JPH0923895A - 免疫力増強物質及びその製造方法 - Google Patents

免疫力増強物質及びその製造方法

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JPH0923895A
JPH0923895A JP7283047A JP28304795A JPH0923895A JP H0923895 A JPH0923895 A JP H0923895A JP 7283047 A JP7283047 A JP 7283047A JP 28304795 A JP28304795 A JP 28304795A JP H0923895 A JPH0923895 A JP H0923895A
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Abstract

(57)【要約】 【目的】 本発明は、ＮＫ−細胞を増加させ、活性化さ
せることができる安定した物質を提供すると共に、それ
を製造する工業的に利用し得る方法を提供する。 【解決手段】 植物組織水溶性多糖体を調整して水溶性
多糖体を得、糸状菌の細胞外酵素を調整して酵素の複合
体を得、上記水溶性多糖体と上記酵素の複合体とを加え
ｐＨ４．５で３０〜６０分反応させ、さらにｐＨ６．０
で３０〜６０分反応させることによって上記多糖体に生
物学的装飾を施す。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の技術分野】本発明は、免疫力を増強させる物
質、及び、それを得るための例えばイネ科植物、特に米
糟などの植物組織原料の水溶性多糖体を糸状菌の産生す
る酵素複合体によって修飾を行う方法に関するものであ
る。
【０００２】
【従来の技術】免疫力増強物質は食品として、又は薬品
として広い用途がある。加齢やストレス等により免疫力
が低下し、種々の疾病に罹病しやすくなることは一般的
に知られている。日常の食生活において免疫力を強化さ
せようとする新しい栄養化学の考え方が、予防医学の重
要性と相まって、新たな展開を見せている。また、癌の
治療において化学療法剤、放射線治療法と免疫増強剤の
併用が高い治療効果を上げている。
【０００３】本発明者は免疫系におけるナチュラルキラ
ー細胞（ＮＫ−細胞）を増加させ、活性化させるために
天然の素材を糸状菌を用いて修飾させたものが有効であ
ることを見いだした。
【０００４】天然の素材、すなわち、植物繊維素材を糸
状菌の培養液で資化する方法がすでに知られている（特
開平１−１５３７０１）。この従来技術では素材として
米糠を用い、これを脱脂し、且つ脱ニグニンした後、低
濃度アルカリで処理して米糠粗ヘミセルロースを作成
し、これを用いて糸状菌を培養することによってヘミセ
ルロースを資化させ部分分解している。
【０００５】上記方法によって得た物質が人体に対して
様々な有効な効果を期待し得る。しかしながら、上記文
献に記載された方法では植物繊維素材を資化により得て
いるので、品質の安定したものが得られない。また、得
られた製品もＮＫ−細胞の増加、活性化に関しては充分
ではなかった。さらに、上記方法では、糸状菌を培養す
るのに時間がかかりすぎ、工業的に製造する方法として
は必ずしも適切とは言えない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、ＫＮ−細胞
を増加させ、活性化させることができる安定した物質を
提供すると共に、それを製造する工業的に利用し得る方
法を提供することを目的とするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明方法は、以下の３
工程からなっている。 １） 植物組織水溶性多糖体の調整 イネ科などの植物組織、特に米糠を熱水で抽出し、不溶
物を濾別し、その濾液をグルコアミラーゼで処理してで
んぷんを分解して水溶性多糖体を得る。 ２） 糸状菌の細胞外酵素の調整 アスペルギルス属のＡｓｐ Ｏｒｙｚａｅ、バシディオ
ミセテス属のＬｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓを１０日
ないし１４日間培養した培養濾液に硫酸アンモニウムを
加え、その沈澱物から酵素の複合体を得る。 ３） 上記１）で得た水溶性多糖体と上記２）で得た酵
素の複合体とを加えｐＨ４．５で３０〜６０分反応さ
せ、さらにｐＨ６．０で３０〜６０分反応させることに
よって１）で得た多糖体に生物学的装飾を施す。 上記方法によって得た物質はβ−１．４キシロピラノー
ス鎖を主とするキシランである。
【０００８】
【作用】上記のように、本発明方法では植物組織の水溶
性多糖体を得る工程と、酵素の複合体を得る工程とを別
々の工程として、それらを一定の条件のもとで反応させ
ている。したがって、本発明による生物学的装飾は酵素
反応、炭水化物分解酵素群による加水分解あるため、こ
の製法によって得られる物質は一定の構成糖のものが得
られ、その活性は一定している。また、１０日〜１４日
ほどかかる培養工程を必要とする酵素の複合体を得る工
程を植物組織の水溶性多糖体を得る工程とは別に行うこ
とになり、酵素の複合体を予め準備しておくことが可能
となり、時間の短縮を図り、コスト低減に役立てること
ができる。
【０００９】さらに、本発明方法で得られた物質はβ−
１．４キシロピラノース鎖を主とするキシランである。
本発明においてはキシロース結合を分解するものは含有
されていないので、上記酵素を作用させることにより、
キシロース結合以外の結合が加水分解され、キシロース
結合が残るので、本発明方法で生物学的修飾がすすむほ
ど製品にはキシロースが高い割合で含まれる。
【００１０】
【実施例】米糠１０００ｇに水５リットルを加え、１０
０℃で６０分熱水抽出を行った後、不溶物を濾別する。
濾液中のでんぷんをグルコアミラーゼで加水分解するこ
とにより、米糠水溶性多糖体抽出液を得る。米糠以外に
もヘミセルロースであれば使用し得る。特にイネ科の植
物のヘミセルロースは原料として優れている。
【００１１】本実施例においては２種類の酵素複合体を
作成した。その一つはアスペルギルス属のＡｓｐ Ｏｒ
ｙｚａｅを培養した酵素複合体であり、他はバシディオ
ミセテス属のＬｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓを培養し
た酵素複合体である。これらの培地組成は以下の通りで
ある。
【００１２】１） Ａｓｐ Ｏｒｙｚａｅの培地組成 蒸留水 １リットル、 ブドウ糖 ４０ｇ、 ペプトン ６ｇ、 ｋＨ2ＰＯ4 ０．１ｇ、 ＮａＣｌ 小量、 ＣａＣｌ2 小量、 ＦｅＣｌ3 小量、 培養条件ｐＨ３．５、３０℃、１４日間。
【００１３】２） Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓの
培地組成 蒸留水 １リットル、 ショ糖 ５ｇ、 ＮＡ4ＶＮＯ3 １０ｇ、 ＫＨ2ＰＯ4 ５ｇ、 ＭｇＳＯ4 ２．５ｇ、 ＦｅＳＯ4 小量、 培養条件 ｐＨ４．５、２０℃、１４日間。
【００１４】これらの培地での培養の後、培養濾液に硫
酸アンモニウムを５０％飽和となるように加え、生じた
沈澱物を分別し、Ａｓｐ Ｏｒｙｚａｅの酵素複合体
（Ｅｎｚｙｍｅ−ＡＯ）とＬｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄ
ｅｓの酵素複合体（Ｅｎｚｙｍｅ−ＬＥ）を得る。
【００１５】最後に前記米糠水溶性多糖体抽出液４．５
リットルにＥｎｚｙｍｅ−ＡＯを３ｇ加え、最初にｐＨ
を４．５に調整し、４０℃で３０分反応させて、さらに
ｐＨを６．０に調整して３０分反応させてＡｓｐ Ｏｒ
ｙｚａｅの菌体外酵素によって修飾された米糠水溶性多
糖体（ＲＢＸ−ＡＯ）を作成した。米糠水溶性多糖体抽
出液にＥｎｚｙｍｅ−ＬＥを加えて同様に反応させてＬ
ｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓの菌体外酵素によって修
飾された米糠水溶性多糖体（ＲＢＸ−ＬＥ）を作成し
た。これらの物質の主成分はβ−１．４キシロピラノー
ス鎖を主とするキシランである。
【００１６】これを除菌、滅菌してそのまま濃縮し、液
剤として使用することができ、さらに凍結乾燥やスプレ
ードライによって粉体化して錠剤、顆粒として使用する
こともできる。
【００１７】これらのＲＢＸ−ＡＯとＲＢＸ−ＬＥの理
化学的性質は以下の通りである。 ＲＢＸ−ＡＯ ＲＢＸ−ＬＥ 平均分子量 ６５万ダルトン ６０万ダルトン 構成糖 アラビノース ２２％ アラビノース ２６％ キシロース ５４％ キシロース ４８％ ガラクトース ５％ ガラクトース ７％ グルコース ６％ グルコース ６％ マンノース ８％ マンノース ９％ その他 ５％ その他 ４％
【００１８】上記したＲＲＢＸ−ＬＥならびにＲＲＢＸ
−ＡＯの効果を測定するため患者のＮＫ細胞の活性化を
測定した。最初、他の薬による影響を除くため１カ月間
あらゆる薬の投与を中止し、その後ＲＢＸ−ＬＥを口径
で１日６ｇ与えた結果、当初のＮＫ細胞の活性化が３
４．５ＬＵであったのが、２週間後６６．５ＬＵに上昇
していた。その後投与を中止しても６カ月間高レベル
（６４ＬＵ）に保たれた。ＲＢＸ−ＡＯでもほぼ同様で
あった。
【００１９】酵素反応の進行状況を判定するにはキシロ
ースの割合を調べればよい。そこでこのキシロースが最
高の値を示す米糠抽出液４．５リットルに対するＲＢＸ
−ＬＥならびにＲＢＸ−ＡＯの割合について検討した結
果を以下に示す。前記実施例同様最初にｐＨ４．５、６
０℃で３０分反応させ、その後ｐＨ６．０で３０分反応
させた。
【００２０】 ＲＢＸ−ＡＯの場合のキシロースの含有割合 １．５ｇ ３８％ ３．０ｇ ４８％ ４．５ｇ ４９％ ６．０ｇ ４８％
【００２１】 ＲＢＸ−ＬＥの場合キシロースの含有割合 １．５ｇ ３１％ ３．０ｇ ４３％ ４．５ｇ ４４％ ６．０ｇ ４４％
【００２２】上記のように、いずれも３．０ｇで最高値
に達しそれ以上のＲＢＸ−ＬＥやＲＢＸ−ＡＯを作用さ
せても、キシロースの含有量は増加しない。
【００２３】次に、反応時間について検討した結果は以
下の通りであった。時間はいずれもｐＨ４．５の場合と
ｐＨ６．０の場合それぞれが示された時間通り行われた
ことを示す。 時間 ３０ ６０ ９０ １２０分 ＲＢＸ−ＬＥ ４８％ ５４％ ５５％ ５３％ ＲＢＸ−ＡＯ ４３％ ４８％ ４９％ ４８％ いずれも、６０分で最高値に達し、６０分以上反応させ
てもキシロースの含有量は増加しなかった。
【００２４】
【発明の効果】本発明方法は、植物繊維の水溶性多糖体
を得る工程と、酵素の複合体を得る工程とを別々の工程
とし、酵素反応を行わせているので、炭水化物分解酵素
群による加水分解であるため、本発明の製法によって得
られる物質は一定の構成糖のものとなり、その活性は一
定している。本発明においては、１０日〜１４日必要と
する培養工程を多糖体を得る工程とは別にしてあるの
で、酵素の複合体を予め準備しておくことが可能とな
り、製品を得るための工程としては実質的に多糖体を得
る工程の時間と酵素反応の時間だけでよいので全体とし
ての時間の短縮を図り、コスト低減に役立てることがで
きる。
【００２５】さらに、本発明方法で得られた物質はβ−
１．４キシロピラノース鎖を主とするキシランであっ
て、キシロースを多量に含み、ＮＫ−細胞を増加させ、
活性化させることができる。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成７年１１月１３日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００１】
【発明の技術分野】本発明は、免疫力を増強させる物
質、及び、それを得るための例えばイネ科植物、特に米
糠などの植物組織原料の水溶性多糖体を糸状菌の産生す
る酵素複合体によって修飾を行う方法に関するものであ
る。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００２】
【従来の技術】免疫力増強物質は食品として、又は薬品
として広い用途がある。加齢やストレス等により免疫力
が低下し、種々の疾病に罹病しやすくなることは一般的
に知られている。日常の食生活において免疫力を強化さ
せようとする新しい栄養化学の考え方が、予防医学の重
要性と相まって、新たな展開を見せている。また、癌の
治療において化学療法剤、放射線治療法と免疫増強剤の
併用が高い治療効果をあげている。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００４】天然の素材、すなわち、植物繊維素材を糸
状菌の培養液で資化する方法がすでに知られている（特
開平１−１５３７０１）。この従来技術では素材として
米糠を用い、これを脱脂し、且つ脱リグニングした後、
低濃度アルカリで処理して米糠粗へミセルロースを作成
し、これを用いて糸状菌を培養することによってヘミセ
ルロースを資化させ部分分解している。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１８】上記したＲＲＢＸ−ＬＥならびにＲＲＢＸ
−ＡＯの効果を測定するため患者のＮＫ細胞の活性化を
測定した。最初、他の薬による影響を除くため１カ月間
あらゆる薬の投与を中止し、その後ＲＢＸ−ＬＥを経口
で１日６ｇ与えた結果、当初のＮＫ細胞の活性化が３
４．５ＬＵであったのが、２週間後６６．５ＬＵに上昇
していた。その後投与を中止しても６カ月間高レベル
（６４ＬＵ）に保たれた。ＲＢＸ−ＡＯでもほぼ同様で
あった。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｐ 19/20 Ｃ１２Ｐ 19/20 //(Ｃ１２Ｎ 9/14 Ｃ１２Ｒ 1:69） (Ｃ１２Ｎ 9/14 Ｃ１２Ｒ 1:645）

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 １） 植物組織原料を熱水で抽出し、不
    溶物を濾別し、その濾液をグルコアミラーゼで処理して
    でんぷんを分解して水溶性多糖体を得る過程と、 ２） アスペルギルス属のＡｓｐ Ｏｒｙｚａｅ及びバ
    シディオミセテス属のＬｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓ
    のいずれかを培養した培養濾液に硫酸アンモニウムを加
    え、その沈澱物から酵素の複合体を得る過程と、 ３） 上記１）で得た水溶性多糖体と上記２）で得た酵
    素の複合体とを加えｐＨ４．５で３０〜６０分反応さ
    せ、さらにｐＨ６．０で３０〜６０分反応させることに
    よって１）で得た水溶性多糖体に生物学的装飾を施すこ
    とを特徴とする免疫力増強物質を生成する方法。
  2. 【請求項２】 請求項１記載の方法で生成した免疫増強
    物質。
JP28304795A 1995-07-12 1995-10-31 免疫力増強物質及びその製造方法 Expired - Lifetime JP3519187B2 (ja)

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US501751 1995-07-12
US08/501,751 US5560914A (en) 1995-07-12 1995-07-12 Immunopotentiator and method of manufacturing the same

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JPH0923895A true JPH0923895A (ja) 1997-01-28
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EP (1) EP0753582B1 (ja)
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