DK171906B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af proteiner til anvendelse i den farmaceutiske industri og/eller veterinærindustrien ved udvinding fra mælk - Google Patents
Fremgangsmåde til fremstilling af proteiner til anvendelse i den farmaceutiske industri og/eller veterinærindustrien ved udvinding fra mælk Download PDFInfo
- Publication number
- DK171906B1 DK171906B1 DK216578A DK216578A DK171906B1 DK 171906 B1 DK171906 B1 DK 171906B1 DK 216578 A DK216578 A DK 216578A DK 216578 A DK216578 A DK 216578A DK 171906 B1 DK171906 B1 DK 171906B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- proteins
- silica
- casein
- solution
- anion exchange
- Prior art date
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 65
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 65
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims description 25
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims description 25
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims description 25
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 93
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 64
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 46
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims description 32
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 claims description 27
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 claims description 27
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 25
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 23
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 22
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 21
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 12
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 12
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 11
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 7
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 claims description 5
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims description 3
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001449 anionic compounds Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 150000002891 organic anions Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims 1
- 229910001412 inorganic anion Chemical group 0.000 claims 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 54
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 18
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 18
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 16
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 16
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 12
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 10
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 8
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 8
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 6
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 5
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 4
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 4
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000877 Melamine resin Polymers 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- JDSHMPZPIAZGSV-UHFFFAOYSA-N melamine Chemical compound NC1=NC(N)=NC(N)=N1 JDSHMPZPIAZGSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 3
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 3
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 2
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 229940023913 cation exchange resins Drugs 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001568 phenolic resin Polymers 0.000 description 2
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- KXGFMDJXCMQABM-UHFFFAOYSA-N 2-methoxy-6-methylphenol Chemical compound [CH]OC1=CC=CC([CH])=C1O KXGFMDJXCMQABM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGIGUEBEKRSTEW-UHFFFAOYSA-N 2-vinylpyridine Chemical compound C=CC1=CC=CC=N1 KGIGUEBEKRSTEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000002841 Lewis acid Substances 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 229910001854 alkali hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 150000008051 alkyl sulfates Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- HRQGCQVOJVTVLU-UHFFFAOYSA-N bis(chloromethyl) ether Chemical compound ClCOCCl HRQGCQVOJVTVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000011437 continuous method Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 125000004386 diacrylate group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- SLGWESQGEUXWJQ-UHFFFAOYSA-N formaldehyde;phenol Chemical compound O=C.OC1=CC=CC=C1 SLGWESQGEUXWJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000007517 lewis acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- OINMATXWPCYGSR-UHFFFAOYSA-N n-methylidenebuta-2,3-dienamide Chemical compound C=NC(=O)C=C=C OINMATXWPCYGSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000006068 polycondensation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052814 silicon oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003440 styrenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- -1 β-lactolglobulin Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
- A23J1/205—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey from whey, e.g. lactalbumine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
- A23C9/146—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by ion-exchange
- A23C9/1465—Chromatographic separation of protein or lactose fraction; Adsorption of protein or lactose fraction followed by elution
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Description
DK 171906 B1
Denne opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af proteiner til anvendelse i den farmaceutiske industri og/eller veterinærindustrien ved udvinding fra mælk.
5 Behandlingen af skummetmælk består i almindelighed i først at extrahere caseinet ved syre- eller enzymatisk koagulering, derpå at extrahere mælkeserumproteiner ved termisk koagulering, ultrafiltrering eller ionbytning og til sidst at udskille lactosen, som kan hydrolyseres.
10 Men denne behandling frembyder visse ubekvemme egenskaber. Det fraseparerede casein foreligger i form af et præcipitat, der er delvis nedbrudt, og som kan indeholde andre, medrevne proteiner; de andre proteiner, som er ex-traheret ved termisk koagulering, mister en del af deres 15 biologiske egenskaber, og det samme er tilfældet ved ul-tracentrifugering, idet længden af bearbejdningstiden i almindelighed nødvendiggør en pasteurisering af mælkese-rumet; med hensyn til udskillelse ved ionbytning er det vanskeligt at udføre denne proces industrielt, eftersom 20 de kendte ionbyttere baseret på cellulose eller dextran har dårlige mekaniske egenskaber.
Ionbyttere til fraseparering af proteiner fra serum, som ikke frembyder disse ulemper, er beskrevet i de franske patentansøgninger nr. 7 526 530 af 28. august 1975 og nr.
25 7 622 985 af 28. juli 1076. Caseinet er dog også her i form af præcipitat, delvis nedbrudt og det kan indeholde medrevne proteiner.
Den foreliggende opfindelse angiver en hidtil ukendt fremgangsmåde til fraktionering af mælk, hvorved disse 30 ulemper undgås og det gøres muligt industrielt at fremstille rene proteiner i uomdannet tilstand og i besiddelse af alle deres biologiske egenskaber.
DK 171906 B1 2
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen af den i krav l's indledning beskrevne art er særegen ved det i krav l's kendetegnende del anførte.
Ved proteiner, der ikke er casein, eller proteiner fra 5 mælkeserum forstår man lactalbuminer, serumalbumin, lac-toglobuliner og immunoglobuliner.
Anionbytterharpikserne er dannet på bærestoffer: aluminiumoxider eller siliciumoxider, som er beklædt med en mængde mindre end 20 mg/m i form af en tværbunden poly-10 merfilm indeholdende eller medførende reaktionsdygtige grupper af typen tertiære aminer eller kvaternære ammoniumsalte med de almene formler:
Θ, , Q
-CH2-N-CH2- eller -CH2-N - (R)^ X
R
15 hvori R, som kan være ens eller forskellig, betyder en alkylgruppe eller hydroxyalkylgruppe med 1-4 carbonato-mer, og X betyder en uorganisk eller organisk anion som f.eks. chlorid, sulfat, nitrat, phosphat, citrat. De er i 20 besiddelse af en ionbytningskapacitet mindre end 2 mækv./g.
Siliciumoxidet og bærestofferne for anionbytterharpikserne har en kornstørrelse på mellem 4 p og 5 mm, en speci-fik overflade i størrelsesordenen fra 5 til 150 m /g, et 25 porevolumen på fra 0,4 til 2 ml/g og en porediameter, der er mindre end størrelsen af caseinet og større end størrelsen af de øvrige proteiner, og som er på mellem 25 og 250 nm.
De tværbundne polymere, som beklæder bærestoffets over-30 flade, består af i sig selv velkendte produkter, som er DK 171906 B1 3 dannet ud fra monomere såsom epoxyforbindelser, der tværbindes med polyaminer som katalysatorer; formaldehyd, som tværbindes ved polykondensation med urinstof, melamin, polyaminer eller phenoler; vinylmonomererne: vinylpyri- 5 din, styren og afledte forbindelser som tværbindes med polyvalente monomere såsom diacrylater eller dimethacry-later af mono- eller polyalkylenglycoler, divinylbenzen, vinyltrialkoxysilan, vinyltrihalogensilan, bis-methylen-acrylamid i nærvær af en starterforbindelse eller ultra-10 violette stråler.
Beklædningen af det uorganiske bærestof med tværbundet polymer opnås ved imprægnering af bærestoffet med en opløsning af den eller de monomere og eventuelt af starterforbindelsen i et opløsningsmiddel, som derpå afdampes, 15 hvorpå de monomere tværbindes ved kendte fremgangsmåder.
Som opløsningsmiddel anvender man ethvert påløsningsmid-delprodukt brugbart for de monomere og starterforbindelsen, hvis kogepunkt fortrinsvis er så lavt som muligt for at gavne dets endelige fordampning. Det drejer sig f.eks.
20 om methylenchlorid, ethylether, benzen, acetone, ethyl-acetat.
I det tilfælde, hvor den på overfladen af bærestoffet tværbundne polymere ikke i sin kæde besidder reaktionsdygtige grupper, er det nødvendigt at modificere den.
25 Dette er særligt tilfældet med tværbundne polymere baseret på styren og styrenderivater, med formaldehydpolymere med urinstof, melamin, polyaminer, phenoler.
Denne modifikation består, når det drejer sig om styren eller phenolformaldehydpolymere, i at fæstne til den po-30 lymere chlormethylgruppe, som man derpå omsætter med en sekundær eller tertiær amin, idet omsætningen sker efter en hvilken som helst kendt fremgangsmåde.
DK 171906 B1 4
Til at fæstne chlormethylgrupperne på den polymere er det fordelagtigt, når det drejer sig om styrenpolymere, at dispergere det med polymer beklædte uorganiske bærestof i chlormethyletheren i varmen i nærvær af en Lewis-syre.
5 Når det omvendt drejer sig om en phenolformaldehydhar-piks, kan man f.eks. dispergere det med polymer beklædte uorganiske bærestof i epichlorhydrin og lade det reagere i varm tilstand.
Denne modifikation består, når det drejer sig om polymere 10 af formaldehyd med polyaminer, urinstof, melamin, i at omdanne de i kæden tilstedeværende primære aminer til tertiære aminer eller salte af kvaternære ammoniumforbindelser ved enhver klassisk teknik f.eks. ved omsætning med et alkylsulfat eller et alkylhalogenat.
15 Kontakten imellem skummetmælken og den eller de anvendte anionbytterharpikser og siliciumoxidet sker uden modifikation af mælkens pH ved temperaturer på mellem 0 og 50 °C fortrinsvis mellem 0 og 15 °C.
Mængden eller mængderne af anionbytterharpikser er i 20 størrelsesordenen fra 5 til 15 g pr. g samlet protein, der skal extraheres, og mængden af siliciumoxid er i størrelsesordenen fra 2 til 7 g pr. g samlet protein, der skal extraheres.
De proteiner, der tilbageholdes af den eller de anvendte 25 anionbytterharpikser, består af β-lactoglobulinerne, a-lactalbuminer, serumalbumin og en lille del immunoglobu-liner. Siliciumoxidet fastholder størstedelen af immu-noglobulinerne.
Adskillelsen af proteiner fra den eller de anvendte har-30 pikser samt fra siliciumoxidet sker ved eluering med enten en opløsning med forhøjet ionstyrke eller med en opløsning med surt pH for anionbytterharpiksernes vedkom- DK 171906 B1 5 mende, basisk for siliciumoxidet. Opløsningen med surt pH er en opløsning af uorganisk eller organisk syre som f.eks. saltsyre, eddikesyre, salpetersyre, svovlsyre, mælkesyre, og opløsningen med basisk pH er en opløsning 5 af alkalihydroxid såsom ammoniak, natriumhydroxid eller kaliumhydroxid.
For at opnå en mere selektiv adskillelse er det muligt at behandle mælken efter hinanden med flere anionbytterhar-pikser, som ligner hinanden, eller som er forskellige, 10 før eller efter behandling med siliciumoxid. I tilfælde af to anionbytterharpikser vil eluatopløsningen fra den første harpiks være meget rig på β-lactoglobuliner, medens eluatopløsningen fra den anden harpiks indeholder oc-lactalbuminerne og serumalbumin og meget små mængder af 15 β-lactoglobuliner og af immunoglobuliner.
Extraktionen af proteiner fra skummetmælk kan udføres med identiske resultater ved diskontinuert, semikontinuert fremgangsmåde i kolonner, eller kontinuert under anvendelse af en serie af kolonner. Den kontinuerte udførelse 20 er særlig egnet til industriel udførelse, idet harpikserne tillader en let påfyldning af kolonnerne, en stor gennemstrømningshastighed og en let eluering.
De dannede proteinopløsninger indeholder ikke mere end spor af lactose og af mineralsalte. De kan anvendes som 25 de er, eller proteinerne kan separeres ved enhver kendt teknik og især ved forstøvningstørring.
Efter extraktion af den eller de anvendte anionbytterharpikser og af siliciumoxidet indeholder den tilbageværende opløsning, som består af casein, af lactose og af mine-30 ralsalte, ikke flere proteiner. Caseinet extraheres ved udelukkelseschromatografi eller særligt ved ultrafiltrering efter enhver kendt fremgangsmåde tillempet dette DK 171906 B1 6 specielle tilfælde. Extraktionen kan udføres diskontinuert eller kontinuert.
Man opnår således en opløsning af nativt casein i vand, hvis koncentration er afhængig af den anvendte ekstrak-5 tionsfremgangsmåde, samt en opløsning af lactose og mineralsalte .
Opløsningen af nativt, ikke-koaguleret casein indeholder kun spor af lactose og kan anvendes, som den er, eller caseinet kan separeres fra opløsningen, især ved forstøv-10 ningstørring.
Ifølge en variant af fremgangsmåden ifølge opfindelsen fraskilles lactosen og mineralsaltene fra skummetmælken, hvorpå proteinerne, der ikke er casein, extraheres ved, at mælken bringes i kontakt med mindst én anionbytterhar-15 piks og derpå med siliciumoxid, eller med siliciumoxid og derpå med mindst én anionbytterharpiks, fiksering af proteinerne efterfulgt af eluering; hvorved caseinet forbliver i opløsning.
Separationen af lactose og af mineralsalte fra skummet-20 mælken opnås ved extraktion, ved udelukkelseschromatogra-fi eller ved ultrafiltrering.
Extraktionen af proteinerne med anionbytterharpiksen eller -harpikserne og siliciumoxidet gennemføres som beskrevet nedenfor. Efter extraktion af proteinerne, der 25 ikke er casein, opnår man en opløsning af uomdannet casein, der ikke er koaguleret.
Ifølge en anden variant kan fremgangsmåden ifølge opfindelsen anvendes på mælkeserum, dvs. på skummetmælk, hvorfra caseinet er blevet fjernet. I dette tilfælde bringes 30 mælkeserumet i kontakt med mindst én anionbytterharpiks og derpå med siliciumoxid, eller med siliciumoxid og der- DK 171906 B1 7 på mindst én anionbytterharpiks, fiksering af proteinerne og eluering.
Adskillelsen af mælkeserumproteinerne ved anvendelse af anionbytterharpikser og af kationbytterharpikser er be-5 skrevet i fransk tilægspatentansøgning nr. 7 622 985 af 28. juli 1976. Anvendelsen af siliciumoxid i stedet for en kationbytterharpiks muliggør dog en meget lettere eluering og fører til mere koncentrerede proteinopløsninger.
Som følge heraf er den mængde vand, der skal fjernes ved 10 tørring af proteinerne, mindre, hvoraf følger en kortere behandling, som er mindre skadelig for proteinerne.
Derudover er siliciumoxid et mere enkelt produkt end kationbytterharpikserne.
Extraktionen af mælkeserumproteinerne med en eller flere 15 anionbytterharpikser og med siliciumoxid udføres som beskrevet for mælk, men kontakten mellem mælkeserum og en eller flere anionbytterharpikser og med siliciumoxid foretages ved et pH større end 4 og fortrinsvis mellem 5,5 og 7,5, og ved temperaturer på mellem 0 og 50 °C og 20 fortrinsvis mellem 0 og 30 °C.
Efter extraktion af proteinerne med en eller flere anionbytterharpikser og med siliciumoxid indeholder den tilbageværende opløsning lactose og mineralsalte, men ikke flere proteiner.
25 Uanset oprindelsen kan lactosen i opløsningen hydrolyseres kemisk eller enzymatisk ved enhver kendt fremgangsmåde til dannelse af en opløsning af glucose og galactose.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen udføres i mejeriindustrien til fremstilling af proteiner, herunder casein, 30 som er særligt egnet til anvendelse i den farmaceutiske industri og i veterinærindustrien.
DK 171906 B1 8 I det efterfølgende anføres til belysning eksempler på udførelsesformer for opfindelsen.
EKSEMPEL 1 I en kolonne 1 med 2,5 cm diameter anbringes 20 g anion-5 bytterharpiks bestående af siliciumoxid med kornstørrelse på 100-200 pm, en specifik overflade på 24 m2/g, en mid-delporediameter på 140 nm og et porevolumen på 1 ml/g, som er beklædt med 3,3 mg/m2 af en styren-vinyltriethoxy-silan-copolymer med følgende reaktionsdygtige grupper: 10 ch3 —/> - CH2 - - CH3 Cl CH3
Denne harpiks frembyder følgende kendetegn: - carbonindhold 4,8% 15 - chlorindhold 2 % - nitrogenindhold 0,9% - ionbytterkapacitet 0,6 mækv./g.
I en kolonne 2 med 2,5 cm diameter anbringes 10 g silici-umoxidkorn med en kornstørrelse på 100-200 pm, en speci-20 fik overflade på 25 m2/g, en porediameter på 140 nm og et porevolumen på 1,1 ml/g.
Efter at de to kolonner er blevet anbragt i serie vaskes harpiksen og siliciumoxidet ved at føre 500 ml vand igennem dem.
25 250 ml skummetmælk, som indeholder 7 g casein, 1,6 g an dre proteiner og 12 g lactose, perkoleres først igennem kolonne 1, derpå igennem kolonne 2 med en hastighed på 100 ml/time.
DK 171906 B1 9
Harpiksen og siliciumoxidet i de to kolonner vaskes ved at sende 200 ml vand igennem dem.
Ved at sende en opløsning af 0,01 N saltsyre igennem kolonne 1 elueres de bundne proteiner. Der opnås 33 ml op-5 løsning indeholdende 1,3 g proteiner. Disse proteiner er a-lactalbuminer, β-lactoglobuliner, serumalbumin og en ringe andel af immunoglobuliner.
Ved at sende en opløsning af 1 N ammoniumcarbonat igennem kolonne 2 elueres de bundne proteiner: der opnås 12 ml 10 opløsning indeholdende 0,3 g immunoglobuliner.
De to proteinopløsninger indeholder mindre end 1 vægt-% fedtbestanddele og lactose. Den elektroforetiske bevægelighed af proteinerne er identisk med den, som de havde i mælken. De er derfor ikke blevet denatureret.
15 De fra kolonne 2 kommende opløsninger (mælk + vaskevand), som ikke indeholder andre proteiner end casein, ultrafil-treres. Den tilbageholdte fase indeholder ca. 7 g uomdan-net casein ved en koncentration på 20 vægt-%.
Ultrafiltratet indeholder næsten den samlede mængde lac-20 tose ved en koncentration tæt ved 42 g/1 samt mineralsaltene.
EKSEMPEL 2
Eksempel 1 gentages, idet dog behandlingen af skummetmælken med anionbytterharpiks og siliciumoxid udføres ved 50 25 “C.
De opnåede resultater er identiske med de i eksempel 1 opnåede.
DK 171906 B1 EKSEMPEL 3 10
Man gentager eksempel 1, idet man anbringer før kolonne 1 en kolonne A med 1 can diameter indeholdende 3 g af den samme anionbytterharpiks, som findes i kolonne 1. Ved 5 eluering af kolonne A med en 0,01 N opløsning af saltsyre opnår man 15 ml af en opløsning indeholdende 0,3 g proteiner, som næsten udelukkende består af β-lactoglobuliner.
Eluering af kolonne 1 med en opløsning af 0,01 N saltsyre fører til 33 ml af en opløsning indeholdende 1 g protei-10 ner, som for størstedelen består af a-lactalbuminer og af serumalbumin samt en meget lille del af β-lactoglobuliner og immunoglobuliner.
Eluering af kolonne 2 fører til samme resultater, som er anført for eksempel 1.
15 EKSEMPEL 4 I en kolonne 1 med 2,5 cm diameter anbringes 10 g silici-umoxidkorn med en kornstørrelse på 100-200 pm, en specifik overflade på 25 m2/g, en porestørrelse på 140 nm og et porevolumen på 1,1 ml/g.
20 I en kolonne 2 med 2,5 cm diameter anbringes 15 g af en anionbytterharpiks, som består af siliciumoxid med en kornstørrelse på fra 100 til 200 pm, en specifik overflade på 24 m2/g, en middelporediameter på 140 nm og et porevolumen på 140 nm og et porevolumen på 1 ml/g, som er 25 beklædt med 6 mg/m2 af en styren-vinyl triethoxysilan-copolymer, som har følgende reaktionsdygtige grupper: ^/C2H5 -yj-c'· - \ c2h5 DK 171906 B1 11 og som har følgende karakteristika: - carbonindhold 7,5% - nirogenindhold 1,5% - ionbytterkapacitet 1,07 mækv./g.
5 Efter at de to kolonner er blevet anbragt i serie vaskes siliciumoxidet og harpiksen ved at man fører 500 ml vand igennem dem. 250 ml skummetmælk, som indeholder 7 g casein, 1,6 g andre proteiner og 12 g lactose, perkoleres med en hastighed på 100 ml/time først igennem kolonne 1, der-10 efter igennem kolonne 2.
Siliciumoxidet og harpiksen i de to kolonner vaskes derpå ved at man hælder 200 ml vand igennem dem.
Ved at hælde en opløsning af 0,01 N ammoniak igennem kolonne 1 elueres de bundne proteiner. Man opnår 12 ml op-15 løsning indeholdende 0,4 g immunoglobuliner, dvs. størstedelen.
Ved at føre en opløsning af 0,01 N saltsyreopløsning igennem kolonne 2 elueres de bundne proteiner: a-lactal-buminer, β-lactoglobuliner, serumalbumin og spor af immu-20 noglobuliner. Der opnås 23 ml opløsning indeholdende 1,2 af disse proteiner.
De to proteinopløsninger indeholder mindre end 1 vægt-% lactose. Den elektroforetiske bevægelse af proteinerne er identisk med den, som de havde i mælk. De er således ikke 25 blevet denatureret.
Den fra kolonne 2 kommende opløsning ca. 260 ml, som ikke indeholder andre proteiner end casein, perkoleres gennem kolonne 3 til adskillelse af caseinet ved udelukkel-seschromatografi. Denne kolonne med 3 cm diameter inde-30 holder 450 g siliciumoxid med en kornstørrelse på fra 100 til 200 pm, en specifik overflade på 400 m2/g, en middel- DK 171906 B1 12 porediameter på 8 nm og et porevolumen på 1 ml/g, og den elueres med vand.
Der opnås 330 ml af en opløsning indeholdende omtrent den samlede mængde uomdannnet casein, og en opløsning inde-5 holdende lactosen og mineralsaltene.
EKSEMPEL 5 I en kolonne 1 med 2,5 diameter anbringes 15 g af den samme anionbytterharpiks, som blev anbragt i kolonne 2 i eksempel 4.
10 I kolonne 2 med 2,5 cm diameter anbringes 10 g silicium-oxidkorn med en kornstørrelse på 100-200 pm, en specifik overflade på 50 m2/g, en porediameter på 80 nm og et porevolumen på 1,1 ml/g.
Efter at de to kolonner er anbragt i serie, vaskes har-15 piksen og siliciumoxidet ved at føre 500 ml vand igennem dem.
300 ml mælkeserum med pH 6,5, som indeholder 1,5 g proteiner og 11 g lactose, perkoleres ved stuetemperatur først igennem kolonne 1 og derpå igennem kolonne 2 med en has-20 tighed på 400 ml/time.
Harpiksen og siliciumoxidet i de to kolonner vaskes ved at føre 200 ml vand igennem dem.
Ved at føre en 0,01 N opløsning af saltsyre igennem kolonne 1 elueres de bundne proteiner. Der opnås 33 ml op-25 løsning indeholdende 1,25 g proteiner. Disse proteiner er a-lactalbuminer, β-lactoglobuliner, serumalbumin og en lille andel immunoglobuliner.
Ved at føre en 0,01 N opløsning af ammoniak igennem kolonne 2 elueres de bundne proteiner. Der opnås 10 ml op DK 171906 B1 13 løsning indeholdende 0,25 g proteiner, som næsten udelukkende består af immunoglobuliner.
De to proteinopløsninger indeholder mindre end 1 vægt-% fedtstof og lactose. Proteinernes elektroforetiske bevæ-5 gelse er identisk med den, som de havde i mælkeserumet.
De er således ikke blevet denatureret.
EKSEMPEL 6
Eksempel 5 gentages, idet dog behandlingen af serum med anionbytterharpiks og siliciumoxid foretages ved 50 °C.
10 De opnåede resultater er identiske med de i eksempel 5 opnåede.
EKSEMPEL.-7
Man gentager eksempel 5, idet man dog før kolonne 1 anbringer en kolonne A med 1 cm diameter, som indeholder 3 15 g af den samme anionbytterharpiks, som er placeret i kolonne 1. Ved eluering af kolonne A med en 0,01 N opløsning af saltsyre opnår man 15 ml af en opløsning indeholdende 0,3 g proteiner, som næsten udelukkende består af β-lactoglobuliner.
20 Eluering af kolonne 1 med en 0,01 N opløsning af saltsyre fører til 33 ml af en opløsning indeholdende 0,95 g proteiner, som for størstedelen består af a-lactalbuminer og af serumalbumin samt en meget lille andel af β-lactoglobuliner og immunoglobuliner.
25 Eluering af kolonne 2 fører til de samme resultater, som opnået i eksempel 5.
EKSEMPEL 8 DK 171906 B1 14 I en kolonne 1 med 2,5 cm diameter anbringes 10 g silici-umoxidkorn, der har en kornstørrelse på 100-200 μιη, en specifik overflade på 25 m2/g, en porediameter på 140 run 5 og et porevolumen på 1,1 ml/g.
I en kolonne 2 med 2,5 cm diameter anbringes 20 g af den samme anionbytterharpiks, som er anvendt i kolonne 1 i eksempel 1.
Efter at de to kolonner er anbragt i serie vaskes silici-10 umoxidet og harpiksen ved at føre 500 ml vand igennem dem.
300 ml mælkeserum med pH 6,5, som indeholder 1,5 g proteiner og 11 g lactose, perkoleres ved stuetemperatur med en hastighed på 600 ml/time først igennem kolonne 1 og 15 derpå igennem kolonne 2.
Siliciumoxidet og harpiksen i de to kolonner vaskes derpå ved at man fører 200 ml vand igennem.
Ved at føre en 0,01 N opløsning af ammoniak igennem kolonne 1 elueres de bundne proteiner. Der opnås 12 ml op-20 løsning, som indeholder 0,4 g immunoglobuliner, dvs. størstedelen.
Ved at føre en n/10 opløsning af svovlsyre igennem kolonne 2 elueres de bundne proteiner: α-lactalbuminer, β- lactolglobuliner, serumalbumin og spor af immunoglobulin; 25 der opnås 20 ml opløsning indeholdende 1,1 g af disse proteiner.
De to proteinopløsninger indeholder mindre end 1 vægt-% lactose. Proteinernes elektroforetiske bevægelse er identisk med den, som de havde i mælkeserumet. De er således 30 ikke blevet denatureret.
EKSEMPEL 9 DK 171906 B1 15 I en kolonne 1 med 2,5 cm diameter anbringes 20 g af den samme anionbytterharpiks, som er anbragt i kolonne 1 i eksempel 1.
5 I en kolonne 2 med 2,5 cm diameter anbringes 10 g silici-umoxidkorn, der har en kornstørrelse på 100-200 pm, en specifik overflade på 25 m2/g, en porediamter på 140 nm og et porevolumen på 1,1 ml/g.
Efter at de to kolonner er anbragt i serie vaskes harpik-10 sen og siliciumoxidet ved at man fører 500 ml vand igennem dem.
500 ml mælkeserum justeret til pH 7,5 ved tilsætning af 0,1 N natriumhydroxid, og som er filtreret til fjernelse af uopløselige bestanddele, og som indeholder 2,5 g pro-15 teiner og 18 g lactose, perkoleres ved stuetemperatur først igennem kolonne 1 og derpå igennem kolonne 2 med en hastighed på 300 ml/time.
Harpiksen og siliciumoxidet i de to kolonner vaskes ved at man fører 100 ml vand igennem dem.
20 Ved at føre en 0,01 N opløsning af saltsyre igennem kolonne 1 elueres de bundne proteiner. Der opnås 35 ml opløsning indeholdende 2,05 g proteiner. Disse proteiner er a-lactalbuminer, β-lactoglobuliner, serumalbumin, og en lille andel inununoglobuliner.
25 Ved at føre en molær opløsning af ammoniumcarbonat igennem kolonne 2 elueres de bundne proteiner: der opnås 12 ml opløsning indeholdende 0,45 g proteiner, som næsten udelukkende består af inununoglobuliner.
Til sammenligning gentager man dette eksempel, idet man i 30 stedet for de 10 g siliciumoxid i kolonne 2 anvender 10 DK 171906 B1 16 gaf kationbytterharpiks, som består af et siliciumoxid, der har en kornstørrelse på 100-200 pm, en specifik overflade på 25 m2/g, en middelporediameter på 140 run og et porevolumen på 1,1 ml/g, og er beklædt med 7,2 mg/m2 af 5 en acrylsyre-diethylenglycoldimethacrylat-copolymer, som bærer funktionelle COOH-grupper.
Denne harpiks udviser følgende karakteristika: - carbonindhold 10,55% - ionbytterkapacitet 1,05 mækv./g.
10 Ved eluering af den første kolonne opnår man samme resultater som i eksempel 5.
Ved eluering af den anden kolonne opnår man 17 ml af en opløsning, som indeholder 0,45 g proteiner, der næsten udelukkende består af immunoglobuliner.
15 Man konstaterer, at anvendelsen af siliciumoxid, der er et meget mere enkelt materiale end kationbytterharpiks, muliggør dannelse af en mere koncentreret opløsning af immunoglobulinerne: - med ionbytterharpiks: 2,65 g/100 ml 20 - med siliciumoxid: 3,75 g/100 ml, dvs. 41,5% mere protein
Claims (6)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af proteiner til anvendelse i den farmaceutiske industri og/eller veterinærindustrien ved udvinding fra mælk, kendetegnet 5 ved, at man først extraherer de proteiner, der ikke er casein, idet man i vilkårlig rækkefølge bringer skummetmælk i berøring med mindst én anionbytterharpiks og med siliciumoxid med en kornstørrelse på 4 pm - 5 mm, en specifik overflade på 5-15 m1/g, et porevolumen på 0,4-2 10 ml/g og en porediameter på 25-250 run, fixerer proteinerne og eluerer disse og derpå fraseparerer det i den flydende fase tilbageblevne casein fra de uorganiske salte og lac-tosen, hvorved anionbytterharpiksen udviser en ionbytningskapacitet på mindre end 2 mækv./g og består af alu-15 miniumoxid eller siliciumoxid med en kornstørrelse på 4 pm-5 mm, en specifik overflade på 5-150 m1/g, et porevolumen på 0,4-2 ml/g og en porediameter på 25-250 run, og er beklædt med mindre end 20 mg/m1 af en film af et tværbundet polymerisat, som er bærer af funktionelle tertiære 20 aminogrupper eller kvaternære ammoniumsaltgrupper med de almene formler: -CH2-N-CH2- eller -OL.-N -(R), X^> R ^ hvori R, som kan være ens eller forskellige, betegner en 25 Ci-C« alkylgruppe eller hydroxyalkylgruppe, og X er en organisk eller uorganisk anion. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man bringer skummetmælken i kontakt med anionbytterharpiksen og siliciumoxidet ved en temperatur på 0- 30 50 “C. DK 171906 Bl
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at man pr. g protein, der skal ex tr aher es, anvender 5-15 g anionbytterharpiks og 2-7 g siliciumoxid.
4. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 5 1-3, kendetegnet ved, at man eluerer de af ionbytterharpikserne og siliciumoxidet fastholdte proteiner enten med en opløsning med høj ionstyrke eller med en opløsning med sur pH-værdi, når det drejer sig om anionbytterharpiks, eller med en opløsning med basisk pH-10 værdi, når det drejer sig om siliciumoxid.
5. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-4, kendetegnet ved, at man efter extraktio-nen af proteiner, som ikke er casein, extraherer uomdan-net casein ved hjælp af udelukkelseschromatografi eller 15 ultrafiltrering.
6. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-4, kendetegnet ved, at man gennemfører ex-traktionen af proteiner, der ikke er casein, fra skummetmælk, der ved ultrafiltrering eller udelukkelseschromato- 20 grafi er befriet for lactose såvel som uorganiske salte.
7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-4, kendetegnet ved, at man gennemfører ex-traktionen af proteiner, der ikke er casein, fra mælkeserum med en pH-værdi større end 4.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR7715230A FR2390906A1 (fr) | 1977-05-18 | 1977-05-18 | Procede d'extraction des proteines du lait |
FR7715230 | 1977-05-18 | ||
FR7724162A FR2399214A2 (fr) | 1977-08-05 | 1977-08-05 | Procede d'extraction des proteines du lait |
FR7724162 | 1977-08-05 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK216578A DK216578A (da) | 1978-11-19 |
DK171906B1 true DK171906B1 (da) | 1997-08-11 |
Family
ID=26220026
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK216578A DK171906B1 (da) | 1977-05-18 | 1978-05-17 | Fremgangsmåde til fremstilling af proteiner til anvendelse i den farmaceutiske industri og/eller veterinærindustrien ved udvinding fra mælk |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS54113470A (da) |
AU (1) | AU514604B2 (da) |
CA (1) | CA1107127A (da) |
CH (1) | CH631327A5 (da) |
DK (1) | DK171906B1 (da) |
GB (1) | GB1563990A (da) |
IE (1) | IE46971B1 (da) |
IT (1) | IT1156754B (da) |
NL (1) | NL186059C (da) |
NZ (1) | NZ187301A (da) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2188526B (en) * | 1986-02-19 | 1990-10-10 | Agricultural & Food Res | A proteinaceous material obtainable from milk or casein-containing milk products ,process for its production and its use in food and drink |
GB8705562D0 (en) * | 1987-03-10 | 1987-04-15 | Cardiff Energy & Resources | Whey processing |
DK0876106T3 (da) | 1996-01-26 | 2004-08-16 | Univ Massey | Fremgangsmåde til adskillelse og genvinding af proteiner fra en proteinoplösning |
SE9904197D0 (sv) | 1999-11-22 | 1999-11-22 | Amersham Pharm Biotech Ab | A method for anion exchange adsorption on matrices carrying mixed mode ligands |
WO2001041584A1 (en) | 1999-12-08 | 2001-06-14 | Massey University | Process for separation of whey proteins using a novel anion exchanger |
CN112028984B (zh) * | 2020-09-09 | 2022-02-18 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 应用曲拉制备干酪素的方法 |
-
1978
- 1978-05-16 CA CA303,480A patent/CA1107127A/en not_active Expired
- 1978-05-16 NZ NZ187301A patent/NZ187301A/xx unknown
- 1978-05-17 DK DK216578A patent/DK171906B1/da not_active IP Right Cessation
- 1978-05-17 CH CH535578A patent/CH631327A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1978-05-17 NL NLAANVRAGE7805357,A patent/NL186059C/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-05-17 JP JP5869178A patent/JPS54113470A/ja active Granted
- 1978-05-17 IT IT49416/78A patent/IT1156754B/it active
- 1978-05-17 IE IE993/78A patent/IE46971B1/en not_active IP Right Cessation
- 1978-05-17 GB GB20197/78A patent/GB1563990A/en not_active Expired
- 1978-05-18 AU AU36234/78A patent/AU514604B2/en not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IT7849416A0 (it) | 1978-05-17 |
DK216578A (da) | 1978-11-19 |
IT1156754B (it) | 1987-02-04 |
JPS54113470A (en) | 1979-09-05 |
NL186059C (nl) | 1990-09-17 |
NZ187301A (en) | 1981-03-16 |
CH631327A5 (en) | 1982-08-13 |
CA1107127A (en) | 1981-08-18 |
GB1563990A (en) | 1980-04-02 |
AU514604B2 (en) | 1981-02-19 |
IE46971B1 (en) | 1983-11-16 |
IE780993L (en) | 1978-11-18 |
AU3623478A (en) | 1979-11-22 |
JPS565499B2 (da) | 1981-02-05 |
NL186059B (nl) | 1990-04-17 |
NL7805357A (nl) | 1978-11-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4229342A (en) | Process for extracting proteins from milk using silica and anion exchange resins | |
DK164741B (da) | Fremgangsmaade til chromatografisk fraktionering af plasmaproteiner, samt albumin med hoej renhed opnaaet ved fremgangsmaaden | |
US2228514A (en) | Anion exchanging resin | |
IE43536B1 (en) | Ion-exchange separation process for proteins | |
DK148617B (da) | Materiale med kationisk karakter, der paa reversibel eller irreversibel maade kan binde biologiske makromolekylaere stoffer og lavmolekylaere stoffer, og fremgangsmaade til dets fremstilling | |
KR101123481B1 (ko) | 코팅된 이온 교환 기재 및 이를 형성하는 방법 | |
DK171906B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af proteiner til anvendelse i den farmaceutiske industri og/eller veterinærindustrien ved udvinding fra mælk | |
JPH01156937A (ja) | ビスフェノールaの収率および純度を最大にする方法 | |
US4331483A (en) | Ion exchange purification of sugar beet juice | |
US5194591A (en) | Isolation of an immunoglobulin rich fracton from whey | |
SU1600619A3 (ru) | Способ получени ионита дл производства бисфенола "А | |
US9821249B2 (en) | Continuous process for separation of proteins | |
IE57388B1 (en) | Process for selectively separating the alpha-lactalbumin from the proteins of whey | |
AU2001283945B2 (en) | Adsorption method and ligands | |
US4150205A (en) | Composite ion exchange resins having low residual amounts of quaternary ammonium cation | |
CN1103396A (zh) | 双酚-a合成法用离子交换剂催化剂的处理方法 | |
US4154801A (en) | Process for purifying alkali metal hydroxide or carbonate solutions | |
KR960000249A (ko) | 알부민 제제의 제조방법 | |
JP4636818B2 (ja) | 多硫酸化コンドロイチン硫酸の製造方法 | |
AU777698B2 (en) | Process for separation of whey proteins using a novel anion exchanger | |
US3159632A (en) | Repetitive process for the removal and/or recovery of amines from aqueous solutions | |
EP0188053A2 (en) | Purification of superoxide dismutase | |
KR20230098181A (ko) | 발효액으로부터 산성 모유 올리고당의 정제 방법 | |
Rowe | Cellulose ion-exchange adsorbents | |
CN109746056B (zh) | 用于分析多价离子的离子交换固定相 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
B1 | Patent granted (law 1993) | ||
PUP | Patent expired |