TWI386401B

TWI386401B - 醫藥用水合物

Info

Publication number: TWI386401B
Application number: TW096109898A
Authority: TW
Inventors: Makoto Ono; Shoko Yoshida
Original assignee: Daiichi Seiyaku Co
Priority date: 2006-03-27
Filing date: 2007-03-22
Publication date: 2013-02-21
Also published as: EP2000467A9; ES2513819T3; JPWO2007111023A1; AR060162A1; US8003666B2; US20100234410A1; TW200813005A; EP2000467B1; JP5131926B2; EP2000467A4; EP2000467A2; WO2007111023A1

Description

醫藥用水合物

本發明係關於適合作為用於製造醫藥品製劑、尤其是固體製劑之藥品原料粉末的化合物。

具有以式(I) 所表示之結構的新穎喹諾酮化合物，其不僅對於革蘭氏陰性菌，且對於對喹諾酮系抗菌藥為低感受性之革蘭氏陽性球菌亦具有較強之抗菌活性；其可期待作為喹諾酮系合成抗菌藥，該喹諾酮系合成抗菌藥具有優異之安全性、及作為具有體內動態之醫藥優異之特性。(參照專利文獻1)。

為了將某化合物製成醫藥而提供，需要具有可製造各種製劑、尤其是固體製劑之特性之，具有適合作為藥品原料粉末之特性的化合物(或結晶)。作為如此之化合物，期望其具有，例如，優異之化學穩定性、不會產生吸脫濕、或不會產生結晶轉換，又，若為水合物，則不會失去結晶水等穩定性優異之特性。進而，即使為具有如此之穩定性(貯藏穩定性)之化合物，為獲得其而使用的溶劑必須為可安全使用者。

然而，關於式(I)化合物，並不確知其係補充有上述特性之化合物。

[專利文獻1]

日本專利特願2005-146386號

本發明之目的在於提供一種化合物，其相關於式(I)化合物，且具有可採用作固體製劑製造用之藥品原料粉末的特性。

本發明者們發現以式(I)所表示之化合物之1/2水合物(再者，本說明書中有時僅將下式簡稱為「1/2水合物」。)

具有充分之保存穩定性，進而關於其製備已明確可由具有優異安全性之溶劑製備，且具有作為藥品原料粉末所必須之特性，從而完成本發明。

即，本發明係關一種於以式(I)[化3] 所表示化合物之1/2水合物者。

即，本發明係關於以下態樣：1. 7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸之1/2水合物；2.以下述式所表示之化合物。

又，本發明係關於一種醫藥，其含有上述1/2水合物。

進而，本發明係關於一種醫藥組合物，其係含有上述1/2水合物及藥學上所容許之載體。

進而，本發明係關於一種上述1/2水合物之用途，其係用於醫藥製造。

進而，本發明係關於一種感染症之預防治療法，其特徵在於：投與上述1/2水合物之有效量。

本發明係提供一種穩定且容易製備之化合物，若根據本發明，則可提供具有作為藥品原料粉末優異之特性的化合物。

式(I)之化合物，例如可依據下述參考例1~11或參考例12~22而製造。即，若根據參考例1~11，則式(I)之化合物可依據下述反應式而製造。

又，若根據參考例12~22，則式(I)之化合物可依據下述反應式而製造。

本發明之1/2水合物，可將式(I)之化合物自乙腈中進行再結晶而獲得。為製備1/2水合物，可使用各種形態之式(I)之化合物。至於如此之化合物，例如可列舉：酸酐或於參考例中所獲得之乙醇化物，以及1/2水合物本身之粗體等。

自乙腈中進行再結晶時之乙腈之使用量，相對於起始原料可使用5~20(v/w)左右、較好的是5~15(v/w)左右。再結晶本身可依據該領域中通常所實施之方法進行。例如，較好的是，將原料添加於乙腈中，加熱至50℃而使之溶解，再冷卻至25℃，藉此使1/2水合物結晶析出。

使用乙腈以外之溶劑，亦可獲得本申請案之1/2水合物。作為如此之溶劑，例如可列舉：酯類、酮類及醚類。作為酯類，可列舉：甲酸乙酯、乙酸甲酯；作為酮類，可列舉：甲基乙基酮、甲基異丙基酮、2-戊酮、3-戊酮；作為醚類，可列舉四氫呋喃。進而，該等溶劑亦可製成與醇或水之混合溶劑而使用。使用該等溶劑之情形，係與使用乙腈之情形相同，可將原料添加於溶劑中，並加熱至50℃使之溶解，再冷卻至25℃，藉此使1/2水合物析出。

本發明者們驚奇地判明，本發明之1/2水合物具有如下之優異特性。

即，已判明：1.濕度變化所引起之重量變化微小，其係穩定之吸脫濕行為；2.加熱脫水後之吸脫濕變化中，脫水後可迅速液化，吸濕後之行為亦與加熱處理前無差異；3.加熱脫水後之晶形變化，於脫水後亦維持結晶狀態，吸水後亦可恢復成穩定之1/2水合物，而迅速產生液化；4.於保存時，不會產生晶形之變化；5.於濕熱條件、乾熱條件下均穩定且含量不產生變化，且已判明，其係穩定性優異之化合物，作為藥品原料粉末較佳之化合物。

本發明之1/2水合物具有較強之抗菌作用，因此，可用作人、動物及魚類用之醫藥品，或用作農藥、食品之保存劑。於將本發明之1/2水合物用作人體用之醫藥品之情形時，投與量為成人每1天50 mg~1 g、更好的是300~800 mg。又，作為動物用之投與量，係根據投與目的，所處理動物之大小，感染病原菌之種類、程度而不同，作為一天用量，通常每1公斤動物體重為1~200 mg、更好的是5~100 mg。該一天用量一天1次進行投與，或分為2~4次進行投與。再者，一天用量亦可根據需要而超過上述量。

本發明之1/2水合物對成為各種感染症之原因之廣泛範圍的微生物種類具有活性，可治療、預防或減輕由該等病原體所引起之疾病。至於本發明之化合物有效之細菌類或細菌樣微生物種類，可列舉：葡萄球菌屬、化膿性鏈球菌、溶血性鏈球菌、腸球菌、肺炎球菌、消化鏈球菌屬、淋病球菌、大腸桿菌、檸檬酸桿菌屬、志賀桿菌屬、肺炎桿菌、腸桿菌屬、沙雷氏菌屬、變形桿菌屬、綠膿桿菌、流行性感冒桿菌、不動菌屬、曲狀桿菌屬、沙眼披衣菌等。

至於由該等病原體所引起之疾病，可列舉：毛囊炎、癤、癰、丹毒、蜂巢組織炎、淋巴管(腺)炎、瘭疽、皮下膿瘍、汗腺炎、聚合性痤瘡、感染性粉瘤、肛周膿腫、乳腺炎、外傷．燙傷．手術傷口等淺表性二次感染、咽喉炎、急性支氣管炎、扁桃體炎、慢性支氣管炎、支氣管擴張症、彌漫性細支氣管炎、慢性呼吸疾病之二次感染、肺炎、腎盂腎炎、膀胱炎、前列腺炎、副睾丸炎、淋病球菌性尿道炎、非淋病球菌性尿道炎、膽囊炎、膽管炎、細菌性赤疾、腸炎、子宮附屬器炎、子宮內感染、巴林氏腺炎、眼瞼炎、瞼板腺炎、淚囊炎、瞼板腺炎、角膜潰瘍、中耳炎、副鼻竇炎、牙周炎、牙冠周圍炎、顎炎、腹膜炎、心內膜炎、敗血症、髓膜炎、皮膚感染症等。

進而，至於本發明之1/2水合物有效之抗酸菌類，可列舉：結核菌群(結核分歧桿菌(Mycobacterium tuberculosis)、牛分歧桿菌(M.bovis)、非洲分歧桿菌(M. africanum))、非典型結核菌(肯沙士分枝桿菌(M.kansasii)、M.malaynum、M.scrofaseum、禽結核分枝桿菌(M.avium)、細胞內分枝桿菌(M.intracellulare)、M.xenobi、偶然分枝桿菌(M.fortuitum)、M.cherone)等。由該等病原體所引起之抗酸菌感染症，可根據其起因菌之類別可大致分類為結核病、非典型抗酸菌症、麻風3大類。結核菌感染症，除肺之外，可見於胸腔、氣管．支氣管、淋巴腺、全身散播性、骨關節、髓膜．腦、消化器官(腸．肝臟)、皮膚、乳腺、眼、中耳．咽喉、尿道、男性生殖器、女性生殖器等。非典型抗酸菌症(非結核性抗酸菌症)之主要患病器官為肺，其它可列舉：局部淋巴腺炎、皮膚軟組織、骨關節、全身散播性型等。

又，成為動物感染症原因之各種微生物，例如對大腸桿菌屬、沙氏桿菌屬、巴斯德菌屬、嗜血桿菌屬、博德氏桿菌屬、葡萄球菌屬、黴漿菌屬等。作為具體疾病，可列舉：鳥類之大腸桿菌症、雛白痢、雞副傷寒症、家禽霍亂、傳染性鼻炎、葡萄球菌症、黴漿菌感染症等，豬中大腸桿菌症、沙氏桿菌症、巴斯德菌症、嗜血桿菌感染症、萎縮性鼻炎、滲出性表皮炎、黴漿菌感染症等，牛之大腸桿菌症、沙氏桿菌症、出血性敗血症、黴漿菌感染症、牛接觸傳染性胸膜肺炎、乳房炎等，狗之大腸桿菌性敗血症、沙氏桿菌感染症、出血性敗血症、子宮積膿症、膀胱炎等，以及貓之滲出性胸膜炎、膀胱炎、慢性鼻炎、嗜血桿菌感染症、貓仔之腹瀉、黴漿菌感染症等。

含有本發明之1/2水合物之抗菌劑，可根據投與方法而選擇適當之製劑，可藉由通常所使用之各種製劑之調製方法進行調製。至於將本發明之1/2水合物作為主劑之抗菌劑的劑型，例如可列舉：錠劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、溶液劑、糖漿劑、酏劑、油性或水性之懸濁劑液體等。至於注射劑，可於製劑中使用穩定劑、防腐劑、溶液輔助劑等，亦可將含有該等之溶液裝入容器內之後，藉由冷凍乾燥等作為固體製劑而製成使用時製備之製劑。又，可將一次投與量裝入容器內，亦可將多次投與量裝入同一容器內。至於外用製劑，例如可列舉：溶液劑、懸濁液、乳濁液、軟膏、凝膠、霜劑、洗劑、噴霧劑等。

至於固體製劑，可含有活性化合物，亦可含有製劑學上所容許之添加劑，至於該等添加劑，例如可列舉：填充劑類、黏合劑類、崩解劑類、溶液促進劑類、潤濕劑類、潤滑劑類等。至於液體製劑，可列舉：溶液、懸濁液、乳液劑等，作為添加劑亦包括懸濁化劑、乳化劑等。

其次，將製劑處方例表示於下。

製劑例1. [膠囊劑]：

製劑例2. [溶液製劑]：

製劑例3. [飼料混合用散劑]：

[實施例]

以下，藉由實施例及參考例對本發明加以說明，本發明並不限定於該等。

[參考例1]

1-乙醯基-1-環丙烷羧酸第三丁酯

將乙醯乙酸第三丁酯(497 mL，3.00 mol)、1,2-二溴乙烷(310 mL，3.60 mmol)、碳酸鉀(1.106 kg，8.00 mmol)、及二甲基甲醯胺(2.0 L)之混合物於30℃水浴中加熱攪拌1.5小時，再於60℃水浴中上加熱攪拌3.5小時，繼而於30℃水浴中加熱攪拌4天。以氟鎂石過濾反應液，且以乙醚(3.5 L)清洗濾取物。將濾液及乙醚清洗液一併加入到水(2 L)中，萃取有機層。以乙醚(2 L)進而自殘留之水層中萃取有機層，於殘留水層中加入水(1 L)之後，進而以乙醚(2 L)萃取有機層。合併全部有機層之後，以10%檸檬酸水溶液(2 L)、水(2 L×3)、及飽和食鹽水(2 L×3)進行清洗，再加入無水硫酸鈉進行乾燥。過濾除去乾燥劑後，減壓蒸餾除去溶劑，將所獲得之殘留物進行減壓蒸餾，獲得371.8 g(10 mmHg，72~78℃之餾分，2.02 mol，67%)之無色透明油狀物之目標化合物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：1.37-1.40(4H,m),1.49(9H,s),2.44(3H,s)。

[參考例2]

1-(1-胺基-1-氰乙基)-1-環丙烷羧酸第三丁酯

將1-乙醯基-1-環丙烷羧酸第三丁酯(9.21 g，50.0 mmol)溶解於7當量之氨水/甲醇溶液(300 mL)，於冰浴冷卻下，加入濃氨水(90 mL)、氯化銨(53.5 g，1.00 mol)、及氰化鈉(4.90 g，100.0 mmol)，其後於室溫下攪拌18小時。將溶劑減壓濃縮，於殘留液中加入水(100 mL)之後，以二氯甲烷(300 mL+2×100 mL)進行萃取。於合併之有機層中加入無水硫酸鈉進行乾燥，再過濾除去乾燥劑之後，減壓蒸餾除去溶劑，藉此而獲得10.15 g(48.3 mmol，97%)之薄褐色油狀物之目標化合物粗產物。所獲得之粗產物並不進行進一步純化而用於以下反應。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：1.02-1.12(2H,m),1.19-1.17(2H,m),1.48(9H,s),1.50(3H,s),2.13(2H,brs)。

MS(ESI)m/z：155(M-tBu)⁺ 。

[參考例3]

1-(1,2-二胺基-1-甲基乙基)-1-環丙烷羧酸第三丁酯

於1-(1-胺基-1-氰乙基)-1-環丙烷羧酸第三丁酯(1.12 g，5.30 mmol)之乙醇溶液(50 mL)中，加入雷氏鎳觸媒(NIKKO RICA Corporation，R-100，10 mL)之乙醇懸濁液(30 mL)，於氫氣環境下、於室溫下劇烈攪拌6小時。以氟鎂石過濾除去觸媒，且減壓蒸餾除去溶劑，藉此獲得0.84 g(3.92 mmol，74%)之無色透明油狀物之目標化合物粗產物。所獲得之粗產物並不進行進一步純化而用於以下反應。

¹ H-NMR(三氟乙酸鹽，400 MHz,DMSO-d₆ )δ ppm：1.08- 1.19(5H,m),1.21-1.27(1H,m),1.28-1.33(1H,m),1.39(9H,s),3.27(1H,d,J=12.9 Hz),3.48(1H,d,J=13.4 Hz),8.34(6H,brs)。

MS(ESI)m/z：215(M+H)⁺ 。

[參考例4]

1-(1,2-二胺基-1-甲基乙基)-1-環丙烷羧酸二鹽酸鹽

將0.82 g(3.83 mmol)之1-(1,2-二胺基-1-甲基乙基)-1-環丙烷羧酸第三丁酯粗產物，於室溫下溶解於濃鹽酸(5 mL)，於相同溫度下攪拌30分鐘。於反應液中加入水之後，減壓蒸餾除去溶劑，繼而以乙醇進行共沸(2次)，獲得0.82 g(3.55 mmol，93%)之薄黃色泡狀固體之目標化合物粗產物。所獲得之粗產物並不進行進一步純化而用於以下反應。

¹ H-NMR(400 MHz,CD₃ OD)δ ppm：1.20-1.26(1H,m),1.28(3H,s),1.32-1.43(2H,m),1.58-1.62(1H,m),3.46(1H,d,J=13.4 Hz),3.80(1H,d,J=13.4 Hz)。

MS(ESI)m/z：159(M+H)⁺ 。

[參考例5]

7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮

[化11]

於1-(1,2-二胺基-1-甲基乙基)-1-環丙烷羧酸二鹽酸鹽粗產物(800 mg，3.46 mmol)之乙腈溶液(70 mL)中，加入1,1,1,3,3,3-六甲基二矽氮烷(7.38 mL，34.6 mmol)添加，並於氮氣置換下，於100℃油浴中加熱回流4小時。冷卻至室溫，加入甲醇(70 mL)之後，減壓蒸餾除去溶劑，藉此獲得淺褐色膠狀固體之7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮之粗產物。

MS(ESI)m/z：141(M+H)⁺ 。

於室溫下，於上述所獲得之7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮之粗產物中，加入1,4-二氧雜環己烷(20 mL)、及二碳酸二第三丁酯(1.528 g，7.00 mmol)，並將混合物於相同溫度下攪拌5小時。於反應液中加入水(50 mL)，且以氯仿(100 mL+50 mL)進行萃取之後，於合併之有機層中加入無水硫酸鈉而進行乾燥，使用短矽膠管柱過濾除去乾燥劑之後，減壓蒸餾除去溶劑。於所獲得之殘留物中加入乙醚使其懸濁而進行濾取，藉此獲得502 mg(2.09 mmol，2步驟，60%)之白色粉末之目標化合物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.77-0.82(1H,m),0.94-1.04(2H,m),1.16-1.23(1H,m),1.28(3H,s),1.43(9H,s),3.29(1H,d,J=10.3 Hz),4.12(1H,m),4.60(0.9H,brs), 5.82(1H,brs)。

MS(ESI)m/z：185(M-tBu)⁺ 。

[參考例6]

5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮

於7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮(3.12 g，12.97 mmol)之二甲基甲醯胺溶液(65 mL)中，於冰浴冷卻下，經5分鐘添加氫氧化鈉(55%，礦物油分散液，538 mg，12.33 mmol)。於相同溫度下攪拌40分鐘之後，加入溴甲苯(1.851 mL，15.56 mmol)，於室溫下攪拌1.5小時。於反應液中加入乙酸乙酯(300 mL)進行稀釋，以水(100 mL×2)及飽和食鹽水(100 mL)進行清洗。加入無水硫酸鈉而進行乾燥，過濾除去乾燥劑之後，減壓蒸餾除去溶劑，以矽膠管柱層析法(己烷：乙酸乙酯=9：1→4：1→2：1)對所獲得之殘留物進行純化，藉此獲得4.20 g(12.71 mmol，98%)之無色透明膠狀固體之目標化合物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.76-0.81(1H,m),0.93-1.06(2H,m),1.21-1.29(4H,m),1.37(9H,m),3.14(1H,d, J=10.3 Hz),3.92-3.98(1H,m),4.44(1H,d,J=15.1 Hz),4.56(1H,d,J=14.6 Hz),4.56(1H,brs),7.22-7.33(5H,m)。

MS(ESI)m/z：331(M+H)⁺ 。

[參考例7]

(-)-5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮及(+)-5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮

以光學活性管柱(CHIRALPAK AD，20 mm×250 mm，己烷：異丙醇=90：10，流速=20 mL/min，每1次分離50 mg)，將於參考例6中所獲得之消旋體5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮(2.254 g，6.82 mmol)進行光學分離，獲得(-)-5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮(997 mg，3.02 mmol，保持時間=7.0分鐘，[α]_D ^25.1 =-113.9°(c=0.180，氯仿))、及(+)-5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮(957 mg，2.90 mmol，保持時間=11.3分鐘，[α]_D ^25.1 =+108.8°(c=0.249，氯仿))。

[參考例8]

(-)-5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷

[化13]

於溫室下，於(-)-5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-4-酮(950 mg，2.88 mmol)之二氯甲烷溶液(15 mL)中，加入三氟乙酸(7.5 mL)，於相同溫度下攪拌40分鐘。減壓蒸餾除去溶劑，以甲苯進行共沸(2次)之後，加入飽和碳酸氫鈉水溶液(30 mL)，以氯仿(100 mL+2×50 mL)進行萃取。於合併之有機層中添加無水硫酸鈉進行乾燥，過濾除去乾燥劑之後，減壓蒸餾除去溶劑。將所獲得之殘留物溶解於四氫呋喃(30 mL)中，於冰浴冷卻攪拌下，加入氫化鋰鋁(218 mg，5.74 mmol)，於相同溫度下攪拌1小時。進而加入氫化鋰鋁(109 mg，2.87 mmol)，於室溫下攪拌2.5小時之後，再次進行冰浴冷卻，仔細地按順序添加水(0.31 mL)、15%氫氧化鈉水溶液(0.31 mL)、及水(0.93 mL)。於室溫下，將所獲得之混合物攪拌一晚之後，加入硫酸鎂而進行乾燥，且以氟鎂石進行過濾。藉由減壓濃縮濾液，而獲得無色透明油狀物之7-胺基-5-苄基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷粗產物。所獲得之粗產物並不進行進一步純化而用於以下反應。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.37-0.45(2H,m),0.56-0.66(2H,m),0.96(3H,s),2.48(1H,d,J=9.0 Hz),2.55(1H,d,J=8.8 Hz),2.74(2H,d,J=9.0 Hz),3.59(2H,s), 7.21-7.37(5H,m)。

MS(ESI)m/z：217(M+H)⁺ 。

將上述所獲得之7-胺基-5-苄基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷粗產物溶解於二氯甲烷(15 mL)中，加入二碳酸二第三丁酯(1.255 g，5.75 mmol)，於室溫下攪拌22小時。減壓蒸餾除去溶劑之後，以矽膠管柱層析法(氯仿：甲醇：三乙基胺=98：2：1→95：5：1)對殘留物進行純化，藉此獲得586 mg(1.852 mmol，3步驟，64%)之無色透明膠狀固體之目標化合物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.40-0.45(1H,m),0.50-0.55(1H,m),0.63-0.69(1H,m),0.80-0.85(1H,m),1.20(3H,s),1.43(9H,s),2.44(1H,d,J=8.8 Hz),2.59(1H,d,J=9.5 Hz),2.83(1H,d,J=8.8 Hz),3.33(1H,m),3.57(1H,d,J=13.2 Hz),3.68(1H,d,J=13.2 Hz),4.75(1H,brs),7.20-7.37(5H,m)。

MS(ESI)m/z：317(M+H)⁺ 。

[α]_D ^25.1 =-63.6°(c=0.129，氯仿)

[參考例9]

(-)-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷

於(-)-5-苄基-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷(581 mg，1.836 mmol)之甲醇(40 mL)溶液中，加入10%鈀碳觸媒(M，含水約50%，349 mg)，於氫氣環境下，於室溫下攪拌2.5小時。過濾除去觸媒後，減壓蒸餾除去溶劑，獲得434 mg(定量)之無色透明膠狀固體之目標化合物粗產物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.38-0.43(1H,m),0.55-0.60(2H,m),0.74-0.80(1H,m),1.08(3H,s),1.44(9H,s),2.75(1H,d,J=12.0 Hz),2.77(1H,d,J=11.5 Hz),3.13(1H,d,J=11.5 Hz),3.75(1H,brd,J=12.0 Hz),4.44(1H,brs)。

MS(ESI)m/z：227(M+H)⁺ 。

[α]_D ^25.1 =-63.5°(c=0.277，氯仿)

[參考例10]

7-[7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸

將參考例9中所獲得之(-)-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷粗產物(434 mg，1.836 mmol)、6,7- 二氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．二氟硼錯合物(663 mg，1.836 mmol)、及三乙胺(0.768 mL，5.510 mmol)溶解於二甲基亞碸(5 mL)中，於40℃油浴中加熱攪拌14小時。於反應液中加入乙醇：水=4：1之混合溶液(50 mL)及三乙基胺(5 mL)，於100℃油浴中加熱回流2小時。減壓濃縮反應液，將殘留物溶解於乙酸乙酯(200 mL)中，以10%檸檬酸水溶液(50 mL)及水(50 mL×2)及飽和食鹽水(50 mL)進行清洗。以無水硫酸鈉對有機層進行乾燥之後，減壓蒸餾除去溶劑，藉此獲得870 mg(1.676 mmol，91%)之黃色泡狀固體之目標化合物粗產物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.55-0.60(1H,m),0.68-0.73(1H,m),0.74-0.80(1H,m),0.92-0.97(1H,m),1.22(3H,s),1.40(9H,s),1.43-1.59(2H,m),3.13(1H,d,J=9.8 Hz),3.60(3H,s),3.75(1H,dd,J=11.0,3.7 Hz),3.85(1H,dt,J=10.2,4.5 Hz),4.18(1H,d,J=10.0 Hz),4.47(1H,m),4.62(1H,s),4.79-4.99(1H,dm),7.83(1H,d,J=13.7 Hz),8.68(1H,d,J=2.7 Hz),14.88(0.7H,brs)。

MS(ESI)m/z：520(M+H)⁺ 。

[α]_D ^25.1 =-128.5°(c=1.240，氯仿)

[參考例11]

7-(7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基)-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸

於冰浴冷卻下，將於參考例10中所獲得之7-[7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸(870 mg，1.676 mmol)溶解於濃鹽酸(10 mL)之後，於室溫下攪拌20分鐘，以氯仿(20 mL×5)對反應液進行清洗。於冰浴冷卻下，於水層中加入飽和氫氧化鈉水溶液，使pH成為12.0，繼而以鹽酸將pH調整為7.4之後，以氯仿：甲醇=10：1混合溶液(200 mL×2)、及氯仿：甲醇：水=7：3：1底層溶液(200 mL)進行萃取。以無水硫酸鈉對合併之有機層進行乾燥後，減壓蒸餾除去溶劑。自乙醇中再結晶純化所獲得之殘留物，進行減壓乾燥，藉此獲得644 mg(1.535 mmol，92%)之淡粉紅色粉末之目標化合物。

mp：195-200℃。

[α]_D ^25.1 =+40.8°(c=0.147,0.1 N-NaOH)。

¹ H-NMR(400 MHz,0.1 N-NaOD)δ ppm：0.49-0.56(2H,m),0.67-0.76(2H,m),1.12(3H,s),1.43-1.64(2H,m),3.56(3H,s),3.59-3.71(4H,m),3.99-4.04(1H,m),4.80-5.03(1H,m),7.65(1H,d,J=13.9 Hz),8.45(1H,s)。

元素分析：C₂₁ H₂₃ F₂ N₃ O₄ ．0.75EtOH．0.5H₂ O；

計算值：C，58.37；H，6.20；F，8.21；N，9.08。

實測值：C，58.23；H，5.99；F，8.09；N，9.02。MS(EI)m/z：419(M⁺ )。

IR(ATR)：2964,2843,1726,1612,1572,1537,1452,1439,1387,1360,1346,1311,1294,1265,1207 cm^-1 。

[參考例12]

5-側氧基-1-[(1R)-1-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯

於攪拌翼攪拌下，於室溫下，於5-氧-1-[(1R)-1-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸(1165 g，4.994 mol)之二氯甲烷(10 L)之懸濁液中，加入鄰第三丁基-N,N'-二異丙基脲(3020 g，15.00 mol)之後，於確認內溫上升及回流開始後，於冰水浴中進行冷卻。將反應液冷卻至室溫後，拆除冰水浴1小時後，於40℃下一面加熱一面攪拌3小時。繼而，將反應液於冰水浴中進行冷卻，攪拌1小時後，過濾除去不溶物，將濾液減壓乾燥固化，以矽膠管柱層析法(矽膠：4 kg；溶離液，己烷：乙酸乙酯=3：1)對所獲得之殘留物進行純化，獲得925.2 g(64%)之淡黃色糖漿之目標化合物(3位異構體混合物)。由吡咯啶之3位衍生出之各非對映體可容易地分離獲得，但，因下述步驟為伴有表異構化之反應，故為能分離獲得而使用。以下表示以其他方法分離獲得之異構體之各¹ H-NMR光譜。

低極性異構體：

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：1.45(9H,s),1.54(3H,d,J=7.08 Hz),2.59-2.74(2H,m),2.95-3.03(1H,m),3.14(1H,dd,J=9.77,8.79 Hz),3.49(1H,dd,J=9.77,6.35 Hz),7.26-7.36(5H,m)。

高極性異構體：

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：1.36(9H,s),1.53(3H,d,J=7.32 Hz),2.59-2.75(2H,m),3.02-3.11(1H,m),3.16(1H,dd,J=10.01,5.62 Hz),3.51(1H,dd,J=10.01,8.54 Hz),7.24-7.36(5H,m)。

[參考例13]

(3S)-3-甲基-5-側氧基-1-[(1R)-1-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯

於氮氣環境下，於5-側氧基-1-[(1R)-1-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯(30.05 g，0.104 mol)之N,N'-二甲基甲醯胺(210 mL)溶液中，於攪拌下加入26.0 mL(59.28 g，0.418 mol)碘甲烷，繼而於室溫下，加入氫化鈉(55%油性，11.35 g，0.260 mol)。於內溫上升達到約50℃時，於冰水浴中冷卻至30℃，繼而更換至外溫為17℃之水浴中攪拌23小時。將反應液注入冷檸檬酸水溶液(1 L之10%檸檬酸及500 g之冰)中攪拌30分鐘後，以乙酸乙酯(800 mL，500 mL)進行萃取。合併有機層，以飽和食鹽水進行清洗之後，以無水硫酸鈉乾燥後，進行過濾，且減壓濃縮濾液。以矽膠管柱層析法(己烷：乙酸乙酯=5：1→4：1溶出部)對殘留物進行純化，獲得10.63 g(33.7%)之白色固體之目標化合物作為高極性異構物。又，獲得14.91 g(47.3%)之(3R)-3-甲基-5-側氧基-1-[(1R)-1-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯作為低極性異構物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：1.34(12H,s),1.52(3H,d,J=7.10 Hz),2.27(1H,d,J=17.0 Hz),2.93(1H,d,J=17.0 Hz),3.05(1H,d,J=10.1 Hz),3.32(1H,d,J=10.1 Hz),5.50(1H,q,J=7.1 Hz),7.23-7.38(5H,m)。

[參考例14]

(3S)-4-[2-(第三丁基二甲基矽烷基)羥乙基]-3-甲基-5-側氧基-1-[(1R)-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯

[化19]

於-4℃下，於(3S)-3-甲基-5-側氧基-1-[(1R)-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯(30.0 g，98.9 mmol)、及第三丁基(2-碘代乙氧基)二甲基矽烷(36.8 g，129 mmol)之無水四氫呋喃(288 mL)溶液中，滴加雙(三甲基矽烷基)醯胺鋰(1.0 M之四氫呋喃溶液，129 mL，129 mmol)，於2℃下攪拌3.5小時。於反應液中加入飽和氯化銨水溶液(300 mL)，以乙酸乙酯(300 mL，200 mL)進行萃取。以飽和食鹽水(200 mL)清洗有機層，以無水硫酸鈉乾燥後，進行過濾，且將濾液減壓乾燥固化，獲得54.1 g之目標化合物。再者，該產物並不進行精緻而用於以下步驟。

MS(ESI)m/z：363(M-Boc+H)⁺ 。

[參考例15]

(3S)-4-(2-羥乙基)-3-甲基-5-側氧基-1-[(1R)-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯

[化20]

將上述矽烷基體粗產物(54.1 g，98.9 mmol)溶解於四氫呋喃(450 mL)中，於冰浴冷卻下，滴加氟化四丁基銨之1.0 mol/L之四氫呋喃溶液(148 mL，148 mmol)之後，於室溫下攪拌2小時。將反應液濃縮後，以乙酸乙酯(200 mL，100 mL)進行萃取。以10%碳酸氫鈉水溶液(200 mL)、檸檬酸水溶液(300 mL)、及飽和食鹽水(100 mL)清洗有機層，以無水硫酸納乾燥之後，進行過濾，且將濾液減壓乾燥固化。以矽膠管柱層析法(己烷：乙酸乙酯=6：1→4：1→1：1溶出部)對殘留物進行純化，獲得29.1 g(83.9 mmol，85%)之無色透明糖漿狀物質之目標化合物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：1.28(3H,s),1.40(9H,s),1.51-1.53(1H,m),1.53(3H,d,J=7.1 Hz),1.78-1.94(2H,m),2.90-3.08(2H,m),3.67-3.75(1H,m),3.80-3.91(1H,m),4.85-4.89(1H,m),5.43-5.53(1H,m),7.27-7.37(5H,m)。

MS(ESI)m/z：348(M+H)⁺ 。

[參考例16]

(3S)-4-[2-(苯磺醯基)氧基乙基]-3-甲基-5-側氧基-1-[(1R)-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯

於冰浴冷卻下，於(3S)-4-(2-羥乙基)-3-甲基-5-氧-1-[(1R)-苯乙基]吡咯啶-3-羧酸第三丁酯(29.1 g，83.9 mmol)之二氯甲烷(280 mL)溶液中，加入三乙基胺(15.2 mL，109 mmol)、苯磺醯氯(11.8 mL，92.3 mmol)、及4-二甲胺基吡啶(1.02 g，8.39 mmol)，於室溫下將混合物攪拌19小時。於反應液中，加入飽和氯化銨水溶液(280 mL)，分離有機層，於減壓下蒸餾除去溶劑，將殘留物溶解於乙酸乙酯(280 mL，180 mL)之後，再次以先前之飽和氯化銨水溶液進行清洗。以1 mol/L之鹽酸水溶液(250 mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(250 mL)、飽和食鹽水(200 mL)清洗有機層之後，以無水硫酸鈉乾燥，且進行過濾之後，將濾液減壓乾燥固化，獲得目標之苯磺醯基體粗產物(43.7 g)。再者，該產物並不進行純化而用於以下步驟。

MS(ESI)m/z：510(M+Na)⁺ 。

[參考例17]

(7S)-7-甲基-4-側氧基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-7-羧酸第三丁酯

[化22]

於冰浴冷卻下，於上述苯磺醯體粗產物(43.7 g，83.9 mmol)之無水四氫呋喃(470 mL)溶液中，加入雙(三甲矽烷基)醯胺鈉之1.0 mol/L之四氫呋喃溶液(109 mL，109 mmol)，於室溫下將化合物攪拌1小時。於反應液中加入飽和氯化銨水溶液(300 mL)，以乙酸乙酯(300 mL，200 mL)進行萃取，以飽和食鹽水(200 mL)進行清洗。以無水硫酸鈉乾燥有機層之後，進行過濾，且將濾液減壓乾燥固化。以矽膠管柱層析法(己烷：乙酸乙酯=3：1→2：1溶出)對所獲得之殘留物進行純化，獲得24.6 g(89%，2步驟)之白色固體之目標化合物。

mp：55-57℃。

[α]_D ^25.1 =122.1°(c=0.517,CHCl₃ )。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.72-0.77(1H,m),0.85-0.90(1H,m),1.04-1.13(2H,m),1.18(3H,s),1.32(9H,s),1.54(3H,d,J=7.1 Hz),3.08(1H,d,J=9.8 Hz),3.53(1H,d,J=9.8 Hz),5.52(1H,q,J=7.1 Hz),7.26-7.34(5H,m)。

元素分析：C₂₀ H₂₇ NO₃ ；

計算值：C，72.92；H，8.26；N，4.25。

實測值：C，72.64；H，8.27；N，4.06。

MS(FAB)m/z：330(M+H)⁺ 。

HRMS(FAB)m/z：330.2069(以C₂₀ H₂₈ NO₃ 計算，為330.2069)。

IR(ATR)ν：3066,2976,2933,2879,1720,1676,1481,1454,1433,1365,1329,1286,1238,1203 cm^-1 。

針對本化合物實施可判定7位之配位的X射線結構解析。收集資料後，以直接法判定初期相位，以全矩陣最小平方法進行相位精密化。於精密化時，非氫原子適用異向性溫度因子，氫原子係藉由計算判定其位置，再固定其座標。本化合物中存在2個不對稱碳原子，且已知其中1個不對稱碳原子之絕對組態。根據該絕對組態，而判定另一個不對稱碳原子之絕對組態。即，可確定與標題化合物之7位有關之配位為(S)。並且，亦可判定經由該化合物製備之一系列化合物之配位。

[參考例18]

(7S)-7-甲基-4-側氧基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-7-羧酸

於冰浴冷卻下，於(7S)-7-甲基-4-側氧基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-7-羧酸第三級丁酯(24.5 g，74.4 mmol)之二氯甲烷(120 mL)溶液中，滴加三氟乙酸(120 mL)，且攪拌2小時。將反應混合物減壓乾燥固化，於殘留物中加入甲苯(20 mL)，進行減壓乾燥固化之後，於冰浴冷卻下，將殘留物溶解於1 mol/L之氫氧化鈉水溶液(300 mL)中。將該水溶液以乙酸乙酯(350 mL)清洗後，於冰浴冷卻下，於水層中加入濃鹽酸(25 mL)，以使pH值成為2~3，再以氯仿(300 mL×2)進行萃取。

以水(200 mL)及飽和食鹽水(100 mL)清洗有機層，以無水硫酸鈉乾燥之後，減壓蒸餾除去溶劑。於所獲得之殘留物中加入甲苯(20 mL)，進行減壓乾燥固化之後，使殘留物懸濁於氯仿(20 mL)中，加入己烷(200 mL)，使之結晶化。以己烷(100 mL)清洗所析出之固體之後，進行減壓乾燥，獲得20.48 g(定量性)之白色固體之目標化合物。該產物並不進行純化而用於以下步驟。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.78-0.83(1H,m),0.90-0.95(1H,m),1.08-1.18(2H,m),1.24(3H,s),1.55(3H,d,J=7.3 Hz),3.11(1H,d,J=10.0 Hz),3.55(1H,d,J=10.0 Hz),5.52(1H,q,J=7.1 Hz),7.28-7.32(5H,m)。

MS(ESI)m/z：274(M+H)⁺ 。

[參考例19]

(7S)-7-胺基-7-甲基-4-側氧基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷

[化24]

於(7S)-7-甲基-4-側氧基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷-7-羧酸(20.4 g，74.4 mmol)及二苯基磷醯疊氮(17.6 mL，81.8 mmol)之甲苯(200 mL)溶液中，加入三乙基胺(20.7 mL，149 mmol)，於125℃油浴中加熱攪拌1小時。減壓濃縮反應液而獲得異氰酸酯體粗產物。

將所獲得之異氰酸酯體粗產物溶解於1,4-二氧雜環己烷(180 mL)中，加入水(90 mL)及濃鹽酸(90 mL)之後，於50℃油浴中加熱攪拌1小時。於反應液中加入水(200 mL)，以乙酸乙酯(200 mL)進行清洗之後，於冰浴冷卻下，於水層中加入10 mol/L之氫氧化鈉水溶液(170 mL)，以使pH成為9~10，且以甲苯(200 mL×2)進行萃取。以飽和食鹽水(100 mL)清洗有機層，以無水硫酸鈉乾燥之後，進行過濾，將濾液減壓濃縮而獲得15.8 g(64.7 mmol)淡黃色油狀物之目標化合物。再者，該產物並不進行純化而用於以下步驟。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.72-0.78(2H,m),0.99-1.10(2H,m),1.08(3H,s),1.53(3H,d,J=7.4 Hz),2.82(1H,d,J=9.6 Hz),3.27(1H,d,J=9.6 Hz),5.56(1H,q,J=7.1 Hz),7.14-7.37(5H,m)。

[參考例20]

(7S)-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷

將上述(7S)-7-胺基-7-甲基-4-側氧基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷(15.8 g，64.7 mmol)溶解於甲苯(82 mL)中，一面以內溫不超過70℃之方式進行冰浴冷卻，一面經15分鐘滴加雙(2-甲氧基乙氧基)鋁氫化鈉、65%(重量)甲苯溶液(77.6 mL，259 mmol)之甲苯(6 mL)溶液後，於80℃油浴中加熱攪拌10分鐘。對反應液進行冰浴冷卻，滴加25%(重量)之氫氧化鈉水溶液(158 mL)使反應停止之後，以甲苯(135 mL)進行萃取。以飽和食鹽水(100 mL)清洗有機層之後，於其中加入二碳酸二第三丁酯(15.6 g，71.2 mmol)。於室溫下將反應液攪拌3小時之後，減壓蒸餾除去溶劑，以矽膠管柱層析法(以己烷：乙酸乙酯=8：1→4：1→1：1溶出)對所獲得之殘留物進行純化，獲得18.0 g(73%)之無色透明糖漿狀物質之目標化合物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.37-0.49(2H,m),0.62-0.68(1H,m),0.77-0.82(1H,m),1.20(3H,s),1.32(3H,d, J=6.6 Hz),1.44(9H,s),2.46(2H,dd,J=33.2,9.3 Hz),2.68(1H,d,J=8.8 Hz),3.27(1H,q,J=6.6 Hz),3.31-3.34(1H,m),4.71(1H,s),7.19-7.34(5H,m)。

MS(ESI)m/z：331(M+H)⁺ 。

[參考例21]

(7S)-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷

於(7S)-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-[(1R)-苯乙基]-5-氮雜螺[2.4]庚烷(18.0 g，54.5 mmol)之甲醇(180 mL)溶液中，加入10%鈀碳觸媒(含水52.8%，9.00 g)，於氫氣環境下，於室溫下攪拌18小時之後，進而於40℃之油浴中攪拌5.5小時。過濾除去觸媒後，將溶劑減壓乾燥固化，獲得13.4 g(定量)之白色固體之目標化合物的粗產物。

¹ H-NMR(400 MHz,CDCl₃ )δ ppm：0.38-0.43(1H,m),0.54-0.61(2H,m),0.74-0.80(1H,m),1.08(3H,s),1.44(9H,s),2.75(1H,d,J=7.6 Hz),2.78(1H,d,J=7.1 Hz),3.13(1H,d,J=11.5 Hz),3.73-3.77(1H,m),4.45(1H,s)。

MS(ESI)m/z：227(M+H)⁺ 。

[參考例22]

7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸

將(7S)-7-(第三丁氧基羰基胺基)-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷(13.4 g，54.5 mmol)、6,7-二氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．二氟化硼錯合物(17.9 g，49.5 mmol)、及三乙基胺(8.97 mL，64.4 mmol)溶解於二甲基亞碸(52 mL)中，於40℃油浴中加熱攪拌17小時。將反應液注入冷水(1000 mL)中，過濾取出所析出之固體。對該固體加入乙醇：水=5：1之混合溶液(180 mL)及三乙基胺(15 mL)，加熱回流1.5小時。將反應混合物減壓乾燥固化，將所獲得之殘留物溶解於乙酸乙酯(150 mL×2)中，以10%檸檬酸水溶液(200 mL)、水(200 mL)、飽和食鹽水(100 mL)進行清洗。以無水硫酸鈉乾燥有機層之後，減壓蒸餾除去溶劑。將所獲得之殘留物溶解於氯仿：甲醇=9：1之混合溶液(100 mL)中，加入矽膠(10 g)，攪拌1小時。過濾除去矽膠，以氯仿：甲醇=9：1之混合溶液(50 mL×2)進行清洗，再將濾液合併，進行濃縮乾燥固化。將殘留物於冰浴冷卻下溶解於濃鹽酸(200 mL)之後，於室溫下攪拌30分鐘，以氯仿(400 mL×5)清洗反應液。於冰浴冷卻下，於水層中添加10 mol/L之氫氧化鈉水溶液，以使pH成為11.8，繼而以鹽酸將pH調整為7.4之後，以氯仿(1000 mL×3)進行萃取。以無水硫酸鈉乾燥有機層之後，減壓蒸餾除去溶劑。自乙醇中對所獲得之殘留物進行再結晶純化，且進行減壓乾燥，獲得18.5 g(79%)之淺粉紅色粉末之目標化合物。

以該產物之¹ H-NMR為代表之儀器分析資料與實施例11之化合物之資料完全一致。即，於具有7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基之喹諾酮類衍生物中，高活性化合物之實施例11中所揭示之喹諾酮類衍生物之5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基之7位得立體構型可判定為(7S)。

[試驗例1]

對以下實施例之所揭示之式(I)之化合物之1/2水合物測定抗菌活性。抗菌活性之測定方法係依據日本化學療法學會指定之標準方法進行，將其結果以MIC(微革蘭氏/mL)為單位表示於表1。表中之菌株中，金黃色葡萄球菌，87037及S.pneumoniae,J24係耐喹諾酮性菌。將Levofloxacin(LVFX)、Gatifloxacin(GTFX)、及Ciprofloxacin(CPFX)之MIC值合併進行表示。

又，依據日本化學療法學會之標準方法對式(I)之化合物之1/2水合物之抗結核菌活性進行測定(化學療法學會志1981年，第29巻，第76~79頁)，將其結果以MIC(μg/mL)為單位表示，對感受性菌之活性示於表2，對耐喹諾酮性結核菌之活性示於表3。RFP係Rifampicin。式(I)之化合物之1/2水合物對結核菌顯示出優異之抗菌活性。

[試驗例2]小鼠肺局部感染模型中之治療效果

使用耐盤尼西林(Penicillin)性肺炎球菌(PRSP)之小鼠肺局部感染模型，經口投與式(I)之化合物之1/2水合物，對該等之治療效果進行研究。

於氯胺酮．甲苯噻混合液麻醉下，對雄性CBA/JNCrlj系小鼠(3~4週齡，日本Chrales River實驗室：1群4隻)滴鼻接種使用Todd Hewitt液體培養基進行厭氧培養之PRSP 033806株。於該感染模型中，於感染2小時及8小時後，分別以圖2中之用量(25、50及100 mg/kg/day)經口投與式(I)之化合物之1/2水合物(僅1天之治療，1天用量為50、100及200 mg/kg/day)。對無處理對照組投與注射用蒸餾水。

測定藥劑投與前不久之無處理組(感染2小時後，前對照)、藥劑投與第二天之無處理組(感染第二天，後對照)及藥劑投與組之肺內菌數，將其作為治療效果之指標。

[試驗例3]大鼠單純性膀胱炎模型(大腸桿菌)中之治療效果

感染模型：對自前一天起禁水之大鼠(Cr1：CD(SD)(IGS)系，雌性，7週齡，日本Charles River實驗室，1群4隻)施行氯胺酮．甲苯噻混合麻醉之後，將大腸桿菌E77156株經尿道接種於膀胱內(1.2×10⁷ CFU/大鼠)。接種後，以防止菌液排出為目的，將尿道口阻塞2小時，於解除阻塞之同時再開始給水。

藥劑投與：分別以5、20及80 mg/kg之投與量，於感染第二天單次經口投與式(I)之化合物的1/2水合物。

有效性評價：測定即將藥劑之前、藥劑投與第二天之無處理群(感染兩天後)及藥劑投與組之膀胱內菌數，將其作為治療效果之指標。

結果：式(I)之化合物之1/2水合物，與治療開始時相比較可見細菌數有意義之減少(圖2)。由此可表明，式(I)之化合物之1/2水合物與先前之試驗例相比，係可發揮優異治療效果之化合物。

[實施例1]7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．1/2水合物

於7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸(2.08 g)中，加入乙腈(16 mL)，加溫至約50℃使之溶解。將該溶液恢復至室溫後，一面攪拌1天，一面使結晶析出。過濾取出所析出之結晶，進行風乾，獲得1.19 g (57%)之目標化合物之1/2水合物。對本結晶測定粉末X射線繞射(圖3)、熱分析(TG/DTA)(圖4)及元素分析，可確認，其係1/2水合物之目標化合物。

元素分析：C₂₁ H₂₃ N₃ O₄ F₂ ．1/2H₂ O；

計算值：C，58.87；H，5.65；N，9.81；F，8.87。

實測值：C，58.73；H，5.65；N，9.94；F，8.87。

粉末X射線繞射之測定條件如下：

裝置：PHILIPS，X'Pert-MPD PW3050

掃描速度：0.015° 2θ/s

掃描範圍：5~40°

熱分析(TG/DTA)之測定條件如下：

熱分析裝置：SEIKO電子工業，SSC5200 TG/DTA220

升溫速度：10℃/min

環境：氮氣200 mL/min

[評價例1]吸脫濕行為

對實施例1中所獲得之7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．1/2水合物，以大氣壓型自動水蒸汽吸附裝置研究其吸脫濕行為。將結果示於圖5。可判明，該結晶由濕度變化引起之重量變化為1%以內，且穩定。

[評價例2]加熱脫水後之吸脫濕變化

對實施例1中所獲得之7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基- 1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．1/2水合物，研究其加熱脫水(60℃)後之吸脫濕變化。將其結果示於圖6。脫水後之液化迅速，且吸濕後之行為與加熱處理前無變化。

[評價例3]加熱脫水後之晶形變化

對實施例1中所獲得之7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．1/2水合物，研究其加熱處理之晶形變化。將其結果示於圖7。可認為，其脫水後維持結晶狀態，於繞射圖案上亦僅有微小不同，即使吸水亦可恢復至穩定之1/2水合物而迅速液化。

[評價例4]結晶之穩定性

於25℃，相對濕度為0、52、93%之環境下，將實施例1中所獲得之7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．1/2水合物保存3天，研究其重量變化及晶形。晶形係利用粉末X射線繞射及熱分析之測定加以判定。其結果為，重量變化微小(表4)，且晶形亦未產生變化。

[評價例5]化學穩定性

將實施例1中所獲得之7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺 [2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．1/2水合物，於濕熱條件(40℃，相對濕度75%)及乾熱條件(50℃，相對濕度0%)下保存2週，及將其保存於光照射條件下。將結果示於表5。本發明之化合物於濕熱及乾熱條件下穩定，且不會產生含量降低，然而，於光照射下可見著色變化、殘存率稍有降低。

圖1係表示式(I)之化合物之1/2水合物對PRSP小鼠肺局部感染模型之治療效果的圖。

圖2係表示式(I)之化合物之1/2水合物對由大腸菌引起的大鼠單純性膀胱炎模型之治療效果的圖。

圖3係表示本發明化合物[7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟代環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸之1/2水合物]之粉末X射線繞射光譜的圖。

圖4係表示本發明化合物之熱分析(TG/DTA)光譜的圖。

圖5係表示本發明化合物之吸脫濕行為之圖案的圖。

圖6係表示本發明化合物於加熱脫水(60℃)後之吸脫濕變化之圖案的圖。

圖7係表示本發明化合物於加熱處理時之X射線繞射光譜中之變化圖案的圖。

Claims

一種化合物，其係7-[(7S)-7-胺基-7-甲基-5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基]-6-氟-1-[(1R,2S)-2-氟環丙基]-8-甲氧基-1,4-二氫-4-氧代喹啉-3-羧酸．1/2水合物。
一種化合物，其係以下述式表示。
一種醫藥，其含有如請求項1或2之化合物。
如請求項3之醫藥，其係感染症預防治療用醫藥。
一種醫藥組合物，其含有如請求項1或2之化合物及藥學上所容許之載體。
如請求項5之醫藥組合物，其係感染症預防治療用醫藥組合物。
一種請求項1或2之化合物之用途，其係用於醫藥製造。
如請求項7之用途，其中醫藥係感染症預防治療用醫藥。