ES3049645T3 - Beta-d-2'-deoxy-2'alpha-fluoro-2'-beta-c-substituted-2-modified-n6-substituted purine nucleotides for hcv treatment - Google Patents

Abstract

Un compuesto de la estructura (A), o una sal o composición farmacéuticamente aceptable del mismo para el tratamiento de un huésped infectado o expuesto a un virus VHC u otros trastornos descritos con más detalle en este documento. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Nucleótidos de purina p-D-2'-desox¡-2'-a-fluoro-2'-p-C-sust¡tu¡dos-2-mod¡f¡cados-N6-sust¡tu¡dos para el tratamiento del

[0003] VHC

[0004] Campo técn¡co

[0005] La presente ¡nvendón hace referenc¡a a compuestos y compos¡c¡ones de nucleót¡dos, así como a sus usos para tratar el v¡rus de la hepat¡t¡s C («VHC»).

[0006] Antecedentes de la ¡nvendón

[0007] La hepat¡t¡s C (VHC) es un v¡rus de ARN monocatenar¡o y m¡embro del género Hepac¡v¡rus. Se est¡ma que el 75 % de la total¡dad de los casos de enfermedad hepát¡ca son provocados por el VHC. La ¡nfecc¡ón por VHC puede provocar c¡rros¡s y cáncer de hígado; además, s¡ se deja progresar, puede der¡var en ¡nsufldenda hepát¡ca, lo que puede requer¡r un trasplante de hígado. Entre alrededor de 170 y 200 m¡llones de personas de todo el mundo están ¡nfectadas, con alrededor de entre 3 y 4 m¡llones de ¡nfecc¡ones est¡madas en Estados Un¡dos.

[0008] La pol¡merasa de ARN es un componente clave en la ¡dent¡f¡cac¡ón y el tratam¡ento de los v¡rus de ARN monocatenar¡os. La pol¡merasa de ARN depend¡ente de ARN correspondente a la proteína no estructural NS5B del

[0009] VHC es una enz¡ma fundamental encargada de ¡n¡c¡ar y catal¡zar la síntes¡s del ARN v¡ral. Como resultado, la NS5B

[0010] del VHC const¡tuye un objetivo de gran ¡nterés en la ¡nvest¡gac¡ón de fármacos y el desarrollo de agentes ant¡VHC.

[0011] Ex¡sten dos subclases pr¡nc¡pales de ¡nh¡b¡dores de la NS5B: los análogos de nucleós¡dos, que se metabol¡zan a su

[0012] forma act¡va de tr¡fosfato —la cual actúa como un sustrato alternat¡vo para la pol¡merasa—, y los ¡nh¡b¡dores no nucleós¡dos (NNI), que se unen a reg¡ones alostér¡cas de la proteína. Los ¡nh¡b¡dores nucleós¡dos o nucleót¡dos

[0013] ¡m¡tan al sustrato natural de la pol¡merasa y actúan como term¡nadores de cadena. Estos ¡nh¡ben el ¡n¡c¡o de la transcr¡pc¡ón del ARN y la elongac¡ón de una cadena de ARN nac¡ente.

[0014] Además de la pol¡merasa de ARN, las terap¡as comb¡nadas tamb¡én pueden tener como objet¡vo otras proteínas v¡rales de ARN. Por ejemplo, entre las proteínas del VHC que const¡tuyen objet¡vos ad¡c¡onales para enfoques terapéut¡cos se encuentran NS3/4A (una ser¡na proteasa) y NS5A (una proteína no estructural que forma parte esenc¡al de la repl¡casa del VHC y que ejerce d¡versos efectos sobre las vías celulares).

[0015] En d¡c¡embre de 2013, se aprobó el pr¡mer ¡nh¡b¡dor nucleós¡do de la pol¡merasa NS5B, sofosbuv¡r (Sovald¡®, G¡lead Sc¡ences). Sovald¡® es un profármaco de fosforam¡dato de ur¡d¡na que es captado por los hepatoc¡tos y exper¡menta

[0016] una act¡vac¡ón ¡ntracelular para generar el metabol¡to act¡vo: 2'-desox¡-2'-a-fluoro-p-C-met¡lur¡d¡na-5'-tr¡fosfato; véanse

[0017] las estructuras a cont¡nuac¡ón:

[0020]

[0021]

[0024] 2'-Desox¡-2'-a-fluoro-p-C-metiluridma-5'-trifosfato

[0026] Sovaldi® es el primer fármaco en haber demostrado seguridad y eficacia a la hora de tratar determinados tipos de infección por v Hc sin necesidad de coadministración de interferón. Sovaldi® es el tercer fármaco designado como

[0027] terapia innovadora en recibir la aprobación de la FDA.

[0029] En 2014, la FDA de Estados Unidos aprobó Harvoni® (ledispasvir, un inhibidor de NS5A, y sofosbuvir) para tratar la infección crónica por el virus de la hepatitis C genotipo 1. Harvoni® es la primera pastilla combinada aprobada para

[0030] tratar la infección crónica por el genotipo 1 del VHC. Asimismo, se trata del primer régimen aprobado que no requiere

[0031] la administración de interferón ni ribavirina. Además, la FDA también aprobó simeprevir (Olysio™) en combinación

[0032] con sofosbuvir (Sovaldi®) como tratamiento de una sola administración diaria, totalmente oral, sin interferón ni ribavirina, y dirigido a adultos con infección por el VHC de genotipo 1.

[0034] La FDA de Estados Unidos. aprobó también VIEKIRA Pak™ de AbbVie en 2014, un paquete con varias pastillas que contiene dasabuvir (inhibidor no nucleósido de la polimerasa NS5B), ombitasvir (inhibidor de la NS5A), paritaprevir (inhibidor de la NS3/4A) y ritonavir. VIEKIRA Pak™ puede usarse con o sin ribavirina para tratar a pacientes infectados por el VHC genotipo 1, incluyendo a pacientes que presentan cirrosis compensada. VIEKIRA Pak™ no requiere terapia combinada con interferón.

[0036] En julio de 2015, la FDA de Estados Unidos aprobó Technivie™ y Daklinza™ para el tratamiento del VHC genotipo 4 y el VHC genotipo 3, respectivamente. Technivie™ (ombitasvir/paritaprevir/ritonavir) fue aprobado para su uso en combinación con ribavirina para el tratamiento de VHC genotipo 4 en pacientes sin cicatrices ni cirrosis, y constituye

[0037] la primera opción para los pacientes infectados por VHC-4 que no requieren la coadministración de interferón.

[0038] Daklinza™ fue aprobado para su uso con Sovaldi® en el tratamiento de infecciones por de VHC genotipo 3.

[0039] Daklinza™ es el primer fármaco en haber demostrado seguridad y eficacia a la hora de tratar el VHC genotipo 3 sin necesidad de coadministración de interferón o ribavirina.

[0041] En octubre de 2015, la FDA de Estados Unidos advirtió que los tratamientos contra el VHC Viekira Pak y Technivie

[0042] pueden causar lesiones hepáticas graves, principalmente en pacientes con enfermedad hepática avanzada subyacente, por lo que exigió que se añadiera información adicional sobre seguridad a la etiqueta.

[0044] Otras terapias que están aprobadas en el presente para el VHC comprenden interferón alfa-2b o interferón alfa-2b pegilado (Pegintron®), que pueden administrarse con ribavirina (Rebetol®), NS3/4A telaprevir (Incivek®, Vertex y Johnson & Johnson), boceprevir (Victrelis™, Merck), simeprevir (Olysio™, Johnson & Johnson), paritaprevir (AbbVie), Ombitasvir (AbbVie), (NNI) Dasabuvir (ABT-333) y Zepatier™ de Merck (una combinación en un solo comprimido de los dos fármacos grazoprevir y elbasvir).

[0046] En el presente, se encuentran bajo desarrollo otros inhibidores de la polimerasa de NS5B Merck está desarrollando

[0047] el profármaco de nucleótido de uridina MK-3682 (en el pasado, conocido como Idenix IDX21437). El fármaco se encuentra actualmente en ensayos de combinación de fase II.

[0049] Las patentes estadounidenses y las solicitudes WO que describen inhibidores de la polimerasa nucleósido para el tratamiento de Flaviviridae, incluido el VHC, incluyen las presentadas por Idenix Pharmaceuticals (6,812,219;

[0050] 6,914,054; 7,105,493; 7,138,376; 7,148,206; 7,157,441; 7,163,929; 7,169,766; 7,192,936; 7,365,057; 7,384,924; 7,456,155; 7,547,704; 7,582,618; 7,608,597; 7,608,600; 7,625,875; 7,635,689; 7,662,798; 7,824,851; 7,902,202; 7,932,240; 7,951,789; 8,193,372; 8,299,038; 8,343,937; 8,362,068; 8,507,460; 8,637,475; 8,674,085; 8,680,071; 8,691,788, 8,742,101, 8,951,985; 9,109,001; 9,243,025; US2016/0002281; US2013/0064794; WO/2015/095305;

[0051] WO/2015/081133; WO/2015/061683; WO/2013/177219; WO/2013/039920; WO/2014/137930; WO/2014/052638; WO/2012/154321); Merck (6,777,395; 7,105,499; 7,125,855; 7,202,224; 7,323,449; 7,339,054; 7,534,767; 7,632,821; 7,879,815; 8,071,568; 8,148,349; 8,470,834; 8,481,712; 8,541,434; 8,697,694; 8,715,638, 9,061,041; 9,156,872 y WO/2013/009737); Emory University (6,348,587; 6,911,424; 7,307,065; 7,495,006; 7,662,938; 7,772,208; 8,114,994; 8,168,583; 8,609,627; US 2014/0212382; y WO2014/1244430 (7,842,672; 7,973,013; 8,008,264; 8,012,941; 8,012,942; 8,318,682; 8,324,179; 8,415,308; 8,455,451; 8,563,530; 8,841,275; 8,853,171; 8,871,785; 8,877,733; 8,889,159; 8,906,880; 8,912,321; 8,957,045; 8,957,046; 9,045,520; 9,085,573; 9,090,642; y 9,139,604) y (6,908,924; 6,949,522; 7,094,770; 7,211,570; 7,429,572; 7,601,820; 7,638,502; 7,718,790; 7,772,208; RE42,015; 7,919,247; 7,964,580; 8,093,380; 8,114,997; 8,173,621; 8,334,270; 8,415,322; 8,481,713; 8,492,539; 8,551,973; 8,580,765; 8,618,076; 8,629,263; 8,633,309; 8,642,756; 8,716,262; 8,716,263; 8,735,345; 8,735,372; 8,735,569; 8,759,510 y 8,765,710); Hoffman La-Roche (6,660,721), Roche (6,784,166; 7,608,599, 7,608,601 y 8,071,567); Alios BioPharma Inc. (8,895,723; 8,877,731; 8,871,737, 8,846,896, 8,772,474; 8,980,865; 9,012,427; US 2015/0105341; US 2015/0011497; US 2010/0249068; US2012/0070411; WO 2015/054465; WO 2014/209979; WO 2014/100505; WO 2014/100498; WO 2013/142159; WO 2013/142157; WO 2013/096680; WO 2013/088155; WO 2010/108135), Enanta Pharmaceuticals (US 8,575,119; 8,846,638; 9,085,599; WO 2013/044030; WO 2012/125900), Biota (7,268,119; 7,285,658; 7,713,941; 8,119,607; 8,415,309; 8,501,699 y 8,802,840), Biocryst Pharmaceuticals (7,388,002; 7,429,571; 7,514,410; 7,560,434; 7,994,139; 8,133,870; 8,163,703; 8,242,085 y 8,440,813), Alla Chem, LLC (8,889,701 y WO 2015/053662), Inhibitex (8,759,318 y WO/2012/092484), Janssen Products (8,399,429; 8,431,588, 8,481,510, 8,552,021, 8,933,052; 9,006,29 y 9,012,428) University of Georgia Foundation (6,348,587; 7,307,065; 7,662,938; 8,168,583; 8,673,926, 8,816,074; 8,921,384 y 8,946,244), RFS Pharma, LLC (8,895,531; 8,859,595; 8,815,829; 8,609,627; 7,560,550; US 2014/0066395; US 2014/0235566; US 2010/0279969; WO/2010/091386 y WO 2012/158811) University College Cardiff Consultants Limited (WO/2014/076490, WO 2010/081082; WO/2008/062206), Achillion Pharmaceuticals, Inc. (WO/2014/169278 y WO 2014/169280), Cocrystal Pharma, Inc. (US 9,173,893), Katholieke Universiteit Leuven (<w>O 2015/158913), Catabasis (WO 2013/090420) y Regents of the University of Minnesota (WO 2006/004637).

[0053] El documento CN 103980332 A hace referencia a un compuesto de 2'-fluoro-2'-(fluorometil)-2'-desoxinucleósido y a posible fármaco fosfato del mismo. El documento US 2010/016251 A1 hace referencia a profármacos de fosforamidato de nucleósido. El documento WO 2012/158811 A2 hace referencia a profármacos de monofosfato de purina usados para el tratamiento de infecciones virales.

[0055] Sin embargo, sigue existiendo una importante necesidad médica de desarrollar terapias antiVHC que sean seguras, eficaces y bien toleradas. Esta necesidad se ve acentuada por las expectativas existentes en cuanto a la resistencia a los fármacos. Los antivirales de acción directa más potentes podrían reducir de forma muy significativa la duración del tratamiento, así como mejorar el cumplimiento y las tasas de RVS en pacientes infectados con todos los genotipos del VHC.

[0057] Por consiguiente, un objeto de la presente invención es proporcionar compuestos y composiciones y compuestos farmacéuticos para su uso en el tratamiento de las infecciones por VHC.

[0059] Breve descripción de la invención

[0061] Se ha descubierto que los compuestos de la Fórmula I, Fórmula II, Fórmula III, Fórmula IV, Fórmula V, Fórmula VI, Fórmula VII, incluidos los nucleótidos de purina p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-N6-(mono o dimetil), son altamente activos contra el virus del VHC cuando se administran en una cantidad efectiva a un hospedador que los necesita. El hospedador puede ser un ser un humano o cualquier animal que porta la infección viral.

[0063] Los nucleótidos divulgados incluyen aquellos que presentan actividad a nivel nanomolar frente al VHC in vitro y que tienen índices terapéuticos que alcanzan 25000 o más.

[0065] De forma sorprendente, los nucleósidos de purina N6-(metil) parentales de los compuestos descritos no se habían desarrollado ni se habían divulgado específicamente como candidatos a fármacos antes de esta invención. Por ejemplo, en 2010 se informó de que 3'-azido-N6-dimetil-2,6-diaminopurina no sufre una desanimación sustancial por la adenosina desaminasa durante un período prolongado (120 minutos) y, por ese motivo, se había considerado un compuesto inadecuado para ser derivatizado como un fármaco (véase, por ejemplo, la página 86 del documento WO 2010/091386 y la correspondiente patente de EE. UU. n.° 8,609,627).

[0067] No obstante, ahora se ha descubierto que los compuestos de la presente invención se anabolizan a un 5-monofosfato de la purina N6-sustituida sin N6-deaminación sustancial, y a continuación, se anabolizan en la posición 6 con el fin de generar compuestos activos de trifosfato de guanina, de una manera que se logran una actividad y un índice terapéutico excelentes.

[0068] En particular, se ha descubierto que un profármaco de fosfato 5'-estabilizado o un derivado del nucleótido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina, así como el nucleótido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina y otros nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N<6>-sustituidos, tal y como se describe a continuación, son altamente activos contra el VHC. Se trata de un hallazgo sorprendente, porque la actividad del nucleósido parental de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina en un ensayo de replicón (EC50 = 15,7 micromolar) indica que no es adecuado para su uso como fármaco humano debido a su actividad insuficiente (en combinación con la referencia de la página 86 del documento WO 2010/091386 y la correspondiente patente de EE. UU. n.° 8,609,627, que sugiere que las N<6>-metil-2,6-diaminopurinas no se desaminan in vivo), sin embargo, el profármaco racémico estabilizado de fosfato (fosforamidato) presenta un EC50 = 26 nanomolar (nM) en un ensayo de replicón, lo que constituye un aumento de al menos 600 veces en la actividad. El (S)-fosforamidato correspondiente presenta un EC50 = 4 nM, lo que constituye un aumento de al menos 3900 veces en la actividad; véanse la estructura siguiente y el Compuesto 5-2 en la Tabla 7. Con un TC50 superior a cien micromolares, el compuesto presenta, de esta manera, un índice terapéutico superior a 25 000. A modo de comparación, el sofosbuvir presenta un EC50 = 53 nM, un TC50 superior a cien micromolares y un índice terapéutico superior a 1920.

[0071]

[0074] Compuesto 5-2 (Tabla 7)

[0076] De forma similar, la actividad del nucleósido parental de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina en un ensayo de replicón (EC50 = 10,7 micromolar, «|jM») indica que tampoco es adecuado para su uso como fármaco humano debido a su actividad insuficiente; sin embargo, el profármaco racémico estabilizado de fosfato (fosforamidato) presenta un EC<50>=12 nM en un ensayo de replicón, lo que constituye un aumento de más de 890 veces en la actividad. El (S)-fosforamidato (Compuesto 25 de la Tabla 7) correspondiente presenta un EC50 = 4 nM, lo que constituye un aumento de al menos 2600 veces en la actividad; véase la siguiente estructura. Por otra parte, el Compuesto 25 presenta además un índice terapéutico superior a 25000.

[0079]

[0082] En otro ejemplo, el compuesto isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-N-ciclopropil-amino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxi-fosforil)-L-alaninato mostró un EC50 = 7 nM y el (S)-fosforamidato correspondiente mostró EC50 = 5 nM en un ensayo de replicón; véase el Compuesto 27 de la Tabla 7 y la estructura a continuación.

[0085]

[0088] Como se ha indicado anteriormente, el metabolismo del nucleósido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N6-metil-2,6-diaminopurina como fosforamidato implica la producción de un 5'-monofosfato y el posterior anabolismo de la base N6-metil-2,6-diaminopurina para generar el nucleósido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina como 5'-monofosfato. A continuación, el monofosfato se anaboliza en mayor medida hasta la especie activa: el 5'-trifosfato. El trifosfato de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina presenta un IC50 = 0,15 |<j>M frente a la polimerasa NS5B del VHC genotipo 1b.

[0090] Por consiguiente, la presente invención queda definida por las reivindicaciones adjuntas. Una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, es:

[0093]

[0096] en donde:

[0098] Y es NR<1>R<2>;

[0100] R<1>es alquilo C1-C5 (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CH2F, CHF2, CF3, CH2CF3, CF2CH3 y CF2CF3), alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo Co-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo Co-C2)(heterociclo), -(alquilo Co-C2)(arilo), -(alquilo Co-C2)(heteroarilo), -OR<25>, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>Hy, -C(O)OC4Hg y -C(O)OC5Hn ), -C(S)R3D, o -SO2R28 cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

[0101] R<2>es hidrógeno, alquilo C1-C5 (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), -(alquilo Co-C2)(cicloalquilo C3-C6), -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>Hy, -C(O)OC<4>H y -C(O)OC5Hn ), -(alquilo Co-C2)(arilo), -(alquilo Co-C2)(heterociclo), -(alquilo Co-C2)(heteroarilo); y

[0102] en donde al menos uno de entre R<1>y R<2>es metilo, CH2F, CHF2 o CF3;

[0103] 0

[0104] O — H - l -1 i

[0105] R3 es hidrógeno, O , difosfato, trifosfato, un aminoácido enlazado a un carbonilo opcionalmente sustituido, o -C(O)R3C;

[0106] R3A puede seleccionarse de entre O- , OH, un arilo -O-opcionalmente sustituido, un heteroarilo -O-opcionalmente sustituido o un heterociclilo opcionalmente sustituido;

[0107] R3B puede seleccionarse de O-, OH, un aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido o un éster de aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido;

[0108] R3C es alquilo, alquenilo, alquinilo, -(Cü-C2)(cicloalquilo), -(Cü-C2)(heterociclo), -(Cü-C2)(arilo), -(Cü-C2)(heteroarilo), -O­ alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(Cü-C2)(cicloalquilo), -O-(Cü-C2)(heterociclo), -O-(Cü-C2)(arilo) o -O-(C<ü>-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0109] R<4>es un profármaco de monofosfato, difosfato, trifosfato o fosfato estabilizado, que comprende, entre otros, un fosforamidato, un tiofosforamidato o cualquier otro resto que se metaboliza a monofosfato, difosfato o trifosfato in vivo en el hospedador humano o animal; o

[0110] R<3>y R<4>, junto con los oxígenos a los que están enlazados, pueden formar un profármaco cíclico 3',5', que comprende, entre otros, un profármaco de fosfato cíclico 3',5';

[0111] R<12>es CH3, CH2F, CHF2, CF3, o etinilo.

[0112] Una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente es:

[0115]

[0117] en donde:

[0118] Y es NR<1>R<2>;

[0119] R<1>es alquilo C1-C5 (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CH2F, CHF2, CF3, CH2CF3, CF2CH3 y CF2CF3), alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo Cü-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo Cü-C2)(heterociclo), -(alquilo Cü-C2)(arilo), -(alquilo Cü-C2)(heteroarilo), -OR<25>, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>Hy, -C(O)OC4Hg y -C(O)OC5H<h>), -C(S)R3D, o -SO2R28 cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido. R<2>es hidrógeno, alquilo C1-C5 opcionalmente sustituido (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), -(alquilo C0-C2XC3-C6 cicloalquilo) opcionalmente sustituido, -(alquilo Co-C2)(heterocido) opcionalmente sustituido, -(alquilo Co-C2)(arilo) opcionalmente sustituido.

[0120] -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) opcionalmente sustituido, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3-C(O)CH(CH3)2, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>H<7>, -C(O)OC<4>Hg, y

[0121] -C(O)OC5H<h>), -C(S)R3D, o -SO2R28; y

[0122] en donde al menos uno de entre R<1>y R<2>es metilo, CH2F, CHF2 o CF3;

[0123] 0

[0124] O — H - l -1 $

[0125] R3 es hidrógeno, O , difosfato, trifosfato, un aminoácido enlazado a un carbonilo opcionalmente sustituido, o

[0126] -C(O)R3C;

[0127] R3A puede seleccionarse de entre O- , OH, un arilo -O-opcionalmente sustituido, un heteroarilo -O-opcionalmente sustituido o un heterociclilo opcionalmente sustituido;

[0128] R3B puede seleccionarse de O-, OH, un aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido o un éster de aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido;

[0129] R3C es alquilo, alquenilo, alquinilo, -(C0-C2)(cicloalquilo), -(C0-C2)(heterociclo), -(C0-C2)(arilo), -(C0-C2)(heteroarilo), -O­ alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(C0-C2)(cicloalquilo), -O-(C0-C2)(heterociclo), -O-(C0-C2)(arilo) o -O-(C0-C2)(heteroarilo), -S-alquilo, -S-alquenilo, -S-alquinilo, -S-(C0-C2)(cicloalquilo), -S-(C0-C2)(heterociclo), -S-(C0-C2)(arilo) o -S-(C0-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0130] R3D es alquilo, alquenilo, alquinilo, -(C0-C2)(cicloalquilo), -(C0-C2)(heterociclo), -(C0-C2)(arilo), -(C0-C2)(heteroarilo), -O­ alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(C0-C2)(cicloalquilo), -O-(C0-C2)(heterociclo), -O-(C0-C2)(arilo) o -O-(C0-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0131] R<4>es un profármaco de monofosfato, difosfato, trifosfato o fosfato estabilizado, que comprende, entre otros, un fosforamidato, un tiofosforamidato o cualquier otro resto que se metaboliza a monofosfato, difosfato o trifosfato in vivo en el hospedador humano o animal; o

[0132] R<3>y R<4>, junto con los oxígenos a los que están enlazados, pueden formar un profármaco cíclico 3',5', que comprende, entre otros, un profármaco de fosfato cíclico 3',5';

[0133] R<5>es alquilo C1-C5 (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo), -(alquilo C0-C2)(arilo), -(alquilo C0-C2)(heteroarilo), -OR<25>, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH3-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>H<7>, -C(O)OC<4>Hg, y -C(O)OC5Hn ), -C(S)R3D, o -SO2R28 cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

[0134] R<6>es hidrógeno, alquilo C1-C5 opcionalmente sustituido (metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, secbutilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6) opcionalmente sustituido, -(alquilo C0-C2)(heterociclo) opcionalmente sustituido, -(alquilo C0-C2)(arilo) opcionalmente sustituido, -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) opcionalmente sustituido, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>H<7>, -C(O)OC<4>Hg, y -C(O)OC<5>H<h>), -C(S)R3D, o -SO2R<28>; o

[0135] R<5>y R<6>, junto con el nitrógeno al que están enlazados, pueden formar un anillo heterocíclico;

[0136] R<12>es CH3, CH2F, CHF2, CF3, o etinilo;

[0137] R22 es Cl, Br, F, CN, N3, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C i-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo Co.C2)(heterocido C3-C6), -(alquilo Cü-C2)(arilo), -(alquilo Cü-C2)(heteroarilo);

[0138] -ONHC(=O)OR23, -NHOR24, -OR25, -SR25, -NH(CH2)1-4N(R26)2, -NHNHR26, -N=NR27,

[0139] -NHC(O)NHNHR27, -NHC(S)NHNHR27, -C(O)NHNHR27, -NR27SO2R28, -SO2NR27R29,

[0141]

[0143] -P(O)(OR29)(NR29R30) o -NR5R6;

[0144] por ejemplo, sin limitarse a las siguientes realizaciones, se incluyen cloro, bromo, flúor, ciano, azido, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y n-pentilo, 1,1-dimetilpropilo, 2,2-dimetilpropilo, 3-metilbutilo, 1-metilbutilo, 1-etilpropilo, vinilo, alilo, 1 -butinilo, 2-butinilo, acetilenilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, -(CH2)-ciclopropilo, -(CH2)-ciclobutilo, -(CH2)-ciclopentilo, -(CH2)-ciclohexilo, aziridina, oxirano, tiirano, azetidina, oxetano, tietano, pirrolidina, tetrahidrofurano, tiolano, pirazolidina, piperidina, oxano, tiano, -(CH2)-aziridina, -(CH2)-oxirano, -(CH2)-tiirano, -(CH2)-azetidina, -(CH2)-oxetano, -(CH2)-tietano, -(CH2)-pirrolidina, -(CH2)-tetrahidrofurano, -(CH2)-tiolano, -(CH2)-pirazolidina, -(CH2)-piperidina, -(CH2)-oxano, -(CH2)-tiano, fenilo, piridilo, -ONHC(=O)OCH3, -ONHC(=O)OCH2CH3, -NHOH, NHOCH3, -OCH3, OC2H5, -OPh, OCH2Ph, -SCH3, -SC2H5, -SPh, SCH2Ph, -NH(CH2)2NH2, -NH(CH2)2N(CH3)2, -NHNH2,

[0145] -NHNHCH3, -N=NH, -N=NCH<3>, -N=NCH<2>CH<3>, -NHC(O)NHNH2, -NHC(S)NHNH2,

[0146] -C(O)NHNH2, -NHSO2CH3, -NHSO2CH2CH3, -SO2NHCH3, -SO<2>N(CH<3>)<2>, -C(O)NH2,

[0147] -C(O)NHCH<3>, -C(O)N(CH<3>)<2>, -CO<2>CH<3>, -CO<2>CH<2>CH<3>, -CO<2>Ph, -CO<2>CH<2>Ph, -SO<2>CH<3>,

[0149]

[0151] -P(O)(OH)(NHCH<3>), -P(O)(OH)N(CH<3>)<2>, -NHC(O)CH<3>, -NHC(O)CH<2>CH<3>, -NHC(O)CH(CH<3>)<2>,

[0152] -NHC(O)OCH<3>, -NHC(O)OCH<2>CH<3>, -NHC(O)OCH(CH<3>)<2>, -NHC(O)OCH<2>CH<2>CH<3>,

[0153] -NHC(O)OCH<2>CH<2>CH<2>CH<3>y -NHC(O)OCH<2>CH<2>CH<2>CH<2>CH<3>;

[0154] R<23>es alquilo C1-C5, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo)-(alquilo C0-2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

[0155] R<24>es hidrógeno, alquilo C1-C6, -(alquilo C1-C2)(cicloalquilo C3-C6),

[0156] -(alquilo C1-C2)(heterociclo C3-C6) -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos;

[0157] R<25>es hidrógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos;

[0158] R<26>se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo C1-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo Co-C2)(heterociclo), -(alquilo Co-C2)(arilo) o -(alquilo Co-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos;

[0160] R<27>es hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido;

[0162] R<28>es alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6),

[0164] -(alquilo C0-C2)(heterociclo C3-C6) -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0166] R<29>es hidrógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos; o

[0168] R<27>y R<29>, junto con el nitrógeno al que están enlazados, pueden formar un anillo heterocíclico;

[0170] R<30>es hidrógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6,

[0172] -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(arilo) o

[0174] -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos; o

[0176] R<29>y R<30>pueden enlazarse para formar un anillo heterocíclico;

[0178] x es 1, 2 o 3.

[0180] El metabolismo del nucleótido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina implica tanto la formación del trifosfato de nucleósido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina, como la generación del trifosfato de nucleósido de guanina correspondiente. Véanse los Esquemas 2 y 3.

[0182] Los nucleótidos 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-N<6>-sustituidos-2,6-diaminopurina pueden ser además sustituidos en la posición N<2>mediante alquilación o acilación, lo que puede modificar la lipofilicidad, las propiedades farmacocinéticas y/o la capacidad de dirigir el nucleótido al hígado. Se ha descubierto que los nucleótidos 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-N<6>-sustituidos-2,6-diaminopurina, modificados en la posición 2 de la diaminopurina, pueden ser desalquilados o desacilados por parte de enzimas hepáticas, lo que permite aumentar en mayor medida la especificidad de los derivados de nucleótidos, tanto in vitro como in vivo, a menos que el grupo amino N<2>sea reemplazado en su totalidad por otro resto, como se describe en el presente documento, por ejemplo, flúor. Por ejemplo, el fosforamidato de nucleósido 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<2>-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina se desalquila a fosforamidato de nucleósido 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina cuando se incuba con una fracción S9 hepática humana in vitro durante hasta 60 minutos, condiciones que simulan las condiciones in vivo. En una realización, las modificaciones de N<2>aumentan la permeabilidad celular y la capacidad de dirección al hígado.

[0184] A pesar del volumen de literatura y solicitudes de patentes sobre nucleósidos antivirales, no se han divulgado específicamente el derivado fosfato 5'-estabilizado del nucleósido de 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina, el nucleósido 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina, ni otros derivados de nucleósidos de purina p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N<6>-sustituidos, como se describen en el presente documento, y tampoco se han descrito sus actividades ventajosas.

[0186] A menos que se especifique lo contrario, los compuestos descritos en el presente documento se proporcionan en la configuración p-D-. De forma similar, cuando se encuentra en forma de fosforamida o tiofosforamidato, la porción de aminoácido puede estar en la configuración L- o D-. En una realización alternativa, los compuestos pueden proporcionarse en una configuración p-L-. De forma similar, cualquier grupo sustituyente que muestre quiralidad puede proporcionarse en forma racémica, enantiomérica, diastereomérica o cualquier mezcla de estas. Cuando se usa un fosforamidato, tiofosforamidato u otros profármacos de fósforo estabilizado en los que el fósforo muestra quiralidad como el profármaco de fosfato estabilizado R<4>, puede proporcionarse como un derivado de fósforo quiral R o S o una mezcla de estos, incluida una mezcla racémica. Todas las combinaciones de estas estereoconfiguraciones están incluidas en la invención descrita en el presente documento.

[0187] De forma correspondiente, la presente invención queda definida por las reivindicaciones adjuntas.

[0190]

[0193] En una realización específica descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga según la reivindicación 1, el nucleósido parental, es decir, el nucleósido en donde R4 es hidrógeno y la posición 5' cuenta, por tanto, con un grupo hidroxilo, no es desaminado sustancialmente por la adenosina desaminasa en condiciones que simulan el entorno in vivo (p. ej., temperatura ambiente y pH fisiológico acuoso), durante un período de 7 minutos, 10 minutos, 30 minutos, 60 minutos o 120 minutos. A menos que se indique lo contrario, el período de tiempo es de 30 minutos. En esta realización, el término «no es desaminado sustancialmente» quiere decir que el compuesto parental no se convierte en el derivado de guanina o el derivado de 6-oxo correspondientes, en una cantidad suficiente para proporcionar un efecto terapéutico in vivo.

[0195] Los compuestos y las composiciones se proporcionan para su uso en el tratamiento de un hospedador infectado con un virus VHC a través de la administración de una cantidad eficaz del compuesto o de su sal farmacéuticamente aceptable.

[0197] Los compuestos y las composiciones también se pueden usar para tratar condiciones con positivo en anticuerpos antiVHC y positivo en antígenos, la inflamación hepática crónica de origen viral, el cáncer de hígado derivado de la hepatitis C avanzada, la cirrosis, la hepatitis C aguda, la hepatitis C fulminante, la hepatitis C persistente crónica y la fatiga basada en anticuerpos del VHC. El compuesto o las formulaciones que comprenden los compuestos también se pueden usar profilácticamente para prevenir o restringir la progresión de la enfermedad clínica en individuos que sean positivos a anticuerpos o antígenos antiVHC o que hayan estado expuestos a la hepatitis C.

[0199] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, se divulgan los compuestos de la Fórmula Ia:

[0202]

[0205] en donde:

[0206] Y, R3 y R4 son tal y como se han definido anteriormente.

[0207] En una realización de la Fórmula Ia, R3 es hidrógeno.

[0208] En una realización de la Fórmula Ia, cuando Y es NR1R2, R1 es metilo y R2 es hidrógeno.

[0209] En una realización de la Fórmula Ia, cuando Y es NR1R2, tanto R1 como R2 son metilo.

[0210] En una realización de la Fórmula Ia, cuando Y es NR1R2, R1 es metilo y R2 es ciclopropilo.

[0211] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada, se divulgan los compuestos de la Fórmula Ib:

[0214]

[0216] en donde:

[0217] Y, R3 y R4 son tal y como se han definido anteriormente.

[0218] En una realización de la Fórmula Ib, R3 es hidrógeno.

[0219] En una realización de la Fórmula Ib, cuando Y es NR1R2, R1 es metilo y R2 es hidrógeno.

[0220] En una realización de la Fórmula Ib, cuando Y es NR1R2, tanto R1 como R2 son metilo.

[0221] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se divulgan los compuestos de la Fórmula II:

[0224]

[0226] Fórmula II

[0227] en donde:

[0228] Y, R3, R4, R12 y R22son tal y como se han definido anteriormente.

[0229] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se divulgan los compuestos de la Fórmula IIa:

[0232]

[0234] en donde:

[0235] Y, R3, R4 y R22 son tal y como se han definido anteriormente.

[0236] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se divulgan los compuestos de la Fórmula IIb:

[0239]

[0241] en donde:

[0242] Y, R3, R4 y R22 son tal y como se han definido anteriormente.

[0243] En una realización de acuerdo con la presente invención, se divulgan los compuestos de la Fórmula III:

[0244]

[0246] Fórmula III

[0247] en donde R22 es NH2 y las variables Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 y R12 son según la reivindicación 1.

[0248] En una realización de acuerdo con la presente invención, se divulgan los compuestos de la Fórmula IV:

[0251]

[0253] Fórmula IV

[0254] En donde R22 es NH2 y las variables Y, R3, R7, R8, R9a, R9b y R10 son según la reivindicación 1.

[0255] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada, se divulgan los compuestos de la Fórmula V:

[0258]

[0260] Fórmula V

[0261] en donde las variables Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 y R22 se describen en el presente documento.

[0262] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, se divulgan los compuestos de la Fórmula VI:

[0265]

[0267] Fórmula VI

[0268] en donde:

[0269] R41 es halógeno (en concreto, F o Cl), OR3, N3, NH2 o CN; y

[0270] las variables Y, R3, R4 y R12 se describen en el presente documento.

[0271] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, se divulgan los compuestos de la Fórmula VII:

[0274]

[0276] En donde las variables Y, R3, R4, R12 y R41 se describen en el presente documento.

[0277] El fósforo presente en cualquiera de las fórmulas anteriores puede ser quiral y, por lo tanto, puede proporcionarse como un enantiómero R o S, o mezcla de ambos, que comprende una mezcla racémica.

[0278] El Compuesto 5 se separó en los compuestos enantioméricos 5-1 y 5-2. El Compuesto 5-2 también se preparó mediante síntesis quiral, y se designó como Compuesto 24.

[0279] En una realización, se proporcionan compuestos y composiciones para su uso en el tratamiento de un hospedador infectado con hepatitis C descrito en el presente documento. Los compuestos de la invención pueden administrarse en una cantidad efectiva solos o en combinación con otros fármacos antiVHC para tratar el hospedador infectado. En algunas realizaciones, es útil administrar una combinación de fármacos que module la misma ruta, o una diferente, o que inhiba un objetivo diferente en el virus. Dado que los nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N<6>-sustituidos son inhibidores de la polimerasa NS5B, pueden ser útiles para administrar el compuesto a un hospedador en combinación con un inhibidor de la proteasa, como un inhibidor de la proteasa NS3/4A (p. ej., telaprevir (Incivek®), boceprevir (Victrelis™), simeprevir (Olysio™), o paritaprevir, o un inhibidor de NS5A (p. ej., Ombitasvir). Los compuestos de la invención también se pueden administrar en combinación con un inhibidor de la polimerasa NS5B estructuralmente diferente, como otro compuesto descrito en el presente documento o a continuación, incluido Sovaldi® de Gilead. Los compuestos de la invención también se pueden administrar en combinación con interferón alfa-2a, que puede estar pegilado o modificado de otra forma, y/o ribavirina.

[0281] Los nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N<6>-sustituidos de la invención se administran típicamente por vía oral, por ejemplo, en forma de pastilla o comprimido, pero se pueden administrar a través de otra ruta que el médico considere adecuada, incluidas las vías intravenosas, transdérmica, subcutánea, tópica, parenteral u otra ruta adecuada.

[0283] Breve descripción de los dibujos

[0285] La Fig. 1 es un cromatograma de muestra de un proceso semipreparativo que ilustra la separación de los estereoisómeros del Compuesto 5 usando una columna Phenominex Luna como se divulga en el Ejemplo 9. El eje y se muestra en mAU y el eje x se mide en minutos.

[0287] La Fig. 2 es un gráfico de las curvas de inhibición de la replicación del VHC para el Compuesto 5-2 (Tabla 7) y Sofosbuvir. El Compuesto 5-2 presenta un EC50 = 4 nM, un TC50 superior a cien micromolares y un índice terapéutico superior a 25000. El Sofosbuvir presenta un EC50 = 53 nM, un TC50 superior a cien micromolares y un índice terapéutico superior a 1920. El eje y representa el porcentaje de control viral y el eje x indica la concentración del fármaco en |jM.

[0289] La Fig. 3 es un gráfico de las curvas de inhibición de la replicación del VHC para el Compuesto 25 (Tabla 7) y Sofosbuvir. Como se describe en el Ejemplo 27, el Compuesto 25 presenta un EC50 = 4 nM, un TC50 superior a 100 j M y un índice terapéutico superior a 25000. El Sofosbuvir presenta un EC50 = 53 nM, un TC50 superior a cien micromolares y un índice terapéutico superior a 1920. El eje y representa el porcentaje de control viral y el eje x indica la concentración del fármaco en<j>M.

[0291] La Fig. 4 es una comparación intraensayo de la actividad antiVHC de los compuestos 5-2, 25, 27 (Tabla 7) y Sofosbuvir. El eje y representa el porcentaje de control viral y el eje x indica la concentración del fármaco en j M. Véase el Ejemplo 27.

[0293] La Fig. 5 es un gráfico que muestra la estabilidad de los compuestos 5-2; el N<2>-acetato del Compuesto 5-2, el N<2>-butirato del Compuesto 5-2, el derivado de N<2>-metilo del Compuesto 5-2 y el N<2>-n-pentilcarbamato del Compuesto 5­ 2 en sangre humana. El eje x representa el tiempo de incubación, medido en minutos, y el eje y indica la medida del porcentaje del compuesto parental restante.

[0295] La Fig. 6 es un gráfico de la evolución temporal in vitro de la desalquilación del fosforamidato de nucleósido 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metilo-N<2>-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina hacia el fosforamidato de nucleósido 2'-desoxi-2'-afluoro-2'-p-metilo-N<6>-metil-2,6-diaminopurina en presencia de una fracción S9 hepática humana. El eje x se mide en minutos y el eje y es la medida en nM de la concentración del compuesto restante.

[0297] La Fig. 7 es un gráfico que muestra la estabilidad de los compuestos 5-2; el N<2>-acetato del Compuesto 5-2, el N<2>-butirato del Compuesto 5-2, el derivado de N<2>-metilo del Compuesto 5-2 y el N<2>-n-pentilcarbamato del Compuesto 5­ 2 en la presencia de una fracción S9 hepática humana. El eje x se mide en minutos y el eje y es la medida en nM del porcentaje de compuesto restante.

[0299] La Fig. 8 muestra los metabolitos predominantes del Compuesto 25 generados en hepatocitos humanos. El eje x es el tiempo de incubación en horas. El eje y es la concentración intracelular en pmol/10<6>células. Véase el Ejemplo 33.

[0300] La Fig. 9 muestra los metabolitos predominantes del Compuesto 27 generados en hepatocitos humanos. El eje x es el tiempo de incubación en horas. El eje y es la concentración intracelular en pmol/10<6>células. Véase el Ejemplo 33.

[0301] La Fig. 10 muestra los metabolitos predominantes del Compuesto 5-2 generados en hepatocitos humanos. El eje x es el tiempo de incubación en horas. El eje y es la concentración intracelular en pmol/10<6>células. Véase el Ejemplo 33.

[0303] La Fig. 11 es un gráfico que muestra las vías de activación de los compuestos 25, 27 y 5-2. Como puede observarse, los compuestos 25, 27 y 5-2 se convierten en sus respectivos análogos de monofosfato, que posteriormente se metabolizan hasta un análogo de MP común: el monofosfato de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina. A continuación, se fosforila el monofosfato de manera secuencial hasta formar el trifosfato activo: trifosfato de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina. Véase el Ejemplo 33.

[0305] Descripción detallada de la invención

[0307] La invención queda definida por las reivindicaciones adjuntas. Los compuestos de la presente invención, o bien poseen actividad antiviral, o bien se metabolizan para formar un compuesto que muestra dicha actividad.

[0309] Los compuestos y las composiciones también se pueden usar para tratar afecciones relacionadas con la exposición al virus del VHC o que se producen como resultado de ella. Por ejemplo, el compuesto activo puede usarse para tratar condiciones con positivo en anticuerpos antiVHC y positivo en antígenos del VHC, la inflamación hepática crónica de origen viral, el cáncer de hígado derivado de la hepatitis C avanzada, la cirrosis, la hepatitis C aguda, la hepatitis C fulminante, la hepatitis C persistente crónica y la fatiga basada en anticuerpos del VHC. En una realización, el compuesto o las formulaciones que comprenden los compuestos también se pueden usar profilácticamente para prevenir o retardar la progresión de la enfermedad clínica en individuos que sean positivos a anticuerpos del VHC o antígenos del VHC o que hayan estado expuestos a la hepatitis C.

[0311] En particular, se ha descubierto que un profármaco de fosfato 5'-estabilizado o un derivado del nucleótido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina, así como el nucleótido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina y otros nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N<6>-sustituidos, tal y como se describe a continuación, son altamente activos contra el VHC. Esto es sorprendente en cuanto a que la actividad del nucleósido parental de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina en un ensayo de replicón (EC50 = 15,7 micromolar) indica que no es adecuado para su uso como fármaco humano debido a su actividad insuficiente; sin embargo, el profármaco de fosfato estabilizado (fosforamidato) presenta un EC<50>=26 nanomolar en un ensayo de replicón, lo que constituye un aumento de más de 870 veces en la actividad. De forma similar, la actividad del nucleósido parental de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina en un ensayo de replicón (EC50 = 10,7 micromolar, «|jM») indica que tampoco es adecuado para su uso como fármaco humano debido a su actividad insuficiente; sin embargo, el profármaco de fosfato estabilizado (fosforamidato) presenta un EC50=12 nanomolar en un ensayo de replicón, lo que constituye un aumento de más de 1300 veces en la actividad.

[0313] A pesar del volumen de literatura y solicitudes de patentes sobre nucleósidos antivirales, no se han divulgado específicamente el derivado fosfato 5'-estabilizado del nucleótido de purina 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina, el nucleótido de purina 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-dimetil-2,6-diaminopurina, ni otros nucleótidos de purina p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N<6>-sustituidos.

[0315] A menos que se especifique lo contrario, los compuestos descritos en el presente documento se proporcionan en la configuración p-D-. En una realización alternativa, los compuestos pueden proporcionarse en una configuración p-L-. De forma similar, cualquier grupo sustituyente que muestre quiralidad puede proporcionarse en forma racémica, enantiomérica, diastereomérica o cualquier mezcla de estas. Cuando se usa un fosforamidato, tiofosforamidato u otros profármacos de fósforo estabilizado en los que el fósforo muestra quiralidad como el profármaco de fosfato estabilizado R<4>, puede proporcionarse como un derivado de fósforo quiral R o S o una mezcla de estos, incluida una mezcla racémica. El aminoácido del fosforamidato o el tiofosforamidato puede estar en la configuración D- o L-, o una mezcla de ambas, incluida una mezcla racémica. Todas las combinaciones de estas estereoconfiguraciones están incluidas en la invención descrita en el presente documento.

[0317] La presente invención comprende las siguientes características:

[0319] (a) un compuesto según la reivindicación 1 y las sales farmacéuticamente aceptables de este;

[0321] (b) compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de estos para su uso en el tratamiento de una infección por el virus de la hepatitis C según la reivindicación 11.

[0323] Las siguientes características se describen en el presente documento, pero no se reivindican explícitamente: (c) uso de las Fórmulas I-VII, así como de sales y profármacos farmacéuticamente aceptables de estas, en la fabricación de un fármaco para el tratamiento de una infección por el virus de la hepatitis C;

[0324] (d) método para la fabricación de un medicamento destinado a su uso terapéutico para tratar una infección por el virus de la hepatitis C, caracterizado por que se usa una de las Fórmulas I-VII descritas en el presente documento en la fabricación.

[0325] La presente invención comprende las siguientes características:

[0326] (e) composición farmacéutica según la reivindicación 8.

[0327] Las siguientes características se describen en el presente documento, pero no se reivindican explícitamente:

[0328] (f) Fórmulas I-VII descritas en el presente documento sustancialmente en ausencia de estereoisómeros del compuesto descrito, o sustancialmente aisladas de otras entidades químicas; y

[0329] (g) procesos para la preparación de productos terapéuticos que contienen una cantidad efectiva de una Fórmula I-VII descrita en el presente documento.

[0330] I. Nucleótidos de purina 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N6-sustituidos de la invención

[0331] Los compuestos activos descritos en el presente documento, pero no reivindicados explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1 son aquellos representados, por ejemplo, en la Fórmula I, y que pueden proporcionarse en una composición, sal o profármaco farmacéuticamente aceptables de los mismos:

[0334]

[0336] en donde:

[0337] Y es NR<1>R<2>;

[0338] R<1>es alquilo C1-C5 (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CH2F, CH2F, CF3, CH2CF3, CF2CH3 y CF2CF3), alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo Co-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo Co-C2)(heterociclo), -(alquilo Co-C2)(arilo), -(alquilo Co-C2)(heteroarilo), -OR<25>, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>Hy, -C(O)OC4Hg, y -C(O)OC5Hn ), -C(S)R3D, o -SO2R28, cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido; R<2>es hidrógeno, alquilo C1-C5 opcionalmente sustituido (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CH2F, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), -(alquilo C0-C2XC3-C6 cicloalquilo) opcionalmente sustituido, -(alquilo Co-C2)(heterociclo) opcionalmente sustituido, -(alquilo Co-C2)(arilo) opcionalmente sustituido,

[0339] -(alquilo Co-C2)(heteroarilo) opcionalmente sustituido, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3-C(O)CH(CH3)2, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>H<7>, -C(O)OC<4>Hg, y

[0340] -C(O)OC5Hi i ), -C(S)R3D, o -SO2R28; y

[0341] en donde al menos uno de entre R<1>y R<2>es metilo, CH2F, CHF2 o CF3;

[0342] 0

[0343] O — H - l -1 $

[0344] R3 es hidrógeno, O , difosfato, trifosfato, un aminoácido enlazado a un carbonilo opcionalmente sustituido, o -C(O)R3C;

[0345] R3A puede seleccionarse de entre O- , OH, un arilo -O-opcionalmente sustituido, un heteroarilo -O-opcionalmente sustituido o un heterociclilo opcionalmente sustituido;

[0346] R3B puede seleccionarse de entre O- , OH, un aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido o un éster de aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido;

[0347] R3C es alquilo, alquenilo, alquinilo, -(Cü-C2)(cicloalquilo), -(Cü-C2)(heterociclo), -(Cü-C2)(arilo), -(Cü-C2)(heteroarilo), -O­ alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(Cü-C2)(cicloalquilo), -O-(Cü-C2)(heterociclo), -O-(Cü-C2)(arilo) o -O-(C<ü>-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0348] R<4>es un profármaco de monofosfato, difosfato, trifosfato o fosfato estabilizado, que comprende, entre otros, un fosforamidato, un tiofosforamidato o cualquier otro resto que se metaboliza a monofosfato, difosfato o trifosfato in vivo en el hospedador humano o animal; o

[0349] R<3>y R<4>, junto con los oxígenos a los que están enlazados, pueden formar un profármaco cíclico 3',5', que comprende, entre otros, un profármaco de fosfato cíclico 3',5';

[0350] R<12>es CH3, CH2F, CHF2, CF3, o etinilo.

[0351] Un profármaco de fosfato estabilizado es cualquier resto capaz de liberar un mono, di o trifosfato.

[0352] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, se divulgan los compuestos de la Fórmula Ia:

[0355]

[0357] en donde:

[0358] Y, R3 y R4 son tal y como se han definido anteriormente.

[0359] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada, se divulgan los compuestos de la Fórmula Ib:

[0360]

[0362] en donde:

[0363] Y, R3 y R4 son tal y como se han definido anteriormente.

[0364] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, el compuesto es de acuerdo con la Fórmula Ic:

[0367]

[0369] en donde:

[0370] R<7>es hidrógeno, alquilo C1-6; cicloalquilo C3-7; heteroarilo, heterocíclico o arilo, incluyendo, entre otros, fenilo o naftilo, en donde el fenilo o naftilo pueden estar opcionalmente sustituidos con alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, alcoxi C1-6, F, Cl, Br, I, nitro, ciano, haloalquilo C1-6, -N(R7')2, acilamino C1-6, NHSO2-alquilo C1<-6>, -SO2N(R7')2, COR7" y -SO2-alquilo C1-6; (R7' es, de forma independiente, hidrógeno o alquilo C1-6; R7" es -OR<11>o-N(R<7>)2);

[0371] R<8>es hidrógeno, alquilo C1-6, o R9a o R9b y R<8>juntos son (CH2)n para formar un anillo cíclico que incluye los átomos N y C adyacentes; en donde n es de 2 a 4;

[0372] R9a y R9b se (i) seleccionan de forma independiente entre hidrógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo,

[0373] -(CH2)c(NR9')2, hidroxialquilo C1-6, --CH2SH, -(CH2)2S(O)(Me), -(CH<2>)<3>NHC(=NH)NH<2>, (lH-indol-3-il)metil, (lH-imidazol-4-il)metil, -(CH2)cCOR9", arilo y arilo(alquilo C1-3)-, los grupos arilos pueden estar sustituidos opcionalmente con un grupo seleccionado de entre hidroxilo, alquilo C1-6, alcoxi C1-6, halógeno, nitro y ciano; (ii) R9a y R9b son ambos alquilo C1-6; (iii) R9a y R9b juntos son (CH2V para formar un anillo espiro; (iv) R9a es hidrógeno y R9b y R<8>juntos son (CH2)n para formar un anillo cíclico que incluye los átomos N y C adyacentes (v) R9b es hidrógeno y R9a y R<8>juntos son (CH2)n para formar un anillo cíclico que incluye los átomos N y C adyacentes, en donde c es de 1 a 6, n es de 2 a 4, r es de 2 a 5 y en donde R9' es, de forma independiente, hidrógeno o alquilo C1-6 y R9" es -OR<11>o -N(R11')2; (vi) R9a es hidrógeno y R9b es hidrógeno, CH3, CH2CH3, CH(CH^, CH2CH(CH3)2, CH(CH3)CH2CH3, CH2Ph, CH<2>-indol-3-il, -CH2CH2SCH3, CH2CO2H, CH2C(O)NH2, CH2CH2COOH, CH2CH2C(O)NH2, CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2NHC(NH)NH2, CH<2>-imidazol-4-il, CH2OH, CH(OH)CH3, CH<2>((4'-OH)-Ph), CH2SH, o cicloalquilo inferior; o (vii) R9a es CH3, CH2CH3, CH(CH<3>)<2>, CH<2>CH(CH<3>)<2>, CH(CH<3>)CH<2>CH<3>, CH2Ph, CH<2>-indol-3-il,

[0375] -CH<2>CH<2>SCH<3>, CH<2>CO<2>H, CH<2>C(O)NH<2>, CH<2>CH<2>COOH, CH<2>CH<2>C(O)NH<2>, CH<2>CH<2>CH<2>CH<2>NH<2>, -CH2CH2CH2NHC(NH)NH2, CH<2>-imidazol-4-il, CH2OH, CH(OH)CH3, CH<2>((4'-OH)-Ph), CH2SH, o cicloalquilo inferior y R9b es hidrógeno;

[0377] R<10>es hidrógeno, alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con un alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, o halógeno, haloalquilo C1-6, cicloalquilo C3-7, heterocicloalquilo, aminoacilo, arilo, como fenilo, heteroarilo, como piridinilo, arilo sustituido o heteroarilo sustituido;

[0379] R<11>es un alquilo C1-6 opcionalmente sustituido, un cicloalquilo opcionalmente sustituido; un alquinilo C2-6 opcionalmente sustituido, un alquenilo C2-6 opcionalmente sustituido, o acilo opcionalmente sustituido, incluyendo, entre otros, C(O)(alquilo C1-6); y

[0381] Y, R<3>y R<12>son como se definen en el presente documento.

[0383] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se divulgan los compuestos de la Fórmula II:

[0386]

[0389] en donde:

[0391] Y es NR<1>R<2>;

[0393] R<1>es alquilo C1-C5 (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CH2F, CHF2, CF3, CH2CF3, CF2CH3 y CF2CF3), alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo), -(alquilo C0-C2)(arilo), -(alquilo C0-C2)(heteroarilo), -OR<25>, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>H<7>, -C(O)OC4H9 y -C(O)OC5H<h>), -C(S)R3D, o -SO2R28 cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido. R<2>es hidrógeno, alquilo C1-C5 opcionalmente sustituido (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), -(alquilo C0-C2)(C3-C6 cicloalquilo) opcionalmente sustituido, -(alquilo C0-C2)(heterociclo) opcionalmente sustituido, -(alquilo C0-C2)(arilo) opcionalmente sustituido.

[0395] -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) opcionalmente sustituido, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH3, -C(O)CH2CH3-C(O)CH(CH3)2, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>H<7>, -C(O)OC<4>H<9>, y

[0397] -C(O)OC5H11), -C(S)R3D, o -SO2R<28>; y

[0398] en donde al menos uno de entre R<1>y R<2>es metilo, CH2F, CHF2 o CF3;

[0399] 0

[0400] O — H - l -1 i

[0401] R3 es hidrógeno, O , difosfato, trifosfato, un aminoácido enlazado a un carbonilo opcionalmente sustituido, o

[0402] -C(O)R3C;

[0403] R3A puede seleccionarse de entre O- , OH, un arilo -O-opcionalmente sustituido, un heteroarilo -O-opcionalmente sustituido o un heterociclilo opcionalmente sustituido;

[0404] R3B puede seleccionarse de O-, OH, un aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido o un éster de aminoácido

[0405] enlazado a N opcionalmente sustituido;

[0406] R3C es alquilo, alquenilo, alquinilo, -(Cü-C2)(cicloalquilo), -(Cü-C2)(heterociclo), -(Cü-C2)(arilo), -(Cü-C2)(heteroarilo), -O­

[0407] alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(Cü-C2)(cicloalquilo), -O-(Cü-C2)(heterociclo), -O-(Cü-C2)(arilo) o -O-(C<ü>-C2)(heteroarilo), -S-alquilo, -S-alquenilo, -S-alquinilo, -S-(Cü-C2)(cicloalquilo), -S-(Cü-C2)(heterociclo), -S-(Cü-C2)(arilo)

[0408] o -S-(Cü-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0409] R3D es alquilo, alquenilo, alquinilo, -(Cü-C2)(cicloalquilo), -(Cü-C2)(heterociclo), -(Cü-C2)(arilo), -(Cü-C2)(heteroarilo), -O­

[0410] alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(Cü-C2)(cicloalquilo), -O-(Cü-C2)(heterociclo), -O-(Cü-C2)(arilo) o -O-(C<ü>-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0411] R<4>es un profármaco de monofosfato, difosfato, trifosfato o fosfato estabilizado, que comprende, entre otros, un fosforamidato, un tiofosforamidato o cualquier otro resto que se metaboliza a monofosfato, difosfato o trifosfato in vivo

[0412] en el hospedador humano o animal; o

[0413] R<3>y R<4>, junto con los oxígenos a los que están enlazados, pueden formar un profármaco cíclico 3',5', que comprende, entre otros, un profármaco de fosfato cíclico 3',5';

[0414] R<5>es alquilo C1-C5 (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CHF2, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alq C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo), -(alquilo C0-C2)(arilo), -(alquilo C0-C2)(heteroarilo), -OR<25>, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>Hy, -C(O)OC<4>Hg, y -C(O)OC5Hn ), -C(S)R3D, o -SO2R28 cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

[0415] R<6>es hidrógeno, alquilo C1-C5 opcionalmente sustituido (incluyendo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo,

[0416] isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y pentilo), haloalquilo C1-C5 (incluyendo CHF2, CH2F, CF3, CH2CF3 y CF2CF3), -(alquilo

[0417] C0-C2)(cicloalquilo C3-C6) opcionalmente sustituido, -(alquilo C0-C2)(heterociclo) opcionalmente sustituido, -(alquilo

[0418] C0-C2)(arilo) opcionalmente sustituido, -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) opcionalmente sustituido, -C(O)R3C (incluyendo -C(O)CH<3>, -C(O)CH<2>CH<3>-C(O)CH(CH<3>)<2>, -C(O)OCH<3>, -C(O)OC<2>H<5>, -C(O)OC<3>H<7>, -C(O)OC<4>Hg y -C(O)OC<5>H<h>), -C(S)R3D, o -SO2R<28>; o

[0419] R<5>y R<6>, junto con el nitrógeno al que están enlazados, pueden formar un anillo heterocíclico;

[0420] R<12>es CH3, CH2F, CHF2, CF3, o etinilo;

[0421] R<22>es Cl, Br, F, CN, N3, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C1-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo

[0422] C0-C2)(heterociclo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(arilo), -(alquilo C0-C2)(heteroarilo);

[0423] -ONHC(=O)OR<23>, -NHOR<24>, -OR<25>, -SR<25>, -NH(CH<2>)<1-4>N(R<26>)<2>, -NHNHR<26>, -N=NR<27>,

[0424] -NHC(O)NHNHR<27>, -NHC(S)NHNHR<27>, -C(O)NHNHR<27>, -NR<27>SO<2>R<28>, -SO<2>NR<27>R<29>,

[0425]

[0427] por ejemplo, sin limitarse a las siguientes realizaciones, se incluyen cloro, bromo, flúor, ciano, azido, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y n-pentilo, 1,1-dimetilpropilo, 2,2-dimetilpropilo, 3-metilbutilo, 1-metilbutilo, 1-etilpropilo, vinilo, alilo, 1 -butinilo, 2-butinilo, acetilenilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, -(CH2)-ciclopropilo, -(CH2)-ciclobutilo, -(CH2)-ciclopentilo, -(CH2)-ciclohexilo, aziridina, oxirano, tiirano, azetidina, oxetano, tietano, pirrolidina, tetrahidrofurano, tiolano, pirazolidina, piperidina, oxano, tiano, -(CH2)-aziridina, -(CH2)-oxirano, -(CH2)-tiirano, -(CH2)-azetidina, -(CH2)-oxetano, -(CH2)-tietano, -(CH2)-pirrolidina, -(CH2)-tetrahidrofurano, -(CH2)-tiolano, -(CH2)-pirazolidina, -(CH2)-piperidina, -(CH2)-oxano, -(CH2)-tiano, fenilo, piridilo, -ONHC(=O)OCH3, -ONHC(=O)OCH2CH3, -NHOH, NHOCH3, -OCH3, OC2H5, -OPh, OCH2Ph, -SCH3, -SC2H5, -SPh, SCH2Ph, -NH(CH<2>)<2>NH<2>, -NH(CH<2>)<2>N(CH<3>)<2>, -NHNH<2>,

[0428] -NHNHCH3, -N=NH, -N=NCH<3>, -N=NCH<2>CH<3>, -NHC(O)NHNH2, -NHC(S)NHNH2,

[0429] -C(O)NHNH2, -NHSO2CH3, -NHSO2CH2CH3, -SO2NHCH3, -SO<2>N(CH<3>)<2>, -C(O)NH2,

[0430] -C(O)NHCH<3>, -C(O)N(CH<3>)<2>, -CO<2>CH<3>, -CO<2>CH<2>CH<3>, -CO<2>Ph, -CO<2>CH<2>Ph, -SO<2>CH<3>,

[0432]

[0434] -P(O)(OH)(NHCH<3>), -P(O)(OH)N(CH<3>)<2>, -NHC(O)CH<3>, -NHC(O)CH<2>CH<3>, -NHC(O)CH(CH<3>)<2>,

[0435] -NHC(O)OCH<3>, -NHC(O)OCH<2>CH<3>, -NHC(O)OCH(CH<3>)<2>, -NHC(O)OCH<2>CH<2>CH<3>,

[0436] -NHC(O)OCH<2>CH<2>CH<2>CH<3>y -NHC(O)OCH<2>CH<2>CH<2>CH<2>CH<3>;

[0437] R<23>es alquilo C1-C5, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo)-(alquilo C0-2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

[0438] R<24>es hidrógeno, alquilo C1-C6, -(alquilo C1-C2)(cicloalquilo C3-C6),

[0439] -(alquilo C1-C2)(heterociclo C3-C6) -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos;

[0440] R<25>es hidrógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos;

[0441] R<26>se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo C1-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo), -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos;

[0442] R<27>es hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido;

[0443] R<28>es alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6),

[0444] -(alquilo Co-C2)(heterocido C3-C6) -(alquilo Co-C2)(arilo) o -(alquilo Co-C2)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido;

[0445] R<29>es hidrógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(arilo) o -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos; o

[0446] R<27>y R<29>, junto con el nitrógeno al que están enlazados, pueden formar un anillo heterocíclico;

[0447] R<30>es hidrógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6,

[0448] -(alquilo C0-C2)(cicloalquilo C3C6), -(alquilo C0-C2)(heterociclo C3-C6), -(alquilo C0-C2)(arilo) o

[0449] -(alquilo C0-C2)(heteroarilo) en donde, excepto el hidrógeno, todos los demás pueden estar opcionalmente sustituidos; o

[0450] R<29>y R<30>pueden enlazarse para formar un anillo heterocíclico;

[0451] x es 1, 2 o 3.

[0452] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se divulgan los compuestos de la Fórmula IIa:

[0455]

[0457] en donde:

[0458] Y, R3, R4 y R22 son tal y como se han definido anteriormente.

[0459] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se divulgan los compuestos de la Fórmula IIb:

[0460]

[0462] en donde:

[0463] Y, R3, R4 y R22 son tal y como se han definido anteriormente.

[0464] En una realización típica, el compuesto es un isómero p-D con referencia al nucleósido correspondiente (es decir, en la configuración natural). En una configuración alternativa, se proporciona el compuesto como un isómero p-L. Por lo general, el compuesto está libre del enantiómero opuesto en al menos un 90 %, y puede estar libre del enantiómero opuesto en al menos un 98 %, un 99 % o incluso un 100 %. A menos que se describa lo contrario, el compuesto está libre del enantiómero opuesto en al menos un 90 %.

[0465] En otra realización de acuerdo con la presente invención, el compuesto es según la Fórmula III:

[0468]

[0470] Fórmula III

[0471] en donde:

[0472] R22 es NH2 y las variables Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 y R12 son según la reivindicación 1.

[0473] En una realización de acuerdo con la presente invención, se divulgan los compuestos de la Fórmula IV:

[0474]

[0476] Fórmula IV

[0477] en donde R22 es NH2 y las variables Y, R3, R7, R8, R9a, R9b y R10 son según la reivindicación 1.

[0478] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada, se divulgan los compuestos de la Fórmula V:

[0481]

[0484] Fórmula V

[0485] en donde las variables Y, R3, R7, R8, R9a, R9b, R10 y R22 se describen en el presente documento.

[0486] En una realización alternativa de acuerdo con la presente invención, se proporcionan compuestos y composiciones para el uso en el tratamiento de un hospedador infectado con hepatitis C.

[0487] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, se divulgan los compuestos de la Fórmula VI:

[0488]

[0490] Fórmula VI

[0491] en donde:

[0492] R41 es halógeno (en concreto, F o Cl), OR3 (incluido OH), N3, NH2 o CN; y

[0493] las variables Y, R3, R4 y R12 se describen en el presente documento.

[0494] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1, se divulgan los compuestos de la Fórmula VII:

[0497]

[0499] en donde las variables Y, R<3>, R<4>, R<12>y R<41>se describen en el presente documento.

[0500] Metabolismo de nucleótidos de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-N<6>-sustituidos-2,6-diaminopurina El metabolismo del fosforamidato de nucleósido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina implica la producción de un 5'-monofosfato y el posterior anabolismo de la base N<6>-metil-2,6-diaminopurina para generar el nucleósido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina como 5'-monofosfato. A continuación, el monofosfato se anaboliza en mayor medida hasta la especie activa: el 5'-trifosfato. El trifosfato de p-D-2'-desoxi-2'-afluoro-2'-p-metil-guanina presenta un IC50 = 0,15 |jM frente a la polimerasa NS5B del VHC genotipo 1b. La ruta metabólica del fosforamidato de nucleósido de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina se ilustra en el Esquema 1 mostrado a continuación.

[0501]

[0504] El metabolismo del nucleótido de p-D-2'-desox¡-2'-a-fluon>2'-p-met¡l-N56-dimet¡l-2,6-d¡ammopurina implica tanto la formación del trifosfato de nucleósido de p-D^'-desoxi^'-a-fluoro^'-p-metil-N^dimetil^^-diaminopurina, como la generación del trifosfato de nucleósido de guanina correspondiente. Estas rutas metabólicas quedan ilustradas en los Esquemas 2 y 3 mostrados a continuación.

[0505]

[0507] Esquema 2

[0508]

[0511] Esquema 3

[0513] Profármacos de fosfato estabilizados

[0515] Los profármacos de fosfato estabilizados son restos capaces de liberar un mono, di o trifosfato in vivo. Por ejemplo, McGuigan ha divulgado fosforamidatos en las patentes de EE. UU. n.° 8,933,053; 8,759,318; 8,658,616; 8,263,575; 8,119,779; 7,951,787 y 7,115,590. Alios ha divulgado tiofosforamidatos en US 8,895,723 y 8,871,737. Alios también ha divulgado nucleótidos cíclicos en la patente de EE. UU. n.° 8,772,474. Idenix ha divulgado fosforamidatos cíclicos y derivados de fosforamidato/SATE en WO 2013/177219. Idenix también ha divulgado compuestos de carboniloximetilfosforamidato sustituido en WO 2013/039920. Hostetler ha divulgado profármacos de fosfato lipídicos, véase, por ejemplo, US 7,517,858. Hostetler también ha divulgado conjugados lípidos de profármacos de fosfonato, véanse, por ejemplo, US 8,889,658; 8,846,643; 8,710,030; 8,309,565; 8,008,308; y 7,790,703. Emory University ha divulgado derivados nucleotídicos de esfingoides y lípidos en WO 2014/124430. RFS Pharma ha divulgado profármacos de monofosfato de nucleósido de purina en WO 2010/091386. Cocrystal Pharma Inc. también ha divulgado profármacos de monofosfato de nucleósido de purina en la patente de EE. UU. n.° 9,173,893. La tecnología HepDirect™ se divulga en el artículo «Design, Synthesis, and Characterization of a Series of Cytochrome P(450) 3A-Activated Prodrugs (HepDirect Prodrugs) Useful for Targeting Phosph(on)ate-Based Drugs to the Liver» (Diseño, síntesis y caracterización de una serie de profármacos activados por el citocromo P(450) 3A (profármacos HepDirect) de utilidad para dirigir fármacos basados en fosfonatos o fosfatos hacia el hígado) (J. Am. Chem. Soc.

[0516] 126, 5154-5163 (2004). Los profármacos de fosfato adicionales comprenden, entre otros, ésteres fosfato, fosfatos cíclicos 3',5', incluidos los del tipo CycloSAL, así como derivados de SATE (S-acilo-2-tioésteres) y los profármacos DTE (ditiodietilo). Para reseñas de literatura que describen ejemplos no limitantes, véanse los documentos: A. Ray y K. Hostetler, «Application of kinase bypass strategies to nucleoside antivirals» (Aplicación de estrategias de bypass de quinasas a antivirales nucleósidos), Antiviral Research (2011) 277-291; M. Sofía, «Nucleotide prodrugs for HCV therapy» (Profármacos de nucleótido para el tratamiento de la hepatitis C (VHC)), Antiviral Chemistry and Chemotherapy 2011; 22-23-49; y S. Peyrottes et al., «SATE Pronucleotide Approaches: An OverView» (Enfoques de profármacos SATE: Una visión general), Mini Reviews in Medicinal Chemistry 2004, 4, 395. En una realización, un profármaco 5' descrito en cualquiera de estas presentaciones de patente o documentos puede usarse en la posición R4 de los compuestos presentados.

[0518] Los profármacos de fosfato estabilizado comprenden, entre otros, los descritos en la patente de EE. UU. n.° 9,173,893 y la patente de EE. UU. n.° 8,609,627, que incluyen los procesos de preparación. Por ejemplo, los profármacos de 5' de la Fórmula I-V pueden estar representados por el grupo:

[0520]

[0523] Por ejemplo, los profármacos de 3',5' de la Fórmula I-V pueden estar representados por el grupo:

[0525]

[0528] en donde:

[0530] cuando existe quiralidad en el centro del fósforo, este puede ser totalmente o parcialmente Rp o Sp, o cualquier mezcla de ambos.

[0532] Z es O o S;

[0534]

[0537] en donde R34, R35 y R36 son como se definen a continuación;

[0539] R31 y R32, cuando se administran in vivo, son capaces de proporcionar el monofosfato de nucleósido o tiomonofosfato, que pueden ser o no ser, parcial o totalmente, resistentes a la desaminación de 6-NH2 en un sistema biológico. R31 y R32 se seleccionan de forma independiente de entre:

[0541] (a) OR34 en donde R34 se selecciona de H, Li, Na, K, fenilo y piridinilo; el fenilo y piridinilo se sustituyen con de uno a tres sustituyentes seleccionados de forma independiente de entre el grupo compuesto por (CH2)0-6CO2R37 y (CH2V 6CON(R37)2;

[0543] R<37>es, de forma independiente, H, alquilo C1-20, la cadena carbonada derivada de un alcohol graso (como un alcohol oleílico, octacosanol, triacontanol, alcohol linoléico, etc.) o alquilo C1-20 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, cicloalquilo-alquilo, cicloheteroalquilo, arilo, como fenilo, heteroarilo, como piridinilo, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido; en donde los sustituyentes son alquilo C1-5, o alquilo C1-5 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, o cicloalquilo;

[0544]

[0546] (c) el éster de un D-aminoácido o L-aminoácido

[0548]

[0551] en donde R36 se limita a las cadenas laterales presentes en los L-aminoácidos naturales, y

[0552] R35 es H, alquilo C1-20, la cadena carbonada derivada de un alcohol graso (como un alcohol oleílico, octacosanol, triacontanol, alcohol linoléico, etc.) o alquilo C1-20 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, cicloalquilo-alquilo, cicloheteroalquilo, arilo, como fenilo, heteroarilo, como piridinilo, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido; en donde los sustituyentes son alquilo C1-5, o alquilo C1-5 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, o cicloalquilo;

[0553] (d) R31 y R32 puede unirse para formar un anillo

[0555]

[0557] en donde R<38>es H, alquilo C1-20, alquenilo C1-20, la cadena carbonada derivada de un alcohol graso (como un alcohol oleílico, octacosanol, triacontanol, alcohol linoléico, etc.) o alquilo C1-20 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, cicloalquilo-alquilo, cicloheteroalquilo, arilo, como fenilo, heteroarilo, como piridinilo, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido; en donde los sustituyentes son alquilo C1-5, o alquilo C1-5 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, o cicloalquilo;

[0558] (e) R<31>y R<32>pueden unirse para formar un anillo seleccionado de entre

[0559]

[0562] en donde R<39>es O o NH, y

[0563] R<40>se selecciona de entre H, alquilo C1-20, alquenilo C1-20, la cadena carbonada derivada de un ácido graso (como ácido oléico, ácido linoléico y similares) y alquilo C1-20 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, cicloalquilo-alquilo, cicloheteroalquilo, arilo, como fenilo, heteroarilo, como piridinilo, arilo sustituido, o heteroarilo sustituido; en donde los sustituyentes son alquilo C1-5, o alquilo C1-5 sustituido con un alquilo inferior, alcoxi, di(alquilo inferior)-amino, fluoro, cicloalquilo C3-10, o cicloalquilo;

[0564] Los compuestos pueden prepararse, por ejemplo, preparando los análogos de 5'-OH y, a continuación, convirtiéndolos en los análogos de monofosfato.

[0565] Realizaciones

[0566] A continuación, se describen las realizaciones particulares descritas en el presente documento, pero que no se reivindican explícitamente salvo que se haga conforme a la reivindicación 1:

[0567] (i) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno, R<4>es un profármaco de fosfato estabilizado;

[0568] (ii) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un profármaco de tiofosfato estabilizado;

[0569] (iii) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un fosforamidato; (iv) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un tiofosforamidato; (v) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un monofosfato; (vi) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un difosfato;

[0570] (vii) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un trifosfato;

[0571] (viii) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno, R<4>es un profármaco de fosfato estabilizado;

[0572] (ix) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un profármaco de tiofosfato estabilizado;

[0573] (x) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un fosforamidato;

[0574] (xi) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un tiofosforamidato: (xii) en la Fó rm u la la, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s metilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un monofosfato;

[0575] (xiii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s metilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un difosfato;

[0576] (xiv) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s metilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un trifosfato;

[0577] (xv) en la Fórm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s ciclopropilo , R<3>e s hidrógeno, R<4>e s un profárm aco de fosfato estab ilizad o;

[0578] (xvi) en la Fórm ula Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s ciclopropilo , R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un profárm aco de tiofosfato estab ilizad o;

[0579] (xvii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s ciclopropilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un fosforam idato; (xviii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s ciclopropilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un tiofosforam idato: (xix) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s ciclopropilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un monofosfato: (xx) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s ciclopropilo, R<3>e s metilo y R<4>e s un difosfato:

[0580] (xxi) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s ciclopropilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un trifosfato:

[0581] (xxii) en la Fórm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>es metilo, R<2>e s propilo, R<3>e s hidrógeno, R<4>e s un profárm aco de fosfato estab ilizad o;

[0582] (xxiii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s propilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un profárm aco de tiofosfato estab ilizad o;

[0583] (xxiv) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s propilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un fosforam idato;

[0584] (xxv) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s propilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un tiofosforam idato; (xxvi) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s propilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un monofosfato;

[0585] (xxvii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s propilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un difosfato;

[0586] (xxviii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>es propilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un trifosfato; (xxix) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s etilo, R<3>e s hidrógeno, R<4>e s un profárm aco de fosfato estab ilizad o;

[0587] (xxx) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>es metilo, R<2>e s etilo, R<3>es h idrógeno y R<4>e s un profárm aco de tiofosfato estab ilizad o;

[0588] (xxxi) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s etilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un fosforam idato;

[0589] (xxxii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s etilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un tiofosforam idato:

[0590] (xxxiii) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s etilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un monofosfato;

[0591] (xxxiv) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s etilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un difosfato;

[0592] (xxxv) en la Fó rm u la Ia, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s etilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>es un trifosfato;

[0593] (xxxvi) en la Fó rm u la Ib, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s metilo, R<3>e s hidrógeno, R<4>es un profárm aco de fosfato estab ilizad o;

[0594] (xxxvii) en la F ó rm u la Ib, Y e s N R<1>R 2, R<1>e s metilo, R<2>e s metilo, R<3>e s hidrógeno y R<4>e s un profárm aco de tiofosfato estab ilizad o;

[0595] (xxxviii) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un fosforamidato;

[0596] (xxxix) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un tiofosforamidato: (xl) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un monofosfato;

[0597] (xli) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un difosfato;

[0598] (xlii) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es metilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un trifosfato;

[0599] (xliii) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno, R<4>es un profármaco de fosfato estabilizado;

[0600] (xliv) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un profármaco de tiofosfato estabilizado;

[0601] (xlv) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un fosforamidato; (xlvi) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un tiofosforamidato; (xlvii) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un monofosfato; (xlviii) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un difosfato;

[0602] (xlix) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es hidrógeno, R<3>es hidrógeno y R<4>es un trifosfato;

[0603] (l) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es ciclopropilo , R<3>es hidrógeno, R<4>es un profármaco de fosfato estabilizado; (li)

[0604] (li) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es ciclopropilo , R<3>es hidrógeno y R<4>es un profármaco de tiofosfato estabilizado;

[0605] (lii) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es ciclopropilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un fosforamidato; (liii) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es ciclopropilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un tiofosforamidato: (liv) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es ciclopropilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un monofosfato: (lv) en la Fórmula Ib, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es ciclopropilo, R<3>es metilo y R<4>es un difosfato:

[0606] (lvi) en la Fórmula Ia, Y es NR<1>R<2>, R<1>es metilo, R<2>es ciclopropilo, R<3>es hidrógeno y R<4>es un trifosfato.

[0607] En realizaciones alternativas de cualquiera de las descritas en el presente documento, pero no reivindicadas explícitamente a menos que se haga conforme a la reivindicación 1, el compuesto tiene un sustituyente R<22>. En algunas de estas realizaciones específicas descritas en el presente documento, pero no reivindicadas explícitamente a menos que se haga conforme a la reivindicación 1, R<22>es F, amida o carbamato. En otros aspectos específicos de las realizaciones antes descritas, pero no reivindicadas, R<22>es cloro, bromo, ciano, azido, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo y n-pentilo, 1,1-dimetilpropilo, 2,2-dimetilpropilo, 3-metilbutilo, 1-metilbutilo, 1-etilpropilo, vinilo, alilo, 1-butinilo, 2-butinilo, acetilenilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, -(CH2)-ciclopropilo, -(CH2)-ciclobutilo, -(CH2)-ciclopentilo, -(CH2)-ciclohexilo, aziridina, oxirano, tiirano, azetidina, oxetano, tietano, pirrolidina, tetrahidrofurano, tiolano, pirazolidina, piperidina, oxano, tiano, -(CH2)-aziridina, -(CH2)-oxirano, -(CH2)-tiirano, -(CH2)-azetidina, -(CH2)-oxetano, -(CH2)-tietano, -(CH2)-pirrolidina, -(CH2)-tetrahidrofurano, -(CH2)-tiolano, -(CH2)-pirazolidina, -(CH2)-piperidina, -(CH2)-oxano, -(CH2)-tiano, fenilo, piridilo, -ONHC(=O)OCH3, -ONHC(=O)OCH2CH3, -NHOH, NHOCH3, -OCH3, OC2H5, -OPh, OCH2Ph, -SCH3, -SC2H5, -SPh, SCH2Ph, -NH(CH2)2NH2, -NH(CH<2>)<2>N(CH<3>)<2>, -NHNH2, -NHNHCH3, -N=NH, -N=NCH<3>, -N=NCH<2>CH<3>-NHC(O)NHNH2, -NHC(S)NHNH2, -C(O)NHNH2, -NHSO2CH3, -NHSO2CH2CH3 -SO2NHCH3, -SO<2>N(CH<3>)<2>, -C(O)NH2, -C(O)NHCH<3>, -C(O)N(CH<3>)<2>, -CO<2>CH<3>, -CO<2>CH<2>CH<3>, -CO<2>Ph, CO<2>CH<2>Ph, -SO<2>CH<3>, -SO<2>CH<2>CH<3>, -SO<2>Ph, -SO<2>CH<2>Ph,

[0609] En realizaciones alternativas de compuestos (i) a (Ivi) descritas en el presente documento, pero no reivindicadas explícitamente a menos que se haga conforme a la reivindicación 1, en las Fórmulas I-VII se usa un L-nucleósido. En una realización alternativa descrita en el presente documento, pero no reivindicada, la variable R<12>de la Fórmula I es CH2F.

[0610] En una realización alternativa descrita en el presente documento, pero no reivindicada, la variable R<12>de la Fórmula I es CHF2.

[0611] En una realización alternativa descrita en el presente documento, pero no reivindicada, la variable R<12>de la Fórmula I es CF3.

[0612] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente a menos que se haga conforme a la reivindicación 1, se proporciona un compuesto de la Fórmula Ia. Los ejemplos no limitativos de los compuestos de la Fórmula Ia comprenden:

[0615]

[0616]

[0617]

[0618]

[0620] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada, se proporciona un tiofosforamidato de la Fórmula Ia. Los ejemplos no limitativos de los tiofosforamidatos de la Fórmula Ia comprenden, entre otros:

[0621]

[0622]

[0624] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente a menos que se haga conforme a la reivindicación 1, se proporciona un profármaco de fosfato estabilizado de la Fórmula Ia. Los ejemplos no limitativos de los profármacos de fosfato estabilizados de la Fórmula la se ilustran a continuación:

[0626]

[0628] En otra realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente a menos que se haga conforme a la reivindicación 1, se proporciona un compuesto de la Fórmula Ia. Los ejemplos no limitativos de los compuestos de la Fórmula Ia comprenden:

[0630]

[0631]

[0632]

[0633]

[0634]

[0636] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada, se proporciona un tiofosforamidato de la Fórmula la. Los ejemplos no limitativos de los tiofosforamidatos de la Fórmula la comprenden, entre otros:

[0638]

[0639]

[0640]

[0641]

[0643] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se proporciona un profármaco de fosfato estabilizado de la Fórmula Ia. Los ejemplos no limitativos de los profármacos de fosfato estabilizados de la Fórmula Ia se ilustran a continuación:

[0644]

[0645]

[0647] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se proporciona un compuesto de la Fórmula II. Los ejemplos no limitativos de los compuestos de la Fórmula II comprenden:

[0649]

[0650] Ċ

[0651]

[0654] 52

[0655] Ċ

[0656]

[0659] 53

[0660] Ċ

[0661]

[0664] 54

[0665] Ċ

[0666]

[0669] 55

[0670]

[0672] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente a menos que se haga conforme a la reivindicación 1, se proporciona un compuesto de la Fórmula I. Los ejemplos no limitativos de los compuestos de la Fórmula I comprenden:

[0674]

[0675]

[0676]

[0678] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, se proporciona un compuesto de la Fórmula II. Los ejemplos no limitativos de los compuestos de la Fórmula II comprenden:

[0680]

[0681]

[0683] E n una realizació

[0684] E n una realización d escrita en el presente docum ento, pero no re iv ind icad a explícitam ente, se proporciona un com p uesto de la Fó rm u la II. Lo s e jem p lo s no lim itativos de los com p uesto s de la Fórm u la II com prenden:

[0686]

[0687] Ċ

[0688]

[0691] 61

[0692] Ċ

[0693]

[0696] 62

[0697] Ċ

[0698]

[0701] 63

[0702] Ċ

[0703]

[0706] 64

[0707]

[0709] y

[0710] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 3 e s H y R 4 es

[0712]

[0714] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 3 e s H y R 4 es

[0716]

[0717] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 3 e s H y R 4 es

[0718] E n una realización d escrita en el presente docum ento, pero no re iv ind icad a explícitam ente, se proporciona un com p uesto de la Fó rm u la II. Lo s e jem p lo s no lim itativos de los com p uesto s de la Fórm u la II com prenden:

[0720]

[0721] Ċ

[0722]

[0725] 66

[0726] 

[0727]

[0730] 

[0731] 

[0732]

[0735] 

[0736] 

[0737]

[0740] 

[0741] Ċ

[0742]

[0745] 70

[0746] Ċ

[0747]

[0750] 71

[0751] Ċ

[0752]

[0755] 72

[0756] Ċ

[0757]

[0760] 73

[0761] Ċ

[0762]

[0765] 74

[0766]

[0768] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 3 e s H y R 4 es

[0770]

[0772] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 3 e s H y R 4 es

[0773] En a lg u n a s re a liza cio

[0774] En a lg u n a s re a liza cio

[0775]

[0777] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 1 e s C H<3>, R 2 e s H, R 3 es H y R 4 es

[0780]

[0781] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 1 e s C H<3>, R 2 e s H, R 3 es H y R 4 es

[0782] Y3T

[0783]

[0784] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 1 e s C H<3>, R 2 e s C H<3>, R 3 es H y R 4 es

[0785]

[0787] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 1 e s C H<3>, R 2 e s C H<3>, R 3 es H y R 4 es

[0788]

[0789] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R<1>e s C H<3>, R<2>e s C H<3>, R<3>es H y R<4>es

[0791] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R<1>e s ciclopropilo,

[0793]

[0796] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R clopropilo, R >»

[0797] <1>e s ci<2>e s C H<3>, R<3>es H y R<4>es

[0799]

[0800] En a lg u n a s re a liza cio n e s, R 1 e s ciclopropilo, R 2 e s C H<3>, R 3 es H y R 4 es

[0801] II. D efin ic io nes

[0802] L o s térm inos inclu id os a continuación s e u san para d escrib ir la presente invención. Lo s térm in os que no s e definan e sp e cíficam e n te en el presente docum ento adq uirirán el sign ificad o reconocido en la té cn ica por parte de a q u e lla s p e rso n a s con conocim ientos ord inario s que a p lican el térm ino en cuestión en el contexto de su uso para d escrib ir la presente invención.

[0803] El térm ino «a lq u ilo » habrá de h a cer referencia, dentro de su contexto, a un radical o grupo alquilo de hidrocarburo totalm ente saturado, lineal o de ca d e n a ram ificada, que puede estar o pcionalm ente sustitu id o (por ejem plo, con un halógeno, incluid o F). Po r ejem plo, un grupo alquilo puede tener 1, 2, 3, 4, 5,<6>, 7 u<8>átom os de carbono (e s decir, alquilo C r C a ) , 1 , 2 , 3, 4, 5 o<6>átom os de carbono (e s decir, alquilo C<1>- C<6>), o de 1 a 4 átom os de carbono (e s decir,<1>- C<4>). E je m p lo s de grupos alquilo apro p iado s com prenden, entre otros, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-b utilo , terc-butilo, pentilo, isopentilo, terc-pentilo, neopentilo, hexilo, 2-m etilpentilo , 3-m etilpentilo, 2 ,2 -dim etilbutilo y 2,3-dim etilbutilo .

[0804] El término «alquenilo» hace referencia a un grupo de hidrocarburo no aromático que comprende al menos un doble enlace entre átomos de carbono adyacentes y una estructura similar a un grupo alquilo, como se describe en el presente documento. Por ejemplo, un grupo alquenilo puede tener entre 2 y 8 átomos de carbono (es decir, alquenilo C<2>-C<8>), o entre 2 y 4 átomos de carbono (es decir, alquenilo C<2>-C<4>). Ejemplos de grupos alquenilo adecuados comprenden, entre otros, etenilo o vinilo (-<c>H=CH2), alilo (-CH<2>CI-NCH<2>), 1-butenilo (-C=CH-CH<2>CH<3>) y 2-butenilo (-CH<2>CI-NCHCH<2>). El grupo alquenilo puede sustituirse opcionalmente de la manera descrita en el presente documento.

[0806] El término «alquinilo» hace referencia a un grupo de hidrocarburo no aromático que comprende al menos un triple enlace entre átomos de carbono adyacentes y una estructura similar a un grupo alquilo, como se describe en el presente documento. Por ejemplo, un grupo alquinilo puede tener entre 2 y 8 átomos de carbono (es decir, alquinilo C<2>-C<8>), o entre 2 y 4 átomos de carbono (es decir, alquinilo C<2>-C<4>). Ejemplos de grupos alquinilo comprenden, entre otros, acetilénico o etinilo y propargilo. El grupo alquinilo puede sustituirse opcionalmente de la manera descrita en el presente documento.

[0808] El término «acilo» hace referencia al resto -C(O)R en la que el resto carbonilo está unido a R, por ejemplo, -C(O)alquilo. R se puede seleccionar de entre alcoxi, alquilo, cicloalquilo, alquilo inferior (es decir, C<1>-C<4>); alcoxialquilo, incluyendo metoximetilo, aralquilo- incluyendo bencilo, ariloxi-alquilo- como fenoximetilo; arilo incluyendo fenilo opcionalmente sustituido con halógeno alquilo C i a C<4>o alcoxi C i a C<4>. En una realización, el término «acilo» hace referencia a un mono, di o trifosfato.

[0810] El término «acilo inferior» hace referencia a un grupo acilo en el que el resto carbonilo es alquilo inferior (es decir, Ci-C<4>).

[0812] El término «alcoxi» hace referencia a un grupo -OR', en donde -OR' es -O- alquilo, -O-alquenilo, -O-alquinilo, -O-(Co-C<2>)(cicloalquilo), -O-(Co-C<2>)(heterociclo), -O-(Co-C<2>)(arilo) o -O-(Co-C<2>)(heteroarilo), cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

[0814] El término «amino» hace referencia al grupo -NH<2>.

[0816] El término «aminoácido» o «residuo de aminácido» hace referencia a un aminoácido D o L que se produce de forma natural o de forma natural. Los aminoácidos representativos comprenden, entre otros, alanina, p-alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, cistina, ácido glutámico, glutamina, glicina, fenilalanina, histidina, isoleucina, lisina, leucina, metionina, prolina, serina, treonina, valina, triptófano o tirosina, entre otros.

[0818] El término «azido» hace referencia al grupo -N<3>.

[0820] El término «arilo» o «aromático», en contexto, hace referencia a un radical aromático monovalente sustituido (como se describe en el presente documento) o no sustituido que cuenta con un solo anillo (p. ej., fenilo o bencilo) o con anillos condensados (p. ej., naftilo, antracenilo, fenantrenilo, etc.) y puede unirse al compuesto de acuerdo con la presente invención en cualquier posición estable disponible de o de los anillos o según se indique en la estructura química presentada. El grupo arilo puede sustituirse opcionalmente de la manera descrita en el presente documento.

[0821] Los términos «cicloalquilo», «carbociclo» o «carbociclio» hacen referencia a un anillo saturado (es decir, cicloalquilo) o parcialmente insaturado (p. ej., cicloalquenilo, cicloalcadienilo, etc.) que presenta de 3 a 7 átomos de carbono como un monociclo. Los carbociclos bicíclicos tienen de 3 a 7 átomos de anillo y, de forma más típica, 5 o 6 átomos de anillo. Los ejemplos no limitantes de grupos cicloalquilo comprenden ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, l-ciclopent-1-enilo, l-ciclopent-2-enilo, l-ciclopent-3-enilo, ciclohexilo, l-ciclohex-1-enilo, lciclohex-2-enilo y l-ciclo-hex-3-enilo.

[0823] El término «ciano» hace referencia al grupo -CN.

[0825] Los términos «halógeno» o «halo» hacen referencia a cloro, bromo, fluoro o yodo.

[0827] Un sistema de anillo heteroarilo es un anillo saturado o insaturado con uno o más átomos de nitrógeno, oxígeno o sulfuro en el anillo (monocíclico) que comprende, entre otros, imidazol, furilo, pirrol, furanilo, tienilo, tiazol, piridina, pirimidina, purina, pirazina, triazol, oxazol o sistemas de anillos fusionados como indol, quinolina, etc., entre otros, que pueden estar opcionalmente sustituidos como se ha descrito anteriormente. Los grupos heteroarilo comprenden grupos heteroarilo que contienen nitrógeno, como pirrol, piridina, piridona, piridazina, pirimidina, pirazina, pirazol, imidazol, triazol, triazina, tetrazol, indol, isoindol, indolizina, purina, indazol, quinolina, isoquinolina, quinolizina, ftalazina, naftiridina, quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, imidazopiridina, imidazotriazina, pirazinopiridazina, acridina, fenantridina, carbazol, carbazolina, perimidina, fenantrolina, fenaceno, oxadiazol, benzimidazol, pirrolopiridina, pirrolopirimidina y piridopirimidina; heterociclos aromáticos que contienen azufre, como tiofeno y benzotiofeno; heterociclos aromáticos que contienen oxígeno, como furano, pirano, ciclopentapirano, benzofurano e isobenzofurano; y heterociclos aromáticos que comprenden dos o más heteroátomos seleccionados de entre nitrógeno, azufre y oxígeno, tales como tiazol, tiadiazol, isotiazol, benzoxazol, benzotiazol, benzotiadiazol, fenotiazina, isoxazol, furazan, fenoxazina, pirazoloxazol, imidazotiazol, tienofurano, furopirrol, piridoxazina, furopiridina, furopirimidina, tienopirimidina y oxazol, entre otros, todos los cuales pueden estar opcionalmente sustituidos.

[0829] Los términos «heterociclo» o «heterociclio» hacen referencia a un grupo cíclico que comprende al menos un heteroátomo, es decir, O, N o S, y puede ser aromático (heteroarilo) o no aromático. Ejemplos de grupos heterocíclicos no aromáticos para su uso en la presente invención comprenden, por ejemplo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, N-metilpiperazinilo, imidazolinilo, pirazolidinilo, imidazolidinilo, morfolinilo, tetrahidropiranilo, azetidinilo, oxetanilo, oxatiolanilo, piridona, 2-pirrolidona, etilenurea, 1,3-dioxolano, 1,3-dioxano, 1,4-dioxano, ftalimida y succinimida, entre otros, todos los cuales pueden estar opcionalmente sustituidos.

[0831] El término «hidroxilo» hace referencia al grupo -OH.

[0833] El término «nitro» hace referencia al grupo -NO<2>.

[0835] Los términos «sal farmacéuticamente aceptable» o «profármaco» se usan en la presente descripción para describir cualquier forma farmacéuticamente aceptable (como un éster, fosforamidato, tiofosforamidato, éster fosfato, sal de un éster o un grupo relacionado) de un nucleótido de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituido que, al administrarse a un paciente, proporciona el compuesto activo deseado. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables comprenden sales de adición de ácidos orgánicos formadas con ácidos, que generan un anión fisiológicamente aceptable, por ejemplo, tosilato, metanosulfonato, acetato, citrato, malonato, tartrato, succinato, benzoato, ascorbato, a-cetoglutarato y a-glicerofosfato. También pueden formarse sales inorgánicas adecuadas, entre las que se incluyen las sales de sulfato, nitrato, bicarbonato y carbonato. Las sales farmacéuticamente aceptables pueden obtenerse mediante procedimientos estándar bien conocidos en el estado de la técnica, por ejemplo, reaccionando un compuesto suficientemente básico, como una amina, con un ácido adecuado que proporcione un anión fisiológicamente aceptable. También pueden prepararse sales de ácidos carboxílicos con metales alcalinos (por ejemplo, sodio, potasio o litio) o metales alcalinotérreos (por ejemplo, calcio).

[0836] El término «profármaco farmacéuticamente aceptable» hace referencia a un compuesto que se metaboliza, por ejemplo, hidrolizado u oxidado, en el hospedador para formar el compuesto de la presente invención. Los ejemplos típicos de profármacos comprenden compuestos que tienen grupos protectores biológicamente lábiles en un resto funcional del compuesto activo. Los profármacos comprenden compuestos que pueden oxidarse, reducirse, aminarse, desaminarse, hidroxilarse, deshidroxilarse, hidrolizarse, deshidrolizarse, alquilarse, desalquilarse, acilarse, desacilarse, fosforilarse, desfosforilarse, tiofoshoramidarse, detiofosoramidarse, foshoramidarse o desfosforamidarse para producir el compuesto activo. Los compuestos de la presente invención poseen actividad antiviral contra el VHC o se metabolizan para formar un compuesto que muestra dicha actividad. El nucleósido de purina p-D-2'-D-2'-afluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituido también puede administrarse como un lípido 5'-fosfoéter, un bisfosforamidato, un fosforamidato 3',5'-cíclico, un tiofosforamidato 3',5'-cíclico, un conjugado<d>T<e>, un derivado mixto fosforamidato-SATE o un derivado «SATE».

[0838] El término «ácido fosfónico» hace referencia al grupo -P(O)(OH)<2>.

[0840] En una realización, el término base de purina o pirimidina comprende, entre otros, adenina, N6-alquilpurinas, N6-acilpurinas (en donde acilo es -C(O)alquilo, -C(O)(arilo)alquilo C<0>-C<4>, o -C(O)(alquilo Co-C^arilo), N6-bencilpurina, N6-halopurina, N6-vinilpurina, N6-acetilénico purina, N6-acil purina, N6-hidroxialquil purina, N6-tioalquilo purina, N2-alquilpurinas, N2-alquilo-6-tiopurinas, timina, citosina, 5-fluorocitosina, 5-metilcitosina, 6-azapirimidina, incluyendo 6-azacitosina, 2- y/o 4-mercaptopirmidina, uracilo, 5-halouracilo, incluyendo 5-fluorouracilo, C5-alquilpirimidinas, C5-bencilpirimidinas, C5-halopirimidinas, C5-vinilpirimidina, C5-pirimidina acetilénica, C5-acil pirimidina, C5-hidroxialquilo purina, C5-amidopirimidina, C5-cianopirimidina, C5-nitropirimidina, C5-aminopirimidina, N2-alquilpurinas, N2-alquilo-6-tiopurinas, 5-azacitidinilo, 5-azauracil, triazolopiridinila, imidazol-piridinila, pirrol-pirimidinila y pirazolopirimidinila. Las bases de purina comprenden, entre otras, guanina, adenina, hipoxantina, 2,6-diaminopurina y 6-cloropurina. Los grupos funcionales de oxígeno y nitrógeno en la base se pueden proteger según sea necesario o deseado. Los grupos protectores adecuados son bien conocidos por las personas con conocimientos ordinarios en la técnica y comprenden bencilo, trimetilsililo, dimetilhexilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo, tritilo, grupos alquilo y gruposacilo, como acetilo y propionil; metanosulfonilo y p-toluenosulfonilo. De forma alternativa, la base de purina o pirimidina se puede sustituir opcionalmente de modo que forme un profármaco viable, que se puede escindir in vivo. Ejemplos de sustituyentes apropiados comprenden un resto de acilo.

[0841] Los términos «sustituido» u «opcionalmente sustituido» indican que el resto puede tener al menos un sustituyente adicional que comprende, entre otros, halógeno (F, Cl, Br, I), OH, fenilo, bencilo, N3, CN, acilo, alquilo, incluyendo metilo; alquenilo, alquinilo, alcoxi, haloalquilo; incluyendo CHF2, CH2F y CF3; etc. En una realización, los términos «sustituido» u «opcionalmente sustituido» indican que el resto puede tener al menos un sustituyente adicional que comprende, entre otros, azido, ciano, halógeno (fluoro, cloro, bromo o yodo), alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterociclo, arilo, heteroarilo, haloalquilo, hidroxilo, alcoxi, amino, -NH (alquilo C1-C6no sustituido), -NH(alquilo C1-C6sustituido), -NH-(alquilo Cü^Xcicloalquilo C3-C8), -NH-(alquilo Cü-C2)(heterociclo C3-C8),-NH-(alquilo Cü-C2)(arilo), -N(alquilo C1-C6no sustituido^ , -N(alquilo C1-C6no sustituido)(alquilo C1-C6sustituido), -N(alquilo C1-C6sustituido^ ,-NH-(alquilo Co-C2)(cicloalquilo C3-C8), -NH-(alquilo Co-C2)(heterociclo C3-C8),-NH-(alquilo Co-C2(arilo), acilo, nitro, ácido sulfónico, sulfato, ácido fosfónico, fosfato, fosfonato o tiol.

[0842] El término «ésteres de sulfonato», representado por la fórmula R14S(O)2OR15, comprende R14en donde R14es alquilo, haloalquilo, aralquilo o arilo. R15es alquilo, arilo o aralquilo.

[0843] El término «ácido sulfónico» hace referencia al grupo -SO2OH.

[0844] El término «tiol» se refiere al grupo -SH.

[0845] El término «grupo protector de nitrógeno», según se usa en el presente documento, hace referencia a un resto que está unido covalentemente al nitrógeno y que puede eliminarse y, por lo general, reemplazarse con hidrógeno, cuando sea apropiado. Por ejemplo, un grupo protector de nitrógeno puede ser un grupo que se elimina in vivo después de la administración a un hospedador, in vitro por una célula, o puede ser eliminado durante un proceso de fabricación. Los grupos protectores de nitrógeno adecuados útiles en la presente invención son descritos por Greene y Wuts en Protective Groups in Organic Synthesis (grupos protectores en la síntesis orgánica) (1991) Nueva York, John Wiley and Sons, Inc.

[0846] El término «grupo protector de oxígeno», según se usa en el presente documento, hace referencia a un resto que está unido covalentemente al oxígeno y que puede eliminarse y, por lo general, reemplazarse con hidrógeno, cuando sea apropiado. Por ejemplo, un grupo protector de oxígeno puede ser un grupo que se elimina in vivo después de la administración a un hospedador, in vitro por una célula, o puede ser eliminado durante un proceso de fabricación. Los grupos protectores de oxígeno adecuados útiles en la presente invención son descritos por Greene y Wuts en Protective Groups in Organic Synthesis (grupos protectores en la síntesis orgánica) (1991) Nueva York, John Wiley and Sons, Inc.

[0847] El término «fosfato» hace referencia al grupo -OP(O)(OH)2.

[0848] El término «éster de fosfato» hace referencia a mono, di y trifosfatos, a menos que se indique lo contrario.

[0849] Los términos «fosfoamidato», «fosforamidato» o «fosforoamidato» son un resto que tiene un fósforo unido a tres grupos de oxígeno y una amina (que puede sustituirse opcionalmente). Los fosforamidatos adecuados útiles en la presente invención fueron descritos por Madela, Karolina y McGuigan en 2012, «Progress in the development of anti­ hepatitis C virus nucleoside and nucleotide prodrugs» (avances en el desarrollo de profármacos nucleósido y nucleótido contra el virus de la hepatitis C),Future Medicinal Chemistry4(5), páginas 625-65010: 1021/jm300074y, y por Dominique, McGuigan y Balzarini en 2004, «Aryloxy Phosphoramidate Triesters as Pro-Tides» (triésteres de fosforamidato de ariloxi como pro-tides),Mini Reviews in Medicinal Chemistry4(4), páginas 371-381. Fosforamidatos adicionales útiles en la presente invención se describen en las patentes dee

E.UU. n.° 5,233,031, 7,115,590, 7,547,704, 7,879,815, 7,888,330, 7,902,202, 7,951,789, 7,964,580, 8,071,568; 8,148,349, 8,263,575, 8,324,179, 8.334.270, 8,552,021, 8,563,530, 8,580,765, 8,735,372, 8,759,318; EP 2120565; EP 1143995; 6,455,513 y 8.334.270. Otros fosforamidatos se describen en las patentes de nucleósidos descritas en los Antecedentes de la invención.

[0850] Los grupos de fosforamidato para el uso en la presente invención quedan definidos por la reivindicación 1. Los grupos de fosforamidato comprenden aquellos de las estructuras:

[0851]

[0853] O tros fosforam idatos com p renden aq uello s de la estructura:

[0854]

[0856] en donde:

[0857] R P1 e s un grupo alquilo lineal, ram ificado o c íc lico opcionalm ente sustituido, o un grupo arilo, heteroarilo o h eterocíclico o pcionalm ente sustituido, o una co m b in ación v in cu la d a de los m ism os; y

[0858] R P2 e s un grupo -N R N1R N2 o un grupo B';

[0859] en donde:

[0860] R N1 y R N2 so n ca d a uno indep endientem ente H, alquilo Ci-8, (cicloalquilo C<3>- C<7>)alquilo C<0>- C<4>-, (arilo)alquilo C<0>- C<4>-, (heterociclo C<3>- C<6>)alquilo C<0>- C<4>, o (heteroarilo)alquilo C<0>- C<4>-; que pueden se r sustitu id o s opcionalm ente; o

[0861] R N1 y R N2 junto con el átom o de nitrógeno al que están unidos, s e unen para form ar un anillo heterocíclico de 3 a 7

[0862] m iem bros;

[0864]

[0866] B' e s un grupo

[0867] en donde:

[0868] R 16 e s hidrógeno, alquilo ( C<1>- C<8>), alquenilo ( C<2>- C<8>), alquin ilo ( C<2>- C<8>), (cicloalquilo C<3>- C<8>)alquilo C<0>- C<4>-, (arilo)alquilo C<0>- C<4>-, (heterociclo C<3>- C<6>)alquilo C<0>- C<4>-, (heteroarilo)alquilo C<0>- C<4>, o la ca d e n a lateral de un am ino ácid o, por ejem plo, una ca d e n a lateral de un a m in o ácid o (según s e d e scrib e en el presente docum ento) a m enudo se le c c io n a d a

[0869] de entre el grupo consistente en alan in a, p -a la n in a, arginina, a sp arag in a , ácido aspártico, ciste ína, cistina, ácido

[0870] glutám ico, glutam ina, glicina, fen ila lan in a, histidina, iso leu cin a, lisina, leu cina, m etionina, prolina, serin a, treonina, va lin a , triptófano o tirosina (a m enudo R 16 e s hidrógeno, metilo, isopropilo o isobutilo);

[0871] R 17 e s hidrógeno, alquilo ( C<1>- C<8>), alquenilo ( C<2>- C<8>), alquin ilo ( C<2>- C<8>), (cicloalquilo C<3>- C<8>)alquilo C<0>- C<4>-, (arilo)alquilo C<0>- C<4>-, (heterociclo C<3>- C<6>)alquilo C<0>- C<4>-, (heteroarilo)alquilo C<0>- C<4>, o la ca d e n a lateral de un am ino ácid o, por ejem plo, una ca d e n a lateral de un a m in o ácid o (según s e d e scrib e en el presente docum ento) a m enudo se le c c io n a d a

[0872] de entre el grupo consistente en alan in a, p -a la n in a, arginina, a sp arag in a , ácido aspártico, ciste ína, cistina, ácido

[0873] glutám ico, glutam ina, glicina, fen ila lan in a, histidina, iso leu cin a, lisina, leu cina, m etionina, prolina, serin a, treonina, va lin a , triptófano o tirosina (a m enudo R 17 e s hidrógeno, metilo, isopropilo o isobutilo);

[0874] R 18 e s hidrógeno o alquilo C<1>- C<3>; o

[0875] R 16 y R 17 pueden form ar un cicloalq uilo (C<3>- C<7>) o un grupo h eterocíclico ( C<3>- C<7>); o

[0876] R 18 y R 16 o R 17 pueden form ar un grupo heterocíclico (C<3>- C<6>); y

[0877] R 19 e s hidrógeno, alquilo ( C<1>- C<6>), alquenilo ( C<3>- C<6>), alquin ilo ( C<3>- C<6>), (cicloalquilo C<3>- C<8>)alquilo C<0>- C<4>-, (arilo)alquilo

[0878] C<0>- C<4>-, (heterociclo C<3>- C<6>)alquilo C<0>- C<4>-, (heteroarilo)alquilo C<0>- C<4>-; o

[0880]

[0882] B' e s un grupo

[0883] en donde:

[0884] R 20 e s hidrógeno, alquilo ( C<1>- C<3>), (ciclo alq uilo C<3>- C<8>)alquilo C<0>- C<4>-, (arilo)alquilo C<0>- C<4>-, (heterociclo C<3>- C<6>)alquilo C<0>

[0885] C4- o (heteroarilo)alquilo C0-C4-;

[0886] R21es hidrógeno, alquilo (C1-C3), (cicloalquilo C3-C8)alquilo C0-C4-, (arilo)alquilo C0-C4-, (heterociclo C3-C6)alquilo Co-C4- o (heteroarilo)alquilo C0-C4-; y

[0887] R18y R19son tal y como se han definido anteriormente.

[0888] Los grupos RP1preferidos comprenden fenilo, naftilo y heteroarilo monocíclico, opcionalmente sustituidos, especialmente aquellos grupos (particularmente grupos lipofílicos) que aumentan la biodisponibilidad de los compuestos en las células del paciente y que presentan toxicidad reducida, mayor índice terapéutico y mejores propiedades farmacocinéticas (los compuestos se metabolizan y excretan más lentamente).

[0889] El término fosforamidato se utiliza en toda la descripción para describir un grupo presente que se encuentra en la posición 5' o 3' del anillo furanoso del compuesto nucleósido y que forma una forma de profármaco del compuesto nucleósido. En una realización, los fosforamidatos se pueden encontrar en las posiciones 5' y 3' del anillo furanoso del compuesto nucleósido y forman una forma de profármaco del compuesto nucleósido. En otra realización, el fosforamidato que se encuentra en la posición 5' del anillo furanoso del nucleósido puede formar un compuesto de fosforamidado cíclico formando un enlace con el sustituyente 3'-hidroxilo en la posición 3' del anillo furanoso del compuesto nucleósido y formar una forma de profármaco del compuesto nucleósido.

[0890] Los términos «tiofosfoamidato», «tiofosforamidato» o «tiofosforoamidato» son un resto que tiene un fósforo unido a azufre, dos grupos de oxígeno y una amina (que puede sustituirse opcionalmente). Tiofosforamidatos adicionales útiles en la presente invención se describen en las patentes de EE. UU. n.° 8,772,474 y WO 2012/040124.

[0891] Los grupos de tiofosforamidato comprenden aquellos de las estructuras:

[0893]

[0894]

[0896] Otros tiofosforamidatos comprenden aquellos de la estructura:

[0898]

[0901] en donde:

[0902] RP1es un grupo alquilo lineal, ramificado o cíclico opcionalmente sustituido, o un grupo arilo, heteroarilo o heterocíclico opcionalmente sustituido, o una combinación vinculada de los mismos; y

[0903] RP2es un grupo -NRN1RN2o un grupo B';

[0904] en donde:

[0905] RN1y RN2son cada uno independientemente H, alquilo C1-C8, (cicloalquilo C3-C7)alquilo C0-C4-, (arilo)alquilo C0-C4-, (heterociclo C3-C6)alquilo C0-C4-, o (heteroarilo)alquilo C0-C4-; o

[0906] RN1y RN2junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, se unen para formar un anillo heterocíclico de 3 a 7 miembros;

[0908] B' es un grupo

[0909] en donde:

[0910] R 16 e s hidrógeno, alquilo ( C<1>- C<8>), alquenilo ( C<2>- C<8>), alquin ilo ( C<2>- C<8>), (cicloalquilo C<3>- C<8>)alquilo C<0>- C<4>-, (arilo)alquilo C<0>- C<4>-, (heterociclo C<3>- C<6>)alquilo C<0>- C<4>-, (heteroarilo)alquilo C<0>- C<4>, o la ca d e n a lateral de un am ino ácid o, por ejem plo, una ca d e n a lateral de un a m in o ácid o (según s e d e scrib e en el presente docum ento) a m enudo se le c c io n a d a

[0911] de entre el grupo consistente en alan in a, p -a la n in a, arginina, a sp arag in a , ácido aspártico, ciste ína, cistina, ácido

[0912] glutám ico, glutam ina, glicina, fen ila lan in a, histidina, iso leu cin a, lisina, leu cina, m etionina, prolina, serin a, treonina, va lin a , triptófano o tirosina (a m enudo R 16 e s hidrógeno, metilo, isopropilo o isobutilo);

[0914] R 17 e s hidrógeno, alquilo ( C<1>- C<8>), alquenilo ( C<2>- C<8>), alquin ilo ( C<2>- C<8>), (cicloalquilo C<3>- C<8>)alquilo C<0>- C<4>-, (arilo)alquilo C<0>- C<4>-, (heterociclo C<3>- C<6>)alquilo C<0>- C<4>-, (heteroarilo)alquilo C<0>- C<4>, o la ca d e n a lateral de un am ino ácid o, por ejem plo, una ca d e n a lateral de un am ino ácid o (según s e d escrib e en el presente docum ento) a m enudo se le cc io n a d a

[0915] de entre el grupo consistente en alan in a, p -a la n in a, arginina, a sp arag in a , ácido aspártico, ciste ína, cistina, ácido

[0916] glutám ico, glutam ina, glicina, fen ila lan in a, histidina, iso leu cin a, lisina, leu cina, m etionina, prolina, serin a, treonina, va lin a , triptófano o tirosina (a m enudo R 17 e s hidrógeno, metilo, isopropilo o isobutilo);

[0918] R 18 e s hidrógeno o alquilo C<1>- C<3>; o

[0920] R 16 y R 17 pueden form ar un cicloalq uilo (C<3>- C<7>) o un grupo h eterocíclico ( C<3>- C<7>); o

[0922] R 18 y R 16 o R 17 pueden form ar un grupo heterocíclico (C<3>- C<6>); y

[0924] R19es hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C3-C6), alquinilo (C3-C6), (cicloalquilo C3-C8)alquilo C0-C4-, (arilo)alquilo

[0925] C0-C4-, (heterociclo C3-C6)alquilo C0-C4-, (heteroarilo)alquilo C0-C4-; o

[0927]

[0929] <B' e s un grupo>y

[0931] R 18, R 19, R 20 y R 21 so n tal y com o s e ha definido anteriorm ente.

[0933] Lo s grupos R P1 preferidos com p renden fenilo, naftilo y heteroarilo m onocíclico, o pcionalm ente sustituidos, e sp e cia lm e n te aquellos grupos (particularm ente grupos lipofílicos) que aum entan la b iodisponibilidad de los co m p u esto s en la s c é lu la s del paciente y que presentan toxicidad reducida, m ayor ín d ice terapéutico y m ejores prop ied ad es fa rm a co cin é tica s (los com p uesto s s e m etabolizan y excretan m ás lentam ente).

[0935] El tiofosforam idato p uede encontrarse en la s p o sic io n e s 5' o 3' del anillo furan o so del com puesto n u cleósido para

[0936] form ar una form a de profárm aco del com puesto nucleósido. En una realización, los tiofosforam idatos s e pueden encontrar en la s p o sic io n e s 5' y 3' del anillo furanoso del com puesto nucleósido y form an una form a de profárm aco

[0937] del com p uesto nucleósido. En otra realizació n, el tiofosforam idato que s e encuentra en la p osición 5' del anillo

[0938] furano so del nu cleósid o p uede form ar un com puesto de tiofosforam idato c íc lico form ando un e n la ce con el sustituyente 3'-hidroxilo en la posición 3' del anillo furanoso del com puesto nucleósido y form ar una form a de

[0939] profárm aco del com puesto nucleósido.

[0941] El térm ino «co n fig u ració n D », tal com o s e utiliza en el contexto de la presen te invención , s e refiere a la configuración principal que imita la configuración natural de la s fra cc io n e s de azúcar, en contraposición a los n u cleó sid o s de configuración « L » o que ocurren de form a no natural. El térm ino « p » o «a n ó m ero p » s e utiliza con referencia a a n álo g o s de n u cleó sid o s en los que la b a se del nucleósido está configurada (dispuesta) por e n cim a del plano del resto furano so en el análo go de nucleósido.

[0943] Lo s térm inos «co ad m in istra r» y «co ad m in istra ció n » o terapia co m b in ad a s e utilizan para d escrib ir la adm inistración

[0944] de al m enos uno de los co m p u e sto s 2 '-d e so x i-2 '-a -f lu o ro -2 '-p -C -n u c le ó s id o de acu erdo con la presente invención en

[0945] com b in ación con al m eno s otro agente activo, por ejem plo, cuando correspond a, al m eno s un agente a n tiV H C

[0946] adic io nal, incluyend o otros a g en tes 2 '-d e s o x i-2 '-a -f lu o ro -2 '-p -C -n u c le ó s id o s que s e d escrib en en el presente

[0947] docum ento. El m om ento de la co ad m inistració n d ebe determ inarlo el e sp e c ia lista m édico que trata al paciente. En

[0948] o casio n e s, e s preferible que los a g en tes se adm inistren al m ism o tiempo. D e form a alternativa, los fárm a co s se le c c io n a d o s para la terapia co m b in ad a pueden adm inistrarse en diferentes m om entos al paciente. Po r supuesto, cu an d o hay m ás de una infección viral o de otro tipo, u otra afección, los com p uestos p resen tes pueden com b in arse con otros a g en tes para tratar e s a otra infección o afección se g ú n s e a n ecesario .

[0949] El térm ino «h o sp e d a d o r» , se g ú n s e e m p lea en el presente docum ento, h a ce referencia a un o rganism o u n ice lu la r o m ulticelular en el que s e puede replicar un v iru s V H C , in c lu id as lín e a s ce lu lare s y a n im ales, y típ icam ente hace referencia a un hum ano. El térm ino h osped ad or h a ce referencia e sp e cíficam e n te a c é lu la s infectadas, cé lu la s tra n sfecta d a s con la totalidad o parte de un genom a de V H C , y a a n im a le s, en particular, prim ates (incluidos ch im p an cé s) y a hu m anos. En la m ayo ría de la s a p lica c io n e s a n im a le s de la presente invención, el h o sp ed ad o r e s un paciente hum ano. S in em bargo, la presente invención prevé claram en te a p lica c io n e s ve terin a ria s en d eterm inadas in d ic a c io n e s (com o en ch im p an cés). E l h o sp ed ad o r puede ser, por ejem plo, un bovino, equino, aviar, can ino , felino, etc.

[0950] Sustitu ció n isotópica

[0951] L a presente invención com p rend e com p uesto s y el uso de com p uesto s con su stitu cio n es isotó p icas d e se a d a s de átom os, en can tid ad es su p e rio re s a la a b u n d a n c ia natural del isótopo, es decir, enriq u ecid o s. Los isótopos son átom os que cuentan con el m ism o núm ero atóm ico, pero con un núm ero de m a sa diferente, e s decir, el m ism o núm ero de protones, pero un núm ero diferente de neutrones. A modo de ejem plo general y sin lim itación, los isótopos de hidrógeno, por ejem plo, el deuterio (2H) y el tritio (3H), s e pueden u sar en cu a lq u ier parte de las estructuras d escritas. D e form a alternativa o ad ic io n al, s e p ueden u sa r los isótopos de carbono, p. ej., 13C y 14C . Una sustitu ción isotó p ica preferida e s el deuterio por hidrógeno en una o m ás u b ica c io n e s de la m o lécu la para m ejorar el rendim iento del fárm aco. El deuterio puede un irse en una ub icació n de ruptura de e n la ce durante el m etab olism o (un efecto de isótopo cinético de a -d euterio) o ce rca del sitio de ruptura del e n la ce (un efecto de isótopo cinético de pdeuterio). Lo s docum entos de A chillion P h a rm ace u tica ls, Inc. (W O /2014 /169278 y W O /2014 /169280 ) d escrib en la deuteración de nucleótidos con el propósito de m ejorar s u s p rop ied ad es fa rm a co cin é tica s o farm a co d in á m icas, incluyend o la posición 5 de la m olécula.

[0952] L a sustitución por isótopos com o el deuterio puede ofrecer c iertas ve n ta ja s te ra p é u ticas resultantes de una m ayor estab ilid ad m etabólica, com o, por ejem plo, el aum ento de la v id a m edia in vivo o la reducción de los requisitos de d osificación. La sustitución de deuterio por hidrógeno en un sitio de catabolism o puede reducir la ve lo cid ad del m etabolism o o elim inarlo en e se enlace. E n cu a lq u ier posición del com puesto en la que pueda estar presente un átom o de hidrógeno, el átom o de hidrógeno puede se r cu a lq u ier isótopo de hidrógeno, incluyend o protio (1H), deuterio (2H) y tritio (3H). Por co nsigu iente, la referencia en el presen te docum ento a un com p uesto a b a rca to d a s la s fo rm as isotó p icas posibles, sa lv o que el contexto indiq ue claram en te lo contrario.

[0953] El térm ino análogo «isotó p icam ente m a rca d o » hace referencia a un análo go que e s un «a n álo g o deuterado», un «a n álo g o m arcado con 13C » o un «an álo g o d euterad o/m arcado con 13C » . E l térm ino «a n álo g o d euterad o» sign ifica un com puesto descrito en el presente docum ento, en el cual un isótopo H, e s decir, hidrógeno/protio (1H), es sustitu ido por un isótopo H, e s decir, deuterio (2H). L a sustitución de deuterio puede se r parcial o com pleta. La sustitu ción parcial de deuterio s ig n ifica que al m eno s un hidrógeno e s sustitu ido por al m en o s un deuterio. En c iertas re a liza cio n e s, el isótopo está enriq u ecid o al 90, 95 o 99 % o m ás en un isótopo en cu a lq u ie r ub icació n de interés. En a lg u n a s re a liza cio n e s, e s el deuterio el que está enriquecido al 90, 95 o 99 % en una u b icación d e se a d a . A m enos que s e indique lo contrario, la d euteración e s de al m eno s el 80 % en la ub ica ció n se le c c io n a d a . La deuteración del n u cleósido puede producirse en cu a lq u ier hidrógeno reem p lazab le que proporcione los resultad os d esea d o s.

[0954] III. M étodos de tratam iento o profilaxis

[0955] El térm ino «tratam iento», se g ú n s e em plea en el presente docum ento, h a ce referencia a la adm inistració n de un com p uesto activo a un hosp ed ad o r que está infectado con un v iru s V H C .

[0956] El térm ino «profiláctico » o preventivo, cu an d o s e u sa, hace referencia a la adm inistración de un com p uesto activo para p revenir o reducir la probabilidad de que s e prod uzca un trastorno viral. La presente invención com p rend e tanto el tratam iento com o la s te ra p ia s p rofilácticas o preventivas. E n una realizació n , el com puesto activo s e ad m in istra a un h o sp ed ad o r que ha estad o expuesto a y, por tanto, está en riesg o de infección de una infección por el v iru s de la hepatitis C .

[0957] S e proporcionan com p uesto s para su uso en el tratam iento de un v iru s de la hepatitis C de a cu e rd o con las re iv in d icac io n e s, lo que co m p rend e fo rm as de V H C re sisten tes a fá rm a co s y m ultirresistentes, a s í com o estad o s deenfermedad, condiciones o complicaciones de una infección por VHC, incluyendo cirrosis y hepatotoxicidades relacionadas, así como otras condiciones secundarias a la infección por VHC, tales como debilidad, pérdida de apetito, pérdida de peso, aumento mamario (especialmente en hombres), sarpullidos (especialmente en las palmas), dificultades en la coagulación sanguínea, arañas vasculares en la piel, confusión, coma (encefalopatía), acumulación de líquido en la cavidad abdominal (ascitis), várices esofágicas, hipertensión portal, insuficiencia renal, esplenomegalia, disminución de células sanguíneas, anemia, trombocitopenia, ictericia y cáncer hepatocelular, entre otros. El método consiste en administrar a un hospedador que lo necesite una cantidad efectiva de al menos un nucleótido de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituido según se describe en el presente documento, opcionalmente en combinación con al menos un agente bioactivo adicional, por ejemplo, un agente antiVHC adicional, además en combinación con un aditivo vehículo y/o excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0959] En otro aspecto descrito en el presente documento, pero no reivindicado explícitamente, se proporciona un método para la prevención o profilaxis de una infección por VHC o de un estado de enfermedad, o de un estado patológico relacionado, condición o complicación derivada de una infección por VHC, incluyendo cirrosis y hepatotoxicidades relacionadas, debilidad, pérdida de apetito, pérdida de peso, aumento mamario (especialmente en hombres), sarpullidos (especialmente en las palmas), dificultades en la coagulación sanguínea, arañas vasculares en la piel, confusión, coma (encefalopatía), acumulación de líquido en la cavidad abdominal (ascitis), várices esofágicas, hipertensión portal, insuficiencia renal, esplenomegalia, disminución de células sanguíneas, anemia, trombocitopenia, ictericia y cáncer hepatocelular, entre otros, en donde dicho método comprende la administración a un paciente en riesgo de una cantidad eficaz de al menos un compuesto de acuerdo con la presente invención, tal como se ha descrito anteriormente, en combinación con un vehículo, aditivo o excipiente farmacéuticamente aceptable, opcionalmente en combinación con otro agente antiVHC. En otra realización, los compuestos activos de la invención se pueden administrar a un paciente después de un trasplante hepático relacionado con la hepatitis para proteger el nuevo órgano.

[0961] El nucleótido de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituido 5'-estabilizado se puede administrar si se desea como cualquier sal o profármaco que, al administrarse al receptor, sea capaz de proporcionar directa o indirectamente el compuesto parental o que exhiba actividad por sí mismo. Ejemplos no limitativos son las sales farmacéuticamente aceptables y un compuesto que ha sido modificado en un grupo funcional, como una función de hidroxilo o amino, para modificar la actividad biológica, las propiedades farmacocinéticas, la vida media, la liberación controlada, la lipofilicidad, la cinética de absorción, la facilidad de fosforilación al 5'-trifosfato activo o la eficiencia de administración mediante la vía de administración deseada del compuesto. Los métodos para modificar las propiedades de un compuesto activo con el propósito de lograr las propiedades objetivo son conocidos por las personas con conocimientos ordinarios en la técnica o pueden evaluarse fácilmente mediante métodos estándar, por ejemplo, acilación, fosforilación, tiofosforamidación, fosforamidación, fosfonación, alquilación o pegilación.

[0963] IV. Composiciones farmacéuticas

[0965] En un aspecto de la invención, las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención son conforme a las reivindicaciones, opcionalmente en combinación con al menos otro compuesto activo.

[0967] En un aspecto de la invención, las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención son conforme a las reivindicaciones, opcionalmente en combinación con al menos otro antiviral, como un agente antiVHC.

[0969] La invención comprende composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad efectiva para tratar una infección por el virus de la hepatitis C de uno de los compuestos de nucleótido de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituido de la presente invención o de su sal, en un vehículo farmacéuticamente aceptable. En una realización alternativa descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, la invención comprende composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad efectiva para prevenir una infección por el virus de la hepatitis C de uno de los compuestos de nucleótido de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituido de la presente invención o de su sal o profármaco, en un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0971] Las personas con conocimientos ordinarios en la técnica reconocerán que una cantidad terapéuticamente efectiva variará según la infección o condición que deba tratarse, su gravedad, el régimen de tratamiento que se emplee, las propiedades farmacocinéticas del agente usado, así como el paciente o sujeto (animal o humano) que vaya a tratarse, y dicha cantidad terapéutica puede ser determinada por el médico o especialista.

[0973] Los compuestos de nucleótido de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituidoestabilizados en posición 5' de acuerdo con la presente invención pueden formularse en una mezcla con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Por lo general, es preferible administrar la composición farmacéutica en una forma de administración oral, pero ciertas formulaciones pueden administrarse por vía parenteral, intravenosa, intramuscular, tópica, transdérmica, bucal, subcutánea, en supositorio u otra vía, incluyendo pulverización intranasal. Las formulaciones intravenosas e intramusculares suelen administrarse en solución salina estéril. Las personas con conocimientos ordinarios en la técnica podrán modificar las formulaciones para hacerlas más solubles en agua u otro vehículo; por ejemplo, esto puede lograrse fácilmente mediante modificaciones menores (fórmulación en forma de sal, esterificación, etc.), que forman parte de las habilidades ordinarias en la técnica. También forma parte de las habilidades ordinarias en la técnica modificar la vía de administración y el régimen de dosificación de un compuesto determinado con el propósito de gestionar las propiedades farmacocinéticas de los presentes compuestos para obtener el máximo efecto beneficioso en los pacientes.

[0975] En determinadas formas de dosificación farmacéuticas, se prefieren las formas de profármaco de los compuestos descritos en el presente documento, pero no reivindicados explícitamente, incluyendo en particular los derivados acilados (acetilados u otros) y éter (alquilo y relacionados), ésteres fosfato, tiofosforamidatos, fosforamidatos y diversas formas de sal de los presentes compuestos. Las personas con conocimientos ordinarios en la técnica reconocerán cómo modificar fácilmente los presentes compuestos a formas de profármaco con el propósito de facilitar la entrega de los compuestos activos a un sitio específico dentro del organismo hospedador o el paciente. La persona con conocimientos ordinarios en la técnica también aprovechará los parámetros farmacocinéticos favorables de las formas de profármaco, cuando sea aplicable, para administrar los presentes compuestos en un sitio específico dentro del organismo hospedador o paciente con el propósito de maximizar el efecto previsto del compuesto.

[0977] La cantidad de compuesto incluida en las formulaciones terapéuticamente activas de acuerdo con la presente invención es una cantidad efectiva para el tratamiento de la infección por VHC. Por lo general, una cantidad terapéuticamente efectiva del presente compuesto en forma de dosificación farmacéutica suele estar comprendida entre alrededor de 0 , 0 0 1 mg/kg y alrededor de 1 0 0 mg/kg al día o más; con mayor frecuencia, de algo menos de alrededor de 0,1 mg/kg a más de alrededor de 25 mg/kg del paciente al día o considerablemente más, dependiendo del compuesto usado, la condición o la infección tratada, así como de la vía de administración. El compuesto nucleósido activo de acuerdo con la presente invención se administra con frecuencia en cantidades comprendidas entre alrededor de 0,1 mg/kg y alrededor de 15 mg/kg del paciente al día, dependiendo de las propiedades farmacocinéticas del agente en el paciente. Este rango de dosificación produce por lo general concentraciones en sangre efectivas del compuesto activo que pueden variar entre alrededor de 0 , 0 0 1 y alrededor de 1 0 0 , o entre alrededor de 0,05 y alrededor de cien microgramos/cc de sangre en el paciente.

[0979] Con frecuencia, para tratar, prevenir o retrasar la aparición de estas infecciones y/o reducir la probabilidad de una infección por el virus VHC, o de un estado de enfermedad, condición o complicación secundaria de VHC, las composiciones se administrarán en forma de dosificación oral en cantidades comprendidas desde alrededor de 250 microgramos hasta alrededor de 500 mg o más, al menos una vez al día; por ejemplo, al menos 25, 50, 100, 150, 250 o 500 miligramos, hasta cuatro veces al día. Los presentes compuestos se administran con frecuencia por vía oral, pero también pueden administrarse por vía parenteral, tópica o en forma de supositorio, así como por vía intranasal, en forma de un aerosol nasal o según se describa en el presente documento.

[0981] En el caso de la coadministración de los presentes compuestos en combinación con otro compuesto antiVHC según se describe en el presente documento, la cantidad del compuesto de acuerdo con la presente invención que se debe administrar varía desde alrededor de 0,01 mg/kg del paciente hasta alrededor de 500 mg/kg o más, o considerablemente más, dependiendo del segundo agente que se va a coadministrar y su potencia contra el virus, de la condición del paciente y de la gravedad de la enfermedad o infección que se va a tratar, así como de la vía de administración. El otro agente antiVHC puede administrarse, por ejemplo, en cantidades comprendidas entre alrededor de 0,01 mg/kg y alrededor de 500 mg/kg. En ciertas realizaciones preferidas, estos compuestos pueden administrarse con frecuencia en una cantidad comprendida entre alrededor de 0,5 mg/kg y alrededor de 50 mg/kg o más (habitualmente hasta alrededor de 1 0 0 mg/kg), lo que por lo general depende de las propiedades farmacocinéticas de los dos agentes en el paciente. Estos rangos de dosificación producen, por lo general, concentraciones en sangre efectivas del compuesto activo en el paciente.

[0983] En una realización descrita en el presente documento, pero no reivindicada explícitamente, una cantidad efectiva para la profilaxis o prevención de las composiciones de acuerdo con la presente invención se encuentra dentro del mismo rango de concentración establecido anteriormente para la cantidad terapéuticamente efectiva, y suele ser la misma que una cantidad terapéuticamente efectiva.

[0985] La administración del compuesto activo puede variar desde continua (goteo intravenoso) hasta diversasadministraciones orales o intranasales diarias (por ejemplo, Q.I.D.), o administración transdérmica, y puede comprender vías de administración oral, tópica, parenteral, intramuscular, intravenosa, subcutánea, transdérmica (que puede incluir un agente potenciador de penetración), bucal y en forma de supositorio, entre otras vías de administración. También pueden utilizarse tabletas orales recubiertas entéricamente con el propósito de mejorar la biodisponibilidad de los compuestos para una vía oral de administración. La forma de dosificación más efectiva dependerá de la biodisponibilidad/propiedades farmacocinéticas del agente seleccionado particular, así como de la gravedad de la enfermedad del paciente. Se prefieren particularmente las formas de dosificación oral, debido a la facilidad de administración y al posible buen cumplimiento por parte del paciente.

[0986] Para preparar las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención, una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más de los compuestos de acuerdo con la presente invención se suele mezclar íntimamente con un vehículo farmacéuticamente aceptable, de acuerdo con técnicas convencionales de fórmulación farmacéutica para producir una dosis. Un vehículo puede adoptar una amplia variedad de formas, dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración, p. ej., oral o parenteral. Al preparar composiciones farmacéuticas en forma de dosificación oral, puede utilizarse cualquiera de los medios farmacéuticos habituales. Por consiguiente, para preparaciones líquidas orales, como suspensiones, elixires y soluciones, pueden utilizarse vehículos y aditivos adecuados, incluyendo agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, conservantes, agentes colorantes y similares. Para preparaciones sólidas orales, como polvos, tabletas y cápsulas, y para preparaciones sólidas como supositorios, pueden utilizarse vehículos y aditivos adecuados, incluyendo almidones, transportadores de azúcar como dextrosa, maltosa, lactosa y vehículos relacionados, diluyentes, agentes granulantes, lubricantes, aglutinantes, agentes desintegrantes y similares. Si así se desea, las tabletas o cápsulas pueden tener un recubrimiento entérico o una liberación sostenida mediante técnicas estándares. El uso de estas formas de dosificación puede aumentar significativamente la biodisponibilidad de los compuestos en el paciente. En lo que respecta a formulaciones parenterales, el vehículo suele comprender agua estéril o solución acuosa de cloruro de sodio, aunque también pueden incluirse otros ingredientes, incluidos aquellos que facilitan la dispersión. Por supuesto, cuando se va a usar agua estéril y se va a mantener como estéril, las composiciones y los vehículos también deben esterilizarse. También se pueden preparar suspensiones inyectables, en cuyo caso se pueden emplear vehículos líquidos apropiados, agentes de suspensión y similares apropiados.

[0987] También se pueden preparar suspensiones liposomales (incluidos los liposomas dirigidos a antígenos virales) con métodos convencionales para producir vehículos farmacéuticamente aceptables. Esto puede ser apropiado para el suministro de nucleósidos libres, nucleósidos de acilo/alquilo o formas de profármaco de éster de fosfato de los compuestos nucleósidos de acuerdo con la presente invención.

[0988] En las realizaciones típicas de acuerdo con la presente invención, los compuestos y las composiciones se usan para tratar una infección por VHC.

[0989] V. Terapia de combinación y alternancia

[0990] Es bien sabido que, tras un tratamiento prolongado con un agente antiviral, pueden surgir variantes de virus resistentes a los fármacos. La resistencia a fármacos se produce más típicamente por la mutación de un gen que codifica una enzima utilizada en la replicación viral. La eficacia de un fármaco contra una infección por VHC puede prolongarse, aumentarse o restaurarse administrando el compuesto en combinación o alternancia con otro, y posiblemente incluso con dos o tres compuestos antivirales adicionales que induzcan una mutación diferente o actúen a través de una vía distinta a la del fármaco principal. De forma alternativa, pueden alterarse las propiedades farmacocinéticas, la biodistribución, la vida media u otro parámetro del fármaco mediante dicha terapia combinada (que también puede comprender terapia en alternancia si se considera concertada). Debido a que los nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N6-sustituido divulgados son inhibidores de la polimerasa NS5B, puede ser útil administrar el compuesto a un hospedador en combinación con, por ejemplo, un:

[0991] (1) inhibidor de la proteasa, como un inhibidor de la proteasa NS3/4A;

[0992] (2) inhibidor de NS5A;

[0993] (3) otro inhibidor de la polimerasa NS5B;

[0994] (4) inhibidor sin sustrato de NS5B;

[0995] (5) interferón alfa-2a, que puede estar pegilado o modificado de otro modo, y/o ribavirina;

[0996] (6) inhibidor no basado en sustrato;

[0997] (7) inhibidor de helicasa;

[0998] (8) oligodesoxinucleótido antisentido (S-ODN);

[0999] (9) aptámero;

[1000] (10) ribozima resistente a nucleasas;

[1001] (11) iRNA, incluyendo microRNA y siRNA;

[1002] (12) anticuerpo, anticuerpo parcial o anticuerpo de dominio dirigido al virus, o

[1003] (13) antígeno viral o antígeno parcial que induce una respuesta de anticuerpos en el hospedador.

[1004] Ejemplos no limitativos de agentes antiVHC que pueden administrarse en combinación con los nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N6-sustituidos de la invención son:

[1005] (i) inhibidores de proteasa, como telaprevir (Incivek®), boceprevir (Victrelis™), simeprevir (Olysio™), paritaprevir (ABT-450), ACH-2684; AZD-7295; BMS-791325; danoprevir; Filibuvir; GS-9256; GS-9451; MK-5172; Setrobuvir; Sovaprevir; Tegobuvir; V<x>-135; VX-222 y ALS-220;

[1006] (ii) inhibidor de NS5A como ACH-2928, ACH-3102, IDX-719, daclatasvir, ledispavir y Ombitasvir (ABT-267); (iii) inhibidores de NS5B como ACH-3422; AZD-7295; Clemizol; ITX-5061; PPI-461; PPI-688; Sovaldi®; MK-3682 y mericitabina;

[1007] (iv) inhibidores de NS5B como ABT-333, MBX-700; y

[1008] (v) anticuerpo como GS-6624.

[1009] Si el nucleótido de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituido-2-modificado-N6-sustituido se administra para tratar la hepatitis C avanzada que conduce a cáncer de hígado o cirrosis, en una realización, el compuesto puede administrarse en combinación o alternancia con otro fármaco que se utilice típicamente para tratar el carcinoma hepatocelular (HCC), por ejemplo, según lo descrito por Andrew Zhu en «New Agents on the Horizon in Hepatocellular Carcinoma» (nuevos agentes en el horizonte del carcinoma hepatocelular), Therapeutic Advances in Medical Oncology, V 5(1), enero de 2013, pp. 41-50. Ejemplos de compuestos adecuados para la terapia combinada cuando el hospedador tiene o está en riesgo de HCC comprenden agentes antiangiogénicos, sunitinib, brivanib, linifanib, ramucirumab, bevacizumab, cediranib, pazopanib, t SU-68, lenvatinib, anticuerpos contra EGFR, inhibidores de mTor, inhibidores de MEK e inhibidores de desacetilasa de histonas.

[1010] Los fármacos actualmente aprobados para la influenza son Amantadina, Rimantadina y Oseltamivir Cualquiera de estos fármacos puede usarse en combinación o alternancia con un compuesto activo proporcionado en el presente documento para tratar una infección viral susceptible a los mismos. La ribavirina se usa para tratar el sarampión, Influenza A, Influenza B, parainfluenza, bronquiolitis grave por VRS y SARS, así como otras infecciones virales, y por consiguiente es particularmente útil en combinación con el presente compuesto para el tratamiento del hospedador infectado con un virus de ARN monocatenario. Palivizumab está aprobado para su uso en bebés con alto riesgo de infección por VRS.

[1011] Actualmente, no existen fármacos aprobados para el virus del Nilo Occidental. Se recomienda que los médicos proporcionen terapia de apoyo intensiva, que puede incluir hospitalización, líquidos intravenosos, uso de un respirador para asistir la respiración, medicamentos para controlar convulsiones, hinchazón cerebral, náuseas y vómitos, y el uso de antibióticos para prevenir infecciones bacterianas que puedan agravar la enfermedad. Esto destaca la importancia de los presentes compuestos para la terapia médica viral.

[1012] VI. Proceso de preparación de los nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluoro-2'-p-C-sustituidos-2-modificados-N6-sustituidos de la invención

[1013] Los métodos generales para proporcionar los compuestos de la presente invención son conocidos en la técnica o sedescriben en el presente documento. La síntesis de nucleótidos 2'-cloro se describe en los documentos US 20150366888, WO 2014058801; WO 2015/066370 y WO 2015200219.

[1014] En los esquemas de síntesis se utilizan las siguientes abreviaturas.

[1015] CBr4: tetrabromuro de carbono

[1016] DBU: 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno

[1017] DCM: diclorometano

[1018] THF: tetrahidrofurano (THF), anhidro

[1019] EtOAc: acetato de etilo

[1020] EtOH: etanol

[1021] Li(OtBu)3AlH: hidruro de aluminio litio tri-terc-butóxido

[1022] Na2SO4: sulfato de sodio (anhidro)

[1023] MeCN: acetonitrilo

[1024] MeNH2: metilamina

[1025] MeOH: metanol

[1026] Na2SO4: sulfato de sodio

[1027] NaHCO3: bicarbonato de sodio

[1028] NH4Cl: cloruro de amonio

[1029] NH4OH: hidróxido de amonio

[1030] PE: éter de petróleo

[1031] Ph3P: trifenilfosfano

[1032] Gel de sílice (malla 230 a 400, sorbente)

[1033] t-BuMgCl: cloruro de f-butil magnesio

[1034] t-BuOK: terc-butóxido de sodio

[1035] t-BuOH: terc-butanol

[1036] Ejemplos

[1037] Métodos generales

[1038] Los espectros1H,19F y3 1P NMR se registraron en un espectrómetro Brücker de transformada de Fourier de 300 MHz. Los espectros se obtuvieron a partir de muestras preparadas en tubos de 5 mm de diámetro en CDCU, CD3OD o DMSO-d6. Las multiplicidades de los picos se indican mediante los símbolos s (singulete), d (doblete), t (triplete), m (multiplete) y br (ancho). Las constantes de acoplamiento (J) se notifican en Hz. Los espectros de MS se obtuvieron utilizando ionización por electroaspersión (ESI) en un espectrómetro de masas de cuadrupolo Agilent Technologies 6120. Las reacciones se llevaron a cabo, por lo general, bajo atmósfera de nitrógeno seco utilizando disolventes anhidros de Sigma-Aldrich. Todos los productos químicos comunes se adquirieron en fuentes comerciales.

[1039]

[1041] i) Li(O fBu)3A IH , TH F , -30 ° C - - > - 15 °C : ii) P P h 3, C B r4, D CM , -20 ° C - > 0 °C ; iii 2-am ino-6-clorop urina fBuO K, íB u O H /M e C N 9 : 1 , 65 °C ; iv M eN H2 (33 % T M eOH, 85 °C ; v IsopropiloÍ (R ,S-(pentafluorofenoxi)-fenoxi-fosfonl-L-alaninato, fBuM gCI, TH F, 0 C - > T A

[1043] E je m p lo 1. P re p a ra c ió n de isopropilo ((((R ,S )-(2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 -a m in o -6 -(m e tila m in o )-9 H -p u rin a -9 -il)-4 -f lu o ro -3 -h id rox i-4-m etiltetrah id rofurano-2-il)m etoxi)-fenoxi-fosforil)-L-a lan inato

[1044] P a s o 1. Prep aració n de benzoato ((2R ,3R ,4 R ,5 R )-3 -(b e n zo ilo x i)-5 -b ro m o -4 -flu o ro -4 -m e tilte trah id ro fu ran o -2 -il)m e til (2).

[1045] A una so lución de (2 R )-3 ,5 -d i-0 -b e n z o il-2 -f lu o ro -2 -C -m e til-D -r ib o n o -Y -la c to n a (24,8 g, 66,6 mmol) en T H F se co (33 3 mL), bajo una atm ósfera de nitrógeno y enfriada hasta -30 °C , s e añad ió gota a gota tri-ferc-hidruro de butoxialum inio ( 1 ,0 M en T H F , 22 ,6 mL, 22 ,6 mmol). U n a v e z co m p letad a la adición, s e calentó lentam ente la m ezcla de reacció n h asta - 15 ° C durante 90 min, luego s e agregó E tO A c (300 m L) y s e interrum pió la m e zcla con a so lució n a cu o sa satu rad a de N H 4C l (200 m L). La so lució n resultante s e filtró so b re C e lite ® y el filtrado s e extrajo dos v e c e s con EtO A c. Lo s com p uesto s o rg án ico s com b in ad o s s e se ca ro n (N a 2S O 4), filtraron y concentraron. El residuo se recogió en D C M se c o (225 m L) bajo una atm ósfera de nitrógeno, s e enfrió hasta -20 ° C y luego s e añad ió P P h<3>( 19 ,1 g, 72 ,8 mmol). T r a s 10 min de ag itació n a -20 °C , s e añad ió C B r 4 (26,0 g, 78 ,4 mmol) y s e dejó que la m ezcla de reacció n s e calen tara lentam ente h asta 0 ° C durante 2 h. La m e zcla resultante s e vertió en una co lu m n a de gel de s ílic e y s e eluyó con P E /E tO A c (gradiente de 100 :0 a 80:20). L a s fra cc io n e s que contenían el a -b ro m ofu ran ósido se reunieron y concentraron para obtener el producto 2 ( 18 ,1 g; 41 ,3 mmol; 62%en dos p a so s) com o un ace ite e sp e so e incoloro.

[1046] 1H N M R (300 M Hz, C D C U )58 ,15 -8 ,11 (m, 2H ), 8 ,04 -8 ,01 (m, 2H ), 7 ,64 -7 ,55 (m, 2H ), 7 ,51 -7 ,41 (m, 4H), 6 ,34 (d,J= 1 ,6 Hz, 1H ), 5 ,29 (dd,J= 5,5, 3 ,1 Hz, 1H ), 4 ,89 -4 ,85 (m, 1H ), 4 ,78 (dd,J= 12 ,5 , 3 ,2 Hz, 1H ), 4 ,63 (dd,J= 12 ,5 , 4 ,5 Hz, 1H ), 1 ,72 (d,J= 21 ,6 Hz, 3H ). 19F N M R (282 M Hz, C D C U )5-150 ,0.

[1047] P a s o 2. P re p a ra c ió n de (2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 -a m in o -6 -c lo ro -9 H -p u rin a -9 -il) -2 -(b e n z o ilo x im e til) -4 -flu o ro -4 -m etiltetrahidrofurano-3-il benzoato (3).

[1048] S e su sp e n d ió 2 -a m in o -6 -c lo ro p u rin a (2 ,63 g, 15 ,5 mmol) en f-B u O H (54 m L) bajo una atm ósfera de nitrógeno. La m e zcla de reacció n s e calentó h asta 30 ° C y luego s e añad ió ferc-butóxido de potasio (1,69 g; 15 ,1 mmol). D e sp u é s de 45 min, s e añad ió una d iso lución de brom ofuranósido 2 (2 ,24 g; 5 , 12 mmol) d isuelta en M e C N anhidro (6 m L). La m e zcla de reacció n s e calentó h asta 65 ° C durante 16 h y luego s e dejó enfriar a tem peratura am biente. S e añad ió una so lución a cu o sa satu rad a de N H 4C l (70 m L) y la m ezcla resultante s e extrajo con E tO A c (3 * 60 mL). Los co m p u esto s o rg án ico s com b in ad o s s e se ca ro n (N a 2S O 4), filtraron y concentraron. El residuo s e purificó d os v e c e s por crom atografía en co lum na (gradiente P E /E tO A c 80:20 a 0 :100 , luego 60:40 a 20 :80) para obtener el producto 3 ( 1 ,56 g, 2 ,96 mmol, 57 % ) com o un só lido blanco.1

[1049] 1H N M R (300 M Hz, C D C U )58 ,05 -8 ,02 (m, 2H ), 7 ,95 -7 ,92 (m, 2H ), 7 ,88 (s, 1H ), 7 ,63 -7 ,57 (m, 1H ), 7 ,53 -7 ,41 (m, 3H), 7,35-7,30 (m, 2H), 6,43 (dd,J =22,6, 9,1 Hz, 1H), 6,12 (d,J =18,3 Hz, 1H), 5,34 (br s, 2H), 5,00 (dd,J =11,9, 4,5 Hz, 1H), 4,79-4,73 (m, 1H), 4,60 (dd,J= 11,9, 5,3 Hz, 1H), 1,34 (d,J= 22,6 Hz, 3H).<19>F NMR (282 MHz, CDCI<3>)5-157,0. Ms (ESI) m/z calculado para C<25>H<22>FN<5>O<5>[M+H]+ 526,9; encontrado 527,0.

[1051] Paso 3. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-(met¡lam¡no)-9H-pur¡na-9-¡l)-4-fluoro-2-(h¡drox¡met¡l)-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (4).

[1053] A una soluc¡ón del Compuesto 3 (575 mg, 1,09 mmol) en MeOH (9 mL) se añad¡ó met¡lam¡na (33% en EtOH absoluto, 1,7 mL, 1,81 mmol). La mezcla de reacc¡ón se calentó hasta 85 °C en un tubo sellado durante 16 h, se enfr¡ó a temperatura amb¡ente y se concentró. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en columna (grad¡ente DCM/MeOH 100:0 a 85:15) y luego cromatografía en columna de fase ¡nversa (grad¡ente H<2>O/MeOH 100:0 a 0:100) para obtener el producto 4 (286 mg, 0,91 mmol, 84 %) como un sól¡do blanco.

[1055] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)58,06 (s, 1H), 6,11 (d,J= 18,1 Hz, 1H), 4,41 (dd,J= 24,4, 9,1 Hz, 1H), 4,07-4,01 (m, 2H), 3,86 (dd,J= 12,9, 3,3 Hz, 1H), 3,04 (br s, 3H), 1,16 (d,J= 22,3 Hz, 3H).<19>F NMR (282 MHz, CD<3>OD)5-163,7. EM (|En )m/zcalculado para C<12>H<19>FN<6>O<3>[M+H]+ 313,1; encontrado 313,2.

[1057] Paso 4. Preparac¡ón de ¡soprop¡lo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-(met¡lam¡no)-9H-pur¡na-9-¡l)-4-fluoro-3-h¡drox¡-4-met¡ltetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)-fenox¡-fosfor¡l)-L-alan¡nato (5).

[1059] A una soluc¡ón del Compuesto 4 (114 mg, 365 |jmol) en THF seco (4 mL), bajo una atmósfera de n¡trógeno y enfr¡ada hasta 0 °C se añad¡ó cloruro de í-butíi magnes¡o (1,0 M en THF, 0,66 mL, 660 jmol) gota a gota durante 10 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó 15 m¡n a 0 °C y luego otros 15 m¡n a temperatura amb¡ente. La mezcla de reacc¡ón se enfrió hasta 0°C y luego se añad¡ó, gota a gota durante 10 m¡nutos, una d¡soluc¡ón de ¡soprop¡lo ((R,S)-(pentafluorofenox¡)-fenox¡-fosfor¡l)-L-alan¡nato (Ross, B.S., Reddy, P.G., Zhang, H.R., Rachakonda, S. y Sof¡a, M.J., J. Org. Chem., 2011) (253 mg; 558 jmol) d¡suelta en THF seco (1 mL). La mezcla de reacc¡ón se agitó a 0 °C durante 30 m¡n, luego se mantuvo 18 h a temperatura amb¡ente y Analmente se ¡nterrump¡ó con una d¡soluc¡ón acuosa saturada de NH<4>Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 * 5 mL). Los compuestos orgán¡cos comb¡nados se secaron, futraron (Na<2>SO<4>) y concentraron. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en columna (grad¡ente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) y luego cromatografía en columna de fase ¡nversa (grad¡ente H<2>O/MeOH 100:0 a 0:100) para obtener el producto 5 (una mezcla de d¡astereómeros, 101 mg, 174 jmol, 48 %) como un sól¡do blanco.

[1061] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,83 (s, 0,55H), 7,82 (s, 0,45H), 7,38-7,16 (m, 5H), 6,15 (d,J= 18,5 Hz, 0,45 H), (d,J= 18,8 Hz, 0,55 H), 4,99-4,88 (superpuesto con H<2>O, m, 1H), 4,65-4,36 (m, 3H), 4,25-4,17 (m, 1H), 3,97-3,85 (m, 1H), 3,05 (br s, 3H), 1,32-1,28 (m, 3H), 1,25-1,15 (m, 9H).<19>F NMR (282 MHz, CD<3>OD)5-162,8 (s), -163,3 (s).<3 1>P NMR

[1064]

[1065] Ejem p lo 2 (ejem plo de referencia). P rep a ra ció n de isopropilo ((((R ,S )-(2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 -a m in o -6 -(d im e tila m in o )-9 H -pu rina-9-il)-4 -fluo ro -3-h id ro xi-4 -m etiltetrah id ro furan o -2-il)m etoxi)-fen o xi-fo sforil)-L -a lan in ato (7).

[1066] P a s o 1. P rep aració n de (2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 -a m in o -6 -(d im e tila m in o )-9 H -p u rin a -9 -il) -4 -flu o ro -2 -(h id ro x im e til) -4 -m etiltetrahidrofurano-3-ol (<6>).

[1067] A una so lución del C o m p u esto 3, del Ejem plo 1, (500 mg, 0 ,95 mmol) en M eO H<( 6>mL) s e añad ió hidrocloruro de d im etilam ina (783 mg, 9,6 mmol) y 1,8 -d ia z a b ic ic lo [5.4.0 ]u n d e c-7 -e n o ( 1 ,43 m L, 9,6 mmol). La m e zcla de reacció n s e calentó a 8 5 ° C en un tubo se llad o durante<6>h, s e enfrió a tem peratura am biente y s e concentró. El residuo se purificó por crom atografía en co lum na (gradiente D C M /M e O H 100 :0 a 85 :15 ) y luego crom atografía en co lu m n a de fa se in ve rsa (gradiente H<2>O /M e O H<1 0 0 : 0>a<0>:<1 0 0>) para obtener el producto<6 ( 2 0 0>mg, 0 ,61 mmol, 64 % ) com o un só lido blanco.

[1068] 1H N M R (300 MHz, C D<3>O D )58 ,07 (s, 1H ), 6 ,14 (d,J= 18 ,1 Hz, 1H ), 4 ,41 (dd,J= 24 ,4 , 9 ,2 Hz, 1H ), 4 ,08 -4 ,02 (m, 2H ), 3 ,87 (dd,J= 12 ,8 , 2 ,9 Hz, 1H ), 3 ,42 (br s,<6>H), 1 , 16 (d,J= 22 ,0 Hz, 3H ). 19F N M R (282 M Hz, C D<3>O D )5-163 ,8. M S (E S I)m /zca lcu la d o para C<13>H<20>F N<6>O<3>[M+H]+ 327 ,2 ; encontrado 327 ,2.

[1069] P a so 2. Prep aració n de isopropilo ((((R ,S )-(2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 -a m in o -6 -(d im e tila m in o )-9 H -p u rin a -9 -il) -4 -f lu o ro -3 -h id roxi-4-m etiltetrah id rofurano-2-il)m etoxi)-fenoxifosforil)-L-a laninato (7).

[1070] A una so lu ció n del C o m p u esto<6>(80 mg, 245 |jm ol) en T H F s e c o (4 mL), bajo una atm ósfera de nitrógeno y enfriad a h a sta 0 ° C s e añad ió cloruro de ferc-butil m ag n e sio (1 ,0 M en T H F , 0,64 m L, 640 jm o l) gota a gota d urante 10 min. La m e zcla de reacció n s e agitó 15 min a 0 ° C y luego otros 15 min a tem peratura am biente. L a m e zcla de reacción se enfrió hasta 0 ° C y d e sp u é s s e añad ió gota a gota una so lución de isopropilo ((R ,S)-(pentafluorofenoxi)-feno xifo sfo ril)-L -a lan inato ( 167 mg, 367 jm o l) disuelto en T H F se c o (4 m L) durante 10 min. La m e zcla de reacció n s e agitó a 0 ° C durante 30 m in y 18 h a tem peratura am biente. L a reacció n s e interrum pió con una so lu ció n a cu o sa de N H<4>C l (4 mL) y s e extrajo con E tO A c (3 * 5 mL). Lo s com p uestos o rg án ico s co m b in ad o s s e secaro n , filtraron (N a<2>S O<4>) y concentraron. E l residu o s e purificó por crom atografía en co lu m n a (gradiente D C M /M e O H 100 :0 a 90 :10 ) y luego crom atografía en co lum na de fa se in versa (gradiente H<2>O /M e O H 100 :0 a 0 :100 ) para obtener el producto 7 (una m e zcla de d iastereóm ero s, 35 mg, 58 jm o l, 24 % ) com o un só lido blanco.1

[1071] 1H N M R (300 M Hz, C D<3>O D )57 ,83 (s, 0 ,5H ), 7 ,82 (s, 0,5H ), 7 ,34 -7 ,16 (m, 5H), 6 ,15 (d,J= 18 ,7 Hz, 0, 5 H), 6 ,13 (d,J= 18 ,8 Hz, 0 ,5 H), 4 ,99 -4 ,85 (superpuesto con H<2>O, m, 1H ), 4 ,65 -4 ,26 (m, 3H ), 4 ,27 -4 ,12 (m , 1H ), 3 ,99 -3 ,81 (m, 1H ), 3 ,42 , 3 ,41 (2b r s,<6>H), 1 ,36 -1 ,25 (m, 3H ), 1 , 24 - 1 , 11 (m, 9H). 19F N M R (282 M Hz, C D<3>O D ) 5 - 162 , 7 (s), - 163 ,2 (s). 31P N M R ( 121 M Hz, C D<3>O D )54 ,08 (s), 4 ,00 (s). M S (E S I)m /zca lcu la d o para C<25>H,<36>FN ,<7>O,<7>P [M+H]+ 596,5; encontrado 596,2.

[1072]

[1074] i) a) Hidrodoruro de /v-metilcidopropilamma, Et3 N, MeOH, 100 C; b) NmOH, MeOH, 100 C; n) Isopropilo {(R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxi-fosforil)-L-alaninato, fBuMgCI, THF, 0 C.

[1076] Ejemplo 3 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo (((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metilcidopropilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (9). Paso 1. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-ciclopropilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (8 ).

[1077] A una solución del Compuesto 3 (600 mg, 1,14 mmol) en MeOH (10 mL) se añadió hidrocloruro de N-metilciclopropilamina (366 mg, 3,40 mmol) y trietilamina (470 gL, 3,40 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C en un tubo sellado durante 15 h y se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió una solución acuosa que contenía un 30 % de NH4OH (4 mL) y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C en un tubo sellado durante 2 h, se enfrió y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto 8 (351 mg, 0,99 mmol, 87 %) como un sólido blanco.

[1079] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)58,13 (s, 1H), 6,15 (d,J= 18,0 Hz, 1H), 4,40 (dd,J= 24,3, 9,0 Hz, 1H), 4,06-4,02 (m, 2H), 3,89-3,83 (m, 1H), 3,32 (m, 3H), 3,18-3,11 (m, 1H), 1,16 (d,J= 22,2 Hz, 3H), 0,96-0,89 (m, 2H), 0,74-0,69 (m,2H).<19>F NMR (282 MHz, CD<3>OD)5-163,8. MS (ESI)m/zcalculado para C<15>H<, 22>FN,<a>O<, 3>[M+H]<+>353,2; encontrado 353,2.

[1080] Paso 2. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-ciclopropilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (9).

[1081] A una solución del Compuesto 8 (200 mg, 0.57 mmol) en THF seco (15 mL) a 0°C se añadió cloruro de ferc-butil magnesio (1,0 M en THF, 680 gL, 0,68 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (283 mg, 0,62 mmol) disuelto en THF seco (4mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y 18 ha temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) y luego cromatografía en columna de fase inversa (gradiente H2O/MeOH 100:0 a 0:100) para obtener el producto 9 (una mezcla de 2 diastereómeros, 160 mg, 0,26 mmol, 45 %) como un sólido blanco.1

[1083] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,85 (m, 1H), 7,38-7,16 (m, 5H), 6,18 (d,J= 18,6 Hz) y 6,16 (d,J= 18,9 Hz, 1H), 4,95­ 4,90 (superpuesto con H<2>O, m, 1H), 4,58-4,47 (m, 3H), 4,22-4,19 (m, 1H), 3,95-3,87 (m, 1H), 3,36-3,34 (superpuesto con MeOH, m, 3H), 3,19-3,12 (m, 1H), 1,32-1,22 (m, 12H), 0,96-0,89 (m, 2H), 0,74-0,69 (m,2H).<31>P NMR (121 MHz,

C D<3>O D ) 5 4 ,11 (s), 4 ,02 (s). M S (E S I)m /zca lcu la d o para C<27>H<38>FN<7>O<7>P [M+H]+ 622 ,2 ; encontrado 622 ,2.

[1086]

[1088] <1>) 2 ,6 -d ic lo ro p u rin a , tB u O K , fB u O H /M e C N , 65 C ;<11>) M e N H<2>, M e O H , 130 C ; m) Isopropilo

[1089] ((R ,S )-(p e n ta flu o ro fe n o x i)-fe n o xi-T o sfo ril)-L -a lin aria to , fB u M g C I, T H F , D C a T A

[1091] Ejem p lo 4 (ejem plo de referencia). P rep a ra ció n de isopropilo ((((R ,S )-(2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 ,6 -6 /s -m e tila m in o -9 H -p u rin a -9-il)-4 -fluo ro -3-h id ro xi-4 -m etiltetrahidro furano -2-il)m eto xi)-feno xifo sforil)-L -a lan inato (<1 2>).

[1092] P a s o 1. P rep aració n de benzoato (2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 ,6 -d ic lo ro -9 H -p u rin a -9 -il) -2 -(b e n z o ilo x im e til) -4 -f lu o ro -4 -m etiltetrahidrofurano-3-il (10).

[1093] S e su sp e n d ió el C o m p u esto 2,6 -d ic lo ro p u rin a ( 1 ,30 g,<6 , 8 6>mmol) en t-B u O H (25 m L) bajo una atm ósfera de nitrógeno. S e a ñ ad ió ferc-butóxido de potasio (778 mg, 6 ,92 mmol) en p o rcio nes y d e sp u é s la m e zc la de reacció n s e agitó a tem peratura am biente. D e sp u é s de 1 h, s e añad ió una d iso lución de brom ofuranósido 2 ( 1 ,0 g; 2 ,29 mmol) d isuelta en M e C N anhidro (20 mL). L a m e zcla de reacció n s e calentó a 65 ° C durante la noche y luego s e dejó enfriar a tem peratura am biente. S e añad ió una so lución a cu o sa satu rad a de N H<4>C l y la m e zcla resultante s e extrajo con E tO A c (3 v e ce s). Lo s co m p u esto s o rg á n ico s co m b in ad o s s e se ca ro n so b re N a<2>S O<4>y se concentraron. El residuo se purificó por crom atografía en co lum na (gradiente P E /E tO A c 100 : 0 a 0: 100 ) para obtener el producto 10 (148 mg, 0 ,27 mmol, 12 % ) com o un só lido pegajoso.

[1094] 1H N M R (300 M Hz, C D C U )58 ,31 (s, 1H ), 8 ,12 -8 ,09 (m, 2H ), 8 ,02 -7 ,99 (m, 2H ), 7 ,64 -7 ,39 (m,<6>H), 6 ,38 (d,J= 17 ,2 H z, 1H ), 6 ,02 (dd,J= 21 ,2 , 8,9 Hz, 1H ), 4 ,90 -4 ,68 (m, 3H ), 1 ,33 (d,J= 22 ,4 Hz, 3H ). 19F N M R (282 M Hz, C D C U )5-158 ,0. Ms (E S I)m /zca lcu la d o para C<25>H<20>G<2>F N<4>O<5>[M+h ]+ 546,4; encontrado 546,3.

[1095] P a so 2. P rep a ra ció n de (2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 ,6 -6 /s -m e tila m in o -9 H -p u rin a -9 -il) -4 -f lu o ro -2 -(h id ro x im e til) -4 -m etiltetrahidrofurano-3-ol ( 11 ) .

[1096] U n a so lu ció n del C o m p u esto 10 (148 mg, 0 ,27 mmol) en m etilam ina (33 % en EtO H , 30 m L) s e calentó a 130 ° C en un tubo se llad o durante 4 d ía s, s e enfrió a tem peratura am biente y s e concentró. El residuo s e purificó por crom atografía en co lu m n a (gradiente D C M /M e O H 100 :0 a 50:50) y luego crom atografía en co lum na de fa s e in versa (gradiente H<2>O /M e O H 100 :0 a 0 :100 ) para obtener el producto 11 (33 mg, 0 ,10 mmol, 37 % ) com o un só lido blanco.

[1097] 1H N M R (300 MHz, C D<3>O D )58 ,00 (s, 1H ), 6 ,12 (d,J= 18 ,5 Hz, 1H ), 4 ,51 (dd,J= 24 ,4 , 9,5 Hz, 1H ), 4 ,06 -3 ,85 (m, 3H ), 3 ,04 (s, 3H ), 2 ,93 (s, 3H), 1 ,20 (d,J= 22 ,4 Hz, 3H). 19F N M R (282 M Hz, C D<3>O D )5-163 ,2. EM (IE N )m /zcalcu la d o para C<13>H<20>FN<6>O<3>[M+H]+ 327 ,2 ; encontrado 327 ,2.

[1098] P a s o 3. P re p a ra c ió n de isopropilo ((((R ,S )-(2 R ,3 R ,4 R ,5 R )-5 -(2 ,6 -6 /s -m e tila m in o -9 H -p u rin a -9 -il) -4 -f lu o ro -3 -h id ro x i-4 -m etiltetrahidrofurano-<2>-il)m etoxi)-fenoxifosforil)-L -alan inato (<1 2>).

[1099] A una so lución del C o m p u esto 11 (55 mg, 0 ,17 mmol) en T H F se co (2 m L) a 0 ° C s e añad ió cloruro de ferc-butil m ag n e sio (1 M en T H F , 304 DL, 0 ,30 mmol) gota a gota durante 10 min. La m e zcla de reacció n s e agitó 15 min a 0 ° C y luego 15 min a tem peratura am biente. La so lución s e enfrió h asta 0 ° C y s e a ñ ad ió gota a gota una solución de isopropilo ((R ,S)-(pentafluo ro feno xi)-feno xifo sfo ril)-L -a lan inato ( 115 mg, 0 ,25 mmol) d isuelto en T H F se c o (1 m L) a lo largo de 10 min. La m e zcla s e calentó lentam ente h asta tem peratura am biente y s e agitó durante 4 d ía s. Lareacción se interrumpió con una solución acuosa de solución de NH4CI y se extrajo con EtOAc (3 veces). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 50:50) para obtener el producto 12 (mezcla de diastereómeros, 13 mg, 0,02 mmol, 13%) como un sólido blanco.1H nMr (300 MHz, CD3OD)57,78 (s, 1H), 7,35­ 7,12 (m, 5H), 6,13 (d,J= 19,1 Hz, 0,53H), 6,10 (d,J= 19,2 Hz, 0,47H), 4,99-4,78 (superpuesto con H2O, m, 1H), 4,72-4,46 (m, 3H), 4,24-4,15 (m, 1H), 3,79-3,92 (m, 1H), 3,02 (br s, 3H), 2,92 (s+s, 3H), 1,29-1,11 (m, 12H).19F NMR (282 MHz, CD3OD)5-162,0 (s), -162,3 (s).3 1P NMR (121 MHz, CD3OD)53,97 (s), 3,89 (s). MS (ESI) m/z calculado para C25H36FN7O7P [M+H]+596,6; encontrado 596,2.

[1102]

[1104] Ejemplo 5 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-isobutiramido-6-metilamino-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (16).

[1105] Paso 1. Preparación del Compuesto 13.

[1106] A una solución del Compuesto 4 (286 mg, 0,92 mmol) e imidazol (370 mg, 5,43 mmol) en DMF seca ( 6 mL) a 0 °C se añadió 1,3-dicloro-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxano (300 |jL, 0,94 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc (50 mL) y la suspensión se lavó con una disolución acuosa saturada de NH4Cl y con salmuera (40 mL cada una). Los compuestos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente PE/EtOAc 7:3 a 3:7) para obtener el producto 13 (283 mg, 0,51 mmol, 56 %) como un sólido blanco. MS (ESI)m/zcalculado para C24H44FN6O4S¡2 [M+H]+ 555,8; encontrado 555,2.

[1107] Paso 2. Preparación del Compuesto 14.

[1108] A una solución del Compuesto 13 (200 mg, 0,36 mmol) en piridina seca (3 mL) a 0 °C se añadió cloruro de isobutirilo (38 jL, 0,36 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió mediante la adición de agua (500 jL). La mezcla se concentró y se coevaporó con tolueno (3 * 10 mL) El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente PE/EtOAc 1:0 a 1:1) para obtener el producto 14 (99 mg, 0,16 mmol, 44 %) como un sólido blanco. MS (ESI)m/zcalculado para C28H 50FN 6O 5 S¡ 2 [M+H] 625,9; encontrado 625,3.

[1109] Paso 3. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-isobutiramida-6-metilamino-9H-purina-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (15).

[1110] A una solución del Compuesto 14 (90 mg, 0,14 mmol) en THF seco (2 mL) se añadió fluoruro de tetrabutilamonio (1 M en THF, 38 |jL, 0,38 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 10:0 a 9:1) y luego cromatografía en columna de fase inversa (gradiente H2O/MeOH 100:0 a 0:100) para obtener el producto 15 (42 mg, 0,11 mmol, 77%) como un sólido blanco.1H NMR (300 MHz, CD3OD)58,31 (s, 1H), 6,29 (d,J= 17,9 Hz, 1H), 4,70-4,60 (m, 1H), 4,07-3,98 (m, 2H), 3,89 (dd,J= 12,5, 3,4 Hz, 1H), 3,10 (br s, 3H), 2,87 (br s, 1H), 1,23-1,16 (m, 9H).19F NMR (282 MHz, CD3OD)5-163,8. MS (ESI) m/z calculado para C16H24FN6O4[M+H]+383,4; encontrado 3 8 3 ,2.

[1112] Paso 4. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-isobutiramido-6-metilamino-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (16).

[1114] A una solución del Compuesto 15 (27 mg, 0,07 mmol) en THF seco (1 mL) a 0°C se añadió cloruro de í-butil magnesio (1,0 M en THF, 130 jL, 0,13 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (50 mg, 0,11 mmol) disuelto en THF seco (1 mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y después 18 h a temperatura ambiente y luego se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (2 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 95:5) y luego cromatografía en columna de fase inversa (gradiente H2O/MeOH 100:0 a 0:100) para obtener el producto 16 (una mezcla de 2 diastereómeros, 25 mg, 0,04 mmol, 54 %) como un sólido blanco.1H NMR (300 MHz, CD3OD)58,05 (s, 1H), 7,33-7,13 (m, 5H), 6,27 (d,J= 18,6 Hz) y 6,21 (d,J= 19,1 Hz, 1H), 5,10-4,95 (m, 1H), 4,93-4,78 (superpuesto con H2O, m, 1H), 4,60-4,42 (m, 2H), 4,26-4,18 (m, 1H), 3,90-3,80 (m, 1H), 3,09 (br s, 3H), 2,84-2,80 (m, 1H), 1,33-1,15 (m, 18H).3 1P NMR (121 MHz, CD3OD)53,69 (s).3 1P NMR (121 MHz, CD3OD)54,11 (s), 3,99 (s). MS (ESI)m/zcalculado para C28H40FN7O8P [M+H]+652,6; encontrado 652,3.

[1117]

[1119] 1) N-metiletilamina, MeOH, 100 C; n) Isopropilo í(R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxi fosforil)-L-alinanata, íBuMgCI, THF, 0 C

[1121] Ejemplo 6 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo (((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metiletilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (18).

[1123] Paso 1. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-etilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (17).

[1125] A una solución del Compuesto 3 (150 mg, 0,29 mmol) en MeOH (4 mL) se añadió N-metiletilamina (245 jL, 2,90 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C en un tubo sellado durante 15 h, se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto 31 (89 mg, 0,26 mmol, 89 %) como un sólido blanco.

[1126] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)58,06 (s, 1H), 6,13 (d,J =18,0 Hz, 1H), 4,40 (dd,J =24,9, 8,7 Hz, 1H), 4,11-4,01 (m, 4H), 3,98-3,83 (m, 1H), 3,34 (br, s, 3H), 1,24-1,11 (m, 6 H).<19>F NMR (282 MHz, CD<3>OD)5-163,7. EM (IEN) m/z calculado para C<14>H<22>FN<6>O<3>[M+H]<+>341,2; encontrado 341,2.

[1128] Paso 2. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-etilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (18).

[1130] A una solución del Compuesto 17 (30 mg, 0,09 mmol) en THF seco (2 mL) a 0°C se añadió cloruro de íerc-butil magnesio (1,0 M en THF, 110 |jL, 0,11 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (48 mg, 0,11 mmol) disuelto en THF seco (1 mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y 18 ha temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto 18 (mezcla de 2 diastereómeros, 22 mg, 0,04 mmol, 40 %) como un sólido blanco.

[1132] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,69 (m, 1H), 7,26-7,04 (m, 5H), 6,05 (d,J= 18,6 Hz) y 6,03 (d,J= 18,9 Hz, 1H), 4,86­ 4,79 (superpuesto con H<2>O, m, 1H), 4,50-4,32 (m, 3H), 4,12-4,06 (m, 1H), 3,96-3,79 (m, 3H), 3,25 (br, s, 3H), 1,24­ 1,02 (m, 15H).<3 1>P NMR (121 MHz, CD<3>OD)54,07 (s), 4,00 (s). MS (ESI)m/zcalculado para C<26>H<38>FN<7>O<7>P [M+H]<+>609,3; encontrado 609,2.

[1135]

[1137] 1) /V-metilpropilamina, MeOH, 100 C; n) Isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxi

[1138] fosforil)-Z_-alaninato, fBuMgCI, THF, 0 °C

[1140] Ejemplo 7 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metilpropilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (20).

[1141] Paso 1. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-propilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (19).

[1143] A una solución del Compuesto 3 (150 mg, 0,29 mmol) en MeOH (4 mL) se añadió N-metilpropilamina (295 jL, 2,90 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C en un tubo sellado durante 15 h, se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) y luego cromatografía en columna de fase inversa (gradiente H2O/MeOH 100:0 a 0:100) para obtener el producto 19 (80 mg, 0,23 mmol, 78 %) como un sólido blanco.1

[1145] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)58,04 (s, 1H), 6,13 (d,J= 18,3, 1H), 4,40 (dd,J= 24,2, 9,2 Hz, 1H), m, 4,06-3,84 (m, 5H), 1,68 (sept,J= 7,5 Hz, 2H), 1,15 (d,J= 22,2 Hz, 3H), 0,93 (t,J= 7,5 Hz, 3H).<19>F NMR (282 MHz, CD<3>OD)5-163,8. EM (IEN)mizcalculado para C15H24FN6O3[M+H]+355,2; encontrado 355,2.

[1147] Paso 2. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-propilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato de isopropilo (20).

[1149] A una solución del Compuesto 19 (30 mg, 0,09 mmol) en THF seco (2 mL) a 0°C se añadió cloruro de ferc-butil magnesio (1,0 M en THF, 110 |jL, 0,11 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (46 mg, 0,11 mmol) disuelto en THF seco (1 mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y 18 ha temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCMiMeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto 20 (mezcla de 2 diastereómeros, 22 mg, 0,03 mmol, 33 %) como un sólido blanco.

[1151] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,78, 7,77 (s+s, 1H), 7,37-7,13 (m, 5H), 6,15 (d,J= 18,6 Hz) y 6,13 (d,J= 18,9 Hz, 1H), 4,97-4,89 (superpuesto con H<2>O, m, 1H), 4,63-4,30 (m, 3H), 4,22-4,14 (m, 1H), 4,02-3,84 (m, 2H), 1,74-1,63 (3H, m), 1,32-1,27 (m, 3H), 1,23-1,13 (m, 9H), 0,94 (t,J= 7,4 Hz) y 0,93 (t,J= 7,4 Hz, 3H).<3 1>P NMR (121 MHz, CD<3>OD) 5 4,05 (s), 4,00 (s). MS (ESI) miz calculado para C<27>H<40>FN<7>O<7>P [m+H]<+>623,3; encontrado 623,2.

[1154]

[1156] 1) a) Hidrocloruro de /v-metilciclobutilamina, Et3N, MeOH, 100 C; n) Isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxi-fosforil)-L-alaninato, fBuMgCI, THF, 0 °C

[1158] Ejemplo 8 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo (((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metilciclobutilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (22).

[1159] Paso 1. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metil-ciclobutilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-2-(hidroximetil)-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (21).

[1161] A una solución del Compuesto 3 (150 mg, 0,29 mmol) en MeOH (4 mL) se añadió hidrocloruro de N-metilciclobutilamina (105 mg, 0,90 mmol) y trietilamina (190 jL, 1,00 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C en un tubo sellado durante 15 h y se enfrió hasta temperatura ambiente. Se añadió una solución acuosa con un 30 % de NH4OH (1 mL) y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C en un tubo sellado durante 2 h, se enfrió y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCMiMeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto 21 (90 mg, 0,25 mmol, 8 6 %) como un sólido amarillo pálido.1

[1163] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)58,09 (s, 1H), 6,14 (d,J= 18,0 Hz, 1H), 5,80-5,70 (m, 1H), 4,44-4,33 (m, 1H), 4,06-4,02 (m, 2H), 3,88-3,84 (m, 1H), 3,34 (s, 3H), 2,38-2,19 (m, 4H), 1,79-1,71 (m, 2H), 1,17 (d,J= 22,2 Hz, 3H).<19>F NMR (282 MHz, CD<3>OD)5-163,8. EM (IEN) miz calculado para C<16>H<24>FN<a>O<3>[M+H]<+>367,2; encontrado 367,2.

[1164] Paso 2. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(W-metil-ciclobutilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (22).

[1166] A una solución del Compuesto 21 (50 mg, 0,14 mmol) en THF seco (2 mL) a 0°C se añadió cloruro de terc-butil magnesio (1,0 M en THF, 210 |jL, 0,21 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (74 mg, 0,16 mmol) disuelto en THF seco (2mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y 18 ha temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) y luego cromatografía en columna de fase inversa (gradiente H2O/MeOH 100:0 a 0:100) para obtener el producto 22 (una mezcla de 2 diastereómeros, 24 mg, 0,04 mmol, 28 %) como un sólido blanco.

[1168] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,79 (s, 0,2H), 7,77 (s, 0,8H), 7,38-7,12 (m, 5H), 6,18 (d,J= 17,6 Hz) y 6,16 (d,J= 17,5 Hz, 1H), 4,95-4,81 (m, 2H), 4,62-4,43 (m, 3H), 4,25-4,18 (m, 1H), 3,96-3,83 (m, 1H), 3,38 (s) y 3,36 (s, 3H), 2,38­ 2,21 (m, 4H), 1,75-1,63 (m, 2H), 1,32-1,16 (m, 12H).<3 1>P NMR (121 MHz, CD<3>OD) 54,04 (s), 3,97 (s). MS (ESI) m/z calculado para C<28>H<40>FN<7>O<7>P [M+H]<+>636,3; encontrado 636,2.

[1170] Modificación del resto 2-amino en los compuestos activos

[1172] Las personas con conocimientos ordinarios en la técnica pueden añadir un sustituyente al resto purina 2-amino mediante métodos bien conocidos por los expertos en la técnica. En el presente documento se proporciona un proceso no limitante, y también se pueden adaptar otros fácilmente. ((2R,3R,4R,5R)-3-(benzoiloxi)-5-bromo-4-fluoro-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metil benzoato se trata con 2,6-dicloropurina disponible comercialmente, una base y una mezcla de disolventes orgánicos a una temperatura elevada para generar benzoato (2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-dicloro-9H-purina-9-il)-2-(benzoiloximetil)-4-fluoro-4-metiltetrahidrofurano-3-il. En una realización, la base es terc-butóxido de potasio. En una realización, la mezcla de disolventes orgánicos comprende terc-butanol y acetonitrilo. El compuesto, benzoato (2R,3R,4R,5R)-5-(2,6-dicloro-9H-purina-9-il)-2-(benzoiloximetil)-4-fluoro-4-metiltetrahidrofurano-3-il se trata con una amina, una base y un disolvente orgánico a temperatura ambiente para generar purinas 2-cloro-N6-sustituidas. En una realización, la amina es metilamina. En una realización, la base es trietilamina. En una realización, el disolvente orgánico es etanol. Las personas con conocimientos ordinarios en la técnica también reconocerán que, tras el tratamiento con una amina y una base, los grupos benzoato presentes en el nucleósido se eliminarán simultáneamente para generar el resto furanoso desprotegido. Las purinas 2-cloro-N6-sustituidas pueden tratarse después con una amina, y un disolvente orgánico en un tubo sellado a una temperatura elevada de alrededor de 100 °C para generar nucleósidos de purina N2,N6-disustituidos de la presente invención. En una realización, la amina es metilamina. En una realización, el disolvente orgánico es etanol. Los nucleósidos de purina N2,N6-disustituido de la presente invención pueden tratarse con una base, isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato y un disolvente orgánico a una temperatura reducida para generar los compuestos de la Fórmula I-V. En una realización, la base es cloruro de terc-butil magnesio. En una realización, el disolvente orgánico es tetrahidrofurano.

[1174] Preparación de enantiómeros de fósforo estereoespecíficos

[1176] Algunos de los compuestos activos descritos en el presente documento tienen un resto de fósforo quiral. Cualquiera de los compuestos activos descritos en el presente documento puede proporcionarse como una forma enantiomérica de fósforo aislada, por ejemplo, al menos 80, 90, 95 o 98 % del enantiómero R o S, usando métodos conocidos por las personas con conocimientos ordinarios en la técnica. Por ejemplo, existe una serie de publicaciones que describen cómo obtener tales compuestos, que comprenden, entre otros, cromatografía en columna, por ejemplo como se describe en el Ejemplo 17 a continuación y en las patentes de EE. UU. n.° 8,859,756; 8,642,756 y 8,333,309 de Ross, et al.

[1178] Ejemplo 9. Separación de los estereoisómeros del Compuesto 5.

[1180] Los estereoisómeros del Compuesto 5 se separaron en una columna Phenominex Luna utilizando las siguientes condiciones:

[1182] Columna: Phenominex Luna 5 micron C18 (2) 250 x 10 mm part# OOG-4252-BO

[1183] Concentración de muestra: alrededor de 50 mg/ml en acetonitrilo

[1184] Volumen de inyección: 50 |jl

[1185] Fase móvil A: agua de grado HPLC

[1186] Fase móvil B: acetonitrilo de grado HPLC

[1187] Flujo: 5 mL/min

[1188] UV: 283nm

[1189] Gradiente:

[1192]

[1194] Tiempo de ejecución: 45 minutos

[1195] Temperatura de columna: 40 °C

[1196] Se muestra un cromatograma de muestra de un proceso semipreparativo en la Fig. 1.

[1197] Las fracciones combinadas se evaluaron usando una columna analítica con las siguientes condiciones:

[1198] Columna: Phenominex Luna 5 micron C18 (2) 250 x 2 mm part# OOG-4252-BO

[1199] Volumen de inyección: 10 jl

[1200] Fase móvil A: agua de grado HPLC

[1201] Fase móvil B: acetonitrilo de grado HPLC

[1202] Flujo: 0,2 mL/min

[1203] UV: 283nm

[1204] Gradiente:

[1207]

[1209] Tiempo de ejecución: 45 minutos

[1210] Temperatura de columna: 40 °C

[1211] Las fracciones combinadas para cada estereoisómero se evaporaron hasta secarlas usando un rotavapor con una temperatura del baño de 30 °C. Los sólidos resultantes se disolvieron en 1 mL de acetonitrilo, se transfirieron a tubosde microcentrífuga de 1,7 mL y el disolvente se evaporó en la centrífuga de vacío a una temperatura de 30 °C. Los datos sobre las muestras finales son de la siguiente manera:

[1212] 1. Primer pico eluido: Compuesto 5#1 (5-1) (21,7 mgs-97,8% ee).

[1213] 2. Segundo pico eluido: Compuesto 5 #2 (5-2) (13,2 mgs-95,9 % ee).

[1214] Los pesos finales del 1.° y 2.° pico corresponden adecuadamente con sus porcentajes en la mezcla original. (62,2 % y 37,8 %, respectivamente).

[1215] Síntesis estereoespecífica de los compuestos de la Fórmula I-VII

[1218]

[1221] Ejemplo 10 (ejemplo de referencia). Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-cloro-9H-purina-9-il)-2-(hidroximetil)-4-fluoro-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (23).

[1222] Paso 1. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-cloro-9H-purina-9-il)-2-(hidroximetil)-4-fluoro-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (23).

[1223] El compuesto benzoato (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-cloro-9H-purina-9-il)-2-(benzoiloximetil)-4-fluoro-4-metiltetrahidrofurano-3-il, 3, (80 g, 140 mmol) se añadió a una solución de trimetilamina en metanol (7 M, 800 mL) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró y después se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 100:1) para obtener (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-cloro-9H-purina-9-il)-2-(hidroximetil)-4-fluoro-4-metil-tetrahidrofurano-3-ol (23) (40 g, 90 %).

[1226]

[1228] Ejemplo 11. Preparación de ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-met¡ltetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)-fenox¡fosfor¡l)-L-alan¡nato.

[1231]

[1234] H

[1236] Paso 1. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-(met¡lam¡no)-9H-pur¡na-9-¡l)-4-fluoro-3-h¡drox¡-4-met¡ltetrah¡drofurano-3-ol (4).

[1238] A una soluc¡ón de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-cloro-9H-pur¡na-9-¡l)-2-(h¡drox¡met¡l)-4-fluoro-4-met¡l-tetrah¡drofurano-3-ol (2,0 g, 1,0 eq) en d¡oxano (l5 mL) se añad¡ó una soluc¡ón acuosa de MeNH2 (5,0 eq). Después de ag¡tar durante la noche a temperatura amb¡ente, la TLC mostró que el mater¡al de part¡da se había consum¡do. La mezcla se concentró y se pur¡f¡có por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 40:1- 30:1) para proporc¡onar (2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-(met¡lam¡no)-9H-pur¡na-9-¡l)-4-fluoro-3-h¡drox¡-4-met¡ltetrah¡drofurano-3-ol como un polvo blanco (1,6 g, 81,6%).

[1240] [M+H]+ = 313,5

[1243]

[1246] Paso 2. Preparac¡ón de ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-(met¡lam¡no)-9H-pur¡na-9-¡l)-4-fluoro-3-h¡drox¡-4-met¡ltetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)-fenox¡fosfor¡l)-L-alan¡nato.

[1248] El compuesto (2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-(met¡lam¡no)-9H-pur¡na-9-¡l)-4-fluoro-3-h¡drox¡-4-met¡ltetrah¡drofurano-3-ol (1,47 g, 1,0 eq) y PpAL-S (2,35 g, 1,1 eq) se d¡solv¡eron en ThF anh¡dro (29 mL). Tras enfr¡ar la mezcla a -10 °C, se añad¡ó lentamente t-BuMgCl (5,8 mL, 1,7 M, 2,1 eq) bajo una capa de N2. Después de ag¡tar a temperatura amb¡ente durante 45 m¡n, la mezcla se ¡nterrump¡ó con NH4Cl saturado acuoso y se extrajo con EtOAc (20 mL x 3). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con agua y salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El producto bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna (DCM:MeOH = 50:1-20:1) para obtener (((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-am¡no-6-(met¡lam¡no)-9H-pur¡na-9-¡l)-4-fluoro-3-h¡drox¡-4-met¡l-tetrah¡drofurano-2-¡l)metox¡)-fenox¡-fosfor¡l)-L-alan¡nato como un polvo blanco (1,1 g, 40,3 %).1

[1250] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 57,81 (s, 1H), 7,33-7,16 (m, 5H), 6,10 (d, J= 18,4 Hz, 1H), 4,90-4,84(m, 5H), 4,55-4,46 (m, 3H), 4,20-4,16 (m, 1H), 3,91-3,87 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,03 (s, 3H), 1,30-1,20(m, 12H), [M+H]<+>= 582,8.

[1251]

[1253] Ejemplo 12 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (25).

[1256]

[1258] Paso 1. Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-3-ol.

[1259] A una solución de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-cloro-9H-purina-9-il)-2-(hidroximetil)-4-fluoro-4-metil-tetrahidrofurano-3-ol (2,8 g, 8 mmol) en dioxano (20 mL) se añadió una solución acuosa de dimetilamina (5 mL). Tras agitar a temperatura ambiente durante 3 h, la TLC mostró que el material de partida se había consumido. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 60:1) para obtener (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (2,2 g).1

[1261] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 58,08 (s, 1H), 6,13 (d,J= 18,0 Hz, 1H), 4,43 (dd,J= 9,2, 9,2 Hz, 1H), 4,06 (d, J= 10,8 Hz, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 3,06 (s, 3H), 1,18(d,J= 22 Hz , 3H).

[1262]

[1265] Paso 2. Preparación de isopropilo ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (25).

[1267] El compuesto (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-3-ol ( 8 g, 1,0 eq) y PPAL-S (11,1 g, 1 eq) se disolvieron en THF anhidro (100 mL). La mezcla se enfrió hasta -5-0 °C y se añadió lentamente f-BuMgCl (30,5 mL, 1,7 M, 2,1 eq) bajo una atmósfera de N2. Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, la mezcla se interrumpió con solución acuosa saturada de NH4C y se extrajo con EtOAc (70 mL x 3 ). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SO4anhidro y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 50:1) para obtener isopropilo ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato como un polvo blanco (9,5 g, 65 %).

[1269] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 57,81(s, 1H), 7,35-7,19 (m, 5H), 6,15 (d,J= 18,8 Hz, 1H), 4,90 (m, 1H), 4,54-4,49 (m, 3H), 4,22-4,19 (m, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,43 (s, 3H), 1,32(d,J= 7,2 Hz , 3H), 1,24-1,17(m, 9H).<3 1>P NMR (160 MHz, CD<3>OD) 53,89.

[1271]

[1274] Ejemplo 13 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((R)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-f¡uoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (26).

[1276] El compuesto (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (3 g, 1,0 eq) y PPAL-R (4,17 g, 1 eq) se disolvieron en THF anhidro (60 mL). La mezcla se enfrió hasta -5-0 °C y se añadió lentamente f-BuMgCl (11,4 mL, 1,7 M, 2,1 eq) bajo una atmósfera de N2. Después de agitar a temperatura ambiente durante 16 h, la mezcla se interrumpió con solución acuosa saturada de NH4Cl y se extrajo con EtOAc (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SO4anhidro y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 50:1) para obtener isopropilo ((((R)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(dimetilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato como un polvo blanco (2,2 g, 41 %).1

[1278] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 57,8(s, 1H), 7,35-7,29 (m, 5H), 6,18 (d,J= 18,8 Hz, 1H), 4,92 (m,1H), 4,60 (m, 1H), 4,51-4,23 (m, 3H), 3,90 (m, 1H), 3,44 (s, 6 H), 1,29(d,J= 6 Hz ,3H), 1,22-1,16(m, 10H).<3 1>P NMR (160 MHz, CD<3>OD) 5 3,98.

[1279]

[1282] Ejemplo 14 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluon>3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato.

[1285]

[1288] Paso 1: Preparación de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluon>3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (8).

[1290] Se añadió K2CO3(53 g, 500 mmol) a hidrocloruro de N-metilciclopropanamina en una solución acuosa (100 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 10 min, se añadió una solución de (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-cloro-9H-purina-9-il)-2-(hidroximetil)-4-fluoro-4-metil-tetrahidrofurano-3-ol (35 g, 109 mmol) en dioxano (300 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h y la HPLC indicó que la reacción se había completado. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 60:1) para obtener (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (30 g, 82%).1

[1291] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 58,16 (s, 1H), 6,17 (d,J= 18,0 Hz, 1H), 4,41 (dd,J= 9,2, 9,2 Hz, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 3,16 (m, 1H),1,18 (d,J= 22,4 Hz, 3H), 0,94 (m, 2H), 0,74 (m, 2H), [M+H]<+>= 353,2.

[1292]

[1295] Paso 2: Preparación de isopropilo ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato.

[1297] El compuesto (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-met¡ltetrah¡drofurano-3-ol (8 g, 1,0 eq) y PPAL-S (10,3 g, 1 eq) se disolvieron en THF anhidro (100 mL). Tras enfriar la mezcla hasta -5-0 °C, se añadió lentamente f-BuMgCl (28 mL, 1,7 M, 2,1 eq) bajo una atmósfera de N2. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, se interrumpió con una solución acuosa saturada de NH4O y se extrajo con EtOAc (70 mL * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SO4anhidro y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 100:1 a 50:1) para obtener isopropilo ((((S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato como un polvo blanco (9,5 g, 65 %).

[1299] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 57,86 (s, 1H), 7,35-7,19 (m, 5H), 6,17 (d,J= 19,2 Hz, 1H), 4,91 (m, 1H), 4,52 (m, 3H), 4,21 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,16 (m, 1H), 2,0 (s, 1H), 1,26-1,16 (m, 12H), 0,93 (m, 2H), 0,73 (m, 2H).<3 1>P NMR (160 MHz, CD<3>OD) 53,90

[1302]

[1305] Ejemplo 15 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((R)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato.

[1307] El compuesto (2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(metilciclopropanamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofurano-3-ol (3 g, 1,0 eq) y PPAL-R (2,8 g, 1 eq) se disolvieron en THF anhidro (60 mL). Tras enfriar la mezcla hasta -5-0 °C, se añadió lentamente f-BuMgCl (7,6 mL, 1,7 M, 2,1 eq) bajo una atmósfera de N2. A continuación, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, se interrumpió con una solución acuosa saturada de NH4O y se extrajo con EtOAc (50 mL * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera (30 mL), se secaron sobre Na2SO4anhidro y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 100:1 a 50:1) para obtener el producto como un polvo blanco (3 g, 55 %).

[1308] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 57,81 (s, 1H), 7,30-7,25 (m, 5H), 6,16 (d,J= 24,8 Hz, 1H), 4,84 (m, 1H), 4,84-4,50 (m, 3H), 4,22-4,19 (m, 1H), 3,88 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 3,14 (m, 1H), 2,0 (s, 1H), 1,28-1,13 (m, 12H), 0,92 (m, 2H), 0,90 (m, 2H).<3 1>P NMR (160 MHz, CD<3>OD) 53,99.

[1309]

[1311] Ejem p lo 16 (ejem plo de referencia). P re p a ra c ió n del C o m p u esto 32.

[1314]

[1317] P a so 1. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 29.

[1318] A una so lució n de<6>(3,0 g, 1 ,0 eq) en piridina (30 mL) s e a ñ ad ió T IP D S C h (4 ,35 g, 1 ,5 eq) a 0 °C . T r a s agitar a tem peratura am biente durante 4 h, la T L C m ostró que el m aterial de partida s e h a b ía consum id o. L a m e zcla s e diluyó con EtO A c, s e lavó con una d iso lu ción a c u o s a de H C l 1 M, una d iso lu ción a cu o sa satu rad a de N a H C O<3>y salm u era, s e se c ó so b re N a<2>S O<4>anhidro y s e concentró para obtener el C o m p u e sto 29 com o un aceite am arillo (6,3 g, 100 % )

[1321]

[1324] P a so 2. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 30.

[1325] A una m e zcla del C o m p u e sto 29 (800 mg, 1 ,0 eq), D M A P (16 mg, 0 ,1 eq), piridina ( 1 ,6 m L) y D C M ( 10 m L) s e añad ió cloruro de isobutirilo (209 mg, 1 ,5 eq) a 0 °C . T r a s agitar a tem peratura a m b ien te durante 2 h, la T L C m ostró que el m aterial de partida s e h a b ía consum id o. La m e zcla s e interrum pió con agua, s e lavó con una so lució n a cu o sa de H C l 1 M, una so lució n a cu o sa satu rad a de N a H C O<3>y sa lm u e ra , se se c ó so b re N a<2>S O<4>anhidro y s e concentró. El producto bruto s e purificó por crom atografía en co lu m n a para obtener el producto, 30, com o un aceite blanco (56 3 mg, 62 ,3 % ) .1

[1326] 1H N M R (400 M Hz, C D C U ) 5 7 ,98 (s, 1H ), 787 (s, 1H ), 6 ,20 (d,J= 16 ,0 Hz, 1H ), 4 ,32 -4 ,07 (m, 4H ), 3 ,50 (s,<6>H), 2 ,3 (m, 1H ), 1 ,29 -1 ,05 (m, 45H ).

[1327]

[1330] Paso 3. Preparación del Compuesto 31.

[1331] A una mezcla de 30 (560 mg, 1,0 eq) en THF (10 mL) se añadieron Et3N3HF (706 mg, 5 eq) y Et3 N (890 mg, 10 eq) a temperatura ambiente. Tras agitar a temperatura ambiente durante 1.5 h, la TLC mostró que el material de partida se había consumido. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna para proporcionar 31 como un polvo blanco (288 mg, 83 %).

[1332] 1H NMR (400 MHz, CDCU) 57,72 (s, 1H), 5,96 (d,J= 44,0 Hz, 1H), 5,22 (m, 1H), 4,13-3,99 (m, 4H), 3,42 (s, 6H), 2,83-2,63 (m, 2H), 1,29-1,17 (m, 9H).

[1335]

[1338] Paso 4. Preparación del Compuesto 32.

[1339] El Compuesto 31 (280 mg, 1,0 eq) y PPAL-S (320 mg, 1 eq) se disolvieron en THF anhidro (10 mL). Tras enfriar la mezcla hasta -5 °C, se añadió lentamente f-BuMgCl (0,87 mL, 1,7 M, 2,1 eq) bajo una atmósfera de N2. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, se interrumpió con una solución acuosa saturada de NH4Cl y se extrajo con EtOAc (10 mL * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera (20 mL), se secaron sobre Na2SO4anhidro y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna para obtener el producto, como un polvo blanco (260 mg, 50 %).1

[1341] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 57,98 (s, 1H), 7,25 (m, 5H), 6,23 (d,J= 18,8 Hz, 1H), 4,52 (m, 3H), 4,38 (m, 1H), 3,81 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,48 (s, 6H), 2,81(m, 1H), 1,32 (m, 18H), [M+H]<+>= 666,9.

[1342]

[1344] Ejem p lo 17 (ejem plo de referencia). P re p a ra c ió n del C o m p u esto 35.

[1347]

[1349] P a so 1. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 33.

[1350] A una m e zcla de 29 (2 ,0 g, 1 ,0 eq), D M A P (0,04 g, 0 ,1 eq), piridina (4 m L) y D C M (20 m L) s e añad ió A c C l (0 ,414 g, 1 ,5 eq) a 0 °C . T r a s agitar a tem peratura am biente durante 2 h, la T L C m ostró que el material de partida s e h ab ía consum id o. La m ezcla s e interrum pió con agua, s e lavó con una so lución a cu o sa de H C l 1 M, una so lución a cu o sa satu rad a de N a H C O<3>y sa lm u e ra , s e se c ó so b re N a<2>S O<4>anhidro y s e concentró. El producto bruto s e purificó por crom atografía en co lum na para obtener el producto, 33, com o un aceite blanco ( 1.73 mg, 80,8 % ) .1

[1351] 1H N M R (400 M Hz, C D C U ) 5 7 ,99 (s, 1H ), 7 ,74 (s, 1H ), 6 ,20 (d,J= 20 ,0 Hz, 1H ), 4 ,33 -4 ,11 (m, 4H), 3 ,50 (s,<6>H), 2 ,63 (s, 3H ), 2 ,3 (m, 1H ), 1 ,26 -1 ,05 (m, 29 H ), [M H ]+ = 611 ,9.

[1354]

[1357] P a so 2. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 34.

[1358] A una m e zcla de 33 ( 1 ,58 g, 1 ,0 eq) en T H F (20 m L) s e añ ad ieron Et<3>N 3 H F (2 ,1 g, 5 eq) y Et<3>N (2 ,6 g, 10 eq) atemperatura ambiente. Tras agitar a temperatura ambiente durante 1.5 h, la TLC mostró que el material de partida se había consumido. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna para proporcionar 34 como un polvo blanco (782 mg, 82 %).

[1359] [M+H]+ = 369,6.

[1362]

[1365] Paso 3. Preparación del Compuesto 35.

[1366] El Compuesto 34 (136 mg, 1,0 eq) y PPAL-S (184 mg, 1,1 eq) se disolvieron en THF anhidro (3 mL). Tras enfriar la mezcla hasta -5 °C, se añadió lentamente f-BuMgCl (0,5 mL, 1,7 M, 2,1 eq) bajo una atmósfera de N2. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, se interrumpió con una solución acuosa saturada de NH4O y se extrajo con EtOAc (10 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera (20 mL), se secaron sobre anhidro y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH = 50:1- 20:1) para obtener el fosforamidato 35 como un polvo blanco (150 mg, 63,8 %).

[1367] 1H NMR (400 MHz, CD3OD) 57,81 (s, 1H), 7,35-7,16 (m, 5H), 6,10 (d,J= 18,4 Hz, 1H), 4,87 (m, 1H), 4,52-4,46 (m, 3H), 4,21 (m, 1H), 3,91-3,87 (m, 1H), 3,03 (s, 3H), 1,30-1,13 (m, 12H).

[1368] 31P NMR (160 MHz, CD3OD) 53,84, 19F NMR (376 MHz, CD3OD) 5 -162,79.

[1369] Síntesis de nucleótidos de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-etinil-N6-sustituido-2,6-diaminopurina

[1372]

[1375] Ejemplo 18 (ejemplo de referencia). Ruta general para la obtención de nucleótidos de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-petinil-N6-sustituido-2,6-diaminopurina

[1376]

[1378] Paso 1. Preparación del Compuesto 36.

[1379] A una solución de 6-cloroguanosina (100 g, 332 mmol) en piridina (400 mL) se añadió gota a gota TPDSCh (110 mL, 1,05 eq.) a -5~5 °C bajo una atmósfera de N2. Tras agitar a esa temperatura durante 2 h, la TLC mostró que el material de partida se había consumido. Se añadió DCM (600 mL) y después se añadió gota a gota TMSCl (85 mL, 2 eq.) a 0-5 °C. Tras agitar a esa temperatura durante 2 h, la tLc mostró que el producto intermedio se había consumido.

[1380] Se añadió cloruro de isobutirilo gota a gota a 0-5 °C. Tras agitar a esa temperatura durante 2 h, la TLC mostró que el producto intermedio se había consumido. Se añadió agua y el contenido se extrajo con DCM. La fase orgánica se lavó entonces con HCl 0,5 N para eliminar la piridina.

[1381] Después de lavar el pH del contenido hasta 5~6, se añadió PTSAH2 O (9,2 g, 484,5 mmol) a 0-5 °C. Tras agitar a esa temperatura durante 1 h, la TLC mostró que el producto intermedio se había consumido. Después se añadió agua y la fase orgánica se lavó con agua, NaHCO3 acuoso saturado y salmuera. Después de secar sobre Na2SO4, el disolvente se eliminó al vacío. El residuo se purificó después con cromatografía en columna (PE/EA = 100-10/1) para obtener el producto como un sólido amarillo claro (82 g, 40 %).

[1382] 1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 510,88 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 5,91 (d,J= 1,6 Hz, 1H), 5,53 (d,J= 4,6 Hz, 1H), 4,72 -4,58 (m, 2H), 4,16 (dd,J= 12,4, 4,8 Hz, 1H), 4,00 (ddd,J= 7,7, 4,8, 2,6 Hz, 1H), 3,93 (dd,J= 12,4, 2,7 Hz, 1H), 2,78 (h,J= 6,9 Hz, 1H), 1,26 -1,12 (m, 3H), 1,10 (d,J= 6,7 Hz, 6H), 1,09 - 0,88 (m, 24H).

[1385]

[1387] Paso 2. Preparación del Compuesto 37.

[1388] A una solución de 36 (10,0 g, 16,3 mmol) en DCM (100 mL) se añadió periodinano de Dess-Martin a temperatura ambiente y la reacción se agitó durante 12 h. La TLC mostró que el material de partida se había consumido. La mezcla de reacción se diluyó después con DCM (200 mL) y se lavó con solución acuosa saturada de Na2 S2O3 y salmuera. La fase orgánica se secó entonces sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el Compuesto 37 bruto como un sólido amarillo claro (12 g). El crudo 53 se puede usar directamente en el siguiente paso sin purificación.

[1389]

[1391] Paso 3. Preparación del Compuesto 38.

[1392] A una solución de etiniltrimetilsilano (18,6 mL, 142,7 mmol) en THF (240 mL) se añadió gota a gota n-BuLi (46 mL, 2,5 M, 115,0 mmol) a -15~-20 °C bajo una atmósfera de N2. Después de agitar durante 30 min, la reacción se enfrió hasta -70 °C, y se añadió 37 (bruto, 16,3 mmol) en THF (60 mL) a esa temperatura. El contenido se calentó hasta 0 °C. La TLC mostró que el material de partida se había consumido. Se añadió NH4O acuoso saturado y la reacción se extrajo con EA (100 mL) tres veces. La fase orgánica se combinó y después se lavó con salmuera, después se secó sobre Na2SO4. Después de concentrarse al vacío, el residuo se purificó por cromatografía en columna (Pe/EA = 100-> 10/1) para obtener un sólido amarillo claro (6,0 g, 52%).

[1395]

[1397] Paso 4. Preparación del Compuesto 39.

[1398] A una solución de 38 (6,0 g, 8,4 mmol) en DCM (240 mL) se añadió piridina (4,2 mL, 52,9 mmol) bajo una atmósfera de N2. La reacción se enfrió hasta -70 °C y se añadió DAST (12 mL, 90,4 mmol). El contenido se calentó hasta 30 °C. La TLC mostró que el material de partida se había consumido. La reacción se vertió en NaHCO3 acuoso saturado y después se extrajo con DCM (200 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre Na2 SO4. Después de concentrarse al vacío, el residuo se purificó por cromatografía en columna (PE/EA = 100-> 10/1) para obtener un sólido amarillo claro (3,8 g, 63 %).

[1401]

[1404] Paso 5. Preparación del Compuesto 40.

[1405] A una solución de 39 (3,8 g, 5,3 mmol) en THF (120 mL) se añadieron AcOH (1,3 g, 22 mmol) y TBAF (4,2 g, 15,9 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La TLC mostróque el material de partida se había consumido. Después de concentrarse al vacío, el residuo se purificó por cromatografía en columna (EA) para obtener el producto como un sólido blanco (2,0 g, 95 %).

[1408]

[1411] Procedimiento general para el desplazamiento y la desprotección de amino:

[1413] A una solución de 40 (350 mg, 0,88 mmol) en dioxano (20 mL) se añadió la solución en metanol o agua de la amina correspondiente (base libre o sal como hidrocloruro más DIEA) a temperatura ambiente. El contenido se agitó a ta durante 1-12 h. La TLC mostró que el material de partida se había consumido. Después de concentrarse al vacío, el residuo se usó directamente en el siguiente paso sin purificación. El residuo mencionado anteriormente se disolvió en metanol (10 mL). Se añadió NaOH acuoso (2,5 N, 10 mL). Después de agitar durante la noche a temperatura ambiente, la TLC mostró que el material de partida se había consumido. El pH del contenido se ajustó a 7-8 con HCl 1 N. La solución se concentró y se purificó con cromatografía en columna (DCM/MeOH = 100-> 20/1) para obtener el producto como un sólido blanquecino (rendimiento: 40-80 % en dos pasos). La Tabla 1 ilustra las estructuras de los compuestos 57-63 y el correspondiente espectro de masas y 1H RMN para los compuestos correspondientes.

[1415] Tabla 1.

[1417]

[1418]

[1420] *no de acuerdo con la presente invención

[1421] Ejemplo 19 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-dimetilamino-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-etiniltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato

[1424]

[1425] so propilo R S pentafluorofenoxi -fenoxi-fosforil alan nato fBuMgCI THF

[1427] Paso 1. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-dimetilamino-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-etiniltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato.

[1428] A una solución del Compuesto 41 (30 mg, 0,09 mmol) en THF seco (2 mL) a 0°C se añadió cloruro de ferc-butil magnesio (1,0 M en THF, 125 pL, 0,13 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (49 mg, 0,11 mmol) disuelto en THF seco (2mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y 18 ha temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto (mezcla de 2 diastereómeros, 12 mg, 0,02 mmol, 24 %) como un sólido blanco.

[1430] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,79 (s, 0,45H), 7,77 (s, 0,55H), 7,36-7,14 (m, 5H), 6,28 (d,J= 17,4 Hz) y 6,26 (d,J= 17,5 Hz, 1H), 5,00-4,44 (m, 5H), 4,23-4,16 (m, 1H), 3,69-3,81 (m, 1H), 3,42 (bs, 3H), 3,40 (bs, 3H), 1,32-1,26 (m, 3H), 1,20-1,15 (m, 6H).<3 1>P NMR (121 MHz, CD<3>OD)54,04 (s), 3,98 (s), MS (ESI) m/z calculado para C<26>H<34>FN<7>O<7>P [M+H]<+>606,2; encontrado 606,2.

[1431] Ejemplo 20 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-metilamino-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-etiniltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato.

[1432]

[1435] i) Isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxi-fosforil)-L-alaninato, íBuMgCI, THF, 0 C

[1437] Paso 1. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-metilamino-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-etiniltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato.

[1439] A una solución del Compuesto 42 (30 mg, 0,09 mmol) en THF seco (2 mL) a 0°C se añadió cloruro de íerc-butil magnesio (1,0 M en THF, 125 pL, 0,13 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (49 mg, 0,11 mmol) disuelto en THF seco (2mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y 18 ha temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto (mezcla de 2 diastereómeros, 9 mg, 0,02 mmol, 18 %) como un sólido blanco.

[1441] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,81, 7,79 (0,9s+0,1s, 1H), 7,36-7,14 (m, 5H), 6,26 (d,J= 17,4 Hz, 0,1H) y 6,24 (d,J= 17,4 Hz, 0,9H), 4,93-4,89 (superpuesto con H<2>O, m, 1H), 4,80-4,78 (m, 1H), 4,53-4,49 (m, 2H), 4,21-4,18 (m, 1H), 3,95-3,84 (m, 1H), 3,23-3,20 (m, 1H), 3,04 (bs, 1H), 1,31-1,14 (m, 9H),<3 1>P NMR (121 MHz, CD<3>OD)54,06 (s), 3,97 (s),<m>S (<e>S<i>)m/z calculado para C25H32FN7O7P [M+H]+592,2; encontrado 592,2.

[1443] Ejemplo 21 (ejemplo de referencia). Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metilciclopropilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-etiniltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato

[1446]

[1449] 1) Isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxi-fosforil)-L-alaninato, ÍBuMgCI, THF, 0 C

[1451] Paso 1. Preparación de isopropilo ((((R,S)-(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-(N-metilciclopropilamino)-9H-purina-9-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-etiniltetrahidrofurano-2-il)metoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato.

[1453] A una solución del Compuesto 43 (40 mg, 0,11 mmol) en THF seco (2 mL) a 0°C se añadió cloruro de terc-butil magnesio (1,0 M en THF, 160 pL, 0,16 mmol) gota a gota durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó 15 min a 0 °C y luego otros 15 min a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y después se añadió gota a gota una solución de isopropilo ((R,S)-(pentafluorofenoxi)-fenoxifosforil)-L-alaninato (55 mg, 0,12 mmol) disuelto en THF seco (2mL) durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y 18 h a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con una solución acuosa de NH4Cl (4 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo sepurificó por cromatografía en columna (gradiente DCM/MeOH 100:0 a 90:10) para obtener el producto (mezcla de 2 diastereómeros, 18 mg, 0,03 mmol, 26 %) como un sólido blanco.

[1455] <1>H NMR (300 MHz, CD<3>OD)57,84, 7,82 (s+s, 1H), 7,35-7,14 (m, 5H), 6,30 (d,J= 17,4 Hz) y 6,26 (d,J= 17,6 Hz, 1H), 4,99-4,89 (superpuesto con H<2>O, m, 1H), 4,82-4,69 (m, 1H), 4,59-4,46 (m, 2H), 4,21 (m, 1H), 3,96-3,82 (m, 1H), 3,24-3,22 (m, 1H), 3,17-3,11 (m, 1H) 1,31-1,26 (m, 3H), 1,20-1,15 (m, 6H), 0,93-0,89 (m, 2H), 0,75-0,68 (m, 2H).<3 1>P NMR (121 MHz, CD<3>OD)54,06 (s), 3,98 (s). MS (ESI) m/zcalculado paraC<28>H<36>FN<7>O<7>P [M+H]<+>632,2; encontrado 632,2.

[1456] Ejemplo 22 (ejemplo de referencia). Preparación de PPAL-S

[1459]

[1460] PPAL-RS

[1461] Paso 1. Preparación de PPAL racémico

[1462] A una solución agitada de diclorofosfato de fenilo (250 g) en EtOAc (800 mL) se añadió L-alaninato de isopropilo (200 g) en trietilamina (120 g) a -10 °C. La reacción se agitó a -10 °C durante 1 h. El Compuesto 2,3,4,5,6-pentafluorofenol (220 g) en trietilamina (120 g) y EtOAc (400 mL) se añadió a -5 °C y se agitó a esa temperatura durante 0,5 h. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta 25 °C y se agitó a esa temperatura durante 2 h. La solución se filtró y se lavó con EtOAc (2 * 200 mL), y las fases orgánicas combinadas se evaporaron al vacío para obtener el PPAL-RS sólido (racemato).

[1463] Paso 2. Preparación de PPAL-RS

[1464] A una solución agitada de PPAL-RS en EtOAc (200 mL) y n-heptano (1,4 l) se añadió 2,3,4,5,6-pentafluorofenol (10,1 g) en trietilamina (6 g), y se continuó agitando durante alrededor de 4-8 h. Después de que el isómero R del sólido fuera inferior al 0,5 %, se filtró el sólido. El sólido se disolvió en EtOAc (4 l), se lavó con agua (2 * 100 mL), salmuera (1 l), se secó sobre Na2 SO4 anhidro y se filtró. El disolvente se eliminó al vacío para obtener el PPAL-S (350 g).

[1465] 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) 5 = 7,42 - 7,40 (m, 2H), 7,24 - 7,22 (m, 3H), 6,87 (dd,J= 14,1, 9,9 Hz, 1H), 4,90 -4,84 (m, 1H), 3,94 - 3,88 (m, 1H), 1,27 (dd,J= 7,1, 1,1 Hz, 3H), 1,15 (dd,J= 6,2, 1,2 Hz, 6H) ppm. 13P NMR (160 MHz, DMSO- d6) 5 = 0,37 ppm.

[1466] Ejemplo 23 (ejemplo de referencia). Preparación de PPAL-R

[1469]

[1471] En una matraz de fondo redondo de tres cuellos equipada con un agitador mecánico se añadieron diclorofosfato de fenilo (189,6 g, 0,90 mol) y EtOAc anhidro (750 mL). La solución se enfrió hasta -10 °C bajo atmósfera de nitrógeno. Se añadieron L-alaninato de isopropilo (118 g, 0,90 mmol) y trietilamina (100 g, 1,1 eq) a la solución anterior. Se añadió a la mezcla una mezcla preenfriada (por debajo de 10 °C) de 2,3,4,5,6-pentafluorofenol (165 g, 1 eq) y trietilamina (90,5 g, 1 eq) en EtOAc (300 mL) a través de un embudo de adición a -5 °C y la mezcla resultante se agitó entre 20-25 °C durante 1 hora. Se filtró el precipitado blanco (TEAHCl) y se aclaró con EtOAc. Se concentró el filtrado a presión reducida para producir alrededor de 280 g de PPAL-RS (S/R=1/1) como un sólido blanco. Se trituró el PPAL-RS (280 g) en 300 mL de heptano/EtOAc (20:1) a temperatura ambiente durante 5 min. La suspensión blanca se filtró y el sólido se lavó con una mezcla de heptano/EtOAc (20:1). Se enfrió el filtrado hasta 8 °C y el sólido se recogió por filtración. Se obtuvo PPAL-R bruto (10 g) con una pureza quiral del 95 %. Se purificó el producto bruto siguiendo el paso anterior. Se obtuvo PPAL-R (5 g) con una pureza quiral del 98 % de NLT.

[1472] 1H N M R (400 M Hz, D M S O - da) 5 = 7 ,43 - 7 ,39 (m, 2H ), 7 ,27 - 7 ,22 (m, 3H), 6 ,87 (dd,J = 14,1 ,9,9 Hz, 1H ), 4 ,89 -4 ,85 (m, 1H ), 3 ,95 - 3 ,90 (m, 1H ), 1 ,27 (dd,J= 7 ,1 , 1 , 1 Hz, 3H ), 1 , 14 (dd,J= 6 ,2, 1 ,2 Hz,<6>H). 13P N M R (160 M Hz, D M S O - d<6>) 5 = 0,35.

[1474] E jem p lo 24 (ejem plo de referencia). P re p a ra c ió n del C o m p u esto 52.

[1477]

[1480] P a so 1. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 49.

[1482] A una so lución de 48 ( 1 ,81 g, 3 ,23 mmol) en d ioxano (18 m L) s e añad ió una so lució n a cu o sa de C H<3>N H<2>al 40 % ( 16 ,2 mmol). La reacció n s e agitó a 40 ° C durante 2 h. La m e zcla s e concentró, s e diluyó con E tO A c (50 mL), s e lavó con a g u a y sa lm u e ra . La ca p a o rg á n ica s e se c ó so b re N a<2>S O<4>anhidro, s e filtró y s e concentró para obtener un sólido blanco 49 (1,66 g, 92 % ) .

[1485]

[1486] Paso 2. Preparación del Compuesto 50.

[1487] A una solución del Compuesto 49 (1,34 g, 2,42 mmol) y 1-metilimidazol (794 mg, 9,68 mmol) en DCM (14 mL) se añadió lentamente cloroformiato de pentilo (547 mg, 3,63 mmol) a 0 °C. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna (PE: EtOAc = 5:1 - 2:1) para proporcionar el Compuesto 50 (1,01 g, 62 %) como un sólido blanco.

[1488] 1HNMR (400 MHz, DMSO) 57,96 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 6,06-6,10 (d, J= 16,0 Hz, 1H), 4,09-4,30 (m, 2H), 3,97-4,09 (m, 4H), 3,28 (s, 3H), 1,39-1,46 (m, 2H), 1,0-1,2 (m, 35H), 0,73-0,76 (t, J= 8,0 Hz, 3H).

[1491]

[1493] Paso 3. Preparación del Compuesto 51.

[1494] A una solución del Compuesto 50 (1,00 g, 1,5 mmol) en THF (11 mL) se añadieron Et3 N (2,0 mL, 15 mmol) y Et3 N.3 HF (1,21 g, 7,5 mmol) a 0 °C. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía en columna (MeOH: CH2 Ch = 50:1) para obtener el Compuesto 75 (460 mg, 72,2 %) como un polvo blanco.

[1497]

[1499] Paso 4. Preparación del Compuesto 52.

[1500] A una solución del Compuesto 51 (460 mg, 1,08 mmol) y PPAL-S (538 mg, 1,19 mmol) en THF anhidro (9 mL) se añadió lentamente f-BuMgCl (2,27 mmol) a 5-10 °C bajo N2. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 40 min. La mezcla se interrumpió con solución acuosa saturada de NH4O, se extrajo con EtOAc, se lavó con solución acuosa de K2 CO3 al 5 % y salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía en columna (CH2 Ch: MeOH = 15:1) para obtener el Compuesto 52 (280 mg, 37,3 %) como un sólido blanco.

[1501] 1H NMR (400 MHz, DMSO) 58,12 (s, 1H), 7,34-7,38 (m, 2H), 7,18-7,23 (m, 3H), 6,74 (s, 2H), 6,11-6,16 (d, J= 16,0 Hz, 1H), 5,99-6,05 (m, 1H), 5,84 (m, 1H), 4,77-4,81 (m, 1H), 4,30-4,41 (m, 3H), 4,03-4,11 (m, 3H), 3,78-3,80 (m, 1H), 3,3 (s, 3H), 1,44-1,51 (m, 2H), 1,00-1,21 (m, 16H), 0,76-0,80(t, J= 8,0 Hz, 3H), [M+H]+= 696,6.

[1502] Ejemplo 25 (ejemplo de referencia). Preparación del Compuesto 56.

[1503]

[1506] P a so 1. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 48.

[1508] A una so lució n del C o m p u e sto 23 (600 mg, 1 eq) en piridina (30 m L) s e añ ad ió T I P D S C h ( 1 ,5 eq) a 0 °C . La solución resultante s e dejó rep osar a tem peratura am biente durante<2>h. La m ezcla s e interrum pió con a g u a he lad a y se extrajo con EtO A c. La ca p a o rg á n ica s e lavó con so lució n a cu o sa de H C l 1 M, bicarbonato de so d io a cu o so satu rad o y cloruro de sodio a cu oso saturado, s e se c ó so b re sulfato de sodio anhidro y s e concentró para producir el residuo bruto. El residuo s e purificó por crom atografía (M eO H : C H<2>O<2>= 1:50 ) para obtener el Co m p u esto 48 (998 mg, 94,4 % ) com o una e sp u m a b lan ca sólida.

[1511]

[1514] P a so 2. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 53.

[1515] Una mezcla del Compuesto 48 (800 mg, 1 eq), piridina (3,2 mL), DMAP (34,9 mg, 0,2 eq) en DCM (20 mL) se agitó a temperatura ambiente. Se añadió gota a gota cloroformiato de N-amilo (3,2 mL) a 0 °C y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 día. La capa orgánica se lavó con solución acuosa de HCl 1 M, bicarbonato de sodio acuoso saturado y cloruro de sodio acuoso saturado, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporó al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (MeOH: CH2 Ch = 1:50) para obtener el Compuesto 53 (255 mg, 26 %) como una espuma blanca sólida.

[1518]

[1520] Paso 3. Preparación del Compuesto 54.

[1521] A la solución del Compuesto 53 (270 mg, 1 eq) en 1,4-dioxano (10 mL), se le añadió gota a gota una solución acuosa al 40 % de CH3 NH2 (225,7 mg, 5 eq). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y después se concentró al vacío. El residuo se cromatografió sobre gel de sílice (metanol:diclorometano = 1:40) para obtener 54 (220 mg, 81,7 %) como una espuma blanca sólida.

[1524]

[1526] Paso 4. Preparación del Compuesto 55.

[1527] Se añadieron trietilamina (1011,9 mg, 10 eq) y Et3 N 3HF (806,05 mg, 5 eq) a una solución enfriada con hielo de 54 ( 6 6 8 mg, 1 eq) en THF (10 mL), la mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y se cromatografió sobre gel de sílice (MeOH: CH2O2 = 1:30) para obtener el Compuesto 55 (492 mg, 84%) como una espuma blanca sólida.

[1530]

[1533] Paso 5. Preparación del Compuesto 56.

[1534] A la mezcla del Compuesto 55 (113 mg, 1 eq) y PPAL-S (120 mg, 1 eq) en THF (4 mL) se añadió gota a gota t-BuMgCl 1,7 M en tHf (0,327 mL, 2,1 eq) a -10 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, y después se interrumpió con solución acuosa saturada de NH4CL La fase acuosa se extrajo con EtOAc y la faseo rg á n ica s e lavó con sa lm u e ra , s e se có y s e concentró para obtener un residuo bruto. El residuo s e som etió a crom atografía flash para obtener el C o m p u e sto 56 ( 126 mg, 68 ,5 % ) com o un só lido blanco.

[1535] 1H N M R (400 M Hz, D M S O ) 5 8,00 (s, 1H ), 7 ,10 -7 ,45 (m, 5H ), 6 ,15 -6 ,20 (d, J = 20 ,0 Hz, 1H ), 5 ,00 -5 ,25 (s, 1H ), 4 ,80 ­ 4,86 (m, 1H ), 4 ,45 -4 ,70 (m, 2H ), 4 ,12 -4 ,19 (m, 3H), 3 ,80 -3 ,85 (m, 1H ), 3,04 (s, 3H), 1 ,60 -1 ,75 (m, 2H ), 1 , 10 -1 ,40 (m, 16 H ), 0,76-0,80(t, J = 8,0 Hz, 3H).

[1536] 31P N M R (160 M Hz, D M S O ) 5 3 ,57 , [M+H]+= 696,5.

[1537] E jem p lo 26 (ejem plo de referencia). P re p a ra c ió n del C o m p u esto 60.

[1540]

[1543] P a so 1. P re p a ra c ió n del C o m p u e sto 57.

[1544] A una so lución de<6>(20 g, 1 eq) en C H<3>C N (100 mL) s e añ ad ió im idazol (16 ,6 g), T IP D S C h (28 ,9 g, 1 ,5 eq) en se c u e n c ia a 5 ± 5 °C . La so lución resultante s e dejó reposar a tem peratura am biente durante 4 h. La m ezcla se interrum pió con ag u a helad a y se extrajo con EtO A c. La ca p a o rgánica s e lavó con agua, bicarbonato de sodio a cu o so satu rad o y cloruro de sodio a cu oso saturado, s e se c ó so b re sulfato de sodio anhidro y s e concentró para producir el residuo bruto (32 g).

[1545]

[1547] Paso 2. Preparación del Compuesto 58.

[1548] A la solución del Compuesto 57 (9,8 g, 1 eq) en THF (4 mL) se añadió gota a gota f-BuMgCl 1,7 M en THF (50 mL, 4,8 eq) a 0-5 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h, y

[1549] se añadió lentamente cloroformiato de n-amilo (2,7 g, 1,05 eq). La mezcla se agitó a 0-5 °C durante 3-4 h. La mezcla se interrumpió con solución saturada acuosa de NH4CL La fase acuosa se extrajo con EtOAc (200 mL) y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó y se concentró para obtener 58 (10,7 g) en forma de un aceite.

[1552]

[1554] Paso 3. Preparación del Compuesto 59.

[1555] Se añadieron trietilamina (10,119 g) y EtsN-3HF (8 , 6 g, 5 eq) a una solución enfriada con hielo del Compuesto 58 (7,3 g, 1 eq) en THF (100 mL) y la mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y se cromatografió sobre gel de sílice (MeOH: CH2 Ch = 1:30) para obtener el Compuesto 59 (4,3 g, 91 %) como un sólido blanco.

[1558]

[1561] Paso 4. Preparación del Compuesto 60.

[1562] A la mezcla del Compuesto 59 (2 g, 1 eq) y PPAL-S (2.3 g, 1,1 eq) en THF (40 mL) se añadió gota a gota f-BuMgCl 1,7 M en THF (5,6 mL, 2,1 eq) a -5 °C. La mezcla se agitó a -20 ± 5 °C durante 1 h, y después se interrumpió con solución saturada de NH4CL La fase acuosa se extrajo con EtOAc y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó y se concentró para obtener un residuo bruto. El residuo se sometió a cromatografía flash para obtener el Compuesto 60 (1,5 g, 47 %) como un sólido blanco.

[1563] <1>H NMR (400 MHz, CD<3>OD) 57,9 (s, 1H), 7,1~7,2 (m,5H), 6,2 (d, J = 20 Hz, 1H), 5,1 (br,1H), 4,84 (m, 1H), 4,49 (m, 2H), 4,16 (m, 1H), 4,13 (m, 2H), 3,86 (m, 1H), 3,45 (br, 6H), 1,70 (m, 2H), 1,26 (m, 4H), 1,20 (m, 6H), 1,14 (m, 6H), 0,93 (m, 3 H), [M+H]+ =710,5.

[1565] Datos biológicos

[1567] Ejemplo 27. Metodología de ensayo y datos biológicos adicionales

[1569] Se sembraron células Huh-7 luc/neo ET portadoras de un replicón reportero discistrónico de luciferasa del VHC genotipo 1b a 7,5 * 10<3>células/ml en placas duplicadas de 96 pocillos para la determinación paralela de la eficacia antiviral (EC<50>) y citotoxicidad (TC<50>). Las placas se cultivaron durante 24 horas antes de la adición de los compuestos. Se prepararon seis diluciones de medio logaritmo seriadas de los artículos de ensayo (concentración de prueba alta de 100,0 |<j>M o concentración de prueba alta de 1,0 |<j>M) e interferón alfa2b humano (prueba alta de 10,0 U/ml) en un medio de cultivo celular y se añadieron a las células cultivadas en pocillos triplicados para cada dilución. Seis pocillos de las placas de ensayo recibieron solo el medio como control sin tratamiento. Después de 72 horas de cultivo en presencia del compuesto, una de las placas se usó para la determinación de la citotoxicidad mediante tinción con XTT y la otra para la eficacia antiviral mediante la determinación de la actividad reportera de luciferasa. Se recopilaron los datos de citotoxicidad y eficacia y se importaron en una hoja de cálculo de Excel personalizada para la determinación de los valores de TC50 y EC50. Los datos correspondientes a los compuestos de las Fórmulas I-VII se ilustran en la Tabla 7. Además, la Fig. 2 ilustra las curvas de inhibición de la replicación del VHC correspondientes al Compuesto 5-2 y a Sofosbuvir. Como muestra la Fig. 2, el Compuesto 5-2 cuenta con una EC<50>= 4 nM, mientras que el Sofosbuvir tiene una EC<50>= 53 nM. El eje y representa el porcentaje del control viral y el eje x indica la concentración del fármaco en<j>M. La Fig. 3 ilustra las curvas de inhibición de la replicación del VHC correspondientes al Compuesto 25 y a Sofosbuvir. El Compuesto 25 tiene una EC<50>= 4 nM y el Sofosbuvir tiene una EC<50>= 53 nM. El eje y representa el porcentaje del control viral y el eje x indica la concentración del fármaco en<j>M. La Fig. 4 ilustra una comparación intraensayo de la actividad antiVHC de los compuestos 5-2, 25, 27 y Sofosbuvir. El eje y representa el porcentaje del control viral y el eje x indica la concentración del fármaco en j M.

[1570] Se utilizaron genotipos del VHC derivados de varios pacientes que contenían variantes de tipo salvaje y asociadas a resistencia para determinar su sensibilidad relativa a la replicación a los compuestos de ensayo. Se prepararon vectores de prueba de resistencia del replicón (RTV) que contenían las regiones genómicas NS5<b>, utilizando ARN viral aislado del plasma de pacientes con VHC. Cada región NS5B se amplificó mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa y se clonó en un RTV de resistencia del replicón del VHC, que posteriormente se transfirió a células Huh-7 mediante electroporación. Después de la incubación en ausencia y presencia de compuestos de ensayo diluidos en serie durante 72-96 h, se midió la replicación viral mediante la actividad de la luciferasa y se determinaron las concentraciones inhibitorias del 50 % (valores de IC<50>).

[1572] La Tabla 2 presenta los valores de IC<50>e IC<95>para los compuestos 25, 27, 5-2 y Sofosbuvir frente a diversos aislados clínicos que contienen variantes de tipo salvaje y asociadas a resistencia.

[1574] Todos los compuestos fueron significativamente más efectivos contra la replicación del VHC que el sofosbuvir y ni los compuestos 25, 27 ni el Compuesto 5-2 mostraron ninguna evidencia de resistencia cruzada a los mutantes L159F, L159F y S282T y C316N.

[1576] Tabla 2: Actividad antiviral de los compuestos de ensayo en genotipos de VHC derivados de pacientes

[1578]

[1579]

[1582] S e llevó a cab o un e n sa yo de transfección transitoria para d eterm inar la se n s ib ilid a d del m utante S 282 T de tipo s a lv a je del V H C a los com p uesto s de prueba. L a s cé lu la s H u h -7 fueron electro p o radas en p resen cia de A R N transcrito a partir de p lásm id o s de replicón del V H C de tipo sa lv a je o S 282 T , d e sd e el promotor T 7. S e sem b raro n la s c é lu la s tra n sfecta d a s en p laca s de 96 pozos a 7 ,5 x 10<3>c é lu la s por pozo en un m edio D u lb ecco 's M odified E a g le 's (D M EM ). T r a s 24 h de incubació n, s e elim inó el m edio y s e reem plazó por un m edio fresco sin o con v a ria s co n cen trac io n e s del com puesto de prueba. T ra s una in cu b ació n ad icional de 96 h, se m idió la actividad a n tiV H C m ediante e n sa yo de punto final de lu cife ra sa u san d o el kit de gen reportero de lu m in isce n c ia B rite lite™ P lu s (PerkinElmer, Shelton, CT). Se trataron e incubaron en paralelo placas duplicadas para evaluar la toxicidad celular mediante tinción con el colorante de tetrazolio XTT.

[1583] La Tabla 3 presenta los valores de IC<50>e IC<95>de los compuestos 25, 27, 5-2 y Sofosbuvir frente a los replicones de tipo salvaje y S282T del VHC.

[1584] Todos los compuestos fueron significativamente más efectivos contra la replicación del VHC que el sofosbuvir y ni los compuestos 25, 27 ni el Compuesto 5-2 mostraron ninguna evidencia de resistencia a la variante S282T.

[1585] Tabla 3: Actividad antiviral de los compuestos de prueba en un ensayo de infección transitoria por VHC.

[1587]

[1589] La estabilidad de los compuestos seleccionados en sangre entera humana fresca y en la fracción S9 hepática humana se determinó en incubaciones que contenían 10 |jM del compuesto de prueba. Después de incubaciones de 0, 30, 60 min y hasta 120 min, se retiraron las alícuotas y se extrajo inmediatamente con 3 volúmenes de metanol/acetonitrilo enfriado con hielo (1:1, v/v). Se centrifugaron los extractos y se analizaron los sobrenadantes mediante LC-MS/MS para determinar las concentraciones del compuesto de prueba sin modificar y los posibles metabolitos.

[1590] La Fig. 5 muestra la excelente estabilidad del Compuesto 5-2 y de todos los derivados 2-amino en sangre humana. De manera interesante, la Fig. 6 ilustra la evolución temporal in vitro de la desalquilación del fosforamidato de nucleósido 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metilo-N<2>-metil-N<6>-metil-2,6-diaminopurina hacia el fosforamidato de nucleósido 2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metilo-N<6>-metil-2,6-diaminopurina con una fracción S9 hepática humana. Además, se observó una tasa de escisión inesperada, más rápida y más extensa de la porción de carbamato por parte del resto S9 hepático humana en comparación con el Compuesto 5-2 y sus otros derivados 2-amino (Fig. 7).

[1591] Ejemplo 28. Ensayo de polimerasa NS5B del VHC (gt1b)

[1592] La inhibición de la polimerasa NS5B del VHC (gt1b) se determinó por triplicado mediante la medición de la polimerización de novo en mezclas de reacción que contenían diluciones seriadas de TA, ARN viral transcrito in vitro complementario a la región 3'UTR de la hebra (-) del VHC, polimerasa, ribonucleótido radiomarcado, 250<j>M de rNTP no competidores y 1<j>M de rNTP competidor. Se determinaron las concentraciones de TA que produjeron una inhibición del 50 % (IC<50>) a partir de las curvas de inhibición obtenidas como resultado.

[1593] Ejemplo 29. Ensayo con células progenitoras de médula ósea humana

[1594] Se añadieron células progenitoras de médula ósea humana (Invitrogen) frescas suspendidas en un medio de cultivo específico de BFU-E o GM-CSF, a 10<5>células/pocillo, para triplicar las diluciones seriadas de TA en placas de 6 pocillos. Después de 14 días de incubaciones, se usaron los recuentos de colonias para determinar los valores de CC<50>. Las colonias BFU-E se confirmaron mediante la técnica de bencidina.

[1595] Los compuestos 25, 27 y 5-2 no presentan citotoxicidad frente a células madre de médula ósea in vitro.

[1596] Ejemplo 30. Ensayo de cardiomiocitos de ¡PS

[1597] Se sembraron cardiomiocitos de ¡PS (Cellular Dynamics) en placas de microtitulación a 1,5 x 10<4>células por pocillo.

[1598] Tras 48 horas de incubación, las células se lavaron y se añadió un medio de mantenimiento que contenía TA en diluciones seriadas por triplicado. Después de incubar durante 3 días adicionales, se midió la viabilidad celular mediante tinción con XTT y se calcularon los valores CC<50>.

[1600] Los compuestos 25, 27 y 5-2 no muestran citotoxicidad contra cardiomiocitos de iPS in vitro.

[1602] Ejemplo 31. Ensayos de ADN polimerasa humana

[1604] Se determinó la inhibición de las ADN polimerasas humanas a, p y y (CHIMERx) por triplicado en mezclas de reacción de TA diluido en serie, 0,05 mM de dCTP, dTTP y dATP, 10 |<j>C¡ de [32P]-a-dGTP (800 Ci/mmol), 20 | jg de ADN de timo de ternero activado y reactivos adicionales específicos para cada polimerasa. Después de incubaciones de 30 minutos, se midió la incorporación de [a-32P]-GTP y se utilizaron las curvas de incubación obtenidas como resultado para calcular los valores de IC<50>.

[1606] El trifosfato, trifosfato de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina, así como los análogos de trifosfato de los compuestos 25, 27 y 5-2 no inhiben las ADN polimerasas humanas a, p o y.

[1608] Ejemplo 32. Cocultivos de hepatocitos humanos

[1610] La citotoxicidad y la salud de los hepatocitos se evaluaron por triplicado mediante la medición de la liberación de ALT, la producción de urea, la secreción de albúmina y el contenido de ATP celular en cocultivos de hepatocitos humanos con micropatrones (HepatoPac®, Hepregen Corporation), preparados mediante la siembra de hepatocitos humanos femeninos criopreservados (donante único) y fibroblastos de ratón 3T3 J2 en placas de microtitulación, de acuerdo con los procedimientos establecidos por Hepregen. Los medios de cultivo se reemplazaron por medios frescos que contenían TA, artículo de prueba, (0, 1, 10 o 30 j M) cada 2 o 3 días hasta el día 16. Los medios de cultivo usados se analizaron para determinar el contenido de ALT y urea en los días 2, 5, 7, 9, 12, 16 y 21, y para determinar el contenido de albúmina en los días 2, 5, 7 y 9. Los niveles de ATP celular se midieron en los días 9 y 21. Se restaron las señales de ATP de los cultivos de control solo estromales (fibroblastos murinos 3T3) de las de los cocultivos humanos HepatoPac para obtener los efectos específicos de hepatocitos. Véanse las Tablas 4, 5, y 6 a continuación.

[1612] El Compuesto 5-2, a concentraciones de hasta 30 j M, no mostró signos de citotoxicidad medidos por liberación de ALT, secreción de albúmina, producción de urea y contenido de ATP celular cuando se incubó durante hasta 12 días con hepatocitos humanos cocultivados con micropatrones. Las indicaciones menores de citotoxicidad detectadas con una exposición prolongada (hasta 21 días de cultivo) fueron significativamente menores que las observadas con sofosbuvir. Véanse las Tablas 4, 5, y 6 a continuación.

[1614] INX-189 fue altamente citotóxico para los hepatocitos cocultivados humanos, mostrando una disminución de la secreción de albúmina ya desde el día 2 y citotoxicidad en todas las medidas. Sofosbuvir mostró más citotoxicidad que AT-511 en las mismas condiciones.

[1616] Tabla 4 Efecto del artículo de prueba sobre las concentraciones de ATP celular

[1619]

[1622] Tabla 5. Efecto de los artículos de prueba en la secreción de albúmina

[1625]

[1628] Tabla 6 Efecto de los artículos de prueba en la secreción de albúmina

[1629]

[1631] Ejemplo 33. Estudios metabólicos

[1632] El metabolismo de los compuestos 25, 27 y 5-2, a una concentración de 10|jM, se investigó en cultivos primarios frescos de hepatocitos humanos, de perro y de ratón. Hepatocitos procedentes de humanos (XenoTech, sexo mixto, combinados de 10 donantes), perros Beagle machos (BioreclamationlVT) y ratones ICR/CD-1 machos (BioreclamationlVT, 8 donantes) se sembraron en placas de 6 pozos con recubrimiento de matrigel y se incubaron en condiciones individuales con 10 jM de TA. Después de 2, 4, 6, 8 o 24 horas, los niveles intracelulares de profármacos nucleótidos y sus metabolitos potenciales (profármacos, monofosfatos, trifosfatos y nucleósidos) se cuantificaron mediante LC-EM/EM. Las concentraciones por debajo del límite inferior de cuantificación (1,5 pmol/106 células para profármacos, monofosfatos y nucleósidos, y 12 pmol/106 células para trifosfatos) se extrapolaron de las curvas estándares.

[1633] El compuesto trifosfato de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina es el metabolito predominante de los compuestos 25, 27 y 5-2 observado en hepatocitos humanos cultivados y es un potente inhibidor de la polimerasa NS5B del VHC (gt1b), con una IC50 de 0,15 jM.

[1634] La Fig.8 muestra los metabolitos predominantes del Compuesto 25 generados en hepatocitos humanos.

[1635] La Fig.9 muestra los metabolitos predominantes del Compuesto 27 generados en hepatocitos humanos.

[1636] La Fig. 10 muestra los metabolitos predominantes del Compuesto 5-2 generados en hepatocitos humanos.

[1637] La Fig. 11 ilustra las vías de activación para los Compuestos 25, 27 y 5-2. Como puede observarse, los compuestos 25, 27 y 5-2 se convierten en sus respectivos análogos de monofosfato, que posteriormente se metabolizan hasta un análogo de MP común: el monofosfato de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina (Compuesto 61). A continuación, se fosforila el monofosfato de manera secuencial hasta formar el trifosfato activo: trifosfato de p-D-2'-desoxi-2'-a-fluoro-2'-p-metil-guanina (Compuesto 62).

[1638] Ejemplo 34. Controles

[1639] En los ejemplos anteriores se usaron INX-189 (INX-08189/BMS-986094) y Sofosbuvir se utilizaron como controles. Los dos profármacos nucleotídicos más potentes, los Compuestos 25 y 27, demostraron una selectividad excelente, con valores CC 50 superiores a 100 jM en células Huh-7, células madre de médula ósea humana y cardiomiocitos humanos. No se observó inhibición de la ADN polimerasa humana a, p o y, ni actividad frente a otros virus de ARN o ADN, ni toxicidad en todas las líneas celulares del hospedador a concentraciones de hasta 100 jM.

[1640] La Tabla 7 es una tabla que ilustra los compuestos ensayados en un Ensayo de replicón de VHC junto con los resultados EC50/EC95 (jM) y CC50 (jM).

[1641] Tabla 7 Resultados del ensayo de replicón para los compuestos probados.

[1643]

[1644] Ċ

[1645]

[1648] 130

[1649]

[1650]

[1651]

[1652]

[1653]

[1654]

[1657] Los nucleótidos de purina p-D-2'-D-2'-a-fluon>2'-p-C-sustitu¡do-2-mod¡flcado-N6-sustitu¡do descritos en el presente documento exhiben una actividad significativa contra el virus VHC. Los compuestos de acuerdo con la presente invención se ensayan para determinar la actividad relativa deseada usando ensayos bien conocidos y convencionales encontrados en la literatura.

[1659] Por ejemplo, la actividad antiVHC y la citotoxicidad de los compuestos pueden medirse en el sistema de ensayo de replicón de ARN subgenómico del VHC en células Huh7 ET. (Véase, Korba, et al.,Antiviral Research2008, 77, 56). Los resultados se pueden resumir en comparación con un control positivo, 2'-C-Me-citosina {2'-C-Me-C} (Pierra, et al.,Journal of Medicinal Chemistry2006,49,6614.

[1661] Otro ensayo in vitro para la actividad del virus de la hepatitis C se describe en la patente de EE. UU. n.° 7,718,790 de Stuyver, et al., y asignada a Pharmasset, Inc.

Claims (15)

1. REIVINDICACIONES

1. Compuesto de la fórmula:

en donde:

R7 es hidrógeno, alquilo C1 -6 , cicloalquilo C3 -7 , heteroarilo, heterocíclico, fenilo o naftilo, en donde el fenilo o el naftilo están sustituidos opcionalmente por alquilo C1 -6 , alquenilo C2 -6 , alquinilo C2 -6 , alcoxi C1 -6 , F, Cl, Br, I, nitro, ciano, haloalquilo C1 -6 , -(CH2)1 -6COOH, -(CH2)1 -6COO-alquilo C1 -6 , -N(R7')2 , acilamino C1 -6 , NHSO2-alquilo C1 -6 , -SO2 N(R7')2COR7"y -SO2-alquilo C1.6 ;

R7' es independientemente hidrógeno o alquilo C1 -6;

R7" es -OR11;

R8 es hidrógeno, alquilo C1 -6 , o R9a, o R9b y R8 juntos son (CH2 )n para formar un anillo cíclico que incluye los átomos N y C adyacentes; en donde n es de 2 a 4;

R9a y R9b se (i) seleccionan de forma independiente entre hidrógeno, alquilo C1 -6 , cicloalquilo, -(CH2 )c(NR9')2, hidroxialquilo C1.6 , -CH2 SH, -(CH2)2S(O)(Me), -(CH2 )3 NHC(=NH)NH2 , (lH-indol-3-il)metil, (lH-imidazol-4-il)metil, -(CH2 )cCOR9", arilo y arilo(alquilo C1 -3 )-, en donde los grupos arilos pueden estar sustituidos opcionalmente por un grupo seleccionado de entre hidroxilo, alquilo C1 -6 , alcoxi C1 -6 , halógeno, nitro y ciano; (ii) R9a y R9b son ambos alquilo C1 -6 ; (iii) R9a y R9b juntos son (CH2 V para formar un anillo espiro; (iv) R9a es hidrógeno y R9b y R8 juntos son (CH2)n para formar un anillo cíclico que comprende los átomos N y C adyacentes (v) R9b es hidrógeno y R9a y R8 juntos son (CH2 )n para formar un anillo cíclico que comprende los átomos N y C adyacentes, en donde c es de 1 a 6, n es de 2 a 4, r es de 2 a 5 y en donde R9' es, de forma independiente, hidrógeno o alquilo C1-6 y R9" es -OR11 o -N(R1r)2 ; (vi) R9a es hidrógeno y R9b es hidrógeno,-CH3, -CH2 CH3 , -CH(CH3h, -CH2CH(CH3h, -CH(CH3)CH2CH3, -CH2 Ph, -CH2-indol-3-il, -CH2CH2SCH3, -CH2CO2H, -CH2C(O)NH2, -CH2CH2COOH, -CH2CH2C(O)NH2, -CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2 CH2 NHC(NH)NH2 , -CH2-imidazol-4-il, -CH2OH, -CH(OH)CH3 , -CH2((4'-OH)-Ph) o -CH2SH; o (vii) R9a es -CH3 , -CH2 CH3 , -CH(CH3)2 , -CH2CH(CH3)2 , -CH(CH3)CH2 CH3 , -CH2 Ph, -CH2-indol-3-il, -CH2CH2SCH3 , -CH2 CO2 H, -CH2C(O)NH2 , -CH2 CH2 COOH, -CH2 CH2C(O)NH2, -CH2 CH2 CH2 CH2 NH2 , -CH2 CH2 CH2 NHC(NH)NH2 , -CH2-imidazol-4-il, -CH2OH, -CH(OH)CH3, -CH2((4'-OH)-Ph) o -CH2 SH, y R9bes hidrógeno;

R10 es hidrógeno, alquilo C1-6 sustituido opcionalmente por un alcoxi, di(alquilo C1-C4)-amino o halógeno, haloalquilo C1 -6 , cicloalquilo C3 -7 , heterocicloalquilo, aminoacilo, arilo, heteroarilo, arilo sustituido o heteroarilo sustituido;

R11 es un alquilo C1.6 opcionalmente sustituido, un cicloalquilo opcionalmente sustituido; un alquinilo C2-6 opcionalmente sustituido, un alquenilo C2-6 opcionalmente sustituido o acilo opcionalmente sustituido;

Y es NR1R2, en donde R1 es metilo y R2 es hidrógeno;

R12 es CH3 ;

R3 es hidrógeno, , difosfato, trifosfato, un aminoácido enlazado a un carbonilo opcionalmente sustituido o -C(O)R3C;

R3A se selecciona de entre O-, OH, un -O-arilo opcionalmente sustituido, un -O-heteroarilo opcionalmente sustituido o un heterociclilo opcionalmente sustituido;

R3B se selecciona de entre de O-, OH, un aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido o un éster de aminoácido enlazado a N opcionalmente sustituido;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Compuesto de la reivindicación 1 de la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. Compuesto de la reivindicación 1 de la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. Compuesto de la reivindicación 1 de la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. Compuesto de la reivindicación 1 de la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. Compuesto de la reivindicación 1 de la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Compuesto de la reivindicación 1 de la fórmula:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

8. Composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva del compuesto de cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para tratar el VHC en un hospedador en un vehículo farmacéuticamente aceptable.

9. Composición farmacéutica de la reivindicación 8, en una forma de dosificación oral.

10. Composición farmacéutica de la reivindicación 9, en una tableta o una cápsula.

11. Compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo para su uso en el tratamiento de una infección por el virus de la hepatitis C.

12. Compuesto para su uso de la reivindicación 11, en donde el VHC es de genotipo 1a, 1b, 2a, 2b, 3a, 4a, o 4d.

13. Compuesto para su uso de la reivindicación 12, en donde el VHC es de genotipo 1a o 1b.

14. Compuesto para su uso de la reivindicación 12,donde el VHC es de genotipo 3a.

15. Compuesto para su uso de cualquiera de las reivindicaciones 11 a 14, en donde el hospedador es un humano.