JP3815496B2 - 酢酸アニリド誘導体を有効成分とする過活動膀胱治療剤 - Google Patents

Description

本発明は、（Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の治療剤に関する。

哺乳類の膀胱は自律神経の二重支配を受け、排尿筋は排尿時には交感神経刺激によってアドレナリンβ受容体を介して弛緩し、尿排出時には副交感神経刺激によってムスカリン受容体を介して収縮する。この二重支配のバランスが崩れることによって生ずる過活動膀胱の治療剤として、現在、塩酸プロピベリン及び塩酸オキシブチニン等の抗コリン剤が主に用いられている。しかしながら、これらの化合物に対して抵抗性を示す難治例が存在すること、排出障害、口渇等の抗コリン剤作用に由来する副作用が存在し、必ずしも満足な臨床効果をあげていないのが現状である。
更に、近年の老齢人口の増加に伴い、過活動膀胱を患う患者数は毎年増加しており、患者のＱＯＬ（クオリィティ・オブ・ライフ）の観点からも、新たな薬剤の開発が切望されている。
本発明者等は、国際公開第９９／２０６０７号パンフレットの実施例４１において、下記化学構造式で示される、（Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド２塩酸塩が、インスリン分泌促進作用とインスリン感受性増強作用を併せ持ち、さらに選択的β_３受容体刺激作用に基づく抗肥満作用及び抗高脂血症作用を有し、糖尿病の治療に有用な化合物であることを報告しているが、過活動膀胱の治療用途については示唆も開示もしていない（特許文献１参照）。

一方、国際公開第９８／０７４４５号パンフレットには、β_３−アドレナリン受容体刺激作用薬を有効成分として含有する頻尿および尿失禁の予防・治療剤として、下記化学構造式で示される、ＣＧＰ−１２，１７７Ａが膀胱弛緩効果を有することが記載されている（特許文献２参照）。ＣＧＰ−１２，１７７Ａは、選択的β_３−アドレナリン受容体刺激作用薬として知られている（非特許文献１及び２参照）。

また、国際公開第９９／３１０４５号パンフレットには、β_３−アドレナリン受容体刺激作用を有し、肥満症、高血糖症、腸管運動亢進に起因する疾患、頻尿または尿失禁、うつ病、胆石または胆道運動亢進に起因する疾患等の予防または治療剤として、下記一般式で示される化合物が記載されている（特許文献３参照）。

（式中、Ｒ^１は水酸基、低級アルキル基、アルアルコキシ基、アミノ基等、Ｒ^２は水酸基または低級アルキル基、Ｒ^３は水素原子またはハロゲン原子、Ｒ^４およびＲ^５は水素原子、ハロゲン原子または低級アルキル基、Ａは低級アルキレン基を表す。）
また、国際公開第９９／５２８５６号パンフレットには、β_３−アドレナリン受容体刺激作用を有し、肥満症、高血糖症、腸管運動亢進に起因する疾患、頻尿、尿失禁、うつ病、胆石または胆道運動亢進に起因する疾患の予防または治療剤として、下記一般式で示される化合物が記載されている（特許文献４参照）。

（式中、Ｒ^１は水素原子、低級アルキル基またはアラルキル基、Ｒ^２は水素原子、低級アルキル基またはハロゲン原子、Ａは酸素原子またはイミノ基を表す。）
更に、国際公開第００／０２８４６号パンフレットには、β_３−アドレナリン受容体刺激作用を有し、肥満症、高血糖症、腸管運動亢進に起因する疾患、頻尿、尿失禁、うつ病、胆石または胆道運動亢進に起因する疾患の予防または治療剤として、下記一般式で示される化合物が記載されている（特許文献５参照）。

（式中、Ｒ^１は水酸基等、Ｒ^２及びＲ^３はどちらか一方が水素原子、ハロゲン原子等であり、他方が水素原子であり、Ｒ^４はハロゲン原子等を表す。）
特許文献１：国際公開第９９／２０６０７号パンフレット
特許文献２：国際公開第９８／０７４４５号パンフレット
特許文献３：国際公開第９９／３１０４５号パンフレット
特許文献４：国際公開第９９／５２８５６号パンフレット
特許文献５：国際公開第００／０２８４６号パンフレット
非特許文献１：ドラッグス・オブ・ザ・フューチャー（Ｄｒｕｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｕｔｕｒｅ）、１９９３年、第１８巻、第６号、ｐ．５４２
非特許文献２：ジ・アメリカン・ソサィティ・フォー・ファーマコロジー・アンド・エクスペリメンタル・セラピューティックス（Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、１９９３年、４４巻、ｐ．１１００

本発明者等は、糖尿病治療剤として有用な、（Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド又はその塩（以下「本発明の有効成分」という）の新たな薬理効果を見出すべく鋭意研究を行った結果、本発明の有効成分が、殊に過活動膀胱の治療剤として有用であることを見出した。本発明において過活動膀胱とは、尿意切迫感を頻繁に生じさせる疾患名として定義される。過活動膀胱の一原因として、前立腺肥大症が挙げられるが、原因がはっきりしない場合が多く、それらは本態性の過活動膀胱と呼ばれる。また、過活動膀胱には、頻尿や尿失禁を伴う場合があるが、必ずしも頻尿や尿失禁を伴う疾患に限定されない。つまり、軽度の過活動膀胱にあっては、患者は排尿したいとの感覚に過敏になっており、排尿したいとの感覚を頻繁に持つのであるが、実際には排尿を一定期間我慢することができる。しかし、患者のＱＯＬ（クオリィティ・オブ・ライフ）の観点から、軽度の過活動膀胱であっても、その改善が強く求められている。一方、重度の過活動膀胱にあっては、頻尿や尿失禁を伴うこともある。頻尿とは、正常な排尿回数を超えている状態であり、おおよそ夜間２回以上、２４時間で８回以上とされる。尿失禁は、尿の不随意の漏れがあり、社会的に、または衛生上で問題がある状態として定義され、咳・くしゃみ等腹圧がかかったときに起こる腹圧性尿失禁、突然に尿意がありトイレにたどり着くまでに尿が漏れる切迫性尿失禁、腹圧性尿失禁と切迫性尿失禁が混在する混合型尿失禁等に分類される。
本発明の特徴は、本発明の有効成分が、特に、患者の尿意切迫感を頻繁に生じさせることを緩和し、排尿回数、排尿状態をより正常な状態にすることに特徴がある。本発明における過活動膀胱には、当然ながら前立腺肥大に伴う過活動膀胱の他、尿意切迫感、尿失禁や頻尿を伴う過活動膀胱を含むものである。
特許文献１には、本発明の有効成分が糖尿病の治療以外に、肥満症、高脂血症の症状を低減することにより症状の改善の図れるその他の疾患、例えば、動脈硬化症、心筋梗塞、狭心症等の虚血性心疾患、脳梗塞等の脳動脈硬化症あるいは動脈瘤等の予防・治療剤としても有用であることが記載されている。しかし、本発明の有効成分が過活動膀胱の治療剤として有用であることは全く記載されておらず、示唆もされていない。
特許文献２にも過活動膀胱の用途は記載されていない。特許文献２には、選択的β_３−アドレナリン受容体刺激作用薬を有する化合物として、唯一、ＣＧＰ−１２，１７７Ａが膀胱弛緩効果を有することが記載されている。しかしながら、本発明の有効成分はＣＧＰ−１２，１７７Ａと比較して、更に強い膀胱弛緩効果を有するものである。また、特許文献２には、過活動膀胱の治療に有用であることを示す「ラット律動的膀胱収縮測定試験」や「シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿機能測定試験」等のｉｎ ｖｉｖｏ試験は記載されていない。
更に、特許文献３〜５にも過活動膀胱の用途は記載されていない。特許文献３〜５記載の化合物と本発明の有効成分とは、文献記載の化合物はフェノール環を必ず有するがチアゾール環を有さない点、アミド結合を有さない点等において、本発明の有効成分とは基本構造を異にするものである。また、特許文献３〜５にも、過活動膀胱の治療に有用であることを示す「ラット律動的膀胱収縮測定試験」や「シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿機能測定試験」等のｉｎ ｖｉｖｏ試験は記載されていない。
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、（Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド又はその塩を有効成分とする。本発明の特徴点は、本発明の有効成分が、新規な用途である過活動膀胱の治療剤として有用であることを見出したことにある。
本発明の有効成分は、塩を有さないフリー体であることが特に好ましい。しかし、酸と塩を形成する場合もあり、かかる塩としては塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸、炭酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、グルタミン酸等の有機酸との酸付加塩を挙げることができる。塩を有する本発明の有効成分は、通常の造塩反応によりフリー体から容易に製造することができる。さらに本発明の有効成分には、水和物や溶媒和物及び結晶多形も含まれる。また本発明の有効成分には、薬理学的に許容されるプロドラッグも含まれる。プロドラッグを形成する基としては、Ｐｒｏｇ．Ｍｅｄ．，５，２１５７−２１６１（１９８５）や「医薬品の開発」（廣川書店、１９９０年）第７巻 分子設計１６３−１９８に記載の基が挙げられる。
本発明の有効成分を含有する医薬は、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等による経口投与、あるいは吸入剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、一つ又はそれ以上の活性物質が、少なくとも一つの不活性な賦形剤、例えば乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等と混合される。組成物は、常法に従って、不活性な添加剤、例えばステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤やカルボキシメチルスターチナトリウム等の崩壊剤、溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要により糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性コーティング剤で被膜してもよい。投与量は症状、投与対象の年齢、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定されるが、通常経口投与の場合成人１日当たり０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ程度であり、これを１回で、あるいは２〜４回に分けて投与する。
本発明の有効成分は、特許文献１に記載の方法によって容易に製造できるが、本発明の有効成分として好ましいフリー体の製造方法は具体的に記載されていないので、その製造方法を製造例として示した。また、製造ルートを下記に図示する。

製造例（本発明の有効成分の製造法）
工程１
４−ニトロフェニルエチルアミン−塩酸塩５．９０ｋｇ、（Ｒ）−マンデル酸４．４３ｋｇ、トリエチルアミン２．９４ｋｇ及びＮ，Ｎ−ジメチルフォルムアミド２２ｌの混合物に対し、ヒドロキシベンズトリアゾール３．９３ｋｇ及び１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）５．５８ｋｇを加え、室温付近にて２時間攪拌した。ＥＤＣ０．２８ｋｇをさらに加え、室温付近にて終夜攪拌した。反応液を１１０ｌの水で希釈し、酢酸エチル（６０ｌ，３０ｌ）で抽出した。有機層を１Ｍ塩酸水６０ｌ、２０％炭酸カリウム水溶液６０ｌ及び水（６０ｌ，６０ｌ）にて順次洗浄し、１０〜１９℃にて減圧濃縮した。残渣をトルエン３５ｌにて加熱溶解（８７℃）後冷却し、２０℃にて終夜攪拌した。生じた結晶を濾取し、トルエン１０ｌにて洗浄した。真空乾燥し、（Ｒ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−［２−（４−ニトロフェニル）エチル］−２−フェニルアセタミド７．６６ｋｇを淡黄色結晶として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）＝２．８７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），３．３０−３．４６（２Ｈ，ｍ），４．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），６．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），７．２０−７．３３（５Ｈ，ｍ），７．４０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），８．０４−８．１２（３Ｈ，ｍ）．ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：３０１（Ｍ＋Ｈ）^＋．
工程２
（Ｒ）−２−ヒドロキシ−Ｎ−［２−（４−ニトロフェニル）エチル］−２−フェニルアセタミド７．５１ｋｇ、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン２３ｌ及びテトラヒドロフラン２３ｌの混合物を−１８℃に冷却し、１Ｍボラン−テトラヒドロフラン溶液４９．４ｋｇを−７℃以下にて滴下した。その後、７０℃に昇温し、５時間攪拌した。反応混合物を−１２℃に冷却し、メタノール２．９ｋｇ及び濃塩酸５．９ｋｇを５℃以下にて加えた。６８℃にて１時間攪拌後、内容量が５０ｌになるように減圧濃縮した。３０％Ｋ_２ＣＯ_３水溶液６０ｋｇ及び水６ｌを加え、酢酸エチル７５ｌにて抽出した。有機層を水７５ｌにて洗浄し、減圧濃縮した。残渣にイソプロパノール７５ｌを加え４０℃にて溶解し、濃塩酸２．４６ｋｇを加え結晶化し、２３℃にて終夜攪拌した。結晶を濾取し、イソプロパノール３８ｌにて洗浄した。真空乾燥し、（Ｒ）−２−［［２−（４−ニトロフェニル）エチル］アミノ］−１−フェニルエタノール−塩酸塩７．２９ｋｇを得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）＝３．００−３．０８（１Ｈ，ｍ），３．１５−３．３０（５Ｈ，ｍ），５．００−５．０５（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．２９−７．３５（１Ｈ，ｍ），７．３６−７．４３（４Ｈ，ｍ），７．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．２１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），９．１２（２Ｈ，ｂｒ）．ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：２８７（Ｍ＋Ｈ）^＋．
工程３
（Ｒ）−２−［［２−（４−ニトロフェニル）エチル］アミノ］−１−フェニルエタノール−塩酸塩１１．０ｋｇ、メタノール１１０ｌ及びウエット１０％パラジウム−炭素（ウエット率５４．２％）１．２０ｋｇの混合物を、水素雰囲気下にて、水素の吸入が停止するまで攪拌した。反応液を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣にメタノール４０ｌを加え４０℃にて溶解し、ジイソプロピルエーテル２２０ｌを加え結晶化し、２０℃にて終夜攪拌した。結晶を濾取し、ジイソプロピルエーテル３０ｌにて洗浄した。真空乾燥し、（Ｒ）−２−［［２−（４−アミノフェニル）エチル］アミノ］−１−フェニルエタノール−塩酸塩９．４３ｋｇを得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）＝２．７６−２．９０（２Ｈ，ｍ），２．９５−３．１６（４Ｈ，ｍ），４．９５−５．１１（３Ｈ，ｍ），６．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），６．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．８９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．２８−７．４３（５Ｈ，ｍ），８．９７（１Ｈ，ｂｒ），９．２９（１Ｈ，ｂｒ）．ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：２５７（Ｍ＋Ｈ）^＋．
工程４
（Ｒ）−２−［［２−（４−アミノフェニル）エチル］アミノ］−１−フェニルエタノール−塩酸塩８．００ｇ、２−アミノチアゾール−４−イル酢酸４．３２ｇ、濃塩酸２．６４ｇ及び水１２０ｍｌの混合液に１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド−塩酸塩（ＥＤＣ）５．７６ｇを室温にて加え１時間攪拌した。水酸化ナトリウム２．４０ｇ及び水４０ｍｌの混合液を反応液に滴下し結晶化した。生じた結晶を濾取し、水にて洗浄後、真空乾燥し、（Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド（以下「化合物Ａ」という）９．９３ｇを得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６，５００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）＝１．６０（１Ｈ，ｓ），２．５９−２．６６（４Ｈ，ｍ），２．６８−２．８０（２Ｈ，ｍ），３．４５（２Ｈ，ｓ），４．５９（１Ｈ，ｂｒ），５．２１（１Ｈ，ｂｒ），６．３０（１Ｈ，ｓ），６．８９（２Ｈ，ｓ），７．１１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．１９−７．２３（１Ｈ，ｍ），７．２７−７．３３（４Ｈ，ｍ），７．４９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），９．９９（１Ｈ，ｓ）．ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：３９７（Ｍ＋Ｈ）^＋．

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明はその内容に限定されるものではない。
実施例１（ラット摘出膀胱平滑筋弛緩作用試験）
試験方法
試験は［ザ・ジャーナル・オブ・ウロロジー（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｕｒｏｌｏｇｙ）、１９９９年、１６１巻、ｐ．６８０］を参考に実施した。
１０−１１週齢のウイスター（Ｗｉｓｔａｒ）系雄性ラットを放血致死後、開腹して膀胱全体を摘出し、９５％Ｏ_２＋５％ＣＯ_２で十分に酸素化した栄養液（Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ液（ＮａＣｌ，１１８．４ｍＭ；ＫＣｌ，４．７ｍＭ；ＫＨ_２ＰＯ_４，１．２ｍＭ；ＭｇＳＯ_４，１．２ｍＭ；ＣａＣｌ_２，２．５ｍＭ；ＮａＨＣＯ_３，２５．０ｍＭ；ｇｌｕｃｏｓｅ，１１．１ｍＭ））中にて３ｘ１０ｍｍ程度の大きさの膀胱切片標本を作製した。９５％Ｏ_２＋５％ＣＯ_２を通気した３７℃の栄養液（Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ液）をマグヌス管内に満たした中に標本を吊るし、１ｇの負荷を掛けながら３０−６０分間安定化させた後に１０^−６Ｍカルバコール（ＣＣｈ）あるいは４０ｍＭ塩化カリウム（ＫＣｌ）を繰り返し添加し、ＣＣｈあるいはＫＣｌに対する反応性がほぼ一定となることを確認した。１０^−６Ｍ ＣＣｈあるいは４０ｍＭ ＫＣｌによる収縮を惹起し、発生張力が安定した後に、被験薬物（化合物ＡあるいはＣＧＰ−１２，１７７Ａ）を約１０分間隔で１０倍比で累積投与し、弛緩反応を観察した。被験薬物の最高濃度の弛緩反応の観察終了後、１０^−４Ｍパパベリンを添加して最大弛緩を惹起させ、その弛緩反応を１００％として弛緩率を算出した。
結果
上記試験の結果、本発明の有効成分である化合物Ａは、ラット摘出膀胱平滑筋弛緩作用試験におけるカルバコール収縮拮抗試験及び塩化カリウム収縮拮抗試験において、強い弛緩作用を示した。また、化合物ＡはＣＧＰ−１２，１７７Ａ（対照化合物）と比較して、著しく強い弛緩作用を示した。
本発明の有効成分である化合物Ａと対照化合物の薬物濃度に対する弛緩率を図１（カルバコール収縮拮抗試験）及び図２（塩化カリウム収縮拮抗試験）に示した。また、カルバコール収縮拮抗試験における被験薬物のＥＣ_５０と最大弛緩率を表１に、ＣＧＰ−１２，１７７Ａの最大弛緩率を発現する化合物Ａの濃度比較を表２に示した。化合物Ａは、ＣＧＰ−１２，１７７Ａ（対照化合物）と比較して２７０倍の作用強度を示した。同様に、塩化カリウム収縮拮抗試験における被験薬物のＥＣ_５０と最大弛緩率を表３に、ＣＧＰ−１２，１７７Ａの最大弛緩率を発現する化合物Ａの濃度比較を表４に示した。化合物Ａは、ＣＧＰ−１２，１７７Ａ（対照化合物）と比較して３８３倍の作用強度を示した。

実施例２（ラット律動的膀胱収縮測定試験）
試験方法
試験は［ヨーロピアン・ジャーナル・ファーマコロジー（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）、２０００年、４０７巻、ｐ．１７５］を参考に実施した。
１．測定方法
試験にはＷｉｓｔａｒ系雌性ラット（２２５−２９０ｇ）を使用した。ウレタン麻酔下、左右の尿管を結紮、切断し、その後、外尿道口よりポリエチレンカニューレを挿入、固定した。固定したカニューレは三方活栓を介して、一方は圧力トランスデューサに連結し、膀胱内圧を測定した。また、他方はシリンジポンプに連結し、生理食塩水を膀胱内に一定速度で持続注入することで律動的な膀胱収縮を誘発させた。生理食塩水の持続注入は、律動的な膀胱収縮が認められた後に停止した．律動的膀胱収縮を安定させた後、大腿静脈に挿入した薬物投与用カテーテルから薬物または溶媒を投与した。
２．薬物
化合物Ａは公比３の増加用量（０．０３、０．１、０．３、１、３ｍｇ／ｋｇ）にて静脈内に投与した。溶媒を投与した群をコントロール群とした。
３．評価項目および統計処理
評価パラメータは、薬物投与後５−１５分までの１０分間における膀胱収縮の回数および収縮圧とし、各群ともｎ＝５で実施した。結果は平均値±標準誤差で示し、２群間の比較にはＳｔｕｄｅｎｔ ｔ検定を実施した。
結果
化合物Ａの静脈内投与により、律動的膀胱収縮の収縮頻度が用量依存的に減少した（図３）。化合物Ａの３ｍｇ／ｋｇ静脈内投与（ｉ．ｖ．）による収縮頻度減少作用はコントロール群に比べ有意であった。その一方で、化合物Ａは３ｍｇ／ｋｇ静脈内投与まで収縮圧に影響を及ぼさなかった（図４）。収縮圧に影響を及ぼさないことは、尿閉を引き起こさない、あるいは排尿時に残尿を生じさせないという観点から好ましい性質である。
また、化合物Ａの収縮頻度抑制効果は、化合物Ａが膀胱に存在するβ_３受容体を刺激したことにより、膀胱の容量が増大したためと考えられた。膀胱に貯めることのできる尿の量を示す機能的膀胱容量を増大させることは、臨床上過活動膀胱患者の治療に有益であると考えられていることから、化合物Ａは臨床上過活動膀胱治療薬として有効であると考えられる。
実施例３（シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿機能測定試験）
シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットは、［ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ファーマコロジー（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）、２０００年、１３０巻、ｐ．３３１］を参考に作製し、下記試験を行った。
試験方法
１．測定方法
試験にはＷｉｓｔａｒ系雌性ラット（２２０−２３０ｇ）を使用した。ペントバルビタール・ナトリウム麻酔下、生理食塩水注入および膀胱内圧測定用カテーテルを膀胱頂部より膀胱内に、薬物投与用カテーテルを頸静脈に挿入・固定した。シクロフォスファミド（ＣＹＰ）を腹腔内に投与し、回復後ラットを飼育ケージに戻した。手術翌日に、ラット膀胱に挿入したカテーテルは三方活栓を介して、一方はシリンジポンプに連結し、生理食塩水を持続注入することにより排尿反射を惹起させた。また、他方を圧力トランスデューサに連結し、膀胱内圧を測定した。排尿反射を安定させた後、頸静脈に挿入した薬物投与用カテーテルから１ｍｇ／ｋｇの化合物Ａを投与した。
２．評価項目および統計処理
評価パラメータは、薬物投与後３０分までの平均排尿間隔とした。結果は、薬物投与前３０分間の平均排尿間隔を１００％とし、薬物投与前の平均排尿間隔に対する薬物投与後の平均排尿間隔として示し、ｎ＝３の平均値で示した。
結果
化合物Ａ（１ｍｇ／ｋｇ）の静脈内投与により、シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿間隔を１７．３％延長した（図５）。このことから、本モデルラットの排尿間隔を延長させる化合物Ａは、臨床上過活動膀胱治療薬として有効であると考えられる。
以上本発明の有効成分は、「ラット摘出膀胱平滑筋弛緩作用試験」において強い膀胱弛緩作用を示し、「ラット律動的膀胱収縮測定試験」において律動的膀胱収縮の収縮頻度を用量依存的に減少させ、更に「シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿機能測定試験」において排尿間隔を延長させることから、臨床上過活動膀胱の治療剤として有用である。また、前立腺肥大に伴う過活動膀胱の他、尿意切迫感、尿失禁や頻尿を伴う過活動膀胱の治療剤として使用することができる。
実施例４（処方例）
経口剤の処方例

１００ｍｇ錠
本発明の有効成分２００．０ｇ・乳糖３９９．０ｇをポリエチレン袋中で混合した。この混合物をサンプルミル（ホソカワミクロン製）で混合粉砕した。混合粉砕物４５０．０ｇとコーンスターチ６０．１ｇを流動造粒コーティング装置（大川原製作所製）中で均一に混合した。これに１０％ヒドロキシプロピルセルロース溶液１９２ｇを噴霧して造粒した。乾燥後・２０メッシュの篩を通し、これにステアリン酸マグネシウム２．３ｇを加え、ロータリー打錠機（畑鉄工所）で¢９．０ｍｍ ｘ １０．８Ｒの臼杵を使用して１錠当たり３５０ｍｇの錠剤とした。この錠剤をコーティング装置（フロイント産業製）中でヒドロキシプロピルメチルセルロース８．７ｇ・ポリエチレングリコール６０００ １．２ｇ・酸化チタン４．８ｇ及びタルク０．３ｇを含むコーティング液１５０ｇを噴霧し、１錠当たり１５ｍｇコートしたフィルムコート錠とした。

本発明の有効成分である（Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド又はその塩は、上述したごとく、「ラット摘出膀胱平滑筋弛緩作用試」において、対照化合物と比較して、著しく強い弛緩作用を示した。また、「ラット律動的膀胱収縮測定試験」において、律動的膀胱収縮の収縮頻度を用量依存的に減少させた。更に、「シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿機能測定試験」において、シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿間隔を延長させた。
従って、本発明の有効成分である（Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド又はその塩は、過活動膀胱の治療剤として使用することができる。また、前立腺肥大に伴う過活動膀胱の他、尿意切迫感、尿失禁や頻尿を伴う過活動膀胱の治療剤として使用することができる。

図１：ラット摘出膀胱平滑筋弛緩作用試験における化合物Ａ及び対照化合物の効果
（カルバコール収縮拮抗試験）
図２：ラット摘出膀胱平滑筋弛緩作用試験における化合物Ａ及び対照化合物の効果
（塩化カリウム収縮拮抗試験）
図３：ラット律動的膀胱収縮に対する化合物Ａの効果
（収縮頻度に対する効果（^＊：ｐ＜０．０５））
図４：ラット律動的膀胱収縮に対する化合物Ａの効果
（収縮圧に対する効果）
図５：シクロフォスファミド誘発過活動膀胱モデルラットの排尿機能に対する化合物Ａの効果
（薬物投与前の排尿間隔を１００％としたときの薬物投与後の排尿間隔を示す）

Claims (10)

1. （Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリド又はその塩を有効成分とする過活動膀胱の治療剤。
2. 前立腺肥大に伴う過活動膀胱の治療剤である請求の範囲１記載の治療剤。
3. 尿意切迫感の治療剤である請求の範囲１記載の治療剤。
4. 尿失禁の治療剤である請求の範囲１記載の治療剤。
5. 頻尿の治療剤である請求の範囲１記載の治療剤。
6. （Ｒ）−２−（２−アミノチアゾール−４−イル）−４’−［２−［（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）アミノ］エチル］酢酸アニリドのフリー体を有効成分とする過活動膀胱の治療剤。
7. 前立腺肥大に伴う過活動膀胱の治療剤である請求の範囲６記載の治療剤。
8. 尿意切迫感の治療剤である請求の範囲６記載の治療剤。
9. 尿失禁の治療剤である請求の範囲６記載の治療剤。
10. 頻尿の治療剤である請求の範囲６記載の治療剤。

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