JPS603367B2 - 白血球分離法および白血球分離材 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、血液、体液またはこれらを処理して得られる
血球浮遊液を白血球、リンパ球を選択的に捕捉、採取す
るための白血球の分離法および白血球の分離材に関する
ものである。

近年、血液学、免液学の進歩に伴ない、血液の成分輸血
、白血球の機能検査、白血球の表面抗原の検査、リンパ
球のサブポピュレーションの比率測定等を行ない、各種
疾患の治療、診断等に応用されている。

さらにヘルパーＴ細胞やサプレツサーＴ細胞などのサプ
セツトに分類、分離する試みなどが広く各地の病院、研
究機関で行なわれ始めている。このような目的に使用可
能な従来の白血球、リンパ球の捕捉・採取技術としては
、赤血球凝集剤を用いる方法、遠心分離法、繊維への粘
着力を利用する方法等がある。

さらに詳しく述べると、赤血球凝集剤を用いる方法は血
液にデキストランやヒドロキシェチルスターチなどの赤
血球凝集剤を加え、一定時間放置後に白血球に富んだ上
蒲を得る方法であり、遠心分離方法は血液を遠０分離し
て白血球に富むバッフィーコートを採取する方法、比重
１．０７７の液体に血液を重層後、遠心分離を行ない、
リンパ球層を回収する密度勾配遠心分離方法等である。
繊維への粘着力を利用する既知の方法は、繊維に単球・
額粒球を付着させ、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水
等により付着した血球を回収する方法、凝集剤や遠心分
離器の使用により白血球に富む分画を得、その後この白
血球分画をナイロン、ガラスウール等の繊維を詰めたカ
ラムに入れ、３７℃に保温し３０分位放置した後リンパ
球を回収する方法である。しかし、これらの方法は、採
取した白血球、リンパ球分画に赤血球、血小板の混入が
多いという大きな欠点を持っていた。

赤血球・血小板の混入が多いと、白血球、リンパ球を用
いた各種検査に対して測定誤差の大きな原因となり、ま
た、混入量が多過ぎると検査不能に陥ることもいまいま
起こり、大きな問題であった。個々の方法について述べ
ると、赤血球凝集剤を用いる方法では、赤血球が白血球
の数倍から十数倍混入し、血小板になると白血球の数十
倍も混入する。

遠心分離法のうち、バッフィ−コートを使用する方法で
は、赤血球、血小板の混入は白血球の数倍から十数倍あ
り、密度勾配遠心分離法では、血小板はリンパ球の数倍
以上である。赤血球はリンパ球の１／１０以下にできる
が、患者血液等一部の赤血球の比重が小さくなっている
場合には、赤血球がリンパ球の数倍から十数倍になって
しまうことが多かった。また、操作が煩雑であり、かつ
分離するのに長時間を要するため、得られた白血球がダ
メージを受け、白血球の機能低下および生存率の低下が
みられることが多い。繊維への血球の粘着力を利用する
従来の方法では、赤血球、血小板共リンパ球、額粒球の
数倍から十数倍になってしまうことが多かった。本発明
者らは上述の問題に着目し、白血球、リンパ球を捕捉、
採取する方法において、採取された白血球、リンパ球に
対してその他の成分の赤血球、血小板の混入を非常に少
なくすることを目的に鋭意研究した結果、水に対し０．
３の９／ｍｉｎ・塊から１．０の９／ｍｊｎ・塊の溶解
速度で溶解する物質を繊維状物質表面にコートした白血
球分離材を便用すると、上記目的が達成されることを見
出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明の第１の発明は、血液、体液またはこ
れらを処理して得られる血球浮遊液を白血球の分離材に
接触させ、白血球を該分離材に捕捉させることによって
白血球とその他の成分を分離した後、該分離材から白血
球を回収する白血球の分離方法において、白血球の分離
材として繊維状物質表面に水に対し０．３雌ノｍｉｎ・
地から１．０の９／ｍｉｎ・ｃ鰭の溶解速度で溶解する
物質をコートしたものを使用することを特徴とする白血
球分離法であり、第２の発明は、繊維状物質表面に水に
対し０．３雌／ｍｉｎ・地から１．０の夕／ｍｉｎ・地
の溶解速度で溶解する物質をコートしてなることを特徴
とする白血球分離材である。

以下、本発明の構成について詳細に説明する。

最初に本発明の白血球分離材について説明する。繊維状
物質とは、平均直径に比べて長さが非常に長いものを言
い、平均直径Ｄとは、そのもの）重さをｘｇ、長さをｙ
肌、密度をｐｇ／地とするとＤ＝２今毒；（肌）で定義
される。

上記繊維状物質の平均直径は、特に限定されないが、白
血球を効率よく捕捉するためには、平均直径が１０山ｍ
より小さいものが好ましく、さらに捕捉された白血球を
回収することまで考えると、平均直径が７〜ｌｏＡｍの
ものが好ましい。繊維状物質の素材としては、白血球に
害を与えず、水に対し徐々に溶解する物質がコートされ
る物質であれば特に限定されないが、たとえばポリアク
リロニトリル、ポリエステル、ポリアミド、セルロース
アセテ−ト、キュプラアンモニウム法レーヨン等の合成
繊維、半合成繊維、再生人造繊維、綿等の天然繊維等が
挙げられる。本発明において、上記繊維状物質の表面に
コーティングする物質は、水に対し０．３の９／ｍｉｎ
・洲から１．０雌／ｍｉｎ・のの溶解速度で溶解する物
質であることが必要である。

こ）で言う溶解速度とは、以下に述べる測定方法によっ
て得られる数値であると定義する。

測定には、第１図ないし第３図に示される容器１９を使
用するが、第１図は該容器の正面図、第２図は側面図、
第３図は平面図である。この容器１９は、内径が縦イ３
仇奴、横口６１側、深さハ１５帆であり、両側面の中央
、内底から高さ二５脇のところに内蓬木２肋の流水管２
０が取り付けるれている。該容器の内側底面に被測定物
質の被覆（表面積１８．３の）を形成する。

被測定物質は、２００の９使用し、均質な被膜を作る。
この被膜の形成方法は特に限定されないが、たとえばｌ
ｏｇ／ｄその濃度に調整された被測定物質の水溶液２の
【を前記容器に入れ、底面全体に広げ、蓋を外した状態
で３７ｏ０のふ卵器中で充分乾燥することによって形成
することができる。

この場合、被膜が割れ易い物質については、室温で乾燥
する等、条件をマイルドにし、均質な被膜を作るように
する。次に底面に被覆を形成した容器を第４図に示され
る装置にセットする。

図中、２１は底面に被覆を形成した容器、２２は水の入
ったビーカー、２３はポンプ、２４は振とう機を表わす
。まず、容器２１中にビーカー２２より３０ｑｏの水を
ポンプ２３によって５の【／ｍｉｎの流量で送り、容器
２１から溶出してきた被測定物質をサンプリングし、経
過時間に対する溶出量を測定する。

この際、容器２１は水平に保ち、振とう器２４によって
常に振とうしておく。振とうの方法は、水平運動であっ
て水の流れの方向ｙに対して１秒当り３伽の１往復動作
（ｙ＝１．＆ｏｓ２ｍｔ〔肌〕、ｔは時間〔ｓｅｃ〕）
流れに対して垂直方向ｘに対して１秒当り２伽の２往復
動作（ｘ：−ｓｉｎ４刀ｔ〔弧〕、ｔは時間〔ｓｅｃ）
）が同時に与えられる８の字運動を行なわせた。容器２
１から溶出した被測定物質は、たとえば４分毎に（２０
の【毎）にサンプリングし、その時間に対する溶出パタ
ーンを描く。このようにして描いた被測定物質の溶解パ
ターンは、第５図のようになり、曲線ａは溶解速度の速
いものであって、ｂ，ｃの順に溶解速度は遅くなってい
る。

本発明においては、この溶解パターンのうち、直線性の
良い部分を選び、溶出時間が８分の時点での一定表面積
（１８．３の）をもつ被測定物質の溶出量から物質の溶
解速度を定義した。すなわち、（溶解速度）＝（溶出時
間が８分の時の物質の溶出塁双９）÷（Ｓｈｉｎ×１８
．３の）〔双９／ｍｉｎの〕（ただし、測定方法は前記
した方法による）と定義する。上記のような溶解速度に
おいて、水に対し０．３の９／ｍｉｎ・地から１．０雌
／ｍｉｎ・めで溶解する物質（以下、赤血球付着阻止物
質と呼ぶ）によって、赤血球や血小板の白血球分離材へ
の付着を抑制する効果が得られるのであるが、その理由
は、織縦状物質表面上の該物質が徐々に流出しているた
めに、赤血球や血小板が繊維状物質に付着し難くなるた
めと考えられる。

溶解速度が０．３秘／ｍｉｎ・塊より遅い物質では、繊
維状物質から流出する量が徴量すぎて上記効果が乏しく
、溶解速度が１．物２／ｍｉｎ・係より早い物質では、
繊維状物質からすぐに流出してしまうために、繊維状物
質が未コートの状態となってしまう。

水に対す溶解速度が１．０の９／ｍｉｎ・洲より早い物
質でも、繊維状物質表面に大量にコートしたり、分離す
る血液が少量であったり、流速を遠くしたり、温度を下
げたりすれば、赤血球や血小板を白血球分離材に粘着す
るのを防ぐことができる。

すなわち、赤血球や血小板が白血球分離材と援触する間
だけ繊維状物質表面にコートした物質が血液中に溶け出
していれば、赤血球や血小板は繊維状物質表面に粘着し
難くなるからである。しかし、実際には繊維状物質表面
のコート物質の厚みには限度があること、また血液の流
速を上げるには白血球が洩れ易くなり、白血球の回収率
が悪くなる等から、赤血球付着阻止物質の溶解速度は１
．０雌／ｍｊｎ・彬以下が必要である。また溶解速度が
０．３の夕／ｍｉｎ・地より遅い物質でも、流速を上げ
たり、物理的な振動を与えたり、温度を上げたりして繊
維状物質表面上のコート物質を血液中に溶け出し易い状
態にしてやれば、赤血球や血４・板が白血球分離材に付
着し難くなる。

しかし、実際には流速を上げたり、物理的な振動を与え
ると、白血球が洩れ易くなって白血球回収率が下がり、
また、温度を過剰に上げると血液が変性してしまうため
、溶解速度は０．３の９／ｍｉｎ・均以上が必要である
。繊維状物質にコートするための赤血球付着阻止物質の
素材としては、白血球に対して害を与えないものであれ
ば特に限定されないが、たとえばゼラチン、カゼイン、
ポリビニルピ０リドン、ポリビニルアルコール、ポリメ
チルェーテル等が挙げられる。

特にゼラチン、カゼイン等の蛋白質は、白血球に悪影響
を与え難いという点で優れている。繊維状物質に赤血球
付着阻止物質をコートする方法は、特に限定されないが
、たとえば白血球分離操作を行なう直前に、赤血球付着
阻止物質の等張溶液を該繊維状物質表面に接触させるこ
とによってコートすることができる。

すなわち、繊維状物質表面への赤血球付着阻止物質の付
着量は、少なくとも単分子層以上あればよく、必ずしも
吸着していなくてもよい。該付着量は、血液量、洗浄量
、流速等の使用条件により適宜選定する。また、あらか
じめ繊維状物質表面に赤血球付着阻止物質を付着させ、
乾燥しておいたものを使用することもできる。たゞし、
白血球分離材と血液等が接触する際には、繊維状物質表
面上のコート物質がウェット状態になっている方が好ま
しい。以上述べたところから明らかなように、本発明の
白血球分離材は繊維状物質表面に赤血球付着阻止物質を
コートしてなるものである。上記本発明の白血球分離材
の使用に当っては、これを容器に収めて白血球分離フィ
ルターを形成して用いるのが好適である。

この場合、白血球分離材は充分ほぐされた状態であるこ
とが好ましい。容器の中に入れる白血球分離材の嵩密度
は、乾燥した状態で０．０暖／地以上０．唆／塊以下が
好ましい。嵩密度が低すぎると白血球を充分捕捉するこ
とができなくなり、収率が悪くなる。また、高密度が高
過ぎると白血球の捕捉は十分されるが、回収率が悪くな
ったり、赤血球が残り易くなったりする弊害がでてくる
。特に好ましくは高密度の範囲は０．０蜜ノ地以上、０
．２斑／例以下である。本発明白血球の分離材を用いた
白血球の分離フィルターは、たとえば第６図のように構
成される。

すなわち、白血球分離材１が液体の入口２、出口３を持
った耐水容器４に収められて構成される。メッシュ５，
６は、白血球分離材１が容器４の外に洩れ出すのを防ぐ
ためである。次に、本発明の白血球分離法について例を
挙げて説明する。第７図の例において、７は本発明の白
血球分離材を容器に納めて構成した白血球の分離フィル
ターである。この白血球分離フィルター７内の白血球分
離材は、繊維状物質に赤血球付着阻止物資をコートし、
乾燥状態にしてあるものを用いた場合として説明すれば
、先ず、ポンプ８により、容器９内の生理的溶液１０を
白血球分離フィルター７に送り、白血球分離フィルター
７内の白血球分離材表面をウェット状態にする。次に、
導入口１１を容器１２に入れ替え、血液１３を白血球分
離フィルター７に送る。この白血球分離フィルター７に
おいて白血球が選択的に捕捉され、血数、赤血球、血小
板は殆んど捕捉されずに白血球分離フィルター７を通過
し、容器１４に送られる。さらに導入口１１を容器９に
戻し「生理的溶液１０を白血球分離フィルター７に流す
ことにより、血糠、赤血球、血小板は洗い流され、白血
球分離フィルター７内には血糠、赤血球は殆んど残留せ
ず、血小板も僅かしか残らない。すなわち、ほゞ純粋に
白血球だけが捕捉されている。なお、図中１５は白血球
分離フィルターの出口である。次に、第８図の例は、白
血球の表面抗原を測定する場合や、リンパ球の亜分画を
測定する際に必要なりンパ球のみを採取するための装置
であり、単球、額粒球は前もって単球、額粒球の分離フ
ィルター１６によって捕捉されて取り除かれ、リンパ球
が白血球分離フィルター７にほゞ純粋に捕捉される。図
中、１７は容器、１８はシリコンゴム、１９は白血球分
離フィルター７の入口である。このように簡便に純粋に
白血球だけがフィルターに捕捉できる技術は今までにな
く、繊維状物質に赤血球付着阻止物質をコートした本発
明の白血球分離材を用いることによって始めて可能にな
った。

この後、物理的衝撃等を与えながら白血球分離フィルタ
ー７内に捕捉されている血球を回収すると、収率良く白
血球が回収され、白血球に対する赤血球、血小板の混入
率は非常に低い。一般に、繊縦を詰めたフィルターを用
いて白血球を分離しようとするとき、血液を流し、その
後、生理的溶液でフィルターを洗浄することによって、
かなり多くの赤血球を洗い流すことができる。

しかし、もともと血液中には、赤血球が白血球の１００
ぴ苔位含まれているため、フィルター内に残る赤血球は
少量であっても、白血球の数倍から数十倍のオーダーに
なってしまう。本発明の白血球分離法では、繊維状物質
に赤血球付着阻止物質をコートした白血球分離材を用い
ているため、白血球分離フィルター内に残存する赤血球
は、白血球の数分の一から数十分の一以下まで減らすこ
とができる。これは、赤血球付着阻止物質が適当な溶解
速度を持っているため「繊維状物質表面から赤血球付着
阻止物質に常にわずかずつ流出し、変形能の大きい赤血
球は繊維状物質表面に付着し驚くなるからである。一方
、白血球は変形館が小さく粘着能も高いため、繊維状物
質のクロスした部分や繊維状物質表面に捕捉されるもの
と考えられる。次に、赤血球付着阻止物質の水に対する
溶解速度と白血球分離における混入赤血球との関係につ
いて述べる。

第９図は水に対する溶解速度と混入赤血球濃度との関係
を示すグラフである。

実験は以下に述べる方法で行なった。実験に用いた物質
はゼラチン、カゼイン、ポＩＪビニルアルコール、ポリ
ビニルピロリドン、ポリメチルビニルェーテル、糖等で
、分子量の違うものや繊維状物質にコートした後、架橋
して用いたものもある。

繊維状物質としては、平均直径が８．２ｒｍのポリアク
リロニトリル繊維を用い、これをよく関総して直径１０
肌、長さ２５肋の容器に０．２鹿詰めてフィルターとし
た。各種物質のコート方法は、各種物質の３．５％等張
溶液（粘度が高くなり過ぎる物質については２．５％等
張溶液）を作り、この溶液をフィルターに５の【／ｍｉ
ｎの流速で５分間楯濁することによって行なった。白血
球分離操作は、上記のフィルターに３７０の血液を５机
上、１の‘／ｍｉｎの流速で流し、次に生理食塩水２０
舷を５の【／ｍｉｎの流速で流し、赤血球を洗浄した。

その後、２の‘の生理食塩水を急速に流し、フィルター
内に捕捉されていた白血球を回収した。この回収液中の
赤血球濃度を浸入赤血球濃度として縦軸にとり、前記し
た方法で測定した物質の溶解速度を機軸にとったのが第
９図のグラフである。なお、第９図において、Ａはゼラ
チン（水に不溶化）、Ｂはポリビニルアルコール（重合
度１２００）、Ｃはゼラチン（分子量１１万）、Ｄはポ
リメチルェーテル、Ｅはゼラチン（分子量６万）または
ポリビニルピロリドン（分子量３６方）またはカゼイン
、Ｆはポリビニルアルコール（重合度５００）、Ｇはゼ
ラチン（分子量３万）、日は糖、ゼラチン（分子量４〜
７千）、１はポリビニルピロリドン（分子量４方）を用
いたものを示す。

第９図から明らかなように、水に対する溶解速度が０．
礎／ｍｉｎ・地から１．０岬／ｍｉｎ・地の範囲にある
物質をコートした場合に限って、混入赤血球濃度が１０
００／仏そ以下になることがわかる。安定的に１０００
／＃そ以下にするためには、溶解速度が０．４奴ｃ／ｍ
ｊｎ・洲から０．９柵／ｍｉｎ・地の範囲の物質を用い
るのが好ましい。同じ物質、たとえばポリビニルピロリ
ドン、ゼラチン等でも分子量の違いや架橋することによ
って、水に対する溶解速度が速すぎたり、遅すぎたりす
ると、混入赤血球減少の効果が薄れることがわかる。以
下、実施例を挙げて説明する。

実施例において用いた血液は、健康な人から採取した血
液１の‘に対して５単位のへパリンを加えたへパリン加
血液であり、赤血球数は４１０万／ムそから４８０万／
山そ、白血球数は５００／仏そから８５００／ムそ（リ
ンパ球が２５〜４５％）、血４・板数は１３方／山そか
ら３Ｚ万ｒその範囲に入っているものを用いた。

実施例 １ 第７図に示す実験装置を用いて白血球の分離実験を行な
った、直径１仇岬、長さ２５側の容器に平均直径８２山
ｍのポリアクリロニトリル繊維を０．２股詰め、これに
２．鼓ノｄのこ調製した水に対する溶解速度が０．６２
雌／ｍｊｎ・地のポリビニルピロリドン（分子量３６万
）の生理食塩水溶液を充填した白血球分離フィルター７
とした。

これに人のへパリンカロ血液３の‘をポンプ８により１
の‘／ｍｉｎの流速で流し、次に生理食塩水を５の【／
ｍｉｎの流速で２０の‘流し、赤血球を洗い流した。こ
の後、白血球分離フィルター７の出口１５に生理食塩水
２Ｍを入れた注射器を取り付け、白血球分離フィルター
７内に捕捉されている白血球を勢いよく流出させた。縛
られた回収液を検査したところ、白血球は４０％回収さ
れ、混入した赤血球は白血球に対して１／５、濃度６０
０／ムそであった。比較例 １ 水に対する溶解速度が０．６２雌／ｍｉｎ・地のポリビ
ニルピロリドン（分子量３６方）の代わりに、溶解速度
が１．２雌／ｍｉｎ・地のポリビニルピロリドン（分子
量４万）を使用した以外は、実施例１と同様に実験した
。

その結果、白血球は４２％回収されたが、赤血球は白血
球の５．８倍、濃度にして１８０００／ｒ夕もあった。
実施例 ２ ２．班／ｄ〆に調製した水に対する溶解速度が０．６２
燐／ｍｉｎ・ののポリビニルピロリドンの代わりに、３
．５ｇノｄ夕もこ調製した水に対する溶解速度が０．６
３柵／ｍｉｎ・仇のカゼインナトリウムを用いた以外は
、実施例１と同様に実験した。

その結果、白血球は３９％回収され、混入した赤血球は
白血球に対して１／６、濃度にして５００ノリそであつ
た。比較例 ２ 水に対する溶解速度が０．６物夕／ｍｉｎ・塊のポリビ
ニルピロリドン（分子量３６万）の代わりに、水に対す
る溶解速度が０．２７の夕／ｍｉｎ・洲のポリビニルア
ルコール（重合度１２００）を使用した以外は、実施例
１と同様に実験した。

その結果、白血球は４０％回収されたが、混入した赤血
球は白血球に対して等量、濃度にして３０００／ムそで
あった。実施例 ３２．頭／ｄそに調製した水に対する
溶解速度が０．６２の９／ｍｉｎ・鮒のポリビニルピロ
リドンの代わりに、３．斑ノｄのこ調製した水に対する
溶解速度が０．６２の９／ｍｉｎ・係のゼラチン（分子
量６方）を加熱分解し、水に対する溶解速度を０．９３
の９／ｍｉｎ・地（分子量３万）にしたものを使用した
以外は、実施例１と同様に実験した。

その結果、白血球は４２％回収され、混入した赤血球は
７倍、濃度で９００／仏〆であった。比較例 ３２．酸
／ｄ夕に調製した水に対する溶解速度が０．６２の９／
ｍｉｎ・鮒のポリビニルピロリドンの代わりに、３．５
ｇノｄれこ調製した水に対する溶解速度が０．６２の夕
／ｍｉｎ・鮒のゼラチン（分子量６万）をコートした後
、２％グルタールアルデヒド水溶液で繊維表面のゼラチ
ンを架橋し、水に対して不溶化してから使用した以外は
、実施例１と同様に実験した。

その結果、白血球は４４％回収されたが、混入した赤血
球は白血球に対して５．４倍、濃度で１８０００／仏〆
であった。実施例 ４ 第８図に示した実験装置を用いてリンパ球の採取実験を
行なった。

白血球の分離フィルター７とした内径１仇吻、長さ２６
肋の容器の中に白血球分離材０．３雌詰めたものを用い
た。白血球分離材は平均直径７．８ｒｍの綿状のポリア
クリロニトリル繊維を７ｇ／ｄ夕に調整したゼラチン水
溶液にディツプし、その後遠心して余分のゼラチンを除
き関織、真空乾燥して作った。このゼラチンの分子量は
１１万で、水に対する溶解速度は０．４９の９／ｍｉｎ
・めであった。単球、額粒球の分離フィルター１６とし
ては内径１比肋、長さ７５肋の容器に平均直径が２０．
８ムｍのポリアミド繊維０．災笹を綿状にして詰めたも
のを用いた。まず生理食塩水１０をポンプ８により単球
・顎粒球の捕捉フィルター１６および白血球の分離フィ
ル夕−了もこ充填し、その後、導入ロー１を容器１２に
移し３７００に保温した人へパリン加血液１３を１の‘
／分の流速で５の‘、単球・額粒球の捕捉フィルター１
６に送った。

次に、導入口を容器１７に移し、シリコンオイル１８を
１の‘／分の流速で流し、単球・額粒球の捕捉フィルタ
ー１６内に残留している血液を白血球分離フィルター７
に送り出した。その後、単球・額粒球の捕捉フィルター
１６を取り外し、白血球の分離フィルター７の入口１９
から生理食塩水１０を２０の‘、５の‘／分の流速で送
り、白血球の分離フィル夕−７を洗浄した。次に白血球
の分離フィルター７を外し、白血球分離フィルター７の
入口１９に生理食塩水２の‘を入れた注射器を取り付け
、フィルター内の白血球を勢いよく流出させた。得られ
た回収液を検査山たところ、リンパ球は１５％回収され
、リンパ球に対する単球・顎粒球の混入率は８％であっ
た。そして、混入した赤血球はリンパ球に対して１／ｎ
止血小板も１／１０であった。赤血球濃度は７５／ｒそ
であった。比較例 ４ 実施例４と同じ実験装置でポリアクリロニトリル繊維を
ゼラチン水溶液にディップしなかったこと以外は、実施
例７と同様に実験した。

この実験の結果、リンパ球は１４％回収され、リンパ球
に対する単球・額粒球の混入率も６％であったが、混入
した赤血球はリンパ球に対して１４倍、血小板も４／１
０であった。

赤血球は濃度でｈｏｏｏ０／ｒそであった。以上述べた
ように本発明白血球分離方法によれば、血球浮遊液から
白血球を採取するに当り、採取した白血球に対して混入
する赤血球を大幅に減らすことが可能となり、また血小
板についても少なくすることができるようになった。

また、操作方法も簡便であり、操作時間も短いので白血
球に与える影響も少なかった。このようにして得られた
白血球は、各種臨床検査の信頼性を充分に高めた。

【図面の簡単な説明】

第１図は物質の溶解速度を測定する際に用いる容器の正
面図、第２図は該容器の側面図、第３図は該容器の平面
図、第４図は物質の溶解速度を測定する際に用いる実験
装置を示す図、第５図は代表的な物質の溶解速度を示す
グラフ、第６図は本発明の白血球の分離材を容器に詰め
て構成した白血球の分離フィルターを示す断面榛式図、
第７図は本発明の白血球分離法を行なう際に用いる装置
の一例を示す説明図、第８図は該装置の他の一例を示す
説明図、第９図は物質の溶解速度とその物質を繊維状物
質にコートして、白血球分離操作を行なったときの混入
赤血球濃度との関係を示すグラフである。 １・・・白血球の分離材、２・・・入口、３・・・出口
、４・・・容器、５，６・・・メッシュ、７・・・白血
球の分離フイルター、８…ポンプ、９，１１，１２，１
４，１７・・・容器、１０・・・生理的溶液、！１…導
入口、１３・・・血液、１５・・・出口、１６・・・単
球・顎粒球の分離フィルター、１８・・・シリコンオイ
ル、１９…入口。 第１図 第２図 第３図 第４図 第６図 第７図 第５図 第８図 第９図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 血液、体液またはこれらを処理して得られる血球浮
   遊液を白血球の分離材に接触させ、白血球を該分離材に
   捕捉させることによって白血球とその他の成分を分離し
   た後、該分離材から白血球を回収する白血球の分離方法
   において、白血球の分離材として繊維状物質表面に水に
   対し０．３ｍｇ／ｍｉｎ・ｃｍ＾２から１．０ｍｇ／ｍ
   ｉｎ・ｃｍ＾２の溶解速度で溶解する物質をコートした
   ものを使用することを特徴とする白血球分離法。 ２ 水に対し０．３ｍｇ／ｍｉｎ・ｃｍ＾２から１．０
   ｍｇ／ｍｉｎ・ｃｍ＾２の溶解速度で溶解する物質がゼ
   ラチンおよび／またはカゼインである特許請求の範囲第
   １項記載の白血球分離法。 ３ 繊維状物質の平均直径が１０μｍ以下である特許請
   求の範囲第１項または第２項記載の白血球分離法。 ４ 繊維状物質表面に水に対し０．３ｍｇ／ｍｉｎ・ｃ
   ｍ＾２から１．０ｍｇ／ｍｉｎ・ｃｍ＾２の溶解速度で
   溶解する物質をコートしてなることを特徴とする白血球
   分離材。 ５ 水に対し０．３ｍｇ／ｍｉｎ・ｃｍ＾２から１．０
   ｍｇ／ｍｉｎ・ｃｍ＾２の溶解速度で溶解する物質がゼ
   ラチンおよび／またはカゼインである特許請求の範囲第
   ４項記載の白血球分離材。 ６ 繊維状物質の平均直径が１０μｍ以下である特許請
   求の範囲第４項または第５項記載の白血球分離材。