JPH0253458A - 食品 - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、歯周炎、歯槽膿漏やう蝕などの口腔疾患を予
防することができる口腔疾患予防食品に関する。
防することができる口腔疾患予防食品に関する。
来の び が しようとする
歯周炎、歯槽膿漏等の歯周病とう蝕とは口腔の2大疾患
といわれているが、これら口腔疾患の原因としては、例
えば前者の場合はバクテロイデス・ジンジバリス等、後
者の場合はストレプトコッカス・ミュータンス等の細菌
が口腔内に定着し、増殖していくことによるところが大
きいとされており、このため口腔疾患の予防にはこれら
細菌の口腔内への定着を抑制するのが有効である。
といわれているが、これら口腔疾患の原因としては、例
えば前者の場合はバクテロイデス・ジンジバリス等、後
者の場合はストレプトコッカス・ミュータンス等の細菌
が口腔内に定着し、増殖していくことによるところが大
きいとされており、このため口腔疾患の予防にはこれら
細菌の口腔内への定着を抑制するのが有効である。
従来、かかる観点から、バクテロイデス・ジンジバリス
等の歯周病原因菌やストレプトコッカス・ミュータンス
の全菌体又は菌体成分で咄乳動物を免疫することによっ
て得られる血中抗体又は乳中抗体を口腔用組成物或いは
食品中に配合し、上記細菌の口腔内への定着を抑制して
口腔疾患を予防することは知られている(特開昭60−
142915゜特開昭60−38327.特開昭60−
38329゜特開昭61−112028.特開昭61−
112029゜特開昭61−112030.特開昭61
−289024゜特開昭62−417.特開昭61−2
77632号公報)。
等の歯周病原因菌やストレプトコッカス・ミュータンス
の全菌体又は菌体成分で咄乳動物を免疫することによっ
て得られる血中抗体又は乳中抗体を口腔用組成物或いは
食品中に配合し、上記細菌の口腔内への定着を抑制して
口腔疾患を予防することは知られている(特開昭60−
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−289024゜特開昭62−417.特開昭61−2
77632号公報)。
しかし、食品を製造する場合の配合性等の点から更に口
腔内細菌の定着を有効に抑制し、歯周病やう蝕を防止し
得る有効成分の開発が望まれる。
腔内細菌の定着を有効に抑制し、歯周病やう蝕を防止し
得る有効成分の開発が望まれる。
するための び
本発明者らは、上記事情に鑑み、更に検討を続けた結果
、口腔内細菌、特にバクテロイデス・ジンジバリス、バ
クテロイデス・インテルメデイウス、ア′クチノマイセ
ス・ビスコ−サス、ヘモフィルス・アクチノミセテムコ
ミタンス、フシバクテリウム・ヌクレイタム、アイコネ
ラ・コロ−デンス、ストレプトコッカス・ミュータンス
、ストレプトコッカス・サンイス等の細菌の1種もしく
は2種以上の全菌体又は菌体成分を抗原とし、これで家
禽を免疫した場合、得られる卵の卵黄中に抗体が蓄積、
存在し、この卵黄を含む卵全体、卵黄、或いはこの卵黄
から分画される水溶性画分を食品原料として使用するこ
とにより、得られた食品を摂取した場合に上記細菌の口
腔内定着を効果的に抑制し得ることを知見し1本発明を
なすに至ったものである。
、口腔内細菌、特にバクテロイデス・ジンジバリス、バ
クテロイデス・インテルメデイウス、ア′クチノマイセ
ス・ビスコ−サス、ヘモフィルス・アクチノミセテムコ
ミタンス、フシバクテリウム・ヌクレイタム、アイコネ
ラ・コロ−デンス、ストレプトコッカス・ミュータンス
、ストレプトコッカス・サンイス等の細菌の1種もしく
は2種以上の全菌体又は菌体成分を抗原とし、これで家
禽を免疫した場合、得られる卵の卵黄中に抗体が蓄積、
存在し、この卵黄を含む卵全体、卵黄、或いはこの卵黄
から分画される水溶性画分を食品原料として使用するこ
とにより、得られた食品を摂取した場合に上記細菌の口
腔内定着を効果的に抑制し得ることを知見し1本発明を
なすに至ったものである。
以下、本発明につき更に詳しく説明する。
本発明に係る口腔疾患予防用食品は、バクテロイデス・
ジンジバリス、バクテロイデス・インテルメディウス、
アクチノマイセス・ビスコ−サス。
ジンジバリス、バクテロイデス・インテルメディウス、
アクチノマイセス・ビスコ−サス。
ヘモフィルス・アクチノミセテムコミタンス、フシバク
テリウム・スタレイタム、アイコネラ・コロ−デンス、
ストレプトコッカス・ミュータンス。
テリウム・スタレイタム、アイコネラ・コロ−デンス、
ストレプトコッカス・ミュータンス。
ストレプトコッカス・サンイス等の口腔内細菌の1種も
しくは2種以上の全菌体又は菌体成分を抗原とし、これ
で免疫した家禽から得られる卵、卵黄又は水溶性卵黄分
画物を原料とするものである。
しくは2種以上の全菌体又は菌体成分を抗原とし、これ
で免疫した家禽から得られる卵、卵黄又は水溶性卵黄分
画物を原料とするものである。
ここで、バクテロイデス・ジンジバリス、バクテロイデ
ス・インテルメデイウス、アクチノマイセス・ビスコ−
サス、ヘモフィルス・アクチノミセテムコミタンス、フ
シバクテリウム・ヌクレイタム、アイコネラ・コロ−デ
ンス等の全菌体は、バクテロイデス・ジンジバリス、バ
クテロイデス・インテルメディウスにおいては1例えば
ヘミン及びメナジオンを加えたl−ツドヘビソトブロー
スを培地としで使用し、その他の」菌はトリプテイケー
スソイブロースを培地として使用し、生育した菌を洗浄
した後、ホルマリン処理するなど、公知の方法にi(@
じて培養、前処理を行なったものが抗原として使用し得
る。また、これらの細菌の611体成分としては、その
線毛や莢膜が使用さ九るが、これら線毛抗原、莢膜抗原
は、公知の方法に準じて菌体から分断2分離したものを
用いることができる。
ス・インテルメデイウス、アクチノマイセス・ビスコ−
サス、ヘモフィルス・アクチノミセテムコミタンス、フ
シバクテリウム・ヌクレイタム、アイコネラ・コロ−デ
ンス等の全菌体は、バクテロイデス・ジンジバリス、バ
クテロイデス・インテルメディウスにおいては1例えば
ヘミン及びメナジオンを加えたl−ツドヘビソトブロー
スを培地としで使用し、その他の」菌はトリプテイケー
スソイブロースを培地として使用し、生育した菌を洗浄
した後、ホルマリン処理するなど、公知の方法にi(@
じて培養、前処理を行なったものが抗原として使用し得
る。また、これらの細菌の611体成分としては、その
線毛や莢膜が使用さ九るが、これら線毛抗原、莢膜抗原
は、公知の方法に準じて菌体から分断2分離したものを
用いることができる。
なお、これら細菌の菌株としては、いずれも公知のもの
を使用することができ、例えば微工研、アメリカン・タ
イプ・カルチャー・コレクション(ATCC)、ボスト
ンのフォーサイス・デンタル・センターなどから分与さ
れる菌株や、歯周病の病巣局所から分離した菌株などが
使用され得る。
を使用することができ、例えば微工研、アメリカン・タ
イプ・カルチャー・コレクション(ATCC)、ボスト
ンのフォーサイス・デンタル・センターなどから分与さ
れる菌株や、歯周病の病巣局所から分離した菌株などが
使用され得る。
一方、ストレプトコッカス・ミュータンス菌。
ストレプトコッカス・サンギス菌等は、例えばBHI培
地の透析外液を培地として使用し、生育した菌を洗浄後
ホルマリン処理するなど、公知の培養、前処理を行なっ
たものが使用し得る。この場合、ストレプトコッカス・
ミュータンス菌としては人の口腔内に多く存在する血清
型分類Cに居するものが好ましい。このようなストレプ
トコッカス・ミュータンス菌としてはNCTC104,
49゜Ingbritt、 OM Z 70 、 J
C−2等が挙げられる。
地の透析外液を培地として使用し、生育した菌を洗浄後
ホルマリン処理するなど、公知の培養、前処理を行なっ
たものが使用し得る。この場合、ストレプトコッカス・
ミュータンス菌としては人の口腔内に多く存在する血清
型分類Cに居するものが好ましい。このようなストレプ
トコッカス・ミュータンス菌としてはNCTC104,
49゜Ingbritt、 OM Z 70 、 J
C−2等が挙げられる。
また、ストレプトコッカス・サンギス菌としてはN C
,T C1055G 、 N CT C1055g及び
5SH−83,KIH−T等が挙げられる。
,T C1055G 、 N CT C1055g及び
5SH−83,KIH−T等が挙げられる。
これらストレプトコッカス・ミュータンス、ストレプト
コッカス・サンイス等の菌体成分としては、該菌の細胞
壁画分、該菌の線維状構造物1ilii分。
コッカス・サンイス等の菌体成分としては、該菌の細胞
壁画分、該菌の線維状構造物1ilii分。
該閑のグルコシルトランスフェレース(GTF)画分及
び該閑のプロティン抗原画分が挙げられる。
び該閑のプロティン抗原画分が挙げられる。
この場合、ストレプトコッカス・ミュータンス菌、スト
レプトコッカス 画分ブライワイス(BLcityeis)らの方法(J
. II;〕ctt□.rjo1. 。
レプトコッカス 画分ブライワイス(BLcityeis)らの方法(J
. II;〕ctt□.rjo1. 。
88、 1198−1200.1.964)に従い、
ブラウンの細胞破砕機を使用し、直径0.17〜Q.1
8nn+のガラスピーズを用いて破砕処理を行ない、得
られた細胞壁をトリプシンで処理して細胞壁に混在する
タンパク質を除去し、蒸留水で洗浄後凍結乾燥を行なう
という方法等により調製したものなどが使用できる。線
維状構造物画分はジエイ・ヴアン・ホーテ(J. Va
n Hoate)らの方法(Arch. Oral.
Bio.、よ旦, 1131−114.1。
ブラウンの細胞破砕機を使用し、直径0.17〜Q.1
8nn+のガラスピーズを用いて破砕処理を行ない、得
られた細胞壁をトリプシンで処理して細胞壁に混在する
タンパク質を除去し、蒸留水で洗浄後凍結乾燥を行なう
という方法等により調製したものなどが使用できる。線
維状構造物画分はジエイ・ヴアン・ホーテ(J. Va
n Hoate)らの方法(Arch. Oral.
Bio.、よ旦, 1131−114.1。
1 9 7 1)に従い、B H I透析培地に5%シ
ヨ糖を加え、嫌気的条件下で培養し、培養液の遠心分離
上清に3倍量のエタノールを加えて沈殿を集めるという
方法等により調製したものなどが使用できる。更に、G
TF画分は井」:らの方法(Microbial As
pects of der+tal caries V
ol、III 。
ヨ糖を加え、嫌気的条件下で培養し、培養液の遠心分離
上清に3倍量のエタノールを加えて沈殿を集めるという
方法等により調製したものなどが使用できる。更に、G
TF画分は井」:らの方法(Microbial As
pects of der+tal caries V
ol、III 。
665−682.1976 [Information
RCtrievalInc、] )に従い、BHI透
祈培地にストレプトコッカス・ミュータンス菌、ストレ
プ1−コツカス。
RCtrievalInc、] )に従い、BHI透
祈培地にストレプトコッカス・ミュータンス菌、ストレ
プ1−コツカス。
サンイス菌等を植菌し、生育後遠心分離により菌体を除
去し、上清に硫酸アンモニウムを加え、40%硫酸アン
モニウム画分の沈Faを50mMのリン酸緩衝液で透析
し、濃縮した液を用いるという方法等により調製したも
のなどが使用できる。また、プロティン抗原画分はレー
ナー(Lehncr)らの方法(,1,General
Microbiology、 122 、217−
225.1981)に従い、B )−I I透析培地で
培養し、遠心して得られた上清を75%の硫酸アンモニ
ウムを用いて分画し、沈殿を採取し、この沈殿を6M尿
素存在下でDE−52カラムクロマトグラフイーを行な
い、更にプロティン抗原画分を生理食塩水に溶かし、透
析後セファロースCL6Bにてゲル濾過を行なって両分
を得るという方法等により調製したものなどが使用し得
る。
去し、上清に硫酸アンモニウムを加え、40%硫酸アン
モニウム画分の沈Faを50mMのリン酸緩衝液で透析
し、濃縮した液を用いるという方法等により調製したも
のなどが使用できる。また、プロティン抗原画分はレー
ナー(Lehncr)らの方法(,1,General
Microbiology、 122 、217−
225.1981)に従い、B )−I I透析培地で
培養し、遠心して得られた上清を75%の硫酸アンモニ
ウムを用いて分画し、沈殿を採取し、この沈殿を6M尿
素存在下でDE−52カラムクロマトグラフイーを行な
い、更にプロティン抗原画分を生理食塩水に溶かし、透
析後セファロースCL6Bにてゲル濾過を行なって両分
を得るという方法等により調製したものなどが使用し得
る。
本発明は、前記抗原を用いて家禽に免疫することによっ
て得られる抗体を含有する卵、卵黄、水溶性卵黄分画物
を食品原料とするものである。この場合免疫される家禽
としてはニワトリ、アヒル。
て得られる抗体を含有する卵、卵黄、水溶性卵黄分画物
を食品原料とするものである。この場合免疫される家禽
としてはニワトリ、アヒル。
ウズラ等が用いられる。また、家禽に免疫する方法とし
ては抗原単独又は2種以上を組合せて免疫することがで
き、その際アジュバン1−と共に皮下又は筋肉内へ免疫
する方法、飼料又は水と共に経口的に免疫する方法等、
通常の方法が採用できる。
ては抗原単独又は2種以上を組合せて免疫することがで
き、その際アジュバン1−と共に皮下又は筋肉内へ免疫
する方法、飼料又は水と共に経口的に免疫する方法等、
通常の方法が採用できる。
なお、水溶性卵黄分画物を得る方法としては。
卵黄にカラギナンやキサンタンガムを加え、生じた沈殿
を遠心分離等の方法で除去し、その上清に一対し硫酸ア
ンモニウムによる分画沈殿を行ない、水で透析するなど
の方法が採用し得る。
を遠心分離等の方法で除去し、その上清に一対し硫酸ア
ンモニウムによる分画沈殿を行ない、水で透析するなど
の方法が採用し得る。
本発明の食品は、上記卵、卵黄、水溶性卵黄分画物の1
種又は2種以上を原料として使用することにより製造さ
れ、例えばチューインガム、アイスクリーム、ババロア
、マヨネーズ、ドレッシング、チョコレート、プリン、
生クリームなどとして調製され得るが、この場合を記卵
、卵黄、水溶性卵黄分画物は、その摂取1が0.000
1〜50g/kg/日になるように使用することが好ま
しい。
種又は2種以上を原料として使用することにより製造さ
れ、例えばチューインガム、アイスクリーム、ババロア
、マヨネーズ、ドレッシング、チョコレート、プリン、
生クリームなどとして調製され得るが、この場合を記卵
、卵黄、水溶性卵黄分画物は、その摂取1が0.000
1〜50g/kg/日になるように使用することが好ま
しい。
なお、食品の他成分はその食品の種類に応じて適宜選定
される。
される。
1班列仇呆
本発明の食品によれば、口腔内細菌の全菌体又は菌体成
分を免疫した家禽から得られる卵、卵黄。
分を免疫した家禽から得られる卵、卵黄。
水溶性卵黄分画物を配合したことにより、上記細菌の口
腔内への定着を有効に防止し1口腔疾患の予防に効果的
に使用されると共に、これら抗体含有成分の配合性は良
好なものであるから、食品の調製上難点がないものであ
る。
腔内への定着を有効に防止し1口腔疾患の予防に効果的
に使用されると共に、これら抗体含有成分の配合性は良
好なものであるから、食品の調製上難点がないものであ
る。
以下、実験例により本発明の効果を具体的に示す。
〔実験例1〕
(1)抗原の調製
バクテロイデス・ジンジバリス381株、バクテロイデ
ス・インテルメディウスATCC33563株。
ス・インテルメディウスATCC33563株。
ATCC25611株はそれぞれヘミン及びメナジオン
を加えたトツドヘビットブロースで、アクチノマイセス
・ビスコ−サスT14V株、ヘモフィルス・アクチノミ
セテムコミタンスY4株、フシバクテリウム・ヌクレイ
タムATCC25286株、アイコネラ・コロ−デンス
1073株はそれぞれトリプチケースソイブロースで2
11間培養した後、8000rpm、15分間の遠心で
菌体を集め、これを5mM、pH7,4のリン酸緩衝液
で洗滌した後、0.5%のホルマリンで1晩処理したも
のを全菌体抗原とした。
を加えたトツドヘビットブロースで、アクチノマイセス
・ビスコ−サスT14V株、ヘモフィルス・アクチノミ
セテムコミタンスY4株、フシバクテリウム・ヌクレイ
タムATCC25286株、アイコネラ・コロ−デンス
1073株はそれぞれトリプチケースソイブロースで2
11間培養した後、8000rpm、15分間の遠心で
菌体を集め、これを5mM、pH7,4のリン酸緩衝液
で洗滌した後、0.5%のホルマリンで1晩処理したも
のを全菌体抗原とした。
綿毛抗原の調製は、同様に上記培地で2日間培養した上
記細菌を集菌、洗滌した後、蒸留水中でガラスピーズと
共に2日間ゆるやかに撹拌し、No、25の注射針(0
,5X25+1111)に3回通し、菌体より線毛を分
断した。次いで8000rpm。
記細菌を集菌、洗滌した後、蒸留水中でガラスピーズと
共に2日間ゆるやかに撹拌し、No、25の注射針(0
,5X25+1111)に3回通し、菌体より線毛を分
断した。次いで8000rpm。
15分間の遠心で菌体と上清に有る線毛を分離し、」二
清を蒸留水で透析した後、凍結乾燥を行ない、線毛抗原
とした。
清を蒸留水で透析した後、凍結乾燥を行ない、線毛抗原
とした。
また、莢膜抗原は、同様に集めた菌体をO,OIM−E
DTAを含むIJ ’)酸緩衝液(0,05M、pH7
,4)で60℃において30分間反応させた後、No、
2’5の注射針に3回通し、菌体より莢膜を分離した。
DTAを含むIJ ’)酸緩衝液(0,05M、pH7
,4)で60℃において30分間反応させた後、No、
2’5の注射針に3回通し、菌体より莢膜を分離した。
次いで8000rpm、15分間の遠心で菌体を除去し
た上清を4000Orpm、2時間超遠心し、その沈渣
を莢膜抗原とした。
た上清を4000Orpm、2時間超遠心し、その沈渣
を莢膜抗原とした。
(2)鶏卵抗体画分の3A製法
上記の抗原をフロイント完全アジュバントと混合して鶏
に免疫し、その後上記抗原とフロイント不完全アジュバ
ントとを混合したもので3回免疫し、卵を採取した。そ
ののち、卵を卵黄と卵白に分け、卵黄に等量の水を加え
、0.5%のλ−カラギナンの懸濁液を加え、撹拌後8
000 rpm 110分間遠心し、上清を採取した。
に免疫し、その後上記抗原とフロイント不完全アジュバ
ントとを混合したもので3回免疫し、卵を採取した。そ
ののち、卵を卵黄と卵白に分け、卵黄に等量の水を加え
、0.5%のλ−カラギナンの懸濁液を加え、撹拌後8
000 rpm 110分間遠心し、上清を採取した。
更に、20%硫酸アンモニウムによる分画沈殿を5回繰
り返し、水で透析後、10倍濃度の生理食塩水を加えて
0.15M−NaCfl水溶液とし、その後0.45g
nのフィルターで濾過を行ない、炉液を採取した。
り返し、水で透析後、10倍濃度の生理食塩水を加えて
0.15M−NaCfl水溶液とし、その後0.45g
nのフィルターで濾過を行ない、炉液を採取した。
(3)バクテロイデス・ジンジバリスのハムスター口腔
内定着抑制実験 ゴールデンハムスター(8週令、雄)を−群6〜7匹に
し、下顎第一臼歯を木綿糸(No、 50 )で結紮後
、バクテロイデス・ジンジバリス381−R’ lX
l0”個/mQの菌液0,1mQ、をハムスター口腔内
に接種した。菌接種30分後にバクテロイデス・ジンジ
バリスを抗原として得られた鶏卵抗体画分とグリセリン
との等景況合液0.1mQ又は水とグリセリンとの等景
況合液(コントロール)0.1mQを[1腔内に投与し
、混合液の存在下歯周ブラシにて各歯列を20回ブラッ
シングした。
内定着抑制実験 ゴールデンハムスター(8週令、雄)を−群6〜7匹に
し、下顎第一臼歯を木綿糸(No、 50 )で結紮後
、バクテロイデス・ジンジバリス381−R’ lX
l0”個/mQの菌液0,1mQ、をハムスター口腔内
に接種した。菌接種30分後にバクテロイデス・ジンジ
バリスを抗原として得られた鶏卵抗体画分とグリセリン
との等景況合液0.1mQ又は水とグリセリンとの等景
況合液(コントロール)0.1mQを[1腔内に投与し
、混合液の存在下歯周ブラシにて各歯列を20回ブラッ
シングした。
以上の操作を3日間行ない、その後1週間は毎日2回ブ
ラッシングのみを行なった。ブラッシング終了後、結紮
した木綿糸を採取し、結紮糸中のバクテロイデス・ジン
ジバリス数及び全嫌気性菌数を測定した。結果を第1表
に示す。
ラッシングのみを行なった。ブラッシング終了後、結紮
した木綿糸を採取し、結紮糸中のバクテロイデス・ジン
ジバリス数及び全嫌気性菌数を測定した。結果を第1表
に示す。
第1表
第1表の結果から明らかなように、対照群に比較して各
種鶏卵抗体画分は有意の差をもってバクテロイデス・ジ
ンジバリスの口腔内定着を阻止することが認められた。
種鶏卵抗体画分は有意の差をもってバクテロイデス・ジ
ンジバリスの口腔内定着を阻止することが認められた。
(4)鶏卵抗体による各種口腔細菌のハムスター口腔内
定着阻止効果 3日間培養したアクチノマイセス・ビスコ−サスT14
V、バクテロイデス・インテルメディウスATCC33
563,ヘモフィルス・アクチノミセテムコミタンスY
4.フシバクテリウム・ヌクレイタムATCC2528
6及びアイコネラ・コロ−デンス1073のストレプト
マイシンkH’1株をpH7,2の1mMリン酸緩衝液
に濁度1.0(OD、、a=1.0)となるように1謁
濁し、各種抗体と1=1の割合で混合し、37℃で30
分間反応させた。対照群として同様にリン酸ml液と反
応させた。
定着阻止効果 3日間培養したアクチノマイセス・ビスコ−サスT14
V、バクテロイデス・インテルメディウスATCC33
563,ヘモフィルス・アクチノミセテムコミタンスY
4.フシバクテリウム・ヌクレイタムATCC2528
6及びアイコネラ・コロ−デンス1073のストレプト
マイシンkH’1株をpH7,2の1mMリン酸緩衝液
に濁度1.0(OD、、a=1.0)となるように1謁
濁し、各種抗体と1=1の割合で混合し、37℃で30
分間反応させた。対照群として同様にリン酸ml液と反
応させた。
これをアクナノマイセス実験群は無処置のハムスター口
腔内に、その他の細菌実験群は下顎第一臼歯に本綿糸(
No、 50 )を結紮したゴールデンハムスターの口
腔内に反応液Q、1mQ、左右類のう内に各0.1mQ
接種した。菌の接種は連続3日間行ない、その1週間後
に結紮糸を取り、結紮糸中の標的細菌数および全嫌気性
菌数を測定した。
腔内に、その他の細菌実験群は下顎第一臼歯に本綿糸(
No、 50 )を結紮したゴールデンハムスターの口
腔内に反応液Q、1mQ、左右類のう内に各0.1mQ
接種した。菌の接種は連続3日間行ない、その1週間後
に結紮糸を取り、結紮糸中の標的細菌数および全嫌気性
菌数を測定した。
1群6匹で行ない、実験期間中飼料は高蔗糖含有のダイ
エツト2000を、飲料水に水道水を自由に与えた。結
果を第2表に示す。
エツト2000を、飲料水に水道水を自由に与えた。結
果を第2表に示す。
第2表
ストレプトコッカス・サンイスN CT C10556
BHI培地の透析外液を培地として使用し、生育した菌
を洗浄した後、ホルマリン処理したものを全菌体抗原と
して使用した。
BHI培地の透析外液を培地として使用し、生育した菌
を洗浄した後、ホルマリン処理したものを全菌体抗原と
して使用した。
ブライワイス(BleitlIeis)らの方法(J、
Bacteriol、。
Bacteriol、。
−L影、、1198−1200.1964)に従って調
製したものを使用した。
製したものを使用した。
第2表の結果からも、各種鶏卵抗体がいずれもその抗原
細菌の口腔内定着を有効に抑制することが認められる。
細菌の口腔内定着を有効に抑制することが認められる。
〔実験例2〕
下記抗原を使用し、下記の方法によりその抗体画分を得
た。
た。
(1)抗原の調製
ストレプトコ カス・ミュータンスNCTC10449
ジェイ・ヴアン・ホーテ(J、 Van Hoate)
らの方法(Arch、 0ra1. Bio、、 l
6. 1131−11.41゜1971)に準じて調製
したものを使用した。
ジェイ・ヴアン・ホーテ(J、 Van Hoate)
らの方法(Arch、 0ra1. Bio、、 l
6. 1131−11.41゜1971)に準じて調製
したものを使用した。
井上らの方法(Microbial Aspects
of dental cariesVol、In、
665−682. 1976 [Tnformatio
nRetrieval Inc、] )に従って調製し
たものを使用した。
of dental cariesVol、In、
665−682. 1976 [Tnformatio
nRetrieval Inc、] )に従って調製し
たものを使用した。
レーナー(Lehner)らの方法(J、 Gener
al Microbiology。
al Microbiology。
122.217−225.1981)に従って調製した
ものを使用した。
ものを使用した。
(2)鶏卵抗体画分の調製法
」二記の抗原をフロイント完全アジュバントと混合して
鶏に免疫し、その後抗原とフロイント不完全アジjバン
トとを混合したもので2週間ごとに3回免疫し、卵を採
取した。なお、抗体の低下にともない、その後1ケ月ご
とに免疫した。そののち卵を卵黄と卵白に分け2卵黄に
等量の水を加え、0.5%のλ−カラギナンの懸濁液を
加え、撹拌後110000rp、10分間遠心し、上清
を採取した。更に、20%硫酸アンモニウムによる分画
沈殿を5回繰り返し、水で透析後、10倍濃度の生理食
塩水を加えて0.15M−NaCQ水溶液とし、その後
0.45−のフィルターで′?jj過を行ない、p液を
採取した。
鶏に免疫し、その後抗原とフロイント不完全アジjバン
トとを混合したもので2週間ごとに3回免疫し、卵を採
取した。なお、抗体の低下にともない、その後1ケ月ご
とに免疫した。そののち卵を卵黄と卵白に分け2卵黄に
等量の水を加え、0.5%のλ−カラギナンの懸濁液を
加え、撹拌後110000rp、10分間遠心し、上清
を採取した。更に、20%硫酸アンモニウムによる分画
沈殿を5回繰り返し、水で透析後、10倍濃度の生理食
塩水を加えて0.15M−NaCQ水溶液とし、その後
0.45−のフィルターで′?jj過を行ない、p液を
採取した。
次に、下記方法によりストレプトコッカス・ミュータン
ス、ストレプトコッカス・サンイスの口腔内定着試験を
行なった。
ス、ストレプトコッカス・サンイスの口腔内定着試験を
行なった。
(3)ストレゾ1−コツカス・ミュータンス、ストレプ
トコッカス・サンイスのロ腔内定着実験ハムスター5週
令雄を一群5匹にし、それぞれにストレプトコッカス・
ミュータンスNCTC10449株又はストレプトコッ
カス・サンイスNCTC10556株をI X 10’
個接種した。
トコッカス・サンイスのロ腔内定着実験ハムスター5週
令雄を一群5匹にし、それぞれにストレプトコッカス・
ミュータンスNCTC10449株又はストレプトコッ
カス・サンイスNCTC10556株をI X 10’
個接種した。
その日から上記鶏卵抗体画分を飲料水に混ぜて1%溶液
として投惨し、1週間後及び4週間後にハムスターの口
腔内の歯列を滅菌した綿球でこすり。
として投惨し、1週間後及び4週間後にハムスターの口
腔内の歯列を滅菌した綿球でこすり。
少量の生理食塩水中に浸して菌を均一に分散させた。そ
の一定量をBHI平板培地及びミーティスサリバリウス
平板培地にまいて全菌体数及びストレプトコッカス・ミ
ュータンス菌、ストレプトコッカス・サンイス菌のコロ
ニー数をカランI−L、た。
の一定量をBHI平板培地及びミーティスサリバリウス
平板培地にまいて全菌体数及びストレプトコッカス・ミ
ュータンス菌、ストレプトコッカス・サンイス菌のコロ
ニー数をカランI−L、た。
ストレプトコッカス・ミュータンス菌、ストレプトコッ
カス・サンイス菌の数は全菌数10000個当りの菌数
で表わした。なお、飲料水中の抗体画分の濃度はいずれ
も0.025%とした。
カス・サンイス菌の数は全菌数10000個当りの菌数
で表わした。なお、飲料水中の抗体画分の濃度はいずれ
も0.025%とした。
結果を第3,4表に示す。
第4表
第3表
第3.4表の結果より、ストレプトコッカス・ミュータ
ンス、ストレプトコッカス・サンイスの鶏卵抗体画分は
、ストレプトコッカス・ミュータンス、ストレプトコッ
カス・サンイスの定看を良好に抑制することが知見され
る。更に、免疫抗原としては全菌体よりも菌体成分の方
が優れていることが確認された。
ンス、ストレプトコッカス・サンイスの鶏卵抗体画分は
、ストレプトコッカス・ミュータンス、ストレプトコッ
カス・サンイスの定看を良好に抑制することが知見され
る。更に、免疫抗原としては全菌体よりも菌体成分の方
が優れていることが確認された。
以下、実施例を示す。なお、%はいずれも重量%を示す
。
。
〔実施例1〕チユーインガム
ガムベース 43.9%炭酸カルシ
ウム 水アメ 砂糖 ショ糖パルミテート フルクトース アル1ヘース 香料 卵黄抗細胞壁抗体画分又は卵黄 抗莢膜抗体画分(使用菌:スト レプトコッカス・ミュータンス NCTC10449又はバクテ ロイデス・インテルメデイウス ATC,C25611 2,0 15、。
ウム 水アメ 砂糖 ショ糖パルミテート フルクトース アル1ヘース 香料 卵黄抗細胞壁抗体画分又は卵黄 抗莢膜抗体画分(使用菌:スト レプトコッカス・ミュータンス NCTC10449又はバクテ ロイデス・インテルメデイウス ATC,C25611 2,0 15、。
30.0
1.0
4.0
3.0
1.0
0.1
〔実施例2〕アイスクリーム
クリーム(脂肪率50%)
牛乳(脂肪率3.7%)
無糖脱脂練乳
砂糖
コーンシロップ
100.0%
16.84%
42.17
24.24
11’、25
4.65
安定剤
卵黄抗線毛状構造物抗体画分又
は抗線毛状構造物卵黄(使用菌:
ストレプトコツカス・ミュータ
ンスNCTCLO449又はス
トレプ1−コツカス・サンイス
NCTC:lO556)
0.35
0.5
100.0%
〔実施例3〕アイスクリーム
クリーム(脂肪率40%)
牛乳(脂肪率3.7%)
無糖脱脂練乳
砂糖
コーンシロップ
安定剤
抗プロティン卵黄(使用菌:ス
トレプトコッカス・ミュータン
スNCTC10449
31,54%
32.1 G
15.08
1L、25
4.67
0.3
5.0
100.0%
〔実施例4〕ババロア生地
牛乳
砂糖
バニラのサヤ
セラチン
生クリーム
抗線維状構造物卵黄又は抗莢膜
卵黄(使用菌:ストレプトコツ
カス・ミュータンスNCTC
10449、ストレプトコツ力
ス・サンイスNCTC10558゜
バクテロイデス・ジンジバリス
381又はバクテロイデス・
インテルメディウスATCC
75m9
0g
1本
0g
5m9
5個
出願人 ラ イ オ ン 株式会社
代理人 弁理士 小 島 隆 司
Claims (1)
- 1、口腔内細菌の全菌体又は菌体成分を抗原とし、これ
で免疫した家禽から得られる卵、卵黄又は水溶性卵黄分
画物を原料とすることを特徴とする食品。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63205110A JP2689511B2 (ja) | 1988-08-18 | 1988-08-18 | 食 品 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63205110A JP2689511B2 (ja) | 1988-08-18 | 1988-08-18 | 食 品 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0253458A true JPH0253458A (ja) | 1990-02-22 |
JP2689511B2 JP2689511B2 (ja) | 1997-12-10 |
Family
ID=16501589
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP63205110A Expired - Lifetime JP2689511B2 (ja) | 1988-08-18 | 1988-08-18 | 食 品 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2689511B2 (ja) |
Cited By (4)
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-
1988
- 1988-08-18 JP JP63205110A patent/JP2689511B2/ja not_active Expired - Lifetime
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Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2689511B2 (ja) | 1997-12-10 |
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