JP2001525823A

JP2001525823A - 抗血栓化合物

Info

Publication number: JP2001525823A
Application number: JP54930698A
Authority: JP
Inventors: ジャクソン，チャールズ・バン; カーズ，ケネス・ディーン; シューマン，ロバート・セオドア
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1997-05-15
Filing date: 1998-05-07
Publication date: 2001-12-11
Also published as: EP0884326A2; US6214841B1; ZA984088B; AU7292398A; CA2289625A1; TW404948B; WO1998051684A1; EP0884326A3

Abstract

(57)【要約】本出願は、本明細書中に定義する式（Ｉ）の新規化合物(またはその医薬的に許容され得る塩)、その製造のための方法および中間体、式（Ｉ）の新規化合物を含んでなる医薬品製剤、並びに抗血栓剤としての式（Ｉ）の化合物の使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】抗血栓化合物本発明は、驚くほど強力な抗血栓効力を有するヘテロ環式ケトン化合物に関する。従って、本発明は、新たな抗血栓化合物、その化合物を活性成分として含む医薬組成物、並びに静脈血栓症、肺塞栓症、動脈血栓症、特に心筋虚血、心筋梗塞、もしくは脳血栓症といったような血栓塞栓障害、血管形成術および冠動脈バイパス手術の後に起こるような全身凝固亢進状態および局所凝固亢進状態、または炎症過程に関係のある全身性組織傷害の予防または治療のためのその化合物の使用に関する。加えて、その新たな化合物は、インビトロおよびエクスビボでの適用において抗凝固剤として有用である。あるペプチジルヘテロ環は、トロンビンに関係のある障害の処置において有用なトロンビンの阻害剤として米国特許第５,５２３,３０８号に開示されている。驚くべきことに、本発明の化合物は、トロンビンおよびＸa因子の両方の阻害における高い効能、さらにはまた、非常に強力な抗血栓効力を示す。本発明により、式Ｉ：Ｙ−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−Arg−ＲＩ［式中、 Argは、Ｌ−アルギニルであり；Ｒは、２−ベンゾチアゾリルであり；Ｘ−ＣＯ−は、Ｌ−プロリルまたは(Ｓ)−アゼチジン−２−カルボニルであり；およびＹ−ＣＯ−は、式IIa、IIb、IIc、またはIId：の基である。］の化合物、またはその医薬的に許容され得る塩を提供する。式Ｉの特定の化合物は、Ｘ−ＣＯ−がＬ−プロリル(Pro)である化合物である。式Ｉのより特定の化合物は、Ｘ−ＣＯ−がProであって、Ｙ−ＣＯ−が式IIaまたはIIbの基である化合物である。式Ｉの好ましい化合物の１つは、Ｘ−ＣＯ−がProであって、Ｙ−ＣＯ−が式I Iaの基である化合物であり、この化合物は、式Ｉa：の化合物として表示することができる。好ましい種を以下に実施例１として記載し、同実施例中では、それを硫酸との酸付加塩として単離している。式Ｉの別の特定の化合物は、Ｘ−ＣＯ−がProであって、Ｙ−ＣＯ−が式IIbの基である化合物であり、この化合物は、式Ｉbの化合物として表示することができる。式Ｉの化合物に加えて、本発明は、医薬的に許容され得る担体、希釈剤、または賦形剤と共に、式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容され得る塩を含んでなる医薬組成物を提供する。本発明はまた、哺乳動物において血栓症を抑制する方法であって、処置を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物の抗血栓用量を投与することを含んでなる方法も提供する。以下にさらに論ずる通り、本発明の化合物は、凝固カスケードの酵素であるトロンビンおよびＸa因子の一方または両方の強力で直接的な阻害剤である。従って、本発明はさらに、トロンビンを阻害する方法であって、処置を必要とする噛乳動物に、式Ｉの化合物のトロンビン阻害用量を投与することを含んでなる方法、さらにはまた、インビトロまたはエクスビボでの適用においてトロンビンを阻害する方法を提供する。同様に、本発明はさらに、Ｘa因子を阻害する方法であって、そのことを必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物のＸa因子阻害用量を投与することを含んでなる方法、さらにはまた、インビトロまたはエクスビボでの適用においてＸa因子を阻害する方法を提供する。Ｙ基において星印で示したキラル中心は、Ｄ−アミノ酸のキラル中心に対応する(Ｒ)−立体化学のものであるのが好ましい。しかし、本発明は、ジアステレオマーの混合物としての式Ｉの化合物、さらにはまた、個々のジアステレオマーの形での式Ｉの化合物を包含すること、そして本発明は、エナンチオマーの混合物としての式Ｉの化合物、さらにはまた、個々のエナンチオマーの形での式Ｉの化合物を包含することが理解されるべきであり、これらの混合物または形はいずれも、抗血栓性を有し、どのようにして特定の形を製造または単離するか、そして以下に記載する試験が含まれる標準的な試験により、どのようにして抗血栓性を決定するかは当業界でよく知られている。ベンゾオキサゾリルのケト基に隣接するArg部分のα−プロトンの容易なエピマー化のために、式Ｉの化合物をその中心でのエピマーの混合物として使用するのが好ましくあり得る。加えて、式Ｉの化合物(またはその医薬的に許容され得る塩)は、水または有機溶媒と溶媒和物を形成し得る。さらに、その化合物、その塩または溶媒和物は、多形性を示し得る。本発明はまた、そのような溶媒和物、多形型、またはその混合物をいずれも包含する。式Ｉの化合物は、構造的に類似している化合物の製造に関して化学業界で知られている方法が含まれる方法により、または本明細書中に記載する新規方法により製造することができる。上に定義した式Ｉの化合物の製造のための新規方法および中間体は、本発明のさらなる特徴を与え、そして次の方法により説明され、ここで、一般的な基の意味は、特に指定しない限り、上に定義する通りである。従来の保護基を使用して官能基が保護されている式Ｉの化合物を製造した後、その保護基を除去して、式Ｉの化合物を与えるのが好ましくあり得、または必要であり得ることが認められるであろう。従って、上のいずれかの記述において提供する式Ｉの化合物(またはその医薬的に許容され得る塩)を製造する方法を提供し、これには、式III：Ｙ−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−Arg(ＯＨ)−Ｒ III ［式中、Arg(ＯＨ)は、Ｌ−アルギニル基のカルボニル部分がヒドロキシメチレン基で置換されていることを示す。］の対応する化合物のアルコールの酸化；が含まれ、その後、上のいずれの方法に関しても、保護基を使用して官能基が保護されている場合、その保護基を除去し；そしてその後、上のいずれの方法に関しても、式Ｉの化合物の医薬的に許容され得る塩が必要とされる場合、式Ｉの化合物の塩基性の形態を、生理学的に許容され得る対イオンを与える酸と反応させることにより、または例えば、塩の対イオンを交換するといったような、いずれかの他の従来の方法により、それを得る。便利には、その酸化は、例えば、以下の実施例１に記載する通り、塩化オキサリル、ジメチルスルホキシド、および第三級アミンを使用して、不活性溶媒中で行う。一般的には、その酸化の間、Ｙ−ＣＯ−およびArg側鎖のアミノ基を保護するのが好ましい。１つまたはそれ以上の官能基が保護されている式Ｉの化合物に対応する化合物は、本発明の別の態様を提供する。そのような化合物は、１つまたはそれ以上の保護基Ｐ^AおよびＰ^Yを有する式Ip： (Ｐ^Y)Ｙ−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−Arg(Ｐ^A)−Ｒ Ip ［式中、Ｐ^Aは、Arg側鎖のグアニジノ部分に対する任意の保護基であり；およびＰ^Yは、ペルヒドロイソキノリン部分のアミノ窒素に対する任意の保護基である。］の化合物として表すことができる。Ｐ^Aに関する典型的な意義はトシルであり、そしてＰ^Yに関してはベンジルオキシカルボニルである。便利には、式IIIのアルコールは、従来の結合法、例えば、実施例１に記載する混合無水物法を使用して、式IV：Ｙ−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−ＯＨ IV の保護されている形の酸を、式Ｖ：Ｈ−Arg(ＯＨ)−ＲＶの保護されている形のアルコールと結合させることにより、保護されている形で製造する。式IVの(場合により保護されていることのある)酸は、従来の方法により製造することができる。例えば、Ｙ−ＣＯ−が式IIaのものであって、Ｘ−ＣＯ−がプロリルである場合、式IVの保護されている酸は、以下の実施例１に記載するように、または欧州特許第６７０３１０号の実施例８５で記載されているように製造することができる。同様に、Ｙ−ＣＯ−が式IIdまたはIIbのものであって、Ｘ− ＣＯ−がプロリルである場合、式IVの保護されている酸は、欧州特許第６７０３１０号または米国特許第５,４３６,２２９号の実施例８０または８２で開示されている。グアニジノ基がＮ−トシル保護基を有する式Ｖのアミノアルコールの製造を以下の実施例１に記載する。上に述べた通り、本発明には、式Ｉの化合物の医薬的に許容され得る塩が含まれ、これは、十分に塩基性の官能基を有しており、無毒のアニオンを与える多くの無機および有機酸のいずれかと反応して、医薬的に許容され得る塩を形成する。酸付加塩を形成するために一般に使用される酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸等といったような無機酸、およびp−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、p−ブロモベンゼンスルホン酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸等といったような有機酸である。従って、そのような医薬的に許容され得る塩の例は、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１,４−二酸塩、ヘキシン−１, ６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、マンデル酸塩等である。好ましい医薬的に許容され得る酸付加塩には、塩酸、臭化水素酸、および硫酸といったような鉱酸で形成される塩が含まれる。式Ｉの化合物は、酸付加塩の形態で最も良く単離される。上に述べた酸の１つのような酸で形成された式Ｉの化合物の塩は、抗血栓化合物の投与のための、およびその化合物の製剤の製造のための医薬的に許容され得る塩として有用である。他の酸付加塩を製造して、その化合物の単離および精製に使用することができる。式Ｉの化合物は、身体の本来の血餅を溶解する能力に対して認め得るほどの干渉をすることなく(その化合物は、フィブリン溶解に対して低い阻害作用を有する)、血液凝固に関与する他のプロテイナーゼおよび非酵素タンパク質以上に選択的にトロンビンおよびＸa因子を阻害すると信じられる。さらに、そのような選択性は、血栓崩壊およびフィブリン溶解に対して実質的な干渉をすることなく、血栓崩壊剤との使用を可能にすると信じられる。その別の態様において、本発明は、血栓塞栓障害を処置する方法であって、処置を必要とする啼乳動物に、式Ｉの化合物の有効用量(血栓塞栓障害の治療的な量および／または予防的な量)を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明は、その別の態様において、哺乳動物において凝固を阻止する方法であって、処置を必要とする呻乳動物に、式Ｉの化合物の有効用量(凝固阻止用量)を投与することを含んでなる方法を提供する。本発明の方法により意図される凝固阻止および血栓塞栓障害の処置には、医学療法的な処置および／または予防的な処置の両方が適宜含まれる。さらなる態様において、本発明は、ヒトまたは動物における、トロンビンまたはＸa因子の阻害が必要とされる状態の処置に関する。本発明の化合物は、人間を含め、哺乳動物における、血栓症、並びに血液および組織での凝固能亢進の処置または予防において有用であろうと期待される。その化合物が可能性のある有用性を有する障害は、血栓症、並びに血液および組織での凝固能亢進の処置または予防におけるものである。その化合物が処置および／または予防において可能性のある有用性を有する障害には、静脈血栓症および肺塞栓症、例えば、心筋虚血、心筋梗塞、不安定なアンギナ、血栓形成に基づく発作、および末梢動脈血栓症における動脈血栓症が含まれる。さらに、その化合物は、冠動脈疾患、脳動脈疾患、および末梢動脈疾患といったようなアテローム性動脈硬化障害(疾患)の処置または予防における有用性が期待されている。さらに、その化合物は、心筋梗塞において血栓崩壊剤との併用が有用であろうと期待される。さらに、その化合物は、血栓崩壊、経皮経管冠動脈形成術(ＰＴＣＡ)、および冠動脈バイパス手術後の再閉塞に対する予防における有用性が期待されている。さらに、その化合物は、顕微手術後の再血栓形成の防止における有用性が期待されている。さらに、その化合物は、人工器官および心臓弁に関連しての抗凝固処置に有用であろうと期待される。さらに、その化合物は、血液透析および散在性血管内凝固での抗凝固処置における有用性が期待されている。さらなる期待される有用性は、患者のインビボにおいて使用したカテーテルおよび機械装置の濯ぎにおける有用性、並びに血液、血漿、および他の血液製剤のインビトロでの保存のための抗凝固剤としての有用性である。またさらに、その化合物は、癌(転移を含む)、炎症性疾患 (関節炎を含む)、および糖尿病といったような、血液凝固が基本的な寄与過程または二次的な病状の原因となり得るであろうという他の疾患における有用性が期待されている。その抗凝固化合物は、経口で、非経口で、例えば、静脈内注入(i v)、筋肉内注射(im)、皮下(sc)、または経皮により投与する。治療的な効果および／または予防的な効果を得るために本発明により投与する化合物の具体的な用量は、勿論、例えば、投与する化合物、投与速度、投与経路、および処置すべき状態を含め、その症例を取り巻く特定の状況により決定されるであろう。上の各々の有用性に対する典型的な１日用量は、約０.０１mg／kg〜約１０００mg／kgの間である。用量レジメンは変えることができ、例えば、予防的な使用には、１日１回の用量を投与するのがよく、または１日３回もしくは５回といったような複数回の用量が適当となり得る。重篤な介護状況では、本発明の化合物をiv注入により、約０.０１mg／kg／時間〜約２０mg／kg／時間の間、好ましくは約０.１mg／kg／時間〜約５mg／kg／時間の間の速度で投与する。本発明の方法はまた、血餅溶解剤、例えば、組織プラスミノーゲン活性化因子 (t−ＰＡ)、修飾されたt−ＰＡ、ストレプトキナーゼ、またはウロキナーゼと組み合わせても行われる。血餅形成が起こって、動脈または静脈が部分的または完全にブロックされた場合には、通常、血餅溶解剤を使用する。本発明の化合物は、その溶解剤より前に、もしくはその溶解剤と共に、またはその使用後に投与することができ、そして血餅形成の再発を防ぐために、アスピリンと共に投与するのがさらに好ましい。本発明の方法はまた、血小板凝集を阻害する血小板糖タンパク質レセプター(I Ib／IIIa)アンタゴニストと組み合わせても行われる。本発明の化合物は、血餅形成の発生または再発を防ぐために、そのIIb／IIIaアンタゴニストより前に、もしくはそのIIb／IIIaアンタゴニストと共に、またはその使用後に投与することができる。本発明の方法はまた、アスピリンと組み合わせても行われる。本発明の化合物は、血餅形成の発生または再発を防ぐために、アスピリンより前に、もしくはアスピリンと共に、またはその使用後に投与することができる。上に述べた通り、好ましくは、本発明の化合物を血餅溶解剤およびアスピリンと共に投与する。本発明はまた、上に記載した治療法において使用するための医薬組成物も提供する。本発明の医薬組成物は、医薬的に許容され得る担体、賦形剤、または希釈剤と共に、有効な抗血栓量の式Ｉの化合物を含んでなる。経口投与には、その抗血栓化合物を、結合剤、滑沢剤、崩壊剤等といったような賦形剤を含み得るゼラチンカプセル剤または錠剤に製剤化する。非経口投与には、その抗血栓剤を、医薬的に許容され得る希釈剤(例えば、生理食塩水(０.９％)、５％デキストロース、リンゲル溶液等)中で製剤化する。経皮投与には、その抗血栓剤をパッチに製剤化する。本発明の化合物は、約０.１mg〜約１０００mgの間の用量を含んでなる単位用量製剤に製剤化することができる。好ましくは、その化合物は、例えば、硫酸塩、酢酸塩、またはリン酸塩といったような、医薬的に許容され得る塩の形態である。単位用量製剤の一例は、１０mlの無菌ガラス製アンプル中、本発明の化合物５mgを医薬的に許容され得る塩として含んでなる。単位用量製剤の別の例は、無菌アンプルに含まれる等張食塩水２０ml中、本発明の化合物約１０mgを医薬的に許容され得る塩として含んでなる。その抗血栓化合物は、経口、直腸、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、および鼻腔内が含まれる様々な経路により投与することができる。本発明の化合物は、投与より前に製剤化するのが好ましい。本発明の別の態様は、そのための医薬的に許容され得る担体、希釈剤、または賦形剤と共に、有効量の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容され得る塩もしくは溶媒和物を含んでなる医薬組成物である。そのような製剤中の活性成分は、その製剤の０.１重量％〜９９.９重量％を構成する。「医薬的に許容され得る」という語は、担体、希釈剤、または賦形剤が製剤の他の成分と共存できなければならず、そしてそのレシピエントに対して有害であってはならないことを意味する。本発明の医薬組成物は、よく知られていて容易に入手できる成分を使用して、既知の方法により製造する。本発明の組成物は、当業界でよく知られている方法を使用することにより、患者に投与した後、活性成分の迅速な、持続した、または遅延した放出を与えるよう製剤化することができる。本発明の組成物を製造する際には、活性成分を、通常、担体と混合するか、または担体で希釈するか、または担体内に充填して、カプセル、サシェ、紙、もしくは他の容器の形態となり得る。担体が希釈剤として働く場合、それは、その活性成分に対して、ビヒクル、賦形剤、または媒体として作用する、固体、半固体、または液体の物質であってよい。従って、その組成物は、錠剤、丸剤、粉末剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁液剤、乳剤、溶液剤、シロップ剤、エアゾール剤 (固体として、または液体媒体中の)、軟および硬ゼラチンカプセル剤、坐剤、無菌注射用溶液剤、無菌包装粉末剤等の形態にすることができる。次の製剤例は、単に説明するだけのものであって、本発明の範囲を何ら限定しようとするものではない。「活性成分」という語は、勿論、式Ｉによる化合物、またはその医薬的に許容され得る塩もしくは溶媒和物を意味する。製剤例１：次の成分を使用して、硬ゼラチンカプセル剤を製造する。製剤例２：以下の成分を使用して、錠剤を製造する。各成分を混合し、圧縮して、各々の重量が６６５mgである錠剤を成形する。製剤例３：次の成分を含むエアゾール溶液剤を製造する。活性化合物をエタノールと混合して、その混合物をプロペラント２２の一部に加え、−３０℃まで冷却して、充填装置に移す。次いで、必要とされる量をステンレススチール製の容器に入れ、残りのプロペラントで希釈する。次いで、バルブ装置を容器に取り付ける。製剤例４：活性成分を各々６０mg含む錠剤を次のように製造する。活性成分、デンプン、およびセルロースをNo.４５メッシュのＵ.Ｓ.篩にかけて、完全に混合する。その結果得られた粉末と、ポリビニルピロリドンを含む水溶液とを混合した後、その混合物をNo.１４メッシュのＵ.Ｓ.篩にかける。このようにして製造した顆粒を５０℃で乾燥させて、No.１８メッシュのＵ.Ｓ.篩にかける。次いで、その顆粒に、あらかじめNo.６０メッシュのＵ.Ｓ.篩にかけておいたカルボキシメチルデンプンナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、およびタルクを加え、混合した後、これを打錠機で圧縮して、各々の重量が１５０mgである錠剤を得る。製剤例５：活性成分を各々８０mg含むカプセル剤を次のようにして製造する。活性成分、セルロース、デンプン、およびステアリン酸マグネシウムを混合し、 No.４５メッシュのＵ.Ｓ.篩にかけて、硬ゼラチンカプセルに２００mg量を充填する。製剤例６：活性成分を各々２２５mg含む坐剤を次のようにして製造する。活性成分をNo.６０メッシュのＵ.Ｓ.篩にかけて、あらかじめ必要最小限の熱を使用して溶融しておいた飽和脂肪酸グリセリドに懸濁させる。次いで、その混合物を容量２ｇの坐剤型に注ぎ入れて、放冷する。製剤例７：５ml用量につき活性成分を各々５０mg含む懸濁液剤を次のようにして製造する。活性成分をNo.４５メッシュのＵ.Ｓ.篩にかけ、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよびシロップと混合して、滑らかなペーストとする。安息香酸溶液、香料、および着色料を少量の水で希釈して、撹拌しながら加える。次いで、水を十分加えて、必要とされる容量とする。製剤例８：静脈内製剤は、次のようにして製造することができる。一般的には、上の成分の溶液を１分間につき１mlの割合で被験者に静脈内投与する。有効であって、経口で活性な抗血栓剤であるべき本発明の化合物の能力を次の１つまたはそれ以上のアッセイで評価する。本発明により提供する化合物(式Ｉ)は、哺乳動物におけるトロンビンおよび／またはＸa因子の作用を選択的に阻害する。その阻害は、その酵素が色原体基質を加水分解するアッセイで測定する、その酵素のアミダーゼ活性のインビトロでの阻害により実証する。例えば、トロンビンは、Ｎ−ベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリル−Ｌ−アルギニル−p−ニトロアニリド、Ｎ−ベンゾイル −Ｌ−Phe−Ｌ−Val−Ｌ−Arg−p−ニトロアニリドを加水分解する。そのアッセイは、緩衝液(０.０３Ｍトリス、０.１５Ｍ NaCl、pH７.４)５０μ lをヒトトロンビン溶液(精製されたヒトトロンビン、Enzyme Research Laborato ries，South Bend，Indiana，８ＮＩＨ単位／ml)２５μlおよび溶媒(５０％水性メタノール（ｖ：ｖ））中の試験化合物２５μlと混合することにより行う。次いで、色原体基質の水溶液(０.２５mg／ml)１５０μlを加えて、その反応をp− ニトロアニリンの放出に関して４０５nmでモニターすることにより、その基質の加水分解速度を測定する。加水分解速度に対して遊離トロンビン濃度をプロットすることにより、標準曲線を作成する。次いで、その標準曲線を使用することにより、試験化合物で観察された加水分解速度を各々のアッセイでの「遊離トロンビン」値に変換する。そのアッセイで使用したトロンビンの既知の初期量から各々のアッセイで観察された遊離トロンビンの量を減ずることにより、結合した( 試験化合物に結合した)トロンビンを算出する。加えた阻害剤(試験化合物)のモル数から結合したトロンビンのモル数を減ずることにより、各々のアッセイでの遊離阻害剤の量を算出する。 Kass値は、トロンビンと試験化合物（Ｉ）との間の反応に関する仮定平衡定数である。 Kassを試験化合物の濃度範囲に関して算出して、その平均値を１モル当たりのリットル単位で報告する。実質的には、ヒトトロンビンに関して上に記載した方法に従って、以下に指定する適当な色原体基質と共に、他のヒト血液凝固系セリンプロテアーゼを使用することにより、そしてフィブリン溶解系セリンプロテアーゼを使用することにより、凝固因子であるセリンプロテアーゼに関する本発明の化合物の選択性、およびフィブリン溶解セリンプロテアーゼに関する本発明の化合物の選択性、さらにはまた、ヒト血漿血餅フィブリン溶解に対するそれらの実質的な干渉の欠如を評価する。ヒトのＸ、Ｘa、IXa、XIa、およびＸIIa因子をEnzyme Research Laboratories ，South Bend，Indianaから購入し；ヒトウロキナーゼをLeo Pharmaceuticals， Denmarkから購入し；そして組換え活性化プロテインＣ(aPC)は、実質的には米国特許第４,９８１,９５２号により、Eli Lilly and Co．で製造する。色原体基質：Ｎ−ベンゾイル−Ile−Glu−Gly−Arg−p−ニトロアニリド(Ｘa因子用)；Ｎ− Cbz−Ｄ−Arg−Gly−Arg−p−ニトロアニリド(Ｘa因子基質としてのIXa因子アッセイ用)；ピログルタミル−Pro−Arg−p−ニトロアニリド(ＸＩa因子用およびaP C用)；Ｈ−Ｄ−Pro−Phe−Arg−p−ニトロアニリド(ＸIIa因子用)；およびピログルタミル−Gly−Arg−p−ニトロアニリド(ウロキナーゼ用)；をKabi Vitrum， Stockholm，Swedenから、またはMidwest Biotech，Fishers，Indianaから購入する。ウシトリプシンをWorthington Biochemicals，Freehold，New Jerseyから、そしてヒト血漿カリクレインをKabi Vitrum，Stockholm，Swedenから購入する。血漿カリクレインに対する色原体基質であるＨ−Ｄ−Pro−Phe−Arg−p−ニトロアニリドをKabi V itrum，Stockholm，Swedenから購入する。ヒトトロンビンに対する基質、およびトリプシンに対する基質であるＮ−ベンゾイル−Phe−Val−Arg−p−ニトロアニリドは、本発明の化合物に関して上に記載した方法により、商業的に入手できる反応物から既知のペプチド結合法を使用して合成するか、またはMidwest Biotec h，Fishers，Indianaから購入する。ヒトプラスミンをBoehringer Mannheim，Indianapolis，Indianaから購入し； nt−ＰＡを一本鎖活性の対照標準としてAmerican Diagnostica，Greenwich，Con necticutから購入し；修飾されたｔ−ＰＡ６(mt−ＰＡ６)は、当業界で知られている方法により、Eli Lilly and Companyで製造する(Burckら，J ．Biol．Chem. ，２６５，５１２０−５１７７（１９９０）を参照）。プラスミン色原体基質であるＨ−Ｄ−Val−Leu−Lys−p−ニトロアニリドおよび組織プラスミノーゲン活性化因子(t−ＰＡ)基質であるＨ−Ｄ−Ile−Pro−Arg−p−ニトロアニリドをKab i Vitrum，Stockholm，Swedenから購入する。上に記載した色原体基質では、三文字記号であるIle、Glu、Gly、Pro、Arg、P he、Val、Leu、およびLysを使用して、各々、対応するアミノ酸基であるイソロイシン、グルタミン酸、グリシン、プロリン、アルギニン、フェニルアラニン、バリン、ロイシン、およびリジンを示す。抗血栓化合物は、好ましくは、ウロキナーゼ、組織プラスミノーゲン活性化因子(t−ＰＡ)、およびストレプトキナーゼにより誘発されるフィブリン溶解を温存すべきである。このことは、ストレプトキナーゼ、t−ＰＡ、またはウロキナーゼの血栓崩壊療法に対する補助物質としての薬剤の治療的な使用に、そして内因性フィブリン溶解温存性(t−ＰＡおよびウロキナーゼに関する)抗血栓剤としての薬剤の使用に重要であろう。フィブリン溶解プロテアーゼのアミダーゼ活性に対する干渉の欠如に加えて、そのようなフィブリン溶解系温存は、ヒト血漿血餅、および各々のフィブリン溶解プラスミノーゲン活性化因子によるそれらの溶解により調べることができる。材料イヌ血漿を、意識のある雑種の猟犬(どちらかの性別、Butler Farms，Clyde， New York，U.S.A.)から静脈穿刺により３.８％クエン酸塩中に採取する。フィブリノーゲンは、新鮮なイヌ血漿から調製し、そしてヒトフィブリノーゲンは、先の方法および仕様書により、イン−デート(in−date)のＡＣＤヒト血液からＩ− ２画分で調製する。Smith，Biochem ．J.，１８５，１−１１（１９８０）；およびSmithら、Biochemistry，１１，２９５８−２９６７（１９７２）。ヒトフィブリノーゲン（純度９８％／プラスミンを含まない）をAmerican Diagnostica， Greenwich，Connecticutから得る。フィブリノーゲンＩ−２調製物の放射能標識を先に報告したように行う。Smithら，Biochemistry，１１，２９５８−２９６７（１９７２）。ウロキナーゼを２２００プローグ(Ploug)単位／バイアルとして、Leo Pharmaceuticals，Denmarkから購入する。ストレプトキナーゼをHoechs t−Roussel Pharmaceuticals，Somerville，New Jerseyから購入する。方法−ヒト血漿血餅の溶解に対するt−ＰＡによる効果０.０２２９μCiの１２５−ヨウ素で標識したフィブリノーゲンを含むヒト血漿１００μlに、トロンビン５０μl(７３ＮＩＨ単位／ml)を加えることにより、ヒト血漿血餅を微小試験管中で形成させる。その血餅にウロキナーゼまたはストレプトキナーゼ５０μl(５０、１００、または１０００単位／ml)を積層して、室温で２０時間インキュベートすることにより、血餅溶解を調べる。インキュベーション後、その管をBeckman Microfugeで遠心分離する。γ計数するために、上清２５μlを１.０ml体積の０.０３Ｍトリス／０.１５Ｍ NaCl緩衝液中に加える。トロンビンを省く(そして代わりに緩衝液を使う)ことにより、計数対照の１００％溶解を得る。その積層溶液中に化合物を１、５、および10μg／mlの濃度で含ませることにより、フィブリン溶解に対して可能性のある干渉に関して抗血栓化合物を評価する。データポイントから、その特定の濃度のフィブリン溶解剤に関して５０％の溶解を表すであろう値までの直線外挿により、概算のＩＣ₅₀値を推定する。抗凝固活性材料イヌ血漿およびラット血漿を、意識のある雑種の猟犬(どちらかの性別、Butle r Farms，Clyde，New York，U.S.A.)から、または麻酔した雄のSprague−Dawley ラット(Harlan Sprague−Dawley，Inc.，Indianapolis，Indiana，U.S.A.)から、静脈穿刺により３.８％クエン酸塩中に採取する。フィブリノーゲンは、先の方法および仕様書により、イン−デートのＡＣＤヒト血液からＩ−２画分として調製する。Smith，Biochem ．J.，１８５，１−１１（１９８０）；およびSmith ら，Biochemistry，１１，２９５８−２９６７（１９７２）。ヒトフィブリノーゲンをまた、純度９８％／プラスミンを含まないものとして、American Diagnos tica，Greenwich，Connecticutから購入する。凝固試薬であるアクチン、トロンボプラスチン、およびヒト血漿をＢaxter Healthcare Corp.，Dade Division，M iami，Floridaから得る。Parke−Davisから得たウシトロンビンを血漿中での凝固アッセイに使用する。方法抗凝固測定凝固アッセイ方法は、先に記載した通りである。Smithら，Thrombosis Resear ch ，５０，１６３−１７４（１９８８）。CoAScreener凝固装置(American LABor ，Inc.)を全ての凝固アッセイ測定に使用する。試験血漿０.０５mlに、食塩水０ .０５mlおよびトロンビン(１０ＮＩＨ単位／ml)０.０５mlを加えることにより、トロンビン時間(ＴＴ)を測定する。試験血漿０.０５mlをアクチン試薬０.０５ml と共に１２０秒間インキュベーションした後、CaCl₂(０.０２Ｍ)０.０５mlと共にインキュベーションすることにより、活性化部分トロンボプラスチン時間(ＡＰＴＴ)を測定する。試験血漿０.０５mlに、食塩水０.０５mlおよびトロンボプラスチン−Ｃ試薬０.０５mlを加えることにより、プロトロンビン時間(ＰＴ)を測定する。式Ｉの化合物を広範囲にわたる濃度でヒトまたは動物の血漿に加えて、ＴＴ、ＡＰＴＴ、およびＰＴアッセイに対する延長効果を測定する。直線外挿を行って、凝固時間を二倍とするのに必要とされる濃度を各々のアッセイに関して推定する。動物雄のSprague−Dawleyラット(３５０−４２５ｇ、Harlan Sprague Dawley，Inc .，Indianapolis，ＩＮ)をキシラジン(２０mg／kg、s.c.)およびケタミン(１２０mg／kg、s.c.)で麻酔して、温めたウォーターブランケット(３７℃)上で保持する。頸静脈にカニューレ挿入して、注入を可能とする。動脈−静脈のシャントモデル左頸静脈および右頸動脈に長さ２０cmのポリエチレンＰＥ６０管をカニューレ挿入する。管腔中に綿糸(５cm)をもつより大きな管(ＰＥ１９０)の中央部分６cm を、より長い部分の間に摩擦装着して、動脈−静脈のシャント回路を完成する。そのシャントに血液を１５分間循環させた後、糸を注意深く取り除いて、重量を測定する。糸および血栓の総重量から湿った糸の重量を減ずる(J．R．Smith，Br ．J．Pharmacol .，７７：２９（１９８２）を参照)。動脈損傷のFeCl₃モデル頸動脈を正中腹側頸部切開によって単離する。熱電対を各々の動脈下に配置して、血管温度をストリップチャート記録計で連続的に記録する。縦に切断した管のカフ(０.０５８ＩＤ×０.０７７ＯＤ×４mm、Baxter Med．Grade Silicone)を熱電対上の各々の頸動脈の周囲に直接巻き付ける。FeCl₃六水和物を水に溶解して、濃度(２０％)をFeCl₃だけの実際の重量に換算して表す。動脈を損傷して、血栓症を誘発するために、２.８５μlをカフ中にピペットで分注して、熱電対プローブ上の動脈を濡らす。動脈閉塞は、温度の急速な下降により示される。閉塞までの時間を分単位で報告して、FeCl₃の適用と血管温度の急速な下降との間の経過時間を表す(K．D．Kurz，Thromb ．Res.，６０：２６９，１９９０を参照)。ウサギにおける動脈−静脈(ＡＶ)のシャントモデル化合物の効力および効能を、左頸静脈に管を付けることによって血液を頸動脈からシャントした、麻酔したウサギにおける血栓症のモデルで調べる。そのシャントに血栓性物質が付着した糸を入れて、試験化合物の存在下または不存在下に定量する。具体的には、左頸静脈および右頸動脈にカニューレ挿入(ＰＥ２００管、２２cm)する。動脈管の先端を約１cm進めて、静脈管の先端を約１cm進める。動脈および静脈のシャントセグメントを、管腔中に端を１つの結び目で一緒に結んだ４本の綿糸(各々、５.５cm)をもつより大きな管(ＰＥ２６０、６cm)の中央部分に摩擦装着する。そのシャントに血液を１５分間循環させる。動脈および静脈のセグメントをクランプし、その中央部分を剥離し、懸垂し、糸を注意深く取り除いて、重量を測定する。糸および血栓の総重量から湿った糸の重量(３８m g、１０−４本の同じ長さの平均)を減ずる。シャントを通して血液を循環させる１５分前から始めて、血液を循環させる１５分間の間ずっと、薬物をもう１つのカテーテルによって右頸静脈(２cm内側の血管)に注入する。血液を採取するための別のカテーテルもまた右頸静脈に埋め込み、その先端を１５cm進めて、試料が薬物注入カテーテルの先端を通過して流れる血液に富まないよう、それが心臓に対して遠位となることを確実にする。自発的な血栓崩壊モデルインビトロでのデータは、ペプチドであるトロンビンまたはＸa因子の阻害剤が、より高い濃度で、プラスミンおよび組織プラスミノーゲン活性化因子といったような他のセリンプロテアーゼを阻害し得ることを示唆する。化合物がインビボでのフィブリン溶解を阻害するかどうかを評価するためには、標識した全血血餅を肺循環中に移入することにより、自発的な血栓崩壊の速度を測定する。ラット血液(１ml)をウシトロンビン(４ＩＵ、Parke Davis)および¹²⁵Ｉヒトフィブロゲン(５μCi、ＩＣＮ)と急速に混合し、直ちにシラスティック管中に吸引して、３７℃で１時間インキュベートする。経時した血栓を管から取り出し、１cmのセグメントに切り分け、標準食塩水中で３回洗浄して、各々のセグメントをγカウンターで計数する。既知の計数をもつセグメントをカテーテル中に吸引した後、これを頸静脈中に移入する。そのカテーテルの先端を右心房付近まで進め、血餅を取り出して、肺循環中に浮遊させる。移入してから１時間後、心臓および肺を摘出して、別々に計数する。血栓崩壊をという％として表す。移入した血餅のフィブリン崩壊性溶解は、時間に依存して起こる(J．P．Clozel，Cardiovas ．Pharmacol.，１２：５２０，１９８８を参照 )。凝固パラメータ血漿トロンビン時間(ＴＴ)および活性化部分トロンボプラスチン時間(ＡＰＴＴ)をフィブロメーターで測定する。血液を頸静脈カテーテルから採取して、クエン酸ナトリウム(３.８％、血液９部に対して１部)を含むシリンジ中に集める。ＴＴを測定するために、ラット血漿を食塩水およびヒトトロンビンと３７℃で混合する。ＡＰＴＴに関しては、血漿(０.１ml)およびＡＰＴＴ溶液(０.１ml、O rganon Teknika)を５分間(３７℃)インキュベートし、CaCl₂(０.１ml、０.０２５Ｍ)を加えて、凝固を開始させる。アッセイを２回行って、平均する。バイオアベイラビリティー指数生物活性の基準である血漿トロンビン時間(ＴＴ)は、ＴＴの増加が親によるトロンビン阻害だけから起こるという仮定の下に、親化合物のアッセイに代わる物として働く。ＴＴに対するトロンビン阻害剤の効果の時間経過を、麻酔したラットへのi.v.ボーラス投与後、および断食した意識のあるラットの経口処置後に測定する。血液量の制限、および処置時間から応答が処置前の値に戻る時間までの時間経過を測定するために必要とされるポイント数の制限により、２つのラット集団を使用する。各々の試料集団は、交互する連続的時間ポイントを表す。その時間経過にわたる平均のＴＴを使用して、曲線下面積(ＡＵＣ)を算出する。バイオアベイラビリティー指数を以下に示す式により算出して、相対活性(％)として表す。血漿ＴＴ時間経過の曲線下面積(ＡＵＣ)を測定して、用量を調節する。このバイオアベイラビリティー指数は、「相対活性(％)」と呼ばれており、として算出される。化合物化合物溶液を標準食塩水中で毎日新たに調製して、ボーラスとして注射するか、または実験摂動１５分前に開始して、動静脈シャントモデルでは１５分、並びに動脈損傷のFeCl₃モデルおよび自発的な血栓症モデルでは６０分である実験摂動中ずっと続けて注入する。ボーラス注射量は、i.v.の場合には１ml／kg、およびp.o.の場合には５ml／kgであって、注入量は3ml／時間である。統計結果を平均＋／−ＳＥＭとして表す。分散の一元分析を使用して、統計的に有意な差を見つけ出した後、ダンネット(Dunnett)試験を適用して、どの平均が異なっているかを決定する。等しい平均値の帰無仮説の棄却に対する有意レベルは、Ｐ＜０.０５である。動物雄のイヌ(ビーグル；１８ヶ月−２年；１２−１３kg、Marshall Farms，North Rose，New York １４５１６)を一晩断食させて、投薬してから２４０分後にピューリナ(Purina)保証処方飼料(Purina Mills，St．Louis，M issouri)を与える。水は自由に摂取させる。室温を６６−７４°Ｆ；相対湿度を４５−５０％の間に保持し；そして０６００−１８００時間点灯する。薬物動態学モデル５mg／mlの調製物となるまで０.９％無菌食塩水に溶解することにより、試験化合物を投与する直前に製剤化する。イヌに１回２mg／kg用量の試験化合物を経口栄養により与える。投薬してから０.２５、０.５、０.７５、１、２、３、４、および６時間後に、血液試料(４.５ml)を頭部静脈から採取する。試料をクエン酸入りバキュテイナー(citrated Vacutainer)管中に集めて、氷上に置いた後、遠心分離により血漿まで縮小する。血漿試料をＨＰＬＣＭＳにより分析する。試験化合物の血漿濃度を記録して、薬物動態学パラメーター：排泄速度定数、 Ke；総クリアランス、Clt：分布容量、Ｖ_D；最大血漿試験化合物濃度の時間、Ｔ_max ；Ｔ_maxの試験化合物の最大濃度、Ｃ_max；血漿半減期、ｔ_0.5；および曲線下面積、Ａ.Ｕ.Ｃ.；吸収された試験化合物の割合、Ｆを算出するのに使用する。イヌの冠動脈血栓症モデルイヌの外科手術上の準備および器具使用は、Jacksonら、Circulation，８２，９３０−９４０（１９９０）に記載されている通りである。雑種の猟犬(６−７ヶ月齢、どちらかの性別、Butler Farms，Clyde，New York，U.S.A.)をペントバルビタールナトリウム(静脈内に３０mg／kg、i.v.)で麻酔し、挿管して、室内の空気で換気する。換気量および呼吸速度を調節して、血液のＰＯ₂、ＰＣＯ₂、およびpHを正常限界内に保持する。リード(lead)II ＥＣＧを記録するために、皮下針電極を挿入する。左頸静脈および総頸動脈を左の中外側頸部切開によって単離する。動脈血圧( ＡＢＰ)を、頸動脈に挿入した、あらかじめ検定しておいたミラー(Millar)変換器(ＭＰＣ−５００型，Millar Instruments，Houston，TX，U.S.A.)で連続的に測定する。実験中に血液を採取するために、頸静脈にカニューレ挿入する。加えて、試験化合物を投与するために、両後足の大腿静脈にカニューレ挿入する。左胸部フィステル形成術を第五肋間隙で行って、心臓を心膜離被架に懸架する。左回旋冠動脈(ＬＣＸ)の１〜２cmのセグメントを、第一主要対角線の心室枝付近で単離する。長さ３−４mmの２６ゲージ針を先端とする針金の陽極電極(テフロンで被覆された、３０ゲージの銀メッキされた銅線)をＬＣＸに挿入して、動脈の内膜表面と接触するよう配置する(実験が終了した時点で確認する)。陰極を皮下(s.c.)部位に配置することにより、刺激回路を完成する。調節可能なプラスチック製オクルダーを電極領域上のＬＣＸの周囲に配置する。冠血流(ＣＢＦ)を測定するために、あらかじめ検定しておいた電磁流プローブ(Carolina Medical Electronics，King，NC，U.S.A.)を、陽極と隣接したＬＣＸの周囲に配置する。オクルダーを調節して、ＬＣＸの１０秒の機械的な閉塞後に観察される充血血流応答の４０−５０％の阻害を引き起こす。血流力学の測定値およびＥＣＧの測定値を全て記録して、データ取得システム(Ｍ３０００型、Modular Instruments， Malvern，PA，U.S.A.)で分析する。血栓の形成および化合物の投与レジメ陽極に１００μＡの直流(ＤＣ)を適用することにより、ＬＣＸの内膜に電解損傷を引き起こす。その電流を６０分間保持した後、血管が閉塞しているかいないかに拘らず中止する。血栓形成は、ＬＣＸが完全に閉塞されるまで自発的に進行する(０のＣＢＦ、およびＳ−Ｔセグメントの増加として決定する)。閉塞している血栓を１時間経時させた後、化合物の投与を開始する。本発明の化合物の０．２５、０.５、および１mg／kg/時間の用量での２時間の注入を、血栓崩壊剤(例えば、組織プラスミノーゲン活性化因子、ストレプトキナーゼ、ＡＰＳＡＣ)の注入と同時に開始する。試験化合物を投与してから３時間後、再灌流が続いて起こる。血栓崩壊が成功した後の冠動脈の再閉塞は、少なくとも３０分間持続した０のＣＢＦとして定義する。血液学およびテンプレート出血時間の測定全血球数、ヘモグロビン、およびヘマトクリット値を、クエン酸入り(３.８％ )血液(クエン酸塩１部：血液９部)試料40μlに関して血液学アナライザー (Cell−Dyn ９００、Sequoia−Turner，Mount View，CA，U.S.A.)で測定する。歯肉テンプレート出血時間をシンプレート(Simplate)II出血時間装置(Organon T eknika Durham，N.C.，U.S.A.)で測定する。その装置を使用して、イヌの左の上顎または下顎のどちらかの歯肉を２ケ所水平に切開する。切開は各々、幅３mm× 深さ２mmである。切開を行なつて、ストップウォッチを使用して、どれだけの時間出血が起こるかを測定する。綿棒を使用して、切開部から滲み出る血液を吸い取る。テンプレート出血時間とは、切開から出血停止までの時間である。出血時間は、試験化合物を投与する直前(０分)、注入に入って６０分、試験化合物の投与が終了した時点(１２０分)、および実験が終わった時点で測定する。データは全て、分散の一元分析(ＡＮＯＶＡ)により分析した後、Student−Neu man−Kuels post hoc t検定により分析して、有意レベルを測定する。反復測定ＡＮＯＶＡを使用して、実験中の時間ポイント間の有意差を測定する。値は、少なくともｐ＜０.０５のレベルで統計上異なると決定する。値は全て、平均±ＳＥＭである。研究は全て、米国生理学会の指針に従って行う。その方法に関するさらなる詳細な説明は、Jacksonら，J ．Cardiovasc．Pharmacol．２１，５８７ −５９９（１９９３）に記載されている。式Ｉaの化合物は、特に驚くべき特性を有する。従って、ＤＬ−Arg−Ia(Arg中心でのエピマーのほぼ等しい混合物、以下の実施例１を参照)の場合、その化合物は、トロンビンの阻害剤(Kass＝３億５２００万、３回のアッセイの平均)およびＸa因子の阻害剤(Kass＝３億１００万、３回のアッセイの平均)と同様の高い効能を実証した。さらに、非常に強力な抗血栓効力がウサギのＡＶシャントモデルにおいて示され、０.００８ｍｇ／kg/時間i.v.のＥＤ５０％(血栓の重量を５０％まで減少させるための注入用量)値が観察された。この用量では、トロンビン時間比の変化は観察されなかった。次の実施例は、本発明をさらに記載するために提供するものであって、その限定として解釈すべきものではない。その実施例で使用する略語は、次の意味を有する。アミノ酸：Azt＝アゼチジン−２−カルボン酸、Pro＝プロリン。 Anal．＝元素分析。 Boc＝t−ブチルオキシカルボニル。Ｂｎ＝ベンジル。 t−Bu＝t−ブチル。ｎ−BuLi＝ブチルリチウム。 Cbz＝ベンジルオキシカルボニル。ＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミド。ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド。ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド。 Et＝エチル。 EtOAc＝酢酸エチル。 Et₂O＝ジエチルエーテル。 EtOH＝エタノール。ＦＡＢ−ＭＳ＝高速原子衝撃質量スペクトル。ＦＤ−ＭＳ＝電界脱離質量スペクトル。ＨＰＬＣ＝高性能液体クロマトグラフィー。ＨＲＭＳ＝高分解能質量スペクトル。ＨＯＢＴ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物。 i−PrOH＝イソプロパノール。ＩＲ＝赤外スペクトル。 Me＝メチル。 MeOH＝メタノール。ＮＭＲ＝核磁気共鳴。ＲＰＨＰＬＣ＝逆相高性能液体クロマトグラフィー。 SiO₂＝シリカゲル。ＴＥＡ＝トリエチルアミン。ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸。ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン。ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー。 Ts＝トシル(p−トルエンスルホニル)。特に述べない限り、pH調節および後処理は、酸または塩基の水溶液で行う。実施例でのRf値は、次の系：（Ａ）クロロホルム−メタノール一酢酸１３５：１５：１；（Ｂ）酢酸エチル−酢酸−無水アルコール９０：１０：１０；（Ｃ）酢酸エチル−ヘキサン３０：７０；でのシリカゲル薄層クロマトグラフィー(Kieselgel ６０Ｆ−２５４)により決定する。実施例１ (１Ｒ,４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン−１−イルカルボニル−Ｎ−[(１Ｓ )−４−[(アミノイミノメチル)アミノ]−１−(ベンゾチアゾール−２−イルカルボニル)ブチル]−Ｌ−プロリンアミド・１.５Ｈ₂ＳＯ₄の製造Ａ．Ｎ−メトキシカルボニルフェネチルアミンＴＨＦ(５００ml)中のフェネチルアミン(７５.２ml、０.６mol)およびトリエチルアミン(８３ml、０.６mol)の攪拌溶液に、ＴＨＦ(５０ml)に溶解したクロロギ酸メチル(４６.２ml、０.６mol)を徐々に加えた。その反応物を室温でさらに１時間攪拌し、ジエチルエーテル(２Ｌ)および１Ｎ HCl(８００ml)を加えた。有機層を水で洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、減圧下に濃縮して、純粋な標記化合物(１０２ｇ、９５％)の透明な油状物質を得た。Ｂ．２−メトキシカルボニル−ＤＬ−１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン −１−カルボン酸トリフルオロ酢酸(３００ml)中のＮ−メトキシカルボニルフェネチルアミン( １０２ｇ、０.５７mol)の溶液に、グリオキシル酸(６３ｇ、０.６８mol)を加えて、その混合物を還流温度まで加熱した。還流温度で４時間後、その反応物を室温まで冷却し、溶媒を減圧下に除去して、残留物にジエチルエーテル(８００ml) ／水(１００ml)を加えた。その反応混合物のpHを５ＮＮａＯＨで１２まで上げて、水層を分離した。その水層にジエチルエーテル(５００ml)を加えて、その溶液を５Ｎ HClでpH２.５まで酸性にした。有機層を分離し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、純粋な標記化合物(１０７ｇ、８０％)の油状物質を得た。ＦＡＢ−ＭＳ２３６（ＭＨ⁺）。Ｃ．２−メトキシカルボニル−ＤＬ−１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン −１−カルボン酸ｔ−ブチルエステル CH₂Cl₂(２００ml)中の２−メトキシカルボニル−ＤＬ−１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸(１０５ｇ、０.４５mol)の冷却した(０℃) 攪拌溶液に、ｔ−ブタノール(５２ml、０.５４mol)およびＤＣＣ(９２ｇ、０.４５mol)を加えた。０℃で２時間および室温で２４時間後、溶媒を減圧下に除去して、残留物に酢酸エチル(８００ml)／１Ｎ NaHCO₃(３００ml)を加えた。有機層を分離し、水、１.５Ｎクエン酸、および水で洗浄した。有機層を乾燥させ(MgSO₄ )、濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、純粋な標記化合物(１０６g、８１％)の油状物質を得た。ＦＡＢ−ＭＳ２９２(ＭＨ⁺)。ＴＬＣＲ_f（Ａ）０.６１。Ｃ₁₆Ｈ₂₁ＮＯ₄に関する元素分析：計算値：Ｃ６５.９６；Ｈ７.２７；Ｎ４.８１。実測値：Ｃ６６.２４；Ｈ７.２８；Ｎ４.７３。Ｄ．２−メトキシカルボニル−(１ＲＳ,４aSR,8aSR)−ペルヒドロイソキノリン −１−カルボン酸t−ブチルエステル高圧装置中、t−ブタノール(８００ml)中の２−メトキシカルボニル−ＤＬ− １,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン−１−カルボン酸t−ブチルエステル( １０５ｇ、０.３６mol)の溶液を５５バール(８００psi)の水素下に５％Ｒｈ／A l₂O₃(５２.５ｇ)で５０℃にて２４時間還元した。その反応混合物をケイ藻土パッドに通して濾過して、濾液を減圧下に濃縮した。その結果得られた油状物質を乾燥させて、純粋な標記化合物(９６.５ｇ、９０％)を得た。ＦＤ−ＭＳ２９８(ＭＨ⁺)。ＴＬＣＲ_f（Ｃ）０.６３。Ｅ．２−メトキシカルボニル−(１ＲＳ,4aRS,8aRS)−ペルヒドロイソキノリン− １−カルボン酸エチルエステル EtOH(５００ml)中の２−メトキシカルボニル−(１ＲＳ,４aSR,８aSR)−ペルヒドロイソキノリン−１−カルボン酸t−ブチルエステル(８１.２ｇ、２７３mmol) の溶液に、ナトリウムエトキシド(エタノール中の２１％)(８８.４ml、２７３mm ol)を加えて、その反応混合物を還流した(２４時間)。有機溶媒を減圧下に蒸発させ、残留物に酢酸エチル(４００ml)および水(１００ml)を加えた。有機層を分離し、水で２回洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、純粋な標記化合物(７０ｇ、９５％)の油状物質を得た。ＦＡＢ−ＭＳ２７０（ＭＨ⁺）。ＴＬＣＲ_f（Ａ）０.６１。Ｆ．２−メトキシカルボニル−(１ＲＳ,４aRS,８aRS)−ペルヒドロイソキノリン −１−カルボン酸ＴＨＦ(２５０ml)中の工程Ｅの生成物(７０ｇ、２６０mmol)の溶液に、２ＮNa OH(１５６ml、３１２mmol)を加えて、その反応混合物を室温で攪拌した(３０時間)。有機溶媒を減圧下に蒸発させ、残留物にジエチルエーテル(４００ml)および水(１００ml)を加えた。水層を分離して、酢酸エチル(４００ml)を加えた。その溶液のpHを５Ｎ HClで２.０に調節した。有機層を乾燥させ(MgSO₄)、濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、透明な油状物質を得た。その油状物質をヘキサン(２００ml)から結晶化させて、純粋な標記化合物(４６.４ｇ、７４％)を得た。ＦＡＢ−ＭＳ２４２（ＭＨ⁺）。ＴＬＣＲ_f（Ａ）０.３６。Ｃ₁₂Ｈ₁₉ＮＯ₄に関する元素分析：計算値：Ｃ５９.７４；Ｈ７.９４；Ｎ５.８１。実測値：Ｃ５９.９５；Ｈ７.８８；Ｎ５.５４。ＮＭＲの帰属は、等核デカップリング、ＣＯＳＹ、ＨＭＱＣ、およびＤＥＰＴ実験により行った。Ｇ．２−Cbz−(１ＲＳ,４aRS,８aRS)−ペルヒドロイソキノリン−１−カルボン酸不活性雰囲気下、室温にて無水ＣＨ₃ＣＮ(２００ml)中の工程Ｆの生成物(４６ｇ、１９１mmol)の攪拌溶液に、ＣＨ₃ＣＮ(６０ml)中のヨードトリメチルシラン (６２.４ml、４４０mmol)の溶液を加えた。その反応混合物を５５℃で３０分間攪拌して、室温まで冷却した。その反応を、水(１００ml)、続いて、メタ重亜硫酸ナトリウム(１ｇ)でクエンチした。その反応物のpHを５Ｎ NaOHで１０.０まで上げて、そのpHを２Ｎ NaOHで１０に維持しながら、クロロギ酸ベンジル(２７. ３ml、１９１mmol)を滴加した。その反応物を室温でさらに３０分間攪拌した後、有機溶媒を減圧下に蒸発させて、ジエチルエーテル(２００ml)を加えた。その反応物を室温で放置して(２時間)、酢酸エチル(２００ml)を加えた。その水溶液を５Ｎ HClでpH２.５まで酸性にした；有機層を分離し、乾燥させ(Mg SO₄)、濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、純粋な標記化合物(３９.５ｇ、６５％ )を油状物質として得た。ＦＡＢ−ＭＳ３１８（ＭＨ⁺）。Ｃ₁₈Ｈ₂₃ＮＯ₄に関する元素分析：計算値：Ｃ６８.１２；Ｈ７.３０；Ｎ４.４１。実測値：Ｃ６６.３７；Ｈ７.５２；Ｎ４.３７。Ｈ．２−Cbz−(１ＲＳ,４aRS,８aRS)−ペルヒドロイソキノリン−１−カルボニル−Pro−Ｏ−ｔ−Bu ＤＭＦ(２００ml)中の工程Ｇの生成物(３９ｇ、１２３mmol)の冷却した(０℃) 攪拌溶液に、プロリンt−ブチルエステル(２１.１ｇ、１２３mmol)、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール(１６.６ｇ、１２３mmol)、およびＤＣＣ(２５.３ｇ、１２３mmol)を加えた。その反応混合物を０℃で２時間および室温で２４時間攪拌した。反応沈殿を濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、油状物質とした。その油状物質をEtOAc(２００ml)および水(１００ml)に溶解した。有機層を、１ＮNaHCO₃ 、水、１.５Ｎクエン酸、および水で連続的に洗浄した。有機層を乾燥させ(MgS O₄)、濾過し、濾液を蒸発させて、標記化合物(５２.７ｇ、９１％)の非晶質固体をジアステレオマーの混合物とした。ＦＡＢ−ＭＳ４７１（ＭＨ⁺）。Ｉ．２−Cbz−(４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン−１(Ｒ)−カルボニル−Pr o−ＯＨ CH₂Cl₂(２０ml)中の工程Ｈの生成物(５２.４ｇ、１１１mmol)の攪拌溶液に、トリフルオロ酢酸(７０ml)およびアニソール(５ml)を加えた。その反応混合物を室温で１時間攪拌して、加熱することなく、減圧下に濃縮した。残留物をジエチルエーテル(４００ml)、水(１００ml)で希釈して、その溶液のpHを５Ｎ NaOHで１０.０に調節した。水層を分離して、酢酸エチル(３００ml)を加えた。その溶液のpHを５Ｎ HClで２.５に調節した；有機層を分離し、乾燥させ(Mg SO₄)、濾過し、濾液を減圧下に濃縮して、透明な油状物質を得た。その油状物質をジエチルエーテル(５００ml)に溶解して、その溶液に(Ｌ)−(−)−α−メチルベンジルアミンを加えた。その溶液を室温で放置した(２４時間)。その結果得られた固体を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄して、乾燥させた。固体を酢酸エチルに縣濁させ、１.５Ｎクエン酸、および水で洗浄した。有機層を乾燥させ(MgSO₄ )、濾過し、濾液を蒸発させて、標記化合物(２０.２ｇ、４４％)を油状物質として得た。ＦＡＢ−ＭＳ４１５（ＭＨ⁺）。 [α]_D＝３．２°（Ｃ＝０.５、MeOH）。Ｃ₂₃Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₅に関する元素分析：計算値：Ｃ６６.６５；Ｈ７.３０；Ｎ６.７６。実測値：Ｃ６６.３８；Ｈ７.３６；Ｎ６.６３。 J．Boc−Arg(トシル)−N(OMe)Me ＤＭＦ(１５０ml)中のBoc−Ｌ−Arg(トシル)−ＯＨ(３４.２ｇ、７９.８mmol) の冷却した(０℃)攪拌溶液に、Ｎ,Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(１５ .６ｇ、１５９.６mmol)、続いて、ジイソプロピルエチルアミン(２７.８ml、１５９.６mmol)、ＨＯＢＴ(１０.８ｇ、７９.８mmol)、およびＤＣＣ(１６.５ｇ、７９.８mmol)を加えた。その反応混合物を０℃で１時間攪拌し、室温まで温めて、１８時間攪拌した。その反応混合物を冷却し(０℃)、沈殿を濾過して、母液を減圧下に乾燥状態となるまで濃縮した。その結果得られた油状物質をEtOAcに溶解して、１Ｎ NaHCO₃、水、１.５Ｎクエン酸、および水で連続的に洗浄した。有機溶液を乾燥させて(MgSO₄)、減圧下に蒸発乾固した。その結果得られた油状物質をEtOAcに溶解した；そして、４℃で放置した(４時間)後、沈殿を濾過し、EtO Acで洗浄し、乾燥させて、純粋な標記化合物(21.２ｇ、５７％)を得た。ＦＡＢ−ＭＳ４７２（ＭＨ⁺）。Ｃ₂₀Ｈ₃₃Ｎ₅Ｏ₆Ｓに関する元素分析：計算値：Ｃ５０.９４；Ｈ７.０５；Ｎ１４.８５。実測値：Ｃ５２.２９；Ｈ７.３２；Ｎ１４.９８。Ｋ．２−[Boc−Arg(トシル)]ベンゾチアゾール不活性雰囲気下、無水ＴＨＦ(１５０ml)の冷却した(−７８℃)攪拌溶液に、ヘキサン中の１.６Ｍｎ−ブチルリチウム(１５０ml、２４０mmol)を加えた。その反応混合物に、ＴＨＦ(１５０ml)中のベンゾチアゾール(３２.４ｇ、２４０mmol )の溶液を徐々に加えた。加えた後、その反応混合物に、ＤＭＳＯ(２７ml)中の工程Ｊのアミド(２２.６ｇ、４８mmol)の溶液を徐々に加えた。その反応混合物を、−７８℃で３時間および氷浴中で４０分間攪拌した。その反応混合物を１. ５Ｎクエン酸(３００ml)で徐々に希釈した。その結果得られた混合物を約４００ mlまで減圧下に濃縮した後、EtOAc(２００ml)および水(１００ml)を加えた。有機層を水で３回洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、減圧下に蒸発させて、油状物質を得た。粗製の油状物質を、段階的グラジエント溶出(CHCl₃１００〜EtOAc １００) を使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーにより精製して、純粋なケトン( １７.４ｇ、６６％)を得た。ＦＡＢ−ＭＳ５４６（ＭＨ⁺）。 [α]_D＝２５.８°（Ｃ，０.５ CHCl₃）。Ｃ₂₅Ｈ₃₁Ｎ₅Ｏ₅Ｓに関する元素分析：計算値：Ｃ５５.０３；Ｈ５.７３；Ｎ１２.８３。実測値：Ｃ５４.７３；Ｈ５.７２；Ｎ１２.６９。Ｌ．２−[Boc−Arg(トシル)(ＯＨ)]ベンゾチアゾール EtOH(６０ml)中のＫ部分のケトン(２.７ｇ、４.９５mmol)の冷却した(０℃)攪拌溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(１８７mg、４.９５mmol)を加えた。その反応混合物を０℃で１時間攪拌して、室温まで一晩徐々に温めた。その混合物のpH を２Ｎ HClで２.０に調節した後、１Ｎ NaOHでpH ７.０まで上げた。その結果得られた混合物をEtOAc(２００ml)および水(１００ml)で希釈した。有機層を乾燥させ(MgSO₄)、蒸発させて、粗製のアルコール(２.７ｇ、９９％)を得た。ＦＡＢ−ＭＳ５４８（ＭＨ⁺）。ＴＬＣＲ_f（Ａ）０.２１。Ｍ．ベンジルオキシカルボニル−(１Ｒ,４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン− １−イルカルボニル−Ｎ−[(１Ｓ)−４−[(Ｎ−トシルアミノイミノメチル) アミノ]−１−[(ベンゾチアゾール−２−イル)(ヒドロキシ)メチル]ブチル] −Ｌ−プロリンアミド工程Ｌのアルコール(２.６ｇ、４.７５mmol)を含むフラスコに、アニソール( ５ml)、続いて、トリフルオロ酢酸(７０ml)を加えた。その反応混合物を０℃で２０分間攪拌して、加熱することなく、減圧下に濃縮した。その反応混合物をジエチルエーテル(４００ml)で希釈し、固体を濾過し、乾燥させて、粗製の２−[ Ｈ−Arg(トシル)(ＯＨ)]ベンゾチアゾール２.３ｇを得た。フラスコ１では、工程Ｉの生成物(１.９７ｇ、４.７５mmole)をCH₂Cl₂(５０ml )に溶解し、−１５℃まで冷却して、Ｎ−メチルモルホリン(０.５２ml、４.７５ mmole)、続いて、クロロギ酸イソブチル(０.６２ml、４.７５mmole)を加えた。その反応混合物を−１５℃で２分間攪拌した。フラスコ２では、上の粗製の２−[Ｈ−Arg(トシル)(ＯＨ)]ベンゾチアゾール( ２.３ｇ、４.７４mmole)をCH₂Cl₂(２０ml)に溶解し、０℃まで冷却して、その溶液にジイソプロピルエチルアミン(２.５ml、１４.３mmole)を加えた。その反応混合物を０℃で２分間攪拌した。フラスコ１にフラスコ２の内容物を加えて、その反応混合物を２時間(−１５ ℃)、続いて、室温で２４時間攪拌した。その反応混合物に１Ｎ NaHCO₃(１ml)を加え、その反応溶媒を減圧下に除去して、油状物質を得た。残留物をEtOAc(２００ml)に溶解して、１.５Ｎクエン酸、水、１Ｎ NaHCO₃(１００ml)、および水で連続的に洗浄した。有機溶液を乾燥させ(MgSO₄)、減圧下に乾燥状態となるまで濃縮して、標記アルコール(９.０ｇ、３９％)を粗製の固体として得た。ＦＡＢ−ＭＳ８４４（ＭＨ⁺）。ＴＬＣＲ_f（Ａ）０.３４。Ｎ．ベンジルオキシカルボニル−(１Ｒ,４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン −１−イルカルボニル−Ｎ−[(１Ｓ)−４−[(アミノイミノメチル)アミノ] −１−(ベンゾチアゾール−２−イルカルボニル)ブチル]−Ｌ−プロリンアミド窒素下、磁気攪拌棒および温度計を備えた５００mlの３ツ頸フラスコを無水Ｃ H₂Cl₂ １０ml中の塩化オキサリル(０.７４ml、８.４mmol)の溶液で充填して、ドライアイス−アセトン浴(内部温度−５５℃)中に置いた。その内部温度を−５５ ℃に保つ速度で、CH₂Cl₂ ２００ml中のＤＭＳＯ(１.２ml、１７mmol)の溶液を加えた。５分間攪拌し続けて、CH₂Cl₂ １０ml中の工程Ｍのアルコール(１.４ｇ、１.６６mmol)の溶液を一度に加えた。その混合物を−１０℃まで温めて、４０分間攪拌した。その溶液を冷却し(−５５℃)、トリエチルアミン(３.９ml、２８mm ol)を徐々に加えて、加えた後、冷却浴を取り外した。その温度が−２０℃に達したら、その反応物に１.５Ｎクエン酸溶液を加えた。有機層を分離し、水で１回洗浄し、乾燥させ(MgSO₄)、減圧下に乾燥状態となるまで濃縮して、保護されている標記ケトン(１.４ｇ、１００％)を得た。ＦＡＢ−ＭＳｍ／ｚ８４２（ＭＨ⁺）。Ｃ₄₃Ｈ₅₁Ｎ₇Ｏ₇Ｓ₂に関する元素分析：計算値：Ｃ６１.３４；Ｈ６.１０；Ｎ１１.６４。実測値：Ｃ６１.６６；Ｈ６.５８；Ｎ１０.５２。Ｏ．(１Ｒ,４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン−１−イルカルボニル−Ｎ−[( １Ｓ)−４−[(アミノイミノメチル)アミノ]−１−(ベンゾチアゾール−２− イルカルボニル)ブチル]−Ｌ−プロリンアミド・１．５Ｈ₂ＳＯ₄ ＨＦ−反応装置の反応フラスコを工程Ｎの保護されているケトン(１.３５ｇ、１.６０mmol)で充填して、全ての保護基のＨＦ脱保護に適用した。そのペプチドを、アニソール１.０mlおよびジメチルスルフィド１.０mlを含むＨＦ１０mlで０℃にて１時間処理した後、ＨＦを蒸発させた。残留物をジエチルエーテルで処理し、沈殿を濾過し、乾燥させて、白色の固体とした。その固体(０.９g)を０. ０１％Ｈ₂ＳＯ₄に溶解して、５×２５cmのカラムVydac Ｃ₁₈樹脂に適用した。ＣＨ₃ＣＮの濃度を増大させる(２％〜３５％)グラジエントを使用して、そのペプチドをカラムから溶出した。画分を集めて、分析用ＲＰ−ＨＰＬＣプロフィールに基づいてプールした。ＡＧ１−Ｘ８樹脂(Bio−Rad分析用陰イオン交換樹脂５０−１００メッシュ)を水酸化物型で使用して、合わせた画分をpH４.２に調節した。その溶液を濾過し、濾液を凍結乾燥させて、純粋な標記化合物(０.４０３ｇ、３６％)を得た。ＦＡＢ−ＭＳ５５４（ＭＨ⁺）。Ｃ₂₈Ｈ₃₉Ｎ₇Ｏ₃Ｓ・１.５Ｈ₂ＳＯ₄に関する元素分析：計算値：Ｃ４７.９９；Ｈ６.０４；Ｎ１３.９９。実測値：Ｃ４８.０２；Ｈ６.０２；Ｎ１３.３３。ＲＰＨＰＬＣ(Ｃ₁₈樹脂、グラジェント溶出、０.１％ＴＦＡを含む５−４５％アセトニトリル−０.１％ＴＦＡを含む水)による上の化合物の試験は、その生成物がArg中心での約９５：５Ｓ：Ｒ−異性体の混合物であることを明らかにした。この化合物は、便利なようにＬ−Arg−Iaとして表示され得る。 (１Ｒ,４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン−１−イルカルボニル−Ｎ−[(１ＲＳ)−４−[(アミノイミノメチル)アミノ]−１−(ベンゾチアゾール−２−イルカルボニル)ブチル]−Ｌ−プロリンアミド・１.５Ｈ₂ＳＯ₄ より多くの過剰の２−ベンゾチアゾリルリチウム試薬を上の工程Ｋに対応する工程で使用する、この化合物の違う製法では、ＲＰＨＰＬＣおよび¹³ＣＮＭＲにより測定した場合、最終生成物を約１：１のＳ：Ｒ−異性体比で得た。この化合物は、便利なようにＤＬ−Arg−Iaとして表示され得る。実施例２ (１Ｒ,４aS,８aS)−ペルヒドロイソキノリン−１−イルカルボニル−Ｎ−[(１Ｓ )−４−[(アミノイミノメチル)アミノ]−１−(ベンゾチアゾール−２−イルカルボニル)ブチル]−Ｌ−プロリンアミド・Ｈ₂ＳＯ₄の製造異性体の２−Cbz−(４aS,８aS)−ペルヒドロイソキノリン−１(Ｒ)−カルボニル−Pro−ＯＨ、および上に記載した方法と同様の方法を使用して、標記化合物を得た。ＦＡＢ−ＭＳ５５４（ＭＨ⁺）。Ｃ₂₈Ｈ₃₉Ｎ₇Ｏ₃Ｓ・Ｈ₂ＳＯ₄・Ｈ₂Ｏに関する元素分析：計算値：Ｃ５０.２１；Ｈ６.４７；Ｎ１４.６４。実測値：Ｃ５０.１２；Ｈ６.０６；Ｎ１４.４２。 [α]_D＝−６９．６°（Ｃ，０.５ＭｅＯＨ）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者シューマン，ロバート・セオドアアメリカ合衆国86336アリゾナ州セドナ、バルセロナ・ロード180番

Claims

【特許請求の範囲】１．式Ｉ：Ｙ−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−Arg−ＲＩ［式中、 Argは、Ｌ−アルギニルであり；Ｒは、２−ベンゾチアゾリルであり；Ｘ−ＣＯ−は、Ｌ−プロリルまたは(Ｓ)−アゼチジン−２−カルボニルであり；およびＹ−ＣＯ−は、式IIa、IIb、IIc、またはIId：の基である。］の化合物、またはその医薬的に許容され得る塩。２．Ｘ−ＣＯ−がＬ−プロリル(Pro)である、請求項１の化合物(またはその塩) 。３．Ｘ−ＣＯ−がProであって、Ｙ−ＣＯ−が式IIaまたはIIbの基である、請求項２の化合物(またはその塩)。４．Ｘ−ＣＯ−がProであって、Ｙ−ＣＯ−が式IIaの基である、請求項３の化合物(またはその塩)。５．Ｘ−ＣＯ−がProであって、Ｙ−ＣＯ−が式IIbの基である、請求項３の化合物(またはその塩)。６．Ｙ基において星印で示したキラル中心が、Ｄ−アミノ酸のキラル中心に対応する(Ｒ)−立体化学のものである、請求項１−５のいずれかの化合物(またはその塩)。７．(１Ｒ,４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン−１−イルカルボニル−Ｎ−[( １Ｓ)−４−[(アミノイミノメチル)アミノ]−１−(ベンゾチアゾール−２−イルカルボニル)ブチル]−Ｌ−プロリンアミド、またはその医薬的に許容され得る塩である、請求項１に記載の化合物。８．(１Ｒ,４aR,８aR)−ペルヒドロイソキノリン−１−イルカルボニル−Ｎ−[( １ＲＳ)−４−[(アミノイミノメチル)アミノ]−１−(ベンゾチアゾール−２−イルカルボニル)ブチル]−Ｌ−プロリンアミド、またはその医薬的に許容され得る塩である、請求項１に記載の化合物。９．硫酸との酸付加塩である、請求項７または８に記載の塩。１０．医薬的に許容され得る担体、希釈剤、または賦形剤と共に、請求項１に記載の式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容され得る塩を含んでなる医薬組成物。１１．請求項１に記載の式Ｉの化合物(またはその医薬的に許容され得る塩)を製造する方法であって、式III：Ｙ−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−Arg(ＯＨ)−Ｒ III ［式中、Arg(ＯＨ)は、Ｌ−アルギニル基のカルボニル部分がヒドロキシメチレン基で置換されていることを示す。］の対応する化合物のアルコールを酸化し；その後、保護基を使用して官能基が保護されている場合、その保護基を除去し；そしてその後、式Ｉの化合物の医薬的に許容され得る塩が必要とされる場合、式Ｉの化合物の塩基性の形態を、生理学的に許容され得る対イオンを与える酸と反応させることにより、またはいずれかの他の従来の方法により、それを得る；方法（式中、Arg、Ｒ、Ｘ、およびＹは、請求項１に定義した通りである。）。１２．式III：Ｙ−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−Arg(ＯＨ)−Ｒ III ［式中、Arg(ＯＨ)は、Ｌ−アルギニル基のカルボニル部分がヒドロキシメチレン基で置換されていることを示し、そしてＲ、Ｘ、およびＹは、請求項１に定義した通りである。］のアルコール。１３．哺乳動物において血栓症を抑制する方法であって、処置を必要とする哺乳動物に、請求項１に記載の式Ｉの化合物の抗血栓用量を投与することを含んでなる方法。