JPH08157433A - 塩基性アミノ酸の精製方法 - Google Patents
塩基性アミノ酸の精製方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 塩基性アミノ酸を含む中、酸性の水溶液を濾
過処理しても濾過性に問題を生じない塩基性アミノ酸の
製造方法を提供する。 【構成】 発酵法で生産された塩基性アミノ酸の水溶液
をルーズな逆浸透膜で濾過することを特徴とする塩基性
アミノ酸の精製方法。
過処理しても濾過性に問題を生じない塩基性アミノ酸の
製造方法を提供する。 【構成】 発酵法で生産された塩基性アミノ酸の水溶液
をルーズな逆浸透膜で濾過することを特徴とする塩基性
アミノ酸の精製方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は発酵法で生産され蛋白系
不純物を含む塩基性アミノ酸の精製方法に関するもので
ある。
不純物を含む塩基性アミノ酸の精製方法に関するもので
ある。
【０００２】
【従来の技術】Ｌ−アルギニン等の塩基性アミノ酸が発
酵法で生産されている。その精製方法としては、まず発
酵液を菌体を除去してからあるいは除去せずにそのまま
イオン交換樹脂に接触させて塩基性アミノ酸を吸着さ
せ、これを溶離後晶析する方法または溶離後、活性炭等
による脱色濾過し、晶析する方法等が行なわれている。
ところで、発酵液中には各種の不純物が含まれている
が、そのなかには水溶性蛋白等もある。水溶性蛋白等は
イオン交換樹脂に吸着されてアルカリ等の溶離剤により
塩基性アミノ酸とともに溶離される。しかも晶析の際に
は析出してくるので除去の難しい不純物のひとつであ
る。そこで、従来は塩基性アミノ酸の水溶液に蛋白凝固
剤を加えて加熱させることにより蛋白質を凝固させこれ
を濾過して除去していた。
酵法で生産されている。その精製方法としては、まず発
酵液を菌体を除去してからあるいは除去せずにそのまま
イオン交換樹脂に接触させて塩基性アミノ酸を吸着さ
せ、これを溶離後晶析する方法または溶離後、活性炭等
による脱色濾過し、晶析する方法等が行なわれている。
ところで、発酵液中には各種の不純物が含まれている
が、そのなかには水溶性蛋白等もある。水溶性蛋白等は
イオン交換樹脂に吸着されてアルカリ等の溶離剤により
塩基性アミノ酸とともに溶離される。しかも晶析の際に
は析出してくるので除去の難しい不純物のひとつであ
る。そこで、従来は塩基性アミノ酸の水溶液に蛋白凝固
剤を加えて加熱させることにより蛋白質を凝固させこれ
を濾過して除去していた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】塩基性アミノ酸の大き
な用途はアミノ酸輸液等の栄養剤や中和剤等としての医
薬原料にあり、一般に中性〜弱酸性で使用される。とこ
ろが、塩基性アミノ酸を溶解し、中性〜弱酸性に調整さ
れたアミノ酸等を含有する水溶液を除菌処理等のために
メンブレンフィルターで濾過すると濾過速度が大巾に低
下してしまうことがあった。
な用途はアミノ酸輸液等の栄養剤や中和剤等としての医
薬原料にあり、一般に中性〜弱酸性で使用される。とこ
ろが、塩基性アミノ酸を溶解し、中性〜弱酸性に調整さ
れたアミノ酸等を含有する水溶液を除菌処理等のために
メンブレンフィルターで濾過すると濾過速度が大巾に低
下してしまうことがあった。
【０００４】尚、本発明でいうメンブレンフィルター
は、除菌等に使用される精密濾過膜のことであり、その
膜細孔径は、０．２２〜１．０μｍである。
は、除菌等に使用される精密濾過膜のことであり、その
膜細孔径は、０．２２〜１．０μｍである。
【０００５】本発明の目的は、塩基性アミノ酸を含む
中、酸性の水溶液をメンブレンフィルターで濾過処理し
ても濾過性に問題を生じない塩基性アミノ酸の製造方法
を提供することにある。
中、酸性の水溶液をメンブレンフィルターで濾過処理し
ても濾過性に問題を生じない塩基性アミノ酸の製造方法
を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは上記問題点
を解決するべく鋭意検討の結果、塩基性アミノ酸水溶液
がアルカリ性であるため、通常の精製法では蛋白等の不
純物の除去が不充分になり、この残与の蛋白等の不純物
が中、酸性で析出して濾過性を阻害していることを見出
した。すなわち、一般に中、酸性アミノ酸はもとより塩
基性アミノ酸であっても多くは塩の形で商品化されるた
め、その水溶液は中、酸性に調整され、濾過が行なわれ
る。中、酸性水溶液中では、蛋白等のコロイド性物質が
凝集しやすいため、濾過によって容易に除去される。と
ころが、塩基性アミノ酸の場合には水溶液がアルカリ性
であるために、コロイド物質の凝集性が悪く、濾材から
漏出してしまうものもある。さらに、アルカリ性である
ために蛋白の溶解度が高く溶存状態のものも存在してい
る。このような挙動をする蛋白およびその他の不純物が
前記の濾過性を阻害していることを見いだした。
を解決するべく鋭意検討の結果、塩基性アミノ酸水溶液
がアルカリ性であるため、通常の精製法では蛋白等の不
純物の除去が不充分になり、この残与の蛋白等の不純物
が中、酸性で析出して濾過性を阻害していることを見出
した。すなわち、一般に中、酸性アミノ酸はもとより塩
基性アミノ酸であっても多くは塩の形で商品化されるた
め、その水溶液は中、酸性に調整され、濾過が行なわれ
る。中、酸性水溶液中では、蛋白等のコロイド性物質が
凝集しやすいため、濾過によって容易に除去される。と
ころが、塩基性アミノ酸の場合には水溶液がアルカリ性
であるために、コロイド物質の凝集性が悪く、濾材から
漏出してしまうものもある。さらに、アルカリ性である
ために蛋白の溶解度が高く溶存状態のものも存在してい
る。このような挙動をする蛋白およびその他の不純物が
前記の濾過性を阻害していることを見いだした。
【０００７】従って、中、酸性側での濾過性を改善する
ためにはこのような挙動を示すコロイド性物質の完全な
除去とアルカリ性で溶解していて中、酸性側で析出する
物質の除去が必要である。
ためにはこのような挙動を示すコロイド性物質の完全な
除去とアルカリ性で溶解していて中、酸性側で析出する
物質の除去が必要である。
【０００８】このような物質を除去するための手段とし
ては、アルカリ性である塩基性アミノ酸水溶液を塩酸等
の酸により中和し、その中和液をメンブレンフィルター
で濾過する方法があげられる。しかし、この方法には、
中和のための酸が必要であること、塩基性アミノ酸水溶
液または結晶を得るためには、イオン交換樹脂操作が必
要であることなど欠点があり、塩基性アミノ酸水溶液ま
たは結晶を得る手段としては適切ではない。
ては、アルカリ性である塩基性アミノ酸水溶液を塩酸等
の酸により中和し、その中和液をメンブレンフィルター
で濾過する方法があげられる。しかし、この方法には、
中和のための酸が必要であること、塩基性アミノ酸水溶
液または結晶を得るためには、イオン交換樹脂操作が必
要であることなど欠点があり、塩基性アミノ酸水溶液ま
たは結晶を得る手段としては適切ではない。
【０００９】そこで、本発明者らは、輸液用の原料に使
用する医薬用アミノ酸の発熱性物質除去に通常用いられ
ており、精密濾過用のメンブレンフィルターより膜細孔
径の小さい限外濾過膜（膜細孔径０．００２〜０．１μ
ｍ）を晶析工程の前の精製工程に使用すれば、上記の不
純物を除去できると考え、試験した。しかし、メンブレ
ンフィルターより遥かに膜細孔径の小さい限外濾過膜を
濾過に使用したにもかかわらず、得られた塩基性アミノ
酸を溶解し、中性〜弱酸性に調整した水溶液の濾過性
は、あまり改善されなかった。
用する医薬用アミノ酸の発熱性物質除去に通常用いられ
ており、精密濾過用のメンブレンフィルターより膜細孔
径の小さい限外濾過膜（膜細孔径０．００２〜０．１μ
ｍ）を晶析工程の前の精製工程に使用すれば、上記の不
純物を除去できると考え、試験した。しかし、メンブレ
ンフィルターより遥かに膜細孔径の小さい限外濾過膜を
濾過に使用したにもかかわらず、得られた塩基性アミノ
酸を溶解し、中性〜弱酸性に調整した水溶液の濾過性
は、あまり改善されなかった。
【００１０】そこで、本発明者らはこれら効率よく除去
する手段を開発するべくさらに検討を進めた結果、最近
開発されたルーズな逆浸透膜を用いた濾過方法がこの目
的に最適であることを見出し、この知見に基づいて本発
明を完成するに至った。
する手段を開発するべくさらに検討を進めた結果、最近
開発されたルーズな逆浸透膜を用いた濾過方法がこの目
的に最適であることを見出し、この知見に基づいて本発
明を完成するに至った。
【００１１】すなわち、本発明は、発酵法で生産された
塩基性アミノ酸の水溶液をルーズな逆浸透膜で濾過する
ことを特徴とする塩基性アミノ酸の精製方法に関するも
のである。
塩基性アミノ酸の水溶液をルーズな逆浸透膜で濾過する
ことを特徴とする塩基性アミノ酸の精製方法に関するも
のである。
【００１２】本発明の方法が適用される塩基性アミノ酸
は、その種類は問わないが、Ｌ−リジン、Ｌ−アルギニ
ン、Ｌ−オルニチン、Ｌ−ヒスチジン等である。本発明
の方法が特に威力を発揮するのは水溶液のアルカリ性が
高くかつ晶析によって精製しうるものであり、この点で
Ｌ−アルギニンとＬ−リジン、Ｌ−オルニチンが好適で
あり、Ｌ−アルギニンが特に好ましい。
は、その種類は問わないが、Ｌ−リジン、Ｌ−アルギニ
ン、Ｌ−オルニチン、Ｌ−ヒスチジン等である。本発明
の方法が特に威力を発揮するのは水溶液のアルカリ性が
高くかつ晶析によって精製しうるものであり、この点で
Ｌ−アルギニンとＬ−リジン、Ｌ−オルニチンが好適で
あり、Ｌ−アルギニンが特に好ましい。
【００１３】塩基性アミノ酸水溶液の性状としては、発
酵液のように菌体等の多量の浮遊物を含むものは濾過効
率が悪いためある程度精製したものがよい。好ましいも
のの例としては、発酵液から塩基性アミノ酸をカチオン
交換樹脂に吸着させて非吸着液を分離後当該塩基性アミ
ノ酸を水酸化ナトリウム水溶液等で溶離した溶離液、こ
の溶離液を活性炭等により脱色後濾過した脱色液、この
溶離液から塩基性アミノ酸を晶析して得た粗結晶を溶解
した水溶液、この粗結晶水溶液を活性炭等により脱色・
濾過した脱色液、この粗結晶水溶液に蛋白凝固剤を添加
後活性炭等により脱色・濾過した脱色液等がある。塩基
性アミノ酸水溶液のｐＨは当該アミノ酸の等電点付近で
あり、通常等電点±０．５の範囲である。水溶液の塩基
性アミノ酸濃度としては、当該塩基性アミノ酸の熱分解
温度と使用するルーズな逆浸透膜の耐用温度から勘案し
た操作温度を設定し、この温度に対する当該アミノ酸の
飽和溶解度より低い濃度が適当であるが、操作性の点か
ら飽和溶解度に近い濃度が好ましい。例えば、４０℃で
Ｌ−アルギニン水溶液をルーズな逆浸透膜濾過を行う場
合は、Ｌ−アルギニンの４０℃における飽和溶解度が約
３５ｇ／ｄｌであるので、Ｌ−アルギニンの濃度は、２
０〜３０ｇ／ｄｌ程度が好ましい。
酵液のように菌体等の多量の浮遊物を含むものは濾過効
率が悪いためある程度精製したものがよい。好ましいも
のの例としては、発酵液から塩基性アミノ酸をカチオン
交換樹脂に吸着させて非吸着液を分離後当該塩基性アミ
ノ酸を水酸化ナトリウム水溶液等で溶離した溶離液、こ
の溶離液を活性炭等により脱色後濾過した脱色液、この
溶離液から塩基性アミノ酸を晶析して得た粗結晶を溶解
した水溶液、この粗結晶水溶液を活性炭等により脱色・
濾過した脱色液、この粗結晶水溶液に蛋白凝固剤を添加
後活性炭等により脱色・濾過した脱色液等がある。塩基
性アミノ酸水溶液のｐＨは当該アミノ酸の等電点付近で
あり、通常等電点±０．５の範囲である。水溶液の塩基
性アミノ酸濃度としては、当該塩基性アミノ酸の熱分解
温度と使用するルーズな逆浸透膜の耐用温度から勘案し
た操作温度を設定し、この温度に対する当該アミノ酸の
飽和溶解度より低い濃度が適当であるが、操作性の点か
ら飽和溶解度に近い濃度が好ましい。例えば、４０℃で
Ｌ−アルギニン水溶液をルーズな逆浸透膜濾過を行う場
合は、Ｌ−アルギニンの４０℃における飽和溶解度が約
３５ｇ／ｄｌであるので、Ｌ−アルギニンの濃度は、２
０〜３０ｇ／ｄｌ程度が好ましい。
【００１４】ルーズな逆浸透膜とは、分画分子量が限外
濾過膜と逆浸透膜の中間に位置する膜であり、一般に分
画分子量が数百〜数千の膜のことをいうが、食塩の阻止
率でその分画性能を表現することも多い。本発明におい
て使用するルーズな逆浸透膜はその食塩の阻止率が、１
％〜５０％程度、好ましくは５％〜３０％程度の範囲に
あるものである。材質としては酢酸セルロース系、ポリ
アミド系、ポリベンズイミダゾール系、ポリスルホン系
などのものがある。
濾過膜と逆浸透膜の中間に位置する膜であり、一般に分
画分子量が数百〜数千の膜のことをいうが、食塩の阻止
率でその分画性能を表現することも多い。本発明におい
て使用するルーズな逆浸透膜はその食塩の阻止率が、１
％〜５０％程度、好ましくは５％〜３０％程度の範囲に
あるものである。材質としては酢酸セルロース系、ポリ
アミド系、ポリベンズイミダゾール系、ポリスルホン系
などのものがある。
【００１５】濾過条件としては、温度は５〜９５℃程
度、好ましくは２０〜６０℃程度である。圧力は、使用
するルーズな逆浸透膜の耐用圧力以下であれば良いが、
圧力が低すぎると濾過速度が遅くなってしまい、効率的
でないので、効率を考慮して設定することが好ましい。
通常は、５〜１００ｋｇ／ｃｍ2位である。濾過装置に
は市販品をそのまま用いればよい。
度、好ましくは２０〜６０℃程度である。圧力は、使用
するルーズな逆浸透膜の耐用圧力以下であれば良いが、
圧力が低すぎると濾過速度が遅くなってしまい、効率的
でないので、効率を考慮して設定することが好ましい。
通常は、５〜１００ｋｇ／ｃｍ2位である。濾過装置に
は市販品をそのまま用いればよい。
【００１６】
【作用】発酵法で生産され蛋白系不純物を含む塩基性ア
ミノ酸の水溶液をルーズな逆浸透膜で濾過することによ
り、コロイド粒子、分画分子量以上の水溶性蛋白等は濾
過されずに残り、塩基性アミノ酸は膜を通過して両者が
分離される。
ミノ酸の水溶液をルーズな逆浸透膜で濾過することによ
り、コロイド粒子、分画分子量以上の水溶性蛋白等は濾
過されずに残り、塩基性アミノ酸は膜を通過して両者が
分離される。
【００１７】
実施例１ 特開平２−１８６９９５号公報の実施例に記載の方法に
準じて、ブレビバクテリウム・フラバム ＡＪ１２４２
９（ＦＥＲＭ ＢＰ−２２２７）を培養し、Ｌ−アルギ
ニン発酵液２５ｋｌ（Ｌ−アルギニン含量７５０ｋｇ）
を調製した。この発酵液を塩酸でｐＨ６．５〜７に調整
後遠心分離機で菌体を分離した。次に除菌液を陽イオン
交換樹脂（三菱化成ＳＫ１Ｂ、樹脂量：６ｋｌ）に通液
しＬ−アルギニンを吸着させた後、水８ｋｌで水押しし
た。引続き、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を通液しＬ−アルギ
ニンを溶離した。溶離液を減圧下で１ｋｌまで濃縮後１
０℃まで冷却し、Ｌ−アルギニン２水和物を晶析した。
得られた結晶を遠心分離機で分離し、粗結晶（Ｌ−アル
ギニン２水和物）６００ｋｇが得られた（Ｌ−アルギニ
ン含量：４８０ｋｇ）。この粗結晶６００ｋｇに純水を
加え２５００ｌとし６０℃に加熱し溶解した。この溶解
液に蛋白凝固剤サニゾールの１０％水溶液を０．５ｌ添
加し、１時間攪拌しながら放置した。次いで、活性炭６
ｋｇを加え、更に４５分間攪拌しながら放置した。次
に、セライトをプレコートした小型セラミックフィルタ
ーにフィードし、フィード終了後さらに６０℃の純水５
００ｌを加え、引き続き濾過してフィルター内の溜まり
を置換回収した。こうして得られた脱色液の液量は３０
００ｌであった。
準じて、ブレビバクテリウム・フラバム ＡＪ１２４２
９（ＦＥＲＭ ＢＰ−２２２７）を培養し、Ｌ−アルギ
ニン発酵液２５ｋｌ（Ｌ−アルギニン含量７５０ｋｇ）
を調製した。この発酵液を塩酸でｐＨ６．５〜７に調整
後遠心分離機で菌体を分離した。次に除菌液を陽イオン
交換樹脂（三菱化成ＳＫ１Ｂ、樹脂量：６ｋｌ）に通液
しＬ−アルギニンを吸着させた後、水８ｋｌで水押しし
た。引続き、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を通液しＬ−アルギ
ニンを溶離した。溶離液を減圧下で１ｋｌまで濃縮後１
０℃まで冷却し、Ｌ−アルギニン２水和物を晶析した。
得られた結晶を遠心分離機で分離し、粗結晶（Ｌ−アル
ギニン２水和物）６００ｋｇが得られた（Ｌ−アルギニ
ン含量：４８０ｋｇ）。この粗結晶６００ｋｇに純水を
加え２５００ｌとし６０℃に加熱し溶解した。この溶解
液に蛋白凝固剤サニゾールの１０％水溶液を０．５ｌ添
加し、１時間攪拌しながら放置した。次いで、活性炭６
ｋｇを加え、更に４５分間攪拌しながら放置した。次
に、セライトをプレコートした小型セラミックフィルタ
ーにフィードし、フィード終了後さらに６０℃の純水５
００ｌを加え、引き続き濾過してフィルター内の溜まり
を置換回収した。こうして得られた脱色液の液量は３０
００ｌであった。
【００１８】この脱色液を従来法、比較例としての限外
濾過（ＵＦ）法および本発明法（Ｌ−ＲＯ法）で処理し
てそれぞれ精製結晶を得た。
濾過（ＵＦ）法および本発明法（Ｌ−ＲＯ法）で処理し
てそれぞれ精製結晶を得た。
【００１９】〔従来法〕脱色液１０００ｌを０．５μｍ
のフィルターで濾過後、減圧下（６８０ｍｍＨｇ）で３
００ｌまで濃縮晶析した。濃縮液を晶析缶に移し、攪拌
しながら１０℃まで冷却して晶析した後、結晶を分離し
た。分離結晶は少量の脱パイロジェン水で洗浄した。
のフィルターで濾過後、減圧下（６８０ｍｍＨｇ）で３
００ｌまで濃縮晶析した。濃縮液を晶析缶に移し、攪拌
しながら１０℃まで冷却して晶析した後、結晶を分離し
た。分離結晶は少量の脱パイロジェン水で洗浄した。
【００２０】得られたＷｅｔ精製結晶は１７０ｋｇであ
った。
った。
【００２１】次に、Ｗｅｔ精製結晶をコニカルドラヤー
に仕込、減圧下（７２０ｍｍＨｇ）で温度を６５〜９５
℃まで段階的に上げ１２時間かけて乾燥した。
に仕込、減圧下（７２０ｍｍＨｇ）で温度を６５〜９５
℃まで段階的に上げ１２時間かけて乾燥した。
【００２２】得られた乾燥精製結晶は１３６ｋｇであっ
た。
た。
【００２３】〔ＵＦ法〕脱色液１０００ｌを限外濾過膜
（「ＮＴＵ−３２５０」（日東電気工業(株)製品，分画
分子量（蛋白）約６０００）を使用し、下記のＵＦ条件
で濾過した。
（「ＮＴＵ−３２５０」（日東電気工業(株)製品，分画
分子量（蛋白）約６０００）を使用し、下記のＵＦ条件
で濾過した。
【００２４】（ＵＦ条件） 圧 力 ２ｋｇ／ｃｍ2 循環流量 １０ｌ／ｍｉｎ 温 度 ２５〜３０℃
【００２５】脱色液の濃縮濾過は、濃縮液（被処理液）
が２．５ｌになるまで行い、その後１０ｌの純水でダイ
アフィルトレーションを行うことで残存Ｌ−アルギニン
を置換回収した。透過液液量は１０１０ｌであった。
が２．５ｌになるまで行い、その後１０ｌの純水でダイ
アフィルトレーションを行うことで残存Ｌ−アルギニン
を置換回収した。透過液液量は１０１０ｌであった。
【００２６】この透過液を従来法の０．５μｍのフィル
ターの濾液と同様に操作し乾燥結晶を取り上げた。
ターの濾液と同様に操作し乾燥結晶を取り上げた。
【００２７】得られた乾燥精製結晶は１３５ｋｇであっ
た。
た。
【００２８】〔Ｌ−ＲＯ法〕脱色液１０００ｌをスルホ
ン酸基を含有する荷電性合成樹脂製のルーズな逆浸透膜
（「ＮＴＲ−７４１０」（日東電気工業(株)製品，食塩
阻止率１０％））を使用し、下記のＬ−ＲＯ条件で濾過
した。
ン酸基を含有する荷電性合成樹脂製のルーズな逆浸透膜
（「ＮＴＲ−７４１０」（日東電気工業(株)製品，食塩
阻止率１０％））を使用し、下記のＬ−ＲＯ条件で濾過
した。
【００２９】（Ｌ−ＲＯ条件） 圧 力 １０ｋｇ／ｃｍ2 循環流量 １０ｌ／ｍｉｎ 温 度 ２５〜３０℃
【００３０】脱色液の濃縮濾過は、濃縮液（被処理液）
が２．５ｌになるまで行い、その後１０ｌの純水でダイ
アフィルトレーションを行うことで残存Ｌ−アルギニン
を置換回収した。透過液液量は１０１０ｌであった。
が２．５ｌになるまで行い、その後１０ｌの純水でダイ
アフィルトレーションを行うことで残存Ｌ−アルギニン
を置換回収した。透過液液量は１０１０ｌであった。
【００３１】この透過液を従来法の０．５μｍのフィル
ターの濾液と同様に操作し乾燥結晶を取り上げた。
ターの濾液と同様に操作し乾燥結晶を取り上げた。
【００３２】得られた乾燥精製結晶は１３６ｋｇであっ
た。
た。
【００３３】上記の３つの方法で得られた乾燥精製結晶
を下表の条件で濾過し濾過性を比較した。ｐＨ調整は、
２Ｎ ＨＣｌ水溶液を用いて行い、濾過性評価は、濾過
に必要な時間を測定することで行った。その評価結果を
表１に示す。
を下表の条件で濾過し濾過性を比較した。ｐＨ調整は、
２Ｎ ＨＣｌ水溶液を用いて行い、濾過性評価は、濾過
に必要な時間を測定することで行った。その評価結果を
表１に示す。
【００３４】（濾過性評価の条件） 圧 力：２ｋｇ／ｃｍ2 濃 度：５ｇ／ｄｌ 温 度：３０℃ 液 量：１．４ｌ フィルター：ミリポア０．２２μｍＧＳ ｐ Ｈ ：１１，７，５，３
【００３５】（濾過性評価の結果）
【表１】
【００３６】従来法結晶とＵＦ法精製結晶は、中、酸
性、特にｐＨ３、で濾過性が極端に悪化した。それに対
して、Ｌ−ＲＯ法精製結晶は、中、酸性側での濾過性の
悪化がなかった。
性、特にｐＨ３、で濾過性が極端に悪化した。それに対
して、Ｌ−ＲＯ法精製結晶は、中、酸性側での濾過性の
悪化がなかった。
【００３７】尚、Ｌ−ＲＯ処理する事によって濾過性改
善ばかりではなく、同時に発熱性物質、等の除去率もさ
らに改善された。
善ばかりではなく、同時に発熱性物質、等の除去率もさ
らに改善された。
【００３８】実施例２ 実施例１と同様に処理してつくった脱色液１０００ｌを
無電荷のルーズな逆浸透膜（「ＨＲ−２０」（東レ(株)
製品，食塩阻止率１５％））を使用し、下記Ｌ−ＲＯ条
件で濾過した。
無電荷のルーズな逆浸透膜（「ＨＲ−２０」（東レ(株)
製品，食塩阻止率１５％））を使用し、下記Ｌ−ＲＯ条
件で濾過した。
【００３９】（Ｌ−ＲＯ条件） 圧 力 ２５ｋｇ 循環流量 １２ｌ／ｍｉｎ 温 度 ２０〜２５℃
【００４０】脱色液の濃縮濾過は、濃縮液（被処理液）
が２．５ｌになるまで行い、その後１０ｌの純水でダイ
アフィルトレーションを行うことで残存Ｌ−Ａｒｇ・Ｂ
ａｓｅを置換回収した。透過液液量は１０２０ｌであっ
た。
が２．５ｌになるまで行い、その後１０ｌの純水でダイ
アフィルトレーションを行うことで残存Ｌ−Ａｒｇ・Ｂ
ａｓｅを置換回収した。透過液液量は１０２０ｌであっ
た。
【００４１】この透過液を従来法の０．５μｍのフィル
ターの濾液と同様に操作し乾燥を結晶取り上げた。
ターの濾液と同様に操作し乾燥を結晶取り上げた。
【００４２】得られた乾燥精製結晶は１３２ｋｇであっ
た。
た。
【００４３】上記の方法で得られた乾燥精製結晶を実施
例１と同じ条件で濾過し濾過性を評価した。その結果を
表２に示す。
例１と同じ条件で濾過し濾過性を評価した。その結果を
表２に示す。
【００４４】（濾過性評価の結果）
【表２】
【００４５】
【発明の効果】本発明の方法により、アルカリ性溶液状
態で精製が行なわれる塩基性アミノ酸を中、酸性状態で
濾過しても濾過速度低下の問題がなくなる。
態で精製が行なわれる塩基性アミノ酸を中、酸性状態で
濾過しても濾過速度低下の問題がなくなる。
Claims (1)
- 【請求項１】 発酵法で生産された塩基性アミノ酸の水
溶液をルーズな逆浸透膜で濾過することを特徴とする塩
基性アミノ酸の精製方法
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29607294A JP3617091B2 (ja) | 1994-11-30 | 1994-11-30 | 塩基性アミノ酸の精製方法 |
| EP95118778A EP0714884A1 (en) | 1994-11-30 | 1995-11-29 | A method for the production of a basic amino acid |
| KR1019950044510A KR960017852A (ko) | 1994-11-30 | 1995-11-29 | 염기성 아미노산의 정제 방법 |
| CN95120524A CN1132741A (zh) | 1994-11-30 | 1995-11-30 | 碱性氨基酸的一种提纯方法 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08157433A true JPH08157433A (ja) | 1996-06-18 |
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| JP29607294A Expired - Fee Related JP3617091B2 (ja) | 1994-11-30 | 1994-11-30 | 塩基性アミノ酸の精製方法 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006051940A1 (ja) * | 2004-11-15 | 2006-05-18 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Ｌ－オルニチン結晶およびその製造方法 |
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| SI9500265A1 (en) | 1995-08-28 | 1997-02-28 | Lek Tovarna Farmacevtskih | Process for purification of the aqueous fermented broth filtrate of streptomyces sp. p 6621 ferm p 2804 by ultrafiltration |
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|---|---|---|---|---|
| JPS6078588A (ja) * | 1983-10-04 | 1985-05-04 | Ajinomoto Co Inc | 限外濾過流束改良法 |
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| US5017480A (en) * | 1987-08-10 | 1991-05-21 | Ajimomoto Co., Inc. | Process for recovering L-amino acid from fermentation liquors |
| JP2817155B2 (ja) | 1989-01-12 | 1998-10-27 | 味の素株式会社 | 発酵法によるｌ‐アルギニンの製造法 |
| JP3228813B2 (ja) * | 1993-03-05 | 2001-11-12 | 日本電産株式会社 | センサレス多相直流モータの回転制御方法 |
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- 1994-11-30 JP JP29607294A patent/JP3617091B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1995
- 1995-11-29 EP EP95118778A patent/EP0714884A1/en not_active Withdrawn
- 1995-11-29 KR KR1019950044510A patent/KR960017852A/ko not_active Application Discontinuation
- 1995-11-30 CN CN95120524A patent/CN1132741A/zh active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006051940A1 (ja) * | 2004-11-15 | 2006-05-18 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Ｌ－オルニチン結晶およびその製造方法 |
| JPWO2006051940A1 (ja) * | 2004-11-15 | 2008-05-29 | 協和醗酵工業株式会社 | Ｌ−オルニチン結晶およびその製造方法 |
| JP4778913B2 (ja) * | 2004-11-15 | 2011-09-21 | 協和発酵バイオ株式会社 | Ｌ−オルニチン結晶およびその製造方法 |
| US20210396595A1 (en) * | 2018-02-07 | 2021-12-23 | Renault S.A.S. | Method and device for detecting when a predefined temperature threshold is exceeded |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0714884A1 (en) | 1996-06-05 |
| CN1132741A (zh) | 1996-10-09 |
| JP3617091B2 (ja) | 2005-02-02 |
| KR960017852A (ko) | 1996-06-17 |
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