FI109996B

FI109996B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen D-vitamiinisarjan 25-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi

Info

Publication number: FI109996B
Application number: FI951614A
Authority: FI
Inventors: Martin Haberey; Guenter Neef; Gerald Kirsch; Andreas Steinmeyer; Katica Schwarz; Herbert Wiesinger; Ruth Thieroffekerdt
Original assignee: Schering Ag
Priority date: 1992-10-06
Filing date: 1995-04-05
Publication date: 2002-11-15
Also published as: HUT70562A; WO1994007853A1; ES2117150T3; SK45895A3; DK0663902T3; NO309599B1; FI951614A; FI951614A0; JP3565847B2; KR950703526A; CA2146429A1; IL107185A0; DE59308257D1; HU221588B; CA2146429C; NO951318D0; CN1042026C; AU5177193A; NZ256862A; MX9306204A

Description

, 109996 >

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen D-vitamiini-sarjan 25-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi

Esillä olevan keksintö koskee menetelmää terapeut-5 tisesti käyttökelpoisten 25-karboksyylihappojohdannaisten valmistamiseksi, joiden yleinen kaava on I

A b f R19 15 [ R (I), a3o v'""......'/^>,OR1 jossa R1 ja R3 ovat toisistaan Tippumatta vetyatomeja, suora- tai haaraketjuisia tyydyttyneitä Ci-9-alkanoyyliryh-20 miä tai aroyyliryhmiä, . R19 ja R19a ovat kumpikin vetyatomeja tai muodostavat yh- ···· dessä eksosyklisen metyleeniryhmän, * A ja B ovat yhdessä ketohappiatomi tai A on ryhmä OR24 ja B on vetyatomi tai A on vetyatomi ja B on ryhmä OR24, 25 jossa R24 on vetyatomi tai suora- tai haaraketjuinen tyy-: dyttynyt Ci-g-alkanoyyliryhmä tai aroyyliryhmä, R21 ja R21a ovat toisistaan Tippumatta vetyatomeja, kloori-tai fluoriatomeja, Ci-4-alkyyliryhmiä tai yhdessä me-tyleeniryhmä, tai muodostavat yhdessä hiiliatomin 20 _··._ 30 kanssa 3 - 7-jäsenisen tyydyttyneen tai tyydyttymättömän karbosyklisen renkaan, • "·· R4 ja R4a ovat samanaikaisesti kumpikin vetyatomeja, kloori- tai fluoriatomeja, trifluorimetyyliryhmiä, suora- tai haa- .

2 109996 raketjuisia C^-hiilivetytähteitä tai R4 ja R4a muodostavat yhdessä hiiliatomin 25 kanssa 3 - 7-jäsenisen tyydyttyneen tai tyydyttymättömän karbosyklisen renkaan, ja Y on jokin ryhmistä -C(0)NR5R5R5', -C(0)0R6, -C(0)SR6, -CN, joissa R5 ja 5 R5 toisistaan riippumatta ja R6 tarkoittavat kukin vetyatomia tai suora- tai haaraketjuista C1.8-alkyyliryhmää ja R6 lisäksi tyydyttymätöntä, suora- tai haaraketjuista C3_8-hii- li vety tähdettä tai ryhmää ~(CH2)m-CH^ (CH2)n t jossa m = 10 0 tai 1 ja n = 2, 3, 4, 5 tai 6 ja, kun m = 1, niin n voi olla 1, sekä menetelmä niiden valmistamiseksi, tässä menetelmässä käytettävät välituotteet, näitä johdannaisia sisältävät farmaseuttiset valmisteet ja näiden johdannaisten käyttö lääkkeiden valmistukseen.

15 Edullisesti R1, R3 ja R24 ovat kukin vetyatomeja.

Mahdollisina alkanoyyliryhminä ollessaan R1, R3 ja R24 on edullisesti johdettu tyydyttyneistä karboksyylihapoista, varsinkin etikkahaposta, propionihaposta, voihaposta, iso-voihaposta, pivaliinihaposta tai valeriaanahaposta. Aroyy-20 liryhmistä on lähinnä mainittava bentsoyyliryhmä.

. Ryhmät R4 ja R4a ovat edullisesti metyyli-, etyy- •••\ li-, n-propyyli-, n-butyyli-, isopropyyli-, isobutyyli tai tert-butyyliryhmiä. Myös vastaavat tyydyttymättömät kak- • · ' λ’ sois- ja/tai kolmoissidoksia sisältävät ryhmät tulevat ky-23 ’ symykseen.

:.· * Ryhmistä R21 ja R21a on toisella myös edullisesti ·/· ·' jokin näistä merkityksistä toisen ollessa metyyliryhmä. Edullisesti R21 on myös vetyatomi ja R21a metyyliryhmä; • tässä tapauksessa on lisäksi edullista, että 24-asemassa 30;·. on β-hydroksiryhmä. R21 ja R21a ovat lisäksi edullisesti yhdessä metyleeniryhmä tai muodostavat yhdessä hiiliatomin ··'· 20 kanssa syklopropyylirenkaan.

Lisäksi edullisia ovat seuraavat substituutiomal- lit; * · · * 3 109996 R21 = F ja R21a = metyyli sekä R21 = metyyli ja R21a = F.

R4 ja R4a ovat myös edullisesti kumpikin metyyli-tai etyyliryhmiä tai muodostavat yhdessä tertiäärisen hii-5 liatomin 25 kanssa syklopropyyli-, syklobutyyli-, syklo-pentyyli- tai sykloheksyylirenkaan.

Alkyyliryhmistä R5, R5 ja R6 alkyyliryhmänä esimerkkejä ovat metyyli-, etyyli-, n-propyyli-, n-butyyli-, iso-propyyli-, isobutyyli-, tert-butyyliryhmä tai myös kor-10 keammat suora- tai haaraketjuiset alkyyliryhmät.

Lisäksi edullisia ovat seuraavat substituutiomal- lit:

Kun R19 ja R19a ovat kumpikin vetyatomeja, R21 on vetyatomi ja R21a on metyyliryhmä, 15 R21 ja R21a ovat yhdessä metyleeniryhmä, R21 ja R21a ovat kumpikin metyyliryhmiä tai R21 on vetyatomi ja R21a on fluoriatomi tai päinvastoin; kun R19 ja R19a tarkoittavat metyleeniryhmää, 20 R21 on vetyatomi ja R21a on metyyliryhmä, R21 ja R21a ovat yhdessä metyleeniryhmä tai R21 ja R21a ovat kumpikin metyyliryhmiä.

Esillä olevan keksinnön erityisen edullisia yhdis-’ teitä ovat seuraavat: 25' (5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- : ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste- ri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-26,27-dimetyyli-l,3,24-trihydrok-• si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy- 30. lihappometyyliesteri, ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles->··«’ ta-5,7,10( 19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli- *...· etyyliesteri, 4 109996 ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylieste-ri, ( 5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24S )-1,3, 24-trihydroksi-9,10-sekokoles-5 ta-5,7,10( 19), 22-tetraeeni-24-etikkahappometyyliesteri, ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihapponitriili, ( 5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies-10 teri, ( 5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo, ( 5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- 15 happometyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri, ( 5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 20 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- . happopropyyliesteri, « · · ( 5Z,7E,22E)-(1S, 3R, 24R)-l,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happobutyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- I 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- : Γ: happo-2-metyylipropyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- : 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- * 1 · · .90. happopentyy lies teri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- ·.: 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- :...: happoheksyyliesteri, 5 1C9996 ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3, 24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappodimetyyli-amidi, (5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-5 ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappodietyyliami- di, ( 5Z, 7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happodietyyliamidi, 10 (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happo-n-butyyliamidi, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-20-metyyli-1,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- 15 happometyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-20-metyyli-1,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli~ happometyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi-20 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- . happoetyyliesteri, ( 5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- • · happoetyyliesteri, ‘25: ( 5Z, 7E,22E)-(IS,3R,24R)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- :.| - 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- : happopropyyliesteri, ( 5Z,7E,22E)-(IS, 3R,24S)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- : .·. 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- • · · · ,3p. happopropyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS, 3R, 24R)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- ...: happo-1 -metyy lietyy 1 ies ter i, 6 109996 (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happo-1-metyylietyyliesteri, ( 5Z,7E,22E)-(IS, 3R,24R)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi-5 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- happobutyyliesteri, ( 5Z, 7E,22E)-(IS,3R,24S)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happobutyyliesteri, 10 (5Z, 7E, 22E)-( 1S,3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappometyyli-esteri, (5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24S )-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappometyyli-15 esteri, ( 5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19 ), 20, 22-pentaeeni-25-karboksyylihappoetyylies-teri, (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24S )-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-20 ta-5,7,10( 19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappoetyylies- teri, ···! ( 5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- * * ta-5, 7,10( 19 ), 20, 22-pentaeeni-25-karboksyylihappopropyyli- esteri, 25·: (5Z, 7E, 22E)-(IS,3R, 24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- : ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappopropyyli- • · · · esteri, • · · ' (5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- . ta-5,7,10( 19 ), 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-l-metyy- ‘3'0‘ lietyyliesteri, • · · ( 5Z, 7E, 22E)- (IS, 3R, 24S )-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19), 20, 22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-l-metyy-i : lietyyliesteri, t * t · • · · 7 109996 ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3, 24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappobutyyli-esteri, ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-5 ta-5,7,10( 19 ), 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappobutyyli- esteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappometyyliesteri, 10 (5Z,7E,22E)-(lS,3R,24S)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok- si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappometyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-15 lihappoetyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappoetyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-20 si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy- . lihappopropyyliesteri, ··*· ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24S )-20,21-metyleeni-l, 3,24-trihydrok- si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappopropyyliesteri, 25· (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok- j j I si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy- lihappo-1-metyylietyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok- : .·, si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy- • 1 · · 3P. lihappo-1-metyylietyyliesteri, ( 5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-...: si-9,10-sekokolesta-5, 7,10( 19), 22-tetraeeni-25-karboksyy- lihappobutyyliesteri, * » « · β 109996 (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappobutyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-5 kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappometyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappometyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri, 10 (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-15 kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyy-liesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- 20 kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyy- . liesteri, • · · ( 7E, 22E )-(1R, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappobutyyliesteri, ··* ( 7E, 22E )-(1R, 3R, 24S )-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- 25' kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappobutyyliesteri, !.· · (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-l9-nor-9,10-seko- • t * ·’ : kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylies- teri, : ( 7E, 22E)-(1R, 3R, 24S )-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- ,30. kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylies- teri, ···' ( 7E, 22E)-(1R, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste-f ri, I * 9 1G9996 (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylies-teri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-5 kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies- teri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies-teri, 10 (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli-etyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli-15 etyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylies-teri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-20 kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylies- . teri, , (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko- ***** kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappometyyliesteri, ( 7E, 22E)-(1R, 3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko- '25' kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri, !,: · (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko- : : kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko- j kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyy- * « · · 30. liesteri, • · · 10 109996 (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20, 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste- ri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-5 kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies- teri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli-etyyliesteri, 10 (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-l9-nor-9,10-seko- kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylies-teri, (7E,22E)-(1R,3R,20S,24R)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-15 etyyliesteri, (7E,22E )-(1R,3R,20S,24S)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-etyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,20R,24R)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19-20 nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo- . etyyliesteri, ( 7E, 22E )- (1R, 3R, 20R, 24S ) -20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo- » · etyyliesteri, *2K: ( 7E,22E)-(1R,3R,20S, 24R)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19- ♦ 1 : nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l- i : : metyylietyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,20S,24S)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-l9- ’ nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l- • » · · j3p. metyylietyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,20R,24R)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19-··.: nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l- t t < metyylietyyliesteri, I · I t . · 1 · u 109996 (7E,22E)-(1R,3R,20R,24S)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5, 7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyyliesteri, (5Z,7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3, 24-trihydroksi-9,10-sekokoles-5 ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylieste- ri, (5Z, 7E, 22E)-( 1S,3R, 24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylieste-ri, 10 (5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyyli-propyyliesteri, ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24S )-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyyli-15 propyyliesteri, ( 5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyylies-teri, ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24S )-1,3, 24-trihydroksi-9,10-sekokoles- 20 ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyylies- , teri, > · · *, ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles-

> < «· I

ta-5, 7,10( 19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylieste-i.! ri, (5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- • .

j · ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste- •*V; ri, (5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R )-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- '· ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies- ,¾¾ teri, * * * • > ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- =..! ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli- « * i etyyliesteri, > I * ' f »

• > I

* * * ·

I I * I

I f « 109996 12 (5Z, 7E, 22E)-( IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylieste-ri, ( 5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles-5 ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyyli- propyyliesteri, (5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyylies-teri, 10 (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-20-metyyli-24-okso- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-20-metyyli-24-okso- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- 15 happo-1-metyylietyyliesteri, ( 5Z, 7E, 22E ) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-26a, 27-syklo-26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar-boksyylihappoetyyliesteri, ( 5Z, 7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-26a,27-syklo-20 26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar- ,:. boksyylihappoetyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S, 3R, 24R )-1,3,24-trihydroksi-26a, 27-syklo- • « , 25a-homo-9,lO-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar- ··* boksyylihappo-1-metyylietyyliesteri, 2( 5Z, 7E, 22E)-(IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-26a,27-syklo- :,: : 26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar- V · boksyylihappo-1-metyylietyyliesteri,

Luonnossa esiintyvät D2- ja D3-vitamiinit (vrt.

: D-vitamiinin yleinen kaava) ovat sinänsä biologisesti inaktiivisia ja muuttuvat biologisesti aktiivisiksi meta- boliiteikseen vasta maksassa tapahtuvan 25-aseman tai mu- *;·· nuaisisissa tapahtuvan 1-aseman hydroksyloitumisen jäi- • · ’···’ keen. D2- ja D3-vitamiinien vaikutus perustuu plasman • Ca+t-peilin ja plasman fosfaattipeilin stabiloi tumiseen; 35; ne vaikuttavat plasman Ca++-peilin alenemista vastaan.

109996 "3VA^V28 > Y„)r-CH3 h3c 17 2 27/\ .

ch3 XRb 5 11f 13 14

]® H

/ I 19 5 1 jCHo 10 10 H0n

Ergokalsiferoli: Ra=Rb=H, Rc=CH3 D2-vitamiini 15 Kaksoisidos C-22/23

Kolekalsiferoli: Ra=Rb=Rc=H D3-vitamiini 25-hydroksikolekalsiferoli: Ra=Rc=H, Rb=0H la-hydroksikolekalsiferoli: Ra=0H, Rb=Rc=H 20 la-dihydroksikolekalsiferoli: Ra=Rb=OH, Rc=H Kalsitrioli

Kalsium- ja fosfaattiaineenvaihduntaan aiheuttaman selvän vaikutuksen lisäksi D2- ja D3-vitamiineilla ja nii-25”. den synteettisillä johdannaisilla on myös uudiskasvua ehkäisevää vaikutusta ja solujen erilaistumisvaikutusta ··* (H.F. De Luca, The Metabolism and Function of Vitamin D in * ’ Biochemistry of Steroid Hormones, julk. H.L.J Makin, 2nd :.·: Edition, Blackwell Scientific Publications 1984, s. 71 - 3Ό-* ·’ 116).

D-vitamiinin käytössä voi kuitenkin esiintyä ylian- • ;*; nostusilmiöitä (hyperkalsemia).

24-asemassa hydroksyloituja Ια-kolekalsiferoleja on ·. aikaisemmin kuvattu julkaisussa DE-A-2 526 981; niiden 3&j myrkyllisyys on vähäisempi kuin vastaavan ei-hydroksyloi- • · ’···* dun Ια-kolekalsiferolin myrkyllisyys. Hydroksyloiduille : yhdisteille on ominaista kalsiumabsorption selektiivinen aktivoituminen suolistossa ja Ια-kolekalsiferoliin verrat- 109996 14 tuna heikompi absorboituminen luustossa. Kansainvälisessä patenttihakemuksessa WO 87/00 834 kuvattuja D-vitamiinin 24-hydroksianalogeja voidaan käyttää solujen epänormaalin uudiskasvun ja/tai soluerilaistumisen aiheuttamien 5 häiriöiden käsittelemiseen ihmisillä ja eläimillä.

De Luca on jo lyhyesti maininnut erilaisten 1,25-dihydroksi-homo-D-vitamiinij ohdannaisten ominaisuuksien eroavuuksista koskien luustoabsorptiovaikutusta ja HL-60 soluerilaistumista. Luustoabsorptiovaikutus in vitro on 10 siten suorana mittana kalsiumin mobilisoitumisesta in vivo.

Lopuksi julkaisussa EP-A-0 421 561 on kuvattu 24-sykloalkyylimetyyli-substituoituj a D-vitamiinij ohdan-naisia, joiden vaikutusspektri on edullisempi kuin kalsi-15 triolilla. Kun niiden vaikutukset kalsium- ja fosfaattiai-neenvaihduntaan ovat kalsitrioliin verrattuna selvästi heikommat, niin uudiskasvua ehkäisevä vaikutus ja solueri-laistumisvaikutus pysyvät lähes ennallaan.

Sen sijaan keksinnön mukaisella menetelmällä 20 valmistetuille D-vitamiinisarjan 25-karboksyylihappojoh-dannaisille on näihin rakenteelli-sesti läheisiin yhdis-teisiin verrattuna ominaista, että niiden vaikutukset . soluerilaistumiseen ja hyperkalsemiaan vielä vahvemmin ···] eroavat toisistaan.

25 Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettujen : yhdisteiden D-vitamiiniaktii-visuus määritetään kalsi- · triolireseptori-kokeella. Se suo-ritetaan käyttäen nuorien sikojen suolesta saatua erityis-tä reseptoriproteiinia.

·;··· Reseptoripitoista sideproteiinia inkuboidaan koe- .·". 30 putkessa 2 tuntia 4 °C:ssa 3H-kalsitriolin (5 x 1CT10 • · · mol/1) kanssa reaktiotilavuutena 0,270 ml ilman koeainetta : " ja koeaineen kanssa. Vapaan ja reseptorisidotun kalsitrio- ’...· Iin erottamiseksi suoritetaan hiili-dekstraani-absorptio (Charcoal-Dextran-Absorption). Sen suorittamiseksi lisä- » ,·, : 35 tään jokaiseen koeputkeen 250 μΐ hiili-dekstraanisuspen- siota ja koeputkia inkuboidaan 4 °C:ssa 20 minuuttia. Sit- 1G9996 15 ten näytteitä lingoltaan 4 °C:ssa 10 000 g:ssä 5 minuuttia. Päällä oleva neste dekantoidaan ja 1 tunnin tasapainottumisen jälkeen Picofluor 15 TM:ssä näytteet mitataan β-laskimessa.

5 Verrattaessa koesubstanssin ja referenssisubstans- sin (merkitsemätön kalsitrioli) erilaisilla konsentraa-tioilla vertailusubstanssin (3H-kalsitrioli) vakiokonsen-traatiossa saatuja kompetitiokäyriä toisiinsa saadaan kom-petitiokerroin (KF) . Se määritellään sellaiseksi kulloin-10 kin käytetyn koesubstanssin ja referenssisubstanssin osamääräksi, joka tarvitaan 50-%:isen kompetition saamiseen :

Koesubstanssin konsentraatio 50-%:isessa 15 KF = kompetitiossa

Referenssisubstanssin konsentraatio 50-%:isessa kompetitiossa

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetuille 20 yhdisteille on yhteistä, että niillä kaikilla on huomattava affiniteetti kalsitriolireseptorin suhteen.

• · ·

Erilaisten kalsitriolijohdannaisten akuutin hyper-kalseemisen vaikutuksen määrittämiseksi suoritettiin seuraavassa kuvattu koe: ·:··; 25 Kontrollin (liuotusperusaine) , referenssisubstans- • sin (1,25 (OH) 2-D3 = kalsitrioli) ja koesubstanssin vaikutus • * * · testattiin antamalla niitä ihonalaisena ruiskeena 10 tavallisen urosrotan (140 - 170 g) ryhmille, jokaiselle kerran. Rottia pidetään koeaikana erityishäkeissä veden ja ... 30 mineraaliaineiden erittymisen mittaamiseksi. Virtsa koo- *;·’ taan kahtena eränä (0 - 16 tuntia ja 16 - 22 tuntia) .

: \. Ajankohtana 16 tuntia annetaan suun kautta kalsiumannos (0,1 mM Ca 6,5-%:isessa a-hydroksipropyyliselluloosaliuok-sessa, 5 ml/eläin) korvaamaan rehun poisjäämisen aiheutta-\ > 35 ma kalsiumsaannin puuttuminen. Kokeen lopussa eläimet ta- 1C 9 9 9 6 16 petaan katkaisemalla kaula ja niistä valutetaan veri seerumin kalsiumarvojen määrittämiseksi. Primaarinen seulon-takoe suoritetaan in vivo yhdellä ainoalla standardiannok-sella (200 pg/kg). Valituilla substansseilla tulos varmis-5 tetaan määrittämällä annos-vaikutus-suhde.

Hyperkalsemiavaikutus havaitaan kontrolliin verrattuna kohonneista seerumin kalsiumpeilin arvoista.

Substanssiryhmien ja kontrollien sekä koesubstans-sin ja referenssisubstanssin välillä esiintyvien erojen 10 merkitsevyys varmistetaan sopivilla tilastollisilla menetelmillä. Tulos ilmoitetaan annossuhteena DR (DR = koe-substanssiannos/referenssisubstanssiannoskerroin vaikutusten ollessa vertailukelpoisia).

Kalsitriolianalogien erilaistumista stimuloiva vai-15 kutus saadaan myös kvantitatiivisesti. Kirjallisuudesta on tunnettua (Mangelsdorf, D.J. et ai., J. Cell. Biol. 98: 391 - 398 (1984)), että käsittelemällä in vitro ihmisen leukemiasoluja (promyelosyyttilinja HL 60) kalsitriolilla saadaan solut erilaistumaan makrofageiksi.

20 HL 60 -soluja viljellään kudosviljelyväliaineessa (RPMI - 10 % vasikansikiöseerumia) 37 °C:ssa 5 % C02 sisäl-tävässä ilmassa.

* · , Substanssin testaamiseksi solut erotetaan linkoa- ·] maila ja siirretään fenolipunaista sisältämättömään kudos- 2¾ ’ viljelyväliaineeseen, 2,0 χ 105 solua/ml. Koesubstanssit i.: : liuotetaan etanoliin ja laimennetaan fenolipunaista si- • · · ·.· * sältämättömällä kudosviljelyväliaineella haluttuun kon- sentraatioon. Laimennusasteet sekoitetaan solususpension ! kanssa suhteessa 1:10 ja tätä substanssipitoista solusus- • « » · £0'; pensiota pipetoidaan kutakin 100 pl 96-reikäisen levyn sy- ·, vennyksiin. Kontrolliksi lisätään solususpensioon vastaa- * · · ·)·· vasti liuotinta.

"···’ 96 tunnin inkuboinnin jälkeen 37 °C:ssa 5 % C02 si- sältävässä ilmassa jokaiseen 96-reikäisen levyn syvennyk- • * · · 35’; sen solususpensioon lisätään 100 pl NBT-TPA-liuosta (Nit- [ 109996 17 roblautetratsolium (NBT), loppukonsentraatio suspensiossa 1 mg/ml, tetradekanoyyliforbolmyristaatti-13-asetaatti (TPA), loppukonsentraatio suspensiossa 2 x 10'7 ml/1).

Inkuboimalla 2 tuntia 37 °C:ssa 5 % C02 sisältävässä 5 ilmassa TPA:n stimuloiman solunsisäisen happiradikaalien vapautumisen seurauksena NBT pelkistyy liukenemattomaksi formatsaaniksi makrofageiksi erilaistuneissa soluissa.

Reaktion lopuksi 96-reikäisen levyn syvennyksistä imetään neste pois, syvennykseen takertuneet solut kiinni-10 tetään lisäämällä metanolia ja kiinnityksen jälkeen kuiva taan. Muodostuneiden solunsisäisten formatsaanikiteiden liuottamiseksi jokaiseen syvennykseen pipetoidaan 100 μΐ kaliumhydroksidia (2 val/1) ja 100 μΐ dimetyylisulfoksi-dia, jonka jälkeen ultraäänikäsitellään 1 minuutin ajan.

15 Formatsaanin konsentraatio määritetään spektrofotometri- sesti 550 nm:ssä. Mittana HL 60 -solujen erilaistumisin-duktiosta makrofageiksi on muodostuneen formatsaanin konsentraatio. Tulos ilmoitetaan myös annossuhteena (DR = tekijä koesubstanssiannos/referenssisubstanssiannos ver-20 tailukelpoisille vaikutuksille).

Kalsitriolireseptorikokeen tulokset sekä tulokset HL 60 -solujen erilaistumisinduktion annossuhteen ja hy-perkalsemian annossuhteen määrityksistä ovat seuraavassa : ·* yhteenvetona: 25 ’ Koeyhdisteet: : ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ·' ta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri 10a ! (5Z,7E,22E)-(lS,3R,24R)-l,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- 3Ό6 ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli- \ etyyliesteri 13a ··** ( 5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24R)-1,3, 24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies-• teri 19a 18 109996 (5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19 ),22-tetraeeni-25-karboksyylihappodimetyyli-amidi 31a (5Z,7E,22E)-(IS, 3R,24R)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi-5 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- happoetyyliesteri 46a (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happopropyyliesteri 48a 10 (5Z,7E,22E)-(1S, 3R,24S)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happopropyyliesteri 48b (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-20-metyyli-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-15 happo-1-metyylietyyliesteri 50a ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10( 19 ), 20, 22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-l-metyy-lietyyliesteri 64a (7E,22E)-(1R,3R,20R,24S)-20-fluori-1,3,24-trihydroksi-19-20 nor-9,10-sekokolesta-5, 7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-.:. etyyliesteri 111 ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- • · . ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylieste- » · ri 125 25 ' (5Z, 7E, 22E)-( IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ·.: : ta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo 21a • it V * ( 5Z , 7E, 22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- : happometyyliesteri 22a • «t · 3Q‘; (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-;;; happoetyyliesteri 23a ( 5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo-: 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- ^5*. happopropyyliesteri 24a i incog f-,

2 g I c > /' y U

( 5Z, 7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9,10-sekokolesta-5, 7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happobutyyliesteri 25a ( 5Z, 7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo-5 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- happo-2-metyylipropyyliesteri 26a Vertailuyhdiste: kalsitrioli

Re septorisidonnan kompetitiokerroin Annossuhde Annossuhde, 20 Yhdiste KF HL 60 -solut hyperkalsemia 6a 4,1 1,3 100 10a 2,4 0,6 100 13a 2,1 0,3 1500 19a 1,8 0,2 100 15 31a 2,6 0,8 100 46a 4,1 1,3 100 48a 2,8 0,2 >100 48b 16 1 100 50a 2,4 0,6 >100 20 64a 2,7 2 »100 111 11 4 >100 > 125 3,6 2 100 • » 21a 32 >1000 1000 * ·

Kalsitrioli 1 11 25 ' Esitetyillä yhdisteillä on kalsitriolireseptorin !.· · suhteen kalsitriolin kaltainen affiniteetti, mutta osit- V 1 tain vahvempi agonistinen aktiivisuus in vitro (HL 60 -toimintakoe). Hyperkalsemia sen sijaan indusoituu in vivo •vasta selvästi korkeammilla annoksilla kuin kalsitriolil- 30 i\ la.

• » · \ Vapaa karboksyylihappo 21a, joka saattaisi olla • i · ···’· koeyhdisteiden mahdollinen metaboliitti, sitoutuu kuiten-* 1 » kin huomattavasti huonommin reseptoriin in vitro ja on in » I · vivo käytännöllisesti katsoen inaktiivinen.

1G P 9 9 6 20

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettujen yhdisteiden alentuneen hyperkalsemiariskin vuoksi yhdisteet sopivat erityisen hyvin sellaisten sairauksien hoitoon käytettävien lääkkeiden valmistukseen, joille on tun-5 nusomaista liiallinen uudiskasvu (hyperproliferaatio), esim. ihon hyperproliferatii-viset sairaudet (psoriaasi) ja pahanlaatuiset kasvaimet (leukemia, paksusuolensyöpä, rintasyöpä) ja akne (J. Invest. Dermatol., voi. 92 nro 3, 1989). Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan myös käyttää 10 sellaisten häiriöiden käsittelemiseen ja ennaltaehkäisyyn, joille on tunnusomaista immuunisysteemin tasapainon häiriintyminen, esimer-kiksi autoimmuunisairauksien, kuten diabetes mellitus -sairauden ja elinsiirtojen hylkimisreaktioiden käsittelyyn (iulkaisu WO-A-91/00 855). Keksinnön 15 eräässä erityisen edullisessa suoritusmuodossa ennen käsittelyä kohde-elimessä osoitetaan olevan kalsitriolire-septorej a.

Edelleen yllättäen havaittiin, että käsittelemällä paikallisesti hiirien, rottien ja marsujen ihoa ihon 20 punaisuus voidaan saada lisääntymään ja orvaskeden paksuus kasvamaan. Ihon punaisuuden lisääntyminen todetaan väri-:··' mittauslaitteella kvantitatiivisesti saatavan puna-arvon * ‘ kohonneesta arvosta. Puna-arvo on 24 tunnin välein tehdyn kolmen substanssiapplikaation (annos 0, 003 %) jälkeen 25 tyypillisesti kohonnut 1,5-kertaiseksi. Orvaskeden pak-suuntuminen mitataan kvantitatiivisesti histologisesta • * · · preparaatista. Se on tyypillisesti kohonnut 2,5-kertaiseksi. Proliferoivien orvaskesisolujen (solusyklin S-vai-heessa olevat solut) lukumäärä saadaan läpivirtaussytome- • · ... 30 trisesti ja se on tyypillisesti kohonnut. Nämä keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettujen D-vitamiinisarjan i · | *·· 25-karboksyylihappojohdan-naisten ominaisuudet näyttävät : : osoittavan yhdisteiden sopivan kuihtuneen (atrooppi- ;·| sen) ihon terapeuttiseen käsittelyyn, kuten luonnolli- \ . 35 sen vanhenemisen aiheuttaman tai liiallisen valoaltis- • ‘ tumisen johdosta ennenaikaisesti vanhentuneen ihon tai 21 1G9996 lääkinnän, kuten glukokortikoidikäsittelyn aiheuttaman ihoatropian terapeuttiseen käsittelyyn.

Lisäksi voidaan olettaa, että paikallisesti käytettyinä uudet yhdisteet voivat edistää haavojen paranemista.

5 Yleisen kaavan I mukaiset keksinnön yhdisteet ovat myös vaikuttavia ihmisen lymfosyyttien uudiskasvun ja in-terleukiini (IL-2) -synteesin estoaineita. Johtuen lymfo-syyttiuudiskasvun ja IL 2 -synteesin estymisestä keksinnön mukaisten yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden alhaisil-10 la konsentraatioilla yhdisteet sopivat immuunisysteemin sairauksien hoitoon, esim. atooppisen tautiryhmän (atoop-pinen ihottuma, astma) sairauksien, autoimmuunisairauksien (mukaan liukien diabetes mellitus), elinsiirtojen hylkimisreaktioiden ja AIDS:in hoitoon. Kalsitriolia koskien 15 havaittiin, että se reseptorivälitteisen mekanismin johdosta estää paitsi IL 2 -erityksen myös muiden tulehdusta edistävien sytokoiinien tuoton. Kun yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden sitoutuminen reseptoriin on suunnilleen yhtä hyvä kuin kalsitriolilla, niin ne sopivat tuleh-20 dustautien kuten niveltulehduksen, haavaisen paksunsuolentulehduksen ja Crohnin taudin hoitamiseen. Autoimmuunisai-rauksien, elinsiirtojen hylkimisreaktioiden ja AIDS:in kä-sittelyssä uusia yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä voi-. daan edullisesti käyttää yhdessä muiden immuunisuppressii- ;2*5 visten aineiden, kuten syklosporiini A:n ja FK 506:n kans- : sa.

* · · *

Lisäksi todettiin, että tietyt yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet vaikuttavat HL 60 -soluissa yllättäen kalsitriolin vaikutuksen vastaisesti. 26,27-syklosarjaan « · · •SfO' (R4 + R4a + C20 = syklopropyyli) kuuluvien karboksyylihappo- ’·’ estereiden tähteessä Y olevan R6:n ketjunpituuden kasvaessa ·;· reseptoriaffiniteetin pysyessä samana D-vitamiiniaktiivi- suus selvästi heikkenee in vitro ja in vivo. Agonismin muuttuminen antagonismiksi tapahtuu propyyli- ja butyyli- *35"· estereiden 24a ja 25a välillä. Siten 25a:n affiniteetti • · 22 1G9P96 reseptoriin on sama kuin kalsitriolilla, mutta sillä ei ole HL 60 -soluissa lainkaan erilaistumista stimuloivaa vaikutusta. Tämä kalsitrioliantagonistinen ominaisuus HL 60 -soluissa jatkuu tähteen R6 ketjunpituuden lisään-5 tyessä. Kun kalsitriolia inkuboidaan kasvavina konsentraa-tioina samanaikaisesti yhdisteiden kanssa, joiden antagonismia HL 60 -soluissa testataan, niin kalsitriolin indusoiman NBT-pelkistyksen eston on havaittu olevan kalsitriolin erilaistumista stimuloivan vaikutuksen mittana, 10 joka estovaikutus on täydellinen esimerkiksi yhdisteen 25a ylimäärän ollessa kalsitriolin suhteen 100-kertainen. Sama koskee myös yhdistettä 26a sekä korkeampia karboksyylihap-poestereitä.

Seuraavassa on lueteltu joitakin koetuloksia, jois-15 ta nähdään agonistisen vaikutuksen aleneminen R6:n ketjunpituuden kasvaessa:

Yhdiste Reseptorisidonnan kompetitiokerroin Annossuhde Annossuhde, 20 KF HL 60 -solut hyperkalsemia

Kalsitrioli \ 11 22a 4,0 2,2 >100 !!!!: 23a 2,8 2,9 »100 24a 4,6 22 »100 "2£ 25a 1,0 >1000 >1000 26a 2,5 >1000 1000 # « ♦ • · · · • · * • · ·

Sellaisia yhdisteitä, jotka ovat kalsitriolin antagonisteja, voidaan käyttää hyperkalsemian terapiassa, ku- • · · •EiÖ ten esim. D-vitamiinimyrkytyksessä tai kalsitriolin ja ' kalsitriolinkaltaisella tavalla vaikuttavien aineiden myr-··· kytyksissä, tai jyväiskasvamataudeissa esiintyvän munuais-ten ulkopuolisen kohonneen kalsitriolisynteesin terapias- • · · \ sa. Myös paraneoplastisia hyperkalsemioita (esim. osteo- I I · •35· lyyttisissä luumetastaaseissa) ja kilpirauhasen liikatoi-• · · • i · 23 1G 9 99 6 minnassa esiintyvää hyperkalsemiaa voidaan käsitellä kal-sitrioliantagonisteilla.

Edelleen kalsitrioliantagonisteja voidaan käyttää hedelmällisyyskontrolliin. Naaras- ja uroseläinten lisään-5 tymiselinten alueella esiintyy D-vitamiinireseptoreja. On tunnettua, että D-vitamiinipuutteesta kärsivien naaras- ja uroseläinten hedelmällisyys on alentunut. Korvaamalla lyhytaikaisesti kalsitrioli voidaan lisääntymissuoritusta parantaa. Siten kalsitrioliantagonistit pystyvät vaikutta-10 maan sekä naaraiden että urosten hedelmällisyyteen.

Kun kalsitrioli tietyillä edellytyksillä vaikuttaa immuunisuppressiivisesti, niin kalsitriolireseptoriantago-nistit ovat myös immuunistimulantteja, joita voidaan käyttää esim. infektion vastustuskyvyn ollessa heikko.

15 On tunnettua, että kalsitrioli voi moduloida kar vankasvua. Kalsitrioliantagonisteilla voi siten olla terapeuttista käyttöä käsiteltäessä ei-toivottua karvankasvua, esim, hirsutismia.

Esillä oleva keksintö koskee siten myös farmaseut-20 tisia valmisteita, jotka sisältävät ainakin yhtä yleisen kaavan I mukaista yhdistettä yhdessä farmaseuttisesti hy-väksyttävän kantaja-aineen kanssa.

·;··: Yhdisteet voidaan formuloida liuoksiksi farmaseut tisesti hyväksyttävien liuottimien kanssa tai sopiviin ..25 farmaseuttisiin liuottimiin tai kantaja-aineisiin valmis- : ,·. tetuiksi emulsioiksi, suspensioiksi tai dispersioiksi tai • · · pillereiksi, tableteiksi tai kapseleiksi, jotka sisältävät ’ sinänsä tunnetulla tavalla kiinteitä kantaja-aineita. Pai kalliseen käyttöön yhdisteet formuloidaan edullisesti voi-•3O: teiksi tai salvoiksi tai muun sen kaltaisen paikalliseen V · käyttöön sopivan lääkevalmisteen muotoon. Jokainen tällai-nen koostumus voi sisältää myös muita farmaseuttisesti hy- • · I t .···, väksyttäviä ja myrkyttömiä apuaineita, kuten esim. sta-

I I

bilisaattoreita, antioksidantteja, sideaineita, värejä, • · · 35 emulgointiaineita tai makua parantavia aineita. Yhdisteitä 109996 24 annetaan lääkkeeksi sopivan steriilin liuoksen muodossa edullisesti injektiona tai suonenesisäisenä inf.uusiona tai oraalisena annosmuotona ruuansulatuskanavan kautta tai paikallisesti voiteiden, salvojen, vesien muodossa tai 5 sellaisen sopivan transdermaalisen laastarin avulla, joka on kuvattu julkaisussa EP-A 0 387 077.

Päiväannos on 0,1 μg/potilas/päivä - 1 000 μς (1 mg)/potilas/päivä, edullisesti 1,0 μg/potilas/päivä - 500 μg/potilas/päivä.

10 Keksinnön mukaisia yhdisteitä annetaan lääkkeeksi tavallisesti analogisesti tunnetun, psoriaasin käsittelyyn käytetyn valmisteen "Clacipotriol" annostuksen kanssa.

Lisäksi keksintö koskee kaavan I mukaisten yhdisteiden käyttöä lääkkeiden valmistukseen.

15 Yleisen kaavan I mukaisia terapeuttisesti käyt

tökelpoisia 25-karboksyylihappojoh-dannaisia valmiste-taan keksinnön mukaisesti siten, että yhdiste, jonka yleinen kaava on II

r21 R21a

J

' · 25 f R19 f jT 00, rV"V^or1· jossa ... 30 R1 ja R3 ovat alkyyli- tai aryylisubstituoituja, tai sekä alkyyli- että aryyliryhmillä substituoituja • 1·· silyyliryhmiä, edullisesti tert-butyylidimetyylisilyyli-, : : tert-butyylidifenyylisilyyli- tai tri-isopropyylisilyyli- ;·’ ryhmiä, * 1 1 . 35 A' ja B' ovat yhdessä ketoryhmä tai toinen näistä ' kahdesta substituentista on mahdollisesti suojattu hydrok- 1 ϋ 9 9 9 6 25 siryhmä ja toinen on vetyatomi (edellä määritelty silyyli-suojaryhmä, tetrahydrofuranyyli-, tetrahydropyranyyli-, metoksimetyyli-, metoksietoksimetyyli- tai trimetyylisi-lyylietoksimetyyliryhmä), R19, R19a, R21, R21a, R4 ja R4a 5 merkitsevät samaa kuin edellä yleisessä kaavassa I, ja Y' tarkoittaa samoja tähteitä kuin Y yleisessä kaavassa I, tai kun Y:n tulee kaavassa I olla -C(0)0R6, jossa R6 on vety, niin Y' on mahdollisesti 2-(trimetyylisilyyli)etyyli-karboksyylihappoesteriryhmä, 10 muutetaan yleisen kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi samanaikaisesti tai peräkkäin lohkaisemalla siitä hydrok-si- ja mahdollisesti karboksyylihapposuojaryhmiä ja mahdollisesti osittain, peräkkäin tai täydellisesti esteröi-mällä vapaat hydroksiryhmät ja/tai, kun Y’ on karboksyyli-15 ryhmä -COOH, haluttaessa esteröimällä se tai muuttamalla se amiditähteeksi -C(0)NR5R5a.

Silyylisuojaryhmmien tai trimetyylisilyylietoksime-tyyliryhmän tapauksessa niiden lohkaisemiseen käytetään tetrabutyyliammoniumfluoridia, fluorivetyhappoa tai fluo-20 rivetyhappo/pyridiiniseosta; muiden eetteriryhmien tapauk sessa nämä lohkaistaan katalyyttisesti hapon, esimerkiksi /I' p-tolueenihapon, pyridinium-p-tolueenisulfonaatin, etikka- ·:·1 2 3: hapon, kloorivetyhapon avulla tai happamen ioninvaihtajan avulla.

• · ..23 Kun R6:n tulee yleisessä kaavassa I olla vety, niin .·. Y' on yleisessä kaavassa II edullisesti 2-(trimetyylisi- 2 i « · "···1 lyyli)etyylikarboksyylihappoesteriryhmä, jonka lohkaisemi nen tapahtuu jollakin mainituista fluorireagensseista. Syntynyt vapaa karboksyylihappo voidaan mahdollisesti ta- • · « :310· vanomaisin menetelmin saattaa edelleen reagoimaan esterik- V 1 si tai amiditähteeksi -C(0)NR5R5’ tai tioesteriksi -C(0)SR6.

3

Yleisen kaavan II mukaisten lähtöaineiden valmistus tapahtuu erilaisista lähtöyhdisteistä kulloinkin riippuen lopullisesti halutusta 10- ja 20-aseman substituutiomal-&5 · lista.

• M

26 109996

Sellaisten yleisen kaavan II mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa R19 ja R19a muodostavat yhdessä ek-soasemassa olevan metyleeniryhmän, käytetään lähtöyhdis-teenä M. Calverleyn et ai. julkaisussa Tetrahedron 43, 5 4609 (1987) tai patenttihakemuksessa WO 87/00 834 kuvaamia

(20S)-formyylisekopregnatrieenejä, joiden yleinen kaava on m CHO

10

Ys ΛΡ); 0r3' jossa R1 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä.

Yhdisteen III muita kuin viitejulkaisuissa mainit- 20 tuja suojaryhmiä saadaan analogisin menetelmin käyttäen vastaavasti modifioituja silyyliklorideja (esim. tert-bu- ;· tyylidifenyylisilyylikloridia tert-butyylidimetyylisilyy- • · « » likloridin sijasta).

Kun lopullisesti toivottujen yleisen kaavan I mu- 2*5 kaisten yhdisteiden valmistukseen tarvittavien yleisen • · , . kaavan II mukaisten yhdisteiden 20-asemassa tulee olla i : : kalsitriolista poikkeava substituutiomalli, niin yleisen i · » ’·’ kaavan III mukaiset yhdisteet muutetaan uusilla menetel

millä 20-modifioiduiksi analogeiksi, joiden yleinen kaava •äCi on IV

» * • · I I i I · 27 1C9P96 R21a ^CH°

H

io YS M, R1'o''' ^^^OR3' jossa R1 , R3 , RZ1 ja R21a merkitsevät samaa kuin edellä.

15 Yleisen kaavan V mukaisten yhdisteiden

c CHO

{ίίΗ

CP

. I H

Λ (V),

"M CC

i R1 θ' t · · syntetisoimiseksi (kaava V vastaa kaavaa IV, jossa R21 ja . . R21a ovat metyyliryhmiä) deprotonoidaan yleisen kaavan III ‘30’ mukainen yhdiste emäksen, kuten natriumhydridin, kalium-*. hydridin, litiumdi-isopropyyliamidin tai kalium-tert-buta- nolaatin avulla ja saatetaan reagoimaan elektrofiilisen, C : metyyliryhmän luovuttavan reagenssin, kuten CH3X:n (X = Cl, . Br, I, tosylaatti, mesylaatti) kanssa.

I · » » · 28 109996

Homologiset alkyyliryhmät R21 ja Rzla liitetään analogisesti homologisen alkyyliryhmän luovuttavan reagenssin avulla.

Kloori- tai fluoriatomin liittäminen 20-asemaan 5 suoritetaan α-halogenoimalla käyttäen standardimenetelmää.

Sivuketjun rakentamiseksi, kun lopullisesti R21:n tulee olla vetyatomi ja R21a:n metyyliryhmä, yleisen kaavan III mukainen yhdiste tai yleisen kaavan IV (tai vastaavasti V) mukainen yhdiste saatetaan Wittig-reaktioon N-me- 10 toksi-N-metyyli-2-( trifenyylifosforanylideeni )asetamidin (D.A. Evans et ai., J. Am. Chem. Soc. 112, 7001 (1990)) tai muun analogisesti reagoivan fosforanylideenin kanssa korotetussa lämpötilassa yleisen kaavan VI mukaiseksi yhdisteeksi 15 21 S.213 o -OMe dTo 20 j s 'ϊν\ .25 • ,·. jossa R1 , R3 , R21 ja R21a merkitsevät samaa kuin edellä.

Reaktio suoritetaan edullisesti lämpötila-alueella 90 - 120 °C liuottimessa, kuten esim. dimetyylisulfoksi-dissa (DMSO) tai tolueenissa.

:3Ö: Seuraavassa reaktiovaiheessa yleisen kaavan VI mu- t · * * kaisesta yhdisteestä poistetaan pelkistämällä amiinitäh-··· de -N(CH3) (0CH3) pelkistysaineella kuten di-isobutyylialu- j··*. miniumhydridillä (DIBAH) tai litiumaluminiumhydridillä liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa tai muussa eette- » i » I » 29 1G 9 9 9 6 rissä alhaisessa lämpötilassa (-60 - -100 °C), jolloin

saadaan homologinen aldehydi, jonka yleinen kaava on VII

R21a R21 5 ” Oi5" VN (VII); R1'0^^^W’ 15 Jos siinä R21 = H ja R21a = CHa, niin kyseessä ovat jo julkaisusta WO-A-91/00 855 tunnetut yhdisteet.

Sopivan nukleofiilisen komponentin additiolla alde-hydin VII karbonyylifunktioon voidaan nyt rakentaa sellainen sivuketju, joka lopullisesti halutaan yleisen kaavan 20 I mukaiseen 25-karboksyylihappojohdannaiseen. Jos kuitenkin R4:n ja R4a:n tulee muodostaa syklopropyylirengas yhdes-sä hiiliatomin 25 kanssa, niin on käytettävä reaktiotietä, joka on kuvattu sivun 32 riviltä 1 alkaen.

Vahvan emäksen, kuten esim. litiumdi-isopropyyli-<:2*S amidin, litiumdietyyliamidin, litium-, natrium- tai ka-;liumheksametyylidisilatsidin vaikutuksella deprotonoidaan j·:*. ensin yhdiste, jonka yleinen kaava on VIII * $ r4'^V*· (vuo, jossa R4 ja R4a merkitsevät samaa kuin edellä yleisessä , *. kaavassa II R4 ja R4a ja Y' merkitsee samaa kuin edellä :35‘ yleisessä kaavassa II sillä poikkeuksella, että R4 ja R4a

» » t I I

30 1 0 9 9 9 6

eivät voi muodostaa syklopropyylirengasta yhdessä kes-kushiiliatomin kanssa, liuottimessa, kuten tetrahydrofu-raanissa tai muussa eetterissä lämpötila-alueella -60 --90 °C ja sen jälkeen saatu yhdiste liitetään additioreak-5 tiolla yleisen kaavan VII mukaiseen yhdisteeseen, jolloin saadaan yhdiste, jonka yleinen kaava on IX

r21 R21a OH

10 /.f I (IX), 15 rI'o^'^^oR3' jossa 20 R1 , R3 , R4 , R4a ja Y' merkitsevät samaa kuin edellä.

Tällöin saadaan sekä 24a- että 24fi-hydroksi-isomee-reja, jotka voidaan erottaa kromatografisesti tässä tai *”*: myöhemmässä vaiheessa. Seuraaviin reaktioihin voidaan si- ten käyttää haluttaessa joko erotettuja diastereomeereja • ;3p tai niiden seosta. Siinä tapauksessa, että RZ1 = H ja R21a = i CH3 ja R19 ja R19a ovat yhdessä metyleeniryhmä (ns. "normaa- • » « * lisarja"), yleisen kaavan I mukaisten 246-hydroksiyhdis- * teiden affiniteetti kalsitriolireseptorin suhteen on kor- . keampi kuin 24a-yhdisteiden affiniteetti (alhaisemmat re- •;3P septoriarvot KF).

» » · * Kun lopullisissa yleisen kaavan I mukaisissa yhdis- *:* teissä A:n ja B:n halutaan tarkoittavan yhdessä ketohappi-atomia, niin yleisen kaavan IX mukainen 24-hydroksiyhdiste . *. hapetetaan tässä tai myöhemmässä vaiheessa mangaanidioksi- k * * dilla, pyridiniumkloorikromaatilla, bariummanganaatilla i * t · · 31 1G9996 tai oksalyylikloridi/dimetyylisulfoksidilla 24-ketoyhdis-teeksi.

Yleisen kaavan IX mukaisen yhdisteen muuttaminen vastaavaksi yleisen kaavan II mukaiseksi yhdisteeksi ta-5 pahtuu esimerkiksi säteilyttämällä UV-valolla ns. "trip-lettisensibilaattorin" läsnä ollessa. Keksinnön puitteissa tähän käytetään antraseenia. Pilkkomalla 5,6-kaksoissidok-sen π-sidos, kääntämällä A-rengas yksinkertaisen 5,6-si-doksen ympäri 180° ja muodostamalla uudelleen 5,6-kaksois-10 sidos saadaan stereoisomeria käännettyä vastakkaiseksi 5,6-kaksoissidoksen kohdalla. Sen jälkeen mahdollisesti läsnä oleva 24-hydroksiryhmä varustetaan mahdollisesti suojaryhmällä (tetrahydrofuranyyli-, tetrahydropyranyyli-, metoksimetyyli-, metoksietoksimetyyli- tai trimetyylisi-15 lyylietoksimetyyliryhmä) alalla tunnetuissa tavanomaisissa olosuhteissa. Tällä menettelytavalla tehdään mahdolliseksi silyyliryhmien R1 ja R3 puhdas lohkaiseminen erityisesti silloin, kun R1 ja R3 molemmat ovat tert-butyylidifenyy-lisilyylisuojaryhmiä. Lopuksi mahdollisesti läsnä oleva 20 24-hydroksisuojaryhmä viimeisessä vaiheessa poistetaan jälleen katalyyttisesti happamen agenssin (pyridinium-p- * € tolueenisulfonaatti [PPTS], p-tolueenisulfonihappo, etik- :*’i kahappo, kloorivetyhappo, hapan ioninvaihtaja) avulla ja vapaat hydroksiryhmät saatetaan mahdollisesti edelleen ...25 reagoimaan siten kuin edellä kuvattiin. Kun R1 ja R3 ovat ; kumpikin tert-butyylidimetyylisilyyli- tai tri-isopropyy-

Iti *'.[<* lisilyylisuojaryhmiä, niin suojaryhmien poistaminen voi- * * · daan suorittaa suoraan, so. ilman 24-hydroksiryhmän väliaikaista suojaamista, happamilla ioninvaihtajilla (p-tolu- * » · eenisulfonihappo, etikkahappo, kloorivetyhappo, pyridi- i * f V ‘ nium-p-tolueenisulfonaatti) tai antamalla tetrabutyyliam-··* moniumfluoridin (trihydraatti) tai fluorivedyn tai fluori- » * I * vety/pyridiinikompleksin vaikuttaa yhdisteeseen lämpötilassa 30 °C.

i i I

t · · « 109996

Kun haluttujen lopullisten aktiivisten yhdisteiden yleisessä kaavassa I R4 ja R4a muodostavat yhdessä hiiliatomin 25 kanssa 3- tai 4-jäsenisen sykloalkyyliryhmän, niin tarvittavien yleisen kaavan II mukaisten yhdisteiden val-5 mistuksessa on käytettävä (syklopropyylin tapauksessa) tai voidaan käyttää (syklobutyylin tapauksessa) toista reak-tiotietä: Lähtöyhdisteenä käytetään jälleen yleisen kaavan III mukaista yhdistettä, jonka karbonyyliryhmään lisätään 10 sivuketjunpidennykseksi vahvan emäksen, kuten esimerkiksi litiumdi-isopropyyliamidin avulla, C-H-hapan yhdiste, jonka yleinen kaava on XXVIII (D.F. Taber et ai., J. Org. Chem. (1992) 57, 436)

O

vV·' Z_(CHv (Vili),

2)P

20 V*™* jossa p on 1 tai 2. Tällöin esterin lohjetessa saadaan

;j· vapaa 25-karboks^ylihappo, jonka yleinen kaava on XXIX

R21a .·. R2’ " 0

* · «»S

·;?'? COOH

> ^—(ch2)?

Uci Jj^ (XXIX) ’’ 1* \\V3* rV ^OPi » « < i * •'35! jossa R1 , R3 ja p merkitsevät samaa kuin edellä.

33 1C9996

Kun Y ei lopputuotteessa ole substituoimaton kar-boksyyliryhmä, niin seuraava reaktiovaihe koskee johdannaisen muodostamista.

Karboksyyliryhmä voidaan lievissä olosuhteissa 5 (Synth. Commun. 12, 727 - 731 (1982)) -20 - -30 °C:ssa aktivoida saattamalla yleisen kaavan IX mukainen yhdiste reagoimaan metaanisulfonyylikloridin ja trietyyliamiinin kanssa ja käsittelemällä välituotteena saatua seka-anhyd-ridiä alkoholilla, jonka yleinen kaava on XXX

10 R60H ( XXX ),

jossa R6 merkitsee samaa kuin R6 kaavassa I, muuttaa se vastaavaksi esteriksi, jonka yleinen kaava on XXXI

15 R21a Λ

r21 R O

(i (xxx i) .;2$ • · • · · · · • · « · jossa R1 , R3 ja p merkitsevät samaa kuin edellä ja Yx on karboksyyliesteriryhmä -C(0)0R6, jossa R6 merkitsee samaa . . kuin edellä. Yleisen kaavan XXIX mukainen karboksyylihappo • · · • · · ‘30 voidaan myös tunnetuin menetelmin muuttaa yleisen kaavan • · · ‘’ XXXI mukaisen yhdisteen kanssa analogiseksi yhdisteeksi, '11 jossa Yx on amidiryhmä -C(0)NR5R5a tai syaaniryhmä.

Tämän jälkeen 24-ketoryhmä pelkistetään 24-hydrok- « » « siryhmäksi natriumboorihydridillä. Tällöin saadaan samoin I I · 3,5.’ kuin yleisen kaavan VI mukaisen yhdisteen nukleofiilises- 1 · ΙΠΟΟΟλ

34 \ L· s s J U

sä additioreaktiossa yleisen kaavan IV mukaisen aldehydin kanssa molemmat mahdolliset 24-hydroksi-isomeerit, joiden yleinen kaava on XXXII

p21a

5 r21 _ OH

io y jT (XXXII) 1' 3' ro' 15 jossa on 24a- tai 24B-hydroksiryhmä ja muut subs- tituentit ja p merkitsevät samaa kuin edellä.

Koskien isomeerejä ja niiden jatkoreaktioita pätee edellä yleisen kaavan IX mukaisten yhdisteiden yhteydessä 20 esitettyä. Täysin analogisesti yleisen kaavan IX mukaisen yhdisteen säteilytyksen kanssa tämän muuttamiseksi yleisen _ kaavan II mukaiseksi yhdisteeksi muutetaan yleisen kaavan ·;··: XXXII mukainen yhdiste (tai vastaavien 24-hydroksi-isomee rien seos) vastaavaksi yleisen kaavan II mukaiseksi yhdis- ..35 teeksi.

« · : Haluttujen yleisen kaavan I mukaisten lopputuottei- • · · * ,··.·. den valmistamiseksi tämän jälkeen läsnä olevat hydroksi-suojaryhmät poistetaan ja haluttaessa vapaat hydroksiryh-. . mät tavanomaisilla menetelmillä osittain, peräkkäin tai *90 täydellisesti esteröidään vastaavalla karboksyylihappoha- ‘ logenidilla (halogenidi = kloridi, bromidi) tai karboksyy- ·’:* lihappoanhydr idillä.

Kun yleisen kaavan I mukaisessa yhdisteessä Y on ,vapaa karboksyyliryhmä, niin myös tämä voidaan loppuvai-» · · i · * incog f, 35 * O Ο heessa esteröidä tavanomaisin menetelmin reagenssilla, joka tuottaa ryhmän -OR6.

Vapaiden hydroksiryhmien suojaryhmien poistaminen onnistuu yleensä käsittelemällä vastaavaa yleisen kaavan 5 II mukaista yhdistettä tetrabutyyliammoniumfluoridilla (trihydraatti) poolisessa liuottimessa, kuten esimerkiksi tetrahydrofuraanissa, mahdollisesti lisäten vähän jääetik-kahappoa. Mahdollisesti läsnä oleva 25-karboksyylihapon suojana oleva 2-(trimetyylisilyyli)etyyliryhmä poistuu 10 tällöin samalla.

Hydroksisuojaryhmät voidaan silloin, kun R4, R4a ja hiiliatomi 25 eivät muodosta yhdessä syklopropyylirengas-ta, poistaa myös käsittelemällä vastaavaa yleisen kaavan II mukaista yhdistettä happamella ioninvaihtajalla kuten 15 esimerkiksi "Dowex 50X8":11a liuottimessa kuten metano- li/metyleenikloridiseoksessa.

Vapaiden hydroksiryhmien osittainen, peräkkäinen tai täydellinen, kuitenkin erilainen, substituutio voidaan saada ottaen huomioon niiden erilaiset reaktiivisuudet ja 20 käyttäen esteröintireagenssin vastaavia moolimääriä.

Edelleen muun C-20-modifikaation (R21 + R21a = mety-leeni) saamiseksi valmistetaan yhdiste, jonka yleinen kaa-va on X

• : : cho •:2-S . f 11 ^ W. W| • t · t rS'o^'^^Nor1' .*. jossa R1 ja R3' merkitsevät samaa kuin edellä, joka yhdiste I I t 3^.' on johdettu yleisen kaavan IV mukaisesta yhdisteestä, jos- t · * 36 109996 sa R21 ja R21a muodostavat yhdessä metyleeniryhmän ja jonka trieenisysteemin isomerointi on jo suoritettu.

Tällöin yleisen kaavan III mukainen yhdiste muutetaan analogisesti julkaisussa WO-90/09 991 kuvatun mene-5 telmän kanssa (esillä olevassa tapauksessa R1 ja R3 ovat edullisesti tert-butyylidifenyylisilyyliryhmiä) yhdisteeksi, jonka yleinen kaava on XI

di" ili 15 VS (XI),

Rr0v"'VdNoR3· jossa R1’ ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä.

Saattamalla sellainen yleisen kaavan XI mukainen 20 17B-asetyyliyhdiste reagoimaan rikkiylideenin kanssa, joka tuotetaan tyyppiä Me3S*I~ tai Me3S*(0)I' olevista reagens-#>|·’ seista deprotonoimalla emäksen kuten kalium-tert-butano-·:**: laatin, natriumhydridin tai kaliumhydridin avulla, saadaan

·/: yhdiste, jonka yleinen kaava on XII

.23

N^WVO

: : :

bb: j] H

V (xn),

Td V π,·0^'·Ό>0Β3· * » » 37 Λ p O O Q f, I U > -· J o- jossa R1 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä ja jonka ste-reokemia C-20:ssa ei välttämättä ole yhtenäinen.

Saattamalla yleisen kaavan XII mukaiset epoksidit toisiintumaan emäksen, kuten esim. litiumdi-isopropyyli-5 amidin, litiumdietyyliamidin tai aluminiumisopropylaatin

avulla saadaan allyylialkoholeja, joiden yleinen kaava on XIII

/vlXu H

10 i I > 15 r''o""'^>oh3' jossa R1 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä, ja jotka muutetaan analogisesti aikaisemmin kuvatulla tavalla foto-20 kemiallisesti trieenisysteemin isomeroinnilla yhdisteeksi,

jonka yleinen kaava on XIV

';:^Xoh jii t t ‘tT: Jf (XIV), :3D: R3'o>'x,^/^oRr I · * jossa R1 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä. Tämän muut-_··, taminen yleisen kaavan X mukaiseksi yhdisteeksi tapahtuu • t sitten hapettamalla tunnetulla tavalla hapetusaineella, 3¾ ; kuten esim. mangaanidioksidilla, pyridiniumkloorikromaa-

III

38 1 0 9 9 9 6 tiliä, pyridiniumdikromaatilla, bariummanganaatilla tai oksalyylikloridi/DMSO:11a.

Edelleen eräs C-20-modifikaatio (R21 + R21a + C20 = syklopropyyli) valmistetaan saattamalla yleisen kaavan XIV 5 mukainen yhdiste reagoimaan tyyppiä I-CH2-Zn-I olevan me-talliorgaanisen yhdisteen kanssa, joka on muodostettu Zn/ Cu:sta, Zn/Ag:stä tai Et2Zn:stä ja CH2l2:sta (Simmons-Smith-reaktio), jolloin saadaan yhdiste, jonka yleisen kaavan on XV

10 /Λ .

H

R3'0^k>V0R1· 20 jossa Rr ja R3’ merkitsevät samaa kuin edellä.

Yleisen kaavan XV mukaisen yhdisteen alkoholifunk-tio saatetaan nyt reagoimaan hapetusaineen, kuten esim.

« · ·

pyridiniumkloorikromaatin, pyridiniumdikromaatin tai oksalyylikloridi/DMSO: n kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jonka *25 kaava on XVI

'·;·;· oho \3p\

J) H

o rV

35'i > · · 109996 39 jossa R1 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä, ja joka eroaa yleisen kaavan IV mukaisista yhdisteistä siinä, että R21 ja R21a muodostavat yhdessä kvarteerisen hiiliatomin C-20 kanssa syklopropyylirenkaan ja trieenisysteemi on jo 5 isomeroitu.

Sivuketjujen liittäminen yleisten kaavojen X tai XVI mukaisiin yhdisteisiin tapahtuu sitten täysin analogisesti sen kanssa, mitä yleisen kaavan III mukaista yhdistettä koskien kuvattiin, yleisten kaavojen XVII, XVIII ja 10 XIX mukaisten välituotteiden välityksellä, jolloin lopuksi saadaan yleisen kaavan II mukainen yhdiste, jossa R19 ja R19a molemmissa tapauksissa muodostavat yhdessä metyleeni-ryhmän ja R21 ja R21a samoin muodostavat yhdessä metyleeni-ryhmän tai muodostavat yhdessä C20:n kanssa syklopropyyli- 15 renkaan. R1', R3’, R4, R4a ja Y' merkitsevät samaa kuin edel- 2, A2’3 ° r21 -R2’a

YT ) R

JY ^ \Ύ* ^1111 '.:'2.6 R3'0."Y>»0R1· r3'o'"''^/^or1' * ' I » ·

/l·. n21a OH

R2' 1 i y> ιΥΐ3''Η 4 r43 I h f ’ / 25/ (XIX) R3’0xV',L^S0R1· ,ί0 1G 9 996

Diastereomeerierotukset tai hydroksiryhmien suoja-ryhmien poistaminen ja johdannaisten muodostaminen suoritetaan jo edellä kuvatulla tavalla. Haluttaessa voidaan ennen suojaryhmien poistamista jälleen 24-hydroksiryhmä 5 hapettaa edellä jo kuvatulla tavalla ketofunktioksi.

Sellaisten yleisen kaavan II mukaisten yhdisteiden synteti soimi seen, joissa R19 ja R19a ovat kumpikin vetyatomeja ("19-nor-sarja" ) käytetään kirjallisuudesta tunnettua aldehydiä, jonka kaava on XX 10 \___CHO

15 PO

(H.H. Inhoffen et ai., Chem. Ber. 93^, 780 (1958), Chem. Ber. 92, 1772 (1959); W.G. Dauben et ai., Tetrahedron

Lett. 30, 677 (1989)), jossa P on asyyli-, alkyyli- tai alkyylisubstituoitu silyyli- tai tetrahydropyranyyli-, 20 tetrahydrofuranyyli- tai metoksimetyylisuojaryhmä tai jokin muu alkoholisuojaryhmä.

I;' Hiiliatomissa 20 tapahtuvat rakennemodif ikaatiot r‘i voidaan suorittaa analogisesti edellä kuvattujen D-vita-miini johdannaisia koskevien menetelmien kanssa, jolloin » ♦ ..25 saadaan yhdisteitä, joiden yleinen kaava on XXI . ^ r21 jt21a ·. .*· ;3o: 4 \!’! Po (xxi) ··* jossa P merkitsee samaa kuin edellä ja R21 ja R21a ovat kum-pikin metyyliryhmiä tai tarkoittavat yhdessä metyleeniryh- • t i mää tai yhdessä hiiliatomin 20 kanssa syklopropyylirengas-§5/ ta. Lisäksi R21 voi olla fluoriatomi ja R21a metyyliryhmä, tai R21 metyyliryhmä ja R21a fluoriatomi.

41 1G999 6 Tämä substituutiomalli voidaan rakentaa seuraavasti:

Yleisen kaavan XXI mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan emäksen kuten di-isopropyylietyyliamiinin, tri-5 etyyliamiinin tai 2,5-di-tert-butyylipyridiinin ja sily-lointireagenssin kuten trimetyylisilyylikloridin tai tri-metyylisilyylitrifluorisulfonaatin kanssa, jolloin saadaan silylenolieetterien Ε,Ζ-seos, jonka yleisen kaavan on XXII

Natosi cp PO (XXII).

Reaktiolla elektrofiilisen fluorausreagenssin 15 (esim. N-fluoridifenyylisulfonimidi tms.) (E. Differding, H. Ofner, Synlett 187 (1991)) kanssa saadaan edellä määritelty yleisen kaavan XXI mukainen α-fluorialdehydi. Mahdollisesti esiintyvät diastereomeerit voidaan erottaa kromatografisesta ja saattaa erillisinä jatkoreaktioihin.

20 Edellä kuvattuja sellaisia 20-asemassa modifioituja yhdisteitä, mutta myös yleisen kaavan XXI mukaisia yhdis-1 !* teitä, joissa R21 = vety ja R21a = metyyli (normaalikonf igu- ·,·<· raatio) tai R21 = metyyli ja R21a = vety ( "20-epi-sarja" ), muutetaan siten kuin edellä koskien D-vitamiinijohdannai- * *

,,.25 siä kuvattiin (analogisesti reaktion III -» VI kanssa) yh-• /, disteiksi, joiden yleinen kaava on XXIII

R21 R21a o OMe is φ ^ po (xxiii) • Yleisen kaavan XXIV mukaisen yhdisteen suojaryhmä I I ► -35· poistetaan sitten standardiolosuhteissa: r

Ml 42 Λ C Π Γ Π <- I υ y y y u

Silyylieetterisuojaryhmien poistamiseen käytetään tetrabutyyliammoniumfluoridia (TBAF), fluorivetyä tai fluorivety-pyridiinikompleksia; tetrahydropyranyyli-, me-toksimetyyli- tai metoksietoksimetyylieetterien poistami-5 seen käytetään happamia reaktio-olosuhteita (pyridinium-p-tolueenisulfonaatti, p-tolueenisulfonihappo, etikkahappo, kloorivetyhappo, happamet ioninvaihtajat), jolloin saadaan yhdiste, jonka yleinen kaava on XXIV

10 R2' R2,a ° YS-vJI^QMe

ςϋ> L

15 HO (XXIV)

Vapaa hydroksyyliryhmä hapetetaan hapetusaineella (pyridiniumkloorikromaatti, pyridiniumdikromaatti, barium-manganaatti, oksalyyliklorifdi tai dimetyylisulfoksidi) 20 ketoniksi (yleisen kaavan XXV mukainen yhdiste) R^1 R21a 0 ^¥^AN-oMe I ςϋ i» :·Γ: ° (XXV).

Yleisen kaavan XXV mukainen yhdiste saatetaan sit- • · · · .30. ten reagoimaan anionin kanssa, joka on tuotettu emäksen • kuten n-butyylilitiumin tai litiumdi-isopropyyliamiinin

···'· avulla kirjallisuudessa tunnetusta yleisen kaavan XXVI

mukaisesta fosfiinioksidista (H.F. DeLuca et ai., Tetra- : .·. hedron Lett. 32 7663 (1991)) •Ί Ο ο C ί~- .·; 43 I u v S y 0 0

II

PPh b3o''' ^/Sor1’ (xxvi)

(jossa R1 ja R3 merkitsevät samaa kuin edellä kaavassa II: alkyyli- tai aryyli- tai alkyyliaryylisubstituoituja si-10 lyyliryhmiä) tuotetun anionin kanssa (Horner-Wittig-reak-tio), jolloin saadaan vastaavia yleisen kaavan XXVII mukaisia yhdisteitä R21 R21a O

JJ OMe 15 |^^/ Me ) 1 (XXVII) 20 R3'0\\N' \/VoR1'

Analogisesti "normaalisarjan" valmistuksen kanssa saadaan yleisen kaavan XXIII mukaisesta välituotteesta R21 R21a s cö [Γ (XXI") :3b: f) r3'0^'\^Sor1, t i vastaava yleisen kaavan II mukainen yhdiste, jossa R19 ja . R19a ovat molemmat vetyatomeja, ja tästä sitten edellä ku- 35.' vatulla tavalla yleisen kaavan I mukainen yhdiste.

Seuraavat esimerkit valaisevat lähemmin keksintöä.

109996 44

Normaalisarjän lähtöyhdisteiden valmistus 1) (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime-tyylietyyli)silyyli]oksi] -N-metoksi-N-metyyli-9,10-sekoko-la-5,7,10(19),22-tetraeeni-24-amidi (2) 5 Aldehydiä 1 (17,65 g) (Calverley, Tetrahedron 43 4609 (1987)) ja N-metoksi-N-metyyli-2-(trifenyylifosfor-anylideeni)asetamidia (26,97 g) (D.A. Evans et ai., J.

Am. Chem. Soc. 112 7001 (1990)) sekoitetaan 6 tuntia 105 °C:ssa DMSOrssa (101 ml). Jäähtynyt reaktioseos sekoi-10 tetaan NaCl-liuokseen, uutetaan etyyliasetaatilla, uute kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännös kro-matografoidaan silikageelillä etyyliasetaatilla. Saadaan 14,9 g yhdistettä 2 värittömänä kiteytyneenä öljynä.

lH-NMR(300 MHz, CDC13): δ = 0,05 ppm (s,12H); 0,57 (s,3H); 0,84 (s,9H); 0,87 (s,9H); 15 1,10 (d,7Hz,3H); 3,24 (s,3H); 3,72 (s,3H); 4,23 (m,lH); 4,53 (m,lH); 4,94 (br.s,lH); 4,99 (br.s.lH); 5,83 (d, J=llHz,lH); 6,33 (d,J=15Hz,lH); 6,45 (d,J=llHz,lH); 6,85 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH).

2) (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime-tyylietyyli) silyyli] oksi] -9,10-sekokola-5,7,10(19), 22-tet- 20 raen-24-aali (3)

Yhdisteeseen 2 (10,7 g) lisätään tipoittain tetra-hydrofuraanissa (54ml) -78 °C:ssa typpikehässä di-isobu-tyylialuminiumhydridiä (68,2 ml, 1,2 M tolueenissa) ja sekoittamista jatketaan -78 °C:ssa vielä 70 minuuttia.

..25 Seokseen lisätään tipoittain -78 °C:ssa 3,66 ml metanolia : .·. ja reaktioseos sekoitetaan jään ja kalium-natriumtartraat- tiliuoksen seokseen (1 1). Sitten lisätään 700 ml eetteriä • · · ja sekoitetaan 1,5 tuntia, seos uutetaan eetterillä, uute kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Öljymäinen *3’0: jäännös puhdistetaan silikageelillä etyyliasetaatti/hek- V ' saaniseoksella, jolloin saadaan 8,86 g yhdistettä 3 vaa- · leankeltaisena massana.

« * · I · 1G9996 45 3) (5E,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri (4a) 5 4,6 ml butyylilitiumia (1,6 M heksaanissa) tipute taan typpikehässä jäillä jäähdyttäen di-isopropyyliamiinin (1,13 ml) liuokseen tetrahydrofuraanissa (51,6 ml) ja seosta sekoitetaan vielä 15 minuuttia. Sitten seokseen tiputetaan -78 °C:ssa 0,99 ml isovoihappoetyyliesteriä ja 10 sekoittamista jatketaan 75 minuutia. Sen jälkeen tiputetaan samassa lämpötilassa 2,0 g yhdistettä 3 tetrahydrofu-raanissa (6,0 ml) ja sekoitetaan -78 °C:ssa 75 minuuttia. Reaktioseokseen lisätään -78 °C:ssa kyllästettyä NH4C1-liuosta, seos laimennetaan -10 °C:ssa jääkylmällä NaCl-15 liuoksella ja uutetaan eetterillä, uute kuivataan natrium-sulfaatilla ja haihdutetaan. Kromatografoimalla öljymäi-nen jäännös silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseok-sella saadaan eluointijärjestyksessä 730 mg (5E,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyy-20 li]oksi] -24-hydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetra- eeni-25-karboksyylihappoetyyliesteriä (4b) kiteytyneenä öljynä ja 520 mg otsikon yhdistettä 4a värittömänä öljynä. Seuraavissa reaktioissa kuvataan yhtä poikkeusta lukuunot-: : tamatta vain yhdisteen 4a jatkoreaktioita.

•:2$ 4) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1- j dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokoles- .· :*. ta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri (5a) , . 520 mg yhdistettä 4a liuotetaan tolueeniin (68 ml), •3P‘ liuokseen lisätään antraseenia (80 mg) ja 1 tippa trietyy-| » · *·' ’ liamiinia ja reaktioseosta säteilytetään 13 minuuttia typ- '!’ pikehässä elohopeasuurpainelampulla (Heraeus TQ 150) Py- i * * *; rex-lasin lävitse. Reaktioseos haihdutetaan ja jäännös . ", (600 mg) - yhdisteen 5a ja antraseenin seos - viedään suo- 35’..' raan seuraavaan silyylieetterin lohkaisuvaiheeseen.

t » 1 f: G C G i,

46 1 U

5) (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri (5b) 5 730 mg yhdistettä 4b (vrt. ohje 3) liuotetaan tolu- eeniin (95 ml), liuokseen lisätään antraseenia (80 mg) ja 1 tippa trietyyliamiinia ja reaktioseosta säteilytetään 15 minuuttia typpikehässä elohopeasuurpainelampulla (Heraeus TQ 150) Pyrex-lasin lävitse. Reaktioseos haihdutetaan ja 10 jäännös (845 mg) - yhdisteen 5b ja antraseenin seos - viedään suoraan seuraavaan silyylieetterin lohkaisuvaihee-seen.

6) (5E,7E,22E)- (IS,3R) -1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime-tyylietyyli)silyyli]oksi] -24-okso-26,27-syklo-9,10-sekoko- 15 lesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo (6) 38,8 ml butyylilitiumia (1,6 M heksaanissa) tiputetaan jäillä jäähdyttäen typpikehässä di-isopropyyliamii-niin (9,5 ml) tetrahydrofuraanissa (607 ml) ja sekoittamista jatketaan vielä 15 minuuttia. Sitten seokseen tipu-20 tetaan -78 °C:ssa 8,83 g 1-asetyylisyklopropaanikarboksyy-lihappometyyliesteriä (D.F. Taber et ai., J. Org. Chem. (1992) 57, 436) ja seosta sekoitetaan tunnin ajan. Sitten reaktioseokseen tiputetaan -78 °C:ssa aldehydiä 1 (Calver-ley, Tetrahedron 43 4609 (1987)) tetrahydrofuraanissa *;2*5 (18,4 ml) ja seosta sekoitetaan 1,5 tuntia. Reaktioseoksen ; annetaan sitten lämmetä 0 °C:seen 1,5 tunnin kuluessa ja ,··.·. sekoittamista jatketaan tässä lämpötilassa vielä 15 mi nuuttia. Seokseen lisätään -20 °C:ssa kyllästettyä NH4C1- . . liuosta, seos laimennetaan kyllästetyllä NaCl-liuoksella • · · • · * ^p/ ja uutetaan etyyliasetaatilla lisäten 5-%lista oksaalihappoa, uute kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan.

'1* Saatu raakatuote (11,90 g keltaista öljyä) esteröidään i’“: seuraavassa vaiheessa ilman enempää puhdistamista.

« * · . Puhdistamalla ohutkerroskromatografisesti (silika- 35’..' geeli, etyyliasetaatti/heksaani) saadaan NMR-näyte.

• · * 1 n O O Ci f ·.

47 ' w ·' L/ NMR (300 MHz,CDCl3): δ= 0,05 ppm (s,12H); 0,57 (s,3H); 0,84 (s,9H); 0,87 (s,9H); 1,10 (d,J=7Hz,3H); 1,73 (m,2H); 2,03(m,2H); 4,23 (m,lH); 4,53 (m,lH); 4,94 (br.s,lH); 4,97 (br.s.lH); 5,82 (d,J=llHz,lH); 5,85 (d,J=15Hz,lH); 6,43 (d,J=llHz,lH); 7,13 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH).

5 7) (5E,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime- tyylietyyli)silyylijoksi] -24-okso-26,27-syklo-9,10-seko-kolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyy-liesteri (7)

Yhdisteeseen 6 (11,90 g) lisätään tipoittain mety-10 leenikloridissa (119 ml) -30 °C:ssa peräkkäin 7,28 ml tri-etyyliamiinia ja 2,06 ml mesyylikloridia ja seosta sekoitetaan tunnin ajan. Sitten lisätään -30 °C:ssa peräkkäin 3,53 ml metanolia ja 0,43 g 4-dimetyyliaminopyridiiniä. 1,25 tunnin kuluttua -10 °C:ssa reaktioseos kaadetaan jää/ 15 NaHC03-liuokseen. Sitten seos laimennetaan NaCl-liuoksella, uutetaan etyyliasetaatilla, uute kuivataan natriumsulfaa-tilla ja haihdutetaan. Kromatografoimalla öljymäinen jäännös silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksella saadaan 4,10 g yhdistettä 7 värittömänä massana.

20 iH-NMR (300 MHz,CDCl3): 6= 0,05 ppm (s,12H); 0,57 (s,3H); 0,85 (s,9H); 0,89 (s,9H); 1,10 (d,J=7Hz,3H); 1,45 (m,4H); 3,73 (s,3H); 4,21 (m,lH); 4,53 (m,lH); 4,93 (br.s,lH); 4,95 (br.s,lH); 5,82 (d,J=llHz,lH); 6,40 (d,J=15Hz,lH); 6,44 (d,J=llHz,lH); 6,75 (dd,J=15Hz, ·:*·: J=9Hz,lH).

.·. 8) (5E, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3-bis [ [dimetyyli (1,1- dimetyylietyyli) silyyli ] oksi] -24-hydroksi-26,27-syklo-. .t 9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happometyyliesteri (8a) ♦ · ·

Yhdisteen 7 (2,0 g), tetrahydrofuraanin (4,8 ml) ja metanolin (5,8 ml) seokseen lisätään 11,2 ml cerium(III)-ί30· kloridi-heptahydraatin 0,4 M metanoliliuosta. Sitten lisä-V · tään typpikehässä jäillä jäähdyttäen annoksittain 310 mg .· natriumboorihydridiä. Jäillä jäähdytettyä reaktioseosta ··*. sekoitetaan vielä 45 minuuttia, sitten siihen lisätään • jää/vesiseosta. Seos uutetaan etyyliasetaatilla, uute kui-35 · vataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Kromatografoi- 48 10999ο maila jäännös silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseok-sella saadaan eluointijärjestyksessä 610 mg (5E,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyy- li]oksi]-24-hydroksi-26,27-syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10-5 (19 ),22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyyliesteriä (8b) ja 370 mg otsikon yhdistettä 8a kiteytyneenä öljynä.

Seuraavissa reaktioissa on kuvattu ainoastaan yhdisteen 8a jatkoreaktioita.

9) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1- 10 dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-26,27-syklo- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happometyyliesteri (9a) 370 mg yhdistettä 8a liuotetaan tolueeniin (53 ml), liuokseen lisätään antraseenia (61 mg) ja 1 tippa trietyy-15 liamiinia ja reaktioseosta säteilytetään 5 minuuttia typ-pikehässä elohopeasuurpainelampulla (Heraeus TQ 150) Py-rex-lasin lävitse. Reaktioseos haihdutetaan ja jäännös (435 mg) - yhdisteen 9a ja antraseenin seos - viedään suoraan seuraavaan silyylieetterin lohkaisuvaiheeseen.

20 Esimerkki 1 10) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi9,10- • ••l sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo- · etyyliesteri (10a) ·/ Yhdisteen 5a valmistuksessa saatua haihdutusjään- ·:*25 nöstä (600 mg) sekoitetaan huoneenlämpötilassa Dowex 50WX8:n (9,23 g) kanssa metanoli/metyleenikloridiseoksessa • · · * ι'Γ; (9:1) (22,5 ml) 25 tuntia. Suspensio suodatetaan, suodos haihdutetaan ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä ; t·, etyyliasetaatti/heksaaniseoksella. Saadaan 210 mg yhdis- • · · ‘3Cf tettä 10a vaahtona.

iH-NMRCSOO MHz,CDC13): δ = 0,58 ppm (s,3H); 1,05 (d,J=7Hz,3H); 1,17 (s,6H); 1,28 .••Ϊ' (t,J=7Hz,3H); 2,60 (m,2H); 4,08 (br.t,lH); 4,15 (q,J=7Hz,2H); 5,00 (br.s.lH); 5,32 (br.s.lH); *".: 5,36 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,55 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,02 (d,J=llHz,lH); 6,48 ; (d,J=llHz,lH).

49 1G 9 9 91,

Esimerkki 2 11) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri (10b) 5 Yhdisteen 5b valmistuksessa saatua haihdutusjään nöstä (845 mg) sekoitetaan huoneenlämpötilassa Dowex 50WX8:n (12,95 g) kanssa metanoli/metyleenikloridiseokses-sa (9:1) (31,6 ml) 25 tuntia. Suspensio suodatetaan, suo-dos haihdutetaan ja jäännös kromatografoidaan silikagee-10 Iillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksella. Saadaan eristet tyä 251 mg otsikon yhdistettä, sp. 133 - 134 °C.

Esimerkki 3 12) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-26,27-dimetyyli-l,3,24-trihydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25- 15 karböksyylihappometyyliesteri (11a) Lähtien aldehydistä 3 ja 2-etyylivoihappometyylies-teristä saadaan analogisesti yhdisteen 10a synteesisarjan kanssa yhdisteestä 4a otsikon yhdiste 11a vaahtona.

iH-NMR^OO MHz,CDC13): δ = 0,57 ppm (s,3H); 0,82 (t,J=7,5Hz,3H); 0,88 (t,J=7,5Hz,3H); 20 1,05 (d,J=7Hz,3H); 1,72 (q,J=7,5Hz); 2,95 (d,J=6,5Hz,lH); 3,72 (s,3H); 4,15 (br.t,lH); 4,23 (m,lH); 4,42 (m,lH); 5,00 (br.s,lH); 5,32 (br.s.lH); 5,37 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,55 ..‘.i* (dd, J=15Hz, J=9Hz, 1H); 6,02 (d,J=llHz,lH); 6,39 (d„J=HHz,lH).

·:**! Esimerkki 4 13) (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi9,10- ·;·2£ sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l- : metyylietyyliesteri (13a) • « · * Lähtien aldehydistä 3 (1,82 g) ja isovoihappoiso-propyyliesteristä saadaan analogisesti yhdisteen 4a ja 5a , , synteesin kanssa 580 mg (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3-bis- •äÖ [ [dimetyyli( 1,1-dimetyylietyyli )silyyli]oksi] -24-hydroksi- ’·' ’ 9,10-sekokolesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- ·; happo-l-metyylietyyliesteriä 12a, jossa on epäpuhtautena antraseenia.

• · . Silyylieetterin lohkaisemiseksi lisätään 20 ml tet- 5S · rahydrofuraania ja 1,06 g tetrabutyyliammoniumfluoridi- 50 1C9596 trihydraattia. Reaktioseosta sekoitetaan 50 minuuttia 60 °C:ssa ja seoksen jäähdyttyä se kaadetaan jää/NaHC03-liuokseen. Sitten uutetaan etyyliasetaatilla, uute kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Kromatografoimal-5 la silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksella saadaan 68 mg yhdistettä 13a vaahtona.

iH-NMR (300 MHz,CDCl3); δ = 0,57 ppm (s,3H); l,05(d,J=7Hz,3H); 1,16 (s,3H); 1,17 (s,3H); 1>2Ί (d,J=7Hz,6H); 2,70 (br.d,lH); 4,05 (m,lH); 4,24 (m,lH); 4,44 (m,lH); 5,05 (m,2H); 5,31 (br.s,lH); 5,36 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,51 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,02 10 (d,J=llHz,lH); 6,38 (d,J=llHz,lH).

Esimerkki 5 14) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happometyyliesteri (15a) 15 Lähtien aldehydistä 3 (1,82 g) ja isovoihappometyy- liesteristä saadaan analogisesti yhdisteen 4a ja 5a synteesin kanssa (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli-(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-seko-kolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyy-20 liesteri yhdiste 14a, jossa on epäpuhtautena antraseenia.

Silyylieetterin lohkaisemiseksi se liuotetaan tetrahydro- *·· furaaniin (5 ml) ja jääetikkahappoon (0,098 ml). Liuos- • · * * ....· ta käsitellään tetrabutyyliammoniumfluoridi-tetrahydraa- tiliä (865 mg) 3 kertaa seuraavasti: 2 tuntia 40 eC:ssa; ,,ä$ 1,5 tuntia 40 eC:ssa ja 12 tuntia huoneenlämpötilassa; . 5 tuntia 60 eC:ssa, jolloin tavanomaisen jatkokäsitte- t t · lyn jälkeen (vrt. 13a) saadaan 110 mg otsikon yhdistettä, * sp. 145 °C.

Esimerkki 6 » · Ϊ3Ό:· 15) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- ·.· ' 9,10-sekokola-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-etikkahappometyy- .·· liesteri (16a) ,'". Lähtien aldehydistä 3 ja 2-etikkahappometyylieste- ristä saadaan yhdisteen 15a synteesisarjan kanssa analogi-36 sesti otsikon yhdiste 16a vaahtona.

1 f · O O 0 f,

51 I U > ? O

iH-NMR^OO MHz,CDC13): ö= 0,57 ppm (s,3H); 1,05 (d,J=7Hz,3H); 2,54 (d,J=5Hz,2H); 2,70 (br.d.lH); 3,71 (s,3H); 4,23 (m,lH); 4,47 (m,2H); 5,00 (br.s.lH); 5,32 (br.s.lH); 5,40 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,56 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,01 (d,J=UHz,lH); 6,38 (d,J=llHz,lH).

5 Esimerkki 7 16) (5Z,7E,22E)-(lS,3R,24R)-l,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happonitriili (17a) Lähtien aldehydistä 3 ja isovoihapponitriilistä 10 saadaan analogisesti yhdisteen 6 synteesisarjan kanssa yhdisteestä 4a otsikon yhdiste 17a kiteytyneenä öljynä, sp. 138 °C.

Esimerkki 8 17) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 15 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- happopropyyliesteri (19a) Lähtien aldehydistä 3 ja isovoihappopropyylVesteristä saadaan analogisesti yhdisteen 6a synteesisarjän kanssa yhdisteestä 4a välituote (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-20 1,3-bist [dimetyyli( 1,1-dimetyylietyyli )silyyli]oksi] -24- hydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar- « boksyylihappopropyyliesteri (18a) ja siitä otsikon yhdiste * « « « · 19a kiinteänä aineena, sp. 123 °C.

* *

Esimerkki 9 ‘25 18) (5Z,7E,22E)-(1S,3r,24R)-1,3,24-trihydroksi- i « * · · 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- ί happo (21a) Lähtien aldehydistä 3 (3,10 g) ja isovoihappo-2-; (trimetyylisilyyli )etyyliesteristä - valmistettu isovoi- t · < * ,30 haposta ja 2-(trimetyylisilyyli)etanolista N,N'-disyklo- > heksyylikarbodi-imidin ja 4-dimetyyliaminopyridiinin läsnä ollessa (vrt. Tetrahedron Lett. (1978) 4475 - saa- l t t daan yhdisteen 4a ja 5a synteesin kanssa analogisesti ; ( 5Z, 7E, 22E)- (IS, 3R, 24R)-1,3-bis[ [dimetyyli (1,1-dimetyyli- 35 etyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10-(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-(trimetyylisilyy- 52 1C9996 li)etyyliesteri (20a), jossa on epäpuhtautena antraseenia. Silyylieetterin ja esterin lohkaisemiseksi yhdisteen 20a (100 mg) annetaan seistä 5 päivää huoneenlämpötilassa tet-rahydrofuraanissa (3,7 ml), joka sisältää tetrabutyyliam-5 moniumfluoridi-trihydraattia (196 mg). Reaktioseos kaade taan jää/ammoniumkloridiliuokseen ja uutetaan etyyliasetaatilla. Uute kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan ja väritön, kiinteä jäännös sekoitetaan etyyliasetaattiin. Suodattamalla suspensio saadaan 23 mg otsikon 10 yhdistettä 21a, sp. 208 °C (hajoaa).

Esimerkki 10 19) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 26.27- syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyyliesteri (22a) 15 435 mg yhdisteen 9a haihdutusjäännöstä saa seistä yön yli huoneenlämpötilassa 15,4 ml:ssa tetrahydrofuraa-nia, joka sisältää 815 mg tetrabutyyliammoniumfluoridi-trihydraattia . Reaktioseos kaadetaan jää/natriumvetykarbo-naattiliuokseen ja siihen lisätään natriumkloridiliuosta.

20 Sitten uutetaan etyyliasetaatilla, uute kuivataan natrium-sulfaatilla ja haihdutetaan. Kromatografoimalla jäännös silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksella saadaan "·"· 130 mg vaaleanruskeata massaa. Kiteyttämällä uudelleen ;t'· etyyliasetaatti/sykloheksaaniseoksesta saadaan 45 mg yh- :*25 distettä 22a, sp. 100 - 101 °C.

* */: Esimerkki 11 > il · 20) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 26.27- syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25- . . karboksyylihappoetyyliesteri (23a) ! « i Lähtien karboksyylihaposta 6 ja etanolista saadaan * * » **’ analogisesti yhdisteen 22a syntesisarjän kanssa yhdistees- "·' tä 7 otsikon yhdiste 23a vaahtona.

: iH-NMR (300 MHz,CDCl3): δ = 0,57 ppm (s,3H); 0,86 (m,lH); 0,95 (m,lH); 1,05 ; * ·. (d,J=7Hz,3H); 1,25 (t,J=7Hz,5H); 3,17 (d,J=6,5Hz,lH); 3,97 (br.t,lH); 4,15 (q,J=7Hz,2H); ‘ 35 4,22 (m.lH); 4,43 (m,lH); 4,99 (br.s,lH); 5,33(br.s,lH); 5,41 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,52 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,01 (d,J=HHz,lH); 6,38 (d,J=UHz,lH).

53 1C9P96

Esimerkki 12 21) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-l,3,24-trihydroksi- 26.27- syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri (24a) 5 Lähtien karboksyylihaposta 6 ja propanolista saa daan analogisesti yhdisteen 22a synteesisarjan kanssa yhdisteestä 7 otsikon yhdiste 24a vaahtona.

iH-NMR (300 MHz,CDC!3): δ = 0,57 ppm (s,3H); 0,86 (m,lH); 0,95 (t,J=7Hz,4H); 1,05 (d,J=7Hz,3H); 1,23 (m,2H)); 3,19 (d,J=6,5Hz,lH); 3,96 (br.t,lH); 4,04 (t,J=7Hz,2H); 4,22 10 (m,lH); 4,42 (m,lH); 4,99 (br.s,lH); 5,32(br.s,lH); 5,41 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,52 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,01 (d,J=llHz,lH); 6,38 (d,J=llHz,lH).

Esimerkki 13 22) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 26.27- syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-15 karboksyylihappobutyyliesteri (25a) Lähtien karboksyylihaposta 6 ja etanolista saadaan analogisesti yhdisteen 22a syntesisarjän kanssa yhdisteestä 7 otsikon yhdiste 25a vaahtona.

^H-NMR (300 MHz,CDCI3): δ = 0,57 ppm (s,3H); 0,86 (m,lH); 0,93 (t,J=7Hz,4H); 1,05 20 (d,J=7Hz,3H); 1,25 (m,2H)); 3,19 (d,J=6,5Hz,lH); 3,97 (br.t.lH); 4,10 (t,J=7Hz,2H); 4,24 (m,lH); 4,43 (m,lH); 5,00 (br.s.lH); 5,32(br.s,lH); 5,41 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,52 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,01 (d,J=llHz,lH); 6,38 (d,J=llHz,lH).

. Esimerkki 14 • · ’ 23) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- . 25 26,27-syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10 (19), 22-tetraeeni-25- karboksyylihappo-2-metyylipropyyliesteri (26a) '·' ' Lähtien karboksyylihaposta 6 ja 2-metyyli-l-propa- nolista saadaan analogisesti yhdisteen 22a syntesisarjän ·.· · kanssa yhdisteestä 7 otsikon yhdiste 26a vaahtona.

: 30 iH-NMR (300 MHz,CDC13): δ = 0,57 ppm (s,3H); 0,86 (m,lH); 0,92 (d,J=7Hz,7H); 1,05 !:. (d,J=7Hz,3H); 1,25 (m,2H)); 3,20 (d,J=6,5Hz,lH); 3,87 (d,J=7Hz,2H); 3,98 (br.t.lH); 4,25 '^1. (m,lH); 4,45 (m,lH); 4,99 (br.s,lH); 5,32(br.s,lH); 5,41 (dd,J=15Hz, J=7,5Hz,lH); 5,52 *·;·' (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,01 (d,J=UHz,lH); 6,38 (d,J=llHz,lH).

• · • * · i · · · • # · 54 1G999C,

Esimerkki 15 24) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-l,3,24-trihydroksi- 26,27-syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-n-pentyyliesteri (27a) 5 Lähtien karboksyylihaposta 6 ja pentanolista saa daan analogisesti yhdisteen 22a synteesisarjan kanssa yhdisteestä 7 otsikon yhdiste 27a vaahtona.

^H-NMR (300 MHz,CDCI3): δ = 0,57 ppm (s,3H); 0,90 (m,5H); 1,05 (d,J=7Hz,3H); 3,20 (br, s,lH); 3,98 (br,d,lH); 4,08 (t,J=7Hz,2H); 4,23 (m,lH); 4,42 (m,lH); 10 5,00 (br,s,lH); 5,32 (br.s.lH); 5,41 (dd,J=15Hz,J=7,5Hz,lH); 5,52 (dd,J=15Hz,J=9Hz,lH); 6.00 (d,J=llHz,lH); 6,38 (d,J=llHz,lH).

Esimerkki 16 25) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,2 7-syklo-9,10-sekoko les ta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25- 15 karboksyylihappo-n-heksyyliesteri (28a) Lähtien karboksyylihaposta 6 ja heksanolista saa daan analogisesti yhdisteen 22a syntesisarjän kanssa yhdisteestä 7 otsikon yhdiste 28a vaahtona.

iH-NMR (300 MHz,CDC13): δ = 0,57 ppm (s,3H); 0,90 (m,5H); 1,05 (d,J=7Hz,3H); 20 3,2 (br,s,lH); 3,98 (br.d.lH); 4,08 (t,J=7Hz,2H); 4,23 (m, 1H); 4,42 (m,1H); 5,00 (br,s,lH); 5,32 (br,s,lH); 5,41 (dd,J=15Hz,J=7,5Hz,lH); 5,52 (dd,J=15Hz,J=9Hz,lH); 6.00 (d,J=llHz,lH); 6,38 (d,J=HHz,lH).

.·. 25-karboksyylihappoamidien (normaalisarja) lähtöai- neet ja esimerkit . 25 26) (5E, 7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1- dimetyylietyyli) silyyli] oksi] -24-hydroksi-9,10-sekokoles- ♦ ♦ * ’·* ’ ta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappodimetyyli- amidi (29a) : 3,0 g aldehydiä 3 ja 1,32 g aktivoitua sinkkiä :/30 [E.A. Hallinau et ai. Tetrahedron Lett. 25 2301 (1984)] kuumennetaan palautusjäähdyttäen tetrahydrofuraanissa ···. (40 ml) typpikehässä 5 minuuttia. Sitten lisätään 3,92 g α-bromi-isovoihappodimetyyliamidia [Lauceill et ai., C.R. 248 3311 (1959)] ja reaktioseosta keitetään palautusjääh- * · · •35 dyttäen vielä tunnin ajan. Jäähdytetty reaktioseos lisätään jää/KHS04-liuokseen, uutetaan etyyliasetaatilla, uute 55 1 0 9 9 9 6 kuivataan ja haihdutetaan. Kromatografoimalla öljymäinen jäännös silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksel-la saadaan eluointijärjestyksessä 1,01 g (5E,7E,22E)-(lS,3R,24R)-l,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyy-5 li]oksi] -24-hydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetra- eeni-25-karboksyylihappodimetyyliamidia (29b) ja 0,49 g otsikon yhdistettä 29a kiteytyneenä massana.

Seuraavissa reaktioissa kuvataan nyt yhdisteen 29a j atkoreaktioita.

10 27) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1- dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappodimetyyli-amidi (30a) 0,48 g yhdistettä 29a liuotetaan tolueeniin (68 15 ml), liuokseen lisätään antraseenia (74 mg) ja 1 tippa trietyyliamiinia ja reaktioseosta säteilytetään 30 minuuttia typpikehässä elohopeasuurpainelampulla (Heraeus TQ 150) Pyrex-lasin lävitse. Reaktioseos haihdutetaan ja jäännös (0,56 g) - yhdisteen 30a ja antraseenin seos -20 viedään suoraan seuraavaan silyylieetterin lohkaisuvaihee- ··> seen.

Esimerkki 17 • · 28) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- . 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- . 25 happodimetyyliamidi (31a)

Yhdisteen 30a valmistuksessa saatua haihdutusjään-"·* ’ nöstä (0,56 g) sekoitetaan huoneenlämpötilassa Dowex 50WX8:n (8,5 g) kanssa metanoli/metyleenikloridiseoksessa ♦ · i.i : (9:1) (20,8 ml) 30 tuntia. Suspensio suodatetaan ja suodos haihdutetaan ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksella. Saadaan 242 mg yhdis-... tettä 31a kiteytyneenä öljynä.

:' iH-NMRpOO MHz, CDC13): δ = 0,57 ppm (S.3H); 1,06 (d, J = 7Hz, 3H); 1,28 (S,6H); i: 3,05 (S, 6H); 4,05 (br, t, 1H); 4,23 (m, 1H); 4,43 (br, d, 2H); 4,99 (br, s, 1H); : 35 5,30 (br, S, 1H); 5,50 (br, t, 1H); 6,00 (d, J = 11 Hz, 1H); 6,38 (d, J = 11Hz, 1H).

56 1 ^ '' ' -7 L

Esimerkki 18 29) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9, 10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happodietyyliamidi (32a) 5 Lähtien aldehydistä 3 ja α-bromi-isovoihappodietyy- liamidista [Neemau, J. Chem. Soc. 2525 (1055)] saadaan analogisesti esimerkkien 29a - 31a reaktiosarjan kanssa otsikon yhdiste 32a vaahtona.

lH-NMR(300 MHz, CDC13): δ = 0,57 ppm (S,3H); 1,05 (d, J = 7Hz, 3H); 1,15 (br, t, 6H); 10 i>22 (S, 3H); 1,23 (S, 3H); 3,38 (m,lH); 4,00 (br.t.lH); 4,20 (m,lH); 4,40 (m,lH); 4,58 (br,d,lH); 4,98 (br,S,lH); 5,30 (br.S.lH); 5,48 (m,2H); 6,00(d, J = ΙΙΗζ,ΙΗ); 6,38 (d,J= ΙΙΗζ,ΙΗ) 30) (5E,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-bis ([dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli) silyyli]oksi) -24-okso-26,27-syklo-9,10-seko- 15 kolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappodietyy- liamidi (33)

Raakatuotteena saadun karboksyylihapon 6 (8,31 g) ja N,N’-disykloheksyylikarbodi-imidin (2,51 g) seokseen metyleenikloridissa (25,1 ml) lisätään jäillä jäähdyttäen 20 1,40 g N-hydroksisukkinimidiä ja edelleen 30 minuutin ku- •i' luttua 976 mg dietyyliamiinia. Reaktioseosta sekoitetaan vielä 40 minuuttia jäillä jäähdyttäen ja seisotetaan yön yli huoneenlämpötilassa. Sitten uutetaan kyllästetyn NaCl-liuoksen ja etyyliasetaatin seoksella, orgaaninen faasi : 25 kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Kromatogra-foimalla jäännös silikageelillä etyyliasetaatti/heksaani-• seoksella saadaan 2,94 g yhdistettä 33 öljynä.

31) (5E,7E,22E)-(1S,3R, 24R)-1,3-bis[[dimetyyli(l,l-dimetyylietyyli)silyyli]oksi] -24-hydroksi*'26,27-syklo9,10- !^Ö sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappodi- etyyliamidi (34a) ,··*. Yhdisteen 33 (3,60 g), tetrahydrofuraanin (8,2 ml) ja metanolin (18,9 ml) seokseen lisätään 18,9 ml 0,4 M :*: · cerium(III)kloridi-heptahydraattiliuosta. Sitten lisätään tl» •35’ typpikehässä jäillä jäähdyttäen annoksittain 520 mg nat- 57 109996 riumboorihydridiä. Jäillä jäähdytettyä reaktioseosta sekoitetaan vielä 90 minuuttia, sitten siihen lisätään jää/ vesiseosta. Seos uutetaan etyyliasetaatilla, orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Kroma-5 tografoimalla jäännös silikageelillä etyyliasetaatti/hek- saaniseoksella saadaan eluointijärjestyksessä 760 mg (5E,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyyli-etyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-26,27-syklo-9,10-sekoko-lesta-5,7,10( 19 ), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappodietyyli-10 amidia (34b) ja 300 mg otsikon yhdistettä 34a kiteytyneenä öljynä.

Seuraavissa reaktioissa on kuvattu ainoastaan yhdisteen 34a jatkoreaktioita.

32) (52,7E,22E)- (IS,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-15 dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-26,27-syklo- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happodietyyliamidi (35a) 290 mg yhdistettä 34a ja 42 mg antraseenia säteily-tetään toluenissa trietyyliamiinin (1 tippa) läsnä ollessa 20 5 minuuttia typpikehässä elohopeasuurpainelampulla. Reak- ·:* tioseos haihdutetaan ja jäännös (330 mg) - yhdisteen 35a ja antraseenin seos - viedään suoraan seuraavaan silyyli-.·. eetterin lohkaisuvaiheeseen.

Esimerkki 19 . 25 33) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 26,27-syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-' karboksyylihappodietyyliamidi (36a)

Yhdisteen 35a valmistuksessa saatua haihdutusjään-'· nöstä (330 mg) sekoitetaan huoneenlämpötilassa tetrabutyy- •,3b liammoniumfluoridi-trihydraatin (605 mg) kanssa tetrahyd- rofuraanissa (11,4 ml) ja seisotetaan sitten yön yli huo-···. neenlämpötilassa. Reaktioseos kaadetaan jää/natriumvety- karbonaattiliuokseen ja siihen lisätään natriumkloridi-liuosta. Sitten uutetaan etyyliasetaatilla, uute kuivataan :3? natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännös kromatografoi- 58 109996 daan silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksella, jolloin saadaan 100 mg otsikon yhdistettä 36a vaahtona. lH-NMR(300 MHz, CDCI3): 6 = 0,55 ppm (S,3H); 0,85 (m,4H); 1,02 (d, J=7Hz,3H); 1,14 (br,t,6H); 2,76 (br,d,lH); 3,4 (m,4H); 3,95 (br,t,lH); 4,23 (m,1H); 4,43 (m, 1H); 5 5,00 (br,s,lH); 5,30 (dd, J=lsHz, J=7,5Hz,lH); 5,32 (br,s,lH); 5,56 (dd,J=15Hz, J=9Hz,lH); 6,02 (d, J=llHz,lH); 6,48 (d, J=llHz,lH).

34) (5Z,7E)-(IS,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli)silyyli]oksi]formyyli-9,10-sekopregna-5,7,10(19)-trieeni (37) 10 1,0 g aldehydiä 1 ja 192 mg antraseenia säteilyte- tään trietyyliamiinin (3 tippaa) läsnä ollessa 15 minuuttia typpikehässä elohopeasuurpainelampulla. Tämä toistetaan vielä 2 kertaa. Yhdistetyt reaktioseokset haihdutetaan ja jäännös (3,6 g) viedään suoraan seuraavaan reak-15 työvaiheeseen.

35) (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-me tyylie tyyli) silyyli joksi] -24-okso-26,27-syklo-9,10-seko-kolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo (38) 19,4 ml butyylilitiumia (1,6 M heksaanissa) tipute-20 taan typpikehässä jäillä jäähdyttäen di-isopropyyliamiinin (4,79 ml) ja tetrahydrofuraanin (304 ml) seokseen ja se-’ _ ; koittamista jatketaan 15 minuuttia. Sitten reaktioseokseen . tiputetaan -78 °C:ssa 4,42 g asetyylisyklopropaanikarbok- syylihappometyyliesteriä [D.F.Taber et ai., J. Org. Chem.

25 57 436 (1992)] ja seosta sekoitetaan tunnin ajan. Sitten ··: · seokseen tiputetaan -78 °C:ssa aldehydi 37 9,2 mlrssa tet- • t ♦ *.· ' rahydrofuraania ja sekoitetaan edelleen -78 °C:ssa 1,5 tuntia. Reaktioseoksen annetaan lämmetä 100 minuutissa I : | -10 °C:seen ja sitten siihen lisätään kyllästetty ammo- :‘$’Q niumkloridiliuos. Reaktioseos laimennetaan NaCl-liuoksella ja uutetaan etyyliasetaatilla 5-%:isen oksaalihapon läsnä ·;;; ollessa. Orgaaninen faasi pestään NaCl-liuoksella, kuiva- i : ·;· taan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan 7,7 g j : : raakatuotetta öljynä.

1C 9 9 9 c 59 36) (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli)silyyli]°ksi] -24-okso-26,27-syklo-9,10-seko-kolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-n-bu-tyyliamidi (39) 5 7,70 g yhdistettä 38 ja 1,30 g N-hydroksisukkinimi- diä liuotetaan metyleenikloridiin (15 ml) ja liuokseen lisätään 0 °C:ssa 2,33 g N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä.

40 minuutin kuluttua lisätään 1,12 ml n-butyyliamiinia ja sekoitetaan 5 tuntia huoneenlämpötilassa. Yön yli seisot-10 tamisen jälkeen reaktioseos laimennetaan jää/natriumklori-diliuoksella. Sitten seos uutetaan etyyliasetaatilla, orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan 1,84 g epäpuhdasta otsikon yhdistettä 39 öljynä.

15 Esimerkki 20 37) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi]-24-okso- 26,27-syklo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-n-butyyliamidi (40)

Yhdiste 39 (970 mg) liuotetaan 38 ml:aan metyleeni-20 kloridi/metanoliseosta (1:9) ja liuosta sekoitetaan Dowex 50WX8:n kanssa 26 tuntia huoneenlämpötilassa. Seos suoda-tetaan ja suodos haihdutetaan, jäännös kromatografoidaan . silikageelillä etyyliasetaatti/heksaaniseoksella. Saadaan 340 mg yhdistettä 40 vaahtona.

"'"ib iH-NMRpOO MHz, CDCI3): δ = 0,58 ppm (s,3H); 0,93 (t,J=7,5Hz,3H);

Li : 1,08 (d, J=7Hz,3H); 1,50 (m,4H); 3,30 (J=5Hz,2H); 4,24 (m.lH); 4,45 (m,lH); : 4,98 (br,s,lH); 5,22 (br.s.lH); 5,85 (d,J=15Hz,lH), 6,00 (d,J=HHz,lH); 6,38 (d,J=llHz,lH); 6,91 (dd,J=l5Hz, J=9Hz,lH); 8,95 (br,t,lH). , : 20-metyylisarjän lähtöaineet (tert-butyylidifenyy- :ÖD lisilyyli-suojaryhmät) 38) (5E,7E)-(IS,3R)-1,3-bis[[1,1-dimetyylietyyli-··)! (difenyyli)silyyli]oksi] -20-formyyli-20-metyyli-9,10-seko- pregna-5,7,10(19)-trieeni (42) • Reaktioastiaan lisätään 140 mg (4,5 mmol) natrium- hydridiä (80-%:inen) 20 mlrssa tetrahydrofuraania, happi 1G 9 G 9 6 60 poistetaan imemällä vakuumi useita kertoja ja huuhtomalla argonilla. Sitten lisätään tipoittain 0 °C:ssa 2,5 g (3,0 mmol)(5E,7E)-(IS,3R,20S)-l,3-bis[[1,l-dimetyylietyyli(di-fenyyli)silyyli]oksi]-20-formyyli-9,10-sekopregna-5,7,10-5 (19)-trieeniä (41) (M. Calverley Tetrtahedron 43, 4609 (1987), julkaisu WO-87/00 834, tert-butyylidimetyylisilyy-li-suojaryhmät) 20 ml:ssa tetrahydrofuraania ja sen jälkeen 1,87 g (13,5 mmol) metyylijodidia. Reaktioseosta sekoitetaan yön yli huoneenlämpötilassa, seos kaadetaan sit-10 ten natriumkloridiliuokseen, uutetaan etyyliasetaatilla, orgaaninen faasi pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla, liuotin poistetaan ja raakatuote puhdistetaan kromatografoimalla käyttäen eluenttina hek-saani/etyyliasetattiseosta, jolloin saadaan 2,0 g otsikon 15 yhdistettä värittömänä vaahtona.

^-NMR (CDC13) : δ = 0,52 ppm (s, 3H, H-18); 0,96 ja 0,98 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,13 ja 1,15 (2x s, kukin 3H, H-21 ja C-20-Me); 4,29 (m, 1H, H-3); 4,64 (m, 1H, H-l); 4,73 ja 4,90 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,62 ja 6,38 20 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 7,22 - 7,68 (m, .:. 20H, Si-fenyyli); 9,68 (s, 1H, H-22).

(Käytetään yleensä steroidien numerointisysteemiä) . 39) (5E,7E,22E)-(1S,3R)-bis[[1,1-dimetyylietyyli- (difenyyli)silyyli joksi] -20,N-dimetyyli-N-metoksi-9,10-se-‘2*5 kokola-5,7,10(19),22-tetraeeni-24-amidi (43) 20 g (2,44 mmol) yhdistettä 42 ja 5,2 g (14,6 mmol) '.· * N-metoksi-N-metyyli-2-(trifenyylifosforanylideeni)aset- amidia [D.A. Evans et ai., J. Am. Chem. Soc. 112, 7001 : (1990)] sekoitetaan 100 ml:ssa tolueenia argonkehässä :‘3ti 80 °C:ssa 48 tuntia. Liuoksen annetaan jäähtyä, se haihdu- tetaan ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä heksaa- * « · *;;; ni/etyyliasetaattiseoksella, jolloin lähtöaineen (905 mg) * ·;·’ lisäksi saadaan 880 mg otsikon yhdistettä värittömänä : vaahtona.

•« · • · 1G 9 9 9 fc 61 1H-NMR (CDC13): δ = 0,53 ppm (s, 3H, H-18); 0,99 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,16 ja 1,18 (2x s, kukin 3H, H-21 ja C-20-Me); 3,27 (s, 3H, N-Me); 3,70 (s, 3H, N-OMe); 4,29 (m, 1H, H-3); 4,60 (m, 1H, H-l); 4,68 ja 4,88 (2x s, kukin 1H, 5 H-19); 5,60 ja 6,38 (d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,30 (d, J=16 Hz, 1H, H-23); 7,19 (d, J=16 Hz, 1H, H-22); 7,23 - 7,70 (m, 20H, Si-fenyyli).

40) (5E, 7E, 22E) - (IS, 3R) -1,3-bis[ [1,1-dimetyylietyy-li(difenyyli)silyyli]oksi]-20-metyyli-9,10-sekokola-5,7,- 10 10(19),22-tetraen-24-aali (44) 880 mg (096 mmol) yhdistettä 43 liuotetaan argon-kehässä tetrahydrofuraaniin (15 ml), liuos jäähdytetään -78 °C:seen ja siihen tiputetaan 4,2 ml (5 mmkol) DIBAH-liuosta (1,2 M tolueenissa). 2 tunnin kuluttua -78 °C:ssa 15 lisätään 0,3 ml metanolia ja sekoitetaan tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Sitten sakka suodatetaan pois, suodos haihdutetaan ja jäännös puhdistetaan kromatografisesti, jolloin saadaan 690 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

20 ^-NMR (CDCI3): δ = 0,51 ppm (s, 3H, H-18); 0,98 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,16 ja 1,20 (2x s, kukin 3H, H-21 ja C-20-Me); 4,30 (m, 1H, H-3); 4,61 (m, 1H, H-l); 4,70 ja 4,88 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,61 ja 6,37 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,07 (dd, J=16, 8 Hz, 1H, H-23); 7,04 (d, /25 J=16 Hz, 1H, H-22); 7,22 - 7,68 (m, 20H, Si-fenyyli); 9,57 : (d, J=8 Hz, 1H, H-24).

t I» f.‘ ' Esimerkki 21 41) (5E, 7E,22E)-(IS,3R)-1,3-bis[[1,1-dimetyylietyy- • : li (difenyyli Jsilyyli] oksi] -24-hydroksi-20-metyyli-9,10-se- : ¾¾ kokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyy- \ liesteri (45)

Di-isopropyyliamiinista (180 mg, 1,8 mmol) ja 1,1 1 ·;* ml:sta (1,7 mmol) n-butyylilitiumia (1,6 M heksaanissa) : : 30 ml:ssa tetrahydrofuraania valmistetaan argonkehässä LDA, se jäähdytetään -78 °C:seen. Siihen lisätään sitten 1G 9 Q Q 6 62 s ^ -78 °C:ssa 200 mg (1,7 mmol) isovoihappoetyyliesteriä ja 30 minuutin sekoittamisen jälkeen -78 °C:ssa lisätään 590 mg (0,68 mmol) yhdistettä 44 3 mlrssa tetrahydrofuraania. Sekoittamista jatketaan 2 tuntia -78 °C:ssa, sitten seos 5 kaadetaan natriumkloridiliuokseen ja uutetaan etyyliase taatilla. Orgaaninen faasi pestään natriumkloridiliuoksel-la, kuivataan natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan. Jäännös puhdistetaan kromatografoimalla, jolloin saadaan 480 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona (1:1 10 diastereomeerit C-24:n suhteen).

1H-NMR (CDC13): δ = 0,53 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,05/1,07, 1,10/1,12, 1,17, 1,18 (4x s, kukin 3H, H-21), C-20-Me, H-26 ja H-27); 1,28 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 2,57 (d, J=5 Hz, 1H, OH); 4,15 (q, J=7 Hz, 2H, 15 COOEt); 4,18 (m, 1H, H-24); 4,28 (m, 1H, H-3); 4,63 (m, 1H, H-l); 4,72 ja 4,90 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,32 (dd, J=15,5, 7,5 Hz, H-23); 5,89/5,90 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 5,60 ja 6,38 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 7,20 -7,68 (m, 20H, Si-fenyyli).

20 42) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10 (19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri (46a) ja (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3,24-. trihydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25- ", karboksyylihappoetyyliesteri (46b) ’ 2‘5 Yhdistettä 45 (480 mg, 0,5 mmol) sekoitetaan argon- • 1 « kehässä huoneenlämpötilassa dihydropyraanin (65 mg, 0,77 » · · *,· 1 mmol) ja pyridinium-p-tolueenisulfonaatin (spaattelinkär- jellinen) kanssa 5 mlrssa metyleenikloridia 24 tuntia.Or- : : \ gaaninen faasi pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan :1$1Q natriumsulfaatilla, liuotin haihdutetaan ja jäännös kroma- \ tografoidaan silikageelillä heksaani/etyyliasetattiseok- "" sella, jolloin saadaan 480 mg diastereomeeriseosta värit- 1 ··1‘ tömänä vaahtona. Tämä tuote liuotetaan tolueeniin (80 ml) : : : ja liuosta säteilytetään antraseenin (100 mg, 0,55 mmol) -.33: ja trietyyliamiinin (0,1 ml) läsnäollessa Pyrex-upporeak- * » 1 η Π 9 ^ 91 ‘ 63 1 Ν" ' ' ' ' torissa elohopeasuurpainelampulla (Philips HPK 125) typpi-kehässä 15 minuuttia. Liuotin poistetaan ja raakatuotetta sekoitetaan tetrabutyyliammoniumfluoridin (708 mg, 2,25 mmol) kanssa tetrahydrofuraanissa (10 ml) argonkehässä 5 60 °C:ssa tunnin ajan. Seos kaadetaan sitten natriumklori- diliuokseen, uutetaan etyyliasetaatilla, uute pestään nat-riumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja liuotin poistetaan. Jäännös liuotetaan 5 ml:aan metanoli/ metyleenikloridiseosta (9:1) ja liuosta sekoitetaan argon-10 kehässä aktivoidun Amberliten (500 mg) kanssa 24 tuntia. Seos suodatetaan, suodos pestään natriumvetykarbonaatti-liuoksella ja sitten natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla, liuotin poistetaan ja jäännös puhdistetaan kromatografisesti. Diastereomeerien erotus suorite-15 taan HPLC:llä (käänteisfaasiolosuhteet, asetonitriili/ve-si-liuotin), jolloin saadaan peräkkäin 5 mg yhdistettä 46b ja 6 mg yhdistettä 46a värittöminä vaahtoina.

1H-NMR (CD2C12): 46a: δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 1,03, 1,07, 1,18 (3x s, 3H, 3H, 6H, H-21, C-20-Me, H-26 ja 20 H-27); 1,27 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,10 (m, 1H, H-24); 4,12 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,18 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,97 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,31 (dd, • · J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); 5,86 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); • · 5,99 ja 6,35 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7).

/25 46b: δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 1,01, 1,09, 1,12 (3x s, :..i i 3H, 3H, 6H, H-21, C-20-Me, H-26 ja H-27); 1,27 (t, J=7 Hz, » » · : 3H, COOEt); 4,10 (m, 1H, H-24); 4,11 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,18 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,30 : (2x s, kukin 1H, H-19); 5,30 (dd, J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); :’$'0 5,88 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 5,99 ja 6,35 (2x d, J=ll

Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7).

» t : 1 · « · Λ f: O O O r, c. u > 64

Esimerkki 22 43) (5E,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-bis[[1,1-dimetyylietyy-li(difenyyli)silyyli joksi] -24-hydroksi-20-metyyli-9,10-se-kokolesta-5,7,10(19),22-1etraeeni-2 5-karboksyy1ihappopro- 5 pyyliesteri (47)

Analogisesti 41):n kanssa yhdiste 44 (690 mg, 0,8 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (2 mmol) ja isovoihap-popropyyliesterin (256 mg, 2 mmol) kanssa, jolloin saadaan 550 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona (1:1 10 diastereomeerit C-24:n suhteen).

1H-NMR (CDC13): δ = 0,53 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 (t, 3=7 Hz, 3H, COOPr); 0,97 ja 0,98 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyy-li); 1,07/1,08, 1,10/1,12, 1,18 ja 1,19 (4x s, kukin 3H, H-21), C-20-Me, H-26 ja H-27); 1,68 (hex, J=7 Hz, 2H, 15 COOPr); 2,53 (d, J=7 Hz, 1H, OH); 4,08 (q, J=7 Hz, 2H, COOPr); 4,15 (m, 1H, H-24); 4,28 (m, 1H, H-3); 4,62 (m, 1H, H-l); 4,72 ja 4,89 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,33 (dd, J=15,5, 7 Hz, H-23); 5,90/5,91 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 5,60 ja 6,39 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 7,22 -20 7,65 (m, 20H, Si-fenyyli).

44) (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) - 20-metyyli-1,3,24-tri-hydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-kar-boksyylihappopropyyliesteri (48a) ja (5Z,7E,22E)-(IS,3R,-24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22- 2.5 tetraeeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri (48b) ··· · Yhdiste 47 (540 mg, 0,55 mmol) saatetaan reagoimaan *·* ' analogisissa olosuhteissa 42):ssa käytettyjen kanssa, jol loin saadaan 34 mg yhdistettä 48b ja 24 mg yhdistettä 48a • : · värittöminä vaahtoina.

:*S0 1H-NMR (CD2C12): 48a: δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 (t, J=7 Hz, 3H, COOPr); 1,04, 1,08, 1,22 (3x s, 3H, 3H, 6H, H-21, C-20-Me, H-26 ja H-27); 1,67 (hex, J=7 Hz, 3H, 1 ·;*' COOPr); 4,02 (t, J=7 Hz, 2H, COOPr); 4,10 (m, 1H, H-24); 4,18 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,29 (2x s, :35: kukin 1H, H-19); 5,31 (dd, J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); 5,86 65 1G 9 9 9 6 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 6,00 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7).

48b: δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 (t, J=7 Hz, 3H, COOPr); 1,00, 1,09, 1,22 (3x s, 3H, 3H, 6H, H-21, C-20-Me, 5 H-26 ja H-27); 1,68 (hex, J=7 Hz, 3H, COOPr); 4,02 (t, J=7

Hz, 2H, COOPr); 4,10 (m, 1H, H-24); 4,18 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,29 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,32 (dd, J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); 5,89 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 6,00 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7). 10 Esimerkki 23 45) (5E,7E,22E)- (IS,3R)-1,3-bis[[1,1-dimetyylietyy-li(difenyyli)silyyli]oksi] -24-hydroksi-20-metyyli-9,10-se-kokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyyliesteri (49) 15 Analogiasesti 41):n kanssa yhdiste 44 (440 mg, 0,51 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (1,7 mmol) ja isovoihap-poisopropyyliesterin (221 mg, 1,7 mmol) kanssa, jolloin saadaan 390 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona (1:1 diastereomeerit C-24:n suhteen).

20 1H-NMR (CDC13): 6 = 0,53 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 ja 0,97 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,05/1,07, 1,09/1,11, 1,17 ja 1,18 (4x s, kukin 3H, H-21, C-20-Me, H-26 ja H-27); 1,28 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 4,12 (m, 1H, H-24); 4,28 (m, 1H, H-3); 4,64 (m, 1H, H-l); 4,72 ja 4,90 (2x s, kukin 1H, ?5 H-19); 5,24 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,33 (dd, J=15,5, 7 Hz, H-23); 5,90/5,91 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 5,61 ja : 6,38 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 7,22 - 7,65 (m, 20H, Si-fenyyli).

I.:'· 46) (5Z,7E,22E)-( IS, 3R, 24R) -20-metyyli-l, 3,24-tri- : Ύθ hydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar- boksyylihappo-l-metyylietyyliesteri (50a) ja (5Z,7E,22E)- ‘11! (IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10- 1 : (19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyylieste- ·,· i ri (50b) * · · :35: Yhdiste 49 (385 mg, 0,39 mmol) saatetaan reagoimaan 42):ssa kuvattujen olosuhteiden kanssa analogisissa olo- 66 1C999t suhteissa, jolloin saadaan 12 mg yhdistettä 50b ja 11 mg yhdistettä 50a värittöminä vaahtoina.

1H-NMR (CD2C12): 50a: δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 1,03, 1,06, 1,18 (3x s, 3H, 3H, 6H, H-21, C-20-Me, H-26 ja 5 H-27); 1,28 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 4,09 (m, 1H, H-24); 4.18 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,98 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,31 (dd, J=15,5, 7 Hz, H-23); 5,85 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 5,99 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 10 ^-NMR (CD2C12): 50b: 6 = 0,59 ppm (s, 3H, H-18); 1,02, 1,11, 1,18 (3x s, 3H, 3H, 6H, H-21, C-20-Me, H-26 ja H-27); 1,27 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 4,09 (m, 1H, H-24); 4.18 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,99 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,31 15 (dd, J-15,5, 7 Hz, H-23); 5,88 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 6,00 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7).

20-metyylisarjan lähtöaineet (tert-butyylidimetyy-lisilyyli suoj aryhmät) 47) ( 5E, 7E) - (IS, 3R) -1,3-bis [ [dimetyyli (1,1-dimetyy- 20 lietyyli) silyyli]oksi] -20-formyyli-20-metyyli-9,10-seko- ... pregna-5, 7,10(19)-trieeni (51) ( 5E, 7Z )-(IS, 3R, 20S ) -1,3-bis[ [dimetyyli(1,1-dimetyy- lietyyli)silyyli]oksi] - 20-formyyli-9,10-sekopregna-5,7,10- (l9)-trieeni (1) (M. Calverley Tetrahedron 4J3, 4609 , ?5 (1987), julkaisu W0-87/00 834) (4,0 g, 7 mmol) saatetaan * * · *'* reagoimaan natriumhydridin (314 mg, 10,5 mmol) ja metyyli- i * · ’ jodidin (3,87 g, 28 mmol) kanssa analogisesti 38):n mukaisesti, jolloin saadaan 3,1 g otsikon yhdistettä värittömä- | · ·,· · nä vaahtona.

:*5’ö 1H-NMR (CDC13): 6 = 0,00 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,80 ja 0,85 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,06 ΊΓ. ja 1,08 (2x s, kukin 3H, H-21 ja C-20-Me); 4,18 (m, 1H, t : H-3); 4,48 (m, 1H, H-l); 4,89 ja 4,92 (2x s, kukin 1H, !.f; H-19); 5,76 ja 6,38 (2x d, J=ll Hz, H-6 ja H-7); 9,59 (s, ;35: 1H, H-22).

irooor: 67 I v. > ,·· .·· ^ 48) (5E, 7E,22E)-(1S, 3R)-bis[ [dimetyyli(1,1-dimetyy-lietyyli) silyyli] oksi] -20,N-dimetyyli-N-metoksi-9,10-seko-kola-5,7,10(19),22-tetraeeni (52)

Yhdiste 51 (3,1 g, 5,3 mmol) saatetaan reagoimaan 5 N-metoksi-N-metyyli-2-( trifenyylifosforanylideeni )asetami-din (15,4 g, 42,4 mmol) kanssa analogisesti 39):n kanssa, jolloin saadaan 1,3 g otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona ja 1,1 g lähtöainetta.

1H-NMR (CDC13): δ = 0,01 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, 10 H-18); 0,81 ja 0,84 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,07 ja 1,10 (2x s, kukin 3H, H-21 ja C-20-Me); 3,19 (s, 3H, N-Me); 3,64 (s, 3H, N-OMe); 4,17 (m, 1H, H-3); 4,48 (m, 1H, H-l); 4,88 ja 4,92 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,73 ja 6,39 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,23 (d, J=16 15 Hz, 1H, H-23); 7,11 (d, J=16 Hz, 1H, H-22).

49) (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli)silyyli]oksi]-20-metyyli-N-9,10-sekokola-5,7,10(19),22-tetraen-24-aali (53)

Yhdiste 52 (1,3 g, 1,9 mmol) saatetaan reagoimaan 20 DIBAH-liuoksen (9,5 mmol) kanssa tolueenissa analogisesti 40) :n kanssa, jolloin saadaan 840 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

«IMI

XH-NMR (CDCI3): δ = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,83 ja 0,87 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,09 M M 1 *25 ja 1,14 (2x s, kukin 3H, H-21 ja C-20-Me); 4,18 (m, 1H, ’··! : H-3 ); 4,48 (m, 1H, H-l); 4,88 ja 4,92 (2x s, kukin 1H, i t 1 * H-19); 5,74 ja 6,38 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,99 (dd, J=15, 8 Hz, 1H, H-23); 6,98 (d, J=15 Hz, 1H, ! f1. H-22); 9,48 (d, J=8 Hz, H-24).

I t 1 • 1 · • 1 » 4.1» t I 1 t 1 1

* t I

f- s » 1 1 1 J 1 • · 1 r': O O O h es > ^ y^

Esimerkki 24 50) (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(l,1-di-metyylietyyli) silyyli] oksi ] -24-hydroksi-20-metyyli-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-5 etyyliesteri (54)

Analogisesti 41):n kanssa yhdiste 53 (210 mg, 0,34 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (1,4 mmol) ja isovoihap-poetyyliesterin (165 mg, 1,4 mmol) kanssa, jolloin saadaan 180 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona (1:1 10 diastereomeerit C-24:n suhteen).

1H-NMR (CDC13): δ = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,51 (s, 3H, H-18); 0,80 ja 0,83 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 0,98/ 1,00, 1,02/1,06, 1,09, 1,10 (4x s, kukin 3H, H-21, C-20-Me, H-26 ja H-27); 1,23 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,07 (m, 15 1H, H-24); 4,10 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,15 (m, 1H, H-3); 4,48 (m, 1H, H-l); 4,88 ja 4,92 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,27 (dd, J=15,7 Hz, 1H, H-23); 5,82/5,83 (2x d, J=15 Hz, 1H, H-22); 5,73 ja 6,39 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7).

20 51) (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi-20-metyyli- I. 24-okso-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-kar- 1 * * · boksyylihappoetyyliesteri (55) • · ,·, 210 mg (029 mmol) yhdistettä 54 liuotetaan toluee- • · niin (80 ml), liuokseen lisätään antraseenia (80 mg, 0,44 » t ?5 mmol) ja 3 tippaa trietyyliamiinia ja seosta säteilytetään I * * • ·· · Pyrex-upporeaktorissa elohopeasuurpainelampulla (Philips * HPK 125) typpikehässä 15 minuuttia. Liuotin poistetaan ja jäännös puhdistetaan kromatografisesti silikageelillä hek- t * • ·· saani/etyyliasetaattiseoksella, jolloin saadaan 200 mg ; 30 isomeroitua tuotetta värittömänä vaahtona. Tämä materiaali ,liuotetaan metyleenikloridiin (1 ml) ja liuos tiputetaan » -50 °C:ssa oksalyylikloridin (0,1 ml, 1 mmol) ja DMS0:n • * « · (0,15 ml, 2 mmol) liuokseen metyleenikloridissa (10 ml).

« « ·,· · Sekoittamista jatketaan 15 minuuttia, sitten seokseen li-sätään 0,65 ml (5 mmol) trietyyliamiinia. Seoksen lämmet- „ 10999ο 69 tyä huoneenlämpötilaan se laimennetaan natriumkloridi-liuoksella ja uutetaan etyyliasetaatilla, uute pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja liuotin poistetaan. Raakatuote kromatografoidaan sitten 5 silikageelillä, jolloin jäännöksenä saadaan 103 mg hape-tustuotetta, jota sekoitetaan 5 mlrssa metyleenikloridi/ metanoliseosta (1:9) aktivoidun Dowexin (500 mg) kanssa 3 päivää huoneenlämpötilassa. Sitten ioninvaihtaja suodatetaan pois, suodos haihdutetaan ja puhdistetaan kromato-10 grafisesti, jolloin saadaan 38 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): 6 = 0,50 ppm (s, 3H, H-18); 1,04 ja 1,10 (2x s, kukin 3H, H-21 ja C-20-Me); 1,20 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 1,33 (s, 6H, H-26 ja H-27); 4,12 (q, J=7 Hz, 2H, 15 COOEt); 4,15 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,93 ja 5,29 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,98 ja 6,32 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,10 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 7,13 (d, J=15 Hz, 1H, H-22).

20-metyleenisarjän lähtöaineet 20 52) (5E, 7E) - (IS, 3R, 20R)-1,3-bis[ [1,1-dimetyylietyy- . li(difenyyli)silyyli]oksi] -20,21-epoksi-20-metyyli-9,10- ·*’· sekopregna-5,7,10(19)-trieeni (57) ‘ 3,1 g (3,84 mmol) (5E,7E)-(IS,3R)-bis[[1,1-dimetyy- • lietyyli(difenyyli )silyyli]oksi]-9,10-sekopregna-5,7,10- '"’25 (19)-trien-20-onia (yhdiste 56, bis-TBDMS-eetteri, katso : · julkaisu WO-90/09 991, Leo Pharmaceutical Products) liuo- tetaan dimetyyliformamidiin (70 ml) argonkehässä, ja liuokseen lisätään 1,06 g (5,2 mmol) trimetyylisulfonium- : jodidia. 0 °C:seen jäähdytettyyn seokseen lisätään an- • · · • · · · , = βΡ noksittain 0,51 g (5,2 mmol) kalium-tert-butanolaattia.

• · · 15 minuutin kuluttua 0 °C:ssa lisätään kyllästettyä nat-riumkloridiliuosta, uutetaan etyyliasetaatilla ja orgaani-nen faasi pestään useita kertoja natriumkloridiliuoksella.

: .·. Uute kuivataan natriumsulfaatilla, liuotin poistetaan ja .35, jäännös puhdistetaan kromatografoimalla silikageelillä 70 Ί f; ° C 9 r heksaani/etyyliasetaattiseoksella, jolloin saadaan 2,2 g otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): 6 = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 0,89 ja 0,94 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,32 (s, 3H, H-21); 2,31 5 ja 2,50 (2x d, J=5 Hz, kukin 1H, H-22); 4,19 (m, 1H, H-3); 4,59 (t, J=5,5 Hz, 1H); H-l); 4,70 ja 4,82 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,57 ja 6,31 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 7,12 - 7,68 (m, 20H, Si-fenyyli).

53) (5E,7E)-(1S,3R)-1,3-bis[[1,1-dimetyylietyyli- 10 (difenyyli)silyyli]oksi ]-20-metyleeni-9,10-sekopregna- 5,7,10(19)-trien-21-oli (58) 0,28 g (3,8 mmol) dietyyliamiinia liuotetaan argon- kehässä dietyylieetteriin (35 ml), ja liuokseen lisätään

0 °C:ssa 2,4 ml (3,8 mmol) n-butyylilitiumliuosta (1,6 M

15 heksaanissa). 30 minuutin kuluttua tässä lämpötilassa seokseen tiputetaan 0,72 g (0,88 mmol) yhdistettä 57 5 ml:ssa dietyylieetteriä ja seosta sekoitetaan tunnin ajan 0 °C:ssa ja sitten tunnin ajan huoneenlämpötilassa.

Seos laimennetaan sitten natriumkloridiliuoksella, uute- 20 taan etyyliasetaatilla ja orgaaninen faasi pestään nat- , riumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja • · * ···· haihdutetaan. Jäännös kromatografoidaan silikageelillä * ‘ heksaani/etyyliasetaattiseoksella, jolloin saadaan 360 mg • · • *..· otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona ja 280 mg lähtöai- i‘'25 netta.

: XH-NMR (CDC13): δ = 0,45 ppm (s, 3H, H-18); 0,99 ja 1,00 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 4,08 ja 4,17 (2x d, J=14,5 Hz, kukin 1H, H-22); 4,29 (m, 1H, H-3); 4,65 (m, 1H, H-l); ; 4,75 ja 4,90 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,03 ja 5,23 (2x s, « 1 * ’ · «3*0 kuukin 1H, H-21); 5,67 ja 6,39 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, • · · H-6 ja H-7); 7,20 - 7,62 (m, 20H, Si-fenyyli).

54) (5Z,7E)-(lS,3R)-l,3-bis[ [ 1,1-dimetyylietyyli- • · · (difenyyli) silyyli] oksi] -20-metyleeni-9,10-sekopregna-; .·. 5,7,10(19)-trien-21-oli (59) 35 500 mg (0,61 mmol) yhdistettä 58 liuotetaan 80 ml;aan tolueeenia, liuokseen lisätään 80 mg (0,44 mmol) 71 109996 antraseenia ja 15 μΐ trietyyliamiinia ja seosta säteilyte-tään 18 minuuttia 42):ssa kuvatussa laitteistossa. Reak-tioseoksen jatkokäsittelyn ja tuotteen puhdistamisen jälkeen saadaan 450 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahto-5 na.

1H-NMR (CDC13) : δ = 0,43 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 ja 1,00 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 4,05 ja 4,15 (2x d, J=14,5 Hz, kukin 1H, H-22); 4,25 (m, 1H, H-3); 4,55 (m, 1H, H-l); 4,83 ja 5,08 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,00 ja 5,21 (2x s, 10 kukin 1H, H-21); 6,02 ja 6,10 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 7,15 - 7,68 (m, 20H, Si-fenyyli).

55) (5Z,7E)-(IS,3R)-l,3-bis[[1,1-dimetyylietyyli-(difenyyli)silyyli]oksi]-20-formyyli-9,10-sekopregna-5,7,10(19),20-tetraeeni (60) 15 2,8 g (3,36 mmol) yhdistettä 59 liuotetaan metylee- nikloridiin (100 ml) ja liuokseen lisätään 11,6 g (133 mmol) mangaanidioksidia. Seosta sekoitetaan tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja sitten suodatetaan celitellä. Liuotin poistetaan, jolloin saadan 2,5 g otsikon yhdistettä 20 värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDCI3): δ = 0,35 ppm (s, 3H, H-18); 0,92 ja 0,99 ···’_ (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 4,23 (m, 1H, H-3); 4,55 (m, 1H, H-l); 4,83 ja 5,10 (2x s, kukin 1H, H-19); 6,02 ja • 6,09 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,11 ja 6,32 '•"25 (2x s, kukin 1H, H-21); 7,23 - 7, 69 (m, 20H, Si-fenyyli); 9,58 (s, 1H, H-22).

56) (5Z, 7E, 22E)-(IS,3R)-bis[[1,l-dimetyylietyyli-(difenyyli)silyyli]oksi]-N-metoksi-N-metyyli-9,10-sekoko- ; la-5,7,10(19) ,20,22-pentaeeni-24-amidi (61) . -3P 1,2 g (1,4 mmol) yhdistettä 60 saatetaan reagoimaan • · * N-metoksi-N-metyyli-2-( trifenyylifosforanylideeni )asetami-din (3,75 g, 9 mmol) kanssa analogisesti 39):n kanssa, l,,,: jolloin saadaan 1,07 g otsikon yhdistettä värittömänä : . ·. vaahtona.

1G 9 9 9 o 72 1H-NMR (CDC13): δ = 0,39 ppm (s, 3H, H-18); 0,93 ja 0,99 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 3,28 (s, 3H, N-Me); 3,75 (s, 3H, N-OMe); 4,25 (m, 1H, H-3); 4,55 (m, 1H, H-l); 4,84 ja 5,10 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,32 ja 5,57 (2x s, kukin 5 1H, H-21); 6,04 ja 6,10 (d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,65 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-23); 7,23 - 7,70 (m, 21H, Si-fenyyli ja H-22).

57) (5Z,7E,22E)-(IS, 3R) -bis[[ 1,1-dimetyylietyyli-(difenyyli) silyyli] oksi] -9,10-sekokola-5,7,10(19),20,22- 10 pentaen-24-aali (62) 750 mg (0,8 mmol) yhdistettä 61 saatetaan reagoimaan DIBAH-liuoksen (4 mmol) kanssa analogisesti 40) :n kanssa, jolloin saadaan 500 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

15 6 = 0,40 ppm (s, 3H, H-18); 0,92 ja 1,00 (2x s, kukin 9H,

Si-t-butyyli); 4,22 (m, 1H, H-3); 4,56 (m, 1H, H-l); 4,82 ja 5,10 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,51 ja 5,68 (2x s, kukin 1H, H-21); 6,02 ja 6,10 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,36 (dd, J=16, 8 Hz, 1H, H-23); 7,18 (d, J=16 Hz, 20 1H, H-22); 7,22 - 7,68 (m, 20H, Si-fenyyli); 9,60 (d, J=8

Hz, 1H, H-24).

··*·. Esimerkki 25 58) (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3-bis[ [1,1-dimetyyli- • etyyli (difenyyli) silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokoles- '•"'25 ta-5,7,10(19), 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-l-metyy- \\\ lietyyliesteri (63a) ja (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3-bis- [ [1,1-dimetyylietyyli(difenyyli) silyyli]oksi] -24-hydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyy- : lihappo-l-metyylietyyliesteri (63b) » · » » .= =.3.0 Di-isopropyyliamiinista (385 mg, 3,8 mmol) ja 2,2 • * # ml:sta (3,4 mmol) n-butyylilitiumia (1,6 M heksaanissa) 30 mlrssa tetrahydrofuraania valmistetaan argonkehässä LDA ja jäähdytetään -78 °C:seen. Siihen lisätään sitten 442 mg ; (3,4 mmol) isovoihappoisopropyyliesteriä ja seosta sekoi- * · » · .35 tetaan 30 minuuttia -78 °C;ssa, sitten lisätään 650 mg • · · 73 λ r. O O O t-, I \j y y y u (0,76 mmol) yhdistettä 62 tetrahydrofuraanissa (5 ml).

3 tunnin sekoittamisen jälkeen -78 °C:ssa seos kaadetaan natriumkloridiliuokseen, uutetaan etyyliasetaatilla ja orgaaninen faasi pestään natriumkloridiliuoksella, kuiva-5 taan natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan. Jäännöksestä erotetaan kromatografisesti peräkkäin yhdiste 63b (207 mg) ja 63a (160 mg) värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): 63a: δ = 0,37 ppm (s, 3H, H-18); 0,94 ja 0,96 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,13 ja 1,14 (2x s, 10 kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 4,14 (m, 1H, H-24); 4,24 (m, 1H, H-3); 4,54 (m, 1H, H-l); 4,81 ja 5,17 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,98 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 4,99 ja 5,07 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,78 (dd, J=15,5, 6Hz, H-23); 6,02 ja 6,12 (2x d, J=ll Hz, ku-15 kin 1H, H-6 ja H-7); 6,24 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 7,22 -7,65 (m, 20H, Si-fenyyli).

XH-NMR (CD2C12): 63b: 6 = 0,37 ppm (s, 3H, H-18); 0,94 ja 0,96 (2x s, kukin 9H, si-t-butyyli); 1,15 ja 1,18 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,23 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 20 4,14 (m, 1H, H-24); 4,24 (m, 1H, H-3); 4,54 (m, 1H, H-l); , 4,82 ja 5,19 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,99 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,00 ja 5,08 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,80 (dd, J=15,5, 6 Hz, H-23); 6,02 ja 6,12 (2x d, J=ll Hz, ψ • ·.’· kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,28 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); "‘‘25 7,22 - 7,65 (m, 20 H, Si-fenyyli).

: 59) (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 20,22-pentaeeni-25-karboksyy- lihappo-l-metyylietyyliesteri (64a) : Yhdistettä 63a (160 mg, 0,16 mmol) sekoitetaan di- • * · #---βΡ hydropyraanin (162 mg, 1,6 mmol) ja pyridinium-p-tolueeni- • « t sulfonaatin (spaattelinkärjellinen) kanssa metyleeniklo-ridissa (5 ml) argonkehässä 24 tuntia huoneenlämpötilassa.

>>t,: Reaktioseos pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan ; .·. natriumsulfaatilla, liuotin poistetaan ja jäännös puhdis-.35, tetaan kromatografisesti. Näin saatu diastereomeeriseos 1G 9 9 9 c 74 liuotetaan tetrahydrofuraaniin (20 ml) ja liuosta sekoitetaan tetrabutyyliammoniumfluoridin (408 mg, 1,3 ml) kanssa 60 °C:ssa argonkehässä. Seos kaadetaan natriumkloridi-liuokseen, uutetaan etyyliasetaatilla, uute pestään nat-5 riumkloridiliuoksella ja haihdutetaan. Jäännöstä sekoitetaan huoneenlämpötilassa aktivoidun Amberliten (420 mg) kanssa 5 ml:ssa metanoli/metyleenikloridiseosta (9:1). Sitten seos suodatetaan ja suodos pestään natriumvetykar-bonaattiliuoksella ja natriumkloridiliuoksella, kuivataan 10 natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan. Raakatuote puhdistetaan kromatografoimalla silikageelillä heksaani/ etyyliasetaattiseoksella, jolloin saadaan 23 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,42 ppm (s, 3H, H-18); 1,11 ja 1,12 15 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 4,15 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,37 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,97 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,00 ja 5,17 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,78 (dd, J=15,5, 6 Hz, H-23); 6,03 ja 6,34 (2x d, J=ll Hz, 20 kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,22 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22).

60) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- • 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 20, 22-pentaeeni-25-karboksyy- ’* * lihappo-l-metyylietyyliesteri (64b) ·.* 207 mg (0,21 mmol) yhdistettä 63b saatetaan reagoi- ”‘25 maan analogisesti 59):n kanssa, jolloin saadaan 28 mg ot- i sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

• · · · ^-NMR (CD2C12): 6 = 0,42 ppm (s, 3H, H-18); 1,12 ja 1,15 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 4,14 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,36 (m, 1H, H-l); • * * ‘130 4,95 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,96 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 4,98 ja 5,16 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,80 (dd, J=15,5, 6 Hz, H-23); 6,03 ja 6,34 (2x d, J= 11 Hz, i’’*’· kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,25 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22).

* » i · I · · j 10999ο 75

Esimerkki 26 61) (5Ζ,7Ε,22E)-(1S,3R,24R)-1,3-[[1,1-dimetyyli-etyyli(difenyyli)silyyli]oksi] -24-hydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19), 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-metyyli-5 esteri (65a) ja (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3-[[1,1-dimetyy-lietyyli(difenyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekoko-lesta-5,7,10(19), 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-me-tyyliesteri (65b) 400 mg (0,47 mmol) yhdistettä 62 saatetaan reagoi-10 maan LDA:n (1,2 mmol) ja isovoihappometyyliesterin (0,18 ml, 1,18 mmol) kanssa analogisesti 58):n kanssa ja diaste-reomeerit erotetaan HPLC:llä (normaalifaasi, metyleeniklo-ridi/metanoli), jolloin saadaan 134 mg yhdistettä 65a ja 128 mg yhdistettä 65b värittöminä vaahtoina.

15 1H-NMR (CDClj): 65a: δ = 0,36 ppm (s, 3H, H-18); 0,92 ja 0,95 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,14 (s, 6H, H-26 ja H-27); 2,48 (d, J= 5 Hz, 1H, OH); 3,66 (s, 3H, COOMe); 4,16 (dd, J=6,5 Hz, 1H, H-24); 4,24 (m, 1H, H-3); 4,53 (m, 1H, H-l); 4,81 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,99 ja 20 5,06 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,77 (dd, J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); 6,02 ja 6,12 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,24 (d, J= 15,5 Hz, 1H, H-22); 7,21 - 7,66 (m, 20H, Si-'· 1 fenyyli) 1H-NMR (CDClj): 65b: δ = 0,36 ppm (s, 3H, H-18); 0,93 ja *i"25 0,96 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,15 (s, 6H, H-26 ja : H-27); 2,48 (d, J=5 Hz, 1H, OH); 3,65 (s, 3H, COOMe); 4,17 (dd, J=6,5 Hz, 1H, H-24); 4,24 (m, 1H, H-3); 4,53 (m, 1H, H-l); 4,82 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,99 ja 5,06 : (2x s, kukin 1H, H-21); 5,79 (dd, J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); *-&Ö 6,02 ja 6,12 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,27 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 7,23 - 7,70 (m, 20H, Si-fenyyli) » • · » · i · · · • · · * · Ί G 9 9 9 ό 76 62) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyy-lihappometyyliesteri (66a)

Yhdiste 65a (134 mg, 0,14 mmol) saatetaan reagoi-5 maan analogisesti 59):n kanssa, jolloin saadaan 15 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

^-NMR (CD2C12): δ = 0,43 ppm (s, 3H, H-18); 1,17 (s, 6H, H-26 ja H-27); 2,52 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 3,68 (s, 3H, COOMe); 4,17 (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,17 (m, 1H, H-3); 10 4,38 (m, 1H, H-l); 4,97 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,01 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,77 (dd, J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); 6,03 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,25 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22) 63) (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- 15 9,10-sekokolesta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyy- lihappometyyliesteri (66b)

Yhdiste 65b (128 mg, 0,13 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 59):n kanssa, jolloin saadaan 19 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

20 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,44 ppm (s, 3H, H-18); 1,15 ja 1,16 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,48 (d, J=6 Hz, 1H, OH); *··'· 3,66 (s, 3H, COOMe); 4,18 (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,17 ’ ' (m, 1H, H-3); 4,37 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,31 (2x s, kukin • !.: 1H, H-19); 5,00 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,79 (dd, ”“25 J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); 6,04 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, ku- ί kin 1H, H-6 ja H-7); 6,28 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22) * · · *

Esimerkki 27 64) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3-[[1,1-dimetyyli- : etyyli(difenyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokoles- • » * j3*P ta-5,7,10(19), 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappoetyylies-teri (67a) ja (5Z,7E,22E)-(IS, 3R, 24S)-1,3-[[1,1-dimetyyli-etyyli (difenyyli) silyyli] oksi] - 24-hydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19), 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappoetyylies-; ,·. teri (67b) ‘35 400 mg (0,47 mmol) yhdistettä 62 saatetaan reagoi maan LDA:n (1,2 mmol) ja isovoihappoetyyliesterin (0,16 77 inoept, ml, 1,18 mmol) kanssa analogisesti 58):n kanssa ja diaste-reomeerit erotetaan HPLCrllä (normaalifaasi, metyleeniklo-ridi/metanoli), jolloin saadaan 105 mg yhdistettä 67a ja 90 mg yhdistettä 67b värittöminä vaahtoina.

5 XH-NMR (CDC13): 67a: ö = 0,38 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 ja 1.00 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,20 (s, 6H, H-26 ja H-27); 1,29 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,18 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,20 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,54 (m, 1H, H-l); 4,83 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,01 ja 5,09 (2x s, kukin 10 1H, H-21); 5,80 (dd, J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); 6,02 ja 6,09 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,29 (d, J= 15,5 Hz, 1H, H-22); 7,20 - 7,65 (m, 20H, Si-fenyyli) ^-NMR (CDCI3): 67b: δ = 0,39 ppm (s, 3H, H-18); 0,94 ja 1.00 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,18 ja 1,22 (2x s, 15 kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,28 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,18 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,21 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,54 (m, 1H, H-l); 4,83 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,00 ja 5,08 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,82 (dd, J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); 6,02 ja 6,10 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 20 6,30 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22); 7,20 - 7,65 (m, 20H, Si-fe nyyli ) • · · —: 65) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyy-lihappoetyyliesteri (68a) 'J”25 Yhdiste 67a (100 mg, 0,11 mmol) saatetaan reagoi- I maan analogisesti 59) :n kanssa, jolloin saadaan 15 mg ot- sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

^-NMR (CD2C12): 6 = 0,43 ppm (s, 3H, H-18); 1,15 (s, 6H, H-26 ja H-27); 1,22 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,10 (q, J=7 t » 1 "130 Hz, 2H, COOEt); 4,18 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,39 (m, 1H, H-l); 4,98 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,01 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,78 (dd, J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); 6,03 ja 6,37 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,25 : (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22) t 1 » • I I · t · » t 1 · · 78

1G999C

66) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyy-lihappoetyyliesteri (68b)

Yhdiste 67b (89 mg, 0,11 mmol) saatetaan reagoimaan 5 analogisesti 59):n kanssa, jolloin saadaan 13 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

^-NMR (CD2C12): δ = 0,43 ppm (s, 3H, H-18); 1,17 ja 1,18 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,23 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,11 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,18 (m, 2H, H-3 ja 10 H-24); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,97 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, H-19); 4,99 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,80 (dd, J=15,5, 6 Hz, 1H, H-23); 6,04 ja 6,35 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,28 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-22) 19-nor-sarjän 20-asemassa normaalikonfiguraation 15 omaavien yhdisteiden lähtöaineet 67) [1R-(la[R*-(E)],3a8,4a,7aa]]-N-metoksi-4-[4-(metoks imet oksi) -7a-metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli] -N-metyyli-2-penteeniamidi (70) 10,0 g (39,3 mmol) [1R-[la(S*),3aB,4a,7aa]]-a,7a- 20 dimetyyli-4- (metoksimetoksi )oktahydro-lH-indeeni-l-aset- aldehydiä 69 [H.H. Inhoffen et ai. Chem. Ber. 91, 780 • (1958), Chem. Ber. 92 1772 (1959), VJ.G. Dauben et ai.

• - ’ Tetrahedron Lett. 30, 677 (1989)] saatetaan reagoimaan ·.· N-metoksi-N-metyyli-( 2-trifenyylifos£oranylideeni )asetami- ”'.'35 din (41,9 g, 117,8 mmol) kanssa analogisesti 39):n kanssa, i ·.*: jolloin saadaan 10,6 g otsikon yhdistettä värittömänä öl- sY: jynä.

1H-NMR (CDC13): 6 = 0,89 ppm (s, 3H, H-18); 1,03 (d, J=7 ; Hz, 3H, H-21); 3,19 (s, 3H, N-Me); 3,30 (s, 3H, OMe); 3,65 i · * "äo (s, 3H, N-OMe); 3,80 (m, 1H, H-8); 4,48 ja 4,60 (2x d, J=6 ! · »

Hz, kukin 1H, 0CH20); 6,28 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,78 (d, J=15, 9 Hz, 1H, H-22) ( ♦ · « * * 1 * 1Γ000, 79 68) [lR-[la[R*-(E)],3a8,4α,7aa]]-4-(4-hydroksi-7a-metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli) -N-metoksi-N-metyyli-2-penteeniamidi (71)

Yhdisteeseen 70 (5,3 g, 15,6 mmol) THF:ssä (250 ml) 5 lisätään 4,45 g (23,5 mmol) p-tolueenisulfonihappoa ja seosta sekoitetaan yön yli 70 °C:ssa. Jäähtynyt seos laimennetaan natriumkloridiliuoksella ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi pestään natriumvetykarbonaatti-liuoksella ja natriumkloridiliuoksella, kuivataan natrium-10 sulfaatilla ja liuotin poistetaan. Jäännös kromatografoi-daan silikageelillä heksaani/etyyliasetaattiseoksella, jolloin saadaan 3,08 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

XH-NMR (CDC13): δ = 0,99 (s, 3H, H-18); 1,08 (d, J=7 Hz, 15 3H, H-21); 3,22 (s, 3H, N-Me); 3,70 (s, 3H, N-OMe); 4,08 (m, 1H, H-8); 6,30 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,81 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22) 69) 1R- [la[R*~ (E) ] , 3a8,7aa] ] -N-metoksi-N-metyyli-4-(7a-metyyli-4-okso-oktahydro-4H-inden-l-yyli)-2-penteeni- 20 amidi (72)

Yhdistettä 71 (3,08 g, 10,5 mmol) sekoitetaan « · · • 150 ml:ssa metyleenikloridia pyridiniumkloorikromaatin « ' * (3,16 g, 14,7 mmol) kanssa 2 tuntia. Seos laimennetaan ·/ dietyylieetterillä, suodatetaan celitellä, liuotin poiste- ’;*‘25 taan ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä heksaa- i f: ni/etyyliasetaattiseoksella, jolloin saadaan 2,07 g otsi- .'·*: kon yhdistettä värittömänä öljynä.

1H-NMR (CDCI3): δ = 0,69 ppm (s, 3H, H-18); 1,13 (s, 3H, H-21); 2,48 (dd, J=10,5, 7,5 Hz, 1H, H-14); 3,23 (s, 3H, :’3Ö N-Me); 3,70 (s, 3H, N-OMe); 6,33 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 1 · · X* 6,81 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22) 70) (7E,22E)-(lR,3R)-l,3-bis[ [dimetyyli(1,1-dime- f,.’· tyylietyyli)silyyli]oksi] -N-metoksi-N-metyyli-19-nor-9,10- . ,·, sekokola-5,7,22-trieeni-24-amidi (73) '3l5i 1,5 g (2,63 mmol) (3-trans)-[2-[3,5-bis[ [dimetyyli- » » “* (1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]sykloheksylideeni]etyy- 1G 9 9 9 6 80 li]difenyylifosfiinioksidia [H.F. DeLuca et ai. Tetrahedron Lett. 32, 7663 (1991)] liuotetaan 15 ml:aan THF:a ja liuos jäähdytetään argonkehässä -70 °C:seen. Siihen tiputetaan sitten 1,94 ml (3,16 mmol) n-butyylilitiumliuosta 5 (1,6 M heksaanissa). 5 minuutin kuluttua siihen tiputetaan 696 mg (2,39 mmol) yhdistettä 72 THF:ssa (15 ml) ja seosta sekoitetaan 30 minuuttia tässä lämpötilassa. Sitten hydrolysoidaan kalium-natriumtartraatti/kaliumvetykarbonaatti-liuoksella, uutetaan etyyliasetaatilla, orgaaninen faasi 10 pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsulfaa-tilla ja liuotin poistetaan, jolloin saadaan 390 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): δ = 0,05 ja 0,06 ppm (2x s, kukin 6H, SiMe); 0,58 (s, 3H, H-18); 0,86 ja 0,87 (2x s, kukin 3H, 15 Si-t-butyyli); 1,13 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 3,23 (s, 3H, N-Me); 3,70 (s, 3H, N-OMe); 4,08 (m, 2H, H-l ja H-3); 5,81 ja 6,17 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,32 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,85 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22) 71) (7E, 22E)-(1R,3R)-l,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime-20 tyylietyyli)silyyli]oksi]-19-nor-9,10-sekokola-5,7,22- trien-24-aali (74) * 4 « ··'· 380 mg (0,59 mmol) yhdistettä 73 saatetaan reagoi- . t · · · * 1 maan DIBAH-liuoksen (1,48 mmol) kanssa analogisesti 40):n kanssa, jolloin saadaan 305 mg otsikon yhdistettä värittö- :‘25 mänä vaahtona.

I ; j ^-NMR (CDCI3): 6 = 0,05 ja 0,06 ppm (2x s, kukin 6H,

SiMe); 0,60 (s, 3H, H-18); 0,87 ja 0,88 (2x s, kukin 3H, Si-t-butyyli); 1,17 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 4,08 (m, 2H, ; ,·, H-l ja H-3); 5,82 ja 6,17 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja t · 1 '30 H-7); 6,07 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 6,72 (dd, J=15, 9

Hz, 1H, H-22); 9,49 (d, J=7 Hz, 1H, H-24) » X I ♦ 1 · I » * · t » »

* » 1 i > 1 I

1 · I 1 t 1 I I t 1G 9 P 9 ο 81

Esimerkki 28 72) (7E, 22E)- (1R,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(l,1-di- metyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyy-5 liesteri (75a) ja (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyy-li (1,1-dimetyylietyyli) silyyli] oksi] -24-hydroksi-19-nor- 9.10- sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-me-tyylietyyliesteri (75b)

Analogisesti 41):n kanssa yhdiste 74 (305 mg, 0,52 10 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (2,1 mmol) ja isovoihap-poisopropyyliesterin (0,28 ml, 2,07 mmol) kanssa, jolloin puhdistamalla raakatuote HPLC:llä (normaalifaasi, liuotin: metyleenikloridi/metanoli) saadaan 62 mg yhdistettä 75a ja 115 mg yhdistettä 75b värittöminä vaahtoina.

15 1H-NMR (CD2C12): 75a: 6 = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,51 (s, 3H, H-18); 0,82 ja 0,83 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,01 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,08 ja 1,09 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,20 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 2,45 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,02 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,96 (hept, 20 J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,31 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,48 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 5,78 ja 6,12 (2x d, J=ll Hz, . * · • kukin 1H, H-6 ja H-7) 1H-NMR (CD2C12): 75b: δ = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,82 ja 0,83 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); :“25 1,00 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,07 ja 1,08 (2x s, kukin 3H, S 5*; H-26 ja H-27); 1,19 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 4,02 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,93 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,33 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,52 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, ; H-22); 5,78 ja 6,13 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) • · * "•3p 73) (7E, 22E) - (1R, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-19-nor- \ * » 9.10- sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-me- t ,,,ί tyylietyyliesteri (76a) < * * *,,/ 59 mg (0,082 mmol) yhdistettä 75a sekoitetaan Do- ; wexin (600 mg) kanssa 6 ml:ssa metanoli/metyleenikloridi- i » » Γ * » » ,S§, seosta (9:1) 3 päivää. Reaktioseos suodatetaan, liuotin » f poistetaan ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä 10959c.

82 heksaani/etyyliasetaatilla, jolloin saadaan 22 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 1,03 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,11 ja 1,12 (2x s, kukin 3H, H-26 ja 5 H-27); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 2,51 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,02 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,98 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,35 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,51 (dd, J=15 Hz, 1H, H-22); 5,84 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 10 74) (7E, 22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor- 9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-me-tyylietyyliesteri (76b) 112 mg (0,156 mmol) yhdistettä 75b saatetaan reagoimaan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 81 mg 15 otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12); δ = 0,57 ppm (s, 3H, H-18); 1,03 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,12 ja 1,13 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 2,50 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,02 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,98 (hept, J=7 Hz, 20 1H, COOiPr); 5,38 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,57 (dd, J=15 Hz, 1H, H-22); 5,84 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7)

Esimerkki 29 75) (7E, 22E)-(1R,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(l,1-di-25 metyylietyyli)silyylijoksi]-24-hydroksi-19-nor-9,10-seko- :·: : kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri < Il V * (77a) ja (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime- tyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-19-nor-9,10-sekoko-: j : lesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri(77b) :'$*0 Analogisesti 41):n kanssa yhdiste 74 (280 mg, 0,48 *. mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (2 mmol) ja isovoihappo-

It* ’!!! etyyliesterin (0,26 ml, 1,9 mmol) kanssa, jolloin puhdis- tamalla raakatuote analogisesti 72):n kanssa saadaan 58 mg i yhdistettä 77a ja 86 mg yhdistettä 77b värittöminä vaah- :3¾ töinä.

83 1C999f; 1H-NMR (CD2C12): 77a: 6 = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,51 (s, 3H, H-18); 0,82 ja 0,84 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,08 ja 1,09 ( 2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,27 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 2,46 (d, J=6 5 Hz, 1H, OH); 4,02 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,05 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 5,32 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,49 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 5,78 ja 6,12 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 1H-NMR (CD2C12): 77b: δ = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,51 (s, 10 3H, H-18); 0,82 ja 0,83 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,01 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,07 ja 1,08 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,28 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,02 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,05 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 5,34 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,54 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 15 5,78 ja 6,13 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 76) (7E, 22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor- 9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyli-esteri (78a)

Yhdiste 77a (58 mg, 0,082 mmol) saatetaan reagoi-20 maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 20 mg ot-sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,57 ppm (s, 3H, H-18); 1,04 (d, J=7 * » . Hz, 3H, H-21); 1,11 ja 1,12 (2x s, kukin 3H, H-26 ja * H-27); 1,29 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 2,53 (d, J=6 Hz, 1H, /2$ OH); 4,03 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,07 (q, J=7 Hz, 2H, i.i : COOEt); 5,36 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,52 (dd, J=15 ( Il V : Hz, 1H, H-22); 5,85 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) : 77) (7E,22E)-(lR,3R,24S)-l,3,24-trihydroksi-19-nor- ;’$‘Q 9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyli- *. esteri (78b) 'Hl Yhdiste 77b (72 mg, 0,102 mmol) saatetaan reagoi- i : ·;· maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 51 mg ot- : : : sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

:3$ 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 1,04 (d, J=7

Hz, 3H, H-21); 1,12 ja 1,13 (2x s, kukin 3H, H-26 ja 1G 9 S 9 ό 84 H-27); 1,28 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 2,52 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,03 (m, 3H, H-l, H-3 ja H-24); 4,06 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 5,39 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,58 (dd, J=15 Hz, 1H, H-22); 5,85 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 5 ja H-7)

Esimerkki 30 78) (7E,22E)-(lR,3R)~l,3-bis[ [dimetyyli(1,1-dime-tyylietyyli) silyyli]oksi] -24-okso-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri (79) 10 0,04 ml (0,4 mmol) oksalyylikloridia liuotetaan -50 °C:ssa metyleenikloridiin (5 ml), liuokseen tiputetaan 0,06 ml (0,8 mmol) DMS0:ta 1 ml:ssa metyleenikloridia ja sitten sekoitetaan 2 minuuttia. Seokseen lisätään sitten 80 mg (0,11 mmol) 75a/75b-seosta 1 ml:ssa metyleeniklori-15 dia. 15 minuutin kuluttua -50 °C:ssa lisätään 0,26 ml tri-etyyliamiinia ja reaktioseoksen annetaan lämmetä huoneenlämpötilaan. Seos hydrolysoidaan natriumkloridiliuoksella, uutetaan etyyliasetaatilla, uute pestään natriumsulfaatil-la ja liuotin haihdutetaan. Jäännös kromatografoidaan si-20 likageelillä heksaani/etyyliasetaatilla, jolloin saadaan 51 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

_ 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,01 ja 0,05 ppm (2x s, kukin 6H,

SiMe); 0,51 (s, 3H H-18); 0,83 (s, 18H, Si-t-butyyli) ; * 1,05 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,18 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); /25 1,29 (s, 6H, H-26 ja H-27); 4,05 (m, 2H, H-l ja H-3); 4,98 · (hept J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,78 ja 6,11 (2x d, J=ll Hz, •V ; kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,10 (J=15 Hz, 1H, H-23); 6,77 (dd, J=15, 9,5 Hz, 1H, H-22) : : : 79) (7E, 22E) - (1R, 3R)-l,3-dihydroksi-24-okso-19-nor- 9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-me-tyylietyyliesteri (80) *;;; Yhdiste 79 (48 mg, 0,067 mmol) saatetaan reagoimaan 1 ·;** analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 19 mg otsikon : yhdistettä värittömänä vaahtona.

:3¾ 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,51 ppm (s, 3H, H-18); 1,08 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,20 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 1,31 (s, 6H, 85 λ *'· η π π I υ ? > u Η-26 ja Η-27); 3,98 ja 4,08 (2χ m, kukin 1Η, H-l ja H-3); 5,00 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,83 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,15 (J=15 Hz, 1H, H-23); 6,80 (dd, J=15, 9,5 Hz, 1H, H-22) 5 19-nor-sarjän 20-asemassa modifioitujen yhdisteiden lähtöaineet 80) [lS-(la,3a8,4a,7aa)]-1-[4-(metoksimetoksi)-7a-metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli]-1-etanoni (81) 12,2 g (47,9 mmol) [1R-[la(S*),3aB,4a,7aa]]-a,7a-10 dimetyyli-4-(metoksimetoksi )oktahydro-lH-indeeni-l-asetal- dehydiä 69 [H.H. Inhoffen et ai. Chem. Ber. 91, 780 (1958), Chem. Ber. 92 1772 (1959), W.G. Dauben et ai. Tetrahedron Lett. 30, 677 (1989)] sekoitetaan DMF:ssä (600 ml) DABC0:n (4,78 g, 41,9 mmol), kupari(II)asetaatin (720 15 mg, 3,6 mmol) ja bipyridyylin (574 mg, 3,6 mmol) kanssa 70 °C:ssa 24 tuntia samalla johtaen ilmaa reaktioseokseen. Jäähtynyt seos laimennetaan natriumkloridiliuoksella, uutetaan etyyliasetaatilla ja orgaaninen faasi, pestään perusteellisesti natriumkloridiliuoksella. Orgaaninen faa-20 si kuivataan natriumsulfaatilla, liuotin poistetaan ja jäännös puhdistetaan kromatografoimalla silikageelillä heksaani/etyyliasetaatilla, jolloin saadaan 7,1 g otsikon • · yhdistettä värittömänä öljynä.

‘ 1H-NMR (CDC13): 6 = 0,82 ppm (s, 3H, H-18); 2,10 (s, 3H, '2β H-21); 2,49 (t, J=9 Hz, 1H, H-17); 3,34 (s, 3H, OMe); 4,52 : ja 4,63 (2x d, J=6 Hz, kukin 1H, 0CH20) « * · : 81) [lS-[la(R)*,3a8,4a,7aa] ]-l-[4-(metoksimetoksi)- 7a-metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli]-1-metyylioksiraani j (82)

Yhdiste 81 (6,1 g, 25,38 mmol) saatetaan reagoimaan *. analogisesti 52):n kanssa, jolloin saadaan 6,4 g otsikon *;;; yhdistettä värittömänä öljynä.

^-NMR (CDCI3): δ = 1,03 ppm (s, 3H, H-18); 1,38 (s, 3H, : H-21); 2,31 ja 2,50 (2x d, J=5 Hz, kukin 1H, H-22); 3,35 :35; (s, 3H, OMe); 3,85(m, 1H, H-8); 4,54 ja 4,64 (2x d, J=6

Hz, kukin 1H, 0CH20) 10999c 86 82) [IS-(la,3a8,4α,7aa)]-(4-(metoksimetoksi)-7a-me-tyyli-8-metyleenioktahydro-lH-indeeni-l-etanoli (83) 12,1 g (47 mmol) yhdistettä 82 ja 19,03 g (94 mmol) aluminiumisopropylaattia liuotetaan tolueeniin (400 ml) 5 ja liuosta kuumennetaan kiehuvana 3 tuntia. Jäähtynyttä liuosta sekoitetaan isopropanoli/vesiseoksen kanssa ja sitten saostuneet aluminiumsuolat suodatetaan pois. Liuotin haihdutetaan ja jäännös puhdistetaan kromatografoimal-la silikageelillä heksaani/etyyliasetaattiseoksella, jol-10 loin saadaan 11,5 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä. ^-NMR (CDC13): δ = 0,80 ppm (s, 3H, H-18); 3,37 (s, 3H, OMe); 3,89 (m, 1H, H-8); 4,00 ja 4,10 (dbr, J=14 Hz, kukin 1H, H-22); 4,56 ja 4,65 (2x d, J=6 Hz, kukin 1H, 0CH20); 4,94 ja 5,21 (2x s, kukin 1H, H-21) 15 83) [IS-(la,3a8,4a,7aa)]-2-[4-(metoksimetoksi)-7a- metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli]-2-propenaali (84)

Yhdiste 83 (12,0 g, 47 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 55):n kanssa, jolloin saadaan 7,87 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

20 1H-NMR (CDCI3): δ = 0,76 ppm (s, 3H, H-18); 2,78 (t, J=9,5 ... Hz, H-17); 3,37 (s, 3H, OMe); 3,90 (m, 1H, H-8); 4,55 ja 4,66 (2x d, J=6 Hz, kukin 1H, 0CH20); 6,12 ja 6,28 (2x s, kukin 1H, H-21); 9,54 (s, 1H, H-22) :·’ 84) [1R- [la(E), 3a8,4a, 7aa] ] -N-metoksi-[4-(metoksi- 25 metoksi) -7a-metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli] -N-metyyli-; 2,4-pentadienamidi (85) ‘ · Yhdiste 84 (6,6 g, 31,06 mmol) saatetaan reagoimaan N-metoksi-N-metyyli-( 2-trifenyylifosforanylideeni )asetami-j din kanssa analogisesti 39):n kanssa, jolloin saadaan ;3fi. 6,8 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

1H-NMR (CDCI3) : δ = 0,70 ppm (s, 3H, H-18); 2,41 (t, J=10 ··;*’ Hz, 1H, H-17); 3,20 (s, 3H, N-Me); 3,30 (s, 3H, OMe); 3,64 (s, 3H, N-OMe); 3,84 (m, 1H, H-8); 4,49 ja 4,60 (2x d, J=6 I Hz, kukin 1H, 0CH20); 5,22 ja 5,51 (2x s, kukin 1H, H-21); 35. 6,53 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 7,30 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) λ f. π n o /- 87 ! ,; . ,; ./ υ 85) [1R- [1α(Ε) , 3a8,4α, 7aa] ] -4-(4-hydroksi-7a-metyy-lioktahydro-lH-inden-l-yyli)-N-metoksi-N-metyyli-2,4-pen-tadienamidi (86)

Yhdiste 85 (1,75 g, 5,19 mmol) saatetaan reagoimaan 5 analogisesti 68):n kanssa, jolloin saadaan 806 mg otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

1H-NMR (CDC13): δ = 0,75 ppm (s, 3H, H-18); 2,42 (t, J=10 Hz, 1H, H-17); 3,20 (s, 3H, N-Me); 3,65 (s, 3H, N-OMe); 4,05 (m, 1H, H-8); 5,20 ja 5,52 (s, kukin 1H, H-21); 6,53 10 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 7,30 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 86) [1R- [la(E) , 3afi, 7aa] ] -N-metoksi-N-metyyli-4- (7a-metyyli-4-okso-oktahydro-4H-inden-l-yyli) -2,4-pentadien-amidi (87)

Yhdiste 86 (800 mg) saatetaan reagoimaan analogi-15 sesti 69):n kanssa, jolloin saadaan 640 mg otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

1H-NMR (CDCI3): δ = 0,52 ppm (s, 3H, H-18); 2,67 (dd, J=10,5, 7,5 Hz, 1H, H-14); 2,80 (t, J=10,5 Hz, 1H, H-17); 3,29 (s, 3H, N-Me); 3,74 (s, 3H, N-OMe); 5,32 ja 5,60 (2x 20 s, kukin 1H, H-21); 6,65 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 7,38 (d, .:. J=15 Hz, 1H, H-22) **”. 87) (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime- . tyylietyyli)silyyli]oksi] -N-metyyli-N-metoksi-19-nor-9,10- sekokola-5,7,20,22-tetraeeni-24-amidi (88) • · · · · ’25 Yhdiste 87 (640 mg, 2,2 mmol) saatetaan reagoimaan : analogisesti 70) :n kanssa, jolloin saadaan 275 mg otsikon • * t ’ yhdistettä värittömänä vaahtona.

XH-NMR (CDCI3): δ = 0,05 ppm (s, 12H, SiMe); 0,43 (s, 3H, : H-18); 0,88 ja 0,89 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 3,28 :·30 (s, 3H, N-Me); 3,73 (s, 3H, N-OMe); 4,08 (m, 2H, H-l ja *. H-3); 5,33 ja 5,55 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,85 ja 6,18 ·;;; (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,63 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 7,39 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 10999c 88 88) (7E, 22E)-(1R, 3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dime-tyylietyyli)silyyli]oksi]-19-nor-9,10-sekokola-5,7,20,22-tetraen-24-aali (89)

Yhdiste 88 (265 mg, 0,41 mmol) saatetaan reagoimaan 5 DIBAH-liuoksen (1,03 mmol) kanssa analogisesti 40):n kanssa, jolloin saadaan 220 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): δ = 0,04 ppm (s, 12H, SiMe); 0,43 (s, 3H, H-18); 0,87 (s, 18H, Si-t-butyyli); 4,09 (m, 2H, H-l ja 10 H-3); 5,51 ja 5,68 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,85 ja 6,15 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,34 (dd, J=15, 7,5 Hz, 1H, H-23); 7,18 (d, J=15 Hz, 1H, H-22); 9,58 (d, J=7,5 Hz, 1H, H-24)

Esimerkki 31 15 89) (7E, 22E)-(1R,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(l,1-di- metyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-meyyli-etyyliesteri (90a) ja (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli (1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-19-20 nor-9,10-sekokolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyyli- happo-l-meyylietyyliesteri (90b)

Analogisesti 41):n kanssa yhdiste 89 (305 mg, 0,52 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (2,1 mmol) ja isovoihap-·’·’ poisopropyyliesterin (0,28 ml, 2,07 mmol) kanssa, jolloin '25 puhdistamalla raakatuote HPLC:llä (normaalifasi, liuotin: !.·: metyleenikloridi/metanoli) saadaan 64 mg yhdistettä 90a ja

I M

ly ' 67 mg yhdistettä 90b värittöminä vaahtoina.

1H-NMR (CD2C12) : 90a: δ = 0,05 ppm (s, 12H, SiMe); 0,41 (s, I 3H, H-18); 0,85 ja 0,86 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); ;<3Q 1,14 ja 1,15 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (d, J=7

Hz, 6H, COOiPr); 2,61 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,07 (m, 2H, H-l ja H-3); 4,13 (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,98 (hept, l...: J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,01 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-21); : 5,84 ja 6,16 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,76 [b5. (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 6,21 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 1C; 9 9 9 e 89 1H-NMR (CD2C12): 90 b: δ = 0,05 ppm (s, 12H, SiMe); 0,41 (s, 3H, H-18); 0,86 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,14 ja 1,16 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,20 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 2,62 (d, J=7 Hz, 1H, OH); 4,08 (m, 2H, H-l ja 5 H-3); 4,18 (t, J=7 Hz, 1H, H-24); 4,98 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 4,99 ja 5,19 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,84 ja 6,17 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,80 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 6,26 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 90) (7E, 22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor- 10 9,10-sekokolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo- 1-metyylietyyliesteri (91a)

Yhdiste 90a (64 mg, 0,09 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 22 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

15 1H-NMR (CD2C12): 6 = 0,42 ppm (s, 3H, H-18); 1,14 ja 1,15 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 3,98 ja 4,08 (2x m, kukin 1H, H-l ja H-3); 4,15 (d, J=7 Hz, 1H, H-24); 4,98 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 5,00 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,88 ja 6,28 (2x d, 20 J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,79 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 6,26 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 91) (7E, 22E) - (1R, 3R, 24S) -1,3,24-trihydroksi-19-nor- . 9,10-sekokolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo- 1-metyylietyyliesteri (91b) '25 Yhdiste 90b (67 mg, 0,09 mmol) saatetaan reagoimaan : analogisesti 73) :n kanssa, jolloin saadaan 27 mg otsikon * · *.· · yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,42 ppm (s, 3H, H-18); 1,14 ja 1,17 • (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, » * · · :3q COOiPr); 3,98 ja 4,07 (2x m, kukin 1H, H-l ja H-3); 4,18 (t, J=7 Hz, 1H, H-24); 4,99 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); ;;; 5,00 ja 5,20 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,88 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,80 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, i H-23); 6,28 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) • · » » · 90 1G9996

Esimerkki 32 92) (7E, 22E)- (1R,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste- 5 ri (92a) ja (7E, 22E)-(1R,3R,24S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-19-nor-9,10-se-kokolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylies-teri (92b)

Analogisesti 41):n kanssa yhdiste 89 (300 mg, 0,51 10 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (2 mmol) ja isovoihappo-etyyliesterin (0,26 ml, 1,9 mmol) kanssa, jolloin puhdistamalla raakatuote HPLCrllä (normaalifaasi, liuotin: mety-leenikloridi/metanoli) saadaan 68 mg yhdistettä 92a ja 85 mg yhdistettä 92b värittöminä vaahtoina.

15 1H-NMR (CD2C12): 92a: δ = 0,04 ppm (s, 12H, SiMe); 0,40 (s, 3H, H-18); 0,84 ja 0,86 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 1,13 ja 1,14 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,27 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 2,59 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,05 (m, 2H, H-l ja H-3); 4,11 (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,12 (q, J=7 Hz, 20 2H, COOEt); 5,01 ja 5,19 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,84 ja 6,16 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,75 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 6,20 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) ^-NMR (CD2C12) : 92b: δ = 0,04 ppm (s, 12H, SiMe); 0,40 (s, 3H, H-18); 0,85 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,13 ja 1,15 (2x '26 s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,28 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); '••i : 2,60 (d, J=7 Hz, 1H, OH); 4,06 (m, 2H, H-l ja H-3); 4,12 : (t, 3=7 Hz, 2H, COOEt); 4,14 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,99 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,84 ja 6,16 (2x d, J=ll i Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,80 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, ;30. H-23); 6,25 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 93) (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor- ·;;; 9,10-sekokolesta-5,7, 20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo- ’··· etyyliesteri (93a) : Yhdiste 92a (65 mg, 0,093 mmol) saatetaan reagoi- ;3*5: maan analogisesti 73) :n kanssa, jolloin saadaan 23 mg ot sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

91 Ί f: o o Q f·., 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,41 ppm (s, 3H, H-18); 1,13 ja 1,15 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,26 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 3,98 ja 4,07 (2x m, kukin 1H, H-l ja H-3); 4,14 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,15 (d, J=7 Hz, 1H, H-24); 5,00 5 ja 5,20 (2x, s, kukin 1H, H-21); 5,87 ja 6,28 (2x, d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,78 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 6,25 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 94) (7E, 22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor- 9,10-sekokolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-10 etyyliesteri (93b)

Yhdiste 92b (80 mg, 0,14 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 31 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

"H-NMR (CD2C12): 6 = 0,41 ppm (s, 3H, H-18); 1,14 ja 1,16 15 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,28 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 3,98 ja 4,06 (2x m, kukin 1H, H-l ja H-3); 4,15 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,17 (t, J=7 Hz, 1H, H-24); 5,00 ja 5,19 (2x s, kukin 1H, H-21); 5,87 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 5,80 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, 20 H-23); 6,28 (d, J=15 Hz, 1H, H-22) 20-fluori-19-nor-sarjän lähtöaineet f> ' 95) [IS-(la, 3aB, 4a, 7aa) ]-4-[ [dimetyyli-(1,1-dime- . tyylietyyli)silyyli]oksi] -7a-metyyli-l-[l-metyyli-2-[ (tri- metyylisilyyli)oksi]-1-etenyyli]oktahydro-lH-indeeni (95) '25 Trimetyylisilyylitri fluorimetaanisulfonaattiin l·.'· (37,7 g, 170 mmol) 270 mlrssa metyleenikloridia lisätään * t * · tipoittain huoneenlämpötilassa 21,9 g (170 mmol) di-iso-propyylietyyliamiinia ja sitten 5 °C:ssa 9 g (27 mmol) : [1R-[la(S* ), 3aB, 4a, 7aa] ]-a,7a-dimetyyli-4-[ [dimetyyli( 1,1- :3Cj dimetyylietyyli)silyyli]oksi]oktahydro-lH-indeeni-l-aset- *. aldehydiä 94 [H.H. Inhoffen et ai. Chem. Ber. 91_, 780 (1958), Chem. Ber. 92 1772 (1959), W.G. Dauben et ai. Tet-*··' rahedron Lett. 30, 677 (1989)] 600 ml:ssa metyleeniklori- : : : dia. Tunnin sekoittamisen jälkeen huoneenlämpötilassa :3f5; liuotin poistetaan vakuumissa. Jäännös liuotetaan heksaa- niin, suodatetaan natriumsulfaatin kanssa ja haihdutetaan 10999ο 92 jälleen kuiviin, jolloin saadaan 13 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä (E/Z-seos noin 3:1).

1H-NMR (CD2C12): 6 = 0,00 ppm (s, 6H, SiMe); 0,13 (s, 9H, SiMe3); 0,78 (s, 3H, H-18); 0,88 (s, 9H, Si-t-butyyli); 5 1,50/1,57 (sbr, 3H, H-21); 4,02 (m, 1H, H-8); 6,02/6,18 (m, 1H, H-22) 96) [ IS- [ la(S*),3aB,4a,7aa)]-a,7a-dimetyyli-4-[[di-metyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli] oksi] -α-fluorioktahyd-ro-lH-indeeni-l-asetaldehydi (96) ja [IS-[la(R*),3aB,4a,- 10 7aa) ] -a, 7a-dimetyyli-4-[ [dimetyyli (1,1-dimetyylietyyli) si lyyli ] oksi]-a-fluorioktahydro-lH-indeeni-l-asetaldehydi (97) 15 g (37,81 mmol) yhdistettä 95 liuotetaan metylee-nikloridiin (300 ml) ja liuokseen tiputetaan 5 °C:ssa 26 g 15 (82 mmol) N-fluoridifenyylisulfonimidiä 250 ml:ssa mety- leenikloridia. Seosta sekoitetaan yön yli huoneenlämpötilassa. Sitten reaktioseos kaadetaan veteen, orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan, jäännös kromatografoidaan silikageelillä heksaani/ 20 etyyliasetaatilla, jolloin saadaan 3,85 g yhdistettä 96 ja 2,08 g yhdistettä 97 värittömänä öljynä.

^-NMR (CDC13): 96: δ = 0,00 ja 0,01 ppm (2x s, kukin 3H, SiMe); 0,88 (s, 9H, Si-t-butyyli); 1,02 (d, J=2 Hz, 3H, 1 ' H-18); 1,42 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 4,01 (m, 1H, H-8); :25 9,75 (d, J=7 Hz, 1H, H-22) » · : 97: δ = 0,01 ppm (s, 6H, SiMe); 0,88 (s, 9H, Si-t-butyy- • * · ; li); 1,08 (d, J=4,5 Hz, 3H, H-18); 1,46 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 4,01 (m, 1H, H-8); 9,87 (d, J=6 Hz, 1H, H-22) i 20-B-fluorisarjän lähtöaineet 97) [lS-(la[R*-(E)],3aB,4a,7aa)]-4-[4-[[dimetyyli- *. (1,1-dimetyylietyyli)silyyli] oksi] -7a-metyylioktahydro-lH- • > · "· j inden-l-yyli] -4-fluori-N-metoksi-N-metyyli-2-pentenamidi (98) • Yhdiste 96 (342 mg, 1 mmol) saatetaan reagoimaan .35; analogisesti 39):n kanssa, jolloin saadaan 380 mg otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

10999b 93 1H-NMR (CDC13): δ = 0,00 ja 0,01 ppm (2x s, kukin 3H,

SiMe); 0,88 (s, 9H, Si-t-butyyli); 1,05 (d, J=2 Hz, 3H, H-18); 1,50 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 3,27 (s, 3H, N-Me); 3,70 (s, 3H, N-OMe); 4,01 (m, 1H, H-8); 6,55 (d, J=15,5 5 Hz, 1H, H-23); 6,93 (dd, J=21, 15,5 Hz, 1H, H-22) 98) [IS-(la[R*-(E)],3aB,4a,7aa)]-4-fluori-4-(4-hyd-roksi-7a-metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli) -N-metoksi-N-rae-tyyli-2-pentenamidi (99)

Yhdistettä 98 (100 mg, 0,23 mmol) sekoitetaan ase-10 tonitriilissä (1,9 ml) ja THF:ssa (1,5 ml) fluorivedyn (40-%:inen, 1,4 ml) kanssa 90 minuuttia. Reaktioseos kaadetaan natriumkloridiliuokseen, uutetaan etyyliasetaatilla, orgaaninen faasi pestään natriumvetykarbonaattiliuok-sella ja natriumkloridiliuoksella, kuivataan natriumsul-15 faatilla ja haihdutetaan. Jäännös puhdistetaan kriomato-grafoimalla silikageelillä heksaani/etyyliasetaattiseok-sella, jolloin saadaan 53 mg otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

^-NMR (CDCI3): δ « 1,08 ppm (d, J=2 Hz, 3H, H-18); 1,50 20 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 3,25 (s, 3H, N-Me); 3,68 (s, 3H, N-OMe); 4,07 (m, 1H, H-8); 6,54 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-23); 6,89 (dd, J=21, 15,5 Hz, 1H, H-22) . 99) [lS-(la[R*-(E) ],3a8,7aa) ]-4-fluori-N-metoksi-N- • · ” m metyyli-4- (7a-metyyli-4-okso-oktahydro-4H-inden-l-yyli) -2- • t « · · '25 pentenamidi (100) i.: : Yhdiste 99 (427 mg, 1,36 mmol) liuotetaan metylee- * · · V ·' nikloridiin (12 ml), liuokseen lisätään 63 mg (0,76 mmol) natriumasetaattia ja liuos jäähdytetään 0 °C:seen. Sitten I lisätään 414 mg (1,92 mmol) pyridiniumkloorikromaattia ja > I · > ;‘^O sekoitetaan huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Seos laimenne-*, taan dietyylieetterillä suodatetaan celitellä, haihdute- * * * * taan ja kromatografoidaan silikageelillä heksaani/etyyli- '...· asetaattiseoksella, jolloin saadaan 357 mg otsikon yhdis- • tettä.

.35. 1H-NMR (CDC13): δ = 0,77 ppm (d, J=2 Hz, 3H, H-18); 1,53 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 2,46 (dd, J=10,5, 7,5 Hz, 1H, 10999ο 94 Η-14 ); 3,26 (s, 3Η, N-Me); 3,72 (s, 3H, N-OMe); 6,56 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-23); 6,93 (dd, J=21, 15,5 Hz, 1H, H-22) 100) (7E,22E)-(1R, 3R,20S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyy 1 ietyy 1 i) silyyli ] oksi ] - 20 - f luor i -N-metoksi -N-metyy-5 li-19-nor-9,10-sekokola-5,7,22-trieeni-24-amidi (101)

Yhdiste 100 (350 mg, 1,15 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 70):n kanssa, jolloin saadaan 460 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): δ = 0,03 ppm (s, 12H, SiMe); 0,62 (d, 3=2 10 Hz, 3H, H-18); 0,81 ja 0,82 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyy-li); 1,50 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 3,22 (s, 3H, N-Me); 3,68 (s, 3H, N-OMe); 4,03 (m, 2H, H-l ja H-3); 5,77 ja 6,11 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,53 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-23); 6,90 (dd, J-21, 15,5 Hz, 1H, H-22) 15 101) (7E, 22E)-(1R,3R,20S)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1- dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-20-fluori-19-nor-9,10-seko-kola-5,7,22-trien-24-aali (102)

Yhdiste 101 (440 mg, 0,66 mmol) saatetaan reagoimaan DIBAH-liuoksen (3,3 mmol) kanssa analogisesti 3):n 20 kanssa, jolloin saadaan 340 mg otsikon yhdistettä värittö-mänä vaahtona.

« 1H-NMR (CDCI3) : δ = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,62 (d, J=2

Hz, 3H, H-18); 0,83 ja 0,84 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyy- li); 1,52 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 4,03 (m, 2H, H-l ja #25 H-3); 5,78 ja 6,11 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); ··· ϊ 6,22 (dd, J=15,5, 8 Hz, 1H, H-23); 6,78 (dd, J=21, 15,5 • * * : Hz, 1H, H-22); 9,54 (dbr, J=8 Hz, 1H, H-24)

Esimerkki 33 I:': 102) (7E,22E)-(lR,3R,20S)-l,3-bis[ [dimetyyli (1,1- :3¾ dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-20-fluori-24-hydroksi-19- k nor-9,10-sekokola-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyy-liesteri (103) !·;·’ Yhdiste 102 (700 mg, 1,15 mmol) saatetaan reagoi- : : : maan LDA:n (7,8 mmol) ja isovoihappoetyyliesterin (1,2 ml, :3*5; 7,8 mmol) kanssa analogisesti 41) kanssa, jolloin saa- 10999ο 95 daan 200 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona (1:1 diastereomeerit C-24:n suhteen).

1H-NMR (CDC13) : δ = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,62 (d, J=2 Hz, 3H, H-18); 0,83 ja 0,84 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyy-5 li); 1,12/1,16 ja 1,22 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,22 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 1,47 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 4,04 (m, 2H, H-l ja H-3); 4,13 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,13 (m, 1H, H-24); 5,61 (dd, J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); 5,75/5,78 (dd, J=2l, 15,5 Hz, 1H, H-22); 5,78 ja 6,12 (2x 10 d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 103) (7E,22E)-(1R,3R,20S)-20-fluori-1,3,24-trihyd-roksi-19-nor-9,10-sekokola-5,7,22-trieeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri (104)

Yhdistettä 103 (150 mg, 0,2 mmol) sekoitetaan 15 THF:ssa (20 ml) tetrabutyyliammoniumfluoridin (630 mg, 2 mmol) kanssa huoneenlämpötilassa yön yli, sitten seosta kuumennetaan 30 minuuttia 40 °C:ssa. Jäähtynyt seos laimennetaan natriumkloridiliuoksella, uutetaan etyyliasetaatilla, uute pestään natriumkloridiliuoksella, kuivataan 20 natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännös kromatografoi-.·. daan useita kertoja silikageelillä heksaani/etyyliasetaat- ///; tiseoksella, jolloin saadaan 17,3 mg otsikon yhdistettä • · . värittömänä vaahtona (1:1 diastereomeerit C-24:n suhteen).

* XH-NMR (CD2C12): δ = 0,60 ppm (d, J=2 Hz, 3H, H-18); 1,07 • 1 * t · /25 ja 1,09/1,12 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,18 (t, J=7 : Hz, 3H, COOEt); 1,40 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 3,99 (m, 2H, « · : H-l ja H-3); 4,05 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,08 (m, 1H, H-24); 5,55/5,56 (dd, J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); 5,71/5,72 j ./: (dd, J=21, 15,5 Hz, 1H, H-22); 5,78 ja 6,20 (2x d, J=ll

Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 1 1 » ► * « * · » · · « » * ► · 10999c 96 20-a-fluorisarjän lähtöaineet 104) [IS-[la[S*-(E),3aB,4a,7aa]]-4-[4-[[dimetyyli-(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-7a-metyylioktahydro-H-inden-l-yyli] - 4-f luori-N-metoksi-N-metyyli-2-pentenamidi 5 (105)

Yhdiste 97 (2,03 mg, 5,9 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 39):n kanssa, jolloin saadaan 2,4 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

1H-NMR (CDC13): δ = 0,02 ppm (s, 6H, SiMe); 0,88 (s, 9H, 10 Si-t-butyyli); 1,00 (d, J=4,5 Hz, 3H, H-18); 1,40 (d, J=21

Hz, 3H, H-21); 3,29 (s, 3H, N-Me); 3,72 (s, 3H, N-OMe); 4,01 (m, 1H, H-8); 6,62 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-23); 6,99 (dd, J=25, 15,5 Hz, 1H, H-22) 105) [lS-[la[S*-(E),3aB,4a,7aa]]-4-fluori-4-(4-hyd- 15 roksi-7a-metyylioktahydro-lH-inden-l-yyli) -N-metoksi-N-me- tyyli-2-pentenamidi (106)

Yhdiste 105 (2,4 mg, 5,6 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 98):n kanssa, jolloin saadaan 1 g otsikon yhdistettä värittömänä öljynä.

20 1H-NMR (CDCI3): δ = 0,97 ppm (d, J=4,5 Hz, 3H, H-18); 1,40 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 3,25 (s, 3H, N-Me); 3,72 (s, 3H, N-OMe); 4,02 (m, 1H, H-8); 6,57 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-23); 1 « 6,92 (dd, J=25, 15,5 Hz, 1H, H-22) ", 106) [IS-[la[S*-(E)],3aB,7aa]]-4-fluori-N-metoksi- • 11«· 25 N-metyyli-4-(7a-metyyli-4-okso-oktahydro-4H-inden-l-yyli)- ·♦ · 2-pentenamidi (107) . 1 > *,* ’ Yhdiste 106 (1 g, 3,19 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 99):n kanssa, jolloin saadaan 800 mg otsikon j j \ yhdistettä värittömänä öljynä.

;3Q 1H-NMR (CDCI3): δ = 0,70 ppm (d, J=4,5 Hz, 3H, H-18); 1,41 ;.t (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 2,44 (dd, J=10,5, 7,5 Hz, 1H, H-14); 3,26 (s, 3H, N-Me); 3,73 (s, 3H, N-OMe); 6,62 (d, *···’ J=15,5 Hz, 1H, H-23); 6,98 (dd, J=25, 15,5 Hz, 1H, H-22) • * f 1 · 97 109996 107) (7E,22E)- (1R, 3R, 20R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli) silyyli]oksi] -20-fluori-N-metoksi-N-metyy-li-19-nor-9,10-sekokola-5,7,22-trieeni-24-amidi (108)

Yhdiste 107 (600 mg, 2,5 mmol) saatetaan reagoimaan 5 analogisesti 70):n kanssa, jolloin saadaan 470 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): δ = 0,03 ppm (s, 12H, SiMe); 0,60 (d, J=4,5 Hz, 3H, H-18); 0,81 ja 0,82 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyy-li); 1,45 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 3,24 (s, 3H, N-Me); 3,72 10 (s, 3H, N-OMe); 4,03 (m, 2H, H-l ja H-3); 5,77 ja 6,12 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,57 (d, J=15,5 Hz, 1H, H-23); 6,98 (dd, J=25, 15,5 Hz, 1H, H-22) 108) (7E,22E)-(1R,3R,20R)-1,3-bis([dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-20-fluori-19-nor-9,10-seko- 15 kola-5,7,22-trien-24-aali (109)

Yhdiste 108 (440 mg, 0,66 mmol) saatetaan reagoimaan DIBAH-liuoksen (3,3 mmol) kanssa analogisesti 40) :n kanssa, jolloin saadaan 294 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

20 1H-NMR (CDCI3): 6 = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,58 (d, J=4,5 • t Hz, 3H, H-18); 0,82 ja 0,83 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyy- li); 1,45 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 4,03 (m, 2H, H-l ja t » 11 * H-3); 5,78 ja 6,11 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); Ϊ·| 6,29 (dd, J=15,5, 8 Hz, 1H, H-23); 6,84 (dd, J=25, 15,5 "25 Hz, 1H, H-22); 9,62 (dbr, J=8 Hz, 1H, H-24) i.i I Esimerkki 34 ί/ί.* 109) (7E, 22E) - (1R, 3R, 2 OR, 24S) -1,3-bis [ [dimetyyli- (1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-20-fluori-24-hydroksi- i 19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihap- 1(1 > ,3Q poetyyliesteri (110) c *t Yhdiste 109 (240 mg, 0,39 mmol) saatetaan reagoi- f * * maan LDA:n (3,9 mmol) ja isovoihappoetyyliesterin (0,52 it* % » ml, 3,9 mmol) kanssa analogisesti 41) kanssa, jolloin saa- » \ daan 160 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

* t 1 * ;S5j 1H-NMR (CD2C12); δ = 0,01 ppm (s, 12H, SiMe); 0,55 (d, J=4,5 Hz, 3H, H-18); 0,82 ja 0,83 (2x s, kukin 9H, Si-t- 98 1G 9 9 91, butyyli); 1,11 ja 1,13 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); l, 22 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 1,46 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 4,02 (m, 2H, H-l ja H-3); 4,08 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4.13 (m, 1H, H-24); 5,63 (dd, J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); 5 5,83 (dd, J=25, 15,5 Hz, 1H, H-22); 5,79 ja 6,13 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 110) (7E,22E)-(lR,3R,20R,24S)-20-fluori-l,3,24- trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-kar-boksyylihappoetyyliesteri (111) 10 Yhdiste 110 (150 mg, 0,2 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 103):n kanssa, jolloin saadaan 25 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12) : δ = 0,60 ppm (d, J=4,5 Hz, 3H, H-18); 1,15 ja 1,18 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 1,23 (t, J=7 Hz, 15 3H, COOEt); 1,35 (d, J=21 Hz, 3H, H-21); 3,99 ja 4,08 (2x m, kukin 1H, H-l ja H-3); 4,12 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,18 (d, J=7 Hz, 1H, H-24); 5,68 (dd, J=15,5, 7 Hz, 1H, H-23); 5,88 (dd, J=25, 15,5 Hz, 1H, H-22); 5,83 ja 6,28 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 20 Normaalisarjän johdannaisia (lisäys EM 50741:een)

Esimerkki 35 ··* 111) (5E, 7E, 22E) - (IS,3R) -1,3-bis[ [dimetyyli(1,1-di- im· metyylietyyli)silyyli]oksi] -24-hydroksi-9,10-sekokolesta-.·. 5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyyliesteri Ä5.‘: (112) ; ^ ( 5E, 7E, 22E)-(IS, 3R)-1,3-bis[ [dimetyyli( 1,1-dimetyy-

• · I

lietyyli )silyyli]oksi] -9,10-sekokola-5,7,10( 19 ), 22-tetra-* " en-24-aali, yhdiste 3 (500 mg, 0,91 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (4,5 mmol) ja isovoihappobutyyliesterin * · 3Ö; (0,76 ml, 4,5 mmol) kanssa analogisesti 41) kanssa, jol- : loin saadaan 677 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahto- na (1:1 diastereomeerit C-24:n suhteen) !···. 1H-NMR (CDClj): δ = 0,04 ppm (s, 12H, SiMe); 0,53 (s, 3H, • i ’·’ H-18); 0,88 ja 0,90 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 0,99 35* (t, J=7 Hz, 3H, COOBu); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,13/ 1.14 ja 1,15/1,16 (2x s, kukin 3H, C-26 ja C-27); 4,07 (t, 10999ο 99 J=7 Hz, 2H, COOBu); 4,09 (m, 1H, H-24); 4,19 (m, 1H, H-3); 4,51 (m, 1H, H-l); 4,92 ja 4,97 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,36/5,38 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,52/5,57 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 5,80 ja 6,43 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, 5 H-6 ja H-7) 112) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3-bis[[dimetyyli- (1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-seko-kolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyy-liesteri (113a) ja (5Z,7E,22E)-(lS,3R,24S)-l,3-bis[[dime-10 tyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappobu-tyyliesteri (113b)

Yhdiste 112 (670 mg, 0,90 mmol) liuotetaan toluee- niin (80 ml) ja liuosta säteilytetään antraseenin (180 mg, 15 0,96 mmol) ja trietyyliamiinin (0,1 ml) läsnä ollessa Py-

rex-upporeaktorissa elohopeasuurpainelampulla (Philips HPK

125) typpikehässä 10 minuuttia. Liuotin poistetaan ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä heksaani/etyyli- asetaattiseoksella, jolloin saadaan 102 mg yhdistettä 113a 20 ja 158 mg yhdistettä 113b värittömänä vaahtona.

"H-NMR (CDC13): 113a: δ = 0,06 ppm (s, 12H, SiMe); 0,54 (s, ··· 3H, H-18); 0,88 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,96 (t, J=7 Hz, » · · · 3H, COOBu); 1,05 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,16 ja 1,17 (2x .·. s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,60 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,06 25. (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,10 (t, J=7 Hz, 2H, COOBu); • · ; . 4,20 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,87 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,36 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,52 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 6,01 ja 6,23 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) ;3Ö: 113b: δ = 0,06 ppm (s, 12H, SiMe); 0,53 (s, 3H, H-18); V : 0,88 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,94 (t, J=7 Hz, 3H, COOBu); 1,03 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,17 ja 1,18 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,58 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,10 (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,10 (t, J=7 Hz, 2H, COOBu); 4,18 (m, 1H, !ä5| H-3); 4,37 (m, 1H, H-l); 4,87 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, 9.’·' H-19); 5,38 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,59 (dd, J=15, 10999ο 100 9 Hz, 1Η, H-22); 6,01 ja 6,23 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 113) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli-5 happobutyyliesteri (114a)

Yhdiste 113a (100 mg, 0,13 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 39 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,57 ppm (s, 3H, H-18); 0,93 (t, J=7 10 Hz, 3H, COOBu); 1,04 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,12 (s, 3H, H-26 ja H-27); 2,45 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,02 (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,06 (t, J=7 Hz, 2H, COOBu); 4,17 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,28 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,35 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,51 (dd, J=15, 9 15 Hz, 1H, H-22); 6,01 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 114) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happobutyyliesteri (114b) 20 Yhdiste 113b (155 mg, 0,21 mmol) saatetaan reagoi maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 69 g otsi-it|:* kon yhdistettä värittömänä vaahtona.

·:·: ^-NMR (CD2C12): 6 = 0,56 ppm (s, 3H, H-18); 0,94 (t, J=7 . Hz, 3H, COOBu); 1,03 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,12 (s, 3H, .25: H-26 ja H-27); 2,46 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,08 (m, 1H, ; H-24); 4,08 (t, J=7 Hz, 2H, COOBu); 4,17 (m, 1H, H-3); * · · ’•".j 4,39 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,29 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,37 (dd, J-15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,57 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 6,01 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) •3S0: Esimerkki 36 V : 115) (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di- .·. metyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokolesta- ,*··. 5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyylipro- • · * pyyliesteri (115) *•35 (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis [ [ dimetyyli (1,1-dimetyy- ’...· lietyyli )silyyli]oksi] -9,10-sekokola-5,7,10( 19 ), 22-tetra-

IpOCQf

101 ' - · " L

en-24-aali, yhdiste 3 (500 mg, 0,91 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (4,5 mmol) ja isovoihappoisobutyyliesterin (0,76 ml, 4,5 mmol) kanssa analogisesti 41) kanssa, jolloin saadaan 400 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahto-5 na (1:1 diastereomeerit C-24:n suhteen).

1H-NMR (CDC13): δ = 0,03 ppm (s, 12H, SiMe); 0,57 (s, 3H, H-18); 0,89 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,90 ja 0,92 (2x d, J=7 Hz, kukin 6H, COOiBu); 1,04/1,05 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,17 ja 1,18 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 3,88 10 (m, 2H, COOiBu); 4,10 (m, 1H, H-24); 4,23 (m, 1H, H-3); 4,53 (m, 1H, H-l); 4,94 ja 4,99 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,37/5,39 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,53/5,59 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-22); 5,81 ja 6,46 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 15 116) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-l,3-bis[[dimetyyli- (1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10-seko-kolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-me-tyylipropyyliesteri (116a) ja (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3-bis[ [dimetyyli (1,1-dimetyylietyyli) silyyli] oksi] -24-hyd-20 roksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karbok-syy1ihappo-2-metyy1ipropyy1iesteri (116b)

Yhdiste 115 (400 mg, 0,54 mmol) saatetaan reagoi-maan analogisesti 112 ):n kanssa, jolloin saadaan 102 mg . yhdistettä 116a ja 200 mg yhdistettä 116b värittömänä ·:···25 vaahtona.

: .·. 1H-NMR (CDCI3) : 116a: δ = 0,05 ppm (s, 12H, SiMe); 0,55 (s, .*:·. 3H, H-18); 0,89 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,95 (d, J=7 Hz, * · · 6H, COOiBu); 1,05 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,19 ja 1,20 (2x . . s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,60 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 3,89 • * · :;;.:30 (d, J=7 Hz, 2H, COOiBu); 4,08 (dd, J=7, 6 Hz, 1H, H-24); 4,19 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,87 ja 5,18 (2x s, /!* kukin 1H, H-19); 5,37 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,52 Γ"; (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 6,02 ja 6,23 (2x d, J=ll Hz, . *, kukin 1H, H-6 ja H-7) ^/35 116b: δ = 0,05 ppm (s, 12H, SiMe); 0,54 (s, 3H, H-18), '·*· 0,89 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,96 (d, J=7 Hz, 6H, COOiBu); 102 inQQQf,

'-ν' y \.J

1,04 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,18 ja 1,19 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,59 (d, J=7 Hz, 1H, OH); 3,89 (d, J=7 Hz, 2H, COOiBu); 4,10 (t, J=7 Hz, 1H, H-24); 4,19 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,87 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, 5 H-19); 5,39 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,59 (dd, J=15, 9

Hz, 1H, H-22); 6,02 ja 6,23 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 117) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-10 happo-2-metyylipropyyliesteri (117a)

Yhdiste 116a (98 mg, 0,13 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 48 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12) : δ = 0,57 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 (d, J=7 15 Hz, 6H, COOiBu); 1,04 (d, 3 = 7 Hz, 3H, H-21); 1,12 ja 1,13 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,44 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 3,85 (d, J=7 Hz, 2H, COOiBu); 4,04 (dd, 3=7r 6 Hz, 1H, H-24); 4,17 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,28 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,36 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 20 5,52 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 6,01 ja 6,37 (2x d, J=ll

Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) ··· 118) (5Z,7E,22E)-(lS,3R,24S)-l,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happo-2-metyylipropyyliesteri (117b) ,25; Yhdiste 116b (193 mg, 0,26 mmol) saatetaan reagoi- . . maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 105 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

Hl-NMR (CD2C12): δ = 0,56 ppm (s, 3H, H-18); 0,95 (d, J=7 Hz, 6H, COOiBu); 1,03 (d, J=7 Hz, 3H, H-21; 1,14 (s, 6H, •:30: H-26 ja H-27); 2,46 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 3,84 (d, J=7 Hz, 2H, COOiBu); 4,08 (dd, J=7,6 Hz, 1H, H-24); 4,17 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,96 ja 5,29 (2x s, kukin 1H, ’···. H-19); 5,38 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,58 (dd, J=15, 9

Hz, 1H, H-22); 6,00 ja 6,37 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 iäk ja H-7) Λ f: o C O /· 103 I u > > u

Esimerkki 37 119) (5E, 7E,22E)- (IS,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli)silyyli)oksi]-24-hydroksi-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyyliesteri 5 (118) (5E, 7E, 22E) - (IS, 3R) -1,3-bis [ [dimetyyli(1,1-dimetyy-lietyyli)silyyli]oksi]-9,10-sekokola-5,7,10(19),22-tetra-en-24-aali, yhdiste 3 (500 mg, 0,91 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (4,5 mmol) ja isovoihappopentyyliesterin 10 (0,76 ml, 4,5 mmol) kanssa analogisesti 41) kanssa, jol loin saadaan 550 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona (1:1 diastereomeerit C-24:n suhteen).

1H-NMR (CDC13): δ = 0,03 pm (s, 12H, SiMe); 0,52 (s, 3H, H-18); 0,88 (t, J=7 Hz, 3H, COOPent); 0,90 (s, 18H, Si-t- 15 butyyli); 1,01/1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,14 ja 1,15 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,51 (quint, J=7 Hz, 2H, COOPent); 4,02 (t, J=7 Hz, 2H, COOPent); 4,08 (m, 1H, H-24); 4,20 (m, 1H, H-3); 4,52 (m, 1H, H-l); 4,93 ja 4,98 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,35/5,39 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, 20 H-23); 5,52/5,57 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-22); 5,80 ja 6,43 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) •i· 120) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-l,3-bis[[dimetyyli- : (1,1-dimetyylietyyli) silyyli] oksi] -24-hydroksi-9,10-seko- .·. kolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyy-• · · 25. liesteri (119a) ja (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3-bis[[dime- . . tyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-9,10- *;;/ sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-• · · metyylipentyyliesteri (119b)

Yhdiste 118 (550 mg, 0,71 mmol) saatetaan reagoi- • · *30: maan analogisesti 112) :n kanssa, jolloin saadaan 156 mg » · « ·*,! ' yhdistettä 119a ja 174 mg yhdistettä 119b värittömänä t;# vaahtona.

^-NMR (CDCI3): 119a: δ = 0,03 ppm (s, 12H, SiMe); 0,53 (s, 3H, H-18); 0,87 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,89 (t, J=7 Hz, ;^5| 3H, COOPent); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,17 ja 1,18 (2x s, kukin 3H, H-26 ja H-27); 2,60 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,08 hm 10999c (m, 1H, H-24); 4,09 (t, J=7 Hz, 2H, COOPent); 4,18 (m, 1H, H-3); 4,35 (m, 1H, H-l); 4,85 ja 5,16 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,36 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,53 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 6,00 ja 6,23 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 5 ja H-7) 119b: δ = 0,03 ppm (s, 12H, SiMe); 0,52 (s, 3H, H-18); 0,86 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,88 (t, J=7 Hz, 3H, COOPent); 1,01 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,15 ja 1,16 (2x s, kukkin 3H, H-26 ja H-27); 2,57 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,08 10 (m, 1H, H-24); 4,08 (t, J=7 Hz, 2H, COOPent); 4,18 (m, 1H, H-3); 4,34 (m, 1H, H-l); 4,83 ja 5,14 (2 x s, kukin 1H, H-19); 5,37 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,56 (dd, J= 15, 9 Hz, 1H, H-22); 5,98 ja 6,22 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 15 121) (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happopentyyliesteri (120a)

Yhdiste 119a (150 mg, 0,2 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 75 mg ot-20 sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

^-NMR (CD2C12): δ = 0,58 ppm (s, 3H, H-18); 0,90 (t, J=7 ···:* Hz, 3H, COOPent); 1,04 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 2,43 (d, J=6

Hz, 1H, OH); 4,05 (t, J=7 Hz, 2H, COOPent); 4,08 (m, 1H; ,0 H-24); 4,17 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,28 29: (2x s, kukin 1H, H-19); 5,35 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); : 5,52 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 6,01 ja 6,37 (2x d, J=ll

Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 122) (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- : 9,10-sekokolesta-5,7,10 (19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- [S0' happo-2-pentyyliesteri (120b)

Yhdiste 119b (169 mg, 0,22 mmol) saatetaan reagoi-maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 86 mg ot-t : sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

; ^-NMR (CD2C12) : δ = 0,57 ppm (s, 3H, H-18); 0,91 (t, J=7 '!3JS Hz, 3H, COOPent); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 2,44 (d, J=6

Hz, 1H, OH); 4,03 (t, J=7 Hz, 2H, COOPent); 4,06 (m, 1H, 105 1 n ocQf, ! y y y V_/ H-24); 4,18 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,29 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,38 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,56 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22); 6,01 ja 6,37 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 5 Syklobutyylisarja

Esimerkki 38 123) (5E,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-dimetyylietyyli)silyyli]oksi]-24-hydroksi-26a,27-syklo-26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar-10 boksyylihappoetyyliesteri (121) ( 5E, 7E, 22E)-(IS, 3R)-1,3-bis[ [dimetyyli(l,l-dimetyy-lietyyli)silyyli]oksi]-9,10-sekokola-5,7,10(19),22-tetra-en-24-aali, yhdiste 3 (400 mg, 0,72 mmol) saatetaan reagoimaan LDA:n (2,2 mmol) ja syklobutaanikarboksyylihappo-15 etyyliesterin (281 mg, 2,2 mmol) kanssa analogisesti 41) kanssa, jolloin saadaan 300 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona (1:1 diastereomeerit C-24:n suhteen).

1H-NMR (CDC13): δ = 0,02 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,83 ja 0,86 (2x s, kukin 9H, Si-t-butyyli); 0,98/ 20 0,99 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,25 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,17 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,18 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,49 (m, 1H, H-l); 4,89 ja 4,92 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,35/5,38 (dd, J=15, 6 Hz, 1H, H-23); 5,52 ja 5,57 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-22); 5,76 ja 6,40 (2x d, J=ll Hz, kukin 25·: 1H, H-6 ja H-7) : 124) ( 5Z, 7E, 22E)-(IS, 3R, 24R)-1,3-bis [ [dimetyyli- • · · (1,1-dimetyylietyyli) silyyli] oksi] -24-hydroksi-26a, 27-syk-lo-26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-• . karboksyylihappoetyyliesteri (122a) ja (5Z,7E,22E)-(IS,- ‘3D* 3R,24S)-1,3-bis[ [dimetyyli(l, 1-dimetyylietyyli) silyyli]ok- ·, si]-24-hydroksi-26a,27-syklo-26a-homo-9,10-sekokolesta- 5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri t‘“: (122b) ; Yhdiste 121 (300 mg, 0,41 mmol) saatetaan reagoi- ‘35’ maan analogisesti 112 ):n kanssa, jolloin saadaan 43 mg 10999c 106 yhdistettä 122a ja 67 mg yhdistettä 122b värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): 122a: δ = 0,06 ppm (s, 12H, SiMe); 0,53 (s, 3H, H-18); 0,89 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,02 (d, J=7 Hz, 5 3H, H-21); 1,30 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 2,67 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,19 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,20 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,37 (m, 1H, H-l); 4,85 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,38 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,58 (dd, J=15, 7

Hz, 1H, H-22); 6,00 ja 6,23 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 10 ja H-7) 122b: δ = 0,06 ppm (s, 12H, SiMe); 0,53 (s, 3H, H-18); 0,89 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,30 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 2,64 (d, J=6 Hz, 1H, OH); 4,18 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,20 (m, 1H, H-3); 4,22 (m, 15 1H, H-24); 4,37 (m, 1H, H-l); 4,85 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,40 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-23); 5,61 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-22); 6,00 ja 6,23 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) 125) (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi- 20 26a,27-syklo-26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tet- raeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri (123a)

Yhdiste 122a (43 mg, 0,059 mmol) saatetaan reagoi- maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 15 mg ot- j : sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

£5\: 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,52 ppm (s, 3H, H-18); 1,01 (d, J=7 f :·; Hz, 3H, H-21); 1,23 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,13 (q, J=7 • * · ·

Hz, 2H, COOEt); 4,13 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,33 (m, 1H, H-l); 4,91 ja 5,25 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,34 (dd, J=15, . . 7 Hz, 1H, H-23); 5,53 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-22); 5,96 ja 3ίΓ 6/32 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) *** ‘ 126) (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi- # 26a,27-syklo-26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tet- 1 raeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri (123b) . Yhdiste 122b (43 mg, 0,059 mmol) saatetaan reagoi- '3$' maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 26 mg ot- *··’ sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

10999ό 107 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,52 ppm (s, 3H, H-18); 1,00 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,24 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,12 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,13 (m, 2H, H-3 ja H-24); 4,34 (m, 1H, H-l); 4,92 ja 5,26 ( 2x s, kukin 1H, H-19); 5,38 (dd, J=15, 5 7 Hz, 1H, H-23); 5,57 (dd, J=15, 7 Hz, 1H, H-22); 5,97 ja 6,33 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7) C-24-ketonit (normaalisarja)

Esimerkki 39 127) (5Z, 7E,22E)-(1S,3R)-l,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-10 metyylietyyli)silyyli]oksi] -24-okso-9,10-sekokolesta-5,7, - 10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyyliesteri(124) Yhdiste 14a (200 mg, 0,3 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 78):n kanssa, jolloin saadaan 135 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

15 1H-NMR (CDC13): δ = 0,01 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,82 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,33 (s, 6H, C-26 ja C-27); 3,64 (s, 3H, COOMe); 4,12 (m, 1H, H-3); 4,31 (m, 1H, H-l); 4,89 ja 5,12 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,95 ja 6,18 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, 20 H-6 ja H-7); 6,08 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,78 (dd, J=15, 9,5 Hz, 1H, H-22) 128) (5Z,7E,22E)-(1S, 3R) -1,3-dihydroksi-24-okso- ’·”·' 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- j.‘ happometyyliesteri (125) 25: Yhdiste 124 (130 mg, 0,19 mmol) saatetaan reagoi- f ;·. maan analogisesti 73) :n kanssa, jolloin saadaan 31 mg ot-• » · · sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,55 ppm (s, 3H, H-18); 1,06 (d, J=7 ; Hz, 3H, H-21); 1,33 (3, 6H, C-26 ja C-27); 3,65 (s, 3H, '3p: COOMe); 4,14 (m, 1H, H-3); 4,35 (m, 1H, H-l); 4,93 ja 5,25 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,98 ja 6,34 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,13 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,76 (dd, Γ”: J=15, 9 Hz, 1H, H-22) 10 9 9 9 f, 108

Esimerkki 40 129) (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-l,3-bis[[dimetyyli(l,l-di-metyylietyyli) silyyli]oksi] -24-okso-9,10-sekokolesta-5,7, -10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri (126) 5 Yhdiste 5a (420 mg, 0,59 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 78):n kanssa, jolloin saadaan 350 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): 6 = 0,01 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,82 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, 10 H-21); 1,18 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 1,20 ja 1,30 (2x s, kukin 3H, C-26 ja C-27); 4,10 (q, J=7 Hz, 2H, COOEt); 4,12 (m, 1H, H-3); 4,30 (m, 1H, H-l); 4,89 ja 5,10 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,95 ja 6,18 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,08 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,78 (dd, J=15, 9,5 Hz, 15 1H, H-22) 130) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri (127)

Yhdiste 126 (50 mg, 0,07 mmol) saatetaan reagoimaan 20 analogisesti 73);n kanssa, jolloin saadaan 23 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,55 ppm (s, 3H, H-18); 1,06 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,30 (t, J=7 Hz, 3H, COOEt); 1,32 (s, 6H, ·.·* C-26 ja C-27); 4,13 (q, J=7 Hz, 3H, COOEt); 4,14 (m, 1H, 25: H-3); 4,35 (m, 1H, H-l); 4,93 ja 5,27 (2x s, kukin 1H, f H-19); 5,98 ja 6,34 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); » 1 » · 6,13 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,78 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22) • · Esimerkki 41 • · » [φ] 131) (5Z, 7E,22E)- (IS,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di- • · · metyylietyyli)silyyli]oksi] -24-okso-9,10-sekokolesta-5,7, -,,1;” 10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri 1'“; (128) : \t Yhdiste 18a (EM 50741) (204 mg, 0,3 mmol) saatetaan * 1 » ’35 reagoimaan analogisesti 78):n kanssa, jolloin saadaan 155 *· mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

10999c 109 ^-NMR (CDC13): δ = 0,01 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,83 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,84 (t, J=7 Hz, 3H, COOPr); 1,02 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,19 ja 1,30 (2x s, kukin 3H, C-26 ja C-27); 4,02 (m, Hz, 2H, COOPr); 4,13 (m, 5 1H, H-3); 4,30 (m, 1H, H-l); 4,90 ja 5,11 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,95 ja 6,19 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,08 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,77 (dd, J=15, 9,5 Hz, 1H, H-22 ) 132) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso- 10 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- happopropyyliesteri (129)

Yhdiste 128 (145 mg, 0,2 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 56 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

15 1H-NMR (CD2C12): δ = 0,55 ppm (s, 3H, H-18); 0,80 (t, J=7 Hz, 3H, COOPr); 1,08 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,32 (3, 6H, C-26 ja C-27); 4,03 (t, J=7 Hz, 2H, COOPr); 4,17 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,29 (2x s, kukin 1H, H-19); 6,00 ja 6,35 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 20 6,15 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,79 (dd, J=15, 9Hz, 1H, H-22); ••9 Esimerkki 42 133) (5Z, 7E,22E)-(lS,3R)-l,3-bis[[dimetyyli(l,1-di-metyylietyyli)silyyli]oksi] -24-okso-9,10-sekokolesta-5,7, - 25’: 10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyylies- i teri (130)

Yhdiste 12a (800 mg, 1,14 mmol) saatetaan reagoi maan analogisesti 78):n kanssa, jolloin saadaan 630 mg : otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1 » I

1H-NMR (CDCI3): δ = 0,01 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,83 (s, 18H, Si-t-butyyli); 1,03 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,18 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 1,31 (s, 6H, C-26 ja C-27); 4,13 (m, 1H, H-3); 4,32 (m, 1H, H-l); 4,95 (hept, ; J=7 Hz, 1H, COOiPr); 4,89 ja 5,12 (2x s, kukin 1H, H-19); * > · ‘35’ 5,95 ja 6,17 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,08 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,79 (dd, J=15, 9,5 Hz, 1H, H-22) 10999ο 110 134) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happo-l-metyylietyyliesteri (131)

Yhdiste 130 (130 mg, 0,18 mmol) saatetaan reagoi-5 maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 64 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

"H-NMR (CD2C12): δ = 0,55 ppm (s, 3H, H-18); 1,06 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,22 (d, J=7 Hz, 6H, COOiPr); 1,31 (3, 6H, C-26 ja C-27); 4,14 (m, 1H, H-3); 4,36 (m, 1H, H-l); 4,99 10 (hept, J=7 Hz, 1H, COOiPr); 4,94 ja 5,28 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,99 ja 6,35 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,13 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,78 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22)

Esimerkki 43 15 135) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di- metyylietyyli) silyyli] oksi] -24-okso-9,10-sekokolesta-5,7, -10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyyliesteri(132) 113a/113b (180 mg, 0,23 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 78):n kanssa, jolloin saadaan 100 mg otsikon 20 yhdistettä värittömänä vaahtona.

XH-NMR (CDC13): δ = 0,04 ppm (s, 12H, SiMe); 0,53 (s, 3H, * H-18); 0,89 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,90 (t, J=7 Hz, 3H, COOBu); 1,06 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,36 (s, 6H, C-26 ja C-27); 4,08 (t, J=7 Hz, 3H, COOBu); 4,18 (m, 1H, H-3); ‘23: 4,38 (m, 1H, H-l); 4,85 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-19); i 6,00 ja 6,22 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,14 » * » · .•j\ (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,82 (dd, J=15, 9,5 Hz, 1H, H-22) 136) (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso- . . 9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- « * * ‘30* happobutyyliesteri (133) 1 1 * ·’ * Yhdiste 132 (95 mg, 0,13 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 73) :n kanssa, jolloin saadaan 35 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

. 1H-NMR (CD2C12) : δ = 0,56 ppm (s, 3H, H-18); 0,89 (t, J=7

Hz, 3H, COOBu); 1,08 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,32 (3, 6H, t ► C-26 ja C-27); 4,08 (tbr, J=7 Hz, 2H, COOBu); 4,17 (m, 1H, 1G 9 9 9 ο 111 H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,29 (2x s, kukin 1H, H-19); 6,00 ja 6,36 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,15 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,80 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22 ) 5 Esimerkki 44 137) (5Z,7E,22E) - (IS,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli) silyyli]oksi] -24-okso-9,10-sekokolesta-5,7, -10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyylipropyyli-esteri (134) 10 116a/116b (205 mg, 0,28 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 78):n kanssa, jolloin saadaan 120 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

XH-NMR (CDC13) : δ = 0,01 ppm (s, 12H, SiMe); 0,50 (s, 3H, H-18); 0,82 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,86 (d, J=7 Hz, 6H, 15 COOiBu); 1,04 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,32 (s, 6H, C-26 ja C-27); 3,87 ja 3,90 (2x dd, J=10, 7 Hz, kukin 1H, COOiBu); 4,14 (m, 1H, H-3); 4,33 (m, 1H, H-l); 4,89 ja 5,11 (2x s, kukin 1H, H-19); 5,95 ja 6,17 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,09 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,78 (dd, J=15, 20 9,5 Hz, 1H, H-22) 138) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happo-2-metyylipropyyliesteri (135) : : Yhdiste 134 (115 mg, 0,15 mmol) saatetaan reagoi- 25* maan analogisesti 73):n kanssa, jolloin saadaan 54 mg ot- ! sikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

, 1H-NMR (CD2C12); 6 = 0,56 ppm (s, 3H, H-18); 0,89 (d, J=7

Hz, 6H, COOiBu); 1,08 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,34 (3, 6H, . , C-26 ja C-27); 3,84 ja 3,89 (2x dd, J=10, 6 Hz, kukin 1H, • t * ;3?0: COOiBu); 4,17 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja « · » '·' ’ 5,29 (2x s, kukin 1H, H-19); 6,00 ja 6,35 (2x d, J = ll Hz, |§;;* kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,16 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,80 i (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22) t » 1 » *

t I I

i t *

• I

» * * 1G 9 9 9 6 112

Esimerkki 45 139) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-bis[[dimetyyli(1,1-di-metyylietyyli)silyyli]oksi] -24-okso-9,10-sekokolesta-5,7, -10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyyliesteri 5 (136) 119a/119b (190 mg, 0,25 mmol) saatetaan reagoimaan analogisesti 78):n kanssa, jolloin saadaan 108 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CDC13): 6 = 0,04 ppm (s, 12H, SiMe); 0,55 (s, 3H, 10 H-18); 0,89 (s, 18H, Si-t-butyyli); 0,89 (t, J=7 Hz, 3H, COOPent); 1,08 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,36 (s, 6H, C-26 ja C-27); 4,09 (t, J=7 Hz, 3H, COOPent); 4,19 (m, 1H, H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,85 ja 5,18 (2x s, kukin 1H, H-19); 6,01 ja 6,22 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja H-7); 6,14 15 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,83 (dd, J=15, 9,5 Hz, 1H, H-22) 140) (5Z,7E,22E)-(1S,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso- 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli-happopentyyliesteri (137)

Yhdiste 136 (103 mg, 0,14 mmol) saatetaan reagoi-20 maan analogisesti 73) :n kanssa, jolloin saadaan 42 mg otsikon yhdistettä värittömänä vaahtona.

1H-NMR (CD2C12): δ = 0,56 ppm (s, 3H, H-18); 0,88 (t, J=7 r‘: Hz, 3H, COOPent); 1,08 (d, J=7 Hz, 3H, H-21); 1,32 (3, 6H,

**ϊ C-26 ja C-27); 4,08 (t, J=7 Hz, 2H, COOPent); 4,17 (m, 1H

2:5' i H-3); 4,38 (m, 1H, H-l); 4,95 ja 5,30 (2x s, kukin 1H, > ·/; H-19); 6,00 ja 6,35 (2x d, J=ll Hz, kukin 1H, H-6 ja * # 1 · H-7); 6,15 (d, J=15 Hz, 1H, H-23); 6,80 (dd, J=15, 9 Hz, 1H, H-22) f 1 * 1 1 • · ’ 1 · • » t ' 1 »

? 1 I

? 1 i * ; » » t * » I < ( t » t I ’ 1 » * ' t .

? I » t » I » *

Claims

10999ο 113

1. Menetelmä terapeuttiset! käyttökelpoisten 25-karboksyylihappojohdannaisten, joiden yleinen kaava on I 5 r21 R21a io C0 J 1> 1 o.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R1, R3 ja R24 tarkoittavat kukin asetyyli-, propionyyli-, n-butyryyli-, isobutyryy-li-, pivaloyyli- tai valeryyli- 15 tähdettä.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R1, R3 ja R24 tarkoittavat kukin bentsoyylitähdettä.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n- 20. e t t u siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R4 ja R4a tarkoittavat kumpikin metyyli-, etyyli-, n-propyyli-, n-butyyli-, isopropyyli-, isobutyyli- tai tert-butyyli-ryhmää.

. 6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n- •”••25 n e t t u siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R21 : on vetyatomi ja R21a on metyyliryhmä. • · ·

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n- • · · n e t t u siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I . , substituentti R21 tai R21a on metyyli-, etyyli-, n-propyyli- *;t/30 , n-butyyli-, isopropyyli-, isobutyyli- tai tert-butyyli- • · ···' ryhmä ja toinen substituentti on metyyliryhmä.

• 8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n-n e t t u siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R21 ja R21a muodostavat yhdessä hiiliatomin 20 kanssa syklopro- *‘•’35 pyylirenkaan. » · · • · 116 109596

9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R21 ja R21a tarkoittavat yhdessä metyleeniryhmää.

10. R4 ja R4a tarkoittavat kumpikin metyyli- tai etyyliryhmää tai muodostavat yhdessä tertiäärisen hiiliatomin 25 kanssa syklopropyyli-, syklobutyyli-, syklopentyyli- tai syklo-heksyylirenkaan.

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R21 on fluoriatomi ja R21a on metyyliryhmä tai R21 on me-tyyliryhmä ja R21a on fluoriatomi.

10. R1, R3 ja R24 tarkoittavat kukin vetyatomia.

11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa

12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R5, R5' ja/tai R6, R6' tarkoittavat metyyli-, etyyli-, n-propyyli-, n-butyyli-, isopropyyli-, isobutyyli- tai tert-butyyliryhmää.

13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa I R19 ja R19a tarkoittavat kumpikin vetyatomia. « 4 ·

14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden kaavassa I R21 on , j *. vetyatomi ja R21a on metyyliryhmä. •:*·:25 15. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden R21 ja R21a ovat • i » · yhdessä metyleeniryhmä. • · «

15 R30 jossa R1 ja R3 ovat toisistaan riippumatta vetyatomeja, suora- tai haaraketjuisia tyydyttyneitä Ci-9-alkanoyyliryh-hmiä tai aroyyliryhmiä, R19 ja R19a ovat kumpikin vetyatomeja tai muodostavat yhdessä 20 eksosyklisen metyleeniryhmän, A j a B ovat yhdessä ketohappiatomi tai A on ryhmä OR24 ja B on vetyatomi tai A on vetyatomi ja B on ryhmä OR24, jossa R24 on vetyatomi tai suora- tai haaraketjuinen tyydyttynyt Ci-g-alkanoyyliryhmä tai aroyyliryhmä, .·. 25 R21 ja R21a ovat toisistaan riippumatta vetyatomeja, kloori- • t · **’. tai fluoriatomeja, Ci_4-alkyyliryhmiä tai yhdessä mety- • ♦ leeniryhmä tai muodostavat yhdessähiiliatomin kanssa 3-7- ·: : jäsenisen tyydyttyneen tai tyydyttymättömän karbosyklisen • · · :.· · renkaan,

30 R4 ja R4a ovat samanaikaisesti kumpikin vetyatomeja, kloori-tai fluoriatomeja, trifluorimetyyliryhmiä, suora- tai haa-.···. raketjuisia Ci_4-hiilivetytähteitä tai R4 ja R4a muodostavat yhdessä hiiliatomin 25 kanssa 3 - 7-jäsenisen tyydyttyneen f,· ) tai tyydyttymättömän karbosyklisen renkaan, ja Y on jokin 35 ryhmistä -C (O) NR5R5R5, -C(0)OR6, -C(0)SR6, -CN, joissa R5 ja R5, toisistaan riippumatta ja R6 tarkoittavat kukin vetyato- 1 · 114 10p99f mia tai suora- tai haaraketjuista G^g-alkyyliryhmää ja R6 lisäksi tyydyttymätöntä, suora- tai haaraketjuista C3.8-hiilivetytähdettä tai ryhmää (*^2)η t jossa 5 m = 0 tai 1 ja n = 2, 3, 4, 5 tai 6 ja, kun m = 1, niin n voi lisäksi olla 1, valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdiste, jonka yleinen kaava on II 'j f /R irRl9a pi)' Β3'0'""^0Β'' 20 jossa ..!! R1 ja R3 ovat alkyyli- tai aryylisubstituoituja, tai sekä alkyyli- että aryyliryhmillä substituoituja silyyli-. ryhmiä, •.•••25 A' ja B' ovat yhdessä ketoryhmä tai toinen näistä j kahdesta substituentista on mahdollisesti suojattu hydrok- .·;·. siryhmä ja toinen vetyatomi, edellä määritelty silyy- • ♦ · lisuojaryhmä, tetrahydrofuranyyli- tetrahydropyranyyli-, . . metoksimetyyli-, metoksietoksimetyyli- tai trimetyy- • « · * * * 3 0 lisilyylietoksimetyyliryhmä, R19, R19a, R21, R21a, R4 ja R4a ··* merkitsevät samaa kuin edellä yleisessä kaavassa I, ja Y' ; tarkoittaa samoja tähteitä kuin Y yleisessä kaavassa I, tai kun Y:n tulee kaavassa I olla -C(0)0R6, jossa R6 on vety, niin Y' on mahdollisesti 2-(trimetyylisilyyli) etyy- • · ’•••*35 1 ikarboksyyl ihappoes t er iryhmä, • · 115 1Q999f; muutetaan yleisen kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi samanaikaisesti tai peräkkäin lohkaisemalla siitä hydrok-si- ja mahdollisesti karboksyylihapposuojaryhmiä ja mahdollisesti osittain, peräkkäin tai täydellisesti 5 esteröimällä vapaat hydroksiryhmät ja/tai, kun Y' on karboksyyliryhmä -COOH, haluttaessa esteröimällä se tai muuttamalla se amiditähteeksi -C(0)NR5R5a.

16. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden kaavassa I R21 ja • * · » · · ;it*30 R21a ovat kumpikin metyyliryhmiä.

• » ···’ 17. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden kaavassa I R21 on t k t · vetyatomi ja R21a on fluoriatomi tai päinvastoin.

18. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, * * ] * *; * 3 5 tunnettu siitä, että yhdisteiden yleisessä kaavassa » t t ·’ ·* I R19 ja R19a ovat yhdessä metyleeniryhmä. 117 109996

19. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden kaavassa I R21 on vetyatomi ja R21a on metyyliryhmä.

20. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että yhdisteiden kaavassa I R21 ja R21a ovat yhdessä metyleeniryhmä.

21. Patenttivaatimuksen 18 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteiden kaavassa I R21 ja R21a ovat kumpikin metyyliryhmiä.

22. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet ovat (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste- 15 ri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-26,27-dimetyyli-l,3,24-trihydrok-si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappometyyliesteri, (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-20 ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli- etyyliesteri, (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylieste- •i; ri, **"*· 25 (5Z, 7E, 22E) - (1S,3R,24S) -1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ·.· ; ta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-24-etikkahappometyyliesteri, (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihapponitriili, : (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ,···, 30 ta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies- teri, : (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo, .···. (5Z, 7E, 22E) - (IS , 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 35 9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- happometyyliesteri, 10999t 118 (5Z,7E,22E) - (IS ,3R,24R)-1,3,24 -1rihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19) ,22 -tetraeeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri, (5Z,7E,22E) - (IS, 3R,24R)-1,3,24 -1rihydroksi-2 6,27-syklo-5 9,10 - sekokoIestä-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli- happopropyyliesteri, (5Z, 7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24 -trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-happobutyyliesteri, 10 (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-happo-2-metyylipropyyliesteri, (5Z, 7E, 22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22 -tetraeeni-25-karboksyyli- 15 happopentyyliesteri, (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26,27-syklo- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-happoheksyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-20 ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappodimetyyli-amidi, (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24 -trihydroksi - 9,10 - sekokolesta-5, 7,10 (19) ,22-tetraeeni-25-karboksyylihappodietyyli-amidi, ':""25 (5 Z , 7E , 2 2E) - (IS , 3R, 24R) -1,3,24 - tr ihydroksi - 2 6,2 7 - syklo- :.· · 9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) ,22-tetraeeni-25-karboksyyli- '·.: : happodietyyliamidi, (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-2 6,2 7 -syklo-\ 9,10-sekokolesta-5,7,10(19), 22-tetraeeni-25-karboksyyli- ,*••,30 happo-n-butyyliamidi, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R) -20-metyyli-1,3,24 -trihydroksi-: 9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- :...· happometyyliesteri, .···. (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S) - 2 0-metyyli -1,3,24-trihydroksi- 35 9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyyli- happometyyliesteri, 119 1G 9 9 9 c ( 5Z,7E,22E)- (IS ,3R,24R)-2 O-metyyli-1,3,24 -trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-happoetyyliesteri, (5Z,7E, 22E)- (1S,3R,24S)-20-metyyli -1,3,24 -1rihydroksi-5 9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli- happoetyyliesteri, (5Z,7E,22E)- (IS ,3R,24R)- 20-metyyli -1,3,24 -1rihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-happopropyyliesteri, 10 (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S) -20-metyyli-1,3,24 -1rihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-happopropyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20-metyyli-1,3,24 -1rihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli- 15 happo-l-metyylietyyliesteri, (5Z,7E,22E) - (IS ,3R,24S)-20-metyyli-1,3,24 - trihydroksi-9,10 -sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli-happo-l-metyylietyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-20-metyyli-1,3,24-trihydroksi-20 9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli- happobutyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-20-metyyli-1,3,24-trihydroksi- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli- ’··’·* happobutyyliesteri, * '25 (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- « · ;,· : ta-5,7,10 (19) ,20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappometyyli- ’·/· · esteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappometyyli- • « 9·*;30 esteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-·' ta-5,7,10 (19) , 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappoetyylies- teri, .·**. (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24S) -1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- :*.*.35 ta-5, 7,10 (19) , 20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappoetyylies- » · teri, 120 109996 (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10 (19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappopropyyli-esteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-5 ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappopropyyli- esteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-l-metyy-lietyyliesteri, 10 (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ta-5,7,l0(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappo-l-metyy-lietyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappobutyyli-15 esteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),20,22-pentaeeni-25-karboksyylihappobutyyli-esteri, (5Z,7E,2 2E)- (IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24 -trihydrok-20 si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy- lihappometyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappometyyliesteri, *'**25 (5Z, 7E, 22E) - (1S,3R,24R) -20,21 -metyleeni-1,3,24-trihydrok- ·.* · si-9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyy- · lihappoetyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-20,21-metyleeni-1,3,24-trihydrok-:**t; si-9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyy- .*•*,30 lihappoetyyliesteri, /** (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-1,3,24-trihydrok- > si-9, l0-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyy- :...· lihappopropyyliesteri, .*··. (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24S) -20,21-metyleeni-l, 3,24-trihydrok- :*.\35 si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyy- lihappopropyyliesteri, 10999c 121 (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-si-9,lO-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappo-l-metyylietyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-20,21-metyleeni-1,3,24-trihydrok-5 si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy- lihappo-l-metyylietyyliesteri, (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24R)-20,21-metyleeni-l,3,24-trihydrok-si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappobutyyliesteri, 10 (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-20,21-metyleeni-l,3,24 -trihydrok- si-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyy-lihappobutyyliesteri, (7E,2 2E)- (1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5, 7,22 -trieeni-25-karboksyylihappometyyliesteri, 15 (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappometyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5 ,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-20 kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri, . (7E, 22E) - (1R, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- *’**. kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri, (7E,22E)- (1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22- trieeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri, 25 (7E, 22E) - (1R, 3R, 24R) -1,3,24 -trihydroksi-19-nor-9,10-seko- ·,·· kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyy- : : : liesteri, (7E,22E)- (1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-: kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyy- ,··. 30 liesteri, '·' (7E, 22E) - (1R, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- :.i i kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappobutyyliesteri, (7E, 22E) - (1R, 3R, 24S) -1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- .···. kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappobutyyliesteri, • · * I · I I · 10999c 122 (7E,22E)- (1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylies-teri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-5 kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylies-teri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24 -trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste-ri, 10 (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24 -trihydroksi-19-nor-9,10-seko- kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylies-teri, (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies-15 teri, (7E,22E)- (1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies-teri, (7E,22E)- (1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-20 kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli- .:. etyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-1-metyyli-*··*.’ etyyliesteri, ' '25 (7E,22E)-(1R,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko- :,: · kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylies- .* teri, (7E,22E)-(1R,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylies-.'*.30 teri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-·.!· kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappometyyliesteri, (7E, 22E) - (1R, 3R) -1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappoetyyliesteri, ; · , 3 5 (7E,22E)-(1R,3R)-1,3 - dihydroksi-24-okso-19-nor - 9,10-seko- kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappopropyyliesteri, 123 λ e Γ; n r ,. I υ >· y y l (7Ε,22Ε)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyy-liesteri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-5 kolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappobutyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylies-teri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-10 kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste- ri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies-teri, 15 (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko- kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-l-metyyli-etyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-19-nor-9,10-seko-kolesta-5,7,20,22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylies-20 teri, (7E,22E)-(1R,3R,20S,24R)-20-fluori-l,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-etyyliesteri, (7E, 22E) - (1R, 3R, 20S, 24S) -20-f luori-1,3,24-trihydroksi-19-" '25 nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo- :,: : etyyliesteri, :T: (7E,22E)-(1R,3R,20R,24R)-20-fluori-l,3,24-trihydroksi-19- nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-j * · > j etyyliesteri, =“=30 (7E,22E)-(1R,3R,20R,24S)-20-fluori-l,3,24-trihydroksi-19- nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-: etyyliesteri, (7E, 22E) - (1R, 3R, 2 OS, 24R) - 2 0 - f luori -1,3,24-trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-;·.·,35 metyylietyyliesteri, 124 1G 9 9 9 c- (7E,22E) -(1R,3R,20S,24S)-2O -fluori-1,3,24 -trihydroksi-19-nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,20R,24R)-20 - fluori-1,3,24-trihydroksi-19 -5 nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyyliesteri, (7E,22E)-(1R,3R,2 OR,24S)-20 -fluori-1,3,24-trihydroksi-19 -nor-9,10-sekokolesta-5,7,22-trieeni-25-karboksyylihappo-l-metyylietyyliesteri, 10 (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ta-5,7,10 (19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylieste-ri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylieste-15 ri, (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyyli-propyyliesteri, (5Z,7E,22E)- (IS,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles-20 ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyyli- . propyyliesteri, *'·*, (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R, 24R) -1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyylies-teri, ’:";25 (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-9,10-sekokoles- • · ·,· | ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyylies- :: : teri, (5Z,7E,22E)- (IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- .·. : ta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappometyylieste- • ♦ ,*·\30 ri, *·* (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R) -1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- !.· i ta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappoetyylieste- ·...· ri, .··*. (5Z, 7E, 22E) - (IS, 3R) -1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- • · 35 ta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappopropyylies- t » teri, 10999(, 125 (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-1-metyyli-etyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles-5 ta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappobutyylieste- ri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles-ta-5,7,10(19) , 22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-2-metyyli-propyyliesteri, 10 (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi-24-okso-9,10-sekokoles- ta-5,7,10 (19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappopentyylies-teri, (5Z,7E,22E)- (IS,3R)-1,3-dihydroksi-20-metyyli-24-okso- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyyli- 15 happoetyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(IS,3R)-1,3-dihydroksi- 20-metyyli-24-okso- 9.10- sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-karboksyylihappo-1 -me tyylietyyl ies ter i , (5Z, 7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24-trihydroksi-26a,27-syklo-20 26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar- boksyylihappoetyyliesteri, ‘ (5Z,7E,22E) - (IS, 3R, 24S) -1,3,24-trihydroksi-26a,27-syklo- 26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10(19),22-tetraeeni-25-kar- • · ’·!·' boksyylihappoetyyliesteri, ' 125 (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24R)-1,3,24 -trihydroksi-26 a,27-syklo- • · :.: ; 26a-homo-9,10-sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-kar- :: : boksyylihappo-l-metyylietyyliesteri, (5Z,7E,22E)-(1S,3R,24S)-1,3,24-trihydroksi-26a,27-syklo-2 6a-homo-9,10 - sekokolesta-5,7,10 (19) , 22-tetraeeni-25-kar- · 30 boksyylihappo-1-metyylietyyliesteri . » ·

23. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t I « tunnettu siitä, että kaavassa II substituentit R1’ *...· ja R3’ ovat tert-butyylidimetyylisilyyli-, tert-butyylidi- fenyylisilyyli- tai tri-iso-propyylisilyyliryhmiä. 126 in ooG/· • '-· -· -- ν’ V..·