JP2908357B2 - 菌糸体含有培地からの有用成分の抽出方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の技術分野】本発明は、菌糸体含有培地からの有
用成分の抽出方法に関し、さらに詳しくは菌糸体含有培
地からの有用成分を短時間に高収率で得ることができる
ような菌糸体含有培地からの有用成分の抽出方法に関す
る。

【０００２】

【従来技術】古来より、椎茸、松茸、エノキ茸などの担
子菌類の茸は食用されており、中には、担子菌類サルノ
コシカケ科に属する茸のように漢方薬として重用されて
いるものもある。

【０００３】一方で、このような担子菌類から有効成分
を抽出する種々の方法が提案されている。例えば、特開
昭５４-４６８５９号公報には、担子菌類を主としてバ
ガスからなる培地に接種し、菌糸を繁殖させた後、この
菌糸体繁殖培地を圧搾して、有効成分を採取する、保健
食品の製造方法が開示されている。

【０００４】この方法で用いられている培地のバガス自
体の効用については、例えば、岡捨巳氏等による論文
「植物多糖の抗腫瘍作用（バガス多糖体の分留法と抗腫
瘍作用）」，ＧＡＮＮ，３９号，３５〜４２頁，１９６
８年２月刊」において、バガス多糖体の粗末から得られ
る分留物には、ガラクトース、アラビノース、キシロー
ス、マンノースと少量のグルコースが含まれ、該分留物
を静注した結果、マウスの皮下に移植したＳａｒｃｏｍ
ａ１８０（肉腫，悪性腫瘍）の成長に著明な阻害効果を
示したことが記載されており、バガス成分摂取の保健効
果も期待できる。

【０００５】しかしながら上記公報に記載の方法では、
分離液中の有効成分の濃度が低く、手間のかかる濃縮操
作が必要であるなど、抽出効率が悪いという問題点があ
った。

【０００６】このような問題点を解決すべく鋭意研究し
て、本願出願人は、先に、「バガスを基材とする固体培
地上に、エノキ茸菌を接種し、次いで菌糸体を増殖して
得られる菌糸体を含む固体培地を、１２メッシュ通過分
が３０重量％以下となるように解束し、この解束された
固体培地に、水およびセルラーゼ、プロテアーゼまたは
グルコシターゼから選ばれる酵素の１種またはそれ以上
を添加し、そして前記固体培地を酵素の存在下で粉砕お
よび擂潰してバガス繊維の少なくとも７０重量％以上が
１２メッシュ通過分であるようにし、次いで９５℃まで
の温度に加熱することにより酵素を失活させかつ滅菌す
ることを特徴とする、エノキ茸菌糸体およびバガス培地
からの有用成分の抽出方法。」を、特願昭６２-３４１
２３号として提案した。

【０００７】また特公昭６０-２３８２６号公報におい
て、本発明者らは接種菌として椎茸菌を用いた以外は上
記特願昭６２-３４１２３号記載の方法と同様の方法で
保健飲料を製造する方法を提案している。

【０００８】さらにまた特願昭５９-５３５５号（特公
平４-３５１４９号公報）、特願昭５９-５３５６号（特
公平４-６１７１号公報）においては、霊芝菌を用いた
保健飲料の製造方法を提案している。

【０００９】これらの方法によれば、上記菌糸体（エノ
キ茸菌糸体、椎茸菌糸体、あるいは霊芝菌糸体）および
バガス培地からの有用成分を高濃度で抽出することがで
きる。

【００１０】本発明者らは、さらなる抽出効率の向上な
どを目指して鋭意研究したところ、増殖させた担子菌類
の菌糸体を含むバガス培地を解束し、この菌糸体を含む
バガス培地に特定条件下で特定の酵素類を接触（作用）
させ、次いで得られた細胞壁溶解生成物含有液を加熱し
て上記の酵素類を失活させるとともに滅菌すると、担子
菌類菌糸体およびバガス固体培地からの有用成分を効率
よく抽出できることなどを見出して、本発明を完成する
に至った。

【００１１】なお、「新細胞壁溶解酵素について」（島
田伸一郎著，New Food Industry Vol.28,No.8(1986)）
と題する論文には、茸類のヒラ茸、エノキ茸を完全培養
してなる菌体を、この「ファンセラーゼ」（株式会社ヤ
クルト本社の酵素試薬の商品名）の２％溶液（ｐＨ５．
６）で３０℃の温度条件下に１時間または２時間処理し
てプロトプラストを生成させたことが記載され、また椎
茸菌糸からもプロトプラストが生成されることが記載さ
れている。

【００１２】しかしながら、上記条件下でこのような長
時間に亘って、上記菌体とファンセラーゼとを接触させ
たのでは、抗腫瘍作用を有するβ-グルカンなどのよう
な有用成分を、担子菌類菌糸体およびバガス固体培地か
ら効率よく抽出できなかった。

【００１３】

【発明の目的】本発明は、上記のような従来技術に伴う
問題点を解決しようとするものであって、菌糸体含有培
地からの有用成分を短時間に高収率で得ることができる
ような、菌糸体含有培地からの有用成分の抽出方法を提
供することを目的としている。

【００１４】

【発明の概要】本発明に係る菌糸体含有培地からの有用
成分の抽出方法は、バガス（bagasse）を基材とする固
体培地上に担子菌類を接種し、次いで菌糸体を増殖して
得られる菌糸体を含む固体培地を解束し、解束された固
体培地を、β-１，３−グルカナーゼを主成分とし、さ
らにキチナーゼ、セルラーゼを含有している酵素液(a)
（例：ファンセラーゼ含有液）と、３０〜６０℃の温度
で１〜６５分間接触させて菌糸体細胞壁を溶解（分解）
させ、次いで、得られた細胞壁溶解生成物含有液を９５
℃までの温度に加熱し上記酵素類を失活させるととも
に、滅菌することを特徴としている。

【００１５】本発明の好ましい態様においては、上記条
件下では、固体培地１ｋｇに対して、通常、濃度０．０
１〜０．１重量％、好ましくは０．０３〜０．０５重量
％の酵素液(a)を１００〜２０００ｍｌの量で作用させ
ることが好ましい。

【００１６】本発明の好ましい態様においては、上記細
胞壁溶解生成物含有液をさらに固液分離（例：圧搾、遠
心分離）した後で、得られた分離液を上記のように、９
５℃までの温度に加熱し上記酵素を失活させるととも
に、滅菌することが好ましい。

【００１７】本発明の好ましい態様においては、前記担
子菌類が、椎茸、エノキ茸、霊芝、舞茸の内の何れか１
種であることが望ましく、さらには霊芝、舞茸の内の何
れか１種であることが好ましい。

【００１８】本発明に係る上記方法によれば、菌糸体含
有培地からの有用成分を短時間に高収率で得ることがで
きる。上記の方法により得られる抽出液には、担子菌類
の細胞壁分解物であり、抗腫瘍効果のあるβ-グルカン
等が高濃度で含まれており、また、菌糸体の代謝成分で
あるグルコース等と共に、免疫賦活作用、植物に対する
ホルモン作用を有するサイトカイニン様物質なども高濃
度に含まれており、しかもこれらの成分はバランス良く
含まれており、ドリンク剤、植物ホルモン剤、化粧品原
料等への利用が期待できる。

【００１９】

【発明の具体的説明】以下本発明に係る菌糸体含有培地
からの有用成分の抽出方法について具体的に説明する。菌糸体の培養 本発明における固体培地の基材としては、バガスあるい
はバガスに米糠を添加したものが用いられる。バガスは
砂糖キビのしぼりかすであって、バガス中には菌糸体の
栄養源となる糖類および蛋白質が含まれており、このま
までも固体培地となりうるが、バガス１００重量部に対
して米糠１０〜３０重量部を添加して固体培地とするこ
とが好ましい。

【００２０】このようなバガスを基材とする固体培地
に、椎茸、エノキ茸等の担子菌類の種菌を接種する。担
子菌類が接種された固体培地を、温度および湿度さらに
は照度が調節された培養室内に所定期間放置すると、固
体培地中に担子菌類菌糸体が増殖する。なお、担子菌類
としては、通常食用されている、松茸、椎茸、エノキ
茸、ヒラ茸、なめこ、イグチ、シメジ、チチタケ等の松
茸目の茸類；和漢薬として利用され、あるいは食用され
るコフキサルノコシカケ、ツガサルノコシカケ、カワラ
茸、マンネン茸（霊芝）、舞茸等のサルノコシカケ目の
茸類；通常食用されるキクラゲ、シロキクラゲ等のキク
ラゲ目あるいはシロキクラゲ目の茸類；などが挙げられ
る。

【００２１】これらの担子菌類の茸の内では、培養容易
性、栄養価、薬効などの観点から、椎茸、エノキ茸、舞
茸、霊芝が好ましく用いられる。解束 本発明においては、上記のようにして担子菌類菌糸体が
培地中に充分蔓延し、子実体の発生直前・直後の時期
に、得られた菌糸体を含むバガス培地（バガス培地ブロ
ック、固体培地とも言う）を解束する。

【００２２】このように菌糸体を含むバガス培地の特に
繊維素を解束し、通常、１２メッシュ通過分が、３０重
量％以下となるようにする。このバガス繊維素を解束す
る場合に、１２メッシュ通過分を３０重量％以上とする
には、特殊な粉砕機などが必要となるため好ましくな
い。換言すると、バガス培地を特殊な粉砕機などを用い
ることなく解束した場合には、通常１２メッシュ通過分
は３０重量％以下となる。

【００２３】なお、バガス培地の解束は、上記のように
子実体の発生直前時期に行うことが好ましい。菌糸体細胞壁溶解 次いで、このように解束された固体培地を、β-１，３
−グルカナーゼを主成分［全酵素類中、５０．０〜９
０．０重量％含有］とし、さらにキチナーゼ、セルラー
ゼを含有している酵素液(a)（例：ファンセラーゼ含有
液）と３０〜６０℃、好ましくは３５〜５５℃の温度で
１〜６５分間、好ましくは１０〜６０分間接触させて菌
糸体細胞壁を溶解させる。

【００２４】このような温度で上記時間固体培地と上記
酵素液(a)とを接触させると、上記酵素のみならず菌糸
体由来の酵素も細胞壁溶解に利用でき、細胞毒性として
のプロトプラスト破壊の進行などが少なく、抗腫瘍効果
のあるβ-グルカン等が高濃度で含まれており、また、
菌糸体の代謝成分であるグルコースなどと共に、免疫賦
活作用、植物に対するホルモン作用を有するサイトカイ
ニン様物質なども高濃度に含まれ、しかもこれらの成分
がバランス良く含まれた抽出液が得られる。なお、接種
菌糸体の種類などにもより、好適な酵素処理温度は変化
し、一概に決定されないが、一般的にこの酵素処理温度
が上記範囲で高いほど、酵素活性は低下してくる傾向が
あり、酵素処理すべき時間は、上記範囲で長くなる傾向
がある。

【００２５】なお、このように解束された固体培地を上
記酵素液(a)と接触させて、菌糸体細胞壁を溶解させる
には、解束された固体培地を、この固体培地の全体を同
時に浸漬させるに充分な量の酵素液(a)中に浸漬しても
よく、また酵素液(a)を上記固体培地に掛けてもよく、
さらにはこれより少ない量の酵素液(a)中に解束された
固体培地を入れて攪拌しあるいは震蕩してもよい。要す
るに、固体培地が実質上、上記温度および時間で酵素液
(a)と接触する限り、その接触方法は、特に限定されな
い。

【００２６】酵素液(a)としては、分散媒が水であり、
分散質の酵素としては、主成分のβ-１，３−グルカナ
ーゼと、キチナーゼ、セルラーゼなどとを含み、これら
の酵素類(A)（例：ファンセラーゼ）が酵素液(a)中に総
量で通常０．５〜１０重量％の量で、好ましくは１〜５
重量％の量で含まれたものが用いられる。

【００２７】なお、ファンセラーゼは、株式会社ヤクル
ト本社の酵素試薬の商品名であり、Trichoderma viride
の一菌株が産生する活性酵素であり、主成分のβ-１，
３−グルカナーゼの他に、キチナーゼ、セルラーゼ等を
含有しており、茸等の細胞壁をに溶解し、プロトプラス
トの調製が可能である（島田伸一郎著「新細胞壁溶解酵
素について」New Food Industry Vol.28,No.8(1986)参
照）。

【００２８】本発明においては、酵素として、このよう
にβ-１，３−グルカナーゼを主成分とし、さらにキチ
ナーゼ、セルラーゼなどを含有するもの(A)を用いてい
るので、培地の微粉砕を必要とせず短時間で菌糸体細胞
壁を溶解（分解）することができ、しかも培地が微粉砕
されていない酵素処理物からのエキス抽出は短時間で済
むため、酵素の失活と滅菌とを行う熱処理工程をそれぞ
れ別々に行う必要がなく、抽出最終工程でまとめて１回
行うだけで済む。

【００２９】酵素液(a)の量は、用いられる菌糸体の種
類、培地と酵素液(a)との接触方法の相違、酵素液(a)の
濃度などにより異なり、一概に決定されないが、例え
ば、培地を酵素液(a)中に浸漬させる場合には、酵素総
量に換算して、バガス培地１ｋｇに対して通常、０．１
〜１ｇ、好ましくは０．３〜０．５ｇの量であることが
好ましい。換言すれば、バガス培地１ｋｇに対して、通
常、０．０１〜０．１重量％、好ましくは０．０３〜
０．０５重量％濃度の酵素液(a)では、通常、１００〜
２０００ｍｌ、好ましくは５００〜１０００ｍｌの量で
用いられる。

【００３０】このような濃度の酵素液を用いると、細胞
壁の溶解によりβ-グルカンの大量生成のみが効率よく
促進される傾向がある。なお、これより高濃度（例：２
〜３％）のファンセラーゼ含有液溶液を用いると、上記
温度および時間の条件下では、細胞壁が完全に溶解され
てしまい、β-グルカンは大量には得られなくなる傾向
がある。

【００３１】また酵素液(a)に含まれる水としては、金
属イオンなどのイオン類を含有しないものが好ましく、
バガス培地１ｋｇに対して１００〜２０００ｇ、好まし
くは５００〜１０００ｇ添加される。なお本発明におい
ては、酵素液(a)のｐＨは必ずしも調節する必要はない
が、通常ｐＨ４．０〜７．０、好ましくはｐＨ５．０〜
６．０に調整することが好ましい。加熱による酵素失活・滅菌 本発明においては、次いで、上記のように酵素処理して
得られた細胞壁溶解生成物含有液、好ましくは下記のよ
うにこの細胞壁溶解生成物含有液をさらに固液分離して
なる分離液を、９５℃までの温度、好ましくは７０〜９
０℃の温度に加熱し、添加した上記酵素あるいはバガス
中に元来含有されている酵素を失活させるとともに、滅
菌する。このような温度で加熱すると、得られる細胞壁
溶解生成物含有液あるいは分離液の変質を防止すること
ができる。固液分離 なお、本発明においては、細胞壁溶解生成物含有液を加
熱して酵素を失活させるとともに滅菌処理を行った後に
固液分離してもよく、細胞壁溶解生成物含有液を一旦固
液分離した後で、得られた分離液を上記のように加熱し
酵素を失活させるとともに、滅菌してもよい。固液分離
手段としては、圧搾、遠心分離、濾過等の方法を採用し
うる。

【００３２】例えば、上記圧搾操作は、通常５０〜２０
０ｋｇ／ｃｍ²の加圧下で１〜１０分間程度、好ましく
は８０〜１８０ｋｇ／ｃｍ²の加圧下で、３〜５分間程
度行われる。また、本発明では、このような圧搾操作
は、１回でもよく、同一または異なった圧力条件下に複
数回に分けて行うこともできる。

【００３３】例えば、２回に分けて上記細胞壁溶解生成
物含有液の圧搾操作を行う場合には、１回目は、５０〜
１００ｋｇ／ｃｍ²の加圧下で３〜５分間程度、好まし
くは６０〜８５ｋｇ／ｃｍ²の加圧下で、３〜５分間程
度行ない、２回目は、１００〜２００ｋｇ／ｃｍ²の加
圧下で１〜１０分間程度、好ましくは１５０〜１８０ｋ
ｇ／ｃｍ²の加圧下で、３〜５分間程度行なうこともで
きる。

【００３４】このように複数回に分けて段階的に昇圧す
るように加圧し、あるいは１回で圧搾する場合には、好
ましくは徐々に昇圧させると、細胞壁溶解生成物含有液
全体からほぼ均等に搾汁液を効率よく抽出することがで
きる。

【００３５】上記のようにして得られた搾汁液（抽出
液）には、β-グルカン、タンパク質、種々のアミノ酸
類、ビタミン類などが多量に含有されており、液中には
微小な浮遊物が残存することことがある。この微小な浮
遊物は、培地の分解物のほかに、酵素反応および加熱に
よって凝固した蛋白質および澱粉質である。この微小浮
遊物は、放置することにより沈澱させて分離するか、あ
るいは目の細かい濾布などを用いることにより分離する
ことができる。

【００３６】また、このようにして得られた分離液は、
必要に応じて、さらにセライト、メンブランフィルター
等を用いて、澄明にしてもよい。また、本発明において
は、このように酵素失活・滅菌して得られた分離液にさ
らにプロテアーゼ等のタンパク質分解酵素を作用させ
て、アミノ酸を生成させてもよい。

【００３７】このようにして得られた分離液には、抗腫
瘍効果を有し、担子菌類の細胞壁を分解しプロトプラス
トを生成させる際に生じた細胞壁分解物であり、抗腫瘍
効果を有するβ-グルカン、菌糸体代謝成分のグルコー
ス等と共に、免疫賦活作用、植物に対するホルモン作用
を有するサイトカイニン様物質などがバランス良く、高
濃度に含まれており、通常褐色澄明であり、この分離液
は、ドリンク剤、植物ホルモン剤、化粧品原料等への利
用が期待できる。

【００３８】

【発明の効果】本発明に係る菌糸体含有培地からの有用
成分の抽出方法によれば、菌糸体含有培地からの有用成
分を短時間に高収率で得ることができる。

【００３９】また上記の方法によれば、担子菌類の細胞
壁分解物であり、特に抗腫瘍効果に優れるβ-グルカン
などが高濃度で含まれており、また、菌糸体の代謝成分
であるグルコースなどと共に、免疫賦活作用、植物に対
するホルモン作用を有するサイトカイニン様物質なども
高濃度に含まれるものが得られており、しかもこれらの
成分はバランス良く含まれており、褐色澄明であり、ド
リンク剤、植物ホルモン剤、化粧品原料等への利用が期
待できる。

【００４０】

【実施例】以下、本発明について実施例に基づいてさら
に具体的に説明するが、本発明は、かかる実施例により
何等限定されるものではない。

【００４１】

【実施例１】バガス９０重量部、米糠１０重量部からな
る固体培地に純水を適度に含ませた後に、椎茸種菌を接
種し、温度および湿度を調節した培養室内に放置し、菌
糸体を増殖せしめた。菌糸体が固体培地に蔓延した後、
菌糸体が増殖した固体培地(i)を、１ｋｇ当たりを、β-
１，３−グルカナーゼを主成分とし、さらにキチナー
ゼ、セルラーゼを含有している酵素液(a)［酵素液中の
全酵素濃度０．０４重量％，そのうちで主成分のβ-
１，３−グルカナーゼ量：酵素総量中５０重量％］１リ
ットルに浸漬し、４０℃の温度に保持して、攪拌機を用
いて６０分間攪拌し、菌糸体細胞壁を溶解させた。

【００４２】次いで、得られた酵素処理物（細胞壁溶解
生成物含有液）を、固液分離装置の圧搾機を用いて固液
分離し、酵素処理抽出液（Ａ−１）１５００ｇを得た。
次いで、得られた酵素処理抽出液を加熱して、９０℃と
して３０分間放置した。このような９０℃への加熱によ
り、酵素を失活せしめ、かつ殺菌を施した。

【００４３】得られた殺菌処理抽出液を、さらに６０メ
ッシュ濾布を用いて濾過し、微小浮遊物を含有する抽出
液を、菌糸体が増殖した上記固体培地(i)１ｋｇ当たり
１４００ｍｌ（Ｂｒｉｘ濃度４．０重量％）得た。

【００４４】この抽出液では、水以外の成分中には蛋白
質（タンパク質部分分解物のアミノ酸を含む）、糖質、
ミネラル、β-グルカン等がそれぞれ含有されており、
菌糸体代謝成分と菌糸体の細胞壁分解物（β-グルカン
等）をバランス良く含有していることが分かった。

【００４５】このようにして得られた抽出液中に含まれ
る各種有効成分の量を表１に示す。一方固体残査として
は充分に細かく粉砕されたものが得られ、これを乾燥し
た後、牛などの家畜の飼料として提供した。

【００４６】

【実施例２】実施例１において、椎茸種菌に代えてエノ
キ茸種菌を用いた以外は実施例１と同様にして菌糸体を
培養し、攪拌機を用いて菌糸体細胞壁を溶解させた。

【００４７】次いで得られた酵素処理抽出液を固液分離
して酵素処理抽出液（Ａ−１）１３００ｍｌを得た。次
いで、得られた酵素処理液を加熱し、酵素失活させ、殺
菌処理して得られた殺菌処理抽出液を実施例１と同様に
して濾過し、微小浮遊物を含有する抽出液を、菌糸体が
増殖した上記固体培地(i)１ｋｇ当たり１１５０ｍｌ
（Ｂｒｉｘ濃度３．３重量％）得た。

【００４８】このようにして得られた抽出液では、菌糸
体代謝成分と菌糸体の細胞壁分解物（β-グルカン等）
をバランス良く含有していた。該抽出液中に含まれる各
種有効成分の量を表１に示す。

【００４９】一方固体残査は実施例１と同様にして家畜
の飼料として提供した。

【００５０】

【実施例３】実施例１において、椎茸種菌に代えて霊芝
種菌を用いた以外は実施例１と同様にして菌糸体を培養
し、攪拌機を用いて菌糸体細胞壁を溶解させた。

【００５１】次いで得られた酵素処理抽出液を固液分離
して酵素処理抽出液（Ａ−１）１４５０ｍｌを得た。次
いで、得られた酵素処理液を加熱し、酵素失活させ、殺
菌処理して得られた殺菌処理抽出液を実施例１と同様に
して濾過し、微小浮遊物を含有する抽出液を、菌糸体が
増殖した上記固体培地(i)１ｋｇ当たり１３００ｍｌ
（Ｂｒｉｘ濃度４．５重量％）得た。

【００５２】このようにして得られた抽出液では、菌糸
体代謝成分と菌糸体の細胞壁分解物（β-グルカン等）
をバランス良く含有していた。この抽出液中に含まれる
各種有効成分の量を表１に示す。

【００５３】一方固体残査は実施例１と同様にして家畜
の飼料として提供した。

【００５４】

【表１】

【００５５】

【比較例１】 （酵素擂潰法）実施例１で用いたと同様の固体培地１ｋ
ｇを解束し、この解束された培地にセルラーゼ、プロテ
アーゼ：各濃度０．０５％からなる酵素液３リットルを
加え、４０℃の温度に保持し、攪拌およびギヤポンプに
て擂潰しつつ循環させ、１時間反応させた。反応終了
後、７０℃の温度に昇温し、３０分間保持し、酵素を失
活させた。遠心分離により、固液分離したところ、Ｂｒ
ｉｘ濃度２．０重量％の抽出液が約２８００ｍｌ抽出さ
れた。

【００５６】

【比較例２】 （静置循環法）実施例１で用いたと同様の固体培地１ｋ
ｇを破砕した後、ろ布に充填し、水を５リットル加え、
５０℃の温度に保持し、ポンプにて液を循環し、１５時
間保持したのち固液分離したところ、Ｂｒｉｘ濃度０．
７重量％の抽出液が約４４００ｍｌ抽出された。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 35/84 Ａ６１Ｋ 35/84 Ａ (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C12P 1/02 A23L 1/28 C07G 17/00 C12N 1/06 A61K 35/84

Claims (4)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】バガスを基材とする固体培地上に担子菌類
   を接種し、次いで菌糸体を増殖して得られる菌糸体を含
   む固体培地を解束し、 解束された固体培地を、β-１，３−グルカナーゼを主
   成分とし、さらにキチナーゼ、セルラーゼを含有してい
   る酵素液(a)と３０〜６０℃の温度で１〜６５分間接触
   させて菌糸体細胞壁を溶解させ、 次いで、得られた細胞壁溶解生成物含有液を９５℃まで
   の温度に加熱し上記酵素類を失活させるとともに滅菌す
   ることを特徴とする菌糸体含有培地からの有用成分の抽
   出方法。
2. 【請求項２】固体培地１ｋｇに対して、濃度０．０１〜
   ０．１重量％の酵素液(a)を１００〜２０００ｍｌの量
   で作用させることを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. 【請求項３】上記解束された固体培地を、β-１，３−
   グルカナーゼを主成分とし、さらにキチナーゼ、セルラ
   ーゼを含有している酵素液(a)に浸漬させることによ
   り、解束された固体培地と上記酵素類との接触を行うこ
   とを特徴とする請求項１〜２の何れかに記載の方法。
4. 【請求項４】上記細胞壁溶解生成物含有液をさらに固液
   分離した後、得られた分離液を９５℃までの温度に加熱
   し上記酵素類を失活させるとともに滅菌することを特徴
   とする請求項１〜３の何れかに記載の方法。