JPS62201901A - β−Ｄ−グルカンとその製造方法及び用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、化学工業、食品工業、医薬品工業ない ど幅Ｅ曲途を持つ新規なβ−Ｄ−グルカン（オーレオバ
シラン）とその製造方法及び用途に関するものである。

更に詳細には、理化学的性質 ａ　元素分析 Ｃミル４．１チ　　Ｈ＃６．１８チ Ｎ＜０．１チ　　　灰分（０，０１％ ｂ　分子量（ゲル濾過法） １００　、０００乃至５００　、０００Ｃ融　　　点 約２３０℃で分解 ｄ　比旋光度 〔α〕　±４゜ （ｔ＝１、Ｃ＝１．０％　１Ｎ−ＮａＯＨ）ｅ　赤外線
吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）図面に示す ｆ溶解性 ０．５Ｎ−ＮａＯＨ、ジメチルスルホキシドに易溶水に
可溶 メタノール、エタノール、アセトン、クロロホルムに不
溶 ｇ　呈色反応 アントロン−硫酸反応　　　　　　陽性フェノール−硫
酸反応　　　　　　陽性カルバゾール反応　　　　　　
　　陰性ニンヒドリン反応　　　　　　　　陰性ヨード
反応　　　　　　　　　　　陰性ｈ　塩基性、酸性、中
性の区別 凍結乾燥品の０．１％水溶液は中性乃至微酸性 ｉ　　物　　　性 粉末品は白色 ケ示す新規なβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシラン）と
その製造方法及び用途に関する。

（従来の技術） β−Ｄ−グルカンのある種のものは、血糖低下作用、コ
レステロール低下作用、細胞性免疫機構金倉しての抗腫
瘍作用などの生理作用金示すことが知られており、医薬
若しくはその原料として注目されている。

なかでも、悪性腫瘍に対して抗腫瘍活性を示し、抗腫瘍
剤として注目されているβ−Ｄ−グルカンとしては、例
えば、Ｈ，５ａｉｔｏ　ｅｔ　ａｌ、、　Ａｇｒ、　Ｂ
ｉｏｌ。

Ｃｈｅｍ、、　Ｖｏｌ、　３２．１２６）−１２６９　
（１９６８）テ報告されているバキマ：ｙ　（ｐａｃｈ
ｙｍａｎ　）、’Ｉ’、　５ａｓａｋｉ　ｅｔ　ａｌ＋
。

（：：ａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｒｅｓ、　、　Ｖｏｌ
、　４７．９９−１０４　（１９７６）で報告されてい
るレンチナン（Ｌｅｎｔｉｎａｎ　）、Ｋ、　Ｔａｂａ
ｔａ　ｅｔ　ａｌ、、　（’ａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　
Ｒｅｓ、、　Ｖｏｌ、　８９゜１２１−１３５　（１９
８１”）報告されているシゾフイラン（５ｈｉｚｏｐｈ
ｙｌｌａｎ　）、Ａ、　Ｍｉｓａｋｉ　ｅｔ　ａｔ、、
　ＣａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅＲｅｓ、、　Ｖｏｌ、　９
２．１１５−１２９　（１９８１）で報告されているβ
−Ｄ−グルカンなどがある。

しかしながら、これらβ−Ｄ−グルカンは、担子菌の子
実体全原料とすることから、製造に長期間？要するだけ
でなく、その生産量も不充分である。

（本発明の解決しようとする問題点） 本発明者等は、用途が医薬品工業のみならず、食品工業
、化学工業など、その他多くの工業分野にも利用できる
新しいβ−Ｄ−グルカンの開発？目的に鋭意研究した。

その結果、オーレオバシディウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉ
ｄｉｕｍ）属に属する微生物全培養して、その培養物中
に、理化学的性質が、 ａ　元素分析 Ｃ嬌４４．１チ　　Ｈ嬌６．１８チ Ｎく帆１チ　　　灰分＜０．０１％ ｂ　分子量（ゲルｆ過法） Ｚｏｏ、０００乃至ｓｏｏ　、　ｏｏ。

Ｃ融　　　点 約２３０℃で分解 ｄ　比旋光度 〔α〕　±４゜ （ｔ＝１、ｃ　＝　１．０％　１Ｎ−ＮａＯＨ）ｅ　赤
外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）図面に示す ｆ溶解性 ０．５Ｎ−ＮａＯＨ、ジメチルスルホギシドに易溶水に
可溶 メタノール、エタノール、アセトン、クロロホルムに不
溶 ｇ　呈色反応 アントロン−硫酸反応　　　　　　陽性フェノール−硫
酸反応　　　　　　陽性カルバゾール反応　　　　　　
　　陰性ニンヒドリン反応　　　　　　　　陰性ヨード
反応　　　　　　　　　　　陰性ｈ　塩基性、酸性、中
性の区別 凍結乾燥品の０．１　％水溶液は中性乃至微酸性 ｉ　　物　　　性 粉末品は白色 を示すβ−Ｄ−グルカン、とりわけ、β−Ｄ−グルカン
が、メチル化分析法により、２，３，４．６−テト５−
０−メチル−Ｄ−グルコース　１．０モルに対して、２
，４．６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース　１１乃
至１５モル、２，３．４−１−リーＯ−メチル−Ｄ−グ
ルコース　０．８乃至１．２モル、２．３．６−トリ−
Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．６乃至１．０モルおよ
び２．４−ジ−０−メチル−Ｄ−１’ルコース　０．８
乃至１．２モルのモル比に示すか、または、２，３，４
．６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース　１．０モ
ルに対して、２，４．６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グル
コース　３乃至５モル、２，３．４−１−リーＯ−メチ
ル−Ｄ−グルコース　０．３乃至０．５モル、２，３．
６−トリ−Ｏ　−メチル−Ｄ−グルコース　０．２　乃
至０．４モルおよび２，４−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グル
コース　０．９乃至１．２モルのモル比を示す新規構造
のβ−Ｉｌ−グルカンを見いだした。

このβ−Ｄ−グルカンは、Ｒ，Ｇ、　１３ｒｏｗｎ　Ｃ
ｔ　ａｌ、。

Ａｃｔａ　（：’ｈｅｍ、　５ｃａｎｄ、、　Ｖｏｌ、
　２１．２３７９−２３８２　（１９６７）で報告され
ているオーレオパシディウム　プルランスからの多糖類
とも明らかに異っていることが判明した。

本発明者等は、この新規なβ−Ｄ−グルカンとオーレオ
バシラン（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｌｌａｎ　）と命名した
。

このオーレオバシランは、次のような理化学的性質を有
していることから、新規なβ−Ｄ−グルカンであること
が認められる。

ａ　元素分析 実測値　Ｃ：４４．１％　　Ｈ舞６．１８％Ｎ（０，１
チ　　　灰分＜　０．０１％計算値　Ｃ＝　４４．４チ
　　Ｈ＝　６．１７％ｂ　分子量（ゲル濾過法） １００．０００乃至５００　、０００ Ｃ融　　　点 約２３０℃で分解 ｄ　比旋光度 〔α〕　±４゜ （ｔ＝１、Ｃ＝　１．０％、１Ｎ−ＮａＯＨ）ｅ　赤外
線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）図面に示す ｆ溶解性 ０．５Ｎ−ＮａＯＨ、ジメチルスルホキシドに易溶水に
可溶 メタノール、エタノール、アセトン、クロロホルムに不
溶 ｇ　呈色反応 アントロン−硫酸反応　　　　　　陽性フェノール−硫
酸反応　　　　　　陽性カルバゾール反応　　　　　　
　　陰性ニンヒドリン反応　　　　　　　　陰性ヨード
反応　　　　　　　　　　　陰性ｈ　塩基性、酸性、中
性の区別 凍結乾燥品の０．１　％水溶液は中性乃至微酸性 ｉ　　物　　　性 粉末品は白色 ｊ構成糖 無機酸または有機酸、例えば７２チ硫酸に室温で５分間
放置後、７倍に水で希釈し１００℃で４乃至５時間保つ
か、または、２Ｍ−トリクロロ酢酸に１００℃で６時間
加熱するなどの方法により完全加水分解１〜で得られる
糖ハ、ペーパークロマトグラフィー、ガスクロマトグラ
フィー、およびグルコースオキシダーゼ・パルオキシダ
ーゼ法による分析結果からＤ−グルコースであることが
判明した。

ｋ　結合様式 （１）比旋光度がＣα：’ｏｆ：４　　と低い値を示す
こと、および赤外線吸収スペクトルが８９０　ｃｍ−’
附近に吸収を示すことから、オーレオバシラン金構成す
るすべての、若しくはほとんどのグルコース残基は、β
−結合？している。

（１１）メチル化分析法、すなわち、オーレオバシラン
をジメチルスルホキシドに溶解後、メチルスルフィニル
カルバニオンおよび沃化メチルを用いる箱守法で２チル
誘導体に導き、これ金酸で加水分解し、更にメチル化糖
をアルディド−ル　アセテートに誘導し、ガスクロマト
グラフィー、ガスクロマトグラフィー・質量分析により
分析すると、その生成物は次のモル比を有する。

比較的低分子量であって、ＤＥＡＥ−セルロースに非吸
着性のオーレオバシラン（オーレオバシランＡと命名す
る。）は、２，３，４．６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−
グルコース１．０モルに対して、２，４．６−トリ−Ｏ
−メチル−Ｄ−グルコース　１１乃至１５モル、２．３
．４−　）リーＯ−メチル−Ｄ−グルコース　０．８乃
至１．２モル、２，３．６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グ
ルコース　０．６乃至１．０モルおよび２．４−ジ−Ｏ
−メチル−Ｄ−グルコース　０．８乃至１．２モル？示
す。

比較的高分子景であって、ＤＥＡＥ−セルロースＫ　吸
Ｍ　性のオーレオバシラン（オーレオバシラ７Ｂと命名
する。）は、２，３，４．６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ
−グルコース１．０モルに対して、２，４．６−トリ−
Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース　３乃至５モル、２，３．
４−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース　０．３乃至０
．５モル、２，３．６−　）ソーＯ−メチル−Ｄ−グル
コース　０．２乃至０，４モルおよび２．４−ジ−Ｏ−
メチル−Ｄ−グルコース０．９乃至１．２モルのモル比
を示す。

０１０　　緩和スミス分解で得られた水不溶性の高分子
画分全メチル化後、酸加水分解すると、大量の２．４．
６−ト１ノー０−メチル−Ｄ−グルコースと少量の２．
３，４．６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコースを生
成する。

マ几、オーレオバシランにエンド型β−１，３グルカナ
ーゼを作用させると、その生成物には、主にラミナリピ
オース、少量のグルコースおよび更に少量の２６−Ｏ−
β−グルコシルラミナリビオースを含有する。これらの
事実は、β−１，６Ｍ合のかなりの部分がβ−１，３Ｍ
合テ繰シ返している主鎖中にβ−１，３Ｍ合と隣接した
形で組み込まれていることを示すものである。

以上の事実から、本発明のオーレオバシランは、従来か
ら知られているβ−Ｄ−グルカンとは全く異なり、β−
１，３結合を繰り返している主鎖中に一定の割合でβ−
１，６結合を有していること、および主鎖？形成するグ
ルコース残基がら一定の割合でそのグルコース残基の０
６位から短かい側鎖を分岐しており、更に、その側鎖に
はβ−１，６結合以外にかなりの量のβ−１，４結合を
有しているβ−Ｄ−グルカンである。上述の結果？総合
的に判断すると、オーレオパフランの構造式は、繰り返
し単位が、 式１ および式■ （但し、式中、Ｑｌｅはβ−結合したＤ−グルコビラノ
ース残基？示し、ｘ、　ｙ、　ｘ’およびＹ′は、Ｘ＋
ＹまたはＸ’　＋　Ｙ’が１１乃至１５になる１以上の
整数を示し、ｍおよびｎは、その比が１＝３乃至５を示
す。） テ表すレルβ−Ｄ−グルカン（オーレオパフランＡ）で
あるか、または、 式ｌ および式■ （但し、式中、Ｇｌｃはβ−結合したＤ−グルコビラノ
ース残基？示し、ｘ、　ｙ、　ｘ’およびＹ′は、Ｘ＋
ＹまたはＸ’　＋　Ｙ’が３乃至５になる１以上の整数
を示し、ｍおよびｎは、その比が１＝３乃至５全示す。

） で表されるβ−Ｄ−グルカン（オーレオパフランＢ）で
あることが判明した。

本発明のオーレオパフランを製造する方法としては、例
えば、オーレオバ／ディウム　プルランス（Ａｕｒｅｏ
ｂａｓｉｄｉｕｍ　ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）　Ｉ　ＦＯ４
４６４、ＩＩ”Ｏ４８７５、Ｉ　ＦＯ６３５３、Ｉ　Ｆ
　Ｏ６４０１、ＩＦ’０６７２５、オーレオバシディウ
ム　マンソーニ（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ　ｍａｎ
ｓｏｎｉ　）　Ｉ　Ｆｏ　９２３３　など？、炭素源、
窒素源、無機塩などの適当な栄養源金含有する固体培地
、または液体培地に植菌して静置または通気攪拌などの
培養方法で培養し、培養物中にオーレオパフランを産生
せしめ、これを分離し採取すればよい。

また、培養物中に、オーレオパフランとともにプルラン
を生成蓄積せしめ、両者２分離し採取することもきわめ
て有利に実施できる。

培地の栄養源としては、本発明のオーレオパフラン金産
生じ得るものであればよく、炭素源としてハ、グリセロ
ール、キシロース、グルコース、ンルビトール、フラク
トース、マルトース、イソマルトース、マルチトール、
シュクロース、ラクトース、セロビオース、マルトトリ
オース、マルトテトラオース、ＤＥ　　１０乃至７０の
澱扮部分分解物、廃糖蜜などが適している。オーレオパ
フランとともにプルラン？産生さぜる場合には、これら
糖類全豹３乃至２０　ｗ／　ｖ％″含有せしめグこ液体
培地を用いて好気的条件で培養するのが好適である。

窒素源としては、硝酸塩、アンモニウム塩、ＬＸなどの
合成化合物やポリペプトン、酵母エキス、麦芽エキス、
コーンステイープリカー、脱脂大豆抽出物、ペプタイド
、アミノ酸などの天然有機物などが適宜利用できる。！
、た、無機塩としては、リン酸塩、カリウム塩、硫酸塩
、マグネシウム塩、必要に応じて鉄塩、マンガン塩、カ
ルシウム塩などが適宜選択できる。

培養時のｐＨ１温度は、該微生物が生育しオー−オバシ
ランケ産生しうる条件であればよく、通常、ｐＨ２，０
乃至９．０、温度　１５乃至３５℃が選ばれる。

また、培養期間は、オーレオバシランの産生量が最大に
なる期間が選ばれ、通常、液体培地で通気攪拌する場合
１乃至１０日間である。

培養物力λらオーレオバシランを分離採取する方法とし
ては、例えば、前記液体培養物ｅ濾過または遠心分離な
どの方法で微生物菌体を分離し、この菌体から採取する
。この際、プルランを採取する場合には、菌体を分離し
たｒ液または上清から常法に従って採取すればよい。

菌体からオーレオバシランを採取する方法は、菌体また
はその破砕物から得られる細胞壁に、例えば、熱水、希
酸、希アルカリなどの溶出剤、望まし７〈は、ｐＨ７゜
０全越えるアルカリ性水溶液、とりわけ０．０１乃至４
．ＯＮの水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化マ
グネシウム、水酸化カルシウムなどの希アルカリ性水溶
液と接触せしめ、オー　レオハシラン全溶出し、オーレ
オバシラン溶ｌを採取する。

本溶液を、必要により濃縮、中和などした後、常法に従
って、活性炭、イオン交換樹脂などにより脱色、脱塩精
製し、濃縮、乾燥してオーレオバシランの白色粉末金得
る。

また、オー−オバシラン水溶液を、メタノール、エタノ
ール、インプロパツール、アセトンなどの有機沈澱剤で
処理したり、クロマトグラフィーにかけたりして分画精
製し、超遠心的および電気泳動的に均一な高純度オーレ
オバシラン画分金採取することは容易に実施でき、更に
、これを乾燥し、粉末化することも容易である。

この際の乾燥方法としては、通風乾燥、熱風乾燥、噴霧
乾燥、ドラム乾燥、凍結乾燥などの方法が適宜選択でき
る。

このようにして得られたオーレオバシランから、ポリオ
ール型オーレオバシラン全製造するには、オーレオバフ
ラフ１重量部（以下、本明細書では重量部金部と略称す
る。）に約０．０１乃至約０．５Ｍの過沃素酸若しくは
その水溶性塩、例えば、メタ過沃素酸ナトリウム、メタ
過沃素酸カリウムを含む水溶液約５０乃至５００部に溶
解、または懸濁させ、通常ｐＨ３乃至８の範囲で反応さ
せる。この操作は、通常、緩やかな条件、例えば、暗所
で室温以下の温度、望ましくは１５℃以下で１乃至５日
間行ない酸化反応を終了させればよい。このようにして
得られる主として側鎖部分が酸化されたポリアルデヒド
型オーレオバシランは、反応性に富んでおり、例えば、
共有結合による固定化酵素の担体などとして有利に利用
できる。

更に、還元するには、酸化反応液にエチレングリコール
を添加するか、または透析処理するかなどの方法により
、過剰の過沃素酸全消費、または除去した後、これに還
元剤を加えて還元させる。

また、必要ならば、酸化反応液からポリアルデヒド型オ
ーレオバシランを分離採取した後に還元してもよい。

還元する方法は、オーレオバシランの酸化物が還元でき
ればよく、例えば、ニッケル触媒による水素還元、水素
化硼素ナトリウムによる還元などが適宜選択できる。こ
のようにして還元した反応液は、常法に従って、ニッケ
ル触媒を除去するか、または水素化硼素ナトリウム金有
機酸全添加するなどして分解させた後、有機沈澱剤で水
溶液からの沈澱を繰り返す力・、また、必要ならば、活
性炭、イオン交換樹脂などで脱色、脱塩して精製し、濃
縮して、ポリオール型オーレオバシランのシラツブ製品
金、更に、乾燥、粉末化してポリオール型オーレオバシ
ランの粉末製品を採取することも容易である。このポリ
オール型オーレオバシランは、オー−１／オバシランの
主鎖に含まれるβ−１，３結合しているグルコース残基
には変化なく、側鎖のグルコース残基および主鎖に含ま
れるβ−１，６結合しているグルコース残基が開環して
ポリオール型となったものである。

このようにして得られるオーレオバシランまたはポリオ
ール型オーレオバシランは、化学工業、食品工業、医薬
品工業など各種用途に自由に利用できる。化学工業用途
としては、オーレオバシランが水可溶性の多糖であるこ
とから、これを含有せしめ定組成物、成形物、例えば、
顆粒、錠剤、シートなどが単独で、または他の材料と併
用して自由に製造できる。また、ポリオール型オーレオ
バシランは、水易溶性であることから、例えば、糊剤、
粘質剤、・乳化剤、糸、フィルム、被覆膜などの製造原
料として好適である。

食品工業用途としては、オーレオバシランおよびポリオ
ール型オーレオバシランは、共に、無味、無毒で、不消
化乃至難消化性の食物繊維であり、コレステロール低下
作用、重金属排泄促進作用など含有していることから健
康増進食品などの配合剤として有利に利用できる。

また、医薬品用途としても自由に利用できるが、とりわ
け、細胞性免疫賦活による顕著な抗腫瘍作用が見いださ
れたことより、抗腫瘍剤として好適である。

従って、オーレオバシラン、若しくはポリオール型オー
レオバシランは、単独で、捷たは、これらのいずれ力・
に１種若しくは２種以上の薬剤、補助剤などを含有せし
めることにより、例えば、注射薬、内服薬、外用薬など
として、オーレオバシラン、またはポリオール型オーレ
オバシラン感受性の悪性腫瘍、例えば、乳癌、肺癌、膀
胱癌、子宮癌、大腸癌、胃癌、白抑病、リンパ腫、皮膚
癌などの治療に有利に用いることができる。

この治療に際して、他の抗腫瘍剤、例えば、シクロフォ
スフアミド、塩酸ニムスチンなどのアルキル化剤、メン
トレキサート、フルオロウラシル、テガフールなどの代
謝拮抗剤、プレオマイシン、マイトマイシンＣ、アクチ
ノマイシンＣなどの抗生物質、硫酸ビンクリスチン、硫
酸ビンブラスチンなどのアルカロイド、グレドニゾン、
メチルテストステロン、結合型エストロゲンなどのホル
モン剤、インターフェロン、リンホトキシン、ツモアネ
クロシス　ファクター、ＩＬ−２などのリンホカインな
どの一種または二種以上と併用して、その治療効果を更
に高めることも有利に実施できる。

次に、実施例を使って、オーレオバシランおよびポリオ
ール型オーレオバシランの抗腫瘍作用、毒性、用法およ
び用量について説明する。

実験１゜ ４週令のＩＣＲ−ＪＣＬ雌マウマウス全各群１０匹、Ｓ
ａｒｃｏｍａ　１８０腹水ガン約６　Ｘ　１０”ｅ右鼠
跳部に移植した。移植後１日目から、実施例１の方法で
得たオーレオバシラン、または実施例３の方法で得たポ
リオール型オーレオバシランを、マウスＫｇ当り、それ
ぞれ１岬、５■、１０■？含む生理食塩水として、１日
１回、０．エコずつ、連日１０日間、腹腔内に注射した
。対照は、オーレオバシラン、または、ポリオール型オ
ーレオバシラン無含有の生理食塩水を、同様に投与した
。移植後、３５日目に解剖してｌ１１１２瘍をとり出し
、重量を測定し、オーレオバシラン、またはポリオール
型オーレオバシラン投与群の腫瘍重量？、対照群のそれ
と比較して、腫瘍増殖抑制率（％）？求めた。

但し、Ａは対照群の１０匹の平均腫瘍重量金示し、Ｂは
、ｔ−レオバシラン、またはポリオール型オーレオバシ
ラン投与群のそれぞれの１０匹ずつの平均腫瘍重量を示
す。

結果は、第１表に示す。

第１表の結果から明らかなように、本発明のオーレオパ
フランおよびポリオール型オーレオパフランは、悪性腫
瘍の増殖抑制にきわめて効果的である。

本実験は、他の温血動物、例えば、ヒト、ウシ、ウマ、
イヌ、ネコ、ウサギ、ラットなどの哺乳類、ニワトリ、
ハトなどの鳥類などにおいても、その効果を同様に発現
するものと認められている実験である。

実験Ｚ 体重約２５２のＢＤＦ１雄マウス金各群】０匹とし、２
Ｗ角に切断したルイス（Ｌｅｗｉｓ　）肺癌を、背部皮
下に移植した。移植後８日目から実施例１の方法・で得
られたオーレオパフラン、または実施例３の方法で得ら
れたポリオール型オーレオパフランを、マウスｇ当り、
それ、ぞれ０．０２〜．０，１■、１■を含む生理食塩
水として、１日２回、０．１コずつ、連日１０日間、静
脈注射した。対照は、オーレオパフラン、まｔはポリオ
ール型オーレオバシラン無含有の生理食塩水を、同様に
投与した。移植後、ｎ日目に解剖して腫瘍金とり出し、
′Ｍ量を測定して、実験１と同様に腫瘍増殖抑制率（％
）を求めた。

結果は、第２表に示す。

第２表の結果から明らかなように、本発明のオーレオバ
シランおよびポリオール型オーレオパフランは、治療が
きわめて困難とされている肺ガンなどの悪性腫瘍に対し
ても、顕著な増殖抑制効果が見られる。

実験３゜ ４週令マウス金用いて、実施例１の方法で得られたオー
レオバシランおよび実施例３の方法で得られたポリオー
ル型オーレオパフランを、常法に従って、経口、腹腔内
、ま食は静脈の投与経路で急性毒性テストヲ行なりた。

その結果、両β−グルカンともに、きわめて低毒性の物
質であって、投与可能な最大投与量においても、死亡例
は認められなかりた。

従って、正確な値とけ言えないが、両β−グルカンとも
そのＬＤ５ｏ値は、 経口投与の場合　　　　　　２０１以上／に９腹腔内投
与の場合　　　　　５７以上７に９静脈投与の場合　　
　　　１．５７以上／に９であった。

以上の実験からも明らかなように、本発明のオーレオバ
シランおよびポリオール型オーレオパフランは、その有
効用量からも極めて安全であり、悪性腫瘍の治療に有利
に用いることができる。その投与方法としては、悪性腫
瘍を治療しうる方法であればよく、例えば、皮下、筋肉
内、腹腔内、静脈などへの注射、経口投与、廃剤として
投与、外用剤として塗布、点滴などの投与が適宜選択で
きる。

本発明のオーレオバシラン、またはポリオール型オーレ
オパフランの成人１日当りの用量は、投与方法によって
も変るが、通常、０．１■乃至５００２であり、例えば
、経口の場合１０■乃至５００？、注射の場合０．１η
乃至１００　Ｓ’程度が用いられる。

以下、本発明の実施例金述べる。

実施例　１．オーレオバシラン オーレオバシデイウム　プルランス　ＩＦｏ　４４６４
を澱粉部分分解物（Ｄ、Ｅ、４０）　　１０％、Ｋ２Ｈ
ＰＯ４０，２チ、ベプト７０．２％、ＮａＣ１Ｏ，２％
、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，０４％、Ｆｅ５０．−７Ｈ
２００，００１％からなる培地　２０１に無菌的に植菌
し、２７℃で５日間通気攪拌培養を行なった。菌体はプ
レコートフィルターにてｒ別した。

ｒ液は、常法に従って精製、濃縮、粉末化してプルラン
粉末約１．４Ｋｙ’に採取した。

一方、ｒ別された湿菌体は乾物として約２００ｙであっ
た。本菌体金、温水で洗浄し几。この洗浄菌体を菌体破
砕機（商品名　１）ｉｎｏ　Ｍｉｌｌ　）で破砕後、遠
心分離して細胞壁を採取し、これをアセトンで脱脂し得
られ之細胞壁に０．５Ｎ水酸化ナトリウム４ｔ’ｚ加え
、窒素気流中で２５℃で４時間ゆっくり攪拌を続け、次
いで遠心分離し、この上清全水道水で透析し、更に濃縮
乾燥して約８１の粗オーレオバシ２ン全採取した。この
１ｆｉＯ，０１Ｍリン酸塩緩衝液（ｐＨ７，８）　、２
００　ｒｄに溶解し、ＤＥＡＥ−セルロースカラムにか
け、その非吸着画分を透析し、濃縮、凍結乾燥、粉末化
して白色のオーレオバシランＡ粉末約４００■を得た。

水晶をセファロースＣＬ−６Ｂｉ用いるゲル濾過法によ
って分子量を求めたところ、１０ｏ、ｏｏｏ乃至２００
．０００であつ友。ま几、水晶を窒素気流下でＩＮ水酸
化ナトリウムで１．０％水溶液を調整し、比旋光度全測
定したところ、〔α〕ｏ＋１　であった。

更に、水晶の赤外線吸収スペクトル金、ＫＢｒ錠剤法で
測定したところ、図面の結果？得た。

一方、ＤＥＡＥ−セルロース吸着画分は、０．Ｉ　Ｎ水
酸化すトリウム水溶液で溶離し、前記の非吸着両分の場
合と同様に精製し、粉末化して白色のオーレオバシラン
Ｂ粉末約５００■金得た。

水晶の分子量、比旋光度、赤外線吸収スペクトルｔオー
レオバシランＡの場合と同様に求めたところ、分子量は
３５０　、０００乃至４５０　、０００であり、比旋光
度は、〔α〕　−１であった。また、赤外線吸り 収スペクトルは、図面の結果とほぼ同一のパターン？示
した。

このようにして得られた各種オーレオバシランは、化学
工業、食品工業、゛医薬品工業など各種用途に有利に利
用できる。

実施例２ シュクロース　８Ｗ／ｖ％、酵母エキス　Ｑ、２ｗ／ｖ
係、コーンステイープリカー　０．３ｗ／ｖ％、ＮＨ４
Ｎｏ　３　０−１　ｗ／　Ｖ　％、Ｋ　２　ＨＰ　Ｏ４
０、１ｗ／　ｖ　％、Ｍｇ　ＳＯ４・７Ｈ２００，０５
ｗ／　ｖ％、ＫＣｔＯ，０５ｗ／ｖ％、ＭｎＳＯ４・４
Ｈ２００，０００１ｗ／ｖ％　および水からなる液体培
地　２Ｏｔ　金１２０℃で２０分間滅菌した後、冷却し
、始発ｐＨ１７，０として、オーレオバシデイウム　プ
ルランス　Ｉ　Ｆｏ　６３５３　ｋ植菌し、３０℃で４
日間通気攪拌培養した。この培養液力）ら実施例１と同
様に処理して、ｒ液からプルラン粉末約０．７Ｋｇｋ採
取し、菌体から粗オーレオバシ乏ン約７２全採取した。

この粗オーレオパシラン１１ｉ０．０ＩＮ水酸化ナトリ
ウム水溶液５００ｍ１に溶解し、常法に従って、活性炭
で脱色し、Ｈ型、ＯＨ型イオン交換樹脂で脱塩して精製
し、更に濃縮、凍結乾燥し粉末化して白色の高純度オー
レオバシラン粉末約８００〜を得た。水晶は、オーレオ
バシランＡおよびＢｉ金含有ており、その比旋光度は〔
α〕　０　であった。

水晶は、実施例１と同様に各種用途に有利に利用できる
。

実施例３．　ポリオール型オー１／オバシラン実施例】
の方法で得／むオーレオバシランＡま／ζはオーレオバ
シランＢの１０ｙｉ、メタ過沃素酸ナトリウム（Ｎａｒ
ｏ４）　６．６）　ｆ含む水溶Ｈｓｏｏ　ｄに懸濁し、
１０℃で７日間、暗室にて攪拌しつつ酸化反応させた。

この反応液金水に対して透析し、透析内液に水素化硼素
ナトＩＪウム（ＮａＢ’Ｈ４）　１，５　？を加え、室
温で２日間還元反応を行なわせた後、酢酸を加えてｐＨ
６，０とし、過剰の水素化硼素ナトリウム全分解し、更
に水に対して透析しり５゜この透析内液に対して、３倍
容のメタノール全顎え、遠心分離して沈澱物？採取し、
この沈澱物を水に溶解し、再沈澱させた後、水に溶解し
、凍結乾燥、粉末化して白色のポリオール型オーレオバ
シランＡ粉末またはポリオール型オーレオバシランＢ粉
末の約７．５２金得た。

水晶は、原料のオーレオバシランよりも水に対する溶解
性に優れており、化学工業、食品工業、医薬品工業など
の各種用途に有利に利用できる。

実施例４．　フィルム 実施例３の方法で得たポリオール型オーレオノ（シラン
Ａの乾物に対して、グリセリンｋ　１０ｗ／ｗチ含有す
るポリオール型オーレオバシランＡのｌ　Ｑ　ｗ／　ｖ
％水溶液を調製し、これをガラス板上に流延して７０℃
の熱風で乾燥し、透明で強靭なフィルムを得之。

水晶は、透明で光沢があり、強靭である。ま友、酸素透
過度においても、ガスバリヤ−性の大きいことにより、
酸化されやすい物品を被覆、または密封することが容易
であり、それら物品の貯蔵期間、有効期間全大幅に延長
することができる。

実施例５．繊　　維 実施例３の方法で得たポリオール型オーレオノくフラン
Ｂの２Ｑ　ｗ／　ｖ％を含む防糸原ｇ２ｓｏ℃にして、
直径０．３門、長さ１間の円筒状ノズルより、圧力’ｆ
ｒ　３　Ｋｑ／ｃ肩かけて室温の空気中にストランド金
押し出し、水分全蒸散乾燥させつつ巻取機にて巻き取っ
た。

得られた繊維の太さは、約２０ミクロンで、強靭であっ
友。この繊維は、撚ることも、編むことも、織ることも
できる。しかも、親水性であって、無毒であり、皮膚へ
の刺激がないという特徴を有しているので、例えば、脱
脂綿、生理綿、ガーゼ、手術糸などとして、ま友悪性腫
瘍治療用として、例えば、体内へ埋め込み成形物などと
して有利に利用できる。また、他の横維と混防すれば、
その吸湿性、非帯電性、染色性を生かして、肌着、その
他衣料としても使用することができる。

実施例６．被　覆　膜 実施例２の方法で得九粗オーレオバシランの０．５ｗ／
ｖ　％水溶液ヲ３５℃とし、これに産卵後、１０時間以
内の新鮮卵ｉ３０秒間浸漬し、次いで、３０℃の温風で
１時間乾燥して、卵表面上に被覆膜全形成させた。この
被覆膜を形成さぜた卯ケ、室温（１５〜２５℃）で保存
しで、その町食期間士対照の無処理卵と比較した。その
結果、被覆膜全形成させた卵の保存期間は、約５〜ｌＯ
ｆ￥ｉにも延長された。

実施例７．　カ　ッ　プ 実施例１の方法で得たオーレオバシランＡ粉末金、攪拌
しつつ水を噴霧して含水率を約３０ｗ／ｗチとし、これ
全押し出し成形機にかけてストランドを調製し、これを
裁断して直径２５胴、長さ４鰭のペレット’に製造した
。このペレット金射出成形機に供給し、樹脂温度１２０
℃にてカップ成形用金型内に射出注入して成形した。強
靭、かつ半透明な力・ノブが得られた。

実施例８　肥　料　杭 配合肥料（Ｎ　＝　１４チ、Ｐ２Ｏ５＝８％、Ｋ２０＝
１２チ）７０部、実施例１の方法で得た粗オーレオバシ
ラン１０部、硫酸カルシウム１５部、水５部とを充分混
合した後、押出機（Ｌ／Ｄ＝２０、圧縮比＝１８、ダイ
スの口径＝　３０　ｔｅａ　）で、８０℃に加熱して肥
料杭を製造した。

水晶は、肥料用容器が不要で取扱い容易であり、全層施
肥に適した強度を有し、さらに配合割合を変えることに
より、肥料成分の溶出速度を調節できるものである。

実施例９．　カプセル 実施例３の方法で得たポリオール型オーレオバシランＡ
５Ｗ／Ｖ％およびゼラチン１０ｗ／ｖ％に含有する水溶
液を６０℃に加温し、脱気した後、カプセル用金属棒金
浸漬し、直ちに引き上げて４０℃の温風で徐々に乾燥し
た。弾性が強く、透明で光沢のある高品質の硬質カプセ
ルが得られた。このカブセ、ルは、経口薬、座薬などの
容器として好都合である。

実施例１０．接　着　剤 ジメチルスルホキシド３０部、水２５部、実施例２の方
法で得た高純度オーレオ７７２７２部、プルラン８部及
びジベンジリデンキシリット２部の混合物を温［９０℃
にて１時間攪拌し、溶解せしめｔ後、これ全直径１４電
、高さ５０叫の円筒状の繰り上げ、繰り下げ可能な機構
を備えた口紅式容器に注入して、室温で放冷し、固形状
接着剤全製造］−た。本接着剤をクラフト紙に塗りつけ
たところ、薄く均一に塗布することができ、初期接着力
も充分でありた。

実施例１１．麺　　類 米粉７０部、馬鈴薯澱粉２０部、小麦粉１０部、実施例
１の方法で得たオーレオバクランＡ２部、１０チ食塩水
約４０部をよく混合した後、これを蒸し上げ、更によく
練り上げ、次いで、麺帯生地？調製して一夜放置した。

これを細断して麺線にし、沸騰水中で３分間ゆでて調理
ｓｉ′ｆｆ：得た。この麺は、こしの強い麺であった。

実施例１２．珍　　味 トリ肉のミンチ３０部を砂糖２部、醤油２部、みりん６
部と共にフライパンで煎りつけて調製したそぼろに、実
施例１の方法で得たオーレオバシランＢ粉末３部全顎え
て、よく混合した後、約１５０〜１７０℃で約５０　Ｋ
ｇ／ａｄに加熱、加圧して結合成形し、約１ｃｒｎの厚
さのシート状成形物を得た。これを適当な大きさに細断
することにより、珍味とした。ビールのつまみや、子供
のおやつなどに好適である。

実施例１３．　　魚肉練製品 解凍し之スケソウすり身４，０００部に対し、マルトー
ス８０部、グルタミン酸ナトリウム８０部、馬鈴薯澱粉
２００部、氷水３００部、トリポＩＪ　ＩＪン酸ナナト
リウム１２部食塩１２０部および、予め実施例３の方法
で得たポリオール型オーレオバシランＡ　１０部とソル
ビトール１部とを溶解しておいた水溶液１００部ヲ捕潰
し、約１２０２ずつ全定形１−で板付し友。

これらを、３０分間で内部の品温か約８０℃になるよう
に蒸し上げた。続いて、室温で放冷した後、４℃で２４
時間放置し７て製品とした。

これらの製品は、いずれも足が強く、肌面が細やかで、
艶やかな光沢を有しており、食感も良好であった。

実施例１４．　　揚げ物用衣 薄力粉１００部に実施例２の方法で得た高純度オーレオ
バシラン１部を加え、これに水３００部？加えて攪拌混
合して衣を得た。この衣でエビ、サツマイモなどの種を
包んで揚げたところ、衣の口当りはよく、ま几種へのつ
きもよかった。

実施例１５．　　アイスクリーム ４０　ｗ／　ｗチクリーム７０部、全脂加糖練乳２００
部、全乳４６０部、脱脂粉乳２０部、砂糖５部、マルト
−７５部及び実施例２の方法で得た高純度オーレオ３７
２７１，０％水溶液４部金加熱して混合し、７０℃で３
０分間加熱殺菌した後、ホモゲナイザー全通して３〜４
℃に急冷し、−夜熟成の後、フリーザーに入れた。

なめらかな口当りのよいアイスクリームが得られた。

実施例１６．　　レモンゼリー 寒天３部と実施例３の方法で得られたポリオール型オー
レオバシランＢ５部を水２００部、砂糖５０部を加えて
溶解し、続いて６５℃まで冷却した。

これにレモン香料および着香料の少量を加え友炭酸水り
５０部全混合して型に入れ、冷却して艶やかなレモンゼ
ＩＪ−Ｔｈ得た。水晶は、食物繊維ポリオール型オーレ
オバシラン金含有した健康増進食品である。

実施例１７．　　ヨーグルト 脱脂粉乳１７５部、砂糖８０部、マルトース５０部、実
施例１の方法で得たオーレオバシランＡ　３０部金水１
．２００部に加熱溶解し、ホモゲナイザーにかけた後、
約８５℃で３０分間加熱ｉ〜で殺菌し、次いで、４０℃
に冷却した。これに市販されているヨーグルトの乳酸菌
で調製したスターター３０部を植菌１〜．３７℃で８時
間培養してゲル状のヨーグルト金得た。

このヨーグルトは、なめらかで光沢もあり、口当りもよ
かった。水晶は、オーレオバシラン金含有し、コレステ
ロール低下作用を有する健康食品である。

実施例１８１錠　　剤 実施例３のポリオール型オーレオバシランＡの２０　ｗ
／ｖ　％水溶液１００部に、マルトース１４０部、ビタ
ミンＡ・パルミテート２０部全顎え、充分に攪拌混合し
た後、ガラス板上に流延し、風乾した。

次いで、この乾燥物を粉末とした後、常法に従って打錠
機で錠剤’ｋｆｆ造し友。打錠剤１１中には、ビタミン
Ａ・パルミテート１０万ＩＵｔ含有しており、３０℃で
３ケ月放置した後も、はとんど減少は認められなかった
。また、水晶は経口用抗腫瘍剤として、例えば、胃癌、
十二指腸癌、直腸癌などの悪性腫瘍の治療剤としても、
有利に利用できる。

実施例１９９錠　　剤 アスピリン５０部に実施例１の方法で得たオーレオバフ
ランＢ１４部、コーンスター−ｙ−４部ｅ充分に混合し
た後、常法に従って打錠機により錠剤を製造し之。

水晶は吸湿性がなく、物理的強度も充分であり、しかも
水中での崩壊はきわめて良好であった。

実施例２０．注　射　薬 実施例１の方法で得念オーレオバシランＡ’ｔ−０，２
ｗ／ｖ％水溶液とし、次いで、活性炭にて脱色し、Ｈ型
、ＯＨ型イオン交換樹脂で脱塩精製し、減圧濃縮し、更
に、メンブランフィルタ−にて無菌的にｒ過した。得ら
れたｒ液を、１バイアル当りオーレオバシランＡが２０
０■になるように、滅菌した２〇−容ガラス容器に充填
し、凍結乾燥し、密栓して注射用製剤とした。水晶は生
理食塩水などでオーレオバシランＡｋ溶解、または懸濁
して、皮下、または筋肉内などに注射し、例えば、乳癌
、肺癌、肝癌、白血病などの悪性腫瘍の治療に有利に用
いられる。

実施例２１．注　射　薬 実施例３の方法で得たポリオール型オーレオバシランＢ
ｅ約２Ｗ／ｖｑｂ水溶液とし、次いで、実施例２０と同
様に活性炭、イオン交換樹脂にて脱色、脱塩精製し、濃
縮し、メンブランフィルタ−にて無菌的にｒ過した。得
られたｒ成金、ポリオール型オーレオバシランｆ３２　
Ｗ／　Ｖ％の等張溶液とし、２０コ容アンプルとンに充
填し、滅菌して注射用製剤とした。

水晶は、腹腔内、静脈などに注射し、例えば、乳癌、膀
胱癌、子宮癌、大腸癌、胃癌などの悪性腫瘍の治療に有
利に用いられる。

実施例２２．軟　　膏 実施例２の方法で得た高純度オーレオバシラン粉末を、
少量の流動パラフィン全顎えて研和した後、ワセリン？
加え１０■／２の軟膏薬とした。

水晶は、例えば、皮膚癌、乳癌、リンパ腫などの悪性腫
瘍の治療に有利に用いられる。

（発明の効果） 上記したことから明らかなように、本発明のβ−Ｄ−１
’ルカン（オーレオバシラン）およびこれから誘導され
るポリオール型オーレオバシランは、無味、無毒の不消
化乃至難消化性の食物繊維であり、コレステロール低下
作用、重金属排泄作用などを有していることから、健康
増進食品の配合剤として好適であり、また、強い抗腫瘍
作用を有していることから、各種悪性腫瘍の治療剤など
として、更に、錠剤、フィルム、シートなど各種成形物
、組成物の製造にも有利に利用できる。

オーレオバシランの大量製造方法としては、オーレオバ
シディウム属に属する微生物の培養物から分離採取すれ
ばよく、とりわけ、オーレオバシランとプルランと金共
に産生させ、これらを分離し採取する方法は、工業的製
造方法としてきわめて有利に実施できる方法である。

【図面の簡単な説明】

図面は、オーレオバシランの赤外線吸収スペクトルを示
す図である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）理化学的性質が、 ａ　元素分析 Ｃ≒４４．１％　Ｈ≒６．１８％ Ｎ＜０．１％　灰分＜０．０１％ ｂ　分子量（ゲル濾過法） １００，０００乃至５００，０００ ｃ　融点 約２３０℃で分解 ｄ　比旋光度 〔α〕＾２＾５＿Ｄ±４° （ｌ＝１、ｃ＝１．０％　１Ｎ−ＮａＯＨ） ｅ　赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）図面に示す ｆ　溶解性 ０．５Ｎ−ＮａＯＨ、ジメチルスルホキシドに易溶水に
   可溶 メタノール、エタノール、アセトン、クロロホルムに不
   溶 ｇ　呈色反応 アントロン−硫酸反応　陽性 フェノール−硫酸反応　陽性 カルバゾール反応　陰性 ニンヒドリン反応　陰性 ヨード反応　陰性 ｈ　塩基性、酸性、中性の区別 凍結乾燥品の０．１％水溶液は中性乃至微酸性 ｉ　物性 粉末品は白色 を示すβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシラン）。 （２）β−Ｄ−グルカンが、メチル化分析法により、２
   ，３，４，６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース１
   ．０モルに対して、２，４，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ
   −グルコース１１乃至１５モル、２，３，４−トリ−Ｏ
   −メチル−Ｄ−グルコース０．８乃至１．２モル、２，
   ３，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．６乃至
   １．０モルおよび２，４−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコ
   ース０．８乃至１．２モルのモル比を示すβ−Ｄ−グル
   カン（オーレオバシランＡ）であるか、または、２，３
   ，４，６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース１．０
   モルに対して、２，４，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グ
   ルコース３乃至５モル、２，３，４−トリ−Ｏ−メチル
   −Ｄ−グルコース０．３乃至０．５モル、２，３，６−
   トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．２乃至０．４モ
   ルおよび２，４−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．
   ９乃至１．２モルのモル比を示すβ−Ｄ−グルカン（オ
   ーレオバシランＢ）であることを特徴とする特許請求の
   範囲第（１）項記載のβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシ
   ラン）。 （３）β−Ｄ−グルカンが、繰り返し単位として、式
   I ▲数式、化学式、表等があります▼ および式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｇｌｃはβ−結合したＤ−グルコピラノ
   ース残基を示し、Ｘ、Ｙ、Ｘ′およびＹ′は、Ｘ＋Ｙま
   たはＸ′＋Ｙ′が１１乃至１５になる１以上の整数を示
   し、ｍおよびｎは、その比が１：３乃至５を示す。） で表されるβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシランＡ）で
   あるか、または、 式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ および式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｇｌｃはβ結合したＤ−グルコピラノー
   ス残基を示し、Ｘ、Ｙ、Ｘ′およびＹ′は、Ｘ＋Ｙまた
   はＸ′＋Ｙ′が３乃至５になる１以上の整数を示し、ｍ
   およびｎは、その比が１：３乃至５を示す。） で表されるβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシランＢ）で
   あることを特徴とする特許請求の範囲第（１）項または
   第（２）項記載のβ−Ｄ−グルカン。 （４）オーレオバシディウム属に属する微生物を培養し
   、その培養物から、 理化学的性質が、 ａ　元素分析 Ｃ≒４４．１％　Ｈ≒６．１８％ Ｎ＜０．１％　灰分＜０．０１％ ｂ　分子量（ゲル濾過法） １００，０００乃至５００，０００ ｃ　融点 約２３０℃で分解 ｄ　比旋光度 〔α〕＾２＾５＿Ｄ±４° （ｌ＝１、ｃ＝１．０％　１Ｎ−ＮａＯＨ） ｅ　赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）図面に示す ｆ　溶解性 ０．５Ｎ−ＮａＯＨ、ジメチルスルホキシドに易溶水に
   可溶 メタノール、エタノール、アセトン、クロロホルムに不
   溶 ｇ　呈色反応 アントロン−硫酸反応　陽性 フェノール−硫酸反応　陽性 カルバゾール反応　陰性 ニンヒドリン反応　陰性 ヨード反応　陰性 ｈ　塩基性、酸性、中性の区別 凍結乾燥品の０．１％水溶液は中性乃至微酸性 ｉ　物性 粉末品は白色 を示すβ−Ｄ−グルカンを採取することを特徴とするβ
   −Ｄ−グルカン（オーレオバシラン）の製造方法。 （５）β−Ｄ−グルカンが、メチル化分析法により、２
   ，３，４，６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース１
   ．０モルに対して、２，４，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ
   −グルコース１１乃至１５モル、２，３，４−トリ−Ｏ
   −メチル−Ｄ−グルコース０．８乃至１．２モル、２，
   ３，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．６乃至
   １．０モルおよび２，４−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコ
   ース０．８乃至１．２モルのモル比を示すβ−Ｄ−グル
   カン（オーレオバシランＡ）であるか、または、２，３
   ，４，６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース１．０
   モルに対して、２，４，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グ
   ルコース３乃至５モル、２，３，４−トリ−Ｏ−メチル
   −Ｄ−グルコース０．３乃至０．５モル、２，３，６−
   トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．２乃至０．４モ
   ルおよび２，４−ジ−Ｏメチル−Ｄ−グルコース０．９
   乃至１．２モルのモル比を示すβ−Ｄ−グルカン（オー
   レオバシランＢ）であることを特徴とする特許請求の範
   囲第（４）項記載の製造方法。 （６）β−Ｄ−グルカンが、繰り返し単位として、式
   I ▲数式、化学式、表等があります▼ および式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｇｌｃはβ−結合したＤ−グルコピラノ
   ース残基を示し、Ｘ、Ｙ、Ｘ′およびＹ′は、Ｘ＋Ｙま
   たはＸ′＋Ｙ′が１１乃至１５になる１以上の整数を示
   し、ｍおよびｎは、その比が１：３乃至５を示す。） で表されるβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシランＡ）で
   あるか、または、 式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ および式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｇｌｃはβ結合したＤ−グルコピラノー
   ス残基を示し、Ｘ、Ｙ、Ｘ′およびＹ′は、Ｘ＋Ｙまた
   はＸ′＋Ｙ′が３乃至５になる１以上の整数を示し、ｍ
   およびｎは、その比が１：３乃至５を示す。） で表されるβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシランＢ）で
   あることを特徴とする特許請求の範囲第（４）項または
   第（５）項記載の製造方法。 （７）β−Ｄ−グルカン（オーレオバシラン）を微生物
   菌体または該菌体細胞壁からアルカリ性水溶液で溶出採
   取することを特許請求の範囲第（４）項、第（５）項ま
   たは第（６）項記載の製造方法。 （８）β−Ｄ−グルカン（オーレオバシラン）とともに
   プルランを採取することを特徴とする特許請求の範囲第
   （４）項、第（５）項または第（６）項記載の製造方法
   。 （９）理化学的性質が、 ａ　元素分析 Ｃ≒４４．１％　Ｈ≒６．１８％ Ｎ＜０．１％　灰分＜０．０１％ ｂ　分子量（ゲル濾過法） １００，０００乃至５００，０００ ｃ　融点 約２３０℃で分解 ｄ　比旋光度 〔α〕＾２＾５＿Ｄ±４° （ｌ＝１、ｃ＝１．０％　１Ｎ−ＮａＯＨ） ｅ　赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）図面に示す ｆ　溶解性 ０．５Ｎ−ＮａＯＨ、ジメチルスルホキシドに易溶水に
   可溶 メタノール、エタノール、アセトン、クロロホルムに不
   溶 ｇ　呈色反応 アントロン−硫酸反応　陽性 フェノール−硫酸反応　陽性 カルバゾール反応　陰性 ニンヒドリン反応　陰性 ヨード反応　陰性 ｈ　塩基性、酸性、中性の区別 凍結乾燥品の０．１％水溶液は中性乃至微酸性 ｉ　物性 粉末品は白色 を示すβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシラン）、または
   該β−Ｄ−グルカン（オーレオバシラン）を過沃素酸若
   しくはその水溶性塩で酸化処理し、次いで、還元処理し
   て得られるポリオール型β−Ｄ−グルカン（ポリオール
   型オーレオバシラン）を含有せしめたことを特徴とする
   組成物。 （１０）β−Ｄ−グルカンが、メチル化分析法により、
   ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース
   １．０モルに対して、２，４，６−トリ−Ｏ−メチル−
   Ｄ−グルコース１１乃至１５モル、２，３，４−トリ−
   Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．８乃至１．２モル、２
   ，３，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．６乃
   至１．０モルおよび２，４−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グル
   コース０．８乃至１．２モルのモル比を示すβ−Ｄ−グ
   ルカン（オーレオバシランＡ）であるか、または、２，
   ３，４，６−テトラ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース１．
   ０モルに対して、２，４，６−トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−
   グルコース３乃至５モル、２，３，４−トリ−Ｏ−メチ
   ル−Ｄ−グルコース０．３乃至０．５モル、２，３，６
   −トリ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０．２乃至０．４
   モルおよび２，４−ジ−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコース０
   ．９乃至１．２モルのモル比を示すβ−Ｄ−グルカン（
   オーレオバシランＢ）であることを特徴とする特許請求
   の範囲第（９）項記載の組成物。 （１１）β−Ｄ−グルカンが、繰り返し単位として、式
   I ▲数式、化学式、表等があります▼ および式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｇｌｃはβ−結合したＤ−グルコピラノ
   ース残基を示し、Ｘ、Ｙ、Ｘ′およびＹ′は、Ｘ＋Ｙま
   たはＸ′＋Ｙ′が１１乃至１５になる１以上の整数を示
   し、ｍおよびｎは、その比が１：３乃至５を示す。） で表されるβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシランＡ）で
   あるか、または、 式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ および式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （但し、式中、Ｇｌｃはβ結合したＤ−グルコピラノー
   ス残基を示し、Ｘ、Ｙ、Ｘ′およびＹ′は、Ｘ＋Ｙまた
   はＸ′＋Ｙ′が３乃至５になる１以上の整数を示し、ｍ
   およびｎは、その比が１：３乃至５を示す。） で表されるβ−Ｄ−グルカン（オーレオバシランＢ）で
   あることを特徴とする特許請求の範囲第（９）項または
   第（１０）項記載の組成物。 （１２）組成物が成形物であることを特徴とする特許請
   求の範囲第（９）項、第（１０）項または第（１１）項
   の組成物。 （１３）組成物が、飲食物であることを特徴とする特許
   請求の範囲第（９）項、第（１０）項、第（１１）項ま
   たは第（１２）項の組成物。 （１４）組成物が、抗腫瘍剤であることを特徴とする特
   許請求の範囲第（９）項、第（１０）項、第（１１）項
   または第（１２）項記載の組成物。