JPH07278092A - 抗血栓剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 新規アルギニンアルデヒド誘導体を提供す
る。 【構成】 本発明は、式Ｉ： 【化１】 ［式中、ＸおよびＹは明細書中に定義された意義を有す
る］を有するＬ−アルギニンアルデヒド誘導体、ならび
にこれらの化合物を含有する薬用製剤ならびにトロンビ
ン阻害剤、凝固阻害剤、および血栓塞栓症処置剤として
のそれらの使用方法に関するものである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、哺乳動物の有用な抗凝
固剤であるトロンビン阻害剤に関するものである。詳細
には、本発明は、高い抗凝固活性、抗血栓活性、および
経口バイオアベイラビリティーを有するＬ−アルギニン
アルデヒド誘導体に関するものである。

【０００２】血液凝固の過程、血栓形成は、トロンビン
の形成につながる複雑な蛋白分解的カスケードがきっか
けとなって誘発される。トロンビンは、血漿に可溶であ
るフィブリノーゲンのＡα鎖およびＢβ鎖から活性化ペ
プチドを除去し、不溶性のフィブリンの形成を開始させ
る。

【０００３】抗凝固は現在ヘパリンおよびクマリンの投
与により達成される。凝固および血栓形成の非経口的薬
理学的制御は、ヘパリンの使用によるトロンビンの阻害
に基づいている。ヘパリンは、内因性抗トロンビンＩＩ
Ｉ（トロンビンの主要な生理的阻害物質）の阻害作用を
亢進することによって間接的にトロンビンに作用する。
抗トロンビンＩＩＩのレベルは血漿中で異なり、また表
面結合しているトロンビンはこの間接的機作に対し耐性
のようであるので、ヘパリンは無効な処置となり得る。
凝固検定は有効性および安全性と関連していると信ぜら
れているため、ヘパリンレベルは凝固検定（とりわけ活
性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）検定）を
もって監視されねばならない。クマリンはプロトロンビ
ンおよびこの型の他の蛋白の合成における翻訳後γカル
ボキシ化を遮断することによりトロンビンの生成を妨げ
る。その作用機作の故にクマリンの効果は、徐々に、投
与の６−２４時間後にしか現われない。さらに、これは
選択的抗凝固剤ではない。クマリンもまた凝固検定（と
りわけプロトロンビン時間（ＰＴ）検定）で監視する必
要がある。

【０００４】近年、天然の基質と似た様式で蛋白分解酵
素により認識される小型の合成ペプチドへの関心が高ま
っている。Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ、Ｂｏｃ−
Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ、およびＤ−ＭｅＰｈ
ｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈのようなトリペプチドアルデヒ
ド［バジュス等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３３巻１７
２９−１７３５頁（１９９０）］は、強力なトロンビン
の直接阻害を表わす。多くの研究者、例えばシャマン
等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３６巻３１４−３１９頁
（１９９３）、ならびに欧州特許公開公開番号４７９４
８９および５４２５２５号、が薬剤開発の努力の下に類
似体を合成している。Ｄ−ＭｅＰｈｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−Ｈスルファートが人間における抗凝固剤であることを
立証する初期の臨床研究が報告されている。シムーンズ
等、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、８０巻Ｉ−２３１、要約
１２４１（１９９４）を参照されたい。

【０００５】ヘパリンおよびクマリンは有効な抗凝固剤
であり、既知のトリペプチドアルデヒドからはまだ薬剤
として浮かび上がっているものはなく、そしてこのクラ
スの化合物に対する有望性が継続しているにも拘らず、
トロンビンに対して選択的に且つ抗トロンビンＩＩＩに
対し独立して作用し、好ましくは経口的投与から短時間
で阻害作用を示し、そして止血の維持に必要な血餅の溶
解に干渉しない、抗凝固剤に対する必要性が存在する。

【０００６】本発明は、下記に定義される本発明に係る
化合物が経口投与後の高いバイオアベイラビリティーを
有する強力なトロンビン阻害剤であるという発見に対す
るものである。したがって、抗凝固剤として有用な強力
なトロンビン阻害剤である新規なＬ−アルギニンアルデ
ヒド誘導体を提供することが、本発明の第一の目的であ
る。その他の目的、特徴および利点は、当業者にとって
以下の既述および請求項から明らかであろう。

【０００７】本発明は、式Ｉ：

【化４】 ［式中、Ｘは、ホモプロリニル、プロリニル、チアゾリ
ジノイル、イソチアゾリジノイル、チオモルホリノイ
ル、ピペラジノイル、モルホリノイル、オキサゾリジノ
イル、イソキサゾリジノイル、２−アザノルボルノイ
ル、および縮合二環式基：

【化５】 ［式中、ｎは１−３であり、ｍは２または３である］か
ら選ばれる置換されていないまたは置換された基であ
り、硫黄を含む基においてこの硫黄は１または２個の酸
素原子で酸化されていてよく；Ｙは、

【化６】 である］を有するトロンビン阻害化合物またはその薬学
上許容し得る塩または薬学上許容し得る該化合物もしく
はその塩の溶媒和物を提供する。

【０００８】式Ｉの化合物に加えて、本発明は、式Ｉの
化合物を薬学上許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と
共に含有して成る薬用製剤を提供する。本発明はさら
に、処置を必要とする哺乳動物に式Ｉの化合物の凝固阻
害用量を投与することからなる、哺乳動物において凝固
を阻害する方法を提供する。本発明はさらに、処置を必
要とする哺乳動物に式Ｉの化合物のトロンビン阻害用量
を投与することからなる、トロンビンを阻害する方法を
提供する。さらに本発明は、処置を必要とする哺乳動物
に式Ｉの化合物の有効用量を投与することからなる、血
栓塞栓症の処置方法を提供する。

【０００９】本発明は、トロンビンの新たな阻害剤、活
性成分として該化合物を含有する薬用組成物、ならび
に、静脈血栓症、肺塞栓、動脈血栓症、特に心筋虚血、
心筋梗塞および脳血栓症、ならびに例えば血管形成術お
よび冠動脈バイパス手術後のもの、および炎症過程に関
連するような全身的組織損傷といった全身的凝固亢進状
態および局所凝固亢進状態といったような血栓塞栓症の
予防および処置のための抗凝固剤としての該化合物の用
途に関するものである。

【００１０】単独または他の置換基の一部としての「ア
ルキル」という語は、示されている数の炭素原子を有す
る直鎖または分枝鎖アルキル基、例えばメチル、エチ
ル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブ
チル、イソブチルおよびｓｅｃ−ブチルを意味する。

【００１１】「アルコキシ」という語は、酸素原子によ
って親部分に結合した示されている数の炭素原子を有す
る直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。「ハロ」と
いう語はクロロ、フルオロ、ブロモまたはヨードを意味
する。「ジ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）アミノ」という語は、
各アルキル基が個別に、示されている数の炭素原子を有
する、基−Ｎ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）₂を意味する。

【００１２】基：

【化７】 は本明細書において時にホモプロリニルを意味しｈＰｒ
ｏと略記する。

【００１３】「アゼチジン」という語はアゼチジン−２
−カルボニル基を意味しＡｚｔと略記する。「チアゾリ
ジノイル、イソチアゾリジノイル、チオモルホリノイ
ル、ピペラジノイル、モルホリノイル、オキサゾリジノ
イル、およびイソキサゾリジノイル」という語は、安定
な構造を与えるようそれに結合したカルボニル官能基を
有する示された環状基を意味する。

【００１４】「２−アザノルボルノイル」という語は、
基：

【化８】 を意味する。

【００１５】Ｘが、縮合二環式基を包含する置換された
基である場合、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、
Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、アミノ（−ＮＨ₂）、モノ（Ｃ₁−
Ｃ₄アルキル）アミノ、ジ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）アミ
ノ、メルカプト、Ｃ₁−Ｃ₄アルキルチオ（−Ｓ（Ｏ）_p
（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル））、−ＮＨＳ（Ｏ）_p（Ｃ₁−Ｃ₄
アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、−Ｓ
（Ｏ）_pＮＨ₂、−Ｓ（Ｏ）_pＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキ
ル）、−Ｓ（Ｏ）_pＮ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）₂、置換また
は非置換フェノキシ、置換または非置換ナフチルオキ
シ、置換または非置換ピリジルオキシ、置換または非置
換フェニルチオから選ばれる安定構造を与える１ないし
３個の同じまたは異なる置換基があってよく；ｐは０、
１または２であり；そしてフェノキシ、ナフチルオキ
シ、ピリジルオキシおよびフェニルチオ基上の置換基
は、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₁−Ｃ₄ア
ルコキシ、アミノ（−ＮＨ₂）、モノ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキ
ル）アミノ、ジ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）アミノ、メルカプ
ト、Ｃ₁−Ｃ₄アルキルチオ（−Ｓ（Ｏ）_p（Ｃ₁−Ｃ₄ア
ルキル））、−ＮＨＳ（Ｏ）_p（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）、
−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、−Ｓ（Ｏ）_pＮＨ₂、
−Ｓ（Ｏ）_pＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）、−Ｓ（Ｏ）_pＮ
（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）₂から選ばれる１または２個の同
じまたは異なる置換基であり、ｐは０、１または２であ
る。

【００１６】式Ｉの表現において、基Ｘのカルボニル官
能基はＹ基のアミノ官能基と結合している。Ｙのカルボ
ニル官能基は式Ｉに描かれているアミノ基と結合してい
る。式Ｉおよび置換基Ｙ中の星印は（Ｌ）であるキラル
中心を示す。

【００１７】さらに、Ｘ置換基にはジアステレオマーが
存在し、そしてこのＸ置換基上の置換に応じてさらなる
ジアステレオマーが存在し得る。本発明に係る化合物
は、２またはそれ以上のジアステレオマーの混合物なら
びに各々個々の異性体を包含する。

【００１８】以下の化合物は式Ｉの範囲内に意図される
化合物を例示するものである：Ｄ−ホモプロリニル−Ｌ
−プロリニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド；Ｄ−プロ
リニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン アルデヒ
ド；Ｄ−ホモプロリニル−Ｌ−アゼチジン−２−カルボ
ニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド；Ｄ−プロリニル−
Ｌ−アゼチジン−２−カルボニル−Ｌ−アルギニン ア
ルデヒド；および、Ｄ−（４−フェノキシ）プロリニル
−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド。

【００１９】本発明に係る好ましい化合物は、Ｘが非置
換もしくは一置換ホモプロリニル、非置換もしくは一置
換プロリニル、非置換もしくは一置換ピペラジノイル、
または、

【化９】 ［式中、ｎおよびｍおよびＹは式Ｉについて上に定義さ
れる通りである］から選ばれる非置換もしくは一置換縮
合二環である式Ｉの化合物、ならびに薬学上許容し得る
その塩および溶媒和物である。

【００２０】特に好ましい本発明化合物は、Ｘがホモプ
ロリニル、プロリニル、４−フェノキシプロリニル、ピ
ペラジノイル、または、

【化１０】 ［式中、ｎ、ｍおよびＹは式Ｉについて上に定義される
通りである］から選ばれる縮合二環である、式Ｉの化合
物；および薬学上許容し得るその塩または溶媒和物であ
る。

【００２１】上に述べたように、本発明は上の式Ｉによ
り定義される化合物の薬学上許容し得る塩を包含する。
本発明に係る特定の化合物は１またはそれ以上の充分塩
基性の官能基を有しており、従って多数の非毒性無機お
よび有機酸のいずれかと反応して薬学上許容し得る塩を
形成することができる。酸付加塩を形成させるために通
常用いられる酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、
硫酸、燐酸等のような無機酸、およびｐ−トルエンスル
ホン酸、メタンスルホン酸、蓚酸、ｐ−ブロモフェニル
スルホン酸、炭酸、琥珀酸、クエン酸、安息香酸、酢酸
等のような有機酸である。したがってこのような薬学上
許容し得る塩の例は、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、
亜硫酸塩、重亜硫酸塩、燐酸塩、一水素燐酸塩、二水素
燐酸塩、メタ燐酸塩、ピロ燐酸塩、塩化物、臭化物、ヨ
ウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリ
ル酸塩、アクリル酸塩、蟻酸塩、イソ酪酸塩、カプロン
酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、蓚酸塩、マロ
ン酸塩、琥珀酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマ
ル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキ
シン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸
塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキ
シ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スル
ホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フ
ェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、
乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石
酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナ
フタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホ
ン酸塩、マンデル酸塩等である。好ましい薬学上許容し
得る酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸および硫酸のような
鉱酸により形成された塩である。

【００２２】上に述べたように、本発明は式Ｉの化合物
および薬学上許容し得るその塩の溶媒和物を包含する。
本発明に係る特定の化合物または薬学上許容し得るその
塩は水または一般的有機溶媒により溶媒和物を形成する
ことができる。このような溶媒和物は本発明化合物の範
囲内に包含される。

【００２３】式Ｉで示される化合物は、対応する式Ｉ
Ｉ：

【化１１】 ［式中、グアニジノ基上のＰはアミノ保護基を表わし、
（Ｐ）Ｘは基Ｘ（これは、Ｘが塩基性ＮＨ基を含む式Ｉ
の化合物に対しては、個別に選択されたアミノ保護基Ｐ
を有していてよい）を表わす］で示される化合物の保護
基Ｐを同時にまたは順次除去し；その後式Ｉの化合物の
塩が必要である場合は薬学上許容し得る酸によって塩を
形成させることにより、製造する。例えば、アミノ保護
基がベンジルオキシカルボニルである式ＩＩの化合物
は、希エタノール性塩酸中、炭素上パラジウム触媒によ
り、大気圧下に水素化することによって、式Ｉの対応化
合物のヒドロクロリドに変換することができる。

【００２４】式Ｉの化合物はペプチドを結合する既知の
方法によって製造される。このような方法の一つによれ
ば、酸ＰＸ−ＣＯＯＨ［式中、Ｘ−ＣＯＯＨは式Ｉのた
めに定義されたＸ基の酸等価物であり、そしてＰはアミ
ノ保護基である］をカルボキシ保護プロリン（またはア
ゼチジン−２−カルボキシ エステル）と結合させてジ
ペプチドを形成させる。次にプロリン部分のカルボキシ
保護エステル基を除去（脱遮断または脱エステル化）
し、遊離酸型のジペプチドをアルギニンのラクタム型と
結合させる。上の反応経路は以下の反応式１：

【化１２】 ［式中、Ｐはアミノ保護基を表わす］により例示され
る。

【００２５】結合させたＡｒｇ（Ｐ）ラクタム生成物
（ｃ）は、不活性溶媒または溶媒混合物中で水素化物還
元剤、好ましくは水素化リチウムアルミニウムまたはリ
チウムトリ−ｔ−ブトキシアルミノヒドリドと反応して
ラクタム環が還元され、式：

【化１３】 ［式中、（Ｐ）はアミノ保護基を表わす］で示されるア
ルギニンアルデヒド型のトリペプチドを提供する。

【００２６】保護基は金属触媒による水素化といった当
業者に知られる方法によって除去する。アルギニンのラ
クタム型はアミノ保護アルギニン［Ａｒｇ−ＯＨ］の分
子内結合により得られる。例えば、式：

【化１４】 ［式中、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニルでありＣ
ｂｚはベンジルオキシカルボニルである］で示されるＢ
ｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ＯＨをまず、クロロ蟻酸エステ
ルによって活性な混合酸無水物のような活性エステル型
に、例えばクロロ蟻酸エチルによってクロロ蟻酸イソブ
チルに変換する。このエステル形成は、Ｎ−メチルモル
ホリンのような第三級アミンの存在下に実施する。さら
なるまたは別の第三級アミン塩基、例えばトリエチルア
ミンまたはジイソプロピルエチルアミンの添加は分子内
アシル化をもたらし、下に示されるジアミノ保護アルギ
ニンのラクタム型を供する：

【化１５】 上の反応式に示されるようなＰＸ（Ｃ＝Ｏ）−Ｐｒｏ−
ＯＨとの結合に使用する前に、Ｂｏｃまたはその他のア
ミン保護基をトリフルオロ酢酸またはＨＣｌにより選択
的に除去し、必要な遊離アミノ基を得る。

【００２７】Ｘが式Ｉについて上に定義される通りであ
る場合、ＰＸＣＯＯＨ化合物とプロリンエステルとの結
合は、まず該アミノ酸のアミノ基を保護することにより
実施する。アミノ基の一時的保護または遮断のために一
般的に使用される常套的アミノ保護基を使用する。

【００２８】アミノ保護基とは、化合物上の他の官能基
を反応させつつアミノ官能基を遮断または保護するため
に一般的に使用されるアミノ基の置換基を意味する。こ
のようなアミノ保護基の例は、ホルミル基、トリチル
基、フタルイミド基、トリクロロアセチル基、クロロア
セチル、ブロモアセチルおよびヨードアセチル基、ウレ
タン型遮断基、例えばベンジルオキシカルボニル、ｔ−
ブトキシカルボニル ４−フェニルベンジルオキシカル
ボニル、２−メチルベンジルオキシカルボニル、４−メ
トキシベンジルオキシカルボニル、４−フルオロベンジ
ルオキシカルボニル、４−クロロベンジルオキシカルボ
ニル、３−クロロベンジルオキシカルボニル、２−クロ
ロベンジルオキシカルボニル、２，４−ジクロロベンジ
ルオキシカルボニル、４−ブロモベンジルオキシカルボ
ニル、３−ブロモベンジルオキシカルボニル、４−ニト
ロベンジルオキシカルボニル、４−シアノベンジルオキ
シカルボニル、２−（４−キセニル）イソプロポキシカ
ルボニル、１，１−ジフェニルエト−１−イルオキシカ
ルボニル、１，１−ジフェニルプロプ−１−イルオキシ
カルボニル、２−フェニルプロプ−２−イルオキシカル
ボニル、２−（ｐ−トルイル）プロプ−２−イルオキシ
カルボニル、シクロペンタニルオキシカルボニル、１−
メチルシクロペンタニルオキシカルボニル、シクロヘキ
サニルオキシカルボニル、１−メチルシクロヘキサニル
オキシカルボニル、２−メチルシクロヘキサニルオキシ
カルボニル、２−（４−トルイルスルホニル）エトキシ
カルボニル、２−（メチルスルホニル）エトキシカルボ
ニル、２−（トリフェニルホスフィノ）エトキシカルボ
ニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル（「ＦＭＯ
Ｃ」）、２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニ
ル、アリルオキシカルボニル、１−（トリメチルシリル
メチル）プロプ−１−エニルオキシカルボニル、５−ベ
ンズイソキサリルメトキシカルボニル、４−アセトキシ
ベンジルオキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエ
トキシカルボニル、２−エチニル−２−プロポキシカル
ボニル、シクロプロピルメトキシカルボニル、４−（デ
シルオキシ）ベンジルオキシカルボニル、イソボルニル
オキシカルボニル、１−ピペリジルオキシカルボニル
等；ベンゾイルメチルスルホニル基、２−（ニトロ）フ
ェニルスルフェニル基、ジフェニルホスフィン オキシ
ド基等のアミノ保護基を包含する。誘導されたアミノ基
が当該分子の他の場所でのその後の反応条件に対して安
定であり、且つ適当な時点で分子の他の部分を乱すこと
なく除去され得る限り、使用されるアミノ保護基の種類
は重要ではない。好ましいアミノ保護基は、ベンジルオ
キシカルボニル、アリルオキシカルボニル、ｔ−ブトキ
シカルボニル、およびトリチル基である。セファロスポ
リン、ペニシリンおよびペプチド分野で使用される類似
のアミノ保護基もまた上の語に包含される。上の語が意
味する基のさらなる例は、Ｊ．Ｗ．バートン、「プロテ
クティヴ・グループス・イン・オーガニック・ケミスト
リー（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏ
ｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」、Ｊ．Ｇ．Ｗ．
マコーミー編、プレナム・プレス、ニューヨーク、Ｎ．
Ｙ．、１９７３、２章およびＴ．Ｗ．グリーン、「プロ
テクティヴ・グループス・イン・オーガニック・シンセ
シス（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏ
ｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、ジョン・ウィ
レイ・アンド・サンズ、ニューヨーク、Ｎ．Ｙ．、１９
８１、７章に記載されている。関連する語「保護アミ
ノ」は、上に論じたアミノ保護基で置換されているアミ
ノ基を定義する。

【００２９】結合反応の実施にあたり、プロリンのため
のエステル保護基を使用するが、これはアミノ保護基が
無傷で残る条件によって除去し得る。したがってアシル
化酸ＰＸＣＯＯＨのアミノ保護基は、反応式Ｉにおける
（ｃ）を形成するためのアルギニンラクタム化合物との
その後の結合中、アミノ基の保護のための適切な場所に
残っている。

【００３０】本明細書で使用されるカルボキシ保護エス
テル基は、反応が化合物の他の官能基上で行なわれてい
る間、カルボン酸基を遮断または保護するために一般に
使用されるカルボン酸基のエステル誘導体の１つを意味
する。このようなカルボン酸保護基の例は、Ｃ₁−Ｃ₄ア
ルキル、ベンジル、４−ニトロベンジル、４−メトキシ
ベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、２，４−ジメ
トキシベンジル、２，４，６−トリメトキシベンジル、
２，４，６−トリメチルベンジル、ペンタメチルベンジ
ル、３，４−メチレンジオキシベンジル、ベンズヒドリ
ル、４，４'−ジメトキシベンズヒドリル、２，２'，
４，４'−テトラメトキシベンズヒドリル、ｔ−ブチ
ル、ｔ−アミル、トリチル、４−メトキシトリチル、
４，４'−ジメトキシトリチル、４，４'，４''−トリメ
トキシトリチル、２−フェニルプロプ−２−イル、トリ
メチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、フェナシ
ル、２，２，２−トリクロロエチル、２−（トリメチル
シリル）エチル、２−（ジ（ｎ−ブチル）メチルシリ
ル）エチル、ｐ−トルエンスルホニルエチル、４−ニト
ロベンジルスルホニルエチル、アリル、シンナミル、１
−（トリメチルシリルメチル）−プロプ−１−エン−３
−イル、等の基を包含する。誘導されたカルボン酸が当
該分子の他の場所でのその後の反応条件に対して安定で
あり、且つ適当な時点で分子の他の部分を乱すことなく
除去され得る限り、使用されるカルボキシ保護基の種類
は重要ではない。特に、カルボキシ保護された分子は、
強い求核性塩基またはラネーニッケルのような極めて活
性化された金属触媒を使用する還元条件に付さないこと
が重要である。（このような苛酷な除去条件は、下に論
じるアミノ保護基の除去の際にも避けるべきである。）
好ましいカルボキシ保護基はＣ₁−Ｃ₃アルキルおよびベ
ンジルである。これらの基のさらなる例は、Ｅ．ハスラ
ム、「プロテクティヴ・グループス・イン・オーガニッ
ク・ケミストリー（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐ
ｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」、
Ｊ．Ｇ．Ｗ．マコーミー編、プレナム・プレス、ニュー
ヨーク、Ｎ．Ｙ．、１９７３、５章およびＴ．Ｗ．グリ
ーン、「プロテクティヴ・グループス・イン・オーガニ
ック・シンセシス（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐ
ｓ ｉｎＯｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、ジ
ョン・ウィレイ・アンド・サンズ、ニューヨーク、Ｎ．
Ｙ．、１９８１、５章に記載されている。

【００３１】Ｙがアゼチジニル（ｃ：プロリニル）であ
る式Ｉの化合物はペプチド結合の既知の方法によって同
じ様なやり方で製造される。このような方法の１つによ
れば、アルギニンの環状ラクタム型（ｅ）を製造し、ア
ミノ保護されたアゼチジン−２−カルボン酸（ｄ）と下
記のように結合させて、ジペプチド（ｆ）：

【化１６】 ［式中、Ｐは、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）
基、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｐ−トルエン
スルホニル、等のようなアミノ保護基を表わす］を得
る。好ましくは、用いられるアミノ保護基は水素化また
は緩和な酸（例えばトリフルオロ酢酸）もしくは強酸
（例えばＨＣｌ）による処理によって除去し得る。その
他の好適なアミノ保護基の例は、「プロテクティヴ・グ
ループス・イン・オーガニック・シンセシス（Ｐｒｏｔ
ｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ
Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」、第２版、Ｔ．Ｗ．グリーンお
よびピーター・Ｇ．Ｍ．ワッツ、７章３０９−４０５頁
（１９９１）、ジョン・ウィレイ・アンド・サンズ・Ｉ
ｎｃ．、出版、に供されている。Ｂｏｃまたはその他の
好適な保護基は、アゼチジン環の窒素から除去され、次
いでこれを所望のアミノ酸アシル基によりアシル化して
下に示されるトリペプチドを得る。

【化１７】

【００３２】Ｙがアゼチジニル−２−カルボニルである
本発明化合物について例示および説明してきたが、当業
者は、これらの方法を使用してＹがプロリニルである本
発明化合物を得ることもできることが理解できるであろ
う。結合したＡｒｇ（Ｐ）ラクタム生成物（ｇ）は、不
活性溶媒または溶媒の混合物中、水素化物還元剤、好ま
しくは水素化リチウムアルミニウムまたはリチウムトリ
−ｔ−ブトキシアルミノヒドリドにより還元してラクタ
ムを還元し、式： ＰＸ（Ｃ＝Ｏ）−Ａｚｔ−Ａｒｇ（Ｐ）−Ｈ ［式中、Ｐはアミノ保護基を表わす］で示されるアルギ
ニンアルデヒド型のトリペプチドを得る。保護基は金属
触媒による水素化のような当業者に知られる方法によっ
て除去する。

【００３３】別法として本発明に係る化合物は、ＰＸＣ
ＯＯＨ酸をカルボキシ保護されたアゼチジン−２−カル
ボン酸と結合させることにより製造される。このカルボ
キシをジペプチドとして脱保護し、次いでこれを上記の
ように製造したラクタム型のアミノ保護アルギニンと結
合させる。次にこのトリペプチドを還元して、上記のよ
うなアミノ保護アルギニントリペプチドを得る。

【００３４】ＰＸＣＯＯＨ化合物の結合は、まずこのア
ミノ酸のアミノ基を保護することによって実施する。ア
ミノ基の一時的な保護または遮断のために一般的に使用
される常套的アミノ保護基が使用される。このような保
護基の例は上に記載されている。

【００３５】上記の結合反応は低温、好ましくは約−２
０℃および約１５℃の間の温度で実施する。結合反応
は、不活性有機溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド、
ジメチルアセトアミド、テトラヒドロフラン、塩化メチ
レン、クロロホルム等の一般的溶媒または係る溶媒の混
合物中で実施する。一般には、結合反応においてアシル
化酸の活性エステルが使用される場合には、無水条件を
用いる。

【００３６】本発明に係る化合物は酸付加塩の形で最も
良く単離される。上に述べたような酸により形成された
式Ｉの化合物の塩は、抗血栓剤の投与のため、およびこ
れら薬剤の製剤の製造のための薬学上許容し得る塩とし
て有用である。その他の酸付加塩を製造し該ペプチドの
単離および精製に使用することができる。例えば、メタ
ンスルホン酸、ｎ−ブタンスルホン酸、ｐ−トルエンス
ルホン酸およびナフタレンスルホン酸のようなスルホン
酸類によって形成される塩をそのように使用することが
できる。

【００３７】式Ｉの化合物を精製し、同時に所望の安定
な塩型を製造するための好ましい方法は、米国特許第５
２５０６６０号に記載されている方法である。この方法
によれば、水性成分がｐＨ２．５の硫酸または塩酸から
成りアセトニトリルが有機成分であるＣ₁₈逆相クロマト
グラフィーによる調製的精製によって、安定な硫酸塩ま
たは塩酸塩が得られる。酸性溶出液のｐＨはヒドロキシ
型の陰イオン交換樹脂、例えばバイオ−ラドＡＧ−１Ｘ
８によって約ｐＨ４および約６の間に調節する。ｐＨ調
節の後、トリペプチド硫酸塩または塩酸塩の溶液を凍結
乾燥して乾燥粉末型の純粋な塩を得る。この工程の１つ
の例においては、粗製のＤ−ｈＰｒｏ−Ｌ−Ａｚｔ−Ｌ
−Ａｒｇ−Ｈ硫酸塩を水に溶解し、この溶液をヴィダッ
クＣ₁₈ＲＰＨＰＬＣの５ｃｍ Ｘ ５０ｃｍカラムにロ
ードする。Ａに対する２−２０％のＢの勾配（Ａ＝０．
０１％Ｈ₂ＳＯ₄；Ｂ＝アセトニトリル）を１０時間にわ
たり使用する。複数の画分を集め、分析用ＲＰＨＰＬＣ
により決定された生成物含有画分をプールする。プール
された画分のｐＨをヒドロキシド型のＡＧ−１Ｘ８樹脂
（バイオ−ラド、３３００ラガッタ・ブールヴァード、
リッチモンド、ＣＡ、９４８０４）によりｐＨ４．０−
４．５に調節する。この溶液を濾過し、濾液を凍結乾燥
して硫酸塩の形の純粋なＤ−、Ｌ−、Ｌ−トリペプチド
を得る。

【００３８】Ｘ置換基のジアステレオマーの光学活性異
性体もまた本発明の一部と考える。このような光学活性
異性体は、上記の方法により、またはラセミ混合物の分
割により、それらの各々の光学活性前駆体から製造する
ことができる。この分割は、キラル試薬を用いた誘導体
形成とその後のクロマトグラフィーまたは反復結晶化に
よって実施することができる。標準的方法によるこのキ
ラル補助部分の除去は、実質上光学的に純粋な本発明化
合物またはその前駆体の異性体を与える。分割に関する
さらなる詳細は、ジャックス等、エナンチオマーズ、ラ
セメイツ、アンド・レゾルーションズ（Ｅｎａｎｔｉｏ
ｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄＲｅｓｏｌｕｔ
ｉｏｎｓ）、ジョン・ウィレイ・アンド・サンズ、１９
８１で得られる。

【００３９】本発明化合物の合成において最初の出発物
質として用いられる化合物は良く知られており、市販品
が入手できない範囲まで、当業者により一般に用いられ
る標準的方法により容易に合成される。

【００４０】以下の実施例は本発明をさらに説明するた
めに供されるものであって、本発明を限定するものと解
してはならない。以下の実施例中、Ｒ_f値は、別途記載
の無い限り、以下の溶媒系中、キーセルゲル６０Ｆ−２
５４（メルク、ダルムシュタット）を用いるシリカゲル
薄層クロマトグラフィーにより測定された： （Ａ）クロロホルム−メタノール−酢酸、１３５：１
５：１、ｖ：ｖ：ｖ。 （Ｂ）酢酸エチル−酢酸−無水エタノール、９０：１
０：１０、ｖ：ｖ：ｖ。 （Ｃ）クロロホルム−メタノール−酢酸、９０：３０：
５、ｖ：ｖ：ｖ。

【００４１】実施例中使用された分析用ＨＰＬＣ法は以
下の通りであった：方法１ ０.４６ｃｍ ｘ １０ｃｍのヴィダックＣ₁₈
逆相カラムを使用するウォーターズ６００Ｅ。クロマト
グラムは、Ａ＝０.１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含有する
水、およびＢ＝０.１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含有するア
セトニトリルの勾配を用いてＬＤＣ上２１４ｎＭで監視
した。

【００４２】方法２ ０.４６ｃｍ ｘ １０.０ｃｍ寸
法のヴィダックＣ₁₈逆相カラムを用いるファルマシアＦ
ＰＬＣ。監視は、Ａ＝０.１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含有
する水、またはＢ＝０.１％（ｖ：ｖ）ＴＦＡを含有す
るアセトニトリルのいずれかの勾配を用いてファルマシ
アＵＶ−Ｍ上２１４ｎＭで行なった。

【００４３】方法３ ０.４６ｃｍ ｘ １０ｃｍのヴ
ィダックＣ₁₈逆相カラムを用いるヒタチＬ−６２００。
Ａ（０.１％（ｖ：ｖ）水性ＴＦＡ）およびＢ（アセト
ニトリル中０.１％ＴＦＡ）から成る勾配を用いて試料
を溶出した。クロマトグラムはＬ−４０００ ＵＶ検出
機を用いて２１４ｎｍで監視した。

【００４４】実施例中で用いられる略語は以下の意義を
有する。 アミノ酸：Ａｒｇ＝アルギニン、Ｐｒｏ＝プロリン、ｈ
Ｐｒｏ＝ホモプロリン、Ａｚｔ＝アゼチジン−２−カル
ボン酸、Ｐｈｅ＝フェニルアラニン、ｈＰｈｅ＝ホモフ
ェニルアラニン。 Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔ−ブトキシカ
ルボニル)。 Ｂｚｌ＝ベンジル。 Ｃｂｚ＝ベンジルオキシカルボニル。 ＤＣＣ＝ジシクロヘキシルカルボジイミド。 ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド。 ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド。 ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル。 Ｅｔ₂Ｏ＝ジエチルエーテル。 ＥｔＯＨ＝エタノール。 ＦＡＢ−ＭＳ＝高速原子衝撃質量分析。 ＦＤ−ＭＳ＝電界脱離質量分析。 ＨＯＢＴ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾールヒドラー
ト。 ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー。 ＩＲ＝赤外スペクトル。 ＬＡＨ＝水素化リチウムアルミニウム。 ＮＭＲ＝核磁気共鳴。 ＭＯＣ＝メトキシカルボニル。 ＲＰＨＰＬＣ＝逆相高速液体クロマトグラフィー。 ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸。 ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン。 ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー。 別途記載の無い限りｐＨ調節および後処理は水性の酸ま
たは塩基溶液による。

【００４５】

【実施例】実施例１ Ｄ−ホモプロリニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−
アルギニン アルデヒド ジヒドロクロリド（Ｄ−ｈＰ
ｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌ）の製造Ａ）Ｃｂ
ｚ−Ｄ−ホモプロリン Ｄ−ピペコリン酸（５.０ｇ、３８.７ｍｍｏｌ）をテト
ラヒドロフラン（１００ｍＬ）および水（３０ｍＬ）に
溶解した。溶液のｐＨを２Ｎ ＮａＯＨで９.５に調節
し、クロロ蟻酸ベンジル（５.５ｍＬ、３８.７ｍｍｏ
ｌ）を滴下し、２Ｎ ＮａＯＨでｐＨを９.５に維持し
た。反応を室温でさらに１時間攪拌した。有機溶媒を減
圧で蒸発させ、残留物にジエチルエーテル（１００ｍ
Ｌ）および水（５０ｍＬ）を加えた。水層を分離し、こ
の溶液のｐＨを３Ｎ ＨＣｌで２.８に調節し、酢酸エ
チル（１５０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し乾燥（Ｍ
ｇＳＯ₄）し、濾液を減圧濃縮すると表記化合物が透明
な油状物として得られた（９.６ｇ；収率９５％）： ＦＤ−ＭＳ ２６４（ＭＨ⁺）； ＴＬＣ Ｒ_f （Ａ）０.３７；¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ１.２２−１.５８（ｍ，２
Ｈ)、１.６０−１.８０（ｍ，２Ｈ)、２.２０−２.３５
（ｍ，１Ｈ)、２.９８−３.１８（ｍ，１Ｈ)、４.００
−４.２０（ｍ，１Ｈ)、４.８５−５.０５（ｍ，１
Ｈ)、５.２０（ｓ，２Ｈ)、７.３０−７.４０（ｄ，５
Ｈ）； ［α］_D＋３９.０゜（Ｃ＝０.５／ＭｅＯＨ)。

【００４６】Ｂ）Ｃｂｚ−Ｄ−ホモプロリニル−プロリ
ン Ｃｂｚ−Ｄ−ホモプロリン（Ａ）（９.５ｇ、３６ｍｍ
ｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）に溶解し、この溶液
を０℃に冷却した。この溶液に２，４，５トリクロロフ
ェノール（７.１ｇ、３６ｍｍｏｌ）およびジシクロヘ
キシルカルボジイミド（７.４ｇ、３６ｍｍｏｌ）を加
えた。反応を０℃で１時間、そして室温で１時間攪拌し
た。沈澱を濾過し、濾液を減圧濃縮して油状物を得た。
この油状物をピリジン（１００ｍＬ）に溶解し、Ｌ−プ
ロリン（４.２ｇ、３６ｍｍｏｌ）およびトリエチルア
ミン（５.０ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）を加えた。反応を室
温で攪拌した（２４時間)。反応溶媒を減圧で除去し油
状物を得た。残留物を水（１００ｍＬ）に溶解し、ジエ
チルエーテル（５０ｍＬ）を加え、ｐＨを２Ｎ ＮａＯ
Ｈで９.５に調節した。水層をジエチルエーテルで２回
抽出した。水層を分離し、ｐＨを３Ｎ ＨＣｌで２.８
に調節し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）を加えた。有機層
を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾液を減圧で蒸発さ
せるとアモルファスの固体が得られた（１１.４ｇ；収
率８８％）； ＦＤ−ＭＳ ３６１（ＭＨ⁺）； ＴＬＣ Ｒ_f （Ａ）０.７８； ［α］_D＝−２.７゜（ｃ＝０.５／トリフルオロエタノ
ール）； 元素分析（Ｃ₁₉Ｈ₂₄Ｎ₂Ｏ₅として）： 理論値：Ｃ ６３.３２、Ｈ ６.７１、Ｎ ７.７７； 実測値：Ｃ ６３.４２、Ｈ ６.８４、Ｎ ７.９６。

【００４７】Ｃ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ Ｂｏｃ−Ａｒｇ（ＨＣＬ）−ＯＨ（８２.１ｇ、２５０
ｍｍｏｌ）を三頸フラスコ中で５Ｎ ＮａＯＨ（２４０
ｍＬ）に溶解した。反応混合物を−５℃に冷却し、クロ
ロ蟻酸ベンジル（１４３ｍＬ、１.０ｍｏｌ）を滴下し
つつ（５５分間）５Ｎ ＮａＯＨ（２５０ｍＬ）を用い
てｐＨを１３.２−１３.５に維持した。反応混合物を−
５℃でさらに１時間攪拌し、Ｈ₂Ｏ（１００ｍＬ）およ
びＥｔ₂Ｏ（５００ｍＬ）で希釈した。水層を分離しＥ
ｔ₂０で抽出した（２ Ｘ ５００ｍＬ)。水層を３Ｎ
Ｈ₂ＳＯ₄（５６０ｍＬ）でｐＨ３.０に酸性化し、Ｅｔ
ＯＡｃ（５５０ｍＬ）で抽出した。水層を分離しＥｔＯ
Ａｃで１回抽出した。合したＥｔＯＡｃ層を水洗し乾燥
（ＭｇＳＯ₄）した。有機層を減圧で濃縮乾固すると表
記化合物が得られた（６６.１ｇ；収率６５％）： ＴＬＣ Ｒ_f （Ｃ）０.４３； ＦＤ−ＭＳ ４０８（Ｍ⁺）；¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ１.４２（ｓ，９Ｈ)、１.６
１−１.９１（ｍ，４Ｈ)、３.２３−３.４１（ｍ，２
Ｈ)、４.１７（ｄ，１Ｈ)、５.２１（ｓ，２Ｈ)、５.６
２（ｄ，１Ｈ)、７.３０−７.４２（ｍ，６Ｈ)、８.３
７（ｍ，１Ｈ)。

【００４８】Ｄ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ＯＨ（Ｃ）（６６.０ｇ、
０.１６２ｍｏｌ）をＴＨＦ（２３０ｍＬ）に溶解し、
−１０℃に冷却した。この反応混合物にＮ−メチルモル
ホリン（１８.７ｍＬ、０.１７ｍｏｌ)、続いてクロロ
蟻酸イソブチル（２２.５ｍＬ、０.１７ｍｏｌ）を加え
た。反応混合物を−１０℃で５分間攪拌し、トリエチル
アミン（２３.５ｍＬ、０.１７ｍｏｌ）を加えた。反応
混合物を−１０℃で１時間、そして室温で１時間攪拌し
た。反応混合物を氷水１Ｌ中に注ぎ、得られた沈澱を濾
過し、冷水で洗浄し、減圧乾燥した。生成物をＥｔＯＡ
ｃから結晶化すると表記化合物が得られた（３８.０５
ｇ；収率６０％）： ＴＬＣ Ｒ_f （Ａ）０.７７； ＦＤ−ＭＳ ３９１（ＭＨ⁺）；¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ１.４８（ｓ，９Ｈ)、１.７
８−１.９８（ｍ，２Ｈ)、２.５０（ｍ，１Ｈ)、３.４
１（ｍ，１Ｈ)、４.４３（ｍ，１Ｈ)、４.９０（ｍ，１
Ｈ)、５.１６（ｓ，２Ｈ)、５.２７（ｍ，１Ｈ)、７.２
８−７.４５（ｍ，６Ｈ)、９.４１（ｍ，１Ｈ)、９.６
８（ｍ，１Ｈ)。

【００４９】Ｅ）ＨＣｌ・Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム ＥｔＯＡｃ（７.２Ｌ）に飽和させたＨＣｌ（ｇ）の溶
液を、ＣＨ₂Ｃｌ₂（３Ｌ）に溶解したＢｏｃ−Ａｒｇ
（Ｃｂｚ）−ラクタム（Ｄ）（６４１ｇ、１.６４ｍｏ
ｌ）の溶液に−１０℃で３０分間かけて滴下した。−１
０℃で１時間攪拌して反応させ、３時間かけて徐々に室
温に温めた。ジエチルエーテル（１２Ｌ）を加え、沈澱
を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ
₄）し、減圧で濃縮乾固すると表記化合物が得られた
（５８０ｇ）： ＴＬＣ Ｒ_f （Ｃ）０.２９； ＦＤ−ＭＳ ２９１（ＭＨ⁺）；

【００５０】Ｆ）Ｃｂｚ−Ｄ−ｈＰｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム フラスコ１中でＣｂｚ−ｈＰｒｏ−Ｐｒｏ−ＯＨ（Ｂ）
（１１.１ｇ、３０.８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（７５ｍＬ）
に溶解し、−１５℃に冷却し、Ｎ−メチルモルホリン
（３.４ｍＬ、３０.８ｍｍｏｌ)、次いでクロロ蟻酸イ
ソブチル（４.０ｍＬ、３０.８ｍｍｏｌ）を加えた。反
応混合物を−１５℃で２分間攪拌した。フラスコ２中で
ＨＣｌ・Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム（Ｅ）（１０.１
ｇ、３０.８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（７５ｍＬ）に溶解
し、０℃に冷却し、ジイソプロピルエチルアミン（１
０.７ｍＬ、６１.６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を
０℃で２分間攪拌した。フラスコ２の内容物を一度にフ
ラスコ２に加え、反応混合物を−１５℃で４時間攪拌し
た。反応混合物を徐々に室温まで温めた（２４時間)。
反応混合物に１Ｎ ＮａＨＣＯ₃（５ｍＬ）を加え、反
応溶媒を減圧で除去した。この油状物にＥｔＯＡｃ（２
００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を加え、有機層を分
離し、１Ｎ ＮａＨＣＯ₃、水、１.５Ｎクエン酸、およ
び水で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾液
を蒸発させると表記化合物のアモルファス固体が得られ
た（１７.４ｇ、収率８９％)。 ＴＬＣ Ｒ_f （Ａ）０.６６； ＦＤ−ＭＳ ６３３（ＭＨ⁺）；

【００５１】Ｇ）Ｃｂｚ−Ｄ−ｈＰｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ（Ｃｂｚ）−Ｈ Ｃｂｚ−Ｄ−ｈＰｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラ
クタム（Ｆ）（１７.２ｇ、２７.１ｍｍｏｌ）を無水Ｔ
ＨＦ（２００ｍＬ）に溶解し、Ｎ₂雰囲気下にフラスコ
に入れた。反応混合物を−６５℃に冷却し、ＴＨＦ（２
７.１ｍＬ、２７.１ｍｍｏｌ）中の水素化リチウムアル
ミニウム１Ｍを５分間かけて滴下した。反応混合物を−
６５℃で３０分間攪拌した。ＴＨＦ５ｍＬおよび０.５
Ｎ Ｈ₂ＳＯ₄５ｍＬの溶液を反応混合物に５分間かけて
滴下した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希
釈し、水（５０ｍＬ）および有機層を分離した。有機層
を水（２ Ｘ １００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ
₄）した。濾液をアモルファス固体となるまで減圧で濃
縮乾固すると表記化合物が得られた（１４.１ｇ；収率
８２％）： ＴＬＣ Ｒ_f （Ａ）０.３３； ＦＡＢ−ＭＳ ６３５（ＭＨ⁺）；

【００５２】Ｈ）Ｄ−ｈＰｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・
２ＨＣｌ・１.５Ｈ₂Ｏ Ｃｂｚ−Ｄ−ｈＰｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−Ｈ
（Ｇ）（１４.０ｇ、２２.０ｍｍｏｌ）をエタノール
（１５０ｍＬ)、水（５０ｍＬ)、および１ＮＨＣｌ（５
５ｍＬ）に溶解した。この溶液に５％Ｐｄ／Ｃ（５.０
ｇ）を加え、この反応を周囲温度および圧力下で３時間
水素化し、反応を窒素で５分間パージした。珪藻土板で
濾過することにより触媒を除去し、濾液を１００ｍＬま
で減圧濃縮した。さらに５０ｍＬのＨ₂Ｏを反応に加
え、溶液のｐＨをバイオラドＡＧ１−Ｘ８樹脂（ヒドロ
キシド型）で４.０に調節した。樹脂を濾過により除去
し、溶液を凍結乾燥して粗製の表記化合物８.２９ｇ
（８６％）を得た。二部に分けた粗製物質を０.０５％
ＨＣｌ（ｐＨ２.５）２０ｍＬに溶解し、直列に連結し
た２本の５ Ｘ ２５ｃｍカラム（ヴィダックＣ₁₈樹
脂）に適用した。（Ａ）０.０５％ＨＣｌおよび（Ｂ）
ＣＨ₃ＣＮから成る勾配系を用いて純粋なペプチドを溶
離した。使用された勾配は、２％から１０％の漸増する
濃度のＣＨ₃ＣＮとした。画分を集め分析用ＲＰＨＰＬ
Ｃプロフィルを基にプールした。合した画分をヒドロキ
シド型のＡＧ１−Ｘ８樹脂（バイオラド分析用陰イオン
交換樹脂５０−１００メッシュ）を用いてｐＨ４.０に
調節した。この溶液を濾過し、濾液を凍結乾燥すると純
粋な表記化合物が得られた（３.１ｇ；収率６１％）： ＦＡＢ−ＭＳ ３６７ （ＭＨ⁺）； アミノ酸分析：ｈＰｒｏ、１.００；Ｐｒｏ、０.９８； ［α］_D＝−８８.４゜（Ｃ＝０.５／０.１Ｎ ＨＣ
ｌ）； 元素分析（Ｃ₁₇Ｈ₃₀Ｎ₆Ｏ₃・２ＨＣｌ・１.５Ｈ₂Ｏとし
て）： 理論値：Ｃ ４３.７８、Ｈ ７.５６、Ｎ １８.０
２； 実測値：Ｃ ４３.４８、Ｈ ７.２５、Ｎ １８.０
０。

【００５３】上記実施例１に記載の方法と実質上同等の
方法を用いて、または本明細書の他の箇所に記載のよう
にして、以下の化合物を合成した。

【００５４】実施例２ Ｄ−プロリニル−Ｌ−プロリニ
ル−Ｌ−アルギニン アルデヒドジヒドロクロリド（Ｄ
−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌ）の製造 元素分析（Ｃ₁₆Ｈ₃₀Ｎ₆Ｏ₃Ｃｌ₂として）： 理論値：Ｃ ４５.１８、Ｈ ７.１１、Ｎ １９.７
６； 実測値：Ｃ ４４.９６、Ｈ ６.９０、Ｎ １９.５
６。

【００５５】実施例３ Ｄ−ホモプロリニル−Ｌ−アゼ
チジニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド ジヒドロクロ
リド（Ｄ−ｈＰｒｏ−Ａｚｔ−Ａｒｇ−Ｈ・２ＨＣｌ）
の製造 元素分析（Ｃ₁₆Ｈ₃₄Ｎ₆Ｏ₅Ｃｌ₂として）： 理論値：Ｃ ４１.６５、Ｈ ７.４３、Ｎ １８.２
２； 実測値：Ｃ ４２.０５、Ｈ ７.３５、Ｎ １８.３
７。

【００５６】実施例４ Ｄ−チアゾリジニル−４−カル
ボニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド
ジヒドロクロリドの製造 ＦＡＢ−ＭＳ ３７１ （ＭＨ⁺）； ［α］_D＝−３６.２゜（Ｃ−０.５／０.１Ｎ ＨＣ
ｌ)。

【００５７】実施例５ Ｄ−２−イソプロピル−５，５
−ジメチルチアゾリジニル−４−カルボニル−Ｌ−プロ
リニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド ジヒドロクロリ
ドの製造 Ａ）Ｄ−２，２，５，５−テトラメチルチアゾリジン アセトン（１８００ｍＬ）に入れたＤ−ペニシラミン
（２９.８ｇ、０.２ｍｏｌ）の溶液を１２Ｎ ＨＣｌ
（１８.３ｍＬ）と５０℃で４時間反応させた。反応混
合物を濾過し、濾液を減圧下に１５００ｍＬまで濃縮
し、４℃で２４時間放置した。固体を濾過し乾燥すると
純粋な表記化合物が得られた（３９.１ｇ、収率８６
％）； ｍｐ１８８−１９１℃。

【００５８】Ｂ）Ｄ−５，５−ジメチル−２−イソプロ
ピルチアゾリジン Ｄ−２，２，５，５−テトラメチルチアゾリジン（Ａ）
（１１.２５ｇ、０.０５０ｍｏｌ）の溶液をジオキサン
（１５０ｍＬ）に溶解し、イソブチルアルデヒド（１４
ｍＬ、０.１５３ｍｏｌ）を加え、反応混合物を２時間
加熱還流した。反応混合物を室温に冷却し、２４時間放
置した。沈澱を濾過し、エタノール（ＥｔＯＨ）（４５
ｍＬ）／ジエチルエーテル（１２５ｍＬ）から再結晶し
て純粋な表記化合物を得た（９.０ｇ、収率７７％）：
ｍｐ２１４−２１６℃。

【００５９】Ｃ）Ｄ−２−イソプロピル−５，５−ジメ
チルチアゾリジニル−４−カルボニル−Ｌ−プロリニル
−Ｌ−アルギニン アルデヒド ジヒドロクロリド 実施例１の工程ＢからＨまでの方法に実質上従って、表
記化合物を製造した： ＦＡＢ−ＭＳ ４４１ （ＭＨ⁺）； ［α］_D＝−８８.４゜（Ｃ＝０.５／０.０１Ｎ ＨＣ
ｌ）； 元素分析（Ｃ₂₀Ｈ₄₀Ｎ₆Ｏ₄Ｃｌ₂Ｓとして）： 理論値：Ｃ ４５.２０、Ｈ ７.５７、Ｎ １５.８
１、Ｓ ６.０３； 実測値：Ｃ ４５.４４、Ｈ ７.３９、Ｎ １５.８
６、Ｓ ５.８７。

【００６０】実施例６ トランス−４−（２−ナフチル
オキシ）−Ｄ−プロリニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アル
ギニン アルデヒド トリヒドロクロリド モノヒドラ
ートの製造 Ａ）Ｎ−Ｃｂｚ−シス−４−ヒドロキシ−Ｄ−プロリン
メチルエステル ２Ｎ ＮａＯＨ水１１５ｍＬ中のシス−４−ヒドロキシ
−Ｄ−プロリン（３０ｇ；２２９ｍｍｏｌ）の５℃の溶
液をクロロ蟻酸ベンジル３６ｍＬ（２５２ｍｍｏｌ）お
よび２Ｎ ＮａＯＨ水１１５ｍＬで同時に処理した。反
応のｐＨが安定した後、この混合物をＥｔ₂Ｏ（２ Ｘ
１５０ｍＬ）で洗浄し、５Ｎ ＨＣｌ水でｐＨ２に酸
性化した。反応をＥｔＯＡｃ（４ Ｘ ２００ｍＬ）で
抽出し、合したＥｔＯＡｃ抽出物をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し
減圧で蒸発させると粗製のＮ−Ｃｂｚ−保護酸６４.１
ｇがゴム状物質として得られた。

【００６１】ＤＭＦ３００ｍＬ中のＫ₂ＣＯ₃３３.０ｇ
（２３９ｍｍｏｌ）および粗製の酸の混合物をＭｅＩ
１４.５ｍＬ（２３３ｍｍｏｌ）を滴下することにより
処理した。室温で５４時間攪拌した後、反応物をＨ₂Ｏ
３００ｍＬ中に注ぎ、この混合物をＥｔＯＡｃ（５
Ｘ ２００ｍＬ）で抽出した。合した有機抽出液をＨ₂
Ｏ（３ Ｘ ２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥
し、減圧で蒸発させると油状物６５.３ｇが得られた。
フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂；ヘキサン中
２５％ＥｔＯＡｃ）による精製は、表記化合物４７.３
ｇ（１６９ｍｍｏｌ；シス−４−ヒドロキシ−Ｄ−プロ
リンから７４％）を粘稠な油状物として与えた。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ２７９（Ｍ⁺）； 元素分析（Ｃ₁₄Ｈ₁₇ＮＯ₅として）： 理論値：Ｃ ６０.２１、Ｈ ６.１３、Ｎ ５.０１； 実測値：Ｃ ５９.９５、Ｈ ６.１１、Ｎ ４.９２。

【００６２】Ｂ）Ｎ−Ｃｂｚ−トランス−４−（２−ナ
フチルオキシ）−Ｄ−プロリン メチルエステル ＴＨＦ３００ｍＬに入れたＮ−Ｃｂｚ−シス−４−ヒド
ロキシ−Ｄ−プロリン メチルエステル１５.０ｇ（５３.７ｍｍｏｌ)、β−ナ
フトール１１.３ｇ（７８.４ｍｍｏｌ)、およびトリフ
ェニルホスフィン２０.５ｇ（７８.２ｍｍｏｌ）をジエ
チルアジドジカルボキシラート１２.３ｍＬ（７８.１ｍ
ｍｏｌ）で０.５時間処理した。反応物を室温で１８時
間攪拌し、飽和ＮａＣｌ水１００ｍＬの添加により反応
を鎮めた。２つの層を分離し、有機溶液を乾燥（Ｎａ₂
ＳＯ₄）した。溶媒を蒸発させて油状物４６.２ｇを得、
これをフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂；ヘキ
サン中２５％ないし５０％ＥｔＯＡｃの勾配）により精
製すると表記化合物１５.２ｇ（３７.５ｍｍｏｌ；７０
％）が得られた。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４０５（Ｍ⁺）； ＩＲ（フィルム） ３０１４、１７４９、１７０５、１
６３０、１４２２、１３５７、１１７９、１１２１ｃｍ
^-1。 元素分析（Ｃ₂₄Ｈ₂₃ＮＯ₅として）： 理論値：Ｃ ７１.１０、Ｈ ５.７２、Ｎ ３.４６； 実測値：Ｃ ７１.０４、Ｈ ５.７３、Ｎ ３.５９。

【００６３】Ｃ）トランス−４−（２−ナフチルオキ
シ）−Ｄ−プロリン−Ｌ−プロリン−Ｌ−アルギニン
アルデヒド トリヒドクロリド モノヒドラート 結合したアミノ保護Ａｒｇラクタムの還元に水素化リチ
ウムアルミニウムではなくリチウムトリ−ｔ−ブトキシ
アルミノヒドリドを使用する外は実施例１の方法に実質
上従って、Ｎ−Ｃｂｚ−トランス−４−（２−ナフチル
オキシ）−Ｄ−プロリンメチルエステルを表記化合物に
変換し、これをトリヒドロクロリドモノヒドラートとし
て単離した。 ＦＡＢ−ＭＳ ４９５ （ＭＨ⁺）； ［α］_D＝−５.１１゜（Ｃ＝０.０１、ＭｅＯＨ）； 元素分析（Ｃ₂₆Ｈ₃₉Ｃｌ₃Ｎ₆Ｏ₅として）： 理論値：Ｃ ５０.２１、Ｈ ６.３２、Ｎ １３.５
１； 実測値：Ｃ ５０.１１、Ｈ ６.０７、Ｎ １３.７
２。

【００６４】実施例７ （１，７−シス）−３−アザ−
ビシクロ［５.４.０］ウンデカニル−４−カルボニル−
Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド ジヒド
ロクロリドの製造

【化１８】 Ａ）２−メトキシカルボニル−２，３，４，５−テトラ
ヒドロ−１Ｈ−２−ベンズアゼピン−３−カルボン酸エ
チルエステル ｉ）α−テトラロン−２−カルボン酸エチルエステル

【化１９】 Ｉ.ウギ等（Ｊ.Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ.Ｃｈｅｍ.、６
４１巻６３頁（１９６１））による記載のようにして、
無水エタノール中のナトリウムエトキシドを用いてα−
テトラロンを蓚酸ジエチルでアシル化する。得られたエ
ステルを、Ｃ.−Ｊ.ルーおよびＦ.Ｆ.ブリッケ（Ｃｈｅ
ｍ.Ａｂｓｔｒ.、５２巻１１０８６ｅ）の方法を用いて
熱により脱カルボニル化して、表記化合物を得た。

【００６５】ｉｉ）１−オキソ−２，３，４，５−テト
ラヒドロ−１Ｈ−２−ベンズアゼピン−３−カルボン酸
エチルエステル

【化２０】 Ｍ.ヴィンセント等（米国特許第５１９０８２３号（１
９９３）；欧州特許出願、公開番号４６２８８４号（１
９９１））による記載のようにして、置換α−テトラロ
ンを、Ｃ.−Ｊ.リーおよびＦ.Ｆ.ブリッケ（Ｃｈｅｍ.
Ａｂｓｔｒ.、５２巻１１０８６ｅ−ｆ）の方法を用い
て、ナトリウムアジドおよびクロロホルム中の濃硫酸を
使用して表記のベンズアゼピンに変換する。

【００６６】ｉｉｉ）１−チオオキソ−２，３，４，５
−テトラヒドロ−１Ｈ−２−ベンズアゼピン−３−カル
ボン酸エチルエステル

【化２１】 モリサワ等の方法（日本国公開特許公報ＪＰ６１ ５７
５９９号［８６ ５７５５９］（１９８６）；Ｃｈｅ
ｍ.Ａｂｓｔｒ.、１０５巻９７３５４ｒ）に従ってオキ
ソベンズアゼピンをチオオキソベンズアゼピンに変換す
る。即ち、無水テトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）に溶
解した１−オキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１
Ｈ−２−ベンズアゼピン−３−カルボン酸エチルエステ
ル（２０ｇ）を五硫化リン（３.８０ｇ）で処理し、得
られた混合物を４時間加熱還流する。不溶性物質を濾過
した後、溶液を蒸発させ、残留物を１：２ｖ／ｖ酢酸エ
チル：ヘキサンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィ
ーによって精製し、チオオキソ化合物を黄色針状物とし
て得た（ｍｐ７８−８１℃、収率７１％が報告され
た)。

【００６７】ｉｖ）２，３，４，５−テトラヒドロ−１
Ｈ−２−ベンズアゼピン−３−カルボン酸エチルエステ
ル

【化２２】 モリサワ等の方法に従い、チオオキソ基を環から還元す
る。即ち、１−チオオキソ−２，３，４，５−テトラヒ
ドロ−１Ｈ−２−ベンズアゼピン−３−カルボン酸エチ
ルエステル（１.５０ｇ）を無水エタノール（２００ｍ
Ｌ）に溶解する。ラネーニッケル（３０ｇ）を加え、得
られた混合物を室温で３０分間攪拌する。不溶性物質を
濾過した後、溶液を蒸発させ、残留物を１：２ｖ／ｖ酢
酸エチル：ヘキサンで溶出するシリカゲルクロマトグラ
フィーによって精製すると、ベンズアゼピンが淡茶色油
状物質として得られる（収率７８％が報告された)。

【００６８】ｖ）２−メトキシカルボニル−２，３，
４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−２−ベンズアゼピン−３
−カルボン酸エチルエステル

【化２３】 実施例８−Ａに記載の方法と同様の方法を用いてベンズ
アゼピンをクロロ蟻酸メチルでアシル化する。

【００６９】Ｂ）２−メトキシカルボニル−２，３，
４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−２−ベンズアゼピン−３
−カルボン酸

【化２４】 ＴＨＦ（１００ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中のエステ
ル１０ｇの溶液を当モル量の２Ｎ ＮａＯＨで処理し、
引続き室温で一夜攪拌することにより、エチルエステル
は簡便に加水分解される。反応混合物をジエチルエーテ
ル（２００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で希釈する。
相を分離した後、酢酸エチル（２００ｍＬ）を水相に加
え、この溶液を３Ｎ ＨＣｌでｐＨ２.０に酸性化す
る。有機相を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し蒸発させて
表記の酸を得る。この酸は、キラル生成物の製造のため
の常法により分割することができる。

【００７０】Ｃ）３−メトキシカルボニル−（１，７−
シス）−３−アザビシクロ［５.４.０］ウンデカン−４
−カルボン酸

【化２５】 実施例８−Ｃに記載の方法と同様の方法を用いてテトラ
ヒドロベンズアゼピンを水素化してペルヒドロ化合物を
得る。

【００７１】Ｄ）３−Ｃｂｚ−（１，７−シス）−３−
アザビシクロ［５.４.０］ウンデカン−４−カルボン酸

【化２６】 実施例８−Ｄに記載の方法と同様の方法を用いてメトキ
シカルボニル基をＣｂｚに置き換える。

【００７２】Ｅ）３−Ｃｂｚ−（１，７−シス）−３−
アザビシクロ［４.５.０］ウンデカニル−４−カルボニ
ル−Ｐｒｏ−Ｏ−ｔ−ブチル

【化２７】 実施例８−Ｅに記載の方法と同様の方法を用いて酸をＬ
−Ｐｒｏ−Ｏ−ｔ−ブチルと結合させる。

【００７３】Ｆ）３−Ｃｂｚ−（１，７−シス）−３−
アザビシクロ［５.４.０］ウンデカニル−４−カルボニ
ル−Ｐｒｏ−ＯＨ

【化２８】 実施例８−Ｆに記載の方法と同様の方法を用いてカルボ
キシ基を脱保護する。

【００７４】Ｇ）３−Ｃｂｚ−（１，７−シス）−３−
アザビシクロ［５.４.０］ウンデカニル−４−カルボニ
ル−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム

【化２９】 実施例８−Ｇに記載の方法と同様の方法を用いて酸をＡ
ｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタムと結合させる。

【００７５】Ｈ）３−Ｃｂｚ−（１，７−シス）−３−
アザビシクロ［５.４.０］ウンデカニル−４−カルボニ
ル−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−（Ｃｂｚ） アルデヒド

【化３０】 実施例８−Ｈに記載の方法と同様の方法を用いてラクタ
ムを還元してアルデヒドを得る。

【００７６】Ｉ）（１，７−シス）−３−アザビシクロ
［５.４.０］ウンデカニル−４−カルボニル−Ｌ−プロ
リニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド ジヒドロクロリ
ド実施例８−Ｉに記載の方法と同様の方法を用いてＣｂ
ｚ基を除去し、表記生成物を精製する。

【００７７】実施例８ ＤＬ−シス−３−アザ−ビシク
ロ［５.４.０］ウンデカニル−２−カルボニル−Ｌ−プ
ロリニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド ジヒドロクロ
リドの製造

【化３１】 Ａ）Ｎ−メトキシカルボニル−３−フェニル−１−プロ
ピルアミン ＴＨＦ（５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）に入れた３−
フェニル−１−プロピルアミン（１９.６ｇ、１４５ｍ
ｍｏｌ）の攪拌溶液を２Ｎ ＮａＯＨでｐＨ９．０に調
節した。ｐＨを２Ｎ ＮａＯＨで９．０に維持しながら
この反応物にクロロ蟻酸メチル（１２.３ｍＬ、１５９
ｍｍｏｌ）を滴下した。反応物を室温でさらに３０分間
攪拌した後に酢酸エチル（２５０ｍＬ）を加えた。有機
層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し、そして濾
液を減圧濃縮して純粋な表記化合物を透明な油状物とし
て得た（２８ｇ、収率１００％）： ＦＡＢ−ＭＳ １９３ （Ｍ⁺）； ＴＬＣ Ｒ_f （Ｃ）０.８３。

【００７８】Ｂ）Ｍｏｃ−ＤＬ−２−カルボキシ−３，
４−ベンゾホモピペリジン

【化３２】 トリフルオロ酢酸（１２５ｍＬ）中のＮ−メトキシカル
ボニル−３−フェニル−１−プロピルアミン（Ａ）（２
４.１ｇ、１２５ｍｍｏｌ）の溶液にグリオキシル酸
（１１.１ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を加え、還流温度に加
熱した。４時間還流した後、反応物を室温に冷却し、溶
媒を減圧で除去し、残留物にジエチルエーテル（２００
ｍＬ）／水（５０ｍＬ）を加えた。反応混合物のｐＨを
５Ｎ ＮａＯＨで９.３に上げ、水層を分離した。この
水層に酢酸エチル（２５０ｍＬ）を加え、溶液を３Ｎ
ＨＣｌでｐＨ２.５に酸性化した。有機層を分離し、乾
燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し、濾液を減圧濃縮すると純
粋な表記化合物が油状物として得られた（２６.９ｇ、
収率８６％）； ＦＡＢ−ＭＳ ２５０ （ＭＨ⁺）； 元素分析（Ｃ₁₃Ｈ₁₅ＮＯ₄として）： 理論値：Ｃ ６２.６４、Ｈ ６.０７、Ｎ ５.６２； 実測値：Ｃ ６２.７２、Ｈ ６.０２、Ｎ ５.８７。

【００７９】Ｃ）Ｍｏｃ−ＤＬ−シス−３−アザ−２−
カルボキシビシクロ−［５.４.０］ウンデカン

【化３３】 ＥｔＯＨ（４００ｍＬ）中のＢ（３１.５ｇ、１２６ｍ
ｍｏｌ）の溶液を、１６０℃の高圧装置中、１３８バー
ル（２０００ｐｓｉ）で５％Ｒｈ／Ａｌ₂Ｏ₃（１６.０
ｇ）により１６時間水素と反応させた。反応混合物を珪
藻土板で濾過し、濾液を減圧濃縮して純粋な表記化合物
を得た（２７.８ｇ、収率８７％)。 ＦＡＢ−ＭＳ ２５６ （ＭＨ⁺)。

【００８０】Ｄ）Ｃｂｚ−ＤＬ−シス−３−アザ−２−
カルボキシビシクロ−［５.４.０］ウンデカン

【化３４】 不活性雰囲気下、無水ＣＨ₃ＣＮ（２００ｍＬ）に入れ
たＣ（２７.８ｇ、１０９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、室
温で、ＣＨ₃ＣＮ（２０ｍＬ）中のヨードトリメチルシ
ラン（３５.７ｍＬ、２５０ｍｍｏｌ）の溶液を加え
た。反応物を４５℃で３０分間攪拌し、室温に冷却し
た。水（２００ｍＬ)、引続きメタ重亜硫酸ナトリウム
（１ｇ）で反応を鎮めた。反応物のｐＨを５Ｎ ＮａＯ
Ｈで９.５に上げ、２Ｎ ＮａＯＨでｐＨを９.５に維持
しながらクロロ蟻酸ベンジル（１４.４ｍＬ、１０１ｍ
ｍｏｌ）を滴下した。反応物を室温でさらに３０分間攪
拌した後、有機溶媒を減圧で蒸発させ、酢酸エチル（２
００ｍＬ）を加え、この溶液を５Ｎ ＨＣｌでｐＨ２.
５に酸性化した。有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）
し、濾過し、濾液を減圧濃縮して粗製の油状物（３１.
８ｇ）を得た。この粗製油状物を段階的勾配溶離（ＣＨ
Ｃｌ₃１００％からＣＨＣｌ₃／ＥｔＯＡｃ １：１に至
る）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製
して油状物を得た（１８.２ｇ、収率５０％)。ＴＨＦ
（１００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）に入れたこの油状
物（１８.２ｇ）の攪拌冷溶液（０℃）に、２Ｎ Ｎａ
ＯＨ（２５.３ｍＬ、５０.６ｍｍｏｌ）を加えた。反応
物を室温で２４時間攪拌した。反応物をジエチルエーテ
ル（２００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で希釈した。
水層を分離し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を加え、溶液
を５Ｎ ＨＣｌでｐＨ２.０に酸性化した。有機層を分
離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し、濾液を減圧濃縮
すると純粋な表記化合物が油状物として得られた（６.
９ｇ、収率４０％)。 ＦＡＢ−ＭＳ ３３２ （ＭＨ⁺）； 元素分析（Ｃ₁₉Ｈ₂₅ＮＯ₄として）： 理論値：Ｃ ６８.８６、Ｈ ７.６０、Ｎ ４.２３； 実測値：Ｃ ６８.２６、Ｈ ７.５７、Ｎ ４.１２。

【００８１】Ｅ）Ｃｂｚ−ＤＬ−シス−３−アザ−ビシ
クロ［５.４.０］ウンデカニル−２−カルボニル−Ｐｒ
ｏ−Ｏ−ｔ−ブチル。

【化３５】 ＤＭＦ（６０ｍＬ）に入れたＤ（６.７ｇ、２０.２ｍｍ
ｏｌ）の攪拌冷溶液（０℃）に、Ｌ−Ｐｒｏ−Ｏ−ｔ−
ブチル（３.４６ｇ、２０.２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ
（２.７３ｇ、２０.２ｍｍｏｌ）、およびＤＣＣ（４.
１７ｇ、２０.２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０
℃で２時間攪拌し、室温に温め、攪拌した（２４時
間）。反応混合物を減圧で濃縮乾固し残留物をＥｔＯＡ
ｃに溶解した。この有機溶液を１Ｎ ＮａＨＣＯ₃（１
００ｍＬ）、水、１.５Ｎクエン酸、および水で順次洗
浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し、減圧
で濃縮乾固して純粋な表記化合物を得た（９.２ｇ、収
率９４％）： ＴＬＣ Ｒ_f （Ａ）０.７４； ＦＡＢ−ＭＳ ４８４ （Ｍ⁺）。

【００８２】Ｆ）Ｃｂｚ−ＤＬ−シス−３−アザ−ビシ
クロ［５.４.０］ウンデカニル−２−カルボニル−Ｐｒ
ｏ−ＯＨ。

【化３６】 ＣＨ₂Ｃｌ₂（２０ｍＬ）に入れたＥ（９.２ｇ、１９ｍ
ｍｏｌ）の攪拌冷溶液（０℃）にアニソール（２.５ｍ
Ｌ）を加えた。反応物を室温で１時間攪拌した。反応物
を加熱せずに減圧濃縮し、ジエチルエーテル（２００ｍ
Ｌ）および水（２００ｍＬ）で希釈した。溶液のｐＨを
５Ｎ ＮａＯＨで９.８に調節した。水層を分離し、酢
酸エチル（２５０ｍＬ）を加え、この溶液を５Ｎ ＨＣ
ｌでｐＨ２.８に酸性化した。有機層を分離し、乾燥
（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し、濾液を減圧濃縮して表記化
合物（７.７ｇ、収率９５％）を透明な油状物として得
た。 ＴＬＣ Ｒ_f （Ａ）０.７５； ＦＡＢ−ＭＳ ４２９ （ＭＨ⁺）。

【００８３】Ｇ）Ｃｂｚ−ＤＬ−シス−３−アザビシク
ロ［５.４.０］ウンデカニル−２−カルボニル−Ｐｒｏ
−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）ラクタム。

【化３７】 フラスコ１中で化合物Ｆ（７.４ｇ、１７.３ｍｍｏｌ）
をＤＭＦ（５０ｍｌ）に溶解し、−１５℃に冷却し、Ｎ
−メチルモルホリン（１.９ｍｌ、１７.３ｍｍｏｌ）、
次いでクロロ蟻酸イソブチル（２.３ｍＬ、１７.３ｍｍ
ｏｌ）を加えた。反応混合物を−１５℃で２分間攪拌し
た。実施例１、工程ＤおよびＥの記載と実質上同様にし
て製造されたＨＣｌ・Ａｒｇ（Ｃｂｚ）−ラクタム
（５.７ｇ、１７.３ｍｍｏｌ）をフラスコ２中でＤＭＦ
（４０ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却し、この溶液にジイ
ソプロピルエチルアミン（７.５ｍｌ、４３.２ｍｍｏ
ｌ）を加えた。反応混合物を０℃で２分間攪溝した。

【００８４】フラスコ２の内容物をフラスコ１に加え、
反応混合物を２時間（−１５℃）、次いで室温で２４時
間攪拌した。反応溶媒を減圧で除去して油状物を得た。
この残留物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に溶解し、１Ｎ
ＮａＨＣＯ₃（１００ｍｌ）、水、１.５Ｎクエン酸、
および水で順次洗浄した。有機溶液を乾燥（ＭｇＳ
Ｏ₄）し、濾過し、減圧で濃縮乾固して粗製の固体を得
た。この粗製の固体を段階的勾配溶離（ヘキサン１００
％からヘキサン−ＥｔＯＡｃ ２０：８０に至る）を用
いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると純
粋な表記化合物（２.１ｇ、収率１７％）が遅く流出す
る物質として得られた： ＦＡＢ−ＭＳ ７０１ （ＭＨ⁺）； 元素分析（Ｃ₃₈Ｈ₄₈Ｎ₆Ｏ₇として）： 理論値：Ｃ ６５.１２、Ｈ ６.９０、Ｎ １１.９
９； 実測値：Ｃ ６５.５８、Ｈ ７.２６、Ｎ １１.１
３。

【００８５】Ｈ）Ｃｂｚ−ＤＬ−シス−３−アザ−ビシ
クロ［５.４.０］ウンデカニル−２−カルボニル−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ（Ｃｂｚ）アルデヒド。

【化３８】 Ｎ₂雰囲気下、無水ＴＨＦ（３０ｍＬ）に入れたＧ（２.
１ｇ、３.０ｍｍｏｌ）の攪拌冷溶液（−７０℃）に、
ＴＨＦ中の水素化リチウムアルミニウム１Ｍ（３.０ｍ
ｌ、３.０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を−７０℃で３
０分間攪拌した。ＴＨＦ５ｍＬおよび０.５Ｎ Ｈ₂ＳＯ
₄５ｍＬの溶液をこの反応物に滴下した。反応物をＥｔ
ＯＡｃ（１００ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で希釈し
た。有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濾過し
た。有機溶媒を減圧で除去してアモルファス固体の表記
化合物（２.０ｇ、９５％）を得た： ＦＡＢ−ＭＳ ７０３ （ＭＨ⁺）。 Ｉ）ＤＬ−シス−３−アザ−ビシクロ［５.４.０］ウン
デカニル−２−カルボニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アル
ギニン アルデヒド ジヒドロクロリド。

【化３９】

【００８６】エタノール（１２０ｍＬ）、水（３０ｍ
Ｌ）、および１Ｎ ＨＣｌ（７.０ｍＬ、７.０ｍｍｏ
ｌ）に溶解した化合物Ｈ（２.０ｇ、２.８ｍｍｏｌ）を
周囲温度および圧力下で５％Ｐｄ／Ｃ触媒（１.５ｇ）
の存在下に水素化した。反応が完結した後、触媒を濾去
した。濾液を減圧で３０ｍＬまで濃縮し、水（５０ｍ
Ｌ）を加えた。溶液のｐＨをバイオラドＡＧ１−Ｘ８樹
脂（ヒドロキシド型）で４.０に調節した。樹脂を濾過
により除き、溶液を凍結乾燥して表記化合物（１.２７
ｇ、８９％）を得た： ＦＡＢ−ＭＳ ４３５ （ＭＨ⁺）； 元素分析（Ｃ₂₂Ｈ₃₈Ｎ₆Ｏ₃・２ＨＣｌ・３Ｈ₂Ｏとし
て）： 理論値：Ｃ ４６.３１、Ｈ ８.３０、Ｎ １４.７
３； 実測値：Ｃ ４６.１０、Ｈ ７.９４、Ｎ １４.４
３。

【００８７】実施例９ Ｄ，Ｌ−ピペラジン−２−オイ
ル−Ｌ−プロリル−Ｌ−アルギニンアルデヒド ジヒド
ロクロリドの製造 結合したアミノ保護Ａｒｇラクタムの還元に水素化リチ
ウムアルミニウムではなくリチウムトリ−ｔ−ブトキシ
アルミノヒドリドを使用する外は実施例１の方法に実質
上従って、表記化合物をＤ，Ｌ−ピペラジン−２−カル
ボン酸 ジヒドロクロリドから製造した： ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ３６８ （ＭＨ⁺）； 元素分析（Ｃ₁₆Ｈ₃₁Ｃｌ₂Ｎ₇Ｏ₃として）： 理論値：Ｃ ４３.６４、Ｈ ７.１０、Ｎ ２２.２
６； 実測値：Ｃ ４３.１７、Ｈ ７.７８、Ｎ １５.２
１。

【００８８】実施例１０ Ｄ，Ｌ−チアゾリジニル−２
−カルボニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン アル
デヒド ジヒドロクロリドの製造 Ａ）Ｃｂｚ−Ｄ，Ｌ−チアゾリジニル−２−カルボニル
−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニル ラクタム 実施例９に記載の方法に実質上従って、表記化合物を
Ｄ，Ｌ−チアゾリジニル−２−カルボン酸から製造し
た。 ＦＤ−ＭＳ：ｍ／ｅ ６３６ （Ｍ⁺） ［α］_D＝−７４.２６゜（Ｃ＝０.０１、ＣＨ₂Ｃｌ₂） 元素分析（Ｃ₃₁Ｈ₃₆Ｎ₆Ｏ₇Ｓとして）： 理論値：Ｃ ５８.４８、Ｈ ５.７０、Ｎ １３.２
０； 実測値：Ｃ ５８.４９、Ｈ ５.５７、Ｎ １２.９
５。

【００８９】Ｂ）Ｃｂｚ−Ｄ，Ｌ−チアゾリジニル−２
−カルボニル−Ｌ−プロリン−Ｃｂｚ−Ｌ−アルギニン
アルデヒド ＴＨＦ２００ｍＬ中の−２５℃のＣｂｚ−Ｄ，Ｌ−チア
ゾリジニル−２−カルボニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−ア
ルギニル ラクタム１２.３ｇ（１９.０ｍｍｏｌ）の溶
液を、反応温度が−２０℃を超えないような速度で２９
ｍＬ（ＴＨＦ中１Ｍ；２９ｍｍｏｌ）のＬｉ（ｔ−Ｂｕ
Ｏ）₃ＡｌＨ溶液で処理した。反応物を−２５℃で３時
間攪拌し、ＨＣｌ １００ｍＬ中に注いだ。この混合物
を１：１のＴＨＦ−ヘキサン（２ Ｘ １００ｍＬ）お
よびＥｔＯＡｃ（２ Ｘ １００ｍＬ）で抽出した。Ｅ
ｔＯＡｃ層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧で蒸発させて粗
生成物６.９６ｇ（１０.９ｍｍｏｌ；収率５８％）を白
色泡状物として得た。所望生成物の存在を質量分析［Ｆ
Ｄ−ＭＳ；ｍ／ｅ ６３８（Ｍ⁺）］により確認し、こ
の混合物をさらに精製することなく次の反応に使用し
た。

【００９０】Ｃ）Ｄ，Ｌ−チアゾリジニル−２−カルボ
ニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン アルデヒド
ジヒドロクロリド 保護アルデヒド（Ｂ）（６.７２ｇ；１０.５ｍｍｏｌ）
及びｐ−クレゾール（７.０ｍＬ）の混合物に、テフロ
ン／ケル−Ｆ装置中で液体ＨＦ３５ｍＬを加えた。混合
物を０℃で２０分間攪拌し、次いでＨＦを減圧で除去し
た。残留物をＥｔ₂Ｏで摩砕して白色固体を得、これ
を、０.５％水性ＨＣｌ中の２％ＣＨ₃ＣＮから０.５％
水性ＨＣｌ中の４０％ＣＨ₃ＣＮに至る勾配を使用して
５ ｘ ２５ｃｍヴィダックＣ₁₈ＲＰＨＰＬＣカラムを
用いる逆相クロマトグラフィーによって精製した。純粋
な画分を合し、凍結乾燥すると表記化合物２.６５ｇ
（６.０ｍｍｏｌ；６０％）がジヒドロクロリドとして
得られた。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ３７０ （Ｍ⁺） 元素分析（Ｃ₁₅Ｈ₂₈Ｃｌ₂Ｎ₆Ｏ₃Ｓとして）： 理論値：Ｃ ４０.６３、Ｈ ６.３７、Ｎ １８.９
５； 実測値：Ｃ ４０.８４、Ｈ ６.１９、Ｎ １８.８
０。

【００９１】実施例１１ Ｄ，Ｌ−チオモルホリニル−
２−カルボニル−Ｌ−プロリン−Ｌ−アルギニン アル
デヒド ジヒドロクロリドの製造 Ｄ，Ｌ−チアゾリジニル−２−カルボニル−Ｌ−プロリ
ン−アルギニン アルデヒド ジヒドロクロリドの合成
（実施例１０）に使用された方法に実質上従って、表記
化合物を製造した： ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ３８５ （Ｍ⁺）； ［α］_D＝−５８.４３゜（Ｃ＝０.０１、ＭｅＯＨ）； 元素分析（Ｃ₁₆Ｈ₃₀Ｃｌ₂Ｎ₆Ｏ₃Ｓとして）： 理論値：Ｃ ４２.０１、Ｈ ６.６１、Ｎ １８.３
７； 実測値：Ｃ ４０.７３、Ｈ ６.７３、Ｎ １５.０
９。

【００９２】実施例１２ Ｄ−シス−（４−フェノキ
シ）プロリニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン ア
ルデヒド トリヒドロクロリド モノヒドラートの製造 実施例６の方法に実質上従って表記化合物を製造した： ＦＡＢ−ＭＳ ４４５ （ＭＨ⁺）； 元素分析（Ｃ₂₂Ｈ₃₂Ｎ₆Ｏ₄・３ＨＣｌ・Ｈ₂Ｏとし
て）： 理論値：Ｃ ４６.２０、Ｈ ６.５２、Ｎ １４.６
９； 実測値：Ｃ ４６.０４、Ｈ ６.７３、Ｎ １４.４
４。

【００９３】実施例１３ ４−（３−ピリジルオキシ）
−Ｄ−プロリニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン
アルデヒド ヒドロクロリド ヒドラートの製造 Ａ）Ｎ−Ｃｂｚ−トランス−４−（３−ピリジルオキ
シ）−Ｄ−プロリン メチルエステル。 Ｎ−Ｃｂｚ−トランス−４−（２−ナフチルオキシ）−
Ｄ−プロリン メチルエステルの製造に使用された実施
例６、工程ＡおよびＢの方法に実質上従って、表記化合
物を３−ヒドロキシピリジンおよびＮ−Ｃｂｚ−シス−
４−ヒドロキシ−Ｄ−プロリン メチルエステルから製
造した。 ＦＤ−ＭＳ ３５６ （Ｍ⁺）； 元素分析（Ｃ₁₉Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₅として）： 理論値：Ｃ ６４.０４、Ｈ ５.６６、Ｎ ７.８６； 実測値：Ｃ ６４.２２、Ｈ ５.８１、Ｎ ７.７６。

【００９４】Ｂ）４−（３−ピリジルオキシ）−Ｄ−プ
ロリン−Ｌ−プロリン−アルギニンアルデヒド ヒドロ
クロリド ヒドラート 実施例９の方法に実質上従って、表記化合物をＮ−Ｃｂ
ｚ−トランス−４−（３−ピリジルオキシ）−Ｄ−プロ
リン メチルエステルから製造した。 ＦＡＢ−ＭＳ ３６８ （Ｍ⁺）； 元素分析（Ｃ₂₁Ｈ₃₄ＣｌＮ₇Ｏ₅として）： 理論値：Ｃ ５０.４５、Ｈ ６.３８、Ｎ １９.６
１； 実測値：Ｃ ５０.６２、Ｈ ６.６１、Ｎ １９.６
０。

【００９５】実施例１４ トランス−４−フェニルチオ
−Ｄ−プロリニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン
アルデヒド トリヒドロクロリド トリヒドラートの製
造。 Ａ）Ｎ−Ｃｂｚ−シス−４−トシル−Ｄ−プロリン メ
チルエステル ＣＨＣｌ₃２００ｍＬに入れたＮ−Ｃｂｚ−シス−４−
ヒドロキシ−Ｄ−プロリン メチルエステル２０ｇ（７
１.６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン１５ｍＬ（１０７
ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン０.４ｇ
（３.３ｍｍｏｌ）の溶液を、ｐ−トルエンスルホニル
クロリド１５.１ｇ（７９.２ｍｍｏｌ）で少しずつ処理
した。反応物を室温で１８時間攪拌し、Ｈ₂Ｏ １００
ｍＬ、１Ｎ水性クエン酸１００ｍＬ、およびＨ₂Ｏ １
００ｍＬで順次洗浄した。有機画分をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥
し、減圧で蒸発させて油状物３１.４ｇを得、これをフ
ラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂；ヘキサン中５
０％ＥｔＯＡｃ）により精製すると表記化合物１８.２
ｇ（４２ｍｍｏｌ；５９％）が白色固体として得られ
た。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ４３３ （Ｍ⁺）； 元素分析（Ｃ₂₁Ｈ₂₃ＮＯ₇Ｓとして）： 理論値：Ｃ ５８.１９、Ｈ ５.３５、Ｎ ３.２３； 実測値：Ｃ ５８.４３、Ｈ ５.３３、Ｎ ３.１６。

【００９６】Ｂ）Ｎ−Ｃｂｚ−トランス−４−フェニル
チオ−Ｄ−プロリン エチルエステル ＥｔＯＨ４０ｍＬ中のナトリウムエトキシド３５.６ｍ
ｍｏｌの溶液（ＥｔＯＨ４０ｍＬにＮａ８２０ｍｇを加
えることにより製造する）にチオフェノール（３.３ｍ
Ｌ；３２.２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１５分間攪
拌し、Ｎ−Ｃｂｚ−シス−４−トシル−Ｄ−プロリン
メチルエステルの固体６.０ｇ（１５ｍｍｏｌ）で処理
した。反応物を４０℃で１９時間攪拌し、この時点で冷
却しＨ₂Ｏ１００ｍＬで希釈した。ＥｔＯＨを減圧で蒸
発させ、水層をＥｔＯＡｃ（３ｘ １００ｍＬ）で抽出
した。合した有機抽出物をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧で
蒸発させて油状物７.４０ｇを得、これをフラッシュク
ロマトグラフィー（ＳｉＯ₂；ヘキサン中５％ＥｔＯＡ
ｃ）により精製すると表記化合物４.６０ｇ（１２ｍｍ
ｏｌ；７９％）が透明な油状物として得られた。 ＦＤ−ＭＳ ｍ／ｅ ３８５ （Ｍ⁺）； 元素分析（Ｃ₁₄Ｈ₁₇ＮＯ₅として）： 理論値：Ｃ ６５.４３、Ｈ ６.０１、Ｎ ３.６３； 実測値：Ｃ ６５.３９、Ｈ ６.０１、Ｎ ３.８５。

【００９７】Ｃ）トランス−４−フェニルチオ−Ｄ−プ
ロリン−Ｌ−プロリン−アルギニンアルデヒド トリヒ
ドロクロリド トリヒドラート Ｄ，Ｌ−チアゾリジニル−２−カルボニル−Ｌ−プロリ
ン−Ｌ−アルギニンアルデヒド ジヒドロクロリドの合
成に使用された実施例１０の方法に実質上従って、表記
化合物をＮ−Ｃｂｚ−トランス−４−フェニルチオ−Ｄ
−プロリンエチルエステルから製造した。 ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｅ ４６１ （Ｍ⁺）； 高分解能質量分析（ＨＲＭＳ）（ＭＨ⁺）、Ｃ₂₂Ｈ₃₃Ｎ₆
Ｏ₃Ｓ。理論値：４６１.２３４１、実測値：４６１.２
３１８。 元素分析（Ｃ₂₂Ｈ₃₅Ｃｌ₃Ｎ₆Ｏ₃Ｓ・３Ｈ₂Ｏとして）： 理論値：Ｃ ４２.３５、Ｈ ６.６２、Ｎ １３.４
７； 実測値：Ｃ ４２.４６、Ｈ ５.７３、Ｎ １３.５
３。

【００９８】本発明に係る化合物は、生体の天然の血餅
溶解能に対し認め得る干渉をすることなく（この化合物
はフィブリン溶解に対する阻害作用が低い）、血液凝固
に関わる他のプロテイナーゼおよび非酵素蛋白に優る選
択的なトロンビンの阻害を行なうと信ぜられる。さらに
このような選択性は、血栓溶解およびフィブリン溶解へ
の実質的な干渉無しに血栓溶解剤と共に使用することを
可能にすると信ぜられる。

【００９９】本発明はその態様の１つにおいて、処置を
必要とする哺乳動物に式Ｉの化合物の有効（トロンビン
阻害）用量を投与することからなる、哺乳動物において
トロンビンを阻害する方法を提供する。

【０１００】別の態様において、本発明は、処置を必要
とする哺乳動物に式Ｉの化合物の有効（血栓塞栓症治療
および／または予防量）用量を投与することからなる、
血栓塞栓症を処置する方法を提供する。

【０１０１】別の態様において本発明は、処置を必要と
する哺乳動物に式Ｉの化合物の有効（凝固阻害）用量を
投与することからなる、哺乳動物において凝固を阻害す
る方法を提供する。

【０１０２】本方法により意図されるトロンビン阻害、
凝固阻害および血栓塞栓症処置は、医学的治療および／
または予防処置の両者を適宜包含する。

【０１０３】さらなる態様において本発明は、人間また
は動物においてトロンビンの阻害が必要とされる状態の
処置に関連する。本発明に係る化合物は、人間を包含す
る動物において、血栓症ならびに血液および組織におけ
る凝固能亢進の処置または予防に有用であると期待され
る。この化合物が有用である可能性のある疾患は、血栓
症ならびに血液および組織の凝固能亢進の処置または予
防である。この化合物が処置および／または予防に有用
である可能性のある疾患は、静脈血栓症および肺塞栓、
動脈血栓症、例えば心筋虚血、心筋梗塞、不安定狭心
症、血栓に基づく卒中および末梢動脈血栓症の際のもの
を包含する。さらに本化合物は、アテローム性動脈硬化
症（疾患）、例えば冠動脈疾患、脳動脈疾患および末梢
動脈疾患の処置または予防に有用性が予想される。さら
に本化合物は心筋梗塞における血栓溶解剤との併用に役
立つと予想される。さらに本化合物は、血栓溶解、経皮
貫腔血管形成術（ＰＴＣＡ）および冠動脈バイパス手術
後の再閉塞の予防に有用性が予想される。さらに本化合
物は、顕微手術後の再血栓形成の防止に有用性が予想さ
れる。さらに本化合物は人工臓器および心臓弁に関連す
る抗凝固処置に有用性が予想される。さらに本化合物
は、血液透析および播種性血管内凝固における抗凝固処
置に有用性が予想される。さらに予想される有用性は、
患者にインビボで使用されるカテーテルおよび機械装置
のすすぎに、そして血液、血漿およびその他の血液製品
のインビトロでの保存のための抗凝固剤としてである。
またさらに、本化合物は、血液凝固が基本的寄与工程ま
たは二次的病態の原因となり得るその他の疾患、例えば
転移を包含する癌腫、関節炎を包含する炎症性疾患、な
らびに糖尿病に有用性が予想される。この抗凝固化合物
は、経口的、非経口的、例えば静脈内注入（ｉｖ）、筋
肉内注射（ｉｍ）または皮下（ｓｃ）により投与され
る。

【０１０４】治療的および／または予防的効果を得るた
めに本発明に従って投与される化合物の個々の用量は、
無論、例えば投与される化合物、投与速度、投与経路、
および処置される状態を包含する、その症例を取り巻く
個別的状況によって決定されるであろう。

【０１０５】上記用途の各々に対する典型的な日用量は
約０.０１ｍｇ／ｋｇおよび約１０００ｍｇ／ｋｇの間
である。用量計画は変えることができ、例えば予防的使
用のためには１日に１回の用量を投与することができ、
または１日に３または５回といった複数回投与が適当で
あるかも知れない。重篤な処置状況の場合、本発明化合
物はｉｖ注入により、約０.０１ｍｇ／ｋｇ／時および
約２０ｍｇ／ｋｇ／時の間、好ましくは約０.１ｍｇ／
ｋｇ／時および約５ｍｇ／ｋｇ／時の間の速度で投与さ
れる。

【０１０６】さらに本発明に係る方法は、血餅溶解剤、
例えば組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、
修飾ｔ−ＰＡ、ストレプトキナーゼまたはウロキナーゼ
と組み合わせて実施される。血餅の形成が起こり動脈ま
たは静脈が部分的にまたは完全に遮断された場合には、
通常血餅溶解剤が使用される。本発明化合物はこの溶解
剤の前またはこれと共にまたはその使用後に投与するこ
とができ、そして好ましくは血餅形成の再発を防ぐため
にさらにアスピリンと共に投与する。

【０１０７】本発明に係る方法はさらに、血小板凝集を
阻害する血小板糖蛋白レセプター（ＩＩｂ／ＩＩＩａ）
アンタゴニストと組み合わせて実施される。本発明化合
物は、血餅形成またはその再発を防ぐために、ＩＩｂ／
ＩＩＩａアンタゴニストの前またはこれと共にまたはそ
の使用後に投与することができる。

【０１０８】本発明に係る方法はさらにアスピリンと組
み合わせて実施される。本発明化合物は、血餅形成また
はその再発を防ぐために、アスピリンの前またはこれと
共にまたはその使用後に投与することができる。上に述
べたように、好ましくは本発明化合物は血餅溶解剤およ
びアスピリンと組み合わせて投与する。

【０１０９】さらに本発明は、上記の治療法における使
用のための薬用製剤を提供する。本発明に係る薬用製剤
は、式Ｉの化合物の有効なトロンビン阻害量を、薬学上
許容し得る担体、賦形剤または希釈剤と共に含有する。
経口投与のためには、この抗血栓化合物はゼラチンカプ
セルまたは錠剤に製剤化し、これらは結合剤、潤滑剤、
崩壊剤等のような賦形剤を含有させることができる。非
経口投与のためにはこの抗血栓化合物は、薬学上許容し
得る希釈剤、例えば生理食塩水（０.９％）、５％デキ
ストロース、リンゲル溶液等で製剤化される。

【０１１０】本発明に係る化合物は約０.１ｍｇおよび
約１０００ｍｇの間の用量を含む単位投与剤型に製剤化
することができる。好ましくは本化合物は、例えば硫酸
塩、酢酸塩または燐酸塩のような薬学上許容し得る塩の
形である。単位投与剤型の例は、１０ｍＬの滅菌ガラス
アンプル中に薬学上許容し得る塩としての本発明化合物
５ｍｇを含む。単位投与剤型の別の例は、滅菌アンプル
に入れた等張食塩水２０ｍＬ中に薬学上許容し得る塩と
しての本発明化合物約１０ｍｇを含む。

【０１１１】この化合物は、経口、直腸、経皮、皮下、
静脈内、筋肉内、および経鼻を包含する種々の経路によ
り投与することができる。本発明化合物は好ましくは投
与前に調合する。本発明の別の態様は、式Ｉの化合物ま
たは薬学上許容し得るその塩もしくは溶媒和物の有効量
を、そのための薬学上許容し得る担体、希釈剤または賦
形剤と共に含む薬用製剤である。

【０１１２】このような製剤中の活性成分は当該製剤の
０.１％ないし９９.９％（重量）を構成する。「薬学上
許容し得る」とは、担体、希釈剤または賦形剤がその製
剤の他の成分と共存可能でなければならず、且つその受
容者にとって有害であってはならないことを意味する。

【０１１３】この薬用製剤は既知のそして容易に入手し
得る成分を用いる既知の方法によって製造される。本発
明に係る組成物は、当分野で良く知られる方法を用いる
ことにより、患者への投与後迅速な、持続性の、または
遅延された活性成分の放出を提供するよう調合すること
ができる。本発明に係る組成物の製造において、通常、
活性成分は担体と混合され、または担体により希釈さ
れ、またはカプセル、サシェー、紙もしくはその他の容
器の形であってよい担体内に封入される。担体が希釈剤
の役割を有する場合、これは該活性成分のための媒質、
賦形剤または媒体として挙動する固体、半固体もしくは
液体物質であってよい。したがってこの組成物は、錠
剤、丸剤、散剤、トローチ剤、サシェー剤、カシェー
剤、エリキシル、懸濁剤、乳剤、溶液、シロップ、エア
ゾール、（固体としてまたは液体媒体中の）、軟および
硬ゼラチンカプセル剤、座剤、無菌注射用溶液、無菌包
装散剤等の形とすることができる。

【０１１４】以下の製剤例は単なる例示であって、いか
なる方法によっても本発明の範囲を限定する意図はな
い。「活性成分」は、無論式Ｉで示される化合物または
薬学上許容し得るその塩もしくは溶媒和物を意味する。

【０１１５】製剤例１ 以下の成分を用いて硬ゼラチンカプセル剤を製造する： 量（ｍｇ／カプセル） 活性成分 ２５０ 乾燥澱粉 ２００ ステアリン酸マグネシウム １０ 計 ４６０ｍｇ

【０１１６】製剤例２ 下記の成分を用いて錠剤を製造する： 量（ｍｇ／カプセル） 活性成分 ２５０ 微結晶性セルロース ４００ 二酸化珪素、フュームド １０ ステアリン酸 ５ 計 ６６５ｍｇ 成分を混和し圧縮して各々６６５ｍｇ重量の錠剤を形成
する。

【０１１７】製剤例３ 以下の成分を含有するエアゾール溶液を製造する： 重量 活性成分 ０.２５ エタノール ２５.７５ プロペラント２２（クロロジフルオロメタン） ７０.００ 計 １００.００ 活性化合物をエタノールと混合し、この混合物をプロペ
ラント２２の一部に加え、−３０℃に冷却し、充填装置
に移す。次に必要量をステンレススチール容器に供給
し、プロペラントの残量で希釈する。次いでバルブユニ
ットをこの容器に取り付ける。

【０１１８】製剤例４ 活性成分６０ｍｇを各々含有する錠剤を以下のように製
造する： 活性成分 ６０ｍｇ 澱粉 ４５ｍｇ 微結晶性セルロース ３５ｍｇ ポリビニルピロリドン（１０％水溶液として） ４ｍｇ カルボキシメチル澱粉ナトリウム ４.５ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ０.５ｍｇ タルク １ｍｇ 計 １５０ｍｇ 活性成分、澱粉およびセルロースをＮｏ.４５メッシュ
Ｕ.Ｓ.篩で篩過し良く混合する。得られた粉末にポリビ
ニルピロリドンを含有する水溶液を混合し、次にこの混
合物をＮｏ.１４メッシュＵ.Ｓ.篩で篩過する。このよ
うに生成された顆粒を５０℃で乾燥し、Ｎｏ.１８メッ
シュＵ.Ｓ.篩で篩過する。予めＮｏ.６０メッシュＵ.
Ｓ.篩で篩過したカルボキシメチル澱粉、ステアリン酸
マグネシウムおよびタルクを次いでこの顆粒に加え、混
合後に打錠機で圧縮して各々１５０ｍｇ重量の錠剤を製
造する。

【０１１９】製剤例５ 活性成分各々８０ｍｇを含有するカプセル剤を以下のよ
うに製造する： 活性成分 ８０ｍｇ 澱粉 ５９ｍｇ 微結晶性セルロース ５９ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ 計 ２００ｍｇ 活性成分、セルロース、澱粉、およびステアリン酸マグ
ネシウムを混和し、Ｎｏ.４５メッシュＵ.Ｓ.篩で篩過
し、２００ｍｇの量で硬ゼラチンカプセル中に充填す
る。

【０１２０】製剤例６ 活性成分２２５ｍｇを各々含有する座剤を以下のように
製造する： 活性成分 ２２５ｍｇ 飽和脂肪酸グリセリド ２０００ｍｇ 計 ２２２５ｍｇ 活性成分をＮｏ.６０メッシュＵ.Ｓ.篩で篩過し、予め
必要最低限の熱を用いて融解させた飽和脂肪酸グリセリ
ド中に懸濁する。次にこの混合物を公称２ｇ容量の座剤
鋳型中に注ぎ、放冷する。

【０１２１】製剤例７ ５ｍｌ用量につき活性成分５０ｍｇを各々含有する懸濁
剤を以下のように製造する： 活性成分 ５０ｍｇ カルボキシメチルセルロースナトリウム ５０ｍｇ シロップ １.２５ｍＬ 安息香酸溶液 ０.１０ｍＬ 香料 所望量 着色料 所望量 精製水を加えて５ｍＬとする活性成分をＮｏ.４５メッ
シュＵ.Ｓ.篩で篩過し、カルボキシメチルセルロースナ
トリウムおよびシロップと混合して滑らかなペーストを
形成させる。安息香酸溶液、香料および着色料を水の一
部で希釈して攪拌しながら加える。次いで、必要な容量
とするに充分な水を加える。

【０１２２】製剤例８ 静脈内投与用製剤を以下のように製造することができ
る： 活性成分 １００ｍｇ 等張食塩水 １０００ｍＬ 上の成分の溶液は一般に１分間に１ｍＬの速度で対象に
静脈内投与される。本発明に係る化合物が有効且つ経口
で活性なトロンビン阻害剤であるための能力は、以下の
検定の１またはそれ以上において評価される。

【０１２３】本発明により提供される化合物（式１）は
哺乳動物においてトロンビンの作用を選択的に阻害す
る。トロンビンの阻害は、トロンビンが色素生成基質Ｎ
−ベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリル−Ｌ
−アルギニル−ｐ−ニトロアニリド、Ｎ−ベンゾイル−
Ｌ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニ
リドを加水分解する検定において測定されるトロンビン
のアミダーゼ活性のインビトロ阻害によって立証され
る。

【０１２４】この検定は、緩衝液（０.０３Ｍトリス、
０.１５Ｍ ＮａＣｌ、ｐＨ７.４）５０μＬをヒトトロ
ンビン溶液（精製ヒトトロンビン、エンザイム・リサー
チ・ラボラトリーズ、サウスベンド、インディアナ、８
ＮＩＨ単位／ｍｌ）２５μｌおよび溶媒（５０％水性メ
タノール（ｖ：ｖ））中の被験化合物２５μｌと混合す
ることにより実施する。次に色素生成基質の水溶液
（０.２５ｍｇ／ｍｌ）１５０μｌを加え、基質の加水
分解速度をｐ−ニトロアニリンの放出について反応を４
０５ｎｍで監視することによって測定する。加水分解速
度に対する遊離トロンビン濃度をプロットすることによ
り標準曲線を作成する。次いで、被験化合物で観察され
た加水分解速度をこの標準曲線を用いることによりそれ
ぞれの検定における「遊離トロンビン」値に変換する。
結合した（被験化合物に結合した）トロンビンを、検定
に使用されたトロンビンのわかっている最初の量から各
検定で観察された遊離トロンビンの量を差し引くことに
よって算出する。各検定における遊離阻害剤の量を、添
加された阻害剤（被験化合物）のモル数から結合したト
ロンビンのモル数を差し引くことによって算出する。

【０１２５】Ｋａｓｓ値は、トロンビンおよび被験化合
物（Ｉ）の間の反応に対する仮説的平衡定数である。

【数１】 Ｋａｓｓを被験化合物の濃度範囲について算出し、平均
値をリットル毎モルの単位で報告する。

【０１２６】ヒトトロンビンについての上記方法に実質
上従うことにより、そして下に指定する適当な色素生成
基質と共に他のヒト血液凝固系セリンプロテアーゼを使
用しそしてフィブリン溶解系セリンプロテアーゼを使用
して、凝固因子セリンプロテアーゼおよびフィブリン溶
解セリンプロテアーゼに関する本発明化合物の選択性
を、ヒト血漿血餅フィブリン溶解への干渉の実質的欠如
と共に評価する。

【０１２７】ヒト因子Ｘ、Ｘａ、ＩＸａ、ＸＩａ、およ
びＸＩＩａはエンザイム・リサーチ・ラボラトリーズ、
サウスベンド、インディアナから、ヒトウロキナーゼは
レオ・ファーマシューティカルズ、デンマークから購入
し、そして組み替え活性プロテインＣ（ａＰＣ）はイー
ライ・リリー・アンド・Ｃｏ.において米国特許第４９
８１９５２号に実質上従って製造する。色素生成基質：
Ｎ−ベンゾイル−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ
−ニトロアニリド（因子Ｘａ用）；Ｎ−Ｃｂｚ−Ｄ−Ａ
ｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（因子Ｘａ
基質として因子ＩＸａ検定用）；ピログルタミル−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（因子ＸＩａおよびａ
ＰＣ用）；Ｈ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ｐ−ニト
ロアニリド（因子ＸＩＩａ用）；およびピログルタミル
−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリド（ウロキナーゼ
用）；は、カビヴィトラム、ストックホルム、スウェー
デンから、またはミッドウェスト・バイオテク、フィッ
シャーズ、インディアナから購入する。牛トリプシンは
ワーシングトン・バイオケミカルズ、フリーホールド、
ニュージャージーから、そしてヒト血漿カリクレインは
カビヴィトラム、ストックホルム、スウェーデンから購
入する。血漿カリクレイン用の色素生成基質Ｈ−Ｄ−Ｐ
ｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリドはカビヴィ
トラム、ストックホルム、スウェーデンから購入する。
ヒトトロンビンに対する、そしてトリプシンに対する基
質であるＮ−ベンゾイル−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−ｐ
−ニトロアニリドは、入手し得る市販の反応体から既知
のペプチド結合法を用いて本発明化合物のための上記方
法に従って合成するか、またはミッドウェスト・バイオ
テク、フィッシャーズ、インディアナから購入する。

【０１２８】ヒトプラスミンはベーリンガー・マンハイ
ム、インディアナポリス、インディアナから購入し；ｎ
ｔ−ＰＡは一本鎖活性対照としてアメリカン・ダイアグ
ノスティカ、グリーンウィッチ、コネティカットから購
入し；修飾ｔ−ＰＡ６（ｍｔ−ＰＡ６）はイーライ・リ
リー・アンド・カンパニーにおいて当分野で知られる方
法により製造する（バーク等、Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅ
ｍ.、２６５巻５１２０−５１７７頁（１９９０）を参
照されたい）。プラスミン色素生成基質Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ
−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ｐ−ニトロアニリドおよび組織プラ
スミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）基質Ｈ−Ｄ−Ｉｌ
ｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐ−ニトロアニリドはカビ・ヴィ
トラム、ストックホルム、スウェーデンから購入する。

【０１２９】上記の色素生成基質において、三文字記号
Ｉｌｅ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｖ
ａｌ、ＬｅｕおよびＬｙｓを使用して対応するアミノ酸
基イソロイシン、グルタミン酸、グリシン、プロリン、
アルギニン、フェニルアラニン、バリン、ロイシンおよ
びリジンをそれぞれ示す。

【０１３０】以下の第１表は、式Ｉにより表わされる示
されている化合物について得られたＫａｓｓ値を列挙し
ている。

【０１３１】

【表１】ヒトトロンビン阻害レベル 実施例 Kass X 10⁶(1/mole) １ ４６ ２ １２ ３ ４５ ４ ５ ５ ４ ６ ２１ ８ ５９５ ９ １２１ １０ ２７ １１ １２ ２５ １３ １４ ３７

【０１３２】トロンビン阻害剤は好ましくは、ウロキナ
ーゼ、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）お
よびストレプトキナーゼにより誘発されるフィブリン溶
解を温存すべきである。この事は、ストレプトキナー
ゼ、ｔ−ＰＡまたはウロキナーゼの血栓溶解療法に対す
る補助としての係る薬物の治療用途にとって、そして、
内因性フィブリン溶解温存性（ｔ−ＰＡおよびウロキナ
ーゼに関して）抗血栓剤としての係る薬物の用途にとっ
て重要であろう。フィブリン溶解プロテアーゼのアミダ
ーゼ活性への干渉の欠如に加えて、このようなフィブリ
ン溶解系温存を、ヒト血漿血餅およびそれぞれのフィブ
リン溶解プラスミノーゲン活性化因子による血餅の溶解
によって研究することができる。

【０１３３】材料 犬の血漿は、静脈穿刺により意識のある雑種犬（いずれ
かの性、ヘーゼルトン−ＬＲＥ、カラマズー、ミシガ
ン、米国）から３.８％クエン酸塩中に採取する。フィ
ブリノーゲンは新鮮な犬の血漿から調製し、ヒトフィブ
リノーゲンは前記の方法および明細書に従ってＡＣＤヒ
ト血液の画分Ｉ−２から調製する。スミス、Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ.Ｊ.、１８５巻１−１１頁（１９８０）；およびス
ミス等、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１１巻２９５８−
２９６７頁（１９７２）。ヒトフィブリノーゲン（９８
％純度／無プラスミン）はアメリカン・ダイアグノステ
ィカ、グリーンウィッチ、コネティカットより得る。フ
ィブリノーゲンＩ−２調製物の放射標識をかつて報告さ
れたように実施する。スミス等、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ、１１巻２９５８−２９６７頁（１９７２）。ウロ
キナーゼは２２００プローグ単位／バイアルとしてレオ
・ファーマシューティカルズ、デンマークから購入す
る。ストレプトキナーゼはヘキスト−ラッセル・ファー
マシティカルズ、ソマーヴィル、ニュージャージーから
購入する。

【０１３４】方法 − ヒト血漿血餅の溶解に及ぼすｔ
−ＰＡの効果 ０.０２２９ｕＣｉの１２５−ヨウ素で標識されたフィ
ブリノーゲンを含有するヒト血漿１００ｕｌにトロンビ
ン５０ｕｌ（７３ＮＩＨ単位／ｍｌ）を加えることによ
り、微小試験管内でヒト血漿血餅を形成させる。血餅に
５０ｕｌのウロキナーゼまたはストレプトキナーゼ（５
０、１００、または１０００単位／ｍｌ）を積層し室温
で２０時間インキュベートすることにより血餅の溶解を
調べる。インキュベーション後、管をベックマン遠心機
で遠心する。ガンマ計数のため、上清２５ｕｌを１.０
ｍｌ容の０.０３Ｍトリス／０.１５Ｍ ＮａＣｌ緩衝液
中に加える。１００％溶解の計数対照はトロンビンを除
く（そして緩衝液に置き換える）ことにより得られる。
トロンビン阻害剤を１、５、および１０ｕｇ／ｍｌ濃度
で積層溶液に含有させることにより、フィブリン溶解に
対する干渉の可能性について該化合物を評価する。デー
タの点からフィブリン溶解物質の特定の濃度についての
５０％溶解を表わす値に直線的外挿を行なうことによ
り、概算のＩＣ₅₀値を見積る。

【０１３５】抗凝固活性 材料 静脈穿刺により、意識のある雑種犬（いずれかの性、ヘ
ーゼルトン−ＬＲＥ、カラマズー、ミシガン、米国）か
ら犬の血漿を、または麻酔した雄のスプラーグ−ドーレ
イラット（ハーラン・スプラーグ−ドーレイ・Ｉｎ
ｃ.、インディアナポリス、インディアナ、米国）から
ラットの血漿を、３.８％クエン酸塩中に採取する。フ
ィブリノーゲンは前記の方法および明細書に従ってＡＣ
Ｄヒト血液から画分Ｉ−２として調製する。スミス、Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ.Ｊ.、１８５巻１−１１頁（１９８０）；
およびスミス等、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１１巻２
９５８−２９６７頁（１９７２）。さらにヒトフィブリ
ノーゲンは９８％純度／無プラスミンとしてアメリカン
・ダイアグノスティカ、グリーンウィッチ、コネティカ
ットより購入する。凝固試薬ＡＣＴＩＮ、トロンボプラ
スチン、およびヒト血漿はバクスター・ヘルスケア・Ｃ
ｏｒｐ.、デイド・ディヴィジョン、マイアミ、フロリ
ダから得る。パーク−デイヴィス（デトロイト、ミシガ
ン）からの牛トロンビンを血漿中の凝固検定に使用す
る。

【０１３６】方法 抗凝固測定 凝固検定法は前に記載された通りである。スミス等、Ｔ
ｈｒｏｍｂｏｓｉｓＲｅｓｅａｒｃｈ、５０巻１６３−
１７４頁（１９８８）。ＣｏＡスクリーナー凝固装置
（アメリカン・レイバー・Ｉｎｃ.）を全ての凝固検定
の測定に使用する。被験血漿０.０５ｍｌに食塩水０.０
５ｍｌおよびトロンボプラスチン−Ｃ試薬０.０５ｍｌ
を加えることによりプロトロンビン時間（ＰＴ）を測定
する。活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）
は、被験血漿０.０５ｍｌをアクチン試薬０.０５ｍｌと
共に１２０秒間インキュベートした後にＣａＣｌ₂（０.
０２Ｍ）を加えることによって測定する。トロンビン時
間（ＴＴ）は、被験血漿０.０５ｍｌに食塩水０.０５ｍ
ｌおよびトロンビン０.０５ｍｌ（１０ＮＩＨ単位／ｍ
ｌ）を加えることにより測定する。式Ｉの化合物を広い
範囲の濃度にわたりヒトまたは動物の血漿に加え、ＡＰ
ＴＴ、ＰＴ、およびＴＴ検定に及ぼす延長効果を測定す
る。直線的外挿を行ない、各検定において凝固時間を二
倍とするのに要する濃度を見積る。

【０１３７】動物 雄のスプラーグ−ドーレイラット（３５０−４２５ｇ、
ハーラン・スプラーグ・ドーレイ・Ｉｎｃ.、インディ
アナポリス、ＩＮ）をキシラジン（２０ｍｇ／ｋｇ、
ｓ.ｃ.）およびケタミン（１２０ｍｇ／ｋｇ、ｓ.ｃ.）
で麻酔し、加温したウォーターブランケット（３７℃）
上に維持する。注入を可能にするため頸静脈にカニュー
レを挿入する。

【０１３８】動静脈吻合モデル 左頸静脈および右頸動脈を２０ｃｍの長さのポリエチレ
ンＰＥ６０管によりカニューレ挿入する。管腔に綿糸
（５ｃｍ）を入れた、より大きな管（ＰＥ１９０）でで
きた６ｃｍの中央部分を、長い部分の間に摩擦によって
装着し、動静脈吻合回路を完成する。血液をこの吻合部
に１５分間循環させ、その後、糸を注意深く除去して重
量を測定する。濡らした糸の重量をこの糸および血栓の
合計重量から差し引く（Ｊ.Ｒ.スミス、Ｂｒ.Ｊ.Ｐｈａ
ｒｍａｃｏｌ.、７７巻２９頁、１９８２を参照された
い）。

【０１３９】動脈損傷のＦｅＣｌ₃モデル 正中腹側頸部切開により頸動脈を分離する。熱電対を各
々の動脈下に位置させ、血管の温度を連続的に連続記録
紙記録計に記録する。縦に切った管の帯（０.０５８Ｉ
Ｄ ｘ ０.０７７ＯＤ ｘ ４ｍｍ、バクスター・Ｍ
ｅｄ.グレイド・シリコン）を各頸動脈の周囲に直接熱
電対の上に巻き付ける。ＦｅＣｌ₃ヘキサヒドラートを
水に溶解し、濃度（２０％）を実際のＦｅＣｌ₃の重量
のみによって表現する。動脈を損傷し血栓症を誘発する
ために、２.８５ｕｌをピペットで帯に入れて、熱電対
プローブの上の動脈を濡らす。動脈の閉塞は温度の急速
な下降によって示される。閉塞に対する時間を分で報告
し、ＦｅＣｌ₃の適用と血管温度の急速な下降との間の
所要実時間を表わす（Ｋ.Ｄ.クルツ、Ｔｈｒｏｍｂ.Ｒ
ｅｓ.、６０巻２６９、１９９０）。

【０１４０】自然血栓溶解モデル インビトロのデータは、ペプチドトロンビン阻害剤はト
ロンビンを阻害し、より高濃度ではプラスミンおよび組
織プラスミノーゲン活性化因子のような他のセリンプロ
テアーゼを阻害し得ることを示唆している。この化合物
がインビボでフィブリン溶解を阻害するか否かを評価す
るために、標識された全血血餅を肺循環中に注入するこ
とにより、自然血栓溶解の速度を測定する。ラットの血
液（１ｍｌ）を牛トロンビン（４ＩＵ、パーク・デイヴ
ィス）および¹²⁵Ｉヒトフィブロゲン（５μＣｉ、ＩＣ
Ｎ）と迅速に混合し、直ちにシラスティック管中に吸引
し３７℃で１時間インキュベートする。経時した血栓を
管から追い出し、１ｃｍの断片に切り取り、正常食塩水
で３回洗浄し、各断片をガンマカウンターで計数する。
計数値のわかった断片をカテーテル中に吸引し、その後
これを頸静脈中に挿入する。カテーテルの先端を右心房
の近傍に進め、血餅を追い出して肺循環中に浮遊させ
る。挿入の１時間後、心臓および肺を収穫し別々に計数
する。血栓溶解は、

【数２】 の％として表現される。

【０１４１】注入された血餅のフィブリン溶解性の分解
は時間に依存して起こる（Ｊ.Ｐ.クローツェル、Ｃａｒ
ｄｉｏｖａｓ.Ｐｈａｒｍａｃｏｌ.、１２巻５２０頁、
１９８８を参照されたい）。

【０１４２】凝固パラメータ 血漿トロンビン時間（ＴＴ）および活性化部分トロンボ
プラスチン時間（ＡＰＴＴ）をフィブロメーターで測定
する。頸静脈カテーテルから血液を採取し、クエン酸ナ
トリウム（３.８％、血液９部に対して１部）を入れた
注射筒に集める。ＴＴを測定するために、ラットの血漿
（０.１ｍｌ）を３７℃で食塩水（０.１ｍｌ）および牛
トロンビン（０.１ｍｌ、トリス緩衝液中３０Ｕ／ｍ
ｌ；パーク・デイヴィス）と混合する。ＡＰＴＴのため
には、血漿（０.１ｍｌ）およびＡＰＴＴ溶液（０.１ｍ
ｌ、オルガノン・テクニカ）を５分間（３７℃）インキ
ュベートし、ＣａＣｌ₂（０.１ｍｌ、０.０２５Ｍ）を
加えて凝固を開始させる。検定は二重に行ない平均す
る。

【０１４３】バイオアベイラビリティー指数 生物活性の尺度、血漿トロンビン時間（ＴＴ）は、ＴＴ
の増加は親化合物によるトロンビン阻害のみからもたら
されるという仮定の下に、親化合物の検定の代替として
の役割を有する。ＴＴに及ぼすトロンビン阻害剤の効果
の時間的経過を、麻酔したラットへのｉ.ｖ.ボーラス投
与後、そして意識のある飢餓ラットに対する経口処置後
に測定する。血液容量が限定されている事、そして処置
時間から反応が処置前の値に戻る時間までの時間的経過
を測定するために必要な点の数の故に、２つのラット集
団を使用する。各試料集団は連続する時点を交互に代表
する。この時間経過全体における平均のＴＴを用いて曲
線下面積（ＡＵＣ）を算出する。バイオアベイラビリテ
ィー指数は下に示される式によって計算し、相対的活性
％として表現する。

【０１４４】血漿ＴＴ時間経過の曲線下面積（ＡＵＣ）
を決定し、用量について調節する。このバイオアベイラ
ビリティー指数は「相対活性％」と呼ばれ、

【数３】 として算出される。

【０１４５】化合物 化合物溶液は正常食塩水中で毎日新たに作成し、ボーラ
スとして、または実験による侵襲の１５分前に開始しそ
の間じゅう、即ち動静脈吻合モデルでは１５分間、動脈
損傷のＦｅＣｌ₃モデルおよび自然血栓溶解モデルでは
６０分間継続して注入する。ボーラス注射容量はｉ.ｖ.
で１ｍｌ／ｋｇ、ｐ.ｏ.で５ｍｌ／ｋｇ、そして注入容
量は３ｍｌ／時である。

【０１４６】統計学 結果を平均＋／−ＳＥＭとして表わす。分散の一元分析
を用いて統計学的に有意な差を検出し、次いでどの平均
が異なっているのかを決定するためにダネット試験を適
用する。等しい平均値の帰無仮説の棄却のための有意性
レベルはＰ＜０.０５である。

【０１４７】

【表２】バイオアベイラビリティー指数 実施例 相対活性パーセント １ ３８％ ２ ３６％ ３ ３２％ ４ １６％ ５ ６ ８ ４３％ ９ １９％ １０ ５％ １１ １２ １６％ １３ １４

【０１４８】動物 雄の犬（ビーグル；１８ヶ月齢−２歳；１２−１３ｋ
ｇ、マーシャル・ファームズ、ノースローズ、ニューヨ
ーク１４５１６）を一夜絶食させ、投与の２４０分後に
ピューリナ保証処方飼料（ピューリナ・ミルズ、セント
ルイス、ミズーリ）を与える。水は自由に摂取させる。
部屋の温度は６６−７４゜Ｆ；相対湿度４５−５０％に
維持し；０６００−１８００時間点灯する。

【０１４９】薬動力学的モデル 被験化合物を投与の直前に、５ｍｇ／ｍｌの調合となる
よう０.９％滅菌食塩水に溶解することにより調製す
る。犬に被験化合物２ｍｇ／ｋｇ用量を１回、経口胃管
栄養法により与える。投与の０.２５、０.５、０.７
５、１、２、３、４および６時間後に血液試料（４.５
ｍｌ）を頭部静脈から採取する。試料はクエン酸入りバ
キュテナー管に集め、氷上に保持した後遠心により血漿
に変形する。血漿試料をジニトロフェニルヒドラジンで
誘導体とし、メタノール／燐酸でｐＨ７に調節した５０
０ｍＭ酢酸ナトリウム（６０：４０、ｖ／ｖ）で溶出す
るＨＰＬＣ（ゾルバックスＳＢ−Ｃ８カラム）により分
析する。被験化合物の血漿濃度を記録し、薬動力学的パ
ラメータ：排泄速度定数、Ｋｅ；総クリアランス、Ｃｌ
ｔ：分布容量、Ｖ_D；血漿中最大被験化合物濃度の時
間、Ｔｍａｘ；Ｔｍａｘでの被験化合物の最大濃度、Ｃ
ｍａｘ；血漿半減期、ｔ_0.5；および曲線下面積、Ａ.
Ｕ.Ｃ.；吸収された被験化合物の画分、Ｆ、の算出に使
用する。

【０１５０】

【表３】 薬動力学的パラメータ Ke Clt/F VD/F Tmax Cmax t0.5 A.U.C. 実施例 (min-1) (L/hr.kg) (L/kg) (hr) (ng/ml) (min) (ng.hr/ml) o-無限大 1 0.0104 0.437 0.729 1-2 1676 67 4651 ±0.0009 ±0.032 ±0.120 ±202 範囲= ±319 57-86

【０１５１】犬の冠動脈血栓症のモデル 犬の外科的準備および器具はジャクソン等、Ｃｉｒｃｕ
ｌａｔｉｏｎ、８２巻９３０−９４０頁（１９９０）に
記載の通りである。雑種の犬（６−７ヶ月齢、いずれか
の性、ヘーゼルトン−ＬＲＥ、カラマズー、ＭＩ、米
国）をペントバルビタールナトリウム（３０ｍｇ／ｋｇ
静脈内、ｉ.ｖ.）で麻酔し、挿管し、室内の空気で換気
する。１回換気容量および呼吸速度を血液のＰＯ₂、Ｐ
ＣＯ₂およびｐＨが正常限界内に維持されるように調節
する。皮下注射針電極を、第ＩＩ誘導のＥＣＧを記録す
るために挿入する。

【０１５２】左頸静脈および総頸動脈を左の中外側頸部
切開によって分離する。動脈血圧（ＡＢＰ）を、頸動脈
に挿入した、前もって検定したミラー変換器（モデル
（ＭＰＣ−５００、ミラー・インストゥルメンツ、ヒュ
ーストン、ＴＸ、米国）により連続して測定する。実験
中血液試料を採取するため、この頸静脈にカニューレを
挿入する。さらに、被験化合物の投与のため、両後足の
大腿静脈にカニューレを挿入する。

【０１５３】左の第五肋間で開胸し、心臓を心膜揺籃に
懸架する。左回旋冠動脈（ＬＣＸ）を、第一主対角心室
枝に隣接した１ないし２ｃｍの部分を分離する。３−４
ｍｍの長さの２６ゲージの針を先端とする針金の負電極
（テフロン被覆、３０ゲージの銀メッキされた銅線）を
このＬＣＸに挿入し、動脈の内膜表面に接触するよう位
置させる（実験終了時に確認する）。正極を皮下（ｓ.
ｃ.）部位に位置させることにより刺激回路を完成させ
る。調節可能なプラスチック閉塞器をＬＣＸの電極の領
域に巻き付ける。前もって検定した電磁気流プローブ
（カロリナ・メディカル・エレクトロニクス、キング、
ＮＣ、米国）を、冠血流（ＣＢＦ）の測定のため、負極
と隣接してＬＣＸのまわりに位置させる。ＬＣＸの機械
的閉塞の１０秒後に観察される充血血流反応の４０−５
０％阻害をもたらすよう、閉塞器を調節する。血行動態
およびＥＣＧの測定値を全て記録し、データ獲得系（モ
デルＭ３０００、モデュラー・インストゥルメンツ、マ
ルヴァーン、ＰＡ、米国）によって分析する。

【０１５４】血栓の形成および化合物の投与計画 負極に１００μＡの直流（ＤＣ）を流すことにより、Ｌ
ＣＸの内膜に電気分解的損傷を作り出す。この電流を６
０分間維持し、その後血管が閉塞されているか否かに拘
らず停止する。血栓の形成はＬＣＸが完全に閉塞するま
で自然に進行する（ＣＢＦが０であることおよびＳ−Ｔ
部分の上昇として判断される）。閉塞している血栓を１
時間経時させた後に化合物の投与を開始する。０.５お
よび１ｍｇ／ｋｇ／時の用量の本発明化合物の２時間の
注入を、血栓溶解剤（例えば組織プラスミノーゲン活性
化因子、ストレプトキナーゼ、ＡＰＳＡＣ）の注入と同
時に開始する。被験化合物の投与後３時間の間、再灌流
を追跡する。成功した血栓溶解の後の冠動脈の再閉塞
は、≧３０分間持続した０のＣＢＦとして定義する。

【０１５５】血液学およびテンプレート出血時間の測定 全血球数、ヘモグロビン、およびヘマトクリット値を４
０μｌのクエン酸（３.８％）添加血液（クエン酸１
部：血液９部）試料について血液分析機（セル−ダイン
９００、セコイア−ターナー、マウントビュー、ＣＡ、
米国）により測定する。歯肉テンプレート出血時間をシ
ンプレートＩＩ出血時間装置（オルガノン・テクニカ、
ダーラム、Ｎ.Ｃ.、米国）によって測定する。この装置
を用いて犬の左の下顎または上顎いずれかの歯肉を２箇
所水平に切開する。切開は各々幅３ｍｍ ｘ 深さ２ｍ
ｍである。この切開を行ない、ストップウォッチを使用
してどれだけの時間出血が起こるかを測定する。綿棒を
用いて切開部からにじみ出る血液を吸い取る。テンプレ
ート出血時間は、切開から出血の停止までの時間であ
る。出血時間は、被験化合物の投与直前（０分）、注入
に入って６０分、被験化合物の投与終了時（１２０
分）、そして実験の終点において測定する。

【０１５６】全てのデータは、一元配置分散分析（ＡＮ
ＯＶＡ）、およびその後のステューデント−ノイマン−
クエルズ・ポスト・ｈｏｃ・ｔ検定により分析して有意
性のレベルを決定する。反復測定ＡＮＯＶＡを用いて、
実験中の時点間の有意性の相違を決定する。値は、少な
くともｐ＜０.０５のレベルで統計学的に異なると判断
する。全ての値は平均±ＳＥＭである。研究は全て米国
生理学界の指針に従って実施する。方法に関するさらな
る詳細は、ジャクソン等、Ｊ.Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ.Ｐ
ｈａｒｍａｃｏｌ.、２１巻５８７−５９９頁（１９９
３）に記載されている。

【０１５７】

【表４】 犬の冠動脈血栓症のモデル 実施例 用量(mg/kg・hr) 閉塞時間(分) １ ０.２５ ６０ ０.５０ １５０ １.００ ＞２２５

【０１５８】実施例１の化合物をさらに、０.２５、０.
５０および１.０ｍｇ／ｋｇ.ｈｒでのテンプレート出血
時間検定で評価した。２４０分間にわたって実施例１の
化合物はテンプレート出血時間に有意な作用を示さなか
った。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ロバート・バーキー・ローゼンバーガー アメリカ合衆国46112インディアナ州ブラ ウンズバーグ、イースト・カレッジ・アベ ニュー525番 (72)発明者 ダニエル・ジョン・サール アメリカ合衆国46142インディアナ州グリ ーンウッド、レジャー・レイン376番 (72)発明者 ロバート・セオドア・シューマン アメリカ合衆国46143インディアナ州グリ ーンウッド、ウィロー・ストリート2596番 (72)発明者 ジェラルド・フロイド・スミス アメリカ合衆国46217インディアナ州イン ディアナポリス、クウィーンズウッド・コ ート825番 (72)発明者 マイケル・ロバート・ウィリー アメリカ合衆国46268インディアナ州イン ディアナポリス、ラングウッド・ドライブ 7725番

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式Ｉ： 【化１】 ［式中、 Ｘは、ホモプロリニル、プロリニル、チアゾリジノイ
   ル、イソチアゾリジノイル、チオモルホリノイル、ピペ
   ラジノイル、モルホリノイル、オキサゾリジノイル、イ
   ソキサゾリジノイル、２−アザノルボルノイル、および
   縮合二環式基： 【化２】 ［式中、ｎは１−３であり、ｍは２または３である］か
   ら選ばれる置換されていないまたは置換された基であ
   り、硫黄を含む基においてこの硫黄は１または２個の酸
   素原子で酸化されていてよく；Ｙは、 【化３】 である］を有する化合物またはその薬学上許容し得る塩
   または薬学上許容し得る該化合物もしくはその塩の溶媒
   和物［ここで、 さらに、Ｘが、縮合二環式基を包含する置換された基で
   ある場合、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₁
   −Ｃ₄アルコキシ、アミノ（−ＮＨ₂）、モノ（Ｃ₁−Ｃ₄
   アルキル）アミノ、ジ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）アミノ、メ
   ルカプト、Ｃ₁−Ｃ₄アルキルチオ（−Ｓ（Ｏ）_p（Ｃ₁−
   Ｃ₄アルキル））、−ＮＨＳ（Ｏ）_p（Ｃ₁−Ｃ₄アルキ
   ル）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、−Ｓ（Ｏ）_p
   ＮＨ₂、−Ｓ（Ｏ）_pＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）、−Ｓ
   （Ｏ）_pＮ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）₂、置換または非置換フ
   ェノキシ、置換または非置換ナフチルオキシ、置換また
   は非置換ピリジルオキシ、置換または非置換フェニルチ
   オから選ばれる安定構造を与える１ないし３個の同じま
   たは異なる置換基があってよく；ｐは０、１または２で
   あり；そしてフェノキシ、ナフチルオキシ、ピリジルオ
   キシおよびフェニルチオ基上の置換基は、ハロ、ヒドロ
   キシ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、アミノ
   （−ＮＨ₂）、モノ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）アミノ、ジ
   （Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）アミノ、メルカプト、Ｃ₁−Ｃ₄ア
   ルキルチオ（−Ｓ（Ｏ）_p（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル））、−
   ＮＨＳ（Ｏ）_p（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）、−ＮＨＣ（Ｏ）
   Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、−Ｓ（Ｏ）_pＮＨ₂、−Ｓ（Ｏ）_pＮ
   Ｈ（Ｃ₁−Ｃ₄アルキル）、−Ｓ（Ｏ）_pＮ（Ｃ₁−Ｃ₄ア
   ルキル）₂から選ばれる１または２個の同じまたは異な
   る置換基であり、ｐは０、１または２である］。
2. 【請求項２】 化合物が、 Ｄ−ホモプロリニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−アルギニン
   アルデヒド；Ｄ−プロリニル−Ｌ−プロリニル−Ｌ−
   アルギニン アルデヒド；Ｄ−ホモプロリニル−Ｌ−ア
   ゼチジン−２−カルボニル−Ｌ−アルギニン アルデヒ
   ド；Ｄ−プロリニル−Ｌ−アゼチジン−２−カルボニル
   −Ｌ−アルギニン アルデヒド；および、 Ｄ−（４−フェノキシ）プロリニル−Ｌ−プロリニル−
   Ｌ−アルギニン アルデヒドから選ばれる請求項１に記
   載の化合物またはその塩または溶媒和物。