JP4778913B2

JP4778913B2 - Ｌ−オルニチン結晶およびその製造方法

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Publication number: JP4778913B2
Application number: JP2006544998A
Authority: JP
Inventors: 英城村田; 育弘中谷; 摩里子下重; 健治田島
Original assignee: KYOUWA HAKKO BIO CO.,LTD
Current assignee: KYOUWA HAKKO BIO CO.,LTD
Priority date: 2004-11-15
Filing date: 2005-11-14
Publication date: 2011-09-21
Anticipated expiration: 2025-11-14
Also published as: JPWO2006051940A1; US20090082594A1; WO2006051940A1; US7772280B2

Description

本発明は、Ｌ−オルニチンの結晶（Ｌ−オルニチン結晶）およびその製造方法に関する。

Ｌ−オルニチンは、栄養強化添加物や医薬品などの成分として広く用いられている。
しかしながら、Ｌ−オルニチンは、その遊離塩基を結晶として取得することが難しいことから、通常、塩酸塩などの塩の形態で流通している（シグマ社製品カタログ２００４−２００５年版）。
Ｌ−オルニチンを例えば栄養強化などの目的で輸液などの成分として用いる場合、例えば塩酸塩をそのまま利用するとアシドーシス症状を引き起こす恐れがある。また、塩素イオンを多量に含む輸液を投与することは、特に腎疾患患者などでは好ましくない。さらに、Ｌ−オルニチンを栄養強化添加物などとして食品などに混合して、またはそのまま経口で用いる場合、例えば塩酸塩では、その苦味のため利用が難しくなることはよく知られている。そのため、遊離塩基としてのＬ−オルニチンが求められているが、上述した通り、Ｌ−オルニチン結晶を取得することは難しい。一般に非結晶のアミノ酸は吸湿性が高く、流通形態としては好ましくない。従って、流通形態として良好なＬ−オルニチン結晶およびその製造方法が求められている。

一方、遊離塩基であるＬ−オルニチンの水溶液（Ｌ−オルニチンの水溶液）などの使用が知られているが、該Ｌ−オルニチンの水溶液からＬ−オルニチン結晶を取得する方法は知られていない（特許文献１〜３参照）。また、Ｌ−オルニチンを含む遊離塩基であるアミノ酸の水溶液を十分乾燥させることにより遊離のアミノ酸を結晶状で取得できることが知られているが、Ｌ−オルニチン結晶に関する具体的な記載はない（特許文献４参照）。
特公昭４６−３１９４号公報特開平４−３６４１５５号公報特開昭５５−１３６２５４号公報特開２００３−１４４０８８号公報

本発明の目的は、Ｌ−オルニチンの供給源として優れたＬ−オルニチン結晶およびその製造方法を提供することにある。

本発明は、以下の（１）〜（１１）に関する。
（１）Ｌ−オルニチンの結晶。
（２）Ｌ−オルニチンの含有量が９５重量％以上である（１）記載の結晶。
（３）Ｌ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程を含むＬ−オルニチンの結晶の製造方法。
（４）Ｌ−オルニチンの水溶液を親水性有機溶媒と混合し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させる工程を含むＬ−オルニチンの結晶の製造方法。
（５）（ｉ）Ｌ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物あるいはそれらを含有する溶液を陽イオン交換樹脂に付し、Ｌ−オルニチンを該陽イオン交換樹脂に吸着させる工程、（ｉｉ）Ｌ−オルニチンを吸着させた該陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程、および（ｉｉｉ）該Ｌ−オルニチン水溶液を親水性有機溶媒と混合し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させる工程を含むＬ−オルニチンの結晶の製造方法。
（６）Ｌ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物を含有する溶液がＬ−オルニチン培養液である（５）記載の製造方法。
（７）アルカリ水溶液がアンモニア水である（３）、（５）または（６）記載の製造方法。
（８）溶出液からアルカリ成分を除去する方法が溶出液の濃縮である（３）または（５）〜（７）のいずれかに記載の製造方法。
（９）親水性有機溶媒がメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブタノール、エチレングリコール、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドからなる群から選ばれる溶媒である（４）〜（８）のいずれかに記載の製造方法。
（１０）親水性有機溶媒がメタノールまたはエタノールである（４）〜（８）のいずれかに記載の製造方法。
（１１）（ｉ）Ｌ−オルニチンを陽イオン交換樹脂に付し、該陽イオン交換樹脂に吸着させる工程、（ｉｉ）Ｌ−オルニチンを吸着させた該陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程、および（ｉｉｉ）該Ｌ−オルニチン水溶液を親水性有機溶媒と混合し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させる工程を含むＬ−オルニチンの精製方法。

本発明により、Ｌ−オルニチンの供給源として優れたＬ−オルニチン結晶およびその製造方法が提供される。

本発明のＬ−オルニチン結晶におけるＬ−オルニチンの含有量は好ましくは９５重量％以上、より好ましくは９７重量％以上である。該結晶は、５重量％未満の、好ましくは３重量％未満の水分を含有していてもよく、更に、５％重量未満の、好ましくは３重量％未満のメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブタノール、エチレングリコール、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどの親水性有機溶媒を含有していてもよい。

本発明のＬ−オルニチン結晶には、複数の結晶形が存在するが、本発明のＬ−オルニチン結晶は、これら全ての結晶形を包含する。
本発明のアルカリ成分とは、例えばＬ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出して得られた溶出液中に含有するＬ−オルニチン以外のアルカリ性を示す成分のことであり、より具体的には、例えば水酸化ナトリウムを含有する溶出液の場合（例えば水酸化ナトリウム水溶液で溶出した場合）は水酸化ナトリウムであり、炭酸ナトリウムを含有する溶出液の場合（例えば炭酸ナトリウム水溶液で溶出した場合）は炭酸ナトリウムであり、アンモニアを含有する溶出液の場合（例えばアンモニア水で溶出した場合）はアンモニアである。

次に、本発明のＬ−オルニチン結晶の製造方法について説明する。
本発明のＬ−オルニチン結晶の製造方法の原料としては、種々の形態のＬ−オルニチンを用いることができるが、例えばＬ−オルニチンもしくはその塩、それらを含有する組成物、それらを含有する水溶液などの溶液（Ｌ−オルニチン溶液）、Ｌ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂などが用いられる。原料に含まれるＬ−オルニチンは、例えば発酵法により製造されたもの、化学合成法により製造されたもの、発酵法と化学合成法を組み合わせて製造されたものなどいずれの方法によって製造されたものであってもよい。

上記のＬ−オルニチンの塩としては、例えば、Ｌ−オルニチン・塩酸塩（シグマ社製品カタログ２００４−２００５年版）、Ｌ−オルニチン・Ｌ−アスパラギン酸塩（特開平４−３６４１５５）、Ｌ−オルニチン・リンゴ酸塩（特開昭５５−１３６２５４）、Ｌ−オルニチン・コハク酸塩（ＣＡＳＲｅｇｉｓｔｒｙＮｏ．２４８７０−６７−５）などがあげられる。

上記のＬ−オルニチンまたはその塩を含有する組成物としては、上記のＬ−オルニチンまたはその塩を含有していれば特に限定されないが、例えば、Ｌ−オルニチンを含有する発酵生産物（例えば、Ｌ−オルニチンと菌体、酸、塩基、無機塩、溶媒などとの混合物など）、Ｌ−オルニチンとその製造に用いた物質との混合物（例えば、Ｌ−オルニチンとその製造に用いた溶媒、無機塩などとの混合物など）、上記のＬ−オルニチンの塩を含有する組成物などがあげられる。

上記のＬ−オルニチン溶液としては、上記のＬ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物が水、親水性有機溶媒またはそれらの混合溶媒に溶解した溶液であれば特に限定されないが、例えば、Ｌ−オルニチンの水溶液、市販のＬ−オルニチン・塩酸塩などを水に溶解したＬ−オルニチンを含有する水溶液、発酵法により得られるＬ−オルニチン培養液などがあげられ、好ましくはＬ−オルニチン培養液があげられる。

本発明で用いられる上記Ｌ−オルニチン培養液は、例えば、従来公知の発酵法により得ることができる。すなわち、Ｌ−オルニチン生産菌、例えばコリネバクテリウム・グルタミカム、コリネバクテリウム・アセトアジドフィラム、コリネバクテリウム・ハーキュリス、コリネバクテリウム・リリウム、ブレビバクテリウム・ディバリカツム、ブレビバクテリウム・フラブム、ブレビバクテリウム・イマリオフィラム、ブレビバクテリウム・ラクトファーメンタム、ブレビバクテリウム・チオゲンタリスなどを炭素源、窒素源、無機塩、ビタミンなどを含有する通常の培地中、好気的条件下、温度、ｐＨなどを適宜調整しながら培養すると、培養物中にＬ−オルニチンが生成し蓄積するので、該培養物から上記Ｌ−オルニチン培養液を得ることができる。上記の培地としては、炭素源、窒素源、無機塩、ビタミンなどＬ−オルニチン生産菌の増殖、およびＬ−オルニチンの生合成に必要な栄養素を含む限り、合成培地、天然培地のいずれでもよい。炭素源としては、使用する微生物の資化できる炭素源であればいずれでもよく、例えば、グルコース、フラクトースのような糖質、エタノール、グリセロールのようなアルコール類、酢酸のような有機酸類などをあげることができる。窒素源としては、例えば、アンモニア、硫酸アンモニウム等のアンモニウム塩、アミンなどの窒素化合物、ペプトン、大豆加水分解物のような天然窒素源などをあげることができる。無機塩としては、例えば、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、炭酸カリウムなどをあげることができる。ビタミンとしては、例えば、ビオチン、チアミンなどをあげることができる。培養に際しては、さらに必要に応じてＬ−オルニチン生産菌が生育に要求する物質（例えばアミノ酸要求性の微生物であれば要求アミノ酸）を添加することができる。培養は、好ましくは振とう培養や通気攪拌培養のような好気的条件で行う。培養温度は２０〜５０℃、好ましくは２０〜４２℃、より好ましくは２８〜３８℃である。培養ｐＨは５〜９、好ましくは６〜７．５である。培養時間は、５時間〜５日間、好ましくは１６時間〜３日間である。培養物からの培養液と菌体との分離は、従来公知の方法により行うことができ、例えば濾過または遠心分離などにより培養液と菌体を分離する場合は、ヌッチェ、フィルタープレス、ラバル型遠心分離器などを用いることができる。このとき、培養物は塩酸、硫酸、硝酸など、好ましくは硫酸を添加し、ｐＨを１．５〜３．８、好ましくは１．５〜１．８に調整しておくことが好ましい。

本発明のＬ−オルニチン結晶の製造方法は、（ｉ）Ｌ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物あるいはそれらを含有する溶液を陽イオン交換樹脂に付し、Ｌ−オルニチンを該陽イオン交換樹脂に吸着させる工程、（ｉｉ）Ｌ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程、および（ｉｉｉ）Ｌ−オルニチンの水溶液を親水性有機溶媒と混合し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させる工程の少なくとも１つを含む。

（ｉ）Ｌ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物あるいはそれらを含有する溶液を陽イオン交換樹脂に付し、Ｌ−オルニチンを該陽イオン交換樹脂に吸着させる工程は、上記のＬ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物あるいはＬ−オルニチン溶液中に含まれるＬ−オルニチンを陽イオン交換樹脂に吸着させる工程である。具体的には、例えば上記のＬ−オルニチン溶液または上記のＬ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物を水、有機溶媒などの溶媒に溶解した溶液を、陽イオン交換樹脂を充填したカラムなどに通塔することにより、Ｌ−オルニチンを該陽イオン交換樹脂に吸着させる工程である。通塔後、必要に応じ水などで該陽イオン交換樹脂を洗浄するのが好ましい。用いられる陽イオン交換樹脂としては、例えば強酸性陽イオン交換樹脂があげられ、具体的には、スチレンジビニルベンゼン共重合体からなるスルホン酸を交換基として備えたゲル型強酸性カチオン交換樹脂などがあげられ、より具体的には、ダウエックスＨＣＲ−Ｓ、ダウエックスＨＣＲ−Ｗ２、ダウエックスＨＧＲ−Ｗ２、ダウエックス・マラソンＣ（以上、ダウケミカル社製）、ダイアイオンＳＫ１Ｂ、ダイアイオンＳＫ１０２、ダイアイオンＳＫ１０４、ダイアイオンＳＫ１１０、ダイアイオンＳＫ１１２、ダイアイオンＳＫ１１６（以上、三菱化学社製）などがあげられる。

（ｉｉ）Ｌ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程は、例えばＬ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂、好ましくは上記（ｉ）の方法でＬ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂から、アルカリ水溶液を用いＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程である。アルカリ水溶液としては、例えば１〜６ｍｏｌ／Ｌ、好ましくは１〜３ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどの無機塩基の水溶液、１〜６ｍｏｌ／Ｌ、好ましくは１〜３ｍｏｌ／Ｌのアンモニア水、１０〜８０重量％、好ましくは１０〜４０重量％のメチルアミン、ジメチルアミン、エチルアミンなどの有機アミンの水溶液などがあげられる。中でもアンモニア水やメチルアミン、ジメチルアミンなどの低沸点の有機アミンの水溶液が好ましく、アンモニア水がより好ましい。

Ｌ−オルニチン水溶液は、上記のアルカリ水溶液で溶出したＬ−オルニチンを含有する溶出液を例えば塩酸、硫酸、酢酸などでＬ−オルニチンの等電点まで中和すること（アルカリ成分の除去）により得ることができる。このとき、得られた溶液は脱塩処理に付し、次工程（ｉｉｉ）に用いることが好ましい。脱塩処理方法としては、従来公知の方法などがあげられる。

また、アンモニア水などの上記の好ましいアルカリ水溶液を用いて溶出した場合、得られたＬ−オルニチンを含有する溶出液を減圧下で濃縮するだけで溶存するアンモニアなどのアルカリ成分を除去することができ、Ｌ−オルニチン水溶液を容易に調製することができる。例えば、アンモニア水などを溶出溶媒として用いる場合は、溶出液を、常圧下または減圧下で濃縮することによってＬ−オルニチン水溶液を得ることができる。減圧下での濃縮は、好ましくは１４０ｍｍＨｇ以下、より好ましくは４０ｍｍＨｇ以下の減圧度で、好ましくは２０〜８０℃、より好ましくは４０〜５０℃の温度範囲で行われる。濃縮は、例えばＬ−オルニチンの濃度が２００〜６００ｇ／Ｌ、好ましくは３００〜４００ｇ／Ｌとなるまで行うことが好ましい。

（ｉｉｉ）Ｌ−オルニチンの水溶液を親水性有機溶媒と混合し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させる工程は、例えば、Ｌ−オルニチンの水溶液、好ましくは上記（ｉｉ）の方法により得られたＬ−オルニチン水溶液に、親水性有機溶媒を添加するか、または親水性有機溶媒中にＬ−オルニチンの水溶液、好ましくは上記（ｉｉ）の方法により得られたＬ−オルニチン水溶液を添加し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させることによりＬ−オルニチン結晶を得る工程である。

Ｌ−オルニチンの水溶液は、遊離塩基であるＬ−オルニチンを含有する水溶液であれば特に限定されないが、例えば上記（ｉｉ）で得られたＬ−オルニチン水溶液そのままで、または後述する所定の濃度に調整して用いることが好ましく、該Ｌ−オルニチン水溶液を活性炭などで処理することにより脱色して用いることがより好ましい。
親水性有機溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブタノール、エチレングリコール、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどがあげられ、好ましくはメタノール、エタノールなどがあげられる。

Ｌ−オルニチンの水溶液に親水性有機溶媒を添加する場合、Ｌ−オルニチン結晶は、例えば、Ｌ−オルニチンの水溶液、好ましくは上記（ｉｉ）で得られたＬ−オルニチン水溶液に、攪拌下、０℃〜５０℃で、好ましくは５℃〜室温で、より好ましくは室温で親水性有機溶媒を徐々に添加し、必要により放置、攪拌、冷却などの処理を行った後、析出した結晶を分離・乾燥することにより得ることができる。

上記（ｉｉ）で得られたＬ−オルニチン水溶液を用いる場合、上記（ｉｉ）で得られたＬ−オルニチン水溶液は、得られた水溶液そのままで用いることもできるが、Ｌ−オルニチンの濃度が、例えば６００〜９００ｇ／Ｌ、好ましくは８００〜９００ｇ／Ｌ、より好ましくは８６０〜８８０ｇ／Ｌとなるように調整して用いることが好ましい。
親水性有機溶媒は、Ｌ−オルニチンの水溶液に対して、例えば１〜１０倍量、好ましくは３〜８倍量、より好ましくは４〜６倍量用いられる。また、親水性有機溶媒を添加した後、例えば０℃〜室温で、好ましくは０℃〜１０℃で５分間〜４８時間攪拌することにより、Ｌ−オルニチン結晶の収率を向上させることができる。

分離・乾燥方法としては、従来公知の方法を用いることができる。例えば、析出したＬ−オルニチン結晶を遠心分離、単板濾過、ヌッチェなどを用いる減圧濾過などの操作により分離した後、例えば室温〜５０℃、好ましくは室温で５〜９０時間、好ましくは１２〜７２時間、減圧乾燥することにより、Ｌ−オルニチン結晶を得ることができる。
親水性有機溶媒中にＬ−オルニチンの水溶液を添加する場合、Ｌ−オルニチン結晶は、例えば、親水性有機溶媒中に攪拌下、０℃〜室温で、Ｌ−オルニチンの水溶液、好ましくは上記（ｉｉ）で得られたＬ−オルニチン溶液を徐々に添加し、析出した結晶を分離・乾燥することにより得ることができる。

上記（ｉｉ）で得られたＬ−オルニチン水溶液を用いる場合、上記（ｉｉ）で得られたＬ−オルニチン水溶液は、得られた水溶液そのままで用いることもできるが、Ｌ−オルニチンの濃度が、例えば６００〜１０００ｇ／Ｌ、好ましくは８５０〜９００ｇ／Ｌとなるように調整して用いることが好ましい。
親水性有機溶媒は、添加するＬ−オルニチンの水溶液に対して、例えば１０〜２００倍量、好ましくは１００〜１５０倍量用いられる。また、Ｌ−オルニチンの水溶液を添加した後、例えば、０℃〜室温で、好ましくは０℃〜１０℃で５分間〜４８時間攪拌することにより、Ｌ−オルニチン結晶の収率を向上させることができる。

分離・乾燥方法は、上記と同様の方法を用いることができる。
本発明の精製方法は、上記本発明の製造方法の説明で記載した事項に準じて行うことができる。
以下に、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

特開昭６１−１１９１９４号に記載の方法に準じて得られたＬ−オルニチン培養物を遠心分離により菌体分離し、得られたＬ−オルニチン培養液を強酸性イオン交換樹脂（マラソンＣ（Ｈ型））を充填したカラムに導通した。このカラムを水５００ｍＬで洗浄した後、２ｍｏｌ／Ｌアンモニア水１０００ｍＬでＬ−オルニチンを溶出した。溶出液を約２００ｍＬまで濃縮した後、この溶液に活性炭２．５ｇを加え、６０℃で３０分間攪拌した。活性炭を濾別した後、濾液を７０ｍＬまで濃縮した。得られた濃縮液を室温で攪拌しながら、エタノール３５０ｍＬを滴下した。次いで、得られた混合物を５℃に冷却し、４８時間攪拌した。析出した結晶を濾取し、エタノール３５０ｍＬで洗浄したのち、２０℃で３日間減圧乾燥することにより、Ｌ−オルニチン結晶を白色、柱状晶として得た。収率５６．６％。
融点（ＤＳＣ）：１５０．５℃
赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）：１４８０．３，１４４７．５，１２４４．０，１１４４．７，９３３．５
結晶組成分析：第１表に示す。

粉末Ｘ線結晶解析：ＲＡＤ−Ｘ型（理学電機社製）により測定した。結果を第２表に示す。

実施例１と同様にして、Ｌ−オルニチン培養液を強酸性イオン交換樹脂で処理し、溶出液を２０ｍＬまで濃縮した。得られた濃縮液を、室温でエタノール５００ｍＬ中に攪拌しながら滴下した。析出した結晶を濾取し、エタノール７５ｍＬで洗浄した後、２０℃で３日間減圧乾燥することにより、Ｌ−オルニチン結晶を白色、柱状晶として得た。収率６１．１％。
融点（ＤＳＣ）：１５１．８℃
赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）：１４８０．３，１４４７．５，１２４４．０，１１４４．７，９３３．５
結晶組成分析：第３表に示す。

粉末Ｘ線結晶解析：ＲＡＤ−Ｘ型（理学電機社製）により測定した。結果を第４表に示す。

本発明により提供される、Ｌ−オルニチンの結晶（Ｌ−オルニチン結晶）およびその製造方法などはＬ−オルニチンの供給源として有用である。

Claims

遊離のＬ−オルニチンの結晶。
粉末X線回折において、以下の［１］または［２］に記載の回折角（２θ）にピークを有する請求項１記載の結晶。
［１］４．９５°、５．３０°、１２．１５°、１４．９５°、１５．２５°、１５．９５°、１７．７０°、１９．４５°、２０．００°、２０．８５°、２１．２５°、２２．００°、２２．４０°、２２．６５°、２４．０５°、２４．４５°、２４．９５°、２７．１５°、２８．３５°、２９．００°、３２．２５°、３３．８０°、３４．２０°、３４．９５°、３５．９５°、３７．１５°および３９．００°
［２］５．２５°、１２．１５°、１５．２５°、１５．９０°、１７．６５°、１９．４０°、２０．８５°、２２．００°、２２．４０°、２２．６０°、２４．００°、２４．４５°、２４．９０°、２７．２５°、２７．７０°、２８．３５°、２８．９５°、３２．２０°、３４．１０°、３４．９０°、３７．１０°および３８．９５°
Ｌ−オルニチンの含有量が９５重量％以上である請求項１または２に記載の結晶。
Ｌ−オルニチンを吸着させた陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程を含む遊離のＬ−オルニチンの結晶の製造方法。
（ｉ）Ｌ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物あるいはそれらを含有する溶液を陽イオン交換樹脂に付し、Ｌ−オルニチンを該陽イオン交換樹脂に吸着させる工程、（ｉｉ）Ｌ−オルニチンを吸着させた該陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程、および（ｉｉｉ）該Ｌ−オルニチン水溶液を親水性有機溶媒と混合し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させる工程を含む遊離のＬ−オルニチンの結晶の製造方法。
Ｌ−オルニチンもしくはその塩またはそれらを含有する組成物を含有する溶液がＬ−オルニチン培養液である請求項５記載の製造方法。
親水性有機溶媒がメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブタノール、エチレングリコール、アセトン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドからなる群から選ばれる溶媒である請求項５または６記載の製造方法。
親水性有機溶媒がメタノールまたはエタノールである請求項５または６記載の製造方法。
アルカリ水溶液がアンモニア水である請求項４〜８のいずれかに記載の製造方法。
溶出液からアルカリ成分を除去する方法が溶出液の濃縮である請求項４〜９のいずれかに記載の製造方法。
（ｉ）Ｌ−オルニチンを陽イオン交換樹脂に付し、該陽イオン交換樹脂に吸着させる工程、（ｉｉ）Ｌ−オルニチンを吸着させた該陽イオン交換樹脂からアルカリ水溶液でＬ−オルニチンを溶出し、得られた溶出液からアルカリ成分を除去しＬ−オルニチン水溶液を得る工程、および（ｉｉｉ）該Ｌ−オルニチン水溶液を親水性有機溶媒と混合し、得られた混合溶液からＬ−オルニチンを結晶化させる工程を含む遊離のＬ−オルニチンの精製方法。