JP2022526738A - アレルギーを治療するためのｉｌ－４／ｉｌ－１３経路阻害剤と形質細胞除去の組み合わせ - Google Patents

Abstract

本開示は、アレルギーを有する患者を選択すること、ならびに治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４受容体抗体またはその抗原結合フラグメント）を治療有効量の形質細胞を枯渇させる薬剤（例えば、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体）と組み合わせて投与することを含む、アレルギーを治療するための方法を提供する。特定の実施形態において、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体のような形質細胞除去剤は、ＩｇＥ＋形質細胞を含む形質細胞を除去する一方、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、新しいＩｇＥ＋形質細胞の生成を防ぎ、よって、患者のアレルゲン特異的ＩｇＥを排除する。

Description

関連出願の相互参照
この出願は、ＰＣＴ国際特許出願として２０２０年３月２０日に出願され、２０１９年３月２１日に出願された米国仮特許出願第６２／８２２，０２２号および２０２０年１月６日に出願された米国仮特許出願第６２／９５７，５５０号に対する優先権を主張しており、そのそれぞれの内容全体が、参照によって本明細書に組み入れられる。

本開示は、治療を必要とする対象に、治療有効量の形質細胞除去剤と組み合わせて、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を投与することを含む、アレルギーを治療するための方法に関する。

アレルギーおよびアレルギー性疾患は、時間と共に解消する生命を脅かさない反応から、アナフィラキシーのような生命を脅かす影響にまで及ぶ範囲の転帰を伴う深刻な病状である。アレルギー反応は、特定の食品、昆虫毒、植物由来の物質（例えば、花粉）、化学物質、薬物／医薬品、および動物の鱗屑のような様々な産物への接触または曝露から生じ得る。アレルギーの病態生理学は、免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）を介した感作、免疫系、および環境要因の間の複雑な相互作用によって影響される。アレルギーの現在の治療選択肢は、回避、薬理学的な症状の治療、およびアレルゲン特異的免疫療法（ＳＩＴ）を用いた予防を含む。残念ながら、これらの現在の治療戦略は、しばしば不十分で、費用がかかり、実用的でないか、重大なリスクを伴う。例えば、アレルゲンの回避は、常に可能であるとは限らず、患者と介護者の生活の質にネガティブな影響を与え得る。他方、免疫療法アプローチは、感受性の高い個人へのアレルゲンの意図的な投与を含み、したがって、望ましくない重度のアレルギー反応またはアナフィラキシーの可能性があり、本質的に危険である。

したがって、アレルギーまたはアレルギー反応を予防または治療し、アレルギー反応を発症するリスクを低減する新規の治療アプローチに対する満たされていない必要性が当技術分野に存在する。

一つの態様において、本開示は、対象におけるアレルギー、アレルギー反応、もしくはアレルギー性障害を治療するための方法、アレルギー反応の重症度を予防もしくは低減するための方法、またはアレルゲン特異的血清ＩｇＥを低減もしくは排除するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、対象（例えば、アレルギー、アレルギー性障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を有する対象）にＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤を投与することを含む。

特定の実施形態において、本開示は、（ａ）アレルギー性疾患もしくは障害、肥満細胞活性化障害または肥満細胞症を有する対象を選択すること；ならびに（ｂ）それを必要とする対象に、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および治療有効量の形質細胞除去剤を投与することを含む、アレルギーを治療する方法、またはアレルギー反応の重症度を予防もしくは低減する方法を含む。

特定の実施形態において、本開示は、（ａ）アレルギー性疾患もしくは障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を有する対象を選択すること；ならびに（ｂ）それを必要とする対象に、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤を投与することを含む、アレルギーを治療する方法、またはアレルギー反応の重症度を予防もしくは低減する方法を含む。

特定の実施形態において、本開示は、（ａ）アレルギー性疾患もしくは障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を有する対象であって、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の１つまたはそれ以上の用量を含むバックグラウンド治療レジメンを受けている対象を選択すること；ならびに（ｂ）少なくとも１用量の形質細胞除去剤を投与することを含む、アレルギーを治療する方法、またはアレルギー反応の重症度を予防もしくは低減するための方法を含む。

一つの実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の投与は、新しいＩｇＥ＋形質細胞の生成を防ぎ、形質細胞除去剤の投与は、骨髄に存在するＩｇＥ＋形質細胞の排除を導き、よって、アレルゲン特異的血清ＩｇＥを排除する。

特定の実施形態において、本開示は、アレルギーを有する対象における免疫療法レジメンの有効性および／または耐容性を増大させるための方法を含む。いくつかの実施形態では、本方法は、免疫療法レジメンの前または同時に、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、免疫療法レジメンは、経口免疫療法（ＯＩＴ）レジメンである。いくつかの実施形態では、免疫療法レジメンは、皮下免疫療法（ＳＣＩＴ）レジメンである。いくつかの実施形態では、免疫療法は、食物アレルゲン（例えば、ピーナッツアレルゲン）のためのアレルゲン特異的免疫療法レジメンである。いくつかの実施形態では、免疫療法は、環境アレルゲンに対するアレルゲン特異的免疫療法レジメンである。

本明細書に開示される方法の一つの実施形態において、アレルギー性疾患または障害は、アレルギー性喘息、枯草熱、慢性蕁麻疹、食物アレルギー、花粉アレルギー、および環境アレルゲンによるアレルギーから成る群から選択される。一つの実施形態では、対象はアレルゲンによるアナフィラキシーのリスクがある。一つの実施形態では、対象は季節性のアレルギーを有する。一つの実施形態では、対象は重度のアレルギーを有する。一つの実施形態において、対象は、ミルク、乳製品、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、果物、大豆、魚、甲殻類、砂糖、ピーナッツ、マメ科植物、木の実、ほこり、チリダニ、花粉、昆虫毒、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属、家庭用クリーナー、洗剤、薬、化粧品、香水、ペニシリン、スルホンアミド、サリチル酸塩のような薬剤、治療用モノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ）、ブタクサ、草、およびカバノキから成る群から選択された１つまたはそれ以上のアレルゲンによるアレルギーを有する。一つの実施形態では、アレルゲンは、ミルク、乳製品、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、果物、大豆、魚、甲殻類、砂糖、ピーナッツ、マメ科植物、および木の実から成る群から選択される食品中に含まれる。一つの実施形態では、アレルゲンは、ほこり、チリダニ、花粉、昆虫毒、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属、家庭用クリーナー、洗剤、薬、化粧品、香水、ペニシリン、スルホンアミド、サリチル酸塩のような薬剤、治療用モノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ）、ブタクサ、草、およびカバノキから成る群から選択される非食物アレルゲンである。

本明細書に開示される方法の一つの実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４抗体、抗ＩＬ－１３抗体、抗ＩＬ－４／ＩＬ－１３二重特異性抗体、ＩＬ－４受容体（ＩＬ－４Ｒ）阻害剤、ＩＬ－４トラップ、ＩＬ－１３トラップ、および抗ＩＬ－４Ｒ抗体から成る群から選択される。一つの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４抗体（例えば、パスコリズマブ）である。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－１３抗体（例えば、トラロキヌマブ、レブリキズマブ、デクトレクマブ、ＧＳＫ６７９５８６、またはＭＥＤＩ７８３６）である。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４／ＩＬ－１３二重特異性抗体（例えば、ロミルキマブ）である。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、ＩＬ－４Ｒ阻害剤（例えば、ピトラキンラまたは抗ＩＬ－４Ｒ抗体のようなＩＬ－４ミューテイン）である。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４Ｒ抗体である。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、ＩＬ－４トラップまたはＩＬ－１３トラップである。

一つの実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントである。一つの実施形態において、抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、３つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、ならびに３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、ここで：ＨＣＤＲ１は配列番号３のアミノ酸配列を有し；ＨＣＤＲ２は配列番号４のアミノ酸配列を有し；ＨＣＤＲ３は配列番号５のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ１は配列番号６のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ２は配列番号７のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ３は配列番号８のアミノ酸配列を有する。別の実施形態において、抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含む。別の実施形態において、抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、重鎖および軽鎖を含み、ここで、重鎖は配列番号９のアミノ酸配列を有する。別の実施形態では、抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、重鎖および軽鎖を含み、軽鎖は配列番号１０のアミノ酸配列を有する。別の実施形態において、抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、重鎖および軽鎖を含み、ここで、重鎖は配列番号９のアミノ酸配列を有し、軽鎖は配列番号１０のアミノ酸配列を有する。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、デュピルマブまたはその生物学的同等物である。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、デュピルマブ、パスコリズマブ、ＡＭＧ３１７、ＭＥＤＩ２０４５、ＭＥＤＩ９３１４、トラロキヌマブ、レブリクジマブ、アンルキンズマブ、デクトレクマブ、ＧＳＫ６７９５８６、ＭＥＤＩ７８３６、ロミルキマブ、ＩＬ－４トラップ、ＩＬ－１３トラップ、ＡＥＲ－００３、およびピトラキンラから成る群から選択される。

本明細書に開示される方法の一つの実施形態では、形質細胞除去剤は、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）標的化剤、プロテアソーム阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、Ｂ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ）阻害剤、および増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ；ＣＤ２５６）の阻害剤から成る群から選択される。一つの実施形態では、ＢＣＭＡ標的化剤は、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体、ＢＣＭＡに対するキメラ抗原受容体、および細胞障害性薬物にコンジュゲートした抗ＢＣＭＡ抗体から成る群から選択される。

一つの実施形態では、形質細胞除去剤は、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントであり、（ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン；および（ｂ）ＣＤ３に特異的に結合する２番目の抗原結合ドメインを含む。一つの実施形態では、第１の抗原結合ドメインは、配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と共に含まれる３つの重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）；ならびに配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）と共に含まれる３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含む。さらなる実施形態において、ＨＣＤＲ１は配列番号１４のアミノ酸配列を有し；ＨＣＤＲ２は配列番号１６のアミノ酸配列を有し；ＨＣＤＲ３は配列番号１８のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ１は配列番号２２のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ２は配列番号２４のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ３は配列番号２６のアミノ酸配列を有する。別の実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、配列番号２８および３６から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と共に含まれる３つの重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）；ならびに配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）と共に含まれる３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含む。さらなる実施形態において、ＨＣＤＲ１は配列番号３０または３８のアミノ酸配列を有し；ＨＣＤＲ２は配列番号３２または４０のアミノ酸配列を有し；ＨＣＤＲ３は配列番号３４または４２のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ１は配列番号２２のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ２は配列番号２４のアミノ酸配列を有し；ＬＣＤＲ３は配列番号２６のアミノ酸配列を有する。一つの実施形態において、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下を含む：（ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合し、３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここで６つのＣＤＲ、ＨＣＤＲ１－ＨＣＤＲ２－ＨＣＤＲ３－ＬＣＤＲ１－ＬＣＤＲ２－ＬＣＤＲ３は、配列番号１４－１６－１８－２２－２４－２６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）ＣＤ３に特異的に結合し、３つの重鎖ＣＤＲと３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここで６つのＣＤＲ、ＨＣＤＲ１－ＨＣＤＲ２－ＨＣＤＲ３－ＬＣＤＲ１－ＬＣＤＲ２－ＬＣＤＲ３は、配列番号３０－３２－３４－２２－２４－２６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合ドメインを含む。一つの実施形態において、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下を含む：（ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合し、３つの重鎖ＣＤＲおよび３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここで６つのＣＤＲ、ＨＣＤＲ１－ＨＣＤＲ２－ＨＣＤＲ３－ＬＣＤＲ１－ＬＣＤＲ２－ＬＣＤＲ３は、配列番号１４－１６－１８－２２－２４－２６のアミノ酸配列を含む、第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）ＣＤ３に特異的に結合し、３つの重鎖ＣＤＲと３つの軽鎖ＣＤＲを含み、ここで６つのＣＤＲ、ＨＣＤＲ１－ＨＣＤＲ２－ＨＣＤＲ３－ＬＣＤＲ１－ＬＣＤＲ２－ＬＣＤＲ３は、配列番号３８－４０－４２－２２－２４－２６のアミノ酸配列を含む、第２の抗原結合ドメイン。一つの実施形態では、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下を含む：（ａ）配列番号１２のＨＣＶＲおよび配列番号２０のＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）配列番号２８のＨＣＶＲおよび配列番号２０のＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。一つの実施形態では、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下を含む：（ａ）配列番号１２のＨＣＶＲおよび配列番号２０のＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）配列番号３６のＨＣＶＲおよび配列番号２０のＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。

一つの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、形質細胞除去剤の前に投与される。一つの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、形質細胞除去剤の後に投与される。一つの実施形態では、形質細胞除去剤と組み合わせたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の投与は、ＩｇＥ産生を遮断し、単剤療法としていずれかの治療薬で治療された対象と比較して、患者の血清からアレルゲン特異的ＩｇＥを排除する。

別の実施形態において、１つまたはそれ以上の用量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、１つまたはそれ以上の用量の形質細胞除去剤と組み合わせて投与される。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の少なくとも１つの用量は、対象の体重１ｋｇあたり約０．１から約５０ｍｇを含む。別の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の少なくとも１つの用量は、約０．０５から約６００ｍｇの阻害剤を含む。別の実施形態において、形質細胞除去剤の少なくとも１つの用量は、対象の体重１ｋｇあたり約０．１ｍｇから約２０ｍｇを含む。別の実施形態において、形質細胞除去剤の少なくとも１つの用量は、約０．０５から約５００ｍｇの薬剤を含む。

別の実施形態において、本方法は、少なくとも１つの追加の治療薬または治療法を施すことをさらに含む。別の実施形態において、追加の治療薬または治療法は、ＩｇＥアンタゴニスト、抗ヒスタミン薬、抗炎症薬、コルチコステロイド、ロイコトリエンアンタゴニスト、肥満細胞阻害薬、気管支拡張薬、充血除去薬、エピネフリン、ＩＬ－１アンタゴニスト、ＩＬ－５アンタゴニスト、ＩＬ－３１アンタゴニスト、ＩＬ－３３アンタゴニスト、ＩＬ－２５アンタゴニスト、インターフェロンγ、ＴＮＦアンタゴニスト、および／またはＴＳＬＰアンタゴニストを含む。

一つの態様において、本開示は、アレルギーを有する対象におけるアレルギー、アレルギー反応もしくはアレルギー性障害を治療するため、アレルギー反応の重症度を予防もしくは低減するため、対象のアレルゲン特異的血清ＩｇＥを低減もしくは排除するため、または免疫療法レジメンの有効性および／もしくは耐容性を高めるための、医薬組成物および組み合わせを提供する。いくつかの実施形態において、医薬組成物または組み合わせは、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）および形質細胞除去剤（例えば、ＢＣＭＡ標的化剤）を含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物または組み合わせは、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）および治療有効量の形質細胞除去剤（例えば、ＢＣＭＡ標的化剤）を含む。いくつかの実施形態において、医薬組成物または組み合わせは、治療量以下の用量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）および／または形質細胞除去剤（例えば、ＢＣＭＡ標的化剤）を含む。

さらに別の態様では、本開示は、アレルギーを有する対象におけるアレルギー、アレルギー反応もしくはアレルギー性障害を治療するため、アレルギー反応の重症度を予防もしくは低減するため、対象のアレルゲン特異的血清ＩｇＥを低減もしくは排除するため、または免疫療法レジメンの有効性および／もしくは耐容性を高めるための、医薬品の製造におけるＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）および形質細胞除去剤（例えば、ＢＣＭＡ標的化剤）の使用を提供する。いくつかの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤の一方または両方が、治療有効量で使用される。いくつかの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤の一方または両方が、治療量以下の用量で使用される。

図１は、実施例１に記載された試験に従うヒョウヒダニ（ＨＤＭ）曝露および抗体治療プロトコールの概略図である。 図２Ａは、実施例１に記載された試験に従って、ＨＤＭに１１週間曝露した後、１週間安静にさせた、生理食塩水、抗体なし、アイソタイプ対照抗体、ＲＥＧＮ５４５９（抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）、ＲＥＧＮ１１０３（抗ＩＬ－４Ｒ抗体）、またはＲＥＧＮ５４５９とＲＥＧＮ１１０３の組み合わせのいずれかで処置したマウスにおける血清ＩｇＥレベルを示している。アスタリスク（^＊）は、アイソタイプ対照（ＩｇＧ）と比較した統計的有意性の程度を示している。 図２Ｂは、実施例１に記載された試験に従って、ＨＤＭに１１週間曝露した後、６週間安静にさせた、生理食塩水、抗体なし、アイソタイプ対照抗体、ＲＥＧＮ５４５９（抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）、ＲＥＧＮ１１０３（抗ＩＬ－４Ｒ抗体）、またはＲＥＧＮ５４５９とＲＥＧＮ１１０３の組み合わせのいずれかで処置したマウスにおける血清ＩｇＥレベルを示している。アスタリスク（^＊）は、アイソタイプ対照（ＩｇＧ）と比較した統計的有意性の程度を示している。 図３は、実施例２に記載された試験に従うＨＤＭ曝露および抗体治療プロトコールの概略図である。 図４Ａは、実施例２に記載された試験に従うＨＤＭへの継続的な曝露、および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体（ＲＥＧＮ５４５９）またはアイソタイプ対照（ＲＥＧＮ４４６０）による治療の１週間後のマウスにおけるＨＤＭ特異的血清ＩｇＥレベルを示している。アスタリスク（^＊）は、アイソタイプ対照（ＩｇＧ）と比較した統計的有意性の程度を示している。ＬＬＯＱ＝定量の下限。 図４Ｂは、実施例２に記載された試験に従うＨＤＭへの継続的な曝露、および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体（ＲＥＧＮ５４５９）またはアイソタイプ対照（ＲＥＧＮ４４６０）による治療の３週間後のマウスにおけるＨＤＭ特異的血清ＩｇＥレベルを示している。アスタリスク（^＊）は、アイソタイプ対照（ＩｇＧ）と比較した統計的有意性の程度を示している。 図４Ｃは、実施例２に記載された試験に従うＨＤＭへの継続的な曝露、および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体（ＲＥＧＮ５４５９）またはアイソタイプ対照（ＲＥＧＮ４４６０）による治療の５週間後のマウスにおけるＨＤＭ特異的血清ＩｇＥレベルを示している。アスタリスク（^＊）は、アイソタイプ対照（ＩｇＧ）と比較した統計的有意性の程度を示している。 図５は、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体の投与の５週間後における、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体および抗ＩＬ－４Ｒα抗体の単独または組み合わせのＩｇＥ骨髄形質細胞に対する効果を示している。アスタリスク（^＊）は、アイソタイプ対照（ＩｇＧ）と比較した統計的有意性の程度を示している；^＊ｐ≦０．０５；^＊＊ｐ≦０．０１；^＊＊＊ｐ≦０．００１；^＊＊＊＊ｐ≦０．０００１。 図６は、実施例４に記載された試験に従うＨＤＭ曝露および抗体治療プロトコールの概略図である。 図７は、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体および抗ＩＬ－４Ｒα抗体の単独または組み合わせの血清ＨＤＭ特異的ＩｇＥレベルに対する効果を示している。治療群は実施例４および表７に記載されており、Ａ群（生理食塩水）、Ｂ群（１２週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｃ群（１５週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｄ群（１５週間のＨＤＭ、アイソタイプ対照抗体）、Ｅ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）、Ｆ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）、ならびにＧ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）である。挿入図に示されているように、統計的有意性は処置群間で比較されている。ｎｓ＝統計的に有意ではない；^＊ｐ≦０．０５；^＊＊ｐ≦０．０１；^＊＊＊ｐ≦０．００１；^＊＊＊＊ｐ≦０．０００１。ＬＬＯＱ＝定量の下限。 図８Ａ～８Ｄは、総骨髄形質細胞（図８Ａ）、ＩｇＥ骨髄形質細胞（図８Ｂ）、総脾臓形質細胞（図８Ｃ）、およびＩｇＥ脾臓形質細胞（図８Ｄ）に対する抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体単独または抗ＩＬ－４Ｒα抗体との組み合わせの効果を示している。治療群は実施例４および表７に記載されており、Ａ群（生理食塩水）、Ｂ群（１２週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｃ群（１５週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｄ群（１５週間のＨＤＭ、アイソタイプ対照抗体）、Ｅ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）、Ｆ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）、ならびにＧ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）である。挿入図に示されているように、統計的有意性は処置群間で比較されている。ｎｓ＝統計的に有意ではない；^＊ｐ≦０．０５；^＊＊ｐ≦０．０１；^＊＊＊ｐ≦０．００１；^＊＊＊＊ｐ≦０．０００１。 図８Ａ～８Ｄは、総骨髄形質細胞（図８Ａ）、ＩｇＥ骨髄形質細胞（図８Ｂ）、総脾臓形質細胞（図８Ｃ）、およびＩｇＥ脾臓形質細胞（図８Ｄ）に対する抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体単独または抗ＩＬ－４Ｒα抗体との組み合わせの効果を示している。治療群は実施例４および表７に記載されており、Ａ群（生理食塩水）、Ｂ群（１２週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｃ群（１５週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｄ群（１５週間のＨＤＭ、アイソタイプ対照抗体）、Ｅ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）、Ｆ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）、ならびにＧ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）である。挿入図に示されているように、統計的有意性は処置群間で比較されている。ｎｓ＝統計的に有意ではない；^＊ｐ≦０．０５；^＊＊ｐ≦０．０１；^＊＊＊ｐ≦０．００１；^＊＊＊＊ｐ≦０．０００１。 図８Ａ～８Ｄは、総骨髄形質細胞（図８Ａ）、ＩｇＥ骨髄形質細胞（図８Ｂ）、総脾臓形質細胞（図８Ｃ）、およびＩｇＥ脾臓形質細胞（図８Ｄ）に対する抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体単独または抗ＩＬ－４Ｒα抗体との組み合わせの効果を示している。治療群は実施例４および表７に記載されており、Ａ群（生理食塩水）、Ｂ群（１２週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｃ群（１５週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｄ群（１５週間のＨＤＭ、アイソタイプ対照抗体）、Ｅ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）、Ｆ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）、ならびにＧ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）である。挿入図に示されているように、統計的有意性は処置群間で比較されている。ｎｓ＝統計的に有意ではない；^＊ｐ≦０．０５；^＊＊ｐ≦０．０１；^＊＊＊ｐ≦０．００１；^＊＊＊＊ｐ≦０．０００１。 図８Ａ～８Ｄは、総骨髄形質細胞（図８Ａ）、ＩｇＥ骨髄形質細胞（図８Ｂ）、総脾臓形質細胞（図８Ｃ）、およびＩｇＥ脾臓形質細胞（図８Ｄ）に対する抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体単独または抗ＩＬ－４Ｒα抗体との組み合わせの効果を示している。治療群は実施例４および表７に記載されており、Ａ群（生理食塩水）、Ｂ群（１２週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｃ群（１５週間のＨＤＭ、抗体なし）、Ｄ群（１５週間のＨＤＭ、アイソタイプ対照抗体）、Ｅ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）、Ｆ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体）、ならびにＧ群（１５週間のＨＤＭ、抗ＩＬ－４Ｒα抗体および抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）である。挿入図に示されているように、統計的有意性は処置群間で比較されている。ｎｓ＝統計的に有意ではない；^＊ｐ≦０．０５；^＊＊ｐ≦０．０１；^＊＊＊ｐ≦０．００１；^＊＊＊＊ｐ≦０．０００１。

本開示は、記載された特定の方法および実験条件に限定されないことが、そのような方法および条件は変化し得るため、理解されるべきである。また、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としており、限定することを意図するものではなく、本開示の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることも理解されるべきである。

特に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての技術的および科学的な用語は、本開示の属する当該技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書において使用される場合、「約」という用語は、特定の記載された数値に関して使用される場合、その値が記載された値から１％以下だけ変化し得ることを意味する。例えば、本明細書で使用される場合、「約１００」という表現は、９９および１０１、ならびにその間の全ての値（例えば、９９．１、９９．２、９９．３、９９．４など）を含む。

本明細書中で記載されるものと類似もしくは等価なあらゆる方法および材料が本開示の実施において使用され得るが、好ましい方法および材料がこれから記述される。

イントロダクション
アナフィラキシーを含むアレルギー症状は、肥満細胞の脱顆粒を誘発し得るエフェクター細胞（肥満細胞および好塩基球）上のＦｃεＲに結合したアレルゲン特異的ＩｇＥのアレルゲン誘発性架橋によって引き起こされる。アレルギー性の個体において、循環ＩｇＥは骨髄の抗体分泌細胞と、クラススイッチして新しいＩｇＥ産生細胞を産生するＢ細胞から発生する。骨髄に蓄積する抗体分泌細胞は長寿命であり、アレルゲンが存在しない場合においても、アレルゲン特異的ＩｇＥの供給源となる。さらに、アレルゲン特異的ＩｇＥは、少なくとも以下によって証明されるように、個体において長命であり得る：（１）ＩｇＥは、アレルゲンの非存在下でアトピー患者において維持される（Ｌｕｇｅｒら、Ａｌｌｅｒｇｏｌ Ｉｎｔ ２０１０年、５９：１～８頁）；（２）アレルギーは、アトピー患者から非アトピー個体への骨髄移植の際に、前者から後者に移行し得る（Ｇａｒｚｏｒｚら、Ｊ Ｅｕｒ Ａｃａｄ Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｖｅｎｅｒｅｏｌ ２０１６年、３０：１１３６～１１３９頁；Ｈａｌｌｓｔｒａｎｄら、Ｂｌｏｏｄ ２００４年、１０４：３０８６～３０９０頁）；および（３）血清ＩｇＥは、ＩｇＥ＋ Ｂ細胞除去アプローチでは患者において消滅しない（Ｇａｕｖｒｅａｕら、Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ２０１４年、６：２４３ｒａ８５）。

初期の研究において、本開示の発明者らは、抗ＩＬ－４Ｒ抗体による治療が、アレルゲン誘発性肺炎症のマウスモデルにおいて、Ｂ細胞のＩｇＥ産生形質細胞へのクラススイッチと分化を防ぐが、慢性的なアレルゲン曝露における骨髄中のＩｇＥ＋形質細胞には影響を与えないことを観察した。したがって、本発明者らは、長寿命の形質細胞（ＩｇＥ＋形質細胞を含む）を標的にした除去と組み合わせたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤による治療が、骨髄におけるＩｇＥ＋形質細胞と同様に、新たに生成されたＩｇＥ＋形質細胞からのＩｇＥ産生の遮断を導き得ると仮定した。本明細書に示されるように、この治療の組み合わせは、アレルゲン（ＨＤＭ）誘発性２型肺炎症の動物モデルにおけるアレルゲン特異的ＩｇＥの産生を有意に低減させるか、または完全に遮断することができる。したがって、このような治療薬の組み合わせは、アトピー性の対象におけるアレルギー性疾患の治療にも有用となり得る。

アレルギーの治療方法
一つの態様において、本開示は、慢性アレルゲン誘発性肺炎症モデルにおいて、形質細胞除去剤（例えば、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体）と組み合わせたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒ抗体）の投与が、対象の血清中におけるアレルゲン特異的ＩｇＥの完全な排除をもたらしたという、本発明者らによって得られた驚くべき結果に関する。

したがって、いくつかの実施形態において、本開示は、対象における少なくとも１つのアレルギーの症状または徴候の重症度を治療、改善、または低減するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、対象におけるアレルギー反応の重症度を予防または低減するための方法を提供する。一つの態様において、開示される方法は、アレルギー性疾患または障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を有する対象を選択すること、ならびに治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４抗体、抗ＩＬ－１３抗体、抗ＩＬ－４／ＩＬ－１３二重特異性抗体、ＩＬ－４受容体（ＩＬ－４Ｒ）阻害剤、抗ＩＬ－４Ｒ抗体、または本明細書に記載のその他の「ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤」）および治療有効量の形質細胞除去剤（例えば、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体、または本明細書に記載のその他の「形質細胞除去剤」）をそれを必要とする対象に投与することを含む。

本開示において、任意の特定の抗ＩＬ－４Ｒ抗体および／または任意の特定の形質細胞除去剤への言及は、代表的なＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および代表的な形質細胞除去剤をそれぞれ説明するために提供され、他のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤の組み合わせもまた使用され得ることから、本開示の範囲を制限はしない。

本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療的」などの用語は、対象におけるアレルギー症状を軽減すること、一時的または永続的にアレルギー症状の原因を排除すること、またはアレルギー症状の出現を予防または遅らせることを意味する。本明細書で使用される用語はまた、アレルギー反応を防ぐためにアレルゲン特異的血清ＩｇＥを低減または無効化することを含む。いくつかの実施形態において、これらの用語は、本開示の方法によって提供される形質細胞除去剤と組み合わせたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の投与時に、ベースラインと比較して、血清アレルゲン特異的ＩｇＥのレベルを少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％またはそれ以上減少させることを指す。特定の実施形態において、これらの用語は、本開示の方法によって提供される形質細胞除去剤と組み合わせたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の投与時に、ベースラインと比較して、血清アレルゲン特異的ＩｇＥのレベルを下げることを指す。

本明細書で使用される場合、「それを必要とする対象」という表現は、アレルギーまたはアトピーの１つまたはそれ以上の症状または徴候を示す、および／またはアレルゲンに対するアレルギーと診断されたヒトまたは非ヒト動物を意味する。「対象」および「患者」という用語は、本明細書では交換可能に使用される。特定の実施形態において、「それを必要とする対象」という用語はアレルギー、またはアレルゲンに対するアレルギー反応を発症するリスクが高い対象を含む。特定の実施形態において、本用語は、１つまたはそれ以上のアレルゲンに対してアレルゲン感作を示す対象を含む。特定の実施形態において、本開示の方法は、総ＩｇＥ、アレルゲン特異的ＩｇＥ、胸腺および活性化調節ケモカイン（ＴＡＲＣ）、肺および活性化調節ケモカイン（ＰＡＲＣ）、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）、および／またはペリオスチンを含むがこれらに限定されない、１つまたはそれ以上の血清バイオマーカーの上昇したレベルを示す対象を治療するために使用され得る。例えば、いくつかの実施形態において、本開示の方法は、上昇したレベルのアレルゲン特異的血清ＩｇＥを有する患者に、形質細胞除去剤と組み合わせてＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を投与することを含む。

「それを必要とする対象」という用語はまた、アレルギー性喘息、枯草熱、慢性蕁麻疹、食物アレルギー、花粉アレルギー、および環境（非食物）アレルゲンによるアレルギーから成る群から選択されるアレルギー性疾患または障害を有する対象を含む。この用語はまた、１つまたはそれ以上のアレルゲンによる重度のアレルギーに苦しむ対象も含む。例えば、いくつかの実施形態では、対象がアナフィラキシーの症状（例えば、呼吸困難／喘鳴、舌の腫れ、喉の腫れ／圧迫感、会話の困難および／または嗄声、喘鳴または持続性の咳、吐き気／嘔吐、持続性のめまい、虚脱、または意識喪失）のようなアレルギー反応の１つまたはそれ以上の重度の症状を示している場合、対象は「重度の」アレルギーを有する。

特定の実施形態において、「それを必要とする対象」という用語は、アレルギー反応に感受性であるか、またはアレルゲンに対するアレルギー反応を発症するリスクが高い対象を含む。例えば、この用語は、ピーナッツまたはペニシリンのようなアレルゲンによるアナフィラキシーのリスクがある対象を含む。特定の実施形態において、対象は、前記アレルゲンに対する感作のために、アレルギーまたはアレルゲンに対するアレルギー反応を発症するリスクが高い場合がある。例えば、本用語は、１つまたはそれ以上のアレルゲン、例えば１つまたはそれ以上の食物アレルゲンおよび／または環境アレルゲンに対して特異的な血清ＩｇＥの増加したレベル（「アレルゲン感作」）を示す対象を含む。いくつかの実施形態において、対象は（例えば、食物アレルゲンもしくは環境アレルゲン、または、ミルク、乳製品、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、果物、大豆、魚、甲殻類、砂糖、ピーナッツ、マメ科植物、木の実、ほこり、チリダニ、花粉、昆虫毒、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属、家庭用クリーナー、洗剤、薬、化粧品、香水、ペニシリン、スルホンアミド、サリチル酸塩のような薬剤、治療用モノクローナル抗体、ブタクサ、草、およびカバノキから成る群から選択されるアレルゲンのような、本明細書に開示される１つまたはそれ以上のアレルゲンについて）少なくとも約０．３５ｋＵ／Ｌのアレルゲン特異的ＩｇＥレベルを有する。本開示の文脈において、「それを必要とする対象」という用語はまた、アトピー性疾患を有する対象、およびアトピー性皮膚炎、喘息、アレルギー性鼻炎、好酸球性食道炎および食物アレルギーから成る群から選択される疾患または障害を有する対象も含む。「対象」という用語はまた、アレルギー反応を発症する増加したリスクを有し得る、血清総ＩｇＥおよびアレルゲン特異的ＩｇＥ、または血清ケモカイン（例えば、ＣＣＬ１７またはＣＣＬ２７）のレベルが上昇している対象も含む。一つの態様において、本開示は、感受性の高い対象においてアレルギーまたはアレルギー反応を発症するリスクを減らすための方法を提供する。

本明細書で使用される場合、「アレルギー応答」、「アレルギー反応」、「アレルギー症状」などの用語は、蕁麻疹（例えば、発疹）、血管浮腫、鼻炎、喘息、嘔吐、くしゃみ、鼻水、副鼻腔炎、涙目、喘鳴、気管支痙攣、最大呼気流量（ＰＥＦ）の低下、胃腸障害、紅潮、唇の腫れ、舌の腫れ、血圧低下、アナフィラキシー、および臓器の機能不全／障害から成る群から選択される１つまたはそれ以上の徴候または症状を含む。「アレルギー応答」、「アレルギー反応」、「アレルギー症状」などはまた、例えば、ＩｇＥ産生の増加および／またはアレルゲン特異的免疫グロブリン産生の増加のような免疫学的応答および反応を含む。

本明細書で使用される「アレルゲン」という用語は、感受性のある個体のアレルギー反応を刺激することができる任意の物質、化学物質、粒子または組成物を含む。アレルゲンは、例えば、乳製品（例えば、牛乳）、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、大豆、魚、甲殻類、糖（例えば、アルファガラクトースのような肉に存在する糖）、ピーナッツ、他のマメ科植物（例えば、豆、エンドウ豆、大豆など）、および木の実のような食品に含まれ得る、または食品に由来し得る；食品に含まれる、または食品に由来するアレルゲンは、本明細書では「食物アレルゲン」と呼ばれる。あるいは、アレルゲンは、例えば、ほこり（例えば、チリダニを含む）、花粉、昆虫の毒（例えば、ミツバチ、ハチ、蚊、ヒアリなどの毒）、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属（例えば、ニッケル）、家庭用クリーナー、洗剤、医薬品、化粧品（例えば、香水など）、薬剤（例えば、ペニシリン、スルホンアミド、サリチル酸塩など）、治療用モノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ）、ブタクサ、草およびカバノキのような屋内または屋外の環境アレルゲンといった非食品に含まれるか、または非食品に由来してもよい。例示的な花粉アレルゲンは、例えば、カバノキ花粉、ヒマラヤスギ花粉、オーク花粉、アルダー花粉、ホーンビーム花粉、エスキュラス花粉、ヤナギ花粉、ポプラ花粉、プランタヌス花粉、ティリア花粉、オレア花粉、アッシュジュニパー花粉、およびアルストニア・スコラリ（Ａｌｓｔｏｎｉａ ｓｃｈｏｌａｒｉｓ）花粉のような樹木花粉を含む。アレルゲンの他の例は、本明細書の他の場所に見出され得る。

本開示は、それを必要とする対象に、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、本明細書に記載の抗ＩＬ－４Ｒ抗体）を、治療有効量の形質細胞除去剤（例えば、本明細書に記載の抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体）と組み合わせて投与することを含む、重度のアレルギーを含むアレルギーを治療するための方法、またはアレルギー反応の重症度を予防または低減するための方法を含む。いくつかの実施形態において、開示される方法は、アレルギー性疾患または障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を標的とする。一つの実施形態では、アレルギー性疾患またはアレルギー性障害は、アレルギー性喘息、枯草熱、慢性蕁麻疹、食物アレルギー、花粉アレルギー、および環境（非食物）アレルゲンによるアレルギーから成る群から選択される。いくつかの実施形態において、アレルギー性疾患は食物アレルギー、例えば、ピーナッツアレルギーである。いくつかの実施形態において、アレルギー性疾患は、重度の食物アレルギーである。

特定の実施形態によれば、本開示は、（ａ）アレルギー性疾患もしくは障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を有する患者であって、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の１つまたはそれ以上の用量を含むバックグラウンド治療レジメンを受けている患者を選択すること；ならびに（ｂ）少なくとも１用量の形質細胞除去剤を投与することを含む、アレルギーを治療する方法、またはアレルギー反応の重症度を予防または低減するための方法を含む。この態様において、本方法は、アレルゲン特異的ＩｇＥの血清レベルを低減することにおけるＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の治療効果を高める。特定の実施形態において、患者は、１つまたはそれ以上の用量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路を含む治療レジメンを受けており、１つまたはそれ以上の用量の形質細胞除去剤を投与されて、それにより、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の抗アレルギー効果が増強される。

いくつかの実施形態において、開示される方法は、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および治療有効量の形質細胞除去剤を、追加の治療薬または治療法（例えば、レジメンまたは手順）と組み合わせて投与することを含む。追加の治療薬または治療法は、抗アレルギー効果を高めるため、１つまたはそれ以上の治療法の毒性効果を低減するため、および／または１つまたはそれ以上の治療法の投与量を低減するために投与され得る。様々な実施形態において、追加の治療薬または治療法は、１つまたはそれ以上のＩｇＥアンタゴニスト、抗ヒスタミン薬、抗炎症薬、コルチコステロイド、ロイコトリエンアンタゴニスト、肥満細胞阻害薬、気管支拡張薬、充血除去薬、エピネフリン、ＩＬ－１アンタゴニスト、ＩＬ－５アンタゴニスト、ＩＬ－３１アンタゴニスト、ＩＬ－３３アンタゴニスト、ＩＬ－２５アンタゴニスト、インターフェロンγ、ＴＮＦアンタゴニスト、およびＴＳＬＰアンタゴニストを含み得る。

追加の治療薬は、例えば、別のＩＬ－４Ｒアンタゴニスト、ＩＬ－１アンタゴニスト（例えば、米国特許第６，９２７，０４４号に記載のＩＬ－１アンタゴニストを含む）、ＩＬ－６アンタゴニスト、ＩＬ－６Ｒアンタゴニスト（例えば、米国特許第７，５８２，２９８号に記載の抗ＩＬ－６Ｒ抗体を含む）、ＩＬ－１３アンタゴニスト、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニスト、ＩＬ－８アンタゴニスト、ＩＬ－９アンタゴニスト、ＩＬ－１７アンタゴニスト、ＩＬ－５アンタゴニスト、ＩｇＥアンタゴニスト（例えば、オマリズマブのような抗ＩｇＥ抗体）、ＣＤ４８アンタゴニスト、ＩＬ－３１アンタゴニスト（例えば、米国特許第７，５３１，６３７号に記載されているものを含む）、胸腺間質リンホポイエチン（ＴＳＬＰ）アンタゴニスト（例えば、米国２０１１／０２７４６８に記載されているものを含む）、インターフェロン－ガンマ（ＩＦＮγ）、抗生物質、局所コルチコステロイド、タクロリムス、ピメクロリムス、シクロスポリン、アザチオプリン、メトトレキサート、クロモリンナトリウム、プロテイナーゼ阻害剤、全身性コルチコステロイド、全身性免疫療法、抗ヒスタミン薬、またはそれらの組み合わせであり得る。

特定の実施形態において、開示される治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および治療有効量の形質細胞除去剤を投与する方法は、未治療の対象または単剤療法としていずれかの阻害剤で治療された対象と比較して、１つまたはそれ以上のアレルギーの症状または適応症の低減または抑制を導く。

特定の実施形態において、開示される方法は、治療された対象におけるアレルゲン特異的ＩｇＥの低減、好ましくは完全な排除を導く。例えば、開示される治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および治療有効量の形質細胞除去剤を投与する方法は、未治療の対象または単剤療法としていずれかの阻害剤で治療された対象と比較して、治療された対象におけるアレルゲン特異的ＩｇＥの血清レベルの少なくとも約５０％、約６０％、約７０％または約８０％以上の減少を促進する。特定の実施形態において、開示される方法は、単剤療法としていずれかの薬剤で治療された対象と比較して、治療された対象におけるアレルゲン特異的血清ＩｇＥの完全な排除を導く。

特定の実施形態によれば、対象は、１つまたはそれ以上の用量の形質細胞除去剤（例えば、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体）と組み合わせた１つまたはそれ以上の用量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒ抗体）の投与後に、１つまたはそれ以上のアレルゲンに特異的な血清ＩｇＥのレベルの減少を示し得る。例えば、形質細胞除去剤と組み合わせた抗ＩＬ－４Ｒ抗体（例えば、デュピルマブ）の１つまたはそれ以上の用量の投与後、約８日目、１５日目、２２日目、２５日目、２９日目、３６日目、４３日目、５０日目、５７日目、６４日目、７１日目、８５日目、または１１２日目において、本開示によれば、対象は、ベースラインから約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％またはそれ以上のアレルゲン特異的ＩｇＥの減少を示し得る（ここで、「ベースライン」は、最初の投与直前の対象におけるアレルゲン特異的ＩｇＥのレベルとして定義される）。

血清中のアレルゲン特異的ＩｇＥまたは総ＩｇＥを検出および／または定量化するための方法は、当技術分野で知られている；そのようなものを測定するためのキットは、様々な商業的供給元から入手可能である；また、様々な商業的に診断に関わる研究所が、そのようなレベルの測定を同様に提供するサービスを提供している。

例えば、ファディアトープ（商標）は、アレルギー感作のスクリーニングのために導入された血清特異的または抗原特異的ＩｇＥアッセイ試験の商業的に利用可能な変種である（Ｍｅｒｒｅｔｔら、１９８７年、Ａｌｌｅｒｇｙ １７：４０９～４１６頁）。この試験は、一般的な吸入アレルギーを引き起こす関連するアレルゲンの混合物に対する血清特異的ＩｇＥの同時試験を提供する。この試験は、得られた蛍光反応に応じて、陽性または陰性の定性的な結果を与える。患者のサンプルが参照以上の蛍光反応を与える場合、陽性の試験結果が指し示される。蛍光反応が低い患者サンプルは、陰性の試験結果を指し示す。本開示は、陽性の試験結果を示す対象を選択すること、および形質細胞除去剤と組み合わせて治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を対象に投与することを含む方法を含む。

特定の実施形態において、投与された治療薬の組み合わせは、単剤療法としていずれかの治療薬で治療された対象と比較して、有害な副作用の増加が無いように、安全で、対象によって十分に耐容される。

ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤
本明細書に開示される方法は、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を、それを必要とする対象に投与することを含む。本明細書で使用される場合、「ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤」（本明細書では「ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路アンタゴニスト」、「ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路遮断薬」などとも呼ばれる）は、以下のうちの少なくとも１つを阻害または減弱させる任意の薬剤である：（ｉ）ＩＬ－４および／もしくはＩＬ－１３のそれぞれの受容体への結合；（ｉｉ）ＩＬ－４および／もしくはＩＬ－１３のシグナル伝達および／もしくは活性；ならびに／または（ｉｉｉ）ＩＬ－４および／もしくはＩＬ－１３のそれぞれの受容体への結合から生じる下流のシグナル伝達／活性。例示的なＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４抗体（例えば、米国特許第７，７４０，８４３号、および米国特許出願公開第２０１０／０２９７１１０号および第２０１６／０２０７９９５号に開示されている抗体）、抗ＩＬ－１３抗体（例えば、米国特許第７，５０１，１２１号、第７，６７４，４５９号、第７，８０７，７８８号、第７，９１０，７０８号、第７，９１５，３８８号、第７，９３５，３４３号、第８，０８８，６１８号、第８，６９１，２３３号、および第９，６０５，０６５号、米国特許出願公開第２００６／００７３１４８号および第２００８／００４４４２０号、ならびにＥＰ２６２７６７３Ｂ１に開示されている抗体）、ＩＬ－４およびＩＬ－１３に結合する二重特異性抗体（例えば、米国特許第８，３８８，９６５号に開示されている抗体、ならびに米国特許出願公開第２０１１／０００８３４５号、第２０１３／０２５１７１８号、および第２０１６／０２０７９９５号）、ならびにＩＬ－４受容体（ＩＬ－４Ｒ）阻害剤（以下に記載）を含むが、これらに限定されない。本明細書において引用されたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を同定する刊行物の部分は、参照によって本明細書に組み入れられる。

いくつかの実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗体、低分子化合物、核酸、ポリペプチド、またはそれらの機能的フラグメントまたはバリアントであり得る。適切なＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤抗体の非限定的な例は、抗ＩＬ－４抗体、抗ＩＬ－１３抗体、および抗ＩＬ－４／ＩＬ－１３二重特異性抗体、抗ＩＬ－４Ｒ抗体、ならびに前述の抗体の任意の抗原結合フラグメントを含む。適切なＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の他の非限定的な例は、抗ＩＬ－４ ＲＮＡｉ分子および抗ＩＬ－１３ ＲＮＡｉのようなＲＮＡｉ分子、抗ＩＬ－４アンチセンスＲＮＡおよび抗ＩＬ－１３アンチセンスＲＮＡのようなアンチセンス分子、ならびにドミナントネガティブＩＬ－４タンパク質、ドミナントネガティブＩＬ－１３タンパク質のようなドミナントネガティブタンパク質を含む。

本明細書で使用される場合、「ＩＬ－４Ｒ阻害剤」（本明細書では「ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤」、「ＩＬ－４Ｒαアンタゴニスト」、「ＩＬ－４Ｒ遮断薬」、「ＩＬ－４Ｒα遮断薬」などとも呼ばれる）は、ＩＬ－４ＲαまたはＩＬ－４Ｒリガンドに結合または相互作用し、１型および／または２型ＩＬ－４受容体の通常の生物学的シグナル伝達機能を阻害または減弱させる任意の薬剤である。１型ＩＬ－４受容体は、ＩＬ－４Ｒα鎖とγｃ鎖を含む二量体の受容体である。２型ＩＬ－４受容体は、ＩＬ－４Ｒα鎖とＩＬ－１３Ｒα１鎖を含む二量体の受容体である。１型ＩＬ－４受容体はＩＬ－４と相互作用して刺激される一方、２型ＩＬ－４受容体はＩＬ－４とＩＬ－１３の両方と相互作用して刺激される。したがって、本開示の方法において使用され得るＩＬ－４Ｒ阻害剤は、ＩＬ－４媒介シグナル伝達、ＩＬ－１３媒介シグナル伝達、またはＩＬ－４およびＩＬ－１３媒介シグナル伝達の両方を遮断することによって機能し得る。したがって、本開示のＩＬ－４Ｒ阻害剤は、ＩＬ－４および／またはＩＬ－１３と、１型または２型受容体との相互作用を防ぎ得る。

ＩＬ－４Ｒ阻害剤のカテゴリーの非限定的な例は、ＩＬ－４ミューテイン（例えば、ピトラキンラ）、低分子ＩＬ－４Ｒ阻害剤、抗ＩＬ－４Ｒアプタマー、ペプチドベースのＩＬ－４Ｒ阻害剤（例えば、「ペプチボディ」分子）、「レセプターボディ」（例えば、ＩＬ－４Ｒ成分のリガンド結合ドメインを含む改変された分子）、およびヒトＩＬ－４Ｒαに特異的に結合する抗体または抗体の抗原結合フラグメントを含む。本明細書で使用される場合、ＩＬ－４Ｒ阻害剤はまた、ＩＬ－４および／またはＩＬ－１３に特異的に結合する抗原結合タンパク質も含む。

本開示の文脈で使用され得る適切なＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の他の非限定的な例は、例えば、ピトラキンラ（ＡＥＲ－００１；ＢＡＹ－１６－９９９６）、エアロダーム（ＡＥＲ－００３）、および当技術分野でデュピルマブ、パスコリズマブ、ＡＭＧ－３１７、ＭＩＬＲ１４４４Ａ、ＣＡＴ－３５４、ＱＡＸ５７６、アンルキンズマブ（ＩＭＡ－６３８）、ＩＳＩＳ－３６９６４５（ＡＩＲ－６４５）、ＩＭＡ－０２６、ＡＰＧ－２０１、ＣＮＴＯ－６０７、ＭＫ－６１０５、ＭＥＤＩ９３１４、ＭＥＤＩ２０４５、トラロキヌマブ、レブリキズマブ、ロミルキマブ、およびＤＯＭ－０９１０と呼ばれ、知られている抗体を含む。

抗ＩＬ－４Ｒα抗体およびその抗原結合フラグメント
本開示の特定の例示的な実施形態によれば、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４Ｒα抗体またはその抗原結合フラグメントである。本開示を通して使用される「抗体」という用語は、ジスルフィド結合によって相互に連結された４つのポリペプチド鎖、２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む免疫グロブリン分子、ならびにそれらの多量体（例えば、ＩｇＭ）を含む。典型的な抗体では、各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＨＣＶＲまたはＶ_Ｈと略される）および重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は３つのドメイン、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３を含む。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＬＣＶＲまたはＶ_Ｌと略される）および軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメイン（Ｃ_Ｌ１）を含む。Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに細分化でき、そこにはフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存された領域が散在している。各Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌは、３つのＣＤＲと４つのＦＲで構成され、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序で配置されている。本開示の異なる実施形態において、抗体（またはその抗原結合部分）のＦＲは、ヒト生殖系列配列と同一であっても、または自然に、もしくは人工的に改変されていてもよい。アミノ酸コンセンサス配列は、２つまたはそれ以上のＣＤＲのサイド－バイ－サイド分析に基づいて定義され得る。

本開示を通して使用される「抗体」という用語は、その抗原結合フラグメント、すなわち、抗体分子全体の抗原結合フラグメントを含む。本開示を通して使用される、抗体の「抗原結合部分」、抗体の「抗原結合フラグメント」などの用語は、天然に存在する、酵素的に得られる、合成の、または遺伝子改変された、抗原に特異的に結合して複合体を形成する任意のポリペプチドもしくは糖タンパク質を含む。抗体の抗原結合フラグメントは、例えば、タンパク質分解などの任意の適切な標準的技法、または抗体可変ドメイン、場合により定常ドメインをコードするＤＮＡの操作および発現を含む組換え遺伝子工学技術を使用して、全長の抗体分子から得られ得る。そのようなＤＮＡは既知であり、および／または、例えば、商業的供給源、ＤＮＡライブラリー（例えば、ファージ抗体ライブラリーを含む）から容易に入手可能であるか、または合成され得る。ＤＮＡは化学的に、または分子生物学的手法を使用して、配列決定され、操作されて、例えば、１つまたはそれ以上の可変ドメインおよび／または定数ドメインを適切な構成に配置してもよく、あるいはコドンを導入、システイン残基を作製、アミノ酸を修飾、追加、もしくは削除などしてもよい。

抗原結合フラグメントの非限定的な例は、（ｉ）Ｆａｂフラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント；（ｉｉｉ）Ｆｄフラグメント。（ｉｖ）Ｆｖフラグメント；（ｖ）単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子；（ｖｉ）ｄＡｂフラグメント；および（ｖｉｉ）抗体の超可変領域を模倣するアミノ酸残基から成る最小認識ユニット（例えば、ＣＤＲ３ペプチドのような単離された相補性決定領域（ＣＤＲ））、または拘束されたＦＲ３－ＣＤＲ３－ＦＲ４ペプチドを含む。ドメイン特異的抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン欠失抗体、キメラ抗体、ＣＤＲグラフト化抗体、ダイアボディ、トライアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ（例えば、一価ナノボディ、二価ナノボディなど）、小型モジュラー免疫医薬品（ＳＭＩＰ）、およびサメ可変ＩｇＮＡＲドメインのような他の改変分子も、本開示全体で使用される「抗原結合フラグメント」という表現に含まれる。

抗体の抗原結合フラグメントは、典型的には少なくとも１つの可変ドメインを含むであろう。可変ドメインは、任意のサイズまたはアミノ酸組成であり得るが、一般に、１つまたはそれ以上のフレームワーク配列に隣接するか、インフレームとなる少なくとも１つのＣＤＲを含む。Ｖ_Ｌドメインに関連するＶ_Ｈドメインを有する抗原結合フラグメントにおいて、Ｖ_ＨドメインとＶ_Ｌドメインは、任意の適切な配置で互いに対して配置され得る。例えば、可変領域は二量体であってもよく、Ｖ_Ｈ－Ｖ_Ｈ、Ｖ_Ｈ－Ｖ_ＬまたはＶ_Ｌ－Ｖ_Ｌ二量体を含み得る。あるいは、抗体の抗原結合フラグメントは、単量体のＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインを含み得る。

特定の実施形態において、抗体の抗原結合フラグメントは、少なくとも１つの定常ドメインに共有結合した少なくとも１つの可変ドメインを含み得る。本開示の抗体の抗原結合フラグメント内に見出され得る可変ドメインおよび定常ドメインの非限定的で例示的な構成は、（ｉ）Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ１；（ｉｉ）Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ２；（ｉｉｉ）Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ３；（ｉｖ）Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２；（ｖ）Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３；（ｖｉ）Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３；（ｖｉｉ）Ｖ_Ｈ－Ｃ_Ｌ；（ｖｉｉｉ）Ｖ_Ｌ－Ｃ_Ｈ１；（ｉｘ）Ｖ_Ｌ－Ｃ_Ｈ２；（ｘ）Ｖ_Ｌ－Ｃ_Ｈ３；（ｘｉ）Ｖ_Ｌ－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２；（ｘｉｉ）Ｖ_Ｌ－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３；（ｘｉｉｉ）Ｖ_Ｌ－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３；および（ｘｉｖ）Ｖ_Ｌ－Ｃ_Ｌを含む。上に列挙された例示的な構成のいずれかを含む、可変ドメインおよび定常ドメインの任意の構成において、可変ドメインおよび定常ドメインは、互いに直接連結されていても、または完全または部分的なヒンジまたはリンカー領域によって連結されていてもよい。ヒンジ領域は、単一のポリペプチド分子内の隣接する可変および／または定常ドメイン間のフレキシブルまたはセミフレキシブル連結をもたらす少なくとも２つ（例えば、５、１０、１５、２０、４０、６０またはそれ以上）のアミノ酸からなり得る。さらに、本開示の抗体の抗原結合フラグメントは、（例えば、ジスルフィド結合によって）互いに、および／または１つもしくはそれ以上の単量体Ｖ_ＨまたはＶ_Ｌドメインと非共有結合した、上に列挙された可変および定常ドメイン構成のいずれかのホモ二量体またはヘテロ二量体（または他の多量体）を含んでいてもよい。

本開示を通して使用される「抗体」という用語はまた、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体も含む。多重特異性抗体または抗体の抗原結合フラグメントは、典型的には、少なくとも２つの異なる可変ドメインを含み、ここで、各可変ドメインは、別個の抗原または同じ抗原上の異なるエピトープに特異的に結合することができる。任意の多重特異性抗体のフォーマットが、当技術分野で利用可能な日常的な技法を使用して、本開示の抗体または抗体の抗原結合フラグメントの文脈での使用に適合され得る。例えば、本開示は、免疫グロブリンの一方のアームがＩＬ－４Ｒαまたはそのフラグメントに特異的であり、免疫グロブリンの他方のアームが第２の治療標的に特異的であるか、または治療薬物部分にコンジュゲートされている、二重特異性抗体の使用を含む方法を含む。本開示の文脈で使用され得る例示的な二重特異性フォーマットは、限定はされないが、例えば、ｓｃＦｖベースのフォーマットまたはダイアボディ二重特異性フォーマット、ＩｇＧ－ｓｃＦｖフュージョン、デュアル可変ドメイン（ＤＶＤ）－Ｉｇ、クアドローマ、ノブ・イントゥ・ホール（ｋｎｏｂｓ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅｓ）、共通軽鎖（例えば、ノブ・イントゥ・ホールを有する共通軽鎖など）、クロスＭａｂ、クロスＦａｂ、（シード）ボディ、ロイシンジッパー、デュオボディ、ＩｇＧ１／ＩｇＧ２、二重作用性Ｆａｂ（ＤＡＦ）－ＩｇＧ、およびＭａｂ^２二重特異性フォーマット（前述のフォーマットの総説については、例えば、Ｋｌｅｉｎら、２０１２年、ｍＡｂｓ ４（６）：６５３～６６３頁、およびそこに引用されている参考文献を参照）を含む。二重特異性抗体は、ペプチド／核酸結合を使用して構築することもでき、例えば、直交性の化学反応性を持つ非天然アミノ酸を使用して、定義された組成、結合価、および形状を持つ多量体複合体へと自己集合する、部位特異的な抗体－オリゴヌクレオチドコンジュゲートを生成することができる。（例えば、Ｋａｚａｎｅら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０１３年，１３５（１）：３４０～４６頁を参照）。

本開示の方法で使用される抗体は、ヒト抗体であり得る。本開示を通して使用される「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変および定常領域を有する抗体を含むことが意図される。本開示のヒト抗体はそれでもなお、例えばＣＤＲ、特にＣＤＲ３中にヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのランダムまたは部位特異的な突然変異誘発またはｉｎ ｖｉｖｏでの体細胞突然変異によって導入される変異）を含み得る。しかしながら、本開示を通して使用される「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体を含むことは意図されない。

本開示の方法で使用される抗体は、組換えヒト抗体であり得る。本開示を通して使用される「組換えヒト抗体」という用語は、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクター（以下でさらに説明される）を使用して発現された抗体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリー（以下でさらに説明される）から単離された抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子のトランスジェニック動物（例えば、マウス）から単離された抗体（例えば、Ｔａｙｌｏｒら、（１９９２年）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、２０：６２８７～６２９５頁を参照）、またはヒト免疫グロブリン遺伝子配列を他のＤＮＡ配列にスプライシングすることを含む任意の他の手段によって調製、発現、作製、または単離された抗体のような、組換え法によって調製、発現、作製、または単離される全てのヒト抗体を含むことが意図されている。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変および定常領域を有する。しかしながら、特定の実施形態では、そのような組換えヒト抗体は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ突然変異誘発（または、ヒトＩｇ配列のトランスジェニック動物が使用される場合は、ｉｎ ｖｉｖｏ体細胞突然変異誘発）に供され、したがって、組換え抗体のＶ_ＨおよびＶ_Ｌ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ配列に由来し、関連しているが、ｉｎ ｖｉｖｏのヒト抗体生殖細胞系列レパートリー内に天然には存在しない可能性がある配列である。

特定の実施形態によれば、本開示の方法で使用される抗体は、ＩＬ－４Ｒαに特異的に結合する。「特異的に結合する」などの用語は、抗体またはその抗原結合フラグメントが、生理学的条件下で比較的安定な複合体を抗原と形成することを意味する。抗体が抗原に特異的に結合するかどうかを決定するための方法は、当技術分野で周知であり、例えば、平衡透析、表面プラズモン共鳴などを含む。例えば、いくつかの実施形態では、本開示の文脈で使用されるＩＬ－４Ｒαに「特異的に結合する」抗体は、表面プラズモン共鳴アッセイで測定した場合、約５００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満、約９０ｎＭ未満、約８０ｎＭ未満、約７０ｎＭ未満、約６０ｎＭ未満、約５０ｎＭ未満、約４０ｎＭ未満、約３０ｎＭ未満、約２０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約４ｎＭ未満、約３ｎＭ未満、約２ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、または約０．５ｎＭ未満のＫ_ＤでＩＬ－４Ｒαまたはその一部に結合する抗体を含む。しかしながら、ヒトＩＬ－４Ｒαに特異的に結合する単離された抗体は、他の（非ヒト）種由来のＩＬ－４Ｒα分子のような、他の抗原に対して交差反応性を有していてもよい。

本開示の特定の例示的な実施形態によれば、参照により本明細書に組み入れられる米国特許第７，６０８，６９３号に記載されている抗ＩＬ－４Ｒ抗体のアミノ酸配列のいずれかを含む、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）、および／または相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４Ｒα抗体またはその抗原結合フラグメントである。特定の例示的な実施形態において、本開示の方法の文脈で使用され得る抗ＩＬ－４Ｒα抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）、および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を含む。特定の実施形態によれば、抗ＩＬ－４Ｒα抗体またはその抗原結合フラグメントは、３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）ならびに３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含み、ここで、ＨＣＤＲ１は配列番号３のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ２は配列番号４のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ３は配列番号５のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ１は配列番号６のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ２は配列番号７のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ３は配列番号８のアミノ酸配列を含む。さらに他の実施形態では、抗ＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１を含むＨＣＶＲおよび配列番号２を含むＬＣＶＲを含む。特定の実施形態において、本開示の方法は、抗ＩＬ－４Ｒ抗体の使用を含み、ここで、抗体は配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態において、抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む例示的な抗体は、デュピルマブ（デュピクセント（商標））として知られる完全ヒト抗ＩＬ－４Ｒ抗体である。特定の例示的な実施形態によれば、本開示の方法は、デュピルマブまたはその生物学的同等物の使用を含む。デュピルマブに関する「生物学的同等物」という用語は、単回投与または複数回投与のいずれかの同様な実験条件下において同じモル用量で投与された場合にデュピルマブの吸収率および／または吸収の程度と有意な差を示さない医薬品同等物または医薬品代替物である、抗ＩＬ－４Ｒ抗体またはＩＬ－４Ｒ結合タンパク質またはそれらのフラグメントを指す。本開示の文脈において、本用語は、安全性、純度、および／または効力においてデュピルマブと臨床的に有意味な差を有さない、ＩＬ－４Ｒに結合する抗原結合タンパク質を指す。

本開示の特定の実施形態によれば、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲを含む。いくつかの実施形態では、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号３、４および５のアミノ酸配列を含む３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）を含み、配列番号１に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲを含む。

本開示の特定の実施形態によれば、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号２に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号６、７および８のアミノ酸配列を含む３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含み、配列番号２に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む。

本開示の特定の実施形態によれば、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、５以下のアミノ酸置換を有する配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲを含む。本開示の特定の実施形態によれば、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、２以下のアミノ酸置換を有する配列番号２のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲを含む。

いくつかの実施形態において、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、配列番号１に対して９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲ、および配列番号２に対して９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗ヒトＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）配列番号３、４および５のアミノ酸配列をそれぞれ含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３、ならびに配列番号１に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲ；ならびに（ｂ）配列番号６、７および８のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３、ならびに配列番号２に対して少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む。

配列同一性は、当技術分野で知られている方法（例えば、ＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、およびＢＬＡＳＴ）によって測定され得る。

本開示はまた、対象におけるアレルギーを治療するための、またはアレルゲン特異的ＩｇＥを排除するための方法における抗ＩＬ－４Ｒ抗体の使用を含み、ここで、抗ＩＬ－４Ｒ抗体は１つまたはそれ以上の保存的アミノ酸置換を有する、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかのバリアントを含む。例えば、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、１０以下、８以下、６以下、４以下などの保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗ＩＬ－４Ｒ抗体の使用を含む。いくつかの実施形態において、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して１、２、３、または４個の保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗ＩＬ－４Ｒ抗体の使用を含む。

本開示の方法の文脈で使用され得る他の抗ＩＬ－４Ｒα抗体は、例えば、ＡＭＧ３１７（Ｃｏｒｒｅｎら、２０１０年、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．、１８１（８）：７８８～７９６頁）と呼ばれ、当技術分野で知られている抗体、またはＭＥＤＩ９３１４、または米国特許第７，１８６，８０９号、米国特許第７，６０５，２３７号、米国特許第７，６３８，６０６号、米国特許第８，０９２，８０４号、米国特許第８，６７９，４８７号、または米国特許第８，８７７，１８９号に記載されている抗ＩＬ－４Ｒα抗体のいずれかを含む。本明細書に引用された抗ＩＬ－４Ｒα抗体を同定する刊行物の部分は、参照によって本明細書に組み入れられる。

本開示の方法の文脈で使用される抗ＩＬ－４Ｒα抗体は、ｐＨ依存的な結合特性を有し得る。例えば、本開示の方法で使用するための抗ＩＬ－４Ｒα抗体は、中性ｐＨと比較して、酸性ｐＨにおいてＩＬ－４Ｒαへの結合の低減を示し得る。あるいは、本開示の抗ＩＬ－４Ｒα抗体は、中性ｐＨと比較して、酸性ｐＨにおいてその抗原への増強された結合を示し得る。「酸性ｐＨ」という表現は、約６．２未満、例えば、約６．０、５．９５、５．９、５．８５、５．８、５．７５、５．７、５．６５、５．６、５．５５、５．５、５．４５、５．４、５．３５、５．３、５．２５、５．２、５．１５、５．１、５．０５、５．０またはそれ以下のｐＨ値を含む。本開示を通して使用される「中性ｐＨ」という表現は、約７．０から約７．４のｐＨを意味する。「中性ｐＨ」という表現は、約７．０、７．０５、７．１、７．１５、７．２、７．２５、７．３、７．３５および７．４のｐＨ値を含む。

特定の例において、「中性ｐＨと比較して、酸性ｐＨにおけるＩＬ－４Ｒαへの結合の低減」は、酸性ｐＨにおいてＩＬ－４Ｒαに結合する抗体のＫ_Ｄ値と、中性ｐＨにおいてＩＬ－４Ｒαに結合する抗体のＫ_Ｄ値との比（またはその逆）の点から表される。例えば、本開示の目的のために、抗体またはその抗原結合フラグメントは、抗体またはその抗原結合フラグメントが約３．０以上の酸性／中性Ｋ_Ｄ比を示す場合、「中性ｐＨと比較して、酸性ｐＨにおけるＩＬ－４Ｒαへの結合の低減」を示すと見なされ得る。特定の例示的な実施形態において、本開示の抗体または抗原結合フラグメントの酸性／中性Ｋ_Ｄ比は、約３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５、１５．０、２０．０、２５．０、３０．０、４０．０、５０．０、６０．０、７０．０、１００．０、またはそれ以上であり得る。

ｐＨ依存的な結合特性を有する抗体は、例えば、中性ｐＨと比較した酸性ｐＨにおける特定の抗原への結合の低減（または増強）について、抗体の集団をスクリーニングすることによって得られ得る。さらに、アミノ酸レベルでの抗原結合ドメインの修飾は、ｐＨ依存的な特徴を有する抗体を生じ得る。例えば、抗原結合ドメインの１つまたはそれ以上のアミノ酸（例えば、ＣＤＲ内）をヒスチジン残基で置換することにより、中性ｐＨと比較して、酸性ｐＨにおける抗原結合が低減した抗体が得られ得る。本開示を通して使用される「酸性ｐＨ」という表現は、６．０以下のｐＨを意味する。

形質細胞除去剤
本明細書に開示される方法は、治療有効量の形質細胞除去剤を、それを必要とする対象に投与することを含む。本明細書で使用される場合、「形質細胞除去剤」は、形質細胞上の表面抗原に特異的に結合し、前記形質細胞を死滅または除去することができる任意の分子を指す。いくつかの実施形態において、形質細胞除去剤は、抗体、低分子化合物、核酸、ポリペプチド、またはそれらの機能的フラグメントまたはバリアントであり得る。本開示の文脈において、形質細胞除去剤は、開示された方法においてＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤と組み合わせて使用される。

適切な形質細胞除去剤の非限定的な例は、ＢＣＭＡ標的化剤（本明細書の他の場所に記載されている）、プロテアソーム阻害剤［例えば、ボルテゾミブ（ベルケイド）、カルフィルゾミブ（キプロリス）、イキサゾミブ（ニンラーロ）］、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤［例えば、パノビノスタット（ファリダック）］、Ｂ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ；ＢＬｙＳ、ＴＡＬＬ－１、またはＣＤ２５７とも呼ばれる）阻害剤（例えば、ベリムマブ、タバルマブ、ＡＭＧ５７０のような抗ＢＡＦＦ抗体、またはイアナルマブのような抗ＢＡＦＦ受容体抗体）、および増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ；ＴＮＦＳＦ１３またはＣＤ２５６とも呼ばれる）阻害剤（例えば、ＢＩＯＮ－１３０１またはＶＩＳ６２４のような抗ＡＰＲＩＬ抗体）を含む。

ＢＣＭＡ標的化剤
特定の例示的な実施形態によれば、本明細書に開示される方法で使用される形質細胞除去剤は、ＢＣＭＡ標的化剤である。

本明細書で使用される場合、「ＢＣＭＡ標的化剤」という用語は、対象の細胞の表面に発現されるＢＣＭＡに特異的に結合することができ、よって、前記細胞を破壊の標的にすることができる任意の分子を指す。ＢＣＭＡは、Ｂ細胞系統細胞、特に胚中心の濾胞間領域、ならびに形質芽細胞および分化した形質細胞で排他的に発現する。ＢＣＭＡは形質細胞の分化中に選択的に誘導され、骨髄内の長寿命の形質細胞の最適な生存に必要とされる。したがって、ＢＣＭＡ標的化剤は、形質細胞表面に発現されるＢＣＭＡに結合し、ＢＣＭＡを発現する細胞の死滅または除去（形質細胞除去）を媒介する。本開示の文脈において、いくつかの実施形態において、ＢＣＭＡ標的化剤は、形質細胞表面発現ＢＣＭＡに結合する結合部分（抗原結合部分またはその抗原結合フラグメント）および前記の形質細胞の殺傷を促進する部分を含む。特定の実施形態において、形質細胞表面に発現されるＢＣＭＡに結合する部分は、ＢＣＭＡに特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントである。そのようなＢＣＭＡ結合部分は、標的形質細胞の死滅または破壊を助長する部分に連結されている（例えば、共有結合されている）。結合した形質細胞を標的にした殺傷を促進する部分は、標的細胞を直接殺傷する分子（例えば、細胞障害剤）であり得るか、または免疫細胞、例えばＴ細胞による標的細胞の殺傷を媒介するタンパク質またはそのフラグメントであり得る。本開示の文脈において、「ＢＣＭＡ標的化剤」という用語は、細胞障害性薬物のような治療薬にコンジュゲートされた抗ＢＣＭＡ抗体（「ＢＣＭＡ ＡＤＣ」または「抗ＢＣＭＡ ＡＤＣ」）、ＢＣＭＡに特異的に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）（「ＢＣＭＡ ＣＡＲ」または「抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ」）および抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体を含むが、これらに限定はされない。

特定の実施形態によれば、開示の方法の文脈において使用されるＢＣＭＡ標的化剤は、抗ＢＣＭＡ抗体および細胞障害性薬物を含む抗体薬物複合体（ＡＤＣ）である。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ抗体もしくはその抗原結合フラグメントと細胞障害剤は、リンカーを介して共有結合されている。一般的な用語では、ＡＤＣはＡ－［Ｌ－Ｐ］_ｙを含み、ここで、Ａは抗原結合分子、例えば、抗ＢＣＭＡ抗体またはそのフラグメントであり、Ｌはリンカーであり、Ｐはペイロードまたは治療薬部分（例えば、細胞障害剤）であり、ｙは１から３０までの整数である。ＡＤＣを形成するための適切な細胞障害剤および化学療法剤の例は、当技術分野で知られている。開示の方法における使用のために抗ＢＣＭＡ抗体にコンジュゲートされ得る適切な細胞障害剤の非限定的な例は、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）もしくはモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）のようなオーリスタチン、ＴＵＢ－ＯＨもしくはＴＵＢ－ＯＭＯＭのようなツブリシン、トマイマイシン誘導体、ドラスタチン誘導体、またはＤＭ１もしくはＤＭ４のようなメイタンシノイドである。特定の例示的な実施形態によれば、本開示は、アレルギーを治療する方法における抗ＢＣＭＡ ＡＤＣの使用を含み、ここで、抗ＢＣＭＡ ＡＤＣは、本明細書の他の場所に開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかを含む。

本開示はまた、アレルギーを治療する方法における抗ＢＣＭＡ ＡＤＣの使用を含み、ここで、抗体は１つまたはそれ以上の保存的アミノ酸置換を有する、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかのバリアントを含む。例えば、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、１０以下、８以下、６以下、４以下などの保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗体の使用を含む。いくつかの実施形態において、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して１、２、３、または４個の保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗体の使用を含む。

本開示の方法の文脈で使用され得る他の抗ＢＣＭＡ ＡＤＣは、例えば、当技術分野でベランタマブマフォドチン、ＧＳＫ２８５７９１６、ＡＭＧ２２４、ＨＤＰ－１０１、ＭＥＤＩ２２２８、およびＴＢＬ－ＣＬＮ１と呼ばれ、知られているＡＤＣ、または、例えば、特許公開ＷＯ２０１１／１０８００８、ＷＯ２０１４／０８９３３５、ＷＯ２０１７／０９３９４２、ＷＯ２０１７／１４３０６９、ＷＯ２０１９／０２５９８３に記載されている抗ＢＣＭＡ ＡＤＣのいずれかを含む。本明細書に引用された抗ＢＣＭＡ ＡＤＣを同定する刊行物の部分は、参照によって本明細書に組み入れられる。

特定の実施形態によれば、開示の方法の文脈において使用されるＢＣＭＡ標的化剤は、ＢＣＭＡに特異的に結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である（「ＢＣＭＡ ＣＡＲ」）。「キメラ抗原受容体」（ＣＡＲ）という用語は、特定の抗標的細胞免疫活性を示すキメラタンパク質を生成するために、標的細胞上に存在する成分に対する結合ドメイン、例えば、所望の抗原（例えば、形質細胞上のＢＣＭＡ）に対する抗体ベースの特異性をＴ細胞受容体活性化細胞内ドメインと組み合わせる分子を指す。一般にＣＡＲは、Ｔ細胞抗原受容体複合体ゼータ鎖の細胞内シグナル伝達ドメインに融合した細胞外一本鎖抗体結合ドメイン（ｓｃＦｖ）から成り、Ｔ細胞において発現されると、モノクローナル抗体の特異性に基づいて抗原認識を切り換える能力を有する。特定の実施形態において、ＢＣＭＡ ＣＡＲまたはその抗原結合フラグメントは、参照によってその全体が本明細書に組み入れられる２０１８年７月１９日に出願された米国仮特許出願第６２／７００，６１５号または国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１９／０４２４５２号に記載されている抗体のいずれかのアミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）、および／または相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。特定の例示的な実施形態によれば、本開示は、アレルギーを治療する方法における抗ＢＣＭＡ ＣＡＲの使用を含み、ここで、抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、本明細書の他の場所に開示されるＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかを含む。

本開示はまた、アレルギーを治療する方法における抗ＢＣＭＡ ＣＡＲの使用を含み、ここで、ＣＡＲは１つまたはそれ以上の保存的アミノ酸置換を有する、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかのバリアントを含む。例えば、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、１０以下、８以下、６以下、４以下などの保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗ＢＣＭＡ ＣＡＲの使用を含む。いくつかの実施形態において、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して１、２、３、または４個の保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗ＢＣＭＡ ＣＡＲの使用を含む。

本開示の方法の文脈で使用され得る他の抗ＢＣＭＡ ＣＡＲは、例えば、当技術分野でｂｂ２１２１、ＬＣＡＲ－Ｂ３８Ｍ、および４Ｃ８Ａと呼ばれ、知られているＣＡＲ、または例えば、特許文献ＷＯ２０１５／０５２５３８、ＷＯ２０１５／０５２５３６、ＷＯ２０１６／０９４３０４、ＷＯ２０１６／１６６６３０、ＷＯ２０１６／１５１３１５、ＷＯ２０１６／１３０５９８、ＷＯ２０１７／１８３４１８、ＷＯ２０１７／１７３２５６、ＷＯ２０１７２１１９００、ＷＯ２０１７／１３０２２３、ＷＯ２０１８／２２９４９２、ＷＯ２０１８／０８５６９０、ＷＯ２０１８／１５１８３６、ＷＯ２０１８／０２８６４７、ＷＯ２０１９／００６０７２に記載されている抗ＢＣＭＡ ＣＡＲのいずれかを含む。本明細書に引用された抗ＢＣＭＡ ＣＡＲを同定する刊行物の部分は、参照によって本明細書に組み入れられる。

特定の例示的な実施形態によれば、開示の方法の文脈で使用されるＢＣＭＡ標的化剤は、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体（本明細書では「抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体」とも呼ばれる）である。抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体は、ＢＣＭＡを発現する細胞の特異的な標的化とＴ細胞を介した殺傷に有用である。「抗体」、「抗原結合フラグメント」、「ヒト抗体」、「組換え抗体」という用語、および他の関連する用語は、上記で定義されている。抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体およびその抗原結合フラグメントの文脈において、本開示は、免疫グロブリンの片方のアームが、ＢＣＭＡまたはそのフラグメントに特異的であり、免疫グロブリンのもう一方のアームが、第２の治療標的（例えば、Ｔ細胞上のＣＤ３）に特異的である、二重特異性抗体の使用を含む。本開示の文脈で使用され得る例示的な二重特異性フォーマットは、限定はされないが、例えば、ｓｃＦｖベースのフォーマットまたはダイアボディ二重特異性フォーマット、ＩｇＧ－ｓｃＦｖフュージョン、デュアル可変ドメイン（ＤＶＤ）－Ｉｇ、クアドローマ、ノブ・イントゥ・ホール、共通軽鎖（例えば、ノブ・イントゥ・ホールを有する共通軽鎖など）、クロスＭａｂ、クロスＦａｂ、（シード）ボディ、ロイシンジッパー、デュオボディ、ＩｇＧ１／ＩｇＧ２、二重作用性Ｆａｂ（ＤＡＦ）－ＩｇＧ、およびＭａｂ^２二重特異性フォーマット（前述のフォーマットの総説については、例えば、Ｋｌｅｉｎら、２０１２年、ｍＡｂｓ ４（６）：６５３～６６３頁、およびそこに引用されている参考文献を参照）を含む。二重特異性抗体は、ペプチド／核酸結合を使用して構築することもでき、例えば、直交性の化学反応性を持つ非天然アミノ酸を使用して、定義された組成、結合価、および形状を持つ多量体複合体へと自己集合する、部位特異的な抗体－オリゴヌクレオチドコンジュゲートを生成することができる。（例えば、Ｋａｚａｎｅら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０１３年，１３５（１）：３４０～４６頁を参照）。

「特異的に結合する」などの用語は、抗体またはその抗原結合フラグメントが、生理学的条件下で比較的安定な複合体を抗原と形成することを意味する。抗体が抗原に特異的に結合するかどうかを決定するための方法は、当技術分野で周知であり、例えば、平衡透析、表面プラズモン共鳴などを含む。例えば、本開示の文脈で使用されるＢＣＭＡに「特異的に結合する」抗体は、表面プラズモン共鳴アッセイで測定した場合、約１００ｎＭ未満、約５０ｎＭ未満、約２０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、約５００ｐＭ未満、約２００ｐＭ未満、約１００ｐＭ未満、または約５０ｐＭ未満のＫ_ＤでＢＣＭＡまたはその一部に結合する抗体を含む。しかしながら、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する単離された抗体は、他の（非ヒト）種由来のＢＣＭＡ分子のような、他の抗原に対して交差反応性を有していてもよい。

特定の例示的な実施形態によれば、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、参照によってその全体が本明細書に組み入れられる２０１９年１月１７日に出願された米国仮特許出願第６２／７９３，６４５号または国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１９／０４２４４７号に記載されている抗体のいずれかのアミノ酸配列を含む、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）、および／または相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。特定の例示的な実施形態において、本開示の文脈で使用され得る抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン；および（ｂ）ＣＤ３に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む。一つの実施形態では、第１の抗原結合ドメインは、配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を含む。特定の実施形態によれば、第１の抗原結合ドメインは、３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）ならびに３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含み、ここで、ＨＣＤＲ１は配列番号１４のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ２は配列番号１６のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ３は配列番号１８のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ１は配列番号２２のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ２は配列番号２４のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ３は配列番号２６のアミノ酸配列を含む。一つの実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、配列番号２８または配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）および配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を含む。一つの実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）と３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含み、ここで、ＨＣＤＲ１は配列番号３０または３８のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ２は配列番号３２または４０のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ３は配列番号３４または４２のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ１は配列番号２２のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ２は配列番号２４のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ３は配列番号２６のアミノ酸配列を含む。

一つの実施形態では、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１４、１６および１８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびにそれぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号３０、３２および３４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびにそれぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第２の抗原結合ドメインを含む。一つの実施形態では、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下を含む：（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲおよび配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）配列番号２８のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲおよび配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。

一つの実施形態では、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、（ａ）それぞれ配列番号１４、１６および１８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびにそれぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号３８、４０および４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびにそれぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第２の抗原結合ドメインを含む。一つの実施形態では、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下を含む：（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲおよび配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＣＶＲおよび配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。

例示的な抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体は、ＲＥＧＮ５４５８およびＲＥＧＮ５４５９として知られる完全ヒト二重特異性抗体を含む。特定の例示的な実施形態によれば、本開示の方法は、ＲＥＧＮ５４５８もしくはＲＥＧＮ５４５９、またはそれらの生物学的同等物の使用を含む。本明細書で使用される場合、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体に関する「生物学的同等物」という用語は、同様な実験条件下、同じモル用量で、単回投与または複数回投与のいずれかで投与された場合に、参照抗体（例えば、ＲＥＧＮ５４５８またはＲＥＧＮ５４５９）と有意な差を示さない吸収の速度および／または程度を有する医薬品同等物または医薬品代替物である抗体またはＢＣＭＡ／ＣＤ３結合タンパク質またはそのフラグメントを指す；「生物学的同等物」という用語はまた、ＢＣＭＡ／ＣＤ３に結合し、安全性、純度および／または効力に関して参照抗体（例えば、ＲＥＧＮ５４５８またはＲＥＧＮ５４５９）と臨床的に有意味な差を有さない抗原結合タンパク質も含む。

いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下を含む：（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲ、および配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲ、および配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下を含む：（ａ）それぞれ配列番号１４、１６および１８のアミノ酸配列を含む３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）、ならびに配列番号１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲを含み、それぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含む３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号３０、３２および３４のアミノ酸配列を含む３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）、ならびに配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲを含み、それぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含む３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。

いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下を含む：（ａ）配列番号１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲ、および配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲ、および配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。いくつかの実施形態において、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、以下を含む：（ａ）それぞれ配列番号１４、１６および１８のアミノ酸配列を含む３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）、ならびに配列番号１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲを含み、それぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含む３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第１の抗原結合ドメイン；ならびに（ｂ）それぞれ配列番号３８、４０および４２のアミノ酸配列を含む３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）、ならびに配列番号３６のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＨＣＶＲを含み、それぞれ配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列を含む３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するＬＣＶＲを含む第２の抗原結合ドメイン。

本開示はまた、アレルギーを治療する方法における抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体の使用を含み、ここで、抗体は１つまたはそれ以上の保存的アミノ酸置換を有する、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかのバリアントを含む。例えば、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して、例えば、１０以下、８以下、６以下、４以下などの保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体の使用を含む。いくつかの実施形態において、本開示は、本明細書に開示のＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列のいずれかと比較して１、２、３、または４個の保存的アミノ酸置換を有するＨＣＶＲ、ＬＣＶＲおよび／またはＣＤＲのアミノ酸配列を有する抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体の使用を含む。

本開示の方法の文脈で使用され得る他の抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体は、例えば、当技術分野でＡＭＧ４２０、ＡＭＧ７０１、ＣＣ－９３２６９、ＥＭ８０１、ＪＮＪ－６４００７９５７、およびＴＮＢ３８４Ｂと呼ばれ、知られている抗体、または例えば、特許文献ＷＯ２０１３／０７２４１５、ＷＯ２０１４／１４０２４８、ＷＯ２０１４／１２２１４４、ＷＯ２０１６／１６６６２９、ＷＯ２０１６／０７９１７７、ＷＯ２０１６／０２０３３２、ＷＯ２０１７０３１１０４、ＷＯ２０１７／２２３１１１、ＷＯ２０１７／１３４１３４、ＷＯ２０１８／０８３２０４、ＷＯ２０１８／２０１０５１に記載されている抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体のいずれかを含む。本明細書に引用された抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体を同定する刊行物の部分は、参照によって本明細書に組み入れられる。

アレルゲン免疫療法と組み合わせたＩｇＥ枯渇
本開示はまた、アレルギーを有する対象における免疫療法レジメン（例えば、アレルゲン特異的免疫療法レジメン）の有効性および／または耐容性を増強するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本方法は、免疫療法レジメンの前または同時に、（抗ＩＬ－４Ｒ抗体のような）ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および（抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体のような）形質細胞除去剤をアレルギーを有する対象に投与することを含む。

いくつかの実施形態において、治療される対象は食物アレルギーを有する。例えば、いくつかの実施形態では、対象はミルク、乳製品、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、果物、大豆、魚、甲殻類、砂糖、ピーナッツ、マメ科植物、木の実、またはそれらの組み合わせに対するアレルギーを有する。いくつかの実施形態では、対象はピーナッツアレルギーを有する。いくつかの実施形態では、治療される対象は、非食物アレルギー（例えば、環境アレルゲンに対するアレルギー）を有する。例えば、いくつかの実施形態において、対象は、ほこり、チリダニ、花粉、昆虫毒、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属、家庭用クリーナー、洗剤、薬、化粧品、香水、ペニシリン、スルホンアミド、サリチル酸塩のような薬剤、治療用モノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ）、ブタクサ、草、およびカバノキから成る群から選択される非食物アレルゲンに対するアレルギーを有する。いくつかの実施形態において、治療される対象は、重度のアレルギー（例えば、重度の食物アレルギーまたは重度の非食物アレルギー）を有する。

本明細書で使用される場合、「アレルゲン特異的免疫療法」は、アレルギーおよびアレルギー反応を治療または予防するための手段として、またはアレルギー反応を低減もしくは排除するための手段として、経時的に対象にアレルゲン（例えば、本明細書に開示されているアレルゲン）を繰り返し投与することを指す。いくつかの実施形態において、アレルゲン特異的免疫療法レジメンは、経口免疫療法を含む。いくつかの実施形態において、アレルゲン特異的免疫療法レジメンは、皮下免疫療法を含む。いくつかの実施形態において、アレルゲン特異的免疫療法レジメンは、舌下免疫療法を含む。一般に、免疫療法レジメンは、「従来的」免疫療法レジメンまたは「加速」免疫療法レジメンであり得る。典型的には、従来的免疫療法レジメンでは、増加する用量（「漸増」とも呼ばれる）のアレルゲンが、厳重に監視された医学的監督の下で、数週間から数か月にわたって（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２か月またはそれ以上にわたって）週ごとの間隔で患者に投与され、その後、典型的には、漸増レジメン中に投与される最高の用量でアレルゲンの１つまたはそれ以上の用量を投与することを含む維持レジメンが続く。加速免疫療法レジメンでは、従来的免疫療法と比較して、漸増スケジュールが加速される。加速免疫療法の例は、「ラッシュ」免疫療法および「クラスター」免疫療法を含む。ラッシュ免疫療法では、典型的には、増加する用量のアレルゲンが、最大耐用量に達するまで連続して数日間にわたって（例えば、２日、３日、４日、５日、６日、または１週間にわたって）１日ごとに投与される。クラスター免疫療法では、典型的には数回（例えば、２～３回）の増加する用量のアレルゲンが、最大耐用量に達するまで、通常は４～８週間以内に、非連続的に数日にわたって１日で投与される。

いくつかの実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤は、本明細書に開示されるように、アレルゲン特異的免疫療法レジメンの前または同時に投与される（例えば、従来的免疫療法または加速免疫療法であり得る経口、舌下、または皮下免疫療法）。いくつかの実施形態では、形質細胞除去剤（例えば、１、２、３、４、５またはそれ以上の用量）が、免疫療法レジメンの開始前に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、１、２、３、４、５またはそれ以上の用量）が、免疫療法レジメンの開始前に投与される。いくつかの実施形態では、形質細胞除去剤およびＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤のそれぞれの少なくとも１用量が、免疫療法レジメンの開始前に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、免疫療法レジメンと同時に投与される。いくつかの実施形態では、形質細胞除去剤が、免疫療法レジメンと同時に投与される。

医薬組成物および投与
開示される方法は、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を形質細胞除去剤と組み合わせて、それを必要とする対象に投与することを含み、ここで、阻害剤は別個の医薬組成物または組み合わされた（単一の）医薬組成物内に含まれる。本開示の医薬組成物は、薬学的に許容される担体、賦形剤、および適切な移動、送達、耐容性などを提供する他の薬剤と共に製剤化されてもよい。多数の適切な製剤が、あらゆる医薬品化学者に知られている処方集に見出され得る：Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、イーストン、ペンシルベニア州。これらの製剤は、例えば、粉末、ペースト、軟膏、ゼリー、ワックス、オイル、脂質、（リポフェクチン（商標）のような）脂質（カチオン性またはアニオン性）含有ベシクル、ＤＮＡコンジュゲート、無水吸収ペースト、水中油型および油中水型エマルジョン、エマルジョンカーボワックス（様々な分子量のポリエチレングリコール）、半固体ゲル、およびカーボワックスを含む半固体混合物を含む。Ｐｏｗｅｌｌら、１９９８年、Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ Ｔｅｃｈｎｏｌ、５２：２３８～３１１頁も参照されたい。

いくつかの実施形態において、本開示の医薬組成物は、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（抗ＩＬ－４Ｒ抗体など）および／または治療有効量の形質細胞除去剤（抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体など）ならびに薬学的に許容される担体を含む。特定の実施形態では、開示される医薬組成物は、静脈内注射のような注射による投与用に製剤化される。

例えば、リポソーム、微粒子、マイクロカプセルへのカプセル化、変異ウイルスを発現することができる組換え細胞、受容体媒介エンドサイトーシスなど、様々な送達系が知られており、本開示の医薬組成物を投与するために使用され得る（例えば、Ｗｕら、１９８７年、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９～４４３２頁を参照）。投与方法は、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、および経口経路を含むが、これらに限定はされない。組成物は、都合のよい任意の経路によって、例えば、注入またはボーラス注射によって、上皮または粘膜皮膚内層（例えば、口腔粘膜、直腸および腸粘膜など）を介した吸収によって投与されてもよく、また、他の生物学的に活性な薬剤と一緒に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および／または形質細胞除去剤は静脈内投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および／または形質細胞除去剤は皮下投与される。

いくつかの実施形態において、本開示の医薬組成物は、容器内に収容されている。したがって、別の態様では、本明細書に開示される医薬組成物を含む容器が提供される。例えば、いくつかの実施形態では、医薬組成物はガラスバイアル、シリンジ、ペン送達デバイス、およびオートインジェクターから成る群から選択される容器内に収容されている。

いくつかの実施形態において、本開示の医薬組成物は、標準的なニードルおよびシリンジを用いて皮下または静脈内に送達される。いくつかの実施形態では、シリンジは、充填済みシリンジである。さらに、皮下送達に関して、ペン送達デバイスまたはオートインジェクターは、本開示の医薬組成物を容易に送達することに用途を有する。ペン送達デバイスは、再利用可能またはディスポーザブルであり得る。典型的には、再利用可能なペン送達デバイスは、医薬組成物を含む交換可能なカートリッジを利用する。カートリッジ内の全ての医薬組成物が投与され、カートリッジが空になった後、空のカートリッジは容易に廃棄され、医薬組成物を含む新しいカートリッジと交換され得る。その後、ペン送達デバイスは再利用され得る。ディスポーザブルなペン送達デバイスには、交換可能なカートリッジは無い。むしろ、ディスポーザブルペン送達デバイスには、デバイス内のリザーバーに保持された医薬組成物が事前に充填されている。リザーバーの医薬組成物が空になると、デバイス全体が廃棄される。

適切なペンおよびオートインジェクター送達デバイスの例は、オートペン（商標）（Ｏｗｅｎ Ｍｕｍｆｏｒｄ、Ｉｎｃ．、ウッドストック、英国）、ディセトロニック（商標）ペン（Ｄｉｓｅｔｒｏｎｉｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ、スイス、ブルクドルフ）、ヒューマログＭＩＸ７５／２５（商標）ペン、ヒューマログ（商標）ペン、ヒューマリン７０／３０（商標）ペン（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏ．、インディアナポリス、インディアナ州）、ノボペン（商標）Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ、コペンハーゲン、デンマーク）、ノボペンジュニア（商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ、コペンハーゲン、デンマーク）、ＢＤ（商標）ペン（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ、フランクリンレイクス、ニュージャージー州）、オプティペン（商標）、オプティペンプロ（商標）、オプティペンスターレット（商標）、およびオプティクリック（商標）（ｓａｎｏｆｉ－ａｖｅｎｔｉｓ、フランクフルト、ドイツ）を含むが、これらに限定はされない。本開示の医薬組成物の皮下送達に用途を有するディスポーザブルペン送達デバイスの例は、ソロスター（商標）ペン（ｓａｎｏｆｉ－ａｖｅｎｔｉｓ）、フレックスペン（商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ）、およびクイックペン（商標）（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、シュアクリック（商標）オートインジェクター（Ａｍｇｅｎ、サウザンドオークス、カリフォルニア州）、ペンレット（商標）（Ｈａｓｅｌｍｅｉｅｒ、シュトゥットガルト、ドイツ）、エピペン（Ｄｅｙ、Ｌ．Ｐ．）、およびヒューミラ（商標）ペン（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ、アボットパーク、イリノイ州）を含むが、これらに限定されない。

特定の状況においては、一方または両方の医薬組成物が、制御放出系で送達され得る。一つの実施形態では、ポンプが使用され得る。別の実施形態では、ポリマー材料が使用され得る。Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ、ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編）、１９７４年、ＣＲＣ Ｐｒｅｓ．、ボーカラトーン、フロリダ州を参照されたい。さらに別の実施形態では、制御放出系は、組成物の標的の近くに配置することができ、したがって、全身用量のほんの一部しか必要とされない（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ、１９８４年、ＭＥＤＩＣＡＬ ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＳ ＯＦ ＣＯＮＴＲＯＬＬＥＤ ＲＥＬＥＡＳＥ、ｖｏｌ．２、１１５～１３８頁を参照）。他の制御放出系は、Ｌａｎｇｅｒ、１９９０年、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７～１５３３頁において論ぜられている。

適切な注射可能調製物は、静脈内、皮下、皮内および筋肉内注射、点滴注入などのための剤形を含み得る。これらの注射可能調製物は、既知の方法によって調製され得る。例えば、注射可能調製物は、例えば、上記の抗体またはその塩を注射に従来的に使用されている無菌の水性媒体または油性媒体中に溶解、懸濁または乳化することによって調製され得る。注射用の水性媒体としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖および他の補助剤を含む等張液などがあり、これらは、アルコール（例えば、エタノール）、ポリアルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤［例えば、ポリソルベート８０、ＨＣＯ－５０（硬化ヒマシ油のポリオキシエチレン（５０ｍｏｌ）付加物）］などのような適切な可溶化剤と組み合わせて使用され得る。油性媒体としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが使用され、これらは、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどのような可溶化剤と組み合わせて使用され得る。このように調製された注射剤は、好ましくは適切なアンプルに充填される。

いくつかの実施形態において、上記の経口または非経口使用のための医薬組成物は、有効成分の用量に適合するのに適した単位用量の剤形へと調製される。単位用量におけるそのような剤形は、例えば、錠剤、ピル、カプセル、注射剤（アンプル）、カートリッジ、坐剤などを含む。

医薬組成物の注射可能な製剤は、既知の方法によって調製され得る。例えば、注射可能な製剤は、例えば、阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒ抗体）またはその塩を注射に従来的に使用されている無菌の水性媒体または油性媒体中に溶解、懸濁または乳化することによって調製され得る。注射用の水性媒体としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖および他の補助剤を含む等張液などがあり、これらは、アルコール（例えば、エタノール）、ポリアルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤［例えば、ポリソルベート８０、ＨＣＯ－５０（硬化ヒマシ油のポリオキシエチレン（５０ｍｏｌ）付加物）］などのような適切な可溶化剤と組み合わせて使用され得る。油性媒体としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが使用され、これらは、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどのような可溶化剤と組み合わせて使用され得る。このように調製された注射可能な製剤は、好ましくは適切な注射アンプルに充填される。いくつかの実施形態において、注射可能な製剤は、ある濃度の阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒ抗体）および１つまたはそれ以上の薬学的に許容される溶媒（例えば、蒸留水、生理食塩水など）を含み得る。

本開示の文脈で使用され得る抗ＩＬ－４Ｒ抗体を含む例示的な医薬組成物は、例えば、米国特許第８，９４５，５５９号に開示されており、抗ＩＬ－４Ｒ抗体を含む医薬組成物を同定するその一部は参照によって本明細書に組み入れられる。

キット
特定の実施形態において、本開示は、本明細書に開示されるＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および本明細書に開示される形質細胞除去剤を含む医薬の組み合わせおよびキットを提供する。いくつかの実施形態において、本組み合わせまたはキットは、本明細書に開示される抗ＩＬ－４Ｒ抗体（例えば、配列番号３、４および５のアミノ酸配列をそれぞれ含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３、ならびに配列番号６、７および８のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む抗ＩＬ－４Ｒ抗体またはその抗原結合フラグメント）ならびに本明細書に開示される形質細胞除去剤（例えば、ＢＣＭＡに特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン；およびＣＤ３に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体）を含み；ここで、第１の抗原結合ドメインは、配列番号１４、１６および１８のアミノ酸配列をそれぞれ含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３、ならびに配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含み、第２の抗原結合ドメインは、配列番号３０または３８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号３２または４０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号３４または４２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、ならびに配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３を含む。

いくつかの実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤を含む組み合わせまたはキットは、本明細書に開示される方法で使用するためのものである。いくつかの実施形態において、組み合わせまたはキットは、対象におけるアレルギーまたはアレルギー性障害を治療するため、またはアレルゲン特異的血清ＩｇＥを低減または排除するために使用するためのものである。いくつかの実施形態では、組み合わせまたはキットは、本明細書に開示される１つまたはそれ以上の追加の治療薬をさらに含む。

いくつかの実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤を含む組み合わせまたはキットは、アレルギーを有する対象における免疫療法レジメンの有効性および／または耐容性を高めるために使用するためのものである。したがって、いくつかの実施形態では、組み合わせまたはキットは、免疫療法レジメンのための１つまたはそれ以上の試薬をさらに含む。

いくつかの実施形態において、本明細書に開示される使用のためのキットは、使用のための説明書をさらに含む。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される使用のためのキットは、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤を含む１つまたはそれ以上の容器を含む。いくつかの実施形態において、本キットは、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を含む第１の容器と、形質細胞除去剤を含む第２の容器とを含む。

投与レジメン
いくつかの実施形態において、開示される方法は、治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を治療有効量の形質細胞除去剤と組み合わせて、それを必要とする対象に連続的に投与することを含み、ここで、各治療薬は、例えば、特定の治療投薬レジメンの一部として、１つまたはそれ以上の用量で対象に投与される。特定の実施形態において、本開示の方法は、アレルギー性疾患または障害、肥満細胞活性化障害または肥満細胞症を治療するために、相加的または相乗的な活性のための阻害剤を投与することを含む。

本明細書で使用される場合、「連続投与」は、阻害剤の各用量が、異なる時点で、例えば、所定の間隔（例えば、時間、日、週、または月）で隔てられた異なる日に、対象に投与されることを意味する。いくつかの実施形態において、開示される方法は、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の単一の初期用量に続いて、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の１つまたはそれ以上のその後の用量を対象に連続投与することを含む。特定の実施形態において、本方法は、形質細胞除去剤の単一の初期用量に続いて、形質細胞除去剤の１つまたはそれ以上のその後の用量を対象に連続投与することをさらに含む。

いくつかの実施形態において、治療的投薬レジメンは、１つまたはそれ以上の用量の形質細胞除去剤と組み合わせて１つまたはそれ以上の用量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を投与することを含む。特定の実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の１つまたはそれ以上の用量および／または形質細胞除去剤の１つまたはそれ以上の用量が、約１日１回、２日に１回、３日に１回、４日に１回、５日に１回、６日に１回、週に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、月に１回、２か月に１回、３か月に１回、４か月に１回の頻度、またはそれ以下の頻度で対象に投与される。

本明細書で使用される場合、「組み合わせて」という表現は、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が、形質細胞除去剤の前、後、または同時に投与されることを意味する。「組み合わせて」という用語はまた、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤の連続投与または同時投与も含む。

例えば、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が形質細胞除去剤の「前」に投与される場合、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、形質細胞除去剤の投与の１５０時間以上前、約１５０時間前、約１００時間前、約７２時間前、約６０時間前、約４８時間前、約３６時間前、約２４時間前、約１２時間前、約１０時間前、約８時間前、約６時間前、約４時間前、約２時間前、約１時間前、約３０分前、または約１５分前に投与され得る。ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が形質細胞除去剤の「後」に投与される場合、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、形質細胞除去剤の投与の約１５分後、約３０分後、約１時間後、約２時間後、約４時間後、約６時間後、約８時間後、約１０時間後、約１２時間後、約２４時間後、約３６時間後、約４８時間後、約６０時間後、約７２時間後、または７２時間以上後に投与され得る。形質細胞除去剤と「同時」のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の投与は、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が、形質細胞除去剤の投与の１０分以内（前、後、または同時）に別個の剤形で対象に投与されるか、またはＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤の両方を含む単一の併用剤形として対象に投与されることを意味する。

本明細書で使用される場合、「初期用量」は、治療レジメンの開始時に投与される用量（「ベースライン用量」とも呼ばれる）である。初期投与後に投与される１つまたはそれ以上のその後の投与は全て、同量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤または形質細胞除去剤を含んでいてもよい。しかしながら、特定の実施形態では、初期用量およびその後の用量に含まれる量は、治療の過程中に互いに変化する（例えば、上方または下方に適宜調整される）。特定の実施形態では、治療レジメンの開始時に１つまたはそれ以上（例えば、１、２、３、４、または５）の用量が「負荷用量」として投与され、その後に、より少ない頻度で投与される後続の用量（例えば、「維持用量」）が続く。例えば、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤または形質細胞除去剤は、患者の体重１ｋｇあたり約１ｍｇから約２０ｍｇの負荷用量と、それに続く患者の体重１ｋｇあたり約０．１ｍｇから約１０ｍｇの１つまたはそれ以上の維持用量でアレルギー性疾患を有する患者に投与され得る。

本開示の１つの例示的な実施形態において、その後の各用量は、直前の用量の１／２から１４週間またはそれ以上（例えば、１／２、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０、１０．５週間またはそれ以上）後に投与される。本明細書で使用される「直前の用量」という句は、複数回の一連の投与において、介在する用量を伴わずに、次の一連の用量の投与の前に対象に投与された各阻害剤の用量を意味する。

投与量
特定の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の少なくとも１つの用量は、対象の体重１ｋｇあたり約０．１～５０ｍｇ、例えば、約０．１～１０ｍｇ／ｋｇを含む。例えば、少なくとも１つの用量は、対象の体重１ｋｇあたり約０．１、１、０．３、３、４、５、６、７、８、９または１０ｍｇを含み得る。特定の実施形態において、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の少なくとも１つの用量は、約０．０５～６００ｍｇ、例えば、約５、１０、１５、２０、２５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇまたはそれ以上のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤のような、例えば、約５～６００ｍｇ、約１０～３００ｍｇ、約５０～６００ｍｇ、または約５０～３００ｍｇのＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を含む。一つの実施形態では、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、ＲＥＧＮ６６８（デュピルマブ）である。

特定の実施形態において、形質細胞除去剤の少なくとも１つの用量は、対象の体重１ｋｇあたり約０．１、１、０．３、３、４、５、６、７、８、９または１０ｍｇのような、対象の体重１ｋｇあたり約０．１～２０ｍｇを含む。特定の実施形態において、形質細胞除去剤の少なくとも１つの用量は、約０．０５～５００ｍｇの形質細胞除去剤、例えば、約５、１０、１５、２０、２５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００ｍｇまたはそれ以上の形質細胞除去剤を含む。一つの実施形態では、形質細胞除去剤は、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体（ＲＥＧＮ５４５９など）である。一つの実施形態では、形質細胞除去剤は、ボルテゾミブのようなプロテアソーム阻害剤である。

本明細書に開示される方法に従って対象に投与されるＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤の量は、治療有効量である。本明細書で使用される場合、「治療有効量」という用語は、以下のうちの１つまたはそれ以上をもたらす各治療薬の量を意味する：（ａ）アレルギーの症状または兆候、例えば、アナフィラキシーの重症度または期間の低減；（ｂ）血清アレルゲン特異的ＩｇＥのレベルの低減；（ｃ）対象における血清ＩｇＥの除去；（ｄ）アレルゲン感作の低減；（ｅ）アレルギー反応に対する感受性の低減、および／または；（ｆ）未治療の対象または単剤療法としていずれかの治療薬で治療された対象と比較した、従来的な抗アレルギー療法の使用または必要性の低減（例えば、コルチコステロイドの使用の低減または排除）。

ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒ抗体）の場合、治療有効量は約０．０５ｍｇから約６００ｍｇ、例えば、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約１．０ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２．０ｍｇ、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５１０ｍｇ、約５２０ｍｇ、約５３０ｍｇ、約５４０ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５６０ｍｇ、約５７０ｍｇ、約５８０ｍｇ、約５９０ｍｇ、または約６００ｍｇのＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤であり得る。特定の実施形態では、１０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１５０ｍｇ、または３００ｍｇのＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が対象に投与される。

形質細胞除去剤（例えば、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体）の場合、治療有効量は約０．０５ｍｇから約５００ｍｇ、約１ｍｇから約５００ｍｇ、約１０ｍｇから約４５０ｍｇ、約５０ｍｇから約４００ｍｇ、約７５ｍｇから約３５０ｍｇ、または約１００ｍｇから約３００ｍｇの抗体であり得る。例えば、様々な実施形態において、形質細胞除去剤の量は約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約１．０ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２．０ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、または約５００ｍｇの形質細胞除去剤である。

特定の実施形態では、対象に投与されるＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤（例えば、抗ＩＬ－４Ｒ抗体）および／または形質細胞除去剤（例えば、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３抗体）の個々の投与量は、治療有効量よりも少ない量、すなわち、治療量以下の用量であってもよい。例えば、阻害剤の治療有効量が３ｍｇ／ｋｇを含む場合、治療量以下の用量は、３ｍｇ／ｋｇ未満の量、例えば、２ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、または０．３ｍｇ／ｋｇを含む。本明細書で定義される「治療量以下の用量」は、それ自体では治療効果をもたらさない阻害剤の量を指す。しかしながら、特定の実施形態では、複数の治療量以下の用量の阻害剤を投与して、対象において治療効果を集合的に達成してもよい。

実施例
次に、開示される技術について、以下の実施例を用いて説明する。これらおよび本明細書中における他の例の使用は、単なる例示であり、開示または例示された形式の範囲および意味を決して制限するものではない。同様に、本開示は、本明細書に記載された特定の好ましい実施形態には限定されない。実際、本開示の修正および変形は、本明細書を読んだ当業者には明らかとなり、その精神および範囲から逸脱することなく為され得る。したがって、本開示は、請求の範囲が権利を与えられる同等物の全ての範囲と共に、請求の範囲の用語によってのみ制限されるべきである。また、使用される数値（例えば、量、温度など）に関して正確さを確保するための努力がなされているとはいえ、いくらかの実験誤差と偏差が考慮されるべきである。特に明記されていない限り、部分は重量部、分子量は平均分子量、温度は摂氏温度、圧力は大気圧または近大気圧である。

抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体と組み合わせた抗ＩＬ－４Ｒ抗体の効果
この実施例は、慢性アレルゲン誘導性肺炎症のマウスモデルにおけるＩｇＥ産生の遮断における形質細胞除去剤と組み合わせたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の増強された効力を実証する試験に関する。

この実施例で使用されたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、ＲＥＧＮ１１０３として同定されるマウス抗ＩＬ－４Ｒ抗体であったが、これは、ＲＥＧＮ６６８（デュピルマブとしても知られる）として同定される、ヒトＩＬ－４Ｒに対するヒトモノクローナル抗体のマウス代理抗体である。ＲＥＧＮ１１０３は、配列番号４３／４４のＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列のペアを含み、ヒトＩＬ－４Ｒに対するデュピルマブの親和性と同様な範囲にあるマウスＩＬ－４Ｒに対する親和性を有する。さらに、ＲＥＧＮ１１０３は、それぞれ１．９ｎＭおよび１１ｐＭのＩＣ５０でＩＬ－４およびＩＬ－１３依存的な細胞株の増殖を阻害する。

この実施例で使用された形質細胞除去剤は、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体ＲＥＧＮ５４５９であり、これは、配列番号１２のＨＣＶＲおよび配列番号２０のＬＣＶＲを含む抗ＢＣＭＡ結合ドメインと、配列番号３６のＨＣＶＲおよび配列番号２０のＬＣＶＲを含む抗ＣＤ３結合ドメインを含む。

材料および方法
関連するｉｎ ｖｉｖｏモデルにおいてＩｇＥ産生に対する抗ＩＬ－４Ｒαおよび抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３の組み合わせの効果を決定するために、マウスＢＣＭＡとＣＤ３の代わりにヒトＢＣＭＡとヒトＣＤ３についてホモ接合性であるマウスにおいて、慢性ヒョウヒダニ（ＨＤＭ）誘導性肺炎症試験を実施した。１週間に３回、１１週間、鼻腔内投与（ｉ．ｎ．）でマウスに２０μＬの生理食塩水（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｓ８７７６）で希釈した２５μｇのＨＤＭ（Ｇｒｅｅｒ、カタログ番号ＸＢＰ７０Ｄ３Ａ２５）または２０μＬの生理食塩水（対照群）を曝露させることによって、慢性肺炎症および持続性のＩｇＥ産生を誘導した。このモデルは、二次リンパ器官におけるＢ細胞のＩｇＥ産生形質細胞へのクラススイッチを誘導し、骨髄におけるＩｇＥ形質細胞の蓄積を促進する。最初のＨＤＭ投与後８週目に、一部のマウスに対して実験が終わるまで続く２５ｍｇ／ｋｇのＲＥＧＮ１１０３（抗ＩＬ－４Ｒα）または２５ｍｇ／ｋｇのアイソタイプ対照の皮下注射が開始された。１１週目に２用量のＲＥＧＮ５４５９（抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３）または２用量のアイソタイプ対照抗体を皮下投与し、マウスを鼻腔内ＨＤＭの非存在下で９週間安静にさせた。ＨＤＭ曝露と抗体治療プロトコールの詳細が表１と図１に概説されている。

ＨＤＭの最後の投与から１週間後と６週間後に、眼窩後出血によってマウスの全ての群から約１００μＬの血液を採取し、血清単離のためにマイクロテナーチューブ（ＢＤ、カタログ番号３６５９６７）に移した。血清中の総ＩｇＥ濃度は、ＯｐｔＥＩＡ（商標）ＥＬＩＳＡキット（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、＃５５５２４８）を使用して、製造元の指示に従って決定した。簡単に説明すると、ＥＬＩＳＡプレートをコーティングバッファー（炭酸塩－重炭酸塩バッファー、Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｃ３０４１、１００ｍＬ蒸留水で希釈、Ｇｉｂｃｏ；カタログ番号１５２３０－２７０）で希釈したＩｇＥ捕捉抗体により４°で一晩コーティングした。コーティングしたプレートを洗浄バッファー（ＤＰＢＳ、ＧＥ；カタログ番号ＳＨ３００１３０４で希釈した０．０５％ツイーン２０、Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｐ１３７９）で４回洗浄した。プレートをアッセイ希釈剤（ＢＤ；カタログ番号５５５２１３）により室温（ＲＴ）で１時間ブロッキングした。１：５０または１：１００の開始濃度でさらに３倍段階希釈で希釈した１００μＬの血清サンプルと、１００ｎｇ／ｍＬの開始濃度で希釈し、さらに２倍段階希釈したＩｇＥ標準をプレートに添加し、ＲＴで２時間インキュベートした。次にプレートを洗浄バッファーで４回洗浄し、１００μＬの動作検出溶液（ｓＡｖ－ＨＲＰを有する検出抗体）中、ＲＴで１時間インキュベートした。プレートを７回洗浄し、洗浄バッファーに５分間浸し、再度４回洗浄して、結合していない検出抗体を除去した。１００μＬのＴＭＢ基質溶液（ＢＤ；カタログ番号５５５２１４）を各サンプルに加え、プレートを暗所で３０分間インキュベートした後、５０μＬの停止溶液（２Ｎ硫酸、ＢＤＨ ＶＷＲ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ；カタログ番号ＢＤＨ７５００）を添加した。吸光度を４５０ｎｍで測定し、ＩｇＥ濃度を検量線から計算した。血清ＩｇＥ値はｎｇ／ｍＬとして示される。統計的有意性は、ダンの事後多重比較検定を使用したクラスカル・ウォリス検定によって、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍで決定した。

結果
慢性ＨＤＭモデルにおいて、抗ＩＬ４Ｒα治療は、それ自体で循環ＩｇＥを低減させたが、排除はしなかった（図２Ａおよび２Ｂ；表２）。

抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療単独では、ＩｇＥ産生が一時的に低減したが、６週間の安静後には、血清ＩｇＥレベルは回復した（図２Ａおよび２Ｂ；表２）。抗ＩＬ－４Ｒαと抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療の組み合わせは、血清ＩｇＥを排除し（ＩｇＥ ＥＬＩＳＡでは検出不可能）（図２Ａおよび２Ｂ；表２）、これは、ＩｇＥ産生を遮断するための成功した戦略として、ＩＬ－４Ｒαを遮断し、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３で形質細胞を枯渇させることの有効性を示している。

ＢＣＭＡ×ＣＤ３二重特異性抗体と抗ＩＬ－４Ｒα抗体との治療的組み合わせは、進行中のＨＤＭ曝露の際のＨＤＭ特異的ＩｇＥ産生を完全に遮断する
この実施例は、継続的なアレルゲン曝露の存在下でさえ、ＩＬ－４Ｒを遮断し、形質細胞を枯渇させることが、アレルゲン特異的ＩｇＥ産生の遮断に有効であることを実証する。

この実施例で使用されたＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、マウス抗ＩＬ－４Ｒ抗体ＲＥＧＮ１１０３であったが、これは、ＲＥＧＮ６６８（デュピルマブとしても知られる）として同定されるヒトＩＬ－４Ｒに対するヒトモノクローナル抗体のマウス代理抗体である。ＲＥＧＮ１１０３は、上記の実施例１において説明されている。使用した形質細胞除去剤は、上記の実施例１に記載の抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３二重特異性抗体ＲＥＧＮ５４５９であった。マウスＩｇＧ１抗体（ＲＥＧＮ１０９４）およびヒトＩｇＧ４×抗ＣＤ３抗体（ＲＥＧＮ４４６０）をアイソタイプ対照として使用した。

材料および方法
関連するｉｎ ｖｉｖｏモデルにおいてＩｇＥ産生に対する抗ＩＬ－４Ｒαおよび抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３の組み合わせの効果を決定するために、マウスＢＣＭＡとＣＤ３の代わりにヒトＢＣＭＡとヒトＣＤ３についてホモ接合性であるマウスにおいて、慢性ヒョウヒダニ（ＨＤＭ）誘導性肺炎症試験を実施した。１週間に３回、１９週間、鼻腔内投与（ｉ．ｎ．）で２０μＬの生理食塩水（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｓ８７７６）で希釈した２５μｇのＨＤＭ（Ｇｒｅｅｒ、カタログ番号ＸＰＢ７０Ｄ３Ａ２５）または２０μＬの生理食塩水（対照群）にマウスを曝露させることによって、慢性肺炎症および持続性のＩｇＥ産生を誘導した。このモデルは、二次リンパ器官におけるＢ細胞のＩｇＥ産生形質細胞へのクラススイッチを誘導し、骨髄におけるＩｇＥ形質細胞の蓄積を促進する。最初のＨＤＭ投与後１２週目に、一部のマウスに対して実験が終わるまで続く２５ｍｇ／ｋｇのＲＥＧＮ１１０３（抗ＩＬ－４Ｒα）または２５ｍｇ／ｋｇのＲＥＧＮ１０９４（アイソタイプ対照）の皮下注射が開始された。１５週目に、２用量のＲＥＧＮ５４５９（抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３）または２用量のＲＥＧＮ４４６０（アイソタイプ対照）を皮下投与し、マウスをさらに４週間ＨＤＭに曝露した。ＨＤＭ曝露と抗体治療プロトコールの詳細が以下の表３と図３に示されている。

ＲＥＧＮ５４５９投与から１週間後、３週間後および５週間後に、眼窩後出血によってマウスの全ての群から約１００μＬの血液を採取し、血清単離のためにマイクロテナーチューブ（ＢＤ、カタログ番号３６５９６７）に移した。血清中のＨＤＭ特異的ＩｇＥ濃度を、マウス血清抗ＨＤＭ ＩｇＥ抗体アッセイキット（Ｃｈｏｎｄｒｅｘカタログ番号３０３７）を使用して、製造元の指示に従って決定した。簡単に説明すると、１：２０または１：６０の濃度で希釈した１００μＬの血清サンプルと５０ｎｇ／ｍＬの開始濃度で希釈し、さらに２倍段階希釈したＨＤＭ－ＩｇＥ標準をキットに付属のプレコートプレートに添加し、４℃で一晩インキュベートした。次にプレートを洗浄バッファーで３回洗浄し、１００μＬのキットに付属のビオチン化ＨＤＭ中でインキュベートした。次にプレートを洗浄バッファーで４回洗浄し、１００μＬのストレプトアビジンペルオキシダーゼ（キットに付属）中、ＲＴで３０分間インキュベートした。プレートを７回洗浄し、１００μＬのＴＭＢ基質溶液（キットに付属）を各サンプルに加え、プレートを暗所で２５分間インキュベートした後、５０μＬの停止溶液（２Ｎ硫酸、キットに付属）を添加した。吸光度を４５０ｎｍで測定し、ＨＤＭ－ＩｇＥ濃度を検量線から計算した。血清ＩｇＥ値はｎｇ／ｍＬとして示される。ＨＤＭ特異的ＩｇＥのＥＬＩＳＡの定量下限（ＬＬＯＱ）は１５．６２ｎｇ／ｍＬであった。統計的有意性は、ダンの事後多重比較検定を使用したクラスカル・ウォリス検定によって、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍで決定した。

結果
慢性ＨＤＭモデルにおいて、抗ＩＬ４Ｒα治療は、統計的有意性には到達しなかったが、血清ＨＤＭ特異的ＩｇＥレベルの低減に向かう傾向を示し、この傾向は調査した３つの時点にわたって維持されていた（図４Ａ、４Ｂおよび４Ｃならびに表４を参照）。抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療は単独で、ＲＥＧＮ５４５９投与の１週間後にアイソタイプ対照群と比較した循環ＨＤＭ特異的ＩｇＥの有意な低減を導いたが（図４Ａ）、この効果は短命であり、二重特異性抗体投与の３週間後または５週間後には、ＨＤＭ特異的ＩｇＥのレベルは、アイソタイプ対照群と比較して有意に異ならなかった（図４Ｂおよび４Ｃおよび表４）。抗ＩＬ－４Ｒαと抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療の組み合わせは、血清ＨＤＭ特異的ＩｇＥを排除した（ＥＬＩＳＡでは検出不可能）。この効果は、実験期間中維持され（図４Ａ、４Ｂおよび４Ｃならびに表４を参照）、これは、継続的なアレルゲン曝露の存在下においても、アレルゲン特異的ＩｇＥ産生を遮断するための成功した戦略として、ＩＬ－４Ｒαを遮断し、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３で形質細胞を枯渇させることの効果を実証している。

ＩｇＥ骨髄形質細胞に対するＢＣＭＡ×ＣＤ３二重特異性抗体と抗ＩＬ－４Ｒα抗体との併用治療の効果
実施例２に記載のマウスをＩｇＥ骨髄形質細胞についても分析した。表３および図３に記載のＨＤＭ曝露および抗体治療プロトコールに従って、マウスを屠殺し、マウスから大腿骨を採取した。骨髄は、各骨の両端を切断し、各ウェルの底に穴を開けた９６ウェルＰＣＲプレートの個々のウェルに各骨を配置し、次にＰＣＲプレートを９６ウェル２ｍＬディープウェルコレクションプレートの上に置き、プレートを５００ｇで４分間遠心分離することによって、大腿骨から抽出した。骨髄を０．５ｍＬのＲＢＣ溶解緩衝液に再懸濁し、室温で３分間インキュベートした後、１～２ｍＬのＰＢＳを添加して溶解緩衝液を失活させた。細胞を４００ｇで４分間遠心分離し、上清をデカントし、ペレットを１ｍｌのＤＰＢＳに再懸濁し、ミリポアプレートフィルター（１００μｍ）で２ｍＬディープウェルプレート中に濾過した。次に、細胞を遠心分離し、２００μＬのＰＢＳに再懸濁した。次に、骨髄細胞を９６ウェルプレートにプレーティングし、生／死細胞マーカーで染色した後、抗体Ｂ２２０、ＣＤ１３８、ＩｇＭ、ＩｇＧ１、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ（細胞外ブロック）、および「Ｄｕｍｐ」（ＴＣＲβ、ＣＤ２００Ｒ３、Ｌｙ６Ｇ、ＣＤ４９ｂおよびＣＤ１１ｂを含む）で抗体染色を行った。

染色後、細胞をＭＡＣＳ緩衝液で２回洗浄し、ＰＢＳで１：４に希釈したＢＤ Ｃｙｔｏｆｉｘ（カタログ番号５５４６５５）で１５分間固定し、次にＭＡＣＳ緩衝液に再懸濁し、４℃で保存した。取得した日に細胞を洗浄し、ＢＤ Ｐｅｒｍ／洗浄バッファー（カタログ番号５５４７２３）中で１０分間インキュベートし、細胞内抗体Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｉｎ κ、ＩｇＧ１、およびＩｎｔｒａ ＩｇＥで染色した。次に、ＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａ機器で細胞を取得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアを使用して分析した。成熟ＩｇＥ骨髄形質細胞は、Ｌｉｖｅ、Ｄｕｍｐ－ Ｂ２２０－ Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｉｎ κ＋ ＩｇＥ＋として同定された。個々の抗体投与マウスにおける形質細胞の減少率は、次の式で計算した：１００－（１００×パーセント形質細胞／アイソタイプ群の平均パーセント形質細胞）。ここで、パーセント形質細胞は、全生細胞に対して計算される。

結果
抗体治療後の継続的なＨＤＭ曝露を伴う慢性ＨＤＭモデルでは、抗Ｉｌ－４Ｒαによる治療がＩｇＥ骨髄形質細胞低減の傾向を示したものの、抗ＩＬ４ＲαまたはＢＣＭＡ×ＣＤ３単独の投与はどちらも、採取時（ＢＣＭＡ×ＣＤ３投与の５週間後）にＩｇＥ骨髄形質細胞に有意な影響を示さなかった（図５および表５を参照）。対照的に、継続的な抗ＩＬ－４Ｒα投与と一過的な抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３投与の組み合わせは、未処置およびアイソタイプ対照の両方と比較して、ＩｇＥ骨髄形質細胞の有意な低減をもたらした（図５および表５を参照）。

ＩｇＥ産生およびＩｇＥ産生細胞に対するＢＣＭＡ×ＣＤ３二重特異性抗体と抗ＩＬ－４Ｒα抗体との併用治療の効果
関連するｉｎ ｖｉｖｏモデルにおいてＩｇＥ産生およびＩｇＥ産生細胞に対する抗ＩＬ－４Ｒαおよび抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３との併用治療の効果を決定するために、上記の実施例１～２に記載されているようにマウスＢＣＭＡおよびＣＤ３の代わりにヒトＢＣＭＡとヒトＣＤ３についてホモ接合性であるマウスにおいて、ＨＤＭ誘導性肺炎症試験を実施した。１週間に３回、１５週間、鼻腔内投与（ｉ．ｎ．）で２０μＬの生理食塩水で希釈した２５μｇのＨＤＭまたは２０μＬの生理食塩水（対照群）にマウスを曝露させることによって、慢性肺炎症および持続性のＩｇＥ産生を誘導した。このモデルは、二次リンパ器官におけるＢ細胞のＩｇＥ産生形質細胞へのクラススイッチを誘導し、骨髄におけるＩｇＥ形質細胞の蓄積を促進する。最初のＨＤＭ投与後１２週目に、一部のマウスに対して実験が終わるまで続く２５ｍｇ／ｋｇのＲＥＧＮ１１０３（抗ＩＬ－４Ｒα）または２５ｍｇ／ｋｇのＲＥＧＮ１０９４（アイソタイプ対照）の皮下注射が開始された。１５週目に、２用量のＲＥＧＮ５４５９（抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３）または２用量のＲＥＧＮ４４６０（アイソタイプ対照）を皮下投与し、さらなるＨＤＭの投与は行わずにマウスを２週間安静にさせた。ＨＤＭ曝露と抗体治療プロトコールの詳細は、以下の図６と表６に概説されている。

ＨＤＭ曝露および抗体治療プロトコールの後、マウスを屠殺し、血液、脾臓、および骨を採取した。心臓穿刺によってマウスの全ての群から血液を採取し、血清単離のためにマイクロテナーチューブ（ＢＤ、カタログ番号３６５９６７）に移した。血清中のＨＤＭ特異的ＩｇＥ濃度を、マウス血清抗ＨＤＭ ＩｇＥ抗体アッセイキット（Ｃｈｏｎｄｒｅｘカタログ番号３０３７）を使用して、製造元の指示に従って決定した。簡単に説明すると、１：１０または１：６０の濃度で希釈した１００μＬの血清サンプルと５０ｎｇ／ｍＬの開始濃度で希釈し、さらに２倍段階希釈したＨＤＭ－ＩｇＥ標準をキットに付属のプレコートプレートに添加し、４℃で一晩インキュベートした。次にプレートを洗浄バッファーで３回洗浄し、１００μＬのキットに付属のビオチン化ＨＤＭ中でインキュベートした。次にプレートを洗浄バッファーで４回洗浄し、１００μＬのストレプトアビジンペルオキシダーゼ（キットに付属）中、ＲＴで３０分間インキュベートした。プレートを７回洗浄し、１００μＬのＴＭＢ基質溶液（キットに付属）を各サンプルに加え、プレートを暗所で２５分間インキュベートした後、５０μＬの停止溶液（２Ｎ硫酸、キットに付属）を添加した。吸光度を４５０ｎｍで測定し、ＨＤＭ－ＩｇＥ濃度を検量線から計算した。血清ＩｇＥ値はｎｇ／ｍＬとして示される。統計的有意性は、ダンの事後多重比較検定を使用したクラスカル・ウォリス検定によって、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍで決定した。

脾臓および大腿骨もまたマウスから採取した。脾臓は、３ｍＬシリンジの後端を使用して２ｍｌのＲＰＭＩ培地中で７４ミクロンの細胞ストレーナー上で磨りつぶし、単一細胞の懸濁液を９６ウェルプレートに移した。骨髄は、各骨の両端を切断し、各ウェルの底に穴を開けた９６ウェルＰＣＲプレートの個々のウェルに各骨を配置し、次にＰＣＲプレートを９６ウェルディープ２ｍＬディープウェルコレクションプレートの上に置き、プレートを５００ｇで４分間遠心分離することによって、大腿骨から抽出した。脾臓サンプルを１ｍＬのＲＢＣ溶解緩衝液に、骨髄を０．５ｍＬのＲＢＣ溶解緩衝液に再懸濁し、室温で３分間インキュベートした後、１～２ｍＬのＰＢＳを添加して溶解緩衝液を失活させた。細胞を４００ｇで４分間遠心分離し、上清をデカントし、ペレットを１ｍＬのＤＰＢＳに再懸濁し、ミリポアプレートフィルター（１００μｍ）で２ｍＬディープウェルプレート中に濾過した。次に、細胞を遠心分離し、脾臓細胞を１ｍＬのＰＢＳに、骨髄を２００μＬのＰＢＳに再懸濁した。次に、脾臓細胞の１０分の１と全ての骨髄細胞を９６ウェルプレートにプレーティングし、生／死細胞マーカーで染色した後、抗体Ｂ２２０、ＣＤ１３８、ＩｇＭ、ＩｇＧ１、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ（細胞外ブロック）、および「Ｄｕｍｐ」（ＴＣＲβ、ＣＤ２００Ｒ３、Ｌｙ６Ｇ、ＣＤ４９ｂおよびＣＤ１１ｂを含む）で抗体染色を行った。染色後、細胞をＭＡＣＳ緩衝液で２回洗浄し、ＰＢＳで１：４に希釈したＢＤ Ｃｙｔｏｆｉｘ（カタログ番号５５４６５５）で１５分間固定し、ＭＡＣＳ緩衝液に再懸濁して４度で保存した。取得した日に細胞を洗浄し、ＢＤ Ｐｅｒｍ／洗浄バッファー（カタログ番号５５４７２３）中で１０分間インキュベートし、細胞内抗体Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｉｎ κ、ＩｇＧ１、およびＩｎｔｒａ ＩｇＥで染色した。次に、ＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａ機器で細胞を取得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアを使用して分析した。成熟形質細胞は、Ｌｉｖｅ、Ｄｕｍｐ－（ＤｕｍｐはＴＣＲｂ、ＣＤ２００Ｒ３、Ｌｙ６Ｇ、ＣＤ４９ｂおよびＣＤ１１ｂを含む） Ｂ２２０－ Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｉｎ ｋ＋として同定された。個々の抗体投与マウスにおける形質細胞の減少率は、次の式で計算した：１００－（１００×パーセント形質細胞／アイソタイプ群の平均パーセント形質細胞）。ここで、パーセント形質細胞は全生細胞に対して計算される。結果は以下の表７に示されている。

結果
慢性ＨＤＭモデルにおいて、抗ＩＬ４Ｒα治療（Ｆ群）は、血清ＨＤＭ特異的ＩｇＥレベル低減の傾向を示したが、ほとんどのサンプルは検出可能なレベルのＨＤＭ特異的ＩｇＥを有していた（表７および図７を参照）。抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療単独（Ｅ群）および抗ＩＬ－４Ｒαと抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療の組み合わせ（Ｇ群）の両方が、血清ＨＤＭ特異的ＩｇＥを排除し、全てのマウスが定量化の下限未満のレベルを示した。これらのデータは、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療が、投与２週間後において血清ＨＤＭ特異的ＩｇＥを有意に低下させるのに十分であることを実証している。

同じ実験において、抗ＩＬ４Ｒα治療は、総骨髄形質細胞には影響を与えず（図８Ａ）、ＩｇＥ骨髄形質細胞低減の傾向を示した（図８Ｂ）。抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療単独は、採取時（ＲＥＧＮ５４５９投与の２週間後）に、未処置群とアイソタイプ対照処置群の両方と比較して、総骨髄形質細胞とＩｇＥ骨髄形質細胞の両方の有意な低減を導いた（図８Ａ～８Ｂ）。抗ＩＬ－４Ｒαと抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療の組み合わせも、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３単独と同程度に、総骨髄形質細胞およびＩｇＥ特異的骨髄形質細胞を有意に低減させ、これは、後者の治療が骨髄形質細胞を枯渇させるのに十分であることを実証している。同様な結果が脾臓でも観察された；抗ＩＬ４Ｒα治療は、総またはＩｇＥ脾臓形質細胞に対して影響を与えなかった（図８Ｃ～８Ｄ）。抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療単独は、採取時（ＲＥＧＮ５４５９投与の２週間後）に、未処置群とアイソタイプ対照処置群の両方と比較して、総脾臓形質細胞の有意な低減を導いた（図８Ｃ～８Ｄ）。抗ＩＬ－４Ｒαと抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療の組み合わせも、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３単独と同程度に、総脾臓形質細胞を有意に低減させ、後者の治療が脾臓形質細胞を枯渇させるのに十分であることを実証した。ＩｇＥ形質細胞は、抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３治療単独および抗ＩＬ－４Ｒαと抗ＢＣＭＡ×抗ＣＤ３の組み合わせの両方で低減した。しかしながら、ＩｇＥ脾臓形質細胞の低減は、抗体治療の非存在下で１２週間ＨＤＭを受けた群またはアイソタイプ対照群と比較した場合にのみ統計的有意性を達成し、ＨＤＭを１５週間受け、抗体治療を受けなかった群と比較した場合には、統計的有意性は達成されなかった。

本発明は、本明細書に記載の特定の実施形態によって範囲が限定されるべきではない。実際、本明細書中に記載されているものに加えて、本発明の様々な改変が、前述の説明および付随する図面から当業者には明らかとなるであろう。そのような修正は、添付の特許請求の範囲内におさまることが意図されている。

Claims (48)

1. 対象におけるアレルゲン特異的血清ＩｇＥを低減または排除する方法であって、（ａ）アレルギー性疾患もしくは障害、肥満細胞活性化障害または肥満細胞症を有する対象を選択すること；ならびに（ｂ）治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤をそれを必要とする対象に投与することを含む前記方法。
2. アレルギーを治療する方法、またはアレルゲンに対するアレルギー反応の重症度を予防または低減する方法であって、（ａ）アレルギー性疾患もしくは障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を有する対象を選択すること；ならびに（ｂ）治療有効量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤をそれを必要とする対象に投与することを含む方前記法。
3. アレルギーを治療するための方法、またはアレルゲンに対するアレルギー反応の重症度を予防または低減するための方法であって、（ａ）アレルギー性疾患もしくは障害、肥満細胞活性化障害、または肥満細胞症を有する対象であって、１つまたはそれ以上の用量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤を含むバックグラウンド治療レジメンを受けている対象を選択すること；ならびに（ｂ）該対象に少なくとも１用量の形質細胞除去剤を投与することを含む前記方法。
4. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤の投与は、新しいＩｇＥ＋形質細胞の生成を防ぎ、形質細胞除去剤の投与は、骨髄に存在するＩｇＥ＋形質細胞の排除を促進し、よって、対象におけるアレルゲン特異的血清ＩｇＥを低減または排除する、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
5. アレルギー性疾患または障害は、アレルギー性喘息、枯草熱、慢性蕁麻疹、食物アレルギー、花粉アレルギー、および環境（非食物）アレルゲンによるアレルギーから成る群から選択される、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法、
6. 対象にアレルゲンによるアナフィラキシーのリスクがある、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
7. 対象が季節性のアレルギーを有する、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。
8. 対象が重度のアレルギーを有する、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。
9. 対象は、ミルク、乳製品、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、大豆、魚、果物、甲殻類、砂糖、ピーナッツ、マメ科植物、木の実、ほこり、チリダニ、花粉、昆虫毒、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属、家庭用クリーナー、洗剤、薬、化粧品、香水、ペニシリン、スルホンアミド、またはサリチル酸塩のような薬剤、治療用モノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ）、ブタクサ、草およびカバノキから成る群から選択される１つまたはそれ以上のアレルゲンに起因するアレルギーを有する、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
10. アレルゲンは、ミルク、乳製品、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、果物、大豆、魚、甲殻類、砂糖、ピーナッツ、マメ科植物、および木の実から成る群から選択される食品に含まれるか、またはそれらに由来する、請求項１～９のいずれか１項に記載の方法。
11. アレルゲンは、ほこり、チリダニ、花粉、昆虫毒、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属、家庭用クリーナー、洗剤、薬、化粧品、香水、ペニシリン、スルホンアミド、またはサリチル酸塩のような薬剤、治療用モノクローナル抗体（例えば、セツキシマブ）、ブタクサ、グラスおよびカバノキから成る群から選択される非食物アレルゲンである、請求項１～９のいずれか１項に記載の方法。
12. アレルギーを有する対象における免疫療法レジメンの有効性および／または耐容性を高める方法であって、該免疫療法レジメンの前または同時に、ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤を該対象に投与することを含む前記方法。
13. 免疫療法が経口免疫療法である、請求項１２に記載の方法。
14. 免疫療法が皮下免疫療法である、請求項１２に記載の方法。
15. 対象が食物アレルギーを有する、請求項１２～１４のいずれか１項に記載の方法。
16. 対象は、ミルク、乳製品、卵、セロリ、ゴマ、小麦、肉、果実、大豆、魚、甲殻類、砂糖、ピーナッツ、マメ科植物、または木の実に対するアレルギーを有する、請求項１５に記載の方法。
17. 対象は、ほこり、チリダニ、花粉、昆虫毒、カビ、動物の毛皮、動物の鱗屑、羊毛、ラテックス、金属、家庭用クリーナー、洗剤、化粧品、香水、薬、治療用モノクローナル抗体、ブタクサ、草およびカバノキから成る群から選択される非食物アレルゲンに対してアレルギーを有する、請求項１２～１４のいずれか１項に記載の方法。
18. 形質細胞除去剤は、免疫療法レジメンの開始前に投与される、請求項１２～１７のいずれか１項に記載の方法。
19. 免疫療法レジメンの開始前に、少なくとも１用量のＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が投与される、請求項１２～１８のいずれか１項に記載の方法。
20. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、免疫療法レジメンと同時に投与される、請求項１２～１９のいずれか１項に記載の方法。
21. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、抗ＩＬ－４抗体、抗ＩＬ－１３抗体、抗ＩＬ－４／ＩＬ－１３二重特異性抗体、ＩＬ－４受容体（ＩＬ－４Ｒ）阻害剤、ＩＬ－４トラップ、ＩＬ－１３トラップ、および抗ＩＬ－４Ｒ抗体から成る群から選択される、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。
22. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が抗ＩＬ－４抗体である、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。
23. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が抗ＩＬ－１３抗体である、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。
24. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が抗ＩＬ－４／ＩＬ－１３二重特異性抗体である、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。
25. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤がＩＬ－４Ｒ阻害剤である、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。
26. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤が抗ＩＬ－４Ｒ抗体である、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。
27. 抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、３つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）、ならびに３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含み、ここで、ＨＣＤＲ１は配列番号３のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２は配列番号４のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３は配列番号５のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１は配列番号６のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２は配列番号７のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ３は配列番号８のアミノ酸配列を有する、請求項２６に記載の方法。
28. 抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と、配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含む、請求項２７に記載の方法。
29. 抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号９のアミノ酸配列を有する、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。
30. 抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖が配列番号１０のアミノ酸配列を有する、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。
31. 抗ＩＬ－４Ｒ抗体は、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号９のアミノ酸配列を有し、該軽鎖が配列番号１０のアミノ酸配列を有する、請求項２６～２８のいずれか１項に記載の方法。
32. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤がデュピルマブまたはその生物学的同等物である、請求項１～３１のいずれか１項に記載の方法。
33. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、デュピルマブ、パスコリズマブ、ＡＭＧ３１７、ＭＥＤＩ２０４５、ＭＥＤＩ９３１４、トラロキヌマブ、レブリクジマブ、アンルキンズマブ、デクトレクマブ、ＧＳＫ６７９５８６、ＭＥＤＩ７８３６、ロミルキマブ、ＩＬ－４トラップ、ＩＬ－１３トラップ、ＡＥＲ－００３、およびピトラキンラから成る群から選択される、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。
34. 形質細胞除去剤は、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）標的化剤、プロテアソーム阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、ＢＡＦＦ阻害剤、およびＡＰＲＩＬ阻害剤から成る群から選択される、請求項１～３３のいずれか１項に記載の方法。
35. ＢＣＭＡ標的化剤は、抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体、ＢＣＭＡに対するキメラ抗原受容体（「ＢＣＭＡ ＣＡＲ」）、および細胞障害剤にコンジュゲートした抗ＢＣＭＡ抗体（「ＢＣＭＡ ＡＤＣ」）から成る群から選択される、請求項３４に記載の方法。
36. 形質細胞除去剤は、（ａ）ＢＣＭＡに特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン；および（ｂ）ＣＤ３に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項１～３５のいずれか１項に記載の方法。
37. 第１の抗原結合ドメインは、配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と共に含まれる３つの重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）；ならびに配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）と共に含まれる３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含む、請求項３６に記載の方法。
38. ＨＣＤＲ１が配列番号１４のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２が配列番号１６のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３が配列番号１８のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１が配列番号２２のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２が配列番号２４のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ３が配列番号２６のアミノ酸配列を有する、請求項３７に記載の方法。
39. 第２の抗原結合ドメインは、配列番号２８および３６から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）と共に含まれる３つの重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）、ならびに配列番号２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）と共に含まれる３つの軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含む、請求項３６～３８のいずれか１項に記載の方法。
40. ＨＣＤＲ１が配列番号３０または３８のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ２が配列番号３２または４０のアミノ酸配列を有し、ＨＣＤＲ３が配列番号３４または４２のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ１が配列番号２２のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ２が配列番号２４のアミノ酸配列を有し、ＬＣＤＲ３が配列番号２６のアミノ酸配列を有する、請求項３９に記載の方法。
41. 抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、
    （ａ）配列番号１４、１６および１８のアミノ酸配列をそれぞれ含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第１の抗原結合ドメイン：ならびに
    （ｂ）配列番号３０、３２および３４のアミノ酸配列をそれぞれ含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第２の抗原結合ドメイン
    を含む、請求項３６に記載の方法。
42. 抗ＢＣＭＡ／抗ＣＤ３二重特異性抗体またはその抗原結合フラグメントは、
    （ａ）配列番号１４、１６および１８のアミノ酸配列をそれぞれ含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第１の抗原結合ドメイン：ならびに
    （ｂ）配列番号３８、４０および４２のアミノ酸配列をそれぞれ含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３ドメイン、ならびに配列番号２２、２４および２６のアミノ酸配列をそれぞれ含むＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３ドメインを含む第２の抗原結合ドメイン
    を含む、請求項３６に記載の方法。
43. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、形質細胞除去剤の前に投与される、請求項１～４２のいずれか１項に記載の方法。
44. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤は、形質細胞除去剤の後に投与される、請求項１～４２のいずれか１項に記載の方法。
45. ＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤および形質細胞除去剤が同時に投与される、請求項１～４２のいずれか１項に記載の方法。
46. 投与は、単剤療法としてＩＬ－４／ＩＬ－１３経路阻害剤または形質細胞除去剤のいずれかで治療された対象と比較して、ＩｇＥ産生を遮断し、対象の血清からアレルゲン特異的ＩｇＥを排除する、請求項１～４５のいずれか１項に記載の方法。
47. 少なくとも１つの追加の治療薬または治療法を施すことをさらに含む、請求項１～４６のいずれか１項に記載の方法。
48. 追加の治療薬は、ＩｇＥアンタゴニスト、抗ヒスタミン薬、抗炎症薬、コルチコステロイド、ロイコトリエンアンタゴニスト、肥満細胞阻害薬、気管支拡張薬、充血除去薬、エピネフリン、ＩＬ－１アンタゴニスト、ＩＬ－５アンタゴニスト、ＩＬ－３１アンタゴニスト、ＩＬ－３３アンタゴニスト、ＩＬ－２５アンタゴニスト、インターフェロンγ、ＴＮＦアンタゴニスト、およびＴＳＬＰアンタゴニストから成る群から選択される、請求項４７に記載の方法。

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