JP2023538740A - ファミリー４４キシログルカナーゼの変異体 - Google Patents
ファミリー４４キシログルカナーゼの変異体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2023538740A JP2023538740A JP2023512728A JP2023512728A JP2023538740A JP 2023538740 A JP2023538740 A JP 2023538740A JP 2023512728 A JP2023512728 A JP 2023512728A JP 2023512728 A JP2023512728 A JP 2023512728A JP 2023538740 A JP2023538740 A JP 2023538740A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- variant
- seq
- polypeptide
- another embodiment
- sequence identity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108010083879 xyloglucan endo(1-4)-beta-D-glucanase Proteins 0.000 title claims abstract description 126
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 22
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 20
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 243
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 243
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 240
- 102200108155 rs201717599 Human genes 0.000 claims description 238
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 192
- 102220207584 rs146115797 Human genes 0.000 claims description 166
- 102220179353 rs376307136 Human genes 0.000 claims description 143
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 105
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 47
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 47
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 41
- 102200028670 rs1940475 Human genes 0.000 claims description 39
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 38
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 35
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 29
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 27
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 27
- 102220209728 rs1057523598 Human genes 0.000 claims description 24
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 22
- 239000004753 textile Substances 0.000 claims description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- 102220547177 Profilin-3_A41R_mutation Human genes 0.000 claims description 9
- 102220291178 rs1556638919 Human genes 0.000 claims description 9
- 102220090287 rs875989951 Human genes 0.000 claims description 9
- 102220154334 rs886061290 Human genes 0.000 claims description 9
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 8
- 102200062496 rs121909225 Human genes 0.000 claims description 8
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 7
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 5
- 239000004145 Methyl glucoside-coconut oil ester Substances 0.000 claims description 4
- 239000004237 Ponceau 6R Substances 0.000 claims description 4
- 102220297016 rs1553877330 Human genes 0.000 claims description 4
- 102200067482 rs34817956 Human genes 0.000 claims description 4
- 102220114396 rs886039195 Human genes 0.000 claims description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 3
- 238000004900 laundering Methods 0.000 claims description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 2
- 239000006072 paste Substances 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 102200151424 rs5198 Human genes 0.000 claims 5
- 102200129085 rs118203931 Human genes 0.000 claims 3
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 claims 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 abstract description 5
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 172
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 125
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 123
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 111
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 95
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 91
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 91
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 89
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 89
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 89
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 89
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 89
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 88
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 88
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 88
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 85
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 83
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 83
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 82
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Chemical group NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 82
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 80
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 26
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 24
- 102220026629 rs587778901 Human genes 0.000 description 16
- 125000003412 L-alanyl group Chemical group [H]N([H])[C@@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 15
- -1 p-toluenesulfonyl groups Chemical group 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 13
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 13
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 13
- 238000004851 dishwashing Methods 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 11
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 11
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 11
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 11
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 102220591322 Hemoglobin subunit beta_K18E_mutation Human genes 0.000 description 10
- 229920002000 Xyloglucan Polymers 0.000 description 10
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 9
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 8
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 8
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 7
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 7
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 7
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 7
- 229920000297 Rayon Polymers 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 6
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 229920002488 Hemicellulose Polymers 0.000 description 5
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 4
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Chemical group 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 208000037065 Subacute sclerosing leukoencephalitis Diseases 0.000 description 4
- 206010042297 Subacute sclerosing panencephalitis Diseases 0.000 description 4
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 4
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 4
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 4
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- 108010008885 Cellulose 1,4-beta-Cellobiosidase Proteins 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 3
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000002964 rayon Substances 0.000 description 3
- 102220087235 rs864622622 Human genes 0.000 description 3
- 102220466243 Acyl-coenzyme A thioesterase MBLAC2_R170A_mutation Human genes 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 2
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 2
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 2
- 240000008564 Boehmeria nivea Species 0.000 description 2
- 240000000491 Corchorus aestuans Species 0.000 description 2
- 235000011777 Corchorus aestuans Nutrition 0.000 description 2
- 235000010862 Corchorus capsularis Nutrition 0.000 description 2
- 208000037595 EN1-related dorsoventral syndrome Diseases 0.000 description 2
- 101000637245 Escherichia coli (strain K12) Endonuclease V Proteins 0.000 description 2
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 2
- 102220477021 Hexokinase-4_S411F_mutation Human genes 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102220468791 Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor type 2_Y167A_mutation Human genes 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- 125000002842 L-seryl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 2
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 2
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 2
- 229920000433 Lyocell Polymers 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 2
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Chemical group OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002334 Spandex Polymers 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 2
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 2
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 239000004760 aramid Substances 0.000 description 2
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000002979 fabric softener Substances 0.000 description 2
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 2
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 2
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 102220052102 rs35524245 Human genes 0.000 description 2
- 102220026086 rs397518426 Human genes 0.000 description 2
- 102220019635 rs80358902 Human genes 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 2
- CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N thioglycolic acid Chemical compound OC(=O)CS CWERGRDVMFNCDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 3-Methylhistidine Natural products CN1C=NC(CC(N)C(O)=O)=C1 BRMWTNUJHUMWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940117976 5-hydroxylysine Drugs 0.000 description 1
- 229920002972 Acrylic fiber Polymers 0.000 description 1
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 description 1
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 description 1
- 244000198134 Agave sisalana Species 0.000 description 1
- 241000228215 Aspergillus aculeatus Species 0.000 description 1
- 241000193422 Bacillus lentus Species 0.000 description 1
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 1
- 229920002749 Bacterial cellulose Polymers 0.000 description 1
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 description 1
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 description 1
- 108010023736 Chondroitinases and Chondroitin Lyases Proteins 0.000 description 1
- 108020004638 Circular DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 101001096557 Dickeya dadantii (strain 3937) Rhamnogalacturonate lyase Proteins 0.000 description 1
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 1
- 101710126559 Endoglucanase EG-II Proteins 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical group O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 108010029541 Laccase Proteins 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical group CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 102100031688 N-acetylgalactosamine-6-sulfatase Human genes 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 229920002396 Polyurea Polymers 0.000 description 1
- 229920001131 Pulp (paper) Polymers 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241001292348 Salipaludibacillus agaradhaerens Species 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 1
- 241000499912 Trichoderma reesei Species 0.000 description 1
- 241000223261 Trichoderma viride Species 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- UGXQOOQUZRUVSS-ZZXKWVIFSA-N [5-[3,5-dihydroxy-2-(1,3,4-trihydroxy-5-oxopentan-2-yl)oxyoxan-4-yl]oxy-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl (e)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-enoate Chemical compound OC1C(OC(CO)C(O)C(O)C=O)OCC(O)C1OC1C(O)C(O)C(COC(=O)\C=C\C=2C=CC(O)=CC=2)O1 UGXQOOQUZRUVSS-ZZXKWVIFSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010084650 alpha-N-arabinofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229920000617 arabinoxylan Polymers 0.000 description 1
- 229920006231 aramid fiber Polymers 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 229920003235 aromatic polyamide Polymers 0.000 description 1
- 108010009043 arylesterase Proteins 0.000 description 1
- 102000028848 arylesterase Human genes 0.000 description 1
- 239000005016 bacterial cellulose Substances 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 210000000085 cashmere Anatomy 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 125000002668 chloroacetyl group Chemical group ClCC(=O)* 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 108010005400 cutinase Proteins 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 108010091371 endoglucanase 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010091384 endoglucanase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010092450 endoglucanase Z Proteins 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003248 enzyme activator Substances 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical group NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 108010002430 hemicellulase Proteins 0.000 description 1
- 229940059442 hemicellulase Drugs 0.000 description 1
- VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N hexamethylenetetramine Chemical compound C1N(C2)CN3CN1CN2C3 VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Chemical group OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003752 hydrotrope Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000017730 intein-mediated protein splicing Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010059345 keratinase Proteins 0.000 description 1
- 108010076363 licheninase Proteins 0.000 description 1
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 1
- 108010062085 ligninase Proteins 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000001724 microfibril Anatomy 0.000 description 1
- 210000000050 mohair Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N ornithyl group Chemical group N[C@@H](CCCN)C(=O)O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108010087558 pectate lyase Proteins 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 108010072638 pectinacetylesterase Proteins 0.000 description 1
- 102000004251 pectinacetylesterase Human genes 0.000 description 1
- 108020004410 pectinesterase Proteins 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920006306 polyurethane fiber Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002374 sebum Anatomy 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000004759 spandex Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical class 0.000 description 1
- 239000012209 synthetic fiber Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 108010038851 tannase Proteins 0.000 description 1
- 150000003588 threonines Chemical group 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 108010068608 xanthan lyase Proteins 0.000 description 1
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 1
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 1
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
- C11D3/38636—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing enzymes other than protease, amylase, lipase, cellulase, oxidase or reductase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
- C11D3/38645—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing cellulase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
- C12N9/2437—Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01151—Xyloglucan-specific endo-beta-1,4-glucanase (3.2.1.151), i.e. endoxyloglucanase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
- C11D2111/10—Objects to be cleaned
- C11D2111/12—Soft surfaces, e.g. textile
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
- C11D2111/10—Objects to be cleaned
- C11D2111/14—Hard surfaces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Detergent Compositions (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本開示は、キシログルカナーゼ変異体に関する。本発明はまた、変異体をコードするポリヌクレオチド；核酸構築物、ベクター、及びポリヌクレオチドを含む宿主細胞；及び変異体を使用する方法にも関する。
Description
配列表の参照
本出願には、コンピュータ可読形式の配列表が含まれる。このコンピュータ可読形式は、参照によって本明細書に組み込まれる。
本出願には、コンピュータ可読形式の配列表が含まれる。このコンピュータ可読形式は、参照によって本明細書に組み込まれる。
本発明は、グリコシルヒドロラーゼのファミリー４４に属するキシログルカナーゼの変異体、この変異体をコードするポリヌクレオチド、及びこの変異体の製造方法に関する。
キシログルカンは、植物の一次（成長）細胞壁における主要な構造多糖である。構造的には、キシログルカンはセルロース様のβ－１，４結合グルコース骨格からなり、このグルコース骨格は様々な側鎖で置換されていることが多い。キシログルカンは、植物の一次壁において、セルロースのミクロフィブリルを架橋し、セルロース－キシログルカンネットワークを形成することによって機能していると考えられている。
キシログルカナーゼ（Ｘｙｌｏｇｌｕｃａｎｓｅ）は、キシログルカンからキシログルカンオリゴ糖への可溶化に触媒作用を及ぼすことができる。いくつかのキシログルカナーゼはキシログルカナーゼ活性のみを示すが、他のものは、キシログルカナーゼ活性及びセルラーゼ活性の両方を示す。キシログルカナーゼ（Ｘｙｌｏｇｌｕｃａｎｓｅ）はＥＣ３．２．１．４又はＥＣ３．２．１．１５１に分類され得る。キシログルカナーゼ活性を有する酵素は、例えば、Ｖｉｎｃｋｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２９８（４）：２９９－３１０に記載されており、トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄｅ）（Ｔ．リーセイ（Ｔ．ｒｅｅｓｅｉ）に類似）からの３種類のエンドグルカナーゼ、ＥｎｄｏＩ、ＥｎｄｏＶ及びＥｎｄｏＶＩが特徴付けられている。ＥｎｄｏＩ、ＥｎｄｏＶ及びＥｎｄｏＶＩは、それぞれグリコシルヒドロラーゼのファミリー５、７及び１２に属し、Ｈｅｎｒｉｓｓａｔ，Ｂ．（１９９１）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２８０：３０９－３１６、及びＨｅｎｒｉｓｓａｔ，Ｂ． ａｎｄ Ｂａｉｒｏｃｈ，Ａ．（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２９３：７８１－７８８参照。国際公開第９４／１４９５３号パンフレットは、菌類アスペルギルス・アクレータス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）からクローニングされたファミリー１２のキシログルカナーゼ（ＥＧＩＩ）を開示している。国際公開第９９／０２６６３号パンフレットは、バチルス ・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）及びバチルス ・アグラヒアレンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）からそれぞれクローニングされたファミリー１２及びファミリー５のキシログルカナーゼを開示している。国際公開第０１／０６２９０３号パンフレットは、ファミリー４４のキシログルカナーゼを開示している。
特に、国際公開第９９／０２６６３号パンフレット及び国際公開第０１／０６２９０３号パンフレットは、キシログルカナーゼが洗剤中で使用され得ることを示唆している。国際公開第２００９／１４７２１０号パンフレットは、キシログルカナーゼの変異体を提供している。
本発明の目的は、グリコシルヒドロラーゼのファミリー４４に属するキシログルカナーゼの変異体を提供することである。
本発明は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置での改変を含む、キシログルカナーゼ活性を有する単離されたキシログルカナーゼ変異体に関する。好ましくは、変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有し、キシログルカナーゼ活性を有する。
本発明は、配列番号２のポリペプチドの１２９Ｔ位に相当する位置に置換を含む、キシログルカナーゼ活性を有する単離されたキシログルカナーゼ変異体に関する。好ましくは、変異体は、配列番号２のポリペプチドに対して少なくとも９９％の配列同一性であるが１００％未満配列同一性を有する。特に、本発明は、配列番号３のポリペプチドを含む、又はそれからなる単離されたキシログルカナーゼ変異体に関する。
本発明はまた、変異体をコードする単離されたポリヌクレオチド；このポリヌクレオチドを含む核酸構築物、ベクター及び宿主細胞；並びに変異体を生成する方法に関する。
また、本発明は、本発明の変異体を含むクリーニング方法及び組成物に関する。
配列
配列番号１ パエニバチルス・ポリミキサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）から得られる成熟型ポリペプチド。
配列番号２ 変異体ポリペプチド。
配列番号３ 変異体ポリペプチド。
配列番号４ バチルス・レンタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｅｎｔｕｓ）由来のプロテアーゼタンパク質配列。
配列番号１ パエニバチルス・ポリミキサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）から得られる成熟型ポリペプチド。
配列番号２ 変異体ポリペプチド。
配列番号３ 変異体ポリペプチド。
配列番号４ バチルス・レンタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｅｎｔｕｓ）由来のプロテアーゼタンパク質配列。
定義
この詳細な説明に従い、下記の定義を適用する。単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その」は、別途文脈が明確に示さない限り、複数の言及を含むことに留意されたい。
この詳細な説明に従い、下記の定義を適用する。単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その」は、別途文脈が明確に示さない限り、複数の言及を含むことに留意されたい。
本明細書におけるある値又はパラメータの「約」への言及は、この値又はパラメータ自体に向けられている態様を含む。例えば、「約Ｘ」に言及する説明は、態様「Ｘ」を含む。
別途定義されない限り又は文脈により明確に示されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されるのと同じ意味を有する。
対立遺伝子変異体：用語「対立遺伝子変異体」は、同じ染色体座位を占める遺伝子の２つ以上の代替形態のいずれかを意味する。対立遺伝子のバリエーションは、突然変異により天然に生じ、集団内で多型を生じる場合がある。遺伝子突然変異は、サイレントであり得る（コードされたポリペプチドでは変化がない）か、又は改変されたアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする場合がある。ポリペプチドの対立遺伝子変異体は、遺伝子の対立遺伝子変異体によりコードされるポリペプチドである。
アミノ酸：用語「アミノ酸」は、本明細書で使用される場合、下記を指す：標準的な２０の遺伝的にコードされているアミノ酸及び（天然の「ｌ」型と比較して）「ｄ」型の対応する立体異性体、オメガ－アミノ酸、他の天然に存在するアミノ酸、非従来型のアミノ酸（例えば、α，α－二置換アミノ酸、Ｎ－アルキルアミノ酸等）、及び化学的に誘導体化されたアミノ酸。１個又は複数個のアミノ酸の化学的誘導体を、官能性側基との反応により得ることができる。そのような誘導体化分子として、例えば、遊離アミノ基が誘導体化されて、アミン塩酸塩、ｐ－トルエンスルホニル基、カルボキシベンゾキシ基、ｔ－ブチルオキシカルボニル基、クロロアセチル基、又はホルミル基が形成されている分子が挙げられる。遊離カルボキシル基を誘導体化して、塩、メチル、及びエチルエステル又は他のタイプのエステル、及びヒドラジドを形成し得る。遊離ヒドロキシル基を誘導体化して、Ｏ－アシル誘導体又はＯ－アルキル誘導体を形成し得る。同様に化学誘導体として含まれるのは、２０の標準的なアミノ酸の天然に存在するアミノ酸誘導体を含むペプチドである。例えば：プロリンを４－ヒドロキシプロリンに置換し得；リシンを５－ヒドロキシリシンに置換し得；ヒスチジンを３－メチルヒスチジンに置換し得；セリンをホモセリンに置換し得、リシンをオルニチンに置換し得る。誘導体には、必要な活性が維持されている限り、１個又は複数個の付加又は欠失を含むペプチドも含まれる。他の含まれる変性は、下記である：アミド化、アミノ末端アシル化（例えば、アセチル化又はチオグリコール酸アミド化）、末端カルボキシアミド化（例えば、アンモニア又はメチルアミンによるもの）、及び同様の末端変性である。
アミノ酸が具体的に列挙されている場合（例えば、「アラニン」又は「Ａｌａ」又は「Ａ」）、この用語は、別途明記されていない限り、ｌ－アラニン及びｄ－アラニンの両方を指す。他の非従来型のアミノ酸も、所望の機能的特性がポリペプチドにより保持される限り、本発明のポリペプチドの好適な構成要素であり得る。ペプチドが示される場合、コードされた各アミノ酸残基は、適切な場合、従来のアミノ酸の慣用名に対応する一文字指定で表される。一実施形態において、本発明のポリペプチドは、ｌ－アミノ酸を含むか又はそれからなる。
セルロース分解酵素又はセルラーゼ：用語「セルロース分解酵素」又は「セルラーゼ」は、セルロース性材料を加水分解する１種又は複数種（例えば、数種類）の酵素を意味する。そのような酵素は、エンドグルカナーゼ（例えば、ＥＣ３．２．１．４）、セロビオヒドロラーゼ、ベータ－グルコシダーゼ、又はその組み合わせを含む。セルロース分解酵素活性を測定するための２つの基本的な手法としては、（１）総セルロース分解酵素活性を測定すること、及び（２）個々のセルロース分解酵素活性（エンドグルカナーゼ、セロビオヒドロラーゼ、及びベータ－グルコシダーゼ）を測定すること（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００６，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｄｖａｎｃｅｓ ２４：４５２－４８１に説明のとおり）を含む。全体的なセルロース分解酵素活性は、Ｗｈａｔｍａｎ Ｎｏ．１濾紙、結晶セルロース、細菌性セルロース、藻類のセルロース、綿、前処理されたリグノセルロースなどを含む不溶性基質を使用して測定され得る。最も一般的な全体的なセルロース分解活性アッセイは、基質としてＷｈａｔｍａｎ Ｎｏ．１濾紙を使用する濾紙アッセイである。このアッセイは、国際純正及び応用化学連合（ＩＵＰＡＣ）によって確立された（Ｇｈｏｓｅ，１９８７，Ｐｕｒｅ Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．５９：２５７－６８）。
セルロース由来材料：用語「セルロース由来材料」は、セルロースを含有する任意の材料を意味する。バイオマスの一次細胞壁における支配的な多糖はセルロースであり、２番目に豊富なものは、ヘミセルロースであり、３番目はペクチンである。細胞が増殖を停止した後に生成される二次細胞壁はまた、多糖を含有し、ヘミセルロースに共有結合的に架橋されたポリマーリグニンによって強化される。セルロースは、無水セロビオースのホモポリマー、したがって、線状ベータ－（１－４）－Ｄ－グルカンである一方、ヘミセルロースは、一連の置換基を有する複合分岐構造におけるキシラン、キシログルカン、アラビノキシラン、及びマンナンなどの様々な化合物を含む。一般にセルロースは多形であるが、植物組織中では主にグルカン鎖が並列した不溶性の結晶性マトリックスとして見出される。ヘミセルロースは通常、セルロース、及び他のヘミセルロースに水素結合し、細胞壁マトリックスを安定化するのに役立つ。
ｃＤＮＡ：用語「ｃＤＮＡ」は、真核細胞又は原核細胞から得られた成熟してスプライシングされたｍＲＮＡ分子からの逆転写により調製され得るＤＮＡ分子を意味する。ｃＤＮＡは、対応するゲノムＤＮＡ中に存在し得るイントロン配列を欠いている。最初の一次ＲＮＡ転写物は、成熟してスプライシングされたｍＲＮＡとして現れる前にスプライシングを含む一連の工程により処理されているｍＲＮＡの前駆体である。
コード配列：用語「コード配列」は、変異体のアミノ酸配列を直接特定するポリヌクレオチドを意味する。コード配列の境界は、一般的に、ＡＴＧ、ＧＴＧ、又はＴＴＧなどの開始コドンで始まり且つＴＡＡ、ＴＡＧ、又はＴＧＡなどの終止コドンで終わるオープンリーディングフレームにより決定される。コード配列は、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、合成ＤＮＡ又はこれらの組み合わせであり得る。
制御配列：用語「制御配列」は、本発明の変異体をコードするポリヌクレオチドの発現に必要となる核酸配列を意味する。変異体それぞれの制御配列は、変異体をコードするポリヌクレオチドに対して天然（即ち、同一の遺伝子に由来する）若しくは外来性（即ち、異なる遺伝子に由来する）のものであってよいか、又は互いに天然若しくは外来性のものであってよい。そのような制御配列としては、リーダー、ポリアデニル化配列、プロペプチド配列、プロモーター、シグナルペプチド配列、及び転写ターミネーターが挙げられるが、これらに限定されない。少なくとも、制御配列としては、プロモーター並びに転写停止シグナル及び翻訳停止シグナルが挙げられる。制御配列には、変異体をコードするポリヌクレオチドのコード領域と制御配列の連結を容易にする特異的な制限部位を導入するためのリンカーが設けられていてもよい。
食器洗浄組成物：用語「食器洗浄組成物」は、本明細書で使用する場合、硬質表面をクリーニングするためのあらゆる形式の組成物を指す。本発明は、食器洗浄組成物の任意の特定の種類又は任意の特定の洗剤に限定されない。したがって、一実施形態において、食器洗浄組成物は、液体食器洗浄組成物、粉末食器洗浄組成物であり、ここで、組成物は、任意選択的に単位用量の形態であってもよい。
洗剤構成成分：用語「洗剤構成成分」は、洗剤組成物において使用され得る化学物質の種類を意味するように本明細書で定義される。洗剤構成成分の例は、界面活性剤、ヒドロトロープ、ビルダー、コビルダー、キレーター又はキレート剤、漂白系又は漂白構成成分、ポリマー、布地色調剤、布地柔軟仕上げ剤、起泡促進剤、起泡抑制剤、分散剤、移染防止剤、蛍光増白剤、香料、光学的光沢剤、殺菌剤、殺真菌剤、汚れ懸濁剤、汚れ遊離ポリマー、再付着防止剤、酵素阻害剤又は安定剤、酵素活性化剤、抗酸化剤、及び可溶化剤である。洗剤構成成分は、洗剤構成成分のいずれかの種類の１種又は複数種のものを含み得る。
洗剤組成物：用語「洗剤組成物」は、クリーニングされる物品、例えば、織物、食器類、及び硬質表面からの望ましくない化合物の除去に用途が見出される組成物を指す。洗剤組成物は、例えば、家庭でのクリーニング及び工業的なクリーニング並びに／又は布地ケアの両方に関する織物、食器類及び硬質表面をクリーニングするために使用され得る。本用語は、特定のタイプの所望のクリーニング組成物及び製品の形態（例えば、液体、ゲル、粉末、顆粒、ペースト、又はスプレー組成物）のために選択されるあらゆる材料／化合物を包含し、限定されないが、洗剤組成物（例えば、液体及び／又は固体洗濯洗剤並びに微細な布地用洗剤；硬質表面用のクリーニング配合物、例えば、ガラス、木材、プラスチック、セラミック及び金属のカウンタートップ及び窓；カーペットクリーナー；オーブンクリーナー；布地フレッシュナー；布地用柔軟剤；並びに織物及び洗濯プレスポッター、並びに食器洗浄洗剤）を含む。本発明の酵素を含有することに加えて、洗剤配合物は、１種又は複数種の追加の酵素（アミラーゼ、プロテアーゼ、ペルオキシダーゼ、セルラーゼ、ベータグルカナーゼ、キシログルカナーゼ、ヘミセルラーゼ、キサンタナーゼ、キサンタンリアーゼ、リパーゼ、アシルトランスフェラーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、ラッカーゼ、カタラーゼ、アリールエステラーゼ、アミラーゼ、アルファ－アミラーゼ、グルコアミラーゼ、クチナーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、ケラチナーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、カラゲナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、アラビノシダーゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、キシログルカナーゼ、キシラナーゼ、ペクチンアセチルエステラーゼ、ポリガラクツロナーゼ、ラムノガラクツロナーゼ、エンド－ベータ－マンナナーゼ、エキソ－ベータ－マンナナーゼ（ＧＨ５及び／又はＧＨ２６）、リケニナーゼ、ホスホジエステラーゼ、ペクチンメチルエステラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、トランスグルタミナーゼ、ヌクレアーゼ、及びその組み合わせ、又はその任意の混合物など）、並びに／又は界面活性剤、ビルダー、キレーター若しくはキレート剤、漂白系若しくは漂白構成成分、ポリマー、布地色調剤、起泡促進剤、起泡抑制剤、染料、香料、黄褐色阻害剤、光学的光沢剤、殺菌剤、殺真菌剤、汚れ懸濁剤、抗腐食剤、酵素阻害剤若しくは安定剤、酵素活性化剤、トランスフェラーゼ、加水分解酵素、オキシドレダクターゼ、青み付け剤及び蛍光色素、抗酸化剤、及び可溶化剤などの構成成分を含有し得る。
食器洗浄：用語「食器洗浄」は、例えば、手動食器洗浄（ＨＤＷ）の又は自動食器洗浄（ＡＤＷ）によって食器を洗浄する全ての形態を指す。食器類を洗浄することは、プレート、カップ、ガラス、ボウルなどの陶器の全ての形態、スプーン、ナイフ、フォーク及び配膳用具などの食卓用金物類の全ての形態並びにセラミックス、プラスチック、金属、陶磁器類、ガラス及びアクリルのクリーニングを含むが、これらに限定されない。
酵素洗浄力による有益性：用語「酵素洗浄力による有益性」は、酵素を伴わない同一の洗剤と比較して、酵素が洗剤に追加し得る有利な効果として本明細書で定義される。酵素によりもたらされることが可能である重要な洗浄力による有益性は、洗浄及び／又はクリーニング後に視認可能な汚れがないか又はほとんどない汚れ除去、洗浄プロセスで遊離した汚れの再付着の防止又は減少（再付着防止とも呼ばれる効果である）、元々は白色であったが反復的な使用及び洗浄の後に灰色がかった若しくは黄色がかった外観となってしまった織物の白色度の完全な又は部分的な回復である（白色化とも呼ばれる効果である）。触媒による汚れ除去若しくは汚れの再付着防止に直接関係はしない、織物の保護による有益性もまた酵素洗浄力による有益性に重要である。このような織物の保護による有益性の例は、ある布地から他の布地へ、若しくは同一の布地の他の部分への移染の防止若しくは減少（移染防止又は逆汚染防止とも呼ばれる効果である）、ピリング傾向を減少させるための布地表面からの突出繊維若しくは破断繊維の除去、又は既に存在している毛玉若しくは綿毛の除去（毛玉防止とも呼ばれる効果である）；布地柔軟性の向上、布地の色の清澄化、及び布地若しくは衣服の繊維中に詰まった粒状の汚れの除去である。酵素的漂白はさらなる酵素洗浄力による有益性であり、ここで、触媒活性は一般に、過酸化水素又は他の過酸化物などの漂白成分の形成を触媒するために用いられる。
発現：用語「発現」は、変異体の産生に関与するあらゆる工程（例えば、限定されないが、転写、転写後変性、翻訳、翻訳後変性、及び分泌）を含む。
発現ベクター：用語「発現ベクター」は、変異体をコードするポリヌクレオチドを含む直鎖状又は環状のＤＮＡ分子であって、その発現をもたらす制御配列に作動可能に連結されている直鎖状又は環状のＤＮＡ分子を意味する。
断片：「断片」という用語は、成熟ポリペプチドのアミノ及び／又はカルボキシル末端に存在しない１個又は複数個の（例えばいくつかの）アミノ酸を有するポリペプチドを意味しており、この断片は、キシログルカナーゼ活性を有する。一態様において、断片は、少なくとも４４５アミノ酸残基、少なくとも４７１アミノ酸残基、又は少なくとも４９７アミノ酸残基を含有する。
融合ポリペプチド：用語「融合ポリペプチド」は、あるポリペプチドが本発明の変異体のＮ－末端又はＣ－末端で融合されているポリペプチドである。融合ポリペプチドは、別のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを本発明のポリヌクレオチドに融合させることにより作製される。融合ポリペプチドを生成する技術は、当技術分野で既知であり、ポリペプチドをコードするコード配列を、この配列がインフレームであり且つ融合ポリペプチドの発現が同一のプロモーター及びターミネーターの制御下であるようにライゲートすることが挙げられる。融合ポリペプチドは、融合ポリペプチドが翻訳後に作成されるインテイン技術を使用しても構築され得る（Ｃｏｏｐｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９３，ＥＭＢＯ Ｊ．１２：２５７５－２５８３；Ｄａｗｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６６：７７６－７７９）。融合ポリペプチドは、２つのポリペプチドの間に開裂部位をさらに含み得る。融合タンパク質の分泌時、この部位が開裂されて２つのポリペプチドが放出される。開裂部位の例として、下記で開示されている部位が挙げられるが、これらに限定されない：Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｉｎｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３：５６８－５７６；Ｓｖｅｔｉｎａ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７６：２４５－２５１；Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ－Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６３：３４８８－３４９３；Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １３：４９８－５０３；及びＣｏｎｔｒｅｒａｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：３７８－３８１；Ｅａｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２５：５０５－５１２；Ｃｏｌｌｉｎｓ－Ｒａｃｉｅ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １３：９８２－９８７；Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ６：２４０－２４８；及びＳｔｅｖｅｎｓ，２００３，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｗｏｒｌｄ ４：３５－４８。
硬質表面クリーニング：用語「硬質表面クリーニング」は硬質表面のクリーニングとして本明細書で定義され、ここで、硬質表面は、床、机、壁、屋根など、並びに自動車（自動車洗浄）及び食器類（食器洗い）などの硬質の物体の表面を含み得る。食器洗浄は、これらに限定されないが、プレート、カップ、グラス、ボウル、スプーン、ナイフ、フォークなどのカトラリー、配膳用具、セラミック、プラスチック、金属、陶磁器、ガラス及びアクリルのクリーニングを含む。
宿主細胞：用語「宿主細胞」は、本発明のポリヌクレオチドを含む核酸コンストラクト又は発現ベクターによる形質転換、トランスフェクション、トランスダクションなどを受けやすい任意の細胞型を意味する。「宿主細胞」という用語は、複製中に生じる突然変異に起因して親細胞と同一ではない、親細胞のあらゆる子孫を包含する。
ハイブリッドポリペプチド：用語「ハイブリッドポリペプチド」は、異なる供給源（起源）由来の２種以上のポリペプチド由来のドメイン、例えば、あるポリペプチド由来の結合モジュール及び別のポリペプチド由来の触媒ドメインを含むポリペプチドを意味する。ドメインは、Ｎ末端又はＣ末端で融合され得る。あるポリペプチド（天然に存在し得るか又はさらに変性され得る）由来の結合モジュール、合成構築物であるプロリンリッチリンカー領域などの操作されたリンカー領域、及び別のポリペプチド（天然に存在し得るか又はさらに変性され得る）由来の触媒ドメインを含むポリペプチドが、本明細書における特別な興味の対象である。
ハイブリダイゼーション：用語「ハイブリダイゼーション」は、標準的なサザンブロッティング手順を使用して核酸の実質的に相補的な鎖の対形成を意味する。ハイブリダイゼーションは、中程度、中程度～高い、高い又は非常に高いストリンジェンシー条件下で実施され得る。中程度のストリンジェンシー条件は、５×ＳＳＰＥ、０．３％ ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの断片処理済みの変性サケ精子ＤＮＡ、及び３５％ホルムアミド中において４２℃で１２～２４時間のプレハイブリダイゼーション及びハイブリダイゼーションに続いて０．２×ＳＳＣ、０．２％ ＳＤＳを使用して５５℃でそれぞれ１５分間の３回の洗浄を行うことを意味する。中程度～高いストリンジェンシー条件は、５×ＳＳＰＥ、０．３％ ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの断片処理済みの変性サケ精子ＤＮＡ、及び３５％ホルムアミド中において４２℃で１２～２４時間のプレハイブリダイゼーション及びハイブリダイゼーションに続いて０．２×ＳＳＣ、０．２％ ＳＤＳを使用して６０℃でそれぞれ１５分間の３回の洗浄を行うことを意味する。高いストリンジェンシー条件は、５×ＳＳＰＥ、０．３％ ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの断片処理済みの変性サケ精子ＤＮＡ、及び５０％ホルムアミド中において４２℃で１２～２４時間のプレハイブリダイゼーション及びハイブリダイゼーションに続いて０．２×ＳＳＣ、０．２％ ＳＤＳを使用して６５℃でそれぞれ１５分間の３回の洗浄を行うことを意味する。非常に高いストリンジェンシー条件は、５×ＳＳＰＥ、０．３％ ＳＤＳ、２００マイクログラム／ｍｌの断片処理済みの変性サケ精子ＤＮＡ、及び５０％ホルムアミド中において４２℃で１２～２４時間のプレハイブリダイゼーション及びハイブリダイゼーションに続いて０．２×ＳＳＣ、０．２％ ＳＤＳを使用して７０℃でそれぞれ１５分間の３回の洗浄を行うことを意味する。
改善された特性：用語「改善された特性」は、参照酵素／親酵素と比較して改善された変異体に関連する特徴を意味する。そのような改善された特性には、改善された洗濯性能、改善された酵素洗浄力による有益性、改善された安定性、及び／又は改善された白色度が含まれるが、これらに限定されるものではない。
改善された安定性：用語「改善された安定性」は、本明細書において、親酵素の酵素活性を低減させる天然又は合成の化学物質の存在下におけるインキュベーション期間後、酵素活性の保持を示す変異体酵素として定義される。改善された安定性は、変異体酵素が、参照酵素／親酵素の安定性と比較して、プロテアーゼの存在下でより優れた安定性を有することを意味し、これには、例えば、タンパク質分解安定性、洗剤中貯蔵安定性、キレーター又はキレート剤の存在下での洗剤中貯蔵安定性、洗剤組成物の製造中の改善された安定性、並びに洗浄中の安定性が含まれる。改善された洗剤安定性は、特に、本発明のキシログルカナーゼ変異体を液体洗剤配合物又は単位用量洗剤配合物中に混合し、次いで１５～５０℃の温度で貯蔵した場合のキシログルカナーゼ活性の改善された安定性である。
本発明において、液体洗剤は、液体洗濯用洗剤及び／又は単位用量洗濯用洗剤として特に有用である。
安定性の改善は、例えば、実施例３に記載されるような洗剤安定性アッセイによって定量化することができる。
改善された洗浄性能：用語「改善された洗浄性能」は、参照酵素／親酵素の洗浄性能と比較して、洗剤組成物中で洗浄性能の増大、例えば、新鮮な試料を評価するとき及び／又は試料が同じ条件下で保管されているとき、色の清澄化及び／又は毛玉防止効果の増大を示す酵素として本明細書で定義される。用語「改善された洗浄性能」は、洗濯中の洗浄性能だけでなく、例えば、自動食器洗浄（ＡＤＷ）などの硬質表面クリーニングにおける洗浄性能も含む。
単離された：用語「単離された」は、ポリペプチド、核酸、細胞、又は自然界に見出されるものとしてそれが自然に関連する少なくとも１つの他の材料若しくは構成成分から分離された他の特定の材料若しくは成分を意味し、限定されないが、例えば、他のタンパク質、核酸、細胞などが含まれる。単離されたポリペプチドは、分泌ポリペプチドを含む培養ブロスを含むが、これに限定されない。
洗濯：用語「洗濯」は、家庭での洗濯及び工業的洗濯の両方に関し、本発明のクリーニング又は洗剤組成物を含有する溶液を用いて織物を処理するプロセスを意味する。例えば、洗濯プロセスは、例えば家庭用若しくは工業用の洗濯機を使用して実施してもよく、又は手によって実施してもよい。
成熟ポリペプチド：用語「成熟したポリペプチド」は、Ｎ－末端プロセシング（例えば、シグナルペプチドの除去）後のその成熟した形態のポリペプチドを意味する。
成熟ポリペプチドコード配列：用語「成熟ポリペプチドコード配列」は、キシログルカナーゼ活性を有する成熟ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを意味する。
突然変異体：用語「突然変異体」は、変異体をコードするポリヌクレオチドを意味する。
変性：用語「変性」は、本発明のポリペプチドの文脈では、参照アミノ酸配列（すなわち、配列番号１、２又は３）内の１個又は複数個のアミノ酸が、異なるアミノ酸によって置換されることによって、アミノ酸の挿入によって、又は欠失によって、好ましくは少なくとも１つの欠失によって改変されていることを意味する。用語「変性」、「改変」、及び「突然変異」は互換的に使用されてもよく、同じ意味及び目的をなす。
核酸コンストラクト：用語「核酸構築物」は、天然に存在する遺伝子から単離した、又は普通では自然界に存在することのない方法で核酸のセグメントを含有するように変性させた、或いは１個又は複数個の制御配列を含む合成物である、一本鎖又は二本鎖のいずれかの核酸分子を意味する。
作動可能に連結された：用語「作動可能に連結された」は、制御配列がコード配列の発現を指示するように制御配列がポリヌクレオチドのコード配列に対して適切な位置に配置されている構成を意味する。
親又は親キシログルカナーゼ：用語「親」又は「親キシログルカナーゼ」は、キシログルカナーゼ活性を有する任意のポリペプチドを意味し、これに改変、例えば、置換、挿入、欠失及び／又は切断を施し、本発明のキシログルカナーゼ変異体を作製する。親は、天然に存在する（野生型）ポリペプチド又はその変異体であり得る。親は、配列番号１の酵素などの天然由来（野生型）ポリペプチド、又はそれに対して少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも６５％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも８５％、さらに好ましくは少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％若しくは少なくとも９９％の配列同一性があるポリペプチドであり得る。親ポリペプチドはまた、本明細書の配列番号２又は配列番号３のポリペプチドなどのアミノ酸配列が変性又は改変された天然由来のポリペプチドの変異体であってもよい。親は、同一の染色体遺伝子座を占める遺伝子の２つ以上の代替形態のいずれかによりコードされるポリペプチドである対立遺伝子変異体でもあり得る。
精製された：用語「精製された」は、当技術分野でよく知られる分析技術によって決定されるとおりの他の成分が実質的にない核酸又はポリペプチドを意味する（例えば、精製されたポリペプチド又は核酸は、電気泳動ゲルにおける分離したバンド、クロマトグラフィー溶出液、及び／又は密度勾配遠心分離にかけられた媒体を形成し得る）。精製された核酸又はポリペプチドは、少なくとも約５０％純粋、通常、少なくとも約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、約９９．５％、約９９．６％、約９９．７％、約９９．８％以上純粋（例えば、重量又はモル濃度基準のパーセント）である。関連する意味において、組成物は、精製又は濃縮技術の適用後に分子の濃度の実質的な増加があるとき、分子に関して濃縮される。用語「濃縮された」は、出発組成物よりも高い相対濃度又は絶対濃度で組成物中に存在する化合物、ポリペプチド、細胞、核酸、アミノ酸、又は他の特定の材料若しくは構成成分を指す。
組換え体：用語「組換え」は、細胞、核酸、タンパク質又はベクターに関して使用する場合、天然の状態から変性されていることを意味する。したがって、例えば、組換え細胞は、細胞の天然形態内に見られない（非組換え型）遺伝子を発現するか、又は自然界に見られるものと異なるレベル若しくは異なる条件下で天然の遺伝子を発現する。組換え核酸は、１個又は複数個のヌクレオチドが天然の配列と異なり、且つ／又は異種配列、例えば、発現ベクターにおける異種プロモーターに作動可能に連結される。組換えタンパク質は、１個又は複数個のアミノ酸が天然の配列と異なる場合があり、且つ／又は異種配列と融合される。ポリペプチドをコードする核酸を含むベクターは、組換えベクターである。用語「組換え」は、「遺伝子変性の」及び「トランスジェニック」と同義である。
配列同一性：２つのアミノ酸配列間又は２つのヌクレオチド配列間の関連性は、パラメータ「配列同一性」によって説明される。
本発明の目的のために、２つのアミノ酸配列間の配列同一性は、好ましくはバージョン５．０．０以降のＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｏｐｅｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｔｒｅｎｄｓ Ｇｅｎｅｔ．１６：２７６－２７７）のＮｅｅｄｌｅプログラムにおいて実装されている、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８；４４３－４５３）を用いて決定する。使用されるパラメータは、１０のギャップオープンペナルティ、０．５のギャップ伸長ペナルティ、及びＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＢＬＯＳＵＭ６２のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスである。「最長同一性（ｌｏｎｇｅｓｔ ｉｄｅｎｔｉｔｙ）」と表示されたＮｅｅｄｌｅ出力（－ｎｏｂｒｉｅｆオプションを使用して得られる）が同一性パーセントとして使用され、次のように計算される。
（同一残基×１００）／（アライメントの長さ－アライメント中のギャップの合計数）
（同一残基×１００）／（アライメントの長さ－アライメント中のギャップの合計数）
本発明の目的上、２つのデオキシリボヌクレオチド配列間の配列相同性は、好ましくはバージョン５．０．０以降のＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ；Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｏｐｅｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ ｅｔ ａｌ．，２０００，前掲）のＮｅｅｄｌｅプログラムに実装されているような、ニードルマン－ブンシュアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，前掲）を用いて決定する。使用されるパラメータは、ギャップ開始ペナルティが１０、ギャップ伸長ペナルティが０．５、及びＥＤＮＡＦＵＬＬ（ＮＣＢＩ ＮＵＣ４．４のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換行列である。「最長同一性（ｌｏｎｇｅｓｔ ｉｄｅｎｔｉｔｙ）」と表示されたＮｅｅｄｌｅ出力（－ｎｏｂｒｉｅｆオプションを使用して得られる）が同一性パーセントとして使用され、次のように計算される。
（同一デオキシリボヌクレオチド×１００）／（アライメントの長さ－アライメント中のギャップの合計数）。
（同一デオキシリボヌクレオチド×１００）／（アライメントの長さ－アライメント中のギャップの合計数）。
部分配列：用語「部分配列」は、成熟ポリペプチドコード配列の５’末端及び／又は３’末端で欠けている１個又は複数個のヌクレオチドを有するポリヌクレオチドを意味し、部分配列は、キシログルカナーゼ活性を有する断片をコードする。
織物：用語「織物」は、織り糸、織り糸中間物、繊維、不織材料、天然材料、合成材料及び任意の他の織物材料を含む任意の織物材料、これらの材料から作られた布地及び布地から作られた製品（例えば、衣服及び他の物品）を意味する。織物又は布地は、ニット、織布、デニム、不織布、フェルト、織り糸及びタオルの形態であり得る。織物は、綿、亜麻／リネン、ジュート、カラムシ、サイザル又はコイアを含む天然セルロース、又はビスコース／レーヨン、酢酸セルロース繊維（ｔｒｉｃｅｌｌ）、リオセル又はそのブレンドを含む人工セルロース（例えば、木材パルプ由来のもの）などのセルロース系のものであり得る。織物又は布地はまた、ウール、ラクダ、カシミヤ、モヘア、ウサギ及び絹などの天然ポリアミド、若しくはナイロン、アラミド、ポリエステル、アクリル、ポリプロピレン及びスパンデックス／エラスタンなどの合成ポリマーなどの非セルロース系のもの、又はそのブレンド、並びにセルロース系繊維及び非セルロース系繊維のブレンドであり得る。ブレンドの例は、綿及び／又はレーヨン／ビスコースと、ウール、合成繊維（例えばポリアミド繊維、アクリル繊維、ポリエステル繊維、ポリ塩化ビニル繊維、ポリウレタン繊維、ポリウレア繊維、アラミド繊維）、及び／又はセルロース－含有繊維（例えばレーヨン／ビスコース、カラムシ、亜麻／リネン、ジュート、酢酸セルロース繊維、リオセル）などの１種又は複数種の随伴材料のブレンドである。布地は、例えば汚れのついた家庭洗濯物といった従来の洗濯のきく洗濯物であり得る。布地又は衣服という用語が用いられる場合、より幅広い用語としての織物をも含むことが意図されている。
変異体：用語「変異体」は、１個又は複数個の（例えば、いくつかの）位置で改変を含み且つ親の活性を保持する、キシログルカナーゼ活性を有するポリペプチドを意味する。置換は、ある位置を占めるアミノ酸の異なるアミノ酸による置き換えを意味する。本発明の変異体は、配列番号１のポリペプチドのキシログルカナーゼ活性の少なくとも２０％、例えば、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は少なくとも１００％を有する。
洗浄液：用語「洗浄液」は、洗濯プロセスにおける洗浄液などの希釈された形態で洗濯洗剤組成物を含有する洗剤溶液などであるがこれに限定されない、希釈された形態で洗剤組成物を含有する水溶液を指す。
白色度：用語「白色度」は、異なる地域及び異なる消費者で異なる意味を有する広範な用語として本明細書で定義される。白色度の低下は、例えば、灰色化、黄色化、又は光学的光沢剤／色調剤の除去に起因し得る。灰色化及び黄色化は、汚れの再付着、身体の汚れ、例えば鉄イオン及び銅イオンからの着色又は移染に起因する場合がある。白色度は、以下のリストからの１個又は複数個の問題点を含み得る：着色料又は染料作用；不完全な汚れの除去（例えば、身体の汚れ、皮脂など）；再付着（物体の灰色化、黄色化、又はその他の変色）（除去した汚れが、汚れた、又は汚れていない織物の他の部分に再結合したもの）；使用中の織物における化学変化；並びに色の清澄化又は明化。
野生型：アミノ酸配列又は核酸配列に関する用語「野生型」は、アミノ酸配列又は核酸配列が天然の配列又は天然に存在する配列であることを意味する。本明細書で使用する場合、用語「天然に存在する」は、天然に見出されるもの（例えば、タンパク質、アミノ酸、又は核酸配列）を指す。逆に、用語「天然に存在しない」は、天然に見出されないもの（例えば、研究室で生成された組換え核酸及びタンパク質配列又は野生型配列の変性）を指す。
キシログルカナーゼ活性：本明細書において、用語「キシログルカナーゼ活性」は、キシログルカンの酵素触媒による加水分解と定義される。この反応は、キシログルカンの１，４－β－Ｄ－グルコシド結合のエンド加水分解を含む。本発明の目的のために、キシログルカナーゼ活性は、反応基質としてＡＺＣＬ－キシログルカン（Ｍｅｇａｚｙｍｅ製）を用いて測定される。このアッセイはいくつかの方法で行うことができ、例えば、本願の実施例２に記載されているように、又は国際公開第０１／６２９０３号パンフレットに記載されているように行うことができる。キシログルカナーゼ活性（ＸｙｌｏＵ）の１単位は、国際公開第０１／６２９０３号パンフレット、６０ページ、３～１７行目に記載のアッセイ方法を参照して定義される。
変異体の表記に関する従来法
本発明の目的で、配列番号１で開示されるキシログルカナーゼのアミノ酸配列を使用して、別のキシログルカナーゼ中の対応するアミノ酸残基を判定する。別のキシログルカナーゼのアミノ酸配列を配列番号１に開示されるキシログルカナーゼのアミノ酸配列とアライメントさせ、このアライメントに基づいて、配列番号１に開示されるキシログルカナーゼのアミノ酸配列内の任意のアミノ酸残基に対応するアミノ酸位置番号を、好ましくはバージョン５．０．０以降のＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ；Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｏｐｅｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｔｒｅｎｄｓ Ｇｅｎｅｔ．１６；２７６－２７７）のＮｅｅｄｌｅプログラムに実装されているような、ニードルマン－ブンシュ（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈ）アルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８；４４３－４５３）を用いて決定する。使用されるパラメータは、１０のギャップオープンペナルティ、０．５のギャップ伸長ペナルティ、及びＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＢＬＯＳＵＭ６２のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスである。
本発明の目的で、配列番号１で開示されるキシログルカナーゼのアミノ酸配列を使用して、別のキシログルカナーゼ中の対応するアミノ酸残基を判定する。別のキシログルカナーゼのアミノ酸配列を配列番号１に開示されるキシログルカナーゼのアミノ酸配列とアライメントさせ、このアライメントに基づいて、配列番号１に開示されるキシログルカナーゼのアミノ酸配列内の任意のアミノ酸残基に対応するアミノ酸位置番号を、好ましくはバージョン５．０．０以降のＥＭＢＯＳＳパッケージ（ＥＭＢＯＳＳ；Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｏｐｅｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｓｕｉｔｅ，Ｒｉｃｅ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｔｒｅｎｄｓ Ｇｅｎｅｔ．１６；２７６－２７７）のＮｅｅｄｌｅプログラムに実装されているような、ニードルマン－ブンシュ（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈ）アルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８；４４３－４５３）を用いて決定する。使用されるパラメータは、１０のギャップオープンペナルティ、０．５のギャップ伸長ペナルティ、及びＥＢＬＯＳＵＭ６２（ＢＬＯＳＵＭ６２のＥＭＢＯＳＳバージョン）置換マトリックスである。
本発明の変異体を記載する際、下記の命名法が、参照の容易さのために適応させられる。承認されたＩＵＰＡＣの一文字又は三文字のアミノ酸略称が利用される。
置換 アミノ酸置換に関して、以下の命名法が使用される：元のアミノ酸、位置、置換されたアミノ酸。したがって、２２６位のスレオニンのアラニンによる置換は、「Ｔｈｒ２２６Ａｌａ」又は「Ｔ２２６Ａ」と命名される。複数の突然変異は、追加の印（「＋」）によって隔てられ、例えば、「Ｇｌｙ２０５Ａｒｇ＋Ｓｅｒ４１１Ｐｈｅ」又は「Ｇ２０５Ｒ＋Ｓ４１１Ｆ」は、それぞれ２０５位及び４１１位のアルギニンＩによるグリシン（Ｇ）及びフェニルアラニン（Ｆ）によるセリン（Ｓ）の置換を表す。
欠失 アミノ酸欠失に関して、以下の命名法が使用される：元のアミノ酸、位置、＊。したがって、１９５位のグリシンの欠失は、「Ｇｌｙ１９５＊」又は「Ｇ１９５＊」と指定される。複数の欠失は、追加の印（「＋」）によって隔てられ、例えば、「Ｇｌｙ１９５＊＋Ｓｅｒ４１１＊」又は「Ｇ１９５＊＋Ｓ４１１＊」である。
挿入 アミノ酸挿入に関して、以下の命名法が使用される：元のアミノ酸、位置、元のアミノ酸、挿入されたアミノ酸。したがって、１９５位でのグリシンの後のリジンの挿入は、「Ｇｌｙ１９５ＧｌｙＬｙｓ」又は「Ｇ１９５ＧＫ」と指定される。複数のアミノ酸の挿入は、［元のアミノ酸、位置、元のアミノ酸、挿入アミノ酸＃１、挿入アミノ酸＃２など］と指定される。例えば、１９５位のグリシンの後のリシン及びアラニンの挿入は、「Ｇｌｙ１９５ＧｌｙＬｙｓＡｌａ」又は「Ｇ１９５ＧＫＡ」と示される。
そのような場合、挿入されたアミノ酸残基は、この挿入されたアミノ酸残基に先行するアミノ酸残基の位置番号への小文字の追加により付番される。上記の例では、配列は下記のようになる。
複数の改変 複数の改変を含む変異体は、加算記号「＋」で分けられ、例えば、「Ａｒｇ１７０Ｔｙｒ＋Ｇｌｙ１９５Ｇｌｕ」又は「Ｒ１７０Ｙ＋Ｇ１９５Ｅ」は、１７０位及び１９５位のアルギニン及びグリシンを、それぞれチロシン及びグルタミン酸で置換することを表す。
異なる改変 異なる改変がある位置で導入され得る場合、異なる変化は、カンマによって隔てられ、例えば、「Ａｒｇ１７０Ｔｙｒ，Ｇｌｕ」は、１７０位のアルギニンのチロシン又はグルタミン酸による置換を表す。したがって、「Ｔｙｒ１６７Ｇｌｙ，Ａｌａ＋Ａｒｇ１７０Ｇｌｙ，Ａｌａ」は、以下の変異体を命名する：
「Ｔｙｒ１６７Ｇｌｙ＋Ａｒｇ１７０Ｇｌｙ」、「Ｔｙｒ１６７Ｇｌｙ＋Ａｒｇ１７０Ａｌａ」、「Ｔｙｒ１６７Ａｌａ＋Ａｒｇ１７０Ｇｌｙ」、及び「Ｔｙｒ１６７Ａｌａ＋Ａｒｇ１７０Ａｌａ」。
「Ｔｙｒ１６７Ｇｌｙ＋Ａｒｇ１７０Ｇｌｙ」、「Ｔｙｒ１６７Ｇｌｙ＋Ａｒｇ１７０Ａｌａ」、「Ｔｙｒ１６７Ａｌａ＋Ａｒｇ１７０Ｇｌｙ」、及び「Ｔｙｒ１６７Ａｌａ＋Ａｒｇ１７０Ａｌａ」。
キシログルカナーゼ変異体
本発明は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置での改変を含む、キシログルカナーゼ活性を有する単離されたキシログルカナーゼ変異体に関する。好ましくは、変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有し、キシログルカナーゼ活性を有する。
本発明は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置での改変を含む、キシログルカナーゼ活性を有する単離されたキシログルカナーゼ変異体に関する。好ましくは、変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有し、キシログルカナーゼ活性を有する。
本発明は、配列番号２のポリペプチドの１２９Ｔ位に相当する位置に置換を含む、キシログルカナーゼ活性を有する単離されたキシログルカナーゼ変異体に関する。好ましくは、変異体は、配列番号２のポリペプチドに対して少なくとも９９％の配列同一性であるが１００％未満配列同一性を有する。特に、本発明は、配列番号３のポリペプチドを含む、又はそれからなる単離されたキシログルカナーゼ変異体に関する。
一実施形態において、変異体は、親キシログルカナーゼのアミノ酸配列に対して、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％であるが、１００％未満などの少なくとも６０％の配列同一性を有する。
他の実施形態において、変異体は、配列番号１のポリペプチドに対して、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％であって、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％であるが、１００％未満などの配列同一性を有する。
他の実施形態において、変異体は、配列番号２のポリペプチドに対して、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％であって、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％であるが、１００％未満などの配列同一性を有する。
他の実施形態において、変異体は、配列番号３のポリペプチドに対して、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％であって、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％であるが、１００％未満などの配列同一性を有する。
一態様において、改変の数は、１～５０、例えば、１～４５、１～４０、１～３５、１～３０、１～２５、１～２０、１～１５、１～１０又は１～５、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９又は５０個の改変である。
一態において、置換の数は、１～５０、例えば、１～４５、１～４０、１～３５、１～３０、１～２５、１～２０、１～１５、１～１０又は１～５、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９又は５０個の置換である。
一態様において、欠失の数は、１～５０、例えば、１～４５、１～４０、１～３５、１～３０、１～２５、１～２０、１～１５、１～１０又は１～５、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９又は５０個の欠失である。
一態様において、置換アミノ酸残基は、その位置の天然に存在するアミノ酸残基と異なっている。一実施形態において、置換は、Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｐ、Ｑ、Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｖ、Ｗ及びＹからなる群から選択されるが、ただし、置換アミノ酸残基がその位置の天然に存在するアミノ酸残基と異なっている。
一実施形態において、本発明のキシログルカナーゼ変異体は、単離された変異体である。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する２以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する３以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する４以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する５以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する６以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する７以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する８以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する９以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１０以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１１以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１２以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１３以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１４以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１５以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１６以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１７以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１８以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１９以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する２０以上の位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する各位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１２９、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する各位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
別の態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドの１１１、１２３、１２９、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する各位置での改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＰ１１１、Ｓ１２３、Ｖ１５９、Ｓ２５６、Ｉ２９４、Ｋ８、Ｋ１８、Ｒ２０、Ａ４１、Ａ４２、Ｓ７６、Ｑ８２、Ａ８３、Ｋ８７、Ｓ９４、Ｇ１０３、Ｔ１０４、Ｙ１０５、Ａ１１８、Ｎ１２１、Ｑ１２５、Ｅ１２６、Ｓ１２７、Ｎ１３６、Ｑ１３７、Ｆ１４６、Ｑ１４７、Ｌ１４８、Ｌ１５２、Ｎ１５３、Ｎ１５５、Ｆ１６５、Ｎ１６８、Ｋ１６９、Ａ１７７、Ｌ１８４、Ａ１８９、Ｖ２０３、Ｋ２０６、Ｄ２１０、Ｒ２１１、Ｓ２１４、Ｋ２１７、Ｖ２１９、Ｋ２２０、Ａ２２６、Ｇ２３７、Ａ２３８、Ｋ２４０、Ｑ２４３、Ｔ２４４、Ｗ２４８、Ｖ２５１、Ｋ２５２、Ｒ２６７、Ｑ２７１、Ｒ２７６、Ａ２８９、Ｒ２９５、Ｎ２９８、Ｖ３００、Ｎ３０２、Ｋ３２２、Ｑ３２９、Ｐ３３９、Ｋ３４７、Ｒ３４７、Ｋ３５３、Ｒ３５３、Ｎ３８３、Ｄ３８４、Ｋ３９２、Ｋ３９４、Ｄ３９５、Ｐ３９５、Ｓ４０２、Ｋ４１４、Ｔ４２７、Ｖ４３１、Ｋ４４５、Ｌ４４７、Ａ４５９、Ｉ４７３、Ｓ４７４、Ｋ４７６、Ｋ４８２、Ｋ４８８、Ｅ４８９、Ａ４９１、Ｐ４９２、Ｙ５０３及びＶ５０５位に相当する位置で１個又は複数個の改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＰ１１１、Ｓ１２３、Ｖ１５９、Ｓ２５６、Ｉ２９４、Ｋ８、Ｋ１８、Ｒ２０、Ａ４１、Ａ４２、Ｓ７６、Ｑ８２、Ａ８３、Ｋ８７、Ｓ９４、Ｇ１０３、Ｔ１０４、Ｙ１０５、Ａ１１８、Ｎ１２１、Ｑ１２５、Ｅ１２６、Ｓ１２７、Ｋ１２９、Ｎ１３６、Ｑ１３７、Ｆ１４６、Ｑ１４７、Ｌ１４８、Ｌ１５２、Ｎ１５３、Ｎ１５５、Ｆ１６５、Ｎ１６８、Ｋ１６９、Ａ１７７、Ｌ１８４、Ａ１８９、Ｖ２０３、Ｋ２０６、Ｄ２１０、Ｒ２１１、Ｓ２１４、Ｋ２１７、Ｖ２１９、Ｋ２２０、Ａ２２６、Ｇ２３７、Ａ２３８、Ｋ２４０、Ｑ２４３、Ｔ２４４、Ｗ２４８、Ｖ２５１、Ｋ２５２、Ｒ２６７、Ｑ２７１、Ｒ２７６、Ａ２８９、Ｒ２９５、Ｎ２９８、Ｖ３００、Ｎ３０２、Ｋ３２２、Ｑ３２９、Ｐ３３９、Ｋ３４７、Ｒ３４７、Ｋ３５３、Ｒ３５３、Ｎ３８３、Ｄ３８４、Ｋ３９２、Ｋ３９４、Ｄ３９５、Ｐ３９５、Ｓ４０２、Ｋ４１４、Ｔ４２７、Ｖ４３１、Ｋ４４５、Ｌ４４７、Ａ４５９、Ｉ４７３、Ｓ４７４、Ｋ４７６、Ｋ４８２、Ｋ４８８、Ｅ４８９、Ａ４９１、Ｐ４９２、Ｙ５０３及びＶ５０５位に相当する位置で１個又は複数個の改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＰ１１１、Ｓ１２３、Ｖ１５９、Ｓ２５６、Ｉ２９４、Ｋ８、Ｋ１８、Ｒ２０、Ａ４１、Ａ４２、Ｓ７６、Ｑ８２、Ａ８３、Ｋ８７、Ｓ９４、Ｇ１０３、Ｔ１０４、Ｙ１０５、Ａ１１８、Ｎ１２１、Ｑ１２５、Ｅ１２６、Ｓ１２７、Ａ１２９、Ｎ１３６、Ｑ１３７、Ｆ１４６、Ｑ１４７、Ｌ１４８、Ｌ１５２、Ｎ１５３、Ｎ１５５、Ｆ１６５、Ｎ１６８、Ｋ１６９、Ａ１７７、Ｌ１８４、Ａ１８９、Ｖ２０３、Ｋ２０６、Ｄ２１０、Ｒ２１１、Ｓ２１４、Ｋ２１７、Ｖ２１９、Ｋ２２０、Ａ２２６、Ｇ２３７、Ａ２３８、Ｋ２４０、Ｑ２４３、Ｔ２４４、Ｗ２４８、Ｖ２５１、Ｋ２５２、Ｒ２６７、Ｑ２７１、Ｒ２７６、Ａ２８９、Ｒ２９５、Ｎ２９８、Ｖ３００、Ｎ３０２、Ｋ３２２、Ｑ３２９、Ｐ３３９、Ｋ３４７、Ｒ３４７、Ｋ３５３、Ｒ３５３、Ｎ３８３、Ｄ３８４、Ｋ３９２、Ｋ３９４、Ｄ３９５、Ｐ３９５、Ｓ４０２、Ｋ４１４、Ｔ４２７、Ｖ４３１、Ｋ４４５、Ｌ４４７、Ａ４５９、Ｉ４７３、Ｓ４７４、Ｋ４７６、Ｋ４８２、Ｋ４８８、Ｅ４８９、Ａ４９１、Ｐ４９２、Ｙ５０３及びＶ５０５位に相当する位置で１個又は複数個の改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＰ１１１Ｑ、Ｓ１２３Ｐ、Ｖ１５９Ｍ、Ｓ２５６Ｅ、Ｓ２５６Ｑ、Ｉ２９４Ｅ、Ｉ２９４Ｑ、Ｋ８Ｅ、Ｋ８Ｒ、Ｋ１８Ｅ、Ｒ２０Ｋ、Ａ４１Ｌ、Ａ４１Ｅ、Ａ４１Ｒ、Ａ４２Ｖ、Ｓ７６Ｅ、Ｑ８２Ｅ、Ａ８３Ｅ、Ｋ８７Ｅ、Ｓ９４Ｒ、Ｇ１０３Ｖ、Ｔ１０４Ｇ、Ｔ１０４Ｒ、Ｙ１０５Ｅ、Ａ１１８Ｋ、Ｎ１２１Ｅ、Ｑ１２５Ｆ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｌ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、Ｅ１２６Ｐ、Ｓ１２７Ｈ、Ｓ１２７Ｌ、Ｓ１２７Ｗ、Ｓ１２７Ｄ、Ｎ１３６Ｄ、Ｑ１３７Ｅ、Ｑ１３７Ｋ、Ｆ１４６Ｄ、Ｑ１４７Ｇ、Ｑ１４７Ｋ、Ｌ１４８Ｐ、Ｌ１５２＊、Ｌ１５２Ｄ、Ｌ１５２Ｅ、Ｌ１５２Ｐ、Ｎ１５３Ｅ、Ｎ１５５Ｄ、Ｎ１５５Ｅ、Ｆ１６５Ｈ、Ｎ１６８Ｒ、Ｋ１６９Ｅ、Ｋ１６９Ｒ、Ａ１７７Ｇ、Ｌ１８４Ｍ、Ａ１８９Ｇ、Ｖ２０３Ｔ、Ｋ２０６Ｅ、Ｋ２０６Ｒ、Ｄ２１０Ｈ、Ｄ２１０Ｒ、Ｒ２１１Ｋ、Ｓ２１４Ｑ、Ｋ２１７Ｒ、Ｋ２１７Ｔ、Ｖ２１９Ａ、Ｖ２１９Ｔ、Ｋ２２０Ｒ、Ａ２２６Ｄ、Ａ２２６Ｋ、Ｇ２３７Ｍ、Ａ２３８Ｓ、Ａ２３８Ｔ、Ｋ２４０Ｆ、Ｋ２４０Ｌ、Ｑ２４３Ｅ、Ｔ２４４Ｅ、Ｔ２４４Ｒ、Ｗ２４８Ｖ、Ｖ２５１Ｅ、Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２６７Ｃ、Ｒ２６７Ｈ、Ｒ２６７Ｋ、Ｑ２７１Ｄ、Ｑ２７１Ｅ、Ｒ２７６Ｋ、Ａ２８９Ｔ、Ｒ２９５Ｋ、Ｎ２９８Ｄ、Ｖ３００Ｌ、Ｎ３０２Ｈ、Ｋ３２２Ｅ、Ｑ３２９Ｅ、Ｐ３３９Ｓ、Ｋ３４７Ｅ、Ｋ３４７Ｒ、Ｋ３５３Ｒ、Ｎ３８３Ｅ、Ｎ３８３Ｑ、Ｄ３８４Ｇ、Ｋ３９２Ｅ、Ｋ３９４Ｒ、Ｄ３９５Ｐ、Ｓ４０２Ｑ、Ｋ４１４Ｅ、Ｔ４２７Ｖ、Ｖ４３１Ｅ、Ｋ４４５Ｅ、Ｌ４４７Ｍ、Ａ４５９Ｐ、Ｉ４７３Ｔ、Ｓ４７４Ｅ、Ｋ４７６Ｒ、Ｋ４８２Ｒ、Ｋ４８８Ｔ、Ｅ４８９Ｋ、Ｅ４８９Ｒ、Ａ４９１Ｅ、Ａ４９１Ｖ、Ｐ４９２Ｄ、Ｙ５０３Ｌ、Ｙ５０３Ｖ及びＶ５０５Ｌ位に相当する位置で１個又は複数個の以下の改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＰ１１１Ｑ、Ｓ１２３Ｐ、Ｖ１５９Ｍ、Ｓ２５６Ｅ、Ｓ２５６Ｑ、Ｉ２９４Ｅ、Ｉ２９４Ｑ、Ｋ８Ｅ、Ｋ８Ｒ、Ｋ１８Ｅ、Ｒ２０Ｋ、Ａ４１Ｌ、Ａ４１Ｅ、Ａ４１Ｒ、Ａ４２Ｖ、Ｓ７６Ｅ、Ｑ８２Ｅ、Ａ８３Ｅ、Ｋ８７Ｅ、Ｓ９４Ｒ、Ｇ１０３Ｖ、Ｔ１０４Ｇ、Ｔ１０４Ｒ、Ｙ１０５Ｅ、Ａ１１８Ｋ、Ｎ１２１Ｅ、Ｑ１２５Ｆ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｌ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、Ｅ１２６Ｐ、Ｓ１２７Ｈ、Ｓ１２７Ｌ、Ｓ１２７Ｗ、Ｓ１２７Ｄ、Ｋ１２９Ａ、Ｋ１２９Ｔ、Ｎ１３６Ｄ、Ｑ１３７Ｅ、Ｑ１３７Ｋ、Ｆ１４６Ｄ、Ｑ１４７Ｇ、Ｑ１４７Ｋ、Ｌ１４８Ｐ、Ｌ１５２＊、Ｌ１５２Ｄ、Ｌ１５２Ｅ、Ｌ１５２Ｐ、Ｎ１５３Ｅ、Ｎ１５５Ｄ、Ｎ１５５Ｅ、Ｆ１６５Ｈ、Ｎ１６８Ｒ、Ｋ１６９Ｅ、Ｋ１６９Ｒ、Ａ１７７Ｇ、Ｌ１８４Ｍ、Ａ１８９Ｇ、Ｖ２０３Ｔ、Ｋ２０６Ｅ、Ｋ２０６Ｒ、Ｄ２１０Ｈ、Ｄ２１０Ｒ、Ｒ２１１Ｋ、Ｓ２１４Ｑ、Ｋ２１７Ｒ、Ｋ２１７Ｔ、Ｖ２１９Ａ、Ｖ２１９Ｔ、Ｋ２２０Ｒ、Ａ２２６Ｄ、Ａ２２６Ｋ、Ｇ２３７Ｍ、Ａ２３８Ｓ、Ａ２３８Ｔ、Ｋ２４０Ｆ、Ｋ２４０Ｌ、Ｑ２４３Ｅ、Ｔ２４４Ｅ、Ｔ２４４Ｒ、Ｗ２４８Ｖ、Ｖ２５１Ｅ、Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２６７Ｃ、Ｒ２６７Ｈ、Ｒ２６７Ｋ、Ｑ２７１Ｄ、Ｑ２７１Ｅ、Ｒ２７６Ｋ、Ａ２８９Ｔ、Ｒ２９５Ｋ、Ｎ２９８Ｄ、Ｖ３００Ｌ、Ｎ３０２Ｈ、Ｋ３２２Ｅ、Ｑ３２９Ｅ、Ｐ３３９Ｓ、Ｋ３４７Ｅ、Ｋ３４７Ｒ、Ｋ３５３Ｒ、Ｎ３８３Ｅ、Ｎ３８３Ｑ、Ｄ３８４Ｇ、Ｋ３９２Ｅ、Ｋ３９４Ｒ、Ｄ３９５Ｐ、Ｓ４０２Ｑ、Ｋ４１４Ｅ、Ｔ４２７Ｖ、Ｖ４３１Ｅ、Ｋ４４５Ｅ、Ｌ４４７Ｍ、Ａ４５９Ｐ、Ｉ４７３Ｔ、Ｓ４７４Ｅ、Ｋ４７６Ｒ、Ｋ４８２Ｒ、Ｋ４８８Ｔ、Ｅ４８９Ｋ、Ｅ４８９Ｒ、Ａ４９１Ｅ、Ａ４９１Ｖ、Ｐ４９２Ｄ、Ｙ５０３Ｌ、Ｙ５０３Ｖ及びＶ５０５Ｌ位に相当する位置で１個又は複数個の改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＰ１１１Ｑ、Ｓ１２３Ｐ、Ｖ１５９Ｍ、Ｓ２５６Ｅ、Ｓ２５６Ｑ、Ｉ２９４Ｅ、Ｉ２９４Ｑ、Ｋ８Ｅ、Ｋ８Ｒ、Ｋ１８Ｅ、Ｒ２０Ｋ、Ａ４１Ｌ、Ａ４１Ｅ、Ａ４１Ｒ、Ａ４２Ｖ、Ｓ７６Ｅ、Ｑ８２Ｅ、Ａ８３Ｅ、Ｋ８７Ｅ、Ｓ９４Ｒ、Ｇ１０３Ｖ、Ｔ１０４Ｇ、Ｔ１０４Ｒ、Ｙ１０５Ｅ、Ａ１１８Ｋ、Ｎ１２１Ｅ、Ｑ１２５Ｆ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｌ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、Ｅ１２６Ｐ、Ｓ１２７Ｈ、Ｓ１２７Ｌ、Ｓ１２７Ｗ、Ｓ１２７Ｄ、Ａ１２９Ｔ、Ｎ１３６Ｄ、Ｑ１３７Ｅ、Ｑ１３７Ｋ、Ｆ１４６Ｄ、Ｑ１４７Ｇ、Ｑ１４７Ｋ、Ｌ１４８Ｐ、Ｌ１５２＊、Ｌ１５２Ｄ、Ｌ１５２Ｅ、Ｌ１５２Ｐ、Ｎ１５３Ｅ、Ｎ１５５Ｄ、Ｎ１５５Ｅ、Ｆ１６５Ｈ、Ｎ１６８Ｒ、Ｋ１６９Ｅ、Ｋ１６９Ｒ、Ａ１７７Ｇ、Ｌ１８４Ｍ、Ａ１８９Ｇ、Ｖ２０３Ｔ、Ｋ２０６Ｅ、Ｋ２０６Ｒ、Ｄ２１０Ｈ、Ｄ２１０Ｒ、Ｒ２１１Ｋ、Ｓ２１４Ｑ、Ｋ２１７Ｒ、Ｋ２１７Ｔ、Ｖ２１９Ａ、Ｖ２１９Ｔ、Ｋ２２０Ｒ、Ａ２２６Ｄ、Ａ２２６Ｋ、Ｇ２３７Ｍ、Ａ２３８Ｓ、Ａ２３８Ｔ、Ｋ２４０Ｆ、Ｋ２４０Ｌ、Ｑ２４３Ｅ、Ｔ２４４Ｅ、Ｔ２４４Ｒ、Ｗ２４８Ｖ、Ｖ２５１Ｅ、Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２６７Ｃ、Ｒ２６７Ｈ、Ｒ２６７Ｋ、Ｑ２７１Ｄ、Ｑ２７１Ｅ、Ｒ２７６Ｋ、Ａ２８９Ｔ、Ｒ２９５Ｋ、Ｎ２９８Ｄ、Ｖ３００Ｌ、Ｎ３０２Ｈ、Ｋ３２２Ｅ、Ｑ３２９Ｅ、Ｐ３３９Ｓ、Ｋ３４７Ｅ、Ｋ３４７Ｒ、Ｋ３５３Ｒ、Ｎ３８３Ｅ、Ｎ３８３Ｑ、Ｄ３８４Ｇ、Ｋ３９２Ｅ、Ｋ３９４Ｒ、Ｄ３９５Ｐ、Ｓ４０２Ｑ、Ｋ４１４Ｅ、Ｔ４２７Ｖ、Ｖ４３１Ｅ、Ｋ４４５Ｅ、Ｌ４４７Ｍ、Ａ４５９Ｐ、Ｉ４７３Ｔ、Ｓ４７４Ｅ、Ｋ４７６Ｒ、Ｋ４８２Ｒ、Ｋ４８８Ｔ、Ｅ４８９Ｋ、Ｅ４８９Ｒ、Ａ４９１Ｅ、Ａ４９１Ｖ、Ｐ４９２Ｄ、Ｙ５０３Ｌ、Ｙ５０３Ｖ及びＶ５０５Ｌ位に相当する位置で１個又は複数個の改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
他の態様において、変異体は、８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ８Ｒ又はＫ８Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ１８Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２０位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２０位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｒ２０Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ４１Ｅ、又はＡ４１Ｌ、又はＡ４１Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ４２Ｖを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、７６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、７６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ７６Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、８２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、８２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｑ８２Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、８３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、８３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ８３Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、８７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、８７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ８７Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、９４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、９４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ９４Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１０３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１０３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｖａｌによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｇ１０３Ｖを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１０４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１０４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｇｌｙ、Ａｒｇによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｔ１０４Ｇ又はＴ１０４Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１０５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１０５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｙ１０５Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１１１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１１１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｐ１１１Ｑを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１１８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１１８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ１１８Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１２１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１２１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ１２１Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１２３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１２３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ１２３Ｐを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１２５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１２５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、最も好ましくは、Ｓｅｒによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｑ１２５Ｆ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｌ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、最も好ましくは、Ｑ１２５Ｓを含むか又はそれからなる。
他の態様において、変異体は、位置１２６に対応する位置における置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１２６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｅ１２６Ｐを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１２７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１２７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ１２７Ｈ又はＳ１２７Ｌ又はＳ１２７Ｗ又はＳ１２７Ｄを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１３６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１３６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ１３６Ｄを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１３７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１３７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｑ１３７Ｅ又はＱ１３７Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１４６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１４６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｆ１４６Ｄを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１４７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１４７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｑ１４７Ｇ又はＱ１４７Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１４８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１４８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｌ１４８Ｐを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１５２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１５２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換又は欠失Ｌ１５２Ｄ又はＬ１５２Ｅ又はＬ１５２Ｐ又はＬ１５２＊を含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１５３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１５３位に対応する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ１５３Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１５５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１５５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ１５５Ｄ又はＮ１５５Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１５９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１５９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｖ１５９Ｍを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１６５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１６５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｆ１６５Ｈを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１６８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１６８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ１６８Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１６９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１６９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ１６９Ｅ又はＫ１６９Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１７７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１７７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ１７７Ｇを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１８４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１８４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｌ１８４Ｍを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、１８９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、１８９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ１８９Ｇを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２０３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２０３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｖ２０３Ｔを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２０６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２０６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ２０６Ｅ又はＫ２０６Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２１０位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２１０位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏで置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｄ２１０Ｈ又はＤ２１０Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２１１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２１１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｒ２１１Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２１４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２１４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ２１４Ｑを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２１７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２１７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ２１７Ｒ又はＫ２１７Ｔを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２１９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２１９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｖ２１９Ａ又はＶ２１９Ｔを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２２０位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２２０位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ２２０Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２２６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２２６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ２２６Ｄ又はＡ２２６Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２３７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２３７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｇ２３７Ｍを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２３８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２３８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ２３８Ｓ又はＡ２３８Ｔを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２４０位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２４０位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ２４０Ｌ又はＫ２４０Ｆを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２４３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２４３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｑ２４３Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２４４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２４４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｔ２４４Ｅ又はＴ２４４Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２４８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２４８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｗ２４８Ｖを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２５１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２５１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｖ２５１Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２５２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２５２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ２５２Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２５６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２５６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ２５６Ｅ又はＳ２５６Ｑを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２６７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２６７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｒ２６７Ｃ、又はＲ２６７Ｈ、又はＲ２６７Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２７１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２７１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｑ２７１Ｄ又はＱ２７１Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２７６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２７６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｒ２７６Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２８９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２８９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ２８９Ｔを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２９４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２９４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｉ２９４Ｅ又はＩ２９４Ｑを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２９５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２９５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｒ２９５Ｋを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、２９８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、２９８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ２９８Ｄを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３００位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３００位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｖ３００Ｌを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３０２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３０２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ３０２Ｈを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３２２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３２２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ３２２Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３２９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３２９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｑ３２９Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３３９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３３９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｐ３３９Ｓを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３４７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３４７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ３４７Ｅ又はＫ３４７Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３５３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３５３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ３５３Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３８３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３８３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｎ３８３Ｅ又はＮ３８３Ｑを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３８４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。ある実施形態では、別の態様において、３８４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏで置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｄ３８４Ｇを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３９２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３９２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ３９２Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３９４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、３９４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ３９４Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、３９５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。ある実施形態では、別の態様において、３９５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏで置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｄ３９５Ｐを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４０２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４０２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ４０２Ｑを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４１４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４１４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ４１４Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４２７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４２７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｔ４２７Ｖを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４３１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４３１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、又はＴｙｒ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｖ４３１Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４４５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４４５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ４４５Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４４７位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４４７位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｌ４４７Ｍを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４５９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４５９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ４５９Ｐを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４７３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４７３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｉ４７３Ｔを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４７４位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４７４位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｓ４７４Ｅを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４７６位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４７６位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ４７６Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４８２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４８２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ４８２Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４８８位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４８８位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｋ４８８Ｔを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４８９位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４８９位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｅ４８９Ｋ又はＥ４８９Ｒを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４９１位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４９１位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ａ４９１Ｅ又はＡ４９１Ｖを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、４９２位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、４９２位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｐ４９２Ｄを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、５０３位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、５０３位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、又はＶａｌ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｙ５０３Ｌ又はＹ５０３Ｖを含むか又はそれからなる。
別の態様において、変異体は、５０５位に相当する位置に置換を含むか又はそれからなる。別の態様において、５０５位に相当する位置のアミノ酸は、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、又はＴｙｒ、好ましくは、Ｐｒｏによって置換される。別の態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの置換Ｖ５０５Ｌを含むか又はそれからなる。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＥ１２６Ｐ、Ｓ１２７Ｈ、Ｔ１０４Ｇ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、Ｄ３９５Ｐ、Ｇ１０３Ｖ、Ｔ１０４Ｒ、Ｑ１２５Ｌ、Ａ４１Ｅ、Ａ４１Ｒ、Ｑ１２５Ｆ、Ｓ１２７Ｌ、Ａ２２６Ｋ、Ａ４１Ｌ、Ａ２２６Ｄ、Ｋ３９４Ｒ、Ｓ１２７Ｄ、Ｒ２１１Ｋ、Ｓ１２３Ｐ、Ｋ４８８Ｔ、Ｓ２５６Ｑ、Ｋ４７６Ｒ、Ｋ２１７Ｒ、Ｑ２７１Ｄ、Ｓ２１４Ｑ、Ｌ４４７Ｍ、Ｋ４８２Ｒ、Ｋ１６９Ｒ、Ｌ１５２Ｄ、Ｒ２６７Ｋ、Ｌ１５２Ｅ、Ｄ２１０Ｒ、Ｌ１５２＊、Ｒ２９５Ｋ、Ｎ１５５Ｄ、Ｑ１３７Ｋ、Ｎ１５５Ｅ、Ｑ１４７Ｋ、Ｒ２７６Ｋ、Ｖ２０３Ｔ、Ｓ９４Ｒ、Ｋ１８Ｅ、Ｋ２５２Ｅ、Ｖ２１９Ｔ、Ｑ２４３Ｅ、Ｋ４１４Ｅ、Ｋ４４５Ｅ、Ｖ１５９Ｍ、Ｋ３９２Ｅ、Ｑ８２Ｅ、Ｓ７６Ｅ、Ａ８３Ｅ、Ｑ２７１Ｅ、Ｓ２５６Ｅ、Ｉ２９４Ｅ、Ｑ３２９Ｅ、Ｖ４３１Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＥ１２６Ｐ、Ｓ１２７Ｈ、Ｔ１０４Ｇ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、Ｋ１２９Ｔ、Ｋ１２９Ａ、Ｄ３９５Ｐ、Ｇ１０３Ｖ、Ｔ１０４Ｒ、Ｑ１２５Ｌ、Ａ４１Ｅ、Ａ４１Ｒ、Ｑ１２５Ｆ、Ｓ１２７Ｌ、Ａ２２６Ｋ、Ａ４１Ｌ、Ａ２２６Ｄ、Ｋ３９４Ｒ、Ｓ１２７Ｄ、Ｒ２１１Ｋ、Ｓ１２３Ｐ、Ｋ４８８Ｔ、Ｓ２５６Ｑ、Ｋ４７６Ｒ、Ｋ２１７Ｒ、Ｑ２７１Ｄ、Ｓ２１４Ｑ、Ｌ４４７Ｍ、Ｋ４８２Ｒ、Ｋ１６９Ｒ、Ｌ１５２Ｄ、Ｒ２６７Ｋ、Ｌ１５２Ｅ、Ｄ２１０Ｒ、Ｌ１５２＊、Ｒ２９５Ｋ、Ｎ１５５Ｄ、Ｑ１３７Ｋ、Ｎ１５５Ｅ、Ｑ１４７Ｋ、Ｒ２７６Ｋ、Ｖ２０３Ｔ、Ｓ９４Ｒ、Ｋ１８Ｅ、Ｋ２５２Ｅ、Ｖ２１９Ｔ、Ｑ２４３Ｅ、Ｋ４１４Ｅ、Ｋ４４５Ｅ、Ｖ１５９Ｍ、Ｋ３９２Ｅ、Ｑ８２Ｅ、Ｓ７６Ｅ、Ａ８３Ｅ、Ｑ２７１Ｅ、Ｓ２５６Ｅ、Ｉ２９４Ｅ、Ｑ３２９Ｅ、Ｖ４３１Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＥ１２６Ｐ、Ｓ１２７Ｈ、Ｔ１０４Ｇ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、Ａ１２９Ｔ、Ｄ３９５Ｐ、Ｇ１０３Ｖ、Ｔ１０４Ｒ、Ｑ１２５Ｌ、Ａ４１Ｅ、Ａ４１Ｒ、Ｑ１２５Ｆ、Ｓ１２７Ｌ、Ａ２２６Ｋ、Ａ４１Ｌ、Ａ２２６Ｄ、Ｋ３９４Ｒ、Ｓ１２７Ｄ、Ｒ２１１Ｋ、Ｓ１２３Ｐ、Ｋ４８８Ｔ、Ｓ２５６Ｑ、Ｋ４７６Ｒ、Ｋ２１７Ｒ、Ｑ２７１Ｄ、Ｓ２１４Ｑ、Ｌ４４７Ｍ、Ｋ４８２Ｒ、Ｋ１６９Ｒ、Ｌ１５２Ｄ、Ｒ２６７Ｋ、Ｌ１５２Ｅ、Ｄ２１０Ｒ、Ｌ１５２＊、Ｒ２９５Ｋ、Ｎ１５５Ｄ、Ｑ１３７Ｋ、Ｎ１５５Ｅ、Ｑ１４７Ｋ、Ｒ２７６Ｋ、Ｖ２０３Ｔ、Ｓ９４Ｒ、Ｋ１８Ｅ、Ｋ２５２Ｅ、Ｖ２１９Ｔ、Ｑ２４３Ｅ、Ｋ４１４Ｅ、Ｋ４４５Ｅ、Ｖ１５９Ｍ、Ｋ３９２Ｅ、Ｑ８２Ｅ、Ｓ７６Ｅ、Ａ８３Ｅ、Ｑ２７１Ｅ、Ｓ２５６Ｅ、Ｉ２９４Ｅ、Ｑ３２９Ｅ、Ｖ４３１Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、Ｒ２６７Ｃ＋Ｔ４２７Ｖ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｄ３９５Ｐ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ、Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、Ｙ５０３Ｌ＋Ｖ５０５Ｌ、Ｙ５０３Ｖ＋Ｖ５０５Ｌ、Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ａからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２６７Ｃ＋Ｔ４２７Ｖ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｄ３９５Ｐ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｙ５０３Ｌ＋Ｖ５０５Ｌ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｙ５０３Ｖ＋Ｖ５０５Ｌ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ａ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２６７Ｃ＋Ｔ４２７Ｖ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｄ３９５Ｐ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ａ１２９Ｔ、Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ａ１２９Ｔ、Ｙ５０３Ｌ＋Ｖ５０５Ｌ＋Ａ１２９Ｔ、Ｙ５０３Ｖ＋Ｖ５０５Ｌ＋Ａ１２９Ｔ、Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ａ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＲ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＲ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＲ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ｋ３５３Ｒ＋Ｄ３９５Ｐ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２６７Ｋ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１３６Ｄ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ、Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２２０Ｒ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ、Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２１９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ｋ３５３Ｒ＋Ｄ３９５Ｐ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２６７Ｋ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＳ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ｋ３５３Ｒ＋Ｄ３９５Ｐ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２６７Ｋ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｒ２６７Ｋ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｉ４７３Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｋ１８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ３４７Ｅ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２５２Ｅ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ４８８Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ２２０Ｒ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ、Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｒ２６７Ｋ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｉ４７３Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｋ１８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＳ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｒ２６７Ｋ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｉ４７３Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｋ１８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＹ１０５Ｅ＋Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｒ２６７Ｋ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｒ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｉ２９４Ｑ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｉ２９４Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｋ２５２Ｅ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＹ１０５Ｅ＋Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｒ２６７Ｋ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＹ１０５Ｅ＋Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｒ２６７Ｋ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＰ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｎ１６８Ｒ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｋ４８８Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｋ８Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＰ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｎ１６８Ｒ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＰ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｎ１６８Ｒ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ２８９Ｔ＋Ｎ３０２Ｈ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｋ８Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ、Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ２８９Ｔ＋Ｎ３０２Ｈ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ２８９Ｔ＋Ｎ３０２Ｈ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１２１Ｅ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ａ４９１Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１７７Ｇ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ、Ｋ８Ｒ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１２１Ｅ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ａ４９１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１７７Ｇ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＳ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１２１Ｅ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ａ４９１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１７７Ｇ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｋ８Ｒ＋Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＱ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｅ４８９Ｒ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＱ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＱ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｆ１４６Ｄ＋Ｑ１４７Ｇ＋Ｌ１４８Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｖ３００Ｌ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｌ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｆ１６５Ｈ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ２３８Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｆ１４６Ｄ＋Ｑ１４７Ｇ＋Ｌ１４８Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｖ３００Ｌ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｌ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｆ１６５Ｈ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ２３８Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｆ１４６Ｄ＋Ｑ１４７Ｇ＋Ｌ１４８Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｖ３００Ｌ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｌ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｆ１６５Ｈ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ａ１２９Ｔ、Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ２３８Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＳ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＳ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｅ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｗ２４８Ｖ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｒ２９５Ｋ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｌ４４７Ｍ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｅ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｗ２４８Ｖ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｒ２９５Ｋ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｌ４４７Ｍ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｅ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｗ２４８Ｖ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｒ２９５Ｋ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｌ４４７Ｍ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｖ５０５Ｌ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４５９Ｐ、Ｋ８Ｒ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｋ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｖ５０５Ｌ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４５９Ｐ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｋ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｖ５０５Ｌ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４５９Ｐ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｒ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｋ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３９４Ｒ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３９４Ｒ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３９４Ｒ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ１２９Ｔ、Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ａ１２９Ｔ、Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ｋ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ｋ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号２のポリペプチドのＡ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ａ１２９Ｔ、Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ＋Ａ１２９Ｔからなる群から選択される位置に相当する位置で改変を含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
一態様において、変異体は、配列番号１のポリペプチドの
Ｋ３９４Ｒ、
Ｓ１２７Ｄ、
Ｒ２１１Ｋ、
Ｓ１２３Ｐ、
Ｋ４８８Ｔ、
Ｓ２５６Ｑ、
Ｋ４７６Ｒ、
Ｋ２１７Ｒ、
Ｑ２７１Ｄ、
Ｓ２１４Ｑ、
Ｌ４４７Ｍ、
Ｋ４８２Ｒ、
Ｋ１６９Ｒ、
Ｌ１５２Ｄ、
Ｒ２６７Ｋ、
Ｌ１５２Ｅ、
Ｄ２１０Ｒ、
Ｌ１５２＊、
Ｒ２９５Ｋ、
Ｓ１２７Ｗ、
Ｅ１２６Ｐ、
Ｓ１２７Ｈ、
Ｔ１０４Ｇ、
Ｑ１２５Ｋ、
Ｑ１２５Ｐ、
Ｑ１２５Ｓ、
Ｄ３９５Ｐ、
Ｇ１０３Ｖ、
Ｔ１０４Ｒ、
Ｑ１２５Ｌ、
Ａ４１Ｅ、
Ａ４１Ｒ、
Ｑ１２５Ｆ、
Ｓ１２７Ｌ、
Ａ２２６Ｋ、
Ａ４１Ｌ、
Ａ２２６Ｄ、
Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、
Ｎ１５５Ｄ、
Ｑ１３７Ｋ、
Ｎ１５５Ｅ、
Ｑ１４７Ｋ、
Ｒ２７６Ｋ、
Ｖ２０３Ｔ、
Ｓ９４Ｒ、
Ｋ１８Ｅ、
Ｋ２５２Ｅ、
Ｖ２１９Ｔ、
Ｒ２６７Ｃ＋Ｔ４２７Ｖ、
Ｑ２４３Ｅ、
Ｋ４１４Ｅ、
Ｋ４４５Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ｋ３５３Ｒ＋Ｄ３９５Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｄ３９５Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ、
Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ３９２Ｅ、
Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｙ５０３Ｌ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ｙ５０３Ｖ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ａ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｑ８２Ｅ、
Ｓ７６Ｅ、
Ａ８３Ｅ、
Ｑ２７１Ｅ、
Ｓ２５６Ｅ、
Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ３２９Ｅ、
Ｖ４３１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１３６Ｄ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ、
Ｙ１０５Ｅ＋Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｉ４７３Ｔ、
Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８Ｅ＋Ｋ１８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ３４７Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｎ１６８Ｒ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｉ２９４Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２１９Ｔ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ２８９Ｔ＋Ｎ３０２Ｈ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１２１Ｅ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ａ４９１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６ＥＩ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１７７Ｇ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ、
Ｋ８Ｒ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｆ１４６Ｄ＋Ｑ１４７Ｇ＋Ｌ１４８Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｖ３００Ｌ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｌ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｆ１６５Ｈ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｒ＋Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｅ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ２３８Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｗ２４８Ｖ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｒ２９５Ｋ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｌ４４７Ｍ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３９４Ｒ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４５９Ｐ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ｋ８Ｒ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｋ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖからなる群から選択される改変又は改変の組み合わせを含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
Ｋ３９４Ｒ、
Ｓ１２７Ｄ、
Ｒ２１１Ｋ、
Ｓ１２３Ｐ、
Ｋ４８８Ｔ、
Ｓ２５６Ｑ、
Ｋ４７６Ｒ、
Ｋ２１７Ｒ、
Ｑ２７１Ｄ、
Ｓ２１４Ｑ、
Ｌ４４７Ｍ、
Ｋ４８２Ｒ、
Ｋ１６９Ｒ、
Ｌ１５２Ｄ、
Ｒ２６７Ｋ、
Ｌ１５２Ｅ、
Ｄ２１０Ｒ、
Ｌ１５２＊、
Ｒ２９５Ｋ、
Ｓ１２７Ｗ、
Ｅ１２６Ｐ、
Ｓ１２７Ｈ、
Ｔ１０４Ｇ、
Ｑ１２５Ｋ、
Ｑ１２５Ｐ、
Ｑ１２５Ｓ、
Ｄ３９５Ｐ、
Ｇ１０３Ｖ、
Ｔ１０４Ｒ、
Ｑ１２５Ｌ、
Ａ４１Ｅ、
Ａ４１Ｒ、
Ｑ１２５Ｆ、
Ｓ１２７Ｌ、
Ａ２２６Ｋ、
Ａ４１Ｌ、
Ａ２２６Ｄ、
Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、
Ｎ１５５Ｄ、
Ｑ１３７Ｋ、
Ｎ１５５Ｅ、
Ｑ１４７Ｋ、
Ｒ２７６Ｋ、
Ｖ２０３Ｔ、
Ｓ９４Ｒ、
Ｋ１８Ｅ、
Ｋ２５２Ｅ、
Ｖ２１９Ｔ、
Ｒ２６７Ｃ＋Ｔ４２７Ｖ、
Ｑ２４３Ｅ、
Ｋ４１４Ｅ、
Ｋ４４５Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ｋ３５３Ｒ＋Ｄ３９５Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｄ３９５Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ、
Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ３９２Ｅ、
Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｙ５０３Ｌ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ｙ５０３Ｖ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ａ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｑ８２Ｅ、
Ｓ７６Ｅ、
Ａ８３Ｅ、
Ｑ２７１Ｅ、
Ｓ２５６Ｅ、
Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ３２９Ｅ、
Ｖ４３１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１３６Ｄ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ、
Ｙ１０５Ｅ＋Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｉ４７３Ｔ、
Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８Ｅ＋Ｋ１８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ３４７Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｎ１６８Ｒ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｉ２９４Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２１９Ｔ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ２８９Ｔ＋Ｎ３０２Ｈ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１２１Ｅ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ａ４９１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６ＥＩ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１７７Ｇ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ、
Ｋ８Ｒ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｆ１４６Ｄ＋Ｑ１４７Ｇ＋Ｌ１４８Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｖ３００Ｌ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｌ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｆ１６５Ｈ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｒ＋Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｅ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ２３８Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｗ２４８Ｖ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｒ２９５Ｋ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｌ４４７Ｍ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３９４Ｒ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４５９Ｐ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ｋ８Ｒ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｋ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖからなる群から選択される改変又は改変の組み合わせを含み、変異体はキシログルカナーゼ活性を有し、且つ前記変異体は、配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する。
変異体は、国際公開第２００９／１４７２１０号パンフレットに記載されるものなどの１個又は複数個の位置で置換をさらに含んでもよい。
アミノ酸の変化は、タンパク質の折り畳み及び／又は活性に著しく影響を及ぼさない保存的アミノ酸置換又は挿入；典型的には１～３０アミノ酸の小規模な欠失；アミノ末端メチオニン残基などの小規模なアミノ末端又はカルボキシル末端伸長；最大２０～２５残基の小さいリンカーペプチド；又は正味の電荷又は別の機能を変えることにより精製を容易にする、ポリヒスチジン配列、抗原エピトープ又は結合ドメインなどの小規模な伸長である軽微なものであり得る。
保存的置換の例は、塩基性アミノ酸（アルギニン、リジン及びヒスチジン）、酸性アミノ酸（グルタミン酸及びアスパラギン酸）、極性アミノ酸（グルタミン及びアスパラギン）、疎水性アミノ酸（ロイシン、イソロイシン及びバリン）、芳香族アミノ酸（フェニルアラニン、トリプトファン及びチロシン）並びに小さいアミノ酸（グリシン、アラニン、セリン、トレオニン及びメチオニン）の群に含まれる。概して比活性を変えないアミノ酸置換は、当該技術分野で知られており、例えば、Ｈ．Ｎｅｕｒａｔｈ ａｎｄ Ｒ．Ｌ．Ｈｉｌｌ，１９７９，Ｉｎ，Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋに記載されている。一般的な置換としては、Ａｌａ／Ｓｅｒ、Ｖａｌ／Ｉｌｅ、Ａｓｐ／Ｇｌｕ、Ｔｈｒ／Ｓｅｒ、Ａｌａ／Ｇｌｙ、Ａｌａ／Ｔｈｒ、Ｓｅｒ／Ａｓｎ、Ａｌａ／Ｖａｌ、Ｓｅｒ／Ｇｌｙ、Ｔｙｒ／Ｐｈｅ、Ａｌａ／Ｐｒｏ、Ｌｙｓ／Ａｒｇ、Ａｓｐ／Ａｓｎ、Ｌｅｕ／Ｉｌｅ、Ｌｅｕ／Ｖａｌ、Ａｌａ／Ｇｌｕ、及びＡｓｐ／Ｇｌｙである。
或いは、アミノ酸変化は、ポリペプチドの物理化学的特性が変えられるような性質のものである。例えば、アミノ酸変化は、ポリペプチドの熱安定性を改善する場合があり、基質特異性を変える場合があり、至適ｐＨを変える場合などがある。
ポリペプチドにおける必須アミノ酸は、部位特異的突然変異誘発又はアラニン走査突然変異誘発（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ，１９８９，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１－１０８５）などの当技術分野において公知である手法に従って同定することができる。後者の技術では、分子の活性に極めて重要なアミノ酸残基を同定するために、分子内のあらゆる残基に単一のアラニン突然変異を導入して、結果として生じる突然変異体分子をキシログルカナーゼ活性について試験する。Ｈｉｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：４６９９－４７０８も参照されたい。酵素の活性部位又は他の生物学的相互作用は、推定される接触部位アミノ酸の突然変異との組み合わせにより、核磁気共嗚、結晶構造解析、電子回折又は光親和性標識などの技術によって測定される構造の物理的分析によって判定することもできる。例えば、ｄｅ Ｖｏｓ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５５；３０６－３１２；Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４；８９９－９０４；Ｗｌｏｄａｖｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９２，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．３０９；５９－６４を参照されたい。必須アミノ酸の同定は、関連するポリペプチドとのアライメントから推測することもでき、例えば、国際公開第２００９／１４７２１０号パンフレットに記載されている。
変異体は、４４５～５２４個のアミノ酸、例えば、４７１～５２４個のアミノ酸、４９７～５２４個のアミノ酸からなってもよい。
一実施形態において、変異体は、親酵素と比較して改善された洗浄性能を有する。
一実施形態において、変異体は、親酵素と比較して改善された酵素洗浄力を有する。
一実施形態において、変異体は、親酵素と比較して改善された安定性を有する。
一実施形態において、変異体は、親酵素と比較して改善された熱安定性を有する。
一実施形態において、変異体は、親酵素と比較して改善された洗剤中での貯蔵安定性を有する。
一実施形態において、変異体は、親酵素と比較して改善された白色度を有する。
親キシログルカナーゼ
親キシログルカナーゼは、配列番号１のポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチドであり得る。
親キシログルカナーゼは、配列番号１のポリペプチドに対して少なくとも６０％の配列同一性を有するポリペプチドであり得る。
一態様において、親は、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列番号１のポリペプチドに対する配列同一性を有し、キシログルカナーゼ活性を有する。一態様において、親のアミノ酸配列は、配列番号１のポリペプチドから、最高１０個のアミノ酸まで、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸が異なる。別の態様において、親は、配列番号１のアミノ酸配列を含むか又はこれからなる。別の実施形態において、親は、少なくとも４４５個のアミノ酸残基、例えば、少なくとも４７１個及び少なくとも４９７個のアミノ酸残基を含有する配列番号１のポリペプチドのフラグメントである。
一態様において、親は、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列番号２のポリペプチドに対する配列同一性を有し、キシログルカナーゼ活性を有する。一態様において、親のアミノ酸配列は、配列番号２のポリペプチドから、最高１０個のアミノ酸まで、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸が異なる。別の態様において、親は、配列番号２のアミノ酸配列を含むか、又はこれからなる。別の実施形態において、親は、少なくとも４４５個のアミノ酸残基、例えば、少なくとも４７１個及び少なくとも４９７個のアミノ酸残基を含有する配列番号２のポリペプチドのフラグメントである。
一態様において、親は、少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％の配列番号３のポリペプチドに対する配列同一性を有し、キシログルカナーゼ活性を有する。一態様において、親のアミノ酸配列は、配列番号３のポリペプチドから、最高１０個のアミノ酸まで、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸が異なる。別の態様において、親は、配列番号３のアミノ酸配列を含むか、又はこれからなる。別の実施形態において、親は、少なくとも４４５個のアミノ酸残基、例えば、少なくとも４７１個及び少なくとも４９７個のアミノ酸残基を含有する配列番号３のポリペプチドのフラグメントである。
親ポリペプチドは、一方のポリペプチドの領域がもう一方のポリペプチドの領域のＮ末端又はＣ末端で融合されているハイブリッドポリペプチドであり得る。
親は、別のポリペプチドが本発明のポリペプチドのＮ末端又はＣ末端で融合されている融合ポリペプチド又は切断可能な融合ポリペプチドであり得る。融合ポリペプチドは、別のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを本発明のポリヌクレオチドに融合させることにより生成される。融合ポリペプチドを生成する技術は、当該技術分野で知られており、ポリペプチドをコードするコード配列を、それらがインフレームであり、且つ融合ポリペプチドの発現が同じプロモーター及びターミネーターの制御下にあるように結合することを含む。翻訳後に融合ポリペプチドが生成されるインテイン技術を使用して融合ポリペプチドを構築することもできる（Ｃｏｏｐｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９３，ＥＭＢＯ Ｊ．１２：２５７５－２５８３、Ｄａｗｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６６：７７６－７７９）。
融合ポリペプチドは、２つのポリペプチドの間に開裂部位をさらに含み得る。融合タンパク質の分泌時、この部位が開裂されて２つのポリペプチドが放出される。開裂部位の例として、下記で開示されている部位が挙げられるが、これらに限定されない：Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｉｎｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３：５６８－５７６；Ｓｖｅｔｉｎａ ｅｔ ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７６：２４５－２５１；Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ－Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６３：３４８８－３４９３；Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １３：４９８－５０３；及びＣｏｎｔｒｅｒａｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：３７８－３８１；Ｅａｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２５：５０５－５１２；Ｃｏｌｌｉｎｓ－Ｒａｃｉｅ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １３：９８２－９８７；Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ６：２４０－２４８；及びＳｔｅｖｅｎｓ，２００３，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｗｏｒｌｄ ４：３５－４８。
親は、任意の属の微生物から得てもよい。本発明の目的のために、「から得られる」という用語は、所与の供給源に関連して本明細書で使用される場合、ポリヌクレオチドによりコードされる親が、供給源により産生されているか又は供給源からのポリヌクレオチドが挿入されている株により産生されていることと意味する。一態様において、親は、細胞外に分泌される。
さらなる態様において、親キシログルカナーゼは、細菌性キシログルカナーゼであってよい。例えば、キシログルカナーゼは、グラム陽性細菌ポリペプチド、例えば、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、好ましくはバチルス／ラクトバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ／Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）亜門からのもの、好ましくはペニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属からの種、特にペニバチルスポリミキサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、例えばペニバチルスポリミキサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、ＡＴＣＣ８３２であってよく、好ましくはキシログルカナーゼは例えば、国際公開第０１／６２９０３号パンフレットに記載されるファミリー４４キシログルカナーゼであってよい。
前述の種に関して、本発明は、完全及び不完全な状態の両方並びにそれらが知られている種の名称にかかわらず、他の分類学上の均等物、例えばアナモルフを包含することが理解されるであろう。当業者であれば、適切な均等物の同一性を容易に認識するであろう。
これらの種の株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）、Ｄｅｕｔｓｃｈｅ Ｓａｍｍｌｕｎｇ ｖｏｎ Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｅｎ ｕｎｄ Ｚｅｌｌｋｕｌｔｕｒｅｎ ＧｍｂＨ（ＤＳＭＺ）、Ｃｅｎｔｒａａｌｂｕｒｅａｕ Ｖｏｏｒ Ｓｃｈｉｍｍｅｌｃｕｌｔｕｒｅｓ（ＣＢＳ）及びＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ Ｐａｔｅｎｔ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｒｅｇｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ（ＮＲＲＬ）などのいくつかのカルチャーコレクションにおいて公的に容易に利用可能である。
親は、上記のプローブを用いて、自然界（例えば、土壌、堆肥、水など）から単離される微生物又は天然の物質（例えば、土壌、堆肥、水など）から直接得られるＤＮＡ試料を含む他の供給源から同定され且つ得られてもよい。自然の生育地から微生物及びＤＮＡを直接単離する技術は、当技術分野で知られている。次に、親をコードするポリヌクレオチドを、別の微生物のゲノムＤＮＡ若しくはｃＤＮＡライブラリー又は混合ＤＮＡ試料を同様にスクリーニングすることによって得てもよい。１つ又は複数のプローブを用いて親をコードするポリヌクレオチドを検出してから、当業者に知られる技術を利用することにより、ポリヌクレオチドを単離又はクローン化することができる（例えば、前出のＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，１９８９を参照されたい）。
変異体の調製
本発明はまた、キシログルカナーゼ活性を有する変異体を得るための方法であって、（ａ）配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置における改変を親キシログルカナーゼに導入し、変異体はキシログルカナーゼ活性を有することと、（ｂ）変異体を回収することとを含む方法にも関する。
本発明はまた、キシログルカナーゼ活性を有する変異体を得るための方法であって、（ａ）配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置における改変を親キシログルカナーゼに導入し、変異体はキシログルカナーゼ活性を有することと、（ｂ）変異体を回収することとを含む方法にも関する。
変異体は、部位特異的変異誘発、合成的遺伝子構築、半合成的遺伝子構築、ランダム変異誘発、シャッフリングなどの当該技術分野で知られる任意の変異誘発手順を使用して調製され得る。
部位特異的変異誘発は、１個又は複数個の（例えばいくつかの）突然変異が、親をコードするポリヌクレオチド中の１個又は複数個の定義された部位で導入される技術である。
部位特異的変異誘発を、所望の突然変異を含むオリゴヌクレオチドプライマーの使用を含むＰＣＲによりインビトロで達成し得る。部位特異的変異誘発は、親をコードするポリヌクレオチドを含むプラスミド中の部位での制限酵素による開裂、及びその後のこのポリヌクレオチド中の突然変異を含むオリゴヌクレオチドのライゲーションを含むカセット変異誘発によってもインビトロで実施され得る。通常、プラスミド及びオリゴヌクレオチドを消化する制限酵素は同一であり、プラスミド及びインサートの付着末端が互いにライゲートされ得る。例えば、Ｓｃｈｅｒｅｒ ａｎｄ Ｄａｖｉｓ，１９７９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７６：４９４９－４９５５；及びＢａｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１８：７３４９－４９６６を参照されたい。
部位特異的変異誘発は、当技術分野で既知の方法によりインビボでも達成され得る。例えば、米国特許出願公開第２００４／０１７１１５４号明細書；Ｓｔｏｒｉｃｉ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９：７７３－７７６；Ｋｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９９８，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．４：２８５－２９０；及びＣａｌｉｓｓａｎｏ ａｎｄ Ｍａｃｉｎｏ，１９９６，Ｆｕｎｇａｌ Ｇｅｎｅｔ．Ｎｅｗｓｌｅｔｔ．４３：１５－１６を参照されたい。
任意の部位特異的変異誘発手順が、本発明において使用され得る。変異体を調製するために使用され得る多くの入手可能な市販のキットがある。
合成遺伝子構築は、目的のポリペプチドをコードする設計されたポリヌクレオチド分子のインビトロ合成を必要とする。遺伝子合成は、Ｔｉａｎら（２００４，Ｎａｔｕｒｅ ４３２：１０５０－１０５４）により説明されている多重マイクロチップベース技術、及びオリゴヌクレオチドが合成されて光プログラム可能なマイクロ流体チップ上で組み立てられる同様の技術等の多くの技術を利用して実施し得る。
単一又は複数のアミノ酸の置換、欠失及び／又は挿入を行い得、且つ変異誘発、組換え及び／又はシャッフリングの既知の方法、続いて、関連するスクリーニング手順（例えば、Ｒｅｉｄｈａａｒ－Ｏｌｓｏｎ ａｎｄ Ｓａｕｅｒ，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４１：５３－５７；Ｂｏｗｉｅ ａｎｄ Ｓａｕｅｒ，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６；２１５２－２１５６；国際公開第９５／１７４１３号パンフレット；又は国際公開第９５／２２６２５号パンフレットに開示されているような関連するスクリーニング手順を行うことができる。使用可能な他の方法としては、エラープローンＰＣＲ、ファージディスプレイ（例えば、Ｌｏｗｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３０；１０８３２－１０８３７；米国特許第５，２２３，４０９号明細書；国際公開第９２／０６２０４号パンフレット）及び領域特異的変異誘発（Ｄｅｒｂｙｓｈｉｒｅ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｇｅｎｅ ４６；１４５；Ｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８８，ＤＮＡ ７；１２７）が挙げられる。
変異誘発／シャッフリング法は、ハイスループットな自動化されたスクリーニング方法と組み合わせて、宿主細胞によって発現した、クローニングされ、変異が誘発されたポリペプチドの活性を検出することができる（Ｎｅｓｓ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １７；８９３－８９６）。活性ポリペプチドをコードする、変異誘発されたＤＮＡ分子を宿主細胞から回収し、標準的な当該技術分野の方法を使用して容易に配列決定することができる。これらの方法により、ポリペプチド内の個々のアミノ酸残基の重要性を迅速に決定することが可能となる。
半合成遺伝子構築法は、合成遺伝子構築法、及び／又は部位特異的変異誘発、及び／又はランダム変異誘発、及び／又はシャッフリング法の態様を組み合わせることによって実施する。半合成構築法としては、ＰＣＲ手法と組み合わせた、合成されたポリヌクレオチドフラグメントを利用したプロセスが典型的なものである。このように、遺伝子の画定された領域を新規に合成してもよいが、一方で他の領域を部位特異的変異プライマーを使用して増幅してもよく、一方で更に他の領域をエラープローンＰＣＲ又は非エラープローンＰＣＲ増幅に供してもよい。次いで、ポリヌクレオチド部分配列をシャッフリングしてもよい。
ポリヌクレオチド
本発明はまた、本発明の変異体をコードするポリヌクレオチドに関する。
本発明はまた、本発明の変異体をコードするポリヌクレオチドに関する。
核酸構築物
本発明はまた、本発明の変異体をコードするポリヌクレオチドを含む核酸構築物であって、ポリヌクレオチドが、制御配列と適合する条件下で好適な宿主細胞においてコード配列の発現を誘導する１個又は複数個の制御配列に作動可能に連結されている核酸構築物に関する。
本発明はまた、本発明の変異体をコードするポリヌクレオチドを含む核酸構築物であって、ポリヌクレオチドが、制御配列と適合する条件下で好適な宿主細胞においてコード配列の発現を誘導する１個又は複数個の制御配列に作動可能に連結されている核酸構築物に関する。
ポリヌクレオチドは、変異体の発現をもたらす様々な方法において操作され得る。ベクターに挿入する前に、発現ベクターに応じてポリヌクレオチドを操作することが望ましいか、又は必要であり得る。組換えＤＮＡ法を利用した、ポリヌクレオチドを変性するための技法は、当該技術分野においてよく知られている。
制御配列は、プロモーター（ポリヌクレオチドの発現のために宿主細胞によって認識されるポリヌクレオチド）であってもよい。プロモーターは、変異体の発現を媒介する転写制御配列を含んでいる。プロモーターは、突然変異体、短縮型及びハイブリッドプロモーターを含む、宿主細胞において転写活性を示す任意のポリヌクレオチドであってもよく、宿主と同種又は異種のいずれかの細胞外又は細胞内ポリペプチドをコードする遺伝子から得てもよい。
細菌性宿主細胞内で本発明の核酸構築物の転写を誘導する好適なプロモーターの例は、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）のα－アミラーゼ遺伝子（ａｍｙＱ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）のα－アミラーゼ遺伝子（ａｍｙＬ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）のペニシリナーゼ遺伝子（ｐｅｎＰ）、バチルス・ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）のマルトース生成アミラーゼ遺伝子（ａｍｙＭ）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のレバンスクラーゼ遺伝子（ｓａｃＢ）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のｘｙｌＡ及びｘｙｌＢ遺伝子、バチルス・チューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）のｃｒｙＩＩＩＡ遺伝子（Ａｇａｉｓｓｅ ａｎｄ Ｌｅｒｅｃｌｕｓ，１９９４，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ １３；９７－１０７）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）のＬａｃオペロン、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）のｔｒｃプロモーター（Ｅｇｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｇｅｎｅ ６９；３０１－３１５）、ストレプトマイセス・セリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）のアガラーゼ遺伝子（ｄａｇＡ）、及び原核生物のβ－ラクタマーゼ遺伝子（Ｖｉｌｌａ－Ｋａｍａｒｏｆｆ ｅｔ ａｌ．，１９７８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７５：３７２７－３７３１）から得られるプロモーター並びにｔａｃプロモーター（ＤｅＢｏｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８０：２１－２５）。さらなるプロモーターは、Ｇｉｌｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．，１９８０，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａｍｅｒｉｃａｎ ２４２：７４－９４中の”Ｕｓｅｆｕｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｆｒｏｍ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｂａｃｔｅｒｉａ”；及びＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，１９８９、上記参照で説明されている。国際公開第９９／４３８３５号パンフレットでは、タンデムプロモーターの例が開示されている。
糸状真菌宿主細胞において本発明の核酸構築物の転写を誘導するための好適なプロモーターの例は、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）のアセトアミダーゼ、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の中性アルファ－アミラーゼ、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の酸安定性アルファ－アミラーゼ、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）又はアスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）のグルコアミラーゼ（ｇｌａＡ）、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のＴＡＫＡアミラーゼ、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のアルカリプロテアーゼ、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のトリオースリン酸イソメラーゼ、フザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）のトリプシン様プロテアーゼ（国際公開第９６／００７８７号パンフレット）、フザリウム・ベネナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）アミログルコシダーゼ（国際公開第００／５６９００号パンフレット）、フザリウム・ベネナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）のダリア（Ｄａｒｉａ）（国際公開第００／５６９００号パンフレット）、フザリウム・ベネナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）のクイン（Ｑｕｉｎｎ）（国際公開第００／５６９００号パンフレット）、リゾムコール・ミーヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）のリパーゼ、リゾムコール・ミーヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）のアスパラギン酸プロテイナーゼ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のベータ－グルコシダーゼ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のセロビオヒドロラーゼＩ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のセロビオヒドロラーゼＩＩ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のエンドグルカナーゼＩ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のエンドグルカナーゼＩＩ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のエンドグルカナーゼＩＩＩ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のエンドグルカナーゼＩＶ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のエンドグルカナーゼＶ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のキシラナーゼＩ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のキシラナーゼＩＩ、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）のベータ－キシロシダーゼ、及びから得られるプロモーター、並びにＮＡ２－ｔｐｉプロモーター（非翻訳リーダーがアスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）のトリオースリン酸イソメラーゼ遺伝子由来の非翻訳リーダーによって置き換えられたアスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）の中性アルファ－アミラーゼ遺伝子に由来する改変プロモーターであり；非限定的な例としては、非翻訳リーダーが、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）又はアスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のトリオースリン酸イソメラーゼ遺伝子由来の非翻訳リーダーによって置き換えられたアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の中性アルファ－アミラーゼ遺伝子に由来する改変プロモーターが挙げられる）；並びにその突然変異体、短縮型及びハイブリッドプロモーターが挙げられる。
酵母宿主において、有用なプロモーターは、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のエノラーゼ（ＥＮＯ－１）、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のガラクトキナーゼ（ＧＡＬ１）、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のアルコール脱水素酵素／グリセルアルデヒド－３－リン酸脱水素酵素（ＡＤＨ１、ＡＤＨ２／ＧＡＰ）、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のトリオースリン酸イソメラーゼ（ＴＰＩ）、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のメタロチオネイン（ＣＵＰ１）及びサッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）の３－ホスホグリセリン酸キナーゼに関する遺伝子から得られる。酵母宿主細胞に有用な他のプロモーターは、Ｒｏｍａｎｏｓ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｙｅａｓｔ ８：４２３－４８８により説明されている。
制御配列は、転写を終結させるために宿主細胞により認識される転写ターミネーターでもあり得る。ターミネーター配列は、変異体をコードするポリヌクレオチドの３’末端に作動可能に連結される。宿主細胞中で機能的な任意のターミネーターが使用され得る。
細菌宿主細胞のために好ましいターミネーターは、バチルス・クラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｌａｕｓｉｉ）のアルカリプロテアーゼ（ａｐｒＨ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）のアルファ－アミラーゼ（ａｍｙＬ）及び大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）のリボソームＲＮＡ（ｒｒｎＢ）に関する遺伝子から得られる。
糸状真菌宿主細胞のための好ましいターミネーターは、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）のアントラニル酸合成酵素、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）のグルコアミラーゼ、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）のアルファ－グルコシダーゼ、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のＴＡＫＡアミラーゼ、及びフザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）のトリプシン様プロテアーゼに関する遺伝子から得られる。
酵母宿主のために好ましいターミネーターは、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のエノラーゼ、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のシトクロムＣ（ＣＹＣ１）及びサッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のグリセルアルデヒド－３－リン酸脱水素酵素に関する遺伝子から得られる。酵母宿主細胞のための他の有用なターミネーターは、前出のＲｏｍａｎｏｓ ｅｔ ａｌ．，１９９２によって記載されている。
制御配列は、プロモーターの下流及び遺伝子の発現を増大させる遺伝子のコード配列の上流のｍＲＮＡ安定化領域でもあり得る。
好適なｍＲＮＡ安定化領域の例は、バチルス・チューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ｃｒｙＩＩＩＡ遺伝子（国際公開第９４／２５６１２号パンフレット）及び古草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＳＰ８２遺伝子（Ｈｕｅ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ １７７：３４６５－３４７１）から得られる。
制御配列は、宿主細胞による翻訳に重要であるｍＲＮＡのリーダー非翻訳領域でもあり得る。リーダー配列は、変異体をコードするポリヌクレオチドの５’末端に作動可能に連結される。宿主細胞内で機能的な任意のリーダーを使用してもよい。
糸状菌宿主細胞に好ましいリーダーは、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のＴＡＫＡアミラーゼ及びアスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）のトリオースリン酸イソメラーゼの遺伝子から得られるものである。
酵母宿主細胞のために好適なリーダーは、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のエノラーゼ（ＥＮＯ－１）、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）の３－ホスホグリセリン酸キナーゼ、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のα因子及びサッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のアルコール脱水素酵素／グリセルアルデヒド－３－リン酸脱水素酵素（ＡＤＨ２／ＧＡＰ）に関する遺伝子から得られる。
制御配列はまた、変異体コード配列の３’末端に作動可能に連結された配列であり、転写されるとき、宿主細胞によってシグナルとして認識され、転写されたｍＲＮＡにポリアデノシン残基を付加するポリアデニル化配列であり得る。宿主細胞内で機能的な任意のポリアデニル化配列を使用してもよい。
糸状菌宿主細胞に好ましいポリアデニル化配列は、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）のアントラニル酸シンターゼ、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）のグルコアミラーゼ、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）のα－グルコシダーゼ、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のＴＡＫＡアミラーゼ、及びフザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）のトリプシン様プロテアーゼの遺伝子から得られるものである。
酵母菌宿主細胞に有用なポリアデニル化配列は、Ｇｕｏ ａｎｄ Ｓｈｅｒｍａｎ，１９９５，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌ．１５：５９８３－５９９０によって記載される。
制御配列はまた、変異体のＮ末端に連結されるシグナルペプチドをコードし、且つ変異体を細胞の分泌経路に導くシグナルペプチドコード領域であり得る。ポリヌクレオチドのコード配列の５’末端は、変異体をコードするコード配列のセグメントとともに、翻訳読み枠において本来連結されるシグナルペプチドコード配列を本質的に含有し得る。或いは、コード配列の５’末端は、コード配列に対して外来であるシグナルペプチドコード配列を含み得る。外来シグナルペプチドコード配列は、コード配列がシグナルペプチドコード配列を天然に含有しない場合に必要とされる場合がある。或いは、外来シグナルペプチドコード配列により、変異体の分泌を増強するために天然のシグナルペプチドコード配列を単に置き換えてもよい。しかしながら、発現された変異体を宿主細胞の分泌経路に導く任意のシグナルペプチドコード配列が使用され得る。
細菌宿主細胞のために効果的なシグナルペプチドコード配列は、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ＮＣＩＢ １１８３７マルトース生成アミラーゼ、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）のサブチリシン、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）のベータ－ラクタマーゼ、バチルス・ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）のアルファ－アミラーゼ、バチルス・ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の中性プロテアーゼ（ｎｐｒＴ、ｎｐｒＳ、ｎｐｒＭ）及びバチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のｐｒｓＡに関する遺伝子から得られるシグナルペプチドコード配列である。さらなるシグナルペプチドは、Ｓｉｍｏｎｅｎ ａｎｄ Ｐａｌｖａ，１９９３，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ５７：１０９－１３７によって記載されている。
糸状真菌宿主細胞のために効果的なシグナルペプチドコード配列は、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の中性アミラーゼ、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）のグルコアミラーゼ、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のＴＡＫＡアミラーゼ、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）のセルラーゼ、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）のエンドグルカナーゼＶ、フミコラ・ラヌギノーサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）のリパーゼ及びリゾムコール・ミーヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）のアスパラギン酸プロテイナーゼに関する遺伝子から得られるシグナルペプチドコード配列である。
酵母宿主細胞のために有用なシグナルペプチドは、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のα因子及びサッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のインベルターゼに関する遺伝子から得られる。他の有用なシグナルペプチドコード配列は、前出のＲｏｍａｎｏｓ ｅｔ ａｌ．，１９９２によって記載されている。
制御配列は、変異体のＮ末端に位置するプロペプチドをコードするポリペプチドコード配列でもあり得る。得られたポリペプチドはプロ酵素又はプロポリペプチド（又は場合によりチモーゲン）として知られる。プロポリペプチドは、一般的に不活性であり、このプロポリペプチドからのプロペプチドの触媒的又は自己触媒的な開裂により、活性ポリペプチドに変換され得る。プロペプチドコード配列は、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のアルカリプロテアーゼ（ａｐｒＥ）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）の中性プロテアーゼ（ｎｐｒＴ）、ミセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）のラッカーゼ（国際公開第９５／３３８３６号パンフレット）、リゾムコール・ミーヘイ（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）のアスパラギン酸プロテイナーゼ、及びサッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）のα因子の遺伝子から得られてもよい。
シグナルペプチド及びプロペプチド配列の両方が存在する場合、プロペプチド配列は、変異体のＮ末端の隣に位置し、シグナルペプチド配列は、プロペプチド配列のＮ末端の隣に位置する。
宿主細胞の増殖に対して変異体の発現を制御する制御配列を加えることが望ましい場合もある。制御系の例は、制御化合物の存在を含む化学的刺激又は物理的刺激に反応して遺伝子の発現をオン又はオフにするものである。原核系中の制御系は、ｌａｃ、ｔａｃ及びｔｒｐオペレーター系を含む。酵母では、ＡＤＨ２系又はＧＡＬ１系が有用であろう。糸状真菌では、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）グルコアミラーゼプロモーター、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）ＴＡＫＡ アルファ－アミラーゼプロモーター、及びアスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）グルコアミラーゼプロモーターが使用されてよい。調節配列のその他の例は、遺伝子増幅を可能にする配列である。真核生物系では、これらの制御配列として、メトトレキサートの存在下で増幅されるジヒドロ葉酸レダクターゼ遺伝子、及び重金属により増幅されるメタロチオネイン遺伝子が挙げられる。これらの場合、変異体をコードするポリヌクレオチドは、制御配列に作動可能に連結されているであろう。
発現ベクター
本発明はまた、本発明の変異体をコードするポリヌクレオチド、プロモーター、並びに転写及び翻訳終止シグナルを含む組換え発現ベクターに関する。１個又は複数個の都合のよい制限部位を含み、そのような部位で変異体をコードするポリヌクレオチドを挿入又は置換することを可能にし得る組換え発現ベクターを作製するために、様々なヌクレオチド及び制御配列を共に連結してもよい。或いは、発現に適切なベクターにポリヌクレオチド又はポリヌクレオチドを含む核酸構築物を挿入することによってポリヌクレオチドを発現させてもよい。発現ベクターを作製する際に、コード配列が発現に適切な制御配列に作動可能に連結されるように、コード配列をベクター内に配置する。
本発明はまた、本発明の変異体をコードするポリヌクレオチド、プロモーター、並びに転写及び翻訳終止シグナルを含む組換え発現ベクターに関する。１個又は複数個の都合のよい制限部位を含み、そのような部位で変異体をコードするポリヌクレオチドを挿入又は置換することを可能にし得る組換え発現ベクターを作製するために、様々なヌクレオチド及び制御配列を共に連結してもよい。或いは、発現に適切なベクターにポリヌクレオチド又はポリヌクレオチドを含む核酸構築物を挿入することによってポリヌクレオチドを発現させてもよい。発現ベクターを作製する際に、コード配列が発現に適切な制御配列に作動可能に連結されるように、コード配列をベクター内に配置する。
組換え発現ベクターは、組換えＤＮＡ法を都合よく受けることが可能であり、且つポリヌクレオチドの発現をもたらすことが可能である任意のベクター（例えば、プラスミド又はウイルス）であり得る。ベクターの選択は、通常、ベクターが導入される宿主細胞に対するベクターの適合性に依存することになる。ベクターは、直鎖状又は閉環状プラスミドであり得る。
ベクターは、例えば、プラスミド、染色体外要素、ミニ染色体又は人工染色体など、自己複製ベクター、すなわち染色体外の実体として存在し、その複製が染色体複製に依存しないベクターであり得る。ベクターは、自己複製を確実なものにするための任意の手段を含み得る。或いは、ベクターは、宿主細胞に導入される際にゲノム中に統合され、且つ内部に統合された１つ又は複数の染色体とともに複製されるものであり得る。さらに、単一のベクター若しくはプラスミド、又は宿主細胞のゲノムに導入される全ＤＮＡを共に含有する２つ以上のベクター若しくはプラスミド、又はトランスポゾンが使用され得る。
ベクターは、形質転換、トランスフェクション、トランスダクションなどされた細胞の選択を容易にする１個又は複数個の選択マーカーを含有することが好ましい。選択マーカーは、その生成物が殺生物剤又はウイルス耐性、重金属に対する耐性、栄養要求体に対する原栄養性などをもたらす遺伝子である。
細菌性選択マーカーの例には、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）若しくはバチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のｄａｌ遺伝子、又はアンピシリン耐性、クロラムフェニコール耐性、カナマイシン耐性、ネオマイシン耐性、スペクチノマイシン耐性、又はテトラサイクリン耐性などの抗生物質耐性を付与するマーカーがある。酵母宿主細胞に好適なマーカーとしては、これらに限定されないが、ＡＤＥ２、ＨＩＳ３、ＬＥＵ２、ＬＹＳ２、ＭＥＴ３、ＴＲＰ１、及びＵＲＡ３が挙げられる。糸状真菌宿主細胞における使用のための選択マーカーとしては、ａｍｄＳ（アセトアミダーゼ）、ａｒｇＢ（オルニチンカルバモイルトランスフェラーゼ）、ｂａｒ（ホスフィノスリシンアセチルトランスフェラーゼ）、ｈｐｈ（ハイグロマイシンホスホトランスフェラーゼ）、ｎｉａＤ（硝酸レダクターゼ）、ｐｙｒＧ（オロチジン－５’－リン酸デカルボキシラーゼ）、ｓＣ（硫酸アデニリルトランスフェラーゼ）、及びｔｒｐＣ（アントラニル酸シンターゼ）、並びにそれらの均等物が挙げられるが、これらに限定されない。アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）細胞中での使用に好ましいのは、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）又はアスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）のａｍｄＳ遺伝子及びｐｙｒＧ遺伝子並びにストレプトマイセス・ハイグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）ｂａｒ遺伝子である。
ベクターは、好ましくは、宿主細胞のゲノムへのベクターの組み込み又はゲノムと独立して細胞内でのベクターの自己複製を可能にするエレメントを含有する。
宿主細胞ゲノム中への組み込みに関して、ベクターは、相同又は非相同組換えによるゲノム中への組み込みのために、変異体をコードするポリヌクレオチドの配列又はベクターの任意の他のエレメントに依拠し得る。代わりに、ベクターは、染色体中の正確な位置での宿主細胞のゲノムへの相同組換えによる組み込みを指示するための追加のポリヌクレオチドを含む場合がある。正確な位置での組み込みの可能性を高めるために、組み込みエレメントは、十分な数の核酸（例えば、１００～１０，０００個の塩基対、４００～１０，０００個の塩基対、及び８００～１０，０００個の塩基対）を含有するべきであり、この核酸は、相同組換えの可能性を高めるために、対応する標的配列に対する配列同一性が高い。組み込みエレメントは、宿主細胞のゲノム中の標的配列と相同である任意の配列であり得る。さらに、組み込みエレメントは、ポリヌクレオチドをコードしていなくてもよいし、コードしていてもよい。一方、ベクターは、非相同組換えにより宿主細胞のゲノムに組み込まれ得る。
自律的な複製の場合、ベクターは、問題の宿主細胞中でベクターが自律的に複製することを可能にする複製起点をさらに含み得る。複製起点は、細胞中で機能する自律的な複製を媒介する任意のプラスミド複製開始点であり得る。「複製起点」又は「プラスミド複製開始点」という用語は、プラスミド又はベクターがインビボで複製することを可能にするポリヌクレオチドを意味する。
細菌の複製起点の例は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中での複製を可能にするプラスミドｐＢＲ３２２、ｐＵＣ１９、ｐＡＣＹＣ１７７及びｐＡＣＹＣ１８４の複製起点並びにバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）中での複製を可能にするｐＵＢ１１０、ｐＥ１９４、ｐＴＡ１０６０及びｐＡＭβ１の複製起点である。
酵母宿主細胞中での使用のための複製起点の例は、２ミクロン複製起点、ＡＲＳ１、ＡＲＳ４、ＡＲＳ１及びＣＥＮ３の組み合わせ並びにＡＲＳ４及びＣＥＮ６の組み合わせである。
糸状菌で有用な複製起点の例は、ＡＭＡ１及びＡＮＳ１である（Ｇｅｍｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｇｅｎｅ ９８：６１－６７；Ｃｕｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１５：９１６３－９１７５；国際公開第００／２４８８３号パンフレット）。ＡＭＡ１遺伝子の単離並びにこの遺伝子を含むプラスミド又はベクターの構築は、国際公開第００／２４８８３号パンフレットで開示されている方法に従って達成され得る。
本発明のポリヌクレオチドの２つ以上のコピーを宿主細胞内に挿入して、変異体の生成を増加させ得る。ポリヌクレオチドのコピー数を増大させることは、配列の少なくとも１つのさらなるコピーを宿主細胞ゲノムに組み込むことによって、又はポリヌクレオチドに増幅可能な選択マーカー遺伝子を含めることによって達成することができ、適切な選択剤の存在下で細胞を培養することにより、増幅されたコピーの選択マーカー遺伝子を含む細胞、したがってさらなるコピーのポリヌクレオチドを含む細胞を選択することができる。
上記のエレメントを結合して本発明の組換え発現ベクターを構築するために使用される手順は、当業者によく知られている（例えば、前出のＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，１９８９を参照されたい）。
宿主細胞
本発明はまた、組換え宿主細胞であって、本発明の変異体の生成を誘導する１個又は複数個の制御配列に作動可能に連結されている本発明の変異体をコードするポリヌクレオチドを含む組換え宿主細胞に関する。ポリヌクレオチドを含む構築物又はベクターは、構築物又はベクターが染色体組み込み体として又は先に記載される自己複製染色体外ベクターとして維持されるように宿主細胞中に導入される。「宿主細胞」という用語は、親細胞の任意の子孫であって、複製中に生じた突然変異に起因して親細胞と同一ではない子孫を包含する。宿主細胞の選択は、変異体をコードする遺伝子及びその供給源に大きく依存することになる。
本発明はまた、組換え宿主細胞であって、本発明の変異体の生成を誘導する１個又は複数個の制御配列に作動可能に連結されている本発明の変異体をコードするポリヌクレオチドを含む組換え宿主細胞に関する。ポリヌクレオチドを含む構築物又はベクターは、構築物又はベクターが染色体組み込み体として又は先に記載される自己複製染色体外ベクターとして維持されるように宿主細胞中に導入される。「宿主細胞」という用語は、親細胞の任意の子孫であって、複製中に生じた突然変異に起因して親細胞と同一ではない子孫を包含する。宿主細胞の選択は、変異体をコードする遺伝子及びその供給源に大きく依存することになる。
宿主細胞は、変異体の組換え体産生において有用な任意の細胞、例えば、原核生物又は真核生物であり得る。
原核生物の宿主細胞は、任意のグラム陽性細菌又はグラム陰性細菌であり得る。グラム陽性細菌としては、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ゲオバチルス属（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、オセアノバチルス属（Ｏｃｅａｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、及びストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）が挙げられるが、これらに限定されない。グラム陰性細菌としては、カンピロバクター属（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、フラボバクテリウム属（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ヘリコバクター属（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）、イリオバクター属（Ｉｌｙｏｂａｃｔｅｒ）、ナイセリア属（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、及びウレアプラズマ属（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ）が挙げられるが、これらに限定されない。
細菌宿主細胞は、限定されるものではないが、バチルス・アルカロフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・ブレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）、バチルス・サークランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、バチルス・クラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｌａｕｓｉｉ）、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・ロータス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｕｔｕｓ）、バチルス・レンタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｅｎｔｕｓ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）、バチルス・ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）及びバチルス・チューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）の細胞を含む任意のバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）細胞であり得る。
細菌宿主細胞は、限定されるものではないが、ストレプトコッカス・エクイシミリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｅｑｕｉｓｉｍｉｌｉｓ）、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・ユベリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｕｂｅｒｉｓ）及びストレプトコッカス・エクイ亜種ズーエピデミカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｅｑｕｉ ｓｕｂｓｐ．Ｚｏｏｅｐｉｄｅｍｉｃｕｓ）の細胞を含む任意のストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）細胞でもあり得る。
細菌宿主細胞は、限定されるものではないが、ストレプトマイセス・アクロモゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトマイセス・アベルミティリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ）、ストレプトマイセス・セリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）、ストレプトマイセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）、及びストレプトマイセス・リビダンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ）の細胞を含む任意のストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）細胞でもあり得る。
バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）細胞内へのＤＮＡの導入は、プロトプラスト形質転換（例えば、Ｃｈａｎｇ ａｎｄ Ｃｏｈｅｎ，１９７９，Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．１６８：１１１－１１５を参照されたい）、コンピテント細胞形質転換（例えば、Ｙｏｕｎｇ ａｎｄ Ｓｐｉｚｉｚｅｎ，１９６１，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．８１：８２３－８２９、又はＤｕｂｎａｕ ａｎｄ Ｄａｖｉｄｏｆｆ－Ａｂｅｌｓｏｎ，１９７１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．５６：２０９－２２１を参照されたい）、エレクトロポレーション（例えば、Ｓｈｉｇｅｋａｗａ ａｎｄ Ｄｏｗｅｒ，１９８８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ６：７４２－７５１を参照されたい）、又はコンジュゲーション（例えば、Ｋｏｅｈｌｅｒ ａｎｄ Ｔｈｏｒｎｅ，１９８７，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１６９：５２７１－５２７８を参照されたい）。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）へのＤＮＡの導入は、下記により行われ得る：プロトプラスト形質転換（例えば、Ｈａｎａｈａｎ，１９８３，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１６６：５５７－５８０を参照されたい）、又はエレクトロポレーション（例えば、Ｄｏｗｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１６：６１２７－６１４５を参照されたい）。ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）へのＤＮＡの導入は、下記により行われ得る：プロトプラス形質転換、エレクトロポレーション（例えば、Ｇｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｆｏｌｉａ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．（Ｐｒａｈａ）４９：３９９－４０５を参照されたい）、コンジュゲーション（例えば、Ｍａｚｏｄｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１７１：３５８３－３５８５を参照されたい）又は形質導入（例えば、Ｂｕｒｋｅ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９８：６２８９－６２９４を参照されたい）。シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）細胞へのＤＮＡの導入は、下記により行われ得る：エレクトロポレーション（例えば、Ｃｈｏｉ ｅｔ ａｌ．，２００６，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ６４：３９１－３９７を参照されたい）、又はコンジュゲーション（例えば、Ｐｉｎｅｄｏ ａｎｄ Ｓｍｅｔｓ，２００５，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７１：５１－５７を参照されたい）によって行われ得る。ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）細胞へのＤＮＡの導入は、下記により行われ得る：天然コンピテンス（ｎａｔｕｒａｌ ｃｏｍｐｅｔｅｎｃｅ）（例えば、Ｐｅｒｒｙ ａｎｄ Ｋｕｒａｍｉｔｓｕ，１９８１，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．３２：１２９５－１２９７を参照されたい）、プロトプラスト形質転換（例えば、Ｃａｔｔ ａｎｄ Ｊｏｌｌｉｃｋ，１９９１，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｓ ６８：１８９－２０７を参照されたい）、エレクトロポレーション（例えば、Ｂｕｃｋｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６５：３８００－３８０４を参照されたい）、又はコンジュゲーション（例えば、Ｃｌｅｗｅｌｌ，１９８１，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．４５：４０９－４３６を参照されたい）。しかしながら、宿主細胞にＤＮＡを導入するための当技術分野で既知の任意の方法を使用し得る。
宿主細胞はまた、哺乳動物、昆虫、植物、又は真菌細胞などの真核生物であり得る。
宿主細胞は、真菌細胞であり得る。「真菌」は、本明細書で使用される場合、子嚢菌門、担子菌門、ツボカビ門及び接合菌門並びに卵菌類及び全ての栄養胞子形成菌（Ｈａｗｋｓｗｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ，Ａｉｎｓｗｏｒｔｈ ａｎｄ Ｂｉｓｂｙ’ｓ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｔｈｅ Ｆｕｎｇｉ，８ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９５，ＣＡＢ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫで定義されている）を含む。
真菌宿主細胞は、酵母細胞であり得る。本明細書で使用する場合、「酵母」としては、有子嚢胞子酵母（エンドミセス目（Ｅｎｄｏｍｙｃｅｔａｌｅｓ））、担子菌酵母、及び不完全菌類（不完全酵母菌綱（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｔｅｓ））に属する酵母が挙げられる。酵母の分類は将来変る場合があることから、本発明の目的のために、酵母は、Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｙｅａｓｔ（Ｓｋｉｎｎｅｒ，Ｐａｓｓｍｏｒｅ，ａｎｄ Ｄａｖｅｎｐｏｒｔ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｓｏｃ．Ａｐｐ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ Ｎｏ．９，１９８０）で説明されているように定義されるべきである。
酵母宿主細胞は、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、ハンゼヌラ属（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）、クルイベロマイセス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）、ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）、サッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、シゾサッカロマイセス属（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）又はヤロウイア属（Ｙａｒｒｏｗｉａ）の細胞、例えばクルイベロマイセス・ラクティス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ）、サッカロマイセス・カールスベルゲンシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、サッカロマイセス・ディアスタティカス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ）、サッカロマイセス・ドウグラシー（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｄｏｕｇｌａｓｉｉ）、サッカロマイセス・クリュイベリ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｋｌｕｙｖｅｒｉ）、サッカロマイセス・ノルベンシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｎｏｒｂｅｎｓｉｓ）、サッカロマイセス・オヴィフォルミス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｏｖｉｆｏｒｍｉｓ）又はヤロウイア・リポリティカ（Ｙａｒｒｏｗｉａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）の細胞であり得る。
真菌宿主細胞は、糸状真菌細胞であり得る。「糸状真菌」は、細分類の真菌門（Ｅｕｍｙｃｏｔａ）及び卵菌門（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）（前出のＨａｗｋｓｗｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，１９９５により定義される）の全ての糸状形態を含む。糸状真菌は、一般的に、キチン、セルロース、グルカン、キトサン、マンナン及び他の複合ポリサッカリドで構成される菌糸体壁により特徴付けられる。栄養生長は菌糸伸長によるものであり、炭素異化は偏性好気性である。対照的に、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）等の酵母による栄養生長は単細胞葉状体の出芽によるものであり、炭素異化は発酵性であり得る。
糸状菌宿主細胞は、下記であり得る：アクレモニウム（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、アウレオバシジウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ）、ビルカンデラ（Ｂｊｅｒｋａｎｄｅｒａ）、セリポリオプシス（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ）、クリソスポリウム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）、コプリナス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）、コリオルス（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ）、クリプトコッカス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、フィロバシディウム（Ｆｉｌｉｂａｓｉｄｉｕｍ）、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、フミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、マグナポルテ（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ）、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）、ミセリオフトラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）、ネオカリマスティクス（Ｎｅｏｃａｌｌｉｍａｓｔｉｘ）、ニューロスポラ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）、ペシロマイセス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ）、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、ファネロカエテ（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ）、フレビア（Ｐｈｌｅｂｉａ）、ピロミセス（Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓ）、プレウロタス（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ）、シゾフィラム（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ）、タラロミセス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ）、サーモアスカス（Ｔｈｅｒｍｏａｓｃｕｓ）、シーラビア（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）、トイポクラディウム（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ）、トラメテス（Ｔｒａｍｅｔｅｓ）、又はトリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）の細胞。
例えば、糸状真菌宿主細胞は、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）、アスペルギルス・フォティダス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｏｅｔｉｄｕｓ）、アスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、アスペルギルス・ジャポニカス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ）、アスペルギルス・ニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）、ヤケイロタケ（Ｂｊｅｒｋａｎｄｅｒａ ａｄｕｓｔａ）、セリポリオプシス・アネイリナ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ ａｎｅｉｒｉｎａ）、セリポリオプシス・カレギエア（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ ｃａｒｅｇｉｅａ）、セリポリオプシス・ギルベッセンス（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ ｇｉｌｖｅｓｃｅｎｓ）、セリポリオプシス・パノンシンタ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ ｐａｎｎｏｃｉｎｔａ）、セリポリオプシス・リブロサ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ ｒｉｖｕｌｏｓａ）、セリポリオプシス・サブルファ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ ｓｕｂｒｕｆａ）、セリポリオプシス・サベルミスポラ（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ ｓｕｂｖｅｒｍｉｓｐｏｒａ）、クリソスポリウム・イノプス（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｉｎｏｐｓ）、クリソスポリウム・ケラチノフィラム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｋｅｒａｔｉｎｏｐｈｉｌｕｍ）、クリソスポリウム・ルクノウェンス（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｌｕｃｋｎｏｗｅｎｓｅ）、クリソスポリウム・メルダリウム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｍｅｒｄａｒｉｕｍ）、クリソスポリウム・パニコラ（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｐａｎｎｉｃｏｌａ）、クリソスポリウム・クイーンズランジカム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄｉｃｕｍ）、クリソスポリウム・トプロピカム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｔｒｏｐｉｃｕｍ）、クリソスポリウム・ゾナタム（Ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ｚｏｎａｔｕｍ）、コプリナス・シネレウス（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｃｉｎｅｒｅｕｓ）、コリオラス・ハースタス（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｈｉｒｓｕｔｕｓ）、フザリウム・バクトリジオイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｂａｃｔｒｉｄｉｏｉｄｅｓ）、フザリウム・セレアリス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｃｅｒｅａｌｉｓ）、フザリウム・クロックウェレンズ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｃｒｏｏｋｗｅｌｌｅｎｓｅ）、フザリウム・クルモラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｃｕｌｍｏｒｕｍ）、フザリウム・グラミネアラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）、フザリウム・グラミナム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｕｍ）、フザリウム・ヘテロスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｈｅｔｅｒｏｓｐｏｒｕｍ）、フザリウム・ネグンジ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｎｅｇｕｎｄｉ）、フザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、フザリウム・レチキュラタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｍ）、フザリウム・ロゼウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｒｏｓｅｕｍ）、フザリウム・サムブシヌム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓａｍｂｕｃｉｎｕｍ）、フザリウム・サルクロウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓａｒｃｏｃｈｒｏｕｍ）、フザリウム・スポロトリキオイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｏｒｏｔｒｉｃｈｉｏｉｄｅｓ）、フザリウム・スルフレウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｕｌｐｈｕｒｅｕｍ）、フザリウム・トルロサム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｔｏｒｕｌｏｓｕｍ）、フザリウム・トリコセシオイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｃｉｏｉｄｅｓ）、フザリウム・ベネナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｎｅｎａｔｕｍ）、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、フミコラ・ラヌギノーサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）、ムコール・ミーヘイ（Ｍｕｃｏｒ ｍｉｅｈｅｉ）、ミセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）、ネウロスポラ・クラサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ ｃｒａｓｓａ）、ペニシリウム・プルプロゲナム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｐｕｒｐｕｒｏｇｅｎｕｍ）、ファネロカエテ・クリソスポリウム（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）、フレビア・ラジアータ（Ｐｈｌｅｂｉａ ｒａｄｉａｔａ）、プレウロツス・エリンギ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｅｒｙｎｇｉｉ）、チエラビア・テレストリス（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、トラメテス・ビロサ（Ｔｒａｍｅｔｅｓ ｖｉｌｌｏｓａ）、トラメテス・ベルシカラー（Ｔｒａｍｅｔｅｓ ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、トリコデルマ・コニンギ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｋｏｎｉｎｇｉｉ）、トリコデルマ・ロンギブラキアタム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｌｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）又はトリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄｅ）の細胞であり得る。
真菌細胞は、それ自体知られている方法において、プロトプラストの形成、プロトプラストの形質転換及び細胞壁の再生を含む方法により形質転換され得る。アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）及びトリコデルマ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）宿主細胞の形質転換のための好適な手順は、欧州特許第２３８０２３号明細書、Ｙｅｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８４、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：１４７０－１４７４、及びＣｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６：１４１９－１４２２で説明されている。フザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）の種をトランスフォームするのに好適な方法は、Ｍａｌａｒｄｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｇｅｎｅ ７８：１４７－１５６及び国際公開第９６／００７８７号パンフレットにより記載されている。酵母を、下記により説明されている手順を使用して形質転換し得る：Ｂｅｃｋｅｒ ａｎｄ Ｇｕａｒｅｎｔｅ，Ｉｎ Ａｂｅｌｓｏｎ，Ｊ．Ｎ．ａｎｄ Ｓｉｍｏｎ，Ｍ．Ｉ．，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｙｅａｓｔ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ １９４，ｐｐ １８２－１８７、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；Ｉｔｏ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１５３：１６３；及びＨｉｎｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９７８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７５：１９２０。
生成方法
本発明は、変異体を生成する方法であって、（ａ）この変異体の発現に好適な条件下で本発明の組換え宿主細胞を培養すること；及び（ｂ）変異体を回収することを含む方法にも関する。
本発明は、変異体を生成する方法であって、（ａ）この変異体の発現に好適な条件下で本発明の組換え宿主細胞を培養すること；及び（ｂ）変異体を回収することを含む方法にも関する。
組換え宿主細胞は、当技術分野において知られる方法を使用して変異体の生成に好適な栄養培地中で培養される。例えば、細胞は、好適な培地中において並びに変異体の発現及び／又は単離が可能になる条件下で実施される実験用又は工業用発酵槽におけるフラスコ振盪培養、又は小規模若しくは大規模発酵（連続、バッチ、フェドバッチ、又は固体状態の発酵を含む）により培養され得る。この培養を、当該技術分野で知られる手順を使用して、炭素源及び窒素源並びに無機塩を含む好適な栄養培地中で行う。好適な培地は、商業的供給業者から入手可能であるか、又は公開されている組成（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎのカタログで公開されている組成）に従って調製し得る。変異体が栄養培地に分泌される場合、変異体は、培地から直接的に回収することができる。変異体が分泌されない場合、それは、細胞可溶化物から回収することができる。
変異体は、変異体に特異的である当該技術分野において知られる方法を用いて検出され得る。これらの検出法としては、特異抗体の使用、酵素生成物の形成、又は酵素基質の消失が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、酵素アッセイを使用して、この変異体の活性を決定してもよい。
変異体は、当該技術分野において知られる方法を使用して回収され得る。例えば、変異体は、採取、遠心分離、濾過、抽出、噴霧乾燥、蒸発又は沈殿を含むが、これらに限定されない従来の手順によって栄養培地から回収され得る。
変異体は、実質的に純粋な変異体を得るための、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、親和性、疎水性、クロマトフォーカシング及びサイズ排除）、電気泳動法（例えば、分取等電点電気泳動）溶解度の相違（例えば、硫酸アンモニウム沈殿）、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ又は抽出（例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｊａｎｓｏｎ ａｎｄ Ｒｙｄｅｎ，ｅｄｉｔｏｒｓ，ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８９を参照されたい）を含むが、これらに限定されない、当技術分野において知られる様々な手順によって精製され得る。
代替的な態様において、変異体は回収されず、むしろ変異体を発現する本発明の宿主細胞が変異体の供給源として使用される。
発酵ブロス配合物又は細胞組成物
本発明は、本発明の変異体を含む発酵ブロス配合物又は細胞組成物にも関する。発酵ブロス産物はさらに、例えば、細胞（本発明の変異体をコードする遺伝子を含有する宿主細胞であって、目的の変異体の産生に使用される宿主細胞を含む）、細胞片、バイオマス、発酵培地及び／又は発酵産物などの発酵プロセスで用いられる追加の成分を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、１つ又は複数の有機酸、死細胞及び／又は細胞片並びに培養培地を含有する死滅した細胞の全ブロスである。
本発明は、本発明の変異体を含む発酵ブロス配合物又は細胞組成物にも関する。発酵ブロス産物はさらに、例えば、細胞（本発明の変異体をコードする遺伝子を含有する宿主細胞であって、目的の変異体の産生に使用される宿主細胞を含む）、細胞片、バイオマス、発酵培地及び／又は発酵産物などの発酵プロセスで用いられる追加の成分を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、１つ又は複数の有機酸、死細胞及び／又は細胞片並びに培養培地を含有する死滅した細胞の全ブロスである。
用語「発酵ブロス」は、本明細書で使用する場合、回収及び／又は精製を全く行わないか又は最小限にのみ行う細胞発酵により産生される調製物を指す。例えば、発酵ブロスは、微生物培養物を飽和するまで増殖させ、炭素制限条件下でインキュベートしてタンパク質を合成させて（例えば、宿主細胞による酵素の発現）、細胞培養培地中に分泌させるときに作製される。発酵ブロスは、発酵の終了時に得られる発酵材料の未分画又は分画内容物を含有し得る。通常、発酵ブロスは、未分画であり、使用済みの培養培地及び微生物細胞（例えば、糸状真菌細胞）が例えば遠心分離により除去された後に存在する細胞片を含む。いくつかの実施形態において、発酵ブロスは、使用済みの細胞培養培地、細胞外酵素並びに生存及び／又は非生存微生物細胞を含有する。
ある実施形態において、発酵ブロス配合物及び細胞組成物は、少なくとも１つの１～５炭素の有機酸及び／又はその塩を含む第１の有機酸成分並びに少なくとも１つの６炭素以上の有機酸及び／又はその塩を含む第２の有機酸成分を含む。特定の実施形態において、第１の有機酸成分は、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、その塩又は前述の２つ以上の混合物であり、第２の有機酸成分は、安息香酸、シクロヘキサンカルボン酸、４－メチル吉草酸、フェニル酢酸、その塩又は前述の２つ以上の混合物である。
一態様において、組成物は、１つ又は複数の有機酸を含有し、且つ任意選択により死細胞及び／又は細胞片をさらに含有する。一実施形態において、死細胞及び／又は細胞片は、死滅した細胞の全ブロスから除去されて、これらの成分を含まない組成物が提供される。
発酵ブロス配合物又は細胞組成物は、限定されないが、ソルビトール、塩化ナトリウム、ソルビン酸カリウム及び当技術分野において知られる他のものを含む保存剤及び／又は抗菌剤（例えば、静菌剤）をさらに含み得る。
死滅した細胞の全ブロス又は組成物は、発酵の終了時に得られる発酵材料の未分画内容物を含有し得る。通常、死滅した細胞の全ブロス又は組成物は、微生物細胞（例えば、糸状真菌細胞）を飽和するまで増殖させ、炭素制限条件下でインキュベートしてタンパク質を合成させた後に存在する使用済みの培養培地及び細胞片を含有する。いくつかの実施形態において、死滅した細胞の全ブロス又は組成物は、使用済みの細胞培養培地、細胞外酵素及び糸状真菌の死細胞を含有する。いくつかの実施形態において、死滅した細胞の全ブロス又は組成物中に存在する微生物細胞は、当技術分野において知られる方法を用いて透過処理及び／又は溶解され得る。
本明細書に記載されるとおりの全ブロス又は細胞組成物は、通常、液体であるが、死細胞、細胞片、培養培地成分及び／又は１つ若しくは複数の不溶性酵素などの不溶性成分を含有し得る。いくつかの実施形態において、不溶性成分が除去されて清澄化された液体組成物が提供され得る。
本発明の全ブロス配合物及び細胞組成物は、国際公開第９０／１５８６１号パンフレット又は国際公開第２０１０／０９６６７３号パンフレットに記載される方法によって作製され得る。
組成物
一実施形態において、本発明は、本発明のキシログルカナーゼ変異体を、１種又は複数種の追加のクリーニング組成物成分及び好ましくは本明細書に記載の洗剤補助成分と組み合わせて含む洗剤組成物などのクリーニング組成物に関する。追加の構成成分の選択は、当業者の技術の範囲内であり、下記の例示的な非限定的な構成成分を含む従来の成分を含む。この洗剤組成物は、織物、食器、及び硬質表面などのクリーニングされる品目のクリーニングのために、品目の汚れの前処理のために、洗浄サイクル中の汚れの再付着防止、低減、若しくは除去のために、品目の白色度の維持若しくは改善のために使用することができる。
一実施形態において、本発明は、本発明のキシログルカナーゼ変異体を、１種又は複数種の追加のクリーニング組成物成分及び好ましくは本明細書に記載の洗剤補助成分と組み合わせて含む洗剤組成物などのクリーニング組成物に関する。追加の構成成分の選択は、当業者の技術の範囲内であり、下記の例示的な非限定的な構成成分を含む従来の成分を含む。この洗剤組成物は、織物、食器、及び硬質表面などのクリーニングされる品目のクリーニングのために、品目の汚れの前処理のために、洗浄サイクル中の汚れの再付着防止、低減、若しくは除去のために、品目の白色度の維持若しくは改善のために使用することができる。
好ましくは、この組成物はそのような変異体に富む。用語「濃縮される」は、組成物のキシログルカナーゼ活性が、例えば、少なくとも１．１の濃縮係数を有して増大されていることを示す。
この組成物は、主要な酵素成分（例えば一成分組成物）として、本発明の変異体を含むことができる。或いは、組成物は、複数の酵素活性、例えば、以下：ヒドロラーゼ、イソメラーゼ、リガーゼ、リアーゼ、オキシドレダクターゼ、又はトランスフェラーゼ、例えば、α－ガラクトシダーゼ、α－グルコシダーゼ、アミノペプチダーゼ、アミラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、β－グルコシダーゼ、β－キシロシダーゼ、カルボヒドラーゼ、カルボキシペプチダーゼ、カタラーゼ、セロビオヒドロラーゼ、セルラーゼ、キチナーゼ、クチナーゼ、シクロデキストリングリコシルトランスフェラーゼ、デオキシリボヌクレアーゼ、エンドグルカナーゼ、エステラーゼ、グルコアミラーゼ、インベルターゼ、ラッカーゼ、リパーゼ、マンノシダーゼ、ムタナーゼ、ヌクレアーゼ、オキシダーゼ、ペクチン分解酵素、ペルオキシダーゼ、フィターゼ、ポリフェノールオキシダーゼ、タンパク質分解酵素、リボヌクレアーゼ、トランスグルタミナーゼ、又はキシラナーゼからなる群から選択される１種又は複数種の酵素を含んでもよい。
組成物は、当技術分野で公知の方法に従って調製してよく、液体又は乾燥組成物の形態であってもよい。この組成物を、当技術分野で既知の方法に従って安定化させ得る。
本発明の組成物の好ましい使用の例を以下に示す。この組成物の投与量及びこの組成物が使用される他の条件を、当分野で既知の方法に基づいて決定することができる。
構成成分の選択は、織物ケアのために、クリーニングされる織物の種類、汚れの種類及び／又は程度、クリーニングが行われる温度、並びに洗剤製品の配合の検討を含み得る。下記の構成成分は、特定の機能性に従って一般的な見出しにより分類されているが、これは、当業者に理解されるように、構成成分が追加の機能性を含み得るため、限定として解釈されるべきではない。
本発明の一実施形態において、洗剤組成物などの組成物は、本明細書に開示されるキシログルカナーゼ変異体及び洗剤補助剤を含む。
本発明の一実施形態において、洗剤補助成分は、以下：界面活性剤、ビルダー、凝集助剤、キレート化剤、移染防止剤、酵素、酵素安定剤、酵素阻害剤、触媒材料、漂白活性化剤、過酸化水素、過酸化水素供給源、事前形成された過酸（ｐｒｅｆｏｒｍｅｄ ｐｅｒａｃｉｄ）、ポリマー分散剤、泥汚れ除去／再付着防止剤、増白剤、セッケン泡抑制剤、染料、香料、構造弾性化剤、布地柔軟剤、キャリア、ヒドロトロープ、ビルター及びコビルダー、布地色相剤、消泡剤、分散剤、加工助剤、及び／又は顔料からなる群から選択される。
洗剤補助成分は、界面活性剤であってよい。キシログルカナーゼ変異体を含む洗剤組成物中に界面活性剤を含有させる１つの利点は、洗浄性能が向上することである。一実施形態において、洗剤補助成分は、ビルダー又は泥汚れ除去／再付着防止剤である。
一実施形態において、洗剤補助成分は酵素である。洗剤補助成分は、以下に示すように、１種又は複数種の酵素を含んでもよい。１種又は複数種の酵素は、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、ヌクレアーゼ及びオキシダーゼからなる群から選択してもよい。本発明の洗剤組成物に適した具体的な酵素は、以下に記載する。
洗剤組成物は、バー、均質錠剤、２つ以上の層を有する錠剤、１個又は複数個の区画を有するポーチ、通常の若しくは圧縮された粉末、顆粒、ペースト、ゲル、又は通常の、圧縮若しくは濃縮液体として配合してもよい。洗剤組成物は、液体洗剤、粉末洗剤又は顆粒状洗剤であってよい。
本発明のキシログルカナーゼは、洗濯などのクリーニング工程での使用に好適である。本発明は、さらに、
ａ．キシログルカナーゼ活性を有する変異体ポリペプチドを含む洗浄液又はポリペプチドを含む洗剤組成物に、品目を曝露するステップ；
ｂ．少なくとも１回の洗浄サイクルを完了するステップ；及び
ｃ．任意選択で前記品目をすすぐステップ
を含む、織物である品目を洗濯する方法に関する。
ａ．キシログルカナーゼ活性を有する変異体ポリペプチドを含む洗浄液又はポリペプチドを含む洗剤組成物に、品目を曝露するステップ；
ｂ．少なくとも１回の洗浄サイクルを完了するステップ；及び
ｃ．任意選択で前記品目をすすぐステップ
を含む、織物である品目を洗濯する方法に関する。
溶液のｐＨは、１～１１の範囲、例えば５．５～１１の範囲、例えば７～９の範囲、７～８の範囲又は７～８．５の範囲である。
洗浄液は、５℃～９５℃の範囲、又は１０℃～８０℃の範囲、１０℃～７０℃の範囲、１０℃～６０℃の範囲、１０℃～５０℃の範囲、１５℃～４０℃の範囲又は２０℃～３０℃の範囲の温度を有し得る。一実施形態において、洗浄液の温度は３０℃である。
本発明の一実施形態において、品目を洗濯する方法は、洗浄サイクルの完了後に洗浄液又は洗浄液の一部を排出するステップをさらに含む。次に、洗浄液を後の洗浄サイクル又は後のすすぎサイクルで再利用することができる。第１の洗浄サイクル、任意選択で第２又は第３の洗浄サイクル中に、品目を洗浄液に曝露させてもよい。一実施形態において、品目を洗浄液に曝露した後すすぐ。水又はコンディショナを含む水で品目をすすぐことができる。本発明はさらに、本発明の方法に従って洗浄される品目にも関する。本発明のキシログルカナーゼ変異体を洗浄液に添加してもよい。
したがって、本発明の一実施形態は、１種又は複数種のアニオン性界面活性剤；プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、ヌクレアーゼ、及びオキシダーゼからなる群から選択される酵素；並びに本発明のキシログルカナーゼ変異体を含む洗浄剤組成物に関する。
一実施形態は、さらに、
ａ．キシログルカナーゼ変異体を含む洗浄液、又は少なくとも１種のキシログルカナーゼ変異体を含む洗剤組成物に織物を曝露するステップ；
ｂ．少なくとも１回の洗浄サイクルを完了するステップ；並びに
ｃ．任意選択で、織物をすすぐステップ
を含む織物の洗浄方法であって、キシログルカナーゼ変異体が、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置で改変を含む方法に関する。
ａ．キシログルカナーゼ変異体を含む洗浄液、又は少なくとも１種のキシログルカナーゼ変異体を含む洗剤組成物に織物を曝露するステップ；
ｂ．少なくとも１回の洗浄サイクルを完了するステップ；並びに
ｃ．任意選択で、織物をすすぐステップ
を含む織物の洗浄方法であって、キシログルカナーゼ変異体が、配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置で改変を含む方法に関する。
別の実施形態は、本発明の方法に従って洗浄される織物に関する。
洗浄液中のキシログルカナーゼ変異体の濃度は、典型的に、例えば、０．００００８～１００の範囲、０．０００１～１００の範囲、０．０００２～１００の範囲、０．０００４～１００の範囲、０．０００８～１００の範囲、０．００１～１００ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、０．０１～１００ｐｐｍ酵素タンパク質、好ましくは０．０５～５０ｐｐｍ酵素タンパク質、より好ましくは０．１～５０ｐｐｍ酵素タンパク質、より好ましくは０．１～３０ｐｐｍ酵素タンパク質、さらに好ましくは０．５～２０ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲、並びに最も好ましくは０．５～１０ｐｐｍ酵素タンパク質など、０．００００４～１００ｐｐｍ酵素タンパク質の範囲である。
本発明のキシログルカナーゼ変異体は、少なくとも０．００２ｍｇのキシログルカナーゼタンパク質、例えば、少なくとも０．００４ｍｇのキシログルカナーゼタンパク質、少なくとも０．００６ｍｇのキシログルカナーゼタンパク質、少なくとも０．００８ｍｇのキシログルカナーゼタンパク質、少なくとも０．０１ｍｇのキシログルカナーゼタンパク質、少なくとも０．１ｍｇのタンパク質、好ましくは少なくとも１ｍｇのタンパク質、より好ましくは少なくとも１０ｍｇのタンパク質、さらに好ましくは少なくとも１５ｍｇのタンパク質、非常に好ましくは少なくとも２０ｍｇのタンパク質、最も好ましくは少なくとも２５ｍｇのタンパク質に対応する量で、洗剤組成物に添加してよい。従って、洗剤組成物は、少なくとも０．００００８％のキシログルカナーゼタンパク質、好ましくは少なくとも０．００２％、０．００３％、０．００４％、０．００５％、０．００６％、０．００８％、０．０１％、０．０２％、０．０３％、０．０５％、０．１％、０．２％、０．３％、０．４％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％又は１．０％のキシログルカナーゼタンパク質を含み得る。
本発明の洗剤に含まれる酵素は、通常の安定剤、例えば、プロピレングリコール若しくはグリセロールなどのポリオール、糖若しくは糖アルコール、並びにＮａＣｌ及びＫＣｌなどの各種塩を用いて、安定化させてもよい。本発明の洗剤に存在するプロテアーゼは、乳酸、ギ酸、ホウ酸、若しくはホウ酸誘導体、例えば、芳香族ホウ酸エステル、又は４－ホルミルフェニルボロン酸などのフェニルボロン酸誘導体、又はジ－、トリ－若しくはテトラペプチドアルデヒドなどのペプチドアルデヒド又はアルデヒド類似体（形態Ｂ１－Ｂ０－Ｒ０－Ｒ（式中、Ｒは、Ｈ、ＣＨ３、ＣＸ３、ＣＨＸ２、又はＣＨ２Ｘ（Ｘ＝ハロゲン）、Ｂ０は、単一のアミノ酸残基（好ましくは、任意選択で置換された脂肪族若しくは芳香族側鎖）であり；Ｂ１は、１個又は複数個のアミノ酸残基（好ましくは、１、２若しくは３個）から成り、任意選択でＮ末端保護基を含む）、或いは国際公開第０９１１８３７５号パンフレット、国際公開第９８／１３４５９号パンフレットに記載されるもののいずれか）又はＲＡＳＩ、ＢＡＳＩ、ＷＡＳＩ（イネ、オオムギ及びコムギの二官能価αアミラーゼ／サブチリシン阻害剤）又はＣＩ２若しくはＳＳＩなどのタンパク質タイプのプロテアーゼ阻害剤を使用して安定化させてもよい。組成物は、国際公開第９２／１９７０９号パンフレット、国際公開第９２／１９７０８号パンフレット及び米国特許第６，４７２，３６４号明細書に記載されるように配合してもよい。いくつかの実施形態において、本明細書で使用される酵素は、下記のようなイオンを酵素に供給する完成組成物中の亜鉛（ＩＩ）、カルシウム（ＩＩ）及び／又はマグネシウム（ＩＩ）イオンの水溶性供給源、並びに他の金属イオン（例えば、バリウム（ＩＩ）、スカンジウム（ＩＩ）、鉄（ＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、アルミニウム（ＩＩ）、スズ（ＩＩ）、コバルト（ＩＩ）、銅（ＩＩ）、ニッケル（ＩＩ）、及びオキソバナジウム（ＩＶ））の存在によって安定される。
一実施形態において、ポリペプチドは、ペプチドアルデヒド又はケトンを使用して安定化される。好適なペプチドアルデヒドは、国際公開第９４／０４６５１号パンフレット、国際公開第９５／２５７９１号パンフレット、国際公開第９８／１３４５８号パンフレット、国際公開第９８／１３４５９号パンフレット、国際公開第９８／１３４６０号パンフレット、国際公開第９８／１３４６１号パンフレット、国際公開第９８／１３４６２号パンフレット、国際公開第０７／１４１７３６号パンフレット、国際公開第０７／１４５９６３号パンフレット、国際公開第０９／１１８３７５号パンフレット、国際公開第１０／０５５０５２号パンフレット及び国際公開第１１／０３６１５３号パンフレットに記載される。本発明のポリペプチドは、国際公開第９７／０７２０２号パンフレットに開示される洗剤配合物に含有させてもよく、この文献は、参照により本明細書に組み込まれる。
別の実施形態において、ポリペプチドは、次式を有する４－ホルミルフェニルボロン酸（４－ＦＰＢＡ）である、フェニルボロン酸誘導体を用いて安定化される。
洗剤組成物は、例えば、プロピレングリコール、グリセロール、４－ホルミルフェニルボロン酸及びホウ酸塩からなる群から選択されるものなどの２種以上の安定剤を含んでもよい。
洗剤組成物は、例えば、プロピレングリコール、グリセロール、４－ホルミルフェニルボロン酸及びホウ酸塩からなる群から選択されるものなどの２種以上の安定剤を含んでもよい。
安定剤は、好ましくは、０．００１～約５．０重量％、０．０１～約２．０重量％、０．１～約３重量％、又は０．５～約１．５重量％の量で洗剤組成物中に存在する。
界面活性剤
洗剤組成物は、アニオン性及び／若しくはカチオン性及び／若しくは非イオン性及び／若しくは半極性及び／若しくは双性イオン性、又はこれらの混合物であり得る１種又は複数種の界面活性剤を含んでもよい。特定の実施形態において、洗剤組成物は、１種又は複数種の非イオン性界面活性剤及び１種又は複数種のアニオン性界面活性剤の混合物を含む。界面活性剤は通常、約５％～約５０％、又は約１０％～約５０％、又は約２０％～約５０％などの約５重量％～６０重量％のレベルで存在する。界面活性剤は所望のクリーニング用途に基づいて選択され、当該技術分野において知られる任意の従来の界面活性剤を含み得る。
洗剤組成物は、アニオン性及び／若しくはカチオン性及び／若しくは非イオン性及び／若しくは半極性及び／若しくは双性イオン性、又はこれらの混合物であり得る１種又は複数種の界面活性剤を含んでもよい。特定の実施形態において、洗剤組成物は、１種又は複数種の非イオン性界面活性剤及び１種又は複数種のアニオン性界面活性剤の混合物を含む。界面活性剤は通常、約５％～約５０％、又は約１０％～約５０％、又は約２０％～約５０％などの約５重量％～６０重量％のレベルで存在する。界面活性剤は所望のクリーニング用途に基づいて選択され、当該技術分野において知られる任意の従来の界面活性剤を含み得る。
含まれる場合、洗剤は通常、約１０％～約２５％を含む、約５％～約４０％などの約５重量％～約６０重量％の１種又は複数種のアニオン性界面活性剤を含有することになり、アニオン性界面活性剤の非限定的な例としては、硫酸塩及びスルホン酸塩、特に、直鎖アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳ）、ＬＡＳの異性体、分岐アルキルベンゼンスルホネート（ＢＡＢＳ）、フェニルアルカンスルホネート、アルファ－オレフィンスルホネート（ＡＯＳ）、オレフィンスルホネート、アルケンスルホネート、アルカン－２，３－ジイルビス（硫酸塩）、ヒドロキシアルカンスルホネート及びジスルホネート、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）などのアルキルスルフェート（ＡＳ）、脂肪族アルコールスルフェート（ＦＡＳ）、第１級アルコールスルフェート（ＰＡＳ）、アルコールエーテルスルフェート（アルコールエトキシスルフェート又は脂肪族アルコールエーテルスルフェートとしても知られるＡＥＳ又はＡＥＯＳ又はＦＥＳ）、第２級アルカンスルホネート（ＳＡＳ）、パラフィンスルホネート（ＰＳ）、エステルスルホネート、スルホン化脂肪酸グリセロールエステル、メチルエステルスルホネート（ＭＥＳ）を含むα－スルホ脂肪酸メチルエステル（α－ＳＦＭｅ又はＳＥＳ）、アルキル－又はアルケニルコハク酸、ドデセニル／テトラデセニルコハク酸（ＤＴＳＡ）、アミノ酸の脂肪酸誘導体、スルホコハク酸又は脂肪酸の塩（石鹸）又は脂肪酸のジエステル及びモノエステル、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
含まれる場合、洗剤は通常、約０．１重量％～約１０重量％のカチオン性界面活性剤、例えば、約０．１％～約５％を含有することになり、カチオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルエタノール第４級アミン（ＡＤＭＥＡＱ）、臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、塩化ジメチルジステアリルアンモニウム（ＤＳＤＭＡＣ）、及びアルキルベンジルジメチルアンモニウム、アルキル第４級アンモニウム化合物、アルコキシル化第４級アンモニウム（ＡＱＡ）化合物、第４級エステル類、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
含まれる場合、洗剤は通常、約０．２重量％～約６０重量％の非イオン性界面活性剤、例えば、約１％～約４０％、特に、約５％～約２０％、約３％～約１５％を含有することになり、非イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルコールエトキシレート（ＡＥ又はＡＥＯ）、アルコールプロポキシレート、プロポキシル化脂肪族アルコール（ＰＦＡ）、アルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、例えばエトキシル化脂肪酸アルキルエステル及び／又はプロポキシル化脂肪酸アルキルエステル、アルキルフェノールエトキシレート（ＡＰＥ）、ノニルフェノールエトキシレート（ＮＰＥ）、アルキルポリグリコシド（ＡＰＧ）、アルコキシル化アミン、脂肪酸モノエタノールアミド（ＦＡＭ）、脂肪酸ジエタノールアミド（ＦＡＤＡ）、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＥＦＡＭ）、プロポキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＰＦＡＭ）、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、又はグルコサミンのＮ－アシルＮ－アルキル誘導体（グルコサミド、ＧＡ又は脂肪酸グルカミド、ＦＡＧＡ）、メチルエステルエトキシレート（ＭＥＥ）、並びに商標名ＳＰＡＮ及びＴＷＥＥＮの下で入手可能な製品、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
含まれる場合、洗剤は通常、約０．１重量％～約１０重量％の半極性界面活性剤を含有することになる。半極性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルアミンオキシド、Ｎ－（ココアルキル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミンオキシド及びＮ－（牛脂－アルキル）－Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）アミンオキシドなどのアミンオキシド（ＡＯ）、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
含まれる場合、洗剤は通常、約０．１重量％～約１０重量％の双性イオン性界面活性剤を含有することになる。双性イオン性界面活性剤の非限定的な例としては、アルキルジメチルベタイン、スルホベタイン、及びこれらの組み合わせなどのベタインが挙げられる。
溶媒系：界面活性剤及び他の洗剤成分の溶解のために、溶媒系が必要とされる。溶媒は通常、水、アルコール、ポリオール、糖及び／又はその混合物である。好ましい溶媒は、水、グリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール（ＭＰＧ、１，２－プロパンジオール又は１，３－プロパンジオール）、ジプロピレングリコール（ＤＰＧ）、ポリエチレングリコールファミリー（ＰＥＧ３００－６００）、ヘキシレングリコール、イノシトール、マンニトール、エタノール、イソプロパノール、ｎ－ブトキシプロポキシプロパノール、エタノールアミン（モノエタノールアミン、ジエタノールアミン及びトリエタノールアミン）、スクロース、デキストロース、グルコース、リボース、キシロース、並びに関連するモノピラノシド及びジピラノシド及びモノフラノシド及びジフラノシドである。
溶媒系は、典型的には全体として５～９０重量％、５～６０重量％、５～４０重量％、１０～３０重量％で存在する。
ＰＶＡフィルム中に包まれる単位用量に関する水含量は通常、１～１５％、２～１２％、３～１０％、５～１０％の範囲である。
ＰＶＡフィルム中に包まれる単位用量に関するポリオール含量は通常、５～５０％、１０～４０％又は２０～３０％の範囲である。
一実施形態において、界面活性剤は、天然に存在しない界面活性剤である。
ヒドロトロープ
ヒドロトロープは、水溶液（又は非極性環境中の反対の極性の物質）中で疎水性化合物を可溶化する化合物である。通常、ヒドロトロープは、親水性及び疎水性の両方の特徴（界面活性剤から知られるとおりの、いわゆる両親媒性特性）を有するが、ヒドロトロープの分子構造は通常、自然発生的な自己凝集を好まず、例えば、Ｈｏｄｇｄｏｎ ａｎｄ Ｋａｌｅｒ（２００７），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｏｌｌｏｉｄ ＆ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ １２：１２１－１２８による概説を参照されたい。ヒドロトロープは、ミセル相、ラメラ相又は他の明確なメソ相を形成する界面活性剤及び脂質に関して見出されるとおり、自己凝集が起こる臨界濃度を示さない。実際に、多くのヒドロトロープは、濃度が増大するにつれて凝集体のサイズが大きくなる持続型凝集プロセスを示す。しかしながら、多くのヒドロトロープは、水、油、界面活性剤、及びポリマーの混合物を含む、極性及び非極性の物質を含有する系の相挙動、安定性、及びコロイド特性を変化させる。ヒドロトロープは、製薬、パーソナルケア、食品から技術用途に至る産業全体で、古典的に使用される。洗剤組成物中のヒドロトロープの使用は、相分離又は高粘度などの望まれない現象を誘発することなく、（水を除去することによって液体洗剤を濃縮するプロセスの場合のように）例えば、界面活性剤のより濃縮された配合物を可能にする。
ヒドロトロープは、水溶液（又は非極性環境中の反対の極性の物質）中で疎水性化合物を可溶化する化合物である。通常、ヒドロトロープは、親水性及び疎水性の両方の特徴（界面活性剤から知られるとおりの、いわゆる両親媒性特性）を有するが、ヒドロトロープの分子構造は通常、自然発生的な自己凝集を好まず、例えば、Ｈｏｄｇｄｏｎ ａｎｄ Ｋａｌｅｒ（２００７），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｏｌｌｏｉｄ ＆ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ １２：１２１－１２８による概説を参照されたい。ヒドロトロープは、ミセル相、ラメラ相又は他の明確なメソ相を形成する界面活性剤及び脂質に関して見出されるとおり、自己凝集が起こる臨界濃度を示さない。実際に、多くのヒドロトロープは、濃度が増大するにつれて凝集体のサイズが大きくなる持続型凝集プロセスを示す。しかしながら、多くのヒドロトロープは、水、油、界面活性剤、及びポリマーの混合物を含む、極性及び非極性の物質を含有する系の相挙動、安定性、及びコロイド特性を変化させる。ヒドロトロープは、製薬、パーソナルケア、食品から技術用途に至る産業全体で、古典的に使用される。洗剤組成物中のヒドロトロープの使用は、相分離又は高粘度などの望まれない現象を誘発することなく、（水を除去することによって液体洗剤を濃縮するプロセスの場合のように）例えば、界面活性剤のより濃縮された配合物を可能にする。
洗剤は、０～１０重量％、例えば、約０～５重量％、例えば、約０．５～約５％、又は約３％～５％のヒドロトロープを含有し得る。洗剤における使用のための当該技術分野で知られる任意のヒドロトロープが利用され得る。ヒドロトロープの非限定的な例としては、ベンゼンスルホン酸ナトリウム、ｐ－トルエンスルホン酸ナトリウム（ＳＴＳ）、キシレンスルホン酸ナトリウム（ＳＸＳ）、クメンスルホン酸ナトリウム（ＳＣＳ）、シメンスルホン酸ナトリウム、アミン酸化物、アルコール及びポリグリコールエーテル、ナトリウムヒドロキシナフトエート、ヒドロキシナフタレンスルホン酸ナトリウム、硫酸ナトリウムエチルヘキシル、並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
ビルダー及びコビルダー
洗剤組成物は、約０～６５％、０～２０％；又は０．５～５％の洗剤ビルダー若しくはコビルダー、又はその組み合わせを含有し得る。食器洗浄洗剤中、ビルダーのレベルは通常、１０～６５％、特に２０～４０％である。ビルダー及び／又はコビルダーは、特に、Ｃａ及びＭｇとの水溶性錯体を形成するキレート化剤であり得る。洗濯洗剤における使用のための当該技術分野知られる任意のビルダー及び／又はコビルダーが利用され得る。非限定的な例は、クエン酸塩、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム及びクエン酸ナトリウムであり、ホスホネートの例としては、１－ヒドロキシエチリデン－１，１－ジホスホン酸（ＨＥＤＰ、エチドロン酸）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）、アミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）、ニトリロトリメチレンホスホン酸（ＮＴＭＰ）、２－アミノエチルホスホン酸（ＡＥＰｎ）、ジメチルメチルホスホネート（ＤＭＰＰ）、テトラメチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＴＤＴＭＰ）、ヘキサメチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＨＤＴＭＰ）、ホスホノブタン－トリカルボン酸（ＰＢＴＣ）、Ｎ－（ホスホノメチル）イミノジ酢酸（ＰＭＩＤＡ）、２－カルボキシエチルホスホン酸（ＣＥＰＡ）、２－ヒドロキシホスホノカルボン酸（ＨＰＡＡ）及びアミノ－トリス－（メチレン－ホスホン酸）（ＡＭＰ）が挙げられる。Ｌ－グルタミン酸Ｎ，Ｎ－ジ酢酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）、メチルグリシンジ酢酸（ＭＧＤＡ）。ビルダーの非限定的な例としては、ポリアクリレートのホモポリマー又はそのコポリマー、例えば、ポリ（アクリル酸）（ＰＡＡ）又はコポリ（アクリル酸／マレイン酸）（ＰＡＡ／ＰＭＡ）が挙げられる。さらなる非限定的な例としては、シトレート、キレート化剤、例えば、アミノカルボキシレート、アミノポリカルボキシレート、及びホスホネート、並びにアルキル又はアルケニルコハク酸が挙げられる。追加の具体例としては、２，２’，２’’－ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、イミノジコハク酸（ＩＤＳ）、エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’－ジコハク酸（ＥＤＤＳ）、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、グルタミン酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＧＬＤＡ）、１－ヒドロキシエタン－１，１－ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）、ジエチレントリアミンペンタキス（メチレンホスホン酸）（ＤＴＭＰＡ又はＤＴＰＭＰＡ）、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸（ＥＤＧ）、アスパラギン酸－Ｎ－一酢酸（ＡＳＭＡ）、アスパラギン酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＡＳＤＡ）、アスパラギン酸－Ｎ－モノプロピオン酸（ＡＳＭＰ）、イミノジコハク酸（ＩＤＡ）、Ｎ－（２－スルホメチル）－アスパラギン酸（ＳＭＡＳ）、Ｎ－（２－スルホエチル）アスパラギン酸（ＳＥＡＳ）、Ｎ－（２－スルホメチル）－グルタミン酸（ＳＭＧＬ）、Ｎ－（２－スルホエチル）グルタミン酸（ＳＥＧＬ）、Ｎ－メチルイミノ二酢酸（ＭＩＤＡ）、α－アラニン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（α－ＡＬＤＡ）、セリン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＳＥＤＡ）、イソセリン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＩＳＤＡ）、フェニルアラニン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＰＨＤＡ）、アントラニル酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＡＮＤＡ）、スルファニル酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＳＬＤＡ）、タウリン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＴＵＤＡ）、及びスルホメチル－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＳＭＤＡ）、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）－エチリデンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、ジエタノールグリシン（ＤＥＧ）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、アミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）、並びにこれらの組み合わせ及び塩が挙げられる。さらなる例示的ビルダー及び／又はコビルダーは、例えば、国際公開第０９／１０２８５４号パンフレット、米国特許第５９７７０５３号明細書に記載されている。
洗剤組成物は、約０～６５％、０～２０％；又は０．５～５％の洗剤ビルダー若しくはコビルダー、又はその組み合わせを含有し得る。食器洗浄洗剤中、ビルダーのレベルは通常、１０～６５％、特に２０～４０％である。ビルダー及び／又はコビルダーは、特に、Ｃａ及びＭｇとの水溶性錯体を形成するキレート化剤であり得る。洗濯洗剤における使用のための当該技術分野知られる任意のビルダー及び／又はコビルダーが利用され得る。非限定的な例は、クエン酸塩、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム及びクエン酸ナトリウムであり、ホスホネートの例としては、１－ヒドロキシエチリデン－１，１－ジホスホン酸（ＨＥＤＰ、エチドロン酸）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）、アミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）、ニトリロトリメチレンホスホン酸（ＮＴＭＰ）、２－アミノエチルホスホン酸（ＡＥＰｎ）、ジメチルメチルホスホネート（ＤＭＰＰ）、テトラメチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＴＤＴＭＰ）、ヘキサメチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＨＤＴＭＰ）、ホスホノブタン－トリカルボン酸（ＰＢＴＣ）、Ｎ－（ホスホノメチル）イミノジ酢酸（ＰＭＩＤＡ）、２－カルボキシエチルホスホン酸（ＣＥＰＡ）、２－ヒドロキシホスホノカルボン酸（ＨＰＡＡ）及びアミノ－トリス－（メチレン－ホスホン酸）（ＡＭＰ）が挙げられる。Ｌ－グルタミン酸Ｎ，Ｎ－ジ酢酸四ナトリウム塩（ＧＬＤＡ）、メチルグリシンジ酢酸（ＭＧＤＡ）。ビルダーの非限定的な例としては、ポリアクリレートのホモポリマー又はそのコポリマー、例えば、ポリ（アクリル酸）（ＰＡＡ）又はコポリ（アクリル酸／マレイン酸）（ＰＡＡ／ＰＭＡ）が挙げられる。さらなる非限定的な例としては、シトレート、キレート化剤、例えば、アミノカルボキシレート、アミノポリカルボキシレート、及びホスホネート、並びにアルキル又はアルケニルコハク酸が挙げられる。追加の具体例としては、２，２’，２’’－ニトリロ三酢酸（ＮＴＡ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、イミノジコハク酸（ＩＤＳ）、エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’－ジコハク酸（ＥＤＤＳ）、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、グルタミン酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＧＬＤＡ）、１－ヒドロキシエタン－１，１－ジホスホン酸（ＨＥＤＰ）、エチレンジアミンテトラ（メチレンホスホン酸）（ＥＤＴＭＰＡ）、ジエチレントリアミンペンタキス（メチレンホスホン酸）（ＤＴＭＰＡ又はＤＴＰＭＰＡ）、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸（ＥＤＧ）、アスパラギン酸－Ｎ－一酢酸（ＡＳＭＡ）、アスパラギン酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＡＳＤＡ）、アスパラギン酸－Ｎ－モノプロピオン酸（ＡＳＭＰ）、イミノジコハク酸（ＩＤＡ）、Ｎ－（２－スルホメチル）－アスパラギン酸（ＳＭＡＳ）、Ｎ－（２－スルホエチル）アスパラギン酸（ＳＥＡＳ）、Ｎ－（２－スルホメチル）－グルタミン酸（ＳＭＧＬ）、Ｎ－（２－スルホエチル）グルタミン酸（ＳＥＧＬ）、Ｎ－メチルイミノ二酢酸（ＭＩＤＡ）、α－アラニン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（α－ＡＬＤＡ）、セリン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＳＥＤＡ）、イソセリン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＩＳＤＡ）、フェニルアラニン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＰＨＤＡ）、アントラニル酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＡＮＤＡ）、スルファニル酸－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＳＬＤＡ）、タウリン－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＴＵＤＡ）、及びスルホメチル－Ｎ，Ｎ－二酢酸（ＳＭＤＡ）、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）－エチリデンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、ジエタノールグリシン（ＤＥＧ）、ジエチレントリアミンペンタ（メチレンホスホン酸）（ＤＴＰＭＰ）、アミノトリス（メチレンホスホン酸）（ＡＴＭＰ）、並びにこれらの組み合わせ及び塩が挙げられる。さらなる例示的ビルダー及び／又はコビルダーは、例えば、国際公開第０９／１０２８５４号パンフレット、米国特許第５９７７０５３号明細書に記載されている。
一実施形態において、ビルダー又はコビルダーは、天然に存在しないビルダー又はコビルダーである。
漂白系
洗剤は、０～３０重量％、例えば、約１％～約２０％の漂白系を含有し得る。洗濯洗剤における使用のための当該技術分野で知られる任意の漂白系が利用され得る。好適な漂白系構成成分としては、漂白触媒、光脱色剤、漂白活性化剤、過炭酸ナトリウムなどの過酸化水素の供給源、過ホウ酸ナトリウム及び過酸化水素－尿素（１：１）、予め形成された過酸及びその混合物が挙げられる。好適な予め形成された過酸としては、ペルオキシカルボン酸及び塩、ジペルオキシカルボン酸、過イミド酸及び塩、ペルオキシモノ硫酸及び塩、例えば、オキソン（Ｒ）、並びにその混合物が挙げられるが、これらに限定されない。漂白系の非限定的な例としては、ペルオキシド系漂白系が挙げられ、過酸形成漂白活性化剤と組み合わせて、例えば、過ホウ酸のナトリウム塩（通常、一又は四水和物）、過炭酸塩、過硫酸塩、過リン酸塩、過ケイ酸塩などのアルカリ金属塩を含む無機塩を含み得る。漂白活性化剤という用語は、本明細書では、過酸化水素と反応して過加水分解を介して過酸を形成する化合物を意味する。そのように形成される過酸は、活性化された漂白をなす。本明細書で使用されることになる好適な漂白活性化剤としては、エステル、アミド、イミド又は無水物のクラスに属するものが挙げられる。好適な例は、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、４－［（３，５，５－トリメチルヘキサノイル）オキシ］ベンゼン－１－スルホン酸ナトリウム（ＩＳＯＮＯＢＳ）、４－（ドデカノイルオキシ）ベンゼン－１－スルホン酸塩（ＬＯＢＳ）、４－（デカノイルオキシ）ベンゼン－１－スルホン酸塩、４－（デカノイルオキシ）安息香酸塩（ＤＯＢＳ又はＤＯＢＡ）、４－（ノナノイルオキシ）ベンゼン－１－スルホン酸塩（ＮＯＢＳ）、及び／又は国際公開第９８／１７７６７号パンフレットに開示されるものである。目的の漂白活性化剤の特定のファミリーが欧州特許第６２４１５４号明細書に開示されており、そのファミリーの中でも、クエン酸アセチルトリエチル（ＡＴＣ）が特に好ましい。ＡＴＣ又は短鎖トリグリセリド様トリアセチンは、それが環境に優しいという利点を有する。さらに、クエン酸アセチルトリエチル及びトリアセチンは、保管時の製品において良好な加水分解安定性を有し、効率的な漂白活性化剤である。最後に、ＡＴＣは、過加水分解反応中に放出されたクエン酸塩がビルダーとして機能し得るため、多機能性である。或いは、漂白系は、例えば、アミド、イミド、又はスルホン型のペルオキシ酸を含み得る。漂白系はまた、６－（フタリミド）ペルオキシヘキサン酸（ＰＡＰ）などの過酸を含み得る。漂白系はまた、漂白触媒を含み得る。いくつかの実施形態において、漂白構成成分は、以下の式を有する有機触媒：
（ｉｉｉ）及びその混合物
からなる群から選択される有機触媒であり得る。
（式中、各Ｒ１は、独立して、９～２４個の炭素を含有する分岐アルキル基又は１１～２４個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、好ましくは、各Ｒ１は、独立して、９～１８個の炭素を含有する分岐アルキル基又は１１～１８個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、より好ましくは、各Ｒ１は、独立して、２－プロピルヘプチル、２－ブチルオクチル、２－ペンチルノニル、２－ヘキシルデシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イソノニル、イソデシル、イソトリデシル及びイソペンタデシルからなる群から選択される）。他の例示的な漂白剤系は、例えば、国際公開第２００７／０８７２５８号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２４４号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２５９号パンフレット、欧州特許第１８６７７０８号明細書（ビタミンＫ）及び国際公開第２００７／０８７２４２号パンフレットに記載されている。好適な光漂白剤は、例えば、スルホン化亜鉛又はアルミニウムフタロシアニンであってもよい。
洗剤は、０～３０重量％、例えば、約１％～約２０％の漂白系を含有し得る。洗濯洗剤における使用のための当該技術分野で知られる任意の漂白系が利用され得る。好適な漂白系構成成分としては、漂白触媒、光脱色剤、漂白活性化剤、過炭酸ナトリウムなどの過酸化水素の供給源、過ホウ酸ナトリウム及び過酸化水素－尿素（１：１）、予め形成された過酸及びその混合物が挙げられる。好適な予め形成された過酸としては、ペルオキシカルボン酸及び塩、ジペルオキシカルボン酸、過イミド酸及び塩、ペルオキシモノ硫酸及び塩、例えば、オキソン（Ｒ）、並びにその混合物が挙げられるが、これらに限定されない。漂白系の非限定的な例としては、ペルオキシド系漂白系が挙げられ、過酸形成漂白活性化剤と組み合わせて、例えば、過ホウ酸のナトリウム塩（通常、一又は四水和物）、過炭酸塩、過硫酸塩、過リン酸塩、過ケイ酸塩などのアルカリ金属塩を含む無機塩を含み得る。漂白活性化剤という用語は、本明細書では、過酸化水素と反応して過加水分解を介して過酸を形成する化合物を意味する。そのように形成される過酸は、活性化された漂白をなす。本明細書で使用されることになる好適な漂白活性化剤としては、エステル、アミド、イミド又は無水物のクラスに属するものが挙げられる。好適な例は、テトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、４－［（３，５，５－トリメチルヘキサノイル）オキシ］ベンゼン－１－スルホン酸ナトリウム（ＩＳＯＮＯＢＳ）、４－（ドデカノイルオキシ）ベンゼン－１－スルホン酸塩（ＬＯＢＳ）、４－（デカノイルオキシ）ベンゼン－１－スルホン酸塩、４－（デカノイルオキシ）安息香酸塩（ＤＯＢＳ又はＤＯＢＡ）、４－（ノナノイルオキシ）ベンゼン－１－スルホン酸塩（ＮＯＢＳ）、及び／又は国際公開第９８／１７７６７号パンフレットに開示されるものである。目的の漂白活性化剤の特定のファミリーが欧州特許第６２４１５４号明細書に開示されており、そのファミリーの中でも、クエン酸アセチルトリエチル（ＡＴＣ）が特に好ましい。ＡＴＣ又は短鎖トリグリセリド様トリアセチンは、それが環境に優しいという利点を有する。さらに、クエン酸アセチルトリエチル及びトリアセチンは、保管時の製品において良好な加水分解安定性を有し、効率的な漂白活性化剤である。最後に、ＡＴＣは、過加水分解反応中に放出されたクエン酸塩がビルダーとして機能し得るため、多機能性である。或いは、漂白系は、例えば、アミド、イミド、又はスルホン型のペルオキシ酸を含み得る。漂白系はまた、６－（フタリミド）ペルオキシヘキサン酸（ＰＡＰ）などの過酸を含み得る。漂白系はまた、漂白触媒を含み得る。いくつかの実施形態において、漂白構成成分は、以下の式を有する有機触媒：
からなる群から選択される有機触媒であり得る。
（式中、各Ｒ１は、独立して、９～２４個の炭素を含有する分岐アルキル基又は１１～２４個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、好ましくは、各Ｒ１は、独立して、９～１８個の炭素を含有する分岐アルキル基又は１１～１８個の炭素を含有する直鎖アルキル基であり、より好ましくは、各Ｒ１は、独立して、２－プロピルヘプチル、２－ブチルオクチル、２－ペンチルノニル、２－ヘキシルデシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イソノニル、イソデシル、イソトリデシル及びイソペンタデシルからなる群から選択される）。他の例示的な漂白剤系は、例えば、国際公開第２００７／０８７２５８号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２４４号パンフレット、国際公開第２００７／０８７２５９号パンフレット、欧州特許第１８６７７０８号明細書（ビタミンＫ）及び国際公開第２００７／０８７２４２号パンフレットに記載されている。好適な光漂白剤は、例えば、スルホン化亜鉛又はアルミニウムフタロシアニンであってもよい。
好ましくは、漂白構成成分は、漂白触媒、特に、有機漂白触媒に加えて過酸の供給源を含む。過酸の供給源は、（ａ）予め形成された過酸；（ｂ）好ましくは漂白活性化剤と組み合わせた過炭酸塩、過ホウ酸塩又は過硫酸塩（過酸化水素供給源）；及び（ｃ）織物又は硬質表面処理工程において水の存在下にてインサイチュで過酸を形成するためのペルヒドロラーゼ酵素及びエステルから選択され得る。
一実施形態において、漂白系は、天然に存在しない漂白系である。
ポリマー
洗剤は、０～１０重量％、例えば、０．５～５％、２～５％、０．５～２％又は０．２～１％のポリマーを含有し得る。洗剤における使用のために当該技術分野で知られる任意のポリマーを利用してもよい。ポリマーは、上記のコビルダーとして機能するものでもよいし、或いは、再付着防止、繊維保護、汚れ遊離、移染防止、油脂のクリーニング及び／又は消泡性を付与するものであってもよい。一部のポリマーは、上記の特性の２つ以上及び／又は下記のモチーフの２つ以上を有し得る。例示的ポリマーとして、（カルボキシメチル）セルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリ（エチレングリコール）又はポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＧ）、エトキシル化ポリ（エチレンイミン）、カルボキシメチルイヌリン（ＣＭＩ）、及びＰＡＡ、ＰＡＡ／ＰＭＡ、ポリアスパラギン酸及びメタクリル酸ラウリル／アクリル酸コポリマーなどのポリカルボキシレート、疎水的に変性されたＣＭＣ（ＨＭ－ＣＭＣ）及びシリコーン、テレフタル酸とオリゴマーグリコールのコポリマー、ポリ（エチレンテレフタレート）とポリ（オキシエチレンテレフタレート）のコポリマー（ＰＥＴ－ＰＯＥＴ）、ＰＶＰ、ポリ（ビニルイミダゾール）（ＰＶＩ）、ポリ（ビニルピリジン－Ｎ－オキシド）（ＰＶＰＯ若しくはＰＶＰＮＯ）及びポリビニルピロリドン－ビニルイミダゾール（ＰＶＰＶＩ）が挙げられる。さらなる例示的なポリマーとしては、スルホン化ポリカルボキシレート、ポリエチレンオキシド及びポリプロピレンオキシド（ＰＥＯ－ＰＰＯ）、及びジクアテルニウムエトキシスルフェートが挙げられる。その他の例示的ポリマーは、例えば、国際公開第２００６／１３０５７５号パンフレットに開示されている。また、上記ポリマーの塩も検討される。
洗剤は、０～１０重量％、例えば、０．５～５％、２～５％、０．５～２％又は０．２～１％のポリマーを含有し得る。洗剤における使用のために当該技術分野で知られる任意のポリマーを利用してもよい。ポリマーは、上記のコビルダーとして機能するものでもよいし、或いは、再付着防止、繊維保護、汚れ遊離、移染防止、油脂のクリーニング及び／又は消泡性を付与するものであってもよい。一部のポリマーは、上記の特性の２つ以上及び／又は下記のモチーフの２つ以上を有し得る。例示的ポリマーとして、（カルボキシメチル）セルロース（ＣＭＣ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、ポリ（エチレングリコール）又はポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＧ）、エトキシル化ポリ（エチレンイミン）、カルボキシメチルイヌリン（ＣＭＩ）、及びＰＡＡ、ＰＡＡ／ＰＭＡ、ポリアスパラギン酸及びメタクリル酸ラウリル／アクリル酸コポリマーなどのポリカルボキシレート、疎水的に変性されたＣＭＣ（ＨＭ－ＣＭＣ）及びシリコーン、テレフタル酸とオリゴマーグリコールのコポリマー、ポリ（エチレンテレフタレート）とポリ（オキシエチレンテレフタレート）のコポリマー（ＰＥＴ－ＰＯＥＴ）、ＰＶＰ、ポリ（ビニルイミダゾール）（ＰＶＩ）、ポリ（ビニルピリジン－Ｎ－オキシド）（ＰＶＰＯ若しくはＰＶＰＮＯ）及びポリビニルピロリドン－ビニルイミダゾール（ＰＶＰＶＩ）が挙げられる。さらなる例示的なポリマーとしては、スルホン化ポリカルボキシレート、ポリエチレンオキシド及びポリプロピレンオキシド（ＰＥＯ－ＰＰＯ）、及びジクアテルニウムエトキシスルフェートが挙げられる。その他の例示的ポリマーは、例えば、国際公開第２００６／１３０５７５号パンフレットに開示されている。また、上記ポリマーの塩も検討される。
一実施形態において、ポリマーは、天然に存在しないポリマーである。
布地色調剤
本発明の洗剤組成物はまた、染料又は顔料などの布地色調剤を含んでもよく、これが洗剤組成物に配合される場合、前記洗剤組成物を含む洗浄液と前記布地が接触するときに布地上に沈積することができ、これによって、可視光の吸収／反射による前記布地の色合いを改変する。蛍光増白剤は、少なくとも一部の可視光を放射する。対照的に、布地色調剤は、可視光スペクトルの少なくとも一部を吸収するため、表面の色合いを改変する。好適な布地色相剤は、染料及び染料－粘土コンジュゲートを含み、また、顔料を含んでもよい。好適な染料は、小分子染料及びポリマー染料を含む。好適な小分子染料としては、例えば、国際公開第２００５／０３２７４号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７５号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７６号パンフレット及び欧州特許第１８７６２２６号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているとおり、ダイレクトブルー（Ｄｉｒｅｃｔ Ｂｌｕｅ）、ダイレクトレッド（Ｄｉｒｅｃｔ Ｒｅｄ）、ダイレクトバイオレット（Ｄｉｒｅｃｔ Ｖｉｏｌｅｔ）、アシッドブルー（Ａｃｉｄ Ｂｌｕｅ）、アシッドレッド（Ａｃｉｄ Ｒｅｄ）、アシッドバイオレット（Ａｃｉｄ Ｖｉｏｌｅｔ）、ベーシックブルー（Ｂａｓｉｃ Ｂｌｕｅ）、ベーシックバイオレット（Ｂａｓｉｃ Ｖｉｏｌｅｔ）及びベーシックレッド（Ｂａｓｉｃ Ｒｅｄ）のカラーインデックス（Ｃ．Ｉ．）分類に分類される染料からなる群から選択される小分子染料、又はそれらの混合物が挙げられる。洗剤組成物は、好ましくは、約０．００００３重量％～約０．２重量％、約０．００００８重量％～約０．０５重量％、又は約０．０００１重量％～約０．０４重量％の布地色相剤を含む。組成物は、０．０００１重量％～約０．２重量％の布地色相剤を含んでよく、これは、組成物が単位用量ポーチの形態である場合、特に好ましいと考えられる。好適な色調剤については、例えば、国際公開第２００７／０８７２５７号パンフレット及び国際公開第２００７／０８７２４３号パンフレットにも開示されている。
本発明の洗剤組成物はまた、染料又は顔料などの布地色調剤を含んでもよく、これが洗剤組成物に配合される場合、前記洗剤組成物を含む洗浄液と前記布地が接触するときに布地上に沈積することができ、これによって、可視光の吸収／反射による前記布地の色合いを改変する。蛍光増白剤は、少なくとも一部の可視光を放射する。対照的に、布地色調剤は、可視光スペクトルの少なくとも一部を吸収するため、表面の色合いを改変する。好適な布地色相剤は、染料及び染料－粘土コンジュゲートを含み、また、顔料を含んでもよい。好適な染料は、小分子染料及びポリマー染料を含む。好適な小分子染料としては、例えば、国際公開第２００５／０３２７４号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７５号パンフレット、国際公開第２００５／０３２７６号パンフレット及び欧州特許第１８７６２２６号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているとおり、ダイレクトブルー（Ｄｉｒｅｃｔ Ｂｌｕｅ）、ダイレクトレッド（Ｄｉｒｅｃｔ Ｒｅｄ）、ダイレクトバイオレット（Ｄｉｒｅｃｔ Ｖｉｏｌｅｔ）、アシッドブルー（Ａｃｉｄ Ｂｌｕｅ）、アシッドレッド（Ａｃｉｄ Ｒｅｄ）、アシッドバイオレット（Ａｃｉｄ Ｖｉｏｌｅｔ）、ベーシックブルー（Ｂａｓｉｃ Ｂｌｕｅ）、ベーシックバイオレット（Ｂａｓｉｃ Ｖｉｏｌｅｔ）及びベーシックレッド（Ｂａｓｉｃ Ｒｅｄ）のカラーインデックス（Ｃ．Ｉ．）分類に分類される染料からなる群から選択される小分子染料、又はそれらの混合物が挙げられる。洗剤組成物は、好ましくは、約０．００００３重量％～約０．２重量％、約０．００００８重量％～約０．０５重量％、又は約０．０００１重量％～約０．０４重量％の布地色相剤を含む。組成物は、０．０００１重量％～約０．２重量％の布地色相剤を含んでよく、これは、組成物が単位用量ポーチの形態である場合、特に好ましいと考えられる。好適な色調剤については、例えば、国際公開第２００７／０８７２５７号パンフレット及び国際公開第２００７／０８７２４３号パンフレットにも開示されている。
追加の酵素
洗剤添加剤及び洗剤組成物は、エステル結合に作用するヒドロラーゼ（ＥＣ３．１．－．－）、グリコシダーゼ（ＥＣ３．２．－．－）、及びペプチド結合に作用するヒドロラーゼ（ＥＣ３．４．－．－）などのヒドロラーゼ（ＥＣ３．－．－．－）、ラッカーゼ（ＥＣ１．１０．－．－）若しくはペルオキシダーゼ（ＥＣ１．１１．－．－）などのオキシドレダクターゼ（ＥＣ１．－．－．－）又は炭素－酸素リアーゼ（ＥＣ４．２．－．－）などのリアーゼ（ＥＣ４．－．－．－）などの１種又は複数種の［追加の］酵素を含み得る。特定の実施形態において、洗剤組成物は、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、例えば、ラッカーゼ、及び／又はペルオキシダーゼなどの１種又は複数種の［追加の］酵素を含み得る。
洗剤添加剤及び洗剤組成物は、エステル結合に作用するヒドロラーゼ（ＥＣ３．１．－．－）、グリコシダーゼ（ＥＣ３．２．－．－）、及びペプチド結合に作用するヒドロラーゼ（ＥＣ３．４．－．－）などのヒドロラーゼ（ＥＣ３．－．－．－）、ラッカーゼ（ＥＣ１．１０．－．－）若しくはペルオキシダーゼ（ＥＣ１．１１．－．－）などのオキシドレダクターゼ（ＥＣ１．－．－．－）又は炭素－酸素リアーゼ（ＥＣ４．２．－．－）などのリアーゼ（ＥＣ４．－．－．－）などの１種又は複数種の［追加の］酵素を含み得る。特定の実施形態において、洗剤組成物は、プロテアーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、例えば、ラッカーゼ、及び／又はペルオキシダーゼなどの１種又は複数種の［追加の］酵素を含み得る。
一般に、選択された酵素の特性は、選択された洗剤と適合すべきであり（すなわち、至適ｐＨ、他の酵素成分及び非酵素成分との適合性など）、また、酵素は有効量で存在すべきである。
セルラーゼ
好適なセルラーゼとしては、細菌又は真菌由来のものが挙げられる。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体が含まれる。好適なセルラーゼとしては、例えば、米国特許第４，４３５，３０７号明細書、米国特許第５，６４８，２６３号明細書、米国特許第５，６９１，１７８号明細書、米国特許第５，７７６，７５７号明細書及び国際公開第８９／０９２５９号パンフレットに開示されている、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、ミセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）及びフザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）から産生される真菌セルラーゼといった、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、フザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、チエラビア属（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）、アクレモニウム属（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）由来のセルラーゼが挙げられる。
好適なセルラーゼとしては、細菌又は真菌由来のものが挙げられる。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体が含まれる。好適なセルラーゼとしては、例えば、米国特許第４，４３５，３０７号明細書、米国特許第５，６４８，２６３号明細書、米国特許第５，６９１，１７８号明細書、米国特許第５，７７６，７５７号明細書及び国際公開第８９／０９２５９号パンフレットに開示されている、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）、ミセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）及びフザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）から産生される真菌セルラーゼといった、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、フザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、チエラビア属（Ｔｈｉｅｌａｖｉａ）、アクレモニウム属（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）由来のセルラーゼが挙げられる。
特に好適なセルラーゼは、白色度を提供するか又は維持し且つ再付着を防止するか又は色の保護に関して利点を有するアルカリ性又は中性セルラーゼである。このようなセルラーゼの例は、欧州特許第０ ４９５ ２５７号明細書、欧州特許第０ ５３１ ３７２号明細書、国際公開第９６／１１２６２号パンフレット、国際公開第９６／２９３９７号パンフレット、国際公開第９８／０８９４０号パンフレットに記載されているセルラーゼである。他の例は、国際公開第９４／０７９９８号パンフレット、欧州特許第０ ５３１ ３１５号明細書、米国特許第５，４５７，０４６号明細書、米国特許第５，６８６，５９３号明細書、米国特許第５，７６３，２５４号明細書、国際公開第９５／２４４７１号パンフレット、国際公開第９８／１２３０７号パンフレット及び国際公開第９９／００１５４４号パンフレットに記載されているものなどのセルラーゼ変異体である。
他のセルラーゼは、国際公開第２００２／０９９０９１号パンフレットの配列番号２の１位～７７３位のアミノ酸配列と少なくとも９７％同一性の配列を有するエンド－β－１，４－グルカナーゼ酵素、又はファミリー４４キシログルカナーゼであり、キシログルカナーゼ酵素は、国際公開第２００１／０６２９０３号パンフレットの配列番号２の４０～５５９位と少なくとも６０％の同一性の配列を有する。
市販されているセルラーゼとしては、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（商標）、及びＣａｒｅｚｙｍｅ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｃａｒｅｚｙｍｅ Ｐｒｅｍｉｕｍ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ Ｃｌａｓｓｉｃ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｃｅｌｌｕｓｏｆｔ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｗｈｉｔｅｚｙｍｅ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｃｌａｚｉｎａｓｅ（商標）、及びＰｕｒａｄａｘ ＨＡ（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．）、及びＫＡＣ－５００（Ｂ）（商標）（花王株式会社）が挙げられる。
マンナナーゼ
好適なマンナナーゼとしては、細菌又は真菌起源のものが挙げられる。化学的又は遺伝的に変性した変異体が含まれる。マンナナーゼは、ファミリー５又は２６のアルカリマンナナーゼであり得る。それは、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）又はフミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、特に、Ｂ．アガラドヘレンス（Ｂ．ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）、Ｂ．リケニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．ハロデュランス（Ｂ．ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．クラウシー（Ｂ．ｃｌａｕｓｉｉ）、又はＨ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）に由来する野生型であってもよい。好適なマンナナーゼは、国際公開第１９９９／０６４６１９号パンフレットに記載されている。市販のマンナナーゼは、Ｍａｎｎａｗａｙ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）である。
好適なマンナナーゼとしては、細菌又は真菌起源のものが挙げられる。化学的又は遺伝的に変性した変異体が含まれる。マンナナーゼは、ファミリー５又は２６のアルカリマンナナーゼであり得る。それは、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）又はフミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）、特に、Ｂ．アガラドヘレンス（Ｂ．ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）、Ｂ．リケニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．ハロデュランス（Ｂ．ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．クラウシー（Ｂ．ｃｌａｕｓｉｉ）、又はＨ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）に由来する野生型であってもよい。好適なマンナナーゼは、国際公開第１９９９／０６４６１９号パンフレットに記載されている。市販のマンナナーゼは、Ｍａｎｎａｗａｙ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）である。
プロテアーゼ
好適なプロテアーゼとしては、細菌、真菌、植物、ウイルス又は動物起源、例えば、植物又は微生物起源のものが挙げられる。微生物起源のものが好ましい。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体が含まれる。それは、セリンプロテアーゼ又はメタロプロテアーゼなどのアルカリプロテアーゼであってもよい。セリンプロテアーゼは、例えば、トリプシンなどのＳ１ファミリー、又はサブチリシンなどのＳ８ファミリーであってもよい。メタロプロテアーゼプロテアーゼは、例えば、Ｍ４ファミリー由来のサーモリシン又はＭ５、Ｍ７若しくはＭ８ファミリー由来のものなどの他のメタロプロテアーゼであってもよい。
好適なプロテアーゼとしては、細菌、真菌、植物、ウイルス又は動物起源、例えば、植物又は微生物起源のものが挙げられる。微生物起源のものが好ましい。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体が含まれる。それは、セリンプロテアーゼ又はメタロプロテアーゼなどのアルカリプロテアーゼであってもよい。セリンプロテアーゼは、例えば、トリプシンなどのＳ１ファミリー、又はサブチリシンなどのＳ８ファミリーであってもよい。メタロプロテアーゼプロテアーゼは、例えば、Ｍ４ファミリー由来のサーモリシン又はＭ５、Ｍ７若しくはＭ８ファミリー由来のものなどの他のメタロプロテアーゼであってもよい。
用語「サブチラーゼ」は、Ｓｉｅｚｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．４（１９９１）７１９－７３７及びＳｉｅｚｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ６（１９９７）５０１－５２３によるセリンプロテアーゼのサブグループを指す。セリンプロテアーゼは、基質と共有結合性の付加体を形成する活性部位においてセリンを有することを特徴とするプロテアーゼのサブグループである。サブチラーゼは、６つの下位区分、すなわち、サブチリシンファミリー、テルミターゼファミリー、プロテイナーゼＫファミリー、ランチビオティックなペプチダーゼファミリー、ケキシンファミリー、及びピロリシンファミリーに分類され得る。
サブチラーゼの例は、米国特許第７２６２０４２号明細書及び国際公開第０９／０２１８６７号パンフレットに記載されているバチルス・レンタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｅｎｔｕｓ）、Ｂ．アルカロフィルス（Ｂ．ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．サブチリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、Ｂ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）及びバチルス・ギブソニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｇｉｂｓｏｎｉｉ）、並びに国際公開第８９／０６２７９号パンフレットに記載のサブチリシン・レンタス、サブチリシン・ノボ、サブチリシン・カールスバーグ、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、サブチリシンＢＰＮ’、サブチリシン３０９、サブチリシン１４７及びサブチリシン１６８並びに（国際公開第９３／１８１４０号パンフレット）に記載のプロテアーゼＰＤ１３８などのバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）由来のものである。他の有用なプロテアーゼは、国際公開第９２／１７５１７７号パンフレット、国際公開第０１／０１６２８５号パンフレット、国際公開第０２／０２６０２４号パンフレット、及び国際公開第０２／０１６５４７号パンフレットに記載のものであってもよい。トリプシン様プロテアーゼの例は、トリプシン（例えば、ブタ又はウシ起源）及び国際公開第８９／０６２７０号パンフレット、国際公開第９４／２５５８３号パンフレット及び国際公開第０５／０４０３７２号パンフレットに記載のフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）プロテアーゼ、並びに国際公開第０５／０５２１６１号パンフレット及び国際公開第０５／０５２１４６号パンフレットに記載のセルモナス（Ｃｅｌｌｕｍｏｎａｓ）由来のキモトリプシンプロテアーゼである。
さらに好ましいプロテアーゼは、例えば、国際公開第９５／２３２２１号パンフレットに記載されているようなバチルス・レンタス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｅｎｔｕｓ）ＤＳＭ ５４８３由来のアルカリプロテアーゼ、並びに国際公開第９２／２１７６０号パンフレット、国際公開第９５／２３２２１号パンフレット、欧州特許第１９２１１４７号明細書及び欧州特許第１９２１１４８号明細書に記載されているその変異体である。
メタロプロテアーゼの例は、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）由来のものなど、国際公開第０７／０４４９９３号パンフレット（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔ．）に記載のような中性メタロプロテアーゼである。
有用なプロテアーゼの例は、国際公開第９２／１９７２９号パンフレット、国際公開第９６／０３４９４６号パンフレット、国際公開第９８／２０１１５号パンフレット、国際公開第９８／２０１１６号パンフレット、国際公開第９９／０１１７６８号パンフレット、国際公開第０１／４４４５２号パンフレット、国際公開第０３／００６６０２号パンフレット、国際公開第０４／０３１８６号パンフレット、国際公開第０４／０４１９７９号パンフレット、国際公開第０７／００６３０５号パンフレット、国際公開第１１／０３６２６３号パンフレット、国際公開第１１／０３６２６４号パンフレットに記載される変異体であって、特に、ＢＰＮ’付番を使用する以下の位置：３、４、９、１５、２７、３６、５７、６８、７６、８７、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０６、１１８、１２０、１２３、１２８、１２９、１３０、１６０、１６７、１７０、１９４、１９５、１９９、２０５、２０６、２１７、２１８、２２２、２２４、２３２、２３５、２３６、２４５、２４８、２５２及び２７４の１個又は複数個において置換を有する変異体である。より好ましいサブチラーゼ変異体は、突然変異：Ｓ３Ｔ、Ｖ４Ｉ、Ｓ９Ｒ、Ａ１５Ｔ、Ｋ２７Ｒ、＊３６Ｄ、Ｖ６８Ａ、Ｎ７６Ｄ、Ｎ８７Ｓ，Ｒ、＊９７Ｅ、Ａ９８Ｓ、Ｓ９９Ｇ，Ｄ，Ａ、Ｓ９９ＡＤ、Ｓ１０１Ｇ，Ｍ，Ｒ Ｓ１０３Ａ、Ｖ１０４Ｉ，Ｙ，Ｎ、Ｓ１０６Ａ、Ｇ１１８Ｖ，Ｒ、Ｈ１２０Ｄ，Ｎ、Ｎ１２３Ｓ、Ｓ１２８Ｌ、Ｐ１２９Ｑ、Ｓ１３０Ａ、Ｇ１６０Ｄ、Ｙ１６７Ａ、Ｒ１７０Ｓ、Ａ１９４Ｐ、Ｇ１９５Ｅ、Ｖ１９９Ｍ、Ｖ２０５Ｉ、Ｌ２１７Ｄ、Ｎ２１８Ｄ、Ｍ２２２Ｓ、Ａ２３２Ｖ、Ｋ２３５Ｌ、Ｑ２３６Ｈ、Ｑ２４５Ｒ、Ｎ２５２Ｋ、Ｔ２７４Ａ（ＢＰＮ’付番を使用する）を含み得る。
好適な市販のプロテアーゼ酵素としては、商標名Ａｌｃａｌａｓｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ（登録商標）Ｅｖｉｔｙ（登録商標）、Ｄｕｒａｌａｓｅ（商標）、Ｄｕｒａｚｙｍ（商標）、Ｒｅｌａｓｅ（登録商標）、Ｒｅｌａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｐｒｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ（登録商標）、Ｋａｎｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、Ｎｅｕｔｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ Ｅｘｃｅｌ（登録商標）、及びＰｒｏｇｒｅｓｓ Ｕｎｏ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）の下で販売されるもの、商標名Ｍａｘａｔａｓｅ（登録商標）、Ｍａｘａｃａｌ（登録商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ Ｐｒｉｍｅ（登録商標）、Ｐｒｅｆｅｒｅｎｚ（商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ ＭＡ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ Ｏｘ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ ＯｘＰ（登録商標）、Ｐｕｒａｍａｘ（登録商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｆｆｅｃｔｅｎｚ（商標）、ＦＮ２（登録商標）、ＦＮ３（登録商標）、ＦＮ４（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｏｐｔｉｃｌｅａｎ（登録商標）及びＯｐｔｉｍａｓｅ（登録商標）（Ｄａｎｉｓｃｏ／ＤｕＰｏｎｔ）、Ａｘａｐｅｍ（商標）（Ｇｉｓｔ－Ｂｒｏｃａｓｅｓ Ｎ．Ｖ．）の下で販売されるもの、ＢＬＡＰ（米国特許第５３５２６０４号明細書の図２９に示される配列）及びこれに関する変異体（Ｈｅｎｋｅｌ ＡＧ）並びにＫａｏからのＫＡＰ（バチルス・アルカロフィル（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）サブチリシン）が挙げられる。
リパーゼ及びクチナーゼ
好適なリパーゼ及びクチナーゼとしては、細菌又は真菌を起源とするものが挙げられる。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体酵素が含まれる。例としては、欧州特許第２５８０６８号明細書及び欧州特許第３０５２１６号明細書に記載されている、サーモマイセス属（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）由来、例えば、Ｔ．ラヌギノスス（Ｔ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ）（以前はフミコラ・ラヌギノーサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）と命名されていた）由来のリパーゼ、例えば、Ｈ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）といったフミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）由来のクチナーゼ（国際公開第９６／１３５８０号パンフレット）、例えば、Ｐ．アルカリゲネス（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）又はＰ．シュードアルカリゲネス（Ｐ．ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）（欧州特許第２１８２７２号明細書）、Ｐ．セパシア（Ｐ．ｃｅｐａｃｉａ）（欧州特許第３３１３７６号明細書）、Ｐ．ｓｐ．株ＳＤ７０５（国際公開第９５／０６７２０号パンフレット及び国際公開第９６／２７００２号パンフレット）、Ｐ．ウィスコンシネンシス（Ｐ．ｗｉｓｃｏｎｓｉｎｅｎｓｉｓ）（国際公開第９６／１２０１２号パンフレット）といったシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）（これらの一部は、現在、バークホルデリア属（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）と改名されている）の株由来のリパーゼ、ＧＤＳＬタイプのストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）リパーゼ（国際公開第１０／０６５４５５号パンフレット）、イネいもち病菌（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）（国際公開第１０／１０７５６０号パンフレット）由来のクチナーゼ、シュードモナス・メンドシナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）由来のクチナーゼ（米国特許第５，３８９，５３６号明細書）、サーモビフィダ・フスカ（Ｔｈｅｒｍｏｂｉｆｉｄａ ｆｕｓｃａ）由来のリパーゼ（国際公開第１１／０８４４１２号パンフレット）、ジェオバシラス・ステアロサーモフィラス（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）リパーゼ（国際公開第１１／０８４４１７号パンフレット）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のリパーゼ（国際公開第１１／０８４５９９号パンフレット）、並びにストレプトマイセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）（国際公開第１１／１５０１５７号パンフレット）及びＳ．プリスチナエスピラリス（Ｓ．ｐｒｉｓｔｉｎａｅｓｐｉｒａｌｉｓ）（国際公開第１２／１３７１４７号パンフレット）由来のリパーゼが挙げられる。
好適なリパーゼ及びクチナーゼとしては、細菌又は真菌を起源とするものが挙げられる。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体酵素が含まれる。例としては、欧州特許第２５８０６８号明細書及び欧州特許第３０５２１６号明細書に記載されている、サーモマイセス属（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）由来、例えば、Ｔ．ラヌギノスス（Ｔ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ）（以前はフミコラ・ラヌギノーサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）と命名されていた）由来のリパーゼ、例えば、Ｈ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）といったフミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）由来のクチナーゼ（国際公開第９６／１３５８０号パンフレット）、例えば、Ｐ．アルカリゲネス（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）又はＰ．シュードアルカリゲネス（Ｐ．ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）（欧州特許第２１８２７２号明細書）、Ｐ．セパシア（Ｐ．ｃｅｐａｃｉａ）（欧州特許第３３１３７６号明細書）、Ｐ．ｓｐ．株ＳＤ７０５（国際公開第９５／０６７２０号パンフレット及び国際公開第９６／２７００２号パンフレット）、Ｐ．ウィスコンシネンシス（Ｐ．ｗｉｓｃｏｎｓｉｎｅｎｓｉｓ）（国際公開第９６／１２０１２号パンフレット）といったシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）（これらの一部は、現在、バークホルデリア属（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）と改名されている）の株由来のリパーゼ、ＧＤＳＬタイプのストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）リパーゼ（国際公開第１０／０６５４５５号パンフレット）、イネいもち病菌（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）（国際公開第１０／１０７５６０号パンフレット）由来のクチナーゼ、シュードモナス・メンドシナ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｅｎｄｏｃｉｎａ）由来のクチナーゼ（米国特許第５，３８９，５３６号明細書）、サーモビフィダ・フスカ（Ｔｈｅｒｍｏｂｉｆｉｄａ ｆｕｓｃａ）由来のリパーゼ（国際公開第１１／０８４４１２号パンフレット）、ジェオバシラス・ステアロサーモフィラス（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）リパーゼ（国際公開第１１／０８４４１７号パンフレット）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）由来のリパーゼ（国際公開第１１／０８４５９９号パンフレット）、並びにストレプトマイセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ）（国際公開第１１／１５０１５７号パンフレット）及びＳ．プリスチナエスピラリス（Ｓ．ｐｒｉｓｔｉｎａｅｓｐｉｒａｌｉｓ）（国際公開第１２／１３７１４７号パンフレット）由来のリパーゼが挙げられる。
他の例は、欧州特許第４０７２２５号明細書、国際公開第９２／０５２４９号パンフレット、国際公開第９４／０１５４１号パンフレット、国際公開第９４／２５５７８号パンフレット、国際公開第９５／１４７８３号パンフレット、国際公開第９５／３０７４４号パンフレット、国際公開第９５／３５３８１号パンフレット、国際公開第９５／２２６１５号パンフレット、国際公開第９６／００２９２号パンフレット、国際公開第９７／０４０７９号パンフレット、国際公開第９７／０７２０２号パンフレット、国際公開第００／３４４５０号パンフレット、国際公開第００／６００６３号パンフレット、国際公開第０１／９２５０２号パンフレット、国際公開第０７／８７５０８号パンフレット及び国際公開第０９／１０９５００号パンフレットに記載のものなどのリパーゼ変異体である。
好ましい市販されているリパーゼ製品としては、Ｌｉｐｏｌａｓｅ（商標）、Ｌｉｐｅｘ（商標）；Ｌｉｐｏｌｅｘ（商標）及びＬｉｐｏｃｌｅａｎ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｌｕｍａｆａｓｔ（当初はＧｅｎｅｎｃｏｒから）及びＬｉｐｏｍａｘ（当初はＧｉｓｔ－Ｂｒｏｃａｄｅｓから）が挙げられる。
さらに他の例は、アシルトランスフェラーゼ又はペルヒドロラーゼと呼ばれこともあるリパーゼ、例えば、カンジダ・アンタークティカ（Ｃａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）リパーゼＡとの相同性を有するアシルトランスフェラーゼ（国際公開第１０／１１１１４３号パンフレット）、マイコバクテリウム・スメグマチス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｍｅｇｍａｔｉｓ）由来のアシルトランスフェラーゼ（国際公開第０５／５６７８２号パンフレット）、ＣＥ ７ファミリー由来のペルヒドロラーゼ（国際公開第０９／６７２７９号パンフレット）、並びにＭ．スメグマチス（Ｍ．ｓｍｅｇｍａｔｉｓ）ペルヒドロラーゼの変異体、特に、Ｈｕｎｔｓｍａｎ Ｔｅｘｔｉｌｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ Ｐｔｅ Ｌｔｄ製の製品Ｇｅｎｔｌｅ Ｐｏｗｅｒ Ｂｌｅａｃｈに使用されているＳ５４Ｖ変異体（国際公開第１０／１０００２８号パンフレット）である。
アミラーゼ
本発明の変異体とともに使用され得る好適なアミラーゼは、アルファ－アミラーゼ又はグルコアミラーゼであってもよく、細菌又は真菌起源のものであってもよい。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体酵素が含まれる。アミラーゼとしては、例えば、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、例えば英国特許第１，２９６，８３９号明細書にさらに詳細に記載されているバチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の特殊な系統から得られるα－アミラーゼが挙げられる。
本発明の変異体とともに使用され得る好適なアミラーゼは、アルファ－アミラーゼ又はグルコアミラーゼであってもよく、細菌又は真菌起源のものであってもよい。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体酵素が含まれる。アミラーゼとしては、例えば、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、例えば英国特許第１，２９６，８３９号明細書にさらに詳細に記載されているバチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の特殊な系統から得られるα－アミラーゼが挙げられる。
好適なアミラーゼとしては、国際公開第９５／１０６０３号パンフレットにおける配列番号２を有するアミラーゼ又はその配列番号３と９０％の配列同一性を有する変異体が挙げられる。好ましい変異体は、国際公開第９４／０２５９７号パンフレット、国際公開第９４／１８３１４号パンフレット、国際公開第９７／４３４２４号パンフレット及び国際公開第９９／０１９４６７号パンフレットの配列番号４に記載され、例えば、以下の位置の１個又は複数個における置換を有する変異体である：１５、２３、１０５、１０６、１２４、１２８、１３３、１５４、１５６、１７８、１７９、１８１、１８８、１９０、１９７、２０１、２０２、２０７、２０８、２０９、２１１、２４３、２６４、３０４、３０５、３９１、４０８、及び４４４。
異なる好適なアミラーゼとしては、国際公開第０２／０１０３５５号パンフレットにおける配列番号６を有するアミラーゼ又はその配列番号６と９０％の配列同一性を有するその変異体が挙げられる。配列番号６の好ましい変異体は、１８１及び１８２位における欠失及び１９３位における置換を有するものである。
好適な他のアミラーゼは、国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号６に示されるＢ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）から得られるα－アミラーゼの残基１～３３と、国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットの配列番号４に示されるＢ．リケニホルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）α－アミラーゼの残基３６～４８３を含むハイブリッドα－アミラーゼ又はそれらに９０％の配列同一性を有する変異体である。このハイブリッドアルファ－アミラーゼの好ましい変異体は、以下の位置の１個又は複数個において置換、欠失又は挿入を有するものである：Ｇ４８、Ｔ４９、Ｇ１０７、Ｈ１５６、Ａ１８１、Ｎ１９０、Ｍ１９７、Ｉ２０１、Ａ２０９及びＱ２６４。国際公開第２００６／０６６５９４号パンフレットに記載の配列番号６に示されるＢ．アミロリケファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）から得られるα－アミラーゼの残基１～３３と、配列番号４の残基３６～４８３を含むハイブリッドα－アミラーゼの最も好ましい変異体は、以下の置換を有するものである：
Ｍ１９７Ｔ、
Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ；又は
Ｇ４８Ａ＋Ｔ４９Ｉ＋Ｇ１０７Ａ＋Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ｉ２０１Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ
を有するものである。
Ｍ１９７Ｔ、
Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ；又は
Ｇ４８Ａ＋Ｔ４９Ｉ＋Ｇ１０７Ａ＋Ｈ１５６Ｙ＋Ａ１８１Ｔ＋Ｎ１９０Ｆ＋Ｉ２０１Ｆ＋Ａ２０９Ｖ＋Ｑ２６４Ｓ
を有するものである。
好適であるさらなるアミラーゼは、国際公開第９９／０１９４６７号パンフレットにおける配列番号６を有するアミラーゼ又は配列番号６と９０％の配列同一性を有するその変異体である。配列番号６の好ましい変異体は、以下の位置の１個又は複数個において置換、欠失又は挿入を有するものである：Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｈ１８３、Ｇ１８４、Ｎ１９５、Ｉ２０６、Ｅ２１２、Ｅ２１６及びＫ２６９。特に好ましいアミラーゼは、Ｒ１８１位及びＧ１８２位、又はＨ１８３位及びＧ１８４位に欠失を有するものである。
使用され得る追加のアミラーゼは、国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号１、配列番号３、配列番号２若しくは配列番号７を有するもの又は配列番号１、配列番号２、配列番号３若しくは配列番号７と９０％の配列同一性を有するその変異体である。配列番号１、配列番号２、配列番号３又は配列番号７の好ましい変異体は、付番のために国際公開第９６／０２３８７３号パンフレットの配列番号２を使用する、以下の位置の１個又は複数個において置換、欠失又は挿入を有するものである：１４０、１８１、１８２、１８３、１８４、１９５、２０６、２１２、２４３、２６０、２６９、３０４及び４７６。より好ましい変異体は、１８１、１８２、１８３及び１８４から選択される２つの位置、例えば、１８１及び１８２、１８２及び１８３、又は１８３位及び１８４位に欠失を有するものである。配列番号１、配列番号２又は配列番号７の最も好ましいアミラーゼ変異体は、１８３位及び１８４位における欠失並びに１４０位、１９５位、２０６位、２４３位、２６０位、３０４位及び４７６位の１個又は複数個における置換を有するものである。
使用され得る他のアミラーゼは、国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０を有するアミラーゼ又は国際公開第０８／１５３８１５号パンフレットの配列番号２と９０％の配列同一性若しくは国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０と９０％の配列同一性を有するその変異体である。国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１０の好ましい変異体は、以下の位置の１個又は複数個における置換、欠失又は挿入を有するものである：１７６、１７７、１７８、１７９、１９０、２０１、２０７、２１１及び２６４。
さらなる好適なアミラーゼは、国際公開第０９／０６１３８０号パンフレットの配列番号２を有するアミラーゼ又はその配列番号２と９０％の配列同一性を有する変異体である。配列番号２の好ましい変異体は、Ｃ末端の短縮化及び／又は以下の位置の１個又は複数個において置換、欠失又は挿入を有するものである：Ｑ８７、Ｑ９８、Ｓ１２５、Ｎ１２８、Ｔ１３１、Ｔ１６５、Ｋ１７８、Ｒ１８０、Ｓ１８１、Ｔ１８２、Ｇ１８３、Ｍ２０１、Ｆ２０２、Ｎ２２５、Ｓ２４３、Ｎ２７２、Ｎ２８２、Ｙ３０５、Ｒ３０９、Ｄ３１９、Ｑ３２０、Ｑ３５９、Ｋ４４４及びＧ４７５。配列番号２のより好ましい変異体は、以下の位置：Ｑ８７Ｅ，Ｒ、Ｑ９８Ｒ、Ｓ１２５Ａ、Ｎ１２８Ｃ、Ｔ１３１Ｉ、Ｔ１６５Ｉ、Ｋ１７８Ｌ、Ｔ１８２Ｇ、Ｍ２０１Ｌ、Ｆ２０２Ｙ、Ｎ２２５Ｅ，Ｒ、Ｎ２７２Ｅ，Ｒ、Ｓ２４３Ｑ，Ａ，Ｅ，Ｄ、Ｙ３０５Ｒ、Ｒ３０９Ａ、Ｑ３２０Ｒ、Ｑ３５９Ｅ、Ｋ４４４Ｅ及びＧ４７５Ｋの１個又は複数個における置換、並びに／又はＲ１８０位及び／若しくはＳ１８１位又はＴ１８２位及び／若しくはＧ１８３位における欠失を有するものである。配列番号２の最も好ましいアミラーゼ変異体は、置換：
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｆ２０２Ｙ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｄ３１９Ｔ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；又は
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｔ１３１Ｉ＋Ｔ１６５Ｉ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋを有するものであり、変異体は、Ｃ末端が短縮化されており、任意選択により、２４３位の置換並びに／又は１８０位及び／若しくは１８１位の欠失をさらに含む。
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｆ２０２Ｙ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｄ３１９Ｔ＋Ｇ４７５Ｋ；
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋ；又は
Ｓ１２５Ａ＋Ｎ１２８Ｃ＋Ｔ１３１Ｉ＋Ｔ１６５Ｉ＋Ｋ１７８Ｌ＋Ｔ１８２Ｇ＋Ｙ３０５Ｒ＋Ｇ４７５Ｋを有するものであり、変異体は、Ｃ末端が短縮化されており、任意選択により、２４３位の置換並びに／又は１８０位及び／若しくは１８１位の欠失をさらに含む。
他の好適なアミラーゼは、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットの配列番号１２を有するアルファ－アミラーゼ又は配列番号１２と少なくとも９０％の配列同一性を有する変異体である。好ましいアミラーゼ変異体は、国際公開第０１／６６７１２号パンフレットにおける配列番号１２の以下の位置の１個又は複数個における置換、欠失又は挿入を有するものである：Ｒ２８、Ｒ１１８、Ｎ１７４；Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｄ１８３、Ｇ１８４、Ｇ１８６、Ｗ１８９、Ｎ１９５、Ｍ２０２、Ｙ２９８、Ｎ２９９、Ｋ３０２、Ｓ３０３、Ｎ３０６、Ｒ３１０、Ｎ３１４；Ｒ３２０、Ｈ３２４、Ｅ３４５、Ｙ３９６、Ｒ４００、Ｗ４３９、Ｒ４４４、Ｎ４４５、Ｋ４４６、Ｑ４４９、Ｒ４５８、Ｎ４７１、Ｎ４８４。特定の好ましいアミラーゼとしては、Ｄ１８３及びＧ１８４の欠失を有し、且つ置換Ｒ１１８Ｋ、Ｎ１９５Ｆ、Ｒ３２０Ｋ及びＲ４５８Ｋを有する変異体、並びに群：Ｍ９、Ｇ１４９、Ｇ１８２、Ｇ１８６、Ｍ２０２、Ｔ２５７、Ｙ２９５、Ｎ２９９、Ｍ３２３、Ｅ３４５及びＡ３３９から選択される１個又は複数個の位置における置換をさらに有する変異体、これら全ての位置において置換をさらに有する最も好ましい変異体が挙げられる。
他の例は、国際公開第２０１１／０９８５３１号パンフレット、国際公開第２０１３／００１０７８号パンフレット及び国際公開第２０１３／００１０８７号パンフレットにおいて記載されるものなどのアミラーゼ変異体である。
市販されているアミラーゼとしては、Ｄｕｒａｍｙｌ（商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ（商標）、Ｆｕｎｇａｍｙｌ（商標）、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ（商標）、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ Ｐｌｕｓ（商標）、Ｎａｔａｌａｓｅ（商標）、及びＢＡＮ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ製）、並びにＲａｐｉｄａｓｅ（商標）、Ｐｕｒａｓｔａｒ（商標）／Ｅｆｆｅｃｔｅｎｚ（商標）、Ｐｏｗｅｒａｓｅ（商標）、Ｐｒｅｆｅｒｅｎｚ Ｓ１０００（商標）、Ｐｒｅｆｅｒｅｎｚ Ｓ１１０（商標）及びＰｒｅｆｅｒｅｎｚ Ｓ１００（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．／ＤｕＰｏｎｔ製）がある。
ペルオキシダーゼ／オキシダーゼ
ペルオキシダーゼは、国際生化学分子生物学連合（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）（ＩＵＢＭＢ）の命名委員会により記載されている酵素分類ＥＣ１．１１．１．７に含まれるペルオキシダーゼ酵素、又はそれから得られる、ペルオキシダーゼ活性を呈する任意の断片である。
ペルオキシダーゼは、国際生化学分子生物学連合（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ）（ＩＵＢＭＢ）の命名委員会により記載されている酵素分類ＥＣ１．１１．１．７に含まれるペルオキシダーゼ酵素、又はそれから得られる、ペルオキシダーゼ活性を呈する任意の断片である。
好適なペルオキシダーゼとしては、植物、細菌又は真菌起源のものが挙げられる。化学変性又はタンパク質工学による突然変異体酵素が含まれる。有用なペルオキシダーゼの例としては、例えば、ウシグソヒトヨタケ（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅａ）といったヒトヨタケ属（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ）由来のペルオキシダーゼ（欧州特許第１７９，４８６号明細書）、並びに国際公開第９３／２４６１８号パンフレット、国際公開第９５／１０６０２号パンフレット、及び国際公開第９８／１５２５７号パンフレットに記載されているものなどのその変異体が挙げられる。
ペルオキシダーゼはまた、クロロペルオキシダーゼ、ブロモペルオキシダーゼなどのハロペルオキシダーゼ酵素及びクロロペルオキシダーゼ活性又はブロモペルオキシダーゼ活性を呈する化合物を含み得る。ハロペルオキシダーゼは、ハロゲン化物イオンに対するそれらの特異性に従って分類される。クロロペルオキシダーゼ（Ｅ．Ｃ．１．１１．１．１０）は、塩化物イオンからの次亜塩素酸塩の形成を触媒する。
一実施形態において、ハロペルオキシダーゼは、クロロペルオキシダーゼである。好ましくは、ハロペルオキシダーゼは、バナジウムハロペルオキシダーゼ、すなわち、バナジン酸塩含有ハロペルオキシダーゼである。本発明の好ましい方法において、バナジン酸塩含有ハロペルオキシダーゼは、塩化物イオンの供給源と組み合わせられる。
ハロペルオキシダーゼは、多種の真菌、特に、暗色線菌科（ｄｅｍａｔｉａｃｅｏｕｓ ｈｙｐｈｏｍｙｃｅｔｅｓ）の真菌群、例えば、Ｃ．フマゴ（Ｃ．ｆｕｍａｇｏ）などのカルダリオマイセス属（Ｃａｌｄａｒｉｏｍｙｃｅｓ）、アルテルナリア属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）、例えば、Ｃ．ベルクローサ（Ｃ．ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）及びＣ．イナエクアリス（Ｃ．ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）などのクルブラリア属（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ）、ドレクスレラ属（Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ）、ウロクラジウム属（Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ）及びボトリチス属（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）から単離されている。
ハロペルオキシダーゼはまた、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、例えば、Ｐ．ピロシニア（Ｐ．ｐｙｒｒｏｃｉｎｉａ）及びストレプトマイセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、例えば、Ｓ．オーレオファシエンス（Ｓ．ａｕｒｅｏｆａｃｉｅｎｓ）などの細菌からも単離されている。
好ましい実施形態において、ハロペルオキシダーゼは、クルブラリア属（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ ｓｐ．）、特に、クルブラリア・ベルクローサ（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）又はクルブラリア・イナエクアリス（Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）、例えば、国際公開第９５／２７０４６号パンフレットに記載されるとおりのＣ．イナエクアリス（Ｃ．ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）ＣＢＳ １０２．４２；又は国際公開第９７／０４１０２号パンフレットに記載されるとおりのＣ．ベルクローサ（Ｃ．ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）ＣＢＳ １４７．６３若しくはＣ．ベルクローサ（Ｃ．ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ）ＣＢＳ ４４４．７０；又は国際公開第０１／７９４５９号パンフレットに記載されるとおりのドレクスレラ・ハルトレビイ（Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ ｈａｒｔｌｅｂｉｉ）、国際公開第０１／７９４５８号パンフレットに記載されるとおりのデンドロフィエラ・サリナ（Ｄｅｎｄｒｙｐｈｉｅｌｌａ ｓａｌｉｎａ）、国際公開第０１／７９４６１号パンフレットに記載されるとおりのファエオトリココニス・クロタラリエ（Ｐｈａｅｏｔｒｉｃｈｏｃｏｎｉｓ ｃｒｏｔａｌａｒｉｅ）、又は国際公開第０１／７９４６０号パンフレットに記載されるとおりのゲニクロスポリウム属（Ｇｅｎｉｃｕｌｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｐ．）から得ることができる。
オキシダーゼとしては、特に、酵素分類ＥＣ１．１０．３．２に含まれる任意のラッカーゼ酵素、又はそれから得られるラッカーゼ活性を呈する任意の断片、又は類似の活性を呈する化合物、例えば、カテコールオキシダーゼ（ＥＣ１．１０．３．１）、ｏ－アミノフェノールオキシダーゼ（ＥＣ１．１０．３．４）、又はビリルビンオキシダーゼ（ＥＣ１．３．３．５）が挙げられる。
好ましいラッカーゼ酵素は、細菌起源の酵素である。酵素は、植物、細菌又は真菌（糸状真菌及び酵母を含む）から得てもよい。
真菌由来の好適な例としては、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、ニューロスポラ属（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）、例えば、Ｎ．クラッサ（Ｎ．ｃｒａｓｓａ）、ポドスポラ属（Ｐｏｄｏｓｐｏｒａ）、ボトリチス属（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）、コリビア属（Ｃｏｌｌｙｂｉａ）、ツリガネタケ属（Ｆｏｍｅｓ）、レンチヌス属（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ）、ヒラタケ属（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ）、カワラタケ属（Ｔｒａｍｅｔｅｓ）、例えば、フルイカワラタケ（Ｔ．ｖｉｌｌｏｓａ）及びカワラタケ（Ｔ．ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、リゾクトニア属（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）、例えば、Ｒ．ソラニ（Ｒ．ｓｏｌａｎｉ）、ヒヨトタケ属（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ）、例えば、ウシグソヒトヨタケ（Ｃ．ｃｉｎｅｒｅａ）、ササクレヒトヨタケ（Ｃ．ｃｏｍａｔｕｓ）、ヒメヒトヨタケ（Ｃ．ｆｒｉｅｓｉｉ）、及びヒメヒガサヒトヨタケ（Ｃ．ｐｌｉｃａｔｉｌｉｓ）、ナヨタケ属（Ｐｓａｔｈｙｒｅｌｌａ）、例えば、イタチタケ（Ｐ．ｃｏｎｄｅｌｌｅａｎａ）、ヒカゲタケ属（Ｐａｎａｅｏｌｕｓ）、例えば、ワライタケ（Ｐ．ｐａｐｉｌｉｏｎａｃｅｕｓ）、ミセリオフトラ属（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）、例えば、Ｍ．サーモフィラ（Ｍ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）、シタリジウム属（Ｓｃｈｙｔａｌｉｄｉｕｍ）、例えば、Ｓ．サーモフィルム（Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）、ポリポルス属（Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）、例えばＰ．ピンシツス（Ｐ．ｐｉｎｓｉｔｕｓ）、フレビア属（Ｐｈｌｅｂｉａ）、例えば、Ｐ．ラジアータ（Ｐ．ｒａｄｉａｔａ）（国際公開第９２／０１０４６号パンフレット）、又はコリオルス属（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ）、例えば、Ｃ．ヒルスツス（Ｃ．ｈｉｒｓｕｔｕｓ）（日本特許第２２３８８８５号公報）の株から得られるラッカーゼが挙げられる。
細菌由来の好適な例としては、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の株から得られるラッカーゼが挙げられる。
ヒトヨタケ属（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ）又はミセリオフトラ属（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）から得られるラッカーゼ；特に、国際公開第９７／０８３２５号パンフレットに開示されるウシグソヒトヨタケ（Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）から得られるラッカーゼ；又は国際公開第９５／３３８３６号パンフレットに開示されるミセリオフトラ・サーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）から得られるラッカーゼが好ましい。
ヌクレアーゼ
好適なヌクレアーゼとしては、それぞれＤＮＡ又はＲＮＡ骨格におけるホスホジエステル結合の加水切断を触媒し、それによりＤＮＡ及びＲＮＡを分解するいずれかの酵素であるデオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）及びリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）が挙げられる。活性の部位に基づいて２つの主要な分類がある。エキソヌクレアーゼは、末端から核酸を消化する。エンドヌクレアーゼは、標的分子の中間の領域に対して作用する。ヌクレアーゼは好ましくはＤＮａｓｅであり、微生物、好ましくは真菌又は細菌から得ることができることが好ましい。特に、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の種から得ることができるＤＮａｓｅが好ましく；特に、バチルス・シビー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｂｉ）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）又はバチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）から得ることができるＤＮａｓｅが好ましい。そのようなＤＮａｓｅの例は、国際公開第２０１１／０９８５７９号パンフレット、国際公開第２０１４／０８７０１１号パンフレット及び国際公開第２０１７／０６０４７５号パンフレットに記載される。アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）の種から得ることができるＤＮａｓｅ；特に、国際公開第２０１５／１５５３５０号パンフレットに記載されるＤＮａｓｅなどのアスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）から得ることができるＤＮａｓｅも特に好ましい。
好適なヌクレアーゼとしては、それぞれＤＮＡ又はＲＮＡ骨格におけるホスホジエステル結合の加水切断を触媒し、それによりＤＮＡ及びＲＮＡを分解するいずれかの酵素であるデオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）及びリボヌクレアーゼ（ＲＮａｓｅ）が挙げられる。活性の部位に基づいて２つの主要な分類がある。エキソヌクレアーゼは、末端から核酸を消化する。エンドヌクレアーゼは、標的分子の中間の領域に対して作用する。ヌクレアーゼは好ましくはＤＮａｓｅであり、微生物、好ましくは真菌又は細菌から得ることができることが好ましい。特に、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の種から得ることができるＤＮａｓｅが好ましく；特に、バチルス・シビー（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｂｉ）、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）又はバチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）から得ることができるＤＮａｓｅが好ましい。そのようなＤＮａｓｅの例は、国際公開第２０１１／０９８５７９号パンフレット、国際公開第２０１４／０８７０１１号パンフレット及び国際公開第２０１７／０６０４７５号パンフレットに記載される。アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）の種から得ることができるＤＮａｓｅ；特に、国際公開第２０１５／１５５３５０号パンフレットに記載されるＤＮａｓｅなどのアスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）から得ることができるＤＮａｓｅも特に好ましい。
リケニナーゼ
好適なリケニナーゼ（リケナーゼ）としては、ベータ－１，４－グルコシド結合の加水分解を触媒してベータ－グルカンを得る酵素が挙げられる。リケニナーゼ（又はリケナーゼ）（例えば、ＥＣ３．２．１．７３）は、（１，３）－及び（１，４）－結合を含有するベータ－Ｄ－グルカンにおける（１，４）－ベータ－Ｄ－グルコシド結合を加水分解し、リケニン及び穀類のベータ－Ｄ－グルカンに対して作用することができるが、１，３－又は１，４－結合のみを含有するベータ－Ｄ－グルカンに対しては作用できない。そのようなリケニナーゼの例は、特許出願国際公開第２０１７／０９７８６６号パンフレット及び国際公開第２０１７／１２９７５４号パンフレットに記載される。
好適なリケニナーゼ（リケナーゼ）としては、ベータ－１，４－グルコシド結合の加水分解を触媒してベータ－グルカンを得る酵素が挙げられる。リケニナーゼ（又はリケナーゼ）（例えば、ＥＣ３．２．１．７３）は、（１，３）－及び（１，４）－結合を含有するベータ－Ｄ－グルカンにおける（１，４）－ベータ－Ｄ－グルコシド結合を加水分解し、リケニン及び穀類のベータ－Ｄ－グルカンに対して作用することができるが、１，３－又は１，４－結合のみを含有するベータ－Ｄ－グルカンに対しては作用できない。そのようなリケニナーゼの例は、特許出願国際公開第２０１７／０９７８６６号パンフレット及び国際公開第２０１７／１２９７５４号パンフレットに記載される。
洗剤酵素は、１種又は複数種の酵素を含有する別々の添加剤を添加すること、又はこれらの酵素の全てを含む組み合わせた添加剤を添加することによって洗剤組成物中に含まれ得る。本発明の洗剤添加剤、すなわち、別々の添加剤又は組み合わせた添加剤は、例えば、顆粒、液体、スラリーなどとして配合され得る。好ましい洗剤添加剤配合物は、顆粒、特に、非飛散性顆粒、液体、特に、安定化された液体、又はスラリーである。
非発塵性粒質物は、例えば、米国特許第４，１０６，９９１号明細書及び米国特許第４，６６１，４５２号明細書に開示の通りに製造することができ、任意選択で、当技術分野において公知の方法によりコーティングしてもよい。ワックスコーティング材料の例としては、平均モル重量が１０００～２００００のポリ（エチレンオキシド）製品（ポリエチレングリコール、ＰＥＧ）；１６～５０のエチレンオキシド単位を有するエトキシル化ノニルフェノール；アルコールが１２～２０個の炭素原子を含有し、且つ１５～８０のエチレンオキシド単位が存在するエトキシル化脂肪アルコール；脂肪アルコール；脂肪酸；並びに脂肪酸のモノ－及びジ－及びトリグリセリドがある。流動層技術による用途に好適な膜形成コーティング材料の例は、英国特許第１４８３５９１号明細書に記載されている。液体酵素調製物は、例えば、確立された方法に従い、プロピレングリコールなどのポリオール、糖又は糖アルコール、乳酸又はホウ酸を添加することにより安定化させてもよい。保護酵素は、欧州特許第２３８，２１６号明細書に開示されている方法に従って調製され得る。
調整材料－洗濯洗剤における使用のための当該技術分野で知られる任意の洗剤構成成分もまた利用され得る。他の任意選択の洗剤構成成分としては、単独で又は組み合わせた抗腐食剤、収縮防止剤、再汚染防止剤、しわ防止剤、殺菌剤、結合剤、腐食防止剤、崩壊剤／崩壊薬剤、染料、酵素安定化剤（ホウ酸、ホウ酸塩、ＣＭＣ、及び／又はプロピレングリコールなどのポリオール）、粘土を含む布地柔軟仕上げ剤、充填剤／加工助剤、蛍光増白剤／光学的光沢剤、起泡促進剤、泡（石鹸泡）調節剤、香料、汚れ懸濁剤、柔軟剤、起泡抑制剤、黄褐色阻害剤、及びウィッキング剤が挙げられる。洗濯洗剤における使用のための当該技術分野で知られる任意の成分が利用され得る。そのような成分の選択は、十分に当業者の技術の範囲内である。
分散剤－本発明の洗剤組成物はまた、分散剤も含有することができる。特に、粉末洗剤は、分散剤を含んでもよい。好適な水溶性有機材料としては、ホモ－若しくはコポリマー酸又はそれらの塩が挙げられ、ここで、ポリカルボン酸は、２個以下の炭素原子によって相互に分離された少なくとも２つのカルボキシル基を含む。好適な分散剤は、例えば、Ｐｏｗｄｅｒｅｄ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ ｓｃｉｅｎｃｅ ｓｅｒｉｅｓ ｖｏｌｕｍｅ ７１，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．に記載されている。
移染防止剤－本発明の洗剤組成物はまた、１種又は複数種の移染防止剤を含んでもよい。好適なポリマー移染防止剤としては、限定されないが、ポリビニルピロリドンポリマー、ポリアミンＮ－オキシドポリマー、Ｎ－ビニルピロリドンとＮ－ビニルイミダゾールとのコポリマー、ポリビニルオキサゾリドン及びポリビニルイミダゾール、又はこれらの混合物が挙げられる。主題の組成物中に存在する場合、移染防止剤は、組成物の約０．０００１重量％～約１０重量％、約０．０１重量％～約５重量％のレベルで、又は約０．１重量％～約３重量％のレベルでも存在し得る。
蛍光増白剤－本発明の洗剤組成物はまた、蛍光増白剤又は光学的光沢剤などのクリーニングされる物品に色合いを付与し得る追加の構成成分を含有するのが好ましい。存在する場合、光沢剤は、約０．０１％～約０．５％のレベルであることが好ましい。洗濯洗剤組成物での使用に好適な任意の蛍光増白剤が、本発明の組成物において使用されてもよい。最も一般的に用いられる蛍光増白剤は、ジアミノスチルベン－スルホン酸誘導体、ジアリールピラゾリン誘導体及びビスフェニル－ジスチリル誘導体のクラスに属するものである。ジアミノスチルベン－スルホン酸誘導体タイプの蛍光増白剤の例として、４，４’－ビス－（２－ジエタノールアミノ－４－アニリノ－ｓ－トリアジン－６－イルアミノ）スチルベン－２，２’－ジスルホネート、４，４’－ビス－（２，４－ジアニリノ－ｓ－トリアジン－６－イルアミノ）スチルベン－２，２’－ジスルホネート、４，４’－ビス－（２－アニリノ－４－（Ｎ－メチル－Ｎ－２－ヒドロキシ－エチルアミノ）－ｓ－トリアジン－６－イルアミノ）スチルベン－２，２’－ジスルホネート、４，４’－ビス－（４－フェニル－１，２，３－トリアゾール－２－イル）スチルベン－２，２’－ジスルホネート、及びナトリウム５－（２Ｈ－ナフト［１，２－ｄ］［１，２，３］トリアゾール－２－イル）－２－［（Ｅ）－２－フェニルビニル］ベンゼンスルホネートのナトリウム塩が挙げられる。好ましい蛍光増白剤は、Ｃｉｂａ－Ｇｅｉｇｙ ＡＧ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄから市販されているＴｉｎｏｐａｌ ＤＭＳ及びＴｉｎｏｐａｌ ＣＢＳである。Ｔｉｎｏｐａｌ ＤＭＳは、４，４’－ビス－（２－モルホリノ－４－アニリノ－ｓ－トリアジン－６－イルアミノ）スチルベン－２，２’－ジスルホネートのジナトリウム塩である。Ｔｉｎｏｐａｌ ＣＢＳは、２，２’－ビス－（フェニル－スチリル）－ジスルホネートのジナトリウム塩である。また、好ましい蛍光増白剤は、Ｐａｒａｍｏｕｎｔ Ｍｉｎｅｒａｌｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｍｕｍｂａｉ，Ｉｎｄｉａ製の市販のＰａｒａｗｈｉｔｅ ＫＸである。本発明における使用に好適な他の蛍光剤としては、１－３－ジアリールピラゾリン及び７－アルキルアミノクマリンが挙げられる。
好適な蛍光性増白剤レベルは、約０．０１、０．０５、約０．１、又は、さらには約０．２重量％の下限レベルから、０．５又はさらには０．７５重量％の上限レベルまでを含む。
汚れ遊離ポリマー－本発明の洗剤組成物はまた、綿及びポリエステル系布地などの布地からの汚れの除去、特にポリエステル系布地からの疎水性汚れの除去を補助する１種又は複数種の汚れ遊離ポリマーを含んでもよい。汚れ遊離ポリマーは、例えば、非イオン性又はアニオン性テレフタレート系ポリマー、ポリビニルカプロラクタム及び関連するコポリマー、ビニルグラフトコポリマー、ポリエステルポリアミドであってもよく、例えば、Ｃｈａｐｔｅｒ ７，Ｐｏｗｄｅｒｅｄ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ ｓｃｉｅｎｃｅ ｓｅｒｉｅｓ ｖｏｌｕｍｅ ７１，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．を参照されたい。別のタイプの汚れ遊離ポリマーは、コア構造と、このコア構造に結合した複数のアルコキシレート基とを含む両親媒性アルコキシル化油脂クリーニングポリマーである。コア構造は、国際公開第２００９／０８７５２３号パンフレット（本明細書において参照により組み込まれる）に詳述されているとおり、ポリアルキレンイミン構造又はポリアルカノールアミン構造を含み得る。さらに、ランダムグラフトコポリマーは、好適な汚れ遊離ポリマーである。好適なグラフトコポリマーは、国際公開第２００７／１３８０５４号パンフレット、国際公開第２００６／１０８８５６号パンフレット及び国際公開第２００６／１１３３１４号パンフレット（本明細書において参照により組み込まれる）において、より詳細に記載されている。他の汚れ遊離ポリマーは、欧州特許第１８６７８０８号明細書又は国際公開第２００３／０４０２７９号パンフレット（共に本明細書において参照により組み込まれる）に記載されているものなどの変性セルロース誘導体などの特に置換セルロース系構造といった置換多糖類構造である。好適なセルロース系ポリマーとしては、セルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、セルロースアミド及びこれらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとしては、アニオン性変性セルロース、非イオン性変性セルロース、カチオン性変性セルロース、双性イオン性変性セルロース、及びこれらの混合物が挙げられる。好適なセルロース系ポリマーとしては、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシルエチルセルロース、ヒドロキシルプロピルメチルセルロース、エステルカルボキシメチルセルロース及びこれらの混合物が挙げられる。
再付着防止剤－本発明の洗剤組成物としてはまた、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリオキシエチレン及び／又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アクリル酸のホモポリマー、アクリル酸とマレイン酸とのコポリマー、並びにエトキシル化ポリエチレンイミンなどの１種又は複数種の再付着防止剤を含んでもよい。前述の汚れ遊離ポリマーの下で、上記セルロース系ポリマーは、再付着防止剤としても機能し得る。
レオロジー変性剤は、粘度降下剤とは異なる、構造化剤又は増粘剤である。レオロジー変性剤は、非ポリマー性結晶質でヒドロキシ官能性の材料、液体洗剤組成物の水性液体マトリックスにずり減粘特性を付与するポリマーレオロジー変性剤からなる群から選択される。洗剤のレオロジー及び粘性は、例えば、欧州特許第２１６９０４０号明細書に示されるように、当技術分野で知られる方法により、変性及び調節することができる。
他の好適な補助材料としては、これらに限定されないが、防縮剤、しわ防止剤、殺菌剤、結合剤、担体、染料、酵素安定剤、柔軟剤、充填剤、発泡調節剤、ヒドロトロープ、香料、顔料、泡立ち（ｓｏｄ）抑制剤、溶媒、液体洗剤のための構造体（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｎｔ）及び／又は構造弾性化剤が挙げられる。
複合顆粒（ｃｏ－ｇｒａｎｕｌｅ）状の酵素の配合物
キシログルカナーゼ変異体は、顆粒として、例えば１種又は複数種の酵素を組み合わせた複合顆粒として配合してもよい。その場合、各酵素は、より多くの顆粒中に存在することになり、洗剤中への酵素のより均質な分布を確実にするであろう。これはまた、様々な粒径に起因する各種酵素の物理的分離も低減する。洗剤業界用の多酵素複合顆粒を製造する方法は、ＩＰ．ｃｏｍ開示ＩＰＣＯＭ０００２００７３９Ｄに開示されている。
キシログルカナーゼ変異体は、顆粒として、例えば１種又は複数種の酵素を組み合わせた複合顆粒として配合してもよい。その場合、各酵素は、より多くの顆粒中に存在することになり、洗剤中への酵素のより均質な分布を確実にするであろう。これはまた、様々な粒径に起因する各種酵素の物理的分離も低減する。洗剤業界用の多酵素複合顆粒を製造する方法は、ＩＰ．ｃｏｍ開示ＩＰＣＯＭ０００２００７３９Ｄに開示されている。
複合顆粒の使用による酵素の配合の別の例が、国際公開第２０１３／１８８３３１号パンフレットに開示されており、これは、（ａ）多酵素複合顆粒；（ｂ）１０ｗｔ未満のゼオライト（無水物基準）；及び（ｃ）１０ｗｔ未満のリン酸塩（無水物基準）を含む洗剤組成物に関し、ここで、前記酵素複合顆粒は、１０～９８重量％の水分シンク（ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｓｉｎｋ）成分を含み、組成物は、さらに、２０～８０重量％の洗剤水分シンク（ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｓｉｎｋ）成分を含む。国際公開第２０１３／１８８３３１号パンフレットはまた、表面、好ましくは布地表面を処理及び／又はクリーニングする方法にも関し、この方法は、（ｉ）前記表面を特許請求の範囲に記載され、また、本明細書に記載される水性洗浄液中の洗剤組成物と接触させるステップ、（ｉｉ）表面をすすぎ、及び／又は乾燥させるステップを含む。
洗剤製品の調合
本発明の洗剤組成物は、例えば、バー、均質錠剤、２層以上を有する錠剤、１個又は複数個の区画を有するパウチ、定型的若しくは緻密な粉末、顆粒、ペースト、ゲル、又は定型的、緻密な若しくは濃縮された液体など、任意の好都合な形態であってもよい。
本発明の洗剤組成物は、例えば、バー、均質錠剤、２層以上を有する錠剤、１個又は複数個の区画を有するパウチ、定型的若しくは緻密な粉末、顆粒、ペースト、ゲル、又は定型的、緻密な若しくは濃縮された液体など、任意の好都合な形態であってもよい。
洗剤成分は、水溶解性パウチ内の区画によって、互いに物理的に離隔され得る。これにより、構成成分間の好ましくない貯蔵時の相互作用を回避することができる。区画の各々の様々な溶解プロファイルによって、洗浄溶液中の選択した構成成分の溶解遅延を起こすことも可能である。
洗剤組成物は、単位用量製品の形態を取ってもよい。単位用量製品は、非再利用容器内の単回用量の包装である。これは、洗濯用洗剤で使用されることが多くなっている。洗剤の単位用量製品は、１回の洗浄に使用する量の洗剤のパッケージング（例えば、水溶性フィルムから製造されたポーチ中の）である。
パウチを単一区画又は多区画として構成することができる。これは、組成物を保持するのに好適な任意の形態、形状及び材料であってもよく、例えば、水との接触前に、パウチから組成物が放出できないようにする。パウチは、内容物を封入する水溶性フィルムから作られる。前記内体積は、パウチの区画に分割することができる。好ましいフィルムは、ポリマー材料、好ましくは、フィルム又はシートに形成されるポリマーである。好ましいポリマー、コポリマー又はその誘導体は、選択されるポリアクリレート、及び水溶性アクリレートコポリマー、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ナトリウムデキストリン、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マルトデキストリン、ポリメタクリレートであり、最も好ましくは、ポリビニルアルコールコポリマー及び、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）である。好ましくは、フィルム中のポリマー、例えば、ＰＶＡのレベルは、少なくとも約６０％である。好ましい平均分子量は通常、約２０，０００～約１５０，０００となる。フィルムはまた、加水分解により分解可能で、水溶性のポリマーブレンド、例えば、ポリラクチド及びポリビニルアルコール（ＭｏｎｏＳｏｌ ＬＬＣ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡから販売される商品名Ｍ８６３０で知られる）と、グリセロール、エチレングリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール及びこれらの混合物のような可塑剤などを含むブレンドされた組成物であってもよい。パウチは、水溶性フィルムによって分離された固体洗濯クリーニング組成物若しくは一部分の構成成分及び／又は液体クリーニング組成物若しくは一部分の構成成分を含むことができる。液体構成成分用の区画は、固体を含有する区画とは、組成が異なり得る：参考文献：（米国特許出願公開第２００９／００１１９７０ Ａ１号明細書）。
洗剤成分は、水溶解性パウチ内の区画によって又は錠剤の様々な層で、互いに物理的に分離することができる。これにより、構成成分間の好ましくない貯蔵時の相互作用を回避することができる。区画の各々の様々な溶解プロファイルによって、洗浄溶液中の選択した構成成分の溶解遅延を起こすことも可能である。
単位用量ではない液体又はゲル洗剤は、水溶性であってもよく、通常、少なくとも２０重量％、及び最大９５％の水、例えば、最大約７０％の水、最大約６５％の水、最大約５５％の水、最大約４５％の水、最大約３５％の水を含有する。限定されないが、アルカノール、アミン、ジオール、エーテル及びポリオールなどの他のタイプの液体が、水溶性液体又はゲルに含まれてもよい。水溶性液体又はゲル洗剤は、０～３０％の有機溶剤を含有し得る。
液体又はゲル洗剤は、非水溶性であってもよい。
本発明をさらに以下の実施例により説明するが、これは、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
材料及び方法
ＰＣＲ、クローニング、ライゲーションヌクレオチドなどの一般的な方法は、当業者によく知られており、例えば、“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ”，Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（１９８９），Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ ｌａｂ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）；“Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，（１９９５）；Ｈａｒｗｏｏｄ，Ｃ．Ｒ．，ａｎｄ Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｓ．Ｍ．（ｅｄｓ．）；“ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｖｏｌｕｍｅｓ Ｉ ａｎｄ ＩＩ”，Ｄ．Ｎ．Ｇｌｏｖｅｒ ｅｄ．（１９８５）；“Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ ｅｄ．（１９８４）；“Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ”，Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ ＆ Ｓ．Ｊ．Ｈｉｇｇｉｎｓ ｅｄｓ（１９８５）；“Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ Ｔｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ”，Ｂ．Ｐｅｒｂａｌ，（１９８４）において見出され得る。
ＰＣＲ、クローニング、ライゲーションヌクレオチドなどの一般的な方法は、当業者によく知られており、例えば、“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ”，Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（１９８９），Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ ｌａｂ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）；“Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，（１９９５）；Ｈａｒｗｏｏｄ，Ｃ．Ｒ．，ａｎｄ Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｓ．Ｍ．（ｅｄｓ．）；“ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｖｏｌｕｍｅｓ Ｉ ａｎｄ ＩＩ”，Ｄ．Ｎ．Ｇｌｏｖｅｒ ｅｄ．（１９８５）；“Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ ｅｄ．（１９８４）；“Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ”，Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ ＆ Ｓ．Ｊ．Ｈｉｇｇｉｎｓ ｅｄｓ（１９８５）；“Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ Ｔｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ”，Ｂ．Ｐｅｒｂａｌ，（１９８４）において見出され得る。
モデル洗剤Ａの組成物（液体）
洗剤Ａの組成物（液体）：成分：１２％ＬＡＳ、１１％ＡＥＯ Ｂｉｏｓｏｆｔ Ｎ２５－７（ＮＩ）、７％ＡＥＯＳ（ＳＬＥＳ）、６％ＭＰＧ（モノプロピレングリコール）、３％エタノール、３％ＴＥＡ、２．７５％ココア石鹸、２．７５％ダイズ石鹸、２％グリセロール、２％水酸化ナトリウム、２％クエン酸ナトリウム、１％ギ酸ナトリウム、０．２％ＤＴＭＰＡ及び０．２％ＰＣＡ、１００％までの水（全てのパーセンテージはｗ／ｗである）。
洗剤Ａの組成物（液体）：成分：１２％ＬＡＳ、１１％ＡＥＯ Ｂｉｏｓｏｆｔ Ｎ２５－７（ＮＩ）、７％ＡＥＯＳ（ＳＬＥＳ）、６％ＭＰＧ（モノプロピレングリコール）、３％エタノール、３％ＴＥＡ、２．７５％ココア石鹸、２．７５％ダイズ石鹸、２％グリセロール、２％水酸化ナトリウム、２％クエン酸ナトリウム、１％ギ酸ナトリウム、０．２％ＤＴＭＰＡ及び０．２％ＰＣＡ、１００％までの水（全てのパーセンテージはｗ／ｗである）。
モデル洗剤Ａ２の組成物（液体）
洗剤Ａ２の組成物（液体）：成分：１２％ＬＡＳ、１２％ＡＥＯ Ｂｉｏｓｏｆｔ Ｎ２５－７（ＮＩ）、４％ＡＥＯＳ（ＳＬＥＳ）、２％ＭＰＧ（モノプロピレングリコール）、３％エタノール、２％ＴＥＡ（トリエチルアミン）、３％石鹸、０．５％水酸化ナトリウム、３．９％クエン酸ナトリウム、１．５％ＤＴＭＰＡ、Ｎａ７（ジエチレントラミンペンタキス（メチレン）ペンタキス（ホスホン酸）、七ナトリウム塩）、０．５％フェノキシエタノール、１００％までの水（全てのパーセンテージはｗ／ｗである）。
洗剤Ａ２の組成物（液体）：成分：１２％ＬＡＳ、１２％ＡＥＯ Ｂｉｏｓｏｆｔ Ｎ２５－７（ＮＩ）、４％ＡＥＯＳ（ＳＬＥＳ）、２％ＭＰＧ（モノプロピレングリコール）、３％エタノール、２％ＴＥＡ（トリエチルアミン）、３％石鹸、０．５％水酸化ナトリウム、３．９％クエン酸ナトリウム、１．５％ＤＴＭＰＡ、Ｎａ７（ジエチレントラミンペンタキス（メチレン）ペンタキス（ホスホン酸）、七ナトリウム塩）、０．５％フェノキシエタノール、１００％までの水（全てのパーセンテージはｗ／ｗである）。
洗浄アッセイ
Ｌａｕｎｄｅｒ－Ｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）モデル洗浄系
Ｌａｕｎｄｅｒ－Ｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）は、最大２０種の異なる洗浄条件を同時に試験するために適用され得る中規模のモデル洗浄系である。ＬＯＭは、基本的には、内部に回転する２０個の密閉された金属ビーカーを伴う大きい温度制御された水浴である。各ビーカーは、１つの小さい洗濯機に相当し、実験の間、各々は、試験される汚れた布地及び汚れていない布地とともに試験されることになる特定の洗剤／酵素系の溶液を含有することになる。機械的負荷は、ビーカーが水浴中で回転されること及びビーカー中に金属球を含むことによって達成される。
Ｌａｕｎｄｅｒ－Ｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）モデル洗浄系
Ｌａｕｎｄｅｒ－Ｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）は、最大２０種の異なる洗浄条件を同時に試験するために適用され得る中規模のモデル洗浄系である。ＬＯＭは、基本的には、内部に回転する２０個の密閉された金属ビーカーを伴う大きい温度制御された水浴である。各ビーカーは、１つの小さい洗濯機に相当し、実験の間、各々は、試験される汚れた布地及び汚れていない布地とともに試験されることになる特定の洗剤／酵素系の溶液を含有することになる。機械的負荷は、ビーカーが水浴中で回転されること及びビーカー中に金属球を含むことによって達成される。
ＬＯＭモデル洗浄系は主に、欧州の洗浄条件での洗剤及び酵素の中規模の試験において使用される。ＬＯＭ実験において、バラストと汚れの比及び布地と洗浄液の比などの因子は変動し得る。したがって、ＬＯＭは、ＡＭＳＡ及びミニウォッシュなどの小規模実験と、より時間のかかるフロントローダー洗濯機での実物大の実験の間の接点を提供する。
Ｍｉｎｉ Ｌａｕｎｄｅｒ－Ｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＭｉｎｉＬＯＭ）モデル洗浄系
ＭｉｎｉＬＯＭは、Ｌａｕｎｄｅｒ－Ｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）の変性された小型の洗浄系であり、最大２０種の異なる洗浄条件を同時に試験するために適用され得る中規模のモデル洗浄系である。ＬＯＭは、基本的には、内部に回転する２０個の密閉された金属ビーカーを伴う大きい温度制御された水浴である。各ビーカーは、１つの小さい洗濯機に相当し、実験の間、各々は、試験される汚れた布地及び汚れていない布地とともに試験されることになる特定の洗剤／酵素系の溶液を含有することになる。機械的負荷は、ビーカーが水浴中で回転されること及びビーカー中に金属球を含むことによって達成される。
ＭｉｎｉＬＯＭは、Ｌａｕｎｄｅｒ－Ｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＬＯＭ）の変性された小型の洗浄系であり、最大２０種の異なる洗浄条件を同時に試験するために適用され得る中規模のモデル洗浄系である。ＬＯＭは、基本的には、内部に回転する２０個の密閉された金属ビーカーを伴う大きい温度制御された水浴である。各ビーカーは、１つの小さい洗濯機に相当し、実験の間、各々は、試験される汚れた布地及び汚れていない布地とともに試験されることになる特定の洗剤／酵素系の溶液を含有することになる。機械的負荷は、ビーカーが水浴中で回転されること及びビーカー中に金属球を含むことによって達成される。
ＬＯＭモデル洗浄系は主に、欧州の洗浄条件での洗剤及び酵素の中規模の試験において使用される。ＬＯＭ実験において、バラストと汚れの比及び布地と洗浄液の比などの因子は変動し得る。したがって、ＬＯＭは、ＡＭＳＡ及びミニウォッシュなどの小規模実験と、より時間のかかるフロントローダー洗濯機での実物大の実験の間の接点を提供する。
ｍｉｎｉＬＯＭにおいて、洗浄は、Ｓｔｕａｒｔローターに置かれた５０ｍｌの試験管において実施される。
Ｔｅｒｇ－Ｏ－Ｔｏｍｅｔｅｒ（ＴＯＭ）洗浄アッセイ
Ｔｅｒｇｏ－Ｔｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＴＯＭ）は、１２の異なる洗浄条件を同時にテストするために適用することができる中規模モデル洗浄システムである。ＴＯＭは、基本的に、温度制御付きの大きい水槽であり、そこに最大１２個の開放した金属ビーカーが浸される。各ビーカーは、１つの小さいトップローダー式洗濯機に相当し、実験の間、それらの各々は、その性能が試験される特定の洗剤／酵素系の溶液並びに汚れた布地及び汚れていない布地を含有することになる。機械的負荷は、各ビーカー内の液体を撹拌する回転式撹拌アームによって実現される。ＴＯＭビーカーは蓋を有しないため、ＴＯＭ実験中に試料を取り除き、洗浄中にオンラインで情報をアッセイすることが可能である。
Ｔｅｒｇｏ－Ｔｏ－Ｍｅｔｅｒ（ＴＯＭ）は、１２の異なる洗浄条件を同時にテストするために適用することができる中規模モデル洗浄システムである。ＴＯＭは、基本的に、温度制御付きの大きい水槽であり、そこに最大１２個の開放した金属ビーカーが浸される。各ビーカーは、１つの小さいトップローダー式洗濯機に相当し、実験の間、それらの各々は、その性能が試験される特定の洗剤／酵素系の溶液並びに汚れた布地及び汚れていない布地を含有することになる。機械的負荷は、各ビーカー内の液体を撹拌する回転式撹拌アームによって実現される。ＴＯＭビーカーは蓋を有しないため、ＴＯＭ実験中に試料を取り除き、洗浄中にオンラインで情報をアッセイすることが可能である。
ＴＯＭモデル洗浄系は主に、ＵＳ又はＬＡ／ＡＰの洗浄条件での洗剤及び酵素の中規模の試験において使用される。ＴＯＭ実験において、バラストと汚れの比及び布地と洗浄液の比などの因子は変動し得る。このように、ＴＯＭは、ＡＭＳＡ及びミニ洗浄などの小規模実験と、トップローダ式洗浄機を用い、より多くの時間がかかる実物実験とをつなげる役割を果たす。
装置：１２個のスチール製ビーカーを備え、ビーカー１個につき１本の回転アームを備えた、洗浄液の容量が５００ｍＬ又は１２００ｍＬである水浴。温度範囲は、５～８０℃である。水浴は、脱イオン水で満たされていなければならない。回転速度は、７０～１２０ｒｐｍ／分以下に設定することができる。
Ｔｅｒｇ－Ｏ－Ｔｏｍｅｔｅｒの温度を設定し、水浴内の回転を開始する。温度が調節される（誤差は、＋／－０．５℃）のを待つ。ビーカーは全て清浄であり、以前のテスト材料を一切含まないものとする。
所望の量の洗剤、温度及び水硬度を有する洗浄溶液をバケツ中に調製する。１０分間磁気攪拌し、洗剤を溶解させる。調製後３０～６０分以内に洗浄溶液を使用する。
８００ｍｌの洗浄溶液をＴＯＭビーカーに添加する。洗浄溶液を１２０ｒｐｍで攪拌した後、任意選択で、１種又は複数種の酵素をビーカーに添加する。スワッチ、続いてバラストロード（ｌｏａｄ）をビーカーに導入する。スワッチ及びバラストをビーカーに添加したとき、時間測定を開始する。スワッチを２０分間洗浄した後、攪拌を停止する。続いて、洗浄ロードをＴＯＭビーカーから篩に移して、水道水ですすぐ。汚れたスワッチをバラストロードから分離する。５Ｌビーカーに汚れたスワッチを移し、５分間、冷水道水を流水する。バラストロードは、次の不活性化のために、分けたままにしておく。スワッチの水を手で軽く絞り、紙で覆ったトレイの上に置く。別の紙をスワッチの上部に配置する。スワッチを一晩乾燥させた後、Ｃｏｌｏｒ Ｅｙｅを用いた色の強度の計測などの分析に付す。
実施例１－キシログルカナーゼ変異体の製造及び精製
本発明のキシログルカナーゼ変異体は、標準的な手順で調製される。要するに、遺伝子にランダム及び／又は部位特異的突然変異を導入し、変異した遺伝子バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）宿主細胞を形質転換し、形質転換した宿主細胞を発酵させ、発酵ブロスからキシログルカナーゼ変異体を得る。
本発明のキシログルカナーゼ変異体は、標準的な手順で調製される。要するに、遺伝子にランダム及び／又は部位特異的突然変異を導入し、変異した遺伝子バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）宿主細胞を形質転換し、形質転換した宿主細胞を発酵させ、発酵ブロスからキシログルカナーゼ変異体を得る。
０．７％のＦｅＣｌ２．２Ｈ２Ｏ、０．１％のＭｎＣｌ２．４Ｈ２Ｏ及び１．５％のＭｇＳＯ４．７Ｈ２Ｏを含む０．６ｍｌの微量元素溶液を添加した、１３．３ｇ／Ｌのトリプトン、２６．６ｇ／Ｌの酵母エキス（Ｂａｃｔｏ）及び４．４ｇ／Ｌのソルビトール０．４４％を含む３００ｍｌのＴＢ－Ｇｌｙ培地を３７℃で３日間振盪し、振盪フラスコ培養液中で発酵を実施した。
発酵後、遠心分離（１３０００×ｇ、２０分）により培養ブロスを採取した。次いで、上清を０．２μカットオフ中空繊維フィルター（ＣＦＰ－２－Ｅ－４ＭＡ）タンジェンシャルフロー濾過システム（ＧＥ ＱｕｉｘＳｔａｎｄ（商標）ベンチトップシステム）によって濾過し、宿主細胞を除去した。次いで、１Ｍ （ＮＨ４）２ＳＯ４を添加して濾過試料の導電率を上昇させた後、この試料を２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ、１Ｍ （ＮＨ４）２ＳＯ４、１ｍＭ ＣａＣｌ２中ｐＨ８．０で平衡化したＢｕｔｙｌ Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ ６５０Ｍ（Ｔｏｓｏｈ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に適用した。平衡化緩衝液でカラムを洗浄した後、２５ Ｍ トリス／ＨＣｌ、０．８５Ｍ （ＮＨ４）２ＳＯ４、１ｍＭ ＣａＣｌ２、ｐＨ８．０を含む洗浄緩衝液で再度広範囲に洗浄し、２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ、０．３Ｍ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２、ｐＨ８．０による定組成溶出によりタンパク質を溶出し、ＵＶピークに相当する溶出フラクションは、カラム上でＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ２５カラム（Ｍｅｒｃｋ）を通して２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２、ｐＨ８．０に緩衝液交換された。緩衝液交換された試料を２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２、ｐＨ８．０で平衡化したＮｕｖｉａ Ｑ Ｒｅｓｉｎ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）に適用し、平衡化緩衝液でカラムを洗浄後、２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２、ｐＨ８．０でタンパク質を溶出した。クロマトグラム上のＵＶ溶出ピークに相当する溶出フラクションを回収し、精製タンパク質としてプールした。
実施例２－キシログルカナーゼアッセイ
酵素試料、例えば精製からのキシログルカナーゼ活性は、ＡＺＣＬ－キシログルカンアッセイで測定される。
酵素試料、例えば精製からのキシログルカナーゼ活性は、ＡＺＣＬ－キシログルカンアッセイで測定される。
ＡＺＣＬ－キシログルカン（Ｍｅｇａｚｙｍｅ）をキシログルカナーゼと一緒にインキュベートし、遊離した青色を６５０ｎｍで測定した。キシログルカナーゼ活性は、適切なブランク値を差し引いた後のインキュベーション中の青色の増加として計算される。
ＡＺＣＬ－キシログルカン基質：撹拌によって０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００中に均一に懸濁させた４ｍｇ／ｍｌ ＡＺＣＬ－キシログルカン（Ｍｅｇａｚｙｍｅ）。
アッセイ温度：３７℃。
アッセイ緩衝液：５０ｍＭコハク酸／ＮａＯＨ、０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、ｐＨ５．０。
５００μｌのＡＺＣＬ－キシログルカン基質懸濁液をエッペンドルフ（Ｅｐｐｅｎｄｒｆ）チューブに入れ、氷上に置く。５００μｌのアッセイ緩衝液を添加し、混合物を氷冷する。２０Μｌの酵素試料（０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００で希釈）を添加する。エッペンドルフチューブをアッセイ温度に設定したエッペンドルフサーモミキサーに移すことによりアッセイを開始する。チューブを、最大の振盪率（１４００ｒｐｍ）でエッペンドルフサーモミキサーで１５分間インキュベートする。チューブを氷浴に戻すことによりインキュベーションを停止する。チューブを氷冷したら、氷冷遠心機で短時間遠心し、未反応の基質を沈殿させる。２００μｌの上清をマイクロタイタープレートに移し、Ａ６５０を読み取る。アッセイには緩衝液ブランク（酵素の代わりに２０μｌの０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００）が含まれ、酵素試料と緩衝液ブランクとのＡ６５０の差異をキシログルカナーゼ活性の指標とする。
実施例３－キシログルカナーゼの変異体の安定性
本発明におけるキシログルカナーゼ変異体の洗剤安定性は、プロテアーゼを含むモデルＡ２液体洗剤中で４２℃又は４５℃の高温において所定時間インキュベートすることによりストレスを与えた後のそれらの活性を測定することにより評価した。所定のインキュベーション時間後、これらのストレスを与えた試料の酵素活性を決定し、４℃で同一時間貯蔵した同等の試料の活性と比較した。安定性は、高温で貯蔵されたストレス試料に見られる残存活性から推測され、ストレスを受けていない低温貯蔵試料に見られる活性に対するパーセンテージで表される。キシログルカナーゼ変異体の％残存活性（％ＲＡ）の結果は、同一条件で試験した親キシログルカナーゼの結果と比較された。これらの２つの安定性結果の比率が安定性改善度（Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ Ｆａｃｔｏｒ）（ＳＩＦ）である。さらに、変異体半減期（Ｔ１／２）、又は変異体が元の活性の５０％まで減少するのに要する時間を、洗剤中でのインキュベーション時間及び残存活性％に基づいて決定した。変異体及び親キシログルカナーゼの半減期の比率を半減期改善度（Ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ Ｆａｃｔｏｒ）（ＨＩＦ）と呼ぶ。ＳＩＦ又はＨＩＦ＞１を有する変異体は、試験条件下で親キシログルカナーゼよりも安定である。好ましい変異体は、この試験で高いＳＩＦ又はＨＩＦを有するものである。
本発明におけるキシログルカナーゼ変異体の洗剤安定性は、プロテアーゼを含むモデルＡ２液体洗剤中で４２℃又は４５℃の高温において所定時間インキュベートすることによりストレスを与えた後のそれらの活性を測定することにより評価した。所定のインキュベーション時間後、これらのストレスを与えた試料の酵素活性を決定し、４℃で同一時間貯蔵した同等の試料の活性と比較した。安定性は、高温で貯蔵されたストレス試料に見られる残存活性から推測され、ストレスを受けていない低温貯蔵試料に見られる活性に対するパーセンテージで表される。キシログルカナーゼ変異体の％残存活性（％ＲＡ）の結果は、同一条件で試験した親キシログルカナーゼの結果と比較された。これらの２つの安定性結果の比率が安定性改善度（Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ Ｆａｃｔｏｒ）（ＳＩＦ）である。さらに、変異体半減期（Ｔ１／２）、又は変異体が元の活性の５０％まで減少するのに要する時間を、洗剤中でのインキュベーション時間及び残存活性％に基づいて決定した。変異体及び親キシログルカナーゼの半減期の比率を半減期改善度（Ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ Ｆａｃｔｏｒ）（ＨＩＦ）と呼ぶ。ＳＩＦ又はＨＩＦ＞１を有する変異体は、試験条件下で親キシログルカナーゼよりも安定である。好ましい変異体は、この試験で高いＳＩＦ又はＨＩＦを有するものである。
材料及び試薬
（Ａ）希釈緩衝液：０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００を含有する１００ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ８．０
・２０９．０６ｇのＭＯＰＳ（Ｓｉｇｍａ，Ｍ１２５４）を１ＬのＭｉｌｌｉ－Ｑ水に添加し、５Ｍ ＮａＯＨ溶液を使用してｐＨを８．０に調整し、１Ｍ ＭＯＰＳを調製する。１０ｍｌのＴｒｉｔｏｎ－Ｘ １００（Ｓｉｇｍａ，Ｔ８７８７）を９０ｍｌのＭｉｌｌｉ－Ｑ水に添加することによって、１０％ Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ １００ストック溶液を調製する。
・希釈緩衝液を製造するために、１００ｍｌの１Ｍ ＭＯＰＳ及び１ｍｌの１０％ Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００を添加し、測定メスシリンダーを使用してＭｉｌｌｉ－Ｑ水によって１Ｌにする。
（Ｂ）洗剤混合物：モデルＡ２洗剤（上記の通り）＋突然変異：Ｓ９Ｅ＋Ｎ４２Ｒ＋Ｎ７４Ｄ＋Ｖ１９９Ｉ＋Ｑ２００Ｌ＋Ｙ２０３Ｗ＋Ｓ２５３Ｄ＋Ｎ２５５Ｗ＋Ｌ２５６Ｅを有する配列番号４の、１％ プロテアーゼ
・ガラス瓶中、１００ｍｌのモデルＡ２洗剤、１ｍｌのプロテアーゼを添加する。マグネチックスターラーバーを加え、３０分間、又は均一に混合するまでマグネチックスターラー上で混合させる。
（Ｃ）基質：１．３％ Ｃｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ（希釈緩衝液５ｍｌあたり１個のＣｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ錠）。
・Ｃｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ錠（Ｍｅｇａｚｙｍｅｓ，Ｔ－ＣＴＺ－１０００Ｔ）は、アズリン架橋された染色キシログルカンを含有する錠剤である。本品は、キシログルカナーゼ及びエンドセルラーゼのアッセイに高感度な不溶性基質である。ビーカー中で１００ｍｌの希釈緩衝液中に２０錠のＣｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ錠を添加することにより、測定当日に新鮮な１．３％基質を調製する。マグネチックスターラーバーを加え、１０分間撹拌する。
（Ｄ）精製タンパク質：配列番号２のキシログルカナーゼを精製し、親キシログルカナーゼ参照として使用した。キシログルカナーゼ変異体は、上記の実施例１と同様に発酵及び精製した。全てのタンパク質濃度は、希釈緩衝液を使用して２００ｐｐｍに正規化した。
（Ｅ）消耗品：９６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ，２６０８３６）、３８４ウェルプレート（Ｎｕｎｃ，２６２１６０）、５０μｌ ＭＣＡ ９６ネスト型チップ（Ｔｅｃａｎ，３００３８６０９）、１００μｌ ＭＣＡ ９６ネスト型チップ（Ｔｅｃａｎ，３００３８６１４）、２００μｌ ＭＣＡ ９６ネスト型チップ（Ｔｅｃａｎ，３００３８６１９）、ワイドボアチップ（Ａｘｙｇｅｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｔ－２０５－ＷＢ－Ｃ）、トラフ（Ａｘｙｇｅｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＲＥＳ－ＳＷ９６－ＨＰ）
（Ｆ）試料インキュベーター：ストレス試料を温度制御されたＬｉｃｏｎｉｃインキュベーター（４２℃に設定）でインキュベートし、非ストレス試料は冷蔵庫（Ｓａｍｓｕｎｇ）中４℃でインキュベートした。
（Ｇ）アッセイに使用したサーモミキサー：エッペンドルフサーモミキサーＣ
（Ｈ）自動的な試料取り扱いにはＴｅｃａｎ Ｅｖｏ Ｆｒｅｅｄｏｍ １５０リキッドハンドラー、吸光度測定にはＭａｇｅｌｌａｎ ２００ Ｐｒｏ
（Ａ）希釈緩衝液：０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００を含有する１００ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ８．０
・２０９．０６ｇのＭＯＰＳ（Ｓｉｇｍａ，Ｍ１２５４）を１ＬのＭｉｌｌｉ－Ｑ水に添加し、５Ｍ ＮａＯＨ溶液を使用してｐＨを８．０に調整し、１Ｍ ＭＯＰＳを調製する。１０ｍｌのＴｒｉｔｏｎ－Ｘ １００（Ｓｉｇｍａ，Ｔ８７８７）を９０ｍｌのＭｉｌｌｉ－Ｑ水に添加することによって、１０％ Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ １００ストック溶液を調製する。
・希釈緩衝液を製造するために、１００ｍｌの１Ｍ ＭＯＰＳ及び１ｍｌの１０％ Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００を添加し、測定メスシリンダーを使用してＭｉｌｌｉ－Ｑ水によって１Ｌにする。
（Ｂ）洗剤混合物：モデルＡ２洗剤（上記の通り）＋突然変異：Ｓ９Ｅ＋Ｎ４２Ｒ＋Ｎ７４Ｄ＋Ｖ１９９Ｉ＋Ｑ２００Ｌ＋Ｙ２０３Ｗ＋Ｓ２５３Ｄ＋Ｎ２５５Ｗ＋Ｌ２５６Ｅを有する配列番号４の、１％ プロテアーゼ
・ガラス瓶中、１００ｍｌのモデルＡ２洗剤、１ｍｌのプロテアーゼを添加する。マグネチックスターラーバーを加え、３０分間、又は均一に混合するまでマグネチックスターラー上で混合させる。
（Ｃ）基質：１．３％ Ｃｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ（希釈緩衝液５ｍｌあたり１個のＣｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ錠）。
・Ｃｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ錠（Ｍｅｇａｚｙｍｅｓ，Ｔ－ＣＴＺ－１０００Ｔ）は、アズリン架橋された染色キシログルカンを含有する錠剤である。本品は、キシログルカナーゼ及びエンドセルラーゼのアッセイに高感度な不溶性基質である。ビーカー中で１００ｍｌの希釈緩衝液中に２０錠のＣｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ錠を添加することにより、測定当日に新鮮な１．３％基質を調製する。マグネチックスターラーバーを加え、１０分間撹拌する。
（Ｄ）精製タンパク質：配列番号２のキシログルカナーゼを精製し、親キシログルカナーゼ参照として使用した。キシログルカナーゼ変異体は、上記の実施例１と同様に発酵及び精製した。全てのタンパク質濃度は、希釈緩衝液を使用して２００ｐｐｍに正規化した。
（Ｅ）消耗品：９６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ，２６０８３６）、３８４ウェルプレート（Ｎｕｎｃ，２６２１６０）、５０μｌ ＭＣＡ ９６ネスト型チップ（Ｔｅｃａｎ，３００３８６０９）、１００μｌ ＭＣＡ ９６ネスト型チップ（Ｔｅｃａｎ，３００３８６１４）、２００μｌ ＭＣＡ ９６ネスト型チップ（Ｔｅｃａｎ，３００３８６１９）、ワイドボアチップ（Ａｘｙｇｅｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｔ－２０５－ＷＢ－Ｃ）、トラフ（Ａｘｙｇｅｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＲＥＳ－ＳＷ９６－ＨＰ）
（Ｆ）試料インキュベーター：ストレス試料を温度制御されたＬｉｃｏｎｉｃインキュベーター（４２℃に設定）でインキュベートし、非ストレス試料は冷蔵庫（Ｓａｍｓｕｎｇ）中４℃でインキュベートした。
（Ｇ）アッセイに使用したサーモミキサー：エッペンドルフサーモミキサーＣ
（Ｈ）自動的な試料取り扱いにはＴｅｃａｎ Ｅｖｏ Ｆｒｅｅｄｏｍ １５０リキッドハンドラー、吸光度測定にはＭａｇｅｌｌａｎ ２００ Ｐｒｏ
手順
（Ａ）１００μｌの正規化した２００ｐｐｍ精製タンパク質を９６ウェルプレートに４回複製して分注する。また、希釈緩衝液が添加された緩衝液ブランクも４回複製して分注する。
（Ｂ）洗剤混合物をトラフに注ぎ入れ、Ｔｅｃａｎの９６ウェルプレートに９０μｌ／ウェルで分注する。
（Ｃ）酵素プレートからの１０μｌをＴｅｃａｎの９０μｌ洗剤プレートに添加する。プレートを密閉し、サーモミキサーを使用して１４００ｒｐｍ、２５℃で３０分間撹拌する。
（Ｄ）プレートを非ストレスの場合は４℃、ストレスの場合は４２℃で１５時間貯蔵する。
（Ｅ）ビーカー中でアッセイ当日に新鮮な１．３％ Ｃｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ基質を調製する。マグネチックスターラーで連続的に撹拌しながら、９６ウェルプレートにワイドボアチップを使用して１８０μｌの基質／ウェルを分注する。基質の撹拌を続けることにより、不溶性の基質粒子が動き続け、沈殿を防ぎ、それによって、確実に９６ウェルプレート中に基質が均一に分注される。
（Ｆ）１４００ｒｐｍ、２５℃で１０分間撹拌することによって、非ストレスプレート及びストレスプレートを室温に戻す。Ｔｅｃａｎの１８０μｌ基質プレートに２０μｌの非ストレス試料及びストレス試料を添加し、最終的なアッセイ中タンパク質濃度が２ｐｐｍとなるようにする。プレートをサーモミキサー上に配置し、８００ｒｐｍ、２５℃で４５分間撹拌する。
（Ｇ）未反応の基質粒子が沈殿するようにアッセイプレートを１０分間静置し、５０μｌの上清を９６ウェルプレートからＴｅｃａｎの３８４ウェルプレートに移し替える。５９０ｎｍでの吸光度を読み取る。
（Ａ）１００μｌの正規化した２００ｐｐｍ精製タンパク質を９６ウェルプレートに４回複製して分注する。また、希釈緩衝液が添加された緩衝液ブランクも４回複製して分注する。
（Ｂ）洗剤混合物をトラフに注ぎ入れ、Ｔｅｃａｎの９６ウェルプレートに９０μｌ／ウェルで分注する。
（Ｃ）酵素プレートからの１０μｌをＴｅｃａｎの９０μｌ洗剤プレートに添加する。プレートを密閉し、サーモミキサーを使用して１４００ｒｐｍ、２５℃で３０分間撹拌する。
（Ｄ）プレートを非ストレスの場合は４℃、ストレスの場合は４２℃で１５時間貯蔵する。
（Ｅ）ビーカー中でアッセイ当日に新鮮な１．３％ Ｃｅｌｌａｚｙｍｅ Ｔ基質を調製する。マグネチックスターラーで連続的に撹拌しながら、９６ウェルプレートにワイドボアチップを使用して１８０μｌの基質／ウェルを分注する。基質の撹拌を続けることにより、不溶性の基質粒子が動き続け、沈殿を防ぎ、それによって、確実に９６ウェルプレート中に基質が均一に分注される。
（Ｆ）１４００ｒｐｍ、２５℃で１０分間撹拌することによって、非ストレスプレート及びストレスプレートを室温に戻す。Ｔｅｃａｎの１８０μｌ基質プレートに２０μｌの非ストレス試料及びストレス試料を添加し、最終的なアッセイ中タンパク質濃度が２ｐｐｍとなるようにする。プレートをサーモミキサー上に配置し、８００ｒｐｍ、２５℃で４５分間撹拌する。
（Ｇ）未反応の基質粒子が沈殿するようにアッセイプレートを１０分間静置し、５０μｌの上清を９６ウェルプレートからＴｅｃａｎの３８４ウェルプレートに移し替える。５９０ｎｍでの吸光度を読み取る。
データ分析
（Ａ）各試料に対してＯＤ５９０測定を２回行った。
ＯＤ（ＵＳ）：４℃での非ストレス酵素試料の５９０ｎｍにおける吸光度
ＯＤ（Ｓ）：４２℃でのストレス酵素試料の５９０ｎｍにおける吸光度
（Ａ）各試料に対してＯＤ５９０測定を２回行った。
ＯＤ（ＵＳ）：４℃での非ストレス酵素試料の５９０ｎｍにおける吸光度
ＯＤ（Ｓ）：４２℃でのストレス酵素試料の５９０ｎｍにおける吸光度
同様に、等量の洗剤を含むが酵素を含まない非ストレス及びストレス条件での緩衝液ブランク試料のＯＤ５９０測定［ＯＤ（ブランク＿ＵＳ）及びＯＤ（ブランク＿Ｓ）］を２回行った。これは４つのブランク複製で平均化された。
（Ｂ）緩衝液ブランク試料の吸光度を差し引き、４つの酵素複製の平均を取ることによって、酵素試料のブランクＯＤ値を計算する。
ＢＯＤ（ＵＳ）＝ＯＤ（ＵＳ）－ＯＤ（ブランク＿ＵＳ）
ＢＯＤ（Ｓ）＝ＯＤ（Ｓ）－ＯＤ（ブランク＿Ｓ）
ＢＯＤ（ＵＳ）＝ＯＤ（ＵＳ）－ＯＤ（ブランク＿ＵＳ）
ＢＯＤ（Ｓ）＝ＯＤ（Ｓ）－ＯＤ（ブランク＿Ｓ）
各酵素とも、ＢＯＤ（ＵＳ）の下限値は０．３、そしてＢ（ＯＤ）の下限値は０．０５に設定され、その値未満はノイズ範囲となるため、安定性の計算には使用されない。
（Ｃ）安定性は、残存活性率（％ＲＡ）として表される。
（Ｄ）安定性改善度（ＳＩＦ）は、変異体及び参照（ここでは、配列番号２又は配列番号３のキシログルカナーゼ）の残存活性の比率を取ることによって計算される。
（Ｅ）酵素半減期（Ｔ１／２）又は酵素が元の活性の５０％を失うのにかかる時間（時間）は、残存活性と、洗剤中の試料の全インキュベーション時間（Ｔｄｅｔ、ここでは１５時間）に基づいて計算される。
（Ｆ）半減期改善度（ＨＩＦ）は、変異体及び参照の半減期の比率を取ることによって計算される。
Claims (19)
- 配列番号１のポリペプチドの１１１、１２３、１５９、２５６、２９４、８、１８、２０、４１、４２、７６、８２、８３、８７、９４、１０３、１０４、１０５、１２１、１２５、１２６、１２７、１３６、１３７、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５５、１６５、１６８、１６９、１７７、１８４、１８９、２０３、２０６、２１０、２１１、２１４、２１７、２１９、２２０、２２６、２３７、２３８、２４０、２４３、２４４、２４８、２５１、２５２、２６７、２７１、２７６、２８９、２９５、２９８、３００、３０２、３２２、３２９、３３９、３４７、３４７、３５３、３８３、３８４、３９２、３９４、３９５、４０２、４１４、４２７、４３１、４４５、４４７、４５９、４７３、４７４、４７６、４８２、４８８、４８９、４９１、４９２、５０３及び５０５からなる群から選択される位置に相当する１個又は複数個の位置での改変を含む、キシログルカナーゼ活性を有するキシログルカナーゼ変異体。
- 配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する、請求項１に記載の変異体。
- 配列番号１のポリペプチドのＰ１１１、Ｓ１２３、Ｖ１５９、Ｓ２５６、Ｉ２９４、Ｋ８、Ｋ１８、Ｒ２０、Ａ４１、Ａ４２、Ｓ７６、Ｑ８２、Ａ８３、Ｋ８７、Ｓ９４、Ｇ１０３、Ｔ１０４、Ｙ１０５、Ａ１１８、Ｎ１２１、Ｑ１２５、Ｅ１２６、Ｓ１２７、Ｎ１３６、Ｑ１３７、Ｆ１４６、Ｑ１４７、Ｌ１４８、Ｌ１５２、Ｎ１５３、Ｎ１５５、Ｆ１６５、Ｎ１６８、Ｋ１６９、Ａ１７７、Ｌ１８４、Ａ１８９、Ｖ２０３、Ｋ２０６、Ｄ２１０、Ｒ２１１、Ｓ２１４、Ｋ２１７、Ｖ２１９、Ｋ２２０、Ａ２２６、Ｇ２３７、Ａ２３８、Ｋ２４０、Ｑ２４３、Ｔ２４４、Ｗ２４８、Ｖ２５１、Ｋ２５２、Ｒ２６７、Ｑ２７１、Ｒ２７６、Ａ２８９、Ｒ２９５、Ｎ２９８、Ｖ３００、Ｎ３０２、Ｋ３２２、Ｑ３２９、Ｐ３３９、Ｋ３４７、Ｒ３４７、Ｋ３５３、Ｒ３５３、Ｎ３８３、Ｄ３８４、Ｋ３９２、Ｋ３９４、Ｄ３９５、Ｐ３９５、Ｓ４０２、Ｋ４１４、Ｔ４２７、Ｖ４３１、Ｋ４４５、Ｌ４４７、Ａ４５９、Ｉ４７３、Ｓ４７４、Ｋ４７６、Ｋ４８２、Ｋ４８８、Ｅ４８９、Ａ４９１、Ｐ４９２、Ｙ５０３及びＶ５０５位に相当する位置で１個又は複数個の改変を含み、キシログルカナーゼ活性を有する、請求項１～２のいずれか一項に記載の変異体。
- 配列番号１のポリペプチドのＰ１１１Ｑ、Ｓ１２３Ｐ、Ｖ１５９Ｍ、Ｓ２５６Ｅ、Ｓ２５６Ｑ、Ｉ２９４Ｅ、Ｉ２９４Ｑ、Ｋ８Ｅ、Ｋ８Ｒ、Ｋ１８Ｅ、Ｒ２０Ｋ、Ａ４１Ｌ、Ａ４１Ｅ、Ａ４１Ｒ、Ａ４２Ｖ、Ｓ７６Ｅ、Ｑ８２Ｅ、Ａ８３Ｅ、Ｋ８７Ｅ、Ｓ９４Ｒ、Ｇ１０３Ｖ、Ｔ１０４Ｇ、Ｔ１０４Ｒ、Ｙ１０５Ｅ、Ａ１１８Ｋ、Ｎ１２１Ｅ、Ｑ１２５Ｆ、Ｑ１２５Ｋ、Ｑ１２５Ｌ、Ｑ１２５Ｐ、Ｑ１２５Ｓ、Ｅ１２６Ｐ、Ｓ１２７Ｈ、Ｓ１２７Ｌ、Ｓ１２７Ｗ、Ｓ１２７Ｄ、Ｎ１３６Ｄ、Ｑ１３７Ｅ、Ｑ１３７Ｋ、Ｆ１４６Ｄ、Ｑ１４７Ｇ、Ｑ１４７Ｋ、Ｌ１４８Ｐ、Ｌ１５２＊、Ｌ１５２Ｄ、Ｌ１５２Ｅ、Ｌ１５２Ｐ、Ｎ１５３Ｅ、Ｎ１５５Ｄ、Ｎ１５５Ｅ、Ｆ１６５Ｈ、Ｎ１６８Ｒ、Ｋ１６９Ｅ、Ｋ１６９Ｒ、Ａ１７７Ｇ、Ｌ１８４Ｍ、Ａ１８９Ｇ、Ｖ２０３Ｔ、Ｋ２０６Ｅ、Ｋ２０６Ｒ、Ｄ２１０Ｈ、Ｄ２１０Ｒ、Ｒ２１１Ｋ、Ｓ２１４Ｑ、Ｋ２１７Ｒ、Ｋ２１７Ｔ、Ｖ２１９Ａ、Ｖ２１９Ｔ、Ｋ２２０Ｒ、Ａ２２６Ｄ、Ａ２２６Ｋ、Ｇ２３７Ｍ、Ａ２３８Ｓ、Ａ２３８Ｔ、Ｋ２４０Ｆ、Ｋ２４０Ｌ、Ｑ２４３Ｅ、Ｔ２４４Ｅ、Ｔ２４４Ｒ、Ｗ２４８Ｖ、Ｖ２５１Ｅ、Ｋ２５２Ｅ、Ｒ２６７Ｃ、Ｒ２６７Ｈ、Ｒ２６７Ｋ、Ｑ２７１Ｄ、Ｑ２７１Ｅ、Ｒ２７６Ｋ、Ａ２８９Ｔ、Ｒ２９５Ｋ、Ｎ２９８Ｄ、Ｖ３００Ｌ、Ｎ３０２Ｈ、Ｋ３２２Ｅ、Ｑ３２９Ｅ、Ｐ３３９Ｓ、Ｋ３４７Ｅ、Ｋ３４７Ｒ、Ｋ３５３Ｒ、Ｎ３８３Ｅ、Ｎ３８３Ｑ、Ｄ３８４Ｇ、Ｋ３９２Ｅ、Ｋ３９４Ｒ、Ｄ３９５Ｐ、Ｓ４０２Ｑ、Ｋ４１４Ｅ、Ｔ４２７Ｖ、Ｖ４３１Ｅ、Ｋ４４５Ｅ、Ｌ４４７Ｍ、Ａ４５９Ｐ、Ｉ４７３Ｔ、Ｓ４７４Ｅ、Ｋ４７６Ｒ、Ｋ４８２Ｒ、Ｋ４８８Ｔ、Ｅ４８９Ｋ、Ｅ４８９Ｒ、Ａ４９１Ｅ、Ａ４９１Ｖ、Ｐ４９２Ｄ、Ｙ５０３Ｌ、Ｙ５０３Ｖ及びＶ５０５Ｌ位に相当する位置で１個又は複数個の改変を含み、キシログルカナーゼ活性を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載の変異体。
- 配列番号１のポリペプチドの
Ｋ３９４Ｒ、
Ｓ１２７Ｄ、
Ｒ２１１Ｋ、
Ｓ１２３Ｐ、
Ｋ４８８Ｔ、
Ｓ２５６Ｑ、
Ｋ４７６Ｒ、
Ｋ２１７Ｒ、
Ｑ２７１Ｄ、
Ｓ２１４Ｑ、
Ｌ４４７Ｍ、
Ｋ４８２Ｒ、
Ｋ１６９Ｒ、
Ｌ１５２Ｄ、
Ｒ２６７Ｋ、
Ｌ１５２Ｅ、
Ｄ２１０Ｒ、
Ｌ１５２＊、
Ｒ２９５Ｋ、
Ｓ１２７Ｗ、
Ｅ１２６Ｐ、
Ｓ１２７Ｈ、
Ｔ１０４Ｇ、
Ｑ１２５Ｋ、
Ｑ１２５Ｐ、
Ｑ１２５Ｓ、
Ｄ３９５Ｐ、
Ｇ１０３Ｖ、
Ｔ１０４Ｒ、
Ｑ１２５Ｌ、
Ａ４１Ｅ、
Ａ４１Ｒ、
Ｑ１２５Ｆ、
Ｓ１２７Ｌ、
Ａ２２６Ｋ、
Ａ４１Ｌ、
Ａ２２６Ｄ、
Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、
Ｎ１５５Ｄ、
Ｑ１３７Ｋ、
Ｎ１５５Ｅ、
Ｑ１４７Ｋ、
Ｒ２７６Ｋ、
Ｖ２０３Ｔ、
Ｓ９４Ｒ、
Ｋ１８Ｅ、
Ｋ２５２Ｅ、
Ｖ２１９Ｔ、
Ｒ２６７Ｃ＋Ｔ４２７Ｖ、
Ｑ２４３Ｅ、
Ｋ４１４Ｅ、
Ｋ４４５Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ３４７Ｒ＋Ｋ３５３Ｒ＋Ｄ３９５Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｄ３９５Ｐ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ、
Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ３９２Ｅ、
Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｙ５０３Ｌ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ｙ５０３Ｖ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ａ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２１１Ｋ＋Ｋ２１７Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｑ８２Ｅ、
Ｓ７６Ｅ、
Ａ８３Ｅ、
Ｑ２７１Ｅ、
Ｓ２５６Ｅ、
Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ３２９Ｅ、
Ｖ４３１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｙ１０５Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１３６Ｄ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ、
Ｙ１０５Ｅ＋Ａ１１８Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２０６Ｒ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｒ２６７Ｋ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｉ４７３Ｔ、
Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８Ｅ＋Ｋ１８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２０６Ｅ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｋ３４７Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｋ８Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｎ１６８Ｒ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２１７Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｉ２９４Ｑ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２１９Ｔ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４２Ｖ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２２０Ｒ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ａ２８９Ｔ＋Ｎ３０２Ｈ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｅ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｎ１２１Ｅ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ、
Ｓ１２３Ｐ＋Ｓ１２７Ｄ＋Ｎ１３６Ｄ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｌ１５２Ｅ＋Ｎ１５３Ｅ＋Ｎ１５５Ｅ＋Ａ４９１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８７Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６ＥＩ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ１７７Ｇ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ、
Ｋ８Ｒ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ４１Ｌ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｆ１４６Ｄ＋Ｑ１４７Ｇ＋Ｌ１４８Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｖ３００Ｌ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｌ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｆ１６５Ｈ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｄ３８４Ｇ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｒ＋Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２１７Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｒ２６７Ｈ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ３２２Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｋ４８８Ｔ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ａ２３８Ｓ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｖ５０５Ｌ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｅ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｄ２１０Ｈ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ａ２３８Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｗ２４８Ｖ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｒ２９５Ｋ＋Ｎ２９８Ｄ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｌ４４７Ｍ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｌ１５２Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｒ２０Ｋ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｅ４８９Ｒ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｋ４４５Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｓ９４Ｒ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｋ１６９Ｒ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｔ２４４Ｒ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｓ２５６Ｅ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｐ３３９Ｓ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｓ７６Ｅ＋Ｑ８２Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｋ２５２Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２０３Ｔ＋Ｋ２４０Ｆ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２１９Ｔ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｓ４７４Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｐ４９２Ｄ、
Ｓ７６Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｎ１５５Ｄ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｇ２３７Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ａ１８９Ｇ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｑ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ４１Ｌ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３９４Ｒ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｄ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４５９Ｐ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｋ３４７Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ｋ８Ｅ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖ、
Ｋ８Ｒ＋Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ｅ４８９Ｋ、
Ａ８３Ｅ＋Ｐ１１１Ｑ＋Ｓ１２３Ｐ＋Ｑ１３７Ｋ＋Ｑ１４７Ｋ＋Ｖ１５９Ｍ＋Ｌ１８４Ｍ＋Ｖ２５１Ｅ＋Ｓ２５６Ｑ＋Ｑ２７１Ｅ＋Ｉ２９４Ｅ＋Ｑ３２９Ｅ＋Ｎ３８３Ｅ＋Ｓ４０２Ｑ＋Ｖ４３１Ｅ＋Ａ４９１Ｖからなる群から選択される改変又は改変の組合せを含み、キシログルカナーゼ活性を有し、且つ配列番号１、配列番号２又は配列番号３のポリペプチドに対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、例えば、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する、請求項１～４のいずれか一項に記載の変異体。 - 配列番号２のポリペプチドの１２９Ｔ位に相当する位置に置換を含む、キシログルカナーゼ活性を有するキシログルカナーゼ変異体。
- 配列番号２のポリペプチドに対して少なくとも９９％の配列同一性であるが、ただし１００％未満の配列同一性を有する、請求項６に記載の変異体。
- 配列番号３のポリペプチドを含むか又はそれからなる、請求項６～７のいずれか一項に記載の変異体。
- 親と比較して、改善された熱安定性、改善された洗剤中貯蔵安定性、キレーター又はキレート剤の存在下での洗剤中貯蔵安定性、改善された洗浄性能、及び／又は改善された酵素洗浄力などの改善された特性を有する、請求項１～８のいずれか一項に記載の変異体。
- 配列番号２又は配列番号３の参照ポリペプチドと比較して、少なくとも１．１、例えば少なくとも１．２、少なくとも１．３、少なくとも１．４、少なくとも１．５の半減期改善度（ＨＩＦ）及び／又は安定性改善度（ＳＩＦ）を有する、請求項１～９のいずれか一項に記載の変異体。
- 請求項１～１０のいずれか一項に記載の変異体を含む洗剤組成物。
- 固形セッケン、均質な錠剤、２つ以上の層を有する錠剤、単位用量製品、例えば、１個又は複数個の区画を有するポーチ、通常の若しくは圧縮された粉末、顆粒、ペースト、ゲル、又は通常の圧縮若しくは濃縮液体の形態である、請求項１１に記載の洗剤組成物。
- 請求項１～１０のいずれか一項に記載の変異体をコードする単離されたポリヌクレオチド。
- 請求項１３に記載のポリヌクレオチドを含む核酸構築物又は発現ベクター。
- 請求項１３に記載のポリヌクレオチドで形質転換される組換え宿主細胞。
- 変異体の変異体を生成する方法であって、
ａ．前記変異体の発現に好適な条件下で請求項１５に記載の組換え宿主細胞を培養すること；及び
ｂ．前記変異体を回収すること
を含む方法。 - 品目のクリーニングのため、前記品目の汚れの前処理のため、洗浄サイクル中の汚れの再付着防止、低減、若しくは除去のため、及び／又は品目の白色度の維持若しくは改善のための請求項１～１０のいずれか一項に記載の変異体、或いは請求項１１～１２のいずれか一項に記載の洗剤組成物の使用。
- 前記品目が、織物、又は食器などの硬質表面である、請求項１７に記載の使用。
- 織物である品目を洗濯する方法であって、
ｃ．請求項１～１０のいずれか一項に記載の変異体を含む洗浄液、又は請求項１１～１２のいずれか一項に記載の洗剤組成物に、品目を曝露すること；
ｄ．少なくとも１回の洗浄サイクルを完了すること；及び
ｅ．任意選択的に前記品目をすすぐこと
を含む方法。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IN202041036857 | 2020-08-25 | ||
| IN202041036857 | 2020-08-25 | ||
| IN202141023517 | 2021-05-26 | ||
| IN202141023517 | 2021-05-26 | ||
| PCT/EP2021/073379 WO2022043321A2 (en) | 2020-08-25 | 2021-08-24 | Variants of a family 44 xyloglucanase |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023538740A true JP2023538740A (ja) | 2023-09-11 |
Family
ID=77710752
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2023512728A Pending JP2023538740A (ja) | 2020-08-25 | 2021-08-24 | ファミリー４４キシログルカナーゼの変異体 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20230313165A1 (ja) |
| EP (1) | EP4204551A2 (ja) |
| JP (1) | JP2023538740A (ja) |
| CN (1) | CN116323889A (ja) |
| BR (1) | BR112023003468A2 (ja) |
| MX (1) | MX2023001888A (ja) |
| WO (1) | WO2022043321A2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113637656A (zh) * | 2021-08-05 | 2021-11-12 | 云南师范大学 | 一种GDSL家族脱乙酰化酯酶突变体Est8-G45R及其应用 |
Family Cites Families (174)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1296839A (ja) | 1969-05-29 | 1972-11-22 | ||
| GB1483591A (en) | 1973-07-23 | 1977-08-24 | Novo Industri As | Process for coating water soluble or water dispersible particles by means of the fluid bed technique |
| GB1590432A (en) | 1976-07-07 | 1981-06-03 | Novo Industri As | Process for the production of an enzyme granulate and the enzyme granuate thus produced |
| DK187280A (da) | 1980-04-30 | 1981-10-31 | Novo Industri As | Ruhedsreducerende middel til et fuldvaskemiddel fuldvaskemiddel og fuldvaskemetode |
| DK263584D0 (da) | 1984-05-29 | 1984-05-29 | Novo Industri As | Enzymholdige granulater anvendt som detergentadditiver |
| JPS61104784A (ja) | 1984-10-26 | 1986-05-23 | Suntory Ltd | ペルオキシダ−ゼの製造法 |
| JPH0697997B2 (ja) | 1985-08-09 | 1994-12-07 | ギスト ブロカデス ナ−ムロ−ゼ フエンノ−トチヤツプ | 新規の酵素的洗浄剤添加物 |
| EG18543A (en) | 1986-02-20 | 1993-07-30 | Albright & Wilson | Protected enzyme systems |
| DK122686D0 (da) | 1986-03-17 | 1986-03-17 | Novo Industri As | Fremstilling af proteiner |
| ES2058119T3 (es) | 1986-08-29 | 1994-11-01 | Novo Nordisk As | Aditivo detergente enzimatico. |
| US5389536A (en) | 1986-11-19 | 1995-02-14 | Genencor, Inc. | Lipase from Pseudomonas mendocina having cutinase activity |
| ATE125865T1 (de) | 1987-08-28 | 1995-08-15 | Novo Nordisk As | Rekombinante humicola-lipase und verfahren zur herstellung von rekombinanten humicola-lipasen. |
| DE68924654T2 (de) | 1988-01-07 | 1996-04-04 | Novonordisk As | Spezifische Protease. |
| DK6488D0 (da) | 1988-01-07 | 1988-01-07 | Novo Industri As | Enzymer |
| JP3079276B2 (ja) | 1988-02-28 | 2000-08-21 | 天野製薬株式会社 | 組換え体ｄｎａ、それを含むシュードモナス属菌及びそれを用いたリパーゼの製造法 |
| WO1989009259A1 (en) | 1988-03-24 | 1989-10-05 | Novo-Nordisk A/S | A cellulase preparation |
| US5776757A (en) | 1988-03-24 | 1998-07-07 | Novo Nordisk A/S | Fungal cellulase composition containing alkaline CMC-endoglucanase and essentially no cellobiohydrolase and method of making thereof |
| US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
| AU641169B2 (en) | 1989-06-13 | 1993-09-16 | Genencor International, Inc. | A method for killing cells without cell lysis |
| GB8915658D0 (en) | 1989-07-07 | 1989-08-23 | Unilever Plc | Enzymes,their production and use |
| EP0493398B1 (en) | 1989-08-25 | 1999-12-08 | Henkel Research Corporation | Alkaline proteolytic enzyme and method of production |
| EP0531372B2 (en) | 1990-05-09 | 2004-04-14 | Novozymes A/S | A cellulase preparation comprising an endoglucanase enzyme |
| DK115890D0 (da) | 1990-05-09 | 1990-05-09 | Novo Nordisk As | Enzym |
| FI903443A (fi) | 1990-07-06 | 1992-01-07 | Valtion Teknillinen | Framstaellning av lackas genom rekombinantorganismer. |
| WO1992005249A1 (en) | 1990-09-13 | 1992-04-02 | Novo Nordisk A/S | Lipase variants |
| IL99552A0 (en) | 1990-09-28 | 1992-08-18 | Ixsys Inc | Compositions containing procaryotic cells,a kit for the preparation of vectors useful for the coexpression of two or more dna sequences and methods for the use thereof |
| EP0495257B1 (en) | 1991-01-16 | 2002-06-12 | The Procter & Gamble Company | Compact detergent compositions with high activity cellulase |
| US5292796A (en) | 1991-04-02 | 1994-03-08 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Urea-aldehyde condensates and melamine derivatives comprising fluorochemical oligomers |
| ES2085024T3 (es) | 1991-04-30 | 1996-05-16 | Procter & Gamble | Detergentes liquidos reforzados con complejo de acido borico-poliol para inhibir la enzima proteolitica. |
| EP0511456A1 (en) | 1991-04-30 | 1992-11-04 | The Procter & Gamble Company | Liquid detergents with aromatic borate ester to inhibit proteolytic enzyme |
| DE69226182T2 (de) | 1991-05-01 | 1999-01-21 | Novo Nordisk A/S, Bagsvaerd | Stabilisierte enzyme und waschmittelzusammensetzungen |
| US5340735A (en) | 1991-05-29 | 1994-08-23 | Cognis, Inc. | Bacillus lentus alkaline protease variants with increased stability |
| RU2108320C1 (ru) | 1991-12-13 | 1998-04-10 | Дзе Проктер Энд Гэмбл Компани | Активатор пероксида водорода и композиция для отбеливания или дезинфекции на его основе |
| DK28792D0 (da) | 1992-03-04 | 1992-03-04 | Novo Nordisk As | Nyt enzym |
| DK72992D0 (da) | 1992-06-01 | 1992-06-01 | Novo Nordisk As | Enzym |
| DK88892D0 (da) | 1992-07-06 | 1992-07-06 | Novo Nordisk As | Forbindelse |
| JP3678309B2 (ja) | 1992-07-23 | 2005-08-03 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 突然変異α−アミラーゼ、洗剤、皿洗い剤及び液化剤 |
| EP0583534B1 (en) | 1992-08-14 | 1997-03-05 | The Procter & Gamble Company | Liquid detergents containing a peptide aldehyde |
| ATE262035T1 (de) | 1992-10-06 | 2004-04-15 | Novozymes As | Zellulosevarianten |
| ES2202320T3 (es) | 1992-12-23 | 2004-04-01 | Novozymes A/S | Enzima con actividad de endoglucanasa. |
| DK0867504T4 (da) | 1993-02-11 | 2011-08-29 | Genencor Int | Oxidativ stabil alfa-amylase |
| KR950702240A (ko) | 1993-04-27 | 1995-06-19 | 한스 발터 라벤 | 세제로의 이용을 위한 새로운 리파제 변형체 |
| FR2704860B1 (fr) | 1993-05-05 | 1995-07-13 | Pasteur Institut | Sequences de nucleotides du locus cryiiia pour le controle de l'expression de sequences d'adn dans un hote cellulaire. |
| DK52393D0 (ja) | 1993-05-05 | 1993-05-05 | Novo Nordisk As | |
| JP2859520B2 (ja) | 1993-08-30 | 1999-02-17 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | リパーゼ及びそれを生産する微生物及びリパーゼ製造方法及びリパーゼ含有洗剤組成物 |
| WO1995010603A1 (en) | 1993-10-08 | 1995-04-20 | Novo Nordisk A/S | Amylase variants |
| CA2173946A1 (en) | 1993-10-13 | 1995-04-20 | Anders Hjelholt Pedersen | H2o2-stable peroxidase variants |
| JPH07143883A (ja) | 1993-11-24 | 1995-06-06 | Showa Denko Kk | リパーゼ遺伝子及び変異体リパーゼ |
| DE4343591A1 (de) | 1993-12-21 | 1995-06-22 | Evotec Biosystems Gmbh | Verfahren zum evolutiven Design und Synthese funktionaler Polymere auf der Basis von Formenelementen und Formencodes |
| US5605793A (en) | 1994-02-17 | 1997-02-25 | Affymax Technologies N.V. | Methods for in vitro recombination |
| ATE222604T1 (de) | 1994-02-22 | 2002-09-15 | Novozymes As | Methode zur herstellung einer variante eines lipolytischen enzymes |
| DK1921147T3 (da) | 1994-02-24 | 2011-09-19 | Henkel Ag & Co Kgaa | Forbedrede enzymer og detergenter indeholdende disse |
| DE69534513T2 (de) | 1994-03-08 | 2006-07-27 | Novozymes A/S | Neuartige alkalische zellulasen |
| EP0751991A1 (en) | 1994-03-22 | 1997-01-08 | The Procter & Gamble Company | Protease enzyme manufacture using non-protein protease inhibitors |
| NL9401048A (nl) | 1994-03-31 | 1995-11-01 | Stichting Scheikundig Onderzoe | Haloperoxidasen. |
| AU2524695A (en) | 1994-05-04 | 1995-11-29 | Genencor International, Inc. | Lipases with improved surfactant resistance |
| ATE206460T1 (de) | 1994-06-03 | 2001-10-15 | Novo Nordisk Biotech Inc | Gereinigte myceliophthora laccasen und nukleinsäuren dafür kodierend |
| AU2884595A (en) | 1994-06-20 | 1996-01-15 | Unilever Plc | Modified pseudomonas lipases and their use |
| WO1996000292A1 (en) | 1994-06-23 | 1996-01-04 | Unilever N.V. | Modified pseudomonas lipases and their use |
| WO1996000787A1 (en) | 1994-06-30 | 1996-01-11 | Novo Nordisk Biotech, Inc. | Non-toxic, non-toxigenic, non-pathogenic fusarium expression system and promoters and terminators for use therein |
| EP1995303A3 (en) | 1994-10-06 | 2008-12-31 | Novozymes A/S | Enzyme preparation with endoglucanase activity |
| BE1008998A3 (fr) | 1994-10-14 | 1996-10-01 | Solvay | Lipase, microorganisme la produisant, procede de preparation de cette lipase et utilisations de celle-ci. |
| KR970707275A (ko) | 1994-10-26 | 1997-12-01 | 안네 제케르 | 지질분해 활성을 갖는 효소(an enzyme with lipolytic activity) |
| AR000862A1 (es) | 1995-02-03 | 1997-08-06 | Novozymes As | Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del |
| JPH08228778A (ja) | 1995-02-27 | 1996-09-10 | Showa Denko Kk | 新規なリパーゼ遺伝子及びそれを用いたリパーゼの製造方法 |
| CN102080070B (zh) | 1995-03-17 | 2016-01-20 | 诺沃奇梅兹有限公司 | 新的内切葡聚糖酶 |
| EP0824585B1 (en) | 1995-05-05 | 2009-04-22 | Novozymes A/S | Protease variants and compositions |
| CN1194003A (zh) | 1995-07-14 | 1998-09-23 | 诺沃挪第克公司 | 得自Curvularia verruculosa的卤过氧化物酶和编码该酶的核酸 |
| DE69633825T2 (de) | 1995-07-14 | 2005-11-10 | Novozymes A/S | Modifiziertes enzym mit lipolytischer aktivität |
| DE19528059A1 (de) | 1995-07-31 | 1997-02-06 | Bayer Ag | Wasch- und Reinigungsmittel mit Iminodisuccinaten |
| JP4068142B2 (ja) | 1995-08-11 | 2008-03-26 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 新規の脂肪分解酵素 |
| US6008029A (en) | 1995-08-25 | 1999-12-28 | Novo Nordisk Biotech Inc. | Purified coprinus laccases and nucleic acids encoding the same |
| US5763385A (en) | 1996-05-14 | 1998-06-09 | Genencor International, Inc. | Modified α-amylases having altered calcium binding properties |
| AU3938997A (en) | 1996-08-26 | 1998-03-19 | Novo Nordisk A/S | A novel endoglucanase |
| EP1726644A1 (en) | 1996-09-17 | 2006-11-29 | Novozymes A/S | Cellulase variants |
| US6180586B1 (en) | 1996-09-24 | 2001-01-30 | The Procter & Gamble Company | Liquid laundry detergent compositions containing proteolytic enzyme and protease inhibitors |
| WO1998013458A1 (en) | 1996-09-24 | 1998-04-02 | The Procter & Gamble Company | Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors |
| CN1238002A (zh) | 1996-09-24 | 1999-12-08 | 普罗格特-甘布尔公司 | 含有蛋白水解酶、肽醛和硼酸源的液体洗涤剂 |
| CA2266497C (en) | 1996-09-24 | 2002-12-31 | John Mcmillan Mciver | Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors |
| EP0929639B1 (en) | 1996-09-24 | 2002-11-13 | The Procter & Gamble Company | Liquid detergents containing proteolytic enzyme, peptide aldehyde and calcium ions |
| CA2265734A1 (en) | 1996-10-08 | 1998-04-16 | Novo Nordisk A/S | Diaminobenzoic acid derivatives as dye precursors |
| CA2268772C (en) | 1996-10-18 | 2008-12-09 | The Procter & Gamble Company | Detergent compositions comprising an amylolytic enzyme and a cationic surfactant |
| KR100561826B1 (ko) | 1996-11-04 | 2006-03-16 | 노보자임스 에이/에스 | 섭틸라제 변종과 조성물 |
| DE69739020D1 (de) | 1996-11-04 | 2008-11-13 | Novozymes As | Subtilase varianten und verbindungen |
| WO1999001544A1 (en) | 1997-07-04 | 1999-01-14 | Novo Nordisk A/S | FAMILY 6 ENDO-1,4-β-GLUCANASE VARIANTS AND CLEANING COMPOSIT IONS CONTAINING THEM |
| BR9810548A (pt) | 1997-07-07 | 2000-08-15 | Novo Nordisk As | Preparação de enzima, xiloglucanase, molécula isolada de polinucleotìdeo, vetor de expressão, célula cultivada, polipeptìdeo isolado, processos para produzir um polipeptìdeo tendo atividade de xiloglucanase e para tratamento de tecidos em máquina, enzima isolada tendo atividade de xiloglucanase, composição detergente, e, uso da preparação de enzima ou da enzima |
| EP1009815B1 (en) | 1997-08-29 | 2008-01-30 | Novozymes A/S | Protease variants and compositions |
| KR20010015754A (ko) | 1997-10-13 | 2001-02-26 | 한센 핀 베네드, 안네 제헤르, 웨이콥 마리안느 | α-아밀라제 변이체 |
| US5955310A (en) | 1998-02-26 | 1999-09-21 | Novo Nordisk Biotech, Inc. | Methods for producing a polypeptide in a bacillus cell |
| JP4047545B2 (ja) | 1998-06-10 | 2008-02-13 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 新規マンナナーゼ |
| JP2003530440A (ja) | 1998-10-13 | 2003-10-14 | ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー | 洗剤組成物または成分 |
| AU6188599A (en) | 1998-10-26 | 2000-05-15 | Novozymes A/S | Constructing and screening a dna library of interest in filamentous fungal cells |
| WO2000056900A2 (en) | 1999-03-22 | 2000-09-28 | Novo Nordisk Biotech, Inc. | Promoter sequences derived from fusarium venenatum and uses thereof |
| KR20010108379A (ko) | 1999-03-31 | 2001-12-07 | 피아 스타르 | 리파제 변이체 |
| EP2336331A1 (en) | 1999-08-31 | 2011-06-22 | Novozymes A/S | Novel proteases and variants thereof |
| CA2394971C (en) | 1999-12-15 | 2016-01-19 | Novozymes A/S | Subtilase variants having an improved wash performance on egg stains |
| EP1259594B1 (en) * | 2000-02-24 | 2009-02-18 | Novozymes A/S | Family 44 xyloglucanases |
| WO2001066712A2 (en) | 2000-03-08 | 2001-09-13 | Novozymes A/S | Variants with altered properties |
| WO2001079458A2 (en) | 2000-04-14 | 2001-10-25 | Novozymes A/S | Polypeptides having haloperoxidase activity |
| WO2001079463A2 (en) | 2000-04-14 | 2001-10-25 | Novozymes A/S | Nucleic acids encoding polypeptides having haloperoxidase activity |
| AU2001246407A1 (en) | 2000-04-14 | 2001-10-30 | Maxygen, Inc. | Nucleic acids encoding polypeptides having haloperoxidase activity |
| WO2001079462A2 (en) | 2000-04-14 | 2001-10-25 | Novozymes A/S | Nucleic acids encoding polypeptides having haloperoxidase activity |
| CA2408406C (en) | 2000-06-02 | 2014-07-29 | Novozymes A/S | Cutinase variants |
| EP1370648A2 (en) | 2000-08-01 | 2003-12-17 | Novozymes A/S | Alpha-amylase mutants with altered properties |
| CN1337553A (zh) | 2000-08-05 | 2002-02-27 | 李海泉 | 地下观光游乐园 |
| AR030462A1 (es) | 2000-08-21 | 2003-08-20 | Novozymes As | Novedosas enzimas subtilasas que tienen una reducida tendencia hacia su inhibicion por las sustancias presentes en los huevos |
| WO2002099091A2 (en) | 2001-06-06 | 2002-12-12 | Novozymes A/S | Endo-beta-1,4-glucanase from bacillus |
| DK200101090A (da) | 2001-07-12 | 2001-08-16 | Novozymes As | Subtilase variants |
| WO2003012036A2 (en) | 2001-07-27 | 2003-02-13 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services | Systems for in vivo site-directed mutagenesis using oligonucleotides |
| GB0127036D0 (en) | 2001-11-09 | 2002-01-02 | Unilever Plc | Polymers for laundry applications |
| DE10162728A1 (de) | 2001-12-20 | 2003-07-10 | Henkel Kgaa | Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14393) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease |
| EP1520017A2 (en) | 2002-06-26 | 2005-04-06 | Novozymes A/S | Subtilases and subtilase variants having altered immunogenicity |
| TWI319007B (en) | 2002-11-06 | 2010-01-01 | Novozymes As | Subtilase variants |
| CA2529726A1 (en) | 2003-06-18 | 2005-01-13 | Unilever Plc | Laundry treatment compositions |
| GB0314210D0 (en) | 2003-06-18 | 2003-07-23 | Unilever Plc | Laundry treatment compositions |
| GB0314211D0 (en) | 2003-06-18 | 2003-07-23 | Unilever Plc | Laundry treatment compositions |
| JP4880469B2 (ja) | 2003-10-23 | 2012-02-22 | ノボザイムス アクティーゼルスカブ | 洗剤中で改良された安定性を有するプロテアーゼ |
| BRPI0416797A (pt) | 2003-11-19 | 2007-04-17 | Genencor Int | serina proteases, ácidos nucléicos codificando enzimas de serina e vetores e células hospedeiras incorporando as mesmas |
| DE602004031662D1 (de) | 2003-12-03 | 2011-04-14 | Procter & Gamble | Perhydrolase |
| CN101128579B (zh) | 2004-12-23 | 2013-10-02 | 诺维信公司 | α-淀粉酶变体 |
| CN101160385B (zh) | 2005-04-15 | 2011-11-16 | 巴斯福股份公司 | 具有内部聚氧化乙烯嵌段和外部聚氧化丙烯嵌段的两亲水溶性烷氧基化聚亚烷基亚胺 |
| PL1869155T3 (pl) | 2005-04-15 | 2011-03-31 | Procter & Gamble | Ciekłe kompozycje detergentu do prania ze zmodyfikowanymi polimerami polietylenoiminy oraz enzymem lipazy |
| CN101184835A (zh) | 2005-05-31 | 2008-05-21 | 宝洁公司 | 包含聚合物的洗涤剂组合物及其使用 |
| EP1904628B1 (en) | 2005-07-08 | 2011-10-19 | Novozymes A/S | Subtilase variants |
| KR20140027423A (ko) | 2005-10-12 | 2014-03-06 | 다니스코 유에스 인크. | 저장-안정성 중성 메탈로프로테아제의 용도 및 제조 |
| US8518675B2 (en) | 2005-12-13 | 2013-08-27 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Production of peracids using an enzyme having perhydrolysis activity |
| RU2479627C2 (ru) | 2006-01-23 | 2013-04-20 | Дзе Проктер Энд Гэмбл Компани | Композиции моющих средств |
| ES2960774T3 (es) | 2006-01-23 | 2024-03-06 | Procter & Gamble | Composiciones que contienen enzima y agente de matizado de tejidos |
| AR059153A1 (es) | 2006-01-23 | 2008-03-12 | Procter & Gamble | Una composicion que comprende una lipasa y un catalizador de blanqueador |
| ES2629334T3 (es) | 2006-01-23 | 2017-08-08 | Novozymes A/S | Variantes de lipasa |
| CN101370921B (zh) | 2006-01-23 | 2014-08-13 | 宝洁公司 | 包含脂肪酶和漂白催化剂的组合物 |
| AR059155A1 (es) | 2006-01-23 | 2008-03-12 | Procter & Gamble | Composiciones que comprenden enzimas y fotoblanqueadores |
| BRPI0707215A2 (pt) | 2006-01-23 | 2011-04-26 | Procter & Gamble | composições de detergentes |
| US8519060B2 (en) | 2006-05-31 | 2013-08-27 | Basf Se | Amphiphilic graft polymers based on polyalkylene oxides and vinyl esters |
| MX2008015593A (es) | 2006-06-05 | 2008-12-18 | Procter & Gamble | Estabilizacion de enzima. |
| US20080009431A1 (en) | 2006-06-05 | 2008-01-10 | Jean-Pol Boutique | Enzyme stabilization |
| DE202006009003U1 (de) | 2006-06-06 | 2007-10-25 | BROSE SCHLIEßSYSTEME GMBH & CO. KG | Kraftfahrzeugschloß |
| EP1867708B1 (en) | 2006-06-16 | 2017-05-03 | The Procter and Gamble Company | Detergent compositions |
| ATE503011T1 (de) | 2006-07-07 | 2011-04-15 | Procter & Gamble | Waschmittelzusammensetzungen |
| CA2689635C (en) | 2007-05-30 | 2016-07-12 | Danisco Us Inc. | Variants of an alpha-amylase with improved production levels in fermentation processes |
| DE602007013545D1 (de) | 2007-07-02 | 2011-05-12 | Procter & Gamble | Mehrkammerbeutel enthaltend Waschmittel |
| DE102007038031A1 (de) | 2007-08-10 | 2009-06-04 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Mittel enthaltend Proteasen |
| NZ584434A (en) | 2007-11-05 | 2011-12-22 | Danisco Us Inc | VARIANTS OF BACILLUS sp. TS-23 ALPHA-AMYLASE WITH ALTERED PROPERTIES |
| ES2568784T5 (es) | 2008-01-04 | 2023-09-13 | Procter & Gamble | Una composición detergente para lavado de ropa que comprende glicosil hidrolasa |
| US20090209447A1 (en) | 2008-02-15 | 2009-08-20 | Michelle Meek | Cleaning compositions |
| AR070490A1 (es) | 2008-02-29 | 2010-04-07 | Novozymes As | Polipeptidos de thermomyces lanuginosus con actividad de lipasa y polinucleotidos que los codifican |
| ES2807603T3 (es) | 2008-03-26 | 2021-02-23 | Novozymes As | Composiciones enzimáticas líquidas estabilizadas |
| WO2009148983A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition comprising a variant of a family 44 xyloglucanase |
| US8709777B2 (en) * | 2008-06-06 | 2014-04-29 | Novozymes A/S | Variants of a family 44 xyloglucanase |
| EP2169040B1 (en) | 2008-09-30 | 2012-04-11 | The Procter & Gamble Company | Liquid detergent compositions exhibiting two or multicolor effect |
| CN102209776B (zh) | 2008-11-13 | 2013-11-27 | 诺维信公司 | 洗涤剂组合物 |
| EP2367923A2 (en) | 2008-12-01 | 2011-09-28 | Danisco US Inc. | Enzymes with lipase activity |
| KR20110124242A (ko) | 2009-02-20 | 2011-11-16 | 다니스코 유에스 인크. | 발효 브로쓰 제형물 |
| WO2010100028A2 (en) | 2009-03-06 | 2010-09-10 | Huntsman Advanced Materials (Switzerland) Gmbh | Enzymatic textile bleach-whitening methods |
| EP2408805A2 (en) | 2009-03-18 | 2012-01-25 | Danisco US Inc. | Fungal cutinase from magnaporthe grisea |
| EP2411510A2 (en) | 2009-03-23 | 2012-02-01 | Danisco US Inc. | Cal a-related acyltransferases and methods of use, thereof |
| RU2639534C2 (ru) | 2009-09-25 | 2017-12-21 | Новозимс А/С | Применение вариантов протеазы |
| AU2010299799B2 (en) | 2009-09-25 | 2015-10-29 | Novozymes A/S | Subtilase variants |
| EP2480649A1 (en) | 2009-09-25 | 2012-08-01 | Novozymes A/S | Detergent composition |
| CN102712880A (zh) | 2009-12-21 | 2012-10-03 | 丹尼斯科美国公司 | 含有嗜热脂肪地芽孢杆菌脂肪酶的洗涤剂组合物及其使用方法 |
| WO2011084599A1 (en) | 2009-12-21 | 2011-07-14 | Danisco Us Inc. | Detergent compositions containing bacillus subtilis lipase and methods of use thereof |
| JP2013515139A (ja) | 2009-12-21 | 2013-05-02 | ダニスコ・ユーエス・インク | サーモビフィダ・フスカのリパーゼを含む洗剤組成物、及びその使用方法 |
| CN113186178A (zh) | 2010-02-10 | 2021-07-30 | 诺维信公司 | 在螯合剂存在下具有高稳定性的变体和包含变体的组合物 |
| GB2477914B (en) | 2010-02-12 | 2012-01-04 | Univ Newcastle | Compounds and methods for biofilm disruption and prevention |
| AR081423A1 (es) | 2010-05-28 | 2012-08-29 | Danisco Us Inc | Composiciones detergentes con contenido de lipasa de streptomyces griseus y metodos para utilizarlas |
| AR085845A1 (es) | 2011-04-08 | 2013-10-30 | Danisco Us Inc | Composiciones |
| CN103649307B (zh) | 2011-06-30 | 2020-03-27 | 诺维信公司 | α-淀粉酶变体 |
| CN112662734B (zh) | 2011-06-30 | 2024-09-10 | 诺维信公司 | 用于筛选α-淀粉酶的方法 |
| EP2674475A1 (en) | 2012-06-11 | 2013-12-18 | The Procter & Gamble Company | Detergent composition |
| WO2014087011A1 (en) | 2012-12-07 | 2014-06-12 | Novozymes A/S | Preventing adhesion of bacteria |
| CN112899086A (zh) | 2014-04-11 | 2021-06-04 | 诺维信公司 | 洗涤剂组合物 |
| CA2994356A1 (en) | 2015-10-07 | 2017-04-13 | Novozymes A/S | Compositions comprising dnase polypeptides |
| EP3387125B1 (en) | 2015-12-07 | 2022-10-12 | Henkel AG & Co. KGaA | Dishwashing compositions comprising polypeptides having beta-glucanase activity and uses thereof |
| MX2018008051A (es) | 2016-01-29 | 2018-08-23 | Novozymes As | Variantes de beta-glucanasa y polinucleotidos que las codifican. |
-
2021
- 2021-08-24 CN CN202180050488.7A patent/CN116323889A/zh active Pending
- 2021-08-24 BR BR112023003468A patent/BR112023003468A2/pt unknown
- 2021-08-24 EP EP21769102.1A patent/EP4204551A2/en active Pending
- 2021-08-24 JP JP2023512728A patent/JP2023538740A/ja active Pending
- 2021-08-24 US US18/042,282 patent/US20230313165A1/en active Pending
- 2021-08-24 WO PCT/EP2021/073379 patent/WO2022043321A2/en unknown
- 2021-08-24 MX MX2023001888A patent/MX2023001888A/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP4204551A2 (en) | 2023-07-05 |
| WO2022043321A3 (en) | 2022-04-28 |
| CN116323889A (zh) | 2023-06-23 |
| WO2022043321A2 (en) | 2022-03-03 |
| US20230313165A1 (en) | 2023-10-05 |
| BR112023003468A2 (pt) | 2023-04-11 |
| MX2023001888A (es) | 2023-03-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9988616B2 (en) | Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same | |
| KR20200071135A (ko) | 디스페르신 i을 함유하는 세정 조성물 | |
| CN109844110B (zh) | 黄原胶裂解酶变体以及编码它们的多核苷酸 | |
| CN113785039B (zh) | 具有β-葡聚糖酶活性的多肽、编码其的多核苷酸及其在清洁和洗涤剂组合物中的用途 | |
| AU2014286135A1 (en) | Polypeptides with xanthan lyase activity having anti-redeposition effect and polynucleotides encoding same | |
| US20190316107A1 (en) | Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same | |
| EP4225905A2 (en) | Alpha-amylase variants | |
| US20150353871A1 (en) | Polypeptides for Cleaning or Detergent Compositions | |
| JP2022524490A (ja) | α－アミラーゼ変異体及びこれをコードするポリヌクレオチド | |
| JP2019522988A (ja) | ペクチン酸リアーゼ変異体およびこれをコードするポリヌクレオチド | |
| US20220186151A1 (en) | Stabilized glycoside hydrolase variants | |
| JP2023520312A (ja) | 炭水化物結合モジュールバリアント | |
| EP4139431A1 (en) | Cleaning compositions comprising polypeptides having fructan degrading activity | |
| US11001821B2 (en) | Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same | |
| JP2023538740A (ja) | ファミリー４４キシログルカナーゼの変異体 | |
| US10837006B2 (en) | Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same | |
| US20170121643A1 (en) | Polypeptides having amylase activity and polynucleotides encoding same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20240806 |