JP2001503785A - 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法 - Google Patents

炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法

Info

Publication number
JP2001503785A
JP2001503785A JP52499798A JP52499798A JP2001503785A JP 2001503785 A JP2001503785 A JP 2001503785A JP 52499798 A JP52499798 A JP 52499798A JP 52499798 A JP52499798 A JP 52499798A JP 2001503785 A JP2001503785 A JP 2001503785A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
paclitaxel
microtubule
microtubule agent
cells
cell
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP52499798A
Other languages
English (en)
Other versions
JP3287852B2 (ja
Inventor
エル． ハンター，ウイリアム
Original Assignee
アンジオテック ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by アンジオテック ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド filed Critical アンジオテック ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド
Publication of JP2001503785A publication Critical patent/JP2001503785A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP3287852B2 publication Critical patent/JP3287852B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/047—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates having two or more hydroxy groups, e.g. sorbitol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/075—Ethers or acetals
    • A61K31/08—Ethers or acetals acyclic, e.g. paraformaldehyde
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/223—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of alpha-aminoacids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A61K31/36—Compounds containing methylenedioxyphenyl groups, e.g. sesamin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4015—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. piracetam, ethosuximide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/426—1,3-Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/443—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/475—Quinolines; Isoquinolines having an indole ring, e.g. yohimbine, reserpine, strychnine, vinblastine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/16—Fluorine compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
    • A61K47/6951—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes using cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6957—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a device or a kit, e.g. stents or microdevices
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/0004—Screening or testing of compounds for diagnosis of disorders, assessment of conditions, e.g. renal clearance, gastric emptying, testing for diabetes, allergy, rheuma, pancreas functions
    • A61K49/0008—Screening agents using (non-human) animal models or transgenic animal models or chimeric hosts, e.g. Alzheimer disease animal model, transgenic model for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/12—Aerosols; Foams
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/70—Web, sheet or filament bases ; Films; Fibres of the matrix type containing drug
    • A61K9/7007—Drug-containing films, membranes or sheets
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/70—Web, sheet or filament bases ; Films; Fibres of the matrix type containing drug
    • A61K9/7015—Drug-containing film-forming compositions, e.g. spray-on
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
    • A61L31/08—Materials for coatings
    • A61L31/10—Macromolecular materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
    • A61L31/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L31/16—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/416—Anti-neoplastic or anti-proliferative or anti-restenosis or anti-angiogenic agents, e.g. paclitaxel, sirolimus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/606—Coatings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)

Abstract

(57)【要約】 本発明は、乾癬または多発性硬化症のような炎症性疾患を処置または予防するための方法であって、炎症部位に抗微小管剤またはそのアナログもしくは誘導体を送達する工程を包含する方法を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法 技術分野 本発明は、一般に、炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法 に関する。 発明の背景 炎症性疾患（慢性または急性性質のいずれも）は、健康管理産業において重要 な問題を提示する。簡潔には、慢性炎症は、延長した持続時間（週または月）の 炎症であり、ここでは、急性炎症、組織破壊、および治癒の試みが同時に進行し ていると考えられる（R．S．Cotran，V．Kumar、およびS．L．Robbins，W．B．S aunders Co.による、Robbins Pathological Basis of Djsease、75頁、1989）。 慢性炎症は、急性炎症発症に続いて起こり得るが、遅延した過敏症反応、内因性 毒素（例えば、上昇した血漿脂質）または外因性毒素（例えば、シリカ、アスベ スト、シガレットタール、外科的接着）への延長した曝露、または身体自体の組 織に対する自己免疫反応（例えば、リウマチ様関節炎、全身性エリテマトーデス 、多発性硬化症、乾癬）を起こす持続性感染（例えば、結核、梅毒、真菌感染） の結果として、時間とともに進行する、潜伏性プロセスとしても始まり得る。慢 性炎症性疾患は、従って、多くの共通の医療症状（例えば、リウマチ様関節炎、 再狭窄、乾癬、多発性硬化症、外科的接着、結核、および慢性炎症性肺疾患（例 えば、喘息、塵肺症、慢性閉塞肺疾患、鼻ポリープ、および肺線維症））を含む 。乾癬 乾癬は、共通の、慢性炎症性皮膚疾患であり、容易に、痒み、火傷、刺痛、お よび出血を起こす、惹起された病変、炎症性病変、肥厚した病変、および鱗状の 病変によって特徴付けられる。約10％の患者において、乾癬は、明白なリウマチ 様関節炎に見られる変化と類似の関節症状をともなう。米国人口の約２〜３％が 、 乾癬に罹患しており、250,000の新しい事症が毎年診断されている。 乾癬が多遺伝子性の自己免疫障害であるという重要な証拠が存在するが、現在 、乾癬の原因は知られていない。さらに、乾癬に対する治療は、現在のところ存 在しない。利用可能な処置には、局所治療（例えば、ステロイドクリームおよび ステロイド軟膏、コールタールおよびアントラリン（anthralin））、および全 身処置（例えば、ステロイド、ウルトラバイオレットＢ、PUVA、メトトレキサー ト、およびシクロスポリン）が含まれる。しかし、不満足な緩解速度および／ま たは潜在的な重篤な副作用は、ほとんどの抗乾癬治療を特徴づけている。米国に おける乾癬処置の全体の費用は、一年あたり、３０億ドル〜５０億ドルの間であ ると見積られており、これは、乾癬を主要な保健管理問題にしている。多発性硬化症 多発性硬化症(MS)（米国において350,000人（女性：男性＝２：１）が罹患し ており、8,000の新しい事症が毎年報告されている）は、神経系に関与する、最 も一般的な慢性炎症性疾患である。代表的には、MSは、臨床的に、数年間の期間 にわたって存在する有害な神経学的欠損の反復性発症として存在する。およそMS の半分の事症が、より慢性相（phase）に進行する。この疾患は早期には死亡ま たは認識機能障害を生じないが、視覚的知覚を妨害すること；複視の刺激；歩行 および手の使用に影響を及ぼす運動機能を妨害すること；腸失調、および膀胱失 調を生じること；痙縮；ならびに感覚（触覚、痛み、および温度感受性）不損に よって、患者を不自由にする。 MSは自己免疫疾患であるという重要な証拠があるが、MSの原因は知られていな い。現在、多発性硬化症に利用可能な治癒は存在せず、そして現在の治療法は、 部分的に成功しているにすぎない。例えば、メトトレキサート、シクロスポリン 、およびアザチオプリンのような化学療法剤が、処置に応答しない進行性疾患を 有する患者の取り扱いのために試験されているが、最小限の長期的の有利な効果 が、今日までに実証されているにすぎない。近年認可されている他の治療剤には 、再発性回復（relapsing-remitting）MSに罹患した外来患者の使用のためのイ ンタ−フェロン−βが含まれる（Patyら、Neurology 43:662-667，1993）（特に 、Bet aseron（組換えインターフェロンβ-1β；17位が置換されたヒトインターフェロ α；哺乳動物細胞で産生されたグリコシル化ヒトインターフェロンβ；Biogen） ）。不運なことに、BetaseronはMS患者に増大した生活の質を提供するが、疾患 進行は顕著に改善されるようではない。Betaseron治療をともなう有害な経験に は、以下が挙げられる：注射部位反応（炎症、痛み、過敏症、および壊死）、な らびにインフルエンザ様症状合併症（発熱、悪寒、不安、および錯乱）。リウマチ様関節炎 リウマチ様関節炎（RA）は、世界人口の１％〜２％に発症している衰弱性慢性 炎症性疾患である。この症状は、身体の複数の関節の痛み、膨張、および破壊を 起こし、そしてまた肺および腎臓などの他の器官に損傷を生じ得る。進行した疾 患を有する人々は、ガンのいくつかの形態よりも大きな死亡率を有し、そしてこ のために、処置法は、不可逆的な関節障害の可能性を減少するように設計された 、積極的な初期薬物治療にふかってシフトしている。American College of Rheu matologyの最近の推奨（Arthritis and Rheumatism 39(5):713-722，1996）には 、確立された診断および発症している症状を有する任意の患者に対する疾患を改 変する抗リウマチ薬物（DMARD）治療の早い開始が含まれる。抗ガン薬は、莫大 な数の患者に対して、リウマチ学者の60％〜70％により選択される薬物である、 化学療法薬（メトトレキサート）での第一線の治療となった。疾患の重篤度は、 しばしば、この薬物での無期限の毎週の処置を確実にし、そして疾患がメトトレ キサート治療にも関わらず進行する患者（患者の50％以上）では、第二線の化学 療法薬（例えば、シクロスポリンおよびアザチオプリン（単独または組合せて） ）が頻繁に使用されている。再狭窄 再狭窄は、血管壁肥厚化、および組織へ血管によって供給される血流の減少を 導く、慢性血管創傷の形態である。これは、これは、血管閉塞を解放することを 試みる実質的に任意の操作を含む血管再構築手順に応答して起こり、そして血管 疾患の侵襲性処置の効果を制限する主要因子である。再狭窄は、過去15年間の心 臓血管研究の主要な試みである。1994年の評価（U．S．Heart and Stroke Found ation）によると、６千万人を越えるアメリカ人が１つ以上の心血管疾患の形態 を有する。これらの疾患は、同じ年に約100万人（米国における全死亡の41％） の生命を奪い、そして先進国で、死および身体障害の主要な原因であると考えさ れる。 現在、技術的に承認された、ヒトに有効であった、再狭窄の予防のための処置 は存在しない。研究されている全身的治療剤には、内皮欠失の処置に指向される 薬剤である、（抗血小板剤（例えば、アスピリン）、血管拡張薬（例えば、カル シウムチャンネルブロッカー）、抗トロンビン剤（例えば、ヘパリン）、抗炎症 剤（例えば、ステロイド）、血管平滑筋細胞（VSMC）増殖防止剤（例えば、コル チシン）、および再内皮化（reendohelialization）の促進剤（例えば、血管内 皮増殖因子））が含まれる。研究されている局所処置には、局所的薬物送達（例 えば、ヘパリン）、ならびにβ線照射およびγ線照射が含まれる。全てがヒトの 使用において期待はずれであった。なぜなら、第一に、それらは再狭窄プロセス の限定された部分で作用するようであるからである。全身処置はまた、好ましく ない全身的合併症および毒性を引き起こすことなく、持続する生物学的効果を提 供するために、疾患の部位における薬物の適切な吸収および保持を達成するとい う、さらなる問題に遭遇する。炎症性腸疾患 炎症性腸疾患（IBD）は、小腸および大腸での炎症または潰瘍を引き起こす慢 性障害（本来性クーロン病および潰瘍性大腸炎）をいう。簡潔には、米国では約 200万人（罹患している男性と女性の数は等しい）がIBDに罹患している。発生数 のピークは、15歳と30歳の年齢の間で起こり、そして第二のピークはしばしば55 歳と60歳の年齢の間で報告される。多くの実証された有病割合パターンが存在す るが、これは未知の原因の疾患である。 IBDは、しばしば、交互の緩解期間、それに続く重篤度の変化する予測不可能 な再発または発赤の期間によって特徴付けられる。約50％の患者が任意の所定の 時間で緩解し、そして多数が、10年間の期間で、少なくとも１つの再発を起こす 。さらに、最も一般的には関節炎であるこの疾患に付随する、多くの全身的合併 症が存在する。関節炎の症状は、IBDを有する全ての人々の1/4に起こる。関節炎 は、結腸が、疾患プロセスに関与した場合に最もしばしば起こり、そして腸疾患 が最も活性である場合は発赤が拡大する。この炎症性関節炎の形態は、永久的な 変形を起こさず、そしてしばしば、短命である。この疾患の他の合併症には、眼 の炎症（虹彩炎、結膜炎、および上強膜炎）、口の炎症（粘膜炎）、皮膚炎（結 節性紅斑および壊疽性膿皮症）、筋骨格異常（強直性脊椎炎）、腎合併症（腎結 石、および尿管への瘻孔形成）、胆石、ならびに他の肝臓疾患（例えば、肝炎） および胆汁系の疾患（硬化性胆管炎）が含まれる。不運なことに、多くの場合、 長期（＞10年）の疾患はより重篤な合併症（例えば、結腸ガンおよび腸以外のガ ン）を導き得る。 現在では、IBDに対する治療は存在しない。現在の治療剤の多くは、この疾患 に関連した炎症を抑制することによってこの疾患症状を制御することに焦点をあ てている。IBDの処置に使用される主たる薬物には、アミノサリチレートおよび コルチコステロイドであり、これらの薬剤に良好に応答しない個体については、 抗生物質および免疫抑制医薬品もまた使用され得る。薬物処置が70から80％の患 者に有効であるが、より活性な疾患を有する個体には手術がしばしば必要とされ る。小腸の妨害物、穿孔、膿瘍、および出血のような活性な疾患に関連した慢性 症状および合併症は軽減され、そして侵襲的手術で矯正され得る。手術は永久的 に疾患を治療せず、再発率が高いが、活性症状を軽減する。外科的接着 外科的接着形成、通常別々である身体組織がともに増殖する複雑なプロセスは 、手術外傷の結果として最も共通に見られる。これらの手術後接着は、主要な婦 人科手術を経験した患者の60〜90％に起こり、そして先進国において腸閉塞の最 も一般的な原因の１つである。これらの接着は、失敗した手術治療の主要な原因 であり、そして腸閉塞および不妊症の主な原因である。他の接着処置合併症には 、慢性骨盤痛、尿道閉塞、および排尿機能不全が含まれる。現在では、手術の４ 〜 ５日後に投与される予防的治療が、接着形成を阻害するために使用される。接着 予防の種々の様式が研究されており、これには、（１）フィブリン沈着の呼ぶ、 （２）局所的組織炎症の低減、および（３）フィブリン沈着の除去が含まれる。 フィブリン沈着は、機会的または粘稠性溶液から構成される物理学的バリアの使 用により予防される。多くの研究者が接着予防バリアを利用しているが、多くの 技術的困難が存在する。炎症は、コルチコステロイドおよび非ステロイド抗炎症 剤のような薬物の投与によって低減される。しかし、動物モデルにおけるこれら の薬物の使用による結果は、炎症応答の程度および全身的副作用による用量制限 により勇気づけられるものではない。最後に、フィブリン沈着の除去は、タンパ ク質分解酵素および線維素溶解酵素を使用して研究されている。これらの酵素の 臨床使用に可能性のある合併症は、過度の出血の可能性である。炎症性肺疾患 慢性炎症性肺疾患には、例えば、喘息、塵肺症、慢性閉塞肺疾患、鼻ポリープ 、および肺線維症が含まれる。代表的には、このような疾患は、侵襲性炎症プロ セスおよび影響を受けた組織の肥厚によって特徴付けられる。 例えば、鼻ポリープは、鼻の内層の組織の肥厚によって特徴付けられる。ポリ ープは、喘息、嚢胞性繊維症、原発性線毛運動不全、および免疫不全のような呼 吸性疾患に起こり得る。鼻ポリープは、上気道を含む慢性炎症性プロセスの症状 として発達すると考えられる。これらは、アスピリン不耐性の患者の36％、喘息 を有する患者の７％、子供の0.1％、そして嚢胞性繊維症の患者の約20％に見ら れる。鼻ポリープに関連した他の症状は、チャーグ-ストラウス症候群、アレル ギー性真菌副鼻腔炎、および線毛運動不全症候群、およびヤングの症候群である 。外科的ポリープ切除を行った患者の約40％が再発する（Settipane，Allergy A sthma Proc．17(5):231-236，1996）。 鼻ポリープ症の主な症状は、鼻の閉塞およびにおいの感度の妨害である。鼻ポ リープ症の医学的処置の目的は、（1）鼻ポリープおよび鼻炎症状を除去するこ と、（2）鼻呼吸および嗅覚を再確立すること、および（3）再発を予防すること である。少数の大きなポリープによる鼻の経路の閉塞は、簡単なポリープ切除に よって処置され、患者の、鼻を通しての呼吸を援助し得る。手術の目的は、可能 な限りポリープのない気道をつくり、そして感染した副鼻腔炎の排液を可能にす ることによる鼻の生理学的特性を復旧することである。しかし、鼻ポリープの再 発は、臨床的鼻科学の最も共通した未解決問題の１つである。ポリープの補足的 医学的処置は、常に必要であり、手術では粘膜疾患の炎症性成分を処置出来ない 。局所的なコルチコステロイドは、ポリープのサイズを減少するため、および手 術後の再発を予防するために、最も広範に利用される処置である。ステロイドは 、鼻炎を減少し、鼻呼吸を改善し、ポリープのサイズを減少し、そして再発率を 減少させ、においの感受性および任意の腔病理学に対して無視できる効果を有す る。しかし、プロープにおけるステロイドの使用は、抗生物質を必要どする感染 性合併症をともなう。鼻ポリープの処置のための他の薬物には、H1-レセプター アンタゴニスト（例えば、アゼラスチンHCL）および抗利尿薬（例えば、フロセ ミド）が含まれる。これらの処置は、常に効果的であるというわけではなく、そ して再発率は依然として非常に高い。鼻ポリープの現在の医学的処置は、コルチ コステロイドを利用し、疾患の症状を緩和するが、この疾患の原因となる病理学 に対する作用はない。さらに、この疾患の再発、またはステロイド治療に対する 耐性が、鼻ポリープを有する患者に見られる。移植片拒絶 移植片拒絶は複雑なプロセスであり、それにより、移植片組織は宿主免疫系に よって外来物として認識される。形態学および基礎となる機構を元に、拒絶反応 は３つのカテゴリー：超急性、急性、および慢性に分類される。乾癬の危険性が 除去され、そして免疫抑制治療によって初期（急性）拒絶が管理されるとともに 、慢性拒絶が、移植片機能不全および最終的な失敗の増加する重要な原因になっ た。現在、慢性的な血管拒絶は、最初の年後の心臓移植レシピエントに、おける 死または移植の失敗の主要な原因である。 本発明は、炎症性疾患を処置または予防するために適した組成物および方法を 提供する。これらの組成物および方法は、現存する手順を伴う問題を取り扱い、 現存する手順と比較して有意な利点を提供し、そして他の関連した利点をさらに 提供する。 発明の要旨 簡潔に述べると、本発明は、炎症部位に抗微小管剤を送達する工程を包含する 、炎症性疾患を処置または予防するための方法を提供する。このような薬剤の化 学剤は、タキサン類（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル（docetaxel ））、カンポテシン、エレウテロビン（eleutherobin）、サルコジクチン類（sa rcodistyin）、エポチロン（epothilone）AおよびB、ジスコデルモリド（discod ermolide）、重水（D2O）、ヘキシレングリコール（2-メチル-2,4-ペンタンジオ ール）、ツベルシジン（7-デアザアデノシン）、LY290181（2-アミノ-4-(3-ピリ ジル-4H-ナフト（1,2-b）ピラン-3-カルドニトリル）、フッ化アルミニウム、エ チレングリコールビス-（スタシンイミジルスクシネート）、グリシンエチルエ ステル、モノクローナル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タンパク 質（タキソール様タンパク質、TALP）、高浸透性（190ミリオスモル/L）状態に よって誘導される細胞膨張、インスリン（100nmol/L）またはグルタミン（10mmo l/L）、ダイニン結合、ジベレリン（gibberelin）、XCHO1（キネシン様タンパク 質）、リソホスファチジン酸、リチウムイオン、植物細胞壁成分（例えば、ポリ L-リジンおよびエキソテンシン）、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安 定化緩衝液、微小管結関連タンパク質（例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エ ンスコンシン、延長因子-1-α（EF-1α）、およびE-MAP-115）、細胞体（例えば 、ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパク質、および動原体）、内因性微小管構造 物（例えば、軸糸構造、プラグ、およびGTPキャップ）、安定な細管のみのポリ ペプチド(stable tubule only polypeptide）（例えば、ST0P145およびSTOP220 ）、および有糸分裂応力からの張力、ならびに上記のいずれかのアナログおよび 誘導体が含まれる。他の実施態様においては、抗微小管剤は、ポリマーをさらに 含むように処方される。 処置され得る炎症性疾患の代表的な例には、多発性硬化症、乾癬、関節炎、狭 窄、移植片拒絶、外科的接着、炎症性腸疾患、および炎症性肺疾患が含まれる。 本発明の特定の実施態様において、抗微小管剤は、例えば、軟膏、クリーム、 ローション、ゲル、スプレーなどのような他の成分または組成物とともに処方さ れ得る。特定の実施態様において、化合物または組成物は、ポリマーまたは非ポ リマーのいずれかであり得るキャリアとして機能し得る。ポリマーキャリアの代 表的な例には、ポリ（エチレン-ビニルアセテート）、乳酸とグリコール酸との コポリマー、ポリ（カプロラタトン）、ポリ（乳酸）、ポリ（乳酸）とポリ（カ プロラクトン）とのコポリマー、ゼラチン、ヒアルロン酸、コラーゲンマトリッ クス、およびアルブミンが含まれる。他の適切なキャリアの代表的な例には、エ タノール；エタノールおよびグリコールの混合物（例えば、エチレングリコール またはプロピレングリコール）；エタノールおよびイソプロピルミリステートの 混合物、またはエタノール、イソプロピルミリステート、および水（例えば、55 :5:40）の混合物；エタノールおよびエイネオールまtはあD-リモネンの混合物（ 水有りまたは無し）；グリコール（例えば、エチレングリコールまたはプロピレ ングリコール）ならびにプロピレングリコールおよび水、ホスファチジルグリ リコール、またはテルピノレンの混合物；イソプロピルミリステートおよび1-ヘ キシル-2-ピロリドン、N-ドデシル-2-ピペリジノン、または1-ヘキシル-2-ピロ リドンの混合物が含まれる。 さらに他の局面において、抗微小管剤は、例えば、ステント、縫合、留置カテ ーテル、人工器官などのような外科用または医療用デバイスもしくは移植物によ って放出するために、これらの内部に含まれるか、またはこれらに適合されて処 方され得る。 本発明のこれらおよび他の局面は、以下の詳細な説明および添付の図面と参照 すれば明らかとなる。さらに、より詳細な特定の手順、デバイス、または組成物 を記載した種々の参考文献が以下に示され、従って、それらの全体が参考として 援用される。 図面の簡単な説明 図1Aは、好中球（5×106細胞/ml）の血漿オプソニン化CPPD結晶（50mg/ml）に 対する化学発光応答を示すグラフである。（○）パクリタキセルなし、（●）4. 5μM、（△）14μM、（▲）28μM、（□)46μM；n=３におけるパクリタキセル（ 「タキソール」ともいう）の効果。図1Bは、血漿オプソニン化CPPD結晶誘導好中 球化学発光のパクリタキセル阻害の経時的濃度依存性を示すグラフである。図1C は、化学発光によって測定された場合の、オプソニン化ザイモザン（zymozan） 誘導好中球活性化におけるフッ化アルミニウムの効果を示すグラフである。 図1Dは、化学発光によって測定された場合の、オプソニン化ザイモザン誘導好中 球活性化におけるグリシンエチルエステルの効果を示すグラフである。図1Eは、 オプソニン化ザイモザン誘導好中球化学発光におけるLY290181の効果を示すグラ フである。 図2は、血漿オプソニン化CPPD結晶（50mg/ml）の応答における好中球（5×106 ml）からのリゾチーム放出を示すグラフである。（○）パクリタキセルなし、（ ●）28μM、（△）コントロール（細胞単独）、（▲）コントロール（細胞およ び28μMのパクリタキセル）；n=３におけるパクリタキセルの効果。 図3Aは、血漿オプソニン化CPPD結晶（50mg/ml）への応答における好中球（5× 106細胞/ml）によるスーパーオキシドアニオン産生を示すグラフである。（○） パクリタキセルなし、（●）28μM、（△）コントロール（細胞単独）；n=３で のパクリタキセルの効果。図3Bは、血漿オプソニン化CPPD結晶誘導好中球スーパ ーオキシドアニオン産生のパクリタキセル阻害の経時的濃度依存性を示すグラフ である。図3Cは、CPPD結晶誘導好中球スーパーオキシドアニオン産生におけるLY 290181の効果を示すグラフである。 図4Aは、血漿オプソニン化サイモサン（1mg/ml）に対して応答する好中球（5 ×106細胞/ml）の化学発光応答を示すグラフである。（○）パクリタキセルなし 、（●）28μM；n=３でのパクリタキセルの効果。図4Bは、血漿オプソニン化サ イモサン誘導好中球スーパーオキシドアニオン産生を示すグラフである。（○） パクリタキセルなし、（●）28μM、（△）コントロール（細胞単独）；n=３で のパクリタキセルの効果。 図5Aは、血漿オプソニン化CPPD結晶（50mg/ml）への応答における好中球（5× 106細胞/ml）からのミエロペルオキシダーセ放出を示すグラフである。（○）パ クリタキセルなし、（●）28μM、（△）コントロール（細胞単独）、（▲）コ ントロール（細胞および28μMのパクリタキセル）；n=３でのパクリタキセルの 効果。図5Bは、血漿オプソニン化CPPD結晶への応答における好中球からのミエロ ペルオキシダーゼ放出のパクリタキセル阻害の濃度依存性を示すグラフである； n=３。図5Cおよび5Dは、LY290181が、CPPD結晶誘導好中球におけるリゾチームお よびミエロペルオキシダーゼの両方を減少させることを示すグラフである。 図６は、種々の濃度のパクリタキセルでの星状細胞の増殖を示すグラフである 。 図７は、インビトロでのケラチノサイトにおけるパクリタキセルの効果を示す グラフである。 図8Aおよび8Bは、星状細胞形態学におけるパクリタキセルの効果を示すグラフ である。電子顕微鏡画像は、トランスジェニックコントロール動物の星状細胞に おける、厚く、良好に組織化された線維様の突起を明らかにしたが、一方で、パ クリタキセルで処置したトランスジェニック動物は、形態学的に変化した星状細 胞を有した。パクリタキセルは、非処置の動物と比較して、星状細胞の円形化、 細い細胞の突起、および減少した細胞質線維を誘導した。 図９は、10-8Mより大きい濃度のパクリタキセルで処置したEOMA細胞の生存率 を示すグラフである。 図10は、増大した濃度のパクリタキセルで処置した培養物におけるアポトーシ スEOMA細胞の割合を示す棒グラフである。図11A〜11Eは、24時間後の滑膜細胞に おける種々の抗微小管剤の効果を示すグラフである。 図12A〜12Hは、コラゲナーゼ発現を阻害する種々の抗微小管剤の効果を示すブ ロットである。 図13A〜13Hは、プロテオグリカン発現における種々の抗微小管剤の効果を示す ブロットである。 図14Aおよび14Bは、コントロール（充填されていない）サーモペースト（ther mopaste）で処置した腫瘍を有するCAMの２つの写真である。簡潔には、図14Aに おいて、中央の白い塊は腫瘍組織である。全ての方向においてCAMから腫瘍へ多 数の血管が侵入していることに留意すること。腫瘍は、「血管形成因子」の産生 によって宿主血管の増殖を誘導する。腫瘍組織は血管形成因子を提供する血管に 沿って遠位方向に広がる。図14Bは、15Aに示されるCAMの底側の観察である。簡 潔には、この観察は車輪のスポークのように腫瘍に侵入する血管の放射状形態を 示す。血管密度は、周囲の正常CAM組織においてよりも、腫瘍の近傍で大きいこ とに留意すること。図14Cおよび14Dは、20%のパクリタキセルを充填したサーモ ペーストで処置した腫瘍を有するCAMの２つの写真である。簡潔には、図14Cにお いて、中央の白い塊は、腫瘍組織である。腫瘍組織の近傍における少数の血管に 留意すること。抗微小管剤の持続性放出が、腫瘍によって産生される血管形成刺 激を克服し得る。腫瘍自体は、血管新生化に乏しく、そして漸次サイズを減少す る。図14Dは、14Cに示されるCAMの底側から撮影され、そしてコントロール腫瘍 組織と比較した場合、腫瘍中への血流の妨害を示す。血管密度は肺瘍の近傍にお いて減少し、そして正常の周辺CAM組織の腫瘍よりも空間があることに留意する こと。 図15Aは、６日目の殻のない卵を示す写真である。図15Bは、生きた、非染色毛 細血管の実体顕微鏡で撮影したデジタル化コンピュータディスプレイ画像（1040 ×）である。図15Cは、より大きな下にある血管によって給餌される絨毛尿膜（c horioallenteic membranc）（CAM）微小血管を示す腐食キャスティングの写真（ 矢印；1300×）である。図15Dは、CAMを通って横方向に切断し、そして光学顕微 鏡レベルで記録した、0.5mm厚の可塑性セクションを示す写真である。この写真 は、外側二重層外胚葉（Ec）、毛細血管（矢印）および散乱した外膜細胞を含む 中胚葉（M）、ならびに一重層内胚葉（En）を含む、CAMの組成（400×）を示す 。図15Eは、電子顕微鏡レベル（3500×）での写真であり、ここで、代表的な毛 細管構造は薄い壁の内皮細胞（矢印の頭）および結合した周皮細胞を表して示さ れる。 図16A、16B、16C、および16Dは、10mlのメチルセルロース当たりの10μgパク リタキセルに48時間曝した後に撮影した４つの異なった非染色CAMのデジタル化 画像である。パクリタキセルを含む透明なメチルセルロースディスク（*）は、 各CAMに上に存在し、そして周辺血液島（Is）とともに１つの無血管性ゾーン（A ）上に配置される。これらの無血管性領域は、ディスクを越えて伸長し、そして 代表的には約６mmの直径を有する。図16Dは、無血管性ゾーンの周縁から小血管 および大血管の両方の代表的な「押し分け（elbowing）」効果（矢印の頭） を示す。 図17Aは、有糸分裂に止まった多数の内皮細胞を示す無血管性ゾーンに接した 周辺の毛細血管（矢印の頭）を示す写真（=400×）である。外胚葉（Ec）；中胚 葉（M）；内胚葉（En）。図17B（=400×）は、無血管性ゾーン内で、固有の代表 的な毛細管構造から除去され、そして多数の血管外遊出した血液細胞（矢印の頭 ）が存在することを示す。図17C（=400×）は、無血管性ゾーンの中央領域にお いて、赤血球細胞が中胚葉中に分散されることを示す。 図18Aは（=2,200×）は、有糸分裂（*）が止まった３つの内皮細胞を保有する 外胚葉層（Ec）のすぐ下に横たわる小毛細管を示す。外胚葉および中胚葉の両方 におけるいくつかの他の細胞型もまた有糸分裂が止まっている。図18B（=2,800 ×）は、外胚葉の基礎的な血管外遊出した血液細胞を含む初期の無血管性相を示 す；これらの血液細胞は、推定の上皮細胞（*）とそれらの突起と混ざり合う。 衰退した細胞の液胞（矢印の頭）。図18C（=2,800×）は、パクリタキセルに対 する応答において、表面-中胚葉海綿は、密な液胞および顆粒を含む衰退の種々 の段階にある細胞が集まるようになる（矢印の頭）。 図19Aは、マトリックス金属プロテアーゼの転写調節を図式的に示す。図19Bは 、IL-1は、AP-1転写活性を刺激することを示すブロットである。図19Cは、IL-1 が、パクリタキセルで前処理された軟骨細胞からの溶解物における減少した結合 活性を誘導することを示すグラフである。 図20は、IL-1誘導が、軟骨細胞におけるRNAレベルにおけるコラゲナーゼおよ びストロメライシンを増加させること、およびこの誘導は、パクリタキセルの前 処理によって阻害され得ることを示すブロットである。 図21は、インビトロでの正常な軟骨細胞の生存率に対するパクリタキセルの効 果を示す棒グラフである。 図22は、パクリタキセルの観察された偽一次分解速度をプロットするグラフで ある（37℃で、それぞれ3.7および4.9のpHでの、10％HPβf3CDおよび10%HPγCD 溶液中の20μg ml-1）。 図23は、37℃でのシクロデキストリンおよびパクリタキセルについての相溶解 性を示すグラフである。 図24は、37℃での、パクリタキセルおよびγCD、HPβCD、またはHPγCDの複合 化の二次プロットである。 図25は、PDLLA-PEG-PDLLA組成物の融解湿度、エンタルピー、分子量、多分散 性、および固有の粘度を示す表である。 図26は、PDLLA-PEG-PDLLAおよびPEGのDSCサーモグラフを示すグラフである。 加熱速度は、10℃/分であった。融解温度およびエンタルピーについては、図30 を参照のこと。 図27は、37℃で、20％パクリタキセルを充填したPDLLA-PEG-PDLLAシリンダー からPBSアルブミン緩衝液へのパクリタキセルの累積的な放出を示すグラフであ る。エラーバーは、４サンプルの標準偏差を示す。40％PEGのシリンダーを、崩 壊のために４日で中断した。 図28A、28B、および28Cは、37℃でのパクリタキセルのインビトロ放出の間の2 0％パクリタキセルを充填したPDLLA-PEG-PDLLAシリンダーの大きさである、長さ （A）、直径（B）、および湿重量（C）における変化を示すグラフである。 図29は、37℃でのPBSアルブミン緩衝液中への放出の間のPDLLA-PBG-PDLLAシリ ンダー（20％パクリタキセルを充填した）の質量損失およびポリマー組成変化を 示す表である。 図30は、37℃でのPBSアルブミン緩衝液中における放出の間の、20％パクリタ キセルを充填したPDLLA-PEG-PDLLAシリンダー（20％PEG、１mm直径）のゲル透過 性クロマトグラムを示すグラフである。 図31A、31B、31C、および31Dは、パクリタキセル放出の前および放出の間の乾 燥したPDLLA-PEG-PDLLAシリンダーのSEMである。A：20％PEG、0日；B：30%PEG、 0日；C：20％PEG、69日；D：30％PEG、69日。 図32は、37℃での、20％パクリタキセルを充填したPDLLA:PCLブレンドおよびP CLからPBSアルブミン緩衝液へのパクリタキセルの累積放出を示すグラフである 。エラーバーは、４サンプルの標準偏差を示す。 図33は、37℃で、PCLペーストからPBSへのパクリタキセルの放出を、経時的に 示すグラフである。PCLペーストは、メッシュ＃140を使用して調製されたパクリ タキセルの微粒子および種々の添加物を含む。エラーバーは、３サンプルの標準 偏差を示す。 図34は、37℃でのPBSへのパクリタキセル-ゼラチン-PCLペーストからのパクリ タキセル放出の時間経過を示すグラフである。このグラフは、ゼラチン濃度（メ ッシュ＃140）、およびメッシュ＃140またはメッシュ＃60を使用して調製したパ クリタキセル-ゼラチン（1：1）微粒子のサイズ効果を示す。エラーバーは、３ サンプルの標準偏差を示す。 図35Aおよび35Bは、37℃における蒸留水中の懸濁に続く、20％パクリタキセル を含むPCLペーストの膨潤挙動における、添加物（17A；メッシュ＃140）および 微粒子のサイズ（17B；メッシュ＃140または＃60）および添加物（メッシュ＃14 0）の割合の効果を示すグラフである。マトリックスの崩壊のために、パクリタ キセル-ゼラチン中に270μm微粒子で調製したペーストおよび30％ゼラチンを含 むペーストに対する測定を、４時間後に中断した。エラーバーは、３サンプルの 照準偏差を示す。 図36A、36B、36C、および36Dは、37℃で６時間、蒸留水中に懸濁する前（36A ）および後（36B）のパクリタキセル-ゼラチン-PCL（20:20:60）ペーストの代表 的な走査電子顕微鏡写真である。写真36Cおよび36Dは、36Bより高い倍率であり 、パクリタキセル（ロッド型）およびゼラチンマトリックスの緊密な結合を示す 。 図37Aおよび37Bは、パクリタキセル処理CAMにおいて無血管のゾーンを示す、 ゼラチン-PCL（37A）およびパクリタキセル-ゼラチン-PCL（20:20:60；37B）ペ ーストで処理されたCAMの代表的な顕微鏡写真である。 図38は、37℃での水中でのシクロデキストリンおよびパクリタキセルの相溶解 性を示すグラフである。 図39は、37℃でのパクリタキセルおよびγCD、HPβCD、またはHPγCDの複合化 の二次プロットを示すグラフである。 図40は、37℃でのパクリタキセル、および50：50水：エタノール溶液中のヒド ロキシプロピル-β-シクロデキストリンの相溶解性を示すグラフである。 図41は、37℃での0、5、10、または20％HPγCD溶液中のパクリタキセルの溶解 速度プロファイルを示すグラフである。 図42は、37℃、およびそれぞれ3.7および4.9のpHでの、10％HPβCDおよび10％ HPγCD溶液中のパクリタキセル（20μg/ml）の、観察された偽一次分解速度をプ ロットしたグラフである。 図43Aおよび43Bは、それぞれ、EVAフィルムからのパクリタキセルの放出、お よび経時的に同フィルムに残存するパクリタキセルの割合を示す２つのグラフで ある。図43Cは、経時的なパクリタキセル無しでのEVA/F127フィルムの膨潤を示 すグラフである。図43Dは、経時的なパクリタキセル無しでのEVA/Span80フィル ムの膨潤を示すグラフである。図43Eは、種々のEVA/F127ブレンドについてのス トレス対応力曲線を示すグラフである。 図44は、PCLミクロスフェアに対する0.5mlの細胞（濃度5×106細胞/ml）中の 好中球（20mg/ml）ミクロスフェアの化学発光応答における、ポリマー性ミクロ スフェアの血漿オプソニン化の効果を示すグラフである。 図45は、PCLミクロスフェアに対する好中球（5×106細胞/ml）の化学発光応答 におけるプレコーティング血漿+/-2％Pluronic F127の効果を示すグラフである 。 図46は、PMMAミクロスフェアに対する好中球（5×106細胞/ml）の化学発光応 答におけるプレコーティング血漿+/-2％Pluronic F127の効果を示すグラフであ る。 図47は、PLAミクロスフェアに対する好中球（5×106細胞/ml）の化学発光応答 におけるプレコーティング血漿+/-2％Pluronic F127の効果を示すグラフである 。 図48は、EVA：PLAミクロスフェアに対する好中球（5×106細胞/ml）の化学発 光応答におけるプレコーティング血漿+/-2％Pluronic F127の効果を示すグラフ である。 図49は、PCLミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答における、プレコ ーティングIgG（2mg/ml）または2％Pluronic F127、次いでIgG（2mg/ml）の効果 を示すグラフである。 図50は、PMMAミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答における、プレコ ーティングIgG（2mg/ml）または2％Pluronic F127、次いでIgG（2mg/ml）の効果 を示すグラフである。 図51は、PVAミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答における、プレコ ーティングIgG（2mg/ml）、または2％Pluronic F127、次いでIgG（2mg/ml）の効 果を示すグラフである。 図52は、EVA:PLAミクロスフェアに対する好中球の化学発光応答における、プ レコーティングIgG（2mg/ml）、または2％Pluronic F127、次いでIgG（2mg/ml） の効果を示すグラフである。 図53Aは、37℃での、１％、２％、５％、または10％パクリタキセル含有ポリ カプロラクトンミクロスフェアからのリン酸緩衝化生理食塩水への放出速度プロ ファイルを示すグラフである。図53Bは、コントロールミクロスフェアで処理し たCAMを示す写真である。図53Cは、5％パクリタキセルを充填したミクロスフェ アで処理されたCAMを示す写真である。 図54は、コントロールミクロスフェア（PLLA:GA-85:15）の粒子サイズの範囲 を示すグラフである。 図55は、20％パクリタキセルを充填したミクロスフェア（PLLA:GA-85:15）の 粒子サイズの範囲を示すグラフである。 図56は、コントロールミクロスフェア（PLLA:GA-85:15）の粒子サイズの範囲 を示すグラフである。 図57は、20％パクリタキセルを充填したミクロスフェア（PLLA:GA-85:15）の 粒子サイズの範囲を示すグラフである。 図58A、58B、および58Cは、変化するミクロスフェアのサイズの範囲ならびにP LLAおよびGAの種々の比からの、パクリタキセルの放出速度プロファイルを示す グラフである。 図59Aおよび59Bは、PLLAおよびGAの種々の比での、ミクロスフェアからのパク リタキセルの放出速度プロファイルを示すグラフである。 図60Aおよび60Bは、PLLAおよびGAの種々の比での、ミクロスフェアからのパク リタキセルの放出速度プロファイルを示すグラフである。 図61A、61B、および61Cは、変化するミクロスフェアのサイズならびにPLLAお よびGAの種々の比からの、パクリタキセルの放出速度プロファイルを示すグラフ である。 図62は、パクリタキセルナイロンマイクロカプセルからのパクリタキセル放出 を示すグラフである。 図63Aおよび63Bは、膀胱組織におけるフィブロネクチンコートPLLAミクロスフ ェア（63A）、および膀胱組織におけるポリ（L-リジン）ミクロスフェアの写真 である。 図64は、ミセルのパクリタキセルが、コラーゲン誘導関節炎ラットモデルにお ける毎日の平均関節炎スコアを改善することを示すグラフである。 図65A〜65Dは、コラーゲン誘導関節炎ラットモデルにおけるミセル性パクリタ キセルの効果を示す一連のX線である。 図66A〜66Cは、ラット足首関節の走査電子顕微鏡写真である。 図67は、コラーゲン誘導関節炎ラットモデルにおける組織病理学を示す拡大し た観察を示す。 図68Aおよび68Bは、コラーゲン誘導関節炎ラットモデルにおける滑膜血管の拡 大した観察を示す。 図69は、マウスの耳におけるオキサゾロンによる接触過敏性反応の誘導を示す グラフである。抗原チャレンジ時、そして次いで、毎日１回の１％のパクリタキ セルゲルまたはビヒタルで処置。皮膚炎は、チャレンジ前の耳の厚さと比較した 場合、耳の膨張の測定によって定量した。データは平均値+/-SD（n=5）を示す。 **p<0.01；***p<0.001。 図70は、マウスの耳におけるオキサゾロンによる接触過敏性反応の誘導を示す グラフである。抗原チャレンジの24時間後に１％のパクリタキセルゲルまたはパ クリタキセルビヒクルで最初の処置、そしてその後、毎日１回の処置。皮膚炎は 、チャレンジ前の耳の厚さと比較した場合、耳の膨張の測定によって定量した。 データは平均値+/-SD（n=5）を示す。*p<0.05；**p<0.01。 図71は、PMAの局所適用によるマウスの耳における皮膚炎の誘導を示すグラフ である。PMA適用の１時間後に１％のパクリタキセルゲルまたはビヒクルで最初 の処置、そしてその後、毎日１回の処置。皮膚炎は、チャレンジ前の耳の厚さと 比較した場合、耳の膨張の測定によって定量した。データは平均値+/-SD（n=5） を示す。*p<0.05；***p<0.001。 図72は、PMAの局所適用によるマウスの耳における皮膚炎の誘導を示すグラフ である。PMA適用の24時間後に１％のパクリタキセルゲルまたはパビヒクルで最 初の処置、そしてその後、毎日１回の処置。皮膚炎は、チャレンジ前の耳の厚さ と比較した場合、耳の膨張の測定によって定量した。データは平均値+/-SD（n=5 ）を示す。**p<0.01；***p<0.001。 図73は、PMAの局所適用によるマウスの耳における皮膚炎の誘導を示す。１％ のパクリタキセルゲル（右耳）またはビヒクル（左耳）での前処置。画像は、PM A適用の48時間後に撮影した。パクリタキセル処置右耳と比較した場合、ビヒク ル処置左耳の発赤および拡張した血管に留意すること。同様の結果が合計５匹の マウスにおいて観察された。 図74は、DM20トランスジェニックマウスの体重におけるパクリタキセルの効果 を示すグラフである。トランスジェニックマウスを毎週３回24日間、ビヒクルま たはパクリタキセル（2.0mg/kg）で処置し、次いで27日目に屠殺した。結果は、 パクリタキセルで処置した２匹の動物および１匹の未処置動物についての結果で ある。パクリタキセル処置動物は、最少の体重減少を示したが、一方、コントロ ール動物は、29gから22gへ、30％の体重減少を示した。 図75は、トランスジェニックマウスにおける臨床症状の進行における高用量間 隔的パクリタキセル治療の効果を示すグラフである。トランスジェニックマウス を１週間に１度、４週間（０週、１週、２週、および３週）20mg/kgのパクリタ キセルで処置し、そして２週間毎に10週間モニターし、各症状についてスコアを 決定した。データは、パクリタキセル処置トランスジェニックマウス（n=5）、 およびコントロールマウス（n=3）について、平均スコア（全ての症状について 累積）を示す。パクリタキセル処置は、トランスジェニックにおけるDM20の過剰 発現によって引き起こされる分解を低減し、その一方、コントロールマウスは、 ３匹の動物のうちの２匹（実験プロトコールの最後まで生存しなかった）で非常 に早く悪化した（示されるように）。 図76Aおよび76Bは、ラット心臓動脈モデルにおいて血管周囲に（血管の外膜に ）適用されたパクリタキセルペーストを示す。左の総頚動脈の外膜表面を、2.5m gのコントロールペースト（76A）、または20％パクリタキセルを充填した2.5mg のペースト（76B）のいずれかで処置した。コントロール動脈は、平滑筋細胞過 剰増殖により、血管壁の厚さの増大を示したが、その一方、パクリタキセルを充 填したペーストは、内膜肥厚の形跡を示さなかった。 図77Aおよび77Bは、ラット心臓血管モデルにおける血管周囲のパクリタキセル ペーストの近接効果を示す。血管周囲領域のすぐ側に適用したパクリタキセルを 充填したペーストは再狭窄を防いだ；しかし、ペーストが血管壁に直接接しない 場合、新内膜過形成は明らかであった。 図78A、78B、および78Cは、星状細胞GFAP染色におけるパクリタキセルの効果 を示す。ビヒクルまたはパクリタキセルで処置された正常動物およびトランスジ ェニック動物（多発性硬化症に類似した神経疾患を発症した動物）由来の脳切片 をGFAP（活性化星状細胞のマーカー）で染色し、そして組織学的に試験した。コ ントロールトランスジェニックマウスにおいて、星状細胞の数が増加し、そして 総GFAPレベルを正常脳切片と比較した。しかし、細胞の形態は類似であった。パ クリタキセルで処置したトランスジェニックマウスの脳切片は、星状細胞の数か ら減少し、そしてGFAPレベルを非処置トランスジェニック動物と比較した。組織 学的には、細胞の円形化および星状細胞における星状突起の薄さである。 図79Aおよび79Bは、パクリタキセルが、ミエリン塩基性タンパク質ペプチド（ GP68-88）およびConAに対する応答において、Ｔ細胞刺激を阻害することを示す グラフである。ＲＴ−１のＴ細胞増殖の48時間培養を、刺激剤として、GP68-88 （A）またはConA（B）で行った。パクリタキセルおよびそのビヒクル（ミセル） を、抗原刺激の開始時または24時間後に段階的な濃度で添加した。パクリタキセ ルは、刺激剤とは関係なく、0.02μMほど低い濃度でＴ細胞増殖を阻害した。 図80A、80B、80C、および80Dは、ツベルシジンおよびパクリタキセルが、IL-1 活性およびTNF誘導NF-κB活性の両方を阻害することを示すグラフである。 図81Aおよび81Bは、クリスタルバイオレット（0.5％）染色よび492nmでの吸光 度による定量によって測定した場合、ヒト前立腺ガン細胞（LNCaP）（２×103細 胞／ウェル）の細胞増殖における、パクリタキセルまたはカンプトテシンの増加 した濃度の効果を示すグラフである。増殖の割合を、コントロールに対する％お よび得られた８つの結果の平均として表す。 発明の詳細な説明 本発明を提示する前に、本明細書中以下で使用される特定の提示された用語の 定義を理解することは有用であり得る。 本明細書中で使用される「炎症性疾患」は、血管変化：浮腫および好中球の浸 潤（例えば、急性炎症反応）；単核細胞による組織浸潤；炎症性細胞、結合組織 細胞、およびそれらの細胞産物による組織破壊；ならびに結合組織補充による修 復の試み（例えば、慢性炎症反応）によって特徴付けられる任意の多数の疾患を いう。このような疾患の代表的な例には、関節炎、アテローム性動脈硬化症、乾 癬、炎症性腸疾患、多発性硬化症、外科的接着、再狭窄、結核、移植片拒絶、お よび慢性炎症性呼吸疾患（例えば、喘息、塵肺症、慢性閉塞肺疾患、鼻ポリープ 、および肺線維症）のような多くの一般的な医療状態が含まれる。 「抗微小管剤」は、任意のタンパク質、ペプチド、化学薬品、または例えば、 重合の予防または安定化により微小管の機能を損なう他の分子が含まれることが 理解されるべきである。広範な種々の方法が、特定化合物の抗微小管活性（例え ば、Smithら（Cancer Lett 79(2):213-219，1994）およびMooberryら、（Cancer Lett．96(2):261-266，1995）によって記載されるアッセイ）を決定するために 利用され得る。 上記のように、本発明は、炎症疾患処置または予防するための方法（炎症部位 に抗微小管剤を送達する工程を包含する）を提供する。簡潔には、広範な種々の 薬剤が、炎症疾患を処置または予防するために、キャリア（例えば、ポリマーま たは軟膏）有りまたは無しのいずれかで、炎症部位（または炎症の潜在的な部位 ）に送達され得る。このような薬剤の代表的な例には、タキサン類（例えば、パ クリタキセル（下記により詳細に記載される）およびドセタキセル）(Schiffら 、Nature 277:665-667，1979;LongおよびFairchild，Cancer Research 54:4355- 4361，1994;RingelおよびHorwitz，J．Natl．Cancer Inst．83(4):288-291，199 1;Pazdurら、Cancer Treat．Rev．19(4):351-386，1993)、カンポテシン、エレ ンテロビン(例えば、米国特許第5,473,057号)、サルコジクチン類(サルコジクチ ンＡを含む)、エポロチロンＡおよびＢ(Bollagら、Cancer Research 55:2325-23 33，1995)、ジスコデルモリド(ter Haarら、Biochemislty 35:243-250， 1996)、重水(D2O)(JamesおよびLefebvre，Genetics 130(2):305-314，1992;Soll ottら、J．Clin．Invest．95:1869-1876，1995)、ヘキシレングリコール(2-メチ ル-2,4-ペンタジオール)(Okaら、Cell Struct．Funct．16(2):125-134，1991)、 ツベルジジン(7-デアザアデノシン)(Mooberryら、Cancer Lett．96(2):261-266 ，1995)、LY290181(2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H-ナフト(1,2-b)ピラン-3-カル ドニトリル)(Pandaら、J．Biol．Chem．272(12):7681-7687，1997;Woodら、Mol ．Pharmacol．52(3):437-444，1997)、フッ化アルミニウム(Songら、J．Cell．S ci.補遺14:147-150，1991)、エチレングリコールビス-(スクシンイミジルスクシ ネート)(CaplowおよびShanks，J．Biol．Chcm．265(15):8935-8941，1990)、グ リシンエチルエステル(Mejillanoら、Biochemistry,31(13):3478-3483，1992)、 モノクローナル抗イディオタイプ抗体(Leuら、Proc．Natl．Acad．Sci．USA 91( 22):10690-10694，1994)、微小管アセンブリ促進タンパク質(タキソール様タン パク質、TALP)(Hwangら、Biochem．Biophys．Res．Commun．208(3):1174-180，1 995)、低張によって誘導された細胞膨張(190mosmol/L)状態、インスリン(100nmo l/L)、またはグルタミン(10nmol/L)(Haussingerら、Biochem．Cell．Biol．72(1 -2):12-19，1994)、ジオネイン結合(ohbaら、Biochim．Bioplys．Acta 1 158(3) :323-332，1993)、ジベレリン(MitaおよびShibaoka，Protoplasma 199(1/2):100 -109，1984)、XCHOl（キネタシン様タンパク質）(Yonetaniら、Mol．Biol．Cell 7(補遺):211A，1996)、リソホスファチジン酸(Cookら、Mol．Biol．Cell 6(補 遺):260A，1995)、リチウムイオン(BhattacharyyaおよびWolff，Biochem．Bioph ys．Res．Commun．73(2):383-390，1976)、植物細胞壁成分(例えば、ポリ-L-リ ジンおよびエクステンシン)(Akashiら、Planta 182(3):363-369，1990)、グリセ ロール緩衝液(Schilstraら、Biochem．J．277(Pt．3):839-847，1991;Farrellお よびKeatcs，Biochem．Cell．Biol．68(11):1256-1261，1990;Lopezら、J．Cell ．Biochem．43(3):281-291，1990)、Triton X-100微小管安定化緩衝液(Brownら 、J．Cell Sci，104(Pt．2):339-352，1993;Safiejko-MroczkaおよびBell，J．H istochem．Cytochem．44(6):641-656，1996)、微小管関連タンパク質(例えば、M AP2、MAP4、tau、big、tau、エンスコンシン、延長因子-l-α(EF-Iα)およびE-M AP-115)(Burgessら、Cell Motil． Cytoskeleton 20(4):289-3000，1991;Saoudiら、J．Cell．Sci．108(Pt．1):357 -367，1995;BulinskiおよびBossler;J．Cell．Sci．107(Pt．10):2839-2849，19 94;Ookatoaら、J．Cell Biol．128(5):849-862，1995;Boyneら、J．Comp．Neuro l，358(2):279-293，1995;FerreiraおよびCaceres，J．Neurosci．11(2):392-40 0，1991;Thurstonら、Chromosoma 105(1):20-30，1996;Wangら、Brain Res．Mol ，Brain Res．38(2):200-208．1996;Moore aud Cyr．Mol．Biol．Cell 7(補遺): 221-A，1996;MassonおよびKreis．J．Cell Biol．123(2)，357-371，1993)、細 胞体(例えばヒストンH1、ミエリン塩基性タンパク質および動原体)(Saoudiら、J ．Cell．Sci．108(Pt．1):357-367，1995;Simerlyら、J．Cell Biol．111(4):14 91-1504，1990)、内因性微小管構造(例えば、軸糸構造、プラグおよびGTOキャッ プ)(Dyeら、Cell Motil．Cytoskeleton 21(3):171-186，1992;AzharおよびMurph y，Cell Motil．Cytoskeleton 15 15(3):156-161，1990;Walkerら、J．Cell Bio l．I14(1):73-81，1991;DrechselおよびKirschner，Curr．Biol．4(12):1053-10 61，1994)、安定な細管のみのポリペプチド例えば、STOP145およびSTOP220)Piro lletら、Biochim．Biophys．Acta I160(1):113-119，1992;Pirolletら、Biochem istry 31(37):8849-8855，1992;Boscら、Proc．Natl．Acad．Sci．USA 93(5):21 25-2130，1996;Margolisら、EMBO J．9(12):4095-4102，1990)、および有糸分裂 応力からの張力(NicklasおよびWard，J．Cell Biol．126(5):1241-1253，1994) 、ならびに任意の上記の任意のアナログおよび誘導体が含まれる。このような化 合物は、脱重合化微小管（例えば、コルチシンおよびビンブラスチン）によって 、または安定化微小管形成（例えば、パクリタキセル）のいずれかによって作用 し得る。 本発明の１つの好ましい実施態様では、治療剤は、チューブリンへ結合するこ とにより微小管形成を破壊して異常な紡錘体を形成する化合物であるパクリタキ セルである。簡単には、パクリタキセルは、高度に誘導体化されたジテルペノイ ドであり（Waniら，J.Am.Chem.Soc.93:2325，1971）ジテルペノイドは、Taxus b revifolia Pacific Yew．の採集され乾燥された樹皮、ならびにPacific Yew.のT axomyces AndreanaeおよびEndophytic Fungus(Stierleら，Science 60:214-216 ，1993)から得られている、。「パクリタキセル」プロドラック、アナログ、お よ タキセルの10-デスアセチルアナログ、およびパクリタキセルの3'N-デスベンゾ イル-3'N-t-ブトキシカルボニルアナログ）が含まれることが本明細書中で理解 されるべきである）は、当業者に公知の技術（例えば、Sciffら、Nature 277:66 5-667,1979;LongおよびFairchild,Cancer Reseach 54:4355-4361,1994;Ringelお よびHorwitz,J.Natl.Cancer Inst.83(4):288-291,1991;Pazdurら、Cancer Treat .Rev.19(4):351-386,1993;WO94/07882、WO94/07881、O94/07880、WO94/07876、W O93/23555、WO93/10076、WO94/00156、WO93/24476、EP590267、WO94/20089；米 国特許第5,294,637号、同第5,283,253号、同第5,279,949号、同第5,274,137号、 同第5,202,448号、同第5,200,534号、同第5,229,529号、同第5,254,580号、同第 5,412,092号、同第5,395,850号、同第5,380,751号、同第5,350,866号、同第4,85 7,653号、同第5,272,171号、同第5,411,984号、同第5,248,796号、同第5,248,79 6号、同第5,422,364号、同第5,300,638号、同第5,294,637号、同第5,362,831号 、同第5,440,056号、同第4,814,470号、同第5,278,324号、同第5,352,805号、同 第5,411,984号、同第5,059,699号、同第4,942,184号；Tetrahedron Letters 35( 52):9709-9712，1994；J.Med.Chem.35:4230-4237,1992；J.Med.Chem.34:992-998 ,1991；J.Natural Prod.57(10):1404-1410,1994；J.Natural Prod.57(11):1580- 1583，1994；J.Am.Chem.Soc.110:6558-6560，1988を参照のこと）を利用して容 易に調製され得るか、または例えば、Sigma Chemical Co.,St.Louis，Missouri( T7402-Taxus brevifoia由来)を含む、種々の商業的供給源から得られ得る。 このようなパクリタキセル誘導体またはアナログの代表的な例として、7-デオ キシ-ドセタキソール、7,8-シクロプロパタキサン、N-置換2-アセチドン、6,7- エポキシパクリタキセル、6,7修飾パクリタキセル、10-デスアセトキシタキソー ル、10-デアセチルタキソール（10-デアセチルバカチンIII由来）、タキソール のホスホノオキシおよび炭酸塩誘導体、タキソール2',7-ジ(1,2-ベンセンジカル ボン酸ナトリウム)、10-デスアセトキシ-11,12-ジヒドロタキソール-10,12(18)- ジエン誘導体、10-デスアセトキシタキソール、プロタキソール（2'-および/ま たは7-0-エステル誘導体）、（2'-および/または7-0-炭酸塩誘導体）、タキソー ル側鎖の不斉合成、フルオロタキソール、9-デオキソタキサン、(13-アセチル-9 -デオキソバカチンIII)、9-デオキソタキソール、7-デオキシ-9-デオキソタキソ ール、10-デスアセトキシ-7-デオキシ-9-デオキソタキソール、水素またはアセ チル基ならびにヒドロキシおよびtert-ブトキシカルボニルアミノを含む誘導体 、スルホン化2'-アクリロイルタキソールおよびスルホン化2'-0-アシル酸タキソ ール誘導体、スクシニルタキソール、2'-γ-アミノブチリルタキソールホルメー ト、2'-アセチルタキソール、7-アセチルタキソール、7-グリシンカルバメート タキソール、2'-OH-7-PEG(5000)カルバメートタキソール、2'-ベンゾイルおよび 2'-7-ジベンゾイルタキソール誘導体、他のプロドラック（2'-アセチルタキソー ル；2',7-ジアセチルタキソール；2'スクシニルタキソール；2'-(β-アラニル)- タキソール；2'γ-アミノ酪酸（butyryl）タキソールホルメート；2'-スクシニ ルタキソールのエチレングリコール誘導体；2'-グルタリルタキソール；2'-(N,N -ジメチルグルシル)タキソール；2'-[2-(N,N-ジメチルアミノ)プロピオニル]タ キソール：2'オルトカルボキシベンゾイルタキソール；タキソールの2'脂肪族カ ルボン酸誘導体、プロドラック｛2'(N,N-ジエチルアミノプロピオニル)タキソー ル、2'(N,N-ジメチルグリシル)タキソール、7(N,N-ジメチルグリシル)タキソー ル、2',7-ジ-(N，N-ジメチルグリシル)タキソール、7(N,N-ジエチルアミノプロ ピオニル)タキソール、2',7-ジ-(N，N-ジエチルアミノプロピオニル)タキソール 、2'-(L-グリシル)タキソール、7-(L-グリシル)タキソール、2',7-ジ(L-グリシ ル)タキソール、2'-(L-アラニル)タキソール、7-(L-アラニル)タキソール、2',7 -ジ(L-アラニル)タキソール、2'-(L-ロイシル)タキソール、7-(L-ロイシル)タキ ソール、2',7-ジ(L-ロイシル)タキソール、2'-(L-イソロイシル)タキソール、7- (L-イソロイシル)タキソール、2',7-ジ(L-イソロイシル)タキソール、2'-(L-バ リル)タキソール、7-(L-バリル)タキソール、2',7-ジ(L-バリル)タキソール、2' -(L-フェニルアラニル)タキソール、7-(L-フェニルアラニル)タキソール、2',7- ジ(L-フェニルアラニル)タキソール、2'-(L-プロリル)タキソール、7-(L-プロリ ル)タキソール、2',7-ジ(L-プロリル)タキソール、2'-(L-リジル)タキソール、7 -(L-リジル)タキソール、2',7-ジ(L-リジル)タキソール、2'-(L-グルタミル)タ キソール、7-(L-グルタミル)タキソール、2',7-ジ(L-グルタミル)タキソール、2 '-(L-アルギニル)タキソール、7-(L-アルギニル)タキソール、2',7-ジ(L-アルギ ニル)タキソール｝、修飾フェニルイソセリン側鎖を有するタキソールアナログ 、タキソテレ（taxotere）、（N-デベンゾイル-N-tert-(ブトキシカルボニル)-1 0-デアセチルタキソール、ならびにタキサン（例えば、バカチンIII、セファロ マンニン、10-デアセチルバカシンIII、ブレビフォリオール、ユナンタクシン、 およびタクシン）が挙げられる。 微小管脱重合化剤（または不安定化剤、または崩壊剤）の代表的な例としてノ コダゾールが挙げられる(Dingら、J.Exp.Med.171(3):715-727,1990;Dottoiら、J .Cell Sci.Suppl.15:75-84,1991;Okaら、Cell Struc,Funct.16(2):125-134,1991 ；Wiemerら、J.Cell.Biol.136(1)71-80,1997);サイトカラシンB(Illingerら、Bi ol.Cell 73(2-3):131-138,1991);ビンブラスチン（Dingら、J.Ecp.Med.171(3):7 15-727,1990;Dirkら、Neurochem.Res.15(11)1135-1139,1990;Illingerら、Biol. Cell73(2-3):131-138,1991;Wiemerら、J.Cell.Biol.136(1):71-80,1997);ビンク リスチン(Dirkら、Neurochem.Res.15(11)1135-1139;Dingら、J.Exp.Med.171(3)7 15-727,1990);コルヒチン(Allenら、Am.J.Physiol.261-(4 Pt.1):L315-L321,199 1;Dingら、J.Exp.Med.171(3):715-727,1990;Gonzalezら、Exp.Cel1.Res.192(1): 10-15,1991;Stargellら、Mol.Cell.Biol.12(4)1443-1450,1992);CI 980(コルヒ チンアナログ)(Garciaら、Anticancer Drugs 6(4):533-544,1995;コルセミド(Ba rlowら、Cell.Motil.Cytoskeleton 19(1):9-17,1991;Meschiniら、J.Microsc.17 6(Pt.3):204-210,1994;Okaら、Cell Struct.Funct.16(2):125-134,1991);ポドフ ィロトキシン(Dingら、J.Exp.Med.171(3):715-727,1990);ベノルミル剤(Hardwic kら、J.Cell.Biol.131(3):709-720,1995;Shroら、Genes Dev．5(4):549-560,199 1);オリザリン（oryzalin）(Stargellら、Mol.Cell.Biol.12(4):1443-1450,1992 );マジュスクラミデC(Majusculamide C)(Mooreら、J.Ind.Microbiol.16(2):134- 143,1996);デメコルチン(Van DolahおよびRamsdell,J.Cell.Physiol.166(1):49- 56,1996;Wiemerら、J.Cell.Biol.136(1)71-80,1997);ならびにメチル-2-ベンズ イミダゾールカルバメート(MBC)(Brownら、J.Cell.Biol.123(2):387-403,1993) 。 処方 上記のように、本明細書中に記載される治療用抗微小管剤は、種々の様式で処 方され得、したがってさらにキャリアーを含み得る。この点において、広範な種 々のキャリアーが、ポリマー起源または非ポリマー起源のいずれかから選択され 得る。 例えば、本発明の一つの実施態様では、広範な種々のポリマー性キャリアは、 上記の１つ以上の治療剤を含みおよび/または送達するように利用され得る（例 えば、生分解性および非生分解性の組成物の両方を含む）。生分解性組成物の代 表的な例として、アルブミン、コラーゲン、ゼラチン、ヒアルロン酸、デンプン 、セルロース（メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシ プロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロール、セルロースアセテー トフタレート、セルロースアセテートスクシネート、ヒドロキシプロピルメチル セルロースフタレート）、カゼイン、デキストラン、多糖、フィブリノーゲン、 ポリ(D,Lラクチド)、ポリ(D,L-ラクチド-co-グリコリド)、ポリ（グリコリド） 、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（アルキルカーボネート）、およびポリ （オルトエステル）、ポリエステル、ポリ（ヒドロキシ吉草酸）、ポリジオキサ ノン、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（タルトロン 酸(tartronic acid)）、ポリ無水物、ポリホスファゼン、ポリ（アミノ酸）およ びそれらのコポリマーが挙げられる（一般的には、Illum,L.,Davids,S.S.(編)「 制御薬物送達におけるポリマー」Wright,Bristol，1987；Arshady，J.Controlle d Release 17:1-22，1991；Pitt,Int.J.Phar.59:173-196，1990；Hollandら，J. Controlled Release 4:155-0180，1986を参照のこと）。非生分解性ポリマーの 代表的な例として、ポリ（エチレン-ビニルアセテート）（「EVA」）コポリマー 、シリコーンゴム、アクリル性ポリマー（ポリアクリル酸、ポリメチルアクリル 酸、ポリメチルメタクリレート、ポリアルキルシノアクリレート）、ポリエチレ ン、ポリプロピレン、ポリアミド（ナイロン6,6）、ポリウレタン、ポリ（エス テルウレタン）、ポリ（エーテルウレタン）、ポリ（エステル-ウレア）、ポリ エーテル（ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（プロピレンオキシド）、プルロニ ック、ポリ（テトラメチレングリコール））、シリコーンゴム、およびビニルポ リマー（ポリビニルピロリドン、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（ビニルア セテートフタレート））が挙げられる。アニオン性（例えば、アルギン酸、カラ ゲナン、カルボキシメチルセルロース、およびポリ（アクリル酸））またはカチ オン性（例えば、キトサン、ポリ-L-リジン、ポリエチレンイミン、およびポリ （アリルアミン））のいずれかであるポリマーもまた開発され得る（一般的には 、Dunnら，J.Applied Polymer Sci.50:353-365，1993；Casconeら，J.Materials Sci.:Materials in Medicine 5:770-774，1994；Shiraishiら，Biol.Pharm.Bul l.16(11):1164-1168，1993；ThacharodiおよびRao，Int'l J.Pharm.120:115-118 ,1995；Miyazakiら，Int'l J.Pharm.118:257-263，1995を参照のこと）。特に好 ましいポリマー性キャリアとして、ポリ（エチレン-ビニルアセテート）、ポリ( D,L-乳酸)オリゴマーおよびポリマー、ポリ(L-乳酸)オリゴマーおよびポリマー 、ポリ（グリコール酸）、乳酸およびグリコール酸のコポリマー、ポリ（カプロ ラクトン）、ポリ（バレロラタトン）、ポリ無水物、ポリ（カプロラクトン）ま たはポリ（乳酸）のポリエチレングリコールとのコポリマー、ならびにこれらの ブレンドが挙げられる。 所望の放出特徴および／または特定の所望の特性を有するポリマー性キャリア が、種々の形態で形成され得る。例えば、ポリマー性キャリアは、特定の誘発事 象（例えば、pH）への曝露の際に治療剤を放出するように形成され得る(例えば 、Hellerら「化学的に自己調節された薬物送達系」Polymers in Medicine III， Elsevier Science Publshers B.V.,Amsterdam，1988，175-188頁；Kangら，J.Ap plied Polymer Sci.48:343-354，1993；Dongら，J.Controlled Release 19:171- 178，1992；DongおよびHoffman，J.Controlled Release 15:141-152，1991；Kim ら，J.Controlled Release 28:143-152，1994；Coenejo-Bravoら，J.Controlled Release 33:223-229，1995；WuおよびLee，Pharm.Res.10(10):1544-1547，1993 ；Serresら，Pharm.Res.13(2):196-201，1996；Peppas「pHおよび温度感受性送 達系の基礎」Gurmyら（編），Pulsatile Drug Delivery，wissenschaftliche Ve rlagsgesellschaft mbH，Stuttgart，1993，41-45頁；Doelker，「セルロース誘 導体」，1993，PeppasおよびLanger(編)，Biopolymers 1，Springer-Verlag，Be rlinを参照のこと)。pH感受性ポリマーの代表的な例として、ポリ（アタリル酸 ）およびその誘導体（例えば、ホモポリマー（例えば、ポリ（アミノカルボン酸 ）； ポリ（アクリル酸）；ポリ（メチルアクリル酸））、このようなホモポリマーの コポリマー、ならびにポリ（アクリル酸）および上記のもののようなアクリルモ ノマーのコポリマーが挙げられる。他のpH感受性ポリマーとして、多糖（例えば 、セルロースアセテートフタレート；ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタ レート；ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート；セルロ ースアセテートトリメリレート；およびキトサン）が挙げられる。さらに他のpH 感受性ポリマーとして、pH感受性ポリマーおよび水溶性ポリマーの任意の混合物 が挙げられる。 同様に、温度感受性であるポリマー性キャリアが形成され得る（例えば、Chen ら「膣薬物送達のための生体接着性ポリアクリル酸骨格へ融合された温度感受性 プルロニックの新規のヒドロゲル」Proceed.Intern.Symp.Control.Rel.Bioact.M ater.22:167-168，Controlled Relcase Socity，Inc.,1995；Okano，「時間的な 制御薬物送達のための刺激応答性ヒドロゲルの分子設計」Proceed.Intern.Symp. Control.Rel.Bioact.Mater.22:111-112，Controlled Release Society，Inc.,19 95；Johnstonら，Pharm.Res.9(3):425-433，1992；Tung，Int'l J.Pharm.107:85 -90，1994；HarshおよびGehrke，J.Controlled Release 17:175-186，1991；Bac ら，Pharm.Res.8(4)531-537，1991；DinarvandおよびD'Emanuele，J.Controlled Release 36:221-227，1995；YuおよびGrainger，「新規の熱感受性両親媒性ゲ ル：ポリN-イソプロピルアクリルアミド-co-アクリル酸ナトリウム-co-n-N-アル キルアクリルアミドネットワーク合成および物理化学的特徴」Dept.of Chemical ＆Bioligal Sci.,Oregon Graduate Institute of Scicnce＆Technology，Beaver ton，OR，820-821頁；ZhouおよびSmid，「結合スターポリマーの物理的ヒドロゲ ル」Polymer Research Institute，Dept.of Chemistry，College of Environmen tal Science and Forestry，State Univ.of Now York，Syracuse，NY，822-823 頁；Hoffmanら、「刺激応答性ヒドロゲルにおける孔サイズおよび水「構造」の 特徴付け」Center for Bioengineering，Univ.of Washington，Seattle，WA，82 8頁；YuおよびGrainger，「架橋N-イソプロピルアクリルアミドネットワークに おける熱感受性膨張反応：カチオン性、アニオン性、および両親媒性ヒドロゲル 」Dept.of Chemical＆Bioligical Sci.,Oregon Gregon Graduate Institute of Science＆ Technology，Beaverton，OR，829-830頁；Kimら，Pharm.Res.9(3)283-290，1992 ；Baeら，Pharm.Res.8(5):624-628，1992；Konoら，J.Controlled Release 30:6 9-75，1994；Yoshidaら，J.Controlled Release 32:97-102，1994；Okanoら，J. Controlled Release 36:125-133，1995；ChunおよびKim，J.Controlled Release 38:39-47，1996；D'EmanueleおよびDinarvand，Int'l J.Pharm.118:237-242，1 995；Katonoら，J.Controlled Release 16:215-228，1991；Hoffman，「生物学 的に活性な種を含む熱可逆性ヒドロゲル」Migliaresiら（編）,Polymers in Med icine III，Elsecier Science Publishers B.V.，Amsterdam，1988，161-167頁 ；Hoffman，「治療薬および診断薬における熱可逆性ポリマーおよびヒドロゲル の適用」Third International Symposium on Resent Adances in Drug Delivery Systems，Salt Lake City，UT，1987年２月24〜27日，297-305頁；Gutowskaら ，J.Controlled Release 22:95-104，1992；PalasisおよびGehrke，J.Controlle d Release 18:1-12，1992；Paavolaら，Pharm.Res.12(12):1997-2002，1995を参 照のこと)。 熱ゲル化ポリマーおよびそれらのセラチン温度(LCST(℃))の代表的な例として 、ホモポリマー（例えば、ポリ（N-メチル-N-n-ポリアタリルアミド）、19.8； ポリ（N-n-プロピルアクリルアミド）、21.5；ポリ（N-メチル-N-イソプロピル アクリルアミド）、22.3；ポリ（N-n-プロピルメタクリルアミド）、28.0；ポリ （N-イソプロピルアクリルアミド）、30.9；ポリ（N，n-ジエチルアクリルアミ ド）、32.0；ポリ（N-イソプロピルメタクリルアミド）、44.0；ポリ（N-シクロ プロピルアクリルアミド）、45.5；ポリ（N-エチルメチアクリルアミド）、50.0 ；ポリ（N-メチル-N-エチルアクリルアミド）、56.0；ポリ（N-シクロプロピル メタクリルアミド）、59.0；ポリ（N-エチルアタリルアミド）、72.0が挙げられ る。さらに、熱ゲル化ポリマーは、上記のモノマー間でコポリマーを調製するこ とによるか、またはこのようなホモポリマーを他の水溶性ポリマー（例えば、ア クリルモノマー（例えば、アクリル酸およびその誘導体（例えば、メチルアクリ ル酸））、アクリレートおよびその誘導体（例えば、ブチルメタクリレート）、 アクリルアミド、およびN-n-ブチルアクリルアミド）とを組み合わせることによ り作製され得る。 熱ゲル化ポリマーの他の代表的な例として、セルロースエーテル誘導体（例え ば、ヒドロキシプロピルセルロース、41℃；メチルセルロース、55℃；ヒドロキ シプロピルメチルセルロース、66℃；およびエチルヒドロキシエチルセルロース 、ならびにプルロニック（例えば、F-127、10〜15℃；L-122、19℃；L-92、26℃ ；L-81、20℃；およびL-61、24℃）が挙げられる。 広範な種々の形態（例えば、桿状デバイス、ペレット、スラブ、またはカプセ ルを含む）が、本発明のポリマー性キャリアにより形成され得る（例えば、Good ellら，Am.J.Hosp.Pharm.43:1454-1461，1986;Langerら，「ポリマーからの高 分子の制御放出」Biomedical polymers，Polymeric Materials and Pharmaceuti cals for Biomedical Use，Goldberg,E.P.,Nalagim,A（編）Academic Press，11 3-137頁，1980;Rhineら，J.Pham.Sci.69:265-270，1980;Brownら，J.Pharm.Sci. 72:1181-1185，1983；およびBawaら，J.Controlled Release 1:259-267，1985を 参照のこと）。治療剤は、ポリマーのマトリックス内で吸蔵により連結され得る か、共有結合により結合され得るか、またはマイクロカプセル内にカプセル化さ れ得る。本発明の特定の好ましい実施態様では、治療組成物は、非カプセル処方 物（例えば、ミクロスフェア（サイズがナノメーターからマイクロメーターの範 囲）、ペースト、種々のサイズの糸、フィルム、およびスプレー）において提供 される。 好ましくは、本発明の治療組成物は、意図される使用に適切な様式で形成され る。本発明の特定の局面では、治療組成物は生体適合性であり、そして数日から 数ヶ月の期間にわたって１つ以上の治療薬剤を放出すべきである。例えば、７日 〜10日の期間にわたって治療剤（例えば、パクリタキセル）の10％、20％、また は25％(w/v)を超えて放出する、「急速放出」または「バースト」治療組成物が 提供される。このような「急速放出」組成物は、特定の実施態様では、化学療法 レベル（適用可能な場合）の所望の薬剤を放出し得るべきである。他の実施熊様 では、７日〜10日の期間にわたって治療剤の１％(w/v)未満を放出する、「低放 出」治療組成物が提供される。さらに、本発明の治療組成物は、好ましくは、数 ヶ月間安定であり、そして無菌条件下で生成され、そして維持され得るべきであ る。 本発明の特定の局面では、治療組成物は、特定の使用に依存して、50nm〜500 μmの範囲の任意のサイズで形成され得る。あるいは、このような組成物はまた 、フィルムまたはコーティングに凝固する、「スプレー」として容易に適用され 得る。このようなスプレーは、例えば、0.1μm〜３μm、10μm〜30μm、および3 0μm〜100μmを含む、広範な多数のサイズのミクロスフェアから調製され得る。 本発明の治療組成物はまた、種々の「ペースト」またはゲル形態で調製され得 る。例えば、本発明の１つの実施態様では、ある温度（例えば、37℃を超える温 度（例えば、40℃、45℃、50℃、55℃、または60℃））で液体、そして別の温度 （例えば、環境(amblent)体温または37℃より低い任意の温度）で固体または半 固体である治療組成物が提供される。このような「熱ペースト」は、本明細書中 に提供された開示があれば容易に作製され得る。 本発明のさらに他の局面では、本発明の治療組成物は、フィルムとして形成さ れ得る。好ましくは、このようなフィルムは、一般的に、５、４、３、２、また は１mm厚未満、より好ましくは0.75mmまたは0.5mm厚未満、そして最も好ましく は500μm〜100μm厚未満である。このようなフィルムは、好ましくは曲げやすく 、良好な引っ張り強さ（例えば、50N/cm2を超える、好ましくは100N/cm2を超え る、より好ましくは150または200N/cm2を超える）、良好な接着特性を有し（す なわち、湿ったまたは濡れた表面に容易に接着する）、そして制御された浸透性 を有する。 本発明のさらなる局面では、本発明の治療組成物は局所的適応に処方され得る 。代表的な例として：エタノール；エタノールおよびグリコールの混合物（例え ばエチレングリコール、またはプロピレングリコール）；エタノールおよびイソ プロピルミリステート、またはエタノール、イソプロピルミリステートおよび水 （例えば55:5:40）；エタノールおよびエイネオール（eineol）の混合物、また はD-リモネン（水を有する、または有さない）；グリコール（例えば、エチレン グリコールまたはプロピレングリコール）ならびにプロピレングリコールのよう なグリコールと水の混合物、ホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスフ プロピルミリステートと1-ヘキシル-2-ピロリドンとの混合物、N-ドデシル-2-ピ ペリジノン、または1-ヘキシル-2-ピロリドンが挙げられる。また、他の賦形剤 （例えば、酸（例えば、オレイン酸、およびリノール酸）、ならびにセッケン（ 例えば、ラウリル硫酸ナトリウム））がまた、上記に添加され得る。上記につい てのより詳細な記載については、一般に、Hoelgaardら、J.Contr.Rel.2:111,198 5;Linら、Pharm.Rse.8:938,1991;Royら、J.Pharm.Sci.83:126,1991;Ogisoら、J. Pharm.Sci.84:482,1995;Sasakiら、J.Pharm.Sci.80:533,1991;Okabeら、J.Contr .Rel.32:243,1994;Yokomizoら、J.Contr.Rel.38:267,1996;Yokomizoら、J.Contr .Rel.42:37,1996;Mondら、J.Contr.Rel.33:72,1994;Michniakら、J.Contr.Rel.3 2:147、1994；Sasakiら、J.Pharm.Sci.80:533,1991,BakerおよびHadgraft、Phar m.Res.12:993,1995;Jastiら、AAPS Proceedings,1996;Leeら、AAPS Proceedings ,1996;Ritschelら、Skin Pharmacol.4:235;1991;ならびにMcDaidおよびDeasy,In t.J.Pharm.133:71,1996を参照のこと。 本発明の特定の実施態様では、治療組成物はまた、界面活性剤（例えば、プル ロニック（例えば、F-127、L-122、L-92、L-81、およびL-61）のようなさらなる 成分を含み得る。 本発明のさらなる局面では、疎水性化合物を含みそして放出するように適合さ れるポリマー性キャリアが提供され、このキャリアは、炭水化物、タンパク質、 またはポリペプチドと組み合わせた疎水性化合物を含む。特定の実施態様では、 ポリマー性キャリアは、１つ以上の疎水性化合物の領域、ポケット、または顆粒 を含む。例えば、本発明の１つの実施態様では、疎水性化合物は、疎水性化合物 含むマトリックスに取り込まれ、続いてこのマトリックスはポリマー性キャリア に取り込まれ得る。種々のマトリックス（例えば、炭水化物および多糖（例えば 、デンプン、セルロース、デキストラン、メチルセルロース、およびヒアルロン 酸）、タンパク質またはポリペプチド（例えば、アルブミン、コラーゲン、およ びゼラチン）を含む）はこれに関して利用され得る。代替の実施態様では、疎水 性化合物は、疎水性コア内に含まれ得、そしてこのコアは疎水性の殻内に含まれ 得る。 本明細書中に記載される治療薬剤を含みおよび／または送達するために同様に 利用され得る他のキャリアとして以下が挙げられる：ヒドロキシプロピルβシク ロデキストリン(CserhatiおよびHollo，Int.J.Pharm.108:69-75，1994)、リポソ ーム（例えば、Sharmaら，Cancer Res.53:5877-5881，1993；SharmaおよびStrau binger，Pharm.Res.11(60):889-896，1994；WO93/18751；米国特許第5,242,073 号を参照のこと）、リポソーム／ゲル（WO94/26254）、ナノカプセル（Bartoli ら,J.Microencapsulation7(2):191-197，1990）、ミセル（Alkan-Onyukselら,Ph arm.Res.11(2):206-212,1994）、インプラント（Jampelら,Invest.Ophthalm.Vis .Science 34(11):3076-3083，1993；Walterら，Cancer Res.54:22017-2212，199 4）、ナノ粒子（ViolanteおよびLanzafame PAACR）、ナノ粒子−改変（米国特許 第5,145,684号）、ナノ粒子（表面改変）（米国特許第5,399,363号）、タキソー ルエマルジョン／溶液（米国特許第5,407,683号）、ミセル（界面活性剤）（米 国特許第5,403,858号）、合成リン脂質化合物（米国特許第4,534,899号）、気体 媒介分散（米国特許第5,301,664号）、液体エマルジョン、泡、スプレー、ゲル 、ローション、クリーム、軟膏、分散ベシクル、粒子または小滴、固体または液 体エアゾール、マイクロエマルジョン（米国特許第5,330,756号）、ポリマー性 殻（ナノカプセルおよびマイクロカプセル）（米国特許第5,439,686号）、表面 活性剤中のタキソイドベース組成物（米国特許第5,438,072号）、エマルジョン （Tarrら,Pharm Res.4:62-165，1987）、ナノスフェア（Haganら，Proc.Intern. Symp.Control Rel.Bioact.Mater.22，1995；Kwonら，Pharm Res.12(2):192-195 ；Kwonら，Pharm Res.10(7):970-974；Yokoyamaら，J.Contr.Rel.32:269-277，1 994；Grefら，Science 263:1600-1603，1994；Bazileら，J.Pharm.Sci.84:493-4 98,1994）、およびインプラント（米国特許第4,882,168号）を参照のこと）。 以下により詳細に議論されるように、治療組成物を形成するために本明細書中 に記載されるキャリアのうちの１つに必要に応じて取り込まれる本発明の治療剤 は、広範な種々の疾患を処置または予防するために調製され、そして利用され得 る。 炎症性疾患の処置または予防 上記のように、本発明は広範な炎症性疾患の処置方法または予防方法を提供し 、この方法は、患者に抗微小管剤を投与する工程を包含する。処置され得る炎症 性疾患の代表的な例には、以下が挙げられる。例えば、萎縮性胃炎、炎症性溶血 性 貧血、移植片拒絶、炎症性好中球減少症、水疱性類天疱瘡、小児脂肪便症、脱髄 性神経障害、皮膚筋炎、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎およびクローン病）、多発 性硬化症、心筋炎、筋炎、鼻ポリープ、慢性静脈洞炎、尋常性天疱瘡、原発性糸 球体腎炎、乾癬、外科的接着、狭窄、または再狭窄、強膜炎、硬皮症、湿疹（ア トピー性皮膚炎、刺激性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎が挙げられる）およびI型 糖尿病。 炎症性疾患の他の例には、以下が挙げられる、脈管炎（例えば、巨細胞性動脈 炎（側鎖動脈炎、高安動脈炎）、結節性多発動脈炎、アレルギー性血管炎、およ び肉芽種症（チャーグ−ストラウス症候群）、脈管周囲炎重複症候群(polyangit is overlap syndrome)、過敏性血管炎（ヘーノホ−シェーンライン紫斑病）、血 清病、薬剤誘導性脈管炎、感染性脈管炎、新生物脈管炎、結合組織障害に関連す る脈管炎、補体系の先天性欠損に関連する脈管炎、ヴェーゲナー肉芽種症、川崎 病、中枢神経系脈管炎、バーガー病、および全身硬化）；消化管疾患（例えば、 膵炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、潰瘍性直腸炎、原発性硬化胆管炎、特発性を 含む任意の原因による良性狭窄症、（例えば、胆管狭窄症、食道狭窄症、十二指 腸狭窄症、小腸狭窄症、または結腸狭窄症）；気道疾患（例えば、喘息、過敏性 肺炎、石綿症、珪肺、および塵肺の他の形態、慢性気管支炎、および慢性閉塞性 気道疾患）；鼻涙管疾患（例えば、特発性を含む全ての狭窄症の原因）；および エウスタキオ管疾患（例えば、特発性を含む全ての疾患の原因）。 これらの疾患をさらに理解するため、代表的な炎症性疾患をさらに詳細に以下 に述べる。 １．炎症性皮膚疾患（例えば、乾癬およひ湿疹） 本明細書中に提供される薬剤、組成物、および方法を用いることにより、広範 な種々の炎症性皮膚疾患が、容易に処置または予防され得る。例えば、本発明の １つの実施熊様においては、炎症性皮膚疾患（例えば、乾癬または湿疹）は、炎 症部位（または、炎症の可能性のある部位）に微小管機能を阻害する薬剤を送達 することによって、処置または予防され得る。 簡潔には、皮膚細胞は、通常２つの可能なプログラム（正常な増殖および創傷 治癒）をたどるように遺伝的にプログラムされている。正常な増殖パターンにお いては、皮膚細胞は、基底細胞層で産生され、次いで表皮を通過して皮膚表面ま で上昇する。死細胞は、健常な皮膚から新しい細胞が産生されるのと同じ速度で 剥落される。正常皮膚細胞のターンオーバー時間（すなわち細胞誕生から死まで の時間）は、ほぼ28日である。創傷治癒の間、促進された増殖および修復が誘発 され、皮膚細胞の迅速なターンオーバー（創傷の置換および修復）を生じさせ、 血液の供給が増加し（増殖に関連した増加した代謝性要求を満たすため）、そし て炎症を局在化させる。 多くの点で、乾癬は悪化した創傷治癒プロセスに類似している。皮膚細胞が（ 「ケラチノサイト」と呼ばれる）産生され、２〜４日の短さで皮膚表面に押しや られる。表面の皮膚は、死細胞を十分に早く剥落させ得ず、そして過乗なケラチ ノサイトが蓄積し、増大した鱗状の病変を形成する。この増殖は、過剰に増殖し たケラチノサイトを支持するために必要な栄養を提供するために確立された、真 皮中の新しい血管（表皮の下の支持組織）によって支持される。同時に、リンパ 球、好中球、およびマクロファージが、組織を侵襲し、炎症、腫脹、および痛み を引き起こし、そしてケラチノサイトの急激な増殖を増加させる増殖因子を潜在 的に産生する。これら全ての細胞（ケラチノサイト、血管内皮細胞、および白血 球）は、組織分解酵素、または疾患の進行および周辺組織の破壊を助けるタンパ ク質分解酵素を産生する。 上記で提供された組成物を用いて、炎症性皮膚病変を容易に処置し得る。特に 、疾患を処置または予防するために、抗微小管剤を炎症部位（または炎症の潜在 的部位）に直接投与する。適切な抗微小管剤は、上記で詳細に議論しており、例 えば、タキサン（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル）、カンフォテシ ン（campothecin）、エルーテロビン（eleutherobin）、サルコジクチン（sarco dictyins）、エポシロン（epothilones）ＡおよびＢ、ジスコデルモリド、重水 （D2O）、ヘキシレングリコール（2-メチル-2,4-ペンタンジオール）、ツベルシ ジン（7-デアザアデノシン）、LY290181（2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H-ナフト( 1,2-b)ピラン-3-カルドニトリル）、フッ化アルミニウム、エチレングリコール ビス-(スクシンイミジルスクシネート)、グリシンエチルエステル、モノクロー ナ ル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タンパク質（タキソール様タン パク質、TALP）、低張性（190mosmol/L）条件により誘発される細胞膨張、イン スリン（100nmol/L）またはグルタミン（10mmol/L）、ダイニン結合、ジベレリ ン、XCHO1（キネシン様タンパク質）、リソホスファチジン酸、リチウムイオン 、植物細胞壁の構成要素（例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステンシン(extens in)）、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関連タ ンパク質（例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン（ensconsin） 、延長因子-1-α（EF-1α）およびE-MAP-115）、細胞体（entities）（例えば、 ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパク質および動原体）、内因性微小管構造（例 えば、軸糸構造、プラグ、およびGTPキャップ）、安定な細管のみポリペプチド （例えば、STOP145およびSTOP220）、および有糸分裂力からの張力、ならびに上 記のいずれかの任意のアナログおよび誘導体が挙げられる。特定の実施態様にお いて、抗微小管剤は、パクリタキセル、カンフォテシン、またはエポシロン以外 の薬剤である。このような薬剤は、特定の実施態様において、ポリマー性キャリ アとの組成物として、あるいは上記および下記でより詳細に論じたリポソーム、 クリーム、または軟膏の処方物で送達され得る。本発明の好適な実施態様におい て、薬剤または組成物は、局所的または皮下的投与のいずれかにて送達される。 乾癬の有効な抗微小管治療は以下の少なくとも一つを達成する：皮膚病変の数 および重症度の減少、活性な疾患悪化の頻度および持続時間の減少、緩解した時 間の長さの増加（すなわち、患者が病状を有さない場合の期間）、ならびに／ま たは関連病状の重症度または持続期間の減少（例えば、関節痛および関節の腫脹 、中心骨格痛、腸の病状）。 医療的に、処置は皮膚病変のサイズまたは数の減少を起こし、皮膚病状（患部 皮膚の痛み、灼熱感および出血）の減少および／または関連病状（例えば関節の 発赤、熱、腫脹、下痢、腹痛）の減少を起こす。病理学的に、抗微小管剤は少な くとも以下のうちの一つを産生する：ケラチノサイト増殖の阻害、皮膚炎症の減 少（例えば、以下に対する衝撃によって：誘引性因子、および増殖因子、抗原提 示、活性酸素腫の産生ならびにマトリクスメタロプロテイナーゼ）、ならびに皮 膚血管形成の阻害。 抗微小管剤は、上記目的を達成するための任意の様式において投与され得るが 、好ましい方法には、局所投与および全身投与が挙げられる。局部的な疾患を有 する患者は、乾癬病変に直接塗布される局所用パクリタキセルクリーム、軟膏、 または緩和薬を投与され得る。例えば、疾患の重症度、および患者の処置への応 答に依存して、パクリタキセルを0.01重量％〜10重量％を含む局所クリームが投 与され得る。好ましい実施態様においては、パクリタキセルを0.1重量％〜1重量 ％を含む局所調製物が、乾癬病変に投与される。あるいは、適切な薬学的ビヒク ルにおけるパクリタキセルの直接皮内注射が、個々の病変の治療技術に用いられ 得る。 広範囲の疾患または真皮外の症状（例えば、乾癬関節炎、ライター症候群、付 随する脊椎炎、付随する炎症性腸疾患）を有する患者においては、全身的パクリ タキセル処置が投与され得る。例えば、静脈内パクリタキセル処方物での断続的 な処置は、治療応答および患者の許容範囲に依存して、10〜75mg/m2の用量で投 与され得る；等価な経口用の調製物もまた、この徴候に適している。他の抗微小 管剤は、薬剤の効力および許容量について調整された「パクリタキセル等価物」 用量で投与される。 他の状態もまた、局所的抗微小管剤からの利益を受け得、これには以下が含ま れる：湿疹の疾患（アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、湿疹）、免疫水疱性疾患 、前悪性上皮性腫瘍、基底細胞悪性腫瘍、扁平上皮癌、角化棘細胞腫（keratoca nthoma）、悪性黒色腫およびウイルス性いぼ。パクリタキセルを0.01重量％〜10 重量％を含む局所用クリーム、軟膏、または緩和薬がこれらの状態の管理に適切 であり得る。 ２．多発性硬化症 本発明の他の局面において、抗微小管剤は多発性硬化症の治療および予防に利 用され得る。簡潔には、多発性硬化症（MS）は、ヒト中枢神経系の荒廃的な脱髄 性疾患である。この病因および病原は未知であるが、遺伝的、免疫学的および環 境因子が役割を担っていると考えられる。疾患の経過において、運動機能の喪失 を起こす、MS患者の脳における進行性の脱髄がある。ミエリンの喪失に関わる正 確な機構は理解されていないが、ミエリン破壊の領域には、星状細胞の増殖およ び蓄積の増加がある。これらの部位において、マクロファージ様活性、および少 なくとも部分的にミエリン鞘の分解の原因である増加したプロテアーゼ活性があ る。 抗微小管剤は、疾患を処置または予防するために、炎症部位（または炎症の潜 在的部位）に投与され得る。適切な抗微小管剤は、上記で詳細に議論しており、 例えば、タキサン（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル）、カンフォテ シン（campothecin）、エルーテロビン（eleutherobin）、サルコジクチン（sar codictyins）、エポシロン（epothilones）ＡおよびＢ、ジスコデルモリド、重 水（D2O）、ヘキシレングリコール（2-メチル-2,4-ペンタンジオール）、ツベル シジン（7-デアザアデノシン）、LY290181（2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H-ナフ ト(1,2-b)ピラン-3-カルボニトリル）、フッ化アルミニウム、エチレングリコー ルビス-(スクシンイミジルスクシネート)、グリシンエチルエステル、モノクロ ーナル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タンパク質（タキソール様 タンパク質、TALP）、低張性（190mosmol/L）条件により誘発される細胞膨張、 インスリン（100nmol/L）またはグルタミン（10mmol/L）、ダイニン結合、ジベ レリン、XCHOI（キネシン様タンパク質）、リソホスファチジン酸、リチウムイ オン、植物細胞壁の構成要素（例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステンシン(ex tensin)）、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関 連タンパク質（例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン（ensconsi n）、延長因子-1-α（EF-1α）およびE-MAP-115）、細胞体（entities）(例えば 、ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパク質および動原体)、内因性微小管構造（ 例えば、軸糸構造、プラグ、およびGTPキャップ）、安定な細管のみポリペプチ ド（例えば、STOP145およびSTOP220）、および有糸分裂力からの張力、ならびに 上記のいずれかの任意のアナログおよび誘導体が挙げられる。このような薬剤は 、特定の実施態様において、ポリマー性キャリアとの組成物として、あるいは上 記および下記でより詳細に論じたリポソーム処方物で送達され得る。本発明の特 定の実施態様において、薬剤または組成物は、経口的に、静脈内的に、または直 接（好適には、超音波、CT、蛍光、MRI、または内視鏡誘導を用いて）、疾患部 位 に投与され得る。 多発性硬化症の有効な抗微小管治療は、以下の１つ以上を達成する：症状の重 度の減少；疾患悪化の持続時間の減少；疾患の緩解期間／症状のない期間の頻度 および持続期間の増加；治療した損傷および障害の予防；ならびに／または疾患 の慢性的な進行の予防／減弱。臨床的には、これは視覚的な症状（視力喪失、複 視）、歩行失調（衰弱、身体中心軸の不安定性、感覚喪失、痙性、反射亢進、機 敏さの喪失）、上肢機能不全（衰弱、痙性、感覚喪失）、膀胱機能不全（尿意促 進、失禁、排尿躊躇、残尿感）、うつ病、感情不安定、および認識障害の改善と なる。病理学的に、この処置は以下の症状を１つ以上減少する、例えば、ミエリ ン喪失、血液脳関門の機能停止、単核細胞の血管周辺への浸潤、免疫系の異常、 神経膠症の瘢痕の形成、および星状細胞の増殖、金属プロテアーゼの産生、伝達 速度の障害。 抗微小管剤は、上記の目的を達成するために任意の様式で投与され得る。しか し好ましい投与方法には、静脈内、経口または皮下、筋肉内、あるいは髄腔内注 射が挙げられる。抗微小管剤は、疾患の進行、疾患緩解の延長、または活性化さ れた疾患における症状の減少を予防するために長期低容量治療として投与され得 る。あるいは、治療剤は「パルス（pulse）」治療として、急性の活性化疾患の 緩解を誘導するために、高容量で投与され得る。これらの終点を達成し得る最小 用量が用いられ得、そして患者、疾患の重篤度、投与された薬剤の処方、そして 投与経路によって変化し得る。例えばパクリタキセルでは、全身長期低用量治療 は連続して10mg/m2〜50mg/m2のパクリタキセルが１から４週間毎に治療応答に依 存して投与され得る；全身高容量「パルス」治療は、50mg/m2〜250mg/m2で、１ 〜21日毎に１〜６周期で投与され得る。他の抗微小管剤は薬剤の効力および許容 度を調整された等価の用量で投与され得る。 ３．関節炎 炎症性関節炎は、特に高齢者の数の増加があげられる先進国において深刻な健 康問題である。例えば、炎症性関節炎の１つの形態である、慢性関節リウマチ（ RA）は、多システムの長期、再発性、炎症性の原因未知の疾患である。多数の 臓器が影響され得るが、RAは基本的に、ときどき影響された関節の破壊、および 硬直を引き起こす長期滑膜炎の重篤な形態である（Robbins Pathologlcal Basis of Disease,by R.S.Cotran,V.Kumar,およびS.L.Robbins,W.B.Saunders Co.,198 9）。病理学的に、本疾患は、滑膜の著しい肥厚によって特徴付けられる（これ は関節領域に拡がる絨毛突起、滑膜細胞内層の多層化（滑膜細胞増殖）、白血球 （マクロファージ、リンパ球、形質細胞、およびリンパ濾胞；「炎症性滑膜炎」 と呼ばれる）の滑膜の浸潤、ならびに滑膜内における細胞性ネクローシスを伴う フィブリンの沈着を形成する）。このプロセスの結果として形成された組織はパ ンヌスと呼ばれ、そしてパンヌスは最終的に関節領域を満たすように増殖する。 パンヌスは滑膜炎の進行に必要な血管形成のプロセスを介して新規血管の広範な ネットワークを発達させる。消化酵素(マトリクスメタロプロテイナーゼ(例えば 、コラゲナーゼ、ストロメライシン(stromelysin)))およびパンヌス組織の細胞 からの炎症プロセスの他のメディエータ（例えば、過酸化水素、活性酸素、リソ ソーム酵素、およびアラキドン酸代謝産物）の放出は、軟骨組織の進行性の破壊 を導く。パンヌスは、関節軟骨に侵入し、軟骨組織の腐食および断片化を導く。 最終的に関与した関節の線維性の強直および最終的には骨性強直を有する軟骨下 骨の腐食（erosion）がある。 一般的に、最終的に証明されてはいないが、RAは自己免疫疾患であり、そして 多数の異なる関節性刺激が、免疫遺伝学的に感受性の宿主における免疫応答を活 性化させると考えられている。外因性感染性因子（エプスタインバー(Ebstein-b arr)ウイルス、風疹ウイルス、サイトメガロウイルス、ヘルペスウイルス、ヒト T細胞白血病ウイルス、マイコプラズマなど）および内因性タンパク質（コラー ゲン、プロテオグリカン、改変型免疫グロブリン）の両方は、不適当な宿主免疫 応答を引き起こす原因物質として結びつけられている。刺激物質とは関係なく、 自己免疫は疾患の進行に役割を担っている。特に、関連抗原は、抗原提示細胞（ 滑膜中のマクロファージ、または樹状細胞）によって取り込まれ、プロセシング され、そしてTリンパ球に提示される。T細胞は、細胞性免疫応答を開始し、そし てBリンパ球のプラズマ細胞への増殖、および分化を刺激する。最終結果は、宿 主組織に対する過剰な不適切な免疫応答である（例えば、II型コラーゲンに対 する抗体、自己IgGのFc部分に対する抗体（「リウマチ因子」と呼ばれる））。 これはさらに免疫応答を増強し、そして軟骨組織の破壊を促進する。一旦、この カスケードが開始されると、軟骨細胞破壊の多数のメディエータが慢性関節リウ マチの進行の原因となる。 従って、本発明の一つの局面においては、患者に治療的有効量の抗微小管剤を 投与する工程を包含する、炎症性関節炎（例えば、慢性関節リウマチ）を処置ま たは予防する方法が提供される。炎症性関節炎には、以下を含む多様な状態が挙 げられるが、これらに限定されない。慢性関節リウマチ、全身性エリトマトーデ ス、全身性硬化（硬皮症）、混合結合組織病、シェーグレン症候群、硬直性脊椎 炎、ベーチェット病、サルコイドーシス、および変形性関節症−これらの全てが 顕著な症状として、炎症した、有痛性の関節という特徴を有する。本発明の好ま しい実施態様において、抗微小管剤は、関節内注射によって、外科用ペーストと して直接関節に投与され得るか、または別の経路（例えば、全身に、または経口 的に）で投与され得る。 適切な抗微小管剤は、上記で詳細に議論しており、例えば、タキサン（例えば 、パクリタキセルおよびドセタキセル（docetaxel））、カンフォテシン（campo thecin）、エルーテロビン（eleutherobin）、サルコジクチン（sarcodictyins ）、エポシロン（epothilones）ＡおよびＢ、ジスコデルモリド、重水（D2O）、 ヘキシレングリコール（2-メチル-2,4-ペンタンジオール）、ツベルシジン（7- デアザアデノシン）、LY290181（2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H-ナフト(1,2-b)ピ ラン-3-カルボニトリル）、フッ化アルミニウム、エチレングリコールビス-(ス クシンイミジルスクシネート)、グリシンエチルエステル、モノクローナル抗イ ディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タンパク質（タキソール様タンパク質 、TALP）、低張性（190mosmol/L）条件により誘発される細胞膨張、インスリン （100nmol/L）またはグルタミン（10mmol/L）、ダイニン結合、ジベレリン、XCH O1（キネシン様タンパク質）、リソホスファチジン酸、リチウムイオン、植物細 胞壁の構成要素（例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステンシン(extensin)）、 グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関連タンパク質 （例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン（ensconsin）、延長因 子-1-α（EF-1α）、およびE-MAP-115）、細胞体(entities)（例えば、ヒストン H1、ミエリン塩基性タンパク質および動原体）、内因性微小管構造（例えば、軸 糸構造、プラグ、およびGTPキャップ）、安定な細管のみポリペプチド（例えば 、STOP145およびSTOP220）、および有糸分裂力からの張力、ならびに上記のいず れかの任意のアナログおよび誘導体が挙げられる。このような薬剤は、特定の実 施態様において、ポリマー性キャリアとの組成物として、あるいは上記および下 記でより詳細に論じたリポソーム処方物中で送達され得る。特定の抗体に関して 、抗微小管剤は、パクリタキセル、カンフォテシン、またはエポシロン以外の薬 剤である。 炎症性関節炎のための効果的な抗微小管治療は、以下の１つ以上を達成する： （i）症状（患部関節の疼痛、膨張、および圧痛；朝のこわばり（morning stiff ness）、虚弱(weakness)、疲労、食欲不振、体重減少）の重篤度の減少；（ii） 疾患の臨床徴候（関節莢膜の肥厚、滑膜肥大、関節の浸出、軟組織の痙縮、可動 範囲の減少、強直症、および固定化関節の変形）の重篤度の減少；（iii）疾患 （リウマチ性結節、血管炎、肺結節、間質性線維症、心外膜炎、上強膜炎、虹彩 炎、Felty症候群、骨粗鬆症）の関節外症状の減少；（iv）疾患の緩解/徴候のな い期間の頻度および持続時間の増大；（v）固定化障害（fixed impairment）お よび能力障害（disability）の予防；ならびに/または（vi）疾患の慢性的進行 の予防/軽減。病理学的には、炎症性関節炎の効果的な抗微小管治療は、以下の うちの少なくとも１つを生成する：（i）炎症性応答の減少、（ii）炎症性サイ トカイン（例えば、IL-1、TNFα、FGF、VEGF）の活性の破壊、（iii）滑膜細胞 増殖の阻害、（iv）マトリックスメタロプロテイナーゼ活性の遮断、および/ま たは（v）新血管形成の阻害。抗微小管剤は、上記の結果を達成するための最小 用量で全身的に（経口的に、静脈内に、または筋肉内注射もしくは皮下注射によ って）投与される。わずか少数の患部関節を有する患者、または限定された数の 関節においてより顕著な疾患を有する患者については、抗微小管剤は、患部関節 に直接注入（関節内注射）され得る。 ４．ステントおよび移植片を含むインプラントおよび外科用または医学的デバイ ス 種々のインプラント、外科用デバイスまたはステントが、本明細書中に提供さ れる任意の抗微小管剤でコートされるか、またはそうでなければそれを含有し、 そして/または放出するように構築され得る。代表的な例には、心血管デバイス （例えば、移植可能な静脈カテーテル、静脈ポート、トンネル化静脈カテーテル 、長期注入ラインまたはポート（肝動脈注入カテーテルを含む）、ペースメーカ ーワイヤ、移植可能な細動除去器）；神経学的/神経外科的デバイス（例えば、 心室腹膜分路、心室心房分路、神経刺激デバイス、椎弓切除後硬膜外線維症を防 止するためのデュアルパッチおよびインプラント、連続的くも膜下注入のための デバイス）；胃腸デバイス（例えば、長期留置カテーテル、栄養管、門脈体静脈 分路、腹水のための分路、薬物送達のための腹膜移植物、腹膜透析カテーテル、 ヘルニアのための移植可能メッシュ、外科的接着（メッシュを含む）を防止する ための懸濁液または固体インプラント）；尿生殖器デバイス（例えば、子宮イン プラント（子宮内デバイス(IUD)および子宮内膜肥厚を予防するデバイスを含む ）、ファロピウス管インプラント（可逆性滅菌デバイスを含む）、ファロピウス 管ステント、人工括約筋、尿失禁のための尿道周囲インプラント、子宮ステント 、長期留置カテーテル、膀胱増大、または精管吻合のためのラップ（wrap）また は副子）；眼科インプラント（例えば、血管新生緑内障のためのマルチノ（mult ino）インプラントおよび他のインプラント、翼状片のための薬物溶出コンタク トレンズ、失敗した涙嚢鼻腔吻合術のための副子、角膜新血管形成のための薬物 溶出コンタクトレンズ、糖尿病性網膜症のためのインプラント、高リスク角膜移 植のための薬物溶出コンタクトレンズ）；耳鼻咽喉科デバイス（例えば、耳小骨 インプラント、トランステンパニック（transtempanic）排出の代わりとしての 膠状耳もしくは慢性耳炎のためのEusrachian管副子もしくはステント）；形成外 科インプラント（例えば、胸下もしくは腺下アプローチもしくは乳房切除術後に おけるゲルまたは生理食塩水含有乳房インプラント、または顎インプラントに応 答する繊維質の痙縮の予防）、ならびに整形外科インプラント（例えば、セメン ト化整形外科プロステーシス）が含まれる。 適切な抗微小管剤は、上記に詳細に議論され、そして例えば、タキサン(例え ば、パクリタキセルおよびドセタキセル(docetaxel))、カンポテシン(campothec in)、エレウテロビン(eleutherobin)、サルコジクチン(sarcodictyin)、エポチ ロン（epothilone）ＡおよびＢ、ディスコデルモリド(discodermolide)、重水（ D2O）、ヘキシレングリコール(2-メチル-2,4-ペンタンジオール)、ツベルシジン (tubercidin)（7-デアザアデノシン）、LY290181(2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H- ナフト(1,2,-b)ピラン-3-カルドニトリル)、フッ化アルミニウム、エチレングリ コールビス-(スクシンイミジルスクシネート)、グリシンエチルエステル、モノ クローナル抗イディオタイプ抗体、微小管凝集促進タンパク質（タキソール様タ ンパク質、TALP）、低張（190mosmol/L）条件によって誘導される細胞膨張、イ ンスリン（100nmol/L）、またはグルタミン（10mmol/L）、ダイニン結合、ジベ レリン、XCHO1（キネシン様タンパク質）、リゾホスファチジン酸、リチウムイ オン、植物細胞壁成分（例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステンシン(extensin )、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関連タンパ ク質（例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン、延長因子１α(EF- 1α)、およびE-MAP-115)、細胞体（例えば、ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパ ク質、および動原体）、内因性微小管構造（例えば、軸糸構造、プラグ、および GTPキャップ）、安定な細管のみポリペプチド（例えば、STOP145およびSTOP220 ）、および有糸分裂応力からの張力、ならびに上記の任意のもののアナログおよ び誘導体。このような因子は、特定の実施態様において、上記および以下での両 方でより詳細に記載されるように、組成物として、ポリマー性キャリアとともに 、またはリポソーム処方物中で送達され得る。特定の実施態様（例えば、ステン トの場合）において、抗微小管剤は、パクリタキセル、カンポテシン、またはエ ポチロン以外の薬剤である。 インプラントおよび他の外科的または医学的デバイスは、本発明の抗微小管組 成物または抗微小管剤で、例えば、以下を含む種々の様式：（a）インプラント またはデバイスに、抗微小管剤または組成物を、（例えば、インプラントまたは デバイスをポリマー/薬物フィルムでスプレーすることにより、またはポリマー/ 薬物溶液中にインプラントもしくはデバイスを浸けることにより、または他の共 有結合もしくは非共有結合手段によりのいずれかで）直接固定することによっ て；（b）インプラントもしくはデバイスを基質（例えば、抗微小管組成物（ま たは上記の抗微小管剤）を吸着するヒドロゲル）で被覆することによって；（c ）抗微小管組成物で被覆した縫合糸（または、縫合糸へと成形されたポリマー自 体）をインプラントもしくはデバイスに織り合わせることによって；（d）イン プラントもしくはデバイスを抗微小管組成物から構成されるかもしくは被覆され たスリーブまたはメッシュに挿入することによって；（e）インプラントもしく はデバイス自体を抗微小管剤もしくは組成物で構築することによって；または（ f）そうでなければインプラントもしくはデバイスが抗微小管剤を放出するよう に適合させることによって、被覆され得る。本発明の好ましい実施態様において 、組成物は保存の間および挿入の時点で、インプラントまたはデバイスにしっか りと接着しているべきである。抗微小管剤または組成物はまた、好ましくは、保 存の間、挿入の前、または（必要な場合）体内に挿入された後に体温まで温めら れた場合に、分解すべきではない。さらに、好ましくは、インプラントもしくは デバイスを、抗微小管剤を均一に分布して、一方でステントの輪郭を変化させな いで、滑らかかつ均等に被覆すべきである。本発明の好ましい実施態様において 、抗微小管剤または組成物は、一旦それが配置されたならば、抗微小管剤の、イ ンプラントまたはデバイスの周りの組織への均一な、予測可能な、延長した放出 を提供すべきである。血管ステントについて、上記の特性に加えて、組成物は、 ステントを血栓形成性にする（血液凝固が形成されるようにする）べきではなく 、または血流において（ステント自体が被覆されていない場合に引き起こすと予 想されるよりも）有意な乱流を生じるべきではない。 ステントの場合には、広範な種々のステントが、以下を含む本明細書中に提供 される抗微小管剤：食道ステント、胃腸管ステント、血管ステント、胆管ステン ト、結腸ステント、膵臓ステント、尿管および尿道ステント、流涙ステント、Eu stachian管ステント、ファロピウス管ステント、ならびに気管/気管支ステント を含有および/または放出するように開発され得る。ステントは、市販の供給源 から容易に得られるか、または周知の技術に従って構築され得る。ステントの代 表的な例には、「Hydrogel Adhesive」と題された米国特許第4,768,523号；「Ex pandable Intraluminal Graft，and Method and Apparatus for Implanting and Expandable Intraluminal Graft」と題された米国特許第4,776,337号；「Endova scular Stent and Delivery System」と題された米国特許第5,041,126号；「Ind welling Stent and Method of Use」と題された米国特許第5,052,998号；「Self -Expanding Prosthesis Having Stable Axial Length」と題された米国特許第5, 064,435号；「Water-insoluble Polysaccharide Hydrogel Foam for Medical Ap plications」と題された米国特許第5,089,606号；「Nitinol Stent for Hollow Body Conduits」と題された米国特許第5,147,370号；「Indwelling Stent」と題 された米国特許第5,176,626号；「Biodegradable Polymeric Endoluminal Seali ng Process」と題された米国特許第5,213,580号；および「Method and Apparatu s for Treatment of Focal Disease in Hollow Tubular Organs and Other Tiss ue Lumens」と題された米国特許第5,328,471号に記載されるものが含まれる。 本発明の他の局面において、身体通路の管腔を拡張するための方法であって、 上記通路を拡張するように上記通路にステントを挿入する工程を包含し、ここで 上記ステントが一般に管状構造を有し、上記構造の表面が、抗微小管組成物（ま たは、抗微小管剤単独）で被覆（またはそうでなければ放出するように適合され ）ている、方法が提供される。種々の実施態様が以下に記載され、ここで身体通 路の管腔は、胆管の、胃腸管の、食道の、気管/気管支の、尿道の、または血管 の障害を排除するために拡張されている。 一般に、ステントは、処置される部位または疾患に関わらず、類似の様式で挿 入される。簡単には、予挿入検査、通常は診断画像化手順、内視鏡検査、または 手術の時点での直接的可視化が、ステント挿入の適切な位置を決定するために一 般にまず行われる。次いで、ガイドワイヤが、病変または挿入の予定の位置に先 行され、そしてこれを通じて、ステントがその潰れた形態で挿入されることを可 能にする送達カテーテルが通される。代表的には、ステントは、それらが小さな 腔を通して小さなカテーテルによって挿入され、次いで一旦それらが所望の位置 に到達したら、より大きい直径に拡張し得るように、圧縮され得る。一旦拡張さ れると、ステントは物理的には通路の壁を押し広げ、そしてそれを開けたままに 保持する。このようにして、それらは小さな開口を介して挿入し得、そしてなお 大きな直径の腔または通路を開けたままにすることができる。ステントは、自己 拡張的（例えば、WallstentおよびGianturcoステント）、バルーン拡張性（例え ば、PalmazステントおよびStreckerステント）であり得、または温度変化によっ て移植され得る（例えば、Nitinolステント）。 ステントは、代表的には、ステントを正確に処置されるべき器官の近くに配置 するように特に注意しながら、放射線学的制御または直接可視の制御の下で操作 されて配置される。次いで、送達カテーテルは除去され、足場としてステントを それ自体で静置しているようにする。挿入後の検査（通常はＸ線）が、しばしば 適切に位置されたことを確認するために使用される。 本発明の好ましい実施態様において、胆管の障害を排除するための方法であっ て、胆管ステントを胆管通路に挿入する工程を包含する方法が提供される。ここ で、上記ステントは、一般に管状構造を有し、上記構造の表面は、胆管の障害が 排除されるように、上記の薬剤または組成物で被覆（またはそうでなければ上記 の薬剤または組成物を放出されるように適合）されている。簡単には、一般的な 胆管の腫瘍の過増殖は、生命とは適合し得ない進行性の胆汁鬱滞性の黄疸を生じ る。一般には、肝臓から十二指腸へ胆汁を排出する胆管システムは、（１）胆管 細胞（胆管癌）から構成される腫瘍、（２）胆管を侵襲する腫瘍（例えば、膵癌 ）、または（３）外因的な圧力を発揮し、そして胆管を圧縮する腫瘍（拡張した リンパ節）によって最もしばしば妨害される。 原発性胆管腫瘍、および胆管樹(biliary tree)の圧迫を引き起こす他の腫瘍は 共に、本明細書において記載されるステントを利用して処置され得る。原発性胆 管腫瘍の１つの例は、腺ガン(これは、総肝管の分岐に見出される場合、Klatski n腫瘍とも呼ばれる)である。これらの腫瘍はまた、胆管ガン、総胆管肝管ガン(c holedocholangiocarcinomas)、または胆管系の腺ガンとも呼ばれる。胆管に影響 を及ぼす良性腫瘍(例えば、胆管系の腺腫)、ならびに希な症例において胆管の扁 平上皮ガンおよび胆嚢の腺ガンもまた、胆管樹の圧迫を引き起こし得、したがっ て胆管閉塞を生じる。 胆管樹の圧迫は、最も一般的には、胆管を圧縮し、したがってこれを閉塞する 、肝臓および膵臓の腫瘍に起因する。膵臓由来の腫瘍のほとんどが、膵管の細胞 から生じる。これは、高度に致命的な形態のガン(すべてのガンによる死亡の ５％；米国において、１年あたり26,000の新たな症例)であり、平均生存期間は ６ヶ月であり、１年後の生存率はわずかに10％である。これらの腫瘍が、膵頭に 位置する場合、これらは頻繁に胆管閉塞を引き起こし、そしてこれは、患者のク オリティーオブライフを著しく損なう。すべてのタイプの膵臓腫瘍が、一般に、「 膵臓ガン」と呼ばれるが、腺ガン、腺扁平上皮ガン、嚢胞腺ガン、および腺房細 胞ガンを含む組織学的なサブタイプが存在する。上記のような肝臓腫瘍もまた、 胆管樹の圧迫を引き起こし、したがって胆管の閉塞を引き起こし得る。 本発明の１つの実施態様において、いくつかの方法のうちの１つで、胆ステン トは胆の小路にまず挿入される。いくつかの方法とは、すなわち、注射針を腹壁 および肝臓を通して挿入することによって上端から(経皮経肝胆管造影または「PT C」)；口、胃および十二指腸を通じて挿入した内視鏡を介して胆管にカニューレ ーションすることによって下端から(内視鏡的逆行性胆道造影または「ERCP」)；ま たは外科的手順の間の直接切開によるものである。予備挿入検査、PTC、ERCP、 または手術時の直接視覚化は、一般に、ステント挿入に適切な位置を決定するた めに実施されるべきである。次いで、ガイドワイアは、病変を通じて進められ、 そしてステントがしぼんだ形態で挿入され得るように、これを越えて送達カテー テルを通す。診断検査がPTCである場合、ガイドワイアおよび送達カテーテルは 、腹壁を介して挿入される。他方、元の検査がERCPである場合、ステントは口を 介して配置され得る。次いで、ステントは、それが胆管中で狭窄部を横切って正 確に配置されるように特別の注意を払って放射線学的、内視鏡的、または直接視 覚的制御下で配置される。次いで、送達カテーテルは、ステントを、胆管開口を 維持する足場としての状態にしたままで、取り出される。ステントが適切な位置 にあることを実証するために、さらなる胆管造影が実施され得る。 本発明のなお別の実施態様において、食道閉塞を排除するための方法が提供さ れ、この方法は、食道閉塞が排除されるように、食道ステントを食道に挿入する 工程を包含し、このステントはほぼ管状構造を有し、この構造の表面は、抗微小 管剤または上記の組成物でコーティングされている(または、そうでなければ、 これを放出するように適合されている)。簡潔には、食道は、食物および液体を 口から胃まで輸送する中空の管である。食道ガンまたは隣接する器官に生じたガ ン(例えば、胃ガンまたは肺ガン)による侵襲は、食物も唾液も嚥下を不可能にす る。この実施態様において、予備挿入検査(通常はバリウム嚥下または内視鏡観 察)は、一般に、ステント挿入に適切な位置を決定するために、実施されるべき である。次いで、カテーテルまたは内視鏡は、口を通して配置され得、そしてガ イドワイアが障害を通って進められる。ステント送達カテーテルは、放射線学的 または内視鏡的制御下で、ガイドワイア上を通過させられ、そしてステントは、 食道中の狭窄部を横切って正確に配置される。挿入後検査(通常、バリウム嚥下 、Ｘ線)が、適切な位置を確認するために利用され得る。 本発明の他の実施態様において、結腸閉塞を排除するための方法が提供され、 この方法は、結腸閉塞が排除されるように、結腸ステントを結腸に挿入する工程 を包含し、このステントがほぼ管状の構造を有し、この構造の表面は、抗微小管 剤または上記の組成物でコーティングされている(または、そうでなければ、こ れを放出するように適合されている)。簡潔には、結腸は、消化された食物およ び排泄物を、小腸から肛門まで輸送する中空の管である。直腸および/または結 腸ガン、または隣接する器官に生じたガン(例えば、子宮、卵巣、膀胱ガン)によ る侵襲は、腸からの便の排泄を不可能にする。本発明の実施態様において、予備 挿入検査(通常、バリウム浣腸または結腸内視鏡検査)は、一般に、ステント挿入 に適切な位置を決定するために、実施されるべきである。次いで、カテーテルま たは内視鏡は肛門を通じて配置され、そしてガイドワイアは、障害を通って進め られる。ステント送達カテーテルは、放射線学的または内視鏡的制御下でガイド ワイア上を通過させられ、そしてステントは、結腸または直腸の狭窄部を横切っ て正確に配置される。挿入後検査(通常、バリウム浣腸、Ｘ線)が、適切な位置を 確認するために利用され得る。 本発明の他の実施態様において、気管/気管支閉塞を排除するための方法が提 供され、この方法は、気管/気管支閉塞が排除されるように、気管/気管支ステン トを気管または気管支に挿入する工程を包含し、このステントがほぼ管状の構造 を有し、この構造の表面は、抗微小管剤または上記の組成物でコーティングされ ている(または、そうでなければ、これを放出するように適合されている)。簡潔 には、気管および気管支は、空気を口および鼻から肺まで運ぶ管である。ガンに よる気管の妨害、隣接する器官に生じたガン(例えば、肺ガン)による侵襲、また は軟骨軟化(軟骨環の弱体化)に起因する気管もしくは気管支の虚脱は、呼吸を不 可能にする。本発明の実施態様において、予備挿入検査(通常は内視鏡検査)は、 一般に、ステント挿入に適切な位置を決定するために、実施されるべきである。 次いで、カテーテルまたは内視鏡は、口を通じて配置され、そしてガイドワイア が障害を通って進められる。次いで、送達カテーテルは、しぼんだステントの挿 入が可能になるように、ガイドワイア上を通過させられる。ステントは、それが 狭窄部を横切って正確に配置されるように、放射線学的または内視鏡的制御下で 配置される。次いで、送達カテーテルが、ステントを、それ自体の上に足場とし て残して取り出され得る。挿入後検査(通常は、気管支鏡検査)が、適切な位置を 確認するために利用され得る。 本発明の別の実施態様において、尿道閉塞を排除するための方法が提供され、 この方法は、尿道閉塞が排除されるように、尿道ステントを尿道に挿入する工程 を包含し、このステントがほぼ管状の構造を有し、この構造の表面は、抗微小管 剤または上記の組成物でコーティングされている(または、そうでなければ、こ れを放出するように適合されている)。簡潔には、尿道は、膀胱から陰茎を通じ て排水する管である。尿道は前立腺を通過するので前立腺肥大に起因する尿道の 外因性狭窄は、60歳を越えた実質的にすべての男性に生じ、徐々に排尿困難を引 き起こす。本実施態様において、予備挿入検査(通常は内視鏡検査または尿道写 真)は、一般に、ステント挿入に適切な位置を決定するために、まず実施される べきである。適切な位置は、下端が外尿道括約筋の上部、そして上端が膀胱頸と 同一平面近傍である。次いで、内視鏡またはカテーテルは、陰茎開口部を通じて 配置され、そしてガイドワイアが膀胱中に進められる。次いで、送達カテーテル は、ステント挿入を可能とするように、ガイドワイア上を通過させられる。次い で、送達カテーテルが取り出され、ステントが適所で展開される。挿入後検査( 通常は、内視鏡検査または逆行性尿道写真)が、適切な位置を確認するために利 用され得る。 本発明の別の実施態様において、血管閉塞を排除するための方法が提供され、 この方法は、血管閉塞が排除されるように、血管ステントを血管に挿入する工程 を包含し、このステントがほぼ管状の構造を有し、この構造の表面は、抗微小管 剤または上記の組成物でコーティングされている(または、そうでなければ、こ れを放出するように適合されている)。簡潔には、ステントは、血管形成に失敗 した部位で再発性狭窄（本物）を防止するため、血管形成術で処置した場合に失 敗する可能性がある狭窄を処置するため、および手術後の狭窄(例えば、透析移 植片狭窄（本物）)を処置するために、種々の配列の血管(動脈および静脈の両方 )に配置され得る。適切な部位の代表例には、腸骨、腎、および冠状動脈、上大 静脈、および透析移植片が挙げられる。１つの実施態様において、ステントの配 置部位を位置決めするために、血管形成術がまず実施される。これは、代表的に は、Ｘ線が採用されるので、放射線不透過性造影剤を、動脈または静脈中に挿入 されたカテーテルを通じて注射することによって達成される。次いで、カテーテ ルは、経皮的または外科的のいずれかで、大腿動脈、上腕動脈、大腿静脈、もし くは上腕静脈に挿入され得、そしてＸ線透視ガイダンスの下で、カテーテルを血 管系を通じて操縦することによって適切な血管中に進められ得る。次いで、ステ ントは血管狭窄を横切って配置され得る。挿入後血管造影図はまた、適切な位置 を確認するために利用され得る。 狭窄の研究に通常使用される動物モデルは、ラット頸動脈モデルである。ここ で、総頸動脈は、外頸動脈を通じて導入したバルーンカテーテルの内腔通過によ って内皮を剥離される(Clowesら、Lab．Invest．49(2)208-215，1983)。２週間 で、頸動脈は、平滑筋細胞収縮に起因して顕著に狭くなっているが、２〜12週間 の間に、中膜は厚さが２倍になり、管腔サイズの減少を導く。 ５．炎症性腸疾患 本明細書において提供される薬剤、組成物および方法を利用して、腸の広範な 種々の炎症性疾患が処置または予防され得る。炎症性腸疾患は、胃腸管が関与す る未知の病因の慢性炎症性障害群に対する一般的な用語である。慢性IBDは２群( 潰瘍性結腸炎およびクローン病)に分割される。西ヨーロッパおよび米国におい て、潰瘍性結腸炎は、100,000人あたり６〜８症例の発生率を有する。 この疾患の原因は未知のままであるが、遺伝的要因、感染要因、免疫学的要因 および心理学的要因がすべて、原因として提案されている。潰瘍性結腸炎におい て、表面の潰瘍化を導く、結腸粘膜が関与する炎症性反応が存在する。好中球浸 潤が共通し、そして繰り返される炎症性エピソードが結腸の線維症および短縮を 導く。長年の潰瘍性結腸炎により、表面の上皮が異形成になり得、そして結局は 悪性となり得る。クローン病は、すべての層の腸壁を通じて広がる慢性的な炎症 によって特徴付けられる。疾患が進行すると、腸は肥厚し、管腔の狭窄が生じる 。粘膜の潰瘍化が生じ、そして潰瘍が粘膜下組織および筋層に浸透し、フィステ ルおよび裂溝を形成し得る。 抗微小管剤は、いくらかの様式で炎症性腸疾患を処置するために使用され得る 。詳細には、抗微小管剤は、疾患を処置するために、炎症部位(または炎症の可 能性のある部位)に投与され得る。適切な抗微小管剤は上記で詳細に議論されて おり、これには、例えば、タキサン(taxane)(例えば、パクリタキセルおよびド セタキセル)、カンポセシン(campothecin)、エレウセロビン(eleutherobin)、サ ルコジクチイン(sarcodictyin)、エポチロン(epothilone)ＡおよびＢ、ジスコデ ルモリド(discodermolide)、重水(D2O)、ヘキシレングリコール(2-メチル-2,4- ペンタンジオール)、ツベルシジン(tubercidin)(7-デアザアデノシン)、LY29018 1(2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H-ナフソ(1,2-b)ピラン-3-カルドニトリル)、フッ 化アルミニウム、エチレングリコールビス-(スクシンイミジルスクシネート)、 グリシンエチルエステル、モノクローナル抗イディオタイプ抗体、微小管組立促 進タンパク質(タキソール様タンパク質、TALP)、低張(190オスモル/L)条件、イ ンスリン(100nmol/L)またはグルタミン(10mmol/L)によって誘導される細胞腫脹 、ダイニン結合、ジベレリン、XCHO1(キネシン様タンパク質)、リゾホスファチ ド酸、リチウムイオン、植物細胞壁成分(例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステ ンシン(extensin))、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、 微小管結合タンパク質(例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン(en sconsin)、延長因子-1-α(EF-1α)およびE-MAP-115)、細胞性実体(例えば、ヒス トンH1、ミエリン塩基性タンパク質および動原体)、内因性微小管構造(例えば、 アクソネーム構造、plug、およびGTPキャップ)、stable tubule only polypepti de(例えば、STOP145およびSTOP220)および有糸分裂力由来の緊張、ならびに上記 の いずれかのアナログおよび誘導体が含まれる。特定の実施態様内で、このような 因子は、ポリマー性キャリアとともに、または上記および下記の両方でより詳細 に議論されるリポソーム処方物において、組成物として送達され得る。 IBDの研究のための理想的なモデルは、ヒト疾患と実質的に同一である、天然 に生じるかまたは誘導可能な動物疾患であるべきである。現在、わずかに２つの 天然に生じる、腸炎症のモデル(共に霊長類種)が存在する。そこでは、原因微生 物は見出されていない。第１は、cotton-topタマリンは、同定可能な病原体と関 連しない、自発的結腸炎の高い有病率を有し、そしてヒトにおいてと同様に、疾 患プロセスの活性が自発的に大きくなったり小さくなったりする(Madaraら、Gas troenterology、88:13-19，1985)。別の自発的慢性結腸炎もまた、幼若アカゲサ ル(rhesus macaque)において生じる(Adlerら、Gastroenterology，98:A436，199 0)。多くの実験的に誘導される結腸動物モデルがある。マウス、ラット、モルモ ット、およびウサギにおいて、結腸炎は、硫酸処理した多糖(カラゲナンアミロ ペクチンスルフェート、硫酸デキストラン)の経口投与(MarcusおよびWatt、Lanc et 2:489-490，1969)、化学刺激物(希釈酢酸)の直腸注射(MacPhersonおよびPfei ffer、Digestion 17:135-150，1978)、およびジニトロクロロベンゼン(Glickお よびFalchuk、Gut 22:120-125，1981)もしくはトリニトロベンゼンスルホン酸(R abinおよびRogers、Gastroenterology 75:29-33，1978)に対する遅延過敏反応に より誘導され得る。 IBDについてpathogenomicな特徴も特異的な診断試験もないので、この疾患の 管理における抗微小管剤の有効性は臨床的に決定される。IBDに対する効果的な 抗微小管治療は、以下のうちの少なくとも１つで達成される：発作の頻度の減少 、寛解期で過ごした時間量(すなわち、患者に症状が見られない期間)の増大、お よび/または関連する症状発現(膿瘍形成、フィステル形成、結腸ガン、腸穿孔、 腸閉塞、中毒性巨大結腸、末梢関節炎、強直性脊椎炎、胆石症、硬化性胆管炎、 肝硬変、結節性紅斑、虹彩炎、ブドウ膜炎、上強膜炎、静脈血栓症)の重篤度ま たは持続時間の減少。具体的には、血液混じりの下痢、腹痛、発熱、体重減少、 直腸出血、テネスムス、および腹部膨満のような症状が減少するか軽減される。 抗微小管剤は、上記の終点を達成するために任意の様式で投与され得るが、好 ましい方法は、経口、直腸、または管周投与(好ましくは、超音波、CT、Ｘ線透 視、MRI、または内視鏡のガイダンスで；こらはまた、腹部手術と同時に直接投 与により達成され得る)を包含する。いくらかの患者において、因子の静脈内、 皮下、または筋肉内注射もまた、疾患を処置するために使用され得る。広範囲に 及ぶかまたは腸外の症状を有する患者において、全身処置(例えば、経口、静脈 内、皮下、筋肉内注射)が適切である。好ましい実施態様において、パクリタキ セルは、治療応答および患者の耐性に依存して、１〜４週間毎に、10〜75mg/m2 の用量で、経口的に投与され得る。重篤な急性再燃を処置するために、経口的( または静脈内)に与えられる、より高用量の50〜250mg/m2のパクリタキセルが、「 パルス」治療として投与され得る。限局された直腸疾患(潰瘍性結腸炎患者の95％ において直腸が関与)を有する患者において、局所的パクリタキセルは、直腸ク リームまたは坐薬として投与され得る。例えば、0.01重量％〜10重量％パクリタ キセルを含有する局所クリームが、疾患の重篤度および患者の治療応答に依存し て投与され得る。好ましい実施態様において、0.1重量％〜１重量％のパクリタ キセルを含む局所的調製物が、必要に応じて、毎日直腸に投与され得る。周管パ クリタキセル(すなわち、腸の外部表面または腸間膜表面への薬物の投与)が活性 な疾患を有する腸の領域に投与され得る。好ましい実施態様において、0.5重量 ％〜20重量％のパクリタキセルが、(実施例に記載のように)ポリマー性キャリア 中に充填され、そして所定の期間にわたって薬物を放出する「ペースト」、「フィ ルム」、または「ラップ」として腸管膜表面に適用される。すべての実施態様にお いて、他の抗微小管剤は、この薬剤の効力および耐性能について調整した等価用 量で投与される。 ６．外科的手順 上記のように、抗微小管剤および組成物は、広範な種々の外科的手順において 利用され得る。例えば、本発明の１つの局面において、(例えば、スプレーまた はフィルムの形態の)抗微小管剤または組成物は、正常な周囲組織を悪性組織か ら隔離するため、および/または周囲組織への疾患の拡大を予防するために、腫 瘍の除去の前に、所定の領域にコーティングするかまたはスプレーするために利 用され得る。本発明の他の局面において、(例えば、スプレー形態の)抗微小管剤 または組成物は、腫瘍をコーティングするため、または所望の場所で疾患を阻害 するために、内視鏡的手順を介して送達され得る。本発明のなお別の局面におい て、本発明の抗微小管剤または組成物でコーティングされているかまたはこれら を放出するように適合されている外科用メッシュは、外科用メッシュが利用され 得る任意の手順において利用され得る。例えば、本発明の１つの実施態様におい て、抗微小管組成物を負荷された外科用メッシュは、腹部ガン切除手術(例えば 、結腸切除に続く)の間に、その構造に対して支持を提供するため、および所定 量の抗微小管剤を放出するために利用され得る。 本発明のさらなる局面において、腫瘍切除部位を処置するための方法が提供さ れ、この方法は、その部位でのガンの局所的再発が阻害されるように、切除に続 いて、抗微小管剤または上記のような組成物を、腫瘍の切除縁に投与する工程を 包含する。本発明の１つの実施態様において、抗微小管組成物(または抗微小管 剤単独)は、腫瘍切除部位に直接投与される(例えば、抗微小管組成物または薬剤 を、腫瘍の切除縁に綿棒で塗布するか、ブラシで塗布するか、またはそうでなけ ればコーティングすることによって適用される)。あるいは、抗微小管組成物ま たは薬剤は、投与前に公知の外科用ペースト中に組み込まれ得る。本発明の特に 好ましい実施態様においては、抗微小管組成物は、悪性疾患に対する部分的な乳 房切除術後、および神経外科手術の後に適用される。 本発明の１つの局面では、抗微小管剤または組成物（上記に記載のような）を 、広範な種々の腫瘍（例えば、乳房腫瘍、頭部腫瘍および頸部腫瘍、結腸腫瘍、 脳腫瘍および肝腫瘍を含む）の摘出縁に投与し得る。例えば、本発明の１つの実 施態様では、抗微小管剤または組成物を、腫瘍の再発を阻害するように、切除に 引き続いて神経性腫瘍の部位に投与し得る。簡潔には、脳は高度に機能的に配置 されており；すなわち、特定の解剖学的領域の各々は、特定の機能を実施するよ うに特殊化されている。それゆえ、脳症状の型よりもしばしば重要であるのは脳 症状の部位である。重要な領域での比較的小さな病変は、あまり重要ではない領 域でのかなり大きな病変よりも、はるかに打撃的であり得る。同様に、脳表面の 病変は、外科的に切除することは容易であり得るが、同じ腫瘍でも脳の深部に位 置 するものは、容易には切除し得ない（そこに到達するためには、あまりにも多く の生命維持に必要な構造を切開しなければならない）。あるいは、良性腫瘍でさ えも、いくつかの理由に関しては危険であり得る：それは、重要な領域で増殖し 、重大な損傷を引き起こし得る；たとえそれらを外科的切除により治療しても、 これは可能ではあり得ない；そして最終的には、検査をしていないものが残って いる場合は、頭蓋内圧の上昇を引き起こし得る。頭蓋は、拡張し得ない密閉空間 である。それゆえ、ある位置で何かが増殖すると、何か他のものが別の位置に圧 迫されなければならない。その結果、頭蓋における圧力が上昇するか、または頭 蓋内圧力が上昇する。このような状況は、未処置のまま放置されると、生命維持 に必要な構造が圧迫され得、結果として死に終わる。中枢神経系(CNS)悪性腫瘍 の発生率は、100,000例につき８〜16例である。原発性悪性脳腫瘍の予後は、陰 鬱なものである。外科的切除後でさえも、平均生存率は、１年未満である。これ らの腫瘍、特に神経膠腫は、主に、外科的摘出後の疾患の本来の病巣の２cm以内 に再発する局所的疾患である。 本明細書中に記載の薬剤、組成物、および方法を利用して治療し得る脳腫瘍の 代表的な例には、以下が挙げられる：膠細胞腫瘍（例えば、未分化星状細胞腫、 多形の神経膠芽腫、極細胞性(pilocytic)星状細胞腫、乏突起細胞腫、上衣細胞 腫、粘液乳頭型脳室上衣細胞腫、上衣下細胞腫（subependymoma）、脈絡叢乳頭 腫）；神経腫瘍（例えば、神経芽細胞腫、神経節芽細胞腫、神経節細胞腫、およ び髄芽腫）；松果体腫瘍（例えば、松果体芽細胞腫およびピネオサイトーマ）； 髄膜腫瘍（例えば、髄膜腫、髄膜性血管外皮細胞腫、髄膜肉腫）；神経鞘細胞の 腫瘍（例えば、シュワン細胞腫（神経線維鞘腫(neurolemolna））および神経線 維腫）；リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫および非ホジキンリンパ腫（多数 のサブタイプ、原発性および続発性の両方を含む）；先天異常性（malformative )腫瘍（例えば、頭蓋咽頭腫、類表皮嚢胞、類皮嚢胞、および膠質嚢胞）；なら びに転移性腫瘍（これは、実質的に任意の腫瘍に由来し得、最も一般的には、肺 腫瘍、乳房腫瘍、黒色腫、腎腫瘍、および胃腸管肺瘍に由来する）） 適切な抗微小管剤は、上記で詳細に議論されており、そして例えば、タキサン （例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル（docetaxel））、カンポテリン 、 エルーテロビン(erutherobin)、サルコジクチイン(sarcodictyins)、エポチロン (epothilone)ＡおよびＢ、ジスコデルモリド、重水(D2O)、ヘキシレングリコー ル(2-メチル-2,4-ペンタンジオール)、ツベルシジン（7-デアザアデノシン）、L Y290181(2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H-ナフト(1,2-b)ピラン-3-カルドニトリル 、フッ化アルミニウム、エチレングリコールビス-(スクシニルイミジルスクシネ ート)、グリシンエチルエステル、モノクローナル抗イデオタイプ抗体、微小管 アセンブリ促進タンパク質（タキソール様タンパク質、TALP）、低張(190mosmol /L)状態により誘導された細胞膨張、インスリン(100nmol/L)またはグルタミン(1 0mmol/L)、ダイニン結合、ジベレリン、XCHO1(キネシン様タンパク質)、リソホ スファチジン酸、リチウムイオン、植物細胞壁成分(例えば、ポリＬリジンおよ びエクステンシン)、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、 微小管関連タンパク質(例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン、 延長薬剤-1-α(EF-1α)およびE-MAP-115)、細胞体（例えば、ヒストンH1、ミエ リン塩基性タンパク質、および動原体）、内因性微小管構造（例えば、軸糸構造 、プラグ、およびGTPキャップ）、ポリペプチドのみの安定な管(stable tubule only polypeptide)(例えば、STOP145およびSTOP220)および有糸分裂力の張力、 ならびに上記の任意のアナログおよび誘導体)が挙げられる。このような薬剤は 、特定の実施態様において、ポリマー性キャリアとともに、または上記および下 記でより詳細に議論されるリポソーム処方物中の組成物として送達され得る。特 定の実施態様では、抗微小管剤は、パクリタキセル、カンポテシン、またはエポ チロン以外の薬剤である。 ７．外科的癒着 本発明の別の局面では、抗微小管剤を患者に投与することにより、外科的癒着 を処置および/または予防するための方法が提供される。簡潔には、外科的癒着 形成は、通常は別々である体組織がともに増殖する複雑なプロセスである。これ らの手術後癒着は、主要な婦人科的手術を受ける患者の60％から90％に生じる。 組織乾燥、虚血、熱性障害、感染または異物の存在の結果として、外科的外傷は 、組織癒着形成のための刺激として長い間認識されてきた。これらの癒着は、失 敗 した外科的治療の主要な原因である。そして、腸閉塞および不妊の主要な原因で ある。他の癒着を処置された合併症には、慢性骨盤痛、尿道閉塞、および排尿機 能障害が挙げられる。 一般的に、癒着形成は、脈管透過性の上昇、およびフィブリノーゲン流入およ びフィブリン堆積を生じるような因子が放出される炎症性反応である。この堆積 は、隣接の組織を架橋するマトリクスを形成する。線維芽細胞は蓄積して、マト リクスに付着し、コラーゲンを沈着し、そして血管新生を誘導する。この事象の カスケードが、外科手術後４〜５日以内に予防され得る場合、次いで、癒着形成 が阻害される。 従って、上記のように、本発明は、外科的癒着を処置および/または予防する ための方法を提供する。広範の種々の動物モデルが、特定の治療的組成物または 処置措置を評価するために利用され得る。簡潔には、腹膜癒着は、通常は２つの 隣接する表面を含む重篤な損傷を与えられた結果として動物に生じる。虚血に起 因するか、または異物の導入の結果としての傷害は、機械的なものであり得る。 機械的な傷害は、腸の粉砕（Choateら、Arch．Surg．88:249〜254,1964）および 腸壁の外層から剥がすか、または削り落とすこと(Gustavssonら、Acta．Chir．S cand．109:327〜333，1995)を含む。腸のループに主要な脈管を分割すると、虚 血を誘導する（Jamesら、J．Path．Bact.90:279〜287，1965）。領域に導入され 得る異物には、タルカム（Grcenら、Proc．Soc．Exp．Biol．Med．133:544〜550 、1970）、ガーゼスポンジ(LehmanおよびBoys、Ann．Surg 111:427〜435，1940) 、毒性化学物資（Chancy，Arch．Surg．60:1151〜1153,1950）、バクテリア（Mo inら、Am．J．Med．Sci．250:675〜679，1965）、および糞便（Jackson，Surger y 44.507〜518，1958）が挙げられる。 現在では、代表的な癒着予防モデルは、ウサギ子宮(Linskyら、J．Reprod．Me d．32(1):17〜20,1987)、ウサギ子宮角の剥離を含むウサギ子宮角モデル、子宮 の剥離および非血管形成（decascularizaition）（Wisemanら、J．Invest．Surg ．7:527〜532,1994）を含む非血管形成改変モデル、ならびに腹膜頂部のパッチ の切除および盲腸の剥離を含むウサギ盲腸側壁モデル（Wisemen and Johns，Fer til．Steril．増補:25S，1993）を含む。 癒着を処置するための代表的な抗微小管剤は、上記で詳細に議論されており、 タキサン（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル（docetaxel））、カン フォテシン（campothecin）、エルーテロビン（eleutherobin）、サルコジクチ ン（sarcodictyins）、エポシロン（epothilones）ＡおよびＢ、ジスコデルモリ ド、重水（D2O）、ヘキシレングリコール（2-メチル-2,4-ペンタンジオール）、 ツベルシジン（7-デアザアデノシン）、LY290181(2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H- ナフト(1,2-b)ピラン-3-カルボニトリル)、フッ化アルミニウム、エチレングリ コールビス-(スクシンイミジルスクシネート)、グリシンエチルエステル、モノ クローナル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タンパク質（タキソー ル様タンパク質、TALP）、低張性（190mosmol/L）条件により誘発される細胞膨 張、インスリン（100nmol/L）またはグルタミン（10mmol/L）、ダイニン結合、 ジベレリン、XCHO1（キネシン様タンパク質）、リソホスファチジン酸、リチウ ムイオン、植物細胞壁の構成要素（例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステンシ ン）、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関連タン パク質（例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン（ensconsin）、 延長因子-1-α(EF-1α)およびE-MAP-115）、細胞独立体(entities)（例えば、ヒ ストンH1、ミエリン塩基性タンパク質および動原体）、内因性微小管構造（例え ば、軸糸構造、プラグ、およびGTPキャップ）、ポリペプチドのみの安定な管（ 例えば、STOP145およびSTOP220）、および有糸分裂力からの張力、ならびに上記 のいずれかの任意のアナログおよび誘導体を含む。このような薬剤は、特定の実 施態様において、ポリマー製キャリアとの組成物として、または上記および下記 でより詳細に議論したようなリポソーム処方物で送達され得る。特定の実施態様 において、抗微小管剤は、パクリタキセル、カンフォテシン、またはエポシロン 以外の薬剤である。 本明細書中で提供される薬剤、組成物および方法を利用すると、広範な種々の 外科的癒着および外科手術の合併症が、処置または予防され得る。癒着形成また は所望されない瘢組織蓄積/封入が、種々の外科的手順を困難にする。上記のよ うに、外科的癒着は、腹腔もしくは骨盤腔における実質的に任意の開放性の外科 的手順または内視鏡の外科的手順を困難にする。外科的移植片の封入はまた、乳 房再建手術、関節置換手術、ヘルニア改善手術、人工的脈管移植手術、および脳 外科手術を困難にする。各々の場合において、移植片は、外科的移植片（例えば 、乳房移植片、人工関節、外科手術用メッシュ、脈管移植片、硬膜パッチ）の機 能を損なうかまたは減じる線維性結合組織被膜によりカプセル化されることにな る。慢性の炎症および瘢痕はまた、慢性の副鼻腔炎を治すかまたは慢性炎症（例 えば、異物、感染（真菌性、マイコバクテリア））の他の領域を切除する外科的 手術の間に生じる。 抗微小管剤は、以上の終点を達成するために任意の様式で投与され得る。しか し、好ましい方法は、管周囲の投与を含む（外科的手術時または内視鏡、超音波 、CT、MRI、または蛍光透視鏡ガイダンスを用いる時のいずれかに直接適用）； 外科的移植片を「コーティング」すること；および手術部位に薬物を溶出するポ リマー性移植片を配置すること。好ましい実施態様では、0.5重量％〜20重量％ のパクリタキセルが、ポリマー性キャリアに充填され（以下の実施例に記載され るように）、そして管周囲（腸間膜）の表面に、外科的癒着の発生率が減少され るような期間にわたって薬剤を放出する「ペースト」、「フィルム」、または「 ラップ」として適用される。内視鏡手順の間、内視鏡における送達部分を介して 、手術の間に処置される腹腔および骨盤器官の腸間膜に、パクリタキセル−ポリ マー調製物をスプレーとして適用する。特定の好ましい実施態様において、管周 囲の組成物は、１重量％〜５重量％のパクリタキセルである。別の好ましい実施 態様では、0.1％〜20％のパクリタキセルを含むポリマー性コーティングが、外 科的移植片（例えば、乳房移植片、人工関節、脈管移植片）の表面に、移植片近 傍におけるカプセル化/不適切な瘢痕を予防するために適用される。なお別の好 ましい実施態様では、0.1重量％〜20重量％のパクリタキセルを含むポリマー性 移植片が、炎症、癒着形成、または瘢痕の再発が減少されるように、手術部位に 直接（例えば、湾曲腔（sinus cavity）、胸腔、腹腔、または脳外科手術の間に 手術部位に直接）適用される。全ての実施態様において、他の抗微小管剤は、薬 剤の力価および許容性を調節した等価用量で投与される。 ８．気道の慢性炎症疾患 本発明の他の局面では、抗微小管剤（および組成物）は、気道の慢性炎症疾患 のような疾患を処置または予防するために利用され得る。詳細には、抗微小管剤 は、疾患を処置するために、炎症部位（または炎症の可能性のある部位）に適用 され得る。適切な抗微小管剤は、上記で詳細に議論されており、そして例えば、 タキサン（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル（docetaxel））、カン フォテシン（campothecin）、エルーテロビン（eleutherobin）、サルコジクチ ン（sarcodictyins）、エポシロン（epothilones）ＡおよびＢ、ジスコデルモリ ド、重水（D2O）、ヘキシレングリコール（2-メチル-2,4-ペンタンジオール）、 ツベルシジン（7-デアザアデノシン）、LY290181（2-アミノ-4-(3-ピリジル)-4H -ナフト(1,2-b)ピラン-3-カルボニトリル）、フッ化アルミニウム、エチレング リコールビス-(スクシンイミジルスタシネート)、グリシンエチルエステル、モ ノクローナル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タンパタ質（タキソ ール様タンパク質、TALP）、低張性（190mosmol/L）条件により誘発される細胞 膨張、インスリン（100nmol/L）またはグルタミン（10mmol/L）、ダイニン結合 、ジベレリン、XCHO1（キネシン様タンパク質）、リソホスファチジン酸、リチ ウムイオン、植物細胞壁の構成要素（例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステン シン）、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関連タ ンパク質（例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン（ensconsin） 、延長因子-1-α（EF-1α）およびE-MAP-115）、細胞独立体（entities）(例え ば、ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパク質および動原体)、内因性微小管構造 （例えば、軸糸構造、プラグ、およびGTPキャップ）、ポリペプチドのみの安定 な管（例えば、STOP145およびSTOP220）、および有糸分裂力からの張力、ならび に上記のいずれかの任意のアナログおよび誘導体を含む。このような薬剤は、特 定の実施態様において、ポリマー性キャリアとの組成物として、または上記およ び下記でより詳細に議論したようなリポソーム処方物で送達され得る。本発明の 特定の好ましい実施態様において、薬剤または組成物は、鼻腔内に、全身に、吸 入により、局所的に（例えば、鼻ポリープの場合に）、または湾曲腔に投与され 得る。喘息 本発明の特定の局面において、抗微小管剤は、喘息を処置または予防するため に利用され得る。手短には、喘息は、自発的に、または処置に応答して解消し得 る気道閉塞の再発性エピソードによって特徴付けられる状態である。その正確な 病因は知られていないが、その状態は、悪化した気管支収縮、および集団の５％ に影響を及ぼす刺激薬に対する免疫応答である。喘息に有効な抗微小管治療は、 １つ以上の病理学的状態（例えば、炎症細胞（Ｔ細胞、肥満細胞、好酸球）の浸 潤および活性を低減すること、気道上皮の増殖および肥厚を減少させること、気 道壁における平滑筋細胞増殖および肥厚を阻害すること、気道管腔における粘液 分泌を低減させること、炎症を誘導および永続化し、そして気道分泌腺の過形成 および肥厚を阻害する炎症性サイトカイン（IL-3、IL-4、IL-5、GMSF）の活性を ブロックすること）を改変する。 臨床的には、喘息のための有効な抗微小管治療は、以下の内の１つ以上を達成 する：症状の重篤度低減する、増悪の持続期間を減少する、疾患の寛解器官の頻 度および持続期間を増加する、固定した欠陥および障害を予防する、ならびに呼 吸困難、咳、およびぜん鳴の慢性の進行を予防する；一方で、低酸素、FEV1（２ 分の１の強制された(forced)呼気容量）、気道および低炭酸／呼吸性アルカロー シスに対する耐性を改善する、ならびにＶ：Ｑ（通気：灌流）ミスマッチを低減 する。 抗微小管剤は、上記の終点を達成するために任意の様式で投与され得る。投与 の好ましい方法は、吸入処置（例えば、メーター用量呼吸器、ネブライザー、気 管内チューブを介する、微粒子の吸入薬）および全身性処置（静脈内注射、皮下 注射、もしくは筋肉内注射、または経口調製）を含む。全身性処置は、重篤に悪 化した患者に、または吸入治療が適切でない場合に投与される。臨床的または病 理学的改善を生じ得る最小の用量が使用される。例えば、パクリタキセルについ て、全身性慢性低用量治療は、応答に依存して１〜４週間毎に10〜50mg/m2で投 与され得；高用量「パルス」治療は、急性の疾病患者において50〜250mg/m2で投 与され得る。吸入治療について、0.01％〜１％のパクリタキセルが、上記の送達 ビヒクル／処方物を介して直接的に吸入され得る。このことは、気道へ直接的に 、１〜50mg/m2のパクリタキセルの送達を生じる。この用量は、応答に従って滴 下 される。他の抗微小管剤は、薬剤の能力および寛容性に適合した等価の用量で投 与され得る。慢性閉塞性肺疾患（COPD） COPDは、（慢性気道閉塞を導く）種々の状態（慢性気管支炎、喘息性気管支炎 、慢性閉塞性気管支炎、および気腫）を含む。これらの状態は、重篤な障害を引 き起こし得、そして米国において４番目に主要な死因である。臨床的には、すべ ては、呼吸困難、咳、ぜん鳴、および気道の再発性感染によって特徴付けられる 。疾患の徴候は、減少したFDV1、増加した残存容量、Ｖ：Ｑミスマッチ、および 低酸血症を含む。病理学的には、増加した粘液産生、粘液腺の過形成、増加した プロテアーゼ（主に、エラスターゼ）活性、気道の炎症、および肺胞壁の破壊で ある。広範な病因（喫煙が最も一般的である）にもかかわらず、上記の任意の症 状、徴候、または病理学的プロセスを改善することは、好ましくは、状態に影響 を与え；従って、COPDに有効な抗微小管治療は、上記のうちの少なくとも１つを 改変する。抗微小管剤での処置は、喘息について上記のように投与される：吸入 されるパクリタキセルは、１〜50mg/m2で、必要とされる場合は繰り返し与えら れ、全身性パクリタキセル治療については、10〜50mg/m2が、慢性投与において １〜４週間毎に与えられるか、または急性の疾病患者において「パルス」として 50〜250mg/m2が与えられる。他の抗微小管剤は、臨床的等価用量で投与される。 ９．狭窄、新生物性疾患、および閉塞 上記のように、本発明は、身体の通路の閉塞に関連する広範な種々の疾患（例 えば、脈管性疾患、新生物性閉塞、炎症性疾患、および感染性疾患を含む）を処 置または予防するための方法を提供する。 例えば、本発明の１つの局面において、本明細書中に記載のような広範な種々 の抗微小管剤および組成物を利用して、脈管系の閉塞を引き起こす脈管性疾患を 処置し得る。そのような疾患の代表的な例は、以下を含むが、これらに限定され ない全ての脈管（任意の動脈、静脈、または移植片の周囲）：冠状動脈、大動脈 、腸骨動脈、頸動脈、共通大腿動脈、表在(superficial)大腿動脈、膝窩動脈、 お よび移植片吻合の部位のアテローム性動脈硬化症；血管痙攣（例えば、冠状血管 痙攣およびレーノー病）；再狭窄（以前の介入（例えば、バルーン血管形成、バ イパス手術、ステント挿入、および移植片挿入）の部位での脈管の閉塞）；炎症 および自己免疫状態（例えば、側頭動脈炎、脈管炎）を含む。 手短には、アテローム性動脈硬化症のような脈管疾患において、白血球、特に 単球およびＴリンパ球は、内皮細胞に、特に動脈分枝の位置にて接着する。内皮 への接着後、白血球は、ケモスタット刺激(chemostatic stimuli)に応答して内 皮細胞管壁を横切って移動し、そして平滑筋細胞と共に動脈壁の内膜に蓄積する 。アテローム性動脈硬化症発生のこの初期の病巣は、「脂肪縞(fatty streak)」 として公知である。脂肪縞内の単球はマクロファージへ分化し；そしてマクロフ ァージおよび平滑筋細胞は、連続的に脂肪およびリポタンパタ質を取り、泡沫細 胞になる。 マクロファージが蓄積する場合、上層の内皮は、機械的に破壊されるようにな り、そして酸化脂質、酸素由来フリーラジカル、およびマクロファージによって 放出されるプロテアーゼによって化学的に改変されるようになる。泡沫細胞は、 内皮表面を侵食し、脈管壁の微小潰瘍を引き起こす。潜在的なトロンボゲン形成 内皮下組織（例えば、コラーゲンおよび他のタンパタ質）の、血流の成分への曝 露は、血小板の、破壊された内皮の領域への接着を生じる。血小板接着および他 の事象は、この環境(mileau)への増殖因子（PDGF、血小板活性化因子(PAF)、IL- 1、およびIL-6を含む）の生成および放出を誘発する。これらのパラクリン剤は 、脈管平滑筋細胞(VSMC)の移動および増殖を刺激すると考えられている。 正常な（罹患していない）血管壁において、VSMCは、収縮性表現型、および有 糸分裂活性の低い指数を有する。しかし、血小板によって放出されるサイトカイ ンおよび増殖因子の影響下で、マクロファージおよび内皮細胞VSMCは、成熟収縮 性細胞から未成熟分泌細胞への表現型変化を経る。形質転換したVSMCは、血管壁 の中膜で増殖し、内膜に移動し、内膜において増殖し続け、そして大量の細胞外 マトリクスを生じる。これは、成長中の脈管病巣を、線維性プラークに形質転換 する。分泌VSMCによって生成された細胞外マトリクスは、コラーゲン、エラスチ ン、糖タンパク質、およびグリコサミノグリカンを含み、コラーゲンは、アテロ ーム性動脈硬化症プラークの主要な細胞外マトリクス成分を含む。エラスチンお よびグリコサミノグリカンは、リポタンパク質を結合し、そしてまた病巣の成長 に寄与する。線維性プラークは、平滑筋細胞および上層のマクロファージマクロ ファージを含む、種々の厚さの高密度な結合組織の線維性キャップ、Ｔ細胞、お よび細胞外物質からなる。 PDGFに加えて、IL-1およびIL-6、他の分裂促進因子は、以下を含む血管壁に浸 潤する細胞によって生成される：TGFβ、FGF、トロンボスポンジン、セロトニン 、トロンボキサンA2、ノルエピネフリン、およびアンジオテンシンII。これは、 より多くの細胞の補充、さらなる細胞外マトリクスの生成、およびさらなる脂質 の蓄積を生じる。これは、アテローム性動脈硬化症の病巣が脈管管腔に有意に侵 食するまで、その病巣を進行的に大きくする。初期に、脈管を通る閉塞した血流 は、増加した流れが必要とされる場合にのみアテローム性動脈硬化症プラークに 遠位の組織の虚血を引き起こし、その後、病巣がさらに動脈をブロックするにつ れ、虚血は安静な状態にて生じる。 拡大しているアテローム性動脈硬化症プラーク中のマクロファージは、隣接す る組織の細胞損傷および壊死を引き起こす酸化脂質、フリーラジカル、エラスタ ーゼ、およびコラーゲナーゼを放出する。病巣は壊死性コアを発生させ、そして 複合体プラークに形質転換される。複合体プラークは、以下を引き起こすの止め 得る不安定な病巣である：塞栓形成；局所的出血（病巣の急速な拡大に起因する 管腔閉塞を生じるプラークを提供する、脈管の脈管の破裂について二次的）；ま たは潰瘍形成および裂形成（これは、トロンボゲン形成壊死性コアを血流に曝露 し、局所的血栓症または遠位の塞栓形成を生じる）。上記の続発症のどれも生じ ない場合でさえ、接着性血栓は、組織化され、そしてプラークに取り込まれるよ うになり、それによってその増殖を加速し得る。さらに、フィブリノーゲンおよ びトロンビンの局所濃度が増大するにつれ、中膜および内膜内の脈管平滑筋細胞 の増殖が刺激され：このプロセスはまた、血管のさらなる狭小化を究極的に導く 。 正常な動脈の内膜および中膜は、酸素化され、そして動脈の管腔から、または 外膜内の脈管の脈管からの栄養分を補充される。アテローム性動脈硬化症プラー クの発達につれ、外膜の脈管の脈管から生じる微小脈管は、厚くなった内膜およ び中膜に拡張する。プラークが悪化し、そしてプラーク退行を減少するにつれ、 この脈管網はより広範になる。 これらの微小脈管からの出血は、動脈解離、潰瘍形成、または血栓症と関連す るプラークの突然の拡張および破裂を引き起こし得る。これらの微小脈管からの 血漿タンパク質の漏出が領域への炎症性浸潤を誘導し得、そしてこれらの炎症細 胞が、アテローム性動脈硬化症プラークの急速な増殖、および関連する合併症（ 局所的水腫および炎症を介する）に寄与し得ることもまた、仮定されている。 先に議論したような脈管性疾患を処置するために、抗微小管剤（キャリアを含 むか、または含まないかのいずれか）は、身体の通路の外側の部分、または身体 の通路の外膜を介して平滑筋に送達され得る。この点において特に好ましい抗微 小管剤は、例えばタキサン（例えば、パクリタキセルおよびドセタキセル（doce taxel））、カンフォテシン（campothecin）、エルーテロビン（eleutherobin） 、サルコジタチン（sarcodictyins）、エポシロン（epothilones）ＡおよびＢ、 ジスコデルモリド、重水（D2O）、ヘキシレングリコール（2-メチル-2,4-ペンタ ンジオール）、ツベルシジン（7-デアザアデノシン）、LY290181（2−アミノ-4- (3-ピリジル)-4H-ナフト(1,2-b)ピラン-3-カルボニトリル）、フッ化アルミニウ ム、エチレングリコールビス-(スクシンイミジルスタシネート）、グリシンエチ ルエステル、モノクローナル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タン パク質（タキソール様タンパク質、TALP）、低張性（190mosmol/L）条件により 誘発される細胞膨張、インスリン（100nmol/L）またはグルタミン（10mmol/L） 、ダイニン結合、ジベレリン、XCHO1（キネシン様タンパク質）、リソホスファ チジン酸、リチウムイオン、植物細胞壁の構成要素（例えば、ポリ-L-リジンお よびエクステンシン(extensin））、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管 安定化緩衝液、微小管関連タンパク質（例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エ ンスコンシン（ensconsin）、延長因子-1-α（EF-1α）およびE-MAP-115）、細 胞独立体(entities)（例えば、ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパク質および動 原体）、内因性微小管構造（例えば、軸糸構造、プラグ、およびGTPキャップ） 、ポリペプチドのみの安定な管（例えば、STOP145およびSTOP220）、および有糸 分裂力からの張力、ならびに上記のいずれかの任意のアナログおよび誘導体を含 む。 特定の実施態様において、抗微小管剤は、パクリタキセル、カンフォテシン、ま たはエポシロン以外の薬剤である。このような薬剤は、特定の実施態様において 、ポリマー製キャリアとの組成物として、または上記および下記でより詳細に議 論したようなリポソーム処方物で送達され得る。本発明の好ましい実施態様にお いて、薬剤または組成物は、バルーンカテーテルによって、経口的に、脈管周囲 的に、ステントによって、全身に投与され得る。 本発明の他の局面において、本明細書中に記載される抗微小管治療剤または組 成物は、新生物性閉塞を処置するために利用され得る。手短には、本明細書中で 利用されるように、「新生物性閉塞」は、管の位置または存在する悪性腫瘍の組 織学的型にかかわらず、身体的な管の任意の新生物性（良性または悪性）閉塞を 含むことが理解されるべきである。代表的な例は、胃腸疾患（例えば、口−咽頭 ガン腺ガン、食道ガン（扁平上皮細胞、腺ガン、リンパ腫、黒色腫）、胃ガン（ 腺ガン、形成性胃組織炎、リンパ腫、平滑筋肉肺）、小腸腫瘍（腺腫、平滑筋腫 、脂肪腫、腺ガン、リンパ腫、カルチノイド）、結腸ガン（腺ガン）、および肛 門直腸ガン）；胆管疾患（例えば、膵臓ガン（腺管ガン、島細胞腫瘍、嚢胞腺ガ ン）、胆管ガン、および肝細胞ガンのような胆管閉塞を生じる新生物）；肺疾患 （例えば、肺および／または気管／気管支通路のガン（小細胞肺ガン、非小細胞 肺ガン））；女性生殖疾患（例えば、ファローピウス管の悪性腫瘍、子宮ガン、 頸ガン、膣ガン）；男性生殖疾患（例えば、精巣ガン、精巣上体のガン、精管の 腫瘍、前立腺ガン、良性前立腺肥大）；および尿路疾患（例えば、腎細胞ガン、 腎孟の腫瘍、移行細胞ガン、膀胱ガンのような尿収集系の腫瘍、および良性の狭 窄または悪性腫瘍に起因する尿道閉塞）を含む。 例として、良性前立腺肥大(BPH)は、前立腺、特に尿道を囲む腺の中央部分の 、延長したアンドロゲン性刺激に応答して生じる拡大である。それは、50歳を越 える男性の80％より多くに影響を及ぼす。この拡大は、前立腺を通る尿道の部分 の圧縮を生じ得、膀胱流出路の閉塞を生じる、すなわち異常に高い膀胱圧が、尿 の流れを生じるのに必要とされる。1980年、米国において、BPHのための処置と して367,000件の前立腺の経尿道的切除が実施された。他の処置は、投薬、経尿 道的括約筋切開、経尿道的レーザーまたはマイクロ波、経尿道的高熱、経尿道的 超 音波、経直腸的マイクロ波、経直腸的高熱、経直腸的超音波、および外科的切除 を含む。すべては、失禁および狭窄形成を生じる括約筋機構の妨害を含む不利点 を有する。 先に議論したような新生物疾患を処置するために、広範な種々の治療剤（重合 体キャリアを含むか、または含まないのいずれか）は、身体通路の外側の部分、 または身体通路の外膜を介して平滑筋細胞に送達され得る。例えば、１つの好ま しい実施態様において、針またはカテーテルは、超音波ガイダンス下で経直腸的 経路（あるいは経会陰的）を介して、尿道に隣接する前立腺に導き、これを通し て、特に尿道の周りの、特に腺のいくつかの象限(guadrant)に治療剤を送達する 。針またはカテーテルはまた、直接的な触診下、または内視鏡、蛍光透視鏡、CT 、またはMRIガイダンス下で置かれ得、そして間隔をおいて投与され得る。代替 として、カテーテルまたはトロカールを介するペレットの設置もまた、達成され 得る。上記の手順は、単独または前立腺尿道に設置されるステントと組み合わせ て達成され得る。尿道器具または尿道に対する損傷を回避することによって、括 約筋機構は、完全なままであり、失禁を回避し、そして狭窄の可能性はより低く なる。 本発明の他の局面において、身体通路の閉塞に影響を及ぼすか、またはそれを 引き起こす炎症性疾患を予防または処置するための方法が提供される。炎症疾患 は、種々の身体の管の閉塞を生じる、急性および慢性の両方の炎症を含む。代表 的な例は、脈管炎（例えば、巨細胞動脈炎（側頭動脈炎、高安動脈炎）、多発性 動脈炎、アレルギー性血管炎、および肉芽腫症（チャーグ−ストラウス病）、多 発性血管炎オーバーラップ(overlap)症候群、過敏性血管炎（ヘーノホーシェー ライン紫斑病）、血清病、薬物誘導脈管炎、感染性脈管炎、新生物性脈管炎、結 合組織障害に関連する脈管炎、補体系の先天性欠損に関連する脈管炎）、ヴェ− ゲナ−肉芽腫症、川崎病、中枢神経系の脈管炎、バーガー病、および全身性硬化 症）；胃腸管疾患（例えば、膵炎、クローン病、潰瘍性結腸炎、潰瘍性直腸炎、 原発性硬化症胆管炎、特発性を含む任意の原因の良性狭窄（例えば、胆管、食道 、十二指腸、小腸、または結腸の狭窄））；気道疾患（例えば、喘息、過敏性肺 炎、石綿症、珪肺症、およびじん肺の他の形態）、慢性気管支炎、および慢性閉 塞性 気道疾患）；鼻涙管疾患（例えば、特発性を含むすべての原因の狭窄）；ならび にエウスターキオ管疾患（例えば、特発性を含むすべての原因の狭窄）を含む。 先に議論したような炎症性疾患を処置するために、抗微小管剤（キャリアを含 むか、または含まないかのいずれか）は、身体の通路の外側の部分、または身体 の通路の外膜を介して平滑筋に送達され得る。 本発明のなお別の局面において、身体通路の閉塞と関連するか、またはその原 因となる感染性疾患を処置または予防するための方法を提供する。手短には、感 染性疾患は、いくつかの急性および慢性感染性プロセスを含み、以下を含む身体 通路の閉塞を生じ得る：例えば、男性生殖路の閉塞（例えば、尿道炎、精巣上体 炎、前立腺炎に起因する狭窄）；女性生殖路の閉塞（例えば、膣炎、子宮頸炎、 骨盤炎症性疾患（例えば、結核、淋菌、クラミジア属、腸球菌、および梅毒）） ；尿路閉塞（例えば、膀胱炎、尿道炎）；気道閉塞（例えば、慢性気管支炎、結 核、他のマイコバクテリア感染（MAIなど）、嫌気性感染、真菌性感染、および 寄生虫感染）；および心臓血管閉塞（例えば、真菌性動脈瘤および感染性心内膜 炎）を含む。 先に議論したような感染性疾患を処置するために、広範な種々の治療剤（キャ リアを含むか、または含まないかのいずれか）は、身体の通路の外側の部分、ま たは身体の通路の外膜を介して平滑筋に送達され得る。この点において特に好ま しい治療剤は、先に議論したような抗微小管剤を含む。 １０．移植片拒絶 上記の抗微小管剤および組成物は、移植片拒絶を処置または予防するために利 用され得るようである。手短には、慢性移植片／器官拒絶の２つの主要な組織学 的徴候は、炎症およびアテローム性動脈硬化症である。この最内膜(neointimal) 過形成は、長く生存している腎臓同種移植片（Humeら、J．Clin．Invest．34:32 7，1955;Buschら、Human Pathol．2:253，1971)、ならびに心臓同種移植片(John sonら、J．Heart Transplantation 8:349，1989)、肝臓同種移植片(Demetrisら 、Am．J．Pathol 118:151，1985)、ならびに肺移植片(Burkeら、Lancet I:517:1 986)において観察されている。心臓移植片は、冠状血流への心筋の依 存のために、この管腔の狭小化に非常に感受性である。 多くの動物モデルを用いて、慢性の心臓同種異系拒絶が研究されている。Lewi s-F344ラット心臓移植モデルは、動脈硬化性の病変形成により特徴付けられる慢 性拒絶をともなう心臓同種異系拒絶を生成する。このモデルは、レシピエントの 80％以上が３週間以上生存し、これらの90％が冠状動脈内膜病変をともなうので 有用である(Adamsら、Transplantation 53:1115-1119、1992)。病変の高い発生 数および重篤度を示すことに加えて、病変進行の炎症段階は、この系が免疫抑制 を必要としないので、極めて認識が容易である。単核の浸潤および壊死の程度は 、より重篤であるが、このモデルにおける動脈病変は、臨床移植片の動脈硬化に 強く類似している。 移植片拒絶に対する有効な抗微小管治療は、以下の少なくとも１つを達成する ：(i)移植片の寿命を延長し、(ii)免疫抑制治療にともなう副作用を低減し、お よび(iii)移植にともなう促進された動脈硬化症を低減する。 移植片拒絶を処置するための適切な抗微小管剤は、例えば、タギサン類(例え ば、パタリタキセルおよびドセタキセル)、カンプトテシン、エポシロンＡおよ びＢ、ジスコデルモリド、重水(D2O)、ヘキシレングリコール(2-メチル-2,4-ペ ンタンジオール)、ツベルシジン(7-デアザアデノシン)、LY290181(2-アミノ-4− (3−ピリジル)-4H-ナフト(1,2-b)ピラン-3-カルドニトリル)、フッ化アルミニウ ム、エチレングリコールビス-(スクシンイミジルスクシネート)、グリシンエチ ルエステル、モノクローナル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タン パク質(タキソール様タンパク質、TALP)、低張(190mosmol/L)条件により誘導さ れる細胞腫張、インスリン(100nmol/L)またはグルタミン(10mmol/L)、ダイニン 結合、ジベレリン、XCHO1(キネシン様タンパク質)、リソホスファチジン酸、リ チウムイオン、植物細胞壁の構成要素(例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステン シン)、グリセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関連タ ンパク質(例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン、延長因子１α( EF-1α)およびE-MAP-115)、細胞体(例えば、ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパ ク質および動原体)、内因性微小管構造(例えば、軸糸構造、プラグおよびGTPキ ャップ)、安定な細管のみのポリペプチド(例えば、ST0P145およびSTOP220)お よび有糸分裂力からの張力、ならびに上記いずれかの任意のアナログおよび誘導 体を含む。このような薬剤は、特定の実施態様で、上記および下記の両方でより 詳細に論議されるように、ポリマー性キャリアとともに、またはリポソーム処方 物中の組成物として送達され得る。 抗微小管剤は、上記の終点を達成するために、任意の方法で移殖物とともに投 与され得る。しかし、好ましい方法には、経口投与または静脈内、皮下、または 筋肉内注射を含む。抗微小管剤は、慢性の移植片拒絶を防ぐために長期の低用量 治療として、または急性の移植片拒絶を防ぐためにより高い用量で投与され得る 。例えば、パクリタキセルについては、全身的な長期低用量治療は、治療応答に 依存して１〜４週毎に10〜50mg/m2で投与され得；高用量「パルス」治療は、１ 〜21日毎に50〜250mg/m2で投与され得、必要に応じて６回まで繰り返される。他 の抗微小管剤は、薬剤の効力および許容力に調節された相当する用量で投与され 得る。 11．全身性エリテマトーデス 全身性エリテマトーデス(SLE)は、核、細胞質および細胞膜抗原と反応性の抗 体の産生と関連した、多くの異なる器官系における炎症により特徴付けられる未 知の原因の疾患である。SLEは、いくつかの集団において2500人に１人にあり得 るという高い有病率で、かなり一般的な疾患である(Michetら、Mayo Clini．Pro c．60:105、1985)。SLEは、10〜64才の間の年齢の女性の間で700人に１人の頻度 で、女性対男性の比が９：１である女性に優勢な疾患である。SLEの全体で毎年 の発生数は、集団のリスクに依存して、毎年、100,000の集団あたり約６〜35の 新たな事例がある。 SLEは、種々の種類の自己抗体の分泌を生じるヘルパーＴ細胞およびＢ細胞の 活性化を起こすのと同時に作用する、遺伝的、ホルモン的および環境因子の間の 相互作用から生じる複数因子起源の複雑な疾患であるようである。しばしば、SL Ｅは、自己免疫疾患として分類され、特に核抗原(抗核抗体−ANA)およびリン脂 質に対して惹起された、増加した数の自己抗体により特徴付けられる。抗リン脂 質抗体は、狼瘡患者の20〜40％に存在し、そして多数のアニオン性リン脂質と反 応 することが見出されている。 SLEにおける形態学的変化は、極度に可変性であり、個々の患者における疾患 の臨床的徴候および経過の多様性を反映する。最も特徴的な病変は、免疫複合体 の沈着から生じ、そして血管、腎臓、結合組織および皮膚において見出される。 小動脈および細動脈を含む急性の壊死性の血管炎は、皮膚および筋肉が最も一般 的に影響されるが、任意の組織に存在し得る。小血管の血管炎により影響された 器官では、通常、最初の病変は、顆粒球浸潤および細血管周囲の浮腫により特徴 付けられる。血管壁におけるフィブリノイド沈着もまた、動脈炎を特徴付ける。 慢性期には、血管は、管腔が狭くなる線維性の厚膜化を受ける。脾臓では、これ らの血管病変は、中央動脈を含み、そしていわゆるオニオンスキン(onion skin) 病変を生成する顕著な血管周囲の線維症によって特徴付けられる。 SLEを処置するための適切な抗微小管剤は、例えば、タキサン類(例えば、パク リタキセルおよびドセタキセル)、カンプトテシン、エポシロンＡおよびＢ、ジ スコデルモリド、重水(D2O)、ヘキシレングリコール(2-メチル-2,4-ペンタンジ オール)、ツベルシジン(7-デアザアデノシン)、LY290181(2-アミノ-4-(3-ピリジ ル)-4H-ナフト(1,2-b)ピラン-3-カルドニトリル)、フッ化アルミニウム、エチレ ングリコールビス-(スクシンイミジルスクシネート)、グリシンエチルエステル 、モノクローナル抗イディオタイプ抗体、微小管アセンブリ促進タンパク質(タ キソール様タンパタ質、TALP)、低張(190mosmol/L)条件により誘導される細胞腫 張、インスリン(100nmol/L)またはグルタミン(10mmol/L)、ダイニン結合、ジベ レリン、XCHO1(キネシン様タンパク質)、リソホスファチジン酸、リチウムイオ ン、植物細胞壁の構成要素(例えば、ポリ-L-リジンおよびエクステンシン)、グ リセロール緩衝液、Triton X-100微小管安定化緩衝液、微小管関連タンパク質（ 例えば、MAP2、MAP4、tau、big tau、エンスコンシン、延長因子１α(EF-1α)お よびE-MAP-115)、細胞体(例えば、ヒストンH1、ミエリン塩基性タンパク質およ び動原体)、内因性微小管構造(例えば、軸糸構造、プラグおよびGTPキャップ)、 安定な細管のみのポリペプチド(例えば、STOP145およびSTOP220)および有糸分裂 力からの張力、ならびに上記いずれかの任意のアナログおよび誘導体を含む。こ のような薬剤は、特定の実施態様で、上記および下記の両方でより詳細に論議さ れるように、ポリマー性キャリアとともに、またはリポソーム処方物中に組成物 として送達され得る。本発明の好ましい実施態様では、これらの薬剤または組成 物は、吸入により、鼻腔内に、全身に、または局所的に(例えば、鼻ポリープの 場合)投与され得る。 処方および投与 上記のように、本発明の抗微小管剤は、種々の形態(例えば、ミクロスフェア 、ペースト、フィルム、スプレー、軟膏、クリーム、ゲルなど)で処方され得る 。さらに、本発明の組成物は、１より多い抗微小管剤を含み、種々のさらなる化 合物を含み、特定の物理的特性(例えば、弾力性、特定の融点、または特定され た放出速度)を有するように処方され得る。本発明の特定の実施態様では、組成 物は、所望の効果を達成するために組み合わせられ得る(例えば、ミクロスフェ アの種々の調製物は、１つ以上の抗微小管剤の急速かつ緩慢の両方または延長し た放出を達成するために組み合わせられ得る)。 抗微小管剤は、単独、あるいは薬学的または生理学的に受容可能なキャリア、 賦形剤または希釈剤と組み合わせてのいずれかで投与され得る。一般に、このよ うなキャリアは、採用される用量および濃度では、レシピエントに非毒性である べきである。通常、このような組成物の調製は、治療的薬剤を、緩衝液、アスコ ルビン酸のような抗酸化剤、低分子量(約10の残基より少ない)ポリペプチド、タ ンパク質、アミノ酸、グルコース、スクロースまたはデキストリンを含む炭水化 物、EDTAのようなキレート剤、グルタチオンおよびその他の安定剤、ならびに賦 形剤と組み合わせを伴う。中性の緩衝化生理食塩水または非特異的血清アルブミ ンと混合した生理食塩水は、模範的な適切な希釈剤である。 上記のように、本明細書中に提供される、抗微小管剤、組成物、または薬学的 組成物は、例えば、炎症の部位へ局所的に、経口的に、直腸から、頭蓋内に、硬 膜下腔内に、鼻腔内に、眼内に、静脈内に、皮下に、腹膜内に、筋肉内に、舌下 または膀胱内、を含む、種々の異なる経路による投与のために調製され得る。投 与のその他の代表的な経路には、(好ましくは、超音波、CT、蛍光透視法、MRIま たは内視鏡の案内による)疾患部位への直接投与を含む。 本明細書中に提供される治療剤、治療組成物、および薬学的組成物は、このよ うな材料の使用に関する使用説明書を提供するパッケージ材料とともに、容器内 に配置され得る。一般に、このような使用説明書は、試薬濃度、ならびに特定の 実施態様では、抗微小管剤、抗微小管組成物、または薬学的組成物を再構成する ために必要であり得る、賦形剤成分または希釈剤(例えば、水、生理食塩水、ま たはPBS)の相対量を記載する具体的な表現を含む。 以下の実施例は、例示のために提供されるが、限定のために提供されない。 実施例 上記のように、慢性炎症は、白血球細胞(マクロファージ、リンパ球、好中球 、および形質細胞)をともなう組織浸潤、炎症細胞および細胞産物(活性酸素種、 マトリクスメタロプロテイナーゼのような組織分解酵素)による組織破壊、およ び結合組織補充による修復の反復的な試み(血管形成および線維症)により特徴付 けられるプロセスである。 抗微小管剤の、慢性的な炎症に影響するそれらの能力を評価するためには以下 の病理学的/生物学的終点：(1)炎症カスケードを開始する白血球細胞応答(マク ロファージ、好中球およびＴ細胞)の阻害；(2)線維症の進行および器官機能の損 失に至る間葉細胞(線維芽細胞、滑膜細胞など)過剰増殖の阻害；(3)組織病変を 引き起こすマトリクスメタロプロテイナーゼ産生/活性の阻害；(4)炎症応答を増 大し、そして線維組織の増殖および発達に必要な代謝的支持を提供し得る新血管 形成の破壊；および(5)このすべて、は、正常実質細胞に対する実質的な毒性な くしてか、またはマトリックス成分(例えば、コラーゲンおよびプロテオグリカ ン)の正常な合成を損なうことなく達成されなければならない。 以下により詳細に示されるように、微小管を安定化する薬剤、例えば、パクリ タキセルの活性が、種々の組織および炎症疾患状態で検査されている。これらの 薬剤は、上記の疾患パラメーターの多くを改変する能力を示す。 実施例１ 好中球活性に対する抗微小管剤の影響 この実施例は、オプソニン化CPPD結晶またはオプソニン化ザイモザンで刺激さ れた好中球の応答に対する抗微小管剤の影響を記載する。以下に提示される実験 により示されるように、抗微小管剤は、化学発光、スーパーオキシドアニオン産 生、および血漿オプソニン化微結晶またはザイモザンに応答する脱顆粒により測 定したとき、粒子で誘導される好中球活性化の強力なインヒビターである。 Ａ．材料および方法 ハンクスの緩衝化生理食塩水溶液(HBSS)pH7.4をこの研究の間を通じて用いた 。全ての化学薬品は、他の記載がなければ、Sigma Chemical Co(St．Louls，MO) から購入した。すべての実験は、他の記載がなければ37℃で行った。 １．結晶の調製および特徴付け CPPD(三斜晶系)結晶を調製した。この結晶のサイズ分布は、10μm未満が約33 ％、10〜20μmの間が58％、そして20μmを超えるものが９％であった。上記の条 件下で調製された結晶は、発熱物質を含まず、そして滅菌、発熱物質を含まない 条件下で生成された結晶は、通常、無菌でない実験室条件下で調製された結晶と 同じ程度の好中球応答を生じた。 ２．結晶およびザイモザンのオプソニン化 パクリタキセルの存在下で結晶またはザイモザンに対する好中球応答を調べた すべての実験は、血漿オプソニン化CPPDまたはザイモザンを用いて実施された。 結晶またはザイモザンのオプソニン化は、50％血漿の１mlあたり75mgのCPPDまた は12mgのザイモザンの濃度で50％のヘパリン処理血漿を用いて行った。結晶また はザイモザンは、血漿と37℃で30分間インキュベートし、次いで過剰のHBSS中で 洗浄した。 ３．好中球調製 好中球は、新たに採取されたヒトのクエン酸塩化の全血から調製された。簡単 に述べれば、400mlの血液を、HBSS中の４％デキストランT500(Phamacia LKB、B iotechnology AB Uppsala、Sweden)80mlと混合し、そして１時間沈降させた。血 漿を連続的に集め、そして５mlを、15mlポリプロピレンチューブ(Coming、NY)中 の５ml Ficoll Paque(Pharmacia)に添加した。500gで30分間の遠心分離の後、好 中球ペレットを、20秒間の低張ショックにより赤血球を含まないように洗浄した 。好中球をHBSS中に再懸濁し、氷上に保持し、そして３時間以内に実験に用いた 。好中球生存率および純度は、常に90％以上であった。 ４．好中球の抗微小管剤とのインキュベーション （a）パクリタキセル ジメチルスルホキシド(DMSO)中の12mMのパクリタキセルのストック溶液を、各 実験前に新たに調製した。このストック溶液を、DMSO中に希釈し、１〜10mMの濃 度範囲でパクリタキセル溶液を得た。これら希釈パクリタキセル溶液の等容量を 、穏和なボルテックスで、5,000,000細胞/mlの好中球に添加し、0.5％の最終DMS O濃度で０〜50μMの濃度を達成した。結晶またはザイモザンの添加前に、細胞を 、33℃で20分間、次いで37℃で10分間インキュベートした。 （b）フッ化アルミニウム HBSS中１Ｍのフッ化アルミニウム(AlF3)のストック溶液を新たに調製した。こ のストック溶液をHBSS中で希釈し、５〜100mMの濃度範囲のAlF3溶液を得た。こ れら希釈AlF3溶液の等容量(50μl)を、5,000,000細胞/mlの好中球に添加し、そ して37℃で15分間インキュベートした。ルミノール(１μM)を添加し、次いで20 μlのオプソニン化ザイモザン(最終濃度＝１mg/ml)を添加し、細胞を活性化した 。 （c）グリシンエチルエステル HBSS中の100mMのグリシンエチルエステルのストック溶液を新たに調製した。 このストック溶液をHBSS中で希釈し、0.5〜10mMの濃度範囲のグリシンエチルエ ステル溶液を得た。これら希釈グリシンエチルエステル溶液の等容量(50μl)を 、5,000,000細胞/mlの好中球に添加し、そして37℃で15分間インキュベートした 。ルミノール(１μM)を添加し、次いで20μlのオプソニン化ザイモザン(最終濃 度＝１mg/ml)を添加し、細胞を活性化した。 （d）LY290181 HBSS中の100μMのLY290181のストック溶液を新たに調製した。このストック溶 液をHBSS中で希釈し、0.5〜50μMの濃度範囲のLY290181溶液を得た。これら希釈 LY290181溶液の等容量(50μl)を、5,000,000細胞/mlの好中球に添加し、そして3 7℃で15分間インキュベートした。ルミノール(１μM)を添加し、次いで20μlの オプソニン化ザイモザン(最終濃度＝１mg/ml)を添加し、細胞を活性化した。 ５．化学発光アッセイ すべての化学発光研究は、CPPD(50mg/ml)を用い、HBSS中、5,000,000細胞/ml の細胞濃度で実施した。すべての実験において、0.5mlの細胞を、1.5mlのキャッ プ付きEppendorfチューブ中の25mgのCPPDまたは0.5mgのザイモザンに添加した。 HBSS中の25％DMSOに溶解したルミノールの10μlを、１μMの最終濃度になるよう に添加し、そしてサンプルを混合して結晶またはザイモザンによる好中球活性化 を開始した。化学発光は、LKB Luminometer(Model 1250)を用い、結晶またはザ イモザンを再懸濁するために、測定直前に振とうして37℃で20分間モニターした 。コントロールのチューブには、細胞、薬物およびルミノールを含めた(結晶な し)。 ６．スーパーオキシドアニオン生成 スーパーオキシドアニオン濃度は、チトクロムＣアッセイのスーパーオキシド ジスムターゼ阻害可能な還元を用いて測定した。簡単に述べれば、25mgの結晶ま たは0.5mgのザイモザンを、1.5mlのキャップ付きEppendorfチューブに入れ、そ して37℃まで加温した。37℃で0.5mlの細胞を、フェリチトクロムＣとともに添 加(最終濃度1.2mg/ml)し、そしてキャップを閉めたチューブを振とうすることに より細胞を活性化した。適切な時間に、チューブを、10,000gで10秒間遠心分離 し、そして550nmの吸光度が測定されるアッセイ用に上清液を集めた。コントロ ールチューブは、600単位/mlでスーパーオキシドジスムターゼを含めた同一条件 下でセットアップした。 ７．好中球脱顆粒アッセイ 25mgのCPPDまたは１mgのザイモザンのいずれかを含む1.5mlのEppendorfチュー ブを、37℃まで予備加熱した。37℃で、0.5mlの細胞を添加した後、激しく振と うし反応を開始した。適切な時間に、チューブを、10,000gで10秒間遠心分離し 、そして0.4mlの上清を後のアッセイのために-20℃で貯蔵した。 リゾチームは、Micrococcus lysodeikticus懸濁液の450nmの吸光度における減 少により測定した。簡単に述べれば、Micrococcus lysodeikticusを、0.1mg/ml で、65mMのリン酸カリウム緩衝液pH6.2に懸濁し、そして450nmにおける吸光度を 、希釈により0.7単位に調節した。結晶(またはザイモザン)および細胞上清液(10 0μl)を、2.5mlのMicrococcus懸濁液に添加し、そして吸光度における減少をモ ニターした。０〜2000単位/mlの範囲にあるリゾチーム標準(ニワトリ卵白)を調 製し、そして450nmの吸光度における減少速度に対するリゾチーム濃度の更正グ ラフを得た。 ミエロペルオキシダーゼ(MPO)活性は、ジアニシジンの酸化をともなう450nmの 吸光度の増加により測定した。7.8mgのジアニシジンを、音波処理により、3.2mM で、pH5.5の0.1Ｍクエン酸緩衝液100ml中に溶解した。１mlのギュベットに、0.8 9mLのジアニシジン溶液を添加し、次いで１％Tritonｘ100を50μl、水溶液中の0 .05％過酸化水素の10μl、および結晶-細胞上清液の50μlを添加した。MPO活性 は、以下の等式を用いて、吸光度(450nm)/分の変化、ΔÅ450から測定した： ジアニシジン酸化(nmol/分)＝50×ΔÅ450 ８．好中球生存率 好中球生存率に対する抗微小管剤の影響を測定するために、細胞質マーカー酵 素である乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH)の放出を測定した。脱顆粒実験からの薬物( 結晶なし)をともなう細胞を含むコントロールチューブもまた、LDHについてアッ セイした。 Ｂ．結果 すべての実験において、統計学的有意差は、Studentのt-検定を用いて決定し 、 そして有意差はp＜0.05で主張した。誤差のバーが示されているところは、それ らが、所定の数ｎに対する平均値についての１標準偏差を記載する。 １．好中球生存率 （a）パクリタキセル 37℃で、１時間、46μＭのパクリタキセルで処理した好中球は、コントロール を超える増加したレベルのLDH放出をなんら示さず(常に全体の５％未満)、パク リタキセルは細胞死を引き起こさなかったことを示した。 （b）フッ化アルミニウム 37℃で、１時間、５〜100mMの濃度範囲のフッ化アルミニウムで処理した好中 球は、コントロールを超える増加したレベルのLDH放出をなんら示さず、フッ化 アルミニウムは細胞死を引き起こさなかったことを示した。 （c）グリシンエチルエステル 37℃で、１時間、0.5〜20mMの濃度範囲のグリシンエチルエステルで処理した 好中球は、コントロールを超える増加したレベルのLDH放出をなんら示さず、グ リシンエチルエステルは細胞死を引き起こさなかったことを示した。 ２．化学発光 （a）パタリタキセル 28μMのパクリタキセルは、それぞれ図１Ａ、１Ｂおよび図２Ａに示すように 、血漿オプソニン化CPPDおよび血漿オプソニン化ザイモザンの両方の誘導性好中 球化学発光の強い阻害を産生した。ピーク化学発光応答の阻害は、CPPDおよびザ イモザンについて、それぞれ、52％(+/-12％)および45％(+/-11％)であった。28 μMのパクリタキセルによる、血漿オプソニン化CPPDおよび血漿オプソニン化ザ イモザンの両方の誘導好中球化学発光の阻害は、３〜16分のすべての時点で有意 であった(図１および４Ａ)。図１Ａおよび１Ｂは、血漿オプソニン化CPPD誘導好 中球化学発光のパクリタキセル阻害の濃度依存性を示す。すべての実験で、コン トロールサンプルは、５mVを超える化学発光値を決して生成せず、そしてこの研 究で用いたすべての濃度のパクリタキセルの添加は、コントロールの化学発光値 に 対して影響を有していなかった。 （b）フッ化アルミニウム ５〜100mM濃度のフッ化アルミニウムは、図１Ｃに示すように、血漿オプソニ ン化ザイモザン誘導好中球化学発光の強い阻害を産生した。この図は、血漿オプ ソニン化ザイモザン誘導好中球化学発光のAlF3阻害の濃度依存性を示す。この研 究で用いたすべての濃度のAlF3の添加は、コントロールの化学発光値に対して影 響を有していなかった。 （c）グリシンエチルエステル 0.5〜20mM濃度のグリシンエチルエステルは、図１Ｄに示すように、血漿オプ ソニン化ザイモザン誘導好中球化学発光の強い阻害を産生した。この図は、血漿 オプソニン化ザイモザン誘導好中球化学発光のグリシンエチルエステル阻害の濃 度依存性を示す。この研究で用いたすべての濃度のグリシンエチルエステルの添 加は、コントロールの化学発光値に対して影響を有していなかった。 （d）LY290181 0.5〜50μM濃度のLY290181は、図１Ｅに示すように、血漿オプソニン化ザイモ ザン誘導好中球化学発光の強い阻害を産生した。この図は、血漿オプソニン化ザ イモザン誘導好中球化学発光のLY290181阻害の濃度依存性を示す。この研究で用 いたすべての濃度のLY290181の添加は、コントロールの化学発光値に対して影響 を有していなかった。 ３．スーパーオキシド生成 チトクロムＣのスーパーオキシドジスムターセ(SOD)阻害可能な還元により測 定したときの、血漿オプソニン化CPPD結晶誘導スーパーオキシドアニオン産生の 時間経過を図３に示す。28μMのパクリタキセルを用いる細胞の処理は、すべて の時点において、生成するスーパーオキシド量の減少をもたらした。この減少は 、図３Ａに示されるすべての時点で有意であった。この阻害の濃度依存性は図３ Ｂに示される。オプソニン化ザイモザンによるスーパーオキシドアニオン産生の 刺激(図４Ｂ)は、CPPD誘導活性化に類似の時間経過を示した。28μMのパクリタ キセルによるザイモザン誘導スーパーオキシドアニオン産生の阻害は、CPPD活性 化 の阻害に比べ劇的ではなかったが、図４Ｂに示されるすべての時点で有意であっ た。 17μMのLY290181を用いたCPPD結晶誘導好中球の処置もまた、生成するスーパ ーオキシドの量の減少をもたらした(図３Ｃ)。 ４．好中球脱顆粒 好中球脱顆粒を、ミエロペルオキシダーセおよびリゾチームの、血漿オプソニ ン化CPPD結晶誘導放出により、またはミエロペルオキシダーゼの、血漿オプソニ ン化ザイモザン誘導放出によりモニターした。血漿コートCPPD結晶を用いて、細 胞にサイトカラシンＢの添加の必要性なくして好中球を刺激するとき、これら２ つの酵素の十分量が、細胞外培地中に放出されることが示された。図５および２ は、血漿コートCPPDにより刺激された好中球からの、それぞれ、MPOおよびリゾ チーム放出の時間経過を示す。図５Ａは、パクリタキセルが、結晶-細胞インキ ュベーションの最初の９分間に、血漿オプソニン化CPPD活性化好中球からのミエ ロペルオキシダーゼ放出を阻害することを示す。パクリタキセルは、図５Ａで示 されるように、すべての時点で、CPPD誘導ミエロペルオキシダーゼ放出を顕著に 阻害した。図５Ｂは、CPPD誘導ミエロペルオキシダーゼ放出のパクリタキセル阻 害の濃度依存性を示す。 28μMのパクリタキセルはリゾチーム放出を低減し、そしてこの脱顆粒の阻害 は、図２に示されるようにすべての時点で顕著であった。 好中球が、オプソニン化ザイモザンで刺激されたとき、ほんの小量のMPOおよ びリゾチームが放出された。これらの低レベルにも拘わらず、統計学的に有意で あった(p＜0.05)28μMのパクリタキセルの存在下で９分間のインキュベーション 後のMPO放出の50％阻害をモニターすることが可能であった(データは示さず)。1 7μMのLY290181を用いたCPPD結晶誘導好中球の処置は、細胞からのリゾチームお よびミエロペルオキシダーゼ放出の両方を低減した(図５Ｃおよび図５Ｄ)。 Ｃ．考察 これらの実験は、パクリタキセルおよび他の抗微小管剤が結晶誘導好中球活性 化の強力なインヒビターであることを示す。さらに、粒子状アクチベータの別の 形態であるオプソニン化ザイモザンに対する好中球応答における類似のレベルの 阻害を示すことにより、パクリタキセルおよびその他の抗微小管剤の阻害活性が 、結晶に対する好中球応答に制限されないことが明らかである。パクリタキセル 、フッ化アルミニウム、グリシンエチルエステルおよびLY290181はまた、細胞死 を引き起こすことなく、ザイモザン誘導好中球活性化の強力なインイヒビターで あることが示された。LY290181は、スーパーオキシドアニオン産生およびCPDD結 晶誘導好中球の脱顆粒を低減することが示された。 実施例２ 抗原刺激に対するＴ細胞応答 パクリタキセルが、刺激因子(stimulagen)に応答するＴ細胞活性化に影響する か否かを決定するために、TR1 Ｔ細胞クローンを、ミエリン塩基性タンパク質ペ プチドGP68-88またはレクチンconAのいずれかで、ミセル処方物中の増加する濃 度のパクリタキセルの非存在下または存在下で48時間の間刺激した。パクリタキ セルは、実験の開始時か、またはペプチドまたはconAを用いて、細胞の24時間刺 激後に添加した。トリチウム化チミジン取り込みを、ペプチドまたはconA刺激に 応答するＴ細胞増殖の尺度として測定した。 結果は、Ｔ細胞刺激が、ペプチドGP68-88およびconAに応答して増加したこと を示した。コントロールのポリマー性ミセルの存在下で、両方のアゴニストに応 答するＴ細胞刺激は改変されなかった。しかし、パクリタキセルミセルを用いた 処理は、実験の開始時か、または刺激後24時間目のいずれかで、濃度依存性様式 でＴ細胞応答を低減させた。両方の条件下で、Ｔ細胞増殖は、0.02μMパクリタ キセルにより完全に阻害された(図79)。 これらのデータは、パクリタキセルが、抗原誘導刺激に応答するＴ細胞増殖の 有効なインヒビターであることを示す。 実施例３ インビトロ滑膜細胞細胞増殖に対するパクリタキセルの影響 トリチウム化チミジン取り込み(滑膜細胞DNA合成の測定)およびインビトロ細 胞増殖に対する異なる濃度のパクリタキセルの影響を評価するために、２つの実 験を行った。 Ａ．材料および方法 １．滑膜細胞中への3Hチミジン取り込み 滑膜細胞を、異なる濃度のパクリタキセル(10-5M、10-6M、10-7M、および10-8 M)とともに、６または24時間の間連続的にインビトロでインキュベートした。こ れらの時点で、１×10-6cpmの3Hチミジンを細胞培養に添加し、そして37℃で２ 時間インキュベートした。細胞を、細胞回収器を通して配置し、フィルターを通 じて洗浄し、フィルターを切断し、そしてフィルターセクション中に含まれる照 射量を測定した。一旦細胞中に取り込まれたチミジンの量が確かめられると、そ れは、細胞増殖速度を決定するために用いられた。この実験は３回繰り返し、そ してデータを照らし合わせた。 ２．滑膜細胞増殖 ウシ滑膜線維芽細胞を、異なる濃度のパクリタキセル(10-5M、10-6M、10-7M、 および10-8M)の存在下または非存在下で24時間の間増殖させた。この時点の終わ りに、生存滑膜細胞細胞の総数を、トリパンブルー染色を用いて色素排除計数に より肉眼で測定した。この実験は、４回行い、そしてデータを照らし合わせた。 Ｂ．結果 １．滑膜細胞中への3Hチミジン取り込み この研究は、低濃度のパクリタキセルが、10-8Mと同程度の低濃度で、滑膜細 胞における3Hチミジンの取り込みを(そして伸長DNA合成により)阻害することを 示した。６時間で、高濃度と低濃度のパクリタキセルにより生じる阻害の程度の 間の有意な差違はなかった(図８)。しかし、24時間までに、より低濃度の薬物(1 0-8M)で幾分かの効果が失われたが、なおコントロール動物中で観察されたより 実質的に低かった。 ２．滑膜細胞増殖 この研究は、パクリタキセルが、増殖する滑膜線維芽細胞に対して、濃度依存 性様式で細胞傷害性であることを示した。10-7Mと同程度の低濃度のパクリタキ セルは、滑膜細胞の増殖を阻害し得る(図９)。より高濃度のパクリタキセル(10- 6 Mおよび10-5M)で、この薬物は、インビトロの滑膜線維芽細胞に細胞傷害性であ った。 Ｃ．考察 上記の研究は、パクリタキセルが、滑膜由来の線維芽細胞の増殖を、インビト ロで、比較的低濃度で阻害し得ることを示す。従って、慢性炎症の進行における 結合組織の役割および炎症疾患の病因の間のそれらの挙動を考えれば、細胞増殖 をブロックすることは、インビボの疾患の結果に好ましく影響する。 実施例４ インビトロにおけるヒト表皮ケラチノサイトに対する パクリタキセルの活性の特徴付け 活発に増殖する正常ヒトケラチノサイトおよびHaCATケラチノサイト(自然に不 死化したヒト表皮ケラチノサイト)に対するパクリタキセルの時間および用量依 存性効果を調査した。 Ａ．材料および方法 ケラチノサイトに対するパクリタキヤルの効果を、細胞数および細胞による3H チミジン取り込みを測定することにより評価した。チミジン取り込みには、低密 度でプレートしたケラチノサイト(10％FCS、グルタミン、抗生物質を補填したDM EM中)を、対数増殖期に６時間０〜10-4Mのパクリタキセル濃度で処理した。3Hチ ミジンを細胞に添加し、そしてさらに６時間インキュベートした。細胞を回収し 、そして放射線活性を測定した。総細胞数を測定するために、ケラチノサイトを 記載のようにプレートし、そしてパクリタキセルの存在下および非存在下で４日 間 インキュベートした。インキュベーションの後、細胞を集め、そしてトリパンブ ルー排除アッセイにより計数した。 Ｂ．結果 生存細胞数を、非処理コントロールのパーセントとして測定した。10-9Mのパ クリタキセル濃度で、細胞生存率は、非処理コントロールの100％より大きかっ た。その一方、10-8Mにおける生存率は、87％でわずかにより少なかった(図７) 。10-7Mまたはより高い濃度のパクリタキセルでは、細胞生存率が有意に低下し た。 Ｃ．考察 パクリタキセルは、10-7Mと同程度の低濃度で、ヒトケラチノサイトに対して 極度に細胞傷害性であった。乾癬において、ケラチノサイトは、異常に増殖する 細胞であり、そしてパクリタキセルは、微小管を安定化するので、この有糸分裂 が活性な系におけるその影響が期待される。その他の研究では、パクリタキセル は、増殖する滑膜細胞に対して細胞傷害性であるが、増殖しない軟骨細胞に対し ては影響を持たないことが見出された。従って、パクリタキセルは、乾癬病変中 の過剰増殖する細胞に対して作用し得るが、その一方、正常上皮細胞に対しては 細胞傷害性はない。 実施例５ 星状細胞増殖に対するパクリタキセルの影響 MS病変において線維状の星状細胞の数が増加し、これは、サイトカインおよび マトリクスメタロプロテイナーゼの産生を介するミエリンの破壊に関連すると考 えられている(Mastronardiら、J．Neurosci．Res．36:315-324，1993;Chandler ら、J．Neurolmmunol．72:155-161，1997)。線維状の星状細胞は、線維状の星状 細胞増殖の生化学的マーカーとして供される、高レベルの神経膠筋原線維酸性タ ンパク質(GFAP)を有する。パクリタキセルミセルの星状細胞増殖を阻害する能力 は、脱髄疾患のトランスジェニックマウス中で評価された(Mastronardiら、J．N eurosci．Res．36:315-324，1993)。 Ａ．材料および方法 連続的パクリタキセル治療の皮下投与（２mg/kg；３×/週、合計10の注射)を 、疾患の臨床的発症時(約４ケ月齢)に開始した。５匹の動物にミセル状パクリタ キセルを投与し、２匹のマウスをコントロールとして用いた；１匹のマウスは非 処置通常、そして１匹が非処置のトランスジェニック同腹子であった。１匹のト ランスジェニックマウスのみをコントロールとして用いた。何故なら、疾患の経 過は、当実験室で良く確立されていたからである。４ケ月齢の動物に、MSの神経 学的病理の初期徴候が明らかとなった後、ミセル状パクリタキセルを注射した。 第10回目の注射の後３日目に、実験研究を終了し、そして脳組織を、組織学的 分析のために処理した。光学顕微鏡観察には、組織をホルマリンで固定し、そし てパラフィン中に包埋した。切片を、抗GFAP抗体(DACO)で染色し、洗浄し、次い でHPPを結合した二次抗体と反応させた。切片を、HPPについて染色し、そしてヘ マトキシリンで対比染色した。電子顕微鏡観察には、組織を、2.5％グルタルア ルデヒドおよびリン酸緩衝化生理食塩水(pH7.2)中で固定し、そして１％四酸化 オスミウムで後固定した。切片を調製し、そしてJEOL 1200 EXIIトランスミッシ ョンEMで観察した。 Ｂ．結果 神経学的病状が進行するにつれ、トランスジェニックマウスの脳におけるGFAP のレベルが上昇する；これは、存在する線維状の星状細胞の数の増加を反映する と考えられる。対照的に、パクリタキセルで処理されたトランスジェニックマウ スは、ほぼ通常レベルのGFAPを有している(表１)。これらのデータは、パクリタ キセルが、インビボ星状細胞増殖を阻害し得、それがMSにおける脱髄の防止に寄 与し得ることを示唆する。 脳組織中のGFAPのさらなる分析を、組織学的に評価した。図78は、通常マウス、 パクリタキセルで処置していないコントロールトランスジェニックマウス、およ びパクリタキセルで処理したトランスジェニックマウスからの脳切片を示す。 コントロールトランスジェニックマウスは、より多い数の線維状の星状細胞を 有しているが、星状細胞の形態は、通常動物で観察されるそれと類似している( 細胞体から拡がる厚い星状突起)。しかし、パクリタキセルで処理されたトラン スジェニックマウスでは、線維状の星状細胞の数は有意に減少した。さらに、２ つの形態学的変化が観察される：線維状の星状細胞の細胞体は、丸くなるように 見え(これは培養でアポトーシスに至ることが示された)、そして細胞突起は、細 胞体周囲で非常に薄くなる。 電子顕微鏡を用いたさらなる微細構造分析は、トランスジェニックマウスの星 状細胞が、細胞体から伸びる濃く染色された星状細胞突起により特徴付けられた ことを示した。これらの幅広い突起は、生存する活発な細胞を示す、良く組織化 された線維のアレイを含む。しかし、パクリタキセルで処理されたトランスジェ ニック動物中の星状細胞の形態は、細胞円形化、薄い線維状突起、および繊維状 タンパク質の細胞内枯渇および組織崩壊により特徴付けられた(図８０)。 Ｃ．結論 これらのデータは、パクリタキセルが、インビボで、MS病変における最も増殖 性の細胞型である線維状の星状細胞の変化を引き起こすことを示す。パクリタキ セルがまた、星状細胞突起の機能を阻害しており、従って、ミエリン破壊に関与 する細胞事象を改変し得るようである。 実施例６ 内皮細胞増殖に対するパクリタキセルの影響 パクリタキセルが、内皮細胞増殖を阻害するか否かを決定するために、EOMA細 胞(内皮細胞細胞株)を低密度でプレートし、そして増加する濃度のパクリタキセ ルの非存在下および存在下で48時間インキュベートした。インキュベーションの 後、生存細胞の数をトリパンブルー排除アッセイを用いて測定した。(図９に提 供される)結果は、10-8M濃度のパクリタキセルが、内皮細胞増殖を、50％以上阻 害し、そして10-7M以上の濃度が、細胞増殖を完全に阻害したことを示す。これ らのデータは、パクリタキセルが、内皮細胞増殖の有効なインヒビターであるこ とを示す。すべての細胞傷害性アッセイは３回実施し、そして個々の測定を各々 ３回行った。 内皮細胞の周期およびアポトーシスに対するパクリタキセルの影響を測定する ため、EOMA細胞を、増加する濃度のパクリタキセルの非存在下または存在下で、 24時間インキュベートした。細胞を、リン酸緩衝化生理食塩水中の3.7％ホルム アルデヒドで20分間固定し、DAPI(4'-6−ジアミニド-2-フェニルインドール)、 １μg/mlで染色し、そしてエピ蛍光光学下で40×対物レンズで調べた。アポトー シス細胞は、断片化した核および凝縮染色質について細胞を計数することにより 評価した。データは、10-8Mより大きいパクリタキセル濃度が内皮細胞アポトー シスを誘導したことを示す(図１０)。 実施例７ 増殖アッセイプロトコル(MTT) １日目に、5〜10×104滑膜細胞を、ウェルあたり(96ウェルプレート)にプレー トした。カラム番号１を細胞なしにした(ブランク)。２日目にプレートを軽くた たいて培地を捨て、種々の濃度の薬物を含む200μlの培地を添加した。細胞を、 ６時間、24時間または４日間曝した。カラム番号１および番号２には薬物は添加 しなかった(それぞれ、ブランクおよび非処理コントロール)。薬物を含む培地を 捨て、そして200μlの新鮮完全培地を添加した。次いで、細胞を、さらに３〜４ 日増殖させた。５日目に、20μlのジメチルチアゾールジフェニルテトラゾリウ ム臭素塩(MTT)(５mg/mlＰＢＳ)を添加し、そして37℃で４時間インキュベートさ せた。培地をデカントし、そして200μlのDMSOを添加した。プレートを30分間攪 拌し、そして562nmの吸光度を読みとった。結果 データは、処理後に残る細胞数を、非処理コントロールのカラム番号２中の細 胞数(細胞数は、アッセイ前になされた標準から得た)で除することにより得た、 生存の％として表現した。集団の50％を殺す薬物濃度であるIC50は、図１１Ａ〜 Ｅから内挿され得る。24時間曝した場合には、LY290181化合物が、最も有効な抗 微小管剤であり、５nM未満のIC50で細胞増殖を低減および阻害することが見いだ された(図Ｃ)。パクリタキセル、エポチロンＢおよびツベルシジンは、それぞれ 、約30nM(図Ａ)、45nM(図Ｆ)および45nM(図Ｂ)のIC50でわずかにより少なく有効 であった。最終的には、フッ化アルミニウム(AIF3)およびヘキシレングリコール のIC50は、それぞれ、約32μM(図Ｅ)および64mM(図Ｄ)の値で有意により高かっ た。 実施例８ マトリクスメタロプロテイナーゼ産生に対する パクリタキセルおよびその他の抗微小管剤の影響 Ａ．材料および方法 １．IL-1刺激AP-1転写活性は、パクリタキセルにより阻害される 軟骨細胞を、AP-1駆動CATレポーター遺伝子を含む構築物でトランスフェクト し、そしてIL-1で刺激し、IL-1(50ng/ml)を添加し、そして種々の濃度のパクリ タキセルの非存在下および存在下で24時間インキュベートした。パクリタキセル 処理は、濃度依存様式でCAT活性を低減した(平均±SD)。アスタリスク(*)で注記 したデータは、IL-1誘導CAT活性と比較して、t検定に従って、P＜0.05で有意性 を有している。示された結果は、３つの独立した実験の代表である。 ２．IL-1誘導AP-1 DNA結合活性、AP-1 DNAに対するパクリタキセルの影響 結合活性を、放射線標識ヒトAP-1配列プローブおよびゲル移動度シフトアッセ イを用いてアッセイした。種々の量のパクリタキセル(10-7から10-5M)次いでIL- 1β(20ng/ml)で処理しない、または処理した、軟骨細胞からの抽出物を、過剰の プローブと氷上で30分間インキュベートした後、非変性ゲル電気泳動した。「co m」レーンは、過剰の非標識AP-1オリゴヌクレオチドを含む。示された結果は、 ３つの独立した実験の代表である。 ３．IL-1誘導MMP-1およびMMP-3 mRNA発現に対するパクリタキセルの影響 細胞を、種々の濃度のパクリタキセル(10-7から10-5M)で24時間処理した。次 いで、IL-1β(20ng/ml)でさらに18時間、パクリタキセルの存在下で処理した。 総RNAを単離し、そしてMMP-1 mRNAレベルを、ノーザンブロット分析により測定 した。次いでブロットを、細片とし、そしてハウスキーピング遺伝子として用い られた、32Ｐ放射線標識ラットGAPDH cDNAで再プローブした。示された結果は、 ４つの独立の実験の代表である。コラゲナーゼ１およびストロメリシン-発現mRN Aのレベルの定量化。MMP-1およびMMP-3発現レベルは、GAPDHで標準化した。 ４．コラゲナーゼ発現に対するその他の抗微小管剤の影響 一次軟骨細胞培養を、ウシ軟骨から新たに単離した。細胞を、100×20mm培養 デッシュ中2.5×106/mlでプレートし、そして５％FBSを含むハムF12培地中、一 晩、37℃でインキュベートした。細胞を、血清を含まない培地で一晩飢餓させ、 次いで種々の濃度の抗微小管剤で６時間処理した。次いで各プレートに、IL-1(2 0ng/ml)を添加し、そしてプレートを、さらに18時間インキュベートした。総RNA を、酸性化グアニジンイソチオシアネート法により単離し、そして変性ゲル上の 電気泳動に供した。変性したRNA試料(15μg)を、１％変性ゲル中ゲル電気泳動に より分析し、ナイロンメンブレンに移しそして32Ｐ標識コラゲナーゼcDNAプロー ブとハイブリダイズした。32Ｐ標識グリセルアルデヒドホスフェートデヒドロラ ーゼ(GAPDH)cDNAは、ほぼ等量の充填を確実にするための内部標準である。感光 したフィルムをスキャンし、そしてImageQuantを用いて定量的に分析した。 Ｂ．結果 １．マトリクスメタロプロテイナーゼのファミリーに対するプロモーター 図19Aは、ゼラチナーゼＢを除くすべてのマトリクスメタロプロデイナーゼが 、転写要素AP-1およびPEA-3を含んでいたことを示す。コラゲナーゼ、およびス トロメリシンのようなマトリクスメタロプロテイナーゼの発現が、転写因子AP-1 の活性化に依存することは良く確立されている。従って、AP-1のインヒビターは 、マトリクスメタロプロテイナーゼの発現を阻害する。 ２．AP-1転写活性に対するパクリタキセルの影響 図19Bに示されるように、IL-1は、AP-1転写活性を５倍刺激した。パクリタキ セルによる、一時的にトランスフェクトされた軟骨細胞の前処理は、IL-1誘導AP -1レポーター遺伝子CAT活性を低減した。従って、IL-1誘導AP-1活性は、軟骨細 胞において、パクリタキセルにより、濃度依存様式(10-7から10-5M)で低減され た。これらのデータは、パクリタキセルが、軟骨細胞においてAP-1活性の有効な インヒビターであったことを示した。 ３．AP-1 DNA結合活性に対するパクリタキセルの影響 AP-1活性のパクリタキセル阻害が、非特異的影響に起因しなかったことを確認 するため、軟骨細胞核溶解物を用いて、オリゴヌクレオチドへのIL-1誘導AP-1結 合に対するパクリタキセルの影響を調べた。図１９Ｃに示されるように、IL-1誘 導結合活性は、10-7〜10-5Mの濃度のパクリタキセルで24時間前処理された軟骨 細胞からの溶解物で減少した。AP-1転写活性のパクリタキセル阻害は、DNAに対 するAP-1結合における減少と緊密に相関していた。 ４．コラゲナーゼおよびストロメリシン発現に対するパクリタキセルの影響 パクリタキセルは、AP-1活性の有効なインヒビターであったので、炎症性疾患 に関与する２つの重要なマトリックスメタロプロテイナーゼであるコラゲナーゼ およびストロメリシンの、パクリタキセルまたはIL-1誘導発現の影響を調べた。 簡単に述べれば、図20に示されるように、IL-1誘導は、軟骨細胞において、コラ ゲナーゼおよびストロメリシンmRNAレベルを増大した。軟骨細胞のパクリタキセ ルによる24時間の前処理は、コラゲナーゼおよびストロメリシンmRNAのレベルを 有意に低減した。10-5Mのパクリタキセルで、完全阻害があった。この結果は、 パクリタキセルが、AP-1活性を阻害する濃度に類似する濃度で、２つのマトリク スメタロプロテイナーゼの発現を完全に阻害したことを示す。 ５．コラゲナーゼ発現に対する他の抗微小管剤の影響 図１２Ａ〜Ｈは、抗微小管剤がコラゲナーゼ発現を阻害したことを示す。コラ ゲナーゼの発現は、前炎症性サイトカインであるIL-1の添加により刺激された。 種々の抗微小管剤、特に、LY290181、ヘキシレングルコール、重水、グリシンエ チルエステル、AlF3、ツベルシジン、エポシロン、およびエチレングリコールビ ス、(スクシンイミジルスクシネート)を用いた軟骨細胞のプレインキュベーショ ンは、すべて１×10-7Mと同程度の低濃度でIL-1誘導コラゲナーゼ発現を妨げる 。 Ｃ．考証 パクリタキセルは、インビトロで10-6Mの濃度でコラゲナーゼおよびストロメ ライシンの発現を阻害し得た。この阻害は、ゼラチナーゼＢを除く全てのマトリ クスメタロプロテイナーゼの誘導に必要とされる工程であるAP-1活性の阻害によ って説明され得るので、パクリタキセルがAP-1依存性である他のマトリクスメタ ロプロテイナーゼを阻害することが予想される。これらのマトリクスメタロプロ テイナーゼのレベルは全ての炎症性疾患において上昇しており、そしてマトリク ス分解、細胞遊走および細胞増殖、ならびに血管形成において主要な役割を果た す。従って、マトリクスメタロプロテイナーゼ(例えば、コラゲナーゼおよびス トロメライシン)の発現のパクリタキセルによる阻害は、炎症性疾患に有利な効 果を有する。 実施例９ プロテオグリカンの発現に対する抗微小管剤の効果 初代軟骨細胞培養物を、ウシの軟骨から新鮮に単離した。この細胞を、100mm ×20mm培養ディッシュ中１mlあたり2.5×106でプレーティングし、そして５％FB Sを含むハムF12培地中で37℃で一晩インキュベートした。この細胞は、無血清培 地中で一晩飢餓させ、次いで種々の濃度（10-7M、10-6M、10-5M、および10-4M） の抗微小管剤で６時間処置した。次いで、IL-1(20mg/ml)を各プレートに添加し 、そしてこれらのプレートをさらに18時間インキュベートした。総RNAを酸性化 グアニジンイソチオシアネート法により単離し、そして変性ゲル上での電気泳動 に供した。変性RNAサンプル（15μg）を、１％の変性ゲルにおけるゲル電気泳動 により分析し、ナイロンメンブレンに移し、そして32P-標識プロテオグリカン（ アグリカン）cDNAプローブとハイブリダイズさせた。32P-標識グリセルアルデヒ ドリン酸デヒドラーゼ（GAPDH）cDNAを、おおよそ等量の充填を確実にするため の内部標準とした。曝露フィルムをスキャンし、そしてImageQuantを用いて定量 分析した。結果 図13A〜Hは、コラゲナーゼ発現に阻害効果を有した（実施例８）抗微小管剤（ 具体的には、LY290181、ヘキシレングリコール、重水、グリシンエチルエステル 、AIF3、ツベルシジンエポチロン（tubercidin epothilone）、およびエチレン グリコールビス−（スクシンイミジルスクシネート））が、評価した全ての濃度 で、軟骨マトリクスの主要成分であるアグリカンの発現に影響しなかったことを 示す。 実施例10 NF-κB活性（細胞ベースの）アッセイ IL-1およびTNFの両方は、NF-κBと称する転写因子（これはまた、炎症プロセ スに関与する）により駆動される遺伝子の転写を活性化する前炎症サイトカイン として同定された。従って、IL-1およびTNFの炎症効果は、IL-1およびTNFの刺激 に応答するレポーター遺伝子アッセイ（NF-κB）により間接的に評価され得る。 一日目に、NF-κBレポーター構築物（Luciferase、Promega Corp.）で安定に トランスフェクトしたNIH-3T3（マウス線維芽細胞）を、１ウェル（24ウェルプ レート）当たり５×104プレートした。一旦コンフルエントになると（３〜４日 目）、細胞を１mlの無血清培地を完全培地と置換することにより飢餓させた。24 時間の飢餓の後、細胞を種々の濃度の抗微小管剤で６時間処置し、その後IL-1(2 0ng/ml)およびTNF（20ng/ml）を添加した。細胞をIL-1およびTNFに１時間および 16時間曝露し、そして24時間後にNF-κB活性を測定した。５日目に、培地を捨て 、そして細胞をPBSで一回リンスした。次いで、細胞を、250μlの溶解緩衝液（P romega Corp.Wisconsin）で15分間抽出した。2.5μlの細胞抽出物を含むチュー ブに25μlのルシフェラーゼ基質を添加することにより、NF-κB転写活性を、評 価した。チューブをすぐにルミノメーター（Turner Designs）に挿入し、そして 光放射を10秒間測定した。次いで、ルシフェラーゼのデータをタンパク質濃度に ついて標準化した。結果 このデータを、抗微小管剤がNF-κB誘導において示した阻害（誘導の倍数）を 示すことにより表現した。図80A、図80B、図80C、および図80Dに示すように、ツ ベルシジンおよびパクリタキセルは、IL-1誘導NF-κB活性およびTNF誘導NF-κB 活性の両方を阻害した。６時間処理および24時間処理についての、ツベルシジン およびパクリタキセルの阻害効果は、それぞれ、約10μMおよび２μMであった。 実施例11 パクリタキセルによる腫瘍血管形成の阻害 家畜用のニワトリ受精胚を、殻を除去する前に４日間孵化する。卵の内容物を 、周りを空気で囲まれた殻を除去すること、内殻膜を分離すること、殻の反対側 に穴を開けること、および平滑端から穏やかに卵の内容物を滑り出させることに よって空にする。内容物を、滅菌した丸底ガラス容器へと空け、ペトリ皿の蓋で 覆い、そして90％相対湿度および３％二酸化炭素で孵化する。 MDAY-D2細胞（マウスリンパ系腫瘍）をマウスに注射し、そして腫瘍を0.5〜1. 0gの重さになるまで増殖させる。マウスを屠殺し、腫瘍部位をアルコールで拭き 、切除し、滅菌組織培養培地に置き、そして層流フード内で１mm角に刻む。切除 し た腫瘍を９日齢のニワトリ胚に入れる前に、CAM表面を30ゲージ針でおだやかに 擦り、腫瘍移植を確実にする。次いで、腫瘍をインキュベーションの８日後（脱 殻後４日間）にCAMに入れ、血管供給を確立するために４日間CAM上で増殖させる 。４つの胚をこの方法を利用して調製し、各々の胚は３つの腫瘍を受ける。12日 目に、胚の３つの腫瘍各々に、20％パクリタキセルを充填したサーモペースト(t hermopaste)、充填していないサーモペースト、または処置無しのいずれかを与 えた。処置を２日間継続してから結果を記録した。 外植したMDAY-D2腫瘍は、血管形成因子を分泌し、これは毛細管（CAMに由来す る）の内部へ腫瘍塊への成長を誘導し、適切な大きさにまで成長を続けさせる。 すべての腫瘍の血管がCAMに由来するが、全ての腫瘍細胞は移植片に由来するの で、これらの２つのプロセスに対する治療的介入の効果を独立して評価すること が可能である。このアッセイは、以下に対するパクリタキセルを充填したサーモ ペーストの有効性を決定するのに使用されている：（ａ）腫瘍の血管新生の阻害 および（ｂ）腫瘍細胞自身の増殖の阻害。 この研究からの固定組織の、直接インビボ実体顕微鏡による評価および組織学 的検査は以下を実証した。20％パクリタキセルを充填したサーモペーストで処置 した腫瘍において、コントロール腫瘍（図14Aおよび図14B）と比較した場合、腫 瘍に供給する血管の数の減少（図14Cおよび図14D）、腫瘍内の血管の数の減少、 および腫瘍の周辺（代表的には固形腫瘍内に非常に高度に血管新生している領域 ）の血管の数の減少が存在した。腫瘍は、研究が行われた２日間の間に、大きさ および質量が小さくなり始めた。さらに、多くの内皮細胞が細胞分裂を停止して いることが見られ、これは、内皮細胞増殖が影響を受けたことを示唆する。腫瘍 細胞はまた、しばしば、細胞分裂を停止していることが見られた。４つの胚全て が、20％パクリタキセルを充填したサーモペーストが腫瘍血管新生を抑制するが 充填していないサーモペーストは効果が無かった点で一致するパターンを示した 。 比較すると、充填していないサーモペーストで処置したCAMにおいて、腫瘍は 正常な周辺組織のものと比較した場合に、血管の数および密度の増加、およびパ クリタキセルを充填したペーストで処置した腫瘍において観察されるよりも劇的 に多い血管を伴って、良好に血管新生した。新たに形成された血管は、輪の中心 に結合するスポークのように見える全ての角度から腫瘍に進入していた（図14A および図14B）。コントロール腫瘍は、本研究の過程の間、大きさおよび質量の 増加を続けた。組織学的には、多くの膨脹した薄壁毛細管が腫瘍の周囲に見られ 、そして細胞分裂している内皮細胞は殆ど見られなかった。腫瘍組織は、良好に 血管新生し、そしてずっと生存していた。 例として、同一のCAMに入れた２つの類似の大きさ（当初、外植時）の腫瘍に おいて、以下のデータを得た。20％パクリタキセルを充填したサーモペーストで 処置した腫瘍について、腫瘍は330mm×597mmの大きさであった；腫瘍のすぐ周辺 には14の血管を有するが、腫瘍塊は、３〜４の細い毛細管のみを有する。充填し ていないサーモペーストで処置した腫瘍について、腫瘍の大きさは623mm×678mm であった；腫瘍のすぐ周辺には54の血管をするが、腫瘍塊は、12〜14の細い血管 を有する。さらに、周囲のCAM自身は、パクリタキセル処置腫瘍の周辺領域と比 較してはるかに多い血管を含んでいた。 本研究は、サーモペーストが腫瘍増殖および発生に伴う病理学的な血管形成を 阻害するのに充分な量のパクリタキセルを放出することを示す。これらの条件下 で、血管形成は、組織周辺から腫瘍塊への毛細管の内側への伸長を誘導し得る血 管形成因子を産生する腫瘍細胞によって最大限に刺激される。20％パクリタキセ ルを充填したサーモペーストは、このプロセスをブロックし得、そして適切な血 液供給を維持する腫瘍組織の能力を制限し得る。これは、腫瘍細胞自身に対する この薬物の細胞傷害性効果を介すること、および成長および増殖に必要とされる 栄養素を組織から枯渇させることの両方による、腫瘍塊の減少をもたらす。 実施例12 パクリタキセルによる血管形成の阻害Ａ．ニワトリ絨毛尿膜（「CAM」）アッセイ 家畜用の受精ニワトリ胚を、殻無し培養の前に３日間孵化した。この手順にお いて、卵の内容物を周りを空気で囲まれた殻を除去することによって空にした。 次いで、内殻膜を分離し、そして殻の反対端に穴を開けて卵の内容物を平滑端か らおだやかに滑り出させた。卵の内容物を滅菌した丸底ガラス容器に空け、そし てペトリ皿蓋で覆った。次いで、これらを90％相対湿度、および３％CO2で孵化 器に置き、そして３日間孵化した。 パクリタキセル（Sigma、St.Louis、MI）を、0.5％水性メチルセルロースの10 μlアリコートあたり、0.25、0.5、１、５、10、30μgの濃度で混合した。パク リタキセルは水に不溶性であるので、ガラスビーズを使用して細かな粒子を生成 した。この溶液の10μlアリコートをパラフィルム上で１時間乾燥させ、直径２m mのディスクを形成させた。次いで、パクリタキセル含有乾燥ディスクを、孵化 ６日目の各CAMの成長端に慎重に置いた。コントロールは、パクリタキセルを含 まないメチルセルロースディスクを同じ時間経過でCAM上に置くことによって得 た。２日間の曝露後（孵化８日目）、脈管構造を実体顕微鏡の助けを用いて試験 した。白色の不透明溶液であるLiposyn IIをCAMに注射して、脈管の詳細の可視 性を増大させた。染色されていない、生きている胚の脈管構造を、ビデオカメラ （Dage-MTI Inc.，Michigan City、IN）と接続されたZeiss実体顕微鏡を用いて 画像化した。次いで、これらのビデオ信号を、160×の倍率で表示し、そして画 像分析システム（Vidas、Kontron；Etching、Germany）を用いて捕獲した。次い で、画像のネガをグラフィックレコーダー（Model 3000;Matrix Instruments、O rangeburg、NY）上で作製した。 ８日齢の殻無し胚の膜を、0.1Ｍカコジル酸ナトリウム緩衝液中の２％グルタ ルアルデヒドに浸した。さらなる固定剤をCAMの下に注射した。10分間のインサ イチュの後、CAMを除去し、そして室温で２時間新鮮な固定剤中に入れた。次い で、組織を、６％のスクロースを含むカコジル酸緩衝液中で一晩洗浄した。目的 の領域を１％四酸化オスミウム中で４℃で1.5時間後固定した。次いで、組織を 特級エタノール中で脱水し、溶媒をプロピレンオキシドと交換し、そしてSpurr 樹脂中に包埋した。薄い切片をダイヤモンドナイフで切り、銅グリッドに置き、 染色し、そしてJoel 1200EX電子顕微鏡で試験した。同様に、0.5mm切片を切り、 そして光学顕微鏡のためにトルエンブルーで染色した。 発生11日目に、ニワトリ胚を、腐食鋳造技術のために使用した。Mercox樹脂（ Ted Pella、Inc.、Redding、CA）を、30ゲージの皮下用針を用いてCAM脈管構 造に注射した。鋳造材料は2.5グラムのMercox CL-2Bポリマーおよび0.05グラム の触媒（55％ベンゾイルペルオキシド）からなり、５分間の重合時間を有する。 注射後、プラスチックをインサイチュに１時間室温で放置し、次いで65℃で一晩 オーブンに放置した。次いでCAMを、水酸化ナトリウムの50％水溶液に入れてす べての有機成分を消化した。プラスチック鋳造物を徹底的に蒸留水で洗浄し、風 乾し、金／パラジウムでコーティングし、そしてPhilips 501B走査型電子顕微鏡 で観察した。 上記の実験の結果を図15〜18に示す。手短には、正常なニワトリの殻無し卵培 養の一般特性を図15Aに示す。インキュベーションの６日目に、胚を血管の放射 状に拡張する網に対して中心に配置した。CAMは胚に隣接して発生した。これら の成長する血管は表面に近接して存在し、そして容易に可視であり、そのためこ の系を血管形成の研究のために理想化されたモデルとなる。CAMの、生きていて 、染色されていない毛細管網は、実体顕微鏡で非侵襲性に画像化され得る。図15 Bは、このような脈管化領域を示し、ここで毛細管内の細胞血液要素をビデオ／ コンピューターインターフェースの使用により記録した。このようなCAM毛細管 網の三次元構造を、腐食鋳造方法によって示し、そして走査型電子顕微鏡で観察 する（図15C）。これらの鋳造によって、底にある血管がCAMの表面に向かって放 射し、そこで、吻合毛細管の単層を形成することが明らかになった。 CAMを横断する断面図は、二重細胞膜、外胚葉に隣接して存在する毛細管を含 む、より広い中胚葉層、外膜細胞、および内部の単一内胚葉細胞層からなる外側 の外胚葉を示す（図15D）。電子顕微鏡レベルで、CAM毛細管の代表的な構造の詳 細を示す。代表的には、これらの血管は、外胚葉の内部の細胞層と緊密に関連す る位置に存在する（図15E）。 0.25、0.5、１、５、10、または30μｇの濃度のパクリタキセルに48時間曝露 した後、各CAMを、血管形成に対する効果を評価するために、ビデオ／コンピュ ーターインターフェースを備えた実体顕微鏡を用いて、生きている条件下で試験 した。この画像化設定において、160×倍率が使用され、これによって毛細管内 の血液細胞の直接の可視化が可能になり；それにより、目的の領域における血流 が容易に評価され、そして記録され得た。本研究について、血液形成の阻害を、 毛 細管網および血管血流を欠くCAMの領域（直径２〜６mmと測定される）と規定し た。実験を通して、無血管域を４点の無血管勾配で評価した（表１）。この段階 は、全体の阻害の程度を表し、そして最大の阻害を無血管勾配段階において３で 表す。パクリタキセルは、非常に一致しており、そしてその濃度に依存して48時 間以内に最大の無血管域（直径６mmまたは無血管勾配段階で３）を誘導した。 種々の治療剤の異なる濃度での効果の用量依存性の実験データを表２に示す。 代表的なパクリタキセル処置CAMはまた、直径６mmと測定される無血管域に対 して中心に位置する透明のメチルセルロースディスクとともに示す。いくらか高 い倍率で、このような無血管域の周辺は明らかに明瞭である（図16C）；周辺の 機能的な血管は、しばしば、パクリタキセルの供給源から再配向されていた（図 16Cおよび図16D）。このような血流の曲がった再配向は、決して正常な条件下で は観察されなかった。パクリタキセルの効果の別の特徴は、血液細胞凝集を示す 無血管域内での血島の形成であった。 パクリタキセル処置CAMの関連する形熊学的変化は、光学顕微鏡および電子顕 微鏡レベルの両方で容易に明らかになる。簡便な提示のために、正常から無血管 状態までの一般的な転移の３つの異なる相を示す。無血管域の周辺付近では、CA Mは、３つの全ての胚葉内の分裂期の細胞の豊富さによって特徴づけられる（図1 7Aおよび図18A）。この増強された有糸分裂はまた、毛細管内皮細胞についての 観察と一致していた。しかし、内皮細胞は、血液細胞の血管外溢出を伴わないで 無傷で接合部に留まっていた。さらなる分解とともに、CAMは、毛細管の崩壊お よび溶解によって特徴づけられる（図17Bおよび図18B）。推定上の内皮細胞は、 代表的には、分裂を停止しているが、血液細胞との空間的に緊密な関係を維持し 、そして外胚葉の下に存在する。しかし、これらの細胞は、接合部では連結して いない。無血管域の最も中心部分は、厚くなった外胚葉層および内胚葉層によっ て特徴づけられる（図17Cおよび図18C）。これらの層は、厚くなっていたが、細 胞接合部は、無傷のままで、そして層はそれらの構造的な特徴を維持していた。 中胚葉内において、散在した分裂停止細胞が豊富であった。これらの細胞は、以 前の相で観察された内皮細胞の局在化を示さなかった。また、この無血管域を通 して、変性細胞は、電子が濃い液胞および細胞残渣によって示されるように通常 であった（図18C）。 まとめると、本研究によって、パクリタキセルのCAMへの適用後48時間で血管 形成が阻害されたことが示された。血管阻害は、パクリタキセルの効果の３つの 遷移相によって代表される無血管域を形成した。無血管域の中心の最も影響を受 けた領域は、溢出した赤血球を伴う壊れた毛細管を含んでいた。これは、内皮細 胞間の細胞間接合部が存在しなかったことを示した。外胚葉および内胚葉の細胞 は、それらの細胞間接合部を維持し、それによりこれらの胚葉が無傷のままであ った。しかし、それらは、わずかに厚くなっていた。正常の血管域に近付くにつ れ、血管は、それらの接合部複合体を保持し、それによってまた無傷のままであ った。パクリタキセル処置域の周辺では、さらなる血管増殖が阻害された。これ は、血管の代表的な再配向すなわち「くの字曲がり」効果によって明らかであっ た（図16D）。 パクリタキセル処置無血管域によってまた、CAMの３つの全ての胚葉において 多くの細胞が分裂停止していることが明らかになった。これは、パクリタキセル に特有であった。なぜなら、以前の研究においてはそのような事象は示されてい ないからである。分裂停止することによって、内皮細胞は、血管形成に関与する 、それらの正常な代謝機能を受け得ない。比較すると、スラミンおよび酢酸コル チゾンによって形成された無血管域は、CAMにおいて分裂停止細胞を産生しない 。それらは、処置された領域へのさらなる血管成長を抑制しただけであった。従 って、たとえ、これらの因子が抗血管形成因子であるとしても、血管形成過程が 標的化されうる点は多く存在する。 パクリタキセルの48時間の期間にわたる効果もまた、観察した。この期間の観 察の間に、適用後９時間後にすでに血管形成の阻害が起こっていることが認めら れた。組織学的な切片によって、図17Aおよび図18Aにおいて示される48時間後で の無血管域の第一の遷移相に見られるのと類似の形態が明らかになった。また、 本発明者らは、以前に観察された無血管域への再血管形成過程を観察した。ヘパ リンおよび止血性ステロイドによって形成された無血管域が、適用後60時間後に 再血管形成されたことが見い出された。１つの研究において、パクリタキセル処 置無血管域は、適用後少なくとも７日間再血管形成せず、これは、より長期の強 力な効果を示唆した。 実施例13 LNCaP細胞増殖に対するパクリタキセルおよびカンプトテシンの効果 材料および方法 LNCaP細胞を、96ウェルプレートにそれぞれ、２×103細胞／ウェルおよび１× 103細胞／ウェルの濃度で播種した。48時間後、異なる濃度のパクリタキセルま たはカンプトテシン（25μl）を各培養ウェルに添加し、そしてプレートを37℃ で５日間インキュベートした。インキュベーション後、細胞を１％グリセルアル デヒド溶液で固定し、そして0.5％クリスタルバイオレットで５分間染色した。 色素は、100μlの緩衝液で連続的に溶出し、そして吸光度を、492nmの吸光度の 波長を用いて、Titertek Multiskanマイクロプレート読み取り機で読み取った。 細胞増殖を、化合物の非存在下でのコントロールウェル（100％に設定）に対す る百分率として表現した。 結果 パクリタキセルは、約0.09nMのEC50でLNCaP細胞増殖を阻害した。アポトーシ ス実験をDNA断片化アッセイを用いて、パクリタキセル処置後にウェル中の細胞 で実施した。細胞の広範なアポトーシスが観察された。これは、パクリタキセル がアポトーシス機構によって細胞傷害性であることを示唆する。 カンプトテシンのLNCaP細胞に対する細胞傷害性作用は、極めて強力であった 。0.001nMという低い濃度でさえ、60％を超える細胞に毒性であった。従って、 この薬物のLNCaP細胞に対するEC50は、フェムトモル濃度範囲にあるに違いない 。コントロールの492nm吸光度＝0.49±0.06 コントロールの492nm吸光度＝0.47±0.05 実施例14 さらなる抗微小管剤の抗血管形成活性 パクリタキセルに加えて、他の抗微小管剤も同様に、ポリマーキャリア内に取 り込まれ得る。以下に提供する代表的な例は、カンプトテシン（campothecin） およびビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチンおよびビンクリスチン）を 含み、そして微小管安定化剤（例えば、ツベルシジン、フッ化アルミニウムおよ びLY290181）を含む。 Ａ．PCL への薬剤の組込み 薬剤は、乳鉢および乳棒で挽いて、粒子径を５ミクロン未満に減じた。次いで 、これを乾燥粉末としてポリカプロラクトン（分子量18,000、Birmingham Polym ers、AL USA）と混合した。混合物を65℃に５分間加熱し、そして融解ポリマー ／薬剤混合物を５分間滑らかなペーストへと撹拌した。次いで、融解ペーストを １mlシリンジへ入れ、そして押し出して３mgのペレットを形成した。次いで、こ れらのペレットを妊娠６日目にCAMに入れてそれらの抗血管形成特性を評価した 。 Ｂ．CAM に対するカンプトテシンを充填したPCLペーストの効果 カンプトテシンを充填したサーモペーストは、コントロールのPCLペレットと 比較した場合に血管形成を阻害するに有効であった。５％の薬物を充填して、試 験した4/5のCAMが強力な血管形成阻害を示した。さらに、１％および0.25％を充 填して、それぞれ、2/3および3/4のCAMが血管形成阻害を示した。それゆえ、こ れらの結果から、カンプトテシンがPCLサーモペーストから十分に放出され、そ して治療的抗血管形成効力を有することは明白である。 Ｃ．ビンブラスチンを充填したPCLペーストおよびビンクリスチンを充填したPCL ペーストのCAMに対する効果 処方物をCAMに対して試験する場合、薬剤が生物学的効果を誘発するに充分な 量でPCLペレットから放出されたことは明白であった。ビンブラスチンおよびビ ンクリスチンの両方は、コントロールPCLサーモペーストペレットと比較した場 合、CAMアッセイにおいて抗血管形成効果を誘導した。 0.5％および0.1％の薬物充填濃度で、ビンクリスチンは、試験したCAMの全て で血管形成阻害を誘導した。２％を超える濃度を試験した場合、有毒な薬物レベ ルに達し、そして予期しなかった胚の死が起こった。 ビンブラスチンはまた、0.25％、0.5％および１％の濃度でCAMに対して血管形 成を阻害するに有効であった。しかし、２％を超える濃度では、ビンブラスチン は胚に対して毒性であった。 Ｄ．ツベルシジンを充填したPCLペーストのCAMに対する効果 ツベルシジンを充填したペーストは、コントロールペレットと比較した場合、 血管形成を阻害するに有効であった。１％薬物充填で、ツベルシジンは、試験し た1/3のCAMで血管形成阻害を誘導した。しかし、５％薬物充填を超える薬物濃度 では、ツベルシジンは、2/3のCAMにおいて協力に血管形成を阻害した。従って、 これらの結果から、ツベルシジンは、PCLペーストから充分に放出され、そして 強力な抗血管形成活性を有することは明白であった。 Ｅ．フッ化アルミニウムを充填したPCTペーストのCAMに対する効果 フッ化アルミニウム（AlF3）を充填したPCLペーストは、コントロールペレッ トと比較した場合、20％薬物充填で血管形成を阻害するに有効であった。20％薬 物充填で、2/4のCAMが、直径２〜６mmと測定される無血管域によって明らかなよ うに、血管形成阻害を示した。しかし、より低い薬物充填である１％および５％ では、血管形成阻害は明白ではなかった（それぞれ、0/6のCAMおよび0/5のCAM） 。従って、フッ化アルミニウムは、より高い薬物濃度でのみ血管形成阻害を誘導 するに有効であった。 Ｆ．LY290181 を充填したPCLペーストのCAMに対する効果 ５％LY290181を充填したPCLペーストのCAMに対する評価によって、LY290181が 試験した1/3のCAMにおいて血管形成阻害を誘発したことが示された。しかし、１ ％薬物充填で、LY290181は抗血管形成応答を誘発しなかった（n=2）。 実施例15 パクリタキセルの非増殖性細胞の生存度に対する効果 疾患改変剤が、慢性炎症の発症の間に過度に生じる、種々の適切でない細胞活 性（増殖、炎症、タンパク質分解酵素産生）を強力に阻害し得ることは重要であ るが、正常組織に対して毒性であってはならない。特に、正常細胞が障害を受け ないことは重要である。なぜなら、これは、疾患の進行をもたらすからである。 本実施例では、パクリタキセルの正常な非分裂細胞のインビトロでの生存度に対 する効果を、コンフルエンスにまで増殖させた培養軟骨細胞を利用して試験した 。 手短には、軟骨細胞を、パクリタキセルの存在（10-5M、10-7M、および10-9M ）下または非存在下（コントロール）下で72時間インキュベートした。この期間 の最後に、生存している細胞の総数を、トリパンブルー染色除外によって肉眼で 決定した。この実験はを４回行い、そしてデータを照合した。 この実験結果を図21に示す。手短には、図21から明白なように、パクリタキセ ルは、高濃度（10-5M）のパクリタキセルでさえ、正常の非増殖性細胞のインビ トロでの生存度には影響しなかった。より詳細には、以前の実施例において記載 された病理過程を遮断するに充分な薬物濃度でさえ、正常軟骨細胞に対する細胞 傷害性は存在しない。 実施例16 局所的なパクリタキセル処方物のための透過増強剤の選択 Ａ．種々の増強剤におけるパクリタキセルの溶解性 ール、イソプロピルミリステート、オレイン酸、およびTranscutol：イソプロピ ルミリステート（9:1v:v）。ガラスバイアル中の１mlの各増強剤を予め37℃に加 熱し、そして過度のパクリタキセルを添加した。各バイアルからの0.5mlの液体 のサンプルを37℃、および13000rpmで２分間遠心分離した。遠心分離チューブか らの上清のアリコート（0.1ml）を、メスフラスコに移し、そしてメタノールで 希釈した。パクリタキセル含量を高速液体クロマトグラフィー（HPLC）によって 評価した。 Ｂ．分配係数 特定量のパクリタキセルを37℃に加熱した増強剤の一定容積に溶解した。この 溶液のアリコート（1ml）を４mlのガラスバイアル中の1mlのオクタノールへ添加 した。次いで、リン酸緩衝化生理食塩水（1ml）（pH7.4）を添加し、そしてバイ アルをボルテックスして、乳濁液を作製した。バイアルを37℃のオーブンに16時 間入れ、その後、0.1mlのオクタノール相を各バイアルから取り出し、そして9.9 mlのメタノールを用いて希釈した。水相について、0.5mlをオレイン酸のバイア ルおよびイソプロピルミリステートのバイアルからサンプリングし、そして0.5m lをプロピレングリコールのバイアルからサンプリングし、そして0.5mlのメタノ ールで希釈した。Transcutolバイアルから、0.1mlをサンプリングし、そして9.9 mlの50:50 Transcutol：PBSで希釈し、そして0.1mlをエタノールのバイアルから サンプリングし、そして50：50のエタノール：PBSで希釈した。パクリタキセル 含量をHPLCで決定した。各決定を三連で実施した。 Ｃ．結果 37℃での各増強剤におけるパクリタキセルの溶解度を表１に列挙する。 オクタノール／水分配係数KO/Wを表２に列挙する。 有効に作用させるために、パクリタキセルは生きている表皮の下層にまで皮膚 を透過しなければならない。薬物が生きている表皮を透過することは確立されて おり、薬物は、100に近いオクタノール／水分配係数を有していなければならな い（Hadgraft J.H.およびWaltcrs K.、Drug absorption enhancement、A.G．de Boers編、Harwood Publlshers、1994）。表１および表２の結果に基づき、プロ ピレングリコールおよびTranscutolが、パクリタキセルの溶解およびその油相か ら水相への分配の増強の最良の組合せを示した。 しかし、Transcutolおよびプロピレングリコールの両方によって産生されるKO /W は、いくらか低くあり得、それゆえ、それらは、オクタノール相におけるパク リタキセルの溶解度を増大するために無限大のKO/Wを有するイソプロピルミリス テートと合わされた。イソプロピルミリステートおよびTranscutolを１：９の容 積比で混合した。イソプロピルミリステートは、Transcutol中に室温で容易に溶 解した。均質な相を形成させるために、プロピレングリコールおよびイソプロピ ルミリステートもまた、エタノールと、4:3.5:0.5のプロピレングリコール：エ タノール：イソプロピルミリステートの比で混合した。KO/Wの結果を表３に示す 。 イソプロピルミリステートのTranscutolへの添加は、分配係数の有意な増加を もたらした。しかし、プロピレングリコール：エタノール：イソプロピルミリス テート溶液の分配係数は、プロピレングリコール単独の分配係数よりも有意な改 良をもたらさなかった。この最後の結果、およびエタノールが乾癬状態を悪化さ せるという事実によって、この増強剤の組合せを、さらなる考慮から効率的に除 外した。さらに、イソプロピルミリステートの添加は、実際に、パクリタキセル の溶解度をTranscutol単独における溶解度よりも増加させた。パクリタキセルの Transcutolにおける溶解度は346.9mg/mlであったが、イソプロピルミリステート の組合せにおいては、Transcutol：溶解度は353.9mg/mlに増加した。従って、こ の増強剤の組合せを皮膚研究に選択した。 実施例17 局所的パクリタキセル処方物の調製および分析 Ａ．パクリタキセル軟膏Ａの調製 Transcutol（3.2g）、イソプロピルミリステート（0.3g）、ラブラソール（2. 5g）、パクリタキセル（0.01g）および0.5mCi/ml 3Hパクリタキセル（0.3ml）を 、20mlのシンチレーションバイアル中で合わせた。別々のシンチレーションバイ アル中に、ラブラフィル（2.5g）、アルラセル165（1.2g）およびコンプリトー ル（0.3g）を合わせ、そして完全に融解するまで70℃で加熱した。最初のシンチ レーションバイアルの内容物をこの融解物に添加し、均質になるまでボルテック スし、そして放冷した。 Ｂ．パクリタキセル軟膏Ｂの調製 Transcutol（2.5g）、イソプロピルミリステート（1.0g）、ラブラソール（la brasol）（2.5g）、パクリタキセル（0.01g）および0.5mCi/ml 3H-パクリタキセ ル（0.3ml）を、20mlのシンチレーションバイアル中で合わせた。別々のシンチ レーションバイアル中に、ラブラフィル（labrafil）（2.5g）、アルラセル（ar lacel）165（1.2g）およびコンプリトール（comprltol）（0.3g）を合わせ、そ して完全に融解するまで70℃で加熱した。最初のシンチレーションバイアルの内 容物をこの融解物に添加し、均質になるまでボルテックスし、そして放冷した。 Ｃ．皮膚の調製、および透過研究 凍結し、切除したユカタンミニブタの皮膚を使用するまで−70℃に保存した。 皮膚サンプルを、凍結皮膚からディスクを穴開けするためのno.10のコルク穴開 け器を用いて調製した。サンプルをストレプトマイシン−ペニシリン溶液でリン スし、そして凍結用バッグに入れ、そして−70℃で保存した。 皮膚切片を、角質層を上にしてFranz拡散セル上にマウントした。底の受取溶 液はR.O水中の0.05％アモキシシリン溶液であった。供与セルを、各皮膚表面に 取り付けた。パクリタキセル軟膏を融解するまで（40〜50℃）加熱し、そしてシ リンジ中に入れた。まだ融解している間に、0.1mlを各皮膚表面に押し出した。 供与セルをガラスディスクで覆い、そしてこの集合体を24時間放置した。 24時間後、セルを取り外し、過剰な軟膏を除去し、そしてシンチレーションバ イアルに保存した。皮膚表面を、3mlのジタロロメタン（DCM）で素早く洗浄し、 そして乾燥させた。洗浄DCMを過度の軟膏と同じバイアルに保存した。皮膚切片 および受取溶液を別々のシンチレーションバイアルに入れた。皮膚を−30℃で30 μm断片にに凍結切片化（cryotome）し、そして別々のバイアルに採取した。最 初に刈り取ったものおよび残っている皮膚もまた、別々のバイアルに採取した。 切片化した皮膚サンプルを各バイアルに0.5mlの組織溶解剤を添加することによ り溶解した。サンプルを一晩放置して室温で溶解させた。翌日、３mlのシンチレ ーション混液をバイアルに添加した。DCM洗浄溶液について、100μlを１mlのア セトニトリルに移し、次いで３mlのシンチレーション混液を添加した。全ての溶 液の放射能をβカウンターを用いて測定した。 皮膚サンプルをFranz分散セルにマウントし、そして３群に分割した。各サン プルを適切に処置した（処置なしまたはパクリタキセル含有軟膏Ｂもしくは非含 有軟膏Ｂ）。24時間後、サンプルを取り出し、そして標準的な組織学技術を用い て処理した。 Ｄ．結果 組織学的切片から、処理していない皮膚の角質層切片が50〜120μmの間の厚さ であることが見い出された一方、生きている表皮は400〜700μmの厚さであった 。３％w/wイソプロピルミリステートを含んだ軟膏（軟膏Ａ）について、皮膚に おけるパクリタキセルの濃度は、角質層および生きている表皮全体において、本 質的に１μg/ml（1.2×10-6M）で一定であった。10％w/wイソプロピルミリステ ートを含んだ軟膏（軟膏Ｂ）について、パクリタキセルの濃度は、角負層および 生きている上皮全体において、一定であったが、角質層においてより高かった（ ６μg/ml対２μg/ml）。各軟膏試験のための受取溶液中の放射能は存在せず、こ のことは、パクリタキセルが皮膚切片を完全には透過しなかったことを示唆した 。 パクリタキセルを含む軟膏を適用した場合、全体としては差異は認められなか った。 実施例18 乾癬の処置のためのパクリタキセルの全身用処方物の開発 乾癬の重篤な症例において、より積極的な処置が受容可能と見なされ、それゆ えパクリタキセルでの全身処置に関連する毒性は受容可能であり得る。 パクリタキセルのための全身用処方物は、両親媒性ジブロックコポリマー（co pyolymer）を含む。このコポリマーは、水溶液中で、水中で疎水性の芯および親 水性の殻からなるミセルを形成する。ポリ（DL-ラクチド）−ブロック−メトキ シポリエチレングリコール（PDLLA-MePEG）、ポリカプロラクトン−ブロック− メトキシポリエチレングリコール（PCL-MePEG）およびポリ（DL-ラクチド-コ-カ プロラクトン）−ブロック−メトキシポリエチレングリコール（PDLLACL-MePEG ）のジブロックコポリマーは、大量融解重合化手順（bulk melt polymerization procedure）、または類似の方法を用いて合成され得る。手短には、所定量のモ ノマーDL-ラクチド、カプロラクトン、および異なる分子量を有するメトキシポ リエチレングリコールを加熱（130℃）して、窒素通気下で融解させ、そして撹 拌した。触媒オクタン酸スズ（0.2％w/w）を融解したモノマーに添加した。重合 化を４時間実施した。分子量、臨界ミセル濃度、および最大のパクリタキセルを 充填したを、それぞれ、GPC、蛍光、および溶解性試験で測定した（図22）。高 いパクリタキセル保有能力が得られた。パクリタキセルを溶解する能力は、組成 物およびコポリマーの濃度に依存する（図22および図23）。PDLLA-MePEGが最も 安定した溶解パクリタキセルを与えた（図23および図24）。 ポリマーミセルの内部芯内の強力な会合は、パクリタキセルのような疎水性薬 物を運ぶための高容量の環境を提示する。これらの薬物は、ブロックコポリマー と共有結合してミセル構造を形成し得るか、または物理的にミセルの疎水性の芯 内へと取り込まれ得る。ミセルからの薬物放出の機構は、芯からの拡散および単 一のポリマー鎖とミセルとの間の交換を含む。小さな大きさのミセル（通常100n m未満）は、大きな粒子の注射に関連する困難を解消する。 実施例19 サーモペーストの生成手順 20mlガラスシンチレーションバイアル中の５gのポリカプロラクトン（分子量1 0,000〜20,000）（Polysciences、Warrington Penn．USA）を50mlの測定した水 を含む600mlビーカー中へ入れた。ビーカーを穏やかに65℃に加熱し、そしてそ の温度をポリマーが融解するまで20分間維持した。既知量のパクリタキセルまた は他の血管形成インヒビターを、65℃で完全に混合して融解ポリマーとした。融 解ポリマーを予め加温した（60℃オーブン）鋳型へ注ぎ、そしてポリマーが固化 するまで放冷した。ポリマーを小片（約２mm×約２mmの大きさ）に切り、そして １mlのガラスシリンジに入れた。 次いで、ガラスシリンジを、ポリマーが完全に融解するまで、65℃（コーニン グホットプレート）で蒸留水を含む500mlガラスビーカー中に直立して置いた（ 下向きに先端に栓をした）。次いで、プランジャをシリンジに挿入して融解ポリ マーを容器の先端で粘着性の塊へと圧縮した。シリンジにキャップをし、そして 室温にまで放冷した。 適用のために、シリンジを60℃に再加熱し、そして体温にまで冷却した場合に 固化する液体として投与した。 実施例20 PDLLA-PEG-PDLLAおよび低分子量ポリ（D,L乳酸）を用いたサーモペーストからの パクリタキセルの放出の改変 Ａ．PDLLA-PEG-PDLLA および低分子量PDLLAの調製 DL-ラクチドをAldrichから購入した。分子量8,000を有するポリエチレングリ コール（PEG）、オクタン酸スズ、およびDL-乳酸をSigmaから得た。分子量20,00 0を有するポリ−ε−カプロラクトン（PCL）をBirmingham Polymers（Birmingha m、AL）から得た。パクリタキセルをHauser Chemicals（Boulder、CO）から購入 した。狭い分子量分布を有するポリスチレン標準をPolysciences（Warrington、 PA）から購入した。アセトニトリルおよび塩化メチレンはHPLC級であった（Fish er Scientific）。 PDLLA-PEG-PDLLAのトリブロックコポリマーを開環重合化によって合成した。 異なる比のDL-ラクチドのモノマーおよびPEGを混合し、そして0.5重量％のオク タン酸スズを添加した。重合化を150℃で3.5時間実施した。低分了量PDLLAを、D L-乳酸の重縮合によって合成した。反応をガラスフラスコ内で穏やかな窒素パー ジ、機械撹拌、および180℃での1.5時間の加熱の条件下で実施した。PDLLAの分 子量は、カルボン酸末端基を力価測定することによって、約800と測定された。 Ｂ．ペースト処方物の製造 パクリタキセルを20％または30％の充填で、約60℃で融解させた、PDLLA-PEG- PDLLAコポリマーまたはPDLLA：PCL 90：10、80：20、および70：30の混和物のい ずれかの中で完全に混合した。パクリタキセルを充填したペーストを１mlシリン ジ中で重量測定し、そして４℃で保存した。 Ｃ．PDLLA-PEG-PDLLA およびペースト混和物の特徴付け PDLLA-PEG-PDLLAコポリマーの分子量および分布を、周囲温度で、104ÅのHewl ett Packard Plゲルカラムに連結したShimadzu LC−10AD HPLCポンプおよびShim adzu RID-6A屈折指標検出器（Kyoto,Japan）を用いるGPCによって法定した。移 動相はクロロホルムで、流速は1ml／分であった。サンプルの注射容積は、0.2％ （w/v）のポリマー濃度で20μlであった。ポリマーの分子量を、ポリスチレン標 準と比較して決定した。CHCl3中のPDLLA-PEG-PDLLAの25℃での固有粘度をCannon -Fenske粘度計を用いて測定した。 コポリマーの熱分析を、TA Instruments 2000コントローラーおよびDuPont 91 OS DSC（Newcastle、Delaware）を用いて、示差走査熱量測定（DSC）によって 実施した。加熱速度は、10℃／分であり、そしてコポリマーおよびパクリタキセ ル／コポリマーマトリクスサンプルを、襞付き開放型アルミニウム試料天秤皿に おいて重量測定した（３〜５mg）。 1H核磁気共鳴（NMR）を使用して、ポリマーの化学組成を決定した。パクリタ キセルを充填したPDLLA-PEG-PDLLAの1H NMRのスペクトルをCDCl3中で、NMR装置 （Bruker、AC-200E）を200MHzで用いて得た。ポリマーの濃度は１〜２％であっ た。 パクリタキセル／PDLLA-PEG-PDLLAペーストの形態を、走査型電子顕微鏡（SEM ）（Hitachi F-2300）を用いて検査した。サンプルを、Hummer装置（Technics、 USA）を用いて60％Auおよび40％Pdで覆った（厚さ10〜l5nm）。 Ｄ．パクリタキセルのインビトロ放出 20％パクリタキセルを充填したPDLLAPCLペーストの小ペレット（約２ｍｇ）ま たは20％パクリタキセルを充填したPDLLA-PEG-PDLLAペーストのシリンダー（シ リンジを通って溶融ペーストを押し出しすることにより作製された）を、0.4g/L アルブミンを有する10mlリン酸緩衝化生理食塩水（pH7.4）を含む、蓋をした14m lガラス管中に入れた。管を、穏やかに旋回して混合させながら37℃でイン キュベートした。パクリタキセル分析のために、上清を定期的に取り出し、そし て新鮮なPBS/アルブミン緩衝液と置き換えた。上清（10ml）を１ml塩化メチレン で抽出した。水相をデカントし、そして塩化メチレン相を60℃の窒素流下で乾燥 した。乾燥残渣を40:60の水：アセトニトリル混合液中に再構成し、そして約１ 分間10,000gで遠心分離した。次いで、上清中のパクリタキセルの量をHPLCによ り分析した。HPLC分析を、110AポンプおよびC-8超球(ultrasphere)カラム（Beck man）、ならびにSPD-6A UV検出器（232nmに設定）、SIL-9A自動注入器およびC-R 3Aインテグレーター（Shimadzu）を用いて実施した。注入容積は20μlであり、 流速は１ml／分であった。移動相は、58％アセトニトリル、５％メタノール、お よび37％蒸留水であった。 Ｅ．結果および考察 ポリスチレン標準に関するPDLLA-PEG-PDLLAの分子量および分子量分布を、GPC により測定した（図３０）。25℃でのCHCl3中のコポリマーの固有粘度を、Canon -Fenske粘度計を用いて測定した。分子量および固有粘度は、PEG含量の増加に伴 って減少した。10％〜40％のPEG含量を伴うPDLLA-PEG-PDLLAの多分散性は2.4〜3 .5であった。しかし、70％PEGを伴うコポリマーは、狭い分子量分布を有し、こ れは1.21の多分散性であった。これは、ポリマー分子量の広い分布を生じる側鎖 反応（例えば、エステル交換）の機会を減少させる高PEG含量に起因し得る。あ るいは、疎水性−親水性ブロックコポリマーのコイル状構造は、人為的な低い多 分散性値を生じ得る。 純粋PEGおよびPDLLA-PEG-PDLLAコポリマーのDSC走査を、図２５および２６に 示す。70％および40％のPEG含量を伴うPEGおよびPDLLA-PEG-PDLLAは吸熱ピーク を示し、コポリマーのPEG含量が低下するにつれてエンタルピーおよび温度の低 下を伴った。40％および70％のPEGのコポリマーの吸熱ピークは、おそらくPEG領 域の溶融に起因した。これは、相分離の発生を示す。純粋PEGは鋭い溶融ピーク を有したが、70％および40％PEGの両方のコポリマーはブ充填なピークを示し、7 0％PEGの場合、明瞭なショルダーを有した。ブ充填な溶融ピークは、PDLLAがPEG の結晶化を妨害することから生じたとされ得る。70％PEGの場合におけるショル ダーは、PDLLA領域のガラス転移を表し得る。10〜250℃の温度範囲における10％ 、20％、および30％のPEG含量を伴うコポリマーでは、温度変化は生じなかった 。これは、有意な結晶化が生じなかった（従って、相分離であり得る）ことを示 す。 パクリタキセルを含まないまたは20％パクリタキセルを含むPDLLA:PCL（70.30 、80:20、90:10）ブレンドのDSCサーモグラムは、約60℃で吸熱ピークを示し、P CLの溶融から生じた。PDLLAの無定形性質およびその低い分子量（800）に起因し て、PDLLAの溶融およびガラス転移は観察されなかった。パクリタキセルの再結 晶または溶融に起因する温度変化は、観察されなかった。 20％および30％PEG含量のPDLLA-PEG-PDLLAコポリマーを、以下の理由のために 、ペーストのための最適な処方材料として選択した：10％PEGのPDLLA-PEG-PDLLA は約60℃の温度で溶融され得なかった；40％および70％PEGのコポリマーは、60 ℃で容易に溶融し、そして20％および30％PEGコポリマーは、50℃〜60℃の間で 粘性の液体になった；そして40％および70％PEGコポリマーの水中での膨潤は非 常に高く、水中でペーストの迅速な分散を生じた。 PDLLA-PEG-PDLLAシリンダーからのパクリタキセルのインビトロ放出プロフィ ールを図２７に示す。40％PEGシリンダーからの放出を測定する実験は、シリン ダーが非常に高い膨潤度を有し（１日で約200％の水分取り込み）、そして数日 内で崩壊したので、終結した。30％PEGシリンダーからのパクリタキセルの放出 割合は、70日間にわたり漸増した。20％PEGシリンダーからの放出割合は、30日 までゆっくりと増大し、次いで急激に増大し、次いで別の漸増期間が続いた。各 個々のシリンダー（20％PEG含量）がパクリタキセル放出の急激な変化を示した 程度で、有意な差異が存在した。急激な増大の前では、パクリタキセルの放出割 合は、同じシリンダー直径（１mm）ではより低いPEG含量のコポリマーに対して より低い。40％および30％PEGシリンダーは、20％PEGシリンダーよりもずっと高 いパクリタキセル放出速度を示した。例えば、30％PEGのシリンダーは、30日で 、20％PEGシリンダーからの放出が２％であることに比較して、17％のパクリタ キセルを放出した。より小さい直径を有するシリンダーは、より速い放出速度を 生じ（例えば、30日で、0.65mmおよび１mmの直径を有する30％のPEGシリンダー は、それぞれ、26％および17％のパクリタキセルを放出した（図２７）。 上記の観察は、シリンダーからのパクリタキセルの放出機構によって説明され 得る。パクリタキセルは、光学顕微鏡で観察されるように結晶としてポリマー中 に分散された。結晶は、ホットステージ顕微鏡により観察されるように、170℃ でコポリマーマトリックス中に溶解し始め、そして180℃で完全に溶解した。20 ％パクリタキセルを充填したPDLLA-PEG-PDLLA（30％PEG）ペーストのDSCサーモ グラムは、パクリタキセルについて小さな再結晶発熱（16J/g、190℃）および溶 融吸熱（６J/g、212℃）を示した（図２５）。これは、180℃の後に溶融したコ ポリマーからのパクリタキセルの再結晶を示す。このタイプの薬物／ポリマーマ トリックスでは、パクリタキセルは、拡散および／またはポリマー侵食を介して 放出され得た。 拡散制御の場合、薬物は、ポリマー中の分子拡散によって、および／または連 結された薬物粒子により形成された開口チャネルを通じて放出され得る。従って 、20％充填では、パクリタキセルのいくらかの粒子が単離され、そしてパクリタ キセルは、コポリマー中の溶解に続く拡散によって放出され得る。パクリタキセ ルの他の粒子は、表面に連結するクラスターを形成し、チャネル拡散を通じて放 出され得た。両場合とも、より小さい寸法を有するシリンダーが、より短い拡散 通路に起因してより速い薬物放出を与えた（図２７）。 シリンダーの寸法変化および水分取り込みを、放出の間記録した（図２８）。 30％PEGシリンダーの長さ、直径、および湿潤重量の変化は急速に増大して２日 内に最大になり、約15日間変化しないままであり、次いで漸減した。シリンダー の開始直径は、膨潤挙動に影響を及ぼさなかった。20％PEGのシリンダーについ ては、長さは、１日で10％減少し、そして横這いになり、一方、直径および水分 取り込みは時間の経過に伴って漸増した。コポリマー中のPEGが多くなるにつれ てパクリタキセルの拡散を容易にするために水分をより多く取り込むので、より 速い放出が観察された（図２７）。 PDLLA-PEG-PDLLAペーストのコポリマー分子量低下をGPCによりモニターした。 20％PEGシリンダーについては、ピーク位置の溶出容積は経時的に増大し、これ は放出実験の過程の間にポリマー分子量が低下したことを示している（図３０） 。二相性の分子量分布が69日目に観察された。ポリマー分子量はまた、30％PEG シ リンダー（１mmおよび0.65mm）について減少した。しかし、二相性分布は観察さ れなかった。 NMRスペクトルは、3.6ppmでPEGピークを、そして1.65ppmおよび5.1ppmでPDLLA ピークを示した。コポリマーにおけるPDLLAに関するPEGのピーク面積は、69日目 の後に有意に減少した（図２９）。これは、PDLLAからの解離後のPEGの溶解を示 す。シリンダーの乾燥重量損失もまた記録した（図２９）。これは、30％ PEG-0 .65mm>30% PEG-1mm>20％PEG-1mmの順で減少する分解速度を示す。 パクリタキセル放出前およびその間の乾燥シリンダーの形態学的変化をSEMを 用いて観察した（図３１）。簡単に述べれば、固体パクリタキセル結晶および無 孔性ポリマーマトリックスが放出前に見られた（図３１Ａおよび３１Ｂ）。放出 の69日目の後では、パクリタキセル結晶は観察されず、そしてマトリックスは、 ポリマー分解および水分取り込みに起因して、多くの孔を含んだ（図３１Ｃおよ び３１Ｄ）。 30％PEGシリンダーは、水中でたった２日後に多量の膨潤を示し（図２８）、 従って、脱離した水溶性PEGブロックおよび分解したPDLLA（すなわち、DL-乳酸 オリゴマー）の拡散に対する障害が減少した。30％PEGシリンダーの質量損失お よび分解は継続的なので、侵食放出の寄与は漸増し、いかなる急激な変化も伴う ことのないパクリタキセルの持続放出を生じた（図２７）。20％PEGシリンダー については、膨潤は初期には低く（図２８）、分解生成物の緩慢な拡散を生じた 。従って、内部領域における分解生成物が主として保持され、一方、短い拡散通 路に起因して、外部領域においては分解生成物はより少なかった。分解生成物は 、分解速度を加速した。これは、オリゴマーのカルボン酸末端基が加水分解を触 媒したからである。これは、二相性コポリマー分子量分布により示されるように 、高分子量のシェルおよび低分子量の内部を生じた（図３０、６９日目）。シェ ル破裂は、シェルおよび内部分解生成物の強度、厚さ、および欠損のような要因 に依存したので、内部分解生成物の損失の開始および程度は非常に可変性であっ た。シェル破裂は一貫せず、そしてポリマー中の薬物は、顕微鏡下で同質でなか ったので、放出バーストの時点およびバーストの程度は、試験した４つのサンプ ルにおいて異なっていた（図２７）。 PDLLAおよびPCLブレンドならびに純粋PCLからのパクリタキセルの放出を、図 ３２に示す。簡単に述べれば、放出割合は、ブレンド中のPDLLA含量に伴って増 大した。例えば、10日以内で、80:20、7030、および0:100 PDLLA:PCLからの放出 パクリタキセルはそれぞれ、17％、11％、および６％であった。１日における初 期バースト後、ほぼ一定の放出が80:20PDLLA:PCLペーストから得られた。有意な 膨潤度は、放出の間で観察されなかった。PDLLA:PCLブレンドについては、PDLLA は、約800の非常に低い分子量を有したので、水溶性の生成物に急速に加水分解 され、質量損失は長く遅れることはなかった。PCLは、ペーストが急速に崩壊す ることを防ぐ「保持(holding)」材として働いた。従って、放出速度は、分解の 増強に起因するブレンド中のPDLLA含量に伴って増大した。PDLLAの継続的な侵食 は、パクリタキセルの放出を制御し、そして一定の放出を生じた。純粋PCLから のパクリタキセルの放出は、おそらく、PCLの緩慢な分解速度（１〜２年におけ る）に起因して制御された拡散であった。 20％パクリタキセルを充填した90:10 PDLLA:PCLペーストについての放出研究 においては、24時間のインキュベーション内でのペーストペレットの崩壊に起因 して、困難に直面した。簡単に述べれば、最初の12時間のインキュベーションの 間、パクリタキセル放出についてシンク状態を確実にするために、サンプルを１ 時間毎に採取した。90:10ペーストからの放出パクリタキセルは、10時間内で25 〜35％であった。 30％パクリタキセルを含む90:10 PDLLA:PCLペーストは、20％パクリタキセル を含む90:10 PDLLA:PCLペーストより多くのパクリタキセルを放出した。従って 、パクリタキセルの放出速度の調整は、ポリマーおよび化学療法剤の特性ならび に投与部位によって調節され、これは、局所療法の開発において重要であった。 実施例２１ 水溶性添加剤およびパクリタキセルを含有するポリマー性組成物の調製 Ａ．ポリマー性組成物の調製 パクリタキセル／添加剤の共沈殿物の微粒子を調製し、続いてPCLに添加して ペーストを形成させた。簡単に述べれば、パクリタキセル（100mg）を0.5mlのエ タノール（95％）中に溶解し、そして1.0mlの蒸留水中に予め溶解または分散し た添加剤（100mg）と混合した。混合物を、平滑状のペーストが形成されるまで 粉末化した。ペーストをペトリ皿上に拡げ、37℃で一晩風乾した。乾燥塊を乳鉢 および乳棒を用いて粉砕し、そしてメッシュ#140（106μm）篩（Endecotts Test Sieves Ltd，London，England）を通過させた。次いで、微粒子（40％）を、65 ℃で溶融PCL（60％）に組み込ませた。これは、パクリタキセルの20％充填に相 当する。本研究に用いた添加剤は、ゼラチン（Type B、100ブルーム、Fisher Sc ientific）、メチルセルロース、（British Drug Houses）、デキストラン、T50 0（Pharmacia，Sweden）、アルブミン（Fisher Scientific）、および塩化ナト リウム（Fisher Scientific）であった。パクリタキセルと、ゼラチンまたはア ルブミンとの微粒子を上記のように調製したが、メッシュ#60（270μm）篩（End ecotts Test Sieves Ltd，London，England）を通過させて、ペーストからのパ クリタキセルの放出に対する微粒子サイズの効果を評価した。ペーストをまた、 10％、20％、または30％のゼラチン、および20％のパクリタキセルをPCL中に含 有させるように調製し、薬物放出に対する添加剤の割合の効果を研究した。他に 特定しない限り、PCL中に分散させた20％パクリタキセルを含有するペーストを 、放出速度研究についてコントロールとして供するために調製した。 Ｂ．薬物放出研究 パクリタキセルを充填したペーストのほぼ2.5mgのペレットを、ネジ蓋付き管 中で50mlの10mM PBS（pH7.4）中に懸濁した。この管を37℃でとんぼ返りに転倒 させ、そして所定の時間間隔で、49.5mlの上清を取り出し、0.45Atmメンブレン フィルターを通して濾過し、パクリタキセル分析のために保持した。各管中に等 容量のPBSを入れ替え、本研究を通してシンク状態を維持した。分析のために、 濾液を３×１mlのジクロロメタン（DCM）で抽出し、DCM抽出物を乾燥するまで窒 素流下でエバポレートし、そして１mlアセトニトリル中に再溶解した。分析は、 流速１ml/分の水：メタノール：アセトニトリル（37:5:58）の移動相を用いるHP LC（Beckman Isocratic Pump）、C18逆相カラム（Beckman）、および232nmでのU V検出器（Shimadzu SPD A）によって行った。 Ｃ．膨潤研究 パクリタキセル／添加剤／PCLペースト（メッシュサイズ#140（およびゼラチ ンのみについては#60）のパクリタキセルー添加剤微粒子を用いて調製した）を 押し出してシリンダーを形成させ、断片に切断し、秤量し、そして各断片の直径 および長さをマイクロメーター（Mitutoyo Digimatic）を用いて測定した。断片 を37℃で蒸留水（10ml）中に懸濁し、所定の間隔で水を捨て、シリンダー断片の 直径および長さを測定し、そしてサンプルを秤量した。サンプルの形態（水中に 懸濁する前および後）を、走査電子顕微鏡（SEM）(Hitachi F-2300)を用いて調 べた。サンプルを、Hummer Instrumcnt（Tcchnics，USA）を用いて60％Auおよび 40％Pdで被覆した（厚さ10〜15nm）。 Ｄ．ニワトリ胚漿尿膜（CAM）研究 受精した家畜ニワトリ胚を、無殻培養前に、４日間インキュベートした。卵の 中身を90％相対湿度および３％CO2でインキュベートし、インキュベーション６ 日目に、パクリタキセルを充填したペースト（６％パクリタキセル、24％セラチ ン、および70％PCLを含有する）またはコントロール（PCL中30％セラチン）ペー ストの1mg断片をCAM表面上に直接置いた。２日曝露後、血管系を、ビデオカメラ とつないだ実体顕微鏡を用いて調べた。次いで、画像信号をコンピューター上に 表示し、画像をプリントした。 Ｅ．結果および考察 共沈澱したパクリタキセルとゼラチンまたはアルブミンとの微粒子は、硬質で かつ脆弱であり、そして容易にPCL中に組み込まれた。一方、他の添加剤は、軟 質の粒子を生成した。この粒子は、ペーストの調製の間に壊れる傾向を示した。 図３３は、PCL中の20％パクリタキセル、または20％パクリタキセル、20％添 加剤、および60％PCLを含有するペーストからのパクリタキセル放出の時間経過 を示す。添加剤を伴うまたは伴わないPCLからのパクリタキセルの放出は、二相 性放出パターンに従った：まず、より速い薬物放出速度があり、その後薬物のよ り緩慢な薬物放出が起こった。ペーストからのパクリタキセルのより速い放出速 度の初期期間は、表面に位置するパクリタキセルの溶解またはペーストの表層領 域からのパクリタキセルの拡散に起因すると考えられた。放出プロフィールの続 くより緩慢な相は、緩衝液と接触した薬物粒子の有効表面面積の減少、ポリマー マトリックスへの緩衝液の緩慢な進入、またはポリマーマトリックスを通る薬物 の平均拡散通路の増大に起因し得る。 PCLからのパクリタキセルの放出プロフィールの両相は親水性添加剤の存在下 で増大し、ゼラチン、アルブミン、およびメチルセルロースが、薬物放出速度の 最大の増大を生じた（図３３）。より小さなパクリタキセル−添加剤粒子（106 μm）を用いた場合と比較して、より大きなパクリタキセル−添加剤粒子（270μ m）をペーストを調製するために用いた場合、ポリマーマトリックスからのパク リタキセルの放出においてさらなる増大があった（図３４）。添加剤（例えば、 ゼラチン）の量の増大は、薬物放出の対応する増大を生じた（図３４）。図３５ Ａは、20％パクリタキセル、20％添加剤、および60％PCLを含有するペーストの 膨潤挙動を示す。膨潤速度は、以下の順に従った：ゼラチン＞アルブミン＞メチ ルセルロース＞デキストラン＞塩化ナトリウム。さらに、膨潤速度は、より高い 割合の水溶性ポリマーをペーストに添加したとき増大した（図３５Ｂ）。ゼラチ ンまたはアルブミンを含むペーストは、最初の8〜10時間内で急速に膨潤し、続 いて膨潤速度は、サンプルの体積の変化が40％より大きくなったとき減少した。 より大きな（270μm）パクリタキセル−セラチン粒子を用いて調製したペースト は、より小さい（106μm）のパクリタキセル−ゼラチン粒子で調製したものより も速い速度で膨潤した。全てのペーストは、体積が50％より大きく増大したとき 崩壊した。SEM研究は、ペーストの膨潤にはマトリックスの亀裂が伴うことを示 した（図３６）。高い倍率では（図３６Ｃおよび３６Ｄ）、ペーストの表面上に 、かつ膨潤後ゼラチンと密に結合した、針状または稈状のパクリタキセル結晶の 形跡があった（図３６Ｃおよび３６Ｄ）。 疎水性ポリマーにおいて個別の粒子として包埋された浸透剤または膨潤剤のよ うな親水性薬剤は、マトリックス侵食、ポリマーマトリックスを通る薬物の拡散 、 ならびに／または水溶性添加剤の溶解によりマトリックスに作出された孔を通る 拡散および／または対流の組み合わせによる薬物放出を生じた。疎水性ポリマー 中に分散された浸透剤および膨潤性ポリマーは、吸水し（ウィッキング剤(wicki ng agent)として作用する）、溶解または膨潤し、そして隣接粒子間の隔壁（ポ リマー層）を破裂させ得る膨圧を及ぼして、マイクロチャネルを作出し、従って 、拡散または対流による周囲媒体への薬物分子の漏出を容易にする。ペーストマ トリックスの膨潤および亀裂（図３６）は同様に、マトリックスの内部全体にマ イクロチャネルの形成を生じた。ポリマーの膨潤の異なる速度および程度（図３ ５）が、観察されたパクリタキセル放出速度の差異（図３３および３４）の原因 であり得る。 図３７は、コントロールゼラチン−PCLペースト（図３７Ａ）および20％パク リタキセル−ゼラチン−PCLペースト（図３７Ｂ）で処理したCAMを示す。CAMの 表面上のペーストを、図中、矢印で示す。コントロールペーストを有するCAMは 、正常な毛管網構造を示す。パクリタキセル−PCL−ペーストで処理したCAMは、 血管退行および毛管網を欠損した域を一貫して示した。ペースト中の添加剤の組 み込みは、無血管域の直径を顕著に増大した（図３７）。 本研究は、PCLからのパクリタキセルのインビトロ放出が、パクリタキセル／ 親水性ポリマー微粒子のPCLマトリックスへの組み込みにより増大され得たこと を示す。マウスにおいて皮下腫瘍を処置することにおける処方物の効力を評価す るインビボ研究もまた、パクリタキセル／ゼラチン／PCLペーストが腫瘍塊を有 意に減少することを示した。水溶性薬剤のタイプ、微粒子サイズ、および添加剤 の割合のような要因が、薬物の放出特性に影響を及ぼすことが示された。 実施例２２ ナノペーストを製造するための手順 ナノペーストは、親水性ゲル中のミクロスフェアの懸濁液である。本発明の１ つの局面において、ゲルまたはペーストは、標的組織の近くに薬物を充填したミ クロスフェアを位置させる方法として、組織に塗布され得る。水ベースであれば 、 ペーストはすぐに体液で希釈されるようになり、ペーストの固着性（stickiness ）の減少およびミクロスフェアが隣接組織に堆積される傾向を引き起こす。ミク ロスフェアカプセル化薬物のプールが、これにより、標的部位の近くに位置され る。 これらの実験で利用された試薬および装置は、ガラスビーカー、Carbopol 925 （製薬級、Goodyear Chemical Co.）、蒸留水、水酸化ナトリウム（１Ｍ）水溶 液、水酸化ナトリウム（５Ｍ）水溶液、20％w/vで水中に懸濁した0.11m〜31mの サイズ範囲のミクロスフェアを包含する（前記を参照のこと）。 １．５％w/v Carbopolゲルの調製 十分量のcarbopolを１Ｍ水酸化ナトリウムに添加し、５％w/v溶液を達成させ た。１Ｍ水酸化ナトリウム中にcarbopolを溶解させるために、混合物を、ほぼ１ 時間静置させた。この時間の間、混合物を撹拌し、そして１時間後、pHを、５Ｍ 水酸化ナトリウムを用いて7.4に調整し、carbopolを完全に溶解させた。pHが7.4 に達すると、ゲルを覆い、２〜３時間静置させた。 ２．ナノペーストの製造についての手順 十分量の0.1μm〜3μmのミクロスフェアを水に添加し、ミクロスフェアの20％ 懸濁液を生成した。Carbopolゲル（８mlの５％w/v）を、ガラスビーカー中に入 れ、２mlの20％ミクロスフェア懸濁液を添加した。混合物を撹拌してミクロスフ ェアをゲル全体に分散させた。混合物を４℃で保存した。 実施例２３ シクロデキストリンとのパクリタキセルの複合体形成 Ａ．材料 パクリタキセルをHauser Chemical Inc．（Boulder，Colorado）から入手した 。リン酸二ナトリウム（Fisher）、クエン酸（British Drug Houses）、ヒドロ キシプロピル-β-シクロデキストリン（HPβCD）、γ-シクロデキストリン（γ- C D）、およびヒドロキシプロピル-γ-シクロデキストリン（HPγCD）をAmerican Maize-Products Company（Hammond．Indiana）から入手し、そして受け取った通 りに使用した。 Ｂ．方法 １．溶解度研究 過剰量のパクリタキセル（５mg）を、種々の濃度のγ-CD、HPγ-CD、またはHP β-CDを含有する水溶液に添加し、そして37℃で約24時間穏やかに転倒させた。 平衡化後、懸濁液のアリコートを0.45μmメンブレンフィルター（Millipore）を 通して濾過し、適切に希釈し、HPLCを用いて分析した。移動相は、1.0ml／分の 流速のアセトニトリル、メタノール、および水（58:5:37）の混合物で構成され た。10％までの種々の濃度のHPβ-CDを含有する50:50の水およびエタノール（95 ％）で構成された溶媒中のパクリタキセルの溶解度もまた、調べた。さらに、パ クリタキセルの溶解速度プロフィルを、２mgのパクリタキセル（受け取った通り ）を０％、５％、10％、または20％のHPγ-CD溶液に添加するか、あるいは２mg の予め水和させたパクリタキセル（７日間水中に懸濁させることにより）を純水 に添加し、37℃で穏やかに転倒させることにより、調べた。アリコートを種々の 時間間隔で採取し、パクリタキセルについてアッセイした。 ２．安定性研究 20％HPβCDまたはHPγCDを含有する溶液はそれぞれ、3.9および5.2のpH値を有 した。シクロデキストリン溶液中のパクリタキセルの安定性を、種々の時間間隔 で、37℃または55℃で、水または50:50の水−エタノール混合液中10％または20 ％HPγ-CDまたはHPβ-CDを含有する溶液中のパクリタキセル（20mg ml）をアッ セイすることにより調べた。さらに、１％、２％、または５％HPβCDを含有する 溶液中のパクリタキセル（１μg/ml）の55℃での安定性を測定した。 Ｃ．結果 １．溶解度研究 パクリタキセルの溶解度は、研究した全体のＣＤ濃度範囲にわたって増大した ；HPβ-CDは、パクリタキセルの溶解度の最大の増大を生じる（図３８）。溶解 度曲線の形状は、化学量論が１：１複合体より高次であることを示唆する。パク リタキセルは、HPβ-CDおよびHPγ-CDの両方を伴うタイプＡP曲線、ならびにγ- CDを伴うタイプＡN曲線を形成した。HPβ-CDの50％水溶液におけるパクリタキセ ルの溶解度は、37℃で3.2mg/mlであり、これは水におけるパクリタキセルの溶解 度の約2,000倍であった。パクリタキセル−シクロデキストリンの一次複合体に ついての概算安定度定数（図３９から）は、γ-CD、HPγ-CD、およびHPβ-CDに 対してそれぞれ3.1、5.8、および7.2Ｍ-1であり、二次複合体についての概算溶 解度定数は、γ-CD、HPγ-CD、およびHPβ-CDに対してそれぞれ0.785×103、1.8 86×103、および7.965×103Ｍ-1であった。実測安定度定数の値は、シクロデキ ストリンと共にパクリタキセルにより形成された包括複合体が主に二次複合体で あることを示唆した。 50:50の水：エタノール混合液中のパクリタキセルの溶解度は、純水中の複合 体形成について観察されるようなシクロデキストリン濃度の増大（図４０）に伴 って増大した。50％エタノールの存在下でのパクリタキセルおよびHPβ-CDの複 合体形成の見かけ安定度定数（26.57Ｍ-1）は、エタノール不在下の安定度定数 より有意に低かった（約300倍）。安定度定数がより低いことは、エタノールの 存在下の溶媒の誘電率または極性の変化に起因し得る。 ０％、５％、10％、および20％γ-CD溶液中のパクリタキセルの溶解プロフィ ル（図４１）は、純水またはシクロデキストリン溶液中のパクリタキセルの準安 定溶液の形成を説明する；溶液中のパクリタキセルの量は漸増し、最大に達し、 そしてその後減少した。48時間水中に懸濁することにより予め水和したパクリタ キセルサンプルを用いる溶解研究は、準安定溶液の形成を示さなかった。さらに 、水和パクリタキセル（室温で真空オーブン中で乾燥させた）のDSC分析は、60 〜110℃の間で２つのブ充填な吸熱ピークを示した。これらのピークには、水和 物の存在を示す約4.5％重量損失（熱重量分析により測定した）が伴った。約2.1 ％の重量の損失は、パクリタキセル一水和物の形成を示唆する。従って、60℃〜 110℃の間のDSCピークの発生および約4.5％の重量の損失は、二水和物の存在を 示 唆する。受け取ったパクリタキセルサンプルの60℃〜110℃の間の吸熱ピーク（D SC結果）または重量損失（TGA結果）の形跡はなかった。従って、（受け取った ままの）パクリタキセルは無水であり、そして水中への懸濁の際に、これは溶解 して過飽和溶液を形成し、より低い溶解度の水和物として再結晶した（図４１） 。 ２．安定性研究 パクリタキセル分解は、シクロデキストリンの濃度に依存し、疑似一次分解速 度論に従った（例えば、図４２）。55℃での１％HPβ-CDを含有する溶液中のパ クリタキセル（１μg/mlパクリタキセル）の分解速度は、より高いシクロデキス トリン濃度での速度より速かった（ｋ＝3.38×10-3h-1）。1.78×10-3h-1および 0.96×10-3h-1の分解速度定数はそれぞれ、10％HPβ-CDおよびHPγ-CD中のパク リタキセルについて観察された。２、４、６、または８％HPβ-CDを含有するパ クリタキセル溶液（１μg/ml）は、10または20％HPβ-CD溶液（20μg/ml）で得 られたものとは分解速度において有意差は示さなかった。エタノールの存在は、 シクロデキストリン溶液中のパクリタキセルの安定性に有害な影響を及ぼさなか った。 Ｄ．考察 本研究は、パクリタキセルの溶解度がシクロデキストリンとの複合体形成によ り増大し得ることを示した。これらの水性ベースのシクロデキストリン処方物は 、種々の炎症性疾患の処置において利用され得る。 実施例２４ パクリタキセルの増大濃度を有するポリマー性組成物 PDLLA-MePEGおよびPDLLA-PEG-PDLLAは、疎水性（PDLLA）および親水性（PEGま たはMePEG）領域を有するブロックコポリマーである。適切な分子量および化学 組成で、それらは、疎水性PDLLAコアおよび親水性MePEGシェルの小さな凝集を形 成し得る。パクリタキセルは、疎水性コアに充填され得、それにより増大した「 溶解度」を有するパクリタキセルを提供する。 Ａ．材料 D,L-ラクチドを、Aldrichから購入し、オクタン酸第一スズ（Stannous octoat e）、ポリ（エチレングリコール）（分子量8,000）、MePEG（分子量2,000および 5,000）をSigmaから購入した。MePEG（分子量750）をUnion Carbideから購入し た。コポリマーを、触媒としてオクタン酸第一スズを用いる開環重合手順によっ て合成した（Dengら、J．Polym．Sci.，Polym，Lett．28:411-416，1990；Cohn ら、J．Biomed．Mater．Res．22:993-1009，1988）。 PDLLA-MePEGの合成について、DL-ラクチド／MePEG／オクタン酸第一スズの混 合物を10mlガラスアンプルに添加した。アンプルをバキュームに連結し、そして 炎で密封した。重合を、アンプルを150℃油浴中で３時間インキュベートするこ とにより達成した。PDLLA-PEG-PDLLAの合成について、D,L-ラクチド／PEG／オク タン酸第一スズの混合物をガラスフラスコに移し、ゴムストッパーで密封し、そ して150℃オーブン中で３時間加熱した。コポリマーの出発組成物を表１および ２中に示す。全ての場合において、オクタン酸第一スズの量は0.5％〜0.7％であ った。 Ｂ．方法 ポリマーをアセトニトリル中に溶解し、そして10,000ｇで５分間遠心分離し、 非溶解性の不純物を捨てた。次いで、パクリタキセルアセトニトリル溶液を各ポ リマー溶液に添加し、10重量％のパクリタキセル（パクリタキセル＋ポリマー） を有する溶液を与えた。次いで、溶媒アセトニトリルを除去し、窒素流および60 ℃加温下で、透明なパクリタキセル／PDLLA-MePEGマトリックスを得た。蒸留水 、0.9％NaCl生理食塩水、または５％デキストロースを、マトリックスの４倍重 量で添加した。マトリックスをボルテックス混合および60℃での定期加温の助け を借りて、最終的に「溶解」した。透明な溶液が全ての場合において得られた。 粒子サイズは、サブミクロン粒子サイズ測定器（NICOMP Model 270）により測定 されたように全て50nm未満であった。処方を表１に示す。 PDLLA-PEG-PDLLAの場合（表２）、コポリマーは水中には溶解し得ないので、 パクリタキセルおよびポリマーをアセトン中に共溶解した。水または水／アセト ンの混合物をこのパクリタキセルポリマー溶液に徐々に添加し、パクリタキセル ／ポリマー球の形成を誘導した。Ｃ．結果 PDLLA-MePEG組成物の多くは、水、９％生理食塩水、または５％デキストロー ス中で透明な溶液を形成する。これは、ナノメーターの範囲の小さな凝集体の形 成を示している。パクリタキセルは、PDLLA-MePEGミセルに首尾よく充填された 。例えば、％充填（これは、１mlパクリタキセル／PDLLA-MePEG／水系中の10mg パクリタキセルを表す）で、透明な溶液が2000-50/50および2000-40/60から得ら れた。粒子サイズは約60nmであった。 実施例２５ フィルム製造のための手順 用語フィルムは、多くの幾何学的形状の１つに形成されたポリマーを指す。フ ィルムは、薄い、弾性のポリマーシート、または２mm厚のポリマーディスクであ り得る。そのいずれかが、続く瘢痕および付着形成を防ぐように組織表面に適用 され得る。このフィルムは、曝露された組織上に、カプセル化薬物が組織部位で 長期にわたってポリマーから放出され得るように配置されるように設計した。フ ィルムは、いくつかのプロセスにより作製され得る。例えば、キャスティングに よる、およびスプレーによることを包含する。 キャスティング法では、ポリマーを溶融して型に注入するか、ジクロロメタン 中に溶解し型に注入するかのいずれかを行った。次いで、それぞれポリマーは、 それが冷却するにつれて固形化するか、または溶媒がエバポレートするにつれて 固形化した。スプレー法では、ポリマーを溶媒に溶解し、ガラス上に吹き付け、 そして溶媒がエバポレートするにつれてポリマーはガラス上で固形化した。繰り 返し吹き付けは、ガラスから剥離され得るフィルムへのポリマーのビルドアップ （build up)を可能にした。 これらの実験において利用された試薬および装置は、小ビーカー、Corningホ ットプレートスターラー、キャスティング型（例えば、50ml遠沈管キャップ）お よび型保持装置、20mlガラスシンチレーション蓋付きバイアル（プラスチックイ ンサートタイプ）、TLC噴霧器、窒素ガスタンク、ポリカプロラクトン（「PCL」 −分子量10,000〜20,000；Polysciences）、パクリタキセル（Sigma 95％純度） 、エタノール、「洗浄」（前記を参照のこと）エチレンビニルアセテート（「EV A」）、ポリ（DL）乳酸（「PLA」−分子量15,000〜25,000；Polysciences）、DC M(HPLC級；Fisher Scientific)を包含する。 １．フィルム製造のための手順−溶融キャスティング 既知重量のPCLを有する小さなガラスビーカーを、水の入ったより大きなビー カー（水浴として作用する）中に置き、そしてポリマーが充分に溶融されるまで 、70℃のホットプレート上に置いた。既知重量の薬物を溶融ポリマーに添加し、 混合物を十分に撹拌した。溶融ポリマーを型に注入し、そして冷却させた。 ２．フィルム製造のための手順−溶媒キャスティング 既知重量のPCLを20mlガラスシンチレーションバイアル中で直接秤量し、10％w /v溶液を達成するのに十分なDCMを添加した。溶液を混合した後、所望の最終パ クリタキセル濃度を達成するのに十分なパクリタキセルを添加した。この溶液を ボルテックスに供してパクリタキセルを溶解し、１時間静置させ（気泡の存在が なくなるまで）、次いでゆっくりと型に注入した。型を一晩換気フードに置き、 DCMをエバポレートさせた。 ３．フィルム製造のための手順−スプレー 十分量のポリマーを20mlガラスシンチレーションバイアル中で直接秤量し、２ ％w/v溶液を達成するのに十分なDCMを添加した。溶液を混合してポリマーを溶解 させた。自動化ピペットを用いて、適切な容積（最小5ml）の２％ポリマー溶液 を、別の20mlガラスシンチレーションバイアルに移した。十分なパクリタキセル を溶液に添加し、蓋をしたバイアルを振盪することにより溶解した。スプレー用 に調製するために、バイアルの蓋を外し、TLC噴霧器のバレルをポリマー溶液に 突っ込んだ。 窒素タンクを噴霧器のガス注入口に連結し、そして圧力を噴霧および吹き付け が開始するまで漸増させた。型を、スプレー間に15秒乾燥時間を伴う５秒振動ス プレーを用いて吹き付けた。吹き付けは、ポリマーの適切な厚さが型上に堆積さ れるまで続けた。 実施例２６ エチレンビニルアセテートおよび界面活性剤で構成された 治療剤を充填したポリマー性フィルム ２つのタイプのフィルムを本実施例で調査した：パクリタキセルを充填した純 粋EVAフィルムおよびパクリタキセルを充填したEVA／界面活性剤ブレンドフィル ム。 試験される界面活性剤は２つの疎水性界面活性剤（Span 80およびPluronic L1 01）および１つの親水性界面活性剤（Pluronic F127）である。Pluronic界面活 性剤はそれ自体、誘引性のポリマーであった。なぜなら、それらは、種々の薬物 送達特性を至適化するためにEVAとブレンドされ得るからである。Span 80は、ポ リマーマトリックス中に分散する小分子であり、ブレンドを形成しない。 界面活性剤は、フィルムからのパクリタキセルの放出速度を調整すること、お よびフィルムの特定の物理的パラメーターを至適化することにおいて有用であっ た。薬物放出速度が制御され得ることを示した界面活性剤ブレンドフィルムの一 つの局面は、化合物が水中で膨潤する速度および程度を変化させる能力であった 。水のポリマー−薬物マトリックスへの拡散は、キャリアからの薬物の放出に重 要であった。図４３Ｃおよび４３Ｄは、ブレンド中の界面活性剤のレベルが変化 するにつれてのフィルムの膨潤度を示す。純粋EVAフィルムは、２ヶ月を超えて も有意な程度に膨潤しなかった。しかし、EVAに添加される界面活性剤のレベル を増大させることにより、化合物の膨潤度を増大させることが可能であり、そし て親水性を増大させることにより、膨潤が増大した。 これらのフィルムを用いた実験の結果を以下の図４３Ａ〜Ｅに示す。簡単に述 べれば、図４３Ａは、純粋EVAフィルムからの時間の経過に伴うパクリタキセル 放出（mg単位）を示す。図４３Ｂは、同じフィルムに関して残存する薬物の割合 を示す。これらの２つの図面から理解され得るように、パクリタキセル充填が増 大する（すなわち、パクリタキセル重量％が増大する）につれて、薬物放出速度 が増大した。これは、予期された濃度依存性を示す。パクリタキセル充填が増大 するにつれて、フィルム中に残存するパクリタキセルの割合もまた増大した。こ れは、充填がより高いことが、長期放出処方物にとってより魅力的であり得るこ とを示す。 フィルムの物理的強度および弾性を評価し、そして図４３Ｅに示す。簡単に述 べれば、図４３Ｅは、純粋PVAおよびEVA／界面活性剤ブレンドフィルムについて の応力／歪み曲線を示す。この応力の粗測定値は、フィルムの弾性がPluronic F 127の添加を伴って増大すること、および引っ張り強度（破壊時の応力）がPluro nic F127の添加を伴って濃度依存様式で増大することを実証した。弾性および強 度は、化合物の永久変形を引き起こすことなく特定の臨床適用について操作され なければならないフィルムの設計において、重要な考慮要件である。 上記データは、特定の界面活性剤添加剤の、薬物放出速度を制御し、そしてビ ヒクルの物理的特性を変化させる能力を実証する。 実施例２７ ナノスプレーを製造するための手順 ナノスプレーは、生理食塩水中の小ミクロスフェアの懸濁液である。ミクロス フェアが非常に小さい（すなわち、直径１μm以下である）場合、それらは、懸 濁液が重力下でも沈降しないようなコロイドを形成する。以下により詳細に説明 するように、0.1μm〜１μmの微粒子の懸濁液が、手術時における直接の（例え ば、血管癒合のために）、ラプロスコピック(laproscopic)介入を介する、また は指ポンプエアロゾルによる（例えば、局所的に送達される）、組織上のエアロ ゾル化堆積に適切なように作製され得る。ナノスプレーを製造するために利用さ れた装置および材料は、200ml水ジャケットビーカー（KimaxまたはPyrex）、Haa ke循環水浴、２インチ直径を有するオーバーヘッドスターラーおよびコントロー ラー（４ブレードのプロペラタイプのステンレス鋼スターラー；Fisher商標）、 500mlガラスビーカー、ホットプレート／スターラー（Corning商標）、４×50ml ポリプロピレン遠沈管（Nalgene）、プラスチックインサートキャップを有する ガラスシンチレーションバイアル、卓上遠心機（Beckman）、高速遠心床モデル （JS 21 Beckman）、Mettler分析用天秤（AJ 100，0.1mg）、Mettlerデジタル天 井荷重天秤（AE 163，0.01mg）、自動化ピペッター（Gilson）、滅菌ピペットチ ップ、ポンプ作動エアロゾル（Pfeiffer pharmaceuticals）20ml、層流フード、 PCL（分子量10,000〜20,000；Polysciences，Warrington，Pennsylvania USA） 、「洗浄」（前記を参照のこと）EVA、PLA（分子量15,000〜25,000；Polyscienc es）、ポリビニルアルコール（「PVA」−分子量124,000〜186,000；99％加水分 解；Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，WI USA）、DCMまたは「塩化メチレン」 ；HPLC級Fisher Scientific）、蒸留水、滅菌生理食塩水（BectonおよびDickens onまたは等価物）を包含する。 １．５％(w/v)ポリマー溶液の調製 調製されるポリマー溶液に依存して、以下を20mlガラスシンチレーションバイ アル中で直接秤量した：1.00ｇのPCLもしくはPLA、または0.50ｇの各PLAおよび 洗浄EVA。メスシリンダーを用いて、20mlのDCMを添加し、そしてバイアルの蓋を きつく閉めた。全てのポリマーが溶解するまで、バイアルを室温（25℃）で静置 させた。 ２．3.5％(w/v)PVAストック溶液の調製 溶液を、以下に示す手順に従うか、またはミクロスフェアの製造のために調製 した５％（w/v）PVAストック溶液（実施例２８を参照のこと）を希釈することに より調製した。簡単に述べれば、17.5ｇのPVAを600mlガラスビーカー中で直接秤 量し、そして500mlの蒸留水を添加した。ビーカーを覆い、300mlの水を入れた20 00mlガラスビーカー中に置いた。PVAを85℃で300rpmで、充分に溶解するまで撹 拌した。 ３．ナノスプレーの製造のための手順 簡単に述べれば、100mlの3.5％PVA溶液を、連結されたHaake水浴を有する200m l水ジャケットビーカー中に置いた。ビーカーの中身を3000rpmで撹拌し、10mlの ポリマー溶液（製造されるナノスプレーのタイプに基づいてポリマー溶液を用い た）を、5ml自動化ピペッターを用いて２分間にわたって、撹拌中のPVAに滴下し た。３分後、撹拌速度を、2.5時間、2500rpm（+/-200rpm）に調整した。2.5時間 後、撹拌ブレードをナノスプレー調製物から取り出し、10mlの蒸留水でリンスし 、リンス溶液もナノスプレー調製物中に入るようにした。 ミクロスフェア調製物を500mlビーカーに流し込んだ。ジャケット水浴を70ml の蒸留水で洗浄し、この70mlリンス溶液もミクロスフェア調製物中に入るように した。180mlミクロスフェア調製物をガラス棒で撹拌し、４つのポリプロピレン5 0ml遠沈管に等分に流し込み、10,000g（+/-1000g）で10分間遠心分離した。PVA 溶液を各ミクロスフェアペレットから排水して捨てた。蒸留水（5ml）を各遠沈 管に添加し、これをボルテッタスに供した。４つのミクロスフェア懸濁液を20ml の蒸留水を用いて１つの遠沈管中にプールし、そして10,000ｇ（+/-1000g）で10 分間遠沈した。上清をミクロスフェアペレットから排水し、そして40mlの蒸留水 を添加し、そしてミクロスフェア調製物をボルテックスに供した（このプロセス を３回繰り返した）。次いで、ミクロスフェア調製物を予め秤量したガラスシン チレーションバイアルに移した。 バイアルを、室温（25℃）で１時間静置させ、２μmおよび３μm直径ミクロス フェアを重力下で沈降させた。１時間後、上部の9mlの懸濁液を排水し、滅菌キ ャップした50ml遠沈管に入れ、そして10,000（+/-1000g）で10分間遠心分離した 。上清を捨て、そしてペレットを20mlの滅菌生理食塩水中に、懸濁液を10,000ｇ （+/-1000g）で10分間遠心分離することにより再懸濁した。上清を捨て、そして ペレットを滅菌生理食塩水中に再懸濁した。使用する生理食塩水の量は、最終の 必要とされる懸濁液濃度（通常10％w/v）に依存した。ナノスプレー懸濁液をエ アロゾルに添加した。 実施例28 ミクロスフェアの製造 ミクロスフェアを製造するのに用いられる装置には、以下のものが挙げられる ：200mlウォータージャケットビーカー（KimaxまたはPyrex）、Haake循環水浴、 ２インチの直径を有するオーバーヘッドスターラーおよびコントローラー（４枚 刃の、プロペラ型ステンレススチールスターラー-Fisher製）、500mlガラスビー カー、ホットプレート/スターラー（Corning製）、４×50mlポリプロピレン遠心 管（Nalgene）、プラスチック挿入キャップ付きガラスシンチレーションバイア ル、卓上型遠心分離機（GPR Beckman）、高速遠心分離機-フロアモデル（JS 21 Beckman）、Mettler化学天秤（AJ 100、0.1mg）、Mettlerデジタルトップローデ ィング天秤（AE 163、0.01mg）、自動ピペッター（Gilson）。試薬には以下のも のが挙げられる：PCL（分子量10,000〜20,000；Polysciences，Warrington Penn sylvania，USA）、「洗浄した」（下記の「洗浄」の方法を参照のこと）EVA、PL A（分子量15,000〜25,000；Polysciences）、ポリビニルアルコール（「PVA」- 分子量124,000〜186,000；99％加水分解化；Aldrich Chemical Co.，Milwaukee WI，USA）、DCMまたは「塩化メチレン」；HPLCグレード、Fisher Scientific、 および蒸留水。 Ａ．５％（w/v）ポリマー溶液の調製 DCL（1.00g）もしくはPLA、またはPLAおよび洗浄したEVAの各0.50gを、20mlガ ラスシンチレーションバイアルに直接量り入れた。次いで、20mlのDCMを添加し た。バイアルにキャップをし、室温（25℃）で、１時間（場合によっては振盪を 用い得る）、または全てのポリマーが溶解するまで、保存した。この溶液は室温 で、少なくとも２週間保存し得る。 Ｂ．５％（w/v）PVAストック溶液の調製 25gのPVAを600mlガラスビーカーに直接量り取り、そして３インチのTefronコ ートした攪拌子と共に500mlの蒸留水を添加した。ビーカーを蒸発損失を減少さ せるためにガラスで蓋をし、300mlの水を含有する2000mlのガラスビーカーに入 れた。PVAを300rpm、85℃（Corningホットプレート/スターラー）で、２時間ま たは完全に溶解するまで、攪拌した。PVAの溶解を視覚的チエックで決定した； 溶液は透明であるべきである。溶液をガラススクリュートップ保存容器に移し、 ４℃で最高２ヶ月間保存した。しかしながら、溶液を使用前または希釈前に室温 まで加温しなければならない。 Ｃ．ミクロスフェアを生成する手順 作成するミクロスフェアのサイズに基づき（表１参照）、100mlのPVA溶液（表 １に示す濃度）を200mlウォータージャケットビーカーに入れた。Haake循環水浴 をこのビーカーに接続し、内容物を27℃（+/-１℃）で、10分間平衡化した。作 成するミクロスフェアのサイズに基づき（表I参照）、オーバーヘッドスターラ ーの開始速度を設定し、そしてオーバーヘッドスターラーの刃をPVA溶液中に中 程まで降ろした。次に、スターラーを開始し、次いで、10mlのポリマー溶液（生 成するミクロスフェアの型に基づいて用いるポリマー溶液）を、２分間にわたっ て、５ml自動ピペッターを用いて攪拌しているPVA中に滴下した。３分後、攪拌 速度を調整し（表１参照）、溶液をさらに2.5時間攪拌した。次いで、攪拌刃を ミクロスフェア調製物から取り除き、そして10mlの蒸留水でリンスし、その後、 リンス溶液をミクロスフェア調製物中に流し込んだ。次いで、ミクロスフェア調 製物を500mlビーカーに注ぎ入れ、そしてジャケット水浴を70mlの蒸留水で洗浄 した。これをまた、ミクロスフェア調製物中に流し込んだ。次いで、180mlのミ クロスフェア調製物をガラス棒で攪拌し、等量を４個のポリプロピレン50ml遠心 管に注ぎ込んだ。次いで、管を蓋し、そして10分間遠心分離した（表１に示した 力）。各ミクロスフェアのペレットから45mlのPVA溶液を抜き取った。 次いで、５mlの蒸留水を各遠心管に添加し、ボルテックスしてミクロスフェア を再懸濁した。次いで、４つのミクロスフェア懸濁液を１つの遠心管に、20mlの 蒸留水と共にプールし、そしてさらに10分間遠心分離した（表１に示す力）。こ のプロセスを、合計で３回洗浄するためさらに２回繰り返した。次いで、ミクロ スフェアを最後に１回遠心分離し、10mlの蒸留水で再懸濁した。最終洗浄後、ミ クロスフェア調製物を予め秤量したガラスシンチレーションバイアル中に移した 。バイアルをキャップし、そしてミクロスフェアを重力下で沈降させるため、室 温（25℃）で一晩放置した。0.1um〜３umのサイズ範囲に該当するミクロスフェ アは重力下で沈降しないので、これらは10mlの懸濁液中に残された。 Ｄ．10μm〜30μmまたは30μm〜100μmの直径のミクロスフェアの乾燥 ミクロスフェアを室温で一晩放置した後、上清を沈降したミクロスフェアから 流し出した。ミクロスフェアを蓋をしていないバイアルで、引き出しの中で、１ 週間の間またはこれらが完全に乾燥するまで（一定重量のバイアル）、乾燥した 。より速い乾燥は、蓋をしていないバイアルを、ヒュームフード中、窒素ガスの 緩 慢な流動下（流速約10ml/分）に放置することにより達成され得る。完全に乾燥 した時（一定重量のバイアル）、バイアルを秤量し、蓋をする。ラベルを貼り、 蓋をしたバイアルを、室温で、引き出し中に保存した。ミクロスフェアは通常、 ３ヶ月しか保存されなかった。 Ｅ．0.1μm〜３μm直径のミクロスフェアの懸濁液の濃度測定 このサイズ範囲のミクロスフェアは沈降せず、そのためこれらは４℃で、最大 ４週間懸濁液のままであった。10mlの懸濁液中のミクロスフェアの濃度を測定す るため、懸濁液の200μlのサンプルを1.5mlの予め秤量した微量遠心管中にピペ ッティングした。次いで、管を10,000gで遠心分離し（Eppendorf卓上微量遠心機 ）、上清を取り除き、そして管を50℃で一晩乾燥させた。次いで、管中の乾燥さ せたミクロスフェアの重量を測定するために管を再秤量した。 Ｆ．パクリタキセルを充填したミクロスフェアの製造 パクリタキセル含有ミクロスフェアを調製するため、適切な量の秤量したパク リタキセル（カプセル化されるべきパクリタキセルのパーセントに基づく）を、 20mlガラスシンチレーションバイアル中に直接入れた。次に、10mlの適切なポリ マー溶液をパクリタキセル含有バイアルに添加し、次いでこれをパクリタキセル が溶解するまでボルテックスした。 次いで、パクリタキセル含有ミクロスフェアを基本的に上記工程（Ｃ）〜（Ｅ ）の様に生成し得る。 実施例29 界面活性剤コーティングミクロスフェア Ａ．材料および方法 ミクロスフェアを、ポリ(DL)乳酸（PLA）、ポリメチルメタタリレート（PMMA ）、ポリカプロラクトン（PCL）およびエチレンビニルアセテート（EVA）:PLA（ 50:50）から、基本的に上記のように製造した。サイズは10〜100umの範囲であり 、平均直径45umを有した。 ヒト血液を健常なボランティアから得た。好中球（白血球）を、デキストラン 沈降法およびFicoll Hypaque遠心分離技法を用いて、血液から分離した。好中球 をHBSS１mlあたり500万細胞で懸濁した。 好中球活性化レベルを化学発光により測定されるような活性酸素種の産生によ って測定した。特に、１uMルミノールエンサンサーを用いたLKB照度計を使用す ることによって化学発光を測定した。ミクロスフェアの血漿プレコーティング（ またはオプソニン化）を、0.5mlの血漿中に10mgのミクロスフェアを懸濁し、そ して37℃、30分間のタンブリングすることにより行った。 次いで、ミクロスフェアを１mlのHBBSで洗浄し、そして遠心分離したミクロス フェアペレットを好中球懸濁液に、37℃、時間ｔ＝０で添加した。ミクロスフェ ア表面を、Pluronic F127（BASF）と呼ばれる界面活性剤を用いて、F127の２％w /wHBBS溶液0.5mlに10mgのミクロスフェアを、30分間37℃で懸濁することによっ て改変した。次いで、ミクロスフェアを、好中球にまたはさらにプレコーティン グするために血漿に添加する前に、１mlのHBBSで２回洗浄した。 Ｂ．結果 図44は、未処理のミクロスフェアが50mV未満の化学発光値を生じることを示す 。これらの値は低レベルの好中球の活性化を示す。比較のため、炎症性微結晶は 1000mVに近い値を生じ得、可溶性化学アクチベーターは5000mVに近い値を生じ得 る。しかしながら、ミクロスフェアを血漿でプレコーティングした場合、全ての 化学発光値は100〜300mVの範囲に増幅される（図44）。このレベルの好中球応答 または活性化は、中程度に炎症性であると考えられ得る。PMMAは最も大きな応答 を生じ、最も炎症性であると考えられ得た。PLAおよびPLCは両方とも、血漿前処 理（またはオプソニン化）後、好中球の活性化において３〜４倍より強力になっ たが、この点で、２つのポリマー間に差異はほとんどない。EVA:PLAは血管新生 処方物に用いられる可能性はない。なぜならこのミクロスフェアは乾燥および水 性緩衝液に再懸濁し難いからである。この血漿の効果はオプソニン作用と名付け られ、表面上への抗体もしくは補体分子の吸着に起因する。これらの吸着種は白 血球上のレセプターと相互作用し、増幅された細胞活性化を引き起こす。 図45〜48は、PCL、PMMA、PLAおよびEVA:PLAそれぞれの血漿プレコーティング の効果を記載し、そしてミクロスフェアの血漿プレコーティング前のPluronic F 127プレコーティングの効果を示す。これらの図は全て、同様の効果を示す：（ １）血漿プレコーティングは応答を増幅する；（２）Pluronic F127プレコーテ ィングはそれ自身に対する効果を有さない；（３）血漿プレコーティングにより 引き起こされた増幅された好中球応答は、ミクロスフェア表面を２％Pluronic F 127でプレコーティングすることにより強力に阻害され得る。 血漿由来の吸着されたタンパク質種の性質をまた、電気泳動により研究した。 この方法を用いて、ポリマー表面をPluronic F127で前処理することが、抗体の ポリマー表面への吸着を阻害することが示された。 図49〜52は同様に、PCL、PMMA、PLAまたはEVA:PLAミクロスフェアを（それぞ れ）、IgG（２mg/ml）または２％Pluronic F127次いでIgG（２mg/ml）でプレコ ーティングする効果を示す。これらの図から理解され得るように、ミクロスフェ アをIgGでプレコーティングすることにより引き起こされる増幅された応答は、P luronic F127での処理により阻害され得る。 この結果は、４つ全ての型のミクロスフェアのポリマー表面をPluronic F127 でプレコーティングすることによって、ミクロスフェアに対する好中球の「炎症 」応答は阻害され得ることを示す。 実施例30 ポリ(E-カプロラクトン)ミクロスフェアへの治療薬のカプセル化。 パクリタキセルを充填したミクロスフェアによるCAMアッセイにおける血管新生 の阻害 本実施例は、ポリ（ε-カプロラクトン）（PCL）の生分解性ミクロスフェアか らのパクリタキセルのインビトロ放出速度プロフィールを評価し、そしてCAM上 に配置した場合のこれらのミクロスフェアから放出されるパクリタキセルのイン ビボ抗血管新生活性を示す。 これらの実験に利用した試薬には以下のものが挙げられる：PCL（分子量35,00 0〜45,000；Polysciences（Warrington，PA）から購入）；Fisher Scientific C o.，CanadaのDCM；Aldrich Chemical Co.（Milwaukee，Wis）のポリビニルアル コール（PVP）（分子量12,000〜18,000、99％加水分解化）、およびSigma Chemi cal Co.（St．Louls，MO）のパクリタキセル。別に記述していなければ、全ての 化学薬品および試薬を供給されたまま使用する。蒸留水を全てにわたり使用する 。 Ａ．ミクロスフェアの調製 ミクロスフェアを溶媒エバポレーション法を用いて、実施例28に記載のように 基本的に調製した。手短に言うと、５％w/wパクリタキセルを充填したミクロス フェアを10mgのパタリタキセルおよび190mgのPCLを２mlのDCMに溶解し、100mlの １％PVP水溶液に添加し、そして1000rpmで、25℃２時間攪拌することにより調製 した。ミクロスフェアの懸濁液を1000×ｇで10分間遠心分離し（Beckman GPR） 、上清を除去し、そしてミクロスフェアを３回水で洗浄した。洗浄したミクロス フェアを一晩風乾し、室温で保存した。コントロールミクロスフェア（パクリタ キセル非充填）を上記のように調製した。１％および２％パクリタキセル含有ミ クロスフェアをまた調製した。ミクロスフェアを対物ミクロメーターを備えた光 学顕微鏡を用いてサイズを測った。 Ｂ．カプセル化効率 既知の重量の薬物を充填したミクロスフェア（約５mg）を８mlのアセトニトリ ルに溶解し、そして２mlの蒸留水を添加してポリマーを沈殿させた。混合物を10 00ｇで10分間遠心分離し、カプセル化されたパクリタキセル量をUV分光光度計（ Hewlett-Packard 8452Aダイオードアレイ分光光度計）で、232nmで測定した上情 の吸光度から計算した。 Ｃ．薬物放出研究 約10mgのパクリタキセルを充填したミクロスフェアを、スクリューキャップし たチューブ中、20mlの10mM PBS（pH7.4）に懸濁した。チューブを37℃で所定の 時間間隔で隅々まで振盪し、19.5mlの上清を除去し（ミクロスフェアを底に沈降 させた後）、0.45μmメンブランフィルターを通して濾過し、そしてパクリタキ セル分析のため保持した。研究中ずっとシンク状態を保持するため、等容量のPB Sを各チューブにおいて置換した。濾液を３×１ml DCMで抽出し、DCM抽出物を窒 素流動下でエバポレートして乾燥させ、１mlのアセトニトリルに再溶解し、そし て１ml/分の流速（Beckman Isocratic Pump）の水：メタノール：アセトニトリ ル（37:5:58）の移動相、C8逆相カラム（Beckman）、および232nmのUV検出器（S himadzu SPD A）を用いたHPLCによって分析した。 Ｄ．CAM研究 受精した家ニワトリ胚を、シェルレス培養前に４日間インキュベートした。イ ンキュベーションの６日目、５％パクリタキセルを充填したまたはコントロール （パクリタキセル非充填）ミクロスフェアの１mgアリコートをCAM表面に直接置 いた。２日曝露後、血管系を、ビデオカメラに接続した実体顕微鏡を用いて検査 した；次いで、映像信号をコンピューター上に表示し、映像を印刷した。 Ｅ．走査電子顕微鏡観察 ミクロスフェアをサンプルホルダーに入れ、金でスパッタリングコーティング し、次いで、15kVで作動するPhilips 501B SEMに配置した。 Ｆ．結果 ミクロスフェアのサンプルのサイズ範囲は30〜100μmであったが、全てのパク リタキセルを充填したまたはコントロールミクロスフェアバッチで、いくらかの ミクロスフェアがこの範囲から外れていることは明らかであった。PCLミクロス フェアをパクリタキセルで充填する効率は、全ての薬物充填研究について、常に 95％より大きかった。走査電子顕微鏡観察は、ミクロスフェアが全て球形であり 、多くが粗いかまたはあばたのある表面形態を示すことを実証した。ミクロスフ ェアの表面上の固形薬物の証拠はないようであった。 １％、２％および５％充填PCLミクロスフェアからのパクリタキセル放出の経 時変化を図53Aに示す。この放出速度プロフィールは二相性であった。全ての薬 物充填において、パクリタキセルの初期急速放出または「バースト相」があった 。 バースト相は、１％および２％パクリタキセル充填で１〜２日にわたり、そして ５％充填ミクロスフェアで３〜４日にわたり生じた。急速放出の初期相に、有意 により緩慢な薬物放出相が続いた。１％または２％パクリタキセル含有ミクロス フェアについては、21日後、さらなる薬物放出はなかった。５％パクリタキセル 充填で、ミクロスフェアは、21日後、全薬物含有量の約20％を放出した。 図53BはコントロールPCLミクロスフェアで処理したCAMを示し、図53Cは５％パ クリタキセルを充填したミクロスフェアでの処理を示す。コントロールミクロス フェアでのCAMは、正常な毛細血管網様構造を示した。パクリタキセル-PCLミク ロスフェアで処理したCAMは、顕著な血管退行および毛細血管網を欠いている領 域を示した。 Ｇ．考察 パクリタキセルを充填したミクロスフェアを製造する溶媒エバポレーション法 は、95〜100％の間の非常に高いパクリタキセルカプセル化効率を生じた。これ はパクリタキセルの低い水溶性、およびポリマー含有有機溶媒相をにおける分配 を好むその疎水性の性質に起因した。 パクリタキセルの二相性放出プロフィールは、生分解性ポリマーマトリックス からの多くの薬物の放出パターンの典型であった。ポリ(ε-カプロラクトン)は 、生理的条件下で加水分解によって分解され得る脂肪族ポリエステルであり、そ してそれは非毒性およびそして組織適合性である。PCLの分解は、広範に研究さ れた酪酸およびグリコール酸のポリマーおよびコポリマーの分解よりも有意に緩 慢であり、それ故、長期薬物送達システムの設計に適している。パクリタキセル 放出の初期急速相またはバースト相は、ミクロスフェアの表在領域（ミクロスフ ェア表面の近傍）からの薬物の拡散放出によると考えられた。放出プロフィール の第２（より緩慢な）相におけるパクリタキセルの放出は、PCLの分解または侵 食に依らないようである。なぜなら、研究により、水中のインビトロ条件下では 、7.5週間にわたるPCLの有意な重量損失または表面侵食は存在しないことが示さ れているからである。パクリタキセル放出のより緩慢な相はおそらく、ポリマー マトリックスの液体が充満した孔内の薬物の溶解および孔を介した拡散に依った の であろう。より高いパクリタキセル充填におけるより高い放出速度はおそらく、 ポリマーマトリックス内のより広範囲な孔網の結果であったのであろう。 ５％充填パクリタキセルミクロスフェアは、CAM上に配置した場合、血管新生 の広範な阻害を産生するために十分な薬物を放出することが示された。血管増殖 の阻害は、図53Cに示したような無血管性領域を生じた。 実施例31 PLGAミクロスフェアの製造 ミクロスフェアを酪酸-グリコール酸コポリマー（PLGA）から製造した。 Ａ．方法 ミクロスフェアを0.5〜10μm、10〜20μmおよび30〜100μmのサイズ範囲で、 標準的方法を用いて製造した（PCLまたはPDLLAミクロスフェア製造法に前記した ように、ポリマーをジクロロメタンに溶解し、攪拌しつつポリビニルアルコール 溶液に乳化した）。PLLA対GAの様々な比を、異なる分子量（固有粘度（I.V.）と して示した）を有するポリマーとして用いた。 Ｂ．結果 ミクロスフェアを以下の出発ポリマーから首尾よく製造した： PLLA ： GA I.V. 50 ： 50 0.74 50 ： 50 0.78 50 ： 50 1.06 65 ： 35 0.55 75 ： 25 0.55 85 ： 15 0.56 10％または20％充填のパクリタキセルを、これら全てのミクロスフェアに首尾 よく組み入れた。１つの出発ポリマー（85:15、IV＝0.56）のサイズ分布の例を 図54〜57に示す。パクリタキセル放出実験を、様々なサイズおよび様々な組成の ミクロスフェアを用いて行った。放出速度を図58〜61に示す。 実施例32 パクリタキセルのナイロンマイクロカプセルへのカプセル化 治療薬はまた、選択された形態またはデバイスに形成され得る広範なキャリア 中にカプセル化され得る。例えば、以下により詳細に記載するように、パクリタ キセルは、人工心臓弁、血管移植片、外科手術用メッシュ、または縫合糸に処方 され得るナイロンマイクロカプセル中に組み込まれ得る。 Ａ．パクリタキセルを充填したマイクロカプセルの調製 パクリタキセルを、界面重合化技術を用いて、ナイロンマイクロカプセル中に カプセル化した。簡潔には、100mgのパクリタキセルおよび100mgのPluronic F-1 27を１mlのDCM中に溶解させ、そして0.4ml（約500mg）のアジポイルクロリド（A DC）を添加した。この溶液を、Polytronホモジナイザー（設定１）を用いて、15 秒間にわたり、２％PVA溶液中にホモジナイズした。ホモジナイズの間、5ml蒸留 水中の1,6-ヘキサンジアミン（HMD）の溶液を滴下した。HMD溶液の添加後、さら に10秒間、この混合物をホモジナイズした。この混合物をビーカーに移し、そし てマグネチックスターラーで３時間にわたって撹拌した。この混合物を遠心分離 し、回収し、そして１mlの蒸留水中に再懸濁させた。 Ｂ．カプセル化効率／パクリタキセルローディング 約0.5mlの懸濁液を濾過し、そしてミクロスフェアを乾燥させた。約2.5mgのマ イクロカプセルを秤量し、そして10mlのアセトニトリル中に、24時間にわたって 懸濁させた。上清をパクリタキセルについて分析し、そして結果をパクリタキセ ルの百分率として表した。予備的研究は、パクリタキセルが、高いローディング （60％まで）および高いカプセル化効率（80％を越える）で、ナイロンマイクロ カプセル中にカプセル化され得たことを示している。 Ｃ．パクリタキセル放出の研究 約2.5mgのパクリタキセル−ナイロンミクロスフェアを、それぞれ1Mの塩化ナ トリウムおよび尿素を含む50mlの水中に懸濁させ、そして定期的に分析した。マ イクロカプセルからのパクリタキセルの放出は速く、72時間後、95％を越える薬 物が放出された（図62）。 実施例33 生体接着性ミクロスフェア Ａ．生体接着性ミクロスフェアの調製 ミクロスフェアを、10μm〜60μmの粒子直径範囲を有するPLLA 100kg/molから 調製した。ミクロスフェアを、水酸化ナトリウム溶液中でインキュベートして、 ポリエステルの加水分解により、表面上にカルボン酸基を生成させた。表面の電 荷を測定することにより、水酸化ナトリウム濃度およびインキュベーション時間 について、反応をキャラクタライズした。反応は、0.1M水酸化ナトリウム中での 45分のインキュベーションの後、完結に達した。塩基処理の後、ミクロスフェア をジメチルアミノプロピル（proyl）カルボジイミド（DEC）（架橋剤）のアルコ ール性溶液に懸濁させ、そして混合物を乾燥させて分散可能な粉末にすることに より、ミクロスフェアを、DECでコーティングした。ミクロスフェアとDECの重量 比は、９：１であった。ミクロスフェアが乾燥した後、これらを撹拌しながら、 ポリ（アクリル酸）（PAA）の２％w/v溶液中に分散させ、そしてDECをPAAと反応 させて、ミクロスフェア表面上に、水不溶性の架橋PAA網目を生成させた。ミク ロスフェア表面上のPAAの存在を確認するために、走査電子顕微鏡を用いた。 塩基での処理前および処理後における、ミクロスフェアの示差走査熱量分析は 、バルク熱（bulk thermal）特性（Tg、融解、および結晶化度）における変化が なかったことがSEMによって観察されたことを明らかにした。 Ｂ．インビトロでのパクリタキセル放出速度 同じ粒子直径サイズ範囲を有する、パクリタキセルを充填したミクロスフェア （10％および30％w/wのローディング）を製造し、そしてPBS中10日にわたる放出 におけるインビトロ放出プロフィールを作成した。放出は、薬物ローディングに 比例し、10日の間、30％充填ミクロスフェアの５mgから放出されたパクリタキセ ルは400μgであり、そして同様の期間中、10％充填ミクロスフェアから放出され たパクリタキセルは150μgであった。カプセル化の効率は、約80％であった。パ クリタキセルを充填したミクロスフェアを、0.1Ｍの水酸化ナトリウム中で45分 間にわたってインキュベートし、そして水酸化ナトリウム中でのインキュベーシ ョンの前後で、ゼータポテンシャルを測定した。パクリタキセルを充填したミク ロスフェアの表面電荷は、塩基による処理の前後の両方で、パクリタキセルを有 しないミクロスフェアよりも低かった。 Ｃ．ポリリジンまたはフィブロネクチンのいずれかでコーティングされたPLLAの 調製およびインビトロでの評価 １％スーダンブラック（sudan black）を含む（ミクロスフェアを着色するた め）PLLAミクロスフェアを調製した。これらのスフェアを、ポリリジン（Sigma chemicals-ヒドロブロメル形態（Hydrobromell form））またはフィブロネクチ ン（Sigma）のいずれかの２％（w/体積）溶液中に、10分間にわたって懸濁させ た。このミクロスフェアを、緩衝液中で１回洗浄し、そして新たに準備したラッ トの膀胱の内部表面に配置した。膀胱を10分間放置し、次いで緩衝液中で３回洗 浄した。このプロセス後、膀胱壁に存在している残存（結合）したミクロスフェ ア（従って、生体接着を示すミクロスフェア）は、フィブロネクチンをコーティ ングしたミクロスフェアおよびポリ-1-リジンをコーティングしたミクロスフェ アの両方について、生じた（図63Ａおよび63Ｂ）。 実施例34 CIAラットモデルにおける、パクリタキセルによる関節炎発症の防止 Ａ．材料および方法 同系の雌性Louvainラット（体重120〜150グラム）に、0.1Ｍ酢酸で可溶化しそ してFIA（Difco、Detroit、MI）で乳化した、0.5mgの天然のチック（chick）コ ラーゲンII（Genzyme、Boston、MA）を皮内注射した。免疫処置のほぼ９日後、 動物は、パンヌス形成および骨／軟骨侵食の組織学的変化を伴う多発性関節炎を 発現した。４つのプロトコル（ビヒクルを単独で受容したコントロール群（n=17 ）、ならびに１つの防止プロトコルおよび２つの抑制プロトコルからなる、３つ のパクリタキセル処置群）中、計45匹のラットが用いられた。パクリタキセルの 効果を評価するために、パクリタキセル（エタノールとCremophor E.L．(登録商 標)（Sigma）との１：１希釈物中で可溶化し、生理食塩水に添加して、５％w/v エタノールおよびCremophor E.L.中のパクリタキセルの最終濃度を4.8mg/mlにし た）を、そして免疫処置後第２日目（防止プロトコル）または第９日目の関節炎 発症時（抑制プロトコル）に、腹腔内（i.p.）投与を開始した。防止プロトコル （n=8）については、パクリタキセルを、1mg/kg体重の濃度で、第２日目から開 始して、その後の５回の投与（第５日目、第７日目、第９日目、第12日目、およ び第14日目）により与えた。高用量の抑制プロトコル（n=10）については、パク リタキセル（1mg/kg体重）を、第９日目から開始して１日おきに与えた。低用量 の抑制プロトコル（n=10）では、パクリタキセルを、1mg/kg体重で、第９日目、 第11日目、および第13日目に与え、次いでこの用量レベルの75％（0.75mg/kg体 重）を、１日おきに、第21日目まで与えた。コントロール動物および実験動物を 、疾患の重篤度について、処置群を知らされていない（blinded to）個人によっ て、臨床的におよびＸ線写真により評価した。 各肢についての炎症の重篤度を、日毎に評価し、そして腫脹および関節周囲の 紅斑の標準化されたレベル（０は正常であり、４は重篤である）に基づいて評定 した。動物を、実験の第28日目に、Ｘ線写真により評価した。両方の後肢のＸ線 写真を、軟組織の腫脹、関節の間隙の狭さ、骨の破壊、および骨膜の新骨形成の 程度によりランク付けした。各肢を数量化するために、０〜３のスケールを用い た（０＝正常、１＝軟組織腫脹、２＝骨の初期侵食、３＝重篤な骨の破壊およ び／または強直症）。関節の組織学的評価を、この実験の終わりに完結させた。 CIIに対する、遅延型過敏症（DTH）を、第28日目に完結した放射線耳アッセイ （radiometric ear assay）により測定した。1.4以上の放射線耳指数（radiomet ric earindex）は、CIIへの顕著な応答を表す。抗-CII IgG抗体の存在は、酵素 結合免疫吸着アッセイ（ELISA）により測定された。第26日目に得られた血清サ ンプルを、１：2560に希釈し、そして結果を、490nmにおける平均光学密度（４ 連のアリコート中）として表した。この希釈率での正常なラット血清中のバック グラウンドレベルは０であり、そしてこれらは、コラーゲンで免疫処置したラッ ト血清から容易に識別可能である。 Ｂ．結果 このモデルにおいて、関節炎発症の前に実施されたパクリタキセル処置は、ビ ヒクルコントロール群と比較すると、全ての処置されたラットにおいて（パクリ タキセル処置を中断した後でさえも）、疾患の発現を完全に防止した。 コントロール動物において、疾患の臨床的症状は、変形および関節機能の喪失 が起こるまで漸進的に増加した。関節炎の発症後、低用量および高用量のパクリ タキセルを受容した動物は共に、顕著な臨床的改善を示した。平均して、臨床的 評点は、処置の開始時に見られた評点と同等であり、このことはパクリタキセル が疾患の臨床的進行を防止する能力を示した。 パクリタキセルを受容した動物は、体重を支えること（weight bear）ができ 、歩行可能であり、そして仮に処置に何らかの毒性効果があるとしても、それら を少しも示さなかった。処置された動物において、ワクチン接種部位における創 傷治癒および体毛再成長が観察された。パクリタキセルで処置した動物は、コン トロールと比較して、体重が増加した。 パクリタキセル関節炎防止プロトコルにおけるラットはいずれも、いかなるＸ 線写真での変化も、臨床的関節炎も表さなかった。高用量および低用量のパクリ タキセルの群の両方とも、コントロール群と比較して、Ｘ線写真で観察される疾 患が顕著に少なかった。さらに、組織学的評価により、コントロール群のラット は顕著なパンヌス（骨および軟骨の侵食を伴う）を示したが、パクリタキセルで 処理したラットは、たとえパンヌスを有しても最小限であり、関節の軟骨が保護 されたことが明らかになった。 ELISAアッセイを用いると、II型コラーゲンに対するIgG抗体は、コントロール 群と比較して、パクリタキセルで処理したラットにおいて顕著に低かった；防止 プロトコルにおけるラットは、高用量および低用量のパクリタキセル投与抑制プ ロトコルにおけるラットと比較して、顕著に低いIgG抗体を有した。 Ｃ．考察 パクリタキセルは、関節炎およびおそらくは他のタイプの自己免疫疾患のため の実行可能な処置である。なぜなら、これは、免疫処置の後であるが関節炎の発 症の前に投与される場合、疾患のプロセスを遮断するからである。この結果は、 パクリタキセルが、CII免疫処置の２日後に開始された場合、関節炎発症を完全 に抑止し得ることを示す。抑制プロトコルにおけるパクリタキセル処置に関して 、関節炎の重篤性は、パクリタキセル投与の期間中減少し続けたが、両方の抑制 プロトコルにおいて、処置を中止した後４日以内に増加し始めた。しかし、パク リタキセルを用いる早期介入により、連続的な治療の必要性が緩和されるようで あった。 実施例35 パクリタキセルを用いる、コラーゲン誘発関節炎の後退 パクリタキセルは、ミセル製剤中で全身投与される場合、CIAモデルにおける 疾患改変効果（disease-modifying effect）を示した。パクリタキセルの潜在的 な疾患改変効果を評価するために、ミセル性（Cremophorを有さない）パクリタ キセルを、４日毎に（q.o.d.）、５mg/kg（第１群）または10mg/kg（第２群）で 、臨床的に検出可能な関節炎の発症時（第９日目）に、免疫処置した動物に腹腔 内（i.p.）投与した。評価期間を通して、パクリタキセルを投与した。標準的治 療との比較として、第３の群は、関節炎の発症後第０日目、第５日目、および第 10日目に、0.3mg/kg（i.p.）（ヒト等価用量）で、メトトレキセートを受容した 。 第４の群は、メトトレキセート（0.3mg/kg）およびミセル性パクリタキセル（10 mg/kg）の組み合わせ治療を受けた。コントロール（第５群）および実験動物を 、処置群について知らされていない個人によって、臨床的およびＸ線写真の両方 により、疾患の重篤性について評価した。 各肢についての炎症の重篤度を、日毎に評価し、そして腫脹および関節周囲の 紅斑の標準化されたレベル（０は正常であり、４は重篤である）に基づいて評定 した。動物を、実験の第28日目に、Ｘ線写真により評価した。両方の後肢のＸ線 写真を、軟組織の肺脹、関節の間隙の狭さ、骨の破壊、および骨膜の新骨形成の 程度によりランク付けした。各後肢を数量化するために、０〜３のスケールを用 いた（０＝正常、１＝軟組織腫脹、２＝骨の初期侵食、３＝重篤な骨の破壊およ び／または強直症）（Brahnら、Arthritis Rheum．37：839-845，1994；Oliver ら、Cell．Immunol．157：291-299、1994）。関節の組織学的評価を、この実験 の終わりに完結させた。 このモデルにおいて、関節炎発症の前に実施されたミセル性パクリタキセル処 置は、パクリタキセル処置を中断した後でさえも、疾患の発現を完全に防止した 。コントロール動物において、疾患の臨床的症状（図64）は、変形および関節機 能の喪失が起こるまで漸進的に増加した。メトトレキセート治療を受容した動物 は、コントロールと比較して、統計的に改善されなかった（図64および表１）。 関節炎の発症後、低用量ミセル性パクリタキセル（５mg/kg）を受容した動物は 、幾分か改善を示したが、10mg/kgの用量のミセル性パクリタキセルを受容した 動物は、高度に有意な（p=0.0002）臨床的改善を示した（図64）。平均して、臨 床的評点は、処置の開始時において見られた評点と同等であり、ミセル性パクリ タキセルが疾患の臨床的進行を防止する能力を示した（表１）。 ミセル性パクリタキセルを受容した動物は、体重を支えることができ、歩行可 能であり、そして処置のいかなる毒性の影響も示さなかった。処置された動物に おいて、ワクチン接種部位における創傷治癒および体毛再成長が観察された。ミ セル性パクリタキセル処置動物は、非処置コントロールと比較して、体重が増加 した。ミセル性パクリタキセルおよびメトトレキセートを受容した動物は共に、 コントロールと比較して、治療に良好に耐え、そして印象的な臨床的改善を示し た（p≦0.0001）(図64)。酵素結合免疫吸着抗体（ELISA）アッセイを用いると、 II型コラーゲンに対するIgG抗体は、パクリタキセルでおよび組み合わせ（MTX/ パクリタキセル）で処置されたラットにおいて、コントロールと比較して低かっ た。 Ｘ線写真の研究はまた、パクリタキセル治療について顕著な改善を示した。コ ントロール動物およびメトトレキサートで処置した動物は、軟組織の腫脹、関節 の間隙が狭くなっていること、骨破壊、および骨膜の新骨形成のＸ線写真による 証拠を示したが、パクリタキセルで処置した動物は、Ｘ線上で、ほぼ正常な関節 の形状を有した（図65）。 実際に、ミセル性パクリタキセル単独（10mg/kg）またはメトトレキセートと の組み合わせを受容した動物のうち、軟骨の侵食を発現したのはごく小さい割合 （17〜18％）の動物であった。疾患の進行／結果の重要な指標である軟骨の侵食 は、ミセル性パクリタキセル治療を受容する動物と比較して、コントロール動物 （72％）またはメトトレキセートを単独で受容する動物では、４倍起こりやすい （表２）。 走査型電子顕微鏡写真は、インビボにおけるパクリタキセル治療の軟骨保護効 果を明らかにする。正常な関節表面は、薄い骨膜内層によって囲まれた、滑らか な無傷の軟骨マトリックスにより特徴付けられる（A）。CIAにおいて、軟骨表面 はパンヌス組織により産生されたMMP、および炎症を起こした骨膜で侵食されて いる（図66B）。浅在性軟骨マトリックスは消化され、軟骨細胞またはかつては 軟骨細胞が占めていた空小腔を曝す（図66B挿入図）。臨床関節炎の発症後にパ クリタキセル処置を受けた、CIAを有する動物では、関節表面は無傷のままであ り（図66C）、そして軟骨マトリックスは、高倍率でさえ大部分が正常なようで あった（図66C挿入図）。パンヌス組織形成、および骨膜肥大はパクリタキセル 処置群においては見られなかった。 組織学的には、CIAは、顕著な骨膜肥大、骨膜の炎症性細胞浸潤、および軟骨 破壊によって特徴付けられる（図67A）。パクリタキセル処置動物においては、 骨膜は１〜２層の骨膜細胞のみを有して正常であるように見え、炎症細胞浸潤は 観察されなかった（図67B）。 また、腐食鋳造物を、パクリタキセルがCIAを有する動物の骨における新血管 形成をブロックし得るかを決定するために評価した。メルコックス（mercox）ポ リマーを、屠殺した動物の大腿動脈に100mmHgの圧力で注入し、インサイチュで 固化させ、続いて、組織を消化して、下肢血管系の鋳造物を作った。CIAを有す る動物の骨膜血管系の鋳造物の走査電子顕微鏡写真により、関節空間に向かう内 向きに突出した末端部が判別不可能な（blind-ended）毛細血管新芽が明らかに なった。これらの血管は、固形腫瘍および他の血管形成形態で記載される成長中 の血管形成性血管に形態学的に類似するようであった（図68A挿入図）。対照的 に、パクリタキセル処置動物の骨膜血管は、毛細血管ループに配置され（図68B ）、血管新生芽の証拠はなかった。 投薬を受けていないコントロールに見出されるものと同じく、パクリタキセル ／MTXレシピエントにおいて、血管増殖の退行および形態学的な血管構造が存在 した。これらの研究は、ミセルのパクリタキセル、およびパクリタキセル／メト トレキセート組合せ治療が、新生血管形成を退行させ、炎症プロセスを阻害し、 定着した骨膜炎を退縮させ、そして関節破壊を防止し得ることを示唆する。 パクリタキセルの全身投与は、関節炎に対する実行可能な治療であることが示 された。疾患の本来の過程は、発赤および軽減であり、連続する発赤のそれぞれ が、加算的な損傷を生じ、最終的に関節の破壊を導く。疾患の緩解傾向を導くた めに用いられる、短期的で高容量の全身治療、または疾患制御を維持するための 、持続的低容量治療の可能性が存在する。パクリタキセルを送達する他の方法に は、１ヶ所または２ヶ所の顕著な関節疾患を有する患者の罹患関節への薬物の直 接的な関節内注射が挙げられる。 実施例36 乾癬の動物モデルにおけるパクリタキセル処方物の評価 A. 皮膚血管形成モデル 皮膚特異的血管形成を研究するため、新規の動物モデルを用いた。免疫不全SC IDマウスを、センス方向、またはアンチセンス方向で血管内皮増殖因子（VEGF） をトランスフェクトしたヒトケラチノサイト株の表面移植物のレシピエントとし て、用いる。ケラチノサイトを、改変型シリコーン移植チャンバーアッセイの使 用を介してレシピエントマウスの皮膚上に移植する。ケラチノサイトを、分化さ せ、そして皮膚血管形成を誘導させる。次いでパクリタキセルを全身、または局 所的（クリーム、軟膏、ローション、ゲル）に投与し、そして処置群および非処 置群において、血管数およびサイズの形態計測的測定を行う。 B. 皮膚遅延型過敏反応に対するマウスモデル 皮膚遅延型過敏反応に対するマウスモデルを用いて、誘導性皮膚炎症に対する パクリタキセルの効果を研究した。簡潔には、皮膚上にオキサゾロン(oxazolone )を局所的に適用することにより、マウスをこの化合物に感作させた。５日後、 耳の皮膚に局所的に適用することでマウスをオキサゾロンで攻撃し（左耳：オキ サゾロン、右耳；ビヒクル単独）、皮膚炎症性の「遅延型過敏」反応を起こした 。炎症の程度を、48時間にわたって、生じた耳の腫脹を測定することにより数値 化した（図69および70を参照のこと）。Eponに包埋し、Giesmaで染色した１μm 組織切片を、炎症細胞の存在、組織肥満脂肪の存在およびその活性化の状態、な らびに上皮過形成の程度について評価した。このインビボモデルにおける、皮膚 炎症反応に対するパクリタキセルの効果を定量化するため、全身または局所的の いずれかでパクリタキセルを投与した。 C. 結果 これらの研究は、マウスにおいて実験的に誘導した皮膚炎症の処置における１ ％パクリタキセルの局所投与と、ビヒクル単独の局所投与との比較は、パクリタ キセルが皮膚炎症に阻害効果を及ぼすことを示した。実験的に誘導した遅延型過 敏反応において、ビヒクル単独で局所的に処置した耳と比較して、１％パタリタ キセルで局所的に処置した耳の耳腫脹に有意な減少が存在した。１％パクリタキ セル処方物の局所的適用は、PMA(ホルボル12-ミリストール13-アセテート)の局 所適用によって誘導された、耳の腫脹および紅斑（発赤）を有意に阻害した（図 71および図72を参照のこと）。図73に例示したように、パクリタキセルで処置し た耳（右耳）は、コントロール（左耳）と比較して外見上は正常であった。計５ 匹のマウスで類似の結果が得られた。 １％パクリタキセルの皮膚刺激を、ビヒクル単独と比較して評価するために、 これらの２つの処方物の適用を８日間にわたって、両耳の各側にそれぞれ、毎日 20μl適用した。８日後、正常または炎症の起きたマウス耳皮膚へのビヒクル単 独、および１％パクリタキセル処方物いずれの適用後も、皮膚刺激は検出されな かった。 実施例37 動物モデルにおける慢性拒絶の評価 促進型のアテローム性動脈硬化症が、心臓移植レシピエントの大部分で進展し 、長期の移植片の生存を制限する。慢性拒絶のLewis-F344異所性ラット心臓移植 モデルは有用な実験モデルである。なぜなら、これは、アテローム性動脈硬化症 の病変を、中期および長期生存同種移植片において段階的に産生するからである 。Lewis-F344モデルの利点は：(i)長期生存移植片における、アテローム性動脈 硬化症の病変の発生率および重篤度が極めて高く；そして(ii)この系は免疫抑制 を必要としないので、病変進展の炎症段階が容易に認識されるということである 。 成体雄性Lewisラットはドナーとして供され、そしてF-344ラットはレシピエン トとして供される。麻酔したレシピエントにおいて腹部に長い正中切開を行い、 大動脈および下大静脈を露出させることによって、20の異所性腹部心臓同種移植 片を移植した。２つの血管を、互いに分離し、そして周囲の結合組織から分離し 、血管上に小さい留め具を付ける。各血管に吻合部位で縦方向の切開（２mm〜３ mm）を行う。 麻酔されたドナーラットの腹部を、下大静脈内に300ユニットの水性ヘパリン を注入するために切開する。胸壁を心臓が露出するように切開する。大静脈を結 紮し、次いで上大動脈および主肺動脈を切除し、２〜３mmの長さで残った血管起 点を心臓に接続する。結紮に対して遠位側の大静脈を分割し、そして結紮を左心 房および肺静脈の集団のまわりに配置する。結紮の肺側の血管を分割し、そして 心臓を除去する。 ドナー心臓をレシピエントの腹腔内に配置し、そして大動脈をレシピエントの 血管の切開部位で一緒に縫合する。同様に、肺動脈を下大静脈の切開部位に同様 の様式で接続する。血管クランプを放し(近位大静脈、遠位静脈および動脈、な らびに近位大静脈)、針穴からの出血を最小限にする。 移植後、ポリカプロラクトン(PCL)ペースト(n=10)中のパクリタギセル(33％) またはPCLペースト単独(n=10)を10匹のラットの冠状動脈の外側表面の長さにわ たって心外膜を通じて注射し、その結果心筋に包埋された動脈領域が未処置のま ま残る。 全てのレシピエントは、移植時にペニシリンＧ(100,000ユニット)の単回筋肉 内注射を受ける。同種移植に次いで日々の触診を行い、そして１〜４のスケール で(４が通常の心拍を表し、そして０が機械的活動の欠如を表す)それらの機能を 評価する。各グループからの５匹のラットを14日間で屠殺し、残りの５匹のラッ トも28日間で屠殺する。ラットを重量の減少および他の全身性疾病の徴候に関し て観察する。14または28日後、動物を麻酔し、そして最初の実験の様式で心臓を 露出させる。被覆されたおよび被覆されていない冠状動脈を単離し、10％緩衝化 ホルムアルデヒドで固定化し、そして組織学的に検査する。 最初の実験は、移植後の冠状動脈でのパクリタキセル/EVAフィルムまたは被覆 されたステントの使用のために改変され得る。EVAフィルムは、被覆されたステ ントを管腔内に設置しながら、冠状動脈の管腔外表面に上記と同様の様式で適用 される。 さらに、これらの調査は他の組織移植ならびに移植片移植(例えば、静脈、皮 膚)を含むようにさらに拡張され得る。 実施例38 MSの動物モデルにおけるパクリタキセルの効果 脱髄性トランスジェニックマウスのMS症状の進行および病原性を阻害するパク リタキセルミセルの能力(Mastronardiら、J．Neurosci．Res．36：315-324、199 3)は検査された。これらのトランスジェニックマウスは、70コピーのトランスジ ーンDM20(ミエリンプロテオリピド)含む。臨床的に、動物は３月齢まで通常であ る。３ヶ月後、神経学的病理の証拠(例えば、発作、震え、後肢可動性(hind lim b mobility)、歩行不安定、びっこ引き(limp tail)、ゆらぎ歩行および活動性の 程度の減少)が明らかであり、そして動物が６月齢と８月齢との間で死ぬまで重 症度が進行的に増大する。臨床的な徴候は、脳内の脱髄および増加した線維性星 状細胞増殖と組織学的に相関する(Mastronardiら、J．Neurosci．Res．36：315- 324、1993)。 Ａ．材料および方法 ２つの動物研究を、低容量継続治療パクリタキセルプロトコール(2.0mg/kg； １週間当たり３回、合計10回の注射)または疾患の臨床的発症で開始される高用 量「パルス」治療パクリタキセルプロトコール(20mg/kg；４回、１週間に１度) のいずれかの皮下投与を用いて実施された(約４月齢)。低容量プロトコールに関 して、５匹の動物がミセルパクリタキセルを受け、２匹のマウスをコントロール として用いた；１方のマウスは未処置の正常であり、そしてもう一方は未処置の トランスジェニック同腹仔であった。疾患の過程が研究室内で十分に確立される ので、１方のマウスのみがコントロールとして使用された。MSの最初の徴候が上 記の症状カテゴリーの１＋のスコアに達した後、４月齢の動物をミセルパクリタ キセルで注射した。処置の過程は、24日間であった(2.0mg/kgパクリタキセル、 １週間当たり３回、10回用量)。体重および臨床的徴候を各注射の日に決定した 。 Ｂ．結果 パクリタキセルを受けた５匹の動物は、顕著な体重減少を示さなかった。しか し、未処置のトランスジェニックマウスは30％の体重減少(29gから22g(図74))を 示し、疾患の進行に正常に関連している。 MSの臨床的指標(例えば、震え、後肢可動性、発作、頭部震動、歩行不安定、 ゆらぎ歩行および活動性の程度の減少)は、日々モニターされた。処置の開始に おいて、動物は主な症状カテゴリーの１＋のスコアを有した。未処置の動物は、 多くの症状において次の27日間にわたって１＋から４＋へスコアが進行した；３ ＋は貧弱な平衡感覚で特徴づけられ、疾患の主な特徴の１つである。パクリタキ セル処置グループにおいて、全５匹の動物はモニターされた症状の全てにおいて 同じ期間にわたって１＋のスコアのままであった(表１)。 高用量プロトコールに関して、マウスは腫瘍患者に使用されるように(乳ガン および卵巣ガンに関して月々与えられる)疑似間隔パルス化学療法に４週間の間 、20mg/kgのパクリタキセルで週に１度処置された。動物を１０週間、２日おき にモニターし、そしてスコアを各症状ごとに決定した。３匹の未処置の動物にお いて、実験の過程の間に神経学的症状が急速に進行し、そしてそれらの動物のう ち２匹が(５週間および９週間で)死亡した；第３の生き残っている動物は、重篤 な臨床的症状を有した。症状の発症後に開始されたパクリタキセル処置を受けて いる５匹のトランスジェニック動物において、モニターした最初の１週間後、コ ントロールに対してMSスコアの減少があり、そしてその後、さらなる神経学的悪 化 は観察されなかった。これらの動物において、疾患の進行は、観察されず、そし て動物は治療の間(０〜３週間)および薬物処置の中止の後(４〜10週間)の両方で 臨床的に緩解のままである(図75)。 Ｃ．結論 パクリタキセルは、低容量および高用量でのMSのこの動物モデルにおいて観察 された神経学的症状の急速な進行を防止した。これらのデータは、パクリタキセ ルが脱髄疾患の強力な治療剤であり得ることを示唆する。 実施例39 鼻ポリープの処置のためのパクリタキセルおよび他の微小管安定剤の評価 上皮細胞培養物および/または鼻ポリープ組織培養物は、鼻ポリープの処置に おけるパクリタキセルまたは他の薬剤を含む処方物の効力を評価するために使用 される。このアプローチは、上皮細胞がサイトカインを放出し、そして鼻ポリー プ症および鼻炎ならびに喘息で検出される慢性的な炎症に寄与すること、および 延長された放出投薬が、好酸球増加症を予防し、サイトカイン遺伝子発現を阻害 するという前述の事項に基づいている。 鼻スプレーとして使用するための粘膜接着性ポリマー中にカプセル化されたパ クリタキセルを含有する溶液(シクロデキストリンの使用)または懸濁液を含むパ クリタキセル処方物、および/または粘膜接着性ポリマー中のマイクロカプセル 化パクリタキセルは、ガス注入として使用される。これらの処方物は以下に詳述 された研究に使用される。 Ａ．インビトロでのパクリタキセルの効果 組織の取り扱い−正常鼻粘膜(NM)標本を、鼻炎の臨床的な証拠がなく、そして 鼻再建手術中に肌刺しテスト(skin-prick test)で陰性である患者から得る。鼻 ポリープ(NP)標本を鼻ポリープ切除を施した肌刺しテスト(skin-prick test)で 陽性および陰性である患者から得る。鼻の標本は、100UI/mlペニシリン、100μg /mlストレプトマイシンおよび２μg/mlアンホテリシンＢを補充したHam's F12培 地に設置され、そして直ちに研究室に移される。 上皮細胞培養物−NMおよびNPからの鼻上皮細胞を、以下のようにプロテアーゼ 消化によって単離する。組織標本を100UI/mlペニシリン、100μg/mlストレプト マイシンおよび２μg/mlアンホテリシンＢを補充したHam's F12で２〜３回リン スし、次いでHam's F12中の0.1％プロテアーゼXIV型で４℃で一晩インキュベー トする。インキュベートの後、10％FBSをプロテアーゼ活性を中和するために添 加し、そして上皮細胞を穏やかな撹拌により剥離する。細胞懸濁液を60メッシュ 細胞解離シーブでろ過し、そして500gで10分間室温で遠心する。次いで細胞ペレ ットを、以下の試薬を含むホルモン規定Ham's F12培地(Ham's HD)に再懸濁する ：100UI/mlペニシリン、100μg/mlストレプトマイシン、２μg/mlアンホテリシ ンＢ、150μg/mlグルタミン、５μg/mlトランスフェリン、５μg/mlインスリン 、25ng/ml上皮成長因子、15μg/ml内皮細胞成長補充物、200pMトリヨードチロニ ン(triiodothryonine)および100nMヒドロコルチゾン。次いで、細胞懸濁液(105 細胞/ウェル)を２mlのHam's HD中にコラーゲンコーティングされたウェルにプレ ートし、そして５％CO2加湿雰囲気で37℃で培養する。培地を１日で、次いで１ 日おきに交換する。単層細胞コンフルエンスは培養６〜10日後に達成される。 ヒト上皮条件培地(HECM)生成−上皮細胞培養物がコンフルエンスに達した場合 、Ham's HDを、100UI/mlペニシリン、100μg/mlストレプトマイシン、２μg/ml アンホテリシンＢ、150μg/mlグルタミンおよび25mM Hepes緩衝液で補充されたR PMI1640培地(Irvin、Scotland)に切り替える(RPMI 10％)。RPMI(10％)とのイン キュベートの48時間後に生じるHECMを培養物から収集し、室温(RT)で10分間400g で遠心し、0.22μmフィルターでろ過して滅菌し、そして使用するまで-70℃で貯 蔵する。 好酸球生存およびパクリタキセルの効果−好酸球を末梢血から単離し、そして 好酸球生存におけるNMおよびNP両方からのHECMの効果を以下の２つの異なる方法 で決定する：時間経過および用量応答分析。時間経過実験において、約250,000/ mlの濃度の好酸球を、50％HECMを有するまたは有さない(ネガティブコントロー ル)６ウェル組織培養物中でインキュベートし、そして生存指数を２、４、６お よび８日で評価する。他の実験は１〜50％HECMで行う。HECM誘導好酸球生存にお ける薬物(例えば、パクリタキセル)の効果が試験される実験において、0.1nM〜1 0μMの薬物(パクリタキセル)をHECMの添加の前の１時間にわたって37℃で好酸球 とインキュベートする。各実験において、ネガティブコントロール(培地のみ)お よびポジティブコントロール(HECM含有培地)ウェルを常に評価する。薬物がいか なる毒性効果を有するかを調査するために、薬物(種々の濃度)とインキュベート された好酸球の生存度を、24時間にわたってRPMI10％のみで培養した好酸球と比 較する。 Ｂ．サイトカイン遺伝子発現におけるパクリタキセルの効果および上皮細胞から の放出 鼻ポリープおよび正常鼻粘膜から得た上皮細胞をコンフルエンスまで培養し、 パクリタキセル(または他の薬剤)を有するまたは有さずに生成したヒト上皮細胞 条件培地および上清をELISAで測定する。サイトカイン遺伝子発現を、Mullolら 、Clinical and Experimental Allergy 25:607-615、1995で記載されるように逆 転写ポリメラーセ連鎖反応(RT-PCR)で調査する。 結果は、パクリタキセルが好酸球生存を阻害する手段としてサイトカイン遺伝 子発現を調節するかどうかを示す。１次細胞培養物を用いる主な欠点は、細胞が コンフルエントに達するまで10日かかることであり、局所環境および全身性効果 から細胞機能を切り離し、これが第一に疾患を導く。しかし、これは構造細胞( 例えば、上皮細胞)の機能および増殖を調節する成長因子を研究するために優れ たインビトロ/エクスビボモデルであり、それにより粘膜炎症のいくつかの局面 を明らかにする。 Ｃ．ヒト鼻ポリープからの化学的メディエータの免疫性放出 パクリタキセルおよび他の薬剤による媒介−ポリープを切除の時に得、Tyrode 's緩衝液で５回洗浄し、そして鋭いハサミで断片化し、湿潤重量で約200mgの複 製物にする。複製物を種々の濃度のパクリタキセルを含む３mlの緩衝液に37℃で 懸濁し、0.2μg/mlの抗原Ｅで(５分後)チャレンジする。抗原とインキュベート した15分後、拡散気体を除去し、そして組織を新鮮な緩衝液で10分間ボイルし、 残留ヒスタミンを抽出する。放出されたヒスタミンおよびSRS-AをHPLCを用いて アッセイする。 実施例40 微小管機能を破壊する薬剤の血管周囲投与 再狭窄についての血管周囲処置としてのパクリタキセル-カンプトテシンを充 填した外科用ペースト(PCL)および/またはEVAフィルムの効力を評価するために 研究を行った。 Ａ．材料および方法 体重250〜300gのWISTERラットをInnovar(0.33ml/kg)の筋肉内注射によって麻 酔した。一旦鎮静されると、それらをハロタン麻酔下においた。全身麻酔を確立 した後、頚部領域にわたって剃毛し、皮膚をクランプし、そしてベタジン(betad ine)を塗布した。左頚動脈の上を垂直切開し、そして外部左頚動脈を露出させた 。２つの結紮を外部左頚動脈のまわりに配置し、そして横断動脈切開を施した。 次いで、番号２のFrench Fogartyバルーンカテーテルを頚動脈内に導入し、そし て左総頚動脈内に通し、そしてバルーンを生理食塩水で膨らませた。内皮を、膨 らませたバルーンを通して頚動脈を３度膨らませそしてしぼませることにより剥 皮した。次いで、カテーテルを除去し、そして結紮を左外部頚動脈上で結んだ。 ラットを、処置を受けない、ポリマーのみ(EVAフィルムまたはPCLペースト)、 またはポリマーおよび20％パクリタキセルを受ける10のグループに無作為化した 。ポリマー混合物(2.5mg)を頚動脈のまわりの周囲の様式で配置された。次いで 創傷を閉じた。各グループから５匹のラットを14日で屠殺し、そして残りの５匹 を28日で屠殺した。その間に、ラットを重量減少または全身系の疾患の他の徴候 に関して観察した。14日または28日後、動物を麻酔し、そして左頚動脈を単離し 、10％ホルムアルデヒド緩衝液で固定し、そして組織学的に検査した。 予備研究として、２匹のラットを10％カンプトテシンを充填したEVAフィルム で14日間処置し、この疾患モデルにおけるカンプトテシンの効力を評価した。 Ｂ．結果 これらの研究からの結果によって、パクリタキセルを充填した(20％)ポリマー は再狭窄を完全に予防するが、コントロールの動物およびポリマーのみを受けた 動物は、バルーン損傷後14日および28日で、28％と55％との間で管腔損傷が進行 したことが明らかになった(図76Aおよび76B)。 パクリタキセルが血管壁に接触した場所で、初期過形成の絶対阻害があった。 しかし、血管壁に隣接する薬物を保持することができない場所でのパクリタキセ ルの不均一な効果によって証明されるように、効果は非常に局所的であった(図7 7Aおよび77B)。 予備データはカンプトテシンを充填したEVAフィルムが疾患の動物モデルでの 再狭窄応答の予防において有効であることを示している。カンプトテシンは、試 験された２匹の動物で初期過形成を完全に阻害した。 実施例41 外科的癒着の動物モデルにおけるパクリタキセルの効果 癒着形成を減少するためのパクリタキセルを充填したEVAフィルムの使用をウ サギ子宮角モデルで検査する。 ニュージーランド雌性シロウサギを麻酔し、そして開腹を正中線切開によって 行う。子宮角を露出し、そしてそれぞれ５cm長の切片をメスを用いて剥離する。 この剥離は漿膜を除去するのに十分であり、点状出血を生じる。ウサギを無作為 にコントロールまたはパクリタキセル処置グループおよび２、４および８週間の 術後評価期間に割り当てる。パクリタキセル処置グループにおいて、各ウサギ子 宮角を剥離後にパクリタキセルを充填したEVAフィルムで完全に包む。筋腹膜(mu sculoperitoneal)層を縫合で閉じ、そして皮膚ステープルで皮膚層を閉じる。 動物を、術後２、４および８週間での癒着形成に関して評価する。動物を人道 的に安楽死させ、そして検死を行う。子宮角を肉眼で、および標準的な顕微鏡技 術を用いて組織学的に検査する。肉眼では、癒着は標準的な評価システムを用い て等級を付け、これは５cmの子宮角が外傷を受けている事実に基づく；従って、 癒着形成の程度を、癒着を含む領域の長さを測定することにより決定する。以下 の等級付けシステムを用いる：０＝癒着無し、１＝領域の25％で癒着、２＝領域 の50％で癒着および３＝総癒着関与。癒着の重篤度を以下のように測定する：０ ＝分離に抵抗無し、0.5＝いくらか抵抗あり(中程度の力を要する)、および１＝ 鋭い解剖を要する。総等級は相加的であり、程度および重篤度の両方を表す０〜 ４の癒着評価範囲を有する。 実施例42 炎症性腸疾患(IBD)の処置におけるミセルパクリタキセル 炎症性腸疾患(IBD)、すなわちクローン病および潰瘍性大腸炎は、再発および 緩解の期間によって特徴づけられる。IBDの最もよく利用されるモデルは、エタ ノールおよび生理食塩水の溶液中の2,4,6-トリニトロベンセンスルホン酸(TNB) の結腸内注射によってラットに生じさせる(Morrisら、Gastroenterology、96：7 95-803、1989)。単回投与は、急性および数週間持続する慢性の炎症を惹起する 。しかし、薬理学的に、ウサギ結腸はラットが似ているよりもヒト結腸に似てい ることが示されている(Gastroenterology、99:13424-1332、1990)。 雌性ニュージーランド白ウサギを全ての実験で用いる。動物をペンタバルビト ールを用いて静脈内注射(i.v.)で麻酔する。TNB(0.6ml；生理食塩水中25％エタ ノールに40mg)の注入のために、乳児用摂食チューブを直腸に挿入し、その結果 先端は肛門に対して20cm近位である。TNB投与の１週間後に、ウサギを３つの処 置グループに無作為化する。この時に、動物は、無処置、ミセル単独(i.v.)また はミセルパクリタキセル(i.v.)のいずれかを受ける。これを全部で４回の処置の 間、４日ごとに繰り返す。 研究の過程の間、ウサギを一般的な麻酔の状態で小児用気管支鏡を用いて内視 鏡により週ごとに検査され、上記のように誘導される。損傷を以下のスケールに 従って内視鏡操作者(知らされていない)によってスコアをつける：０、異常無し ；１、炎症、しかし潰瘍形成無し；２、１部位(＜1cm)において炎症および潰瘍 形成；３、結腸の長さに沿って２つ以上の部位の炎症および潰瘍形成、または１ つの主な部位の炎症および潰瘍形成(＞1cm)。 最後の処置に次いで、ウサギをEuthanolを用いて24時間、ならびに１、２、４ および６週間で屠殺する。全体の結腸を単離し、切除しそして抗腸管膜の境界に そって切開し、生理食塩水で洗浄し、そして抗生物質を含むHank's平衡化塩溶液 中に配置される。結腸を立体顕微鏡で検査し、そして内視鏡と同じ判断基準に従 ってスコアを付ける。また、結腸標本を、明らかに炎症性および潰瘍形成領域か ら、ならびに肛門から上向きに結腸への全体の長さにわたる正常結腸からの両方 で部検において選択される。組織を10％ホルムアルデヒド中で固定し、そしてパ ラフィン中に埋め込むように加工し；５(ｍセクションを切断し、そしてヘモト キシリン(hemotoxylin)およびエオシンで染色する。スライドをIBD組織病理学の 存在または非存在に関して検査する。 最初の実験は、TNBの結腸内注射によってウサギに大腸炎を誘導した後、経口 パクリタキセルの使用のために改変され得る。動物を、無処置、ビヒクル単独ま たは経口処方されたパクリタキセルを受ける３つのグループに無作為化される。 実施例43 全身性紅斑性狼蒼の動物モデルにおけるパクリタキセルの効果 全身性紅斑性狼蒼におけるパクリタキセルの効力は、雌性NZB/NZWF1マウス(B/ W)をミセルパクリタキセルで処置することにより決定される。このマウスの系統 はヒトSLEに類似の疾患を進行する。１月齢において、これらのマウスは、正常 マウスに比べて自発的に免疫グロブリンを分泌する上昇したレベルの脾臓Ｂ細胞 を有する。高レベルの抗ssDNA抗体は、２月齢で生じる。５月齢で、免疫グロブ リンは、糸球体の毛細血管壁に沿って蓄積する。重篤な糸球体腎炎は進行し、そ して９月齢までにB/Wマウスの50％が死亡する。 Ａ．材料および方法 雌性B/Wマウスを、The Jackson Laboratory(Bar Harbor、ME、USA)から購入す る。５月齢雌性B/Wマウスを、処置およびコントロールグループに無作為に割り 当てる。処置グループは、低容量継続ミセルパクリタキセル(2.0mg/kg；１週間 当たり３回、合計10回の注射)または高用量「パルス」ミセルパクリタキセル(20 mg/kg；４回、１週間に１度)のいずれかを受ける。コントロールグループはコン トロールミセルを受ける。 所定の時間間隔で、類似の年齢のパクリタキセル処置されたB/Wマウスおよび 未処置のコントロールB/Wマウスを屠殺し、これらの脾臓を無菌的に除去し、そ して単一細胞懸濁液をリンパ球を数えるために調製する。脾臓リンパ球亜集団を 同定するために、蛍光分析を行う。自発的に免疫グロブリンまたば抗ssDNA抗体( IgG、IgM、総免疫グロブリン)を分泌する脾臓Ｂ細胞数(細胞／百万）を、ELISA を用いて決定する。 上記より、本発明の特定の実施態様は例示のために本明細書中で記載されたが 、種々の改変が、本発明の精神および範囲を逸脱することなくなされ得ることが 理解される。従って、本発明は、添付の請求の範囲による以外は制限さない。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/4015 Ａ６１Ｋ 31/4015 31/427 31/427 31/4433 31/4433 31/7064 31/7064 33/00 33/00 33/16 33/16 47/32 47/32 47/34 47/34 Ａ６１Ｍ 25/00 ４２０ Ａ６１Ｍ 25/00 ４２０Ｚ 29/02 29/02 Ａ６１Ｐ 1/00 Ａ６１Ｐ 1/00 9/00 9/00 11/00 11/00 25/00 25/00 29/00 29/00 37/00 37/00 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ， ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ， ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １．多発性硬化症を処置または予防するための方法であって、該多発性硬化症が 処置または予防されるように、患者に治療有効量の抗微小管剤を投与する工程を 包含する方法。 ２．前記抗微小管剤が、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデルモリド、重水（D2O ）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ化アルミニウム、エ チレングリコールビス-（スクシンイミジルスクシネート）、グリシンエチルエ ステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群から選択される、請求 項１に記載の方法。 ３．前記抗微小管剤がパクリタキセル、またはそのアナログもしくは誘導体であ る、請求項１に記載の方法。 ４．乾癬を処置または予防するための方法であって、該乾癬が処置または予防さ れるように、患者に治療有効量の抗微小管剤を投与する工程を包含する、方法。 ５．前記抗微小管剤が、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデルモリド、重水（D2O ）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ化アルミニウム、エ チレングリコールビス-（スクシンイミジルスクシネート）、グリシンエチルエ ステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群から選択される、請求 項４に記載の方法。 ６．前記抗微小管剤が局所的に投与される、請求項５に記載の方法。 ７．関節炎を処置または予防するための方法であって、該関節炎が処置または予 防されるように、患者に治療有効量の抗微小管剤を投与する工程を包含し、ただ し、該抗微小管剤は、パクリタキセル、またはそのアナログもしくは誘導体では ない、方法。 ８．前記抗微小管剤が、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデルモリド、重水（D2O ）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ化アルミニウム、エ チレングリコールビス-（スクシンイミジルスクシネート）、グリシンエチルエ ステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群から選択される、請求 項７に記載の方法。 ９．前記抗微小管剤が、全身的または関節内に投与される、請求項７に記載の方 法。 １０．狭窄を処置するための方法であって、該狭窄が処置または予防されるよう に、患者に治療有効量の抗微小管剤を投与する工程を包含し、ただし、該抗微小 管剤は、パクリタキセル、またはそのアナログもしくは誘導体ではない、方法。 １１．前記抗微小管剤が、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデルモリド、重水（D2 O）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ化アルミニウム、 エチレングリコールビス-（スクシンイミジルスクシネート）、グリシンエチル エステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群から選択される、請 求項１０に記載の方法。 １２．前記抗微小管剤が、全身的または血管周辺に投与される、請求項１０に記 載の方法。 １３．前記抗微小管剤が、医療用デバイス上のコーティングとして投与される、 請求項１０に記載の方法。 １４．前記医療用デバイスが、ステント、ステント移植片、血管移植片、または 留置カテーテルである、請求項１３に記載の方法。 １５．前記抗微小管剤が、管腔内デバイスを通じて投与される、請求項１０に記 載の方法。 １６．移植片拒絶を処置するための方法であって、患者に抗微小管剤を投与する 工程を包含する、方法。 １７．前記抗微小管剤が、パクリタキセル、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデル モリド、重水（D2O）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ 化アルミニウム、エチレングリコールビス-（スクシンイミジルスクシネート） 、グリシンエチルエステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群か ら選択される、請求項１６に記載の方法。 １８．外科的接着を処置または予防するための方法であって、該外科的癒着は処 置または予防されるように、患者に治療有効量の抗微小管剤を投与する工程を包 含し、ただし、該外科的癒着は、パクリタキセル、またはそのアナログもしくは 誘導体ではない、方法。 １９．前記抗微小管剤が、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデルモリド、重水（D2 O）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ化アルミニウム、 エチレングリコールビス-（スタシンイミジルスクシネート）、グリシンエチル エステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群から選択される、請 求項１８に記載の方法。 ２０．炎症性腸疾患を処置するための方法であって、炎症性腸疾患が処置または 予防されるように、患者に有効量の抗微小管剤を投与する工程を包含する、方法 。 ２１．前記微小管剤が、パクリタキセル、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデルモ リド、重水（D2O）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ化 アルミニウム、エチレングリコールビス-（スクシンイミジルスクシネート）、 グリシンエチルエステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群から 選択される、請求項２０に記載の方法。 ２２．慢性炎症性肺疾患を処置または予防するための方法であって、鼻ポリープ が、処置または予防されるように、患者に治療有効量の抗微小管剤を投与する工 程を包含する、方法。 ２３．前記抗微小管剤が、パクリタキセル、エポチロンＡまたはＢ、ジスコデル モリド、重水（D2O）、ヘキシレングリコール、ツベルシジン、LY290181、フッ 化アルミニウム、エチレングリコールビス-（スクシンイミジルスクシネート） 、グリシンエチルエステル、およびそれらのアナログまたは誘導体からなる群か ら選択される、請求項２０に記載の方法。 ２４．前記抗微小管剤が、鼻に投与される、請求項２２に記載の方法。 ２５．前記薬剤が、さらにポリマーを含む、請求項１、４、６、８、１４、また は１６のいずれか１項に記載の方法。 ２６．前記ポリマーが、0.5と200μmとの間の平均サイズを有するミクロスフェ アに形成されている、請求項２５に記載の方法。 ２７．前記ポリマーが、乳酸およびグリコール酸のコポリマーである、請求項２ ５に記載の方法。 ２８．前記ポリマーが、ポリ（カプロラクトン）を含む、請求項２５に記載の方 法。 ２９．前記ポリマーが、ポリ（乳酸）を含む、請求項２５に記載の方法。 ３０．前記ポリマーが、ポリ（乳酸）およびポリ（カプロラクトン）のコポリマ ーである、請求項２５に記載の方法。 ３１．前記ポリマーが、エチレンビニル酢酸を含む、請求項２５に記載の方法。 ３２．前記ポリマーが、イソプロピルミリステートを含む、請求項２５に記載の 方法。 ３４．前記ポリマーが、ジブロッタコポリマーまたはトリブロックコポリマーで ある、請求項２５に記載の方法。
JP52499798A 1996-12-02 1997-12-02 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法 Expired - Fee Related JP3287852B2 (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3221596P 1996-12-02 1996-12-02
US60/032,215 1996-12-02
US6308797P 1997-10-24 1997-10-24
US60/063,087 1997-10-24
PCT/CA1997/000910 WO1998024427A2 (en) 1996-12-02 1997-12-02 Compositions and methods for treating or preventing inflammatory diseases

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2001401899A Division JP2002226399A (ja) 1996-12-02 2001-12-28 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2001503785A true JP2001503785A (ja) 2001-03-21
JP3287852B2 JP3287852B2 (ja) 2002-06-04

Family

ID=26708132

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP52499798A Expired - Fee Related JP3287852B2 (ja) 1996-12-02 1997-12-02 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法
JP2001401899A Withdrawn JP2002226399A (ja) 1996-12-02 2001-12-28 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法
JP2009057154A Pending JP2009161555A (ja) 1996-12-02 2009-03-10 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2001401899A Withdrawn JP2002226399A (ja) 1996-12-02 2001-12-28 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法
JP2009057154A Pending JP2009161555A (ja) 1996-12-02 2009-03-10 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法

Country Status (21)

Country Link
US (1) US6515016B2 (ja)
EP (5) EP0941089B1 (ja)
JP (3) JP3287852B2 (ja)
KR (2) KR20050098031A (ja)
CN (4) CN101011576B (ja)
AR (1) AR013878A1 (ja)
AT (4) ATE241977T1 (ja)
AU (1) AU735655B2 (ja)
BR (1) BR9713673A (ja)
CA (2) CA2607067A1 (ja)
DE (4) DE69722681T2 (ja)
DK (1) DK0941089T3 (ja)
ES (2) ES2207451T3 (ja)
GR (1) GR3036364T3 (ja)
HK (3) HK1022270A1 (ja)
NO (2) NO322610B1 (ja)
NZ (5) NZ547206A (ja)
PT (1) PT941089E (ja)
RU (2) RU2242974C2 (ja)
TW (1) TW562674B (ja)
WO (1) WO1998024427A2 (ja)

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003523926A (ja) * 1998-08-14 2003-08-12 インセプト エルエルシー 複合ヒドロゲル薬物送達システム
JP2004529934A (ja) * 2001-05-01 2004-09-30 アンジオテック ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 抗微小管剤およびポリペプチドまたはポリサッカリドを含む組成物、ならびに炎症状態を処置するための医薬品の調製のためのそれらの組成物の使用
JP2005525360A (ja) * 2002-03-01 2005-08-25 シエーリング アクチエンゲゼルシャフト 増殖過程に関連する脳疾患の処理へのエポチロンの使用
WO2005089800A1 (ja) * 2004-03-17 2005-09-29 Locomogene, Inc. hsHRD3を含む医薬組成物
JP2006515291A (ja) * 2002-12-09 2006-05-25 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト ステントに入れて狭窄症を処置するための微小管安定化剤
JP2007519709A (ja) * 2004-01-30 2007-07-19 アンスティテュト ナショナル ド ラ サンテ エ ド ラ ルシェルシュ メディカル （アンセルム） 神経接続欠陥、例えば精神分裂病及び自閉症の治療においてエポチロン（ｅｐｏｔｈｉｌｏｎｅ）を使用する方法
JP2018531231A (ja) * 2015-09-16 2018-10-25 ディーエフビー ソリア リミテッド ライアビリティ カンパニー 薬物ナノ粒子の送達およびその使用法
US10842736B2 (en) 2017-03-15 2020-11-24 Dfb Soria, Llc Topical therapy for the treatment of skin malignancies using nanoparticles of taxanes
US11497726B2 (en) 2018-03-16 2022-11-15 Dfb Soria, Ll. Topical therapy for the treatment of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and cervical cancer using nanoparticles of taxanes

Families Citing this family (169)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6774278B1 (en) 1995-06-07 2004-08-10 Cook Incorporated Coated implantable medical device
US7611533B2 (en) * 1995-06-07 2009-11-03 Cook Incorporated Coated implantable medical device
AU716005B2 (en) * 1995-06-07 2000-02-17 Cook Medical Technologies Llc Implantable medical device
ES2218328T5 (es) 1995-11-17 2011-11-11 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Derivados de epotilón, su preparación y utilización.
CN100344627C (zh) 1996-11-18 2007-10-24 生物技术研究有限公司(Gbf) 埃坡霉素c、其制备方法以及作为细胞抑制剂和植物保护剂的应用
US20030157187A1 (en) * 1996-12-02 2003-08-21 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating or preventing inflammatory diseases
US6495579B1 (en) 1996-12-02 2002-12-17 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Method for treating multiple sclerosis
US6605599B1 (en) 1997-07-08 2003-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives
US6320045B1 (en) 1997-12-04 2001-11-20 Bristol-Myers Squibb Company Process for the reduction of oxiranyl epothilones to olefinic epothilones
US6365749B1 (en) 1997-12-04 2002-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of ring-opened epothilone intermediates which are useful for the preparation of epothilone analogs
FR2775187B1 (fr) 1998-02-25 2003-02-21 Novartis Ag Utilisation de l'epothilone b pour la fabrication d'une preparation pharmaceutique antiproliferative et d'une composition comprenant l'epothilone b comme agent antiproliferatif in vivo
US6399638B1 (en) 1998-04-21 2002-06-04 Bristol-Myers Squibb Company 12,13-modified epothilone derivatives
US6498257B1 (en) 1998-04-21 2002-12-24 Bristol-Myers Squibb Company 2,3-olefinic epothilone derivatives
US6264991B1 (en) * 1998-08-18 2001-07-24 Southern Research Institute Compositions and methods for treating intracellular infections
AU5925399A (en) * 1998-09-16 2000-04-03 Oncopharmaceutical, Inc. Treatment of oncologic tumors with an injectable formulation of a golgi apparatus disturbing agent
US6127406A (en) * 1998-10-09 2000-10-03 Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. Discodermolide compounds and methods of use
US6494879B2 (en) * 1998-10-15 2002-12-17 Scimed Life Systems, Inc. Treating urinary retention
US6780620B1 (en) 1998-12-23 2004-08-24 Bristol-Myers Squibb Company Microbial transformation method for the preparation of an epothilone
WO2000045868A1 (en) * 1999-02-05 2000-08-10 The Regents Of The University Of California Thermo-reversible polymer for intralumenal implant
CN1205208C (zh) 1999-02-22 2005-06-08 生物技术研究股份有限公司 C－21修饰的环氧噻酮类化合物
US6291684B1 (en) 1999-03-29 2001-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of aziridinyl epothilones from oxiranyl epothilones
EP1173151B1 (en) 1999-04-16 2003-07-09 Novo Nordisk A/S Dry, mouldable drug formulation
CN1354642A (zh) * 1999-04-26 2002-06-19 Gmp视力康复公司 治疗青光眼的分流装置和方法
US20040015079A1 (en) * 1999-06-22 2004-01-22 Teratech Corporation Ultrasound probe with integrated electronics
GB9918429D0 (en) * 1999-08-04 1999-10-06 Novartis Ag Organic compounds
CA2390164C (en) 1999-11-05 2011-03-29 Cytovia, Inc. Substituted 4h-chromene and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
WO2001064214A2 (en) 2000-02-28 2001-09-07 The University Of British Columbia Compositions and methods for the treatment of inflammatory diseases using topoisomerase inhibitors
DE60108359T2 (de) 2000-03-01 2005-12-22 Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc., Fort Pierce Biologisch wirksame, analoge verbindungen von discodermoliden
US6518421B1 (en) * 2000-03-20 2003-02-11 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of epothilone analogs
US6593115B2 (en) 2000-03-24 2003-07-15 Bristol-Myers Squibb Co. Preparation of epothilone intermediates
DE10015479A1 (de) * 2000-03-29 2001-10-11 Basf Ag Feste orale Darreichungsformen mit retardierter Wirkstofffreisetzung und hoher mechanischer Stabilität
WO2001078626A1 (en) * 2000-04-13 2001-10-25 Sts Biopolymers, Inc. Targeted therapeutic agent release devices and methods of making and using the same
US6489314B1 (en) * 2001-04-03 2002-12-03 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone derivatives and methods for making and using the same
US20050095268A1 (en) * 2000-06-12 2005-05-05 Acorn Cardiovascular, Inc. Cardiac wall tension relief with cell loss management
EP1301500B1 (en) 2000-06-22 2007-11-21 Nitromed, Inc. Nitrosated and nitrosylated taxanes, compositions and methods of use
UA75365C2 (en) 2000-08-16 2006-04-17 Bristol Myers Squibb Co Epothilone analog polymorph modifications, a method for obtaining thereof (variants), a pharmaceutical composition based thereon
KR101005299B1 (ko) 2000-10-18 2011-01-04 파마셋 인코포레이티드 바이러스 감염 및 비정상적인 세포 증식의 치료를 위한 변형된 뉴클레오시드
JP2002154963A (ja) * 2000-11-14 2002-05-28 Yakult Honsha Co Ltd 徐放性抗腫瘍剤
WO2002058699A1 (en) * 2001-01-25 2002-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Pharmaceutical forms of epothilones for oral administration
CA2434566A1 (en) 2001-01-25 2002-08-15 Timothy M. Malloy Parenteral formulation containing epothilone analogs
KR100851719B1 (ko) 2001-01-25 2008-08-11 브리스톨-마이어스스퀴브컴파니 암 치료용 에포틸론 유사체의 투여 방법
US6893859B2 (en) 2001-02-13 2005-05-17 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone derivatives and methods for making and using the same
EP1385529A4 (en) 2001-02-20 2007-05-09 Bristol Myers Squibb Co TREATMENT OF REFRACTORY TUMORS USING EPOTHILONE DERIVATIVES
RU2003128312A (ru) 2001-02-20 2005-02-10 Бристол-Маерс Сквибб Компани (Us) Производные эпотилона, используемые для лечения резистентных опухлей
AU2002240755B2 (en) * 2001-03-13 2007-07-05 Angiotech International Ag Micellar drug delivery vehicles and uses thereof
US7312237B2 (en) 2001-03-14 2007-12-25 Bristol-Myers Squibb Co. Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of prolilferative diseases
US7771468B2 (en) * 2001-03-16 2010-08-10 Angiotech Biocoatings Corp. Medicated stent having multi-layer polymer coating
DE10115740A1 (de) 2001-03-26 2002-10-02 Ulrich Speck Zubereitung für die Restenoseprophylaxe
PT1392254E (pt) * 2001-04-20 2007-06-29 Univ British Columbia Sistemas de distribuição micelares de fármacos para fármacos hidrofóbicos.
US20030157161A1 (en) * 2001-05-01 2003-08-21 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating inflammatory conditions utilizing protein or polysaccharide containing anti-microtubule agents
US6858607B1 (en) 2001-05-16 2005-02-22 Cytovia, Inc. 7,8-fused 4H-chromene and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
CN100564377C (zh) 2001-05-16 2009-12-02 西托维亚公司 用作半胱天冬酶激活剂和细胞凋亡诱导剂的取代的4h-色烯和类似物及其应用
EP1392664A4 (en) 2001-06-01 2005-01-26 Bristol Myers Squibb Co EPOTHILONE DERIVATIVES
IL145751A (en) * 2001-10-04 2010-12-30 Avi Dascalu Use of aluminum fluoride for the preparation of compositions for the treatment of acne vulgaris and folliculitis
US7582670B2 (en) * 2001-12-13 2009-09-01 Natrogen Therapeutics, Inc. Methods of treating an inflammatory-related disease
US8454997B2 (en) 2001-12-18 2013-06-04 Novo Nordisk A/S Solid dose micro implant
JP2006501134A (ja) * 2001-12-20 2006-01-12 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー 高い生物学的利用能を有する、経口活性タキサン誘導体の医薬組成物
US20030194421A1 (en) * 2001-12-28 2003-10-16 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Treatment of uveitis
ES2555307T3 (es) 2002-03-08 2015-12-30 Eisai R&D Management Co., Ltd. Compuestos macrocíclicos útiles como agentes farmacéuticos
AU2003218107A1 (en) 2002-03-12 2003-09-29 Bristol-Myers Squibb Company C12-cyano epothilone derivatives
DE60330651D1 (en) 2002-03-12 2010-02-04 Bristol Myers Squibb Co C3-cyanoepothilonderivate
IL163868A0 (en) 2002-03-22 2005-12-18 Eisai Co Ltd Hermiasterlin derivatives and uses thereof
TW200403994A (en) 2002-04-04 2004-03-16 Bristol Myers Squibb Co Oral administration of EPOTHILONES
TW200400191A (en) 2002-05-15 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pharmaceutical compositions and methods of using C-21 modified epothilone derivatives
EP1513515A2 (en) 2002-05-16 2005-03-16 Cytovia, Inc. Substituted 4h-chromenes, 2h-chromenes, chromans and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
WO2003097806A2 (en) 2002-05-16 2003-11-27 Cytovia, Inc. Substituted 4-aryl-4h-pyrrolo[2,3-h]chromenes and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
WO2003105828A1 (en) 2002-06-14 2003-12-24 Bristol-Myers Squibb Company Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of proliferative diseases
WO2004006976A1 (en) * 2002-07-12 2004-01-22 Cook Incorporated Coated medical device
DE10244847A1 (de) 2002-09-20 2004-04-01 Ulrich Prof. Dr. Speck Medizinische Vorrichtung zur Arzneimittelabgabe
GEP20074017B (en) 2002-09-23 2007-01-10 Bristol Myers Squibb Co Methods for the preparation, isolation and purification of epothilone b, and x-ray crystal structures of epothilone b
BR0314743A (pt) * 2002-09-26 2005-07-26 Angiotech Int Ag Envoltórios perivasculares
US7544932B2 (en) * 2002-10-21 2009-06-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Of The Department Of Health And Human Services Contiguous capillary electrospray sources and analytical devices
CA2518960C (en) 2003-03-14 2013-08-27 Sinexus, Inc. Sinus delivery of sustained release therapeutics
US6989370B2 (en) * 2003-05-01 2006-01-24 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Bacteriocins and novel bacterial strains
US7229979B2 (en) * 2003-06-23 2007-06-12 Immune Modulation, Inc. Hypoestoxides, derivatives and agonists thereof for use as stent-coating agents
WO2005007129A2 (en) * 2003-07-17 2005-01-27 Angiotech International Ag Topical formulations with bioactive components
US20050095283A1 (en) * 2003-09-16 2005-05-05 Aphios Corporation Compositions and methods for topically treating diseases
EP1682196A2 (en) * 2003-11-10 2006-07-26 Angiotech International Ag Medical implants and anti-scarring agents
US20050208095A1 (en) * 2003-11-20 2005-09-22 Angiotech International Ag Polymer compositions and methods for their use
JP2007516742A (ja) * 2003-11-20 2007-06-28 アンジオテック インターナショナル アーゲー 電気装置と瘢痕化抑制剤
JP2007517550A (ja) 2004-01-02 2007-07-05 アドヴァンスド カーディオヴァスキュラー システムズ， インコーポレイテッド 高比重リポ蛋白をコーティングした医療デバイス
US20050186261A1 (en) * 2004-01-30 2005-08-25 Angiotech International Ag Compositions and methods for treating contracture
US20060211752A1 (en) 2004-03-16 2006-09-21 Kohn Leonard D Use of phenylmethimazoles, methimazole derivatives, and tautomeric cyclic thiones for the treatment of autoimmune/inflammatory diseases associated with toll-like receptor overexpression
US8003122B2 (en) * 2004-03-31 2011-08-23 Cordis Corporation Device for local and/or regional delivery employing liquid formulations of therapeutic agents
US7989490B2 (en) * 2004-06-02 2011-08-02 Cordis Corporation Injectable formulations of taxanes for cad treatment
US20050266043A1 (en) * 2004-05-27 2005-12-01 Medtronic Vascular, Inc. Methods and compounds for treatment of aneurysmal tissue
WO2006002365A2 (en) * 2004-06-24 2006-01-05 Angiotech International Ag Microparticles with high loadings of a bioactive agent
US20060142198A1 (en) * 2004-07-02 2006-06-29 Wound Care Partners Llc Compositions for treating wounds and processes for their preparation
US8119153B2 (en) * 2004-08-26 2012-02-21 Boston Scientific Scimed, Inc. Stents with drug eluting coatings
WO2006060737A2 (en) * 2004-12-03 2006-06-08 Takeda San Diego, Inc. Mitotic kinesin inhibitors
USH2260H1 (en) 2005-02-17 2011-07-05 Angiotech International Ag Stents combined with paclitaxel derivatives
EP1700596A1 (en) 2005-03-09 2006-09-13 Max-Planck-Gesellschaft Zur Förderung Der Wissenschaften E.V. Use of microtubule stabilizing compounds for the treatment of lesions of CNS axons
US20060222627A1 (en) * 2005-03-30 2006-10-05 Andrew Carter Optimizing pharmacodynamics of therapeutic agents for treating vascular tissue
EP2298317A1 (en) 2005-04-04 2011-03-23 Sinexus, Inc. Device and methods for treating paranasal sinus conditions
US20060224095A1 (en) * 2005-04-05 2006-10-05 University Of New Hampshire Biocompatible polymeric vesicles self assembled from triblock copolymers
US8002738B2 (en) * 2005-05-17 2011-08-23 Boston Scientific Scimed, Inc. Self-adhering lesion formation apparatus and methods
CA2608631C (en) * 2005-06-09 2014-07-29 Biolipox Ab Method and composition for treating inflammatory disorders
ITMI20051826A1 (it) * 2005-09-29 2007-03-30 Novachem S A Kit per la somministrazione parenterale di medicamenti
US20070196423A1 (en) * 2005-11-21 2007-08-23 Med Institute, Inc. Implantable medical device coatings with biodegradable elastomer and releasable therapeutic agent
KR20080098066A (ko) * 2006-03-01 2008-11-06 얀센 파마슈티카 엔.브이. 림프구 제거제를 ｃｔｌ 및 사이토카인과 결합한 암 치료
US20070275035A1 (en) * 2006-05-24 2007-11-29 Microchips, Inc. Minimally Invasive Medical Implant Devices for Controlled Drug Delivery
US9173773B2 (en) * 2006-06-21 2015-11-03 Johnson & Johnson Vision Care, Inc. Punctal plugs for the delivery of active agents
US8066824B2 (en) * 2006-07-07 2011-11-29 Intezyne Technologies, Inc. Covalent modification of metal surfaces
WO2008013966A2 (en) * 2006-07-28 2008-01-31 Johns Hopkins University Use of 8-quinolinol and its analogs to target cancer stem cells
US20080085293A1 (en) * 2006-08-22 2008-04-10 Jenchen Yang Drug eluting stent and therapeutic methods using c-Jun N-terminal kinase inhibitor
US20080051702A1 (en) * 2006-08-24 2008-02-28 Herrmann Robert A Therapeutic agent delivery for the treatment of asthma via implantable and insertable medical devices
DE102006049185A1 (de) * 2006-10-18 2008-04-24 Bayerl, Thomas M., Prof. Dr. Verwendung von Deuteriumdioxid zur Behandlung von hyperproliferativen Erkrankungen der Haut
WO2008076383A2 (en) * 2006-12-18 2008-06-26 Med Institute Inc. Stent graft with releasable therapeutic agent
EP1964560A1 (en) * 2007-02-28 2008-09-03 Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung GmbH Use of inhibitors of the degradation of p27 for the treatment of cancer
ES2310122B1 (es) * 2007-04-20 2009-10-30 Instituto Cientifico Y Tecnologico De Navarra, S.A Nanoparticulas que comprenden una ciclodextrina y una molecula biologicamente activa y sus aplicaciones.
ITMI20071267A1 (it) * 2007-06-22 2008-12-23 Fidia Farmaceutici Uso di coniugati dell'acido ialuronico nel trattamento locale di malattie cutanee iperproliferative
DE102007031397A1 (de) 2007-07-05 2009-01-08 D2O Bioscience Group Ltd. Verwendung von Deuteriumoxid zur Behandlung von Virus-basierten Erkrankungen der Haut
CN101842084B (zh) * 2007-07-26 2014-11-05 亚克蒂斯Ip有限公司 包含pcl的微粒及其用途
EP2050814A1 (en) * 2007-10-17 2009-04-22 Txcell Compositions for treating multiple sclerosis
WO2009079418A2 (en) * 2007-12-18 2009-06-25 Sinexus, Inc. Self-expanding devices and methods therefor
US8420110B2 (en) * 2008-03-31 2013-04-16 Cordis Corporation Drug coated expandable devices
US8409601B2 (en) * 2008-03-31 2013-04-02 Cordis Corporation Rapamycin coated expandable devices
KR101100867B1 (ko) * 2008-05-14 2012-01-02 주식회사 운화 주목의 형성층 또는 전형성층 유래 식물줄기세포주를 유효성분으로 함유하는 항산화, 항염증 또는 항노화용 조성물
US8642063B2 (en) * 2008-08-22 2014-02-04 Cook Medical Technologies Llc Implantable medical device coatings with biodegradable elastomer and releasable taxane agent
RU2543327C2 (ru) * 2008-08-29 2015-02-27 Джензим Корпорейшн Лекарственные средства с контролируемым высвобождением, содержащие пептиды
DE102009003942A1 (de) 2009-01-07 2010-07-08 D2O Biosience Group Ltd., Hamilton Verwendung von Deuteriumoxid zur Behandlung Virus-basierter Erkrankungen des Auges
DE102009003992A1 (de) * 2009-01-07 2010-07-08 D2O Biosience Group Ltd., Hamilton Verwendung von Deuteriumoxid zur Behandlung Virus-basierter Erkrankungen des Respirationstraktes
ES2400466T3 (es) * 2009-01-13 2013-04-10 Pergamum Ab Composiciones que contienen ácido hialurónico para el tratamiento de heridas, cicatrices y la formación de adherencias postquirúrgicas
DE102009011931A1 (de) 2009-03-10 2010-09-16 Innora Gmbh Vorrichtung zur Applikation von Wirkstoffen auf die Wand eines Körpergefäßes
US10206813B2 (en) 2009-05-18 2019-02-19 Dose Medical Corporation Implants with controlled drug delivery features and methods of using same
US20110021869A1 (en) * 2009-07-24 2011-01-27 Hilary John Cholhan Single-incision minimally-invasive surgical repair of pelvic organ/vaginal prolapse conditions
GB0917817D0 (en) 2009-10-12 2009-11-25 Biotica Tech Ltd Novel compounds and methods for their production
GB0917816D0 (en) 2009-10-12 2009-11-25 Biotica Tech Ltd Novel compounds and methods for their production
CA2784689A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Interface Biologics, Inc. Local delivery of drugs from self assembled coatings
US8945156B2 (en) 2010-05-19 2015-02-03 University Of Utah Research Foundation Tissue fixation
US8858577B2 (en) 2010-05-19 2014-10-14 University Of Utah Research Foundation Tissue stabilization system
US8852214B2 (en) 2011-02-04 2014-10-07 University Of Utah Research Foundation System for tissue fixation to bone
RU2451680C1 (ru) 2011-02-21 2012-05-27 Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательская Компания "Медбиофарм" Клатратный комплекс циклодекстрина или арабиногалактана с 9-фенил-симм-октагидроселеноксантеном, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство
US20120315303A1 (en) * 2011-05-05 2012-12-13 Medtronic Vascular, Inc. Methods and intravascular treatment devices using paclitaxel for treatment of atherosclerosis
US20140286908A1 (en) * 2011-10-18 2014-09-25 Nestec S.A. Composition for use in the promotion of intestinal angiogenesis and of nutrient absorption and of enteral feeding tolerance and/or in the prevention and/or treatment of intestinal inflammation and/or in the recovery after intestinal injury and surgery
US9220759B2 (en) 2012-02-23 2015-12-29 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Treatment of diabetic patients with a drug eluting stent and adjunctive therapy
US9220584B2 (en) 2012-03-30 2015-12-29 Abbott Cardiovascular Systems Inc. Treatment of diabetic patients with a stent and locally administered adjunctive therapy
US11957334B2 (en) 2012-07-30 2024-04-16 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
US11944531B2 (en) 2012-07-30 2024-04-02 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
US11253252B2 (en) 2012-07-30 2022-02-22 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
US10219804B2 (en) 2012-07-30 2019-03-05 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
US10390935B2 (en) 2012-07-30 2019-08-27 Conextions, Inc. Soft tissue to bone repair devices, systems, and methods
US10835241B2 (en) 2012-07-30 2020-11-17 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
US9427309B2 (en) 2012-07-30 2016-08-30 Conextions, Inc. Soft tissue repair devices, systems, and methods
US20160081916A1 (en) * 2013-05-03 2016-03-24 Lipidor Ab Topical Composition and Carrier for Administration of Pharmaceutically or Cosmetically Active Ingredients
RU2525181C1 (ru) * 2013-07-26 2014-08-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ КПССЗ" СО РАМН) Способ изготовления биодеградируемых мембран для предотвращения образования спаек после кардиохирургических операций
WO2015138760A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Conextions, Inc. Soft tissue repair devices, systems, and methods
US11583384B2 (en) 2014-03-12 2023-02-21 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
KR102348707B1 (ko) * 2014-08-12 2022-01-06 주식회사 엘지생활건강 도세탁셀 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피부 탄력, 주름개선, 보습 또는 항염증용 화장료 또는 약학 조성물
KR102263764B1 (ko) * 2014-08-13 2021-06-09 주식회사 엘지생활건강 세팔로만닌 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백 또는 항염증용 화장료 또는 약학 조성물
CN104546931B (zh) * 2014-09-30 2019-04-09 深圳华大基因科技有限公司 华德萨特氏菌在治疗或预防类风湿性关节炎或其相关疾病中的应用
CN107921237A (zh) * 2015-04-27 2018-04-17 反射医学公司 交感神经心肺神经调节系统和方法
WO2017024282A1 (en) 2015-08-05 2017-02-09 Children's Medical Center Corporation Compositions with permeation enhancers for drug delivery
WO2017139487A1 (en) 2016-02-09 2017-08-17 Northwind Medical, Inc. Methods, agents, and devices for local neuromodulation of autonomic nerves
KR20180000682A (ko) * 2016-06-22 2018-01-03 서울대학교산학협력단 5-(3',4'-디히드록시페닐)-감마-발레로락톤을 함유하는 동맥경화 개선용 식품 조성물 및 동맥경화 예방 및 치료용 약학 조성물
US11154547B2 (en) 2016-06-29 2021-10-26 Tulavi Therapeutics, Inc. Treatment of sepsis and related inflammatory conditions by local neuromodulation of the autonomic nervous system
US11696822B2 (en) 2016-09-28 2023-07-11 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
WO2018191752A1 (en) * 2017-04-14 2018-10-18 Gelesis Llc Compositions and methods for treating or preventing gut permeability-related disorders
CN106943380B (zh) * 2017-05-17 2021-02-05 杜楠 Vegf单抗联合纳米紫杉醇在制备治疗癌性腹腔粘连药物中的应用
US11547397B2 (en) 2017-12-20 2023-01-10 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
AU2019223962A1 (en) 2018-02-20 2020-09-10 Conextions, Inc. Devices, systems, and methods for repairing soft tissue and attaching soft tissue to bone
US10974022B2 (en) * 2018-02-28 2021-04-13 Gyrus Acmi, Inc. Nasal implant assembly
US20210228556A1 (en) * 2018-05-08 2021-07-29 University Of Connecticut Long-acting local anesthetic formulation
CN112638436A (zh) 2018-05-22 2021-04-09 界面生物公司 用于将药物递送至血管壁的组合物和方法
CA3105187A1 (en) 2018-06-28 2020-01-02 Arx, Llc Dispensing method for producing dissolvable unit dose film constructs
CA3105343A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Corinne Bright Methods and devices for in situ formed nerve cap
RU2703257C1 (ru) * 2018-12-04 2019-10-16 Закрытое акционерное общество "СКАЙ ЛТД" Способ лечения воспалительных процессов суставов и простатита
CN110420072B (zh) * 2019-07-24 2024-01-23 莆田学院 一种应用于机能学的大鼠灌胃装置
CN117982720B (zh) * 2024-04-01 2024-06-04 成都中医药大学 一种预防损伤放松肌肉的中药材凝胶敷料及其制备方法

Family Cites Families (90)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4391797A (en) 1977-01-05 1983-07-05 The Children's Hospital Medical Center Systems for the controlled release of macromolecules
GB2074858B (en) 1980-04-23 1985-03-20 Wellcome Found Compositions containing 3-deazaaden-osine
US4534899A (en) 1981-07-20 1985-08-13 Lipid Specialties, Inc. Synthetic phospholipid compounds
JPS6163613A (ja) 1984-09-04 1986-04-01 Mitsui Toatsu Chem Inc 顆粒状に調整された徐放性製剤
US4882168A (en) 1986-09-05 1989-11-21 American Cyanamid Company Polyesters containing alkylene oxide blocks as drug delivery systems
US4808610A (en) 1986-10-02 1989-02-28 Schering Corporation Mometasone furoate anti-inflammatory cream composition using hexylene glycol
US4893623A (en) 1986-12-09 1990-01-16 Advanced Surgical Intervention, Inc. Method and apparatus for treating hypertrophy of the prostate gland
US5092885A (en) 1987-02-12 1992-03-03 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Peptides with laminin activity
US4904697A (en) 1987-04-09 1990-02-27 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Controlling the growth of certain tumor tissue with chalcone derivatives
US4753965A (en) 1987-04-09 1988-06-28 Merrell Dow Pharmaceuticals, Inc. Method of treating multiple sclerosis with chalcone derivatives
US4863968A (en) 1987-04-09 1989-09-05 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Methods of treating gout with chalcone derivatives
NL8701337A (nl) 1987-06-09 1989-01-02 Sentron V O F Substraat voorzien van een bloedcompatibel oppervlak, verkregen door koppeling aan het oppervlak van een fysiologisch aktieve stof met remmende invloed op de vorming van bloedstolsels en/of in staat om gevormde bloedstolsels af te breken, alsmede werkwijze ter vervaardiging van het substraat.
WO1989010758A1 (en) 1988-05-02 1989-11-16 Zynaxis Technologies, Inc. Compounds, compositions and method for binding bio-affecting substances to surface membranes of bio-particles
EP0649637A1 (en) 1988-08-24 1995-04-26 SLEPIAN, Marvin J. Material for endoluminal paving and sealing
US5676978A (en) 1989-02-14 1997-10-14 Amira, Inc. Methods of inhibiting undesirable cell growth using a combination of a cyclocreatine compound and a hyperplastic inhibitory agent
US5411947A (en) 1989-06-28 1995-05-02 Vestar, Inc. Method of converting a drug to an orally available form by covalently bonding a lipid to the drug
AU6747790A (en) 1989-11-13 1991-06-13 President And Fellows Of Harvard College Extraluminal regulation of the growth and repair of tubular structures in vivo
US5192744A (en) 1990-01-12 1993-03-09 Northwestern University Method of inhibiting angiogenesis of tumors
DK0512071T3 (da) 1990-01-25 1996-11-25 Childrens Hospital Fremgangsmåde og sammensætninger til inhibering af angiogenese
JPH05502179A (ja) 1990-02-28 1993-04-22 メドトロニック　インコーポレーテッド 管状器官内薬剤溶出装具
US5407683A (en) 1990-06-01 1995-04-18 Research Corporation Technologies, Inc. Pharmaceutical solutions and emulsions containing taxol
DE69129812T2 (de) 1990-07-12 1999-02-11 Sts Biopolymers, Inc., Rush, N.Y. Antithrombogene und/oder antimikrobielle zusammensetzung
ATE130517T1 (de) 1990-08-08 1995-12-15 Takeda Chemical Industries Ltd Intravaskulär embolisierendes mittel mit gehalt an einem die angiogenesis hemmenden stoff.
WO1992006701A1 (en) 1990-10-18 1992-04-30 Huffstutler, M., Conrad, Jr. Preparation of concentrated fluid symphytum extracts, therapeutic forms and methods of use
US5466455A (en) 1990-10-18 1995-11-14 Huffstutler, Jr.; Miles C. Polyphase fluid-extraction process, resulting products and methods of use
MX9102128A (es) 1990-11-23 1992-07-08 Rhone Poulenc Rorer Sa Derivados de taxano,procedimiento para su preparacion y composicion farmaceutica que los contiene
WO1992012717A2 (en) 1991-01-15 1992-08-06 A composition containing a tetracycline and use for inhibiting angiogenesis
US5145684A (en) 1991-01-25 1992-09-08 Sterling Drug Inc. Surface modified drug nanoparticles
US5399363A (en) 1991-01-25 1995-03-21 Eastman Kodak Company Surface modified anticancer nanoparticles
AU1579092A (en) 1991-02-27 1992-10-06 Nova Pharmaceutical Corporation Anti-infective and anti-inflammatory releasing systems for medical devices
US5620971A (en) 1991-05-09 1997-04-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Biologically active acylated amino acid derivatives
FR2678833B1 (fr) 1991-07-08 1995-04-07 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouvelles compositions pharmaceutiques a base de derives de la classe des taxanes.
US5811447A (en) 1993-01-28 1998-09-22 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
WO1993006792A1 (en) 1991-10-04 1993-04-15 Scimed Life Systems, Inc. Biodegradable drug delivery vascular stent
US5270047A (en) 1991-11-21 1993-12-14 Kauffman Raymond F Local delivery of dipyridamole for the treatment of proliferative diseases
CA2124329C (en) 1991-11-27 2008-11-18 Gregory A. Kopia Compounds, compositions and methods for binding bio-affecting substances to surface membranes of bio-particles
CA2086642C (en) 1992-01-09 2004-06-15 Randall E. Morris Method of treating hyperproliferative vascular disease
US5301664A (en) 1992-03-06 1994-04-12 Sievers Robert E Methods and apparatus for drug delivery using supercritical solutions
US5322779A (en) 1992-04-16 1994-06-21 The Research And Development Institute, Inc. At Montana State University Taxol production by taxomyces andreanae
CA2094858C (en) 1992-04-28 2004-06-15 Robert D. Mitchell Method of treating hyperproliferative vascular disease
DE4214215A1 (de) 1992-04-30 1993-11-04 Behringwerke Ag Verwendung von inhibitoren von plasminogenaktivatoren zur behandlung von entzuendungen
FR2693193B1 (fr) 1992-07-03 1994-09-02 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux dérivés de la désacétyl-10 baccatine III, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
CA2086874E (en) 1992-08-03 2000-01-04 Renzo Mauro Canetta Methods for administration of taxol
CA2145190A1 (en) 1992-09-22 1994-03-31 The Government Of The United States Of America As Represented By The Sec Retary, Department Of Health And Human Services Use of taxol for treating lymphomas and breast cancer
US5770609A (en) 1993-01-28 1998-06-23 Neorx Corporation Prevention and treatment of cardiovascular pathologies
US5789189A (en) 1993-09-24 1998-08-04 The Regents Of The University Of California Inhibition of cyst formation by cytoskeletal specific drugs
FR2696461B1 (fr) 1992-10-05 1994-11-10 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux dérivés d'analogues du taxol, leur préparation et les compositions qui les contiennent.
FR2698363B1 (fr) 1992-11-23 1994-12-30 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux dérivés du taxane, leur préparation et les compositions qui les contiennent.
US5565439A (en) 1992-11-24 1996-10-15 The Procter & Gamble Company Methods of using lysophosphatidic acid for treating hyperproliferative conditions
EP1384474A1 (en) 1992-11-27 2004-01-28 Napro Biotherapeutics, Inc. Injectable composition containing taxol
FR2698543B1 (fr) 1992-12-02 1994-12-30 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouvelles compositions à base de taxoides.
US5356927A (en) 1992-12-02 1994-10-18 Thomas Jefferson University Methods of treating plasmodium and babesia parasitic infections
US5631278A (en) 1992-12-02 1997-05-20 Thomas Jefferson University Methods of killing protozoal parasites
CA2150803C (en) 1992-12-02 2006-01-31 Henry Auer Controlled release growth hormone containing microspheres
FR2698871B1 (fr) 1992-12-09 1995-02-24 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveau taxoïdes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5443458A (en) 1992-12-22 1995-08-22 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Multilayered biodegradable stent and method of manufacture
US5981568A (en) 1993-01-28 1999-11-09 Neorx Corporation Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells
US5439686A (en) 1993-02-22 1995-08-08 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods for in vivo delivery of substantially water insoluble pharmacologically active agents and compositions useful therefor
US6096331A (en) 1993-02-22 2000-08-01 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions useful for administration of chemotherapeutic agents
FR2702212B1 (fr) 1993-03-02 1995-04-07 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux taxoïdes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
EP0689465A1 (en) 1993-03-18 1996-01-03 Cedars-Sinai Medical Center Drug incorporating and releasing polymeric coating for bioprosthesis
US5475011A (en) * 1993-03-26 1995-12-12 The Research Foundation Of State University Of New York Anti-tumor compounds, pharmaceutical compositions, methods for preparation thereof and for treatment
SE9301422D0 (sv) 1993-04-28 1993-04-28 Kabi Pharmacia Ab Method and means for inhibiting posterior capsule opacification
US5409690A (en) 1993-06-23 1995-04-25 Chemex Pharmaceuticals, Inc. Treatment of multidrug resistant diseases in cancer cell by potentiating with masoprocol
ATE537858T1 (de) 1993-07-19 2012-01-15 Angiotech Pharm Inc Anti-angiogene mittel und verfahren zu deren verwendung
US5994341A (en) 1993-07-19 1999-11-30 Angiogenesis Technologies, Inc. Anti-angiogenic Compositions and methods for the treatment of arthritis
ATE314845T1 (de) 1993-07-29 2006-02-15 Us Health Verwendung von paclitaxel und seinen derivaten zur herstellung eines medikaments für die behandlung von restenose
FR2712289B1 (fr) 1993-11-08 1996-01-05 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux dérivés de taxicine, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
FR2712288B1 (fr) 1993-11-08 1996-01-05 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux taxoïdes, leur préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
JPH09508892A (ja) 1993-11-17 1997-09-09 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー ヘパリナーゼを用いる血管形成の阻害方法
WO1995017901A1 (en) 1993-12-29 1995-07-06 Matrix Pharmaceutical, Inc. Methods and compositions for the treatment of a host with a cellular proliferative disease
US5565478A (en) 1994-03-14 1996-10-15 The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services Combination therapy using signal transduction inhibitors with paclitaxel and other taxane analogs
US5696153A (en) 1994-05-16 1997-12-09 Napro Biotherapeutics, Inc. Therapeutic regimen for treating patients
US5540934A (en) * 1994-06-22 1996-07-30 Touitou; Elka Compositions for applying active substances to or through the skin
US5626862A (en) 1994-08-02 1997-05-06 Massachusetts Institute Of Technology Controlled local delivery of chemotherapeutic agents for treating solid tumors
US5587459A (en) 1994-08-19 1996-12-24 Regents Of The University Of Minnesota Immunoconjugates comprising tyrosine kinase inhibitors
US5583153A (en) 1994-10-06 1996-12-10 Regents Of The University Of California Use of taxol in the treatment of rheumatoid arthritis
US5480901A (en) * 1994-10-07 1996-01-02 Zynaxis, Inc. Method for reducing unwanted cellular adhesions
US5614515A (en) * 1994-11-17 1997-03-25 University Of Southern California Lazaroid-based compositions and method for preventing adhesion formation using the same
CA2163837C (en) 1994-12-13 1999-07-20 Robert K. Perrone Crystalline paclitaxel hydrates
US5654337A (en) 1995-03-24 1997-08-05 II William Scott Snyder Topical formulation for local delivery of a pharmaceutically active agent
US5612052A (en) * 1995-04-13 1997-03-18 Poly-Med, Inc. Hydrogel-forming, self-solvating absorbable polyester copolymers, and methods for use thereof
US5627206A (en) 1995-06-02 1997-05-06 Warner-Lambert Company Tricyclic inhibitor of matrix metalloproteinases
TW354293B (en) 1995-06-06 1999-03-11 Bristol Myers Squibb Co Prodrugs of paclitaxel derivatives
AU716005B2 (en) 1995-06-07 2000-02-17 Cook Medical Technologies Llc Implantable medical device
JP3737518B2 (ja) 1996-03-12 2006-01-18 ピージー−ティーエックスエル カンパニー， エル．ピー． 水溶性パクリタキセルプロドラッグ
US5635531A (en) 1996-07-08 1997-06-03 Bristol-Myers Squibb Company 3'-aminocarbonyloxy paclitaxels
US5773464A (en) * 1996-09-30 1998-06-30 Bristol-Myers Squibb Company C-10 epoxy taxanes
US6040306A (en) 1997-11-18 2000-03-21 Pharmacia & Upjohn Company Method of treating psoriasis, arthritis and reducing the toxicity of cancer chemotherapy
US5916913A (en) 1998-08-03 1999-06-29 Joseph; Hazel L. Inhibition of wound contraction with paclitaxel, colchicine and penicillamine

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003523926A (ja) * 1998-08-14 2003-08-12 インセプト エルエルシー 複合ヒドロゲル薬物送達システム
JP2004529934A (ja) * 2001-05-01 2004-09-30 アンジオテック ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 抗微小管剤およびポリペプチドまたはポリサッカリドを含む組成物、ならびに炎症状態を処置するための医薬品の調製のためのそれらの組成物の使用
JP2009161543A (ja) * 2001-05-01 2009-07-23 Angiotech Pharmaceuticals Inc 抗微小管剤およびポリペプチドまたはポリサッカリドを含む組成物、ならびに炎症状態を処置するための医薬品の調製のためのそれらの組成物の使用
JP2005525360A (ja) * 2002-03-01 2005-08-25 シエーリング アクチエンゲゼルシャフト 増殖過程に関連する脳疾患の処理へのエポチロンの使用
JP2006515291A (ja) * 2002-12-09 2006-05-25 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト ステントに入れて狭窄症を処置するための微小管安定化剤
JP2012121890A (ja) * 2004-01-30 2012-06-28 Inst National De La Sante & De La Recherche Medicale (Inserm) 神経接続欠陥、例えば精神分裂病及び自閉症の治療においてエポチロン（ｅｐｏｔｈｉｌｏｎｅ）を使用する方法
JP2007519709A (ja) * 2004-01-30 2007-07-19 アンスティテュト ナショナル ド ラ サンテ エ ド ラ ルシェルシュ メディカル （アンセルム） 神経接続欠陥、例えば精神分裂病及び自閉症の治療においてエポチロン（ｅｐｏｔｈｉｌｏｎｅ）を使用する方法
WO2005089800A1 (ja) * 2004-03-17 2005-09-29 Locomogene, Inc. hsHRD3を含む医薬組成物
JP2018531231A (ja) * 2015-09-16 2018-10-25 ディーエフビー ソリア リミテッド ライアビリティ カンパニー 薬物ナノ粒子の送達およびその使用法
US10918606B2 (en) 2015-09-16 2021-02-16 Dfb Soria, Llc Delivery of drug nanoparticles and methods of use thereof
US11331278B2 (en) 2015-09-16 2022-05-17 Dfb Soria, Llc Delivery of drug nanoparticles and methods of use thereof
US10842736B2 (en) 2017-03-15 2020-11-24 Dfb Soria, Llc Topical therapy for the treatment of skin malignancies using nanoparticles of taxanes
US11191717B2 (en) 2017-03-15 2021-12-07 Dfb Soria, Llc Topical therapy for the treatment of skin malignancies using nanoparticles of taxanes
US11633349B2 (en) 2017-03-15 2023-04-25 Dfb Soria, Llc Topical therapy for the treatment of skin malignancies using nanoparticles of taxanes
US11497726B2 (en) 2018-03-16 2022-11-15 Dfb Soria, Ll. Topical therapy for the treatment of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and cervical cancer using nanoparticles of taxanes

Also Published As

Publication number Publication date
ATE246500T1 (de) 2003-08-15
EP1070502B1 (en) 2003-06-04
DE69704877T2 (de) 2001-11-15
CN101195028A (zh) 2008-06-11
EP0941089B1 (en) 2001-05-16
RU2242974C2 (ru) 2004-12-27
HK1033422A1 (en) 2001-08-31
HK1022270A1 (en) 2000-09-15
AU5113298A (en) 1998-06-29
CA2607067A1 (en) 1998-06-11
JP3287852B2 (ja) 2002-06-04
NO992641L (no) 1999-07-30
EP0941089A2 (en) 1999-09-15
TW562674B (en) 2003-11-21
JP2009161555A (ja) 2009-07-23
US20020037919A1 (en) 2002-03-28
EP1092433A2 (en) 2001-04-18
CN1246791A (zh) 2000-03-08
NZ512097A (en) 2005-05-27
EP1582210B1 (en) 2010-02-10
BR9713673A (pt) 2000-10-31
PT941089E (pt) 2001-11-30
EP1090637A3 (en) 2001-09-12
NO20063667L (no) 1999-07-30
DE69739761D1 (de) 2010-03-25
KR100809304B1 (ko) 2008-03-04
GR3036364T3 (en) 2001-11-30
ES2207451T3 (es) 2004-06-01
DE69704877D1 (de) 2001-06-21
DE69724016T2 (de) 2004-06-17
US6515016B2 (en) 2003-02-04
EP1092433A3 (en) 2001-09-12
AR013878A1 (es) 2001-01-31
CN101011576B (zh) 2014-09-17
EP1090637A2 (en) 2001-04-11
CA2273240C (en) 2008-02-19
ATE201138T1 (de) 2001-06-15
NZ336094A (en) 2001-08-31
WO1998024427A3 (en) 1998-10-01
DE69724016D1 (de) 2003-09-11
EP1070502A2 (en) 2001-01-24
DK0941089T3 (da) 2001-09-10
NO992641D0 (no) 1999-06-01
JP2002226399A (ja) 2002-08-14
EP1582210A2 (en) 2005-10-05
HK1037320A1 (en) 2002-02-08
NZ552215A (en) 2008-04-30
EP1070502A3 (en) 2001-10-17
CN101011576A (zh) 2007-08-08
KR20050098031A (ko) 2005-10-10
CA2273240A1 (en) 1998-06-11
NZ538260A (en) 2007-09-28
RU2004126705A (ru) 2006-02-10
DE69722681D1 (de) 2003-07-10
CN1200706C (zh) 2005-05-11
EP1582210A3 (en) 2005-10-12
AU735655B2 (en) 2001-07-12
EP1092433B1 (en) 2003-08-06
ATE241977T1 (de) 2003-06-15
ATE457170T1 (de) 2010-02-15
KR20000069265A (ko) 2000-11-25
WO1998024427A2 (en) 1998-06-11
ES2157601T3 (es) 2001-08-16
NO322610B1 (no) 2006-10-30
CN1679937A (zh) 2005-10-12
DE69722681T2 (de) 2004-05-13
NZ547206A (en) 2007-12-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3287852B2 (ja) 炎症性疾患を処置または予防するための組成物および方法
US6689803B2 (en) Compositions and methods for treating surgical adhesions
US20080113035A1 (en) Compositions and methods for treating or preventing inflammatory diseases
AU771994B2 (en) Compositions and methods for treating or preventing inflammatory diseases
AU2006220416B2 (en) Compositions and methods for treating or preventing inflammatory diseases
AU2004200715C1 (en) Compositions and methods for treating or preventing inflammatory diseases

Legal Events

Date Code Title Description
R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090315

Year of fee payment: 7

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090315

Year of fee payment: 7

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100315

Year of fee payment: 8

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees