JPH0365148B2 - - Google Patents

Info

Publication number
JPH0365148B2
JPH0365148B2 JP58009241A JP924183A JPH0365148B2 JP H0365148 B2 JPH0365148 B2 JP H0365148B2 JP 58009241 A JP58009241 A JP 58009241A JP 924183 A JP924183 A JP 924183A JP H0365148 B2 JPH0365148 B2 JP H0365148B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
cells
human
antibodies
antibody
hybridoma
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP58009241A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS58128323A (ja
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed filed Critical
Publication of JPS58128323A publication Critical patent/JPS58128323A/ja
Publication of JPH0365148B2 publication Critical patent/JPH0365148B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
    • C12N5/16—Animal cells
    • C12N5/166—Animal cells resulting from interspecies fusion
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はハイブリドーマ細胞系（セルライン）、
に関する。 ハイブリドーマは、雑種を形成するために、
「不死化」細胞（特に骨髄腫細胞）を、特定物質
を産生する能力により通常選択した「正常」非形
質変換細胞（例、抗体を産生するリンパ球細胞）
と融合させることによつて形成される細胞に適用
する用語である。これらの雑種は、単一の構造お
よび／または性質を有する物質を生産する細胞系
を得るために選択し、スローン化することができ
る。特に、リンパ球で形成されるかかるハイブリ
ドーマは、モノクローン抗体を製造するのに使用
することができる。 最近ハイブリドーマ技術の開発は、安定で、取
得希望の特定物質を高収率かつ特異的に産生する
細胞系を得ることに向けられていた。この問題に
ついて各種のアプローチがなされたが、歴史的理
由により、免疫グロブリン／抗体の分野に大きく
集中していた。 この分野での従前の活動を研究すると、直面し
た問題を類別の大要と、今までに試みられた各種
の解決法が出てくる。 モノクローン生産物を製造する雑種セルライン
の研究の最初の衝動は、生産物がモノクローン抗
体である免疫生物学の分野から発生した。 通常の抗血清は、抗原結合部位において製造的
には異なるがそれぞれ大または小なる持続性およ
び／または特異性でもつて同じ抗原に結合する非
常に多数の抗体を一般に含有している。加えてま
た、通常の抗血清は、他の抗原に対するもので、
抗血清が得られる宿主個体の以前の防御反応を反
映する多数の抗体を含有している。ほとんどの目
的には、かかる広範な抗血清で充分であるが、よ
りすぐれた特異性や再現性を与えることが特に診
断と療法の分野において重大な前進をもたらし、
すばらしい能力をもつ科学的手段を付与すること
になるのであろうと考えられていた。 最初であり且つ現在では古典的な解決法は、
KohlerとMilsteinがNature、256495〜497（1975）
に報告したが、彼らは前免疫化マウス脾臓細胞を
薬物感受性マウス骨髄腫細胞に融合させることに
成功した。こうして不死化した融合細胞はインビ
トロで生育しそして単一細胞レベルからクローン
化して、均質な抗体集団（モノクローン抗体）を
産出する均質な細胞集団を製造することができ
た。多くのユニークな細胞から選択し、且つ選択
的な再クローニングによつて、所望の抗原特異性
をもつ抗体を産生する細胞を取得し、生育するこ
とが可能となつた。 このような方法で製造されたマウス抗体は、研
究や診断の目的には有用であることが証明されて
おり、またあるものはヒトの治療にさえ用いられ
ていた。しかし、同様な特異性と再現性のヒト抗
体がこの方法で得ることができるのであれば、ヒ
トの免疫グロブリン療法において大きな前進とな
るであろう。またこのことは感作した危険性を減
少するであろう。 インビトロでかかるヒト抗体を製造する問題へ
のアプローチがいくつか試みられたが、それらは
現在のところ大きく成功していない。これらには
以下のことが挙げられる。 () Epstein−Barrウイルス（EBV）による正
常なヒトリンパ球の形質転換。このタイプの細
胞は樹立されるには長くて冗長な工程を必要と
し、またクローンおよび選択することが非常に
困難であるので、この方法はほとんど成功しな
かつた。 () ヒト骨髄腫細胞との正常な（ヒト）リンパ
球の融合。この方法はマウス−マウスハイブリ
ドーマの法に明らかに類似していることを表わ
しているが、ヒト系ではただ一つの骨髄腫細胞
系のみしか容易に入手できないという問題に直
面し、またこの系は融合の成功を妨害するマイ
コプラスマでもつて汚染されていることが判明
した。 () EBV−形質転換ヒトリンパ芽球様のＢ細胞
系への正常なヒトリンパ球の融合。おそらくこ
れはすでに報告されたものでは最も確実な再現
性ある方法であるが、リンパ芽球様細胞が出会
う基本的なインビトロの欠点をもつ。上記細胞
はクローン化することが非常に困難である。ま
たＢ細胞分化系統の早期段階に該当するので、
それらの抗体を産生し分泌する能力が真性骨髄
腫のそれより約10倍低い。 () マウス骨髄腫へのヒトリンパ球の融合。こ
の方法はマウス−マウスハイブリドーマと同様
に優れたインビトロ特性を有する細胞を製造し
得るが、それははるかに雑種が固有の遺伝学的
不安定性を有するという大きな欠点を備えてい
る。これから生ずる厄介な結果の１つは、免疫
グロブリンの軽カツパー鎖を形成するためのゲ
ノムが位置するヒト染色体を上記細胞が追放す
るということである。 従つて、要約すれば、方法（）は実施するに
はあまりにも冗長で非能率的である。方法（）
は未だ実用的意義を有していない。方法（）は
現在利用可能なものでは最良である。方法（）
は実行可能であるが、細心の注意を払うクローニ
ング手段でもつてしても生産性を維持できない。 以上の検討も現在までのほんとんどの研究も抗
体製造に集中しているが、生産性ある細胞パート
ナーを、取得希望の特定物質の分泌に関して選択
し、また不死化セルラインに融合できるというこ
とが明らかである。 今回、他の細胞に更に融合させるために親とし
て異種間ハイブリドーマ細胞を使用することによ
り、安定性を大きく改良されたハイブリドーマを
得ることができるということが判明した。 従つて、本発明は、不死化細胞がマウス骨髄腫
細胞と親細胞としてのヒトリンパ球の融合による
異種間ハイブリドーマ細胞であること、および目
的とする抗体を産生するリンパ球があらかじめ感
作された抗体産生ヒトリンパ球であり、異種間ハ
イブリドーマの元になつた形質転換されていない
パートナー細胞と遺伝学的に適合することを特徴
とする、目的とする抗体を産生するリンパ球に融
合した不死化細胞であるハイブリドーマセルライ
ンに関する。 かかる細胞の安定性は、正しく培養される場合
に抗体の生産を維持する能力をもたらす。 ある具体例においては、不死化細胞として選択
された異種間ハイブリドーマは、免疫グロブリン
を生産するそれ自体の能力を失つた骨髄腫雑種で
ある。かかる異種間ハイブリドーマの具体例は、
骨髄腫細胞とリンパ球細胞の間のものであると思
われる。適切な骨髄腫細胞の具体例は、マウスと
ラツトから得られたものであり、免疫グロブリン
は産生しないものが好ましい。これらの骨髄腫は
それ自体、実際上骨髄腫の性質をもつ雑種（例、
マウス骨髄腫／マウスリンパ球）であり得る。か
かる細胞は例えばマウスSP−２骨髄種セルライ
ンである。次いでこれを例えば、他の種から得ら
れるリンパ球（例、ヒトリンパ球細胞）に融合さ
せる。 好ましい実施態様では、免疫グロブリンをもは
や産生しないかかる融合で生ずる異種間ハイブリ
ドーマを、物質産生細胞に更に融合させるために
選択する。 これらの異種間ハイブリドーマは、染色体喪失
の点ですぐれた安定性を得るため、より一層好適
な環境を与える。 不死化に使用する異種間ハイブリドーマは、通
常の方法で更に融合する以前に薬剤耐性にする。
方法の例は８−アザグアニン耐性に関する選択で
ある。 このようにして得られるハイブリドーマは、更
に融合するための安定な親を与える。他の融合パ
ートナーは、抗体の産生の場合リンパ球の選択で
あり、異種間ハイブリドーマの非形質変換パート
ナーと遺伝学的に適合するものである。 必要度の特異性を得るには、選択細胞を前感作
して所望物質産生性にすることが望ましい。この
ことは抗体の場合には、特定抗原でもつて宿主を
免疫化し次いで対応する抗体を製造する免疫細胞
（即ち、免疫適格細胞）を採集することによつて
達成できる。 これらは例えば脾臓、リンパ節または血球であ
り得る。 異種間ハイブリドーマ細胞である親の物質産生
細胞への融合は、通常の方法で行なう。これには
通常、融合を促進する物質（例、PEG1500）と
共に適当な培地で同等量の各細胞をインキユベー
トすることが含まれる。所望の雑種の選択も、通
常の方法でよく、選択培地（例、不死化細胞がヒ
ポキサンチンホスホリボシル転移酵素を含有しな
い場合にはHAT（ヒポキサンチン／アミノプテ
リン／チミジン））で実施することができる。 得られるセルラインは安定で、抗体を高収率で
産生する。 これらはクローン化することもでき、また要す
れば再選択することもできる。 従つて、本発明は安定なハイブリドーマセルラ
インの製造法にも関し、該方法は異種間ハイブリ
ドーマ細胞である親を薬剤耐性にし、これを異種
間ハイブリドーマの非形質変換パートナーと遺伝
学的に適合する物質産生細胞に融合させ、そして
所望の雑種を選択することから成る。 これら細胞を使用する抗体製造は、適当な培地
（例、希釈牛胎児血清を含むもの）でインビトロ
でまたは宿主（例、ヌードまたは無胸線のマウス
またはラツト）への注入および腹水液の収穫によ
つてインビボで、通常の方法によつて実施するこ
とができる。方法の選択により、一つまたはそれ
以上の精製工程が必要となり得る。 本発明はまた、かかる細胞系を使用する抗体の
製造を可能にする。 所望の性質を有する単純ハイブリドーマセルラ
インが経済的理由により好ましいことは明らかで
あるが、所望または必要であれば、かかるセルラ
インを更に融合することも可能である。 本発明による典型的な抗体産生ハイブリドーマ
は、親としてのヒトリンパ球と融合したマウス骨
髄種を抗体産生者としての前感作ヒトリンパ球と
融合させて形成されるものである。適当な場合に
は、骨髄種細胞自体が（例えばマウス／マウス雑
種自体であるSP−２マウス細胞系のように）雑
種であり得る。 通常の技術と従前の研究を述べている文献の例
は以下の通りである。 (1) Kohler、Ｇ、およびMilstein、Ｃ、Nature、
256495−497（1975） (2) Nadler，L.M.等Cancer Research、40，
3147−3154（1980） (3) Cosimi，A.B.等Ｎ，Engl.J.Med.，305，305
−314（1981） (4) Zurawski，V.R.等Science，199，1439−
1441（1978） (5) Koskimies，S.，Scand.J.Immunol.，11，73
−77（1980） (6) Steinitz，M.等Nature，287，443−445
（1980） (7) Olsson，L.およびKaplan，H.S.，Proc.
Natl.Acad.Sci.U，S.A.，77，5429−5431
（1980） (8) Croce，C.M.等Nature，288，448−489
（1980） (9) Nowinski，R.等Science.210，537−539
（1980） (10) Croce，C.M.等Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，
76，3416−3419（1979） (11) Galfre，G.等Nature266，550（1977） (12) Miller，R.A.等N.Engl.J.Med.306，517
（1982） (13) Sikora K.，等Lancet，ｉ 11（1982）お
よび 例えば米国特許第4172124号、EP出願公開第
0043718号と0044722号。 また、Mclntyreによつてモノクローン抗体に
関する書箱が最近発行されている。 異種間融合の親（これは予定物質製造能力を喪
失している）を使用することによつて、本発明
は、安定、急速な成長、クローン容易であり、所
望物質（例、ヒト抗体）の高産生率を有するハイ
ブリドーマの取得を可能にする。 本発明のハイブリドーマにより製造されるヒト
抗体は、通常の如く抗体に使用でききる。かかる
使用分野の例は以下の通りである。 感染症：ウイルス（サイトロメガロウイルス、帯
状痘疹ウイルス、単純ヘルプスウイルス、肝炎
ＡおよびＢウイルス、風疹ウイルス等）、バク
テリア（抗毒素、抗細胞壁）、真菌（カンジダ） 悪性疾患：毒素の抱合ありおよびなしにかかわら
ずあらゆる種類の毒性腫瘍に対する抗体 中毒：抗毒物抗体（解毒薬、ジギタリス、オピエ
ート剤、三環性抗うつ剤、バルビツレート剤
等） 抗イデイオタイプ：抗・抗膵臓β細胞、抗・抗ア
セチルコリンレセプタ、抗リウマチ様因子 血液型抗原：抗Rh 移植：拒絶を抑制する抗Ｔ細胞、移植片の刺激能
力を減少する強化抗体 アレルギー：アレルゲンに対するIgG抗体、感受
性減退化の代換物 ホルモン：避妊薬として使用する絨毛性性腺刺激
ホルモン抗体 ハイブリドーマ細胞自体は、免疫グロブリン遺
伝子のクローニングを試みる場合にはmRNA源
としても使用できる。 本発明の特定の実施態様においては、元来P3
−X63−Ag8系と羊の赤血球細胞に対する抗体を
産生するマウス脾臓細胞のハイブリドーマ自体で
あつたSP−２細胞系であつて抗体産生能力を喪
失したものが使用される（C.F.M.Shulmann等，
Nature，276，269（1987））。 これは例えばNIGMS Human Genetic
Mutant Cell Repository Ref.GM35669Aから入
手できる（US DHHS 1982 Catalog of Cell
Lines参照）。 このセルラインは、通常の技術によつて薬剤耐
性にされ次いで正常なヒト抹消リンパ球と融合さ
れている（C.F.G.Galfre等，Nature，266，550
（1977）およびR.Nowinski等Science，210，537
（1980））。 多数の雑種を得、約５週間後に急速な成長を示
し且つ抗体を産生しない５クローンを選択する。
これらの細胞を８−アザグアニン耐性に関して選
択し、かかる系の３つでもつて、20μｇ／mlの８
−アザグアニンに耐性の変異体を得ることが可能
である。これらの細胞は同時にヒポキサンチン−
アミノプテリン−チミジン（HAT）培地に感受
性であり、これらがヒポキサンチンホスホリボシ
ル転移酵素を産生する能力を喪失していることを
示す。 これらのセルライン（SPYZ−４）の一つを、
次いで２×107SPAZ−４細胞と108扁桃腺細胞を
使用して、ヒト扁桃腺リンパ球とインビトロで融
合させる。融合は標準法に従つて実施する。比較
のために、SP／２セルラインも融合させる。得
られる細胞集団を、必要な雑種を回収するために
HAT培地で選択する。非融合対照培養物の全細
胞が死滅すると直ちに、HAT培地を正常な非選
択性生育培地と置きかえる。 生育２週間後に抗体産生について最初の試験を
行い、各融合からの47培養体の全部がヒト抗体を
産生したことが判明する。更に４週間後に再試験
すると、SP／２ハイブリドーマの55％に対して
SPAZ−４ハイブリドーマの83％が未だに抗体を
産生していることが認められる。SP／２ライン
のわずか３％に対してSPAZ−４の28％におい
て、高い産生率が認められる。 抗体産生喪失の主たるフアクターがＬ鎖ゲノム
の喪失であるという事実にかんがみ、軽鎖産生の
特異的試験を行う。SPAZ−４ラインの67％がカ
ツパー鎖、その88％がラムダー鎖を生産すること
が認められる。SP／２の対応する値はそれぞれ
39％と61％である（勿論、これらのパーセント値
は特定の試験と使用免疫グロブリン（１ｇ）につ
いてのみ比較可能である。）結果は第１表に示す。
すべての場合において、SPAZ−４がSP／２よ
り優れており、特に実用的見地からして最も重要
である強力な生産性に関して優れている。これら
のすべての実験を、安定なクローンに対する圧力
を最大にするために、非クローン細胞について行
う（安定クローンは多くの遺伝物質を有し、彼ら
に不必要な染色体の追放に成功した細胞よりも常
に成長が悪い）。 しかし、細胞をクローンするために実験を行つ
た。現在までに得られた結果では、安定で生産性
のSP／２雑種はただ１つも得られなかつたこと
を示す（即ち、すべての生育細胞が抗体を産生す
るセルラインはない）が得られることを示す。他
方、SPAZ−４雑種ではかかるクローンを誘導す
ることが可能である。 本発明は、不安定性問題を解決により、従来の
公知方法よりも実質的に良好な結果を得ることを
可能にする。古典的なマウスーマウスハイブリド
ーマが不安定であり、そしてわずらわしいサブク
ローニングが常に必要であるとしても、それが実
用に供し得ることは一言の価値がある。SPAZ−
４ハイブリドーマの示す不安定度はマウスーマウ
スハイブリドーマのそれよりも低いので、後者は
より一層実用的でさえある。 次に実施例を挙げて本発明を具体的に説明す
る。 実施例 １ SPAZ−４系の製造 Ficoll−Isopaque遠心分離によつて、健康な提
供者のヘパリン化血液から、末梢血液リンパ球
（PBLS）を単離する。洗浄後、PH8.0に調節した
Dulbeccos H21培地50ml中の５×107SP／２細胞
と108PBLSを混合する。細胞を600×ｇで５分間
ペレツト化し、その後上澄液を注意深く除去す
る。細胞を37℃に保ちながら、50％PEG4000／
H21の１mlを１分で徐々に加える。更に10mlの
H21を２分で加える。細胞を遠心分離によつて集
め（ペレツト化）、55mlのHAT培地に懸濁し
（HAT培地：20％胎児牛血清10％NCTC109、１
％非必須アミノ酸、0.5％ピルビン酸塩、0.2U／
mlインスリン、1mMオキサル酢酸、10-4ヒポキ
サンチン、４×10-7Mアミノプテリンおよび1.6
×10-3Mチミジンを含むDulbeccos H21）、平底
組織培養マイクロプレート中の0.1ml培養物528個
に播種する。２週間毎３〜５日で新しいHAT培
地を培養物に与え、その後培地をHT培地（10％
FCE、10-4ヒポキサンチンおよび1.6×10-3チミ
ジンを含むDulbeccos H21）に変える。15日後
ヒト抗体試験のために試料を取る。良好な成長を
示し抗体産生を示さない５個の培養物を選択す
る。次いでこれらを８−アザグアニン耐性サブラ
インの製造に選択する。 10％FCSおよび20μｇ／ml８−アザグアニンを
含むDulbeccos H21に５個のセルラインを２×
105細胞／mlで播種する。これらの培養物の３個
から、二、三週間後に生育成長する細胞を回収す
ることができる。これらの１個はHATに感性の
SPAZ−４であり、更に試験するのに使用する。 実施例 ２ 扁桃腺リンパ球との融合 小児から扁桃腺を結合組織部で切り取り、微細
金属網を通過させて、単一細胞プレパラートを得
る。赤血球の数を減ずるために、全細胞をFicoll
−Isopaqueで分画する。得られる細胞集団の108
の細胞を、実施例１で述べたのと同じ方法でもつ
て２×107のSPAZ−４またはSP／２細胞に融合
させる。その後細胞をHAT培地の培養物0.5mlの
47個に播種し、この時にシクロスポリンA0.5μ
ｇ／mlを補給する。１日後にシクロスポリンＡを
含まないHAT培地0.5mlを加える。３日目にすで
に培地の50％がHT培地に変化する。この後毎３
〜５日の経過でもつて細胞をHT培地に維持す
る。 免疫グロブリン製造試験 伝統的なELISA（固相酵素免疫検定）システム
を使用する。PH9.6の重炭酸塩緩衝剤中１：400の
希釈でウサギ抗ヒト免疫グロブリンをNunc EIA
プレートに補捉させる。該プレートを洗浄後、培
養上清を37℃で30分インキユベートする。再度洗
浄後、１：400の希釈でペルオキシダーゼ抱合ウ
サギ抗ヒトIgG、IgM、IgA試剤（Miles−Yeda）
でインキユベーシヨン物を処理する。洗浄後酵素
反応物を１，２−フエニレンジアミン二塩酸塩と
H2O2で発色させる。 ヤギ抗ヒトラムダーまたはヤギ抗ヒトカツパー
試剤（Tago）を１：3000の希釈でウサギ抗ヒト
IgG、IgM、IgMの代わりに使用する以外は同じ
方法で、軽鎖産生試験を行う。 結果をTitertek Multiscan Elisa光度計で評価
し、第１表の「４」と「７」の値をこの光度計か
らの低い読みと高い読みとしてそれぞれ表示す
る。 実施例 ３ インフルエンザＡおよびＢ型に対するモトクロ
ーン抗体の製造（インビボ免疫後） 使用したインフルエンザワクチンは、Ａ／バン
コツク、Ａ／ブラジルおよびＢ／シンガポールか
らの赤血球凝集素とノイラミニダーゼを含む商品
名SANDOVACである。３人の健康な志願者を
免疫化し、３、７、10、14および17日に採血す
る。各回50〜60mlの血液をひじ静脈からヘパリン
含有注射器へ抜く。リンパ球をFicoll−Paque
（Pharmacia）上の遠心分離によつて単離し、使
用前に塩水で２回洗う。 融合は親は (a) SPAZ−４（実施例１参照） (b) SP／２（上記参照） (c) WISTAR INSTITUTEで８−アザグアニ
ン耐性にしたGM 1500ヒトリンパ芽球様細胞
（ヒトIgG2カツパーを産生する）である。 SPAZ−４とSP／２は全く同じに融合する。
骨髄腫（107細胞）とヒトリンパ球（約３×107細
胞を、PH8.0でDMEM無血清培地の存在下試験管
で混合する。細胞を600×ｇで５分遠心分離にか
ける。得られるペレツトを50％PEG400で１分処
理し、その後PEGを培地で徐々に希釈する。１
回洗浄後、20％胎児牛血清を含むDMEM−HAT
培地の100μ培養物176個に細胞を播腫する。細
胞を湿気のある10％CO2−大気で37℃で培養す
る。 GM 1500細胞（107細胞）をPH8.0の無血清
DMEM中でヒトリンパ球（約３×107細胞）と混
合し、600×ｇで５分遠心分離する。ペレツトを
50％PEG6000で５分処理し、その間に細胞を600
×ｇで遠心分離する。この後PEGを培地で徐々
に希釈する。１回洗浄後、20％胎児牛血清を含む
RPMI 1640−HAT培地の100μ培養物176個に
細胞を播腫する。細胞を湿気のある５％CO2一大
気で37％で培養する。 6160個の培養物（GM 1500により2640体、
SPAZ−４により2464体、SP／２により1056体）
を行ない全体で35個の融合（GM1500に１本、
SPAZ−４に14体、SP／２に６体）を得る。 一般に毎３〜５日間で、細胞増殖が必要とする
ときはいつでも、培地を培養物に変える。上澄液
に抗インフルエンザ抗体が存在することを
ELISA法で検定する。関連インフルエンザ抗原
をマイクロプレートウエル（Nunc）に補捉し、
上澄液を加え、抗原と相互作用させる。洗浄後ペ
ルオキシダーゼ抱合ウサギ抗ヒトIgG、IgA、
IgM（Miles）をウエルに加える。インキユベー
シヨン後非結合ペルオキシダーゼ抱合体を洗浄除
去し、酵素発色物質をウエルに加える。反応を視
覚で評価し、Titertekマイクロプレート光度計で
証明する。陽性結果を示す培養物を、マウス胸線
細胞供給細胞と共に100μのDMEM＋20％胎児
牛血清中に（SPAZ−４およびSP／２由来細
胞）、またはMRC−５供給細胞のRPMI 1640＋
20％胎児牛血清中にGM 1500由来細胞）、１細
胞／培養物で細胞を播腫する88個の新しいウエル
に限界希釈条件でクローン化する。生産性細胞は
大スケールで生育させ、液体N2中に凍結する。 合計86個の培養物をクローン化した（GM
1500から58体、SPAZ−４から26体、SP／２か
ら２体）。細胞をクローン化すべきであるか否か
については、その決定に全く自由な基準を適用す
るがこれはクローン化後に真に陽性の細胞の収率
が低い結果を招き得る。。例えばGM 1500は高産
生細胞を製造しないのでこの決定が必要となる。
SPAZ−４細胞からは４個の陽性クローンが確認
され、SP／２からは１個が確認されるが、しか
し後者は雑種ではなく、自然に起生したEBウイ
ルス形質変換細胞であつた。産生細胞はGM
1500からは誘導されない。 融合の結果を下記表に要約して示す。 【表】 ５個の陽性セルラインを数回再クローンし、大
スケールで成長させる。これはEBV系の消滅を
もたらす（かかる細胞コロニーが低密度クローニ
ングを生存させないことはよく知られている）。 ４個の陽性SPAZ−４ハイブリドーマセルライ
ンをC15、C28、C29およびC75として確認した。 実施例 ４ 抗インフレンザハイブリドーマの製造（インビ
トロ免疫後） ヒト脾臓細胞をFalcon 2051チユーブ中の２ml
に106／mlで播腫し、全体で34％106の細胞を使用
する。最適量の遮糖濃度勾配精製Ａ／バンコツク
ウイルスを加え、培養物を５％ヒト熱不活化血漿
を含むRPMI 1640倍地で空気中５％CO2の雰囲
気下37℃で101時間維持する。回収した９×106細
胞を実施例３に述べたのと同様にして同数の
SPAZ−４細胞に融合する。細胞を176個の培養
物に播腫し、20％胎児牛血清、HATおよび1μ
ｇ／mlシクロスポリンＡを含むDulbeccosの
MEMで成長させる。２日後HAT倍地をHT倍地
で次第に置換し、その後４〜５日の間隔で変え
る。融合後12日と19日目に培養物を抗インフルエ
ンザ抗体についてスクリーンニングし、陽性培養
物をクローン化する。陽性クローン（B2として
確認）を得、これは大スケールで成長させること
ができ、また薬剤用の純粋抗体をインビトロで製
造するのに使用することができる。 実施例 ５ ヒト抗インフルエンザモノクローン抗体の特性
づけ (a) 抗体／C15 この抗体はIgG1クラスのものであり、カツ
パー軽鎖を有する。抗体は試験したすべてのイ
ンフルエンザＡ型ウイルス（H1N1、H2N2、
H3N2）に反応し、それは恐らくウイルスの核
タンパクに向けられている。抗体はインビトロ
で中和活性を有せず、またインビボで保護効果
を有していない。 (b) 抗体／C28 この抗体はIgG1クラスのものであり、ラム
ダー軽鎖を有している。抗体はH3N2型のイン
フルエンザウイルスに反応するのみであり、そ
れは恐らくウイルスの赤血球凝集素に向けられ
ている。抗体はインビトロで強い中和効果を有
し、またインビボで劇的な保護活性を有してい
る。それは試験したすべてのH3N2ウイルス
（即ち、1968、1969、1973、1974、1975、1977、
1979および1980からのウイルス）を中和するこ
とができる。 MDCK細胞上の1973A／ポートチヤーマー
ズで試験すると、純粋抗体1.5mg／mlを含む抗
体製品は、中和価12800を有することが認めら
れる。同一実験において、標準ヒト免疫グロブ
リン製剤（Sandoglobulin）は濃度60mg／mlで
中和価50を有することが認められる。このこと
は、モノクローン抗体C28がタンパク質当量レ
ベルで正常な免疫グロブリンよりも10240倍高
い能力を有していることを意味している。これ
に関連して、抗インフルエンザ抗体が正常な免
疫グロブリン製剤の越的成分一つであるという
こと指摘したい。このことは、C28と同じ中和
能力を有し、例えばサイトメガロウウイルスま
たは帯状痘疹ウイルス（この場合正常な免疫グ
ロブリン製剤の抗体レベルはかなり低い）に対
する抗体は、相対的能力がより一層高い値に達
することを意味する。 (c) 抗体／C29 この抗体はIgG1クラスのものであり、ラム
ダー軽鎖を有している。抗体はＢ／シンガポー
ル型インフルエンザに反応する。他のＢ型ウイ
ルスに対する試験は行わなかつた。Ａ型ウイル
スに対しては活性は有していない。 (d) 抗体／C75 この抗体はIgG3クラスのものであり、カツ
パー軽鎖を有している。これはH3N2型ウイル
スに反応するのみであり、恐らくはウイルスの
赤血球凝集素に向けられている。これはインビ
トロで中和活性を有せず、インビボで保護効果
を有しない。 (e) 抗体／B2 この抗体はIgG1クラスのものであり、カツ
パー軽鎖を有している。これはH3N2型ウイル
スに反応するまみであり、恐らくはウイルスの
赤血球凝集素に向けられている。抗体はインビ
トロで中和効果を有せず、インビボ保護試験は
行わなかつた。 【表】 本発明により実施可能になるものを列挙すると
次の通りである。なお、物質は抗体を示す。 １ 異種間ハイブリドーマ細胞の骨髄腫パートナ
ーが免疫グロブリンを産生しないマウス骨髄腫
である本発明のハイブリドーマセルライン、 ２ マウス骨髄腫がSP−２細胞系によつてもた
らされる上記第１項記載のハイブリドーマセル
ライン。 ３ 異種間ハイブリドーマ細胞母体が予定物質を
産生する能力を失つているかまたは他の理由で
産生することができない上記第１〜２項のいず
れか１項のハイブリドーマセルライン、 ４ マウス骨髄腫細胞と親細胞としてのヒトリン
パ球の融合による異種間ハイブリドーマ細胞お
よび物質産生細胞としてのあらかじめ感作され
た抗体産生ヒトリンパ球を含む上記第１〜３項
のいずれかのハイブリドーマセルライン。 ５ 異種間ハイブリドーマ細胞を薬剤耐性にした
ものから選択する上記第１項記載のハイブリド
ーマセルライン。 ６ 薬剤耐性を８−アザグアニンに耐性の細胞か
ら選択する上記第５項記載のハイブリドーマセ
ルライン。 ７ マウス細胞がマウス／マウスハイブリドーマ
自体である上記第１〜６項のハイブリドーマセ
ルライン。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ 不死化細胞がマウス骨髄腫細胞と親細胞とし
    てのヒトリンパ球の融合による異種間ハイブリド
    ーマ細胞であること、および目的とする抗体を産
    生するリンパ球があらかじめ感作された抗体産生
    ヒトリンパ球であり、異種間ハイブリドーマの元
    になつた形質転換されていないパートナー細胞と
    遺伝学的に適合することを特徴とする、目的とす
    る抗体を産生するリンパ球に融合した不死化細胞
    であるハイブリドーマセルライン。 ２ マウス／ヒト／ヒトハイブリドーマセルライ
    ンである、特許請求の範囲第１項記載のハイブリ
    ドーマセルライン。 ３ 目的とする特異性を有するヒト抗体を産生可
    能な安定なマウス／ヒト／ヒトハイブリドーマセ
    ルラインである、特許請求の範囲第１項のハイブ
    リドーマセルライン。
JP58009241A 1982-01-22 1983-01-21 ヒトモノクロ−ン抗体の製造法 Granted JPS58128323A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH409/82 1982-01-22
CH409/82A CH652145A5 (de) 1982-01-22 1982-01-22 Verfahren zur in vitro-herstellung von hybridomen welche humane monoklonale antikoerper erzeugen.

Related Child Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2267500A Division JPH03236794A (ja) 1982-01-22 1990-10-03 ヒトモノクローン抗体の製造法
JP3157731A Division JPH0789909B2 (ja) 1982-01-22 1991-05-30 ハイブリドーマセルラインの製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS58128323A JPS58128323A (ja) 1983-07-30
JPH0365148B2 true JPH0365148B2 (ja) 1991-10-09

Family

ID=4186382

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP58009241A Granted JPS58128323A (ja) 1982-01-22 1983-01-21 ヒトモノクロ−ン抗体の製造法
JP2267500A Granted JPH03236794A (ja) 1982-01-22 1990-10-03 ヒトモノクローン抗体の製造法
JP3157731A Expired - Lifetime JPH0789909B2 (ja) 1982-01-22 1991-05-30 ハイブリドーマセルラインの製造法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2267500A Granted JPH03236794A (ja) 1982-01-22 1990-10-03 ヒトモノクローン抗体の製造法
JP3157731A Expired - Lifetime JPH0789909B2 (ja) 1982-01-22 1991-05-30 ハイブリドーマセルラインの製造法

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4634664A (ja)
JP (3) JPS58128323A (ja)
AT (1) AT388932B (ja)
CH (1) CH652145A5 (ja)
CY (1) CY1488A (ja)
DE (1) DE3301249A1 (ja)
DK (1) DK23183A (ja)
FI (1) FI83538C (ja)
FR (1) FR2522679B1 (ja)
GB (1) GB2113715B (ja)
HK (1) HK52589A (ja)
IL (1) IL67721A (ja)
IT (1) IT1160468B (ja)
KE (1) KE3884A (ja)
MY (1) MY8700169A (ja)
SE (1) SE502344C2 (ja)
SG (1) SG28189G (ja)

Families Citing this family (171)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1247538A (en) * 1982-05-21 1988-12-28 Mark C. Glassy Human-human hybridomas for solid tumors
US4613576A (en) * 1983-03-09 1986-09-23 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Human monoclonal antibodies to cancer cells
EP0148644A3 (en) * 1984-01-06 1987-06-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University A novel fusion partner and its products
US4634666A (en) * 1984-01-06 1987-01-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Human-murine hybridoma fusion partner
US4764465A (en) * 1984-04-26 1988-08-16 Cetus Corporation Human monoclonal antibody against group A red blood cells
US4950595A (en) * 1984-09-28 1990-08-21 Teijin Limited Mouse-human hybridoma which produces antivirus-human antibody, process for preparation thereof, and antivirus-human monoclonal antibody
JPS6187630A (ja) * 1984-10-08 1986-05-06 Teijin Ltd 単純ヘルペスウイルスに対するヒトモノクロ−ナル抗体及びその製造法
US4693975A (en) * 1984-11-20 1987-09-15 The Wistar Institute Human hybridroma fusion partner for production of human monoclonal antibodies
JPS61155398A (ja) * 1984-12-28 1986-07-15 Teijin Ltd 抗緑膿菌ヒトモノクロ−ナル抗体及びその製造法並びにそれを有効成分とする治療剤
US4677070A (en) * 1985-04-26 1987-06-30 Cetus Corporation Pseudomonas aeruginosa exotoxin A antibodies, their preparation and use
USH1198H (en) 1985-04-26 1993-06-01 Cetus Corporation Pseudomonas aeruginosa type-specific human monoclonal antibodies, their preparation and use
CH670098B (ja) * 1985-05-23 1989-05-12
JPH0720885B2 (ja) * 1985-09-27 1995-03-08 帝人株式会社 単純ヘルペスウイルス感染症の予防又は治療剤
NZ218499A (en) * 1985-12-10 1990-04-26 Genetic Systems Corp Monoclonal antibodies against pseudomonas aeruginosa, pharmaceutical compositions and detection methods
JPS63502962A (ja) * 1986-04-01 1988-11-02 ジーンラブズ　インコーポレイテッド ウイルス特異的な永久増殖性組織細胞
EP0262211A1 (en) * 1986-04-01 1988-04-06 Genelabs, Incorporated Immortalized cells which produce tissue-specific products
US5565354A (en) * 1986-09-05 1996-10-15 Sandoz Ltd. Production of human monoclonal antibodies specific for hepatitis B surface antigen
US5646041A (en) * 1987-02-12 1997-07-08 Harfeldt; Elisabeth Monoclonal antibody to herpes simplex virus and cell line producing same
US5001065A (en) * 1987-05-27 1991-03-19 Cetus Corporation Human cell line and triomas, antibodies, and transformants derived therefrom
JPH01101896A (ja) * 1987-10-14 1989-04-19 Teijin Ltd カンジダに対するヒト・モノクローナル抗体とその製造法
US5215913A (en) * 1987-11-30 1993-06-01 Roger Williams General Hospital IgG-1 human monoclonal antibody reactive with an HIV-1 antigen and methods of use
IT1226477B (it) * 1988-07-04 1991-01-16 Genetik Mab S R L Linee cellulari n omas quale un mezzo per immortalare cellule produttrici di sostanze di qualunque specie animale.
US5770429A (en) * 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US7041871B1 (en) 1995-10-10 2006-05-09 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
JP2535455B2 (ja) * 1991-02-07 1996-09-18 帝人株式会社 サイトメガロウイルスに対するヒト・モノクロ―ナル抗体を産生するハイブリド―マ
EP0523949B1 (en) * 1991-07-15 2003-06-25 The Wellcome Foundation Limited Production of antibodies
JPH05276984A (ja) * 1991-09-05 1993-10-26 Teijin Ltd カンジダに対するヒト・モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ
JPH05260961A (ja) * 1992-05-21 1993-10-12 Teijin Ltd サイトメガロウイルスに対するヒト・モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ
EP0576093B1 (en) * 1992-06-26 2000-03-22 Association Pour L'essor De La Transfusion Sanguine Dans La Region Du Nord Human monoclonal anti-Rhesus (D) antibodies and cell lines producing same
EP0583980A1 (en) * 1992-08-20 1994-02-23 Eli Lilly And Company Method for generating monoclonal antibodies from rabbits
AU684455B2 (en) * 1992-11-06 1997-12-18 Sandoz Ltd. Production of human monoclonal antibodies active against hepatitis B surface antigen
US5750106A (en) * 1993-01-28 1998-05-12 Novartis Ag Human monoclonal antibodies to cytomegalovirus
US6046310A (en) * 1996-03-13 2000-04-04 Protein Design Labs., Inc. FAS ligand fusion proteins and their uses
ATE443141T1 (de) 1997-02-07 2009-10-15 Us Gov Health & Human Serv Aktivitätsabhänginger neurotropischer faktor iii(adnf iii)
US7179892B2 (en) 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US7964192B1 (en) 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
US6197582B1 (en) * 1998-03-18 2001-03-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Development of human monoclonal antibodies and uses thereof
UA81216C2 (en) 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
AU1456101A (en) * 1999-11-03 2001-05-14 Maxygen, Inc. Antibody diversity generation
US7060802B1 (en) * 2000-09-18 2006-06-13 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Tumor-associated marker
PE20020574A1 (es) 2000-12-06 2002-07-02 Wyeth Corp Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta
IL158419A0 (en) 2001-04-19 2004-05-12 Scripps Research Inst Methods and composition for the production of orthoganal trna-aminoacyl trna synthetase pairs
US7084257B2 (en) * 2001-10-05 2006-08-01 Amgen Inc. Fully human antibody Fab fragments with human interferon-gamma neutralizing activity
WO2003048301A2 (en) * 2001-10-11 2003-06-12 Protein Design Labs Inc. Anti-hla-dr antibodies and the methods of using thereof
WO2005016232A2 (en) 2002-08-01 2005-02-24 The Regents Of The University Of California Therapeutic monoclonal antibodies that neutralize botulinum neurotoxins
US8506959B2 (en) 2002-11-01 2013-08-13 Neotope Biosciences Limited Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
TW200509968A (en) 2002-11-01 2005-03-16 Elan Pharm Inc Prevention and treatment of synucleinopathic disease
US7321065B2 (en) * 2003-04-18 2008-01-22 The Regents Of The University Of California Thyronamine derivatives and analogs and methods of use thereof
US7709610B2 (en) 2003-05-08 2010-05-04 Facet Biotech Corporation Therapeutic use of anti-CS1 antibodies
US20050025763A1 (en) 2003-05-08 2005-02-03 Protein Design Laboratories, Inc. Therapeutic use of anti-CS1 antibodies
EP1633189B1 (en) 2003-05-19 2017-07-05 Prothena Biosciences Limited Truncated fragments of alpha-synuclein in lewy body disease
US7358331B2 (en) 2003-05-19 2008-04-15 Elan Pharmaceuticals, Inc. Truncated fragments of alpha-synuclein in Lewy body disease
WO2005018539A2 (en) 2003-06-16 2005-03-03 Medimmune Vaccines, Inc. Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
US7993872B2 (en) 2003-06-18 2011-08-09 The Scripps Research Institute Unnatural reactive amino acid genetic code additions
EP1771552B1 (en) 2004-05-25 2012-08-01 MedImmune Vaccines, Inc. Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
US7973134B2 (en) * 2004-07-07 2011-07-05 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in anaplastic large cell lymphoma signaling pathways
MX2007001679A (es) 2004-08-09 2007-05-23 Elan Pharm Inc Prevencion y tratamiento de la enfermedad sinucleinopatica y amiloidogenica.
US7935790B2 (en) * 2004-10-04 2011-05-03 Cell Singaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in T-cell receptor signaling pathways
US7807789B2 (en) * 2004-12-21 2010-10-05 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in EGFR-signaling pathways
PT2682126T (pt) 2005-01-27 2017-02-28 Children`S Hospital & Res Center At Oakland Vacinas de vesícula com base em agn1870 para proteção de amplo espetro contra doenças causadas por neisseria meningitidis
WO2007094754A2 (en) 2005-01-27 2007-08-23 The Regents Of The University Of Califordnia Therapeutic monoclonal antibodies that neutralize botulinum neurotoxins
WO2006098901A2 (en) 2005-03-08 2006-09-21 Medimmune Vaccines, Inc. Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
US20090099340A1 (en) * 2007-10-12 2009-04-16 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
US8187817B2 (en) * 2005-08-02 2012-05-29 Xbiotech, Inc. Diagnosis, treatment, and prevention of vascular disorders using IL-1 autoantibodies
WO2007027906A2 (en) * 2005-08-31 2007-03-08 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in leukemia signaling pathways
US20100151495A9 (en) * 2005-08-31 2010-06-17 Cell Signaling Technolgy, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
DOP2006000277A (es) 2005-12-12 2007-08-31 Bayer Pharmaceuticals Corp Anticuerpos anti mn y métodos para su utilización
AU2007235496B2 (en) 2006-03-31 2013-11-21 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Transgenic animals expressing chimeric antibodies for use in preparing human antibodies
JP5160412B2 (ja) 2006-04-13 2013-03-13 株式会社医学生物学研究所 融合パートナー細胞
US20090298093A1 (en) * 2006-04-27 2009-12-03 Roberto Polakiewicz Reagents for the Detection of Protein Phosphorylation in ATM & ATR Kinase Signaling Pathways
US20110008282A1 (en) * 2006-05-15 2011-01-13 Xbiotech, Inc. IL-1alpha immunization induces autoantibodies protective against atherosclerosis
EP2109623B1 (en) * 2006-05-22 2011-10-12 XBiotech, Inc Treatment of cancer with anti-il-1 antibodies
ES2612383T3 (es) 2006-07-19 2017-05-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania WSX-1/IL-27 como una diana para respuestas antiinflamatorias
US7939636B2 (en) * 2006-08-11 2011-05-10 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in c-Src signaling pathways
US20090258442A1 (en) * 2006-08-31 2009-10-15 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
US8097419B2 (en) 2006-09-12 2012-01-17 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Compositions and method for rapid, real-time detection of influenza A virus (H1N1) swine 2009
US8080645B2 (en) 2007-10-01 2011-12-20 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection/transport compositions and methods
US9481912B2 (en) 2006-09-12 2016-11-01 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples
US8652782B2 (en) 2006-09-12 2014-02-18 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting, identifying and quantitating mycobacterial-specific nucleic acids
WO2008083169A2 (en) * 2006-12-26 2008-07-10 The Johns Hopkins University Compositions and methods for the treatment of immunologic disorders
US20090142342A1 (en) * 2006-12-27 2009-06-04 Johns Hopkins University B7-h4 receptor agonist compositions and methods for treating inflammation and auto-immune diseases
US7989173B2 (en) * 2006-12-27 2011-08-02 The Johns Hopkins University Detection and diagnosis of inflammatory disorders
AU2007339762B2 (en) * 2006-12-27 2011-03-31 The Johns Hopkins University Compositions and methods for treating inflammation and auto-immune diseases
PL2118300T3 (pl) 2007-02-23 2015-11-30 Prothena Biosciences Ltd Zapobieganie i leczenie synukleinopatii i amyloidozy
PT3067066T (pt) 2007-02-23 2019-06-17 Univ California Prevenção e tratamento da doença sinucleinopática e amiloidogénica
US20090081659A1 (en) 2007-03-07 2009-03-26 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways
EP1975184A3 (en) 2007-03-26 2008-11-26 Cell Signaling Technology, Inc. Serine or threonine phosphorylation sites
US20080238709A1 (en) * 2007-03-28 2008-10-02 Faramarz Vaziri One-way communication apparatus with dynamic key generation
US7977462B2 (en) 2007-04-19 2011-07-12 Cell Signaling Technology, Inc. Tyrosine phosphorylation sites
EP2145902A3 (en) 2007-04-19 2010-09-29 Peter Hornbeck Tyrosine phosphorylation sites and antibodies specific for them
EP1983003A3 (en) 2007-04-19 2009-03-11 Peter Hornbeck Tyrosine phosphorylation sites and antibodies specific for them
US20090053831A1 (en) 2007-05-01 2009-02-26 Cell Signaling Technology, Inc. Tyrosine phosphorylation sites
AU2008284015B2 (en) 2007-08-03 2014-05-15 Musc Foundation For Research Development Human monoclonal antibodies and methods for producing the same
ES2628395T3 (es) 2007-08-15 2017-08-02 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Anticuerpo regulado por proteasa
US9683256B2 (en) 2007-10-01 2017-06-20 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system
US11041215B2 (en) 2007-08-24 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc PCR ready compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences
AU2008293504B2 (en) 2007-08-27 2012-04-12 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Immunogenic compositions and methods
US10004799B2 (en) 2007-08-27 2018-06-26 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
US11041216B2 (en) 2007-10-01 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and quantifying nucleic acid sequences in blood samples
DK2535428T3 (en) 2007-10-01 2015-11-23 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological prøvesamlings- and transport system, and methods of using
EP2195654A1 (en) 2007-10-05 2010-06-16 National Institute for Bioprocessing Research and Training Limited Glycosylation markers for pancreatitis, sepsis and pancreatic cancer
EP2062920A3 (en) 2007-11-21 2009-06-17 Peter Hornbeck Protein phosphorylation by basophilic serine/threonine kinases in insulin signalling pathways
US20090169549A1 (en) * 2007-12-19 2009-07-02 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Conformational isomers of alpha-synuclein, antibodies thereto and methods of their manufacture and use
US20090220991A1 (en) * 2008-02-29 2009-09-03 Cell Signaling Technology, Inc. Reagents for the detection of protein phosphorylation in leukemia signaling pathways
US10000568B2 (en) 2008-04-10 2018-06-19 Cell Signaling Technology, Inc. Compositions and methods for detecting EGFR in cancer
EP3705135A1 (en) * 2008-05-30 2020-09-09 XBiotech, Inc Il-1 alpha abs and methods of use
EP2309264A4 (en) * 2008-06-06 2011-11-23 Univ Toyama Nat Univ Corp FLU VIRUS DETECTION DEVICE
CN102149405A (zh) 2008-07-11 2011-08-10 米迪缪尼股份有限公司 流感血凝素和神经氨酸酶变体
WO2010030979A2 (en) * 2008-09-12 2010-03-18 Xbiotech, Inc. Targeting pathogenic monocytes
US20100260752A1 (en) 2009-01-23 2010-10-14 Biosynexus Incorporated Opsonic and protective antibodies specific for lipoteichoic acid of gram positive bacteria
MX2011008497A (es) 2009-02-12 2011-12-16 Us Gov Nat Inst Health Variantes de hemaglutinina y neuraminidasa de influenza.
EP2427479B1 (en) 2009-05-07 2018-11-21 The Regents of The University of California Antibodies and methods of use thereof
AU2010286361A1 (en) 2009-08-31 2012-03-15 Amplimmune, Inc. Methods and compositions for the inhibition of transplant rejection
US8765432B2 (en) 2009-12-18 2014-07-01 Oligasis, Llc Targeted drug phosphorylcholine polymer conjugates
CN102946904A (zh) 2010-06-18 2013-02-27 埃克斯生物科技公司 关节炎治疗
EP3443985B1 (en) 2010-08-23 2020-12-16 XBiotech, Inc Treatment for neoplastic diseases
JP6105481B2 (ja) 2010-12-06 2017-03-29 シアトル ジェネティクス，インコーポレーテッド Ｌｉｖ−１に対するヒト化抗体および癌治療のためのその使用
PT2694107T (pt) 2011-04-01 2018-11-27 Xbiotech Inc Tratamento para patologias dermatológicas
US9724409B2 (en) 2011-04-01 2017-08-08 Xbiotech, Inc. Treatment of inflammatory skin disease
CN103906536A (zh) 2011-09-23 2014-07-02 埃克斯生物科技公司 恶病质治疗
CN104203272A (zh) 2012-01-26 2014-12-10 长角牛疫苗和诊断有限责任公司 复合抗原序列及疫苗
US20130309223A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Seattle Genetics, Inc. CD33 Antibodies And Use Of Same To Treat Cancer
UA105278C2 (ru) 2012-09-06 2014-04-25 Інститут Біології Клітини Нан України Способ получения каталитически активных антител (абзимов) с сиалидазной активностью
US9545441B2 (en) 2012-09-18 2017-01-17 Xbiotech, Inc. Treatment of diabetes
EP2904010A4 (en) 2012-10-04 2016-06-01 Xbiotech Inc TREATMENT OF VASCULAR DISEASES AND ASSOCIATED COMPLICATIONS
UA118441C2 (uk) 2012-10-08 2019-01-25 Протена Біосаєнсиз Лімітед Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн
CU24446B1 (es) 2013-03-13 2019-10-04 Prothena Biosciences Ltd Un anticuerpo monoclonal humanizado que se une a tau
WO2015003114A1 (en) 2013-07-05 2015-01-08 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Soluble mic neutralizing monoclonal antibody for treating cancer
WO2015004633A1 (en) 2013-07-12 2015-01-15 Neotope Biosciences Limited Antibodies that recognize islet-amyloid polypeptide (iapp)
US9850302B2 (en) 2013-07-12 2017-12-26 Prothena Biosciences Limited Antibodies that recognize IAPP
PT3041513T (pt) 2013-09-08 2020-09-07 Kodiak Sciences Inc Conjugados de polímeros zwiteriónicos com fator viii
KR20160127825A (ko) 2014-03-12 2016-11-04 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 항-mcam 항체 및 관련된 사용 방법
TW201623331A (zh) 2014-03-12 2016-07-01 普羅帝納生物科學公司 抗黑色素瘤細胞黏著分子（ｍｃａｍ）抗體類及使用彼等之相關方法
KR20160131082A (ko) 2014-03-12 2016-11-15 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 Lg1-3에 특이적인 항-라미닌4 항체
WO2015136472A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Prothena Biosciences Limited Anti-laminin4 antibodies specific for lg4-5
WO2015155694A1 (en) 2014-04-08 2015-10-15 Prothena Biosciences Limited Blood-brain barrier shuttles containing antibodies recognizing alpha-synuclein
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
US20160075772A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva
WO2016061562A2 (en) 2014-10-17 2016-04-21 Kodiak Sciences Inc. Butyrylcholinesterase zwitterionic polymer conjugates
TWI786505B (zh) 2015-01-28 2022-12-11 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI781507B (zh) 2015-01-28 2022-10-21 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI711631B (zh) 2015-01-28 2020-12-01 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
JP2018518461A (ja) 2015-04-29 2018-07-12 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドＲｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． 進行性骨化性線維異形成症の治療
CA2985652C (en) 2015-05-14 2020-03-10 Gerald W. FISHER Rapid methods for the extraction of nucleic acids from biological samples
JP2018530540A (ja) 2015-09-16 2018-10-18 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 巨細胞動脈炎、リウマチ性多発筋痛症又は高安動脈炎の処置又は予防のための抗ｍｃａｍ抗体の使用
WO2017046774A2 (en) 2015-09-16 2017-03-23 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of giant cell arteritis, polymyalgia rheumatica or takayasu's arteritis
AU2016381964B2 (en) 2015-12-30 2024-02-15 Kodiak Sciences Inc. Antibodies and conjugates thereof
WO2017149513A1 (en) 2016-03-03 2017-09-08 Prothena Biosciences Limited Anti-mcam antibodies and associated methods of use
IL261188B (en) 2016-03-04 2022-08-01 Jn Biosciences Llc An anti-tigit antibody that binds to the tigit polypeptide on one or more amino acid residues
WO2017153955A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases
WO2017153953A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases
EP3452508A1 (en) 2016-05-02 2019-03-13 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
CA3022765A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
WO2017208210A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Prothena Biosciences Limited Anti-mcam antibodies and associated methods of use
WO2018007924A2 (en) 2016-07-02 2018-01-11 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
WO2018007922A2 (en) 2016-07-02 2018-01-11 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
JP7016470B2 (ja) 2016-07-02 2022-02-07 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 抗トランスサイレチン抗体
ES2883182T3 (es) 2016-07-06 2021-12-07 Prothena Biosciences Ltd Ensayo para la detección de alfa-sinucleína total y fosforilada en S129
WO2018150265A1 (en) 2017-02-16 2018-08-23 Xbiotech, Inc. Treatment of hidradenitis suppurativa
WO2018191548A2 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Kodiak Sciences Inc. Complement factor d antagonist antibodies and conjugates thereof
KR20200030029A (ko) 2017-05-02 2020-03-19 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 타우 인식 항체
EP3655031A1 (en) 2017-07-21 2020-05-27 The U.S.A. as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neisseria meningitidis immunogenic compositions
CA3081152A1 (en) 2017-11-02 2019-05-09 Bayer Aktiengesellschaft Bispecific antibodies binding alk-1 and bmpr-2
KR20210094609A (ko) 2018-11-28 2021-07-29 포티 세븐, 인코포레이티드 절제 레짐에 대해 저항성인 유전적으로 변형된 hspc
TW202045206A (zh) 2019-02-27 2020-12-16 美商健生生物科技公司 抗體調配物
PE20212324A1 (es) 2019-03-03 2021-12-14 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos que reconocen tau
WO2021072265A1 (en) 2019-10-10 2021-04-15 Kodiak Sciences Inc. Methods of treating an eye disorder
CA3164168A1 (en) 2020-01-08 2021-07-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of fibrodysplasia ossificans progressiva
WO2021211924A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Janssen Biotech, Inc. Treatment of atopic dermatitis
MX2022015157A (es) 2020-06-02 2023-01-16 Arcus Biosciences Inc Anticuerpos para tigit.
AU2022210371A1 (en) 2021-01-22 2023-07-20 Bayer Aktiengesellschaft Lrrc15 antibodies and conjugates thereof

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5685287A (en) * 1979-11-01 1981-07-11 Bio Response Inc Production of monoclonal antibody

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2757169A1 (de) * 1977-12-22 1979-07-05 Hoechst Ag Verfahren zur gewinnung insulin produzierender tierischer zellen
GB2079313A (en) * 1980-07-07 1982-01-20 Nat Res Dev Improvements in or relating to rat myeloma cell lines
EP0043718B1 (en) * 1980-07-07 1984-11-28 National Research Development Corporation Improvements in or relating to cell lines
WO1982001461A1 (en) * 1980-07-18 1982-05-13 Leland Stanford Junior Univ Human hybridomas,precursors and products
JPS586475B2 (ja) * 1980-08-23 1983-02-04 株式会社 林原生物化学研究所 ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンの製造方法
JPS6045849B2 (ja) * 1980-08-25 1985-10-12 林原 健 ヒトエリトロポエチンの製造方法
JPS585671B2 (ja) * 1980-08-27 1983-02-01 株式会社 林原生物化学研究所 ヒト卵胞刺激ホルモンの製造方法
JPS5743696A (en) * 1980-08-27 1982-03-11 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of human luteinizing hormone
US4474893A (en) * 1981-07-01 1984-10-02 The University of Texas System Cancer Center Recombinant monoclonal antibodies
US4529694A (en) * 1982-04-16 1985-07-16 The Children's Medical Center Corporation Cell fusion

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5685287A (en) * 1979-11-01 1981-07-11 Bio Response Inc Production of monoclonal antibody

Also Published As

Publication number Publication date
MY8700169A (en) 1987-12-31
CY1488A (en) 1989-12-08
CH652145A5 (de) 1985-10-31
IL67721A (en) 1986-04-29
IT8319234A0 (it) 1983-01-21
DE3301249C2 (ja) 1990-04-05
JPS58128323A (ja) 1983-07-30
JPH0690753A (ja) 1994-04-05
DE3301249A1 (de) 1983-09-22
FI83538C (fi) 1991-07-25
GB8301384D0 (en) 1983-02-23
DK23183A (da) 1983-07-23
FR2522679A1 (fr) 1983-09-09
FI830190A0 (fi) 1983-01-20
JPH0471520B2 (ja) 1992-11-13
SE8300290D0 (sv) 1983-01-20
US4634664A (en) 1987-01-06
SE502344C2 (sv) 1995-10-09
IT1160468B (it) 1987-03-11
GB2113715A (en) 1983-08-10
ATA19583A (de) 1989-02-15
IL67721A0 (en) 1983-05-15
JPH03236794A (ja) 1991-10-22
HK52589A (en) 1989-07-07
AT388932B (de) 1989-09-25
SE8300290L (sv) 1983-07-23
FI83538B (fi) 1991-04-15
FI830190L (fi) 1983-07-23
JPH0789909B2 (ja) 1995-10-04
KE3884A (en) 1989-08-11
GB2113715B (en) 1986-06-04
SG28189G (en) 1989-08-11
DK23183D0 (da) 1983-01-20
FR2522679B1 (fr) 1986-05-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPH0365148B2 (ja)
US4464465A (en) Cell-driven viral transfer in eukaryotes
EP0182467B1 (en) Human hybridoma fusion partner for production of human monoclonal antibodies
US4634666A (en) Human-murine hybridoma fusion partner
EP0488470B1 (en) Method for the production of antibodies
US4451570A (en) Immunoglobulin-secreting human hybridomas from a cultured human lymphoblastoid cell line
US4594325A (en) High fusion frequency fusible lymphoblastoid cell line
JPH032515B2 (ja)
JPS6317688A (ja) ヒト―ヒトハイブリドーマの製造法
EP0583980A1 (en) Method for generating monoclonal antibodies from rabbits
US5114847A (en) Process for the production of permanently culturable animal and human cell lines and the use thereof
GB2134134A (en) Novel cell lines for use in the preparation of hybridoma cells
US4752582A (en) Monoclonal antibodies to human glycophorin A and cell lines for the production thereof
US8173425B2 (en) Fusion partner cells
EP0157574B1 (en) Antitetanic antibody producing human-human hybridoma and method of producing the same
Van Meel et al. Human and chimpanzee monoclonal antibodies
Diamond et al. Monoclonal antibodies
JP3043023B2 (ja) ハイブリドーマ
WO1989000607A1 (en) Preparation of human monoclonal antibodies of selected specificity and isotypes
KR900007950B1 (ko) 모노클로날 항체의 제조방법
Bartal et al. Current methodologies in hybridoma formation
JP2599258B2 (ja) ガン関連抗原特異的ヒト免疫グロブリン生産性ヒト／ヒトハイブリドーマ
JPS6239999B2 (ja)
Chang Monoclonal antibodies: preparation by hybridoma method and applications in biological research
JPH02186980A (ja) ニワトリチミジンキナーゼ欠損ｂリンパ芽細胞株