JP3990505B2

JP3990505B2 - 血液成分の分析方法

Info

Publication number: JP3990505B2
Application number: JP02447999A
Authority: JP
Inventors: 貴喜新井; 建一郎矢沢; 修瀬志本
Original assignee: Fujifilm Corp
Current assignee: Fujifilm Corp
Priority date: 1999-02-02
Filing date: 1999-02-02
Publication date: 2007-10-17
Anticipated expiration: 2019-02-02
Also published as: US6383818B1; JP2000221189A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、血液をガラス繊維フィルターで濾過して得られた血漿または血清検料を分析する際に、ガラス繊維フィルターによって生じる誤差を補正する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
血液中の構成成分例えば代謝産物、蛋白質、脂質、電解質、酵素、抗原、抗体などの種類や濃度の測定は通常全血を遠心分離して得られる血漿または血清を検体として行われている。ところが、遠心分離は手間と時間がかかる。特に少数の検体を急いで処理したいときや、現場検査などには、電気を動力とし、遠心分離機を必要とする遠心法は不向きである。そこで、濾過により全血から血漿や血清を分離する方法が検討されてきた。
【０００３】
この濾過方法には、ガラス繊維濾紙をカラムに充填し、カラムの一方から全血を注入し、加圧や減圧を行なって他方から血漿や血清を得るいくつかの方法が公知化されている（特公昭４４−１４６７３号公報、特開平２−２０８５６５号公報、特開平４−２０８８５６号公報、特公平５−５２４６３号公報等）。
【０００４】
しかし、全血から濾過により自動分析等による測定に必要な量の血漿または血清を得る方法に関しては血糖など一部の項目を除いては、いまだ試行の段階にあり、広く実用化されるに至っていない。
【０００５】
そこで、本発明者らは先に、微量な血液であっても血漿や血清を効率よく分離しうる血液濾過ユニットとして、濾材にガラス繊維濾紙と微多孔性膜を組み合わせるとともに濾材の血漿等の出口側にシール部材を設けて濾過材料の開口面積を狭めた血液濾過ユニットを完成した（特開平９−１９６９１１号公報）。
【０００６】
また、その吸引側に血漿受槽を設けたものも既に開発した（特開平９−２７６６３１号公報）。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
臨床分析される血液中の電解質には、カルシウム、ナトリウム、カリウム等も対象に含まれている。ところが、本発明者らが市販のガラス繊維フィルターを調べたところ、その中にはこれらが血液中に溶出して分析誤差を与えるものが複数存在することを見出した。
【０００８】
さらに、蛋白、アンモニア態窒素、アルカリホスファターゼ等の酵素等も影響を受けることを見出した。
【０００９】
本発明の目的は、ガラス繊維フィルターを用いて血液を濾過してもそれによって生じる誤差を除去でき、もって血液成分を簡便に測定できる分析方法を提供することにある。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するべく鋭意検討の結果、ガラス繊維フィルターによる電解質、蛋白、アンモニア態窒素、酵素等の誤差は一次方程式で表されること、および同種のガラス繊維フィルターであれば現れる誤差が同じになることを見出した。従って、測定しようとする分析項目についてこのガラス繊維フィルターの一次方程式で表される誤差の２つの係数を予め求めておけば、この一次方程式によって誤差を補正することができる。
【００１１】
本発明は、これらの知見に基づいてなされたものであり、血液をガラス繊維フィルターで濾過して得られた血漿検体または血清検体を分析する際に、予め当該ガラス繊維フィルターを用いて濾過して得られた血漿または血清の分析値Ｘと標準となる血液分離方法で得られた血漿または血清の分析値Ｙとの関係式
Ｙ＝ａＸ＋ｂ
におけるａとｂを求めておき、当該血漿検体または血清検体の分析値Ｘ_tから上記式により補正された分析値Ｙ_tを算出することを特徴とする血液成分の分析方法に関するものである。
【００１２】
【発明の実施の形態】
ガラス繊維フィルターは密度が０．０２〜０．５程度、好ましくは０．０３〜０．２程度、特に好ましくは０.０５〜０.１３程度で、保留粒子径が０．６〜９μｍ程度、特に１〜５μｍ程度のものが好ましい。ガラス繊維の表面を、特開平２−２０８５６５号公報、同４−２０８８５６号公報に記載された様な方法で、親水性高分子で処理することによって濾過をより速やかに円滑に行なうことができる。また、ガラス繊維の表面をレクチンで処理することもできる。ガラス繊維濾紙は複数枚を積層して用いることができる。
【００１３】
空間体積あるいは血漿または血清濾過量に対応する指標として、透水速度が有効である。透水速度は、入口と出口をチューブに接続できるように絞った濾過ユニット中に一定面積のガラス繊維フィルターを密閉保持し、一定量の水を加えて一定圧力で加圧または減圧したときの、単位面積あたりの濾過量を速度で表したものであり、ｍｌ／ｓｅｃ等の単位を持つ。
【００１４】
具体例としては、濾過ユニット中に直径２０ｍｍのガラス繊維フィルターをセットし、その上に１００ｍｌの注射筒をたてて６０ｍｌの水を入れて自然流下させ、開始後１０秒と４０秒の間の３０秒間にガラス繊維フィルター中を通り抜けた水の量をもって透水量とし、これから単位面積あたりの透水速度を算出する。
【００１５】
血漿または血清の濾過に特に適しているのは透水速度が１．０〜１．３ｍｌ／ｓｅｃ程度のもので、例えば、ワットマン社ＧＦ／Ｄ、東洋濾紙ＧＡ−１００、同ＧＡ−２００等がある。さらに、市販のガラス繊維濾紙を熱水中で再分散してナイロンネット上で再抄紙して低密度濾紙（密度約０．０３）を作成することもでき、これは良好な血漿または血清濾過特性を示す。
【００１６】
本発明で使用される血液濾過材料は、ガラス繊維フィルターのみからなるものでもよく、ガラス繊維フィルターに他の血液濾過材料を組み合わせたものであってもよい。ガラス繊維濾紙に組み合わせる他の血液濾過材料の例として微多孔性膜がある。
【００１７】
表面を親水化されており血球分離能を有する微多孔性膜は、実質的に分析値に影響を与える程には溶血することなく、全血から血球と血漿を特異的に分離するものである。この微多孔性膜は孔径がガラス繊維濾紙の保留粒子径より小さくかつ０．２μｍ以上、好ましくは０．３〜５μｍ程度、より好ましくは０．５〜３μｍ程度のものが適当である。また、空隙率は高いものが好ましく、具体的には、空隙率が約４０％から約９５％、好ましくは約５０％から約９５％、さらに好ましくは約７０％から約９５％の範囲のものが適当である。微多孔性膜の例としてはポリスルホン膜、弗素含有ポリマー膜等がある。
【００１８】
好ましい微多孔性膜はポリスルホン膜、酢酸セルローズ膜等であり、特に好ましいのはポリスルホン膜である。本発明の血液濾過材料においてはガラス繊維濾紙が血液供給側に配置され、微多孔性膜が吸引側に配置される。最も好ましい材料は血液供給側からガラス繊維濾紙、ポリスルホン膜をこの順に積層した積層体である。
【００１９】
本発明で用いられる濾過材料は特開昭６２−１３８７５６〜８号公報、特開平２−１０５０４３号公報、特開平３−１６６５１号公報等に開示された方法に従って各層を部分的に配置された接着剤で接着して一体化することができる。
【００２０】
ガラス繊維フィルター層の厚さは、回収すべき血漿や血清の量とガラス繊維フィルターの密度（空隙率）及び面積から定められる。分析を乾式分析素子を用いて複数項目行なう場合の血漿や血清の必要量は１００〜５００μｌであり、ガラス繊維フィルターの密度が０.０２〜０．２程度、面積が１〜５ｃｍ²程度が実用的である。この場合ガラス繊維フィルター層の厚さは１〜１０ｍｍ程度、好ましくは２〜８ｍｍ程度である。このガラス繊維濾紙は複数枚、例えば２〜１０枚程度、好ましくは３〜８枚程度を積層して上記厚さとすることができる。
【００２１】
微多孔性膜の厚さは０．０５〜０．５ｍｍ程度、特に０．１〜０．３ｍｍ程度でよく、通常は１枚の微多孔性膜を用いればよい。しかしながら、必要により複数枚を用いることもできる。
【００２２】
いずれにしても、本発明が適用される血液濾過材料はガラス繊維フィルター層が容積％で４０％以上、通常６０％以上のものである。
【００２３】
血液濾過が乾式分析用検体の調製として行われる場合には、本発明者らが先に開発した血液濾過ユニットの形で使用することが好ましい。
【００２４】
血液濾過材料はホルダーに入れられる。このホルダーは一般に血液濾過材料を収容する本体と、蓋体に分けた態様で作製される。通常は、いずれにも少なくとも１個の開口が設けられていて、一方は血液入口として、他方は濾過液出口として、場合により更に吸引口として使用される。吸引口を別に設けることもできる。ホルダーが四角形で蓋体を側面に設けた場合には血液入口と濾過液出口の両方を本体に設けることができる。
【００２５】
その場合、血液濾過材料収納部すなわち血液濾過室の容積は、収納すべき濾過材料の乾燥状態および検体(全血)を吸収し膨潤した時の総体積より大きい必要がある。濾過材料の総体積に対して収納部の容積が小さいと、濾過が効率良く進行しなかったり、溶血を起こしたりする。収納部の容積の濾過材料の乾燥時の総体積に対する比率は濾過材料の膨潤の程度にもよるが、通常１０１％〜４００％、好ましくは１１０％〜１５０％、更に好ましくは１２０％〜１４０％である。具体的には血漿や血清の必要量との関係で定まるが０．５〜２．５ｍｌ程度、通常０．６〜２．２ｍｌ程度である。
【００２６】
また、体積濾過材料と収納部の壁面との間は、全血を吸引した時に体積濾過材料を経由しない流路が出来ないように構成されていることが好ましい。但し、微多孔性膜で止めうる程度の血球が漏れてきても支障はない。
【００２７】
濾過ユニットは、上記本体に蓋体が取付けられると、これらの血液入口と吸引口としても使用される濾過液出口を除いて全体が密閉構造になる。
【００２８】
ホルダーの材料はプラスチックが好ましい。例えば、ポリスチレン、ポリメタアクリル酸エステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステル、ナイロン、ポリカーボネート等の透明あるいは不透明の樹脂が用いられる。
【００２９】
上記本体と蓋体の取付方法は、接着剤を用いた接合、融着等如何なる手段によってもよい。この際、上記本体と蓋体のいずれの周縁が内側に位置してもよく、あるいは突き合わせ状態であってもよい。また、上記本体と蓋体をネジ等の手段で組立分解ができる構造とすることもできる。
【００３０】
血液濾過材料の形状に特に制限はないが、製造が容易なように、円形とすることが望ましい。この際、円の直径をホルダー本体の内径よりやや大きめとし、濾過材料の側面から血漿が漏れることを防ぐことができる。一方、四角形にすれば作製した血液濾過材料の切断ロスがなくなるので好ましい。
【００３１】
濾過液受槽は濾過液出口から吐出される濾過液である血漿や血清を受けるものであり、しかも濾過液出口が濾過液受槽の液面より上に配置されているものである。濾過液出口はこの受槽の側壁の上部に設けられていてもよく、あるいは受槽内に起立する管等であってもよい。濾過液受槽の形状は他の要因、例えばそこからの分析試料の吸引位置との関係、血液濾過室との関係、任意に設けられる他部品との関係、等を考慮して種々の形状とされるが、特段の事情がなければ円筒形、方形等でよい。底面は平底、擂鉢状、丸底等でよい。受槽の容積は、乾式分析用試料の調製の場合には、１００〜９００μｌ程度、通常２００〜６００μｌ程度、深さは３〜１２ｍｍ程度、横幅は(直径または辺)５〜１１ｍｍ程度のものである。受槽における濾過液出口の位置は該出口の下縁が受槽の設計液面より０．５〜５ｍｍ程度、通常１〜２ｍｍ程度上方に位置している。濾過液量は血液のヘマトクリット値によって変わるがこの設計液面はヘマトクリット値が２０〜６０％の血液を濾過したときの液面である。この濾過液受槽はホルダーと一体であってもよく、あるいは別体であってもよい。
【００３２】
予め関係式Ｙ＝ａＸ＋ｂの係数を求めるために使用されるガラス繊維フィルターは測定しようとする血液を濾過する際に使用されるものと同種のものである。上記関係式の係数はガラス繊維フィルターの種類、銘柄、製造業者、原料、製造方法、構造、物性等によって変化する可能性がある。一方、同一銘柄であれば、特に原料、製造方法、製造装置が同一であればほぼ同一の係数となり、特に同一ロット品であれば同一係数となる。そこで、要求される分析精度に従い、通常は同一銘柄品について、特に精度が要求される場合には同一ロット品について予め係数ａ，ｂを求めておき、血漿検体あるいは血清検体の分析値の補正はこのａ，ｂを用いて行えばよい。多くの場合ａは１であるので、実際にはｂだけを求めておいても足りる場合が多い。血液濾過材料がガラス繊維フィルターと他の濾過材料との組合せからなっている場合には、上記の関係式のａとｂはこの組合せからなる濾過材料について測定することが好ましい。
【００３３】
ａとｂの決定に必要な標準となる血液分離方法は、血漿または血清の分析対象物の濃度が分離の際に実質的に影響を受けない、つまり分析対象物の変質や濃度変化が実質的に無視できる程度のものであり、具体的には遠心分離法などが利用される。
【００３４】
ａとｂの決定は、分析対象物の濃度が異なる血液について、ガラス繊維フィルターを用いて得られた血漿または血清とこの標準となる分離方法で得られた血漿または血清の分析対象物濃度を測定することによって行うことができる。濃度は測定範囲のなるべく全範囲をカバーするよう血液を選択することが好ましいが、実用的観点から選択すればよく、例えば測定範囲の５０％以上、好ましくは８０％以上カバーできればよい。測定する血液の数は最少で２点でよいわけであるが、実用的に許される範囲で数が多いほうがよいことはいうまでもなく、実際には５〜１０点程度が現実的である。測定点が３点以上の場合のａ，ｂの決定方法は周知であり、例えば、測定範囲内の測定下限に近い試料(全血)、測定中心に近い試料、測定上限に近い試料を準備し、それぞれ半分を遠心分離して測定値Ｙ₁，Ｙ₂，Ｙ₃を得る。別に本発明に記載のガラスフィルターにより濾過した血漿（あるいは血清）を測定し、Ｘ，Ｘ₂，Ｘ₃を得る。以上の値を用いて最小二乗法によりＹ＝ａＸ＋ｂのａ，ｂ値を得る。
【００３５】
本発明の方法は乾式分析、湿式分析を問わず適用できるが、乾式分析素子を用いた乾式分析法が特に好ましい。
【００３６】
乾式分析素子の基本構成は、水不透過性支持体の上に、親水性ポリマー層および多孔性展開層が、この順に積層されて成る。
【００３７】
多孔性展開層は、水性の検体に含有されている成分を実質的に偏在させることなしに平面的に拡げ、単位面積当りほぼ一定量の割合で親水性ポリマー層に供給する機能を有する層であり、これまでドライケミストリー分析要素に使われている展開層として、公知の非繊維質及び繊維質の全ての多孔性材料を用いることができる。具体的には特開昭４９−５３８８８に開示されているメンブランフィルター（ブラッシュドポリマー）に代表される非繊維性等方的微多孔質媒体層、特開昭５５−９０８５９等に開示されたポリマーミクロビーズが水不膨潤性の接着剤で点接触状に接着されて成る連続空隙含有三次元格子粒状構造物層に代表される非繊維性多孔性層、特開昭５５−１６４３５６、同５７−６６３５９等に開示された織物布地からなる多孔性層、同６０−２２２７６９等に開示された編物布地からなる層等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００３８】
例えば、セルロース誘導体（ＤＡＣ，ＴＡＣ，ＮＣ，ＨＭＣ（ヒドロキシメチルセルロース），ＨＥＣ（ヒドロキシエチルセルロース））の多孔質膜、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、塩化ビニール等のエチレン重合体または共重合体で作られた多孔質膜、ポリエチレンテレフタレート、ポリカーボネート、ポリスルホン等で作られた多孔質膜、アクリル酸やメタクリル酸、これらのエステルのビニル重合体または共重合体から成る多孔質膜、ナイロン、ポリアミド、ポリウレタン等の縮合重合体の多孔膜、ガラス粒子、けい藻土等の無機材料微粒子を少量のポリマーで結合させて作られた多孔性膜、ポリテトラフルオロエチレンで作られた多孔性膜、濾紙、ガラス繊維濾紙等がある。
【００３９】
展開層は、１層だけに限定する必要はなく、特開昭６１−４９５９、同６２−１３８７５６、同６２−１３５７５７、同６２−１３８７５８等に開示されている様に、２層以上の層を重ねて用いることができる。
【００４０】
展開層中には、検体の展開を促進するために、ノニオン、アニオン、カチオンもしくは両性の界面活性剤を含ませることができる。
【００４１】
また、展開性をコントロールする目的で、親水性のポリマー等の展開制御剤を含ませることができる。
【００４２】
更に、目的とする検出反応を促進する為の、あるいは干渉、妨害反応を低減、阻止する為の各種試薬、もしくは試薬の１部を含ませることができる。
【００４３】
展開層の厚さは、２０〜２００μｍ、好ましくは５０〜１７０μｍ、更に好ましくは８０〜１５０μｍである。
【００４４】
親水性ポリマー層は通常分析に必要な試薬の少なくとも１部を含んでおり、その場合、この層は試薬層と称される。この層には、これまで乾式分析素子に使われている公知の水に可溶性、膨潤性、親水性の各種ポリマーを用いることができる。水吸収時の膨潤率が３０℃で約１５０％から約２０００％、好ましくは約２５０％から約１５００％の範囲の天然又は合成親水性ポリマーを使用することができ、具体的には、特開昭５９−１７１８６４、同６０−１０８７５３等に開示されたゼラチン（例えば、酸処理ゼラチン、脱イオンゼラチン等）、ゼラチン誘導体（例えば、フタル化ゼラチン、ヒドロキシアクリレートグラフトゼラチン等）、アガロース、プルラン、プルラン誘導体、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００４５】
親水性ポリマー層に代えて、ポリマー多孔質膜等を用いることもできる。
【００４６】
親水性ポリマー層の厚さは、乾燥時に約１μｍ〜約１００μｍ、好ましくは約３μｍ〜約５０μｍ、特に好ましくは約５μｍ〜約３０μｍであり、実質的に透明であることが好ましい。
【００４７】
親水性ポリマー層中には、目的とする反応を促進する、もしくは干渉、妨害反応を防止、低減するための各種試薬もしくは試薬の１部を含ませることができる。
【００４８】
水不透過性支持体としては、これまで乾式分析素子に使われている公知の水不透過性の支持体を用いることができる。具体的には、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノールＡのポリカーボネート、ポリスチレン、セルロースエステル（例えば、セルロースジアセテート、セルローストリアセテート、セルロースアセテートプロピオネート等）等から成る厚さ約５０μｍ〜１ｍｍ、好ましくは約８０μｍ〜約３００μｍの透明フイルムを用いることができる。
【００４９】
支持体は、通常光透過性のものを用いるが、展開層側から測定をする場合には、着色されていても、もしくは光不透過性であっても良い。
【００５０】
支持体の表面には、必要により公知の下塗層もしくは接着層を設けて、親水性ポリマー層との接着を強固にすることができる。
【００５１】
乾式分析素子には分析項目等に応じて各種の層が組込まれる。例えば、検出層、吸水層、光反射層、光遮蔽層等である。
【００５２】
乾式分析素子は分析に必要な試薬の全てを予め含むものであるが、本発明者らが先に開発した、試薬の１部または全部を分析時に添加するものであってもよい。
【００５３】
検体を分析するにあたって、上記の係数ａ，ｂを予めアナライザーにキーボード入力しておいたり、バーコード記録してバーコード読取り機で読取らせ補正したり、あるいはカード発行機により磁気記録しておいて、アナライザーのカード読取装置で読取らせて補正させることが好ましい。
【００５４】
【実施例】
［実施例１］
図１〜３に示す血液濾過ユニットを作製した。図１は血液濾過ユニットを組み立てた状態の縦断面図、図２は血液濾過ユニットを構成する蓋体の平面図、図３は血液濾過ユニットを構成する蓋体の底面図である。
【００５５】
この血液濾過ユニットは、図１に示すように、ホルダー１を有し、このホルダー１は、ホルダー本体１０と、その上部に密着固定された蓋体２０とからなっている。
【００５６】
このホルダー本体１０はハイインパクトポリスチレン樹脂で形成されたもので、血液濾過材料を構成するガラス繊維濾紙３０を収容するガラス繊維濾紙収容室１１が形成されるとともに、このガラス繊維濾紙収容室１１の上部において、血液濾過材料を構成する微多孔性膜としてのポリスルホン多孔性膜４０を収容する微多孔性膜収容室１２が形成されている。この微多孔性膜収容室１２は、下端においてガラス繊維濾紙収容室１１より大きい径の段部１９が形成されており、この段部１９にポリスルホン多孔性膜４０が載置された状態で収容される。また、この段部１９の外周縁から、上方に斜めに立ち上がった傾斜部１３が形成されており、傾斜部１３の上縁から外方にフランジ１４が形成されている。
【００５７】
一方、ホルダー本体１０の底部には、周縁よりやや内側にガラス繊維濾紙載置部１５を設けてそこから浅いロート状円板部１６が連接され、このロート状円板部１６の中心から下方にノズル状血液入口１７が延設されている。このノズル状血液入口１７には、血液濾過の際、吸引チップ（図示せず）が装着される。上記ガラス繊維濾紙載置部１５は、ガラス繊維濾紙３０の下面をホルダー本体１０のロート状円板部１６から隔離させて空間１８を形成するスぺーサとしても機能している。
【００５８】
前記蓋体２０は、外側から、同心円の円筒状をした外壁２１、内壁２２及び濾過した血漿を貯溜するためのカップ２３が形成されている。前記外壁２１は、上方へ行くに従って外側へ広がるテーパー状に形成されており、この外壁２１の傾斜角は前記傾斜部１３の傾斜角と同一であり、また、外径が傾斜部１３の内径と同一となっている。すなわち、外壁２１が傾斜部１３に密着状態で嵌合するようになっている。また、外壁２１の周縁部には外方に突出するフランジ２４が形成され、このフランジ２４がホルダー本体１０のフランジ１４と超音波で接着されている。このフランジ２４の底面(フランジ１４と接着する面)には、図３に示すように、接着以前の段階において、接着の際超音波エネルギーをそこに集めて液密性を充分に確保した状態で接着できるように、リブ２５が形成されている（なお、接着後は溶融消滅している）。
【００５９】
また、蓋体２０の底面には、図３に示すように、１２個の突起２６が略均等な間隔で形成されており、この突起２６により、ポリスルホン多孔性膜４０が密着するのを防止している。
【００６０】
蓋体２０の内壁２２とカップ２３との間には、煙突状の血漿通路２７が蓋体２０を貫通して上方に突設されており、この血漿通路２７の上方には、血漿の噴出を阻止する庇２８が水平方向に形成されている。この庇２８は、図２に示されるように、大小２つの半円を組み合わせた形状をしており、内側の半円は血漿通路２７の外壁と一致している。また、血漿通路２７の上端内側部分は、カップ２３方向へ斜めになった流入部２９が形成され、濾過されて来た血漿２７がカップ２３内に容易に流れ込むようにようになっていた。
【００６１】
なお、以上のような血液濾過ユニットにおいて、ガラス繊維濾紙収容室１１の直径は２０．１ｍｍ、同深さ５．９ｍｍ、微多孔性膜収容室１２の下端における直径２３．０ｍｍ、同上端における直径２２．５ｍｍ、同深さ２．１０ｍｍ、外壁２１の外周面下端の直径２０．９８ｍｍ、同下面からフランジ２４までの高さ２ｍｍ、内壁２２の内径１５．０ｍｍ、カップ２３の内径７．５ｍｍ、ガラス繊維濾紙３０の直径２０．０ｍｍ、同厚さ０．９１ｍｍのものを６枚、ポリスルホン多孔性膜４０の直径２０．９ｍｍ、同厚さ１５０μｍである。
【００６２】
以上の血液濾過ユニットを用いて、試験を行った。
【００６３】
テルモ社ベノジェクトII真空採血管ＶＰ−Ｈ０５０（ヘパリンＮａ）で血液を５ｍｌ採血した。
【００６４】
被検体を男女計５人について用意し、各々の血液５ｍｌを４〜５回静かに転倒混和し均一にした。
【００６５】
市販２ｍｌスポイトを用いて、２ｍｌを２ｍｌの遠心用サンプルチューブに分注した。その２ｍｌ血液を遠心機（ＣＦＭ−２００，岩城硝子Ｋ.Ｋ.）で３分、１２０００ｒｐｍ血漿を分離し、すみやかに、Ａ／Ｔ（ＥＡ−０６Ｔ）のサンプル容器に２００μｌを採取した。
【００６６】
Ａ／Ｔ測定器にてＮａ及びＣｌの測定値（Ｙ_Na，Ｙ_Cl）を得た。
【００６７】
一方、残りの３ｍｌの血液を前記の血液濾過ユニットを用いて濾過し、３５０μｌの血漿を採取した。この血漿をＡ／Ｔ測定器にて、Ｎａ及びＣｌの測定値（Ｘ_Na，Ｘ_Cl）を得た。
【００６８】
各被験者について下記表１の結果を得た。
【００６９】
【表１】

【００７０】
上記乖離値の最下欄の数字は関係式Ｙ＝ａＸ＋ｂの係数ｂ（ａ≒１）に相当するものであり、これが下記の式で示される補正値になる。
Ｎａの補正値：
Ｘ_Na−Ｙ_Na＝Ｎａ補正値（ｍｅｑ／Ｌ）
Ｃｌの補正値：
Ｘ_Cl−Ｙ_Cl＝Ｃｌ補正値（ｍｅｑ／Ｌ）
【００７１】
次に、この補正後の確認を行った。
ヘパリン採血血液５ｍｌを３検体用意した。
【００７２】
前記の血液濾過ユニットを用いて３ｍｌの血液を濾過し、３５０μｌの血漿を得た。
【００７３】
富士ドライケムシステムＦＤＣ−８００と電解質分析素子（Ｎａ−Ｋ−ＣＬ，富士写真フィルム(株)）を用いて比較測定をした。
未補正測定値：
内蔵演算式の変更はせずに、測定値（Ａ_Na（ｍＥｑ／Ｌ））を得た。
補正処理測定値：
内蔵演算式に前記の補正値を導入して、その後に測定値（Ｂ_Na(ｍＥｑ／Ｌ)）を得た。
【００７４】
得られた結果を表２に示す。
【００７５】
【表２】

【００７６】
確認された補正量は、

であった。
【００７７】
［実施例２］
実施例１と同じ血液濾過ユニットおよび遠心機を用いて病院外来患者血５０検体の血液を分離し、各血漿を得た。
【００７８】
この血漿を富士ドライケムシステムＦＤＣ−５０００と総蛋白分析スライド（ＴＰ−Ｐ）を用いて測定した。
【００７９】
得られた結果を表３に示す。
【００８０】
【表３】

【００８１】
また、表３より、生化学分析項目ＴＰの平均補正値として−０．２２３が得られた。５０検体より得たそれぞれの遠心測定値に補正値を加算して得た値とＰＦ値とから補正式を作成した。未知全血検体のＴＰ測定に対する補正式Ｙ＝０．９８３９Ｘ＋０．３４７５を得た。有効な結果を得ることが出来た。複数検体を用いてこの補正値が有効であることが確認できた（図４参照）。
【００８２】
【発明の効果】
本発明により、血液をガラス繊維フィルターで濾過して目的成分項目を簡便かつ正確に測定することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施例で使用した血液濾過ユニットの縦断面図である。
【図２】上記血液濾過ユニットを構成する蓋体の組み立てる前の状態の平面図である。
【図３】上記血液濾過ユニットを構成する蓋体の組み立てる前の状態の底面図である。
【図４】補正値加算後の相関係数を示すグラフである。

Claims

血液をガラス繊維フィルターで濾過して得られた血漿検体または血清検体を分析する際に、予め当該ガラス繊維フィルターを用いて濾過して得られた血漿または血清の分析値Ｘと標準となる血液分離方法で得られた血漿または血清の分析値Ｙとの関係式
Ｙ＝ａＸ＋ｂ
におけるａとｂを求めておき、当該血漿検体または血清検体の分析値Ｘ_ｔから上記式により補正された分析値Ｙ_ｔを算出することを特徴とする血液成分の分析方法
血液成分が電解質、蛋白、アンモニア態窒素又は酵素である請求項１記載の分析方法