JP2000180443A - 血液濾過残留物の回収方法 - Google Patents
血液濾過残留物の回収方法Info
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- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/25—Chemistry: analytical and immunological testing including sample preparation
- Y10T436/25375—Liberation or purification of sample or separation of material from a sample [e.g., filtering, centrifuging, etc.]
Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【課題】 簡単な手段で変形が少なく、しかも観察
しやすい血球試料を調製する方法を提供する。 【解決手段】 上記課題は、体積濾過材料よりなる血液
濾過材料と、これを収容し血液入口と濾過液出口を有す
るホルダーよりなる血液濾過器を用いて血液濾過を行っ
た後、濾過液出口側から回収水を通液することを特徴と
する血液濾過材料に堆積している濾過残留物を回収する
方法によって解決される。
しやすい血球試料を調製する方法を提供する。 【解決手段】 上記課題は、体積濾過材料よりなる血液
濾過材料と、これを収容し血液入口と濾過液出口を有す
るホルダーよりなる血液濾過器を用いて血液濾過を行っ
た後、濾過液出口側から回収水を通液することを特徴と
する血液濾過材料に堆積している濾過残留物を回収する
方法によって解決される。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は全血から血球成分を
回収する方法に関するものである。
回収する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】血液の分析は、大きく血球成分と血漿成
分に分けられるが、主に分析されるのは血漿成分のほう
である。
分に分けられるが、主に分析されるのは血漿成分のほう
である。
【０００３】一方、血球成分の分析としては赤血球や白
血球等の外形に基づく分析と内容物の分析がある。外形
に基づく分析では、例えば白血球の場合には、芽細胞か
ら各種成育段階の細胞、あるいは、顆粒白血球、リンパ
球等の各種白血球の構成割合や大きさ、形の正常、異常
等が調べられる。内容物の分析では、ＤＮＡの分析とか
赤血球のヘモグロビンの含有量等の分析が行われる。外
形に基づく分析の場合には、多くは全血のまま顕微鏡観
察されるが、遠心分離して血球成分を集めることもあ
る。内容物の分析を行う場合には遠心分離で血球を集め
て更に分離精製が行われる。
血球等の外形に基づく分析と内容物の分析がある。外形
に基づく分析では、例えば白血球の場合には、芽細胞か
ら各種成育段階の細胞、あるいは、顆粒白血球、リンパ
球等の各種白血球の構成割合や大きさ、形の正常、異常
等が調べられる。内容物の分析では、ＤＮＡの分析とか
赤血球のヘモグロビンの含有量等の分析が行われる。外
形に基づく分析の場合には、多くは全血のまま顕微鏡観
察されるが、遠心分離して血球成分を集めることもあ
る。内容物の分析を行う場合には遠心分離で血球を集め
て更に分離精製が行われる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】血球成分の外形に基づ
く分析を行う場合観察しにくいという問題がある。一
方、遠心分離を行えばこの見にくさの問題は解消される
が、遠心分離によって形がこわれやすいという問題があ
る。
く分析を行う場合観察しにくいという問題がある。一
方、遠心分離を行えばこの見にくさの問題は解消される
が、遠心分離によって形がこわれやすいという問題があ
る。
【０００５】本発明の目的は、簡単な手段で変形が少な
く、しかも観察しやすい血球試料を調製する方法を提供
することにある。溶血させて血球中の成分を測定する場
合、赤血球を洗浄することで血漿中蛋白の妨害を防止で
きる。
く、しかも観察しやすい血球試料を調製する方法を提供
することにある。溶血させて血球中の成分を測定する場
合、赤血球を洗浄することで血漿中蛋白の妨害を防止で
きる。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、先に血漿
成分分析のための血漿の分離方法として、遠心分離は手
間と時間がかかり、特に、少数の検体を急いで処理した
ときや、現場検査などには、電気を動力とし、遠心分離
機を必要とする遠心法は不向きであることに着目し、濾
過により全血から血漿や血清を分離する血液濾過ユニッ
トの開発を進めてきた（特開平９−１９６９１１号公
報、特開平９−２７６６３１号公報、特開平１０−１８
５７８０号公報、特開平１０−１８５９０９号公報、特
開平１０−２２７７８８号公報など）。
成分分析のための血漿の分離方法として、遠心分離は手
間と時間がかかり、特に、少数の検体を急いで処理した
ときや、現場検査などには、電気を動力とし、遠心分離
機を必要とする遠心法は不向きであることに着目し、濾
過により全血から血漿や血清を分離する血液濾過ユニッ
トの開発を進めてきた（特開平９−１９６９１１号公
報、特開平９−２７６６３１号公報、特開平１０−１８
５７８０号公報、特開平１０−１８５９０９号公報、特
開平１０−２２７７８８号公報など）。
【０００７】今回、この血液濾過ユニットで濾過した後
の体積濾過材料内に堆積している血球成分を逆洗して回
収することにより、血球成分を変形少なく回収でき、こ
の血球成分が外形に基づく分析等に極めて好適であるこ
とを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至
った。溶血させて血球中の成分を測定する場合、赤血球
を洗浄することで血漿中蛋白の妨害を防止できる。
の体積濾過材料内に堆積している血球成分を逆洗して回
収することにより、血球成分を変形少なく回収でき、こ
の血球成分が外形に基づく分析等に極めて好適であるこ
とを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至
った。溶血させて血球中の成分を測定する場合、赤血球
を洗浄することで血漿中蛋白の妨害を防止できる。
【０００８】すなわち、本発明は、体積濾過材料よりな
る血液濾過材料と、これを収容し血液入口と濾過液出口
を有するホルダーよりなる血液濾過器を用いて血液濾過
を行った後、濾過液出口側から回収水を通液することを
特徴とする血液濾過材料に堆積している濾過残留物を回
収する方法に関するものである。逆洗の前に血球を洗浄
し蛋白を除くことも有効である。
る血液濾過材料と、これを収容し血液入口と濾過液出口
を有するホルダーよりなる血液濾過器を用いて血液濾過
を行った後、濾過液出口側から回収水を通液することを
特徴とする血液濾過材料に堆積している濾過残留物を回
収する方法に関するものである。逆洗の前に血球を洗浄
し蛋白を除くことも有効である。
【０００９】
【発明の実施の形態】血液濾過材料の種類は問わない
が、本発明の濾過材料では、その表面のみで血球をトラ
ップするいわゆる表面濾過材料ではなく、ガラス繊維濾
紙等の厚さ方向に浸透するに従って、初めは大きな血球
成分、後には小さな血球成分と徐々に空隙構造にから
め、厚さ方向に全長にわたって血球を留め除去してい
く、いわゆる体積濾過材料によるものが使用される。好
ましいものはガラス繊維濾紙等であり、ガラス繊維濾紙
に微多孔性膜を組み合わせたものが特に好ましい。
が、本発明の濾過材料では、その表面のみで血球をトラ
ップするいわゆる表面濾過材料ではなく、ガラス繊維濾
紙等の厚さ方向に浸透するに従って、初めは大きな血球
成分、後には小さな血球成分と徐々に空隙構造にから
め、厚さ方向に全長にわたって血球を留め除去してい
く、いわゆる体積濾過材料によるものが使用される。好
ましいものはガラス繊維濾紙等であり、ガラス繊維濾紙
に微多孔性膜を組み合わせたものが特に好ましい。
【００１０】ガラス繊維濾紙は密度が０．０２〜０．５
程度、好ましくは０．０３〜０．２程度、特に好ましく
は０.０５〜０.１３程度で、保留粒子径が０．６〜９μ
ｍ程度、特に１〜５μｍ程度のものが好ましい。ガラス
繊維の表面を、特開平２−２０８５６５号公報、同４−
２０８８５６号公報に記載された様な方法で、親水性高
分子で処理することによって濾過をより速やかに円滑に
行なうことができる。また、ガラス繊維の表面をレクチ
ンで処理することもできる。ガラス繊維濾紙は複数枚を
積層して用いることができる。ガラス繊維濾紙はシート
状のものを積み重ねて使用するほか、細断小片としてホ
ルダーに充填することもできる。１枚のガラス繊維濾紙
の厚さは０．２〜３ｍｍ程度、通常０．５〜２ｍｍ程度
である。これを径が１０〜３０ｍｍ程度、好ましくは１
５〜２５ｍｍ程度に細断するのである。細断小片の形状
は問うところではなく、正方形、長方形のほか三角形、
円形等如何なる形状であってもよい。
程度、好ましくは０．０３〜０．２程度、特に好ましく
は０.０５〜０.１３程度で、保留粒子径が０．６〜９μ
ｍ程度、特に１〜５μｍ程度のものが好ましい。ガラス
繊維の表面を、特開平２−２０８５６５号公報、同４−
２０８８５６号公報に記載された様な方法で、親水性高
分子で処理することによって濾過をより速やかに円滑に
行なうことができる。また、ガラス繊維の表面をレクチ
ンで処理することもできる。ガラス繊維濾紙は複数枚を
積層して用いることができる。ガラス繊維濾紙はシート
状のものを積み重ねて使用するほか、細断小片としてホ
ルダーに充填することもできる。１枚のガラス繊維濾紙
の厚さは０．２〜３ｍｍ程度、通常０．５〜２ｍｍ程度
である。これを径が１０〜３０ｍｍ程度、好ましくは１
５〜２５ｍｍ程度に細断するのである。細断小片の形状
は問うところではなく、正方形、長方形のほか三角形、
円形等如何なる形状であってもよい。
【００１１】表面を親水化されており血球分離能を有す
る微多孔性膜は、実質的に分析値に影響を与える程には
溶血することなく、全血から血球と血漿を特異的に分離
するものである。この微多孔性膜は孔径がガラス繊維濾
紙の保留粒子径より小さくかつ０．２μｍ以上、好まし
くは０．３〜５μｍ程度、より好ましくは０．５〜３μ
ｍ程度のものが適当である。また、空隙率は高いものが
好ましく、具体的には、空隙率が約４０％から約９５
％、好ましくは約５０％から約９５％、さらに好ましく
は約７０％から約９５％の範囲のものが適当である。微
多孔性膜の例としてはポリスルホン膜、弗素含有ポリマ
ー膜等がある。
る微多孔性膜は、実質的に分析値に影響を与える程には
溶血することなく、全血から血球と血漿を特異的に分離
するものである。この微多孔性膜は孔径がガラス繊維濾
紙の保留粒子径より小さくかつ０．２μｍ以上、好まし
くは０．３〜５μｍ程度、より好ましくは０．５〜３μ
ｍ程度のものが適当である。また、空隙率は高いものが
好ましく、具体的には、空隙率が約４０％から約９５
％、好ましくは約５０％から約９５％、さらに好ましく
は約７０％から約９５％の範囲のものが適当である。微
多孔性膜の例としてはポリスルホン膜、弗素含有ポリマ
ー膜等がある。
【００１２】好ましい微多孔性膜はポリスルホン膜、酢
酸セルローズ膜等であり、特に好ましいのはポリスルホ
ン膜である。本発明の血液濾過材料においてはガラス繊
維濾紙が血液供給側に配置され、微多孔性膜が吸引側に
配置される。最も好ましい材料は血液供給側からガラス
繊維濾紙、ポリスルホン膜をこの順に積層した積層体で
ある。
酸セルローズ膜等であり、特に好ましいのはポリスルホ
ン膜である。本発明の血液濾過材料においてはガラス繊
維濾紙が血液供給側に配置され、微多孔性膜が吸引側に
配置される。最も好ましい材料は血液供給側からガラス
繊維濾紙、ポリスルホン膜をこの順に積層した積層体で
ある。
【００１３】本発明で用いられる濾過材料は特開昭６２
−１３８７５６〜８号公報、特開平２−１０５０４３号
公報、特開平３−１６６５１号公報等に開示された方法
に従って各層を部分的に配置された接着剤で接着して一
体化することができる。
−１３８７５６〜８号公報、特開平２−１０５０４３号
公報、特開平３−１６６５１号公報等に開示された方法
に従って各層を部分的に配置された接着剤で接着して一
体化することができる。
【００１４】ガラス繊維濾紙層の厚さは、回収すべき血
漿や血清の量とガラス繊維濾紙の密度(空隙率)及び面積
から定められる。分析を乾式分析素子を用いて複数項目
行なう場合の血漿や血清の必要量は１００〜５００μｌ
であり、ガラス繊維濾紙の密度が０.０２〜０．２程
度、面積が１〜５ｃｍ2程度が実用的である。この場合
ガラス繊維濾紙層の厚さは１〜１０ｍｍ程度、好ましく
は２〜８ｍｍ程度である。このガラス繊維濾紙は複数
枚、例えば２〜１０枚程度、好ましくは３〜８枚程度を
積層して上記厚さとすることができる。
漿や血清の量とガラス繊維濾紙の密度(空隙率)及び面積
から定められる。分析を乾式分析素子を用いて複数項目
行なう場合の血漿や血清の必要量は１００〜５００μｌ
であり、ガラス繊維濾紙の密度が０.０２〜０．２程
度、面積が１〜５ｃｍ2程度が実用的である。この場合
ガラス繊維濾紙層の厚さは１〜１０ｍｍ程度、好ましく
は２〜８ｍｍ程度である。このガラス繊維濾紙は複数
枚、例えば２〜１０枚程度、好ましくは３〜８枚程度を
積層して上記厚さとすることができる。
【００１５】微多孔性膜の厚さは０．０５〜０．５ｍｍ
程度、特に０．１〜０．３ｍｍ程度でよく、通常は１枚
の微多孔性膜を用いればよい。しかしながら、必要によ
り複数枚を用いることもできる。
程度、特に０．１〜０．３ｍｍ程度でよく、通常は１枚
の微多孔性膜を用いればよい。しかしながら、必要によ
り複数枚を用いることもできる。
【００１６】血液濾過材料はホルダーに入れられる。こ
のホルダーには血液入口と濾過液出口が設けられ、一般
に血液濾過材料を収容する本体と、蓋体に分けた態様で
作製される。通常は、いずれにも少なくとも１個の開口
が設けられていて、一方は血液入口として、他方は濾過
液出口として、場合により更に吸引口として使用され
る。吸引口を別に設けることもできる。ホルダーが四角
形で蓋体を側面に設けた場合には血液入口と濾過液出口
の両方を本体に設けることができる。
のホルダーには血液入口と濾過液出口が設けられ、一般
に血液濾過材料を収容する本体と、蓋体に分けた態様で
作製される。通常は、いずれにも少なくとも１個の開口
が設けられていて、一方は血液入口として、他方は濾過
液出口として、場合により更に吸引口として使用され
る。吸引口を別に設けることもできる。ホルダーが四角
形で蓋体を側面に設けた場合には血液入口と濾過液出口
の両方を本体に設けることができる。
【００１７】血液濾過材料収納部すなわち血液濾過室の
容積は、収納すべき濾過材料の乾燥状態および検体（全
血）を吸収し膨潤した時の総体積より大きい必要があ
る。濾過材料の総体積に対して収納部の容積が小さい
と、濾過が効率良く進行しなかったり、溶血を起こした
りする。収納部の容積の濾過材料の乾燥時の総体積に対
する比率は濾過材料の膨潤の程度にもよるが、通常１０
１％〜４００％、好ましくは１１０％〜１５０％、更に
好ましくは１２０％〜１４０％である。具体的には血漿
や血清の必要量との関係で定まるが０．５〜２．５ｍｌ
程度、通常０．６〜２．２ｍｌ程度である。
容積は、収納すべき濾過材料の乾燥状態および検体（全
血）を吸収し膨潤した時の総体積より大きい必要があ
る。濾過材料の総体積に対して収納部の容積が小さい
と、濾過が効率良く進行しなかったり、溶血を起こした
りする。収納部の容積の濾過材料の乾燥時の総体積に対
する比率は濾過材料の膨潤の程度にもよるが、通常１０
１％〜４００％、好ましくは１１０％〜１５０％、更に
好ましくは１２０％〜１４０％である。具体的には血漿
や血清の必要量との関係で定まるが０．５〜２．５ｍｌ
程度、通常０．６〜２．２ｍｌ程度である。
【００１８】また、体積濾過材料と収納部の壁面との間
は、全血を吸引した時に体積濾過材料を経由しない流路
が出来ないように構成されていることが好ましい。但
し、微多孔性膜で止めうる程度の血球が漏れてきても支
障はない。
は、全血を吸引した時に体積濾過材料を経由しない流路
が出来ないように構成されていることが好ましい。但
し、微多孔性膜で止めうる程度の血球が漏れてきても支
障はない。
【００１９】採血管から血液を吸引するノズルはホルダ
ーの血液入口に接続される。このノズルはホルダーと同
体であっても別体であってもよい。別体の場合、ホルダ
ー本体に固着して接続部が密閉構造になっていればよ
く、接続手段は接着、融着、螺着、嵌着、ネジ止等いか
なる手段であってもよい。
ーの血液入口に接続される。このノズルはホルダーと同
体であっても別体であってもよい。別体の場合、ホルダ
ー本体に固着して接続部が密閉構造になっていればよ
く、接続手段は接着、融着、螺着、嵌着、ネジ止等いか
なる手段であってもよい。
【００２０】濾過器は、上記本体に蓋体が取付けられる
と、これらの血液入口と吸引口としても使用される濾過
液出口を除いて全体が密閉構造になる。
と、これらの血液入口と吸引口としても使用される濾過
液出口を除いて全体が密閉構造になる。
【００２１】ホルダーの材料はプラスチックが好まし
い。例えば、ポリスチレン、ポリメタアクリル酸エステ
ル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステル、ナ
イロン、ポリカーボネート等の透明あるいは不透明の樹
脂が用いられる。
い。例えば、ポリスチレン、ポリメタアクリル酸エステ
ル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステル、ナ
イロン、ポリカーボネート等の透明あるいは不透明の樹
脂が用いられる。
【００２２】上記本体と蓋体の取付方法は、接着剤を用
いた接合、融着等如何なる手段によってもよい。この
際、上記本体と蓋体のいずれの周縁が内側に位置しても
よく、あるいは突き合わせ状態であってもよい。また、
上記本体と蓋体をネジ等の手段で組立分解ができる構造
とすることもできる。
いた接合、融着等如何なる手段によってもよい。この
際、上記本体と蓋体のいずれの周縁が内側に位置しても
よく、あるいは突き合わせ状態であってもよい。また、
上記本体と蓋体をネジ等の手段で組立分解ができる構造
とすることもできる。
【００２３】血液濾過材料の形状に特に制限はないが、
製造が容易なように、円形とすることが望ましい。この
際、円の直径をホルダー本体の内径よりやや大きめと
し、濾過材料の側面から血漿が漏れることを防ぐことが
できる。一方、四角形にすれば作製した血液濾過材料の
切断ロスがなくなるので好ましい。
製造が容易なように、円形とすることが望ましい。この
際、円の直径をホルダー本体の内径よりやや大きめと
し、濾過材料の側面から血漿が漏れることを防ぐことが
できる。一方、四角形にすれば作製した血液濾過材料の
切断ロスがなくなるので好ましい。
【００２４】上記の血液濾過器を用いて行う血液濾過方
法は特に限定されないが、血球を破壊しないよう、血液
入口と濾過液出口間の圧力差を２００ｍｍＨｇ以下、好
ましくは１７０ｍｍＨｇ以下、特に好ましくは１５０ｍ
ｍＨｇ以下とするのがよい。圧力差の下限は特にない
が、濾過時間の実用面で３０ｍｍＨｇ以上、好ましくは
５０ｍｍＨｇ以上とすることが望ましい。
法は特に限定されないが、血球を破壊しないよう、血液
入口と濾過液出口間の圧力差を２００ｍｍＨｇ以下、好
ましくは１７０ｍｍＨｇ以下、特に好ましくは１５０ｍ
ｍＨｇ以下とするのがよい。圧力差の下限は特にない
が、濾過時間の実用面で３０ｍｍＨｇ以上、好ましくは
５０ｍｍＨｇ以上とすることが望ましい。
【００２５】特に好ましい濾過方法は、まず、被濾過血
液を供給後、厳密にはガラス繊維濾紙層に接触後少なく
とも５秒間血液入口側と濾過液出口側の圧力差を５０ｍ
ｍＨｇ以下に保つ。この第１段階における圧力差は５０
ｍｍＨｇ以下であるが、好ましくは３０ｍｍＨｇ以下で
あり、血液を自然に展開させるだけでもよい。一方、保
持時間は５秒間以上であるが、好ましくは１０秒間以上
である。
液を供給後、厳密にはガラス繊維濾紙層に接触後少なく
とも５秒間血液入口側と濾過液出口側の圧力差を５０ｍ
ｍＨｇ以下に保つ。この第１段階における圧力差は５０
ｍｍＨｇ以下であるが、好ましくは３０ｍｍＨｇ以下で
あり、血液を自然に展開させるだけでもよい。一方、保
持時間は５秒間以上であるが、好ましくは１０秒間以上
である。
【００２６】血液の供給量は血液濾過材料の体積の１．
２〜５倍程度、好ましくは２〜４倍程度が適当であり、
ガラス繊維濾紙の体積ではその１．２〜３倍程度、好ま
しくは１．２〜２倍程度が適当である。
２〜５倍程度、好ましくは２〜４倍程度が適当であり、
ガラス繊維濾紙の体積ではその１．２〜３倍程度、好ま
しくは１．２〜２倍程度が適当である。
【００２７】上記第１段階後は濾過液出口側からの吸引
および／または血液入口側からの加圧によって血液濾過
を促進する。この加、減圧手段はペリスタルあるいはシ
リンジを利用する方法が簡便である。その際に圧力差が
最大でも２００ｍｍＨｇ以下とするのがよい。この最大
圧力差は好ましくは１７０ｍｍＨｇ以下であり、特に好
ましくは１５０ｍｍＨｇ以下に抑えるようにする。圧力
差の下限は特になく、遅くても良いが、時間がかかるの
で実用的でなくなる。この点で圧力差が最低で３０ｍｍ
Ｈｇ、好ましくは５０ｍｍＨｇを越えるようにすること
が好ましい。シリンジを用いる場合のピストンを移動さ
せる距離はピストンの移動体積が濾過材料の体積の２〜
５倍程度になるようにするのがよい。 移動速度は１ｃ
ｍ2当り１〜５００ｍｌ／ｍｉｎ程度、好ましくは２０
〜１００ｍｌ／ｍｉｎ程度が適当である。
および／または血液入口側からの加圧によって血液濾過
を促進する。この加、減圧手段はペリスタルあるいはシ
リンジを利用する方法が簡便である。その際に圧力差が
最大でも２００ｍｍＨｇ以下とするのがよい。この最大
圧力差は好ましくは１７０ｍｍＨｇ以下であり、特に好
ましくは１５０ｍｍＨｇ以下に抑えるようにする。圧力
差の下限は特になく、遅くても良いが、時間がかかるの
で実用的でなくなる。この点で圧力差が最低で３０ｍｍ
Ｈｇ、好ましくは５０ｍｍＨｇを越えるようにすること
が好ましい。シリンジを用いる場合のピストンを移動さ
せる距離はピストンの移動体積が濾過材料の体積の２〜
５倍程度になるようにするのがよい。 移動速度は１ｃ
ｍ2当り１〜５００ｍｌ／ｍｉｎ程度、好ましくは２０
〜１００ｍｌ／ｍｉｎ程度が適当である。
【００２８】ところで、血液はヘマトクリット値に大き
なバラツキがあり、それによって濾過抵抗（加減圧に伴
う圧力差の上昇速度）が変わる。つまり、一定速度で
加、減圧を加えていった場合、ヘマトクリット値の大き
な血液では圧力差がどんどん上昇し、血漿や血清の必要
量が得られる前に濾過材料の目詰まりによる濾過速度の
急激な低下や多大な圧力差の付加による血球破壊を生じ
てしまう。一方、ヘマトクリット値の小さな血液では濾
過速度が大きすぎて血球漏出を生じる。そこで、血液を
濾過層に供給後一定の速度パターンで吸引および／また
は加圧して血液入口側と濾過液出口側の圧力差の経時変
化を追跡し、当該圧力差から被濾過血液のヘマトクリッ
ト値を推定し、その後の吸引および／または加圧速度を
調整することが望ましい。上記一定の速度パターンは通
常は一定速度でよいが、同一の速度パターンを採用すれ
ば一定速度でなくともよい。ヘマトクリット値に対応す
る吸引および／または加圧速度の調整は、ヘマトクリッ
トが高い血液の場合は溶血を起こし易いので、吸引ある
いは加圧の変化率を小さく保ち、かつ最大減圧度を低く
する（濾過に要する時間を長くする）。低いヘマトクリ
ットの血液では溶血は起こりにくくかつ濾過もし易いの
で、相対的に高い吸引または加圧で短時間処理すれば良
い。
なバラツキがあり、それによって濾過抵抗（加減圧に伴
う圧力差の上昇速度）が変わる。つまり、一定速度で
加、減圧を加えていった場合、ヘマトクリット値の大き
な血液では圧力差がどんどん上昇し、血漿や血清の必要
量が得られる前に濾過材料の目詰まりによる濾過速度の
急激な低下や多大な圧力差の付加による血球破壊を生じ
てしまう。一方、ヘマトクリット値の小さな血液では濾
過速度が大きすぎて血球漏出を生じる。そこで、血液を
濾過層に供給後一定の速度パターンで吸引および／また
は加圧して血液入口側と濾過液出口側の圧力差の経時変
化を追跡し、当該圧力差から被濾過血液のヘマトクリッ
ト値を推定し、その後の吸引および／または加圧速度を
調整することが望ましい。上記一定の速度パターンは通
常は一定速度でよいが、同一の速度パターンを採用すれ
ば一定速度でなくともよい。ヘマトクリット値に対応す
る吸引および／または加圧速度の調整は、ヘマトクリッ
トが高い血液の場合は溶血を起こし易いので、吸引ある
いは加圧の変化率を小さく保ち、かつ最大減圧度を低く
する（濾過に要する時間を長くする）。低いヘマトクリ
ットの血液では溶血は起こりにくくかつ濾過もし易いの
で、相対的に高い吸引または加圧で短時間処理すれば良
い。
【００２９】具体的には、以下の方法が挙げられる。ヘ
マトクリット値の異なる全血試料を用いて、吸引圧と吸
引時間の最適なパターンを予め決めておく。実際の検体
の濾過に際してはヘマトクリット値は判らないので、標
準的な血液（例えばヘマトクリット値４５％）で設定し
た吸引パターンで吸引を開始し、その後の濾過の進行に
伴う濾過圧の変動と基準値との差から検体のヘマトクリ
ット値を推定して、予め決めた最適パターンに合致する
吸引条件に合うように吸引圧や吸引時間を調整しながら
濾過を行う。
マトクリット値の異なる全血試料を用いて、吸引圧と吸
引時間の最適なパターンを予め決めておく。実際の検体
の濾過に際してはヘマトクリット値は判らないので、標
準的な血液（例えばヘマトクリット値４５％）で設定し
た吸引パターンで吸引を開始し、その後の濾過の進行に
伴う濾過圧の変動と基準値との差から検体のヘマトクリ
ット値を推定して、予め決めた最適パターンに合致する
吸引条件に合うように吸引圧や吸引時間を調整しながら
濾過を行う。
【００３０】加圧による濾過においても同様に調整でき
ることはいうまでもない。
ることはいうまでもない。
【００３１】血液濾過が終了したら、得られた血漿ある
いは血清を除く。次に、血液濾過器の濾過液出口側から
回収水を通液して血液濾過材料に堆積している血球成分
を洗い出して回収する。必要な場合は、次に、濾過時と
同じ方向に洗浄水を流し血球を洗う。次いで、出口側か
ら回収水を通液し血球成分を回収する。
いは血清を除く。次に、血液濾過器の濾過液出口側から
回収水を通液して血液濾過材料に堆積している血球成分
を洗い出して回収する。必要な場合は、次に、濾過時と
同じ方向に洗浄水を流し血球を洗う。次いで、出口側か
ら回収水を通液し血球成分を回収する。
【００３２】回収水には精製水や生理食塩水、各種緩衝
液などが使用される。回収水の使用量は血液濾過材料の
容積の０．５〜１０倍量程度、好ましくは０．５〜５倍
量程度が適当である。
液などが使用される。回収水の使用量は血液濾過材料の
容積の０．５〜１０倍量程度、好ましくは０．５〜５倍
量程度が適当である。
【００３３】この回収水は、血液濾過が終了して空にな
った血液濾過器内に導入して該濾過器を血液等の保存容
器として使用することもできる。
った血液濾過器内に導入して該濾過器を血液等の保存容
器として使用することもできる。
【００３４】
【実施例】実施例１ (１) ホルダーの作製 図１〜３に示す血液濾過ユニットを作製した。この濾過
ユニットは組み立てた状態の縦断面図である図２に示す
ようにホルダー本体１０と蓋体２０からなっている。
ユニットは組み立てた状態の縦断面図である図２に示す
ようにホルダー本体１０と蓋体２０からなっている。
【００３５】ホルダー本体１０には血液濾過材料３０の
収容室１１（直径２０．１ｍｍ）とその上縁から外方に
形成されたフランジ１３が形成されている。一方、ホル
ダー本体１０の底部には周縁よりやや内側に段部を設け
てそこから浅いロート状円板部１２が連設され、その中
心から下方にノズル状血液供給口１４が延設されてい
る。上記の段部は血液濾過材料３０の下面をホルダー本
体１０のロート状円板部１２から隔離させて空間１５を
形成するスペーサー１６として機能させている。図１及
び図３に示されているように血液供給口１４の基部には
４方にフラップ１７が形成されている。このフラップは
血液を入れたサンプル管（図示されていない。）を嵌め
込むことによって保持するものである。
収容室１１（直径２０．１ｍｍ）とその上縁から外方に
形成されたフランジ１３が形成されている。一方、ホル
ダー本体１０の底部には周縁よりやや内側に段部を設け
てそこから浅いロート状円板部１２が連設され、その中
心から下方にノズル状血液供給口１４が延設されてい
る。上記の段部は血液濾過材料３０の下面をホルダー本
体１０のロート状円板部１２から隔離させて空間１５を
形成するスペーサー１６として機能させている。図１及
び図３に示されているように血液供給口１４の基部には
４方にフラップ１７が形成されている。このフラップは
血液を入れたサンプル管（図示されていない。）を嵌め
込むことによって保持するものである。
【００３６】蓋体２０の底面は中心に向かって同心円状
の段２１が４段形成されて中央が凹みここが上部空間を
形成している。この底面中央にはサイコロの５の目状に
５つの突起２５が血液濾過材料の密着を阻止する手段と
して下方に突出形成されている。また、血漿受槽２２の
中心と周壁の中間に両側を削ぎ落とした煙突状の血漿通
路２４が上方に起立し、その頂部には血漿の噴出を阻止
する庇２６が水平方向にせり出している。この庇２６は
図３に示されているように大小２つの半円を組み合わさ
れた形状をしており、周壁側の半円は血漿通路外壁と一
致させ、中心側の半円は血漿通路内壁の延長線と一致さ
せている。血漿通路２４の両側部には、血漿の液深を確
保するため、血漿受槽２２の周壁面に達する仕切壁２７
が形成されている。血漿受槽２２の上端は開放されてお
り、これが吸引口２８となっている。蓋体２０の底部に
は外方に突出するフランジ２３が形成され、このフラン
ジがホルダー本体のフランジ１３と超音波で接着され
る。フランジ２３のホルダー本体のフランジ１３と合わ
さる面にはリブ（図示されていない。）が形成されてい
る。これは接着の際には超音波エネルギーをそこに集め
て液密性を充分に確保した状態で接着されるようにした
ものである。
の段２１が４段形成されて中央が凹みここが上部空間を
形成している。この底面中央にはサイコロの５の目状に
５つの突起２５が血液濾過材料の密着を阻止する手段と
して下方に突出形成されている。また、血漿受槽２２の
中心と周壁の中間に両側を削ぎ落とした煙突状の血漿通
路２４が上方に起立し、その頂部には血漿の噴出を阻止
する庇２６が水平方向にせり出している。この庇２６は
図３に示されているように大小２つの半円を組み合わさ
れた形状をしており、周壁側の半円は血漿通路外壁と一
致させ、中心側の半円は血漿通路内壁の延長線と一致さ
せている。血漿通路２４の両側部には、血漿の液深を確
保するため、血漿受槽２２の周壁面に達する仕切壁２７
が形成されている。血漿受槽２２の上端は開放されてお
り、これが吸引口２８となっている。蓋体２０の底部に
は外方に突出するフランジ２３が形成され、このフラン
ジがホルダー本体のフランジ１３と超音波で接着され
る。フランジ２３のホルダー本体のフランジ１３と合わ
さる面にはリブ（図示されていない。）が形成されてい
る。これは接着の際には超音波エネルギーをそこに集め
て液密性を充分に確保した状態で接着されるようにした
ものである。
【００３７】(２) 濾過ユニットの作製 (１)のプラスチック製のホルダー(内径２０．１ｍｍ)の
ホルダー本体１０に、直径２０．３ｍｍの円板状に打ち
抜いたガラス繊維濾紙（ワットマン社製，ＧＦ／Ｄ）６
枚を重ねて入れ、その上に、直径２０．７ｍｍの円板状
に打ち抜いた厚さ１７０μｍのポリスルホン多孔膜３３
(富士写真フイルム社製 ＳＥ−２００）をのせた。蓋体
２０をセットし、両者のフランジ１３と２３を超音波で
溶着してシールした。ノズル状血液供給口１４に血液吸
引用ノズルとしてフジクリーンチップ（富士写真フイル
ム社製）を装着して、濾過ユニットを完成させた。
ホルダー本体１０に、直径２０．３ｍｍの円板状に打ち
抜いたガラス繊維濾紙（ワットマン社製，ＧＦ／Ｄ）６
枚を重ねて入れ、その上に、直径２０．７ｍｍの円板状
に打ち抜いた厚さ１７０μｍのポリスルホン多孔膜３３
(富士写真フイルム社製 ＳＥ−２００）をのせた。蓋体
２０をセットし、両者のフランジ１３と２３を超音波で
溶着してシールした。ノズル状血液供給口１４に血液吸
引用ノズルとしてフジクリーンチップ（富士写真フイル
ム社製）を装着して、濾過ユニットを完成させた。
【００３８】(３) 血液の採取 男子健常者より、ヘパリン入り真空採血管（テルモ社
製）を用いて静脈血１０ｍｌを採血した。この血液のヘ
マトクリットを測定したところ、４４％であった。この
血液３ｍｌを容量４ｍｌのプラスチック製試験管に分取
した。
製）を用いて静脈血１０ｍｌを採血した。この血液のヘ
マトクリットを測定したところ、４４％であった。この
血液３ｍｌを容量４ｍｌのプラスチック製試験管に分取
した。
【００３９】(４) 吸引機 排気速度が可変のペリスタポンプと接続されている小型
吸引機を作製した。小型吸引機のチューブの先端には、
上記濾過ユニットの吸引面と気密状態で接続可能なシリ
コーンゴム製の吸引ピペットを取り付けた。チューブの
途中に圧力モニター用のゲージを接続した。
吸引機を作製した。小型吸引機のチューブの先端には、
上記濾過ユニットの吸引面と気密状態で接続可能なシリ
コーンゴム製の吸引ピペットを取り付けた。チューブの
途中に圧力モニター用のゲージを接続した。
【００４０】(５) 血液の濾過 (３)で分取した血液に（２）の濾過ユニットの検体吸引
ノズルを挿入し、濾過ユニットの他端を吸引機の吸引パ
ッドに接続した。吸引ポンプの排気速度を調節し、３０
秒後に減圧度が１００ｍｍＨｇに到達するようにしつつ
吸引を続けた。１０秒後の減圧度は３０ｍｍＨｇであっ
た。
ノズルを挿入し、濾過ユニットの他端を吸引機の吸引パ
ッドに接続した。吸引ポンプの排気速度を調節し、３０
秒後に減圧度が１００ｍｍＨｇに到達するようにしつつ
吸引を続けた。１０秒後の減圧度は３０ｍｍＨｇであっ
た。
【００４１】(６) 血漿の回収 吸引に伴って濾過ユニットの貯留槽中に血漿が流出し
た。量は、３３０μｌであった。血漿の色は淡黄色であ
り、溶血液や赤血球の混入は観察されなかった。
た。量は、３３０μｌであった。血漿の色は淡黄色であ
り、溶血液や赤血球の混入は観察されなかった。
【００４２】(７) 濾過残留物の回収 血漿を除いたあと、順方向に生理食塩水を２ｍｌで２回
洗った後、逆方向に２ｍｌで回収する。一部は赤血球を
観察したところ破壊した物は認められなかった。残りを
溶血させヘモグロビンＡＩＣの測定試料とした。
洗った後、逆方向に２ｍｌで回収する。一部は赤血球を
観察したところ破壊した物は認められなかった。残りを
溶血させヘモグロビンＡＩＣの測定試料とした。
【００４３】
【発明の効果】本発明により、血液から血球試料を容易
に取得することができる。
に取得することができる。
【図１】 本発明の一実施例である血液濾過ユニットを
組み立てた状態の縦断面図である。
組み立てた状態の縦断面図である。
【図２】 同上平面図である。
【図３】 上記血液濾過ユニットのホルダー本体の底面
図である。
図である。
【図４】 各種吸引パターンを示すグラフである。
１０…ホルダー本体 １１…血液濾過材料収容室 １２…円板部 １３…フランジ １４…血液供給口 １５…空間 １６…スペーサー １７…フラップ ２０…蓋体 ２１…段 ２２…血漿受槽 ２３…フランジ ２４…血漿通路 ２５…突起（密着阻止手段） ２６…庇 ２７…仕切壁 ２８…吸引口 ３０…血液濾過材料 ３１…ナイロンメッシュ ３２…ガラス繊維濾紙フレーク層 ３３…ポリスルホン多孔膜（微多孔性膜）
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｂ０１Ｄ 29/38 ５１０Ａ 29/42 ５２０ (72)発明者 新井 貴喜 埼玉県朝霞市泉水三丁目11番46号 富士写 真フイルム株式会社内 Ｆターム(参考） 2G045 AA02 BA08 BA10 BB06 CA01 CA25 CA26 HA06 HA14 HB02 HB03 HB05
Claims (1)
- 【請求項１】 体積濾過材料よりなる血液濾過材料と、
これを収容し血液入口と濾過液出口を有するホルダーよ
りなる血液濾過器を用いて血液濾過を行った後、濾過液
出口側から回収水を通液することを特徴とする血液濾過
材料に堆積している濾過残留物を回収する方法
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10355475A JP2000180443A (ja) | 1998-12-15 | 1998-12-15 | 血液濾過残留物の回収方法 |
| US09/464,614 US6375856B1 (en) | 1998-12-15 | 1999-12-15 | Method of recovering blood filtration residues |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10355475A JP2000180443A (ja) | 1998-12-15 | 1998-12-15 | 血液濾過残留物の回収方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000180443A true JP2000180443A (ja) | 2000-06-30 |
Family
ID=18444169
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10355475A Pending JP2000180443A (ja) | 1998-12-15 | 1998-12-15 | 血液濾過残留物の回収方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6375856B1 (ja) |
| JP (1) | JP2000180443A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003034038A2 (en) * | 2001-10-19 | 2003-04-24 | Monogen, Inc. | Flow control metering system and method for controlling filtration of liquid-based specimens |
| JPWO2003005039A1 (ja) * | 2001-07-04 | 2004-10-28 | 協和メデックス株式会社 | 定量用溶液調製方法、この定量用溶液を用いた定量方法並びに定量用溶液調製器具及びその使用方法 |
| WO2005012557A1 (ja) * | 2003-08-04 | 2005-02-10 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. | 赤血球採取方法及びソルビトール測定方法 |
| WO2005080979A1 (ja) * | 2004-02-20 | 2005-09-01 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | 多層分析要素 |
| JP2018031730A (ja) * | 2016-08-26 | 2018-03-01 | コニカミノルタ株式会社 | ヘマトクリット値の測定方法、ヘマトクリット値の測定装置、被測定物質の量の測定方法、および被測定物質の量の測定装置 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7238532B1 (en) * | 2001-06-01 | 2007-07-03 | David Michael Philbrook | Isothiazolone monitoring in aqueous systems |
| DE10304365A1 (de) * | 2003-02-04 | 2004-08-05 | Ls-Medcap Gmbh | Filtervorrichtung |
| FI20031678A0 (fi) * | 2003-11-18 | 2003-11-18 | Teemu Korpimaeki | Näytteen käsittelymenetelmä ja järjestely siihen |
| FR2883488B1 (fr) * | 2005-03-24 | 2010-12-10 | Inst Nat Sante Rech Med | Procede et dispositif pour separer par filtration verticale des particules biologiques contenues dans un liquide |
| US20140060330A1 (en) * | 2012-09-05 | 2014-03-06 | Donaldson Company, Inc. | Microporous membrane and fine-fiber laminate |
| US9317068B2 (en) | 2012-09-24 | 2016-04-19 | Donaldson Company, Inc. | Venting assembly and microporous membrane composite |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2018151B (en) * | 1978-03-06 | 1982-12-08 | Asahi Chemical Ind | Seperation of leukocytes from leukocyte-containing suspension by filtration |
| JPS603367B2 (ja) * | 1979-10-09 | 1985-01-28 | 旭化成株式会社 | 白血球分離法および白血球分離材 |
| JP3903098B2 (ja) * | 1997-07-18 | 2007-04-11 | 富士フイルム株式会社 | 血液濾過方法 |
| US6120474A (en) * | 1997-12-15 | 2000-09-19 | Nissho Corporation | Blood component-recovering apparatus and a method for recovering blood components using the same |
-
1998
- 1998-12-15 JP JP10355475A patent/JP2000180443A/ja active Pending
-
1999
- 1999-12-15 US US09/464,614 patent/US6375856B1/en not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPWO2003005039A1 (ja) * | 2001-07-04 | 2004-10-28 | 協和メデックス株式会社 | 定量用溶液調製方法、この定量用溶液を用いた定量方法並びに定量用溶液調製器具及びその使用方法 |
| WO2003034038A2 (en) * | 2001-10-19 | 2003-04-24 | Monogen, Inc. | Flow control metering system and method for controlling filtration of liquid-based specimens |
| WO2003034038A3 (en) * | 2001-10-19 | 2003-07-03 | Monogen Inc | Flow control metering system and method for controlling filtration of liquid-based specimens |
| WO2005012557A1 (ja) * | 2003-08-04 | 2005-02-10 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. | 赤血球採取方法及びソルビトール測定方法 |
| WO2005080979A1 (ja) * | 2004-02-20 | 2005-09-01 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | 多層分析要素 |
| JP2018031730A (ja) * | 2016-08-26 | 2018-03-01 | コニカミノルタ株式会社 | ヘマトクリット値の測定方法、ヘマトクリット値の測定装置、被測定物質の量の測定方法、および被測定物質の量の測定装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US6375856B1 (en) | 2002-04-23 |
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