JPH02300106A - 抗微生物組成物、フィルム及び食料品の表面処理方法 - Google Patents

Abstract

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め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １１−二五皿分１ 本発明は抗微生物性及び抗菌性組成物、かかる組成物を
含有する食料品包装及び加工用フィルム及び食品表面上
の細菌、カビ、イースト等の微生物の生育を抑制或は防
止する方法に関する。

良米辺弦ｌ 「食品保存」とは、その用語を本明細書中で使用する場
合、食品中毒を防ぐ方法、並びに微生物による食品損傷
を遅らせる或は防止する方法を含む。食品保存は食品を
摂取するのに安全に保ちかつ養分分解或は食品の味が恋
（なるようにさせる官能的変化を抑制或は防止する。

「食品損傷」とは、その用語を本明細書中で使用する場
合、味、臭い、口当り（ｔｃｘｔｕｒ６１或は外観の変
化を含む、食品の味を悪くさせる食品の状態の全ての変
化を含む、損傷した食品は毒性であっても或はΔ■性で
なくてもよい。

「食品中毒」とは、その用語を本明細書中で使用する場
合、病原性のウィルス、カビ或は細菌及び／又はそれら
の毒素で汚染された食品を摂取して引き起こされる哨乳
動物の病気を言う。病原でｔＴＦｉ染された食品は必ず
しも損傷の官能的徴候を示さない。細菌食品中毒は宿主
の細菌生物による感染か或は細菌が食品中か或は宿主に
おいて産生きれる毒素の作用によるかのいずれかで引き
起こされ得る。

食品損傷及び食品中毒の防止は歴史を通じて、しばしば
試行錯誤によって試みられてきた。初期の試みでは、食
品を保存するために、食品を乾燥、塩漬は及び／又は燻
煙するような食品保存方法を採用してきた０食品保存が
科学的根拠に基づいて考えられるようになったのは、記
録に残る歴史において比較的最近のことであった。１９
世紀になって、ルイパスツールやロパートコッホのよう
な科学者の研究によって、食品中毒及び損傷は細菌が原
因であることを明瞭にし、病原性細菌を識別し、食品を
保存する新規な方法を提供した。

現在の食品技術者達は、多数の物理的、化学的及び生物
学的方法及び薬剤を利用して食品を保存しかつ病気が食
料品を経て伝播するのを防止している。照射、発酵、低
温殺菌、温度調節、ｐＨ及び／又は水活性のようなプロ
セスに加えて、多数の化学薬剤が存在する。これらの薬
剤は食品の化学的劣化を防止するための酸、化防止剤、
並びに有害な細菌及び／又はその他の微生物を殺し或は
抑制し、それで食品を保存する、すなわち損傷及び病気
の伝播を防止する組成物を含む、一般に用いられている
抗微生物性化学薬剤は下記を含む：ニトリット、ニトレ
ート、二酸化イオウ、スルフイツト、酸、例えば酢酸、
プロピオン酸、乳酸、安息香酸、ソルビン酸及びそれら
の塩、木燻（ｗｏｏｄｓｍｏｋｅ）、液燻（ｌｉｑｕｉ
ｄ　ｓｍｏｋｅ）抗生物質、例えばナタマイシン、ナイ
シン。

食中毒の防止は食品加工産業における最大の重要事であ
る０食品の安全についての関心により、はとんどの国で
国民の健康を保証するために、食品産業を厳しく規制す
るに至った。また、加工食品の製造業者は製品の安全を
確保するために相当の資金を投資している。これらの努
力にもかかわらず、食中毒は依然起きている。食中毒の
多くの例は、とりわけ、サルモネラ、クロストリジウム
、ぶどう球菌に起因する。

関心が高まっているのは、家禽及び加工食品例えばウィ
ンナ−ソーセージ、その他のソーセージ、チーズ、新規
アイスクリームを含む酪農製品、シーフードの食品加工
産業において広範囲にわたる、リステリア汚染が、比較
的最近見出されたことである。特に関心があるのは、低
温殺菌した及び完全に調理した加工食品が、調理或は低
温殺菌した後、販売するために包装する前に、リステリ
ア閑のような微生物で汚染されているという最近の証拠
である。このような汚染は、熱処理（すなわち、調理或
は低温殺菌）した後に、微生物が食品表面に接触して引
き起こされると考えられる表面汚染が代表的である。リ
ステリアなどの微生物は空気によって運ばれ（すなわち
、ダストによって運ばれ）或は加工装置等の食品接触表
面上に存在し得る。

１９８０年代に、食中毒の大発生が世界的に報告され、
原因物質はリステリア汚染された食品が疑いありありと
見られており或はかかる食品と身元が明らかにされた。

ヒトにおけるリステリア症（リステリア細菌による感染
）の大発生が米国のマ→ノ゛チューセッツ、カリフォル
ニア及びペンシルバニア及びまたカナダ、スイスにおい
て報告された。これらの大発生は、リステリア汚染され
た食品、例えばコールスロー、生ミルクから作ったチー
ズ、表面熟成ソフトチーズ、サラミを摂取することに起
因した。何百人もの人々がかかり、死亡率は、かかった
人の約三分の−にまで達した。病気（感染性）に特に感
染しやすいのは、妊婦、胎児、新生児、幼児、並びに弱
体化免疫系を持った大人、例えばコルチコステローｒド
のような免疫抑制案による治療を受けている大人である
。リステリア症はひどい病気であり、髄膜炎、自然流産
、周産期敗血症を引き起こし得る。リステリア症は早期
診断で治療可能であるが、治療しない場合、高い死亡率
を示す。

リステリア閑の生育を抑制して食品保存することは困難
である。リステリアは、４．８５より高いｐＨでおよび
３℃程に低く及び約４５℃程に高くなることができる広
い湯度範囲にわたって、好気性及び嫌気性の両方で再生
し、生育することができると報告されている。このこと
は、リステリアは通常の冷凍温度で生育し得ることを意
味する。リステリアは、また、塩１０％までの水溶液中
で生育することができると報告されてきた。幸いなこと
に、調理或は低温殺菌はリステリアを殺す７残念なこと
に微生物汚染は、加工業者が低温殺菌した後に起こり得
る。多くの人々は加工食品を、食品製造業者が初めに調
理或は低温殺菌してから相当の期間が経過した後に食べ
、それで低温殺菌後の汚染によって導入されるバクテリ
アを増殖させることになる。この食品摂取は、加工食品
を、初めに調理した後に導入されたかもしれない微生物
（例えば、リステリア）を殺すのに十分な温度及び時間
再加熱しなければ起こり得るので、食品中毒の危険があ
る。本発明は上述した危険を改良しようとするものであ
る。

尺朋辺月刃 発明の目的は乳連鎖球菌（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｌａｃｔｉｓ　）由来の或は均等の合成バクテリオシン
、例えばナイシン及びキレート化或は金属イオン封鎖剤
を組合わせて含む新規な殺菌性組成物を提供するにある
。

発明の目的は乳連鎖球菌由来の或は均等の合成バクテリ
オシン、例えばナイシン及びキレート化或は金属イオン
封鎖剤を含む耐熱性抗微生物剤を含有するフィルムを提
供するにある。

発明の別の目的はリステリアを殺す及び／又はリステリ
アの生育を抑制するのに有効な抗菌性組成物を含有する
フィルムを提供するにある。

発明の目的は調節された量の抗微生物剤を食料品表面に
移動させることができるポリマーフィルムを提供するに
ある。

発明の別の目的は抗微生物剤を調節された量で食料品の
表面に移動させる方法によって食料品表面上の病原性微
生物の生育を殺し°、抑制し或は防止するにある。

発明の別の目的は、抗微生物剤を、フィルムを　　　　
〜取り去った後に食料品の表面上の病原性細菌の生育を
食料品の通常の包装寿命の間防止するのに有効な量で食
料品に移動させることにある。

発明の別の目的は、初めに調理しかつケーシングを取り
去った後に、スキンレスウィンナ−ソーセージ上のリス
テリア菌の生育を、消費者販売用の包装により、消費者
が被包装ウインナーソーセ−ジを消費するために開封す
るまで、防止或は抑制するにある。

発明の別の目的は、乳連鎖球菌由来の（或は合成均等の
）バクテリオシンとキレート化剤との相乗混合物、好ま
しくは液体或は！！＃！濁体を適用することによって加
工食品の包装寿命を増大させるにある。

１朋Ｊと生成 上記の目的及び下記から明らかになると思う他の目的は
、食料品、好ましくは食料品表面を、抗微生物剤、好ま
しくはキレート化剤、例えばクエン酸と、連鎖法菌属（
５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）由来のバクテリオシン、
例えばナイシンか或はペジオコックス属（Ｐｅｄｉｏｃ
ｏｃｃｕｓｌ由来のバクテリオシン、例えばペジオシン
のいずれかとを組合せたもので処理して達成することが
できる。処理は適当な手段、例えば吹付け、浸漬、混合
によるものでよく或は食料品に抗微生物剤を含有するフ
ィルムを接触させることによってもよい。フィルムは薬
剤を食料品表面に接触させたままにし、それでフィルム
から調節された量のＸ　ｆｆ１１を食料品の表面に移行
させることができ或は抗微生物剤を食料品に（ゼイン等
の移動剤を使用して或は使用しないで）移行させ、それ
でフィルムを取り去り、移行された抗微生物剤が食料品
表面上に有効量残って食品損傷生物か或は病原性微生物
、例えばリステリアのいずれかの生育を殺し、防止或は
抑制することができる。

発明の一態様では、耐熱性の連鎖球菌属由来或はペジオ
コックス属由来のバクテリオシン（或は均等の合成）抗
細菌剤を含有するポリマーフィルムを含む食品包装フィ
ルムを提供する。この剤はグラム陽性細菌、特にリステ
リア菌の生育に反するのに有効であるのが好ましく、耐
熱性の抗生物質或はバクテリオシン、例えばナイシン或
はバクテリオシンＰＡ−１にすることができる。耐熱性
剤はナイシンが好ましい。

上記の目的の各々及びどれもが発明の全ての実施態様に
存在することは必要でな（、発明を有利に採用し得るこ
とで十分である。

発明の組成物にとって基本的なことは、金属イオン封鎖
或はキレート化剤、例えばＥＤＴＡ塩或はクエン酸と連
鎖球菌属由来の或はペジオコックス属由来のバクテリオ
シン（或は合成均等物）、例えばナイシン或はペジオシ
ンＰＡ−１との相乗的組合せである。ナイシンとキレー
ト化剤との液体混合物或は懸濁体が特に好ましい。

本発明の一方法の基本的な態様は、食料品表面を、フィ
ルムを取り去った後に相当な期間保護することである。

本発明のフィルムの一実施態様の基本的な態様は、低温
殺菌或は熱処理した後に細菌に対抗するのに有効な耐熱
性抗微生物剤を使用することである。

日の詳　な言明 連鎖球菌属由来のバクテリオシン、例えばナイシン或は
へジオコックス属由来のバクテリオシン、例えばペジオ
シン（或は合成の均等物）とキレート化剤１例えばクエ
ン酸との相乗的組合わせを含む新規な抗微生物性組成物
は、特に病原性細菌、例えばリステリア菌に対して予期
されない程に良好な殺菌性を有することを見出した。加
えて、発明の組成物は、驚くべきことに、食品の損傷を
いずれかの成分単独の有効性に基づいて予期されるより
も長い期間防止することによって、食品の保存寿命を伸
ばすことができる。

ナイシンは好ましいバクテリオシンである。ナイシンは
乳酸菌である乳連鎖球菌グループＮが産生ずるポリペプ
チドバクテリオシンである。

ナイシンは同様のアミノ酸組成を有するＡ、Ｂ％Ｃ，Ｄ
及びＥナイシンと表示されたいくつかの密接に関連した
物質を表わす集合名であると報告されている。ナイシン
の構造及び性質は、更に、ザ　２５回　プロシーティン
ゲス　オブ　シイ−スターン　スクール　イン　アグリ
カルチャーサイエンス　アト　ザ　ユニバーシティ　オ
ブノッチンガム、１９７６年、１０３−１３０頁（１９
７７年）、Ｅ、リビンス力（Ｌ　ｉｐ　１ｎｓｋａ）、
「ナイシン　アンド　イッツ　アプリケーションズ」な
る表題の論文に検討されており、同論文を本明細書中に
援用する。ワールド　へルス　オーガニゼーション　コ
ミティオン　バイオロジカルスタンダーダイゼーション
はナイシンの国際的標準製剤を確立し、国際単位（本明
細書以降ＩＵ）をこの製剤のＯ，００１ｍｇと規定する
。

Ｎ　Ｉ　５ＡＰＬ　Ｉ　Ｎは英国、ウイルトシャ、ドロ
ウブリッジ、アブリン　アンド　パレット　リミティド
から市販されている、１ｇ当り１００万ＩＵを含有する
ナイシンコンセントレートについての商標名である。

ナイシンは知られている食品防腐剤であり、また、熱安
定性、酸安定性であり、ダラム陽性菌に対して活性であ
ることも知られている。ナイシンは通常熱処理と共に酪
農製品及び植物中に食品防腐剤として用いられる。ナイ
シンはまた生乳中に天然に生じ、肉ペーストを熱加工す
る際に用いられてきた。ナイシンは毒物学的データでは
体重１ｋｇ当り３．３百万ＩＵのレベルで悪い作用を示
さず、非毒性と考える。ナイシンは１２１℃までの加熱
に耐えることができ、活性を失わないと報告されている
。加工食品と共に使用する場合、ある程度の活性損失が
予想されるが、これは、例えば適用するナイシンの量を
増大させて改善することができる。食料品を腐敗しない
ように保存するのに有効なナイシンのレベルは２５〜５
００１Ｕ／ｇ或はそれ以上の範囲であると報告されてい
る。

ペジオコックス属菌が産生ずるバクテリオシンを本発明
において用いることができる。ペジオコックス属は乳酸
菌であり、発酵ソーセージの製造において発端培養とし
て用いられる。ペジオコックス屈は病原性微生物及び損
傷微生物の両方を抑制することが知られている。ツーバ
ー（Ｈｏｏｖｅｒ）等の論文、「ア　バクテリオシン　
プロプイースト　バイ　ペジオコックス　スビシーズ　
アソシエーテッド　ウィズ　ア　５．５−メガダルトン
プラスミド」、ジャーナル　オン　フード　プロテクシ
ョン、５１巻、１号、２９−３１頁（１９８８年、１月
）では（同論文全体を本明細書中に援用する）、５．５
メガダルトンプラスミドに関連させたペジオコックス種
が産生ずるバクテリオシンはいくつかのリステリア菌株
の生育を抑制するのに有効であると開示されている。ペ
ジオコックスの種々の種からのバクテリオシンはリステ
リア菌の生育を抑制し、殺し或は防止するのに有効であ
ることが知られている。特に、ペジオコックスアシジラ
クチシ（ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉｌからのバクテリオ
シンはリステリア菌に対して有効であることが知られて
いる。アプライド　アンド　インバイアロンメンタル　
マイクロバイオロジー、５４巻、１０号、２３４９〜２
３５３頁（１９８８年、ｉｏ月）、ブーチ（Ｐｕｃｃｉ
ｌ等の［インヒビジョン　オン　リステリア　モノシト
ゲネス　パイユージレグ　バクテリオシンＰＡ−１プロ
デユースト　バイ　ペジオコックス　アシジラクチシＰ
ＡＣ１，ＯＪなる表題の論文（同論文を本明細書中に援
用する）では、ペジオコックスアシジラクチシは極めて
有効な抗リステリア物質を産生ずると開示されている。

同論文で検討するＰ、アシジレクチシの菌株はＰＡＣｌ
、０と表示され、ＰＡ−１と表示されるバクテリオシン
を産生した。　ＰＡ−ｌは１ミリリットル当り細菌１．
２Ｘ１０”の初期接種物レベルでリステリア菌に対して
非常に有効であった。ＰＡ−１バクテリオシンはフロツ
ク、マイクロライフ　テクニックス　オン　サラツタで
製造されている。ペジオコックスベントサシウス（ｐｅ
ｎｔｏｓａｃｅｕｓ）か或はペジオコックスアシジラク
チシのいずれから産生されたバクテリオシンを本明細書
中ペジオシンと呼ぶ。

適したキレート化（金属イオン封鎖）剤はカルボン酸、
ポリカルボン酸、アミノ酸及びホスフェートを含む。特
に、下記の化合物及びそれらの塩は有用であると考えら
れるものの内である：酢酸 アデニン アジピン酸 ＤＰ アラニン Ｂ−アラニン アルブミン アルギニン アスコルビン酸 アスパラギン アスパラギン酸 八′ｒＰ 安息香酸 醋酸 カゼイン シトラコン酸 クエン酸 システィン デヒドロ酢酸（Ｄｅｈｙｄｒａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ）
デスフェリーフェリクリシン（Ｄｅｓｆｅｒｒｉ　−ｆ
ｅｒｒｉｃｈｒｙｓｉｎ） デスフェリーフェリクロム デスフェリーフェリオキサミンＥ ３．４−ジヒドロキシ安息香酸 ジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）ジメチル
グリオキシム ０５０−ジメチルブルブロガリン ＤＴＡ ギ酸 フマル酸 グロブリン グルコン酸 グルタミン酸 グルタル酸 グリシン グリコール酸 グリシルグリシン クリシルサルコシン グアノシン ヒスタミン ヒスチジン ３−ヒドロキシフラボン イノシン イノシントリホスフェート 鉄−フリーフェリクロム イソ吉草酸 イタコン酸 コウジ酸 乳酸 ロイシン リジン マレイン酸 リンゴ酸 メチオニン メチルサリチレート ニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ） オルニチン オルトホスフェート シュウ酸 オキシステアリン Ｂ−フェニルアラニン リン酸 フィテート ピメリン酸 ピバリン酸 ポリホスフェ−１〜 プロリン プロピオン酸 プリン ピロホスフェート ピルビン酸 リボフラビン サリチルアルデヒド サリチル酸 サルコシン セリン ソルビトール コハク酸 酒石酸 テトラメタホスフェート チオスルフェート トレオニン トリメタホスフェート トリホスフェート トリブトファン ウリジンジホスフェート ウリジントリホスフェート 吉草酸 バリン キサントシン 上記の金属イオン封鎖剤の内の多くは、それらの塩の形
で食品加工において有用である。かかる塩の形は通常ア
ルカリ金属或はアルカリ土類塩、例えば、ナトリウム、
カリウム或はカルシウム或は第四アンモニウム塩である
。複数の価を有する金属イオン封鎖材料は、例えば食品
系コーティングにおいて、ｐＨを調整する或は金属イオ
ンを進択的に導入したり或は取り去るのに有利になり得
る。金属イオン封鎖剤及びキレート化剤に関する追加ノ
情ＭＬｔＴ　、　Ｅ、　７　’）　７　（［Ｊ）　、Ｃ
ＲＣＡンドプック　オプ　フード　アデイテイブズ、第
２版、２７１．−２９４頁（１９７２年、ケミカルラバ
ー　カンパニー）、及びｆｆｉ　Ｓ、ピーターソン及び
Ａ、Ｍ、ジョンソン（編集）、エンサイクロペディア　
オン　フード　サイエンス、６９４−６９９頁（１９７
８年、ＡＶＩパブリッシングカンパニー、インコーボレ
ーテヅド）に開示されており、これらの論文を両方本明
細書中に援用する。

「キレート化剤」及び「金属イオン封鎖剤」なる用語を
本明細書中、同義語として使用し、金属と配位複合体を
形成することのできる有機或は無機化合物と定義する。

また、「キレート化剤」なる用語を本明細書中で使用す
る場合、分子対人材料、例えばシクロデキストリンを含
む。キレート化剤は無機でも或は有機でもよいが、有機
であるのが好ましい。

好ましいキレート化剤は哨乳動物にとって非毒性であり
、アミノポリカルボン酸及びそれらの塩、例えばエチレ
ンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）或はその塩（特に、
そのジー及びトリーナトリウム塩）、ヒドロカルボン酸
及びそれらの塩、例えばクエン酸を含む。しかし、非ク
エン酸及び非シトレートヒドロカルボン酸キレート化剤
、例えば酢酸、ギ酸、乳酸、酒石酸及びそれらの塩もま
た本発明において有用と考えられる。

上述した通りに、「キレート化剤」なる用語は本明細書
中で金属イオン封鎖剤と同義語と定義しかつ使用し、ま
た、シクロデキストリンのような分子対人材料を含むと
も定義する。シクロデキストリンはグルコースモノマー
を６．７或は８個ドーナツ形状をした環に配置させた環
状炭水化物であり、それぞれアルファ、ベータ或はガン
マシクロデキストリンと表わす。本明細書中で用いる通
りのシクロデキストリンは未改質及び改質の両方のシク
ロデキストリンモノマー及びポリマーを言う。シクロデ
キストリン分子封入剤はインディアナ、アメリカン　メ
イズ−プロダクツ　オン　ハモンドから市販されている
。シクロデキストリンは、更に、インクルージヨン　コ
ンパウンダ、■巻（アカデミツク　プレス、１９８４年
）の３３１−３９０頁、シエイトリ（Ｓｚｅｊｔｌｉｌ
著、「インダストリアル　アプリケーションズ　インシ
クロデキストリン」なる表題の１章に記載されており、
同車を本明細書中に援用する。

連鎖球菌属由来か或はペジオコックス属由来のいずれか
のバクテリオシン、例えばナイシン、ペジオシンと１種
或はそれ以上のキレート化剤との混合物は本発明に従っ
て有用に用いることができる。このような混合物は液中
固体（５ｏｌｉｄ　１ｎｌｉｑｕｉｄ）懸濁液或は溶液
であるのがよい。本明細書中、「溶液」なる用語の使用
は、他に示さない場合、液体に溶解した固体或は液体ば
かりでなく、液中固体懸濁液は混合物をも含む。キレー
ト化剤の混合物について適した溶剤、希釈剤或はキャリ
ヤーは水、アルコール、プロピレングリコール、油、例
えば、鉱油、動物或は植物油、グリセリン或はレシチン
である。

市販されているバクテリオシンは酪農製品を含有するか
もしれないが、本発明の殺菌性組成物或は食品保存製剤
は添加酪農製品、例えばチーズ。

ホエー、カード或はカルシウム含有ミルクベースの固形
分を含有しないのが有利かもしれない。カルシウム及び
マグネシウムイオンはナイシンを不活性化し得ることが
報告された。信念に束縛されることを望むものではない
が、カルシウム及び／又はマグネシウムをキレート化す
る薬剤が特に有利になり得るかもしれない。バクテリオ
シン及びキレート化剤の混合物を含有する本発明の混合
物は、任意の慣用の塗被手段、例えば噴霧或は食料品を
溶液に浸漬することにより、或は下記の通りの含浸或は
塗被したフィルムを使用することによって、酪農製品及
び非酪農製品１例えばソーセージ、他の肉、植物及び果
物を含む食料品に適用することができる。このような溶
液は広範囲のｐＨで配合してよいが、中性或は酸性が有
利になる。酸性溶液はこれらの新規な溶液の殺菌効力を
高める或は維持するものと考えられ、よって好ましい。

ｐＨが約６に等しいか或はこれより低い溶液が好ましく
、５に等しいか或はこれより低いのが特に好ましい。バ
クテリオシン及びキレート化剤成分の量は下記のような
要因に応じて変わり得る：バクテリオシンのタイプ、キ
レート化剤のタイプ、ｐＨ１存在する他の成分（例えば
、溶液、溶媒のタイプ）、適用、すなわち、物質を適用
している食料品のタイプ、どのように適用するか（例え
ば、食料品に混合する或は表面塗被する）、続（加工条
件（例えば、熱処理）、細菌を殺す或は抑制する所望の
有効期間、食料品を対抗して保護している細菌のタイプ
、等。当業者ならばバクテリオシン及びキレート化剤の
適当な量を、過度に実験することなく、求めることがで
きる。水が溶液を作る、例えば浸漬処理用の好ましい溶
剤である。ソーセージのような食料品を処理するための
混合物中のバクテリオシンの適した量はバクテリオシン
を（全混合物の重量により）５〜２５０　ｐｐｍ或はそ
れ以上含む。５　ｐｐｍより少ない量が実際使用できる
が、使用に応じて、それより高い濃度に比べて有効性が
劣るかもしれない。２５０　ｐｐｍより多い量もまた実
際に使用できるが、濃度を増大することは、バクテリオ
シンの費用により、費用を増大させる不利を有する。濃
度５０〜１５０　ｐＰｍが有効でありかつ費用がかから
ないことが認められ、濃度１５０　ｐｐｍ或はそれ以上
が、例えば調理したフランクフルトソーセージ表面上の
リステリア菌のような病原性細菌を殺す或は抑制するの
に極めて有効である。発明の溶液は他の細菌に対しても
使用することができ、グラム陽性細菌に対して特に有効
である。キレート化剤の使用量は広範囲になることがで
き、例えば約０．２〜約０．８重量％或は３．０重皿％
或はそれ以上の量を有効に用いることができる。発明の
組成物は、また、他の抗微生物或は抗菌剤、或は他の添
加剤、例えば着色剤、風味剤、例えばガス或は液温を含
有してもよい。

本発明において使用するのに適した食品包装用フィルム
はポリマーフィルム、例えばインフレートフィルム、延
伸フィルム、ストレッチ及び収縮フィルム、熱収縮性バ
ッグ及び食品ケーシングを含む。「食品包装用フィルム
Ｊとは、その用語を本明細書中で用いる場合、厚さが適
当には１５ミル（３８ミクロン）或はそれ以下、好まし
くは１０ミル（２５ミクロン）より薄い軟質性シート材
料である。

適したフィルムは再生セルロース及び熱可塑性ストレッ
チ或は収縮フィルムを含み、単層フィルムでも或は多層
フィルムでもよい。収縮フィルムを成形して熱収縮性二
軸延伸バッグにするのが好ましい。

適したフィルムは好ましくはチューブ状の（チューブラ
）通常軟質性フィルムである食品ケーシングを含み、下
記で作ることができる：再生セルロース或はセルロース
カーバメート等のセルロース系材料を含むポリマー材料
；或はポリオレフィン、例えばポリプロピレン、ポリエ
チレンのホモポリマー或はコポリマー、或はポリアミド
、ポリエチレンテレフタレート、ポリ塩化ビニリデンコ
ポリマー或はエチレン−ビニルアセテートコポリマー等
のプラスチックス；或はタンパク質フィルム、例えばコ
ラーゲン、ケーシングはよく知られた方法の内のいずれ
か１つによって作ったチューブラセルロース系ケーシン
グが好ましい。このようなケーシングは、好ましくは再
生セルロース、等で作った、神々の直径の軟質性薄肉シ
ームレスチェーピングであるのが普通である。また、フ
ィブラス補強ウェブを壁中に埋封させたチューブラセル
ロース系ケーシングも適している。補強ウェブを有する
ケーシングは一般に「フィブラス食品ケーシング」と呼
ばれており、フィブラス強化材のないセルロース系ケー
シングを本明細書中「非繊維状（ノン−フィブラス）」
セルロース系ケーシングと呼ぶ。天然及び合成の両方の
ケーシングを本発明で意図する。

従来［ドライ　ストック　ケーシング」として知られて
いるケーシングを本発明の実施において用いてよい。こ
のようなケーシングは、ノンフィブラスケーシングなら
ば、水を含むケーシングの全重量を基準にして、本釣５
〜約１４重量％の範囲内、或はフィブラスケーシングな
らば、本釣３〜約８重皿％の範囲内の水分を有するのが
普通である。

従来［ゲル　ストック　ケーシング」として知られてい
るケーシングは、あらかじめ乾燥されていないので、一
層高い水分を有するケーシングで、　　あり、かかるケ
ーシングもまた本発明の実施において用いてよい。

従来［回加？ＦＡ（ｒｅｍｏｉｓｔｕｒｉｚｃｄｊケー
シング」として知られているケーシングは、例えばひだ
寄せ及び／又は充填（ｓｔｕｆｆｉｎｇ）を容易にする
ために水分を加えておいたドライストックケーシングで
あり、このよりなケーシングを本発明の実施において用
いてよい。このようなケーシングは、ノン−フィブラス
ケーシングならば、水を含むケーシングの全重量を基準
にして、約１５〜約２３重量％の範囲内、或はフィブラ
スケーシングならば約１６〜約３５重量％の範囲内の水
分を有するのが普通である。

発明において用いるのに適した抗微生物剤は食品包装フ
ィルムから食料品に有効に移行されて、好ましくはフィ
ルムを食料品表面との接触から取り去った後でさえ、食
料品上の微生物の生育を防止或は抑制する抗微生物剤を
倉荷する食料品表面とすることができる薬剤を含む。

適した抗微生物はカビ、イースト及び／又は細菌に対し
て有効であるのがよい。適した薬剤は下記を含むと考え
られる：細菌を殺し或は抑制するのに有効な抗菌剤、例
えば抗生物質、例えばナイシン、ナタマイシン、サブチ
リン、或はペジオコックス属由来のバクテリオシン、耐
熱性酵素、例えばリゾチーム及びその他の薬剤、例えば
液温、パラベン、ソルビン酸、安息香酸及びこれらの混
合物。

かかる抗微生物剤は添加剤、例えば結合剤、緩衝剤、乳
化剤、移動剤或はキレート化剤１例えばエチレンジアミ
ンテトラ酢ｆ！！　（ＥＤＴＡ）或はその塩を含んでも
よい。これらの剤は剤の抗微生物作用を高めることがで
き或は包装フィルムから食料品への移行を助成すること
ができる。

特に、結合剤、例えばセラック、ゼインのような水不溶
性剤を移動手段或は剤として使用して、包装フィルムか
らそれらと共に加入された抗微生物剤を加湿条件下で食
料品表面に移行させるのがよい。好ましい結合或は移動
剤は、包装フィルムよりも食料品表面への優先的直接性
（ｓｕｂｓｔａｎｔｉ−ｖｉｔｙ）を有する。

本発明の食品包装フィルムは、フィルム上に或はフィル
ム内に抗微生物剤、好ましくは抗菌剤を含有する。この
ような薬剤は細菌、例えばリステリア、サルモネラ及び
クロストリジウム属、好ましくはリステリア菌種からの
細菌の生育を殺し、抑制し或は防止するのに有効である
のが有利である。

好ましい抗菌剤は、熱処理、例えば調理或は低温殺菌温
度及び時間による分解或は不活性化に対し耐性である。

このような好ましい薬剤は包装フィルム内の食料品を熱
処理するにもかかわらず生き残ることができかつ熱処理
し、フィルムを取り去った後に有効であることが必要で
ある。

「耐熱性」とは、その用語を本明細書中で使用する場合
、調節された量でフィルムに適用させることができる抗
微生物剤が、熱処理、例えば低温殺菌或は調理による分
解、不活性化或は損失に耐え、それで、熱処理した後に
、抗微生物剤を適用する食料品上の微生物の生育を殺し
、抑制し或は防止するのに有効な薬剤が十分残ることを
意味する。薬剤の量或は薬剤の有効性の部分的損失が生
じ得かつ部分的不活性化もまた起き得ることは理解すべ
きである。が、残った活性な薬剤がリステリアのような
病原性微生物に対抗して食料品表面を保護することがで
きれば十分である。

発明の代表的な応用では、抗微生物剤を含浸或は塗被す
ることができるチューブラセルロース系食品ケーシング
をスキンレスウィンナ−ソーセージの製造において使用
する。このよく知られたソーセージ低温殺菌プロセスで
は、ケーシングに肉エマルションを充填して、結合剤（
ｌｉｎｋｌ　に形成する。ケーシングによってその形状
が与えられた被包装肉エマルションを、次いで、適当な
温度で十分な時間調理（熱処理）して低温殺菌を行なう
。ソーセージを含む肉製品を約１９０下（８８℃）より
低い温度に保った（低温殺菌する間でさえ）後に、家庭
或は企業の使用用に販売するのが代表的である。加工肉
のような食料品は、低温殺菌する間、約１４５下（６３
℃）より高（かつ約１８０下（８２℃）以下の内部温度
にもたらした後に、製品を加工する間彫付けるのに使用
したフィルムを取り去るのが普通である。これらの低温
殺菌した食↑４品の表面温度は１９０下（８８℃）を越
えないようにするのが代表的であり、１７０下（７７℃
）より低くするのが普通である。次いで、被包装ウィン
ナ−ソーセージを例えば水を注ぎ及び／又は冷却するこ
とによって更に加工或は処理してもよい。次いで、ケー
シングをよ（知られた剥離手段で熱処理したウィンナ−
ソーセージから取り去り、ウィンナ−ソーセージを再包
装して小売り販売する。

発明の一実施態様では、ケーシングは特に機械によって
高速剥離及び除去するのに適応させた可剥性ケーシング
である。ケーシングは当分野で手により或は機械によっ
て剥離し得ることが知られている。手で剥離し得るケー
シングが全て、機械、例えばテネシー、バートレットの
レインジャー　ツール　カンパニー、インコーホレーテ
ッド製の良く知られたＡｐｏｌｌｏ　Ｐｅｒｔｔｅｒに
よって行う高速剥離に適用されるとは限られない。この
及び同様の商用ピーラ−は１時間当り４０．０００〜６
０、０００のソーセージからケーシングを取り去ること
ができる。

このように、充填する前にケーシングに適用した抗微生
物剤はこの熱処理及び加工工程の作用に耐えて熱処理し
た後に望ましくない微生物の生育を殺し、抑制し或は防
止するのに有効なままでなければならない。また、ケー
シングを取り去ることから、薬剤は有効量が食料品に移
行しなければならない。ウィンナ−ソーセージ表面の微
生物汚染は、ケーシングを取り去った後、包装する前の
時間に起き得る。

別法として、発明の抗菌性組成物のような抗微生物剤を
、熱処理した後に適用するフィルム上のコーティングを
経て食料品に適用してもよく或はかかる組成物を食料品
に混合し、食料品表面に吹付け、或は食料品を抗菌性組
成物中に浸漬して直接適用してもよい。

よって、移行或は適用された薬剤は、熱処理し、加工し
、ケーシングを取り去った後に、微生物、好ましくはリ
ステリア菌の生育を十分な期間殺し、抑制し或は防止す
る程の量で伴在して依然十分有効なままになるべきであ
る。フィルムに適用した薬剤が効果をもっているこの期
間は、少なくともケーシングを取り去った時から、例え
ば消費者或は会社に販売するために包装するまでに及ぶ
べきである。薬剤は、小売商品人が食品を販売に供する
期間である通常の「セルバイ」或は「満了」日を通じて
有効なままになるのが有利である。有効な期間は消費者
が包装を開けて、食品損傷が明らかになる通常の鮮度期
間の終りまで及ぶのが好ましい。スキンレスウィンナ−
ソーセージの場合、代表的な期間は下記の通りである：
ケーシングを取り去ってから消費者用包装するまで、約
１０分〜１時間；消費者用包装してから通常の小売販売
する間、約３０〜６０日：消費者用包装を通常の冷蔵貯
蔵して開けて使用する期間、約７日或はそれ以上。いず
れの場合でも、所望の期間及び通常の保存寿命時間は食
料品毎に変わり、当業者ならば、包装時間及び保存寿命
時間が食料品のタイプ（例えば、牛肉、ウィンナ−ソー
セージ、家禽或はチーズ）、食料品のサイズ、被包装品
の数（消費者サイズ或は企業サイズ包装）、貯蔵温度、
加工条件及び包装装置に応じて変わることを認識してい
る。

発明の一実施態様に従う、隣接する食料品表面と直接に
接触するフィルムの内面からの抗微生物剤の移行は、薬
剤が加工する間に、次いでゲージングを剥離して取り去
るにもかかわらず、食料品表面上のリステリア細菌の生
育を殺し或は抑制するのに有効な程の量で少なくとも一
部恒久的に食料品に移行されるものである。

上記の例は好例であり、発明をウィンナ−ソーセージに
よる使用に限ると考えるべきではない。

発明は任意の食料品、特に、抗微生物剤、特に抗菌剤を
調節した量で食料品表面に適用して利点を得ることがで
きるものに適用することができる。

発明の組成物、フィルム及び方法は動物白米及び植物由
来の両方の食料品に適用性を有するものと考えられる。

このような食料品は下記を含み、これらに限定されない
二全てのタイプのソーセージ（牛、豚、ニワトリ、七面
鳥、魚、等）、肉のブライマル及びサブブラマル切身、
ランチョンミート、ハム、ラム、ステーキ、ハンバーガ
ー、ニワトリ、上面、１、アヒル、ガチョウを含む家出
、並びに魚、酪農製品、例えばセミソフト及びハードチ
ーズ、加工チーズ、植物性製品、例えばレタス、豆腐、
コールスロー、大豆由来のタンパク質肉代用品。

本発明のフィルム及び／又は抗微生物性、好ましくは抗
菌性の、耐熱性剤、例えばリゾチーム、ナイシン或はペ
ジオコックスアシジラクチシＰＡＣ１，Ｏが産生するバ
クテリオシンＰＡ−１を利用するのが好ましい。ナイシ
ンは上述した通りのポリペプチドバクテリオシンである
。

リゾチームは溶菌反応を引き起こすことができる酵素で
ある。Ｎ−アセチルへキソサミノダーゼとして或は１．
４−ベーターＮ−アセヂルムラミダーゼとしても知られ
ているリゾチームは卵アルブミンから抽出することがで
き、自然において広く見出される。細菌細胞を崩壊する
或は溶解する酵素であるリゾチームはリステリア閑のよ
うなグラム陽性細菌に対して有効である。リゾチームは
１００℃に耐えることができて活性をほとんど失わない
と報告されている。例えば、ブロクター（Ｐｒｏｃ七ｏ
ｒ）等、「ザ　ケミストリー　オプ　リゾチーム　アン
ド　イック　ユース　アズ　ア　フード　ブリザーバテ
ィブ　アンド　ア　ファーマシューティカルＪ、ＣＲＣ
クリティカル　リビューズ　イン　フート　サイエンス
　アンド　ニュートリジョン、２６巻、イシュー４．３
５９−３９５頁（１９８８年）を参照。同文献を本明細
書中に採用する。リゾチームはインディアナ、エルクハ
ードのマイルズ　インコーホレーテッドから水溶性白色
粉末として入手し得る。

本発明の方法及びフィルムに従って用いる抗微生物剤は
、フィルム形成の前或は後に適用してフィルムにフィル
ムの単位面積当り調節した量の剤を点在、塗被及び含浸
させることができる。また、薬剤を混合して使用しても
よ（或は複数の薬剤を逐次に適用してもよい。キレート
化剤、結合剤、乳化剤及びその他の添加剤も同様にケー
シングに同時に（混合してか或は別々のいずれかで）適
用してもよく或は逐次に適用してもよい。

本発明において、抗微生物剤及び添加剤を、ヂューブラ
ケーシングのようなフィルムの外面に、ケーシングを剤
及び／又は添加剤を含有する溶液の浴の中に通して適用
してもよい。薬剤をケーシングの中に、ケーシングが所
望の量の薬剤及び添加剤を含浸させる程の時間浸透させ
た後に、ケーシングを絞りロール或はワイパーの中に通
して過剰の液体を掻取っ（ドクターし）でもよい。ケー
シングを処理浴（また、「浸漬浴」或は「浸漬タンク」
とも呼ばれ得る）の中に通すプロセスもまた「浸漬」工
程と呼ぶことができる。別法として、薬剤或は添加剤を
浸漬と異なる方法、例λば吹付け、はけ塗、ロール陰性
、プリント、等によってケーシングの外面に適用しても
よい。

別法として、薬剤或は添加剤をチュー（ｃｈｉｕｌに係
る米国特許４．１７１．３８１号に記載されているいく
つかのよく知られた手順の内のいずれかによってケーシ
ング等のフィルムチューブの内面に適用してもよく、同
米国特許の開示内容を本明細書中に援用する。これらは
スラッギング或はバブルコーティング、吹付け、ひだ寄
せしながらのコーティングを含む。

ケーシングの内面を塗布するスラッギング法はケーシン
グの一部にコーティング材料を、コーティング材料のス
ラグがケーシングを２つの平行ローラーの上にたらして
かけて形成する「Ｕ」形状の底部に通常圧るように充填
し、次いでコーティング材料のスラグをケーシング内部
に閉じ込めたままにしてケーシングの連続した不定長を
移動させ、その間、ケーシングはスラグを通って移動し
てスラグの内に含有されるコーティング材料によってケ
ーシング内壁が塗被されることを伴う。

また、例えば米国特許３．４５１．８２７号に、種々の
コーティング材料を直径の小さいケーシングの内面上に
適用する吹付は法が開示されている。

シャイナー（Ｓｈｉｎｅｒ）等に係る米国特許３．３７
８゜３７９号では、コーティング材料を直径の大きいケ
ーシングの内面に適用する「スラッギング」法が用いら
れている。

抗微生物剤は、食料品に接触するように適応させるフィ
ルム表面が薬剤を食料品に移行させることができるなら
ば、フィルムのどちらの面に適用してもよい０例えば、
セルロース系チューブラ食品ケーシングの内面に、薬剤
を溶質或は分散として含有する溶液をスラッギングによ
って、或は調節量を乾燥か或は液体のいずれかの形で吹
付けることによって塗被してもよい。次いで、ケーシン
グの内部に、食料品と薬剤とを接触させるために、ハム
、肉エマルション或はチーズ等の食品を充填してよい、
別法として、ケーシングの外面に薬剤を塗被し、ケーシ
ングな当分野でよく知られた手段（例えば、米国特許４
．１６２．６９３号参照）によって反転充填して食料品
の表面に薬剤を接触させてもよい。

フィルム表面上に塗被する薬剤は、外部塗被しようと或
は内部塗被しようと、単に表面コーティングとして存在
しても或は存在しなくてもよいことに注目すべきで在る
。例えば、薬剤は、セルロースが薬剤を含有する溶液の
液体溶媒を吸収するにつれて、ケーシングのセルロース
構造に侵入し得る。別法として、非吸収性熱可塑性フィ
ルム、或は含浸を妨げるバリヤーコーティングを有する
セルロース系フィルム或はバリヤ一層まで含浸させる多
層フィルムを使用してもよい。よって、本明細書中で用
いる通りの「塗被する」なる用語はフィルム壁が必ずし
も含浸されずに、単に抗微生物剤をフィルム表面上に有
するだけでもよい意味であることを了解すべきであるが
、その用語は、また、フィルム壁に薬剤を点在或は含浸
させる場合にも適用し得る。いずれの場合でも、薬剤は
、使用中、フィルムから開放可能でありかつ食料品の表
面に抗微生物作用をもたらすのに必要な程度に食料品表
面に移行可能であるべきである。

抗微生物剤を含有する溶液は、本発明に従って、また、
フィルムを処理するのに適当に用いることができる他の
成分を含有してもよい。例えば、チューブラ食品ケーシ
ングに、例えば保湿剤或は軟化剤として機能することが
できるグリセリン及び／又はプロピレングリコール、等
を、抗微生物剤と共に溶液で、或は別々に塗被してもよ
い。

食品包装フィルムを製造するのに、或は更に処理するの
に通常用いられる他の成分を、所望ならば、またフィル
ムの中に或は上に存在させてもよく、それらは、抗微生
物剤を使用しなかった場合と同じ方法及び量で使用して
よい。例えば、セルロースエーテル及び鉱油をセルロー
ス系ケーシングの場合に使用することがよくあり、粘着
防止及び帯電防止剤を熱可塑性フィルムの場合に使用す
ることがよくある。

フィルムはシート状であっても或はチューブラであって
もよく、ロール状であっても或は定尺物であってもよい
。チューブラフィルムを慣用の技法により、例えば熱シ
ールし、チューブを横断して切断してバッグに形成して
もよく或はひだ寄せしてもよい。フィルムを慣用の方法
によってひだ寄せしてもよい。

ひだ寄せする前の所定のタイプのフィルム、例えば再生
セルロース系ケーシングを乾燥及び／又は給温してひだ
寄せ及び／又はそれ以上加工するのに適した水分にして
もよい。慣用の乾燥及び／又は加湿の必要性は処理した
後のケーシングの水分、ケーシングのタイプ及び最終用
途に依存する。ゲルストック、ドライストック及び再加
湿したケーシングは、全て本発明において用いるのに適
している。

今１発明は下記の例によって一層明瞭に理解されるもの
と思う。下記の例は単に発明の例示として挙げるもので
あって、発明をいささかも制限するつもりのものではな
い。他に示さない場合、全ての部及びパーセンテージは
重量により、かつフィルム或はケーシングに関連したパ
ーセンテージは全てフィルム或はケーシングの全重量を
基串にする。細菌平板菌数（プレートカウント）は、他
に示さない場合、３つのプレートのついての算術平均で
ある。推定のプレートカウントは微生物学分野で一般に
認められている手順によって行った。

阿ユニニ乙溢 種々の試験溶液の効力及び抗微生物剤であるナイシン及
びペジオシンの濃度を、ダラム陽性細菌すステリア菌の
ような病原性細菌の増殖に対する液体アセイ法によって
調べた。全好気性細菌の増殖もまた測定し、効力を同様
にして調べた。キレート化剤であるエチレンジアミンテ
トラ酢酸にナトリウム塩）、クエン酸及びシクロデキス
トリンの使用もまた単独で及び種々の濃度のナイシン或
はペジオシンと共に調べた。

これらの例を、微生物学の分野の当業者によく知られた
無菌技法を使用して行った。二倍強度の滅菌したＤ　Ｉ
　ＦＣＯブランドトリプトース肉汁に、１ｍｇ当り少な
くとも約１０．０００コロニ一形成単位（ｃｆｕｌの食
品単離したリステリア菌血清型（七ロタイブ）４ｂの２
つの病原性菌株の混合物を接種した。この接種した肉汁
を、次いで、接種した肉汁及び試験溶液の等部分を用い
て、二倍強度の抗微生物性試験溶液を収容する試験管に
加えた。。次いで、試験管にふたをして内容物を十分に
混ぜた。表１ａ及び１ｂに試験溶液成分及び量を挙げる
。試験した後に、未接種肉汁と試験溶液とを同様に混ぜ
た溶液についてｐＨを測定し、ｌ）Ｈ値もまた表１ａ及
びｌｂに報告する。試験溶液成分についての量を「二倍
強度」溶液を、次いで上述した通りの等容積の接種した
肉汁で希釈することに基づいて計算した。表１８及びｔ
ｂに挙げる量は、接種した肉汁及び試験溶液の等容積に
ついて等重量を仮定して計算した。混合接種試験溶液を
二連りに作り、約３０℃において撹拌しないでインキュ
ベートした。各々の試験サンプルについて、アリコート
０．３　ａｉを、混合した直後（０時間）、並びに４．
８．２４及び４８時間に、無菌状態で、ピペットによっ
て抜き出した。これらのアリコートを、取り出した直後
に、微生物学の分野の当業者に知られている標準のプレ
ートカウント手順に従って、ＬＰＭアガール及びトリブ
チックソイアガールプレート上に平板培養（プレートア
ウト）してリステリア及び全好気性細菌カウントを求め
た０選択的リステリアカウントをＵ。

Ｓ、デパートメント　イン　アグリカルチャー（ＵＳＤ
Ａ）フード　セーフティ　アンド　インスベクションサ
ービス（ＦＳＩＳ）、マイクロバイオロジーディビジョ
ン、ｒＦＳＩＳメソッドフォージ　アイソレーション　
アンド　アイデンティフィケーション　才ブ　リステリ
ア　モノサイトゲネス　フロム　プロセスド　ミート　
アンドボウルトリープロダクツ」　（フォー　ユース　
イン　インタリム　ラボラタリー　リコグニションプロ
グラム）なる表題の方法を用い、ＦＳＩＳから入手し得
るＦＳｒＳの１９８８年１１月４日付けＡ、Ｂ、モラン
（Ｍｏｒａｎ入及び１９８８年１１月８日イ寸けＲ，Ｗ
、ジョンストン（Ｊｏｈｎｓｔｏｎ）による上記表題の
論文に記載されている通りにして行った。同論文を本明
細書中に援用する。特定の試験溶液成分及び濃度につい
ての細菌カウント結果を表１８及び１ｂに、３つの反復
試験プレートについて、■−当りのコロニー形成単位（
ｃｆｕ）の算術平均細菌カウントとして報告する。

例１及び２は対照例である（発明の例でない）。例１及
び２において、試験溶液は脱イオン水であり、これに上
述した通りにして肉汁を混ぜ（例１には接種しなかった
）、対照としてランした。例２は接種し、対照としてラ
ンした。試験結果は、未接種対照（例１）について、４
８時間の試験期間中に有意のレベルのリステリアが存在
しなかったこと及び、全好気性細菌の増殖が、かかる増
殖が８時間の期間から２４時間及び４８時間の試験期を
通じて速いベースで進行した場合に、８時間の試験期間
まで明らかでなかったことを示す。接種した脱イオン水
対照Ｃ例２）は初期カウント約３１．０００ｃｆｕ　／
−から４時間の試験サンプル（３７，０００ｃｆｕ　／
ＩＩＩ）を通じてのろい段階を示した後に、８時間（ｌ
　Ｏ，ＯＯＯ，０ＯＯｃｆｕ　／−）及び２４時間（３
００，０００，０００ｃｆｕ　／−）において爆発的増
殖を示し、次いで４８時間において死滅（ダイオフ）段
階（７，７００，０００ｃｆｕ　／　ｍｌ　）を示した
。爆発的増殖の後のこの死滅段階は、即時に進行する高
い増殖に関連した要因、例えば養分の枯渇或は試験細菌
（リステリア）による抑制性廃棄物の生成によるものと
考えられる。同様に、全好気性細菌カウントはのろい増
殖の後に、爆発的増殖、次いで「死滅ｊＬｊ′）期間を
示す。例１−２８について全好気性細菌カウントを行う
場合、多（の例において、芽胞形成バヂルスの証拠があ
った。これらの生物は全好気性及びリステリア細菌カウ
ントの間の差異を示すのが代表的である。

２つの異なるキレート化剤、すなわちＦＩＬＥＤＴＡの
ニナトリウム塩（Ｎａ２ＥＤＴＡ）及び（２）クエン酸
の抗菌性活性を、各々０．８ｆｌＸｆｉ％を脱イオン水
に入れて上述した通りにして接種して試験した。例３　
（Ｎａ、ＥＤＴＡ）はリステリア生物の増殖を抑制する
ことが認められ、生物の最大数が２４時間において、死
滅段階が４８時間において求、められな。例４（クエン
酸）もまたリステリアを殺しかつ抑制するのに有効であ
ったが、生物のレベルは４８時間の試験期間にわたっ、
で変動し、高い平均カウント３５．０００ｃｆｕ　／−
が８時間において報告された。Ｎ　ａ２　Ｅ　Ｄ　Ｔ　
Ａは、全好気性細菌カウントに関して抑制的であり、接
種対照（例２）の場合の５（Ｑ６千万ｃｆｕ／ｆｆ１ｇ
に比べて、８時間において報告された平均プレートカウ
ント８８．０００ｃｆｕ　／−は高いものであった。ク
エン酸は極めて有効であり、初期平均カウント６．５０
０ｃｆｕ／−から４８時間における低い６４０ｃｆｕ／
ａｆｆｉまでの試験期間にわたって、全好気性細菌の数
の一様の減少を生じた。クエン酸の効力は少なくとも一
部ｐＨ作用によるものであったかもしれず、低いｐＨは
当分野で知られている通りに細菌の増殖を抑制すること
ができる。

例５−１６では、試験溶液はナイシン単独で及びクエン
酸及びＮａ、ＥＤＴＡと共に、種々の濃度で用いた。こ
れら全ての試験について平均のリステリアプレートカウ
ントは、接種直後に行ったゼロ時間試験を含む全試験期
間の間、１ｏｃｆｕ／Ｉｌｌより少なかった。例２（接
種した対照）並びに例３及び４（キレート化剤のみを含
有する）は、接種直後（０時間）平均リステリアカウン
ト少なくともｌ　０．０００ｃｆｕ　／ｒｎ１を有する
として求めた。

よって、これらの試験条件下でナイシンを含有する同様
にして接種したサンプルが、全て混合した際に実質的に
全てのリステリアを殺すように作用したのは明らかであ
る。初期試験期間の後にリステリアの増殖が見られなか
ったことは、初期根絶か或はリステリアの有意の減少の
いずれかの後に極めて有効な抑制を示し得る。

例５−１６の場合の全好気性細菌プレートカウントにつ
いての結果は、キレート化剤の不存在及び存在における
ナイシン濃度が全細菌増殖に及ぼす作用を立証するもの
である。

例５−８は脱イオン水中のナイシン（アブリンアンド　
パレット　リミティドから入手し得るＮ１５ａｐｌｉｎ
ブランドナイシン製剤の形）の濃度を変えた試験溶液で
あった。例５−８は、ナイシンの各々の濃度について、
接種細菌を初期に殺して１０ｃｆｕ／！より少ないレベ
ルにすることを示す。接種した試験溶液を非選択性トレ
ブチックンイアガールにプレートして得られた全好気性
細菌カウントは、故意に加えたリステリアと付随する他
の微生物の汚染との混合物になる。比較して、例２−４
は、全て初期カウント５．９００〜９．　ｌ　Ｏ０ｃｆ
ｕ／耐を示し、他方、未接種の対照（例１）は１０ｃｆ
ｕ　／ｌｄより少ない初期カウントを有していた。

ナイシン１．ｐｐｍを含有する例５を未接種の対照（例
２）と比べると、ナイシンは、特に初期に好気性細菌を
殺しかつ少なくとも初めに好気性細菌の増殖を抑制する
のに有効であることを示す。しかし、例５の場合の８時
間平均カウント１３０ｃｆｕ　／−は２４時間試験期間
までに、爆発的に増殖して９．　Ｌ　００．０００ｃｆ
ｕ　／−になっていた。この増殖は接種対照（例２）の
場合の増殖より少なく、未接種対照（例１）の場合の２
４時間における増殖とほぼ同じである。例５において、
全好気性細菌の急速な増殖が続いて、４８時間において
平均プレートカウント４５．０００．０００ｃｆｕ　／
ａｄになった。例５と例６−８とを比べると、ナイシン
の濃度を増大させることは全好気性細菌についてｂＡ発
的増殖段階の開始を遅らせ、かつ各々の期間についての
平均全好気性細菌カウントを、ナイシンの含有量が少な
い他の溶液に比べて減少させる働きをすることを立証す
る。

例９−１２はナイシン濃度において例５−８に匹敵する
が、またキレート化剤であるＥＤＴＡの二ナトリウム塩
（本明細書以降、Ｎ　ａ　２　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａ　）０．
８重量％も含有する。平均全好気性細菌プレートカウン
トについての結果は、例９の場合に４８時間において１
１０ｃｆｕ／−である他は、全て１０ｃｆｕ／−より少
ない。これより、例えば２４時間平均細菌カウントを例
３　（Ｎａ、ＥＤＴＡｏ、８重量％）、例５（ナイシン
ｉ　ｐｐｍ　）及びｆ９１１９（ナイシン１　ｐｐｍと
Ｎａ、ＥＤＴＡｏ、８重量％との組合せ）について比較
すれば、平均全好気性細菌カウント、それぞれ８８，０
００ｃｆｕ　／ｒｄ、９．　ｌ　Ｏ０゜０００ｃｆｕ／
−及び＜１０ｃｆｕ／−を示す。ナイシンとキレート化
剤とを組合せた場合に、細菌が驚（程に減少して１０　
ｃｆｕ　／−より少な（なることは予期されないことで
ある。例３及び５−１２の２４時間及び４８時間データ
の比較が示す通りに、ナイシン及びＮａ２ＥＤＴＡ等の
キレート化剤は明らかに相乗的に作用して全好気性細菌
の平均数を減少させる。例１３−１６では、第２のキレ
ート化剤をナイシンと組合わせて試みた。これらの例は
例５−８と同様であったが、各々はまたクエン酸０．８
重量％も含有した。例１６の場合の初期平均カウントが
３０ｃｆｕ／−である他は、クエン酸とナイシンとを組
合わせて含有するこれらの試験溶液は全て１ｏｃｆｕ／
−より少ない平均全好気性プレートカウントを有してい
た。上記の試験結果は個々のキレート剤及びナイシンの
抗菌活性、並びにナイシンとキレート化剤とを組合せた
ものの全好気性細菌レベルに対する活性が驚くべき程に
かつ予期されない程に良好であることを立証する。この
ことは、ナイシンとＮ　ａｍ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａ或はクエ
ン酸等のキレート化剤との組合せが細菌を殺しかつ抑制
するのに予期されない効率で働き、よって食料品に適用
して保存寿命を著しく向上させ得ることを意味する。

１＠＋　１７−２８では、試験溶液は種々の濃度のペジ
オシンを、キレート化剤Ｎ　ａ　ｚ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａ及
びクエン酸を伴って及び伴わずに含有する。ペジオシン
は、当分野で一般的に知られている、ペジオコックスア
シジラクチをスキムミルク中で培養してペジオシンを作
る手順に従ってスキムミルクで作った製剤として加えた
。

表１ａにおける平均リステリアプレートカウントを参照
すれば、ペジオシン単独でリステリアを殺し、その増殖
を抑制するが、等重量基質でナイシン程には有効でない
ことは明らかである。結果は、ペジオシンの濃度をｌ　
ｐｐｍより高（上げれば通常リステリアの初期カウント
数を減少させることを示す。ペジオシンの量が１０ｐｐ
Ｉ１１或はそれ以下のレベルでは接種対照（例２）に比
べてリスプリアの増殖を抑制したが、リステリアは増殖
し続けたのに対し、ペジオシンが５０　ｐｐｍ或はそれ
以上のレベルでは、ペジオシンは初期に報告される細菌
カウントを減少させるように思われるばかりでなく、リ
ステリアカウントを対数ファクター分増大させなかった
：すなわち、４８時間の試験期間中の最も高い平均リス
テリアカウントは７４０ｃｆｕ／ｍｉ！であった０例２
１−２４では、試験溶液は例１７−２０の場合と同様で
あったが、キレート化剤Ｎ　ａ　２　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａ　
０．８重量％が種々の濃度のペジオシンと共に存在した
０例２１−２４を例３及び例１７−２０に比べ立証され
る通りに、ペジオシンとＮ　ａｍ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａとの
組合せは、特にペジオシンのレベルが低い（１０ｐｐｍ
及びそれ以°Ｆ）場合、リステリアの増殖を４８時間の
試験期間にわたり殺し及び殺すのに予期されない程に有
効であった。例２５−２８では、これらの溶液は例２１
−２４のＮ　ａｍ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａに代えて別のキレー
ト化剤であるクエン酸を用いた。ペジオシン及びクエン
酸含有溶液の場合の平均リステリアプレートカウントは
驚く程に少なく、かつリステリア細菌を殺しかつ抑制す
る際の相乗的効率を示す６例えば、２４時間における平
均プレートカウントの比較は下記の通りである：クエン
酸０．８重量％単独の場合−７０，０００ｃｆｕ　／　
ｍｌ　（例４）；ペジオシン１　ｐｐｍの場合−１７０
゜ＯＯＯ，０００ｃｆｕ　／ｍｉ（例１７）：クエン酸
０．８重ヱ％とペジオシンｌ　ｐｐｍとを組合せた場合
−１０ｃｆｕ　／ｄ　（例２５）。例２５についての１
０ｃｆｕ／−なる結果は著しく低い。個々の成分単独に
比べてペジオシンとキレート化剤とを組合わせて達成す
ることができる対数的減少は顕著でありかつ子！■され
ないものである。

ペジオシンは、平均全好気性細菌カウントに関し、特に
２４及び４８時間試験期間において、明らかに増殖をお
くらせかつ減少させ、ペジオシンの濃度が高い程その効
果が太き（なる。ペジオシンとキレート化剤であるＮａ
２ＥＤＴＡ及びクエン酸との使用もまた全好気性細菌の
増殖を抑制するのに有効であった。

上記の例１−２８は種々、の抗微生物剤が病原性及び好
気性細菌に対して有効であることを立証する。ナイシン
とＮ　ａ　ｔ　Ｅ　Ｄ　Ｔ’　Ａ或はクエン酸のような
キレート化剤との組合せが、いずれかの成分を単独で使
用した場合に比べて、全好気性細菌に対して驚く程に有
効であることを示したのは予期されないことであった。

また、ペジオシンとＮａ２ＥＤＴΔ或はクエン酸のよう
なキレート化剤との組合せが個々の成分に比べて病原性
リステリア細菌に対して驚くべき程に有効なことも予期
されない。

例２９−４３ 種々の抗微生物剤をウィンナ−ソーセージのような食料
品に適用して、後の損傷に対する効力を試験した。新し
く作ったスキンレス（ケーシングを取り去った）低温殺
菌したフランクフルトソーセージが有する表面細菌は、
代表的な商業的製造プロセスの間に直接真空包装した後
では、フランクフルトソーセージ当り１．ｏｏＯｃｆｕ
より少ないのが代表的である。細菌カウントがフランク
フルトソーセージ当りｌｏ７〜１．　Ｏ’　ｃｆｕ或は
それ以上のオーダーの大きさに達した場合、損傷が目で
見て明らかになるのが代表的である。真空包装した冷蔵
加工肉について一般的な損傷細菌は乳酸菌（１ａｃｔｏ
ｂａｃｉｌｉｕｓｌを含む。特に、種々の溶液が。

その中に浸漬させた食料品をリステリア菌のような病原
性細菌の増殖に対して保ルする際の効力を二式験した。

代表的な肉エマルション及び加工処理から形成したフラ
ンクフルトソーセージを使用した。フランクフルトソー
セージは、牛／豚肉エマルションをＥ　−Ｚ　Ｐｅｅｌ
　Ｎ　ＯＪ　Ａ　Ｘ　（登録商標）ブランドセルロース
系ケーシング（イリノイ、シカゴのビスケースコーポレ
ーションから市販されている）に充填し、ガス燃焼、湿
度調節した燻製室内で相対温度約２０％において、フラ
ンクフルトソーセージが燻煙を添加しない条件下で内部
温度少なくとも１６０°Ｆ（７１”Ｃ）に達するまで調
理して作った。次いで、ケーシングを商用剥離機で剥離
し７て廃棄した。剥離したフランクフルトソーセージを
、微生物学的試験を始めるまで、ポリエヂレンバッグに
入れて約４℃において短期間貯蔵した。

肉エマルションは、表Ａに挙げる成分から、商用ボウル
チョッパーで約５分間細断かつ混合し、次いで商用エマ
ルションミルの中に通して細かく切って均一な肉エマル
ションを達成することにょって作った。低温殺菌したフ
ランクフルトソーセージの化学分析は下記を示した二水
分５６．９％、脂肪２７．２％、タンパク質１２．２％
、灰分２．５％。

ｉ語１．９０％、亜硝酸ナトリウム６５ｐｐｍ、フラン
クフルトソーセージ表面ｐＨ６，４０゜表　　Ａ ビーフチャック　　３０　　　　　（１３，５）レギュ
ラーボーク　２０　　　　　（９１トリミング 水／氷　　　　　　１２．５　　　　（５，６１塩　　
　　　　　　　１．１２５　（０，５０６１デキストロ
ース　　　１．０　　　（０，４５）４０下（４℃）に
おいて貯蔵した冷蔵フランクフルトソーセージ試験溶液
を、個々のフランクフルトソーセージを試験液中に約３
０秒間できるだけ手でされらずに浸した後に、各々のフ
ランクフルトソーセージを垂直に約３０秒間保って排液
させることによって、表面塗被した。塗被したフランク
フルトソーセージに、次いで、病原性リステリア菌の３
菌株（肉製品か或は肉プラントのいずれかから単離した
菌株から培養した）の混合物を、フランクフルトソーセ
ージ当りおよそ１０．０００〜３０，０００コロニ一形
成単位（ｃｆｕ）のレベルで接種した（未接種の対照を
除く）。接種した直後に、各々の例からのフランクフル
トソーセージを無菌緩衝液で洗い、該液を上述した方法
を用いて非選択性トリプトングルコースイースト（ＴＧ
Ｙ）アガール及びリステリア選択性ＬＰＭアガールの両
方にプレートし、インキュベートして全好気性細菌及び
リステリアの存在を求めることによって試験した。

フランクフルトソーセージを、接種し、た後に、市販さ
れているＰＥ、ＲＦＬＥＸ（登録商標）５１Ｂ　　Ｂａ
ｒｒｉｅｒ　Ｂａｇ　　（イリ、ノイ、シカゴのビスケ
ース　コーポレーション製）で個々に包装した。これら
のバッグを商用エバキュエータ−／シーラーによって排
気しかつ高真空下でヒートシールして■口境に対する酸
素及び水分バリヤーとした。試験サンプルを周囲温度（
約２５℃）において２日間貯蔵し、次いで接種した後の
サンプルについて上述した通りにして全細菌及びリステ
リアカウントの試験をした。試験溶液及び細菌カウント
を表２に報Ｉ′９する。

例２９−４３では抗微生物剤を脱イオン水に溶解或は懸
濁させた。表２に報告する試験溶液は全て水をベースに
した。

例２９は他の例と、フランクフルトソーセージを脱イオ
ン水ザンブル中に浸漬しただけで、次いでリステリア生
物を接種しなかった点で、異なった。例２９を未接種対
解（発明でない）として実施して、例えばフランクフル
トソーセージ上にすでにある、或は付随して起きる汚染
によって導入されるバックグラウンド生物の増殖を調べ
た。例２９についての結果は、２日の試験期間中に有意
のレベルのリステリアが検出されず、全好気性細菌につ
いての平均プレートカウントがフランクフルトソーセー
ジ当り２．６００から推定５９０゜０００　ｃｆｕに増
大したことを示す。

例３０は、脱イオン水を試験溶液とした接種対照（発明
でない）として実施した。この例は例２４と同じであっ
たが、浸漬したフランクフルトソーセージにリステリア
生物を接種した。リステリアの増洋は、２日の試験期間
にわたって爆発的であり、フランクフルトソーセージ当
りの推定平均プレートカウント３８．０００．０００に
達した。

全好気性細菌カウントは同様の爆発的増殖を示した。

例３１では、ＥＤＴＡの三ナトリウム塩の３重量％溶液
は、２日の試験期間にわたって、フランクフルトソーセ
ージ上のリステリア増殖か或は全好気性増殖のいずれか
に認め得る程の９音な与えなかった。

例３２−３５では、種々の濃度のナイシンを単独で及び
キレート化剤Ｎ　ａｓ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａと組合わせてフ
ランクフルトソーセージに関して試験した。これらの例
では、ナイシンをミルクを醗酵させて作った製剤として
加えた。このナイシン製剤は英国、ドロウブリッジのア
ブリン　アンド　パレットから商品名ｒ　Ｎ１５ａｐＬ
ｉｎＪで市販されている。試験溶液で、例えばナイシン
０．ＯＩ重爪％を得るには、ナイシン製剤（Ｎｉｓａｐ
ｌｉｎ）　０．４重量％を加えることが必要であった。

例３０−４３の試験溶液を塗被したフランクフルトソー
セージ全てに初めにフランクフルトソーセージ当り少な
くとも約１０．０ＯＯｃｆｕのリステリアを接種したと
考えたが、例３２−３５の場合のリステリアについての
平均初期プレートカウントは全て１ｏｃｆｕより少なか
った。これらの少ない初期カウントは、ナイシン含有コ
ーティングに接触して相当数のリステリアが殺されたこ
とを示すものと考えられる。ナイシン含有コーティング
溶液は全て２日の期間にわたってリステリアの増殖を低
下させるのに有効であり、溶液のナイシン含有量が多け
ればリステリアを抑制するのに一后有効であった。フラ
ンクフルトソーセージがナイシン単独を試験溶液レベル
１００　ｐｐｍで含有する例３２は、明らかに２日の期
間にわたって最も有効であったが、これは初期根絶か、
或は相当の減少の後に非常に有効な抑制があったことに
よるものであったかもしれない。全好気性細菌について
の試験結果は、例３５と例３１及び３２とを比較してわ
かる通りに、ナイシンｔ　ｏ　ｏ　ｐｐｍ及びＮａｇＥ
　Ｄ　Ｔ　Ａ　３．０重量％が相乗的に作用して、塗被
し、調理し或は低温殺菌した肉表面上の全好気性細菌増
殖を抑えつけることを示唆する。

例３６−３９では、非商用のナイシン製剤を使用した。

このナイシン製剤は、乳連鎖球菌を一般に知られている
手順を用いてスキムミルク中で培養して作った。例３６
はキレート化剤Ｎ　ａｓ　Ｅ　Ｄ　ＴＡを持たないナイ
シン５２　ｐｐｍのｉ８１ｆｆｌを塗被したフランクフ
ルトソーセージを試験した。例３６についての結果を例
３１及び３９と比較すると、ナイシンとキレート化剤Ｎ
ａ、ＥＤＴＡとを組合わせて用いることにより、２日の
試験期間の間、リステリアについての平均プレートカウ
ント及び全好気性細菌の両方において驚くべき程のかつ
予期されない減少を生じたことを示す。

他のキレート化剤を調べて、ナイシンとクエン酸か或は
シクロデキストリンのいずれかとの組合せが全好気性細
菌に対して予期されない程に良好な抑制的及び殺減作用
を有していた。カイシン／シクロデキストリン及びナイ
シン／クエン酸の組合せもまた食品表面上のリステリア
増殖に対して極めて良くイ１効であることを立証した。

これらの例で使用したシクロデキストリンはベーターシ
クロデキストリンであり、インディアナ、ハモンドのア
メリカンメイズ−プロダクツ　カンパニーから市販され
ている。

例２９−４３は、ナイシン及びＮ　ａｓ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　
Ａ、クエン酸或はシクロデキストリンのようなキレート
化剤を含む殺菌性組成物を用いて病原性細菌を段しかつ
抑制して食品貯蔵寿命を伸ばし得ることを立証する。ナ
イシンとキレート化剤との組合せを含む新規な組成物は
明らかに食品保存剤として有用である。ここでは、溶液
を浸漬によってフランクフルトソーセージ表面に適用し
たが、前述した通りに他の適用方法、例えば吹付け、混
合或は開放可能に塗被したフィルムを接触させる方法を
用いることができ、かつ発明の組成物は、加工肉ばかり
でなく、果実、野菜、穀物、酪農製品、卯、並びに肉、
家禽及び魚を含む他の食品に関しても用いることができ
ると考えられる。組成物はフレッシュな、生の、調理し
た。低温殺菌した及び滅菌した食品について使用効果を
有するものと考えられる。病原性及び食品損傷生物を殺
しかつ抑制する相乗効率は上記の試験結果によって立証
される。

皿」二先二」し旦 種々の抗微生物剤をフランクフルトソーセージに、ソー
セージの各々を、剤を有する水をベースにした試験溶液
中に浸漬させて適用した。浸漬したフランクフルトソー
セージに細菌を接種して細菌の表面増殖を　時間にわた
って試験した。この試験についての手順は、上記の例２
９−４３の場合にたどった手順と実質的に同じであった
が、下記に示す通りの変更を行った。ここで使用した肉
エマルションは例２９−４３の場合に用いたのと実質的
に同じ配合であったが、例４４−５５の場合の肉エマル
ションはデキストロースを使用しなかった。フランクフ
ルトソーセージの調理／加工条件は同じであったが、相
対湿度を２５％にし、かつフランクフルトソーセージを
内部温度１６２下（７２℃）に達するまで調理した。今
低温殺菌したフランクフルトソーセージの化学分析は下
記を示した二表面ｐ＋１６．３６．水分５６．３％、脂
肪２８．７％、タンパク質１２．４％、灰分２．６％、
塩１．９４％、！１１硝酸ナトリウム５６ｐｐｍ、ｉ煙
を加えなかったが、燻煙分析を行って、調理したフラン
クフルトソーセージｌｏｏｇ当り、酸２４．６ｍｇ、フ
ェノール０．３　ｍｇ及びカルボニル化合物７．１ｍｇ
を示した。これらの量は燻製室における燻煙成分の残留
付着によるものと考えられた。

フランクフルトソーセージを試験溶液に３０秒間浸漬さ
せた後に３０秒間排液させて、ソーセージに試験溶液を
塗被した。塗被したフランクフルトソーセージに、次い
で、病原性リステリア閑の３菌株の混合物を、接種物０
．０５ｔｉ（約１００細胞）をピペットで各々のフラン
クフルトソーセージに移して、接種した。接種物を無菌
の綿棒で広げた。次いで、フランクフルトソーセージを
４つの内の２Ｎで包装して市販されているＰＥＲＦＬＥ
Ｘ　　５１Ｂバ’Ｊ　’ｔ’−ハッ’７　（イＩＪ　／
イ、シカゴのビスケース　コーポレーション製）の中に
入れた。熱可塑性フィルムのこれらのバッグを商用のエ
バキュエータ−／シーラーラを用いて排気しかつ高真空
下でヒートシールして環境に対する酸素及び水分バリヤ
ーとした。各々の試験溶液を塗被したフランクフルトソ
ーセージ用に、別のパッケージセットを作った。８つの
フランクフルトソーセージの各々のシールしたパッケー
ジを約４０下（４，４℃）で貯蔵した。三重パッケージ
を貯蔵の初め（０日）及び１４．２８及び４２日におい
て分析した。アセイするために、１つのフランクフルト
ソーセージを試験する各々のパッケージから無菌状態で
取り出し、ホスフェート緩衝液ＩＯ−と共にバッグに入
れ、次いで振侶してフランクフルトソーセージ表面に付
着している細菌細胞をすすぎ落す。逐次小数（デシマル
）希釈液を、上記例２９−４３の通りにして、ＬＰＭア
ガール及びＴＧＹアガール上にプレートアウトした。試
験した３つの重複パッケージからの算術平均プレートカ
ウント結果を表３に報告する。

例４４及び４５の場合のフランクフルトソーセージは、
オルトリン酸カリウム約４２．５　ｐｐｍをｐ１１７．
２に調整した脱イオン水中に含有するバッターフィール
ドの緩衝ホスフェート希釈液の溶液に各々のフランクフ
ルトソーセージを浸漬して塗被した。例４４及び４５は
、例４５のフランクフルトソーセージだけにリステリア
を接種した点で異なった。よって、例４４は未接種の対
照（発明でない）として働き、例４５は上記の例２９及
び３０と同様の接種対昭（発明でない）として働いた。

バッターフィールドの緩衝ホスフェート希釈液を用いて
すでに存在するか或は加えた細菌に浸透力による破壊を
最小にした。結果は、未接種対照の場合、４２日試験期
間にわたって有意のレベルのリステリアを示さず、他方
、全好気性細菌についての平均プレートカウントは４２
日アセイによってフランクフルトソーセージ当り３．２
００゜０００　ｃｆｕに達した。接種した対照（例４５
）からのフランクフルトソーセージは、初期平均プレー
トカウント３４０ｃｆｕ／フランクフルトソーセージか
ら２８における平均１．４０　Ｑ、　０００．０００ｃ
ｆｕ　／フランクフルトソーセージへのリステリアの急
速な増殖を示した。４２日サンプルについての細菌プレ
ートカウントは、ｔＪｌ：気したパッケージ内に含有さ
れる流体の曇りを示すパッケージを目視検査して求める
通りに、細菌の故が過度に多いことによって、求められ
なかった。この曇りが、極めて高いレベルのｍ菌を示す
ことは食品微生物学の当業者に知られている。４２日に
おける過度の細菌数は、未接種の対口へ（例４４）及び
下記に検討する例５４及び５５を除く全ての試験におい
て明白であった。全好気性中温プレートカウントの結果
は、リステリア（条件好気菌）及びイ」随する全ての細
菌の両方を含む全好気性細菌の増殖が平均１２０ｃｆｕ
／フランクフルトソーセージから２８日アセイにおける
平均１．９００．　ＯＯＯ，ＯＯＯ／フランクフルトソ
ーセージに増大することを示す。

例４６−５３では、ＥＤＴΔのニナトリウム塩の水をベ
ースにした溶液を試験した。溶解したＮ　ａ　２　Ｅ　
Ｄ　Ｔ　Ａを単独で、プロピレングリコール、ナトリウ
ムベンゾエート、カリウムツルベート、リゾチームと組
合わせて、及びプロピレングリコール及びパラベンとの
３成分系として、フランクフルトソーセージに関して試
験した。プロピレングリコールもまた単独で及びウィン
スコンシン、マニトワクのレッド　アロウ　プロダクツ
　カンパニーが商品名Ｃｈａｒｓｏｌ　（登録商標）、
Ｃ−，１０で販売する市販されている液温と共に試験し
た。

これらの試験溶液を塗被したフランクフルトソーセージ
は全て４２日試験期間の終りにおいて容認し得ない程に
高い細菌増殖を示した。しかし、例４６．４９−５２は
、２８日アセイを通して平均全好気性細菌カウントの減
少によって示される通りに、未接種の対称に比べて細菌
の増殖を抑制するのにある程度の利点があったが、例５
２．５０及び５１のそれぞれリゾチーム、ナトリウムベ
ンゾエート及びカリウムツルベート含有溶液は２８日に
おける平均リステリアプレートカウントの対数的減少を
生じた点で効果を示した。

例５４及び５５はナイシン（ナイシンはＮ１５ａｐｌｉ
ｎの形で加えた）ｌｏｏｐｐｍ及び２５０ｐｐｍをＮ　
ａ　ｚ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａ　０．８重量％と組合わせて含
有する水をベースにした溶液を低温殺菌したフランクフ
ルトソーセージ用抗殺菌性コーティングとして試験した
。これらのコーティングはフランクフルトソーセージに
病原性リステリアが植え付けられるのに抗するのに有効
であり、初１ｑ１平均プレートカウントを減少させて１
ｏｃｆｕ／フランクフルトソーセージより少なくシ、全
４２日試験期間の間平均プレートカウントを２０ｃｆｕ
／フランクフルトソーセージ或はそれ以下に保った。リ
ステリア進択性ＬＰＭアガールの使用は、アガールの選
択性によって、もとがら存在するりステリア生物の数を
減少させ得る。よって、全好気性細［でカウントは、Ｔ
ＧＹアガールのような非選択性標鵡法を用いて行った。

全好気性細菌について行ったカウントはリステリアコロ
ニーばかりでなくスタフロコックスのようなリステリア
と競争して或はリステリアに加えて増殖し得る他の細菌
からの付随するコロニーもまた含む。例５４及び５５の
場合の令好慨性細菌についての平均プレートカウントは
１例１４５の接種対照に比べて、驚くべき生物の対ｔｔ
的減少を示す。平均プレートカウントは初め及び１４日
において１０ｃｆｕ／フランクフルトソーセージ或はそ
れ以下であったばかりでなく、２８日のカウントは、３
つの接種した対照プレートについて８千万、４億４千万
及び５２億ｃｆｕ　／フランクフルトソーセージ（平均
−１９（Ｍｃｆｕ　）であるのに比べて、例５４の場合
、＜１０、＜１０及び３．９００ｃｆｕ／フランクフル
トソーセージ及び例５５の場合、く１０．２３０及び７
０．０００ｃｆｕ　／フランクフルトソーセージであっ
た。４２日において、１００　ｐｐ＋ｏナイシン及びＮ
ａ２ＥＤＴ△溶液を塗被したフランクフルトソーセージ
は１０ｃｆｕ／フランクフルトソーセージより少ない平
均プレートカウントを有しており、他方、例５５の２５
０　ｐｐｍナインン及びＮ　ａ２　Ｅ　Ｄ　ＴＡｔ容ン
夜を塗ン皮したフランクフルトソーセー９番ごついてア
セイした３つのプレートをカウントして＜Ｉｏ、２７０
．０００．及び１．３００．０００ｃｆ＊／フランクフ
ルトソーセージであった。このように、例５４及び５５
の接種したフランクフルトソーセージについての４２日
全好気性細菌カウントは１例４４の未接種対照について
４２日においてアセイした３つのプレートカウント１３
０．０００；１ｇ０．０００；及び９．２００．０００
ｃｆｕ　／フランクフルトソーセージ（平均−３２０万
ｃｆｕ　）に有利に比較し得る。これらの顕著な結太は
、更に、ナイシン及びキレート化剤を含有する組成物を
使用して低い温度において長期間にわたって病原性及び
食品損傷細菌の増殖に対して保護し得ることを示す。こ
うして、食品保存を一層長い時間の保存によって高める
ことができる。新規組成物は浸漬溶液として用いてもよ
（或は吹付けても、食料品に混合してもよく、或は包装
フィルムに塗被し、次いで食品表面に接触させてもよい
。

匠ｊ」二二則二 例５６〜６５は、真空包装に先立ちケーシングを取除い
たフランクフルトソーセージ上のリステリア菌ないし自
然発生する他の微生物を制御すべく被覆したフランクフ
ルトソーセージケーシングを用いることの抗微生物ポテ
ンシャルを評価した。

例２９〜４３に記載の牛肉／豚肉エマルジョン配合表お
よび手順を用いてフランクフルトソーセージを製造した
が、例５６〜６５の場合配合物中のブドウ糖レベルを表
Ａに記載した量の半分とした。加工も、相対湿度を２５
％とし、また約１６０下（７１”Ｃ）の内部温度に達す
るまでフランクフルトソーセージを調理したほかは同じ
であった。上記のフランクフルトソーセージの製造手順
に対する他の例外は、ケーシングのひだ寄せ前ひだ寄せ
用溶液にナイシンおよび（又は）　ＥＤＴＡのジー若し
くはトリナトリウム塩を加えることによって使用ケーシ
ングに試験成分を内部被覆することであった。試験成分
は、ひだ寄せし再給溝した完成ケーシングの総重量に基
づく、表４にリストした重量％をもたらすのに十分な量
で加えた。

例５６および５７は夫々、未接種対照および接種対照（
本発明のものではない）として実施し、ナイシン又はＥ
ＤＴＡナトリウム塩を加えなかった外は例５８〜６５と
実質上回じひだ寄せ用溶液成分を含む市販ケーシングを
用いた０代表的ひだ寄せ用溶液は例えば米国特許第３．
８９８．３４８号に開示されている。ケーシングの除去
に続いて、フランクフルトソーセージを微生物学的試験
の開始までに約４℃で冷蔵した。この新たに製造した冷
蔵フランクフルトソーセージにリステリア菌の混合物を
接種し、これを、ここに注記した以外は例４４〜５５に
関し既述した手順に従い当初（１日）と７日、１４日、
２８日および４２日に検定した。

フランクフルトソーセージのリステリア閑接種は、フラ
ンクフルトソーセージ当り少なくとも約１０００の有機
体レベルで行なった。接種したフランクフルトソーセー
ジはパッケージ一つに８個保存し、例４４〜５５に関す
る手順に似た各試験ケーシングのフランクフルトソーセ
ージ別パッケージセットとし、検定時まで約４０下（４
，４℃）で保存した。検定結果の算術平均を表４８およ
び表４ｂに報告する。

表４８および表４ｂを参照するに、対照例５６の未接種
、未処理フランクフルトソーセージは４２日の試験でリ
ステリア菌の形跡を何ら示さず、平均的好気性平板の総
カウント数は当初の９００ｃｆｕ／フランクフルトソー
セージから２８日の４，３００，０００　ｃ　ｆ　ｕ　
／フランクフルシトソーセージないし４２日の２２，０
００ｃ　ｆ　ｕ　／フランクフルトソーセージに増殖し
た。

接種対照は、当初の平均的リステリア菌レベル８，５０
０ｃｆｕ／フランクフルトソーセージとそれが４２日ま
でに２００．０００，０００　ｃ　ｆ　ｕ　／フランク
フルトソーセージに増殖したことを示し、また当初の平
均的好気性平板の総カウント数が６．７０Ｑｃｆｕ／フ
ランクフルトソーセージで、それが４２日には６８０百
万ｃｆｕ／フランクフルトソーセージに増殖したことを
示した。対照はいずれも、イリノイ州シカゴ所在のビス
ケースコーポレーションが製造した未変性市販品セルロ
ースノンフィブラスケーシングＥ−Ｚ　Ｐｅｅｌ　Ｎｏ
ｊａｘ■を用いて製造した１例５８〜６５に関するデー
タを検討するとき、肉エマルジョンを充填し調理する前
にケーシングに適用される抗微生物剤は、フランクフル
トソーセージからケーシングを取除いた後接種対照（例
５７）に対するリステリア菌および全好気性細菌双方の
増殖を抑制するのに十分なＭで、調理法フランクフルト
ソーセージの表面に移動したことが分かる。

レギュラーセルロースケーシングも本発明に用いること
ができる。斯かるケーシングは剥離助剤に先行しつる。

有利なことに、斯かるケーシングは酸処理することがで
き、或は包被食品特にフレッシュ充填ソーセージの如き
蛋白質ないし脂肪含有食品は熱処理（調理若しくは低温
殺菌）前、酸性溶液のシャワーを浴びることができる。

斯かる酸処理は、ナイシン又はペジオシンの如き抗微生
物剤が単独若しくはキレート化剤との組合せで、熱処理
および（又は）ケーシング除去の前後包被食品を保護す
る能力を高め或は維持する有益な効果を有しつる。

例」ニニ■ 例■および例ＩＩは、本発明のものでない比較例である
。例ＩＩＩおよび例■は本発明のものである。

下記例のすべてにおいて、食品包装フィルムは、スキン
レスフランクフルトソーセージ、ウィンナ−ソーセージ
等の製造業界でよく知られたタイプのノンフィブラス小
径再生セルロースケーシングを含むものとする。斯かる
ケーシングは包装ヲチ命、剥離性等を高めるべく種々の
添加剤を被覆ないし含浸させることができる。

常法により、ドライストックノンフィブラスケーシング
を、慣用充填機上で用いられるケーシングスティック状
にひだ寄せする。ひだ寄せ作業の際、ケーシングにひだ
を作る直前、ケーシングの内面に噴霧液を一定の速度で
一様に施す。これは常法である。（ケーシングに内部被
覆を施すことに関しては例えば米国特許第３．４６２，
７９４号を合焦のこと） 各ケーシング試料に等しい制御量の溶液を一様に施した
四つの異なる試料が得られるよう表１に記載の溶液４種
を上記手順によって施すことができる。

比較例Ｉの溶液組成物は、ひだ寄せの直前ケーシング内
部に噴霧される典型的な溶液である。水はケーシングを
加湿し且つまた、可塑剤並びに（或は）プロピレングリ
コールの如き保湿剤、鉱油の如き潤滑剤、・ｒリノイ州
ガーニー所在のメイザー　ケミカルス、インコーホレー
テッドより商標名Ｍａｚｏｌ　８０で市販されているエ
トキシル化モノジグリセリド混合物の如き乳化剤および
カルボキシメチルセルロースの如き剥離助剤を含みつる
他成分用担体として作用する。

比較例ＩＩの溶液は、キレート化剤すなわちエチレンジ
アミン四酢酸のジナトリウム塩（ＮａｚＥＤＴＡ・２１
１□０）を加えるほかは例Ｉと同じ組成のものである。

本発明の例Ｉ１１の溶液は、溶液の０．０２５重量％が
リゾチーム形態め抗微生物剤であること以外は比較例＋
１のそれと同じである。

本発明の例ＩＶの溶液は、Ｎ１５ａｐｌｉｎ　１．０重
量％を加えるほかは比較例ＩＩのそれと同じである。

Ｎ１５ａｐｌｉｎは、ペニシリン不含熱処理滅菌脱脂ミ
ルク消化物とともにランスフィールドグループＮに屈す
る乳連鎖球菌の非病原性菌種の純粋培養発酵からつくら
れた商標登録済商用ナイシン製剤である。この発酵物を
発泡法により濃縮し、酸条件下での塩沈殿によって抽出
し、また噴霧法により乾燥して純粋ナイシンの１／４０
の活性を有する混合物を得る。ナイシン製剤については
Ｆｅｄｅｒａｌ　Ｒｅｇｉｓｔｅｒ、　Ｖｏｌ、５３、
Ｎｏ、６６、ｐ　１１２４７−１１２５１（１９８８年
４月６日）に更に記載されている。　Ｎ１５ａｐｌｉｎ
１重量％を用るので、例■の溶液は０．０２５重量％の
ナイシンを含有する。純粋ナイシンの活性は約４０Ｘ　
１０’ＩＵ／ｇである。

上記四種の溶液各々を類似の、しかし別個のケーシング
試料に一様に施す、各溶液は、加湿被覆ケーシングの総
重量を基にした約１９．３重量％の水分を有する噴霧ケ
ーシングをもたらすべく各溶液に関して調整された一定
速度で噴霧される。

各々異なる溶液で内部被覆されたひだ寄せケーシングの
四つの試料に、アイオワ州デスモイネス所在のＴｏｗｎ
ｓｅｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｃｏ、製フランク
フルトソーセージ充填機、商標Ｆｒａｎｋ−Ａ−Ｍａｔ
ｉｃの如き市販機上で典型的な全牛肉フランクフルトソ
ーセージミートエマルジョンを常法によって約２１〜２
２ｍｍの充填径に詰めることができる。

この包被ウィンナ−を次いでラック上に集め、慣用の熱
処理に備えて薫製室に入れる。

典型的な熱処理法は、薫製室が約１４０下（６０℃）の
乾球温度に昇温し且つ相対湿度（Ｒ１（）が約２５％に
なるまで、ガス炊きヒーターからの加湿熱風を入れるこ
とを含む。次いで、薫製室ダンパーを閉じ、煙を入れ、
１５分間温度と湿度を６０℃／２５％ＲＨの一定値に保
つ。その後、煙の導入を止め、必要時薫製室ダンパーを
開放し、薫製室温度を、約２５％の一定相対湿度で約１
６０下（７１℃）の乾球温度に（通常１５〜２０分間で
）上げ、その温度に１５分間保持する。次いで、乾球温
度を約２５％の一定相対湿度で約１８０”Ｆ（８２℃）
ニ（通常１５〜２０分かけて）再度上げ、包被フランク
フルトソーセージの内部温度り月５５〜１６０”Ｆ　（
６８〜７１’ｃ）になるまでこの温度に約４５分間保持
する。

１５５〜１６０°Ｆ（６８〜７１℃）の内部温度に達し
た後、加熱を止め、約１０分間フランクフルトソーセー
ジに冷い水道水のシャワーを浴びせた後、フランクフル
トソーセージを塩水のシャワートンネルに移動させ、そ
こで包被フランクフルトソーセージに、その内部温度が
約３５下（２℃）に低下するまでおよそ１０分間約２５
°Ｆ（−４℃）の塩水（８％塩）シャワーを浴びせる。

次いで、冷却した包被フランクフルトソーセージからＲ
ａｎｇｅｒ　Ａｐｐｏｌｏ剥離機の如き慣用装置により
ケーシングを取除いて「スキンレス」ウィンナ−を製造
することができる６ 各側のスキンレスフランクフルトソーセージに、３種の
病原性リスドリア菌株を含む緩衝液を接種することがで
きる。リストリア菌は、無菌スワブを用いて各フランク
フルトソーセージ表面に塗布しつる。而して、該スワブ
をリストリア菌含有溶液に浸漬し、これでフランクフル
トソーセージの長さに沿い一回拭いて、各フランクフル
トソーセージの表面に少なくとも約１ｏｏ好ましくは少
なくとも１０００のリストリア菌細胞が付着するように
する。

次いで、接種ウィンナ−を各層がウィンナ−４個からな
る２店で包装し、ウィンナ−８個が、塩化ビニリデン−
アクリル酸メチル共重合体と塩化ビニリデン−塩化ビニ
ル共重合体との混合物よりなる６部の酸素−水分バリヤ
一層および該６部の両側にあるエチレン−酢酸ビニル共
重合体の外層を有する多層熱可塑性バリヤーバッグ内に
あるようにする。各側で、各々ウィンナ−８個を内蔵し
た複数個のバッグを２９　ｉ　ｎ　（７４ｍｍ）Ｈｇに
１非気し、ヒートシールする。

次いで、包装した接種ウィンナ−を約４０下（４℃）で
冷蔵し、そして各側のパッケージからの試料を当初とそ
の後２週間毎に６週間試験する。

上記の間隔で、フランクフルトソーセージ試料は、ウィ
ンナ−を取出し且つその表面の微生物を無菌緩衝剤で洗
去することにより試験することができる。次いで、緩衝
剤洗液を、（１）トリプトングルコースイーストアガー
ルを用いた慣用手段による標準平板カウントおよび（２
）例１〜２８に関して既述したＦＳｒＳ法とＬＰＭアガ
ールを用いた選択的リステリア菌カウントについて試験
する。

フランクフルトソーセージの初期サンプリングは、すべ
ての試料上にリステリア菌が存在することを確証し、ま
た例ＩＩＩおよび例■からのフランクフルトソーセージ
上に夫々リゾチームおよびナイシンの存在することを確
証すると予想される。

４週間後と６週間後、上記比較例■およびＩＩはいずれ
も初期接種物に対してリステリア菌の生存コロニーが増
殖することを示すと予想される。

例Ｉ１１のリゾチーム処理したフランクフルトソーセー
ジは、接種対照試料と比較して生育可能なりステリア菌
をほとんど示さないと予想される。例■のナイシン処理
されたフランクフルトソーセージも亦、４週間後および
６週間後に、接種対照ウィンナ−に対して生育可能なリ
ステリア菌が低下することを示すと予想される。

上記の比較例ＩおよびＩＩ並びに本発明の例■およびＩ
Ｖは本発明の方法およびフィルムを例証する。

本発明の他の修正は当業者に明らかであり、斯かるすべ
ての修正は、前掲特許請求の範囲に定義した本発明の範
囲内であると見なされる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、連鎖球菌属由来或はペジオコックス属由来のバクテ
   リオシン或は均等の合成抗細菌剤をキレート化剤と組合
   わせて含む殺菌性組成物。 ２、前記抗細菌剤がナイシンを含む特許請求の範囲第１
   項記載の組成物。 ３、前記抗細菌剤がペジオシンを含む特許請求の範囲第
   １項記載の組成物。 ４、液体或は液中固体懸濁である特許請求の範囲第１項
   記載の組成物。 ５、前記キレート化剤が有機性である特許請求の範囲第
   １項記載の組成物。 ６、前記キレート化剤がアミノポリカルボン酸或はその
   塩を含む特許請求の範囲第１項記載の組成物。 ７、前記キレート化剤がヒドロカルボン酸或はその塩を
   含む特許請求の範囲第１項記載の組成物。 ８、前記キレート化剤がＥＤＴＡ或はその塩、クエン酸
   或はその塩、或はシクロデキストリンを含む特許請求の
   範囲第１項記載の組成物。 ９、前記抗微生物剤が乳連鎖球菌由来のバクテリオシン
   を含む特許請求の範囲第１項記載の組成物。 １０、ｐＨ≦６を有する特許請求の範囲第１項記載の組
   成物。 １１、ｐＨ≦５を有する特許請求の範囲第１項記載の組
   成物。 １２、前記キレート化剤がＥＤＴＡの塩を含む特許請求
   の範囲第２項記載の組成物。 １３、接触した際に病原性リステリア菌を殺すのに有効
   な特許請求の範囲第１項記載の組成物。 １４、前記キレート化剤がクエン酸或はその塩を含む特
   許請求の範囲第２項記載の組成物。 １５、前記キレート化剤がシクロデキストリンを含む特
   許請求の範囲第２項記載の組成物。 １６、食品に添加して食品を保存するように適応された
   、ニシン及びキレート化剤を含む組成物を含む食品保存
   用製剤。 １７、前記組成物が液中固体懸濁或は液状混合物である
   特許請求の範囲第１６項記載の製剤。 １８、組成物がｐＨ≦６を有する特許請求の範囲第１６
   項記載の製剤。 １９、組成物がｐＨ≦５を有する特許請求の範囲第１６
   項記載の製剤。 ２０、耐熱性の連鎖球菌属由来或はペジオコックス属由
   来のバクテリオシン或は均等の合成抗細菌剤を含有する
   ポリマーフィルムを含む食品包装フィルム。 ２１、前記剤をフィルム中に含浸させた特許請求の範囲
   第２０項記載のフィルム。 ２２、前記剤をフィルムの少なくとも１つの表面上に塗
   被した特許請求の範囲第２０項記載のフィルム。 ２３、前記抗細菌剤がナイシンを含む特許請求の範囲第
   ２０項記載のフィルム。 ２４、前記抗菌剤が乳連鎖球菌由来のバクテリオシンを
   含む特許請求の範囲第２０項記載のフィルム。 ２５、チューブラケーシングを構成する特許請求の範囲
   第２０項記載のフィルム。 ２６、熱収縮性バッグを構成する特許請求の範囲第２０
   項記載のフィルム。 ２７、前記剤をフィルムと接触する食品表面に、フィル
   ムを取り去った後に該食品表面上で微生物が生育するの
   を防止或は抑制するのに有効な量で移行させるように適
   応させた特許請求の範囲第２０項記載のフィルム。 ２８、更にキレート化剤を前記抗菌剤と組合わせて含む
   特許請求の範囲第２０項記載のフィルム。 ２９、再生セルロースを含む特許請求の範囲第２０項記
   載のフィルム。 ３０、非繊維質セルロース系チューブラ食品ケーシング
   を構成する特許請求の範囲第２０項記載のフィルム。 ３１、ポリオレフィン、ポリアミドの熱可塑性ホモポリ
   マー或はコポリマー或はポリ塩化ビニリデンコポリマー
   を含む特許請求の範囲第２０項記載のフィルム。 ３２、前記剤がペジオコックスアシジラクチ由来のバク
   テリオシン或は合成均等物を含む特許請求の範囲第２０
   項記載のフィルム。 ３３、前記剤がペジオシンを含む特許請求の範囲第２０
   項記載のフィルム。 ３４、更に食料品をフィルムによって囲ませてなる特許
   請求の範囲第２０項記載のフィルム。 ３５、前記食料品がソーセージを含む特許請求の範囲第
   ３４項記載のフィルム。 ３６、フィルムの前記塗布面がｐＨ≦６を有する特許請
   求の範囲第２２項記載のフィルム。 ３７、更に、キレート化剤を含む特許請求の範囲第２３
   項記載のフィルム。 ３８、更に、ＥＤＴＡを含む特許請求の範囲第２３項記
   載のフィルム。 ３９、ａ）食料品に抗微生物剤を含有するポリマーフィ
   ルムを接触させ、 ｂ）該フィルムから調節された量の該微生物剤を該食料
   品の表面に移行させ、 ｃ）該フィルムを取り去る ことを含み、それで該移された剤の量が該食料品表面上
   に残って微生物の生育を防止或は抑制する、食料品表面
   を抗微生物剤で処理する方法。 ４０、前記微生物がリステリア菌を含む特許請求の範囲
   第３９項記載の方法。 ４１、前記食料品が動物由来の製品を含む特許請求の範
   囲第３９項記載の方法。 ４２、前記ポリマーフィルム再生セルロース食品ケーシ
   ングを構成する特許請求の範囲第３９項記載の方法。 ４３、前記ポリマーフィルムが非繊維質セルロース系食
   品ケーシングを構成する特許請求の範囲第３９項記載の
   方法。 ４４、前記抗微生物剤がナイシンを含む特許請求の範囲
   第３９項記載の方法。 ４５、前記抗微生物剤が酵素を含む特許請求の範囲第３
   ９項記載の方法。 ４６、前記抗微生物剤が耐熱性である特許請求の範囲第
   ３９項記載の方法。 ４７、前記食料品を、前記接触工程から前記フィルム除
   去工程の後まで、８８℃（１９０°Ｆ）より低い温度に
   保つ特許請求の範囲第３９項記載の方法。 ４８、前記食料品を６３℃（１４５°Ｆ）より高くかつ
   ８２℃（１８０°Ｆ）以下の内部温度にもたらした後に
   フィルムを取り去り、食料品の表面温度は８８℃（１９
   ０°Ｆ）を越えないようにして食料品を低温殺菌する特
   許請求の範囲第３９項記載の方法。 ４９、前記ポリマーフィルムがポリオレフィン、ポリア
   ミドの熱可塑性ホモポリマー或はコポリマー或はポリ塩
   化ビニリデンコポリマーを含む特許請求の範囲第３９項
   記載の方法。 ５０、食料品に、連鎖球菌属由来の或はペジオコックス
   属由来の或は合成の均等バクテリオシンをキレート化剤
   と組合わせて塗被したフィルムを接触させることを含む
   、食料品表面を抗菌剤で処理する方法。 ５１、前記バクテリオシンがナイシンを含む特許請求の
   範囲第５０項記載の方法。 ５２、前記バクテリオシンがペジオシンを含む特許請求
   の範囲第５０項記載の方法。 ５３、食料品表面に、キレート化剤と連鎖球菌属由来の
   或はペジオコックス属由来のバクテリオシン或は合成均
   等物との混合物を病原性細菌を殺す或は病原性細菌の生
   育を抑制する程の量で塗被することを含む、食料品表面
   を抗菌剤で処理する方法。 ５４、前記バクテリオシンがナイシン或はペジオシンを
   含む特許請求の範囲第５３項記載の方法。 ５５、前記キレート化剤がクエン酸或はその塩、ＥＤＴ
   Ａ或はその塩、或はシクロデキストリンを含む特許請求
   の範囲第５３項記載の方法。 ５６、前記バクテリオシンが前記混合物中に該混合物の
   少なくとも５重量ｐｐｍの濃度で存在する特許請求の範
   囲第５３項記載の方法。 ５７、前記バクテリオシンが前記混合物中に該混合物の
   少なくとも１００重量ｐｐｍの濃度で存在する特許請求
   の範囲第５３項記載の方法。 ５８、前記キレート化剤が前記混合物の少なくとも０．
   ２重量％の量で存在する特許請求の範囲第５３項記載の
   方法。 ５９、前記キレート化剤が前記混合物の少なくとも０．
   ８重量％の量で存在する特許請求の範囲第５３項記載の
   方法。 ６０、前記塗被を、前記混合物を前記食料品に吹付けて
   或は食料品を混合物中に浸漬して行う特許請求の範囲第
   ５３項記載の方法。 ６１、前記食料品が非酪農製品である特許請求の範囲第
   ５３項記載の方法。 ６２、表面を、少なくとも一部キレート化剤とナイシン
   或はペジオシンを含む抗菌剤との混合物で被覆させた食
   料品。 ６３、内面上に耐熱性抗微生物剤を有し、該剤は隣接す
   る食料品表面に直接接触しかつ加工する間に食料品に、
   後にケーシングを剥離するにもかかわらず食料品表面上
   のリステリア菌を殺すか或はその生育を抑制するのに有
   効な程の量で少なくとも一部恒久的に移行可能な可剥性
   食品ケーシング。 ６４、高速機械で剥離するのに適応させた特許請求の範
   囲第６３項記載のケーシング。 ６５、ひだ寄せした特許請求の範囲第６３項記載のケー
   シング。 ６６、前記剤がキレート化剤とナイシン或はペジオシン
   を含むバクテリオシンとの混合物を含む特許請求の範囲
   第６３項記載のケーシング。 ６７、食料品がソーセージを含む特許請求の範囲第６３
   項記載のケーシング。 ６８、前記キレート化剤がＥＤＴＡ、クエン酸或はそれ
   らの塩を含む特許請求の範囲第６６項記載のケーシング
   。 ６９、食料品を、フィルムと食料品表面との界面に、キ
   レート化剤及び連鎖球菌属由来の或はペジオコックス属
   由来のバクテリオシン或は合成均等物を含むバクテリオ
   シンを含有するフィルムにくるませて含む食品パッケー
   ジ。 ７０、前記バクテリオシンがナイシンを含む特許請求の
   範囲第６９項記載の食品パッケージ。 ７１、前記バクテリオシンがペジオシンを含む特許請求
   の範囲第６９項記載の食品パッケージ。 ７２、前記キレート化剤がクエン酸、ＥＤＴＡ或はそれ
   らの塩を含む特許請求の範囲第６９項記載の食品パッケ
   ージ。 ７３、前記フィルムが再生セルロースを含む特許請求の
   範囲第６９項記載の食品パッケージ。 ７４、フィルムがポリオレフィン、ポリアミドの熱可塑
   性ホモポリマー或はコポリマー或はポリ塩化ビニリデン
   コポリマーを含む特許請求の範囲第６９項記載の食品パ
   ッケージ。