JP2013534827A - 脂質を生成する方法 - Google Patents
脂質を生成する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013534827A JP2013534827A JP2013516905A JP2013516905A JP2013534827A JP 2013534827 A JP2013534827 A JP 2013534827A JP 2013516905 A JP2013516905 A JP 2013516905A JP 2013516905 A JP2013516905 A JP 2013516905A JP 2013534827 A JP2013534827 A JP 2013534827A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- transgenic
- plant
- seq
- seed
- sequence
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 228
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract description 182
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 161
- 108010092861 2-acylglycerol O-acyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 141
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims abstract description 66
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 41
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 claims abstract description 32
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract description 16
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 303
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 295
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 295
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 295
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 163
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 163
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 162
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 120
- 101710091951 Glycerol-3-phosphate acyltransferase Proteins 0.000 claims description 100
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 88
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 88
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 88
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 79
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 77
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 73
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 67
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 64
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 58
- 101000698136 Homo sapiens Acyl-CoA wax alcohol acyltransferase 1 Proteins 0.000 claims description 49
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 49
- 102100027840 Acyl-CoA wax alcohol acyltransferase 1 Human genes 0.000 claims description 48
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 45
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 45
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 claims description 44
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 43
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 43
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 42
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 42
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 36
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 claims description 35
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 34
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 34
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 31
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 28
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 claims description 27
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 claims description 22
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 claims description 21
- 241000219198 Brassica Species 0.000 claims description 21
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims description 21
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 21
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 claims description 19
- 101100122577 Arabidopsis thaliana GPAT6 gene Proteins 0.000 claims description 18
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 18
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 18
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 16
- 108050004099 Diacylglycerol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 claims description 16
- 235000007230 Sorghum bicolor Nutrition 0.000 claims description 16
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 16
- 102100025376 Glycerol-3-phosphate acyltransferase 4 Human genes 0.000 claims description 15
- 101710199766 Glycerol-3-phosphate acyltransferase 4 Proteins 0.000 claims description 15
- 108010052187 1-Acylglycerophosphocholine O-Acyltransferase Proteins 0.000 claims description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 102100038805 Lysophospholipid acyltransferase 2 Human genes 0.000 claims description 13
- 108010069394 Phosphatidate Phosphatase Proteins 0.000 claims description 13
- 102000001107 Phosphatidate Phosphatase Human genes 0.000 claims description 13
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 12
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 claims description 12
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 11
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 claims description 11
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 claims description 11
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 claims description 11
- 239000000446 fuel Substances 0.000 claims description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 11
- YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N (7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCC(O)=O YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N 0.000 claims description 10
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 claims description 10
- 235000021294 Docosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims description 10
- OPGOLNDOMSBSCW-CLNHMMGSSA-N Fursultiamine hydrochloride Chemical compound Cl.C1CCOC1CSSC(\CCO)=C(/C)N(C=O)CC1=CN=C(C)N=C1N OPGOLNDOMSBSCW-CLNHMMGSSA-N 0.000 claims description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 claims description 10
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims description 10
- IQLUYYHUNSSHIY-HZUMYPAESA-N eicosatetraenoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O IQLUYYHUNSSHIY-HZUMYPAESA-N 0.000 claims description 10
- JIWBIWFOSCKQMA-UHFFFAOYSA-N stearidonic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCCC(O)=O JIWBIWFOSCKQMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 claims description 9
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 claims description 9
- AHANXAKGNAKFSK-PDBXOOCHSA-N all-cis-icosa-11,14,17-trienoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCCCC(O)=O AHANXAKGNAKFSK-PDBXOOCHSA-N 0.000 claims description 9
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims description 9
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 claims description 9
- PRHHYVQTPBEDFE-UHFFFAOYSA-N eicosatrienoic acid Natural products CCCCCC=CCC=CCCCCC=CCCCC(O)=O PRHHYVQTPBEDFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 9
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 claims description 8
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 8
- 241000219745 Lupinus Species 0.000 claims description 8
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 8
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 8
- 101100499137 Arabidopsis thaliana DGAT1 gene Proteins 0.000 claims description 7
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 claims description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 7
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 claims description 7
- XSXIVVZCUAHUJO-AVQMFFATSA-N (11e,14e)-icosa-11,14-dienoic acid Chemical compound CCCCC\C=C\C\C=C\CCCCCCCCCC(O)=O XSXIVVZCUAHUJO-AVQMFFATSA-N 0.000 claims description 6
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000021297 Eicosadienoic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 claims description 6
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 claims description 6
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000219793 Trifolium Species 0.000 claims description 6
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 claims description 6
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims description 6
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 5
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 claims description 5
- 241000878006 Miscanthus sinensis Species 0.000 claims description 5
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 5
- 241001074116 Miscanthus x giganteus Species 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 4
- 150000004702 methyl esters Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims description 4
- DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N (2e,4e,6e,8e,10e,12e)-docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N 0.000 claims description 3
- GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 6-Ketone, O18-Me-Ussuriedine Natural products CC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241001080168 Saliana Species 0.000 claims description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 3
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 3
- KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N docosahexaenoic acid (DHA) Natural products COC(=O)C(C)NOCC1=CC=CC=C1 KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 3
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 claims description 2
- 241001057636 Dracaena deremensis Species 0.000 claims description 2
- 240000002024 Gossypium herbaceum Species 0.000 claims description 2
- 235000004341 Gossypium herbaceum Nutrition 0.000 claims description 2
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 claims description 2
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 2
- 102100036869 Diacylglycerol O-acyltransferase 1 Human genes 0.000 claims 17
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 claims 4
- 101000927974 Homo sapiens Diacylglycerol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 claims 2
- 101710124165 1-acyl-sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase Proteins 0.000 claims 1
- 101710097496 Lysophospholipid acyltransferase Proteins 0.000 claims 1
- 101710163746 Lysophospholipid acyltransferase 2 Proteins 0.000 claims 1
- 101710172946 Probable 1-acyl-sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase Proteins 0.000 claims 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims 1
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 claims 1
- 102000045404 acyltransferase activity proteins Human genes 0.000 abstract description 2
- 108700014220 acyltransferase activity proteins Proteins 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 233
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 169
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 91
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 86
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 85
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 83
- 108010001348 Diacylglycerol O-acyltransferase Proteins 0.000 description 79
- 102000002148 Diacylglycerol O-acyltransferase Human genes 0.000 description 79
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 50
- 150000002759 monoacylglycerols Chemical class 0.000 description 50
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 45
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 34
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 30
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 30
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 29
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 28
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 27
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol group Chemical group OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 101001115709 Homo sapiens 2-acylglycerol O-acyltransferase 3 Proteins 0.000 description 25
- 101001052060 Homo sapiens Beta-1,4-mannosyl-glycoprotein 4-beta-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 25
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 25
- 102100023287 2-acylglycerol O-acyltransferase 3 Human genes 0.000 description 24
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 24
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 23
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 23
- -1 candles Substances 0.000 description 22
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 21
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 20
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 19
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 18
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 16
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 16
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 16
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 16
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 16
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 description 16
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000011331 Brassica Nutrition 0.000 description 15
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 15
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 15
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 15
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 13
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 13
- 241000219195 Arabidopsis thaliana Species 0.000 description 12
- 241000252212 Danio rerio Species 0.000 description 12
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 12
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 12
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 12
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 12
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 12
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 11
- 241000209219 Hordeum Species 0.000 description 11
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 11
- 108010054662 2-acylglycerophosphate acyltransferase Proteins 0.000 description 10
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 description 10
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 10
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 10
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 10
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 10
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 10
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 10
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 10
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- 102000018659 1-Acylglycerophosphocholine O-Acyltransferase Human genes 0.000 description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 9
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 9
- 108030002254 Phosphate acyltransferases Proteins 0.000 description 9
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 9
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 9
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 9
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 9
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 9
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 8
- 101800004637 Communis Proteins 0.000 description 8
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N Glycerol 2-phosphate Chemical compound OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 8
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 8
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 8
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 8
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 229940046257 glyceryl phosphate Drugs 0.000 description 8
- 235000002532 grape seed extract Nutrition 0.000 description 8
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 8
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 8
- 238000009482 thermal adhesion granulation Methods 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 101710171812 Glycerol-3-phosphate phosphatase Proteins 0.000 description 7
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 7
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 7
- 101100170389 Mus musculus Dgat2 gene Proteins 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 7
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 7
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 7
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 7
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 7
- 239000002551 biofuel Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 7
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 7
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 7
- 238000012225 targeting induced local lesions in genomes Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000589155 Agrobacterium tumefaciens Species 0.000 description 6
- 241000610258 Arabidopsis lyrata Species 0.000 description 6
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 6
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 6
- 102000013444 Diacylglycerol Cholinephosphotransferase Human genes 0.000 description 6
- 108010051225 Diacylglycerol cholinephosphotransferase Proteins 0.000 description 6
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 6
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000219146 Gossypium Species 0.000 description 6
- 101800000653 Helper component proteinase Proteins 0.000 description 6
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 6
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 6
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 6
- 150000002185 fatty acyl-CoAs Chemical class 0.000 description 6
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 6
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 6
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 6
- 101100122579 Arabidopsis thaliana GPAT8 gene Proteins 0.000 description 5
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 5
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 5
- 101000972916 Homo sapiens Alpha-1,3-mannosyl-glycoprotein 2-beta-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 5
- 101000577110 Mus musculus 2-acylglycerol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 description 5
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 5
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 5
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 5
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 5
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 5
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 5
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 5
- 210000002706 plastid Anatomy 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 5
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 5
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 5
- LWTDZKXXJRRKDG-KXBFYZLASA-N (-)-phaseollin Chemical compound C1OC2=CC(O)=CC=C2[C@H]2[C@@H]1C1=CC=C3OC(C)(C)C=CC3=C1O2 LWTDZKXXJRRKDG-KXBFYZLASA-N 0.000 description 4
- DUCVQOXJVCRDDH-UHFFFAOYSA-N (2-acetyloxy-3-hydroxypropyl) tetradecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)OC(C)=O DUCVQOXJVCRDDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101100170396 Arabidopsis thaliana DGAT3 gene Proteins 0.000 description 4
- 101100122571 Arabidopsis thaliana GPAT4 gene Proteins 0.000 description 4
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 4
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 description 4
- 241000195585 Chlamydomonas Species 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 4
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 4
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 4
- 101000930020 Homo sapiens Diacylglycerol O-acyltransferase 2 Proteins 0.000 description 4
- 101000581402 Homo sapiens Melanin-concentrating hormone receptor 1 Proteins 0.000 description 4
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 4
- 241000208467 Macadamia Species 0.000 description 4
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 description 4
- 108090000553 Phospholipase D Proteins 0.000 description 4
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 4
- 241000195887 Physcomitrella patens Species 0.000 description 4
- 102000037055 SLC1 Human genes 0.000 description 4
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 4
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 4
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 4
- 239000003225 biodiesel Substances 0.000 description 4
- 235000019506 cigar Nutrition 0.000 description 4
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 4
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000589156 Agrobacterium rhizogenes Species 0.000 description 3
- 102100022622 Alpha-1,3-mannosyl-glycoprotein 2-beta-N-acetylglucosaminyltransferase Human genes 0.000 description 3
- 244000226021 Anacardium occidentale Species 0.000 description 3
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000197813 Camelina sativa Species 0.000 description 3
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 3
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 3
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- 102100025682 Dystroglycan 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 3
- 102100024008 Glycerol-3-phosphate acyltransferase 1, mitochondrial Human genes 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 101000904268 Homo sapiens Glycerol-3-phosphate acyltransferase 1, mitochondrial Proteins 0.000 description 3
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 3
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 description 3
- 241000235575 Mortierella Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 241000207746 Nicotiana benthamiana Species 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 3
- 101710091688 Patatin Proteins 0.000 description 3
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 3
- 108700001094 Plant Genes Proteins 0.000 description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000942681 Rattus norvegicus Clusterin Proteins 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- 240000000528 Ricinus communis Species 0.000 description 3
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 3
- 108091006211 SLC4 Proteins 0.000 description 3
- 101000930003 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) Diacylglycerol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 description 3
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 3
- 108010039811 Starch synthase Proteins 0.000 description 3
- 241000948359 Tomato chlorosis virus Species 0.000 description 3
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 3
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 3
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 3
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 3
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000004136 fatty acid synthesis Effects 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 3
- 230000032361 posttranscriptional gene silencing Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 3
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 3
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N (+)-Abscisic acid Chemical compound OC(=O)/C=C(/C)\C=C\[C@@]1(O)C(C)=CC(=O)CC1(C)C JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N 0.000 description 2
- ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N (n-propan-2-yloxycarbonylanilino) acetate Chemical compound CC(C)OC(=O)N(OC(C)=O)C1=CC=CC=C1 ODIGIKRIUKFKHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010069159 1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase Proteins 0.000 description 2
- WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 1-oleoyl-sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 101710159080 Aconitate hydratase A Proteins 0.000 description 2
- 101710159078 Aconitate hydratase B Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 2
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 2
- 235000001274 Anacardium occidentale Nutrition 0.000 description 2
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 description 2
- 101100170383 Arabidopsis thaliana DGAT2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100229739 Arabidopsis thaliana GPAT1 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100229751 Arabidopsis thaliana GPAT3 gene Proteins 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 description 2
- 101000577108 Bos taurus 2-acylglycerol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 description 2
- 101100170385 Bos taurus DGAT2 gene Proteins 0.000 description 2
- 244000178924 Brassica napobrassica Species 0.000 description 2
- 235000011297 Brassica napobrassica Nutrition 0.000 description 2
- 235000011299 Brassica oleracea var botrytis Nutrition 0.000 description 2
- 240000003259 Brassica oleracea var. botrytis Species 0.000 description 2
- 101100494448 Caenorhabditis elegans cab-1 gene Proteins 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000016401 Camelina Nutrition 0.000 description 2
- 240000006432 Carica papaya Species 0.000 description 2
- 235000009467 Carica papaya Nutrition 0.000 description 2
- 241000195649 Chlorella <Chlorellales> Species 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- YAHZABJORDUQGO-NQXXGFSBSA-N D-ribulose 1,5-bisphosphate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)C(=O)COP(O)(O)=O YAHZABJORDUQGO-NQXXGFSBSA-N 0.000 description 2
- 241000255581 Drosophila <fruit fly, genus> Species 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 2
- 108010018837 Glycerol-3-Phosphate O-Acyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 102000002754 Glycerol-3-Phosphate O-Acyltransferase Human genes 0.000 description 2
- 102100024017 Glycerol-3-phosphate acyltransferase 3 Human genes 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- 108091027305 Heteroduplex Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000577109 Homo sapiens 2-acylglycerol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000577113 Homo sapiens 2-acylglycerol O-acyltransferase 2 Proteins 0.000 description 2
- 101001052064 Homo sapiens Alpha-1,6-mannosyl-glycoprotein 2-beta-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 101000904259 Homo sapiens Glycerol-3-phosphate acyltransferase 3 Proteins 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000186779 Listeria monocytogenes Species 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- 102100023740 Lysophosphatidylcholine acyltransferase 1 Human genes 0.000 description 2
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 2
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 2
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 2
- 101150030635 Mgat1 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 101710202365 Napin Proteins 0.000 description 2
- 108020003217 Nuclear RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000043141 Nuclear RNA Human genes 0.000 description 2
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 2
- 101710089395 Oleosin Proteins 0.000 description 2
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 2
- 241000209117 Panicum Species 0.000 description 2
- 235000006443 Panicum miliaceum subsp. miliaceum Nutrition 0.000 description 2
- 235000009037 Panicum miliaceum subsp. ruderale Nutrition 0.000 description 2
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 2
- 101710163504 Phaseolin Proteins 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- 102000011420 Phospholipase D Human genes 0.000 description 2
- 102000017352 Phospholipid/glycerol acyltransferases Human genes 0.000 description 2
- 108050005363 Phospholipid/glycerol acyltransferases Proteins 0.000 description 2
- 101710133727 Phospholipid:diacylglycerol acyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 108030002650 Phospholipid:diacylglycerol acyltransferases Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100021762 Phosphoserine phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 241000218657 Picea Species 0.000 description 2
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 description 2
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 241000508269 Psidium Species 0.000 description 2
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 2
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 2
- 241000233671 Schizochytrium Species 0.000 description 2
- 241000607762 Shigella flexneri Species 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 2
- 241000592344 Spermatophyta Species 0.000 description 2
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 2
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 108010043934 Sucrose synthase Proteins 0.000 description 2
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 2
- 241000233675 Thraustochytrium Species 0.000 description 2
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 2
- 241000723792 Tobacco etch virus Species 0.000 description 2
- 108700029229 Transcriptional Regulatory Elements Proteins 0.000 description 2
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 2
- 101710100170 Unknown protein Proteins 0.000 description 2
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 2
- 108010055615 Zein Proteins 0.000 description 2
- ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N acetyl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-ZSJPKINUSA-N 0.000 description 2
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical class C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 150000001336 alkenes Chemical group 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 2
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 2
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010087667 beta-1,4-mannosyl-glycoprotein beta-1,4-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 238000003390 bioluminescence detection Methods 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 2
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 2
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 2
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000004332 deodorization Methods 0.000 description 2
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- AEBZCFFCDTZXHP-UHFFFAOYSA-N europium(3+);oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[Eu+3].[Eu+3] AEBZCFFCDTZXHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001924 fatty-acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000004426 flaxseed Nutrition 0.000 description 2
- 238000005188 flotation Methods 0.000 description 2
- 238000004508 fractional distillation Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 108020002326 glutamine synthetase Proteins 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 108010050792 glutenin Proteins 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 2
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 2
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 description 2
- 230000006372 lipid accumulation Effects 0.000 description 2
- 230000004132 lipogenesis Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 235000021073 macronutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 2
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 2
- 210000000680 phagosome Anatomy 0.000 description 2
- LWTDZKXXJRRKDG-UHFFFAOYSA-N phaseollin Natural products C1OC2=CC(O)=CC=C2C2C1C1=CC=C3OC(C)(C)C=CC3=C1O2 LWTDZKXXJRRKDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 108010076573 phosphoserine phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 2
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150057826 plsC gene Proteins 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 2
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- 125000003203 triacylglycerol group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 description 1
- GEWDNTWNSAZUDX-WQMVXFAESA-N (-)-methyl jasmonate Chemical compound CC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](CC(=O)OC)CCC1=O GEWDNTWNSAZUDX-WQMVXFAESA-N 0.000 description 1
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGSSUFQMXBFFTM-UHFFFAOYSA-N (24R)-24-ethyl-5alpha-cholestane-3beta,5,6beta-triol Natural products C1C(O)C2(O)CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 VGSSUFQMXBFFTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N (2r,3r)-2,3-bis[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]butane-1,4-diol;(2r,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O.C1=C(O)C(OC)=CC(C[C@@H](CO)[C@H](CO)CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M (E)-Ferulic acid Natural products COC1=CC(\C=C\C([O-])=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-M 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- 102000000990 1-Acylglycerol-3-Phosphate O-Acyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108010010888 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150028074 2 gene Proteins 0.000 description 1
- JAHNSTQSQJOJLO-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluorophenyl)-1h-imidazole Chemical compound FC1=CC=CC(C=2NC=CN=2)=C1 JAHNSTQSQJOJLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MWMOPIVLTLEUJO-UHFFFAOYSA-N 2-oxopropanoic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.CC(=O)C(O)=O MWMOPIVLTLEUJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ARYTXMNEANMLMU-UHFFFAOYSA-N 24alpha-methylcholestanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(C)C(C)C)C1(C)CC2 ARYTXMNEANMLMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPMXNNIRAGDFEH-UHFFFAOYSA-N 3,5-dibromo-4-hydroxybenzonitrile Chemical compound OC1=C(Br)C=C(C#N)C=C1Br UPMXNNIRAGDFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CAAMSDWKXXPUJR-UHFFFAOYSA-N 3,5-dihydro-4H-imidazol-4-one Chemical compound O=C1CNC=N1 CAAMSDWKXXPUJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010020183 3-phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101150033839 4 gene Proteins 0.000 description 1
- HUNCSWANZMJLPM-UHFFFAOYSA-N 5-methyltryptophan Chemical compound CC1=CC=C2NC=C(CC(N)C(O)=O)C2=C1 HUNCSWANZMJLPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010000700 Acetolactate synthase Proteins 0.000 description 1
- QTXZASLUYMRUAN-QLQASOTGSA-N Acetyl coenzyme A (Acetyl-CoA) Chemical group O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1.O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 QTXZASLUYMRUAN-QLQASOTGSA-N 0.000 description 1
- 101710197633 Actin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 102100029457 Adenine phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108010024223 Adenine phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010000239 Aequorin Proteins 0.000 description 1
- 241000702449 African cassava mosaic virus Species 0.000 description 1
- 241000724328 Alfalfa mosaic virus Species 0.000 description 1
- 235000019489 Almond oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 description 1
- 241000744007 Andropogon Species 0.000 description 1
- 241000256186 Anopheles <genus> Species 0.000 description 1
- 240000002339 Anredera cordifolia Species 0.000 description 1
- 108010037870 Anthranilate Synthase Proteins 0.000 description 1
- 241001124076 Aphididae Species 0.000 description 1
- 241000710009 Apple chlorotic leaf spot virus Species 0.000 description 1
- 108700021822 Arabidopsis oleosin Proteins 0.000 description 1
- 101000857703 Arabidopsis thaliana Glycerol-3-phosphate 2-O-acyltransferase 6 Proteins 0.000 description 1
- 101100243066 Arabidopsis thaliana PDAT1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100243067 Arabidopsis thaliana PDAT2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101001095994 Arabidopsis thaliana Phospholipase D gamma 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100204308 Arabidopsis thaliana SUC2 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010002493 Arachin Proteins 0.000 description 1
- 241001225321 Aspergillus fumigatus Species 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241000724306 Barley stripe mosaic virus Species 0.000 description 1
- 241000710149 Beet yellows virus Species 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000021533 Beta vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 235000006463 Brassica alba Nutrition 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 244000140786 Brassica hirta Species 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000017647 Brassica oleracea var italica Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- 239000005489 Bromoxynil Substances 0.000 description 1
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 1
- 241000244203 Caenorhabditis elegans Species 0.000 description 1
- 235000014595 Camelina sativa Nutrition 0.000 description 1
- 240000001548 Camellia japonica Species 0.000 description 1
- SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N Campesterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 101100507655 Canis lupus familiaris HSPA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001249699 Capitata Species 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 235000014649 Carica monoica Nutrition 0.000 description 1
- 244000132069 Carica monoica Species 0.000 description 1
- 101000767750 Carya illinoinensis Vicilin Car i 2.0101 Proteins 0.000 description 1
- 235000019492 Cashew oil Nutrition 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010004103 Chylomicrons Proteins 0.000 description 1
- 240000006740 Cichorium endivia Species 0.000 description 1
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 description 1
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000767759 Corylus avellana Vicilin Cor a 11.0101 Proteins 0.000 description 1
- 102000034534 Cotransporters Human genes 0.000 description 1
- 108020003264 Cotransporters Proteins 0.000 description 1
- 241000723655 Cowpea mosaic virus Species 0.000 description 1
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 1
- 101900178036 Cucumber mosaic virus Suppressor of silencing 2b Proteins 0.000 description 1
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 1
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 229920000832 Cutin Polymers 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010066133 D-octopine dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101150042222 DGAT1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- NDUPDOJHUQKPAG-UHFFFAOYSA-N Dalapon Chemical compound CC(Cl)(Cl)C(O)=O NDUPDOJHUQKPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150102653 Dgat2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 235000001950 Elaeis guineensis Nutrition 0.000 description 1
- 244000127993 Elaeis melanococca Species 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 101000896135 Enterobacteria phage T4 Baseplate tail-tube junction protein gp48 Proteins 0.000 description 1
- 241000608781 Eptesicus serotinus Species 0.000 description 1
- 241000160765 Erebia ligea Species 0.000 description 1
- 101000896134 Escherichia phage Mu Baseplate protein gp48 Proteins 0.000 description 1
- 241000490229 Eucephalus Species 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 1
- 101710129170 Extensin Proteins 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 101100325703 Flock house virus B2 gene Proteins 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 description 1
- 240000009088 Fragaria x ananassa Species 0.000 description 1
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 108010017464 Fructose-Bisphosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102000027487 Fructose-Bisphosphatase Human genes 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 102100035184 General transcription and DNA repair factor IIH helicase subunit XPD Human genes 0.000 description 1
- 108010061711 Gliadin Proteins 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 1
- XYZZKVRWGOWVGO-UHFFFAOYSA-N Glycerol-phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.OCC(O)CO XYZZKVRWGOWVGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700037728 Glycine max beta-conglycinin Proteins 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000168525 Haematococcus Species 0.000 description 1
- BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N Haliclonasterol Natural products CC(C=CC(C)C(C)(C)C)C1CCC2C3=CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000519953 Hibiscus chlorotic ringspot virus Species 0.000 description 1
- 101000599886 Homo sapiens Isocitrate dehydrogenase [NADP], mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 101100291032 Homo sapiens MGAT1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100345336 Homo sapiens MGAT2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000923016 Homo sapiens Protein GAPT Proteins 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- GRRNUXAQVGOGFE-UHFFFAOYSA-N Hygromycin-B Natural products OC1C(NC)CC(N)C(O)C1OC1C2OC3(C(C(O)C(O)C(C(N)CO)O3)O)OC2C(O)C(CO)O1 GRRNUXAQVGOGFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 description 1
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 description 1
- 102100037845 Isocitrate dehydrogenase [NADP], mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 101000622316 Juglans regia Vicilin Jug r 2.0101 Proteins 0.000 description 1
- 108010025815 Kanamycin Kinase Proteins 0.000 description 1
- 101100288095 Klebsiella pneumoniae neo gene Proteins 0.000 description 1
- 241000588744 Klebsiella pneumoniae subsp. ozaenae Species 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 235000003228 Lactuca sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000218652 Larix Species 0.000 description 1
- 235000008119 Larix laricina Nutrition 0.000 description 1
- 241000218653 Larix laricina Species 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- 101710094902 Legumin Proteins 0.000 description 1
- 241000209510 Liliopsida Species 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000218922 Magnoliophyta Species 0.000 description 1
- 241000723994 Maize dwarf mosaic virus Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 235000004456 Manihot esculenta Nutrition 0.000 description 1
- 235000010624 Medicago sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101100409013 Mesembryanthemum crystallinum PPD gene Proteins 0.000 description 1
- 101150093077 Mgat2 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000003433 Miscanthus floridulus Species 0.000 description 1
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 1
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 1
- 101001115707 Mus musculus 2-acylglycerol O-acyltransferase 2 Proteins 0.000 description 1
- 241000234295 Musa Species 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 1
- 101000800735 Mycolicibacterium fortuitum Putative 3-methyladenine DNA glycosylase Proteins 0.000 description 1
- 241000237536 Mytilus edulis Species 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000221961 Neurospora crassa Species 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 108010033272 Nitrilase Proteins 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 1
- 101150063227 PAT21 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001520808 Panicum virgatum Species 0.000 description 1
- 235000008753 Papaver somniferum Nutrition 0.000 description 1
- 240000001090 Papaver somniferum Species 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N Paromomycin II Natural products NC1C(O)C(O)C(CN)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(N)CC(N)C2O)OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)N)OC1CO UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 235000008673 Persea americana Nutrition 0.000 description 1
- 244000025272 Persea americana Species 0.000 description 1
- 102100032967 Phospholipase D1 Human genes 0.000 description 1
- 102100038121 Phospholipid phosphatase 1 Human genes 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 241000235061 Pichia sp. Species 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 101000767757 Pinus koraiensis Vicilin Pin k 2.0101 Proteins 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 101000767758 Pistacia vera Vicilin Pis v 3.0101 Proteins 0.000 description 1
- 108020005120 Plant DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000723784 Plum pox virus Species 0.000 description 1
- 241000209504 Poaceae Species 0.000 description 1
- 101100505672 Podospora anserina grisea gene Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 208000020584 Polyploidy Diseases 0.000 description 1
- 241000218976 Populus trichocarpa Species 0.000 description 1
- 241000723762 Potato virus Y Species 0.000 description 1
- 108700042986 Potyvirus 35-kDa Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031494 Protein GAPT Human genes 0.000 description 1
- 235000006029 Prunus persica var nucipersica Nutrition 0.000 description 1
- 244000017714 Prunus persica var. nucipersica Species 0.000 description 1
- 241000643890 Quercus ellipsoidalis Species 0.000 description 1
- 244000084520 Quercus macrocarpa Species 0.000 description 1
- 101150090155 R gene Proteins 0.000 description 1
- 101710105008 RNA-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000589187 Rhizobium sp. Species 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010003581 Ribulose-bisphosphate carboxylase Proteins 0.000 description 1
- 241000702632 Rice dwarf virus Species 0.000 description 1
- 241000724205 Rice stripe tenuivirus Species 0.000 description 1
- 108700008530 Rice yellow mottle virus P1 Proteins 0.000 description 1
- 241000235088 Saccharomyces sp. Species 0.000 description 1
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 1
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 1
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 108010016634 Seed Storage Proteins Proteins 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 235000003434 Sesamum indicum Nutrition 0.000 description 1
- 244000040738 Sesamum orientale Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 108010052160 Site-specific recombinase Proteins 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-JFBKYFIKSA-N Sitostanol Natural products O[C@@H]1C[C@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@@H]([C@H]4[C@@](C)([C@@H]([C@@H](CC[C@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC2)CC1 LGJMUZUPVCAVPU-JFBKYFIKSA-N 0.000 description 1
- 238000000944 Soxhlet extraction Methods 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000187191 Streptomyces viridochromogenes Species 0.000 description 1
- 241000723806 Sugarcane mosaic virus Species 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 101710180274 Suppressor of RNA-mediated gene silencing Proteins 0.000 description 1
- 241001609660 Sweet potato chlorotic stunt virus Species 0.000 description 1
- 241000192707 Synechococcus Species 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- 241000255588 Tephritidae Species 0.000 description 1
- 241001122767 Theaceae Species 0.000 description 1
- 108010089860 Thylakoid Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108700042974 Tobacco mosaic virus 130k Proteins 0.000 description 1
- 241000723573 Tobacco rattle virus Species 0.000 description 1
- 241000724280 Tomato aspermy virus Species 0.000 description 1
- 101900024951 Tomato bushy stunt virus RNA silencing suppressor p19 Proteins 0.000 description 1
- 241000702295 Tomato golden mosaic virus Species 0.000 description 1
- 241000016010 Tomato spotted wilt orthotospovirus Species 0.000 description 1
- 241000543828 Tomato yellow leaf curl Sardinia virus Species 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 241001557886 Trichoderma sp. Species 0.000 description 1
- 102000005924 Triose-Phosphate Isomerase Human genes 0.000 description 1
- 108700015934 Triose-phosphate isomerases Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 241000714211 Turnip crinkle virus Species 0.000 description 1
- 101000897785 Turnip crinkle virus Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000014384 Type C Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010079194 Type C Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004922 Vigna radiata Species 0.000 description 1
- 235000010721 Vigna radiata var radiata Nutrition 0.000 description 1
- 235000011469 Vigna radiata var sublobata Nutrition 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 239000004164 Wax ester Substances 0.000 description 1
- 241000702302 Wheat dwarf virus Species 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 1
- 241000607477 Yersinia pseudotuberculosis Species 0.000 description 1
- 229920002494 Zein Polymers 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- RZZPDXZPRHQOCG-UHFFFAOYSA-N [[5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound OC1C(O)C(COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC1N1C(=O)N=C(N)C=C1 RZZPDXZPRHQOCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 108020002494 acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 108010050181 aleurone Proteins 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 125000002009 alkene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001353 alkyl acyl glycerols Chemical class 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- ZOJBYZNEUISWFT-UHFFFAOYSA-N allyl isothiocyanate Chemical compound C=CCN=C=S ZOJBYZNEUISWFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 239000008168 almond oil Substances 0.000 description 1
- 108010090354 alpha-1,6-mannosyl-glycoprotein beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229940019748 antifibrinolytic proteinase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940091771 aspergillus fumigatus Drugs 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 238000000211 autoradiogram Methods 0.000 description 1
- 235000021302 avocado oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008163 avocado oil Substances 0.000 description 1
- 101150103518 bar gene Proteins 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- GINJFDRNADDBIN-FXQIFTODSA-N bilanafos Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCP(C)(O)=O GINJFDRNADDBIN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 238000003766 bioinformatics method Methods 0.000 description 1
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940094199 black currant oil Drugs 0.000 description 1
- 235000013614 black pepper Nutrition 0.000 description 1
- 235000021324 borage oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- ARYTXMNEANMLMU-ATEDBJNTSA-N campestanol Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](C)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 ARYTXMNEANMLMU-ATEDBJNTSA-N 0.000 description 1
- SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N campesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N 0.000 description 1
- 235000000431 campesterol Nutrition 0.000 description 1
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 description 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 235000020226 cashew nut Nutrition 0.000 description 1
- 239000010467 cashew oil Substances 0.000 description 1
- 229940059459 cashew oil Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003518 caustics Substances 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 238000011072 cell harvest Methods 0.000 description 1
- 230000010307 cell transformation Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 235000003733 chicria Nutrition 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 229930002868 chlorophyll a Natural products 0.000 description 1
- NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M chlorophyll b Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C=O)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M 0.000 description 1
- 229930002869 chlorophyll b Natural products 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical group C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N coenzime A Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 239000005516 coenzyme A Substances 0.000 description 1
- 229940093530 coenzyme a Drugs 0.000 description 1
- 235000018597 common camellia Nutrition 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N dephosphocoenzyme A Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- FCRACOPGPMPSHN-UHFFFAOYSA-N desoxyabscisic acid Natural products OC(=O)C=C(C)C=CC1C(C)=CC(=O)CC1(C)C FCRACOPGPMPSHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009025 developmental regulation Effects 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000013367 dietary fats Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N diphosphatidyl glycerol Natural products OP(O)(=O)OCC(OP(O)(O)=O)COP(O)(O)=O FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- NEKNNCABDXGBEN-UHFFFAOYSA-L disodium;4-(4-chloro-2-methylphenoxy)butanoate;4-(2,4-dichlorophenoxy)butanoate Chemical compound [Na+].[Na+].CC1=CC(Cl)=CC=C1OCCCC([O-])=O.[O-]C(=O)CCCOC1=CC=C(Cl)C=C1Cl NEKNNCABDXGBEN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 244000079386 endoparasite Species 0.000 description 1
- 230000026502 entry into host cell Effects 0.000 description 1
- 230000009483 enzymatic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 210000002468 fat body Anatomy 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N ferulic acid Chemical compound COC1=CC(\C=C\C(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-HWKANZROSA-N 0.000 description 1
- KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N ferulic acid Natural products COC1=CC(C=CC(O)=O)=CC=C1O KSEBMYQBYZTDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001785 ferulic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940114124 ferulic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000002803 fossil fuel Substances 0.000 description 1
- 238000001640 fractional crystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Natural products O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000004383 glucosinolate group Chemical group 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 102000005396 glutamine synthetase Human genes 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N glyphosate Chemical compound OC(=O)CNCP(O)(O)=O XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000009629 growth pathway Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 101150062015 hyg gene Proteins 0.000 description 1
- GRRNUXAQVGOGFE-NZSRVPFOSA-N hygromycin B Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC)C[C@@H](N)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H]2O[C@@]3([C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](C(N)CO)O3)O)O[C@H]2[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 GRRNUXAQVGOGFE-NZSRVPFOSA-N 0.000 description 1
- 229940097277 hygromycin b Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012212 insulator Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M iron chloride Chemical compound [Cl-].[Fe] FBAFATDZDUQKNH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 1
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 230000004576 lipid-binding Effects 0.000 description 1
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010083942 mannopine synthase Proteins 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000010297 mechanical methods and process Methods 0.000 description 1
- 230000005226 mechanical processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- GEWDNTWNSAZUDX-UHFFFAOYSA-N methyl 7-epi-jasmonate Natural products CCC=CCC1C(CC(=O)OC)CCC1=O GEWDNTWNSAZUDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- LVHBHZANLOWSRM-UHFFFAOYSA-N methylenebutanedioic acid Natural products OC(=O)CC(=C)C(O)=O LVHBHZANLOWSRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 235000020638 mussel Nutrition 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- 239000008164 mustard oil Substances 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical class 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 108010058731 nopaline synthase Proteins 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000031787 nutrient reservoir activity Effects 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000003715 nutritional status Nutrition 0.000 description 1
- 235000019645 odor Nutrition 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 238000009401 outcrossing Methods 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N paromomycin Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N 0.000 description 1
- 229960001914 paromomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000005325 percolation Methods 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000009048 phenolic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 1
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000001931 piper nigrum l. white Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 101150063097 ppdK gene Proteins 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000011027 product recovery Methods 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 108060006613 prolamin Proteins 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 229940087119 scoparium Drugs 0.000 description 1
- 230000008117 seed development Effects 0.000 description 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 235000011649 selenium Nutrition 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 1
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 description 1
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229940048086 sodium pyrophosphate Drugs 0.000 description 1
- OESFSXYRSCBAQJ-UHFFFAOYSA-M sodium;3-carboxy-3,5-dihydroxy-5-oxopentanoate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC([O-])=O OESFSXYRSCBAQJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-HRJGVYIJSA-N stigmastanol Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]2(C)CC1 LGJMUZUPVCAVPU-HRJGVYIJSA-N 0.000 description 1
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 description 1
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 description 1
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 description 1
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000004960 subcellular localization Effects 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N sulfonylurea Chemical class OC(=N)N=S(=O)=O YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020238 sunflower seed Nutrition 0.000 description 1
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001577 tetrasodium phosphonato phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000007970 thio esters Chemical group 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N trans-isoferulic acid Natural products COC1=CC=C(C=CC(O)=O)C=C1O QURCVMIEKCOAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005029 transcription elongation Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 230000017105 transposition Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N tungsten Chemical compound [W] WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010937 tungsten Substances 0.000 description 1
- 238000007039 two-step reaction Methods 0.000 description 1
- 101150101900 uidA gene Proteins 0.000 description 1
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 1
- 235000014107 unsaturated dietary fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 101150085703 vir gene Proteins 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 108700026215 vpr Genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002912 waste gas Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 235000019386 wax ester Nutrition 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 description 1
- 229940093612 zein Drugs 0.000 description 1
- 239000005019 zein Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 235000016804 zinc Nutrition 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
- A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C10—PETROLEUM, GAS OR COKE INDUSTRIES; TECHNICAL GASES CONTAINING CARBON MONOXIDE; FUELS; LUBRICANTS; PEAT
- C10L—FUELS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NATURAL GAS; SYNTHETIC NATURAL GAS OBTAINED BY PROCESSES NOT COVERED BY SUBCLASSES C10G, C10K; LIQUEFIED PETROLEUM GAS; ADDING MATERIALS TO FUELS OR FIRES TO REDUCE SMOKE OR UNDESIRABLE DEPOSITS OR TO FACILITATE SOOT REMOVAL; FIRELIGHTERS
- C10L1/00—Liquid carbonaceous fuels
- C10L1/02—Liquid carbonaceous fuels essentially based on components consisting of carbon, hydrogen, and oxygen only
- C10L1/026—Liquid carbonaceous fuels essentially based on components consisting of carbon, hydrogen, and oxygen only for compression ignition
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
- C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
- C11C3/003—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fatty acids with alcohols
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
- C12N15/8247—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified lipid metabolism, e.g. seed oil composition
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
- C12N9/1029—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y203/00—Acyltransferases (2.3)
- C12Y203/01—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
- C12Y203/0102—Diacylglycerol O-acyltransferase (2.3.1.20)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
- C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
- C12Y204/01101—Alpha-1,3-mannosyl-glycoprotein 2-beta-N-acetylglucosaminyltransferase (2.4.1.101)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
- C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
- C12Y204/01143—Alpha-1,6-mannosyl-glycoprotein 2-beta-N-acetylglucosaminyltransferase (2.4.1.143)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Birds (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Physiology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
高まっている代替エネルギー源に対する要求は、植物由来のバイオ燃料の再生可能な供給によって少なくとも部分的に満たすことができる。化石燃料に対する現実的な代替物とするために、バイオ燃料は、既存のバイオ燃料生成による現在の予想外の副産物である食物供給の低減を伴わずに、生成の際に正味エネルギー利得を提供し、環境的利益を有し、経済的な競争力があり、かつ大量に生成できるべきである。
モノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ(MGAT)酵素は、哺乳類と関連し、特に、哺乳類の腸と関連し、そこにおいて、モノアシルグリセロール(MAG)および脂肪アシルCoAからのジアシルグリセロール(DAG)の合成を直接触媒する。対照的に、植物に見られる一次TAG合成経路は、ケネディ経路、すなわち、MGATステップを含まないグリセリンリン酸経路(図1)である。ケネディ経路において、DAGは、2ステップの反応でアシル化グリセロール骨格から形成される。この反応は、最初の、脂肪アシルCoAをリゾホスファチジン酸(LysoPA;LPA)基質に添加する、リゾホスファチジン酸アシルトランスフェラーゼ(LPAAT)によるアシル化のステップと、その後の、産物であるホスファチジン酸(PA)からリン酸基を除去して無機リン酸塩(Pi)およびDAGを生ずるステップとから成る。対照的に、MGATは、脂肪アシルCoA由来のアシル基でMAGをアシル化することによって、DAGの形成を直接触媒する。DAGの合成に続いて、別の酵素であるジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ(DGAT)がDAGをアシル化してTAGを形成する。
DGATは、植物、菌類、および哺乳類においてTAGを生成する際の最終的な酵素ステップを触媒する、内在性膜タンパク質である。この酵素は、アシルコエンザイムA(アシルCoA)からDAGにアシル基を転移させてTAGを形成する役割を果たす。DGATは、植物および菌類、特に油料種子における膜および脂肪体画分と関連し、そこにおいて、エネルギーの蓄えとして使用される炭素の貯蔵に寄与する。DGATは、TAG構造を調節して、TAG合成を指令することが知られている。さらに、DGAT反応が脂質合成に特異的であることも知られている。野生型植物における種子特異的様式でのアシルCoAに依存するDGATの過剰発現は、種子油の堆積および平均種子重量の増大をもたらす(Jako他,2001)
i)1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを含み、1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する生物またはその一部と比較したときに、増加したレベルの1つ以上の非極性脂質を有する、トランスジェニック非ヒト生物またはその一部を得るステップと、
ii)トランスジェニック非ヒト生物またはその一部から脂質を抽出し、それによって、抽出脂質を生成するステップと、
を含む。
i)モノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ(MGAT)、
ii)ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ2(DGAT2)、
iii)MGATおよびグリセロール−3−リン酸アシルトランスフェラーゼ(GPAT)、
iv)MGATおよびDGAT、または、
v)MGAT、GPAT、およびDGAT
をコードする。
i)配列番号1〜44のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、
ii)配列番号45〜82のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、または
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含んでもよい。
i)配列番号1、3〜5、または7〜23のいずれか1つから選択されるヌクレオチドの配列、
ii)配列番号45〜61のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、または
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む。
i)配列番号2、6、または24〜37のいずれか1つから選択されるヌクレオチドの配列、
ii)配列番号62〜75のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、または
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む。
i)配列番号38〜44のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、
ii)配列番号76〜82のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、または
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む。
i)配列番号204〜211のいずれか1つから選択されるヌクレオチドの配列、
ii)配列番号212〜219のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、または
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、のうちの1つ以上を含む。好ましい実施形態において、DGAT2は、配列番号204のヌクレオチドの配列、および/または配列番号212で提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチドをコードする、ヌクレオチドの配列を含む。
i)配列番号84〜141のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、
ii)配列番号144〜210のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、または
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちのいずれか1つを含んでもよい。
i)外因性モノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ(MGAT)を含み、
外因性MGATが欠如しているそのような生物またはその一部と比較したときに、増加したレベルの非極性脂質を有する、トランスジェニック光合成生物またはその一部を得るステップと、
ii)トランスジェニック光合成生物またはその一部から脂質を抽出し、それによって、抽出脂質を生成するステップと、
を含む。
i)MGAT、
ii)DGAT2、
iii)MGATおよびGPAT
iv)MGATおよびDGAT、または
v)MGAT、GPAT、およびDGAT
をコードする1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを含む、トランスジェニック非ヒト生物を提供する。
i)細胞の中に、
a)MGAT、
b)DGAT2、
c)MGATおよびGPAT、
d)MGATおよびDGAT、または
e)MGAT、GPAT、およびDGAT、をコードする1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを導入することであって、
1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが、細胞における1つ以上の外因性ポリヌクレオチドの発現を指令することが可能である1つ以上のプロモーターに操作可能に連結される、導入することと、
ii)細胞において1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを発現させることと、
iii)細胞の脂質含量を分析することと、
iv)外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する細胞と比較したときに、増加したレベルの1つ以上の非極性脂質を有する細胞を選択することと、
を含む。
i)MGAT、
ii)DGAT2
iii)MGATおよびGPAT
iv)MGATおよびDGAT、または
v)MGAT、GPAT、およびDGAT、
をコードする1つ以上の外因性ポリヌクレオチドの使用を提供する。増強された能力の程度は、特徴(i)で定義される通りであり得る。トランスジェニック非ヒト生物またはその一部は、特徴(ii)で定義される通りであってもよく、または特徴(i)、(ii)、および(iii)、もしくは特徴(i)および(ii)、または特徴(i)および(iii)の組み合わせによって定義されてもよい。1つ以上の外因性ポリヌクレオチドは、上記に定義される配列を含んでもよい。
i)本発明のトランスジェニック植物を成長させることと、
ii)種子を採取することと、
を含む。
別の態様において、本発明は、発酵プロセスを提供し、該プロセスは、
i)発酵に好適である本発明のトランスジェニック非ヒト生物と、発酵および脂肪酸生合成に必要とされる成分と、を含む液体組成物を収容する容器を提供するステップと、
ii)容器に収容された液体組成物の発酵に寄与する条件を提供するステップと、
を含む。
i)随意に触媒の存在下で、本発明の脂質をアルコールと反応させて、アルキルエステルを生成することと、
ii)随意に、アルキルエステルを石油に基づく燃料と混ぜ合わせることと、
を含む。
一実施形態において、アルキルエステルは、メチルエステルである。本方法によって生成される燃料は、少なくとも10%、少なくとも20%、または少なくとも30%(w/w)等の、最小レベルの本発明の脂質を含み得る。
i)細胞において活性であるプロモーターに操作可能に連結される核酸分子を含み、本明細書で定義されるヌクレオチドの配列、および/もしくは配列番号220、221、222、223、224、225、226、および227で提供される1つ以上のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチドの配列、または少なくとも50%、好ましくは少なくとも60%、より好ましくは少なくとも65%それらに同一であるアミノ酸の配列を含む、細胞を得ることと、
ii)細胞において生成されるMAG、DAG、および/またはTAGのレベルが、核酸が欠如している対応する細胞と比較して増加したかどうかを判定することと、
iii)細胞においてMAG、DAG、および/またはTAGを生成する増加した能力を有するアシルトランスフェラーゼをコードする核酸分子を特定することと、
を含む。
i)配列番号1〜6のいずれか1つから選択されるヌクレオチド配列、または
ii)i)と少なくとも80%同一である、ヌクレオチドの配列、
を含む、単離されたおよび/または組み換えポリヌクレオチドを提供する。
別の態様において、本発明は、本発明のポリヌクレオチドを含む、ベクターを提供する。
配列番号1:マス・マスクルスのコドンを最適化したMGAT1
配列番号2:マス・マスクルスのコドンを最適化したMGAT2
配列番号3:シオナ・インテスチナリスのコドンを最適化した予測MGAT1
配列番号4:トリボリウム・カスタネウムのコドンを最適化した予測MGAT1
配列番号5:ダニオ・レリオのコドンを最適化したMGAT1
配列番号6:ダニオ・レリオのコドンを最適化したMGAT2
配列番号7:マス・マスクルスのMGAT1ポリヌクレオチド(AF384162)
配列番号8:ホモ・サピエンスのMGAT1ポリヌクレオチド(AF384163)
配列番号9:パン・トログロデュテスの予測MGAT1ポリヌクレオチド転写物変異形(XM_001166055)
配列番号10:パン・トログロデュテスの予測MGAT1ポリヌクレオチド転写物変異形2(XM_0526044.2)
配列番号11:カニス・ファミリアリスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(XM_545667.2)
配列番号12:ボス・タウルスのMGAT1ポリヌクレオチド(NM_001001153.2)
配列番号13:ラッタス・ノルベギカスのMGAT1ポリヌクレオチド(NM_001108803.1)
配列番号14:ダニオ・レリオのMGAT1ポリヌクレオチド(NM_001122623.1)
配列番号15:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(NM_073012.4)
配列番号16:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(NM_182380.5)
配列番号17:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(NM_065258.3)
配列番号18:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(NM_075068.3)
配列番号19:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(NM_072248.3)
配列番号20:クライベロマイセス・ラクティスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(XM_455588.1)
配列番号21:アシビア・ゴシピイの予測MGAT1ポリヌクレオチド(NM_208895.1)
配列番号22:マグナポルテ・オリザエの予測MGAT1ポリヌクレオチド(XM_368741.1)
配列番号23:シオナ・インテスチナリスの予測MGAT1ポリヌクレオチド(XM_002120843.1)
配列番号24:マス・マスクルスのMGAT2ポリヌクレオチド(AY157609)
配列番号25:ホモ・サピエンスのMGAT2ポリヌクレオチド(AY157608)
配列番号26:パン・トログロデュテスの予測MGAT2ポリヌクレオチド(XM_522112.2)
配列番号27:カニス・ファミリアリスの予測MGAT2ポリヌクレオチド(XM_542304.1)
配列番号28:ボス・タウルスのMGAT2ポリヌクレオチド(NM_001099136.1)
配列番号29:ラッタス・ノルベギカスのMGAT2ポリヌクレオチド(NM_001109436.2)
配列番号30:ガッルス・ガッルスの予測MGAT2ポリヌクレオチド(XM_424082.2)
配列番号31:ダニオ・レリオのMGAT2ポリヌクレオチド(NM_001006083.1)
配列番号32:ドロソフィラ・メラノガスターのMGAT2ポリヌクレオチド(NM_136474.2)
配列番号33:ドロソフィラ・メラノガスターのMGAT2ポリヌクレオチド(NM_136473.2)
配列番号34ドロソフィラ・メラノガスターのMGAT2ポリヌクレオチド(NM_136475.2)
配列番号35:アノフェレス・ガンビェのMGAT2ポリヌクレオチド(XM_001688709.1)
配列番号36:アノフェレス・ガンビェのMGAT2ポリヌクレオチド(XM_315985)
配列番号37:トリボリウム・カスタネウムの予測MGAT2ポリヌクレオチド(XM_970053.1)
配列番号38:ホモ・サピエンスのMGAT3ポリヌクレオチド(AY229854)
配列番号39:パン・トログロデュテスの予測MGAT3ポリヌクレオチド転写物変異形1(XM_001154107.1)
配列番号40:パン・トログロデュテスの予測MGAT3ポリヌクレオチド転写物変異形2(XM_001154171.1)
配列番号41:パン・トログロデュテスの予測MGAT3ポリヌクレオチド転写物変異形3(XM_527842.2)
配列番号42:カニス・ファミリアリスの予測MGAT3ポリヌクレオチド(XM_845212.1)
配列番号43:ボス・タウルスの予測MGAT3ポリヌクレオチド(XM_870406.4)
配列番号44:ダニオ・レリオの予測MGAT3ポリヌクレオチド(XM_688413.4)
配列番号45:マス・マスクルスのMGAT1ポリペプチド(AAK84177.1)
配列番号46:ホモ・サピエンスのMGAT1ポリペプチド(AAK84178.1)
配列番号47:パン・トログロデュテスの予測MGAT1ポリペプチドアイソフォーム1(XP_001166055.1)
配列番号48:パン・トログロデュテスの予測MGAT1ポリペプチドアイソフォーム2(XP_526044.2)
配列番号49:カニス・ファミリアリスの予測MGAT1ポリペプチド(XP_545667.2)
配列番号50:ボス・タウルスのMGAT1ポリペプチド(NP_001001153.1)
配列番号51:ラッタス・ノルベギカスのMGAT1ポリペプチド(NP_001102273.1)
配列番号52:ダニオ・レリオのMGAT1ポリペプチド(NP_001116095.1)
配列番号53:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリペプチド(NP_505413.1)
配列番号54:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリペプチド(NP_872180.1)
配列番号55:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリペプチド(NP_497659.1)
配列番号56:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリペプチド(NP_507469.1)
配列番号57:カエノラブディティス・エレガンスの予測MGAT1ポリペプチド(NP_504649.1)
配列番号58:クライベロマイセス・ラクティスの予測MGAT1ポリペプチド(XP_455588.1)
配列番号59:アシビア・ゴシピイの予測MGAT1ポリペプチド(NP_983542.1)
配列番号60:マグナポルテ・オリザエの予測MGAT1ポリペプチド(XP_368741.1)
配列番号61:シオナ・インテスチナリスの予測MGAT1ポリペプチド(XP_002120879)
配列番号62:マス・マスクルスのMGAT2ポリペプチド(AA023673.1)
配列番号63:ホモ・サピエンスのMGAT2ポリペプチド(AA023672.1)
配列番号64:パン・トログロデュテスの予測MGAT2ポリペプチド(XP_522112.2)
配列番号65:カニス・ファミリアリスの予測MGAT2ポリペプチド(XP_542304.1)
配列番号66:ボス・タウルスのMGAT2ポリペプチド(NP_001092606.1)
配列番号67:ラッタス・ノルベギカスのMGAT2ポリペプチド(NP_001102906.2)
配列番号68:ガッルス・ガッルスの予測MGAT2ポリペプチド(XP_424082.2)
配列番号69:ダニオ・レリオのMGAT2ポリペプチド(NP_001006083.1)
配列番号70:ドロソフィラ・メラノガスターのMGAT2ポリペプチド(NP_610318.1)
配列番号71:ドロソフィラ・メラノガスターのMGAT2ポリペプチド(NP_610317.1)
配列番号72:ドロソフィラ・メラノガスターのMGAT2ポリペプチド(NP_610319.2)
配列番号73:アノフェレス・ガンビェのMGAT2ポリペプチド(XP_001688761)
配列番号74:アノフェレス・ガンビェのMGAT2ポリペプチド(XP_315985.3)
配列番号75:トリボリウム・カスタネウムの予測MGAT2ポリペプチド(XP_975146)
配列番号76 :ホモ・サピエンスのMGAT3ポリペプチド(AA063579.1)
配列番号77:パン・トログロデュテスの予測MGAT3ポリペプチドアイソフォーム1(XP_001154107.1)
配列番号78:パン・トログロデュテスの予測MGAT3ポリペプチドアイソフォーム2(XP_001154171.1)
配列番号79:パン・トログロデュテスの予測MGAT3アイソフォーム3(XP_527842.2)
配列番号80:カニス・ファミリアリスの予測MGAT3ポリペプチド(XP_850305.1)
配列番号81:ボス・タウルスの予測MGAT3ポリペプチド(XP_875499.3)
配列番号82:ダニオ・レリオの予測MGAT3ポリペプチド(XP_693505.1)
配列番号83:アラビドプシス・サリアナのDGAT1ポリペプチド(CAB44774.1)
配列番号84:アラビドプシス・サリアナのGPAT4ポリヌクレオチド(NM_100043.4)
配列番号85:アラビドプシス・サリアナのGPAT6ポリヌクレオチド(NM_129367.3)
配列番号86:アラビドプシス・サリアナのBAC F5I10ポリヌクレオチド(AF195115.1)
配列番号87:アラビドプシス・サリアナの未知タンパク質ポリヌクレオチド(AY062466.1)
配列番号88:オリザ・サティバの第3染色体ポリヌクレオチド(AC118133.4)
配列番号89:ピセア・シトケンシスのクローンWS0276_F13ポリヌクレオチド(EF086095.1)
配列番号90:ゼア・マイスのクローンZM_BFc0110A1ポリヌクレオチド(BT067649.1)
配列番号91:アラビドプシス・サリアナのクローンRAFL16−19−H05ポリヌクレオチド(AK228870.1)
配列番号92オリザ・サティバのクローンJ065058J01ポリヌクレオチド(AK241033.1)
配列番号93:オリザ・サティバの第2染色体ポリヌクレオチド(CM000127.1)
配列番号94:オリザ・サティバの第5染色体ポリヌクレオチド(CM000130.1)
配列番号95:オリザ・サティバの第2染色体ポリヌクレオチド(CM000139.1)
配列番号96:オリザ・サティバの第1染色体ポリヌクレオチド(CM000126.1)
配列番号97:オリザ・サティバの第3染色体ポリヌクレオチド(CM000128.1)
配列番号98:オリザ・サティバの第3染色体ポリヌクレオチド(CM000140.1)
配列番号99:セラギネラ・moellendorffiiのSELMOscaffold_102ポリヌクレオチド(GL377667.1)
配列番号100:セラギネラ・moellendorffiiのSELMOscaffold_102ポリヌクレオチド(GL377667.1)
配列番号101:セラギネラ・moellendorffiiのSELMOscaffold_83ポリヌクレオチド(GL377648.1)
配列番号102:セラギネラ・moellendorffiiのSELMOscaffold_57ポリヌクレオチド(GL377622.1)
配列番号103:セラギネラ・moellendorffiiのSELMOscaffold_25ポリヌクレオチド(GL377590.1)
配列番号104:セラギネラ・moellendorffiiのSELMOscaffold_11ポリヌクレオチド(GL377576.1)
配列番号105:セラギネラ・moellendorffiiのSELMOscaffold_11ポリヌクレオチド(GL377576.1)
配列番号106:オリザ・サティバのOs01g0855000ポリヌクレオチド(NM_001051374.2)
配列番号107:オリザ・サティバのOs02g0114400ポリヌクレオチド(NM_001052203.1)
配列番号108:ゼア・マイスのGPAT8ポリヌクレオチド(NM_001153970.1)
配列番号109:ゼア・マイスのLOC100282930ポリヌクレオチド(NM_001155835.1)
配列番号110:ゼア・マイスのLOC100382119ポリヌクレオチド(NM_001174880.1)
配列番号111:アラビドプシス・サリアナのGPAT6ポリヌクレオチド(NM_129367.3)
配列番号112:アラビドプシス・サリアナのGPAT8ポリヌクレオチド(NM_116264.5)
配列番号113:フィスコミトレラ・パテンスの予測タンパク質(PHYPADRAFT_128739)ポリヌクレオチド(XM_001764949.1)
配列番号114:フィスコミトレラ・パテンスの予測タンパク質(PHYPADRAFT_83824)ポリヌクレオチド(XM_001769619.1)
配列番号115:フィスコミトレラ・パテンスの予測タンパク質(PHYPADRAFT_188308)ポリヌクレオチド(XM_001769672.1)
配列番号116:フィスコミトレラ・パテンスの予測タンパク質(PHYPADRAFT_189499)ポリヌクレオチド(XM_001771134.1)
配列番号117:フィスコミトレラ・パテンスの予測タンパク質(PHYPADRAFT_95487)ポリヌクレオチドXM_001780481.1)
配列番号118:ヴィティス・ヴィニフェラの予測タンパク質LOC100243321ポリヌクレオチド(XM_002268477.1)
配列番号119:ヴィティス・ヴィニフェラの予測タンパク質LOC100243093ポリヌクレオチド(XM_002275312.1)
配列番号120:ヴィティス・ヴィニフェラの予測タンパク質LOC100259433ポリヌクレオチド(XM_002275996.1)
配列番号121:ヴィティス・ヴィニフェラの予測タンパク質LOC100264832ポリヌクレオチド(XM_002279055.1)
配列番号122:ポピュラス・トリコカルパの予測タンパク質ポリヌクレオチド(XM_002309088.1)
配列番号123:ポピュラス・トリコカルパの予測タンパク質ポリヌクレオチド(XM_002309240.1)
配列番号124:ポピュラス・トリコカルパの予測タンパク質ポリヌクレオチド(XM_002322716.1)
配列番号125:ポピュラス・トリコカルパの予測タンパク質ポリヌクレオチド(XM_002323527.1)
配列番号126:ソルガム・バイカラーのタンパク質ポリヌクレオチド(XM_002439842.1)
配列番号127:ソルガム・バイカラーのタンパク質ポリヌクレオチド(XM_002458741.1)
配列番号128:ソルガム・バイカラーのタンパク質ポリヌクレオチド(XM_002463871.1)
配列番号129:ソルガム・バイカラーのタンパク質ポリヌクレオチド(XM_002464585.1)
配列番号130:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリヌクレオチド(XM_002511827.1)
配列番号131:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリヌクレオチド(XM_002517392.1)
配列番号132:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリヌクレオチド(XM_002520125.1)
配列番号133:アラビドプシス・lyrataのリン脂質/グリセロールアシルトランスフェラーゼファミリータンパク質ポリヌクレオチド(XM_002872909.1)
配列番号134:アラビドプシス・lyrataのGPAT6ポリヌクレオチド(XM_002881518.1)
配列番号135:ベルニシア・フォルジイの推定GPAT8ポリヌクレオチド(FJ479753.1)
配列番号136:オリザ・サティバのOs03g0735900ポリヌクレオチド(NM_001057724.1)
配列番号137:アラビドプシス・サリアナのGPAT4ポリヌクレオチド(NM_100043.4)
配列番号138:ポピュラス・トリコカルパの予測タンパク質ポリヌクレオチド(XM_002320102.1)
配列番号139:ソルガム・バイカラーのタンパク質ポリヌクレオチド(XM_002451332.1)
配列番号140:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリヌクレオチド(XM_002531304.1)
配列番号141:アラビドプシス・lyrataのGPAT4ポリヌクレオチド(XM_002889315.1)
配列番号142:アラビドプシス・サリアナのGPAT1ポリヌクレオチド(NM_100531.2)
配列番号143:アラビドプシス・サリアナのGPAT3ポリヌクレオチド(NM_116426.2)
配列番号144:アラビドプシス・サリアナのGPAT4ポリペプチド(NP_171667.1)
配列番号145:アラビドプシス・サリアナのGPAT6ポリペプチド(NP_181346.1)
配列番号146:アラビドプシス・サリアナのF5I10.4遺伝子産物ポリペプチド(AAF02784.1)
配列番号147:アラビドプシス・サリアナの未知タンパク質ポリペプチド(AAL32544.1)
配列番号148:オリザ・サティバのタンパク質ポリペプチド(AAP03413.1)
配列番号149:ピセア・シトケンシスの未知ポリペプチド(ABK25381.1)
配列番号150:ゼア・マイスの未知ポリペプチド(ACN34546.1)
配列番号151:アラビドプシス・サリアナの予測タンパク質ポリペプチド(BAF00762.1)
配列番号152:オリザ・サティバの無名タンパク質産物ポリペプチド(BAH00933.1)
配列番号153:オリザ・サティバの予測タンパク質Osl_05566ポリペプチド(EAY84189.1)
配列番号154:オリザ・サティバの予測タンパク質Osl_20155ポリペプチド(EAY98245.1)
配列番号155:オリザ・サティバの予測タンパク質OsJ_05094ポリペプチド(EAZ21484.1)
配列番号156:オリザ・サティバの予測タンパク質Osl_04478ポリペプチド(EEC71826.1)
配列番号157:オリザ・サティバの予測タンパク質Osl_13423ポリペプチド(EEC76137.1)
配列番号158:オリザ・サティバの予測タンパク質OsJ_12482ポリペプチド(EEE59882.1)
配列番号159:セラギネラ・moellendorffiiの予測タンパク質SELMODRAFT_269600ポリペプチド(EFJ08963.1)
配列番号160:セラギネラ・moellendorffiiの予測タンパク質SELMODRAFT_184962ポリペプチド(EFJ08964.1)
配列番号161:セラギネラ・moellendorffiiの予測タンパク質SELMODRAFT_235331ポリペプチド(EFJ11200.1)
配列番号162:セラギネラ・moellendorffiiの予測タンパク質SELMODRAFT_118155ポリペプチド(EFJ15664.1)
配列番号163:セラギネラ・moellendorffiiの予測タンパク質SELMODRAFT_102257ポリペプチド(EFJ24086.1)
配列番号164:セラギネラ・moellendorffiiの予測タンパク質SELMODRAFT_170164ポリペプチド(EFJ29816.1)
配列番号165:セラギネラ・moellendorffiiの予測タンパク質SELMODRAFT_170165ポリペプチド(EFJ29817.1)
配列番号166:オリザ・サティバのOs01g0855000ポリペプチド(NP_001044839.1)
配列番号167:オリザ・サティバのOs02g0114400ポリペプチド(NP_001045668.1)
配列番号168:ゼア・マイスのGPAT8ポリペプチド(NP_001147442.1)
配列番号169:ゼア・マイスのLOC100282930ポリペプチド(NP_001149307.1)
配列番号170:ゼア・マイスのタンパク質LOC100382119ポリペプチド(NP_001168351.1)
配列番号171:アラビドプシス・サリアナのGPAT6ポリペプチド(NP_181346.1)
配列番号172:アラビドプシス・サリアナのGPAT8ポリペプチド(NP_191950.2)
配列番号173:フィスコミトレラ・パテンスのタンパク質ポリペプチド(XP_001765001.1)
配列番号174:フィスコミトレラ・パテンスのタンパク質ポリペプチド(XP_001769671.1)
配列番号175:フィスコミトレラ・パテンスのタンパク質ポリペプチド(XP_001769724.1)
配列番号176:フィスコミトレラ・パテンスのタンパク質ポリペプチド(XP_001771186.1)
配列番号177:フィスコミトレラ・パテンスのタンパク質ポリペプチド(XP_001780533.1)
配列番号178:ヴィティス・ヴィニフェラのタンパク質ポリペプチド(XP_002268513.1)
配列番号179:ヴィティス・ヴィニフェラのタンパク質ポリペプチド(XP_002275348.1)
配列番号180:ヴィティス・ヴィニフェラのタンパク質ポリペプチド(XP_002276032.1)
配列番号181:ヴィティス・ヴィニフェラのタンパク質ポリペプチド(XP_002279091.1)
配列番号182:ポピュラス・トリコカルパのタンパク質ポリペプチド(XP_002309124.1)
配列番号183:ポピュラス・トリコカルパのタンパク質ポリペプチド(XP_002309276.1)
配列番号184:ポピュラス・トリコカルパのタンパク質ポリペプチド(XP_002322752.1)
配列番号185:ポピュラス・トリコカルパのタンパク質ポリペプチド(XP_002323563.1)
配列番号186:ソルガム・バイカラーのタンパク質SORBIDRAFT_09g022020ポリペプチド(XP_002439887.1)
配列番号187:ソルガム・バイカラーのタンパク質SORBIDRAFT_03g040260ポリペプチド(XP_002458786.1)
配列番号188:ソルガム・バイカラーのタンパク質SORBIDRAFT_01g008880ポリペプチド(XP_002463916.1)
配列番号189:ソルガム・バイカラーのタンパク質SORBIDRAFT_01g022140ポリペプチド(XP_002464630.1)
配列番号190:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリペプチド(XP_002511873.1)
配列番号191:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリペプチド(XP_002517438.1)
配列番号192:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリペプチド(XP_002520171.1)
配列番号193:アラビドプシス・lyrataのリン脂質/グリセロールアシルトランスフェラーゼファミリータンパク質ポリペプチド(XP_002872955.1)
配列番号194:アラビドプシス・lyrataのGPAT6ポリペプチド(XP_002881564.1)
配列番号195:ベルニシア・フォルジイの推定GPATポリペプチド(ACT32032.1)
配列番号196:オリザ・サティバのOs03g0735900ポリペプチド(NP_001051189.1)
配列番号197:アラビドプシス・サリアナのGPAT4ポリペプチド(NP_171667.1)
配列番号198:ポピュラス・トリコカルパのタンパク質ポリペプチド(XP_002320138.1)
配列番号199:ソルガム・バイカラーのタンパク質SORBIDRAFT_04g001060ポリペプチド(XP_002451377.1)
配列番号200:リシナス・コムニスのERグリセリンリン酸アシルトランスフェラーゼポリペプチド(XP_002531350.1)
配列番号201:アラビドプシス・lyrataのGPAT4ポリペプチド(XP_002889361.1)
配列番号202:アラビドプシス・サリアナのGPAT1ポリペプチド(NP_563768.1)
配列番号203:アラビドプシス・サリアナのGPAT3ポリペプチド(NP_192104.1)
配列番号204:アラビドプシス・サリアナのDGAT2ポリヌクレオチド(NM_115011.3)
配列番号205:リシナス・コムニスのDGAT2ポリヌクレオチド(AY916129.1)
配列番号206:ベルニシア・フォルジイのDGAT2ポリヌクレオチド(DQ356682.1)
配列番号207:モルティエレラ・ラマニアナのDGAT2ポリヌクレオチド(AF391089.1)
配列番号208:ホモ・サピエンスのDGAT2ポリヌクレオチド(NM_032564.1)
配列番号209:ホモ・サピエンスのDGAT2ポリヌクレオチド(NM_001013579.2)
配列番号210:ボス・タウルスのDGAT2ポリヌクレオチド(NM_205793.2)
配列番号211:マス・マスクルスのDGAT2ポリヌクレオチド(AF384160.1)
配列番号212:アラビドプシス・サリアナのDGAT2ポリペプチド(NP_566952.1)
配列番号213:リシナス・コムニスのDGAT2ポリペプチド(AAY16324.1)
配列番号214 :ベルニシア・フォルジイのDGAT2ポリペプチド(ABC94474.1)
配列番号215:モルティエレラ・ラマニアナのDGAT2ポリペプチド(AAK84179.1)
配列番号216:ホモ・サピエンスのDGAT2ポリペプチド(Q96PD7.2)
配列番号217:ホモ・サピエンスのDGAT2ポリペプチド(Q58HT5.1)
配列番号218:ボス・タウルスのDGAT2ポリペプチド(Q70VZ8.1)
配列番号219:マス・マスクルスのDGAT2ポリペプチド(AAK84175.1)
配列番号220:YFPトリペプチド−保存DGAT2および/またはMGAT1/2配列モチーフ
配列番号221:HPHGテトラペプチド−保存DGAT2またはMGAT1/2配列モチーフ
配列番号222:EPHテトラペプチド−保存植物DGAT2配列モチーフ
配列番号223:RXGFX(K/R)XAXXXGXXX(L/V)VPXXXFG(E/Q)−推定グリセロールリン脂質ドメインの一部であるDGAT2の長い保存配列モチーフ
配列番号224:FLXLXXXN−マウスDGAT2の保存配列モチーフおよび推定中性脂質結合ドメインであるMGAT1/2
配列番号225:GPATのplsCアシルトランスフェラーゼドメイン(PF01553)
配列番号226:GPATのHAD様ヒドロラーゼ(PF12710)スーパーファミリードメイン
配列番号227ホスホセリンホスファターゼドメイン(PF00702)。GPAT4〜8は、このドメインに相同のN末端領域を含む。
配列番号228:保存GPATアミノ酸配列GDLVICPEGTTCREP
配列番号229:保存GPAT/ホスファターゼアミノ酸配列(モチーフI)
配列番号230:保存GPAT/ホスファターゼアミノ酸配列(モチーフIII)
別途具体的に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、(例えば、細胞培養、分子遺伝学、免疫学、免疫組織化学、タンパク質化学、脂質および脂肪酸化学、バイオ燃料生成、ならびに生化学において)当業者によって一般に理解される意味と同じ意味を有するものと解釈されるものとする。
別途指示されていない限り、本発明で利用される組み換えタンパク質、細胞培養、および免疫学的手法は、標準的な手順であり、当業者によく知られている。そのような手法は、J.Perbal,A Practical Guide to Molecular Cloning,John Wiley and Sons(1984)、J.Sambrook et al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbour Laboratory Press(1989)、T.A.Brown(編),Essential Molecular Biology:A Practical Approach,Volumes 1および2,IRL Press(1991)、D.M.Glover and B.D.Hames(編),DNA Cloning:A Practical Approach,Volumes 1−4,IRL Press (1995および1996)、F.M.Ausubel et al.(編),Current Protocols in Molecular Biology,Greene Pub.Associates and Wiley−Interscience(1988,現在までの全ての最新版を含む)、Ed Harlow and David Lane(編)Antibodies:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbour Laboratory,(1988)、およびJ.E. Coligan et al.(編)Current Protocols in Immunology,John Wiley & Sons(現在までの全ての最新版を含む)等の出展の文献全体を通して記載および説明されている。
「トランスジェニック非ヒト生物」という用語は、例えば、外因性ポリヌクレオチド(導入遺伝子)または外因性ポリペプチドを含む、植物、藻類、非ヒト動物、または酵母もしくは真菌等の発酵に好適な生物全体を指す。ある実施形態において、トランスジェニック非ヒト生物は、動物またはその一部ではない。一実施形態において、トランスジェニック非ヒト生物は、日光からエネルギーを得て、栄養のための有機化合物を合成することができる、光合成生物(例えば、植物または藻類)である。別の実施形態において、トランスジェニック非ヒト生物は、光合成細菌である。「外因性」という用語は、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドとの関連において、その自然な状態と比較して変化した量で細胞に存在するときの、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドを指す。一実施形態において、細胞は、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドを自然に含まない細胞である。別の実施形態において、外因性ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、異なる属に由来する。別の実施形態において、外因性ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、異なる種に由来する。一実施形態において、外因性ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、宿主植物または植物細胞において発現し、外因性ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、異なる種または属に由来する。一実施形態において、外因性ポリペプチドは、外因性MGATである。本明細書で使用される「抽出脂質」という用語は、少なくとも60%(w/w)の脂質を含む、トランスジェニック生物またはその一部から抽出される組成物を指す。
本明細書で使用される「アシルトランスフェラーゼ」という用語は、アシルCoAから基質上にアシル基を転移させることができるタンパク質を指し、MGAT、GPAT、およびDGATを含む。
本明細書で使用される「ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ」(DGAT)という用語は、アシルCoAからDAG基質に脂肪アシル基を転移させてTAGを生成する、タンパク質を指す。したがって、「ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ活性」という用語は、アシルCoAからDAGにアシル基を転移させてTAGを生成することを指す。DGATはまた、MGAT機能も有し得るが、主にDGATとして機能する。すなわち、酵素活性を、産物−nmole/分/mg−タンパク質で表したときに、MGATとしての触媒活性よりも高い、DGATとしての触媒活性を有する(例えば、Yen他,2005を参照されたい)。
DGAT3ポリペプチドの例としては、ピーナッツ(アラキス・ヒポゲア、Saha他,2006)、ならびに変異形および/またはその変異体由来のDGAT3遺伝子によってコードされるタンパク質が挙げられる。DGATは、検出可能なMGAT活性をほとんどまたは全く有さず、例えば、300pmol/分/mg−タンパク質、好ましくは、200pmol/分/mg−タンパク質、より好ましくは、100pmol/分/mg−タンパク質である。
一実施形態において、本発明のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部は、対応する非ヒト生物またはその一部よりも高いレベルの、DAGまたはTAG等の、好ましくは双方の非極性脂質を生成する。一実施例において、本発明のトランスジェニック植物は、対応する種子および/または葉と比較したときに、DAGまたはTAG等の、好ましくは双方の増加した非極性脂質含量を有する種子および/または葉を生成する。非ヒト生物またはその一部の非極性脂質含量は、対応する非ヒト生物またはその一部と比較したときに、重量基準で0.5%大きい。
「ポリヌクレオチド」および「核酸」という用語は、同じ意味で使用される。それらは、デオキシリボヌクレオチドもしくはリボヌクレオチド、またはその類似体である、任意の長さのポリマー形態のヌクレオチドを指す。本発明のポリヌクレオチドは、ゲノム、cDNA、半合成もしくは合成起源、2本鎖もしくは1本鎖のものであってもよく、また、その起源または操作によって、(1)自然界で伴うポリヌクレオチドの全部または一部を伴わない、(2)自然界で連結されるもの以外のポリヌクレオチドに連結する、または(3)自然界で生じない。ポリヌクレオチドの限定的でない例としては、遺伝子または遺伝子断片のコードもしくは非コード領域、連結分析から定義される座(単数または複数)、エキソン、イントロン、メッセンジャーRNA(mRNA)、転移RNA(tRNA)、リボソームRNA(rRNA)、リボザイム、cDNA、組み換えポリヌクレオチド、分岐ポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、任意の配列の単離されたDNA、任意の配列の単離されたRNA、任意の配列のキメラDNA、核酸プローブ、およびプライマーが挙げられる。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似体等の修飾ヌクレオチドを含んでもよい。存在する場合、ヌクレオチド構造に対する修飾は、ポリマーの集合前または集合後に与えられてもよい。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって中断されてもよい。ポリヌクレオチドは、標識化成分との複合体化等によって、ポリメリゼーション後にさらに修飾することができる。
本発明の一実施形態は、組み換えベクターを含み、該組み換えベクターは、本明細書で定義される少なくとも1つのポリヌクレオチドを含み、該ポリヌクレオチドを宿主細胞に送達することができる。組み換えベクターとしては、発現ベクターが挙げられる。組み換えベクターは、異種ポリヌクレオチド配列、すなわち、自然には見出されず、本明細書で定義されるポリヌクレオチドに隣接し、好ましくは、異なる種に由来する、ポリヌクレオチド配列を含む。ベクターは、RNAまたはDNAのいずれか、原核生物または真核生物のいずれかとすることができ、典型的に、ウイルスに由来するウイルスベクター、またはプラスミドである。プラスミドベクターは、典型的に、原核生物細胞、例えば、pUC由来のベクター、pSK由来のベクター、pGEM由来のベクター、pSP由来のベクター、pBS由来のベクター、または1つ以上のT−DNA領域を含むバイナリーベクターにおける容易な発現カセットの選択、増幅、および形質転換を提供する、付加的な核酸配列を含む。付加的な核酸配列は、ベクターの自律複製を提供する複製の起源、好ましくは、抗生物質または除草剤耐性をコードする選択マーカー遺伝子、核酸配列または核酸構築体にコードされる遺伝子を挿入するための複数の部位を提供する一意の多重クローニング部位、ならびに原核生物および真核生物(特に植物)細胞の形質転換を増強する配列を含む。
本明細書で使用される「発現ベクター」は、宿主細胞を形質転換すること、および1個以上の特定のポリヌクレオチドの発現を生じさせることができる、DNAまたはRNAベクターである。好ましくは、発現ベクターはまた、宿主細胞内で複製することもできる。発現ベクターは、原核性または真核性とすることができ、典型的に、ウイルスまたはプラスミドである。本発明の発現ベクターとしては、細菌、真菌、内寄生性生物、節足動物、動物、藻類、および植物細胞を含む、本発明の宿主細胞において機能する(すなわち、遺伝子発現を指令する)、あらゆるベクターが挙げられる。本発明の特に好ましい発現ベクターは、酵母、藻類、および/または植物細胞の遺伝子発現を指令することができる。
塊茎特異的または塊茎で増強された発現を伴う遺伝子に対する多くのプロモーターが知られており、クラスIパタチンプロモーター、ジャガイモ塊茎ADPGPP遺伝子に対するプロモーター、大サブユニットおよび小サブユニットの双方、スクロースシンターゼプロモーター、22kDタンパク質複合体およびプロテイナーゼ阻害剤を含む大塊茎タンパク質に対するプロモーター、顆粒結合デンプンシンターゼ遺伝子(GBSS)に対するプロモーター、ならびに他のクラスIおよびIIパタチンプロモーターが挙げられる。また、他のプロモーターを使用して、種子または果実等の特異的組織においてタンパク質を発現させることもできる。β−コングリシニンに対するプロモーター、またはナピン、ゼイン、リニン、およびファゼオリンプロモーター等の他の種子特異的プロモーターを使用することができる。根特異的プロモーターを使用してもよい。そのようなプロモーターの一例は、酸キチナーゼ遺伝子に対するプロモーターである。根組織における発現は、特定されたCaMV35Sプロモーターの根特異的サブドメインを利用することによって達成することも可能である。
転移核酸は、外因性ポリヌクレオチドを細胞に送達するために使用することができ、1つ、好ましくは2つの境界配列と、関心のポリヌクレオチドとを含む。転移核酸は、選択可能なマーカーをコードしてもよく、またはコードしなくてもよい。好ましくは、転移核酸は、細菌におけるバイナリーベクターの一部を形成し、バイナリーベクターは、細菌におけるベクターの複製を可能にするか、またはベクターを含む細菌細胞の選択もしくは維持を可能にする要素をさらに含む。真核細胞へ転移すると、バイナリーベクターの転移核酸成分は、真核細胞をゲノムに組み込むことができる。
本発明はまた、本明細書で定義される1つ以上のポリヌクレオチドもしくはベクター、またはその組み合わせで形質転換される宿主細胞である、組み換え細胞、例えば、組み換え植物細胞も提供する。本明細書では、「組み換え細胞」という用語は、「トランスジェニック細胞」という用語と同じ意味で使用される。本発明の好適な細胞としては、例えば本明細書で説明されるポリペプチドまたは酵素をコードする本発明のポリヌクレオチドまたは組み換えベクターで形質転換することができる、あらゆる細胞が挙げられる。細胞は、好ましくは、それによって、脂質を生成するために使用することができる細胞である。組み換え細胞は、培養物中の細胞、インビトロの細胞、または例えば植物等の生物中の細胞、または例えば種子もしくは葉等の器官中の細胞であってもよい。好ましくは、細胞は、植物中にあり、より好ましくは、植物の種子中にある。
本発明はまた、本発明の外因性ポリヌクレオチドもしくはポリペプチド、本発明の細胞、本発明のベクター、またはこれらの組み合わせを含む植物も提供する。「植物」という用語は、全植物を指すが、「その一部」という用語は、植物器官(例えば、葉、茎、根、花、果実)、単一の細胞(例えば、花粉)、種子、胚、胚乳、胚盤、または種皮等の種子部、脈管組織等の植物組織、植物細胞、およびその子孫を指す。本明細書で使用される植物部は、植物細胞を含む。
トランスジェニック植物は、Slater et al.,Plant Biotechnology−The Genetic Manipulation of Plants,Oxford University Press(2003)、およびP.Christou and H.Klee、Handbook of Plant Biotechnology,John Wiley and Sons(2004)で一般に説明されているもの等の、当技術分野で知られている手法を使用して生成することができる。
一実施形態において、TILLING法(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes)は、内因性遺伝子、例えば、DGAT、sn−1−グリセロール−3−リン酸アシルトランスフェラーゼ(GPAT)、1−アシル−グリセロール−3−リン酸アシルトランスフェラーゼ(LPAAT)、アシルCoA:リゾホスファチジルコリンアシルトランスフェラーゼ(LPCAT)、ホスファチジン酸ホスファターゼ(PAP)、またはその二つ以上の組み合わせをコードする遺伝子がノックアウトされる植物を生成するために使用することができる。
転写後遺伝子サイレンシング(PTGS)は、分解のために細胞mRNAおよびウイルスmRNAの双方を標的とすることができる、ヌクレオチド配列特異的防御機構である。PTGSは、組み換えポリヌクレオチドで安定的または一過性に形質転換された植物または菌類において起こり、導入されたポリヌクレオチドに対する配列類似性を伴うRNA分子の減少した蓄積をもたらす。
フロックハウスウイルスB2、
ポソスラテントウイルスP14、
ポソスラテントウイルスAC2、
アフリカカッサバモザイクウイルスAC4、
ベンディ黄色葉脈モザイク病C2、
ベンディ黄色葉脈モザイク病C4、
ベンディ黄色葉脈モザイク病βC1、
トマトクロロシスウイルスp22、
トマトクロロシスウイルスCP、
トマトクロロシスウイルスCPm、
トマトゴールデンモザイクウイルスAL2、
トマト葉巻病ジャワウイルスβC1、
トマト黄化葉巻ジャワウイルスV2、
トマト黄化巻葉ウイルス−ChinaC2、
トマト黄化葉巻ChinaウイルスY10分離菌βC1、
トマト黄化葉巻イスラエル系分離菌V2、
リョクトウ黄色モザイクウイルス−VignaAC2、
ハイビスカスクロロティックリングスポットウイルスCP、
カブクリンクルウイルスP38、
カブクリンクルウイルスCP、
カリフラワーモザイクウイルスP6、
ビート黄色ウイルスp21、
シトラストリステイザウイルスp20、
シトラストリステイザウイルスp23、
シトラストリステイザウイルスCP、
ササゲモザイクウイルスSCP、
サツマイモクロロティックスタントウイルスp22、
キュウリモザイクウイルス2b、
トマトアスパーミーウイルスHC−Pro、
ビートカーリートップウイルスL2、
土壌感染性ムギ類萎縮ウイルス19K、
オオムギストライプモザイクウイルスGammab、
ポア半潜伏ウイルスGammab、
ピーナッツクランプペクルウイルスP15、
イネ萎縮ウイルスPns10、
ククルビットアブラムシ媒介黄色ウイルスP0、
ビートウェスタン黄色ウイルスP0、
ジャガイモウイルスXP25、
キュウリ葉脈黄変ウイルスP1b、
プラムポックスウイルスHC−Pro、
サトウキビモザイクウイルスHC−Pro、
ジャガイモウイルスY株HC−Pro、
タバコエッチウイルスP1/HC−Pro、
カブモザイクウイルスP1/HC−Pro、
コックスフットモットルウイルスP1、
コックスフットモットルウイルス−ノルウェー系分離菌P1、
イネ黄色モットルウイルスP1、
イネ黄色モットルウイルス−ナイジェリア系分離菌P1、
イネオーハブランカウイルスNS3、
イネストライプウイルスNS3、
アブラナ感染性タバコモザイクウイルス126K、
アブラナ感染性タバコモザイクウイルスp122、
タバコモザイクウイルスp122、
タバコモザイクウイルス126、
タバコモザイクウイルス130K、
タバコラットルウイルス16K、
トマトブッシースタントウイルスP19、
トマトスポッテッドウイルトウイルスNS、
リンゴクロロティックリーフスポットウイルスP50、
グレープバインウイルスAp10、
BYVp21のブドウ葉巻随伴ウイルス−2相同体、
ならびに、その変異形/変異体であってもよい。前述のリストは、サプレッサーを得ることができるウイルス、および各特定のウイルスに由来するサプレッサーのためのタンパク質(例えば、B2、P14等)またはコード領域の呼称を提供する。
当技術分野で日常的に行われている手法を使用して、本発明の細胞、生物、またはその一部によって生成される非極性脂質を抽出、処理、精製、および分析することができる。そのような手法は、FereidoonShahidi,CurrentProtocolsinFoodAnalyticalChemistry,JohnWiley&Sons,Inc.(2001)D1.1.1−D1.1.11、およびPerez−Vich他(1998)等の出展の文献全体を通して記載および説明されている。
典型的に、植物種子は、粗製種子油を生成するために調理、圧搾、および/または抽出され、次いで、脱ガムされ、精製され、消色され、そして、消臭される。一般に、種子を破砕するための手法は、当技術分野で知られている。例えば、油料種子は、水を噴霧することによって、例えば8.5%まで含水量を増加させることによって柔らかくし、そして、滑らかなローラーを使用して0.23〜0.27mmの間隙設定でフレーク状にすることができる。種子の種類によっては、破砕する前に水を加えなくてもよい。熱の適用は、酵素を不活性化し、さらなる細胞の破裂を促進し、脂質液滴を癒合させ、タンパク質粒子を塊にし、これらの全てが、抽出プロセスを容易にする。
光合成に関与する植物の一部(例えば、より高度な植物の茎および葉、ならびに藻類等の水生植物)も、脂質を生成するために使用することができる。植物の種類とは関係なく、グリーンバイオマスから脂質を抽出するためのいくつかの方法がある。1つの方法は、物理的抽出であるが、これは、しばしば、溶媒抽出を使用しない。これは、いくつかの異なる種類の機械的抽出を使用した「従来の」方法である。搾油機で圧搾する抽出は一般的な種類であり、スクリュー圧搾機およびラム圧搾機による抽出方法も同様である。これらの方法を使用して抽出される脂質の量は、用いた植物材料および機械的プロセスによって大幅に変動する。機械的抽出は、典型的に、下記で説明される溶媒抽出よりも非効率的である。
藻類養殖は、藻類(微細藻類を含む。また、植物プランクトン、微細植物、またはプランクトン藻類とも称され、一般的に海藻として知られる)の種の養殖を伴う水産養殖の1つの形態である。本発明において有用な藻類の種としては、例えば、クラミドモナス種(例えば、クラミドモナス・ラインハーディ)、ドナリエラ種、ヘマトコッカス種、クロレラ種、スラウストキトリウム種、シゾキトリウム種、およびボルボックス種が挙げられる。
本明細書で使用される「発酵プロセス」という用語は、いかなる発酵プロセス、または発酵ステップをむいかなるプロセスをも指す。発酵プロセスとしては、アルコール(例えば、エタノール、メタノール、ブタノール)、有機酸(例えば、クエン酸、酢酸、イタコン酸、乳酸、グルコン酸)、ケトン(例えば、アセトン)、アミノ酸(例えば、グルタミン酸)、ガス(例えば、H2およびCO2)、抗生物質(例えば、ペニシリンおよびテトラサイクリン)、酵素類、ビタミン類(例えば、リボフラビン、ベータカロテン)およびホルモン類を生成するために使用される発酵プロセスが挙げられるが、これらに限定されない。発酵プロセスはまた、消費アルコール業界(例えば、ビールおよびワイン)、酪農業界(例えば、発酵酪農製品)、革製品業界、およびタバコ業界で使用される発酵プロセスも含む。好ましい発酵プロセスとしては、当技術分野でよく知られているようなアルコール発酵プロセスが挙げられる。好ましい発酵プロセスは、当技術分野でよく知られているような嫌気性発酵プロセスである。好適な発酵性細胞は、典型的に、発酵させることが可能である、すなわち、グルコースまたはマルトース等の糖を所望の発酵産物に直接的または間接的に変換することが可能である微生物である。発酵性微生物の例としては、酵母等の真菌性生物、好ましくは、油脂性生物が挙げられる。本明細書で使用される「油脂性生物」は、その乾燥重量の少なくとも25%がトリグリセリドとして蓄積するものである。本明細書で使用される「酵母」としては、サッカロミセス種、サッカロミセス・セレビジエ、サッカロミセス・カールベルゲンシス、カンジダ種、クルヴェロマイシス種、ピキア種、ハンゼヌラ種、トリコデルマ種、リポミセス・スターケイ、およびヤロウィア・リポリティカが挙げられる。好ましい酵母としては、ヤロウィア・リポリティカ、または他の油脂性酵母、およびサッカロミセス種、特に、サッカロミセス・セレビジエの株が挙げられる。
説明される方法によって生成される脂質は、種々の用途を有する。いくつかの実施形態において、脂質は、食物油として使用される。他の実施形態において、脂質は、精製されて、潤滑剤として、またはプラスチックの合成等の他の工業的用途に使用される。いくつかの好適な実施形態において、脂質は、バイオディーゼルを生成するために精製される。
バイオディーゼルまたはアルキルエステルの生成は、よく知られている。脂質からのエステル生成には、次の3つの基本的な経路がある。すなわち、1)アルコールによる、脂質の塩基触媒エステル交換、2)メタノールによる脂質の直接的な酸触媒エステル化、および3)脂質の脂肪酸への変換、その後の、酸触媒によるアルキルエステルへの変換、である。
本発明は、飼料として使用することができる組成物を含む。本発明の目的について、「飼料」としては、体内に取り込んだときに、(1)組織に栄養分を与える、もしくは組織を作り上げる、またはエネルギーを供給する役目をする、および/または(2)十分な栄養状態もしくは代謝機能を維持する、回復させる、もしくは支援する、(経腸および/もしくは腸管外摂取を含む)ヒトまたは動物の摂取のためのあらゆる食品または調製物が挙げられる。本発明の飼料は、乳児および/または幼児のための栄養組成物を含む。
本発明はまた、本発明の方法を使用して生成される1つ以上の脂質を含む、組成物、特に医薬組成物も包含する。
「ポリペプチド」および「タンパク質」という用語は、一般に、同じ意味で使用される。
指向性進化では、ランダムな変異誘発がタンパク質に適用され、所望の品質、例えば増加したアシルトランスフェラーゼ活性を有する変異形を選択するために、選択レジームが使用される。次いで、さらなる一連の変異および選択が適用される。典型的な指向性進化方策は、次の3つのステップを伴う。すなわち、
タンパク質は、タンパク質構造および折り畳みに関する既知の情報に基づいて、合理的に設計することができる。これは、ゼロからの設計(デノボ設計)によって、または天然の足場に基づく再設計(例えば、Hallinga,1997、およびLu and Berry,Protein Structure Design and Engineering,Handbook of Proteins 2,1153−1157(2007)を参照されたい)によって達成することができる。タンパク質設計は、典型的に、所与または標的の構造に折り畳む配列を特定することを伴い、コンピュータモデルを使用して達成することができる。コンピュータによるタンパク質設計アルゴリズムは、標的構造に折り畳んだときにエネルギーが低い配列について配列−配座空間を検索する。コンピュータによるタンパク質設計アルゴリズムは、どのくらいの変異がタンパク質の構造および機能に影響を及ぼすのかを評価するために、タンパク質エネルギー学のモデルを使用する。これらのエネルギー関数は、典型的に、分子力学、統計学(すなわち知識に基づくもの)、および他の経験項を含む。好適な、入手可能なソフトウェアとしては、IPRO(Interative Protein Redesign and Optimization)、EGAD(AGenetic Algorithm for Protein Design)、Rosetta Design、Sharpen、およびAbalone.が挙げられる。
一態様において、本発明は、細胞においてMAG、DAG、および/またはTAGを生成する増加した能力を有するアシルトランスフェラーゼをコードする核酸分子を特定するための方法を提供する。
一過性発現系での植物細胞における遺伝子の発現
遺伝子は、基本的に、Voinnet他(2003)およびWood他(2009)によって説明されるような一過性発現系を使用して発現させた。複製したエンハンサー領域を含む強力な構成的e35Sプロモーターによって発現するコード領域を含むバイナリベクターを、アグロバクテリウム・ツメファシエンス株AGL1に導入した。p19ウイルスサイレンシングサプレッサーを発現するためのキメラバイナリベクター35S:p19を、国際特許公開第WO2010/057246号で説明されるように、AGL1に別々に導入した。組み換え細胞を、50mg/Lのカナマイシンおよび50mg/Lのリファンビシンを補充したLBブロスにおいて、28℃で静止期まで成長させた。次いで、細菌を、5000gで、室温における5分間の遠心分離によってペレット化し、その後に、10mMのMES、pH5.7、10mMのMgCl2、および100μMのアセトシリンゴンを含む浸潤緩衝液中に、OD600=1.0になるように再懸濁した。次いで、細胞を、28℃で3時間振盪しながらインキュベートし、その後に、OD600を測定し、OD600=0.125という最終濃度に到達させるために必要とされる量の、35S:p19を含む各培養物を新鮮な管に加えた。最終的な体積は、前述の緩衝剤で補った。次いで、培養物混合物を葉に浸潤させ、浸潤後さらに3〜5日間植物を成長させ、その後、精製した細胞溶解物調製物または総脂質単離のために葉片を回収した。対照浸潤物は、35s:p19株だけとした。
上で説明したように事前に浸潤させたニコチアナ・ベンサミアナの葉組織を、ガラスホモジナイザを使用して、0.1Mのリン酸カリウム緩衝液(pH7.2)および0.33Mのスクロースを含む溶液中ですりつぶした。葉ホモジェネートを、4℃、20,000gで45分間遠心分離し、その後に、各上清を採集した。各上清中のタンパク含有量を、Wallac1420マルチレベルカウンタおよびBio−Rad Protein Assay色素試薬(Bio−Rad Laboratories,Hercules,CAUSA)を使用して、Bradford(1976)に従って測定した。アシルトランスフェラーゼアッセイでは、いくつかの改良を伴って、Cao他(2007)に従って、100μgのタンパク質を使用した。反応培地は、100mMのHCl(pH7.0)、5mMのMgCl2、1mg/mLのBSA(脂肪酸含まず)、200mMのスクロース、40mMの低温オレオイル−CoA、16.4μMのsn−2−モノオレオイルグリセロール[14C](55mCi/mmol、American Radiochemicals,Saint Louis,MOUSA)、または6.0μMの[14C]グリセロール−3−リン酸(G−3−P)ジナトリウム塩(150mCi/mmol、American Radiochemicals)を含めた。アッセイは、7.5分、15分、または30分にわたって行った。
葉溶解物アッセイからの脂質の分析
溶解物アッセイによる脂質を、クロロホルム:メタノール:0.1MのKCl(2:1:1)を使用して抽出して、回収した。試料中の異なる脂質クラスを、10%のホウ酸を含浸させたSilica Gel60薄層クロマトグラフィ(TLC)プレート(Merck,Dermstadt,Germany)上で分離した。脂質抽出物からTAGを分画するために使用した溶媒系は、クロロホルム/アセトン(90/10 v/v)で構成した。個々の脂質クラスを、プレートをヨウ素蒸気に露出することによって視覚化し、同じTLCプレート上で真正標準を並列に実行することによって特定した。プレートを、蛍光体撮像スクリーンに一晩露出し、DPMで定量化するために、液体シンチレーション計数の前にFujifilm FLA−5000 Phosphorimagerによって分析した。
組織を、BlighおよびDyer(1959)によって説明されるように冷凍乾燥させて、総脂質を抽出した。各試料中の異なる脂質クラスを、Silica Gel60 TLCプレート上で分離した。中性脂質(NL)および極性脂質(PL)を分画するために使用した溶媒系は、ヘキサン/ジエチルエーテル/酢酸(70/30/1 v/v/v)で構成した。個々の脂質クラスを、プレートをヨウ素蒸気に露出することによって視覚化し、同じTLCプレート上で並列真正標準を実行することによって同定した。
Equity(商標)−1溶融シリカ毛細管カラム(15m×0.1mmのi.d.、0.1μmの膜厚)、FID、スプリット/スプリットレス注射器、ならびにAgilent Technologies7683シリーズ自動試料採取器および注射器を備える、Agilent Technologies6890Nガスクロマトグラフ(Palo Alto,California,USA)を使用して、ガスクロマトグラフィ(GC)によってFAMEを分析した。ヘリウムを担体ガスとして使用した。試料を、120℃のオーブン温度で、スプリットレスモードで注入した。注入後、オーブン温度を、1分あたり10℃で270℃まで上昇させ、最後に1分あたり5℃で310℃まで上昇させた。Agilent Technologies ChemStationソフトウエア(RevB.03.01(317)、Palo Alto、California、USA)を用いてピークを定量化した。
サッカロミセス・セレビシエ株H1246は、DGAT活性が全くなく、かつ4つの遺伝子(DGA1、LRO1、ARE1、ARE2)におけるノックアウト変異の結果として、TAGおよびステロールエステルが欠如している。H1246成長媒体への遊離脂肪酸の添加(例えば、1mM、18:1Δ9)は、DGAT活性がない場合に有毒である。したがって、そのような培地での成長は、この酵母株におけるDGAT活性の存在についての指標または選択肢として使用することができる。
プレート培地、プレートあたり40mLの培地
・ YNBD:ウラシルを含まず、2%のグルコース、0.01%のNP40、および100μLのエタノールを含む、最小限のドロップアウト培地。
・ YNBG:ウラシルを含まず、2%のガラクトース、1%のラフィノース、0.01%のNP40、および100μLのエタノールを含む、最小限のドロップアウト培地。
・ YNBG+FA:ウラシルを含まず、2%のガラクトース、1%のラフィノース、0.01%のNP40、および100μLのエタノールに溶解させた1mMC18:1Δ9を含む、最小限のドロップアウト培地。
MGAT1
M.マスクルス由来の遺伝子によってコードしたモノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ1(MGAT1)(Yen他,2002)、およびここでMGAT1との比較として使用した、A.サリアナのジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ(DGAT1)(Bouvier−Nave他,2000)の酵素活性を、実施例1で説明されるように一過性発現系を使用して、N.ベンサミアナの葉組織において実証した。
末端を鈍化させるためにT4DNAポリメラーゼを処理した後に、35Sプロモーターを含むPstIをベクターpORE04mpのSfoI部位に挿入することによって、35S−pORE04と命名したベクターを作製した(Coutu他,2007)。ブラシカ・ナパスのためにコドン最適化したM.マスクルスMGAT1をコードするキメラDNAを、Geneartによって合成し、0954364_MGAT_pMAと命名した。EcoRI断片内に含まれる0954364_MGAT_pMAのコード領域全体をEcoRI部位の35S−pORE04に挿入することによって、35S:MGAT1と命名した、植物細胞における発現のためのM.マスクルスMGAT1(GenBank登録番号Q91ZV4)をコードするキメラDNAを作製した。35S:MGAT1構築体を含むベクターを、pJP3184と命名した。同様に、BamHI−EcoRV断片内に含まれるpXZP513Eのコード領域全体をBamHI−EcoRV部位の35S−pORE04に挿入することによって、植物細胞における発現のためのA.サリアナDGAT1(GenBank登録番号AAF19262)をコードするキメラDNA35S:DGAT1を作製した。35S:DGAT1構築体を含むベクターを、pJP2078と命名した。
EcoRI断片内に含まれるMGAT2コード領域全体をEcoRI部位の35S−pORE04に挿入することによって、35S:MGAT2と命名した、植物細胞における発現のためのM.マスクルMGAT2をコードするキメラDNAを作製した。M.マスクルス由来の遺伝子によってコードしたモノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ2(MGAT2)(Yen,2003)(GenBank登録番号Q80W94)、およびMGAT2との比較として使用したA.サリアナのDGAT1の酵素活性は、実施例1で説明した一過性発現系を使用した、N.ベンサミアナの葉組織においても示された。
本発明者らは、驚くべきことに、MGAT遺伝子のトランスジェニック発現が、植物細胞における脂質収量のかなりの増加をもたらすことを実証した。本発明者らは、Tumaney他が、一部のMGAT活性によってDGATを単離したこと、およびTumaney他が、本明細書で定義されるように、MGATをコードする遺伝子のクローン化する試みに成功しなかったことを理解している。Tumaney他(2001)は、ピーナッツにおけるMGAT活性を報告し、この活性の原因となる酵素を単離した。しかしながら、Tumaney他は、DGAT活性についての試験結果を公表せず、したがって、報告した酵素は、いくつかのMGAT活性を伴うDGATであったと考えられる。実際に、以前の研究では、他の種においていかなるMGAT活性も特定できなかった(Stobart他,1997)。さらに、意外なことに、Tumaney他が単離した酵素は、膜結合酵素ではなく、可溶性のサイトゾル酵素であった。最後に、Tumaney他は、後に、彼らがピーナッツ(Rajasekharan他,2006)およびアラビドプシス(Ghosh他,2006)からMGATを単離したこと公表したが、これらの遺伝子の単離を説明しているいかなる論文もこれまでに公開されていない。
実施例1で説明されるように、35S:MGAT1、35S:MGAT2、35S:DGAT1を浸潤させたN.ベンサミアナの葉組織から細胞溶解物を作製した。35S:p19構築体だけしか含まない株(陰性対照)、35S:p19株を伴う35S:MGAT2株、ならびに35S:p19株を伴う35S:MGAT2株および35S:DGAT1アグロバクテリウム株の混合物について、それぞれ3つ組で、別々の葉浸潤を行った。3日後に3つ組の試料を採取し、精製した細胞溶解物を、機械的組織溶解および遠心分離によって調製した。実施例1で説明されるように[14C]MAGを溶解物に供給することによって、精製した細胞溶解物のMGAT活性を比較した。データを図4に示す。
葉溶解物を使用した実施例3で説明されるインビトロのアッセイでは、基質(sn−2−MAGおよびオレオイル−CoA)を外因的に供給したのに対して、無傷の植物組織におけるインビボのMGAT活性では、これらの基質が天然に存在することを必要とするであろう。種々の植物組織における低レベルのMAGの存在は、既に報告されている(HirayamaおよびHujii,1965、Panekina他,1978、Lakshminarayana他,1984、PerryおよびHarwood,1993)。MGAT2が天然の植物経路によって生成されたMAGを利用できるかどうかを試験するために、前述の実験を繰り返すが、ここでは、[14C]G−3−Pを溶解物に供給した。結果として生じたデータを図5に概略的に示す。
pYES2:DGAT1、pYES2:MGAT1、およびpYES2:MGAT2を生ずるように、A.サリアナDGAT1、M.マスクルスMGAT1、およびM.マスクルスMGAT2をコードする遺伝子をpYES2ベクターに挿入することによって、キメラ酵母発現ベクターを構成した。これらの構成体を、DGAT活性が全くなく、かつ4つの遺伝子(DGA1、LRO1、ARE1、ARE2)におけるノックアウト変異の結果として、TAGおよびステロールエステルが欠如している、サッカロミセス・セレビシエ株H1246において形質転換した。酵母株H1246は、外因的に添加した脂肪酸からDAGを合成することができるが、ノックアウト変異のため、DAGをTAGに変換することができない。形質転換した酵母培養物に、[14C]18:1Δ9を供給し、その後に、実施例1で説明されるように全ての脂質を抽出して、TLCによって分画した。代表的なTLCプレートのオートラジオグラムを図6に示す。
アラビドプシス・サリアナ種子におけるMGAT1の発現
M.マスクルスMGAT1をコードし、種子特異的プロモーター(FP1、切断したブラシカ・ナパス・ナピン・プロモーター)の制御下にある遺伝子を使用して、安定的に形質転換したA.サリアナおよび子孫種子を生成した。FP1プロモーターおよびグリシネ・マクのレクチンポリアデニル化シグナルが側面に並ぶEcoRI部位を含むSalI断片をベクターpCW141のSalI−XhoI部位に挿入することによって、pJP3174と命名したベクターを作製した。pCW141ベクターはまた、スクリーニング可能なマーカー遺伝子としてFP1駆動、イントロン中断、種子分泌のGFPも含んだ。EcoRI断片内に含まれる構築体0954364_MGAT_pMAのコード領域全体を、pJP3179を生成するEcoRI部位のpJP3174に挿入することによって、FP1:MGAT1−GFPと命名したキメラ遺伝子を作製した。このキメラベクターを、A.ツメファシエンス株AGL1に導入し、形質転換したアグロバクテリウムの培養物由来の細胞を使用して、形質転換のためのフローラルディップ法(CloughおよびBent,1998)を使用してA.サリアナ(生態型コロンビア)植物を処理した。成熟後に、処理した植物に由来する種子を、LeicaMZFLIII解剖顕微鏡およびebq100水銀ランプの下で観察した。15個のトランスジェニック種子(強いGFP陽性)および15個の非トランスジェニック(GFP陰性)種子を、単離して、それぞれプールした。GFP陽性プールおよびGFP陰性プールを、実施例1で説明されるように、総脂肪酸含量について分析した。この分析は、MGAT構築体で形質転換した種子について平均的な脂肪酸含量および組成物を提供したが、ヘミ接合性およびホモ接合性双方の形質転換された種子を含んだかもしれない集団におけるものであった。
アラビドプシス・サリアナ種子のM.マスクルスMGAT1の発現に使用されるベクターFP1:MGAT1を使用して、形質転換されたB.ナパス植物を生成した。標準的な電気穿孔手順を介して、ベクターをA.ツメファシエンス株AGL1に導入した。培養物を、150rpmで攪拌しながら、LB培地中で、28℃で一晩成長させた。細菌細胞を、4000rpmで5分間の遠心分離によって採集し、WinansのAB(Winans、1988)で洗浄し、10mLのWinansのAB培地(pH5.2)中に再懸濁し、そして100μMのアセトシリンゴンを添加しながら、カナマイシン(50mg/L)およびリファンビシン(25mg/L)で一晩成長させた。ブラッシカ細胞を感染させる2時間前に、スペルミジン(120mg/L)を添加し、細菌の最終的な密度を、新鮮なAB媒体で0.3〜0.4のOD600nmに調整した。1/2MS(Murashige−Skoog,1962)上で成長させた8日目のB.ナパス苗木由来の新鮮に単離した子葉柄、またはMS培地上で3〜4日目までに1mg/Lチジアズロン(TDZ)+0.1mg/Lのアルファ−ナフタレン酢酸(NAA)で予め調整した胚軸セグメントを、10mLのアグロバクテリウム培養物で5分間感染させた。次いで、アグロバクテリウムを感染させた外植体(子葉柄および胚軸)を、滅菌濾紙で吸い取って余分なアグロバクテリウムを除去し、異なる抗酸化剤(50mg/LのL−システインおよび15mg/Lのアスコルビン)を補充した、または補充しない、共培養媒体(1mg/LTDZ+0.1mg/LNAA+100μMアセトシリンゴンを伴うMS媒体)に移した。全てのプレートを、パラフィルムで密閉し、暗所において23〜24℃で48時間インキュベートした。
アラビドプシス・サリアナ種子のM.マスクルスMGAT1の発現に使用したものと同じ種子特異的キメラ遺伝子を使用して、形質転換されたゴシピウム・ヒルスツム植物を生成した。FP1:MGAT1と命名したベクターを、標準的な電気穿孔手順を介してA.ツメファシエンス株AGL1に導入し、アグロバクテリウム培養物由来の細胞を使用して、キメラDNAをゴシピウム・ヒルスツム(変種Coker315)の細胞に導入した。10日目の綿苗木から切除した子葉を外植体として使用し、A.ツメファシエンスに感染させて2日間にわたって共培養した。この後に、0.1mg/Lの2,4−D、0.1mg/Lのカイネチン、50mg/Lの硫酸カナマイシン、および25mg/Lのセフォタキシムを含むMS培地(MurashigeおよびSkoog,1962)に対する6週間選択が続いた。子葉外植体由来の健康なカルスを、28℃で第2の6週間にわたって、5mg/Lの6−(γ、γ−ジメチルアリルアミノ)−プリン(2ip)、0.1mg/Lのナフタレン酢酸(NAA)、25mg/Lのカナマイシン、および250mg/Lのセフォタキシムを含むMS媒体に移した。インキュベーションの約6〜10週後に形成される体細胞胚を、同じ培地であるが植物ホルモンまたは抗生物質を添加していない培地上で発芽させて維持した。体細胞胚から発育した小植物を、土壌に移し、葉および根が発育した時点で、28℃/20℃(昼/夜)の成長温度で、温室において維持した。FP1−MGAT1構築体を含むトランスジェニック植物を、温室において成長させ、開花させ、種子を含む莢を生成させた。種子は、成熟期に採取する。MGAT1の種子特異的発現は、含油量を増加させ、綿種子油における多価不飽和脂肪酸の割合を増加させる。
N.ベンサミアナを、実施例2で説明される35S:MGAT1構築体で安定的に形質転換した。35S:MGAT1を、標準的な電気穿孔手順を介して、A.ツメファシエンス株AGL1に導入した。形質転換された細胞を、カナマイシン(50mg/L)およびリファンビシン(25mg/L)を補充した個体LB培地上で成長させ、28℃で2日間インキュベートした。単一の群体を使用して、新鮮な培養を開始した。48時間の活発な培養に続いて、細胞を2,000xgの遠心分離によって採集し、上清を除去した。OD600=0.5の密度で、50%のLBおよび50%のMS培地を含む新鮮な溶液中に細胞を再懸濁した。
M.マスクルスMGAT1をコードするキメラ遺伝子を使用して、トリフォリウム・レペンス(別の双子葉植物)を形質転換した。キメラ遺伝子35S:MGAT1および35S:DGAT1を含むベクターを、標準的な電気穿孔手順を介して、A.ツメファシエンスに導入した。双方のベクターはまた、35S:BAR選択可能なマーカー遺伝子も含む。形質転換されたアグロバクテリウム細胞を、カナマイシン(50mg/L)およびリファンビシン(25mg/L)を補充した固体LB培地上で成長させ、28℃で2日間インキュベートした。単一の群体を使用して、各構築体のための新鮮な培養を開始した。48時間の活発な培養に続いて、アグロバクテリウム培養物を使用して、Larkin他(1996)によって説明されるように、給水種子から解離したT.レペンス(cv.Haifa)子葉を処理した。3日間の共培養に続いて、外植体を、5mg/LのPPTに露出して、形質転換された芽を選択し、次いで、発根培地に移して根を形成させ、その後に、土壌に移した。MGAT1を含む形質転換された植物を得た。35Sプロモーターは、形質転換された植物の細胞において構成的に発現する。含油量は、少なくとも葉等の栄養組織において増加する。
M.マスクルスMGAT1を含むキメラベクターを使用して、安定的に形質転換されたホルデウム・ブルガレ(単子葉植物の植物)を生成した。キメラ遺伝子Ubi:MGAT1およびUbi:DGAT1を含むベクターを、M.マスクルスMGAT1およびA.サリアナDGAT1コード領域全体を、それぞれ、pWVEC8−Ubiの中にクローン化することによって構成した。キメラ遺伝子Ubi:MGAT1およびUbi:DGAT1を含むベクターを、標準的な電気穿孔手順を介して、A.ツメファシエンス株AGL1に導入した。形質転換されたアグロバクテリウム細胞を、カナマイシン(50mg/L)およびリファンビシン(25mg/L)を補充した個体LB培地上で成長させ、プレートを、28℃で2日間インキュベートした。それぞれの単一の群体を使用して、新鮮な培養を開始した。
M.マスクルスMGAT1を含むキメラベクターを使用して、酵母(この実施例では、サッカロミセス・セレビシエ、すなわち、発酵による油の生成に好適な真菌微生物)を形質転換した。遺伝的構築体Gal1:MGAT1は、EcoRI断片内に含まれる0954364_MGAT_pMAと命名した構築体のコード領域全体を、pJP3301を生成するEcoRI部位のpYES2に挿入することによって作製した。同様に、ここでは比較として使用される、酵素A.サリアナDGAT1を別々にコードする遺伝的構築体Gal1:DGAT1を、A.サリアナDGAT1コード領域全体をpYES2に挿入することによって作製した。これらのキメラベクターを、熱衝撃によってS.セレビシエ株S288Cに導入し、形質転換体を、唯一の炭素源として2%のラフィノースを含む酵母最小培地(YMM)プレート上に選択した。クローンの接種原培養物を、唯一の炭素源として2%のラフィノースを伴う液体YMMにおいて確立した。この培養物からの実験培養物を、初期のOD600が約0.3になるように、1%のNP−40を含むYMM培地中に接種した。培養物を、OD600が約1.0になるまで、振盪(約100rpm)しながら28℃で成長させた。この時点で、2%(w/v)の最終濃度になるように、ガラクトースを添加した。遠心分離によって収穫する前に、培養物を、振盪しながらさらに25℃で48時間インキュベートした。細胞ペレットを水で洗浄し、その後に、実施例1で説明されるように、脂質クラス分画および定量化分析のために凍結乾燥した。Galプロモーターは、形質転換された酵母細胞において誘導的に発現し、細胞における含油量が増加する。
M.マスクルスMGAT1を含むキメラベクターを使用して、安定的に藻類細胞を形質転換する。MGAT1コード領域を、カリフラワーモザイクウイルス35SプロモーターカセットおよびC.ラインハーディRBCS2プロモーターによって発現するパロモマイシン耐性遺伝子(アミノグリコシド−O−ホスホトランスフェラーゼVIII)を含むクローニングベクターの中にクローン化することによって、35S:MGAT1と命名した遺伝的構築体を作製する。35S:MGAT1を、改良したガラスビーズ法(Kindle,1990)によって、5×107の対数的培養物cc503(クラミドモナス・ラインハーディの細胞壁欠損株)の中に別々に導入する。双方のベクターはまた、選択可能なマーカー遺伝子としてBLE耐性遺伝子も含む。簡潔には、非形質転換細胞の群体を、TAP寒天培地プレート上で4日間にわたって約24℃に保ち、1mLあたり約5×106個の細胞まで成長させ、結果として生じた細胞を、室温で3分間、3000gでペレット化し、再懸濁して300μLのTAP培地中に5×107個の細胞を生成する。300μLの直径0.6mmのガラスビーズ、5L中0.6μgのプラスミド、および100μLの20%のPEG MW8000を添加し、混合物を、最高速度で30秒間ボルテックスし、次いで、10mLのTAPに移し、暗所で振盪しながら16時間インキュベートする。細胞をペレット化し、200μLのTAP中に再懸濁し、次いで、5mg/Lのゼオシンを含むTAPプレート上で平板培養し、暗所で3週間インキュベートする。形質転換された群体を、新鮮なTAP+5mg/Lのゼオシンプレートに二次培養し、その後に、ゼオシン選択を伴う標準的な培地条件下で成長させる。遠心分離による収穫の後に、細胞ペレットを水で洗浄し、その後に、実施例1で説明されるように、脂質クラス分画および定量化分析のために凍結乾燥する。35S:MGAT1プロモーターは、形質転換された藻細胞において構成的に発現する。細胞の含油量は、大幅に増加する。
M.マスクルスMGAT1を含むキメラベクターを使用して、ルピナス・アングスティフォリウス(マメ科の植物)を形質転換する。アグロバクテリウム中のキメラベクター35S:MGAT1および35S:DGAT1を使用して、Pigeaire他(1997)によって説明されるようにL.アングスティフォリウスを形質転換する。簡潔には、茎頂外植体をトランスジェニックアグロバクテリウムとともに共培養し、その後に、PPT溶液(2mg/mL)で完全に湿潤し、PPTを含まない再生培地上に移す。茎頂から発育した複数の腋芽を、20mg/LのPPTを含む培地上に摘出し、生存している芽を、20mg/LのPPTを含む新鮮な培地上に移す。次いで、健康な芽を土壌に移す。35Sプロモーターは、形質転換された植物の細胞において構成的に発現し、栄養組織および種子における含油量が増加する。種子特異的プロモーターは、トランスジェニックルピナス種子の含油量をさらに増加させるために使用される。
ソルガム・バイカラーの安定的に形質転換した細胞におけるMGATの発現
M.マスクルスMGAT1をコードするキメラ遺伝子を使用して、グリシネ・マク(油の生成に使用され得る別のマメ科植物)を安定的に形質転換する。アグロバクテリウム中の35S:MGAT1を使用して、Zhang他(1999)によって説明されるように、G.マクを形質転換する。アグロバクテリウムを、5日目の苗木由来の子葉外植体とともに3日間共培養する。次いで、外植体を、1.67mg/LのBAPおよび5.0mg/Lのグルホシネートを補充したGamborgのB5培地上で4週間培養し、その後に、外植体を、MS主要塩および副次塩、ならびに1.0mg/Lのゼアチンリボシド、0.5mg/LのGA3、および1.7mg/Lまたは2.0mg/Lのグルホシネートで修正した0.1mg/LのIAAを補充したB5ビタミン(MS/B5)を含む培地に二次培養する。延びた芽を、さらなるグルホシネート選択を伴わずに、0.5mg/LのNAAを補充したMS/B5発根培地上で発根させる。35Sプロモーターは、形質転換された植物の細胞において構成的に発現し、栄養組織および種子における含油量が増加する。
M.マスクルスMGAT1をコードするキメラ遺伝子を使用して、ゼア・マイスを安定的に形質転換する。35S:MGAT1および35S:DGAT1を構成するベクターを使用して、Gould他(1991)によって説明されるように、ゼア・マイスを形質転換する。簡潔には、茎頂外植体を2日間トランスジェニックアグロバクテリウムとともに共培養し、その後に、カナマイシンおよびカルベニシリンを含むMS塩培地上に移す。数回の継代培養の後に、形質転換された芽および根を自発的に形成させて、土壌に移植する。35Sプロモーターは、形質転換された植物の細胞において発現し、栄養組織および種子における含油量が増加する。
M.マスクルスMGAT1をコードするキメラ遺伝子を使用して、エラエイス・ギネエンシスを安定的に形質転換する。アグロバクテリウム中のUbi:MGAT1およびUbi:DGAT1と命名したキメラベクターを使用する。48時間の活発な培養に続いて、細胞を使用してIzawati他(2009)によって説明されるようにエラエイス・ギネエンシスを形質転換する。Ubiプロモーターは、形質転換された植物の細胞において構成的に発現し、少なくとも果実および種子における含油量が増加し、油を得るために使用してもよい。
M.マスクルスMGAT1をコードするキメラ遺伝子を使用して、アベナ・サティバ(別の単子葉植物)を安定的に形質転換する。上で説明したように、どちらもUbi:BAR選択可能なマーカーを含むUbi:MGAT1およびUbi:DGAT1と命名したキメラベクターを使用して、Zhang(1999)によって説明されるように、アベナ・サティバを形質転換する。
同等のDGAT活性を伴うMGATを、関心のMGAT遺伝子に対してランダムな変異誘発、標的変異誘発、もしくは飽和変異誘発を行うことによって、または異なるMGATおよび/もしくはDGAT遺伝子をDNAシャフリングに供することによって操作してもよい。DGAT機能は、例えば、4つの遺伝子(DGA1、LRO1、ARE1、ARE2)における変異を含むH1246等の遊離脂肪酸を供給したときのTAG合成の相補に対する絶対要件を有する酵母株を使用することによって、積極的にスクリーニングすることができる。そのような株におけるMGAT変異形を形質転換し、次いで、野生型MGAT遺伝子によって相補を防止する遊離脂肪酸の濃度で、形質転換された酵母を供給することで、改善されたDGAT活性により増加したTAG合成能力を伴う変異形の成長だけを可能にする。これらの変異した遺伝子のMGAT活性は、標識したsn−1またはsn−2−MAGを供給し、標識したDAGの生成を定量化することによって判定することができる。合理的なタンパク質設計と組み合わせた数回の指向性進化は、類似したMGATおよびDGAT活性を伴う新しいMGAT遺伝子の生成をもたらすであろう。
酵母(Weselake,2009)、および昆虫細胞(Lardizabal,2001)におけるA.サリアナDGAT2の発現は、DGAT活性を示さなかった。同様に、DGAT2は、A.サリアナDGAT1ノックアウト(Weselake他,2009)を相補することができなかった。葉組織におけるA.サリアナDGAT2の酵素活性は、実施例1において説明されるように、N.ベンサミアナ一過性発現系を使用して決定した。A.サリアナDGAT2(登録番号Q9ASU1)を、ゲノムPCRによって得て、35Sプロモーターの制御下で、バイナリ発現ベクターの中にクローン化して、35S:DGAT2を生成した。このキメラベクターを、A.ツメファシエンス株AGL1の中に導入し、これらの培養物由来の細胞を、対照として35S:DGAT1を使用して、24℃の成長室においてN.ベンサミアナ植物の葉組織に浸潤させた。いくつかの直接比較物に、比較する試料を浸潤させて、同じ葉の両側に置いた。実験は、3つ組で行った。浸潤の後、植物をさらに5日間成長させ、葉片を取り出し、その後に、実施例1で説明されるように、脂質クラス分画および定量化分析のために凍結乾燥した。この分析は、DGAT1およびDGAT2がどちらも、ニコチアナ・ベンサミアナにおける葉油レベルを増加させるように機能していることを明らかにした(表6)。
Yang他(2010)は、A.サリアナ由来の2つのグリセロール−3−リン酸アシルトランスフェラーゼ(GPAT4およびGPAT6)がどちらも、G−3−Pからsn−2−MAGを生成することができる、sn−2選好(すなわち、sn−1/3−MAGよりも選好的にsn−2−MAGを形成する)およびホスファターゼ活性を有することを説明した(図1)。これらの酵素は、クチン合成経路の一部であることが提案された。GPAT4およびGPAT6は、種子組織において高度に発現しなかった。そのような二機能性GPAT/ホスファターゼをMGATと組み合わせることで、植物(特に油料種子)または他の細胞におけるDAG合成のための典型的なケネディ経路を置換または補充することができる基質としてG−3−Pを使用して、新しいDAG合成経路を生み出し、その結果、増加した含油量、特にTAGレベルをもたらす。
GPATファミリーは大きく、全ての既知のメンバーは、2つの保存されたドメイン、すなわち、plsCアシルトランスフェラーゼドメインおよびHAD様ヒドロラーゼスーパーファミリードメインを含む。これに加えて、A.サリアナGPAT4〜8は全て、ホスホセリンホスファターゼドメインに相同的なN末端領域を含む。A.サリアナGPAT4およびGPAT6はどちらも、ホスファターゼ活性に重要であることが知られている保存された残基を含む(Yang他,2010)。
Abdullah et al. (1986) Biotech. 4:1087.
Alvarez et al. (2000) Theor Appl Genet 100:319-327.
Al-Mariri et al. (2002) Infect. Immun. 70:1915-1923.
Bao and Ohlrogge (1999) Plant Physiol. 120:1057-62.
Bartlett et al. (2008) Plant Methods 4:22.
Baumlein et al. (1991) Mol. Gen. Genet. 225:459-467.
Baumlein et al. (1992) Plant J. 2:233-239.
Benghezal et al. (2007) Journal of Biological Chemistry 282:30845-30855.
Bligh and Dyer (1959) Canadian Journal of Biochemistry and Physiology 37:911-7.
Bouvier-Nave et al. (2000) European Journal of Biochemistry / FEBS 267:85-96.
Bradford (1976) Anal. Biochem. 72:248.
Broothaerts et al. (2005) Nature 433:629-633.
Broun et al. (1998) Plant J. 13:201-210.
Cadwell and Joyce (1992) PCR Methods Appl. 2:28-33.
Cao et al. (2003) J. Biol. Chem. 278:13860-13866.
Cao et al. (2007) J. Lipid Res. 48:583.
Cheng et al. (1996) Plant Cell Rep. 15:653-657.
Cheng et al. (2003) J. Biol. Chem. 278, 13611-13614.
Chikwamba et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100:11127-11132.
Chung et al. (2006) BMC Genomics 7:120.
Clough and Bent (1998) Plant J. 16:735-743.
Coco et al. (2001) Nature Biotechnology 19:354-359.
Coco et al. (2002) Nature Biotechnology 20:1246-1250.
Comai et al. (2004) Plant J 37: 778-786.
Courvalin et al. (1995) Life Sci. 318:1209-1212.
Coutu et al. (2007) Transgenic Res. 16:771-781.
Crameri et al. (1998) Nature 391:288-291.
Darji et al. (1997) Cell 91:765-775.
Deshpande and Mukund (1992) Appl. Biochem. Biotechnol., 36:227.
Dietrich et al. (1998) Nature Biotech. 18:181-185.
Eggert et al. (2005) Chembiochem 6:1062-1067.
Ellerstrom et al. (1996) Plant Mol. Biol. 32:1019-1027.
Fennelly et al. (1999) J. Immunol. 162:1603-1610.
Fujimura et al. (1985) Plant Tissue Culture Lett. 2:74.
Ghosal et al. (2007) Biochimica et Biophysica Acta 1771:1457-1463.
Ghosh et al. (2006) International Symposium on Plant Lipids, Abstract.
Glevin et al. (2003) Microbiol. Mol. Biol. Rev. 67:16-37.
Grant et al. (1995) Plant Cell Rep. 15:254-258.
Grillot-Courvalin et al. (1998) Nature Biotech. 16:862-866.
Grillot-Courvalin (1999) Curr. Opin. Biotech. 10-477-481.
Gould et al. (1991) Plant Physiol. 95:426-434.
Gurel et al. (2009) Plant Cell Rep. 28:429-444.
Harayama (1998) Trends Biotechnol. 16: 76-82.
Hellinga (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. 94(19):10015-10017.
Henikoff et al. (2004) Plant Physiol 135: 630-636.
Hense et al. (2001) Cell Microbiol. 3:599-609.
Hinchee et al. (1988) Biotechnology 6:915-922.
Hirayama and Hujii K (1965) Agricultural and Biological Chemistry 29:1-6.
Horvath et al. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 97:1914-1919.
Izawati et al. (2009) J. Oil Palm Res. 21:643-652.
Jako et al. (2001) Plant Physiol. 126:861-874.
Jezequel et al. (2008) Biotechniques 45:523-532.
Lacroix et al. (2008) Proc. Natl. Acad. Sci.U.S.A. 105: 15429-15434.
Leung et al. (1989) Technique 1:11-15.
Kindle (1990) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 87: 1228-1232.
Koziel et al. (1996) Plant Mol. Biol. 32:393-405.
Kunik et al. (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98:1871-1876.
U.S.A. 105: 15429-15434.
Lakshminarayana et al. (1984) Journal of the American Oil Chemists Society 61:1249-1253.
Lardizabal et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:38862-38869.
Larkin et al. (1996) Transgenic Res. 5:325-335.
Murashige and Skoog (1962) Physiologia Plantarum 15:473-497.
Ness et al. (2002) Nature Biotechnology 20:1251-1255.
Niedz et al. (1995) Plant Cell Reports 14:403.
Ostermeier et al. (1999) Nature Biotechnology 17:1205-1209.
Ow et al. (1986) Science 234:856-859.
Panekina (1978) Chemistry of Natural Compounds 14:33-36.
Perez-Vich et al. (1998) JAOCS 75:547-555
Perrin et al. (2000) Mol Breed 6:345-352.
Perry and Harwood (1993) Phytochemistry 33:329-333.
Phillips et al. (2002) Journal of Food Composition and Analysis 12:123-142.
Pigeaire et al. (1997) Mol. Breed. 3:341-349.
Potenza et al. (2004) In Vitro Cell Dev. Biol. Plant 40:1-22.
Powell et al. (1996)Vaccines 183, Abstract.
Prasher et al. (1985) Biochem. Biophys. Res. Commun. 127:31-36.
Rajasekharan et al. (2006) International Symposium on Plant Lipids, Abstract.
Saha et al. (2006) Plant Physiol. 141:1533-1543.
Schaffner et al. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 77:2163-2167.
Shiau et al. (2001) Vaccine 19:3947-3956.
Sieber et al. (2001) Nature Biotechnology 19:456-460.
Sizemore et al. (1995) Science 270:299-302.
Slade and Knauf (2005) Transgenic Res. 14: 109-115.
Stobart et al. (1997) Planta 203:58-66.
Stalker et al. 1988 Science 242: 419-423.
Stemmer (1994a) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:10747-10751.
Stemmer (1994b) Nature 370(6488):389-391.
Thillet et al. (1988) J. Biol. Chem 263:12500-12508.
Tingay et al. (1997) Plant J. 11:1369-1376.
Toriyama et al. (1986) Theor. Appl. Genet. 205:34.
Tumaney et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:10847-10852.
Tzfira and Citovsky (2006) Curr. Opin. Biotech. 17:147-154.
Weiss et al. (2003) Int. J. Med. Microbiol. 293:95:106.
Weselake et al. (2009) Biotechnology Advances 27:866-878.
Winans et al. (1988) Journal of Bacteriology 170:4047-4054.
Wood et al. (2009). Plant Biotech. J. 7: 914-924.
Yang et al. (2003) Planta 216:597-603.
Yang et al. (2010) PNAS 107:12040-12045.
Yen and Farese (2003) J. Biol. Chem. 278:18532-18537.
Yen et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99:8512-8517.
Yen et al. (2005) J. Lipid Res., 46: 1502-1511.
Voinnet et al. (2003) Plant J. 33:949-956.
Volkov et al. (1999) Nucleic acids research 27(18):e18.
Zhang et al. (1999) Plant Cell Reports 18:959-966.
Zhang et al. (1999) Plant Cell, Tissue and Organ Culture 56:-46.
Zheng et al. (2003) The Plant Cell 15:1872-1887.
Zhao et al. (1998) Nature Biotechnology 16:258-261.
Claims (82)
- 抽出脂質を生成する方法であって、
i)1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを含み、前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する生物またはその一部と比較したときに、増加したレベルの1つ以上の非極性脂質を有する、トランスジェニック非ヒト生物またはその一部を得るステップと、
ii)前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部から前記脂質を抽出し、それによって、前記抽出脂質を生成するステップと、
を含む、方法。 - 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記1つ以上の非極性脂質のレベルは、前記対応する非ヒト生物またはその一部よりも、重量基準で少なくとも0.5%(w/w)大きい、請求項1に記載の方法。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記1つ以上の非極性脂質のレベルは、前記対応する非ヒト生物またはその一部よりも、相対基準で少なくとも1%(w/w)大きい、請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の総非極性脂質含量は、前記対応する生物またはその一部と比較して増加する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記総非極性脂質含量は、前記対応する非ヒト生物またはその一部よりも、重量基準で少なくとも0.5%(w/w)大きい、請求項4に記載の方法。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記総非極性脂質含量は、前記対応する非ヒト生物またはその一部よりも、相対基準で少なくとも1%(w/w)大きい、請求項4または請求項5に記載の方法。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物は、植物、藻類、または酵母もしくは真菌類等の発酵に好適な生物である、請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
- 前記植物は、ブラッシカ種、ゴシピウム・ヒルスツム、リナム・ウシタチシマム、ヘリアンサス種、カルタムス・ティンクトリウス、グリシネ・マクズ、ゼア・マイス、アラビドプシス・サリアナ、ソルガム・バイカラー、ソルガム・ブルガレ、アベナ・サティバ、トリフォリウム種、カメリナ・サティバ、ミスカンサス・ギガンテウス、またはミスカンサス・シネンシスである、請求項7に記載の方法。
- 前記一部は、植物の種子、果実、または栄養部である、請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 前記一部は、植物種子であり、前記抽出脂質は、種子油である、請求項9に記載の方法。
- 前記種子の総含油量または総脂肪酸含量は、前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する種子よりも、重量基準で少なくとも0.5%(w/w)〜25%(w/w)大きい、請求項10に記載の方法。
- 前記種子は、
i)カノーラ植物、
ii)トウモロコシ植物、
iii)ダイズ植物、
iv)ルピナス植物、
v)ピーナッツ植物、
vi)ヒマワリ植物、
vii)綿植物、
viii)ベニバナ植物、または
ix)アマ植物、
に由来する、請求項10または請求項11に記載の方法。 - 前記カノーラ種子は、
i)重量基準で少なくとも45%の種子油、
ii)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対種子油含量、
iii)対応する種子よりも少なくとも10%(w/w)大きい相対DAG含量、
iv)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対TAG含量、
のうちの1つ以上を含む、請求項12に記載の方法。 - 前記トウモロコシ種子は、
i)重量基準で少なくとも5%の種子油、
ii)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対種子油含量、
iii)対応する種子よりも少なくとも10%(w/w)大きい相対DAG含量、および
iv)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対TAG含量、
のうちの1つ以上を含む、請求項12に記載の方法。 - 前記ダイズ種子は、
i)重量基準で少なくとも20%の種子油、
ii)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対種子油含量、
iii)対応する種子よりも少なくとも10%(w/w)大きい相対DAG含量、および
iv)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対TAG含量
のうちの1つ以上を含む、請求項12に記載の方法。 - 前記ルピナス種子は、
i)重量基準で少なくとも10%の種子油、
ii)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対種子油含量、
iii)対応する種子よりも少なくとも10%(w/w)大きい相対DAG含量および、
iv)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対TAG含量、
のうちの1つ以上を含む、請求項12に記載の方法。 - 前記ピーナッツ種子は、
i)重量基準で少なくとも50%の種子油、
ii)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対種子油含量、
iii)対応する種子よりも少なくとも10%(w/w)大きい相対DAG含量、および
iv)対応する種子よりも少なくとも5%(w/w)大きい相対TAG含量
のうちの1つ以上を含む、請求項12に記載の方法。 - 前記植物の前記栄養部は、葉もしくは茎等の気中植物部または緑色部である、請求項9に記載の方法。
- 前記植物の栄養部のTAG、DAG、TAGおよびDAG、またはMAG含量は、前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する植物の栄養部のTAG、DAG、TAGおよびDAG、またはMAG含量よりも、相対基準で少なくとも10%(w/w)大きい、請求項18に記載の方法。
- 前記抽出脂質の脂肪酸含量の少なくとも60%(mol%)は、オレイン酸である、請求項1〜19のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抽出脂質の多価不飽和脂肪酸含量は、前記対応する生物またはその一部から抽出した脂質と比較して増加する、請求項1〜20のいずれか1項に記載の方法。
- 前記抽出脂質中の多価不飽和脂肪酸のレベルは、前記対応する生物またはその一部から抽出した脂質と比較して増加し、前記多価不飽和脂肪酸は、エイコサジエン酸、アラキドン酸(ARA)、アルファリノレン酸(ALA)、ステアリドン酸(SDA)、エイコサトリエン酸(ETE)、エイコサテトラエン酸(ETA)、エイコサペンタエン酸(EPA)、ドコサペンタエン酸(DPA)、ドコサヘキサエン酸(DHA)、またはこれらの2つ以上の組み合わせである、請求項1〜21のいずれか1項に記載の方法。
- 前記1つ以上の脂質のレベルおよび/または前記総非極性脂質含量は、前記抽出脂質から得られる脂肪酸メチルエステルのガスクロマトグラフィを使用した分析によって決定可能である、請求項1〜22のいずれか1項に記載の方法。
- 前記方法は、前記トランスジェニック植物から前記種子を採取すること、前記種子から前記種子油を圧搾すること、および/または前記種子油を精製することをさらに含む、請求項10〜17のいずれか1項に記載の方法。
- 前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドは、
i)モノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ(MGAT)、
ii)ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ2(DGAT2)、
iii)MGATおよびグリセロール−3−リン酸アシルトランスフェラーゼ(GPAT)、
iv)MGATおよびDGAT、または
v)MGAT、GPAT、およびDGAT
をコードする、請求項1〜24のいずれか1項に記載の方法。 - 前記GPATはまた、アラビドプシスGPAT4またはGPAT6等のMAGを生成するホスファターゼ活性を有する、請求項25に記載の方法。
- 前記DGATは、DGAT2である、請求項25または請求項26に記載の方法。
- MGATをコードする前記外因性ポリヌクレオチドは、
i)配列番号1〜44のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、
ii)配列番号45〜82のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、および
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む、請求項25〜27のいずれか1項に記載の方法。 - GPATをコードする前記外因性ポリヌクレオチドは、
i)配列番号84〜141のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、
ii)配列番号144〜201のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、および
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む、請求項25〜28のいずれか1項に記載の方法。 - DGAT2をコードする前記外因性ポリヌクレオチドは、
i)配列番号204のヌクレオチドの配列、
ii)配列番号212で提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、および
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む、請求項25〜29のいずれか1項に記載の方法。 - 前記トランスジェニック生物もしくはその一部の前記1つ以上の非極性脂質のレベルおよび/または前記総非極性脂質含量は、前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如しているが、アラビドプシス・サリアナDGAT1をコードする外因性ポリヌクレオチドを含む、対応する生物またはその一部よりも、重量基準で少なくとも0.5%(w/w)大きい、および/または相対基準で少なくとも1%(w/w)大きい、請求項25〜30のいずれか1項に記載の方法。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部は、1つ以上の導入された変異体をさらに含み、および/またはDGAT、sn−1−グリセロール−3−リン酸アシルトランスフェラーゼ(sn−1−GPAT)、1−アシル−グリセロール−3−リン酸アシルトランスフェラーゼ(LPAAT)、アシルCoA:リゾホスファチジルコリンアシルトランスフェラーゼ(LPCAT)、ホスファチジン酸ホスファターゼ(PAP)、もしくはこれらの2つ以上の組み合わせから選択される、前記トランスジェニック非ヒト生物の内因性酵素またはその一部の生成および/もしくは活性を下方制御する、外因性ポリヌクレオチドをさらに含む、請求項1〜31のいずれか1項に記載の方法。
- 前記外因性ポリヌクレオチドは、アンチセンスポリヌクレオチド、センスポリヌクレオチド、触媒ポリヌクレオチド、マイクロRNA、内因性酵素に結合するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、および2本鎖RNAから選択される、請求項32に記載の方法。
- 前記非極性脂質は、TAG、DAG、TAGおよびDAG、MAG、総PUFAもしくはエイコサジエン酸(EDA)である特異的PUFA、アラキドン酸(ARA)、アルファリノレン酸(ALA)、ステアリドン酸(SDA)、エイコサトリエン酸(ETE)、エイコサテトラエン酸(ETA)、エイコサペンタエン酸(EPA)、ドコサペンタエン酸(DPA)、ドコサヘキサエン酸(DHA)、またはこれらの2つ以上の組み合わせである、請求項1〜33のいずれか1項に記載の方法。
- 1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを含み、前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する生物またはその一部と比較したときに、増加したレベルの1つ以上の非極性脂質を有する、トランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記1つ以上の非極性脂質のレベルは、前記対応する生物またはその一部よりも、重量基準で少なくとも0.5%(w/w)大きく、および/または相対基準で少なくとも1%(w/w)大きい、請求項35に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記総非極性脂質含量は、前記対応する生物またはその一部と比較して増加する、請求項35または請求項36に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記総非極性脂質含量は、前記対応する生物またはその一部よりも、重量基準で少なくとも0.5%(w/w)大きい、および/または相対基準で少なくとも1%大きい、請求項37に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
- 前記トランスジェニック非ヒト生物またはその一部の前記抽出脂質中の前記多価不飽和脂肪酸含量は、前記対応する生物またはその一部の前記抽出脂質と比較して増加する、請求項35〜38のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
- 前記抽出脂質中の多価不飽和脂肪酸の含量は、前記対応する生物またはその一部から抽出した脂質と比較して増加し、前記多価不飽和脂肪酸は、エイコサジエン酸(EDA)、アラキドン酸(ARA)、アルファリノレン酸(ALA)、ステアリドン酸(SDA)、エイコサトリエン酸(ETE)、エイコサテトラエン酸(ETA)、エイコサペンタエン酸(EPA)、ドコサペンタエン酸(DPA)、ドコサヘキサエン酸(DHA)、またはこれらの2つ以上の組み合わせを含む、請求項35〜39のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
- 前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドは、
i)MGAT、
ii)DGAT2、
iii)MGATおよびGPAT、
iv)MGATおよびDGAT、または
v)MGAT、GPATおよびDGAT、
をコードする、請求項35〜40のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部。 - 前記GPATはまた、アラビドプシスGPAT4またはGPAT6等のMAGを生成するホスファターゼ活性を有する、請求項41に記載のトランスジェニック非ヒト生物。
- 前記DGATは、DGAT2である、請求項41または請求項42に記載のトランスジェニック非ヒト生物。
- MGATをコードする前記外因性ポリヌクレオチドは、
i)配列番号1〜44のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、
ii)配列番号45〜82のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、および
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む、請求項41〜43のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物。 - GPATをコードする前記外因性ポリヌクレオチドは、
i)配列番号84〜141のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、
ii)配列番号144〜201のいずれか1つで提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、および
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む、請求項41〜44のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物。 - DGAT2をコードする前記外因性ポリヌクレオチドは、
i)配列番号204のヌクレオチドの配列、
ii)配列番号212で提供される配列を有するアミノ酸を含むポリペプチド、またはその生物活性断片をコードする、ヌクレオチドの配列、
iii)i)またはii)と少なくとも50%同一である、ヌクレオチドの配列、および
iv)緊縮条件下で、i)〜iii)のいずれか1つにハイブリッド形成する、ヌクレオチドの配列、
のうちの1つ以上を含む、請求項41〜45のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物。 - 前記1つ以上の非極性脂質のレベルおよび/または前記トランスジェニック生物もしくはその一部の総脂質含量は、前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如しているが、アラビドプシス・サリアナDGAT1をコードする外因性ポリヌクレオチドを含む、対応する生物またはその一部よりも、重量基準で少なくとも0.5%(w/w)大きい、および/または相対基準で少なくとも1%(w/w)大きい、請求項44〜46のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物。
- 植物、藻類、または酵母もしくは真菌類等の発酵に好適な生物である、請求項35〜47のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物。
- i)MGAT、
ii)DGAT2、
iii)MGATおよびGPAT、
iv)MGATおよびDGAT、または
v)MGAT、GPAT、およびDGAT、
をコードする1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを含む、トランスジェニック非ヒト生物。 - 請求項35〜48のいずれか1項に記載の1つ以上の特徴を特徴とする、請求項49に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
- 1つ以上の非極性脂質を生成する増強された能力を伴う細胞を得る方法であって、
i)細胞の中に、
a)MGAT、
b)DGAT2
c)MGATおよびGPAT
d)MGATおよびDGAT、または
e)MGAT、GPAT、およびDGAT、をコードする1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを導入することであって、
前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが、前記細胞における前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドの発現を指令することができる1つ以上のプロモーターに操作可能に連結される、導入することと、
ii)前記細胞において前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを発現させることと、
iii)前記細胞の脂質含量を分析することと、
iv)前記外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する細胞と比較したときに、増加したレベルの1つ以上の非極性脂質を有する細胞を選択することと、
を含む、方法。 - 前記選択した細胞は、請求項36〜48のいずれか1項に記載の生物またはその一部の特徴の1つ以上を有する、請求項51に記載の方法。
- 前記第1および第2の外因性ポリヌクレオチドは、前記細胞のゲノムの中に安定的に組み込まれる、請求項51または請求項52に記載の方法。
- 前記ステップi)の細胞からトランスジェニック植物を再生するステップをさらに含む、請求項53に記載の方法。
- 請求項51〜54のいずれか1項に記載の方法を使用して得られるトランスジェニック細胞または植物、またはそれから得られるトランスジェニック植物。
- 前記1つ以上の外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する生物またはその一部と比較したときに、1つ以上の非極性脂質を生成する増強された能力を伴う、トランスジェニック非ヒト生物またはその一部を生成するための、
i)MGAT、
ii)DGAT2、
iii)MGATおよびGPAT
iv)MGATおよびDGAT、または
v)MGAT、GPAT、およびDGAT
をコードする、1つ以上の外因性ポリヌクレオチドの使用。 - 1つ以上の外因性ポリヌクレオチドを含み、前記外因性ポリヌクレオチドが欠如している対応する種子と比較したときに、増加したレベルの1つ以上の非極性脂質を有する、植物のトランスジェニック種子。
- 請求項36〜48に記載の特徴の1つ以上を含む、請求項57に記載のトランスジェニック種子。
- 請求項57または請求項58に記載の種子を生成する、トランスジェニック植物。
- ブラッシカ種、ゴシピウム・ヒルスツム、リナム・ウシタチシマム、ヘリアンサス種、カルタムス・ティンクトリウス、グリシネ・マク、ゼア・マイス、アラビドプシス・サリアナ、ソルガム・バイカラー、ソルガム・ブルガレ、アベナ・サティバ、トリフォリウム種、カメリナ・サティバ、ミスカンサス・ギガンテウス、またはミスカンサス・シネンシスである、請求項59に記載の方法。
- 種子を生成する方法であって、
i)請求項59または請求項60に記載のトランスジェニック植物を成長させることと、
ii)前記種子を収穫することと、
を含む、方法。 - i)発酵に好適である請求項48に記載のトランスジェニック非ヒト生物と、発酵および脂肪酸生合成に必要とされる成分と、を含む液体組成物を収容する容器を提供するステップと、
ii)前記容器に収容された前記液体組成物の発酵に寄与する条件を提供するステップと、
を含む、発酵プロセス。 - 請求項1〜34のいずれか1項に記載の方法によって得ること、または請求項35〜50のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物もしくはその一部から得ること、請求項55に記載のトランスジェニック細胞もしくは植物から得ること、請求項57もしくは請求項58に記載のトランスジェニック種子から得ること、または請求項59もしくは請求項60に記載のトランスジェニック植物から得ることが可能な、抽出脂質。
- 前記抽出脂質の重量基準で少なくとも1%(w/w)であるDAG含量を含む、トランスジェニック非ヒト生物またはその一部から得ることが可能な、抽出脂質。
- 工業製品を製造するための、請求項35〜50のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物またはその一部、請求項55に記載のトランスジェニック細胞もしくは植物、請求項57もしくは請求項58に記載のトランスジェニック種子、請求項59もしくは請求項60に記載のトランスジェニック植物、または請求項63もしくは請求項64に記載の抽出脂質の使用。
- 前記工業製品は、燃料である、請求項65に記載の使用。
- i)随意に、触媒の存在下で、請求項63または請求項64に記載の脂質をアルコールと反応させて、アルキルエステルを生成することと、
ii)随意に、アルキルエステルを石油に基づく燃料と混ぜ合わせることと、
を含む、燃料を生成する方法。 - 前記アルキルエステルは、メチルエステルである、請求項67に記載の方法。
- 請求項35〜50のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物もしくはその一部、請求項55に記載のトランスジェニック細胞もしくは植物、請求項57もしくは請求項58に記載のトランスジェニック種子、請求項59もしくは請求項60に記載のトランスジェニック植物、請求項63もしくは請求項64に記載の抽出脂質、またはその抽出物もしくは一部分を、少なくとも1つの他の食物成分と混合することを含む、飼料を生成する方法。
- 請求項35〜50のいずれか1項に記載のトランスジェニック非ヒト生物もしくはその一部、請求項55に記載のトランスジェニック細胞もしくは植物、請求項57もしくは請求項58に記載のトランスジェニック種子、請求項59もしくは請求項60に記載のトランスジェニック植物、請求項63もしくは請求項64に記載の抽出脂質、またはその抽出物もしくは一部分を含む、飼料、化粧品、または化学薬品。
- 細胞においてMAG、DAG、および/またはTAGを生成する増加した能力を有するアシルトランスフェラーゼをコードする核酸分子を特定するための方法であって、
i)前記細胞において活性であるプロモーターに操作可能に連結される核酸分子を含み、前記核酸分子は、請求項27、28、もしくは29のいずれか1項以上で定義されるヌクレオチドの配列、および/もしくは配列番号220、221、222、223、224、225、226、および227で提供される1つ以上のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードするヌクレオチドの配列、または少なくとも50%、好ましくは少なくとも60%、より好ましくは少なくとも65%それらに同一であるアミノ酸の配列を含む、細胞を得ることと、
ii)前記細胞において生成されるMAG、DAG、および/またはTAGのレベルが、前記核酸が欠如している対応する細胞と比較して増加したかどうかを判定することと、
iii)前記細胞においてMAG、DAG、および/またはTAGを生成する増加した能力を有するアシルトランスフェラーゼをコードする核酸分子を特定することと、
を含む、方法。 - 前記アシルトランスフェラーゼは、MGAT経路において酵素反応を触媒する、請求項71に記載の方法。
- 前記アシルトランスフェラーゼは、MGAT、GPAT、および/またはDGATである、請求項71または請求項72に記載の方法。
- 前記GPATはまた、アラビドプシスGPAT4またはGPAT6等のMAGを生成するホスファターゼ活性を有する、請求項73に記載の方法。
- 前記DGATは、DGAT2である、請求項73または請求項74に記載の方法。
- ステップi)の前に、前記核酸分子を細胞の中に導入することをさらに含む、請求項71〜75のいずれか1項に記載の方法。
- 前記細胞は、植物細胞である、請求項71〜76のいずれか1項に記載の方法。
- 前記アシルトランスフェラーゼは、アラビドプシス・サリアナDGAT1よりも多い量だけ、前記細胞におけるTAGの生成を増加させる、請求項71〜77のいずれか1項に記載の方法。
- i)配列番号1〜6のいずれか1つから選択される、ヌクレオチドの配列、または
ii)i)と少なくとも80%同一である、ヌクレオチドの配列、
を含む、単離されたおよび/または組み換えポリヌクレオチド。 - 請求項79に記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
- 請求項79に記載のポリヌクレオチドまたは請求項80に記載のベクターを含む、トランスジェニック細胞。
- 請求項79に記載のポリヌクレオチド、請求項80に記載のベクター、または請求項81に記載のトランスジェニック細胞を含む、トランスジェニック非ヒト生物またはその一部。
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
AU2010902841A AU2010902841A0 (en) | 2010-06-28 | Methods of producing lipids | |
AU2010902841 | 2010-06-28 | ||
US39928610P | 2010-07-09 | 2010-07-09 | |
US61/399,286 | 2010-07-09 | ||
US201161485349P | 2011-05-12 | 2011-05-12 | |
US61/485,349 | 2011-05-12 | ||
PCT/AU2011/000794 WO2012000026A1 (en) | 2010-06-28 | 2011-06-28 | Methods of producing lipids |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013534827A true JP2013534827A (ja) | 2013-09-09 |
JP2013534827A5 JP2013534827A5 (ja) | 2014-08-14 |
JP6293481B2 JP6293481B2 (ja) | 2018-03-14 |
Family
ID=45351173
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013516905A Active JP6293481B2 (ja) | 2010-06-28 | 2011-06-28 | 脂質を生成する方法 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9127288B2 (ja) |
EP (1) | EP2585589B1 (ja) |
JP (1) | JP6293481B2 (ja) |
CN (1) | CN103201379B (ja) |
AR (1) | AR083323A1 (ja) |
AU (1) | AU2011274301B2 (ja) |
CA (1) | CA2804025C (ja) |
ES (1) | ES2640100T3 (ja) |
RU (1) | RU2636344C2 (ja) |
WO (1) | WO2012000026A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201300684B (ja) |
Families Citing this family (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6166176A (en) * | 1998-03-17 | 2000-12-26 | Immvarx, Inc. | Cancer marker protein and peptides thereof |
CN103451246B (zh) | 2004-04-22 | 2018-02-16 | 联邦科学技术研究组织 | 用重组细胞合成长链多不饱和脂肪酸 |
CA3056110C (en) | 2004-04-22 | 2020-07-14 | Surinder Pal Singh | Synthesis of long-chain polyunsaturated fatty acids by recombinant cells |
CA2693630C (en) | 2006-07-14 | 2021-08-31 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Altering the fatty acid composition of rice |
BRPI0716075A2 (pt) | 2006-08-29 | 2013-08-06 | Commw Scient Ind Res Org | sÍntese de Ácidos graxos |
WO2009129582A1 (en) * | 2008-04-25 | 2009-10-29 | Commonwealth Scientific Industrial Research Organisation | Polypeptides and methods for producing triacylglycerols comprising modified fatty acids |
ES2603530T3 (es) | 2008-07-21 | 2017-02-28 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Aceite de semilla de algodón mejorado y usos |
CA2768737A1 (en) * | 2008-07-21 | 2010-01-28 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Improved vegetable oils and uses therefor |
BR122021003836B1 (pt) | 2008-11-18 | 2022-02-01 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Polinucleotídeo isolado e/ou exógeno que não ocorre de forma natural, vetor e método para produzir óleo contendo ácidos graxos insaturados |
AU2011274301B2 (en) | 2010-06-28 | 2015-06-11 | Nuseed Global Innovation Ltd | Methods of producing lipids |
EP2798063B1 (en) | 2011-12-27 | 2022-03-30 | Commonwealth Scientific and Industrial Research Organisation | Production of dihydrosterculic acid and derivatives thereof |
US8735111B2 (en) * | 2011-12-27 | 2014-05-27 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Processes for producing hydrocarbon products |
US8809026B2 (en) | 2011-12-27 | 2014-08-19 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Processes for producing lipids |
US11639507B2 (en) | 2011-12-27 | 2023-05-02 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Processes for producing lipids |
NZ631696A (en) | 2012-04-25 | 2017-02-24 | Grains Res & Dev Corp | High oleic acid oils |
HUE033766T2 (en) | 2012-06-15 | 2018-01-29 | Commw Scient Ind Res Org | Preparation of long chain polyunsaturated fatty acids in plant cells |
US10253325B2 (en) * | 2012-12-19 | 2019-04-09 | Boston Medical Center Corporation | Methods for elevating fat/oil content in plants |
BR112015014315B1 (pt) * | 2012-12-20 | 2020-10-13 | Archer Daniels Midland Company | processo para produzir um biocombustível |
US9820504B2 (en) | 2013-03-08 | 2017-11-21 | Axiom Foods, Inc. | Rice protein supplement and methods of use thereof |
EP2996487B1 (en) | 2013-03-08 | 2019-12-11 | Axiom Foods Inc. | Rice protein supplements |
CN103421719B (zh) * | 2013-08-13 | 2016-01-27 | 沈阳药科大学 | 一株放线菌波卓链霉菌及其应用 |
CA3241340A1 (en) | 2013-12-18 | 2015-06-25 | Grains Research And Development Corporation | Lipid comprising long chain polyunsaturated fatty acids |
WO2015127421A1 (en) * | 2014-02-24 | 2015-08-27 | Novogy, Inc. | Diacylglycerol acyl transferase (dga1) polynucleotides, and methods of increasing yeast cell lipid production by overexpression of heterologous dga1 |
PT107637A (pt) * | 2014-05-15 | 2015-11-16 | Inst Superior Técnico | Produção de combustíveis utilizando glicolípidos microbianos com cadeias lipídicas compostas por 6 a 14 carbonos |
SG11201610596PA (en) | 2014-06-27 | 2017-01-27 | Commw Scient Ind Res Org | Lipid comprising docosapentaenoic acid |
ES2969618T3 (es) | 2014-07-07 | 2024-05-21 | Nuseed Global Innovation Ltd | Procesos para producir productos industriales de lípidos vegetales |
CN114395500A (zh) * | 2014-12-10 | 2022-04-26 | 银杏生物制品公司 | 酵母中的油酸生产 |
US20180000137A1 (en) * | 2015-01-26 | 2018-01-04 | Roquette Freres | Method for preparing a flour of lipid-rich crushed microalgae |
CN105349433A (zh) * | 2015-11-27 | 2016-02-24 | 长春工业大学 | 一种产γ-亚麻酸的拉曼被孢霉突变菌株及其应用 |
US11859193B2 (en) | 2016-09-02 | 2024-01-02 | Nuseed Global Innovation Ltd. | Plants with modified traits |
CN110868870A (zh) | 2017-05-12 | 2020-03-06 | 艾斯姆食品公司 | 大米产物及制备它们的系统和方法 |
CN107083338A (zh) * | 2017-05-15 | 2017-08-22 | 天津大学 | 重组菌株及其构建方法与在产菜油甾醇中的应用 |
CN107523584B (zh) * | 2017-08-24 | 2020-11-17 | 浙江农林大学 | 提高植物营养组织油含量的转基因方法及表达载体和应用 |
CN107941981B (zh) * | 2017-12-06 | 2020-07-10 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用三乙酸甘油酯中一乙酸甘油酯和二乙酸甘油酯含量的测定方法 |
US11913006B2 (en) | 2018-03-16 | 2024-02-27 | Nuseed Global Innovation Ltd. | Plants producing modified levels of medium chain fatty acids |
CN109504693B (zh) * | 2018-12-04 | 2021-09-28 | 山西大学 | 一种甘蓝型油菜昆虫抗性和抗病性BnGPAT基因及其应用 |
CN109845821B (zh) * | 2018-12-28 | 2022-06-03 | 杭州师范大学 | 一种含牛油果成分的酸奶及其制备方法 |
CN110195085A (zh) * | 2019-05-15 | 2019-09-03 | 中国辐射防护研究院 | 一种应用植物生长激素提高小球藻油脂产率的方法 |
CN110106019A (zh) * | 2019-05-20 | 2019-08-09 | 无限极(中国)有限公司 | 一种利用裂壶藻生产复合型多不饱和脂肪酸油脂的方法 |
CN111334584B (zh) * | 2020-03-04 | 2022-08-16 | 河南省农业科学院植物保护研究所 | 一种预测甘薯种薯spcsv带毒率的方法 |
CN111763716B (zh) * | 2020-08-11 | 2022-08-23 | 河南省畜牧总站 | 黄牛mogat1基因snp标记辅助选择生长性状的方法及应用 |
CN114516906B (zh) * | 2020-11-19 | 2023-11-14 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 玉米与菌根真菌共生相关蛋白及其编码基因与应用 |
CN113980997A (zh) * | 2021-09-17 | 2022-01-28 | 中北大学 | 测定溶血磷脂酸酰基转移酶动力学参数的方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002068595A2 (en) * | 2001-02-23 | 2002-09-06 | The Regents Of The University Of California | Mono-and diacylglycerol acyltransferases and methods of use thereof |
US20050106697A1 (en) * | 2001-02-23 | 2005-05-19 | The Regents Of The University Of California | Mono-and diacylglycerol acyltransferases and methods of use thereof |
WO2008130248A1 (en) * | 2007-04-23 | 2008-10-30 | Agresearch Limited | Improvements in and relating to oil production plants |
WO2008147935A2 (en) * | 2007-05-24 | 2008-12-04 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Dgat genes from yarrowia lipolytica for increased seed storage lipid production and altered fatty acid profiles in soybean |
WO2008157827A2 (en) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Michigan State University | Modified composition of plant extracellular lipids using acyltransferases and fatty acid omega-oxidases |
Family Cites Families (98)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
JPH0714349B2 (ja) | 1983-01-17 | 1995-02-22 | モンサント カンパニ− | 植物細胞での発現に適したキメラ遺伝子 |
US5504200A (en) | 1983-04-15 | 1996-04-02 | Mycogen Plant Science, Inc. | Plant gene expression |
ATE100141T1 (de) | 1984-03-06 | 1994-01-15 | Mgi Pharma Inc | Herbizide resistenz in pflanzen. |
US5420034A (en) | 1986-07-31 | 1995-05-30 | Calgene, Inc. | Seed-specific transcriptional regulation |
CA1338902C (en) | 1986-02-27 | 1997-02-11 | Howard M. Goodman | Plant cells resistant to herbicidal glutamine synthetase inhibitors |
MA20977A1 (fr) | 1986-05-19 | 1987-12-31 | Ciba Geigy Ag | Plantes tolerant les herbicides contenant le gene de gluthathione S-Transferase |
US5188958A (en) | 1986-05-29 | 1993-02-23 | Calgene, Inc. | Transformation and foreign gene expression in brassica species |
US5177010A (en) | 1986-06-30 | 1993-01-05 | University Of Toledo | Process for transforming corn and the products thereof |
SE455438B (sv) | 1986-11-24 | 1988-07-11 | Aga Ab | Sett att senka en brennares flamtemperatur samt brennare med munstycken for oxygen resp brensle |
US5004863B2 (en) | 1986-12-03 | 2000-10-17 | Agracetus | Genetic engineering of cotton plants and lines |
CN87100603A (zh) | 1987-01-21 | 1988-08-10 | 昂科公司 | 抗黑素瘤疫苗 |
US4948811A (en) | 1988-01-26 | 1990-08-14 | The Procter & Gamble Company | Salad/cooking oil balanced for health benefits |
US5416011A (en) | 1988-07-22 | 1995-05-16 | Monsanto Company | Method for soybean transformation and regeneration |
US5932479A (en) | 1988-09-26 | 1999-08-03 | Auburn University | Genetic engineering of plant chloroplasts |
JPH05501352A (ja) | 1989-08-09 | 1993-03-18 | ディカルブ ジェネティクス コーポレイション | 安定な形質転換稔性単子葉植物およびそれらの細胞を製造するための方法および組成物 |
JPH04506155A (ja) | 1990-03-16 | 1992-10-29 | カルジーン,インコーポレイティド | 初期種子形成において優先的に発現される新規配列およびそれに関連する方法 |
US5877402A (en) | 1990-05-01 | 1999-03-02 | Rutgers, The State University Of New Jersey | DNA constructs and methods for stably transforming plastids of multicellular plants and expressing recombinant proteins therein |
US5451513A (en) | 1990-05-01 | 1995-09-19 | The State University of New Jersey Rutgers | Method for stably transforming plastids of multicellular plants |
US6483008B1 (en) | 1990-08-15 | 2002-11-19 | Calgene Llc | Methods for producing plants with elevated oleic acid content |
US5518908A (en) | 1991-09-23 | 1996-05-21 | Monsanto Company | Method of controlling insects |
AU3073592A (en) | 1991-11-15 | 1993-06-15 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Beta -ketoacyl-acp synthetase ii genes from plants |
US5593874A (en) | 1992-03-19 | 1997-01-14 | Monsanto Company | Enhanced expression in plants |
AU6178194A (en) | 1993-03-11 | 1994-09-26 | National Research Council Of Canada | Enhanced regeneration system for cereals |
CA2092588C (en) | 1993-03-26 | 2008-07-08 | Narender S. Nehra | Enhanced regeneration system for cereals |
US5362865A (en) | 1993-09-02 | 1994-11-08 | Monsanto Company | Enhanced expression in plants using non-translated leader sequences |
GB9324707D0 (en) | 1993-12-02 | 1994-01-19 | Olsen Odd Arne | Promoter |
GB9403512D0 (en) | 1994-02-24 | 1994-04-13 | Olsen Odd Arne | Promoter |
US5545818A (en) | 1994-03-11 | 1996-08-13 | Calgene Inc. | Expression of Bacillus thuringiensis cry proteins in plant plastids |
GB9515941D0 (en) | 1995-08-03 | 1995-10-04 | Zeneca Ltd | DNA constructs |
GB9510927D0 (en) * | 1995-05-31 | 1995-07-26 | Ca Nat Research Council | Plant and seed oil modification |
US5939288A (en) | 1995-06-07 | 1999-08-17 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Plant secretory signal peptides and nectarins |
US5959128A (en) | 1996-03-13 | 1999-09-28 | Cargill Incorporated | Method for preparation of purified glycerides and products |
US7109392B1 (en) | 1996-10-09 | 2006-09-19 | Cargill, Incorporated | Methods for increasing oleic acid content in seeds from transgenic plants containing a mutant delta 12 desaturase |
US5977436A (en) | 1997-04-09 | 1999-11-02 | Rhone Poulenc Agrochimie | Oleosin 5' regulatory region for the modification of plant seed lipid composition |
US6432684B1 (en) | 1997-04-11 | 2002-08-13 | Abbott Laboratories | Human desaturase gene and uses thereof |
US7589253B2 (en) | 1997-04-15 | 2009-09-15 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Fatty acid epoxygenase genes from plants and uses therefor in modifying fatty acid metabolism |
US6235529B1 (en) | 1997-04-29 | 2001-05-22 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for plant transformation and regeneration |
KR20010013431A (ko) | 1997-06-05 | 2001-02-26 | 칼진 엘엘시 | 디아실글리세롤 아실 트란스페라제 단백질 |
AU8583798A (en) | 1997-07-23 | 1999-02-16 | Centro De Investigacion Y De Estudios Avanzados Del I.P.N. | Improved plastid transformation of higher plants and production of trans genic plants with herbicide resistance |
CA2303407C (en) | 1997-09-12 | 2011-01-04 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Regulation of gene expression in plants |
ES2276475T5 (es) | 1997-09-30 | 2014-07-11 | The Regents Of The University Of California | Producción de proteínas en semillas de plantas |
US6100447A (en) | 1998-02-12 | 2000-08-08 | Applied Phytologics, Inc. | Method of barley transformation |
JP2002528048A (ja) | 1998-03-20 | 2002-09-03 | イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー | リムナンテス属油の遺伝子 |
EP0965631B1 (en) | 1998-06-05 | 2013-04-17 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | High stable vegetable oils |
DE69939426D1 (de) | 1998-06-24 | 2008-10-09 | David Gladstone Inst | Diacylglycerin o-acyltransferase |
US6344548B1 (en) | 1998-06-24 | 2002-02-05 | The Regents Of The University Of California | Diacylglycerol o-acyltransferase |
ATE442435T1 (de) | 1998-07-02 | 2009-09-15 | Calgene Llc | Diacylglyzerin-acyltransferase proteine |
US7135617B2 (en) | 1998-07-02 | 2006-11-14 | Calgene Llc | Diacylglycerol acyl transferase proteins |
DE69943392D1 (de) | 1998-08-20 | 2011-06-09 | Du Pont | Gene für fettsäuremodfizierende enzyme von planzen und damit verbundene bildung von konjugierten doppelbindungen |
US6100077A (en) | 1998-10-01 | 2000-08-08 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Isolation of a gene encoding diacylglycerol acyltransferase |
CA2703147C (en) | 1998-12-02 | 2014-07-29 | Karlene H. Butler | Plant diacylglycerol acyltransferases |
AU2166400A (en) | 1998-12-04 | 2000-06-19 | Calgene Llc | Diacylglycerol acyl transferase proteins |
CA2355845C (en) | 1998-12-17 | 2008-08-05 | National Research Council Of Canada | Diacylglycerol acyltransferase gene from plants |
US7211418B2 (en) * | 1999-01-14 | 2007-05-01 | Martek Biosciences Corporation | PUFA polyketide synthase systems and uses thereof |
JP2002541783A (ja) | 1999-04-01 | 2002-12-10 | ビーエーエスエフ プランド サイエンス ゲーエムベーハー | トリアシルグリセロール生成の生合成経路における新規クラスの酵素および該酵素をコードする組換えdna分子 |
CA2372632C (en) | 1999-05-04 | 2011-02-15 | Basil S. Shorrosh | Plant acyltransferases |
DE19950589A1 (de) | 1999-10-20 | 2001-05-23 | Gvs Ges Fuer Erwerb Und Verwer | Elongasepromotoren für gewebespezifische Expression von Transgenen in Pflanzen |
US6974898B2 (en) | 2000-04-18 | 2005-12-13 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Method of modifying the content of cottonseed oil |
AU2002329522B2 (en) | 2001-06-06 | 2008-05-22 | Bioriginal Food & Science Corporation | Flax (Linum usitatissimim L.) seed-specific promoters |
BR0215273A (pt) | 2001-12-21 | 2004-10-26 | Univ Michigan State | Proteìnas, genes da ciclopropano ácido graxo sintase de plantas e seus usos |
EP2302060B1 (en) | 2002-03-16 | 2012-07-25 | The University of York | Desaturases |
US7566813B2 (en) | 2002-03-21 | 2009-07-28 | Monsanto Technology, L.L.C. | Nucleic acid constructs and methods for producing altered seed oil compositions |
AR039716A1 (es) | 2002-06-21 | 2005-03-09 | Monsanto Technology Llc | Secuencias de acidos nucleicos relacionadas con tioesterasas y metodos de uso para la produccion de plantas con composicion de acidos grasos modificada |
MXPA05001239A (es) | 2002-07-31 | 2005-06-08 | Monsanto Technology Llc | Secuencias de acidos nucleicos de diacilglicerol aciltransferasa y productos asociados. |
CN1705748A (zh) | 2002-08-12 | 2005-12-07 | 孟山都技术有限公司 | 用于增加植物中总的油类水平的方法 |
US20040172682A1 (en) | 2003-02-12 | 2004-09-02 | Kinney Anthony J. | Production of very long chain polyunsaturated fatty acids in oilseed plants |
US7267976B2 (en) | 2003-07-02 | 2007-09-11 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Acyltransferases for alteration of polyunsaturated fatty acids and oil content in oleaginous yeasts |
CN1826403B (zh) * | 2003-07-21 | 2010-09-01 | 巴西石油公司 | 生产生物柴油的方法 |
WO2005063988A1 (en) | 2003-12-23 | 2005-07-14 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Alteration of oil traits in plants |
CN103451246B (zh) | 2004-04-22 | 2018-02-16 | 联邦科学技术研究组织 | 用重组细胞合成长链多不饱和脂肪酸 |
CA3056110C (en) | 2004-04-22 | 2020-07-14 | Surinder Pal Singh | Synthesis of long-chain polyunsaturated fatty acids by recombinant cells |
US8685679B2 (en) | 2004-11-04 | 2014-04-01 | E I Du Pont De Nemours And Company | Acyltransferase regulation to increase the percent of polyunsaturated fatty acids in total lipids and oils of oleaginous organisms |
MY142383A (en) * | 2005-06-10 | 2010-11-30 | Malaysian Palm Oil Board Mpob | Palm- based biodiesel formulation |
EP1806398A1 (en) | 2006-01-04 | 2007-07-11 | Monsanto S.A.S. | Fad-2 mutants and high oleic plants |
GB2436068A (en) | 2006-03-18 | 2007-09-19 | Ernest Mark Talbot | Surgical contact lens |
EP1837397A1 (en) | 2006-03-21 | 2007-09-26 | Monsanto S.A.S. | FAD-2 mutants and high oleic plants |
CA2693630C (en) | 2006-07-14 | 2021-08-31 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Altering the fatty acid composition of rice |
BRPI0716075A2 (pt) | 2006-08-29 | 2013-08-06 | Commw Scient Ind Res Org | sÍntese de Ácidos graxos |
US20090061492A1 (en) | 2006-11-15 | 2009-03-05 | The Board Of Trustees For Michigan State University System | Method for producing biodiesel |
US20080289248A1 (en) * | 2007-05-23 | 2008-11-27 | Southern Illinois University Carbondale | Immobilized esterification catalysts for producing fatty acid alkyl esters |
EP1944375A1 (en) | 2007-01-11 | 2008-07-16 | Monsanto S.A.S. | FAD2 mutants and high oleic acid plants |
US8847010B2 (en) | 2007-06-15 | 2014-09-30 | Biotechnology Foundation, Inc. | Engineered tobacco biomass with increased oil production |
EP2181349B1 (en) | 2007-08-06 | 2019-05-29 | Canon Kabushiki Kaisha | Image sensing apparatus |
WO2009027335A2 (en) | 2007-08-28 | 2009-03-05 | Basf Plant Science Gmbh | Polypeptides, such as lipases, capable of altering the seed storage content in transgenic plants |
ES2610482T3 (es) | 2007-12-21 | 2017-04-27 | National Research Council Of Canada | Genes de la diacilglicerol aciltransferasa 2 y proteínas codificadas por los mismos procedentes de algas |
WO2009129582A1 (en) | 2008-04-25 | 2009-10-29 | Commonwealth Scientific Industrial Research Organisation | Polypeptides and methods for producing triacylglycerols comprising modified fatty acids |
CA2990650C (en) | 2008-05-23 | 2021-02-09 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Novel dgat genes for increased seed storage lipid production and altered fatty acid profiles in oilseed plants |
CA2768737A1 (en) | 2008-07-21 | 2010-01-28 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Improved vegetable oils and uses therefor |
ES2603530T3 (es) | 2008-07-21 | 2017-02-28 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Aceite de semilla de algodón mejorado y usos |
BR122021003836B1 (pt) | 2008-11-18 | 2022-02-01 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Polinucleotídeo isolado e/ou exógeno que não ocorre de forma natural, vetor e método para produzir óleo contendo ácidos graxos insaturados |
US8507754B2 (en) | 2009-01-31 | 2013-08-13 | University Of North Texas | Engineering lipids in vegetative tissues of plants |
AU2011274301B2 (en) | 2010-06-28 | 2015-06-11 | Nuseed Global Innovation Ltd | Methods of producing lipids |
US8657999B2 (en) | 2010-07-28 | 2014-02-25 | General Electric Company | Methods for preparing fuel compositions from renewable sources, and related systems |
US9311457B1 (en) | 2011-11-02 | 2016-04-12 | Google Inc. | Platform for cloud application software |
EP2798063B1 (en) | 2011-12-27 | 2022-03-30 | Commonwealth Scientific and Industrial Research Organisation | Production of dihydrosterculic acid and derivatives thereof |
US8809026B2 (en) | 2011-12-27 | 2014-08-19 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Processes for producing lipids |
US8735111B2 (en) | 2011-12-27 | 2014-05-27 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Processes for producing hydrocarbon products |
-
2011
- 2011-06-28 AU AU2011274301A patent/AU2011274301B2/en active Active
- 2011-06-28 RU RU2013102419A patent/RU2636344C2/ru active
- 2011-06-28 AR ARP110102279A patent/AR083323A1/es unknown
- 2011-06-28 CA CA2804025A patent/CA2804025C/en active Active
- 2011-06-28 EP EP11799957.3A patent/EP2585589B1/en active Active
- 2011-06-28 JP JP2013516905A patent/JP6293481B2/ja active Active
- 2011-06-28 CN CN201180041568.2A patent/CN103201379B/zh active Active
- 2011-06-28 US US13/171,032 patent/US9127288B2/en active Active
- 2011-06-28 ES ES11799957.3T patent/ES2640100T3/es active Active
- 2011-06-28 WO PCT/AU2011/000794 patent/WO2012000026A1/en active Application Filing
-
2013
- 2013-01-25 ZA ZA2013/00684A patent/ZA201300684B/en unknown
-
2015
- 2015-08-25 US US14/834,914 patent/US10925293B2/en active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002068595A2 (en) * | 2001-02-23 | 2002-09-06 | The Regents Of The University Of California | Mono-and diacylglycerol acyltransferases and methods of use thereof |
US20050106697A1 (en) * | 2001-02-23 | 2005-05-19 | The Regents Of The University Of California | Mono-and diacylglycerol acyltransferases and methods of use thereof |
WO2008130248A1 (en) * | 2007-04-23 | 2008-10-30 | Agresearch Limited | Improvements in and relating to oil production plants |
WO2008147935A2 (en) * | 2007-05-24 | 2008-12-04 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Dgat genes from yarrowia lipolytica for increased seed storage lipid production and altered fatty acid profiles in soybean |
WO2008157827A2 (en) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Michigan State University | Modified composition of plant extracellular lipids using acyltransferases and fatty acid omega-oxidases |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US10925293B2 (en) | 2021-02-23 |
US20110314725A1 (en) | 2011-12-29 |
CA2804025C (en) | 2023-02-21 |
WO2012000026A1 (en) | 2012-01-05 |
ES2640100T3 (es) | 2017-10-31 |
ZA201300684B (en) | 2014-03-26 |
JP6293481B2 (ja) | 2018-03-14 |
EP2585589B1 (en) | 2017-06-21 |
CN103201379A (zh) | 2013-07-10 |
AR083323A1 (es) | 2013-02-21 |
RU2013102419A (ru) | 2014-08-10 |
AU2011274301B2 (en) | 2015-06-11 |
US9127288B2 (en) | 2015-09-08 |
EP2585589A1 (en) | 2013-05-01 |
CA2804025A1 (en) | 2012-01-05 |
CN103201379B (zh) | 2015-08-19 |
RU2636344C2 (ru) | 2017-11-22 |
US20150353863A1 (en) | 2015-12-10 |
AU2011274301A1 (en) | 2012-07-26 |
EP2585589A4 (en) | 2014-02-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6293481B2 (ja) | 脂質を生成する方法 | |
JP7097805B2 (ja) | 脂質製造のための工程 | |
JP7410080B2 (ja) | 植物脂質から工業製品を製造する工程 | |
AU2018204726B2 (en) | Production of dihydrosterculic acid and derivatives thereof | |
US20150037457A1 (en) | Processes for producing lipids | |
CA3035570A1 (en) | Plants with modified traits | |
CA3010724A1 (en) | Plants with modified traits | |
US20230399653A1 (en) | Process for producing lipids | |
AU2013204308A1 (en) | Methods of producing lipids | |
WO2012003545A1 (en) | Acetylenation of fatty acids | |
NZ627107B2 (en) | Processes for producing lipids |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140626 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20140626 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150907 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20151203 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160307 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20160411 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160812 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20170213 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180115 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180214 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6293481 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |