JP4636818B2 - 多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法 - Google Patents
多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4636818B2 JP4636818B2 JP2004168286A JP2004168286A JP4636818B2 JP 4636818 B2 JP4636818 B2 JP 4636818B2 JP 2004168286 A JP2004168286 A JP 2004168286A JP 2004168286 A JP2004168286 A JP 2004168286A JP 4636818 B2 JP4636818 B2 JP 4636818B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- pyridine
- chondroitin sulfate
- complex
- sulfate
- sulfur trioxide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Polymers FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 56
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 15
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims description 40
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 35
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- AKEJUJNQAAGONA-UHFFFAOYSA-N sulfur trioxide Chemical compound O=S(=O)=O AKEJUJNQAAGONA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 13
- AOJFQRQNPXYVLM-UHFFFAOYSA-N pyridin-1-ium;chloride Chemical group [Cl-].C1=CC=[NH+]C=C1 AOJFQRQNPXYVLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 9
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 9
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 claims description 8
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 claims description 7
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- UDYFLDICVHJSOY-UHFFFAOYSA-N sulfur trioxide-pyridine complex Substances O=S(=O)=O.C1=CC=NC=C1 UDYFLDICVHJSOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloro-5,5-dimethylimidazolidine-2,4-dione Chemical compound CC1(C)N(Cl)C(=O)N(Cl)C1=O KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 claims description 4
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N chlorosulfonic acid Substances OS(Cl)(=O)=O XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- ZNCXUFVDFVBRDO-UHFFFAOYSA-N pyridine;sulfuric acid Chemical compound [H+].[O-]S([O-])(=O)=O.C1=CC=[NH+]C=C1 ZNCXUFVDFVBRDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N triethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CC ILWRPSCZWQJDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 9
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 9
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 6
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 6
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 6
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- -1 amine salt Chemical class 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000001180 sulfating effect Effects 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000252233 Cyprinus carpio Species 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241001282110 Pagrus major Species 0.000 description 2
- 241000269799 Perca fluviatilis Species 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229920001021 polysulfide Polymers 0.000 description 2
- 239000005077 polysulfide Substances 0.000 description 2
- 150000008117 polysulfides Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000283153 Cetacea Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Chemical group O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical class Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJJRHUDNGHYASR-UHFFFAOYSA-N N=C=N.S(O)(O)(=O)=O Chemical compound N=C=N.S(O)(O)(=O)=O GJJRHUDNGHYASR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- HLCFGWHYROZGBI-JJKGCWMISA-M Potassium gluconate Chemical compound [K+].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O HLCFGWHYROZGBI-JJKGCWMISA-M 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 229920001284 acidic polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000004805 acidic polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical group O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940094517 chondroitin 4-sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229940006423 chondroitin sulfate sodium Drugs 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- NLXFONFHPKEHOZ-UHFFFAOYSA-N diethylazanium;hydron;sulfate Chemical compound CCNCC.OS(O)(=O)=O NLXFONFHPKEHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CDMADVZSLOHIFP-UHFFFAOYSA-N disodium;3,7-dioxido-2,4,6,8,9-pentaoxa-1,3,5,7-tetraborabicyclo[3.3.1]nonane;decahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].O1B([O-])OB2OB([O-])OB1O2 CDMADVZSLOHIFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- XWBDWHCCBGMXKG-UHFFFAOYSA-N ethanamine;hydron;chloride Chemical compound Cl.CCN XWBDWHCCBGMXKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXVXWUDYARFPLN-UHFFFAOYSA-N ethylazanium;hydron;sulfate Chemical compound CC[NH3+].OS([O-])(=O)=O OXVXWUDYARFPLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- JNONJXMVMJSMTC-UHFFFAOYSA-N hydron;triethylazanium;sulfate Chemical compound OS(O)(=O)=O.CCN(CC)CC JNONJXMVMJSMTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000004224 potassium gluconate Substances 0.000 description 1
- 229960003189 potassium gluconate Drugs 0.000 description 1
- 235000013926 potassium gluconate Nutrition 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- CBPYOHALYYGNOE-UHFFFAOYSA-M potassium;3,5-dinitrobenzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=CC([N+]([O-])=O)=C1 CBPYOHALYYGNOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical class CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
本発明はコンドロイチン硫酸の分子量を制御しながら硫酸化して、一定の分子量および硫酸基含量を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法に関する。
多硫酸化コンドロイチン硫酸は、血液凝固抑制作用、末梢血液循環促進作用、繊維芽細胞増殖抑制作用、皮膚保湿作用等に優れており、医薬品または化粧品として用いられている。
多硫酸化コンドロイチン硫酸の原料となるコンドロイチン硫酸は、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンとＤ−グルクロン酸の繰り返し単位を構成とする酸性多糖であり、動物組織中に存在する。しかし、硫酸基の結合位置により、コンドロイチン硫酸Ａ（コンドロイチン−４硫酸）とコンドロイチン硫酸Ｃ（コンドロイチン−６硫酸）に分類され、この比率は動物種によって異なる。近年、サメ、サケ等の魚類から抽出されたコンドロイチン硫酸が工業レベルで供給されるようになった。ところが、コンドロイチン硫酸Ａとコンドロイチン硫酸Ｃの比率は基原動物に依存し、またコンドロイチン硫酸の分子量は基原動物や抽出、精製方法に依存している。そのため、基原および製造会社によって、コンドロイチン硫酸は幅広い物理化学的性質を示す。
このようにコンドロイチン硫酸の物理化学的性質が広くとも、一定の分子量及び硫酸基含量を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造する方法が望まれている。
このようにコンドロイチン硫酸の物理化学的性質が広くとも、一定の分子量及び硫酸基含量を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造する方法が望まれている。
コンドロイチン硫酸を多硫酸化する方法としては、コンドロイチン硫酸Ｃを濃硫酸中低温で硫酸化する方法（特許文献１）が開示されている。この方法は硫酸化と低分子化が同時に一段階反応で行われる点で優れている。しかし、この方法では硫酸化と低分子化を独立して制御することは困難であるため、品質制御をすることは困難である。また、反応温度を低温に制御しなければならないことや大量のエーテル系溶媒が必要なため工業的には不利である。
また、コンドロイチン硫酸のトリブチルアミン塩を用いて分子内の水酸基全てを硫酸化する方法（特許文献２）、コンドロイチン硫酸の有機アミン塩を三酸化硫黄の錯体あるいは硫酸−カルボジイミド混合物で多硫酸化する方法（特許文献３、４）が開示されている。しかし、いずれの方法でもコンドロイチン硫酸の低分子化は進まないため、望みの分子量の多硫酸化コンドロイチン硫酸を得るには、所定の分子量のコンドロイチン硫酸を用いなければならない。さらに原料であるコンドロイチン硫酸は通常ナトリウム塩の形態で入手することができるが、ナトリウム塩は有機溶媒に難溶であり、反応が不均一になりやすい。そのため、有機溶媒に溶けやすい有機アミン塩に変換してから、多硫酸化している。ナトリウム塩を有機アミン塩に変換する方法はイオン交換樹脂を用いることで可能であるが、工業生産には不利である。それに加えて、反応が進行すると生成物（多硫酸化物）の粘度が上昇し攪拌が困難になる。そうすると工業生産スケールでは攪拌機に過大な負荷がかかり、その結果攪拌機のモーターから出火する危険性がある。
さらに、コンドロイチン硫酸を硫酸とクロロスルホン酸の混合物を用いて硫酸化する方法（特許文献５）が開示されているが、この方法では硫酸化と低分子化が同時に進むことから、硫酸化と低分子化を独立して制御することは困難である。またこの方法ではコンドロイチン硫酸では不安定で、低分子化が進みすぎると明記されている。
他方、低分子化したオリゴ糖を三酸化硫黄の錯体で反応させて多硫酸化する方法（特許文献６）があるが、この方法は予め原料を低分子化させる必要がある上に、この反応で分子量や硫酸基含量を制御できる記載はない。
特公昭４７−３０１６７号公報
特開平１１−１６６００１号公報
特開昭６２−２７４０２号公報
米国特許第６３８８０６０号明細書
特開昭５９−１３３２０１号公報
国際特許公開第０３／０２０７３５号パンフレット
しかしながら、従来の硫酸化方法では、あらかじめ有機アミン塩に変更したり、分子量と硫酸化を制御することが困難であり、一定の分子量および硫酸基含量を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を合成することは困難であった。
したがって、本発明の目的はコンドロイチン硫酸ナトリウムの分子量や基原が異なっていても一定の分子量および硫酸基含量を有する多硫酸コンドロイチン硫酸の製造方法を提供することである。
また、市販しているコンドロイチン硫酸はナトリウム塩であるが、有機溶媒に溶解しやすい塩に塩交換することなく、ナトリウム塩のまま多硫酸化反応に用いることができる製造方法を提供することである。
本願発明者らは、鋭意研究の結果、魚類由来のコンドロイチン硫酸から一定の分子量および硫酸基含量の多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造法を見出し、また、コンドロイチン硫酸の塩交換することなく多硫酸化する製造方法を見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、
（１） 魚類由来コンドロイチン硫酸からａ）硫酸基含量：２５．８〜３７．３％、ｂ）極限粘度：０．０９〜０．１８の物理化学的性質を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造する方法；
（２） 魚類由来コンドロイチン硫酸がサケ、サメ、エイから得られたコンドロイチン硫酸である（１）記載の方法；
（３） 魚類由来コンドロイチン硫酸がコイ、スズキ、マダイ、エツから得られたコンドロイチン硫酸である（１）記載の方法；
（４） コンドロイチン硫酸を有機アミン鉱酸塩の共存下、三酸化硫黄で多硫酸化して、ａ）硫酸基含量：２５．８〜３７．３％、ｂ）極限粘度：０．０９〜０．１８の物理化学的性質を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造する方法；
（５） 有機アミン鉱酸塩を１種類又は２種類用いて多硫酸化する（４）記載の方法；
（６） 三酸化硫黄が三酸化硫黄の錯体である（４）または（５）のいずれかに記載の方法；
（７） 非プロトン性溶媒を用いて多硫酸化する（４）ないし（６）のいずれか１に記載の方法；
（８） コンドロイチン硫酸は魚類由来のコンドロイチン硫酸である（４）ないし（７）のいずれか１に記載の方法；
を提供するものである。
（１） 魚類由来コンドロイチン硫酸からａ）硫酸基含量：２５．８〜３７．３％、ｂ）極限粘度：０．０９〜０．１８の物理化学的性質を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造する方法；
（２） 魚類由来コンドロイチン硫酸がサケ、サメ、エイから得られたコンドロイチン硫酸である（１）記載の方法；
（３） 魚類由来コンドロイチン硫酸がコイ、スズキ、マダイ、エツから得られたコンドロイチン硫酸である（１）記載の方法；
（４） コンドロイチン硫酸を有機アミン鉱酸塩の共存下、三酸化硫黄で多硫酸化して、ａ）硫酸基含量：２５．８〜３７．３％、ｂ）極限粘度：０．０９〜０．１８の物理化学的性質を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造する方法；
（５） 有機アミン鉱酸塩を１種類又は２種類用いて多硫酸化する（４）記載の方法；
（６） 三酸化硫黄が三酸化硫黄の錯体である（４）または（５）のいずれかに記載の方法；
（７） 非プロトン性溶媒を用いて多硫酸化する（４）ないし（６）のいずれか１に記載の方法；
（８） コンドロイチン硫酸は魚類由来のコンドロイチン硫酸である（４）ないし（７）のいずれか１に記載の方法；
を提供するものである。
魚類由来のコンドロイチン硫酸から、工業的に簡便かつ安全な方法で一定の品質を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造することができる。
また、市販されているコンドロイチン硫酸に何ら手を加えることなく、工業的に簡便かつ安全な方法で一定の品質を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造することができる。
また、市販されているコンドロイチン硫酸に何ら手を加えることなく、工業的に簡便かつ安全な方法で一定の品質を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造することができる。
本発明の多硫酸化コンドロイチン硫酸はコンドロイチン硫酸の塩を、有機アミン鉱酸塩の共存下、非プロトン性溶媒中で、０℃から用いる反応溶媒の沸点までの温度下で、コンドロイチン硫酸の構成ユニットの水酸基に対して、１：１ないし１：１０の三酸化硫黄を反応させることにより製造することができる。
出発原料となるコンドロイチン硫酸の基原は特に問わないが、魚類またはほ乳類が好ましい。ほ乳類としては、クジラ、ウシ、ブタなどが好ましい。また、例えば特開２００１−１３９６０２号公報で開示された技術によって得られる魚類のうろこから得られるコンドロイチン硫酸を用いることもできる。特に、コイ、スズキ、マダイ、エツなどのうろこから得られたコンドロイチン硫酸が好ましい。
またコンドロイチン硫酸は市販されている形態であれば、塩の種類は限定されないが、無機塩が好ましく、特にナトリウム塩が好ましい。 コンドロイチン硫酸については、ナカライテスク株式会社、マルハ株式会社、生化学工業株式会社、東京化成工業株式会社、日本バイオコン株式会社、株式会社日本バリアフリー、和光純薬株式会社、American Laboratories, Inc.、Bioiberica、Kraeber GmbH & Co.、Oxford Glyco Sciences、Qingdao Kangyuan Pharmaceutical Co., Ltd.、Sichuan Biosyn Pharmaceutical Co., Ltd.等から入手することができる。
またコンドロイチン硫酸は市販されている形態であれば、塩の種類は限定されないが、無機塩が好ましく、特にナトリウム塩が好ましい。 コンドロイチン硫酸については、ナカライテスク株式会社、マルハ株式会社、生化学工業株式会社、東京化成工業株式会社、日本バイオコン株式会社、株式会社日本バリアフリー、和光純薬株式会社、American Laboratories, Inc.、Bioiberica、Kraeber GmbH & Co.、Oxford Glyco Sciences、Qingdao Kangyuan Pharmaceutical Co., Ltd.、Sichuan Biosyn Pharmaceutical Co., Ltd.等から入手することができる。
溶媒は非プロトン性溶媒であれば特に限定されないが、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）が好ましい。また、これらの溶媒は回収して再利用することが可能であり、０．１〜１０％程度の水分を含んでいても良い。反応温度は、０℃から用いる反応溶媒の沸点までで行えるが、好ましくは６０〜１００℃である。反応時間は原料の分子量により異なるが、３０分以上、好ましくは３０分から１２時間、より好ましくは３０分から５時間である。
コンドロイチン硫酸の構成ユニットの水酸基と三酸化硫黄のモル比は１：１ないし１：１０が好ましく、特に１：３ないし１：８が好ましい。三酸化硫黄は通常市販されている形態のものであれば、特に限定されないが、好ましくはピリジン、トリメチルアミン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ジオキサンの錯体、さらに好ましくは、ピリジン、ＤＭＦの錯体の形で用いてもよい。これらの錯体は公知の方法で、クロロスルホン酸と３級アミンを反応させて作ることもでき、単離精製することなく反応に用いてもよい。
有機アミン鉱酸塩として、好ましくはアンモニアまたは１級、２級、３級の低級アルキルアミンの塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、臭化水素酸塩であり、特に好ましくは塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、エチルアミン塩酸塩、エチルアミン硫酸塩、ジエチルアミン塩酸塩、ジエチルアミン硫酸塩、トリエチルアミン塩酸塩、トリエチルアミン硫酸塩、ピリジン塩酸塩、ピリジン硫酸塩であり、さらに好ましくは、ピリジン塩酸塩、ピリジン硫酸塩である。
また、有機アミン鉱酸塩は複数種類用いることができるが、好ましくは１種類または２種類である。
また、有機アミン鉱酸塩は複数種類用いることができるが、好ましくは１種類または２種類である。
上記方法により、本発明の多硫酸化コンドロイチン硫酸が生成する。単離精製する方法は一般的に知られている方法、例えば透析や限外濾過、樹脂処理による脱塩、有機溶媒を添加して析出させる方法、凍結乾燥や噴霧乾燥による回収方法を使用することができる。
以下に実施例および試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらにより限定されるものではない。
［実施例１］
三酸化硫黄ピリジン錯体13g、ピリジン塩酸塩12gにピリジン10mLを加えて加熱した。ピリジン80mL に懸濁させたサメ由来コンドロイチン硫酸ナトリウム（マルハ株式会社製）10gを加えて加熱した。反応後３時間に反応液の一部をメタノールに注いだ。溶媒を除去した後、粗生成物に水を加えて溶解させ、30%水酸化ナトリウム溶液でpH10以上に調整した後、透析を行った。粗生成物の水溶液に食塩を加えた後、メタノール中に滴下した。析出物をろ取し、多硫酸化物を得た。
反応後5時間においても同様の後処理を実施し、多硫酸化物を得た。
三酸化硫黄ピリジン錯体13g、ピリジン塩酸塩12gにピリジン10mLを加えて加熱した。ピリジン80mL に懸濁させたサメ由来コンドロイチン硫酸ナトリウム（マルハ株式会社製）10gを加えて加熱した。反応後３時間に反応液の一部をメタノールに注いだ。溶媒を除去した後、粗生成物に水を加えて溶解させ、30%水酸化ナトリウム溶液でpH10以上に調整した後、透析を行った。粗生成物の水溶液に食塩を加えた後、メタノール中に滴下した。析出物をろ取し、多硫酸化物を得た。
反応後5時間においても同様の後処理を実施し、多硫酸化物を得た。
実施例２〜７は下記の条件で実施例１と同様（反応時間は１，３または５時間）にして行った。
［比較例］
三酸化硫黄ピリジン錯体13gにピリジン10mLを加えて加熱した。ピリジン80mLに懸濁させたサメ由来コンドロイチン硫酸ナトリウム10gを加えてさらに加熱した。反応後30分で凝固し、攪拌が不可能となったが、その状態で1時間まで反応を継続した。反応物を取り出し、メタノール中に加えた。以下、実施例１の後処理と同様の処理を行い、多硫酸化物を得た。
三酸化硫黄ピリジン錯体13gにピリジン10mLを加えて加熱した。ピリジン80mLに懸濁させたサメ由来コンドロイチン硫酸ナトリウム10gを加えてさらに加熱した。反応後30分で凝固し、攪拌が不可能となったが、その状態で1時間まで反応を継続した。反応物を取り出し、メタノール中に加えた。以下、実施例１の後処理と同様の処理を行い、多硫酸化物を得た。
［試験例１］ 硫酸基含量
多硫酸化物を1M塩酸溶液で2時間加水分解した後、 HPLCで測定した。標準溶液として硫酸カリウムを用いた。
使用カラム：TSKgel IC-ANION PW（東ソー）
移動相：ホウ酸緩衝液
流速：1.0mL/min
注入容量 50μL
カラム温度：40℃
検出器：電気伝導度検出器（Waters）
ホウ酸緩衝液の調製
グルコン酸カリウム 300mg、ホウ酸 360mg、四ホウ酸ナトリウム十水和物 500mg、グリセリン 5.00g、1-ブタノール 30 mL及びアセトニトリル 120mLを水に溶かし 1000mL とする。（pH 8.5）
多硫酸化物を1M塩酸溶液で2時間加水分解した後、 HPLCで測定した。標準溶液として硫酸カリウムを用いた。
使用カラム：TSKgel IC-ANION PW（東ソー）
移動相：ホウ酸緩衝液
流速：1.0mL/min
注入容量 50μL
カラム温度：40℃
検出器：電気伝導度検出器（Waters）
ホウ酸緩衝液の調製
グルコン酸カリウム 300mg、ホウ酸 360mg、四ホウ酸ナトリウム十水和物 500mg、グリセリン 5.00g、1-ブタノール 30 mL及びアセトニトリル 120mLを水に溶かし 1000mL とする。（pH 8.5）
［試験例２］ 極限粘度
日本薬局方外医薬品規格２００２（日本公定書協会編集）のヘパリン類似物質の項の記載方法に従い、ウベローデ型粘度計を用いて測定した。
日本薬局方外医薬品規格２００２（日本公定書協会編集）のヘパリン類似物質の項の記載方法に従い、ウベローデ型粘度計を用いて測定した。
［試験例３］
電気泳動は文献（タンパク質 核酸 酵素,Vol.18, No.9,843-857(1973)）を参考に行い、0.1Mピリジン−0.47Mギ酸緩衝液を電極液として用いた。
実施例３及び比較例の反応１時間後の反応物の電気泳動の結果を図１に示した。実施例３では一本のバンドのみが確認され均一であるが、比較例は複数のバンドが確認され不均一である。
電気泳動は文献（タンパク質 核酸 酵素,Vol.18, No.9,843-857(1973)）を参考に行い、0.1Mピリジン−0.47Mギ酸緩衝液を電極液として用いた。
実施例３及び比較例の反応１時間後の反応物の電気泳動の結果を図１に示した。実施例３では一本のバンドのみが確認され均一であるが、比較例は複数のバンドが確認され不均一である。
［実施例８］
含水（1.5%）ピリジン 260mL中に、クロロスルホン酸 70mL を滴下した。サメ由来コンドロイチン硫酸ナトリウム 100g と含水（1.5%）ピリジン700mLの懸濁液を加え、３時間加熱した。
反応液をメタノール中に注いだ後、溶媒を除去し、残査に食塩水を加えて溶解させた。ここに30%水酸化ナトリウム溶液を加えてpH 11.5に調整し、メタノール中に注いだ。析出した固体をろ取した後に、水に溶解させ、1M塩酸試薬を加えてpHを7.0として、限外ろ過した。残留溶液に塩化ナトリウムを加えた後、メタノール中に注いだ。析出した固体をろ取して、多硫酸化物を得た。
含水（1.5%）ピリジン 260mL中に、クロロスルホン酸 70mL を滴下した。サメ由来コンドロイチン硫酸ナトリウム 100g と含水（1.5%）ピリジン700mLの懸濁液を加え、３時間加熱した。
反応液をメタノール中に注いだ後、溶媒を除去し、残査に食塩水を加えて溶解させた。ここに30%水酸化ナトリウム溶液を加えてpH 11.5に調整し、メタノール中に注いだ。析出した固体をろ取した後に、水に溶解させ、1M塩酸試薬を加えてpHを7.0として、限外ろ過した。残留溶液に塩化ナトリウムを加えた後、メタノール中に注いだ。析出した固体をろ取して、多硫酸化物を得た。
実施例９及び１０は実施例８と同様にして行った。
Claims (8)
- 非プロトン性溶媒中で、コンドロイチン硫酸を、有機アミン鉱酸塩の共存下、三酸化硫黄錯体で多硫酸化して、次の物理化学的性質
ａ）硫酸基含量：２５．８〜３７．３％
ｂ）極限粘度：０．０９〜０．１８
を有する多硫酸化コンドロイチン硫酸を製造する方法であって、
前記非プロトン性溶媒が、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）からなる群から選択されること、
前記有機アミン鉱酸塩が、ピリジン、トリメチルアミンおよびトリエチルアミンの塩酸塩または硫酸塩からなる群から選択されること、
前記三酸化硫黄錯体が、三酸化硫黄のピリジン錯体、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド錯体およびトリメチルアミン錯体からなる群から選択されること
を特徴とする多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法。 - 前記コンドロイチン硫酸が、サケ、サメ、エイ、ブタおよびウシからなる群から選択される基原に由来することを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。
- 前記コンドロイチン硫酸が、サケ、サメ、ブタからなる群から選択される基原に由来することを特徴とする、請求項１または２に記載の製造方法。
- 前記非プロトン性溶媒が、ピリジンまたはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドから選択されることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の製造方法。
- 前記有機アミン鉱酸塩が、ピリジン塩酸塩またはピリジン硫酸塩から選択されることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の製造方法。
- 前記三酸化硫黄錯体が、三酸化硫黄のピリジン錯体またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド錯体から選択されることを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の製造方法。
- 前記非プロトン性溶媒がピリジンであり、前記有機アミン鉱酸塩がピリジン塩酸塩であり、前記三酸化硫黄錯体が三酸化硫黄ピリジン錯体であって、
ピリジン中にクロロスルホン酸を添加することによって、ピリジン塩酸塩と三酸化硫黄ピリジン錯体を生成する工程を含むことを特徴とする、請求項１に記載の製造方法。 - 前記非プロトン性溶媒が含水ピリジンであることを特徴とする、請求項７に記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004168286A JP4636818B2 (ja) | 2004-06-07 | 2004-06-07 | 多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004168286A JP4636818B2 (ja) | 2004-06-07 | 2004-06-07 | 多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2005344073A JP2005344073A (ja) | 2005-12-15 |
| JP4636818B2 true JP4636818B2 (ja) | 2011-02-23 |
Family
ID=35496739
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2004168286A Expired - Lifetime JP4636818B2 (ja) | 2004-06-07 | 2004-06-07 | 多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4636818B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105924544A (zh) * | 2016-05-16 | 2016-09-07 | 山东大学 | 一种高硫酸化硫酸软骨素及其制备方法与应用 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014047155A (ja) * | 2012-08-30 | 2014-03-17 | Tottori Univ | 保護硫酸化オリゴ糖化合物及びその製造方法 |
| JP6757016B2 (ja) * | 2016-03-16 | 2020-09-16 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | 多硫酸化プロテオグリカン |
| JP6786064B2 (ja) * | 2016-04-13 | 2020-11-18 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | 上皮細胞増殖剤 |
| JP2018035281A (ja) * | 2016-08-31 | 2018-03-08 | 国立大学法人千葉大学 | コンドロイチン／デルマタン硫酸並びにこれを含む抗炎症剤、保湿剤及び抗血液凝固剤 |
| CN111234048A (zh) * | 2020-03-09 | 2020-06-05 | 河北农业大学 | 鳐鱼硫酸软骨素的降解产物及其降解方法 |
| CN111253503A (zh) * | 2020-03-09 | 2020-06-09 | 河北农业大学 | 鳐鱼硫酸软骨素及其提取方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59133201A (ja) * | 1982-12-28 | 1984-07-31 | サノフイ | 多糖類の解重合およびスルフエ−ト化法 |
| JPS6147701A (ja) * | 1984-08-14 | 1986-03-08 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | 合成コンドロイチン多硫酸の製造法 |
| JPS6227402A (ja) * | 1985-07-12 | 1987-02-05 | サノフイ | グリコサミノグリカンの硫酸化方法、該方法によつて得られる新規グリコサミノグリカン及びその生物学的適用 |
| JPH11166001A (ja) * | 1997-12-02 | 1999-06-22 | Shin Nippon Yakugyou Kk | 過硫酸化コンドロイチン硫酸、その製造方法及びそれを有効成分として含有する抗血液凝固剤 |
| US6388060B1 (en) * | 1998-11-06 | 2002-05-14 | Vascular Therapeutics Inc. | Process for the sulfation of uronic acid-containing polysaccharides |
| JP2005504067A (ja) * | 2001-08-31 | 2005-02-10 | イヴァックス リサーチ インコーポレイテッド | サッカライド硫酸化方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5235710B1 (ja) * | 1966-06-03 | 1977-09-10 | ||
| JPS5017049B1 (ja) * | 1971-03-02 | 1975-06-18 |
-
2004
- 2004-06-07 JP JP2004168286A patent/JP4636818B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59133201A (ja) * | 1982-12-28 | 1984-07-31 | サノフイ | 多糖類の解重合およびスルフエ−ト化法 |
| JPS6147701A (ja) * | 1984-08-14 | 1986-03-08 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | 合成コンドロイチン多硫酸の製造法 |
| JPS6227402A (ja) * | 1985-07-12 | 1987-02-05 | サノフイ | グリコサミノグリカンの硫酸化方法、該方法によつて得られる新規グリコサミノグリカン及びその生物学的適用 |
| JPH11166001A (ja) * | 1997-12-02 | 1999-06-22 | Shin Nippon Yakugyou Kk | 過硫酸化コンドロイチン硫酸、その製造方法及びそれを有効成分として含有する抗血液凝固剤 |
| US6388060B1 (en) * | 1998-11-06 | 2002-05-14 | Vascular Therapeutics Inc. | Process for the sulfation of uronic acid-containing polysaccharides |
| JP2005504067A (ja) * | 2001-08-31 | 2005-02-10 | イヴァックス リサーチ インコーポレイテッド | サッカライド硫酸化方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105924544A (zh) * | 2016-05-16 | 2016-09-07 | 山东大学 | 一种高硫酸化硫酸软骨素及其制备方法与应用 |
| CN105924544B (zh) * | 2016-05-16 | 2018-03-09 | 山东大学 | 一种高硫酸化硫酸软骨素及其制备方法与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2005344073A (ja) | 2005-12-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106943901B (zh) | 磺化羟丙基壳聚糖改性的生物相容性聚砜膜及其制备方法 | |
| US10801022B2 (en) | Method for solid-phase synthesis of DNA encoded compound library | |
| JP4636818B2 (ja) | 多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法 | |
| Ding et al. | Electrochemically stimulated drug release from dual stimuli responsive chitin hydrogel | |
| KR20190095102A (ko) | 낮은 염소 함량의 폴리페닐렌 설파이드 및 이의 제조 방법, 수지 조성물 및 성형체 | |
| US4319975A (en) | Derivatized agarose and method of making and using same | |
| JP2019504881A5 (ja) | ||
| KR20130084222A (ko) | 신규한 고점도 카복시메틸 셀룰로스 및 제조방법 | |
| JP2002500013A (ja) | ヒトプロインシュリンの製造方法 | |
| KR101966435B1 (ko) | 헤파리노이드의 제조방법 | |
| CN103554303A (zh) | 一种纯化羧甲基壳聚糖的方法 | |
| JP2012219260A (ja) | イオン液体を用いる甲殻類の甲殻又は貝類の貝殻からのキチンの製造方法 | |
| JP2006282926A (ja) | 水溶性ポリウロン酸およびその製造方法 | |
| JPH04117401A (ja) | スルフォン化キトサンの製造法 | |
| CN105777938B (zh) | 一种从硫酸软骨素粗提物中去除硫酸角质素的方法 | |
| BR112020011554B1 (pt) | Processo de preparação de enoxaparina sódica | |
| JP2522356B2 (ja) | 新規な架橋構造を有する陰イオン交換体 | |
| DK171906B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af proteiner til anvendelse i den farmaceutiske industri og/eller veterinærindustrien ved udvinding fra mælk | |
| KR20220149736A (ko) | 생태학적으로 허용 가능한 용매 내 다당류의 직접적인 황산화 방법 | |
| PT98430B (pt) | Processo para a preparacao de heparinas calcicas | |
| EP3713968B1 (en) | Functionalised compounds | |
| JP2003501334A (ja) | 過ヨウ素酸の再生方法 | |
| CZ2003736A3 (cs) | Způsob promývání k čištění polymerů obsahujících atom dusíku nebo aminoskupinu, amoniovou nebo spirobicyklickou amoniovou skupinu | |
| CN105732844A (zh) | 一种含羧基和磺酸基壳聚糖衍生物及其制备方法 | |
| US11919976B1 (en) | Preparation and purification method for cationic quaternary ammonium salt of sodium hyaluronate in homogeneous medium |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070301 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20081117 |
|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20081204 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100825 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101014 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20101104 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20101122 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131203 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |