JP2013534827A5 - - Google Patents

Claims (15)

1. １つ以上の外因性ポリヌクレオチドを含み、前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する生物若しくはその一部または種子と比較したときに、増加したレベルの１つ以上の非極性脂質を有する、トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部、または植物のトランスジェニック種子。
2. 前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが、ＭＧＡＴ、好ましくはＭＧＡＴ２、および／またはＤＧＡＴ２をコードする、請求項１に記載のトランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子。
3. 前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子の前記１つ以上の非極性脂質のレベルは、前記対応する生物若しくはその一部または種子よりも、重量基準で少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）大きく、および／または相対基準で少なくとも１％（ｗ／ｗ）大きい、請求項１または２に記載のトランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子。
4. （ｉ）前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが、ＭＧＡＴ及びＧＰＡＴ、ＭＧＡＴ及びＤＧＡＴ、またはＭＧＡＴ、ＧＰＡＴ及びＤＧＡＴの全ての三種をコードすること、好ましくは前記ＧＰＡＴはまた、ＭＡＧを生成するホスファターゼ活性を有すること、並びに好ましくは前記ＤＧＡＴは、ＤＧＡＴ２であること；
   （ｉｉ）前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子の前記総非極性脂質含量は、前記対応する生物またはその一部と比較して増加すること；
   （ｉｉｉ）前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子の前記総非極性脂質含量は、前記対応する生物若しくはその一部または種子よりも、重量基準で少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）大きい、および／または相対基準で少なくとも１％大きいこと；
   （ｉｖ）前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子の前記脂質中の前記多価不飽和脂肪酸含量は、前記対応する生物若しくはその一部または種子の前記脂質と比較して増加すること；
   （ｖ）前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子の脂質中の多価不飽和脂肪酸の含量は、前記対応する生物若しくはその一部または種子の脂質と比較して増加し、前記多価不飽和脂肪酸は、エイコサジエン酸（ＥＤＡ）、アラキドン酸（ＡＲＡ）、アルファリノレン酸（ＡＬＡ）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）、エイコサトリエン酸（ＥＴＥ）、エイコサテトラエン酸（ＥＴＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、またはこれらの２つ以上の組み合わせを含むこと；
   （ｖｉ）前記トランスジェニック非ヒト生物は、植物、藻類、または酵母もしくは真菌類等の発酵に好適な生物であること；
   （ｖｉｉ）前記一部は、植物の種子、果実、または栄養部であること；
   （ｖｉｉｉ）前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子は、ブラッシカ種、ゴシピウム・ヒルスツム、リナム・ウシタチシマム、ヘリアンサス種、カルタムス・ティンクトリウス、グリシネ・マク、ゼア・マイス、アラビドプシス・サリアナ、ソルガム・バイカラー、ソルガム・ブルガレ、アベナ・サティバ、トリフォリウム種、カメリナ・サティバ、ミスカンサス・ギガンテウス、若しくはミスカンサス・シネンシスから由来し、またはルピナス、ピーナッツ、若しくはヒマワリから由来すること；
   （ｉｘ）前記種子の総含油量または総脂肪酸含量は、前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する種子よりも、重量基準で少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）〜２５％（ｗ／ｗ）大きいこと；
   （ｘ）前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子は、植物の前記栄養部、気中植物部、緑色植物部、植物の葉、または植物の茎であること；
   （ｘｉ）前記植物の栄養部のＴＡＧ、ＤＡＧ、ＴＡＧおよびＤＡＧ、またはＭＡＧ含量は、前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する植物の栄養部のＴＡＧ、ＤＡＧ、ＴＡＧおよびＤＡＧ、またはＭＡＧ含量よりも、相対基準で少なくとも１０％（ｗ／ｗ）大きいこと；
   （ｘｉｉ）前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子の前記脂質の脂肪酸含量の少なくとも６０％（ｍｏｌ％）は、オレイン酸であること；並びに
   （ｘｉｉｉ）前記トランスジェニック生物若しくはその一部または種子の前記１つ以上の非極性脂質のレベルおよび／または総脂質含量は、前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如しているが、アラビドプシス・サリアナＤＧＡＴ１をコードする外因性ポリヌクレオチドを含む、対応する生物若しくはその一部または種子よりも、重量基準で少なくとも０．５％（ｗ／ｗ）大きい、および／または相対基準で少なくとも１％（ｗ／ｗ）大きいこと
   の一つ以上によって特徴付けされる、請求項１から３のいずれか一項に記載のトランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子。
5. 前記非極性脂質は、ＴＡＧ、ＤＡＧ、ＴＡＧおよびＤＡＧ、ＭＡＧ、総ＰＵＦＡ、またはエイコサジエン酸（ＥＤＡ）、アラキドン酸（ＡＲＡ）、アルファリノレン酸（ＡＬＡ）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）、エイコサトリエン酸（ＥＴＥ）、エイコサテトラエン酸（ＥＴＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、またはこれらの２つ以上の組み合わせであるである特異的ＰＵＦＡである、請求項１から４のいずれか一項に記載のトランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子。
6. 抽出脂質を生成する方法であって、
   ｉ）請求項１から５のいずれか一項に記載のトランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子を得るステップと、
   ｉｉ）前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部から前記脂質を抽出し、それによって、前記抽出脂質を生成するステップと、
   を含む、方法。
7. 前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子は、
   ｉ）重量基準で少なくとも４５％の種子油、
   ｉｉ）対応する種子よりも少なくとも５％（ｗ／ｗ）大きい相対種子油含量、
   ｉｉｉ）対応する種子よりも少なくとも１０％（ｗ／ｗ）大きい相対ＤＡＧ含量、
   ｉｖ）対応する種子よりも少なくとも５％（ｗ／ｗ）大きい相対ＴＡＧ含量、
   のうちの１つ以上を含むカノーラ種子である、請求項６に記載の方法。
8. 前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子は、
   ｉ）重量基準で少なくとも５％の種子油、
   ｉｉ）対応する種子よりも少なくとも５％（ｗ／ｗ）大きい相対種子油含量、
   ｉｉｉ）対応する種子よりも少なくとも１０％（ｗ／ｗ）大きい相対ＤＡＧ含量、および
   ｉｖ）対応する種子よりも少なくとも５％（ｗ／ｗ）大きい相対ＴＡＧ含量、
   のうちの１つ以上を含むトウモロコシ種子である、請求項６に記載の方法。
9. 前記トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子は、
   ｉ）重量基準で少なくとも２０％の種子油、
   ｉｉ）対応する種子よりも少なくとも５％（ｗ／ｗ）大きい相対種子油含量、
   ｉｉｉ）対応する種子よりも少なくとも１０％（ｗ／ｗ）大きい相対ＤＡＧ含量、および
   ｉｖ）対応する種子よりも少なくとも５％（ｗ／ｗ）大きい相対ＴＡＧ含量
   のうちの１つ以上を含むダイズ種子である、請求項６に記載の方法。
10. トランスジェニック植物から前記種子を採取すること、前記種子から前記種子油を圧搾すること、前記種子油を精製すること、前記抽出脂質から脂肪酸のメチルエステルといったアルキルエステルを生成することをさらに含む、請求項６から９のいずれか一項に記載の方法。
11. １つ以上の非極性脂質を生成する増強された能力を伴う細胞を得る方法であって、
    ｉ）細胞の中に、
    ａ）ＭＧＡＴ、
    ｂ）ＤＧＡＴ２
    ｃ）ＭＧＡＴおよびＧＰＡＴ
    ｄ）ＭＧＡＴおよびＤＧＡＴ、または
    ｅ）ＭＧＡＴ、ＧＰＡＴ、およびＤＧＡＴ、をコードする１つ以上の外因性ポリヌクレオチドを導入することであって、
    前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが、前記細胞における前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドの発現を指令することができる１つ以上のプロモーターに操作可能に連結される、導入することと、
    ｉｉ）前記細胞において前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドを発現させることと、
    ｉｉｉ）前記細胞の脂質含量を分析することと、
    ｉｖ）前記外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する細胞と比較したときに、増加したレベルの１つ以上の非極性脂質を有する細胞を選択することと、
    を含む、方法。
12. 前記選択した細胞は、請求項１から５のいずれか一項に記載の生物若しくはその一部または種子の特徴の１つ以上を有する、請求項１１に記載の方法。
13. 前記１つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する生物若しくはその一部または種子と比較したときに、１つ以上の非極性脂質を生成する増強された能力を伴う、トランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子を生成するための、
    ｉ）ＭＧＡＴ、
    ｉｉ）ＤＧＡＴ２、
    ｉｉｉ）ＭＧＡＴおよびＧＰＡＴ
    ｉｖ）ＭＧＡＴおよびＤＧＡＴ、または
    ｖ）ＭＧＡＴ、ＧＰＡＴ、およびＤＧＡＴ
    をコードする、１つ以上の外因性ポリヌクレオチドの使用。
14. 種子を生成する方法であって、
    ｉ）トランスジェニック植物である、請求項１から５のいずれか一項に記載のトランスジェニック非ヒト生物を成長させることと、
    ｉｉ）前記植物から種子を収穫することと、
    を含む、方法。
15. 工業製品、好ましくは脂肪酸のメチルエステルといったアルキルエステルを製造するための、請求項１から５のいずれか一項に記載のトランスジェニック非ヒト生物若しくはその一部または種子の使用。