HU206890B - Process for producing sugar-modified somatostatin peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components - Google Patents

Process for producing sugar-modified somatostatin peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components Download PDF

Info

Publication number
HU206890B
HU206890B HU874432A HU443287A HU206890B HU 206890 B HU206890 B HU 206890B HU 874432 A HU874432 A HU 874432A HU 443287 A HU443287 A HU 443287A HU 206890 B HU206890 B HU 206890B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
group
peptide
residue
compound
formula
Prior art date
Application number
HU874432A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT46710A (en
Inventor
Wilfried Bauer
Rainer Albert
Francois Cardinaux
Monika Mergler
Janos Pless
Walter Prikoszovich
Original Assignee
Sandoz Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sandoz Ag filed Critical Sandoz Ag
Priority to HU906340A priority Critical patent/HU210192B/hu
Publication of HUT46710A publication Critical patent/HUT46710A/hu
Publication of HU206890B publication Critical patent/HU206890B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
    • C07D319/06—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C07K1/1072—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups
    • C07K1/1077—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups by covalent attachment of residues other than amino acids or peptide residues, e.g. sugars, polyols, fatty acids
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás új, cukorral módosított szomatosztatín-peptidek és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására.
Közelebbről, a találmány szerinti eljárás szomatosztatin peptidek olyan cukorszármazékai előállítására vonatkozik, amelyek a cukorral nem módosított pepiidhez viszonyítva hosszabban tartó hatással rendelkeznek, és amely peptideknek legalább egy aminosav-egységéhez egy közvetlen glükozidos kötéstől eltérő kötéssel kapcsolódik egy cukor-maradék az aminosavegység aminocsoportjához.
A fentiekben meghatározott vegyületeket ezután mint találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket említjük.
A cukorral nem módosított peptidek alatt a szerkezetileg megfelelő, cukor-maradéko(ka)t nem tartalmazó peptideket értjük. Ezeket a továbbiakban módosítatlan peptideknek nevezzük.
Tapasztalataink szerint a talámány szerinti eljárással előállított peptid-származékok érdekes és meglepő farmakológiai tulajdonságokkal, különösen hosszabban tartó hatással rendelkeznek, amint azt alább ismertetjük.
Azt tapasztaltuk, hogy egy vagy több cukor-maradék beépülése a molekulába - még akkor is, ha ez például az Asn vagy Ser szokásos glükozilezésétől eltérő módon történik - kiváltja ezeket a tulajdonságokat.
A cukor-maradékokat előnyösen a peptid aktív helyétől távol eső aminosavak aminocsoportjaira visszük be.
A leírásban peptid alatt az alábbiakban (VIII) általános képletű vegyületként definiált peptideket értjük. Aminosav egység alatt a leírásban aminoalkohol-egységet- például redukált aminosavat- is értünk.
Cukorként a mono-, di- vagy triózok, vagy ezeknek a későbbiekben definiált származékai alkalmazhatók.
A cukor például egy N-terminális aminocsoporthoz és/vagy a peptid oldalláncban lévő legalább egy aminocsoporthoz kapcsolódhat.
A cukor funkciós csoportjainak egyikén keresztül kapcsolódhat a peptidhez, vagy közvetlenül, vagy egy áthidaló csoporton, például egy alkilén-karbonil-csoporton keresztül.
A kapcsolást ismert módon végezhetjük, előnyösen az alábbiakban ismertetett módon hajthatjuk végre.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek egyik előnyös csoportjában a cukor-maradék a peptid egy aminocsoportjához közvetlen N-glükozídos vagy közvetlen amidkötéstől eltérő módon kapcsolódik.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek egyik csoportját Amadori- vagy Heyns-féle átrendeződési reakcióval állíthatjuk elő.
A találmány szerinti eljárással előállíthatok orálisan alkalmazható gyógyászati készítmények is, amelyek hatóanyagként egy találmány szerinti eljárással előállított vegyületet, különösen egy legalább 8 aminosavegységből álló vegyületet tartalmaznak.
A találmány szerinti eljárás közelebbről az (1) általános képletű biológiailag aktív peptid-cukor-származékok és savaddíciós sóik előállítására vonatkozik, a képletben
a) X jelentése egy mono-, di- vagy triszacharidból levezethető csoport, amelynél a peptidhez kapcsolódó rész mindig ketopentóz, ketohexóz, vagy ketobeptóz dezoxi-maradéka, amely maradék egy, az adott esetben jelen lévő furanóz- vagy piranóz-gyűrűn kívül eső -CH2-csoporton keresztül kapcsolódik egy szomatosztatin P peptid -NH-csoportjához,
b) X jelentése egy mono-, di- vagy triszacharidból levezethető csoport, amelynél a peptidhez kapcsolódó rész mindig egy 2-aIdohexóz vagy 2-aldopentóz dezoxi-maradéka, amely maradék a 2. szénatomnál induló kötésen keresztül kapcsolódik egy szomatosztatin P peptid -NH-csoportjához, vagy
c) X jelentése G3-CO- általános képletű csoport, amely hexuronsav-maradék, vagy egy polihidroxí(4-7 szénatomos)cikloalkil-monokarbonsav-maradék vagy sziálsav-maradék, vagy
d) Xjelentése X’-NH-Q- vagy X’-O-Q általános képletű csoport, ahol
X’jelentése aldohedóz-, dialdohexóz-, vagy acetamino-aldohexóz-maradék és
S O
II II
Q jelentése -C- vagy -C-csoport,
Q’ jelentése
O
II
-CRIOR12- C-csoport, ahol R10 és R12 jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport, vagy
e) X jelentése HOH2C-(CHOH)c-CHY-CH2- általános képletű csoport, ahol
Y jelentése H vagy OH, c értéke 2, 3 vagy 4 és a fenti csoport poliol-maradékában lévő bármely szabad hidroxicsoport adott esetben glükozidos kötéssel kapcsolódik egy redukáló monoszacharidhoz, és
P jelentése egy (Vili) általános képletű pepiidből származó maradék - a képletben A jelentése hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkilcsoport, Η-Gly, H-Ala, Η-Leu, H-IIe, H-Nle vagy H-Val,
Z| jelentése benzilcsoport, amelynek fenilcsoportja adott esetben halogénatommal lehet helyettesítve vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben ómega-helyzetben karbamoilcsoporttal lehet helyettesítve,
Y | és Y2 jelentése hidrogénatom vagy (h) általános képletű csoport, ahol m értéke 1 és 4 közötti egész szám,
Ra jelentése metil- vagy etilcsoport, és
Rbjelentése hidrogénatom, metil- vagy etilcsoport, vagy
Y, és Y2 együtt kémiai, kötést jelentenek,
B jelentése Phe (amelynek fenilcsoportja adott
HU 206 890 B esetben halogénatommal lehet helyettesítve) vagy Tyr,
C jelentése Trp,
D jelentése Lys,
E jelentése Thr, Ser, Alá, Val, Gly, Leu, He vagy Nle,
F jelentése -CO-NHR4, ahol
R4 jelentése hidrogénatom vagy -CH(R5)-Xi általános képletű csoport, ahol R5 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben ómega-helyzetű hidroxilcsoporttal lehet helyettesítve,
Xj jelentése -CONH2 csoport, vagy - CH2OR2, ahol
R2 jelentése hidrogénatom vagy egy gyógyászatilag elfogadható, fiziológiás körülmények között hidrolizálódó észtercsoport, ahol a B, D és E csoportok L-formában lehetnek, és a 2-es és 7-es helyzetben lévő csoportok egymástól függetlenül D- vagy L-formában lehetnek és a P peptidből származó csoport az N-terminális végén, vagy a lizin ε-amino-csoportján keresztül kapcsolódik a molekula többi részéhez.
A fent említett cukor-maradékok mono-, di- vagy oligoszacharidok lehetnek. A fenti cukrok heptózokat, hexózokat és/vagy pentózokat tartalmaznak, amelyek általában piranóz vagy furanóz, de nyílt láncú formában is létezhetnek.
A cukor-polipeptid-származékok előnyösen 1-3 monoszaeharid-maradékot tartalmaznak, amelyek egymáshoz kapcsolódva diszacharidot vagy triszacharidot képezhetnek.
(1) általános képletű vegyületek a) esetét az (I) általános képlet jellemzi, amelyben az (a) általános képletű molekularészjelentése előnyösen a (Via) általános képletű csoport, ahol a
Ga és Gb csoportok egyike hidrogénatom, míg a másik jelentése-OH vagy -O-glükozil-csoport, ahol a glükozil-coport egy redukáló mono-, divagy oligoszacharidból származtatható, a
Geés Gf csoportok egyike hidrogénatom, és a másik jelentése -OH csoport, a
Gg és Gh csoportok egyike hidrogénatom és a másik jelentése hidrogénatom vagy -CH2OH csoport, például a G„-Gh csoportokat úgy választhatjuk meg, hogy a (Via) általános képletű csoport egy természetes vagy szintetikus mono-, di- vagy oligoszacharid Amadori-féle átrendeződésével előállítható csoportot jelent;
a) (Via) általános képletű cukor-maradék például dezoxi-fruktozil-, dezoxi-tagatozil-, dezoxi-szorbozil-, a-glükozil(l-4)-dezoxi-fruktozil-, a-glükozil(l-4)-aglükozil-( l-4)-dezox i-fruktozilcsoport lehet;
b) (VIb) általános képletű csoport, ahol a
Ga és Gb egyike hidrogénatom, és a másik jelentése -OH csoport,
Gc és Gd egyike hidrogénatom és a másik jelentése
-OH csoport vagy -O-glükozil-csoport, ahol a glükozilcsoport egy redukáló mono-, di- vagy oligoszacharidból származtatható, és
Ge és Gf egyike hidrogénatom, és a másik jelentése hidrogénatom, -COOH, -CH2OH, -CH2-O-P(O)-(OH)2 vagy -CH2O-glükozilcsoport, ahol a glükozilcsoport egy redukáló mono-, di- vagy oligoszacharidból származtatható, például a Ga - Gf csoportokat úgy választhatjuk meg, hogy a (VIb) általános képletű csoport egy természetes vagy szintetikus mono-, di- vagy oligoszacharid Amadori-féle átrendeződésével előállítható csoportot jelent; a (VIb) általános képletű csoportokat például Amadori-féle átrendeződéssel állíthatjuk elő szacharidokból, például gentiobiózból, melibiózból, ribózból, xilózból; vagy uronsavakból, például glükuronsavból vagy galakturonsavbói.
Az (1) általános képletű vegyületek b) esetét a (II) általános képlet jellemzi, amelyekben a (b) általános képletű molekularész jelentése előnyösen
a) (Vlla) általános képletű csoport, ahol a
Ga és Gb egyike hidrogénatom, a másik jelentése szabad kötés,
Gc és Gd egyike hidrogénatom, a másik jelentése -OH csoport,
Ge és Gf egyike hidrogénatom és a másik jelentése -OH vagy -O-glükozil-csoport, ahol a glükozilcsoport egy redukáló mono-, di- vagy oligoszacharidból származtatható csoportot jelent,
Gg és Gb egyike hidrogénatom, és a másik jelentése -CH2OH vagy -CH2-O-glükozil-csoport, ahol a glükozilcsoport egy redukáló mono-, di- vagy oligoszacharidból származtatható csoportot jelent, például a Ga - Gh csoportokat úgy választhatjuk meg, hogy a (Vlla) általános képletű csoport egy természetes vagy szintetikus mono-, di- vagy oligoketóz Heyns-féle átrendeződéssel előállítható csoportot jelent;
b) (Vllb) általános képletű csoport, ahol a
Ga és Gb egyike hidrogénatom és a másik jelentése szabad kötés,
Gc és Gd egyike hidrogénatom, és a másik jelentése -OH csoport,
Gc és Gf egyike hidrogénatom, és a másik jelentése -CH2OH vagy -CH2-O-glükozil-csoport, ahol a glükozilcsoport redukáló mono-, di- vagy oligoszacharidból származtatható csoportot jelent, például a Ga-Gf csoportokat úgy választhatjuk meg, hogy a (Vllb) általános képletű csoport egy természetes vagy szintetikus mono-, di- vagy oligoketóz Heyns-féle átrendeződésével előállítható csoportot jelent.
A (Vlla) vagy (Vllb) általános képletű csoportokat például Heyns-féle átrendeződéssel állíthatjuk elő cukrokból, például D-fruktózból, laktulózból, L-szorbózból, D-tagatózból vagy D-ribulózból.
Az (1) általános képletű vegyületek c) esetét a (III) általános képlet jellemzi, e vegyületekben a polihidroxi-(4-7 szénatomos cikloalkil)-monokarbonsav pél3
HU 206 890 B dául legalább 3 hidroxilcsoportot tartalmaz. A sziálsavak egyéb szubsztituenseket, például amino-, vagy acetil-amino-csoporlokat is tartalmazhatnak a hidroxilcsoportokon kívül.
A fenti polihidroxi-karbonsavakra példaként az alábbiakat említhetjük:
- cukrokból származó onsavak, például glukonsav, vagy
-kininsav, acetil-neuraminsav vagy
D-glükózaminsav.
Az uronsavak például glükuronsavak vagy galakturonsavak lehetnek.
Az (1) általános képletű vegyületek d) esetét a (IVa) és (IVb) általános képletek jellemzik, ahol G., és G4’ jelentése azonos a G, és G2 jelentésére fent megadottakkal.
A peptid -NH2 csoportját a cukor-maradék -NH2 vagy -OH csoportjával összekötő Q vagy Q’ csoport például karbonil- vagy tiokarbonilcsoport vagy eló'nyösen egy -CbH2b-CO-csoport lehet, ahol b értéke 1-6.
A fenti csoport elágazó szénláncú is lehet.
Q’ például egy -CbH21-CO-csoportot jelenthet, ahol b értéke például 1-6, Q jelentése -CO- vagy -CS-csoport.
Az (1) általános képletű vegyületek e) esetét az (V) általános képlet jellemzi, ebben az esetben különösen előnyösek azok a vegyületek, amelyek képletében c értéke 3.
A fenti képletekben a P szimbólum biológiailag aktív (VIII) általános képletű szomatosztatin peptidekből származó maradékot jelent. A fenti peptidek például természetes vagy szintetikus eredetű peptidek lehetnek, valamint ezek származékai és analógjai.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek előnyösen legalább 8 aminosav-egységet tartalmaznak.
Előnyösek az (I) és (II) általános képletű peptidek.
A fenti és a következőkben említett képletekben a cukor-maradékot az egyszerűség kedvéért rendszerint csak a piranóz-szerkezettel jelöltük. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek körébe tartoznak azonban természetesen a furanóz- és nyílt láncú szerkezetek is, feltéve, ha az adott cukor ilyen szerkezettel létezhet.
A fenti képietekben a hullámos vonal azt jelenti, hogy a kötés a- vagy β-helyzetű lehet.
A fenti (I)-(V) általános képletű vegyületeket az ilyen típusú vegyületek előállítására szokásosan használt eljárásokkal állíthatjuk elő.
A találmány értelmében a fenti vegyületeket például az alábbi eljárásokkal állítjuk elő:
(a) a peptid-cukor-származékban jelen lévő legalább egy védőcsoportot eltávolítjuk, vagy (b) egy védett vagy védetten peptidbe beviszünk legalább egy, adott esetben védett cukor-maradékot, és adott esetben a védőcsoportot eltávolítjuk, vagy (c) egy olyan peptid-cukor-származékot, amelyben a ciszteinil-csoport merkaptocsoportja szabad formában van, oxidálunk, a reakció termékeként peptid-cukor-származékot kapunk, amelyben két Cys-maradék -S-S-kötéssel kapcsolódik egymáshoz.
Amint azt már említettük, a leírásban cukor alatt cukor-származékokat is értünk, például amino-cukrokat, oxidált vagy redukált cukrokat vagy észterezett cukrokat.
A fenti reakciókat ismert módon végezhetjük, a példákban alább ismertetett eljárásokkal analóg módon, különösen az (a) eljárást végezhetjük a leírásban alább ismertetett szintézisek szerint. Kívánt esetben a peptidek és cukrok funkciós csoportjainak védelmére szokásosan használt védőcsoportokkal védhetjük a reakcióba nem lépő csoportokat. Védőcsoport alatt értünk egy funkciós csoportokat tartalmazó polimer gyantát is.
Az (I) általános képletű vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy egy szabad aminocsoportot tartalmazó védett pepiidet enyhén savas közegben egy redukáló mono-, divagy oligoszachariddal, vagy egy megfelelő uronsavval vagy annak észterével reagáltatunk (Amadori-átrendeződés), majd a védőcsoportokat eltávolítjuk.
A fenti reakciót az Amadori-átrendeződéshez szokásosan alkalmazott körülmények között játszatjuk le. A sav például jégecet lehet. Ha reaktánsként uronsavat használunk, egy másik savat nem szükséges alkalmaznunk. Előnyös, ha a szénhidrátot feleslegben alkalmazzuk, például 1 ekvivalens pepiidhez viszonyítva 10 ekvivalens mennyiségben. A reakciót poláros oldószerben, például metanolban játszathatjuk le, előnyösen, közelítőleg 60 °C és 70 °C közötti hőmérsékleten.
A (II) általános képletű vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy egy szabad aminocsoportot tartalmazó védett peptidet enyhén savas közegben egy ketózzal reagáltatunk (Heyns-átrendeződés). A reakciót az Amadoriátrendeződéssel kapcsolatban fent ismertetett körülmények között játszathatjuk le.
A (III) általános képletű vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy egy szabad aminocsoportot tartalmazó védett peptidet egy G3-COOH általános képletű savval vagy annak reakcióképes származékával reagáltatunk, majd a védőcsoporto(ka)t eltávolítjuk. A fenti reakció egy szokásos amidálás lehet, amelyet ismert módon végezhetünk. A karbonsav reakcióképes származékaként különösen savkIoridot használhatunk. Az amidokat úgy is előállíthatjuk, hogy a szabad savat hidroxi-benzotriazol és diciklohexilkarbodiimid jelenlétében reagáltatjuk a pepiiddel.
A (IVa) és (IVb) átalános képletű vegyületeket összefoglalóan (IV) általános képletű vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy (a) a peptidet először az áthidaló csoportot képező vegyülettel reagáltatjuk, majd az így kapott terméket reagáltatjuk cukorral, vagy (b) a cukrot reagáltatjuk először az áthidaló csoportot képező vegyülettel, majd az így kapott glükozilezett vegyületet reagáltatjuk a peptiddel.
A reakciókat ismert módon játszathatjuk le.
Általában a fő termékek a találmány szerinti eljárással előállított amidok, észterek vagy acetálok. A termékeket ismert módon tisztíthatjuk.
A (IVa) általános képletű vegyületeket, amelyek képletében
HU 206 890 Β
Q jelentése -GO- csoport vagy -CS- csoport, úgy állíthatjuk elő, hogy egy megfelelő (XVII) általános képletű glükozil-izocianátot vagy glükozil-izotiocianátot - a képletben
L jelentése oxigén- vagy kénatom és
G4 jelentése a fent megadott -, amelyben a G4-ben jelen lévő szabad hidroxilcsoportokat például acilezéssel védtük, egy védett formában lévő P-NH2 képletű peptiddel kapcsoljuk, majd a védőcsoportokat lehasítjuk.
A fenti reakciót a karbamidszármazékok előállítására szokásosan alkalmazott módon játszathatjuk le.
Az (V) általános képletű vegyületeket például úgy állíthatjuk elő, hogy (a’) egy aldózt, dezoxi-aldózt vagy ketózt egy P-NH2 általános képletű peptiddel reduktívan animálunk, vagy (b’) egy (I) vagy (II) általános képletű vegyületben lévő félacetál-csoportot redukálunk, a fenti reakciókban a reaktánsokat kívánt esetben átmenetileg védhetjük.
A reduktív aminálást és a redukciót ismert módon végezhetjük. A reduktív aminálást például NaBH3CNdel hajthatjuk végre. A pH értéke előnyösen 7. A félacetál-csoport redukálását bór-hidridekkel, például NaBH4-del végezhetjük. A pH értéke előnyösen 6.
Amennyiben a kiindulási vegyületek előállítására külön nem térünk ki, azok ismertek, vagy szokásos módon - például a szakirodalomból ismert eljárásokkal, vagy az analóg vegyületek előállítására a leírásban ismertetett eljárásokhoz hasonlóan, vagy a leírásban ismertetett eljárásokkal - előállíthatok.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek a (VIII) általános képletű szomatosztatin-peptidek cukor-származékai.
A (VIII) általános képletű vegyületek a 4395 403 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásból ismertek.
A (VIII) általános képletű polipeptid-származékok közül az alábbi jelentések vagy azok kombinációi előnyösek:
\
Ha az N-CH(Z|)-CO- általános képletű csoport / jelentése adott esetben halogénatommal szubsztituált benzilcsoport, ez a csoport előnyösen L- vagy D-fenilalanil-csoport, ahol Z( jelentése benzilcsoport, különösen előnyösen D-fenilalanil-csoport.
\
Ha az N-CH(Z,)-CO- általános képletű csoport / egy adott esetben hidroxilcsoporttal szubsztituált 1-6 szénatomos alkilcsoportot jelent, előnyösek azok a csoportok, amelyekben
Z| jelentése 3, előnyösebben 4 vagy több, például 4-6 szénatomot tartalmazó alkilcsoport.
\
Az N-CH(Zi)-CO- általános képletű csoport lege/ lőnyösebben egy D-Phe csoportot jelent.
Y, és Y2 különösen előnyösen együtt kémiai kötést jelentenek.
B jelentése előnyösen Phe vagy Tyr
C jelentése előnyösen D-Trp
E jelentése előnyösen Thr.
F jelentése -CONHR4 általános képletű csoport, különösen előnyösen (n) általános képletű csoport, ahol a -CH(R5)-Xj általános képletű csoport Lkonfigurációban van.
Rs jelentése előnyösen -CH2OH, -CH(CH3)OH, izobutil-, -€H2CH2OH vagy -CH2CH2CH2OH csoport, különösen -CH2OH vagy -CH(CH3)OH csoport, még előnyösebben -CH(CH3)OH csoport.
X] jelentése -CONH2 csoport vagy -CH2OR2 csoport, előnyösen -CH2OR2 csoport.
R2 jelentése előnyösen hidrogénatom, vagy ha észtercsoportot jelent, akkor HCO-, 2-12 szénatomos alkil-karbonil-, vagy 8-12 szénatomos fenil-alkilkarbonil-csoport vagy benzoilcsoport.
A 2-es és 7-es helyzetben lévő csoportok előnyösen
L-konfigurációban vannak.
Különösen előnyösek azok a szomatosztatin-cukorszármazékok, amelyekben a cukor-maradék az N-terminális aminocsoporton van, például a (Villa), (VlIIb), (VIIIc), (Vilid), (Vilié) vagy (VlIIf) általános képletű vegyületek.
Különösen előnyösek a (Villa), (VlIIb), (Vilié) és (VlIIf) általános képletű cukor-származékok.
A fenti vegyületek egy csoportját a (VlIIpa) általános képletű vegyületek alkotják, a képletben p jelentése egy ketóz vagy egy megfelelő uronsav dezoxi-maradéka, amely egy -CH2- csoporton keresztül kapcsolódik az -NH- csoporthoz, a fenti dezoxi-csoportot egy aldóz vagy egy megfelelő uronsav és a szomatosztatin szabad aminocsoportja közötti Amadori-reakc ióval állíthatjuk elő, és
Zb Y|, B, C, D, E, Y2 jelentése a (VIII) általános képletre megadott.
A fenti vegyületek egy másik csoportját a (VlIIpb) általános képletű vegyületek alkotják, a képletben G jelentése uronsav, polihidroxi-ciklohexánkarbonsav, vagy N-acetil-neuraminsav acilcsoportja,
A jelentése hidrogénatom vagy 1-3 szénatomos alkilcsoport, és
Zb Yb B, C, D, E, Y2 és F jelentése a fent megadott.
Újabb csoportot képeznek a (VIIIpc) általános képletű vegyületek, a képletben
Q jelentése egy mono-, di- vagy oligoszacharid glükozilcsoportja, n értéke 1 és 6 közötti egész szám,
A jelentése hidrogénatom vagy 1-3 szénatomos alkilcsoport, és
Z, , Yb B, C, D, E, Y2 és F jelentése a fent megadott.
A találmányt közelebbről - a korlátozás szándéka nélkül - az alábbi példákkal kívánjuk ismertetni.
A példákban megadott [a] ^értékeket nem korrigáltuk. A leírásban az alábbi rövidítéseket használjuk: AcOh ecetsav
Boc terc-butoxi-karbonil-csoport
Bu’ terc-butil-csoport
HU 206 890 B
DCCI diciklohexil-karbodiimid
DMF dimetil-formamid
Fmoc 9-fluorenil-metoxi-karbonil-csoport
MeOH metanol
NEt3 trietil-amin
Thr-ol treoninol-maradék [CH3-CHOH-CH(CH2OH)-NH-]
TFA trifluor-ecetsav
HOBT N-h idrox i-ben zotri azol
hpGRF emberi hasnyálmirigy növekedési hormont felszabadító faktor
HOSu N-hidroxi-szukcinimid
Az összes pepiidet poliacetát-polihidrát formában állítottuk elő, a peptid-tartalom 70-90%.
A nagynyomású folyadékkromatográfiás adatok azt mutatják, hogy a peptid más peptidekkel való szennyezettsége 5%-nál kisebb.
A példákban megadott F-faktor a kapott tennék peptid-tartalmát jelenti, az F= 1 érték 100% peptid-tartalmat jelent. A 100% és az adott érték közölt különbség [(1F)xl00] az ecetsav- és víztartalomból származik.
Az összes cukor α-konfigurációjú, hacsak azt ettől eltéró'en nem jelezzük.
I. példa
Na-($-dezoxi-fruktozil)-D-Phei ~i
Cys-Phe-D-Tip-Lys-Thr-Cys-Th-ol-acetát [(1) képletű vegyület] előállítása
400 mg Ncc-(P-dezoxi-fruktozil)-D-Phe-Cys-PheD-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Thr-olhoz 3 ml 100%-os trifluor-ecetsavat adunk, és az elegyet a kiindulási anyag feloldódásáig (5 perc) szobahőmérsékleten tartjuk. Az oldathoz 20 ml diizopropil-étert adunk, a kicsapódott cím szerinti vegyületet leszűrjük és diizopropil-éterrel mossuk. A terméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, az eluálást kloroform, metanol, ecetsav és víz 7: 3:0,5:0,5 térfogatarányú elegyével végezzük.
A cím szerinti vegyületet fehér liofilezett anyag formájában izoláljuk, a hozam 87%.
[a]p= -31,3° (c =0,52, 95%-os ecetsavban);
F = 0,88
A kiindulási vegyületet az alábbiak szerint állítjuk elő.
K) H-D-Phe-Cys-Phe~D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Throl előállítása
2,25 g di(terc-butil)-perkarbonát 30 ml dimetil-formamiddal készült oldatát szobahőmérsékleten lassan csepegtetjük 10 g H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-ThrCys-Thr-ol-acetát 100 ml dimetil-formamiddal készült oldatába. Az elegyet 2 órán keresztül szobahőmérsékleten tartjuk, majd az oldószert vákuumban ledesztilláljuk és a maradékhoz 200 ml diizopropilétert adunk. A kivált csapadékot leszűrjük, diizopropil-éterrel mossuk és szárítjuk. A nyersterméket szilikagélen, kromatográfiás eljárással tisztítjuk, az eluálást diklór-metán és metanol 9: 1 térfogatarányú elegyével végezzük.
A cím szerinti vegyületet fehér, amorf por formájában kapjuk.
[a]p= 29,8° (c = 1,28, dimetil-formamidban).
b) Mx-fp-dezoxi-fruktozilj-D-PheCys-Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Thr-ol előállítása g D(+)-glükózt és 0,5 g a) lépés szerint előállított vegyületet 20 ml 9: 1 térfogatarányú metanol-ecetsav elegyben oldunk, és az oldatot 3 órán keresztül 6070 °C-on tartjuk. Az oldatot bepárlással koncentráljuk, a maradékot kevés metanolban felvesszük és a cím szerinti vegyületet diizopropil-éterrel kicsapjuk. A terméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, az eluálást diklór-metán és metanol 9: 1 térfogatarányú elegyével végezzük.
A cím szerinti vegyületet amorf por formájában kapjuk.
[a]§= 12,0° (c= 1,04, dimetil-formamidban).
Az 1. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő az alábbi vegyületeket is, mindet acetát-formában. A képletekben -SMS jelentése (r) képletű polipeptid-csoport.
2. példa
Na'[a.-glükozil(l-4)-dezoxi-fruktozil]-SMS [(2) képletű vegyület] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy D-glükóz helyett D-(+)-maItózt használunk.
[aj§=-7,9° (c=0,71,95%-os ecetsavban);
F=0,9i.
3. példa
Na-[a-glükoz,il(l^l)-ci.-glükozilU^l)-$-dezoxi.fruktozil]-SMS [(3) képletű vegyület] előállítása Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett maltotriózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a§=+113° (c=0,71,95%-os ecetsavban);
F = 0,78.
4. példa
Na'(frukto-furánuronsav)-SMS [(4) képletű vegyület] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett D-glükuronsavat használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]§=-29,4° (c=0,34,95%-os ecetsavban);
F = 0,88.
5. példa
Na-(dezoxl-szorbozil)-SMS [(5) képletű vegyület] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett D-(+)-galaktózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]£^=-30,4° (c=0,50,95%-os ecetsavban);
1--0,85.
HU 206 890 B
6. példa
Na-[ O-$-D-glükozil( l-4)-dezoxi-fruktozil]-SMS [(6) képletű vegyüiet] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett D-(+)-cellobiózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]^=-28,l° (c=0,47, 95%-os ecetsavban);
F=0,81.
7. példa
N^-lL-l-j-dezoxi-fruktozilj-SMS [(7) képletű vegyület] előállítása
Az. 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett L-(-)-gIükózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]§=-20° (c=0,46,95%-os ecetsavban);
F=0,91.
8. példa
Na-[O-^-D-glükozil(J-6-dezoxi-fruktozll]-SMS [(8) képletű vegyüiet] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett genctiobiózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]£$=23,5° (c=0,46,95%-os ecetsavban);
F=0,76.
9. példa
Na-[ 0-$-D-galakt.ozil( l-4)-dezoxi-fruktozil]-SMS [(9) képletű vegyüiet] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett D-(+)-laktózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[α]$· -29,3° (c=0,55,95%-os ecetsavban);
F=0,83.
10. példa
Na-(O-ü.-D-gaÍaktozil(I-6)-dezoxi-fruktozil]SMS [(10) képletű vegyüiet] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyet melibiózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]§=+8,3° (c = 0,5,95%-os ecetsavban);
F=0,76.
11. példa [Na-(l-Dezoxi-D-fruktozil)-TyiJ]-SMS [(11) képletű vegyüiet] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de H-SMS helyett Tyr3-SMS-t használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[ct]£$=-32,2° (c=0,9,95%-os ecetsavban);
F=0,87.
12. példa {Na-[a-D-Glukopi.ranozil( 1 -4)-l -dezoxi-fruktozil]TyiJ}-SMS [(12) képletű vegyüiet] előállítása Az 1. példában leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy D-glükóz helyett D-(+)-maltózt és H-SMS helyett Tyr3-SMS-t használunk.
[a]§=-4,7° (c= 1,0,95%-os ecetsavban);
F=0,81.
13. példa (13) képletű vegyüiet előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett D-glükoheptózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]£$=-12,9° (c= 1,0,95%-os ecetsavban);
F=0,91.
14. példa (14) képletű vegyüiet előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, D-glükóztés a lizin ε-amino-csoportján védőcsoportot nem tartalmazó H-SMS-t használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet, a képletben R jelentése (s) képletű csoport. [a]£$=-42,4° (c=0,37,95%-os ecetsavban);
F=0,83.
15. példa (15) képletű vegyüiet előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, glükoheptózt és a lizin ε-amino-csoportján védőcsoportot nem tartalmazó H-SMS-t használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet, a képletben R jelentése (t) képletű csoport. Md=-9,3° (¢=0,41,95%-os ecetsavban);
F=0,84.
16. példa
Fruktozil-6-foszfát-SMS [(16) képletű vegyüiet] előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett D-glükóz-6-foszfátot használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]$=-19,5° (c= 1,0,95%-os ecetsavban);
F=0,89.
17. példa (17) képletű vegyüiet előállítása
Az 1. példában leírtak szerint eljárva, de D-glükóz helyett D-ribózt használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]($=-31,8° (c= 1,0,95%-os ecetsavban);
18. példa
Na-(Dezoxi-fruktozil)-D-Phe-Cys[ COC( CH3)j]Phe-D-Trp-Lys-Cys[COC(CHj)3]-Thr-ol előállítása
a) Na-( Dezoxi.-fruktozU)-D-PheCys-Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Thr-ol előállítása
0,58 g 1. példa szerint előállított vegyüiet 10 ml dimetil-formamiddal készült elegyéhez 0,08 ml trietilamint, majd 0,12 ml (Boc)2O-t adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten kb. 15 órán keresztül keverjük, majd
HU 206 890 Β vákuumban koncentráljuk és éterrel elkeverjük. A kicsapódott terméket leszűrjük. A maradékot kevés metanolban oldjuk, majd a terméket víz hozzáadásával kicsapjuk, szűrjük, kevés vízzel mossuk, és szárítjuk. Cím szerinti vegyületet kapunk.
[a]^=+14,5° (c=0,7, dimetil-formamidban).
b) Na-(Dezoxi-fruktozil)-D-Phe-Cys-Phe-D-TrpLys(Boc)-Thr-Cys-Thr-oí előállítása
0,51 g a) lépés szerint, előállított vegyület 10 ml dioxánnal és 2 ml trietil-amin-ecetsav-pufferrel (pH 8,6) készült elegyéhez argonatmoszférában összesen 0,4 g ditioeritritet adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten körülbelül 15 órán keresztül keverjük, majd vákuumban koncentráljuk. A kicsapódott terméket centrifugáljuk. A maradékot kevés vízzel mossuk, és vákuumban szárítjuk. Cím szerinti vegyületet kapunk.
[a]^=+3,8° (c=0,8,dimetil-formamidban).
c) Na-(DezoxTfrí<ktozÍl)-D-Phe-Cys[COC(CHj)_i]Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys[COC(CH3)j]-Thr-ol előállítása.
0,38 g b) lépésben előállított vegyületet argonatmoszférában 25 ml N-metil-piiTolidonban oldunk, majd 0 °C-on, 0,3 ml N-metil-morfolinnal és 0,31 ml pivaloil-kloriddal elegyítjük, és 0 °C-on kb. 16 órán keresztül keverjük. A terméket éter és diizopropil-éter elegyével elkeverjük. A kicsapódott terméket centrifugáljuk. A maradékot kevés dimetil-formamidban oldjuk és a terméket metanol és víz hozzáadásával kicsapjuk, majd centrifugáljuk. A maradékot vákuumban szárítjuk és további tisztítás nélkül felhasználjuk.
d) Na-(Dezoxi-fi-uktozil)-D-Phe-Cys[COC(CH3)3]Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys[COC(CHfJ-Thr-ol előállítása
A c) lépés szerint előállított maradékot 0 °C-on 5 ml 9 ·. 1 térfogatarányú trifluor-ecetsav-víz elegyben oldjuk, és 15 percen keresztül keverjük. A terméket 10% 5 n éteres hidrogén-klorid-oidatot tartalmazó éterrel kicsapjuk. A csapadékot szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. A maradékot szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, az eluálást kloroform, metanol, ecetsav és víz elegyével végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, víz hozzáadásával vákuumban koncentráljuk és liofilizáljuk. Cím szerinti vegyületet kapunk.
[ct]§L-15,3° (c = 1,0,95%-os ecétsavban);
F=0,88.
19. példa ___
2-[D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol]-2dezoxi-D-glükóz [(IS) képletű vegyidet] előállítása g D-(-)-fruktózl és 1 g H-D-Phei : i
Cys-Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Thr-olt - amelyet az
1. példa a) lépésében leírtak szerint állítunk elő - 100 ml 9:1 térfogatarányú metanol-ecetsav elegyben oldunk, és 16 órán keresztül 65 °C-on melegítjük. Az elegyet bepárlással koncentráljuk, a maradékot kevés metanolban oldjuk, és a nyersterméket diizopropil-éterrel kicsapjuk. Az így kapott nyersterméket további tisztítás nélkül vetjük alá a védőcsoport (Boc) lehasítási műveletnek.
' · g fent kapott nyersterméket 20 ml 100%-os trifluor-ecetsavval elegyítünk, és az elegyet a kiindulási anyag teljes feloldódásáig (5 perc) szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután 200 ml diizopropil-éter hozzáadásával kicsapjuk a cím szerinti vegyületet, majd leszűrjük, és diizopropil-éterrel mossuk. A cím szerinti vegyületet szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, az eluálást kloroform, metanol, ecetsav és víz 7:3:0,5:0,5 térfogatarányú elegyével végezzük.
A cím szerinti vegyületet fehér liofilizátum formájában izoláljuk, [a][9=-6,7° (c = 0,3, 95%-os ecetsavban);
F=0,73.
További termékként a (19) és (20) képletű vegyületek 1:1 arányú izomer-elegye állítható elő, ezen izomerekben a 2-es helyzetű szénatom konfigurációja ellentétes, mint a (18) képletű vegyületek esetében.
20. példa
2-^13-SMS]-2-dez.oxi-D-glükóz [(21) képletű vegyület] előállítása
A 19. példában leírtak szerint eljárva, de H-SMS helyett Tyr3-SMS-t használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
M2j=-2.9° (c= 1,0, 95%-os ecetsavban);
F = 0,95.
21. példa (_]
H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol glükuronsav-amidja [(22) képletű vegyület] előállítása
A H-D-Phe-Cys-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Thr-ol glükuronsav-amidjának 170 mg-ját 3 ml 100%-os trifluor-ecetsavval kezeljük, míg a kiindulási anyag teljesen feloldódik (5 perc). A cím szerinti vegyületet ezután 20 ml diizopropil-éter hozzáadásával trifluor-acetát-sója formájában kicsapjuk, szűrjük, szárítjuk, és szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, az eluálást kloroform, metanol, ecetsav és víz 7: 3:0,5:0,5 térfogatarányú elegyével végezzük.
A cím szerinti vegyületet tiszta formában izoláljuk, acetátként, fehér liofilizátum formájában.
[a]^=-29,2ö (c = 0,48,95%-os ecetsavban);
F=O,85.
A kiindulási vegyületet az alábbiak szerint állíthatjuk elő.
135 mg DCCI 2 ml dimetil-formamiddal készült oldatát 450 mg H-D-PheCys-Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Thr-ol, 117 mg glűkuronsav és 135 mg HOBT dimetil-formamiddal készült, -30 °C-ra hűtött oldatához adjuk. Az elegyet 48 óra alatt szobahőmérsékletre melegítjük, majd a diciklohexil-karbamidot leszűrjük és a cím szerinti vegyületet 20 ml diizopropil-éter hozzáadásával kicsapjuk. A terméket szűrjük, szárítjuk és szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, az eluálást diklór-metán és metanol 9:1 térfogatarányú elegyével végezzük.
A cím szerinti vegyületet tiszta formában izoláljuk. [o.]2§=+16,7°(c = 0,50, dimetil-formamidban);
HU 206 890 Β
22. példa t _
H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol kininsav-amidja [(23) képletű vegyület] előállítása A 21. példában leírtak szerint eljárva, kiindulási vegyületként L-(-)-kininsavat használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]^=-50° (c = 0,44,95%-os ecetsavban);
F=0,97.
23. példa (_]
H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-olsziálsav-amidja [(24) képletű vegyület] előállítása
A 21. példában leírtak szerint eljárva, kiindulási vegyületként sziálsavat használva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]^=-60,8° (c=0,6,95%-os ecetsavban);
F=0,95.
24. példa
No.-(0-$-D-glükozil-oxi-acetil)-D-PheCys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol [(25) képletű vegyület] előállítása
250 mg [tetra(O-acetil)-O-P-D-glükozil]-oxiacetil-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Throlt 10 ml metanolban oldunk, és az oldat pH-ját néhány csepp 1 n metanolos nátrium-hidrogén-karbonát oldattal 10-re állítjuk. Az oldatot 15 perc múlva egy ioncserélővel (például AmberliteR 15, H+) semlegesítjük, majd az ioncserélőt leszűrjük. A szűrletet koncentráljuk és a maradékot 5 percen keresztül 3 ml trifluor-ecetsavval kezeljük. A cím szerinti vegyületet 20 ml diizopropil-éterrel kicsapjuk, és szűrjük, szárítjuk, majd szilikagélen krogmatografálva tisztítjuk, az eluálást kloroform, metanol, ecetsav és víz 7:3:0,5:0,5 térfogatarányú elegyével végezzük. A cím szerinti vegyületet tiszta formában, fehér liofílizált (emlékként izoláljuk. [a]§=-39,2° (c-0,60,95%-os ecetsavban);
F=0,91.
A kiindulási vegyületet az alábbiak szerint állíthatjuk elő.
a) Tetra(O-acetil)-O-$-D-glükozil-gttkolsav-benztt-észter előállítása
830 mg glikolsav-benzil-észter 50 ml diklór-metánnal készült oldatához 2,5 g porított 4 A molekulaszűrőt adunk, és 2,8 g ezüst-trifluor-metánszulfonát hozzáadása után az elegyhez csepegtetjük 4,1 g aceto-brómglükóz 50 ml diklór-metánnal készült oldatát. A reakciót 15 perc múlva 4 ml piridin hozzáadásával leállítjuk, a szilárd komponenseket leszűrjük és a szűrletet 10%os nátrium-hidrogén-szulfát-oldattal extraháljuk. A cím szerinti vegyületet szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, az eluálást diklór-metán és metanol 99:1 térfogatarányú elegyével végezzük.
Tiszta cím szerinti vegyületet kapunk.
[a][$=-22,4° (c= 1,7, kloroformban).
b) Tetra(O-acetil)-O-$-D-glükozil-glikolsav előállítása
800 mg tetra(O-acetil)-O-P-D-glükozil-glikolsavbenzil-észtert 40 ml 1:1 térfogatarányú etanol-víz elegyben oldunk, és 400 g 10% fémet tartalmazó szénhordozós palládiumkatalizátorral elegyítjük, majd az elegyet Parr-késziilékben 3,45xlO5 Pa nyomáson hidrogénezzük. Az elegyet szűrjük, és vákuumban koncentráljuk,
A cím szerinti vegyületet kristályos formában izoláljuk. [<x][$=-35,50 (c= 1,03, metanolban),
c) Na-[ tetra( O-acetil)-O-$-D-glükozil-oxi-acetil]-DPhe-Cys-Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-Cys-Thr-ol előállítása mg tetra(O-acetil)-O-p-D-glükozil-glikolsav,
225 mg H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys(Boc)-Thr-CysThr-ol és 45 mg HOBT 2 ml dimetil-formamiddal készült oldatát-30 °C-ra hűtjük, majd hozzáadunk 45 mg DCCI-t, 1 ml dimetil-formamidban oldva. 48 óra múlva, miután az elegyet szobahőmérsékletre melegítettük, a kapott diciklohexil-karbamidot leszűrjük és a szűrletből 20 ml diizopropil-éter hozzáadásával kicsapjuk a cím szerinti vegyületet.
25. példa
Na-(O-$-D-galaktozil-oxi-acetil)-SMS [(26) képletű vegyület] előállítása
A 24. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]^=-37,5° (c= 1,95%-os ecetsavban);
F=0,95.
26. példa
Na-(O-$-cellobiozil-oxi-acetil)-SMS [(27) képletű vegyület] előállítása
A 24. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[α][$=-32,5ο (c= 1,95%-os ecetsavban);
F=0,91.
27. példa
Na( O-$-D-glükozil-oxi-2-izobutiril)-SMS [ (28) képletű vegyület] előállítása A 24. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]$=-32,9° (c= 1,95%-os ecetsavban);
F=0,93.
28. példa
Na-(O-a-D-glükozil-o.-L-oxi-2-izovaleril)-SMS [(29) képletű vegyület] előállítása
A 24. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a][$=-44,3° (c= 1,95%-os ecetsavban);
F=l,00.
29. példa
Na-(N-Acetil-muramil)-SMS [(30) képletű vegyület] előállítása
A 24. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]§=-15,4° (c=0,13,95%-os ecetsavban);
F=0,9.
HU 206 890 B
30. példa
Na-($-D-Glükozil-amino-karbonil)-SMS [(31) képletű vegyület] előállítása
620 mg ε-Fmoc-SMS-t 50 ml 3:1 térlogatarányú acetonitril-víz elegyben 0,45 ml trietil-aminnal kezelünk. Hozzáadunk 272 mg 2,3,4,6-tetra(O-acetil)^-Dglükozil-izotiocianátot és az elegyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten tartjuk, majd vákuumban bepároljuk és a maradékot kevés metanolban felvesszük, majd diizopropil-éteres kezeléssel a terméket lényegében tiszta formában kicsapjuk.
A fent kapott terméket 50 ml abszolút metanolban katalitikus mennyisgéű 1 n metanolos nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal kezelve eltávolítjuk az Fmoccsoportot és az acetilcsoportot. A reakció 30 perc alatt befejezó'dik, vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint, ekkor az elegyet 1%-os ecetsavval semlegesítjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot vízben felvesszük és etil-acetáttal extraháljuk. A vizes fázist liofilizáljuk. A maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, és például Duolite-on sómentesítjük. A cím szerinti vegyületet liofilezett formában állítjuk elő. [a]^=-48,5° (c= 1,95%-os ecetsavban);
F=l,
Az ε-Fmoc-SMS kiindulási anyagot az alábbiak szerint állítjuk elő.
g SMS-acetátot és 5 g nátrium-hidrogén-karbonátot 100 ml 3: 1 térfogatarányú dimetil-formamid-víz elegyben 1,6 g Fmoc-HOSu-val kezelünk. Az elegyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten tartjuk, majd 400 ml vízzel hígítjuk és 250 ml 95:5 térfogatarányú etil-acetát-metanol eleggyel extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és koncentráljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk.
Az ε-Fmoc-SMS-t amorf anyag formájában kapjuk. [co]d^24,3° (c= 1,13, dimetil-formamidban).
31. példa
Na-(CeUobiozil-ainÍno-l<okarbonil)-SMS [(32) képletű vegyület] előállítása
Kiindulási anyagként oktaacetil-cellobiozil-izotiocianátot használva, a 30. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a]^=-4,3° (c= 1, ecetsavban);
F=0,87.
32. példa
Na-($-D-Glükozd-amino-karbonil)-SMS [(33) képletű vegyület] előállítása
Kiindulási anyagként 2,3,4,6-tetra(O-acetil)-P-Dglükozil-izocianátot használva, a 30. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet. [a]$=-39,9° (c = 1,95%-os ecetsavban);
F=0,81.
33. példa
Na-(CelÍobioziÍ-amino-karbonilj-SMS [(34) képletű vegyület] előállítása
Kiindulási anyagként oktaacetil-cellobiozil-izocianátot használva, a 30. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[ct]2$=-37,9° (c= 1,95%-os ecetsavban);
F = 0,85.
34. példa
Na-(l -Dezoxi.-D-szorbifil)-SMS [(35) képletű vegyület] előállítása
0,5 g 1. példa szerint előállított vegyületet 50 ml metanolban először nátrium-bór-hidriddel, majd 5%-os ecetsavval kezelünk, miközben a pH-t 7 alatti értéken tartjuk. Összesen 10 ekvivalens nátrium-bór-hidridet használunk fel.
A reakció befejeződése után (4-5 óra) a reakcióelegyet ecetsavval kezelve elbontjuk a nátrium-bór-hidrid feleslegét. Az elegyet vákuumban koncentráljuk. A maradékot például Duolite-tal sómentesíjük, és szilikagélen tisztítjuk. A cím szerinti termék mellett - amelyet liofilizátum formájában állítunk elő - 1-dezoxi-Dmannitil-SMS-t kapunk melléktermékként. [a]^=-17,6° (c= 1,95%-os ecetsavban);
F=0,82.
35. példa
Na-[ <x-D-Glükozil( I~4)-dezoxi-szorbitil]-SMS [(36) képletű vegyület] előállítása
Kiindulási anyagként a 2. példa szerint előállított vegyületet használva, a 34. példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
[a] cr= +1,6° (c = 1, ecetsavban);
F=0,9.
36. példa
Na-(1,2-DidezoxÍ-szorbilll)-SMS [(37) képletű vegyület] előállítása
0,55 g Boc-SMS-t 30 ml 3:7 térfogatarányú dioxán-víz elegyben 50 mg NaBH3CN-del kezelünk. Hozzáadunk 250 mg 2-dezoxi-D-glükózt. Az elegy pH-ját 0,1 ml hidrogén-kloriddal 7-re állítjuk, és 6 órán keresztül 100 °C-on melegítjük az elegyet. A reakcióelegyet ezután lehűtjük, fagyasztjuk és liofizáljuk. A maradékot 50 ml etil-acetátban felvesszük és vízzel extraháljuk. A szerves fázist szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A Boc-csoportot szokásos módon, trifluorecetsavval kezelve hasítjuk le. A terméket szilikagélen tisztítjuk és például Doulite-tal sómentesítjük.
Cím szerinti vegyületet kapunk.
[α][$=25,5° (c = 1,95%-os ecetsavban);
F=O,83.
Analóg módon eljárva állíthatjuk elő a 34. példa szerinti vegyületet (glükózból kiindulva) és a 35. példa szerinti vegyületet (maltózból kiindulva) is.
Sl. példa
Oktreotid (SMS) előállítása
1. Acetál-ankor (p-formil-fenoxi-ecetsav
N-CFjCO-treoninol-acetálja) előállítása
200 ml metanolhoz - amelyet nitrogénáramban keverünk-105 g (1,0 mmól) treoninolt adunk. Tiszta oldatot kapunk. Az oldathoz 0 “G-on 200 ml trifluor10
HU 206 890 B ecetsav-metil-észter 250 ml metanollal készült oldatát adjuk. Az elegyet jeges fürdőn hűtve közelítőleg 10 °C-on tartjuk.
1,5 óra elteltével az elegyben nem mutatható ki szabad treoninol. Az elegyet 40 °C-on koncentrálva fehér, kristályos maradékot kapunk.
A maradékot 200 ml etil-acetátban oldjuk 70 °Con, és hexán hozzáadásával kicsapjuk. Az elegyet 0 °Cra hűtjük, hexánnal mossuk és szobahőmérsékleten szárítjuk. N-trifluor-acetil-treoninolt kapunk.
50,3 g (0,25 mól) így kapott terméket 1,25 1 tetrahidrofuránban oldunk, és 75 ml trimetil-klór-szilánt adunk hozzá cseppenként. Közvetlenül ezután hozzáadjuk 70 ml trietil-amin és 250 ml tetrahidrofurán elegyét. A kapott fehér szuszpenziót 4 órán keresztül keverjük, majd szűrjük és a szűrletet 40 °C-on bepároljuk. Olajat kapunk.
A kapott olajat 1,5 ml metilén-kloridban oldjuk és szobahőmérsékleten 90,4 g p-formil-fenoxi-ecetsavat adunk hozzá, részletekben. Hozzáadunk részletekben 9 ml trifluor-metánszulfonsav-trimetil-szilil-észtert. Az elegyet szobahőmérsékleten 24 órán keresztül keverjük, majd szűrjük és a maradékot metilén-kloriddal alaposan átmossuk.
A szűrletet 40 °C-on koncentráljuk. A kapott narancsvörös, gyantás anyagot szilikagélen kromatografáljuk. Az eluálást etil-acetáttal végezzük. A kívánt vegyületet tartalmazó frakciókat koncentrálva nagynyomású folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint 97%-os tisztaságú cím szerinti vegyületet kapunk.
2. Védett oktapeptid felépítése
17,2 g amino-metilezett polisztirolt (Dow gyártmány, 0,7 tömeg% N, 0,5 mmól amino-metil-csoport gyantának felel meg) 80 ml 4:1 térfogatarányú metilén-klorid-dimetil-formamid elegyben szuszpendálunk. Egymás után hozzáadunk 4,17 g 1) lépés szerint előállított vegyületet, 1,6 g HOBT-t és 4,0 g DCCI-t. Az elegyet szobahőmérsékleten 2 órán keresztül keverjük, ekkor Kaiser-teszttel negatív eredményt kapunk. Az elegyet szűrjük és mossuk. A mosott gyantát 100 ml 3:1 térfogatarányú tetrahidrofurán-metanol elegyben szuszpendáljuk és részletekben 10,4 g nátrium-bór-hidriddel kezeljük. Az elegyét szobahőmérsékleten 6 órán keresztül keverjük, majd szűrjük és a gyantát mossuk. A gyantát 4:1 térfogatarányú metilén-klorid-dimetilformamid elegyben szuszpendáljuk. Hozzáadunk 5,5 g Fmoc-Cys(S-Bul)-OH-t, 1,74 g HOBT-t és 3,6 g DCCI-t. Az Fmoc-csoportot piperidinnel hasítjuk le, a kezelési idő 2x20 perc.
A fenteik szerint eljárva, egymást követő ciklusokban az alábbi N-Fmoc-védett aminosavakat kapcsoljuk a peptidlánchoz, HOBT/DCCI-t használva: ThrOH, Lys(Boc)-OH, D-TrpOH, Phe-OH, Cys(S = Bu')-Oh és D-Phe-OH. Fmoc-védett oktapeptid-gyantát kapunk. A gyantán lévő peptid végkoncentrációja 0,26 mmól/g.
3. Oxidálás és lehasítás
A 2) lépésben kapott gyantát 100 ml 1:1 térfogatarányú trifluor-etanol-metilén-klorid elegyben szuszpendáljuk és 50 ml tributil-foszfinnal kezeljük. Az elegyet szobahőmérsékleten 70 órán keresztül keverjük. Az elegyet szűrjük, mossuk és 100 ml 1:1 térfogatarányú tetrahidrofurán-1 n amino-acetát eleggyel kezeljük. Hozzáadunk 1,1 ml 30%-os vizes hidrogénperoxid-oldatot. Ez elegyet szobahőmérsékleten 24 órán keresztül keverjük. A gyantát mossuk. Az elegyet 20 ml trifluor-ecetsavval, 80 ml metilén-kloriddal, 10 ml vízzel és 2 ml tioanizollal kezeljük. Az elegyet 2 órán keresztül keverjük, majd szűrjük, és trifluor-ecetsavval és metilén-kloriddal mossuk. A szűrlethez 200 ml dietil-étert adunk. A kapott csapadékot leszűrjük. A maradékot vizes pufferoldatban oldjuk, és sómentesítjük, például Doulite-ot használva. Az oldatot fagyasztva szárítjuk. Cím szerinti vegyületet kapunk, acetát formában.
A szabad bázis formára számított hozam 70%.
A fentiek szerint eljárva állíthatjuk elő az összes példa szerinti peptideket, például az 1. és 2. példa vegyületeit is.
S2. példa
Na-[a-glükozil( 1-4 fdezoxi-fruktozil]-SMS előállítása (lásd 2. példa)
Az SÍ. példában leírtak szerint eljárva 393 g gyantához kötött oktapeptidet állítunk elő. A cisztein-védőcsoportot reduktív módon eltávolítjuk. A gyantához kötött peptidet tetrahidrofurán-víz elegyben hidrogénperoxiddal ciklusos oktapeptiddé oxidáljuk.
A tetrahidrofuránnal, majd dimetil-formamiddal végzett mosás után a peptidet 3600 ml 8:1 térfogatarányú dimetil-formamid-ecetsav elegyben rázatjuk. A szuszpenziót 526 g D-(+)-maltóz-monohidráttal kezeljük. Az elegyet 60 °C-ra melegítjük, és a fenti hőmérsékleten 18 órán keresztül keverjük.
Kívánt esetben a maltózzal való reagáltatást a hidrogén-peroxiddal végzett oxidálás előtt is végrehajthatjuk, ugyanúgy, mint ahogy azt fent és az SÍ. példában ismertettük.
Az elegyet lehűtjük, és a peptid-gyantát leszűrjük, és dimetil-formamiddal, majd metanollal mossuk. Ezután a gyantát metilén-kloriddal mossuk. A peptidet 2900 ml metilén-klorid és nyomnyi vizet tartalmazó 716 ml trifluor-ecetsav elegyével 1 óra alatt lehasítjuk a gyantáról.
A szűrletet ezután keverjük, és részletekben 597 g nátrium-karbonáttal kezeljük, 30 percen keresztül keverjük, és szűrjük. A maradékot metilén-kloriddal és metanollal mossuk.
A szűrletet szárazra pároljuk.
A maradékot sómentesítjük, például nem funkcionalizált polisztirol-oszlopot - például Duolite-ot vagy fordított fázisú nagynyomású folyadékkromatográfiás anyagot, például szilikonnal kezelt és hosszú szénláncú zsíralkoholcsoportokat tartalmazó szilikagélt- például HB-SIL-18-80-100-at (Labomatic gyártmány, Svájc) - használva.
Tiszta cím szerinti vegyületet kapunk.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek aktivitását ismert farmakológiai és biofarmakoló11
HU 206 890 B giai vizsgálatokkal mutathatjuk ki. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek aktivitása általában legalább akkora, mint a módosítatlan peptideké (azaz a cukor-maradék nélküli, megfelelő peptidé). Általában jobban abszorbeálódnak és vízben jobban oldódnak, valamint hatásuk időtartama hosszabb, mint a módosítatlan peptidé.
A találmány szerinti eljárással előállított peptidszármazékokat ezért ugyanazon a gyógyászati területeken használhatjuk, mint a módosítatlan peptideket.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket standard biológiai hozzáférhetőségi vizsgálatokkal összehasonlíthatjuk a módosítatlan peptidekkel.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket például a vérplazmán hosszabb időn keresztül mutathatjuk ki a beadagolás után, mint a módosítatlan peptideket, amint azt a szokásos biológiai hozzáférhetőségi vizsgálatok bizonyítják.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket és a módosítatlan peptideket például kutyáknak a terápiás hatás kiváltásához elegendő dózisban, orálisan vagy intravénásán adagolhatjuk.
A vegyületeket olyan dózisban adagoljuk, hogy a peptid vagy annak metabolitja a vérben kimutatható mennyiségben legyen jelen, A kimutatást szokásos módon - például radioimmun-vizsgálattal (RIA-módszer) - végezhetjük.
A fenti vizsgálattal például kimutattuk, hogy a 2. példa szerint előállított vegyülettel orálisan adagolva 10-szer nagyobb vérszint érhető el, mint az oktreotiddal.
A 2. példa szerint előállított vegyület biológiai hozzáférhetősége orális és intravénás adagolás esetén AUC-módszerrel (görbe alatti terület) mérve 5-ször nagyobb, mint az oktreotidé. Az intravénás adagolás esetén mért kiürülési fél-élettartam közelítőleg 2-3 óra, szemben az oktreotid 0,5 órás értékével.
A fentieken kívül, a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek előnyösen nagyobb mértékben ürülnek ki a vesén keresztül. Ezt standard vizsgálatokkal mutathatjuk ki.
225-375 g-os, éheztetett hím patkányoknak orálisan 50 ml/kg dózisban vizet adunk. 30 perc múlva az állatokat elaltatjuk, például 100 mg/kg ip. adagolt inaktinnal. Az epevezetéket és hólyagot kaníilözzük. Mindkét nyaki vénát feltárjuk. Az egyik vénába 1%-os etanollal készült 5%-os glükózoldatot adagolunk infúzió formájában, 5 rnl/óra sebességgel, a vizeletürítés elősegítésére. A másik vénából minden órában 0,5 ml vérmintát veszünk, négy órán keresztül.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket és a módosítatlan peptideket szubkután adagoljuk, közelítőleg 10-1000 mikrogramm/kg dózisban. A vegyületek koncentrációját ismert módon, például RIAmódszerrel határozzuk meg.
A fenti vizsgálattal például az alábbi eredményeket kapjuk, a 2. példa szerint előállított vegyület és az oktreotid 10 mikrogramm/kg dózisa esetén:
%-os kiürülés
epével vizelettel
2. példa szerinti vegyület 1,6 36
oktreopeptid 22 19
Az eredményekből látható, hogy míg a oktreopeptid mind az epével, mind a vizelettel ürül, a 2. példa szerint előállított vegyület túlnyomóan a vizelettel távozik a szervezetből.
Az orális adagolás esetén mutatkozó jobb abszorpciót az alábbi vizsgálattal lehet bizonyítani.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületet és a módosítatlan megfelelő peptidet például 10 mg/kg dózisban orálisan adagoljuk OFA-patkányoknak. Bizonyos idő múlva, például a 15., 30. és 60. percben vérmintát veszünk, és a minták hatóanyag-tartalmát például RIA-módszerrel meghatározzuk.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek farmakológiai aktivitását szokásos farmakológiai vizsgálatokkal vizsgálhatjuk, például injektálással, és kívánt esetben a hatást összehasonlítjuk a módosítatlan peptidek hatásával, például az aktivitás nagysága és időtartama szempontjából.
A farmakológiai vizsgálatokkal például megvizsgálhatjuk a találmány szerinti vegyületek hatását állati hormonokra. így például azokat a vegyületeket, amelyek a hormon-kiválasztást gátolják, a hormon-vérszint csökkenése alapján vizsgálhatjuk.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket, amelyek gátolják a növekedési hormon (továbbiakban GH) szekrécióját - közelebbről a (Villa)-(VlIIf) képletű peptid komponenset tartalmazó vegyületeket és csökkentik a vér GH-koncentrációját, az alábbiak szerint vizsgálhatjuk.
A főemlősök közé tartozó rhesus majmoknak legalább 5 állatnak - egy darab banánban mint hordozóanyagban adjuk a találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket, A vegyületeket tehát orálisan, kb. 0,1 - kb. 10 mg/kg dózisban adagoljuk.
A vérmintát a V. Saphena-ból vesszük, katéter segítségével. A vér GH-szintjét radioimmun-vizsgálati módszerrel (RIA-módszer) mérjük.
A rhesus majmokon végzett fenti vizsgálat alapján megállapíthatjuk, hogy például a 2. példa szerint előállított vegyület 0,1 mg/kg dózisban több mint 10 órán keresztül legalább 50%-al csökkenti a GH-kiválasztást, a módosítatlan pepiid, az oktreopeptid 5 órán keresztül tartó hatásával szemben.
Másik vizsgálati eljárás szerint hím patkányoknak logaritmikus skála szerint növekvő dózisokban adagoljuk a GH-szekréciót gátló vegyületeket, majd a vegyület beadása után 1 órával az állatot lefejezzük, és vérmintát veszünk. A szérum GH-szintjét RIA-módszerrel határozzuk meg. A fenti vizsgálat szerint a találmány szerinti eljárással előállított fenti vegyületek kb. 0,02 kb. 30 mikrogramm/kg dózisban hatásosak, szubkután adagolási mód mellett.
A fenti vizsgálat szerint például· megállapíthatjuk,
HU 206 890 B hogy az 1., 2., 21. és 24. példa szerint előállított vegyületek ID50 értéke 0,045, 0,190, 0,3 és 0,2 mikrogramm/kg, szubkután adagolás esetén, a természetes szomatosztatin ugyanezen vizsgálati módszerrel meghatározott, 93 mikrogramm/kg se. ID50 értékével szemben (az ID50 a vizsgált vegyület azon koncentrációját jelenti, amely a GH-szintet 50%-kal csökkenti, a kezeletlen kontroll állat vérszintjéhez viszonyítva).
A természetes szomatosztatintól eltérően, a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek aktivitása ebben a vizsgálatban sokkal magasabb, és hosszabb időn keresztül - például 6 órán át - érvényesül.
A fenti vegyületek GH-szekréciót gátló aktivitását orális adagolás esetén is kimutatták, ösztradiol-implantátumos hím patkányokon. Ebben a vizsgálatban a GHszint csak viszonylag kis mértékben változik. A vizsgálatot az alábbiak szerint végezzük.
Kb. 300 g-os hím patkányok hasbőre alá egy 50 mg ösztradiolt tartalmazó, 50 mm hosszú, 3 mm átmérőjű implantátumot ültetünk, éteres altatás alkalmazása mellett. Az így előkészített állatokat különböző idők múlva - 1 és 6 hónap - ismételten alávetjük a vizsgálatnak. A vizsgálandó vegyületeket szubkután módon, vagy orálisan adagoljuk. Közvetlenül a vegyületek beadagolása előtt, valamint utána különböző időpontokban a szem mögötti plexusból kb. 0,8 ml vérmintát veszünk. A mintát centrifugáljuk és a szérum GH-szintjét RIA-módszerrel meghatározzuk.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek orálisan alkalmazva sokkal aktívabbak, mint a megfelelő, módosítatlan peptidek, még néhány óra elteltével is. Az 1. és 2. példa szerint előállított vegyületek ID50 értéke két órával a beadagolás után kb. 17-40szer alacsonyabb, mint a megfelelő, módosítatlan pepiidé, azaz az oktreotidé. A vizsgálati eredményeket az alábbi táblázatban ismertetjük.
ID50 pNo. (mikrogramm/kg)
21. példa szerinti vegyület 500
24. példa szerinti vegyület 25
oktreotid 1400
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket ezért olyan betegségek kezelésére használhatjuk, amelyek esetén a GH-szekréció gátlása kívánatos, ide tartoznak például a cukorbaj, az érbántalom és burjánzó recehártya-betegség, valamint acromegalia (óriásnövés) megelőzése és kezelése.
A találmány szerinti eljárással előállított, GH-szekréciót gátló vegyületek a hasnyálmirigy-szekréciót is gátolják.
A fenti hatást állatokon végzett kísérletekkel mutathatjuk ki, például S. J. Konturek [Scand. J. Gastroint. 6, 423 (1975)] módszere szerint.
A találmány szerinti eljárással előállított, GH-szekréciót gátló vegyületek a gyomorsav-szekréciót is gátolják, és növelik a gyomornedv pH-értékét.
A fenti vegyületek ilyen hatását például az alábbiak szerint mutathatjuk ki.
A találmány szerinti eljárással előállított, GH-szekréciót gátló hatású vegyületeket gyomorba implantált fisztulával ellátott, éheztetett patkányoknak adagoljuk, gyomorszonda segítségével, kb. 0,05-5 mg/kg dózisban. Egy óra múlva a fisztulát felnyitjuk. A gyomornedvet 30 percenként összegyűjtjük, és meghatározzuk annak térfogatát és mérjük sav-koncentrációját.
A fenti vizsgálat szerint a 2. példa szerint előállított vegyület 3-5 órán keresztül 6-8-ra növelte a pH-értéket. Az oktreotid csak 2 órán át növelte a pH-értéket 6-7-re. A 2. példa szerint előállított vegyület ugyanebben a vizsgálatban legalább 60-szor aktívabb, mint a cimetidin.
A találmány szerinti eljárással előállított, GH-szekréciót gátló hatású vegyületeket, fenti hatásuk következtében gyomor-bél-rendszeri betegségek, például peptikus fekélyek, gyomor-bél-rendszeri vérzések, akut hasnyálmiriny-gyulladás és gyomor-bél-hasnyálmiriny tumorok - például vipomák, inzulinomák, glukagonomák stb. - kezelésére használhatjuk.
A találmány szerinti eljárással előállított, GH-szekréciót gátló hatású vegyületek a hámsejtek burjánzását és/vagy keratinizációját is gátolják, fenti hatásuk következtében a hámsejtek kóros burjánzásával és/vagy keratinizációjával összefüggő bőrbetegségek, különösen a psoriasis kezelésére használhatók.
A fentieken kívül ezeket a vegyületeket az öregedéssel járó elmbetegségek, így Alzheimer-típusú elmebetegségek (SDAT) kezelésére, valamint ismétlődő fejfájás kezelésére is használhatjuk.
Az összes fenti indikációk esetén a napi dózis 2 mikrogramm és 20 mg között változtatható, a GH-szekréciót gátló hatású, találmány szerinti eljárással előállított vegyületnél. Kívánt esetben a vegyületeket osztott dózisokban, napi 2-4 alkalommal is adhatjuk, egységdózis formában, vagy kívánt esetben nyújtott hatást biztosító formában. A fenti egységdózisok kb. 0,5 mikrogramm 10 mg hatóanyagot tartalmazhatnak.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket szokásos módon alkalmazhatjuk, például enterálisan, így orálisan ivólevek, tabletták, kapszulák formájában, vagy nazálisán folyékony vagy por-spray-k vagy kenőcsök formájában; vagy párénterálisan, például injektálható oldatok vagy szuszpenziók formájában.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek megfelelő dózisát az egyes alkalmazási módok például nazális vagy orális alkalmazás - esetén szokásos biológiai hozzáférhetőségi vizsgálatokkal állapíthatjuk meg, ugyanazon vegyület intravénás, intramuszkuláris vagy szubkután injektálásával. Orális alkalmazás esetén a napi dózisok általában kb. 10-100-szor magasabbak, mint az im. vagy se. injektált dózisok.
A 2. példa szerint előállított vegyület ajánlott dózisa például cukorbaj, fekélyek vagy acromegália kezelésére 3-10 mg, naponta háromszor po. adagolva.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek bármely gyógyászatilag elfogadható formában így szabad formában, azaz szabad bázis formában, vagy ha a vegyület egy sav, szabad sav formában, vagy gyógyászatilag elfogadható só formájában alkalmazha13
HU 206 890 Β tók. A só forma például savaddíciós só lehet, vagy ha a vegyület egy sav, gyógyászatilag elfogadható kationsó lehet. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket komplex formában is adagolhatjuk. A vegyületek egyidejűleg, vagy vagylagosan szolvát - például hidrát - formában is lehetnek.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek a fenti formák mindegyikében azonos nagyságrendű aktivitást mutatnak.
A találmány szerinti eljárás értelmében előállított gyógyászati készítmények egy gyógyászatilag elfogadható formában lévő, találmány szerinti eljárással előállított hatóanyagot, és legalább egy gyógyászatilag elfogadható hordozó- vagy hígítóanyagot tartalmaznak. A fenti készítményeket ismert módon állíthatjuk elő.
Az orálisan vagy injekcióval adagolható oldatot tartalmazó ampulla például milliliterenként 0,5 mg acetát formában lévő, 2. példa szerint előállított vegyületet, 11,45 mg citromsavat, 6,32 mg nátrium-hidroxidot és 4,5 mg nátrium-kloridot tartalmazhat.
A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek gyógyszerkészítmények hatóanyagaként a fent említett javallatok esetén, többek között GH-szekréció csökkentésére, cukorbaj kezelésére, gyomorszekcréció csökkentésére és acromegália kezelésre használhatók.

Claims (4)

1. Eljárás az (1) általános képletű vegyületek - a képletben
a) X jelentése egy mono-, di- vagy triszacharidból levezethető csoport, amelynél a pepiidhez kapcsolódó rész mindig ketopentóz, ketohexóz, vagy ketoheptóz dezoxi-maradéka, amely maradék egy, az adott esetben jelen lévő furanóz- vagy piranóz-gyűrűn kívül eső -CH2-csoporton keresztül kapcsolódik egy szomatosztatin P peptid -NH-csoportjához,
b) X jelentése egy mono- di- vagy triszacharidból levezethető csoport, amelynél a pepiidhez kapcsolódó rész mindig egy 2-aIdohexóz vagy 2-aldopentóz dezoxi maradéka, amely maradék a 2. szénatomnál induló kötésen keresztül kapcsolódik egy szomatosztatin P peptid -NH-csoportjához vagy
c) X jelentése G3-CO- általános képletű csoport, amely hexuronsav-maradék, vagy egy polihidroxi(4-7 szénatomos)cikloalkil-monokarbonsav-maradék vagy sziálsav-maradék, vagy
d) X jelentése X’-NH-Q- vagy X’-O-Q általános képletű csoport, ahol
X’ jelentése aldohexóz-, dialdohexóz-, vagy acetamino-aldohexóz-maradék és
S 0
II II
Q jelentése -C- vagy -C-csoport,
Q’ jelentése
O
II
-CR10R12-C-csoport, ahol
R10 és R12 jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport, vagy
e)X jelentése HOH2C -(CHOH)c-CHY-CH2- általános képletű csoport, ahol Y jelentése H vagy OH, c értéke 2, 3 vagy 4, és a fenti csoport poliol-maradékában lévő bármely szabad hiroxicsoport adott esetben glükozidos kötéssel kapcsolódik egy redukáló monoszacharidhoz, és
P jelentése egy (VIH) általános képletű pepiidből származó maradék - a képletben A jelentése hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkilcsoport, H-Gly, H-Ala, H-Leu, H-Ile, H-Nle vagy H-Val,
Z, jelentése benzilcsoport, amelynek fenilcsoportja adott esetben halogénatommal lehet helyettesítve vagy 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben ómega-helyzetben karbamoilcsoporttal lehet helyettesítve,
Y, és Y2 jelentése hidrogénatom vagy (h) általános képletű csoport, ahol m értéke 1 és 4 közötti egész szám,
R„ jelentése metil- vagy etilcsoport, és
Rb jelentése hidrogénatom, metil- vagy etilcsoport, vagy
Yi és Y2 együtt kémiai kötést jelentenek,
B jelentése Phe (amelynek fenilcsoportja adott esetben halogénatommal lehet helyettesítve) vagy Tyr,
C jelentése Trp,
D jelentése Lys,
E jelentése Thr, Ser, Alá, Val, Gly, Leu, Ile vagy Nle,
F jelentése -CO-NHR4, ahol
R4jelentése hidrogénatom vagy -CH(R5)-Xi általános képletű csoport, ahol R5 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben ómega-helyzetű hidroxilcsoporttal lehet helyettesítve,
X( jelentése -CONH2 csoport, vagy -CH2OR2, ahol
R2 jelentése hidrogénatom vagy egy gyógyászatilag elfogadható, fiziológiás körülmények között hidrolizálódó észtercsoport, ahol a B, D és E csoportok L-formában lehetnek, és a 2-es és 7-es helyzetben lévő csoportok egymástól függetlenül D- vagy L-formában lehetnek és a P peptidből számtazó csoport az N-terminális végén, vagy a lizin amino-csoportján keresztül kapcsolódik a molekula többi részéhez -azzal, jellemezve, hogy
a) egy peptid-cukor-szánnazékban jelen lévő legalább egy védőcsoportot eltávolítunk, vagy
b) egy védett vagy védőcsoport nélküli peptidbe bevisszük legalább egy, adott esetben védett cukor-maradékot, és adott esetben a védőcsoportot lehasítjuk, vagy
HU 206 890 B
c) olyan peptid-származék előállítására, amelyben két Cys-maradék -S-S-kötéssel kapcsolódik egymáshoz, egy peptid-cukor-származékot, amelyben a císzteinilcsoport merkaptocsoportja szabad formában van, oxidálunk, és a kapott vegyületet szabad formában vagy savaddíciós só formájában izoláljuk.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás N“-[a-glükozil(l-4)-dezoxi-fruktozil]-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-LysThr-Cys-Thr-ol előállítására, azzal jellemezve, hogy a 10 megfelelő kiindulási vegyületeket használjuk.
3. Az 1. igénypont szerinti b) eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan cukor-származékot alkalmazunk kiindulási anyagként, amelyet Amadori- vagy Heynsárendeződési reakcióval állítunk elő.
4. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, 5 azzal jellemezve, hogy valamely, az 1. igénypont szerinti eljárással előállított, szabad formában, vagy gyógyászatilag elfogadható savaddíciós só formában lévő (1) általános képletű peptid-cukor-származékot - a képletben X és P jelentése az 1. igénypontban megadott - a gyógyszerkészítésben szokásosan használt hordozó- és/vagy egyéb segédanyagokkal összekeverünk és gyógyászati készítménnyé alakítunk.
HU874432A 1986-10-13 1987-10-01 Process for producing sugar-modified somatostatin peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components HU206890B (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU906340A HU210192B (hu) 1987-08-17 1987-10-01 Szilárd fázisú szintézis peptid-alkoholok előállítására

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3634826 1986-10-13
DE3634825 1986-10-13
DE3634797 1986-10-13
DE3712626 1987-04-14
CH315387 1987-08-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT46710A HUT46710A (en) 1988-11-28
HU206890B true HU206890B (en) 1993-01-28

Family

ID=27509117

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU906340A HU906340D0 (en) 1986-10-13 1987-10-01 Synthesis in solid phase for producing peptonic alcohols
HU906341A HU906341D0 (en) 1986-10-13 1987-10-01 Process for producing peptonic derivatives modified with sugar and pharmaceutical preparatives containing these compounds as active substance
HU874432A HU206890B (en) 1986-10-13 1987-10-01 Process for producing sugar-modified somatostatin peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU906340A HU906340D0 (en) 1986-10-13 1987-10-01 Synthesis in solid phase for producing peptonic alcohols
HU906341A HU906341D0 (en) 1986-10-13 1987-10-01 Process for producing peptonic derivatives modified with sugar and pharmaceutical preparatives containing these compounds as active substance

Country Status (23)

Country Link
US (1) US5656721A (hu)
JP (2) JPH0645639B2 (hu)
KR (1) KR960016861B1 (hu)
AU (2) AU617986B2 (hu)
BE (1) BE1003752A4 (hu)
CA (1) CA1340985C (hu)
CH (2) CH682632A5 (hu)
DE (1) DE3790635T1 (hu)
DK (1) DK174337B1 (hu)
ES (1) ES2007418A6 (hu)
FI (1) FI874495A (hu)
FR (1) FR2609991A1 (hu)
GB (2) GB2199829B (hu)
GR (1) GR871567B (hu)
HU (3) HU906340D0 (hu)
IE (1) IE912442A1 (hu)
LU (1) LU87014A1 (hu)
NL (1) NL194729C (hu)
NZ (1) NZ222133A (hu)
PL (1) PL157156B1 (hu)
PT (1) PT85904B (hu)
SE (2) SE8703938L (hu)
WO (1) WO1988002756A2 (hu)

Families Citing this family (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU906340D0 (en) * 1986-10-13 1991-04-29 Sandoz Ag Synthesis in solid phase for producing peptonic alcohols
DE3845000C2 (de) * 1987-07-10 1998-11-19 Novartis Ag Anwendung von Octreotid zur Behandlung von Brustkrebs
EP0329295A1 (en) * 1988-02-01 1989-08-23 The Upjohn Company Renin inhibiting peptides with polar end groups
GB2218102B (en) * 1988-04-08 1992-09-16 Sandoz Ltd Calcitonin peptide derivatives
DE3910667A1 (de) * 1988-04-11 1989-10-19 Sandoz Ag Peptidderivate
GB8813339D0 (en) * 1988-06-06 1988-07-13 Sandoz Ltd Improvements in/relating to organic compounds
FR2638968B1 (fr) * 1988-11-11 1994-10-07 Sandoz Sa Nouvelle utilisation therapeutique de la somatostatine et de ses analogues et derives
MY106120A (en) * 1988-12-05 1995-03-31 Novartis Ag Peptide derivatives.
US5753627A (en) * 1988-12-05 1998-05-19 Novartis Ag Use of certain complexed somatostatin peptides for the invivo imaging of somatostatin receptor-positive tumors and metastasis
US5776894A (en) * 1988-12-05 1998-07-07 Novartis Ag Chelated somatostatin peptides and complexes thereof, pharmaceutical compositions containing them and their use in treating tumors
IT1229514B (it) * 1989-01-30 1991-09-03 Farmhispania S A A Montme Glicoconiugati anfifilici sintetici per impiego neurologico.
DK111489D0 (da) * 1989-03-08 1989-03-08 Novo Nordisk As Peptider
DE4206858A1 (de) * 1992-03-05 1993-09-09 Behringwerke Ag Glycopeptid-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende pharmazeutische mittel
IT1260156B (it) * 1992-08-03 1996-03-28 Fidia Spa Derivati dell'acido neuraminico
TW263437B (hu) * 1992-09-24 1995-11-21 Takeda Pharm Industry Co Ltd
US5710244A (en) * 1992-12-31 1998-01-20 Labroo; Virender M. Derivatized calcitonins
US5508387A (en) * 1993-08-04 1996-04-16 Glycomed Incorporated Selectin binding glycopeptides
ATE284413T1 (de) * 1993-08-09 2004-12-15 Sod Conseils Rech Applic Therapeutische peptid derivate
US5556939A (en) * 1994-10-13 1996-09-17 Merck Frosst Canada, Inc. TC or RE radionuclide labelled chelate, hexapeptide complexes useful for diagnostic or therapeutic applications
US5632969A (en) * 1994-10-13 1997-05-27 Merck & Co., Inc. N3 S2 chelating ligands optionally radiolabelled with Tc or Re, useful for diagnostic or therapeutic applications
JP3896430B2 (ja) * 1996-07-15 2007-03-22 アークレイ株式会社 糖化アミノ化合物の製造方法
IL119029A0 (en) * 1996-08-07 1996-11-14 Yeda Res & Dev Long-acting drugs and pharamaceutical compositions comprising them
DE69816808T2 (de) 1997-05-13 2004-04-15 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Somatostatin agoniste zur reduzierung von körpergewicht
US6004928A (en) * 1997-05-13 1999-12-21 Biomeasure, Incorporated Method of treating hyperlipidemia
EP0981364B1 (en) 1997-05-13 2006-03-01 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Method and compositions for treating hyperlipidemia
DE69943039D1 (de) * 1998-02-13 2011-01-27 Amylin Pharmaceuticals Inc Neue verbindungen mit gemischter amylin aktivität
US5968903A (en) * 1998-05-07 1999-10-19 Biomeasure, Incorporated Inhibition of H. pylori proliferation
US20050037490A1 (en) * 1999-10-29 2005-02-17 Lawrence Rosenberg Medium for preparing dedifferentiated cells
US7589061B2 (en) * 2001-04-23 2009-09-15 Mallinckrodt Inc. Tc and Re labeler radioactive glycosylated octreotide derivatives
DK1401863T3 (da) 2001-06-08 2009-05-25 Ipsen Pharma Kimære somatostatin-dopamin-analoge
DE60309847T2 (de) * 2002-02-27 2007-10-18 Ferring B.V. Zwischenprodukte und verfahren zur herstellung von heptapeptid-oxytocinanaloga
US7772188B2 (en) 2003-01-28 2010-08-10 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders
JP2009506076A (ja) 2005-08-26 2009-02-12 ザ・ボード・オブ・トラスティーズ・オブ・ザ・レランド・スタンフォード・ジュニア・ユニバーシティ 三叉神経疼痛のための薬物送達のための治療手順
EP1787658B1 (en) 2005-11-10 2012-03-14 CHEMI S.p.A. Sustained release formulations of somatostatin analogue inhibitors of growth hormone
WO2008011168A2 (en) * 2006-07-21 2008-01-24 Amgen Inc. Glycosylated peptide antagonists of the bradykinin b1 receptor
WO2008095063A1 (en) 2007-01-31 2008-08-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized p53 peptides and uses thereof
EP2508531B1 (en) 2007-03-28 2016-10-19 President and Fellows of Harvard College Stitched polypeptides
WO2009040363A1 (en) 2007-09-25 2009-04-02 Glycom Aps Glycoproteins and glycosylated cells and a method for the preparation of the same
AU2008323683B2 (en) * 2007-11-09 2014-10-02 University Of Tennessee Research Foundation Anti-inflammatory quinic acid derivatives for oral administration
JP5799397B2 (ja) 2008-06-12 2015-10-28 イプセン・バイオイノベーション・リミテッドＩｐｓｅｎ Ｂｉｏｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｌｉｍｉｔｅｄ 癌の抑制
EP2719392B1 (en) 2008-06-12 2019-07-24 Ipsen Bioinnovation Limited Fusion proteins for use in the treatment of acromegaly
WO2010089757A2 (en) * 2008-11-07 2010-08-12 Usv Limited An improved process for synthesis of cyclic octapeptide
GB0820970D0 (en) 2008-11-17 2008-12-24 Syntaxin Ltd Suppression of cancer
SI2603600T1 (sl) 2010-08-13 2019-04-30 Aileron Therapeutics, Inc. Peptidomimetični makrocikli
US9422357B2 (en) 2011-09-04 2016-08-23 Glytech, Inc. Glycosylated polypeptide and drug composition containing said polypeptide
US9441024B2 (en) 2011-09-04 2016-09-13 Glytech, Inc. Glycosylated polypeptide and drug composition containing said polypeptide
AU2012326026B2 (en) 2011-10-18 2017-04-13 Aileron Therapeutics, Inc. Peptidomimetic macrocyles
WO2013123267A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Aileron Therapeutics, Inc. Triazole-crosslinked and thioether-crosslinked peptidomimetic macrocycles
CN112500466B (zh) 2012-02-15 2022-05-03 艾瑞朗医疗公司 拟肽大环化合物
AU2013337388B2 (en) 2012-11-01 2018-08-02 Aileron Therapeutics, Inc. Disubstituted amino acids and methods of preparation and use thereof
WO2014197938A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Antisense Therapeutics Ltd Combination therapy
BR112017005598A2 (pt) 2014-09-24 2017-12-12 Aileron Therapeutics Inc macrociclos peptidomiméticos e usos dos mesmos
JP7030517B2 (ja) 2015-01-07 2022-03-07 トライジェミナ， インコーポレイテッド マグネシウム含有オキシトシン製剤および使用の方法
KR20170129879A (ko) 2015-03-20 2017-11-27 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 펩티드모방 거대고리 및 이의 용도
EP3713545A1 (en) 2017-11-22 2020-09-30 Dauntless 1, Inc. Therapeutic compound formulations
EP3713660A1 (en) 2017-11-22 2020-09-30 Dauntless 1, Inc. Membrane emulsification device for microsphere creation
WO2020005842A1 (en) 2018-06-25 2020-01-02 Dauntless 2, Inc. Membrane emulsification device with impeller for microsphere creation
CN114026107A (zh) 2019-04-16 2022-02-08 巴克姆股份公司 二硫键肽的生产
CA3199254A1 (en) * 2020-10-22 2022-04-28 The Trustees Of Indiana University Molecular designs of glucose-responsive and glucose-cleavable insulin analogues

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4254023A (en) * 1979-10-16 1981-03-03 Pennwalt Corporation Synthesis of peptide alcohols by the solid phase method
US4280953A (en) * 1979-11-08 1981-07-28 The Salk Institute For Biological Studies Glycosylated analogs of somatostatin
DE19375086I2 (de) * 1979-11-27 2003-01-09 Novartis Ag Polypeptide Verfahren zu ihrer Herstellung pharmazeutische Zusammensetzungen die diese Polypeptide enthalten und ihre Verwendung
FR2522967B1 (fr) * 1982-03-15 1986-03-07 Anvar Conjugues d'haptenes et de muramyl-peptides, doues d'activite immunogene et compositions les contenant
US4444683A (en) * 1982-11-17 1984-04-24 University Of Utah Glycosylated insulin derivatives
US4483792A (en) * 1982-11-17 1984-11-20 Kim Wan S Glycosylated insulin derivatives
FR2546163B1 (fr) * 1983-05-16 1987-10-09 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives acyles hydrosolubles de peptides ou d'amino-acides, leur preparation et leur application
FR2548673B1 (fr) * 1983-07-05 1985-10-04 Essilor Int Polymeres supports de produits actifs relargables et leur procede de preparation
LU85269A1 (fr) * 1984-03-26 1985-10-14 Techland S A Composes nouveaux de somatostatine,procede pour leur synthese,preparation a usage veterinaire contenant lesdits composes et procede pour le traitement d'animaux
US4564998A (en) * 1984-10-19 1986-01-21 Westinghouse Electric Corp. Coil winding methods and apparatus
DE3439610A1 (de) * 1984-10-30 1986-04-30 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Immunogene, verfahren zu deren herstellung sowie damit gewonnene antikoerper gegen glykosiliertes haemoglobin
EP0192611A3 (de) * 1985-02-20 1988-05-11 Ciba-Geigy Ag Acylierte Hexosederivate und Verfahren zu ihrer Herstellung
JPS61264260A (ja) * 1985-05-17 1986-11-22 Rikagaku Kenkyusho アルデヒド化多孔性高分子材料によるタンパク質の除去方法
CA1337041C (en) * 1985-10-09 1995-09-19 Brett Alan Evans Granular detergent compositions having improved solubility
SE8506094D0 (sv) * 1985-12-20 1985-12-20 Astra Laekemedel Ab New antibacterial agents and intermediates therefor
JPS63165410A (ja) * 1986-09-11 1988-07-08 Tokyo Organ Chem Ind Ltd アルデヒド基を有する架橋共重合体の製造方法
JPS63165411A (ja) * 1986-09-11 1988-07-08 Tokyo Organ Chem Ind Ltd アルデヒド基を有する架橋共重合体の製法
HU906340D0 (en) * 1986-10-13 1991-04-29 Sandoz Ag Synthesis in solid phase for producing peptonic alcohols
US4859736A (en) * 1987-03-30 1989-08-22 Ciba-Geigy Corporation Synthetic polystyrene resin and its use in solid phase peptide synthesis
CH679045A5 (hu) * 1987-06-29 1991-12-13 Sandoz Ag

Also Published As

Publication number Publication date
FR2609991B1 (hu) 1995-03-10
LU87014A1 (fr) 1988-05-03
GB2199831B (en) 1991-04-17
NL194729C (nl) 2003-01-07
HU906340D0 (en) 1991-04-29
ES2007418A6 (es) 1989-06-16
JP2744910B2 (ja) 1998-04-28
KR880005153A (ko) 1988-06-28
NL194729B (nl) 2002-09-02
WO1988002756A3 (en) 1988-07-14
DE3790635T1 (hu) 1988-10-06
AU617986B2 (en) 1991-12-12
GB2199829A (en) 1988-07-20
AU8015091A (en) 1991-10-31
JPS63101399A (ja) 1988-05-06
CH682632A5 (de) 1993-10-29
NL8702345A (nl) 1988-05-02
KR960016861B1 (ko) 1996-12-23
CH680512A5 (hu) 1992-09-15
HUT46710A (en) 1988-11-28
JPH0314599A (ja) 1991-01-23
PT85904A (en) 1987-11-01
IE912442L (en) 1988-04-13
JPH0645639B2 (ja) 1994-06-15
SE518630C2 (sv) 2002-11-05
AU634664B2 (en) 1993-02-25
FR2609991A1 (fr) 1988-07-29
US5656721A (en) 1997-08-12
GR871567B (en) 1988-02-16
GB8800537D0 (en) 1988-02-10
DK532787D0 (da) 1987-10-12
SE8703938L (sv) 1988-04-14
SE8703938D0 (sv) 1987-10-12
FI874495A (fi) 1988-04-14
GB2199831A (en) 1988-07-20
DK174337B1 (da) 2002-12-16
SE9301172D0 (sv) 1993-04-07
DK532787A (da) 1988-04-14
PT85904B (pt) 1990-08-31
PL268173A1 (en) 1988-09-01
BE1003752A4 (fr) 1992-06-09
CA1340985C (en) 2000-05-09
PL157156B1 (pl) 1992-05-29
WO1988002756A2 (en) 1988-04-21
SE9301172L (hu) 1900-01-01
FI874495A0 (fi) 1987-10-12
NZ222133A (en) 1993-02-25
GB8723737D0 (en) 1987-11-11
AU7956487A (en) 1988-04-14
GB2199829B (en) 1991-04-17
HU906341D0 (en) 1991-04-29
IE912442A1 (en) 1992-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU206890B (en) Process for producing sugar-modified somatostatin peptide derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active components
Brocke et al. Synthesis of tumor-associated glycopeptide antigens
US5858994A (en) Carbohydrate conjugates as inhibitors of cell adhesion
JP2882679B2 (ja) 線状ソマトスタチン類似体
US20030153492A1 (en) Novel glycoconjugates, glycoamino acids, intermediates thereto, and uses thereof
SK113797A3 (en) Bioactive compounds conjugated with glycides
US20110206757A1 (en) Novel glycoconjugates, glycoamino acids, intermediates thereto, and uses thereof
Paulsen et al. New solid-phase oligosaccharide synthesis on glycopeptides bound to asolid phase
EP3280450A1 (en) Glucose-responsive insulin conjugates
EP0273388A2 (en) Sialic acid derivatives having active carbonyl group
JP4369052B2 (ja) 抗血栓症化合物
US6413936B1 (en) Glycomimetics as selectin antagonists and pharmaceuticals having antiinflammatory activity
Horvat et al. Synthesis and biological activity of [Leu5] enkephalin derivatives containing d‐glucose
FR2949114A1 (fr) OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
EP0953357A1 (en) Nephrotropic drugs
JP2573625B2 (ja) ゴナドリベリン類似体よびその製法
EP0618215B1 (en) Oligosaccharides used for inhibiting the mitosis of astrocytes and tumoral cells of the nervous system, and methods for obtaining them
HU208834B (en) Process for producing dilysoganglioside derivatives and pharmaceutical compositions comprising such active ingredient
FR2970969A1 (fr) Oligosaccharides 3-o-alkyles activateurs des recepteurs des fgfs, leur preparation et leur application en therapeutique
IL275127B1 (en) Glycosidic antecedents of treprostinil
EP0788504B1 (en) Stereodirected process for synthesis of alpha-n-acetylgalactosaminides
FR2619566A1 (fr) Procede de preparation d&#39;un peptide-alcool
DE3790635B4 (de) Verfahren zur Herstellung eines Peptidalkohols und Ausgangsverbindungen dafür
GB2233652A (en) Synthesis of peptide alcohols
KR830002059B1 (ko) 멀아밀-펲타이드형태인 신규 화합물의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee