JP3519187B2 - 免疫力増強物質及びその製造方法 - Google Patents

免疫力増強物質及びその製造方法

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Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の技術分野】本発明は、免疫力を増強させる物
質、及び、それを得るための例えばイネ科植物、特に米
糠などの植物組織原料の水溶性多糖体を糸状菌の産生す
る酵素複合体によって修飾を行う方法に関するものであ
る。
【０００２】
【従来の技術】免疫力増強物質は食品として、又は薬品
として広い用途がある。加齢やストレス等により免疫力
が低下し、種々の疾病に罹病しやすくなることは一般的
に知られている。日常の食生活において免疫力を強化さ
せようとする新しい栄養化学の考え方が、予防医学の重
要性と相まって、新たな展開を見せている。また、癌の
治療において化学療法剤、放射線治療法と免疫増強剤の
併用が高い治療効果をあげている。
【０００３】本発明者は免疫系におけるナチュラルキラ
ー細胞（ＮＫ−細胞）を増加させ、活性化させるために
天然の素材を糸状菌を用いて修飾させたものが有効であ
ることを見いだした。
【０００４】天然の素材、すなわち、植物繊維素材を糸
状菌の培養液で資化する方法がすでに知られている（特
開平１−１５３７０１）。この従来技術では素材として
米糠を用い、これを脱脂し、且つ脱リグニングした後、
低濃度アルカリで処理して米糠粗へミセルロースを作成
し、これを用いて糸状菌を培養することによってヘミセ
ルロースを資化させ部分分解している。
【０００５】上記方法によって得た物質が人体に対して
様々な有効な効果を期待し得る。しかしながら、上記文
献に記載された方法では植物繊維素材を資化により得て
いるので、品質の安定したものが得られない。また、得
られた製品もＮＫ−細胞の増加、活性化に関しては充分
ではなかった。さらに、上記方法では、糸状菌を培養す
るのに時間がかかりすぎ、工業的に製造する方法として
は必ずしも適切とは言えない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、ＮＫ−細胞
を増加させ、活性化させることができる安定した物質を
提供すると共に、それを製造する工業的に利用し得る方
法を提供することを目的とするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明方法は、以下の３
工程からなっている。 １） 植物組織ヘミセルロースの調整 イネ科などの植物組織、特に米糠を熱水で抽出し、不溶
物を濾別し、その濾液をグルコアミラーゼで処理してで
んぷんを分解してヘミセルロースを得る。 ２） 糸状菌の細胞外酵素の調整 アスペルギルス属の黄麹菌、バシディオミセテス属のシ
イタケ菌を１０日ないし１４日間培養した培養濾液に硫
酸アンモニウムを加え、その沈澱物から酵素の複合体を
得る。 ３） 上記１）で得たヘミセルロースと上記２）で得た
酵素の複合体とを加えｐＨ４．５で３０〜６０分反応さ
せ、さらにｐＨ６．０で３０〜６０分反応させることに
よって１）で得たヘミセルロースに生物学的装飾を施
す。上記方法によって得た物質はβ−１．４キシロピラ
ノース鎖を主とするキシランである。
【０００８】
【作用】上記のように、本発明方法では植物組織のヘミ
セルロースを得る工程と、酵素の複合体を得る工程とを
別々の工程として、それらを一定の条件のもとで反応さ
せている。したがって、本発明による生物学的装飾は酵
素反応、炭水化物分解酵素群による加水分解あるため、
この製法によって得られる物質は一定の構成糖のものが
得られ、その活性は一定している。また、１０日〜１４
日ほどかかる培養工程を必要とする酵素の複合体を得る
工程を植物組織のヘミセルロースを得る工程とは別に行
うことになり、酵素の複合体を予め準備しておくことが
可能となり、時間の短縮を図り、コスト低減に役立てる
ことができる。
【０００９】さらに、本発明方法で得られた物質はβ−
１．４キシロピラノース鎖を主とするキシランである。
本発明においてはキシロース結合を分解するものは含有
されていないので、上記酵素を作用させることにより、
キシロース結合以外の結合が加水分解され、キシロース
結合が残るので、本発明方法で生物学的修飾がすすむほ
ど製品にはキシロースが高い割合で含まれる。
【００１０】
【実施例】米糠１０００ｇに水５リットルを加え、１０
０℃で６０分熱水抽出を行った後、不溶物を濾別する。
濾液中のでんぷんをグルコアミラーゼで加水分解するこ
とにより、米糠ヘミセルロース抽出液を得る。米糠以外
にもヘミセルロースであれば使用し得る。特にイネ科の
植物のヘミセルロースは原料として優れている。
【００１１】本実施例においては２種類の酵素複合体を
作成した。その一つはアスペルギルス属のアスペルギル
スオリゼー（Ａｓｐ Ｏｒｙｚａｅ）を培養した酵素複
合体であり、他はバシディオミセテス類のレンチナスエ
ドデス（Ｌｅｎｔｉｎｕｓｅｄｏｄｅｓ）を培養した酵
素複合体である。これらの培地組成は以下の通りであ
る。
【００１２】１） Ａｓｐ Ｏｒｙｚａｅの培地組成 蒸留水 １リットル、 ブドウ糖 ４０ｇ、 ペプトン ６ｇ、 ｋＨ2ＰＯ4 ０．１ｇ、 ＮａＣｌ 小量、 ＣａＣｌ2 小量、 ＦｅＣｌ3 小量、 培養条件ｐＨ３．５、３０℃、１４日間。
【００１３】２） Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓの
培地組成 蒸留水 １リットル、 ショ糖 ５ｇ、 ＮＡ4ＶＮＯ3 １０ｇ、 ＫＨ2ＰＯ4 ５ｇ、 ＭｇＳＯ4 ２．５ｇ、 ＦｅＳＯ4 小量、 培養条件 ｐＨ４．５、２０℃、１４日間。
【００１４】これらの培地での培養の後、培養濾液に硫
酸アンモニウムを５０％飽和となるように加え、生じた
沈澱物を分別し、Ａｓｐ Ｏｒｙｚａｅの酵素複合体
（Ｅｎｚｙｍｅ−ＡＯ）とＬｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄ
ｅｓの酵素複合体（Ｅｎｚｙｍｅ−ＬＥ）を得る。
【００１５】最後に前記米糠水溶性多糖体抽出液４．５
リットルにＥｎｚｙｍｅ−ＡＯを３ｇ加え、最初にｐＨ
を４．５に調整し、４０℃で３０分反応させて、さらに
ｐＨを６．０に調整して３０分反応させてＡｓｐ Ｏｒ
ｙｚａｅの菌体外酵素によって修飾された米糠水溶性多
糖体（ＲＢＸ−ＡＯ）を作成した。米糠ヘミセルロース
抽出液にＥｎｚｙｍｅ−ＬＥを加えて同様に反応させて
Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓの菌体外酵素によって
修飾された米糠ヘミセルロース（ＲＢＸ−ＬＥ）を作成
した。これらの物質の主成分はβ−１．４キシロピラノ
ース鎖を主とするキシランである。
【００１６】これを除菌、滅菌してそのまま濃縮し、液
剤として使用することができ、さらに凍結乾燥やスプレ
ードライによって粉体化して錠剤、顆粒として使用する
こともできる。
【００１７】これらのＲＢＸ−ＡＯとＲＢＸ−ＬＥの理
化学的性質は以下の通りである。 ＲＢＸ−ＡＯ ＲＢＸ−ＬＥ 平均分子量 ６５万ダルトン ６０万ダルトン 構成糖 アラビノース ２２％ アラビノース ２６％ キシロース ５４％ キシロース ４８％ ガラクトース ５％ ガラクトース ７％ グルコース ６％ グルコース ６％ マンノース ８％ マンノース ９％ その他 ５％ その他 ４％
【００１８】上記したＲＲＢＸ−ＬＥならびにＲＲＢＸ
−ＡＯの効果を測定するため患者のＮＫ細胞の活性化を
測定した。最初、他の薬による影響を除くため１カ月間
あらゆる薬の投与を中止し、その後ＲＢＸ−ＬＥを経口
で１日６ｇ与えた結果、当初のＮＫ細胞の活性化が３
４．５ＬＵであったのが、２週間後６６．５ＬＵに上昇
していた。その後投与を中止しても６カ月間高レベル
（６４ＬＵ）に保たれた。ＲＢＸ−ＡＯでもほぼ同様で
あった。
【００１９】酵素反応の進行状況を判定するにはキシロ
ースの割合を調べればよい。そこでこのキシロースが最
高の値を示す米糠抽出液４．５リットルに対するＲＢＸ
−ＬＥならびにＲＢＸ−ＡＯの割合について検討した結
果を以下に示す。前記実施例同様最初にｐＨ４．５、６
０℃で３０分反応させ、その後ｐＨ６．０で３０分反応
させた。
【００２０】 ＲＢＸ−ＡＯの場合のキシロースの含有割合 １．５ｇ ３８％ ３．０ｇ ４８％ ４．５ｇ ４９％ ６．０ｇ ４８％
【００２１】 ＲＢＸ−ＬＥの場合キシロースの含有割合 １．５ｇ ３１％ ３．０ｇ ４３％ ４．５ｇ ４４％ ６．０ｇ ４４％
【００２２】上記のように、いずれも３．０ｇで最高値
に達しそれ以上のＲＢＸ−ＬＥやＲＢＸ−ＡＯを作用さ
せても、キシロースの含有量は増加しない。
【００２３】次に、反応時間について検討した結果は以
下の通りであった。時間はいずれもｐＨ４．５の場合と
ｐＨ６．０の場合それぞれが示された時間通り行われた
ことを示す。 時間 ３０ ６０ ９０ １２０分 ＲＢＸ−ＬＥ ４８％ ５４％ ５５％ ５３％ ＲＢＸ−ＡＯ ４３％ ４８％ ４９％ ４８％ いずれも、６０分で最高値に達し、６０分以上反応させ
てもキシロースの含有量は増加しなかった。
【００２４】
【発明の効果】本発明方法は、植物繊維の水溶性多糖体
を得る工程と、酵素の複合体を得る工程とを別々の工程
とし、酵素反応を行わせているので、炭水化物分解酵素
群による加水分解であるため、本発明の製法によって得
られる物質は一定の構成糖のものとなり、その活性は一
定している。本発明においては、１０日〜１４日必要と
する培養工程を多糖体を得る工程とは別にしてあるの
で、酵素の複合体を予め準備しておくことが可能とな
り、製品を得るための工程としては実質的に多糖体を得
る工程の時間と酵素反応の時間だけでよいので全体とし
ての時間の短縮を図り、コスト低減に役立てることがで
きる。
【００２５】さらに、本発明方法で得られた物質はβ−
１．４キシロピラノース鎖を主とするキシランであっ
て、キシロースを多量に含み、ＮＫ−細胞を増加させ、
活性化させることができる。
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｎ 9/14 １０１ Ｃ１２Ｎ 9/14 １０１ Ｃ１２Ｐ 19/20 Ｃ１２Ｐ 19/20 //(Ｃ１２Ｎ 9/14 Ｃ１２Ｎ 9/14 Ｃ１２Ｒ 1:69） Ｃ１２Ｒ 1:69 (Ｃ１２Ｎ 9/14 1:645 Ｃ１２Ｒ 1:645） (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12P 19/00 - 19/64

Claims (2)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 １） 米糠を熱水で抽出し、不溶物を濾
    別し、その濾液をグルコアミラーゼで処理してでんぷん
    を分解して水溶性多糖体抽出液を得る過程と、 ２） アスペルギルス属のアスペルギルスオリゼー（Ａ
    ｓｐ Ｏｒｙｚａｅ）及びバシディオミセテス類のレン
    チナスエドデス（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓ）の
    いずれかを培養した培養濾液に硫酸アンモニウムを加
    え、その沈澱物から酵素の複合体を得る過程と、 ３） 上記１）で得た水溶性多糖体抽出液と上記２）で
    得た酵素の複合体とを加えｐＨ４．５で３０〜６０分反
    応させ、さらにｐＨ６．０で３０〜６０分反応させるこ
    とによって１）で得た水溶性多糖体抽出液に生物学的装
    飾を施すことを特徴とする免疫力増強物質を生成する方
    法。
  2. 【請求項２】 請求項１記載の方法で生成した免疫増強
    物質。
JP28304795A 1995-07-12 1995-10-31 免疫力増強物質及びその製造方法 Expired - Lifetime JP3519187B2 (ja)

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