ES2848978T3 - Agentes inmunomoduladores - Google Patents

Agentes inmunomoduladores Download PDF

Info

Publication number
ES2848978T3
ES2848978T3 ES15857812T ES15857812T ES2848978T3 ES 2848978 T3 ES2848978 T3 ES 2848978T3 ES 15857812 T ES15857812 T ES 15857812T ES 15857812 T ES15857812 T ES 15857812T ES 2848978 T3 ES2848978 T3 ES 2848978T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
optionally substituted
alkyl
compound
ido
cancer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES15857812T
Other languages
English (en)
Inventor
Hilary Plake Beck
Juan Carlos Jaen
Maksim Osipov
Jay Patrick Powers
Maureen Kay Reilly
Hunter Paul Shunatona
James Ross Walker
Mikhail Zibinsky
James Aaron Balog
David K Williams
Jay A Markwalder
Emily Charlotte Cherney
Weifang Shan
Audris Huang
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Flexus Bioscience Inc
Original Assignee
Flexus Bioscience Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Flexus Bioscience Inc filed Critical Flexus Bioscience Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2848978T3 publication Critical patent/ES2848978T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/04—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D215/06—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to the ring carbon atoms having only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/12—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/12—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D215/14—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/20—Oxygen atoms
    • C07D215/22—Oxygen atoms attached in position 2 or 4
    • C07D215/233—Oxygen atoms attached in position 2 or 4 only one oxygen atom which is attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C07D217/04—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/12—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/24—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/74—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached to ring carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/08—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/08—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens

Abstract

Un compuesto que tiene la fórmula (I): **(Ver fórmula)** o un estereoisómero, una sal, un hidrato o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde Z es O; R1 y R2 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1- C4 opcionalmente sustituido, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3 o CONH2 y, cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo, se pueden unir para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados, de modo independientemente, entre O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados entre fluoro y alquilo C1-C3; en donde J1 es CN, N u opcionalmente C(R2) cuando R2 está unido al vértice del anillo identificado como J1; R3 y R3a son de modo independiente, hidrógeno, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, haloalquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquil C3-C6-alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, aril-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, flúor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R5)2, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -(CR5R5)m-OH, -(CR5R5)m-CO2H, -(CR5R5)m- C(O)NH2, -(CR5R5)m-C(O)NHR5, -(CR5R5)mN(R5)2, -NH(CR5R5)mCO2H o -NH(CR5R5)m-C(O)NH2; cada R5 es, de modo independiente, H, F, OH o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; cada R5a es, de modo independiente, H o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; R6 es H, OH, F, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o -N(R5a)2; cada m es, de modo independiente, 1, 2 o 3 y R11 y R12 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1- C4 opcionalmente sustituido, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3 o CONH2, y cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo se pueden unir juntos para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados de modo independiente entre O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados entre fluoro y alquilo C1-C3.

Description

DESCRIPCIÓN
Agentes inmunomoduladores
Antecedentes de la invención
La indolamina 2,3-dioxigenasa (IDO; también conocida como IDO1) es un gen diana de IFN-y que desempeña un papel importante en la inmunomodulación. La IDO es una oxidorreductasa y una de las dos enzimas que catalizan la primera etapa limitante de la tasa en la conversión de triptófano en N-formil-quinurenina. Existe como un monómero de 41 kD que se halla en varias poblaciones celulares, incluyendo las células inmunes, células endoteliales y fibroblastos. La IDO está relativamente bien conservada entre especies, donde los ratones y humanos comparten el 63 % de identidad de secuencia en el nivel de aminoácidos. Los datos derivados de esta estructura cristalina y la mutagénesis dirigida a sitio muestran tanto la unión con el sustrato como la relación entre el sustrato y la dioxigenasa ligada al hierro son necesarios para la actividad. Se identificó un homólogo de IDO (IDO2) que comparte el 44 % de homología de secuencia de aminoácidos con la IDO, pero su función es ampliamente distinta de la de IDO. (Ver, por ejemplo, Serafini P, et al., Semin. Cancer Biol., 16(1):53-65 (Feb. 2006) y Ball, H.J. et al., Gene, 396(1):203-213 (Jul.
2007)).
La IDO juega un papel importante en la inmunorregulación y su función inmunosupresora se manifiesta de varias formas. De modo fundamental, la IDO regula la inmunidad en el nivel de las células T y existe un nexo entre la producción de IDO y de citocinas. Además, los tumores manipulan con frecuencia la función inmune por regulación hacia arriba de la IDO. Así, la modulación de la IDO puede tener un impacto terapéutico sobre una cantidad de enfermedades, trastornos y afecciones.
Existe una unión patofisiológica entre IDO y cáncer. La disrupción de la homeostasis inmune está implicada íntimamente con el crecimiento y la progresión tumoral y la producción de IDO en el microambiente tumoral parece ayudar en el crecimiento tumoral y la metástasis. Más aún, niveles incrementados de actividad de IDO están asociados con varios tumores diferentes (Brandacher, G. et al., Clin. Cancer Res., 12(4):1144-1151 (Feb. 15, 2006)).
El tratamiento de cáncer implica comúnmente la resección quirúrgica seguida de quimioterapia y radioterapia. Los regímenes de tratamiento estándar muestran grados altamente variables de éxito a largo plazo debido a la capacidad de las células tumorales de escaparse esencialmente regenerando el crecimiento del tumor primario y, a menudo más importante, implantando una metástasis distante. Recientes avances en el tratamiento del cáncer y enfermedades, trastornos y afecciones relacionados con el cáncer comprenden el uso de terapia combinada incorporando inmunoterapia con más quimioterapia y radioterapia tradicional. En la mayoría de los escenarios, la inmunoterapia se asocia con menor toxicidad que la quimioterapia tradicional porque utiliza el propio sistema inmune del paciente para identificar y eliminar las células tumorales.
Además del cáncer, IDO fue implicada, entre otras afecciones, en la inmunosupresión, infecciones crónicas y enfermedades o trastornos autoinmunes (por ejemplo, artritis reumatoide). Así, la supresión de la degradación de triptófano por inhibición de la actividad de IDO tiene un valor terapéutico tremendo. Más aún, se pueden usar inhibidores de IDO para mejorar la activación de las células T cuando las células T se suprimen por embarazo, malignidad o un virus (por ejemplo, HIV). A pesar de que sus roles no están bien definidos, los inhibidores de IDO también se pueden encontrar uso en el tratamiento de pacientes con enfermedades o trastornos neurológicos o neuropsiquiátricos (por ejemplo, depresión).
Los inhibidores de IDO de moléculas pequeñas fueron desarrollados para tratar o prevenir enfermedades relacionadas con IDO. Por ejemplo, los inhibidores de IDO 1-metil-DL-triptófano; p-(3-benzofuranil)-DL-alanina; p-[3-benzo(b)tienil]-DL-alanina; y 6-nitro-L-triptófano fueron usados para modular la inmunidad mediada por células T por alteración de concentraciones extracelulares locales de triptófano y metabolitos de triptófano (documento WO 99/29310). Los compuestos que tienen actividad inhibidora de IDO se describen más a fondo en el documento WO 2004/094409.
En vista del papel desempeñado por la indolamina 2,3-dioxigenasa en una gama de diversas enfermedades, trastornos y afecciones y las limitaciones (por ejemplo, eficacia) de los inhibidores de IDO actuales, se necesitan nuevos moduladores de IDO y composiciones y métodos asociados con estos.
Breve sumario de la invención
La presente invención se refiere a compuestos que modulan la enzima oxidorreductasa indolamina 2,3-dioxigenasa (IDO) y composiciones (por ejemplo, composiciones farmacéuticas) que comprenden los compuestos. Tales compuestos, incluyendo los métodos de su síntesis y las composiciones, se describen en detalle más abajo.
La presente invención también se refiere al uso de tales compuestos y composiciones para el tratamiento y/o la prevención de una gama diversa de enfermedades, trastornos y condiciones mediadas total o parcialmente por IDO. Dichas enfermedades, trastornos y afecciones se describen en detalle en otras partes del presente documento. A menos que se indique otra cosa, cuando se describen en el presente documento usos de los compuestos de la presente invención, se ha de entender que tales compuestos pueden estar en forma de una composición (por ejemplo, una composición farmacéutica).
Como se trata más abajo, a pesar de que se cree que los compuestos de la presente invención efectúan su actividad por inhibición de IDO, no se requiere una compresión precisa del mecanismo de acción subyacente de los compuestos para poner en práctica la invención. Se prevé que los compuestos puedan efectuar alternativamente su actividad a través de la inhibición de la actividad de la triptófano-2,3-dioxigenasa (TDO). También se prevé que los compuestos puedan efectuar su actividad a través de inhibición de la función tanto de IDO como de TDO. A pesar de que los compuestos de la invención se mencionan en general en el presente documento como inhibidores de IDO, se ha de entender que la expresión “inhibidores de IDO” comprende compuestos que actúan individualmente a través de inhibición de TDO o IDO y/o compuestos que actúan a través de la inhibición tanto de IDO como de TDO.
En un primer aspecto se proporciona un compuesto que tiene la fórmula (I):
Figure imgf000003_0001
o un estereoisómero, sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvato del mismo, en donde Z es O; R1 y R2 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C4 opcionalmente sustituido, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3 , OCF3, SO2CH3 , SO2CF3 o CONH2 y, cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo, se pueden unir para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados, de modo independientemente, entre O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados entre fluoro y alquilo C1-C3 ; en donde J1 es CN, N u opcionalmente C(R2) cuando R2 está unido al vértice del anillo identificado como J1, R3 y R3a son de modo independiente, hidrógeno, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, haloalquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquil C3-C6-alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, aril-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, flúor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R5)2, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -(CR5R5)m-OH, -(CR5R5)m-CO2H, -(CR5R5)mC(O)NH2 , -(CR5R5)m-C(O)NHR5, -(CR5R5)mN(R5)2 , -NH(CR5R5)mCO2H o -NH(CR5R5)m-C(O)NH2; cada R5 es, de modo independiente, H, F, OH o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; cada R5a es, de modo independiente, H o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; R6 es H, OH, F, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o -N(R5a)2; cada m es, de modo independiente, 1,2 o 3 y R11 y R12 son, de modo independiente, hidrógeno, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C4 opcionalmente sustituido, CN, SO2NH2 , NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3 , SO2Ch 3, SO2CF3 o CONH2, y cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo se pueden unir juntos para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados de modo independiente entre O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados entre fluoro y alquilo C1-C3.
En un segundo aspecto de la misma se proporciona un compuesto seleccionado entre;
Figure imgf000004_0001
En un tercer aspecto, se proporciona un compuesto del primer o el segundo aspecto o un estereoisómero, sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvato del mismo, para su uso en un método para tratar una enfermedad, trastorno o afección, mediado al menos en parte, por IDO. De esto se deduce que estos compuestos pueden ser para su uso en los métodos de tratamiento y/o prevención divulgados en el presente documento.
En un cuarto aspecto, se proporciona una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o un estereoisómero, sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvato del mismo y al menos un agente terapéutico más.
En un aspecto, la presente divulgación proporciona compuestos representados por la fórmula (Ix):
Figure imgf000004_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o solvato de los mismos en donde el subíndice n es 1 o 0; el subíndice p es 1 o 0; el anillo denominado A es fenilo, heteroarilo de 5 o 6 miembros o cicloalquilo C5-7; Z es O; B es N, C(OR5a) o C(R3a); cada X es, de modo independiente, NR5a, O, CHR5, C(O) o CH(OR5a); Q es N, C(CN) o CR6; D es un enlace, O, C(R5)2 o NR5a; E es un heteroarilo bicíclico condensado de 9 o 10 miembros opcionalmente sustituido; R1 y R2 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4 , cicloalquilo C3-C6, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C4, CN, SO2NH2, NHSO2CH3 , NHSO2CF3 , OCF3 , SO2CH3, SO2CF3 o CONH2 y, cuando están en vértices adyacentes de un anillo fenilo, se pueden unir para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados, de modo independiente entre O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados de fluoro y alquilo C1-C3 ; R3, R3a y R4 son, de modo independiente, hidrógeno, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, haloalquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquil C3-C6-alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, aril-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, flúor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R5)2, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -(CR5R5)m-OH, -(CR5R5)m-CO2H, -(CR5R5)mC(O)NH2 , -(CR5R5)m-C(O)NHR5, -(CR5R5)mN(R5)2, -NH(CR5R5)mCO2H o -NH(CR5R5)m-C(O)NH2 ; cada R5 es, de modo independiente, H, F, OH o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; cada R5a es, de modo independiente, H o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; R6 es H, OH, F, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o -N(R5a)2 y cada m es, de modo independiente, 1, 2 o 3.
En otro aspecto más, la presente invención proporciona composiciones en las que los compuestos de fórmula (I) se combinan con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
La presente divulgación contempla métodos para el tratamiento o la prevención de cáncer en un sujeto (por ejemplo, un ser humano) que comprenden administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de la menos un inhibidor de IDO descrito en el presente documento. La presente divulgación incluye métodos de tratamiento o prevención de un cáncer en un sujeto administrando al sujeto un inhibidor de IDO en una cantidad eficaz para revertir o detener el avance de la inmunosupresión mediada por IDO. En algunos casos, la inmunosupresión mediada por IDO está mediada por célula que presenta antígeno (APC).
Los ejemplos de los cánceres que se pueden tratar usando los compuestos y composiciones descritos en el presente documento incluyen, pero sin limitación: cánceres de próstata, colorrecto, páncreas, cuello uterino, estómago, endometrio, cerebro, hígado, vejiga, ovario, testículos, cabeza, cuello, piel (incluyendo melanoma y carcinoma basal), revestimiento mesotelial, glóbulos blancos (incluyendo linfoma y leucemia) esófago, mama, músculo, tejido conectivo, pulmón (incluyendo carcinoma de pulmón microcítico y carcinoma de no microcítico), glándula adrenal, tiroides, riñón o huesos; glioblastoma, mesotelioma, carcinoma de células renales, carcinoma gástrico, sarcoma, coriocarcinoma, carcinoma basocelular cutáneo y seminoma testicular. En algunas formas de realización de la presente invención, el cáncer es melanoma, cáncer de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de pulmón, leucemia, un tumor cerebral, linfoma, sarcoma, cáncer de ovario o sarcoma de Kaposi. Los cánceres que son candidatos para el tratamiento con los compuestos y composiciones de la presente invención se tratan más adelante en el presente documento.
[0001] La presente invención contempla métodos de tratamiento de un sujeto que recibe un trasplante de médula ósea o trasplante de células madre de sangre periférica administrando una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de IDO suficiente para incrementar la reacción de hipersensibilidad de tipo retardado a antígeno tumoral, retardar el tiempo hasta la recaída de la malignidad postrasplante, aumentar el tiempo de supervivencia libre de recaídas postrasplante y/o incrementar la supervivencia postrasplante a largo plazo.
En ciertos casos, la presente divulgación contempla métodos para el tratamiento o la prevención de un trastorno infeccioso (por ejemplo, una infección viral) en un sujeto (por ejemplo, un ser humano) que comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un inhibidor de iDo (por ejemplo, un nuevo inhibidor de la presente invención). En algunos casos, el trastorno infeccioso es una infección viral (por ejemplo, una infección viral crónica), una infección bacteriana o una infección parasitaria. En ciertos casos, la infección viral es virus de inmunodeficiencia humana o citomegalovirus. En otras formas de realización, la infección bacteriana es una infección por Mycobacterium (por ejemplo, Mycobacterium leprae o Mycobacterium tuberculosis). En otros casos más, la infección parasitaria es Leishmania donovani, Leishmania trópica, Leishmania major, Leishmania aetiopica, Leishmania mexicana, Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale o Plasmodium malariae. En otros casos, el trastorno infeccioso es una infección fúngica.
La presente divulgación contempla también métodos para el tratamiento o la prevención de una enfermedad, trastorno o afección inmunorrelacionada en un sujeto (por ejemplo, un ser humano), que comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un inhibidor de IDO (por ejemplo, con preferencia, un nuevo inhibidor de la presente invención). Ejemplos de enfermedades trastornos y afecciones inmunorrelacionadas, se describen más adelante en el presente documento.
Otras enfermedades, trastornos y afecciones que se pueden tratar o prevenir, total o parcialmente, por modulación de la actividad de IDO son indicaciones de candidatos para los compuestos inhibidores de IDO que se describen en el presente documento.
La presente invención también contempla el uso de los inhibidores de IDO descritos en el presente documento en combinación con uno o más agentes adicionales. El uno o más agentes adicionales pueden tener cierta actividad de modulación de IDO y/o pueden funcionar a través de distintos mecanismos de acción. En algunos casos, tales agentes comprenden radiación (por ejemplo, radioterapia localizada o radioterapia total del cuerpo) y/u otras modalidades de tratamiento de una naturaleza no farmacológica. Cuando se utiliza una terapia combinada, los inhibidores de IDO y el o los agentes adicionales puede estar en la forma de una única composición o múltiples composiciones y las modalidades de tratamiento se pueden administrar de modo concurrente, secuencial o a través de algún otro régimen.
A modo de ejemplo, la presente invención contempla un régimen de tratamiento en donde una fase de radiación está seguida por una fase quimioterapéutica. La terapia combinada puede tener un efecto aditivo o sinérgico. Otros beneficios de terapia combinada se describen más adelante en el presente documento.
La presente divulgación también comprende el uso de los inhibidores de IDO descritos en el presente documento en combinación con trasplante de médula ósea, trasplante de células madre de sangre periférica u otros tipos de terapia de trasplante.
[0002] La presente divulgación contempla el uso de los inhibidores de la función de IDO descritos en el presente documento en combinación con inhibidores de los puntos de control inmunes. El bloqueo de los puntos de control inmunes, que resultan en la amplificación de respuestas de células T específicas de antígenos mostró ser un enfoque promisorio en los agentes terapéuticos para el cáncer humano. Ejemplos de puntos de control inmunes (ligandos y receptores), algunos de los cuales se regulan selectivamente hacia arriba en diversos tipos de células tumorales, que son candidatos para el bloqueo incluyen PD1 (proteína de muerte celular programada 1); PDL1 (ligando PD1); BTLA (atenuador de linfocitos B y T); CTLA4 (antígeno asociado con linfocitos T citotóxicos 4); TIM3 (proteína de membrana de células T 3); LAG3 (gen de activación de linfocitos 3); A2aR (receptor A2aR de adenosina A2a) y receptores inhibidores Killer. Los inhibidores de los puntos de control inmunes y la terapia combinada con los mismos se tratan en detalle en otra parte en el presente documento.
La presente divulgación también proporciona métodos para tratar cáncer en un sujeto, que comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un inhibidor de IDO y al menos un agente quimioterapéutico, dichos agentes incluyen, pero sin limitación, agentes alquilantes (por ejemplo, mostazas nitrogenadas tales como clorambucilo, ciclofosfamida, isofamida, mecloretamina, melfalán y mostaza de uracilo; aziridinas tales como tiotepa; ésteres de metansulfonato tales como busulfano; análogos de nucleósido (por ejemplo, gemcitabina); nitrosoureas tales como carmustina, lomustina y estreptozocina; inhibidores de topoisomerasa 1 (por ejemplo, irinotecán); complejos de platino tales como cisplatino y carboplatino; alquilantes biorreductores tales como mitomicina, procarbazina, dacarbazina y altretamina); agentes de fragmentación de la cadena de ADN (por ejemplo, bleomicina); inhibidores de topoisomerasa II (por ejemplo, amsacrina, dactinomicina, daunorrubicina, idarrubicina, mitoxantrona, doxorrubicina, etopósido y tenipósido); agentes de unión con la ranura menor de ADN (por ejemplo, plicamidina); antimetabolitos (por ejemplo, antagonistas de folato tales como metotrexato y trimetrexato; antagonistas de pirimidina tales como fluorouracilo, fluorodesoxiuridina, CB3717, azacitidina, citarabina y floxuridina; antagonistas de purina tales como mercaptopurina, 6-tioguanina, fludarabina, pentostatina; asparginasa; e inhibidores de ribonucleótido reductasa tales como hidroxiurea); agentes interactivos de tubulina (por ejemplo, vincristina, estramustina, vinblastina, docetaxol, derivados de epotilona y paclitaxel); agentes hormonales (por ejemplo, estrógenos; estrógenos conjugados; etinilestradiol; dietilstilbesterol; clortrianiseno; idenestrol; progestinas tales como caproato de hidroxiprogesterona, medroxiprogesterona y megestrol y andrógenos tales como testosterona, propionato de testosterona, fluoximesterona y metiltestosterona); corticosteroides adrenales (por ejemplo, prednisona, dexametasona, metilprednisolona y prednisolona); agentes liberadores de la hormona leutinizante o antagonistas de la hormona liberadora de gonadotropina (por ejemplo, acetato de leuprolida y acetato de goserelina) y antígenos antihormonales (por ejemplo, tamoxifeno, agentes antiandrogénicos tales como flutamida y agentes antiadrenales tales como mitotano y aminoglutetimida). La presente invención también contempla el uso de los inhibidores de IDO en combinación con otros agentes conocidos en la técnica (por ejemplo, trióxido de arsénico) y otros agentes quimioterapéuticos desarrollados en el futuro.
[0003] También se divulgan métodos de tratamiento del cáncer, la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de IDO en combinación con al menos un agente quimioterapéutico da como resultado una tasa de supervivencia del cáncer mayor que la tasa de supervivencia del cáncer observada por administración de cada uno solo. También se divulgan métodos de tratamiento del cáncer, la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de IDO en combinación con al menos un agente quimioterapéutico da como resultado una reducción del tamaño del tumor o una reducción del crecimiento del tumor mayor que la reducción del tamaño del tumor o crecimiento del tumor observado mediante la administración de un agente solo.
También se divulgan métodos para el tratamiento o la prevención de cáncer en un sujeto, que comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un inhibidor de IDO y al menos un inhibidor de transducción de señales (STI). En un caso particular, el al menos un STI se selecciona del grupo que consiste en inhibidores de bcr/abl quinasa, inhibidores del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGF), inhibidores del receptor her-2/neu e inhibidores de farnesil transferasa (FTIs). Otros agentes candidatos de STI se establecen en otra parte en el presente documento.
La presente divulgación también contempla métodos de aumento del rechazo de células tumorales en un sujeto que comprende la administración de un inhibidor de IDO junto con al menos un agente quimioterapéutico y/o radioterapia, en donde el rechazo de células tumorales resultantes es mayor que aquel obtenido por administración del inhibidor de IDO, el agente quimioterapéutico o radioterapia sola.
También se divulgan métodos para tratar cáncer en un sujeto, que comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un inhibidor de iDo y al menos un inmunomodulador distinto de un inhibidor de IDO. En casos particulares, el al menos un inmunomodulador se selecciona del grupo que consiste en CD40L, B7, B7RP1, ant-CD40, anti-CD38, anti-ICOS, ligando de 4-IBB, vacuna de cáncer de células dendríticas, IL2, IL12, ELC/CCL19, SLC/CCL21, MCP-1, IL-4, IL-18, TNF, IL-15, MDC, IFN-o/-p, M-CSF, IL-3, GM-CSF, IL-13 y anti-IL-10. Otros agentes inmunomoduladores candidatos se establecen en el presente documento en otras partes.
También se divulgan métodos para el tratamiento o la prevención de un trastorno infeccioso (por ejemplo, una infección viral) en un sujeto (por ejemplo, un ser humano) que comprenden la administración al sujeto de una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un inhibidor de IDO y una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más agentes antiinfecciosos.
En algunos casos, el agente terapéutico adicional es una citocina, incluyendo, por ejemplo, factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) o ligando flt3. También se divulgan métodos para el tratamiento o la prevención de una infección viral (por ejemplo, una infección viral crónica) incluyendo, pero sin limitación, virus de hepatitis C (HCV), virus de papiloma humano (HPV), citomegalovirus (CMV), virus de Epstein-Barr (EBV), virus de varicela zoster, virus coxsackie y virus de inmunodeficiencia humana (HIV). El uso de los inhibidores de IDO descritos en el presente documento para tratar (ya sea solos o como un componente de terapia combinada) una infección se analiza más en profundidad en el presente documento.
También se divulga el tratamiento de un trastorno infeccioso que se efectúa a través de la coadministración de una vacuna en combinación con la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de IDO de la presente invención. En algunos casos, la vacuna es una vacuna antiviral, incluyendo, por ejemplo, una vacuna anti-HIV. En otros casos, la vacuna es eficaz contra tuberculosis o malaria. En otros casos más, la vacuna es una vacuna tumoral (por ejemplo, una vacuna eficaz contra melanoma); la vacuna tumoral puede comprender células tumorales genéticamente modificadas o una línea celular genéticamente modificada, incluyendo células tumorales genéticamente modificadas o una línea celular genéticamente modificada que fue transfectada para expresar un factor estimulante de granulocitos-macrófagos (GM-CSF). En casos particulares, la vacuna incluye uno o más péptidos inmunogénicos y/o células dendríticas.
También se divulgan métodos de uso de los inhibidores de IDO divulgados en el presente documento en combinación con uno o más agentes antimicrobianos.
También se divulga el tratamiento de una infección por administración de un inhibidor de IDO y al menos un agente terapéutico adicional, se mejora un síntoma de infección observado después de la administración tanto del inhibidor de IDO y el agente terapéutico adicional respecto del mismo síntoma de infección observado después de la administración en forma individual. En algunos casos, el síntoma de infección observado puede ser la reducción de la carga viral, el aumento del recuento de células T CD4+, reducción de infecciones oportunistas, mayor tiempo de supervivencia, erradicación de la infección crónica o una de sus combinaciones.
Breve descripción de los dibujos
Las figuras 1A-1P proporcionan una estructura y la actividad biológica para los compuestos descritos en el presente documento. Las potencias de inhibición medidas para los compuestos de la invención en el ensayo descrito en el ejemplo 251 se proporcionan a continuación en las figuras 1A-1P, en donde los niveles de potencia se proporcionan como sigue: (Potencia de IDO: CI50: A < 0,1 pM; B < 1 pM; C z 10 j M).
Descripción detallada de la invención
Antes de seguir describiendo la presente invención, se ha de entender que la invención no está limitada a las formas de realización particulares establecidas en el presente documento y también se ha de entender que la terminología usada en el presente documento es para describir las formas de realización particulares solamente y no pretende ser limitativa.
Cuando se proporciona un rango de valores, se entiende que cada valor interviniente, hasta el décimo de la unidad del límite inferior, a menos que el contexto claramente dictamine otra cosa, entre el límite superior e inferior de ese rango y cualquier otro valor establecido o interviniente en ese estado establecido, está comprendido dentro de la invención. Los límites superiores e inferiores de estos rangos menores pueden estar incluidos, de modo independiente, en los menores rangos y también están comprendidos dentro de la invención, sujetos a cualquier límite específicamente excluido en el rango establecido. Cuando el rango establecido incluye uno o ambos límites, los rangos que excluyen ya sea uno o los dos de estos límites incluidos también están incluidos en la invención. A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos en el presente documento tienen el mismo significado que el comúnmente entendido por un experto en la técnica a la que pertenece esta invención.
Se ha de observar que, como se usa en el presente documento y en las reivindicaciones anexas, las formas singulares “un”, “una”, “el” y “ la” incluyen referentes plurales a menos que el contexto dictamine claramente otra cosa. También se observa que las reivindicaciones se pueden redactar para excluir cualquier elemento opcional. Como tal, esta declaración pretende servir como base de antecedente para usar dicha terminología exclusiva tal como “únicamente”, “solamente” y similares en conexión con la mención de acuerdo con los elementos de las reivindicaciones o el uso de una limitación “negativa”.
Las publicaciones tratadas en el presente documento se proporcionan únicamente para su divulgación antes de la fecha de presentación de la presente solicitud. Además, las fechas de la publicación proporcionadas pueden ser diferentes de las fechas de publicación reales, que pueden necesitar ser confirmadas de forma independiente.
General
La desregulación inmune está íntimamente asociada con evasión del tumor del sistema inmune del huésped, dando como resultado el crecimiento y el avance del tumor. Los enfoques de tratamiento tradicionales que comprenden quimioterapia y radioterapia son en general difíciles de tolerar por el paciente y se vuelven menos efectivos ya que los tumores evolucionan para sobrevivir a tales tratamientos. Utilizando el sistema inmune propio del paciente para identificar y eliminar las células tumorales, la inmunoterapia tiene el beneficio de una toxicidad reducida. Como la regulación hacia arriba de la enzima inmunorreguladora indolamina 2,3-dioxigenasa comprende un mecanismo manipulado por tumores para promover el crecimiento, los agentes (por ejemplo, compuestos de moléculas pequeñas) que inhiben la actividad enzimática presentan una vía prometedora para la prevención y/o el tratamiento.
Además, un gran cuerpo de datos experimentales indica un papel para la inhibición de IDO en la inmunosupresión, resistencia tumoral y/o rechazo, infecciones crónicas, infección de HIV y enfermedades o trastornos autoinmunes. La inhibición de IDO también puede ser una importante estrategia de tratamiento para pacientes con enfermedades o trastornos neurológicos o neuropsiquiátricos como depresión. Los compuestos, composiciones y métodos en el presente documento abordan la necesidad de nuevas clases de moduladores de IDO.
Definiciones
A menos que se indique otra cosa, los siguientes términos pretenden tener el significado establecido más abajo. Otros términos se definen en otra parte a lo largo de la memoria descriptiva.
El término “alquilo”, por sí mismo o como parte de otro sustituyente, significa, a menos que se establezca otra cosa, un radical hidrocarbonato de cadena lineal o ramificada que tiene la cantidad de átomos de carbono designada (a saber, C1-8 significa uno a ocho carbonos). Los ejemplos de grupos alquilo incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo y similares. El término “alquenilo” se refiere a un grupo alquilo insaturado que tiene uno o más dobles enlaces. De modo similar, el término “alquinilo” se refiere a un grupo alquilo insaturado que tiene uno o más triples enlaces. Los ejemplos de dichos grupos alquilo insaturados incluyen vinilo, 2-propenilo, crotilo, 2-isopentenilo, 2-(butadienilo), 2,4-pentadienilo, 3 -(1,4-pentadienilo), etinilo, 1 - y 3-propinilo, 3-butinilo, y los homólogos e isómeros superiores.
El término “cicloalquilo” se refiere a anillos hidrocarbonatos que tienen la cantidad indicada de átomos en el anillo (por ejemplo, cicloalquilo C3 -6 ) y que están totalmente saturados o que tienen no más de un doble enlace entre los vértices del anillo. “Cicloalquilo” también se refiere a anillos hidrocarbonados bicíclicos y policíclicos tales como, por ejemplo, biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[2.2.2]octano, etc.
El término “cicloheteroalquilo” se refiere a un anillo cicloalquilo que tiene la cantidad indicada de vértices de anillo (o miembros) y que tiene de uno a cinco heteroátomos seleccionados de N, O y S, que reemplazan a uno a cinco de los vértices de carbono y en donde los átomos de nitrógeno y azufre se oxidan opcionalmente y los átomos de nitrógeno se cuaternizan opcionalmente. El cicloheteroalquilo puede ser un sistema de anillos monocíclico, bicíclico o policíclico. Los ejemplos no limitativos de grupos cicloheteroalquilo incluyen pirrolidina, imidazolidina, pirazolidina, butirolactama, valerolactama, imidazolidinona, hidantoína, dioxolano, ftalimida, piperidina, 1,4-dioxano, morfolina, tiomorfolina, tiomorfolina-S-óxido, tiomorfolina-S,S-óxido, piperazina, pirano, piridona, 3-pirrolina, tiopirano, pirona, tetrahidrofurano, tetrahidrotiofeno, quinuclidina y similares. Un grupo cicloheteroalquilo se puede unir al resto de la molécula a través de un carbono del anillo o un heteroátomo.
Como se usa en el presente documento, una línea ondulada, “^ ~ ”, que se cruza con un enlace simple, doble o triple en cualquier estructura química representada en el presente documento, representa la unión puntual del enlace simple, doble o triple con el resto de la molécula. Adicionalmente, un enlace que se extiende al centro de un anillo (por ejemplo, un anillo fenilo) pretende indicar la unión en cualquiera de los vértices del anillo disponibles. Un experto en la técnica comprenderá que múltiples sustituyentes mostrados como unidos con el anillo ocuparán los vértices del anillo que proporcionan compuestos estables y son de otro modo estéricamente compatibles. Para un componente divalente, una representación pretende incluir cualquier orientación (directa o inversa). Por ejemplo, el grupo “-C(O)NH-” pretende incluir un enlace en cualquier orientación: -C(O)NH- o -NHC(O)- y de modo similar, “-O-CH2CH2-” pretende incluir tanto -O-CH2CH2- como -CH2CH2-O-.
Los términos “alcoxi”, “alquilamino” y “alquiltio” (o tioalcoxi) se usan en su sentido convencional y se refieren a los grupos alquilo adosados al resto de la molécula a través de un átomo de oxígeno, un grupo amino o un átomo de azufre, respectivamente. Además, para los grupos dialquilamino, las porciones alquilo pueden ser iguales o diferentes y también se pueden combinar para formar un anillo de 3 a 7 miembros con el átomo de nitrógeno al cual cada uno está unido. En consecuencia, un grupo representado como -dialquilamino o -N R aRb pretende incluir piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, azetidinilo y similares.
Los términos “halo” o “halógeno” por sí mismos o como parte de otro sustituyente significan, a menos que se establezca otra cosa, un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo. Además, los términos tales como “haloalquilo,” pretenden incluir monohaloalquilo y polihaloalquilo. Por ejemplo, el término “C1-4 haloalquilo” pretende incluir trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 4-clorobutilo, 3-bromopropilo y similares.
[0004] El término “arilo” significa, a menos que se establezca otra cosa, un grupo hidrocarbonato poliinsaturado, generalmente aromático, el cual puede ser un único anillo o múltiples anillos (hasta tres anillos) los cuales están condensados entre sí o ligados de forma covalente. Los ejemplos no limitativos de grupos arilo incluyen fenilo, naftilo y bifenilo.
El término “heteroarilo” se refiere a grupos arilo (o anillos) que contienen de uno a cinco heteroátomos seleccionados de N, O y S, en donde los átomos de nitrógeno o azufre están opcionalmente oxidados, y el(os) átomo(s) de nitrógeno está(n) opcionalmente cuaternizado(s). Un grupo heteroarilo puede estar adosado al resto de la molécula a través de un heteroátomo. Los ejemplos no limitantes de grupos heteroarilo incluyen piridilo, piridazinilo, pirazinilo, pirimindinilo, triazinilo, quinolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinnolinilo, ftalazinilo, benzotriazinilo, purinilo, bencimidazolilo, benzopirazolilo, benzotriazolilo, benzisoxazolilo, isobenzofurilo, isoindolilo, indolizinilo, benzotriazinilo, tienopiridinilo, tienopirimidinilo, pirazolopirimidinilo, imidazopiridinas, benzotiaxolilo, benzofuranilo, benzotienilo, indolilo, quinolilo, isoquinolilo, isotiazolilo, pirazolilo, indazolilo, pteridinilo, imidazolilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiadiazolilo, pirrolilo, tiazolilo, furilo, tienilo y similares. Los sustituyentes para un anillo heteroarilo pueden ser seleccionados del grupo de sustituyentes aceptables descritos más adelante.
Los términos anteriores (por ejemplo, “alquilo”, “arilo” y “heteroarilo”), en algunas formas de realización, serán opcionalmente sustituidos. Los sustituyentes seleccionados para cada tipo de radical se proporcionan más abajo.
Los sustituyentes opcionales para los radicales alquilo (incluyendo aquellos grupos a menudo mencionados como alquileno, alquenilo, alquinilo y cicloalquilo) pueden ser varios grupos seleccionados de: halógeno, -OR', -NR'R", -SR', -SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R'', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', -NR'-C(O)NR''R''', -NR''C(O)2R', -NH-C(NH2)=NH, -NR'C(NH2)=NH, -NH-C(NH2)=NR', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R'', -NR'S(O)2R'', -CN y -NO2 en un número que va de cero a (2 m'+1), donde m' es el número total de átomos de carbono en tal radical. R', R'' y R''' se refieren cada uno, de modo independiente, a hidrógeno, grupos alquilo C1-8 no sustituido, arilo no sustituido, arilo sustituido con 1-3 halógenos, alquilo C1-8 no sustituido, alcoxi C1-8 o tioalcoxi C1-8 o grupos aril-alquilo C1-4 no sustituidos. Cuando R' y R'' se unen al mismo átomo de nitrógeno, se pueden combinar con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros. Por ejemplo, -NR'R'' pretende incluir 1 -pirrolidinilo y 4-morfolinilo.
De modo similar, los sustituyentes opcionales para los grupos arilo y heteroarilo son variados y se seleccionan en general de: -halógeno, -OR', -OC(O)R', -NR'R'', -SR', -R', -CN, -NO2 , -CO2R', -CONR'R'', -C(O)R', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', -NR''C(O)2R', -NR'-C(O)NR''R''', -NH-C(NH2)=NH, -NR'C(NH2)=NH, -NH-C(NH2)=NR', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R'', -NR'S(O)2R'', -N3, perfluoroalcoxi (C1-C4) y perfluoroalquilo (C1-C4), en una cantidad que va de cero a la cantidad total de valencias abiertas en el sistema de anillos aromáticos y donde R', R'' y R''' se seleccionan, de modo independiente, de hidrógeno, alquilo C1-8, haloalquilo C1-8, cicloalquilo C3-6, alquenilo C2-8 y alquinilo C2-8. Otros sustituyentes apropiados incluyen cada uno de los sustituyentes de arilo anteriores unidos a un átomo de anillo por un enlace de alquileno de 1-4 átomos de carbono.
Dos de los sustituyentes en los átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo se pueden reemplazar opcionalmente con un sustituyente de fórmula -T-C(O)-(CH2)q-U-, en donde T y U son, de modo independiente, -NH-, -O-, -CH2- o un enlace simple y q es un número entero de 0 a 2. De modo alternativo, dos de los sustituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden estar opcionalmente reemplazados con un sustituyente de fórmula -A-(CH2)r-B-, en donde A y B son, de modo independiente, -CH2-, -O-, -NH-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NR'- o un enlace simple y r es un número entero de 1 a 3. Uno de los enlaces simples del nuevo anillo así formado puede ser reemplazado opcionalmente con un enlace doble. De modo alternativo, dos de los sustituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden estar opcionalmente reemplazados con un sustituyente de fórmula -(CH2)s-X-(CH2)t-, donde s y t son, de modo independiente, números enteros de 0 a 3 y X es -O-, -Nr '-, -S-, -S(O)-, -S(O)2- o -S(O)2NR'-. El sustituyente R' en -NR'- y -S(O)2NR'- se selecciona de hidrógeno o alquilo C1-6 no sustituido.
Tal como se usa en el presente documento, el término “heteroátomo” pretende incluir oxígeno (O), nitrógeno (N), azufre (S) y silicio (Si).
La expresión “sales farmacéuticamente aceptables” pretenden incluir sales de los compuestos activos que se preparan con ácidos o bases relativamente no tóxicos, según los sustituyentes particulares tal como se encuentran en los compuestos descritos en el presente documento. Cuando los compuestos de la presente invención contienen funciones relativamente ácidas, se pueden obtener sales por adición de bases al poner en contacto la forma neutra de dichos compuestos con una cantidad suficiente de la base deseada, en forma pura o en un solvente inerte adecuado. Los ejemplos de sales derivadas de las bases inorgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen las de aluminio, de amonio, de calcio, de cobre, férricas, ferrosas, de litio, de magnesio, mangánicas, manganosas, de potasio, de sodio, de zinc y similares. Las sales derivadas de bases orgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, incluso aminas sustituidas, aminas cíclicas, aminas naturales y similares, tales como arginina, betaína, cafeína, colina, N,N'-dibenziletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolino, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y similares. Cuando los compuestos de la presente invención contienen funciones relativamente básicas se pueden obtener sales por adición de ácido al poner en contacto la forma neutra de dichos compuestos con una cantidad suficiente del ácido deseado, ya sea puro o en un solvente inerte adecuado. Los ejemplos de sales por adición de ácido farmacéuticamente aceptables incluyen las derivadas de ácidos inorgánicos tales como los ácidos clorhídrico, bromhídrico, nítrico, carbónico, monohidrógeno carbónico, fosfórico, monohidrógeno fosfórico, dihidrógeno fosfórico, sulfúrico, monohidrógeno sulfúrico, yodhídrico o fosforoso y similares, así como las sales derivadas de ácidos orgánicos relativamente no tóxicos tales como acético, propiónico, isobutírico, malónico, benzoico, succínico, subérico, fumárico, mandélico, ftálico, bencenosulfónico, p -tolilsulfónico, cítrico, tartárico, metanosulfónico y similares. También se incluyen las sales de aminoácidos tales como arginato y similares y las sales de ácidos orgánicos tales como ácidos glucurónico o galacturónico y similares (ver, por ejemplo, Berge, S. M., et al., “Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977)). Ciertos compuestos de la presente invención contienen funciones básicas y ácidas que permiten que los compuestos se conviertan en sales por adición de ácido o de base.
Las formas neutras de los compuestos se pueden regenerar al poner en contacto la sal con una base o ácido y aislar el compuesto original en la forma convencional. La forma original del compuesto difiere de las diversas formas de sales en ciertas propiedades físicas, tales como la solubilidad en solventes polares, pero, por lo demás, las sales son equivalentes a la forma original del compuesto a los fines de la presente invención.
Además de las formas de sales, la presente invención provee compuestos que están en la forma de profármaco. Los profármacos de los compuestos descritos en el presente documento son aquellos compuestos que sufren fácilmente cambios químicos en condiciones fisiológicas a fin de proveer los compuestos de la presente invención. Además, los profármacos se pueden convertir en los compuestos de la presente invención mediante métodos químicos o bioquímicos en un ambiente ex vivo. Por ejemplo, los profármacos se pueden convertir lentamente en los compuestos de la presente invención cuando se colocan en un reservorio de parche transdérmico con una enzima o reactivo químico adecuado.
Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en formas no solvatadas así como en formas solvatadas, incluso formas hidratadas. En general, las formas solvatadas son equivalentes a las formas no solvatadas y pretenden estar abarcadas en el alcance de la presente invención. Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en múltiples formas cristalinas o amorfas. En general, todas las formas físicas son equivalentes para los usos contemplados por la presente invención y pretenden estar dentro del alcance de la presente invención.
Ciertos compuestos de la presente invención poseen átomos de carbono asimétricos (centros ópticos) o dobles enlaces; los racematos, los diastereómeros, los isómeros geométricos, los regioisómeros y los isómeros individuales (por ejemplo, enantiómeros separados) pretenden todos estar abarcados dentro del alcance de la presente invención. Cuando se muestra una representación estereoquímica, se entiende que se refiere al compuesto en el que uno de los isómeros está presente y sustancialmente libre del otro isómero. “Sustancialmente libre de” otro isómero indica al menos una relación 80/20 de los dos isómeros, con mayor preferencia, 90/10 o 95/5 o más. En algunas formas de realización, uno de los isómeros estará presente en una cantidad de al menos el 99 %.
Los compuestos de la presente invención también pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen tales compuestos. Las proporciones no naturales de un isótopo se pueden definir como que varían de la cantidad hallada en la naturaleza a una cantidad que consiste en el 100 % del átomo en cuestión. Por ejemplo, los compuestos pueden incorporar isótopos radiactivos tales como, por ejemplo, tritio (3H), yodo-125 (125I) o carbono-14 (14C) o isótopos no radiactivos, tales como deuterio (2H) o carbono-13 (13C). Estas variaciones isotópicas pueden proporcionar utilidades adicionales a las descritas en otra parte dentro de esta solicitud. Por ejemplo, las variantes isotópicas de los compuestos de la invención pueden tener utilidad adicional, incluyendo pero sin limitación, como reactivos de diagnóstico y/o de imágenes o como agentes terapéuticos citotóxicos/radiotóxicos. Adicionalmente, las variantes isotópicas de los compuestos de la invención pueden tener características farmacocinéticas y farmacodinámicas alteradas que pueden contribuir con una mayor seguridad, tolerabilidad o eficacia durante el tratamiento. Todas las variaciones isotópicas de los compuestos de la presente invención, ya sean radiactivas o no, pretenden estar dentro del alcance de la presente invención.
Los términos “paciente” o “sujeto” se usan indistintamente para referirse a un ser humano o un animal no humano (por ejemplo, un mamífero).
Los términos “administración”, “administrar” y similares, según se apliquen a, por ejemplo, un sujeto, célula, tejido, órgano o fluido biológico, se refieren al contacto, por ejemplo, de un inhibidor de IDO, una composición farmacéutica que comprenden el mismo o un agente de diagnóstico con el sujeto, célula, tejido, órgano o fluido orgánico. En el contexto de una célula, la administración incluye el contacto (por ejemplo, in vitro o ex vivo) de un reactivo con la célula, así como el contacto de un reactivo con un fluido, donde el fluido está en contacto con la célula.
Los términos “tratar”, “tratando”, “tratamiento” y similares se refieren a un curso de acción (tal como administración de un inhibidor de IDO o una composición farmacéutica que lo comprende) iniciado después de que una enfermedad, trastorno o afección o uno de sus síntomas, haya sido diagnosticado, observado y similares para eliminar, reducir, suprimir, mitigar o mejorar, ya sea de modo temporal o permanente, al menos una de las causas subyacentes de una enfermedad, trastorno o afección que aflige a un sujeto o al menos uno de los síntomas asociados con una enfermedad, trastorno o afección que aflige a un sujeto. De esta manera, el tratamiento incluye la inhibición (por ejemplo, detención del desarrollo o posterior desarrollo de la enfermedad, trastorno o afección o síntomas asociados con la misma) de una enfermedad activa.
La expresión “que necesita de tratamiento” como se usa en el presente documento se refiere a un juicio hecho por un médico u otro cuidador de que un sujeto requiere o se beneficiará del tratamiento. Este juicio se hace basándose en varios factores que están en el campo de la experiencia del médico o del cuidador.
Los términos “prevenir”, “previniendo”, “prevención” y similares se refieren a un curso de acción (tales como administración de un inhibidor de IDO o una composición farmacéutica que lo comprende) iniciado de una manera (por ejemplo, anterior al inicio de una enfermedad, trastorno, afección o su síntoma) para prevenir, suprimir, inhibir o reducir, ya sea temporal o permanentemente, un riesgo de que el sujeto desarrolle una enfermedad, trastorno, afección o similares (como se determina, por ejemplo, por ausencia de síntomas clínicos) o retraso de su inicio, en general en el contexto de un sujeto que tiene predisposición a tener una enfermedad, trastorno o afección particular. En ciertas instancias, los términos también se refieren a la ralentización de la progresión de la enfermedad, trastorno o afección o inhibición de su avance hasta un estado nocivo o no deseado de otro modo.
El término “que necesita prevención” como se usa en el presente documento se refiere a un juicio hecho por un médico u otro cuidador de que un sujeto requiere o se beneficiará del cuidado preventivo. Este juicio se hace en base a varios factores que están en el campo de experiencia de un médico o cuidador.
La frase “cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a la administración de un agente a un sujeto, ya sea solo o como parte de una composición farmacéutica y en una dosis simple o como parte de una serie de dosis, en una cantidad capaz de tener cualquier efecto positivo detectable sobre cualquier síntoma, aspecto o característica de una enfermedad, trastorno o afección cuando se administra al sujeto. La cantidad terapéuticamente eficaz se puede determinar midiendo los efectos fisiológicos relevantes y se puede ajustar en conexión con el régimen posológico y los análisis diagnósticos de la condición del sujeto y similares. A modo de ejemplo, la medición del nivel sérico de un inhibidor de IDO (o, por ejemplo, uno de sus metabolitos) en un tiempo particular de posadministración puede ser indicativa de si se usó una cantidad terapéuticamente eficaz.
La frase “en una cantidad suficiente para efectuar un cambio” significa que hay una diferencia detectable entre un nivel de un indicador medido con anterioridad (por ejemplo, un nivel de línea de base) y después de la administración de una terapia particular. Los indicadores incluyen cualquier parámetro objetivo (por ejemplo, concentración sérica) o parámetro subjetivo (por ejemplo, la sensación de un sujeto de bienestar).
La expresión “moléculas pequeñas” se refiere a compuestos químicos que tienen un peso molecular que es inferior a aproximadamente 10 kDa, inferior a aproximadamente 2 kDa o inferior a aproximadamente 1 kDa. Las moléculas pequeñas incluyen, pero sin limitación, moléculas inorgánicas, moléculas orgánicas, moléculas orgánicas que contiene un componente inorgánico, moléculas que comprenden un átomo radiactivo y moléculas sintéticas. Terapéuticamente, una pequeña molécula puede ser más permeable a células, menos susceptible a la degradación y menos probablemente puede producir una respuesta inmune que las moléculas grandes.
Como se usa en el presente documento, las expresiones “inhibidor de IDO”, “bloqueador de IDO” y expresiones similares se refieren a agentes capaces de inhibir la actividad de IDO, invirtiendo la inmunosupresión mediada por IDO. Un inhibidor de IDO puede ser un inhibidor de IDO competitivo, no competitivo o irreversible. “Un inhibidor de IDO competitivo” es un compuesto que inhibe de forma reversible la actividad enzimática de IDO en el sitio catalítico; “un inhibidor de IDO no competitivo” es un compuesto que inhibe de forma reversible la actividad enzimática de IDO en un sitio no catalítico y “un inhibidor de IDO irreversible” es un compuesto que elimina de forma irreversible la actividad enzimática de iDo formando un enlace covalente (u otro medio estable de inhibición de la función enzimática) con la enzima. Una cantidad de inhibidores de IDO son asequibles en comercios (por ejemplo, 1,3-diacetato de 5-Br-4-Cl-indoxilo y 1-metil-DL-triptófano (1 MT); ambos disponibles de Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) y se pueden usar, por ejemplo, como “herramienta” o compuestos de “referencia”.
El término “ligando” se refiere, por ejemplo, a un péptido, un polipéptido, una molécula asociada a membrana o ligada a membrana o uno de sus complejos, que puede actuar como un agonista o antagonista de un receptor. Un ligando comprende ligados naturales y sintéticos, por ejemplo, citocinas, variantes de citocinas, análogos, muteínas y composiciones de unión derivadas de anticuerpos, así como moléculas pequeñas. El término también comprende un agente que no es agonista ni antagonista, pero que se puede unir con un receptor sin significativamente influir sobre las propiedades biológicas, por ejemplo, señalización o adhesión. Más aún, el término incluye un ligando unido a membrana que se cambió, por ejemplo, por métodos químicos o recombinantes, a una versión soluble del ligando unido a membrana. Un ligando o receptor puede ser enteramente intracelular, es decir, puede residir en el citosol, núcleo o algún otro compartimiento intracelular. El complejo de un ligando y receptor se denomina un “complejo de ligando-receptor”.
Los términos “inhibidores” y “antagonistas” o “activadores” y “agonistas” se refieren a moléculas inhibidoras o activantes, respectivamente, por ejemplo, para la activación, por ejemplo, de un ligando, receptor, cofactor, gen, célula, tejido u órgano. Los inhibidores son moléculas que reducen, bloquean, previenen, demoran la activación, inactivan, desensibilizan o regulan hacia abajo, por ejemplo, un gen, proteína, ligando, receptor o célula. Los activadores son moléculas que aumentan, activan, facilitan, mejoran la activación, sensibilizan o regulan hacia arriba, por ejemplo, un gen, proteína, ligando, receptor o célula. Un inhibidor también se puede definir como una molécula que reduce, bloquea o inactiva una actividad constitutiva. Un “agonista” es una molécula que interactúa con un blanco para causar o promover un aumento de la activación del blanco. Un “antagonista” es una molécula que se opone a la acción o acciones de un agonista. Un antagonista previene, reduce, inhibe o neutraliza la actividad de un agonista y un antagonista también evita, inhibe o reduce la actividad constitutiva de un blanco, por ejemplo, un receptor diana, incluso cuando no hay un agonista identificado.
Los términos “modular”, “modulación” y similares se refieren a la capacidad de una molécula (por ejemplo, un activador o un inhibidor) para incrementar o reducir la función o la actividad de IDO, ya sea directa o indirectamente. Un modulador puede actuar solo o puede usar un cofactor, por ejemplo, una proteína, ion metálico o molécula pequeña. Los ejemplos de moduladores incluyen compuestos de molécula pequeña y otras moléculas bioorgánicas. Numerosas bibliotecas de compuestos de molécula pequeña (por ejemplo, bibliotecas combinatorias) son asequibles en comercios y pueden servir como un punto de partida para identificar un modulador. El experto en la técnica es capaz de desarrollar uno o más ensayos (por ejemplo, ensayos bioquímicos o basados en células) en donde tales bibliotecas de compuestos se pueden controlar a fin de identificar uno o más compuestos que tienen las propiedades deseadas; según ello, el químico médico experto es capaz de optimizar tales uno o más compuestos, por ejemplo, por síntesis y evaluación de análogos y derivados de ellos. Los estudios de síntesis y/o de modelación molecular también se pueden utilizar en la identificación de un activador.
La “actividad” de una molécula puede describir o referirse a la unión de la molécula con un ligando o con un receptor; a la actividad catalítica; a la capacidad de estimular la expresión génica o la señalización, diferenciación o maduración celular; a la actividad antigénica; a la modulación de las actividades de otras moléculas y similares. La expresión “actividad proliferativa” comprende una actividad que promueve, es decir, necesaria o que está específicamente asociada, por ejemplo, con la división celular normal, así como cáncer, tumores, displasia, transformación celular, metástasis y angiogénesis.
Como se usa en el presente documento, “comparable”, “actividad comparable”, “actividad comparable con”, “efecto comparable”, “efecto comparable con” y similares son términos relativos que se pueden considerar cuantitativa y/o cualitativamente. El significado de los términos depende con frecuencia del contexto en el que se usan. A modo de ejemplo, dos agentes que activan un receptor se pueden considerar por tener un efecto comparable de una perspectiva cualitativa, pero los dos agentes se pueden ver como carentes de un efecto comparable desde una perspectiva cuantitativa si un agente es solo capaz de lograr el 20 % de la actividad del otro agente según se determina en un ensayo aceptado en la técnica (por ejemplo, un ensayo de respuesta a la dosis) o en un modelo animal aceptado en la técnica. Cuando se compara un resultado con otro resultado (por ejemplo, un resultado con un estándar de referencia), “comparable” significa con frecuencia (a pesar de que no siempre) que un resultado se desvía de un estándar de referencia en menos del 35 %, en menos del 30 %, en menos del 25 %, en menos del 20 %, en menos del 15 %, en menos del 10 %, en menos del 7 %, en menos del 5 %, en menos del 4 %, en menos del 3 %, en menos del 2 % o en menos del 1 %. En formas de realización particulares, un resultado es comparable con un estándar de referencia si se desvía en menos del 15 %, en menos del 10 % o en menos del 5 % del estándar de referencia. A modo de ejemplo, pero sin limitación, la actividad o el efecto se puede referir a la eficacia, estabilidad, solubilidad o inmunogenicidad.
“Sustancialmente puro” indica que un componente conforma más de aproximadamente el 50 % del contenido total de la composición y habitualmente más de aproximadamente el 60 % del contenido de polipéptido total. Más habitualmente, “sustancialmente puro” se refiere a composiciones en las que al menos el 75 %, al menos el 85 %, al menos el 90 % o más de la composición total es el componente de interés. En algunos casos, el polipéptido conformará más de aproximadamente el 90 % o más de aproximadamente el 95 % del contenido total de la composición.
Las expresiones “específicamente se une” o “selectivamente se une”, cuando se refieren a un ligando/receptor, anticuerpo/antígeno u otro par de unión, indica una reacción de unión que es determinante de la presencia de la proteína en una población heterogénea de proteínas y otros productos biológicos. Así, en las condiciones designadas, un ligando especificado se une con un receptor particular y no se une en una cantidad significativa con otras proteínas presentes en la muestra. El anticuerpo o la composición de unión derivada del sitio de unión a antígeno de un anticuerpo del método contemplado se une con su antígeno o una de sus variantes o muteínas, con una afinidad que es al menos dos veces mayor, al menos diez veces mayor, al menos 20 veces mayor o al menos 100 veces mayor que la afinidad con cualquier otro anticuerpo o composición de unión derivada. En una forma de realización particular, el anticuerpo tendrá una afinidad que es mayor que aproximadamente 109 litros/mol, según se determina, por ejemplo, por análisis de Scatchard (Munsen, et al., 1980 Analyt. Biochem. 107:220-239).
El término “respuesta”, por ejemplo, de una célula, tejido, órgano u organismo comprende un cambio en el comportamiento bioquímico o fisiológico, por ejemplo, concentración, densidad, adhesión o migración dentro de un compartimiento biológico, tasa de expresión génica o estado de diferenciación, donde el cambio está correlacionado con la activación, estimulación o tratamiento o con mecanismos internos tales como programación genética. En ciertos contextos, los términos “activación”, “estimulación” y similares se refieren a la activación celular según se regula por medio de mecanismos internos, así como por factores externos o ambientales; mientras que los términos “inhibición”, “regulación hacia abajo” y similares se refieren a los efectos opuestos.
Los términos “polipéptido”, “péptido” y “proteína”, usados indistintamente en el presente documento, se refieren a una forma polimérica de aminoácidos de cualquier longitud, que pueden incluir aminoácidos genéticamente codificados y no genéticamente codificados, aminoácidos química o bioquímicamente modificados o derivados y polipéptidos que tienen estructuras de polipéptido modificadas. Los términos incluyen proteínas de fusión, incluyendo, pero sin limitación, proteínas de fusión con una secuencia de aminoácidos heterólogos, proteínas de fusión con secuencias líder heterólogas y homólogas, con o sin residuos de metionina N-terminal; proteínas rotuladas inmunológicamente y similares.
Como se usa en el presente documento, los términos “variantes” y “homólogos” se usan indistintamente para referirse a secuencias de aminoácidos o de ADN que son similares a las secuencias de aminoácidos o ácidos nucleicos de referencia, respectivamente. El término comprende variantes naturales y variantes no naturales. Las variantes naturales incluyen homólogos (polipéptidos y ácidos nucleicos que difieren en una secuencia de aminoácidos o nucleótidos, respectivamente, de una especie a otra) y variantes alélicas (polipéptidos y ácidos nucleicos que difieren en una secuencia de aminoácidos o nucleótidos, respectivamente, de un individuo a otro dentro de una especie). Así, las variantes y homólogos comprenden secuencias de ADN naturales y proteínas codificadas y sus isoformas, así como variantes de escisión de una proteína o gen. Los términos también comprenden secuencias de ácidos nucleicos que varían en una o varias bases de una secuencia de ADN natural pero también se traducen en una secuencia de aminoácidos que corresponde a la proteína natural debido a la degeneración del código genético. Las variantes no naturales y homólogos incluyen polipéptidos y ácidos nucleicos que comprenden un cambio en la secuencia de aminoácidos o nucleótidos, respectivamente, donde el cambio en la secuencia se introduce artificialmente (por ejemplo, muteínas); por ejemplo, el cambio se genera en el laboratorio por intervención del hombre (“mano del hombre”). En consecuencia, las variantes no naturales y homólogos también podrían referirse a aquellas que difieren de las secuencias naturales por una o varias sustituciones conservativas y/o rótulos y/o conjugados.
El término “muteínas” como se usa en el presente documento se refiere ampliamente a proteínas recombinantes mutadas. Estas proteínas usualmente llevan sustituciones de aminoácidos simples o múltiples y se derivan con frecuencia de genes clonados que se sometieron a mutagénesis dirigida a sitio o aleatoria o genes completamente sintéticos.
Las expresiones “ADN”, “ácido nucleico”, “molécula de ácido nucleico”, “polinucleótido” y similares se usan indistintamente en el presente documento para referirse a una forma polimérica de nucleótidos de cualquier longitud, ya sea desoxirribonucleótidos o ribonucleótidos o sus análogos. Los ejemplos no limitativos de polinucleótidos incluyen ácidos nucleicos lineales y circulares, ARN mensajero (mARN), ADN complementario (cADN), polinucleótidos recombinantes, vectores, sondas, cebadores y similares.
Indolamina 2,3-dioxigenasa
Como se aludió previamente, IDO es una enzima inmunorreguladora que normalmente se expresa en células tumorales y en células inmunes activadas. IDO es uno de los varios puntos de control de respuesta inmune que están implicados en el escape inmune del tumor; de este modo, los inhibidores de IDO disrumpen los mecanismos por los que los tumores evaden el sistema inmune normal del cuerpo.
IDO regula hacia abajo la respuesta inmune mediada a través de la oxidación de triptófano. Esto da como resultado la inhibición de la activación de células T y la inducción de la apoptosis de células T, creando un ambiente en el que los linfocitos T citotóxicos específicos de tumores se vuelven funcionalmente inactivos o ya no son capaces de atacar células cancerosas de un sujeto. En consecuencia, son deseables los agentes terapéuticos pretendidos en la supresión de la degradación de triptófano por inhibición de la actividad de IDO. Los inhibidores de IDO se pueden usar para activar células T y por ende mejorar la activación de las células T cuando las células T se suprimen por embarazo, malignidad o un virus tal como HIV. La inhibición de IDO también puede ser una estrategia importante de tratamiento para pacientes con enfermedades o trastornos neurológicos o neuropsiquiátricos tales como depresión. Los compuestos, composiciones y métodos del presente documento ayudan a cumplir la necesidad actual de moduladores de IDO.
La expresión de IDO se modula por una gama compleja de señales, lo que implica una cantidad de diferentes mecanismos de acción. Por ejemplo, IDO puede ser inducido por inhibición de ADN metil transferasas o histona desacetilasas. La vía de señalización de NF-kB también fue implicada en la función de IDO. La inhibición de la actividad de NF-kB bloquea la expresión de IDO y produce robustas respuestas antitumorales que son dependientes tanto de las células T como de IDO; alternativamente, la activación de NF-kB (que se puede efectuar por varios factores tales como señalización de interferón-YR1/-YR2 y activación de receptor tipo toll) induce la expresión génica de IDO.
Otros mecanismos están implicados con modulación de la función de IDO. A modo de ejemplo, los inhibidores de especies reactivas oxidativas (ROS) pueden efectuar la estabilización de IDO; los niveles de IDO se pueden modular por inhibición o activación de vías que están tanto corriente abajo como corriente arriba de IDO y la activación de interferón-Y puede activar una inducción autocrina de IDO.
Los estudios indican que la vía de IDO es activa en muchos cánceres, tanto dentro de las células tumorales como una defensa directa contra el ataque de células T como también dentro de células que presentan antígeno (APCs) en nodos linfáticos que drenan el tumor que resultan en la tolerancia periférica a los antígenos asociados con tumores (TAAs). Los cánceres pueden usar la vía de IDO para facilitar la supervivencia, el crecimiento, la invasión y la metástasis de células malignas que expresan TAAs que se pueden reconocer y atacar de otro modo por el sistema inmune.
Como se alude en el presente documento, el catabolismo de triptófano en el tejido tumoral por la IDO enzimática limitativa de la tasa proporciona una oportunidad para el uso de inhibidores de IDO como una alternativa terapéutica o un aditivo con quimioterapia convencional. Sin embargo, ciertos cánceres son capaces de catabolizar el triptófano pero son ampliamente IDO-negativos. Recientes estudios indican que la vía enzimática alternativa del catabolismo de triptófano que implica triptófano-2,3-dioxigenasa (TDO) también es relevante en el cáncer. TDO, que se considera responsable de la regulación de niveles sistémicos de triptófano en el hígado, se expresa constitutivamente en algunos cánceres y también es capaz de suprimir las respuestas inmunes antitumorales (ver, por ejemplo, Platten, M. et al., Cáncer Res., 72(21): 5435-5440 (Nov. 1, 2012)).
IDO se expresa en una amplia variedad de tumores humanos y líneas celulares tumorales, así como en APCs huésped, que se correlaciona con un mal pronóstico clínico. En consecuencia, la inhibición de IDO puede mejorar la supervivencia en pacientes con cáncer con inmunosupresión mediada por IDO. En comparación, TDO se expresa en una amplia variedad de tumores humanos y líneas celulares tumorales y la expresión de TDO es evidente en glioblastomas humanos avanzados. La identificación de tumores que expresan altos niveles de IDO o TDO puede permitir una inhibición más selectiva de las vías inmunosupresoras reguladas por triptófano. De modo alternativo, los compuestos que inhiben tanto IDO como TDO podrían proporcionar la mayor cobertura para evitar el escape tumoral por expresión compensatoria de la otra enzima degradante de triptófano. En consecuencia, el uso de inhibidores duales de IDO/TDO o combinaciones de inhibidores específicos de IDO y TDO pueden probar ser una alternativa de tratamiento superior en inmunoterapia de cáncer para bloquear la inmunosupresión mediada por el metabolismo de triptófano.
A pesar de que una comprensión precisa del mecanismo de acción subyacente por el cual los compuestos de la presente invención efectúan su actividad no se requiere para poner en práctica la invención, se cree que los compuestos (o uno de sus subgrupos) inhiben la función de IDO. De modo alternativo, los compuestos (o uno de sus subgrupos) pueden inhibir la función de TDO. Los compuestos (o uno de sus subgrupos) también pueden tener actividad inhibidora tanto sobre la función de IDO como de TDO. A pesar de que los compuestos de la invención se mencionan en general en el presente documento como inhibidores de IDO, se ha de entender que la expresión “inhibidores de IDO” comprende compuestos que actúan de forma individual a través de inhibición de TDO o IDO y/o compuestos que actúan a través de la inhibición tanto de IDO como de TDO.
Identificación de inhibidores de IDO que poseen características deseables
La presente invención se redacta, en parte, para la identificación de inhibidores de IDO con al menos una propiedad o característica que es de relevancia terapéutica. Los inhibidores candidatos se pueden identificar usando, por ejemplo, un ensayo o modelo aceptado en la técnica, cuyos ejemplos se describen en el presente documento.
Después de la identificación, los inhibidores candidatos se pueden evaluar luego usando técnicas que proporcionan datos respecto a las características de los inhibidores (por ejemplo, parámetros farmacocinéticos, medios de determinación de la solubilidad o estabilidad). Las comparaciones de los inhibidores candidatos con un estándar de referencia (que pueden ser los “mejores de la clase” de los inhibidores actuales) son indicativas de la viabilidad potencial de tales candidatos.
Compuestos
Como se observó con anterioridad, la presente divulgación proporciona compuestos representados por la fórmula (Ix):
Figure imgf000015_0001
o una de sus sales, hidratos o solvatos farmacéuticamente aceptables, en donde, el subíndice n es 1 o 0; el subíndice p es 1 o 0; el anillo designado como A es fenilo, heteroarilo de 5 o 6 miembros o cicloalquilo C5-7; Z es O; B es N, C(OR5a) o C(R3a); cada X es, de modo independiente, NR5a, O, CHR5, C(O) o CH(OR5a); Q es N, C(CN) o CR6; D es un enlace, O, C(R5)2 o NR5a; E es un heteroarilo bicíclico condensado opcionalmente sustituido de 9 o 10 miembros; R1 y R2 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4 , cicloalquilo C3-C6 , cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C4 , CN, SO2NH2 , NHSO2CH3, NHSO2CF3 , OCF3, SO2CH3, SO2CF3 o CONH2 y cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo se pueden unir para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados, de modo independiente, de O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados de fluoro y alquilo C1-C3; R3, R3a y R4 son, de modo independiente, hidrógeno, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, haloalquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquil C3-C6-alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, aril-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, flúor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R5)2, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -(CR5R5)m-OH, -(CR5R5)m-CO2H, -(CR5R5)mC(O)NH2 , -(CR5R5)m-C(O)NHR5, -(CR5R5)mN(R5)2, -NH(CR5R5)mCO2H o -NH(CR5R5)m-C(O)NH2 ; cada R5 es, de modo independiente, H, F, OH o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; cada R5a es, de modo independiente, H o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; R6 es H, OH, F, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o -N(R5a)2 y cada m es, de modo independiente, 1,2 o 3.
En algunos casos, Q es C(CN) o CR6.
En algunos casos, se proporcionan compuestos que tienen la fórmula (Ia) o (Ib):
Figure imgf000015_0002
en donde cada uno de los subíndices, letras y R1, R2, R3, R4 y R6 tienen los significados proporcionados con referencia a los compuestos de fórmula (Ix).
En otros casos, se proporcionan compuestos que tienen la fórmula (Ic):
Figure imgf000015_0003
en donde J1 es CH, N u opcionalmente C(R2) cuando R2 está unido al vértice de anillo identificado como J1 y cada uno de los subíndices, letras y R1, R2, R3, R4y R6 tienen los significados proporcionados con referencia a los compuestos de fórmula (Ix).
En algunos casos seleccionados, se proporcionan compuestos que tienen una fórmula seleccionada de (Ic1), (Ic2), (Ic3), (Ic4), (Ic5) y (Ic6):
Figure imgf000016_0001
(Ic4) (Ic5) (Ic6)
en donde J1 es CH, N u opcionalmente C(R2) cuando R2 está unido al vértice de anillo identificado como J1 y cada uno de los subíndices, letras y R1, R2, R3, R3a, R4 y R6 tienen los significados proporcionados con referencia a los compuestos de fórmula (Ix).
En otros casos, se proporcionan compuestos que tienen la fórmula (Id):
Figure imgf000016_0002
en donde J1 es CH, N u opcionalmente C(R2) cuando R2 está unido al vértice de anillo identificado como J1, cada uno de los subíndices, letras y R1, R2, R3, R3ay R6 tienen los significados proporcionados con referencia a los compuestos de fórmula (Ix).
En algunos casos seleccionados, se proporcionan compuestos que tienen una fórmula seleccionada de (Id1), (Id2), (I) e (Id4):
(I) (Id4)
en donde para cada uno de (Id1) e (Id2), los compuestos se proporcionan sustancialmente libres de otros isómeros en los estereocentros mostrados. Pada cada uno de (I) e (Id4), R11 y R12 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4, cicloalquilo C3-C6, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C4, CN, SO2NH2, NHSO2CH3 , NHSO2CF3 , OCF3, SO2CH3 , SO2CF3 o CONH2 y cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo se pueden unir para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados, de modo independiente, de O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados de fluoro y alquilo C1-C3. Para cada uno de (Id1), (Id2), (I) e (Id4), las demás letras y J1, R1, R2, R3, R3a y R6 tienen los significados proporcionados con referencia a los compuestos de la fórmula (Id).
En otros casos, se proporcionan compuestos que tienen la fórmula (Ie):
Figure imgf000017_0001
en donde las letras y R1, R2, R3, R3a y R6 tienen los significados proporcionados con referencia a los compuestos de la fórmula (Ix).
En algunos casos seleccionados, se proporcionan compuestos que tienen una fórmula seleccionada de (Ie1), (Ie2), (Ie3), (Ie4), (Ie5), (Ie6) y (Ie7):
Figure imgf000017_0002
Para cada una de las fórmulas (Ie1), (Ie4), (Ie5), (Ie6) e (Ie7), los compuestos están sustancialmente libres de otros isómeros en cada uno de los estereocentros mostrados. En casos seleccionados de la fórmula (Ie4), se proporcionan compuestos en donde R1 es Cl, F, fenilo opcionalmente sustituido o CN. En casos seleccionados de la fórmula (Ie6), se proporcionan compuestos en donde R1 es Cl, F, fenilo opcionalmente sustituido o CN y R2 es H o F. En casos seleccionados de la fórmula (Ie6), se proporcionan compuestos en donde R1 es Cl. En otros casos seleccionados de la fórmula (Ie6), se proporcionan compuestos en donde R1 es Cl y R3 es CH3. Cuando no se define específicamente como se indica aquí, las demás letras y R1, R2, R3, R3a y R6 tienen los significados proporcionados con referencia a los compuestos de la fórmula (Ix).
En otros casos, se proporcionan compuestos que tienen la fórmula (If) o (Ig):
Figure imgf000018_0001
cada uno de los cuales está sustancialmente libre de otros isómeros en cada uno de los tres estereocentros mostrados y en donde R2 y R3 tienen los significados proporcionados con referencia a la fórmula (Ix).
En un grupo de casos seleccionados, se proporciona cualquier compuesto de las figuras 1A-1L.
En otro grupo de casos seleccionados, se proporciona cualquier compuesto de las figuras 1A-1L que tiene un nivel de actividad identificado como “A” o “B”.
En otro grupo de casos seleccionados, se proporciona cualquier compuesto de las figuras 1A-1L que tiene un nivel de actividad identificado como “A”.
Métodos de Síntesis
Los compuestos descritos en el presente documento se pueden preparar por varios métodos. Se proporcionan métodos representativos en los ejemplos presentados más abajo.
Modificaciones para mejorar las características del inhibidor
Frecuentemente es beneficioso y algunas veces imperativo, mejorar una de varias propiedades físicas de las modalidades de tratamiento divulgadas en el presente documento y/o la manera en la cual son administradas. Las mejoras de las propiedades físicas incluyen, por ejemplo, métodos de aumentar la solubilidad del agua, biodisponibilidad, vida media sérica y/o vida media terapéutica y/o modular la actividad biológica.
Las modificaciones conocidas en la técnica incluyen pegilación, fusión de Fc y fusión de albúmina. Aunque en general están asociadas con agentes de moléculas grandes (por ejemplo, polipéptidos), tales modificaciones han sido evaluadas recientemente con moléculas pequeñas particulares. A modo de ejemplo, Chiang, M. et al. (J. Am. Chem. Soc., 136(9): 3370-3373 (2014)) describe un agonista de moléculas pequeñas del receptor de la adenosina 2a conjugado al dominio Fc de la inmunoglobulina. El conjugado Fc de moléculas pequeñas retuvo interacciones potentes del receptor de Fc y el receptor de adenosina 2a y presentó propiedades superiores en comparación con la molécula pequeña no conjugada. También se ha descrito la unión covalente de las moléculas de PEG a terapéuticas de moléculas pequeñas (Li, W. et al., Progress in Polymer Science, 38: 421-444 (2013)).
Usos terapéuticos y profilácticos
La presente invención contempla el uso de los inhibidores de IDO descriptos en el presente documento para su uso en el tratamiento o la prevención de una amplia gama de enfermedades, trastornos y/o afecciones y/o sus síntomas. Si bien se describen usos particulares en detalle a continuación, debe entenderse que la presente invención no está limitada por ellos. Además, aunque se presentan a continuación categorías generales de enfermedades, trastornos y afecciones particulares, algunas de las enfermedades, trastornos y afecciones pueden ser un miembro de más de una categoría y otros pueden no ser un miembro de ninguna de las categorías divulgadas.
Trastornos relacionados con la oncología. De acuerdo con la presente invención, un inhibidor de IDO se puede usar para tratar o prevenir una afección o un trastorno proliferativo, incluyendo un cáncer, por ejemplo, cáncer del útero, del cuello del útero, de la mama, de la próstata, de los testículos, del tracto gastrointestinal (por ejemplo, esófago, orofaringe, estómago, intestino delgado o grueso, colon o recto), del riñón, de las células renales, de la vejiga, óseo, de la médula ósea, de la piel, de la cabeza o el cuello, del hígado, de la vesícula biliar, del corazón, del pulmón, del páncreas, de las glándulas salivales, de la glándula adrenal, de tiroides, del cerebro (por ejemplo, gliomas), de los ganglios, del sistema nervioso central (SNC) y del sistema nervioso periférico (SNP) y cánceres del sistema hematopoyético y del sistema inmune (por ejemplo, del bazo o del timo). La presente divulgación también proporciona métodos de tratamiento o prevención de otras enfermedades, trastornos o afecciones relacionados con el cáncer, incluyendo, por ejemplo, tumores inmunogénicos, tumores no inmunogénicos, tumores durmientes, cánceres inducidos por virus (por ejemplo, cánceres de las células epiteliales, cánceres de las células endoteliales, carcinomas de las células escamosas y virus del papiloma), adenocarcinomas, linfomas, carcinomas, melanomas, leucemias, mielomas, sarcomas, teratocarcinomas, cánceres inducidos químicamente, metástasis y angiogénesis. La invención contempla la reducción de la tolerancia a un antígeno de una célula tumoral o célula cancerígena, por ejemplo, modulando la actividad de una célula T reguladora y/o una célula T CD8+ (ver, por ejemplo, Ramírez-Montagut et al., Oncogene, 22: 3180-3187 (2003) y Sawaya et al., New Engl. J. Med., 349: 1501-1509 (2003)). En formas de realización particulares, el tumor o el cáncer es cáncer de colon, cáncer de ovario, cáncer de mama, melanoma, cáncer de pulmón, glioblastoma o leucemia. El uso del o de los términos enfermedades, trastornos y afecciones relacionados con el cáncer se entiende que se refiere ampliamente a afecciones que están asociadas, directamente o indirectamente, con el cáncer e incluyen, por ejemplo, angiogénesis y afecciones precancerosas, tales como displasia.
También se divulgan métodos para tratar una afección proliferativa, un cáncer, un tumor o una afección precancerosa con un inhibidor de IDO y al menos un agente terapéutico o diagnóstico adicional, ejemplos de los cuales se presentan en otra parte en el presente documento.
Trastornos inmunes e inflamatorios. Como se usa en el presente documento, los términos tales como “enfermedad inmune”, “afección inmune”, “trastorno inmune”, “enfermedad inflamatoria”, “afección inflamatoria”, “trastorno inflamatorio” y similares se entiende que comprenden ampliamente cualquier afección inmune o inflamatoria (por ejemplo, inflamación patológica y enfermedades autoinmunes). Tales afecciones frecuentemente están entrelazadas en forma inextricable con otras enfermedades, trastornos y afecciones. A modo de ejemplo, una “afección inmune” puede referirse a afecciones proliferativas, tales como cáncer, tumores y angiogénesis; incluyendo infecciones (agudas y crónicas), tumores y cánceres que resisten la erradicación por el sistema inmune.
Una lista no limitativa de enfermedades, trastornos y afecciones inmunes e inflamatorias que pueden ser tratadas o prevenidas con los compuestos y composiciones de la presente invención incluyen, artritis (por ejemplo, artritis reumatoidea), insuficiencia renal, lupus, asma, psoriasis, colitis, pancreatitis, alergias, fibrosis, complicaciones quirúrgicas (por ejemplo, donde las citocinas inflamatorias evitan la curación), anemia y fibromialgia. Otras enfermedades y trastornos que pueden estar asociadas con la inflamación crónica incluyen enfermedad de Alzheimer, insuficiencia cardiaca congestiva, accidente cerebrovascular, estenosis de la válvula aórtica, arteriosclerosis, osteoporosis, enfermedad de Parkinson, infecciones, enfermedad inflamatoria del intestino (por ejemplo, enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa), dermatitis alérgica por contacto y otros eczemas, esclerosis sistémica, trasplantes y esclerosis múltiple.
Entre otros trastornos inmunes, se contempla que la inhibición de la función de IDO puede tener también un rol en la tolerancia inmune y la prevención del rechazo fetal en útero.
En algunas formas de realización, un inhibidor de IDO descrito en el presente documento puede ser combinado con un agente inmunosupresor para reducir el número de células efectoras del sistema inmune.
Algunas de las enfermedades, trastornos y afecciones antes mencionados para los cuales un inhibidor de IDO puede ser particularmente eficaz (debido, por ejemplo, a limitaciones de las terapias actuales) se describen con más detalles a continuación.
La artritis reumatoide (RA), que está caracterizada en general por inflamación crónica en el recubrimiento de membrana (la membrana sinovial) de las articulaciones, afecta aproximadamente al 1 % de la población de los Estados Unidos (~2,1 millones de personas). La comprensión adicional del rol de las citocinas, incluyendo TNF-a e IL-1, en el proceso inflamatorio ha permitido el desarrollo y la introducción de una nueva clase de fármacos antirreumáticos que modifican la enfermedad (DMARDs). Los agentes (algunos de los cuales se superponen con las modalidades de tratamiento para la AR) incluyen En BREL® (etanercept), REMICADE® (infliximab), HUMIRA® (adalimumab) y KINERET® (anakinra). Aunque algunos de estos agentes alivian los síntomas, inhiben el avance del daño estructural y mejoran la función física en poblaciones particulares de pacientes, existe aún la necesidad de contar con agentes alternativos con eficacia mejorada, mecanismos de acción complementarios y menos/más leves efectos secundarios.
La psoriasis, una constelación de enfermedades de la piel crónicas, mediadas inmunológicamente, afecta a más de 4,5 millones de personas en los Estados Unidos, de los cuales 1,5 millones se considera que tienen una forma de la enfermedad de moderada a severa. Más aún, más de 10 % de los pacientes con psoriasis desarrollan una artritis psoriásica, que daña el hueso y el tejido conectivo alrededor de las articulaciones. Una mejor comprensión de la fisiología subyacente de la psoriasis ha dado por resultado la introducción de agentes que, por ejemplo, tienen por objetivo la actividad de los linfocitos T y las citocinas responsables de la naturaleza inflamatoria de la enfermedad. Tales agentes incluyen los inhibidores de TNF-a (también usados en el tratamiento de la artritis reumatoide (RA)), incluyendo ENBRe L® (etanercept), REMICADE® (infliximab) y HUMIRA® (adalimumab)) y los inhibidores de las células T, tales como AMEVIVE® (alefacept) y RAPTIVA® (efalizumab). Aunque varios de estos agentes son efectivos en alguna medida en ciertas poblaciones de pacientes, ninguno ha demostrado tratar eficazmente a todos los pacientes.
Los sujetos que padecen de esclerosis múltiple (MS), una enfermedad autoinmune que debilita seriamente que comprende múltiples áreas de inflamación y lesiones de la mielina en el cerebro y la médula espinal, puede ser ayudados particularmente por los inhibidores de IDO descritos en el presente documento, ya que los tratamientos actuales solo alivian los síntomas o retardan el avance de la discapacidad.
Similarmente, los inhibidores de IDO pueden ser particularmente ventajosos para los sujetos afectados por trastornos neurodegenerativos, tales como la enfermedad de Alzheimer (AD), un trastorno cerebral que afecta seriamente a los procesos del razonamiento, la memoria y el lenguaje de los pacientes y la enfermedad de Parkinson (PD), un trastorno progresivo del SNC caracterizado, por ejemplo, por movimiento anormal, rigidez y temblor. Estos trastornos son progresivos y debilitantes y no hay agentes disponibles para su curación.
Trastornos virales. La presente invención contempla el uso de los inhibidores de IDO en el tratamiento y/o la prevención de cualquier enfermedad, trastorno o afección viral para el cual puede ser beneficioso el tratamiento con un inhibidor de IDO. En formas de realización particulares, el trastorno viral es un trastorno viral crónico. Ejemplos de enfermedades, trastornos y afecciones virales que están contempladas incluyen, pero sin limitación, el virus de la hepatitis B (HBV), el virus de la hepatitis C (HCV), el virus del papiloma humano (HPV), HIV, SIDA (incluyendo sus manifestaciones tales como caquexia, demencia y diarrea), el virus del herpes simple (HSV), el virus de Epstein-Barr (EBV), el virus de la varicela zoster, el virus coxsackie y el citomegalovirus (CMV).
Trastornos bacterianos y parasitarios. Las formas de realización de la presente invención contemplan la administración de los inhibidores de IDO descritos en el presente documento a un sujeto para el tratamiento de una infección bacteriana, por ejemplo, una infección por micobacterias (por ejemplo, Mycobacterium leprae o Mycobacterium tuberculosis) o una infección causada por Listeria monocitogenes o Toxoplasma gondii. Otras formas de realización contemplan los inhibidores de IDO descritos en el presente documento para su uso en el tratamiento de una infección parasitaria incluyendo, pero sin limitación, Leishmania donovani, Leishmania tropica, Leishmania major, Leishmania aetiopica, Leishmania mexicana, Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale o Plasmodium malariae. Frecuentemente, la terapia antiparasitaria es administrada profilácticamente (por ejemplo, antes de que un sujeto viaje a un área con una alta frecuencia de infección parasitaria).
Composiciones farmacéuticas
Los inhibidores de IDO de la presente invención pueden estar en la forma de composiciones adecuadas para la administración a un sujeto. En general, tales composiciones son “composiciones farmacéuticas” que comprenden uno o más inhibidores de IDO y uno o más diluyentes, vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables o fisiológicamente aceptables. En ciertas formas de realización, los inhibidores de IDO están presentes en una cantidad terapéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas pueden ser usadas en los métodos de la presente invención; así, por ejemplo, las composiciones farmacéuticas pueden ser administradas ex vivo o in vivo a un sujeto para poner en práctica los métodos terapéuticos y profilácticos y usos descriptos en el presente documento.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser formuladas para ser compatibles con el método o vía de administración previsto; vías de administración ilustrativas se presentan en el presente documento. Además, las composiciones farmacéuticas pueden ser usadas en combinación con otros principios o compuestos terapéuticamente activos como se describe en el presente documento para tratar o prevenir las enfermedades, trastornos y afecciones como están contempladas por la presente invención.
Las composiciones farmacéuticas que contienen el principio activo (por ejemplo, un inhibidor de la función IDO) pueden presentarse en una forma adecuada para el uso oral, por ejemplo, como comprimidos, cápsulas, trociscos, pastillas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos dispersables o gránulos, emulsiones, cápsulas duras o blandas o jarabes, soluciones, microperlas o elixires. Las composiciones farmacéuticas previstas para uso oral pueden ser preparadas de acuerdo con cualquier método conocido en la técnica para la elaboración de composiciones farmacéuticas y tales composiciones pueden contener uno o más agentes tales como, por ejemplo, agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes conservantes para proporcionar preparados farmacéuticamente elegantes y agradables al paladar. Comprimidos, cápsulas y similares contienen el principio activo mezclado con excipientes no tóxicos, farmacéuticamente aceptables que son adecuados para la elaboración de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes de granulación y desintegrantes, por ejemplo, almidón de maíz o ácido algínico; agentes de unión, por ejemplo, almidón, gelatina o goma arábiga y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco.
Los comprimidos, cápsulas y similares adecuados para la administración oral pueden ser no recubiertos o recubiertos por técnicas conocidas para retardar la desintegración y la absorción en el tracto gastrointestinal y de este modo proporcionar una acción sostenida. Por ejemplo, se puede emplear un material para retardar en el tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. También pueden ser recubiertos por técnicas conocidas en la técnica para formar comprimidos terapéuticos osmóticos para liberación controlada. Agentes adicionales incluyen partículas biodegradables o biocompatibles o una substancia polimérica tal como poliésteres, ácidos poliamínicos, hidrogel, polivinilpirrolidona, polianhídridos, ácido poliglicólico, etileno-vinilacetato, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, sulfato de protamina o copolímeros láctidos/glicólidos, copolímeros poliláctidos/glicólidos o copolímeros de etilenovinilacetato para controlar la liberación de una composición administrada. Por ejemplo, el agente oral puede ser atrapado en microcápsulas preparadas por técnicas de coacervación o por polimerización interfacial, por el uso de hidroximetilcelulosa o microcápsulas de gelatina o microcápsulas de poli(metilmetacrilato), respectivamente o en un sistema de liberación de fármacos coloidal. Los sistemas de dispersión coloidal incluyen complejos de macromoléculas, nano-cápsulas, microesferas, microperlas y sistemas basados en lípidos, incluyendo emulsiones de aceite en agua, micelas, micelas mixtas y liposomas. Los métodos para la preparación de las formulaciones arriba mencionadas resultarán evidentes para los expertos en la técnica.
Las formulaciones para uso oral también pueden presentarse como cápsulas de gelatina duras en donde el principio activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio, caolín o celulosa microcristalina o como cápsulas de gelatina blandas en donde el principio activo se mezcla con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.
Las suspensiones acuosas contienen los materiales activos mezclados con excipientes adecuados para la su elaboración. Tales excipientes pueden ser agentes de suspensión, por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma arábiga; agentes dispersantes o humectantes, por ejemplo, un fosfátido de origen natural (por ejemplo, lecitina) o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos (por ejemplo, estearato de polioxietileno) o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga (por ejemplo, para heptadecaetilenoxicetanol) o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol (por ejemplo, monooleato de sorbitol polioxietileno) o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol (por ejemplo, monooleato de sorbitano polietileno). Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservantes.
Las suspensiones oleosas pueden ser formuladas suspendiendo el principio activo en un aceite vegetal, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo aceite de coco o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo, cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Agentes edulcorantes tales como aquellos presentados más arriba y agentes saborizantes pueden ser agregados para proporcionar un preparado oral agradable al paladar.
Los polvos dispersables y gránulos adecuados para la preparación de una suspensión acuosa por adición de agua proporcionan el principio activo mezclado con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados se ilustran en el presente documento.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención también pueden presentarse en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo, aceite de oliva o aceite de cacahuete o un aceite mineral, por ejemplo, parafina líquida o mezclas de estos. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser gomas de origen natural, por ejemplo, goma arábiga o goma tragacanto; fosfátidos de origen natural, por ejemplo, semilla de soja, lecitina y ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos; anhídridos de hexitol, por ejemplo, monooleato de sorbitano y productos de condensación de ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo, monooleato de polioxietilensorbitano.
Las formulaciones también pueden incluir vehículos para proteger a la composición contra una rápida degradación o eliminación del cuerpo, tal como una formulación de liberación controlada, incluyendo implantes, liposomas, hidrogeles, profármacos y sistemas de liberación microencapsulados. Por ejemplo, se puede emplear un material de retardo en el tiempo tal como monoestearato de glicerilo o estearato de glicerilo solo o en combinación con una cera.
Las composiciones farmacéuticas comprenden habitualmente una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de IDO contemplado por la presente invención y uno o más agentes de formulación farmacéutica y fisiológicamente aceptables. Los diluyentes, vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables o fisiológicamente aceptables adecuados incluyen, pero sin limitación, antioxidantes (por ejemplo, ácido ascórbico y bisulfato de sodio), conservantes (por ejemplo, alcohol bencílico, metilparabenos, etilo o n-propilo, p-hidroxibenzoato), agentes emulsionantes, agentes de suspensión, agentes dispersantes, solventes, cargas, agentes que aumentan el volumen, detergentes, tampones, vehículos, diluyentes, y/o adyuvantes. Por ejemplo, un vehículo adecuado puede ser una solución salina fisiológica o una solución salina con tampón citrato, suplementada posiblemente con otros materiales comunes en las composiciones farmacéuticas para la administración parenteral. La solución salina con tampón neutro o la solución salina mezclada con albúmina sérica son otros vehículos ilustrativos. Los expertos en la técnica reconocerán fácilmente varios tampones que se pueden usar en las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación contempladas en el presente documento. Los tampones habituales incluyen, pero sin limitación, ácidos débiles, bases débiles o mezclas de ellos, farmacéuticamente aceptables. Como un ejemplo, los componentes del tampón pueden ser materiales solubles en agua tales como ácido fosfórico, ácidos tartáricos, ácido láctico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido acético, ácido ascórbico, ácido aspártico, ácido glutámico y sales de estos. Los agentes de tampón aceptables incluyen, por ejemplo, un tampón Tris, ácido N-(2-hidroxietil)piperazin-N'-(2-etansulfónico) (HEPES), ácido 2-(N-morfolino)etansulfónico (MES), sal sódica del ácido 2-(N-morfolino)etansulfónico (MES), ácido 3-(N-morfolino)propansulfónico (MOPS) y ácido N-tris[hidroximetil]metil-3-aminopropanosulfónico (TAPS).
Después que se ha formulado una composición farmacéutica, ésta puede ser almacenada en viales estériles como una solución, suspensión, gel, emulsión, polvo sólido o deshidratado o liofilizado. Tales formulaciones pueden ser almacenadas o bien en una forma lista para usar, una forma liofilizada que requiere ser reconstituida antes del uso, una forma líquida que requiere dilución antes del uso u otra forma aceptable. En algunas formas de realización, la composición farmacéutica es proporcionada en un contenedor de un solo uso (por ejemplo, un vial, ampolla, jeringa o autoinyector (similar, por ejemplo, a un EPIPEN®)) de un solo uso, mientras que un contenedor de uso múltiple (por ejemplo, un vial de uso múltiple) es proporcionado en otras formas de realización. Se puede usar cualquier aparato para la administración de fármacos para la administración del inhibidor de IDO, incluyendo implantes (por ejemplo, bombas implantables) y sistemas de catéter, bombas y dispositivos de inyección lenta, todos los cuales son bien conocidos por los expertos en la técnica. Las inyecciones de depósito, que son administradas en general en forma subcutánea o intramuscular, también pueden ser utilizadas para liberar los polipéptidos divulgados en el presente documento durante un período de tiempo definido. Las inyecciones de depósito usualmente tienen una base sólida u oleosa y en general comprenden al menos uno de los componentes de la formulación presentados en el presente documento. Un experto en la técnica está familiarizado con posibles formulaciones y usos de inyecciones de depósito.
Las composiciones farmacéuticas pueden presentarse en forma de una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión puede ser formulada de acuerdo con la técnica conocida usando aquellos agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados mencionados en el presente documento. El preparado inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo, como una solución en 1,3-butanodiol. Los diluyentes, solventes y medios de dispersión aceptables que se pueden emplear incluyen agua, solución de Ringer, solución isotónica de cloruro de sodio, CREMOPHOR® EL (BASF, Parsippani, NJ) o solución salina con tampón fosfato (PBS), etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido) y mezclas adecuadas de ellos. Además, aceites fijos estériles se emplean convencionalmente como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito se puede emplear cualquier aceite fijo blando, incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Más aún, ácidos grasos tales como ácido oleico, se pueden usar en la preparación de inyectables. La absorción prolongada de formulaciones inyectables particulares se puede lograr incluyendo un agente que retarda la absorción (por ejemplo, monoestearato de aluminio o gelatina).
La presente invención contempla la administración de los inhibidores de IDO en forma de supositorios para la administración rectal. Los supositorios se pueden preparar mezclando el fármaco con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperaturas comunes pero líquido a la temperatura rectal y por lo tanto se derretirá en el recto para liberar el fármaco. Tales materiales incluyen, pero sin limitación, manteca de cacao y polietilenglicoles.
Los inhibidores de IDO contemplados por la presente invención pueden presentarse en forma de cualquier otra composición farmacéutica adecuada (por ejemplo, sprays para uso nasal o inhalación) actualmente conocida o desarrollada en el futuro.
La concentración de un polipéptido o un fragmento de éste en una formulación puede variar ampliamente (por ejemplo, de menos de aproximadamente 0,1 %, usualmente a o al menos aproximadamente 2 % a tanto como 20 % a 50 % o más en peso) y usualmente será seleccionada principalmente en base a volúmenes de fluidos, viscosidades y factores relacionados con el sujeto de acuerdo con, por ejemplo, el modo de administración particular seleccionado.
Vías de administración
La presente invención contempla la administración de inhibidores de IDO y composiciones de estos, en cualquier forma apropiada. Las vías de administración adecuadas incluyen las vías oral, parenteral (por ejemplo, intramuscular, intravenosa, subcutánea (por ejemplo, inyección o implante), intraperitoneal, intracisternal, intraarticular, intraperitoneal, intracerebral (intraparenquimal) e intracerebroventricular), nasal, vaginal, sublingual, intraocular, rectal, tópica (por ejemplo, transdérmica), sublingual y por inhalación. Las inyecciones de depósito, que son administradas en general en forma subcutánea o intramuscular, también pueden ser utilizadas para liberar a los inhibidores de IDO divulgados en el presente documento durante un período de tiempo definido.
Formas de realización particulares de la presente invención contemplan la administración oral.
Terapia combinada
La presente invención contempla el uso de inhibidores de IDO en combinación con uno o más agentes terapéuticos activos (por ejemplo, agentes quimioterapéuticos) u otras modalidades profilácticas o terapéuticas (por ejemplo, radiación). En una terapia combinada de este tipo, los diversos agentes activos frecuentemente tienen mecanismos de acción complementarios, diferentes. Una terapia combinada de este tipo puede ser ventajosa en especial por permitir una reducción de la dosis de uno o más de los agentes, reduciendo o eliminando de este modo los efectos adversos asociados con uno o más de los agentes. Además, esta terapia combinada puede tener un efecto terapéutico o profiláctico sinérgico sobre la enfermedad, trastorno o afección subyacente.
Como se usa en el presente documento, “combinación” se entiende que incluye terapias que pueden ser administradas separadamente, por ejemplo, formuladas separadamente para una administración separada (por ejemplo, como se puede proporcionar en un kit) y terapias que pueden ser administradas juntas en una sola formulación (es decir, una “coformulación”).
En ciertos casos, los inhibidores de IDO son administrados o aplicados secuencialmente, por ejemplo, donde un agente es administrado antes que uno o más de otros agentes. En otros casos, los inhibidores de IDO son administrados simultáneamente, por ejemplo, donde dos o más agentes son administrados al mismo tiempo o aproximadamente al mismo tiempo; los dos o más agentes pueden estar presentes en dos o más formulaciones separadas o combinados en una sola formulación (es decir, una coformulación). Independientemente de que los dos o más agentes sean administrados secuencial o simultáneamente, se considera que son administrados en combinación a los fines de la presente invención.
Los inhibidores de IDO de la presente invención pueden ser usados en combinación con al menos otro principio (activo) de cualquier manera apropiada bajo las circunstancias dadas. En un caso, el tratamiento con el al menos un principio activo y al menos un inhibidor de IDO de la presente invención se mantiene durante un período de tiempo. En otro caso, el tratamiento con el al menos un principio activo es reducido o discontinuo (por ejemplo, cuando el sujeto está estable), mientras el tratamiento con un inhibidor de IDO de la presente invención se mantiene con un régimen de dosificación constante. En un caso más, el tratamiento con el al menos un principio activo es reducido o discontinuo (por ejemplo, cuando el sujeto está estable), mientras que el tratamiento con un inhibidor de IDO de la presente invención es reducido (por ejemplo, menor dosis, dosificación menos frecuente o un régimen de tratamiento más corto). En aun otro caso, el tratamiento con el al menos un principio activo es reducido o discontinuado (por ejemplo, cuando el sujeto está estable) y el tratamiento con el inhibidor de IDO de la presente invención es aumentado (por ejemplo, mayor dosis, dosificación más frecuente o un régimen de tratamiento más prolongado). En aun otro caso, el tratamiento con el al menos un principio activo es mantenido y el tratamiento con el inhibidor de IDO de la presente invención es reducido o discontinuo (por ejemplo, menor dosis, dosificación menos frecuente o un régimen de tratamiento más corto). En aun otro caso, el tratamiento con el al menos un principio activo y el tratamiento con el inhibidor de IDO de la presente invención son reducidos o discontinuos (por ejemplo, menor dosis, dosificación menos frecuente o un régimen de tratamiento más corto).
Trastornos relacionados con oncología. La presente invención proporciona métodos para tratar y/o prevenir una afección proliferativa, cáncer, tumor o una enfermedad, un trastorno o una afección precancerosa con un inhibidor de IDO y al menos un agente terapéutico adicional, tal como radiación, un agente inmunomodulador o un agente quimioterapéutico o un agente de diagnóstico. Los agentes inmunomoduladores adecuados que se pueden usar en la presente invención incluyen CD40L, B7 y B7RP1; anticuerpos monoclonales activadores (mAbs) de receptores estimuladores, tales como, ant-CD40, anti-CD38, anti-ICOS y ligando 4-IBB; carga de antígeno de células dendríticas (in vitro o in vivo); vacunas anti-cáncer tales como las vacunas contra el cáncer de las células dendríticas; citocinas/quimiocinas, tales como, IL1, IL2, IL12, IL18, ELC/CCL19, SLC/CCL21, MCP-1, IL-4, IL-18, TNF, IL-15, MDC, IFNa/b, M-CSF, IL-3, GM-CSF, IL-13 y anti-IL-10; lipopolisacáridos bacterianos (LPS) y oligonucleótidos inmunoestimuladores.
Ejemplos de agentes quimioterapéuticos incluyen, pero sin limitación, agentes alquilantes tales como tiotepa y ciclosfosfamida; sulfonatos de alquilo tales como busulfano, improsulfano y piposulfano; aziridinas tales como benzodopa, carboquona, meturedopa y uredopa; etileniminas y metilamelaminas incluyendo altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosfaoramida y trimetilolomelamina; mostazas nitrogenadas tales como clorambucilo, clornafazina, colofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, clorhidrato de óxido de mecloretamina, melfalano, novembichina, fenesterina, prednimustina, trofosfamida, mostaza de uracilo; nitrosureas tales como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina, ranimustina; antibióticos tales como aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, calicheamicina, carabicina, caminomicina, carzinofilina, cromomicinas, dactinomicina, daunorrubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, doxorrubicina, epirrubicina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, potfiromicina, puromicina, quelamicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina; antimetabolitos tales como metotrexato y 5-fluorouracilo (5-FU); análogos de ácido fólico tales como denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato; análogos de purina tales como fludarabina, 6-mercaptopurina, tiamiprina, tioguanina; análogos de pirimidina tales como ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, dideoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina, 5-FU; andrógenos tales como calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; antiadrenérgicos tales como aminoglutetimida, mitotano, trilostano; regeneradores de ácido fólico tales como ácido frolínico; aceglatona; glucósido de aldofosfamida; ácido aminolevulínico; amsacrina; bestrabucilo; bisantreno; edatraxato; defofamina; demecolcina; diaziquona; elformitina; acetato de eliptinio; etoglúcido; nitrato de galio; hidroxiurea; lentinano; lonidamina; mitoguazona; mitoxantrona; mopidamol; nitracrina; pentostatina; fenamet; pirarrubicina; ácido podofilínico; 2-etilhidrazida; procarbazina; razoxano; sizofirano; espirogermanio; ácido tenuazónico; triaziquona; 2,2',2''triclorotrietilamina; uretano; vindesina; dacarbazina; mannomustina; mitobronitol; mitolactol; pipobromano; gacitosina; arabinósido (Ara-C); ciclofosfamida; tiotepa; taxoides, por ejemplo, paclitaxel y doxetaxel; clorambucilo; gemcitabina; 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; platino y complejos de coordinación de platino tales como cisplatino y carboplatino; vinblastina; etopósido (VP-16); ifosfamida; mitomicina C; mitoxantrona; vincristina; vinorelbina; navelbina; novantrona; tenipósido; daunomicina; aminopterina; xeloda; ibandronato; CPT11; inhibidores de topoisomerasa; difluorometilornitina (DMFO); ácido retinoico; esperamicinas; capecitabina y sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores.
Los agentes quimioterapéuticos también incluyen agentes antihormonales que actúan regulando o inhibiendo la acción hormonal sobre tumores tales como antiestrógenos, incluyendo, por ejemplo, tamoxifeno, raloxifeno, 4(5)-imidazoles que inhiben la aromatasa, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, keoxifeno, onapristona y toremifeno y antiandrógenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprolida y goserelina y sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores. En ciertas formas de realización, la terapia combinada comprende la administración de una hormona o agente hormonal relacionado.
Los agentes quimioterapéuticos también incluyen inhibidores de la transducción de señales (STI). La expresión "inhibidor de la transducción de señal" se refiere a un agente que inhibe selectivamente una o más etapas en una vía de señalización. Los inhibidores de la transducción de señales (ITS) de la presente invención incluyen: (i) inhibidores de la bcr/abl quinasa (por ejemplo, GLEEVEC); (ii) inhibidores del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGF), incluyendo inhibidores de quinasa y anticuerpos; (iii) inhibidores del receptor de her-2/neu (por ejemplo, HERCEPTIN); (iv) inhibidores de la familia Akt quinasas o la vía de Akt (por ejemplo, rapamicina); (v) inhibidores del ciclo celular de quinasa (por ejemplo, flavopiridol) y (vi) inhibidores de la fosfatidil inositol quinasa.
Las modalidades de tratamiento adicionales que se pueden usar en combinación con un inhibidor de IDO incluyen una citocina o antagonista de citocina, tal como IL-12, IFN o anti-receptor de factor de crecimiento epidérmico, radioterapia, anticuerpo monoclonal contra otro antígeno tumoral, un complejo de anticuerpo monoclonal y toxina, un adyuvante de células T, trasplante de médula ósea, o células presentadoras de antígeno (por ejemplo, terapia de células dendríticas). Las vacunas (por ejemplo, como una proteína soluble o como un ácido nucleico que codifica la proteína) también se proporcionan en el presente documento.
Enfermedades cardiovasculares. La presente invención divulgación proporciona compuestos de la presente invención para su uso en para tratar y/o prevenir cierta enfermedades, trastornos y afecciones cardiovasculares y/o relacionados con el metabolismo, trastornos y condiciones, así como los trastornos asociados con estos, con un inhibidor de IDO y al menos un agente terapéutico o de diagnóstico adicional.
Los ejemplos de agentes terapéuticos útiles en terapia combinada para el tratamiento de hipercolesterolemia (y también aterosclerosis) incluyen las estatinas (por ejemplo, CRESTOR, LESCOL, LIPITOR, MEVACOR, PRAVACo L y ZOCOR), que inhiben la síntesis enzimática de colesterol; resinas de ácidos biliares (por ejemplo, COLESTID, LO-CHOLEST, PREVALITE, QUESTRAN y WELCHOL), que secuestran el colesterol y previenen su absorción; ezetimibe (ZETIA), que bloquea la absorción del colesterol; ácido fíbrico (por ejemplo, TRICOR), que reduce los triglicéridos y puede aumentar modestamente el HDL; niacina (por ejemplo, NIACOR), que reduce modestamente el colesterol LDL y los triglicéridos y/o una combinación de los mencionados anteriormente (por ejemplo, VYTORIN (ezetimibe con simvastatina). Los tratamientos de colesterol alternativos que podrían ser candidatos para su uso en combinación con los inhibidores de IDO descritos en el presente documento incluyen varios suplementos y hierbas (por ejemplo, ajo, policosanol y guggul). La presente invención abarca sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores.
Trastornos inmunológicos e inflamatorios. La presente divulgación proporciona métodos para tratar y/o prevenir enfermedades, trastornos y afecciones inmunológicos e inflamatorios, así como los trastornos asociados con estos, con un inhibidor de IDO y al menos un agente terapéutico o de diagnóstico adicional.
Los ejemplos de agentes terapéuticos útiles en la terapia combinada incluyen, pero sin limitación, los siguientes: fármaco antiinflamatorio no esteroideo (NSAID) tales como aspirina, ibuprofeno y otros derivados del ácido propiónico (alminoprofeno, benoxaprofeno, ácido buclóxico, carprofeno, fenbufeno, fenoprofeno, fluprofeno, flurbiprofeno. indoprofeno, ketoprofeno, miroprofeno, naproxeno, oxaprozina, pirprofeno, pranoprofeno, suprofeno, ácido tiaprofénico y tioxaprofeno), derivados del ácido acético (indometacina, acemetacina, alclofenac, clidanac, diclofenac, fenclofenac, ácido fenclózico, fentiazac, fuirofenac, ibufenac, isoxepac, oxpinac, sulindac, tiopinac, tolmetina, zidometacina y zomepirac), derivados del ácido fenámico (ácido flufenámico, ácido meclofenámico, ácido mefenámico, ácido niflúmico y ácido tolfenámico), derivados del ácido bifenilcarboxílico (diflunisal y flufenisal), oxicams (isoxicam, piroxicam, sudoxicam y tenoxican), salicilatos (ácido acetil salicílico, sulfasalazina) y las pirazolonas (apazona, bezpiperilona, feprazona, mofebutazona, oxifenbutazona, fenilbutazona). Otras combinaciones incluyen inhibidores de la ciclooxigenasa-2 (COX-2).
Otros principios activos para combinación incluyen esteroides tales como prednisolona, prednisona, metilprednisolona, betametasona, dexametasona o hidrocortisona. Tal combinación puede ser especialmente ventajosa, ya que se pueden reducir uno o más efectos adversos de los esteroides o incluso eliminar mediante la reducción de la dosis de esteroides requerida.
Ejemplos adicionales de principios activos que se pueden usar en combinaciones para el tratamiento, por ejemplo, de artritis reumatoide, incluyen fármacos antiinflamatorios supresores de citocinas (CSAIDs); anticuerpos a, o antagonistas de, otras citocinas humanas o factores de crecimiento, por ejemplo, TNF, LT, IL-1p, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL -18, EMAP-II, GM-CSF, FGF o PDGF.
Las combinaciones particulares de principios activos pueden interferir en diferentes puntos en la cascada inflamatoria autoinmune y posterior e incluyen antagonistas de TNF como anticuerpos TNF quiméricos, humanizados o humanos, REMICADE, fragmentos de anticuerpos anti-TNF (por ejemplo, CDP870), y receptores de TNF p55 o p75 solubles, derivados de estos, p75TNFRIgG (ENBREL.) o p55TNFR1gG (LENERCEPT), receptor IL-13 soluble (sIL-13) y también inhibidores de la enzima convertidora de TNFa (TACE); del mismo modo, los inhibidores de IL-1 (por ejemplo, inhibidores de la enzima convertidora de interleucina 1) pueden ser eficaces. Otras combinaciones incluyen interleucina 11, anti-P7S y ligando de glicoproteína p-selectina (PSGL). Otros ejemplos de agentes útiles en combinación con los inhibidores de la IDO descriptos en el presente documento incluyen interferón-p1a (AVONEX); interferón-p1b (BETASERON); copaxona; oxígeno hiperbárico; inmunoglobulina intravenosa; clabribina y anticuerpos para o antagonistas de otras citocinas humanas o factores de crecimiento (por ejemplo, anticuerpos para ligando c D40 y CD80).
Inhibidores de puntos de control inmunes. La presente invención contempla el uso de los inhibidores de la función de IDO descritos en el presente documento en combinación con inhibidores de puntos de control inmunes adicionales.
El gran número de alteraciones genéticas y epigenéticas que son características de todos los cánceres proporciona un conjunto diverso de antígenos que el sistema inmune puede usar para distinguir a las células tumorales de sus contrapartidas normales. En el caso de las células T, la amplitud principal (por ejemplo, niveles de producción o proliferación de citocina) y la calidad (por ejemplo, el tipo de respuesta inmune generada, tal como el patrón de la producción de citocinas) de la respuesta, que es iniciada a través del reconocimiento del antígeno por el receptor de las células T (TCR), es regulado por un equilibrio entre las señales co-estimuladoras e inhibidoras (puntos de control inmunes). Bajo condiciones fisiológicas normales, los puntos de control inmunes son cruciales para la prevención de la autoinmunidad (es decir, el mantenimiento de la auto-tolerancia) y también para la protección de los tejidos con respecto al daño cuando el sistema inmune responde a la infección patógena. La expresión de las proteínas de los puntos de control inmunes puede ser desregulada por tumores como un importante mecanismo de resistencia inmune.
Las células T han sido el principal foco de los esfuerzos para manipular terapéuticamente la inmunidad antitumoral endógena debido a i) su capacidad para el reconocimiento selectivo de péptidos derivados de proteínas en todos los compartimientos celulares; ii) su capacidad para reconocer directamente y eliminar a las células que expresan los antígenos (por células T efectoras CD8+; también conocidas como linfocitos T citotóxicos (CTLs)) y iii) su capacidad para orquestar diversas respuestas inmunes por las células T helper CD4+, que integran a los mecanismos efectores adaptadores e innatos. En el entorno clínico, el bloqueo de puntos de control inmunes - que resulta en la amplificación de las respuestas de las células T antígeno-específicas - ha mostrado ser una propuesta promisoria en la terapéutica del cáncer humano.
La inmunidad mediada por las células T incluye múltiples etapas secuenciales, cada una de las cuales es regulada por la compensación de las señales estimuladoras e inhibidoras para optimizar la respuesta. Si bien casi todas las señales inhibidoras en la respuesta inmune modulan principalmente las vías de señalización intracelulares, muchas son iniciadas a través de receptores de la membrana, cuyos ligandos o bien están ligados a la membrana o son solubles (citocinas). Si bien los receptores co-estimuladores e inhibidores y los ligandos que regulan la activación de las células T frecuentemente no están sobreexpresadas en los cánceres con relación a los tejidos normales, los ligandos y receptores inhibidores que regulan las funciones efectoras de las células T en tejidos están comúnmente sobreexpresados en las células tumorales o en células no transformadas asociadas con el microambiente del tumor. Las funciones del receptor soluble y ligado a la membrana - los puntos de control inmunes del ligando pueden ser modulados usando anticuerpos agonistas (para las vías coestimuladoras) o anticuerpos antagonistas (para las vías inhibidoras). Así, por contraste con la mayoría de los anticuerpos aprobados actualmente para la terapia del cáncer, los anticuerpos que bloquean los puntos de control inmunes no tienen como objetivo las células tumorales directamente, sino más bien tienen como objetivo los receptores de linfocitos o sus ligandos para aumentar la actividad antitumoral endógena. [ver Pardoll, (Abril 2O12) Nature Rev. Cancer 12: 252-64].
Ejemplos de puntos de control inmunes (ligandos y receptores), algunos de los cuales son regulados hacia arriba selectivamente en varios tipos de células tumorales, que son candidatas para el bloqueo incluyen PD1 (proteína de muerte celular programada 1); PDL1 (ligando PD1); bTlA (atenuador de linfocitos B y T); CTLA4 (antígeno asociado con linfocitos Te citotóxicos 4); TIM3 (proteína de la membrana de células T 3); LAG3 (gen de activación de linfocitos 3); A2aR (receptor A2aR de adenosina A2a) y receptores de inhibidores asesinos, que pueden ser divididos en dos clases en base a sus características estructurales: i) receptores tipo inmunoglobulina de las células asesinas (KIRs) y ii) receptores de lectina tipo C (miembros de la familia de los receptores de transmembrana del tipo II). Otros puntos de control inmunes menos bien definidos han sido descritos en la literatura, incluyendo ambos receptores (por ejemplo, el 2B4 (también conocido como receptor CD244)) y ligandos (por ejemplo, ciertos ligandos inhibidores de la familia B7, tales como B7-H3 (también conocido como CD276) y B7-H4 (también conocido como B7-S1, B7x y VCTN1)). [Ver Pardoll, (Abril 2012) Nature Rev. Cáncer 12: 252-64].
La presente invención contempla el uso de los inhibidores de la función IDO descriptos en el presente documento en combinación con inhibidores de los receptores y ligandos de punto de control-inmunes mencionados anteriormente, así como receptores y ligandos del punto de control inmunes aún por describir. Ciertos moduladores de los puestos de control inmunes están actualmente disponibles, mientras que otros están en última fase de desarrollo. Para ilustrar, cuando fue aprobado para el tratamiento del melanoma en 2011, el ipilimumab anticuerpo monoclonal totalmente humanizado CTLA4 (YERVOY; Bristol-Myers Squibb) se convirtió en el primer inhibidor de puntos de control inmunes para recibir la aprobación regulatoria en US. Las proteínas de fusión que comprenden CTLA4 y un anticuerpo (CTLA4-Ig; abatcept (ORENCIA; Bristol-Myers Squibb)) se han utilizado para el tratamiento de la artritis reumatoide y se ha demostrado que otras proteínas de fusión son eficaces en pacientes con trasplante renal que están sensibilizados al virus de Epstein Barr. Los anticuerpos PD1 también están disponibles para el tratamiento del cáncer, que incluyen por ejemplo nivolumab (Bristol-Myers Squibb) y pembroluzimab (Merck) y los anticuerpos anti-PDL1 también se están evaluando (por ejemplo, MPDL3280A (Roche)). Se ha mostrado que Nivolumab (Opdivo®) es prometedor en pacientes con melanoma, cáncer de pulmón y riñón, así como múltiples otras neoplasias.
En un aspecto de la presente invención, los inhibidores de IDO reivindicados se combinan con un agente inmunooncológico que es (i) un agonista de un receptor estimulador (incluyendo un coestimulador) o (ii) un antagonista de una señal inhibidora (incluyendo una coinhibidora) en las células T, los cuales producen la amplificación de las respuestas de células T específicas del antígeno. Algunas de las moléculas estimuladoras e inhibidoras son miembros de la super familia de inmunoglobulina (IgSF). Una importante familia de ligandos unidos a membrana que se unen a los receptores coestimuladores o coinhibidores es la familia B7, que incluye B7-1, B7-2, B7-H1 (PD-L1), B7-DC (PD-L2 ), B7-H2 (ICOS-L), B7-H3, B7-H4, B7-H5 (VISTA) y B7-H6. Otra familia de ligandos unidos a membrana que se unen a los receptores coestimuladores o coinhibidores es la familia TNF de las moléculas que se unen a miembros de la familia del receptor de TNF cognados, que incluyen CD40 y CD40L, OX-40, OX-40L, CD70, CD27L, CD30, CD30L, 4-1BBL, CD137 (4-1BB), TRAIL/Apo2-L, TRAILR1/DR4, TRAILR2/DR5, TRAILR3, TRAILR4, OPG, RANK, RANKL, TWEAKR/Fn14, TWEAK, BAFFR, EDAR, XEDAR, TACI, APRIL, BCMA, LTpR, LIGHT, DcR3, HVEM, VEGI/TL1A, TRAMP/DR3, EDAR, EDA1, XEDAR, EDA2, TNFR1, Limfotoxin a/TNFp, TNFR2, TNFa, LTpR, Limfotoxina a 1p2, FAS, FASL, RELT, DR6, TROY, NGFR.
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es una citocina que inhibe la activación de las células T (por ejemplo, IL-6, IL-10, TGF-13, VEGF y otras citocinas inmunosupresoras) o una citocina que estimula la activación de células T, para estimular una respuesta inmune.
En un aspecto, las respuestas de células T pueden ser estimuladas por una combinación de los inhibidores de IDO reivindicados y uno o más de (i) un antagonista de una proteína que inhibe la activación de las células T (por ejemplo, inhibidores de los puntos de control inmunes), tales como CTLA-4, PD -1, PD-L1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, Galectina 9, CEACAM-1, BTLA, CD69, Galectina-1, TIGIT, CD113, GPR56, VISTA, 2B4, CD48, GARP, PD1H, LAIR1, TIM-1, y TIM-4, y/o (ii) un agonista de una proteína que estimula la activación de células T tales como B7-1, B7-2, CD28, el 4-1BB (CD137), 4-1BBL, ICOS, ICOS-L, OX40, OX40L, GITR, GITRL, CD70, CD27, CD40, DR3 y CD2. Otros agentes que se pueden combinar con los inhibidores de IDO de la presente invención para el tratamiento de cáncer incluyen antagonistas de los receptores inhibitorios sobre las células NK o agonistas de los receptores de activación en las células NK. Por ejemplo, los compuestos de la presente se pueden combinar con antagonistas de KIR, tales como lirilumab.
Aún otros agentes para las terapias de combinación incluyen agentes que inhiben o reducen los macrófagos o monocitos, que incluyen pero sin limitación, antagonista de CSF-1R tales como anticuerpos del antagonista CSF-1R incluyendo RG7155 (WO11/70024, WO11/107553, WO11/131407, WO13/87699, WO13/119716, WO13/132044) o FPA-008 (WO11/140249; WO13169264; WO14/036357).
En otro aspecto, los inhibidores de la IDO reivindicados se pueden usar con uno o más de los agentes agonísticos que ligan receptores coestimuladores positivos, agentes de bloqueo que atenúan la señalización a través de los receptores inhibidores, antagonistas y uno o más agentes que aumentan sistémicamente la frecuencia de células T antitumorales, agentes que superan distintas vías inmunosupresoras dentro del microambiente del tumor (por ejemplo, acoplamiento del receptor inhibitorio de bloque (por ejemplo, interacciones PD-L1/PD-1), reducir o inhibir Treg (por ejemplo, usando un anticuerpo monoclonal anti-CD25 (por ejemplo, daclizumab) o por la reducción de la perla anti-CD25 ex vivo) o revertir/evitar la anergia o reducción de células T) y agentes que desencadenan la activación inmune innata y/o inflamación en los sitios tumorales.
En un aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista CTLA-4, tales como un anticuerpo CTLA-4 antagonista. Los anticuerpos anti-CTLA-4 adecuados incluyen, por ejemplo, YERVOY (ipilimumab) o tremelimumab.
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de PD-1, tal como un anticuerpo PD-1 antagonista. Los anticuerpos PD-1 adecuados incluyen, por ejemplo, OPDIVO (nivolumab), KEYTRUDA (pembrolizumab) o MEDI-0680 (AMP-514; WO2012/145493). El agente inmunooncológico también puede incluir pidilizumab (CT-011), aunque su especificidad para PD-1 unión ha sido cuestionada. Otro enfoque para dirigir el receptor PD-1 es la proteína recombinante compuesta por el dominio extracelular de PD-L2 (B7-DC) condensado a la porción Fc de IgG1, llamado AMP-224
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de PD-L1, tal, como un anticuerpo PD-L1 antagonista. Los anticuerpos PD-L1 adecuados incluyen por ejemplo, MPDL3280A (RG7446; WO2010/077634), durvalumab (MEDI4736), BMS-936559 (WO2007/005874) y MSB0010718C (WO2013/79174).
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de LAG-3, tal como un anticuerpo LAG-3 antagonista. Los anticuerpos LAG3 adecuados incluyen, por ejemplo, BMS-986016 (WO10/19570, WO14/08218) o IMP-731 o IMP-321 (WO08/132601, WO09/44273).
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista de CD137 (4-1BB), tales como un anticuerpo CD137 agonista. Los anticuerpos CD137 adecuados incluyen, por ejemplo, urelumab y PF-05082566 (WO12/32433).
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista GITR, tal como un anticuerpo GITR antagonista. Los anticuerpos GITR adecuados incluyen, por ejemplo, BMS-986153, BMS-986156, TrX-518 (WO06/105021, WO09/009116) y MK-4166 (WO11/028683).
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista OX40, tales como un anticuerpo OX40 agonista. Los anticuerpos OX40 adecuados incluyen, por ejemplo, MEDI-6383 o MEDI-6469.
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un antagonista de OX40L, tal como un anticuerpo OX40 antagonista. Los antagonistas de OX40L adecuados incluyen, por ejemplo, RG-7888 (WO06/029879).
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista de CD40, tal como un anticuerpo CD40 agonista. En aún otra forma de realización, el agente inmunooncológico es un antagonista CD40, tales como un anticuerpo CD40 antagonista. Los anticuerpos CD40 adecuados incluyen, por ejemplo, lucatumumab o dacetuzumab.
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es un agonista CD27, tal como un anticuerpo CD27 agonista. Los anticuerpos CD27 adecuados incluyen, por ejemplo, varlilumab.
En otro aspecto, el agente inmunooncológico es MGA271 (a B7H3) (WO11/109400).
La presente invención abarca sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores.
Enfermedades virales. La presente invención proporciona métodos para tratar y/o evitar enfermedades, trastornos y afecciones virales, así como trastornos asociados con los mismos, con un inhibidor de IDO y al menos un agente terapéutico o diagnóstico adicional (por ejemplo, uno o más agentes antivirales y/o uno o más agentes no asociados con la terapia viral).
Tal terapia combinada incluye agentes antivirales dirigidos a varias etapas del ciclo de vida viral y que tienen diferentes mecanismos de acción, que incluyen, pero sin limitación, los siguientes: inhibidores del desprendimiento de la envoltura viral (por ejemplo, amantadina y rimantadina); inhibidores de transcriptasa inversa (por ejemplo, aciclovir, zidovudina y lamivudina); agentes que se dirigen a la integrasa; agentes que bloquean la unión de factores de transcripción al ADN viral; agentes (por ejemplo, moléculas antisentido) que afectan la traducción (por ejemplo, fomivirseno); agentes que modulan la función de traducción/ribozima; inhibidores de la proteasa; moduladores del ensamblaje viral (por ejemplo, rifampicina); antirretrovirales tales como, por ejemplo, análogos de nucleótidos inhibidores de transcriptasa inversa (por ejemplo, la azidotimidina (AZT), ddI, ddC, 3TC, d4T); inhibidores de la transcriptasa inversa no nucleósidos (por ejemplo, efavirenz, nevirapina); análogo de nucleótidos inhibidores de transcriptasa inversa y agentes que impiden la liberación de partículas virales (por ejemplo, zanamivir y oseltamivir). El tratamiento y/o prevención de ciertas infecciones virales (por ejemplo, VIH) con frecuencia implican un grupo ("cóctel") de agentes antivirales.
Otros agentes antivirales contemplados para usar en combinación con un inhibidor de IDO incluyen, pero sin limitación, los siguientes: abacavir, adefovir, amantadine, amprenavir, ampligen, arbidol, atazanavir, atripla, boceprevirertet, cidofovir, combivir, darunavir, delavirdina, didanosina, docosanol, edoxudina, emtricitabina, enfuvirtide, entecavir, famciclovir, fosamprenavir, foscarnet, fosfonet, ganciclovir, ibacitabina, imunovir, idoxuridina, imiquimod, indinavir, inosina, varios interferones (por ejemplo, peginterferón alfa-2a), lopinavir, loviride, maraviroc, moroxidina, metisazona, nelfinavir, nexavir, penciclovir, peramivir, pleconarilo, podofilotoxina, raltegravir, ribavirina, ritonavir, piramidina, saquinavir, estavudina, telaprevir, tenofovir, tipranavir, trifluridine, trizivir, tromantadine, truvada, valaciclovir, valganciclovir, vicriviroc, vidarabina, viramidina y zalcitabina.
La presente invención abarca sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores.
Trastornos parasitarios. La presente invención contempla el uso de los inhibidores de IDO descriptos en el presente documento en combinación con agentes antiparasitarios. Tales agentes incluyen, pero sin limitación, tiabendazol, pamoato de pirantel, mebendazol, praziquantel, niclosamida, bitionol, oxamniquina, metrifonato, ivermectina, albendazol, eflornitina, melarsoprol, pentamidina, benznidazol, nifurtimox y nitroimidazol. El profesional experto conoce otros agentes que pueden ser de utilidad para el tratamiento de trastornos parasitarios.
La presente invención abarca sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores.
Infecciones bacterianas. Las formas de realización de la presente invención contemplan el uso de los inhibidores de IDO descriptos en el presente documento en combinación con agentes útiles en el tratamiento o prevención de trastornos bacterianos. Los agentes antibacterianos se pueden clasificar de varias maneras, incluyendo, los que se basan en el mecanismo de acción, los que se basan en la estructura química y los que se basan en el espectro de actividad. Los ejemplos de agentes antibacterianos incluyen los que se dirigen a la pared bacteriana celular (por ejemplo, cefalosporinas y penicilinas) o la membrana celular (por ejemplo, polimixinas) o interfieren en las enzimas bacterianas esenciales (por ejemplo, sulfonamidas, rifamicinas y quinolinas). La mayoría de los agentes antibacterianos que se dirigen a la síntesis de proteínas (por ejemplo, tetraciclinas y macrólidos) son bacteriostáticos, mientras que agentes tales como los aminoglucósidos son bactericidas. Otro medio de la categorización de los agentes antibacterianos se basa en su especificidad de blanco; los agentes "de espectro reducido" se dirigen a tipos específicos de bacterias (por ejemplo, bacterias Grampositivas como Streptococcus), mientras que los agentes "de amplio espectro" tienen actividad contra un rango más amplio de bacterias. El profesional experto conoce tipos de agentes antibacterianos que son apropiados para usar en las infecciones bacterianas específicas.
La presente invención abarca sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de los agentes (y miembros de las clases de agentes) expuestos anteriormente.
Dosificación
Los inhibidores de IDO de la presente invención se pueden administrar a un sujeto en una cantidad que es dependiente, por ejemplo, del objetivo de administración (por ejemplo, el grado de resolución deseado); la edad, peso, sexo y salud y afección física del sujeto al que se administra la formulación; la vía de administración y la naturaleza de la enfermedad, trastorno, afección o síntoma de estos. El régimen de dosis también puede tomar en consideración la existencia, naturaleza y grado de efectos adversos asociados con los agentes que están administrando. Las cantidades de dosis eficaces y los regímenes de dosis se pueden determinar fácilmente a partir de, por ejemplo, ensayos de seguridad y escalamiento de dosis, estudios in vivo (por ejemplo, modelos animales) y otros métodos conocidos por los profesionales expertos.
En general, los parámetros de dosificación indican que la cantidad de dosis sea menor que una cantidad que pueda ser irreversiblemente tóxica para el sujeto (la dosis máxima tolerada (MTD)) y no menor que una cantidad requerida para producir un efecto medible en el sujeto. Tales cantidades son determinadas, por ejemplo, por los parámetros farmacocinéticos y farmacodinámicos asociados con ADME, que toma en consideración la vía de administración y otros factores.
Una dosis eficaz (ED) es una dosis o cantidad de un agente que produce una respuesta terapéutica o efecto deseado en alguna fracción de los sujetos que la toman. La “dosis eficaz media” o ED50 de un agente es la dosis o cantidad de un agente que produce una respuesta terapéutica o efecto deseado en un 50 % de la población a la que se administra. Si bien la ED50 es comúnmente usada como una medición de expectativa razonable del efecto de un agente, no es necesariamente la dosis que un médico podría estimar apropiada tomando en consideración todos los factores relevantes. En consecuencia, en algunas situaciones la cantidad eficaz es más de la ED50 calculada, en otras situaciones la cantidad eficaz es menor que la ED50 calculada y en aún otras situaciones la cantidad eficaz es la misma que la ED50.
Además, una dosis eficaz de los inhibidores de IDO de la presente invención puede ser una cantidad que, cuando se administra en una o más dosis a un sujeto, produce un resultado deseado con respecto a un sujeto sano. Por ejemplo, para un sujeto que experimenta un trastorno particular, una dosis eficaz puede ser una que mejora un parámetro, medición, marcador diagnóstico y similares de este trastorno en al menos aproximadamente 5 %, al menos aproximadamente 10 %, al menos aproximadamente 20 %, al menos aproximadamente 25 %, al menos aproximadamente 30 %, al menos aproximadamente 40 %, al menos aproximadamente 50 %, al menos aproximadamente 60 %, al menos aproximadamente 70 %, al menos aproximadamente 80 %, al menos aproximadamente 90 % o más de 90 %, donde 100 % se define como el parámetro, medición, marcador diagnóstico y similares exhibidos por un sujeto normal.
Para administración de un agente oral, las composiciones se pueden proporcionar en la forma de comprimidos, cápsulas y similares que contienen de 1,0 a 1000 miligramos del principio activo, en particular 1,0, 3,0, 5,0, 10,0, 15,0, 20,0, 25,0, 50,0, 75,0, 100,0, 150,0, 200,0, 250,0, 300,0, 400,0, 500,0, 600,0, 750,0, 800,0, 900,0 y 1000,0 miligramos del principio activo.
En ciertas formas de realización, la dosis del inhibidor de IDO deseado está contenida en una “forma de dosis unitaria”.
La frase “forma de dosis unitaria” se refiere a unidades físicamente diferenciadas, cada unidad que contiene una cantidad predeterminada del inhibidor IDO, sea solo o en combinación con uno o más agentes adicionales, suficiente para producir el efecto deseado. Se apreciará que los parámetros de una forma de dosis unitaria dependerán del agente particular y el efecto que sea desea obtener.
Kits
La presente invención también contempla kits que comprenden un inhibidor de IDO y composiciones farmacéuticas de éste. Los kits se presentan en general en la forma de una estructura física que aloja a varios componentes, como se describe más abajo y pueden ser utilizados, por ejemplo, para poner en práctica los métodos descritos más arriba.
Un kit puede incluir uno o más de los inhibidores de IDO divulgados en el presente documento (proporcionados, por ejemplo, en un contenedor estéril), que puede presentarse en la forma de una composición farmacéutica adecuada para la administración a un sujeto. Los inhibidores de IDO pueden ser proporcionados en una forma que está lista para usar (por ejemplo, un comprimido o una cápsula) o en una forma que requiere, por ejemplo, la reconstitución o dilución (por ejemplo, un polvo) antes de la administración. Cuando los inhibidores de IDO se encuentran en una forma que necesita ser reconstituida o diluida por un usuario, el kit también puede incluir diluyentes (por ejemplo, agua estéril), tampones, excipientes farmacéuticamente aceptables y similares, envasados con, o separadamente de, los inhibidores de IDO. Cuando se contempla la terapia combinada, el kit puede contener los diversos agentes separadamente o estos pueden estar ya combinados en el kit. Cada componente del kit puede estar alojado en un contenedor individual y todos los diversos contenedores pueden estar dentro de un solo envase. Un kit de la presente invención puede ser diseñado para las condiciones necesarias para mantener adecuadamente a los componentes alojados allí (por ejemplo, refrigeración o congelación).
Un kit puede contener una etiqueta o prospecto incluyendo la información de identificación para los componentes que se encuentran dentro y las instrucciones para su uso (por ejemplo, parámetros de dosificación, farmacología clínica del o de los ingredientes activos, incluyendo el mecanismo de acción, la farmacocinética y la farmacodinamia, los efectos colaterales, las contraindicaciones, etc.). Las etiquetas o los prospectos pueden incluir información del fabricante tales como números de lote y fechas de caducidad. La etiqueta o el prospecto puede estar, por ejemplo, integrado en la estructura física que aloja a los componentes, contenido separadamente dentro de la estructura física o fijado en un componente del kit (por ejemplo, una ampolla, tubo o vial).
Las etiquetas o los prospectos pueden incluir adicionalmente o estar incorporados en, un medio que se puede leer por una computadora, tal como un disco (por ejemplo, disco rígido, tarjeta, disco de memoria), un disco óptico tal como CD- o d Vd -ROM/RAM, DVD, MP3, cinta magnética o un medio de almacenamiento eléctrico tal como RAM y ROM o híbridos de estos, tales como medios de almacenamiento magnético/óptico, medio ultrarrápida o tarjetas tipo memoria. En algunas formas de realización, las instrucciones reales no están presentes en el kit, pero se proporcionan medios para obtener las instrucciones de una fuente remota, por ejemplo, por medio de internet.
EXPERIMENTAL
[0005] se plantean para proporcionar a los expertos en la técnica una divulgación y descripción completa de cómo preparar y usar la presente invención y no están destinados a representar que los siguientes experimentos se realizaron o que son todos los experimentos que se pueden realizar. Se entiende que los ejemplos de descripciones escritos en tiempo presente no se realizaron necesariamente, sino que las descripciones se pueden realizar para generar datos y similares de una naturaleza descrita en el presente documento. Se han realizado esfuerzos para asegurar la exactitud con respecto a los números usados (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.), pero se deben tomar en cuenta algunos errores y desviaciones experimentales.06
[0006] , las partes son partes en peso, peso molecular es peso molecular promedio ponderado, la temperatura es en grados Celsius (°C) y la presión es la o cerca de la atmosférica. Se usan abreviaturas estándar, incluyendo las siguientes: wt = tipo salvaje; bp = pares de bases; kb = kilobase; nt = nucleótidos; aa = aminoácidos; s o seg = segundos; min = minutos; h = horas; ng = nanogramo; |jg = microgramo; mg = miligramo; g = gramo; kg = kilogramo; dl = decilitro; j l = microlitro; ml = mililitro; l = litro; jM = micromolar; mM = milimolar; M = molar; kDa = kilodalton; i.m. = intramuscular(mente); i.p. = intraperitoneal(mente); SC o SQ = subcutánea(mente); QD = diariamente; BID = dos veces por día; QW = semanal; QM = mensual; HPLC = cromatografía líquida de alto rendimiento; BW = peso corporal; U = unidad; ns = no estadísticamente significativa; PBS = solución salina regulada con fosfato; iHc = inmunohistoquímica; DMEM = medio Eagle modificado de Dulbecco; EDTA = etilendiamintetraacético.
Materiales y Métodos
Se usaron los siguientes materiales y métodos, tal como se indica o se pueden usar en los siguientes ejemplos:
Los métodos estándares de biología molecular se describen en la bibliografía científica (ver, por ejemplo, Sambrook et al., Molecular Cloning, tercera edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (2001) y Ausubel et al., Current Protocols en Molecular Biology, vols. 1-4, John Wiley and Sons, Inc. Nueva York, NY (2001), que describe la clonación en células bacterianas y mutagénesis de ADN (Vol. 1), clonación en células de mamífero y levaduras (Vol. 2), glucoconjugados y expresión de proteína (Vol. 3) y bioinformática (Vol. 4)).
La bibliografía científica describe métodos para la purificación de proteína, incluyendo inmunoprecipitación, cromatografía, electroforesis, centrifugación y cristalización, así como análisis químico, modificación química, modificación postraducción, producción de proteínas de fusión y glucosilación de proteínas (ver, por ejemplo, Coligan, et al., Current Protocols in Protein Science, Vols. 1-2, John Wiley and Sons, Inc., NY (2000)).
Los paquetes de software y bases de datos para determinar, por ejemplo, fragmentos antigénicos, secuencias líder, plegamiento de proteína, dominios funcionales, sitios de glicosilación y alineamientos de secuencia están disponibles (ver, por ejemplo, GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA); y DECIFER® (TimeLogic Corp., Cristal Bai, NV).
La bibliografía está repleta de ensayos y otras técnicas experimentales que pueden servir como base para la evaluación de los compuestos descriptos en el presente documento.
Un ensayo enzimático IDO y producción celular de quinurenina (KYN) se describe en Sarkar, S.A. et al., Diabetes, 56: 72-79 (2007). Brevemente, todos los productos químicos se pueden adquirir de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) a menos que se especifique de otro modo. Grupos de 1.000 islotes humanos se pueden cultivar durante 24 horas en 1 ml de medio con citocinas, recuperar por centrifugación durante 5 min a 800 x g y someter a sonicación en 150 pl de PBS que contiene un cóctel inhibidor de proteasa (Set 2; Calbiochem, EMD Biosciences, San Diego, CA). El producto de la sonicación se puede centrifugar durante 10 min a 10.000 x g y el sobrenadante se puede analizar por triplicado mediante la incubación de una muestra de 40 pl con un volumen igual de tampón de fosfato de potasio 100 mmol/l, pH 6,5, que contiene ácido ascórbico 40 mmol/l (neutralizado a pH 7,0), azul de metileno 100 pmol/l, catalasa 200 pg/ml y L-Trp 400 pmol/l durante 30 min a 37 °C. El ensayo se puede terminar por la adición de 16 pl de ácido tricloroacético 30 % (p/v) (TCA) y también se incuba a 60 °C durante 15 min para hidrolizar W-formilquinurenina a KYN. La mezcla luego se puede centrifugar a 12.000 rpm durante 15 min y KYN se puede cuantificar mediante la mezcla de un volumen igual de sobrenadante con reactivo de Ehrlich 2 % (p/v) en ácido acético glacial en placa de microtitulación de 96 pocillos y la lectura de la absorbancia a 480 nm usando L-KYN como estándar. La proteína de las muestras del islote se puede cuantificar por el ensayo de proteína Bio-Rad a 595 nm. Para la detección de L-KYN en los sobrenadantes del cultivo del islote, las proteínas se pueden precipitar con TCA 5 % (p/v) y centrifugar a 12.000 rpm durante 15 min y la determinación de kYn en el sobrenadante con el reactivo de Ehrlich se puede realizar como se describió anteriormente. IL-4 (10 pg/ml; 500-2,000 unidades/ml) y 1-a-metil Trp (1-MT; 40 pmol/l) se pueden añadir al medio de incubación como se indica. Este ensayo también puede formar la base de un ensayo basado en células y se puede cuantificar por medio de LCMS/MS como una alternativa para la detección de UV/Vis.
Análisis de transferencia Western. Grupos de 1.000 -1.200 islotes incubados durante 24 h en medio Miami en presencia de citocinas se pueden recolectar y someter a sonicación en PBS como antes y 50 pg de muestras de proteína se pueden someter a electroforesis en geles SDS-PAGE 10 %. Las células COS7 (0,6 * 106 células/60 mm3 placa de Petri) transfectadas con plásmido IDO humano (3 pg) o células del vector vacío se pueden usar como controles positivos y negativos, respectivamente. Las proteínas se pueden transferir electroforéticamente sobre membranas de fluoruro de polivinilideno por método semiseco y se bloqueó durante 1 hora con leche en polvo no grasa 5 % (p/v) en solución salina regulada Tris y Tween 0,1 % y luego se incuban durante la noche con anticuerpos anti-IDO de ratón humano (1:500; Chemicon, Temecula, CA), fosfo-STAT-ic, p91 y STAT-ic, p91 (1:500; Zimed, San Francisco, CA). Las proteínas inmunorreactivas se pueden visualizar con reactivo de detección de transferencia Western ECL PLUS® (Amersham BioSciences, Buckinghamshire, Reino Unido) después de la incubación durante 1 hora con anticuerpo secundario anti-ratón conjugado a peroxidasa de rábano (Jackson Immunolabs, West Grove, PA).
[0007] de IDO. Los islotes se pueden fijar en paraformaldehído 4 % en PBS (Invitrogen) durante 1 h, se inmovilizan en bloques de gelatina de piel porcina 10 % fundida (37 °C) y se incluye en compuesto de temperatura de corte óptima. Se puede realizar la tinción inmunofluorescente sobre el tejido de islote en secciones de 7 pm que se tiñeron con anticuerpos originados contra homeobox 1 duodenal pancreático (PDX1) e IDO. La recuperación de antígeno se puede realizar en un baño de agua durante 30 min en un tampón que contiene Tris 10 mmol/l y EDTA 1 mmol/l (pH 9,0) a 97 °C. Las secciones se pueden bloquear durante 1 hora con suero de cabra normal 5 % en PBS. Los tejidos luego pueden reaccionar con anticuerpo monoclonal anti-IDO humano de ratón (1:20; Chemicon) y anticuerpo policlonal anti-PDX1 humano de cabra (1:2,000; que puede ser solicitado en Dr. Chris Wright, School of Medicine, Vanderbilt, TN) durante la noche a temperatura ambiente en una cámara húmeda. Los anticuerpos secundarios anti-cabra (marcado con Ci3) y anti-ratón (marcado con Ci2) se pueden adquirir en Jackson Immunolabs y se pueden usar a una concentración de 1:200. Los núcleos se pueden teñir con Hoechst 33258 (Molecular Probes, Eugene, OR). Las imágenes se pueden obtener mediante el software del sistema de imágenes Intelligent de un microscopio motorizado invertido Olimpus 1X81 provisto de Olimpus DSU (confocal de disco giratorio) y cámara CCD monocromática Hamamatsu ORCA IIER.
Los medios alternativos para evaluar los inhibidores de IDO de la presente invención se describen en WO 2010/0233166 y se resumen de aquí en adelante.
Ensayo bioquímico. Los clones de ADNc para IDO humano y de ratón se han aislado y verificado mediante la secuenciación y son asequibles en el comercio. A fin de preparar IDO para los estudios bioquímicos, se puede producir proteína de IDO marcado con His C-terminal en E. coli usando el sistema de vector pET5a inducible por IPTG y se aísla sobre una columna de níquel. El rendimiento de la proteína parcialmente purificada se puede verificar mediante electroforesis en gel y la concentración estimada por la comparación con los estándares de proteína. Para ensayar la actividad enzimática IDO, se puede correr un ensayo espectrofotométrico de placa de 96 pocillos para la producción de quinurenina siguiendo procedimientos publicados (ver, por ejemplo, Littlejohn, T.K., et al., Prot. Exp. Purif., 19:22-29 (2000)). Para analizar la actividad inhibitoria de IDO, los compuestos se pueden evaluar a una concentración única de, por ejemplo, 200 pM contra 50 ng de enzima IDO en volumen de reacción de 100 pl con triptófano añadido en concentraciones crecientes a razón de, por ejemplo, 0, 2, 20 y 200 pM. La producción de quinurenina se puede medir a 1 hora.
Ensayo basado en células. Las células COS-1 se pueden transfectar transitoriamente con un plásmido dirigido por el promotor CMV que expresa ADNc de IDO usando Lipofectamine 2000 (Invitrogen) recomendado por el fabricante. Un conjunto acompañante de las células se puede transfectar transitoriamente con el plásmido que expresa TDO. Cuarenta y ocho horas después de la transfección, las células se pueden distribuir en un formato de 96 pocillos a razón de 6 * 104 células por pocillo. El día siguiente, los pocillos se pueden lavar y se puede añadir nuevo medio (libre de rojo fenol) que contiene 20 pg/ml de triptófano junto con el inhibidor. La reacción se puede detener a las 5 horas y el sobrenadante se elimina y ensaya espectrofotométricamente para determinar quinurenina como se describió previamente para el ensayo enzimático. Para obtener una confirmación inicial de la actividad IDO, los compuestos se pueden evaluar a una concentración única de, por ejemplo, 100 pM. Se pueden recolectar perfiles de escalamiento de dosis más extendidos para los compuestos seleccionados.
Evaluación farmacodinámica y farmacocinética. Un ensayo farmacodinámico se puede basar en la medición de niveles séricos de quinurenina y triptófano y el cálculo de la relación de quinurenina/triptófano proporciona una estimación de la actividad de IDO que es independiente de los niveles de triptófano iniciales. Los niveles séricos de triptófano y quinurenina se pueden determinar por análisis HPLC y en forma opcional también se pueden determinar los niveles de compuesto séricos en la misma ejecución de HPLC.
Los compuestos se pueden evaluar inicialmente mediante la provocación del ratón con LPS y luego la administración posterior de una dosis en bolo de compuesto en el momento en que el nivel de quinurenina sérica alcanza la meseta. Debido a que la mezcla de quinurenina se recambia rápidamente con una vida media en suero menor de 10 minutos, no se espera que la quinurenina preexistente enmascare indebidamente el impacto que tiene un inhibidor de IDO sobre la producción de quinurenina. Cada experimento puede incluir ratones no expuestos a LPS (para determinar los niveles de quinurenina iniciales contra los cuales comparar los otros ratones) y un conjunto de ratones expuestos a LPS tratados con vehículo solo (para proporcionar un control positivo para la activación de IDO). Cada compuesto se puede evaluar inicialmente en los ratones a una dosis en bolo i.p. alta única en el rango de al menos 100 mg/kg. La sangre se puede recolectar en intervalos de tiempo definidos (por ejemplo, 50 pl de muestra a 5, 15, 30 min, 1, 2, 4, 6, 8 y 24 h. Después de la administración del compuesto) para el análisis HPLC de los niveles de quinurenina y triptófano (análisis farmacodinámico) así como para el nivel del compuesto (análisis farmacocinético). A partir de los datos farmacocinéticos se puede determinar la concentración sérica pico del compuesto obtenido así como la tasa estimada de depuración. Mediante la comparación del nivel del compuesto en suero con respecto a la relación de quinurenina/triptófano en varios puntos de tiempo, se puede estimar aproximadamente la CI50 eficaz para la inhibición IDO en vivo. Los compuestos que exhiben eficacia se pueden evaluar para determinar una dosis máxima que alcanza un 100 % de inhibición IDO a la concentración pico.
EJEMPLOS
La invención se describe a continuación con referencia a los siguientes ejemplos. Estos ejemplos se proporcionan solo con el propósito de ilustración y la invención no debe interpretarse ningún modo como limitada a estos ejemplos, sino que más bien se debe interpretar que abarca cualquiera y todas las variaciones que son evidentes como resultado de la enseñanza proporcionada en el presente documento.
Las abreviaturas usadas en el presente documento, se definen de la siguiente manera: "1 x" para una vez, "2 x" para dos veces, "3 x" para tres veces, "°C" para grados Celsius, "eq" para equivalente o equivalentes, “g” para gramo o gramos, “mg” para miligramo o miligramos, “ l” para litro o litros, “ml” para mililitro o mililitros, “pl” para microlitro o microlitros, “N” para normal, “M” para molar, “mmol” para milimol o milimol, “min” para minuto, minutos o min, “h” para hora, horas o h, “ta” para temperatura ambiente, “Tr” para tiempo de retención, “atm” para atmósfera, “psi” para libras por pulgada cuadrada, “conc.” para concentrar o concentrado, “ac” para “acuoso”, “sat” o “sat'd” para saturado, “PM” para peso molecular, “p f para punto de fusión, “MS” o “Mass Spec” para espectrometría de masa, “ESI” para espectroscopia de masa de ionización por electroaspersión, “HR” para resolución alta, “HRMS” para espectrometría de masa de alta resolución, “LCMS” para espectrometría de masa cromatografía líquida, “HPLC” para cromatografía líquida de alta presión, “RP HPLC” para HPLc de fase inversa, “TLC” o “tlc” para cromatografía de capa fina, “RMN” para espectrometría de resonancia magnética nuclear, “nOe” para espectrometría por efecto nuclear Overhauser, “1H” para protón, “8” para delta, “s” para singlete, “d” para doblete, “t” para triplete, “q” para cuadruplete, “m” para multiplete, “a” para ancho, “Hz” para hertz y “a”, “p”, “R”, “S”, “E” y “Z” son denominaciones estereoquímicas familiares para los expertos en la técnica.
Figure imgf000032_0001
continuación
Figure imgf000033_0001
Los compuestos de la presente invención se pueden preparar de numerosas maneras conocidas para un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar usando los métodos descritos a continuación, junto con métodos de síntesis conocidos en la técnica de la química orgánica sintética o por variaciones de estos como apreciarán los expertos en la técnica. Los métodos preferidos incluyen, pero sin limitación, los descritos a continuación. Las reacciones se realizan en un solvente o mezcla de solventes apropiados para los reactivos y materiales empleados y adecuados para las transformaciones efectuadas. Los expertos en la técnica de la síntesis orgánica entenderán que la funcionalidad presente en la molécula debe ser coherente con las transformaciones propuestas. Esto a veces requerirá un criterio para modificar el orden de las etapas de síntesis o para seleccionar un esquema de proceso particular respecto de otro con el fin de obtener un compuesto deseado de la invención.
Los nuevos compuestos de esta invención se pueden preparar usando las reacciones y técnicas descritas en esta sección. Además, en la descripción de los métodos de síntesis descritos a continuación, se debe entender que todas las condiciones de reacción propuestas, incluyendo la elección del solvente, atmósfera de reacción, temperatura de reacción, duración del experimento y procedimientos del tratamiento, se eligen como condiciones estándar para esta reacción, lo que debería ser reconocido fácilmente por un experto en la técnica. Las restricciones a los sustituyentes que son compatibles con las condiciones de reacción serán fácilmente evidentes para un experto en la técnica y en consecuencia se deben usar métodos alternativos.
SÍNTESIS
MÉTODOS DE PREPARACIÓN
Los compuestos de la presente invención se pueden preparar por métodos tales como los ilustrados en los siguientes esquemas que utilizan transformaciones químicas conocidas por los expertos en la técnica. Los solventes, temperaturas, presiones y otras condiciones de reacción pueden ser fácilmente seleccionados por un experto en la técnica. Los materiales de partida están asequibles en el comercio o son preparados fácilmente por un experto en la técnica. Estos esquemas son ilustrativos y no pretenden limitar las posibles técnicas que un experto en la técnica puede utilizar para fabricar los compuestos divulgados en el presente documento. Diferentes métodos pueden ser evidentes para los expertos en la técnica. Adicionalmente, las diversas etapas en la síntesis se pueden realizar en una secuencia u orden alternado para dar el compuesto o los compuestos deseados. Además, la representación de las reacciones en estos esquemas como etapas diferenciadas no impide que sea realicen en tándem, ya sea por múltiples etapas telescópicas en el mismo recipiente de reacción o mediante la realización de múltiples etapas sin purificación o caracterización del o de los productos intermedios. Además, muchos de los compuestos preparados por los siguientes métodos se pueden modificar adicionalmente usando la química convencional bien conocida por los expertos en la técnica.
Las referencias a muchas de estas transformaciones químicas empleadas en el presente documento se pueden hallar en Smith, M.B. et al., March's Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms, and Structure, quinta edición, Wiley-Interscience, Nueva York (2001) u otros textos estándar sobre el tema de la química orgánica sintética. Ciertas transformaciones pueden requerir que los grupos funcionales reactivos sean enmascarados por grupos protectores. Una referencia conveniente que proporciona las condiciones para la introducción, eliminación y susceptibilidad relativa a las condiciones de reacción de estos grupos es Greene, T.W. et al., Protective Groups in Organic Synthesis, tercera edición, Wiley-Interscience, Nueva York (1999).
Con referencia al Esquema I, el tratamiento de la ciclohexanona II en condiciones de Horner-Wadswort Emmons estándar con el fosfonato III dará el correspondiente éster insaturado. La hidrogenación catalítica, por ejemplo, con Pd/C y gas hidrógeno y posterior hidrólisis del cetal en condiciones ácidas da la cicloalcanona anexa de estructura general IV. El tratamiento del compuesto IV con anhídrido tríflico y una base orgánica tal como 2,6-lutidina dará un triflato de vinilo de estructura general V. El acoplamiento de V con ácidos o ésteres arilborónicos E-B(OR)2, con preferencia en las condiciones de Suzuki (ver Kota, S. et al., Tetrahedron, 58: 9633-9695 (2002)) da como resultado cicloalquenos de estructura general VI. Habitualmente, esta reacción se realiza por calentamiento del haluro y el ácido o éster borónico a de aproximadamente 90 a aproximadamente 98 °C con una base tal como fosfato de sodio o potasio tribásico o carbonato de sodio o potasio en un solvente tal como dioxano, DMF, THF o NMP usando un catalizador tal como tetrakis(trifenilfosfina)paladio o ChPd(dppf). Muchas variaciones de esta reacción que involucran el uso de diferentes temperaturas, solventes, bases, condiciones anhidras, catalizadores, derivados de boronato y sustitutos de haluro tales como triflatos son conocidas por los expertos en la técnica de química orgánica/medicinal. Se han informado condiciones leves para el acoplamiento de los derivados de ácido borónico sensibles. Ver Kinzel, T. et al., J. Am. Chem. Soc., 132(40): 14073-14075 (2010). La saturación de la olefina en VII se puede llevar a cabo por tratamiento con Pd/C en atmósfera de hidrógeno para dar un compuesto de estructura general VII como una mezcla de isómeros cis y trans del carbociclo. La sustitución adicional del éster se puede llevar a cabo por tratamiento con una base fuerte, tal como LDA o LiHMDS, seguido por adición de un R4-X electrófilo donde X es Br o I, para obtener compuestos de estructura general VIII después de hidrólisis básica con una base tal como LiOH. El acoplamiento del ácido VIII con aminas de estructura general IX en condiciones estándar, bien conocidas para los expertos en la técnica, dará compuestos de estructura general I.
Esquema 1
Figure imgf000034_0001
Como se representa en el esquema 2, la olefina VI se puede hidroborar por tratamiento con un borano, tales como catecolborano, seguido por elaboración oxidativa estándar con peróxido de hidrógeno para obtener un compuesto hidroxilado de estructura general X, más probablemente como una mezcla de isómeros. El compuesto X se puede convertir en un compuesto de estructura general I por los métodos representados en el esquema 1.
Esquema 2
Figure imgf000034_0002
En el esquema 3, la N-alquilación de una piperidinona protegida de estructura general XI se puede llevar a cabo por tratamiento con un haloacetato de estructura general III (X=Br, Cl), la posterior hidrólisis ácida del cetal dará un cetoéster de estructura general XII. La formación de viniltriflato, como se describió previamente, dará un compuesto de estructura general XIII. El tratamiento del viniltriflato con un diborano, como bis-pinnacolatoborano, en presencia de una fuente de Pd(0), como (PPh3)4Pd, dará un éster vinilborónico de estructura general XIV. El acoplamiento de Suzuki de haluros de arilo, E-X, donde X = Br, I, Cl, OTf, en condiciones estándar descritas previamente, dará un compuesto insaturado de estructura general XV. Los compuestos de estructura general XV se pueden convertir en compuestos de estructura general I por métodos previamente descritos en el presente documento. En otra forma de realización, los compuestos de estructura general XV se pueden tratar primero con un borano, tal como catecolborano, seguido por elaboración oxidativa con peróxido de hidrógeno, para obtener compuestos de estructura general XVI, que se pueden convertir en compuestos de estructura general I por métodos ya descritos.
Esquema 3
Figure imgf000035_0001
El esquema 4 representa formación de amida por medio de un anhídrido de estructura general XVIII. El tratamiento de un ácido de estructura general XVII con reactivo de cloración, tales como cloruro de oxalilo o cloruro de tionilo, dará el cloruro de acilo deseado de estructura general XVIII. Los compuestos de estructura general XVIII se pueden convertir en amidas de estructura general I por tratamiento con una amina de estructura general IX y una base orgánica, tales como diisopropiletilamina.
Esquema 4
Figure imgf000035_0002
El esquema 5 representa cómo se puede llevar a cabo una alquilación selectiva para instalar R3 en la posición alfa de amidas que son de estructura general I. En condiciones estándar, los anhídridos mixtos de estructura general XIX se pueden tratar con auxiliares quirales derivados de una oxazolidinona metalada de estructura general XX para obtener una imida de estructura general XXI. Los auxiliares quirales de Evan son bien conocidos por el experto en la técnica. La alquilación selectiva de XXI se logra por tratamiento con una base fuerte, tales como NaHMDS y un R3-X electrófilo para dar un compuesto de estructura general XXII con alta diastereoselectividad para la incorporación de R3. La hidrólisis de la imida XXII se puede llevar a cabo por métodos estándar tales como una base fuerte y peróxido de hidrógeno (ver Evans et al., Tetrahedron Lett., 28: 6141-6144 (1987)) para dar un compuesto de estructura general XXIII. El ácido XXIII se puede convertir en un compuesto de estructura general I por métodos ya descritos en el presente documento.
Esquema 5
Figure imgf000036_0001
En el esquema 6, una cetona de estructura general XXIV, que se puede preparar por los métodos descritos en los esquemas 1 y 3, se puede tratar en condiciones de fuerte reducción con un borhidruro tal como borhidruro de sodio, para dar un alcohol de estructura general XXV. El alcohol se puede tratar con una base fuerte en presencia de compuestos heteroaromáticos halosustituidos activados para obtener un éter de estructura general XXVI. De modo alternativo, el alcohol XXV se puede tratar en condiciones de Mitsunobu estándar de DIAD y trifenilfosfina para obtener éteres de estructura general XXVI, que se pueden convertir en compuestos de estructura general I por métodos ya descritos en el presente documento.
Esquema 6
Figure imgf000036_0002
El esquema 7 demuestra cómo una cetona de estructura general XXIV se puede convertir en una amina de estructura general XXVII por medio de aminación reductiva. Esto se puede llevar a cabo primero por tratamiento secuencial con una amina seguido por un agente de reducción, tales como borhidruro de sodio. La amina en XXVII puede ser añadida con E-X donde X = Cl, Br o I por medio de condiciones térmicas, tales como calor en un solvente tales como DMF o por medio de acoplamiento catalizado con paladio, tal como un acoplamiento de Buchwald, para obtener una amina de estructura general XXVIII. El éster de estructura general XXVIII se puede convertir en un compuesto de estructura general I por medio de métodos descritos en el presente documento.
Esquema 7
Figure imgf000037_0001
( i)
Como se muestra en el esquema 8, una cetona de estructura general XXIX se puede tratar con un haloacetato de estructura general III en presencia de metal zinc activado para obtener un alcohol terciario de estructura general XXX. El éster de estructura general XXX se puede convertir en un compuesto de estructura general I por medio de métodos ya descritos en el presente documento.
Esquema 8
Figure imgf000037_0002
XXIX XXX
Como se muestra en el esquema 9, una cetona de estructura general XXIV se puede tratar con una especie metalada E-M, donde M = Li, Na o K, producido por tratamiento de un haluro de arilo con, por ejemplo, un alquil-litio, como tercbutil-litio, para producir un alcohol terciario de estructura general XXXI. El éster de estructura general XXXI se puede convertir en un compuesto de estructura general I por medio de métodos ya descritos en el presente documento.
Esquema 9
Figure imgf000037_0004
Como se muestra en el esquema 10, una diamina monoprotegida de estructura general XXXII se puede convertir en un compuesto de estructura general XXXIII por métodos descritos en el esquema 3. El tratamiento de una amina de estructura general XXXIII con E-X, donde X = Cl, Br, I y un catalizador de paladio, tales como Pd(Ph3P)4, dará un compuesto de estructura general XXXIV. De modo alternativo, una amina de estructura general XXXIII se puede tratar con un compuesto ECH2X en condiciones básicas suficientes para N-alquilación para obtener un compuesto de estructura general XXXIV. Un éster de estructura general XXXIV se puede convertir después en un compuesto de estructura general I por métodos ya descritos en el presente documento.
Esquema 10
Figure imgf000037_0003
MÉTODOS DE HPLC/MS Y HPLC PREPARATIVA/ANALÍTICA EMPLEADOS EN LA CARACTERIZACIÓN O LA PURIFICACIÓN DE LOS EJEMPLOS
La HPLC/MS analítica y preparativa se realizó usando los siguientes métodos:
Método A: Waters Acquity SDS usando el siguiente método: Gradiente lineal del 2 % al 98 % de solvente B durante 1,7 min; visualización UV a 220 nm; columna: BEH C18 2,1 mm * 50 mm; partícula de 1,7 |jm (calentado hasta temp. 50 °C); caudal: 0,8 ml/min; fase móvil A: 100 % de agua, 0,05 % de TfA; fase móvil B: 100 % de acetonitrilo, 0,05% de TFA.
Método B: Columna: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 * 50 mm, partículas de 1,7 jm partículas; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; gradiente: 0-100 % de B durante 3 minutos, luego una parada de 0,75 minutos al 100 % de B; caudal: 1,00 ml/min; Detección: UV a 220 nm.
Método C: Berger SFC MGII, Columna: IC 25 * 3 cm ID, 5 jm , caudal: 85,0 ml/min, fase móvil: 70/30 CO2/MeOH, longitud de onda del detector: 220 nm
Método D: Berger SFC analítica, Columna: Chiral IC 250 * 4,6 mm ID, 5 pm, caudal: 2,0 ml/min, fase móvil: 70/30 CO2/MeOH
Método E: Berger SFC MGII, Columna: Chiral OJ-H 25 * 3 cm ID, 5 jm caudal: 85,0 ml/min, fase móvil: 75/25 CO2/MeOH, longitud de onda del detector: 220 nm
Método F: Aurora SFC analítica, Columna: Chiral IC 250 * 4,6 mm ID, 5 pm, caudal: 2,0 ml/min, fase móvil: 70/30 CO2/MeOH
Método G: Berger SFC MGII, Columna: Chiral AS 25 * 3 cm ID, 5 jm caudal: 85,0 ml/min, fase móvil: 87/13 CO2/MeOH, longitud de onda del detector: 220 nm
Método H: Aurora SFC analítica, Columna: Chiral AS 250 * 4,6 mm ID, 5 pm, caudal: 2,0 ml/min, Fase móvil: 85/15 CO2/MeOH
Método I: Berger SFC MGII, Columna: Chiral AS 25 * 3 cm ID, 5 jm caudal: 85,0 ml/min, Fase móvil: 90/10 CO2/MeOH w/ 0,1 % DEA, Longitud de onda del detector: 220 nm
Método J: Aurora SFC analítica, Columna: Chiral AS 250 * 4,6 mm ID, 5 pm, caudal: 2,0 ml/min, fase móvil: 90/10 CO2/MeOH w/ 0,1 % DEA
Método K: Columna: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2,1 * 50 mm, partículas de 1,7 jm ; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; temperatura: 50 °C; gradiente: 0-100 % de B durante 3 minutos, luego una parada de 0,75 minutos a 100 % de B; caudal: 1,0 ml/min; detección: UV a 220 nm.
Método L: Chiral HPLC: columna IF-3, ID 4,6 mm * 150 mm, Caudal: 1 ml/min, Fase móvil: 85 % de Heptanos/15 % de isopropanol.
Método M: HPLC quiral: ID columna CHIRALPAK®, Chiral Technologies, West Chester, PA, 5 jm , ID 4,6 mm * 250 mm, caudal: 20 ml/min fase móvil: 0,4 % de Et2NH en acetonitrilo.
RMN EMPLEADA EN LA CARACTERIZACIÓN DE LOS EJEMPLOS
Los espectros de RMN 1H (a menos que se observe otra cosa) se obtuvieron con espectrómetros de transformada de JEOL® o Bruker FOURIER® que operan a 400 MHz o 500 MHz.
Los datos espectrales se informan como desplazamiento químico (multiplicidad, cantidad de hidrógenos, constantes de acoplamiento en Hz) y se informan en ppm (unidades de 8) respecto de un estándar interno (tetrametilsilano = 0 ppm) para espectros r Mn 1H o se mencionan como el pico de solvente residual (2,49 ppm para CD3SOCD2H, 3,30 ppm para CD2HOD, 1,94 para CHD2CN, 7,26 ppm para CHCl3, 5,32 ppm para CDHCh). Las abreviaturas usadas en la descripción de picos de RMN: “ap” = aparente, “s. a.” = singlete ancho
PROCEDIMIENTOS GENERALES
Procedimiento general A: Preparación de arilciclohexenos por medio de reacción de acoplamiento cruzado de Suzuki
Figure imgf000039_0001
A 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)acetato* de etilo (1,0 eq.), ácido borónico (1,2 equiv), Na2CO3 (2,5 eq.), KBr (1,1 eq.) en 1,4-dioxano/agua (10:1 en volumen, 0,25 M) se le añadió Pd(PPh3)4 (5 % en moles). La mezcla de reacción resultante se calentó hasta 80-90 °C durante 16 h, tras lo cual la mezcla de reacción en bruto se concentró. Los sólidos resultantes se diluyeron con EtOAc y agua y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc tres veces. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. La mezcla de reacción en bruto se purificó empleando cromatografía sobre gel de sílice para obtener el producto deseado.
* 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)acetato de etilo es un compuesto conocido que se puede preparar a partir de 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ona asequible en comercios usando los procedimientos destacados en 1) Stocks, P.A. et al., Angew. Chem. Int. Ed, 46: 6278-6283 (2007); 2) Barlind, J.G. et al., J. Med. Chem., 55: 10610­ 10629 (2012).
Procedimiento general B: Hidrogenación
Figure imgf000039_0002
[0008] El material de partida insaturado se disolvió en un solvente de elección (por ejemplo, metanol, acetato de etilo o ácido acético) para formar una solución 0,1-0,3 M. La solución resultante se purgó con nitrógeno y un 20 % en peso de un catalizador (Pd/C activado seco al 10 % en peso o Degussa Pd/C al 10 % en peso o Pd(OH)2/C al 10 % en peso) se añadió a la solución para formar una mezcla heterogénea. Gas hidrógeno se burbujeó a través de la solución hasta desaparición completa del material de partida determinado por TLC y/o LC-MS y/o RMN. Después de completar, la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno, se filtró a través de CELITE® y se concentró a presión reducida. El producto final se purificó por cromatografía ultrarrápida.
Procedimiento general E: Hidrólisis de éster
Figure imgf000039_0003
A una solución de éster (1,0 eq) en EtOH (1,0 M) se le añadió un volumen igual de solución acuosa de LiOH (7,25 M). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente, se calentó hasta 50 °C durante 1 h y luego se diluyó con 50 ml de agua y luego se calentó hasta 50 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se enfrió con un baño de hielo y se acidificó (pH ~ 1) por adición lenta de solución 3 M de HCl. EtOAc se añadió, las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida para obtener el ácido carboxílico deseado que se usó sin ulterior purificación.
Procedimiento general G: Reacción entre ésteres y anilinas
Figure imgf000039_0004
A una solución de la anilina (2,0 eq.) en THF (0,25 M) a 0 °C se le añadió una solución de 'PrMgCl (2,0 eq., 2 M en THF). La solución resultante se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 5 minutos en cuyo momento el éster (1,0 eq.) se añadió. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 8 horas y se vertió en agua. Acetato de etilo se añadió y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. La mezcla de reacción en bruto se purificó empleando cromatografía sobre gel de sílice para obtener el producto deseado.
Procedimiento general K: Preparación de arilciclohexenos por medio de reacción de acoplamiento cruzado de Suzuki
Figure imgf000040_0001
A 2-(4-(4,4,5,5-tetrametiM,3,2-dioxaborolan-2-N)cidohex-3-en-1-N)acetato de etilo* (1,1 eq), haluro de arilo (1,0 eq) y Cs2COa (2,2 eq), en 1,4-dioxano/agua (10:1 en volumen, 0,25 M) se le añadió una cantidad catalítica de PEPPSI-IPr (2 % en moles). La mezcla de reacción resultante se calentó hasta 100 °C durante 2-12 horas, tras lo cual la mezcla de reacción en bruto se concentró y se cargó sobre gel de sílice. La mezcla de reacción en bruto se purificó empleando cromatografía sobre gel de sílice.
* 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)acetato de etilo es un compuesto conocido que se puede preparar a partir de 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ona asequible en comercios usando los procedimientos destacados en Barlind, J.G. et al., J. Med. Chem., 55: 10610-10629 (2012).
Procedimiento general L: Acoplamiento de ácido carboxílico con auxiliar quiral
Figure imgf000040_0002
A un matraz de fondo redondo secado en horno (matraz n.° 1) se le añadió ácido carboxílico (1,0 eq) como una mezcla de diastereómeros. El recipiente se evacuó y se rellenó con nitrógeno y luego se cargó con THF (0,25 M) y trietilamina (2,0 eq). La solución resultante se enfrió hasta -78 °C antes de la adición lenta de cloruro de pivaloílo (1,25 eq) durante 15 min. La mezcla de reacción luego se agitó a 0 °C durante una hora.
A un matraz de fondo redondo secado en horno separado (matraz n.° 2) se le añadió (R)- o (S)-4-bencil- o 4-fenil-2-oxazolidinona quiral (1,3 eq) y THF (0,25 M). Esta solución se enfrió hasta -78 °C antes de la adición cuidadosa de n-BuLi (2,5 M en hexanos, 1,3 eq). Esta mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 15 minutos antes de retirar del baño de enfriamiento.
El matraz n.° 1 luego se volvió a enfriar hasta -78 °C y los contenidos del matraz n.° 2 se añadieron al matraz n.° 1 por medio de una cánula en el curso de 15 minutos. Después de la adición completa, el baño de enfriamiento se retiró y la reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó por adición de solución saturada de cloruro de amonio (100 ml) y posterior extracción con acetato de etilo (100 ml * 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo en bruto se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice.
Procedimiento general M: Alquilación de imidas derivadas de oxazalidinona
Figure imgf000041_0001
NaHMDS (2 M en THF, 1,2 eq) se añadió gota a gota a una solución 0,2 M de la imida (1,0 eq) en tetrahidrofurano anhidro a -50 °C. La solución se agitó durante 10 min a -50 °C y luego haluro de alquilo puro se añadió gota a gota. La mezcla de reacción se agitó durante 2 a 48 horas más a de -50 a -20 °C y luego se neutralizó por adición de solución saturada de cloruro de amonio mientras aún está fría. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se extrajo 3 veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4, se filtraron, se concentraron a presión reducida y se sometió a cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice.
Procedimiento general N: Escisión de auxiliar quiral
Figure imgf000042_0001
A un matraz de fondo redondo se le añadió una imida derivada de oxazalidinona (0,418 mmol, 1,0 eq), THF (0,25 M) y agua destilada (1 M). Esta solución se enfrió hasta 0 °C antes de la adición lenta de H2O2 (35 % en peso en agua, 4 eq) seguido por la adición de LiOH (2,7 M en agua, 1,6 eq). La solución de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente. El progreso fue seguido por LC/MS y la solución de reacción se neutralizó cuidadosamente a 0 °C por la adición de Na2SO3 saturado una vez consumido el material de partida. El pH se ajustó a ~5-6 con HCl 1 N y luego la mezcla se extrajo con EtOAc y cloruro de metileno. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice.
Procedimiento general O: Acoplamiento de ácidos carboxílicos y anilinas
Figure imgf000042_0002
[0009] propilfosfónico (1,5 eq, 50 % en peso de solución en acetato de etilo) se añadió a la solución de carboxílico (1 eq) y piridina (3 eq) en acetato de etilo (0,1 M) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 5 min y luego se añadió anilina (1,5 eq). La reacción se agitó a temperatura ambiente hasta el consumo completo del ácido, que se determinó por TLC y/o LC-MS. La mezcla de reacción se vertió en agua, NaOH 1 M (10 eq) se añadió y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo tres veces. Los extractos orgánicos combinados se secaron con MgSO4 y se concentraron al vacío. El residuo en bruto se purificó por medio de cromatografía en columna de gel de sílice. Ejemplos 1 y 2
W-(4-clorofenil)-2-(frans-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000042_0003
W-(4-clorofenil)-2-(4-(c/s-quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000043_0001
Ejemplos 1 y 2: A/-(4-dorofeml)-2-(frans-4-(qumol¡n-4-¡l)c¡dohex¡l)acetamida y W-(4-dorofeml)-2-(c/s-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
[0010] Ejemplos 1 y 2 se prepararon usando los procedimientos generales A, B y G. El procedimiento general A empleaba 7,91 g (25 mmol) de 2-(4-(((tr¡fluoromet¡l)sulfon¡l)ox¡)c¡dohex-3-en-1-¡l)acetato de etilo y 4,56 g (26 mmol) de ácido quinolin-4-borónico. El procedimiento general B empleaba 20 % en peso de Pd/C seco (10 % en peso) y metanol como un solvente. El procedimiento general G empleaba 100 mg de 2-(4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡dohex¡l)acetato de etilo (mezcla de diastereómeros) y 87 mg de 4-cloroanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 60 % de acetato de etilo en tolueno) para obtener el ejemplo 1 (diastereómero trans) como el primer isómero de elución. RMN1H del isómero trans (400 MHz; CDCh): 88,85 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,04-8,14 (m, 2H), 7,67-7,72 (m, 1H), 7,53-7,59 (m, 1H), 7,47-7,53 (m, 2H), 7,27-7,31 (m, 3H), 3,27-3,37 (m, 1H), 2,34 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 2,03-2,11 (m, 5H), 1,61-1,73 (m, 2H), 1,31-1,44 (m, 2H) ppm. m/z 379,2 (M+H+).
La posterior elución de la columna dio como resultado el ejemplo 2 (diastereómero cis) como el segundo isómero de elución. RMN 1H del isómero c/s (400 MHz; CDCla): 88,84 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,04-8,14 (m, 2H), 7,67-7,73 (m, 1H), 7,48-7,60 (m, 3H), 7,25-7,31 (m, 3H), 3,36-3,46 (m, 1H), 2,51-2,60 (m, 3H), 1,68-1,96 (m, 8H) ppm. m/z 379,2 (M+H+).
Ejemplos 3 y 4
Clorhidrato de N -^-danofem l^-^rans^qum oN n^-i^dclohexi^acetam ida
Figure imgf000043_0002
Clorhidrato de N -^-danofem l^-C s^quinoN n^-i^dclohexi^acetam ida
Figure imgf000043_0003
Ejemplos 3 y 4: Clorhidrato de N -^-danofem l^-^rans^quinoNn^-i^dclohexi^acetam ida y clorhidrato de N-(4-cianofenil)-2-(c/s-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
Los Ejemplos 3 y 4 se prepararon usando los procedimientos generales A, B y G. El procedimiento general A empleaba 7,91 g (25 mmol) de 2-(4-(((trifluorometil) sulfon¡l)ox¡)ddohex-3-en-1-¡l)acetato de etilo y 4,56 g (26 mmol) de ácido quinolin-4-borónico. El procedimiento general B empleaba 20 % en peso de Pd/C seco (10 % en peso) y metanol como un solvente. El procedimiento general G empleaba 100 mg de 2-(4-(qu¡nol¡n-4-¡l)ddohex¡l)acetato de etilo (mezcla de diastereómeros) y 80 mg de 4-cianoanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 60 % de acetato de etilo en tolueno) para obtener el ejemplo 3 (diastereómero trans) como el primer isómero de elución. La base libre se convirtió en clorhidrato mezclando con exceso de HCl 2 M en éter dietílico, removiendo las sustancias volátiles y secando a alto vacío. RMN 1H de isómero trans (400 MHz; CDCh): 810,53 (s, 1H), 9,2 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,60 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,33 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,09-8,15 (m, 1H), 7,91-8,00 (m, 2H), 7,79-7,84 (m, 2H), 7,72-7,77 (m, 2H), 3,60-3,70 (m, 1H), 2,37 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,87-1,99 (m, 5H), 1,65-1,77 (m, 2H), 1,34-1,47 (m, 2H) ppm. m/z 370,2 (M+H+).
La posterior elución de la columna dio como resultado el ejemplo 4 (diastereómero cis) como el segundo isómero de elución. La base libre se convirtió en clorhidrato mezclando con exceso de HCl 2 M en éter dietílico, removiendo las sustancias volátiles y secando a alto vacío. RMN1H de isómero cis (400 MHz; DMSO-d6): 810,79 (s, 1H), 9,26 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,59 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,36 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,09-8,17 (m, 2H), 7,91-7,97 (m, 1H), 7,83-7,87 (m, 2H), 7,72-7,77 (m, 2H), 3,65-3,75 (m, 1H), 2,66 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 2,37-2,46 (m, 1H), 1,81-1,99 (m, 4H), 1,65-1,77 (m, 4H) ppm. m/z 370,2 (M+H+).
Ejemplos 5 y 6
W-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000044_0001
W-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000044_0002
Ejemplos 5 y 6: A/-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida y W-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
Se preparó usando los procedimientos generales A, B y G. El procedimiento general A empleaba 7,91 g (25 mmol) de 2-(4-(((trifluorometil) sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)acetato de etilo y 4,56 g (26 mmol) de ácido quinolin-4-borónico. El procedimiento general B empleaba 20 % en peso de Pd/C seco (10 % en peso) y metanol como un solvente. El procedimiento general G empleaba 100 mg de 2-(4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetato de etilo (mezcla de diastereómeros) y 76 mg de 4-fluoroanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 60 % de acetato de etilo en tolueno) para obtener el ejemplo 5 (diastereómero trans) como el primer isómero de elución. RMN 1H de isómero trans (400 MHz; CDCla): 88,85 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,05-8,15 (m, 2H), 7,67-7,73 (m, 1H), 7,48-7,58 (m, 4H), 7,27 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 6,98-7,05 (m, 2H), 3,25-3,36 (m, 1H), 2,34 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 2,01-2,10 (m, 5H), 1,58-1,72 (m, 2H), 1,29­ 1,42 (m, 2H) ppm. m/z 363,2 (M+H+).
La posterior elución de la columna dio como resultado el ejemplo 6 (diastereómero cis) como el segundo isómero de elución. RMN 1H de isómero cis (400 MHz; CDCla): 88,84 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,05-8,15 (m, 2H), 7,67-7,73 (m, 1H), 7,54-7,62 (m, 2H), 7,48-7,54 (m, 2H), 7,27 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 6,97-7,05 (m, 2H), 3,36-3,46 (m, 1H), 2,51-2,60 (m, 3H), 1,68-1,98 (m, 8H) ppm. m/z 379,2 (M+H+).
Ejemplos de referencia 7 y 8
W-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)acetamida
Clorhidrato de N-(4-fluorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000045_0001
Ejemplos de referencia 7 y 8: N-(4-fluorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da y clorhidrato de N-(4-fluorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales A, B y G. El proced¡m¡ento general A empleaba 10,0 g (32 mmol) de 2-(4-(((tr¡fluoromet¡l) sulfon¡l)ox¡)c¡clohex-3-en-1-¡l)acetato de et¡lo y 6,02 g (35 mmol) de ác¡do qu¡nol¡n-3-borón¡co. El proced¡m¡ento general B empleaba 20 % en peso de Pd/C seco (10 % en peso) y metanol como un solvente. El proced¡m¡ento general G empleaba 95 mg de 2-(4-(qu¡nol¡n-3-¡l)ddohex¡l)acetato de et¡lo (mezcla de d¡astereómeros) y 71 mg de 4-fluoroan¡l¡na. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (0 % al 60 % de acetato de et¡lo en hexano) para obtener el ejemplo de referenc¡a 7 (d¡astereómero c/s) como el pr¡mer ¡sómero de eluc¡ón. RMN 1H de ¡sómero c/s (400 MHz; DMSO-da): 88,87-8,89 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,91-8,00 (m, 2H), 7,65­ 7,72 (m, 1H), 7,55-7,64 (m, 3H), 7,09-7,15 (m, 3H) 2,77-2,87 (m, 1H), 2,47 (m, J = 8,0 Hz, 2H), 2,26-2,36 (m, 1H), 1,79-1,91 (m, 2H), 1,57-1,78 (m, 6H) ppm. m/z 379,2 (M+H+).
La poster¡or eluc¡ón de la columna d¡o como resultado el ejemplo de referenc¡a 8 (d¡astereómero trans) como el segundo ¡sómero de eluc¡ón. La base l¡bre se conv¡rt¡ó en clorh¡drato mezclando con exceso de HCl 2 M en éter d¡etíl¡co, remov¡endo las sustanc¡as volát¡les y secando a alto vacío. RMN 1H de ¡sómero trans (400 MHz; CDCh): 8 10,05 (s, 1H), 9,21 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,18-8,26 (m, 2H), 7,96-8,03 (m, 1H), 7,81-7,87 (m, 1H), 7,60-7,65 (m, 2H), 7,08-7,16 (m, 2H), 2,83-2,93 (m, 1H), 2,27 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 1,84-2,02 (m, 5H), 1,59-1,71 (m, 2H), 1,15-1,28 (m, 2H) ppm. m/z 379,2 (M+H+).
Ejemplos de referenc¡a 9 y 10
N-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000045_0002
N-(4-clorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000045_0003
Ejemplos de referenc¡a 9 y 10: N-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da y N-(4-clorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales A, B y G. El proced¡m¡ento general A empleaba 10,0 g (32 mmol) de 2-(4-(((tr¡fluoromet¡l) sulfon¡l)ox¡)c¡clohex-3-en-1-¡l)acetato de et¡lo y 6,02 g (35 mmol) de ác¡do qu¡nol¡n-3-borón¡co. El procedimiento general B empleaba 20 % en peso de Pd/C seco (10 % en peso) y metanol como un solvente. El procedimiento general G empleaba 95 mg de 2-(4-(quinolin-3-il)cidohexil)acetato de etilo (mezcla de diastereómeros) y 82 mg de 4-cloroanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 60 % de acetato de etilo en hexano) para obtener el ejemplo de referencia 9 (diastereómero cis) como el primer isómero de elución. RMN 1H de isómero cis (400 MHz; CDCh): 8 8,80 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,06-8,11 (m, 1H), 7,74-7,82 (m, 3H), 7,66-7,72 (m, 1H), 7,51-7,59 (m, 3H), 7,26-7,30 (m, 2H), 2,79-2,89 (m, 1H), 2,43-2,47 (m, 3H), 1,60-1,90 (m, 8H) ppm. m/z 379,1 (M+H+).
La posterior elución de la columna dio como resultado el ejemplo de referencia 10 (diastereómero trans) como el segundo isómero de elución. RMN 1H de isómero trans (400 MHz; CDCla): 88,81 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,04-8,09 (m, 1H), 7,90-7,93 (m, 1H), 7,76-7,80 (m, 1H), 7,63-7,68 (m, 1H), 7,47-7,55 (m, 3H), 7,26-7,32 (m, 2H), 7,24 (bs, 1H), 2,66­ 2,76 (m, 1H), 2,32 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,99-2,09 (m, 5H), 1,57-1,72 (m, 2H), 1,21-1,34 (m, 2H) ppm. m/z 379,1 (M+H+).
Ejemplos de referencia 11 y 12
W-(4-cianofenil)-2-(cis-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000046_0001
W-(4-cianofenil)-2-(trans-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000046_0002
Ejemplos de referencia 11 y 12: W-(4-cianofenil)-2-(cis-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)acetamida y N-(4-cianofenil)-2-(trans-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)acetamida
Se preparó usando los procedimientos generales A, B y G. El procedimiento general A empleaba 10,0 g (32 mmol) del triflato y 6,02 g (35 mmol) de ácido quinolin-3-borónico. El procedimiento general B empleaba 20 % en peso de Pd/C seco (10 % en peso) y metanol como un solvente. El procedimiento general G empleaba 65 mg de 2-(4-(quinolin-3-il)ciclohexil)acetato de etilo (mezcla de diastereómeros) y 52 mg de 4-cianoanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 60 % de acetato de etilo en hexano) para obtener tanto el ejemplo de referencia 11 (diastereómero cis) como el primer isómero de elución. RMN 1H de isómero cis (400 MHz; CDCh): 88,76 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 8,58 (bs, 1H), 8,07-8,11 (m, 1H), 7,69-7,79 (m, 4H), 7,64-7,67 (m, 1H), 7,57-7,63 (m, 3H), 2,75-2,85 (m, 1H), 2,45-2,50 (m, 3H), 1,45-1,85 (m, 8H) ppm. m/z 370,2 (M+H+).
La posterior elución de la columna dio como resultado el ejemplo de referencia 12 (diastereómero trans) como el segundo isómero de elución. RMN 1H de isómero trans (400 MHz; CDCh): 88,80 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 8,05-8,09 (m, 1H), 7,90-7,93 (m, 1H), 7,76-7,80 (m, 1H), 7,60-7,73 (m, 5H), 7,50-7,56 (m, 1H), 7,45 (bs, 1H), 7,67-7,77 (m, 1H), 2,36 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,99-2,10 (m, 5H), 1,59-1,72 (m, 2H), 1,22-1,35 (m, 2H) ppm. m/z 370,2 (M+H+).
Ejemplos de referencia 13 (a) y (b)
2-(4-(cis-1H-indazol-4-il)ciclohexil)-N-(4-cianofenil)acetamida (primer isómero de elución, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000047_0001
2-(4-(frans-1H-¡ndazol-4-¡l)ddohex¡l)-A/-(4-cianofeml)acetam¡da (segundo isómero de elución, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Ejemplo de referencia 13: 2-(4-(1H-Indazol-4-¡l)c¡dohex¡l)-N-(4-c¡anofen¡l)acetam¡da
Se preparó por medio de los procedimientos generales A, B y G. El procedimiento general A utilizó ácido indazol-4-borónico y 2-(4-(((t^fluoromet¡l)sulfon¡l)ox¡)ddol^ex-3-en-1-¡l)acetato de etilo con dimetoxietano como solvente, Pd(dppf)Cl2 como catalizador, K2CO3 como base y se omitió KBr como un aditivo. El procedimiento general B usó el 10 % en peso Pd(OH)2/C (10 % en peso) como catalizador y metanol como solvente. El procedimiento general G utilizó 4-cianoanilina (2 eq.) y 2-(4-(1H-¡ndazol-4-¡l)c¡dohex¡l)acetato de etilo (mezcla de diastereómeros) (1 eq). La purificación de la mezcla de reacción por cromatografía sobre gel de sílice dio como resultado ambos isómeros del ejemplo 13. El ejemplo de referencia 13(a) (primer isómero de elución, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente) : RMN1H (400 MHz, CDCh) 88,15 (s, 1H), 7,55 - 7,40 (m, 2H), 7,40 - 7,20 (m, 4H), 7,14 (s, 1H), 7,08 -7,01 (m, 1H), 3,21 -3,00 (m, 1H), 2,59 -2,44 (m, 3H), 1,98 - 1,72 (m, 8H) ppm.
Ejemplo de referencia 13(b) (segundo isómero de elución, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente): RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,13 (s, 1H), 7,69 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,63 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,37 -7,20 (m, 3H), 6,99 (t, J = 4,0 Hz, 1H), 3,06 - 2,88 (m, 14H), 2,37 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 2,13 - 1,97 (m, 5H), 1,83 - 1,65 (m, 2H), 1,39 - 1,27 (m, 2H) ppm.
Ejemplo de referencia 14
2-(4-(1H-Indazol-4-¡l)c¡dohex¡l)-N-(4-dorofen¡l)acetam¡da (mezcla de diastereómeros)
Figure imgf000047_0002
Ejemplo de referencia 14: 2-(4-(1H-¡ndazol-4-¡l)c¡dohex¡l)-N-(4-dorofen¡l)acetam¡da
Se preparó por medio de los procedimientos generales A, B y G. El procedimiento general A utilizó ácido indazol-4-borónico y 2-(4-(((tr¡fluoromet¡l)sulfon¡l)ox¡)c¡dohex-3-en-1-¡l)acetato de etilo con dimetoxietano como solvente, Pd(dppf)Cl2 como catalizador, K2CO3 como base y se omitió KBr como un aditivo. El procedimiento general B usó 10 % en peso Pd(OH)2/C (10 % en peso) como catalizador y metanol como solvente. El procedimiento general G utilizó 4-cloroanilina (2 eq) y 2-(4-(1H-¡ndazol-4-¡l)c¡dohex¡l)acetato de etilo (1 eq). La purificación de la mezcla de reacción por cromatografía sobre gel de sílice dio como resultado el ejemplo de referencia 14 como una mezcla de diastereómeros c is -y trans. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 88,13 (s, 1H), 7,55 - 7,45 (m, 2H), 7,38 - 7,21 (m, 4H), 7,13 (s, 1H), 6,99 (t, J = 3,9 Hz, 1H), 3,06 -2,90 (m, 1H), 2,33 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 2,13 - 1,96 (m, 5H), 1,82 - 1,64 (m, 2H), 1,38 - 1,28 (m, 2H) ppm. m/z 368,2 (M+H+).
Ejemplo 16
W -^-fluorofem l^^cis^qumoNn^-i^dclohexiOpropanamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000048_0001
Intermedio 16A: 2-(4-(quinoNn-4-N)cidohexN)acetato de etilo
El intermedio 16A se preparó con los procedimientos generales A y B. El procedimiento general A utilizó 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)cidohex-3-en-1-il)acetato de etilo y ácido quinolin-4-borónico. El procedimiento general B empleaba 20 % en peso de Pd/C seco (10 % en peso) y metanol como un solvente para obtener el producto intermedio deseado 16A.
Intermedio 16B: 2-(4-(quinolin-4-il)ciclohexil)propanoato de etilo
A una solución del intermedio 16A (630 mg, 2,15 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C se le añadió solución de NaHMDS (4,3 ml, 4,3 mmol, 1 M en THF). La solución amarilla resultante se agitó a 0 °C durante 5 min y Mel (608 mg, 4,3 mmol) se añadió. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 hora, tras lo cual ácido acético (200 pl) se añadió junto con Et2O (10 ml). La mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de sílice eluyendo con Et2O adicional (50 ml). El filtrado se concentró y se purificó empleando cromatografía sobre gel de sílice (15 % al 30 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 16B en forma de un aceite y mezcla 2:1 de diastereómeros cis.trans.
Ejemplos 16; W-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Se preparó con el procedimiento general G empleando el intermedio 16B (78 mg, 0,25 mmol) y 4-fluoroanilina (56 mg, 0,5 mmol). Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (30 % al 45 % de acetato de etilo en hexanos) para obtener el ejemplo 16 en forma de un sólido blanco y diastereómero simple (primer isómero de elución, racémico, la estereoquímica relativa no se determinó). RMN1H (400 MHz; CDCh): 88,83 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,11 (dd, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 8,4, 0,5 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,4 Hz, 1H), 7,57-7,52 (m, 4H), 7,26 (s, 1H), 7,05-6,99 (m, 2H), 3,31-3,25 (m, 1H), 2,22-2,15 (m, 1H), 2,11-1,98 (m, 4H), 1,90 (s, 1H), 1,82-1,73 (m, 1H), 1,60 (cd, J = 11,8, 2,6 Hz, 2H), 1,44-1,27 (m, 5H) ppm. m/z 377,3 (M+H+).
Ejemplos 17 y 18
W-(4-clorofenil)-2-(trans-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000048_0002
W-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000048_0003
Ejemplos 17 y 18: W-(4-clorofenil)-2-(trans-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)propanamida y W-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(quinolin 4-il)cidohexil)propanamida
Se preparó con el procedimiento general G empleando el intermedio 16B (44 mg, 0,14 mmol) y 4-cloroanilina (36 mg, 0,28 mmol). Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (30 % al 45 % de EtOAc en hexanos) para obtener el ejemplo 17 (diastereómero trans, racémico) en forma de un sólido blanco y el primer isómero de elución. RMN 1H (400 MHz; CDCh): 88,84 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,11 (dd, J = 8,4, 1,0 Hz, 1H), 8,07-8,05 (m, 1H), 7,69 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,4 Hz, 1H), 7,58-7,50 (m, 3H), 7,31-7,25 (m, 4H), 3,34-3,26 (m, 1H), 2,22-2,15 (m, 1H), 2,14-1,98 (m, 5H), 1,83-1,74 (m, 1H), 1,65-1,57 (m, 2H), 1,44-1,32 (m, 2H), 1,30 (d, J = 6,9 Hz, 3H) ppm. m/z 393,2 (M+H+).
La posterior elución de la columna en el ejemplo previo dio como resultado el ejemplo 18 (diastereómero cis, racémico) en forma de un sólido blanco y el segundo isómero de elución. RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,79 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,11 (dd, J = 8,4, 1,2 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,71 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,3 Hz, 1H), 7,58 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,4 Hz, 1H), 7,55-7,52 (m, 2H), 7,28-7,23 (m, 3H), 3,50-3,42 (m, 1H), 2,68-2,60 (m, 1H), 2,18-2,12 (m, 1H), 1,95-1,67 (m, 8H), 1,29 (d, J = 6,8 Hz, 3H) ppm. m/z 393,2 (M+H+).
Ejemplo 19
(R)-A/-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000049_0001
Ejemplo 19: (R)-W-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Se preparó usando los procedimientos generales K, B, E, L, M, N y O. El procedimiento general L empleaba ácido 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)-ciclohexil)acético (mezcla de diastereómeros) y (Rj-2-fenil-oxazolidinona. El procedimiento general M empleaba el producto cis y yodometano. El auxiliar se removió según el procedimiento general N y el producto deseado se formó empleando el procedimiento general O con 4-cloroanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de acetato de etilo en hexanos) para obtener el ejemplo 19. RMN 1H de isómero cis (400 MHz; CDCh): 89,14 (s, 1H), 8,70 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,06 (dd, J = 9,2 Hz, J = 5,6 Hz, 1H), 7,58­ 7,64 (m, 3H), 7,45 (ddd, J = 9,3 Hz, J = 7,8 Hz, J = 2,7 Hz, 1H), 7,19-7,24 (m, 2H), 7,15 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,16-3,26 (m, 1H), 2,59-2,69 (m, 1H), 2,08-2,16 (m, 1H), 1,66-1,86 (m, 7H), 1,31-1,42 (m, 1H), 1,21 (d, J = 6,8 Hz, 3H) ppm. m/z 411,2 (M+H)+.
Ejemplo de referencia 20
('Sj-W-(4-clorofenil)-2-(trans-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000049_0002
Ejemplo 20: SJ-W-(4-clorofenil)-2-(trans-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohexil)propanam¡da
Se preparó usando los procedimientos generales K, B, E, L, M, N y O. El procedimiento general L empleaba ácido 2-(4-(quinolin-3-il)-ciclohexil)acético (mezcla de diastereómeros) y (Sj-2-fenil-oxazolidinona. El procedimiento general M empleaba la mezcla de diastereómeros y yodometano. El auxiliar se removió según el procedimiento general N y el producto deseado se formó empleando el procedimiento general O con 4-cloroanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 10 % isopropanol en hexanos) para obtener el ejemplo 20 (isómero trans) como un segundo isómero de elución. RMN 1H de isómero trans (400 MHz; MeOH): 89,21 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 9,10 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 8,30-8,34 (m, 1H), 8,19-8,23 (m, 1H), 8,10-8,16 (m, 1H), 7,94-8,00 (m, 1H), 7,57-7,63 (m, 2H), 7,29-7,34 (m, 2H), 3,00 (tt, J = 12,0 Hz, J = 3,1 Hz, 1H), 2,28-2,38 (m, 1H), 2,07-2,22 (m, 3H), 1,9302,01 (m, 1H), 1,65­ 1,82 (3H), 1,22-1,46 (m, 5H) ppm. m/z 393,2 (M+H)+.
Ejemplo 21
(R)-A/-(4-c¡anofen¡l)-2-(c/s-4-(7-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)butanam¡da
Figure imgf000050_0001
Ejemplo 21: (R)-W-(4-c¡anofen¡l)-2-(c/s-4-(7-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l) butanam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B, E, L, M, N y O. El proced¡m¡ento general L empleaba ác¡do 2-(4-(7-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-ddohex¡l)acét¡co (mezcla de d¡astereómeros) y (R/)-2-fen¡l-oxazol¡d¡nona. El proced¡m¡ento general M empleaba el producto c/s y yodoetano. El aux¡l¡ar se remov¡ó según el proced¡m¡ento general N y el producto deseado se formó empleando el proced¡m¡ento general O con 4-c¡anoan¡l¡na. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (10 % al 25 % de EtOAc en CH2Ch) para obtener el ejemplo 21 (¡sómero c/s). RMN1H (400 MHz, CDCh) 8 8,78 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,07 (dd, J = 9,4, 5,9 Hz, 1H), 7,80 - 7,67 (m, 3H), 7,60 - 7,53 (m, 2H), 7,37 (ddd, J = 9,4, 7,9, 2,7 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 3,44 (s, 1H), 2,51 (td, J = 10,4, 3,7 Hz, 1H), 2,23 - 2,11 (m, 1H), 2,09 - 1,35 (m, 10H), 1,01 (t, J = 7,4 Hz, 3H) ppm. m/z 416,2 (M+H)+.
Ejemplo 22
(R)-A/-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(7-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)butanam¡da
Figure imgf000050_0002
Ejemplo 22: (R)-W-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(7-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l) butanam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B, E, L, M, N y O. El proced¡m¡ento general L empleaba ác¡do 2-(4-(7-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-c¡clohex¡l)acét¡co (mezcla de d¡astereómeros) y (Rj-2-fen¡l-oxazol¡d¡nona. El proced¡m¡ento general M empleaba el producto c/s y yodoetano. El aux¡l¡ar se remov¡ó según el proced¡m¡ento general N y el producto deseado se formó empleando el proced¡m¡ento general O con 4-cloroan¡l¡na. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (20 % al 50 % de EtOAc en hexanos). El res¡duo luego se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (25 % de EtOAc en CH2Ch) para obtener el producto deseado. RMN 1H (400 MHz, CDCh) 88,83 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,07 (dd, J = 9,4, 5,9 Hz, 1H), 7,74 (dd, J = 10,0, 2,7 Hz, 1H), 7,60 - 7,44 (m, 3H), 7,41 - 7,24 (m, 4H), 3,54 - 3,41 (m, 1H), 2,42 (td, J = 10,7, 3,7 Hz, 1H), 2,19 (d, J = 16,6 Hz, 1H), 2,17 - 1,37 (m, 10H), 1,02 (t, J = 7,4 Hz, 3H) ppm. m/z 425,2 (M+H)+.
Ejemplo 23
(R)-A/-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)propam¡da
Figure imgf000051_0001
Ejemplo 23: (R)-W-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)propam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B, E, L, M, N y O. El proced¡m¡ento general L empleaba ác¡do 2-(4-(qu¡nol¡n-4-¡l)-c¡clohex¡l)acét¡co (mezcla de d¡astereómeros) y (R)-2-fen¡l-oxazol¡d¡nona. El proced¡m¡ento general M empleaba el producto c/s y yodometano. El aux¡l¡ar se remov¡ó según el proced¡m¡ento general N y el producto deseado se formó empleando el proced¡m¡ento general O con 4-cloroan¡l¡na para dar el ejemplo 23. El enant¡ómero secundar¡o, no deseado se remov¡ó por med¡o del método L: t¡empo de retenc¡ón de enant¡ómero secundar¡o, no deseado = 7,1 m¡n, t¡empo de retenc¡ón de enant¡ómero pr¡nc¡pal, deseado mayor = 8,0 m¡n. RMN1H del enant¡ómero deseado (400 MHz; CDCla): 88,84 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,14 -8,02 (m, 2H), 7,70 (ddd, J = 8,3, 6,8, 1,3 Hz, 1H), 7,62 -7,54 (m, 2H), 7,32 - 7,20 (m, 2H), 3,60 - 3,26 (m, 1H), 2,71 - 2,48 (m, 1H), 2,16 - 2,08 (m, 1H), 1,96 - 1,66 (m, 9H), 1,63 - 1,45 (m, 1H), 1,24 (d, J = 6,8 Hz, 3H) ppm. m/z 393,2 (M+H)+.
Ejemplo 24
(R)-A/-(4-c¡anofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)propam¡da
Figure imgf000051_0002
Ejemplo 24: (R)-W-(4-c¡anofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)propam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B, E, L, M, N y O. El proced¡m¡ento general L empleaba ác¡do 2-(4-(qu¡nol¡n-4-¡l)-c¡clohex¡l)acét¡co (mezcla de d¡astereómeros) y (R)-2-fen¡l-oxazol¡d¡nona. El proced¡m¡ento general M empleaba el producto c/s y yodometano. El aux¡l¡ar se remov¡ó según el proced¡m¡ento general N y el proced¡m¡ento general O con 4-c¡anoan¡l¡na d¡o como resultado el ejemplo 24. RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,89 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,11 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,74 -7,67 (m, 1H), 7,64 -7,54 (m, 3H), 7,33 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,54 -3,37 (m, 1H), 2,67 -2,53 (m, 1H), 2,16 -2,09 (m, 1H), 2,00 - 1,72 (m, 7H), 1,57 - 1,45 (m, 1H), 1,26 (d, J = 6,8 Hz, 3H) ppm. m/z 384,2 (M+H)+.
Ejemplo 25
('RJ-A/-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)butanam¡da
Figure imgf000051_0003
Ejemplo 25: (RJ-W-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)butanam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B, E, L, M, N y O. El proced¡m¡ento general L empleaba ác¡do 2-(4-(qu¡nol¡n-4-¡l)-c¡clohex¡l)acét¡co (mezcla de d¡astereómeros) y (R)-4-fen¡l-2-oxazol¡d¡nona, el proced¡m¡ento general M empleaba el producto c/s del proced¡m¡ento L y yodoetano. El aux¡l¡ar se remov¡ó según el proced¡m¡ento general N y el producto deseado se formó empleando el proced¡m¡ento general O con 4-cloroan¡l¡na. El compuesto se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (10 % al 100 % de EtOAc en cloruro de met¡leno) para obtener el ejemplo 25 en forma de un sól¡do blanco. RMN 1H (400 MHz; CDCh): 88,83 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,15 -7,95 (m, 3H), 7,69 (dd, J = 8,3, 7,0 Hz, 1H), 7,63 - 7,49 (m, 3H), 7,31 - 7,22 (m, 3H), 3,47 (s, 1H), 2,43 (td, J = 10,4, 3,7 Hz, 1H), 2,16 - 2,13 (m, 1H), 1,98 - 1,52 (m, 11H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H) ppm. m/z 406,2 (M+H+).
Ejemplo 26
(S)-W-(4-clorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)butanam¡da
Figure imgf000052_0001
Ejemplo 26: ('SJ-A/-(4-clorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)butanam¡da
Se preparó usando los procedimientos generales K, B, E, L, M, N y O. El procedimiento general L empleaba 2-(4-(qu¡nol¡n-4-¡l)-c¡clohex¡l)acét¡co (mezcla de diastereómeros) y (Sj-2-feml-oxazolidinona, el procedimiento general M empleaba yodoetano y el producto trans del procedimiento L. El auxiliar se removió según el procedimiento general N y el producto deseado se formó empleando el procedimiento general O con 4-cloroan¡l¡na. El compuesto se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (10 % al 100 % de EtOAc en cloruro de metileno) para obtener el ejemplo 26 en forma de un sólido blanco. RMN 1H (400 MHz; CDCh): 68,84 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,11 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 8,4, 0,6 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J = 8,4, 6,8, 1,4 Hz, 1H), 7,59 - 7,46 (m, 3H), 7,34 - 7,29 (m, 2H), 7,26 - 7,25 (m, 2H), 3,30 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 2,25 - 1,88 (m, 4H), 1,85 - 1,69 (m, 3H), 1,70 - 1,50 (m, 3H), 1,50 - 1,27 (m, 2H), 0,99 (t, J = 7,4 Hz, 3H) ppm. m/z 406,2 (M+H+).
Ejemplo 27
W-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡lox¡)c¡clohex¡l)propanam¡da (enantioméricamente puro, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000052_0002
Intermedio 27A: 2-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l¡den)propanoato de etilo
Una suspensión de 60 % de NaH (12,8 g, 385 mmol) en THF (500 ml) se enfrió hasta 0 °C y tr¡et¡l-2-fosfonoprop¡onato (91,6 g, 385 mmol) se añadió durante 30 min. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y la suspensión turbia se volvió gradualmente una solución amarilla. Después de calentar hasta temperatura ambiente, la mezcla de reacción se volvió a enfriar hasta 0 °C. Una solución de 1,4-c¡clohexanod¡ona monoetilenacetal (50 g, 320 mmol) se añadió gota a gota por medio de un embudo de adición. Una vez completa la adición, la mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo amarillo se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado (500 ml) y EtOAc (1000 ml). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (500 ml * 2). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida para obtener el intermedio 27A (93,8 g), que se usó en la siguiente etapa sin ulterior purificación.
Intermedio 27B: 2-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)propanoato de etilo racémico
Intermedio 27A (93,8 g, 390,3 mmol) se disolvió en EtOH (1000 ml) y paladio sobre carbón al 10 % (9,4 g) se añadió. Un balón de H2 (g) con una aguja se roció a través de la suspensión negra, tras lo cual el balón se rellenó y el recipiente se mantuvo bajo una atmósfera de H2 (g) durante la noche. La mezcla se filtró a través de CELITE®545 y la torta de filtro se enjuagó con EtOH. El filtrado se concentró a presión reducida para obtener el intermedio 27B (92,5 g), que se usó en la siguiente etapa sin ulterior purificación.
Intermedio 27C: 2-(4-oxoc¡clohex¡l)propanoato de etilo racémico
Una mezcla racémica del intermedio 27B (17,1 g, 70,6 mmol) se disolvió en acetona (250 ml). Luego HCl ac. 1 N (62 ml) se añadió y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla se concentró a presión reducida y se extrajo con EtOAc (200 ml * 3). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaOH ac. 1 N (50 ml), se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (0-20 % de EtOAc en éter de petróleo) para obtener el intermedio 27C (12,8 g, 91,5% de rendimiento).
Intermedio 27D; 2-(trans-4-hidroxiciclohexil)propanoato de etilo
A una solución del intermedio racémico 27C (5,94 g, 30 mmol) en MeOH (100 ml) a 0 °C se le añadió NaBH4 (1,67 g, 45 mmol) en porciones. La mezcla se calentó hasta temperatura ambiente y se controló con TLC. Una vez consumido el material de partida, la mezcla se neutralizó con HCl 1 M y se extrajo con CH2Ch (2 * 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El aceite amarillo claro resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (25 % al 40 % de EtOAc en hexanos) para obtener el isómero trans, intermedio 27D como el segundo isómero de elución.
Intermedio 27E: 2-(c/s-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)propanoato de etilo:
[0011] A una solución del intermedio racémico 27D (690 mg, 3,45 mmol), quinolin-4-ol (600 mg, 4,13 mmol) y trifenilfosfina (2,69 g, 10,3 mmol) en THF (11,5 ml) a 0 °C se le añadió DEAD (0,921 ml, 5,87 mmol) gota a gota. La mezcla se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con NaOH 1 M y se extrajo con EtOAc (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (10 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 27E.
Ejemplo de referencia 27: A/-(4-clorofenil)-2-(c/s-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)propanamida
El ejemplo de referencia 27 se preparó con el procedimiento general G empleando el intermedio 27E y 4-cloroanilina. La mezcla racémica se resolvió usando el método M para obtener el ejemplo de referencia 27 como un enantiómero simple (estereoquímica absoluta no determinada, segundo enantiómero eluido). RMN1H (400 MHz, CDCh) 88,61 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,14 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,42 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,31 -7,13 (m, 2H), 6,62 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,44 -4,20 (m, 1H), 2,27 -2,01 (m, 3H), 1,99 - 1,78 (m, 2H), 1,72 - 1,58 (m, 1H), 1,51 (dd, J = 24,1, 12,8 Hz, 2H), 1,24 -0,96 (m, 5H). m/z 409,2 (M+H)+.
Ejemplo 30
W-(4-clorofenil)-2-(c/s-1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000053_0001
Intermedio 30A: 4-(1,4-dioxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)quinolina
A un vial de reacción de 20 ml con contenido de 4,4,5,5-tetrametil-2-(1,4-dioxaespiro[4.5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxaborolano (ver el procedimiento general K para referencia a la preparación) asequible en comercios, n.° CAS [680596-79-6]) (1,0 g, 3,8 mmol, 1,0 equiv.), 4-bromoquinolina (0,86 g, 4,1 mmol, 1,1 equiv.) y Pd(dppf)Ch (0,154 g, 0,188 mmol, 0,05 equiv.) se le añadió dioxano (12 ml), agua (1,2 ml) y NEt3 (1,0 ml, 7,5 mmol, 2,0 equiv.). El recipiente se inundó con argón y se colocó en un bloque precalentado a 100 °C durante 15 horas. El residuo en bruto se diluyó con EtOAc (100 ml), se filtró a través de un lecho de CELITE® y se concentró. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 50 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 30A (1,0 g, 99 % de rendimiento).
Intermedio 30B: 4-(quinolin-4-il)ciclohexan-1-ona
El intermedio 30A (3,25 g, 12,3 mmol, 1,0 equiv.) se disolvió en MeOH (100 ml) y se roció con argón durante 1 hora antes de añadir Pd/C (2,54 g, 2,4 mmol, 0,2 equiv.). La solución de reacción se roció con H2 (g) y se colocó bajo presión positiva con un balón de H2. La reacción se agitó bajo H2 durante 14 h y se filtró a través de CELITE®, enjuagando con 100 ml de MeOH. La solución se concentró para obtener una mezcla de sólido y aceite amarillo claro. La mezcla en bruto se diluyó directamente con HCl 3 M (100 ml) y acetona (100 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y se controló por TLC. La reacción se alcalinizó con NaOH 1 N y se extrajo con EtOAc (2 * 100 ml), se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 50 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 30B (1,25 g, 45 % de rendimiento durante 2 etapas).
Intermedio 30Ca: 2-(c/s-1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetato de etilo Intermedio 30Cb: 2-(trans-1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetato de etilo
A un vial de reacción de 20 ml con contenido del intermedio 30B (0,99 g, 4,4 mmol, 1,0 equiv.) y Zn0 (350 mg, 5,3 mol, 1,2 equiv.) bajo argón se le añadió anhidro THF (8 ml). Una solución de bromoacetato de etilo (0,54 ml, 4,8 mol, 1,1 equiv.) en THF (4,0 ml) se añadió por medio de jeringa seguido por un cristal de yodo. La mezcla de reacción se colocó en un bloque precalentado a 80 °C durante 5 horas, tras lo cual se añadieron 0,5 equiv. adicionales de bromoacetato de etilo (0,24 ml, 2,2 mmol) y Zn0 (150 mg, 2,2 mmol). La reacción se continuó agitando a 80 °C durante 2 horas más. La mezcla se diluyó con EtOAc y se filtró a través de un lecho de CELITE®. La solución se concentró y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener los isómeros del intermedio 30Ca como el c/s y del intermedio 30Cb como el trans como sólidos amarillos.
Ejemplo 30; W-(4-clorofenil)-2-(c/s-1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
A un vial de reacción que contenía 4-cloroanilina (56 mg, 0,44 mmol, 2,0 equiv.) se le añadió /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,22 ml, 2,0 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. En un vial separado, el intermedio 30C (70 mg, 0,22 mmol, 1,0 equiv.) se disolvió en 0,5 ml de THF antes de añadir 0,11 ml de /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,11 mmol, 1,0 equiv.). Esta solución se agitó durante 5 min antes de aplicar con jeringa en un vial de reacción de anilida. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas y se diluyó con EtOAc (30 ml), se lavó con HCl 3 M (2 x 15 ml) y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el ejemplo 30 (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente). RMN 1H (400 MHz; CD3OD): 88,89 (d, J = 5,5 Hz, 1H) 8,31 (d, J = 8,6 Hz, 1H) 8,14 (d, J = 8,4 Hz, 1H) 7,94 (s, 1H) 7,77-7,85 (m, 2H) 7,50 (d, J = 8,8 Hz, 2H) 7,19­ 7,28 (m, 2H) 3,50-3,64 (m, 1H) 2,75 (s, 2H) 1,93-2,10 (m, 4H) 1,73-1,89 (m, 4H). m/z 395,2 (M+H)+.
Ejemplos de referencia 31 y 32
Ejemplo de referencia 31: trifluoroacetato de W-(4-fluorofenil)-2-(c/s-4-(isoquinolin-4-iloxi)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000054_0001
Ejemplo de referencia 32: trifluoroacetato de W-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(isoquinolin-4-iloxi)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000054_0002
Intermedio 31A. 2-(4-hidroxiciclohexil)acetato de etilo:
A una solución de (2-(4-oxociclohexano)acetato de etilo (ver referencias en el procedimiento general A para la preparación) (1,0 g, 5,4 mmol) en metanol (40 ml) a temperatura ambiente se le añadió NaBH4 (0,60 g, 16 mmol). La solución resultante se agitó al aire durante 13 h, tras lo cual se diluyó con CH2Ch (60 ml), se lavó con HCl 1 M (3 x 30 ml), se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida para obtener el intermedio 31A en forma de una mezcla 1:3 de isómeros c/s y trans, en forma de un aceite incoloro transparente (1,0 g, 99 % de rendimiento).
Intermedio 31B. W-(4-fluorofenil)-2-(4-hidroxiciclohexil)acetamida:
Se preparó usando el procedimiento general G empleando el intermedio 31A (1,0 g, 5,4 mmol) y 4-fluoroanilina (1,01 ml, 11 mmol). Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (50 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 31B en forma de una mezcla de diastereómeros 1:2 (sólido blanco, 772 mg, 57 %).
Ejemplos de referencia 31 y 32: trifluoroacetato de A/-(4-fluorofenil)-2-(c/s-4-(isoquinolin-4-iloxi)ciclohexil)acetamida y trifluoroacetato de A/-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(isoquinolin-4-iloxi)ciclohexil)acetamida
A un vial con contenido del Intermedio 31B (200 mg, 0,80 mmol, 1,0 equiv.) y 4-isoquinolinol (170 mg, 1,2 mmol, 1,5 equiv.) se le añadió tolueno seguido por cianometilentributilfosforano (0,31 ml, 1,2 mmol, 1,5 equiv.), gota a gota. La reacción se agitó a 60 °C durante 16 h antes de concentrar. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener una mezcla con contenido de los ejemplos de referencia 31 y 32, que luego se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (PHENOMENEX® Gemini-NX, 10|j, C18, 110A, 250 x 30 mm, 20 ml/min, eluyendo con 0 % al 100 % de acetonitrilo en agua con 0,1 % de gradiente de TFA durante los primeros 30 min de 40 min de ejecución) para obtener el ejemplo de referencia 31 (diastereómero c/s, eluido primero) en forma de la sal de TFA. RMN 1H (400 MHz; CDCh): 8 8,87 (s, 1H) 8,22 (d, J = 8,0 Hz, 1H) 8,07 (s, 1H) 7,94 (d, J = 8,0 Hz, 1H) 7,56-7,73 (m, 2H) 7,42-7,52 (m, 2H) 7,39 (s. a., 1H) 6,95-7,06 (m, 2H) 4,85 (s. a., 1H) 2,33 (d, J = 7,0 Hz, 2H) 2,22 (d, J = 13,1 Hz, 2H) 2,11 (s, 1H) 1,66-1,79 (m, 4H) 1,51-1,66 (m, 2H). m/z 379,2 (M+H)+.
La posterior elución de la HPLC preparativa en fase inversa previa dio como resultado el ejemplo de referencia 32 (diastereómero trans, segundo eluido) en forma de la sal de t Fa . RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,86 (s, 1H) 8,19-8,25 (m, 1H) 8,09 (s, 1H) 7,93 (d, J = 8,0 Hz, 1H) 7,69 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1H) 7,57-7,63 (m, 1H) 7,45-7,54 (m, 2H) 6,94-7,07 (m, 2H) 4,37-4,51 (m, 1H) 2,24-2,40 (m, 3H) 1,96-2,09 (m, 4H) 1,57-1,72 (m, 2H) 1,17-1,31 (m, 2H). m/z 379,2 (M+H)+.
Ejemplo de referencia 33
W-(4-cianofenil)-2-(c/s-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000055_0001
Ejemplo de referencia 33: A/-(4-cianofenil)-2-(c/s-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)acetamida
A una mezcla de A/-(4-cianofenil)-2-(4-hidroxiciclohexil)acetamida (preparada usando el procedimiento general G a partir del intermedio 31A y 4-cianoanilina) (200 mg, 0,775 mmol, 1,0 equiv.), 4-quinolinol (168 mg, 1,16 mmol, 1.5 equiv.) y PPh3 (609 mg, 2,33 mmol 3,0 equiv.) enfriado hasta 0 °C se le añadió DEAD (0,182 ml, 1,16 mmol, 1.5 equiv.) gota a gota. El baño de hielo se retiró y la mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. La mezcla se diluyó luego con EtOAc, se filtró a través de un lecho de CELITE® y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el ejemplo 33 (diastereómero c/s), que luego se purificó por HPLC preparativa en fase inversa (PHENOMENEX® Gemini-NX, 10 j , C18, 110 A, 250 x 30 mm, 20 ml/min, eluyendo con 0 % al 100 % de acetonitrilo en agua con 0,1 % de gradiente de TFA durante los primeros 30 min de 40 min de corrida) para obtener el ejemplo 33 en forma de la sal de TFA. RMN 1H (400 MHz; CD3OD): 88,96 (d, J = 6,8 Hz, 1H) 8,48-8,56 (m, 1H) 8,06-8,17 (m, 2H) 7,90 (s, 1H) 7,76-7,83 (m, 2H) 7,62-7,69 (m, 2H) 7,52 (d, J = 6,8 Hz, 1H) 5,33 (s. a., 1H) 2,65 (d, J = 0,6 Hz, 1H) 2,43 (d, J = 7,2 Hz, 2H) 2,25 (s. a., 2H) 2,05-2,19 (m, 1H) 1,93 (s. a., 2H) 1,79 (d, J = 3,3 Hz, 2H) 1,64 (s. a., 2H). m/z 386,2 (M+H)+.
Ejemplo 34
W-(4-clorofenil)-2-(trans-1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000055_0002
Ejemplo 34: A/-(4-clorofen¡l)-2-(frans-1-h¡drox¡-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
A un vial de reacción que contenía 4-cloroanilina (33 mg, 0,25 mmol, 2,0 equiv.) se le añadió /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,13 ml, 0,25 mmol, 2,0 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. En un vial separado, un diastereómero simple obtenido a partir del intermedio 30Ca (40 mg, 0,13 mmol, 1,0 equiv.) se disolvió en 0,5 ml de THF antes de añadir 0,064 ml /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,13 mmol, 1,0 equiv.). Esta solución se agitó durante 5 min antes de aplicar con jeringa en un vial de reacción de anilida. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas y se diluyó con EtOAc (30 ml), se lavó con HCl 3 M (2 * 15 ml) y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el ejemplo 34 (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente). RMN 1H (400 MHz; CD3OD): 89,09 (d, J = 5,9 Hz, 1H) 8,62 (d, J = 8,6 Hz, 1H) 8,20-8,29 (m, 1H) 8,15 (ddd, J = 8,4, 7,1, 1,1 Hz, 1H) 7,94-8,06 (m, 2H) 7,54-7,62 (m, 2H) 7,23-7,33 (m, 2H) 3,74 (t, J = 12,1 Hz, 1H) 3,30 (dt, J = 3,3, 1,6 Hz, 1H) 2,61 (s, 2H) 2,09-2,26 (m, 2H) 1,98-2,09 (m, 2H) 1,81-1,96 (m, 4H). m/z 395,2 (M+H)+.
Ejemplo 35
W-(4-fluorofen¡l)-2-(frans-1-h¡drox¡-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000056_0001
Ejemplo 35: W-(4-fluorofen¡l)-2-(frans-1-h¡drox¡-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
A un vial de reacción que contenía 4-fluoroanilina (28 mg, 0,25 mmol, 2,0 equiv.) se le añadió /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,13 ml, 0,26 mmol, 2,0 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. En un vial separado, un diastereómero simple obtenido a partir del intermedio 30Ca (40 mg, 0,13 mmol, 1,0 equiv.) se disolvió en 0,5 ml de THF antes de añadir 0,064 ml de /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,13 mmol, 1,0 equiv.). Esta solución se agitó durante 5 min antes de aplicar con jeringa en un vial de reacción de anilida. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas y se diluyó con EtOAc (30 ml), se lavó con HCl 3 M (2 * 15 ml) y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el ejemplo 35 (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente). RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,81 (d, J = 4,7 Hz, 1H) 8,63-8,70 (m, 1H) 8,12 (dd, J = 8,4, 1,0 Hz, 1H) 8,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H) 7,63-7,73 (m, 1H) 7,42-7,60 (m, 3H) 7,34 (d, J = 4,7 Hz, 1H) 6,94-7,05 (m, 2H) 3,28 (t, J = 12,0 Hz, 1H) 2,58 (s, 2H) 1,97-2,16 (m, 4H) 1,84 (d, J = 10,9 Hz, 2H) 1,57-1,70 (m, 2H). m/z 379,2 (M+H)+.
Ejemplo 36
W-(4-clorofen¡l)-2-(frans-1-h¡drox¡-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000056_0002
Ejemplo 36: A/-(4-clorofen¡l)-2-(frans-1-h¡drox¡-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
A un vial de reacción que contenía 4-cloroanilina (51 mg, 0,40 mmol, 2,0 equiv.) se le añadió /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,20 ml, 0,40 mmol, 2,0 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. En un vial separado, el diastereómero c/s obtenido a partir del intermedio 30C (63 mg, 0,20 mmol, 1,0 equiv.) se disolvió en 0,5 ml de THF antes de añadir 0,10 ml de /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,10 mmol, 1,0 equiv.). Esta solución se agitó durante 5 min antes de aplicar con jeringa en un vial de reacción de anilida. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas y se diluyó con EtOAc (30 ml), se lavó con HCl 3 M (2 * 15 ml) y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el ejemplo 36 (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente). RMN1H(400 MHz; CDCh): 89,73 (s, 1H) 8,75 (d, J = 4,5 Hz, 1H) 8,10 (dd, J = 8,4, 1,0 Hz, 1H) 8,03 (d, J = 7,8 Hz, 1H) 7,70 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1H) 7,50-7,62 (m, 3H) 7,21-7,29 (m, 2H) 7,14 (d, J = 4,7 Hz, 1H) 3,30-3,45 (m, 1H) 2,75 (s, 2H) 2,03-2,12 (m, 2H) 1,93-2,02 (m, 2H) 1,82 (td, J = 13,3, 3,3 Hz, 2H) 1,47-1,63 (m, 2H). m/z 395,2 (M+H)+.
Ejemplo 37
W-(4-fluorofenil)-2-(frans-1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000057_0001
Ejemplo 37: W-(4-fluorofenil)-2-(frans-1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
A un vial de reacción que contenía 4-fluoroanilina (44 mg, 0,40 mmol, 2,0 equiv.) se le añadió /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,20 ml, 0,40 mmol, 2,0 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. En un vial separado, el diastereómero c/s obtenido a partir del intermedio 30Cb (63 mg, 0,20 mmol, 1,0 equiv.) se disolvió en 0,5 ml de THF antes de añadir 0,064 ml de /PrMgCl (2,0 M en THF, 0,10 ml, 0,20 mmol, 1,0 equiv.). Esta solución se agitó durante 5 min antes de aplicar con jeringa en un vial de reacción de anilida. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas y se diluyó con EtOAc (30 ml), se lavó con HCl 3 M (2 * 15 ml) y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el ejemplo 37 (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente). RMN1H (400 MHz; CDCla): 89,60 (s, 1H) 8,76 (d, J = 4,7 Hz, 1H) 8,10 (dd, J = 8,4, 1,0 Hz, 1H) 8,04 (d, J = 8,0 Hz, 1H) 7,71 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,4 Hz, 1H) 7,52-7,65 (m, 2H) 7,15 (d, J = 4,7 Hz, 1H) 6,93-7,07 (m, 2H) 3,30-3,45 (m, 1H) 2,75 (s, 2H) 2,07 (d, J = 13,5 Hz, 2H) 1,92-2,02 (m, 2H) 1,83 (td, J = 13,3, 3,4 Hz, 2H) 1,45­ 1,65 (m, 2H). m/z 379,2 (M+H)+.
Ejemplos de referencia 38 y 39
(R)-A/-(4-cianofenil)-2-(c/s-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)propanamida (enantiómero simple, estereoquímica absoluta no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000057_0002
(S)-W-(4-cianofenil)-2-(c/s-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)propanamida (enantiómero simple, estereoquímica absoluta no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000058_0001
Intermedio 38A: 2-(4-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclohexil)acetato de etilo
A una solución de 2-(4-hidroxicidohexil)acetato de etilo (17,4 g, 93,4 mmol, 1,0 equiv.) en DMF (100 ml) bajo argón se le añadió imidazol (9,54 g, 140 mmol, 1,5 equiv.) y cloruro de terc-butildimetilsililo (15,5 g, 103 mmol, 1,1 equiv.). La reacción se volvió turbia y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con EtOAc (150 ml y 2 * 60 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron para obtener el intermedio 38A en forma de un aceite incoloro transparente.
Intermedio 38B: 2-(4-((terc-butildimetilsilil)oxi)ciclohexil)propanoato de etilo
[0012] Intermedio 38A (5,0 g, 17 mmol, 1,0 equiv.) se diluyó con Et2O y se enfrió hasta -78 °C. Hexametildisilazida de sodio (2,0 M en THF, 9,2 ml, 18 mmol, 1,1 equiv.) se añadió por medio de jeringa y la reacción se volvió amarillo claro y se agitó durante 5 min. Yoduro de metilo (5,1 ml, 83 mmol, 5,0 equiv.) se añadió y la reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La reacción se diluyó con EtOAc (100 ml) y salmuera (100 ml) y NH4Cl sat. ac. (100 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 * 60 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron, se concentraron a presión reducida y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 10 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 38B en forma de un aceite amarillo claro (4,56 g, 86 %).
Intermedio 38C: 2-(4-hidroxiciclohexil)propanoato de etilo
[0013] Intermedio 38B (4,54 g, 14,5 mmol, 1,0 equiv.) se diluyó en THF (48 ml) y la solución se trató con solución de fluoruro de tetrabutilamonio (1,0 M en THF, 22 ml, 21,7 mmol, 1,5 equiv.). La solución de reacción se dejó agitar durante la noche. La solución de reacción se concentró y luego se diluyó con EtOAc (200 ml), se lavó con agua y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 30 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 38C en forma de una relación trans a cis 7:3 (2,78 g, 96 % de rendimiento).
Intermedio 38D:
A una solución del intermedio 38C (1,07 g, 5,35 mmol, 1,0 equiv.), 4-quinolinol (0,931 g, 6,42 mmol, 1,2 equiv.) y PPh3 (4,22 g, 16,1 mmol, 3,0 equiv.) en Th F (18 ml, 0,3 M) a 0 °C se le añadió DeA d (1,27 ml, 8,03 mmol, 1,5 equiv.). La reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró y luego se diluyó con EtOAc (100 ml). La solución se lavó con NaOH 1 M y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró, se concentró a presión reducida y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc en hexanos) para obtener el intermedio 38D.
Ejemplos de referencia 38 y 39: (R)-N-(4-cianofenil)-2-(c/s-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)propanamida y (S)-N-(4-cianofenil)-2-(cis-4-(quinolin-4-iloxi)ciclohexil)propanamida (ambos como enantiómeros simples, estereoquímica absoluta no determinada y asignada arbitrariamente)
A una solución de 4-cloroanilina (340 mg, 2,9 mmol, 2,0 equiv.) en THF (2,5 ml) se le añadió /PrMgCl (2,0 M en THF, 1,45 ml, 2,9 mmol, 2,0 equiv.). La solución se volvió de color anaranjado/marrón y se agitó durante 15 min. Una solución del intermedio 38C (502 mg, 1,45 mmol, 1,0 equiv.) en THF (0,5 ml) se añadió y la reacción se dejó agitar durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (30 ml) y se lavó con HCl 3 M (2 * 15 ml) y salmuera. Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron, se concentraron a presión reducida y se purificaron por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc) para obtener los Ejemplos de referencia 38 y 39 como una mezcla de enantiómeros. HPLC semipreparativa quiral de fase normal (Diacel CHIRALPAK® ID, 5 p, 250 * 20 mm, 15 ml/min, eluyendo con 95 % 1:1 hexano:CH2Ch y 5 % de acetonitrilo con 0,4 % de dietilamina ¡socrática durante 40 min) para obtener el ejemplo de referencia 38 como el primer isómero de elución. RMN 1H (400 MHz; CDCh): 6 8,71 (d, J = 5,3 Hz, 1H) 8,19 (dd, J = 8,4, 1,4 Hz, 1H) 8,02 (d, J = 8,4 Hz, 1H) 7,78 (s, 1H) 7,64-7,73 (m, 2H) 7,54-7,61 (m, 2H) 7,44 (ddd, J = 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1H) 6,70 (d, J = 5,5 Hz, 1H) 4,86 (s. a., 1H) 2,14-2,32 (m, 2H) 1,47-1,86 (m, 7H), 1,27 (d, J = 7,0 Hz, 2H). m/z 400,2 (M+H)+.
La posterior elución de la columna de HPLC semipreparativa quiral previa dio como resultado el ejemplo de referencia 39 como el segundo isómero de elución. RMN 1H (400 MHz; CDCla): 68,71 (d, J = 5,3 Hz, 1H) 8,19 (dd, J = 8,4, 1,4 Hz, 1H) 8,02 (d, J = 8,4 Hz, 1H) 7,78 (s, 1H) 7,64-7,73 (m, 2H) 7,54-7,61 (m, 2H) 7,44 (ddd, J = 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1H) 6,70 (d, J = 5,5 Hz, 1H) 4,86 (s. a., 1H) 2,14-2,32 (m, 2H) 1,47-1,86 (m, 7H), 1,27 (d, J = 7,0 Hz, 2H). m/z 400,2 (M+H)+.
Ejemplos de referencia 40 y 41
(R)-N-(4-fluorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡lox¡)c¡clohex¡l)propanam¡da (enantiómero simple, estereoquímica absoluta no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000059_0001
(S)-N-(4-fluorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡lox¡)c¡clohex¡l)propanam¡da (enantiómero simple, estereoquímica absoluta no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000059_0002
Ejemplos de referencia 40 y 41: (R)-N-(4-fluorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-4-¡lox¡)c¡clohex¡l) propanamida y (S)-N-(4-fluorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nolin-4-¡lox¡)ddohex¡l) propanamida (ambas obtenidas como un enantiómero simple, estereoquímica absoluta no determinada y asignada arbitrariamente)
A una solución de 4-fluoroanilina (0,275 ml, 2,9 mmol, 2,0 equiv.) en THF (2,5 ml) se le añadió /PrMgCl (2,0 M en THF, 1,45 ml, 2,9 mmol, 2,0 equiv.). La solución se volvió de color anaranjado/marrón y se agitó durante 15 min. Una solución del intermedio 38D (502 mg, 1,45 mmol, 1,0 equiv.) en THF (0,5 ml) se añadió y la reacción se dejó agitar durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (30 ml) y se lavó con HCl 3 M (2 * 15 ml) y salmuera. La solución se secó (MgSO4), se concentró y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 100 % de EtOAc) para obtener los Ejemplos de referencia 40 y 41 como una mezcla de enantiómeros. HPLC semipreparativa quiral de fase normal (Diacel cHlRALPAK® ID, 5 p, 250 * 20 mm, 15 ml/min, eluyendo con 95 % 1:1 hexano:CH2Ch y 5 % de acetonitrilo con 0,4 % de dietilamina ¡socrática durante 40 min) para obtener el ejemplo 40 como el primer isómero de elución. RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,72 (d, J = 5,3 Hz, 1H) 8,22 (dd, J = 8,3, 1,1 Hz, 1H) 8,03 (d, J = 8,6 Hz, 1H) 7,69 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,5 Hz, 1H) 7,42-7,53 (m, 2H) 7,21 (s, 1H) 6,94-7,05 (m, 2H) 6,71 (d, J = 5,5 Hz, 1H) 4,87 (s. а. , 1H) 2,06-2,31 (m, 4H) 1,47-1,88 (m, 5H) 1,22-1,29 (m, 4H). m/z 393,2 (M+H)+.
La posterior elución de la columna de HPLC semipreparativa quiral previa dio como resultado el ejemplo de referencia 41 como el segundo isómero de elución. RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,72 (d, J = 5,3 Hz, 1H) 8,22 (dd, J = 8,3, 1,1 Hz, 1H) 8,03 (d, J = 8,6 Hz, 1H) 7,69 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,5 Hz, 1H) 7,42-7,53 (m, 2H) 7,21 (s, 1H) 6,94-7,05 (m, 2H) б, 71 (d, J = 5,5 Hz, 1H) 4,87 (s. a., 1H) 2,06-2,31 (m, 4H) 1,47-1,88 (m, 5H) 1,22-1,29 (m, 4H). m/z 393,2 (M+H)+.
Ejemplo 42
(±)-N-(4-clorofen¡l)-2-(frans-4-(qu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)pent-4-enam¡da
Figure imgf000059_0003
Intermedio 42A: 2-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)pent-4-enoato de etilo
A una solución de 2-(4-(quinolin-4-il)cidohexil)acetato de etilo (que se puede preparar usando los procedimientos generales A y B) en THF (0,2 M) a 0 °C se le añadió solución de NaHMDS (2 equivalentes). La solución amarilla resultante se agitó a 0 °C durante 5 min y bromuro de alilo (2 equivalentes) se añadió. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora, tras lo cual AcOH se añadió junto con Et2O. La mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de sílice eluyendo con Et2O adicional. El filtrado se concentró y se purificó empleando cromatografía sobre gel de sílice para obtener el intermedio 42A en forma de mezcla de diastereómeros cis/trans.
Ejemplo 42: W-(4-clorofenil)-2-(trans-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)pent-4-enamida
[0014] Intermedio 42A se sometió al procedimiento general G usando 4-cloroanilina y el ejemplo 42 se aisló en forma de un sólido blanco. RMN 1H (400 MHz, CDCh): 89,53 (s, 1H), 8,58 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 11,5, 8,5 Hz, 2H), 7,70 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,60 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,25 (ddd, J = 8,9, 5,8, 2,3 Hz, 1H), 7,20 -7,15 (m, 2H), 6,00 -5,87 (m, 1H), 5,21 -5,09 (m, 2H), 3,46 (s, 1H), 2,71 (td, J = 10,1, 4,9 Hz, 1H), 2,45 (q, J = 9,7 Hz, 2H), 2,28 - 1,62 (m, 9H).
Ejemplo de referencia 43
2-(4-(1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)ciclohexil)-A/-(4-clorofenil)acetamida (mezcla de diastereómeros cis-/trans)
Figure imgf000060_0001
Ejemplo de referencia 43: 2-(4-(1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)ciclohexil)-A/-(4-clorofenil)acetamida (mezcla de diastereómeros cis-/ trans)
Se preparó usando los procedimientos generales K, B y G. En el procedimiento general K, se usó 4-bromo-1H-pirazolo[3,4-8]piridina como par de acoplamiento y se usó dimetoxietano como solvente. En el procedimiento general G, se usó 4-cloroanilina. El ejemplo de referencia 43 se aisló en forma de un sólido blanco y ~1:1 mezcla de diastereómeros. RMN 1H (400 MHz, CDCla): 88,52 -8,45 (m, 1H), 8,20 -8,11 (m, 1H), 7,52 -7,46 (m, 2H), 7,34 -7,27 (m, 2H), 7,08 -6,96 (m, 1H), 3,20 -2,90 (m, 1H), 2,50 (s, 1H), 2,33 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 2,14 -1,64 (m, 8H), 1,39 -1,25 (m, 2H). LC/MS, m/z 369 (M+H)+.
Ejemplos de referencia 44 y 45
W-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(quinazolin-4-il)ciclohexil)acetamida
Figure imgf000060_0002
W-(4-fluorofenil)-2-(4-(quinazolin-4-il)ciclohexil)acetamida (mezcla de diastereómeros)
Figure imgf000061_0001
Ejemplos de referencia 44 y 45: A/-(4-fluorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nazol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da y N-(4-fluorofen¡l)-2-(4-(quinazolin-4-il)cidohexil)acetamida (mezcla de d¡astereómeros)
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B y G. La 4-cloroqu¡nazol¡na y Pd(PPh3)4 se emplearon en el proced¡m¡ento K. 4-fluoroan¡l¡na se empleó en el proced¡m¡ento G. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (50 % de EtOAc en hexanos) para dar el ejemplo de referenc¡a 44 (d¡astereómero c/s) como el pr¡mer ¡sómero de eluc¡ón. RMN 1H (400 MHz, CD3OD) 89,15 (s, 1H), 8,37 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,08 - 7,93 (m, 2H), 7,75 (ddd, J = 8,4, 6,0, 2,2 Hz, 1H), 7,56 (ddd, J = 7,0, 5,3, 2,8 Hz, 2H), 7,08 -6,97 (m, 2H), 3,82 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 2,56 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 2,43 (s, 1H), 2,20 - 2,02 (m, 2H), 2,00 (s, 1H), 2,00 - 1,74 (m, 6H) ppm. m/z 364,2 (M+H)+.
La poster¡or eluc¡ón de la columna d¡o como resultado el ejemplo de referenc¡a 45 en forma de una mezcla de ¡sómeros c/s:trans 1:1. m/z 364,2 (M+H)+.
Ejemplos de referenc¡a 46 y 47
Ejemplo de referenc¡a 46: A/-(4-dorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nazol¡n-4-¡l)ddohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000061_0002
Ejemplo de referenc¡a 47: A/-(4-dorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nazol¡n-4-¡l)ddohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000061_0003
Ejemplos de referenc¡a 46 y 47: W-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nazol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da y W-(4-clorofen¡l)-2-(trans-4-(qu¡nazol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B y G. 4-cloroqu¡nazol¡na y Pd(PPh3)4 se empleó en el proced¡m¡ento K. 4-cloroan¡l¡na se empleó en el proced¡m¡ento G. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (50 % de EtOAc en hexanos) para dar el ejemplo de referenc¡a 46 (d¡astereómero c/s) como el pr¡mer ¡sómero de eluc¡ón. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 89,28 (s, 1H), 8,19 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,90 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,3 Hz, 1H), 7,67 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,2 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,32 - 7,24 (m, 2H), 3,69 (dd, J = 12,0, 8,6 Hz, 1H), 2,57 (s, 3H), 2,05 (dt, J = 19,0, 8,4 Hz, 2H), 1,86 - 1,72 (m, J = 30,7, 27,2 Hz, 6H) ppm. m/z 380 (M+H)+.
La poster¡or eluc¡ón de la columna d¡o como resultado el ejemplo de referenc¡a 47 (d¡astereómero trans) como el segundo ¡sómero de eluc¡ón. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 89,25 (s, 1H), 8,17 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,89 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,35 -7,15 (m, 3H), 3,54 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 2,36 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,15 -1,81 (m, 5H), 1,48 - 1,30 (m, 2H), 0,87 (d, J = 11,4 Hz, 2H) ppm. m/z 380 (M+H)+.
Ejemplo de referenc¡a 48
W-(4-clorofen¡l)-2-(4-(1,5-naft¡r¡d¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da (mezcla de d¡astereómeros)
Figure imgf000062_0001
Ejemplo de referencia 48: A/-(4-clorofen¡l)-2-(4-(1,5-naft¡r¡d¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da (mezcla de diastereómeros)
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B y G. 4-cloro-1,5-naft¡r¡d¡na se empleó en el proced¡m¡ento K y 4-cloroan¡l¡na se empleó en el proced¡m¡ento G. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (25-75 % de EtOAc en hexanos) para dar un res¡duo. El res¡duo luego se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (25­ 75 % de EtOAc en tolueno) para dar el producto deseado como una mezcla 2:1 de d¡astereómeros. m/z 380,2 (M+H)+.
Ejemplo de referenc¡a 49
W-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)propanam¡da
Figure imgf000062_0002
Ejemplo de referenc¡a 49: A/-(4-clorofen¡l)-2-(c/s-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)propanam¡da
Se preparó con el proced¡m¡ento general G empleando 2-(4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)propanoato de et¡lo y 4-cloroan¡l¡na. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (0 % al 10 % de 2-propanol en hexanos) para obtener el ejemplo de referenc¡a 49 en forma de un sól¡do blanco y el pr¡mer ¡sómero de eluc¡ón. RMN1H (400 MHz, CDCh): 88,74 (d, J = 2,2 Hz. 1H), 8,64 (s, 1H), 8,05-8,11 (m, 1H), 7,68-7,75 (m, 2H), 7,55-7,64 (m, 3H), 7,23-7,28 (m, 3H), 2,74-2,84 (m, 1H), 2,44-2,54 (m, 1H), 1,99-2,09 (m, 1H), 1,36-1,80 (m, 8H), 1,26 (d, J = 6,9 Hz, 3H) ppm. m/z 393,3 (M+H)+.
Ejemplo de referenc¡a 50
W-(4-fluorofen¡l)-2-(frans-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)propanam¡da
Figure imgf000062_0003
Ejemplo de referenc¡a 50: A/-(4-fluorofen¡l)-2-(frans-4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)propanam¡da
Se preparó con el proced¡m¡ento general G empleando 2-(4-(qu¡nol¡n-3-¡l)c¡clohex¡l)propanoato de et¡lo y 4-fluoroan¡l¡na. Se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (0 % al 10 % de 2-propanol en hexanos) para obtener el ejemplo de referenc¡a 50 en forma de un sól¡do blanco y el segundo ¡sómero de eluc¡ón. RMN 1H (400 MHz, CDCh): 8 8,80 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 8,04-8,09 (m, 1H), 7,89-7,91 (m, 1H), 7,75-7,80 (m, 1H), 7,52-7,69 (m, 1H), 7,48-7,56 (m, 3H), 7,27 (s, 1H), 6,98-7,06 (2H), 2,69 (tt, 1H, J = 3,1 Hz, J = 12,6 Hz), 1,95-2,20 (m, 5H), 1,54-1,90 (m, 5H), 1,28 (d, J = 6,9 Hz, 3H) ppm. m/z 377,3 (M+H)+.
Ejemplos de referenc¡a 51 y 52
W-(4-clorofen¡l)-2-((frans)-4-(¡soqu¡nol¡n-1-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000063_0001
W-(4-clorofen¡l)-2-((c/s)-4-(¡soqu¡nol¡n-1-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000063_0002
Ejemplos de referenda 51 y 52: W-(4-clorofen¡l)-2-((trans)-4-(¡soqu¡nol¡n-1-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da y W-(4-clorofen¡l)-2-((c/s)-4-(¡soqu¡nol¡n-1-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Se preparó usando los proced¡m¡entos generales K, B y G. Para el proced¡m¡ento general K, se empleó 1-cloro¡soqu¡nol¡na. Para el proced¡m¡ento general B, etanol se empleó como el solvente y la reacc¡ón se ejecutó a 50 °C. Para el proced¡m¡ento general G, 4-cloroan¡l¡na se empleó y se usó tr¡met¡lalum¡n¡o en vez de 'PrMgCl. El compuesto deseado se pur¡f¡có por med¡o de HPLC preparat¡va (Var¡an ProStar usando columna Ham¡lton C18 PRP-1 (15 x 250 mm) con caudal de 20 ml/m¡n, fase móv¡l A: 0,5 % de ác¡do fórm¡co en agua; fase móv¡l B: 0,5 % de ác¡do fórm¡co en aceton¡tr¡lo; 0 % al 100 % de B eluc¡ón de grad¡ente durante 30 m¡nutos.) para dar los ejemplos de referenc¡a 51 y 52 como una mezcla de d¡astereómeros. El res¡duo luego se pur¡f¡có por med¡o de TLC preparat¡va (33 % de EtOAc en hexanos) para dar el ejemplo de referenc¡a 51 (d¡astereómero trans, factor de retenc¡ón mayor). RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,49-8,43 (m, 1H), 8,24-8,20 (m, 1H), 7,85-7,82 (m, 2H), 7,65-7,50 (m, 4H), 7,28-7,25 (m, 2H), 3,70-3,62 (m, 1H), 2,62-2,56 (m, 2H), 2,41-2,36 (m, 2H), 2,09-2,02 (m, 2H), 1,86-1,82 (m, 3H), 1,28-1,24 (m, 2H) ppm. m/z 379,2 (M+H)+.
TLC preparat¡va tamb¡én d¡o como resultado el ejemplo de referenc¡a 52 (d¡astereómero c/s, menor factor de retenc¡ón). RMN 1H (400 MHz; CDCla): 88,50-8,46 (m, 1H), 8,24-8,20 (m, 1H), 7,86-7,82 (m, 1H), 7,72-7,50 (m, 4H), 7,30-7,26 (m, 2H), 3,59-3,54 (m, 1H), 2,38-2,33 (m, 2H), 2,20-1,95 (m, 6H), 1,40-1,22 (m, 3H) ppm. m/z 379,1 (M+H)+.
Ejemplos de referenc¡a 53 y 54
W-(4-clorofen¡l)-2-((c/s)-4-(¡soqu¡nol¡n-8-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000063_0003
W-(4-clorofen¡l)-2-((trans)-4-(¡soqu¡nol¡n-8-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Figure imgf000063_0004
Ejemplos de referenc¡a 53 y 54: W-(4-clorofen¡l)-2-((c/s)-4-(¡soqu¡nol¡n-8-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da y W-(4-clorofen¡l)-2-((trans)-4-(¡soqu¡nol¡n-8-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Se preparó usando los procedimientos generales K, B y G. Para el procedimiento general K, se empleó 8-bromoisoquinolina. Para el procedimiento general B, el etanol se empleó como el solvente y la reacción se ejecutó a 50 °C. Para el procedimiento general G, la 4-cloroanilina se empleó y el trimetilaluminio se usó en vez de 'PrMgCl. El residuo se purificó por medio de HPLC preparativa (Varian ProStar usando columna Hamilton C18 PRP-1 (15 * 250 mm) con caudal de 20 ml/min, fase móvil A: 0,5 % de ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0,5 % de ácido fórmico en acetonitrilo; 0 % al 100 % de B elución de gradiente durante 30 minutos) para obtener el ejemplo de referencia 53 (diastereómero cis) como el primer isómero de elución. RMN1H (400 MHz; CDCh): 89,25 (s, 1H), 8,56-8,53 (m, 1H), 7,85-7,82 (m, 2H), 7,62-7,47 (m, 4H), 7,31-7,26 (m, 2H), 3,38-3,27 (m, 1H), 2,57-2,53 (m, 3H), 2,04-1,25 (m, 8H) ppm. m/z 379 (M+H)+.
La posterior elución dio como resultado el ejemplo de referencia 54 (diastereómero trans) como el segundo isómero de elución. RMN 1H (400 MHz; CDCh): 89,24 (s, 1H), 8,56-8,52 (m, 1H), 7,86-7,81 (m, 2H), 7,69-7,49 (m, 4H), 7,32­ 7,26 (m, 2H), 3,26-3,18 (m, 1H), 2,35-2,23 (m, 3H), 1,67-1,59 (m, 4H), 1,40-1,27 (m, 4H) ppm. m/z 379 (M+H)+.
Ejemplo de referencia 55
W-(4-clorofenil)-2-((trans)-4-(isoquinolin-5-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000064_0001
Ejemplo de referencia 55: A/-(4-clorofenil)-2-((trans)-4-(¡soqu¡nol¡n-5-¡l)c¡clohex¡l)acetam¡da
Se preparó usando los procedimientos generales K, B y G. Para el procedimiento general K, se empleó 5-bromoisoquinolina. Para el procedimiento general B, el etanol se empleó como el solvente y la reacción se corrió a 50 °C. Para el procedimiento general G, la 4-cloroanilina se empleó y trimetilaluminio se usó en vez de iPrMgCl. El residuo se purificó por medio de HPLC preparativa (Varian ProStar usando columna Hamilton C18 PRP-1 (15 * 250 mm) con caudal de 20 ml/min. fase móvil A: 0,5 % de ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0,5 % de ácido fórmico en acetonitrilo; 0 % al 100 % de B elución de gradiente durante 30 minutos.) para dar el ejemplo de referencia 55 (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente). RMN1H (400 MHz; CDCla): 89,24 (s, 1H), 8,55-8,52 (m, 1H), 7,85-7,81 (m, 2H), 7,60-7,48 (m, 4H), 7,32-7,26 (m, 2H), 3,27-3,20 (m, 1H), 2,38-2,32 (m, 1H), 2,09­ 2,02 (m, 3H), 1,70-1,57 (m, 3H), 1,41-1,24 (m, 4H). m/z 379 (M+H)+.
Ejemplo de referencia 56
W-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000064_0002
Ejemplo de referencia 56: A/-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(quinolin-3-il)ciclohexil)propanamida
Se preparó con el procedimiento general G empleando 2-(4-(quinolin-3-il)ciclohexil)propanoato de etilo y 4-fluoroanilina. Se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (0 % al 10 % de 2-propanol en hexanos) para obtener el ejemplo de referencia 56 (diastereómero cis) en forma de un sólido blanco y el primer isómero de elución. RMN 1H (400 MHz, CDCh): 88,76-8,79 (m, 1H), 8,19 (bs, 1H), 8,06-8,11 (m, 1H), 7,65-7,77 (m, 3H), 7,53-7,62 (m, 3H), 6,96­ 7,04 (m, 2H), 2,79-2,89 (m, 1H), 2,43-2,53 (m, 1H), 1,99-2,08 (m, 1H), 1,50-1,85 (m, 8H), 1,27 (d, J = 6,8 Hz, 3H) ppm. m/z 377,3 (M+H)+.
Ejemplo 57
(±)-W-(4-cianofenil)-2-((cis)-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)pent-4-enamida
Figure imgf000065_0001
Intermedio 57A: 2-(c/s-4-(quinolin-4-il)cidohexil)pent-4-enoato de etilo
A una solución de 2-(4-(quinolin-4-il)cidohexil)acetato de etilo (que se puede preparar usando los procedimientos generales A y B) (740 mg, 2,5 mmol) en THF (5 ml) a -78 °C se le añadió NaHMDS (2 M en THF, 3,0 ml, 6,0 mmol). La mezcla de reacción resultante se agitó a -78 °C durante 5 min y bromuro de alilo (333 mg, 2,75 mmol) se añadió. La reacción se calentó hasta 0 °C y se agitó durante 10 min. La reacción se diluyó con Et2O y se filtró a través de un lecho de 2*2 cm de gel de sílice, lavando con 50 ml adicionales de Et2O. El filtrado se concentró y se usó directamente en la siguiente etapa.
Ejemplo 57: (±)-W-(4-cianofenil)-2-((c/s)-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)pent-4-enamida
El intermedio 57A se hidrolizó en el ácido carboxílico empleando el procedimiento general E. El producto ácido se acopló con 4-cianoanilina empleando el procedimiento general O. El ejemplo 57 se obtuvo en forma de un sólido blanco después de cromatografía en columna (10 % al 30 % de 2-propanol en hexanos),RMN 1H (400 MHz; CDCh): 8 9,16 (s, 1H), 8,67 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,13-8,08 (m, 2H), 7,72 (dtd, J = 8,7, 3,4, 1,7 Hz, 3H), 7,61 (ddd, J = 8,4, 6,9, 1,4 Hz, 1H), 7,55-7,51 (m, 2H), 7,14 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 5,95-5,84 (m, 1H), 5,18 (dt, J = 16,3, 1,1 Hz, 1H), 5,13-5,10 (m, 1H), 3,50-3,49 (m, 1H), 2,69-2,68 (m, 1H), 2,48-2,41 (m, 2H), 2,23 (dt, J = 10,4, 0,3 Hz, 1H), 2,01-1,65 (m, 8H). Ejemplo 58
(R)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-A/-fenilpropanamida
Figure imgf000065_0002
Intermedio 58A: ácido (R)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil) propanoico
[0015] Intermedio 58A se puede preparar a partir de los procedimientos generales K, B, E, L, M y N. El procedimiento general L empleaba ácido 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)-ciclohexil)acético (mezcla de diastereómeros) y (Rj-2-feniloxazolidinona. El procedimiento general M empleaba el producto c/s y yodometano. El auxiliar se removió según el procedimiento general N. LC-MS Anal: m/z [M+H]+ 302,2. RMN1H (400 MHz; DMSO, d6): 812,10 (s, 1H), 8,70 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,07 (dd, J = 9,2, 5,9 Hz, 1H), 7,97-7,94 (m, 1H), 7,67-7,62 (m, 1H), 7,49 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 3,41-3,36 (m, 1H), 2,73-2,65 (m, 1H), 1,83-1,61 (m, 9H), 1,08 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
Ejemplo 58: (R)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-W-fenilpropanamida
El intermedio 58A ácido (R)-2-((1s,4S)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil) propanoico (10 mg, 0,033 mmol) se añadió a un vial y se extrajo en DMF (350 pl). Anilina (4,64 mg, 0,050 mmol) y Ha Tu (18,93 mg, 0,050 mmol) se añadieron seguido de DIPEA (17,39 pl, 0,100 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se diluyó con DMF para alcanzar un volumen total de 2 ml y se filtró. La muestra en bruto se purificó por medio de HPLC/MS preparativa para dar el ejemplo 58 (9,7 mg, 0,026 mmol, 78 %). LC-MS Anal. calc. para C24H25FN2O 376,20, experimental [M+H] 377,0 Tr = 1,969 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 9,96 (s, 1H), 8,82 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 9,2, 5,8 Hz, 1H), 7,93 (dd, J = 10,9, 2,5 Hz, 1H), 7,62 (td, J = 8,7, 2,6 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,25 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 6,99 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 2,83 (dd, J = 10,8, 6,7 Hz, 1H), 1,64-1,97 (m, 7H), 1,51-1,64 (m, 3H), 1,08 (d, J = 6,6 Hz, 3H)
Ejemplos 59 a 81
Figure imgf000066_0001
Los Ejemplos 59-81 se prepararon a partir del intermedio 58A según el procedimiento para el ejemplo 58 usando las correspondientes anilinas o arilaminas.
Tabla 1
Figure imgf000066_0002
continuación
Figure imgf000067_0001
continuación
Figure imgf000068_0002
Ejemplo 82
(R)-A/-(3-c¡ano-4-(tr¡fluoromet¡l)fen¡l)-2-((c/s)-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)propanam¡da
Figure imgf000068_0001
El ¡ntermed¡o 58A (15 mg, 0,050 mmol) se extrajo en tetrah¡drofurano (249 pl) y tr¡et¡lam¡na (13,88 pl, 0,100 mmol) se añad¡ó. La soluc¡ón se enfr¡ó hasta 0 °C. Carbonoclor¡dato de ¡sobut¡lo (10,20 mg, 0,075 mmol) se añad¡ó y la reacc¡ón se ag¡tó a 0 °C durante 10 m¡nutos antes de la ad¡c¡ón de 5-am¡no-2-(tr¡fluoromet¡l)benzon¡tr¡lo (12,97 mg, 0,070 mmol). Después de la ad¡c¡ón de la an¡l¡na, la reacc¡ón se dejó calentar hasta temperatura amb¡ente y se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche. Después de 16 horas, el 5-am¡no-2-(tr¡fluoromet¡l)benzon¡tr¡lo (12,97 mg, 0,070 mmol) se añad¡ó y la reacc¡ón se calentó hasta 50 °C durante 24 horas. La reacc¡ón luego se concentró al vacío, se d¡luyó con DMF (~2 ml), se f¡ltró y se pur¡f¡có por med¡o de HPLC preparat¡va para dar el ejemplo 82 (5,8 mg, 0,012 mmol, 25 %). LC-MS Anal. calc. para C26H23F4N3O 469,18, exper¡mental [M+H] 470,1 Tr = 2,219 m¡n (Método B). RMN1H (500 MHz, DMSO-da) 8: 10,69 (s. a., 1H), 8,79 (s. a., 1H), 8,38 (s. a., 1H), 8,05 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,95 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,60­ 7,71 (m, 1H), 7,44 (s. a., 1H), 2,39 (s. a., 1H), 1,83-2,00 (m, 3H), 1,60-1,83 (m, 3H), 1,27-1,60 (m, 4H), 1,15 (d, J = 6,2 Hz, 3H)
Ejemplo 83
(± )-N -(4 -c lo ro fe n ¡l)-2 -((fra n s )-4 -((7 -(tr¡f lu o ro m e t¡l)q u ¡n o l¡n -4 -¡l)o x ¡) c ¡c lo h e x ¡l)b u ta n a m ¡d a
Figure imgf000069_0001
Intermedio 83A: 2-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-iliden)acetato de etilo
Fosfonoacetato de triacetilo (21,79 ml, 109 mmol) se añadió a una suspensión de hidruro de sodio (3,84 g, 96 mmol) en THF (64,0 ml) y 0 °C. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de 30 minutos, la reacción se reenfrió hasta 0 °C y se añadió una solución de 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ona (10 g, 64,0 mmol) en 5 ml de THF. La reacción luego se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de neutralizar con agua. La mezcla se extrajo con DCM tres veces. Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo en bruto se purificó por medio de cromatografía sobre gel de sílice para dar el intermedio 83A (13,88 g, 61,3 mmol, 96 % de rendimiento). TLC: manchas de producto como mancha púrpura en anisaldehído (Rf = 0,75 en 1:1 Hex/EtOAc). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 5,65 (s, 1H), 4,13 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,92-3,99 (m, 4H), 2,94-3,02 (m, 2H), 2,31-2,40 (m, 2H), 1,71-1,79 (m, 4H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
Intermedio 83B: 2-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)acetato de etilo
[0016] ntermediario 83A (13,88 g, 61,3 mmol) se extrajo en EtOAc (61,3 ml) y se añadió a una botella de hidrogenación Parr con contenido de paladio sobre carbón al 10 % húmedo (1,306 g, 12,27 mmol) (54 % p/p agua) bajo una atmósfera de nitrógeno. La botella de reacción se purgó y se rellenó con nitrógeno tres veces y luego se purgó y se rellenó tres veces con hidrógeno. Después de rellenar la botella con hidrógeno hasta 344,738 kPa (50 psi), la botella se colocó en un agitador Parr y se agitó. Después de 4 horas, la reacción se filtró sobre CELITE® comprimido y se concentró al vacío para dar el intermedio 83B (13,78 g, 60,4 mmol, 98 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C12H20O4228,14, experimental [M+H] 299,1 Tr = 0,83 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 4,11 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,88-3,95 (m, 4H), 2,21 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,83 (dqd, J = 11,0, 7,5, 3,5 Hz, 1H), 1,68-1,78 (m, 4H), 1,50-1,61 (m, 2H), 1,27-1,35 (m, 2H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Intermedio 83C: 2-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)butanoato de etilo
Diisopropilamina (2,347 ml, 16,63 mmol) se extrajo en THF seco (15,99 ml) (bajo una atmósfera de N2) y se enfrió hasta -78 °C. n-BuLi (6,14 ml, 15,35 mmol) (2,5 M en hexanos) se añadió durante ~5 minutos a -78 °C. Después de agitar durante 45 minutos, la reacción se calentó hasta temperatura ambiente durante 10 minutos y se regresó hasta -78 °C. A continuación, 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona (1,541 ml, 12,79 mmol) se añadió seguido por una solución del intermedio 83B (2,92 g, 12,79 mmol) en THF (15,99 ml) (gota a gota durante ~5 minutos). Después de 1 hora, yodoetano (1,125 ml, 14,07 mmol) (puro) se añadió gota a gota durante ~5 minutos. La reacción se agitó durante otras 2 horas a -78 °C antes de calentar lentamente hasta temperatura ambiente. La reacción luego se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó vertiendo en 1:1 agua/salmuera y extrayendo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo en bruto se purificó por medio de cromatografía en columna de gel de sílice para dar el intermedio 83C (2,27 g, 8,86 mmol, 69 % de rendimiento). TLC: producto se tiñe como mancha púrpura en anisaldehído (Rf = 0,80 en 1:1 Hex/EtOAc). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 4,14 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 3,88-3,95 (m, 4H), 2,09 (td, J = 8,4, 5,6 Hz, 1H), 1,69-1,83 (m, 4H), 1,45-1,64 (m, 6H), 1,33-1,42 (m, 1H), 1,25 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 7,5 Hz, 3H)
Intermedio 83D: 2-(4-oxociclohexil)butanoato de etilo
El intermedio 83C (2,00 g, 7,80 mmol) se extrajo en THF (39,0 ml) y ácido clorhídrico, 1 M (39,0 ml) se añadió. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se concentró al vacío, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. El material en bruto se purificó en cromatografía en columna de gel de sílice para dar el intermedio 83D (1,47 g, 6,92 mmol, 89 % de rendimiento). TLC: el producto se tiñe de rosa claro en anisaldehído (Rf = 0,65 en 1:1 Hex/EtOAc). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 4,15 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,25-2,42 (m, 4H), 2,18 (ddd, J = 9,3, 7,8, 5.2 Hz, 1H), 2,10 (ddt, J = 13,1, 6,2, 3,3 Hz, 1H), 1,90-2,03 (m, 2H), 1,56-1,70 (m, 2H), 1,38-1,56 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0,89 (t, J = 7,4 Hz, 3H)
Intermedio 83E: 2-((frans)-4-hidroxiciclohexil)butanoato de etilo
El intermedio 83D (1,47 g, 6,92 mmol) se disolvió en EtOH (13,85 ml) y enfriado hasta 0 °C. NaBH4 (0,314 g, 8,31 mmol) se añadió y la reacción luego se dejó agitar a 0 °C durante 1 hora. La reacción se neutralizó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. El material en bruto se purificó por medio de cromatografía en columna de gel de sílice para dar el intermedio 83E (1,22 g, 5,69 mmol, 82 % de rendimiento) junto con (138 mg, 0,644 mmol, 9,30 % de rendimiento) del isómero cis. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 4,14 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,53 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 1,92-2,08 (m, 2H), 1,80-1,89 (m, 1H), 1,63-1,70 (m, 1H), 1,52-1,62 (m, 4H), 1,37-1,52 (m, 2H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,95-1,17 (m, 2H), 0,87 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
Intermedio 83F: 2-((frans)-4-((7-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanoato de etilo
El intermedio 83E (100 mg, 0,467 mmol) se extrajo en DMSO (933 pl) y NaH (22,40 mg, 0,933 mmol) se añadió lentamente, en porciones a temperatura ambiente. Después de 1 hora, 4-cloro-7-(trifluorometil)quinolina (130 mg, 0,560 mmol) se añadió y la reacción se calentó hasta 80 °C. Después de 16 horas, la reacción se neutralizó con cloruro de amonio y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato de sodio, se filtraron, se concentraron al vacío. El residuo en bruto se purificó por medio de cromatografía en columna de gel de sílice para dar el intermedio 83F (91 mg, 0,222 mmol, 47,6 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C22H26F3NO3409,19, experimental [M+H] 410,2 Tr = 0,91 min (Método A).
Intermedio 83G: ácido 2-((frans)-4-((7-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanoico
El intermedio 83F (91 mg, 0,222 mmol) se extrajo en THF (889 pl), agua (889 pl) y MeOH (445 pl). Hidróxido de litio (53,2 mg, 2,223 mmol) se añadió y la reacción se agitó a 60 °C durante 40 horas. La reacción se concentró al vacío, se diluyó con agua, ácido acético se añadió (se forma un precipitado), la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar el intermedio 83G (85 mg, 0,223 mmol, 100 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C20H22F3NO3381,16, experimental [M+H] 382,2 Tr = 0,78 min (Método A).
Ejemplo 83: N-(4-clorofenil)-2-((frans)-4-((7-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanamida
El intermedio 83G (41 mg, 0,108 mmol) se colocó bajo una atmósfera de nitrógeno y se extrajo en SOCh (78 pl, 1,075 mmol). 1 gota de DMF anhidra se añadió y la mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla luego se concentró al vacío y se coevaporó con tolueno, al vacío, se usó para remover el cloruro de tionilo restante. El cloruro de acilo en bruto se disolvió en DCM (1075 pl) bajo una atmósfera de nitrógeno y TEA (74,9 pl, 0,538 mmol) se añadió seguido por 4-cloroanilina (20,57 mg, 0,161 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reacción se concentró al vacío, se extrajo en DMF, se filtró y se purificó por medio de HPLC preparativa para dar el ejemplo 83 (14,4 mg, 0,029 mmol, 27 % de rendimiento). l C-MS Anal. calc. para C26H26CF3N2O2 490,16, experimental [M+H] 491,2 Tr = 0,94 min (Método A). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 10,07 (s, 1H), 8,82 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,80 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 4,66 (t, J = 10,1 Hz, 1H), 2,10-2,27 (m, 3H), 1,97 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 1,73 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 1,41-1,65 (m, 5H), 1,28-1,41 (m, 1H), 1,21 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 0,85 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
Enantiómero 1 y Enantiómero 2
Enantiómero 1: Ejemplo 83 (a) N-(4-clorofenil)-2-((frans)-4-((7-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)-2-butanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000070_0001
Enantiómero 2: Ejemplo 83 (b) N-(4-clorofenil)-2-((frans)-4-((7-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)-2-butanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000071_0001
Ejemplo 83(a), enantiómero 1 y el ejemplo 83(b), enantiómero 2: la separación quiral de la muestra racémica (Método C) dio el enantiómero 1 Tr = 3,611 min (Método D) y el enantiómero 2 Tr = 5,106 min (Método D) La estereoquímica absoluta no se determinó.
Ejemplo 83(a), enantiómero 1: MS(ES): m/z = 491,1 [M+H]+. Tr = 2,529 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8: 10,14 (s, 1H), 8,78 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,79 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,21 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,61 (s. a., 1H), 2,06-2,23 (m, 3H), 1,94 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 1,69 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,36-1,62 (m, 5H), 1,30 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 1,11-1,26 (m, 1H), 0,81 (t, J = 7,1 Hz, 3H)
Ejemplo 83(b), enantiómero 2: MS(ES): m/z = 491,1 [M+H]+. Tr = 2,545 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 10,13 (s, 1H), 8,78 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,79 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,22 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 4,62 (s. a., 1H), 2,08-2,25 (m, 3H), 1,95 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 1,70 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 1,39-1,62 (m, 5H), 1,30 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 1,18 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 0,81 (t, J = 7,1 Hz, 3H)
Ejemplo 84
(±)-W-(4-dorofenil)-2-((frans)-4-((2-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ddohexil)butanamida
Figure imgf000071_0002
Ejemplo 84: (±)-W-(4-dorofenil)-2-((frans)-4-((2-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ddohexil)butanamida
El ejemplo 84 se preparó a partir del intermedio 83E y los procedimientos análogos destacados para preparar 83F, 83G y el ejemplo 83 excepto porque 4-doro-2-(trifluorometil)quinolina se usó en la parte F. LC-Ms Anal. calc. para C26H26CF3N2O2490,16, experimental [M+H] 491,2 Tr = 1,20 min (Método A). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 10,07 (s, 1H), 8,20 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,84-7,91 (m, 1H), 7,63-7,74 (m, 3H), 7,48 (s, 1H), 7,35 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 4,79-4,90 (m, 1H), 2,10-2,27 (m, 3H), 1,96 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 1,72 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,44-1,63 (m, J = 7,6 Hz, 5H), 1,32-1,42 (m, 1H), 1,20-1,32 (m, 1H), 0,85 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
Ejemplo 85
(± )-N -(4 -d o ro fe n il) -2 -(( fra n s )-4 -(q u in o lin -4 - ilo x i)d d o h e x il)b u ta n a m id a
Figure imgf000072_0001
Ejemplo 85: (±)-W-(4-dorofeml)-2-((frans)-4-(qumol¡n-4-¡lox¡)ddohex¡l)butanam¡da
[0017] Ejemplo 85 se preparó a part¡r del ¡ntermed¡o 83E y los proced¡m¡entos análogos destacados para preparar 83F, 83G y el ejemplo 83 excepto porque 4-bromo-qu¡nol¡na se usó en la parte F. LC-MS Anal. calc. para C25H27ClN2O2 422,18, exper¡mental [M+H] 423,2 Tr = 0,87 m¡n (Método A). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8: 10,14 (s, 1H), 8,65 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,72 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,54 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,06 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 4,58 (t, J = 10,1 Hz, 1H), 2,08-2,26 (m, 3H), 1,95 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 1,70 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 1,39-1,66 (m, 5H), 1,31 (q, J = 11,9 Hz, 1H), 1,10-1,25 (m, J = 12,4 Hz, 1H), 0,82 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Ejemplo 86
N-(4-dorofeml)-2-((frans)-4-((8-(trifluoromet¡l)qumol¡n-4-¡l)ox¡)ddohex¡l)butanam¡da
Figure imgf000072_0002
El ejemplo 86 se preparó a part¡r del ¡ntermed¡o 83E y los proced¡m¡entos análogos destacados para preparar 83F, 83G y el ejemplo 83 excepto porque la 4-cloro-8-(tr¡fluoromet¡l)qu¡nol¡na se usó en la parte F. LC-Ms Anal. calc. para C26H26CF3N2O2490,16, exper¡mental [M+H] 491,2 Tr = 1,03 m¡n (Método A). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 10,13 (s, 1H), 8,77 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,58-7,67 (m, 3H), 7,33 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,19 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,61 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 2,08-2,24 (m, 3H), 1,94 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,69 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 1,37-1,63 (m, 5H), 1,24-1,37 (m, J = 12,5 Hz, 1H), 1,11-1,24 (m, J = 11,1 Hz, 1H), 0,81 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
Ejemplo 87
Ác¡do 2-(4-((R)-3-((4-dorofeml)am¡no)-2-((c/s)-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)ddohex¡l)-3-oxoprop¡l)fen¡l)propano¡co
Figure imgf000072_0003
Ejemplo 87: ác¡do 2-(4-((R)-3-((4-dorofeml)am¡no)-2-((c/s)-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)ddohex¡l)-3 oxopropil)fenil)propanoico
El ejemplo racémico 87 se puede preparar utilizando los procedimientos generales K con 4-cloroquilina, B, E y L seguido por alquilación con el intermedio 137A usando el procedimiento para preparar 137B seguido por los procedimientos análogos para los intermedios 137C, D y el ejemplo 137.
Enantiómero 1 y Enantiómero 2
Enantiómero 1: Ejemplo 87(a) ácido 2-(4-((R)-3-((4-clorofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)-2-propanoico (homoquiral, estereoquímica no determinada)
Figure imgf000073_0001
Enantiómero 2: Ejemplo 87(b) ácido 2-(4-((R)-3-((4-clorofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)-2-propanoico (homoquiral, estereoquímica no determinada)
Figure imgf000073_0002
Ejemplo 87 (a) enantiómero 1 y ejemplo 87(b) enantiómero 2: la separación quiral de la muestra racémica (Método E) dio el enantiómero 1 Tr = 10,161 min (Método F) y el enantiómero 2 Tr = 13,160 min (Método F) La estereoquímica absoluta no se determinó.
Ejemplo 87 (a) enantiómero 1: MS(ES): m/z = 541,3 [M+H]+. Tr = 0,84 min (Método A). RMN1H (400 MHz, cloroformod) 8: 8,78 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,09 (m, 2H), 7,69 (ddd, J = 8,4, 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,58 (ddd, J = 8,4, 7,0, 1,1 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,11-7,20 (m, 8H), 6,91 (s, 1H), 3,72-3,78 (m, 1H), 3,02 (dd, J = 13,2, 3,4 Hz, 1H), 2,79-2,89 (m, J = 13,0 Hz, 1H), 2,62 (td, J = 10,8, 3,5 Hz, 1H), 2,28-2,37 (m, 1H), 1,71-2,15 (m, 9H), 1,40 (d, J = 7,1 Hz, 3H) Ejemplo 87(b) enantiómero 2: MS(ES): m/z = 541,3 [M+H]+. Tr = 0,84 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, cloroformod) 8: 8,82 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,05-8,14 (m, 2H), 7,70 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,58 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,2 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 7,09-7,20 (m, 8H), 6,78 (s, 1H), 3,72-3,77 (m, 1H), 3,02 (dd, J = 13,1, 3,5 Hz, 1H), 2,83 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 2,61 (td, J = 10,9, 3,5 Hz, 1H), 2,29-2,37 (m, 1H), 1,72-2,16 (m, 9H), 1,40 (d, J = 7,2 Hz, 3H) Ejemplo 88
(± )-W -(4 -c lo ro fe n il)-2 -((c /s )-4 -((2 -(tr if lu o ro m e til)q u in o lin -4 -il)o x i)c ic lo h e x il)b u ta n a m id a
Figure imgf000074_0001
Intermedio 88A: 2-((c/s)-4-((2-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)cidohexil)butanoato de etilo
El intermedio 83E (300 mg, 1,400 mmol) se disolvió en THF (5600 |jl) y 2-(trifluorometil)quinolin-4-ol (656 mg, 3,08 mmol) y trifenilfosfina (808 mg, 3,08 mmol) se añadieron. La solución se enfrió hasta 0 °C en un baño de hielo. Azodicarboxilato de diisopropilo (599 jl, 3,08 mmol) se añadió y la reacción se dejó agitar a temperatura ambiente una vez completa la adición. Se agitó a temperatura ambiente durante la noche. A continuación, la reacción se concentró al vacío y se purificó por medio de cromatografía en columna de gel de sílice para dar el intermedio 88A (383 mg, 0,935 mmol, 66,8 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C22H26F3NO3409,l9, experimental [M+H] 410,2 Tr = 1,22 min (Método A).
Intermedio 88B: ácido 2-((c/s)-4-((2-(Trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanoico
El intermedio 88A (383 mg, 0,935 mmol) se extrajo en THF (748 jl), agua (748 j l) y MeOH (374 jl). Hidróxido de litio (224 mg, 9,35 mmol) se añadió y la reacción se agitó a 60 °C durante la noche. Después de 16 horas, más hidróxido de litio (224 mg, 9,35 mmol) se añadió y la reacción se calentó durante otras 24 horas. La reacción se concentró al vacío, se diluyó con agua, se acidificó con AcOH y se extrajo con EtOAc. La capa acuosa se extrajo otra vez con 7:3 cloroformo:propanol. Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar el intermedio 88B (348 mg, 0,912 mmol, 98 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C20H22F3NO3381,16, experimental [M+H] 382,3 Tr = 1,04 min (Método A).
Ejemplo 88: W-(4-clorofenil)-2-((c/s)-4-((2-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanamida
El intermedio 88B (50 mg, 0,131 mmol) se colocó bajo una atmósfera de nitrógeno y se extrajo en SOCh (96 jl, 1,311 mmol). 1 gota de DMF anhidra se añadió y la mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla luego se concentró al vacío y se coevaporó con tolueno, al vacío, se usó para remover el cloruro de tionilo restante. El cloruro de acilo en bruto se disolvió en DCM (1311 jl) bajo una atmósfera de nitrógeno y TEA (91 jl, 0,655 mmol) se añadió seguido por 4-cloroanilina (25,09 mg, 0,197 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reacción se concentró al vacío, se extrajo en DMF, se filtró y se purificó por medio de HPLC preparativa para dar el ejemplo 88 (38,0 mg, 0,077 mmol, 59 %). LC-MS Anal. calc. para C26H26CF3N2O2490,16, experimental [M+H] 491,2 Tr = 1,18 min (Método A). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 10,09 (s, 1H), 8,21 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,36 (s, 1H), 7,32 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,13 (s. a., 1H), 2,17 (s. a., 1H), 2,03 (s. a., 2H), 1,60-1,78 (m, 4H), 1,46-1,60 (m, 4H), 1,34-1,46 (m, 1H), 0,81 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
Enantiómero 1 y Enantiómero 2
Enantiómero 1: Ejemplo 88 (a) W-(4-clorofenil)-2-((c/s)-4-((2-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000075_0001
Enantiómero 2: Ejemplo 88(b) W-(4-dorofeml)-2-((c/s)-4-((2-(tr¡fluoromet¡l)qumol¡n-4-¡l)ox¡)ddohex¡l)butanam¡da (homoquiral, estereoquím¡ca absoluta no determ¡nada)
Figure imgf000075_0002
Ejemplo 88(a) enant¡ómero 1 y ejemplo 88(b) enant¡ómero 2: la separac¡ón qu¡ral de la muestra racém¡ca (Método G) d¡o el enant¡ómero 1 Tr = 3,911 m¡n (Método H) y el enant¡ómero 2 Tr = 4,551 m¡n (Método H) La estereoquímica absoluta no se determ¡nó.
Ejemplo 88(a), enant¡ómero 1: MS(ES): m/z = 491,3 [M+H]+. Tr = 2,549 m¡n (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8: 10,05 (s, 1H), 8,22 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,88 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,33 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,15 (s. a., 1H), 2,19 (s. a., 1H), 2,04 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 1,35-1,78 (m, 9H), 0,83 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
Ejemplo 88(b), enant¡ómero 2: MS(ES): m/z = 491,3 [M+H]+. Tr = 2,541 m¡n (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8: 10,05 (s, 1H), 8,21 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,87 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,67 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,37 (s, 1H), 7,33 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,15 (s. a., 1H), 2,18 (s. a., 1H), 1,98-2,10 (m, J = 5,0 Hz, 2H), 1,36-1,80 (m, 9H), 0,83 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
Ejemplo 89
(±)-W-(4-dorofeml)-2-((c/s)-4-((6-(tr¡fluoromet¡l)qumol¡n-4-¡l)ox¡)ddohex¡l)butanam¡da
Figure imgf000075_0003
Ejemplo 89: (±)-W-(4-dorofeml)-2-((c/s)-4-((6-(tr¡fluoromet¡l)qu¡nol¡n-4-¡l)ox¡)ddohex¡l)butanam¡da
El ejemplo 89 se preparó a partir del intermedio 83E y los procedimientos análogos destacados para preparar 88F, 88G y el ejemplo 88 excepto porque 4-hidroxi-6-(trifluorometil)quinolina se usó en la parte F. LC-Ms Anal. calc. para C26H26CF3N2O2490,16, experimental [M+H] 491,3 Tr = 0,90 min (Método A). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8: 10,06 (s, 1H), 8,83 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,14 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,98 (s. a., 1H), 2,22 (s. a., 1H), 2,05 (s. a., 2H), 1,72 (d, J = 13,1 Hz, 4H), 1,46-1,62 (m, 4H), 1,41 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 0,83 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
Enantiómero 1 y Enantiómero 2
Enantiómero 1: Ejemplo 89(a) W-(4-clorofenil)-2-((c/s)-4-((6-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000076_0001
Enantiómero 2: Ejemplo 89(b) W-(4-clorofenil)-2-((c/s)-4-((6-(trifluorometil)quinolin-4-il)oxi)ciclohexil)butanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000076_0002
Ejemplo 89(a) enantiómero 1 y ejemplo 89(b) enantiómero 2: la separación quiral de la muestra racémica (Método I) dio el enantiómero 1 Tr = 6,320 min (Método J) y el enantiómero 2 Tr = 7,500 min (Método J) La estereoquímica absoluta no se determinó.
Ejemplo 89(a), enantiómero 1: MS(ES): m/z = 491,3 [M+H]+. Tr = 2,418 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 10,05 (s, 1H), 8,82 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,13 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,97 (s. a., 1H), 2,22 (s. a., 1H), 2,04 (s. a., 2H), 1,34­ 1,79 (m, 9H), 0,83 (t, J = 7,2 Hz, 3H)
Ejemplo 89(b), enantiómero 2: MS(ES): m/z = 491,3 [M+H]+. Tr = 2,418 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8: 10,06 (s, 1H), 8,84 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,14 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,98 (s. a., 1H), 2,23 (s. a., 1H), 2,01-2,11 (m, J = 5,4 Hz, 2H), 1,37-1,79 (m, 9H), 0,84 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 90
N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)acetamida
Figure imgf000077_0001
Intermedio 90A. 4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo e intermedio 90B. 4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo
Una solución de 4-hidroxipiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (0,242 g, 1,200 mmol) en 1 ml de dioxano se trató con hexametildisilazida de potasio (1,200 ml, 1,200 mmol) en THF. La solución turbia resultante se agitó 5 min. a temperatura ambiente, luego se trató con 4-cloro-6-fluoroquinolina (0,182 g, 1 mmol) en 1 ml de dioxano. La reacción se llevó a 60 °C y se agitó durante 30 min, luego durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con 0,1 ml de HOAc glacial y se cromatografió sobre gel de sílice (3:1 diclorometano-EtOAc, luego EtOAc, luego 95:5 EtOAc-EtOH). La concentración de las fracciones apropiadas (alto Rf) dio el intermedio 90A: 4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1 -carboxilato de terc-butilo (0,11 g, 30 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro. MS(ES): m/z = 363 [M+H]+. tR = 0,93 min (Método A). La concentración de las fracciones de Rf bajo dio el intermedio 90B: 4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (0,09 g, 26 % de rendimiento) en forma de un aceite amarillo pálido. MS(ES): m/z = 347 [M+H]+. tR = 0,77 min (Método A).
Intermedio 90C. 4-cloro-6-(piperidin-4-iloxi)quinolina
Una mezcla del intermedio 90A (0,1 g, 0,276 mmol) en HCl/dioxano (1,033 ml, 4,13 mmol) se agitó a temperatura ambiente. El material de partida se engrasó sobre el vidrio después de la adición de HCl. No se disolvió incluso después de sonicación, de modo que se añadieron ~0,5 ml de diclorometano y esta mezcla se agitó durante 3 horas. Durante este tiempo, la disolución del aceite parece haber ocurrido y se formó un precipitado blanco. La reacción se bombeó hasta sequedad para obtener 0,08 g (97 %) del intermedio 90C, HCl en forma de un polvo blanquecino. MS(ES): m/z = 263 [M+H]+. tR = 0,50 min (Método A).
Intermedio 90D. 2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)acetato de etilo
Una suspensión de 4-cloro-6-(piperidin-4-iloxi)quinolina, HCl (0,06 g, 0,201 mmol) y carbonato de potasio (0,097 g, 0,702 mmol) en DMF (0,5 ml) se trató con bromoacetato de etilo (0,045 ml, 0,401 mmol) y la mezcla resultante se agitó 4 horas a temperatura ambiente. Esta mezcla se neutralizó con HOAc glacial y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (1:1 EtOAc-CH2Ch hasta EtOAc). La concentración de las fracciones apropiadas del intermedio 90D en forma de un aceite incoloro. MS(ES): m/z = 349 [M+H]+. tR = 0,56 min (Método A).
Intermedio 90E. Ácido 2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)acético, 2 HCl
Una solución de 0,04 g del intermedio 90D en THF (2 ml) se trató con hidróxido de litio (0,04 g, 1,670 mmol) en agua (1 ml). Metanol, ~1 ml, se añadió para dar una fase simple y la reacción se agitó 2 horas a temperatura ambiente. El solvente se removió bajo una corriente de nitrógeno y la suspensión resultante se trató con ~3 ml de agua para disolver. HCl acuoso se añadió lentamente, finalmente llevando el pH de la solución hasta ~4, pero el producto no precipitó en ningún punto. El pH se llevó hasta ~7,5 con bicarbonato de sodio acuoso. Se añadió salmuera, pero aún no precipitó. Esta solución se extrajo seis veces con 3:1 cloroformo-IPA y los extractos orgánicos combinados se destilaron para obtener un aceite. Este se trató con 5 eq. de HCl/dioxano y se añadió gota de agua hasta disolver. Esta solución luego se liofilizó para obtener el intermedio 90e (0,04 g, 92 %) en forma de un sólido marrón verdoso. MS(ES): m/z = 321 [M+H]+. tR = 0,48 min (Método A).
Ejemplo de referencia 90. N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)acetamida
Una solución del intermedio 90E (0,04 g, 0,102 mmol) y 4-cloroanilina (0,014 g, 0,112 mmol) y trietilamina (0,057 ml, 0,406 mmol) en DMF (1 ml) se trató con BOP (0,067 g, 0,152 mmol). Esta solución se agitó durante 2 h a temperatura ambiente, luego se purificó por HPLC prep. La concentración de la fracción apropiada dio el material con una pureza de ~90 %. Este material luego se purificó por cromatografía ultrarrápida. La concentración de las fracciones apropiadas, luego la liofilización dio como resultado el ejemplo 90 (0,016 g, 36 % de rendimiento) en forma de un polvo blanco. MS(ES): m/z = 430 [M+H]+. tR = 0,73 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 89,88 (s, 1H), 8,69 (d, 1H, J = 4,7 Hz), 8,04 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 7,69-7,74 (m, 3H), 7,57 (dd, 1H, J = 9,2, 2,8 Hz), 7,50 (d, 1H, J = 2,7 Hz), 7,36-7,39 (m, 2H), 4,69-4,76 (m, 1H), 3,19 (s, 2H), 2,78-2,86 (m, 2H), 2,06-2,13 (m, 2H), 1,81-1,89 (m, 2H). Nota: una señal a ~2,55 ppm está muy oscurecida por solvente.
Ejemplo de referencia 91
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida
Figure imgf000078_0001
Intermedio 91A. 2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanoato de (±)-etilo
2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanoato de (±)-etilo se preparó en forma de un aceite amarillo pálido en 97 % de rendimiento de 90C y 2-bromopropionato de etilo usando el procedimiento para la conversión de 90c a 90D excepto porque la reacción se llevó a cabo a 60 °C y no se llevó a cabo una cromatografía. MS(ES): m/z = 363 [M+H]+. tR = 0,58 min (Método A).
Intermedio 91B. Ácido (±)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanoico
[0018] (±)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanoico se preparó en forma de una espuma blanquecina en 93 % de rendimiento de 91A usando el procedimiento para la conversión de 90D a 90E excepto porque el material aislado no se convirtió en la sal de HCl. m S(ES): m/z = 335 [M+H]+. tR = 0,49 min (Método A).
Ejemplo de referencia 91. (±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida se preparó en forma de la sal de trifluoroacetato en 57 % de rendimiento después de la purificación por HPLC preparativa a partir de 91B usando el procedimiento para la conversión de 90E en el ejemplo de referencia 90. MS(ES): m/z = 444 [M+H]+. tR = 0,73 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 10,83 (s, 1H), 8,69 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 8,07 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 7,73 (d, 1H, J = 4,2 Hz), 7,59-7,65 (m, 3H), 7,56 (s, 1H), 7,49 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 4,63-4,67 (m, 1H), 3,10-3,70 (m, 5H), 2,01­ 2,39 (m, 4H), 1,66 (d, 3H, J = 6,7 Hz).
Ejemplo de referencia 92
(±)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)-N-(p-tolil)propanamida
Figure imgf000078_0002
Ejemplo de referencia 92. (±)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)-N-(p-tolil)propanamida
(±)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)-N-(p-tolil)propanamida se preparó como la sal de HCl en 77 % de rendimiento después de la purificación por HPLC preparativa e intercambio de sal a partir de 91B y p-toluidina usando el procedimiento para la conversión de 90E en el ejemplo de referencia 90. MS(ES): m/z = 424 [M+H]+. tR = 0,71 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 611,02 (s, no integrado), 10,91 (s, no integrado), 10,72 (s. a, no integrado), 10,57 (s. a, no integrado), 8,78 (s, 1H), 8,13 (t, 1H, J = 9,8 Hz), 7,83 (s, 1H), 7,52-7,70 (m, 4H), 7,19 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 4,27-4,35 (m, 1H), 3,25-3,77 (m, 5H), 1,96-2,41 (m, 7H), 1,62 (d, 3H, J = 5,1 Hz).
Enantiómero 1 y enantiómero 2 del ejemplo de referencia racémico 91
Enantiómero 1: Ejemplo de referencia 93 N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no se determinó)
Figure imgf000079_0001
Enantiómero 2: Ejemplo de referencia 94 N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no se determinó)
Figure imgf000079_0002
Ejemplos de referencia 93 y 94. N-(4-clorofenil)-2-(4-((4-cloroquinolin-6-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida (ambos enantiómeros, estereoquímica absoluta no asignada)
El material del ejemplo de referencia racémico 91 (0,038 g) se purificó por SFC quiral (27 % de MeOH en CO2, 0,1 % (v/v) cada uno de dietilamina y formiato de amonio) columna CHIRALPAK® AD, 85 ml/min.) La concentración de la fracción apropiada (elución anterior) dio como resultado:
Ejemplo de referencia 93 (enantiómero 1, eluido primero, la estereoquímica absoluta no se determinó) (0,007 g, 23 %). MS(ESI): m/z = 444 [M+H]+. tR = 1,28 min (SCP TFA). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 88,65 (d, 1H, J = 4,5 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 7,69 (d, 1H, J = 4,5 Hz), 7,64 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,54 (a. d, 1H, J = 9,3 Hz), 7,47 (s. a, 1H), 7,37 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 4,68-4,75 (m, 1H), 3,56-3,0 (m, 5H), 2,06-2,15 (m, 2H), 1,80-1,90 (m, 2H), 1,24-1,32 (m, 3H). Ejemplo de referencia 94 (enantiómero 2, segundo eluido, estereoquímica absoluta no se determinó) (0,027 g). MS(ESI): m/z = 444 [M+H]+. tR = 1,27 min (Método K). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): esencialmente igual al racemato RMN (un poco de dietilformiato de amonio está presente.).
Ejemplo de referencia 95
N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)acetamida
Figure imgf000080_0001
Intermedio 95A. 6-fluoro-4-(piperidin-4-iloxi)quinolina, 2 HCl
6-fluoro-4-(piperidin-4-iloxi)quinolina, 2 HCl se preparó a partir de 90B en rendimiento cuantitativo como un sólido castaño usando las condiciones para la conversión de 90A a 90C. MS(ES): m/z = 247 [M+H]+. tR = 0,42 min (Método A).
Intermedio 95B. 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)acetato de etilo
El 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)acetato de etilo se preparó en 63 % de rendimiento en forma de un aceite amarillo pálido a partir de 95A usando las condiciones para la conversión de 90C a 90D. MS(ES): m/z = 333 [M+H]+. tR = 0,48 min (Método A).
Intermedio 95C. Ácido 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)acético
[0019] 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)acético se preparó en 75 % de rendimiento en forma de un vidrio amarillo de 95B usando las condiciones para la conversión de 90d a 90E excepto porque el material aislado no se convirtió en la sal de HCl. MS(ES): m/z = 305 [M+H]+. tR = 0,42 min (Método A).
Ejemplo de referencia 95. N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)acetamida
N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)acetamida se preparó en 38 % de rendimiento de 95C usando las condiciones para la conversión de 90e en el ejemplo 90. MS(ES): m/z = 414 [M+H]+. tR = 0,66 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 88,68 (d, 1H, J = 5,1 Hz), 8,04 (dd, 1H, J = 9,0, 5,2 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 7,63-7,68 (m, 3H), 7,36 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,13 (d, 1H, J = 5,0 Hz), 4,81-4,87 (m, 1H), 3,69 (s, 2H), 2,80-2,88 (m, 2H), 2,58-2,67 (m, 2H), 2,07-2,14 (m, 2H), 1,89-1,98 (m, 2H).
Ejemplo de referencia 96
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida
Figure imgf000080_0002
Intermedio 96A. 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)propanoato de (±)-etilo
2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)propanoato de (±)-etilo se preparó en forma de un aceite incoloro en 83 % de rendimiento de 95A y 2-bromopropionato de etilo usando el procedimiento para la conversión de 90C a 90D. MS(ES): m/z = 347 [M+H]+. tR = 0,51 min. (Método A).
Intermedio 96B. Ácido (±)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)propanoico
[0020] (±)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)propanoico se preparó como un vidrio en 68 % de rendimiento de 96A usando el procedimiento para la conversión de 90D a 90E excepto porque el material aislado no se convirtió en la sal de HCl. MS(ES): m/z = 319 [M+H]+. tR = 0,42 min. (Método A).
Ejemplo de referencia 96. (±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)propanamida se preparó en 58 % de rendimiento después de la purificación por HPLC preparativa a partir de 96b usando el procedimiento para la conversión de 90E en el ejemplo 90. MS(ES): m/z = 428 [M+H]+. tR = 0,72 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 89,97 (s, 1H), 8,69 (d, 1H, J = 5,4 Hz), 8,02 (dd, 1H, J = 9,8, 5,4 Hz), 7,77 (dd, 1H, J = 9,7, 2,8 Hz), 7,71 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,64­ 7,68 (m, 1H), 7,37 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,15 (d, 1H, J = 5,2 Hz), 4,78-4,85 (m, 1H), 2,77-2,87 (m, 2H), 2,57-2,63(m, 1H), 2,06-2,14 (m, 2H), 1,85-1,94 (m, 2h ), 1,22 (d, 3H, J = 6,8 Hz). Nota: una señal está muy oscurecida por solvente. Ejemplos de referencia 97 a 101
Intermedio 97A: 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)butanoato de (±)-etilo
2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)butanoato de (±)-etilo se preparó en forma de un aceite incoloro en 71 % de rendimiento de 95A y 2-bromobutirato de etilo usando el procedimiento para la conversión de 90C a 90D excepto porque la reacción se corrió a 50 °C MS(ES): m/z = 361 [M+H]+. tR = 0,54 min. (Método A).
Intermedio 97B: ácido (±)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)butanoico
Ácido (±)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)butanoico se preparó en forma de una espuma de color paja en 74 % de rendimiento de 97A usando el procedimiento para la conversión de 90D a 90E excepto porque el material aislado no se convirtió en la sal de HCl. Ms (ES): m/z = 333 [M+H]+. tR = 0,44 min. (Método A).
Ejemplos de referencia 97 a 101:
El acoplamiento de Bop (Esquema 1, a continuación) de ácidos carboxílicos x (Intermedios 96B y 97B preparados en los ejemplos precedentes) con las anilinas apropiadas en las condiciones descritas para la conversión de 90E en el ejemplo de referencia 90 da como resultado los compuestos mostrados en la siguiente tabla 2. (todas las entradas son racémicas.)
Esquema 1
Figure imgf000081_0001
Tabla 2
Figure imgf000081_0002
Ejemplo de referencia 102
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)-3-metilbutanamida
Figure imgf000082_0001
102A. 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)-3-metilbutanoato de (±)-etilo
(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)-3-metilbutanoato de (±)-etilo se preparó en forma de un aceite amarillo pálido en 59 % de rendimiento de 95A y 2-bromo-3-metilbutirato de etilo usando el procedimiento para la conversión de 90C en 90D excepto porque la reacción se ejecutó a 90 °C MS(ES): m/z = 375 [M+H]+. tR = 0,60 min. (Método A).
102B. Ácido (±)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)-3-metilbutanoico
Ácido (±)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)-3-metilbutanoico se preparó en forma de un sólido blanquecino en 77 % de rendimiento de 102A usando el procedimiento para la conversión de 90D en 90E excepto porque la reacción se ejecutó durante varios días a 75 °C y el material aislado no se convirtió en la sal de HCl. MS(ES): m/z = 347 [M+H]+. tR = 0,47 min. (Método A).
Ejemplo de referencia 102. (±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)-3-metilbutanamida
Una solución de ácido 2-(4-((6-fluoroquinolin-4-il)oxi)piperidin-1-il)-3-metilbutanoico (0,02 g, 0,058 mmol) y N-metilmorfolina (0,013 ml, 0,115 mmol) en THF (0,2 ml) se enfrió hasta 0 °C y se trató con cloroformiato de isobutilo (9,10 |jl, 0,069 mmol). Esta mezcla se agitó 15 min., luego se trató con 4-cloroanilina (8,84 mg, 0,069 mmol) y se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 1 h. La reacción se neutralizó por adición de 1 gota de agua, se diluyó con DMF y se purificó por HPLC prep. La concentración de la fracción apropiada dio como resultado el ejemplo de referencia 102, 2 TFA (0,005 g, 13 % de rendimiento) en forma de un polvo blanco. MS(ES): m/z = 456 [M+H]+. tR = 0,82 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 10,94 (s. a, 1H), 9,96 (s. a, 1H), 8,02-8,19 (m, 3H), 7,82-7,91 (m, 1H), 7,67 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 7,44 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 2,01-2,37 (m, 5H), 1,10 (d, 6H, J = 5,3 Hz). Nota: varias señales oscurecidas por gran pico de agua.
Ejemplos de referencia 103 a 112
La SFC quiral (Esquema 2, a continuación) de los materiales racémicos (preparados en los ejemplos precedentes) con las columnas indicadas en las condiciones (MeOH-CO2) descritas para la resolución del ejemplo de referencia 91 en sus enantiómeros componentes ejemplo de referencia 93 y ejemplo de referencia 94 da como resultado compuestos homoquirales mostrados en la siguiente tabla 2. (todas las entradas son homoquirales, estereoquímica absoluta no determinada)
Esquema 2
Figure imgf000082_0002
enantiómero eluido enantiómero eluido
Tabla 3
Figure imgf000083_0002
Ejemplo de referencia 113
W-(4-clorofen¡l)-2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetam¡da
Figure imgf000083_0001
Una soluc¡ón de 2-(p¡per¡d¡n-4-¡l)acetato de met¡lo, HCl (0,465 g, 2,400 mmol) y tr¡et¡lam¡na (0,892 ml, 6,40 mmol) en 1 ml de DMF se trató con 4-(cloromet¡l)qu¡nol¡na, HCl (0,428 g, 2 mmol). La soluc¡ón resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 3 horas, luego se d¡luyó con EtOAc. Los extractos orgán¡cos se lavaron luego con agua, se secaron, se f¡ltraron y se dest¡laron para obtener 2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetato de met¡lo (0,54 g, 86 % de rend¡m¡ento) en forma de un ace¡te ámbar. MS(ES): m/z = 299 [M+H]+. tR = 0,48 m¡n (Método A).
Intermed¡o 113B. Ác¡do 2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acét¡co
Una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 113A (0,1 g, 0,335 mmol) en THF (1 ml) se trató con h¡dróx¡do de l¡t¡o acuoso (0,268 ml, 0,670 mmol) segu¡do por 0,2 ml de agua. Metanol, ~0,5 ml, se añad¡ó para dar una fase s¡mple y la reacc¡ón se ag¡tó 18 h a temperatura amb¡ente. La mayor parte del solvente orgán¡co se remov¡ó bajo una comente de n¡trógeno y el res¡duo se neutral¡zó con 0,08 ml de HOAc glac¡al. El pH se llevó a ~7 con b¡carbonato de sod¡o acuoso sat. y la soluc¡ón resultante se extrajo tres veces con 3:1 cloroformo-¡sopropanol. Los extractos orgán¡cos comb¡nados se secaron, se f¡ltraron y se dest¡laron para obtener ác¡do 2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acét¡co (0,095 g, 95 % de rend¡m¡ento) en forma de un sól¡do castaño. MS(ES): m/z = 285 [M+H]+. tR = 0,43 m¡n (Método A).
Ejemplo de referencia 113. A/-(4-clorofen¡l)-2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetam¡da
W-(4-clorofen¡l)-2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetam¡da se preparó en 51 % de rend¡m¡ento de 113B usando las cond¡c¡ones para la convers¡ón de 90E en el ejemplo de referenc¡a 90. MS(ES): m/z = 394 [M+H]+. tR = 1,07 m¡n (Método K). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 8 10,08 (s, 1H), 8,82 (d, 1H, J = 3,9 Hz), 8,27 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,75 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 7,55-7,64 (m, 3H), 7,49 (d, 1H, J = 3,4 Hz), 7,33 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 3,76 (s, 2H), 2,81-2,88 (m, 2H), 2,22 (d, 2H, J = 6,7 Hz), 2,03-2,13 (m, 2H), 1,73-1,82 (m, 1H), 1,59-1,65 (m, 2H), 1,19-1,28 (m, 2H).
Ejemplo de referenc¡a 114
N-(4-fluorofen¡l)-2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetam¡da
Figure imgf000084_0001
N-(4-fluorofen¡l)-2-(1-(qu¡nol¡n-4-¡lmet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetam¡da se preparó en 76 % de rend¡m¡ento de 113B y 4-fluoroan¡l¡na usando las cond¡c¡ones para la convers¡ón de 90E en el ejemplo de referenc¡a 90. MS(ES): m/z = 378 [M+H]+. tR = 0,88 m¡n (Método K). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 810,03 (s, 1H), 8,79 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 8,25 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,01 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,75 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 7,61 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 7,47-7,55 (m, 3H), 7,09 (t, 2H, J = 8,7 Hz), 3,90 (s, 2H), 2,80-2,86 (m, 2H), 2,20 (d, 2H, J = 6,9 Hz), 2,03-2,11 (m, 2H), 1,71-1,79 (m, 1H), 1,58-1,64 (m, 2H), 1,18-1,27 (m, 2H).
Ejemplo de referenc¡a 115
N-(4-fluorofen¡l)-2-(1-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetam¡da
Figure imgf000084_0002
Intermed¡o 115A. 2-(1-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetato de met¡lo
A una mezcla de 4-cloro-6-fluoroqu¡nol¡na (200,0 mg, 1,1 mmol) en NMP anh¡dra (4 ml), en un v¡al con c¡erre hermét¡co, se le añad¡ó 2-(p¡per¡d¡n-4-¡l)acetato de met¡lo (260,0 mg, 1,7 mmol) segu¡do por DIPEA (0,8 ml, 4,6 mmol). El v¡al se tapó y la mezcla se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante dos horas, luego a 120 °C durante 66 horas. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó hasta temperatura amb¡ente antes de d¡v¡d¡r entre agua y Et2O. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces más con Et2O. Estos extractos orgán¡cos se comb¡naron con la capa orgán¡ca or¡g¡nal y se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se f¡ltraron y se concentraron al vacío para obtener el producto en bruto. La pur¡f¡cac¡ón por cromatografía Isco d¡o como resultado 2-(1-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acetato de met¡lo en forma de un ace¡te dorado (304,3 mg; 91 % de rend¡m¡ento). MS(ES): m/z = 303 [m H]+. tR = 0,64 m¡n (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,67 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,04 -7,97 (m, 1H), 7,67 -7,53 (m, 2H), 7,02 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,51 - 3,43 (m, 2H), 2,87 - 2,76 (m, 2H), 2,39 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,94 - 1,89 (m, 1H), 1,87 -1,81 (m, 2H), 1,62 - 1,49 (m, 2H).
Intermed¡o 115B. Ác¡do 2-(1-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)acét¡co
A una mezcla homogénea del intermedio 115A (304,3 mg, 1,0 mmol) en EtOH (10 mi), a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno, se le añadió gota a gota NaOH 2 M (ac) (1 mi, 2,0 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 22 horas antes de neutralizar con HCl 4 M en dioxano (0,5 ml, 2,0 mmol). Después de agitar durante 5 minutos, la mezcla se concentró al vacío para obtener un sólido dorado pálido, que se usó en la siguiente etapa sin ulterior purificación. MS(ES): m/z = 289 [M+H]+. tR = 0,55 min (Método A).
Ejemplo de referencia 115. N-(4-fluorofenil)-2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)acetamida
A una mezcla del intermedio 115B (20,0 mg, 0,07 mmol) y 4-fluoroanilina (9,3 mg, 0,08 mmol) en DMF anhidra (1 ml), a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se le añadió DIPEA (0,04 ml, 0,23 mmol) seguido por PyBOP (36,1 mg, 0,07 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas antes de concentrar al vacío para remover las sustancias volátiles, se diluyó con DMSO, se filtró a través de un filtro de jeringa, luego se purificó por medio de HPLC/MS preparativa para obtener el compuesto del título (14,4 mg; 54 % de rendimiento). MS(ES): m/z = 382 [M+H]+. tR = 1,25 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8 10,04 (s, 1H), 8,66 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,03 -7,99 (m, 1H), 7,64 -7,58 (m, 4H), 7,16 -7,11 (m, 2H), 7,03 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 3,59 -3,15 (m, 2H), 2,86 -2,78 (m, 2H), 2,36 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 2,07 - 1,98 (m, 1H), 1,89 - 1,84 (m, 2H), 1,62 - 1,53 (m, 2H).
Ejemplos de referencia 116 a 119
La reacción del intermedio 115B con una amina apropiada, en las condiciones descritas para el ejemplo de referencia 115 (Esquema 3, a continuación), da como resultado compuestos mostrados en la siguiente tabla 3.
Esquema 3
Figure imgf000085_0001
Tabla 4
Figure imgf000085_0002
continuación
Figure imgf000086_0002
Ejemplo de referencia 120
N-(4-fluorofenil)-2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetamida
Figure imgf000086_0001
Intermedio 120A. 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo, HCl
A un recipiente cargado con MeOH (7,5 ml), a 0 °C bajo atmósfera de nitrógeno, se le añadió lentamente cloruro de acetilo (1,1 ml, 15,2 mmol). Una vez completa la adición, la mezcla se agitó a 0 °C durante 5 minutos antes de añadir una mezcla homogénea de ácido 2-(4-metilpiperidin-4-il)acético, HCl (675,0 mg, 3,5 mmol) en MeOH (1,5 ml) lentamente gota a gota. La mezcla homogénea resultante se agitó a 0 °C durante 5 minutos, luego a 60 °C durante 8 horas, antes de concentrar al vacío para obtener la sal de HCl del intermedio 120A en forma de un sólido blanco (718,0 mg; 99 % de rendimiento) que se usó sin ulterior purificación. RMN1H (400 MHz, DMSO-d6) 89,41 - 9,12 (m, 1h ), 3,60 (s, 3H), 3,25 -3,15 (m, 2H), 2,93 -2,82 (m, 2H), 2,39 -2,30 (m, 2H), 1,74 - 1,64 (m, 4H), 1,02 (s, 3H).
Intermedio 120B. 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo
A una mezcla homogénea de 4-cloro-6-fluoroquinolina (350,0 mg, 1,9 mmol) en NMP anhidra (5 ml), en un vial con cierre hermético, se le añadió la sal de HCl de 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo (120 A, 480,0 mg, 2,3 mmol) seguido por DIPEA (1,6 ml, 9,2 mmol). El vial se cerró herméticamente y la mezcla se agitó a 120 °C. Después de 26 horas, la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, luego se dividió en agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo una vez más con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, luego se concentraron al vacío para obtener el producto en bruto. La purificación por cromatografía Isco dio como resultado el intermedio 120B en forma de un aceite (565,8 mg; 93 % de rendimiento). Ms (ES): m/z = 317 [M+H]+. tR = 0,66 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 8,38 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,96 (dd, J = 11,7, 2,8 Hz, 1H), 7,89 - 7,84 (m, 1H), 7,55 - 7,49 (m, 1H), 6,54 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 3,82 - 3,63 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,54 - 3,34 (m, 2H), 2,45 - 2,38 (m, 2H), 1,87 - 1,72 (m, 4H), 1,05 (s, 3H).
Intermedio 120C. Ácido 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acético
A una mezcla homogénea de 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo (321,0 mg, 1,0 mmol) en MeOH (5 ml), bajo atmósfera de nitrógeno, se le añadió gota a gota una solución acuosa 2 M de NaOH (1 ml, 2,0 mmol). La reacción luego se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas antes de tratar con HCl 1 N (ac) hasta pH 6 con tiras de ensayo de pH. La mezcla luego se dividió en agua y EtOAc, las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. La capa acuosa de la extracción se liofilizó para obtener el ejemplo de referencia 120C en bruto en forma de un sólido blanquecino (302,1 mg, 98 % de rendimiento) que se usó sin ulterior purificación. MS(ES): m/z = 303 [M+H]+. tR = 0,59 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 812,12 (s. a, 1H), 8,41 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 8,12 (dd, J = 11,5, 2,7 Hz, 1H), 8,00 (dd, J = 9,3, 5,7 Hz, 1H), 7,75 - 7,64 (m, 1H), 6,64 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 3,98 - 3,87 (m, 1H), 3,87 - 3,78 (m, 1H), 3,69 - 3,49 (m, 2H), 2,38 - 2,29 (m, 2H), 1,92 - 1,70 (m, 4H), 1,06 (s, 3H).
Ejemplo de referencia 120. N-(4-fluorofenil)-2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetamida A una mezcla de ácido 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acético (25,6 mg, 0,09 mmol) y 4-fluoroanilina (11,3 mg, 0,1 mmol) en DMF anhidra (1 ml), bajo atmósfera de nitrógeno, se le añadió DIPEA (0,05 ml, 0,3 mmol) seguido por PyBOP (44,1 mg, 0,09 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 156 horas, antes de diluir con DMF, se filtró a través de un filtro de jeringa, luego se purificó por medio de HPLC/MS preparativa para obtener el compuesto del título (17,2 mg; 51 % de rendimiento). MS(ES): m/z = 396 [M+H]+. tR = 1,32 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8 10,05 (s, 1H), 8,33 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,99 - 7,93 (m, 1H), 7,89 - 7,83 (m, 1H), 7,57 - 7,50 (m, 3H), 7,13 - 7,08 (m, 2H), 6,54 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 3,85 - 3,61 (m, 2H), 3,59 - 3,36 (m, 2H), 2,41 -2,31 (m, 2H), 1,86 - 1,75 (m, 4H), 1,07 (s, 3H).
Ejemplos de referencia 121 a 125
La reacción de ácido 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acético con una amina apropiada, en las condiciones descritas para el ejemplo de referencia 120 (Esquema 4, a continuación), da como resultado compuestos mostrados en la siguiente tabla 4.
Esquema 4
Figure imgf000087_0001
Tabla 5
Figure imgf000087_0002
Ejemplo de referencia 126
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamida
Figure imgf000088_0001
Intermedio 126A. 4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-carboxilato de ferc-butilo
A una mezcla de 4-cloro-6-fluoroquinolina (200,0 mg, 1,1 mmol) en NMP anhidra (4 ml), en un vial con cierre hermético, se le añadió 1-Boc-piperizina (308,0 mg, 1,7 mmol) seguido por DIPEA (0,8 ml, 4,6 mmol). El vial se tapó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante dos horas, luego a 120 °C durante 66 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente antes de dividir entre agua y Et2O. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces más con Et2O. Estos extractos orgánicos se combinaron con la capa orgánica original y se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para obtener el producto en bruto. La purificación por cromatografía Isco dio como resultado 4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-carboxilato de ferc-butilo en forma de un aceite (362,8 mg; 98 % de rendimiento). MS(ES): m/z = 332 [M+H]+. tR = 0,70 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,70 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,09 - 8,00 (m, 1H), 7,77 - 7,67 (m, 1H), 7,67 - 7,62 (m, 1H), 7,07 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 3,67 - 3,57 (m, 4H), 3,15 - 3,06 (m, 4H), 1,44 (s, 9H).
Intermedio 126B. 6-fluoro-4-(piperazin-1-il)quinolina
A un recipiente cargado con 4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-carboxilato de ferc-butilo (362,8 mg, 1,1 mmol), bajo atmósfera de nitrógeno, se le añadió HCl 4 M en dioxano (10 ml, 40,0 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 5,5 horas, durante lo cual se formó un precipitado. La mezcla heterogénea se concentró a aproximadamente 1/2 de su volumen original. La filtración al vacío dio como resultado la sal de HCl del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino (259,0 mg; 88 % de rendimiento) que se usó sin ulterior purificación. MS(ES): m/z = 232 [M+H]+. tR = 0,34 min (Método A).
Intermedio 126C. 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoato de etilo
A una mezcla heterogénea de la sal de HCl de 6-fluoro-4-(piperazin-1-il)quinolina (126B, 80,0 mg, 0,3 mmol) en NMP anhidra (2 ml), en un vial de reacción con cierre hermético, se le añadió K2CO3 (60,0 mg, 0,4 mmol) seguido por 2-bromopropanoato de etilo (65,0 mg, 0,4 mmol). El recipiente luego se cerró herméticamente y la mezcla se agitó a 60 °C. Después de 67,5 horas, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente luego se dividió en agua y DCM. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo una vez más con DCM. Las capas orgánicas se combinaron y se concentraron al vacío para obtener el producto en forma de un aceite (92,7 mg, 94 %), que se usó sin ulterior purificación. MS(ES): m/z = 332 [M+H]+. tR = 0,51 min (Método A).
Intermedio 126D. Ácido 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoico
A una mezcla homogénea de 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoato de etilo (92,7 mg, 0,3 mmol) en EtOH (3 ml), bajo atmósfera de nitrógeno, se le añadió gota a gota NaOH 2 M (ac) (0,3 ml, 0,6 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas antes de neutralizar con HCl 4 M en dioxano (0,15 ml, 0,6 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla se concentró al vacío para obtener el producto en forma de un sólido castaño claro, que se usó sin ulterior purificación, en base al 100 %, en la siguiente etapa. MS(ES): m/z = 304 [M+H]+. tR = 0,39 min (Método A).
Ejemplo de referencia 126. (±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamida
A una mezcla de ácido 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoico (30 mg, 0,1 mmol) y 4-cloroanilina (15,1 mg, 0,1 mmol) en DMF anhidra (1,5 ml), bajo atmósfera de nitrógeno, se le añadió DIPEA (0,06 ml, 0,3 mmol) seguido por PyBOP (51,5 mg, 0,1 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 17,5 horas, antes de diluir con DMF, se filtró a través de un filtro de jeringa, luego se purificó por medio de HPLC/MS preparativa para obtener el compuesto del título en forma de un racemato (11,0 mg; 27 % de rendimiento). MS(ES): m/z = 413 [M+H]+. tR = 1,01 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8 10,05 (s, 1H), 8,71 - 8,62 (m, 1H), 8,06 - 7,96 (m, 1H), 7,66 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,64 -7,57 (m, 2H), 7,35 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 3,36 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 3,27 -3,13 (m, 4H), 2,90 - 2,73 (m, 4H), 1,25 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 127
(±)-N-(4-bromofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamida
Figure imgf000089_0001
El ejemplo de referencia 127 (17,1 mg; 37 % de rendimiento) se preparó según un procedimiento análogo a aquel para la síntesis del ejemplo de referencia 126, excepto porque 4-bromoanilina (20,4 mg, 0,12 mmol) se usó en vez de 4-cloroanilina. MS(ES): m/z = 457 [M+H]+. Tr = 1,04 min (Método K). RMN1H (500 MHz, DMSO-da) 8 10,58 (s. a., 1H), 8.65 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,09 - 7,98 (m, 1H), 7,85 - 7,76 (m, 2H), 7,61 - 7,48 (m, 4H), 7,20 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 3,76 -3.66 (m, 2H), 3,39 -3,27 (m, 2H), 3,27 -3,16 (m, 2H), 2,95 -2,82 (m, 1H), 2,58 -2,54 (m, 2H), 1,46 (d, J = 6,6 Hz, 3H). Ejemplo de referencia 128
(±)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-A/-fenilpropanamida
Figure imgf000089_0002
El ejemplo de referencia 128 (10,9 mg; 29 % de rendimiento) se preparó según un procedimiento análogo a aquel para la síntesis del ejemplo de referencia 126, excepto porque anilina (11,1 mg, 0,12 mmol) se usó en vez de 4-cloroanilina. MS(ES): m/z = 379 [M+H]+. Tr = 0,81 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 89,92 (s, 1H), 8,65 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,08 - 7,96 (m, 1H), 7,67 - 7,54 (m, 4H), 7,30 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,12 - 7,00 (m, 2H), 3,36 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 3,28 -3,11 (m, 4H), 2,93 -2,74 (m, 4H), 1,25 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
Enantiómero 1 y Enantiómero 2 del ejemplo de referencia racémico 126
Enantiómero 1: Ejemplo de referencia 129 W-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000089_0003
Enantiómero 2: Ejemplo de referencia 130 W-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000090_0001
El ejemplo de referencia racémico 126 (11,0 mg) se purificó por SFC quiral (70/30 CO2/MeOH Fase móvil, columna quiral AD 25 * 3 cm, 5 |jm, 85 ml/min, longitud de onda del detector = 220 nm). La concentración de las fracciones apropiadas dio como resultado:
Ejemplo de referencia 129 (Enantiómero 1, eluido primero) (4,2 mg) MS(ES): m/z = 413 [M+H]+. Tr =1,04 min (Método K). RMN1H (500 MHz, DMSo-d6): superponible sobre la RMn del racemato.
Ejemplo de referencia 130 (Enantiómero 2, segundo eluido) (4,1 mg) MS(ES): m/z = 413 [M+H]+. Tr=1,04 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6): superponible sobre la RMN del racemato.
Ejemplo de referencia 131
(±)-W-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)butanamida
Figure imgf000090_0002
El ejemplo 131 (5,6 mg; 14 % de rendimiento) se preparó según un procedimiento análogo a aquel para la síntesis del ejemplo 126, excepto porque 2-bromobutanoato de etilo se usó en vez de 2-bromopropanoato de etilo. MS(ES): m/z = 427 [M+H]+. Tr = 1,09 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8 10,17 (s, 1H), 8,65 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,01 (dd, J = 9,0, 5,6 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,64 - 7,57 (m, 2H), 7,37 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,03 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,58 -3,54 (m, 1H), 3,25 -3,11 (m, 4H), 2,95 -2,76 (m, 4H), 1,85 - 1,60 (m, 2H), 0,89 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 132
(±)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-fenilbutanamida
Figure imgf000091_0001
El ejemplo de referencia 132 (6,6 mg; 17 % de rendimiento) se preparó según un procedimiento análogo a aquel para la síntesis del ejemplo 131, excepto porque anilina se usó en vez de 4-cloroanilina. MS(ES): m/z = 393 [M+H]+. Tr = 0,91 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 810,08 (s, 1H), 8,61 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,98 (dd, J = 8,8, 5,6 Hz, 1H), 7,65 - 7,52 (m, 4H), 7,31 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 7,13 - 6,98 (m, 2H), 3,24 - 3,09 (m, 5H), 2,96 - 2,76 (m, 4H), 1,83 -1,60 (m, 2H), 0,87 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 133
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoxipropanamida
Figure imgf000091_0002
El ejemplo de referencia 133 (12,0 mg; 29 % de rendimiento) se preparó según un procedimiento análogo a aquel para la síntesis del ejemplo de referencia 126, excepto porque 2-bromo-3-metoxipropanoato de metilo se usó en vez de 2-bromopropanoato de etilo. MS(ES): m/z = 443 [M+H]+. Tr= 1,14 min (Método K). RMN1H(500 MHz, DMSO-d6) 810,15 (s, 1H), 8,68 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,06 - 7,96 (m, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,65 - 7,56 (m, 2H), 7,38 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 3,83 -3,64 (m, 2H), 3,62 -3,36 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 3,01 -2,93 (m, 2H), 2,89 -2,81 (m, 2H), 2,57 -2,53 (m, 4H).
Ejemplo de referencia 134
(±)-N-(4-fluorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoxipropanamida
El ejemplo de referencia 134 (11,3 mg; 35 % de rendimiento) se preparó según un procedimiento análogo a aquel para la síntesis del ejemplo de referencia 133, excepto porque 4-fluoroanilina se usó en vez de 4-cloroanilina. MS(ES): m/z = 427 [M+H]+. Tr = 1,05 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8 10,07 (s, 1H), 8,67 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,09 - 7,98 (m, 1H), 7,73 - 7,65 (m, 2H), 7,63 - 7,58 (m, 2H), 7,20 - 7,11 (m, 2H), 7,04 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 3,88 - 3,62 (m, 2H), 3,60 -3,34 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 3,01 -2,94 (m, 2H), 2,89 -2,82 (m, 2H), 2,56 -2,52 (m, 4H).
Ejemplos de referencia 135 y 136
Enantiómero 1: N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoxipropanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000092_0001
Enantiómero 2: N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoxipropanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta no determinada)
Figure imgf000092_0002
El ejemplo de referencia racémico 133 (9,8 mg) se purificó por SFC quiral (70/30 CO2/MeOH fase móvil, columna Chiral Lux-425 * 3 cm, 5 pm, 85 ml/min, longitud de onda del detector = 220 nm). La concentración de las fracciones apropiadas (de elución anterior) dio como resultado:
Ejemplo 135 (eluido primero) (3,2 mg) se asignó como N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoxipropanamida (Enantiómero 1). MS(ES): m/z = 443 [M+H]+. Tr =1,19 min (Método K). RMN1H(500 MHz, DMSO-d6): superponible sobre RMN del racemato.
Ejemplo 136 (segundo eluido) (3,3 mg) se asignó como N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoxipropanamida (Enantiómero 2). MS(ES): m/z = 443 [M+H]+. Tr =1,19 min (Método K). RMN1H(500 MHz, DMSO-d6): superponible sobre RMN del racemato.
Ejemplo 137
Ácido 2-(4-((R)-3-((4-clorofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)propanoico (mezcla de dos diastereómeros)
Figure imgf000093_0001
Intermedio 137A. 2-(4-(bromometil)fenil)propanoato de ferc-butilo
A una solución de ácido 2-(4-(bromometil)fenil)propanoico (3 g, 12,34 mmol) en CH2CI2 (100 ml) a temperatura ambiente se le añadió cloruro de oxalilo (1,400 ml, 16,04 mmol) y 1 gota de DMF. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Luego la mezcla se concentró hasta sequedad. A la reacción anterior se le añadió CH2Ch (2 ml) seguido por f-BuOH (100 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se diluyó con CH2Cl2 y se lavó con NaHCO3 saturado, salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para dar el intermedio 137A (1,8 g, 6,02 mmol, 48,7 % de rendimiento) como líquido amarillo claro. RMN1H (400 MHz, cloroformo-d) 87,36 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,33 - 7,23 (m, 2H), 4,60 (s, 1H), 4,51 (s, 1H), 3,64 (dd, J = 7,2, 2,8 Hz, 1H), 1,47 (dd, J = 7,2, 1,2 Hz, 3H), 1,42 (s, 9H)
Intermedio 137B. 2-(4-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxo-3-((R)-2-oxo-4-feniloxazolidin-3-il)propil)fenil)propanoato de ferc-butilo (mezcla de diastereómeros)
A una solución de (R)-3-(2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)acetil)-4-feniloxazolidin-2-ona (preparada a partir de los procedimientos generales K, B, E y L) (200 mg, 0,462 mmol) en THF (4 ml) a -40 °C se le añadió NaHMDS (1 M en THF) (0,555 ml, 0,555 mmol) gota a gota. La mezcla se agitó de -40 °C a -30 °C durante 20 min. Luego 2-(4-(bromometil)fenil)propanoato de ferc-butilo (304 mg, 1,017 mmol) en THF (0,5 ml) se añadió. La reacción se agitó a -20 °C durante 16 h. La reacción se neutralizó con NH4Cl saturado y EtOAc a -20 °C. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró hasta sequedad. Este material en bruto se disolvió en DMF y se purificó con HPLC prep (PHENOMENEX® Luna 5 p 30 * 100 mm), 40 ml/min caudal con gradiente de 20 % de B-100 % de B durante 10 minutos. Se mantuvo al 100 % de B durante 5 min. (A: 0,1 % de TFA en agua/MeOH (90:10), B: 0,1 % de TFA en agua/MeOH (10:90) controlando a 254 nm. Fracciones combinadas (tr=11,06 min) con contenido del producto. Después de concentrar, 134 mg del intermedio 137B (0,204 mmol, 44,1 %) se obtuvieron como mezcla de diastereómeros. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 89,15 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 8,65 (dd, J = 9,2, 4,9 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 7,94 (dd, J = 9,3, 2,2 Hz, 1H), 7,89 - 7,73 (m, 1H), 7,36 - 7,24 (m, 4H), 7,13 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 6,84 -6,64 (m, 2H), 5,44 -5,35 (m, 1H), 4,98 (s. a., 1H), 4,63 - 4,46 (m, 1H), 4,10 (ddd, J = 8,9, 6,5, 4,3 Hz, 1H), 3,69 - 3,60 (m, 1H), 3,52 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,03 (dt, J = 13,6, 4,2 Hz, 1H), 2,74 (ddd, J = 13,6, 10,6, 6,8 Hz, 1H), 2,37 -2,23 (m, 1H), 2,16 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 2,10 -2,00 (m, 1H), 2,00 - 1,74 (m, 7H), 1,50 (dd, J = 8,6, 7,2 Hz, 3H), 1,45 -1,29 (m, 9H) MS: Anal. calc. para C40H43FN2O5650,316, experimental [M+H] 651,3 LC: tr = 1,03 min (Método B)
Intermedio 137C. Ácido (R)-3-(4-1-(ferc-butoxi)-1-oxopropan-2-il)fenil)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanoico (mezcla de diastereómeros)
A una solución del intermedio 137B (0,206 mmol, 134 mg) en THF (1,3 ml) a 0 °C se le añadió 30 % de H2O2 (0,093 ml, 0,824 mmol) gota a gota, seguido por la adición de LiOH 2,7 M en H2O (0,122 ml, 0,329 mmol). La reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se neutralizó cuidadosamente a 0 °C por adición de Na2SO3 saturado. El pH se ajustó a 5~6 con HCl 1 N y la mezcla se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El material en bruto se purificó con columna ISCO 12 g, 30 ml/min. 0-100 % de EtOAc/Hexano en 35 min. El producto deseado se eluyó con 22 % de EtOAc/Hexano. Después de concentrar, 35 mg (0,069 mmol, 33 %) de 137C se obtuvo en forma de sólido blanco. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 88,82 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,15 (dd, J = 9,2, 5,7 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 10,5, 2,7 Hz, 1H), 7,49 (ddd, J = 9,2, 7,9, 2,7 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,27 -7,06 (m, 4H), 3,60 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 3,37 (s. a., 1H), 3,04 -2,96 (m, 2H), 2,95 -2,81 (m, 1H), 2,12 (d, J = 19,2 Hz, 1H), 2,00 - 1,76 (m, 8H), 1,45 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,42 - 1,34 (m, 9H) MS: Anal. calc. para C31H36FNO4505,263, experimental [M+H] 506,1 LC: tr = 0,92 min (Método B).
Intermedio 137D. 2-(4-((R)-3-((4-clorofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)propanoato de ferc-butilo (mezcla de diastereómeros)
A una solución de 137C (35 mg, 0,069 mmol) en CH2Ch (3 ml) a temperatura ambiente se le añadió cloruro de oxalilo (8,90 |jl, 0,104 mmol) gota a gota seguido por 1 gota de DMF. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Luego la mezcla se concentró hasta sequedad. A esta mezcla en THF (1 ml) a temperatura ambiente se le añadió 4-cloroanilina (8,76 mg, 0,069 mmol), seguido por base de Hunig (0,018 ml, 0,103 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se diluyó con MeOH y se purificó con HPLC prep (PHENOMENEX® Luna 5 p 30 * 100 mm), 40 ml/min caudal con gradiente de 20 % de B-100 % de B durante 10 minutos se mantuvo al 100 % de B durante 5 min. (A: 0,1 % de TFA en agua/MeOH (90:10), B: 0,1 % de TFA en agua/MeOH (10:90) controlando a 254 nm. El intermedio 137D (10 mg, 0,016 mmol, 46,4 % de rendimiento) se obtuvo en forma de sólido blanco. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 89,06 (s. a., 1H), 8,57 (s. a., 1H), 7,95 - 7,84 (m, 2H), 7,84 - 7,63 (m, 1H), 7,26 - 7,10 (m, 8H), 3,66 - 3,49 (m, 4H), 3,06 (dd, J = 13,6, 3,4 Hz, 2H), 2,87 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 2,70 (s. a., 1H), 2,40 (s. a., 1H), 2,15 (s. a., 1H), 2,10 - 1,80 (m, 7H), 1,41 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,37 - 1,30 (m, 9H) MS: Anal. calc. para C37H40CFN2O3614,271, experimental [M+H] 615,3 LC: tr = 1,06 min (Método B)
Ejemplo 137. Ácido 2-(4-((R)-3-((4-clorofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)propanoico
Al intermedio 137D (10 mg, 0,016 mmol) en un vial de 2 dram se le añadió 50 % de TFA/CH2Ch (0,3 ml, 0,016 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se concentró hasta sequedad y se liofilizó durante 2 días. El ejemplo 137 (9,5 mg, 0,014 mmol, 83 % de rendimiento) se obtuvo en forma de sólido blanco. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 88,74 - 8,52 (m, 1H), 8,34 (s. a., 1H), 7,90 - 7,78 (m, 2H), 7,72 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,32 -7,19 (m, 6H), 7,15 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 3,67 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 3,42 (s. a., 1H), 3,13 -2,83 (m, 3H), 2,30 (s. a., 1H), 2,15 (s. a., 1H), 2,02 (s. a., 1H), 1,97 - 1,87 (m, 3H), 1,84 (s. a., 3H), 1,41 (t, J = 6,1 Hz, 3H) MS: Anal. calc. para C33H32CFN2O3 558,209, experimental [M+H] 559,3 LC: tr = 0,87 min (Método B)
Enantiómero 1 y 2 del ejemplo racémico 137
Enantiómero 1: Ejemplo 138 ácido 2-(4-((R)-3-((4-clorofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)propanoico (homoquiral, estereoquímica no determinada)
Figure imgf000094_0001
Enantiómero 2: Ejemplo 139 ácido 2-(4-((R)-3-((4-clorofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)propanoico (homoquiral, estereoquímica no determinada)
Figure imgf000094_0002
Los diastereómeros del ejemplo 137 se purificaron por medio de SFC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Chiral WHELK-O® Kr OMASIL® 25 * 3 cm ID, partículas de 5 pm; fase móvil A: 70/30 CO2/MeOH; Longitud de onda del detector: 220 nm; caudal: 85 ml/min. Las fracciones apropiadas (Enantiómero 1 “Pico-1” tr = 15,2 min (Ejemplo 138) y Enantiómero 2 “Pico-2” tr = 17,2 min (Ejemplo 139) para obtener:
Ejemplo 138 (Enantiómero 1, eluido primero): RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 88,67 (s. a., 1H), 8,18 - 7,97 (m, 1H), 7,67 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 7,47 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,33 - 7,23 (m, 6H), 7,17 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,08 (s, 4H), 7,02 (s. a., 1H), 3,76 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 3,36 (s. a., 1H), 3,03 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,87 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 2,63 (t, J = 10,0 Hz, 2H), 2,32 (s. a., 2H), 2,12 (s. a., 2H), 2,02 - 1,79 (m, 2H), 1,73 (d, J = 10,0 Hz, 2H), 1,53 (d, J = 7,1 Hz, 3H) MS: Anal. calc. para C33H32CIFN2O3558,209, experimental [M+H] 559,3 LC: tr = 0,86 min (Método B) Ejemplo 139 (Enantiómero 2, eluido primero): RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 88,64 (s. a., 1H), 8,16 - 8,03 (m, 1H), 7,66 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,30 (s. a., 7H), 7,20 - 7,01 (m, 7H), 3,74 (s. a., 1H), 3,35 (s. a., 1H), 3,00 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,96 -2,80 (m, 1H), 2,71 -2,55 (m, 1H), 2,31 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 2,25 -2,13 (m, 1H), 2,09 (s. a., 3H), 2,00 - 1,86 (m, 2H), 1,83 (s. a., 2H), 1,58 - 1,33 (m, 2H), 1,30 - 1,25 (m, 2H), 1,00 - 0,71 (m, 1h ) MS: Anal. calc. para C33H32CFN2O3558,209, experimental [M+H] 559,3 LC: tr = 0,86 min (Método B) Ejemplo 140
Ácido 2-(4-((R)-3-((4-cianofenil)amino)-2-((c/s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)-3-oxopropil)fenil)propanoico
Figure imgf000095_0001
El ejemplo 140 se obtuvo según los procedimientos en el ejemplo 137 usando la correspondiente 4-cianoanilina. RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 88,99 (s. a., 1H), 8,42 (s. a., 1H), 8,06 (s. a., 1H), 7,95 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,83 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,50 -7,35 (m, 3H), 7,25 -7,10 (m, 4H), 3,78 -3,54 (m, 1H), 3,53 (s, 1H), 3,18 -2,92 (m, 2H), 2,92 -2,65 (m, 1H), 2,38 (s. a., 1H), 2,27 -2,16 (m, 1H), 2,03 (s, 2H), 2,00 - 1,93 (m, 3H), 1,91 (s. a., 3H), 1,80 (s. a., 1H), 1,52 -1,36 (m, 3H), 0,94 - 0,69 (m, 1H) MS: Anal. calc. para C34H32FN3O3549,243, experimental [M+H] 550,3 LC: tr = 0,83 min (Método B).
Ejemplos 141 y 142
Estos compuestos se obtuvieron de acuerdo con los procedimientos en el ejemplo 137 usando los correspondientes ácidos carboxílicos (que se pueden preparar ya sea usando los procedimientos generales K, B, E o 58A) y ciclohexilamina.
Figure imgf000095_0002
Figure imgf000096_0002
Ejemplo 143
(±)-N-(4-clorofenil)-2-( cis- y frans-4-(p¡razolo[1,5-a]p¡r¡m¡d¡n-7-¡l)c¡clohex¡l)propanam¡da (mezcla de cuatro isómeros)
Figure imgf000096_0001
Intermedio 143A. 2-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l¡den)propanoato de et¡lo
A una suspens¡ón de NaH (0,307 g, 7,68 mmol) en THF (8 ml) enfr¡ado a 0 °C se le añad¡ó 2-(d¡etox¡fosfor¡l)propanoato de et¡lo (1,830 g, 7,68 mmol) lentamente. Después de 30 m¡n, la 1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-ona (1 g, 6,40 mmol) se añad¡ó. La mezcla resultante se ag¡tó a 0 °C durante 2 horas, luego se calentó hasta temperatura amb¡ente durante la noche. La mezcla se neutral¡zó con agua, THF se remov¡ó a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se d¡solv¡ó en EtOAc, se lavó con agua, salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se pur¡f¡có por ISCO (EtOAc/Hex 0­ 30 %). Las fracc¡ones con conten¡do del producto se concentraron para obtener el ¡ntermed¡o 143A (1,2 g, 78 % de rend¡m¡ento) en forma de un ace¡te amar¡llo claro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 84,19 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 4,03 -3,89 (m, 4H), 2,68 -2,53 (m, 2H), 2,46 -2,28 (m, 2H), 1,89 (s, 3H), 1,78 - 1,66 (m, 4H), 1,30 (t, J = 7,1 Hz, 3H) Intermed¡o 143B. 2-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)propanoato de et¡lo
Una suspens¡ón del ¡ntermed¡o 143A (500 mg, 2,081 mmol) (1A) y 10 % de palad¡o sobre carbón (25 mg, 0,024 mmol) en EtOAc (5 ml) se h¡drogenó en un ag¡tador Parr a 310,264 kPa (45 ps¡) durante 6 h. El catal¡zador se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró para obtener el ¡ntermed¡o 143B (450 mg, 89 % de rend¡m¡ento) en forma de un ace¡te claro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 84,12 (dtt, J = 10,7, 7,1, 3,6 Hz, 2H), 3,98 - 3,81 (m, 4H), 2,35 - 2,17 (m, 1H), 1,83 -1,68 (m, 3H), 1,66 - 1,45 (m, 4H), 1,43 - 1,28 (m, 2H), 1,27 -1,22 (m, 3H), 1,14 -1,07 (m, 3H)
Intermed¡o 143C. 2-(4-oxoc¡clohex¡l)propanoato de et¡lo
A una soluc¡ón de 2-(1,4-d¡oxaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)propanoato de et¡lo (450 mg, 1,857 mmol) (1B) en THF (5 ml) se le añadió cloruro de hidrógeno 1 M (acuoso) (0,929 ml, 3,71 mmol). La mezcla se calentó hasta 50 °C durante 6 h. La mezcla de reacción se concentró. El residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con agua (2X), salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó con ISCO (EtOAc/Hex 0-30 %). Las fracciones que contenían el producto se concentraron para obtener el intermedio 143C (290 mg, 79 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 84,22 - 4,06 (m, 2H), 2,46 - 2,30 (m, 5H), 2,13 - 1,91 (m, 3H), 1,56 - 1,42 (m, 2H), 1,31 - 1,24 (m, 3H), 1,18 (d, J = 7,1 Hz, 3H)
Intermedio 143D. 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)propanoato de etilo
El intermedio 143C (200 mg, 1,01 mmol) (1C) y 2,6-di-ferc-butil-4-metilpiridina (238 mg, 1,16 mmol) se disolvieron en DCM seca (10 ml). A la mezcla de reacción se le añadió anhídrido trifluorometansulfónico (0,186 ml, 1,11 mmol) gota a gota y se agitó durante 2 h. La suspensión se filtró y el filtrado se diluyó con DCM, se lavó con HCl 1 N (2X), solución saturada de bicarbonato de sodio, agua, salmuera y se secó sobre Na2SO4 y se concentró para obtener el intermedio 143D (320 mg, 96 % de rendimiento) en forma de un aceite pardo. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 85,73 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 4,28 -4,05 (m, 2H), 2,52 -2,17 (m, 4H), 2,08 - 1,79 (m, 3H), 1,49 (dt, J = 11,1, 6,6 Hz, 1H), 1,31 - 1,20 (m, 3H), 1,19 -1,04 (m, 3H)
Intermedio 143E. 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)propanoato de etilo
A una solución del intermedio 143D (300 mg, 0,908 mmol) (1D) en DMSO (5 ml) se le añadió 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (230 mg, 0,908 mmol) y acetato de potasio (267 mg, 2,72 mmol). Después de desgasificar la mezcla con N2 durante 10 min, se añadió PdCh(dppf) (19,9 mg, 0,027 mmol). La mezcla se calentó hasta 80 °C durante la noche. La mezcla se dividió en EtOAc y agua. La fase orgánica se concentró y se purificó por ISCO. Las fracciones que contenían el producto se concentraron para obtener el intermedio 143E (168 mg, 60 % de rendimiento) en forma de un aceite marrón. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 86,66 - 6,40 (m, 1H), 4,31 - 4,00 (m, 2H), 2,34 -2,26 (m, 1H), 2,25 -2,19 (m, 1H), 2,19 - 2,04 (m, 2H), 1,95 - 1,75 (m, 3H), 1,73 - 1,60 (m, 1H), 1,29 -1,24 (m, 15H), 1,13 (dd, J = 11,6, 7,0 Hz, 3H)
Intermedio 143F. 2-(4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)ciclohex-3-en-1-il)propanoato de etilo
Una mezcla de 7-cloropirazolo[1,5-a]pirimidina (0,193 g, 1,260 mmol), el intermedio 143E (0,400 g, 1,298 mmol), Na2CO3 (0,534 g, 5,04 mmol) y Pd(PhaP)4 (0,073 g, 0,063 mmol) en dioxano (11,67 ml) y agua (3,89 ml) se calentó a 100 °C durante la noche. La reacción se neutralizó con agua y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo pardo. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 40 g, 40 ml/min, 0-70 % de EtOAc en hexanos durante 16 min, tr = 10,5 min) dio 143F (0,224 g, 0,748 mmol, 59,4 % de rendimiento) en forma de un residuo amarillo. ESI MS (M+H)+ = 300,2. HPLC Pico tr = 0,95 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Intermedio 143G. 2-(4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)ciclohexil)propanoato de etilo
A una solución de 143F (0,224 g, 0,748 mmol) en MeOH (3,74 ml) se le añadió formiato de amonio (0,236 g, 3,74 mmol) seguido por Pd/C (0,021 g, 0,202 mmol). La reacción se calentó a 70 °C durante 1 h. La reacción se filtró a través de CELITE® y la torta de filtro se lavó con CH2Ch. El filtrado se concentró. El material en bruto se extrajo en EtOAc y se lavó con una solución sat. ac. de NaHCO3 (1X). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener 143G (220 mg, 98 %) en forma de un residuo amarillo. ESI MS (M+H)+ = 302,2. HPLC Pico tr = 0,94 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Ejemplo 143. (±)-N-(4-clorofenil)-2-(c/s- y frans-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il) ciclohexil) propanamida (mezcla de cuatro isómeros)
A una solución de 4-cloroanilina (92 mg, 0,720 mmol) en THF (0,9 ml) a 0 °C se le añadió una solución de cloruro de isopropilmagnesio (360 pl, 0,720 mmol). La solución resultante se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 5 min, luego 143g (108,5 mg, 0,360 mmol) en THF (0,9 ml) se añadió gota a gota. La reacción se calentó a 70 °C durante 2,5 h, luego se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. Más 4-cloroanilina (42 mg) y cloruro de isopropilmagnesio (360 pl, 0,720 mmol) se añadieron. La reacción se neutralizó con una solución acuosa saturada de NH4Cl y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo. El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 40-80 % de B durante 20 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título como una mezcla de 4 isómeros (43,4 mg, 31 %). ESI MS (M+H)+ = 383,1. HPLC Pico tr = 0,96 minutos. Pureza = 99 %. Condiciones de HPLC: método A.
Ejemplos 144 (a), (b), (c) y (d)
(S)-N-(4-dorofenil)-2-((c/s)-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cidohexil)propanamida y (R)-A/-(4-clorofen¡l)-2-((c/s)-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cidohexil)propanamida y (S)-N-(4-dorofen¡l)-2-((frans)-4-(p¡razolo[1,5-a]p¡r¡m¡d¡n-7-il)ddohexil)propanairiida y (R)-N-(4-dorofen¡l)-2-((frans)-4-(p¡razolo[1,5-a]p¡r¡m¡d¡n-7-¡l)c¡clohex¡l)propanamida (homoquiral, la estereoquímica absoluta y relat¡va no se determinó y se as¡gnó arb¡trar¡amente)
Figure imgf000098_0001
Aprox¡madamente 43,4 mg del ejemplo 143 d¡astereomér¡co y racém¡co se resolv¡eron. La mezcla ¡somér¡ca se pur¡f¡có por med¡o de SFC preparativa con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: Ch¡ral IE, 25 * 3 cm ID, partículas de 5 |jm; fase móv¡l A: 80/20 CO2/MeOH; Long¡tud de onda del detector: 220 nm; caudal: 85 ml/m¡n. Las fracc¡ones (144(a) “P¡co-1” tr = 13,272, 144(b) “P¡co-2” tr = 14,097, 144(c) “P¡co-3” tr = 19,986, 144(d) “P¡co-4” tr = 27,958; cond¡c¡ones analít¡cas: Columna: Ch¡ral IE, 250 * 4,6 mm ID, partículas de 5 jm ; fase móv¡l A: 80/20 CO2/MeOH; caudal: 2,0 ml/m¡n) se recolectaron en MeOH. La pureza estereo¡somér¡ca del p¡co 2 y p¡co 3 se est¡mó en más del 99 % en base a los cromatogramas de SFC prep. El p¡co 1 (23,8 mg) se repur¡f¡có por med¡o de SFC preparativa con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: Ch¡ral OJ, 25 * 3 cm ID, partículas de 5 jm ; fase móv¡l A: 80/20 CO2/MeOH; Long¡tud de onda del detector: 220 nm; caudal: 85 ml/m¡n. Las fracc¡ones (“P¡co-1” tr = 4,558 y “P¡co-2” tr = 5,622; cond¡c¡ones analít¡cas: Columna: Ch¡ral OJ, 250 * 4,6 mm ID, partículas de 5 jm ; fase móv¡l A: 80/20 CO2/MeOH; caudal: 2,0 ml/m¡n) se recolectó en MeOH. La pureza estereo¡somér¡ca de las fracc¡ones se est¡mó en más del 99 % en base al cromatograma de SFC prep. Cada d¡astereómero o enant¡ómero luego se pur¡f¡có por med¡o de LC/MS preparativa:
Ejemplo 144(a) pr¡mer ¡sómero de eluc¡ón: El mater¡al en bruto se pur¡f¡có por med¡o de LC/MS preparat¡va con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: Waters XBr¡dge c-18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móv¡l A: 5:95 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; fase móv¡l B: 95:5 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; grad¡ente: 40-100 % de B durante 20 minutos, luego un manten¡m¡ento de 10 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/m¡n. Las fracc¡ones que contenían el producto deseado se comb¡naron y se secaron por med¡o de evaporac¡ón centrífuga para obtener el ¡sómero 1 (11,3 mg, 8,2 %). ESI MS (M+H)+ = 383,2. HPLC P¡co tr = 1,833 minutos. Pureza = 100 %. Cond¡c¡ones de HPLC: B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 144(b) segundo ¡sómero de eluc¡ón: El mater¡al en bruto se pur¡f¡có por med¡o de LC/MS preparativa con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: Waters XBr¡dge c-18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móv¡l A: 5:95 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; fase móv¡l B: 95:5 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; grad¡ente: 40-100 % de B durante 20 minutos, luego un manten¡m¡ento de 10 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/m¡n. Las fracc¡ones que contenían el producto deseado se comb¡naron y se secaron por med¡o de evaporac¡ón centrífuga para obtener el ¡sómero 2 (11,1 mg, 8,1 %). ESI MS (M+H)+ = 382,9. HPLC P¡co tr = 1,829 minutos. Pureza = 100 %. Cond¡c¡ones de HPLC: B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 144(c) Tercer ¡sómero de eluc¡ón: El mater¡al en ruto se pur¡f¡có por med¡o de LC/MS preparat¡va con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: Waters XBr¡dge c-18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móv¡l A: 5:95 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; fase móv¡l B: 95:5 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; grad¡ente: 40-100 % de B durante 20 minutos, luego un manten¡m¡ento de 10 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/m¡n. Las fracc¡ones que contenían el producto deseado se comb¡naron y se secaron por med¡o de evaporac¡ón centrífuga para obtener el ¡sómero 3 (7,2 mg, 5,0 %). ESI MS (M+H)+ = 383,2. HPLC P¡co tr = 1,874 minutos. Pureza = 96 %. Cond¡c¡ones de HPLC: B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 144(d) Cuarto ¡sómero de eluc¡ón: El mater¡al en bruto se pur¡f¡có por med¡o de LC/MS preparativa con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: Waters XBr¡dge c-18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móv¡l A: 5:95 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; fase móv¡l B: 95:5 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; grad¡ente: 40-100 % de B durante 20 minutos, luego un manten¡m¡ento de 10 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/m¡n. Las fracc¡ones que contenían el producto deseado se comb¡naron y se secaron por med¡o de evaporac¡ón centrífuga para obtener el ¡sómero 4 (7,6 mg, 5,1 %). ESI MS (M+H)+ = 383,3. HPLC P¡co tr = 1,874 minutos. Pureza = 93 %. Cond¡c¡ones de HPLC: B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 147
(±)-2-(cis-y trans-4-(1,8-naft¡nd¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)-N-(4-clorofen¡l)propanam¡da (mezcla de cuatro isómeros)
Figure imgf000099_0001
Intermedio 147A. 2-(4-(1,8-naft¡r¡d¡n-4-¡l)c¡clohex-3-en-1-¡l)propanoato de etilo
Una mezcla de 4-bromo-1,8-naft¡r¡d¡na (0,070 g, 0,335 mmol), el ¡ntermed¡o 143E (0,106 g, 0,345 mmol), Na2CO3 (0,142 g, 1,339 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,019 g, 0,017 mmol) en d¡oxano (3,10 ml) y agua (1,034 ml) se calentó a 100 °C durante la noche. La reacc¡ón se neutral¡zó con agua y se d¡luyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2X). Las capas orgán¡cas se comb¡naron, se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron y se concentraron para obtener un res¡duo marrón. La pur¡f¡cac¡ón del mater¡al en bruto por cromatografía sobre gel de síl¡ce usando una máqu¡na ISCO (columna 24 g, 35 ml/m¡n, 0-20 % de MeOH en CH2Ch durante 25 m¡n, tr = 17 m¡n) d¡o 147A (92,7 mg, 0,299 mmol, 89 % de rend¡m¡ento) en forma de un res¡duo amar¡llo. ESI MS (M+H)+ = 311,2. HPLC P¡co tr = 0,72 m¡nutos. Cond¡c¡ones de HPLC: método A.
Intermed¡o 147B. 2-(4-(1,8-naft¡r¡d¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)propanoato de et¡lo
A una soluc¡ón de 147A (0,0927 g, 0,299 mmol) en MeOH (1,493 ml) se le añad¡ó form¡ato de amon¡o (0,094 g, 1,493 mmol) segu¡do por Pd/C (8,58 mg, 0,081 mmol). La reacc¡ón se calentó a 70 °C durante 1 h. La reacc¡ón se f¡ltró a través de CELITe® y la torta de f¡ltro se lavó con CH2Ch. El f¡ltrado se concentró. El mater¡al en bruto se extrajo en EtOAc y se lavó con una soluc¡ón sat. ac. de NaHCO3 (1X). La fase orgán¡ca se secó sobre Na2SO4, se f¡ltró y se concentró para obtener 147B (72,5 mg, 78 %) como un res¡duo pardo. ESI MS (M+H)+ = 313,3. HPLC P¡co tr = 0,70 m¡nutos. Cond¡c¡ones de HPLC: método A.
Ejemplo 147. (±)-2-(cis- y trans-4-(1,8-naft¡nd¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)-N-(4-clorofen¡l)propanam¡da (mezcla de cuatro ¡sómeros)
A una soluc¡ón de 4-cloroan¡l¡na (0,059 g, 0,464 mmol) en THF (0,4 ml) a 0 °C se le añad¡ó una soluc¡ón de cloruro de ¡soprop¡lmagnes¡o (0,232 ml, 0,464 mmol). La soluc¡ón resultante se calentó hasta temperatura amb¡ente y se ag¡tó durante 5 m¡n, luego 147B (0,0725 g, 0,232 mmol) en THF (0,76 ml) se añad¡ó gota a gota. La reacc¡ón se calentó a 70 °C durante 3 h, luego se dejó enfr¡ar hasta temperatura amb¡ente. La reacc¡ón se neutral¡zó con una soluc¡ón acuosa saturada de NH4Cl y se d¡luyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron y se concentraron para obtener un res¡duo. El mater¡al en bruto se pur¡f¡có por med¡o de LC/MS preparat¡va con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: XBr¡dge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; fase móv¡l A: 5:95 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; fase móv¡l B: 95:5 aceton¡tr¡lo: agua con acetato de amon¡o 10 mM; grad¡ente: 30-70 % de B durante 19 m¡nutos, luego manten¡m¡ento de 5 m¡nutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/m¡n. Las fracc¡ones que contenían el producto deseado se comb¡naron y se secaron por med¡o de evaporac¡ón centrífuga para obtener el compuesto del título como una mezcla de 4 ¡sómeros (33,4 mg, 36 %). ESI MS (M+H)+ = 394,2. HPLC P¡co tr = 1,743 m¡nutos. Pureza = 98 %. Cond¡c¡ones de HPLC: método B.
Ejemplo 148 (a), (b), (c) y (d)
(S)-2-((cis)-4-(1,8-naft¡r¡d¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)-N-(4-clorofen¡l)propanam¡da y (R)-2-((cis)-4-(1,8-naft¡r¡d¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)-N-(4-clorofen¡l)propanam¡da y (S)-2-((trans)-4-(1,8-naft¡nd¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)-N-(4-clorofen¡l)propanam¡da y (R)-2-((trans)-4-(1,8-naft¡r¡d¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)-N-(4-clorofen¡l)propanam¡da (homoqu¡ral, estereoquímica absoluta y relat¡va no determinada y as¡gnada arb¡trar¡amente)
Figure imgf000100_0001
Aproximadamente 34,3 mg del ejemplo diastereomérico y racémico 147 se resolvieron. La mezcla isomérica se purificó por medio de SFC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Chiral AD, 25 * 3 cm ID, partículas de 5 pm; fase móvil A: 70/30 CÜ2/MeOH; Longitud de onda del detector: 220 nm; caudal: 85 ml/min. Las fracciones (“Pico-1” tr = 7,377, “Pico-2” tr = 8,774, “Pico-3” tr = 10,106, “Pico-4” tr = 14,282; condiciones analíticas: Columna: Chiral AD, 250 * 4,6 mm ID, partículas de 5 pm; fase móvil A: 70/30 CO2/MeOH; caudal: 2,0 ml/min) se recolectaron en MeOH. La pureza estereoisomérica de cada fracción se estimó en más del 99 % en base a los cromatogramas de SFC prep. Cada diastereómero o enantiómero luego se purificó por medio de LC/MS preparativa:
Ejemplo 148 (a) primer isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 30-70 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 1 (5,3 mg, 5,7 %). ESI MS (M+H)+ = 394,1. HPLC Pico tr = 1,757 minutos. Pureza = 99 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 148 (b) segundo isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 30-70 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 2 (6,0 mg, 6,4 %). ESI MS (M+H)+ = 394,1. HPLC Pico tr = 1,719 minutos. Pureza = 98 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 148 (c) Tercer isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 30-70 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 3 (6,1 mg, 6,3 %). ESI MS (M+H)+ = 394,2. HPLC Pico tr = 1,694 minutos. Pureza = 95 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 148 (d) Cuarto isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 30-70 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 4 (3,5 mg, 3,8 %). ESI MS (M+H)+ = 394,3. HPLC Pico tr = 1,743 minutos. Pureza = 99 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 149
(±)-2-(cis-y frans-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohexil)-N-(4-clorofenil)propanamida (mezcla de cuatro isómeros)
Figure imgf000101_0001
Intermedio 149A. 2-(4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohex-3-en-1-il)propanoato de etilo
Una mezcla de 7-doro-1H-pirazolo[4,3-b]piridina (0,048 g, 0,315 mmol), el intermedio 143E (0,100 g, 0,324 mmol), Na2CO3 (0,134 g, 1,260 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,018 g, 0,016 mmol) en dioxano (2,92 ml) y agua (0,972 ml) se calentó a 100 °C durante la noche. La reacción se neutralizó con agua y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo pardo. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 40 g, 40 ml/min, 0-100 % de EtOAc en hexanos durante 23 min, tr = 18 min) dio 149A (0,039 g, 0,124 mmol, 39,3 % de rendimiento) en forma de un residuo amarillo. ESI MS (M+H)+ = 300,2. Hp Lc Pico tr = 0,69 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Intermedio 149B. 2-(4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohexil)propanoato de etilo
A una solución de 149A (0,0395 g, 0,132 mmol) en MeOH (0,660 ml) se le añadió formiato de amonio (0,042 g, 0,660 mmol) seguido por Pd/C (3,79 mg, 0,036 mmol). La reacción se calentó a 70 °C durante 1 h. Formiato de amonio adicional (0,042 g, 0,660 mmol) se añadió y la reacción se calentó durante 1 h a 70 °C, luego se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de CELITE® y la torta de filtro se lavó con CH2Ch. El filtrado se concentró. El material en bruto se extrajo en EtOAc y se lavó con una solución sat. ac. de NaHCO3 (1X). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener 149B (34,3 mg, 86 %) en forma de un residuo amarillo. Se usará en bruto. ESI MS (M+H)+ = 302,4. Hp Lc Pico tr = 0,66 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Ejemplo 149. (±)-2-(cis- y frans-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohexil)-N-(4-clorofenil) propanamida (mezcla de cuatro isómeros)
A una solución de 4-cloroanilina (58,1 mg, 0,455 mmol) en THF (0,3 ml) a 0 °C se le añadió una solución de cloruro de isopropilmagnesio (228 pl, 0,455 mmol). La solución resultante se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 5 min, luego 149B (34,3 mg, 0,114 mmol) en THF (0,3 ml) se añadió gota a gota. La reacción se calentó a 70 °C durante 2 h, luego se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con una solución acuosa saturada de NH4Cl y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo. El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 20-60 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el compuesto del título como una mezcla de 4 isómeros (25,4 mg, 58 %). ESI MS (M+H)+ = 383,3. HPLC Pico tr = 1,662 minutos. Pureza = 99 %. Condiciones de HPLC: método B.
Ejemplo 150 (a), (b), (c) y (d)
(S)-2-((cis)-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohexil)-N-(4-clorofenil)propanamida y (R)-2-((cis)-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohexil)-N-(4-clorofenil)propanamida y (S)-2-((frans)-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohexil)-N-(4-clorofenil)propanamida y (R)-2-((frans)-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)ciclohexil)-N-(4-clorofenil)propanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta y relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000102_0001
Aproximadamente 29,3 mg del ejemplo diastereomérico y racémico 149 se resolvieron. La mezcla isomérica se purificó por medio de SFC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Chiral WHELK-O®, 25 * 3 cm ID, partículas de 5 |jm; fase móvil A: 70/30 CO2/MeOH; Longitud de onda del detector: 220 nm; caudal: 85 ml/min. Las fracciones (150(a) “Pico-1” tr = 9,587, 150(b) “Pico-2” tr = 10,407, 150(c) “Pico-3” tr = 11,794, 15-(d) “Pico-4” tr = 12,855; condiciones analíticas: Columna: Chiral WHELK-O®, 250 * 4,6 mm ID, partículas de 5 jm ; fase móvil A: 80/20 CO2/MeOH; caudal: 2,0 ml/min) se recolectaron en MeOH. La pureza estereoisomérica de los picos 1, 3 y 4 se estimó en más del 95 % en base a los cromatogramas de SFC prep. El pico 2 se repurificó por medio de SFC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Chiral AS, 25 * 3 cm ID, partículas de 5 jm ; fase móvil A: 80/20 CO2/MeOH; Longitud de onda del detector: 220 nm; caudal: 85 ml/min. Las fracciones (“Pico-1” tr = 3,391 y “Pico-2” tr = 4,071; condiciones analíticas: Columna: Chiral AS, 250 * 4,6 mm ID, partículas de 5 jm ; fase móvil A: 80/20 CO2/MeOH; caudal: 2,0 ml/min) se recolectó en MeOH. La pureza estereoisomérica de las fracciones se estimó en más del 99 % en base al cromatograma de SFC prep. Cada diastereómero o enantiómero luego se purificó por medio de LC/MS preparativa:
Ejemplo 150(a) primer isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 20-60 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 1 (4,6 mg, 11 %). ESI MS (M+H)+ = 383,1. HPLC Pico tr = 1,611 minutos. Pureza = 100 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 150(b) segundo isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 20-60 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 2 (4,6 mg, 11 %). ESI MS (M+H)+ = 383,2. HPLC Pico tr = 1,630 minutos. Pureza = 100 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 150(c) Tercer isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 20-60 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 3 (9,1 mg, 21 %). ESI MS (M+H)+ = 383,2. HPLC Pico tr = 1,659 minutos. Pureza = 100 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 150(d) Cuarto isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 jm ; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 20-60 % de B durante 19 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 4 (4,7 mg, 10 %). ESI MS (M+H)+ = 383,3. HPLC Pico tr = 1,704 minutos. Pureza = 93 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 151
(±)-N-(cis-y frans-4-clorofenil)-2-(4-(6-yodoquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000103_0001
Intermedio 151A. 2-(4-(6-nitroquinolin-4-il)ciclohex-3-en-1-il)propanoato de etilo
Un tubo sellado de 350 ml se cargó con una mezcla de 4-cloro-6-nitroquinolina (2 g, 9,59 mmol), el intermedio 143E (3,04 g, 9,88 mmol), Na2CO3 (4,06 g, 38,4 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,554 g, 0,479 mmol) en dioxano (89 ml) y agua (29,6 ml). La reacción se calentó a 100 °C durante la noche. La reacción se neutralizó con agua y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo pardo. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 80 g, 60 ml/min, 0-45 % de EtOAc en hexanos durante 19 min, tr = 14 min) dio 151A (2,955 g, 8,34 mmol, 87 % de rendimiento) en forma de un residuo amarillo. ESI MS (M+H)+ = 355,2. HPLC Pico tr = 0,98 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Intermedio 151B. 2-(4-(6-aminoquinolin-4-il)ciclohexil)propanoato de etilo
A una solución de 151A (0,455 g, 1,284 mmol) en MeOH (6,42 ml) se le añadió formiato de amonio (0,405 g, 6,42 mmol) seguido por Pd/C (0,037 g, 0,347 mmol). La reacción se calentó a 70 °C durante 1 h. La reacción se filtró a través de CELITE® y la torta de filtro se lavó con CH2Ch. El filtrado se concentró. El material en bruto se extrajo en EtOAc y se lavó con una solución sat. ac. de NaHCO3 (2X). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener 151B (379 mg, 90 %) como un residuo pardo. La RMN mostró un producto puro deseado en 1,8:1 dr. ESI MS (M+H)+ = 327,3. HPLC Pico tr = 0,71 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Intermedio 151C. 2-(4-(6-yodoquinolin-4-il)ciclohexil)propanoato de etilo
Una solución de 151B (0,379 g, 1,161 mmol) y HCl ac. (0,59 ml) en agua (2,1 ml) se enfrió hasta 0 °C, luego una solución de nitrito de sodio (0,096 g, 1,393 mmol) en agua (2,1 ml) se añadió. Una solución de yoduro de potasio (0,289 g, 1,742 mmol) en agua (2,1 ml) se añadió gota a gota a la solución anterior después de disolver por completo el sólido. Después de la adición, la mezcla se agitó durante 30 min a temperatura ambiente, luego se calentó a 70 °C durante 1 h. Después de enfriar, la solución se neutralizó por adición lenta de una solución de Na2S2O3 (1,81 ml), luego se extrajo con CH2Ch (2X). La fase orgánica se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para obtener un residuo pardo. El material en bruto se disolvió en una cantidad mínima de CH2Ch y se cromatografió. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCo (columna de 40 g, 40 ml/min, 0-55 % de EtOAc en hexanos durante 15 min, tr = 10,5 min) dio 151C (92,7 mg, 0,212 mmol, 18,26 % de rendimiento) en forma de un residuo amarillo. ESI MS (M+H)+ = 438,1. HPLC Pico tr = 0,89 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Ejemplo 151. (±)-N-(cis- y trans-4-clorofenil)-2-(4-(6-yodoquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
A una solución de 4-cloroanilina (0,464 g, 3,64 mmol) en THF (2,8 ml) a 0 °C se le añadió una solución de cloruro de isopropilmagnesio (1,820 ml, 3,64 mmol). La solución resultante se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 5 min, luego 151C (0,796 g, 1,820 mmol) en THF (4,8 ml) se añadió gota a gota. La reacción se calentó a 70 °C durante 2 h, luego se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. Más cloruro de isopropilmagnesio (1,820 ml, 3,64 mmol) se añadió. La reacción se calentó durante 2 h más. La reacción se neutralizó con una solución acuosa saturada de NH4O y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 80 g, 60 ml/min, 0­ 65 % de EtOAc en hexanos durante 35 min, tr = 27 min) dio (±)-trans-Ejemplo 151 (455 mg, 0,702 mmol, 39 % de rendimiento) y (±)-cis-Ejemplo 151 (111 mg, 12 %). El diastereómero trans se eluye primero seguido por el diastereómero cis. ESI MS (M+H)+ = 519,1.
Ejemplo 152 (a), (b), (c) y (d)
(S)-N-(4-clorofenil)-2-((cis)-4-(6-yodoquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida y (R)-N-(4-clorofenil)-2-((cis)-4-(6-yodoquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida y (S)-N-(4-clorofenil)-2-((trans)-4-(6-yodoquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida y (R)-N-(4-clorofenil)-2-((trans)-4-(6-yodoquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida (homoquiral, estereoquímica absoluta y relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000104_0001
Aproximadamente 65,1 mg del ejemplo diastereomérico y racémico 9 se resolvieron. La mezcla isomérica se purificó por medio de SFC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: OJ-H, 25 x 3 cm ID, partículas de 5 pm; fase móvil A: 80/20 CO2/MeOH; Longitud de onda del detector: 220 nm; caudal: 150 ml/min. Las fracciones (152(a) “Pico-1” tr = 4,64 min, 152(b) “Pico-2” tr = 5,35 min, 152(c) y 152(d) “Pico-3” tr = 6,43 min) se recolectaron en MeOH. La pureza estereoisomérica del pico 1 y 2 se estimaron en más del 95 % en base a los cromatogramas de SFC prep. El pico 3 se repurificó por medio de SFC preparativa con las siguientes condiciones para dar los isómeros 3 y 4: Columna: Lux-Cellulose, 25 x 3 cm ID, partículas de 5 pm; fase móvil A: 75/25 CO2/MeOH; Longitud de onda del detector: 220 nm; caudal: 180 ml/min. Las fracciones (152(a) “Pico-1” tr = 7,63 min y 152(b) “Pico-2” tr = 8,6 min) se recolectaron en MeOH. La pureza estereoisomérica de las fracciones se estimó en más del 95 % en base a los cromatogramas de SFC prep. Cada diastereómero o enantiómero luego se purificó por medio de LC/MS preparativa:
Ejemplo 152(a) primer isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 50-100 % de B durante 20 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 1 (14,5 mg, 12 %). ESI MS (M+H)+ = 519,2. HPLC Pico tr = 2,530 minutos. Pureza = 92 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 152(b) segundo isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 50-100 % de B durante 20 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 2 (8,1 mg, 7,3 %). ESI MS (M+H)+ = 519,1. HPLC Pico tr = 2,470 minutos. Pureza = 100 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 152(c) Tercer isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 50-100 % de B durante 20 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 3 (13,7 mg, 12 %). ESI MS (M+H)+ = 519,1. HPLC Pico tr = 2,481 minutos. Pureza = 97 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 152(d) Cuarto isómero de elución: El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 50-100 % de B durante 20 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el isómero 4 (7,5 mg, 6,7 %). ESI MS (M+H)+ = 518,9. HPLC Pico tr = 2,361 minutos. Pureza = 99 %. Condiciones de HPLC: método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 153
(±)-2-((frans)-4-((1,8-naftiridin-4-il)oxi)ciclohexil)-N-(4-clorofenil)propanamida
Figure imgf000105_0001
Intermedios 153A y 153B. 2-((c/s)-4-hidroxicidohexil)propanoato de etilo (secundario) y 2-((trans)-4-hidroxiciclohexil)propanoato de etilo (principal)
A una solución del intermedio 143C (0,241 g, 1,216 mmol) en MeOH (6,08 ml) se le añadió borohidruro de sodio (0,047 g, 1,240 mmol). La reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se neutralizó con agua y se extrajo con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2X). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2¿O4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 40 g, 40 ml/min, 0-100 % de EtOAc en hexanos durante 19 min, tr = 10,5 min = c/s, 12 min = trans) dio 153A (173 mg, 71 %) y 153B (37 mg, 15 %). El producto principal es el trans. El producto secundario es el c/s. C/s se eluye primero. Trans se eluye segundo. ESI MS (M+H)+ = 201,1.
Intermedio 153C. 2-((trans)-4-((1,8-naftiridin-4-il)oxi)ciclohexil)propanoato de etilo
A una solución de 153B (59,5 mg, 0,297 mmol) en DMF (495 j l) se le añadió NaH (19,80 mg, 0,495 mmol). Después de 30 min, se añadió 4-bromo-1,8-naftiridina (51,8 mg, 0,248 mmol). La reacción se calentó a 80 °C durante la noche. La reacción se neutralizó con una solución acuosa sat. de NH4Cl y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2X). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo pardo. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 40 g, 40 ml/min, 0-20 % de MeOH en CH2Ch durante 9 min, tr = 7,5 min) dio 153C (59,8 mg, 0,182 mmol, 73,5 % de rendimiento) en forma de un residuo incoloro. ESI MS (M+H)+ = 329,2. HPLC Pico tr = 0,72 minutos. Condiciones de HPLC: método A.
Ejemplo de referencia 153. (±)-2-((trans)-4-((1,8-naftiridin-4-il)oxi)ciclohexil)-N-(4-clorofenil) propanamida
A una solución de 4-cloroanilina (0,080 g, 0,628 mmol) en THF (0,1 ml) a 0 °C se le añadió una solución de cloruro de isopropilmagnesio (0,314 ml, 0,628 mmol). La solución resultante se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 5 min, luego el intermedio 153C (0,0516 g, 0,157 mmol) en THF (0,38 ml) se añadió gota a gota. La reacción se calentó a 70 °C durante 2 h, luego se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con una solución acuosa saturada de NH4Cl y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para obtener un residuo. El material en bruto se purificó por medio de LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 * 200 mm, partículas de 5 pm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 20-60 % de B durante 20 minutos, luego mantenimiento de 5 minutos a 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por medio de evaporación centrífuga para obtener el ejemplo de referencia 153 en forma de un racemato (6,7 mg, 10 %). ESI MS (M+H)+ = 410,2. HPLC Pico tr = 1,803 minutos. Pureza = 99 %. Condiciones de HPLC: método B.
Ejemplo 154
N -(4 -c lo ro fe n il)-2 -(4 -(6 -flu o ro q u in o lin -4 - il)c ic lo h e x il)b u ta n a m id a (m e zc la de cu a tro isó m e ro s)
Figure imgf000106_0001
Intermedio 154A. 2-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-iliden)acetato de etilo
A un recipiente que contenía hidruro de sodio (46,1 g, 1153 mmol) se le añadió THF (1200 ml) a 0 °C bajo nitrógeno. Luego fosfonoacetato de trietilo (258 g, 1153 mmol) se añadió gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 minutos. Luego 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ona (150 g, 960 mmol) se añadió y se agitó a 0 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. La mezcla de reacción se neutralizó con agua (500 ml) y la mezcla se concentró al vacío. El residuo se extrajo con acetato de etilo (3 * 1000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua (500 ml) y salmuera (500 ml) sucesivamente. El filtrado se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó por medio de cromatografía ultrarrápida en columna, eluyendo con 0-30 % de acetato de etilo en éter de petróleo para dar el intermedio 154A (aceite amarillo pálido, 135 g, 597 mmol, 62,1 % de rendimiento). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 5,66 (s, 1H), 4,14 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,02 - 3,82 (m, 4H), 3,24 - 2,86 (m, 2H), 2,63 - 2,27 (m, 2H), 1,98 - 1,68 (m, 4H), 1,27 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Intermedio 154B. 2-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)acetato de etilo
El intermedio 154A (13,88 g, 61,3 mmol) se extrajo en EtOAc (61,3 ml) y se añadió a una botella de hidrogenación Parr con contenido de paladio sobre carbón (1,306 g, 12,27 mmol) (54 % p/p agua) 10 % Pd/C bajo una atmósfera de nitrógeno. La botella de reacción se purgó con nitrógeno, luego con hidrógeno. Después de rellenar la botella con hidrógeno hasta 344,738 kPa (50 psi), la botella se colocó en un agitador Parr y se agitó. Después de 4 horas, la mezcla de reacción se filtró sobre CELITE® comprimido y se concentró al vacío para dar el intermedio 154B 2-(1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il)acetato de etilo (aceite incoloro, 13,78 g, 60,4 mmol, 98 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C12H20O4228,14, experimental [M+H] 229,1. Tr = 0,83 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 4,31 - 4,08 (m, 2H), 4,00 - 3,86 (m, 4H), 2,22 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,91 - 1,79 (m, 1H), 1,78 - 1,70 (m, 4H), 1,63 -1,50 (m, 2H), 1,37 -1,14 (m, 5H).
Intermedio 154C. 2-(4-oxociclohexil)acetato de etilo
En un reactor de 10 litros se extrajo el intermedio 154B (67,5 g, 296 mmol) en acetona (5000 ml). A la mezcla de reacción se le añadió solución 1 M de HCl (1183 ml, 1183 mmol) y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró para remover la acetona. El residuo se extrajo con acetato de etilo (3 * 1000 ml). La capa orgánica combinada se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó a través de cromatografía ultrarrápida en columna, eluyendo con 0-20 % de acetato de etilo en éter de petróleo para dar el intermedio 154C (líquido amarillo pálido, 40 g, 217 mmol, 73,4 % de rendimiento). GC-MS Anal. calc. para C10H16O3, 184,11 exp. [M] 184. Tr = 10,03 min (Método C).
Intermedio 154D. 2-(4-(trifluorometilsulfoniloxi)ciclohex-3-enil)acetato de etilo
En un matraz de 4 bocas de 2 litros se extrajo 2,6-di-terc-butil-4-metilpiridina (84 g, 407 mmol) en diclorometano (500 ml) bajo nitrógeno. Anhídrido tríflico (55,0 ml, 326 mmol) se añadió gota a gota. Luego una solución del intermedio 154C (50 g, 271 mmol) en diclorometano (500 ml) se añadió lentamente. Después de completar la adición, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con 1000 ml de diclorometano y se lavó con agua y solución de carbonato de sodio y luego agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó a través de cromatografía ultrarrápida en columna, eluyendo con 0-10 % de acetato de etilo en éter de petróleo para dar el intermedio 154D (aceite amarillo pálido, 65 g, 206 mmol, 76 % de rendimiento). GC-MS Anal. calc. para C11H15F3O5S, 316,06 exp. [M] 317. Tr = 10,16 min (Método C).
Intermedio 154E. 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enil)acetato de etilo
En un matraz de 4 bocas de 2 litros se extrajo el intermedio 154D (120 g, 379 mmol), bis(pinacolato)diboro (106 g, 417 mmol) y acetato de potasio (112 g, 1138 mmol) en 1,4-dioxano (1200 ml) bajo nitrógeno. Nitrógeno se purgó dentro de la mezcla de reacción durante 10 minutos. Luego se añadió complejo de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-didoruro de paladio diclorometano (15,49 g, 18,97 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró. El residuo se dividió en acetato de etilo y agua, se filtró a través de lecho de CELITE®. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3X). La capa orgánica combinada se lavó con agua, salmuera y se secó sobre sulfato de sodio y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó a través de cromatografía ultrarrápida en columna, eluyendo con 0-10 % de acetato de etilo en éter de petróleo para dar el intermedio 154E (aceite amarillo pálido, 56 g, 190 mmol, 50,2 % de rendimiento). GC-MS Anal. calc. para C16H27BO4, 294,20 exp [M] 295,3. Tr = 1,10 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 6,52 (dd, J = 4,1, 1,9 Hz, 1H), 4,14 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,62 - 1,97 (m, 6H), 1,94 - 1,68 (m, 2H), 1,33 - 1,21 (m, 16H)
Intermedio 154F. 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohex-3-en-1-il)acetato de etilo
2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)acetato de etilo ( Intermedio 154E) (5 g, 17,00 mmol) se extrajo en dioxano (28,3 ml) y agua (7,08 ml). 4-cloro-6-fluoroquinolina (2,57 g, 14,15 mmol) se añadió seguido por K2CO3 (5,87 g, 42,5 mmol). La mezcla se burbujeó con gas nitrógeno durante 5 minutos antes de la adición de Pd(Ph3P)4 (0,327 g, 0,283 mmol). Después de la adición, la reacción se vacío y se rellenó con N2 tres veces y luego se cerró herméticamente (se cerró herméticamente el vial con parafilm) y se calentó hasta 100 °C durante 16 horas. La reacción se concentró al vacío y se purificó directamente por medio de cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice para dar el intermedio 154F (4,22 g, 13,47 mmol, 95 % de rendimiento). l C-MS Anal. calc. para C19H20FNO2313,15, experimental [M+H] 314,1 Tr = 0,75 min (Método A).
Intermedio 154G. 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)acetato de etilo
El intermedio 154F (4,22 g, 13,47 mmol) se disolvió en MeOH (67,3 ml) y se añadió formiato de amonio (4,25 g, 67,3 mmol). El recipiente se equipó con un condensador de reflujo y se vació y se inundó con gas nitrógeno 3 veces. A continuación, paladio sobre carbón (0,143 g, 1,347 mmol) (húmedo, tipo Degussa) se añadió y la reacción se calentó a reflujo durante 1 hora. La reacción se enfrió, se concentró al vacío y se diluyó con DCM. Los sólidos se filtraron y el filtrado se concentró para dar intermedio en bruto 154G (4,20 g, 13,32 mmol, 99 % de rendimiento) como una mezcla de diastereómeros cis y trans. LC-MS Anal. calc. para C19H22FNO2315,16, experimental [M+H] 316,2 Tr = 0,76 min (Método A).
Intermedio 154H. 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)butanoato de etilo
Al recipiente que contenía THF (6 ml) se le añadió diisopropilamida de litio (2,0 M solución en THF) (3,17 ml, 6,34 mmol) a -78 °C, seguido por adición de 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona (0,573 ml, 4,76 mmol) y una solución del intermedio 154G (1,0 g, 3,17 mmol) en THF (10 ml) gota a gota a -78 °C. La mezcla resultante se volvió una solución parda y se agitó a -78 °C durante 1 h, luego yodoetano (0,51 ml, 6,34 mmol) se añadió lentamente. La mezcla de reacción luego se agitó a temperatura de baño de enfriamiento durante 1 h, se calentó hasta temperatura ambiente durante la noche. La reacción se neutralizó vertiendo en agua y extrayendo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó con MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en DCM y se purificó por gel de sílice cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 0-20 % de acetato de etilo en hexano para dar el intermedio 154H (aceite, 0,81 g, 2,359 mmol, 74,4 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C21H26FNO2, 343,19 exp. [M+H] 344,3. Tr = 0,87-0,88 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 8,88 -8,77 (m, 1H), 8,18 -8,06 (m, 1H), 7,66 (dd, J = 10,6, 2,6 Hz, 1H), 7,47 (ddd, J = 9,2, 8,0, 2,9 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 4,25 - 4,15 (m, 2H), 3,34 -3,09 (m, 1H), 2,70 -2,16 (m, 1H), 2,13 -1,49 (m, 13 H), 1,36 - 1,24 (m, 3H), 1,00 -0,90 (m, 3H)
Intermedio 154I. Ácido 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)butanoico
A una solución de 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)butanoato de etilo (0,81 g, 2,359 mmol) en THF (4 ml) y MeOH (7 ml) se le añadió solución 2,0 M de LiOH (7,1 ml, 14,2 mmol) lentamente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Al día siguiente, a la mezcla de reacción se le añadió más solución de LiOH (7,1 ml, 14,2 mmol) y la mezcla de reacción resultante se calentó a 70 °C durante 28 h. La mezcla de reacción se enfrió y a la mezcla se le añadió acetato de etilo. La capa acuosa se separó y a la capa acuosa se le añadió HCl 1 N solución para ajustar el pH a 5-6. La mezcla resultante se diluyó con agua y CHCh: 2-propanol (2:1). La capa orgánica se separó y se secó sobre MgSO4. El filtrado se concentró al vacío para dar el intermedio 154I como una mezcla de isómero cis y trans (3:2) (0,64 g, 2,029 mmol, 86 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C19H22FNO2315,16 exp.
[M+H] 316,3. Tr = 0,72 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, cloroformo-d) 8: 8,83 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,30 - 8,03 (m, 1H), 7,67 (dd, J = 10,6, 2,4 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 9,2, 7,9, 2,6 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 7,32 - 7,27 (m, 1H), 3,37 -3,07 (m, 1H), 2,77 -2,21 (m, 1H), 2,11 -1,30 (m, 11H), 1,07 - 1,00 (m, 3H).
Ejemplo 154: N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)butanamida
A una solución del intermedio 154I (60 mg, 0,190 mmol) se le añadió cloruro de tionilo (0,21 ml, 2,85 mmol) y 1 gota de DMF. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y la mezcla se diluyó con tolueno 5 ml y se concentró al vacío. El residuo se secó a alto vacío durante 1 h. Al residuo se le añadió acetonitrilo (3 ml), 4-cloroanilina (36,4 mg, 0,285 mmol) y 4-metilmorfolina (0,13 ml, 1,14 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,6 h. La mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 1 h. A la mezcla de reacción se le añadió más 4-metilmorfolina (0,13 ml, 1,14 mmol) y la mezcla de reacción resultante se calentó a 70 °C durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y salmuera. La capa orgánica se separó y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en MeOH, se filtró y se purificó por medio de HPLC preparativa para dar el ejemplo 155 como una mezcla de 4 isómeros (7,1 mg, 0,017 mmol, 8,8 % de rendimiento). LC-MS Anal. calc. para C25H26CFN2O, 424,17, experimental [M+H] 425,3. Tr = 1,72 min (Método K). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 8: 10,31 - 9,93 (m, 1H), 9,00 - 8,68 (m, 1H), 8,09 (dd, J = 8,9, 5,9 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,7 Hz, 3H), 7,61 - 7,42 (m, 1H), 7,34 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 3,40 -3,31 (m, 1H), 2,84 -2,64 (m, 1H), 2,05 -1,15 (m, 11H), 0,96 -0,70 (m, 3H).
Ejemplo 155
(R)-N-(4-clorofenil)-4-hidroxi-2-((c/s)-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)butanamida
Figure imgf000108_0001
Intermedio 155A: (R)-W-(4-clorofenil)-4-oxo-2-((c/s)-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)butanamida
Figure imgf000108_0002
A una solución de Ejemplo 224 (0,63 g, 1,5 mmol) en 15 ml de una mezcla 3:1 de dioxano y agua, se le añadió NaIO4 (1,28 g, 6 mmol) y 2,6-lutidina (0,32 g, 3 mmol) para dar una suspensión blanca. Luego se añadió OsO4 (5 vol %, 0,15 ml). Después de 2 horas, la reacción se completó por TLC. Se neutralizó con agua y se extrajo tres veces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera y luego se secaron sobre MgSO4. La filtración y la concentración dio como resultado la preparación 155A en bruto en forma de un aceite pardo que se usó sin ulterior purificación.
Ejemplo 155: (R)-A/-(4-clorofenil)-4-hidroxi-2-((c/s)-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)butanamida
A una solución del intermedio 155A (0,16 g, 0,38 mmol) en MeOH (3,8 ml) se le añadió borhidruro de sodio (0,043 g, 1,14 mmol). Después de 1 hora, la reacción se neutralizó con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con una solución de 10 % de MeOH en EtOAc. La cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice dio como resultado 2,2 mg del ejemplo 155 en forma de un sólido blanco. MS(ES): m/z = 443,3 [M+H]+. Tr = 2,72 min (Método L).
Ejemplos de referencia 156(a) y 156(b)
N-(4-clorofenil)-2-((c/s)-4-ciano-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida y N-(4-clorofenil)-2-((frans)-4-ciano-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Figure imgf000108_0003
In te rm e d io 156A: 4 -o xo -1 -(q u in o lin -4 - il)c ic lo h e x a n o -1 -c a rb o n itr ilo
Figure imgf000109_0001
A una solución de 2-(quinolin-4-il)acetonitrilo (2,0 g, 11,4 mmol) en THF (30 ml) se le añadió acrilato de etilo (2,38 g, 23,8 mmol) seguido por ferc-butóxido de potasio (1,6 g, 14,3 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente. Después de 1 hora, agua (200 ml) se añadió seguido por calentamiento hasta 85 °C durante 18 horas. La reacción luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se extrajo tres veces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera y se secaron sobre MgSO4. La filtración y la posterior concentración dio el producto en bruto en forma de un aceite pardo. La purificación por medio de cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (0-100 % de EtOAc en hexanos) dio el intermedio 156A (800 mg) en forma de un sólido blanco.
Intermedio 156B: 2-(4-ciano-4-(quinolin-4-il)ciclohexiliden)acetato de etilo
Figure imgf000109_0002
A una solución de 2-(dietoxifosforil)acetato de etilo (0,75 g, 3,36 mmol) en THF (7 ml) se le añadió ferc-butóxido de sodio (0,32 g, 3,36 mmol) a 0 °C. Después de 10 minutos, una solución del intermedio 156A (0,80 g, 3,2 mmol) en THF (3 ml) se añadió a la reacción. Después de 2 horas más, la reacción se neutralizó con agua, se extrajo tres veces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se filtraron para dar el producto en bruto. La purificación por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (85 % de EtOAc/hexanos) dio el intermedio 156B (1,0 g) en forma de un sólido blanco.
Intermedio 156C: 2-(4-ciano-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetato de etilo
Figure imgf000109_0003
A una solución de la preparación 156 B (1,00 g, 3,13 mmol) en MeOH (31 ml) se le añadió Pd/C (tipo Degussa, 0,10 g, 10 % Pd). Se introdujo hidrógeno por medio de un balón. Después de 16 horas a temperatura ambiente, la reacción se purgó con argón y luego se filtró a través de celite enjuagando con DCM. La concentración dio como resultado la preparación 156 C en bruto como una mezcla de isómeros cis y trans que se usó sin ulterior purificación.
Ejemplos 156(a) y 156(b): W-(4-clorofenil)-2-((cis)-4-ciano-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida y W-(4-clorofenil)-2-((frans)-4-ciano-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (estereoquímica relativa no determinada y asignada arbitrariamente)
Los ejemplos 156A y 156B se prepararon por medio del método descrito en el procedimiento general G para obtener una mezcla de isómeros cis y trans. Se separaron por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice para dar el ejemplo 156A y el ejemplo 156B.
Ejemplo 156A MS(ES): m/z = 393,2 [M+H]+. Tr = 0,84 min (Método M).
Ejemplo 156B MS(ES): m/z = 393,2 [M+H]+. Tr = 2,77 min (Método L).
Ejemplo 157
(R)-N-(4-clorofenil)-5-hidroxi-2-((cis)-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)pentanamida
A una solución de Ejemplo 224 (0,140 g, 0,33 mmol) en THF (3,3 ml) a -78 °C, se le añadió BH3-DMS (0,189 ml, 0,37 mmol, 2,0 M sol.) seguido por calentamiento hasta temperatura ambiente. Después de 2 horas a temperatura ambiente, la solución se enfrió hasta -78 °C y 5 ml de NaOH 1 N y 5 ml de 30 % de peróxido de hidrógeno se añadieron seguido por calentamiento hasta temperatura ambiente. Después de 5 horas, se neutralizó con NH4Cl sat ac y se extrajo tres veces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera y se secaron sobre MgSO4. La filtración y la concentración dio el producto en bruto. La purificación por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice dio el ejemplo 157 en forma de un sólido blanco. MS(ES): m/z = 394,2 [M+H]+. Tr = 0,81 min (Método M).
Ejemplo 158
N-(4-clorofenil)-2-(1-metoxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada)
Figure imgf000110_0001
Intermedio 158A: 2-(1-metoxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetato de etilo
Figure imgf000110_0002
A una solución de 2-(1-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetato de etilo (0,22 g, 0,69 mmol), preparada por los métodos en el ejemplo 30, en DME (3 ml) a -78 °C se le añadió KHMDS (1,5 ml, 0,5 M en tolueno, 0,756 mmol) seguido por 18-corona-6 (0,20 g, 0,756 mmol). Después de 30 minutos, Mel (0,057 ml, 0,756 mmol) se añadió. Después de 30 minutos más, la reacción se neutralizó con NH4Cl sat ac y agua. Se extrajo tres veces con EtOAc, las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para dar el intermedio 158 A en bruto en forma de un isómero simple, estereoquímica no confirmada.
Ejemplo 158
W-(4-clorofenil)-2-(1-metoxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
El ejemplo 158 se preparó a partir del intermedio 158A por medio de los métodos mostrados en el ejemplo 30. Se aísla en forma de un isómero simple, estereoquímica relativa no determinada. MS(ES): m/z = 379,2 [M+H]+. Tr = 2,29 min (Método L).
Ejemplo 159
N-(4-fluorofenil)-2-(4-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada)
Figure imgf000110_0003
In te rm e d io 159A: 2 -(4 -h id ro x i-4 -(q u in o lin -4 - il)c ic lo h e x il)a c e ta to de e tilo
Figure imgf000111_0001
A una solución de 4-bromoquinolina (0,36 g, 1,75 mmol) en THF (8 ml) a -78 °C se le añadió íerc-butil litio (solución 1,7 M, 2,1 ml, 3,51 mmol). Después de 5 minutos, una solución de 2-(4-oxociclohexil)acetato de etilo (0,294 g, 1,60 mmol) en THF (2 ml) se añadió. Después de 1 hora, NaOH 1 N se añadió seguido por calentamiento hasta temperatura ambiente. La mezcla luego se extrajo tres veces con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera. Las capas orgánicas se secaron luego sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para dar el producto en bruto. Se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice eluyendo con 0 - 100 % de EtOAc en hexanos para obtener el intermedio 159A (214 mg) en forma de un aceite amarillo.
Ejemplo 159: W-(4-fluorofenil)-2-(4-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada)
El ejemplo 159 se preparó a partir del intermedio 159A y 4-fluoroanilina por los métodos descritos en el método general G. El ejemplo 159 se aisló en forma de un isómero simple después de cristalización después de concentrar, estereoquímica no confirmada. MS(ES): m/z = 393,2[M+H]+. Tr = 2,77 min (Método L).
Ejemplo 160
N-(4-clorofenil)-2-(4-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida (diastereómero simple, estereoquímica relativa no determinada)
Figure imgf000111_0002
Ejemplo 160: W-(4-clorofenil)-2-(4-hidroxi-4-(quinolin-4-il)ciclohexil)acetamida
El ejemplo 160 se preparó a partir de la Preparación 159A y 4-cloroanilina por los métodos descritos en el método general G. El ejemplo 160 se aisló en forma de un isómero simple después de cristalización después de concentrar, estereoquímica no confirmada. MS(ES): m/z = 431,3 [M+H]+. Tr = 0,85 min (Método M).
Tabla 7.
Figure imgf000111_0003
continuación
Figure imgf000112_0001
continuación
Figure imgf000113_0001
continuación
Figure imgf000114_0001
continuación
Figure imgf000115_0001
continuación
Figure imgf000116_0001
continuación
Figure imgf000117_0001
continuación
Figure imgf000118_0001
continuación
Figure imgf000119_0001
continuación
Figure imgf000120_0001
continuación
Figure imgf000121_0001
continuación
Figure imgf000122_0001
Tabla 8.
Figure imgf000123_0001
continuación
Figure imgf000124_0001
Ejemplos 229 y 230
Ejemplo 229: N-(4-dorofeml)-2-(frans-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡ddohex¡l)propanam¡da
Ejemplo 230: N-(4-dorofeml)-2-(frans-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡ddohex¡l)propanam¡da (estereoquímica absoluta desconoc¡da)
Figure imgf000125_0001
229A: 2-(frans-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡c¡clohex¡l)propanoato de metilo
Figure imgf000125_0002
229B: 2-(c/s-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡c¡dohex¡l)propanoato de met¡lo
Figure imgf000125_0003
A una soluc¡ón de 4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)ddohexanona (200 mg, 0,822 mmol), 2-bromopropanoato de met¡lo (275 mg, 1,644 mmol) en CH3CN (6 ml) a 0 °C se le añadió cloruro de tr¡s(tr¡fen¡lfosf¡no)rod¡o (I) (45,6 mg, 0,049 mmol). La reacción se agitó a 0 °C durante 30 m¡n. Después se añad¡ó d¡et¡lc¡nc (soluc¡ón 1,0 M en heptano) (1,726 ml, 1,726 mmol). La reacc¡ón se ag¡tó a TA durante 16 h. La reacc¡ón se diluyó con EtOAc y NH4Cl saturado. Los productos orgán¡cos se separaron y se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y se concentraron para dar un mater¡al en bruto. Este mater¡al en bruto se pur¡f¡có con ISCO 24 g, 40 ml/m¡n. 0-100 % de EtOAc/Hexano en 50 m¡n. El producto 229A (87 mg, 0,26 mmol, 32 %) se eluyó con 50 % de EtOAc/Hexano. El producto 229B (122 mg, 0,364 mmol, 44 %) se eluyó con 60 % de EtOAc/Hexano.
229A: RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,83 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,14 (dd, J = 9,2, 5,7 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 10.5, 2,8 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = ,2, 8,0, 2,8 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,65 (s, 1H), 3,36 -3,23 (m, 1H), 3,08 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 2,18 -2,08 (m, 1H), 2,06 - 1,94 (m, 2H), 1,94 - 1,81 (m, 2H), 1,79 - 1,68 (m, 3H), 1,68 -1,51 (m, 1H), 1,36 - 1,23 (m, 3H) LC-MS: M+H = 332,2 (tr = 0,59 m¡n) (Método A)
229B: RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,84 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,14 (dd, J = 9,2, 5,7 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 10.6, 2,8 Hz, 1H), 7,49 (ddd, J = 9,1, 8,0, 2,8 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,21 - 3,04 (m, 2H), 2,56 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 2,18 -1,97 (m, 3H), 1,93 - 1,67 (m, 5H), 1,65 (s, 2H), 1,55 -1,41 (m, 1H), 1,36 - 1,23 (m, 3H)
Ejemplos 229 y 230
A una soluc¡ón de 4-cloroan¡l¡na (63,5 mg, 0,498 mmol) en THF (1 ml) a Ta se le añad¡ó ¡PrMgCl (2,0 M en THF) (0,415 ml, 0,830 mmol) gota a gota. Aparec¡eron burbujas. La reacc¡ón se agitó a Ta durante 5 m¡n. Después se añad¡ó 229A (55 mg, 0,166 mmol) en THF (0,3 ml). La reacc¡ón se agitó a 70 °C durante 1 h. La reacc¡ón se diluyó con NH4Cl saturado y EtOAc. Los productos orgánicos se separaron y se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a sequedad. El material en bruto se purificó con una columna ISCO de 24 g, 35 ml/min. 0­ 100 % de EtOAc/Hexano en 30 min. El producto deseado se eluyó con 80 % de EtOAc/Hexano para dar N-(4 clorofen¡l)-2-(frans-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡c¡clohex¡l)propanam¡da (58 mg, 0,135 mmol, 81 % de rendimiento) en forma de un sólido amar¡llo.
El racemato se pur¡f¡có por SFC preparat¡va con las s¡gu¡entes cond¡c¡ones: Columna: Ch¡ral OD-H 25 x 3 cm ID, partículas de 5 mm; fase móv¡l A: 70/30 CO2/MeOH; detector de longitud de onda: 220 nm; caudal: 100 ml/m¡n.
Fracc¡ones ("P¡co 1" tr = 3,98 m¡n (Ejemplo 229) y "P¡co 2" tr = 4,99 m¡n (Ejemplo 230);
Ejemplo 229: RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,83 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,14 (dd, J = 9,2, 5,7 Hz, 1H), 7,67
(dd, J = 10,5, 2,8 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = 9,2, 8,0, 2,8 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,65 (s, 1H), 3,36
- 3,23 (m, 1H), 3,08 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 2,18 -2,08 (m, 1H), 2,06 - 1,94 (m, 2H), 1,94 - 1,81 (m, 2H), 1,79 - 1,68 3H), 1,68-1,51 (m, 1H), 1,36 - 1,23 (m, 3H) LC-MS: M+H = 332,2 (tr = 0,59 m¡n)
Ejemplo 230: RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,83 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 8,14 (dd, J = 9,2, 5,7 Hz, 1H), 7,67
(dd, J = 10,5, 2,8 Hz, 1H), 7,50 (ddd, J = 9,2, 8,0, 2,8 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,65 (s, 1H), 3,36
- 3,23 (m, 1H), 3,08 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 2,18 -2,08 (m, 1H), 2,06 - 1,94 (m, 2H), 1,94 - 1,81 (m, 2H), 1,79 - 1,68 3H), 1,68-1,51 (m, 1H), 1,36 - 1,23 (m, 3H) LC-MS: M+H = 332,2 (tr = 0,59 m¡n) (Método A)
Ejemplo 231 y 232
Ejemplo 231: N-(4-dorofen¡l)-2-(ds-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡ddohex¡l)propanam¡da
Ejemplo 232: N-(4-dorofen¡l)-2-(ds-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡ddohex¡l)propanam¡da (estereoquím¡ca absoluta desconoc¡da)
Figure imgf000126_0001
A una soluc¡ón de 4-cloroan¡l¡na (61,2 mg, 0,480 mmol) en THF (2 ml) a TA se le añad¡ó ¡PrMgCl (2,0 M en THF) (0,400 ml, 0,800 mmol) gota a gota. Aparec¡eron burbujas. La mezcla se ag¡tó a TA durante 5 m¡n. Se añad¡ó la preparac¡ón
229B (53 mg, 0,160 mmol). La reacc¡ón se calentó 70 °C durante 1 h. Se enfr¡ó a TA. La mezcla se d¡luyó con NH4Cl saturado y EtOAc. Los productos orgán¡cos se separaron y se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y se concentraron a sequedad. El mater¡al en bruto se pur¡f¡có con columna ISCO 24 g, 35 ml/m¡n. 0-100 %
de EtOAc/Hexano en 45 m¡n. El producto deseado se eluyó con 75 % de EtOAc/Hexano para proporc¡onar N-(4-clorofen¡l)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)-1-h¡drox¡c¡clohex¡l) propanam¡da (55 mg, 0,128 mmol, 80 % de rend¡m¡ento) como un sólido blanco. El racemato se pur¡f¡có por SFC preparativa con las cond¡c¡ones s¡gu¡entes:
Columna: Ch¡ral OD-H 25 x 3 cm ID, partículas de 5 mm; fase móv¡l A: 70/30 CO2/MeOH; detector de longitud de onda:
220 nm; caudal: 100 ml/m¡n. Las fracc¡ones ("P¡co 1" tr = 4,58 m¡n (Ejemplo 231) y "P¡co 2" tr = 5,33 m¡n (Ejemplo
232);
Ejemplo 231: RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,83 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,14 (dd, J = 9,2, 5,7 Hz, 1H), 7,94 (s,
1H), 7,66 (dd, J = 10,6, 2,8 Hz, 1H), 7,55 - 7,45 (m, 3H), 7,38 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 7,35 - 7,31 (m, 2H), 3,60 (s, a,, 1H),
3,24 -3,02 (m, 1H), 2,38 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 2,21 -1,95 (m, 3H), 1,95 - 1,83 (m, 2H), 1,80 - 1,64 (m, 2H), 1,49 (td, J =
13,3, 4,1 Hz, 1H), 1,42 (d, J = 7,1 Hz, 3H) LC-MS: M+H = 332,2 (tr = 0,78 m¡n) (Método A)
Ejemplo 232: RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,83 (d, J=4,5 Hz, 1H), 8,14 (dd, J=9,2, 5,7 Hz, 1H), 7,94 (s,
1H), 7,66 (dd, J=10,6, 2,8 Hz, 1H), 7,55 -7,45 (m, 3H), 7,38 (d, J=4,6 Hz, 1H), 7,35 -7,31 (m, 2H), 3,60 (s, a, 1H), 3,24
- 3,02 (m, 1H), 2,38 (q, J=7,1 Hz, 1H), 2,21 - 1,95 (m, 3H), 1,95 - 1,83 (m, 2H), 1,80 - 1,64 (m, 2H), 1,49 (td, J=13,3,
4,1 Hz, 1H), 1,42 (d, J=7,1 Hz, 3H) LC-MS: M+H=332,2 (tr=0,78 m¡n) (Método A)
Ejemplo 233
(+/-)-N-(4-clorofen¡l)-2-(frans-1-fluoro-4-(6-fluoroqu¡nol¡n-4-¡l)c¡clohex¡l)propanam¡da
Figure imgf000127_0001
A una solución de 229B (20 mg, 0,047 mmol) en CH2CI2 (1 ml) a TA se le añadió trifluoruro de dietilaminoazufre (0,019 ml, 0,141 mmol). La reacción se agitó a TA durante 3 h. La reacción se diluyó con agua y EtOAc. Los productos orgánicos se separaron y se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a sequedad. El material en bruto se purificó por LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; gradiente: 25-50 % de B durante 25 minutos, después una parada de 2 minutos al 50 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga. El material se purificó adicionalmente mediante LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 50-75 % de B durante 25 minutos, después una parada de 2 minutos a 75 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron mediante evaporación centrífuga. El rendimiento del ejemplo 233 fue de 0,5 mg (1,17 mmol, 2,5 %) RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8 10,13 (s, 1H), 8,84 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 8,15 - 8,00 (m, 2H), 7,72 - 7,55 (m, 4H), 7,36 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 3,21 - 3,12 (m, 1H), 2,15 (s, a, 1H), 2,06 (s, a, 1H), 1,94 (d, J = 9,0 Hz, 3H), 1,88 (s, a, 2H), 1,66 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 3H) LC-MS: M+H = 429,0 (tr = 0,82 min) (Método A)
Ejemplos 234, 235, 236, 237
Ejemplo 234: N-(4-clorofenil)-2-(frans-4-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-hidroxiciclohexil)propanamida (estereoquímica absoluta desconocida)
Ejemplo 235: N-(4-clorofenil)-2-(frans-4-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-hidroxiciclohexil)propanamida (estereoquímica absoluta desconocida)
Figure imgf000127_0002
Ejemplo 236: N-(4-clorofenil)-2(c/s-4-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-hidroxiciclohexil)propanamida (estereoquímica absoluta desconocida)
Ejemplo 237: N-(4-clorofenil)-2(c/s-4-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-hidroxiciclohexil)propanamida (estereoquímica absoluta desconocida)
Figure imgf000128_0001
234A: 2-(4-(6-fluoroquinoNn-4-N)-4-hidroxicidohexN)propionato de etilo
Figure imgf000128_0002
A una solución de 4-bromo-6-fluoroquinolina (163 mg, 0,721 mmol) en THF (5 ml) a -78 °C se le añadió t-BuLi (1,7 M-3,2 M en Heptano) (0,849 ml, 1,443 mmol) gota a gota. Cambió de transparente a color pardo oscuro. La reacción se agitó a -78 °C durante 3 min. Después se añadió propanoato de 2-(4-oxociclohexilo) (130 mg, 0,656 mmol) en THF (1 ml) gota a gota. La reacción se agitó a -78 °C durante 1 h. La reacción se diluyó con NH4Cl saturado y EtOAc. El producto orgánico se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para dar un material en bruto. Este material se purificó con ISCO 40 g, 40 ml/min. 0-100 % de EtOAc/Hexano en 35 min. El producto deseado se eluyó con 55% de EtOAc/Hexano para dar 234A (100 mg, 0,290 mmol, 44 %) en forma de una mezcla de los diastereómeros.
234B: N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-hidroxiciclohexil)propanamida
Figure imgf000128_0003
A una solución de 4-cloroanilina (111 mg, 0,869 mmol) en THF (2 ml) a TA se le añadió iPrMgBr (2,0 M en THF) (0,724 ml, 1,448 mmol) gota a gota. Aparecieron burbujas. La reacción se agitó a TA durante 5 min. Después se añadió 234A (100 mg, 0,29 mmol) en THF (1 ml). La reacción se agitó a 70 °C durante 1 h. Después se enfrió a TA y se diluyó con NH4Cl saturado y EtOAc. El producto orgánico se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó con columna ISCO 24 g, 35 ml/min. 0-100 % de EtOAc/Hexano en 30 min. El producto deseado se eluyó con 80 % de EtOAc/Hexano para dar 234B (110 mg, 0,258 mmol, 89 %) como la mezcla de diastereómeros.
La mezcla de diastereómeros 234B se purificó por SFC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Whelk-O R, R Kromasil 25 x 3 cm ID, partículas de 5 mm; fase móvil A: 75/25 de CO2/MeOH; detector de longitud de onda: 220 nm; caudal: 100 ml/min. Las fracciones ("Pico 1" tr = 9,94 min (ejemplo 234) y "Pico 2" tr = 11,49 min (ejemplo 236); "Pico 3" tr = 13,23 min (ejemplo 235) y "Pico 4" tr = 14,63 min (ejemplo 237);
Ejemplos 234 y 235: 5 mg cada uno (0,011 mmol, 4,44 %) RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,86 - 8,74 (m, 1H), 8,53 (dd, J=11,7, 2,8 Hz, 1H), 8,13 (dd, J=9,2, 5,9 Hz, 1H), 7,57 -7,39 (m, 4H), 7,35 -7,26 (m, 2H), 7,22 (s, 1H), 2,59 (d, J=7,3 Hz, 2H), 2,27 - 2,16 (m, 1H), 2,09 - 1,86 (m, 5H), 1,38 -1,18 (m, 6H); LC-MS: M+H=427,1 (tr=0,78 min) (Método A)
Ejemplos 236 y 237: 40 mg cada uno (0,093 mmol, 36,2 %) RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,83 (d, J=4,6 Hz, 1H), 8,52 (dd, J=11,7, 2,8 Hz, 1H), 8,14 (dd, J=9,3, 6,0 Hz, 1H), 7,58 - 7,53 (m, J=8,8 Hz, 2H), 7,49 (ddd, J=9,2, 7,6, 2,8 Hz, 1H), 7,42 (d, J=4,5 Hz, 1H), 7,39 -7,30 (m, 2H), 7,20 (s, 1H), 2,38 -2,16 (m, 3H), 2,09 -1,91 (m, 3H), 1,88 -1,71 (m, 5H), 1,40 - 1,30 (m, 3H); LC-MS: M+H=427,1 (tr=0,78 min) (Método A)
Los ejemplos 238 - 241 se obtuvieron siguiendo los procedimientos en el ejemplo 58 usando los ácidos y anilinas correspondientes.
Figure imgf000129_0001
Ejemplo de referencia 242
Figure imgf000130_0001
242A. 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo
A un matraz cargado con MeOH (7,5 ml), a 0 °C en atmósfera de nitrógeno, se le añadió lentamente cloruro de acetilo (1,1 ml, 15,2 mmol). Después de completar la adición, la mezcla se agitó a 0 °C durante 5 minutos antes de que se añadiera una mezcla homogénea de ácido 2-(4-metilpiperidin-4-il)acético, HCl (675,0 mg, 3,5 mmol) en MeOH (1,5 ml) lentamente gota a gota. La mezcla homogénea resultante se agitó a 0 °C durante 5 minutos, después a 60 °C durante 8 horas, antes de que se concentrase al vacío para proporcionar la sal de HCl del compuesto de título como un sólido blanco (718,0 mg; 99 % de rendimiento) que se usó sin ulterior purificación. RMN1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 9,41 -9,12 (m, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,25 -3,15 (m, 2H), 2,93 -2,82 (m, 2H), 2,39 -2,30 (m, 2H), 1,74 - 1,64 (m, 4H), 1,02 (s, 3H).
242B. 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo
A una mezcla homogénea de 4-cloro-6-fluoroquinolina (350,0 mg, 1,9 mmol) en NMP anhidra (5 ml), en un recipiente con cierre hermético, se le añadió la sal de HCl de 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo (242A, 480,0 mg, 2,3 mmol) seguido de DIPEA (1,6 ml, 9,2 mmol). El recipiente se cerró herméticamente y la mezcla se agitó a 120 °C. Después de 26 horas, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente , después se repartió entre agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo una vez más con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, después se concentraron al vacío para proporcionar el producto en bruto. La purificación por cromatografía Isco proporcionó 2-(1 -(6-fluoro-quinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo en forma de un aceite (565,8 mg; 93 % de rendimiento). MS (ES): m/z = 317 [M+H]+. tR = 0,66 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,38 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,96 (dd, J = 11,7, 2,8 Hz, 1H), 7,89 -7,84 (m, 1H), 7,55 -7,49 (m, 1H), 6,54 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 3,82 -3,63 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,54 -3,34 (m, 2H), 2,45 -2,38 (m, 2H), 1,87 - 1,72 (m, 4H), 1,05 (s, 3H).
242C. Ácido 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acético
A una mezcla homogénea de 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetato de metilo (321,0 mg, 1,0 mmol) en MeOH (5 ml), en atmósfera de nitrógeno, se le añadió gota a gota solución acuosa 2 M de NaOH (1 ml, 2,0 mmol). La reacción se agitó después a temperatura ambiente durante 20 horas antes de que se tratara con HCl 1 N (ac.) hasta pH 6 con tiras de ensayo de pH. La mezcla se repartió entre agua y EtOAc, las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. La capa acuosa de la extracción se liofilizó para proporcionar el producto en bruto como un sólido blanquecino (302,1 mg, 98 % de rendimiento) el cual se usó sin ulterior purificación. MS (ES): m/z = 303 [M+H]+. tR = 0,58 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 12,12 (s. a., 1H), 8,41 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 8,14 - 8,08 (m, 1H), 8,00 (dd, J = 9,3, 5,7 Hz, 1H), 7,75 - 7,64 (m, 1H), 6,64 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 3,98 - 3,87 (m, 1H), 3,87 -3,78 (m, 1H), 3,69-3,49 (m, 2H), 2,38 -2,29 (m, 2H), 1,92 - 1,70 (m, 4H), 1,06 (s, 3H).
Ejemplo de referencia 242: 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)-N-(1-metilciclohexil)acetamida
A una mezcla de ácido 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acético (26,5 mg, 0,09 mmol) en DMF anhidra (1 ml), en un recipiente con cierre hermético, se le añadió PyBOP (45,6 mg, 0,09 mmol) seguido de DIPEA (0,06 ml, 0,34 mmol). La mezcla se agitó durante 15 minutos antes de que se añadiera 1-metilciclohexanamina, HCl (15,7 mg, 0,11 mmol) y el vial se cerró herméticamente. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas, antes de diluirse con DMF, se pasó a través de un filtro de jeringa, después se purificó por HPLC/MS preparativa para proporcionar el compuesto del título (17,2 mg; 38 % de rendimiento). MS (ES): m/z = 398 [M+H]+. tR = 1,61 min (Método B), RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 88,38 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 7,90 - 7,84 (m, 1H), 7,60 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,57 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 3,94 - 3,64 (m, 2H), 2,16 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,02 - 1,92 (m, 2H), 1,88 - 1,73 (m, 2H), 1,67 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,47 -1,31 (m, 5H), 1,30 -1,10 (m, 8H), 1,04 (s, 3H).
Ejemplo de referencia 243
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)butanamida
Figure imgf000131_0001
243A. 4-(1-etoxi-1-oxobutan-2-ilideno)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A una suspensión de NaH (0,29 g, 7,18 mmol) en THF anhidro (10 ml), en atmósfera de nitrógeno, se le añadió 2-fosfonobutirato de trietilo (1,81 g, 7,18 mmol) durante 5 minutos. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos, tiempo durante el cual se hizo homogénea. A esta solución se le añadió gota a gota una mezcla homogénea de 1-Boc-4-piperidona (1,10 g, 5,52 mmol) en THF anhidro (2,5 ml). Después de agitar durante 1,5 horas, la reacción se inactivó con solución de NH4Cl (ac.) antes de extraerla completamente con EtOAc. Las fracciones orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se secaron y se combinaron al vacío para proporcionar 4-(1-etoxi-1-oxobutan-2-ilideno)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo, un aceite transparente (1,64 g; 100 % de rendimiento) el cual se usó sin ulterior purificación. RMN1H (400 MHz, DMSO-d6) 84.13 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,39 - 3,35 (m, 2H), 3,35 - 3,31 (m, 2H), 2,45 - 2,39 (m, 2H)m 2,31 - 2,22 (m, 4H), 1,40 (s, 9H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,93 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
243B. 4-(1-etoxi-1-oxobutan-2-il)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo
A un matraz cargado con 4-(1-etoxi-1-oxobutan-2-ilideno)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (1,64 g, 5,52 mmol) y en atmósfera de nitrógeno, se le añadió óxido de platino (IV) (0,07 g, 0,31 mmol) seguido por la adición cuidadosa de EtOH (5 ml). La línea de nitrógeno se reemplazó con un balón de hidrógeno y la mezcla se agitó a temperatura ambiente. Después de 15 horas, la mezcla de reacción se purgó con nitrógeno antes de filtrarse a través de un lecho de CELITE®. El lecho se aclaró a fondo con EtOAc antes de que los filtrados combinados se concentraran al vacío para proporcionar 4-(1-etoxi-1-oxobutan-2-il)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo como un aceite transparente (1,65 g; 100 % de rendimiento) el cual se usó sin ulterior purificación. RMN1H (400 MHz, DMSO-d6) 84,08 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,98 -3,83 (m, 2H), 2,78 -2,52 (m, 2H), 2,13 -2,03 (m, 1H), 1,69 - 1,62 (m, 1H), 1,52 -1,43 (m, 2H), 1,38 (s, 9H), 1,28 -1,13 (m, 5H), 1,10 - 0,98 (m, 2H), 0,80 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
243C. 2-(piperidin-4-il)butanoato de etilo
A una mezcla homogénea de 4-(1-etoxi-1-oxobutan-2-il)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (1,65 g, 5,52 mmol) en dioxano anhídrido (5 ml), en atmósfera de nitrógeno, se le añadió HCl (4 N en dioxano, 10 ml, 40,0 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante dos horas antes de que se concentrara al vacío para eliminar los volátiles. El aceite resultante se trató con solución acuosa saturada de NaHCO3 hasta pH 5 y después NaOH 1 N (ac.) hasta pH 8, antes de que la mezcla se extrajera por completo con EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se liofilizó para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo pálido (1,20 g; 92 % de rendimiento) el cual se usó en la siguiente etapa sin ulterior purificación. MS (ES): m/z = 200 [M+h ]+. tR = 0,57 min (Método A). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 84,07 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,01 - 2,78 (m, 2H), 2,48 - 2,29 (m, 3H), 2,07 - 1,98 (m, 1H), 1,60 - 1,35 (m, 5H), 1,18 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,11 - 0,88 (m, 2H), 0,80 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
243D. 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)butanoato de etilo
A una mezcla homogénea de 4-cloro-6-fluoroquinolina (365,0 mg, 2,01 mmol) en NMP anhidra (5 ml), en un recipiente con cierre hermético, se le añadió 2-(piperidin-4-il)butanoato de etilo (243C, 544,0 mg, 2,31 mmol) seguido de DlPEA (1,6 ml, 9,16 mmol). El recipiente se cerró herméticamente y la mezcla se agitó a 120 °C durante tres horas antes de que se dejara enfriar a temperatura ambiente. Después de agitar 7 días, la mezcla se calentó a 120 °C durante tres días, después se dejó enfriar a temperatura ambiente, antes de repartirla entre agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo una vez más con EtOAc. Este extracto orgánico se combinó con la capa orgánica original y se lavó con agua, después se concentró al vacío para proporcionar un residuo pardo oscuro. La purificación por cromatografía Isco proporcionó 2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)butanoato de etilo en forma de un aceite dorado (76,1 mg; 11 % de rendimiento). MS (ES): m/z = 345 [M+H]+. tR = 0,77 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 88,68 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 8,06 - 8,03 (m, 1H), 7,59 - 7,55 (m, 1H), 7,43 - 7,38 (m, 1H), 6,84 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,21 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,62 - 3,52 (m, 2H), 2,84 - 2,71 (m, 2H), 2,29 - 2,20 (m, 1H), 2,01 - 1,93 (m, 1H), 1,82 - 1,60 (m, 6H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,94 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
243E. Ácido 2-(1 -(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)butanoico
A una mezcla homogénea de 2-(1 -(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)butanoato de etilo (76,1 mg, 0,22 mmol) en EtOH (4 ml), en atmósfera de nitrógeno, se le añadió NaOH (solución acuosa 2 M, 0,2 ml, 0,40 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas antes de que se añadiera NaOH (solución acuosa 2 M, 0,2 ml, 0,40 mmol) y la agitación continuó. Después de 22 horas se añadió NaOH (solución acuosa 2 M, 0,2 ml, 0,40 mmol) y la reacción se calentó a 40 °C. la reacción se agitó durante 4 días antes de que se añadiera NaOH (solución acuosa 2 M, 0,2 ml, 0,40 mmol) y la agitación continuó durante 21 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la reacción se inactivó con HCl 4 N en dioxano (hasta pH 5-6 con tiras de ensayo de pH), se agitó durante 5 minutos a temperatura ambiente, después se concentró al vacío para proporcionar el producto en bruto en forma de un sólido de color amarillo pálido, es cual se usó en la siguiente etapa sin ulterior purificación. MS (ES): m/z = 317 [M+H]+. tR = 0,63 min (Método A) .
Ejemplo de referencia 243: (±)-N-(4-clorofenil)-2-(1-(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)-butanamida
A una mezcla de ácido 2-(1 -(6-fluoroquinolin-4-il)piperidin-4-il)butanoico (35,0 mg, 0,11 mmol) y 4-cloroanilina (17,0 mg, 0,13 mmol) en DMF anhidra, en atmósfera de nitrógeno, se le añadió DIPEA (0,1 ml, 0,57 mmol) seguido de PyBOP (57,6 mg, 0,11 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 98 horas antes de diluirse con DMF, se pasó a través de un filtro de jeringa, después se purificó por HPLC/MS preparativa para proporcionar el compuesto del título (2,5 mg; 3 % de rendimiento). MS (ES): m/z = 426 [M+H]+. tR = 2,22 min (Método B) , RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8 10,15 (s, 1H), 8,64 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,00 (dd, J = 9,0, 5,7 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,64 - 7,51 (m, 2H), 7,35 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,07 - 6,96 (m, J = 4,9 Hz, 1H), 3,52 - 3,43 (m, 1H), 2,84 -2,66 (m, 2H), 2,55 -2,53 (m, 1H), 2,27 -2,18 (m, 1H), 2,02 - 1,92 (m, J = 11,9 Hz, 1H), 1,78 - 1,43 (m, 6H), 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 244
(±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamida
Figure imgf000132_0001
244A. 4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-carboxilato de ferc-butilo
A una mezcla de 4-cloro-6-fluoroquinolina (500,0 mg, 2,8 mmol) en NMP anhidra (5 ml), en un recipiente con cierre hermético, se le añadió 1-Boc-piperazina (750,0 mg, 4,0 mmol) seguido de DIPEA (2,0 ml, 11,5 mmol). El recipiente se tapó y la mezcla se agitó a 120 °C durante 15,5 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente antes de repartirse entre agua y Et2O. las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces más con Et2O. estos extractos orgánicos se combinaron con la capa orgánica original y se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraran al vacío para proporcionar el producto en bruto. La purificación por cromatografía Isco proporcionó 4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-carboxilato de ferc-butilo en forma de un aceite (719,3 mg; 77 % de rendimiento). MS (ES): m/z = 332 [M+H]+. tR = 0,70 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,70 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 8,09 -8,00 (m, 1H), 7,77-7,67 (m, 1H), 7,67 -7,62 (m, 1H), 7,07 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 3,67 - 3,57 (m, 4H), 3,15 - 3,06 (m, 4H), 1,44 (s, 9H).
244B. 6-fluoro-4-(piperazin-1-il)quinolina
A una mezcla homogénea de 4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-carboxilato de ferc-butilo (600,0 mg, 1,8 mmol) en dioxano (4 ml), en atmósfera de nitrógeno, se le añadió HCl 4 M en dioxano (10 ml, 40,0 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 horas, tiempo durante el cual se formó un precipitado. La mezcla heterogénea se concentró hasta aproximadamente 1/2 de su volumen original. La filtración al vació proporcionó la sal de HCl del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino (490,0 mg; 100 % de rendimiento) el cual se usó sin ulterior purificación. MS (ES): m/z = 232 [M+H]+. tR = 0,38 min (Método A).
244C. 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanoato de (±)-etilo
A una mezcla heterogénea de la sal de HCl de 6-fluoro-4-(piperazin-1-il)quinolina (244B, 200,0 mg, 0,75 mmol) en DMF anhidra (5 ml), en un recipiente de reacción con cierre hermético, se le añadió K2CO3 (288,0 mg, 2,08 mmol) seguido de 2-bromovalerato de etilo (234,0 mg, 1,12 mmol). El matraz se cerró herméticamente después y la mezcla se agitó a 60 °C. Después de 16 horas, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, después se repartió entre agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo una vez más con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4 acuoso), se filtraron y se concentraron al vacío para proporcionar el producto en forma de un aceite amarillo que se usó en la siguiente etapa sin ulterior purificación. MS (ES): m/z = 360 [M+H]+. tR = 0,62 min (Método A).
244D. Ácido (±)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanoico
A una mezcla homogénea de 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoato de etilo (244C, 0,75 mmol) en MeOH (4 ml), en atmósfera de nitrógeno, se le añadió gota a gota NaOH 2 M (ac.) (0,8 ml, 1,6 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 64 horas antes de que se añadiera NaOH 2 M (ac.) (0,8 ml, 1,6 mmol). Después de 6 horas de agitación, se añadió NaOH 2 M (ac.) (0,8 ml, 1,6 mmol) y se continuó agitando. Después de 115 horas, la reacción se trató con HCl (4 N en dioxano) hasta un pH 5 con tiras de ensayo de pH. La mezcla se repartió después entre agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se liofilizó para proporcionar un sólido amarillo claro. La purificación por HPLC preparativa de fase inversa (columna YMC-ODS 5 m 250 x 30. Condiciones: caudal de 30 ml/min; 40 minute de gradiente del 30-100 % de B (Solvente A = 95:5 H2O/MeCN con 0,05 % de TFA. Solvente B = 5:95 H2O/MeCN con 0,05 % de TFA) proporcionó la sal de TFA del ácido 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanoico en forma de un sólido de color amarillo pálido (160,0 mg; 58 % de rendimiento). MS (ES): m/z = 332 [M+H]+. tR = 0,46 min (Método A). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,77 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 8,10 (dd, J = 10,1, 5,2 Hz, 1H), 7,93-7,86 (m, 2H), 7,28 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 3,84 -3,73 (m, 4H), 3,72 -3,51 (m, 1H), 3,38 -2,99 (m, 4H), 1,86 - 1,68 (m, 2H), 1,46 - 1,33 (m, 2H), 0,94 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 244: (±)-N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamida
A una mezcla de la sal del ácido (±)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanoico (244D, 32,0 mg, 0,10 mmol) en DMF anhidra (1,5 ml), en un recipiente con cierre hermético, se le añadió PyBOP (50,3 mg, 0,10 mmol) seguido de DIPEA (0,06 ml, 0,34 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de que se añadiera 4-cloroanilina (14,8 mg, 0,12 mmol). El recipiente se cerró herméticamente y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 63 horas, antes de que se diluyera con DMF, se pasó a través de un filtro de jeringa, después se purificó por HPLC/MS preparativa para proporcionar el compuesto del título en forma de un racemato (15,9 mg; 37 % de rendimiento). MS (ES): m/z = 441 [M+H]+. tR = 2,24 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 8 10,15 (s, 1H), 8,66 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,08 - 7,95 (m, 1H), 7,68 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,64 - 7,53 (m, 2H), 7,37 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,02 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,57 -3,43 (m, 1H), 3,35 -3,08 (m, 4H), 2,94 -2,78 (m, 4H), 1,81 -1,58 (m, 2H), 1,40 - 1,24 (m, 2H), 0,92 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 245
N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamida (Enantiómero 1, estereoquímica absoluta no asignada)
Figure imgf000133_0001
y
Ejemplo de referencia 246
N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamida (Enantiómero 2, estereoquímica absoluta no asignada)
Figure imgf000134_0001
El ejemplo racémico de referencia 244 (15.9 mg) se purificó por SFC quiral (82/18 CO2/MeOH con 0,1 % de DEA fase móvil, Chiral OJ 25 X 3 cm, columna de 5 mm, 85 ml/min, detector de longitud de onda = 220 nm). La concentración de las fracciones apropiadas (primera elución) proporcionó el ejemplo de referencia 245 (6,7 mg) asignado como N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamida (Enantiómero 1). MS (ES): m/z = 441 [M+H]+. Tr = 2,21 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da): superponible sobre la RMN del racemato. La concentración de las últimas fracciones de elución proporcionó el ejemplo 246 (6,8 mg) asignado como N-(4-clorofenil)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamida (Enantiómero 2). MS (ES): m/z = 441 [M+H]+. Tr = 2,21 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6): superponible sobre la RMN del racemato.
Ejemplo de referencia 247
(±)-2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilciclohexil)pentanamida
Figure imgf000134_0002
El ejemplo de referencia 247 (17,5 mg; 42 % de rendimiento) se preparó siguiendo un procedimiento análogo al de la síntesis del ejemplo 244 excepto porque se usó 1-metilciclohexanamina, HCl (17,3 mg, 0,12 mmol) en lugar de 4-cloroanilina. MS (ES): m/z = 427 [M+H]+. Tr = 2,23 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-da) 88,64 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 8,01 (dd, J = 9,0, 5,7 Hz, 1H), 7,68 - 7,52 (m, 2H), 7,35 - 7,23 (m, 1H), 7,03 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 3,19 - 3,09 (m, 4H), 2,90 - 2,77 (m, 3H), 2,56 - 2,51 (m, 2H), 2,11 - 2,00 (m, 2H), 1,70 - 1,58 (m, 1H), 1,53 - 1,35 (m, 6H), 1,30 -1,19 (m, 8H), 0,88 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Ejemplo de referencia 248
2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilciclohexil)pentanamida (Enantiómero 1, estereoquímica absoluta no asignada)
Figure imgf000134_0003
y
Ejemplo de referencia 249
2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilcidohexil)pentanamida (Enantiómero 2, estereoquímica absoluta no asignada)
Figure imgf000135_0001
El ejemplo racémico de referencia 247 (16,7 mg) se purificó por SFC quiral (80/20 CO2/MeOH con 0,1 % de DEA fase móvil, Chiral AD 25 X 3 cm, columna 5 mm, 85 ml/min, detector de longitud de onda = 220 nm). La concentración de las fracciones apropiadas (primera elución) proporcionó el ejemplo de referencia 248 (7,4 mg) asignado como 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilciclohexil)pentanamida (Enantiómero 1). MS (ES): m/z = 427 [M+H]+. Tr = 2,28 min (Método B). RMN1H (500 Mh z , DMSO-d6): superponible sobre RMN del racemato. La concentración de las últimas fracciones de elución proporcionó el ejemplo de referencia 249 (6,5 mg) asignado como 2-(4-(6-fluoroquinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilciclohexil)pentanamida (Enantiómero 2). MS (ES): m/z = 427 [M+H]+. Tr = 2,28 min (Método B). RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6): superponible sobre RMN del racemato.
Ejemplo 250
(+/-)-cis y trans-N-(4-clorofenil)-2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000135_0002
Preparación 250A. 7-cloro-3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridina
Figure imgf000135_0003
A una solución de 7-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina, sal ácido fórmico (0,2 g, 0,820 mmol) en DMSO (4,10 ml) se le añadió carbonato de cesio (0,534 g, 1,639 mmol) y yodometano (0,054 ml, 0,860 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 28 h, después se inactivó con H2O y se extrajo con EtOAc (5X). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar un líquido naranja, el cual se secó adicionalmente a alto vacío durante una noche. La TLC y la LC-MS mostraron ~1:1 producto/material de partida. El material en bruto se disolvió en una cantidad mínima de CH2Cl2 y se cromatografió. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 40 g, 40 ml/min, 0-20 % de MeOH en CH2Cl2 durante 24 min, tr = 17 min) dio el compuesto del título (0,0729 g, 0,344 mmol, 42,0 % de rendimiento) como un sólido blanco y una mezcla 2.8:1 de isómeros. ESI MS (M+H)+ = 212,0. HPLC Pico tr = 0,55 minutos. Condiciones de HPLC: Método A.
Preparación 250B. 2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)ciclohex-3-en-1-il)propanoato de etilo
Figure imgf000136_0001
Una mezcla de la preparación 250A (0,0729 g, 0,435 mmol), 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)propanoato de etilo (0,138 g, 0,448 mmol), Na2CO3 (0,184 g, 1,740 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,025 g, 0,022 mmol) en dioxano (3,5 ml) y agua (0,5 ml) se calentó a 100 °C durante una noche. La reacción se inactivó con agua y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo pardo. La purificación del material en bruto por cromatografía sobre gel de sílice usando una máquina ISCO (columna de 40 g, 40 ml/min, 0-20 % de MeOH en CH2Cl2 durante 25 min, tr = 12,16 min) dio el compuesto del título (79 mg, 0,253 mmol, 58 % de rendimiento) en forma de un residuo incoloro y su regioisómero (21 mg, 0,067 mmol, 15,41 % de rendimiento) en forma de un residuo pardo. ESI MS (M+H)+ = 314,3. HPLC Pico tr = 0,75 minutos. Condiciones de HPLC: Método A.
Preparación 250C. 2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)ciclohexil)propanoato de etilo
Figure imgf000136_0002
A una solución de la preparación 250B (0,0792 g, 0,253 mmol) en MeOH (1,264 ml) se le añadió formiato de amonio (0,080 g, 1,264 mmol) seguido de Pd/C (7,26 mg, 0,068 mmol). La reacción se calentó a 70 °C durante 1 h. la reacción se filtró a través de CELITE® y la torta de filtro se lavó con CH2Ch. El filtrado se concentró. El material en bruto se recogió en EtOAc y se lavó con una solución ac. sat. de NaHCO3 (2X). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título (59,7 mg, 0,180 mmol, 71 % de rendimiento) en forma de un residuo verde. ESI MS (M+H)+ = 316.2. HPLC pico tr = 0,72 minutos. Condiciones de HPLC: Método A.
Ejemplo 250: (+/-)-cis y trans-N-(4-clorofenil)-2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)ciclohexil)propanamida
A una solución de 4-cloroanilina (0,097 g, 0,757 mmol) en THF (0,4 ml) a 0 °C se le añadió una solución de cloruro de isopropilmagnesio (0,379 ml, 0,757 mmol). La solución resultante se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 5 min, después se añadió la preparación 250C (0,0597 g, 0,189 mmol) en THF (0,6 ml) gota a gota. La reacción se calentó a 70 °C durante 2,5 h, después se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se inactivó con una solución ac. sat. de NH4Cl y se diluyó con EtOAc. Las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3X). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo. El material en bruto se purificó por LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; gradiente: 30-70 % de B durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga para proporcionar el compuesto del título como una mezcla de 4 isómeros (26,6 mg, 35 %). ESI MS (M+H)+ = 397,3. HPLC Pico tr = 1,775 minutos y 1,793 minutos. Pureza = 99 %. Condiciones de HPLC: Método B.
Ejemplo 251
N-(4-clorofenil)-2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)ciclohexil)propanamida, estereoquímica absoluta y relativa no confirmadas
Figure imgf000137_0001
Aproximadamente 25,4 mg del ejemplo 250 diastereomérico y racémico se resolvieron. La mezcla isomérica se purificó por SFC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Chiral OZ-H, 25 x 3 cm ID, partículas de 5 mm; fase móvil A: 82/18 CO2/MeOH con 0,1 % de DEA; detector de longitud de onda: 220 nm; caudal: 100 ml/min. Las fracciones ("Pico 1" tr = 11,910 min, "Pico 2" tr = 15,648 min, "Pico 3" tr = 16,927 min, "Pico 4" tr = 19,403; condiciones analíticas: Columna: Chiral OZ-H, 250 x 4,6 mm ID, partículas de 5 mm; fase móvil A: 80/20 CO2/MeOH con 0,1 % de DEA; caudal: 2,0 ml/min) se recogieron en MeOH con 0,1 % de DEA. La pureza estereoisomérica de cada fracción se estimó que era superior al 99 % basándose los cromatogramas de SFC prep. Cada diastereómero o enantiómero se purificó adicionalmente por LC/MS preparativa:
Ejemplo 250a, primer isómero de elución: el material en bruto se purificó por LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 30-70 % de B durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga. El material se purificó adicionalmente por LC/MS preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 35-60 % de B durante 25 minutos, después una parada de 2 minutos al 60 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga para proporcionar el isómero 1 (3,1 mg, 4 %). ESI MS (M+H)+ = 397,3. Hp Lc Pico tr = 1,840 minutos. Pureza = 95 %. Condiciones de HPLC: Método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 250b, segundo isómero de elución: el material en bruto se purificó por LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 30-70 % de B durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga para proporcionar el isómero 2 (3,0 mg, 4 %). ESI MS (M+H)+ = 397,3. HPLC Pico tr = 1,804 minutos. Pureza = 93 %. Condiciones de HPLC: Método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 250c, tercer isómero de elución: el material en bruto se purificó por LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 30-70 % de B durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga para proporcionar el isómero 3 (3,2 mg, 4 %). ESI MS (M+H)+ = 397,3. HPLC Pico tr = 1,806 minutos. Pureza = 96 %. Condiciones de HPLC: Método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
Ejemplo 250d, cuarto isómero de elución: el material en bruto se purificó por LC/MS preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 mm; fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: 30-70 % de B durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos al 100 % de B; caudal: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se secaron por evaporación centrífuga para proporcionar el isómero 4 (3,0 mg, 4 %). ESI MS (M+H)+ = 397,2. HPLC Pico tr = 1,841 minutos. Pureza = 94 %. Condiciones de HPLC: Método B. Estereoquímica absoluta no determinada.
EJEMPLOS BIOLÓGICOS
Ejemplo 251
Evaluación de la actividad inhibidora en el ensayo de indolamina 2,3-dioxigenasa (IDO) a base de células HeLa Células HeLa (ATCC® CCL-2) se obtuvieron de ATCC y se cultivaron en medio Eagle modificado con Dulbecco suplementado con 4,5 g/l de glucosa, 4,5 g/l de l-glutamina y 4,5 g/l de piruvato de sodio (n.° 10-013-CV, Corning), 2 mM de dipéptido de l-alanil-l-glutamina (n.° 35050-061, Gibco), 100 U/ml de penicilina, 100 pg/ml de estreptomicina (n.° SV30010, Hyclone) y 10 % de suero bovino fetal (n.° SH30071,03 Hyclone). Las células se mantuvieron en una incubadora humidificada a 37 °C en 5 % de CO2.
La actividad de IDO se evaluó en función de la producción de quinurenina de la siguiente manera: las células HeLa se sembraron en una placa de cultivo de 96 pocillos a una densidad de 5000 células/pocillo y se dejó equilibrar durante la noche. Después de 24 horas, el medio se aspiró y se reemplazó con medio que contenía IFNy (n.° 285-IF/CF, R&D Systems) a una concentración final de 25 ng/ml. Una dilución serial de cada compuesto de ensayo se añadió a las células en un volumen total de 200 pl de medio de cultivo. Después de otras 48 horas de incubación, se transfirieron 170 pl de sobrenadante de cada cavidad a una placa fresca de 96 pocillos. Se añadieron 12,1 pl de ácido tricloroacético 6,1 N (n.° T0699, Sigma-Aldrich) a cada cavidad y se mezclaron, seguido por incubación a 65 °C durante 20 minutos para hidrolizar la N-formilquinurenina, el producto de indoleamina 2,3-dioxigenasa, en quinurenina. La mezcla de reacción se centrifugó luego durante 10 min a 500 x g para sedimentar el precipitado. Se transfirieron 100 pl del sobrenadante de cada cavidad a una placa fresca de 96 pocillos. Se añadieron 100 pl de 2 % (p/v) de pdimetilaminobenzaldehído (n.° 15647-7, Sigma-Aldrich) en ácido acético (n.° A6283, Sigma-Aldrich) a cada cavidad mezclados y se incubaron a temperatura ambiente durante 20 min. Las concentraciones de quinurenina se determinaron por medición de la absorbancia a 480 nm y calibración respecto de una curva estándar de L-quinurenina (n.° K8625, Sigma-Aldrich) usando una lectora de microplacas SPECTrA m AX® M2e (Molecular Devices). La actividad en porcentaje a cada concentración de inhibidor se determinó y los valores de CI50 se evaluaron usando regresión no lineal.
Se proporciona una actividad para los compuestos descritos en el presente documento en las Figuras 1A-1P, en donde se proporcionan niveles de potencia de la siguiente manera: (Potencia: IDO CI50: A < 0,1 pM; B < 1 pM; C < 10 pM)
Ejemplo 252
Se transfectaron células de 1HEK293 con un vector de expresión mamífero a base de pCADN que alberga cADN de IDO1 humano (NM 002164,2) por electroporación. Se cultivaron en medio (DMEM con 10 % de FBS) que contenía 1 mg/ml de G418 durante dos semanas. Se seleccionaron clones de células HEK293 que expresaban establemente proteína IDO1 humana y se expandieron para el ensayo de inhibición de IDO.
Las células de IDO1/HEK293 humanas se sembraron a 10000 células por 50 pl por cavidad con medio libre de RPMI/rojo fenol que contenía 10 % de FBS en una placa de cultivo de tejidos de base transparente de paredes negras de 384 pocillos (Matrix Technologies LLC). Luego se añadieron 100 nl de determinada concentración de compuesto a cada cavidad usando sistemas de manipulación de líquidos ECHO. Las células se incubaron durante 20 horas en incubadora a 37 °C con 5 % de CO2.
Los tratamientos del compuesto se detuvieron por adición de ácido tricloroacético (Sigma-Aldrich) hasta una concentración final del 0,2 %. La placa celular se incubó luego a 50 °C durante 30 minutos. El sobrenadante de volumen igual (20 pl) y 0,2 % (p/v) de reactivo de Ehrlich (4-dimetilaminobenzaldehído, Sigma-Aldrich) en ácido acético glacial se mezclaron en una placa de 384 pocillos de base transparente nueva. Esta placa se incubó luego a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se midió la absorbancia a 490 nm en un lector de placas Envision.
Los valores CI50 del compuesto se calcularon usando los recuentos de 500 nM de un tratamiento estándar de referencia como inhibición al uno por ciento y recuentos de no compuesto pero tratamiento de DMSO como inhibición al cero por ciento.
Los compuestos con una CI50 mayor que 250 nM se muestran con (C), compuestos con una CI50 inferior a 250 nM se muestran con (B) y aquellos con una CI50 inferior a 50 nM se muestran con (A) en la siguiente Tabla X.
Tabla X
Figure imgf000138_0001
continuación
Figure imgf000139_0001
continuación
Figure imgf000140_0001
continuación
Figure imgf000141_0001
Se describen en el presente documento formas de realización particulares de esta invención, incluyendo el mejor modo conocido por los inventores para llevar a cabo la invención. Después de leer lo anterior, la descripción, variaciones de las formas de realización reveladas se volverán obvias para los individuos que trabajan en la técnica y se espera que los expertos en la técnica puedan emplear tales variaciones según sea apropiado.

Claims (23)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto que tiene la fórmula (I):
Figure imgf000142_0001
o un estereoisómero, una sal, un hidrato o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde
Z es O;
R1 y R2 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo Ci-C4 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C4 opcionalmente sustituido, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3 o CONH2 y, cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo, se pueden unir para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados, de modo independientemente, entre O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados entre fluoro y alquilo C1-C3;
en donde J1 es Cn , N u opcionalmente C(R2) cuando R2 está unido al vértice del anillo identificado como J1; R3 y R3a son de modo independiente, hidrógeno, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, alquenilo C2-C6 opcionalmente sustituido, alquinilo C2-C6 opcionalmente sustituido, haloalquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, cicloalquil C3-C6-alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, aril-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, flúor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R5)2, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -(CR5R5)m-OH, -(CR5R5)m-CO2H, -(CR5R5)m-C(O)NH2, -(CR5R5)m-C(O)NHR5, -(CR5R5)mN(R5)2, -NH(CR5R5)mCO2H o -NH(CR5R5)m-C(O)NH2;
cada R5 es, de modo independiente, H, F, OH o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido;
cada R5a es, de modo independiente, H o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido;
R6 es H, OH, F, alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido, -O-alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido o -N(R5a)2; cada m es, de modo independiente, 1, 2 o 3
y R11 y R12 son, de modo independiente, hidrógeno, halógeno, haloalquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido, cicloheteroalquilo de 3 a 6 miembros opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido, alcoxi C1-C4 opcionalmente sustituido, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3 o CONH2, y cuando R1 y R2 están en vértices adyacentes de un anillo fenilo se pueden unir juntos para formar un anillo cicloheteroalquilo de 5 o 6 miembros que tiene uno o dos vértices de anillo seleccionados de modo independiente entre O, N y S, en donde dicho anillo cicloheteroalquilo está opcionalmente sustituido con de uno a tres miembros seleccionados entre fluoro y alquilo C1-C3.
2. El compuesto de la reivindicación 1, que tiene la fórmula
Figure imgf000142_0002
en donde R6 es H, y R11 y R12 son, cada uno de modo independiente, seleccionados del grupo que consiste en halógeno, CN y alquilo C1-C4 opcionalmente sustituido
o un estereoisómero, una sal, un hidrato o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
3. El compuesto de la reivindicación 1, que se selecciona entre:
Figure imgf000143_0001
Figure imgf000144_0001
Figure imgf000145_0001
Ċ
Figure imgf000146_0001
en donde
Figure imgf000147_0001
Figure imgf000148_0001
Figure imgf000149_0001
Figure imgf000150_0001
Figure imgf000151_0001
Figure imgf000152_0001
Figure imgf000153_0001
Figure imgf000154_0001
Figure imgf000155_0001
Figure imgf000156_0001
Figure imgf000157_0001
Figure imgf000158_0001
Figure imgf000159_0001
o un estereoisómero o una sal, un hidrato o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
4. Un compuesto que se selecciona entre:
Figure imgf000160_0001
Figure imgf000161_0001
o
Figure imgf000162_0001
o un estereoisómero o una sal, un hidrato o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
5. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 que es (R)-N-(4-clorofenil)-2-(c/s-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000162_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
6. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 que es (R)-N-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000162_0003
o un estereoisómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
7. El compuesto de la reivindicación 5 que es una sal farmacéuticamente aceptable de (R)-N-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida.
8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o un estereoisómero, o una sal, un hidrato o un solvato farmacéuticamente aceptables de la misma y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
9. La composición farmacéutica de la reivindicación 8, en donde el compuesto es (R)-N-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000163_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
10. La composición farmacéutica de la reivindicación 8, en donde el compuesto es una sal farmacéuticamente aceptable de (R)-N-(4-clorofenil)-2-(cis-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida.
11. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o un estereoisómero, o una sal, un hidrato o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, para su uso en un método para tratar una enfermedad, un trastorno o una afección mediados, al menos en parte, por IDO.
12. El compuesto para su uso de la reivindicación 11, en donde el compuesto es (R)-N-(4-clorofenil)-2-(c/s-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida
Figure imgf000163_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
13. El compuesto para su uso de la reivindicación 11, en donde el compuesto es una sal farmacéuticamente aceptable de (R)-N-(4-clorofenil)-2-(c/s-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclohexil)propanamida.
14. El compuesto o el estereoisómero, o sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptables del mismo para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, en donde dicho compuesto se administra en una cantidad eficaz para revertir o detener el avance de la inmunosupresión mediada por IDO.
15. El compuesto o el estereoisómero, o sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptables del mismo para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 14, en donde dichos enfermedad, trastorno o afección son cáncer, opcionalmente en donde dicho cáncer es un cáncer de próstata, colon, recto, páncreas, cuello uterino, estómago, endometrio, cerebro, hígado, vejiga, ovario, testículos, cabeza, cuello, piel (incluyendo melanoma y carcinoma basal), revestimiento mesotelial, glóbulos blancos (incluyendo linfoma y leucemia) esófago, mama, músculo, tejido conectivo, pulmón (incluyendo carcinoma de pulmón microcítico y carcinoma no microcítico), glándula adrenal, tiroides, riñón o huesos o es glioblastoma, mesotelioma, carcinoma de células renales, carcinoma gástrico, sarcoma (incluyendo sarcoma de Kaposi), coriocarcinoma, carcinoma basocelular cutáneo o seminoma testicular u
opcionalmente en donde dicho cáncer se selecciona del grupo que consiste en melanoma, cáncer de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de pulmón, cáncer de cuello uterino, leucemia, sarcoma, cáncer renal, un tumor cerebral, linfoma, cáncer de ovario y sarcoma de Kaposi.
16. El compuesto o el estereoisómero, o sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptables del mismo para el uso de la reivindicación 15, en donde dicho cáncer es melanoma, cáncer de pulmón, cáncer de cabeza, cáncer de cuello, carcinoma de células renales o cáncer de vejiga.
17. Una combinación que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o un estereoisómero, o sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptables del mismo y al menos un agente terapéutico adicional.
18. La combinación de la reivindicación 17, en donde dicho agente terapéutico adicional es un agente inmunooncológico.
19. La combinación de la reivindicación 18, en donde dicho agente inmunooncológico se selecciona entre un antagonista de CTLA-4, un antagonista de PD-1, un antagonista de PD-L1, un antagonista de LAG3, un agonista de CD137, un agonista de GITR, un agonista de OX40, un antagonista de OX40L, un agonista o un antagonista de CD40, un agonista de CD27 o un anticuerpo B7H3.
20. La combinación de la reivindicación 18, en donde el agente terapéutico adicional es ipilimumab.
21. La combinación de la reivindicación 18, en donde el agente terapéutico adicional es nivolumab.
22. La combinación de la reivindicación 18, en donde el agente terapéutico adicional es BMS-986016, BMS-936559, urelumab, BMS-986153 o BMS-986156.
23. La combinación de la reivindicación 18, en donde el agente terapéutico adicional es tremelimumab, pembrolizumab, MEDI-0680, pidilizumab, MPDL3280A, durvalumab, MSB0010718C, IMP-731, IMP-321, PF-05082566, TRX-518, MK-4166, MEDI-6383, MEDI-6469, RG-7888, lucatumumab, dacetuzumab, varlilumab o MGA271.
ES15857812T 2014-11-05 2015-11-05 Agentes inmunomoduladores Active ES2848978T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462075671P 2014-11-05 2014-11-05
US201462098022P 2014-12-30 2014-12-30
PCT/US2015/059311 WO2016073770A1 (en) 2014-11-05 2015-11-05 Immunoregulatory agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2848978T3 true ES2848978T3 (es) 2021-08-13

Family

ID=55909825

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES15857812T Active ES2848978T3 (es) 2014-11-05 2015-11-05 Agentes inmunomoduladores

Country Status (32)

Country Link
US (4) US20180282281A1 (es)
EP (2) EP3854394A1 (es)
JP (1) JP6735274B2 (es)
KR (1) KR102514378B1 (es)
CN (1) CN107427499B (es)
AU (1) AU2015342940B2 (es)
CA (1) CA2964290C (es)
CL (1) CL2017001124A1 (es)
CO (1) CO2017005452A2 (es)
CY (1) CY1123961T1 (es)
DK (1) DK3215153T3 (es)
EA (1) EA037286B1 (es)
ES (1) ES2848978T3 (es)
HR (1) HRP20210291T1 (es)
HU (1) HUE054015T2 (es)
IL (1) IL252009B (es)
LT (1) LT3215153T (es)
MX (1) MX2017005646A (es)
MY (1) MY187510A (es)
NZ (1) NZ730808A (es)
PE (1) PE20171329A1 (es)
PH (1) PH12017500629A1 (es)
PL (1) PL3215153T3 (es)
PT (1) PT3215153T (es)
RS (1) RS61457B1 (es)
SG (1) SG11201702811RA (es)
SI (1) SI3215153T1 (es)
TN (1) TN2017000164A1 (es)
TW (1) TWI740808B (es)
UY (1) UY36390A (es)
WO (1) WO2016073770A1 (es)
ZA (1) ZA201702724B (es)

Families Citing this family (112)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS54750B1 (sr) 2010-10-26 2016-10-31 Mars Inc Borati kao inhibitori arginaze
GB201311891D0 (en) 2013-07-03 2013-08-14 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compound
GB201311888D0 (en) 2013-07-03 2013-08-14 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compounds
BR112016028255A2 (pt) 2014-06-06 2017-08-22 Flexus Biosciences Inc agentes imunorreguladores
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
CN107205970A (zh) 2014-11-05 2017-09-26 弗莱塞斯生物科学公司 免疫调节剂
AR102537A1 (es) 2014-11-05 2017-03-08 Flexus Biosciences Inc Agentes inmunomoduladores
CN113603675A (zh) 2015-12-17 2021-11-05 默克专利有限公司 多环tlr7/8拮抗剂及其在治疗免疫失调中的用途
KR20190003685A (ko) 2016-05-04 2019-01-09 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 인돌아민 2,3-디옥시게나제의 억제제 및 그의 사용 방법
JP2019519485A (ja) 2016-05-04 2019-07-11 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ阻害剤およびその使用方法
WO2017192844A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US11066383B2 (en) 2016-05-04 2021-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
SG11201900336YA (en) * 2016-07-19 2019-02-27 Bristol Myers Squibb Co Radioligands for imaging the ido1 enzyme
CN107674013B (zh) * 2016-08-02 2022-05-24 上海迪诺医药科技有限公司 多环化合物、其制备方法、药物组合物及应用
CN107674029A (zh) * 2016-08-02 2018-02-09 上海迪诺医药科技有限公司 多环化合物、其药物组合物及应用
JP7125385B2 (ja) * 2016-08-08 2022-08-24 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｔｌｒ７／８アンタゴニストおよびそれらの使用
JP2019528300A (ja) 2016-08-26 2019-10-10 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼの阻害剤およびその使用方法
WO2018045150A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Gilead Sciences, Inc. 4,6-diamino-pyrido[3,2-d]pyrimidine derivaties as toll like receptor modulators
PT3507276T (pt) 2016-09-02 2022-01-11 Gilead Sciences Inc Compostos moduladores do recetor de tipo toll
CN109952300B (zh) 2016-09-24 2022-01-18 百济神州有限公司 5或8-取代的咪唑并[1,5-a]吡啶
TW202246349A (zh) 2016-10-11 2022-12-01 美商艾吉納斯公司 抗ｌａｇ－３抗體及其使用方法
IL265921B1 (en) 2016-10-14 2024-01-01 Prec Biosciences Inc Transgenic meganonucleases specific for recognition sequences in the hepatitis B virus genome
AU2017382405B2 (en) 2016-12-22 2021-12-16 Calithera Biosciences, Inc. Compositions and methods for inhibiting arginase activity
US11173145B2 (en) 2017-01-17 2021-11-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Compounds useful as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan dioxygenase
AR110768A1 (es) 2017-01-31 2019-05-02 Gilead Sciences Inc Formas cristalinas de tenofovir alafenamida
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
WO2018209049A1 (en) 2017-05-12 2018-11-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
BR112019027259A2 (pt) * 2017-06-30 2020-07-14 Bristol-Myers Squibb Company formas amorfas e cristalinas de inibidores da ido
US11236048B2 (en) * 2017-06-30 2022-02-01 Bristol-Myers Squibb Company Substituted quinolinylcyclohexylpropanamide compounds and improved methods for their preparation
EP3668880B1 (en) 2017-08-17 2021-10-06 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan 2,3-dioxygenase
CN109843872B (zh) * 2017-09-20 2022-08-30 杭州英创医药科技有限公司 作为ido抑制剂和/或ido-hdac双重抑制剂的多环化合物
CN111386117A (zh) * 2017-09-29 2020-07-07 百时美施贵宝公司 治疗癌症的组合物和方法
WO2019074824A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
WO2019074822A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
US11180497B2 (en) 2017-10-18 2021-11-23 Angex Pharmaceutical, Inc. Cyclic compounds as immunomodulating agents
CN111263752A (zh) * 2017-10-30 2020-06-09 葛兰素史克知识产权开发有限公司 吲哚胺 2,3-双加氧酶的调节剂
CN111417626A (zh) * 2017-12-05 2020-07-14 葛兰素史克知识产权开发有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的调节剂
CN109928923A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类作为ido抑制剂化合物
CN109928922A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类环己烷类化合物
CN109928916A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类作为ido抑制剂的喹啉-4-基环己烷类化合物
CN109928921A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 Ido抑制剂
CN109928924A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类作为ido抑制剂
US10966999B2 (en) 2017-12-20 2021-04-06 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3′3′ cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
AU2018392212B9 (en) 2017-12-20 2021-03-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
CN109956937A (zh) * 2017-12-22 2019-07-02 上海海雁医药科技有限公司 N-(2-环己基乙基)甲酰胺衍生物、其制法与医药上的用途
CN109956929B (zh) * 2017-12-22 2023-09-19 上海迪诺医药科技有限公司 杂环衍生物、其制备方法、药物组合物及应用
CN109575022B (zh) * 2017-12-25 2021-09-21 成都海博锐药业有限公司 一种化合物及其用途
CN109574988B (zh) * 2017-12-25 2022-01-25 成都海博锐药业有限公司 一种化合物及其用途
CN111574442A (zh) * 2017-12-29 2020-08-25 杭州阿诺生物医药科技有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂的制备方法
WO2019129114A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 杭州阿诺生物医药科技有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂以及它们在医学上的应用
WO2019136112A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
JP7217279B2 (ja) 2018-01-15 2023-02-02 イドーシア ファーマシューティカルズ リミテッド インドールアミン ２，３－ジオキシゲナーゼ及び／又はトリプトファン ２，３－ジオキシゲナーゼの阻害剤
WO2019141095A1 (zh) * 2018-01-19 2019-07-25 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 脒类和胍类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN110092750B (zh) * 2018-01-29 2023-07-21 北京诺诚健华医药科技有限公司 五氟硫烷基取代的酰胺类化合物、其制备方法及其在医药学上的应用
CN111868032B (zh) * 2018-02-11 2021-09-03 基石药业（苏州）有限公司 犬尿氨酸通路抑制剂
UA126458C2 (uk) 2018-02-13 2022-10-05 Гіліад Сайєнсіз, Інк. Інгібітори pd-1/pd-l1
EP3759109B1 (en) 2018-02-26 2023-08-30 Gilead Sciences, Inc. Substituted pyrrolizine compounds as hbv replication inhibitors
CA3093189A1 (en) 2018-03-07 2019-09-12 Bayer Aktiengesellschaft Identification and use of erk5 inhibitors
CN111630048B (zh) * 2018-03-19 2023-09-29 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 脒类和胍类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
US10870691B2 (en) 2018-04-05 2020-12-22 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fragments thereof that bind hepatitis B virus protein X
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
WO2019193543A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides
CN110357813A (zh) * 2018-04-09 2019-10-22 信达生物制药(苏州)有限公司 一种新型吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途
US11142750B2 (en) 2018-04-12 2021-10-12 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the Hepatitis B virus genome
JP7242702B2 (ja) 2018-04-19 2023-03-20 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｐｄ－１／ｐｄ－ｌ１阻害剤
TW202014193A (zh) 2018-05-03 2020-04-16 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 包含碳環核苷酸之2’3’－環二核苷酸
CN110526898A (zh) * 2018-05-25 2019-12-03 北京诺诚健华医药科技有限公司 3-吲唑啉酮类化合物、其制备方法及其在医药学上的应用
CN110105275B (zh) * 2018-05-28 2020-12-29 上海海雁医药科技有限公司 酰胺类衍生物、其制法与医药上的用途
WO2020000236A1 (zh) * 2018-06-27 2020-01-02 深圳仁泰医药科技有限公司 (r)-n-(4-氯苯基)-2-(顺-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的晶型
TWI732245B (zh) 2018-07-13 2021-07-01 美商基利科學股份有限公司 Pd‐1/pd‐l1抑制劑
EP3823604A4 (en) 2018-07-17 2022-03-16 Board of Regents, The University of Texas System COMPOUNDS USEFUL AS INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE AND/OR TRYPTOPHANE DIOXYGENASE INHIBITORS
WO2020023355A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US20210355113A1 (en) 2018-07-23 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020028097A1 (en) 2018-08-01 2020-02-06 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of (r)-11-(methoxymethyl)-12-(3-methoxypropoxy)-3,3-dimethyl-8-0x0-2,3,8,13b-tetrahydro-1h-pyrido[2,1-a]pyrrolo[1,2-c] phthalazine-7-c arboxylic acid
US11253525B2 (en) 2018-08-29 2022-02-22 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US10959986B2 (en) 2018-08-29 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3858813A4 (en) * 2018-09-27 2022-06-22 Shenzhen Chipscreen Biosciences Co., Ltd. QUINOLONE DERIVATIVE WITH INDOLEAMINE-2,3-DIOXYGENASE INHIBITED ACTIVITY
WO2020086556A1 (en) 2018-10-24 2020-04-30 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
EP3873608A1 (en) 2018-10-31 2021-09-08 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
CA3117556A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds as hpk1 inhibitors
WO2020117627A1 (en) 2018-12-03 2020-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ido antibody and uses thereof
WO2020147582A1 (zh) * 2019-01-16 2020-07-23 上海海雁医药科技有限公司 环烷基取代的酰胺类衍生物、其制法与医药上的用途
CN113543851A (zh) 2019-03-07 2021-10-22 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 2’3’-环二核苷酸及其前药
JP7350872B2 (ja) 2019-03-07 2023-09-26 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール，ヴイ．ヴイ．アイ． ３’３’－環状ジヌクレオチドおよびそのプロドラッグ
WO2020178768A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
TW202210480A (zh) 2019-04-17 2022-03-16 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI826690B (zh) 2019-05-23 2023-12-21 美商基利科學股份有限公司 經取代之烯吲哚酮化物及其用途
EP3990476A1 (en) 2019-06-25 2022-05-04 Gilead Sciences, Inc. Flt3l-fc fusion proteins and methods of use
US20220259212A1 (en) 2019-07-11 2022-08-18 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan 2,3-dioxygenase
US20220257619A1 (en) 2019-07-18 2022-08-18 Gilead Sciences, Inc. Long-acting formulations of tenofovir alafenamide
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
US20240122857A1 (en) 2019-09-11 2024-04-18 Bristol-Myers Squibb Company Pharmaceutical formulations of indoleamine 2, 3-dioxygenase inhibitors
JP2022549337A (ja) 2019-09-25 2022-11-24 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー がん療法のための複合バイオマーカー
CN114555799A (zh) 2019-09-30 2022-05-27 吉利德科学公司 Hbv疫苗和治疗hbv的方法
JP2023502590A (ja) * 2019-11-12 2023-01-25 エディフィス・ヘルス・インコーポレイテッド 免疫療法のための精密医療法
WO2021108288A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Bristol-Myers Squibb Company Salts/cocrystals of (r)-n-(4-chlorophenyl)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroquinolin-4-yl)cyclohexyl)propanamide
EP4069729A1 (en) 2019-12-06 2022-10-12 Precision BioSciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the hepatitis b virus genome
EP4121437A1 (en) 2020-03-20 2023-01-25 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of 4'-c-substituted-2-halo-2'-deoxyadenosine nucleosides and methods of making and using the same
EP4192474A1 (en) 2020-08-07 2023-06-14 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of phosphonamide nucleotide analogues and their pharmaceutical use
TWI815194B (zh) 2020-10-22 2023-09-11 美商基利科學股份有限公司 介白素2-Fc融合蛋白及使用方法
US20240091202A1 (en) 2021-03-05 2024-03-21 Universität Basel Compositions for the treatment of ebv associated diseases or conditions
EP4052705A1 (en) 2021-03-05 2022-09-07 Universität Basel Vizerektorat Forschung Compositions for the treatment of ebv associated diseases or conditions
CN117120423A (zh) * 2021-03-24 2023-11-24 柳韩洋行 新颖的吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂、其制备方法及包含其的药物组合物
WO2022241134A1 (en) 2021-05-13 2022-11-17 Gilead Sciences, Inc. COMBINATION OF A TLR8 MODULATING COMPOUND AND ANTI-HBV siRNA THERAPEUTICS
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
EP4359415A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CN117377671A (zh) 2021-06-23 2024-01-09 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
US11932634B2 (en) 2021-06-23 2024-03-19 Gilead Sciences, Inc. Diacylglycerol kinase modulating compounds
KR20230072446A (ko) * 2021-11-17 2023-05-24 주식회사유한양행 암의 치료를 위한 인돌아민 2,3-디옥시게나아제 저해제와 면역체크포인트 억제제의 상승적 조합
WO2023122723A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 The Broad Institute, Inc. Panels and methods for diagnosing and treating lung cancer

Family Cites Families (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU645681B2 (en) * 1991-05-02 1994-01-20 John Wyeth & Brother Limited Piperazine derivatives
ES2125285T3 (es) 1992-07-31 1999-03-01 Bristol Myers Squibb Co Derivados inhibidores de la reabsorcion de adenosina de difenil-oxazoles, tiazoles e imidazoles.
AU666040B2 (en) 1992-10-28 1996-01-25 Bayer Aktiengesellschaft Substituted 1-H-3-aryl-pyrrolidine-2,4-dione derivatives
DE4239151A1 (de) 1992-11-20 1994-05-26 Thomae Gmbh Dr K N,N-Disubstituierte Arylcycloalkylamine, deren Salze, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung sowie Verfahren zu ihrer Herstellung
GB9411099D0 (en) 1994-06-03 1994-07-27 Wyeth John & Brother Ltd Piperazine derivatives
DE19615232A1 (de) 1996-04-18 1997-10-23 Merck Patent Gmbh Neue Carbamoylderivate und deren Verwendung als 5-HT ¶1¶¶A¶-Antagonisten
US6395876B1 (en) 1997-12-05 2002-05-28 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. High-affinity tryptophan transporter
DE19756036A1 (de) * 1997-12-17 1999-06-24 Merck Patent Gmbh Amid- und Harnstoffderivate
AU3765899A (en) 1998-04-29 1999-11-16 American Home Products Corporation Serotonergic agents
US6632836B1 (en) 1998-10-30 2003-10-14 Merck & Co., Inc. Carbocyclic potassium channel inhibitors
US6100279A (en) 1998-11-05 2000-08-08 Schering Corporation Imidazoylalkyl substituted with a five, six or seven membered heterocyclic ring containing one nitrogen atom
CO5150225A1 (es) 1999-03-19 2002-04-29 Merck Sharp & Dohme Derivados del tetrahidropirano y su uso como agentes terapeuticos
IL148718A0 (en) 1999-09-17 2002-09-12 Abbott Gmbh & Co Kg Pyrazolopyrimidines as therapeutic agents
SE9904738D0 (sv) * 1999-12-22 1999-12-22 Astra Pharma Prod Novel compounds
WO2001046199A1 (en) * 1999-12-22 2001-06-28 Eli Lilly And Company Methods and compounds for inhibiting mrp1
US6677336B2 (en) * 2000-02-22 2004-01-13 Cv Therapeutics, Inc. Substituted piperazine compounds
AU2001261487A1 (en) 2000-06-01 2001-12-11 Warner Lambert Company Cyclohexylamine derivatives as subtype selective nmda receptor antagonists
WO2002024613A2 (en) 2000-09-21 2002-03-28 Pfizer Products, Inc. Resorcinol derivatives
ES2312603T3 (es) 2001-07-24 2009-03-01 Richter Gedeon Nyrt Derivados de piperidina como antagonistas del receptor nmda.
US20040029887A1 (en) 2002-05-23 2004-02-12 Bhatia Pramila A. Acetamides and benzamides that are useful in treating sexual dysfunction
CA2509711A1 (en) 2002-12-13 2004-07-01 Smithkline Beecham Corporation Piperidine derivatives as ccr5 antagonists
CA2520172C (en) 2003-03-27 2012-10-02 Lankenau Institute For Medical Research Novel methods for the treatment of cancer with an indoleamine 2, 3-dioxygenase inhibitor
US7598287B2 (en) 2003-04-01 2009-10-06 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. Use of inhibitors of indoleamine-2,3-dioxygenase in combination with other therapeutic modalities
EP1615667A2 (en) * 2003-04-11 2006-01-18 Novo Nordisk A/S Combinations of an 11-beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 inhibitor and a glucocorticoid receptor agonist
DE10337184A1 (de) * 2003-08-13 2005-03-10 Gruenenthal Gmbh Substituierte 3-Pyrrolidin-Indol-Derivate
WO2005025498A2 (en) 2003-09-08 2005-03-24 Corus Pharma Substituted acetanilides and benzamides for the treatment of asthma and pulmonary inflammation
WO2005025554A2 (en) 2003-09-09 2005-03-24 Japan Tobacco Inc. Dipeptidyl peptidase iv inhibitor
CA2555970A1 (en) 2004-02-11 2005-09-01 Pfizer Inc. Therapeutic amide derivatives
DE102004023507A1 (de) 2004-05-10 2005-12-01 Grünenthal GmbH Substituierte Cyclohexylessigsäure-Derivate
DE102004039789A1 (de) 2004-08-16 2006-03-02 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Arylsubstituierte polycyclische Amine, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
EP1866339B8 (en) 2005-03-25 2021-12-01 GITR, Inc. Gitr binding molecules and uses therefor
AU2006244068B9 (en) 2005-05-10 2012-10-25 Incyte Holdings Corporation Modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of using the same
US8071768B2 (en) * 2005-06-10 2011-12-06 Janssen Pharmaceutica, N.V. Alkylquinoline and alkylquinazoline kinase modulators
CN105330741B (zh) 2005-07-01 2023-01-31 E.R.施贵宝&圣斯有限责任公司 抗程序性死亡配体1(pd-l1)的人单克隆抗体
ATE533485T1 (de) 2005-10-31 2011-12-15 Merck Sharp & Dohme Cetp-inhibitoren
JP5335432B2 (ja) 2005-11-17 2013-11-06 オーエスアイ・フアーマシユーテイカルズ・エル・エル・シー 縮合２環系ｍＴＯＲ阻害剤
WO2007063839A1 (ja) 2005-11-30 2007-06-07 Shionogi & Co., Ltd. シクロヘキサン誘導体
WO2007076055A2 (en) * 2005-12-22 2007-07-05 Entremed, Inc. Compositions and methods comprising proteinase activated receptor antagonists
EP1963315B1 (en) * 2005-12-22 2014-10-08 Cancer Research Technology Limited Enzyme inhibitors
DE102005061428A1 (de) 2005-12-22 2007-08-16 Grünenthal GmbH Substituierte Cyclohexylmethyl-Derivate
US20080312206A1 (en) 2005-12-22 2008-12-18 Astrazeneca Ab Chemical Compounds-149
WO2007095050A2 (en) 2006-02-09 2007-08-23 Incyte Corporation N-hydroxyguanidines as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
WO2007109288A2 (en) 2006-03-20 2007-09-27 Xytis Inc. Enantiomerically pure r-etifoxine, pharmaceutical compositions thereof and methods of their use
RS52464B (en) * 2006-06-01 2013-02-28 Sanofi SPIRO-CYCLIC NITRILES AS PROTEASE INHIBITORS
EP1918281A1 (en) 2006-11-02 2008-05-07 Laboratorios del Dr. Esteve S.A. Phenylamino-substituted piperidine compounds, their preparation and use as medicaments
CA2668579A1 (en) 2006-11-06 2008-06-05 Neurogen Corporation Cis-cyclohexyl substituted pyrimidinone derivatives
EP2129660A2 (en) 2006-12-19 2009-12-09 Pfizer Products Inc. Nicotinamide derivatives as inhibitors of h-pgds and their use for treating prostaglandin d2 mediated diseases
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
ES2591281T3 (es) 2007-07-12 2016-11-25 Gitr, Inc. Terapias de combinación que emplean moléculas de enlazamiento a GITR
US7986356B2 (en) 2007-07-25 2011-07-26 Hewlett-Packard Development Company, L.P. System and method for determining a gamma curve of a display device
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
CA2702946A1 (en) 2007-10-16 2009-04-23 Northeastern University Monoacylglycerol lipase inhibitors for modulation of cannabinoid activity
KR20230085944A (ko) 2008-03-18 2023-06-14 아레나 파마슈티칼스, 인크. 프로스타시클린 （ｐｇｉ２） 수용체와 관련된 장애의 치료에 유용한 상기 수용체의 조절제
CN102046595B (zh) 2008-03-27 2014-03-05 格吕伦塔尔有限公司 取代的4-氨基环己烷衍生物
US20090298834A1 (en) 2008-06-02 2009-12-03 Hassan Pajouhesh 4-(aminomethyl)cyclohexanamine derivatives as calcium channel blockers
KR101783004B1 (ko) 2008-07-08 2017-09-28 인사이트 홀딩스 코포레이션 인돌아민 ２,３-디옥시게나아제의 억제제로서의 １,２,５-옥사디아졸
EP2149373A1 (en) * 2008-08-01 2010-02-03 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. 5HT7 receptor ligands and compositions comprising the same
US8273900B2 (en) 2008-08-07 2012-09-25 Novartis Ag Organic compounds
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
WO2010025308A2 (en) * 2008-08-27 2010-03-04 Universtiy Of Southern California Inhibitors of dutpase
CN102216299B (zh) 2008-12-01 2015-02-11 默克专利有限公司 作为自体毒素抑制剂的2,5-二氨基取代的吡啶并[4,3-d]嘧啶化合物
SI2376535T1 (sl) 2008-12-09 2017-07-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Protitelesa anti-pd-l1 in njihova uporaba za izboljšanje funkcije celic t
RU2505540C2 (ru) 2008-12-23 2014-01-27 Эббви Инк. Антивирусные соединения
EP2398798A1 (en) * 2009-02-17 2011-12-28 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Triazolopyridine derivatives as p38 map kinase inhibitors
ES2665277T3 (es) 2009-03-13 2018-04-25 Katholieke Universiteit Leuven K.U. Leuven R&D Análogos de purina y su uso como agentes inmunosupresores
LT3023438T (lt) 2009-09-03 2020-05-11 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-gitr antikūnai
US8722720B2 (en) * 2009-10-28 2014-05-13 Newlink Genetics Corporation Imidazole derivatives as IDO inhibitors
ES2722300T3 (es) 2009-12-10 2019-08-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen preferentemente al dominio extracelular 4 de CSF1R y su uso
CN102108078B (zh) * 2009-12-24 2013-10-30 沈阳药科大学 1,4-取代酞嗪类化合物及其制备方法和用途
ME03447B (me) 2010-03-04 2020-01-20 Macrogenics Inc Anтitela reakтivna sa b7-нз, njihovi imunološki akтivni fragmenтi i upotreba
CA2789076C (en) 2010-03-05 2017-11-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against human colony stimulating factor-1 receptor and uses thereof
BR112012022046A2 (pt) 2010-03-05 2017-02-14 F Hoffamann-La Roche Ag ''anticorpo,composição farmacêutica,ácido nucleico ,vetores de expressão,célula hospedeira e método para a produção de um anticorpo recombinante''.
JP5266430B2 (ja) 2010-04-24 2013-08-21 ヴィアメット ファーマスーティカルズ，インコーポレイテッド 金属酵素阻害化合物
WO2011139636A1 (en) * 2010-05-03 2011-11-10 Philadelphia Health & Education Corporation Small molecule inhibitors of functions of the hiv-1 matrix protein
US8206715B2 (en) 2010-05-04 2012-06-26 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies that bind colony stimulating factor 1 receptor (CSF1R)
US8658603B2 (en) 2010-06-16 2014-02-25 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for inducing an immune response
KR101527300B1 (ko) 2010-09-09 2015-06-09 화이자 인코포레이티드 4-1ｂｂ 결합 분자
LT2699264T (lt) 2011-04-20 2018-07-10 Medimmune, Llc Antikūnai ir kitos molekulės, kurios jungiasi prie b7-h1 ir pd-1
TW201326154A (zh) 2011-11-28 2013-07-01 拜耳知識產權公司 作為ｅｐ２受體拮抗劑之新穎２ｈ－吲唑
KR101981873B1 (ko) 2011-11-28 2019-05-23 메르크 파텐트 게엠베하 항-ｐｄ-ｌ1 항체 및 그의 용도
CN104159921B (zh) 2011-12-15 2018-05-04 霍夫曼-拉罗奇有限公司 针对人csf-1r的抗体及其用途
KR20140127855A (ko) 2012-02-06 2014-11-04 제넨테크, 인크. Csf1r 억제제를 사용하는 조성물 및 방법
AR090263A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hoffmann La Roche Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma
EP2847220A1 (en) 2012-05-11 2015-03-18 Five Prime Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind colony stimulating factor 1 receptor (csf1r)
AR091649A1 (es) 2012-07-02 2015-02-18 Bristol Myers Squibb Co Optimizacion de anticuerpos que se fijan al gen de activacion de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
EP3981791A1 (en) 2012-08-30 2022-04-13 Amgen Inc. A method for treating melanoma using a herpes simplex virus and an immune checkpoint inhibitor
AU2013308635A1 (en) 2012-08-31 2015-03-12 Five Prime Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind colony stimulating factor 1 receptor (CSF1R)
WO2014079850A1 (en) 2012-11-23 2014-05-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Substituted heterocyclic derivatives
WO2014086453A1 (en) * 2012-12-07 2014-06-12 Merck Patent Gmbh Azaheterobicyclic compounds
LT2970155T (lt) 2013-03-15 2018-06-25 Bristol-Myers Squibb Company Indolamino 2,3-dioksigenazės (ido) inhibitoriai
WO2014160967A2 (en) 2013-03-29 2014-10-02 Biomed Valley Discoveries, Inc. C. novyi for the treatment of solid tumors in non-human animals
MA47849A (fr) * 2014-05-28 2020-01-29 Agenus Inc Anticorps anti-gitr et leurs procédés d'utilisation
BR112016028255A2 (pt) 2014-06-06 2017-08-22 Flexus Biosciences Inc agentes imunorreguladores
GB201419579D0 (en) 2014-11-03 2014-12-17 Iomet Pharma Ltd Pharmaceutical compound
AR102537A1 (es) 2014-11-05 2017-03-08 Flexus Biosciences Inc Agentes inmunomoduladores
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
CN107205970A (zh) * 2014-11-05 2017-09-26 弗莱塞斯生物科学公司 免疫调节剂

Also Published As

Publication number Publication date
CN107427499A (zh) 2017-12-01
NZ730808A (en) 2023-12-22
IL252009A0 (en) 2017-06-29
EA037286B1 (ru) 2021-03-04
UY36390A (es) 2016-06-01
AU2015342940A1 (en) 2017-04-27
EP3215153A4 (en) 2018-01-24
JP6735274B2 (ja) 2020-08-05
US9643972B2 (en) 2017-05-09
JP2017537080A (ja) 2017-12-14
US10106546B2 (en) 2018-10-23
IL252009B (en) 2019-07-31
SG11201702811RA (en) 2017-05-30
DK3215153T3 (da) 2021-03-22
KR20170097644A (ko) 2017-08-28
US20190002472A1 (en) 2019-01-03
AU2015342940B2 (en) 2021-04-01
LT3215153T (lt) 2021-03-10
EP3215153B1 (en) 2020-12-23
EP3215153A1 (en) 2017-09-13
US20180282281A1 (en) 2018-10-04
PE20171329A1 (es) 2017-09-13
HRP20210291T1 (hr) 2021-04-02
US20170197973A1 (en) 2017-07-13
BR112017008568A2 (pt) 2017-12-19
TN2017000164A1 (en) 2018-10-19
TW201630886A (zh) 2016-09-01
EP3854394A1 (en) 2021-07-28
MX2017005646A (es) 2017-07-14
ZA201702724B (en) 2022-05-25
EA201790992A1 (ru) 2017-09-29
CA2964290A1 (en) 2016-05-12
CO2017005452A2 (es) 2017-09-29
PH12017500629A1 (en) 2017-09-25
US20160137652A1 (en) 2016-05-19
SI3215153T1 (sl) 2021-03-31
HUE054015T2 (hu) 2021-08-30
KR102514378B1 (ko) 2023-03-28
CA2964290C (en) 2021-11-16
PT3215153T (pt) 2021-02-09
TWI740808B (zh) 2021-10-01
PL3215153T3 (pl) 2021-05-31
US10533014B2 (en) 2020-01-14
CN107427499B (zh) 2021-04-16
MY187510A (en) 2021-09-24
RS61457B1 (sr) 2021-03-31
CY1123961T1 (el) 2022-05-27
WO2016073770A1 (en) 2016-05-12
CL2017001124A1 (es) 2018-01-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2848978T3 (es) Agentes inmunomoduladores
ES2867748T3 (es) Agentes inmunorreguladores
US11932601B2 (en) Immunoregulatory agents
CA2951259A1 (en) Immunoregulatory agents
BR112017008568B1 (pt) Agentes imunorregulatórios