FI83538B - Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. - Google Patents
Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. Download PDFInfo
- Publication number
- FI83538B FI83538B FI830190A FI830190A FI83538B FI 83538 B FI83538 B FI 83538B FI 830190 A FI830190 A FI 830190A FI 830190 A FI830190 A FI 830190A FI 83538 B FI83538 B FI 83538B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- cells
- cell
- antibody
- human
- antibodies
- Prior art date
Links
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 107
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 41
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 17
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 241000288906 Primates Species 0.000 claims 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 15
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 13
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 12
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 12
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 101000651671 Bombyx mori Sex-specific storage-protein 2 Proteins 0.000 description 9
- 101000664506 Homo sapiens Spermatogenesis-associated protein 1 Proteins 0.000 description 9
- 102100038832 Spermatogenesis-associated protein 1 Human genes 0.000 description 9
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 7
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 6
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 8-azaguanine Chemical compound NC1=NC(O)=C2NN=NC2=N1 LPXQRXLUHJKZIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960005508 8-azaguanine Drugs 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 5
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 3
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010093857 Viral Hemagglutinins Proteins 0.000 description 3
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 102000018251 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-N oxaloacetic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)C(O)=O KHPXUQMNIQBQEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- KYHPMCZXXRPOKS-ZJWYQBPBSA-N 3,7-dihydropurin-6-one;2-hydrazinyl-1h-pteridin-4-one;1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2.C1=CN=C2C(=O)NC(NN)=NC2=N1.O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 KYHPMCZXXRPOKS-ZJWYQBPBSA-N 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010009685 Cholinergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 240000001879 Digitalis lutea Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000008896 Opium Substances 0.000 description 1
- 239000008118 PEG 6000 Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002535 Polyethylene Glycol 1500 Polymers 0.000 description 1
- 229920002584 Polyethylene Glycol 6000 Polymers 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 229940123445 Tricyclic antidepressant Drugs 0.000 description 1
- 102000034337 acetylcholine receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940075522 antidotes Drugs 0.000 description 1
- 210000001742 aqueous humor Anatomy 0.000 description 1
- 229940125717 barbiturate Drugs 0.000 description 1
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N benzene-1,2-diamine;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NC1=CC=CC=C1N RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940124558 contraceptive agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 210000003917 human chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000009177 immunoglobulin therapy Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000013101 initial test Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001027 opium Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- VUYXVWGKCKTUMF-UHFFFAOYSA-N tetratriacontaethylene glycol monomethyl ether Chemical compound COCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO VUYXVWGKCKTUMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000003029 tricyclic antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
- C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
- C12N5/16—Animal cells
- C12N5/166—Animal cells resulting from interspecies fusion
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
1 83538
Menetelmä hybridoomasolulinjan tuottamiseksi
Esitetään hybridooma-solulinjoja sekä menetelmiä niiden valmistamiseksi samoin kuin niiden käyttö erikois-aineiden kuten esimerkiksi vasta-aineiden valmistamiseksi.
5 Hybridooma on termi, jota käytetään soluista, jotka on muodostettu yhdistämällä "kuolemattomaksi tekevä" solu (erityisesti myelooma-solu) "normaaliin" ei-transformoituun soluun, joka tavallisesti valitaan kykynsä takia tuottaa jokin erikoisaine (esim. imusolu vasta-aineiden 10 tuottamiseksi) muodostamaan hybridi. Nämä hybridit voidaan valikoida ja kloonata solulinjojen saamiseksi, jotka tuottavat aineita, joilla on valittu rakenne ja/tai ominaisuus. Erityisesti tällaisia hybridoomia, jotka on muodostettu imusolujen kanssa, voidaan käyttää tuottamaan mono-15 klonaanisia vasta-aineita.
Hybridoomateknologian kehitys on viime vuosina suunnattu solulinjojen saamiseen, jotka ovat sekä pysyviä että runsaasti ja spesifisesti erikoisaineita tuottavia, joita halutaan saada. Tämän ongelman ratkaisemiseksi on 20 tehty erilaisia yrityksiä, jotka historiallisen alkuperän sä vuoksi ovat suuresti keskittyneet immunoglobuliinien/-vasta-aineiden alueelle.
Aikaisempien toimien tällä alueella tarkastelu antaa katsauksen kohdattavista ongelmatyypeistä ja tähänas-25 tisista eri ratkaisuista.
Alkusysäys hybridi-solulinjojen, jotka tuottavat monoklonaalisia tuotteita, tutkimiseen tuli immunobiolo-gian alalta, jolloin tuotteet olivat monoklonaalisia vasta-aineita.
30 Tavanomaiset antiseerumit sisältävät tavallisesti hyvin suuren joukon vasta-aineita, jotka poikkeavat toisistaan rakenteellisesti antigeenin sitomispaikan suhteen mutta jokainen sitoutuu samaan antigeeniin suuremmalla tai pienemmällä vetovoimalla ja/tai spesifisyydellä. Lisäksi 35 tavanomaiset antiseerumit sisältävät myös suuren joukon 2 83538 vasta-aineita, jotka kohdistuvat muita antigeenejä vastaan ja heijastavat isäntäyksilön, josta antiseerumi saatiin, aikaisempia puolustusreaktioita. Samalla kun tällaiset "laajat" antiseerumit olivat riittäviä useimpia tarkoituk-5 siä varten, tunnettiin, että suuremman spesifisyyden ja toistettavuuden saaminen merkitsisi merkittävää etua ja antaisi suunnattoman voimakkaan työvälineen, erityisesti taudinmäärityksen ja terapian alueella.
Ensimmäinen ja nyt klassinen ratkaisu oli Köhler'in 10 ja Milstein'in selostama [Nature , 256, 495-497 (1975)], jotka onnistuivat esi-immunisoidun hiiren pernasolujen yhdistämisessä "lääke" herkkiin hiiren myelooma-soluihin. Näin kuolemattomiksi tehtyjä yhdistettyjä soluja voitiin kasvattaa in vitro ja kloonata yksinkertaiselta solutasol-15 ta antamaan homogeeninen vasta-aine-populaatio (monoklo- naalisia vasta-aineita). Valikoimalla monien ainutlaatuisten solujen joukosta ja uudelleenkloonaamalla selektiivisesti oli mahdollista saada ja kasvattaa soluja, jotka tuottivat vasta-aineita, joilla oli haluttu antigeenispe-20 sifisyys.
Tällä tavalla valmistetut hiiri-vasta-aineet ovat osoittautuneet käyttökelpoisiksi tutkimus- ja taudinmääri-tystarkoituksiin ja joitakin on jopa käytetty terapeutti-— sesti ihmisille. Saavutettaisiin kuitenkin huomattava etu "'25 ihmisen immunoglobuliiniterapiassa, jos ihmisen vasta-ai neita, joilla olisi samanlainen spesifisyys ja toistettavuus, voitaisiin saada tällä tavalla. Tämä pienentäisi myös herkistymisvaaraa. Monia yrityksiä ongelman ratkaisemiseksi valmistaa tällaisia ihmisen vasta-aineita in vitro 30 on tehty, mutta tähän asti ne ovat olleet suurimmaksi osaksi menestyksettömiä. Tällaisia ovat: (i) Ihmisen normaalien imusolujen transformoiminen Epstein-Barr-viruksella (EBV). Tämä menetelmä on menestynyt heikosti, koska tämäntyyppisten solujen aikaansaaminen 35 vaatii pitkän ja aikaavievän prosessin ja niitä on äärimmäisen vaikea kloonata ja valikoida.
3 83538 (ii) Normaalien (ihmisen) imusolujen yhdistäminen ihmisen myelooma-solujen kanssa. Tämä menetelmä on ilmeisen yhdenmukainen hiiri-hiiri-hybridooma-yrityksen kanssa, mutta siinä on ongelmana, että ihmis-systeemissä ainoas- 5 taan yksi myelooma-solulinja on tehty laajalti saatavaksi ja tämän havaittiin olevan saastunut mykoplasmalla, mikä estää menestykselliset yhdistämiset.
(iii) Normaalien ihmis-imusolujen yhdistäminen EBV-transformoituun ihmisen lymfoblastoidi B-solulinjaan. Sa- 10 maila kun tämä todennäköisesti on tähän asti esitetyistä luotettavin ja parhain toistettava menetelmä, sitä rasittaa in vitro perushaitta, joka kohdataan lymfoblastoidi-soluilla; niitä on äärimmäisen vaikea kloonata, ja koska ne edustavat varhaisvaihetta B-solun erilaistumissukupe- 15 rässä, niiden kyky tuottaa ja erittää vasta-aineita on n. 10 kertaa pienempi kuin todellisilla myeloomilla.
(iv) Ihmisen imusolujen yhdistäminen hiirimyeloo-maan. Tämä menetelmä tuottaa soluja, joilla on samat erinomaiset in vitro-ominaisuudet kuin hiiri-hiirihybridoomil- 20 la, mutta tähän liittyy se suuri haitta, että tällaiset hybridit ovat luonnostaan geneettisesti pysymättömiä. Eräs erikoisen hankala seuraus tästä on, että ne karkottavat ihmis-kromosomin, jolla genomi immunoglobuliinin kevyen kappaketjun muodostamista varten sijaitsee.
25 Yhteenvetona on siten menetelmä (i) liian aikaa vievä ja tehoton ollakseen käyttökelpoinen; menetelmällä (ii) ei vielä ole mitään käytännön merkitystä; menetelmä (iii) on paras nykyään käytännössä saatavissa oleva ja menetelmä (iv), vaikka onkin elinvoimainen, ei voi ylläpi- 30 tää tuottavuutta edes äärimmäisen tarkoilla kloo-nausprosesseilla.
Samalla kun sekä edellä esitetty tarkastelu että suurin osa tähän asti tehdystä työstä on keskittynyt vasta-aineen tuottamiseen, on selvää, että "tuottava" solu- 35 osapuoli voidaan valita jonkun nimenomaisen aineen, jota 4 83538 halutaan saada, erittämistä varten ja yhdistää "kuolemattomaksi tekevään" solulinjaan.
Nyt on keksitty, että käyttämällä vierasgeenistä hybridooma-solua emäsoluna edelleen yhdistämistä varten 5 toiseen soluun on mahdollista saada hybridooma, jolla on suuresti parantunut pysyvyys.
Keksinnön kohteena on siten menetelmä valmistaa:
Hybridooma-solulinja, joka käsittää kuolemattomaksi tekevän solun yhdistettynä soluun, joka tuottaa en-10 naita määrättyä ainetta. Kuolemattomaksi tekevä solu on vierasgeeninen hybridooma-solu ja ainetta tuottava solu on geneettisesti yhteensopiva ei-transformoidun osapuolen kanssa vierasgeenisessä hybridoomassa. Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, mitä patenttivaati-15 muksessa 1 esitetään.
Tällaisten solujen pysyvyys perustuu niiden kykyyn, jos niitä on oikein viljelty, ylläpitää ennalta määrätyn aineen, kuten vasta-aineen, tuotanto.
Eräässä erikoistapauksessa kuolemattomaksi teke-20 väksi soluksi valittu vierasgeeninen hybridooma on myeloo-ma-hybridi, joka on menettänyt oman kykynsä tuottaa immu-noglobuliinia. Eräs esimerkki tällaisesta vierasgeenisestä hybridooma-solusta olisi myelooma-solun ja imusolun väli-— nen hybridooma. Esimerkkejä sopivista myelooma-soluista 25 ovat ne, joita saadaan hiiristä ja rotista ja edullisesti eivät tuota immunoglobuliinia. Nämä myeloomat voivat itse olla hybridejä (esim. hiiri-myelooma/hiiri-imusolu), jotka ovat vaikutukseltaan myeloomia. Tällainen solu on esim. hiiri-SP-2 myelooma-solulinja. Tämä yhdistetään sitten 30 esim. imusoluun, joka on saatu toisesta lajista, esim. ihmisen imusoluun.
Eräässä edullisessa suoritusmuodossa vierasgeenisiä hybridoomia, jotka ovat peräisin tällaisista yhdistymisistä ja jotka eivät enää tuota immunoglobuliinia, valitaan 35 edelleen yhdistettäviksi ainetta tuottaviin soluihin.
5 83538 Nämä vierasgeeniset hybridoomat antavat hyvänlaa-tuisemman ympäristön lisäpysyvyyttä varten kromosomihäviön suhteen.
Vierasgeeniset hybridoomat, joita käytetään kuo-5 lemattomaksi tekemiseen, tehdään lääkekestäviksi ennen edelleen yhdistämistä tavalliseen tapaan. Eräs erityis-menetelmä on valikointi 8-atsaguaniinin kestävyyden suhteen.
Näin saadut hybridoomat ovat pysyviä emäsoluja 10 edelleenyhdistämistä varten. Toinen fuusio-osapuoli valitaan kykynsä perusteella tuottaa ennalta määrättyä ainetta - eräs esimerkki olisi imusolun valinta vasta-aineen tuottamiseksi - ja tämä osapuoli on geneettisesti yhteensopiva ei-transformoidun osapuolen kanssa vierasgeenisessä hybri-15 doomassa.
Tarvittavan spesifisyys-asteen saavuttamiseksi on toivottavaa esiherkistää valittu solu tuottamaan haluttua ainetta. Tämä saavutetaan esimerkiksi vasta-aineiden tapauksessa immunisoimalla isäntä jollakin nimenomaisella 20 antigeenillä ja keräämällä sen jälkeen immunosyyttejä (ts.
soluja, jotka ovat immunologisesti kykeneviä), jotka tuottavat vastaavia vasta-aineita.
Nämä voivat olla esimerkiksi perna- tai imusolmuke-tai verisoluja.
·. 25 Vierasgeenisen hybridooma-emäsolun yhdistäminen ainetta tuottavaan soluun tapahtuu tavalliseen tapaan. Tämä käsittää tavallisesti huomattavien määrien molempia soluja inkuboinnin sopivassa elatusaineessa yhdessä aineen kanssa, joka edistää fuusiota (esim. PEG 1500). Haluttujen 30 hybridien valikointi on jälleen tavanomaista ja voidaan suorittaa valikoivissa elatusaineissa (esim. HAT:ssa (hy-poksantiini/aminopteriini/tymidiinissä), jos kuolemattomaksi tekevä solu ei sisällä hypoksantiinifosforibosyyli-transferaasia).
35 Syntyneet solulinjat ovat pysyviä ja antavat suu ria vasta-ainesaantoja.
6 83538
Niitä voidaan myös kloonata ja valikoida uudelleen, jos on tarpeen tai halutaan.
Keksinnön kohteena on siten menetelmä pysyvän hyb-ridooma-solulinjan aikaansaamiseksi, jossa menetelmässä 5 vierasgeeninen hybridooma-emäsolu tehdään lääkekestäväksi, yhdistetään tämä ainetta tuottavaan soluun, joka on geneettisesti yhteensopiva ei-transformoidun osapuolen kanssa vierasgeenisessä hybridoomassa, ja valikoidaan haluttu hybridi.
10 Vasta-aineen tuottaminen näitä soluja käyttäen voi tapahtua tavanomaisia teitä joko in vitro sopivissa ela-tusaineissa (esim. elatusaineissa, jotka sisältävät laimennettua vasikan sikiöseerumia) tai in vivo injektoimalla isäntään (esim. karvattomaan tai kateenkorvattomaan (an-15 thymic) hiireen tai rottaan) ja keräämällä vesivatsaneste talteen. Valitusta menetelmästä riippuen on yksi tai useampi puhdistusvaihe tarpeen.
Esitetään myös vasta-aineiden tuottaminen tällaisia solulinjoja käyttäen.
20 Samalla kun on selvää, että yksinkertaiset hybri- dooma-soluiinjät, joilla on halutut ominaisuudet, ovat taloudellisista syistä edullisia, on myös mahdollista, jos halutaan tai on tarve, yhdistää edelleen tällaisia solu-linjoja.
25 Tyypillinen keksinnön mukaisesti tuotettu vasta- ainetta tuottava hybridooma olisi hybridooma, joka on muodostettu hiiri-myeloomasta, joka on yhdistetty ihmisen imusolun kanssa emäsoluna ja esiherkistetyn ihmisen imusolun kanssa vasta-ainetuottajana. Mitkä tahansa myelooma-30 soluista voivat, jos on tarkoituksenmukaista, olla hybridejä (kuten esim. SP-2 hiiri-linjassa, joka itse on hii-ri/hiiri-hybridi).
Esimerkkejä kirjallisuudesta, joka kuvaa tavanomaisia menetelmiä ja aikaisempaa työtä ovat: 35 1. Köhler, G. ja Milstein, C. Nature, 256, 495-497 (1975) 7 83538 2. Nadler, L.M. et al., Cancer Research, 40, 3147-3154 (1980) 3. Cosimi, A.B. et al., N. Engl. J. Med. , 305, 308-314 (1981) 5 4. Zurawski, V.R. et al., Science, 199, 1439-1441 (1978) 5. Koskimies, S., Scand. J. Immunol., 11, 73-77 (1980) 6. Steinitz, M. et al., Nature, 287 , 443-445 (1980) 7. Olsson, L. ja Kaplan, H. S., Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A., 77, 5429-5431 (1980) 10 8. Croce, C.M. et al., Nature, 288, 488-489 (1980) 9. Nowinski, R. et al., Science, 210, 537-539 (1980) 10. Croce. C. M. et al., Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 76, 3416-3419 (1979) 11. Galfre, G. et al.. Nature 266, 550, 1977 15 12. Miller, R.A. et al., N. Engl. J. Med. 306, 517, 1982 13. Sikora K., et al., Lancet, i 11, 1982 ja esim. USP 4.172,124 EP hak.julk. no. 0043 718 ja 0044 722 sekä äskettäin julkaistu McIntyre'n kirja monoklonaalisia 20 vasta-aineista.
Tämä menetelmä, jossa käytetään vierasgeenistä fuu-sio-emäsolua (joka on menettänyt kykynsä tuottaa ennalta määrättyjä aineita) tekee mahdolliseksi saada hybridoomia, jotka ovat pysyviä, nopeasti kasvavia, helposti kloonatta-25 via ja joilla on suuri halutun aineen, esim. ihmisen vasta-aineiden tuotantokyky.
Ihmisen vasta-aineita, joita on tuotettu kuvatulla tavalla voidaan käyttää kuten on tavanomaista tällaisille vasta-aineille. Esimerkkejä tällaisista käyttöalueista 30 ovat:
Tarttuvat taudit: virukset (cytomegalo, varicella zoster, herpes simplex, hepatitis A & B, rubella jne). Bakteerit (anti-toksiinit, anti-soluseinä). Sienet (Candida).
35 Malignit sairaudet: vasta-aineita kaikenlaisia pa hanlaatuisia kasvaimia vastaan, joihin liittyy tai ei liity myrkkyjä.
s 83538
Myrkytys: vastamyrkky vasta-aineita (vastamyrkyt, digitalis, oopiumilääkkeet, trisykliset masennuslääkkeet, barbituraatit jne.).
Anti-idiotyypit: anti-anti-haima β-solu, anti-anti 5 asetyylikoliini-reseptori, reumatismin vastatekijä.
Veriryhmä-antigeenit: anti-Rh
Elinsiirto: anti T-solu hylkimisen hillitsemiseen, parantavia vasta-aineita vähentämään siirteen ärsytysky-kyä.
10 Allergia: IgG-vasta-aineita allergeeneille, vaih toehto aliherkistämiselle.
Hormonit: sikiön suonikalvo-gonadotropiini-vasta- aineita käytettäviksi hedelmöitystä ehkäisevinä aineina.
Itse hybridooma-soluja voidaan myös käyttää mRNA-15 lähteenä, jos aiotaan kloonata immunoglobuliinigeenejä.
Tämän keksinnön eräässä erikoissuoritusmuodossa käytetään SP-2 solulinjaa, joka alunperin itse oli hybri-dooma P3-X63-Ag8-linjan ja hiiren pernasolujen välillä, jotka tuottavat vasta-aineita lampaan punaisille veriso-20 luille, ja joka on menettänyt kykynsä tuottaa vasta-aineita (C. F. M. Shulmann et ai., Nature 276, 269, 1978).
Sitä on saatavissa esim. kokoelmasta NIGMS Human Genetic Mutant Cell Repository, Rf. GM 35669 A (ks. US DHHS 1982 Catalog of Cell Lines).
25 Tämä solulinja tehdään lääkkeenkestäväksi ja yhdis tetään sitten normaalien ihmisen ääreisimusolujen kanssa tavanomaisin menetelmin [C.F.G. Galfre et ai.. Nature 266, 550 (1977) ja R. Nowinski et ai., Science 210/537 (1980)]. Saadaan suuri joukko hybridejä ja n. 5 viikon kuluttua 30 valitaan 5 kloonia, joilla on nopea kasvu ja jotka eivät tuota vasta-ainetta. Nämä solut valitaan 8-atsaguaniini-resistenssin suhteen ja kolmella näistä linjoista on mahdollista saada mutantteja, jotka ovat resistenttejä 20 pg/ml:lle 8-atsa-guaniinia. Nämä solut ovat samanaikaises-35 ti herkkiä hypoksantiiniaminopteriini-tymidiini (HAT)-ela-tusaineelle, mikä osoitti, että ne olivat menettäneet kykynsä tuottaa hypoksantiini-fosforibosyyli-transferaasia.
9 83538
Yksi näistä linjoista (SPAZ4) yhdistetään sitten in vitro ihmisen kitarisaimusolujen kanssa käyttäen 10® kita-risasolua 2 x 107 SPAZ4-solun kanssa. Yhdistäminen suoritetaan standardimenetelmien mukaisesti. Vertailutarkoituk-5 siä varten yhdistetään myös SP/2 solulinja. Syntyneet solupopulaatiot valikoidaan HAT-elatusaineessa tarvittavien hybridien talteenottamiseksi. Heti kun kaikki solut yhdistämättömissä vertailuviljelyissä ovat kuolleet, HAT-ela-tusaine korvataan normaalilla ei-valikoivalla kasvu-10 alustalla.
Kahden viikon kasvun jälkeen alkutesti vasta-ainetuotannon suhteen suoritetaan ja havaittiin, että kaikki 47 viljelyä jokaisesta fuusiosta tuottivat ihmisen vasta-ainetta. Uudelleentestattaessa vielä 4 viikon kuluttua 15 havaittiin kuitenkin, että 83 % SPAZ-4-hybridoomista tuottavat vielä vasta-ainetta verrattuna 55 %:iin SP/2-hybri-doomia. Suuri tuotantomäärä havaitaan 28 %:ssa SPAZ-4-lin-joista verrattuna ainoastaan 3 %:iin SP/2-linjoilla.
Ottaen huomioon, että tärkeä tekijä vasta-ainetuo-20 tannon häviössä on L-ketju-genomin häviö, suoritetaan spe sifinen testi kevytketjutuotannon suhteen. Havaitaan, että 67 % SPAZ-4 linjoista tuottavat kappa-ketjuja ja 88 % lambda-ketjuja. Vastaavat arvot SP/2:lie ovat 39 % ja 61 % vastaavasti (nämä prosenttiluvut ovat tietenkin vertailu-25 kelpoisia tälle nimenomaiselle kokeelle ja käytetylle im-munoglobuliinille (Ig). Tulokset on koottu taulukkoon I. Haivataan, että SPAZ-4 on kaikissa tapauksissa parempi kuin SP/2, erityisesti mitä "voimakkaan" tuotannon arvoihin tulee, jotka ovat tärkeimpiä käytännön näkökannalta. 30 Kaikki nämä kokeet suoritetaan kloonaamattomilla soluilla paineen maksimoimiseksi kohti pysyviä klooneja (pysyvät kloonit sisältävät enemmän geneettistä ainesta ja kasvavat aina vähemmän hyvin kuin solut, jotka ovat onnistuneet torjumaan "tarpeettomat" kromosominsa).
35 Kokeita on kuitenkin tehty näiden solujen kloonaa miseksi. Tähänastiset tulokset osoittavat, ettei ainoata- 10 83538 kaan pysyvää ja tuottavaa SP/2-hybridiä ole saatu (ts. ei yhtäkään linjaa, jossa kaikki kasvavat solut tuottaisivat vasta-ainetta). Toisaalta SPAZ-4-hybrideissä on mahdollista kehittää tällaisia klooneja.
5 Tämä keksintö tekee mahdolliseksi saada olennai sesti parempia tuloksia kuin aikaisemmin tunnetuilla menetelmillä ratkaisemalla pysymättömyysongelma, samalla kun on mainitsemisen arvioista, että myös "klassiset" hiiri-hiiri-hybridoomat ovat pysymättömiä ja tarkka subkloonaus 10 on aina tarpeen, mutta silti niiden kanssa on käytännöllistä työskennellä. SPAZ-4-hybridoomien osoittama pysymät-tömyysaste on alempi kuin hiiri-hiiri-hybridoomille ja siten on käytännöllisempää työskennellä niiden kanssa.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
15 Esimerkki 1 SPAZ-4-linjan tuottaminen Ääreisveri-imusoluja (PBLs) eristetään terveen luovuttajan hepariinilla käsitellystä verestä sentrifugoimal-la Ficoll-Isopaque'11a. Pesun jälkeen 108 PBLs sekoitetaan 20 5 x 107 SP/2-solun kanssa 50 ml:ssa Dulbeccos H21-elatusai- netta, joka on asetettu pH 8,0:aan. Soluja pelletoidaan yhteen 600 x g:ssä 5 minuuttia, minkä jälkeen niiden päällä oleva neste varovasti poistetaan. Pitäen solut 37°:ssa lisätään hitaasti 1 minuutin aikana 1 ml 50-%:sta PEG 4000 25 H21:ssä. 2 minuutin aikana lisätään vielä 10 ml H21. Solut kootaan sentrifugoimalla (pelletoimalla) ja suspendoidaan uudelleen 55 ml:aan HAT-elatusainetta (HAT-elatusaine: Dulbeccos H21, jossa 20 % vasikan sikiöseerumia, 10 % NCTC 109, 1 % ei-olennaisia aminohappoja, 0,5 % pyruvaattia, 30 0,2 U/ml insuliinia, 1 mM oksaalietikkahappoa, 10'4M hypok- santiinia, 4 x 10'7M aminopteriinia ja 1,6 x 10'3M tymidii-niä) ja siirrostetaan 528:aan 0,1 ml:n viljelyyn tasapohjaisilla kudosviljelymikromaljoilla. Tuoretta HAT-elatusainetta lisätään viljelyihin aina 3-5 päivän väliajoin 2 35 viikon ajan, minkä jälkeen elatusaine vaihdetaan HT-elatu-saineeksi (Dulbeccos H21, jossa 10 % vasikan sikiöseerumia 11 83538 10*4 hypoksantiinia ja 1,6 x 10'3 tymidiiniä). 15 päivän jälkeen otetaan näytteitä ihmisen vasta-aineen testaamista varten. Valitaan 5 viljelyä, joilla on hyvä kasvu ja vasta-aineen tuotanto 0. Valikoidaan sitten 8-atsaguaniini-5 resistenttien alalinjojen tuotantoa varten.
Nämä viisi solulinjaa siirrostetaan määrässä 2 x 105 solua/ml Dulbeccos H21:een, jossa on 10 % vasikan si-kiöseerumia ja 20 pg/ml 8-atsaguaniinia. Kolmesta näistä viljelystä on mahdollista parin viikon kuluttua ottaa tallo teen elinvoimaisia, kasvavia soluja. Yksi näistä on SPAZ-4, joka on herkkä HAT:lie ja jota käytetään jatkotestausta varten.
Esimerkki 2
Yhdistäminen kitarisaimusolujen kanssa 15 Lapsen kitarisoista poistetaan sidekudos ja ne viedään hienosilmaisen metalliverkon läpi antamaan yksisolu-preparaatti. Punaisten verisolujen lukumäärän pienentämiseksi kaikki solut fraktioidaan Ficoll-Isopaque'11a. Syntyneestä solupopulaatiosta yhdistetään 108 solua 2 x 107 20 kanssa joko SPAZ-4- tai SP/2-soluja menetelmällä, joka on samanlainen kuin esimerkissä 1 kuvattu. Solut siirrostetaan myöhemmin 47:ään 0,5 ml:n viljelyyn HAT-elatusainees-sa, joka tällä kerralla on täydennetty 0,5 pg:lla syklo-sporiini A:ta/ml. Yhden päivän kuluttua lisätään 0,5 ml 25 HAT-elatusainetta ilman syklosporiini A:ta. Jo kolmantena päivänä vaihdetaan 50 % elatusaineesta HT-elatusaineeseen. Tämän jälkeen solut pidetään HT-elatusaineessa vaihtaen aina 3-5 päivän välein.
Testaus immunoglobuliini-tuotannon suhteen 30 Käytetään perinteistä ELISA (entsyymi-kytketty immunosorbenttianalyysi, "Enzyme-linked Immunosorbend Assay )-systeemiä. Kaniinin anti-ihmis-immunoglobuliinia tartutetaan Nunc EIA-levyille laimennussuhteessa 1:400 pH 9,6 bikarbonaatti-puskurissa. Levyjen pesun jälkeen viljely-35 supernatantteja inkuboidaan 30 minuuttia 37°:ssa. Vielä yhden pesukerran jälkeen inkubointeja käsitellään peroksi- i2 83538 daasi-konjugoidulla kaniinin anti-ihmis-IgG, IgM, IgA-rea-genssilla (Miles-Yeda) laimennuksessa 1:400. Pesun jälkeen entsyymi-reaktio kehitetään 1,2-fenyleenidiamiini-dihydro-kloridilla ja H202:lla.
5 Testi kevytketjutuotannon suhteen tehdään täsmäl leen samalla tavalla, paitsi että käytetään vuohen anti-ihmis-lambda- tai vuohen anti-ihmis-kappa-reagenssia (Ta-go) laimennuksessa 1:3000 kaniinin anti-ihmis-IgG, IgM, IgA:n asemesta.
10 Tulokset arvioidaan Titertek Multiscan Elisa-foto- metrillä ja arvot "4" ja "7" taulukossa 1 viittaavat pieniin ja vastaavasti suuriin lukemiin tällä fotometrillä.
Esimerkki 3
Monoklonaalisten vasta-aineiden valmistus influens-15 sa tyyppi A:ta ja B:tä vastaan (in vivo-immusoinnin j älkeen)_ Käytetty influenssa-rokote on SANDOVAC®, joka sisältää hemagglutiniinia ja neuraminidaasia A/Bang-kok'ista, A/Brasiliasta ja B/Singaporesta. Kolme tervettä 20 vapaaehtoista immusoidaan ja otetaan verta päivinä 3., 7., 10., 14. ja 17. Joka kerta imetään 50-60 ml verta kyynär-suonesta hepariinia sisältäviin ruiskuihin. Imusolut eristetään sentrifugoimalla Ficoll-Paque:11a (Pharmacia) ja pestään kahdesti suolaliuoksessa ennen käyttöä.
25 Fuusio-emäsolut ovat: a) SPAZ-4 (vrt. esim. 1) b) SP/2 (ks. edellä) c) GM 1500 ihmisen lymfoblastoidi-solu, joka on tehty 8-atsaguaniini-resistentiksi WISTAR INSTITUTE'ssa 30 (tuottaa ihmis-IgG2-kappaa).
SPAZ-4 ja SP-2 yhdistetään samalla tavalla. Mye-looma-solut (107 solua) ja ihmisen imusolut (n. 3 x 107 solua) sekoitetaan koeputkessa DMEM seerumivapaan elatus-aineen läsnäollessa pH 8,0:ssa. Soluja sentrifugoidaan 35 yhdessä 600 x g:ssä 5 minuuttia. Syntynyttä pellettiä käsitellään 50-%:isella PEG 4000 1 min., minkä jälkeen PEG
13 83538 hitaasti laimennetaan elatusaineella. Yhden pesun jälkeen solut siirrostetaan 176:een 100 μ1:η viljelyyn DMEM-HAT-elatusaineessa, joka sisältää 20 % vasikan sikiöseerumia. Soluja viljellään 37°C:ssa kosteassa 10 % C02 sisältävässä 5 atmosfäärissä.
GM 1500 solut (107 solua) sekoitetaan ihmis-imusolu-jen kanssa (n. 3 x 107 solua) seerumivapaassa DMEM:ssä, pH
8,0 ja sentrifugoidaan 600 x g:ssä 5 min. Pellettiä käsitellään 50-%:isella PEG 6000 5 min., jona aikana soluja 10 sentrifugoidaan 600 x g:ssä. Tämän ajan kuluttua PEG laimennetaan hitaasti elatusaineella. Yhden pesun jälkeen solut siirrostetaan 176:een 100 μ1:η viljelyyn RPMI 1640-HAT-elatusaineessa, joka sisältää 20 % vasikan sikiöseerumia. Soluja viljellään 37°C:ssa kosteassa 5 % C02 sisältä-15 vässä atmosfäärissä.
Suoritetaan yhteensä 35 fuusiota (15 GM 1500:lie, 14 SPAZ-4:lle ja 6 SP-2:lle), mikä käsittää 6160 viljelyä (2640 GM 1500:11a, 2464 SPAZ-4:llä ja 1056 SP-2:lla).
Elatusaineet vaihdetaan viljelyissä aina kun solu-20 jen lisääntyminen tekee sen tarpeelliseksi, ja säännönmukaisesti 3-5 päivän välein. Influenssan vastaisten vasta-aineiden läsnäolo supernatanteissa määritetään ELISA-menetelmällä: merkitykselliset influenssa-antigeenit tartutetaan mikrolevyn syvennyksiin (Nunc), lisätään superna-25 tantti ja annetaan olla vuorovaikutuksessa antigeenin kanssa. Pesun jälkeen syvennyksiin lisätään peroksidaasi-konjugoitua kaniinin anti-ihmis-IgG, IgA, IgM (Miles). Inkuboinnin jälkeen sitoutumaton peroksidaasi-konjugaatti pestään pois ja syvennyksiin lisätään väri-substraattia 30 entsyymiä varten. Reaktio arvioidaan silmämääräisesti ja vahvistetaan Titertek mikrolevy-fotometrillä. Positiivisia tuloksia antavat viljelyt kloonataan rajoitetuissa laimen-nusolosuhteissa 88:ssa uudessa syvennyksessä siirrostaen solut 1 solu/viljely 100 pl:ään DMEM + 20 % vasikan sikiö-35 seerumia yhdessä hiiri-tymosyytti-syöttösolujen kanssa (SPAZ-4 ja SP-2-peräisiä soluja) tai RPMI 1640 :ssa + 20 % i4 83538 vasikan sikiöseerumia MRC-5-syöttösoluilla (GM 1500-peräi-siä soluja). Tuottavia soluja kasvatetaan suuremmassa mittakaavassa ja jäädytetään nestemäisessä N2.
Yhteensä 86 viljelyä (58 GM 1500:sta, 26 SPAZ-4:stä 5 ja 2 SP-2:sta) kloonattiin. Käytetään melko vapaamielisiä arvosteluperusteita päätettäessä tulisiko joku solu kloonata vai ei, mikä on syynä todella positiivisten solujen pieneen saantoon kloonauksen jälkeen. Tämä on tehtävä, koska esimerkiksi GM 1500 ei tuota suurtuotantosoluja.
10 SPAZ-4-soluista tunnistetaan neljä positiivista kloonia, SP-2:sta yksi, joka ei kuitenkaan ollut hybridi vaan pikemminkin itsestään syntynyt EB-viruksen transformoima solu. GM 1500:sta ei kehity tuottavaa solua.
Fuusiotulokset on koottu seuraavaan taulukkoon.
15 Päivä GM1500_SPAZ-4_SP-2_
Vilje- pos.vil- Vilje- pos.vil- Vilje- pos. vil-lyjä jelyjä lyjä jelyjä lyjä jelyjä yhdis- yhdis- yhdis- _tetty_ tetty_tetty_ 20 3 528 0 528 0 176 0 7 528 0 352 2 176 0 10 528 0 528 1 176 0 14 528 0 528 0 354 Is 17 528 0 528 1 176 0 25 Summa 2640 0 2464 4 1056 1
Sltsestään syntynyt EBV-solu.
Näitä viittä positiivista solulinjaa kloonataan 30 uudelleen useita kertoja ja kasvatetaan suuressa mittakaavassa. Tästä on seurauksena EBV-linjan kuolema (on hyvin tunnettua, että tällaiset solupesäkkeet eivät jää eloon pientiheys-kloonauksessa).
Neljä positiivista SPAZ-4-hybridooma-solulinjaa 35 tunnistettiin C15:ksi, C28:ksi, C29:ksi ja C75:ksi.
is 83538
Esimerkki 4
Influenssan vastaisen hybridooman tuottaminen (in vitro-immunisoinnin jälkeen)_
Ihmisen pernasoluja siirrostetaan määrässä 106/ml 5 2 ml:n tasaosissa Falcon 2051 putkissa; yhteensä käyte tään 34 x 106 solua. Optimaalinen määrä sakkaroositiheys-gradientilla puhdistettua A/Bangkok-virusta lisätään ja viljelyjä pidetään RPMI 1640 elatusaineessa, jossa on 5 % ihmisen lämpöinaktivoitua plasmaa, 101 tuntia 37°C;ssa at-10 mosfäärissä, jossa on 5 % C02 ilmassa. Talteenotetut 9 x 106 solua yhdistetään samaan lukumäärään SPAZ-4 soluja kuten esimerkissä 3 selostettiin. Solut siirrostetaan 176 viljelyyn ja kasvatetaan Dulbecco'n MEMrssä, joka sisältää 20 % vasikan sikiöseerumia, HAT ja 1 pg/ml syklosporiini 15 Aita. 2 päivän kuluttua HAT-elatusaine syrjäytetään vähitellen HT-elatusaineella ja vaihdetaan sen jälkeen 4-5 päivän välein. Viljelmät seulotaan influenssan vastaisten vasta-aineiden suhteen päivinä 12 ja 19 yhdistämisen jälkeen ja positiiviset viljelyt kloonataan. Saadaan positii-20 vinen klooni (tunnistettu B2:ksi), joka pystyy kasvuun laajassa mittakaavassa ja jota voidaan käyttää "kemiallisten" määrien puhdasta vasta-ainetta in vitro-valmistuk-seen.
Esimerkki 5 25 Ihmisen influenssan vastaisten monoklonaalisten vasta-aineiden luonnehdinta_ a) Vasta-aine/C 15
Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on kappakevyt-ketju. Vasta-aine reagoi kaikkiin testattuihin influenssa 30 A-typin (HINi H2N2, H3N2) viruksille, se kohdistuu todennäköisimmin viruksen nukleoproteiinia vastaan. Tällä vasta-aineella ei ole neutraloivaa vaikutusta in vitro eikä suojaavaa vaikutusta in vivo.
b) Vasta-aine/C 28 35 Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on lambdake- vytketju. Vasta-aine reagoi ainoastaan H3N2-tyyppiselle i6 83538 influenssavirukselle, se kohdistuu todennäköisimmin viruksen hemagglutiniinia vastaan. Vasta-aineella on voimakas neutraloiva vaikutus in vitro ja dramaattinen suojaava vaikutus in vivo. Se voi neutraloida kaikki testatut H3N2 5 virukset, ts. virukset 1968:sta, 1969:stä, 1973:sta, 1974:stä, 1975:stä, 1977:stä, 1979:stä ja 1980:stä.
Testattuna 1973 A/Port Chalmers:11a MDCK-soluilla havaitaan vasta-aine-valmisteella, joka sisältää 1,5 mg/ml puhdasta vasta-ainetta, olevan neutraloiva tiitteri 10 = 12 800. Samassa kokeessa havaitaan ihmis-immunoglobulii- nin standardivalmisteella (Sandoglobulin) väkevyydessä 60 mg/ml olevan neutralointi-tiitteri = 50. Tämä tarkoittaa, että monoklonaalisella vasta-aineella C 28 samanarvoisella proteiinitasolla on teho, joka on 10 240 kertaa suurempi 15 kuin normaalilla immunoglobuliinilla. Tässä yhteydessä on sopiva korostaa sitä, että influenssan vastainen vasta-aine on yksi pääkomponenteista normaalissa immunoglobulii-ni-valmisteessa, mikä tarkoittaa, että vasta-aineet, joilla on sama neutraloimisteho kuin C 28:11a mutta jotka ovat 20 suunnatut esim. cytomegalo-virusta tai varicella-zoster-virusta vastaan, jossa vasta-ainetaso normaaleissa immuno-globuliini-valmisteissa on melko pieni, suhteellinen teho saattaa saavuttaa paljon suurempia arvoja.
c) Vasta-aine/C 29 25 Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on lambdake- vytketju. Vasta-aine reagoi influenssa tyyppi B/Singapo-relle, sitä ei ole testattu mitään muuta tyypin B virusta vastaan. Sillä ei ole vaikutusta tyypin A virusta vastaan.
d) Vasta-aine/C 75 30 Vasta-aine on IgG 3-luokkaa ja sillä on kappakevyt- ketju. Vasta-aine reagoi ainoastaan H3N2-tyyppisille viruksille, se on todennäköisimmin suunnattu viruksen hemagglutiniinia vastaan. Sillä ei ole neutraloivaa vaikutusta in vitro eikä suojaavaa vaikutusta in vivo.
i7 83538 e) Vasta-aine/B 2
Vasta-aine on IgG 1-luokkaa ja sillä on kappakevyt-ketju. Se reagoi ainoastaan H3N2-tyyppisille viruksille ja on todennäköisimmin suuntautunut viruksen hemagglutiniinia 5 vastaan. Vasta-aineella ei ole neutraloivaa vaikutusta in vitro, sitä ei ole testattu in vivo-suojauksen suhteen. Taulukko 1
Solu Päivä Immunoglobuliini kappa lambda 10 % % % _4_7_4 7 4 7 SPAZ-4 4 83 28 SP/2 4 55 3 SPAZ-4 5 67 25 88 46 15 SP/2 5 39 13 61 17 SPAZ-4 6 36 9 SP/2 6 25 2
Claims (2)
1. Menetelmä hybridoomasolulinjan tuottamiseksi, joka solullnja käsittää kuolemattomaksi tekevän jyrsijän 5 myeloomasolun yhdistettynä kädellisistä peräisin olevaan Imusoluun, joka tuottaa vasta-ainetta, tunnettu siitä, että muodostetaan vierasgeeninen hybridoomasolu, joka on menettänyt kykynsä muodostaa tai on muuten kykenemätön muodostamaan vasta-ainetta, ja että hybridoomasolu 10 fuusioidaan vasta-ainetta tuottavaan imusoluun, joka on geneettisesti yhteensopiva vierasgeenisen hybridooman ei-myelooma-osapuolen kanssa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että imusolu esiherkistetään. is 83538
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH409/82A CH652145A5 (de) | 1982-01-22 | 1982-01-22 | Verfahren zur in vitro-herstellung von hybridomen welche humane monoklonale antikoerper erzeugen. |
| CH40982 | 1982-01-22 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI830190A0 FI830190A0 (fi) | 1983-01-20 |
| FI830190L FI830190L (fi) | 1983-07-23 |
| FI83538B true FI83538B (fi) | 1991-04-15 |
| FI83538C FI83538C (fi) | 1991-07-25 |
Family
ID=4186382
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI830190A FI83538C (fi) | 1982-01-22 | 1983-01-20 | Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4634664A (fi) |
| JP (3) | JPS58128323A (fi) |
| AT (1) | AT388932B (fi) |
| CH (1) | CH652145A5 (fi) |
| CY (1) | CY1488A (fi) |
| DE (1) | DE3301249A1 (fi) |
| DK (1) | DK23183A (fi) |
| FI (1) | FI83538C (fi) |
| FR (1) | FR2522679B1 (fi) |
| GB (1) | GB2113715B (fi) |
| HK (1) | HK52589A (fi) |
| IL (1) | IL67721A (fi) |
| IT (1) | IT1160468B (fi) |
| KE (1) | KE3884A (fi) |
| MY (1) | MY8700169A (fi) |
| SE (1) | SE502344C2 (fi) |
| SG (1) | SG28189G (fi) |
Families Citing this family (171)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1247538A (en) * | 1982-05-21 | 1988-12-28 | Mark C. Glassy | Human-human hybridomas for solid tumors |
| US4613576A (en) * | 1983-03-09 | 1986-09-23 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Human monoclonal antibodies to cancer cells |
| US4634666A (en) * | 1984-01-06 | 1987-01-06 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Human-murine hybridoma fusion partner |
| EP0148644A3 (en) * | 1984-01-06 | 1987-06-03 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | A novel fusion partner and its products |
| US4764465A (en) * | 1984-04-26 | 1988-08-16 | Cetus Corporation | Human monoclonal antibody against group A red blood cells |
| JPS6187630A (ja) * | 1984-10-08 | 1986-05-06 | Teijin Ltd | 単純ヘルペスウイルスに対するヒトモノクロ−ナル抗体及びその製造法 |
| US4950595A (en) * | 1984-09-28 | 1990-08-21 | Teijin Limited | Mouse-human hybridoma which produces antivirus-human antibody, process for preparation thereof, and antivirus-human monoclonal antibody |
| US4693975A (en) * | 1984-11-20 | 1987-09-15 | The Wistar Institute | Human hybridroma fusion partner for production of human monoclonal antibodies |
| JPS61155398A (ja) * | 1984-12-28 | 1986-07-15 | Teijin Ltd | 抗緑膿菌ヒトモノクロ−ナル抗体及びその製造法並びにそれを有効成分とする治療剤 |
| USH1198H (en) | 1985-04-26 | 1993-06-01 | Cetus Corporation | Pseudomonas aeruginosa type-specific human monoclonal antibodies, their preparation and use |
| US4677070A (en) * | 1985-04-26 | 1987-06-30 | Cetus Corporation | Pseudomonas aeruginosa exotoxin A antibodies, their preparation and use |
| CH670098B (fi) * | 1985-05-23 | 1989-05-12 | ||
| JPH0720885B2 (ja) * | 1985-09-27 | 1995-03-08 | 帝人株式会社 | 単純ヘルペスウイルス感染症の予防又は治療剤 |
| NZ218499A (en) * | 1985-12-10 | 1990-04-26 | Genetic Systems Corp | Monoclonal antibodies against pseudomonas aeruginosa, pharmaceutical compositions and detection methods |
| EP0262211A1 (en) * | 1986-04-01 | 1988-04-06 | Genelabs, Incorporated | Immortalized cells which produce tissue-specific products |
| WO1987005930A1 (en) * | 1986-04-01 | 1987-10-08 | Genelabs Incorporated | Immortalized virus-specific tissue cells |
| US5565354A (en) * | 1986-09-05 | 1996-10-15 | Sandoz Ltd. | Production of human monoclonal antibodies specific for hepatitis B surface antigen |
| US5646041A (en) * | 1987-02-12 | 1997-07-08 | Harfeldt; Elisabeth | Monoclonal antibody to herpes simplex virus and cell line producing same |
| US5001065A (en) * | 1987-05-27 | 1991-03-19 | Cetus Corporation | Human cell line and triomas, antibodies, and transformants derived therefrom |
| JPH01101896A (ja) * | 1987-10-14 | 1989-04-19 | Teijin Ltd | カンジダに対するヒト・モノクローナル抗体とその製造法 |
| US5215913A (en) | 1987-11-30 | 1993-06-01 | Roger Williams General Hospital | IgG-1 human monoclonal antibody reactive with an HIV-1 antigen and methods of use |
| IT1226477B (it) * | 1988-07-04 | 1991-01-16 | Genetik Mab S R L | Linee cellulari n omas quale un mezzo per immortalare cellule produttrici di sostanze di qualunque specie animale. |
| US7041871B1 (en) | 1995-10-10 | 2006-05-09 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| US5770429A (en) * | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| JP2535455B2 (ja) * | 1991-02-07 | 1996-09-18 | 帝人株式会社 | サイトメガロウイルスに対するヒト・モノクロ―ナル抗体を産生するハイブリド―マ |
| ES2199216T3 (es) * | 1991-07-15 | 2004-02-16 | The Wellcome Foundation Limited | Produccion de anticuerpos. |
| JPH05276984A (ja) * | 1991-09-05 | 1993-10-26 | Teijin Ltd | カンジダに対するヒト・モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ |
| JPH05260961A (ja) * | 1992-05-21 | 1993-10-12 | Teijin Ltd | サイトメガロウイルスに対するヒト・モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ |
| ATE191006T1 (de) * | 1992-06-26 | 2000-04-15 | Aetsrn | Menschliche monoklonale antikörper gegen rhesus d und zellinien die diese produzieren |
| EP0583980A1 (en) * | 1992-08-20 | 1994-02-23 | Eli Lilly And Company | Method for generating monoclonal antibodies from rabbits |
| WO1994011495A1 (en) * | 1992-11-06 | 1994-05-26 | Sandoz, Ltd. | Production of human monoclonal antibodies active against hepatitis b surface antigen |
| US5750106A (en) * | 1993-01-28 | 1998-05-12 | Novartis Ag | Human monoclonal antibodies to cytomegalovirus |
| US6046310A (en) * | 1996-03-13 | 2000-04-04 | Protein Design Labs., Inc. | FAS ligand fusion proteins and their uses |
| AU737406B2 (en) | 1997-02-07 | 2001-08-16 | Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The | Activity dependent neurotrophic factor III (ADNF III) |
| US7179892B2 (en) | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US7964192B1 (en) | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
| US6197582B1 (en) | 1998-03-18 | 2001-03-06 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Development of human monoclonal antibodies and uses thereof |
| UA81216C2 (en) | 1999-06-01 | 2007-12-25 | Prevention and treatment of amyloid disease | |
| WO2001032712A2 (en) * | 1999-11-03 | 2001-05-10 | Maxygen, Inc. | Antibody diversity generation |
| US7060802B1 (en) * | 2000-09-18 | 2006-06-13 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Tumor-associated marker |
| PE20020574A1 (es) | 2000-12-06 | 2002-07-02 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta |
| DK1456360T3 (en) | 2001-04-19 | 2015-08-31 | Scripps Research Inst | Methods and Composition for Preparation of Orthogonal TRNA-Aminoacyl-TRNA Synthetase Pairs |
| US7084257B2 (en) * | 2001-10-05 | 2006-08-01 | Amgen Inc. | Fully human antibody Fab fragments with human interferon-gamma neutralizing activity |
| WO2003030831A2 (en) * | 2001-10-11 | 2003-04-17 | Protein Design Labs, Inc. | Treatment of prostate cancer by inhibitors of atp synthase |
| CA2492883C (en) | 2002-08-01 | 2012-10-02 | James D. Marks | Therapeutic monoclonal antibodies that neutralize botulinum neurotoxins |
| TW200509968A (en) | 2002-11-01 | 2005-03-16 | Elan Pharm Inc | Prevention and treatment of synucleinopathic disease |
| US8506959B2 (en) | 2002-11-01 | 2013-08-13 | Neotope Biosciences Limited | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
| US7321065B2 (en) * | 2003-04-18 | 2008-01-22 | The Regents Of The University Of California | Thyronamine derivatives and analogs and methods of use thereof |
| US20050025763A1 (en) | 2003-05-08 | 2005-02-03 | Protein Design Laboratories, Inc. | Therapeutic use of anti-CS1 antibodies |
| US7709610B2 (en) | 2003-05-08 | 2010-05-04 | Facet Biotech Corporation | Therapeutic use of anti-CS1 antibodies |
| US7358331B2 (en) | 2003-05-19 | 2008-04-15 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Truncated fragments of alpha-synuclein in Lewy body disease |
| CA2526900C (en) | 2003-05-19 | 2015-11-24 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Truncated fragments of alpha-synuclein in lewy body disease |
| US7566458B2 (en) | 2003-06-16 | 2009-07-28 | Medimmune, Llc | Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants |
| EP2378288B1 (en) | 2003-06-18 | 2015-09-09 | The Scripps Research Institute | Unnatural reactive amino acid genetic code additions |
| CA2568015C (en) | 2004-05-25 | 2013-08-27 | Medimmune Vaccines, Inc. | Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants |
| US7973134B2 (en) * | 2004-07-07 | 2011-07-05 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in anaplastic large cell lymphoma signaling pathways |
| MX2007001679A (es) | 2004-08-09 | 2007-05-23 | Elan Pharm Inc | Prevencion y tratamiento de la enfermedad sinucleinopatica y amiloidogenica. |
| US7935790B2 (en) * | 2004-10-04 | 2011-05-03 | Cell Singaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in T-cell receptor signaling pathways |
| US7807789B2 (en) * | 2004-12-21 | 2010-10-05 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in EGFR-signaling pathways |
| JP2008528060A (ja) | 2005-01-27 | 2008-07-31 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア | ボツリヌス神経毒素を中和する治療的モノクローナル抗体 |
| EP2682126B1 (en) | 2005-01-27 | 2016-11-23 | Children's Hospital & Research Center at Oakland | GNA1870-based vesicle vaccines for broad spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis |
| ES2527503T3 (es) | 2005-03-08 | 2015-01-26 | Medimmune, Llc | Virus influenza reordenantes |
| US20090099340A1 (en) * | 2007-10-12 | 2009-04-16 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways |
| EP2216653A1 (en) * | 2005-08-02 | 2010-08-11 | XBiotech, Inc | Diagnosis, treatment and prevention of vascular disorders using il-1alpha autoantibodies |
| WO2007027906A2 (en) * | 2005-08-31 | 2007-03-08 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in leukemia signaling pathways |
| US20100151495A9 (en) * | 2005-08-31 | 2010-06-17 | Cell Signaling Technolgy, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways |
| DOP2006000277A (es) | 2005-12-12 | 2007-08-31 | Bayer Pharmaceuticals Corp | Anticuerpos anti mn y métodos para su utilización |
| JP5514539B2 (ja) | 2006-03-31 | 2014-06-04 | メダレックス・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | ヒト抗体の調製に用いるためのキメラ抗体を発現するトランスジェニック動物 |
| WO2007119808A1 (ja) | 2006-04-13 | 2007-10-25 | Medical And Biological Laboratories Co., Ltd. | 融合パートナー細胞 |
| US20090298093A1 (en) * | 2006-04-27 | 2009-12-03 | Roberto Polakiewicz | Reagents for the Detection of Protein Phosphorylation in ATM & ATR Kinase Signaling Pathways |
| US20110008282A1 (en) * | 2006-05-15 | 2011-01-13 | Xbiotech, Inc. | IL-1alpha immunization induces autoantibodies protective against atherosclerosis |
| SI2109623T1 (sl) * | 2006-05-22 | 2012-05-31 | Xbiotech Inc | Zdravljenje raka z anti il protitelesi |
| AU2007275654A1 (en) | 2006-07-19 | 2008-01-24 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | WSX-1/p28 as a target for anti-inflammatory responses |
| US7939636B2 (en) * | 2006-08-11 | 2011-05-10 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in c-Src signaling pathways |
| US20090258442A1 (en) * | 2006-08-31 | 2009-10-15 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways |
| US8080645B2 (en) | 2007-10-01 | 2011-12-20 | Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc | Biological specimen collection/transport compositions and methods |
| US9598462B2 (en) | 2012-01-26 | 2017-03-21 | Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc | Composite antigenic sequences and vaccines |
| US8652782B2 (en) | 2006-09-12 | 2014-02-18 | Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc | Compositions and methods for detecting, identifying and quantitating mycobacterial-specific nucleic acids |
| US9481912B2 (en) | 2006-09-12 | 2016-11-01 | Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc | Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples |
| US8097419B2 (en) | 2006-09-12 | 2012-01-17 | Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc | Compositions and method for rapid, real-time detection of influenza A virus (H1N1) swine 2009 |
| US8440185B2 (en) * | 2006-12-26 | 2013-05-14 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for the treatment of immunologic disorders |
| US20090142342A1 (en) * | 2006-12-27 | 2009-06-04 | Johns Hopkins University | B7-h4 receptor agonist compositions and methods for treating inflammation and auto-immune diseases |
| US7989173B2 (en) | 2006-12-27 | 2011-08-02 | The Johns Hopkins University | Detection and diagnosis of inflammatory disorders |
| EP2109455A2 (en) * | 2006-12-27 | 2009-10-21 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for stimulating an immune response |
| EP2118300B1 (en) | 2007-02-23 | 2015-05-27 | Prothena Biosciences Limited | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
| HUE028731T2 (en) | 2007-02-23 | 2016-12-28 | Prothena Biosciences Ltd | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic diseases |
| US20090081659A1 (en) | 2007-03-07 | 2009-03-26 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in carcinoma signaling pathways |
| EP1975184A3 (en) | 2007-03-26 | 2008-11-26 | Cell Signaling Technology, Inc. | Serine or threonine phosphorylation sites |
| US20080238709A1 (en) * | 2007-03-28 | 2008-10-02 | Faramarz Vaziri | One-way communication apparatus with dynamic key generation |
| EP1983002A3 (en) | 2007-04-19 | 2009-03-11 | Peter Hornbeck | Tyrosine phosphorylation sites and antibodies specific for them |
| US7977462B2 (en) | 2007-04-19 | 2011-07-12 | Cell Signaling Technology, Inc. | Tyrosine phosphorylation sites |
| EP1983003A3 (en) | 2007-04-19 | 2009-03-11 | Peter Hornbeck | Tyrosine phosphorylation sites and antibodies specific for them |
| US20090053831A1 (en) | 2007-05-01 | 2009-02-26 | Cell Signaling Technology, Inc. | Tyrosine phosphorylation sites |
| WO2009020923A1 (en) | 2007-08-03 | 2009-02-12 | Musc Foundation For Research Development | Human monoclonal antibodies and methods for producing the same |
| US9624309B2 (en) | 2007-08-15 | 2017-04-18 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Monospecific and multispecific antibodies and method of use |
| US11041215B2 (en) | 2007-08-24 | 2021-06-22 | Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc | PCR ready compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences |
| US9683256B2 (en) | 2007-10-01 | 2017-06-20 | Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc | Biological specimen collection and transport system |
| WO2009029686A1 (en) | 2007-08-27 | 2009-03-05 | Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc | Immunogenic compositions and methods |
| US10004799B2 (en) | 2007-08-27 | 2018-06-26 | Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc | Composite antigenic sequences and vaccines |
| AU2008343745B2 (en) | 2007-10-01 | 2012-05-10 | Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc | Biological specimen collection and transport system and methods of use |
| US11041216B2 (en) | 2007-10-01 | 2021-06-22 | Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc | Compositions and methods for detecting and quantifying nucleic acid sequences in blood samples |
| WO2009044213A1 (en) | 2007-10-05 | 2009-04-09 | National Institute For Bioprocessing Research And Training | Glycosylation markers for pancreatitis, sepsis and pancreatic cancer |
| EP2062920A3 (en) | 2007-11-21 | 2009-06-17 | Peter Hornbeck | Protein phosphorylation by basophilic serine/threonine kinases in insulin signalling pathways |
| US20090169549A1 (en) * | 2007-12-19 | 2009-07-02 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Conformational isomers of alpha-synuclein, antibodies thereto and methods of their manufacture and use |
| US20090220991A1 (en) * | 2008-02-29 | 2009-09-03 | Cell Signaling Technology, Inc. | Reagents for the detection of protein phosphorylation in leukemia signaling pathways |
| EP2274437B1 (en) | 2008-04-10 | 2015-12-23 | Cell Signaling Technology, Inc. | Compositions and methods for detecting egfr mutations in cancer |
| WO2009148575A1 (en) * | 2008-05-30 | 2009-12-10 | Xbiotech, Inc. | Interleukin-1 alpha abs and methods of use |
| US20110129816A1 (en) * | 2008-06-06 | 2011-06-02 | National University Corporation University Of Toyama | Device for detection of influenza virus |
| WO2010006144A2 (en) | 2008-07-11 | 2010-01-14 | Medlmmune, Llc. | Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants |
| JP5976319B2 (ja) * | 2008-09-12 | 2016-08-23 | エックスバイオテク，インコーポレイテッドＸｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ． | 病原性単球の標的化 |
| US20100260752A1 (en) | 2009-01-23 | 2010-10-14 | Biosynexus Incorporated | Opsonic and protective antibodies specific for lipoteichoic acid of gram positive bacteria |
| RU2535970C2 (ru) | 2009-02-12 | 2014-12-20 | МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи | Варианты гемагглютинина и нейраминидазы гриппа |
| US9309325B2 (en) | 2009-05-07 | 2016-04-12 | The Regents Of The University Of California | Antibodies and methods of use thereof |
| IN2012DN02753A (fi) | 2009-08-31 | 2015-09-18 | Amplimmune Inc | |
| WO2011075185A1 (en) | 2009-12-18 | 2011-06-23 | Oligasis | Targeted drug phosphorylcholine polymer conjugates |
| EP2582391B1 (en) | 2010-06-18 | 2018-10-03 | XBiotech, Inc | Arthritis treatment |
| DK2608808T3 (en) | 2010-08-23 | 2017-04-24 | Xbiotech Inc | TREATMENT OF NEOPLASTIC DISEASES |
| US9228026B2 (en) | 2010-12-06 | 2016-01-05 | Seattle Genetics, Inc. | Humanized antibodies to LIV-1 and use of same to treat cancer |
| ES2697056T3 (es) | 2011-04-01 | 2019-01-21 | Xbiotech Inc | Tratamiento para patologías dermatológicas |
| US9724409B2 (en) | 2011-04-01 | 2017-08-08 | Xbiotech, Inc. | Treatment of inflammatory skin disease |
| KR102039198B1 (ko) | 2011-09-23 | 2019-10-31 | 엑스바이오테크, 인크. | 악액질 치료법 |
| US20130309223A1 (en) | 2012-05-18 | 2013-11-21 | Seattle Genetics, Inc. | CD33 Antibodies And Use Of Same To Treat Cancer |
| UA105278C2 (ru) | 2012-09-06 | 2014-04-25 | Інститут Біології Клітини Нан України | Способ получения каталитически активных антител (абзимов) с сиалидазной активностью |
| US9545441B2 (en) | 2012-09-18 | 2017-01-17 | Xbiotech, Inc. | Treatment of diabetes |
| CN104684929A (zh) | 2012-10-04 | 2015-06-03 | 埃克斯生物科技公司 | 治疗血管疾病及其并发症 |
| UA118441C2 (uk) | 2012-10-08 | 2019-01-25 | Протена Біосаєнсиз Лімітед | Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн |
| AU2014248515B2 (en) | 2013-03-13 | 2019-03-07 | Prothena Biosciences Limited | Tau immunotherapy |
| EP3708189B1 (en) | 2013-07-05 | 2023-11-29 | University of Washington through its Center for Commercialization | Soluble mic neutralizing monoclonal antibody for treating cancer |
| US9951131B2 (en) | 2013-07-12 | 2018-04-24 | Prothena Biosciences Limited | Antibodies that recognize IAPP |
| US9850302B2 (en) | 2013-07-12 | 2017-12-26 | Prothena Biosciences Limited | Antibodies that recognize IAPP |
| SI3041513T1 (sl) | 2013-09-08 | 2020-11-30 | Kodiak Sciences Inc. | Zwitterionski polimerni konjugati faktorja VIII |
| US20170158755A1 (en) | 2014-03-12 | 2017-06-08 | Prothena Biosciences Limited | Anti-laminin4 antibodies specific for lg1-3 |
| US10407506B2 (en) | 2014-03-12 | 2019-09-10 | Prothena Biosciences Limited | Anti-MCAM antibodies and associated methods of use |
| TW201623331A (zh) | 2014-03-12 | 2016-07-01 | 普羅帝納生物科學公司 | 抗黑色素瘤細胞黏著分子（ｍｃａｍ）抗體類及使用彼等之相關方法 |
| WO2015136472A1 (en) | 2014-03-12 | 2015-09-17 | Prothena Biosciences Limited | Anti-laminin4 antibodies specific for lg4-5 |
| CA2944402A1 (en) | 2014-04-08 | 2015-10-15 | Prothena Biosciences Limited | Blood-brain barrier shuttles containing antibodies recognizing alpha-synuclein |
| US9840553B2 (en) | 2014-06-28 | 2017-12-12 | Kodiak Sciences Inc. | Dual PDGF/VEGF antagonists |
| US20160075772A1 (en) | 2014-09-12 | 2016-03-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva |
| EP3207128B1 (en) | 2014-10-17 | 2022-07-27 | Kodiak Sciences Inc. | Butyrylcholinesterase zwitterionic polymer conjugates |
| TWI718121B (zh) | 2015-01-28 | 2021-02-11 | 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 | 抗甲狀腺素運送蛋白抗體 |
| TWI711631B (zh) | 2015-01-28 | 2020-12-01 | 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 | 抗甲狀腺素運送蛋白抗體 |
| TWI718122B (zh) | 2015-01-28 | 2021-02-11 | 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 | 抗甲狀腺素運送蛋白抗體 |
| KR20170140318A (ko) | 2015-04-29 | 2017-12-20 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 진행성 골화성 섬유이형성증의 치료 |
| CA2985652C (en) | 2015-05-14 | 2020-03-10 | Gerald W. FISHER | Rapid methods for the extraction of nucleic acids from biological samples |
| WO2017046774A2 (en) | 2015-09-16 | 2017-03-23 | Prothena Biosciences Limited | Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of giant cell arteritis, polymyalgia rheumatica or takayasu's arteritis |
| WO2017046776A2 (en) | 2015-09-16 | 2017-03-23 | Prothena Biosciences Limited | Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of giant cell arteritis, polymyalgia rheumatica or takayasu's arteritis |
| AU2016381964B2 (en) | 2015-12-30 | 2024-02-15 | Kodiak Sciences Inc. | Antibodies and conjugates thereof |
| WO2017149513A1 (en) | 2016-03-03 | 2017-09-08 | Prothena Biosciences Limited | Anti-mcam antibodies and associated methods of use |
| MY191649A (en) | 2016-03-04 | 2022-07-05 | Jn Biosciences Llc | Antibodies to tigit |
| WO2017153955A1 (en) | 2016-03-09 | 2017-09-14 | Prothena Biosciences Limited | Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases |
| WO2017153953A1 (en) | 2016-03-09 | 2017-09-14 | Prothena Biosciences Limited | Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases |
| JP7481726B2 (ja) | 2016-05-02 | 2024-05-13 | プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド | タウ認識抗体 |
| CA3022765A1 (en) | 2016-05-02 | 2017-11-09 | Prothena Biosciences Limited | Antibodies recognizing tau |
| WO2017208210A1 (en) | 2016-06-03 | 2017-12-07 | Prothena Biosciences Limited | Anti-mcam antibodies and associated methods of use |
| EP3478715A2 (en) | 2016-07-02 | 2019-05-08 | Prothena Biosciences Limited | Anti-transthyretin antibodies |
| EP3478714A2 (en) | 2016-07-02 | 2019-05-08 | Prothena Biosciences Limited | Anti-transthyretin antibodies |
| WO2018007924A2 (en) | 2016-07-02 | 2018-01-11 | Prothena Biosciences Limited | Anti-transthyretin antibodies |
| US20190227082A1 (en) | 2016-07-06 | 2019-07-25 | Prothena Biosciences Limited | Assay for detecting total and s129 phosphorylated alpha-synuclein |
| MX2019009798A (es) | 2017-02-16 | 2020-01-30 | Xbiotech Inc | Tratamiento de la hidradenitis supurativa. |
| AU2018250695A1 (en) | 2017-04-14 | 2019-11-07 | Kodiak Sciences Inc. | Complement factor D antagonist antibodies and conjugates thereof |
| KR20200030029A (ko) | 2017-05-02 | 2020-03-19 | 프로테나 바이오사이언시즈 리미티드 | 타우 인식 항체 |
| US11464845B2 (en) | 2017-07-21 | 2022-10-11 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Neisseria meningitidis immunogenic compositions |
| CA3081152A1 (en) | 2017-11-02 | 2019-05-09 | Bayer Aktiengesellschaft | Bispecific antibodies binding alk-1 and bmpr-2 |
| US20220023348A1 (en) | 2018-11-28 | 2022-01-27 | Forty Seven, Inc. | Genetically modified hspcs resistant to ablation regime |
| TW202045206A (zh) | 2019-02-27 | 2020-12-16 | 美商健生生物科技公司 | 抗體調配物 |
| TW202100550A (zh) | 2019-03-03 | 2021-01-01 | 愛爾蘭商普羅帝納生物科學公司 | 識別ｔａｕ之抗體 |
| EP4041312A4 (en) | 2019-10-10 | 2023-12-20 | Kodiak Sciences Inc. | METHOD FOR TREATING AN EYE DISORDER |
| BR112022013589A2 (pt) | 2020-01-08 | 2022-09-13 | Regeneron Pharma | Tratamento da fibrodisplasia ossificante progressiva |
| WO2021211924A1 (en) | 2020-04-16 | 2021-10-21 | Janssen Biotech, Inc. | Treatment of atopic dermatitis |
| BR112022024221A2 (pt) | 2020-06-02 | 2022-12-20 | Arcus Biosciences Inc | Anticorpos para tigit |
| US20240108766A1 (en) | 2021-01-22 | 2024-04-04 | Bayer Aktiengesellschaft | Lrrc15 antibodies and conjugates thereof |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2757169A1 (de) * | 1977-12-22 | 1979-07-05 | Hoechst Ag | Verfahren zur gewinnung insulin produzierender tierischer zellen |
| ZA806506B (en) * | 1979-11-01 | 1981-09-30 | Bio Response Inc | A method for production of monoclonal antibodies |
| GB2079313A (en) * | 1980-07-07 | 1982-01-20 | Nat Res Dev | Improvements in or relating to rat myeloma cell lines |
| EP0043718B1 (en) * | 1980-07-07 | 1984-11-28 | National Research Development Corporation | Improvements in or relating to cell lines |
| JPS57502090A (fi) * | 1980-07-18 | 1982-11-25 | ||
| JPS586475B2 (ja) * | 1980-08-23 | 1983-02-04 | 株式会社 林原生物化学研究所 | ヒト絨毛性性腺刺激ホルモンの製造方法 |
| JPS6045849B2 (ja) * | 1980-08-25 | 1985-10-12 | 林原 健 | ヒトエリトロポエチンの製造方法 |
| JPS5743696A (en) * | 1980-08-27 | 1982-03-11 | Hayashibara Biochem Lab Inc | Preparation of human luteinizing hormone |
| JPS585671B2 (ja) * | 1980-08-27 | 1983-02-01 | 株式会社 林原生物化学研究所 | ヒト卵胞刺激ホルモンの製造方法 |
| US4474893A (en) * | 1981-07-01 | 1984-10-02 | The University of Texas System Cancer Center | Recombinant monoclonal antibodies |
| US4529694A (en) * | 1982-04-16 | 1985-07-16 | The Children's Medical Center Corporation | Cell fusion |
-
1982
- 1982-01-22 CH CH409/82A patent/CH652145A5/de not_active IP Right Cessation
-
1983
- 1983-01-15 DE DE19833301249 patent/DE3301249A1/de active Granted
- 1983-01-19 GB GB08301384A patent/GB2113715B/en not_active Expired
- 1983-01-20 FI FI830190A patent/FI83538C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-01-20 IL IL67721A patent/IL67721A/xx unknown
- 1983-01-20 FR FR8300850A patent/FR2522679B1/fr not_active Expired
- 1983-01-20 DK DK23183A patent/DK23183A/da not_active Application Discontinuation
- 1983-01-20 SE SE8300290A patent/SE502344C2/sv not_active IP Right Cessation
- 1983-01-20 US US06/459,731 patent/US4634664A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-01-21 JP JP58009241A patent/JPS58128323A/ja active Granted
- 1983-01-21 IT IT19234/83A patent/IT1160468B/it active
- 1983-01-21 AT AT0019583A patent/AT388932B/de not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-12-30 MY MY169/87A patent/MY8700169A/xx unknown
-
1989
- 1989-04-27 SG SG281/89A patent/SG28189G/en unknown
- 1989-05-16 KE KE3884A patent/KE3884A/xx unknown
- 1989-06-29 HK HK525/89A patent/HK52589A/xx not_active IP Right Cessation
- 1989-12-08 CY CY1488A patent/CY1488A/xx unknown
-
1990
- 1990-10-03 JP JP2267500A patent/JPH03236794A/ja active Granted
-
1991
- 1991-05-30 JP JP3157731A patent/JPH0789909B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK23183A (da) | 1983-07-23 |
| KE3884A (en) | 1989-08-11 |
| FR2522679A1 (fr) | 1983-09-09 |
| GB8301384D0 (en) | 1983-02-23 |
| IT8319234A0 (it) | 1983-01-21 |
| JPH0789909B2 (ja) | 1995-10-04 |
| SE502344C2 (sv) | 1995-10-09 |
| SE8300290L (sv) | 1983-07-23 |
| FI830190L (fi) | 1983-07-23 |
| JPH03236794A (ja) | 1991-10-22 |
| JPS58128323A (ja) | 1983-07-30 |
| GB2113715A (en) | 1983-08-10 |
| IL67721A0 (en) | 1983-05-15 |
| IT1160468B (it) | 1987-03-11 |
| HK52589A (en) | 1989-07-07 |
| DE3301249A1 (de) | 1983-09-22 |
| FI83538C (fi) | 1991-07-25 |
| GB2113715B (en) | 1986-06-04 |
| JPH0471520B2 (fi) | 1992-11-13 |
| AT388932B (de) | 1989-09-25 |
| MY8700169A (en) | 1987-12-31 |
| SE8300290D0 (sv) | 1983-01-20 |
| DE3301249C2 (fi) | 1990-04-05 |
| CY1488A (en) | 1989-12-08 |
| US4634664A (en) | 1987-01-06 |
| CH652145A5 (de) | 1985-10-31 |
| JPH0365148B2 (fi) | 1991-10-09 |
| FI830190A0 (fi) | 1983-01-20 |
| JPH0690753A (ja) | 1994-04-05 |
| FR2522679B1 (fr) | 1986-05-09 |
| DK23183D0 (da) | 1983-01-20 |
| IL67721A (en) | 1986-04-29 |
| ATA19583A (de) | 1989-02-15 |
| SG28189G (en) | 1989-08-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI83538B (fi) | Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. | |
| EP0014519B1 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
| US4594325A (en) | High fusion frequency fusible lymphoblastoid cell line | |
| CA1190873A (en) | Recombinant monoclonal antibodies | |
| US4451570A (en) | Immunoglobulin-secreting human hybridomas from a cultured human lymphoblastoid cell line | |
| CA1103157A (en) | Method of producing antibodies | |
| JPH05506573A (ja) | ＨＩＶ―１糖タンパクに反応性を有するＩｇＧ―１ヒトモノクローナル抗体およびその使用方法 | |
| JPH06113832A (ja) | ジゴキシンに対し高い親和性を有するモノクローナル抗体を産生するハイブリッドセルライン及びその製造法 | |
| US4752582A (en) | Monoclonal antibodies to human glycophorin A and cell lines for the production thereof | |
| EP0093775A1 (en) | Monoclonal antibodies against brugia malayi | |
| EP0157574B1 (en) | Antitetanic antibody producing human-human hybridoma and method of producing the same | |
| KR900007950B1 (ko) | 모노클로날 항체의 제조방법 | |
| Vetterlein | Monoclonal antibodies: production, purification, and technology | |
| EP0093776A1 (en) | Monoclonal antibodies against schistosoma | |
| Bhat et al. | Production of Monoclonal Antibody | |
| RU1801117C (ru) | Способ получения монокло- нального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jthfs-про- дуцентмоноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита чело- века, культивируемая клетка гибридомы jti-if3-f5 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека, культивируемая клетка гибридомы jti-id7 - про- дуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jt2-n15 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека | |
| RU2031117C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus - продуцент моноклональных антител к вирусу простого герпеса i типа | |
| GB2145113A (en) | Production of human monoclonal antibodies | |
| JPH04190798A (ja) | モノクローナル抗体 | |
| Chanu et al. | Heterohybridoma for the production of non murine monoclonal antibodies | |
| JPH0679553B2 (ja) | 新規な雑種細胞 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: NOVARTIS AG |
|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: NOVARTIS AG |