KR101315813B1

KR101315813B1 - 두발(頭髮) 화장료

Info

Publication number: KR101315813B1
Application number: KR1020077021385A
Authority: KR
Inventors: 준 노지마; 야수오 미야케; 노부아키 오토
Original assignee: 마루젠세이야쿠 가부시키가이샤
Priority date: 2005-02-22
Filing date: 2006-02-14
Publication date: 2013-10-08
Also published as: EP1859774A1; WO2006090613A1; CN101137344B; US20100048703A1; CN101137344A; US20090054522A1; JPWO2006090613A1; KR20070106569A; HK1117040A1; US7910557B2; EP1859774A4

Abstract

테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용, 모유두 세포 증식 촉진 작용, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용 또는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 가지는 물질을 찾아내, 해당 물질을 배합한 두발 화장료, 및 해당 물질을 유효 성분으로 하는 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두 세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자- 7 산생촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생촉진제 및 골형성 인자-2 산생촉진제를 제공하는 것을 목적으로 해, 본 발명의 두발 화장료에, 콜로소린산을 배합해, 본 발명의 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두 세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자- 7 산생촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생촉진제 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제로, 콜로소린산을 유효 성분으로서 함유하게 한다.

두발 화장료

Description

두발(頭髮) 화장료{HAIR COSMETIC}

본 발명은, 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 골형성 인자-2 산생 촉진제 및 두발 화장료에 관한 것이다.

많은 스테로이드 호르몬은 산생 장기로부터 분비된 분자형으로, 수용체와 결합하여 그 작용을 발현하지만, 안드로겐으로 총칭되는 남성 호르몬의 경우, 예를 들면 테스토스테론은 표적 장기의 세포 안으로 들어가 테스토스테론 5α-리덕타제에 의해 5α-디히드로 테스토스테론으로 환원되고(5α-DHT), 그 5α-DHT가 수용체와 결합하여 안드로겐으로서의 작용을 발현한다.

안드로겐은 중요한 호르몬이지만, 이것이 과도하게 작용하면, 남성형 탈모증, 다모증, 지누증(脂漏症), 좌창(座瘡)(여드름 등), 전립선 비대증, 전립선 종양, 남아성 조숙 등 여러 가지 바람직하지 않은 증상을 유발한다. 따라서 종래로부터 이러한 각종 증상을 개선하기 위하여, 안드로겐의 과잉 작용을 억제하는 방법, 구체적으로는 테스토스테론을 활성형 5α-DHT로 환원하는 테스토스테론 5α-리덕타제의 작용을 저해함으로써, 활성형 5α-DHT의 발생을 억제하는 방법이 채택되어 있다. 이러한 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용을 갖는 생약으로서는, 예를 들 면, 코에로스폰디아스(Choerospondias)속에 속하는 식물로부터의 추출물(특허 문헌 1 참조), 마지트(Majihto) 및/또는 카츄어(Kachur)로부터의 추출물(특허 문헌 2 참조), 카람볼라(Averrhoa carambola L)로부터의 추출물(특허 문헌 3 참조), 홍두삼(紅豆杉), 오람(烏欖), 황산풍(幌傘楓:Heteropanax fragrans Seem:오가피 형상) 및 천심련(穿心蓮)으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 또는 2종 이상의 식물로부터의 추출물(특허 문헌 4 참조) 등이 알려져 있다.

모발은 성장기, 퇴행기 및 휴지기로 이루어지는 주기적인 헤어 사이클(모주기:毛周期)에 따라 성장 및 탈락을 반복하고 있다. 이 헤어 사이클 중 휴지기부터 성장기에 걸쳐서의 새로운 모낭이 형성되는 스테이지가 발모에 있어서 가장 중요하다고 볼 수 있고, 이 스테이지에서의 모낭 상피계 세포의 증식·분화에 중요한 역할을 하고 있는 것이 모유두세포라고 볼 수 있다. 모유두세포는 모근 근방에 있는 외모근초 세포와 매트릭스 세포로 이루어지는 모낭 상피계 세포의 안쪽에서, 기저막으로 싸여있는 모근의 근간 부분에 위치하는 세포이며, 모낭 상피계 세포를 작용시켜 그 증식을 촉진하는 등, 모낭 상피계 세포의 증식·분화 및 모발의 형성에 중요한 역할을 담당하고 있다(비특허 문헌 1 참조).

이와 같이 모유두세포는 모낭 상피계 세포의 증식·분화 및 모발의 형성에 중요한 역할을 하고 있고, 모유두세포의 증식을 촉진함으로써 탈모증을 예방·개선할 수 있다고 볼 수 있다. 종래, 모유두세포 증식 촉진 작용을 갖는 생약으로서 예를 들면, 황기 추출물, 황련 추출물, 긴갯금불초 추출물 등이 공지되어 있다(특허 문헌 5 및 특허 문헌 6 참조).

선유아세포 증식 인자(FGF)는 선유아세포에 대한 증식 활성을 갖는 것 뿐만 아니라, 여러 가지 세포에 대한 세포 증식·분화 활성을 갖는 형태 형성 인자, 조직 장해일 때 작용하는 조직 수복 인자, 생체의 항상성을 유지하기 위한 대사조절 인자 등으로서 중요한 역할을 하고 있는 다기능성 분비 인자이다. 이러한 FGF로서는 예를 들면 FGF-7을 들 수 있다. FGF-7은, 남성형 탈모증에 있어서의 모유두세포의 발현 저하가 알려져 있다(비특허 문헌 2 참조). 그렇기 때문에 FGF-7의 산생을 촉진함으로써, 탈모증 등을 예방·개선할 수 있다고 볼 수 있다. 이러한 FGF-7 산생 촉진 작용을 갖는 것으로서 로얄 제리 등이 알려져 있다(특허 문헌 7 참조).

모발의 성장이 멈춰 있는 휴지기의 모근 주위나 모유두세포에서는 모세혈관의 수가 격감하고 있지만, 모발이 성장하고 있는 성장기의 모근 주위나 모유두세포에서는 다수의 모세혈관이 신생되고 있는 것이 알려져 있다. 이로써 모발의 성장, 발모, 육모 등에는, 혈관 신생이 밀접하게 관련되어 있다고 볼 수 있다.

혈관내피 증식인자(VEGF)는 분자량 34~46kDa의 당단백질이며, 혈관내피 세포에 특이한 증식인자로서, 뇌하수체의 여포 세포의 배양액에서 발견되어, 혈관 투과성 인자(VPF)와 동일 물질인 것이 알려져 있다. 이 VEGF는 하수체세포 이외에도, 모유두세포에서 산생되는 것이 알려져 있다. 이와 같이 산생된 VEGF는 혈관내피 세포에 작용하여, 혈관내피 세포의 증식·유주를 촉진하거나 혈관을 신생하거나 하는 작용을 갖는다. 그렇기 때문에 VEGF의 산생을 촉진함으로써, 탈모증 등을 예방·개선할 수 있다고 볼 수 있다. VEGF 산생 촉진 작용을 갖는 식물 엑기스로서는 메꽃(Convolvulaceae)과의 나팔꽃(Evolvulus alsinoides L)속 식물이 알려져 있다(특 허 문헌 8 참조).

골형성 단백(BMP)은 뼈, 연골, 힘줄 및 뼈 내에 존재하는 기타 조직을 형성하는 단백질이다. 이 단백질에는 특유의 유도 활성이 있고, 뼈 내에 존재하고 있다는 점에서 골수복 과정의 중요한 제어 인자이며, 골조직의 정상적인 유지에 관여하고 있다는 것이 시사되어 있다. 이러한 단백질은 많이 알려져 있고 몇개의 서브 패밀리로 분류할 수 있다(비특허 문헌 3 참조). 이러한 BMP로서 예를 들면 BMP-2가 있다. 이 BMP-2는 근래에 모낭 형성과의 관계가 지적되어, 이 BMP-2의 육모·양모작용에 관심이 집중되고 있다(특허 문헌 9 참조).

특허 문헌 1 :특개2003-55162호 공보

특허 문헌 2 :특개2002-241297호 공보

특허 문헌 3 :특개2002-241296호 공보

특허 문헌 4 :특개2002-87976호 공보

특허 문헌 5 :특개평9-208431호 공보

특허 문헌 6 :특개평11-12134호 공보

특허 문헌 7 :특개2003-192541호 공보

특허 문헌 8 :특개2003-160503호 공보

특허 문헌 9 :특개2005-2068호 공보

비특허 문헌 1:「Trends　Genet」, 1992년, 제8권, p. 56-61

비특허 문헌 2:「안티 어게인 시리즈, No.1 백발·탈모·육모의 실제」, 주식회사 엔·티·에스, 2005년, p. 91-104

비특허 문헌 3:Reddi A.H.,「Cytokine Growth Factor Reviews 8」, 1997년, p. 11-20

본 발명은, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식촉진 작용, 선유아세포 증식인자-7(FGF-7) 산생 촉진작용, 혈관내피 증식인자(VEGF) 산생 촉진작용, 또는 골형성 인자(BMP-2) 산생 촉진작용을 갖는 물질을 찾아내어, 해당 물질을 배합한 두발 화장료 및 해당 물질을 유효 성분으로서 함유하는 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식인자-7(FGF-7)산생 촉진제, 혈관내피 증식인자(VEGF) 산생 촉진제 및 골형성 인자-2(BMP-2)산생 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명의 두발 화장료는, 콜로소린산을 배합한 것을 특징으로 한다. 또한 본 발명의 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7(FGF-7)산생 촉진제, 혈관내피 증식인자(VEGF)산생 촉진제 또는 골형성 인자-2(BMP-2)산생 촉진제는, 콜로소린산을 유효 성분으로서 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 의하면, 콜로소린산을 배합한 두발 화장료 및 콜로소린산을 유효 성분으로서 함유하는 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식인자-7(FGF-7) 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자(VEGF) 산생 촉진제 및 골형성 인자-2(BMP-2) 산생 촉진제가 제공된다.

본 발명의 두발 화장료는 콜로소린산이 갖는 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용에 의해, 남성호르몬이 관여하는 질환을 예방·개선할 수 있음과 동시에, 콜로소린산이 갖는 모유두세포 증식 촉진작용에 의해, 탈모증을 예방·개선할 수 있다. 또한 본 발명의 두발 화장료는 콜로소린산이 갖는 선유아세포 증식 인자-7(FGF-7) 산생 촉진작용, 혈관내피 증식 인자(VEGF) 산생 촉진작용 또는 골형성 인자-2(BMP-2) 산생 촉진 작용으로 탈모증을 예방·개선할 수 있다.

본 발명의 육모제는, 유효 성분인 콜로소린산이 갖는 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용에 의해, 남성호르몬의 작용이 억제되어, 탈모증을 예방·개선할 수 있음과 동시에, 유효 성분인 콜로소린산이 갖는 모유두세포 증식 촉진작용으로 육모·양모가 촉진되어, 탈모증을 예방·개선할 수가 있다. 본 발명의 육모제는 유효 성분인 콜로소린산이 갖는 선유아세포 증식인자-7 산생 촉진작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진작용 또는 골형성 인자-2 산생 촉진작용에 의해, 남성형 탈모증을 예방·개선할 수가 있다. 또한 본 발명의 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제는 유효 성분인 콜로소린산이 갖는 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용에 의해, 남성호르몬의 작용이 억제되어, 남성호르몬이 관여하는 질환을 예방·개선할 수가 있다. 더욱 본 발명의 모유두세포 증식 촉진제는 유효 성분인 콜로소린산이 갖는 모유두세포 증식 촉진작용에 의해, 모유두세포의 증식이 촉진되어 탈모증을 예방·개선할 수가 있다. 또한 본 발명의 선유아세포 증식인자-7(FGF-7)산생 촉진제는, 유효 성분인 콜로소린산이 갖는 선유아세포 증식 인자-7(FGF-7) 산생 촉진작용에 의해, 선유아세포 증식인자-7의 산생이 촉진되어, 탈모증 등을 예방·개선할 수가 있다. 또한 본 발명의 혈관내피 증식인자(VEGF) 산생 촉진제는, 혈관내피 증식인자의 산생을 촉진시켜, 탈모증 등을 예방·개선할 수가 있다. 더욱 본 발명의 골형성 인자-2(BMP-2) 산생 촉진제는, 골형성 인자-2의 산생을 촉진시켜, 탈모증 등을 예방·개선할 수가 있다.

이하, 본 발명에 대해 설명한다.

〔육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식인자 산생 촉진제, 골형성 인자-2 산생 촉진제〕

본 발명의 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제는, 콜로소린산을 유효 성분으로서 함유한다.

콜로소린산(corosolic acid)은 다음 식으로 표시되는 화학 구조를 갖는 트리테르페노이드류 화합물의 일종이다.

[화학식 1]

콜로소린산은, 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물로부터 단리·정제함으로써 제조할 수 있고, 합성에 의해 제조할 수도 있다. 또한 합성에 의해 제조하는 경우, 그 합성 방법은 특별히 한정되는 것은 아니고, 공지의 방법으로 합성할 수 있다(특개 2005-29570호 공보 참조).

콜로소린산을 함유하는 식물 추출물은, 식물의 추출에 일반적으로 이용되는 추출 방법으로 얻을 수 있다. 콜로소린산을 함유하는 식물로서는, 예를 들면, 비파나무(학명:Eriobotrya japonica), 바나바(학명:Lagerstroemia speciosa) 등을 들 수 있다.

비파나무(Eriobotrya japonica)는, 장미과의 늘 푸른 큰키나무이며, 과실부는 식용이 되고, 잎 부분은 위장 허약, 신경통, 설사 등의 치료 등에 이용되고 있 다. 비파나무는 일본, 대만, 중국 등에 자생하고 있어 이 지역으로부터 용이하게 입수할 수가 있다. 추출 원료로서 사용할 수 있는 비파나무의 구성 부위는 특별히 한정되는 것은 아니고, 예를 들면, 잎 부분, 가지 부분, 나무 껍질부, 나무 대부, 줄기부, 과실부, 종자부, 꽃부 등의 지상부, 뿌리부 또는 이러한 부위의 혼합물 등을 들 수 있지만, 이들 중에 잎부분을 이용하는 것이 바람직하다.

바나바(Lagerstroemia speciosa)는, 필리핀이나 오스트레일리아 등의 열대·아열대 지역에 넓게 분포하는 부처꽃과(lythraceae)의 식물로, 이 지역에서 용이하게 입수할 수가 있다. 추출 원료로서 사용할 수 있는 바나바의 구성 부위는 특별히 한정되는 것은 아니고, 예를 들면, 잎부분, 가지부, 나무 껍질부, 나무 대부, 줄기부, 과실부, 종자부, 꽃부 등의 지상부, 뿌리부 또는 이러한 부위의 혼합물 등을 들 수 있지만, 이것들 중에 잎부분을 이용하는 것이 바람직하다.

콜로소린산을 함유하는 식물 추출물은 추출 원료를 건조한 후, 그대로 또는 조쇄기를 이용하여 분쇄하고, 추출 용매에 의해 추출에 제공됨으로써 얻어진다. 건조는 햇볕에 의한 건조로 해도 되고, 통상적으로 사용되는 건조기를 이용해도 된다. 또한 핵산 등의 비극성 용매에 의해 탈지 등의 사전 처리를 하고 나서 추출 원료로서 사용해도 된다. 탈지 등의 사전 처리를 함으로써, 식물의 극성 용매에 의한 추출 처리를 효율적으로 할 수 있다.

추출 용매로서는 극성 용매를 사용하는 것이 바람직하고, 예를 들면, 물, 친수성 유기용매 등을 들 수 있고, 이것들을 단독으로 또는 2종 이상을 조합하여 실온 또는 용매의 비점 이하의 온도에서 사용하는 것이 바람직하다.

추출 용매로서 사용할 수 있는 물로서는, 순수한 물, 수도물, 우물물, 광천수, 광수(鑛水), 온천수, 용수(湧水:springwater), 담수 등 이외에 이들에 각종 처리를 가한 것이 포함된다. 물에 실시하는 처리로서는, 예를 들면, 정제, 가열, 살균, 여과, 이온 교환, 침투압 조정, 완충화 등이 포함된다. 그러므로 본 발명에서 추출 용매로서 사용할 수 있는 물로는, 정제수, 열수(熱水), 이온 교환수, 생리 식염수, 인산 완충액, 인산 완충 생리 식염수 등이 포함된다.

추출 용매로서 사용할 수 있는 친수성 유기용매로는, 메탄올, 에탄올, 프로필 알코올, 이소 프로필 알코올 등의 탄소수 1~5의 저급 지방족 알코올; 아세톤, 메틸 에틸 케톤 등의 저급 지방족 케톤; 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 글리세린 등의 탄소수 2~5의 다가 알코올 등을 들 수 있다.

2종 이상의 극성 용매의 혼합액을 추출 용매로서 사용하는 경우, 그 혼합비는 적당하게 조정할 수 있다. 예를 들면 물과 저급 지방족 알코올과의 혼합액을 사용하는 경우에는, 물 10 질량부에 대하여 저급 지방족 알코올 1~90 질량부를 혼합하는 것이 바람직하고, 물과 저급 지방족 케톤과의 혼합액을 사용하는 경우에는, 물 10 질량부에 대하여 저급 지방족 케톤 1~40 질량부를 혼합하는 것이 바람직하고, 물과 다가 알코올과의 혼합액을 사용하는 경우에는, 물 10 질량부에 대하여 다가 알코올 10~90 질량부를 혼합하는 것이 바람직하다.

추출 처리는, 추출 원료에 포함되는 가용성 성분을 추출 용매로 용출하여 얻는 것이면 특별히 한정하는 것은 아니고, 통상적인 방법으로 실시할 수 있다. 예를 들면, 추출 원료의 5~15배량(질량비)의 추출 용매로 추출 원료를 침지시키고, 상온 또는 환류 가열하에서 가용성 성분을 추출시킨 후, 여과하여 추출잔액을 제거함으로써 추출액을 얻을 수 있다. 얻어진 추출액으로부터 용매를 유거(留去)하면 페이스트 형상의 농축물을 얻을 수 있고, 이 농축물을 더욱 건조하면 건조물을 얻을 수 있다.

이상과 같이 하여 얻어진 추출액, 해당 추출액의 농축물 또는 해당 추출액의 건조물로부터 콜로소린산을 단리·정제 하는 방법은, 특별히 한정되는 것은 아니고, 통상적인 방법으로 실시할 수 있다. 예를 들면, 식물 추출물을 실리카 겔이나 알루미나 등의 다공질 물질, 스티렌-디비닐 벤젠 공중합체나 폴리 메타 크릴레이트 등의 다공성 수지 등을 이용한 컬럼 크로마토그래피에 대하여, 물, 알코올, 아세톤의 순서로 용출시켜 알코올 및 아세톤으로 용출되는 분류로서 얻을 수 있다. 컬럼 크로마토그래피에 용출액으로서 이용되는 알코올은, 특별히 한정되는 것은 아니고, 예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로필 알코올, 이소 프로필 알코올 등의 탄소수 1~5의 저급 지방족 알코올 또는 이들 수용액 등을 들 수 있다. 또한 컬럼 크로마토그래피에 의해 얻어진 분류를, ODS를 이용한 역상(逆相) 실리카 겔 크로마토그래피, 재결정, 액-액 향류 추출, 이온교환 수지를 이용한 컬럼 크로마토그래피 등의 임의의 유기 화합물 정제 수단을 이용하여 정제해도 된다.

이상과 같이 하여 얻어진 콜로소린산은, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식 촉진작용, 선유아세포 증식인자-7(FGF-7) 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자(VEGF) 산생 촉진 작용, 또는 골형성 인자-2(BMP-2) 산생 촉진 작용을 갖고 있기 때문에, 이러한 작용을 이용하여 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타 제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식인자-7산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제로서 사용할 수 있다. 또한 추출 처리에 의해 얻어진 식물 추출물은 콜로소린산을 함유하고 있어, 그대로 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제의 유효 성분으로서 사용할 수 있지만, 정제하여 콜로소린산의 순도를 높인 것을 사용하는 것이 바람직하다. 콜로소린산의 순도를 높인 것을 유효 성분으로서 사용함으로써, 보다 한층 사용 효과가 뛰어난 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제를 얻었다. 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물에는, 콜로소린산을 함유하는 식물을 추출 원료로서 얻어진 추출액, 해당 추출액의 희석액 또는 농축액, 해당 추출액을 건조하여 얻어진 건조물, 또는 이러한 조정제물(粗精製物) 또는 정제물 모두가 포함된다.

본 발명의 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제는, 콜로소린산 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물만으로 이루어진 것도 좋고, 콜로소린산 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물을 제제화(製劑化)한 것도 좋다.

콜로소린산 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물은, 덱스트린, 시클로 덱스트린 등의 약학적으로 허용 가능한 캐리어, 기타 임의로 조제하여, 통상적인 방법인 분말 형상, 과립 형상, 액상 등의 임의 제형으로 제제화할 수 있다. 이 때, 조제(助劑)로서는, 예를 들면 부형제, 안정제, 교취(矯臭)제 등을 이용할 수 있다. 콜로소린산 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물을 제제화한 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제의 형태로서는, 예를 들면, 연고제, 외용액제, 첩부제 등을 들 수 있다.

또한 본 발명의 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제는, 필요에 따라 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식 촉진 작용, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 갖는 천연 추출물 등을 콜로소린산 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물과 함께 배합하여 유효 성분으로서 이용할 수 있다.

본 발명의 육모제는 콜로소린산이 갖는 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용을 통하여, 남성호르몬의 작용을 억제하고, 남성호르몬이 관여하는 질환을 예방·개선할 수 있음과 동시에, 콜로소린산이 갖는 모유두세포 증식 촉진 작용을 통하여, 육모·양모가 촉진되어 탈모증을 예방·개선할 수 있다. 또한 본 발명의 육모제는 콜로소린산이 갖는 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용을 통하여, 선유아세포 증식 인자-7의 산생이 촉진되어, 탈모증을 예방·개선할 수 있다. 또한 본 발명의 육모제는 콜로소린산이 갖는 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용을 통하여 혈 관내피 증식 인자의 산생을 촉진하여 탈모증을 예방·개선할 수 있다. 또한 본 발명의 육모제는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 통하여 골형성 인자-2의 산생이 촉진되어 탈모증을 예방·개선할 수 있다. 본 발명의 육모제가 예방·개선 가능한 남성호르몬이 관여하는 질환으로서는, 예를 들면, 남성형 탈모증, 다모증, 지누증(脂漏症), 좌창(座瘡)(여드름 등), 전립선 비대증, 전립선 종양, 남아성 조숙 등을 들 수 있고, 본 발명의 육모제가 예방·개선 가능한 탈모증으로서는, 예를 들면, 남성형 탈모증, 원형 탈모증, 발모광(Trichotillomania:모발 발거증) 등을 들 수 있다. 다만, 본 발명의 육모제는, 이러한 용도 이외에도 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식 촉진 작용, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용 또는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 발휘함에 의의가 있는 모든 용도에 이용 가능하다.

본 발명의 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제는, 콜로소린산이 갖는 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용을 통하여, 테스토스테론 5α-리덕타제의 활성을 저해할 수 있다. 이것에 의해 남성호르몬의 작용을 억제할 수 있고, 남성호르몬이 관여하는 질환을 예방·개선할 수 있다. 본 발명의 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제가 예방·개선 가능한 질환으로서는, 예를 들면, 남성형 탈모증, 다모증, 지누증(脂漏症), 좌창(座瘡)(여드름 등), 전립선 비대증, 전립선 종양, 남아성 조숙 등을 들 수 있다. 다만, 본 발명의 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제는 이러한 용도 이외에도 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용을 발휘함에 의의가 있는 모든 용도에 이용 가능하다.

본 발명의 모유두세포 증식 촉진제는 콜로소린산이 갖는 모유두세포 증식 촉진 작용을 통하여, 모유두세포를 활성화하여, 모낭 상피계 세포의 증식·분화 및 모발의 형성을 촉진할 수 있음과 동시에, 모주기(毛週期)에 있어서 성장기에서 퇴행기 및 휴지기로 이행하는 것을 방지하여, 성장기를 연장시킬 수가 있다. 이것에 의해 탈모증을 예방·개선할 수가 있다. 본 발명의 모유두세포 증식 촉진제가 예방·개선 가능한 탈모증으로서는, 예를 들면, 남성형 탈모증, 원형 탈모증, 발모광 등을 들 수 있다. 다만 본 발명의 모유두세포 증식 촉진제는, 이러한 용도 이외에도 모유두세포 증식 촉진 작용을 발휘함에 의의가 있는 모든 용도에 이용 가능하다.

본 발명의 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제는, 콜로소린산이 갖는 선유아세포 증식 촉진 인자-7 산생 촉진 작용을 통하여, 모유두세포에 있어서의 선유아세포 증식 인자-7의 산생을 촉진하여, 탈모증 등을 예방·개선할 수 있다. 다만 본 발명의 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제는 이러한 용도 이외에도 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용을 발휘함에 의의가 있는 모든 용도에 이용 가능하다.

본 발명의 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제는, 콜로소린산이 갖는 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용을 통하여 모유두세포에서의 혈관내피 증식 인자의 산생을 촉진하여, 모유두세포에서 모세혈관을 신생할 수 있다. 이것에 의해 발모·육모가 촉진되어 탈모증 등을 예방·개선할 수 있다. 다만, 본 발명의 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제는, 이러한 용도 이외에도 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용을 발휘함에 의의가 있는 모든 용도에 이용 가능하다.

본 발명의 골형성 인자-2 산생 촉진제는, 콜로소린산이 갖는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 통하여 골형성 인자-2의 산생이 촉진되어 육모·양모가 촉진되게 된다. 이것에 의해 탈모증 등을 예방·개선할 수 있다. 다만, 본 발명의 골형성 인자-2 산생 촉진제는 이러한 용도 이외에도 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 발휘함에 의의가 있는 모든 용도에 이용 가능하다.

〔두발 화장료〕

본 발명의 두발 화장료는 콜로소린산을 배합한 것이다.

콜로소린산은 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식 촉진작용, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 갖고 있고, 두피에 적용한 경우에 사용감 및 안전성이 뛰어나기 때문에, 두발 화장료에 배합하기에 매우 적합하다. 이 경우, 콜로소린산 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물을 그대로 배합해도 좋고, 콜로소린산 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물로부터 제제화한 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제를 배합해도 좋다. 콜로소린산, 콜로소린산으로부터 제제화한 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제 또는 골형성 인자-2 산생 촉진제, 또는 콜로소린산을 함유하는 식물 추출물을 두발 화장료에 배합함으로써, 두발 화장료에 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식 촉진 작용, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용, 또는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 부여할 수가 있다.

본 발명의 두발 화장료의 형태는 특별히 한정되는 것은 아니지만, 그 구체적인 예로서는, 헤어토닉, 헤어크림, 헤어리퀴드, 샴푸, 린스, 헤어오일 등을 들 수 있다.

두발 화장료 중에서의 유효 성분의 배합량은 그 사용 목적, 성별, 연령 등을 고려하여 적절하게 조정할 수 있는데, 매우 적합한 배합율은 표준적인 추출물로 환산하여 약 0.0001~10 질량%이다.

본 발명의 두발 화장료는, 콜로소린산과 함께, 용도에 따라서 임의 생리 활성 물질이나 조제(助劑), 예를 들면 수렴제, 살균·항균제, 자외선 흡수제, 보습제, 세포부활제, 소염·항 알레르기제, 항산화·활성 산소 소거제 등을 병용할 수가 있다. 이들 조제 등을 병용함으로써, 병용된 다른 유효 성분과의 사이의 상승 작용이 통상적으로 기대되는 이상의 뛰어난 효과를 초래하기도 한다.

본 발명의 두발 화장료에 의하면 콜로소린산이 갖는 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용에 의해, 남성호르몬이 관여하는 질환을 예방·개선할 수 있음과 동시에 콜로소린산이 갖는 모유두세포 증식 촉진 작용에 의해, 탈모증을 예방·개선할 수 있다. 또한 본 발명의 두발 화장료에 의하면, 콜로소린산이 갖는 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 촉진 작용 또는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용에 의해, 남성형 탈모증을 예방·개선할 수 있다. 본 발명의 두발 화장료가 예방·개선 가능한 남성호르몬이 관여하는 질환으로서는, 예를 들면, 남 성형 탈모증, 다모증, 지누증(脂漏症), 좌창(座瘡)(여드름 등), 전립선 비대증, 전립선 종양, 남아성 조숙 등을 들 수 있고, 본 발명의 두발 화장료로 인해 예방·개선 가능한 탈모증으로서는, 예를 들면, 남성형 탈모증, 원형 탈모증, 발모광 등을 들 수 있다.

또한 본 발명의 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 골형성 인자-2 산생 촉진제 또는 두발 화장료는, 사람에게 매우 적합하게 적용되지만, 각각의 작용 효과가 나타나는 한, 사람 이외의 동물에게도 적용할 수 있다.

실시예

이하, 제조예, 실험예 및 배합예를 나타내어, 본 발명을 구체적으로 설명하는데, 본 발명은 하기의 각 예에 제한되는 것은 아니다.

〔제조예 1〕콜로소린산의 제조

잘게 자른 비파나무의 잎부분 300g에 에탄올 3000 mL를 더하여, 95℃에서 2시간 가열 환류 추출을 하여, 더운 여과(熱時濾過:Hot filtration)를 했다. 얻어진 여과액을 증발기로 농축·건고시켜, 비파나무 잎부분 추출물 83g를 얻었다. 얻어진 비파나무 잎부분 추출물을 다공성 흡착 수지(제품명 : 다이어 이온 HP-2O, 미츠비시 화학 회사 제품)에 첨가하여 물 5000mL, 50질량% 메탄올 200OmL, 메탄올 2000mL, 아세톤 2000mL의 순서로 용출시켰다. 이러한 용출부를 박층 크로마토그래피(상품명 : 실리카겔 F6O, Merck회사 제품)에 첨가했는데, 메탄올 용출부 및 아세 톤 용출부에 콜로소린산이 포함되어 있는 것이 확인되었기 때문에, 이러한 용출부를 아울러 (고형분 27.6g), 실리카겔 컬럼(이동상(mobile phase) : 클로로포름 : 메탄올 = 20 : 1 부터 30 : 1, 후지 시리시아 회사 제품)을 이용하여 분리·정제하여, 정제물 152㎎을 얻었다(시료 1). 이 정제물을 ¹³C-NMR로 분석한 결과를 이하로 나타낸다.

< ¹³C-NMR 화학적 이동δ(귀속 탄소)>

17.2(25-C), 17.7(24-C), 17.8(29-C), 17.8(26-C), 19.1(6-C), 21.6(30-C), 24.0(11-C), 24.1(27-C), 25.1(16-C), 28.9(15-C), 29.5(23-C), 31.3(21-C), 33.7(7-C), 37.6(22-C), 38.7(10-C), 38.8(19-C), 39.6(4-C), 40.1(20-C), 40.3(8-C), 42.8(14-C), 48.1(9-C), 48.2(1-C), 48.3(17-C), 53.7(18-C), 56.1(5-C), 68.7(2-C), 84.0(3-C), 125.6(12-C), 139.3(13-C), 179.8(28-C)

이상의 ¹³C-NMR에 의한 분석 결과에서, 제조예 1에서 얻어진 정제물이 콜로소린산인 것이 확인되었다.

〔제조예 2〕3% 콜로소린산의 제조

잘게 자른 비파나무의 잎부분 100g에 80 질량% 에탄올 1000mL를 더하여 95℃에서 2시간 가열 환류 추출하여, 더운 여과를 했다 얻어진 추출액을 증발기로 농축건고시켜, 비파나무 잎부분 추출물 16g을 얻었다. 얻어진 비파나무 잎부분 추출물을 아래의 조건에서 액체 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과, 해당 추출물에 콜로소린산이 3 질량% 포함되어 있었다(시료 2).

<액체 크로마토그래피 조건>

제품명 : Agilent 1100 (Agilent Technologies 회사 제품)

고정상 : Wakosil-II 5C18HG(와코 순약공업 회사 제품)

컬럼 지름 : 4.6㎜

컬럼 길이 : 250㎜

이동상 : 65% 아세토니트릴

이동상 유속 : 1.2mL/분

검출기 :UV

〔제조예 3〕10% 콜로소린산의 제조

잘게 자른 비파나무 잎부분 100g에 90질량% 에탄올 1000mL를 더하여 95℃에서 2시간 가열 환류 추출을 한 후, 활성탄(제품명 : 칼보라핀, 일본 엔바이로케미컬즈회사 제품)을 이용하여 여과했다. 얻어진 여과액을 증발기로 농축·건고시켜, 50 질량% 에탄올에 현탁시켜 해당 현탁액을 규조토로 여과했다. 잔액을 90질량% 에탄올로 추출하고, 얻어진 추출액을 증발기로 농축·건고시키고, 비파나무 잎부분 추출물 1.8g을 얻었다. 얻어진 비파나무 잎부분 추출물을 하기와 같은 조건에서 액체 크로마토그래피를 이용하여 분석한 결과, 해당 추출물 중에 콜로소린산이 10 질량%포함되어 있다(시료 3).

<액체 크로마토그래피 조건>

제품명 : Agilent 1100(Agilent Technologies 회사 제품)

고정상 : Wakosil-II 5C18HG(와코 순약공업 회사 제품)

컬럼 지름 : 4.6㎜

컬럼 길이 : 250㎜

이동상 : 65% 아세토니트릴

이동상 유속 : 1.2 mL/분

검출기 :UV

〔실험예 1〕테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용 실험

제조예 1~3에서 얻어진 콜로소린산(시료1~3)에 대하여, 아래와 같이 하여 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용을 실험했다.

뚜껑이 있는 V바닥 시험관에서, 테스토스테론(와코 순약공업 회사제품) 4.2 ㎎을 프로필렌 글리콜 1mL에 용해하여, 그 20μL과 1㎎/mL의 NADPH를 함유하는 5 ㎜ol/mL의 트리스 염산 완충액(pH7.13) 825μL와를 혼합했다.

또한 각 시료의 에탄올 수용액 80μL 및 S-9(Rat 간조 호모지네이트, 오리엔탈 효모공업 회사 제품) 75μL를 가하여 혼합하고, 37℃에서 30분간 배양했다. 그 후, 염화 메틸렌 1mL를 가하여 반응을 정지시켰다. 이것을 원심분리하여(1600×g, 10분간), 염화 메틸렌 층을 분취하고, 분취한 염화 메틸렌 층에 대하여 아래의 조건에서 가스 크로마토그래피 분석을 하여, 3α- 안드로스텐디올, 5α-디히드로테스토스테론(5α-DHT) 및 테스토스테론의 농도(㎍/mL)를 정량했다. 컨트롤로서 시료 용액 대신에 시료 용매를 동량(80μL) 이용하여 동일형식으로 처리하여, 가스 크로마토 그래피 분석을 했다.

<가스 크로마토그래피 조건>

사용 장치 : Shimadzu GC-7A(시마즈 제작소 회사 제품)

컬럼 : DB-1701(내경:0.53㎜, 길이:30m, 막 두께:1.0μm, J&W Scientific 회사제품)

컬럼 온도 : 240℃

주입구 온도: 300℃

검출기 : FID

시료 주입량 : 1μL

분할(split) 비 : 1:2

운반가스(Carrier Gas) : 질소 가스

운반가스(Carrier Gas) 유속 : 3mL/min

3α-안드로스텐디올, 5α-DHT 및 테스토스테론의 농도의 정량은, 하기의 방법으로 했다.

3α-안드로스텐디올, 5α-DHT 및 테스토스테론의 표준품을 염화 메틸렌에 용해하여, 해당 용액에 대하여 가스 크로마토그래피 분석을 하여, 이러한 화합물의 농도(㎍/mL) 및 피크 면적으로부터, 피크 면적과 화합물의 농도와의 대응 관계를 미리 구했다. 그리고 테스토스테론과 S-9와의 반응 후의 3α-안드로스텐디올, 5α-DHT 및 테스토스테론 각각의 피크 면적 근처의 농도를 미리 구한 대응 관계를 이용하여 다음 식(1)에 의거하여 산출했다.

A=B×C/D···(1)

식 중, A는 「3α-안드로스텐디올, 5α-DHT 또는 테스토스테론의 농도(㎍ /mL)」를 나타내고, B는 「3α-안드로스텐디올, 5α-DHT 또는 테스토스테론의 피크 면적」을 나타내고, C는 「표준품의 농도(㎍/mL)」를 나타내고, D는 「표준품의 피크 면적」을 나타낸다.

식(1)에 의거하여 산출된 화합물 농도를 이용하여, 다음 식(2)에 의거하여, 변환율(테스토스테론 5α-리덕타제에 의해 테스토스테론이 환원되어 생성한 3α-안드로스텐디올 및 5α-DHT의 농도와 테스토스테론의 초기 농도와의 농도비)을 산출했다.

변환율(%)=(E+F)/(E+F+G)··(2)

식 중, E는 「3α-안드로스텐디올의 농도(㎍/mL)」를 나타내고, F는 「5α-DHT의 농도(㎍/mL)」를 나타내고, G는「테스토스테론의 농도(㎍/mL)」를 나타낸다.

식(2)에 의거하여 산출된 변환율을 이용하여 다음 식(3)에 의거하여, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해율(%)을 산출했다.

저해율(%)=(1-H/I)×100···(3)

식 중, H는 「시료 첨가시의 변환율」을 나타내고, I는 「컨트롤의 변환율」을 나타낸다.

시료 농도를 단계적으로 감소시켜 상기 저해율을 측정하고, 테스토스테론 5α-리덕타제의 저해율이 50%가 되는 시료 농도 IC₅₀(㎍/mL)를 보간법(補間法, Interpolation)으로 구했다.

상기 실험의 결과를 표 1에 나타냈다.

[표 1]

시료	IC₅₀(㎍/mL)
시료1	558
시료2	556
시료3	1200

표 1에 나타낸 바와 같이, 콜로소린산은 뛰어난 테스토스테론 5α-리덕타제 저해 작용을 갖는 것이 확인되었다.

〔실험예 2〕모유두세포 증식 촉진 작용 실험

제조예 1~3으로 얻어진 콜로소린산(시료1~3)에 대하여, 아래와 같이 하여 모유두세포 증식 촉진 작용을 실험했다.

정상 사람의 두발모유두 세포를, 2% 소 태아혈청(Fetal Bovine Serum:FBS) 및 증식 첨가제를 함유한 모유두세포 증식 배지(Cell Application Inc. 제품)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리를 하여 세포를 회수했다. 회수한 세포를, 10% FBS 함유 DMEM 배지를 이용하여 1.0×10⁴ cells/mL의 세포 밀도로 희석한 후, 콜라겐 코팅한 96웰 플레이트에 1웰 당 200μL씩 파종하여 3일간 배양했다. 배양 후, 배지를 빼고, 각 시료를 무혈청 DMEM에 용해한 시료 용액을 각 웰에 200μL씩 첨가하여, 4일간 배양했다.

모유두세포 증식 촉진 작용은, MTT 분석을 이용하여 측정했다. 배양 종료후, 배지를 빼고, 무혈청 DMEM에 용해한 MTT(마지막 농도 0.4㎎/mL)를 각 웰에 100μL씩 첨가했다. 2시간 배양한 후에, 세포 내에 생성된 블루 포마잔을 2-프로판올 100μL에서 추출했다. 추출 후 파장 570 ㎚에서의 흡광도를 측정했다. 동시에 탁도로 하여 파장 650㎚에서의 흡광도를 측정하여, 두 개의 차이를 블루 포마잔 생성량으 로 했다. 또한 컨트롤로서 시료 용액 대신에 무혈청 DMEM를 첨가한 경우에 대해서도 동일한 측정을 했다. 얻어진 결과로부터 다음 식에 의거하여, 모유두세포 증식 촉진율(%)을 산출했다.

모유두세포 증식 촉진율(%) =A/B×100

식 중, A는 「시료 첨가시의 흡광도」를 나타내고, B는 「시료 무첨가시의 흡광도」를 나타낸다.

상기 실험 결과를 표 2에 나타낸다.

[표 2]

시료	시료 농도(㎍/mL)	모유두세포 증식 촉진율(%)
시료1	6.25	106.1±1.4
시료1	1.56	111.5±2.2
시료2	6.25	86.2±3.1
시료2	1.56	105.5±2.5
시료3	6.25	107.7±2.1
시료3	1.56	108.0±3.0

표 2에 나타낸 바와 같이, 콜로소린산은 모유두세포 증식 촉진 작용을 갖는 것이 확인되었다.

〔실험예 3〕FGF-7 증식 촉진 작용 실험, VEGF 증식 촉진 작용 실험 및 BMP-2 증식 촉진 작용 실험

제조예 1, 2에 의해 얻어진 콜로소린산(시료 1,2)에 대하여, 아래와 같이 하여 FGF-7 증식 촉진 작용, VEGF 증식 촉진 작용 및 BMP-2 증식 촉진 작용을 실험 했다.

사람의 정상 모유두세포(HFDPC)를 사람의 정상 모유두세포 증식 배지(PCGM)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수했다. 회수한 세포를 2× 10⁵개/mL의 세포 밀도가 되도록 10% FBS 함유 DMEM 배지로 희석한 후, 직경 60㎜의 샬레(페트리접시:세균배양접시)에 5 mL씩 파종하여 하룻밤 배양했다.

배양 종료후, 시료(시료 1,2)를 첨가한 무혈청 DMEM 배지로 교환하여, 2시간 배양한 후, 세포를 1mL의 RNA 추출용 시약(TRIzol, 인피트로젠 주식회사 제품)으로 용해하여, 클로로포름을 200μL 첨가한 후, 원심(12000 회전, 4℃, 15분간)으로 상층 RNA층을 단리(單離)했다. 이어서, 이소프로판올으로 농축했다. 농축 침전시킨 총 RNA를 TE용액(10mM의 Tris-HCl/1mM의 EDTA, pH8.0)으로 용해하여, FGF-7 유전자, VEGF 유전자 및 BMP-2 유전자의 mRNA 발현량을 측정하기 위한 정량적 RT-PCR법의 주형에 사용하는 총 RNA표품(배열 번호1~3)으로 했다. 한편 대조하기 위해 시료를 첨가하지 않고 배양한 세포에 대하여 상기와 같이 하여 총 RNA를 조제했다.

이어서 PCR장치(TaKaRa PCR Themal Cycler MP, TAKARA회사 제품)를 이용하여, 총 RNA 500ng보다 1본쇄 DNA를 합성한 후, 1본쇄 DNA로부터 FGF-7 유전자(배열 번호 4), VEGF 유전자(배열 번호 5), BMP-2 유전자(배열 번호 6) 및 내부 표준으로서의 G3PDH 유전자를, 각각의 유전자에 특이적인 센스 프라이머(서열번호7~9) 및 안티 센스 프라이머(배열 번호10~12)를 이용하여 PCR반응으로 증폭하고, 그 증폭 산물 10μL를 1.2% 아가로스 젤 전기영동으로 했다. 전기영동 후, 에티디움 브로마이드로 염색하여, 이것을 트랜스 일루미네이터 하에서 DC 120 Zoom Digital camera (KODAK회사 제품)를 이용하여 촬영 후, KODAK 1D Image Analysis Software EDAS290 Version3.5에서 RT-PCR산물을 정량적으로 측정했다. 또한 PCR의 반응액은 시 약(TaKaRa RNA PCR Kit(AMV) Ver3.0) 첨부 자료에 따라 조제했다.

시료를 첨가하지 않고, 또한 시료를 첨가하여 각각 배양한 세포로부터 조제한 총 RNA표품을 기본으로 하여, RT-PCR 반응에 의해 증폭시킨 FGF-7 유전자, VEGF 유전자 및 BMP-2 유전자의 밴드 강도치를 G3PDH 유전자의 밴드 강도치로 제거하여 보정치를 구했다. 그리고 하기식에 의거하여, FGF-7 유전자, VEGF 유전자 및 BMP-2 유전자의 mRNA 발현 촉진율을 구했다.

mRNA 발현 촉진율(%)=(A/B)×100

단, 식 중 A는 「시료 첨가시의 보정치」를 나타내고, B는 「시료 무첨가시(대조)의 보정치」를 나타낸다.

결과를 표 3에 나타낸다.

[표 3]

시료	시료농도(㎍/mL)	mRNA발현촉진율(%)
시료	시료농도(㎍/mL)	FGF-7 mRNA	VEGF mRNA	BMP-2 mRNA
시료1	0.25	124.8±7.2	106.7±4.5	135.3±5.5
시료1	0.06	122.9±8.5	121.8±3.5	105.3±3.8
시료2	10	116.l±1.3	112.4±4.2	146.5±9.7
시료2	2.5	127.4±6.0	135.0±4.2	101.5±1.6

표 3에 나타낸 바와 같이 콜로소린산은 FGF-7 유전자, VEGF 유전자 및 BMP-2 유전자의 mRNA의 발현을 촉진하는 것이 확인되었다. 이것으로부터 콜로소린산은 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용 또는 골형성 인자-2 산생 촉진 작용을 갖는 것이 확인되었다.

〔배합예 1〕

하기 조성의 헤어토닉을 통상적인 방법으로 제조했다.

콜로소린산(제조예 1) 0.1g

염산 피리독신 0.1g

레조르신 0.01g

D-판토테닐 알코올 0.1g

글리시리진산 디칼륨 0.1g

센브리 추출액 0.2g

L-멘톨 0.05g

1,3-부틸렌 글리콜 4.Og

당근 엑기스 0.5g

고삼(苦蔘) 엑기스 0.3g

카밀레 추출액 0.2g

살리실산 0.2g

피롤리돈 카르복실산 나트륨 1.Og

에탄올 25.Og

향료 적당량

정제수 잔부(전량을 100g으로 한다)

〔배합예 2〕

하기 조성의 헤어로션을 통상적인 방법으로 제조했다.

콜로소린산(제조예 1) 0.01g

1,3-부틸렌 글리콜 6.Og

에탄올 8.Og

폴리옥시 에틸렌 경화 피마자유(40E.O.) 1.Og

폴리옥시 소르비탄모노스테아레이트(20E.O.) 1.5g

스테아릴 글리시레티 네이트 0.2g

연명초 엑기스 0.5g

유용성 감초 추출액 0.02g

히노키 티올 0.05g

요소(尿素) 3.Og

나이아신 0.1g

염산 디 펜히드라민 0.1g

초산 토코페롤 0.05g

파라옥시 안식향산메틸 0.1g

페녹시 에탄올 0.3g

L-멘톨 0.2g

정제수 잔부(전량을 100g으로 한다)

〔배합예 3〕

하기 조성의 육모제를 통상적인 방법으로 제조했다.

콜로소린산(제조예 1) 0.5g

히노키 티올 0.1g

글리시레틴산 0.1g

세파란틴 0.02g

폴리옥시 에틸렌 경화 피마자유(20E.O.) 1.5g

1,3-부틸렌 글리콜 3.Og

에탄올 60.Og

초산 토코페롤 0.1g

당근 엑기스 0.1g

고추정기 2.Og

마늘 엑기스 0.5g

감광소 301호 0.005g

염산 피리독신 0.05g

D,L-멘톨 0.3g

정제수 잔부(전량을 100g으로 한다)

〔배합예 4〕

하기 조성의 샴푸를 통상적인 방법으로 제조했다.

콜로소린산(제조예 1) 1.Og

폴리 옥시에틸렌 라우릴 황산 트리에탄올아민염 14.Og

에틸렌 글리콜 디 스테아레이트 2.Og

라우릴 디메틸 아미노 초산 베타인 4.Og

라우린산 디에탄올 아미드 5.Og

글리세린 2.Og

케라틴 가수분해물 3.Og

무환자나무 엑기스 0.2g

퀄라야 추출액 1.Og

황기(黃杞) 엑기스 0.5g

황백(黃柏) 엑기스 0.3g

로즈마리 엑기스 0.5g

알로에 추출액 0.2g

복숭아잎 추출액 0.3g

해조(갈조) 추출액 0.5g

마로니에 종자 추출액 0.3g

파라옥시 안식향산메틸 0.1g

향료 0.05g

정제수 잔부(전량을 100g으로 한다)

본 발명의 육모제, 테스토스테론 5α-리덕타제 저해제, 모유두세포 증식 촉진제, 선유아세포 증식 인자-7 산생 촉진제, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진제, 골형성 인자-2 산생 촉진제 또는 두발 화장료는, 남성 호르몬이 관여하는 질환, 탈모증 등의 예방·개선에 크게 공헌할 수 있다.

Claims

콜로소린산을 유효 성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모증을 예방·개선하기 위한 두발 화장료
콜로소린산을 유효 성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모증을 예방·개선하기 위한 육모제.
제 1항에 있어서, 상기 콜로소린산은 테스토스테론 5-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용 및 골형성 인자-2 산생 촉진 작용으로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 작용을 가지는 것을 특징으로 하는 두발 화장료.
제 2항에 있어서, 상기 콜로소린산은 테스토스테론 5-리덕타제 저해 작용, 모유두세포 증식 촉진 작용, 혈관내피 증식 인자 산생 촉진 작용 및 골형성 인자-2 산생 촉진 작용으로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 작용을 가지는 것을 특징으로 하는 육모제.
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