JP2625302B2 - 培 地 - Google Patents
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Description
ー卵巣(CHO)細胞系を培養するための、生化学的に
定義された培地、およびその培地で増殖するよう適応さ
せた細胞に関する。
O)は、puck(J.Exp・Med.108,94
5,1958)により、メスのチャイニーズハムスター
からの卵巣生検から、最初に培養された。これらのオリ
ジナルの細胞から、多くの研究者は様々な欠陥を有する
多数の亜系(sud−lines)をクローン化した。
その一つであるCHO−Klはプロリン要求性であり、
ジハイドロフォレートリダクターゼ(dhfr)遺伝子
について2倍体である。この細胞系から、1つのdhf
r遺伝子での変異および続いて起こる他の遺伝子の滅亡
の結果としての、dhfr機能が失われたことに特徴の
あるdhfr−CHO細胞系(CHODUK Bll)
が開発された(PNAS 77 ,1980,4216
−4220)。これらの細胞は機能的にdhfr−であ
る。表現型としてdhfr−である他のCHO DUK
亜系も誘導されている。dhfr−であるCHO細胞
は、チミジン、ヒポキサンチン、または同等のヌクレオ
シドのようなヌクレオチド前駆体なしには増殖できな
い。
Mol.App.Gen.1981,1,165〜17
5)、ヒト組織型プラスミノーゲンアクチベーター(M
ol&Cell Biol.5,1750〜1759,
1985)、ヒト免疫(γ)インターフェロン(PNA
S 80、4654〜4658)、およびヒトβインタ
ーフェロン(Molecular and Cellu
lar Biology4,166〜172,198
4)を含む。様々なタンパク質が、そのようなCHO細
胞中で発現している。あるdhfr−CHO細胞系は、
生産物遺伝子およひdhfr+表現型のCHO形質転換
細胞の選別を可能にするdhfr遺伝子を、トランスフ
ェクトされる。選別は、チミジンおよびヒポキサンチン
のない媒地中でコロニーを培養することにより行われ、
それらがないことは形質転換されない細胞が増殖するの
を妨げる。形質転換細胞は、両方のトランスフェクトさ
れた遺伝子の共組込み(co−integrutio
n)のため、通常低レベルの生産物遺伝子を発現する。
生産物遺伝子の発現レベルは、メトトレキセートを用い
た増幅により増加する。この薬品は、dhfr酵素の直
接の阻害剤であり、そのdhfr遺伝子コピー数を十分
に拡大し、これらの条件下で生き残る耐性コロニーの分
離ができる。dhfrおよび生産物遺伝子は、もとの形
質転換細胞において、通常密接に結合しているので、通
常共存の増幅が存在し、所望の生産物遺伝子の発現を増
大させる。
/04462号に記載されているグルタミン シンテタ
ーゼ選択マーカー(すなわちGSシステム)により供給
される。GS酵素および所望の抗体遺伝子をコードする
遺伝子をうまくトランスフェクトされたCHO細胞は、
PCT公開番号87/04462号に記載されているよ
うに、グルタミンのない媒地でコロニーを培養し、メチ
オニン スルホキシミン(Msx)を添加して増幅させ
ることにより、選別することができる。
細胞系に生産物遺伝子と選択マーカー遺伝子をトランス
フェクトしたもの)は、血清を含む媒地中で通常増殖さ
せる。(文献:J.Mol.App.Gen.198
1,1,165〜175;Mol&Cell Bio
l.5, 1750〜1759、1985;PNAS8
0,4654〜4658;Molecular and
Gellular Biology4, 166〜1
72,1984)。他の哺乳動物の血清も用いられる
が、牛胎児血清(FBS)はおそらく哺乳動物の細胞培
養に最も広範囲に用いられる血清である。しかしながら
血清の使用は多くの問題を引き起こす。血清は、商業的
生産に必要な量を容易に入手できない高価な商品であ
る。それはまた生化学的にはっきりわかっていない材料
である。血清は、アルブミンやトランフェリンを含む多
くの主成分と、その多くが十分に確認されておらずその
作用が測定されていない少量成分を含むことが知られて
おり、かくて血清はバッチごとに異り、様々な成分のレ
ベルおよびそれらの細胞に及ぼす影響を決めるために試
験する必要がある。しばしば血清はウイルスやマイコブ
ラズマのような微生物で汚染され、その多くは無害であ
るが、付加的な未知の要因を加える。この問題は近年B
ovine Spongiform Encephal
opathy(BSE)の発生により深刻になってい
る。スクリーニングの改良にもかかわらず、取締当局は
(BSE)感染のない地域からの牛生産物の出所を要求
する傾向がある。
と非常に長い精製工程を必要とし、特に牛血清アルブミ
ン(BSA)中の牛の抗体の存在は組換えCHO細胞系
により発現される所望の抗体の精製を非常に困難にす
る。使用に先立って媒地から牛の抗体を除去することは
可能であるが、このことおよび必要とされる付加的な生
産物の試験が、生産物の全体の生産コストに大いに加わ
る。したがって動物成分がなく、細胞、特にCHO細胞
の増殖を支援する培地を探索する多くの研究が行われて
いる。不幸なことにそのような培地の供給に伴う問題そ
のものが無数にある。CHO細胞は血清のない状態では
容易に増殖しない。さらに血清を除くと細胞保護と解毒
活性を与える成分をも除去することになる。
CHO Kl細胞の培養に用いるため、Mendiaz
等により記載されている(In Vitro Cell
ular & Development Biolog
y22巻2号1986)。この培地は“HamのF1
2”として知られているHam(Microbiolo
gy53,1965,288〜293)により開発され
た培地の改変である。他の培地の例は、例えばEPA3
90327号およびEP325190号に開示されてい
るようにHamのF12をベースにしている。これらの
培地は血清代替物としてトランフェリンを含むが、トラ
ンスフェリンは動物源に由来し、したがって生成した媒
地は血清の使用に伴う汚染問題を克服していない。
ずるさらなる問題は、組換えCHO細胞が増殖し生産物
を発現可能にするのを支援するという問題である。血清
を補わないHamのF12をベースにした培地は通常十
分な増殖と発現を支援するのに十分栄養に富んでいな
い。
濁液中で生育させるのが困難である。その細胞を用いた
時、懸濁液中での増殖を達成し、抗体のような生産物を
発現することが非常に望ましい。商業的なスケールでの
生物的タンパク質の生産のためには、1リットルのガラ
ス容器から、数千リットルのステンレススチールタンク
までの範囲のファーメンター中での増殖を支援できるこ
とが望ましい。適切な培地は、ブレードインペラーまた
はタービン、およびスパージング(すなわち空気、酸素
および炭酸ガスを泡の形で培地に供給する)の影響から
のせん断応力に対して細胞を支援できなければならな
い。
ず、生化学的に明確な培地であって、CHO細胞をよく
増殖させ、細胞生産物をよく発現させる培地を提供する
ことを目的とする。本発明はまた、そのような培地で生
育するよう順応させたCHO細胞を提供することをも目
的とする。
物源から分離したタンパク質、脂質および炭水化物を本
質的に含まず、水、浸透圧調節剤、緩衝剤、エネルギー
源、L−グルタミンを含むアミノ酸類、無機また組換え
た鉄源、細換えまたは合成の成長因子、並びに任意的に
非鉄金属イオン、ビタミン類、および補因子類を含む、
工学的に作り出されたCHO細胞を培養するための、生
化学的に定義された培地を提供する。
換えたものであり、動物源から直接得られるものではな
い。いくつかの成分は植物または細菌源から得られる。
組換成分は、その成分を作るのに用いられる細胞へ継代
する親の組織からの汚染の危険を最小限にするために非
常に純粋な状態の下で製造する。さらなる精製工程を、
細胞タンパク質を除去するために用いる。かくて動物源
から分離したタンパク質、脂質および炭水化物をすべ
て、本質的に含まない培地を達成できる。本発明の好ま
しい培地は、動物源から分離したタンパク質、脂質、お
よび炭水化物を含まない。
に、好ましくは290〜350mOsmの範囲に維持す
るのが有利である。浸透圧調節剤は通常塩である。培地
に用いる塩にはNaCl,KCl,KNO3がある。
7.5の範囲に、最も好ましくはpH7.0付近に維持
する。培地に用いる緩衝剤は、NaHCO3のような炭
酸塩類、CaCl2 2H2 O,MgSO4 7H2
O,NaH2 PO4 2H2 Oのような塩化物
類、硫酸塩類、リン酸塩類、またはピルビン酸ナトリウ
ムを含む。そのような緩衝剤は通常50〜500mg/
リットル存在させる。HEPESとしても知られている
N−〔2−ヒドロキシエチル〕ピペラジン−N′−〔2
−エタンスルホン酸〕およびMOPSとして知られてい
る3−〔N−モルホリノ〕−プロパンスルホン酸のよう
な他の緩衝剤は通常1000〜10,000mg/リッ
トル存在する。
0〜10,000mg/リットル存在し、好ましくはマ
ンノース、フラクトース、ガラクトースまたはマルトー
スの如き単糖類であり、最も好ましくはグルコース、特
にD−グルコースである。
マグネシウム、銅および亜鉛、またナトリウム、カリウ
ム、およびセレニウムがある。イオンは通常、塩化物、
硫酸塩のような塩の形で培地に加える。量は表1に示す
ISCOVES培地での量と典型的には同じであるが、
明らかに変化させてもよい。
素補因子ビタミン類(補因子)には、0.01〜0.5
mg/リットルのビタミンB6(ピリドキシン)、ビタ
ミンB12(シアノコバラミン)およびビタミンK(ビ
オチン)、10〜30mg/リットルのビタミンC(ア
スコルビン酸)、0.1〜1.0mg/リットルのビタ
ミンB2(リボフラビン)、並びに0.2〜8.0mg
/リットルのビタミンB1(チアミン)、ニコチンアミ
ド、ビタミンB5(Dカルシウムペントテネート)、葉
酸、i−イノシトールがある。
酸、オレイン酸、ホスファチジルコリン、またはメチル
リネオレエートのような脂質因子を、通常0.05〜
10mg/リットル含ませることが好ましい。エタノー
ルアミンの如きアルコールアミンのような脂質生産に含
まれる化合物も加えてよい。
アミノ酸類を含有させることが好ましい。アミノ酸 好ましいmg/リットル L−アラニン 20− 50 L−アルギニン(HCl) 50−100 L−アスパラギン(H2 O) 20− 50 L−アスパラギン酸 20− 50 L−シスチン(二ナトリウム塩) 50−100 L−グルタミン酸 50−100 L−グルタミン 400−600 グリシン 20− 50 L−ヒスチジン(HCl.H2 O) 30− 60 L−イソロイシン 50−150 L−ロイシン 50−150 L−リシン(HCl) 100−200 L−メチオニン 20− 50 L−フェニルアラニン 40− 80 L−プロリン 30− 60 L−セリン 30− 60 L−スレオニン 50−120 L−トリプトファン 10− 20 L−チロシン(二ナトリウム塩) 50−120 L−バリン 80−120 かっこ内の形が好ましい。
る。通常含まれる量は各アミノ酸によって変るが、一般
的には10〜150mg/mlの範囲である。しかしL
−グルタミン酸は一般に高濃度で、好ましくは400〜
600mg/ml存在する。
リウム塩を、例えば5〜50mg/リットル、培地に含
ませることは有益である。
ースとしての、好ましい量の水、浸透圧調節剤、緩衝
剤、エネルギー源、アミノ酸類、非鉄金属イオン、ビタ
ミン類、および補因子を提供する培地の一例である。こ
の培地はヒポキサンチンまたはチミジンを含有せず、G
IBCO(株)、ユニット4、カウリーミルTd,Es
t,ユックスブリッジUB82YGから、商業的に入手
できる。それは公表された培地(Iscoves an
d Melcher(1978)、J.Exp.Me
d,1,47,923)に似ているが、牛血清アルブミ
ン、純粋なヒトのトランスフェリンまたは大豆レシチン
を含まない。
変(1978),J.Exp・Med.1, 47,9
23.
性効果の可能性を最小限にするのを助けるため、セレニ
ウム(任意的にソジウムセレナイトの形で)通常0.0
1〜0.2mg/リットル、またはL−アスコルビン酸
を20〜50mg/リットル、培地に加えるのが好まし
い。さらにクエン酸またはエチレンジアミンテトラ酢酸
(EDTA)のようなキレート剤、またはα−トセフェ
ロール(ビタミンE)のようなフリーラジカル捕捉剤を
使用することは、フリーラジカルによる損傷を少くする
のに有益である。
またはストレプトマイシンのような抗生物質を、細菌汚
染を防止するため培地に加えてもよい。これらは通常1
0,000〜100,000Iu/リットル含まれる。
または組換えのものであり、インスリンを含む。血小板
由来生長因子(PDFG)、チロキシンT3,スロンビ
ン、1L2および1L6の如きインターロイキン類、プ
ロゲステロン、ハイドロコーチゾン、およびビタミンE
のような他の因子を含ませてもよい。葉酸経路に含まれ
る葉酸、ビタミンB6およびビタミンB12を細胞の増
殖を促進するために加えてもよい。
ヌセリン(Eli Lillyの商標)のようなその類
似物を含む)は組換えDNAの技術により有利に得られ
るが、動物源からは分離されない。それは培地に5μg
/リットル加えるのが好ましい。ヌセリンは本発明に用
いるための、インスリンの好ましい形態である。
しくは無機のものであり、0.25〜5mg/リットル
存在する。例としてはクエン酸第二鉄または硫酸第一鉄
のような第二および第一鉄塩がある。クエン酸第二鉄お
よびクエン酸第二鉄アンモニウムのようなキレート性塩
が好ましい。しかし、動物源から分離されない任意の鉄
源、例えば化学的鉄キレート化剤または組換えタンパク
質鉄担体、を使用してもよい。
パーオキサイドおよびフリーラジカルを発生するのを助
け、それらは細胞自体ばかりでなく、媒地成分や所望の
最終生産物に損傷を与えるので、その濃度は注意深く調
節すべきである。
増殖を支援するためにいくつかのCHO細胞系により必
要とされることが知られている、プトレシンのような化
合物を、有利にはHClのような塩として、媒地に加え
ることも好ましい。プトレシンまたはその塩は好ましく
は0.01〜1.0mg/リットル加える。
地はヒポキサンチンまたはチミジンを含有する。これは
dhfr選択に置かれた選択圧力と、以前に開示された
増殖システムを迂回する。その結果は生産物を指定する
遺伝性物質とdhfr遺伝子の損失である。それ故、本
発明の他の側面においては、本質的にヒポキサンおよび
/またはチミジンを含まない、本発明の工学的に作りだ
されたdhfr−CHO細胞の増殖用の培地を提供す
る。
し、dhfr系に対しメトトレキセートのような適当な
薬剤を通常0.1〜5.0μM(またはGSシステムに
対しMSX)を補うと、十分な選択圧力が細胞に及ぼさ
れる。dhfrシステムの選択を迂回するのには不十分
な濃度のヒポキサンチンおよびチミジンが培地中に存在
してもよいことは理解されるが、これら2つのヌクレオ
チド前駆体が存在することは本発明の使用には好ましく
ない。
乳動物の細胞は、容器をガスでスパージンクし、インペ
ラーで攪拌することにより生ずるせん断応力の影響を受
けやすい。細胞の損傷の発生を最小限にするために、培
地にポリエチレングリコール、ポリピニルアルコール
類、またはプルロニックポリオール類のような細胞保護
剤を含有させるのが有益である。これらの中でプルロニ
ック(BASF Wyandotte(株)の商標)ポ
リオールF68が、ポリビニルアルコールと異り無毒性
の物質であり、ポリエチレングリコールと異り後の精製
を妨害しないので、好ましい。
トリプトン、カゼイン加水分解物、酵母抽出物、または
好ましくはパパイン消化ソヤペプトンのような、ペプチ
ド消化物、加水分解物または抽出物を培地に補うことに
よって得られるかもしれない。好ましい量は1〜0.0
25%(重量/容量)、最も好ましくは0.25%(重
量/容量)である。
の培地は、小スケールおよび大スケールのファーメンタ
ー、静置培養および/またはスピンナー中の懸濁液にお
ける増殖と、そのような細胞からの生産物の分泌を支援
することができる。本発明の培地はまた、高細胞濃度
の、すなわち1×105細胞/ml以上で、1.5×1
06細胞/mlまでまたは以上、増殖、および30mg
/リットル〜150mg/リットル以上の生産物分泌を
支援することができる。本発明の培地はまた、6か月ま
でまたはそれ以上続く多数回の継代にわたって、増殖と
生産物分泌を支援することもできる。
ての型の抗体の生産用に好ましい。したがって本発明
は、HおよびL鎖のアミノ酸配列が、ヒトのリンパ細胞
によりインビホであるいはハイブリドーマによりインビ
トロで作られる抗体のこれらの配列と一致する、ヒトの
抗体の生産を含む。またHおよびL鎖は天然の抗体に一
致するが、天然に起らない方法で結合しているハイブリ
ッド抗体をも提供する。例えば二特異性の抗体は一以上
の抗体に特異的な抗原結合部位を有する。抗体の定常領
域は抗原結合部位の一つまたは他と関係し、あるいは別
の抗体からのものである。改変された抗体、例えばキメ
ラ抗体は、一つの抗体からの可変領域と他の抗体からの
定常領域を有する。このようにしてキメラ抗体は種/種
のキメラ、またはクラス/クラスのキメラでありうる。
そのようなキメラ抗体は、抗原結合能を改良し、あるい
はエフエクター機能を変えるため、一以上のさらなる改
変を有するかも知れない。人体適応化またはCDRグラ
フト抗体(EP239400号)は本発明に包含され
る。特にカンパス1H(EP328404号(カンパス
はWellcome Foundationの商標であ
る)も複合の抗体であり、CDRsに加えて超可変領域
の一部もヒトのフレームワークに移される。そのような
抗体のフレームワークまたは定常領域中の他のアミノ酸
も変えられるかも知れない。本発明はさらに、Hおよび
L鎖のYブランチ部分とほぼ同等なFabフラグメント
の製造を含む。これは不完全なフラグメントまたはFc
領域の一部分を含むフラグメントを含む。
地中で増殖するよう適応させた工学的に作り出されたC
HO細胞を提供する。特にCHO細胞が、組織プラスミ
ノーゲンアクティベーターまたは上に定義した抗体のよ
うなタンパク質を発現するよう作り出された。特に本発
明は、生物的に活性なタンパク質をコードする遺伝子お
よびdhfr選択マーカー遺伝子をトランスフェクト
し、本発明の培地で増殖するよう適応させたdhfr−
CHO細胞系を提供する。
澱を避けるため、鉄源および、使用する場合にはチロシ
ンは最後に加えるのが望ましい。
シチンを除いたDMEMのIscoves改変) + 5ml/リットル 200mM Lグルタミン + 50mg/リットル Lプロリン + 50mg/リットル Lスレオニン + 50mg/リットル Lメチオニン + 50mg/リットル Lシステイン + 50mg/リットル Lチロシン + 25mg.リットル アスコルビン酸 + 0.062mg.リットル ビタミンB6 + 1.36mg.リットル ビタミンB12 + 0.2mg/リットル リポ酸 + 0.088mg/リットル リノレン酸メチル + 1μM メトトレキセート + 1 mg/リットル FeSO4 + 1 mg/リットル ZnSO4 + 0.0025mg/リットル CuSO4 + 5 mg/リットル 組換えインスリン(ヌセリン) + 50,000Iu/リットル ポリミキシン + 20,000Iu/リットル ネオマイシン + 0.16mg/リットル プトレシン−2HCL.
する、ヒポキサンチン、チミジン、またはフォリン酸を
含有しない。この培地は単独で選択を迂回するグリシン
を含まない。したがってこの培地はメトトレキセート低
抗性のための完全な選択を保持する。
除いたDMEMのIscoves改変) + 5ml/リットル 200mM Lグルタミン + 50mg/リットル Lプロリン + 50mg/リットル Lスレオニン + 50mg/リットル Lメチオニン + 50mg/リットル Lシステイン + 50mg/リットル Lチロシン + 25mg/リットル Lアスコルビン酸 + 0.062mg.リットル ビタミンB6 + 1.36mg.リットル ビタミンB12 + 2 mg/リットル クエン酸第二鉄 + 1 mg/リットル 硫酸亜鉛 + 0.0025mg.リットル 硫酸銅 + 50,000IU/リットル ポリミキシン + 20,000IU/リットル ネオマイシン + 3μl/リットル エタノールアミン + 0.16mg/リットル プトレシン + 5 mg/リットル 組換えインスリン(ヌセリン)
生産 CIH 3DII*は遺伝子的に作り出したCHO D
UK BII細胞(VrlaubおよびChasin
(1980)PNAS77,7 pp 4216〜42
20)である。CHO DUK BII細胞はジヒドロ
フォレート レダクターゼ(dhfr)を生産すること
ができない。この細胞を、HおよびL鎖およびマウスの
dhfrを発現するプラスミド コンストラクトを用い
て、人体適応化IgG抗体、カンパス1H(Winte
r等、Nature,1988、322、323〜32
7)を生産するよう作り出した。発現は葉酸拮抗剤メト
トレートを用いて増幅し維持した。Iscoves+1
0%FBSフロー、非必須アミノ酸、10−6Mメトト
レキセートおよび抗生物質中で単層として増殖したCI
H 3DII*細胞は90%集密的であった。これらの
細胞をトリプシン/ベルセンによりプラスチックから除
去し、補充しないIscoves媒地で洗浄し、遠心分
離し、メトトレキセート(MTX)を含まない、WCM
4媒地+0.25%ペプトン+0.1%ポリエチレング
リコール(PEG)10,000+0.5%牛胎児血清
(FBS)中に5×104/mlで再懸濁させた。細胞
懸濁液+ヒポキサンチン(H)、チミジン(T)、また
はHTの10mlを入れた、3個の25cm2フラスコ
を準備した。これらのフラスコを36.5℃で5%CO
2インキュベーター中で培養した。
はPEGを含まない等体積のWCM4+MTXに加え、
75cm2フラスコに移した。
0rpmでスピンする500mlテヒナースピンナーに
接種するのに用いた。細胞は5か月以上の期間、血清な
しで増殖を続け、細胞は適応期間を必要とすることがわ
かったが、増殖速度と生存率は着実に改良された。集団
倍加時間は、約7週間にわたって73.1時間であると
計算された。これは次の20日にわたって47.4時間
に減少し、次に安定化した。抗体の分泌は60μg/m
l以上のレベルで高く維持された。これらの細胞中の遺
伝子コピー数は、ノーサンブロット分析を用いたバンド
強度によると減少しなかった。
g/ml以上の抗体を生産し、100μg/ml以上の
レベルに達した。その細胞をCIH 3DII*44と
表示する。
3DII*の増殖と生産 2か月にわたって血清なしで増殖していた実施例3のC
IH 3DII*44細胞を、70rpmで回転するス
テンレススチールの曲がったバドルを有するSGiの1
リットルのファーメンターに移した。温度を37℃に、
dO2を10%に、pHコントロールを7〜7.2にセ
ットした。ファーメンターに0日目に、0.1%のポリ
エチレングリコール(PEG)10,000および0.
25%のソイペプトンを含むWCM4(実施例1)中に
0.22×106細胞/ml接種し酸素ガスを頂部に供
給した。細胞は新鮮な培地を用いてルーティンに培養
し、スプリット比は典型的には1対2および1対4の間
であった。
大きい物理的損傷を起こすと予期される深部スパージン
グに切り換えた。
5(実施例2)をペプトンおよびPEGと共に用いた。
クF68に置換した。生じた増殖および抗体のレベルを
添付図面(図1および2)に示すが、ファーメンター中
で100μg/ml以上の抗体をタンパク質なしで生産
できる本発明の能力を示している。
清を含有する培地中で生育したCHO AJ19 MC
BIとの比較 CHO DUK細胞から誘導するチャイニーズハムスタ
ー卵巣細胞、CHOAJ19 MCBI(Vrlaub
およびChasin PNAS,77,7,pp 42
16〜4220,1980)を、メトトレキセート選択
下にtPAを生産するよう遺伝子的に作り出した。この
細胞系は、RPMI 1640培地(GIBCO)、
2.5%酸加水分解成牛血清(Imperial)、
0.5%トリプトン、50IV/mlポリマイシン、2
0IV/mlネオマイシン、500nMメトトレキセー
ト(MTX)よりなる正常増殖培地を用いて、懸濁培養
としてファーメンター中でルーティンに増殖させてあっ
た。
た。 46B 0.25%(重量/体積)ソイペプトン(Sigma P 1265 )、0.1%(重量/体積)ポリエチレングリコール(PEG)20 ,000(Serva Carbowax 20M)、1μm MT X 46C 0.25%(重量/体積)イーストエクストラクト(Sigma Y O500)、0.1%(重量/体積)PEG20,000、1μM MTX この培地ではCM4中のIscoves′をRPMl 1640培地 (ICN FIOW)で置き換えた。 46D 0.25%(重量/体積)イーストエクストラクト、0.1%(重量 /体積)PEG20,000、1μM MTX 46E 0.25%(重量/体積)イーストエクストラクト、0.1%(重量 /体積)PEG20,000、0.25%牛胎児血清(Imperi al)、1μM MTX
PEGは水(Wellcome媒地製造ユニット)で1
0%(重量/体積)として調製し、0.2μmの使い捨
てフィルター(Gelman、Supor Vac)で
濾過し、次に使用のために希釈した。細胞を5%のCO
2を含有する調湿したインキュベーター中で37℃で培
養した。
g、+4℃での5分間の遠心分離によりペレット化し、
補充物のないRPMI l640中で洗浄し、再びペレ
ット化した。その細胞を、正常増殖培地(46A)およ
び他の培地(46B、46C、46Dまたは46E)中
で、105細胞/mlに再懸濁した。24ウェルプレー
ト(Costar 16mmウェル)に1ml/ウェ
ル、接種し、5%CO2を有するインキュベート中で3
7℃で培養した。3、4、5および6日目に、それぞれ
の一つのウェルを血球計数器およびトリパンブルー排除
を用いて細胞数を算えた。それぞれのさらに二つのウェ
ルを収穫し、プールし、1200g、+4℃、5分でペ
レットにした。上清液を分離し、−20℃で貯蔵した。
これらの試料を次にtPAに関し分析した。6日目には
46Aおよび46Dからの試料のみを収穫した。
るポリクローナル抗体への結合を用いるtPA抗原濃度
を測定するQA確証ELISA分析、およびtPA活性
をIU/mlで測定する血餅溶解(clot lysi
s)を用いて、試験した。これらの結果(表2)から、
比活性を計算した。
活性の変化はない。タンパク質を含まない媒地B、C、
およびDからのtPAの収量は、グループAおよびEの
標準増殖培地からのtPAの収量にほぼ等しい。
MCBIを、実施例5のようにしてペレットにし洗浄
し、500mlの媒地46B中に7×104/mlで再
懸濁させた。様々な時間間隔で細胞の数を算え、同じ媒
地を用いて二次培養した。試料をtPA分析のために取
り、実施例5のように処理した。
4中で増殖した様々な継代レベルからの上清の比活性
を、ELISAおよび血餅溶解を組み合わせて測定し
た。異った細胞継代の比活性を表3に要約する。
比に基づくと、一つの細胞は分裂して3.77×108
の細胞になった。これは倍加時間36時間の31.8集
団倍価に相当する
本発明の血清を含有しない培地が、血清含有培地で達成
されるのと比較できる細胞増殖とtPA収量を支援する
ことができることを示す。
た、1リットルファーメンター中でのWCM5(タンパ
ク質を含まない培地)中でのCIH 3DII*44の
増殖を示す。
した、1リットルファーメンター中でのWCM5中での
CIH 3DII*44細胞からの抗体生産を示す。
Claims (13)
- 【請求項1】 生物学的に活性な蛋白質をコードする遺
伝子及びdhfr選択マーカー遺伝子で形質転換された
dhfr−CHOセルラインを培養するための生化学的
に定義された培地であって、 本質的にヒポキサンチンおよびチミジンを含まず、 動物源から分離したタンパク質、脂肪および炭水化物を
本質的に含まず、水、浸透圧調節剤、緩衝剤、エネルギ
ー源、L−グルタミンを含むアミノ酸類、無機または組
換え鉄源、組換えまたは合成の成長因子、並びに必要に
より非鉄金属イオン、ビタミン類、および補因子類を含
む、上記培地。 - 【請求項2】 浸透圧調節剤が培地を200〜350m
Osmに維持する、請求項1に記載の培地。 - 【請求項3】 緩衝剤が培地をpH域6.5〜7.5に
維持する、請求項1に記載の培地。 - 【請求項4】 エネルギー源が1,000〜10,00
0mg/リットル存在する、請求項1に記載の培地。 - 【請求項5】 エネルギー源が単糖類である、請求項4
に記載の培地。 - 【請求項6】 アミノ酸類が、L−アラニン、L−アル
ギニン、L−アスパラギン、L−アスパラギン酸、L−
シスチン、L−グルタミン酸、グリシン、L−ヒスチジ
ン、L−イソロイシン、L−ロイシン、L−リシン、L
−メチオニン、L−フェニルアラニン、L−プロリン、
L−セリン、L−スレオニン、L−トリプトファン、L
−チロシン、L−バリンから選択される1以上のもので
ある、請求項1に記載の培地。 - 【請求項7】 L−グルタミンが400〜600mg/
リットル存在する、請求項1に記載の培地。 - 【請求項8】 培地がさらに脂質因子を0.05〜10
mg/リットル含む、請求項1に記載の培地。 - 【請求項9】 鉄源が0.25〜5mg/リットルの無
機第二または第一鉄塩である、請求項1から8のいずれ
かに記載の培地。 - 【請求項10】 生長因子を、インシュリン、PDG
F、チロキシンT3、スロンビン、インターロイキン、
ブロゲステロン、ハイドロコーチゾン、およびビタミン
Eから選択する、請求項1から9のいずれかに記載の培
地。 - 【請求項11】 生長因子がヌセリンである、請求項1
0に記載の培地。 - 【請求項12】 ペプチド消化物、加水分解物または抽
出物を含む、請求項1から11のいずれかに記載の培
地。 - 【請求項13】 メトトレキセートを含む、請求項1か
ら12のいずれかに記載の培地。
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US5292655A (en) * | 1990-01-29 | 1994-03-08 | Wille Jr John J | Method for the formation of a histologically-complete skin substitute |
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JPH0789908B2 (ja) * | 1991-02-28 | 1995-10-04 | 倉敷紡績株式会社 | 動物細胞培養用無血清培地 |
DE4115722A1 (de) * | 1991-05-14 | 1992-11-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | Serumfreies medium zur kultivierung von saeugerzellen |
GB9118664D0 (en) * | 1991-08-30 | 1991-10-16 | Celltech Ltd | Cell culture |
US6352707B1 (en) | 1992-02-24 | 2002-03-05 | Anton-Lewis Usala | Transplant encapsulation in a hydrogel matrix to obscure immune recognition |
US6231881B1 (en) | 1992-02-24 | 2001-05-15 | Anton-Lewis Usala | Medium and matrix for long-term proliferation of cells |
IL102929A (en) * | 1992-08-24 | 1996-11-14 | Interpharm Lab Ltd | Serum-free medium for mammalian cells |
DE4313620A1 (de) * | 1993-04-26 | 1994-10-27 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Hamsterzellinien und Verfahren zur Glykoproteingewinnung |
USH1532H (en) * | 1993-11-03 | 1996-05-07 | Genetics Institute, Inc. | Adaption of mammalian cell lines to high cell densities |
EP0653487A1 (de) * | 1993-11-07 | 1995-05-17 | Ferruccio Dr. Messi | Serum- und proteinfrei wachsende Zellen |
US5856179A (en) | 1994-03-10 | 1999-01-05 | Genentech, Inc. | Polypeptide production in animal cell culture |
US5512477A (en) * | 1994-04-21 | 1996-04-30 | Genzyme Corporation | Serum-free medium supplement |
US5756341A (en) * | 1994-11-10 | 1998-05-26 | Immuno Ag | Method for controlling the infectivity of viruses |
US5753489A (en) * | 1994-11-10 | 1998-05-19 | Immuno Ag | Method for producing viruses and vaccines in serum-free culture |
US5698433A (en) * | 1994-11-10 | 1997-12-16 | Immuno Ag | Method for producing influenza virus and vaccine |
US6146873A (en) * | 1994-11-10 | 2000-11-14 | Baxter Aktiengesellschaft | Production of orthomyxoviruses in monkey kidney cells using protein-free media |
US5721121A (en) * | 1995-06-06 | 1998-02-24 | Genentech, Inc. | Mammalian cell culture process for producing a tumor necrosis factor receptor immunoglobulin chimeric protein |
US6656466B1 (en) | 1995-06-06 | 2003-12-02 | Genetech, Inc. | Human tumor necrosis factor—immunoglobulin(TNFR1-IgG1) chimera composition |
US5705364A (en) * | 1995-06-06 | 1998-01-06 | Genentech, Inc. | Mammalian cell culture process |
EP0891419A4 (en) * | 1996-03-12 | 2000-03-01 | Life Technologies Inc | NUTRIENT ADDITIVE FOR HEMATOPOETIC CELL CULTURES |
AU2662697A (en) * | 1996-04-09 | 1997-10-29 | Board Of Trustees Of Southern Illinois University, The | A cultural medium for maintaining neural cells in ambient atmosphere |
EP0953041A4 (en) | 1996-08-30 | 2003-01-29 | Life Technologies Inc | SERUM-FREE CULTURAL MEDIUM FOR MAMMAL CELLS AND THEIR USE |
US20040171152A1 (en) * | 1996-10-10 | 2004-09-02 | Invitrogen Corporation | Animal cell culture media comprising non-animal or plant-derived nutrients |
AU4751697A (en) * | 1996-10-10 | 1998-05-05 | Douglas Danner | Animal cell culture media comprising plant-derived nutrients |
US6692961B1 (en) * | 1996-10-11 | 2004-02-17 | Invitrogen Corporation | Defined systems for epithelial cell culture and use thereof |
US20020012991A1 (en) * | 1997-04-07 | 2002-01-31 | Florence Chua Nee Ho Kit Fong | Cell culture media for enhanced protein production |
US6475725B1 (en) | 1997-06-20 | 2002-11-05 | Baxter Aktiengesellschaft | Recombinant cell clones having increased stability and methods of making and using the same |
US6566118B1 (en) * | 1997-09-05 | 2003-05-20 | Targeted Genetics Corporation | Methods for generating high titer helper-free preparations of released recombinant AAV vectors |
US6995006B2 (en) | 1997-09-05 | 2006-02-07 | Targeted Genetics Corporation | Methods for generating high titer helper-free preparations of released recombinant AAV vectors |
WO1999057246A1 (en) * | 1998-05-01 | 1999-11-11 | Life Technologies, Inc. | Animal cell culture media comprising non-animal or plant-derived nutrients |
US6528286B1 (en) * | 1998-05-29 | 2003-03-04 | Genentech, Inc. | Mammalian cell culture process for producing glycoproteins |
US6406909B1 (en) * | 1998-07-10 | 2002-06-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Serum-free medium for culturing animal cells |
US7294481B1 (en) * | 1999-01-05 | 2007-11-13 | Immunex Corporation | Method for producing recombinant proteins |
ES2568899T3 (es) | 1999-04-09 | 2016-05-05 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Procedimiento para controlar la actividad de una molécula inmunofuncional |
US20060286668A1 (en) * | 1999-04-30 | 2006-12-21 | Invitrogen Corporation | Animal-cell culture media comprising non-animal or plant-derived nutrients |
AT409379B (de) * | 1999-06-02 | 2002-07-25 | Baxter Ag | Medium zur protein- und serumfreien kultivierung von zellen |
PE20010288A1 (es) | 1999-07-02 | 2001-03-07 | Hoffmann La Roche | Derivados de eritropoyetina |
AU780810B2 (en) * | 1999-08-05 | 2005-04-21 | Baxalta GmbH | Recombinant stable cell clone, its production and use thereof |
JP4668498B2 (ja) * | 1999-10-19 | 2011-04-13 | 協和発酵キリン株式会社 | ポリペプチドの製造方法 |
KR20010056451A (ko) * | 1999-12-15 | 2001-07-04 | 윤재승 | 아르기닌이 강화된 동물세포 배양용 배지 조성물 |
US6811776B2 (en) | 2000-12-27 | 2004-11-02 | The Regents Of The University Of Michigan | Process for ex vivo formation of mammalian bone and uses thereof |
US20020099183A1 (en) * | 2000-08-23 | 2002-07-25 | Pluschkell Stefanie Beate | Process for the preparation of neutrophil inhibitory factor |
WO2002016584A2 (en) * | 2000-08-23 | 2002-02-28 | Pfizer Products Inc. | Process for the preparation of neutrophil inhibitory factor |
US6946292B2 (en) | 2000-10-06 | 2005-09-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity |
CA2431964C (en) | 2000-12-20 | 2013-09-10 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Conjugates of erythropoietin (pep) with polyethylene glycol (peg) |
US6506576B2 (en) | 2001-03-14 | 2003-01-14 | Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Serum-and steroid-free culture media for cerebellar granule neurons |
EP1453948A2 (en) * | 2001-11-28 | 2004-09-08 | Sandoz Gmbh | Cell culture process |
US20070148171A1 (en) * | 2002-09-27 | 2007-06-28 | Xencor, Inc. | Optimized anti-CD30 antibodies |
US7317091B2 (en) | 2002-03-01 | 2008-01-08 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
US8188231B2 (en) | 2002-09-27 | 2012-05-29 | Xencor, Inc. | Optimized FC variants |
US20080260731A1 (en) * | 2002-03-01 | 2008-10-23 | Bernett Matthew J | Optimized antibodies that target cd19 |
US20080254027A1 (en) * | 2002-03-01 | 2008-10-16 | Bernett Matthew J | Optimized CD5 antibodies and methods of using the same |
US20040132101A1 (en) | 2002-09-27 | 2004-07-08 | Xencor | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US8093357B2 (en) * | 2002-03-01 | 2012-01-10 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants and methods for their generation |
JPWO2003084569A1 (ja) | 2002-04-09 | 2005-08-11 | 協和醗酵工業株式会社 | 抗体組成物含有医薬 |
EP1520008B1 (en) | 2002-07-09 | 2012-09-05 | Baxter International Inc. | Animal protein free media for cultivation of cells |
US7067279B1 (en) * | 2002-08-23 | 2006-06-27 | Immunex Corporation | Cell culture performance with betaine |
US20060235208A1 (en) * | 2002-09-27 | 2006-10-19 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized properties |
AU2003274011B2 (en) | 2002-10-15 | 2010-03-04 | Intercell Ag | Nucleic acids coding for adhesion factor of group B streptococcus, adhesion factors of group B streptococcus and further uses thereof |
DE10255508A1 (de) * | 2002-11-27 | 2004-06-17 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Verfahren zur Kultivierung von Zellen zur Produktion von Substanzen |
AU2003303394B2 (en) † | 2002-12-23 | 2009-02-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Product quality enhancement in mammalian cell culture processes for protein production |
US8084582B2 (en) | 2003-03-03 | 2011-12-27 | Xencor, Inc. | Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants |
US20090010920A1 (en) | 2003-03-03 | 2009-01-08 | Xencor, Inc. | Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb |
US8388955B2 (en) * | 2003-03-03 | 2013-03-05 | Xencor, Inc. | Fc variants |
US20070275460A1 (en) * | 2003-03-03 | 2007-11-29 | Xencor.Inc. | Fc Variants With Optimized Fc Receptor Binding Properties |
GB0304799D0 (en) | 2003-03-03 | 2003-04-09 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Novel method |
EP1622941A2 (en) * | 2003-03-20 | 2006-02-08 | ImClone Systems Incorporated | Method of producing an antibody to epidermal growth factor receptor |
US9051373B2 (en) | 2003-05-02 | 2015-06-09 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
GB2404665B (en) * | 2003-08-08 | 2005-07-06 | Cambridge Antibody Tech | Cell culture |
AU2004263723B2 (en) * | 2003-08-08 | 2008-12-18 | Medimmune Limited | Myeloma cell culture in transferrin-free low iron medium |
JP4532493B2 (ja) * | 2003-09-18 | 2010-08-25 | レイベン バイオテクノロジーズ,インコーポレイティド | 細胞培養培地 |
US8101720B2 (en) * | 2004-10-21 | 2012-01-24 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions |
US9714282B2 (en) | 2003-09-26 | 2017-07-25 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants and methods for their generation |
AU2003271194A1 (en) * | 2003-10-09 | 2005-04-21 | Daewoong Co., Ltd. | Process for purifying human thrombopoietin with high content of sialic acid |
CA2542121A1 (en) * | 2003-10-09 | 2005-04-21 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Genomically modified cell neutralized to serum-free system |
CA2543193C (en) | 2003-10-27 | 2015-08-11 | Wyeth | Removal of high molecular weight aggregates using hydroxyapatite chromatography |
EP1697520A2 (en) * | 2003-12-22 | 2006-09-06 | Xencor, Inc. | Fc polypeptides with novel fc ligand binding sites |
US7255288B2 (en) * | 2004-03-08 | 2007-08-14 | Wan Shan Chan | Aroma therapy for fountain |
WO2005092925A2 (en) * | 2004-03-24 | 2005-10-06 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin variants outside the fc region |
US20150010550A1 (en) | 2004-07-15 | 2015-01-08 | Xencor, Inc. | OPTIMIZED Fc VARIANTS |
US7300773B2 (en) | 2004-08-27 | 2007-11-27 | Wyeth Research Ireland Limited | Production of TNFR-Ig |
TWI384069B (zh) | 2004-08-27 | 2013-02-01 | Pfizer Ireland Pharmaceuticals | 多胜肽之製法 |
TWI374935B (en) | 2004-08-27 | 2012-10-21 | Pfizer Ireland Pharmaceuticals | Production of α-abeta |
US20060074225A1 (en) * | 2004-09-14 | 2006-04-06 | Xencor, Inc. | Monomeric immunoglobulin Fc domains |
AU2011221414B2 (en) * | 2004-10-29 | 2012-09-20 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Animal Protein-Free Media for Cultivation of Cells |
US20060094104A1 (en) | 2004-10-29 | 2006-05-04 | Leopold Grillberger | Animal protein-free media for cultivation of cells |
WO2006108455A1 (en) * | 2004-11-02 | 2006-10-19 | Ares Trading S.A. | Serum-free cell culture medium for mammalian cells |
US8273553B2 (en) * | 2004-11-02 | 2012-09-25 | Ares Trading S.A. | Production of growth hormone in serum-free cell culture medium for mammalian cells |
EA011749B1 (ru) * | 2004-11-02 | 2009-06-30 | Арес Трейдинг С.А. | Способ продуцирования гормона роста человека и применение среды, не содержащей сыворотки, для культивирования клеток млекопитающих, экспрессирующих гормон роста человека |
EP2332985A3 (en) | 2004-11-12 | 2012-01-25 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US8802820B2 (en) * | 2004-11-12 | 2014-08-12 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US20070135620A1 (en) * | 2004-11-12 | 2007-06-14 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US8367805B2 (en) * | 2004-11-12 | 2013-02-05 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US8546543B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-10-01 | Xencor, Inc. | Fc variants that extend antibody half-life |
WO2006076594A2 (en) * | 2005-01-12 | 2006-07-20 | Xencor, Inc. | Antibodies and fc fusion proteins with altered immunogenicity |
JP5523674B2 (ja) | 2005-02-11 | 2014-06-18 | ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト | 植物タンパク質加水分解産物を含有する血清フリーの細胞培養液におけるポリペプチドの生産 |
JP2006310392A (ja) * | 2005-04-26 | 2006-11-09 | Toshiba Corp | 電子ビーム描画方法及び電子ビーム描画装置 |
EP1891207A2 (en) * | 2005-06-03 | 2008-02-27 | Biovitrum AB | Process for cultivating animal cells comprising the feeding of plant-derived peptones |
TWI369401B (en) | 2005-07-05 | 2012-08-01 | Ares Trading Sa | Serum-free culture medium for the production of recombinant gonadotropins |
EP1931709B1 (en) * | 2005-10-03 | 2016-12-07 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized fc receptor binding properties |
CA2625998C (en) | 2005-10-06 | 2015-12-01 | Xencor, Inc. | Optimized anti-cd30 antibodies |
PL2522717T3 (pl) * | 2006-01-04 | 2014-08-29 | Baxalta Inc | Pożywki do hodowli komórkowych wolne od oligopeptydów |
US20070190057A1 (en) | 2006-01-23 | 2007-08-16 | Jian Wu | Methods for modulating mannose content of recombinant proteins |
EP3255141B1 (en) | 2006-07-13 | 2021-12-01 | Wyeth LLC | Production of antibodies with improved glycosylation pattern |
ES2529234T3 (es) | 2006-08-04 | 2015-02-18 | Prolong Pharmaceuticals, LLC | Eritropoyetina modificada |
WO2008022152A2 (en) * | 2006-08-14 | 2008-02-21 | Xencor, Inc. | Optimized antibodies that target cd19 |
EP2500416A1 (en) * | 2006-09-13 | 2012-09-19 | Abbott Laboratories | Cell culture improvements |
US8911964B2 (en) | 2006-09-13 | 2014-12-16 | Abbvie Inc. | Fed-batch method of making human anti-TNF-alpha antibody |
MY161866A (en) * | 2006-09-13 | 2017-05-15 | Abbvie Inc | Cell culture improvements |
AU2007299843B2 (en) | 2006-09-18 | 2012-03-08 | Xencor, Inc | Optimized antibodies that target HM1.24 |
EP2135081B1 (en) | 2007-04-16 | 2012-12-05 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods related to cell surface glycosylation |
EP2135089B1 (en) * | 2007-04-16 | 2015-09-02 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Comparative analysis of protein conformations by using 2d noesy nmr spectra |
WO2008128222A1 (en) * | 2007-04-16 | 2008-10-23 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Analysis of phosphorylated glycans, glycopeptides or glycoproteins by imac |
TW200902708A (en) | 2007-04-23 | 2009-01-16 | Wyeth Corp | Methods of protein production using anti-senescence compounds |
TWI601823B (zh) * | 2007-04-26 | 2017-10-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Cell culture methods using media containing high concentrations of amino acids |
GB0710614D0 (en) * | 2007-06-04 | 2007-07-11 | Lonza Biologics Plc | Mammalian expression vector with a highly efficient secretory signal sequence |
CN101319200B (zh) * | 2007-06-08 | 2010-05-19 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种适用于微囊化cho细胞的无血清培养基及其应用 |
US20100221823A1 (en) * | 2007-06-11 | 2010-09-02 | Amgen Inc. | Method for culturing mammalian cells to improve recombinant protein production |
US7580304B2 (en) * | 2007-06-15 | 2009-08-25 | United Memories, Inc. | Multiple bus charge sharing |
EP3327132A3 (en) * | 2007-08-09 | 2018-07-18 | Wyeth LLC | Use of perfusion to enhance production of fed-batch cell culture in bioreactors |
US8771988B2 (en) * | 2007-10-12 | 2014-07-08 | Hoffmann-La Roche Inc. | Protein expression from multiple nucleic acids |
SI2235059T1 (sl) | 2007-12-26 | 2015-06-30 | Xencor, Inc. | Fc variante s spremenjeno vezjo na fcrn |
JP5727790B2 (ja) * | 2007-12-27 | 2015-06-03 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドBaxter International Incorp0Rated | 細胞培養プロセス |
CA2707524C (en) * | 2008-01-09 | 2016-04-12 | Cellca Gmbh | Improved culture media additive and process for using it |
CA2716801A1 (en) * | 2008-03-12 | 2009-09-17 | Wyeth Llc | Methods for identifying cells suitable for large-scale production of recombinant proteins |
EP2345713A4 (en) * | 2008-04-18 | 2012-07-11 | Shanghai Nat Engineering Res Ct Of Antibody Medicine Co Ltd | CONCENTRATED CULTURE SOLUTION AND USE METHOD THEREOF |
DE102008002210A1 (de) | 2008-06-04 | 2009-12-10 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur fermentativen Herstellung von Erythropoietin |
EP2350130B1 (en) * | 2008-10-31 | 2018-10-03 | Wyeth LLC | Purification of acidic proteins using ceramic hydroxyapatite chromatography |
PT2356247E (pt) * | 2008-11-12 | 2015-10-26 | Baxalta Inc | Método de produção de fator vii isento de soro e de insulina |
AU2009327411A1 (en) * | 2008-12-19 | 2010-06-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Feed supplement for mammalian cell culture and methods of use |
JP2012513030A (ja) | 2008-12-19 | 2012-06-07 | モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 修飾グリカンに関する方法 |
US9051544B2 (en) | 2008-12-30 | 2015-06-09 | Baxter International Inc. | Method of enhancing cell growth using alkyl-amine-n-oxide (AANOx) |
EP2401383B1 (en) * | 2009-02-27 | 2013-09-18 | Novartis AG | Methods for selecting eukaryotic cells expressing a heterologous protein |
HUE045635T2 (hu) | 2009-04-09 | 2020-01-28 | Sartorius Stedim Cellca Gmbh | Eljárás továbbfejlesztett egysejtes klónozásra |
ES2569238T3 (es) * | 2009-07-10 | 2016-05-09 | Linzy O. Scott Iii | Procedimientos y composiciones para tratar afecciones médicas relacionadas con la tiroides con folatos reducidos |
CA2769361A1 (en) | 2009-07-31 | 2011-02-03 | Baxter International Inc. | Cell culture medium for adamts protein expression |
WO2011028952A1 (en) | 2009-09-02 | 2011-03-10 | Xencor, Inc. | Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens |
US20120264688A1 (en) | 2009-09-23 | 2012-10-18 | Walter Hinderer | Process for the purification of recombinant human erythropoietin (epo), epo thus purified and pharmaceutical compositions comprising same |
ES2622366T3 (es) * | 2009-10-26 | 2017-07-06 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Procedimiento para la producción de una inmunoglobulina glucosilada |
WO2011079004A1 (en) * | 2009-12-23 | 2011-06-30 | Schering Corporation | Cell line 3m |
US8362210B2 (en) | 2010-01-19 | 2013-01-29 | Xencor, Inc. | Antibody variants with enhanced complement activity |
PT2563906T (pt) | 2010-04-26 | 2018-02-16 | Novartis Ag | Processo para cultivo de células cho |
RU2644651C2 (ru) | 2010-04-26 | 2018-02-13 | Новартис Аг | Среда для культивирования клеток |
CN102234627B (zh) * | 2010-04-30 | 2015-06-03 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种培养基添加剂及其应用 |
BR112013000515B1 (pt) | 2010-07-08 | 2021-11-03 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Método para produzir uma composição de fator von willebrand recombinante (rvwf) |
CN103080300B (zh) | 2010-08-05 | 2015-11-25 | 安姆根有限公司 | 增加细胞培养物的产率和活力的二肽 |
WO2012091023A1 (ja) | 2010-12-27 | 2012-07-05 | 協和発酵キリン株式会社 | 培地およびキレート剤を含む水溶液の調製方法 |
US9133493B2 (en) | 2011-04-21 | 2015-09-15 | Amgen Inc. | Method for culturing mammalian cells to improve recombinant protein production |
WO2012149197A2 (en) | 2011-04-27 | 2012-11-01 | Abbott Laboratories | Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins |
ES2560470T3 (es) | 2011-04-29 | 2016-02-19 | Biocon Research Limited | Un método para reducir la heterogeneidad de anticuerpos y un proceso de producción de dichos anticuerpos |
GB2497249B (en) | 2011-07-12 | 2016-12-28 | Foodchek Systems Inc | Culture medium,method for culturing salmonella and e.coli and method for detecting salmonella and e.coli |
CN103748211B (zh) * | 2011-07-13 | 2016-05-18 | 食品安全测试系统公司 | 用于李斯特菌的培养基和培养方法以及检测李斯特菌的方法 |
KR20140077977A (ko) | 2011-10-21 | 2014-06-24 | 화이자 인코포레이티드 | 철을 첨가하여 세포 배양을 개선하는 방법 |
WO2013126813A1 (en) | 2012-02-22 | 2013-08-29 | Amgen Inc. | Autologous mammalian models derived from induced pluripotent stem cells and related methods |
US9067990B2 (en) | 2013-03-14 | 2015-06-30 | Abbvie, Inc. | Protein purification using displacement chromatography |
US9150645B2 (en) | 2012-04-20 | 2015-10-06 | Abbvie, Inc. | Cell culture methods to reduce acidic species |
US9181572B2 (en) | 2012-04-20 | 2015-11-10 | Abbvie, Inc. | Methods to modulate lysine variant distribution |
WO2013176754A1 (en) | 2012-05-24 | 2013-11-28 | Abbvie Inc. | Novel purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography |
US9206390B2 (en) | 2012-09-02 | 2015-12-08 | Abbvie, Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
US9512214B2 (en) | 2012-09-02 | 2016-12-06 | Abbvie, Inc. | Methods to control protein heterogeneity |
ES2540753T3 (es) | 2012-09-24 | 2015-07-13 | Lonza Biologics Plc. | Vectores de expresión que comprenden secuencias quiméricas de promotor y amplificador de citomegalovirus |
WO2014143205A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-09-18 | Abbvie Inc. | Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same |
WO2014151878A2 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Abbvie Inc. | Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides |
US9017687B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-28 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography |
US9217168B2 (en) | 2013-03-14 | 2015-12-22 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods of cell culture |
WO2014159579A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Abbvie Inc. | MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE |
ITTO20130493A1 (it) * | 2013-06-14 | 2014-12-15 | Determinants Of Metabolism Res Lab S R L | Composizione per l'eliminazione di animali molesti infestanti |
JP6195191B2 (ja) * | 2013-08-08 | 2017-09-13 | 極東製薬工業株式会社 | 無タンパク質・無脂質培地馴化細胞株を用いた組換えタンパク質の製造方法 |
JP6190205B2 (ja) * | 2013-08-08 | 2017-08-30 | 極東製薬工業株式会社 | 無タンパク質・無脂質培地馴化細胞株、その製造方法及び培地 |
US11078464B2 (en) | 2013-08-30 | 2021-08-03 | Amgen Inc. | High titer recombinant AAV vector production in adherent and suspension cells |
EP3052640A2 (en) | 2013-10-04 | 2016-08-10 | AbbVie Inc. | Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins |
US8946395B1 (en) | 2013-10-18 | 2015-02-03 | Abbvie Inc. | Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography |
US9181337B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-11-10 | Abbvie, Inc. | Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same |
US9085618B2 (en) | 2013-10-18 | 2015-07-21 | Abbvie, Inc. | Low acidic species compositions and methods for producing and using the same |
WO2015073884A2 (en) | 2013-11-15 | 2015-05-21 | Abbvie, Inc. | Glycoengineered binding protein compositions |
WO2016049367A1 (en) * | 2014-09-24 | 2016-03-31 | Los Alamos National Security, Llc | Multi-organ media compositions and methods of their use |
ES2962385T3 (es) | 2014-10-15 | 2024-03-18 | Amgen Inc | Elementos promotores y reguladores para mejorar la expresión de genes heterólogos en células hospederas |
JP6432774B2 (ja) * | 2014-12-25 | 2018-12-05 | 江南化工株式会社 | 細胞賦活剤 |
KR20180093086A (ko) | 2016-01-06 | 2018-08-20 | 론자 리미티드 | 개선된 생산을 위한 단백질 분해의 억제 |
US10119117B2 (en) | 2016-01-28 | 2018-11-06 | Nanogen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd | Universal, glycosylation enhancer, completely chemically defined medium formulation |
EP3420072A4 (en) * | 2016-02-22 | 2019-08-28 | Agency for Science, Technology and Research | CELL CULTURE MEDIUM |
US11236520B2 (en) | 2016-03-10 | 2022-02-01 | Lonza Ltd | Customizable facility |
US10689873B2 (en) | 2016-03-10 | 2020-06-23 | Lonza Ltd | Customizable facility |
AU2017251360A1 (en) | 2016-04-14 | 2018-11-01 | Lonza Ltd | Compositions and methods for the detection of host cell proteins |
TWI734775B (zh) * | 2016-04-26 | 2021-08-01 | 美商美國泰福生技股份有限公司 | 細胞培養基 |
KR102536221B1 (ko) | 2016-05-03 | 2023-05-23 | 론자 리미티드 | 단백질 생산을 위한 지질 대사의 조정 |
AU2017277761B2 (en) | 2016-06-10 | 2021-11-11 | Lonza Ltd | Method for stabilizing proteins |
IL307217A (en) | 2016-08-02 | 2023-11-01 | Lonza Ag | Customizable facility |
US20190169675A1 (en) | 2016-08-12 | 2019-06-06 | Lonza Ltd | Proteomic analysis of host cell proteins |
US20190216925A1 (en) | 2016-09-16 | 2019-07-18 | Leukocare Ag | A Novel Method for Stabilization of a Biopharmaceutical Drug Product During Processing |
CN106635958A (zh) * | 2016-12-24 | 2017-05-10 | 严志海 | 一种中国仓鼠卵巢细胞培养基 |
AU2018232698B2 (en) | 2017-03-10 | 2020-06-25 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for producing multispecific antibodies |
KR102647165B1 (ko) | 2017-06-16 | 2024-03-14 | 론자 리미티드 | 생물 제제 생산을 위한 범용 자체 조절 포유동물 세포주 플랫폼 |
JP2020533983A (ja) | 2017-09-15 | 2020-11-26 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company | 目的のポリペプチドのラージスケールの製造間のオンラインバイオマス静電容量モニタリング |
CA3083236A1 (en) | 2017-12-05 | 2019-06-13 | Lonza Ltd | Methods of assaying tropolone |
JP7108036B2 (ja) | 2018-02-02 | 2022-07-27 | ロンザ リミテッド | 細胞選択方法及び細胞代謝改変方法 |
KR20200133240A (ko) | 2018-03-16 | 2020-11-26 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 단백질 생산 동안의 대사 효소 활성 및 디술피드 결합 환원 |
US20190367858A1 (en) | 2018-06-01 | 2019-12-05 | Lonza Ltd. | Midscale Model For Organic Growth and Phasing |
US20210324390A1 (en) | 2018-07-13 | 2021-10-21 | Lonza Ltd | Methods for improving production of biological products by reducing the level of endogenous protein |
WO2020028616A1 (en) | 2018-08-02 | 2020-02-06 | Lonza Ltd | Methods for manufacturing recombinant protein comprising a disulfide bond |
CN110343666B (zh) * | 2019-07-10 | 2023-05-30 | 通化东宝药业股份有限公司 | 一种cho细胞培养的补料培养基及其制备方法和应用 |
EP4058583A1 (en) | 2019-11-14 | 2022-09-21 | Lonza Ltd. | Methods of cell selection |
SG11202110968VA (en) | 2019-12-06 | 2021-10-28 | Regeneron Pharma | Anti-vegf protein compositions and methods for producing the same |
EP4130238A4 (en) * | 2020-03-25 | 2024-05-15 | Ajinomoto Kk | HEPES-CONTAINING MEDIUM |
WO2022140389A1 (en) | 2020-12-22 | 2022-06-30 | Amgen Inc. | Cell culture method |
WO2023045140A1 (zh) * | 2021-09-26 | 2023-03-30 | 上海迈泰君奥生物技术有限公司 | 一种提高宿主细胞中抗体表达量的方法 |
CN113846051B (zh) * | 2021-09-28 | 2023-12-01 | 无锡多宁生物科技有限公司 | 一种通用型化学成分限定cho细胞传代培养基及其应用 |
Family Cites Families (54)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE65933C (de) | Rheinische Gesellschaft für metall | Ventileinrichtung für Spirituskocher | ||
US4205126A (en) | 1978-01-01 | 1980-05-27 | Cartaya Oscar A | Serum-free cell culture media |
SU1662352A3 (ru) * | 1982-05-05 | 1991-07-07 | Генентек, Инк (Фирма) | Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI - продуцент активатора плазминогена тканевого типа |
US4657866A (en) | 1982-12-21 | 1987-04-14 | Sudhir Kumar | Serum-free, synthetic, completely chemically defined tissue culture media |
FR2543158B1 (fr) | 1983-03-24 | 1985-11-15 | Inst Nat Sante Rech Med | Milieu de culture de cellules animales sans serum, sans hormones et sans facteurs de croissance et procedes de culture primaire et d'obtention de lignees cellulaires utilisant ce milieu |
US4767704A (en) * | 1983-10-07 | 1988-08-30 | Columbia University In The City Of New York | Protein-free culture medium |
US4777245A (en) | 1984-01-06 | 1988-10-11 | Genelabs Incorporated | Non-human primate monoclonal antibodies and methods |
EP0164813B1 (en) | 1984-06-14 | 1991-10-09 | Teijin Limited | Method of cultivating animal or plant cells |
JPS6125480A (ja) | 1984-07-13 | 1986-02-04 | Nitsusui Seiyaku Kk | 細胞用の無血清合成培地 |
US5807715A (en) | 1984-08-27 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin |
GB8516415D0 (en) | 1985-06-28 | 1985-07-31 | Celltech Ltd | Culture of animal cells |
GB8531925D0 (en) | 1985-12-31 | 1986-02-05 | Bass Plc | Propagation of yeast |
GB8607679D0 (en) * | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
CA1297434C (en) | 1986-04-14 | 1992-03-17 | Kenji Murakami | Method of producing peptides, recombinant plasmid for use in the same and animal cells transformed with the same |
US4677704A (en) * | 1986-04-22 | 1987-07-07 | Huggins Richard A | Cleaning system for static charged semiconductor wafer surface |
DE3785086T2 (de) | 1986-06-04 | 1993-07-08 | Agency Ind Science Techn | Zubereitung fuer zellkultur und ihre verwendung. |
JPS637780A (ja) | 1986-06-28 | 1988-01-13 | Nippon Zenyaku Kogyo Kk | 細胞への鉄供給方法 |
EP0318487B1 (en) * | 1986-08-04 | 1993-10-13 | The University Of New South Wales | Serum free tissue culture medium containing polymeric cell-protective agent |
CS262822B1 (en) | 1986-10-03 | 1989-04-14 | Kovar Jan | Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells |
US5045468A (en) | 1986-12-12 | 1991-09-03 | Cell Enterprises, Inc. | Protein-free culture medium which promotes hybridoma growth |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
JP2749011B2 (ja) | 1987-02-05 | 1998-05-13 | 鐘淵化学工業 株式会社 | 無血清培地で増殖継代可能な細胞およびその取得方法 |
JPS63196268A (ja) * | 1987-02-10 | 1988-08-15 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 無血清培地で継代増殖可能な形質転換細胞、その育種方法およびその細胞による蛋白質の生産方法 |
DE3871206D1 (de) | 1987-03-24 | 1992-06-25 | Grace W R & Co | Basisnaehrmedium fuer eine zellkultur. |
CA1341235C (en) | 1987-07-24 | 2001-05-22 | Randy R. Robinson | Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use |
AU612404B2 (en) | 1987-09-11 | 1991-07-11 | Genentech Inc. | Method for increasing the expression of polypeptides in recombinant cell culture |
IL87737A (en) * | 1987-09-11 | 1993-08-18 | Genentech Inc | Method for culturing polypeptide factor dependent vertebrate recombinant cells |
EP0316068A1 (en) * | 1987-10-09 | 1989-05-17 | Collaborative Research Inc. | Modified low molecular weight plasminogen activator and method of preparation |
NZ226694A (en) | 1987-10-28 | 1994-04-27 | Oncogen | Human immunoglobulin produced by recombinant dna techniques |
DE3801236A1 (de) * | 1988-01-18 | 1989-07-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | Pentosansulfat-medium |
US5846534A (en) | 1988-02-12 | 1998-12-08 | British Technology Group Limited | Antibodies to the antigen campath-1 |
ATE95068T1 (de) * | 1988-02-12 | 1993-10-15 | British Tech Group | Modifizierte antikoerper. |
CA1341552C (en) | 1988-09-23 | 2007-10-02 | Kenneth Alonso | Method of producing human-human hybridomas, the production of monoclonal and polyclonal antibodies therefrom, and therapeutic use thereof |
AU4312489A (en) | 1988-09-23 | 1990-04-18 | Cetus Corporation | Lipid microemulsions for culture media |
US4929706A (en) | 1988-11-02 | 1990-05-29 | W. R. Grace & Co.-Conn. | Cell growth enhancers and/or antibody production stimulators comprising chemically modified hydrophilic polyurea-urethane prepolymers and polymers |
JPH0322972A (ja) * | 1989-01-12 | 1991-01-31 | Ajinomoto Co Inc | 無血清培地 |
ZA901280B (en) * | 1989-02-27 | 1991-10-30 | Lilly Co Eli | Tissue culture method |
CA2001550A1 (en) * | 1989-03-03 | 1990-09-03 | Aaron H. Heifetz | Very low protein nutrient medium for cell culture |
GB8905669D0 (en) | 1989-03-13 | 1989-04-26 | Celltech Ltd | Modified antibodies |
EP0404003A3 (en) | 1989-06-19 | 1991-10-16 | Xoma Corporation | Chimeric mouse-human km10 antibody with specificity to a human tumor cell antigen |
EP0493433B1 (en) | 1989-09-19 | 1996-01-10 | Centocor, Inc. | Method for improving human monoclonal antibody production and cells used therein |
DE69028713T3 (de) | 1989-12-27 | 2004-05-13 | Centocor, Inc. | Schimäre immunoglobuline für cd4-rezeptoren |
US5122469A (en) * | 1990-10-03 | 1992-06-16 | Genentech, Inc. | Method for culturing Chinese hamster ovary cells to improve production of recombinant proteins |
GB9022547D0 (en) | 1990-10-17 | 1990-11-28 | Wellcome Found | Purified immunoglobulin |
GB9022545D0 (en) | 1990-10-17 | 1990-11-28 | Wellcome Found | Culture medium |
GB9022543D0 (en) | 1990-10-17 | 1990-11-28 | Wellcome Found | Antibody production |
DE4115722A1 (de) | 1991-05-14 | 1992-11-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | Serumfreies medium zur kultivierung von saeugerzellen |
IE922287A1 (en) | 1991-07-15 | 1993-01-27 | Wellcome Found | Production of antibodies |
EP1266965B1 (en) | 1991-07-25 | 2006-05-24 | Biogen Idec Inc. | Recombinant antibodies for human therapy |
DK0610447T3 (da) | 1991-10-15 | 1999-08-23 | Btg Int Ltd | CDw52-specifikt antistof til behandling af T-cellemedieret inflammation af leddene |
US5429746A (en) | 1994-02-22 | 1995-07-04 | Smith Kline Beecham Corporation | Antibody purification |
AT407255B (de) | 1997-06-20 | 2001-02-26 | Immuno Ag | Rekombinanter zellklon mit erhöhter stabilität in serum- und proteinfreiem medium und verfahren zur gewinnung des stabilen zellklons |
KR20010069066A (ko) | 2000-01-12 | 2001-07-23 | 이종원 | 저산소 농도하에서 생존이 가능하도록 하는 동물세포의배양방법 |
JP2005532415A (ja) | 2001-12-11 | 2005-10-27 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | スタフィロコッカス・アウレウスエキソポリサッカライド及び方法 |
-
1990
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