JPH07330772A - マピア・ホエチダからのアルカロイド及び抗ウイルス剤を含む製剤 - Google Patents
マピア・ホエチダからのアルカロイド及び抗ウイルス剤を含む製剤Info
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- JPH07330772A JPH07330772A JP6172542A JP17254294A JPH07330772A JP H07330772 A JPH07330772 A JP H07330772A JP 6172542 A JP6172542 A JP 6172542A JP 17254294 A JP17254294 A JP 17254294A JP H07330772 A JPH07330772 A JP H07330772A
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07G—COMPOUNDS OF UNKNOWN CONSTITUTION
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 本発明は抗腫瘍及び抗ウイルス作用を有す
る、Mappia foetidaから得られる新規なアルカロイド、
フェチジン１及び２に関する。これらのアルカロイドは
水に可溶であり、該植物のすべての部分に存在する。該
物質は医薬作用を有するが水に不溶であることが知られ
ているアルカロイドのカンプトテシン及び９−メトキシ
カンプトテシンの前駆物質である。 【効果】 新規物質が水可溶性であることは、毒性なし
に又は化学的誘導体の使用をさけて患者へ投与するのに
適している。
る、Mappia foetidaから得られる新規なアルカロイド、
フェチジン１及び２に関する。これらのアルカロイドは
水に可溶であり、該植物のすべての部分に存在する。該
物質は医薬作用を有するが水に不溶であることが知られ
ているアルカロイドのカンプトテシン及び９−メトキシ
カンプトテシンの前駆物質である。 【効果】 新規物質が水可溶性であることは、毒性なし
に又は化学的誘導体の使用をさけて患者へ投与するのに
適している。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、マピア・ホエチダ(Map
pia foetida)からの新規なアルカロイド、それらを含む
抗ウイルス剤に関する。
pia foetida)からの新規なアルカロイド、それらを含む
抗ウイルス剤に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】腫瘍学
の分野及びある種のウイルス疾患の治療において、その
ままの形で又は誘導体の形で薬理学的及び臨床的に広く
試験されてきた化合物であるアルカロイドカンプトテシ
ン又は同じ適応症に有用な９−メトキシカンプトテシン
（II）が知られている。
の分野及びある種のウイルス疾患の治療において、その
ままの形で又は誘導体の形で薬理学的及び臨床的に広く
試験されてきた化合物であるアルカロイドカンプトテシ
ン又は同じ適応症に有用な９−メトキシカンプトテシン
（II）が知られている。
【０００３】
【化２】
【０００４】カンプトテシンは水中及び生物学的に許容
できるあらゆる液体に完全に不溶性であり、従ってこの
ような欠点を回避するため半合成的観点から徹底的な努
力が払われてきた。
できるあらゆる液体に完全に不溶性であり、従ってこの
ような欠点を回避するため半合成的観点から徹底的な努
力が払われてきた。
【０００５】
【課題を解決するための手段】構造式（II）をもつカン
プトテシンは、最初その他の化合物と共に Camptoteca
acuminata(Nyssaceae)から、そして Mappia foetida(Ol
inaceae)を含むその他の植物から分離された。後者は長
い間研究されてきたが、さらに化学的スクリーニングに
より、驚くべきことに該植物の粗抽出の過程において、
カンプトテシンを生成する新しいアルカロイドを発見し
た。
プトテシンは、最初その他の化合物と共に Camptoteca
acuminata(Nyssaceae)から、そして Mappia foetida(Ol
inaceae)を含むその他の植物から分離された。後者は長
い間研究されてきたが、さらに化学的スクリーニングに
より、驚くべきことに該植物の粗抽出の過程において、
カンプトテシンを生成する新しいアルカロイドを発見し
た。
【０００６】本発明のアルカロイドは、以下の構造式
（Ｉ）を有する：
（Ｉ）を有する：
【０００７】
【化３】
【０００８】（式中、Ｒが水素のものはフェチジン１で
あり、Ｒがメトキシのものはフェチジン２である）
あり、Ｒがメトキシのものはフェチジン２である）
【０００９】フェチジン１及び２は、酸又は塩基、ある
いは加水分解酵素を用いた処理によって、定量的にそれ
ぞれカンプトテシン及び９−メトキシカンプトテシンを
生成する。カンプトテシンを生成する化合物の中でも特
に重要なものは、該植物中に比較的豊富に存在するフェ
チジン１である。分光分析及び化学分解によるその構造
の解明によって、開環カンプトテシン単位と、２つのク
マル酸でエステル化されたスペルミジン単位を有するこ
とを特徴とする化合物〔構造式（Ｉ）参照〕と同定する
ことができた。この化合物は、該植物のあらゆる部分に
含まれ、特に種子及び根の中に０．１〜０．５％の量で
含まれている。カンプトテシンと比較して、これは、わ
ずかに酸性のpHで水中に容易に溶けるという利点をも
つ。
いは加水分解酵素を用いた処理によって、定量的にそれ
ぞれカンプトテシン及び９−メトキシカンプトテシンを
生成する。カンプトテシンを生成する化合物の中でも特
に重要なものは、該植物中に比較的豊富に存在するフェ
チジン１である。分光分析及び化学分解によるその構造
の解明によって、開環カンプトテシン単位と、２つのク
マル酸でエステル化されたスペルミジン単位を有するこ
とを特徴とする化合物〔構造式（Ｉ）参照〕と同定する
ことができた。この化合物は、該植物のあらゆる部分に
含まれ、特に種子及び根の中に０．１〜０．５％の量で
含まれている。カンプトテシンと比較して、これは、わ
ずかに酸性のpHで水中に容易に溶けるという利点をも
つ。
【００１０】フェチジン１は、低分子量の脂肪族アルコ
ール又はケトンを単独で又はその水との混合物で、室温
で該植物の種々の部分を抽出することによって得られ
る。抽出物は低い温度、好ましくは２５℃以下の温度で
真空下で濃縮する。有機溶剤を除去し、水性濃縮物を塩
素化溶剤で抽出して、カンプトテシン、９−メトキシカ
ンプトテシン及びマピシンを含む塩基度の低いアルカロ
イドを抽出する。ひきつづき水相をｎ−ブタノール又は
水不混和性アルコールを用いて抽出し、これらのブタノ
ール又はアルコール相は次に真空下で低温にて乾燥する
まで濃縮する。ブタノール抽出物からの残渣は、塩素化
溶剤、好ましくは塩化メチレンと、脂肪族アルコール、
好ましくはメタノール又はエタノールとの混合物を溶出
剤として用いて、シリカゲル又は類似の吸着剤で精製す
る。好ましくは４：１乃至１：１の混合物が使用され
る。本発明のアルカロイドを含む分画を合わせ、乾燥す
るまで濃縮し、残渣は、例えば Li Chroprep RP8カラム
を用い、１：１のメタノール／水比から出発し純粋なメ
タノールに至るまでのメタノール／水勾配で溶出する分
取ＨＰＬＣによってさらに精製する。アルカロイド含有
分画は真空下低温で濃縮し、水性濃縮物は凍結乾燥す
る。純粋なアルカロイドは結晶化によって得られる。
ール又はケトンを単独で又はその水との混合物で、室温
で該植物の種々の部分を抽出することによって得られ
る。抽出物は低い温度、好ましくは２５℃以下の温度で
真空下で濃縮する。有機溶剤を除去し、水性濃縮物を塩
素化溶剤で抽出して、カンプトテシン、９−メトキシカ
ンプトテシン及びマピシンを含む塩基度の低いアルカロ
イドを抽出する。ひきつづき水相をｎ−ブタノール又は
水不混和性アルコールを用いて抽出し、これらのブタノ
ール又はアルコール相は次に真空下で低温にて乾燥する
まで濃縮する。ブタノール抽出物からの残渣は、塩素化
溶剤、好ましくは塩化メチレンと、脂肪族アルコール、
好ましくはメタノール又はエタノールとの混合物を溶出
剤として用いて、シリカゲル又は類似の吸着剤で精製す
る。好ましくは４：１乃至１：１の混合物が使用され
る。本発明のアルカロイドを含む分画を合わせ、乾燥す
るまで濃縮し、残渣は、例えば Li Chroprep RP8カラム
を用い、１：１のメタノール／水比から出発し純粋なメ
タノールに至るまでのメタノール／水勾配で溶出する分
取ＨＰＬＣによってさらに精製する。アルカロイド含有
分画は真空下低温で濃縮し、水性濃縮物は凍結乾燥す
る。純粋なアルカロイドは結晶化によって得られる。
【００１１】得られた化合物は、ヒト腫瘍セルライン
（他の抗腫瘍物質に対して耐性をもつ又はもたない、卵
巣、乳房、結腸、肺などの）及びいくつかのウイルス株
に対して生物学的に評価した。実際、カンプトテシン又
その誘導体は、ＤＮＡトポイソメラーゼＩ型及びII型の
阻害と関係している細胞障害活性を有することが知られ
ている。
（他の抗腫瘍物質に対して耐性をもつ又はもたない、卵
巣、乳房、結腸、肺などの）及びいくつかのウイルス株
に対して生物学的に評価した。実際、カンプトテシン又
その誘導体は、ＤＮＡトポイソメラーゼＩ型及びII型の
阻害と関係している細胞障害活性を有することが知られ
ている。
【００１２】例えば結腸ガン腫セルラインに対する細胞
障害は約２５nMである。フェチジン１の抗ウイルス活性
は、株の異なる耐性が関係するが、１〜１００ng/ml の
範囲の濃度で発現する。９の位置のメトキシのため、フ
ェチジン１とは異なる構造のフェチジン２も、類似した
作用をする。ヘルペス、サイトメガロウイルス及びＨＩ
Ｖウイルスは本発明のアルカロイドに対し感受性をもつ
ことが実証された。
障害は約２５nMである。フェチジン１の抗ウイルス活性
は、株の異なる耐性が関係するが、１〜１００ng/ml の
範囲の濃度で発現する。９の位置のメトキシのため、フ
ェチジン１とは異なる構造のフェチジン２も、類似した
作用をする。ヘルペス、サイトメガロウイルス及びＨＩ
Ｖウイルスは本発明のアルカロイドに対し感受性をもつ
ことが実証された。
【００１３】本発明の化合物は、あらゆる種類の薬学製
剤に含有させることが可能であるが、上記の製剤はすべ
て沈殿又は相容性の欠如といった問題をひき起こすこと
なく、血液と相容性のpHで水溶液の形で非経口的に容易
に投与することができる。製剤中には、従来の薬学的賦
形剤がすべて使用可能である。これらの新規アルカロイ
ドの投薬は、一用量及び治療サイクルにつき０．５mg〜
２００mgの範囲であってよい。約５０mg/m2 の用量が予
備的に有効であることが実証された。以下の例はさらに
本発明を例示するものであって、本発明の範囲を制限す
るものではない。
剤に含有させることが可能であるが、上記の製剤はすべ
て沈殿又は相容性の欠如といった問題をひき起こすこと
なく、血液と相容性のpHで水溶液の形で非経口的に容易
に投与することができる。製剤中には、従来の薬学的賦
形剤がすべて使用可能である。これらの新規アルカロイ
ドの投薬は、一用量及び治療サイクルにつき０．５mg〜
２００mgの範囲であってよい。約５０mg/m2 の用量が予
備的に有効であることが実証された。以下の例はさらに
本発明を例示するものであって、本発明の範囲を制限す
るものではない。
【００１４】
実施例１−Mappia foetida種子からのフェチジン１の調
製 細かく摩砕した Mappia foetida の種子５kgを、室温で
攪拌しながら５０L のアセトンを用いて３回抽出する。
合わせたアセトン抽出物を真空下で１０L になるまで濃
縮する。濃縮物を１％のクエン酸溶液１０L を用いて希
釈する。不溶物をろ過し、廃棄する一方で、ヒドロアセ
トン相をアルカロイド抽出可能物質（カンプトテシン、
メトキシカンプトテシンなど）が完全になくなるまで塩
化メチレンで逆抽出する。ヒドロアセトン相を水に濃縮
し、pH７．５に中和の後、フェチジン１及び２が完全に
なくなるまでｎ−ブタノールを用いて濃縮物を抽出す
る。ｎ−ブタノール溶液を濃縮し、残渣を乾燥させて約
２００ｇのブタノール分画を得、この分画を以下のよう
に分画する。すなわち、５００ｇのシリカゲル上で３０
ｇのブタノール分画をクロマトグラフィに付し、カラム
を、まず４：１の塩化メチレン／メタノール混合物、次
に７：３の同じ溶剤の混合物で溶出する。７：３の混合
物で溶出された分画中に含まれる生成物を Li Chroprep
RP8カラム上で精製し、メタノール／水勾配で溶出す
る。フェチジン１及び２を含む分画を合わせ、３０℃以
下の温度で真空下乾燥するまで濃縮し、残渣をアセトン
／ヘキサンから結晶化させる。次の特性をもつフェチジ
ン１が５．１ｇ得られた。m. p. （融点） 157〜58℃；
αd=-37.9 （ｃ＝０．３１， ＭｅＯＨ）．
製 細かく摩砕した Mappia foetida の種子５kgを、室温で
攪拌しながら５０L のアセトンを用いて３回抽出する。
合わせたアセトン抽出物を真空下で１０L になるまで濃
縮する。濃縮物を１％のクエン酸溶液１０L を用いて希
釈する。不溶物をろ過し、廃棄する一方で、ヒドロアセ
トン相をアルカロイド抽出可能物質（カンプトテシン、
メトキシカンプトテシンなど）が完全になくなるまで塩
化メチレンで逆抽出する。ヒドロアセトン相を水に濃縮
し、pH７．５に中和の後、フェチジン１及び２が完全に
なくなるまでｎ−ブタノールを用いて濃縮物を抽出す
る。ｎ−ブタノール溶液を濃縮し、残渣を乾燥させて約
２００ｇのブタノール分画を得、この分画を以下のよう
に分画する。すなわち、５００ｇのシリカゲル上で３０
ｇのブタノール分画をクロマトグラフィに付し、カラム
を、まず４：１の塩化メチレン／メタノール混合物、次
に７：３の同じ溶剤の混合物で溶出する。７：３の混合
物で溶出された分画中に含まれる生成物を Li Chroprep
RP8カラム上で精製し、メタノール／水勾配で溶出す
る。フェチジン１及び２を含む分画を合わせ、３０℃以
下の温度で真空下乾燥するまで濃縮し、残渣をアセトン
／ヘキサンから結晶化させる。次の特性をもつフェチジ
ン１が５．１ｇ得られた。m. p. （融点） 157〜58℃；
αd=-37.9 （ｃ＝０．３１， ＭｅＯＨ）．
【００１５】1H-NMR(300MHz, DMSO d6) 8.60(1H, s, H-
7), 8.19(1H, t, J=5.2, H-10'), 8.15(1H, d, J=8.6,
H-12), 8.05(1H, d, J=8.6, H-9), 8.04(1H, t, J=5.2,
H-19'), 7.80(1H, t, J=7.8, H-11), 7.65(1H, t, J=
7.8, H-10), 7.35(2H, d, J=8.6, H-3'+H-5'), 7.34(2
H, d, J=8.6, H-24'+H-28'), 7.29(1H, d, J=15.8, H-
7'), 7.28(1H, d, J=15.8, H-22'), 6.76(4H, d, J=8.
6, H-2'+H-6'+H-25'+H-27'), 6.36(1H, d, J=15.8, H-
8'), 6.35(1H, d, J=15.8, H-21'), 5.58, 5.41(2H,sys
tem AB, J=10.6, H-17), 5.18(2H, s, H-5), 3.21(2H,
m, H-11'), 3.13(2H,m, H-18'), 2.84(4H, bt, J=7.2,
H-13'+H-15'), 2.02(1H, m, H-19A), 1.96(3H, s, CH3C
O), 1.90(1H, m, H-19B), 1.74(2H, m, H-12'), 1.55(2
H, m, H-16'), 1.46(2H, m, H-17'), 0.84(3H, t, J-7.
2, H-18)
7), 8.19(1H, t, J=5.2, H-10'), 8.15(1H, d, J=8.6,
H-12), 8.05(1H, d, J=8.6, H-9), 8.04(1H, t, J=5.2,
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6, H-2'+H-6'+H-25'+H-27'), 6.36(1H, d, J=15.8, H-
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H, m, H-16'), 1.46(2H, m, H-17'), 0.84(3H, t, J-7.
2, H-18)
【００１６】13C-NMR(78.1MHz, DMSO d6)δ: 175.23
(S, C-21), 170.81(s, CH3CO), 166.27(s, C-9'), 165.
83(s, C-20'), 161.43(s, C-16a), 159.40(s, C-1'), 1
59.14(s,C-15), 153.50(s, C-2), 148.36(s, C-13), 14
3.56(s, C-3), 139.37(d, C-7),139.06(d, C-22'), 13
1.74(d, C-7), 130.58(d, C-11), 130.33(s, C-6), 12
9.63(s, C-3'+C-5'), 129.56(d, C-24'+C-28'), 129.40
(d, C-12), 128.83(d, C-9), 128.23(s, C-8), 127.78
(d, C-10), 126.23(d, C-4'), 126.13(s, C-23'), 123.
42(s, C-16), 119.01(d, C-8'), 118.68(d, C-21'), 11
6.18(d, C-2'+C-6'+C-25'+C-27'), 100.68(d, C-14), 8
0.28(d, C-20), 59.87(t, C-17), 50.45(t, C-5), 47.2
3(t, C-13'), 45.36(t, C-15'), 38.41(t, C-18), 36.3
6(t, C-11'),33.40(t, C-19), 26.99(t, C-12'), 26.87
(t, C-17'), 24.04(t, C-16'), 21.22(q, CH3CO), 9.29
(q, C-18).
(S, C-21), 170.81(s, CH3CO), 166.27(s, C-9'), 165.
83(s, C-20'), 161.43(s, C-16a), 159.40(s, C-1'), 1
59.14(s,C-15), 153.50(s, C-2), 148.36(s, C-13), 14
3.56(s, C-3), 139.37(d, C-7),139.06(d, C-22'), 13
1.74(d, C-7), 130.58(d, C-11), 130.33(s, C-6), 12
9.63(s, C-3'+C-5'), 129.56(d, C-24'+C-28'), 129.40
(d, C-12), 128.83(d, C-9), 128.23(s, C-8), 127.78
(d, C-10), 126.23(d, C-4'), 126.13(s, C-23'), 123.
42(s, C-16), 119.01(d, C-8'), 118.68(d, C-21'), 11
6.18(d, C-2'+C-6'+C-25'+C-27'), 100.68(d, C-14), 8
0.28(d, C-20), 59.87(t, C-17), 50.45(t, C-5), 47.2
3(t, C-13'), 45.36(t, C-15'), 38.41(t, C-18), 36.3
6(t, C-11'),33.40(t, C-19), 26.99(t, C-12'), 26.87
(t, C-17'), 24.04(t, C-16'), 21.22(q, CH3CO), 9.29
(q, C-18).
【００１７】フェチジン１の結晶化母液から、逆相での
同じクロマトグラフィー溶出液の精製により、以下の特
性を持つフェチジン２（１．２ｇ）が得られた。m. p.
（融点）172 〜174 ℃; αd=-44.6(c=0.35, MeOH) 。Ｎ
ＭＲスペクトルは、３．２ppm での芳香環上の−ＯＣＨ
3 の信号を除いて、フェチジン１のスペクトルと重ね合
わせることができる。
同じクロマトグラフィー溶出液の精製により、以下の特
性を持つフェチジン２（１．２ｇ）が得られた。m. p.
（融点）172 〜174 ℃; αd=-44.6(c=0.35, MeOH) 。Ｎ
ＭＲスペクトルは、３．２ppm での芳香環上の−ＯＣＨ
3 の信号を除いて、フェチジン１のスペクトルと重ね合
わせることができる。
【００１８】実施例２−フェチジン１を含む凍結乾燥さ
れたバイアルびんの調製 １．２ｇのクエン酸を含む５００mlの精製水の中に５ｇ
のフェチジン１を溶解させ、溶液をろ過し、滅菌し、無
菌室内で１００本のバイアルびんの中に充填し、これら
のバイアルびんを急速凍結させ凍結乾燥させる。
れたバイアルびんの調製 １．２ｇのクエン酸を含む５００mlの精製水の中に５ｇ
のフェチジン１を溶解させ、溶液をろ過し、滅菌し、無
菌室内で１００本のバイアルびんの中に充填し、これら
のバイアルびんを急速凍結させ凍結乾燥させる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ルイセルラ・ヴェロッタ イタリア国、ミラノ、ヴィア・リパモンテ ィ、99
Claims (7)
- 【請求項１】 式（Ｉ）で示される化合物。 【化１】 （Ｒは水素又はメトキシである。）
- 【請求項２】 Ｒが水素であるフェチジン１と称する請
求項１に記載の化合物。 - 【請求項３】 Ｒがメトキシであるフェチジン２と称す
る請求項１に記載の化合物。 - 【請求項４】 次の工程からなる請求項１に記載の化合
物の製造方法。 ａ）低分子量脂肪族アルコール又はケトンを単独で又は
水との混合物で、室温でマピア・ホエチダ植物の種々の
部分を抽出する工程； ｂ）真空下で２５℃以下の温度で抽出物を濃縮する工
程； ｃ）塩基度の低いアルカロイドを抽出するため、塩素化
溶剤を用いて、有機溶剤を部分的に除去することによっ
て得られたヒドロアセトン濃縮物を抽出する工程； ｄ）ｎ−ブタノール又は水不混和性アルコールを用いて
水相を抽出する工程； ｅ）塩素化溶剤及び脂肪族アルコールの混合物を溶剤と
して用いたシリカゲル又は類似の吸着剤上でのクロマト
グラフィーにより、真空下低温で濃縮して得られたブタ
ノール抽出物を精製する工程； ｆ）アルカロイドを含む分画を乾燥するまで濃縮し、
１：１のメタノール／水比から出発し純粋メタノールに
至るまでのメタノール／水勾配で溶出する分取ＨＰＬＣ
により残渣を精製する工程； ｇ）得られた水性抽出物を凍結乾燥し、純粋なアルカロ
イドを結晶化させる工程。 - 【請求項５】 工程（ｅ）の塩素化溶剤及び脂肪族アル
コールの混合物が、、塩化メチレン及びメタノール又は
エタノールの４：１〜１：１の混合物である、請求項４
に記載の方法。 - 【請求項６】 工程（ｆ）で、Li Chroprep RP8 カラム
を使用する、請求項４に記載の方法。 - 【請求項７】 請求項１乃至３に記載の化合物を活性成
分として含む抗ウイルス剤。
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|---|---|---|---|
| ITMI941112A IT1269862B (it) | 1994-05-30 | 1994-05-30 | Alcaloidi da mappia foetida, loro uso e formulazioni che li contengono |
| IT94A001112 | 1994-05-30 |
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|---|---|---|---|
| JP17254294A Expired - Fee Related JP3615240B2 (ja) | 1994-05-30 | 1994-07-25 | マピア・ホエチダからのアルカロイド及び抗ウイルス剤を含む製剤 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004507563A (ja) * | 2000-09-04 | 2004-03-11 | クイーン・バイオアクティブス・ピーティーワイ・リミテッド | 生物活性成分の選択的抽出方法 |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5527913A (en) * | 1993-02-25 | 1996-06-18 | The Stehlin Foundation For Cancer Research | Methods for purifying camptothecin compounds |
| AU3684395A (en) * | 1994-10-06 | 1996-05-02 | Leon T. Atlas | Use of camptothecin or derivatives thereof for the manufacture of a medicament for the treatment of viral diseases |
| IT1283635B1 (it) * | 1996-05-10 | 1998-04-23 | Indena Spa | Composti a scheletro camptotecinico isolati da mappia foetida e loro uso come sintoni per farmaci o come principi attivi |
| FR2792937B1 (fr) | 1999-04-27 | 2001-08-10 | Cemaf | NOUVEAUX DERIVES DE PYRROLO-(3,4-b) QUINOLEINE, LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LEUR UTILISATION A TITRE DE MEDICAMENT |
| WO2003103610A2 (en) * | 2002-03-01 | 2003-12-18 | University Of Pittsburgh | Mappicine analogs, methods of inhibiting retroviral reverse transcriptase and methods of treating retroviruses |
| US6893668B2 (en) * | 2003-03-31 | 2005-05-17 | Council Of Scientific And Industrial Research | Process for isolation of anticancer agent camptothecin from Nothapodytes foetida |
| US20060135546A1 (en) * | 2004-12-16 | 2006-06-22 | Jagadevappa Basavaraja | Methods for the purification of 20(S)- camptothecin |
| CN103181272A (zh) * | 2011-12-28 | 2013-07-03 | 广东神农衍生物科技有限公司 | 一种药用原材料臭马比木的人工种植方法 |
| WO2015010293A1 (zh) * | 2013-07-24 | 2015-01-29 | Zhang Yuanjin | 抗癌药物组合物及其制备方法和用途 |
| CN105053041A (zh) * | 2015-08-11 | 2015-11-18 | 长沙秋点兵信息科技有限公司 | 一种用于农作物的杀虫剂 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6461482A (en) * | 1987-08-31 | 1989-03-08 | Yakult Honsha Kk | Dehydrocamptothecin and production thereof |
| DE69209969T2 (de) * | 1991-10-29 | 1996-09-12 | Glaxo Wellcome Inc | Wasserlösliche Camptothecinderivate |
| EP0556585A3 (en) * | 1992-01-24 | 1993-09-01 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Condensed camptothecin derivatives their production and use as antitumor agents |
| IT1254517B (it) * | 1992-03-06 | 1995-09-25 | Indena Spa | 14-beta idrossi-10-deacetil-baccatina iii, suoi derivati, loro prepazione ed impiego terapeutico |
| AP9300587A0 (en) * | 1992-11-12 | 1995-05-05 | Glaxo Inc | Water soluble camptothecin derivatives. |
| US5352789A (en) * | 1993-02-25 | 1994-10-04 | The Stehlin Foundation For Cancer Research | Methods for purifying camptothecin compounds |
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1994
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1997
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1998
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| JP2004507563A (ja) * | 2000-09-04 | 2004-03-11 | クイーン・バイオアクティブス・ピーティーワイ・リミテッド | 生物活性成分の選択的抽出方法 |
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