FI96947B - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten N1-(1,2-cis-2-halogeenisyklopropyyli)substituoitujen pyridonikarboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

x 96947

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten N,-(1,2-cis-2-halo-geenisyklopropyyli)substituoitujen pyridonikarboksyyli-happojohdannaisten valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee mentelmää antimikrobisten yh disteiden valmistamiseksi, jotka on käyttökelpoisia ihmis-ja eläinlääkkeinä ja kalalääkkeinä.

Kinolonijohdokset, joissa on kondensoitu pyridoni-karboksyylihapporunko, ovat tunnettuja synteettisinä an-10 timikrobisina aineina, ja niistä tulee tehokkaita anti-mikrobisia yhdisteitä substituoitaessa niissä 1-asema syk-lopropyy1iryhmä1lä.

Lisäksi on tunnettua, että 1-syklopropyylikinolo-nijohdoksilla, joissa fluoriatomi on liittynyt syklopro-15 pyyliryhmän 2-asemaan cis-konfiguraatiossa pyridonikar- boksyylihappo-osan suhteen, myös on tehokas antimikrobi-nen vaikutus, kuten julkaisussa JP-A-87-12760 esitetään (tässä käytettynä termi "JP-A" merkitsee "tutkimaton julkaistu japanilainen patenttihakemus"). Niillä ajatellaan 20 olevan, ei ainoastaan tehokas antimikrobinen vaikutus, vaan myös parantunut turvallisuus. Yksi esimerkki kino-ioni johdoksesta, jossa on cis-fluorisyklopropyyliryhmä 1-asemassa, on esitetty alla.

0

25 F^yA^COOH

CH3-N_X

w AF

30 Kinolonijohdoksilla, joissa on 1-asemassa cis-ha- logeenisyklopropyyliryhmä, cis-fluorisyklopropyyliryhmä * mukaan lukien, kuten yllä esitettiin, on erinomaiset ominaisuudet antimikrobisen vaikutuksen ja turvallisuuden suhteen. Silloinkin kun näiden yhdisteiden pyridonikar- 35 boksyylihappo-osan 7-asemassa on substituentti, jolla ei 1 2 96947 ole stereoisomerlaa, halogeenisyklopropaanirengas sinänsä aikaansaa enantiomeeria, mikä johtuu pyridonikarboksyyli-happo-osan ja halogeeniatomin välisestä eteerisestä suhteesta syklopropaanirenkaaseen nähden, kuten on kuvattu 5 alla: R1 0 0 R1

VyY00H ja ^YYY’

10 M

joissa R1 on substituoitu tai substituoimaton aminoryhmä, hydroksyyliryhmä, tioliryhmä tai vetyatomi; R2 on substi-15 tuoitu tai substituoimaton syklinen aminoryhmä, joka voi sisältää renkaassaan vähintään yhden heteroatomin, joka voi olla typpiatomi, happiatomi ja rikkiatomi; A on C-X3 tai typpiatomi; X1 ja X2, voivat olla samoja tai erilaisia, kumpikin on halogeeniatomi; ja X3 on halogeeniatomi, 20 alkyyliryhmä, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, alkoksyyliryh-mä, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, syanoryhmä, trifluorime-tyyliryhmä tai vetyatomi. Nämä kinolonijohdokset ovat käyttökelpoisia lääkkeinä kunhan ne ovat rasemaatteja. Toisaalta silloin, kun stereoisomeriaa on pyridonikarbok-. 25 syylihappo-osan 7-asemassa olevan substituentin suhteen, tällaiset kinolonijohdokset käsittävät neljänlaisia dia-stereomeereja. Diastereomeerien seoksista on vaikea eritellä erinomaiset lajit ja toimittaa niitä lääkkeinä.

Edellä mainitun tilanteen pohjalta on tehty laajoja 30 tutkimuksia 1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)substituoi-tujen kinolonijohdoksien yksittäiset isomeerit niiden dia-‘ stereomeerien joukosta, ja tämän keksinnön mukaisesti on onnistuttu saamaan cis-2-fluorisyklopropyyliamiinin kukin enantiomeeri puhtaana isomeerinä. Lisätutkimusten tulokse-35 na on onnistuttu myös syntetisoimaan kaikki kinolonijoh- 3 96947 doksen enantiomeerit, jotka johtuvat vain fluorisyklopro-paanirenkaan steerisestä konfiguraatiosta, lähtemällä yllä selitetystä amiinista.

Onnistuminen sellaisten enantiomeeristen kinoloni-5 johdosten saamisessa, jotka ovat käyttökelpoisia välituotteena, on tehnyt mahdolliseksi syntetisoida optisesti aktiivinen kinolonijohdos, joka käsittää vain yhden diaste-reomeerin, käyttämällä reaktiossa amiinin yksittäistä isomeeriä liitettäessä syklinen aminoryhmä 7-asemaan. Kukin 10 näistä diastereomeereista osoittautui tehokkaammaksi an-timikrobisen vaikutuksen suhteen verrattuna vastaaviin kino Ioni johdoksiin, jotka on substituoitu pelkällä syklopro-pyyliryhmällä, ja sen lisäksi erittäin turvallisiksi siten, että niillä on merkittävästi parantunut selektiivinen 15 toksisuus. Tämä keksintö perustuu näihin havaintoihin.

Tämä keksintö koskee menetelmää N1-(l,2-cis-2-halo-geenisyklopropyyli)substituoitujen pyridonikarboksyyli-happojohdannaisten valmistamiseksi

Rl 0

20 FvJvvA,C00H

äXX

25 jossa R1 on aminoryhmä tai vetyatomi; A on typpiatomi tai C-X3, jossa X3 on halogeeniatomi, alkyyliryhmä, jossa on 1 - 6 hiiliatomia tai alkoksiryhmä, jossa on 1 -6 hiiliatomia, ja R2 on syklinen aminoryhmä, jolla on kaava 30 p6 R12 . jrt- r°£> >«tv£> 4 96947 joissa R6 ja R11, jotka voivat olla samat tai erilaiset, merkitsevät alkyyliryhmää, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, tai vetyatomia; ja R12 ja R13 ovat liittyneet toisiinsa siten, että ne muodostavat polymetyleeniketjun, jossa on 2 - 5 5 hiiliatomia; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, mahdollisesti stereoisomeerises-ti puhtaana muotona.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että 7-halogeeni-l-(l,2-cis-2-halogeenisyklopropyyli)py-10 ridonikarboksyylihappo, jolla on kaava R1 0

XXX

“ b jossa R1 ja A ovat edellä määritellyt ja X on halogeeniato-mi, tai sen esteri tai diflucriboorijohdannainen saatetaan reagoimaan syklisen amiiniyhdisteen R2-H kanssa, joka voi 20 olla suojattu tavanomaisella suojaryhmällä ja jossa R2 on edellä määritelty, ja sen jälkeen haluttaessa poistetaan suojaryhmä tavanomaisella menetelmällä ja haluttaessa poistetaan esteriryhmä tai difluoribooriryhmä happamissa tai emäksisissä olosuhteissa.

25 Erityisiä esimerkkejä keksinnön mukaisesti valmis- « tetuista yhdisteistä ovat 7-[3-(S)-amino-l-pyrrolidinyy-li ] —6—fluori—1- (1,2-cis-2-f luorisyklopropyyli) -4-okso-l, 4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo, 7—[3—(S)-amino-1- pyrrolidinyyli]-8-kloori-6-fluori-1-(1,2-cis-fluorisyk-30 lopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihap- po, 7-[7-amino-5-atsaspiro[2.4]heptan-5-yyli]-8-kloori-6-f luori-1-(l,2-cis-2-fluorisyklopropyyli) -4-okso-l, 4-dihyd-rokinoliini-3-karboksyylihappo, 5-amino-7-[3-(S)-amino-1-pyrrolidinyyli]-6,8-difluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopro-35 pyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo, 7- 5 96947 [4- (S) -amino-2-(S) -metyyli-l-pyrrolidinyyli] -6-f luori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydro-l,8-naftyridiini-3-karboksyylihappo, 7-[3-(R)-[1-(S)-amino-etyyli] -l-pyrrolidinyyli]-8-klo°ri-6-f liioiri-l- (1,2-cis-2-5 fluorisyklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-kar- boksyy1ihappo, 7-[4-(S)-amino-2-(S)-metyy1i-1-pyrroiid i- nyyli]-6-fluori-l-(l,2-cis-2-f luorisyklopropyyli) -8-metyy-li-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo, 5-ami-no-7-[7-amino-5-atsaspiro[2.4]heptan-5-yyli] -6,8-dif luori-10 1-(1/2-cis-2-fluorisyklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokino- liini-3-karboksyylihappo ja niiden suolat.

Esimerkkejä syklisistä aminoryhmistä R2 ovat 3-ami-nopyrrolidinyyli, 3-amino-5-metyylipyrrolidinyyli, 3-ami-nometyylipyrrolidinyyli, 3-(1-amino)etyylipyrrolidinyyli, 15 3-(l-amino)propyylipyrrolidinyyli ja 7-amino-5-atsaspiro- [2.4]heptan-5-yyli, 8-amino-6-atsaspiro[3.4]oktan-6-yyli.

7-asemassa olevan syklisen aminoryhmän rakenteella on suuri vaikutus antimikrobiseen vaikutukseen, toksisuuteen, imeytymiseen suun kautta annettuna ja fysikaalisiin 20 ominaisuuksiin kuten vesiliukoisuuteen. Esimerkiksi on tunnettua, että kinoloneilla, jotka on substituoitu 3-ami-nopyrrolidinyyliryhmällä, on voimakas antimikrobinen teho useita erilaisia mikro-organismeja vastaan grampositiivi-sista gramnegatiivisiin bakteereihin. Jotkut tämän tyyp-25 pisistä kinoIonijohdoksista ovat kuitenkin herkkiä aineenvaihdunnalle tai niillä on vain niukka vesiliukoisuus.

Sellaisten 3-aminopyrrolidinyyliryhmien avulla, joissa on spirorengas aminoryhmän viereisessä hiiliatomissa, saadaan kinolonijohdoksia, joilla on parantunut 30 oraalinen imeytyrnisnopeus ja parantunut stabiilisuus in vivo aineenvaihduntaa vastaan ja jotka samalla säilyttävät tehokkaan antimikrobisen vaikutuksen. Tämän tyyppisten yhdisteiden on myös osoitettu aiheuttavan vähemmän kouristuksia, jotka tunnetaan kinolonityyppisten synteet-35 tisten antimikrobisten aineiden sivuvaikutuksena.

6 96947

Lisäksi sellaisten 3-aminometyylipyrrolidinyyli-ryhmien avulla, joissa aminoryhmä on sitoutunut pyrroli-dinyyliryhmään hiiliatomin kautta, saadaan kinolonijohdoksia, joilla on parantunut antimikrobinen vaikutus 5 grampositiivisia bakteereita vastaan. Erityisesti tämän tyyppisten kinolonien, joissa hiiliatomi, joka liittää toisiinsa amino- ja pyrrolidinyyliryhmät, on substituoitu alkyyliryhmällä, todettiin omaavan parantuneen oraalisen imeytymisnopeuden, turvallisuuden ja vesiliukoisuuden ver-10 rattuna niihin, joissa ei ole tällaista substituenttia.

7-asemassa olevan syklisen amiiniosan stereoisome-riaa selitetään seuraavassa. Jos syklisellä amiinilla on isomeerejä ja jos sen annetaan reagoida isomeerien seoksena l-(l,2-cis-fluorisyklopropyyli)kinolonijohdoksen kans-15 sa, saadun kinolonijohdoksen tulisi olla diastereomeerien seos riippuen steerisestä suhteesta 1-asemassa olevaan 1,2-cis-2-fluorisyklopropyyliryhmään. Siitä syystä näissä tapauksissa on välttämätöntä, että vain yhden lähtöaine-amiinin isomeereistä tulisi antaa reagoida.

20 7-asemassa olevan syklisen aminoryhmän funktionaa linen aminoryhmä voidaan suojata tavanomaisilla suojaryh-millä ennen substituutiota kinolonirungon kanssa. Esimerkkejä tällaisista suojaryhmistä ovat alkoksikarbonyyliryh-mät kuten t-butoksikarbonyyliryhmä, 2,2,2-trikloorietoksi-25 karbonyyliryhmä ja muut sellaiset; aralkyylioksikarbonyy- 9 liryhmät kuten bentsyylioksikarbonyyliryhmä, p-metoksi-bentsyylioksikarbonyyliryhmä, p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyliryhmä ja muut sellaiset; asyyliryhmät kuten asetyyli-ryhmä, metoksiasetyyliryhmä, trifluoriasetyyliryhmä, kloo-30 riasetyyliryhmä, pivaloyyliryhmä, formyyliryhmä, bentsoyy- liryhmä ja muut sellaiset; alkyyli- ja aralkyyliryhmät kuten t-butyyliryhmä, bentsyyliryhmä, p-nitrobentsyyliryh-mä, p-metoksibentsyyliryhmä, trifenyylimetyyliryhmä ja muut sellaiset; eetterit kuten metoksimetyyliryhmä, t-bu-35 toksimetyyliryhmä, 2,2,2-trikloorietoksimetyyliryhmä, tet- - 96947 7 rahydrofuran-2-yyliryhmä ja muut sellaiset; silyyliryhmät kuten trimetyylisilyyliryhmä, isopropyylidimetyylisilyyli-ryhmä, t-butyylidimetyylisilyyliryhmä, t-butyylidifenyyli-silyyliryhmä, tribentsyylisilyyliryhmä ja muut sellaiset.

5 Ν,-asemassa oleva l,2-cis-2-fluorisyklopropyyliryhmä selitetään seuraavassa. Fluoriatomin liittäminen syklopro-pyyliryhmään aiheuttaa koko molekyylin lipoiiilisyyttä vähentävän vaikutuksen. On tunnettua, että lääkkeet todennäköisemmin jakautuvat keskushermostoon, kun niiden lipo-10 fiilisyys kasvaa. Tässä yhteydessä liittämällä l,2-cis-2-fluorigeenisyklopropyyliryhmä saadaan kinoloneja, joilla vastaaviin 1-syklopropyylikinoloneihin verrattuna on alentunut toksisuus ja jotka samalla säilyttävät erinomaisen antimikrobisen vaikutuksen.

15 On erityisen edullista, että fluoriatomi ja pyrido- nikarboksyylihappo-osa ovat cis-asemassa syklopropaaniren-kaaseen nähden. Riippumatta siitä, onko 7-asemassa olevalla syklisellä aminoryhmällä stereoisomeereja vai ei, kaavan (I) mukaisilla kinolonijohdoksilla on enantiomeeri-20 pari, joka johtuu 1-asemassa olevasta cis-2-halogeenisyk-lopropyyliosasta niin kuin alla on kuvattu. Tehokas vaikutus ja suuri turvallisuus havaittiin kummallakin näistä enantiomeereista.

25 R' 0 0 R' F γ^γλγΟΟΟΗ ΗΟΟΟ-γΑγ^-ί r2J^JLnJ) ? F ^n^A^R2

hVh hM

30 Tämän keksinnön mukaisiin pyridonikarboksyylihap-pojohdoksiin kuuluvat vastaavat vapaat hapot ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat ja kar-boksyyliryhmän suolat. Happoadditiosuoloihin kuuluvat epä-35 orgaaniset suolat esim. hydrokloridit, sulfaatit, nitraa- 8 96947 tit, hydrobromidit, hydrojodidit ja fosfaatit, ja orgaaniset suolat, esim. asetaatit, metaanisulfonaatit, bentsee-nisulfonaatit, tolueenisulfonaatit, sitraatit, maleaatit, fumaraatit ja laktaatit.

5 Karboksyyliryhmän suolat voivat olla orgaanisia tai epäorgaanisia, ja niihin kuuluvat alkalimetallisuolat, esim. litiumsuolat, natriumsuolat ja kaliumsuolat, maa-alkalimetallisuolat, esim. magnesiumsuolat ja kalsiumsuo-lat, ammoniumsuolat, trietyyliamiinisuolat, N-metyyliglu-10 kamaatit ja tris(hydroksimetyyli)aminometaanisuolat.

Jotkut näistä vapaista hapoista ja suoloista voivat esiintyä hydraattina.

Esteröimällä kaavan (I) mukaisten pyridonikarbok-syylihappojohdosten karboksyyliryhmä saadaan yhdisteitä, 15 jotka ovat käyttökelpoisia synteesivälituotteina tai lääk keen esiasteina. Esimerkiksi alkyyliesterit, bentsyylies-terit, alkoksialkyyliesterit, fenyylialkyyliesterit ja fenyyliesterit ovat käyttökelpoisia synteesivälituotteina. Esterit, jotka hajoavat helposti kehossa niin, että muo-20 dostuu vapaita karboksyylihappoja, ovat hyödyllisiä lääk keen esiasteina. Esimerkkejä tällaisista estereistä ovat asetoksimetyyliesterit, pivaloyylioksimetyyliesterit, etoksikarbonyylioksiesterit, klooriesterit, dimetyyliami-noetyyliesterit, 5-indanyyliesterit, ftalidinyyliesterit 25 ja oksoalkyyliesterit (esim. 5-substituoitu-2-okso-l,3- * dioksol-4-yylimetyyliesterit ja 3-asetoksi-2-oksobutyyli- esterit).

Seuraava reaktiokaavio havainnollistaa menetelmää kaavan (I) mukaisten pyridonikarboksyylihappojohdosten 30 valmistamiseksi, jolloin esimerkkitapaukseksi on valittu yhdiste, jossa A = C-H ja R1 = H. Kaaviossa on R = Et (etyyliryhmä, tämän jälkeen sama). Keksinnön kohteena oleva menetelmä käsittää vaiheet (7a, 7b) -* (lila, Illb) -» (IVa, IVb) tai vaiheet (6a, 6b) - (Ha, Hb) - (Iva, IVb) .

9 96947

O

Q F-^v'N'COOH

FrYVC00R h—1, fXXJf p emäs *L—4* 7a, 7b

5 c HN/H R' -H

ea, 6b I

J R'"H 0

* fyVVC00H

O haPP° tal , p · ,fjc07 “ ** J F Ula, Illb . .

*|^—-4# suojaryhmän hvh poisto

Ha, Hb 0 *

, ς Fv^V^VCOOH

happo tai T ]T ¥ emäs p —-- *l_j* samanaikainen suojaryhmän poisto IVa, IVb jossa ryhmällä R’ on sama merkitys kuin ryhmällä R2 tai se 20 on syklinen aminoryhmä, jolla on muuten sama rakenne kuin ryhmällä R2, mutta se on suojattu.

Optisesti aktiivinen l-(l,2-cis-2-fluorisyklopro-pyyli)-6,7-difluori-l,4-dihydro-4-oksokinoliini-3-karbok-syylihapon etyyliesteri (6a) tai (6b) hydrolysoidaan hap-25 pamissa tai emäksisissä olosuhteissa vapaaksi karboksyy-lihappojohdokseksi (7a) tai (7b). Vapaan hapon (7a) tai (7b) annetaan reagoida syklisen amiinin R4-H kanssa halutun yhdisteen (Ula) tai (Illb) saamiseksi. Jos on tarpeen, suojaryhmä poistetaan saadusta yhdisteestä sopivis-30 sa olosuhteissa, jotka valitaan suojaryhmän mukaan niin, että saadaan haluttu yhdiste (IVa) tai (IVb).

Substituutioreaktio syklisen amiinin kanssa voidaan suorittaa liuottimessa, kuten dimetyylisulfoksidi, pyridiinissä, asetonitriilissä ja 3-metoksibutanolissa, 35 lämpötilassa, joka on huoneen lämpötilan ja 150 °C:n vä- • 10 96947

Iillä, edullisesti 40 - 120 °C, 0,5-5 tunnissa, tavallisesti 0,5-2 tunnissa.

Vaihtoehtoisesti yhdisteen (6a) tai (6b) annetaan reagoida syklisen amiinin kanssa samoissa olosuhteissa, 5 kuin yllä selostettiin, ja saatu yhdiste (Ha) tai (Hb), kun se muodostuu, hydrolysoidaan sitten happamissa tai emäksisissä olosuhteissa ja, jos on tarpeellista, suoja-ryhmä poistetaan halutun yhdisteen (lila) tai (Illb) tai (IVa) tai (IVb) saamiseksi.

10 Optisesti aktiivinen cis-2-fluorisyklopropyyli- amiini voidaan syntetisoida seuraavasti. 2-fluorisyklo-propaanikarboksyylihapon annetaan reagoida (R)-(+)-a-me-tyylibentsyyliamiinin kanssa, jolloin saadaan N-[1-(R)-f enyylietyyli) -1,2-cis-f luor isyklopropaanikarboksamidia. 15 Reaktio voidaan suorittaa tetrahydrofuraanissa N,N-kar-bonyylidi-imidatsolin läsnä ollessa. Reaktio voidaan myös suorittaa seka-anhydridimenetelmän mukaan, jossa karbok-syylihappo liuotetaan aproottiseen liuottimeen ja sen annetaan reagoida halogeenimuurahaishappoesterin kanssa 20 emäksen läsnä ollessa, matalassa lämpötilassa, ja sitten annetaan reagoida bentsyyliamiinin kanssa karboksamidin saamiseksi. Saatu karboksamidi voidaan erottaa kuksikin isomeeriksi kromatografisilla menetelmillä.

Seka-anhydridimenetelmässä käytettävä liuotin ei 25 ole erityisesti rajoitettu ja se käsittää eetterit, esim.

• dietyylieetteri, di-isopropyylieetteri, tetrahydrofuraa ni, 1,4-dioksaani ja 1,2-dimetoksietaani; halogenoidut hiilivedyt, esim. dikloorimetaani, trikloorimetaani, 1,2-dikloorietaani ja l,l,2,2-tetrakloorietaani; aromaattiset 30 hiilivedyt, esim. bentseeni, tolueeni ja ksyleeni; ali-faattiset hiilivedyt, esim. pentaani, heksaani, heptaani ja sykloheksaani. Niistä tavallisesti käytetty on tetra-hydrofuraani tai trikloorimetaani. Käytettävän liuottimen sisältämä vesi poistetaan tavallisesti etukäteen.

11 96947

Halogeenirauurahalshappoesterin halogeeniatomi on normaalisti klooriatomi. Halogeenimuurahaishappoesteri käsittää metyyli-, etyyli-, 2,2,2-trikloorietyyli-, fenyy-li-, p-nitrofenyyli- ja bentsyyliesterit.

5 Käytettävä emäs voi olla joko orgaaninen tai epä orgaaninen. Epäorgaaninen emäs käsittää alkalimetallihyd-roksidit, -karbonaatit ja -vetykarbonaatit, esim. litium-hydroksidi, natriumhydroksidi, kaliumhydroksidi, litium-karbonaatti, natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti, nat-10 riumvetykarbonaatti ja kaliumvetykarbonaatti. Orgaaninen emäs käsittää trialkyyliamiinit, esim. trietyyliamiini, tripropyyliamiini, tributyyliamiini, N,N-di-isopropyyli-etyyliamiini; dialkyylianiliinit, esim. dietyylianiliini ja dimetyylianiliini; ja heterosykliset yhdisteet, esim. 15 N-metyylimorfOliini, pyridiini ja N,N-dimetyyliaminopyri-diini.

Karboksamidin erottaminen optisiksi isomeereiksi voidaan suorittaa tunnetuilla menetelmillä kuten piihap-pogeelipylväskromatografiällä normaalipaineessa tai pai-20 neessa, preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä ja korkean erotuskyvyn nestekromatografiällä (HPLC). Erottaminen optisiksi isomeereiksi voidaan suorittaa myös muilla yleisesti käytetyillä erotusmenetelmillä kuten uudelleenkiteytyksellä ja uudelleensaostuksella.

25 Näin erotettu optisesti aktiivinen karboksamidi voidaan muuttaa optisesti aktiiviseksi cis-2-fluorisyk-lopropaanikarboksyylihapoksi hydrolyysillä. Reaktio voidaan suorittaa liuottamalla karboksamidi esimerkiksi väkevään vetykloridihappoon, jonka jälkeen seuraa kuumen-30 nus. Vetykloridihappo voidaan korvata rikkihapolla tai typpihapolla. Voidaan käyttää liuotinta kuten etikkahap-poa tai alempaa alkoholia.

Saatu karboksyylihappo voidaan muuttaa heti Cur-tius-reaktiolla t-butanolin läsnä ollessa suojatuksi cis-35 1- (t-butoksikarbonyyliamino) -2-f luorisyklopropaaniksi.

12 96947

Reaktio voidaan käytännöllisesti suorittaa difenyylifos-foryyliatsidia käyttäen, mutta välituotteena olevan at-siyhdisteen synteesi ei rajoitu siihen, ja voidaan käyttää yleisiä synteesimenetelmiä.

5 Saatua optisesti aktiivista cis-2-fluorisyklopro- pyyliamiinijohdosta voidaan käyttää hyväksi sellaisen ki-nolonijohdoksen saamiseksi, jossa on 1-asemassa cis-fluo-risyklopropyyliryhmä, yksittäisenä isomeerinä. Tämän keksinnön mukainen kinolonijohdos voidaan sitten saada an-10 tamalla tämän isomeerin reagoida syklisen amiinin kanssa, kuten yllä selitettiin.

Tämän keksinnön mukaisilla pyridonikarboksyylihap-pojohdoksilla on tehokas antimikrobinen vaikutus, ja siten niitä voidaan käyttää ihmis- ja eläinlääkkeinä, kala-15 lääkkeinä, maatalouskemikaaleina ja ruoan säilytysainei-na.

Ihmislääkkeenä käytettäessä pyridonikarboksyyli-happojohdosten annos vaihtelee välillä 50 mg - 1 g, edullisesti 100 mg - 300 mg, päivässä aikuiselle. Eläinlääk-20 keinä käytettävä annos vaihtelee yleensä välillä 1 mg -200 mg, edullisesti 5 mg - 100 mg ruumiin painokiloa kohti, vaikka se enemmän tai vähemmän vaihtelee riippuen an-totarkoituksesta (terapeuttinen käyttö tai ehkäisevä käyttö jne.), eläimen laadusta ja koosta, patogeenisten or-25 ganismien laadusta ja oireista. Yllä selostettu päivittäinen annos voidaan jakaa 2-4 annokseen päivässä. Jos on tarpeen, päivittäinen annos voi joskus poiketa edellä selostetuista rajoista.

Tämän keksinnön mukaiset pyridonikarboksyylihap-30 pojohdokset ovat tehokkaita laajoja mikro-organismimuo- .. toja vastaan, jotka aiheuttavat erilaisia infektiosairauk sia, ja ne pystyvät parantamaan tai lievittämään ja/tai ehkäisemään tällaisten patogeenien aiheuttamat sairaudet.

Kuvaavia esimerkkejä bakteereista tai bakteerin 35 kaltaisista mikro-organismeista, joille keksinnön mukai- · ϊβ ϊ mu ii j i ai 13 96947 set pyridonikarboksyylihappojohdokset ovat tehokkaita, ovat Staphylococcus sp., Streptococcus pyogenes, Streptococcus Haemolyticus, enterococci, Streptococcus pneumoniae, Peptostreptococcus sp., Neisseria gonorrhoeae, 5 Escherichia coli, Citrobacter sp., Shigella sp., Klebsiella pneumoniae, Enterobacter sp., Serratia sp., Proteus sp., Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Aci-netobacter sp., Campylobacter sp. ja Chlamidiae.

Esimerkkejä näiden patogeenien aiheuttamista sai-10 rauksista ovat follikuliitti, paise, ajospahka, ruusu, märkäinen sidekudostulehdus, imusuonitulehdus/imusolmuke-tulehdus, sormimärkimä, ihonalainen absessi, hikirauhas-tulehdus, näppysikermä, tarttuva aterooma, peräaukon viereinen absessi, nisätulehdus, pinnalliset sekundaariset 15 infektiot trauman jälkeen, palovammat tai leikkausvau- riot, nielu-kurkunpääntulehdus, akuutti bronkiitti, ton-siniitti, krooninen bronkiitti, keuhkoputken laajentuma, diffuusi panbronkioliitti, kroonisten hengitystiesairauksien sekundaariset infektiot, keuhkokuume, munuaisaltaan 20 ja munuaisen tulehdus, virtsarakon tulehdus, eturauhastulehdus, lisäkivestulehdus, gonokokin aiheuttama virtsaputken tulehdus, ei-gonokokin aiheuttama virtsaputken tulehdus, sappirakon tulehdus, sappitietulehdus, basillin aiheuttama punatauti, enteriitti, kohdun sivuelintulehdus, 25 kohdunsisäiset infektiot, Bartholin rauhasen tulehdus, luomitulehdus, näärännäppy, kyynelpussintulehdus, luomi-tukirauhasen tulehdus, sarveiskalvon haavauma, välikorvan tulehdus, sinuiitti, parodontiitti, hampaanterän ympärys-tulehdus, hammaskruunun ympärystulehdus, leukatulehdus, 30 vatsakalvontulehdus, endokardiitti, verenmyrkytys, aivokalvontulehdus ja ihoinfektiot.

• Esimerkkejä herkistä mikro-organismeista, jotka aiheuttavat eläinten infektiosairauksia ovat siipikarja mikro-organismit kuten Escherichia sp., Salmonella sp., 35 Pasteurella sp., Haemophilus sp., Bordetella sp., Staphy- 14 96947 lococcus sp. ja Mycoplasma sp. Erityisiä esimerkkejä näiden mikro-organismien aiheuttamista eläinsairauksista ovat kolibasiIloosi, valkovatsuri (salmonelloosi), lintujen pikkulavantauti, lintukolera, tarttuva kananuha, stafylo-5 kokki-infektiot ja mykoplasmoosit; sian vastaavat kuten kolibasilloosi, salmonelloosi, pasteurelloosi, hemofilus-infektio, aivastustauti, porsasrupi ja mykoplasmoosit; karjan vastaavat kuten kolibasilloosi, salmonelloosi, he-morraaginen septikemia, mykoplasmoosit, naudan keuhkorutto 10 ja naudan utaretulehdus; koirien vastaavat kuten kolifor-min aiheuttama sepsis, salmonelloosi, hemorraaginen sepsis, märkäkohtu ja virtsarakon tulehdus; ja kissojen vastaavat kuten hemorraaginen pleuriitti, virtsarakon tulehdus, krooninen nuha, hemofilusinfektio, pentujen ripuli-15 sairaus ja mykoplasmoosit.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa antimikrobisiksi valmisteiksi sopivana annosmuotona valitun antotien mukaan tavanomaisilla valmistusmenetelmillä. Annosmuotoihin oraalista antoa varten kuuluvat tab-20 letit, pulverit, rakeet, kapselit, liuokset, siirapit, eliksiirit ja öljy- tai vesisuspensiot. Infuusiot voivat sisältää vaikuttavan aineosan lisäksi stabilisaattoreita, antiseptisia aineita ja liukoisuutta parantavia aineita.

Liuos, joka voi sisältää tällaisia täyteaineita, laite-25 taan astiaan ja lisäksi liuokselle voidaan suorittaa kyl-mäkuivaus tai muu sellainen menetelmä sellaisten kiinteiden valmisteiden valmistamiseksi, jotka voidaan liuottaa käytettäessä. Astia voi sisältää joko yhden annoksen tai useita annoksia. Ulkoisesti annettaviin annosmuotoihin 30 kuuluvat liuokset, suspensiot, emulsiot, salvat, geelit, voiteet, lotionit ja suihkeet.

: Kiinteiden valmisteiden valmistuksessa vaikuttava aineosa voidaan sekoittaa tarkoituksen mukaisesti valittuihin farmaseuttisesti hyväksyttävien täyteaineiden ku-35 ten täytejauheiden, laimentimien, sideaineiden, hajotus- • 96947 15 aineiden, liukenemista edistävien aineiden, kostutusai-neiden ja liukastavien aineiden kanssa.

Nestemäisiin valmisteisiin kuuluvat liuokset, suspensiot ja emulsiot. Ne voivat sisältää täyteaineita ku-5 ten suspension stabilisaattoreita ja emulgaattoreita.

Tämän keksinnön mukainen yhdiste voidaan antaa eläimille suun kautta joko suoraan tai rehuun sekoitettuna, tai sen liuos voidaan antaa joko suoraan tai veteen tai rehuun sekoitettuna. Yhdiste voidaan myös antaa muu- 10 ten kuin oraalisesti, esimerkiksi ruiskeena.

Tämän keksinnön mukainen yhdiste voidaan valmistaa eläimille annettaviksi valmisteiksi kuten pulvereiksi, hienoiksi rakeiksi, liukoisiksi jauheiksi, siirapeiksi, liuoksiksi ja ruiskeiksi yleisesti käytetyillä valmistus-15 menetelmillä.

Seuraavassa esitetään yhdisteiden käyttötapoja havainnollistavia valmiste-esimerkkejä.

Valmiste-esimerkki 1 Kapseli: 20 Esimerkin 8 yhdiste 100,0 mg

Maissitärkkelys 23,0 mg

Kalsiumkarboksimetyyliselluloosa 22,5 mg

Hydroksipropyylimetyyliselluloosa 3,0 mg

Magnesiumstearaatti 1.5 ma 25 yhteensä: 150,0 mg

Valmiste-esimerkki 2

Liuos:

Esimerkin 7 yhdiste 1 - 10 g

Etikkahappo tai natriumhydroksidi 0,5 - 2 g 30 Etyyli-p-hydroksibentsoaatti 0,1 g

Puhdistettu vesi 88.9 - 98.4 a ' yhteensä: 100 g 16 96947

Valmiste-esimerkki 3 Rehuun sekoitettava jauhe:

Esimerkin 6 yhdiste 1 - 10 g

Maissitärkkelys 98,5 - 98,5 g 5 Hienojakoinen vedetön piihappo 0.5 a yhteensä: 100 g Tätä keksintöä havainnollistetaan nyt yksityiskohtaisemmin seuraavien esimerkkien ja viite-esimerkkien avulla. Viite-esimerkit valaisevat optisesti aktiivisten 10 välituoteyhdisteiden runkojen synteesiä optisesti aktiivi sesta cis-2-fluorisyklopropaanikarboksyylihaposta.

Esimerkeissä valmistettujen optisesti aktiivisten yhdisteiden antimikrobista vaikutusta arvioitiin sellaisen standardimenetelmän mukaan, jonka on yksityiskohtai-15 sesti esittänyt Nippon Kagakuryoho gakkai, ja saadut tulokset on esitetty jäljempänä esitetyssä taulukossa 1 pie-nimpinä inhiboivina pitoisuuksina (MIC; μg/m2) . Esimerkkejä vastaavat reaktiokaaviot on esitetty selityksen lopussa. Viite-esimerkki 1 20 N- [ 1- (R) -fenyylietyyli] -1,2-cis-2-f luorisyklopro- paanikarboksamidi (2a, 2b) 1-1. Karbonyylidi-imidatsolimenetelmä:

Yksi gramma cis-2-fluorisyklopropaanikarboksyyli-happoa liuotettiin 30 ml:aan tetrahydrofuraania (THF), ja 25 siihen lisättiin 1,78 g Ν,Ν'-karbonyylidi-imidatsolia, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yksi tunti. Liuokseen lisättiin 1,45 g (R)-(+)-a-metyylibentsyyli-amiinia, ja sekoitusta jatkettiin kaksi tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännöstä uutettiin trikloo-30 rimetaanilla. Uutetta pestiin peräkkäin 10-% sitruunahapon vesiliuoksella ja vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa. Jäljelle jäävästä viskoosista öljymäisestä aineesta kukin stereoisomeeri eristettiin HPLC:llä alla esitetyis-35 sä olosuhteissa. Kukin isomeeri uudelleenkiteytettiin di- 17 96947 isopropyylieetteristä, jolloin saatiin otsikon yhdiste (2a) tai (2b).

HPLC:n olosuhteet:

Kolonni: Nucleosil 50-5 (2 mm sisähalkaisija x 250 5 mm L) (senshu Pack SSC Silica, 782-IN, valmistanut Senshu Kagaku)

Liuotin: etyyliasetaatti-THF (tilavuussuhde 9:1) Virtausnopeus: 9,0 ml/min Retentioaika: 11 min yhdisteelle (2a) 10 13 min yhdisteelle (2b)

Yhdiste (2a):

Sulamispiste: 108 °C

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C12HuFNO:

Laskettu (%): C 69,55; H 6,81; N 6,76 15 Saatu (%): C 69,31; H 7,01; N 6,65 [a]0: +61,96° (c = 0,965, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) S ppm: 0,92-1,34 (2H, m), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,50-1,96 (1H, m), 4,68 (1H, dm, J * 64 Hz), 5,14 (1H, m), 7,40 (5H, s)

20 Yhdisteen (2b) fysikokemiallisia ominaisuuksia: Sulamispiste: 102 °C

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C12HuFNO:

Laskettu (%): C 69,55; H 6,81; N 6,76 Saatu (%): C 69,45; H 6,87; N 6,70 25 [a]0: +143,61° (c = 0,830, trikloorimetaani) ’H-NMR (CDClj) S ppm: 0,98-1,34 (2H, m), 1,52 (3H, d, J = 7 Hz), 1,64-1,96 (1H, m), 4,58 (1H, dm, J = 66 Hz), 5,24 (1H, m), 7,40 (5H, m) 1-2. Seka-anhydridimenetelmä: 30 4,19 g 2-fluorisyklopropaanikarboksyylihappoa (cis- trans-seos) ja 4,07 g trietyyliamiinia liuotettiin 50 ml:- aan THF:ää, ja liuos jäähdytettiin -10 °C:seen. Tähän li sättiin liuos, jossa oli 4,73 g etyyliklooriformiaattia 20 ml:ssa THF:ää, ja seosta sekoitettiin 10 minuuttia. Sitten 35 liuokseen lisättiin pisaroittain liuosta, jossa oli 4,88 g 18 96947 (R)-(+)-α-metyylibentsyyliamiinia 30 ml:ssa THF:ää, samassa lämpötilassa, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 15 tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännöstä uutettiin bentseenillä. Uutetta pestiin peräk-5 käin 10-% sitruunahapon vesiliuoksella, 1 M natriumhydrok-sidin vesiliuoksella ja vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja saatu vaaleankeltainen öljymäinen jäännös puhdistettiin piihappogeelipylväskromatografiällä käyttäen 10 eluenttina bentseenin ja etyyliasetaatin liuotinseosta kummallekin otsikon yhdisteistä (2a) ja (2b). Viite-esimerkki 2 (+)-cis-2-fluorisyklopropaanikarboksyylihappo (3a) 530 mg viite-esimerkin 1 mukaan valmistettua ami-15 diyhdistettä (2a) liuotettiin 15 ml:aan väkevää vetyklori-dihappoa, ja liuosta kuumennettiin lämpötilassa 100 - 110 °C viisi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin 20 ml vettä, ja seosta uutettiin etyyliasetaatilla. Sitten uutetta uutettiin natriumvetykarbonaatin vesiliuok-20 sella, ja tätä vesipitoista uutetta pestiin etyyliasetaatilla. Vesipitoisen uutteen pH säädettiin 5:een väkevällä vetykloridihapolla, ja sitä uutettiin etyyliasetaatilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin otsikon mu-25 kaista yhdistettä (3a) vaalean keltaisena öljynä.

[a]0: -22,13° (c = 1,020, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) 5 ppm: 1,0-1,42 (1H, m), 1,60-2,10 (2H, m), 4,82 (1H, dm, J = 65 Hz), 12,0 (1H, s) Viite-esimerkki 3 30 (+)-cis-2-fluorisyklopropaanikarboksyylihappo (3b) 1,65 g viite-esimerkin 1 mukaan valmistettua ami-• diyhdistettä (2b) liuotettiin 30 ml:aan väkevää vetyklori- dihappoa, ja liuosta kuumennettiin lämpötilassa 100 - 110 °C viisi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseoksen pH sää-35 dettiin natriumvetykarbonaatilla välille 8-9, ja sitten 19 96947 sitä pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerroksen pH säädettiin 4:ään väkevällä vetykloridihapolla, ja sitä uutettiin etyyliasetaatilla. Uute kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin 5 saatiin otsikon mukaista yhdistettä (3b) vaalean keltaisena öljynä.

[at]0: +21,56° (c = 1,113, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) S ppm: 1,0-1,42 (1H, m), 1,56-1,98 (2H, m), 4,76 (1H, dm, J = 66 Hz), 11,32 (1H, s) 10 Viite-esimerkki 4 (+) -cis-l-(t-butoksikarbonyyliamino) -2-fluorisyk-lopropaani (4a) 200 mg viite-esimerkin 2 mukaan valmistettua kar-boksyylihappoa (3a), 603 mg difenyylifosforyyliatsidia ja 15 203 mg trietyyliamiinia liuotettiin 5 ml:aan t-butanolia, ja liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 4,5 tuntia. Sen jälkeen, kun liuotin oli poistettu alipaineessa, jäännöstä uutettiin trikloorimetaanilla. Uuttetta pestiin peräkkäin 10-% sitruunahapon vesiliuoksella, 2-% natriumhyd-20 roksidin vesiliuoksella ja vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja saadulle jäännökselle suoritettiin piihappogee-lipylväskromatografointi käyttäen eluenttina trikloorime-taania, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (4a) vä-25 rittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 73 °C

[a]D: +65,57° (c = 0,610, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDC13) S ppm: 0,6-1,3 (2H, m), 1,46 (9H, s), 2,48-2,74 (1H, m), 4,62 (1H, dm, J = 65 Hz), 4,6-5,1 (1H, 30 leveä)

Viite-esimerkki 5 : (-) -cis-1- (t-butoksikarbonyyliamino) -2-fluorisyk- lopropaani (4b) 265 mg viite-esimerkin 3 mukaan valmistettua kar-35 boksyylihappoa (3b), 800 mg difenyylifosforyyliatsidia ja 20 96947 270 mg trietyyliamiinia liuotettiin 6 ml:aan t-butanolia. Liuoksen annettiin reagoida, ja sen kanssa työskenneltiin samalla tavalla kuin viite-esimerkissä 4, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (4b).

5 Sulamispiste: 63 °c [a]D: -60,27° (c = 0,740, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDC13) δ ppm: 0,66-1,3 (2H, m), 1,46 (9H, s), 2,48-2,74 (1H, m), 4,58 (1H, dm, J = 65 Hz), 4,6-5,1 (1H, leveä) 10 Viite-esimerkki 6 (-)-etyyli-2-[(1,2-cis-2-fluorisyklopropan-1-yyli) aminometyleeni]-3-okso-3-(2,4,5-trifluorifenyyli)-propionaatti (5a)

Etyyli-2,4,5-trifluoribentsoyyliasetaatti (234 mg) , 15 2 ml etyyliortoformiaattia ja 4 ml etikkahappoanhydridiä yhdistettiin, ja seosta kuumennettiin lämpötilassa 110 -120 °C kaksi tuntia samalla sekoittaen. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan di-kloorimetaania.

20 Viite-esmierkin 4 mukaan saatu yhdiste (4a) (167 mg) ja 5 ml trifluorietikkahappoa yhdistettiin, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia, ja se vä-kevöitiin kuiviin alipaineessa (saatu amiinitrifluoriase-taatti käytettiin puhdistamatta). Jäännös liuotettiin 10 25 ml:aan dikloorimetaania ja jäähdytettiin -10 °C:seen. Siihen lisättiin pisaroittain liuosta, jossa oli 230 mg trietyyliamiinia 10 ml:ssa dikloorimetaania. Sen jälkeen seokseen lisättiin pisaroittain yllä valmistettu dikloo-rimetaaniliuos, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpö-30 tilassa yön yli. Liuotin haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännökselle suoritettiin piihappogeelipylväs- « kromatografointi käyttämällä bentseenin ja etyyliasetaatin liuotinseosta (tilavuussuhde 2:1). Eluentista saatiin liuottimen poistamisen jälkeen keltainen öljymäinen aine. 35 Tuote uudelleenkiteytettiin di-isopropyylieetterin ja n- 21 96947 heksaanln seoksesta, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (5a) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 69 - 70 °C

[α]β: -10,29° (c = 1,088, trikloorimetaani) 5 Viite-esimerkki 7 (+)-etyyli-2-((1,2-cis-2-fluorisyklopropan-l-yyli)-aminometyleeni]-3-okso-3 - (2,4,5-trif luorif enyyli) propio-naatti (5b)

Etyyli-2,4,5-trifluoribentsoyyliasetaatti (337 mg) , 10 2 ml etyyliortoformiaattia ja 4 ml etikkahappoanhydridiä yhdistettiin, ja seosta kuumennettiin lämpötilassa 110 -120 °C kaksi tuntia samalla sekoittaen. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan di-kloorimetaania.

15 Viite-esmierkin 5 mukaan saatu yhdiste (4b) (240 mg) ja 5 ml trifluorietikkahappoa yhdistettiin, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yksi tunti, minkä jälkeen väkevöitiin alipaineessa (amiinitrifluoriasetaatti käytettiin puhdistamatta). Jäännös liuotettiin 10 ml:aan 20 dikloorietaania, ja liuos jäähdytettiin -10 °C:seen. Siihen lisättiin pisaroittain liuosta, jossa oli 230 mg tri-etyyliamiinia 10 ml:ssa dikloorimetaania, ja seokseen lisättiin vielä yllä valmistettu dikloorimetaaniliuos, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin . 25 poistettiin alipaineessa, ja jäännökselle suoritettiin piihappogeelipylväskromatografointi käyttämällä bentseenin ja etyyliasetaatin liuotinseosta (tilavuussuhde 2:1). Eluentista saatiin liuottimen poistamisen jälkeen keltainen öljymäinen aine. Uudelleenkiteytys di-isopropyylieet-30 terin ja n-heksaanin seoksesta antoi otsikon mukaisen yhdisteen (5b) värittöminä kiteinä.

• Sulamispiste: 69 - 70 °C

[a]0: +12,09° (c = 0,645, trikloorimetaani) 22 96947

Viite-esimerkki 8 (+) -etyyli-6,7-difluori-l- (1,2-cis-2-f luorisyklo-propyyli) -4-okso-l, 4-dihydrokinoliini-3-karboksylaatti (6a) 5 180 mg viite-esimerkin 6 mukaan saatua yhdistettä (5a) liuotettiin 15 mlraan vedetöntä dioksaania, ja liuokseen lisättiin 200 mg 60-% natriumhydridiä, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa kaksi päivää. Reaktio-seos lisättiin 10-%:seen sitruunahapon vesiliuokseen, min-10 kä jälkeen väkevöitiin alipaineessa. Jäännöstä uutettiin trikloorimetaanilla, ja uute kuivattiin vedettömällä nat-riumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös puhdistettiin preparatiivisella piihappogeeli-TLC:llä käyttäen kehitysliuottimena bentseeni- etyyliasetaatti-15 seosta (tilavuussuhde 1:2), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (6a) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 231 - 232 °C

[a]D: +27,20° (c = 0,610, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) «S ppm: 1,20 (3H, t, J = 7 Hz), 1,6-20 1,9 (2H, m), 3,28-3,56 (1H, m), 4,42 (2H, q, J = 7 Hz), 5,11 (1H, dm, J = 63 HZ), 7,60 (1H, dd, J = 11 Hz & 7 Hz), 8,28 (1H, dd, J = 10 Hz & 11 Hz), 8,58 (1H, s)

Viite-esimerkki 9 (-) -etyyli-6,7-difluori-l- (1,2-cis-2-f luorisyklo-25 propyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksylaatti (6b) 267 mg viite-esimerkin 7 mukaan saatua yhdistettä (5b) liuotettiin 15 ml:aan vedetöntä dioksaania, ja siihen lisättiin 200 mg 60-% natriumhydridiä, ja seosta se-30 koitettiin huoneen lämpötilassa kaksi päivää. Reaktioseos lisättiin 10-%:seen sitruunahapon vesiliuokseen, minkä jälkeen väkevöitiin alipaineessa. Jäännöstä uutettiin trikloorimetaanilla, ja se kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännös 35 puhdistettiin preparatiivisella piihappogeeli-TLC:llä * 23 96947 käyttäen kehitysliuottimena bentseenin ja etyyliasetaatin seosta (tilavuussuhde 1:2), jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (6b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 226 - 227 °C

5 [a]0: -31,36° (c = 0,610, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) 6 ppm: 1,22 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,5- 1.9 (2H, m), 3,26-3,52 (1H, m), 4,40 (2H, q, J = 7 Hz) , 5.10 (1H, dm, J = 63 Hz), 7,58 (1H, dd, J = 11 Hz & 7 Hz), 8,26 (1H, dd, J = 10 HZ & 11 Hz), 8,55 (1H, s) 10 Viite-esimerkki 10 (+)-6,7-difluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyy-li)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (7a) 106 mg viite-esimerkin 8 mukaan saatua esteriä (6a) liuotettiin 15 ml:aan väkevää vetykloridihappoa, ja liuos-15 ta kuumennettiin lämpötilassa 100 - 110 °C kaksi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin 15 ml vettä, ja saostuma kerättiin suodattamalla, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (7a) värittöminä kiteinä. Sulamispiste: 265 - 270 °C 20 [a]0: +3,66° (c = 0,383, etikkahappo) 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,75-1,95 (2H, m), 3,58 (1H, m), 5,18 (1H, dm, J = 64 Hz), 7,82 (1H, dd, J = 12 Hz & 7 Hz), 8,37 (1H, dd, J = 18 Hz & 8 Hz), 8,94 (1H, s) Viite-esimerkki 11 25 (-) -6,7-difluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyy- *' li)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (7b) 150 mg viite-esimerkin 9 mukaan saatua esteriä (6b) liuotettiin 10 ml:aan väkevää vetykloridihappoa, ja liuosta kuumennettiin lämpötilassa 110 °C kaksi tuntia samalla 30 sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin 20 ml vettä, ja seosta uutettiin trikloorimetaanilla. Uute kuivattiin ve-" dettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin ali paineessa. Jäännös uudelleenkiteytettiin etanolista, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (7b) värittöminä 35 kiteinä.

24 96947

Sulamispiste: 261 - 264 °C

[a]D: -4,08° (c * 0,343, etikkahappo) ’H-NMR (CDCIj) S ppm: 1,75-1,95 (2H, m), 3,58 (1H, m), 5,18 (1H, dm, J = 64 Hz), 7,82 (1H, dd, J = 12 Hz & 7 5 HZ), 8,37 (1H, dd, J = 12 Hz & 8 Hz), 8,94 (1H, s) Esimerkki 1 7-[3-(S) -t-butoksikarbonyyliamino-l-pyrrolidinyy-li]-6-fluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)-4-okso- 1,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (8a) 10 Seitsemänkymmentä milligrammaa viite-esimerkin 10 mukaan saatua karboksyylihappoa (7a), 150 mg (S)-3-(t-

butoksikarbonyyliamino) pyrrolidiinia., 200 mg trietyyli-amiinia ja 20 ml asetonitriiliä sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen neljä tuntia. Liuotin 15 poistettiin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin 10-% sitruunahapon vesiliuosta, minkä jälkeen uutettiin tri-kloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsul-faatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatista, jolloin saatiin 20 otsikon mukainen yhdiste (8a) värittöminä kiteinä. Sulamispiste: 236 - 239 °C

[a]D: +1,0° (c = 0,200, trikloorimetaani) ’h-NMR (CDC13) δ ppm: 1,2-1,7 (2H, m), 1,46 (9H, s) , 1,7-1,9 (1H, m), 2,0-2,36 (1H, m), 3,3-4,0 (5H, m), 4,2-25 4,4 (1H, m), 5,06 (1H, dm, J = 68 Hz), 6,68 (1H, d, J = 7

Hz), 7,84 (1H, d, J = 14 Hz), 8,46 (1H, s)

Esimerkki 2 7—£ 3 — (S) -t-butoksikarbonyyliamino-l-pyrrolidinyy-li]-6-fluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)-4-okso-30 l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (8b)

Viite-esmierkin 11 mukaan saatu karboksyylihappo (7b) (112 mg), 200 mg (S) -3-(t-butoksikarbonyyliamino) - pyrrolidiinia, 220 mg trietyyliamiinia ja 15 ml asetonitriiliä sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin palautus-35 jäähdyttäen neljä tuntia. Liuotin poistettiin alipainees- 25 96947 sa, ja jäännökseen lisättiin 10-% sitruunahapon vesiliuosta, minkä jälkeen uutettiin trikloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös uudelleenkiteytettiin etyy-5 liasetaatista, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (8b) keltaisina kiteinä.

Sulamispiste: 242 - 243 °C

[a]D: -4,0° (c = 0,448, trikloorimetaani) ’h-NMR (CDCIj) i ppm: 1,0-1,7 (2H, m), 1,40 (9H, s), 10 1,6-1,8 (1H, m), 1,9-2,1 (1H, m), 3,3-3,9 (5H, m), 4,2- 4,5 (1H, m), 5,00 (1H, dm, J = 68 Hz), 6,58 (1H, d, J = 7 HZ), 7,72 (1H, d, J = 14 Hz), 8,32 (1H, s)

Esimerkki 3 7-[3-(S) -amino-l-pyrrolidinyyli]-6-fluori-1-(1,2-15 cis-2-fluorisyklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3- karboksyylihappo (9a) 80 mg esimerkin l mukaan saatua karboksyylihappoa (8a) liuotettiin 10 ml:aan trifluorietikkahappoa. 20 minuutin sekoituksen jälkeen reaktioseos haihdutettiin kui-20 viin alipaineessa. Jäännökseen lisättiin 5 ml vettä ja edelleen lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta jäännöksen liuottamiseksi. Vesikerroksen pH säädettiin 7,5:een 1 M vetykloridihapolla, minkä jälkeen uutettiin trikloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettömällä nat-25 riumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa.

*' Uudelleenkiteyttämällä jäännös etanolista saatiin otsikon mukainen yhdiste värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 248 - 252 °C

[ar]0: -31,35° (c = 0,370, 1 M NaOH:n vesiliuos) 30 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,52-1,68 (2H, m), 1,68-1,80 (1H, m), 2,05-2,15 (1H, m), 3,13-3,22 (1H, m), 3,25-3,45 : (2H, m), 3,45-3,65 (3H, m), 5,12 (1H, dm, J = 65 Hz), 6,58 (1H, d, J = 7 Hz), 7,58 (1H, d, J = 14 Hz), 8,29 (1H, s) 26 96947

Esimerkki 4 7-[3-(S) -amino-l-pyrrolidinyyli] -6-f luori-1- (1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (9a) 5 80 mg esimerkin 2 mukaan saatua karboksyylihappoa (8b) lisättiin 10 ml:aan trifluorietikkahappoa. 20 minuutin sekoituksen jälkeen reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännökseen lisättiin 5 ml vettä ja edelleen lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta jäännöksen 10 liuottamiseksi. Vesikerroksen pH säädettiin 7,5:een 1 M vetykloridihapolla, ja sen jälkeen uutettiin trikloorime-taanilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja siitä poistettiin liuotin alipaineessa. Uudelleenki-teyttämällä jäännös etanolista saatiin otsikon mukainen 15 yhdiste (9b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 236 - 240 °C

[a]0: +23,72° (c = 0,413, 1 M NaOH:n vesiliuos) 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,55-1,69 (2H, m), 1,69-1,77 (1H, m), 2,07-2,15 (1H, m), 3,15-3,22 (1H, m), 3,37-3,47 20 (2H, m), 3,52-3,58 (2H, m), 3,58-3,66 (1H, m), 5,13 (1H, dm, J = 65 HZ), 6,62 (1H, d, J = 7 Hz), 7,61 (1H, d, J = 14 Hz), 8,30 (1H, S)

Viite-esimerkki 12 (-) -etyyli-2-[ [l,2-cis-2-f luori-l-syklopropyyli) -25 amino]metyleeni]-3-okso-3-(3-kloori-2,4,5-trifluorifenyy- * li)propionaatti (10a)

Etyyli-3-kloori-2,4,5-trifluoribentsoyyliasetaatti (1,5 g), 6 ml etyyliortoformiaattia ja 10 ml etikkahappo-anhydridiä sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin lämpö-30 tilassa 110 - 120 °C 1,5 tuntia samalla sekoittaen. Reak tioseos väkevöitiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuo- * tettiin 5 ml:aan dikloorimetaania.

Seitsemän millilitraa trifluorietikkahappoa jäähdytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 480 mg (+)-cis-l-35 (t-butoksikarbonyyliamino)-2-fluorisyklopropaania (4a).

> · iu i «m. mu 27 96947

Liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia, minkä jälkeen haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös suspendoitiin 10 ml:aan dikloorimetaania, ja siihen lisättiin 3 ml trietyyliamiinia jäähdyttäen jäillä. 20 minuutin 5 sekoituksen jälkeen siihen lisättiin yllä valmistettu di-kloorimetaaniliuos, ja seosta sekoitettiin yksi tunti. Reaktioseosta pestiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännökselle suoritettiin flash-pylväskromatografointi 10 käyttäen eluenttina bentseeni-etyyliasetaattiliuotinseosta (tilavuussuhde 5:1). Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännöstä pestiin di-isopropyylieetterillä, jolloin saatiin 620 mg otsikon mukaista yhdistettä (10a). Sulamispiste: 98 - 100 °C

15 [a]0: ~6,66° (c 0,998, trikloorimetaani)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C15H12C1F4N03:

Laskettu (%): C 49,26; H 3,31; N 3,83 Saatu (%): C 49,39; H 3,22; N 3,86 ’H-NMR (CDCIj) S ppm: 0,95, 1,08 (3H, 1:2,5, kum- 20 pikin t, J = 7 Hz) , 1,0-1,5 (2H, m), 2,8-3,15 (1H, m), 4,03, 4,07 (2H, 1:2,5, kumpikin q, J = 7 Hz) 4,78 (1H, dm, J = 65 HZ), 7,13 (1H, ddd, J = 5,9, 8,6 & 9,5 Hz), 8,20, 8,25 (1H, 1:2,5, kumpikin d, J - 14 Hz)

Viite-esimerkki 13 25 ( + ) -2-[[l,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)amino)- * metyleeni]-3-okso-3-(3-kloori-2,4,5-trifluorifenyyli)- propionaatti (10b)

Etyyli-3-kloori-2,4,5-trif luoribentsoyyliasetaatti (1,5 g), 6 ml etyyliortoformiaattia ja 10 ml etikkahappo-30 anhydridiä sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin lämpötilassa 110 - 120 °C 1,5 tuntia samalla sekoittaen. Reaktio-seos väkevöitiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan dikloorimetaania.

Kymmenen millilitraa trifluorietikkahappoa jäähdy-35 tettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 1,12 g (-)-cis-l- 28 96947 (t-butoksikarbonyyliamino)-2-fluorisyklopropaania (4b) . Sen jälkeen, kun oli sekoitettu huoneen lämpötilassa 20 minuuttia, seos haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös suspendoitiin 20 ml:aan dikloorimetaania, ja suspen-5 sioon lisättiin 2,0 g trietyyliamiinia jäähdyttäen jäil lä. Siihen lisättiin yllä valmistettu dikloorimetaani-liuos, minkä jälkeen sekoitettiin yksi tunti. Reaktioseos-ta pestiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natrium-sulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännök-10 selle suoritettiin flash-pylväskromatografointi eluoiden bentseeni-etyyliasetaattiliuotinseoksella (tilavuussuhde 4:1). Eluentin liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännöstä pestiin di-isopropyylieetterin ja n-heksaanin seoksella, jolloin saatiin 1,74 g otsikon mukaisen yhdisteen 15 (10b) kiteitä.

Sulamispiste: 99 - 100 °C

[a]0: +6,70° (c= 0,895, trikloorimetaani) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C15H12C1F4N03:

Laskettu (%): C 49,26; H 3,31; N 3,83 20 Saatu (%): C 49,41; H 3,60; N 4,06 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 0,95, 1,08 (3H, 1:2,5, kumpikin t, J = 7 HZ) , 1,0-1,5 (2H, m), 2,8-3,15 (1H, m), 4,03, 4,07 (2H, 1:2,5, kumpikin q, J = 7 Hz) 4,78 (1H, dm, J = 65 Hz), 7,13 (1H, ddd, J = 5,9, 8,6 & 9,5 Hz), 8,20, 25 8,25 (1H, 1:2,5, kumpikin d, J = 14 Hz)

Viite-esimerkki 14 ( + )-etyyli-8-kloori-6,7-difluori-1-(l,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksylaatti (11a) 30 620 mg viite-esimerkin 12 mukaan saatua yhdistettä (10a) liuotettiin 7 ml:aan vedetöntä dioksaania, ja liuokseen lisättiin 80 mg 60-% natriumhydridiä, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa yksi tunti. Reaktioseok-seen lisättiin etyyliasetaattia, ja seosta pestiin peräk-35 käin 10-%:11a sitruunahapon vesiliuoksella ja vedellä.

29 96947

Orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaa-tilla, ja siitä poistettiin liuotin alipaineessa. Jäännöstä pestiin n-heksaanilla, jolloin saatiin 551 mg otsikon mukaista yhdistettä (11a) värittöminä kiteinä.

5 Sulamispiste: 181 - 184 °C

[a]D: +45,1° (c = 1,18, trikloorimetaani) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C15H12C1F4N03:

Laskettu (%): C 52,12; H 3,21; N 4,05 Saatu (%): C 52,09; H 3,33; N 4,01 10 ’H-NMR (CDCIj) S ppm: 1,40 (3H, t, J * 7 Hz) , 1,4- 1.9 (2H, m), 4,08 (1H, m), 4,39 (2H, q, J = 7 Hz), 4,90 (1H, dm, J = 65 Hz), 8,24 (1H, dd, J = 10 & 11 Hz)

Viite-esimerkki 15 (-) -etyyli-8-kloori-6,7-difluori-1-(l,2-cis-2-15 f luori-l-syklopropyyli) -4-okso-l, 4-dihydrokinoliini-3-karboksylaatti (11b) 560 mg 60-% natriumhydridiä, jota oli pesty kaksi kertaa vedettömällä n-heksaanilla, suspendoitiin 10 ml:aan vedetöntä dioksaania. Suspensio lisättiin liuokseen, jossa 20 oli 1,70 g yhdistettä (10b) 20 ml:ssa vedetöntä dioksaania, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa kaksi tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin 0,1 M vetykloridihappoa. Saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, niitä pestiin peräkkäin vedellä ja . 25 dietyylieetterillä, ja ne kuivattiin alipaineessa, jolloin saatiin 1,44 g otsikon mukaista yhdistettä (11b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 174 °C

[a]0: -45,3° (c = 1,05, trikloorimetaani) 30 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C15HiiC1F4N03:

Laskettu (%): C 52,12; H 3,21; N 4,05 Saatu (%): C 51,80; H 3,45; N 4,15 1H-NMR (CDC13) S ppm: 1,40 (3H, t, J = 7 Hz), 1,4- 1.9 (2H, m), 4,08 (1H, m), 4,39 (2H, q, J = 7 Hz), 4,90 35 (1H, dm, J = 65 HZ), 8,24 (1H, dd, J = 10 & 11 Hz) 30 96947 IR(KBr), mK cm'1: 3100, 2998, 1731, 1638, 1614, 1470, 1317

Viite-esimerkki 16 (+)-8-kloori-6,7-difluori-l-(l,2-cis-2-fluori-1-5 syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyy-lihappo (12a)

Esteri (11a) (540 mg) , 5 ml väkevää vetykloridi- happoa ja 5 ml etikkahappoa sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin lämpötilassa 120 - 130 °C kaksi tuntia samalla 10 sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin 50 ml vettä, ja saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, niitä pestiin peräkkäin vedellä ja dietyylieetterillä, ja ne kuivattiin alipaineessa, jolloin saatiin 420 mg otsikon mukaista yhdistettä (12a) värittöminä kiteinä.

15 Sulamispiste: 170 - 171 °C

[a]D: +30,4° (c = 0,54, trikloorimetaani) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C13H7C1F3N03:

Laskettu (%): C 49,16; H 2,22; N 4,41 Saatu (%): C 49,21; H 2,49; N 4,27 20 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,3-2,0 (2H, m), 4,12-4,34 (1H, rn), 4,95 (1H, dm, J - 63 Hz), 8,27 (1H, dd, J = 8 & 8 Hz), 8,87, 8,89 (1H, kumpikin s, jakautunut 1:1) Viite-esimerkki 17 (-)-8-kloori-6,7-difluori-1-(1,2-cis-2-fluori-1-25 syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyy-lihappo (12b)

Esteri (11b) (1,40 g) ja 10 ml väkevää vetykloridi-happoa sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin 110 °C:ssa 2,5 tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin 30 50 ml vettä, ja saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, niitä pestiin vedellä ja dietyylieetterillä, ja ne kuivat-* tiin alipaineessa, jolloin saatiin 1,16 g otsikon mukaista yhdistettä (12b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 177 - 182 °C

35 [a]D: -26,8° (c = 0,90, trikloorimetaani) 31 96947

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C13H7C1F3N03:

Laskettu (%): C 49,16; H 2,22; N 4,41 Saatu (%): C 49,28; H 2,40; N 4,66 ’h-NMR (CDCIj) S ppm: 1,3-2,0 (2H, m), 4,12-4,34 5 (1H, m), 4,95 (1H, dm, J = 63 Hz), 8,27 (1H, dd, J = 8 & 8

Hz), 8,87, 8,89 (1H, kumpikin s, jakautunut 1:1)

Esimerkki 5 (+)-7-[3-(S)-amino-l-pyrrolidinyyli)-8-kloori-6-fluori-1-(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)-4-okso-l,4-10 dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (13a):

Viisi millilitraa trifluorietikkahappoa jäähdytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 230 mg 3-(S)-1-t-butok-sikarbonyyli-3-(t-butoksikarbonyyliamino)pyrrolidiinia, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuut-15 tia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 15 ml:aan asetonitriiliä. Liuokseen lisättiin 170 mg karboksyylihappoa (12a) ja 400 mg tri-etyyliamiinia, minkä jälkeen palautusjäähdytettiin 6,5 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja 20 jäännökseen lisättiin 1 M vetykloridihappoa. Seosta pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerroksen pH säädettiin arvoon 12 käyttäen 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta, ja sitä pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerroksen pH säädettiin vielä 7,6:een vetykloridihapolla, ja sitä uutet-25 tiin trikloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettömällä ' natriumsulfaatilla, ja liuotin haihdutettiin. Jäännös uudelleenkiteytettiin ammoniakin vesiliuos-etanoliseokses-ta, jolloin saatiin 138 mg otsikon mukaista yhdistettä (13a) värittöminä kiteinä.

30 Sulamispiste: 214 - 217 °C (hajoaa) [a]D: +120,8° (c = 0,475, 0,1 M NaOH:n vesiliuos) Alkuaineanalyysi yhdisteelle Ci7Hi6ClF2N3Cyi/2H20: Laskettu (%): C 51,98; H 4,36; N 10,70 Saatu (%): C 52,07; H 4,71; N 10,72 35 ’H-NMR (NaOD) S ppm: 1,28 (1H, dm, J = 27 Hz), 4 32 96947 1,69-1,78 (2H, m), 3,39-3,42 (1H, m), 3,51-3,61 (3H, m), 3,69-3,72 (1H, m), 4,13-4,17 (1H, m), 4,99 (1H, dm, J = 70 Hz), 7,72 (1H, d, J = 14 Hz), 8,44, 8,45 (1H, kumpikin s, jakautunut, 1:1) 5 Esimerkki 6 (—)—7—[3—(S)-amino-l-pyrrolidinyyli]-8-kloori- 6-f luori-1-(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)-4-okso- 1,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (13b):

Viisi millilitraa trifluorietikkahappoa jääh-10 dytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 230 mg 3-(S)- l-t-butoksikarbonyyli-3- (t-butoksikarbonyyliamino) pyr-rolidiinia, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 15 ml:aan aseto-15 nitriiliä. Liuokseen lisättiin 170 mg karboksyylihappoa (12b) ja 400 mg trietyyliamiinia, ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 6,5 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännökseen lisättiin 1 M vetykloridihappoa, ja seosta pestiin trikloorime-20 taanilla. Vesikerroksen pH säädettiin arvoon 12 käyt täen 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta, ja vesikerroksen pH säädettiin 7,6:een vetykloridihapolla, ja sitä uutettiin trikloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin haihdutettiin. 25 Jäännös uudelleenkiteytettiin ammoniakin vesiliuos-eta- noliseoksesta, jolloin saatiin 158 mg otsikon mukaista yhdistettä (13b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 247 - 252 °C (hajoaa) [a]D: -94,7° (c = 0,378, 0,1 M NaOH:n vesiliuos) 30 Alkuaineanalyysi yhdisteelle Ci7H16C1F2N303 H20:

Laskettu (%): C 50,82; H 4,52; N 10,46 : Saatu (%): C 50,97; H 5,14; N 10,42 1H-NMR (NaOD) δ ppm: 1,32 (1H, dm, J = 27 Hz), 1,73-1,80 (2H, m), 2,15-2,19 (1H, m), 3,19-3,22 (1H, 35 m), 3,45-3,50 (1H, m), 3,58-3,61 (1H, m), 3,85-3,88 λ . (& i mu lii i aa 33 96947 (2H, m), 4,16-4,20 (1H, m), 4,99 (1H, dm, J = 63 Hz) , 7,76 (1H, d, J = 14 Hz), 8,54, 8,44 (1H, kumpikin S, j akautunut, 1:1)

Viite-esimerkki 18 5 (-)-etyyli-2-[ [ (l,2-cis-2-fluori-l-syklopropyy- li)amino]metyleeni]-3-okso-3-(2,3,4,5-tetrafluori-6-nitrofenyyli)propionaatti (14a)

Etyyli-2,3,4,5-tetrafluori-6-nitrobentsoyyliase-taatti (1,5 g), 6 ml etyyliortoformiaattia ja 10 ml 10 etikkahappoanhydridiä sekoitettiin, ja seosta kuumen nettiin 120 °C:ssa kaksi tuntia. Reaktioseos väkevöi-tiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan dikloo-rimetaania.

Kymmenen millilitraa trif luorietikkahappoa jääh-15 dytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 1,1 g (+)-cis- 1- (t-butoksikarbonyyliamino) -2-f luorisyklopropaania (4a). Liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia, minkä jälkeen haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös suspendoitiin 20 ml:aan dikloorimetaa-20 nia, ja siihen lisättiin 2,0 g trietyyliamiinia jääh dyttäen jäillä, minkä jälkeen sekoitettiin 20 minuuttia. Siihen lisättiin yllä valmistettu dikloorimetaani-liuos, minkä jälkeen sekoitettiin 30 minuuttia. Reak-tioseosta pestiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömäl-25 lä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipainees sa. Jäännökselle suoritettiin flash-pylväskromatogra-fointi käyttäen eluenttina bentseeniä. Yhdistettä (14a) sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännöstä pestiin n-heksaanilla, 30 jolloin saatiin 1,57 g otsikon mukaisen yhdisteen (14a) kiteitä.

• Sulamispiste: 99 - 100 °C

[a]D: -10,3° (c = 1,25, trikloorimetaani) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C15H11F5N205: 35 Laskettu (%): C 45,70; H 2,81; N 7,10

Saatu (%): C 45,60; H 3,01; N 7,03 34 96947 1H-NMR (CDCI3) δ ppm: 1,10 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,2-1,55 (2H, m) , 2,88-3,16 (1H, m), 4,09 (2H, q, J = 7 Hz), 4,45 (1H, dm, J = 63 Hz), 8,29 (1H, d, J = 14 Hz) 5 IR(KBr) , ^ cm*1: 3454, 1734, 1626, 1566, 1521, 1482

Viite-esimerkki 19 (+)-etyyli-2-[[(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyy-li)amino]metyleeni]-3-okso-3-(2,3,4,5-tetrafluori-6-10 nitrofenyyli)propionaatti (14b)

Etyyli-2,3,4,5-tetrafluori-6-nitrobentsoyyliase-taatti (1,5 g) , 6 ml etyyliortoforraiaattia ja 10 ml etikkahappoanhydridiä sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin lämpötilassa 110 - 120 °C yksi tunti samalla 15 sekoittaen. Reaktioseos väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan dikloorimetaania.

Kymmenen millilitraa trif luorietikkahappoa jäähdytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 1,10 g (-)-cis- 1- (t-butoksikarbonyyliamino) -2-f luorisyklopropaania 20 (4b), minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös suspendoitiin 20 ml:aan dikloorimetaania. Suspensioon lisättiin 1,8 g trietyyliamiinia jäillä jäähdyttäen, minkä jälkeen sekoitettiin 20 mi-25 nuuttia. Seokseen lisättiin yllä valmistettu dikloori- ' metaaniliuos, minkä jälkeen sekoitettiin kaksi tuntia.

Reaktioseosta pestiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännökselle suoritettiin flash-pylväs-30 kromatografointi käyttäen eluenttina bentseeniä. Tuo tetta (14b) sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja liuo-tin poistettiin alipaineessa. Jäännöstä pestiin n-hek-saanilla, jolloin saatiin 1,50 g otsikon mukaisen yhdisteen (14b) kiteitä.

35 Sulamispiste: 98 - 100 °C

[a]0: +10,1° (c = 2,09, trikloorimetaani) 35 96947

Alkuaineanalyysi yhdisteelle Ci5H1lF5N205: Laskettu (%): C 45,70; H 2,81; N 7,10 Saatu (%): C 45,77; H 3,38; N 7,18 ’H-NMR (CDCIj) δ ppm: 1,10 (3H, t, J = 7 Hz), 5 1,2-1,5 (2H, m), 2,88-3,12 (1H, m), 4,09 (2H, q, J = 7 HZ), 4,45 (1H, dm, J = 63 Hz), 8,30 (1H, d, J = 14 Hz) IR(KBr) , MX cm'1: 3454, 1695, 1638, 1554, 1515

Viite-esimerkki 20 (+) -etyyli-6,7,8-trifluori-1-(1,2-cis-2-fluori-10 l-syklopropyyli) -5-nitro-4-okso-l, 4-dihydrokinoliini- 3-karboksylaatti (15a) 580 mg 60-% natriumhydridiä, jota oli pesty kaksi kertaa n-heksaanilla, suspendoitiin 20 ml:aan vedetöntä dioksaania. Suspensio lisättiin liuokseen, jossa 15 oli 1,90 g yhdistettä (14a) 20 ml:ssa vedetöntä diok saania. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yksi tunti, ja liuotin poistettiin reaktioseoksesta alipaineessa. Jäännökseen lisättiin 0,1 M vetykloridihappoa. Näin muodostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, niitä 20 pestiin peräkkäin vedellä ja dietyylieetterillä, ja ne kuivattiin alipaineessa, jolloin saatiin 1,65 g otsikon mukaista yhdistettä (15a) värittöminä kiteinä. Sulamispiste: 172 - 176 °C [a]D: +10,7° (c = 1,12, trikloorimetaani) . 25 Alkuaineanalyysi yhdisteelle C,5H10F4N2O5:

Laskettu (%): C 48,14; H 2,69; N 7,49 Saatu (%): C 48,29; H 2,78; N 7,20 1H-NMR (CDC13) δ ppm: 1,36 (3H, t, J = 7 Hz), 1,4-1,92 (2H, m), 3,80-4,08 (1H, m), 4,34 (2H, q, J = 30 7 Hz), 4,99 (1H, dm, J * 63 Hz), 8,55 (1H, s) IR(KBr) , mx crn'1: 3454, 1734, 1626, 1566, 1521, 1482 36 96947

Viite-esimerkki 21 (-) -etyyli-6,7,8-tr if luori-1- (1,2-cis-2-fluori- 1- syklopropyyli) -5-nitro-4-okso-l,4-dihydrokinoliini- 3-karboksylaatti (15b) 5 440 mg 60-% natriumhydridiä, jota oli pesty kak si kertaa n-heksaanilla, suspendoitiin 10 ml:aan vedetöntä dioksaania. Suspensio lisättiin liuokseen, jossa oli 1,45 g yhdistettä (14b) 20 ml:ssa vedetöntä dioksaania, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa 10 30 minuuttia. Liuotin poistettiin reaktioseoksesta ali paineessa. Jäännökseen lisättiin 0,1 M vetykloridihap-poa, ja muodostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, niitä pestiin peräkkäin vedellä ja dietyylieetterillä, ja ne kuivattiin alipaineessa, jolloin saatiin 1,18 g 15 otsikon mukaista yhdistettä (15b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 171 - 175 °C [a]D: -11,1° (c = 0,27, trikloorimetaani) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C15H10F4N2O5:

Laskettu (%): C 48,14; H 2,69; N 7,49 20 Saatu (%): C 48,44; H 3,17; N 7,48 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,36 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,4-1,92 (2H, m), 3,74-4,02 (1H, m), 4,36 (2H, q, J = 7 Hz), 4,94 (1H, dm, J = 62 Hz), 8,54 (1H, s) IR(KBr), ΜΧ cm'1: 1731, 1626, 1566, 1485, 1323, 25 1275

Viite-esimeEfc&j,...22.

(+)-etyyli-5-amino-6,7,8-trifluori-l-(l,2-cis- 2- fluori-l-syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini- 3- karboksyylihappo (16a) 30 Nitroyhdiste (15a) (1,60 g), 6 ml Raney-nikkeliä ja 200 ml etanolia yhdistettiin, ja seosta ravisteltiin * 2,5 tuntia vetykehässä. Katalysaattori poistettiin suo dattamalla seliitin läpi, ja suodos väkevöitiin alipaineessa. Jäännökselle suoritettiin piihappogeelipylväs-35 kromatografointi käyttäen eluenttina trikloorimetaania.

37 96947

Tuotetta (16a) sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja niistä poistettiin liuotin alipaineessa. Jäännös uudel-leenkiteytettiin etanolista, jolloin saatiin 770 mg otsikon mukaista yhdistettä (16a) vaalean keltaisina 5 kiteinä.

Sulamispiste: 190 - 191 °C

[a]D: +26,0° (c = 0,76, trikloorimetaani)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C15H12F4N2°3 :

Laskettu (%): C 52,33; H 3,51; N 8,14 10 Saatu (%): C 52,13; H 3,95; N 8,13 1H-NMR (CDC13) δ ppm: 1,39 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,4-1,8 (2H, m), 3,60-3,88 (1H, m), 4,38 (2H, q, J = 7 HZ), 4,87 (1H, dm, J = 63 Hz), 6,8-7,1 (2H, m), 8,37 (1H, S) 15 IR(KBr) , MX cm'1: 3436, 1683, 1653, 1557, 1461, 1284

Viite-esimerkki 23 (-)-etyyli-5-amino-6,7,8-trifluori-1-(1,2-cis- 2-fluori-l-syklopropyyli) -4-okso-l,4-dihydrokinoliini-20 3-karboksylaatti (16b)

Nitroyhdiste (15b) (1,60 g), 3 ml Raney-nikkeliä ja 120 ml etanolia yhdistettiin, ja seosta ravisteltiin 4,5 tuntia vetykehässä. Katalysaattori poistettiin suodattamalla seliitin läpi, ja suodos väkevöitiin alipai-25 neessa. Jäännökselle suoritettiin piihappogeelipylväs- kromatografointi käyttäen eluenttina trikloorimetaania. Tuotetta (16b) sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös uudelleenki-teytettiin etanolista, jolloin saatiin 620 mg otsikon 30 mukaista yhdistettä (16b) vaalean keltaisina kiteinä.

Sulamispiste: 191 - 193 °C

’ [ac3D: -25,9° (c - 0,65, trikloorimetaani)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle c15H12F4N203:

Laskettu (%): C 52,33; H 3,51; N 8,14 35 Saatu (%): C 52,16; H 3,54; N 8,08 38 96947 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,39 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,4-1,8 (2H, m), 3,60-3,88 (1H, m) , 4,38 (2H, q, J = 7 Hz), 4,87 (1H, dm, J = 63 Hz) , 6,8-7,1 (2H, m) , 8,38 (1H, s) 5 IR(KBr) , MX cm'1: 3436, 1683, 1653, 1593, 1464, 1284

Viite-esimerkki 24 5-amino-6,7,8-trifluori-1-(1,2-cis-2-fluori-1-syklopropyyli) -4-okso-l, 4-dihydrokinoliini-3-karboksyy-10 lihappo (17a)

Esteri (16a) (750 mg) ja 10 ml väkevää vetyklo-ridihappoa sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin 100 °C:ssa kaksi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin 20 ml vettä, ja saostuneet kiteet kerättiin 15 suodattamalla, jolloin saatiin 610 mg otsikon mukaista yhdistettä (17a) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 297 - 300 °C

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C13HeF4N203:

Laskettu (%): C 49,38; H 2,55; N 8,86 20 Saatu (%): C 49,43; H 2,91; N 8,84 1H-NMR (DMS0-d6) δ ppm: 1,4-2,1 (2H, m), 3,9-4,2 (1H, m), 5,08 (1H, dm, J = 65 Hz), 7,72 (1H, s), 8,62 (1H, s) IR(KBr) , ma* cm'1: 3448, 3334, 1725, 1656, 1596, 25 1566, 1518

Viite-esimerkki 25 5-amino-6,7,8-trifluori-1-(l,2-cis-2-fluori-1-syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karbok-syylihappo (17b) 30 Esteri (16b) (588 mg) ja 10 ml väkevää vetyklo- ridihappoa sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin lämpötilassa 100 - 110 °C kaksi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin 20 ml vettä, ja saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, jolloin saatiin 514 mg 35 otsikon mukaista yhdistettä (17b) värittöminä kiteinä.

39 96947

Sulamispiste: 295 - 300 °C Alkuaineanalyysi yhdisteelle C13H8F4N2°3 :

Laskettu (%): C 49,38; H 2,55; N 8,86 Saatu (%): C 49,41; H 2,81; N 8,88 5 ’h-NMR (CDCIj) S ppm: 1,4-2,1 (2H, m), 3,9-4,2 (1H, m), 5,08 (1H, dm, J - 65 Hz), 7,72 (1H, s) , 8,62 (1H, s) IR(KBr) , MK cm'1: 3448, 3334, 1725, 1656, 1596, 1566, 1518 10 Esimerkki 7 (-)-5-amino-7-[3-(S)-amino-l-pyrrolidinyyli]- 6,8-difluori-1-(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)—4-okso—l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (18a):

Viisi millilitraa trifluorietikkahappoa jäähdy-15 tettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 230 mg 3-(S)-i- t-butoksikarbonyyli-3- (t-butoksikarbonyyliamino) pyrro-lidiinia, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 25 ml:aan aseto-20 nitriiliä. Liuokseen lisättiin 160 mg karboksyylihappoa (17a) ja 400 mg trietyyliamiinia, ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 12 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin 1 M vetykloridihappoa. Sen jälkeen, kun seosta oli pes-. 25 ty trikloorimetaanilla, vesikerroksen pH säädettiin arvoon 12 käyttäen 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta, minkä jälkeen pestiin trikloorimetaanilla. sitten vesi-kerroksen pH säädettiin 7,6:een vetykloridihapolla, minkä jälkeen uutettiin trikloorimetaanilla. Uute kui-30 vattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös uudelleenkiteytettiin : ammoniakin vesiliuos-etanoliseoksesta, jolloin saatiin 128 mg otsikon mukaista yhdistettä (18a) värittöminä kiteinä.

• ' 40 96947

Sulamispiste: 224 - 230 °C

[a]D: -4,72° (c = 0,888, 0,1 M NaOH:n vesiliuos) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C17H17F3N403:

Laskettu (%): C 53,40; H 4,48; N 14,65 5 Saatu (%): c 53,28; H 4,08; N 14,54 1H-NMR (NaOD) δ ppm: 1,47-1,58 (1H, m), 1,67- 1,78 (2H, m), 2,07-2,11 (1H, m), 3,28-3,44 (1H, m), 3,48-3,52 (1H, m), 3,60-3,66 (1H, m), 3,71-3,78 (2H, m), 4,92 (1H, dm, J = 72 Hz), 8,18 (1H, s).

10 IR(KBr) , ^ cm'1: 3400, 1728, 1635, 1605, 1518, 1433, 1350, 1308

Esimerkki 8 (+)-5-amino-7-[3-(S)-amino-l-pyrrolidinyyli]- 6,8-difluori-1—(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)-4-15 okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (18b):

Viisi millilitraa trifluorietikkahappoa jäähdytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 230 mg 3-(S)-l-t-butoksikarbonyyli-3- (t-butoksikarbonyyliamino) pyrro-lidiinia, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpöti-20 lassa 30 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 25 ml:aan aseto-nitriiliä. Liuokseen lisättiin 160 mg karboksyylihappoa (17b) ja 400 mg trietyyliamiinia, ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 12 tuntia. Reaktioseos haihdu-25 tettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin IM vetykloridihappoa. Sen jälkeen, kun seosta oli pesty trikloorimetaanilla, vesikerroksen pH säädettiin arvoon 12 käyttäen 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta, minkä jälkeen pestiin trikloorimetaanilla. Sitten vesi-30 kerroksen pH säädettiin 7,6:een vetykloridihapolla, minkä jälkeen uutettiin tri-kloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös uudelleenkiteytettiin ammoniakin vesiliuos-etanoliseoksesta, jolloin saatiin 35 68 mg otsikon mukaista yhdistettä (18b) värittöminä ki teinä.

41 96947

Sulamispiste: 214 - 217 °C

[α]0: +31,3° (c = 0,268, 0,1 M NaOH:n vesiliuos) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C17H17F3N4Cy 1/2H20: Laskettu (%): C 52,18; H 4,64; N 14,32 5 Saatu (%): C 52,22; H 4,93; N 14,23 1H-NMR (NaOD) δ ppm: 1,48-1,58 (1H, m), 1,66- 1,79 (2H, m), 2,06-2,12 (1H, m), 3,29-3,32 (1H, m), 3,48-3,52 (1H, m), 3,60-3,64 (1H, m), 3,70-3,78 (2H, m), 4,92 (1H, dm, J = 72 Hz), 8,19 (1H, s) 10 IR(KBr), ^ cm'1: 3490, 1716, 1635, 1521, 1437, 1356, 1305

Viite-esimerkki 26

Optisesti aktiivisen 7-araino-5-atsaspiro[2.4]-heptaanin synteesi 15 1) 5-[(1R)-fenyylietyyli]-4,7-diokso-5-atsaspiro- [2.4]heptaani (19) 10,4 g:aan etyyliasetoasetaattia lisättiin 15 g 1,2-dibromietaania, 23 g kaliumkarbonaattia ja 150 ml Ν,Ν-dimetyyliformamidia (DMF), ja seosta sekoitettiin 20 huoneen lämpötilassa kaksi päivää. Kaikki liukenematon aine poistettiin suodattamalla, ja suodos haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännökseen lisättiin vettä, ja seosta uutettiin trikloorimetaanilla. Trikloorimetaani-uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja . 25 liuotin poistettiin alipaineessa. Saatu vaalean keltai nen öljymäinen aine tislattiin alipaineessa, jolloin saatiin 7,5 g etyyli-l-asetyyli-l-syklopropaanikarbok-sylaattia, jonka kiehumispiste oli 70 - 71 °C / 266 -400 Pa.

30 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,30 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,48 (4H, S), 2,49 (3H, S), 4,24 (2H, q, J = 7 Hz) 35,7 g yllä saatua yhdistettä liuotettiin 200 ml:aan etanolia, liuokseen lisättiin pisaroittain 40 g bromia huoneen lämpötilassa, samalla sekoittaen. Kun 35 sekoitusta oli jatkettu huoneen lämpötilassa kaksi tun- 42 96947 tia, bromiylimäärä ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin etyyli-l-bromiasetyyli-l-syklopropaani-karboksylaattia, joka sitten, ilman lisäpuhdistusta, liuotettiin 200 ml:aan etanolia. Liuokseen lisättiin 5 samanaikaisesti pisaroittain 33 g R-(+)-1-fenyylietyy- liamiinia ja 27 g trietyyliamiinia yhden tunnin aikana, samalla sekoittaen jäillä jäähdytystä käyttäen. Lisäyksen jälkeen reaktioseoksen lämpötila nostettiin huoneen lämpötilaan, ja sekoitusta jatkettiin huoneen lämpöti-10 lassa kaksi päivää. Kaikki liukenematon aine poistet tiin suodattamalla, ja etanoli poistettiin suodoksesta alipaineessa. Jäännös liuotettiin 300 ml:aan etyyliasetaattia, ja liuosta pestiin peräkkäin 1 M vetykloridi-hapolla, kylläisellä natriumvetykarbonaatin vesiliuok-15 sella ja kylläisellä natriumkloridin vesiliuoksella tässä järjestyksessä. Orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös vietiin 200 g:n piihappogeeliko-lonniin, jota eluoitiin 0 - 2-%:sella metanolipitoisel-20 la trikloorimetaanilla, jolloin saatiin otsikon mukai nen yhdiste (19) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 98 - 103 °C

1H-NMR (CDClj) S ppm: 1,62 (3H, d, J = 7,2 Hz), 3,5 (1H, d, J = 18 Hz), 3,9 (1H, d, J = 18 Hz), 5,8 25 (1H, g, J = 7,2 Hz), 7,36 (5H, s) 2) 5-[ (lR)-fenyylietyyli]-7-hydroksi-imino-4-okso- 5-atsaspiro[2.4]heptaani (20) 3,35 g:aan yhdistettä (19) lisättiin 1,6 g hyd-roksyyliamiinihydrokloridia, 2,3 g trietyyliamiinia ja 30 80 ml etanolia, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpöti lassa kaksi tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin trikloorimetaania. Seosta pestiin peräkkäin 10-% sitruunahapon vesiliuoksella ja kylläisellä natriumkloridin vesiliuoksella. Orgaaninen 35 kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla.

43 96947

Liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin 3,5 g otsikon mukaista yhdistettä (20) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 188 - 194 °C

1H-NMR (CDC13) S ppm: 1,2-1,4 (2H, m), 1,53 (3H, 5 d, J = 7,2 HZ & 2H, m), 3,8 (1H, d, J = 18 Hz), 4,16 (1H, d, J = 18 HZ), 5,63 (1H, q, J = 7,2 Hz), 7,32 (5H, s) 3) 7-amino-4-okso-5-[(1R)-fenyylietyyli]-5-atsa-spiro[2.4]heptaani (21a, 21b) 10 150 ml:aan metanolia lisättiin 3,5 g yhdistettä (20) ja 7,5 ml Raney-nikkeliä, ja katalyyttistä pelkistystä suoritettiin huoneen lämpötilassa 12 tuntia. Kun katalysaattori oli poistettu suodattamalla, liuotin poistettiin suodoksesta alipaineessa. Jäännös vietiin 15 100 g:n piihappogeelikolonniin eluoiden 5 % metanoli/ trikloorimetaaniliuotinseoksella, jolloin saatiin aikaisemmasta fraktiosta 1,0 g otsikon mukaista yhdistettä (21b) ja myöhemmästä fraktiosta 0,8 g otsikon mukaista yhdistettä (21a), kumpikin värittömänä öljymäi-20 senä aineena.

Yhdiste (21b): ’h-NMR (CDClj) 5 PPm: 0,8-1,4 (4H, m), 1,52 (3H, d, J - 7 Hz), 2,87 (1H, dd, J = 10 & 3 Hz), 3,3-3,9 (2H, m), 4,27 (2H, leveä s), 5,42 (1H, q, J = 7 Hz) , 25 7,29 (5H, S)

Yhdiste (21a): ’h-NMR (CDClj) S ppm: 0,6-1,3 (4H, m), 1,40 (2H, s), 1,53 (3H, d, J = 7,2 Hz), 2,99 (1H, dd, J = 12,8 & 7,2 Hz), 3,15-3,45 (2H, m), 5,52 (1H, q, J = 7,2 Hz), 30 7,30 (5H, s) 4) 7-amino-5-[(1R)-fenyylietyyli)-5-atsaspiro[2.4]-heptaani (22a, 22b) 50 ml:aan vedetöntä tetrahydrofuraania lisättiin 1,0 g yhdistettä (21b) ja 500 mg litiumalumiinihydri-35 diä, ja seosta palautusjäähdytettiin 17 tuntia. Jääh- 96947 44 dyttämisen jälkeen reaktioseokseen lisättiin peräkkäin 0,5 ml vettä, 0,5 ml 15-% natriumhydroksidin vesiliuosta ja 1,5 ml vettä tässä järjestyksessä, minkä jälkeen sekoitettiin hyvin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia.

5 Kaikki liukenematon aine poistettiin suodattamalla, ja pestiin perusteellisesti tetrahydrofuraanilla. Suodos ja pesuliuos yhdistettiin ja kuivattiin. Liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin 940 mg otsikon mukaista yhdistettä (22b) vaalean keltaisena öljymäise-10 nä aineena. Samalla tavalla saatiin 755 mg otsikon mu kaista yhdistettä (22a) 800 mg:sta yhdistettä (21a). Yhdiste (22b): ’H-NMR (CDC13) S ppm: 0,2-0,8 (4H, m), 1,35 (3H, d, J = 6,6 HZ), 1,6-2,0 (2H, leveä m), 2,2-3,1 (4H, m), 15 3,24 (1H, q, J - 6,6 Hz), 3,5-3,9 (1H, m), 7,28 (5H, leveä s)

Yhdiste (22a): ^-NMR (CDClj) δ ppm: 0,3-0,9 (4H, m), 1,36 (3H, d, J = 6,7 Hz), 1,8-2,2 (2H, m), 2,2-3,2 (4H, m), 3,24 20 (1H, q, J = 6,7 Hz), 3,6-3,9 (1H, m), 7,28 (5H, leveä S) 5) 7-(t-butoksikarbonyyliamino)-5-[(1R)-fenyyli- etyyli]-5-atsaspiro[2.4]heptaani (23a, 23b) 20 ml: aan vedetöntä tetrahydrof uraania lisättiin 25 764 mg yhdistettä (22b) ja 1,3 g Boc-ON:ää [Boc-ON; 2- (t-butoksikarbonyylioksi-imino]-2-fenyyliasetonitriili

CN

/

(CH3)3COCOON^ ja seosta sekoitettiin huo-30 \=J

neen lämpötilassa neljä tuntia. Reaktioseokseen lisättiin etyylisetaattia, ja seosta pestiin kahdesti 1 M natriumhydroksidin vesiliuoksella, minkä jälkeen uutettiin 10-% sitruunahapon vesiliuoksella. Vesipitoista 35 uutetta pestiin kerran etyyliasetaatilla, ja vesiker- : . mU:i Bitti |Ί 1 (t 45 96947 rokseen lisättiin samalla jäähdyttäen 15-% natriumhyd-roksidin vesiliuosta niin, että se tulee emäksiseksi. Seosta uutettiin kolme kertaa trikloorimetaani11a, ja orgaanista kerrosta pestiin kylläisellä natriumkloridin 5 vesiliuoksella, ja sitten se kuivattiin. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jäännökselle suoritettiin pii-happogeelipylväskromatografointi (piihappogeeli: 20 g, eluentti: trikloorimetaani:metanoli = 20:1, 10:1), jolloin saatiin 690 g otsikon mukaista yhdistettä (23b). 10 Tämän yhdisteen annettiin seistä, jotta se kiteytyisi, minkä jälkeen pestiin n-heksaanilla. Otsikon mukainen yhdiste (23a) saatiin samalla tavalla.

Yhdiste (23b) (värittömiä kiteitä):

Sulamispiste: 103 - 105 °C

15 [a]0: -15,2° (c = 1,475, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) S ppm: 0,4-0,9 (4H, m), 1,36 (3H, d, J = 7,2 HZ), 1,44 (9H, s), 2,42 (2H, AB q, J = 10,2 Hz), 2,79 (2H, d, J - 5,6 Hz), 3,24 (1H, q, J = 7,2 Hz), 3,6-4,0 (1H, m), 4,6-5,1 (1H, leveä d), 7,28 (5H, 20 s)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C19H28N202:

Laskettu (%): C 72,12; H 8,92; N 8,85 Saatu (%): C 71,63; H 9,07; N 8,64

Yhdiste (23a) (värittömiä kiteitä):

25 Sulamispiste: 94 - 97 °C

[a]D: +47,6° (c = 0,89, trikloorimetaani)

1H-NMR (CDClj) S ppm: 0,4-0,9 (4H, m), 1,33 (3H, d, J = 6,6 Hz), 1,40 (9H, s), 2,29 (1H, d, J = 9 Hz) , 2,44 (1H, dd, J = 10,8 & 3,6 Hz), 2,77 (1H, d, J = 9 30 HZ), 2,88 (1H, dd, J = 10,8 & 5,3 Hz), 3,22 (1H, q, J

= 6,6 Hz), 3,6-3,9 (1H, m), 4,7-5,2 (1H, leveä d), 7,27 (5H, s)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C19H28N202:

Laskettu (%): C 72,12; H 8,92; N 8,85 35 Saatu (%): C 71,86; H 9,36; N 8,68 46 96947 6) 7-t-butoksikarbonyyliamino-5-atsaspiro [2.4] hep- taani (24a, 24b) 30 ml:aan etanolia lisättiin 650 mg yhdistettä (23b) ja 500 mg 50-% hydratoitua palladioitua hiiltä, 5 ja katalyyttinen pelkistys suoritettiin kuumentamalla 426 kPa:n paineessa. Kuuden tunnin kuluttua katalysaattori poistettiin suodattamalla, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Öljyraäiseen jäännökseen lisättiin etyyliasetaattia, minkä jälkeen uutettiin kahdesti 10-% sit-10 ruunahapon vesiliuoksella. Vesipitoinen uute tehtiin emäksiseksi 15-% natriumhydroksidin vesiliuoksella, ja sitten uutettiin kolme kertaa trikloorimetaanilla. Tri-kloorimetaanikerrosta pestiin vedellä, ja se kuivattiin. Liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin 15 440 mg otsikon mukaista yhdistettä (24b) raakatuottee- na. Otsikon mukainen yhdiste (24a) saatiin samalla tavalla kuin yllä. Yhdisteiden (24b) ja (24a) NMR-spek-trit olivat keskenään täysin yhdenmukaiset.

Yhdiste (24) 20 ’h-NMR (CDClj) δ ppm: 0,4-1,0 (4H, m), 1,42 (9H, S) 2,71 (1H, d, J = 10,2 HZ), 2,92 (1H, dd, J = 10,8 & 3,6 Hz), 3,01 (1H, d, J = 10,2 Hz), 3,33 (1H, dd, J = 10,8 & 5,4 Hz), 3,5-3,9 (1H, m), 5,0-5,4 (1H, leveä d)

Esimerkki 9 25 7-(7-t-butoksikarbonyyliamino-5-atsaspiro[2.4]- • heptan-5-yyli) -8-kloori-6-fluori-l-(l,2-cis-2-fluori- 1-syklopropyyli)-1,4-dihydro-4-oksokinoliini-3-karbok-syylihappo (25bb): 160 mg 8-kloori-6,7-difluori-l-(l,2-cis-2-fluo-30 ri-l-syklopropyyli)-1,4-dihydro-4-oksokinoliini-3-kar- boksyylihappoa (12b), 150 mg amiiniyhdistettä (24b) ja 0,5 ml trietyyliamiinia liuotettiin 0,6 ml:aan aseto-nitriiliä, ja liuosta kuumennettiin palautus jäähdyttäen viisi tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen kerättiin suodat-35 tamalla saostuneet värittömät kiteet. Emä liuoksen liuo- : > Utit ub im a : 47 96947 tin poistettiin alipaineessa, ja jäännös puhdistettiin preparatiivisella piihappogeeli-TLG:llä käyttäen kehi-tysliuottimena trikloorimetaani-metanoliseosta (tilavuussuhde 5:1) . Puhdistettu tuote ja yllä saadut kiteet 5 yhdistettiin, jolloin saatiin 255 mg otsikon mukaista tuotetta (25bb).

Sulamispiste: 213 - 218 °C

1H-NMR (CDClj) S ppm: 0,6-1,0 (6H, m), 1,45 (9H, s), 7,99 (1H, d, J * 13,1 Hz), 8,74, 8,78 (kumpikin 10 0,5H, S)

Esimerkki 10 (-)-7-(7-amino-5-atsaspiro[2.4]heptan-5-yyli)- 8-kloori-6-fluori-1-(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyy-li)-1,4-dihydro-4-oksokinoliini-3-karboksyylihappo 15 (26bb): 255 mg:aan esimerkin 9 mukaan saatua Boc-yhdis-tettä (25bb) lisättiin 0,5 ml anisolia ja 10 ml tri-fluorietikkahappoa jäähdyttäen jäillä. Kun seos oli lämminnyt huoneen lämpötilaan, sitä sekoitettiin 30 20 minuuttia. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja jään nökseen lisättiin 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta säätäen pH välille 11 - 12. Alkalista vesiliuosta pestiin kaksi kertaa trikloorimetaanilla. Vesikerroksen pH säädettiin noin 7:ään väkevällä vetykloridihapolla 25 ja 10-% sitruunahapon vesiliuoksella, ja sitä uutettiin kolme kertaa trikloorimetaanilla. Uutetta pestiin vedellä ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa, ja saatu kiinteä aine uudelleenkiteytettiin etanolin ja väkevän ammoniakin 30 seoksesta, jolloin saatiin 142 mg otsikon mukaista yh distettä (26bb) värittöminä kiteinä.

• Sulamispiste: 127 - 140 °C

[α]„: -199,2° (c = 0,24, 1 M NaOH) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C19H18N303F2C1 · 1/4H20: 35 Laskettu (%): C 55,08; H 4,50; N 10,14

Saatu (%): C 54,86; H 4,80; N 10,03 48 96947

Esimerkki 11

Yhdisteen (26ab) synteesi

Yhdiste (26ab) saatiin yhdisteestä (12a) ja yhdisteestä (24b) samalla tavalla, kuin selitettiin esi-5 merkeissä 9 ja 10.

Sulamispiste: 123 - 128 °C (hajoaa) [a]0: +21,5° (C = 0,195, 1 M NaOH) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C19H18N303F2C1 · 1/2H20: Laskettu (%): C 54,49; H 4,57; N 10,03 10 Saatu (%): C 54,33; H 4,73; N 9,81

Esimerkki 12

Yhdisteen (26a) synteesi

Yhdiste (26a) syntetisoitiin yhdisteestä (12b) ja yhdisteestä (24a) samalla tavalla, kuin selitettiin 15 esimerkeissä 9 ja 10.

Sulamispiste: 121 - 127 °C (hajoaa) [α]„: -21,1° (c *» 0,275, 1 M NaOH) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C19H18N3°3F2C11/2H20: Laskettu (%): C 54,49; H 4,57; N 10,03 20 Saatu (%): C 54,77; H 4,43; N 9,86

Esimerkki 13

Yhdisteen (26aa) synteesi

Yhdiste (26aa) syntetisoitiin yhdisteestä (12a) ja yhdisteestä (24a) samalla tavalla, kuin esimerkeissä 25 9 ja 10.

Sulamispiste: 126 - 145 ®C (hajoaa) [a]D: +186,6° (C * 0,228, 1 M NaOH) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C19H18N303F2C1 · 3/4H20: Laskettu (%): C 53,91; H 4,64; N 9,93 30 Saatu (%): C 53,80; H 4,47; N 9,82

Il Ittt MU Cl i lt . .

« 49 96947

Viite-esimerkki 27 (-) -etyyli-8-kloori-7-fluori-l-(l,2-cis-2-f luo-ri-l-syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydro-l,8-naftyridii-ni-3-karboksylaatti (29a) 5 Seosta, jossa oli 1 g etyyli-2,6-dikloori-5- fluorinikotinoyyliasetaattia (27), 3 ml etyyliortofor-miaattia ja 6 ml etikkahappoanhydridiä, kuumennettiin 120 °C:ssa yksi tunti samalla sekoittaen. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotet-10 tiin 10 mitään dikloorimetaania.

Kymmenen millilitraa tr if luorietikkahappoa jäähdytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 750 mg (+)-cis-1- (t-butoksikarbonyyliamino) -2-f luorisyklopropaania (4a). Liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 mi-15 nuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin alipai neessa. Jäännös suspendoitiin 20 mitään dikloorimetaania, ja siihen lisättiin 2,0 g trietyyliamiinia jäillä jäähdyttäen. Suspensioon lisättiin vielä yllä valmistettu dikloorimetaaniliuos, minkä jälkeen sekoitettiin 20 huoneen lämpötilassa 30 minuuttia.

Reaktioseosta pestiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännökselle suoritettiin pylväskromato-grafointi käyttäen 50 g:aa piihappogeeliä ja eluenttina 25 trikloorimetaania, jolloin saatiin 1,29 g etyyli-2- (2,6-dikloori-5-fluorinikotinoyyli)-3-(1,2-cis-2-fluo-ri-l-syklopropyyli)akrylaattia (28a) värittömänä öljynä.

1H-NMR (CDClj) S ppm: 1,06 (3H, t, J = 7 Hz) , 30 1,1-1,6 (2H, m), 2,86-3,18 (1H, m), 4,05 (2H, q, J = 7 HZ), 4,78 (1H, dm, J = 63 Hz), 7,36 (1H, d, J = 7 Hz), 8,31 (1H, d, J = 14 HZ) 1,29 g yhdistettä (28a) liuotettiin 25 ml:aan vedetöntä dioksaania, ja liuokseen lisättiin 300 mg 60-35 % natriumhydridiä, minkä jälkeen sekoitettiin yksi tun- • 50 96947 ti. Reaktioseos väkevöitiin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin 0,1 M vetykloridihappoa. Saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, ja niitä pestiin peräkkäin vedellä ja dietyylieetterillä, jolloin saatiin 860 5 mg otsikon mukaista yhdistettä (29a) värittöminä kitei nä.

Sulamispiste: 184 - 185 °C

[a]D: -1,26° (c = 0,793, trikloorimetaani)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C^H^FjNjOj: 10 Laskettu (%): C 51,16; H 3,37; N 8,52

Saatu (%): C 51,12; H 3,26; N 8,52 1H-NMR (CDClj) S ppm: 1,41 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,4-1,84 (2H, m), 3,50 (1H, m), 4,40 (2H, q, J = 7 Hz), 5,02 (1H, dm, J = 65 HZ), 8,43 (1H, d, J = 7 Hz), 8,66 15 (1H, S)

Viite-esimerkki 28 (+) -etyyli-8-kloori-7-fluori-l-(l,2-cis-2-fluo-ri-l-syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydro-l,8-naftyridii-ni-3-karboksylaatti (29b) 20 Seosta, jossa oli 1,0 g etyyli-2,6-dikloori-5- fluorinikotinoyyliasetaattia (27), 3 ml etyyliortofor-miaattia ja 6 ml etikkahappoanhydridiä, kuumennettiin 120 °C:ssa 1,5 tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotet-25 tiin 10 ml:aan dikloorimetaania.

• Kymmenen millilitraa tr if luorietikkahappoa jääh dytettiin jäillä, ja siihen liuotettiin 750 mg (-)-cis-1- (t-butoksikarbonyyliamino) -2-f luorisyklopropaania (4b). Liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 mi-30 nuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin alipai neessa. Jäännös suspendoitiin 30 ml:aan dikloorimetaania, ja siihen lisättiin 2,0 g trietyyliamiinia jäillä jäähdyttäen. Suspensioon lisättiin vielä yllä valmistettu dikloorimetaaniliuos, ja seosta sekoitettiin huo-35 neen lämpötilassa 30 minuuttia.

51 96947

Reaktioseosta pestiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, ja jäännös puhdistettiin pylväskromatografisesti käyttäen 50 g:aa piihappogeeliä ja eluenttina trikloorime-5 taania, jolloin saatiin 1,29 g etyyli-2-(2,6-dikloori-5 - f luor in ikot inoyy li) -3-(l,2-cis-2-fluori-l-syklopro-pyyli)akrylaattia (28b) värittömänä öljynä.

Yhdisteen (28b) (1,29 g) annettiin reagoida samalla tavalla kuin yhdisteen (28a), jolloin saatiin 936 10 mg otsikon mukaista yhdistettä (29b) värittöminä kitei nä.

Sulamispiste: 183 - 185 °C [a]D: +1,12° (c * 1,07, trikloorimetaani) Alkuaineanalyysi yhdisteelle CiAiWV 15 Laskettu (%): C 51,16; H 3,37; N 8,52

Saatu (%): C 51,39; H 3,24; N 8,49

Viite-esimerkki 29 (-)-8-kloori-7-fluori-l-(l,2-cis-2-fluori-l-syk-lopropyyli)-4-okso-l,4-dihydro-l,8-naftyridiini-3-kar-20 boksyylihappo (30a)

Seosta, jossa oli 800 mg yhdistettä (29a) ja 15 ml väkevää vetykloridihappoa, kuumennettiin 100 °C:ssa 1,5 tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseokseen lisättiin vettä, ja saostuneet kiteet kerättiin suodattamal-25 la, jolloin saatiin 610 mg otsikon mukaista yhdistettä (30a) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 215 - 219 °C

[cr]D: -20,65° (c = 0,910, trikloorimetaani)

Viite-esimerkki 30 30 (+) -8-kloori-7-fluori-1-(1,2-cis-2-fluori-l-syk- i lopropyyli) -4-okso-l, 4-dihydro-l, 8-naf tyridiini-3-kar- boksyylihappo (30b)

Seosta, jossa oli 870 mg yhdistettä (29b) ja 20 ml väkevää vetykloridihappoa, kuumennettiin 100 °C:ssa 35 kaksi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseokseen lisät- 52 96947 ti in vettä, ja saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, jolloin saatiin 715 mg otsikon mukaista yhdistettä (30b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 218 - 220 °C

5 [a]D: +22,34° (c = 0,555, trikloorimetaani)

Esimerkki 14 7-[4-(S)-amino-2-(S)-metyyli-l-pyrrolidinyyli]- 6-f luori-1- (1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)-4-okso- 1,4-dihydro-1,8-naftyridiini-3-karboksyy1ihappo (31a) 10 300 mg 4-(S)-amino-l-t-butoksikarbonyyli-2-(S)- metyylipyrrolidiinia (32) (vrt. Terry Ronson et ai., J. Med. Chem., Voi 31 (1988) s. 1598). liuotettiin 15 ml:-aan trifluorietikkahappoa, ja liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia, minkä jälkeen se haih-15 dutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös liuotettiin 20 ml:aan asetonitriiliä, ja liuokseen lisättiin 150 mg yhdistettä (30a) ja 2 ml trietyyliamiinia, minkä jälkeen palautusjäähdytettiin 30 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännökseen li-20 sättiin vetykloridihappoa. Seosta pestiin trikloorime- taanilla. Vesikerroksen pH säädettiin arvoon 13 nat-riumhydroksidilla, ja sitä pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerroksen pH säädettiin 7,5:een, ja sitä uutettiin trikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros kuivattiin ve-25 dettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin ' alipaineessa. Uudelleenkiteyttämällä jäännös ammoniakin vesiliuos-etanoliseoksesta saatiin 150 mg otsikon mukaista yhdistettä (31a) värittöminä kiteinä. Sulamispiste: 255 - 258 °C 30 [a]„: -14,52° (c = 0,413, 0,1 M NaOH)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle Ci7Hi8F2N,03-1/4H20: Laskettu (%): C 55,36; H 5,06; N 15,19 Saatu (%): C 55,09; H 5,40; N 15,04 » SM I luu I IIM ' „ 96947

Esimerkki 15 (-)-7-[3-(R)-[1-(S)-aminoetyyli]-l-pyrrolidinyy-li] -8-kloori-6-f luori-1- (1,2-cis-2-fluorisyklopropyy-li) -4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo 5 (34b)

Seosta, jossa oli 159 mg (-)-8-kloori-6,7-di-f luori-l- (1,2-cis-2-f luori-l-syklopropyyli) -4-okso- l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappoa (12b), 160 mg 3“ (R) - [ 1- (S) -t-butoksikarbonyyliaminoetyyli]pyrrolidii-10 nia (vrt. JP-A-61-311992), 400 mg trietyyliamiinia ja 20 ml asetonitriiliä, kuumennettiin palautus jäähdyttäen 12 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin trikloorimetaaniin. Orgaanista liuosta pestiin peräkkäin 10-% sitruunahapon vesiliuok-15 sella ja vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä nat- riumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, ja jäännös uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatti-isopropyylieette-riseoksesta, jolloin saatiin 220 mg (-)-7-[3-(R)-[1- (S)-t-butoksikarbonyyliaminoetyyli]-l-pyrrolidinyyli]-20 8-kloori-6-fluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)- 4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappoa (33b). Sulamispiste: 189 - 193 °C [a]D: -205° (c = 0,985, trikloorimetaani) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C24H28C1F2N305: 25 Laskettu (%): C 56,31; H 5,51; N 8,21 * Saatu (%): C 56,16; H 5,48; N 8,21 200 mg yhdistettä (33b) liuotettiin 10 ml:aan trifluorietikkahappoa, ja liuosta sekoitettiin 30 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipainees-30 sa, ja jäännös liuotettiin 1 M natriumhydroksidin vesi- . liuokseen, ja pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerrok- sen pH säädettiin 7,4:ään vetykloridihapolla, ja sitä uutettiin trikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin 35 haihdutettiin. Jäännös uudelleenkiteytettiin ammoniakin 54 96947 vesiliuoksen ja etanolin seoksesta, jolloin saatiin 140 mg otsikon mukaista yhdistettä (34b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 204 - 207 °C 5 (<*]„: -160,0° (c = 0,605, 0,1 M NaOH)

Alkuaineanalyysi yhdisteelle C19H20ClF2N3O3 H20: Laskettu (%): C 53,09; H 5,38; N 9,77 Saatu (%): C 53,20; H 5,17; N 9,66

Viite-esimerkki 31 10 Etyyli-2-(3-asetoksi-2,4,5-trifluoribent soyy1 i) - 3—(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)akrylaatti (36b)

Seosta, jossa oli 1,0 g etyyli-3-asetoksi-2,4,5-trifluoribentsoyyliasetaattia (35) (vrt. JP-A-87-175485), 6 ml etyyliortoformiaattia ja 6 ml etikka-15 happoanhydridiä, kuumennettiin 120 °C:ssa kolme tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan dikloo-rimetaania.

467 mg (-)-cis-l-t-butoksikarbonyyliamino-2-20 fluorisyklopropaania (4b) liuotettiin 5 ml:aan trifluo- rietikkahappoa, ja liuosta sekoitettiin 20 minuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös suspendoitiin 20 ml:aan dikloorimetaania, ja siihen lisättiin pisaroittain 5 ml dikloorimetaani-25 liuosta, joka sisälsi 500 mg trietyyliamiinia, jäillä jäähdyttäen, minkä jälkeen sekoitettiin 10 minuuttia. Liuokseen lisättiin yllä valmistettu dikloorimetaani-liuos, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 16 tuntia. Reaktioseosta pestiin peräkkäin 10-% sitruuna-30 hapon vesiliuoksella ja vedellä. Orgaaninen kerros kui- ; vattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, minkä jälkeen l • haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin 1,25 g ot sikon mukaista yhdistettä (36b).

55 ^6947

Viite-esimerkki 32 (-)-etyyli-6,7-difluori-l-(1,2-cis-2-fluori-1-syklopropyyli) -8-metoksi-4-okso-l,4-dihydrokinoliini- 3-karboksylaatti (37b) 5 1,25 g yhdistettä (36b) liuotettiin 40 ml:aan dioksaania, ja siihen lisättiin 440 mg kaliumkarbonaattia ja 10 ml vettä, minkä jälkeen sekoitettiin huoneen lämpötilassa 19 tuntia. Reaktioseos neutraloitiin vety-kloridihapolla, väkevöitiin alipaineessa, ja sitä 10 uutettiin trikloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettö mällä natriumsulfaatilla, ja liuotin poistettiin alipaineessa. Jäännös liuotettiin 40 ml:aan vedetöntä dioksaania, ja siihen lisättiin 300 mg 60-% natriumhydri-diä ja 1 ml etyylijodidia, minkä jälkeen sekoitettiin 15 huoneen lämpötilassa 24 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin alipaineessa, ja jäännöstä uutettiin trikloorimetaanilla, pestiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin. Jäännös uudel-leenkiteytettiin isopropyylieetteristä, jolloin saatiin 20 235 mg otsikon mukaista yhdistettä (37b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 163 - 164 °C

[a]D: -22,9° (c = 0,490, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDC13) δ ppm: 1,40 (3H, t, J = 7 Hz), 25 1,3-1,8 (2H, m), 3,7-4,0 (1H, m), 4,10 (3H, d, J = 2

Hz), 4,38 (2H, q, J = 7 Hz), 4,85 (1H, dm, J = 63 Hz), 8,02 (1H, dd, J = 9 Hz & 8,5 Hz), 8,55 (1H, s) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C16HuF3N04:

Laskettu (%): C 56,31; H 4,13; N 4,10 30 Saatu (%): C 56,62; H 4,18; N 4,11

Viite-esimerkki 33-1 (±)-cis-4-amino-l-bentsyyli-3-metyyli-2-oksopyr-rolidiini (45)

Seosta, jossa oli 5,13 g etyyli-l-bentsyyli-3-35 metyyli-2-okso-3-pyrrolidiinikarboksylaattia (42, vrt.

56 96947 JP-A-62-4284), 40 ml 50-% etanolia ja 2 g natriumhyd-roksidia, sekoitettiin huoneen lämpötilassa 42 tuntia. Reaktioseokseen lisättiin 100 ml vettä, ja seosta pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerros neutraloitiin ve-5 tykloridihapolla, ja sitä uutettiin etyyliasetaatilla.

Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 3,40 g (±)-l-bent-syyli-2-okso-3-pyrrolidiinikarboksyylihappoa (43) värittöminä kiteinä.

10 Yhdiste (43) (3,40 g), 4,45 g difenyylifosforyy- liatsidia, 1,9 g trietyyliamiinia ja 50 ml t-butyylial-koholia sekoitettiin, ja seosta kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 12 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin trikloorimetaaniin. 15 Liuosta pestiin peräkkäin 10-% sitruunahapon vesiliuok sella, 2-% natriumhydroksidin vesiliuoksella ja vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, ja jäännös puhdistettiin silika-geelipylväskromatografiällä käyttäen eluenttina tri-20 kloorimetaani-metanoliseosta (tilavuussuhde 97,5:2,5), jolloin saatiin 1,76 g (±)-cis-l-bentsyyli-4-t-butoksi-karbonyyliamino-3-metyyli-4-oksopyrrolidiinia (44) värittömänä öljynä.

1,76 g yhdistettä (44) liuotettiin 15 ml:aan 25 trifluorietikkahappoa. Tunnin kuluttua liuos väkevöi tiin alipaineessa. Jäännökseen lisättiin 100 ml vettä, ja seosta pestiin bentseenillä. Vesikerroksen pH säädettiin arvoon 12 natriumhydroksidilla, ja sitä uutettiin trikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros kuivattiin 30 vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin haihdutet- . tiin, jolloin saatiin otsikon mukainen yhdiste (45) värittömänä öljynä.

’h-NMR (CDClj) δ ppm: 1,25 (3H, d, J * 7 Hz), 1,44 (2H, s), 2,16 (1H, dt, J = 7Hz), 2,83 (1H, dd, J 35 = 6,7 HZ & 8 Hz), 3,14 (1H, m), 3,38 (3H, dd, J = 6,7

Hz & 8 Hz), 4,48 (2H, s), 7,28 (5H, s) 57 96947

Viite-esimerkki 33-2

Cis-4-amino-l-bentsyyli-3-metyyli-2-oksopyrroli-diinin (45) optinen resoluutio 4,17 g yhdistettä (45) ja 3,3 ml pyridiiniä 5 liuotettiin 40 ml:aan dikloorimetaania, ja siihen li sättiin pisaroittain liuosta, jossa oli 7,7 g (S)-N-p-tolueenisulfonyyliprolyylikloridia 50 ml:ssa dikloorimetaania, minkä jälkeen sekoitettiin neljä tuntia.

Reaktioseosta pestiin peräkkäin 1 M vetykloridi-10 hapolla, kylläisellä natriumvetykarbonaatin vesiliuok sella ja vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä nat-riumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin alipaineessa, ja isomeerien eristämiseksi jäännökselle suoritettiin pii-happogeelipylväskromatografointi käyttäen eluenttina 15 etyyliasetaattia. Kumpikin isomeereistä uudelleenkitey- tettiin etyyliasetaatista, jolloin saatiin 3,3 g ja 3,6 g cis-l-bentsyyli-3-metyyli-4-[(S)-N-p-tolueenisulfo-nyyliprolyyliamino] -2-oksopyrrolidiinia (46a) ja (46b), vastaavasti.

20 Yhdiste (46a):

Rf (piihappogeeli-TLC, etyyliasetaatti): 0,69 Sulamispiste: 162 °C

[a]D: -87,3° (c = 0,735, trikloorimetaani) Yhdiste (46b): . 25 Rf (piihappogeeli-TLC, etyyliasetaatti): 0,61

Sulamispiste: 175 - 177 eC

[a]D: -148,6° (c = 0,665, trikloorimetaani) Viite-esimerkki 33-3 (+) -cis-l-bentsyyli-3-t-butoksikarbonyyliamino-30 4-metyylipyrrolidiini (47a)

Seosta, jossa oli 3,23 g yhdistettä (46a) ja 50 ml väkevää vetykloridihappoa, kuumennettiin palautus-jäähdyttäen viisi tuntia, minkä jälkeen väkevöitiin alipaineessa. Jäännökseen lisättiin 1 M natriumhydrok-35 sidin vesiliuosta, ja liuosta uutettiin trikloorimetaa- 58 96947 nilla. Orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä nat-riumsulfaatilla, ja liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin 1,48 g yhdistettä (45a) värittömänä öljynä.

Tuote liuotettiin 10 ml:aan tetrahydrofuraania, 5 ja liuos lisättiin pisaroittain suspensioon, jossa oli 2,0 g litiumalumiinihydridiä 50 ml:ssa tetrahydrofuraania. Seosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 24 tuntia. Reaktioseokseen lisättiin pisaroittain 10 ml vettä jäähdyttäen jäillä, ja 30 minuutin sekoituksen jälkeen 10 kaikki liukenematon aine poistettiin suodattamalla.

Suodokseen lisättiin 1,92 g Boc-ON:ää, minkä jälkeen sekoitettiin 24 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin alipaineessa, ja jäännöstä uutettiin trikloorimetaanilla. Uutetta pestiin peräkkäin 5-% natriumhydroksidin vesi-15 liuoksella ja vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Sitten liuotin haihdutettiin.

Jäännös puhdistettiin silikageelipylväskromato-grafiällä käyttäen eluenttina trikloorimetaani-metano-liseosta (tilavuussuhde 1:0 - 9:1), jolloin saatiin 20 1,76 g kiteitä. Tuotteeseen lisättiin n-heksaania, ja seosta sekoitettiin, jolloin dl-yhdiste saostui. Kiteet kerättiin suodattamalla, ja suodos väkevöitiin. Tämä menettely toistettiin kahdesti. Suodatinkakusta saatiin sata milligrammaa dl-yhdistettä, ja emäliuoksesta saa-25 tiin 1,61 g otsikon mukaista optisesti aktiivista yh- distettä (47a).

Sulamispiste: 48 - 52 °C

[a]0: +27,2° (c = 2,33, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDC13) δ ppm: 1,07 (3H, d, J = 7 Hz) , 30 1,43 (9H, s), 1,78-2,02 (2H, m), 2,62 (2H, d, J = 5Hz), , 2,84-3,10 (1H, m), 3,55 (2H, s), 3,5-3,8 (1H, m), 4,8- 5,2 (1H, leveä), 7,23 (5H, s) i 59 96947

Viite-esimerkki 33-4 (-)-c is -1-bent syy 1 i - 3 -1-but oks ikar bonyy 1 i am ino- 4-metyylipyrrolidiini (47b)

Samalla tavalla kuin yhdisteen (47a) synteesis-5 sä, mutta lähtien 3,52 g:sta yhdistettä (46b), saatiin 1,72 g otsikon mukaista yhdistettä (47b).

Sulamispiste: 57 - 61 °C [ot]0: -31,21°

Viite-esimerkki 33-5 10 Cis-3-t-butoksikarbonyyliamino-4-metyylipyrroli- diini (39a, 39b)

Yhdiste (47a) (1,61 g), 1,5 g 5-% palladioitua hiiltä ja 80 ml etanolia sekoitettiin, ja katalyyttistä pelkistystä suoritettiin viisi tuntia säteilyttäen 15 seosta samalla infrapunalampulla vetykehässä 405 kPa:n paineessa. Reaktion jälkeen katalysaattori poistettiin suodattamalla, ja suodos väkevöitiin, jolloin saatiin 1,09 g raakatuotetta värittömänä öljynä. Seisoessaan tuote jähmettyi karbonaattina, joka käytettiin puhdis-20 tamatta.

Samalla tavalla kuin yhdisteen (39a) synteesissä saatiin 1,1 g yhdistettä (39b) värittömänä öljynä 1,70 g:sta yhdistettä (47b).

Viite-esimerkki 34 25 Etyyli-2-(2,4,5-trifluori-3-metyylibentsoyyli)- 3-(l,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)akrylaatti (50b)

Seosta, jossa oli 710 mg etyyli-2,4,5-trifluo-ri-3-metyylibentsoyyliasetaattia (valmistettu 2,4,5-trifluori-3-metyylibentsoehaposta (48), vrt. JP-A-62-30 215572), 6 ml etyyliortoformiaattia ja 6 ml etikkahap- poanhydridiä, kuumennettiin 120 °C:ssa kaksi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 10 ml:aan dikloo-rimetaania.

60 96947 580 mg (-)-cis-l-t-butoksikarbonyyliamino-2-fluorisyklopropaania (4b) liuotettiin 5 ml:aan trifluo-rietikkahappoa, ja liuosta sekoitettiin 30 minuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin alipaineessa.

5 Jäännös suspendoitiin 20 ml:aan dikloorimetaania, ja siihen lisättiin 700 mg trietyyliamiinia jäillä jäähdyttäen. 10 minuutin sekoituksen jälkeen siihen lisättiin yllä valmistettu dikloorimetaaniliuos, minkä jälkeen sen annettiin seistä yön yli. Reaktioseosta pes-10 tiin vedellä, ja se kuivattiin vedettömällä natrium- sulfaatilla. Liuotin haihdutettiin, ja jäännös kiteytettiin n-heksaanista, jolloin saatiin 787 mg otsikon mukaista yhdistettä (50b) vaalean keltaisina kiteinä.

Viite-esimerkki 35 15 (-)-etyyli-6,7-difluori-l-(l,2-cis-2-fluori-l- syklopropyyli) -8-metyyli-4-okso-l,4-dihydrokinoliini- 3-karboksylaatti (51b) 600 mg yhdistettä (50b) liuotettiin 20 ml:aan vedetöntä dioksaania, ja liuokseen lisättiin suspensio-20 ta, jossa pienessä määrässä vedetöntä dioksaania oli 100 mg 60-% natriumhydridiä, jota oli pesty kahdesti n-heksaanilla. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yksi tunti, ja siihen lisättiin 10 ml 10-% sitruunahapon vesiliuosta, minkä jälkeen väkevöitiin alipainees-25 sa. Saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, niitä pestiin peräkkäin vedellä, pienellä määrällä etanolia ja dietyylieetterillä, jolloin saatiin 480 mg otsikon mukaista yhdistettä (51b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 230 - 231 °C

30 [a]D: -80,0° (c = 0,350, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,40 (3H, t, J = 7 Hz), 1,1-1,7 (2H, m), 2,71 (3H, d, J = 3,3 Hz), 3,77-3,98 (1H, m), 4,38 (2H, q, J - 7 Hz), 4,85 (2H, dm, J = 64 HZ), 8,12 (1H, dd, J = 10 Hz), 8,54 (1H, d, J = 3 Hz) ei 96947

Viite-esimerkki 36 (-)-6,7-difluori-1-(i,2-cis-2-fluori-l-syklopro-pyyli) -8-metyyli-4-okso-l, 4-dihydrokinoliini-3-karbok-syylihappo (52b) 5 Seosta, jossa oli 480 mg esteriyhdistettä (51b) ja 10 ml väkevää vetykloridihappoa, kuumennettiin 120 °C:ssa 75 minuuttia samalla sekoittaen. Jäähdytyksen jälkeen kiteet kerättiin suodattamalla, ja niitä pestiin vedellä ja etanolilla, jolloin saatiin 380 mg ot-10 sikon mukaista yhdistettä (52b) värittöminä kiteinä.

Sulamispiste: 204 °C

[a]0: -60,0° (c = 0,100, trikloorimetaani) 1H-NMR (CDClj) δ ppm: 1,3-1,9 (2H, m), 2,80 (3H, d, J = 5,8 Hz), 4,1-4,4 (1H, m), 4,15 (1H, dm, J = 64 15 Hz), 8,17 (1H, dd, J = 16 Hz), 8,82 (1H, d, J = 4 Hz), 14,2 (1H, s)

Esimerkki 16 (-)-7-[3-(R) -(1-(S)-aminoetyy1i)-1-pyrrolidinyy-li]-6-fluori-1-(1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)-8-20 metyyli-4-okso-l, 4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo- hydrokloridi (54b)

Seosta, jossa oli 198 mg yhdistettä (52b), 350 mg 3-(R) —[1—(S)-t-butoksikarbonyyliaminoetyyli]pyrroli-diinia 5 ml dimetyylisulfoksidia ja 1,5 g trietyyli-25 amiinia, kuumennettiin lämpötilassa 110 - 120 °C viisi tuntia samalla sekoittaen. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös liuotettiin trikloorime-taaniin, ja liuosta pestiin 10-% sitruunahapon vesi-liuoksella ja sitten vedellä, ja se kuivattiin vedettö-30 mällä natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutettiin.

. . Jäännökselle suoritettiin preparatiivinen TLC

kehittäen liuotinseoksella, jossa oli trikloorimetaania ja metanolia (tilavuussuhde 95:5), jolloin saatiin 110 mg 7-[3-(R)-(1-(S)-t-butoksikarbonyyliaminoetyyli]pyr-35 rolidinyyli]-6,7-difluori-8-metyyli-4-dihydrokinoliini- 3-karboksyylihappoa (53b) vaalean keltaisena jauheena.

62 96947 1H-NMR (CDCI3) S ppm: 1,24 (3H, d, J = 7 Hz) , 1,45 (9H, S), 1,2-1,9 (2H, m) , 2,52 (3H, s) , 1,9-2,7 (3H, m), 3,2-4,2 (6H, m), 4,73 (1H, d, J = 8 Hz), 4,98 (1H, dm, J = 65 Hz), 7,77 (1H, d, J = 13 Hz), 8,70 (1H, 5 d, J = 3,5 Hz) 110 mg:aan yhdistettä (53b) lisättiin 5 ml väkevää vetykloridihappoa, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 10 minuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös uudelleenkiteytet-10 tiin etanoli-dietyylieetteriseoksesta, jolloin saatiin 62 mg otsikon mukaista yhdistettä (54b) keltaisina kiteinä.

Sulamispiste: 149 - 153 °C

[a]D: -34,4° (c = 0,168, 1 M HC1) 15 Esimerkki 17 5-amino-7-[7-amino-5-atsaspiro[2.4]heptan-5-yyli) -6,8-dif luori-l-(l, 2-cis-2-f luori-l-syklopropyy-li)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo (56b) 20 Seosta, jossa oli 100 mg (-)-5-amino-6,7,8-tri- f luori-1- (1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli) -4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappoa (17b), 100 mg 7- t-butoksikarbonyyliamino-5-atsaspiro[2.4]heptaania (24b), 300 mg trietyyliamiinia ja 20 ml asetonitrii-25 liä, kuumennettiin palautusjäähdyttäen 23 tuntia.

Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännös liuotettiin 100 ml:aan trikloorimetaania. Liuosta pestiin peräkkäin 10-% sitruunahapon vesiliuoksella ja vedellä. Orgaaninen kerros kuivattiin vedettö-30 mällä natriumsulfaatilla, ja liuotin haihdutettiin.

Jäännös uudelleenkiteytettiin asetonitriilistä, jolloin saatiin 120 mg 5-amino-7-[7-t-butoksikarbonyyliamino- 5-atsaspiro[2.4 ]heptan-5-yyli]-6,8-dif luori-1- (1,2-cis- 2-fluori-l-syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-35 3-karboksyylihappoa (55bb) keltaisina neulamaisina ki teinä .

63 96947

Sulamispiste: 250 - 253 °C

1H-NMR (CDClj) S ppm: 0,6-0,8 (2H, m), 0,8-1,0 (2H, m), 1,45 (9H, S), 1,3-1,8 (2H, m), 3,2-3,4 (1H, m), 3,6-3,9 (3H, m), 3,9-4,3 (2H, m), 4,85 (1H, dm, J 5 =63 Hz), 4,7-5,0 (1H, leveä), 8,51 (1H, s)

120 mg yhdistettä (55bb) liuotettiin 5 ml:aan trifluorietikkahappoa, ja liuosta sekoitettiin 30 minuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös liuotettiin vetykloridihappoon, ja 10 liuosta pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerroksen pH

säädettiin 7,4:ään, ja sitä uutettiin trikloorimetaanilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja liuotin haihdutettiin alipaineessa. Jäännös uudel-leenkiteytettiin ammoniakin vesiliuoksen ja etanolin 15 seoksesta, jolloin saatiin 65 mg otsikon mukaista yh distettä (56bb) keltaisina kiteinä.

Sulamispiste: 213 - 217 °C [a]D: -96,7° (c = 0,120, DMF)

Esimerkki 18 20 7-[4-(S)-amino-2-(S) -metyyli-l-pyrrolidinyyli]- 6-f luori-l- (1,2-cis-2-fluori-l-syklopropyyli)-4-okso- 1,4-dihydro-l,8-naftyridiini-3-karboksyylihappo (31b) 300 mg 4-(S)-amino-l-t-butoksikarbonyyli-2-(S)-metyylipyrrolidiinia (32) liuotettiin 15 ml:aan tri-25 fluorietikkahappoa, ja liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös liuotettiin 20 ml:-aan vedetöntä asetonitriiliä, ja liuokseen lisättiin 150 mg yhdistettä (30b) ja 2 ml trietyyliamiinia, minkä 30 jälkeen palautus jäähdytettiin 15 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, ja jäännökseen lisättiin 1 M vetykloridihappoa. Seosta pestiin trikloorimetaanilla. Vesikerros tehtiin emäksiseksi 1 M nat-riumhydroksidin vesiliuoksella, ja pestiin trikloorime-35 taanilla. Vesikerroksen pH säädettiin 7:ään, ja sitä 64 96947 uutettiin trikloorimetaanilla. Orgaaninen kerros kuivattiin, ja liuotin haihdutettiin. Jäännös uudelleenki-teytettiin ammoniakin vesiliuoksen ja etanolin seoksesta, jolloin saatiin 130 mg otsikon mukaista yhdistettä 5 (31b).

Sulamispiste: 247 - 255 °C (hajoaa) [a]„: +120° (c = 0,950, 1 M NaOH) Alkuaineanalyysi yhdisteelle C17Hi8F2N403 1/4H20: Laskettu (%): C 55,36; H 5,06; N 15,19 10 saatu (%): C 55,50; H 5,25; N 14,97

Esimerkki 19 5-amino-6,8-dif luori-1- (1,2-cis-2-f luori-l-syk-lopropyyli) -7-piperatsinyyli-4-oksokinoliini-3-karbok-syylihappo (57b) 15 Seosta, jossa oli 75 mg yhdistettä (17b) , 45 mg vedetöntä piperatsiinia 5 mlrssa asetonitriiliä, kuumennettiin palautusjäähdyttäen kaksi tuntia. Reaktio-seos haihdutettiin alipaineessa, ja jäännös uudelleen-kiteytettiin etanolista, jolloin saatiin 72 mg otsikon 20 mukaista yhdistettä (57b) keltaisina kiteinä.

Sulamispiste: 230 - 239 °C [a]D: +8,00° (C = 0,225, 1 M NaOH) Viite-esimerkki 37 6,7-dif luori-1- (1,2-cis-2-f luori-l-syklopropyy-25 li)-8-metoksi-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyy- lihappo-BF2-kelaatti (38b)

Seosta, jossa oli 230 mg esteriyhdistettä (37b) ja 5 ml 42-% boorifluorivetyhappoa, kuumennettiin 110 °C:ssa sekoittaen kaksi tuntia. Jäähdyttämisen jälkeen 30 saostuneet kiteet kerättiin suodattamalla, ja pestiin vedellä, jolloin saatiin 210 mg otsikon mukaisen yhdisteen värittömiä kiteitä.

Sulamispiste: 261 - 271 °C

Ci s-3-1-butoks ikarbonyy1iamino-4-metyylipyrroli-35 diinin (39a) ja kelaattiyhdisteen (38b) reaktiolla saa- 65 96947 daan 7-(cis-3-amino-4-metyylipyrrolidinyyli)-6-fluori- 8-metoksi-4-okso-l, 4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihap-poa (40ba). Ja lisäksi amiiniyhdisteen (24b) ja kelaat-tiyhdisteen (38b) reaktiolla saadaan 7-(7-amino-5-atsa-5 spiro [ 2.4 ]heptan-5-yyli) -6-f luori-8-metoksi-4-okso-l, 4- dihydrokinoliini-3-karboksyylihappoa (41bb). 1 · 66 96947 o en o o en ' ^ — ' *5 —· r> -( ·— cm ero ’ - ^ <a «oocdooooo o X_ ^ V V V ____ —--^ 1—I S —1—1—1—(_^H—,Ξ ·“ 'n ^ k. v. ·» ^ JD »s. ts. k k v k. k v.

^°°°οοοοο coooocdooo c>

VVVVVVV ^VVVVVVV

_, C3 CD CD CD CD

—, ^ —' ~1 —1 —i —i —I —1 —i Cl -1 —. —( —i 20C:,CSC>0<=0C3 U- CD CD CD^ CD CD^ CD^ o' o"

vvvvvvv 1/5 v V VV

CD o ,’—,^H·—'»—1<DJ -1 —1 -1 —1 .—< ,—I —, —1 ™ _> 1- 1- Ί — —· -Q — V. -i d «s. v. ~ i 2°0000000 voooooooo

VVVVVVV ” V V V V V V V

. _, _„ _. O CD CD O CD OD

^ ·—'^—h<—i—ie>i —< ^-« .—· e-^i .—< <—i «r-j <r-D

^aCD°CDCDCDCDCD —4 0 θ’ CD CD1’’ O1' O1' θ' θ'

VVVVVVV ” v V V

. _ O O CD CD O O CO

e —t-i-i--,--,—,—,^ —(-ICICICI—IC-JC- 5° 1- ·-----·- ro

Jg ^<=>CDCDCDCDCDCDCD —ICDCDCDCDCDCDCDCD

H VVVVVVV ” V V

^ ® O 03 CTD O CD CD

I—I '-l·—<-1-1-1»-,Ot~ -O -1 —( —I Cl —( —1—Id

^ ** ^ ^11 ~ ^ 1 ^ ^ ^ ^ Jg ®5QOOOOOOO CDOOOOOOOO

VV VV ~ V V V VV

w _________._._ 0

-P

3 ° cd 0¾ o cd en r^. oo cd en

Λί ^^CNlCD^H^HCDiri COi—».-««—«eM<-H^HC>ICD

•H JS — -—1·1- -o

« (¾ CnOOOOCDOO—^ COOCDC5CDCDCDCDCD

> w v v v v v c Q)-------------------

G

O ” ” M ” ”

^-,2 OD O CID

‘d ω 1=3 ^ — 0-1 Q) cd ro· -i o —( G-P —1 CD Cl o JJ —1 O Cl o

H M '—I O —H —( LfD CD u) —(0—1—1 LT3C-D

-P H o—(CUC^ CO CD ,,_| CD —i Cl Cl CO CD

GO 40 CD CO LTD f— r— CO CD CD LO 5—1 < -G 2- o-C M eo - ο_-< >H _ OW3-- - L, OM·· , 3 c ro ro o LO -o c ro ro od (Λ o / = 1 03 «rt «rt O —< V) / 7H - 03 trt «rt CD —'1/3 ϋ /|^(ΜϋΟθΝ·σ·ι_ / —1 (/3 O O O Cl Ό ·—· S H ^ T ΪΪ c c ~' JJ z —1 «rt e: c — — 3 L, «_ o> —(.-1. ero -P L- 03 —i ·— . o ro —I m - ro o bo t>0 t/3 i_ u o - roobobocrti-o 3 OJ Ji!? — ??3<L,<U P-B01-333C3C3 S rj—•^«t-i-oj-oro aJ—,_ ro «_ t_ 03 -o ro PJ T^~13E030>t-·—(Mi 1)—13E 03 03L- --.0-1 M Ti P > ro ro 3 cl -P o > ro ro 3 e.

™«-> · ro 03 Aio · ro cj ® · «- · · i_ rt .u·· «-

• P 03 M M · · U ffl · L. 03 «rt «rt . · 4-J

ttia-t/Dcuo-ont/Dt/D ujo-coo-o-toeot^ 67 96947

REAKTIOKAAVIOT

Ph

F COOH

k-yi -- f CONH --^ hVh *k~7l* 1 hX/" 2a,2b 4_F1 __ F NHBoc hV^h tei* 3a, 3b 4a, 4b FOr^cooa —- ÄCC -- f"Ns^f nh f 5a, 5b h^h* fWXj. fWp -- h\7h *1!?^* 6a,6b ^ 7a,7b o o

FY^VV00H F-^v'S'COOH

r»w, —-,~X0F

kL ^ s tee 8a,8b 9a,9b 68 96947 f^^vJLcozb YrY00Et vxv0000 Äx —FVF ^F Wj ° Wh* *k^H* 10a,10b 11a, 11b o o

F^^^VCOOH F^^Tv^SrCOOH

f-QO f - ^XX/ α ta* X α ta* 12a-12b 13a,13b kl_ n N02 0 c 5?2jl m c* FV^VAVCOOEt

F^SrN^'c°2Et __ L Π T

Fft F VF ^ " ^ *XF* ηΧ/Η 14a,14b N02 O NH2 o

FvVvC00Et Fv^kXX-COOEt “ W, — pW, --

F *k/i* F

15a,15b h^h 16a_16b NH2 o 0

fX^V-cooh F rY^ifCOOH

pWp -- oWp

F tar «V

17a,17b 18a,18b 69 96947 CH3COCH2COOEt -► OtaCOCCOOEt -BrCH2CQCC00Et

..0 Λ xN'VQH

_ CH3 JU« j<H

<^0)iCHNH2 H3C"^ H3C 1^1 19 20 <K/NH2 <A ^NH2 <1 ^NHBoc

0¾ —- V —- V

H3C^S0) H3C^|g) H3cA@ 21a.21b 22a,22b 23a,23b t*/NHBoc ? H 24a, 24b

0 P

Fv^y^^COOH F 'Τίί^Νν|ΐΓ COOH

fr f ααγ^γ f

Cl »U-J* Cl *k— 12 HV^ BocHN hV-H 25 0

Fv^^y^yCOOH

- ^AtA

H2N hVh 26 70 96947 o o F>r^£vY'JlvNf''COOEt f'y^Va^c°ob -► JL Jl ? -► I jf Cl 'τ'Γ Cl S*

CI^N^ci , N F

*kr-^* 27 HVfi 28a, 26b o o F^AC00Et f^Acooh qXn^n^p ciXXn^p 29a, 29b *hVh* 30a,30b

O

Ργ^γ^γ'ΟΟΟΗ

^ H2N^0)l N^l F

31a, 31b *

O

FY^AyCOOH h VNHB0C

F^JlNJJ F * Γ) Me -*-

Cl —7I * N

12b H 32 O o

Me Fv^As^COOH Me fyVyC00H

BocHN «sj T X If _^ H2N^/^mXsJCMJJ

ή Cl —y\* HCl *L

hVh h\/h 33b 34b 7i 96947 o o F>Ti^srA>/COOEt F'Tr^C00E1--^ fVf I. --

F^Y^F OAc N F

OAc «M* 35 36 b 5?

Fv^v^N-COOBt o 9

-— YTY

0Me*L_7|* F

37b H H °Me*HV?l* 38b

Me COOB Me COOH Me NHBoc kPh kph Γ

Ph ^ph 42 43 44

Me—NH2 Me NHC0 J? Me NH2

o^> — <*<? JQ

kph '-Ph *-Ph 45 46a.46b 45a,45b

Me NHBoc Me NHBoc

-^ tt —- TT

-N^ —N^

^Ph H

47a, 47b 39a, 39b 96947 72 ;pr - χκ^ — χχίζ”

Me ' X Me N F

Me *l—J* 48 49 50b hX/h O o

FYnV°0Et Fv^vJk^cOOH

^ F'S''^ p P'S'^N'^ ^ W Me *hfr 51b 52 b 9 o 53b 54b f/äV”“ _ f/Xcooh -U tcrrfy 1

17b 55b NHBoc H^H

I T

NH2 O NH2 O

Ργ^ΑγΟΟΟΗ Ργ^^γΟΟΟΗ

p fV'ljV'Ψ F

F *U—rl* F *L—jj*

H\/H H2N H VH

57b 56b = 1 Iti F tm I t I 1!«

Claims (2)

73 96947 Patentt ivaat imukset

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten N,-(1,2-cis-2-halogeenisyklopropyyli)substituoitujen py-5 ridonikarboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (I): R1 0 ί-v^ik^VCOOH i° _X T Ϊ «' v jossa R1 on aminoryhmä tai vetyatomi; A on typpiatomi 15 tai OX3, jossa X3 on halogeeniatomi, alkyyliryhmä, jossa on 1 - 6 hiiliatomia tai alkoksiryhmä, jossa on 1 -6 hiiliatomia, ja R2 on syklinen aminoryhmä, jolla on kaava 2° H R6 R'2 JSj M'S f , nh * *X;*

2 R11 25 joissa R6 ja R11, jotka voivat olla samat tai erilaiset, merkitsevät alkyyliryhmää, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, tai vetyatomia; ja R12 ja R13 ovat liittyneet toisiinsa siten, että ne muodostavat polymetyleeniketjun, jossa on 2 - 5 hiiliatomia; ja niiden farmaseuttisesti hyväk-30 syttävien suolojen valmistamiseksi, mahdollisesti ste- reoisomeerisesti puhtaana muotona, tunnettu * siitä, että7-halogeeni-l-(1,2-cis-2-halogeenisyklopro- pyyli)pyridonikarboksyylihappo, jolla on kaava 96947 74 R> O Fv^x^AtOOH XXX jossa R1 ja A ovat edellä määritellyt ja X on halogee-niatomi, tai sen esteri tai difluoriboorijohdannainen 10 saatetaan reagoimaan syklisen amiiniyhdisteen R2-H kanssa, joka voi olla suojattu tavanomaisella suojaryh-mällä ja jossa R2 on edellä määritelty, ja sen jälkeen haluttaessa poistetaan suojaryhmä tavanomaisella menetelmällä ja haluttaessa poistetaan esteriryhmä tai di-15 f luoribooriryhmä happamissa tai emäksisissä olosuhteis sa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 7-[3-(S)-amino-l-pyrrolidinyyli] -6-f luori-1- (1,2-cis-2-f luori-20 syklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karbok- syylihappo, 7-[3-(S)-amino-l-pyrrolidinyyli]-8-kloori- 6-fluori-l-(1,2-cis-fluorisyklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo, 7-[7-amino-5-at-saspiro[2.4]heptan-5-yyli]-8-kloori-6-fluori-1-(1,2-25 cis-2-f luorisyklopropyyli) -4-okso-l,4-dihydrokinoliini- 3- karboksyylihappo, 5-amino-7-[3-(S)-amino-l-pyrrolidi-nyyli]-6,8-difluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)- 4- okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo, 7- [4- (S) -amino-2- (S) -metyyli-l-pyrrolidinyyli] -6-f luori-1- 3 0 (1,2-cis-2-f luorisyklopropyyli) -4-okso-l, 4-dihydro-l, 8- naftyridiini-3-karboksyylihappo, 7-[3-(R)-[l-(S)-ami-noetyy li] -1-pyrrolidinyy li] -8-kloori-6-f luori-1- (1,2-cis-2-fluorisyk lopr opyy 1 i) -4 -okso-1,4 -d ihydr okino liini-3-karboksyylihappo, 7-[3-amino-4-metyyli-l-pyrrolidi-35 nyyli]-6-fluori-1-(1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)-8- <N IH-l· Ml) I l 1 m 75 96947 metoksi-4-okso-l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo, 7-[4-(S)-amino-2-(S)-metyyli-l-pyrrolidinyyli]-6-fluo-ri-l-(l,2-cis-2-f luorisyklopropyyli) -8-metyyli-4-okso- l,4-dihydrokinoliini-3-karboksyylihappo tai 5-amino-5 7-[7-amino-5-atsaspiro[2.4]heptan-5-yyli]-6,8-difluori- 1- (1,2-cis-2-fluorisyklopropyyli)-4-okso-l,4-dihydroki-noliini-3-karboksyylihappo tai jonkin niistä muodostama suola. « 96947 76