JP6585659B2 - 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 - Google Patents
脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6585659B2 JP6585659B2 JP2017122319A JP2017122319A JP6585659B2 JP 6585659 B2 JP6585659 B2 JP 6585659B2 JP 2017122319 A JP2017122319 A JP 2017122319A JP 2017122319 A JP2017122319 A JP 2017122319A JP 6585659 B2 JP6585659 B2 JP 6585659B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lipid
- mmol
- optionally substituted
- lipids
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
- A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
- C07J41/0055—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of at least three carbon atoms which may or may not be branched, e.g. cholane or cholestane derivatives, optionally cyclised, e.g. 17-beta-phenyl or 17-beta-furyl derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J43/00—Normal steroids having a nitrogen-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
- C07J43/003—Normal steroids having a nitrogen-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not condensed
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J31/00—Normal steroids containing one or more sulfur atoms not belonging to a hetero ring
- C07J31/006—Normal steroids containing one or more sulfur atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J31/003
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Polyethers (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
本発明は、カチオン性脂質化合物、ステルス脂質(stealth lipid)化合物、および、当該化合物を含む組成物に関する。本発明はまた、当該化合物および組成物の製造方法、および、例えば細胞および組織に生物活性薬物を送達するための、当該化合物および組成物の方法およびその方法における当該化合物および組成物の使用に関する。本発明は、特に肝臓および腫瘍を含む特定の細胞型に、生物活性薬物を送達するための脂質製剤に使用するためのカチオン性脂質において、最適化されたpKa範囲、および製剤を最適化する方法を記載している。
生物活性薬物(治療関連化合物を含む)の対象への送達は、しばしば、化合物が標的細胞または組織に到達するのが困難であることによって妨げられる。特に、多くの生物活性薬物の生存細胞への輸送は、細胞の複雑な膜系によってかなり制限される。これらの制限のために、成果を得るために望ましい濃度よりもはるかに高い濃度の生物活性薬物の使用を要し、これは毒作用および副作用のリスクを増大させる。この問題の1つの解決方法は、細胞への選択的な侵入が可能な特異的担体分子を利用することである。脂質担体、生物分解性ポリマーおよび種々のコンジュゲート系を、細胞への生物活性薬物の送達を改善するために用いることが可能である。
は3つが、一体となって、キヌクリジノ、ピペリジノ、ピロリジノまたはモルホリノであるものが開示されている。
を有するアミノ脂質を開示している。
本発明は、新規カチオン性脂質およびステルス脂質、それらを含む製剤、およびそれらの使用方法を提供する。また、特にRNAi構築物を含む薬物を治療有効量でそれを必要とする対象に送達するために当該脂質を使用する製剤を提供する。特定の範囲内のpKaを有するカチオン性脂質を含む特定の製剤が、対象の肝臓および/または体細胞組織中の腫瘍へ治療有効量の薬物を投与するために提供される。原則として(例外がある)、腫瘍への送達に最も有効な製剤(下により詳細に記載)は、約6.1以下のpKaを有するカチオン性脂質を含み、特定の範囲は、腫瘍のタイプに依存して、約5.0〜約6.7を含み、特に約5.2〜約6.3、または約5.4〜約6.2、または約5.8〜約6.1を含む。一方、肝臓への送達に最も有効な製剤(下記により詳細に記載)は、約6.1以上のpKaを有するカチオン性脂質を含み、特定の範囲は、約5.1〜約7.4を含み、約5.3〜約7.3を含み、特に約5.9〜約7.0を含み、一つの態様において約6.2〜約6.8である。
組成物により生物活性薬物(治療薬を含む)を細胞に送達(in vivo送達を含む)するための方法およびその方法における当該化合物および組成物の使用、および、in vivoで特定の細胞型および組織に送達するために当該製剤を最適化する方法を提供する。本発明はまたステルス脂質を提供する。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
bは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
cは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、存在しないか、または−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体を提供する。
Zは、PEG、ならびに、ポリ(オキサゾリン)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(グリセロール)、ポリ(N−ビニルピロリドン)、ポリ[N−(2−ヒドロキシプロピル)メタクリルアミド]およびポリ(アミノ酸)をベースとするポリマー(ここで、ポリマーは直鎖であっても分枝であってもよく、また、所望により置換されていてもよい。)から選択される親水性頭部であり;
ここで、Zは、n個のサブユニットが重合したものであり;
nは、10ユニットと200ユニットの間のZの平均重合度であり、ここで、nは、異なるポリマータイプについて最適化されており;
L1は、エーテル(例えば−O−)、エステル(例えば−C(O)O−)、スクシネート(例えば−O(O)C−CH2−CH2−C(O)O−))、カルバメート(例えば−OC(O)−NR'−)、カーボネート(例えば−OC(O)O−)、ケトン(例えば−C−C(O)−C−);カルボニル(例えば−C(O)−);ウレア(例えば−NRC(O)NR'−)、アミン(例えば−NR'−)、アミド(例えば−C(O)NR'−)、イミン(例えば−C(NR')−)、チオエーテル(例えば−S−)、キサントゲン酸エステル(xanthate)(例えば−OC(S)S−)およびホスホジエステル(例えば−OP(O)2O−)(これらは何れも、0個、1個またはそれ以上のZ基によって置換されていてもよい。)を0個、1個、2個またはそれ以上含む、所望により置換されたC1-10アルキレンまたはC1-10ヘテロアルキレンリンカーであり;
ここで、R'は、−H、−NH−、−NH2、−O−、−S−、ホスフェートまたは所望により置換されたC1-10アルキレンから独立して選択され;
X1およびX2は、炭素原子、または、−NH−、−O−、−S−もしくはホスフェートから選択されるヘテロ原子から独立して選択され;
A1およびA2は、C6-30アルキル、C6-30アルケニルおよびC6-30アルキニルから独立して選択され、ここで、A1およびA2は、同一であっても異なっていてもよいか、
あるいは、A1およびA2は、それらが結合している炭素原子と一体となって、所望により置換されたステロイドを形成する。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を提供する。
これまで、大部分の体細胞組織への治療有効量のRNAi組成物の送達に問題があるために、RNAi分野の治療可能性は満たされていない。RNAi治療薬は、眼、皮膚、肺および肝臓の組織を対象とする場合は、ある程度有効である。他の全ての体細胞組織を処置するために、および転移性癌を含む癌に、治療有効量のRNAiを送達するための組成物および方法に対する必要性が残存している。
一つの態様において、本発明は、式(I):
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
bは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
cは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、存在しないか、または−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体を提供する
式Iの一つの態様において、aは、所望により置換されたC1アルキレンである。式Iの一つの態様において、bは、所望により置換されたC0-2アルキレンである。式Iの一つの態様において、bは、所望により置換されたC1アルキレンである。式Iの一つの態様において、cは、存在しないか、または所望により置換されたC1アルキレンである。
式Iの一つの態様において、a、bおよびcは非置換である。式Iの一つの態様において、cは存在しない。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
bは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
cは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−Lc−
{ここで、Lcは、所望により置換されたC1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンである。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC16-22アルケニル基であり;
Lは、−Lc−
{ここで、Lcは、所望により置換されたC1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンである。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC16-22アルケニル基であり;
Lは、−Lc−
{ここで、Lcは、所望により置換されたC1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンである。}
であり;
Y2は、ステロイドの環Aの3位のヒドロキシ基を介して結合しているコレステロールであり、当該ヒドロキシ基の水素原子は存在しない。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその薬学的に許容される誘導体によって表される。
本発明は、脂質部分に連結している親水性頭部を含む“ステルス脂質”を含む。ステルス脂質のさらなる特徴を以下に示す。
Zは、PEG、ならびに、ポリ(オキサゾリン)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(グリセロール)、ポリ(N−ビニルピロリドン)、ポリ[N−(2−ヒドロキシプロピル)メタクリルアミド]およびポリ(アミノ酸)をベースとするポリマー(ここで、ポリマーは直鎖であっても分枝鎖であってもよく、また、所望により置換されていてもよい。)から選択される親水性頭部であり;
ここで、Zは、n個のサブユニットが重合したものであり;
nは、10ユニットと200ユニットの間のZの平均重合度であり、ここで、nは、異なるポリマータイプについて最適化されており;
L1は、エーテル(例えば−O−)、エステル(例えば−C(O)O−)、スクシネート(例えば−O(O)C−CH2−CH2−C(O)O−))、カルバメート(例えば−OC(O)−NR'−)、カーボネート(例えば−OC(O)O−)、ケトン(例えば−C−C(O)−C−)、カルボニル(例えば−C(O)−)、ウレア(例えば−NRC(O)NR'−)、アミン(例えば−NR'−)、アミド(例えば−C(O)NR'−)、イミン(例えば−C(NR')−)、チオエーテル(例えば−S−)、キサントゲン酸エステル(例えば−OC(S)S−)およびホスホジエステル(例えば−OP(O)2O−)(これらは何れも、0個、1個またはそれ以上のZ基で置換されていてもよい。)を0個、1個、2個またはそれ以上含む、所望により置換されたC1-10アルキレンまたはC1-10ヘテロアルキレンリンカーであり;
ここで、R'は、−H、−NH−、−NH2、−O−、−S−、ホスフェートまたは所望により置換されたC1-10アルキレンから独立して選択され;
X1およびX2は、炭素原子、または、−NH−、−O−、−S−もしくはホスフェートから選択されるヘテロ原子から独立して選択され;
A1およびA2は、C6-30アルキル、C6-30アルケニルおよびC6-30アルキニルから独立して選択され、ここで、A1およびA2は、同一であっても異なっていてもよいか、
あるいは、A1およびA2は、それらが結合している炭素原子と一体となって、所望により置換されたステロイドを形成する。]
のステルス脂質またはその塩または薬学的に許容される誘導体を提供する。
PEGは、ポリ(エチレングリコール)サブユニットであり、ここで、PEGは、直鎖であっても分枝鎖であってもよく;
nは、10ユニットと200ユニットの間のPEGの平均重合度であり、好ましくは約23ユニット、約45ユニットまたは約68ユニットであり;
L1は、エーテル、エステル、スクシネート、カルバメート、カーボネート、ケトン、カルボニル、ウレア、アミン、アミド、イミン、チオエーテル、キサントゲン酸エステルおよびホスホジエステル(これらは何れも、0個、1個またはそれ以上のPEG基によって置換されていてもよい。)を1個、2個またはそれ以上含む、所望により置換されたC1-10アルキレンまたはC1-10ヘテロアルキレンリンカーであり;
X1およびX2は、炭素または酸素から独立して選択され;
A1およびA2は、C6-30アルキル、C6-30アルケニルおよびC6-30アルキニルから独立して選択され、ここで、A1およびA2同一であっても異なっていてもよいか、
あるいは、A1およびA2は、それらが結合している炭素原子と一体となって、所望により置換されたステロイドを形成する。]
のステルス脂質またはその塩または薬学的に許容される誘導体を提供する。
質S006を含む脂質ナノ粒子は、比較すると、in vivoで、83.8%の第VII因子阻害であることを証明した。
を含む脂質ナノ粒子は、腫瘍組織において、in vivoで、46%のPLK1阻害であることを証明した。一方、ステルス脂質S004、S007、S009、S008およびS005を含む脂質ナノ粒子は、腫瘍組織において、in vivoで、それぞれ56%、65%、64%、60%および52%のPLK1阻害であることを証明した。
一つの態様において、ステルス脂質はS005である。一つの態様において、ステルス脂質はS006である。一つの態様において、ステルス脂質はS007である。一つの態様において、ステルス脂質はS008である。一つの態様において、ステルス脂質はS009である。一つの態様において、ステルス脂質はS012である。一つの態様において、ステルス脂質はS013である。一つの態様において、ステルス脂質はS014である。一つの態様において、ステルス脂質はS015である。一つの態様において、ステルス脂質はS016である。一つの態様において、ステルス脂質はS017である。一つの態様において、ステルス脂質はS018である。一つの態様において、ステルス脂質はS019である。一つの態様において、ステルス脂質はS020である。一つの態様において、ステルス脂質はS021である。一つの態様において、ステルス脂質はS022である。一つの態様において、ステルス脂質はS023である。一つの態様において、ステルス脂質はS024である。一つの態様において、ステルス脂質はS025である。一つの態様において、ステルス脂質はS026である。
一般的に、先行技術では、ステルス脂質のみを変更することによって組織依存的有効性を制御していたところ、我々は、驚くべきことに、カチオン性脂質を変えることによって特定の組織に関する有効性を制御することができることを見出した。下に記す通り、生物活性薬物を送達するための脂質製剤を、製剤に含まれるカチオン性脂質のみを変更することによって、他より優先的に1つの細胞型または臓器を標的化するよう調節することができることを見出した。例えば、pKaが約6.1以上であるカチオン性脂質は、肝臓を標的とする製剤において、pKaが約6.1以下であるカチオン性脂質を含む製剤と比べて、かなり有効である。pKaが約6.1以下であるカチオン性脂質を含む製剤は、比較すると、in vivoで腫瘍を標的とする製剤において、より有効である。原則として(例外がある)、腫瘍に送達するのに最も有効な脂質を有する製剤(下記により詳細に記載)は、腫瘍のタイプに依存して、特に、約5.2〜約6.3または約5.4〜約6.2または約5.8〜約6.1を含む、約5.0〜約6.7のpKaを有するカチオン性脂質を含む。一方、肝臓に送達するのに最も有効な脂質を有する製剤(下記により詳細に記載)は、約5.3〜約7.3を含み、約5.9〜約7.0を含み、一つの態様において、約6.2〜約6.8を含む、約5.1〜約7.4のpKaを有するカチオン性脂質を含む。
、環状の頭部の存在が、脂質製剤の挙動を予測されないほど変えること、特にそれが他の置換基の影響を変えることを報告する。
例:
a、bおよびc
一つの態様において、aは、所望により置換されたC1-2アルキレンである。一つの態様において、aは、所望により置換されたC1アルキレンである。
一つの態様において、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニル基、C5ヘテロアリールまたはC6ヘテロアリール基を形成する。一つの態様において、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニルまたはC3-20ヘテロシクロアルキニル基を形成する。
一つの態様において、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル基を形成する。
表1:H 1 〜H 52 と名付けられた部分
一つの態様において、望ましい範囲のpKa範囲を有するカチオン性脂質は、特に生物活性薬物を送達する製剤の場合を含む本発明において好ましい。
一つの態様において、肝臓を特異的に標的とするための製剤に使用するための、約5.3〜約7.3のpKaを有するカチオン性脂質である。従って、一つの態様において、カチオン性脂質のpKaは、肝臓への送達について、約5.3〜約7.3である。一つの態様において、カチオン性脂質のpKaは、肝臓への送達について、約5.9〜約7.0である。
一つの態様において、カチオン性脂質のpKaは、肝臓への送達について、約6.2〜約6.8である。
一つの態様において、X1はOである。他の態様において、X2はOである。一つの態様において、X1およびX2の両方がOである。
一つの態様において、Lは少なくとも1個のヘテロ原子を含む。これは、X2およびY2の間を直接連結する鎖が、少なくとも1個のヘテロ原子を有することを意味する。言い換えれば、L上の置換基中の何れのヘテロ原子も、これらの目的については、考慮されない。一つの態様において、Lは少なくとも1個のO原子を含む。
一つの態様において、Lcは、所望により置換されたC1-11基である。一つの態様において、Lcは、所望により置換されたC1-9基である。一つの態様において、Lcは、所望により置換されたC3-8基である。一つの態様において、Lcは、所望により置換されたC4-7基である。一つの態様において、Lcは、所望により置換されたC5、C6またはC7基である。
一つの態様において、Y1はC12-28基である。一つの態様において、Y1は所望により置換されたC14-26基である。一つの態様において、Y1は所望により置換されたC16-24基である。一つの態様において、Y1は所望により置換されたC16-22基である。一つの態様において、所望により置換されたY1鎖は、18、19、20または21原子長である。
一つの態様において、Y1は、少なくとも2個のcis不飽和アルケニル基を有する。一つの態様において、Y1は、少なくとも3個のcis不飽和アルケニル基を有する。少なくとも1個のcis不飽和アルケニル基は、ω3位、ω6位およびω9位の1箇所、2箇所または3箇所であってもよい。脂質の鎖中の不飽和は、MacLachlan et al., Journal of Controlled Release 107 (2005) 276-287において議論されている。
表2:Y 1-i 〜Y 1-vii と名付けられたY 1 に関連した部分
一つの態様において、Y2は、所望により置換されたステロイド上の酸素原子を介してLに結合している。一つの態様において、Y2は、ステロイドの環Aの3位で、酸素原子を介してLに結合している。一つの態様において、Y2は、ステロイドの環Aの3位のヒドロキシ基の水素原子が除かれたステロールである(Lへの結合は、当該ヒドロキシ基の酸素原子を介したものである)。
一つの態様において、ステロールは、コレステロールである。
新規の本発明のカチオン性脂質およびステルス脂質が、例えば生物活性薬物を含む治療上許容される薬物の送達に用いられ得る。カチオン性脂質、ステルス脂質および他のタイプの脂質を含む製剤が、本明細書に記載されている。本明細書に開示された脂質は、新規であり、有用であると考えられるが、下に示す例示的で非拘束的開示において、さらに詳細に示す通り、治療使用のために、特定の特性が他より好ましい。一つの態様において、リポソーム、脂質ナノ粒子または他のこのような脂質製剤は、さらに、生物学的に有効な薬物を含む。一つの態様において、リポソーム、脂質ナノ粒子または他のこのような脂質製剤は、空である。
一つの態様において、キットは、脂質製剤を作製するための説明書を含む。キットは、予め作られた製剤を含んでも、投与前に混合を必要とする個別の成分または一部の成分を含んでもよい。キットは、さらに、コントロール、緩衝液、容器および送達成分など(これらに限定されない)の追加の成分を提供してもよいし、本明細書に記載された本発明の脂質および成分に限定されてもよい。
一つの態様において、腫瘍に生物活性薬物を送達する組成物は、化合物E0077を含む。一つの態様において、腫瘍に生物活性薬物を送達する組成物は、化合物E0085を含む。一つの態様において、腫瘍に生物活性薬物を送達する組成物は、化合物E0088を含む。
一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0014である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0017である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0018である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0024である。
一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0052である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0054である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0118である。
一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0008である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0025である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0076である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0085である。
一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0175である。一つの態様において、好ましいカチオン性脂質は、E0177である。
本発明は、少なくとも1種の本発明のカチオン性脂質化合物を含む医薬組成物を提供する。本発明は、少なくとも1種の本発明のステルス脂質を含む医薬組成物を提供する。一つの態様において、少なくとも1種の他の脂質成分が存在する。このような組成物はまた、所望により1種以上の他の脂質成分と組み合わせた生物活性薬物を含んでもよい。一つの態様において、1種以上の成分、組成物および/または薬物が、キット中に提供される。1種以上の生物活性薬物と組み合わせて本発明の脂質を含む組成物は、一つの態様において、例えば、細胞または組織に、治療有効量の1種以上の生物活性薬物を送達するのに使用するための製剤として提供される。一つの態様において、細胞または組織は、処置または予防を必要とする対象における細胞または組織である。一つの態様において、対象は、治療有効量の生物活性薬物を必要とする患者である。本明細書で用いられるとき、対象は、ヒトおよび非ヒト動物の双方を含む。
本発明において、中性リン脂質の例は、5−ヘプタデシルベンゼン−1,3−ジオール(レゾルシノール)、コレステロール ヘミスクシネート(CHEMS)、ジパルミトイルホスファチジルコリン(DPPC)、ジステアロイルホスファチジルコリン(DSPC)、ホスホコリン(DOPC)、ジミリストイルホスファチジルコリン(DMPC)、ホスファチジルコリン(PLPC)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)、例えばホスファチジルコリン(EPC)、ジラウリロイルホスファチジルコリン(DLPC)、ジミリストイルホスファチジルコリン(DMPC)、1−ミリストイル−2−パルミトイルホスファチジルコリン(MPPC)、1−パルミトイル−2−ミリストイルホスファチジルコリン(PMPC)、1,2−ジアラキドイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン(DBPC)、1−パルミトイル−2−ステアロイルホスファチジルコリン(PSPC)、1−ステアロイル−2−パルミトイルホスファチジルコリン(SPPC)、1,2−ジステアロイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン(DAPC)、1,2−ジエイコセノイル−sn−グリセロ−3−ホスホコリン(DEPC)、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン(POPC)、リゾホスファチジルコリン、ジリノレオイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン(DSPE)、ジミリストイル ホスファチジルエタノールアミン(DMPE)、ジパルミトイル ホスファチジルエタノールアミン(DPPE)、パルミトイルオレオイル ホスファチジルエタノールアミン(POPE)、リゾホスファチジルエタノールアミン、またはこれらの組み合わせを含む。一つの態様において、中性リン脂質は、ジステアロイルホスファチジルコリン (DSPC)およびジミリストイル ホスファチジル エタノールアミン(DMPE)からなる群から選択される。
これらのパーセンテージは最終脂質粒子中の脂質成分の総モルに対するモル%である。
本発明のカチオン性脂質およびステルス脂質は、生物活性薬物を送達するのに用いられる製剤に有用である。本発明の新規脂質を含む製剤は、ミクロ粒子を含む粒子形成送達剤、ナノ粒子、および、細胞に種々の分子を送達するのに有用な導入剤を含むが、これらに限定されない種々の形態であってもよい。具体的な製剤は、生物活性薬物、例えば、抗体(例えばモノクローナル、キメラ、ヒト化、ナノボディおよびそのフラグメントなど)、コレステロール、ホルモン、ペプチド、タンパク質、化学療法剤および他のタイプの抗腫瘍薬、低分子量薬物、ビタミン、補因子、ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、酵素的核酸、アンチセンス核酸、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、アンチセンスDNAまたはRNA組成物、キメラDNA:RNA組成物、アロザイム、アプタマー、リボザイム、デコイおよびそのアナログ、プラスミドおよび他のタイプの発現ベクター、および小分子核酸、RNAi剤、低分子干渉核酸(siNA)、低分子干渉RNA(siRNA)、二本鎖RNA(dsRNA)、ミクロRNA(miRNA)および低分子ヘアピン型RNA(shRNA)分子を、関連する細胞および/または組織、例えば細胞培養物、対象または生物体に、移入または送達するのに有効である。生物活性薬物の上記リストは、例示のみであり、これらに限定されることを意図しない。このような化合物は、精製されていても部分的に精製されていてもよく、天然由来であっても合成されたものであってもよく、化学的に修飾されていてもよい。
例えばPhysician's Desk Reference, 64th ed., Physician's Desk Reference Inc. (2010), Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Philadelphia, Pa. (1985)、および、Remington The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., Lippincott Williams & Williams Publishers (2005)を参照のこと。
全般
薬学的使用において、本発明の化合物および組成物は、静脈内、筋肉内、皮下、経皮、気道(エアゾール)、経口、鼻腔内、直腸、膣、頬側、鼻咽頭、消化器または舌下投与を含む、経腸または非経腸経路によって、医薬の少なくとも一部として投与され得る。投与は、全身であっても局所であってもよい。局所投与は、例えば、カテーテル挿入、インプラント埋め込み、浸透圧ポンプ、直接注射、皮膚/経皮適用、ステント挿入、耳/眼用滴剤、または門脈投与を含んでもよい。式(I)および/または式(XI)の化合物は、提案された適応症の処置に最も適切な投与形および投与経路を選択するために、溶解度および溶液安定性(pHに対する)、浸透性などの生物薬学的性質について評価されるべきである。
・希釈剤、例えば乳糖、ブドウ糖、ショ糖、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび/またはグリシン;
・滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸とそのマグネシウム塩もしくはカルシウム塩および/またはポリエチレングリコール;
・結合剤、例えばケイ酸アルミニウムマグネシウム、澱粉ペースト、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース ナトリウムおよび/またはポリビニルピロリドン;
・崩壊剤、例えば澱粉、寒天、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩、または、発泡性混合物;および/または
/吸収剤、着色料、風味剤および/または甘味料;
を含む。
本発明の化合物および組成物は、経口で投与されてもよい。経口投与は、化合物が消化器に入る嚥下、および/または、化合物が口から直接血流に入る頬側、舌または舌下の投与を含んでもよい。
本発明の化合物および組成物を、非経腸で投与することができる。本発明の化合物および組成物は、血流、皮下組織、筋肉または内臓に直接投与されてもよい。投与に適当な方法は、静脈内、動脈内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、滑液内および皮下を含む。投与に適当なデバイスは、針(マイクロニードル)のある注射器、針のない注射器および点滴を含む。
本発明の化合物および組成物を、鼻腔内に、典型的には、乾燥粉末の形態(単独で、または、例えば乳糖との乾燥混合物における混合物として、または例えばリン脂質、例えばホスファチジルコリンと混合された混合成分粒子としての何れか)で、乾燥粉末吸入器、加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー(好ましくは微小ミストを作るための電気水力学を用いたアトマイザー)またはネブライザーからのエアゾールスプレーとして、適当な噴射剤、例えば1,1,1,2−テトラフルオロエタンまたは1,1,1,2,3,3,3−ヘプタフルオロプロパンを使用してまたは使用せずに、吸入によって、あるいは、鼻腔用滴剤として、投与することができる。鼻腔内の使用について、粉末は、生体接着剤、例えばキトサンまたはシクロデキストリンを含んでもよい。
経皮適用に適当な製剤は、担体と共に、治療有効量の本発明の化合物または組成物を含む。好都合な担体は、宿主の皮膚を通過するのを助けるための吸収可能な薬理学的に許容される溶媒を含む。典型的には、経皮デバイスは、裏打ち材、所望により担体と共に化合物を含むリザーバー、所望により延長した時間に亘って制御されたおよび予め定められた速度で化合物を宿主の皮膚に送達するための速度制御障壁、および、皮膚にデバイスを固定化するための手段を含むバンテージの形態である。
本発明の化合物、組成物、方法および使用は、患者において、下記の1つ以上に生物活性薬物を送達するために用いられ得る:
肝臓または肝臓細胞(例えば肝細胞);
腎臓または腎臓細胞;
腫瘍または腫瘍細胞;
CNSまたはCNS細胞(中枢神経系、例えば脳および/または脊髄);
PNSまたはPNS細胞(末梢神経系);
肺または肺細胞;
脈管構造または血管細胞;
皮膚または皮膚細胞(例えば真皮細胞および/または濾胞細胞);
眼または眼の細胞(例えば斑、中心窩、角膜、網膜);および
耳または耳の細胞(例えば内耳、中耳および/または外耳の細胞)。
本発明によって処置され得る疾患または状態は、患者の遺伝子、遺伝子発現、タンパク質、タンパク質活性、細胞経路などの調節に関連するものを含む。本発明によって処置される疾患または状態は、増殖性疾患(例えば腫瘍);炎症性疾患;移植片および/または組織拒絶反応(同種移植片拒絶反応);自己免疫疾患;感染性疾患;加齢関連疾患;神経疾患または神経変性疾患(例えばハンチントン病);代謝疾患;心血管疾患;呼吸器疾患;眼疾患;皮膚疾患;聴覚疾患(例えば聴覚消失、難聴);肝臓疾患(例えば肝炎、HCV、HBV、糖尿病、肝硬変、肝細胞癌)および腎臓(kidney/renal)疾患(例えば多発性嚢胞腎疾患)からなる群から選択される、1つ以上であり得る。一つの具体的な態様において、本発明は、増殖性疾患、例えば腫瘍または腫瘍細胞を処置する。一つの具体的な態様において、本発明は、肝臓疾患、例えば肝炎、HCV、HBV、糖尿病、肝硬変、特定の肝細胞癌を処置する。
本化合物、組成物、方法および使用は、疾患または状態を軽減、阻止または寛解するのに適当な状態に投与条件を含み得る。一つの態様において、処置しない患者と比較して、患者において、標的遺伝子の発現レベルを減少させる、治療有効量のRNAi剤を、それを必要とする患者に投与する。
本明細書全体で用いられるとき、“a”および“an”などの記載は、記載の文法上の対象物の1つ以上(少なくとも1つ)を言う。
本明細書で用いられるとき、用語“本発明の(脂質)化合物”、“式(I)の(脂質)化合物”、“(脂質)化合物”、“カチオン性脂質”など(すなわち本発明のカチオン性脂質につ
いての全ての記載)および/または“ステルス脂質”は、その薬学的に許容される誘導体および多型、異性体および同位体標識体を含む。さらに、当該用語は、カチオン性脂質についての式(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)および(X)の化合物;およびステルス脂質についての式(XI)および(XII)の化合物;および本明細書に開示されたその態様を含む。
用語“薬学的に許容される誘導体”は、式(I)の化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物または水和物を何れも含む。一つの態様において、薬学的に許容される誘導体は、式(I)の化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物または水和物である。
用語“薬学的に許容される塩”は、無機酸または有機酸および無機塩基または有機塩基を含む、薬学的に許容される非毒性の酸または塩基から製造される塩を含む。薬学的に許容される塩のレビューについては、Stahl and Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use (Wiley VCH, Weinheim, Germany, 2002)を参照のこと。
本発明の化合物は、溶媒和されていない形態で存在しても溶媒和された形態で存在してもよい。用語“溶媒和物”は、本発明の化合物および1種以上の薬学的に許容される溶媒分子、例えば水またはC1-6アルコール、例えばエタノールを含む分子複合体を含む。
用語“水和物”は、溶媒が水である“溶媒和物”を意味する。
本発明の化合物は、cis型およびtrans型、E型およびZ型、R型、S型およびメソ型、ケト型およびエノール型を含むが、これらに限定されない、1種以上の幾何異性体、光学異性体、エナンチオマー、ジアステレオマーおよび互変異性体の形態で存在してもよい。全てのこのような異性体の形態が本発明の範囲内に含まれる。異性体の形態は、異性体として純粋なまたは富化された形態で存在しても、異性体混合物(例えばラセミ体またはジアステレオマー混合物)で存在してもよい。
・式(I)の化合物の立体異性体混合物;
・式(I)の化合物のジアステレオマーとして富化されたまたはジアステレオマーとして純粋な異性体;または
・式(I)の化合物のエナンチオマーとして富化されたまたはエナンチオマーとして純粋な異性体;
を少なくとも提供する。
本発明は、1個以上の原子が、同じ原子番号を有するが天然に通常見出される原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子に置き換えられている、薬学的に許容される同位体標識された式(I)の化合物を含む。
本明細書で用いられるとき、“処置”は、寛解、治療および予防の処置を含む。本明細書で用いられるとき、“患者”は、処置を必要とする動物、好ましくは哺乳類、好ましくはヒトを意味する。
このような相同な配列は、当技術分野で知られている通りに、例えば配列アラインメントを用いて識別され得る。このようなsiNA分子は、相同な配列を標的化するように、例えば完全に相補的な配列を用いて、またはさらなる標的配列を提供し得る非標準的塩基対、例えばミスマッチおよび/またはゆらぎ塩基対を組み込むことによって設計され得る。
用語“脂質”は、脂肪酸エステルを含むが、これに限定されず、そして、水に不溶性であるが多くの有機溶媒に可溶性であることによって特徴付けられる有機化合物のグループを言う。脂質は、少なくとも3つのクラス(1) 脂および油、ならびに蝋を含む“単純脂質”;(2) リン脂質および糖脂質を含む“脂質化合物”;および(3) “誘導化脂質”例えばステロイド、に分割され得る。
を有する化合物を意味する。カチオン性脂質の他の例は、“組成物”の表題で上に示されている。
用語“ヘルパー脂質”は、本明細書で用いられるとき、トランスフェクション(例えば生物活性薬物を含むナノ粒子のトランスフェクション)を或る程度増強する脂質を意味する。ヘルパー脂質がトランスフェクションを増強するメカニズムは、例えば、粒子の安定性を向上させること、および/または膜融合性を向上させることを含み得る。ヘルパー脂質は、ステロイド類およびアルキルレゾルシノール類を含む。ヘルパー脂質の例は、コレステロール、5−ヘプタデシルレゾルシノールおよびコレステロール ヘミスクシネートである。
用語“ステルス脂質”は、本明細書で用いられるとき、ナノ粒子がin vivoで(例えば血中で)存在することができる時間の長さを延長する脂質を意味する。一つの態様において、ステルス脂質は、脂質部分に連結した親水性ポリマー頭部を含む。一つの態様においてリポソーム製剤中のステルス脂質は、ナノ粒子表面を保護し、それによって血液細胞によるオプソニン化および単核食細胞系のマクロファージによる取り込みを減少させる。本発明で使用するのに適当なステルス脂質の構造は、例えば式XIおよび式XIIで示された化合物を含むが、これらに限定されない。他の意図されるステルス脂質および当該脂質の生化学についての情報は、Romberg et al., Pharmaceutical Research, Vol. 25, No. 1, 2008, p.55-71 および Hoekstra et al., Biochimica et Biophysica Acta 1660 (2004) 41-52で見出され得る。
者によってさらに置き換えられ得る。さらなる適当なPEG脂質は、例えば国際公開第2006/007712号に開示されている。
S010およびS011は、それぞれ、ラベルIVaおよびIVcの下に国際公開第WO 2009/086558号に開示されている。
一つの態様において、PEGは、例えば1個以上のアルキル、アルコキシ、アシルまたはアリール基によって置換されている。一つの態様において、用語は、PEGコポリマー、例えばPEG−ポリウレタンまたはPEG−ポリプロピレンを含む(例えばJ. Milton Harris, Poly(ethylene glycol) chemistry: biotechnical and biomedical applications (1992)を参照のこと。);他の態様において、用語は、PEGコポリマーを含まない。一つの態様において、PEGは、約130〜約50,000、副態様において約150〜約30,000、副態様において約150〜約20,000、副態様において約150〜約15,000、副態様において約150〜約10,000、副態様において約150〜約6000、副態様において約150〜約5000、副態様において約150〜約4000、副態様において約150〜約3000、副態様において約300〜約3000、副態様において約1000〜約3000、副態様において約1500〜約2500の分子量を有する。
“脂質ナノ粒子”とは、分子間力によって互いに物理的に結合している複数の(すなわち1種より多い)脂質分子を含む粒子を意味する。脂質ナノ粒子は、例えばミクロスフィア(単層および多層の小胞を含むもの、例えばリポソーム)、エマルジョン中で分散された相、ミセルまたは懸濁液中の内部相であってもよい。
100%の相補性が好ましいが、50〜75%程の相補性もまた、本発明に有用であり得る(例えばWerner and Uhlenbeck, 1995, Nucleic Acids Research, 23, 2092-2096; Hammann et al., 1999, Antisense and Nucleic Acid Drug Dev., 9, 25-31を参照のこと。)。核酸は、塩基部分、糖部分およびリン酸部分で修飾され得る。用語酵素的核酸は、例えばリボザイム、触媒的RNA、酵素的RNA、触媒的DNA、アプタザイム(aptazyme)またはアプタマー結合リボザイム、制御可能なリボザイム、触媒的オリゴヌクレオチド、ヌクレオザイム(nucleozyme)、DNAザイム、RNA酵素、エンドリボヌクレアーゼ、エンドヌクレアーゼ、ミニザイム(minizyme)、リードザイム(leadzyme)、オリゴザイム(oligozyme)またはDNA酵素などのフレーズと同じ意味で用いられる。これらの用語は全て、酵素活性を有する核酸分子を記載している。酵素的核酸分子の重要な特徴は、標的核酸領域の1つ以上と相補性である基質特異的結合部位を有すること、および、それが核酸切断および/または分子へのライゲーション活性を与える基質結合部位中にまたはその周辺にヌクレオチド配列を有することである(例えば Cech et al., 米国特許出願第4,987,071号; Cech et al., 1988, 260 JAMA 3030を参照のこと)。本発明のリボザイムおよび酵素的核酸分子は、例えば、当技術分野で記載された通りに、または本明細書の他の場所で記載された通りに、化学修飾されていてもよい。
本明細書を説明する目的において、下記の定義を適用し、適切な場合はいつでも、単数形で用いられた用語は、複数を含み、またその逆も同様である。
本明細書で用いられるとき、用語“ハロゲン”または“ハロ”は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを言う。用語“ハロゲン”(または“ハロ”)は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を含む。
用語“アルキル”、“アルキレン”、“アルケニル”および“アルキニル”は、直鎖および分枝鎖の非環式形を言うために本明細書で用いられる。その環状アナログは、シクロアルキル、シクロアルケニルなどと呼ばれる。
C1-6アルキレンであり、他の態様においてC1-4アルキレン、例えばメチレン、エチレン、n−プロピレン、i−プロピレンまたはt−ブチレン基である。
本明細書で用いられるとき、用語“ヘテロ原子”は、窒素(N)、酸素(O)、リン(P)または硫黄(S)原子を言い、特に窒素または酸素である。
用語“アリール”は、一価の芳香族環状ヒドロカルビル基を含み、例えばフェニルまたはナフチル(例えば1−ナフチルまたは2−ナフチル)である。一般的に、アリール基は、単環式芳香環基であっても、多環式縮合芳香環基であってもよい。好ましいアリールは、C6−C14アリールである。本明細書で用いられるとき、用語“アリール”は、環部分に6〜20個の炭素原子を有する芳香族炭化水素基を言う。典型的には、アリールは、6〜20個の炭素原子を有する単環式、二環式または三環式アリールであり、1個以上の非芳香族炭化水素環が縮合した1個以上の芳香環を含む。非限定的な例は、フェニル、ナフチルまたはテトラヒドロナフチルを含む。
用語“ヘテロアリール”は、O、S、NおよびNRN (ここで、RNは下に定義される(一つの態様において、Hまたはアルキル(例えばC1-6アルキル)である。)から独立して選択される1個以上のヘテロ原子を含む、一価のヘテロ芳香族環状ヒドロカルビル基を含む。本明細書で用いられるとき、用語“ヘテロアリール”は、N、OまたはSから選択される1〜8個のヘテロ原子を有する5〜14員単環式または二環式または三環式芳香環
系を言う。典型的に、ヘテロアリールは、5〜10員の環系(例えば5〜7員単環式または8〜10員二環式)または5〜7員環系である。典型的なヘテロアリール基は、2−または3−チエニル、2−または3−フリル、2−または3−ピロリル、2−、4−または5−イミダゾリル、3−、4−または5−ピラゾリル、2−、4−または5−チアゾリル、3−、4−または5−イソチアゾリル、2−、4−または5−オキサゾリル、3−、4−または5−イソオキサゾリル、3−または5−1,2,4−トリアゾリル、4−または5−1,2,3−トリアゾリル、テトラゾリル、2−、3−または4−ピリジル、3−または4−ピリダジニル、3−、4−または5−ピラジニル、2−ピラジニル、および2−、4−または5−ピリミジニルを含む。
立して選択される1個以上のヘテロ原子を含む二価のヘテロ芳香族環状ヒドロカルビル基を含む。一般的に、ヘテロアリーレン基は、単環ヘテロ芳香環基であっても多環式(例えば二環式)縮合ヘテロ芳香環基であってもよい。一つの態様において、ヘテロアリーレン基は、5〜13個の環員(好ましくは5〜10個の環員)を含み、かつ、O、S、NおよびNRNから独立して選択される1個、2個、3個または4個の環ヘテロ原子を含む。一つの態様において、ヘテロアリーレン基は、5員、6員、9員または10員であってもよく、例えば5員単環式環、6員単環式環、9員縮合二環式環または10員縮合二環式環である。用語“ヘテロアリーレン”は、上で述べたヘテロアリール基それぞれの二価の誘導体を含む。
ことわりのない限り、基の組み合わせが、1個の部分(例えばアリールアルキル)として本明細書で記載されたとき、最後に記載された基が、分子の残りにその部分が結合している原子を含む。
−CH=は、−N=または−P(O)r=によって置き換えられるか;
≡C−Hは、≡Nまたは≡P(O)rによって置き換えられるか;または
−CH2−は、−O−、−S(O)q−、−NRN−または−P(O)rRN−(ここで、RNはHまたは所望により置換されたC1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、C3-6シクロアルキル、C3-6ヘテロシクロアルキル、C2-6アルケニル、C2-6ヘテロアルケニル、C3-6シクロアルケニル、C3-6ヘテロシクロアルケニル、フェニルまたは5個もしくは6個の環員を含むヘテロアリールである。)によって置き換えられる。RNは、このましくは、H、C1-6アルキルまたはC3-6シクロアルキルである。
qは、独立して、0、1または2である。一つの態様において、qは0である。
rは、独立して、0または1である。一つの態様において、rは0である。
エーテル(例えば−O−);エステル(例えば−C(O)O−);スクシネート(例えば−O(O)C−CH2−CH2−C(O)O−));カルバメート(例えば−OC(O)−NR'−);カーボネート(例えば−OC(O)O−);ケトン(例えば−C−C(O)−C−);カルボニル(例えば−C(O)−);ウレア(例えば−NRC(O)NR'−);アミン(例えば−NR'−);アミド(例えば−C(O)NR'−);イミン(例えば−C(NR')−);チオエーテル(例えば−S−);キサントゲン酸エステル(例えば−OC(S)S−);ホスホジエステル(例えば−OP(O)2O−)
{ここで、R'は、H、−NH−、−O−、−S−、ホスフェートまたは所望により置換されたC1-10アルキレンから独立して選択されていてもよい。}。
明示的にことわりのない限り、本明細書で記載された全てのpKaは、水中で、標準温度および標準圧力で測定される。また、ことわりのない限り、全てのpKaについての記載は、下記の方法を用いて測定されたpKaについての記載である。
リードモード:蛍光, トップリード
波長:励起 322nm、放出 431nm, オートカットオフ 420nm
感度:測定回数6, PMT:オート
自動混合:前:オフ
自動較正:オン
アッセイプレートタイプ:96ウェル Standard clrbtm
測定したウェル:プレート全体を測定
静置時間:オフ
カラム波長優先度;カラム優先
輸送スピード:通常
自動測定:オフ
本方法を用いて測定されたpKaは、約0.2pKa単位まで正確である。
式(I)中の基a、bまたはcが、“存在しない”とき、意味するところは、その変わりに単結合が存在することであり、すなわち、基a、bまたはcの両側の2つの基が、互いに直接結合している。
本明細書で用いられるとき、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクリル基の何れかに適用される用語“所望により置換されている”は、特にことわりのないかぎり、非置換であるか、あるいは、1個以上、典型的には1個、2個、3個、4個または5個の適当な非水素置換基によって置換されている基を言い、当該置換基はそれそれ、下記の群から独立して選択されるものである:
(a) アルキル;
(b) ヒドロキシ(または保護されたヒドロキシ);
(c) ハロ;
(d) オキソ、すなわち=O、または、アルキルイミノ、すなわち=N−アルキル;
(e) アミノ、アルキルアミノまたはジアルキルアミノ;
(f) アルコキシ;
(g) シクロアルキル;
(h) カルボキシル;
(i) ヘテロシクロオキシ(ここで、ヘテロシクロオキシは、酸素架橋により結合しているヘテロ環基を表す。);
(j) アルキル−O−C(O)−;
(k) メルカプト;
(l) ニトロ;
(m) シアノ;
(n) スルファモイルまたはスルホンアミド;
(o) アリール;
(p) アルキル−C(O)−O−;
(q) アリール−C(O)−O−;
(r) アリール−S−;
(s) アリールオキシ;
(t) アルキル−S−;
(u) ホルミル、すなわちHC(O)−;
(v) カルバモイル;
(w) アリール−アルキル−;および
(x) アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、アルキル−C(O)−NH−、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはハロゲンで置換されたアリール。
Sub1は、独立して、ハロゲン、トリハロメチル、トリハロエチル、−NO2、−CN、−N+(Rs)2O-、−CO2H、−CO2Rs、−SO3H、−SORs、−SO2Rs、−SO3Rs、−OC(=O)ORs、−C(=O)H、−C(=O)Rs、−OC(=O)Rs、=O、−NRs 2、−C(=O)NH2、−C(=O)NRs 2、−N(Rs)C(=O)ORs、−N(Rs)C(=O)NRs 2、−OC(=O)NRs 2、−N(Rs)C(=O)Rs、−C(=S)NRs 2、−NRsC(=S)Rs、−SO2NRs 2、−NRsSO2Rs、−N(Rs)C(=S)NRs 2、−N(Rs)SO2NRs 2、−Rsまたは−ZsRs
(ここで、Zsは、独立して、O、SまたはNRsであり;
Rsは、独立して、H、またはC1-6アルキル、C1-6ヘテロアルキル、−(Alka)f−C3-6シクロアルキル、−(Alka)f−C3-6ヘテロシクロアルキル、C2-6アルケニル、C2-6ヘテロアルケニル、−(Alka)f−C3-6シクロアルケニル、−(Alka)f−C3-6ヘテロシクロアルケニル、C2-6アルキニル、C2-6ヘテロアルキニル、−(Alka)f−C6-14アリール、−(Alka)f−C6-14アリールまたは−(Alka)f−ヘテロアリール−(ここで、ヘテロアリールは5〜13環員を含む。)
(ここで、fは、0または1であり;
Alkaは、C1-6アルキレンまたはC1-6ヘテロアルキレンであり;
Rsは、それ自身、所望により1〜3個の置換基Sub2によって置換されており(一つの態様において非置換である。)である。)
であり;
Sub2は、独立してハロゲン、トリハロメチル、トリハロエチル、−NO2、−CN、−N+(C1-6アルキル)2O-、−CO2H、−CO2C1-6アルキル、−SO3H、−SOC1-6アルキル、−SO2C1-6アルキル、−SO3C1-6アルキル、−OC(=O)OC1-6アルキル、−C(=O)H、−C(=O)C1-6アルキル、−OC(=O)C1-6アルキル、=O、−N(C1-6アルキル)2、−C(=O)NH2、−C(=O)N(C1-6アルキル)2、−N(C1-6アルキル)C(=O)O(C1-6アルキル)、−N(C1-6アルキル)C(=O)N(C1-6アルキル)2、−OC(=O)N(C1-6アルキル)2、−N(C1-6アルキル)C(=O)C1-6アルキル、−C(=S)N(C1-6アルキル)2、−N(C1-6アルキル)C(=S)C1-6アルキル、−SO2N(C1-6アルキル)2、−N(C1-6アルキル)SO2C1-6アルキル、−N(C1-6アルキル)C(=S)N(C1-6アルキル)2、−N(C1-6アルキル)SO2N(C1-6アルキル)2、−C1-6アルキル、−C1-6ヘテロアルキル、−C3-6シクロアルキル、−C3-6ヘテロシクロアルキル、−C2-6アルケニル、−C2-6ヘテロアルケニル、−C3-6シクロアルケニル、−C3-6ヘテロシクロアルケニル、−C2-6アルキニル、−C2-6ヘテロアルキニル、−C6-14アリール、−C5-13ヘテロアリール、−Zt−C1-6アルキル、−Zt−C3-6シクロアルキル、−Zt−C2-6アルケニル、−Zt−C3-6シクロアルケニルまたは−Zt−C2-6アルキニル
(ここで、Ztは、独立して、O、S、NHまたはN(C1-6アルキル)である。)
である。
b1)−CH2−などを含む。
リストが修飾語に先行されるとき、修飾語は、リスト中の各アイテムに適用されると解されるべきことを意図している。例えばフレーズ“所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基”は、リスト中の4個のアイテム、すなわちC3-20ヘテロシクロアルキル基、C3-20ヘテロシクロアルケニル基、C3-20ヘテロシクロアルキニル基およびC6-20ヘテロアリール基がそれぞれ、所望により置換されていてもよいことを意味する。
本明細書で用いられるとき、用語“ステロイド”は、下記の構造:
用語ステロイドはまた、部分的に不飽和なステロイド骨格を含む基を含む。
標準的な使用に従って、ω3位は、鎖の(メチル)末端から3番目の結合を言い;ω6位は、鎖の(メチル)末端から6番目の結合を言い;ω9位は、鎖の(メチル)末端から9番目の結合を言う。
頭字語PDIは、多分散性指数を表す。ことわりのない限り、本明細書で記載された全てのPDIは、Malvern Zetasizerの動的光散乱によって測定された、完全に形成されたナノ粒子のPDIである。計数速度が約200〜400kctsであるように、ナノ粒子サンプルをリン酸緩衝食塩水(PBS)で希釈する。
用語“含む(comprising)”は、“含む(including)”および“からなる(consisting)”を包含し、例えばXを“含む”組成物は、排他的にXからなるのであっても、さらなる何かを含んで、例えばX+Yであってもよい。
経路Aは、本発明の化合物を合成するのに用いられ得る一般的な方法を示す。経路CDTは、コレステロールジグリコール トシレート反応剤をどのように製造するかを説明している。
リノレイルアルコール(48.7g, 183mmol)を丸底フラスコに加え、THF(400ml)に溶解する。得られた溶液を氷浴を用いて冷却し、水素化ナトリウム(13.16g, 329mmol)を加える。得られたスラリーを室温で1時間撹拌する。エピブロモヒドリンを一度に加え、室温で反応を続ける。4時間撹拌した後、さらなる水素化ナトリウム(13.16g, 329mmol)を加える。室温でさらに1時間撹拌撹拌した後、エピブロモヒドリンのさらなるアリコート(32.5g, 238mmol)を加える。反応物を50℃で一夜加熱する。反応物を室温まで冷却し、水で反応停止させた。EtOAcを加え、得られた有機層を厚め、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させる。揮発成分をロータリーエバポレーターによって除去し、得られた残渣をシリカのクロマトグラフィーによって、EtOAc/ヘプタンで精製し、望ましいエポキシドを得る。
コレステロール(50g, 129mmol)をDCM(55ml)およびピリジン(150ml)に溶解する。得られた溶液を0℃まで冷却し、塩化トシルを固体として一度に加える。反応物をゆっくりと室温まで一夜温める。反応物をロータリーエバポレーターによって濃縮し、MeOH(500ml)を加え、白色の固体を得る。30分間撹拌を続け、沈殿物を濾過によって集め、MeOHで洗浄し、真空下で乾燥させ、望ましいトシレートを得る。
コレステロール トシレート(73g, 128mmol)を1,4−ジオキサン(750ml)に溶解する。ジエチレングリコール(294ml, 3077mmol)を加え、反応物を穏やかに還流する。得られた溶液を室温まで冷却し、ロータリーエバポレーターによって濃縮する。得られたゲル状物質をDCMに溶かし、水で撹拌する。得られた有機層を集め、水層をDCMで1回抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ロータリーエバポレーターによって濃縮する。粗生成物を、シリカ上で、EtOAc/ヘプタンで精製し、望ましいコレステロール ジグリコールを得る。
コレステロール ジグリコール(51.5g, 103mmol)を、DCM(160ml)およびピリジン(60ml)中で撹拌する。無水トシル酸(38.7g, 119mmol)を加え、得られた溶液を室温で一夜撹拌する。反応物をロータリーエバポレーターによって濃縮し、得られた残渣を、シリカ上で、EtOAc/ヘプタンで精製し、望ましい生成物を得る。
実施例1のエポキシド(1.0g, 3.1mmol)をEtOH(17ml)に溶解する。ピペリジン(0.45ml, 4.65mmol)を加え、混合物を、マイクロ波反応器中、140℃で5分間加熱する。室温まで冷却した後、混合物をロータリーエバポレーターによって濃縮し、シリカ上で、MeOH/DCMで精製し、望ましいアミノアルコールを得る。
実施例5のアミノアルコール(0.447mg, 1.09mmol)をトルエン(15ml)中で撹拌し、NaH(0.102g, 4.24mmol)を一度に加える。得られた混合物を室温で30分間撹拌し、実施例4のトシレートを一度に加える。反応物を一夜還流する。室温(“rt”)まで冷却した後、反応物を飽和水性重炭酸ナトリウムを添加することによって反応停
止させる。得られた混合物を5分間撹拌し、ロータリーエバポレーターによって濃縮する。得られた残渣を、直接、シリカ上で、MeOH/DCMで精製し、粗生成物を得る。これを、シリカ上で、EtOAc/ヘプタンで精製し、望ましい化合物を得る。
E0011;E0002;E0003;E0013;E0015;E0006;E0008;E0001;E0022;E0026;E0030;E0037;E0038;E0039;E0042;E0050;E0055;E0061;E0062;E0063;E0064;E0065;E0066;E0068;E0069;E0070;E0071;E0072;E0073;E0074;E0075;E0076;E0077;E0078;E0079;E0080;E0081;E0082;E0083;E0084;E0085;E0086;E0087;E0088;E0089;E0090;E0091;E0092;E0093;E0094;E0095;E0096;E0107;E0109;E0023;E0024;E0025;E0031;E0033;E0034;E0043;E0046;E0059;E0067;E0014;E0119;E0016;E0004;E0005;E0017;E0018;E0019;E0120;E0007;E0020;E0010;E0021;E0027;E0028;E0029;E0032;E0035;E0009;E0040;E0041;E0044;E0048;E0049;E0052;E0053;E0057;E0119;E0120;E0121;E0124;E0126;E0127;E0147;E0149;E0158;E0051;E0067;E0112;E0113;E0114;E0118;E0159;E0170;およびE0171。
コレステロール(3.33g, 8.62mmol)、無水ジグリコール酸(1g, 8.62mmol)、DMAP(0.263g, 2.154mmol)、CH2Cl2(35ml)およびスターラーバーを丸底フラスコに加える。反応物を室温で3日間撹拌する。
実施例5のアミノアルコール(105.3mg, 0.258mmol)、DMAP(22mg, 0.180mmol)および実施例7のカルボン酸(135.6mg, 0.270mmol)を、小さいバイアルに秤量する。ジクロロメタン(2.5ml)を加え、次にEDC塩酸塩(67.1mg, 0.350mmol)を加える。反応混合物を室温で一夜撹拌する。粗製の反応混合物をF15 24Gカラムを用いるIntelliFlash 280 (AnaLogix)のフラッシュクロマトグラフィーによって精製する:0〜3CV, 100% CH2Cl2;3〜25CV, 100:0 CH2Cl2:MeOH〜95:5 CH2Cl2:MeOHの直線的濃度勾配。生成物は未だ不純である。残渣を、再度SF15 24Gカラムを用いるIntelliFlash 280 (AnaLogix)のフラッシュクロマトグラフィーによって精製する:0〜3CV, 100% ヘプタン;3〜30CV, 100:0 ヘプタン:酢酸エチル〜65:35 ヘプタン:酢酸エチルの直線的濃度勾配。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、真空で濃縮し、38mg(13%)の純粋な生成物を透明な液体として得る。
経路C
2−(2−クロロエトキシエタノール)(5.01g, 40.2mmol)を丸底フラスコに秤量し、DMF(100ml)に溶解する。溶液を撹拌し、NaN3(2.89g, 44.5mmol)を加え、温度を80℃まで上げる。溶液は濁った。反応物を一夜撹拌する。翌朝、反応物を熱源から取り、300mlの水で希釈する。この溶液を酢酸エチルで洗浄し、生成物を抽出する(4×100ml)。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して液体を得る。1H−NMRによると、この液体は、44重量%のDMFを含んでいた。生成物(5.19g(98%))を、さらに精製することなく次の工程を行う。
実施例9のアジドアルコール(5.25g, 22.42mmol)およびピリジン(3ml, 37.1mmol)を、丸底フラスコ中で、CH2Cl2(45ml)に溶解し、氷浴中で撹拌する。冷えたら、塩化トシル(4.70g, 24.66mmol)を一度に加える。反応物を冷蔵庫中に一夜置く。翌日、反応物をCH2Cl2(50ml)で希釈し、1M HCl(2×40ml)で抽出し、ピリジンを除去する。有機相を塩水(40ml)で1回洗浄し、濃縮する。残渣を、SF40-115Gカラムを用いるIntelliFlash 280 (AnaLogix)のフラッシュクロマトグラフィーによって精製する:0〜20CV, 100:0 ヘプタン:酢酸エチル〜50:50 ヘプタン:酢酸エチルの直線的濃度勾配。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、真空で濃縮し、概算で純度90%、0.61g(10%)の生成物を得る。
実施例5のアミノアルコールおよび実施例10のトシレートを用いる以外、実施例6の通りに製造する。
実施例11のアルキルアジド(334mg, 0.641mmol)を、小さいバイアル中で、THF(4ml)および水(0.400ml)に溶解する。この溶液に、THF中のトリメチルホスフィンの溶液(2.5ml, 2.500mmolのトリメチルホスフィン)を加え、反応物を一夜撹拌する。TLCによると、翌朝までに反応が完了した。溶媒を蒸発させ、残渣を10mlのMeOHに溶解する。溶液を、MeOHで予め平衡化したSCX(10g)カラムに負荷し、50mlのMeOHで洗浄し、4×10mlのMeOH中7M NH3で溶出する。2番目、3番目および4番目のフラクションに生成物が溶出する;これらのフラクションをプールし、濃縮する。TLCによると(および臭いによると)、トリメチルホスフィンが未だ存在しているため、残渣を50mlのEtOAcに溶かし、3×15mlのNaHCO3で僅かに塩基性にした水で洗浄する。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮して無色の液体を得る:232mg(73%)。
実施例12のアミン(232mg, 0.469mmol)を、丸底フラスコ中で、CH2Cl2(5ml)に溶解する。この溶液に、コレステロール クロロホルメート(316mg, 0.703mmol)およびDMAP(86mg, 0.703mmol)を加える。溶液を室温で一夜撹拌する。粗製の反応混合物を、直接、SF15 24Gカラムを用いるIntelliFlash 280 (AnaLogix)のフラッシュクロマトグラフィーによって精製する:0〜5CV, 100% CH2Cl2;5〜15CV, 100:0 CH2Cl2:MeOH〜95:5 CH2Cl2:MeOHの直線的濃度勾配;15〜30, 95:5 CH2Cl2:MeOH。生成物を含むフラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、薄黄色の油状物を得る:339mg(80%)。
経路D
CH2Cl2中のジエチレングリコール ビニルエーテル(3.96g, 30mmol)の溶液に、0℃で、ピリジン(4.85ml)を、次に塩化トシル(6.86g, 36mmol)を加える。
0℃で10分後、反応物を室温まで温め、一夜撹拌する。反応物を、NaHCO3飽和水溶液と酢酸エチルの層間で抽出する。有機抽出物を合わせて、乾燥させ、濃縮する。残渣を30% 酢酸エチル/70% ヘプタンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製する:5.45g(63%)。
CH2Cl2中の実施例14のビニルエーテル(1.0g, 3.49mmol)の溶液に、室温で、コレステロール(0.675g, 1.746mmol)を、次にPPTS(0.878g, 3.49mmol)を加える。反応物を室温で5時間撹拌する。TLCによると、生成物は、コレステロールの非常に近くに溶出し、僅かにUV活性である。反応物を、NaHCO3飽和水溶液と酢酸エチルの層間で抽出する。有機抽出物を合わせて、乾燥させ、濃縮する。粗製の残渣を、30% 酢酸エチル/70% ヘプタンで、フラッシュクロマトグラフィーによって精製する:700mg(60%)。
実施例5のアミノアルコールおよび実施例15のトシレートを用いる以外、実施例6の通りに製造する。
経路E
実施例5のアミノアルコールおよび実施例14のトシレートを用いる以外、実施例6の通りに製造する。
水性HClの1N溶液(0.38ml, 0.38mmol)を、4mlの1:1 エタノール/THF中の実施例17のビニルエーテル(100mg, 0.19mmol)の溶液に、室温で滴下する。1時間後、反応物を、NaHCO3飽和水溶液と酢酸エチルの層間で抽出する。有機抽出物を合わせて、乾燥させ、濃縮して、油状物を得る。これをさらに精製することなく次の工程に用いる:85mg(90%)。
実施例18のアミノアルコールおよびカルボン酸としてコレステロール ヘミスクシネートを用いる以外、実施例8の通りに製造する。
経路F
トルエン(12ml)中の実施例18のアミノアルコール(600mg, 1.21mmol)の溶液に、室温で、60% NaH(97mg, 2.42mmol)を加える(反応物は黄色となった)。
10分後、コレステロール クロロホルメート(815mg, 1.815mmol)を加える。反応物を80℃まで加熱し(反応物は橙色となった)、一夜撹拌する。反応混合物を冷却し、塩水と酢酸エチルの層間で抽出する。有機抽出物を合わせて、Na2SO4で乾燥させ、油状物となるまで濃縮する。粗製の油状物を、5% MeOH/95% CH2Cl2で、フラッシュクロマトグラフィーによって精製する:720mg(66%)。
経路G
THF(10ml)中の実施例5のアミノアルコールの溶液(12.4mmol)およびTHF(10ml)中のDIADの溶液(3ml)を、THF(50ml)中のPPh3(2.5g)およびフタルイミド(2.5g)の溶液に同時に加える。得られた混合物を室温で一夜撹拌する。反応物を乾固するまで濃縮し、次の工程に直接用いる。
実施例21の物質をエタノール(25ml)中で撹拌し、THF中のメチルアミンの溶液を加える。反応物を室温で16時間撹拌し、乾固するまで濃縮する。粗製の物質をシリカのクロマトグラフィーによって精製する。
実施例22のアミン(0.22mmol)を、コレステロール ヘミスクシネート(0.25mmol)、HATU(0.26mmol)と共に、DMF(5ml)中で撹拌する。N−メチルモルホリン(0.55mmol)を加え、反応物を室温で一夜撹拌する。得られた溶液を真空下で濃縮し、EtOAcで希釈する。得られた有機層を、水で、次いで塩水で洗浄し、濃縮して黄色の液体を得る。得られた残渣を中性アルミナで精製し、薄黄色の液体を得る。
経路H
DCM(10ml)中の実施例22のアミン(3.55mmol)の溶液に、DIEA(5.7mmol)およびコレステロール クロロホルメート(6.0mmol)を加える。得られた反応物を室温で一夜撹拌する。反応物をEtOAc(50ml)で希釈し、水で、次いで塩水で洗浄する。得られた有機層を濃縮して残渣を得て、シリカのクロマトグラフィーによって精製し、薄黄色の液体を得る。
経路I
DCM(25ml)中の実施例22のアミン(0.33mmol)の溶液に、BOC−グリシン(0.36mmol)、HATU(0.36mmol)およびDIEA(0.66mmol)を加える。得られた混合物を室温で一夜撹拌する。得られた反応混合物を飽和水性NH4Clで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、粗製の固体を得る。これをさらに精製することなく用いる。
前述の工程で得られた物質をDCM(15ml)中で撹拌し、TFA(5ml)を加える。得られた溶液を室温で一夜撹拌する。得られた混合物を乾固するまで濃縮し、1.5N HCl(20ml)を加える。溶液をEtOAcで洗浄し、固体のNaHCO3でpHを>7まで減少させる。得られた混合物をDCMで抽出し、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗製の固体を得る。これをさらに精製することなく用いる。
前述の工程で得られた物質をDCM(20ml)中で撹拌し、DIEA(0.53mmol)を加える。この溶液に、コレステロール クロロホルメート(0.53mmol)を加え、反応物を室温で一夜撹拌する。反応物をEtOAc(50ml)で希釈し、得られた溶液を、1.5N HCl、10% 水性NaHCO3で、そして塩水で洗浄する。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して固体を得る。
経路Aの方法を用いて製造したBOC保護カチオン性脂質(150mg)を、トリエチルシラン(0.5ml)と共に撹拌し、TFA(10ml)を一度に加える。2時間後、反応物を乾固するまで濃縮する。得られた残渣を、シリカ上で、DCM中0〜15% MeOHで精製し、濃縮してガラス状油状物を得る。
E0012は、この方法を用いて合成され得る。
経路Aの方法を用いて製造したTBDMS保護カチオン性脂質(135mg, 0.138mmol)をTHF(2ml)中で撹拌し、TBAF溶液(0.28ml, THF中1.0M, 0.28mmol)を加える。反応物を室温で一夜撹拌する。反応物を、直接、シリカ上で、DCM中0〜20% MeOHで精製し、透明な油状物を得る。
E0045は、この方法を用いて合成され得る。
TMSCl(9.4ml)中のパラホルムアルデヒド(536mg)の懸濁液に、撹拌しながら、15分かけて、リノレイルアルコール(5.0g)を滴下する。反応物が透明になったら、それを減圧下で濃縮し、すぐに次の工程に用いる。
THF(50ml)中のグリシドール(1.5ml)の溶液に、撹拌しながら、実施例30の化合物(5.8g)、DIEA(9.5ml)、ヨウ化 テトラブチルアンモニウム(6.8g)を加える。反応物を室温で5時間撹拌する。固体を濾過によって除き、ジエチルエーテルで洗浄する。濾液を集め、水で、そして塩水で洗浄する。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗製の油状物を得る。粗製の物質を、予め3% トリエチルアミン含有移動相で処理したシリカのクロマトグラフィーによって精製する。物質をヘプタン中のEtOAcを用いて溶出し、1.65gの純粋な生成物を透明な液体として得る。
エチレングリコール(0.30g)を、THF(20ml)中で撹拌し、60wt% 水素化ナトリウム(0.19g)を加える。得られた混合物を20分間撹拌する。リノレイル メシレート(1.64g)を加え、反応物を50℃で2時間加熱し、一夜還流する。反応物を室温まで冷却し、さらに24時間撹拌する。反応物に飽和水性塩化アンモニウムを加え、得られた混合物をDCMで抽出する。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、粗製の油状物を得る。粗製の物質を、シリカで、ヘプタン中EtOAcを用いて精製し、640mgの望ましい生成物を得る。
経路J
DCM(30ml)中のコレステロール(10g, 26mmol)およびボラン−THF(5滴)の溶液に、エチルジアゾアセテート(3.5ml, 52mmol)を加える。5分間撹拌した後、反応混合物を濃縮し、シリカのクロマトグラフィーによって、ヘキサン/EtOAcで精製し、9gの望ましい生成物を得る。
EtOH(110ml)中の実施例33の化合物(9g, 19mmol)の溶液に、NaOH(3g, 76mmol)を加える。得られた混合物を70℃で3時間加熱する。反応物を室温まで冷却し、濃縮する。残渣を水に溶かし、2N HClで酸性にして、DCM(2×)で抽出する。得られた有機層を合わせ、濃縮し、8gの望ましい生成物を得る。
EDC(1.8g, 9.8mmol)およびDMAP(80mg, 0.66mmol)を、DCM(5ml)中の実施例34の化合物(2.2g, 4.9mmol)の溶液に加える。反応物を10分間撹拌し、アルコール(1.5g)を加え、反応物を室温で一夜撹拌する。反応物をDCMで希釈し、水で洗浄する。得られた有機層を濃縮して残渣を得る。これを、シリカ上で、クロロホルム/MeOHで精製し、望ましい生成物を油状物として得る。
経路K
DCM(6ml)中のN−Boc−β−アラニン(1.25g, 6.61mmol)の溶液に、EDC(2.5g, 13mmol)、HOBt(0.3g, 2mmol)およびTEA(2ml, 13mmol)を加える。得られた混合物を30分間撹拌する。DCM(4ml)中のアミノアルコール(2g)の溶液を加え、反応物を10時間撹拌する。反応物をDCMで希釈し、飽和重炭酸ナトリウムで、そして塩水で洗浄する。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して油状物を得る。これを、シリカ上で、MeOH/DCMで精製する。生成物を濃縮して2.65gの油状物を得る。
実施例36の化合物(2.6g)を、DCM(10ml)中で撹拌し、TFA(10ml)を加える。3時間後、反応物を乾固するまで濃縮し、それを直接次の工程に用いる。
DCM(20ml)中の実施例37の化合物(2g)の溶液に、DIEA(2.7ml, 15.7mmol)およびDMAP(80mg, 0.6mmol)を、続いてコレステロール クロロホルメート(2.1g, 4.7mmol)を加える。反応物を室温で3時間撹拌する。反応物をDCMで希釈し、水で洗浄する。得られた有機層を濃縮し、シリカ上で、MeOH/クロロホルムで精製し、2.1gの望ましい生成物を得る。
経路L
DCM(10ml)中のアルコール(2.5g, 5.8mmol)の溶液に、p−ニトロクロロホルメートおよびTEAを加える。反応物を室温で一夜撹拌する。反応物をDCMで希釈し、水で洗浄する。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して油状物を得る。これを、シリカ上で、EtOAc/ヘキサンで精製し、望ましい生成物を得る。
アルコール(1.3g, 2.9mmol)を、MePh(10ml)中で撹拌する。NaH(0.46g, 11.4mmol)を加え、反応物を室温で30分間撹拌する。実施例39の化合物(1.7g, 1.2mmol)を加え、反応物を室温で16時間撹拌する。反応物を氷浴中で冷却する、水で反応停止させる。得られた混合物をEtOAcで抽出する。有機層を合わせて、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗製の油状物を得る。この物質を、シリカ上で、EtOAc/ヘキサンで精製し、1gの望ましい生成物を得る。
(記載なし)
経路X
ジクロロメタン(25ml)中の2−(2,2−ジメチル−1,3−ジオキソラン−4−イル)エタノール(800mg, 5.47mmol)、トリエチルアミン(0.915ml, 6.57mmol)およびN,N−ジメチルアミノピリジン(134mg, 1.10mmol)の溶液に、室温で、塩化トシル(1.10g, 5.75mmol)を加える。反応物を室温で3時間撹拌する。反応物を飽和水性NaHCO3で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機相を乾燥させ、濃縮し、粗生成物を、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、酢酸エチル/ヘプタンの濃度勾配で精製する:1.24g, 75%。
実施例44のトシレート(1.03g, 3.43mmol)およびモルホリン(2.97ml, 34.3mmol)をフラスコ中で合わせる。フラスコを密封し、60℃で一夜加熱する。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和水性NaHCO3で洗浄する。有機相を乾燥させ、濃縮し、粗生成物を、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノールの濃度勾配で精製する:670mg, 91%。
実施例45のアミン(530mg, 2.46mmol)を、ジオキサン(15ml)に0℃で溶解する。冷却した溶液に、濃塩酸(水性, 7.39mmol)を加える。反応物を室温で一夜撹拌する。過剰量の固体のK2CO3を加えて酸を中和する。固体を濾過によって除き、アセトンで洗浄する。濾液を濃縮し、粗生成物を、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノールの濃度勾配で精製する:320mg, 74%。
実施例46の前述の工程で得られたジオール(320mg, 1.8mmol)を、DCM(12ml)中で、イミダゾール(249mg, 3.65mmol)と共に撹拌する。この溶液に、TBDPSCl(0.475ml, 1.8mmol)を加える。得られた混合物を室温で一夜撹拌する。反応物をDCMで希釈し、飽和重炭酸ナトリウムで洗浄(ished)する。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、油状物になるまで濃縮し、シリカ上で、DCM/MeOHで精製し、650mgの望ましい生成物を得る。
トルエン(15ml)中の前述の工程で得られた物質(640mg, 1.5mmol)に、水素化ナトリウム(124mg, 油中60wt%, 3.1mmol)を加える。20分後、コレステロール反応材(1.17g, 1.86mmol)を加え、反応物を一夜還流する。室温まで冷却した後、反応物を塩水で反応停止させ、酢酸エチルで抽出する。得られた有機層を乾燥させ、濃縮し、シリカ上で、EtOAc/ヘプタンで精製し、560mgの望ましい生成物を得る。
THF(6ml)中の前述の工程で得られた物質(660mg, 0.76mmol)に、THF中1MのTBAF溶液(1.5ml, 1.5mmol)を加える。反応物を2時間撹拌し、EtOAcで希釈する。得られた有機層を塩水で洗浄(ished)し、乾燥させ、濃縮して粗生成物を得る。これを、シリカで、MeOH/DCMで精製する。
実施例49のアミノアルコール(280mg, 0.443mmol)をトルエン(4ml)に室温で溶解し、60% NaH(44mg, 1.1mmol)を加える。20分後、オレイル トシレート(実施例10に記載された方法と類似の方法でオレイルアルコールから製造される)(187mg, 0.443mmol)を加える。反応物を3時間還流する。反応物を室温まで冷却し、酢酸エチルで希釈し、塩水で洗浄(ished)する。有機相を乾燥させ、濃縮し、粗生成物を、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、酢酸エチル/ヘプタンの濃度勾配で精製する:183mg, 47%。
経路Y
DCM(20ml)中のコレステロール(700mg, 1.8mmol)の溶液に、炭酸カリウム(750g, 5.4mmol)およびDMAP(22mg, 0.18mmol)を加え、臭化ブロモアセチル(0.19ml, 2.2mmol)を滴下する。氷浴中で90分間撹拌した後、反応物を濾過し、濃縮し、シリカ上で、DCM/ヘプタンで精製し、850mgの望ましい生成物を得る。
MePh(20ml)中のアミノアルコール(1.08g, 2.37mmol)の溶液に、NaH(190mg, 油中60wt%, 4.74mmol)を加える。混合物を10分間還流し、ブロモアセチルコレステロール(1.20g, 2.37mmol)を加える。反応物を還流しながら2時間撹拌し、室温まで冷却する。反応物に水およびEtOAcおよび塩水を加える。得られた有機層を集め、乾燥させ、濃縮して粗製の物質を得る。カラムをDCM中1% 酢酸で平衡化した後に、これを、シリカ上で、EtOAc/ヘプタンで精製する。精製後、生成物含有フラクションを合わせて、飽和水性重炭酸ナトリウムで洗浄した後、濃縮し、700mgの望ましい生成物を得る。
ステルス脂質の構造および合成
ステルス脂質S001〜S026の構造を表3に示す。下記の実施例54〜67は、ステルス脂質の合成を説明している。
β−アラニン塩酸塩(1.00g, 7.16mmol)、コレステロール クロロホルメート(3.06g, 6.81mmol)およびトリエチルアミン(2.0ml, 14mmol)を無水クロロホルム(25ml)に溶解する。溶液を室温で一夜撹拌する。翌朝、溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチル(100ml)に溶解し、1M HClで、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させる。
生成物を濃縮して白色の固体を得る。これをさらに精製することなく次の工程に用いる:3.31g, 90.0%。
前述の工程で得られた生成物(メチルエステル)(298mg, 0.578mmol)をテトラヒドロフラン(2ml)に溶解し、1M NaOH(2.0ml, 2.0mmol)を加え、二相の溶液を得る。溶液を室温で撹拌すると、エマルジョンが形成する。2時間後、反応混合物を10mlの水で希釈し、1M HClで酸性にする。生成物を酢酸エチル(100ml)で抽出する。有機相を塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濃縮して白色の固体を得る。1H−NMRにより、少量のメチルエステル出発物質(約5mol%)の存在が示されたが、さらに精製することなく次の工程に用いるのに十分な程純粋であると考えられる:252mg, 83.0%。
N−(3−ジメチルアミノプロピル)−N'−エチルカルボジイミド塩酸塩(96mg, 0.50mmol)、前述の工程で得られた生成物(カルボン酸)(252mg, 0.477mmol)、N,N−ジメチルアミノピリジン(122mg, 1.00mmol)およびポリ(エチレングリコール)メチルエーテル(200mg, 0.100mmol, Mn=約2,000g/mol, Sigma Aldrich)を無水ジクロロメタン(5.0ml)に溶解し、室温で撹拌する。24時間後、反応混合物を、10gのBond Elut SCXカラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に負荷し、50:50 ジクロロメタン:メタノールで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノール濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、白色の固体を得る:151mg, 60.3%。
ヒートガンで乾燥した丸底フラスコに、窒素下で、オクタデシルアルデヒド(500mg, 1.86mmol)およびテトラヒドロフラン(10ml)を加える。テトラヒドロフラン中0.5Mの塩化 オクタデシル マグネシウムの溶液(7.5ml, 3.8mmol)をシリンジを介して加え、反応物を40℃まで温める。添加が完了したら、反応物を1時間撹拌する。反応物を熱源から除き、1mlの酢酸で反応停止させる。室温に至った後、溶液をジクロロメタンで希釈し、水で、0.1M NaOHで、1M HClで、そして塩水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過する。粗製の物質を熱ヘプタンから2回結晶化し、白色の粉末として得る:195mg, 20.0%。
前述の工程で得られた生成物(アルコール)(194mg, 0.371mmol)を、ジクロロメタン(4ml)に40℃で溶解し、ピリジン(100μl, 1.24mmol)および4−ニトロフェニルクロロホルメート(93mg, 0.46mmol)を加える。反応物を40℃で一夜撹拌し、室温まで冷却する。粗生成物を、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ヘプタン/ジクロロメタンの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、白色の固体を得る:219mg, 86.0%。
前述の工程で得られた生成物(4−ニトロフェニル カーボネート)を、トルエン(5ml)に室温で溶解する。PEG−NH2(800mg, 0.400mmol, Mn=約2000g/mol, “Sunbright MEPA 20H”, NOF Corp.)、N,N−ジメチルアミノピリジン(50mg, 0.409mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(200μl, 1.145mmol)を加
え、溶液を室温で撹拌する。72時間後、反応物を、10gのBond Elut SCXカラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に負荷し、50:50 ジクロロメタン:メタノールで溶出する。生成物含有フラクションを、TLCによって同定し、合わせて、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノールの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションを、TLCによって同定し、合わせて、濃縮する。4−ニトロフェノール不純物を除去するために、生成物をジクロロメタン(10ml)に溶解し、Si−アミン捕捉樹脂(Silicycle)(2.0g, カタログ番号R52030B)を加える。溶液を室温で1時間激しく撹拌し、濾過し、樹脂を除き、濃縮して薄黄色の固体を得る:806mg, 97.0%。
丸底フラスコ中で、ペンタトリアコンタン−18−オン(750mg, 1.48mmol)を、穏やかに撹拌しながら、テトラヒドロフラン(40ml)に溶解する。ケトン含有溶液を室温まで冷却した後、ジエチルエーテル中4Mの水素化リチウムアルミニウム溶液(0.74ml, 2.96mmol)を滴下する。反応物を室温で30分間撹拌する。固体の硫酸ナトリウム十水和物を加え、スラリーを20分間撹拌し、過剰の水素化リチウムアルミニウムで反応停止させる。固体を濾過して除き、濾液をヘプタンで希釈し、1M HClで洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、白色の固体を得る。粗生成物は、さらに精製することなく次の工程に用いるのに十分な程純粋である:650mg, 86.0%。
ジクロロメタン(10ml)中の前述の工程で得られた生成物(アルコール)(200mg, 0.393mmol)の溶液およびピリジン(78mg, 0.98mmol)に、室温で、4−ニトロフェニル クロロホルメート(99mg, 0.49mmol)を加える。反応混合物を35℃で4時間加熱する。反応混合物をヘプタンで希釈し、1M HClで、そして飽和重炭酸ナトリウムで抽出する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ヘプタン:酢酸エチルの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせ、濃縮し、白色の固体を得る:200mg, 76%。
前述の工程で得られた生成物(4−ニトロフェニル カーボネート)(260mg, 0.386mmol)を、トルエン(4ml)に溶解し、続いてPEG2k(620mg, 0.310mmol, Mn=約2000g/mol, “Sunbright MEPA 20H”, NOF Corp.)、N,N−ジメチルアミノピリジン(40mg, 0.33mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(200μl,
1.15mmol)を加える。溶液を室温で一夜撹拌する。反応混合物を10gのBond Elut SCXカラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に負荷し、50:50 ジクロロメタン:メタノールで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。さらに、粗生成物を、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノールの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。4−ニトロフェノール不純物を除去するために、粗生成物を1:1 ジクロロメタン:メタノールに溶解し、10gのBond Elut NH2カラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に通して溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、薄黄色の固体を得る:631mg, 78.0%。
丸底フラスコに、マグネシウム金属(0.201g, 8.27mmol)および触媒量のヨウ素、続いてテトラヒドロフラン(30ml)および1−ブロモテトラデカン(2.17g, 7.82mmol)を加える。混合物を2時間還流し、室温まで冷却する。テトラヒドロフラン(5ml)中のオクタデシルアルデヒド(0.600g, 2.24mmol)の溶液を加え、反応混合物を室温で30分間撹拌する。反応物を酢酸エチルで希釈し、1M HClで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ヘプタン/酢酸エチルの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する:310mg, 29.7%。
前述の工程で得られた生成物(アルコール)(310mg, 0.664mmol)をジクロロメタン(15ml)で溶解する。ピリジン(0.134ml, 1.66mmol)を、続いて4−ニトロフェニル クロロホルメート(167mg, 0.830mmol)を加える。反応物を室温で一夜撹拌する。反応物を酢酸エチルで希釈し、NaHCO3の飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ヘプタン/酢酸エチルの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する:315mg, 75.0%。
トルエン(10ml)中の前述の工程で得られた生成物(4−ニトロフェニル カーボネート)(315mg, 0.498mmol)の溶液に、室温で、N,N−ジメチルアミノピリジン(48.7mg, 0.399mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(0.174ml, 0.997mmol)を、続いてPEG−NH2(798mg, 0.399mmol, Mn=約2000g/mol, “Sunbright MEPA 20H”, NOF Corp.)を加える。黄色の溶液を室温で一夜撹拌する。反応混合物を10gのBond Elut SCXカラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタ
ノールで平衡化)に負荷し、50:50 ジクロロメタン:メタノールで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノールの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する:540mg, 54.3%。
乾燥した丸底フラスコに、窒素下で、1−ヨードヘキサデカン(0.705g, 2.00mmol)およびジエチルエーテル(15ml)を加える。溶液を−78℃まで冷却し(溶液は白色のスラリーとなる)、ヘプタン中1.7Mのt−ブチル リチウムの溶液(2.59ml, 4.40mmol)を滴下する。20分間撹拌した後、反応混合物を室温まで温め、さらに2時間撹拌する。反応混合物に、ジエチルエーテル(3ml)中のオクタデシルアルデヒド(0.268g, 1.00mmol)の溶液を滴下する(発熱)。反応物を氷冷した1M HClで反応停止させ、ジクロロメタンで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ヘプタン/ジクロロメタンの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する:150mg, 30.3%。
前述の工程で得られた生成物(アルコール)(200mg, 0.404mmol)を、ジクロロメタン(6ml)に溶解する。ピリジン(0.082ml, 1.01mmol)を、次に4−ニトロフェニル クロロホルメート(102mg, 0.505mmol)を加える。反応物を室温で一夜撹拌する。反応物を、酢酸エチルで希釈し、NaHCO3の飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ヘプタン/酢酸エチルの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する:220mg, 82.0%。
トルエン(6ml)中の前述の工程で得られた生成物(4−ニトロフェニル カーボネート)(230mg, 0.348mmol)の溶液に、室温で、N,N−ジメチルアミノピリジン(42.6mg, 0.348mmol)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(0.152ml, 0.871mmol)を、次にPEG−NH2(697mg, 0.348mmol, Mn=約2000g/mol, “Sunbright MEPA 20H”, NOF Corp.)を加える。黄色の溶液を室温で一夜撹拌する。反応混合
物を10gのBond Elut SCXカラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に負荷し、50:50 ジクロロメタン:メタノールで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノールの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する:600mg, 68.3%。
S010およびS011は、例えばPCT出願国際公開第2009/086558号にそれぞれ化合物IVaおよびIVcについて示された通りに製造され得る。これらの化合物は、国際公開第2009/086558号の実施例19に示された通りに合成され得る。
S012は、S001について記載された方法と類似の方法で、ポリ(エチレングリコール)メチルエーテルの代わりにPEG−NH2(“Sunbright MEPA 20H”, NOF Corp.)を用いて製造され得る。
S006、S013、S014、S015、S016、S017、S018、S019、S020、S021、S022、S023およびS024は、S004について記載された方法と類似の方法で製造され得る。
本明細書に記載された化合物S004の合成の工程2の生成物(4−ニトロフェニル カーボネート)(285mg, 0.414mmol)を、N,N−ジメチルホルムアミド(5ml)に懸濁し、次にD−グルタミン酸ジメチルエステル(145mg, 0.828mmol)、N,N−ジイソプロピルエチルアミン(0.145ml, 0.828mmol)およびN,N−ジメチルアミノピリジン(101mg, 0.828mmol)を加える。溶液を60℃で一夜加熱する。反応混合物を10gのBond Elut SCX カラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に負荷し、50:50 ジクロロメタン:メタノールで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、酢酸エチル/ヘプタンの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、白色の固体を得る:131mg, 44%。
前述の工程で得られた生成物(ジメチルエステル)(0.160g, 0.221mmol)をテトラヒドロフラン(5ml)に溶解し、水(5ml)中のLiOH(52.9mg, 2.21mmol)の溶液を加える。反応物を室温で72時間撹拌する。溶液をクロロホルムで希釈し、1N HCl(水性)で、そして塩水で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過する。濾液を濃縮し、白色の固体を得る:130mg, 85%。
前述の工程で得られた生成物(二酸)(130mg, 0.187mmol)をジクロロメタン(9ml)およびヘプタン(1.5ml)に室温で懸濁する。N−(3−ジメチルアミノプロピル)−N'−エチルカルボジイミド塩酸塩(107mg, 0.560mmol)を懸濁液に加え、次にヒドロキシベンゾトリアゾール(86mg, 0.56mmol)を加える。30分後、PEG−NH2(411mg, 0.411mmol, Mn=約1000g/mol, “mPEG-amine, 1k”, Creative PEGWorks)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(65μl, 0.374mmol)を加える。反応物を室温で一夜撹拌する。反応混合物を10gのBond Elut SCX カラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に負荷し、50:50 ジクロロメタン:メタノールで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン/メタノールの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、白色の固体を得る:376mg, 57.8%。
本明細書で記載された化合物S004の合成の工程1の生成物(アルコール)(200mg, 0.382mmol)、無水コハク酸(38mg, 0.38mmol)およびN,N−ジメチルアミノピリジン(12mg, 0.096mmol)をフラスコに秤量し、クロロホルム(3.5ml)に懸濁する。反応混合物を70℃で一夜撹拌する。反応混合物を、1gのBond Elut SCXカラム(Varian;予めジクロロメタンで平衡化)に負荷し、ジクロロメタンで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮する。粗生成物を、さらに、シリカのフラッシュクロマトグラフィーによって、酢酸エチル/ヘプタンの濃度勾配で精製する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、白色の固体を得る:134mg, 56%。
前述の工程で得られた生成物(カルボン酸)(75mg, 0.12mmol)、N−(3−ジメチルアミノプロピル)−N'−エチルカルボジイミド塩酸塩(35mg, 0.18mmol)およびヒドロキシベンゾトリアゾール(28mg, 0.18mmol)を無水クロロホルム(1ml)に溶解し、室温で0.5時間撹拌する。次いでPEG−NH2(265mg, 0.132mmol, Mn=約2000g/mol, “Sunbright MEPA 20H”, NOF Corp.)およびN,N−ジイソプロピルエチルアミン(32μl, 0.18mmol)を加え、溶液を室温で一夜撹拌する。反応混合物を2gのBond Elut SCXカラム(Varian;予め50:50 ジクロロメタン:メタノールで平衡化)に負荷し、ジクロロメタンで溶出する。生成物含有フラクションをTLCによって同定し、合わせて、濃縮し、白色の固体を得る:240mg, 76%。
表4:ステルス脂質S001〜S026の 1 H−NMR
結果の表の概要
合成された化合物を下記の表に表す。誤解を避けるために、幾つかの置換基は、それらが重複しているように表しているが、化合物の真の構造は、それでもなお完全に明確である。例えば、
表6:カチオン性脂質の特性決定および構造
種々の脂質のNMR特性決定を下に示す。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.25-5.48 (m, 5H), 3.69-3.86 (m, 2H), 3.55-3.69 (m, 7H), 3.34-3.55 (m, 4H), 3.07-3.25 (m, 1H), 2.70-3.01 (m, 4H), 2.30-2.53 (m, 3H), 2.15-2.30 (m, 1H), 1.78-2.14 (m, 11H), 1.42-1.66 (m, 12H), 0.97-1.42 (m, 34H), 0.81-0.97 (m, 16H), 0.68 (s, 3H) ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.25-5.47 (m, 5H), 3.56-3.85 (m, 11H), 3.48-3.56 (m, 1H), 3.36-3.48 (m, 3H), 3.11-3.27 (m, 1H), 2.66-2.83 (m, 4H), 2.41-2.49 (m, 2H), 2.30-2.41 (m, 1H), 2.15-2.28 (m, 1H), 1.72-2.12 (m, 11H), 0.96-1.70 (m, 60H), 0.68 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 140.9, 130.2, 130.1, 128.0, 127.9, 121.6, 79.5, 72.0, 71.7, 71.6, 70.9, 69.4, 67.3, 60.2, 60.1, 59.7, 56.8, 56.1, 50.2, 42.3, 39.8, 39.5, 39.0, 37.2, 36.8, 36.2, 35.8, 31.9, 31.9, 31.5, 29.7, 29.5, 29.5, 29.3, 29.3, 29.0, 28.3, 28.2, 28.0, 27.2, 27.2, 26.2, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.7, 22.6, 22.6, 21.0, 19.4, 18.7, 14.1, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.22-5.46 (m, 7H), 3.66-3.93 (m, 5H), 3.54-3.66 (m, 6H), 3.35-3.54 (m, 4H), 3.07-3.23 (m, 1H), 2.73-2.89 (m, 4H), 2.39-2.73 (m, 4H), 2.28-2.39 (m, 1H), 2.28-2.39 (m, 1H), 1.70-2.12 (m, 10H), 1.20-1.65 (m, 24H), 0.94-1.19 (m, 13H), 0.77-0.94 (m, 14H), 0.66 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 140.9, 130.4, 130.0, 128.3, 128.1, 127.8, 127.6, 121.6, 79.5, 71.6, 70.8, 70.7, 69.2, 67.3, 60.1, 56.7, 56.1, 54.2, 50.1, 42.3, 39.7, 39.5, 39.0, 37.2, 36.8, 36.2, 35.8, 31.9, 31.8, 31.5, 29.5, 29.4, 29.3, 28.3, 28.2, 28.0, 27.2, 27.2, 25.8, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.6, 22.5, 21.0, 19.4, 18.7, 14.1, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.26-5.44 (m, 5H), 3.68-3.84 (m, 3H), 5.54-3.68 (m, 7H), 3.32-3.54 (m, 6H), 3.09-3.24 (m, 1H), 2.68-2.80 (m, 2H), 2.27-2.58 (m, 3H), 2.12-2.27 (m, 1H), 1.69-2.12 (m, 9H), 1.41-1.69 (m, 20H), 1.19-1.40 (m, 20H), 0.95-1.19 (m, 11H), 0.78-0.95 (m, 12 H), 0.66 (s, 3H) ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.10-7.24 (m, 3H), 6.96-7.10 (m, 1H), 5.21-5.48 (m, 5H), 3.73-3.90 (m, 3H), 3.37-3.72 (m, 11H), 3.10-3.25 (m, 1H), 2.72-2.86 (m, 2H), 2.28-2.42 (m, 1H), 2.14-2.28 (m, 1H), 1.92-2.14 (m, 6H), 1.78-1.92 (m, 4H), 1.22-1.78 (m, 34 H), 0.95-1.22 (m, 13H), 0.84-0.95 (m, 13H), 0.68 (s, 3H) ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.24-5.44 (m, 5H), 3.66-3.83 (m, 2H), 3.54-3.65 (m, 7H), 3.34-3.51 (m, 4H), 3.11-3.23 (m, 1H), 2.94-3.10 (m, 2H), 2.56-2.87 (m, 6.5H), 2.41-2.50 (d, J=5.02 Hz, 2H), 2.29-2.40 (m, 2.5H), 1.96-2.26 (m, 8H), 1.62-1.96 (m, 8H), 1.62-1.96 (m, 11H), 1.40-1.61 (m, 11H), 1.22-1.40 (m, 20H), 0.81-1.21 (m, 26H), 0.66 (s, 3H) ppm。
13C NMR (CDCl3, 400MHz) δ 142.5, 140.9, 139.7, 130.1, 130.1, 128.7, 127.9, 127.9, 125.8, 121.5, 79.4, 77.2, 71.8, 71.6, 70.8, 70.8, 69.3, 67.3, 63.1, 59.3, 56.7, 56.1, 53.6, 53.3, 50.1, 49.9, 42.2, 39.7, 39.4, 39.0, 37.2, 36.8, 36.1, 35.7, 31.9, 31.8, 31.5, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.3, 28.3, 28.2, 27.9, 27.2, 27.1, 27.0, 26.9, 26.1, 25.6, 24.8, 24.2, 23.8, 22.8, 22.5, 21.3, 21.0, 19.3, 18.6, 14.0, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.28-5.44 (m, 3H), 3.69-3.82 (m, 2H), 3.57-3.67 (m, 7H), 3.48-3.64 (m, 1H), 3.39-3.48 (m, 3H), 3.33 (s, 3H), 3.12-3.24 (m, 2H), 2.70-2.86 (m, 4H), 2.42-2.47 (d, J=6.02 Hz, 2H), 2.33-2.42 (m, 3H), 1.97-2.10 (m, 5H), 1.76-1.97 (m, 7H), 1.42-1.64 (m, 12H), 1.23-1.42 (m, 20H), 0.97-1.23 (m, 12H), 0.81-0.97 (m, 13H), 0.68 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 140.9, 130.2, 130.1, 127.9, 127.9, 121.5, 79.5, 77.5, 72.5, 72.1, 70.9, 70.8, 69.3, 67.3, 63.1, 59.3, 56.7, 56.1, 55.5, 52.0, 51.7, 50.1, 42.3, 39.8, 39.5, 39.0, 37.2, 36.8, 36.2, 35.8, 31.9, 31.9, 31.5, 31.0, 29.7, 29.5, 29.5, 29.3, 29.3, 28.3, 28.2, 28.0, 27.2, 27.2, 26.1, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.6, 21.0, 19.4, 18.7, 14.1, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.26-5.44 (m, 5H), 3.84-3.94 (t, J = 5.56 Hz, 4H),3.68-3.87 (m, 2H), 3.56-3.67 (m, 7H), 3.47-3.54 (m, 1H), 3.38-3.47 (m, 3H), 3.11-3.23 (m, 1H), 2.73-2.82 (t, J=6.44 Hz, 2H), 2.42-2.57 (m, 5H), 2.32-2.41 (m, 1H), 2.11-2.27 (m, 2H), 1.97-2.10 (m, 6H), 1.76-1.96 (m, 7H), 1.66-1.75 (m, 2H), 1.41-1.62 (m, 9H), 1.22-1.41 (m, 20H), 0.81-1.22 (m, 25H), 0.67 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 141.0, 130.1, 130.1, 127.9, 127.9, 121.5, 96.2, 79.5, 77.6, 72.2, 71.6, 70.9, 70.8, 69.4, 67.3, 63.1, 59.3, 59.1, 56.8, 56.1, 50.5, 50.2, 42.3, 39.8, 39.5, 39.1, 37.2, 36.8, 36.2, 35.7, 32.8, 31.9, 31.9, 31.5, 29.7, 29.5, 29.4, 29.3, 29.3, 28.3, 28.2, 28.0, 27.2, 27.2, 26.1, 25.6, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.5, 21.0, 19.3, 18.7, 14.0, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.27-5.44 (m, 5H), 4.07-4.22 (m, 2H), 3.67-3.83 (m, 2H), 3.55-3.67 (m, 6H), 3.37-3.52 (m, 4H), 3.12-3.25 (m, 1H), 2.81-2.90 (m, 1H), 2.73-2.81 (t, J=6.53Hz, 2H), 2.42-2.64 (m, 3H), 2.15-2.41 (m, 4H), 1.76-2.11 (m, 11H), 1.64-1.72 (m, 4H), 1.42-1.63 (m, 12H), 1.21-1.41 (m, 22H), 0.81-1.22 (m, 26H), 0.68 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 140.9, 130.2, 130.1, 127.9, 127.9, 121.5, 79.5, 77.2, 72.7, 72.0, 71.6, 71.5, 70.8, 69.4, 67.3, 61.9, 59.5, 56.7, 56.5, 56.1, 50.1, 49.3, 49.3, 42.3, 39.7, 39.5, 39.0, 37.2, 36.8, 36.2, 35.8, 31.9, 31.9, 31.5, 29.7, 29.5, 29.5, 29.3, 29.3, 28.4, 28.3, 28.2, 28.0, 27.4, 27.4, 27.2, 27.2, 26.5, 26.1, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.6, 22.6, 21.0, 19.4, 18.7, 14.1, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.26-5.45 (m, 5H), 3.68-3.82 (m, 2H), 3.56-3.68 (m, 7H), 3.38-3.53 m, 4H), 3.11-3.24 (m, 1H), 2.73-2.82 (t, J=6.53 Hz, 2H), 2.56-2.69 (m, 4H), 2.50-2.56 (m, 2H), 2.32-2.41 (m, 1H), 2.09-2.27 (m, 2H), 1.77-2.09 (m, 13H), 1.42-1.63 (m, 9H), 1.21-1.42 (m, 20H), 0.83-1.21 (m, 25H), 0.68 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 140.9, 130.2, 130.1, 128.0, 127.9, 124.4, 122.0, 121.5, 119.6, 79.5, 77.6, 77.2, 71.8, 71.6, 70.9, 70.8, 69.4, 67.3, 58.7, 56.7, 56.1, 50.7, 50.1, 42.3, 39.7, 39.5, 39.0, 37.2, 36.8, 36.1, 35.8, 34.0, 31.9, 31.8, 31.5, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 28.3, 28.2, 28.0, 27.2, 27.2, 26.1, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.6, 21.0, 19.3, 18.7, 14.1, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.27-5.46 (m, 5H), 3.58-3.82 (m, 9H), 3.38-3.54 (m, 4H), 3.13-3.26 (m, 1H), 2.74-2.82 (m, 2H), 2.31-2.50 (m, 6H), 2.16-2.2 (m, 1H), 1.70-2.10 (m, 12H), 1.24-1.65 (m, 33H), 0.97-1.23 (m, 13H), 0.82-0.97 (m, 19H), 0.68 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 141.0, 130.2, 130.1, 127.9, 127.9, 121.5, 79.5, 77.2, 73.2, 72.5, 72.3, 71.6, 70.9, 70.8, 69.3, 67.3, 66.0, 61.9, 60.9, 60.2, 56.7, 56.1, 50.7, 50.1, 42.3, 39.8, 39.5, 39.0, 38.7, 37.2, 36.8, 36.2, 35.8, 31.9, 31.9, 31.5, 29.7, 29.5, 29.5, 29.3, 29.3, 28.3, 28.2, 28.0, 27.2, 27.2, 26.1, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.6, 21.0, 19.4, 18.7, 14.1, 11.8 ppm。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.26-5.45 (m, 5H), 3.53-3.84 (m, 9H), 3.37-3.53 (m, 4H), 3.13-3.24 (m, 1H), 2.91-3.00 (m, 1H), 2.74-2.86 (m, 2H), 2.28-2.43 (m, 2H), 2.10-2.28 (m, 2H), 1.42-2.10 (m, 32H), 0.82-1.41 (m, 50H), 0.68 (s, 3H) ppm。
13C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 141.0, 130.2, 130.1, 127.9, 127.9, 121.5, 79.5, 77.2, 71.9, 71.6, 70.9, 70.8, 69.1, 67.3, 66.7, 56.8, 56.1, 55.5, 54.6, 54.0, 50.1, 42.3, 42.1, 42.0, 39.8, 39.5, 39.0, 37.2, 36.8, 36.2, 35.8, 33.2, 32.6, 31.9, 31.9, 31.5, 30.7, 29.7, 29.5, 29.5, 29.3, 29.3, 28.3, 28.2, 28.0, 27.2, 27.2, 26.2, 26.1, 25.8, 25.6, 24.3, 23.8, 22.8, 22.6, 21.0, 19.4, 18.7, 14.1, 11.8 ppm。
表7:カチオン性脂質の特性決定データ
*1 -Zorbax 300SB C3 150×4.6, 1mL/分, 水:MeCN w/0.1% TFA, 40〜100%を15分, 100%を5分, ELSD検出。
*2 - Zorbax RX SIL 250×4.6, 0.7mL/分, ヘキサン:EtOH 4:6, ELSD検出。
*3 - Zorbax NH2 250×4.6, 1mL/分, ヘキサン:IPA, 30〜60%を10分, 60%を5分, ELSD検出器。
*4 - Xbridge C8, 150×4.6 mm, 1mL/分, 水:MeCN w/0.1% TFA, 30〜100%を15分, 100%を5分, ELSD検出。
*5 - Zorbax Eclipse XDB-C18 250×4.6, 1mL/分, 水:MeCN w/0.1% TFA, 50%を5分間維持, 50〜100%を5分, 次いで100%を12分間維持, ELSD検出器。
*6 - Zorbax Eclipse XDB-C18 250×4.6, 1mL/分, 水:MeOH w/0.1% TFA, 50%を5分, 次いで50〜100%を5分, 次いで100%を5分間維持, ELSD検出器。
*7 - Zorbax Eclipse XDB-C18 250×4.6, 1mL/分, 水:MeOH w/0.1% TFA, 50〜70%を2分, 70〜100%を3分, 次いで100%を5分間維持, ELSD検出器。
*8 - Acquity BEH Shield RP 18 50×2.1, 0.5mL/分, 65℃, 水:IPA w/0.0125% TFA, 30〜50%を1.5分, 50〜75%を10.5分, 75〜90%を0.6分, 次いで90%を0.4分間維持, CAD検出器。
組成物の製造
本発明の化合物を脂質ナノ粒子の形態で投与することが好ましい。それ故に、本発明の組成物が、本発明の化合物および所望により1種以上の他の脂質成分を含む脂質ナノ粒子を含むのが好ましい。
組成物の製造方法の例
等容積のアルコールに溶解した脂質と、クエン酸緩衝液に溶解したsiRNAを衝突噴流法により混合して、脂質ナノ粒子(LNP)を形成させる。脂質溶液は、本発明のカチオン性脂質化合物または同等な脂質、ヘルパー脂質(コレステロール)、任意成分としての中性脂質(DSPC)およびPEG(PEG)脂質を、アルコール中12mg/mLを目標として8〜16mg/mLの濃度で含む。本発明の製剤中の各脂質成分の相対的モル比は表8〜11に記載する。LNP製剤が4種の脂質成分を含むとき、モル比は、それらが記載されている順番で、表の最初の4列に記載されている脂質のタイプに対応する。LNP製剤が3種の脂質成分を含むとき、中性脂質がない。
メスのCD 1マウスを、Charles River Labsから購入し、標準的実験食および水を自由に摂取させて飼育する。投与時、動物の体重は約25グラムである。製剤化したsiRNAを、1回投与として、個々の動物の体重に従いmg siRNA/kgベースで計算した種々の投与量で、側面尾静脈から静脈内投与する(10ml/kg注射量)。
1. FVII siRNA二本鎖配列
5' UUu AAU UGA AAC cAA GAc Auu 3' (配列番号1)
5' uGu cuu GGu uuc AAu uAA Auu 3' (配列番号2)
2. PLK1 424 siRNA二本鎖配列
5' UAU UUA AgG AGG GUG AuC Uuu 3' (配列番号3)
5' AGA Uca cCC Ucc uuA AAU auu 3' (配列番号4)
A=アデノシン
U=ウリジン
G=グアノシン
C=シトシン
a=2'−O−メチル−アデノシン
u=2'−O−メチル−ウリジン
g=2'−O−メチル−グアノシン
c=2'−O−メチル−シトシン
製剤化した第VII因子siRNAを、1回投与として、個々の動物体重に従いmg siRNA/kgベースで計算した種々の投与量で、側面尾静脈から静脈内投与する(10ml/kg注射量)。注射約48時間後、マウスをCO2吸入により麻酔し、大静脈を介して放血させる。血漿第VII因子活性分析のために、0.105M クエン酸ナトリウム抗凝血因子を含むチューブに血液を集める。数例で、フォローアップmRNA定量のために肝臓の小片(〜50mg)を回収し、液体窒素で急速冷凍する。
表8:第VII因子アッセイ−in vivoでの肝臓の結果
2 AVANTIは、AVANTI 880150Pを表す。
3 GM−020は、GM 020 NOFを表す。
4 モル比を表す際の脂質タイプの順番は、表の最初の4列の順番に対応している。モル比に3種の脂質しか挙げられていないときは、中性脂質が存在しない。
Hep3B腫瘍を、100μl PBS中7×106細胞を左脇腹にsc注射することによりメスヌードマウスに確立させる。腫瘍の平均サイズが100mm3に到達した播種10〜14日後に、マウスを処置群に無作為化する。siRNA製剤化LNP製剤を、個々の動物体重に従いmg siRNA/kgベースで計算した種々の投与量で、側面尾静脈から静脈内投与する(10ml/kg注射量)。マウスを種々の時点でCO2吸入により麻酔し、腫瘍をmRNA定量用に採取する。広範なpKa(5.3〜6.6)を有する脂質をLNP製剤に使用する。腫瘍をデジタルカリパスを使用して2方向(幅×長さ)で測定して、腫瘍増殖を評価する。腫瘍体積を式[a×b×b/2](式中、aは最大直径であり、bは最小直径である)を使用して計算する。
HepG2腫瘍を、100μl PBS中5×106細胞を左脇腹にsc注射することによりメスヌードマウスに確立させる。腫瘍の平均サイズが150mm3に到達した播種10〜14日後に、マウスを処置群に無作為化する。siRNA製剤化LNP製剤を、個々の動物体重に従いmg siRNA/kgベースで計算した3×3mg/kg投与量で、側面尾静脈から静脈内投与する(10ml/kg注射量)。マウスを種々の時点でCO2吸入により麻酔し、腫瘍をmRNA定量のために最後の投与から24時間後に採取する。広範なpKa(5.3〜6.6)を有する脂質をLNP製剤に使用する。腫瘍をデジタルカリパスを使用して2方向(幅×長さ)で測定して、腫瘍増殖を評価する。腫瘍体積を式[a×b×b/2](式中、aは最大直径であり、bは最小直径である)を使用して計算する。
786−0腫瘍を200μl PBS中10×106細胞のsc注射により、先に記載のとおり確立する。移植4週間後、200〜250mm3の範囲の腫瘍サイズのマウスを処置群に無作為化する。次に、siRNA製剤化LNPを、5または10mg/kg投与量のいずれかで静脈内投与する。1回投与48時間後、腫瘍をmRNA定量のために採取する。
約30〜50mgの腫瘍組織を、Qiagenホモゲナイザー中で組織溶解緩衝液にモホゲナイズし、遠心により溶解物を浄化させる。総RNAを、製造者のプロトコールに従いRNeasy単離キット(カタログ番号74106)を使用して単離する。PLK−1 mRNAを定量的PCRにより分析し、ヒトGAPDHに対して標準化する。Applied BiosystemsヒトPLK−1遺伝子発現アッセイHs00983229_m1およびヒトGAPDH内因性対照(カタログ番号4326317E)をmRNA検出に使用する。
表9:in vivoでのHep3B腫瘍アッセイ結果
2 モル比を表す際の脂質タイプの順番は、表の最初の4列の順番に対応している。モル比に3種の脂質しか挙げられていないときは、中性脂質が存在しない。
3 “レゾルシノール”は、5−ヘプタデシルベンゼン−1,3−ジオールを表す。
2 モル比を表す際の脂質タイプの順番は、表の最初の4列の順番に対応している。モル比に3種の脂質しか挙げられていないときは、中性脂質が存在しない。
2 モル比を表す際の脂質タイプの順番は、表の最初の4列の順番に対応している。モル比に3種の脂質しか挙げられていないときは、中性脂質が存在しない。
例えば、上の表に示すとおりのカチオン性脂質およびステルス脂質を使用する製剤のさらなる最適化は当業者の知識の範囲内で考慮され、過度の実験なしに行い得る。例えば、製剤を、例えば、標的とする細胞または臓器のタイプに対して最適化したカチオン性脂質のpKa、使用するカチオン性脂質、使用するステルス脂質、ヘルパー脂質、使用する中性脂質、中性脂質が存在するか否か、選択したヘルパー脂質、任意成分としての中性脂質、ステルス脂質およびカチオン性脂質の比率、N/P比、粒子サイズ、投与レジメン、投与する用量、製剤法など個々の選択を含むが、これらに限定されない少なくとも一つのパラメーターについて最適化し得る。
それぞれ約10,000ヌクレオチド長の種々の核酸レプリコンを、下に記載するとおりリポソームで送達する。核酸を、本質的にJeffs et al. (2005) Pharmaceutical Research 22 (3):362-372およびMaurer et al. (2001) Biophysical Journal, 80: 2310-2326の方法により製造したリポソームに封入する。
その後等量の色素を各溶液に添加し、色素添加後の約180μLの各溶液を、96ウェル培養プレートにデュプリケートで充填する。蛍光(励起485nm、発光528nm)をマイクロプレートリーダーで読む。
参照リポソームを、カチオン性脂質としてDlinDMAを使用して形成させる(上記参照)。DlinDMAを、下に記載し、表に示す一連の種々のカチオン性脂質と置き換える。2% PEG2000−DMGと(01)40%のカチオン性脂質、10% DSPC、および48% コレステロール、または(02)60%のカチオン性脂質および38% コレステロールのいずれかを用いて、各リポソームの2種のタイプを形成させる。それ故に、(01)と(02)のリポソームの比較は、中性双性イオン性脂質の効果を示す。
表12:核酸レプリコンのリポソーム送達
本発明は、少なくとも1種のカチオン性脂質、少なくとも1種のヘルパー脂質および少なくとも1種のステルス脂質を含む、生物活性薬物を送達する組成物であって、生物活性薬物が、
(a) 組成物が約6.2以上のpKaを有するカチオン性脂質を有するとき、肝臓または肝臓細胞;および
(b) 組成物が約6.2以下のpKaを有するカチオン性脂質を有するとき、腫瘍または腫瘍細胞;
から選択される組織または細胞に送達するためのものである、組成物を含む。
(a) 組成物が約5.1〜約7.4のpKaを有するカチオン性脂質を有するとき、肝臓または肝臓細胞;および
(b) 組成物が約5.0〜約6.7のpKaを有するカチオン性脂質を有するとき、腫瘍または腫瘍細胞;
から選択される組織または細胞に送達するためのものである、組成物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
bは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
cは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、存在しないか、または−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む。
本発明は、ステロールが、コレステロールである、段落[0652]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
bは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
cは、存在しないか、または、所望により置換されたC1-4アルキレンであり;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−Lc−
{ここで、Lcは、所望により置換されたC1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンである。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC16-22アルケニル基であり;
Lは、−Lc−
{ここで、Lcは、所望により置換されたC1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンである。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、Oであり;
X2は、Oであり;
Y1は、所望により置換されたC16-22アルケニル基であり;
Lは、−Lc−
{ここで、Lcは、所望により置換されたC1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンである。}
であり;
Y2は、ステロイドの環Aの3位のヒドロキシ基を介して結合しているコレステロールであり、当該ヒドロキシ基の水素原子は存在しない。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望により置換されたC3-20ヘテロシクロアルキル、C3-20ヘテロシクロアルケニル、C3-20ヘテロシクロアルキニルまたはC5-20ヘテロアリール基を形成し;
aは、メチレンであり;
bは、メチレンであり;
cは、存在せず;
X1は、OまたはSであり;
X2は、OまたはSであり;
Y1は、所望により置換されたC10-30アルケニル、C10-30アルキニル、C10-30ヘテロアルケニルまたはC10-30ヘテロアルキニルであり;
Lは、−(La)d−(Lb)e−(Lc)f−
{ここで、Laは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
Lbは、所望により置換されたC6-14アリーレンまたはC5-13ヘテロアリーレンであり;
Lcは、所望により置換されたC1-15アルキレン、C1-15アルケニレン、C1-15アルキニレン、C1-15ヘテロアルキレン、C1-15ヘテロアルケニレンまたはC1-15ヘテロアルキニレンであり;
dは、0または1であり;
eは、0または1であり;
fは、0または1である。
ただし、Lは、1個以上のヘテロ原子を含む。}
であり;
Y2は、所望により置換されたステロイドである。]
の化合物またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0629]の化合物を含む。
Zは、PEG、ならびに、ポリ(オキサゾリン)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(グリセロール)、ポリ(N−ビニルピロリドン)、ポリ[N−(2−ヒドロキシプロピル)メタクリルアミド]およびポリ(アミノ酸)をベースとするポリマー(ここで、ポリマーは直鎖であっても分子であってもよく、また、所望により置換されていてもよい。)から選択される親水性頭部であり;
ここで、Zは、n個のサブユニットが重合したものであり;
nは、10ユニットと200ユニットの間のZの平均重合度であり、ここで、nは、異なるポリマータイプについて最適化されており;
L1は、エーテル(例えば−O−)、エステル(例えば−C(O)O−)、スクシネート(例えば−O(O)C−CH2−CH2−C(O)O−))、カルバメート(例えば−OC(O)−NR'−)、カーボネート(例えば−OC(O)O−)、ケトン(例えば−C−C(O)−C−)、カルボニル(例えば−C(O)−)、ウレア(例えば−NRC(O)NR'−)、アミン(例えば−NR'−)、アミド(例えば−C(O)NR'−)、イミン(例えば−C(NR')−)、チオエーテル(例えば−S−)、キサントゲン酸エステル(例えば−OC(S)S−)およびホスホジエステル(例えば−OP(O)2O−)(これらは何れも、0個、1個またはそれ以上のZ基で置換されていてもよい。)を0個、1個、2個またはそれ以上含む、所望により置換されたC1-10アルキレンまたはC1-10ヘテロアルキレンリンカーであり;
ここで、R'は、−H、−NH−、−O−、−S−、ホスフェートまたは所望により置換されたC1-10アルキレンから独立して選択され;
X1およびX2は、炭素原子、または、−NH−、−O−、−S−もしくはホスフェートから選択されるヘテロ原子から独立して選択され;
A1およびA2は、C6-30アルキル、C6-30アルケニルおよびC6-30アルキニルから独立して選択され、ここで、A1およびA2は、同一であっても異なっていてもよいか、
あるいは、A1およびA2は、それらが結合している炭素原子と一体となって、所望により置換されたステロイドを形成する。]
のステルス脂質またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む。
PEGは、ポリ(エチレングリコール)サブユニットであり、ここで、PEGは、直鎖であっても分枝鎖であってもよく;
nは、10ユニットと200ユニットの間のPEGの平均重合度であり、好ましくは約23ユニット、約45ユニットまたは約68ユニットであり;
L1は、エーテル、エステル、スクシネート、カルバメート、カーボネート、ケトン、カルボニル、ウレア、アミン、アミド、イミン、チオエーテル、キサントゲン酸エステルおよびホスホジエステル(これらは何れも、0個、1個またはそれ以上のPEG基によって置換されていてもよい。)を1個、2個またはそれ以上含む、所望により置換されたC1-10ヘテロアルキレンリンカーであり;
X1およびX2は、炭素または酸素から独立して選択され;
A1およびA2は、C6-30アルキル、C6-30アルケニルおよびC6-30アルキニルから独立して選択され、ここで、A1およびA2は、同一であっても異なっていてもよいか、
あるいは、A1およびA2は、それらが結合している炭素原子と一体となって、所望により置換されたステロイドを形成する。]
のステルス脂質またはその塩または薬学的に許容される誘導体を含む、段落[0663]のステルス脂質を含む。
Claims (13)
- 少なくとも1種のカチオン性脂質、少なくとも1種のヘルパー脂質、及び式(XI):
Zは、PEG、ならびに、ポリ(オキサゾリン)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(グリセロール)、ポリ(N−ビニルピロリドン)、ポリ[N−(2−ヒドロキシプロピル)メタクリルアミド]およびポリ(アミノ酸)をベースとするポリマー(ここで、ポリマーは直鎖であっても分枝鎖であってもよく、また、所望により置換されていてもよい。)から選択される親水性頭部であり;
ここで、Zは、n個のサブユニットにより重合されており;
nは、10ユニットと200ユニットの間のZの平均重合度であり;
L1は、エステル、スクシネート、カルバメート、カーボネート、ケトン、カルボニル、ウレア、アミン、アミド、イミン、チオエーテル、キサントゲン酸エステルおよびホスホジエステル(これらは何れも、0個、1個またはそれ以上のZ基によって置換されていてもよい。)を1個、2個またはそれ以上含む、所望により置換されたC1-10ヘテロアルキレンリンカーであり;
X1およびX2は、炭素原子、または、−NH−、−O−、−S−もしくはホスフェートから選択されるヘテロ原子から独立して選択され;そして
A1およびA2は、C6-30アルキル、C6-30アルケニルおよびC6-30アルキニルから独立して選択され、ここで、A1およびA2は、同一であっても異なっていてもよい。]
の少なくとも1種のステルス脂質を含む組成物。 - 前記ステルス脂質が、以下:
- 前記ステルス脂質が、以下:
- 前記ステルス脂質が、請求項1〜3の何れか1項に記載されたステルス脂質の薬学的に許容される塩である、請求項1に記載の組成物。
- 前記ステルス脂質が、請求項1〜3の何れか1項に記載されたステルス脂質の薬学的に許容される溶媒和物である、請求項1に記載の組成物。
- 前記ステルス脂質が、請求項1〜3の何れか1項に記載されたステルス脂質の薬学的に許容される水和物である、請求項1に記載の組成物。
- 少なくとも1種の中性脂質をさらに含む、請求項1〜4の何れか1項に記載の組成物。
- 前記カチオン性脂質が、以下の表:
- 生物活性薬物をさらに含む、請求項1〜6の何れか1項に記載の組成物。
- 前記生物活性薬物が、抗体、コレステロール、ホルモン、抗ウイルス剤、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核タンパク質、化学療法剤、低分子量薬物、ビタミン、補因子、ヌクレオシド、ヌクレオシド誘導体、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、酵素的核酸、アンチセンス核酸、三本鎖形成オリゴヌクレオチド、2−5Aアンチセンスキメラ、アロザイム、アプタマー、デコイRNA分子およびそのアナログ、および、低分子核酸から成る群から選択される、請求項9に記載の組成物。
- 前記生物活性薬物が、1又は複数のヌクレオシド、ヌクレオシド誘導体、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、および低分子核酸から選択される、請求項10に記載の組成物。
- 薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項1〜11の何れか1項に記載の組成物。
- 脂質ナノ粒子の形態における、請求項1〜12の何れか1項に記載の組成物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019162148A JP6940567B2 (ja) | 2009-12-23 | 2019-09-05 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US28478709P | 2009-12-23 | 2009-12-23 | |
US61/284,787 | 2009-12-23 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015196915A Division JP6166321B2 (ja) | 2009-12-23 | 2015-10-02 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019162148A Division JP6940567B2 (ja) | 2009-12-23 | 2019-09-05 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018016789A JP2018016789A (ja) | 2018-02-01 |
JP6585659B2 true JP6585659B2 (ja) | 2019-10-02 |
Family
ID=43857652
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012545302A Withdrawn JP2013515693A (ja) | 2009-12-23 | 2010-12-21 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
JP2015196915A Active JP6166321B2 (ja) | 2009-12-23 | 2015-10-02 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
JP2017122319A Active JP6585659B2 (ja) | 2009-12-23 | 2017-06-22 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
JP2019162148A Active JP6940567B2 (ja) | 2009-12-23 | 2019-09-05 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012545302A Withdrawn JP2013515693A (ja) | 2009-12-23 | 2010-12-21 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
JP2015196915A Active JP6166321B2 (ja) | 2009-12-23 | 2015-10-02 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019162148A Active JP6940567B2 (ja) | 2009-12-23 | 2019-09-05 | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20110200582A1 (ja) |
EP (2) | EP3721943A1 (ja) |
JP (4) | JP2013515693A (ja) |
KR (1) | KR101762466B1 (ja) |
CN (1) | CN102905763B (ja) |
AR (1) | AR079745A1 (ja) |
AU (1) | AU2010334911A1 (ja) |
BR (1) | BR112012015755B1 (ja) |
CA (2) | CA2785492C (ja) |
EA (1) | EA026374B1 (ja) |
MX (1) | MX348474B (ja) |
SG (2) | SG10201407996PA (ja) |
TW (1) | TWI549699B (ja) |
WO (1) | WO2011076807A2 (ja) |
Families Citing this family (195)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3403647A1 (en) | 2009-12-01 | 2018-11-21 | Translate Bio, Inc. | Delivery of mrna for the augmentation of proteins and enzymes in human genetic diseases |
EP3721943A1 (en) * | 2009-12-23 | 2020-10-14 | Novartis AG | Lipids, lipid compositions and methods of using them |
HUE047796T2 (hu) | 2010-07-06 | 2020-05-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | RNS bevitele több immunútvonal bekapcsolására |
SI2591114T1 (sl) | 2010-07-06 | 2016-10-28 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Imunizacija velikih sesalcev z majhnimi odmerki RNA |
CA2804591C (en) | 2010-07-06 | 2019-01-22 | Novartis Ag | Cationic oil-in-water emulsions |
LT2590676T (lt) | 2010-07-06 | 2016-10-25 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Viriono tipo išnešiojančios dalelės, skirtos besireplikuojančioms rnr molekulėms |
WO2012006378A1 (en) | 2010-07-06 | 2012-01-12 | Novartis Ag | Liposomes with lipids having an advantageous pka- value for rna delivery |
CA2807552A1 (en) | 2010-08-06 | 2012-02-09 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
ES2918192T3 (es) | 2010-08-31 | 2022-07-14 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomas pegilados para la administración de ARN que codifica para inmunógeno |
EP3542789A3 (en) | 2010-08-31 | 2020-01-01 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Lipids suitable for liposomal delivery of protein-coding rna |
ES2923634T3 (es) | 2010-08-31 | 2022-09-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomas pequeños para la administración de ARN que codifica para inmunógeno |
CN104531671A (zh) | 2010-10-01 | 2015-04-22 | 现代治疗公司 | 设计核酸及其使用方法 |
EP3520813B1 (en) | 2010-10-11 | 2023-04-19 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Antigen delivery platforms |
EP2691101A2 (en) | 2011-03-31 | 2014-02-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Delivery and formulation of engineered nucleic acids |
EP2717893B1 (en) | 2011-06-08 | 2019-05-08 | Translate Bio, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods for mrna delivery |
JP2014522842A (ja) | 2011-07-06 | 2014-09-08 | ノバルティス アーゲー | 免疫原性組み合わせ組成物およびその使用 |
JP6059220B2 (ja) | 2011-07-06 | 2017-01-18 | ノバルティス アーゲー | 核酸を含む水中油型エマルジョン |
ES2702318T3 (es) * | 2011-07-06 | 2019-02-28 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Emulsiones catiónicas de aceite en agua |
EP4014966A1 (en) | 2011-07-06 | 2022-06-22 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Liposomes having useful n:p ratio for delivery of rna molecules |
EP2729168A2 (en) | 2011-07-06 | 2014-05-14 | Novartis AG | Immunogenic compositions and uses thereof |
EP3508220A1 (en) | 2011-08-31 | 2019-07-10 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Pegylated liposomes for delivery of immunogen-encoding rna |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
AU2012315965A1 (en) | 2011-09-27 | 2014-04-03 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Di-aliphatic substituted PEGylated lipids |
EP3492109B1 (en) | 2011-10-03 | 2020-03-04 | ModernaTX, Inc. | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
DK2583680T1 (da) | 2011-10-21 | 2015-01-19 | Abbvie Inc | Mono (PSI-7977) eller kombinationsbehandling af DAA til anvendelse ved behandling af HCV |
US8492386B2 (en) | 2011-10-21 | 2013-07-23 | Abbvie Inc. | Methods for treating HCV |
US8466159B2 (en) | 2011-10-21 | 2013-06-18 | Abbvie Inc. | Methods for treating HCV |
DK2583677T1 (da) | 2011-10-21 | 2015-01-19 | Abbvie Inc | Fremgangsmåder til behandling af HCV omfattende mindst to direktevirkende antivirale midler, ribavirin, men ikke inteferon |
ES2921724T1 (es) | 2011-12-07 | 2022-08-31 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Lípidos biodegradables para la administración de agentes activos |
WO2013090648A1 (en) | 2011-12-16 | 2013-06-20 | modeRNA Therapeutics | Modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
EP2830595B1 (en) | 2012-03-29 | 2019-10-16 | Translate Bio, Inc. | Ionizable cationic lipids |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
AU2013243949A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-10-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of biologics and proteins associated with human disease |
US8999380B2 (en) | 2012-04-02 | 2015-04-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of biologics and proteins associated with human disease |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9878056B2 (en) | 2012-04-02 | 2018-01-30 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides |
EA201492004A1 (ru) | 2012-05-02 | 2015-08-31 | Новартис Аг | Органические композиции для лечения kras-ассоциированных заболеваний |
CN109810977A (zh) * | 2012-05-26 | 2019-05-28 | 株式会社博纳克 | 具有递送功能的基因表达调控用单链核酸分子 |
US20150267192A1 (en) | 2012-06-08 | 2015-09-24 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Nuclease resistant polynucleotides and uses thereof |
US9512456B2 (en) | 2012-08-14 | 2016-12-06 | Modernatx, Inc. | Enzymes and polymerases for the synthesis of RNA |
US9597380B2 (en) | 2012-11-26 | 2017-03-21 | Modernatx, Inc. | Terminally modified RNA |
EP3434774A1 (en) | 2013-01-17 | 2019-01-30 | ModernaTX, Inc. | Signal-sensor polynucleotides for the alteration of cellular phenotypes |
SG10201706960TA (en) | 2013-02-28 | 2017-10-30 | Arrowhead Res Corp | Organic compositions to treat epas1-related diseases |
JP6352950B2 (ja) | 2013-03-08 | 2018-07-04 | ノバルティス アーゲー | 活性薬物の送達のための脂質と脂質組成物 |
WO2014159813A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
AU2014236396A1 (en) | 2013-03-14 | 2015-08-13 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Methods for purification of messenger RNA |
CN105142676B (zh) | 2013-03-14 | 2022-06-28 | 夏尔人类遗传性治疗公司 | Cftr mrna组合物以及相关方法和用途 |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
KR101514320B1 (ko) * | 2013-06-14 | 2015-04-22 | 재단법인 의약바이오컨버젼스연구단 | 신규한 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
US20160194625A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-07 | Moderna Therapeutics, Inc. | Chimeric polynucleotides |
WO2015034925A1 (en) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
ES2892314T3 (es) | 2013-09-16 | 2022-02-03 | Glycomine Inc | Preparación farmacéutica de hidratos de carbono para uso terapéutico |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
BR112016007255A2 (pt) | 2013-10-03 | 2017-09-12 | Moderna Therapeutics Inc | polinucleotídeos que codificam receptor de lipoproteína de baixa densidade |
JP6546161B2 (ja) | 2013-10-04 | 2019-07-17 | ノバルティス アーゲー | B型肝炎ウイルスを治療するための有機化合物 |
WO2015051135A2 (en) | 2013-10-04 | 2015-04-09 | Novartis Ag | Organic compositions to treat hepcidin-related diseases |
WO2015051366A2 (en) | 2013-10-04 | 2015-04-09 | Novartis Ag | Novel formats for organic compounds for use in rna interference |
JP6694811B2 (ja) | 2013-10-04 | 2020-05-20 | ノバルティス アーゲー | RNA干渉に使用するためのRNAi剤用の3’末端キャップ |
JP6506749B2 (ja) | 2013-10-22 | 2019-04-24 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | フェニルケトン尿症のためのmRNA療法 |
EP3060257B1 (en) | 2013-10-22 | 2021-02-24 | Translate Bio, Inc. | Lipid formulations for delivery of messenger rna |
MX2016005237A (es) | 2013-10-22 | 2016-08-12 | Shire Human Genetic Therapies | Terapia de acido ribonucleico mensajero para la deficiencia de argininosuccinato sintetasa. |
WO2015095351A1 (en) | 2013-12-19 | 2015-06-25 | Novartis Ag | LEPTIN mRNA COMPOSITIONS AND FORMULATIONS |
EP3872066A1 (en) | 2013-12-19 | 2021-09-01 | Novartis AG | Lipids and lipid compositions for the delivery of active agents |
ES2908827T3 (es) | 2013-12-19 | 2022-05-04 | Novartis Ag | Lípidos y composiciones lipídicas para el suministro de agentes activos |
US10612020B2 (en) | 2013-12-26 | 2020-04-07 | Tokyo Medical University | Artificial mimic miRNA for controlling gene expression, and use of same |
CN112646812A (zh) | 2013-12-27 | 2021-04-13 | 株式会社博纳克 | 控制基因表达的人工匹配型miRNA及其用途 |
DK3096741T3 (da) | 2014-01-21 | 2020-09-28 | Anjarium Biosciences Ag | Fremgangsmåde til fremstillingen af hybridosomer |
EP3556353A3 (en) | 2014-02-25 | 2020-03-18 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Lipid nanoparticle vaccine adjuvants and antigen delivery systems |
JP6881813B2 (ja) | 2014-04-23 | 2021-06-02 | モデルナティーエックス, インコーポレイテッド | 核酸ワクチン |
PT3134506T (pt) | 2014-04-25 | 2019-10-31 | Translate Bio Inc | Métodos de purificação de rna mensageiro |
EP2974739A1 (en) | 2014-07-15 | 2016-01-20 | Novartis AG | RSVF trimerization domains |
US10022455B2 (en) | 2014-05-30 | 2018-07-17 | Translate Bio, Inc. | Biodegradable lipids for delivery of nucleic acids |
ES2964588T3 (es) | 2014-06-24 | 2024-04-08 | Translate Bio Inc | Composiciones enriquecidas estereoquímicamente para la administración de ácidos nucleicos |
IL298516A (en) * | 2014-06-25 | 2023-01-01 | Acuitas Therapeutics Inc | Novel lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
CA2953265C (en) * | 2014-07-02 | 2023-09-26 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Encapsulation of messenger rna |
EP3169693B1 (en) | 2014-07-16 | 2022-03-09 | ModernaTX, Inc. | Chimeric polynucleotides |
WO2016011123A1 (en) | 2014-07-16 | 2016-01-21 | Arrowhead Research Corporation | Organic compositions to treat apoc3-related diseases |
JP6778175B2 (ja) * | 2014-07-16 | 2020-10-28 | ノバルティス アーゲー | 脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を封入する方法 |
EP3171895A1 (en) | 2014-07-23 | 2017-05-31 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of intrabodies |
CN107072946B (zh) | 2014-09-05 | 2022-01-11 | 诺华股份有限公司 | 用于递送活性剂的脂质和脂质组合物 |
US11027023B2 (en) | 2014-12-27 | 2021-06-08 | Bonac Corporation | Natural type miRNA for controlling gene expression, and use of same |
EP3061826A1 (en) | 2015-02-27 | 2016-08-31 | Novartis AG | Flavivirus replicons |
ES2926369T3 (es) | 2015-03-27 | 2022-10-25 | Bonac Corp | Molécula de ácido nucleico monocatenario que tiene función de suministro y capacidad de control de la expresión génica |
CN104922141B (zh) * | 2015-05-28 | 2016-05-25 | 厦门成坤生物技术有限公司 | 一种用于治疗乙型病毒性肝炎的siRNA组合物 |
US9790490B2 (en) | 2015-06-18 | 2017-10-17 | The Broad Institute Inc. | CRISPR enzymes and systems |
IL283545B2 (en) | 2015-06-29 | 2023-09-01 | Acuitas Therapeutics Inc | Lipids and nanoparticulate lipid formulations for delivery of nucleic acids |
US11564893B2 (en) | 2015-08-17 | 2023-01-31 | Modernatx, Inc. | Methods for preparing particles and related compositions |
EP4286012A3 (en) | 2015-09-17 | 2024-05-29 | ModernaTX, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
WO2017062513A1 (en) | 2015-10-05 | 2017-04-13 | Modernatx, Inc. | Methods for therapeutic administration of messenger ribonucleic acid drugs |
EP3362102A1 (en) * | 2015-10-14 | 2018-08-22 | Life Technologies Corporation | Ribonucleoprotein transfection agents |
CA3003055C (en) | 2015-10-28 | 2023-08-01 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
CA3007955A1 (en) | 2015-12-10 | 2017-06-15 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticles for delivery of therapeutic agents |
WO2017112865A1 (en) | 2015-12-22 | 2017-06-29 | Modernatx, Inc. | Compounds and compositions for intracellular delivery of agents |
RS63135B1 (sr) | 2015-12-23 | 2022-05-31 | Modernatx Inc | Postupci upotrebe polinukleotida koji kodiraju ox40 ligand |
US20190010495A1 (en) | 2015-12-28 | 2019-01-10 | Novartis Ag | Compositions and methods for the treatment of hemoglobinopathies |
MA43587A (fr) | 2016-01-10 | 2018-11-14 | Modernatx Inc | Arnm thérapeutiques codant pour des anticorps anti-ctla-4 |
CA3010974A1 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Verndari, Inc. | Microneedle compositions and methods of using same |
EP3448392A4 (en) | 2016-04-28 | 2020-01-15 | Emory University | ALCYNE-CONTAINING NUCLEOTIDES AND NUCLEOSIDES THERAPEUTIC COMPOSITIONS AND USES THEREOF |
MA45290A (fr) * | 2016-05-04 | 2019-03-13 | Wave Life Sciences Ltd | Procédés et compositions d'agents biologiquement actifs |
BR112018073683A2 (pt) | 2016-05-18 | 2019-02-26 | Modernatx, Inc. | polinucleotídeos codificadores de relaxina |
EP3463445A1 (en) | 2016-06-02 | 2019-04-10 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Zika viral antigen constructs |
CN109562153A (zh) | 2016-08-07 | 2019-04-02 | 诺华股份有限公司 | mRNA介导的免疫方法 |
EP3500671B1 (en) | 2016-08-17 | 2024-07-10 | The Broad Institute, Inc. | Method of selecting target sequences for the design of guide rnas |
CN110312799A (zh) | 2016-08-17 | 2019-10-08 | 博德研究所 | 新型crispr酶和系统 |
WO2018047148A1 (en) | 2016-09-12 | 2018-03-15 | Novartis Ag | Compounds for the inhibition of mirna |
US11466292B2 (en) | 2016-09-29 | 2022-10-11 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Compositions and methods of treatment |
GB201616904D0 (en) | 2016-10-05 | 2016-11-16 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Vaccine |
EP3528827A4 (en) | 2016-10-21 | 2020-11-04 | Merck Sharp & Dohme Corp. | INFLUENZA HEMAGGLUTININ PROTEIN Vaccines |
EP3538067A1 (en) | 2016-11-08 | 2019-09-18 | Modernatx, Inc. | Stabilized formulations of lipid nanoparticles |
BE1025121B1 (fr) | 2016-11-17 | 2018-11-05 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Constructions antigeniques du virus zika |
TW201839136A (zh) | 2017-02-06 | 2018-11-01 | 瑞士商諾華公司 | 治療血色素異常症之組合物及方法 |
US11253605B2 (en) | 2017-02-27 | 2022-02-22 | Translate Bio, Inc. | Codon-optimized CFTR MRNA |
EP4186888A1 (en) | 2017-03-15 | 2023-05-31 | ModernaTX, Inc. | Compound and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
US11969506B2 (en) | 2017-03-15 | 2024-04-30 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticle formulation |
EP3596042B1 (en) | 2017-03-15 | 2022-01-12 | Modernatx, Inc. | Crystal forms of amino lipids |
JP7297676B2 (ja) | 2017-04-28 | 2023-06-26 | アクイタス セラピューティクス インコーポレイテッド | 新規なカルボニル脂質、および核酸を送達するための脂質ナノ粒子製剤 |
US11173190B2 (en) | 2017-05-16 | 2021-11-16 | Translate Bio, Inc. | Treatment of cystic fibrosis by delivery of codon-optimized mRNA encoding CFTR |
US11141377B2 (en) | 2017-06-15 | 2021-10-12 | Infectious Disease Research Institute | Nanostructured lipid carriers and stable emulsions and uses thereof |
EP3638215A4 (en) | 2017-06-15 | 2021-03-24 | Modernatx, Inc. | RNA FORMULATIONS |
CA3073018A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
CN111315359A (zh) | 2017-08-31 | 2020-06-19 | 摩登纳特斯有限公司 | 制备脂质纳米颗粒的方法 |
EP3675826B1 (en) * | 2017-08-31 | 2023-05-31 | Life Technologies Corporation | Cationic lipid compositions for tissue-specific delivery |
JOP20200054A1 (ar) | 2017-09-11 | 2020-03-10 | Arrowhead Pharmaceuticals Inc | عوامل RNAi وتركيبات لتثبيط تعبير صَميمُ البروتينِ الشَّحْمِيّ C-III (APOC3) |
KR102338449B1 (ko) | 2017-09-21 | 2021-12-10 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 표적화된 핵산 편집을 위한 시스템, 방법, 및 조성물 |
EP3461497A1 (en) | 2017-09-27 | 2019-04-03 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Viral antigens |
CN111406108A (zh) | 2017-09-29 | 2020-07-10 | 英特利亚治疗股份有限公司 | 制剂 |
US11413243B2 (en) | 2017-11-06 | 2022-08-16 | Nitto Denko Corporation | Fusogenic compounds for delivery of biologically active molecules |
WO2019094702A1 (en) | 2017-11-10 | 2019-05-16 | Cocoon Biotech Inc. | Ocular applications of silk-based products |
US12018080B2 (en) | 2017-11-13 | 2024-06-25 | The Broad Institute, Inc. | Methods and compositions for treating cancer by targeting the CLEC2D-KLRB1 pathway |
CA3088546A1 (en) | 2018-01-29 | 2019-08-01 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Stabilized rsv f proteins and uses thereof |
CN113286884A (zh) | 2018-08-07 | 2021-08-20 | 博德研究所 | 新型cas12b酶和系统 |
CA3109165A1 (en) | 2018-08-17 | 2020-02-20 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Immunogenic compositions and uses thereof |
WO2020041793A1 (en) | 2018-08-24 | 2020-02-27 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
MX2021003455A (es) | 2018-10-02 | 2021-09-21 | Intellia Therapeutics Inc | Lípidos con amina ionizables. |
KR20210108969A (ko) | 2018-12-05 | 2021-09-03 | 인텔리아 테라퓨틱스, 인크. | 변형된 아민 지질 |
JP7523449B2 (ja) | 2019-01-11 | 2024-07-26 | アクイタス セラピューティクス インコーポレイテッド | 活性剤の脂質ナノ粒子送達のための脂質 |
WO2020191102A1 (en) | 2019-03-18 | 2020-09-24 | The Broad Institute, Inc. | Type vii crispr proteins and systems |
AU2020261419A1 (en) | 2019-04-25 | 2021-11-04 | Intellia Therapeutics, Inc. | Ionizable amine lipids and lipid nanoparticles |
AU2020318680A1 (en) | 2019-07-21 | 2022-02-17 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Therapeutic viral vaccine |
AU2020350759A1 (en) | 2019-09-19 | 2022-03-31 | Modernatx, Inc. | Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents |
CA3147643A1 (en) | 2019-09-23 | 2021-04-01 | Omega Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for modulating hepatocyte nuclear factor 4-alpha (hnf4.alpha.) gene expression |
JP2022548320A (ja) | 2019-09-23 | 2022-11-17 | オメガ セラピューティクス, インコーポレイテッド | アポリポタンパク質b(apob)遺伝子発現をモジュレートするための組成物および方法 |
JP2023506842A (ja) | 2019-12-18 | 2023-02-20 | ノバルティス アーゲー | 異常ヘモグロビン症の治療用組成物及び方法 |
US20240277830A1 (en) | 2020-02-04 | 2024-08-22 | CureVac SE | Coronavirus vaccine |
CA3166256A1 (en) | 2020-02-14 | 2021-08-19 | Marian E. Gindy | Human papillomavirus (hpv) virus-like particles (vlps) vaccine |
EP4118207A1 (en) | 2020-03-11 | 2023-01-18 | Omega Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for modulating forkhead box p3 (foxp3) gene expression |
WO2021209970A1 (en) | 2020-04-16 | 2021-10-21 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Sars cov-2 spike protein construct |
WO2021233352A1 (zh) * | 2020-05-19 | 2021-11-25 | 上海交通大学 | 一种细胞内吞释放响应的化合物及其应用 |
US20230203484A1 (en) | 2020-05-22 | 2023-06-29 | Wave Life Sciences Ltd. | Double stranded oligonucleotide compositions and methods relating thereto |
EP4161570A1 (en) | 2020-06-05 | 2023-04-12 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Modified betacoronavirus spike proteins |
US20230256090A1 (en) | 2020-06-29 | 2023-08-17 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Adjuvants |
BR112023000327A2 (pt) | 2020-07-16 | 2023-01-31 | Acuitas Therapeutics Inc | Lipídeos catiônicos para o uso em nanopartículas lipídicas |
AU2021335334A1 (en) | 2020-09-04 | 2023-04-20 | Access To Advanced Health Institute | Genetically-adjuvanted rna vaccines |
WO2022051022A1 (en) | 2020-09-04 | 2022-03-10 | Infectious Disease Research Institute | Co-lyophilized rna and nanostructured lipid carrier |
CN116867515A (zh) | 2020-09-04 | 2023-10-10 | 高级健康研究所 | 活性减毒rna混合疫苗技术 |
CA3205569A1 (en) | 2020-12-22 | 2022-06-30 | CureVac SE | Rna vaccine against sars-cov-2 variants |
WO2022137128A2 (en) | 2020-12-23 | 2022-06-30 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Self-amplifying messenger rna |
EP4032546A1 (en) | 2021-01-20 | 2022-07-27 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Therapeutic viral vaccine |
TW202245835A (zh) | 2021-02-04 | 2022-12-01 | 美商默沙東有限責任公司 | 用於肺炎球菌結合物疫苗之奈米乳化液佐劑組合物 |
US11524023B2 (en) | 2021-02-19 | 2022-12-13 | Modernatx, Inc. | Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same |
MX2023011400A (es) | 2021-03-26 | 2023-10-09 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Composiciones inmunogenicas. |
WO2022221697A1 (en) | 2021-04-17 | 2022-10-20 | Intellia Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle compositions |
KR20240017791A (ko) | 2021-04-17 | 2024-02-08 | 인텔리아 테라퓨틱스, 인크. | Dna-의존적 단백질 키나제의 억제제 및 이의 조성물 및 용도 |
MX2023012237A (es) | 2021-04-17 | 2024-01-23 | Intellia Therapeutics Inc | Composiciones de nanoparticulas lipidicas. |
EP4346894A1 (en) | 2021-05-24 | 2024-04-10 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Adjuvants |
US20240272143A1 (en) | 2021-06-09 | 2024-08-15 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Release assay for determining potency of self-amplifying rna drug product and methods for using |
WO2022269518A2 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Novartis Ag | Compositions and methods for the treatment of hemoglobinopathies |
EP4367242A2 (en) | 2021-07-07 | 2024-05-15 | Omega Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for modulating secreted frizzled receptor protein 1 (sfrp1) gene expression |
CN115703714A (zh) * | 2021-08-13 | 2023-02-17 | 广州谷森制药有限公司 | 新型阳离子脂质化合物 |
EP4387596A1 (en) | 2021-08-16 | 2024-06-26 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Low-dose lyophilized rna vaccines and methods for preparing and using the same |
WO2023021427A1 (en) | 2021-08-16 | 2023-02-23 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Freeze-drying of lipid nanoparticles (lnps) encapsulating rna and formulations thereof |
WO2023020994A1 (en) | 2021-08-16 | 2023-02-23 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Novel methods |
WO2023020992A1 (en) | 2021-08-16 | 2023-02-23 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Novel methods |
WO2023020993A1 (en) | 2021-08-16 | 2023-02-23 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Novel methods |
TW202315602A (zh) | 2021-08-19 | 2023-04-16 | 美商默沙東有限責任公司 | 新穎熱穩定脂質奈米粒子及其使用方法 |
CN115710193A (zh) * | 2021-08-23 | 2023-02-24 | 广州谷森制药有限公司 | 新型阳离子脂质化合物 |
CN115745942A (zh) * | 2021-09-03 | 2023-03-07 | 广州谷森制药有限公司 | 新型阳离子脂质化合物 |
EP4396355A1 (en) | 2021-09-03 | 2024-07-10 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Substitution of nucleotide bases in self-amplifying messenger ribonucleic acids |
WO2023161350A1 (en) | 2022-02-24 | 2023-08-31 | Io Biotech Aps | Nucleotide delivery of cancer therapy |
US11951177B2 (en) | 2022-03-23 | 2024-04-09 | Nanovation Therapeutics Inc. | High sterol-containing lipid nanoparticles |
CN114605791A (zh) * | 2022-03-28 | 2022-06-10 | 济南际通智能制造有限公司 | 一种扎带及其制备方法 |
WO2023184038A1 (en) | 2022-04-01 | 2023-10-05 | Nanovation Therapeutics Inc. | Mrna delivery method and composition thereof |
CN115626983A (zh) * | 2022-04-27 | 2023-01-20 | 北京清科胜因生物科技有限公司 | 一种聚(2-噁唑啉)脂质及脂质纳米颗粒 |
WO2023228116A1 (en) | 2022-05-24 | 2023-11-30 | Access To Advanced Health Institute | Intranasal administration of thermostable rna vaccines |
CN114805460B (zh) * | 2022-05-31 | 2023-10-24 | 温州大学 | 一种dna-胆固醇功能化树状分子杂化体及合成方法与应用 |
WO2023242817A2 (en) | 2022-06-18 | 2023-12-21 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Recombinant rna molecules comprising untranslated regions or segments encoding spike protein from the omicron strain of severe acute respiratory coronavirus-2 |
WO2024052882A1 (en) | 2022-09-09 | 2024-03-14 | Access To Advanced Health Institute | Immunogenic vaccine composition incorporating a saponin |
WO2024064910A1 (en) | 2022-09-23 | 2024-03-28 | Chroma Medicine, Inc. | Compositions and methods for epigenetic regulation of hbv gene expression |
WO2024068545A1 (en) | 2022-09-26 | 2024-04-04 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Influenza virus vaccines |
WO2024133160A1 (en) | 2022-12-19 | 2024-06-27 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Hepatitis b compositions |
WO2024138189A2 (en) | 2022-12-22 | 2024-06-27 | Intellia Therapeutics, Inc. | Methods for analyzing nucleic acid cargos of lipid nucleic acid assemblies |
WO2024160936A1 (en) | 2023-02-03 | 2024-08-08 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Rna formulation |
GB202302092D0 (en) | 2023-02-14 | 2023-03-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Analytical method |
GB202404607D0 (en) | 2024-03-29 | 2024-05-15 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | RNA formulation |
Family Cites Families (64)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5345374B2 (ja) * | 1974-12-28 | 1978-12-06 | ||
US4166132A (en) | 1977-08-18 | 1979-08-28 | Pfizer Inc. | Antiviral amine derivatives of glycerol and propanediols |
US4173641A (en) * | 1978-05-15 | 1979-11-06 | Pfizer Inc. | Di-O-n-alkyl glycerol derivatives as immune stimulants |
JPH0662517B2 (ja) | 1985-01-07 | 1994-08-17 | シンテツクス(ユー・エス・エイ)インコーポレイテツド | 置換アルキルートリ置換アンモニウム界面活性剤 |
EP0188311A3 (en) | 1985-01-07 | 1988-07-20 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Pharmaceutical formulation of nicardipine and 1,2-dioxy-omega-trialkylammonium compounds |
JPH0832637B2 (ja) * | 1985-02-14 | 1996-03-29 | アクゾ・エヌ・ヴエー | 合成免疫原 |
US4987071A (en) | 1986-12-03 | 1991-01-22 | University Patents, Inc. | RNA ribozyme polymerases, dephosphorylases, restriction endoribonucleases and methods |
JP3595841B2 (ja) | 1992-12-04 | 2004-12-02 | サーナ セラピューティクス,インコーポレイテッド | リボザイム増幅診断用薬 |
JPH08507203A (ja) * | 1992-12-04 | 1996-08-06 | イノーバー ラボラトリーズ,インコーポレイテッド | 調節可能な核酸治療およびそれらの使用方法 |
US5871914A (en) | 1993-06-03 | 1999-02-16 | Intelligene Ltd. | Method for detecting a nucleic acid involving the production of a triggering RNA and transcription amplification |
EP0721328A4 (en) | 1993-09-27 | 1997-09-17 | Smithkline Beecham Corp | CAMPTOTHECIN FORMULATIONS |
US6166197A (en) * | 1995-03-06 | 2000-12-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds having pyrimidine nucleotide (S) with 2'and 5 substitutions |
WO1997048712A1 (fr) | 1996-06-17 | 1997-12-24 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Derives asialotrisaccharide moranoline et medicaments |
US5849902A (en) * | 1996-09-26 | 1998-12-15 | Oligos Etc. Inc. | Three component chimeric antisense oligonucleotides |
US5989912A (en) | 1996-11-21 | 1999-11-23 | Oligos Etc. Inc. | Three component chimeric antisense oligonucleotides |
US5837282A (en) | 1996-10-30 | 1998-11-17 | University Of British Columbia | Ionophore-mediated liposome loading |
WO1998027104A1 (en) | 1996-12-19 | 1998-06-25 | Yale University | Bioreactive allosteric polynucleotides |
JPH10251152A (ja) | 1997-03-14 | 1998-09-22 | Nippon Shinyaku Co Ltd | 虚血再灌流障害治療剤 |
TW589189B (en) | 1997-08-04 | 2004-06-01 | Scras | Kit containing at least one double-stranded RNA combined with at least one anti-viral agent for therapeutic use in the treatment of a viral disease, notably of viral hepatitis |
US20030036517A1 (en) | 1997-12-05 | 2003-02-20 | Bruce A. Sullenger | Nucleic acid mediated rna tagging and rna revision |
US6506559B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
AU1691599A (en) | 1997-12-26 | 1999-07-19 | Nippon Shinyaku Co. Ltd. | Aliphatic derivatives |
GB9827152D0 (en) | 1998-07-03 | 1999-02-03 | Devgen Nv | Characterisation of gene function using double stranded rna inhibition |
IL126731A0 (en) | 1998-10-23 | 1999-08-17 | Intelligene Ltd | A method of detection |
EP1133513A4 (en) | 1998-11-03 | 2002-07-03 | Univ Yale | MOLECULAR SENSORS CONSISTING OF SEVERAL DOMAINS OF POLYNUCLEOTIDES |
US6656498B1 (en) | 1998-11-25 | 2003-12-02 | Vanderbilt University | Cationic liposomes for gene transfer |
CA2361201A1 (en) | 1999-01-28 | 2000-08-03 | Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. | Composition and method for in vivo and in vitro attenuation of gene expression using double stranded rna |
DE19956568A1 (de) | 1999-01-30 | 2000-08-17 | Roland Kreutzer | Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens |
JP2000281569A (ja) | 1999-03-25 | 2000-10-10 | Nippon Shinyaku Co Ltd | 脊髄障害治療剤 |
EP1235842A4 (en) | 1999-10-15 | 2003-04-23 | Univ Massachusetts | GENESIS OF THE RNA INTERFERENCE PATH AS AID OF TARGETED GENTIAN INTERFERENCE |
GB9927444D0 (en) | 1999-11-19 | 2000-01-19 | Cancer Res Campaign Tech | Inhibiting gene expression |
CN1311189A (zh) * | 2000-03-01 | 2001-09-05 | 沈阳药科大学 | 聚乙二醇单甲醚胆固醇琥珀酸酯衍生物的合成及其制剂 |
JP2002212477A (ja) * | 2001-01-19 | 2002-07-31 | Fuji Photo Film Co Ltd | インクジェット用インク |
US20080207542A1 (en) | 2002-03-26 | 2008-08-28 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA inteference mediated inhibition of hepatitis C virus (HVC) gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
US20080214437A1 (en) * | 2002-09-06 | 2008-09-04 | Mohapatra Shyam S | Methods and compositions for reducing activity of the atrial natriuretic peptide receptor and for treatment of diseases |
KR20060087531A (ko) | 2003-08-28 | 2006-08-02 | 노파르티스 아게 | 블런트-말단 및 3'-변형체를 갖는 간섭 rna 이중나선 |
NZ592917A (en) * | 2003-09-15 | 2012-12-21 | Protiva Biotherapeutics Inc | Stable polyethyleneglycol (PEG) dialkyloxypropyl (DAA) lipid conjugates |
LT1771206T (lt) * | 2004-05-05 | 2018-05-25 | Silence Therapeutics Gmbh | Lipidai, lipidų kompleksai ir jų panaudojimas |
EP1750673B1 (en) | 2004-05-17 | 2009-12-02 | Tekmira Pharmaceuticals Corporation | Liposomal formulations comprising dihydrosphingomyelin and methods of use thereof |
EP1766035B1 (en) | 2004-06-07 | 2011-12-07 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Lipid encapsulated interfering rna |
AU2005259799A1 (en) * | 2004-07-02 | 2006-01-12 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Immunostimulatory siRNA molecules and uses therefor |
US20060051405A1 (en) | 2004-07-19 | 2006-03-09 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions for the delivery of therapeutic agents and uses thereof |
GB0418172D0 (en) | 2004-08-13 | 2004-09-15 | Ic Vec Ltd | Vector |
US7404969B2 (en) | 2005-02-14 | 2008-07-29 | Sirna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle based compositions and methods for the delivery of biologically active molecules |
AU2006336384B2 (en) * | 2005-02-14 | 2010-12-16 | Sirna Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle based compositions and methods for the delivery of biologically active molecules |
JP2009509566A (ja) * | 2005-10-03 | 2009-03-12 | サーナ・セラピューティクス・インコーポレイテッド | 低分子干渉核酸を用いた、rna干渉によって媒介される、インフルエンザウイルス遺伝子発現の阻害 |
TW200800235A (en) | 2005-10-18 | 2008-01-01 | Otsuka Pharma Co Ltd | Carrier composition for nucleic acid transport |
BRPI0620074A2 (pt) * | 2005-12-19 | 2011-11-01 | Sirna Therapeutics Inc | composição |
GB0608838D0 (en) | 2006-05-04 | 2006-06-14 | Novartis Ag | Organic compounds |
JP2010503382A (ja) * | 2006-07-17 | 2010-02-04 | サーナ・セラピューティクス・インコーポレイテッド | 低分子干渉核酸(siNA)を用いたプロタンパク質転換酵素サブチリシンケクシン9(PCSK9)遺伝子発現のRNA干渉媒介性阻害 |
EP2695608B1 (en) * | 2006-10-03 | 2016-11-23 | Arbutus Biopharma Corporation | Lipid containing formulations |
EP2119738B1 (en) * | 2007-02-05 | 2014-04-16 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Polyethylene glycol derivative |
JP2010519203A (ja) * | 2007-02-16 | 2010-06-03 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | 生物活性分子の活性を強化するための組成物及び方法 |
CN101674853B (zh) | 2007-05-04 | 2013-03-27 | 玛瑞纳生物技术有限公司 | 氨基酸脂质及其用途 |
US20100297242A1 (en) * | 2007-10-17 | 2010-11-25 | Tae-Gwan Park | Ldl-like cationic nanoparticles for deliverying nucleic acid gene, method for preparing thereof and method for deliverying nucleic acid gene using the same |
CN101468203B (zh) * | 2007-12-25 | 2012-06-27 | 沈阳药科大学 | 可断裂聚乙二醇脂质衍生物的制备方法以及应用 |
ES2535419T3 (es) * | 2007-12-27 | 2015-05-11 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Silenciamiento de expresión de quinasa tipo polo usando ARN interferente |
CA3044134A1 (en) * | 2008-01-02 | 2009-07-09 | Arbutus Biopharma Corporation | Improved compositions and methods for the delivery of nucleic acids |
WO2009129387A2 (en) | 2008-04-16 | 2009-10-22 | Abbott Laboratories | Cationic lipids and uses thereof |
WO2010009065A2 (en) | 2008-07-15 | 2010-01-21 | Novartis Ag | Amphipathic peptide compositions |
CA3039251C (en) * | 2008-11-10 | 2024-01-09 | Arbutus Biopharma Corporation | Novel lipids and compositions for the delivery of therapeutics |
WO2010054384A1 (en) | 2008-11-10 | 2010-05-14 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipids and compositions for the delivery of therapeutics |
US9181295B2 (en) * | 2009-08-20 | 2015-11-10 | Sirna Therapeutics, Inc. | Cationic lipids with various head groups for oligonucleotide delivery |
EP3721943A1 (en) * | 2009-12-23 | 2020-10-14 | Novartis AG | Lipids, lipid compositions and methods of using them |
-
2010
- 2010-12-21 EP EP20173135.3A patent/EP3721943A1/en active Pending
- 2010-12-21 MX MX2012007450A patent/MX348474B/es active IP Right Grant
- 2010-12-21 CA CA2785492A patent/CA2785492C/en active Active
- 2010-12-21 WO PCT/EP2010/070412 patent/WO2011076807A2/en active Application Filing
- 2010-12-21 EA EA201200939A patent/EA026374B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2010-12-21 SG SG10201407996PA patent/SG10201407996PA/en unknown
- 2010-12-21 BR BR112012015755-8A patent/BR112012015755B1/pt active IP Right Grant
- 2010-12-21 KR KR1020127019236A patent/KR101762466B1/ko active IP Right Grant
- 2010-12-21 AU AU2010334911A patent/AU2010334911A1/en not_active Abandoned
- 2010-12-21 US US12/974,906 patent/US20110200582A1/en not_active Abandoned
- 2010-12-21 CA CA3009891A patent/CA3009891C/en active Active
- 2010-12-21 SG SG2012046728A patent/SG181904A1/en unknown
- 2010-12-21 JP JP2012545302A patent/JP2013515693A/ja not_active Withdrawn
- 2010-12-21 EP EP10796052A patent/EP2516010A2/en not_active Withdrawn
- 2010-12-21 CN CN201080064582.XA patent/CN102905763B/zh active Active
- 2010-12-22 TW TW099145423A patent/TWI549699B/zh active
- 2010-12-27 AR ARP100104953 patent/AR079745A1/es active IP Right Grant
-
2014
- 2014-03-04 US US14/197,124 patent/US9301923B2/en active Active
-
2015
- 2015-10-02 JP JP2015196915A patent/JP6166321B2/ja active Active
-
2017
- 2017-06-22 JP JP2017122319A patent/JP6585659B2/ja active Active
-
2019
- 2019-09-05 JP JP2019162148A patent/JP6940567B2/ja active Active
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6585659B2 (ja) | 脂質、脂質組成物およびそれらの使用方法 | |
JP5902617B2 (ja) | カチオン性脂質 | |
CN102215820A (zh) | 用于核酸输送系统的可释放融合脂质 | |
WO2010056403A1 (en) | Branched cationic lipids for nucleic acids delivery system | |
JP2012509272A (ja) | 核酸送達系のための放出性カチオン脂質 | |
EP2362728A1 (en) | Releasable polymeric lipids for nucleic acids delivery system | |
WO2010014895A2 (en) | Nanoparticle compositions for nucleic acids delivery system | |
EP4352038A2 (en) | Ionizable cationic lipids for rna delivery | |
AU2014259532B2 (en) | Lipids, lipid compositions, and methods of using them | |
JP6774965B2 (ja) | カチオン性脂質としての化合物 | |
WO2023086514A1 (en) | Ionizable cationic lipids for rna delivery | |
WO2024073678A2 (en) | Phospholipids containing a heterocycle ring having a tertiary amine or amide |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170724 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171012 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180529 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20180828 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181025 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181101 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190129 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190507 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190806 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190905 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6585659 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |