HUT66060A - Process for producing peptide derivatives of thrombin-inhibiting activity - Google Patents

Process for producing peptide derivatives of thrombin-inhibiting activity Download PDF

Info

Publication number
HUT66060A
HUT66060A HU9400589A HU9400589A HUT66060A HU T66060 A HUT66060 A HU T66060A HU 9400589 A HU9400589 A HU 9400589A HU 9400589 A HU9400589 A HU 9400589A HU T66060 A HUT66060 A HU T66060A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
pro
arg
dcha
dch
group
Prior art date
Application number
HU9400589A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9400589D0 (en
Inventor
Butrus Atrash
David Michael Jones
Michael Szelke
Original Assignee
Astra Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astra Ab filed Critical Astra Ab
Publication of HU9400589D0 publication Critical patent/HU9400589D0/hu
Publication of HUT66060A publication Critical patent/HUT66060A/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

A találmány tárgyát képezik a trombin új kompetitív inhibitorai, az előállításukra szolgáló eljárások, a vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati kompozíciók, továbbá a vegyületek antikoagulánsokkénti alkalmazása, tromboembóliás megbetegedé sek kezelésében és megelőzésében, úgymint vénás trombózis, tüdőembólia, artériás trombózis, különösen miokardiális infarktus és agytrombózis, általános hiperkoagulábilis állapotok és helyi hiperkoagulábilis állapotok, például érplasztikát és koszorúér bypass operációkat követő állapotok esetén.
A vér koaguláció az a kulcsfolyamat, amely szerepet játszik mind a vérzéscsillapításban (vagyis egy sérült véredény révén fellépő vérveszteség megakadályozásában), mind pedig a trombózisban (vagyis egy véredénynek egy vérrög általi patologikus elzáródásában). A koaguláció enzimatikus reakciók komplex sorozatának eredménye, a reakciósorozatot az 1. vázlat mutatja be, ahol a különféle alvadási faktorokat római számokkal jelöljük.
A trombin központi szerepet játszik a koagulációban, akár intrinsic, akár extrinsic rendszerek iniciálják a folyamatot: aktiválja a vérlemezkéket, a fibronogént átalakítja fibrin monomerekké, amelyek spontán módon filamentumokká polimerizálódnak, és aktiválja az F XIII faktort, amely viszont a polimert nem oldódó fibrinné térhálósítja. A trombin aktiválja továbbá az F V és F VIII faktorokat egy pozitív feedback reakcióban. Várható ezért, hogy a trombin inhibitorai hatékony antikoagulánsok.
Az első trombin-inhibitorokat, amelyek elektrofil keton típusúak voltak, M. Szelke és D.M. Jones fejlesztette ki és ismertette az EP-A1-0118 280 számú európai szabadalmi bejelentésben. Ezek a korábbi vegyületek a fibrinogén Act lánc P3-P2' pentapeptid szekvenciájának származékai voltak, ahol a könnyen lehasítható P-^-P^' peptidkötést egy -CO-CH2- molekularésszel helyettesítették, és így a megfelelő peptidek keto-izosztéráját állították elő.
Más ismert példák az elektrofil keton típusú szerin prote ináz inhibitorokra a következő közleményekben találhatók:
(a) M.
bejelentés, (b) B.
Kolb et al., EP-A2-0,195,212 számú európai szabadalmi amely peptid α-keto észtereket és amidokat ismertet;
Imperiali and R.H. Abeles, Biochemistry 1986, 25,
3760 (peptidil-fluor-alkil-ketonokat ismertet);
(c) Ueda et al., Biochem. J. 1990, 265, 539 (peptidil-fluor
-alkil-ketonokat ismertet);
(d) D. Schirlin et al., EP-A1-0,362,002 számú európai szabadalmi bejelentés, amely fluor-alkil-amid-ketonokat ismertet;
(e) P. Bey et al., EP-A2-0,364,344 számú európai szabadalmi bejelentés, amely α,β,δ-triketonvegyületeket ismertet;
(f) E.N. Shaw et al., a 4,318,904 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, amely peptid-klór-metil-ketonokat, pl. H-DPhe-Pro-Arg-CH2Cl-t ismertet.
Peptid aldehid típusú trombin inhibitorokat ismertet S.
Bajusz et al. a J. Med. Chem. 1990, 33, 1729 közleményben és az EP-A2-0,185,390 számú európai szabadalmi bejelentésben. Trombin inhibitorokat mint olyan peptideket, amelyek az arginin C-terminális boronsavszármazékait és azok izotiouronium analógjait tartalmazzák, A.D. Kettner et al., az EP-A2-0,293,881 számú európai szabadalmi bejelentésben ismertetik.
Vannak példák olyan trombin-inhibitor hatású argininszármazékokra vagy analógokra, amelyek nem tartalmaznak elektrofil ketont, ilyeneket közöl például:
(a) S. Okamoto et al·., az EP-A1-0,008,746 számú európai szabadalmi bejelentésben, amely aril-szulfonil-arginin-amidokat, például argatrobant ismertet;
(b) J. Stürzebecher et al., Pharmazie, 1981, 36,639 (a közlemény aril-szulfonil-p-amidino-fenil-alanin-amidokat ismertet).
A találmány célja új és hatékony trombin-inhibitorok kidolgozása, amelyek az enzim kompetitív inhibitorai, vagyis reverzibilis gátlást idéznek elő. A találmány további célja olyan inhibitorok kidolgozása, amelyek orális adagolás esetén is rendelkeznek biológiai aktivitással és szelektíven gátolják a trombint más szerin-proteázokkal szemben. A stabilitás, a hatás tartama, valamint a terápiás dózisok esetén csekély toxicitás a találmány további célja.
Azt találtuk, hogy az (1) általános képletű vegyületek akár önmagukban akár fiziológiailag elfogadható sóik formájában, beleértve a sztereoizomerket is, a trombin hatékony inhibitorai. Az (1) általános képletű vegyületekben és eltérő utalás hiányában a továbbiakban
A jelentése -CH2- csoport, -CH=CH- csoport, -CH2-CH2- csoport vagy -CH2-CH2-CH2- csoport;
R1 és R2 jelentése azonos vagy különböző és mindkettő jelentése lehet hidrogénatom vagy X-B- általános képletű csoport, melyben B jelentése 1-3 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkiléncsoport, és X jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, etilcsoport, 3-6 szénatomos cikloalkilcsoport vagy R'CO- általános képletű csoport, ahol R' jelentése OH csoport, 1-4 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkoxicsoport, NH2 csoport vagy NHR általános képletű csoport, melyben R jelentése 1-4 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, vagy X jelentése karbonsavat utánzó, önmagában ismert csoport, amely lehet -PO(OR''')2 csoport, • *
- 5 -SO3H csoport és 5-(1H)-tetrazolil-csoport, és R'' ' jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy etilcsoport, vagy B jelentése -S02~ csoport és X jelentése metilcsoport vagy etilcsoport;
m értéke 0, 1 vagy 2, R3 jelentése ciklohexilcsoport és
R3a jelentése hidrogénatom; vagy m értéke 1 és R3 jelentése ciklohexilcsoport vagy fenilcsoport és R3A az R1 szubsztituenssel együtt etilénhidat képez;
Y jelentése oxigénatom vagy S(O)p általános képletű csoport, ahol p értéke 0, 1 vagy 2;
R4 jelentése hidrogénatom; 1-6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport vagy cikloalkilcsoport, amely szubsztituálatlan vagy szubsztituálva van egy vagy több fluoratommal és/vagy szubsztituálva van egy fenilcsoporttal; szubsztituált vagy szubsztituálatlan aromás gyűrű, amely lehet fenilcsoport, 4-metoxi-fenil-csoport, 4-terc-butil-fenil-csoport, 4-metil-fenil-csoport, 2- vagy 3- vagy 4-(trifluor-metil)-fenil-csoport, 1-5 fluoratommal szubsztituált fenilcsoport; vagy -CH(CF3)-fenil-csoport.
Az (1) általános képletű vegyületek rokonságban vannak a humán fibrinogén Aa lánc peptidszekvenciájával, amely Ρβ-Ρχ' módosított alegységeket képvisel: H-Ala-Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala15 10
P3 P2 Ρχ ! Pf P2' P3'
-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-Arg---Gly-Pro-Arg-Val14 15 16
Ezt a szekvenciát SEQ ID No: 1 megjelöléssel azonosítjuk a szekvencia felsorolásban.
A találmány egy előnyös kivitele olyan (1) általános képletű vegyületekre vonatkozik, amelyekben
A jelentése -CH2-CH2- csoport vagy -CH2-CH2-CH2- csoport;
R1 jelentése hidrogénatom és R2 jelentése HOCO(CH2)n- képletű csoport vagy CH3CH2OCO(CH2)n- képletű csoport és n értéke 1 vagy 2;
Y jelentése oxigénatom;
m értéke 1, R3 jelentése ciklohexilcsoport és R3A jelentése hidrogénatom.
A találmány különösen előnyös kivitelét a következő vegyületek képviselik.
H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-CH2-CF2 HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu
H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3
H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu
A találmány egy további megvalósítása az emberi vagy állati szervezetben fellépő olyan állapotok kezelésére vonatkozik, amelyek esetén a trombin gátlása szükséges. A találmány szerinti vegyületek várhatóan hasznosak különösen emberi és állati szervezetben trombózis és a vérben és szövetekben fellépő fokozott véralvadékonyság kezelésére vagy megelőzésére. Azon megbetegedéses állapotok, amelyekben a vegyületek potenciálisan felhasználhatók a kezelésben és/vagy a profilaxisban, magukban foglalják a következőket: vénás trombózis, tüdőembólia, artériás trombózis, úgymint a miokardiális infarktus, instabil angina, trombózis alapú hűdés (stroke), perifériás artériás trombózis. A vegyületek továbbá várhatóan felhasználhatók atheroszklerotikus megbetegedések, úgymint coronaria artériás megbetegedések, agyi artériás megbetegedések és perifériás artériás megbetegedések megelőzésében. Továbbá a vegyületek trombolitikumokkal együtt várhatóan jól felhasználhatók a miokardiális infarktus esetén. A vegyületek továbbá várhatóan hasznosak a trombolízis, percutan transzluminális érplasztika (PTCA) és koszorúér bypass operációkat követő újraelzáródás megelőzésében. A vegyületek várhatóan hasznosak továbbá a mikrosebészeti eljárások utáni retrombózis megelőzésében is. A vegyületek továbbá várhatóan hasznosak a mesterséges szervekkel és szívbillentyűkkel összefüggő beavatkozásokkal kapcsolatos antikoaguláns kezelésben. A vegyületek várhatóan hasznosak továbbá a hemodialízis és a disszeminált intravaszkuláris koaguláció esetén végzett antikoaguláns kezelésben. A napi dózis normális esetben 0,1 mg és 10 mg hatóanyag mennyiség tartományban van. Az intravénás oldatok előnyösen 0,1-100 mg/ml hatóanyagot, míg a dózisegységek előnyösen 1-1000 mg hatóanyagot tartalmaznak, és azokat naponta 1-4 alkalommal adagoljuk.
A találmány szerinti vegyületeket várhatóan felhasználhatjuk továbbá in vivő körülmények között a pácienseknél alkalmazott katéterek és mechanikai eszközök öblítésére, továbbá in vitro körülmények között antikoagulánsként vér, plazma és más vérkészítmények tartósítására.
A találmány további célja a találmány szerinti vegyületek előállítási eljárásának kidolgozása. Ennélfogva a találmány tárgyát képezi az (1) általános képletű vegyületek előállítási el
I
- 8 járása, amely eljárást az jellemez, hogy (I. módszer) valamely (2) általános képletű halogén-metil-keton - ahol a képletben W1 jelentése aminoterminális védőcsoport, úgymint terc-butoxi-karbonil-csoport és W2 jelentése védőcsoport, úgymint benzil-oxi-karbonil-csoport - halogénatomját egy R4Y“ csoporttal helyettesítjük, ahol Y jelentése oxigénatom vagy kénatom, R4 jelentése az (1) általános képletnél megadott, amint azt az (A), (D) és (F) eljárásokban bemutatjuk, a ketont alkohollá redukáljuk, majd eltávolítjuk az aminoterminális védőcsoportot és standard peptidkapcsolást végzünk, ezt követően az alkoholt oxidáljuk, és így a védett tripeptid-ketont állítjuk elő, eltávolítjuk az aminoterminális védőcsoportot, majd N-alkilezést végzünk, (amint azt az (A), (Β), (G) és (H) eljárásokban bemutatjuk), majd eltávolítjuk a védőcsoportokat, vagy a fenti és bemutatott [például (A) (iii) eljárás] kapcsolási reakcióban egy védett dipeptidet helyettesítünk egy aminoterminális -N-alkilezett-(trifluor-acil)-védett dipeptiddel [(K) eljárás], majd a terméket oxidáljuk és a védőcsoportokat eltávolítjuk, vagy (II. módszer) valamely R4-halogeniddel, melyben R4 jelentése az (1) általános képletnél megadott, alkilezünk valamely (3) általános képletű α-ketolt, melybe W·'- és W2 jelentése a fenti, [amint azt az (E) eljárásnál bemutatjuk] majd a reakciót az I. módszer szerint végezzük tovább, vagy (III. módszer) a módosított Dakin-West reakció [Angew. Chem. Int. Ed. Engl. .8 (1969) 981, tripeptidekre alkalmazva, J. Org. Chem., 50 (1985) 1112] alkalmazásával valamely (4) általános képletű vegyületet [vagy alternatív módon közvetlenül egy amino-terminális-N-alkilezett-N-(trifluor-acetil)-védett tripeptidet] • « ·« ·· ·· ··· · · 4 ·· · • ···· · » · · · «·· · ·· «· ···«
- 9 használva, ahol W1 és W2 jelentése a fentiekben megadott, reagáltatok egy (T-CH2CO)2O általános képletű vegyülettel, melyben T jelentése halogénatom, R40 vagy R4S és 4-DAMP, ahol R4 jelentése a fenti, majd a reakciót a továbbiakban az I. módszer szerint végezzük.
Azokban az esetekben, amikor a reakció sztereoizomerek elegyét eredményezi, ezeket adott esetben standard kromatográfiás vagy átkristályositási eljárásokkal elválasztjuk, és kívánt esetben egy sztereoizomert elkülönítünk.
A következő leírás a találmány kiviteli formáit szemlélteti.
A találmány szerinti inhibitorok előállításának kémiai eljárásait az (A)-(H) eljárások, valamint az (I) és (K) eljárások szerinti szintézissémák mutatják be. Az arginin szükséges alkoxivagy fenoxi-metil-ketonjait főként úgy állítjuk elő, hogy az I. módszer szerint bróm-metil-ketonok brómatomját R40-csoporttal helyettesítjük vagy úgy, hogy előzetesen készített NaOR4 általános képletű vegyületet használunk [(A) eljárás] vagy KF alkalmazásával [(D) és (F) eljárás] vagy a II. módszer szerint arginin α-ketolt alkilezünk Ag2O / R4I alkalmazásával (ld. (E) eljárás].
Standard peptidkapcsolási reakciókat használunk a DCha, Pro és analógjaik bevitelére. Az N-terminuson lévő karboxi-alkil-csoportot vagy alkilezéssel visszük be bróm-acetátok alkalmazásával vagy terc-butil-akriláthoz végzett Michael-addícióval [(A) és (B) eljárás], vagy úgy, hogy előre bevisszük a karboxi-alkilcsoportot a dipeptid részbe [ld. (K) eljárás]. Majd minden védőcsoportot eltávolítunk [lásd az alábbi (a)-(c) védőcsoport eltávolítás! eljárásokat].
• ·
- ίο - ............
Általános kísérleti eljárások:
A reakcióelegy standard feldolgozása a következőkre vonatkozik: etil-acetátos extrakciók, rendszerint mosás 0,3 m KHSO4, lm KHCO3 oldatokkal, vízzel és sóoldattal, ezt követően szűrés Whatman Phase Separatory szűrőpapíron és szárítás toluollal végzett azeotrópos desztillációval. Vékonyréteg-kromatográfiát (TLC) kereskedelemben kapható Merek Silicagel 60F254 jelű szilikagéllel bevont üveglemezekkel végzünk. A foltokat úgy tesszük láthatóvá, hogy kombináljuk az UV-fény, hevítés majd az azt követő fluorescamine spray alkalmazását vagy hevítés, majd az azt követő klórozás (Cl2)-tank) és 1%-os keményítő/KI oldattal végzett permetezés alkalmazását. Flash kromatográfiát Merek Silicagel 60 (40-63 pm) tölteten nitrogéngáz-nyomás alatt végzünk. Aminosavanalízist Beckman Gold System használatával végzünk. A peptideket hidrolizáljuk (6n HC1 + fenol 110°C-on 22 órán át), majd injektáljuk, és a prolincsúcsot mennyiségileg meghatározzuk. MPLC-t üvegoszlopok (Anachem) alkalmazásával végzünk, az oszlopokat Vydac C18 15-25 pm szilicium-dioxiddal töltjük meg, és gradiensként 1% TFA-MeCN 1% TFA-H2O-be rendszert használunk 226 nm-nél mérve követjük az anyagot. A frakciókat HPLC-vel analizáljuk, és a tiszta frakciókat összegyűjtjük és liofilizáljuk. A HPLC méréseket Spectra-Physics 8700 Series kromatográfiás mérőrendszeren végezzük. Az oldószerrendszer ugyanaz mint az MPLC esetén, és 210 nm-nél detektálunk. Áramlási sebesség 1,5 ml/min, oszlop: Novapack C18, 4 pm (8 x 100 mm cartridge, Waters). Valamennyi intermediert NMR-spektrometriával jellemzünk (Hitachi-Perkin Elmer R24 60 MHz vagy Jeol 270 Mhz készülékeken). Minden peptid végterméket FAB tömegspektrumával jellemzünk (M-Scan i
• · ···· ·
- 11 Ascot, Berks, U.K.).
Kiindulási anyagok készítése:
Boc-Arg(Z2)-CH2Br:
(i) 10 mmol Boc-Arg(Z2)-OH-t 50 ml száraz THF-be és 10 mmol NMM-be adagolunk és az elegyet lehűtjük -10°C-ra, majd 100 mmol iBC-t adunk hozzá cseppenként, a hőmérsékletet 3/4-10°C-on tartva. 10 perc múlva -10°C-on 25 mmol CH2N2 150 ml éterrel készült elegyébe öntjük a vegyes anhididet. Három óra múlva a CH2N2 felesleget ecetsavval elbontjuk és az oldatot háromszor mossuk vízzel, majd sóoldattal. Az elegyet szárítjuk és bepároljuk, és így kapjuk a diazo-ketont sárga olaj alakjában. IR 2100 cm-1 (COCHN2).
(ii) 10 mmol diazo-ketont 200 ml száraz etil-acetátban -15°C-ra hűtünk és kb. 11 ml lm HBr/etil-acetátot adunk hozzá cseppenként. Ha a sárga szín eltűnik, TLC (etil-acetát/hexán) mutatja, hogy a diazo-keton teljesen átalakult bróm-metil-ketonná. Az oldatot gyorsan átvisszük egy rázótölcsérbe, és lm KHCO3-mal, sóoldattal, mossuk, szárítjuk és bepároljuk, hogy szilárd maradék váljon ki. Feloldjuk meleg EtOH-ban, majd lehűtjük, így kapjuk a bróm-metil-ketont amorf, fehér por alakj ában.
NMR (CDC13): δ 1,3 (5, 9H), 1,5 -1,85 (m, 4H) , 3,75- 3,95 (m + s,
4H) , 4,3 (m, 1H) , 5,05 (s, 2H) , 5,15 (s, 2H) , 5,65 (d, 2H), 7,30
(m, 10H), 9,2 (br, s, 1H), 9,3 (br, s , 1H) .
Olvadáspont: 50°C-nál lágyul, majd lassan bomlik >70°C * 1
- 12 ··· ··«««» • •••44» » • ···· « 4 · · · • ·♦ · »♦ ·« ·«· ·
Boc-DCha-X-ONSu (X = Pro, Pic vagy Azé):
(i) 10 mmol Boc-DCha-OH-t 50 ml 1:5 arányú CH2CI2/DMF oldószerelegyben oldunk, és 11 mmol HONSu-val kezelünk, majd az elegyet 0°C-ra hűtjük és 13 mmol WSCDI-t adunk hozzá. 30 perc múlva fölmelegítjük szobahőmérsékletre. TLC 3 óra múlva teljes Boc-DCha-ONSu képződést mutat. 200 ml Et2O-t adunk hozzá és háromszor mossuk vízzel, majd sóoldattal, szárítjuk az elegyet, így kapjuk az észtert, mint színtelen habot.
(ii) 10 mmol N-hidroxi-szukcinimido-észtert 50 ml CH2C12-vel elegyítünk és 11 mmol H-Pro-OBzl.HCl-dal vagy H-Pic-OBzl.HCl-dal vagy H-Aze-OBzl-lel és 20 mmol iPr2NEt-tel kezelünk. Három órán át keverjük, majd standard etil-acetát/0,3 m KHSO4 feldolgozással kapjuk a dipeptid-észtert, mely elég tiszta ahhoz, hogy a következő lépésben felhasználjuk.
(iii) A Boc-DCha-X-OBzl-t THF-ben 5% Pd/C katalizátor jelenlétében, STP-n 4 órán át hidrogénezzük. Szűrés és bepárlás után kapjuk a savat szilárd anyag vagy hab formájában. Az anyagot átkristályosítjuk (iPr2O vagy Et2Ű/hexán), így kapjuk a tiszta terméket.
Boc-DCha-Pro-OH (szilárd, o.p.: 163-166°C): NMR (CDCI3) δ 0,8-2,05 (m, + s 1,4-nél, 26H), 3,4 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,5 (m, 2H), 5,2 (m, 1H).
Boc-DCha-Pic-OH (szilárd, o.p.: 121-122°c): NMR (CDCI3) δ 0,8-2,05 (m, + s 1,45-nél, 28H), 3,35 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 4,6-4,9 (m, 1H), 5,4 (m, 1H), 5,6 (m, 1H), 8,8 (br, s, 1H).
Boc-(Me)-DCha-Pro-ONSu:
Boc-(Me)DPhe-OH-t hidrogénezünk 5% Rh-C katalizátor jelenlétében 90% ecetsav-H2O elegyben 0,41 MPa nyomáson 3 napig, így ·· · ·**· «**· «·*· ····♦·» · • ···· · · · · · ··· · ·-« ·· ····
- 13 Boc-(Me)-DCha-OH kvantitatív hozamát kapjuk. 10 mmol Boc-(Me)DCha-OH-t és 10 mmol NMM-et 50 ml CH2Cl2-ben lehűtünk -15°C-ra és 10 mmol Ph2PO-Cl-t adunk hozzá. 20 perc múlva 11 mmol H-Pro-OBzl.HCl-t és 20 mmol NMM-et adunk hozzá. 1 óra múlva hagyjuk felmelegedni szobahőmérsékletre. 2 óra múlva standard feldolgozás és flash kromatográfia (40% etil-acetát/hexán) után tiszta Boc-(Me)DCha-Pro-OBzl-t kapunk színtelen olaj alakjában (80%).
NMR (CDC13) : δ 0,5-2,2 (m, + s 1,4-nél, 26H) 2,65 (s, 3H) , 3,5 (m, 2H) , 4,3-5,0 (m, 2H) , 5,1 (s, 2H) , 7,30 (s, 5H) .
Ezt átalakítjuk N-hidroxi-szukcinimid-észterré, amint azt az alábbiakban a Boc-DCha-X-ONSu-ra leírjuk.
Előállítási eljárások:
A következőkben ismertetett előállítási eljárások a fenti I-III. módszereket mutatják be, továbbá az azokat követő lépéseket, amelyekkel a végtermékeket kapjuk.
(A) eljárás:
(i) 10 mmol Boc-Arg(Z2)-CH2Br-t adunk szilárd alakban az alkoxid vagy fenoxid előre elkészített oldatához (10 mmol alkohol vagy fenol és 10 mmol 80%-os NaH olajos szuszpenzió) 40 ml DMF-ben -20°C-on, N2 alatt. 30 perc múlva az oldat felmelegítjük szobahőmérsékletre. 2 óra múlva 0,3 m KHSO4 oldatot adunk hozzá, hogy semlegesítsük a visszamaradt alkoxidot, és a DMF-et vákuumban eltávolítjuk. A nyers terméket megosztjuk etil-acetát és víz között, az etil-acetátos fázist sóoldattal· mossuk, szárítjuk és bepároljuk. Flash kromatográfia vagy kristályosítás után kapjuk a tiszta alkoxi-ketonokat.
* 1 •a ·· ·· • · ·· • ♦··· ♦ · « · · ··· · ·« ·· ·«··
Boc-Arg(Z2)-CH2OPh (szilárd): NMR (CDCI3): δ 1,41 (s,10H),
1,64-1,68 (m, 3H), 3,92 (dd, 2H), 4,5 (m, 1H), 4,62 (q, 2H), 5,1 (S, 2H) , 5,2 (s, 2H) , 5,5 (d, 1H) , 6,8 (d, 2H) , 6,95 (t, 1H) ,
7,2-7,45 (m, 12H), 9,2 (br, s, 1H), 9,3 (br, s, 1H),
Olvadáspont: 115-118°C.
Boc-Arg(Z2)-CH2OCH2CF3 (szilárd): NMR (CDCI3): δ 1,35 (s, 10H),
1,55-1,75 (m, 3H) , 3,7 (q, 2H) , 3,85 (m, 2H) , 4,2 (q + m, 3H) , 5,05 (s, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,7 (d, 1H), 7,15-7,35 (m, 10H), 9,15 (br, s, 1H), 9,3 (br, s, 1H).
Olvadáspont: 87-90°C.
(ii) Az alkoxi-metil- vagy fenoxi-metil-ketont 1:1 arányú MeOH/THF elegyben 0°C-on 1 ekv. NaBH^-del kezeljük. 10 perc múlva 0,3m KHSO4-et adunk hozzá 7-es pH-ig, és az elegyet bepároljuk, hogy a MeOH/THF elegyet eltávolitsuk. Etil-acetátot adunk hozzá és a standard feldolgozás után (etil-acetát/0,3m KHSO4) az alkoholt diasztereomer elegyként izoláljuk.
(iii) Az alkoholt 4m HCl-lel kezeljük dioxánban 15 percig szobahőmérsékleten, majd bepároljuk. A maradékot (1 mmol) 5 ml CH2Cl2-ben kezeljük 1 ekv. Boc-DCha-X-ONSu-val és iPr2NEt-tel (pH = 9-ig nedves pH-papir). 3 óra múlva standard feldolgozással kapjuk a módosított tripeptidet, melyet flash kromatográfiával tisztítunk (etil-acetát-hexán elegy, 1% ecetsavat tartalmaz). Hozam: 50-85%.
(iv) A tripeptid alkoholt CH2Cl2-ben Dess-Martin periodinánnal (3 ekv.) kezeljük (Dess, D.B és Martin J.C. J. Org. Chem. 1983, 48. 4155-4156). Két óráig keverjük szobahőmérsékleten, standard feldolgozással (Et20/lm KHCO3/Na2S2O3) kapjuk a nyers tripeptid ketonokat, melyeket flash kromatográfiával tisztítunk • ·*·· · « · « · ·· · · ·· ·« ··«»
- 15 (etil-acetát-hexán).
(v) A ketont 4m HCl-dioxánnal kezeljük 15 percig szobahőmérsékleten és bepároljuk. A maradékot száraz MeCN-ben (1 mmol 5 ml-ben) 1,2 ekv. benzil-bróm-acetáttal, vagy terc-butil-bróm-acetáttal és 3 ekv. iPr2NEt-tel kezeljük. Az elegyet két órán át forraljuk visszafolyó hűtő alkalmazásával, bepároljuk és flash kromatografáljuk (etil-acetát/hexán). így kapjuk a benzil-oxikarbonil-metil- vagy terc-butil-oxi-karbonil-metil-peptideket olaj formájában (40-50%).
A 30. és 31. példákban 2,5 ekv. bróm-acetátot használunk, hogy elérjük a bisz-alkilezést.
(B) eljárás
Az alkoxi-metil-keton-peptidet fölös mennyiségű 4m HCl-dioxánnal kezeljük 15 percig szobahőmérsékleten. Bepároljuk, és így kapjuk a sósavas sót, melyet megosztunk etil-acetát és lm KHCO3 között. Az etil-acetátos fázist elválasztjuk, szárítjuk és bepároljuk, így a szabad amint kapjuk, ezt felvesszük MeOH-ban és 1,5 ekv. frissen desztillált terc-butil-akrilátot adunk hozzá. Viszszafolyóhűtő alatt forraljuk 4 órán át, igy kapjuk a terc-butoxi-karbonil-etil-peptidet, melyet flash kromatográfiával tisztítunk etil-acetát/hexánnal.
(C) eljárás mmol Boc-Arg(Z2)-CHN2-t feloldunk 5 ml R40H alkoholban, Rh2(OAc)4 katalizátorral kezeljük. Több óra múlva szobahőmérékleten, TLC analízis nem mutat ki visszamaradt diazo-ketont. Az alkoholt vákuumban eltávolítjuk és a terméket flash kromatográfiával etil-acetát/hexán keverék használatával izoláljuk.
(D) eljárás (i) 10 mmol Boc-Arg(Z2)-OH-t 50 ml száraz CH2Cl2-ben 11 mmol
2,2,2-triklór-etanollal és 1 mmol 4-DMAP-val kezelünk, lehűtjük 0°C-ra és 13 mmol WSCDI-t adunk hozzá. 30 perc múlva hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, és 24 óráig keverjük. Bepárlás után megosztjuk etil-acetát/0,3 m KHSO4 között, utána háromszor mossuk 0,3 m KHSO^-tal, egyszer vízzel, egyszer sóoldattal, szárítjuk és bepároljuk, így kapjuk a Tce-észtert, amit úgy használunk fel, ahogy megkaptuk.
(ii) 10 mmol Tce-észtert 50 ml 4m HCl-dioxánnal 20 percig szobahőmérsékleten kezelünk és utána bepároljuk. Szárítás után a maradékot 50 ml CH2Cl2~ben kezeljük egymás után 10 ml Boc-DCha-X-ONSu-val (X = Pro, Pic) és iPr2NEt-tel (9-es pH-ig nedves pH papír). 3 óra múlva standard feldolgozással (etil-acetát/0,3m KHSO4) kapjuk a tripeptid-észtert olaj alakjában. A Tce-észtert (10 mmol) 50 ml 90% ecetsav-H2O-ban 5 percnyi intervallumokban frissen aktivált Zn kis részleteivel 1 órán keresztül kezeljük. További 1 óra után az elegyet szűrjük és az oldószert bepároljuk. Standard feldolgozással (etil-acetát/0,3m KHSO4) kapjuk a tripeptid-savat, melyet flash kromatográfiával tisztítunk kovasavon (2% ecetsav-etil-acetát) így nyerjük a tripeptid-savat, mint egy színtelen habot (80% 3 lépésre vonatkoztatva).
(iii) A tripeptid-savat átalakítjuk bróm-metil-ketonná, ugyanazt az eljárást alkalmazva, mint amit leírtunk a Boc-
-Arg(Z2)-CH2Br esetében. A tripeptid-bróm-metil-ketont színtelen olaj alakjában nyerjük flash kromatográfiával etil-acetát/hexán elegyet használva.
ί
- 17 NMR (CDCI3): δ 0,9 (m), 1,15 (m) , 1,25 (m), 1,35 (s), 1,6 (m) , 1,85 (m,), 2,1 (m) (összes: 30H), 3,3 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 3,95 (m, 2H), 4,15 (s, 2H), 4,25 (m, 1H), 4,4 (m, 1H), 4,5 (m, 1H), 5,0 (d, 1H) , 5,1 (dd, 2H) , 5,2 (s, 2H) , 7,2-7,4 (s, m, 1OH) ,
9,2-9,5 (2 br, s, 2H).
(iv) 1 mmol tripeptid-bróm-metil-ketont 5 ml száraz DMF-ben 1,2 mmol fluorozott alkohollal, fenollal vagy tiollal és 1,5 mmol vízmentes kálium-fluoriddal kezelünk, majd szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük az elegyet. Bepároljuk, majd standard eljárással feldolgozzuk, majd flash kromatográfiával kapjuk a tripeptid ketonokat.
Boc-DCha-Pro-Arg(Z2)-CH2O-Ph(4Me): NMR (CDCI3) δ 0,9 (m), 1,15 (m), 1,25 (m), 1,35 (s), 1,6 (m), 1,85 (m), 2,1 (m) (összes: 30H), 2,38 (s, 3H), 3,4 (m, 1H), 3,9 (m, 1H), 4,1 (br, s, 2H), 4,4 (m, 1H) , 4,6 (m, 1H) , 4,7 (m, 1H) , 4,9 (q, 2H) , 6,9 (d, 1H) , 7,15 (d, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,45 (s, 10H), 9,4 (br, S, 1H), 9,6 (br, s, 1H).
• A 37. példa esetében a védett szulfidot szulfonná oxidáljuk m-klór-perbenzoesavval diklór-metánban szobahőmérsékleten.
(E) eljárás (i) 10 mmol Boc-Arg(Z2)-CH2Br-ot és 12 mmol benzoil-hangyasavat 40 ml DMF-ben 14 mmol KF-dal kezelünk. 3 órai keverés után a DMF-et elpároljuk és a terméket etil-acetát és víz között megosztjuk. Szárítás és bepárlás után nyerjük a nyers benzoil-formiát-észtert, melyet kristályosítással tisztítunk (CH2C12-hexán) és a tiszta terméket fehér szilárd formában kapjuk (86%). NMR (CDCI3): δ 1,4 (s, 9H), 1,65-1,9 (m, 4H), 3,95 (m, 2H), 4,3 (m, 1H), 4,95 (q, 2H), 5,15 (ABq, 2H), 5,25 (s, 2H), 5,9 (d, 1H),
«·
7,35 (m, 10H), 7,5 (t, 2H), 7,65 (t, 1H), 8,15 (t, 2H), 9,25 (br, s, 1H), 9,45 (br, s, 1H).
Olvadáspont: 130-132°C.
(ii) 5 mmol benzoil-formiát-észtert 200 ml THF-ben és 200 ml lm KHCO-^-ban erősen keverünk, szobahőmérsékleten 24 órán át. A THF-et elválasztjuk és bepároljuk, majd a vizes fázist extraháljuk etil-acetáttal, amelyet elegyítünk a THF-ből kapott anyaggal. Ezt az elegyet CH2Cl2-hexánból kristályosítjuk, így kapjuk az α-ketolt, mint fehér szilárd anyagot (90%).
NMR (CDCI3): δ 1,4 (s, 9H), 1,7 (m, 4H), 2,95 (t, 1H), 3,95 (m,
2H) , 4,25 (m, 2H), 5,15 (s, 2H) , 5,25 (s, 2H), 5,6 (d, 1H) , 7,35
(m, 10H), 9,25 (br, s, 1H), 9,4 (br, s, 1H).
Olvadáspont: 101-103°C.
(iii) 1 mmol a-ketolt 5 ml száraz CH2Cl2-ben 5-10 mmol alkil-jodiddal és 2 mmol ezüst-oxiddal kezelünk. Az elegyet visszafolyó hűtő alatt melegítjük sötétben 2-17 óráig (pl. Mel, EtI, nPrl esetén 2 óráig, nBuI esetén 5 óráig). Bepároljuk, majd flash kromatografáljuk (etil-acetát/hexán), így kapjuk az alkoxi-metil-ketonokat, mint színtelen olajokat (50-85%).
Boc-Arg(Z2)-CH2OEt (olaj): NMR (CDCI3): δ 1,15 (t, 3H), 1,4 (s, 9H), 1,5-1,8 (m, 4H), 3,4 (q, 2H), 3,95 (t, 2H), 4,1 (q, 2H),
4,45 (m, 1H), 5,15 (S, 2H), 5,25 (S, 2H) , 5,4 (d, 1H), 7,35 (m,
10H) , 9, 25 (br, s, 1H), 9,4 (br, s, 1H).
Boc-Arg( Z2)-CH2NBu (olaj): NMR (CDCI3): δ 0,9 (t, 3H), 1,25-1,8
(m) + 1, 4 (S) [17H] , 3,3 (dd, 2H), 3,95 (t, 2H), 4,05 (q, 2H),
4,45 (m, 1H), 5,1 ( s, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,35 (d, 1H), 7.35 (m,
10H), 9,25 (br, s, 1H), 9,4 (br, s, 1H).
(F) Eljárás
Boc-Arg (Z2)-CH2Br-t CF-jCH^H-val, CF3(CF2)2CH2OH-val vagy Ar-OH és KF-dal DMF-ben kezelünk a (D) eljárásban ismertetett módszereket alkalmazva (iv).
(G) Eljárás
A Boc-védett peptideket 4n HCl-dioxánnal 15 percig szobahőmérsékleten kezeljük és az oldatot bepároljuk. A maradékot CH2Cl2-ben 1,1 ekv. MeSO2Cl-lel és 2,5 ekv. iPr2Net-tel kezeljük. Egy óra múlva standard feldolgozást és flash kromatografálást végzünk, igy kapjuk a metil-szulfonil-peptideket, melyek védocsoportját eltávolítjuk úgy, amint azt az (a) védőcsoport eltávolítás! eljárással végezzük.
(H) Eljárás
A peptidek Boc védőcsoportjait a fentiek szerint eltávolítjuk és a HCl-t kimossuk etil-acetát/lm KHCO3 elválasztást alkalmazva. A szabad aminokat MeOH-ban lehűtjük 0°C-ra, utána
I, 5 ekv. Ch-CHO-aldehiddel és 1 ekv. NaCNBl^-mal kezeljük. 1 óra múlva hidegen bepároljuk és flash kromatográfiával megkapjuk az N-alkilezett peptidet. A védőcsoportokat az (a) védőcsoport eltávolítás! eljárással távolítjuk el.
(I) Eljárás
Boc-(3-transz-fenil)-D,L-prolint állítunk elő Chung et al.
J. Org. Chem. 1990, 55, 270 közleményében leírtak szerint, és H-Pro-OBzl-hez kapcsoljuk, amint azt a fentiekben Boc-(Me)DCha-Pro-OBzl esetére leírtuk. A dipeptidet ezután -ONSu észterré alakítjuk az alábbiak szerint.
Boc-(3-transz ciklohexil)-D,L-prolint a fenil-analógból állítunk elő úgy, hogy a fenil-analógot 5% Rh-C katalizátor
- 20 - ...........
jelenlétében 90% HOAc-H2O-ban 0,41 MPa nyomáson három napon át hidrogénezzük.
(K) Eljárás
Az N-(BzlO2C-CH2-), N-(CF3CO)-DCha-Pro-ONSu intermedier szintézisét a (K) eljárásvázlat szemlélteti, és azt a következőkben részletezzük.
(i) Z-DCha-Pro-OtBu-t (standard peptidkapcsolási reakcióval készült) hidrogénezünk THF-ben 5% Pd-C katalizátor jelenlétében, standard hőmérsékleten és nyomáson 24 óráig. Szűrés és bepárlás után kapjuk a H-DCha-Pro-OtBu-t (olaj. 100%).
(ii) Az előző termék 2 mmol-ját és 1 ekv. benzil-glioxilátot benzolban elegyítünk és háromszor bepárlunk (minden alkalommal friss benzolt adunk hozzá), hogy a vizet eltávolítsuk. A visszamaradó imint (2 mmol) 8 ml 1%-os ecetsav-metanolban 2 mmol NaCNBH^-mal kezeljük. 1 óra múlva bepároljuk, utána flash kromatografáljuk kovasavon (60% EtOAc-hexán), 385 mg (41%) BzlO2C-CH2-DCha-Pro-OtBu-t kapunk.
(iii) A fenti termék 380 mg-ját 8 ml száraz CH2Cl2-ben 2 ekv. Et2N-nel és 1,2 ekv. (CF3CO)20~val kezeljük. 40 perc múlva bepároljuk és flash kromatografáljuk (kovasav, 30% EtoAc-hexán) és 390 mg (86%) N-(BzlO2C-CH2-), N-(CF3CO)-DCha-Pro-OtBu-t, mint olajat kapunk.
1HNMR (COCI3)-komplex 4 rotaméter alkalmazása miatt - például a tBu-csoport δ 1,4-1,5-nál négyszer volt felhasadva a következő arányokban: 1:0,25:0,8:0,4. U 0,9 (m), 1,1 (m), 1,65 (m), 1,95 (m), 2,2 (m) [17H); 1,4-1,5 [4xs, 9H); 3,1 (m), 3,5 (m), 3,7 (m) [2H]; 4,3-4,6 [m, 3H]; 5,05-5,4 (m 3H); 7,35 [s, 5H].
:
(iv) Az előző termék 335 mg-ját CH^212-TFA (1:1,8 ml) eleggyel kezeljük 2,5 órán át szobahőmérsékleten. Az elegyet bepároljuk, majd ezt követően toluolból háromszor pároljuk be, így kapjuk a szabad savat, 100%.
(v) Az előző savat átalakítjuk -ONSu észterévé (100%) HONSu-t használva, amint azt előbb leírtuk a Boc-DCha-OH esetén.
Az intermediert valamely H-Arg(Z)2-CH2-Y-R^ általános képletű vegyülethez kapcsolhatjuk a már ismertetett általános módszerek szerint. Az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással N-CF3-CO- védőcsoportot tartalmazó peptidet kapunk. Az N-CF3-COcsoportot a (d) védőcsoport eltávolítási eljárással hasítjuk le.
Védőcsoport eltávolítási eljárások:
(a) A védett peptidet 2 ekvivalens mennyiségű, lm HCl-t tartalmazó 3:1 arányú MeOH/H2O elegyben 5% Pd/C katalizátor jelenlétében STP-n 40 percig hidrogénezzük. Az elegyet szűrjük (0,2 μπι); majd bepároljuk, majd vízből liofilizáljuk, így a peptideket pelyhes fehér szilárd alakban kapjuk meg. A terméket szükség esetén MPLC-vel tisztítjuk (lásd az általános eljárásokat).
(b) A védett peptidet először 1:1 arányú TFA/CH2C12 eleggyel kezeljük 1 órán át, majd bepároljuk, majd hidrogénezzük, mint fent, az (a) pont szerint.
(c) A COCOPh csoportot először hidrolizáljuk, mint az (E) (ii)-éljárásnál leírtuk, utána hidrogénezzük H2-Pd/C katalizátorral, az (a) pontban leírtak szerint.
(d) az N-CF3-CO (N-trifluor-acetil-csoport) eltávolítása:
Az N-trifluor-acetil-peptidet feloldjuk MeCN-H2O-0,880 ammóniában (1:1:1) és állni hagyjuk szobahőmérsékleten 24 óráig.
·* ·999 · · · ·» • ♦ · · · • · 9 ·· ·♦
Bepároljuk, utána ha szükséges tisztítjuk, megkapjuk a peptidet.
1-37. példa
A továbbiakban példákat mutatunk be a találmány részletesebb bemutatására.
A példákban bemutatott találmány szerinti vegyületekre vonatkozó adatokat az 1-3. táblázatokban foglaljuk össze. Az 1. táblázat a példaképpen bemutatott, találmány szerinti vegyületeket foglalja össze. A 2. táblázatban foglaljuk össze azok előállítási eljárását a leírásban felsorolt eljárásokkal összhangban. A 3. táblázatban foglaljuk össze a felsorolt vegyületek jellemző adatait.
··
··· ·· V* • ··
- - · ·« ♦··· « -• ·· ·· ····
1. táblázat
Példák a találmány szerinti vegyületekre (1-37. példa) szám Képlet
H-DCha-Pro-D, LArg-CH2OH
H-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Me
H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2~CF3
H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH(CF3)2
H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-C*H(Ph)~CF3
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3
Et-OOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF2-CF2-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph
H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph(4-0Me)
H00C-CH2~DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph(4-tBu)
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Ph(4-Me)
H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph(4-F)
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Ph(3-F)
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Ph(2-F)
H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph(3-CF3)
H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph(4-CF3)
H00C-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-Ph(2-CF3)
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-C6F5
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-Et
H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nPr <4
··· • * « · · »··· ·
1. táblázat (folytatás) szám Képlet
HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu
H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-iBu
HOOC-CH2-DCha-Aze-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pic-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu
Me-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-CH2-CF3
Me-S02-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-CH2-CF3
Ch-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3 (HOOC-CH2)2-DCHa-Pro-D,LArg-CH2-0-CH2-CF3 (HOOC-CH2)2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-iBu
H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-0-nBu
H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3
H-D,LPro(3-transz-Ph)-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2~CF3
H-D,LPro(3-transz-Ch)-Pro-D,LArg-CH2-O-CH2-CF3
HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-S-nBu
HOOC-CH2-DCha-Pro-D,LArg-CH2-SO2-nBu
konfiguráció R vagy S
2. táblázat
A példák szerinti vegyületek előállítására szolgáló eljárások
Példa száma Előállítási élj árás Védőcsoport eltávolítás! eljárás
1 D c
2 E b
3 A vagy C b
4 A vagy C b
5 A vagy C b
6 A a
7 A a
8 F a
9 A vagy D a
10 F a
11 D a
12 D a
13 D a
14 D a
15 D a
16 D a
17 D a
18 D a
19 D a
20 E a
2. táblázat (folytatás)
Példa Előállítási Védőcsoport száma eljárás eltávolítás! eljárás
21 E a
22 E a
23 E a
24 A a
25 A a
26 E a
27 A és F a
28 A és G a
29 A és H a
30 A a
31 E a
32 E és B b
33 A és B b
34 I és A b
35 I és A b
36 D a
37 D a
3. táblázat
A példák szerinti vegyületek jellemzői
Példa száma Moltömeg . . - * * retencio (min/rendszer) FAB MS (M + 1) AAA: peptid tartalom %* HPLC idő
1 438.57 439 56/Pro 10.3 /E
2 452.60 453 65/Pro 9.9 /E
3 520.6 521 59/Pro 8.6 /A
4 588.6 589 60/Pro 10.7 /A
5 596.7 597 61/Pro 12.2 /A
6 578.64 579 72/Pro 14.8 /C
7 606.69 607.7 65/Pro 22.0 /B
8 678.65 679.8 76/Pro 18.2 /G
9 572.71 573.3 73/Pro 19.9 /B
10 602.74 603.8 76/Pro 13.4 /G
11 628.82 629.5 77/Pro 22.0 /G
12 586.74 587.2 75/Pro 16.0 /G
13 590.70 591.4 76/Pro 15.2 /G
14 590.70 591.4 63/Pro 15.0 /G
15 590.70 591.4 54/Pro 14.0 /G
16 640.71 641.5 68/Pro 19.0 /G
17 640.71 641.6 70/Pro 20.0 /G
18 640.71 641.4 65/Pro 18.4 /G
19 662.66 663 49/Pro 21.0 /G
20 524.67 525.4 79/Pro 15.5 /B
I
3. táblázat (folytatás)
Példa Moltömeg száma retenció** FAB MS (M + 1) AAA: peptid HPLC idő
tartalom %*
(min/rendszer)
21 538.69 539 67/Pro 9.2 /F
22 552.72 553 69/Pro 19.3 /B
23 552.72 553.4 56/Pro 9.2 /F
24 564.61 565 67/Azé 13.6 /D
25 592.66 593 90/Pic 8.4 /D
26 566.75 567.4 86/Pic 17.0 /G
27 534.63 535.6 70/Pro 18.8 /B
28 598.69 599 71/Pro 11.2 /D
29 616.77 617 64/Pro 14.5 /C
30 636.67 637.6 70/Pro 12.0 /A
31 610.76 611.2 67/Pro 10.0 /F
32 566.75 567.5 65/Pro 19.7 /B
33 592.66 593 46/Pro 10.6 /F
34 540.59 541 56/Pro 14.3 /C
35 546.64 547 49/Pro 15.9 /C
36 568.78 569.4 45/Pro 17.4 /G
37 600.78 601.3 62/Pro 14.6 /G
★ A jelzett aminosav alapján
★ ★ Lásd az általános kísérleti eljárásokat. Az időket L-Arg
epimerekre adjuk meg. A D-epimerek (kisebbek) rendszerint kb. 0,5 perccel korábban futnak le.
A rendszer: 20%-ról 80%-ra növelve 1% TFA-MeCN 1% TFA-H2O-ba perc alatt (20-80%, 25 min)
rendszer: 10-60%, 30 perc
rendszer: 10-90%, 30 perc
rendszer: 30-100%, 30 perc
rendszer: 10-90%, 20 perc
rendszer: 20-100%, 20 perc
rendszer: 20-70%, 30 perc
38. példa
Oldat folyamatos intravénás adagolásra
Az oldatot a következő alkotórészekből készítjük:
Trombin inhibitor 50 mg
Nátrium-klorid injekcióra 4,5 g
Víz injekcióra 500 ml-re
A hatóanyagot és a nátrium-kloridot feloldjuk a vízben, majd az oldatot szűrjük és autoklávban sterilizáljuk vagy 01,2 μπι-es steril szűrőn át szűrjük és aszeptikusán töltjük steril infúziós palackokba.
39. példa
Injekciós oldat
Az oldat a következő alkotórészekből készül:
Trombin inhibitor 5 g
Nátrium-klorid 9 g
Víz injekciós célra 1000 ml-re
A hatóanyagot és a nátrium-kloridot feloldjuk a vízben, majd az oldatot szűrjük és autoklávban sterilizáljuk, vagy 0,2 pm-es
steril szűrőn át szűrjük, aszeptikusán töltjük 5 ml-es steril ampullákba.
40. példa
Oldat nazális adagolásra
Az oldatot a következő alkotórészekből készítjük:
Trombin inhibitor 10g
Glicerin 200g
Metil-p-hidroxi-benzoát 1g
Propil-p-hidroxi-benzoát0,2 g
Víz injekciós céljra 1000 ml-re
A hatóanyagot és a tartósítószereket glicerinben és a víz nagyobb részében oldjuk. A térfogatot ezután beállítjuk 1000 mire és az oldatot sterilpolietilén üvegekbe töltjük.
41. példa
Tabletták orális adagolásra
1000 tablettát készítünk a következő alkotórészekből:
Trombin inhibitor 100g
Laktóz 200g
Poli(vinil-pirrolidon) 30g
Mikrokristályos cellulóz 30g
Magnézium-sztearát 6g
A hatóanyagot és a laktózt poli(vinil-pirrolidon) vizes oldatával elegyítjük. Az elegyet szárítjuk és őröljük, hogy granulátumot képezzünk. A mikrokristályos cellulózt és utána a magnézium-sztearátot hozzákeverjük. Az elegyet azután tablettázó gépben 1000 tablettává préseljük, mindegyik 100 mg hatóanyagot tartartalmaz.
42. példa
Zselatin kapszulák orális adagolásra
Zselatin kapszulákat töltünk meg a következő alkotórészek elegyével:
Trombin inhibitor 5 0 mg
Magnézium-sztearát 3 mg
Laktóz 100 mg
A biológiai hatás vizsgálata
A trombin alvadási idejének és IC50TT értékének meghatározása:
Humán trombint (T, 6769. Sigma Chem. Co.) puffer oldatban (pH = 7,4, 100 μΐ) és inhibitor oldatot (100 μΐ) egy percig inkubálunk. 100 μΐ összegyűjtött, normál, citráttal kezelt plazmát adunk hozzá és az alvadási időt egy automata készülékben (KC 10, Amelung) mérjük.
A másodpercekben mért alvadási időt az inhibitor koncentráció függvényében ábrázoljuk, és az IC50TT értéket interpolációval határozzuk meg.
IC5qTT az az inhibitor koncentráció, amely kétszeresére növeli a humán plazma alvadási idejét. A pID50TT a mol/l-ben kifejezett IC50TT tizes alapú negatív logaritmusa (-lóg 10) .
Az 1-37. példák szerinti vegyületekkel meghatározott pICggTT értékeket a 4. táblázatban foglaljuk össze.
• ·· ·· ··· ·
4. tablazat
A találmány szerinti vegyületek alvadásgátló hatása száma pIC50TT
7.71
7.81
7.92
7.38
7.77
8.04
7.70
7.64
8.45
7.90
7.86
8.25
8.22
8.15
8.12
7.77
8.68
7.30
8.27
8.17
8.14
8.69
7.64 • · « ···· · • · • ♦» • «· • ··
4. táblázat (folytatás)
Példa száma pic50TT
24 8.01
25 8.00
26 7.89
27 7.52
28 6.85
29 6.47
30 7.38
31 6.88
32 7.63
33 7.78
34 7.03
35 7.25
36 7.57
37 7.72
A leírásban alkalmazott rövidítések jelentése a következők:
4-DMAP = 4-dimetil-amino-piridin
AAA = aminosav analízis
Arg = L-arginin
Arg(Z2) = UN, N-dibenzil-oxi-karbonil-L-arginin
Azé - L-azétidin-2-karbonsav
Boc = tercier-butoxi-karbonil
Bu = butil
Bzl = benzil
Ch = ciklohexil
Cha = L-E-ciklohexil-alanin
DMF = dimetil-formamid
Et = etil
EtOAc = etil-acetát
FAB = fást atom bombardment
FI-FXIII = I-XIII számú koagulációs faktorok
FIIa-FXIIIa = a II-XIII számú koagulációs faktorok aktivált
formái
Gly = glicin
HMW-K = nagy molekulatömegű kininogén
HOAc = ecetsav
HONSU = N-hidroxi-szukcinimid
HPLC = nagyteljesítményű folyadékkromatográfia
iBC = izobutil-klór-formiét
Kall = kallikrein
Me = metil
MPLC = közepes teljesítményű folyadékkromatográfia
NMM = N-metil-morfolin
Nph = naftil
Ph = fenil
Pic = L-pipekolinsav
PL = foszfolipidek
Pr = propil
Prekall prekallikrein
Pro = L-prolin
STP = standard hőmérséklet és nyomás
Tce = 2,2,2-triklór-etil
TFA = trilfuor-ecetsav
THF = tetrahidrofurán
Val = L-valin
WSCDI = vízben oldódó karbodiimid
Z = benzil-oxi-karbonil
Az n, i és t prefixumok, jelentése a szokásos: normál izo és tercier.
Szekvencia felsorolás
A szekvenciák száma: 1 (1) SEQ ID NO: 1 (i) Szekvencia jellemzők:
(A) hossz: 20 aminosav (B) típus: aminosav (C) topológia: lineáris (ii) Molekula típus: peptid (iii) Feltételezett: nem (vi) Eredeti forrás:
(A) szervezet: homo sapiens (ix) Jellemző:
(A) név/kulcs: peptid (B) hely: 1..20 (D) más információ: (megyjegyzés = a humán fibrinogén A-alfa láncban trombin hasítóhelyet tartalmazó peptid szekvencia) (ix) Jellemző:
(A) név/kulcs: hasító hely (B) hely: 16..17 (xi) Szekvencia leírás: SEQ ID NO: 1:
Alá Asp Ser Gly Glu Gly Asp Phe Leu Alá Glu Gly Gly Gly
10
Val Arg Gly Pro Arg Val

Claims (12)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Az (1) általános képletű vegyületek, ahol
    A jelentése -CH2~ csoport, -CH=CH- csoport, -CH2-CH2- csoport vagy -CH2-CH2-CH2- csoport;
    R1 és R2 jelentése azonos vagy különböző és mindkettő jelentése lehet hidrogénatom vagy X-B- általános képletű csoport, melyben B jelentése 1-3 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkiléncsoport, és X jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, etilcsoport, 3-6 szénatomos cikloalkilcsoport vagy R'CO- általános képletű csoport, ahol R' jelentése OH csoport, 1-4 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkoxicsoport, NH2 csoport vagy NHR általános képletű csoport, melyben R jelentése 1-4 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport, vagy X jelentése karbonsavat utánzó, önmagában ismert csoport, amely lehet -PO(OR',,)2 csoport, -SO3H csoport és 5-(1H)-tetrazolil-csoport, és R''' jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy etilcsoport, vagy B jelentése -S02~ csoport és X jelentése metilcsoport vagy etilcsoport;
    m értéke 0, 1 vagy 2, R2 jelentése ciklohexilcsoport és
    R2A jelentése hidrogénatom; vagy m értéke 1 és R2 jelentése ciklohexilcsoport vagy fenil-csoport és R2a az R1 szubsztituenssel együtt etilénhidat képez;
    Y jelentése oxigénatom vagy S(O)p általános képletű csoport, ahol p értéke 0, 1 vagy 2;
    • · jelentése hidrogénatom; 1-6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport vagy cikloalkilcsoport, amely szubsztituálatlan vagy szubsztituálva van egy vagy több fluoratommal és/vagy szubsztituálva van egy fenilcsoporttal; szubsztituált vagy szubsztituálatlan aromás gyűrű, amely lehet fenilcsoport, 4-metoxi-fenil-csoport, 4-terc-butil-fenil-csoport, 4-metil-fenil-csoport, 2- vagy 3- vagy 4-(trifluor-metil)-fenil-csoport, 1-5 fluoratommal szubsztituált fenilcsoport; vagy -CH(CF3)-fenil-csoport akár önmagukban akár fiziológiailag elfogadható sóik formájában, beleértve a sztereoizomereket is.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti olyan (1) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, beleértve a sztereoizomereket is, melyekben
    A jelentése -CH2-CH2- csoport vagy -CH2~CH2-CH2- csoport;
    R1 jelentése hidrogénatom és R2 jelentése HOCO(CH2)n- képletű csoport vagy CH3CH2OCO(CH2)n~ képletű csoport és n értéke 1 vagy 2;
    Y jelentése oxigénatom;
    m értéke 1, R3 jelentése ciklohexilcsoport és R3A jelentése hidrogénatom.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti (1) általános képletű vegyületek közül
    H-DCha-Pro-Arg-CH2-OH,
    H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Me,
    H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3,
    H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH(CF3)2,
    H-DCha-Pro-Arg-CH2-0-(R vagy S)CH(Ph)-CF3, * ’ 4
    HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3,
    Et-00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3,
    HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF2-CF2-CF3,
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph,
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-OMe),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-tBu),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-Me),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-F),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(3-F),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(2-F),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(3-CF3),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(4-CF3),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Ph(2-CF3),
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-C6F5,
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-Et,
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nPr,
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu,
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-iBu,
    HOOC-CH2-DCha-Aze-Arg-CH2-O-CH2-CF3,
    HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-CH2-CF3,
    HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu,
    Me-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3,
    Me-S02-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3,
    Ch-CH2~DCha-Pro-Arg-CH2-ö-CH2-CF3, (HOOC-CH2)2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2~CF3, (HOOC-CH2)2DCha-Pro-Arg-CH2-0-iBu,
    H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu,
    H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3,
    H-D,LPro(3-transz-Ph)-Pro-D,L-Arg-CH2-O-CH2-CF3,
    H-DPro(3-transz-Ch)-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3, HOOC-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-S-nBu és
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-S02-nBu, akár önmagukban akár fiziológiailag elfogadható só formájában, beleértve a sztereoizomereket is.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti (1) általános képletű vegyületek közül
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3
    HOOC-CH2-DCha-PÍC-Arg-CH2-O-CH2-CF3
    HOOC-CH2-DCha-Pic-Arg-CH2-O-nBu H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu H00C-CH2-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-CH2-CF3
    H00C-CH2-DCha-Pro-Arg-CH2-0-nBu akár önmagában akár fiziológiailag elfogadható só formájában, beleértve a sztereoizomereket is.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyület alkalmazása a terápiában.
  6. 6. Eljárás az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, valamint ezek sztereoizomerjeinek előállítására, ahol R·1·, R6, R , R3a, R4, Y, A és m jelentése az 1-4. igénypontok bármelyikében megadott, azzal jellemezve, hogy (I. módszer) valamely (2) általános képletű halogén-metil-keton - ahol a képletben W4 jelentése aminoterminális védőcsoport és jelentése védőcsoport - halogénatomját egy R^ csoporttal helyettesítjük, ahol Y jelentése oxigénatom vagy kénatom, *· ·· :: s ·.
    • ··* **·* ···>
    R4 jelentése az (1) általános képletnél megadott, hollá redukáljuk, majd eltávolítjuk az aminoterminális védőcsoportot és standard peptidkapcsolást végzünk, ezt követően az alkoholt oxidáljuk, és így a védett tripeptid-ketont állítjuk elő, eltávolítjuk az aminoterminális védőcsoportot, majd N-alkilezést végzünk, majd eltávolítjuk a védocsoportokat, vagy a fenti kapcsolási reakcióban egy védett dipeptidet helyettesítünk egy aminoterminális -N-alkilezett-(trifluor-acil)-védett dipeptiddel, majd a terméket oxidáljuk és a védőcsoportokat eltávolítj uk, vagy (II. módszer) valamely R4-halogeniddel, melyben R4 jelentése az (1) általános képletnél megadott, alkilezünk valamely (3) általános képletű α-ketolt, melybe W1 és W2 jelentése a fenti, majd a reakciót az I. módszer szerint végezzük tovább, vagy (III. módszer) valamely (4) általános képletű vegyületet, ahol W1 és W2 jelentése a fentiekben megadott, reagáltatunk egy (T-CH2CO)20 általános képletű vegyülettel, melyben T jelentése halogénatom, R40 vagy R4S és 4-DAMP, ahol R4 jelentése a fenti, majd a reakciót a továbbiakban az I. módszer szerint végezzük, és kívánt esetben a kapott vegyületet fiziológiailag elfogadható sóvá alakítjuk, és ha a reakció sztereoizomerek elegyét eredményezi, ezeket adott esetben standard kromatográfiás vagy átkristályosítási eljárásokkal elválasztjuk, és kívánt esetben egy sztereoizomert elkülönítünk.
  7. 7. Gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletű vegyület hatékony mennyiségét egy vagy több gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagokkal együtt tartalmazza.
  8. 8. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletű vegyület felhasználása hatóanyagként az emberi vagy állati szervezetben a trombin gátlására alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására.
  9. 9. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletű vegyület felhasználása antikoagulánsként.
  10. 10. Eljárás trombin gátlására emberi és állati szervezetben ilyen gátlás szükségessége esetén, azzal jellemezve, hogy a szervezetbe az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletű vegyület inhibitorként hatékony mennyiségét adagoljuk.
  11. 11. Eljárás az emberi vagy állati szervezetben a vérben és a szövetekben fellépő trombózis és hiperkoagulabilitás kezelésére vagy megelőzésére, azzal jellemezve, hogy a szervezetbe ilyen kezelés vagy megelőzés szükségessége esetén az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletű vegyület hatékony mennyiségét adagoljuk.
  12. 12. Az 1-11. igénypontok bármelyike szerinti (1) általános képletű vegyület, eljárás, gyógyszerkészítmény, felhasználás és módszer, melynek jellemzői lényegében a leírásnak megfelelőek.
HU9400589A 1991-08-28 1992-08-25 Process for producing peptide derivatives of thrombin-inhibiting activity HUT66060A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9102462A SE9102462D0 (sv) 1991-08-28 1991-08-28 New isosteric peptides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9400589D0 HU9400589D0 (en) 1994-05-30
HUT66060A true HUT66060A (en) 1994-09-28

Family

ID=20383557

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9400589A HUT66060A (en) 1991-08-28 1992-08-25 Process for producing peptide derivatives of thrombin-inhibiting activity

Country Status (27)

Country Link
US (1) US5424291A (hu)
EP (2) EP0530167A1 (hu)
JP (1) JP3353297B2 (hu)
CN (1) CN1069736A (hu)
AP (1) AP313A (hu)
AT (1) ATE212643T1 (hu)
AU (1) AU2499092A (hu)
BG (1) BG98583A (hu)
CA (1) CA2116527A1 (hu)
CZ (1) CZ38094A3 (hu)
DE (1) DE69232394T2 (hu)
DZ (1) DZ1613A1 (hu)
FI (1) FI940945A0 (hu)
HU (1) HUT66060A (hu)
IL (1) IL102840A0 (hu)
IS (1) IS3906A (hu)
MA (1) MA22632A1 (hu)
MX (1) MX9204767A (hu)
NO (1) NO940669L (hu)
NZ (1) NZ243675A (hu)
SE (1) SE9102462D0 (hu)
SI (1) SI9200193A (hu)
SK (1) SK23394A3 (hu)
TN (1) TNSN92076A1 (hu)
TW (1) TW221816B (hu)
WO (1) WO1993005069A1 (hu)
ZA (1) ZA925737B (hu)

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ333492A3 (en) * 1991-11-12 1993-09-15 Lilly Co Eli Dipeptide of l-azetidine-2-carboxylic acids and l-argininaldehyde, process of its preparation and pharmaceutical preparation in which said dipeptide is comprised
SE9103612D0 (sv) * 1991-12-04 1991-12-04 Astra Ab New peptide derivatives
JPH06329627A (ja) * 1993-05-03 1994-11-29 Bristol Myers Squibb Co グアニジニル−またはアミジニル−置換ヘテロ環トロンビンインヒビター
US6984627B1 (en) 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US5780631A (en) * 1993-06-03 1998-07-14 Astra Aktiebolag Starting materials in the synthesis of thrombin and kininogenase inhibitors
CA2143533A1 (en) * 1994-03-04 1995-09-05 Kenneth D. Kurz Antithrombotic agents
US5439888A (en) * 1994-03-04 1995-08-08 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5436229A (en) * 1994-03-04 1995-07-25 Eli Lilly And Company Bisulfite adducts of arginine aldehydes
ZA951618B (en) * 1994-03-04 1996-08-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
ZA951617B (en) * 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5488037A (en) * 1994-03-04 1996-01-30 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5602101A (en) * 1994-03-04 1997-02-11 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5484772A (en) * 1994-03-04 1996-01-16 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
MX9706069A (es) * 1995-02-17 1997-10-31 Basf Ag Nuevos inhibidores de la trombina.
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
SA96170106A (ar) 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
AR005245A1 (es) * 1995-12-21 1999-04-28 Astrazeneca Ab Prodrogas de inhibidores de trombina, una formulación farmaceutica que las comprende, el uso de dichas prodrogas para la manufactura de un medicamento y un procedimiento para su preparacion
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
US5840733A (en) * 1996-07-01 1998-11-24 Redcell, Canada, Inc. Methods and compositions for producing novel conjugates of thrombin inhibitors and endogenous carriers resulting in anti-thrombins with extended lifetimes
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
AR013084A1 (es) 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
JP2002501081A (ja) 1998-01-26 2002-01-15 ビーエーエスエフ アクチェンゲゼルシャフト トロンビンインヒビター
IL139162A0 (en) 1998-04-24 2001-11-25 Dimensional Pharm Inc Amidinohydrazone, alkoxyguanidine and aminoguanidine derivatives, processes for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing the same
SE9802973D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
TR200102037T2 (tr) 1999-01-13 2001-10-22 Astrazeneca Ab Yeni amidinobenzilamin türevleri ve trombin engelleyiciler olarak kullanılmaları.
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
AU1226001A (en) * 1999-11-09 2001-06-06 Alcon Universal Limited Phospholipids of hydroxyeicosatetraenoic acid-like derivatives
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
US7781424B2 (en) 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
US7795205B2 (en) 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
ES2819218T3 (es) 2014-10-06 2021-04-15 Cortexyme Inc Inhibidores de lisina gingipaína
EP3374352A4 (en) 2015-11-09 2019-10-02 Cortexyme, Inc. GINGIPAINE ARGININE INHIBITORS
EP3426674A4 (en) 2016-03-09 2019-08-14 Blade Therapeutics, Inc. CYCLIC KETO AMID COMPOUNDS AS CALPAIN MODULATORS AND METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF
AU2017292646A1 (en) 2016-07-05 2019-02-07 Blade Therapeutics, Inc. Calpain modulators and therapeutic uses thereof
WO2018053353A1 (en) 2016-09-16 2018-03-22 Cortexyme, Inc. Ketone inhibitors of lysine gingipain
SG10201912574WA (en) 2016-09-28 2020-02-27 Blade Therapeutics Inc Calpain modulators and therapeutic uses thereof
RU2020130022A (ru) * 2018-03-28 2022-05-04 Блэйд Терапьютикс, Инк. Модуляторы кальпаина и их терапевтическое применение

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4318904A (en) * 1980-04-25 1982-03-09 Research Corporation Peptide affinity labels for thrombin and other trypsin-like proteases
GB8305985D0 (en) * 1983-03-04 1983-04-07 Szelke M Enzyme inhibition
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
IL99527A (en) * 1990-09-28 1997-08-14 Lilly Co Eli Tripeptide antithrombotic agents

Also Published As

Publication number Publication date
NO940669L (no) 1994-04-19
AU2499092A (en) 1993-04-05
DZ1613A1 (fr) 2002-02-17
MA22632A1 (fr) 1993-04-01
TW221816B (hu) 1994-03-21
ZA925737B (en) 1993-03-01
AP313A (en) 1994-02-10
EP0605462B1 (en) 2002-01-30
FI940945A (fi) 1994-02-28
MX9204767A (es) 1993-05-01
JP3353297B2 (ja) 2002-12-03
WO1993005069A1 (en) 1993-03-18
IS3906A (is) 1993-03-01
AP9200418A0 (en) 1992-10-31
CA2116527A1 (en) 1993-03-18
FI940945A0 (fi) 1994-02-28
DE69232394T2 (de) 2002-08-22
ATE212643T1 (de) 2002-02-15
NO940669D0 (no) 1994-02-25
BG98583A (bg) 1994-09-30
US5424291A (en) 1995-06-13
DE69232394D1 (de) 2002-03-14
CZ38094A3 (en) 1994-08-17
JPH06510059A (ja) 1994-11-10
SI9200193A (en) 1993-06-30
NZ243675A (en) 1994-06-27
EP0530167A1 (en) 1993-03-03
IL102840A0 (en) 1993-01-31
EP0605462A1 (en) 1994-07-13
SK23394A3 (en) 1994-08-10
SE9102462D0 (sv) 1991-08-28
TNSN92076A1 (fr) 1993-06-08
HU9400589D0 (en) 1994-05-30
CN1069736A (zh) 1993-03-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUT66060A (en) Process for producing peptide derivatives of thrombin-inhibiting activity
EP0833839B1 (en) Peptidyl heterocycles useful in the treatment of thrombin related disorders
US6162828A (en) Cysteine protease inhibitor
US5736521A (en) Method of treatment and prophylaxis of arterial thrombosis
RU2142469C1 (ru) Пептидные производные, их стереоизомеры или физиологически приемлемые соли, обладающие противотромбозной, противосвертывающей или противовоспалительной активностью, способ их получения, фармацевтическая композиция, способ подавления тромбина, способ подавления кининогеназ, применение соединений в качестве исходных в синтезе ингибитора тромбина
JP2003535022A6 (ja) セリンプロテアーゼ阻害剤としてのアルファー‐ケトオキサジアゾール含有ペプトイド及び非ペプトイド
JP2001504810A (ja) 選択的第Ｘａ因子阻害剤
JPS5890536A (ja) レニン抑制ペプチド類
JP2000505437A (ja) セリンプロテアーゼ阻害剤
JPH04211095A (ja) 新規ジペプチド、その製造方法及び薬剤におけるレニン阻害剤としてのその使用
CA2005337A1 (en) Use of peptide isosteres as retroviral protease inhibitors
US5827860A (en) Peptidyl heterocycles useful in the treatment of thrombin related disorders
CZ277998A3 (cs) Inhibitory serinproteázy a farmaceutický prostředek
WO1996040741A1 (en) Peptidyl heterocycles useful in the treatment of thrombin related disorders
JP2001525823A (ja) 抗血栓化合物
JPH02295998A (ja) 酵素阻害作用を有するジペプチド誘導体
JPH05222005A (ja) ３（ｓ）−アミノ−４−シクロヘキシル−２（ｒ）−ヒドロキシ酪酸若しくは４−シクロヘキシル−（２ｒ，３ｓ）−ジヒドロキシ酪酸又は関連類似体を含む環状レニン阻害剤
HU221197B1 (en) Elastase inhibitor tripeptides and pharmaceutical compositions comprising thereof
JPH0741497A (ja) レトロ等立体性ジペプチド、その製造方法及び薬剤におけるレニン阻害剤としてのその使用
HU196609B (en) Process for producing new peptides and pharmaceutics comprising them
JPH02202899A (ja) 酵素阻害作用を有するジペプチド誘導体
JPH0757759B2 (ja) フッ素含有レニン阻害剤
JPH0285245A (ja) 新規化合物
FR2564844A1 (fr) Nouveaux peptides derives de la statine, procede d&#39;obtention et compositions pharmaceutiques les contenant
JPH09295996A (ja) システインプロテアーゼ阻害化合物

Legal Events

Date Code Title Description
DFC4 Cancellation of temporary protection due to refusal