EA017824B1

EA017824B1 - Антибактериальные аналоги аминогликозида

Info

Publication number: EA017824B1
Application number: EA201070597A
Authority: EA
Inventors: Джеймс Эгжен; Адам Аарон Голдблум; Мартин Линселл; Паола Доззо; Хейнц Эрнст Моузер; Дарин Хилдебрандт; Миках Глидт
Original assignee: Эйкеоджен, Инк.
Priority date: 2007-11-21
Filing date: 2008-11-21
Publication date: 2013-03-29
Also published as: BRPI0819319B8; CN101868472A; PT2217610T; ES2613936T3; TW200927146A; CN103360440B; AU2008326297A1; HRP20170154T1; PL2217610T3; US11117915B2; US8383596B2; EP2217610A1; IL205880A; IL205880A0; EA201070597A1; CN103360440A; US20200317709A1; WO2009067692A1; EP3150617A1; CY1118915T1

Abstract

В изобретении раскрыты соединения структуры (I)имеющие антибактериальную активность, включая их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и пролекарства, в которых Q, Q, Q, Rи Rимеют определенные здесь значения. Также раскрыты способы, связанные с получением и применением таких соединений, а также фармацевтические композиции, содержащие такие соединения.

Description

Настоящее изобретение относится к новым соединениям аминогликозида, более конкретно, новым производным сизомицина и к способам их получения и применения в качестве терапевтических или профилактических средств.

Описание связанного уровня техники.

Особый интерес в области открытия лекарственных средств представляет в наше время разработка новых низкомолекулярных перорально-биодоступных лекарственных средств, которые действуют, связываясь с РНК. Считалось, что РНК, которая служит посредником между ДНК и белками, является полностью гибкой молекулой без значительной структурной сложности. Недавние исследования раскрыли удивительную сложность структуры РНК. РНК имеет структурную сложность, сравнимую с белками, а не простые звенья, как ДНК. Секвенирование генома раскрывает последовательности как белков, так и мРНК, которые их кодируют. Так как белки синтезируются с использованием матрицы РНК, такие белки могут ингибироваться путем предотвращения их продукции в первую очередь на уровне трансляции мРНК. Поскольку как белки, так и РНК представляют собой потенциальные сайты нацеливания лекарственного средства, число мишеней, определяемых в результате секвенирования генома, фактически удваивается. Эти наблюдения открывают новый мир возможностей для фармацевтической промышленности, позволяя нацеливать на РНК малые молекулы.

В традиционной области открытия лекарственных средств усилия фокусировались на белках как мишенях для вмешательства.

Белки может быть чрезвычайно трудно выделить и очистить в подходящей форме для использования в тестах по скринингу лекарственных средств. Многие белки требуют посттрансляционных модификаций, которые происходят только в определенных типах клеток в определенных условиях. Белки складываются в шаровидные домены с гидрофобными ядрами и гидрофильными и заряженными группами на поверхности. Множественные субъединицы часто формируют комплексы, что может требоваться для эффективного скрининга лекарственных средств. Мембранные белки обычно должны быть встроены в мембрану, чтобы сохранить присущую им форму. Наименьшая практическая единица белка, которая может использоваться в скрининге лекарственных средств, представляет собой шаровидный домен. Понятие удаления единственной альфа-спирали или поворота бета-листа и ее использования в скрининге лекарственных средств не используется на практике, так как только интактный белок может иметь адекватную 3-мерную форму для связывания лекарственного средства. Получение биологически активных белков для скрининга является главным ограничением в классическом высокопроизводительном скрининге. Весьма часто ограничивающим реагентом в высокопроизводительном скрининге является биологически активная форма белка, которая может также быть весьма дорогой.

Для скрининга в целях обнаружить соединения, которые связываются с РНК-мишенями, классические подходы, используемые для белков, можно заменить новыми подходами. Все РНК, по существу, эквивалентны в отношении их растворимости, легкости синтеза или использования в тестах. Физические свойства РНК независимы от белка, который они кодируют. Они могут быть легко получены в большом количестве как химическим, так и ферментативным синтезом и экстенсивно не модифицируются ίη νίνο. В случае РНК, наименьшая практическая единица для связывания лекарственного средства представляет собой функциональный субдомен. Функциональный субдомен в РНК представляет собой фрагмент, который, при его удалении из большей РНК и изолированном изучении, сохраняет ее биологически релевантную форму и свойства в отношении связывания с белком или РНК. Размер и состав функциональных субдоменов РНК делают их доступными путем ферментативного или химического синтеза. Специалисты в области структурной биологии накопили значительный опыт в идентификации функциональных субдоменов РНК, что облегчает структурные исследования такими методиками, как ЯМР-спектроскопия. Например, малые аналоги декодирующей области 168 рРНК (А-участок) были идентифицированы как содержащие только существенную область, и было показано, что они связываются с антибиотиками тем же самым способом, как интактная рибосома.

Связывающие участки на РНК являются гидрофильными и относительно открытыми по сравнению с белками. Потенциал для распознавания малой молекулы, основанного на форме, усиливается за счет способности РНК подвергаться деформации. Связывание молекул со специфической РНК-мишенью может быть определено общей конформацией и распределением заряженных, ароматических групп и групп, образующих водородные связи, относительно твердого скелета. Считается, что правильно расположенные положительные заряды являются важными, так как долгосрочные электростатические взаимодействия могут использоваться для направления молекул в связывающий карман с правильной ориентацией. В структурах с открытыми нуклеобазами накладывающиеся взаимодействия с ароматическими функциональными группами могут способствовать связывающему взаимодействию. Большая борозда

- 1 017824

РНК содержит множество участков для специфического связывания через водородные связи с лигандом. Они включают ароматические атомы азота N7 аденозина и гуанозина, атомы кислорода О4 и О6 уридина и гуанозина и амины аденозина и цитидина. Богатое структурное разнообразие и разнообразие последовательности РНК позволяет сделать предположение, что лиганды могут быть получены с высоким сродством и специфичностью к их мишени.

Хотя наше понимание структуры и фолдинга РНК, а также процессов распознавания РНК другими лигандами далеко от всестороннего, в прошлое десятилетие был достигнут значительный прогресс (см., например, ί.Ίιο\ν. С.8.; Водйап, Б.М., СНет. Яеу., 1997, 97, 1489 апй \УаШк. М.О.; 8сНтоейег, Я., Ргод. Βίορΐινκ. Мо1ес. ΒίοΙ. 1997, 67, 141). Несмотря на центральную роль РНК в репликации у бактерий, не хватает лекарственных средств, мишенями которых являются эти стержневые участки РНК этих патогенов. Увеличивающаяся проблема резистентности бактерий к антибиотикам делает поиск новых агентов, связывающих РНК, критически важным.

Некоторые малые молекулы могут связываться с РНК и блокировать их существенные функции. Примеры таких молекул включают аминогликозидные антибиотики и такие лекарственные средства, как эритромицин, который связывается с бактериальной рРНК и высвобождает пептидил-тРНК и мРНК. Аминогликозидные антибиотики, как давно известно, связываются с РНК. Они проявляют свои антибактериальные эффекты, связываясь с определенными целевыми участками в бактериальной рибосоме. Для структурно связанных антибиотиков неамина, рибостамицина, неомицина В и паромомицина, связывающий участок локализован в А-участке декодирующей области РНК прокариотических рибосом (см. Моахей, Ό.; №11ет, Н.Б., №1ите, 1987, 327, 389). Связывание аминогликозидов с этой РНК-мишенью нарушает точность трансляции мРНК и приводит к неправильному кодированию и усечению, и в конечном счете к гибели бактериальной клетки (см. А1рег, Р.В.; Непйпх, М.; 8еатк, Р.; ^опд, С., 1 Ат. СНет. 8ос., 1998, 120, 1965).

Существует потребность в новых химических соединениях, которые обладали бы антибактериальной активностью широкого спектра. Возможно самой важной задачей в обнаружении связывающихся с РНК антибактериальных лекарственных средств является идентификация витальных структур, общие для бактерий, которые могут быть повреждены в результате связывания с лекарственным средством, представляющим собой малую молекулу. Задачей в нацеливании малых молекул на РНК является разработка химической стратегии распознавания определенных форм РНК. Существуют три набора данных, которые подсказывают, как это сделать: естественные взаимодействия белка с РНК, натуральные антибиотики, которые связываются с РНК, и искусственные РНК (аптамеры), которые связываются с белками и другими молекулами. Каждый из этих наборов данных, однако, дает свое понимание проблемы.

Было показано, что несколько классов лекарственных средств, полученных из естественных источников, действуют, связываясь с РНК или комплексом РНК/белок. Они включают три различных структурных класса антибиотиков: тиострептон, аминогликозидное семейство и макролидное семейство антибиотиков. Эти примеры предоставляют ключи к пониманию того, как малые молекулы и мишени могли бы быть выбраны. Природа выбрала РНК-мишени в рибосоме, одной из самых древних и консервативных мишеней у бактерий. Так как желательно, чтобы антибактериальные лекарственные средства были мощными и имели широкий спектр активности, эти древние процессы, фундаментальные для всей жизни бактерий, представляют собой привлекательные мишени. Чем ближе мы подбираемся к древним консервативным функциям, тем более вероятно мы можем найти высококонсервативные формы РНК. Важно также рассмотреть форму эквивалентной структуры у человека, так как бактерии вряд ли учитывали терапевтический индекс их РНК при эволюции.

Существует большое число натуральных антибиотиков, они включают аминогликозиды, такие как кирромицин, неомицин, паромомицин, тиострептон и многие другие. Они представляют собой очень мощные бактерицидные соединения, которые связываются с РНК малой субъединицы рибосомы. Бактерицидное действие опосредуется связыванием с бактериальной РНК таким образом, что это приводит к неправильному считыванию генетического кода. Считается, что неправильное считывание кода в ходе трансляции мембранных белков приводит к синтезу патологических белков, которые ставят под угрозу барьерные свойства бактериальной мембраны.

Антибиотики представляют собой химические вещества, продуцируемые различными видами микроорганизмов (бактерии, грибы, актиномицеты), которые подавляют рост других микроорганизмов и могут в конечном счете разрушать их. Однако в обиходе термин антибиотики также включает синтетические антибактериальные агенты, такие как сульфонамиды и хинолины, которые не являются продуктами микроорганизмов. Число антибиотиков, которые были идентифицированы к настоящему времени, составляет сотни, и многие из них были разработаны до такой степени, на которой они могут использоваться в терапии инфекционных заболеваний. Антибиотики заметно различаются по физическим, химическим и фармакологическим свойствам, антибактериальным спектрам и механизмам действия. В последние годы результаты изучения молекулярных механизмов репликации бактерий, грибов и вирусов значительно облегчило рациональную разработку соединений, которые могут нарушать жизненные циклы этих микроорганизмов.

По меньшей мере 30% всех госпитализированных пациентов теперь получают один или более кур

- 2 017824 сов терапии с антибиотиками, и миллионы потенциально фатальных инфекций были вылечены. В то же самое время эти фармацевтические средства оказались среди наиболее неправильно используемых из доступных для практикующего врача. Одним из результатов широко распространенного использования антибактериальных агентов было появление резистентных к антибиотикам патогенов, которое, в свою очередь, спровоцировало постоянно увеличивающуюся потребность в новых лекарственных средствах. Многие из этих средств также значительно способствовали увеличению стоимости медицинского обслуживания.

При первом тестировании противомикробной активности нового средства обычно определяется структура чувствительности и резистентности. К сожалению, этот спектр активности может впоследствии в значительной степени измениться, поскольку микроорганизмы эволюционируют множеством изобретательных путей, обсуждаемых выше, что позволяет им выживать в присутствии антибиотиков. Механизм лекарственной резистентности варьирует от микроорганизма к микроорганизму и от лекарственного средства к лекарственному средству.

Развитие резистентности к антибиотикам обычно включает стабильное генетическое изменение, наследуемое от поколения к поколению. Может функционировать любой из механизмов, которые приводят к изменению состава генома бактерий. Хотя причиной часто является мутация, резистентность к антибактериальным агентам может быть приобретена через передачу генетического материала от одной бактерии к другой путем трансдукции, трансформации или конъюгации.

По вышеописанным причинам, несмотря на достигнутые в этой области успехи, существует потребность в новых химических соединениях, которые обладали бы антибактериальной активностью. Кроме того, чтобы ускорить процесс открытия лекарственных средств, необходимы новые способы синтеза аминогликозидных антибиотиков для получения множества соединений, которые были бы потенциальными новыми лекарственными средствами для лечения бактериальных инфекций. Настоящее изобретение отвечает этим потребностям и обеспечивает связанные с этим преимущества.

Краткое описание изобретения

Коротко говоря, настоящее изобретение относится к новым соединениям аминогликозида, более конкретно, к новым производным сизомицина, имеющим антибактериальную активность, включая их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и пролекарства, и к применению таких соединений в лечении бактериальных инфекций.

В одном варианте осуществления изобретение относится к соединениям, имеющим следующую структуру (I):

или к их стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли, в которой Οι обозначает водород,

О₂ обозначает водород.-(СВ_|0Я_||)_рЯ_|;. -С1-Сб-алкил-Сз-Сю-циклоалкил, в случае необходимости за- 3 017824 мещенный амино, гидроксилом или -Сщлкиламино; -Ц-Сб-алкил-Сд-Сб-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом, амино или -С₁-С_балкилом; -ί’(=ΝΗ)ΝΚ.₄Κ,₅; или

но

О₃ обозначает водород, -(СВ₁₀В₁₁)_рВ₁₂; -С₁-С_б-алкил-С₃-С₁₀-циклоалкил, в случае необходимости замещенный амино или гидроксилом; -С1-Сб-алкил-С|-Сб-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом или амино; С|-Сбгетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν; -0(=ΝΗ)ΝΚ4Κ.₅,

каждый К₁, К₂, К₃, К₄, К₅, К₈ и К₁₀, независимо, обозначают водород или С₁-С_б-алкил, или К₁ и К₂вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С₄-С_б-гетероциклоалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, или К₂ и К₃ вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С₄-С_б-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, или К₁ и К₃ вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С₄-С_б-циклоалкил;

каждый К._б и К₇, независимо, обозначает водород или С₁-С_б-алкил или К._б и К₇ вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать гетероциклическое кольцо, имеющее от 4 до б кольцевых атомов;

каждый К,₉. независимо, обозначает водород или метил;

каждый К₁₁, независимо, обозначает водород, гидроксил, амино или С₁-С_б-алкил;

каждый К₁₂, независимо, обозначает гидроксил или амино;

каждый п, независимо, означает целое число от 0 до 4;

каждый т, независимо, означает целое число от 0 до 4;

каждый р, независимо, означает целое число от 1 до 5, и в которой (ί) по меньшей мере два из Ц₁, О₂ и О₃ отличаются от водорода и (ίί), если Ц₁ обозначает водород, то по меньшей мере один из О₂ и О₃ обозначает -ί’(=ΝΗ)ΝΚ.₄Κ,₅.

В другом варианте осуществления изобретение относится к способу применения соединения, имеющего структуру (I) в терапии. В частности, настоящее изобретение относится к способу лечения бактериальной инфекции у млекопитающего, включающему введение млекопитающему эффективного количества соединения, имеющего структуру (I), или его стереоизомера, фармацевтически приемлемой соли или пролекарства.

Эти и другие аспекты изобретения будут очевидны из следующего подробного описания.

Подробное описание

В следующем описании сформулированы некоторые специфические детали, чтобы обеспечить полное понимание различных вариантов осуществления изобретения. Однако специалист поймет, что изобретение может быть осуществлено без этих деталей.

Если контекст не требует иного, по всему тексту настоящего описания и формулы изобретения слово содержит и его варианты, такие как содержащий, должны быть рассмотрены в открытом, включительном смысле, т.е. как включая, но не ограничиваясь.

В рамках описания указание на один вариант осуществления или вариант осуществления означает, что особый признак, структура или характеристика, описанные применительно к этому варианту осуществления, включены по меньшей мере в один вариант осуществления настоящего изобретения. Таким образом, появления фраз в одном варианте осуществления или в варианте осуществления в различных местах настоящего описания не обязательно все относятся к одному и тому же варианту осуществления. Кроме того, особые признаки, структуры или характеристики могут быть скомбинированы любым подходящим образом в одном или более вариантах осуществления.

- 4 017824

В рамках описания и приложенной формулы изобретения, если не указано иное, следующие термины имеют указанное значение.

Амино относится к радикалу -ΝΗ₂.

Циано относится к радикалу -ΟΝ.

Гидрокси или гидроксил относятся к радикалу -ОН.

Имино относится к заместителю =ΝΗ.

Нитро относится к радикалу -ΝΟ₂.

Оксо относится к заместителю =О.

Тиоксо относится к заместителю =8.

Алкил относится к углеводородному радикалу с прямой или разветвленной цепью, состоящей исключительно из атомов углерода и водорода, который является насыщенным или ненасыщенным (то есть содержит одну или более двойных и/или тройных связей), имеющему от одного до двенадцати атомов углерода (С1-С1₂-алкил), предпочтительно от одного до восьми атомов углерода (С|-С₈-алкил) или от одного до шести атомов углерода (С₁-С₆-алкил), и который присоединен к остальной части молекулы простой связью, например метил, этил, н-пропил, 1-метилэтил (изопропил), н-бутил, н-пентил, 1,1диметилэтил (трет-бутил), 3-метилгексил, 2-метилгексил, этенил, проп-1-енил, бут-1-енил, пент-1-енил, пента-1,4-диенил, этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил и т.п. Если в описании специально не указано иное, алкильная группа может быть замещена.

Алкилен или алкиленовая цепь относится к прямой или разветвленной двухвалентной углеводородной цепи, связывающей остальную часть молекулы с радикальной группой, состоящей исключительно из углерода и водорода, которая является насыщенной или ненасыщенной (то есть содержит одну или более двойных и/или тройных связей), и имеющей от одного до двенадцати атомов углерода, например метилен, этилен, пропилен, трет-бутилен, этенилен, пропенилен, н-бутенилен, пропинилен, нбутинилен и т.п. Алкиленовая цепь присоединена к остальной части молекулы простой или двойной связью и к радикальной группе - простой или двойной связью. Точками присоединения алкиленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе могут быть один углерод или любые два углерода в пределах цепи. Если в описании специально не указано иное, алкиленовая цепь может быть замещена.

Алкокси относится к радикалу формулы -ОЕ,. где В_а обозначает алкильный радикал, как определено выше, содержащий от одного до двенадцати атомов углерода. Если в описании специально не указано иное, алкоксигруппа может быть замещена.

Алкиламино относится к радикалу формулы -ΝΗΚ,, или -ΝΚ_αΚ._α, где каждый Β,, независимо, обозначает алкильный радикал, как определено выше, содержащий от одного до двенадцати атомов углерода. Если в описании специально не указано иное, алкиламиногруппа может быть замещена.

Тиоалкил относится к радикалу формулы -8В_а, где В_а обозначает алкильный радикал, как определено выше, содержащий от одного до двенадцати атомов углерода. Если в описании специально не указано иное, тиоалкильная группа может быть замещена.

Арил относится к кольцевому углеводородному радикалу, содержащему водород, от 6 до 18 атомов углерода и по меньшей мере одно ароматическое кольцо. В целях этого изобретения арильный радикал может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или соединенные мостиковой связью кольцевые системы. Арильные радикалы включают, но не ограничены ими, арильные радикалы, полученные из ацеантрилена, аценафтилена, ацефенантрилена, антрацена, азулена, бензола, кризола, флуорантена, флуорена, ак-индацена, к-индацена, индана, индена, нафталина, феналена, фенантрена, плеядена, пирена и трифенилена. Если в описании специально не указано иное, термин арил или приставка Аг- (такая как в аралкиле) включает арильные радикалы, которые могут быть замещены.

Аралкил относится к радикалу формулы -В_ь-В_с, где В_ь обозначает алкиленовую цепь, как определено выше, и В_с обозначает один или более арильных радикалов, как определено выше, например бензил, дифенилметил и т.п. Если в описании специально не указано иное, аралкильная группа может быть замещена.

Циклоалкил или карбоциклическое кольцо относится к стабильному неароматическому моноциклическому или полициклическому углеводородному радикалу, состоящему исключительно из атомов углерода и водорода, которые могут включать конденсированные или соединенные мостиковой связью кольцевые системы, имеющие от 3 до 15 атомов углерода, предпочтительно имеющие от 3 до 10 атомов углерода, и которые являются насыщенными или ненасыщенными и присоединены к остальной части молекулы простой связью. Моноциклнческне радикалы включают, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Полициклические радикалы включают, например, адамантил, норборнил, декалинил, 7,7-диметил-бицикло[2.2.1]гептанил и т.п. Если в описании специально не указано иное, циклоалкильная группа может быть замещена.

Циклоалкилалкил относится к радикалу формулы -ЕВн, где В_ь обозначает алкиленовую цепь, как определено выше, и Κ,ι обозначает циклоалкильный радикал, как определено выше. Если в описании специально не указано иное, циклоалкилалкильная группа может быть замещена.

Конденсированный относится к любой кольцевой структуре, описанной здесь, которая присоеди

- 5 017824 йена к существующей кольцевой структуре в соединениях по изобретению. Когда конденсированное кольцо является гетероциклильным кольцом или гетероарильным кольцом, любой атом углерода на существующей кольцевой структуре, которая становится частью конденсированного гетероциклильного кольца, или конденсированного гетероарильного кольца, может быть заменено атомом азота.

Галоген относится к брому, хлору, фтору или йоду.

Галогеналкил относится к алкильному радикалу, как определено выше, который замещен одним или более атомами галогена, как определено выше, например трифторметил, дифторметил, трихлорметил, 2,2,2-трифторэтил, 1,2-дифторэтил, 3-бром-2-фторпропил, 1,2-дибромэтил и т.п. Если в описании специально не указано иное, галогеналкильная группа может быть замещена.

Гетероциклил или гетероциклическое кольцо относится к стабильному 3-18-членному неароматическому кольцевому радикалу, который состоит из двух-двенадцати атомов углерода и от одного до шести гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы. Если в описании специально не указано иное, гетероциклильный радикал может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или соединенные мостиковой связью кольцевые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероциклильном радикале могут быть окислены; атом азота может быть в случае необходимости кватернизован и гетероциклильный радикал может быть частично или полностью насыщен. Примеры таких гетероциклильных радикалов включают, но не ограничены ими, диоксоланил, тиенил[1,3]дитианил, декагидроизохинолил, имидазолинил, имидазолидинил, изотиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, оксазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразолидинил, хинуклидинил, тиазолидинил, тетрагидрофурил, тритианил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, тиаморфолинил, 1оксотиоморфолинил, и 1,1-диоксотиоморфолинил. Если в описании специально не указано иное, гетероциклильная группа может быть замещена.

Ν-гетероциклил относится к гетероциклильному радикалу, как определено выше, содержащему по меньшей мере один атом азота, и где точкой присоединения гетероциклильного радикала к остальной части молекулы является атом азота в гетероциклильном радикале. Если в описании специально не указано иное, Ν-гетероциклильная группа может быть замещена.

Гетероциклилалкил относится к радикалу формулы -ЯЯ,- где Я_ь обозначает алкиленовую цепь, как определено выше, и Я,, обозначает гетероциклильный радикал, как определено выше, и если гетероциклил представляет собой азотсодержащий гетероциклил, гетероциклил может быть присоединен к алкильному радикалу на атоме азота. Если в описании специально не указано иное, гетероциклилалкильная группа может быть замещена.

Гетероарил относится к 5-14-членному кольцевому радикалу, включающему атомы водорода, от одного до тринадцати атомов углерода, от одного до шести гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и по меньшей мере одно ароматическое кольцо. В целях этого изобретения гетероарильный радикал может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или соединенные мостиковой связью кольцевые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероарильном могут быть окислены; атом азота может быть кватернизован. Примеры включают, но не ограничены ими, азепинил, акридинил, бензимидазолил, бензотиазолил, бензиндолил, бензодиоксолил, бензофуранил, бензооксазолил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, бензо[6][1,4]диоксепинил, 1,4-бензодиоксанил, бензонафтофуранил, бензоксазолил, бензодиоксолил, бензодиоксинил, бензопиранил, бензопиранонил, бензофуранил, бензофуранонил, бензотиенил (бензотиофенил), бензотриазолил, бензо[4,6]имидазо[1,2-а]пиридинил, карбазолил, циннолинил, дибензофуранил, дибензотиофенил, фуранил, фуранонил, изотиазолил, имидазолил, индазолил, индолил, индазолил, изоиндолил, индолинил, изоиндолинил, изохинолил, индолизинил, изоксазолил, нафтиридинил, оксадиазолил, 2-оксоазепинил, оксазолил, оксиранил, 1оксидопиридинил, 1-оксидопиримидинил, 1-оксидопиразинил, 1-оксидопиридазинил, 1-фенил-1Нпирролил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фталазинил, птеридинил, пуринил, пирролил, пиразолил, пиридинил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, хиназолинил, хиноксалинил, хинолинил, хинуклидинил, изохинолинил, тетрагидрохинолинил, тиазолил, тиадиазолил, триазолил, тетразолил, триазинил и тиофенил (то есть тиенил). Если в описании специально не указано иное, гетероарильная группа может быть замещена.

Ν-гетероарил относится к гетероарильному радикалу, как определено выше, содержащему по меньшей мере один атом азота, и где точкой присоединения гетероарильного радикала к остальной части молекулы является атом азота в гетероарильном радикале. Если в описании специально не указано иное, Ν-гетероарильная группа может быть замещена.

Гетероарилалкил относится к радикалу формулы -Я_ЬЯ_£, где Я_ь обозначает алкиленовую цепь, как определено выше, и Я_£ обозначает гетероарильный радикал, как определено выше. Если в описании специально не указано иное, гетероарилалкильная группа может быть замещена.

Термин замещенный, используемый здесь, означает любую из вышеуказанных групп (то есть алкил, алкилен, алкокси, алкиламино, тиоалкил, арил, аралкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, галогенал

- 6 017824 кил, гетероциклил, Ν-гетероциклил, гетероциклилалкил, гетероарил, Ν-гетероарил и/или гетероарилалкил), в которой по меньшей мере один атом водорода заменен связью с атомами, отличными от водорода, такими как, но не ограничиваясь ими: атом галогена, такой как Г, С1, Вг и I; атом кислорода в таких группах, как гидроксильные группы, алкоксигруппы и сложноэфирные группы; атом серы в таких группах, как тиоловые группы, тиоалкильные группы, сульфоновые группы, сульфонильные группы и сульфоксидные группы; атом азота в таких группах, как амины, амиды, алкиламины, диалкиламины, ароматические амины, алкилариламины, диариламины, Ν-оксиды, имиды и енамины; атом кремния в таких группах, как триалкилсилильные группы, диалкиларилсилильные группы, алкилдиарилсилильные группы и триарилсилильные группы; и другие гетероатомы в различных других группах. Замещенный также означает любую из вышеуказанных групп, в которых один или более атомов водорода заменены связью более высокого порядка (например, двойной или тройной связью) с гетероатомом, таким как кислород в оксогруппе, карбонильной, карбоксильной группе и сложноэфирных группах; и азот в таких группах, как имины, оксимы, гидразины и нитрилы. Например, замещенный включает любую из вышеуказанных групп, в которых один или более атомов водорода заменены группами -ΝΚ₆Κη, -Ν6.₆Ο=0)Κ_|, -№₆С(=0)№₆К_ь -И6.₆С(=0)0К_Ь, -ΝΚ₆§0₂Κη, -0С(=0)И6.₆К_Ь, -06_д, -8К₈, -80К₆, -§0₂К₆, -080₂К₆, -80₂0К₆, =Ν80₂Κ₆ и -80₂Ν6_,6|,. Замещенный также означает любую из вышеуказанных групп, в которых один или более атомов водорода заменены группами -С(=0)6_д, -С(=0)06_д, -С(=0^6._д6._ь, -СН₂§0₂6₆, -СН₂80₂НК₆К_ь. В вышеуказанных группах 6_д и К_ь являются одинаковыми или разными и независимо обозначают водород, алкил, алкокси, алкиламино, тиоалкил, арил, аралкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, галогеналкил, гетероциклил, Ν-гетероциклил, гетероциклилалкил, гетероарил, Νгетероарил и/или гетероарилалкил. Замещенный также означает любую из вышеуказанных групп, в которых один или более атомов водорода заменены связью с амино, циано, гидроксильной, имино, нитро, оксо, тиоксо, галогеном, алкильной, алкокси, алкиламино, тиоалкильной, арильной, аралкильной, циклоалкильной, циклоалкилалкильной, галогеналкильной, гетероциклильной, Ν-гетероциклильной, гетероциклилалкильной, гетероарильной, Ν-гетероарильной и/или гетероарилалкильной группой. Кроме того, каждый из описанных выше заместителей может также быть в случае необходимости замещен одним или более вышеуказанных заместителей.

Изобретение, раскрытое здесь, также охватывает все фармацевтически приемлемые соединения структуры (I), изотопно меченные путем замены одного или более атомов атомом, имеющим другую атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть включены в раскрытые в настоящем изобретении соединения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора (3), фтора, хлора и йода, такие как ²Н, ³Н, ^ПС, ¹³С, ¹⁴С, ¹³Ν, ¹⁵Ν, ¹⁵0, ¹⁷0, ¹⁸0, ³¹Р, ³²Р, ³⁵8, ¹⁸Г, ³⁶С1, ¹²³1 и ¹²⁵1, соответственно. Эти меченные изотопом соединения могут быть использованы для определения или измерения эффективности соединений, характеризуя, например, участок или способ действия или связывающее сродство к фармакологически важному участку действия. Некоторые изотопно меченные соединения структуры (I), например, такие, которые включают радиоактивный изотоп, могут быть использованы в исследованиях распределения лекарственного средства и/или субстрата в ткани. Радиоактивные изотопы тритий, то есть ³Н, и углерод 14, то есть ¹⁴С, являются особенно пригодными для использования с этой целью ввиду легкости их включения и имеющихся средств детекции.

Замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, то есть ²Н, может предоставить определенные терапевтические преимущества, являющиеся следствием большей метаболической стабильности, например увеличенного периода полураспада ίη νίνο или сниженной требуемой дозы, и следовательно, может быть предпочтительным при некоторых обстоятельствах.

18 15 13

Замещение изотопов, испускающих позитроны, таких как С, Г, 0 и Ν, может быть полезным в исследованиях методом позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТФ) для того, чтобы исследовать заполнение рецептора субстратом. Изотопно меченные соединения структуры (I) могут в целом быть получены обычными методиками, известными специалисту, или способами, аналогичными описанным в Примерах получения и Примерах, как изложено ниже, с использованием подходящего изотопномеченного реагента вместо немеченного реагента. Изобретение, раскрытое здесь, также охватывает продукты метаболизма раскрытых соединений ίη νίνο. Такие продукты могут образовываться, например, вследствие окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, этерификации и т.п. вводимого соединения, прежде всего вследствие ферментативных процессов. Соответственно изобретение включает соединения, полученные способом, включающим введение соединения по изобретению млекопитающему сроком на время, достаточное, получая продукту его метаболизма. Такие продукты обычно идентифицируют, вводя меченное радиоактивным изотопом соединение по изобретению в обнаруживаемой дозе животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна или человек, оставляя на достаточное для метаболизма время и выделяя его продукты превращения из мочи, крови или других биологических об разцов.

Стабильное соединение и стабильная структура означают соединение, которое является достаточно устойчивым для выделения с полезной степенью чистоты из реакционной смеси и составление в эффективное терапевтическое средство.

Млекопитающее включает человека и как домашних животных, таких как лабораторные живот

- 7 017824 ные и домашние животные (например, кошки, собаки, свиньи, рогатый скот, овцы, козы, лошади, кролики), так и недомашних животных, таких как дикие животные, и т.п.

Возможно или в случае необходимости означает, что описанный случай может иметь место или может не иметь места, и что описание включает ситуации, где указанный случай или обстоятельство имеет место, и ситуации, в которых это не происходит. Например, в случае необходимости замещенный арил означает, что арильный радикал может быть замещен или не замещен и что описание включает как замещенные арильные радикалы, так и арильные радикалы, не имеющие никакого замещения.

Фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент включает без ограничения любой адъювант, носитель, эксципиент, глидант, подсластитель, разбавитель, консервант, краску/пигмент, усилитель аромата, поверхностно-активное вещество, смачивающее вещество, диспергирующий агент, суспендирующий агент, стабилизатор, изотоническое средство, растворитель или эмульгатор, которые были одобрены Фармкомитетом Соединенных Штатов как являющиеся приемлемыми для использования у человека или домашних животных.

Фармацевтически приемлемая соль включает соли присоединения как с кислотой, так и с основанием. Фармацевтически приемлемая соль присоединения с кислотой относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных оснований, которые не являются биологически или в другом отношении нежелательными и которые образованы с неорганическими кислотами, такими как, но не ограничиваясь ими, соляная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., и органическими кислотами, такими как, но не ограничиваясь ими, уксусная кислота, 2,2-дихлоруксусная кислота, адипиновая кислота, альгиновая кислота, аскорбиновая кислота, аспарагиновая кислота, бензолсульфоновая кислота, бензойная кислота, 4ацетамидобензойная кислота, камфорная кислота, камфор-10-сульфоновая кислота, каприновая кислота, капроновая кислота, каприловая кислота, угольная кислота, коричная кислота, лимонная кислота, цикламовая кислота, додецилсерная кислота, этан-1,2-дисульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 2гидроксиэтансульфоновая кислота, муравьиная кислота, фумаровая кислота, галактаровая кислота, гентизиновая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, глюкуроновая кислота, глутаминовая кислота, глутаровая кислота, 2-оксо-глутаровая кислота, глицерофосфорная кислота, гликолевая кислота, гиппуровая кислота, изомасляная кислота, молочная кислота, лактобионовая кислота, лауриновая кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, слизевая кислота, нафталин-1,5-дисульфоновая кислота, нафталин-2-сульфоновая кислота, 1гидрокси-2-нафтойная кислота, никотиновая кислота, олеиновая кислота, оротовая кислота, щавелевая кислота, пальмитиновая кислота, памовая кислота, пропионовая кислота, пироглутаминовая кислота, пировиноградная кислота, салициловая кислота, 4-аминосалициловая кислота, себациновая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, винная кислота, тиоциановая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, трифторуксусная кислота, ундециленовая кислота и т.п.

Фармацевтически приемлемая соль присоединения с основанием относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных кислот, которые не являются биологически или в другом отношении нежелательными. Эти соли получают присоединением неорганического основания или органического основания к свободной кислоте. Соли, полученные из неорганических оснований, включают, но не ограничены ими, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция, магния, железа, цинка, меди, марганца, алюминия и т.п. Предпочтительными неорганическими солями являются соли аммония, натрия, калия, кальция и магния. Соли, полученные из органических оснований, включают, но не ограничены ими, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенные амины, включая натуральные замещенные амины, циклические амины и катионобменные смолы, такие как гидроксид аммония, изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин, диэтаноламин, этаноламин, деанол, 2-диметиламиноэтанол, 2-диэтиламиноэтанол, дициклогексиламин, лизин, аргинин, гистидин, кофеин, прокаин, гидрабамин, холин, бетаин, бенетамин, бензатин, этилендиамин, глюкозамин, метилглюкамин, теобромин, триэтаноламин, трометамин, пурины, пиперазин, пиперидин, Νэтилпиперидин, полиаминовые смолы и т.п. Особенно предпочтительными органическими основаниями являются изопропиламин, диэтиламин, этаноламин, триметиламин, дициклогексиламин, холин и кофеин.

Часто кристаллизация приводит к образованию сольвата соединения по изобретению. В рамках изобретения термин сольват относится к агрегату, который включает одну или более молекул соединения по изобретению с одной или более молекулами растворителя. Растворитель может быть водой, тогда сольват может быть гидратом. Альтернативно, растворитель может быть органическим растворителем. Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в форме гидрата, включая моногидрат, дигидрат, полугидрат, сесквигидрат, тригидрат, тетрагидрат и т.п., а также в соответствующих сольватированных формах. Соединение по изобретению может быть истинным сольватом, в то время как в других случаях соединение по изобретению может просто сохранять адвентициальную воду или представлять собой смесь воды с некоторым количеством адвентициального растворителя.

Фармацевтическая композиция относится к составу соединения по изобретению и среды, обычно используемой в данной области для доставки биологически активного соединения млекопитающим, например человеку. Такая среда включает все фармацевтически приемлемые носители, разбавители или

- 8 017824 эксципиенты.

Эффективное количество или терапевтически эффективное количество относится к количеству соединения по изобретению, которое, при введении млекопитающему, предпочтительно человеку, является достаточным для лечения, как определено ниже, бактериальной инфекции у млекопитающего, предпочтительно человека. Количество соединения по изобретению, которое составляет терапевтически эффективное количество, варьирует в зависимости от соединения, состояния и его серьезности, образа введения и возраста получающего лечение млекопитающего, но может быть определено обычным образом специалистом на основании его собственных знаний и настоящего раскрытия.

Лечение в рамках изобретения включает лечение заболевания или состояния у млекопитающего, предпочтительно человека, имеющего это заболевание или состояние, и включает:

(ί) предупреждение возникновения заболевания или состояния у млекопитающего, в частности, когда такое млекопитающее предрасположено к состоянию, но у которого оно еще не было диагностировано;

(ίί) ингибирование заболевания или состояния, то есть остановку его развития;

(ίίί) излечение заболевания или состояния, то есть регрессию заболевания или состояния; или (ίν) излечение симптомов, являющихся следствием заболевания или состояния, то есть уменьшение боли безотносительно основного заболевания или состояния. В рамках изобретения термины заболевание и состояние могут использоваться взаимозаменяемо или могут различаться в том, что конкретное заболевание или состояние, возможно, не имеют известного возбудителя (так, что этиология еще не была установлена), и поэтому оно еще не считается заболеванием, а только нежелательным состоянием или синдромом, при котором клиническими врачами был идентифицирован более или менее определенный набор симптомов.

Соединения по изобретению или их фармацевтически приемлемые соли могут содержать один или более центров асимметрии и могут, таким образом, давать начало энантиомерам, диастереомерам и другим стереоизомерным формам, которые могут быть определены, в терминах абсолютной стереохимии, как (В)- или (8)-, или как (Ό)- или (Ь)- для аминокислот. Настоящее изобретение включает все такие возможные изомеры, а также их рацемические и оптически чистые формы. Оптически активные (+) и (-), (В)- и (8)- или (Ό)- и (Ь)-изомеры могут быть получены с использованием хиральных синтонов или хиральных реагентов, или разделением с использованием обычных методик, например хроматографии и фракционной кристаллизации. Обычные методики для получения/выделения индивидуальных энантиомеров включают хиральный синтез из подходящего оптически чистого предшественника или разделение рацемата (или рацемата соли или производного) с использованием, например, хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Когда соединения, описанные здесь, содержат олефиновые двойные связи или другие центры геометрической асимметрии, и если не указано иное, соединения включают геометрические изомеры Е и Ζ. Аналогично, все таутомерные формы также входят в рамки изобретения.

Стереоизомер относится к соединению, составленному из тех же самых атомов, соединенных теми же самыми связями, но имеющему другие пространственные структуры, которые не являются взаимозаменяемыми. Настоящее изобретение рассматривает различные стереоизомеры и их смеси и включает энантиомеры, которые относятся к двум стереоизомерам, молекулы которых являются ненакладываемыми зеркальными отображениями друг друга.

Таутомер относится к протонному сдвигу от одного атома молекулы к другому атому той же самой молекулы. Настоящее изобретение включает таутомеры любых указанных соединений.

Как отмечено выше, в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, имеющим антибактериальную активность, имеющим следующую структуру (I):

или к их стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли, в которой О, обозначает водород,

- 9 017824

О₂ обозначает водород, -(СВ₁₀В₁₁)_рК₁₂; -С1-С₆-алкил-Сз-Сю-циклоалкил, в случае необходимости замещенный амино, гидроксилом или -С₁-алкиламино; -С₁-С₆-алкил-С₄-С₆-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом, амино или -С₁-С₆алкилом; -ί.’(=ΝΗ)ΝΚ.₄Κ,₅; или

О₃ обозначает водород, -(СВ₁₀В₁₁)_рК₁₂; -С₁-С₆-алкил-С₃-С₁₀-циклоалкил, в случае необходимости замещенный амино или гидроксилом; -С₁-С₆-алкил-С₄-С₆-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом или амино; С₄-С₆гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν; -Ο(=ΝΗ)ΝΚ.₁Κ₃,

каждый К₁, К₂, К₃, К₄, К₅, К₈ и К₁₀, независимо, обозначают водород или С₁-С₆-алкил, или К₁ и К₂вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С₄-С₆-гетероциклоалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, или К₂ и К₃ вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С₄-С₆-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, или К₁ и К₃ вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С₄-С₆-циклоалкил;

каждый Кб и К₇, независимо, обозначает водород или С₁-С₆-алкил или Кб и К₇ вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать гетероциклическое кольцо, имеющее от 4 до 6 кольцевых атомов;

каждый К₉, независимо, обозначает водород или метил;

каждый К₁₁, независимо, обозначает водород, гидроксил, амино или С₁-С₆-алкил;

каждый р, независимо, означает целое число от 1 до 5, и в которой (ί) по меньшей мере два из р₁, О₂ и О₃ отличаются от водорода и (ίί), если 0₁ обозначает водород, то по меньшей мере один из О₂ и О₃ обозначает -ί.’(=ΝΗ)ΝΚ₄Ρ₅.

В других вариантах осуществления К,₈ обозначает водород.

В других вариантах осуществления каждый К₉ обозначает метил.

В других вариантах осуществления 0₁ и О₂ отличаются от водорода. В некоторых вариантах осуще

- 10 017824 ствления О₃ обозначает водород.

В более частных вариантах осуществления 0₁ обозначает

где К₁ обозначает водород; К₂ обозначает водород и каждый К₃ обозначает водород. Например, 0₁может быть

В других более конкретных вариантах осуществления О₁ обозначает

где К.1 обозначает водород и К₂ и К₃ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют С₄С₆-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой N.

В других более конкретных вариантах осуществления Ο_ι обозначает

где К₃ обозначает водород и К₁ и К₂ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют С₄Сб-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой N.

где К₂ обозначает водород и К₁ и К₃ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют С₄Сб-циклоалкил.

В других более конкретных вариантах осуществления 0₁ обозначает

где К₂ обозначает водород и каждый К₃ обозначает водород.

где К2 обозначает водород и каждый К3 обозначает водород.

В других более конкретных вариантах осуществления О₂ обозначает -(СК₁₀К₁₁)_рК₁₂. В некоторых вариантах осуществления каждый К₁₀ обозначает водород. В некоторых вариантах осуществления каждый К₁₁ обозначает водород.

В других более конкретных вариантах осуществления О₂ обозначает -С₁-С_б-алкил-С₃-С₁₀циклоалкил, в случае необходимости замещенный амино, гидроксилом или -С1алкиламино.

В других более конкретных вариантах осуществления О₂ обозначает -С₁-С_б-алкил-С₄-С_бгетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом, амино или -С1-Сб-алкилом.

В других вариантах осуществления 0₁ и О₃ отличаются от водорода. В некоторых вариантах осуществления О₂ обозначает водород.

- 11 017824

Следует понимать, что любой вариант соединений структуры (I), как определено выше, и любой

Я_|2 в соединениях структуры (I), как определено выше, могут быть независимо скомбинированы с другими вариантами осуществления и/или заместителями соединений структуры (I), образуя варианты осуществления изобретения, специфически не определенные в настоящем описании. Кроме того, когда приведен список заместителей для любой конкретной группы заместителей в конкретном варианте осуществления и/или в пункте формулы изобретения, следует понимать, что каждый индивидуальный заместитель может быть удален из частного варианта осуществления и/или пункта формулы изобретения и что оставшийся список заместителей остается в рамках изобретения.

Соединения согласно настоящему изобретению обладают антибактериальной активностью против широкого спектра грамположительных и грамотрицательных бактерий, а также энтеробактерий и анаэробов. Репрезентативные чувствительные организмы в целом включают такие грамположительные и грамотрицательные, аэробные и анаэробные организмы, рост которых может ингибироваться соединениями по изобретению, такие как §1арйу1ососси5, Ьас1оЬасй1и5, 81гер1ососси5, Загста, ЕксйепсЫа, Еи1егоЬас1ег, К1еЬ51е11а, Ркеиботоиак, Лсте1оЬас1ег, МусоЬас1епит, Рго1еи5, Сатру1оЬас1ег, СйгоЬас1ег, Мккепа, ВассШик, Вас1его16ек, Рер1ососси5, С1ойп6шт, 8а1тоие11а, 8Ыде11а, Зеггайа, НаеторШик, Вгисе11а и другие организмы.

Введение соединений по изобретению или их фармацевтически приемлемых солей может быть осуществлено любым из принятых способов введения средств для подобных целей.

Соединения по изобретению или их фармацевтически приемлемые соли вводят в терапевтически эффективном количестве, которое варьирует в зависимости от различных факторов, включая активность конкретного используемого соединения; метаболическую стабильность и продолжительность действия соединения; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и режим питания пациента; способ и время введения; скорость экскреции; комбинации лекарственных средств; серьезность конкретного нарушения или состояния и особенности проходящего терапию пациента.

Соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемые производные могут также вводиться одновременно с, до или после введения одного или более других терапевтических средств. Такая комбинированная терапия включает введение единственного фармацевтического состава, который содержит соединение по изобретению и одно или более дополнительных активных средств, а также введение соединения по изобретению и каждого активного средства в его собственном отдельном фармацевтическом составе. Например, соединение по изобретению и другое активное средство может вводиться пациенту вместе в единственной пероральной лекарственной композиции, такой как таблетка или капсула, или каждое средство вводят в отдельных пероральных лекарственных составах. Если используют отдельные лекарственные составы, соединения по изобретению и одно или более дополнительных активных средств могут вводиться в, по существу, одно и то же время, то есть одновременно, или отдельно в разное время, то есть последовательно; комбинированная терапия, как ее понимают, включает все эти режимы.

Следует понимать, что в настоящем описании комбинации заместителей и/или переменных в показанных формулах допустимы, только если такие комбинации приводят к стабильным соединениям.

Специалисту также будет понятно, что в способах синтеза, описанных здесь, функциональные группы промежуточных соединений, возможно должны быть защищены подходящими защитными группами. Такие функциональные группы включают гидроксил, амино, меркапто и карбоновую кислоту. Подходящие защитные группы для гидроксила включают триалкилсилил или диарилалкилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил), тетрагидропиранил, бензил и т.п. Подходящие защитные группы для амино, амидино и гуанидино включают трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил и т.п. Подходящие защитные группы для меркапто включают -С(О)-К (где Я обозначает алкил, арил или арилалкил), п-метоксибензил, тритил и т.п. Подходящие защитные группы для карбоновой кислоты включают сложные алкиловые, ариловые или арилалкиловые эфиры. Защитные группы могут быть добавлены или удалены в соответствии со стандартными методиками, которые известны специалисту и как описано здесь. Использование защитных групп описано подробно в Сгееи, Т.^. и Р.С.М. ХУШ/, Рго1ес11уе Сгоирк ίη Огдашс Зуи1йе515 (1999), 3г6 Еб., ^йеу. Как понятно специалисту, защитная группа может также быть полимерной смолой, такой как смола Ванга, смола Ринка или 2хлортритил-хлоридная смола.

Специалисту также будет понятно, что, хотя защищенное производное соединений по изобретению, возможно, не обладает фармакологической активностью как таковое, они могут вводиться млекопитающему и после этого метаболизироваться в организме, образуя соединения по изобретению, которые являются фармакологически активными. Такие производные могут поэтому быть описаны как пролекарства. Все пролекарства соединений по изобретению находятся в рамках изобретения.

Кроме того, все соединения по изобретению, которые существуют в форме свободного основания или кислоты, могут быть превращены в их фармацевтически приемлемые соли обработкой подходящим неорганическим или органическим основанием или кислотой способами, известными специалисту. Соли соединений по изобретению могут быть превращены в форму их свободного основания или кислоты

- 12 017824 стандартными методиками. Следующие примеры иллюстрируют различные способы получения соединений по изобретению, то есть соединений структуры (I)

в которой О₂. О₃ К₈ и К₉ имеют определенные здесь значения. Следует понимать, что специалист может получить эти соединения подобными способами или комбинацией других способов, известных специалисту. Также следует понимать, что специалист может получить, подобным образом, как описано ниже, другие соединения структуры (I), не проиллюстрированные специально ниже, при использовании подходящих исходных компонентов и модификаций параметров синтеза, как это необходимо. В общем, исходные компоненты могут быть получены из таких источников, как 81дта А1йпс1т Ьаисайет ЗуиШекк, 1пс., МауЬпйде, Майтх 8аеи1Шс, ТС1, алй Ниотосйет И8Л и т.д., или могут синтезироваться согласно источникам, известным специалисту (см., например, Айуапсей Отдашс СйеткРу: Веасйоиз, Месйаиктк, апй 8!шс!иге, 5(Н еййюп (^йеу, ЭесетЬег 2000)), или могут быть получены, как описано здесь.

Следующие примеры приведены в целях иллюстрации, но не ограничения.

Примеры

Общие процедуры синтеза.

Процедура 1. Восстановительное аминирование.

Способ А. К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,06 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляли альдегид (0.068 ммоль), цианоборгидрид на кремнеземе (0,1 г, 1,0 ммоль/г) и реакционную смесь нагревали микроволновым облучением до 100°С (мощность 100 Вт) в течение 15 мин. Реакцию проверяли М8 на предмет завершенности и по ее завершении весь растворитель удаляли в роторном испарителе. Полученный остаток растворяли в ЕЮАс (20 мл) и промывали 5%-ным ЫаНСОз (2x5 мл), затем солевым раствором (5 мл). Органическую фазу затем высушивали над Ыа₂8О4, фильтровали и растворитель удаляли в роторном испарителе.

Способ В. К раствору производного сизомицина (0,078 ммоль) в ΌΜΕ (1 мл) добавляли молекулярные сита 3А (15-20), затем альдегид (0,15 ммоль) и реакционную смесь взбалтывали в течение 2,5 ч. Реакцию проверяли М8 на предмет завершенности и при необходимости добавляли дополнительное количество альдегида (0,5 экв.). Реакционную смесь затем добавляли по каплям при 0°С к перемешиваемому раствору ЫаВН₄ (0,78 ммоль) в МеОН (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли Н₂О (2 мл) и ЕЮАс (2 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали ЕЮАс (3x3 мл). Объединенные органические слои высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 2. Удаление защитной группы ΡΝΖ.

К перемешиваемому раствору ΡΝΖ-защищенного производного сизомицина (0,054 ммоль) в ЕЮН (1,5 мл) и Н₂О (1 мл) добавляли 1н. №1ОН (0,3 мл), затем №1₂8₂О₄ (0,315 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 12 ч. Развитие реакции проверяли М8. По завершении реакции реакционную смесь разбавляли Н₂О (5 мл) и затем экстрагировали ЕЮАс (2x10 мл). Объединенные органические слои промывали Н₂О (2x5 мл), солевым раствором (5 мл), высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 3. Удаление защитной группы Вос (трет-бутилдиметилсилильную защитную группу удаляют в этих условиях).

Важно: перед удалением защитной группы Вос образец должен быть хорошо высушен в высоком вакууме в течение 3 ч.

Способ А. К перемешиваемому раствору Вос-защищенного сизомицина (0,054 ммоль) в ОС'М (1 мл) добавляли молекулярные сита 3А (4-6) и трифторуксусную кислоту (0,6 мл). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч и проверяли на предмет завершенности М8. После завершения реакционную смесь разбавляли простым эфиром (15 мл), чтобы вызвать осаждение. Ампулу центрифугировали и супернатант декантировали. Осадок промывали простым эфиром (2x15 мл), декантировали и высушивали над вакуумом.

Способ В. К перемешиваемому раствору Вос-защищенного производного сизомицина (0,078 ммоль) в ОСМ (1,5 мл) при 0°С добавляли трифторуксусную кислоту (1/5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 45 мин и проверяли на предмет завершенности М8. После завершения реакции ре

- 13 017824 акционную смесь разбавляли дихлорэтаном (10 мл) и концентрировали досуха. Последнюю стадию разбавления/концентрации повторяли дважды.

Процедура 4. Сочетание ВОР и РуВОР.

Способ А. К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,078 ммоль) в ΌΜΕ (1 мл) добавляли кислоту (0,16 ммоль), затем РуВОР (0,16 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,31 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (3 мл) и Н₂О (3 мл) и водный слой отделяли и экстрагировали ЕЮАс (3x3 мл). Объединенные органические слои высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Способ В. К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,073 ммоль) в ΌΜΕ (1 мл) добавляли кислоту (0,102 ммоль), ΌΙΡΕΑ (0,43 ммоль) и раствор ВОР (0,102 ммоль) в ΌΜΕ (1 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч, причем протекание реакции проверяли Μ8. Реакционную смесь разбавляли водой (8 мл) и экстрагировали ЕЮАс (2x10 мл). Объединенные органические слои промывали 5%-ным водным раствором ЫаНСО₃ (2x3 мл) и солевым раствором (3 мл), высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 5. Раскрытие эпоксида.

К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,06 ммоль) в ΜеОН (2 мл) добавляли эпоксид (0,07 ммоль), Ь1С1О₄ (0,15 ммоль) и реакционную смесь нагревали микроволновым облучением до 100°С в течение 90 мин. Развитие реакции проверяли Μ8. После завершения растворитель удаляли в роторном испарителе. Полученный остаток растворяли в ЕЮАс (20 мл), промывали Н₂О (2x5 мл) и солевым раствором (5 мл), высушивали над №ь8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 6. Удаление фталимидной защитной группы.

К перемешиваемому раствору защищенного фталимидной группой сизомицина (0,064 ммоль) в ЕЮН (3 мл) добавляли гидразин (0,32 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Развитие реакции проверяли Μ8. После охлаждения до температуры окружающей среды циклический побочный продукт осаждали и удаляли фильтрацией. Фильтрат концентрировали досуха, получая остаток, который растворяли в ЕЮАс (20 мл), промывали 5%-ным ЫаНСО₃ (2x5 мл) и солевым раствором (5 мл), высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 7. Добавление группы гуанидиния.

К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,063 ммоль) в ΌΜΕ (1 мл) добавляли 1Нпиразол-1-карбоксамидин гидрохлорид (0,09 ммоль), затем О1РЕА (0,862 мл), реакционную смесь нагревали до 80°С и перемешивали в течение ночи. Развитие реакции проверяли Μ8. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и разбавляли водой (3 мл). Водную фазу отделяли и экстрагировали ЕЮАс (2x5 мл) и объединенные органические фракции промывали солевым раствором (5 мл), высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 8. Нозилирование.

К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,23 ммоль) в Όί,'Μ (20 мл) добавляли 2нитробензолсульфонил хлорид (0,25 ммоль) и О1РЕА (0,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч. Развитие реакции проверяли Μ8. После завершения Όί,'Μ удаляли в роторном испарителе, полученный остаток растворяли в этилацетате (50 мл) и промывали 5%-ным №1НС'О₃ (2x10 мл) и солевым раствором (10 мл). Объединенные органические слои затем высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 9. Удаление нозильной защитной группы.

К перемешиваемому раствору защищенного нозильной группой производного сизомицина (0,056 ммоль) в ΌΜΕ (1,5 мл) добавляли тиофенол (0,224 ммоль), К₂СО₃ (1,12 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, причем развитие реакции проверяли Μ8. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2x5 мл) и солевым раствором (5 мл), высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 10. Удаление ΡΝΖ гидрогенолизом.

К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,41 ммоль) в ЕЮН (60 мл) добавляли АсОН (0,14 мл), затем Ρά/С (30 вес.%). Реактор эвакуировали и пополняли Н₂ (1 атм.) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч. Реактор затем эвакуировали и пополняли азотом. Твердые частицы удаляли фильтрацией через слой целита и промывали ΜеОН (10 мл). Выпаривание растворителя дало желаемый продукт.

Процедура 11. Моноалкилирование.

К перемешиваемому раствору защищенного нозильной группой производного сизомицина (0,072 ммоль) в ΌΜΕ (1,5 мл) добавляли галогензамещенный алкан (0,144 ммоль), К₂СО₃ (0,216 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 80°С, проверяя развитие реакции Μ8. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли водой (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x5 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (1,5 мл), высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

- 14 017824

Процедура 12. Сульфонилирование.

К перемешиваемому раствору сизомицинового скелета (0,067 ммоль) в ИСМ (3 мл) добавляли ΌΓΡΕΛ (0,128 моль) и сульфонилхлорид (0,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды и развитие реакции проверяли М§. После завершения реакции растворитель удаляли в роторном испарителе и остаток растворяли в этилацетате (20 мл), промывали 5%-ным ЫаНСО₃(2x5 мл) и солевым раствором (5 мл), высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 13. Защита Ν-Вос.

К перемешиваемому раствору амина (4,64 ммоль) в ТНЕ (10 мл) добавляли 1н. ΝαΟΗ (10 мл), затем Вос-ангидрид (5,57 ммоль) и развитие реакции проверяли М§. После завершения реакции ТНЕ удаляли в роторном испарителе и добавляли воду (40 мл). Водную фазу отделяли и экстрагировали Е1₂О (2x30 мл). Водную фазу подкисляли до рН 3 добавлением разбавленного Н₃РО₄ и затем экстрагировали ЕЮАс (2x60 мл). Объединенные органические слои промывали Н₂О (2x30 мл) и солевым раствором (30 мл), высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 14. Синтез эпоксидов.

К перемешиваемому раствору алкена (5,16 ммоль) в хлороформе (20 мл) при 0°С добавляли мхлорпербензойную кислоту (8,0 ммоль), реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С и затем давали нагреться до температуры окружающей среды. Развитие реакции проверяли М§ и ТЬС и при необходимости добавляли дополнительные части м-СРВА. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли хлороформом (50 мл) и промывали 10%-ным водным раствором №₂8О₃ (2x30 мл), 10%-ным водным раствором NаНСΟ₃ (2x50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический слой высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали, получая сырой продукт, который очищали флэшхроматографией (силикагель/гексаны: этилацетат 0-25%).

Процедура 15. Общая процедура для синтеза α-гидроксикарбоновых кислот.

Стадия #1. О-(триметилсилил)цианогидрины. В колбу на 50 мл, оборудованную магнитной мешалкой и сушильной трубкой, загружали кетон или альдегид (0,010 ммоль), затем ТНЕ (50 мл), триметилсилил цианид (1,39 г, 14 ммоль) и йодид цинка (0,090 г, 0,28 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 24 ч. Выпаривание растворителя дало остаток, который растворяли в ЕЮАс (60 мл), промывали 5%-ным водным раствором №1НСО₃, (2x30 мл), Н₂О (30 мл) и солевым раствором (30 мл), высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая сырой продукт, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия #2. Кислотный гидролиз до α-гидроксикарбоновой кислоты. АсОН (25 мл) и конц. НС1 (25 мл) добавляли к неочищенному материалу со стадии #1 и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2-3 ч. Реакционную смесь затем концентрировали досуха, получая твердое вещество белого цвета, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия #3. Защита Вос. К перемешиваемому раствору твердого вещества со стадии #2 в 2 М №ЮН (20 мл) и ί-РтОН (20 мл) при 0°С небольшими порциями добавляли Вос₂О (6,6 г, 3 ммоль) и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды за 4 ч. Затем ί-РтОН выпаривали, добавляли Н₂О (50 мл) и водную фазу отделяли и экстрагировали Е1₂О (2x30 мл). Водный слой подкисляли до 3 добавлением разбавленного Н₃РО₄ и экстрагировали ЕЮАс (2x60 мл). Объединенные органические слои промывали Н₂О (2x30 мл) и солевым раствором (30 мл), высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали, получая желаемые Ν-Вос-а-гидроксикарбоновые кислоты с выходом 56-72%.

Используемые альдегиды и кетоны: №Вос-3-пирролидонон, №Вос-3-азетидинон, №Вос-4пиперидон и №Вос-3-азетидинкарбоксальдегид.

Процедура 16. Защита амина группой Етос.

К перемешиваемому раствору амина (0,049 моль) в ИСМ (100 мл) добавляли И1РЕА (16 мл, 0,099 моль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Затем добавляли Етос-С1 (12,8 г, 0,049 моль) частями за несколько минут и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 2 ч. Органический слой промывали водой (2x50 мл) и солевым раствором (50 мл), высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая Етос-защищенный амин (выход 90-95%).

Процедура 17. Алкилирование МйъипоЬи.

К перемешиваемому раствору нозилированного производного сизомицина (0,087 ммоль) в толуоле (2,5 мл) добавляли спирт (0,174 ммоль), трифенилфосфин (0,174 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 4°С в рефрижераторе в течение 10 мин. Затем добавляли охлажденный раствор ИЕАИ (0,174 ммоль в 2 мл безводного толуола) и реакционную смесь взбалтывали в течение ночи. Развитие реакции проверяли М§ и при необходимости добавляли дополнительное количество спирта и трифенилфосфина. После завершения реакции добавляли этилацетат (30 мл) и органическую фазу промывали 5%-ным водным раствором NаНСΟ₃ (2x5 мл) и солевым раствором (5 мл), высушивали над №1₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 18. Синтез альдегидов через окисление ТЕМРО/В1еасб.

К энергично перемешиваемому раствору спирта (1,54 ммоль) в ИСМ (4 мл) добавляли ТЕМРО

- 15 017824 (0,007 г, 0,045 ммоль, % на 0,03 моль) и 2 М водный раствор КВг (75 мл, 0,15 ммоль, 10 мол.%) и реакционную смесь охлаждали до -10°С. В отдельной колбе ЫаНСО₃ (0,5 г, 9,5 ммоль) растворяли в В1еас11 (25 мл, СЫотох 6,0% ЫаОС1), получая 0,78 М буферизованного раствора ЫаОС1. Этот свежеприготовленный 0,78 М раствор №1ОС1 (2,3 мл, 1,8 ммоль, 117 мол.%) добавляли к реакционной смеси за 5 мин и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 30 мин при 0°С. Органическую фазу отделяли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x4 мл). Объединенные органические слои промывали 10%-ным водным раствором Ыа₂8₂О₃ (4 мл), насыщенным водным раствором ЫаНСО₃ (2x4 мл), солевым раствором (5 мл), высушивали над Ыа₂8О₄ и концентрировали досуха.

Процедура 19. Синтез спиртов восстановлением гидрида бора.

К перемешиваемому раствору кислоты (1,5 ммоль) в ТНР (5 мл) при -10°С медленно добавляли 1,0 М ВН₃-ТНР (2,98 мл, 2,98 ммоль). Реакционную смесь энергично перемешивали в течение дополнительных 3 мин при -10°С и затем давали нагреться до температуры окружающей среды в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением по каплям раствора НОАс/Н₂О (1:1 об./об., 2,0 мл). ТНР удаляли в роторном испарителе и добавляли насыщенный водный раствор ЫаНСО₃ (15 мл). Водный слой экстрагировали ИСМ (3x5 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО₃ (2x5 мл), солевым раствором (10 мл), высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Процедура 20. Сочетание ЕЭС.

К перемешиваемому раствору производного сизомицина (0,048 ммоль) в ИМР (0,3 мл) и ТНР (0,6 мл) добавляли ЕЭС (0,058 ммоль), затем НОИЬ (0,062 ммоль) и кислоту (0,058 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили Н₂О (2 мл) и добавляли ЕЮАс (4 мл). Органический слой промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО₃, насыщенным водным раствором ΝΠ·|Ο. высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха.

Общие процедуры очистки.

Способ #1. Очистка в основных условиях.

Мобильные фазы:

А - вода с 10 мМ NН₄ОН;

В - ацетонитрил с 10 мМ NН₄ОН.

Колонки:

А: колонка \Уа1ег5-ХТегга Ргер М8 С18 ОВИ 19х 100 мм, 5 мкм;

градиент: 20 мин при 0%, затем 0-20% за 200 мин при потоке 20 мл/мин;

В: колонка \Уа1ег5-ХТегга Ргер М8 С18 ОВИ 50х 100 мм, 5 мкм;

градиент: 20 мин при 0%, затем 0-20% за 200 мин при потоке 20 мл/мин.

Используя ^а1ег5-ХТегга, отбор фракций инициировали сигналом М8. Собранные фракции высушивали лиофилизацией и анализировали ЕС/М8/ЕЬ8И. Чистые фракции объединяли и анализировали ЕС/М8/ЕЬ8И для финальной проверки чистоты. Количественную оценку проводили с помощью системы РС/М8/СРИИ.

Способ #2. Очистка в кислых условиях.

Мобильные фазы:

А - вода с 0,1% ТРА;

В - ацетонитрил с 0,1% ТРА.

Колонки:

А: М1сто8ОгЬ ВИ8 Иуиашах 21,4x250 мм, 10 мкм, 100А;

градиент: 0-100%, поток 25 мл/мин;

В: М1сто8ОтЬ ВИ8 Иуиашах 41,4x250 мм, 10 мкм, 100А;

градиент: 0-100%, поток 45 мл/мин;

Способ #3. Очистка хроматографией гидрофильного взаимодействия (НШС).

Буферы:

буфер А - 3400 мл ацетонитрила; 600 мл воды; 15 мл уксусной кислоты; 15 мл ТЕА; буфер В - 4000 мл воды; 100 мл ТЕА; 100 мл уксусной кислоты;

колонка: ПолиС-полигидроксиэтил А 150x21 мм, 5 мкм;

градиент: 20-70% 10 мл/35 мин.

Сигнал ЕЬ8И использовали, чтобы инициировать отбор фракций. Фракции высушивали лиофилизацией и анализировали ЬС/М8/ЕЬ8И. Чистые фракции затем объединяли, разбавляли водой и лиофилизировали. Высушенные фракции снова растворяли в воде и лиофилизировали в третий раз, чтобы гарантировать полное удаление ТЕА. Любые образцы, демонстрирующие следы ТЕА, проходили дополнительное высушивание. Для доставки очищенные соединения растворяли в концентрации >10 мг/мл. Финальную проверку чистоты осуществляли с помощью ЬС/М8/ЕЬ8И и количественную оценку - с помощью 1 .СА18/С1 ,ΝΙλ

- 16 017824

Общие промежуточные соединения. Сизомицин

1КА АтЬет1йе 400 (ОН форма) (200 г) промывали МеОН (3x200 мл). К перемешиваемой суспензии промытой смолы в МеОН (150 мл) добавляли сизомицин сульфат (20,0 г, 0,029 моль) и смесь перемешивали в течение ночи. Смолу затем отфильтровывали, промывали МеОН (100 мл) и объединенные органические слои концентрировали досуха, получая желаемый сизомицин (11,57 г, 0,02б моль, выход 89,б%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 448,3, найдено 448,1.

(№Гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-4-нитробензоат

К перемешиваемому раствору 4-нитробензил хлорформиата (5,0 г, 0,023 моль) в ТНЕ (90 мл) при 0°С добавляли №гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксимид (4,1б г, 0,023 моль) с последующим добавлением по каплям раствора Εΐ₃Ν (3,2 мл, 0,02 моль) в ТНЕ (50 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч с постепенным нагреванием до температуры окружающей среды. Реактор затем помещали в морозильник (-5°С) на 1 ч, чтобы вызвать осаждение гидрохлорида триэтиламина, который удаляли фильтрацией. Фильтрат концентрировали досуха, получая остаток, который энергично перемешивали в МеОН (80 мл) в течение 1 ч и затем фильтровали, получая Р-гидрокси-5-норборнен-2.3дикарбоксилимидо)-4-нитробензоат в форме твердого вещества белого цвета (7,98 г, 0,022 моль, 96%ный выход): ТЬС (гексаны: ЕЮАс об./об. 1:1) КБ=0,35.

2,5-Диоксопирролидин-1-ил-4-нитробензил карбонат (ΡΝΖ-сукцинимид)

К перемешиваемому раствору Ν-гидроксисукцинимида (5,35 г, 4б,5 ммоль) в безводном ТНЕ (100 мл) добавляли п-нитробензилхлорформиат (10,0 г, 4б,5 ммоль) и раствор охлаждали в ванне со льдом. Триэтиламин (б,5 мл, 4,89 г, 4б,5 ммоль) добавляли за 10 мин и через 30 мин реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение ночи. Суспензию охлаждали в ванне со льдом и фильтровали, затем промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток растирали с метанолом. Твердые частицы отделяли фильтрацией, получая 2,5диоксопирролидин-1 -ил-4-нитробензил карбонат.

б'-Трифторацетил-2',3-ди-Р№-сизомицин

К перемешиваемому раствору сизомицина (30,1 г, 0,0б7 моль) в МеОН (700 мл) добавляли ацетат цинка (37,07 г, 0,202 моль) с последующим медленным добавлением раствора 8-этилтрифтортиоацетата (9,37 мл, 0,074 моль) в МеОН (100 мл) и реакционную смесь перемешивали под Ν₂ в течение ночи. Затем по каплям добавляли раствор триэтиламина (37,5 мл, 0,27 моль) и ΡΝΖ-сукцинимид (64,2 г, 0,179 моль) в ТНЕ (1 л) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч. Выпаривание растворителя дало сырой

- 17 017824 продукт, который растворяли в ЭСМ (2 л) и промывали конц. ΝΗ₄ΟΗ:Η₂Ο (3:1 об./об., 2x800 мл) и солевым раствором (800 мл), высушивали над Мд§0₄, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток растворяли в этилацетате (1 л) и экстрагировали АсОН: Η2Ο (1/9 об./об., 1 л). Водный слой промывали этилацетатом (2x1 л), подщелачивали до рН 12 с помощью 10н. ΝαΟΗ и экстрагировали этилацетатом (2x1 л). Органический слой промывали солевым раствором (500 мл), высушивали над Мд§0₄, фильтровали и концентрировали, получая остаток. Сырой продукт растворяли в этилацетате (500 мл) и раствор отстаивали в течение ночи. Осажденные твердые частицы удаляли фильтрацией и оставшийся фильтрат концентрировали, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2колонка В, получая желаемый 6'-трифторацетил-2',3-ди-Р№-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 902,3, найдено 902,2.

6'-Трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-ацетил-3-Вос-сизомицин

N03

К перемешиваемому раствору 6'-трифторацетил-2',3-ди-РNΖ-сизомицина (0,7 г, 0,77 ммоль) в МеОН (7 мл) при 0°С медленно добавляли уксусный ангидрид (0,095 мл, 1,01 ммоль) и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение ночи. Реакция сопровождалась М8, которая подтверждала полное формирование промежуточного 6'-трифторацетил-2',3-ди-РNΖ-1ацетилсизомицина (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 944,3, найдено 944,2, |М+№1|' 966,3). Реакционную смесь затем охлаждали до 0°С и добавляли ΌΙΡΕΆ (0,54 мл, 3,11 ммоль), затем Вос-ангидрид (0,53 мл, 2,33 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч, отслеживая протекание реакции с помощью М8. Реакционную смесь гасили глицином (0,29 г, 3,88 ммоль) и К₂СО₃ (0,54 г, 3,88 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. После выпаривания растворителя остаток разделяли между

Н₂О (10 мл) и ЕЮАс (10 мл). Водный слой отделяли и далее экстрагировали ЕЮАс (3x10 мл) и объединенные органические слои высушивали над Να₂8Ο₄. фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый 6'-грифторацетил-2',3-ди-Р№-1-ацетил-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1044,4, найдено 1044,0, |М+№1|' 1066,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3-Ди-Р№-1 -ацетил-3 -Вос-сизомицин.

N0?

К перемешиваемому раствору 6'-трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-ацетил-3-Вос-сизомицина (0,77 ммоль) в МеΟΗ (5 мл) добавляли конц. ΝΗ₄ΟΗ (8,2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Выпаривание растворителя дало сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В, получая желаемый 2',3-ди-ΡNΖ-1-ацетил-3-Вοс-сизомицин (0,35 г, 0,36 ммоль, выход 46,7%, чистота >95%): М8 т/е [Μ+Η]⁺ рассчит. 948,4, найдено 948,2.

- 18 017824

Ν-ΡΝΖ-4 - Амино -2 (8)-гидроксимасляная кислота

К перемешиваемому раствору 4-амино-2(8)-гидроксимасляной кислоты (5,0 г, 0,041 моль) в смеси диоксан:Н₂О (200 мл, 1:1 об./об.) добавляли К₂СО₃ (11,6 г, 0,084 моль), затем п-нитробензил хлорформиат (9,23 г, 0,043 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Полученный осадок удаляли фильтрацией и органический растворитель удаляли в роторном испарителе. Полученный водный раствор подкисляли до рН 1 добавлением 1 М НС1 (100 мл). После добавления к водному слою этилацетата (100 мл) продукт осаждали и собирали фильтрацией. Фильтрат добавляли к делительной воронке и органический слой отделяли. После добавления к водному слою этилацетата (100 мл) имело место второе осаждение, продукт собирали фильтрацией и этот процесс повторяли еще раз. Объединенные органические слои затем помещали на ночь при -5°С, в результате чего происходило осаждение продукта, который собирали фильтрацией. Желаемую N-ΡNΖ-4-амино-2(8)-гидроксимасляную кислоту (9,3 г, 0,031 моль, 75%-ный выход, 90%-ная чистота) использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 299,1, найдено 298,9.

(МГидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-МР№-4-амино-2(8)-гидроксибутаноат

К перемешиваемому раствору N-ΡNΖ-4-амино-2(8)-гидроксимасляной кислоты (8,95 г, 30,0 ммоль) в ТНР (200 мл) при 0°С медленно добавляли БСС (6,8 г, 33,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем по каплям за 1 ч добавляли раствор имида Мгидрокси-5-норборнен-2,3дикарбоновой кислоты (6,45 г, 36,0 ммоль) в ТНР (100 мл). Осажденный карбамид удаляли фильтрацией и оставшийся фильтрат концентрировали досуха. Остаток растворяли в этилацетате (200 мл) и промывали Н₂О (150 мл), высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали досуха. Продукт перекристаллизовывали из смеси этилацетат/простой диэтиловый эфир, получая желаемый Ν-гидроксиЧнорборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-N-ΡNΖ-4-амино-2(8)-гидроксибутаноат (10,0 г, 21,78 ммоль, выход 72,6%). М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 482,1, найдено 482,2.

(МГидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-МР№-4-амино-2(В)-бензоилбутаноат

К перемешиваемому раствору (N-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-N-ΡNΖ-4-амино2(8)-гидроксибутаноата (6,4 г, 0,014 моль) в ТНР (65 мл) добавляли трифенилфосфин (4,0 г, 0,015 ммоль), затем бензойную кислоту (1,9 г, 0,015 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Затем добавляли по каплям Б1АБ (3,0 мл, 0,015 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 50 мин. Выпаривание растворителя дало сырой продукт, который очищали флэшхроматографией (силикагель/гексаны:этилацетат 20-100%), получая желаемый (Ν-гидроксиЧнорборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-МР№-4-амино-2(В)-бензоилбутаноат (2,3 г, 4,08 ммоль, выход 29,1%), с незначительной примесью трифенилфосфиноксида: ¹Н ЯМР (400 МГц, СБСЕ) δ 8,17 (д, 2Н), 7,98 (д, 2Н), 7,44-7,70 (м, 5Н), 5,96-6,18 (м, 2Н), 5,41-5,55 (м, 1Н), 5,10 (с, 2Н), 3,40-3,58 (т, 2Н), 3,21-3,39 (м, 4Н), 2,10-2,22 (м, 2Н), 1,44-1,60 (м, 2Н).

- 19 017824

6'-Трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(К)-О-бензоилбутирил)-3-Вос-сизомицин

К перемешиваемому раствору 6'-трифторацетил-2',3-ди-Р№-сизомицина (2,5 г, 2,77 ммоль) в ΌΜΡ (50 мл) добавляли (№гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-№Р№-4-амино-2(К)-бензоилбутаноат (2,3 г, 4,08 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч. Затем добавляли ОГРЕЛ (2,5 мл, 0,014 моль), затем Вос-ангидрид (2,5 мл, 0,011 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 2 ч. Раствор глицина (2,5 г, 0,033 моль) и К₂СО₃ (4,6 г, 0,033 моль) в Н₂О (50 мл) затем добавляли частями за 5 мин и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (300 мл) и водный слой отделяли. Органический слой промывали 1 М лимонной кислоты (150 мл), насыщенным водным раствором NаНСО₃ (30 мл), солевым раствором (30 мл), высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В, получая желаемый 6'-трифторацетил-2',3-диР№-1-(№Р№-4-амино-2(К)-бензоилбутирил)-3-Вос-сизомицин (1,6 г, 1,15 ммоль, выход 41,5%).

2',3-Ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(К)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин

К перемешиваемому раствору 6'-трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(К)-Обензоилбутирил)-3-Вос-сизомицина (1,6 г, 1,15 ммоль) в МеОН (30 мл) добавляли конц. №Н₄ОН (3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 дней. Затем добавляли этилацетат (30 мл) и водный слой отделяли. Органический слой промывали 1 М №ЮН (20 мл), солевым раствором (20 мл), высушивали над Мд§О₄ и концентрировали досуха, получая 2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(К)-гидроксибутирил)3-Вос-сизомицин (1,4 г, М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1186,4, найдено 1186,2, [Μ+Να]⁺ 1208,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

(К)-Этил-3-азидо-2-гидроксипропионат

Этил-(2К)-2,3-эпоксипропионат (0,5 г, 4,3 ммоль), хлорид аммония (0,253 г, 4,73 ммоль) и азид натрия (0,336 г, 5,17 ммоль) объединяли в ΌΜΡ (8 мл) и смесь нагревали при 75°С в течение 14 ч. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и разделяли между водой и смесью простой эфир/гексаны (1:1 об./об.). Фазы разделяли и органическую фазу промывали по одному разу водой, солевым раствором, высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали до масла, которое очищали

- 20 017824 флэш-хроматографией (силикагель/гексаны:10%-ный этилацетат), получая (К)-этил-3-азидо-2гидроксипропионат в форме прозрачного масла (0,47 г, 2,97 ммоль, 69%-ный выход). КГ 0,27 (гексаны: 10%-ный ЕЮЛс, об./об., п-анизальдегид); М8 т/е |Μ+Να|' рассчит. 182,1, найдено 182,0.

(К)-3 -(трет-Бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионовая кислота

Стадия 1). К перемешиваемому раствору (К)-этил-3-азидо-2-гидроксипропионата (159 мг, 1,0 ммоль) в этаноле (4 мл) добавляли уксусную кислоту (0,10 мл), затем после промывки колбы азотом - 5% Рй/С (25 мг). Колбу оснащали баллоном с водородом и перемешивали в течение 1 ч. Затем колбу промывали азотом, смесь фильтровали через целит и фильтрующий слой промывали этанолом (4 мл).

Стадия 2). К фильтрату добавляли 1 М ΝαΟΗ (3 мл), затем Вос₂О (0,28 мл, 0,27 г, 1,2 ммоль) и раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 дней. Раствор затем разделяли между простым эфиром и водой и фазы разделяли. Водную фазу промывали дважды простым эфиром, подкисляли с помощью 1 М ЫаН§О₄ и экстрагировали этилацетатом. Этилацетатную фазу промывали солевым раствором, высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали до масла, которое отверждали, получая (К)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионовую кислоту (117 мг, 57%-ный выход): КГ 0,22 (СНС1₃: 10%-ный 1РА, 1%-ный АсОН, трикетогидринденгидрат).

6'-Трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-1-[(В)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил]сизомицин

ΝΟ>

(К)-3-(трет-Бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионовая кислота (1,3 г, 6,3 ммоль) и ΗΟΝΒ (1,35 г, 7,5 ммоль) растворяли в ТНЕ (40 мл), раствор охлаждали до 0°С и добавляли ЕЭС (1,33 г, 6,9 ммоль). Через 20 мин реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды. Через 6 ч добавляли раствор 6'-трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-сизомицина (5,23 г, 5,8 ммоль) в ΌΜΡ (25 мл) и раствор перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, чтобы удалить ТНЕ, и разделяли между водой и этилацетатом. Фазы разделяли и этилацетатную фазу промывали по одному разу водой, насыщенным ЫаНСО₃, водой и солевым раствором. Этилацетатную фазу затем высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали, получая остаток. Остаток хроматографировали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В, получая 6'-трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-1-[(В)-3-(третбутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил]сизомицин в форме грязно-белой пены (1,б4 г, 1,51 ммоль, 24%-ный выход): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1089,4, найдено 1089,2.

- 21 017824

6'-Трифторацетил-2',3-ди-Р№- 1-[(Я)-3 -(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил] -3 Вос-сизомицин

НОг

К перемешиваемому раствору 6'-трифторацетил-2',3-ди-РNΖ-1-[(Я)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил]сизомицина (1,52 г, 1,39 ммоль) в ТНЕ (10 мл) и метаноле (5 мл) добавляли Вос₂О (0,65 мл, 0,62 г, 2,8 ммоль). Через 3 ч добавляли глицин (312 мг, 4,17 ммоль) и 0,5 М К₂СО₃ (24 мл) и реакционную смесь энергично перемешивали в течение 1 ч. Смесь затем разделяли между этилацетатом и водой и фазы разделяли. Этилацетатную фазу промывали по одному разу водой и солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая 6'-трифторацетил-2',3ди-РNΖ-1-[(Я)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил]-3-Вос-сизомицин в форме твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. М8 т/е [М-Вос]⁺рассчит. 1089,4, найдено 1089,2.

2',3-Ди-Р№- 1-[(Я)-3 -(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил] -3 -Вос-сизомицин

К раствору 6'-трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-[(Я)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил]-3-Вос-сизомицина (1,39 ммоль) в метаноле (45 мл) добавляли концентрированный гидроксид аммония (45 мл, ~12 М). Раствор выдерживали при температуре окружающей среды в течение 18 ч и затем концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом и водой и фазы разделяли. Водную фазу повторно экстрагировали один раз этилацетатом. Объединенные этилацетатные фазы концентрировали, получая остаток, который растворяли в смеси 1:1:1 об./об. метанол/уксусная кислота/вода и очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В. Чистые фракции объединяли, подщелачивали с помощью 1 М №ьСО₃ и концентрировали в вакууме, чтобы удалить ацетонитрил. Смесь затем экстрагировали дважды этилацетатом. Конечные этилацетатные фазы объединяли, промывали солевым раствором, высушивали над Мд8О₄, фильтровали и концентрировали, получая 2',3-ди-РNΖ-1-[(Я)-3(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидроксипропионил]-3-Вос-сизомицин (316 мг, 30%-ный выход) в форме твердого вещества белого цвета. М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1093,4, найдено 1093,3.

№Вос-3-Амино-2(8)-гидроксипропионовая кислота

К перемешиваемому раствору 8-изосерина (4,0 г, 0,038 моль) в смеси диоксан:Н₂О (100 мл, 1:1 об./об.) при 0°С добавляли Ν-метилморфолин (4,77 мл, 0,043 моль), затем Вос₂О (11,28 мл, 0,049 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи с постепенным нагреванием до температуры окружающей среды. Затем добавляли глицин (1,0 г, 0,013 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли насыщенный водный раствор NаНСО₃

- 22 017824 (75 мл). Водный слой промывали этилацетатом (2x60 мл) и затем подкисляли до рН 1 с помощью ΝαН8О₄. Этот раствор затем экстрагировали этилацетатом (3x70 мл) и эти объединенные органические слои высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемую Ν-Вос-Ламино-2(8)-гидроксипропионовую кислоту (б,30 г, 0,031 ммоль, выход 81,5%): ¹Н ЯМР (400 МГц, СИС13) δ 7,45 (ушир.с, 1Н), 5,28 (ушир.с, 1Н), 4,2б (м, 1Н), 3,40-3,62 (м, 2Н), 2,09 (с, 1Н), 1,42 (с, 9Н); ¹³С ЯМР (100 МГц, СОС1;) δ 174,72, 158,17, 82, 71,85, 44,28, 28,45.

б'-Трифторацетил-2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Βос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

мо_?

К перемешиваемому раствору №Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионовой кислоты (1,30 г, б,34 ммоль) в ИМЕ (14 мл) медленно добавляли НО№ (1,14 г, б,34 ммоль) и ЕЭС (1,21 г, б,34 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, после чего М8 показала полное формирование активированного сложного эфира (М8 т/е |М+№1|' рассчит. 389,1, найдено 389,1). Затем добавляли б'трифторацетил-2',3-ди-ΡNΖ-сизомицин (4,7б г, 5,28 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором NаНСО₃ (10 мл) и экстрагировали ЕЮАс (5x15 мл). Объединенные органические слои высушивали над №₂8О₄, фильтровали и упаривали досуха, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В, получая желаемый б'-трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (1,бб г, 1,52 ммоль, 29%-ный выход, чистота >95%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1089,4, найдено 1089,2, [М+№]⁺ 1111,3.

б'-Трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин

К перемешиваемой суспензии б'-трифторацетил-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицина (1,бб г, 1,52 ммоль) в МеОН (20 мл) при 0°С добавляли И1РЕА (0,53 мл, 3,05 ммоль), затем Вос-ангидрид (0,52 мл, 2,29 ммоль) и реакционной смеси давали нагреться до температуры окру жающей среды. Через 2 ч все ингредиенты растворялись. Реакционную смесь охлаждали до 0° и гасили глицином (0,5 г, б,бб ммоль) и насыщенным водным раствором NаНСО₃. Реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс (3x20 мл) и объединенные органические слои высушивали над №₂8О₄, фильтровали и упаривали досуха, получая б'-трифторацетил-2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1189,4, найдено 1188,8, |М+№1|' 1211,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 23 017824

2',3-Ди-РЫ2-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин

6'-Трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (1,52 ммоль) растворяли в МеОН (12 мл), добавляли конц. ΝΗ₄ΟΗ (20 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Выпаривание растворителя дало сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В, получая желаемый 2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,96 г, 0,79 ммоль, выход 51,9%, чистота >95%): М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 1093,4, найдено 1093,2, [М+Ыа]⁺ 1115,3.

6'-Трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-РЫ2-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

К перемешиваемому раствору Ы-РЫ2-4-амино-2(8)-гидроксимасляной кислоты (1,47 г, 4,9 ммоль) в ОМЕ (50 мл) медленно добавляли НОЫВ (0,884 г, 4,9 ммоль) и ΕΌΟ (0,945 г, 4,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Затем добавляли 6'-трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-сизомицин (3,42 г, 3,8 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором ЫаНСО₃ (30 мл) и экстрагировали ЕЮЛс (5x50 мл). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали, получая желаемый 6'-трифторацетил2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-РЫ2-3-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ 1182,4, найдено 1182,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-РЫ2-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин

К перемешиваемому раствору 6'-трифторацетил-2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-РЫ2-3-амино-2-(8)-гидроксибутирил)сизомицина (4,9 ммоль) в МеОН (50 мл) при 0°С добавляли О1РЕА (1,70 мл, 9,8 ммоль), затем Вос-ангидрид (1,6 г, 7,35 ммоль) и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей

- 24 017824 среды. Реакционную смесь затем охлаждали до 0°С и гасили глицином (1,10 г, 14,7 ммоль) и насыщенным водным раствором ЫаНСО₃. Реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс (3x50 мл) и объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄, фильтровали и упаривали досуха, получая 6'-трифторацетил2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-РЫ2-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3-Ди-РЫ2-1-(Ы-РЖ-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин

6'-Трифторацетил-2',3-ди-РЖ-1-(Ы-Вос-3-амино-2(§)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (4,9 ммоль) растворяли в МеОН (30 мл), добавляли конц. ΝΗ₄ΟΗ (50 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Выпаривание растворителя дало сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В, получая желаемый продукт 2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-РЖ-4-амино-2(8)гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин. М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1186,4, найдено 1186,3.

6'-РЖ-Сизомицин

К перемешиваемому раствору сизомицина (19,1 г, 42,65 ммоль) в МеОН (300 мл) добавляли 2и(ОАс)₂ (23,5 г, 0,128 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч до растворения всего цинка. Затем по каплям за 3 ч добавляли раствор (Ы-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-4нитробензоата (15,28 г, 42,65 ммоль) в ЭСМ (150 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Затем реакционную смесь концентрировали досуха, получая сырой продукт, который медленно добавляли к энергично перемешиваемому раствору 10%-ного водного раствора ЫН₄ОН (480 мл) и ЭСМ (180 мл). Водный слой отделяли, промывали ЭСМ (3x160 мл) и разбавляли солевым раствором (250 мл).

Водный слой экстрагировали ЭСМ:1РА (7:3 об./об., 4x160 мл). Объединенные органические слои промывали 10%-ным водным раствором ЫН₄ОН:солевым раствором (7:3 об./об., 200 мл), высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали, получая желаемый 6'-РЫ2-сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 627,3, найдено 627,2; чистота 95% СЬЫЭ.

(Ы-Гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-трет-бутилкарбонат

К перемешиваемому раствору Ы-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксимида (20,0 г, 0,112 моль) в ТНЕ (200 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (0,65 мл, 4,8 ммоль) с последующим добавлением по каплям раствора Вос₂О (29,23 г, 0,134 моль) в ТНЕ (30 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи с постепенным нагреванием до температуры окружающей среды. Образовывали осадок, который фильтровали и промывали холодным ТНЕ (200 мл). Сырое твердое вещество энергично перемешивали в МеОН (100 мл) в течение 1 ч, затем отфильтровывали, промывали МеОН (50 мл) и высушивали под высоким вакуумом, получая желаемый (Ы-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-третбутилкарбонат в форме твердого вещества белого цвета (28,0 г, 0,1 моль, выход 89,3%): ТЬС (гекса ны:этилацетат, 1:1 об. /об.) Я£=0,44; ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 6,10 (ушир.с, 2Н), 3,48 (ушир.с, 2Н), 3,29-3,32 (м, 2Н), 1,58-1,62 (м, 1Н), 1,50-1,55 (м, 1Н), 1,47 (с, 9Н).

- 25 017824

6'-Р№-2',3-Ди-Вос-сизомицин

К перемешиваемому раствору 6'-Р№-сизомицина (5,86 г, 9,35 ммоль) в МеΟΗ (100 мл) добавляли Ζη(ΟΑ^₂ (5,15 г, 28,05 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, пока все твердые частицы не растворились. Раствор (№гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-трет-бутилкарбонат (4,96 г, 17,77 ммоль) в ΤΗΡ (48 мл) добавляли по каплям за 4 ч и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Затем добавляли триэтиламин (2,61 мл, 18,7 ммоль), затем раствор (№гидрокси-5норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-трет-бутилкарбоната (1,31 г, 4,68 ммоль) в ΤΗΡ (12 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 24 ч. Реакционную смесь гасили добавлением глицина (2,81 г, 37,4 ммоль). Растворитель удаляли в роторном испарителе, получая остаток, который растворяли в ЭСМ (2 00 мл) и промывали смесью Η₂Ο:конц. ΝΗ₄ΟΗ (7:3 об./об., 3x50 мл). Органический слой высушивали над Мд8Ο₄, фильтровали и концентрировали досуха. Твердые частицы растворяли в водном растворе 0,1 М АсОН (2,0 л) и промывали смесью этилацетат:простой диэтиловый эфир (9:1 об./об., 4x1,0 л). Водный слой затем подщелачивали до ρΗ 10 с помощью конц. ΝΗ₄ΟΗ, превращали в соль и экстрагировали этилацетатом (3x30 мл). Объединенные органические слои высушивали над Мд8Ο.·|. фильтровали и концентрировали, получая 6'-ΡNΖ-2',3-ди-Вос-сизомицин (4,1 г, 4,96 ммоль, выход 53,0%, 92%-ная чистота): М8 т/е [М+Щ⁺ рассчит. 827,4, найдено 827,2.

(№Гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-9-флуорен-ацетат

К перемешиваемому раствору №гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксимида (7,38 г, 0,041 моль) в ΤΗΡ (200 мл) при 0°С добавляли Ν-метилморфолин (4,53 ноля, 0,041 моль) с последующим добавлением по каплям раствора 9-флуоренилметил хлорформиата (10,15 г, 0,039 моль) в ΤΗΡ (50 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи с постепенным нагреванием до температуры окружающей среды. Колбу затем охлаждали до 0°С и осажденные соли удаляли фильтрацией. Фильтрат концентрировали под вакуумом, получая воскообразный остаток, который осаждали из метанола, получая (№гидрокси-5норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-9-флуорен-ацетат (9,9 г, 0,025 моль, выход 61,0%), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки: ВВС (гексаны:этилацетат 3:1 об./об.) РГ=0,28.

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-Ртос-сизомицин

К перемешиваемому раствору 6'-Р№-2',3-ди-Вос-сизомицина (7,38 г, 8,93 ммоль) в ΤΗΡ (200 мл) добавляли (№гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-9-флуорен-ацетат (2,51 г, 6,25 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, контролируя протекание реакции с помощью ВЭЖХ и М8 (М8 т/е [М+Щ⁺ рассчит. 1049,5, найдено 1049,4). Добавляли дополнительное количество (Νгидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-9-флуорен-ацетата (0,05 экв) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч. Затем добавляли Ν-метилморфолин (0,98 мл, 8,93 ммоль) с последующим добавлением Вос-ангидрида (3,94 г, 17,85 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч. Реакционную смесь гасили добавлением глицина (7,51 г, 40,18 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Осажденные соли фильтровали и полученный раствор концентрировали досуха, получая остаток, который растворяли в ОСМ (150 мл) и промывали насыщенным водным раствором NаΗСΟз (3x80 мл), 1 М ли- 26 017824 монной кислоты (3x80 мл), Н₂О:№1НСО₃ (1:1 об./об., 80 мл), солевым раствором (40 мл) и высушивали над Мд8О₄. Фильтрация и выпаривание растворителя дали желаемый 6'-Р№-2',3,3-три-Вос-1-Ртоссизомицин (М8 т/е |Μ+Να|' рассчит. 1171,5, найдено 1171,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

К перемешиваемому раствору 6'-Р№-2',3,3-три-Вос-1-Ртос-сизомицина (8,93 ммоль) в ЭСМ (150 мл) медленно добавляли трис-(2-аминоэтил)амин (13,37 мл, 89,27 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 45 мин. Реакционную смесь затем промывали солевым раствором (3x100 мл), подкисляли до рН 5,5 с помощью фосфатного буферного раствора (2x500 мл, 1x100 мл), Н₂О (100 мл), промывали насыщенным водным раствором NаΗСΟз (100 мл) и солевым раствором (100 мл). Органическую фазу концентрировали, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка В, получая желаемый 6'-РNΖ-2',3,3-три-Вос-сизомицин (2,77 г, 2,99 ммоль, выход 33,5%, 93%-ная чистота): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 927,4, найдено 927,2.

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

К перемешиваемому раствору №Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионовой кислоты (0,93 г, 4,53 ммоль) в ЭМР (8 мл) медленно добавляли НОХВ (0,82 г, 4,53 ммоль) и ЕЭС (0,87 г, 4,53 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Затем добавляли 6'-РNΖ-2',3,3-три-Вос-сизомицин (3,0 г, 3,23 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили Н₂О (10 мл) и экстрагировали ЕЮАс (5x15 мл). Объединенные органические слои высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый 6'-РNΖ-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1114,5, найдено 1113,9, |М+№|' 1136,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (3,23 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РЖ, получая 2',3,3-три-Вос-1-(№Вое-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (2,0 г, 2,14 ммоль, выход 66,2%, чистота >65%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит.

- 27 017824

935,5, найдено 935,3, [Μ+№]⁺ 957,3.

№Вос-4-Амино-2(8)-гидроксимасляная кислота

К перемешиваемому раствору 8-4-амино-2-гидроксимасляной кислоты (51,98 г, 0,44 моль) в смеси диоксан:Н₂О (2 Ь, 1:1 об./об.) добавляли К₂СО₃ (106 г, 0,91 моль), затем раствор Вос-ангидрида (100 г, 0,46 моль) в диоксане (100 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь промывали ЭСМ (2x300 мл) и водный слой подкисляли до рН 2 с помощью Н₃РО₄. Водный слой экстрагировали ЭСМ (2x300 мл) и объединенные органические слои высушивали над Μ^^^ фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемую №Вос-4-амино-2(8)-гидроксимасляную кислоту (48,2 г, 50%-ный выход).

6'-ΡNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

К перемешиваемому раствору №Вос-4-амино-2(8)-гидроксимасляной кислоты (1,35 г, 6,17 ммоль) в ΌΜΡ (12 мл) медленно добавляли НО№ (1,11 г, 6,17 ммоль) и ЕОС (1,18 г, 6,17 ммоль). Затем медленно добавляли раствор 6'-ΡNΖ-2',3,3-три-Вос-сизомицина (4,4 г, 4,75 ммоль) в ΌΜΡ (13 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и гасили насыщенным водным раствором NаНСО₃ (20 мл) и экстрагировали ЕЮАс (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором NаНСО₃ (2x20 мл), солевым раствором (25 мл), высушивали над Μ§8ϋ4, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый 6'-ΡNΖ-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 1128,5, найдено 1129,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-ΡNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (4,75 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡΝΖ, получая 2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин: Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 949,5, найдено 949,1, |Μ+№|' 971,4.

6',2'-Ди-ΡNΖ-сизомицин

Сизомицин (12,9 г, 28,9 ммоль) и ацетат никеля(11) (29 г,

115,6 ммоль) растворяли в метаноле (900 мл) и зеленый раствор охлаждали в ванне, содержащей воду со льдом. К этому раствору добавляли 2,4

- 28 017824 диоксо-3-азабицикло[3.2.1]окт-6-ен-3-ил-4-нитробензил карбонат (16,6 г, 46,2 ммоль) в форме твердого вещества. Смеси давали медленно нагреться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение ночи. Раствор концентрировали в вакууме, получая зеленое масло, и это масло разделяли между концентрированным гидроксидом аммония (~12 М) и этилацетатом. Фазы разделяли и фиолетовую водную фазу повторно экстрагировали один раз этилацетатом. Объединенные этилацетатные фазы промывали один раз солевым раствором, разбавляли 10 об.% изопропанола и экстрагировали три раза 5%-ным водным раствором уксусной кислоты. Объединенные фазы уксусной кислоты подщелачивали с помощью 6 М №1ОН до рН>11 и затем дважды экстрагировали этилацетатом. Две конечные этилацетатные фазы объединяли и промывали один раз солевым раствором, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали до '/₂ объема в вакууме. Продукт, осажденный в ходе концентрации, отделяли фильтрацией, получая 6',2'-ди-ΡNΖ-сизомицин (12,1 г, 65%-ный выход) в форме твердого вещества белого цвета. М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 806,3, найдено 806,2.

6',2'-Ди-Р№-1,3,3-три-Вос-сизомицин

К перемешиваемому раствору 6',2'-ди-ΡNΖ-сизомицина (4,1 г, 5,09 ммоль) в ТНР (70 мл) и метаноле (70 мл) в колбе, помещенной в водяную баню, добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (5,8 мл, 5,51 г, 25,5 ммоль). Через 2 ч добавляли глицин (1,9 г, 25,5 ммоль), воду (70 мл) и 1 М карбоната натрия (15 мл) и смесь энергично перемешивали в течение 12 ч. Смесь концентрировали, чтобы удалить ТНР и метанол, и добавляли воду (100 мл), чтобы суспендировать твердые частицы. Твердые частицы отделяли фильтрацией, промывали водой и высушивали, получая 6',2'-ди-ΡNΖ-1,3,3-три-Вос-сизомицин (5,41 г, 96%-ный выход) в форме твердого вещества белого цвета. КР 0,15 (СНС1₃:5% 1РА об./об., УФ) М8 т/е [М-Вос]⁺ рассчит. 1006,5, найдено 1006,4.

6',2'-Ди-Р№-1,3,3-три-Вос-сизомицин (4,84 г, 4,38 ммоль) и гидросульфит натрия (7,6 г, 44 ммоль) объединяли с этанолом (70 мл) и водой (70 мл) в колбе. Колбу оснащали конденсатором и смесь нагрева ли при 60°С в течение 12 ч. Смесь затем нагревали при 65°С в течение дополнительных 3 ч, после чего охлаждали до температуры окружающей среды. Смесь разделяли между 0,2 М №1ОН и этилацетатом и фазы разделяли. Водную фазу снова экстрагировали один раз этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали один раз солевым раствором, высушивали над №ь8О₊ фильтровали и концентрировали, получая масло. Масло растирали с простым эфиром и твердые частицы отделяли фильтрацией, получая 6',2'-ди-Р№-1,3,3-три-Вос-сизомицин (2,71 г, 83%-ный выход) в форме твердого вещества белого цвета. КР 0,23 (1РА: СНС1₃ 4:1, с 2% N4^ УФ, нингидрин); М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 748,4, найдено 748,3.

- 29 017824

1,3,3-Три-Вос-сизомицин (8,5 г, 11,4 ммоль) растворяли в метаноле (212 мл), охлаждали в воде со льдом и добавляли триэтиламин (1,75 мл, 12,5 ммоль). 2,4-Диоксо-3-азабицикло[3.2.1]окт-6-ен-3-ил 4нитробензил карбонат (4,08 г, 11,4 ммоль) добавляли в форме твердого вещества. Через 1 ч реакционную смесь концентрировали, получая остаток, который разделяли между смесью простой эфир/этилацетат (1:1 об./об.) и водой. Фазы разделяли и органическую фазу промывали один раз 5%-ным водным раствором уксусной кислоты, чтобы удалить оставшийся исходный материал. Органическую фазу затем разбавляли '/₃ объема гексана и экстрагировали три раза 5%-ным водным раствором уксусной кислоты. Эти последние три водные фазы объединяли, солили до приблизительно 10%-ной насыщенности №1С1 и экстрагировали дважды этилацетатом. Эти последние две этилацетатные фазы объединяли, промывали по одному разу 1 М №1ОН и солевым раствором, высушивали над №ь8О₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток растирали со смесью простой эфир/гексаны и твердые частицы отделяли фильтрацией, получая 6'-РNΖ-1,3,3-три-Вос-сизомицин (6,2 г, 61%-ный выход) в форме твердого вещества белого цвета. Непрореагировавший исходный материал в начальной водной фазе можно использовать повторно, просто подщелачивая раствор, экстрагируя его в этилацетат, высушивая над №ь8О₄ и концентрируя. М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 927,4, найдено 927,4.

6',2'-Ди-Р№-3 -Вос-сизомицин

А,

6',2'-Ди-РNΖ-сизомицин (5,5 г, 6,8 ммоль) и ацетат цинка (4,5 г, 20,4 ммоль) растворяли в метаноле (200 мл) и раствор охлаждали в воде со льдом. Добавляли трет-бутил-2,4-диоксо-3-азабицикло[3.2.1]окт6-ен-3-ил карбонат (1,9 г, 6,8 ммоль, Вос-О№) и реакционной смеси давали медленно нагреться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение ночи. Добавляли трет-бутил-2,4-диоксо-3азабицикло[3.2.1]окт-6-ен-3-ил карбонат (500 мг, ~1,7 ммоль) и раствор перемешивали в течение 4 ч. Добавляли другую часть трет-бутил-2,4-диоксо-3-азабицикло[3.2.1]окт-6-ен-3-ил карбоната (500 мг) и реакционную смесь перемешивали в течение еще 4 ч. Затем реакционную смесь концентрировали, получая масло, которое разделяли между концентрированным гидроксидом аммония (~12 М) и этилацетат и фазы разделяли. Этилацетатную фазу промывали по одному разу концентрированным гидроксидом аммония и водой и затем промывали дважды 5%-ным водным раствором уксусной кислоты, которая была на 20% насыщена №С1. Этилацетатную фазу затем разбавляли 20 об.% гексанов и экстрагировали 5%-ным водным раствором уксусной кислоты. Конечную фазу уксусной кислоты подщелачивали с помощью 6 М №1ОН до рН>11 и экстрагировали один раз свежим этилацетатом. Конечную этилацетатную фазу промывали один раз солевым раствором, высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали, получая масло. Масло растворяли в этилацетате (16 мл) и добавляли по каплям в простой эфир (200 мл), чтобы осадить продукт. Твердые частицы отделяли фильтрацией и промывали простым эфиром, получая 6',2'ди-Р№-3-Вос-сизомицин (3,82 г, 62%-ный выход) в форме твердого вещества белого цвета. М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 906,4, найдено 906,3.

- 30 017824

6',2'-Ди-Р№-3-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

К перемешиваемому раствору 6',2'-ди-Р№-3-Вос-сизомицина (10,0 г, 11,0 ммоль) в БМР (100 мл) добавляли МВос-4-амино-2(8)-гидроксимасляную кислоту (3,15 г, 14,4 ммоль), реакционную смесь охлаждали до -40°С и перемешивали 30 мин. Затем добавляли РуВОР (6,9 г, 13,2 ммоль), потом Б1РЕА (7,7 мл, 40,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при -40°С. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (200 мл) и промывали водой (2x100 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали ЕЮАс (100 мл). Объединенные органические слои высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали, получая 6',2'-ди-Р№-3-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин в форме твердого вещества желто-оранжевого цвета (чистота 67% ВЭЖХ), которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6',2'-Ди-Р№-3,3-ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

К перемешиваемому раствору 6',2'-ди-Р№-3-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (11,0 ммоль) в ТНР (100 мл) при 0°С добавляли Ν-метилморфолин (2,44 мл, 22,1 ммоль), затем Восангидрид (4,82 г, 22,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали досуха, получая сырой продукт, который очищали флэш-хроматографией (силикагель/дихлорметан:метанол 0-7%), получая желаемый 6',2'-ди-Р№-3,3-ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (10,47 г, 9,46 ммоль, выход 86,0%, анал.; чистота 85% ВЭЖХ): М8 т/е |М+№1|' рассчит. 1229,5, найдено 1229,4.

3,3-Ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

К перемешиваемому раствору 6',2'-ди-Р№-3,3-ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (10,5 г, 8,71 ммоль) в ЕЮН (100 мл) и Н₂О (50 мл) добавляли 1 М МЮН (34,8 мл, 34,8 ммоль), затем №₂8₂О₄ (12,1 г, 69,6 ммоль) и реакционную смесь нагревали в 70°С в течение 18 ч. После охлаждения образовывался осадок, который удаляли фильтрацией и промывали МеОН (25 мл). Удаление органических растворителей в роторном испарителе сопровождалось добавлением Н₂О (100 мл) и уксусной кислоты (200 мл) с получением кислого раствора (~рН 4), который промывали ЕЮАс (2x100 мл).

- 31 017824

Водный слой затем подщелачивали до рН 12 с помощью конц. NН₄ОН (20 мл), подсаливали с помощью

Ναί,Ί (6,0 г) и экстрагировали ЕЮАс (2x200 мл). Объединенные органические слои высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали, получая желаемый 3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (4,78 г, 5,45 ммоль, выход 62,6%, М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 849,5, найдено 849,3, |М+№1|' 871,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Р№-3,3-Ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

К перемешиваемому раствору 3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (4,78 г, 5,45 ммоль) в МеОН (75 мл) добавляли Э1РЕА (0,95 мл, 5,45 ммоль), затем (№гидрокси-5норборнен-2,3-дикарбоксилимидо)-4-нитробензил карбонат (НО№-Р№, 1,75 г, 4,90 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Выпаривание растворителя дало масляный остаток, который растворяли в ЕЮАс (100 мл), промывали Н₂О (2x100 мл) и разбавляли ЕьО (75 мл) и гексанами (50 мл). Органический слой затем экстрагировали 5%-ным водным раствором АсОН (100 мл) и водный слой отделяли, подсаливали с использованием Ναί,Ί (3,0 г) и экстрагировали ЕЮАс (3x100 мл). Объединенные органические слои высушивали над №-ь8О₊ фильтровали и концентрировали, получая желаемый 6'-ΕΝΖ3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (3,08 г, 3,32 ммоль, выход 60,9%; М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1028,5, найдено 1028,3; чистота ВЭЖХ 90,0%), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Пример 1. 6'-(2-Г идроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизоми цин.

2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,10 г, 0,105 ммоль) обрабатывали трет-бутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'(2-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(18)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1107,6, найдено 1107,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

ЫН

6'-(2-Г идроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,105 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)- 32 017824 гидроксибутирил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 593,3, найдено 593,2, [М+Ыа]⁺ 615,3; чистота СЕ-Νϋ 97,5%.

Пример 2. 6'-(2-Г идроксиэтил)-1-(4-амино-2(К)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(2-Гидроксиэтил)-2',3-ди-Р№-1-(М-Р№-4-амино-(2В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин.

К перемешиваемому раствору 2',3-ди-Р№-1-(М-Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Воссизомицина (0,075 г, 0,063 ммоль) в ОМЕ (2 мл) добавляли димер гликольальдегида (0,015 г, 0,125 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч. Затем добавляли раствор №1С№ВН₃, (0,070 г, 1,11 ммоль) и АсОН (0,145 мл) в МеОН (б мл) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 5 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (10 мл) и промывали Н₂О (10 мл), высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый 6'-(2-гидроксиэтил)-2',3-ди-РЫ2-1(М-Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1230,5, найдено 1230,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Г идроксиэтил)-1-(4-амино-2(К)-гидроксибутирил)-3 -Вос-сизомицин.

6'-(2-Гидроксиэтил)-2',3-ди-Р№-1-(Ы-Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,063 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΓΝΖ. получая сырой продукт, который очищали способом 2колонка А, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(К)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,016 г, 0,023 ммоль, выход 36,5%).

6'-(2-Г идроксиэтил)-1-(4-амино-2(К)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(К)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,016 г, 0,023 ммоль) обрабатывали 90%-ным водным раствором трифторуксусной кислоты (0,5 мл) в течение 25 мин. Реакционную смесь гасили добавлением Н₂О (5 мл) и водный слой лиофилизировали, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая желаемый 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(К)гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 593,3, найдено 593,2, [М+Ыа]⁺ 615,4; СЕ-Νϋ: чистота 98,2%).

- 33 017824

Пример 3. 6'-(2-Г идроксипропанол)-1 -(4-амино-2(6)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3-ди-РК7-1-(Ы-РК7-4-амино-2(6)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин.

К перемешиваемому раствору 2',3-ди-РК7-1-(Ы-РК7-4-амино-2(6)-гидроксибутирил)-3 -Воссизомицина (0,075 г, 0,063 ммоль) в ΏΜΡ (2 мл) добавляли димер глицеральдегида (0,023 г, 0,126 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч. Затем добавляли раствор НаСИВ^ (0,070 г, 1,11 ммоль) и Ас0Н (0,145 мл) в Ме0Н (6 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 5 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (10 мл) и промывали Н20 (10 мл), высушивали над Мд804, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый 6'-(2-гидроксипропанол)-2',3-диРNΖ-1-(N-РNΖ-4-амино-2(6)-гидроксибутирил)-3-Вοс-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1260,5, найдено 1260,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(6)-гидроксибутирил)-3''-Вос-сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-РNΖ-4-амино-2(6)-гидроксибутирил)-3-Вοс-сизомицин (0,063 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления РNΖ, получая сырой продукт, который очищали способом 2-колонка А, получая 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(6)-гидроксибутирил)-3-Воссизомицин (0,016 г, 0,022 ммоль, выход 34,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 723,4, найдено 723,3, [М+Ыа]⁺745,4.

6'-(2-Г идроксипропанол)-1 -(4-амино-2(6)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(6)-гидроксибутирил)-3''-Вос-сизомицин (0,016 г, 0,022 ммоль) обрабатывали 90%-ным водным раствором трифторуксусной кислоты (0,5 мл) в течение 25 мин.

Реакционную смесь гасили добавлением Н20 (5 мл) и водный слой лиофилизировали, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая желаемый 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(4амино-2(6)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 623,3, найдено 623,3, [М+Ыа]⁺ 645,4;

СЕМО: чистота 99,0%).

- 34 017824

Пример 4. 6'-(Метилпиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(Метил-N-Βοс-пиперидин-4-ил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-РNΖ-4-амино-2(Κ)-гидроксибутирил-)-3-Βοс сизомицин.

К перемешиваемому раствору 2',3-ди-РNΖ-1-(N-РNΖ-4-амино-2(Κ)-гидроксибутирил)-3-Βοссизомицина (0,100 г, 0,084 ммоль) в БМЕ (2 мл) добавляли №Вос-пиперидин-4-карбоксальдегид (0,036 г, 0,168 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч. Затем добавляли раствор NаСNΒНз (0,070 г, 1,11 ммоль) и АсОН (0,145 мл) в МеОН (6 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 5 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (10 мл) и промывали Н2О (10 мл), высушивали над М§8О4, фильтровали и концентрировали досуха, получая сырой продукт, который очищали способом 2-колонка А, получая желаемый 6'-(метил-N-Βοс-пиперидин-4-ил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-РNΖ-4амино-2(Е)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,037 г, 0,027 ммоль, выход 32,1%): М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 1383,6, найдено 1383,4.

6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(К)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин. 6'-(Мелил^-В()с-11и11ери;цш-4-ил)-2'3-ди-1^/-1-Ш-1^/-4-ами1ю-2П<)-1идр()1ссибутирил)-3-В()с-сизомицин (0,037 г, 0,027 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления Р№, получая сырой продукт, который очищали способом 2-колонка А, получая 6'-(метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(К)-гидроксибутирил)-3''-Воссизомицин (0,005 г, 0,006 ммоль, выход 22,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 846,5, найдено 846,4, [М+№]⁺ 868,5.

6'-(Метилпиперидин-4-ил)-1 -(4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(Е)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,015 г,

0,018 ммоль) обрабатывали 90%-ным водным раствором трифторуксусной кислоты (0,5 мл) в течение 25 мин. Реакционную смесь гасили добавлением Н2О (5 мл) и водный слой лиофилизировали, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая желаемый 6'-(метилпиперидин-4-ил)-1(4-амино-2(Е)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 646,4, найдено 646,3, |М+Ш|'

668,4; С^N^: чистота 99,2%.

- 35 017824

Пример 5. 6'-(Метилциклопропил)-1 -(4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(Метилциклопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин.

К перемешиваемому раствору 2',3-ди-РМ2-1-(М-РМ2-4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)-3-Воссизомицина (0,100 г, 0,084 ммоль) в ΌΜΕ (2 мл) добавляли циклопропан карбоксальдегид (0,012 мл, 0,168 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч. Затем добавляли раствор ЫаСМВНз (0,070 г, 1,11 ммоль) и АсОН (0,14 5 мл) в МеОН (6 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 5 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (10 мл) и экстрагировали Н₂О (10 мл), высушивали над Мд3О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый 6'(метилциклопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1240,5, найдено 1240,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилциклопропил)-1-(4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)-3''-Вос-сизомицин.

6'-(Метилциклопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,084 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΓΝΖ, получая 6'-(метилциклопропил)-1-(4-амино2(Я)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 703,4, найдено 703,3, |М+№1|'

725,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилциклопропил)-1-(4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Метилциклопропил)-1-(4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,084 ммоль) обрабатывали 90%-ным водным раствором трифторуксусной кислоты (0,5 мл) в течение 25 мин. Реакционную смесь гасили добавлением Н2О (5 мл) и водный слой лиофилизировали, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая желаемый 6'-(метилциклопропил)-1-(4-амино-2(Я)гидроксибутирил)сизомицин (0,0014 г, 0,0023 ммоль, выход 2,7%): М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 603,4, найдено 603,2, [М+№]⁺ 625,4; С1.М): чистота 98,3%.

Пример 6. 6'-(3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(Я)-гидроксибутирил)сизомицин

№Вос-3-Аминопропаналь.

К перемешиваемому раствору 3-(Вос-амино)-1-пропанола (25 мл, 0,144 моль) в насыщенном вод

- 36 017824 ном растворе ЭСМ (1,0 л) добавляли реактив Десса-Мартина (99,2 г, 233,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь затем разбавляли простым эфиром (1,0 л), затем раствором №ь8_;О₃ (250 г) в 80%-ном №1НСО₃ (450 г в 1,0 л Н₂О). Реакционную смесь энергично перемешивали в течение 30 мин, пока не сформировались два слоя, причем верхний слой был прозрачным. Реакционную смесь фильтровали, чтобы удалить осажденные твердые частицы, и водный слой экстрагировали простым эфиром (1,0 л). Органический слой промывали насыщенным NаНСΟ₃ (1,0 л), Н₂О (1,0 л) и солевым раствором (1 л), высушивали над №ь8О₄ и концентрировали до прозрачного масла. Сырое масло растворяли в смеси ЕЮАс:гексаны (1:1 об./об., 1,0 л) и фильтровали через короткую колонку с силикагелем, получая желаемый Ν-Вос-Л-аминопропаналь (21,7 г, 0,125 моль, выход 85,6%): ¹Н ЯМР (400

МГц, СЭС1₃) δ 9,77 (с, 1Н, СНО), 4,85 (ушир.с, 1Н, ΝΉ), 3,36-3,42 (т, 2Н, СН₂), 2,67 (т, 2Н, СН₂), 1,39 (с,

9Н, (СН3)3).

6'-(№Вос-3-Аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизоми цин.

К перемешиваемому раствору 2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Воссизомицина (0,150 г, 0,126 ммоль) в ЭМЕ (2 мл) добавляли Ν-Вос-пропиональдегид (0,043 г, 0,252 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч. Затем добавляли раствор NаСNВН₃ (0,070 г, 1,11 ммоль) и АсОН (0,145 мл) в МеОН (6 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 5 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (10 мл) и промывали Н₂О (10 мл), высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый 6'-(№Вос-3-аминопропил)-2',3-диР№-1-(№Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1343,5, найдено 1343,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(№Вос-3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин.

6'-(№Вос-3-Аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,126 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΡNΖ, получая 6'-(№Вос-3-аминопропил)-1-(4амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 806,5, найдено 806,4, |М+№1|'

828,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(В)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(№Вос-3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,126 ммоль) обрабатывали 90%-ным водным раствором трифторуксусной кислоты (0,5 мл) в течение 25 мин. Реакционную смесь гасили добавлением Н₂О (5 мл) и водный слой лиофилизировали, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая желаемый 6'-(3-аминопропил)-1-(4-амино-2(В)гидроксибутирил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 606,4, найдено 606,3; ΟΓΝΏ: чистота 99,4%).

- 37 017824

Пример 7. б'-Метилциклопропил-1 -(3 -амино-2(К)-гидроксипропионил)сизомицин

N03 б'-Метилциклопропил-2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,078 ммоль) циклопропанкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В получали желаемый б'метилциклопропил-2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

б'-Метилциклопропил-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Сырой б'-метилциклопропил-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 10, получая б'-метилциклопропил-1-(№Вос-3-амино2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

б'-Метилциклопропил-1-(3-амино-2(К)-гидроксипропионил)сизомицин.

б'-Метилциклопропил-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый б'-метилциклопропил-1-(3-амино-2(К)гидроксипропионил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 589,3, найдено 589,3; чистота СБ-ΝΟ 99,5%.

- 38 017824

Пример 8. 6'-Метилпиперидинил-1 -(3 -амино-2(К)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(Метил-Ы-Вос-пиперидинил)-2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(Ы-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,055 ммоль) Ы-Вос-пиперидин-4-карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В получали соответствующий 6'-(метил-Ы-Вос-пиперидинил)-2',3-ди-Р№-1-(Ы-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-Ы-Вос-пиперидинил)-1-(Ы-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин. 6'-(Метил-Ы-Вос-пиперидинил)-2',3-ди-Р№-1-(Ы-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,055 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΓΝΖ. получая 6'-(метил-Ы-Вос-пиперидинил)-1(Ы-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метилпиперидинил-1 -(3 -амино-2(К)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(Метил-Ы-Вос-пиперидинил)-1-(Ы-Вос-3 -амино-2(К)-гидроксипропионил)-3 -Вос-сизомицин (0,055 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-метилпиперидинил-1-(3-амино-2(К)гидроксипропионил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 632,4, найдено 632,4; чистота СЬЫЭ 99,0%.

Пример 9. 6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(3-амино-2(К)-гидроксипропионил)сизомицин

ΝΟϊ

6'-(2-Гидроксиэтил)-2',3-ди-Р№-1-(Ы-Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,055

- 39 017824 ммоль) димером гликольальдегида и АсОН (0,005 мл) согласно процедуре 1-способ В получали желаемый 6'-(2-гидроксиэтил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(В)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(№Вос-3-амино-2(К.)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

6'-(2-Гндроксиэтил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(В)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,055 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления РNΖ, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(№Вос-3-амино-2(К)гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 779,4, найдено 779,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(3-амино-2(В)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(№Вос-3-амино-2(К.)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,055 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(3-амино-2(В)гидроксипропионил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 579,3, найдено 579,3; чистота ΟΕΝΏ 99,0%.

Пример 10. 6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(В)-гидроксипропионил)сизомицин

N01

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К.)-гидроксипропионил)-3-Вос сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К.)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,078 ммоль) димером глицеральдегида и АсОН (0,005 мл) согласно процедуре 1-способ В получали соответствующий 6'-(2-гидроксипропанол)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К.)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 40 017824

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин. 6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΡNΖ, получая 6'-(2-гидроксипропанол)1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 809,4, найдено

809,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(К)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(К)гидроксипропионил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 609,3, найдено 609,2, |М+№|' 631,2; чистота ί.ΈΝϋ 98,2%.

Пример 11. 6'-(3-Аминопропил)-1-(3-амино-2(К)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(№Вос-3-Аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,078 ммоль) №Вос-3-аминопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ В получали соответствующий 6'-(№Вос-3-аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(№Вос-3-Аминопропил)-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

6'-(№Вос-3-Аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΡNΖ, получая 6'-(№Вос-3аминопропил)-1-(№Вос-3-амино-2(К)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 892,5, найдено 892,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 41 017824

6'-(3-Аминопропил)-1-(3-амино-2(В)-гидроксипропионил)сизомицин 6'-(№Вос-3-аминопропил)-1(№Вос-3-амино-2(В)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 3способ В и очистке ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(3аминопропил)-1-(3-амино-2(В)-гидроксипропионил)сизомицин: М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 593,4, найдено 593,3, [М+Να]⁴ 614,3; С1.\1) чистота 92,8%.

Пример 12. 6'-(Метилпиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицина (0,17 ммоль) ΝВос-пиперидин-4-карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В получали соответствующий 6'-(метил№Вос-пиперидин-4-ил)-2',3-ди-Р№-1-(К-Р№-4-амино-2(В)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин. 6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Воссизомицин (0,17 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΡNΖ, получая, 6'-(метил-№Воспиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин: М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 846,5, найдено 846,4.

6'-(Метилпиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,17 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной

- 42 017824 фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(метилпиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин: Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 646,4, найдено 646,3, |Μ+Νη|' 668,4; чистота ^N0 97,8%.

Пример 13. 6'-(Метилциклопропил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(Метилциклопропил)-2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(1§)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,07 8 ммоль) циклопропанкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В получали желаемый 6'(метилциклопропил)-2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (Μ8 т/е [Μ+Ή]⁺ рассчит. 1147,5, найдено 1147,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилциклопропил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

6'-(Метилциклопропил)-2',3-ди-ΡNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 2, получая 6'-(метилциклопропил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 789,4, найдено 789,4, [Μ+№]⁺ 811,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилциклопропил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(Метилциклопропил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(метилциклопропил)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,0008 г, 0,0014 ммоль, выход 1,8%): Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 589,3, найдено 589,3, [Μ+^Ι 611,4; чистота ^ΝΌ 98,9%.

- 43 017824

Пример 14. 6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(2-Г идроксипропаиол)-2',3 -ди-РЖ-1-(Ы-Вос-3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)-3 -Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,078 ммоль) димером глицеральдегида и АсОН (0,005 мл) согласно процедуре 1-способ В получали соответствующий 6'-(2-гидроксипропанол)-2',3-ди-РЫ2-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1167,5, найдено 1167,3, [М+Ыа]⁺ 1189,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксипропаиол)-1-(3-амино-2(§)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

6'-(2-Г идроксипропанол)-2',3 -ди-РЖ-1-(Ы-Вос-3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)-3 -Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΓΝΖ. получая 6'-(2-гидроксипропаиол)-1-(N-Вос-3амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 809,4, найдено 809,3, |М+№1|' 831,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксипропаиол)-1-(3-амино-2(§)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропаиол)-1-(N-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,00137 г, 0,0022 ммоль, выход 2,8%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 609,3, найдено 609,3, [М+№]⁺ 631,4; чистота СЕ-ΝΟ 97,9%.

Пример 15. 6'-(Метилпиперидин-4-ил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(Метил-N-Вос-пиперидин-4-ил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)-3-Вос сизомицин.

- 44 017824

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(К-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,082 ммоль) №Вос-пиперидин-4-карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В с последующей очисткой ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 2-колонка А получали соответствующий 6'-(метил-№Воспиперидин-4-ил)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,021 г, 0,017 ммоль, 20,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1290,6, найдено 1290,3, [М+№]⁺ 1312,5).

6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин. 6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин (0,021 г, 0,017 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 6'-(метил-№Воспиперидин-4-ил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 932,5, найдено 932,4, [М+№]⁺ 954,5), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилпиперидин-4-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(Метил-№Вос-пиперидин-4-ил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,017 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(метилпиперидин-4-ил)-1-(3-амино2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,003 г, 0,0047 ммоль, выход 27,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 632,4, найдено 632,3, [М+№]⁺ 654,4; чистота ί.ΈΝΟ 96,9%.

Пример 16. 6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(2-Гидроксиэтил)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,5 г, 0,41 ммоль) димером гликольальдегида и АсОН (0,005 мл) согласно процедуре 1-способ В получали 6'-(2гидроксиэтил)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2-(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е |М+№1|' рассчит. 1159,5, найдено 1159,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 45 017824

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(К-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Сырую смесь 6'-(2-гидроксиэтил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицина подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(К-Вос-3-амино2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 779,4, найдено 779,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Г идроксиэтил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

Сырую смесь 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(К-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,0142 г, 0,0245 ммоль, выход 5,9%). М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 579,3, найдено 579,2, [М+Ка]⁺ 601,3, чистота СЬКО 94,5%.

Пример 17. 6'-(3-Аминопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(N-Фталимидо-3-аминопропил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вοссизомицин.

К раствору 2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вοс-3-амино-2(18)-гидроксипропионил)-3-Вοс-сизомицина (0,176 г, 0,15 ммоль) в ЭМЕ (2 мл) добавляли 3-фталимидопропиональдегид (0,06 г, 0,29 ммоль) и молекулярные сита 3А (15-20) и реакционную смесь взбалтывали в течение 2 ч. Затем добавляли раствор КаСКЕНа (0,018 г, 0,29 ммоль) в Ме0Н (4 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (5 мл) и органический слой промывали насыщенным водным раствором НаНС03 (3 мл), солевым раствором (3 мл), высушивали над №2804, фильтровали и концентрировали, получая 6'-(N-фталимидо-3-аминопропил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1280,5, найдено 1280,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 46 017824

6'-(3-Аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин. 6'-(МФталимидо-3-аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин (0,15 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления фталимидо, получая 6'-(3-аминопропил)2',3-ди-Р№-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1150,5, найдено 1150,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

6'-(3-Аминопропил)-2',3-ди-Р№-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,15 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡNΖ, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(Ы-Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 792,5, найдено 792,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(3-Аминопропил)-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,15 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(3-аминопропил)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,0021 г, 0,0034 ммоль, Выход 2,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 592,4, найдено 592,2, [М+№]⁺ 614,3; чистота СЕ-ΝΟ 91,6%.

Пример 18. 6'-(Метилциклопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(Метилциклопропил)-2',3-ди-Р№-1-(МР№-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(МР№-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицина (0,084 ммоль) циклопропанкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В получали желаемый 6'(метилциклопропил)-2',3-ди-Р№-1-(МР№-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1240,5, найдено 1240,4, [М+№]⁺ 1262,4), который использовали на следующей стадии

- 47 017824 без дальнейшей очистки.

б'-(Метилциклопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3''-Вос-сизомицин.

б'-(Метилциклопропил)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,084 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления ΡNΖ, получая б'-(метилциклопропил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 703,4, найдено 703,3, [М+№]⁺ 725,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

б'-(Метилциклопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

б'-(Метилциклопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3''-Вос-сизомицин (0,084 ммоль) обрабатывали 90%-ным водным раствором трифторуксусной кислоты (0,5 мл) в течение 25 мин. Реакционную смесь гасили добавлением Н₂О (5 мл) и водный слой лиофилизировали, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая желаемый б'-(метилциклопропил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 603,4, найдено 603,2, [М+№]⁺ 625,4; чистота ίΧΝΩ 98,3%).

Пример 19. б'-(2-Гидроксипропанол)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

б'-(2-Гидроксипропанол)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин.

К перемешиваемому раствору соли 2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(К)-гидроксибутирил)-3-Воссизомицина и трифторуксусной кислоты (0,110 г, 0,085 ммоль) в ИМЕ (1 мл) добавляли И1РЕА (0,019 мл, 0,11 ммоль), затем димер глицеральдегида (0,032 г, 0,17 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение б ч. Затем добавляли раствор К’;ОВН₃ (0,070 г, 1,11 ммоль) и АсОН (0,145 мл) в МеОН (б мл) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 5 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (10 мл) и экстрагировали Н₂О (10 мл), высушивали над Мд§О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый б'-(2-гидроксипропанол)-2',3-ди-Р№-1-(№Р№-4-амино-2(8)гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1260,5, найдено 1260,3.

- 48 017824

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3''-Вос-сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-РNΖ-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Вос-сизомицин (0,085 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления РNΖ, получая сырой продукт, который очищали способом 2-колонка А, получая 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3-Воссизомицин (0,009 г, 0,011 ммоль, выход 13,4%). М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 723,4, найдено 723,3.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)-3''-Вос-сизомицин (0,009 г, 0,011 ммоль) обрабатывали 90%-ным водным раствором трифторуксусной кислоты (0,5 мл) в течение 25 мин. Реакционную смесь гасили добавлением Н2О (5 мл) и водный слой лиофилизировали, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая желаемый 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(4амино-2(К)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 623,3, найдено 623,3, [М+Ыа]⁺ 645,4; СЬЫБ: чистота 96,6%.

Пример 20. 6'-(3-Амино-2-гидроксипропионил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(N-Вос-3-Амино-2-гидроксипропионил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3''Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3''-Вос-сизомицина (0,078 ммоль) Ы-Вос-3-амино-2-гидроксипропионовой кислотой согласно процедуре 4-способ А получали соответствующий 6'-(N-Вос-3-амино-2-гидроксипропионил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Ыа]⁺ рассчит. 1302,5, найдено 1302,4), который ис пользовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 49 017824

6'-(№Вос-3-Амино-2-гидроксипропионил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин.

6'-(N-Вос-3-Амино-2-гндроксипропионил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 6'-(Я-Вос-3-амино-2гидроксипропионил)-1-(К-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 922,5, найдено 922,3, [М+№]⁺ 944,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Амино-2-гидроксипропионил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(Я-Вос-3 -Амино^-гидроксипропионил)-1 -(Я-Вос-3 -амино-2(8)-гндроксипропионил)-3 -Вос-сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(3-амино-2-гндроксипропионил)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил^изомицин (0,0076 г, 0,012 ммоль, выход 15,4%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 622,3, найдено 622,3, [М+№]⁺ 644,4; чистота С1 ,\1) 99,5%.

Пример 21. 6'-(2-Г идрокси-3 -пропионамид)-1-(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(2-Гидрокси-3-пропионамид)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,15 ммоль) глицидамидом согласно процедуре 5 получали 6'-(2-гидрокси-3-пропионамид)-2',3-ди-РNΖ-1-(NВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1180,5, найдено 1180,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидрокси-3-пропионамид)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин.

Сырую смесь 6'-(2-гидрокси-3-пропионамид)-2',3-ди-Р№-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 6'-(2гидрокси-3-пропионамид)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 822,4, найдено 822,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 50 017824

6'-(2-Гидрокси-3-пропионамид)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

Сырую смесь 6'-(2-гидрокси-3-пропионамид)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицина подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос с последующей очисткой ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2-гидрокси-3-пропионамид)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,0093 г, 0,015 ммоль, 10%-ный выход): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 622,3, найдено 622,2, [М+№]⁺ 644,3; чистота ^ΝΌ 96,2%.

Пример 22. 6'-(3-Амино-2-гидроксипропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(N-Вос-3-Амино-2-гидроксипропил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3''Вос-сизомицин.

Обработкой 2',3-ди-Р‘№-1-(№-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицина (0,15 ммоль) ΝВос-оксиран-2-илметанамином согласно процедуре 5 получали соответствующий 6'-(№Вос-3-амино-2гидроксипропил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3''-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 1266,6, найдено 1266,7), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(№Вос-3-Амино-2-гидроксипропил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Воссизомицин.

6'-(N-Вос-3-Амино-2-гидроксипропил)-2',3-ди-РNΖ-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3''Вос-сизомицин (0,15 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 6'-(№Вос-3-амино-2гидроксипропил)-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 908,5, найдено 908,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Амино-2-гидроксипропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(№-Вос-3-Амино-2-гидроксипропил)-1-(№-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)-3-Вос-сизомицин (0,15 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос с последующей очисткой ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(3-амино-2-гидроксипропил)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,0044 г, 0,0072 ммоль, выход 4,8%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 608,3, найдено

- 51 017824

608,2, [М+№]⁺ 630,3; чистота 91% С1 ,ΝΙλ

Пример 23. 6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-Р№-2',3,3''-Три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-2',3,3''-три-Вос-сизомицина (0,075 г, 0,081 ммоль) гликолевой кислотой согласно процедуре 4-способ В получали желаемый 6'-РNΖ-2',3,3''-три-Βοс-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 985,5, найдено 985,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3,3-Три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-Р№-2',3,3''-Три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ?ΝΖ, получая 2',3,3''-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 806,4, найдено 806,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3,3''-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали ОЬ-глицеральдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(2-гидроксипропанол)-2',3,3-три-Вос-1-(2гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 880,5, найдено 880,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0058 г, 0,010 ммоль, выход 12,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 580,3, найдено 580,6; чистота ΟΈΝΩ 89,3%.

- 52 017824

Пример 24. 6'-(3-Аминопропил)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-(Ы-Фталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(2-гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали Νфталимидопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(Ы-фталимидо-3аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 993,5, найдено 993,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(Ы-Фталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления защитной фталамидной группы, получая 6'-(3-аминопропил)2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 863,5, найдено 864,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0035 г, 0,0062 ммоль, выход 7,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 563,3, найдено 563,2; чистота СЬЫЭ 88,9%.

Пример 25. 6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали трет-бутилдиметилсилилокси-ацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(2-третбутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 964,6, найдено 964,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 53 017824

6'-(2-Г идроксиэтил)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВЗ, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(2гидроксиацетил)сизомицин (0,0152 г, 0,028 ммоль, выход 34,6%): М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 550,3, найдено 550,5; чистота СИМБ 90,7%.

Пример 26. 6'-(3-Аминопропил)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин

6'-РNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(N-фталимидо-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-2',3,3-три-Вос-сизомицина (0,075 г, 0,081 ммоль) Ν-фталимидоэтансульфонил хлоридом согласно процедуре 12 получали желаемый 6'-РNΖ-2',3,3-три-Вос-1-(N-фталимидо-2аминоэтилсульфонамид)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1164,5, найдено 1164,6), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

6'-РNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(N-фталимидо-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления защитной фталимидной группы, получая 6'-РNΖ-2',3,3''-три-Вос-1-(2аминоэтилсульфонамид)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1034,5, найдено 1035,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 54 017824

6'-ΡNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(N-Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

6'-ΡNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 13 для присоединения защитной группы Ν-Вос, получая 6'-ΡNΖ-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-2аминоэтилсульфонамид)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 1134,5, найдено 1135,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

6'-ΡNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(N-Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡΝΖ, получая 2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 955,5, найдено 956,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(№Фталимидо-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали Νфталимидопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(№фталимидо-3аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 1142,6, найдено 1143,5), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

6'-(№Фталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления защитной фталимидной группы, получая 6'-(3-аминопропил)2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 1012,5, найдено 1012,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 55 017824

6'-(3-Аминопропил)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,0029 г, 0,0047 ммоль, выход 5,8%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 612,3, найдено 612,4; чистота ίΤΝΩ 84,7%.

Пример 27. 6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вοс-1-(N-Вοс-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081) обрабатывали ОЬглицеральдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(2-гидроксипропанол)-2',3,3''три-Вос-БЩ-Вос^-аминоэтилсульфонамидХизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1029,5, найдено 1030,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксипропанол)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

6'-(2-Гидроксипропанол)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(2аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,0031 г, 0,0049 ммоль, выход 6,0%) М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 629,3, найдено 629,2; ίΤΝΩ чистота 88,2%.

- 56 017824

Пример 28. 6'-(2(8)-Г идроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(Метил-(5)-1-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2',3,3-1ри-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,07 8 ммоль) (К)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В получали соответствующий 6'-(метил-(5)-1-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1063,6, найдено 1063,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2(8)-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(2(8)-Гидроксипропанол)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,078 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая желаемый 6'-(2(8)-гидроксипропанол)-1-(4-амино2(8)-гидроксибутирил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 623,3, найдено 623,4, [М+№]⁺ 645,3; чистота ί.ΈΝϋ 97,9%.

Пример 29. 6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизо мицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,081) обрабатывали третбутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(2-третбутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1113,6, найдено 1114,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин.

6'-(2 -трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил) -2',3,3 -три-В ос-1-(№Вос-2 -аминоэтилсульфонамид)сизо - 57 017824 мицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ΤВ8, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(2аминоэтилсульфонамид)сизомицин (0,0019 г, 0,0032 ммоль, выход 3,9%): М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 599,3, найдено 599,2; чистота ΒΥΝΌ 90,5%.

Пример 30. 6'-(2-Аминопропанол-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(№Вос-2,2-Диметил-1,3-оксазолидинметил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,075 г, 0,079 ммоль) обрабатывали №Вос-4-формил-2,2-диметил-1,3-оксазолидином согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(№Вос-2,2-диметил-1,3-оксазолидинметил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 1162,7, найдено 1163,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Аминопропанол-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(№Вос-2,2-Диметил-1,3-оксазолидинметил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2аминопропанол-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0082 г, 0,013 ммоль, выход 16,4%): М8 т/е [М+Η]⁺ рассчит. 622,4, найдено 622,6; чистота ίΧΝΌ 75,5%.

Пример 31. 6'-(4-Гидроксипиперидин-4-ил)метил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

№Вос-1-Окса-6-азаспиро[2.5]октан.

4-Метиленпиперидин (0,222 г, 1,12 ммоль) подвергали процедуре 14, получая желаемый №Вос-1окса-6-азаспиро[2.5]октан (0,215 г, 1,01 ммоль, выход 90,2%): Ή ЯМР (250 МГц, ДМСО-б₆) δ 3,29-3,61 (м, 6Η), 1,56-1,70 (м, 2Η), 1,30-1,54 (м, 11Η).

- 58 017824

6'-((4-Гидрокси-N-Вос-пиперидин-4-ил)метил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,075 г, 0,079 ммоль) обрабатывали N-Вос-1-окса-6-азаспиро[2.5]октаиом согласно процедуре 5, получая желаемый 6'-((4-гидроксиN-Вос-пиперидин-4-ил)метил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1162,7, найдено 1163,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-((4-Гидроксипиперидин-4-ил)метил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-((4-Гидрокси-N-Вос-пиперидин-4-ил)метил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-((4гидроксипиперидин-4-ил)метил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0023 г, 0,0035 ммоль, выход 4,4%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 662,4, найдено 662,8; чистота ίΧΝΩ 94,5%.

Пример 32. 6'-(2-Гидрокси-5-аминопентил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

2-(Пент-4-енил)изоиндолин- 1,3-дион.

К перемешиваемому раствору 5-бромпентена (6,0 г, 0,040 моль) в ОМЕ (30 мл) добавляли К₂СО₃(4,7 г, 0,034 моль) и фталимид калия (6,21 г, 0,033 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и добавляли воду (50 мл). Водный слой затем экстрагировали этилацетатом (2x50 мл) и объединенные органические слои промывали 5%-ным водным раствором NаΗСΟ₃ (2x20 мл), солевым раствором (30 мл) и высушивали над №₂8О₄. Фильтрация и выпаривание растворителя дали масло, которое очищали флэш-хроматографией (силикагель/гексаны: этилацетат 0-35%), получая желаемый 2-(пент-4-енил)изоиндолин-1,3-дион в форме твердого вещества (6,36 г, 0,029 ммоль, выход 72,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 216,1, найдено 216,1; ЯМР (250 МГц, ДМСО-б₆) δ 7,79-7,95 (м, 4Н), 5,70-5,91 (м, 1Н), 4,90-5,11 (м, 2Н), 3,58 (т, 2Н), 1,98-2,10 (м, 2Н), 1,59-1,78 (м, 2Н).

2-(3 -(Оксиран-2-ил)пропил)изоиндолин-1,3 -дион.

2-(Пент-4-енил)изоиндолин-1,3-дион (6,36 г, 0,029 ммоль) подвергали процедуре 14 для образования эпоксида, получая 2-(3-(оксираи-2-ил)пропилизоиндолин-1,3-дион (5,8 г, 0,025 ммоль, выход 86,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 232,1, найдено 232,1; '11 ЯМР (250 МГц, ДМСО-б₆) δ 1,15-1,90 (м, 4Н, Аг), 3,52 (т, 2Н, СН₂), 2,87-2,96 (м, 1Н, СН), 2,70 (т, 1Н), 2,30-2,45 (м, 1Н), 1,36-1,80 (м, 4Н).

- 59 017824

6'-(М-Фталимидо-2-гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,075 г, 0,079 ммоль) обрабатывали 2-(3-(оксиран-2-ил)пропил)изоиндолин-1,3-дионом соласно роцедуре 5, получая желаемый 6'-(Νфталимидо-2-гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(К-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1180,6, найдено 1181,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(К-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-(М-Фталимидо-2-гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(18)гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления фталимидной группы, получая 6'-(2-гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1050,6, найдено 1051,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидрокси-5-аминопентил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(2-Гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-гидрокси-5-аминопентил)-1-(4амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0024 г, 0,0037 ммоль, выход 4,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 650,4, найдено 650,8; чистота ίΧΝΩ 95,3%.

Пример 3 3. 6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

- 60 017824

6'-(Метил-транс-№Вос-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(Х-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (1,0 г, 1,05 ммоль) обрабатывали транс-Ы-Вос-3-аминоциклобутилкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В, получая желаемый 6'-(метил-транс-№Вос-3-аминоциклобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(1§)-гидроксибутирил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1132,6, найдено 1133,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Метил-транс-№Вос-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (1,05 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-(метил-транс3-аминоциклобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,110 г, 0,174 ммоль, выход 16,6%): М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 632,4, найдено 632,8; чистота ίΧΝΩ 96,1%.

Пример 34. 6'-(2-Г идроксиэтил) -1-(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин

Ν-Вос-Л -Г идроксипирролидин-3 -карбоновая кислота.

Ы-Вос-3-Пирролидон (0,010 ммоль) подвергали процедуре 15, получая желаемую Ν-Вос-.Лгидроксипирролидин-3-карбоновую кислоту.

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-2',3,3-три-Вос-сизомицина (0,075 г, 0,081 ммоль) Ν-Вос-.Лгидроксипирролидин-3-карбоновой кислотой согласно процедуре 4-способ В получали желаемый 6'РХ2-2',3,3''-три-Вос-1-(Х-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1140,6, найдено 1141,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 61 017824

2',3,3-Три-Вос-1 -(Ν-Вос-Л -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин.

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(МВос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡNΖ, получая 2',3,3''-три-Вос-1-(МВос-3-гидроксипирролидин-3илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 961,5, найдено 961,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(К-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(МВос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали трет-бутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'(2-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3''-три-Вос-1 -(Ν-Вос-.Л -гидроксипирролидин-3 илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1119,6, найдено 1119,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(К-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ8, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,008 г, 0,013 ммоль, выход 16,0%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 605,3, найдено 605,8; чистота ίΧΝΩ 92,2%.

Пример 3 5. 6'-(2-Г идрокси-4-аминобутил)-1-(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин

МВос-1-Амино-бут-3-ен.

3-Бутен-1-амин (4,93 г, 0,069 моль) подвергали процедуре 13 для присоединения защитной группы Вос, получая сырой продукт, который очищали флэш-хроматографией (силикагель/гексаны:этилацетат 030%), получая МВос-1-амино-бут-3-ен (6,47 г, 0,038 моль, выход 55,1%).

МВос-2-(Оксиран-2-ил)этилкарбамат.

МВос-1-Амино-бут-3-ен (6,47 г, 0,038 моль) подвергали процедуре 14 для образования эпоксида, получая сырой продукт, который очищали флэш-хроматографией (силикагель/гексаны:этилацетат 0-45%), получая ΝВос-2-(оксиран-2-ил)этилкарбамат (6,0 г, 0,032 моль, выход 84,2%): ¹Н ЯМР (250 МГц, ДМСО-6₆) δ 2,98-3,09 (м, 2Н), 2,83-2,92 (м, 1Н), 2,65 (т, 1Н), 2,42 (дд, 1Н), 1,44-1,66 (м, 2Н), 1,36 (с, 9Н, (СН^).

- 62 017824

цин.

2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали №Вос-2-(оксиран-2-ил)этилкарбаматом согласно процедуре 5, получая желаемый 6'-(№Вос-2гидрокси-4-аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1148,6, найдено 1149,1), который использовали на следующей стадии без дальней шей очистки.

6'-(2-Гидрокси-4-аминобутил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-(№Вос-2-Гидрокси-4-аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизоми цин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-гидрокси-4-аминобутил)-1-(3гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,0015 г, 0,0023 ммоль, выход 2,8%): М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит.

648,4, найдено 648,4; чистота ^N0 87,1%.

Пример 36. 6'-(Метилциклопропил)-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин

№Вос-3-Гидроксиазетидин-3-карбоновая кислота.

№Вос-3-Азетидинон (21,9 г, 0,128 моль) подвергали процедуре 15, получая желаемую №Вос-3гидроксиазетидин-3-карбоновую кислоту (18,7 г, 0,086 моль, выход 67,0%): М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 218,1, найдено 218,2.

6'-РNΖ-2',3,3-Три-Вос-1-(N-Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

Обработкой 6'-РNΖ-2',3,3-три-Вос-сизомицина (0,075 г, 0,081 ммоль) №Вос-3-гидроксиазетидин-3карбоновой кислотой согласно процедуре 4-способ В получали желаемый 6'-РNΖ-2',3,3''-три-Вос-1-(NВос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 63 017824

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 947,5, найдено 948,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилциклопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(Ν-Вос-Л -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин. 2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали циклопропанкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'(метилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1001,6, найдено 1101,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилциклопропил)-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-(Метилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1 -(Ν-Вос-Л-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(метилциклопропил)-1-(3гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,0041 г, 0,0068 ммоль, выход 8,4%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит.

601,3, найдено 601,6; чистота ί.ΈΝΩ 88,2%.

Пример 37. 6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин

6'-(2-1рет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизо- 64 017824 мицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(Ы-Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали трет-бутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(21рет-бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3''-три-Вос-1 -(Ы-Вос-3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1105,6, найдено 1106,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Г идроксиэтил)-1-(3-гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин. 6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3 -три-Вос-1-(Ы-Вос-3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ8, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(3гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,0039 г, 0,0066 ммоль, выход 8,1%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит.

591,3, найдено 591,4; чистота СЬЫЭ 94,7%.

Пример 38. 6'-(2-Аминоэтил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(Ы-Вос-2-Аминоэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(Ы-Вос-4-амино-2(8')-гидроксибутирил)сизомицин. 2',3,3''-Три-Вос-1-(Ы-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,075 г, 0,079 ммоль) обрабатывали Ы-Вос-2-аминоацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(Ы-Вос-2аминоэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(Ы-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1092,6, найдено 1093,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Аминоэтил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Ы-Вос-2-Аминоэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(Ы-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-аминоэтил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,0048 г, 0,0081 ммоль, выход 10,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 592,4, найдено 592,6; чистота СЬЫЭ 77,1%.

Пример 39. 6'-(Метил-( 1 -гидрокси-3 -метиламиноциклобутил))-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

- 65 017824

-Метилен-1 -метиламиноциклобутан.

К перемешиваемому раствору 3-метилен-1-цианоциклобутана (2,5 г, 0,026 моль) в ТНЕ (35 мл) при 0°С медленно добавляли 2 М ЫА1Н₄ (22 мл, 0,044 ммоль) и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды. Реакционную смесь затем гасили добавлением насыщенного водного раствора ΝΉ₄Ο (10 мл) и ТНЕ (10 мл). Органический слой отделяли и концентрировали досуха, получая остаток, который растворяли в этилацетате (100 мл). Органический слой промывали 5%-ным NаНС0з (2x20 мл), солевым раствором (20 мл), высушивали над Ν;·ι₂80.·|, фильтровали и концентрировали, получая желаемый 3 метиленам-1-метиламиноциклобутан в форме масла, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

3-Метилен-1-N-Вοс-метиламиноциклобутан.

К перемешиваемому раствору 3-метилен-1-метиламиноциклобутана (2,52 г, 0,026 моль) в 1н. №10Н (15 мл) и ТНЕ (15 мл) добавляли Вос₂0 (6,7 г, 0,030 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. ТНЕ выпаривали и водный слой экстрагировали этилацетатом (2x40 мл). Объединенные органические слои промывали 5%-ным NаНС0з (2x20 мл), солевым раствором (20 мл), высушивали над №1₂8 0₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая сырой продукт, который очищали флэшхроматографией (силикагель/гексаны:этилацетат 0-60%), получая желаемый 3-метилен-1-N-Вοсметиламиноциклобутан (1,9 г, 0,0096 моль, выход 36,9%): ¹Н ЯМР (250 МГц, ДМСО-й₆) δ 6,88 (ушир.с, 1Н), 4,72 (с, 2Н), 2,95-3,05 (м, 2Н), 2,56-2,71 (м, 2Н), 2,21-2,40 (м, 3Н), 1,20 (с, 9Н).

N-Вοс-1 -Оксаспиро [2.3] гексан-5 -илметанамин.

3-Метилен-1-N-Вοс-метиламиноциклобутан (1,9 г, 0,0096 моль) подвергали процедуре 14 для образования эпоксида, получая N-Вοс-1-оксаспиро[2.3]гексан-5-илметанамин (1,34 г, 6,27 моль, выход 65,3%): ¹Н ЯМР (250 МГц, ДМСО-й₆) δ 2,99-3,10 (м, 2Н), 2,60-2,66 (м, 2Н), 1,99-2,47 (м, 5Н), 1,40 (с, 9Н).

6'-(Метил-(1-гидрокси-N-Вοс-3-метиламиноциклобутил))-2',3,3''-три-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,075 г, 0,079 ммоль) обрабатывали N-Вοс-1-оксаспиро[2.3]гексан-5-илметанамином согласно процедуре 5, получая желаемый 6'-(метил-(1гидрокси-N-Вοс-3-метиламиноциклобутил))-2',3,3-Ίри-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1162,7, найдено 1163,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 66 017824

6'-(Метил-( 1 -гидрокси-3 -метиламиноциклобутил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-(Метил-(1-гидрокси-№Вос-3-метиламиноциклобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(метил-(1гидрокси-3-метиламиноциклобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0037 г, 0,0056 ммоль, выход 7,1%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 662,4, найдено 662,0; чистота ΟΈΝΩ 82,5%.

Пример 40. 6'-(3 - Аминопропил) -1-(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин

6'-(Ы-Фталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(Ы-Вос-3 -гидроксипирролидин-3 илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(М-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали Ν-фталимидопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(Νфталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1-(№Вос-3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1148,6, найдено 1148,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-(Ы-Фталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(Ν-Вос-Л -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления защитной фталимидной группы, получая 6'(3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1 -(Ν-Вос-Л-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

№

6'-(3 - Аминопропил) -1-(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(3-гидроксипирролидин-3илацетил)сизомицин (0,0023 г, 0,0037 ммоль, выход 4,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 618,4, найдено 618,8; чистота 93,1%.

- 67 017824

Пример 41. б'-(Метилциклопропил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин

б'-(Метилциклопропил)-2' ,3,3 -три-Вос-1 -(№Вос-3-гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(ЖВос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали циклопропанкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый б'(метилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(ЖВос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицпн (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1015,6, найдено 1015,6), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

б'-(Метилциклопропил)-1 -(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин.

б'-(Метилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(Х-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая б'-(метилциклопропил)-1-(3-гидроксипирролидин-3илацетил)сизомицин (0,0021 г, 0,0034 ммоль, выход 4,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 615,4, найдено 615,2; чистота СГЖ) 96,5%.

Пример 42. б'-(2-Г идрокси-3 -аминопропил)-1 -(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин

б'-(ХВос-2-Гидрокси-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(ХВос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(ЖВос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали №Вос-оксиран-2-илметанамином согласно процедуре 5, получая желаемый б'-(ЖВос-2-гидрокси-3аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(ЖВос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 1134,б, найдено 1134,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

б'-(2-Г идрокси-3-аминопропил)-1 -(3 -гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин. б'-(ЖВос-2-Гидрокси-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(Х-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая б'-(2-гидрокси-3-аминопропил)-1-(3гидроксипирролидин-3-илацетила)сизомицин (0,003 г, 0,0047 ммоль, выход 5,8%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит.

- б8 017824

634,4, найдено 634,4; чистота ΕΈΝΌ 95,1%.

Пример 43. 6'-(4-Аминобутил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

Ν -Ρ тос-4 -Аминобутиральде гид диэтилацеталь.

4-Аминобутиральдегид диэтилацеталь (8,0 г, 0,050 моль) защищали присоединением группы Ртос согласно процедуре 16, получая желаемый №Ртос-4-аминобутиральдегид диэтилацеталь (22,08 г, М8 т/е [М+№]⁺ рассчит. 406,2, найдено 406,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

К перемешиваемому раствору №Ртос-4-аминобутиральдегид диэтилацеталя (0,050 ммоль) в 1,4диоксане (100 мл) добавляли водный раствор ΗΟ (100 мл, 1:1 об./об., Η₂Ο: конц. ΗΟ) и развитие реакции проверяли с помощью М8. После завершения реакции органический растворитель удаляли в роторном испарителе и водный слой экстрагировали этилацетатом (2x200 мл). Объединенные органические слои промывали 5% NаΗСΟз (2x75 мл), солевым раствором (75 мл), высушивали над Να₂8Ο.₁, фильтровали и концентрировали досуха, получая желаемый №Ртос-4-аминобутиральдегид (15,35 г, 0,049 моль, 90,0% выход), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки: М8 т/е [М+№]⁺рассчит. 332,1, найдено 332,0.

6'-(№Ртос-4-Аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,075 г, 0,079 ммоль) обрабатывали №Ртос-4-аминобутиральдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(ΝРтос-4-аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 1242,7, найдено 1242,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(4-Аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

К перемешиваемому раствору 6'-(№Ртос-4-аминобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицина (0,079 ммоль) в ЭМЕ (1,5 мл) добавляли пиперидин (0,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь затем разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2x5 мл), солевым раствором (5 мл), высушивали над Να₂8Ο.₁, фильтровали и концентрировали досуха, получая 6'-(4аминобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 1020,6, найдено 1020,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 69 017824

6'-(4-Аминобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(4-Аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(4-аминобутил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,010 г, 0,016 ммоль, выход 20,2%): Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 620,4, найдено 620,8; чистота ^ΝΌ 93,4%.

Пример 44. 6'-(5-Аминопентил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,075 г, 0,079 ммоль) подвергали процедуре 8 для нозилирования, получая желаемый 6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 1134,5, найдено 1134,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Нозил-6'-(№Вос-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин 6'нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) обрабатывали №-Вос-5аминопентанолом согласно процедуре 17, получая 6'-нозил-6'-(№Вос-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (Μ8 т/е [1Μ+Ή]⁺ рассчит. 1319,6, найдено 1319,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 70 017824

6'-(N-Вос-5-Аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутнрил)сизомицин. 6'-Нозил-6'-(№Вос-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 9 для удаления нозила, получая 6'-(ΝВос-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1134,7, найдено 1135,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(5-Аминопентил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(№Вос-5-Аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(5-аминопентил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,009 г, 0,014 ммоль, выход 17,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 634,4, найдено 634,6; чистота ΓΈΝΩ 82,6%.

Пример 45. 6'-(Этил-2-( 1 -метилпиперазин-2-ил))-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

2-(4-Вос-1-Метилпиперазин-2-ил)этанол.

2-(1-Метилпиперазин-2-ил)этанол (0,5 г, 3,47 ммоль) защищали присоединением группы Вос согласно процедуре 13, получая 2-(4-Вос-1-метилпиперазин-2-ил)этанол (0,75 г, 3,08 ммоль, выход 88,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 245,2, найдено 245,1.

6'-(Этил-2-(4-Вос-1-метилпиперазин-2-ил))-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-Нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) обрабатывали 2-(4-Вос-1-метилпиперазин-2-ил)этанолом согласно процедуре 17, получая 6'-нозил-6'-(этил-2-(4Вос-1-метилпиперазин-2-ил))-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1360,7, найдено 1360,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 71 017824

6'-(Этил-2-(4-Вос-1-метилпиперазин-2-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-Нозил-6'-(этил-2-(4-Вос-1 -метилпиперазин-2-ил)-2',3,3 ''-три-Вос-1 -(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 9 для удаления нозила, получая 6'-(этил-2-(4-Вос-1метилпиперазин-2-ил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1175,7, найдено 1176,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Этил-2-(1-метилпиперазин-2-ил))-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Этил-2-(4-Вос-1-метилпиперазин-2-ил))-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(этил-2-(1метилпиперазин-2-ил))-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,010 г, 0,015 ммоль, выход 18,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 675,4, найдено 675,4; чистота ί.ΈΝΩ 93,0%.

Пример 46. 6'-(Метил-( 1 -гидрокси-3 -аминоциклобутил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

3-Метиленциклобутанкарбоновая кислота.

К перемешиваемому раствору КОН (70,0 г, 1,25 моль) в ЕЮН/Н₂О (500 мл, 1:1 об./об.) добавляли 3метиленциклобутан карбонитрил (25,0 г, 0,26 моль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч. Развитие реакции проверяли с помощью ТЬС и после завершения смесь охлаждали и подкисляли до рН 3-4 с помощью НС1. Этанол выпаривали и оставшийся водный слой экстрагировали ЕьО (200 мл). Органический слой промывали водой (2x20 мл), солевым раствором (30 мл), высушивали над №ь8О₊ фильтровали и концентрировали досуха, получая 3метиленциклобутанкарбоновую кислоту, которую использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки: ^!Н ЯМР (250 МГц, С1)СЪ) δ 10,75 (ушир.с, 1Н), 4,80 (с, 2Н), 2,85-3,26 (м, 5Н).

Ν-Вос-.Л -метиленциклобутанамин.

К перемешиваемому раствору 3-метиленциклобутанкарбоновой кислоты (1,0 г, 8,9 ммоль) в ТНЕ (90 мл) добавляли NаN₃ (2,0 г, 31,1 ммоль), затем тетрабутиламмоний бромид (0,48 г, 1,5 ммоль) и Ζη(ϋΤί)2 (0,1 г, 0,3 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 40°С. Затем сразу добавляли Вос₂О (2,1 г, 9,8 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 45°С в течение ночи. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°С и гасили 10%-ным водным раствором NаNО₂ (18 0 мл). ТНЕ выпаривали, и водный слой экстрагировали ЕЮАс (180 мл). Органический слой промывали 5%-ным водным раствором NаНСО₃ (2x20 мл), солевым раствором (30 мл), высушивали над №ь8О₊ фильтровали и концентрировали досуха, полу

- 72 017824 чая сырой продукт, который очищали флэш-хроматографией (силикагель/гексаны:этилацетат: 0-90%), получая желаемый №Вос-3-метиленциклобутанамин (0,57 г, 3,1 ммоль, выход 34,9%): *Н ЯМР (250 МГц, СБС13) δ 4,83 (с, 2Н), 4,79 (ушир.с, 1Н), 4,05-4,23 (м, 1Н), 2,92-3,11 (м, 2Н), 2,50-2,65 (м, 2Н), 1,44 (с, 9Н).

№Вос-1-Оксаспиро[2.3]гексан-5-амин.

№Вос-3-Метиленциклобутанамин (1,65 г, 9,0 ммоль) подвергали процедуре 14 для образования эпоксида, получая №Вос-1-оксаспиро[2.3]гексан-5-амин (1,46 г, 7,33 ммоль, выход 81,5%): *Н ЯМР (250 МГц, СБС13) δ 4,79 (ушир.с, 1Н), 4,13-4,31 (м, 1Н), 2,66-2,83 (м, 4 Н), 2,31-2,47 (м, 2Н), 1,45 (с, 9Н).

6'-(Метил-(1-гидрокси-М-Вос-3-аминоциклобутил))-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) обрабатывали ΝВос-1-оксаспиро[2.3] гексан-5-амином согласно процедуре 5, получая 6'-(метил-(1-гидрокси-Ы-Вос-3аминоциклобутил))-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 1148,6, найдено 1148,6), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-(1-гидрокси-3-аминоциклобутил))-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-(Метил-(1-гидрокси-№-Вос-3-аминоциклобу1ил))-2',3,3-три-Вос-1-(№-ВосЛ-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(метил-(1-гидрокси-3аминоциклобутил)-1-(4-амино-2(.8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0098 г, 0,015 ммоль, выход 18,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 648,4, найдено 648,4; чистота ^Νϋ 82,0%.

Пример 47. 6'-(Метил-(1-гидрокси-3-аминоциклобутил))-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-(Метил-(1-гидрокси-№Вос-3-аминоциклобутил))-2',3,3-три-Вос-1-Ш-Вос-3-гидроксиазетидин-3илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали

- 73 017824

Ы-Вос-1-оксаспиро[2.3]гексан-5-амином согласно процедуре 5, получая 6'-(метил-(1-гидрокси-Ы-Вос-3аминоциклобутил))-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1146,6, найдено 1147,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-( 1 -гидрокси-3 -аминоциклобутил) -1-(3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин. 6'-(Метил-(1-гидрокси-М-Вос-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-3-гидроксиазетидин-3илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(метил-(1гидрокси-3-аминоциклобутил)-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,0089 г, 0,014 ммоль, выход 17,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 646,4, найдено 646,6; чистота ίΧΝΩ 95,7%.

Пример 48. 6'-(3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(М-Фталимидо-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизо мицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) обрабатывали Νфталимидопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(Ы-фталимидо-3аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1136,6, найдено 1136,7), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-(М-Фталимидо-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления защитной фталимидной группы, получая 6'-(3аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1006,6, найдено 1007,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 74 017824

6'-(3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,010 г, 0,016 ммоль, выход 20,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит.

606,4, найдено 606,4; чистота ί.ΈΝΩ 95,8%.

Пример 49. 6'-(Метилпирролидин-2-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Метил-Н-Вос-пирролидин-2-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) обрабатывали ΝВос-ЭЬ-пролиналем согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(метил-Н-Вос-пирролидин-2ил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1132,6, найдено 1133,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилпирролидин-2-ил)-1 -(4-амино-2(18)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(Метил-N-Вос-пирролидин-2-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'(метилпирролидин-2-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,010 г, 0,016 ммоль, выход 20,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 632,4, найдено 632,8; чистота ί.Έ·ΝΩ 90,9%.

Пример 50. 6'-(2(8)-Гидрокси-3-пропаноил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-(2(§)-Гидрокси-3-метилпропаиоат)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизо мицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) обрабатывали метил-2-(Я)-глицидатом согласно процедуре 5, получая желаемый 6'-(2(8)-гидрокси-3-метилпропаноат)2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1051,6, найдено 1052,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 75 017824

6'-(2(8)-Гидрокси-3-пропаноат)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-(2(8)-Гидрокси-3-метилпропаноат)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,079 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и гидролиза сложного эфира, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2(8)гидрокси-3-пропаноат)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0028 г, 0,0044 ммоль, выход 5,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 637,3, найдено 637,6; чистота ίΤΝΩ 89,8%.

Пример 51. 6'-(2,2-Диметил-3-аминопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

N-Вοс-2,2-Диметил-3-аминопропиональдегид.

N-Вοс-2,2-Диметилпропанол (0,415 г, 2,04 ммоль) подвергали процедуре 18, получая N-Вοс-2,2диметил-3-аминопропиональдегид (0,39 г, 1,94 ммоль, выход 95,1%): ¹Н ЯМР (250 МГц, СЭС1₃₁) δ 9,42 (с, 1Н), 4,80 (ушир.с, 1Н), 3,11 (д, 2Н), 1,39 (с, 9Н), 1,06 (с, 6Н).

6'-(N-Вοс-2,2-Диметил-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вοс-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали N-Вοс-2,2-диметил-3-аминопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6-(N-Вοс-2,2-диметил-3-аминопропил)-2',3,3''-три-Вοс-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2,2-Диметил-3-аминопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(N-Вοс-2,2-Диметил-3 -аминопропил)-2',3,3 -Ίри-Вοс-1-(N-Вοс-3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2,2-диметил-3-аминопропил)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,0057 г, 0,0092 ммоль, выход 11,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 620,4, найдено 620,8; чистота С1ΛΙ) 97,4%.

- 76 017824

Пример 52. 6'-(3-Амино-3-циклопропил-пропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

МВос-3 -Амино-3 -циклопропилпропиональдегид.

МВос-3-Аминопропанол (0,130 г, 0,60 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего МВос-3-амино-3-циклопропилпропиональдегида, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(МВос-3-Амино-3-циклопропил-пропил)-2',3,3-три-Вос-1-(К-Вос-3-амино-2(18)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали МВос-3-амино-3-циклопропилпропиональдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(МВос-3-амино-3-циклопропил-пропил)-2',3,3-три-Вос-1-(МВос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

'он

йн

6'-(3-Амино-3-циклопропил-пропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(МВос-3-амино-3-циклопропил-пропил)-2',3,3-три-Вос-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(3-амино-3циклопропил-пропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0067 г, 0,010 ммоль, выход 12,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 632,4, найдено 632,8; чистота ί.Έ·ΝΩ 96,7%.

Пример 53. 6'-(Метил-4(8)-гидроксипирролидин-2(В)-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

4(8)-трет-Бутилдиметилсилилокси-Ы-Вос-пирролидин-2(В)-карбоксальдегид.

4(8)-трет-Бутилдиметилсилилокси-Ы-Вос-пирролидин-2(В)-метанол (0,50 г, 1,50 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего 4(8)-трет-бутилдиметилсилилокси-Ы-Воспирролидин-2(В)-карбоксальдегида, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очист ки.

- 77 017824

6'-(Метил-№Вос-4(3)-трет-бутилдиметилсилилокси-2(Я)-пирролидин-2(Я)-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(№ Вос-3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали 4(3)-трет-бутилдиметилсилилокси-№Вос-пирролидин-2(Я)-карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(метил-№Вос-4(3)-трет-бутилдиметилсилилокси-пирролидин2(Я)-ил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1248,7, найдено 1248,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-4(3)-гидроксипирролидин-2(Я)-ил)-1-(3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(Метил-№Вос-4(3)-трет-бутилдиметилсилилоксипирролидин-2(Я)-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ3, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1колонка А, получая 6'-(метил-4(3)-гидроксипирролидин-2(Я)-ил-метил)-1-(3-амино-2(3)гидроксипропионил)сизомицин (0,0022 г, 0,0035 ммоль, выход 4,4%): М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 634,4, найдено 634,6; чистота ΟΈΝΩ 98,0%.

Пример 54. 6'-(3 -Пропанол)-1 -(3 -амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин

3-трет-Бутилдиметилсилилоксипропаналь.

3-трет-Бутилдиметилсилилоксипропанол (0,50 г, 2,62 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего 3-трет-бутилдиметилсилилокси-пропаналя, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-трет-Бутилдиметилсилилокси-пропанол)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали 3-трет-бутилдиметилсилилокси-пропаналем согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(3-трет-бутилдиметилсилилокси-пропанол)-2',3,3''-три-Вос-Г(№Вос-3-амино-2(3)-гидроксипропионил)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1107,6, найдено 1107,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 78 017824

6'-(3-Пропанол)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(3-трет-Бутилдиметилсилилоксипропанол)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ8, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(3-пропанол)1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,011 г, 0,018 ммоль, выход 22,5%): М§ т/е [М+Н]⁺рассчит. 593,3, найдено 593,8; чистота СБМЭ 98,4%.

Пример 55. 6'-(2-Метил-2-аминопропил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

-Метил-Ν-Вос-2 -аминопропаналь.

2-Метил-М-Вос-2-аминопропанол (0,83 г, 4,38 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего 2-метил-Ы-Вос-2-аминопропаналя (0,706 г, 3,77 ммоль, выход 86,1%): ¹Н ЯМР (250

МГц, СЭС1₃) δ 9,40 (с, 1Н), 1,57 (с, 1Н), 1,41 (с, 9Н), 1,30 (с, 6Н).

6'-(2-Метил-Н-Вос-2-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-3-амино-2(§)гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(М-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали 2-метил-Н-Вос-2-аминопропаналем согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(2метил-Н-Вос-2-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1106,6, найдено 1107,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

'он

,ЫН

6'-(2-Метил-2-аминопропил)-1-(3-амино-2(8')-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(2-Метил-Н-Вос-2-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(К-Вос-3-амино-2(§)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2-метил-2-аминопропил)-1-(3-амино-2(§)гидроксипропионил)сизомицин (0,010 г, 0,016 ммоль, выход 20,0%): М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 606,4, найдено 606,4; чистота СБ-ΝΩ 99,2%.

- 79 017824

Пример 56. 6'-(Метил-1-аминоциклобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

№Вос-1-Аминоциклобутанкарбоновая кислота.

Этиловый эфир 1-аминоциклобутанкарбоновой кислоты (1,0 г, 6,28 ммоль) растворяли в 1н. НС1 (10 мл) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь затем концентрировали досуха, получая сырой продукт, который подвергали процедуре 13 для присоединения защитной группы Вос, получая желаемую №Вос-1-аминоциклобутанкарбоновую кислоту.

№Вос-1 - Аминоцикло бутилметанол.

№Вос-1-Аминоциклобутанкарбоновую кислоту (6,28 ммоль) подвергали процедуре 19 для получения соответствующего №Вос-1-аминоциклобутилметанола.

№Вос-1-Аминоциклобутан карбоксальдегид.

№Вос-1-Аминоциклобутилметанол (0,25 г, 1,24 ммоль) подвергали процедуре 18, получая соответствующий №Вос-1-аминоциклобутан карбоксальдегид (0,24 г, 1,20 ммоль, выход 96,8%): ¹Н ЯМР (250 МГц, δ 9,0 (с, 1Н), 4,91 (ушир.с, 1Н), 3,74 (ушир.с, 2Н), 1,71-2,20 (м, 4Н), 1,42 (с, 9Н).

6'-(№Вос-Метил-1-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизо мицин.

2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали Ν-Вос-Ьаминоциклобутан карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(№Вос-метил-1 -аминоциклобутил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(№Вос-3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1118,6, найдено 1118,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

ЫН

6'-(Метил-1-аминоциклобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(№Вос-Метил-1-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино 2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой про

- 80 017824 дукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(метил-1аминоциклобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,002 г, 0,0032 ммоль, выход 4,0%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 618,4, найдено 619,0; чистота СЬЫЭ 69,4%.

Пример 57. 6'-(3 - Аминопропил) -1-(3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин

6'-(Ы-Вос-3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(Ы-Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(Ы-Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,49 г, 0,46 ммоль) обрабатывали Ы-Вос-3-аминопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ В, получая желаемый 6'-(Ы-Вос-3аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(Ы-Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1104,6, найдено 1104,6), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

'КН

6'-(3-Аминопропил)-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-(Ы-Вос-3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(Ы-Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,46 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(3гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 604,4, найдено 604,2; чистота СЬЫЭ 92,4%.

Пример 58. 6'-(3 - Аминопропил) -1-(1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин

Ы-Вос-3-Аминоциклобутанон.

К энергично перемешиваемому раствору Ы-Вос-3-метиленциклобутанамина (9,8 г, 53,5 ммоль) в ОСМ (160 мл) и Н₂О (160 мл) добавляли К₂СО₃ (3 г, 21,7 ммоль), затем ЫаС1О₄ (35 г, 163,5 ммоль), тетрабутиламмоний хлорид (0,2 г, 0,72 ммоль) и КиС1₃ (0,6 г, 7,6 ммоль). В течение реакции органический раствор приобретал темно-коричневый цвет, катализатор ситановился черным, в то время как верхний водный слой становился белым. Реакцию проверяли с помощью ТЬС и после ее завершения в реакционную смесь фильтровали через слой целита. Фильтраты переносили на делительную воронку и водный слой экстрагировали ОСМ (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали 5%-ным ЫаНСО₃(2x30 мл), солевым раствором (30 мл), высушивали над Ыа₂8О₄, фильтровали и упаривали досуха, получая сырой продукт, который очищали флэш-хроматографией (силикагель/гексаны: этилацетат 0-60%), получая желаемый Ы-Вос-3-аминоциклобутанон (7,13 г, 38,53 ммоль, 72%-ный выход): ЯМР (250 МГц, δ 4,88 (ушир.с, 1Н), 4,13-4,29 (м, 1Н), 3,23-3,41 (м, 2Н), 2,9-3,05 (м, 2Н), 1,39 (с, 9Н).

Ы-Вос-1-Гидрокси-3-аминоциклобутилкарбоновая кислота.

Ы-Вос-3-Аминоциклобутанон (7,13 г, 38,53 ммоль) подвергали процедуре 15, получая желаемую ΝВос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилкарбоновую кислоту (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 232,1, найдено 232,2).

- 81 017824

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-2',3,3-три-Вос-сизомицина (0,87 ммоль) Ы-Вос-1-гидрокси-3аминоциклобутилкарбоновой кислотой согласно процедуре 4-способ А получали желаемый 6'-₽ΝΖ2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3,3-Три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин.

6'-РМ2-2',3,3-Три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,87 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΓΝΖ, получая 2',3,3''-три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3аминоциклобутилацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 961,5, найдено 961,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Я-Вос-3 -Аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(Ν-Вос-1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,87 ммоль) обрабатывали Ы-Вос-3-аминопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ В, получая желаемый 6'-(Ы-Вос-3аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1118,6, найдено 1118,6), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3 - Аминопропил) -1-(1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин.

6'-(Ы-Вос-3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,87 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(1гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 618,4, найдено 618,2; чистота СЫЧИ 84,2%.

Пример 59. 6'-(Метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

- 82 017824

6'-(№Вос-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (1,0 г, 1,07 ммоль) обрабатывали №Вос-3-транс-аминоциклобутилкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В, получая желаемый 6'-(№Вос-метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1118,6, найдено 1118,5), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(N-Вос-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гндроксипропионил)сизомицнн (1,07 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-(метил-транс-3аминоциклобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,033 г, 0,053 ммоль, выход 4,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 618,4, найдено 618,3, [М+№]⁺ 640,3; чистота СЬЫЭ 96,5%.

Пример 60. 6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин

6'-(№Вос-метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (1,0 г, 1,042 ммоль) обрабатывали №Вос-3-транс-аминоциклобутилкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В, получая желаемый 6'-(№Вос-метилтранс-3 -аминоциклобутил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(Ν-Вос-1 -гидрокси-3 аминоциклобутилацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1144,6, найдено 1144,5), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 83 017824

• ΝΗ

6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин. 6'-(N-Вοс-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (1,042 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'(метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,033 г, 0,051 ммоль, выход 4,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 644,4, найдено 644,3; чистота ΟΕΝΏ 94,5%.

Пример 61. 6'-Метил-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин

6'-Нозил-2',3,3 -три-Вос-1 -^-^^3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вοс-1-(N-Вοс-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (1,0 г, 1,06 ммоль) подвергали процедуре 8 для нозилирования, получая 6'-нозил-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-3-гидроксиазетидин-3илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1132,5, найдено 1132,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метил-6'-нозил-2',3,3 -три-Вос-1 -^-^^3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин.

6'-Нозил-2',3,3''-три-Вοс-1-(N-Вοс-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (1,06 ммоль) обрабатывали МеI согласно процедуре 11, получая 6'-метил-6'-нозил-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вос-3гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1146,5, найдено 1147,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метил-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-Метил-6'-нозил-2',3,3 -три-Вос-1 -^-^^3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин (1,06 ммоль) подвергали процедуре 9 для удаления защитной нозильной группы, получая 6'-метил-2',3,3-три

- 84 017824

Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 961,5, найдено 961,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метил-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

6'-Метил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (1,06 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-метил-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,247 г, 0,441 ммоль, выход 41,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 561,3, найдено 561,2; чистота ί.ΈΝΩ 96,7%.

Пример 62. 6'-(2-Г идроксиэтил) -1-(1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,65 г, 0,67 ммоль) обрабатывали трет-бутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(2-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3аминоциклобутилацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1119,6, найдено 1119,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин. 6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,67 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ8, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-(2гидроксиэтил)-1-(1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,067 г, 0,111 ммоль, выход 16,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 605,3, найдено 605,6; чистота ί.ΈΝΩ 97,5%.

Пример 63. 6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин

6'-(№Вос-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-1-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (1,0 г, 1,06 ммоль) обрабатывали №Вос-3-транс-аминоциклобутилкарбоксальдегид согласно процедуре 1-способ В, получая желае- 85 017824 мый 6'-(№Вос-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 1130,6, найдено 1130,5), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

,нн

6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин. 6'-(№Вос-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (1,06 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-(метил-транс3-аминоциклобутил)-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин (0,018 г, 0,029 ммоль, выход 2,7%): М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 630,4, найдено 630,3; чистота СЕ-ΝΌ 75,6%.

Пример 64. 6'-Метил-1-(1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин

6'-Нозил-2',3,3 -три-Вос-1 -(№Вос-1-гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (1,0 г, 1,04 ммоль) подвергали процедуре 8 для нозилирования, получая 6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3аминоциклобутилацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 1146,5, найдено 1147,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метил-6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин.

6'-Нозил-2',3,3-три-Вос-1 -(№Вос-1-гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин (1,04 ммоль) обрабатывали Ме1 согласно процедуре 11, получая 6'-метил-6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 1160,5, найдено 1161,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин.

6'-Метил-6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1 -(№Вос-1-гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин (1,04 ммоль) подвергали процедуре 9 для удаления нозильной защитной группы, получая 6'-метил-2',3,3-триВос-1-(№Вос-1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 975,5, найдено 975,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 86 017824

ΝΗ б'-Метил-1-(1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин.

б'-Метил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-1 -гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин (1,04 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая б'-метил-1-(1-гидрокси-3аминоциклобутилацетил)сизомицин (0,098 г, 0,170 ммоль, выход 1б,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 575,3, найдено 575,3; чистота ίΧΝΩ 98,5%.

Пример нил)сизомицин.

65. б'-(Метил-4(8)-аминопирролидин-2(8)-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропио-

Р№Ди-Вос-4(8)-амино-2(8)-метанолпирролидин.

Р№Ди-Вос-4(8)-аминопирролидин-2(8)-карбоновую кислоту (1,03 г, 3,12 ммоль) подвергали процедуре 19, получая соответствующий Р№ди-Вос-4(8)-амино-2(8)-метанолпирролидин (0,605 г, 1,91 ммоль, выход 61,2%), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Р№Ди-Вос-4(8)-аминопирролидин-2(8)-карбальдегид.

Р№Ди-Вос-4(8)-амино-2(8)-метанолпирролидин (0,48б г, 1,53 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего Р№ди-Вос-4(8)-аминопирролидин-2(8)-карбальдегида, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

б'-(Метил-Р№ди-Вос-4(8)-аминопирролидин-2(8)-ил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали Р№ди-Вос-4(8)-аминопирролидин-2(8)-карбальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый б'-(метил-Р№ди-Вос-4(8)-аминопирролидин-2(8)-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1233,7, найдено 1234,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 87 017824

6'-(Метил-4(8)-аминопирролидин-2(8)-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(Метил-^№ди-Вос-4(8)-аминопирролидин-2(§)-ил)-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(§)гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(метил4(8)-аминопирролидин-2(8)-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0006 г, 0,0009 ммоль, выход 1,1%): Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 633,4, найдено 633,4; чистота ΟΕΝΏ 81,7%.

Пример 66. 6'-(Метил-1 -аминометилциклопропил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

№Вос-1-Аминометилциклопропилметанол.

№Вос-1-Аминометилциклопропанкарбоновую кислоту (1,0 г, 4,64 ммоль) подвергали процедуре 19, получая соответствующий №Вос-1-аминометилциклопропилметанол (0,99 г, Μ8 т/е [Μ+Ή]⁺ рассчит. 202,1, найдено 202,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

№Вос-1-Аминометилциклопропан карбоксальдегид.

№Вос-1-Аминометилциклопропилметанол (0,87 г, 4,32 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего №Вос-1-аминометилциклопропан карбоксальдегида, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-№Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали №Вос-1-аминометилциклопропан карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(метил-Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(18)гидроксипропионил)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+Ή]⁺ рассчит. 1118,6, найдено 1118,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-1-аминометилциклопропил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(Метил-№Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(метил-1

- 88 017824 аминометилциклопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0033 г, 0,0053 ммоль, выход 6,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 618,4, найдено 618,4; чистота ΟΕΝΩ 94,5%.

Пример 67. 6'-(Метил-1-аминоциклопропил)-1-(3-амино-2(18)-гидроксипропионил)сизомицин

Ν-ВосЛ - Аминоцикло пропилметано л.

№Вос-1-Аминоциклопропанкарбоновую кислоту (0,25 г, 1,24 ммоль) подвергали процедуре 19, получая соответствующий №Вос-1-аминоциклопропилметанол (0,051 г, 0,27 ммоль, выход 21,8%), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

№Вос-1-Аминоциклопропан карбоксальдегид.

№Вос-1-Аминоциклопропилметанол (0,051 г, 0,27 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего Ν-Вос-1-аминоциклопропан карбоксальдегида, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

нил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали №Вос-1-амино-циклопропан карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(метил-№Вос-1-аминоциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1104,6, найдено 1105,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-1-аминоциклопропил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(Метил-№Вос-1-аминоциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(метил-1аминоциклопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0042 г, 0,0069 ммоль, выход 8,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 604,4, найдено 604,6; чистота ΟΕΝΩ 95,4%.

Пример 68. 6'-(2-Гидрокси-4-аминобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

- 89 017824

6'-(К-Вос-2-Гидрокси-4-аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(К-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизо мицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали МВос-2-(оксиран-2-ил)этилкарбаматом согласно процедуре 5, получая желаемый 6'-(МВос-2гидрокси-4-аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(МВос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1122,6, найдено 1122,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидрокси-4-аминобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(МВос-2-Гидрокси-4-аминобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(МВос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(2гидрокси-4-аминобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0024 г, 0,0038 ммоль, выход 4,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 622,4, найдено 622,6; чистота ί.Έ·ΝΩ 93,2%.

Пример 69. 6'-(Метил-1(В)-амино-2(8)-гидроксициклопент-4(8)-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

МВос-1(В)-Амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилоксициклопентан-4(8)-карбоновая кислота.

К перемешиваемому раствору метилового эфира МВос-1(К)-амино-2(8)-гидроксициклопентан4(8)-карбоновой кислоты (0,622 г, 2,40 ммоль) в ЭСМ (1,9 мл) добавляли имидазол (0,164 г, 2,41 ммоль), ОМАР (0,047 г, 0,35 ммоль) и ТВ8С1 (0,363 г, 2,40 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 18 ч с последующим нагреванием при 40°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и гасили Н₂О (3 мл). Органический слой отделяли и концентрировали досуха, получая остаток, который растворяли в изопропаноле (6 мл) и 1 М М1ОН (2,9 мл), и реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и медленно подкисляли до рН 3 с помощью 1 М НС1 (3 мл). После добавления хлороформа (18 мл) органический слой отделяли, высушивали над №₂8О₄ и концентрировали досуха, получая желаемую кислоту (0,75 г, 2,09 ммоль, выход 87,1%).

МВос-1(В)-Амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилокси-4(8)-гидроксиметилциклопентан.

МВос-1(В)-Амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилоксициклопентан-4(8)-карбоновую кислоту (0,53 г, 1,47 ммоль) подвергали процедуре 19 для получения соответствующего МВос-1(В)-амино-2(8)-третбутилдиметилсилилокси-4(8)-гидроксиметилциклопентана (0,44 г, 1,27 ммоль, выход 86,4%): ¹Н ЯМР (250 МГц, СОС1₃) δ 4,69-4,79 (м, 1Н), 4,08-4,13 (м, 1Н), 3,88 (ушир.с, 1Н), 3,52-3,61 (м, 2Н), 2,16-2,30 (м, 2Н), 1,96-2,14 (м, 2Н), 1,48-1,53 (м, 2Н), 1,47 (с, 9Н), 0,91 (с, 9Н), 0,09 (с, 6Н).

МВос-1(В)-Амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилоксициклопентан-4(8)-карбоксальдегид.

- 90 017824

М-Вос-1(К)-Амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилокси-4(8)-гидроксиметилциклопентан (0,44 г, 1,27 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего №Вос-1(К)-амино-2(8)-третбутилдиметилсилилоксициклопентан-4(8)-карбоксальдегида (0,42 г, 1,22 ммоль, выход 96,1%).

6'-(Метил-Н-Вос-1(К)-амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилоксициклопент-4(8)-ил)-2',3,3-три-Вос1-(М-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(К-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали М-Вос-1(Я)-амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилоксициклопентан-4(8)-карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(метил-№Вос-1(К)-амино-2(8)-третбутилдиметилсилилоксициклопент-4(8)-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(М-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1262,7, найдено 1263,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-1(К)-амино-2(8)-гидроксициклопент-4(8)-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизо мицин.

6'-(Метил-Н-Вос-1(К)-амино-2(8)-трет-бутилдиметилсилилоксициклопент-4(8)-ил)-2',3,3-три-Вос1-(М-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ8, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 3, получая 6'-(метил-1(К)-амино-2(8)-гидроксициклопент-4(8)-ил)-1-(3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (0,0039 г, 0,0060 ммоль, выход 7,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 648,4, найдено 648,4; чистота ΕΈΝΩ 91,6%.

Пример 70. 6'-(Этил-2-(3-гидроксиазетидин-3-ил))-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

трет-Бутил-2-(Ы-Вос-3 -гидроксиазетидин-3 -ил)ацетат.

К перемешиваемому раствору Ы-Вос-3-азетидинона (0,45 г, 2,64 ммоль) в ТНЕ (5 мл) медленно добавлялся раствор 0,5 М хлорида 2-трет-бутокси-2-оксоэтилцинка в ЕьО (10 мл, 5,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч. Затем реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором ЫН₄С1 (10 мл) и водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенные органические слои промывали 5%-ным водным раствором №1НСО₃ (2x10 мл), солевым раствором (15 мл), высушивали над №ь8О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая трет-бутил-2-(Ы-Вос-3гидроксиазетидин-3-ил)ацетат (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 288,2, найдено 287,7).

2-(Ы-Вос-3 -Г идроксиазетидин-3 -ил)уксусная кислота.

К перемешиваемому раствору трет-бутил-2-(Ы-Вос-3-гидроксиазетидин-3-ил)ацетата (0,86 г, 2,99

- 91 017824 ммоль) в диоксане (18 мл) добавляли 3 М НС1 (5 мл) и смесь нагревали при 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до 0°С и подщелачивали с помощью 2 М №1ОН (8 мл) с последующим добавлением Вос2О (1,0 г, 4,6 ммоль). Реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды в течение 2 ч и затем концентрировали до половины ее полного объема на роторном испарителе. Затем добавляли изопропанол (3 мл) и хлороформ (12 мл) и смесь охлаждали до 0°С и медленно подкисляли до рН 3 с помощью 1 М НС1. Органический слой затем отделяли, высушивали над №ь8О₃ и концентрировали досуха, получая 2-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-ил)уксусную кислоту (0,65 г, 2,81 ммоль, выход 94,0%).

№Вос-3 -(2-Г идроксиэтил)азетидин-3 -ол.

2-(№Вос-3-Гидроксиазетидин-3-ил)уксусную кислоту (0,44 г, 1,90 ммоль) подвергали процедуре 19 для получения соответствующего №Вос-3-(2-гидроксиэтил)азетидин-3-ола (0,29 г, 1,33 ммоль, выход 70,0%).

2-(№Вос-3 -Г идроксиазетидин-3 -ил)ацетальдегид.

№Вос-3-(2-Гидроксиэтил)азетидин-3-ол (0,29 г, 1,33 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до соответствующего 2-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-ил)ацетальдегида, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Этил-2-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-ил))-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали 2-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-ил)ацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(этил-2-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-ил))-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(18)гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1134,6, найдено 1135,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Этил-2-(3 -гидроксиазетидин-3 -ил))-1 -(3 -амино-2(18)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(Этил-2-(№Вос-3-гидроксиазетидин-3-ил))-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(этил-2(3-гидроксиазетидин-3-ил))-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0098 г, 0,015 ммоль, выход 18,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 634,4, найдено 634,8; чистота ί.Έ·Νϋ 92,4%.

- 92 017824

Пример 71. 6'-Метилциклопропил-1 -(2-(азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин

№Вос-3 -Г идроксиметилазетидин.

№Вос-Азетидин-3-карбоновую кислоту (1,94 г, 9,64 ммоль) подвергали процедуре 19 для получения соответствующего №Вос-3-гидроксиметилазетидина, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

№Вос-Азетидин-3 -карбоксальдегид.

№Вос-3-Гидроксиметилазетидин (9,64 ммоль) подвергали процедуре 18 для окисления до желаемого №Вос-азетидин-3-карбоксальдегида, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2-(№Вос-Азетидин-3 -ил)-2-гидроксиуксусная кислота.

№Вос-Азетидин-3-карбоксальдегид (1,60 г, 8,64 ммоль) подвергали процедуре 15, получая желаемую 2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиуксусную кислоту (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 232,1, найдено 231,8).

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-2',3,3''-три-Вос-сизомицина (0,075 г, 0,081 ммоль) 2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2гидроксиуксусной кислотой согласно процедуре 4-способ В получали желаемый 6'-РNΖ-2',3,3-три-Вос1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1140,5, найдено 1140,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2',3,3-Три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-Р№-2',3,3-Три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РЖ, получая 2',3,3''-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2- 93 017824 гидроксиацетил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 961,5, найдено 962,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метилциклопропил-2',3,3 -три-Вос-1 -(Ы-Вос-2-азетидин-3 -ил-2-гидроксиацетил)сизомицин. 2',3,3''-Три-Вос-1-(2-(Ы-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали циклопропанкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'метилциклопропил-2',3,3-три-Вос-1-(2-(М-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1015,6, найдено 1015,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метилциклопропил-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-Метилциклопропил-2',3,3-три-Вос-1-(2-(М-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-метилциклопропил-1-(2(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0033 г, 0,0054 ммоль, выход 6,7%): М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 615,4, найдено 615,5; чистота ΓΈΝΩ 77,4%.

Пример 72. 6'-(Метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-(М-Вос-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(М-Вос-азетидин-3-ил)-2гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(2-(Ы-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали Ы-Вос-транс-3-аминоциклобутилкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ В, получая желаемый 6'-(М-Вос-метил-1ранс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(М-Вос-азетидин-3-ил)-2гидроксиацетил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1144,6, найдено 1145,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 94 017824

6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(2-(азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(N-Вοс-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вοс-1-(2-(N-Вοс-азетидин-3-ил)-2гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'(метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0053 г, 0,0082 ммоль, выход 10,1%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 644,4, найдено 644,4; чистота ίΤΝΩ 86,0%.

Пример 73. 6'-(Метилазетидин-3-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

6'-(Метил-N-Вοс-азетидин-3-ил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизо мицин.

2',3,3''-Три-Вοс-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,9 г, 0,96 ммоль) обрабатывали N-Вοс-азетидин-3-карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'(метил-N-Вοс-азетидин-3-ил)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1104,6, найдено 1105,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метилазетидин-3-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(Метил-N-Вοс-азетидин-3-ил)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,96 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 6'-(метилазетидин-3-ил)1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0082 г, 0,014 ммоль, выход 1,46%): М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 604,4, найдено 604,6; чистота ίΤΝΩ 86,3%.

- 95 017824

Пример 74.

тил)сизомицин.

6'-(Метил-1-аминометилциклопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиаце-

6'-(Метил-М-Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали №Вос-1-аминометилциклопропан карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(метил-М-Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1144,6, найдено 1144,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-1-аминометилциклопропил)-1 -(2-(азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин. 6'-(Метил-М-Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(метил-1аминометилциклопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0005 г, 0,0008 ммоль, выход 0,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 644,4, найдено 644,6; чистота ΓΈΝΩ 79,8%.

Пример 75. 6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали трет-бутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'(2-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3''-три-Вос-1 -(2-(№Вос-азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1119,6, найдено 1119,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 96 017824

6'-(2-Гидроксиэтил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(Ы-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ8, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2гидроксиэтил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0037 г, 0,0061 ммоль, выход 7,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 605,3, найдено 605,7; чистота СЬЫЭ 82,4%.

Пример 76. 6'-(3 - Аминопропил) -1 -(2-(азетидин-3 -ил)-2 -гидроксиацетил)сизомицин

6'-(Ы-Фталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(2-(Ы-Вос-азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)си зомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(2-(Ы-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали Ν-фталимидопропиональдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(Νфталимидо-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(Ы-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1148,6, найдено 1148,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(N-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(№Фталимидо-3 -аминопропил)-2',3,3 -три-Вос-1 -(2-(N-Вос-азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления защитной фталимидной группы, получая 6'(3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(N-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1018,6, найдено 1018,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 97 017824

6'-(3-Аминопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(3-Аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(N-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(3-аминопропил)-1-(2-(азетидин-3ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,003 г, 0,0048 ммоль, выход 5,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 618,4, найдено 618,8; чистота ί.Έ·ΝΩ 87,5%.

Пример 77. 6'-(2-Гидрокси-4-аминобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-(И-Вос-2-Г идрокси-4-аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(N-Вос-азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(2-(N-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали N-Вос-2-(оксиран-2-ил)этилкарбаматом согласно процедуре 5, получая желаемый 6'-Щ-Вос-2гидрокси-4-аминобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(N-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1148,6, найдено 1148,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидрокси-4-аминобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(N-Вос-2-Гидрокси-4-аминобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(2-(N-Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2-гидрокси4-аминобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0013 г, 0,002 ммоль, выход 2,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 648,4, найдено 648,4; чистота ί.Έ·ΝΩ 80,8%.

Пример 78. 6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин

6'-(М-Вос-Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-2',3,3 -три-Вос-1-(М-Вос-3 -гидроксипирролидин-3 илацетил)сизомицин.

2',3,3-Три-Вос-1-(М-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатыва- 98 017824 ли N-Вос-транс-3-аминоциклобутилкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(N-Вос-метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3''-три-Вос-1-(N-Вос-3-гидроксипирролидин-3илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1144,6, найдено 1145,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

. нн

6'-(Метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин. 6'-(N-Вос-Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(метилтранс-3-аминоциклобутил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,0025 г, 0,0039 ммоль, выход 4,8%). М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 644,4, найдено 644,4; ΟΕΝΏ чистота 93,9%.

Пример 79. 6'-(Метил-1-аминометилциклопропил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин

6'-(Метил-N-Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-3-гидроксипирролидин-3илацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(N-Вос-3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали М-Вос-1-аминометилциклопропан карбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая желаемый 6'-(метил-N-Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-3-гидроксипирролидин-3илацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1144,6, найдено 1145,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-1-аминометилциклопропил)-1 -(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин. 6'-(Метил-N-Вос-1-аминометилциклопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вос-3-гидроксипирролидин-3илацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(метил-1аминометилциклопропил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин (0,0018 г, 0,0028 ммоль, выход 3,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 644,4, найдено 644,6; чистота Ск-ΝΟ 80,2%.

Пример 80. 6'-(4-Гидрокси-5-аминопентил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

- 99 017824

6'-Нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) подвергали процедуре 8 для нозилирования, получая 6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1120,5, найдено 1120,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(4,5-Эпоксипентил)-6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизоми цин.

6'-Нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) обрабатывали 5-бром-1,2-эпоксипентаном согласно процедуре 11, получая 6'-(4,5-эпоксипентил)-6'-нозил2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1204,5, найдено 1204,6), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(4-Гидрокси-5-аминопентил)-6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

6'-(4,5-Эпоксипентил)-6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) обрабатывали 27%-ным водным раствором ΝΉ₃ согласно процедуре 5, получая 6'-(4гидрокси-5-аминопентил)-6'-нозил-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1221,6, найдено 1222,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 100 017824

мицин. б'-(4-Гидрокси-5-аминопентил)-б'-нозил-2',3,3''-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 9 для удаления защитной нозильной группы, получая б'-(4-гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 103б,б, найдено 1037,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

б'-(4-Гидрокси-5-аминопентил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин. б'-(4-Гидрокси-5-аминопентил)-2',3,3-три-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая б'-(4-гидрокси-5аминопентил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0020 г, 0,0031 ммоль, выход 3,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. б3б,4, найдено б3б,4; чистота СБ-ΝΟ 94,5%.

Пример 81. 6'-(Ν-( Азетидин-3 -ил)-2-аминоэтил)-1 -(3 -амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин

№(№Вос-Азетидин-3-ил)-2-аминоэтанол.

№Вос-3-Азетидинон (1,0 г, 5,84 ммоль) обрабатывали этаноламином согласно процедуре 1-способ А, получая №(№Вос-азетидин-3-ил)-2-аминоэтанол (0,75 г, 3,4б ммоль, выход б2,3%): М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 217,1, найдено 217,2.

РВосР-Р-Вос-Азетидин-3-ил)-2-аминоэтанол.

№(№Вос-Азетидин-3-ил)-2-аминоэтанол (0,75 г, 3,4б ммоль) подвергали процедуре 13 для присоединения защитной группы Вос, получая сырой продукт, который очищали флэш-хроматографией (силикагель/гексаны:этилацетат 0-100%), получая РВосР-Р-Вос-азетидин-3-ил)-2-аминоэтанол (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 317,2, найдено 317,4).

РВосР-Р-Вос-Азетидин-3-ил)-2-аминоацетальдегид.

РВосР-Р-Вос-Азетидин-3-ил)-2-аминоэтанол подвергали процедуре 18 для окисления до Ν-Вос№(№Вос-азетидин-3-ил)-2-аминоацетальдегида, который использовали на следующей стадии без даль- 101 017824 нейшей очистки.

6'-(N-Вοс-N-(N-Вοс-Азетидин-3-ил)-2-аминоэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вοс-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,075 г, 0,080 ммоль) обрабатывали N-Вοс-N-(N-Вοс-азетидин-3-ил)-2-аминоацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А, получая соответствующий 6'-(N-Вοс-N-(N-Вοс-азетидин-3-ил)-2-аминоэтил)-2',3,3-три-Вοс-1-(N-Вοс-3амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1233,7, найдено 1233,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(N-(Азетидин-3-ил)-2-аминоэтил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин. 6'-(N-Вοс-N-(N-Вοс-Азетидин-3-ил)-2-аминоэтил)-2',3,3-три-Вос-1-(N-Вοс-3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин (0,080 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(Ν(азетидин-3-ил)-2-аминоэтил)-1-(3-амино-2(18)-гидроксипропионил)сизомицин (0,0069 г, 0,011 ммоль, выход 13,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 633,4, найдено 633,4; чистота ίΤΝΩ 85,5%.

Пример 82. 6'-(2-Гидрокси-3-аминопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-(N-Вοс-2-Гидрокси-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вοс-1-(2-(N-Вοс-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вοс-1-(2-(N-Вοс-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали N-трет-бутил-(2-оксиранил-метил)карбаматом согласно процедуре 5, получая желаемый 6^^-^^ 2-гидрокси-3-аминопропил)-2',3,3''-три-Вос-1-(2-(N-Вοс-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1134,6, найдено 1135,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 102 017824

6'-(2-Гидрокси-3-аминопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

6'-(№Вос-2-Гидрокси-3-аминопропил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'-(2-гидрокси3-аминопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0012 г, 0,0018 ммоль, выход 2,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 634,4, найдено 634,6; чистота С1 ,ΝΙ) 82,5%.

Пример 83. 6'-(Метил-3-амино-1-гидроксициклобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин

6'-(Метил-№Вос-3-амино-3-гидроксициклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2гидроксиацетил)сизомицин.

2',3,3''-Три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали №Вос-1-оксаспиро[2.3]гексан-5-амином согласно процедуре 5, получая желаемый 6'-(метил-№Вос3-амино-1 -гидроксициклобутил)-2',3,3''-три-Вос-1 -(2-(№Вос-азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1160,6, найдено 1161,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-3 -амино-1 -гидроксициклобутил)-1 -(2-(азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин. 6'-(Метил-№Вос-3-амино-1-гидроксициклобутил)-2',3,3-три-Вос-1-(2-(№Вос-азетидин-3-ил)-2гидроксиацетил)сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 6'(метил-3 -амино-1 -гидроксициклобутил)-1 -(2-(азетидин-3 -ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин (0,0013 г, 0,0019 ммоль, выход 2,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 660,4, найдено 660,4; чистота С1 .ΝΕ) 94,3%.

Пример 84. 2'-(Метилпирролидин-3-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(Метил-№Вос-пирролидин-3-ил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизоми цин.

Обработкой 6'-Р№-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) №Вос-3-пирролидин карбальдегидом согласно процедуре 1-способ В получали желаемый 6'-Р№-2'(метил-№Вос-пирролидин-3-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 103 017824

2'-(Метил-№Вос-пирролидин-3-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-Р№-2'-(Метил-№Вос-пирролидин-3-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡNΖ, получая 2'-(метил-№Вос-пирролидин-3-ил)3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(Метилпирролидин-3 -ил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 2'-(Метил-№Вос-пирролидин-3-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'(метилпирролидин-3-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин: М8 т/е [М+Η]⁴ рассчит. 632,4, найдено 632,3, [М+№]⁺ 654,4; чистота СЕ-ΝΌ 93,7%.

Пример 85. 2'-(Метилпирролидин-2-ил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(Метил-№Вос-пирролидин-2-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизо мицин.

Обработкой 6'-Р№-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) Ν-Вос-пролиналем согласно процедуре 1-способ В получали желаемый 6'-ΡNΖ-2'-(метил-N-Вοспирролидин-2-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 104 017824

2'-(Метил-№Вос-пирролидин-2-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-ΡNΖ-2'-(Метил-N-Вос-пирролидин-2-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡΝΖ, получая 2'-(метил4Х-Вос-пирролидин-2-ил)3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 1032,6, найдено 1032,5), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(Метилпирролидин-2-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(Метил-№Вос-пирролидин-2-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'(метилпиррролидин-2-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин: Μ8 т/е [Μ+НЦ рассчит. 632,4, найдено 632,3, [Μ+^Ι 654,4; чистота ^ΝΌ 97,6%.

Пример 86. 2'-(№Метиламиноацетил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-ΡNΖ-2'-(N-Вос-N-Метиламиноацетил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-ΡNΖ-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицина (0,060 г, 0,06 ммоль) Ν-Вос-саркозином согласно процедуре 20 получали желаемый 6'-ΡNΖ-2'-(N-Вос-Nметиламиноацетил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 105 017824

2'-(М-Вос-Н-Метиламиноацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-РМ2-2'-(М-Вос-Н-Метиламиноацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РЫ2, получая 2'-(М-Вос-Мметиламиноацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺рассчит. 1020,6, найдено 1020,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(Ы-Метиламиноацетил)-1-(4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(М-Вос-Н-Метиламиноацетил)-3,3''-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(Ы-метиламиноацетил)-1-(4амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин: М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 620,3, найдено 620,3, [М+Ыа]⁺ 642,3; чистота ΟΩΝΩ 97,6%.

Пример 87. 2'-(2-Аминоацетил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-РМ2-2'-(М-Вос-2-Аминоацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-РМ2-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицина (0,060 г, 0,06 ммоль) Ν-Вос-глицином согласно процедуре 20 получали желаемый 6'-РМ2-2'-(М-Вос-2-аминоацетил)3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 106 017824

2'-(N-Вое-2-Аминоацетил)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-РNΖ-2'-(N-Вое-2-Аминоацетил)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(N-Вое-2-аминоацетил)-3,3-ди-Вое1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(2-Аминоацетил)-1-(4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(N-Вое-2-Аминоацетил)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(2-аминоацетил)-1-(4-амино-2(3)гидроксибутирил)сизомицин: М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 606,3, найдено 606,3, [М+№]⁺ 628,2; чистота СЬИЭ 97,4%.

Пример 88. 2'-(2-Аминопропионил)-1 -(4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-РNΖ-2'-(N-Вое-2-аминопропионил)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизоми цин.

Обработкой 6'-РNΖ-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицина (0,060 г, 0,06 ммоль) Ν-Вос-аланином согласно процедуре 4-способ А получали желаемый 6'-РNΖ-2'-(N-Вое-2аминопропионил)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1199,6, найдено 1199,2, [М+№]⁺ 1221,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(N-Вое-2-Аминопропионил)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-РNΖ-2'-(N-Вое-2-Аминопропионил)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(№Вос-2-аминопропионил)3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1020,6, найдено 1020,4, [М+№]⁺ 1042,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 107 017824

ΝΗι

2'-(2-Аминопропионил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(№Вос-2-Аминопропионил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(2-аминопропионил)-1-(4амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0092 г, 0,0148 ммоль, выход 24,7%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 620,3, найдено 620,2, [М+№]⁺ 642,4; чистота С1.Х1) 97,5%.

Пример 89. 2'-(3-Амино-2-гидроксипропионил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(Ы-Вос-3-Амино-2-гидроксипропионил)-3,3''-ди-Вос-1-(Н-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,065 г, 0,06 ммоль) Ν-Вос-изосерином согласно процедуре 4-способ А получали желаемый 6'-Р№-2'-(№Вос-3амино-2-гидроксипропионил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1215,6, найдено 1215,0, [М+№]⁺ 1237,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(№Вос-3-Амино-2-гидроксипропионил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-Р№-2'-(Ы-Вос-3-Амино-2-гидроксипропионил)-3,3''-ди-Вос-1-(Н-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡNΖ, получая 2'-(Ы-Вос-3-амино-2гидроксипропионил)-3,3-ди-Вос-1-(Н-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1036,6, найдено 1036,3, [М+№]⁺ 1058,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 108 017824

2'-(3-Амино-2-гидроксипропионил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(№Вос-3-Амино-2-гидроксипропионил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(3-амино-2гидроксипропионил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,005 г, 0,008 ммоль, выход 13,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 636,3, найдено 636,2, [М+№]⁺ 658,3; чистота ΓΈΝΩ 97,5%.

Пример 90. 2'-(Пирролидин-2-илацетил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(№Вос-Пирролидин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-РNΖ-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутнрил)сизомицина (0,060 г, 0,0 6 ммоль) Ν-Вос-пролином согласно процедуре 20 получали желаемый 6'-РМ2-2'-(М-Вос-пирролидин-2илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(М-Вос-Пирролидин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизоми цин.

6'-РNΖ-2'-(N-Вос-пирролидин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутнрил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(№Вос-пирролидин-2илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 109 017824

2'-(Пирролидин-2-илацетил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 2'-(М-Вос-Пирролидин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,06 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'(пирролидин-2-илацетил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин: М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 646,4, найдено 646,3, [М+Иа]⁺ 668,2; чистота ί.Έ·ΝΩ 78,0%.

Пример 91. 2'-(3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-РЖ-2'-(М-Фталимидо-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

К раствору 6'-РЖ-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,105 г, 0,102 ммоль) в ОМЕ (1 мл) добавляли 3-фталимидопропиональдегид (0,041 г, 0,204 ммоль) и молекулярные сита 3А (10-15) и реакционную смесь взбалтывали в течение 2 ч. Затем добавляли раствор №1СНВН₃(0,013 г, 0,204 ммоль) в МеОН (3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (5 мл) и органический слой промывали насыщенным водным раствором ХН₄С1, насыщенным водным раствором ИаНСО₃ (3 мл), солевым раствором (3 мл), высушивали над Иа₂8О₄, фильтровали и концентрировали досуха, получая 6'-РNΖ-2'-(N-фталимидо-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1215,6, найдено 1215,3, [М+Иа]⁺ 1237,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-РЖ-2'-(3-Аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-РЖ-2'-(М-Фталимидо-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,102 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления фталимидо, получая 6'-₽ΝΖ-2'-(3аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1085,5, найдено 1085,4, [М+Иа]⁺ 1107,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 110 017824

2'-(3-Аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-РNΖ-2'-(3-Аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)гидроксибутирил)сизомицин (0,102 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 906,5, найдено 906,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(3-Аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(3-Аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,102 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(3-аминопропил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,0021 г, 0,0035 ммоль, выход 3,4%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 606,4, найдено 606,2, |М-\а|' 628,3; чистота С1.Х1) 94,0%.

Пример 92. 2'-(Морфолин-2-илацетил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(М-Вос-Морфолин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизоми цин.

Обработкой 6'-РNΖ-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) №Вос-морфолин-2-уксусной кислотой согласно процедуре 4-способ А получали желаемый 6'РNΖ-2'-(N-Вос-морфолин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1255,6, найдено 1255,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 111 017824

2'-(N-Вос-Морфолин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-РNΖ-2'-(N-Вос-морфолин-2-илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(М-Вос-морфолин-2илацетил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1076,6, найдено 1076,3, [М+Ыа]⁺ 1098,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(Морфолин-2-илацетил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(N-Вос-Морфолин-2-илацетил)-3,3''-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(морфолин-2-илацетил)-1(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0051 г, 0,0075 ммоль, выход 10,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 676,4, найдено 676,2, [М+Ыа]⁺ 698,4; чистота СЬМИ 96,2%.

Пример 93. 2'-(2-Аминоэтилсульфонамид)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-РNΖ-2'-(N-Фталимидо-2-аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

К перемешиваемому раствору 6'-РNΖ-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)гидроксибутирил)сизомицина (0,108 г, 0,105 ммоль) в ИМР (1 мл) при 0°С добавляли И1РЕА (0,054 мл, 0,31 ммоль), затем Ы-фталимидо-2-аминоэтансульфонил хлорид (0,048 г, 0,175 ммоль) и реакционной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (4 мл) и промывали Н₂О (3x4 мл). Объединенные органические слои высушивали над №ь8О₊ фильтровали

- 112 017824 и концентрировали, получая 6'-ΡNΖ-2'-(N-фталимидо-2-аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]+ рассчит. 1265,5, найдено 1265,3, |М+№1|+ 1287,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-ΡNΖ-2'-(2-Аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-ΡNΖ-2'-(N-Фталимидо-2-аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,105 ммоль) подвергали процедуре 6 для удаления фталимидо, получая 6'ΡNΖ-2'-(2-аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1135,5, найдено 1134,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(2-Аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-ΡNΖ-2'-(2-Аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,105 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡΝΖ, получая 2'-(2-аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вос1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 956,5, найдено 956,2, [М+Να]⁴978,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(2-Аминоэтилсульфонамид)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(2-Аминоэтилсульфонамид)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,105 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(2-аминоэтилсульфонамид)1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,016 г, 0,0244 ммоль, выход 23,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 656,3, найдено 656,1, [М+Νπ]⁴ 678,3; чистота Ο6ΝΌ 92,3%.

- 113 017824

Пример 94. 2'-(^МДиметил-2,2-диметил-3-аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(^МДиметил-2,2-диметил-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-3,3-ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,200 г, 0,195 ммоль) ^Мдиметил-2,2-диметил-3-аминопропиональдегидом (0,033 г, 0,25 ммоль) согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-ΡNΖ-2'-(N,N-диметил-2,2-диметил-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(NВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1141,6, найдено 1141,5), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(^МДиметил-2,2-диметил-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-Р№-2'-(^МДиметил-2,2-диметил-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,195 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡNΖ, получая 2'-(^Мдиметил2,2-диметил-3 -аминопропил)-3,3-ди-Вос-1 -(МВос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 962,6, найдено 962,4, [М+№]⁺ 984,4), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(^МДиметил-2,2-диметил-3-аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 2'-(К,МДиметил-2,2-диметил-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(К-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,195 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(К,Мдиметил-2,2-диметил-3аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,00069 г, 0,001 ммоль, выход 0,5%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 662,4, найдено 662,3, [М+№]⁺ 684,3; чистота СЬЫО 86,2%.

- 114 017824

Пример 95. 2'-(2(8)-Аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-РNΖ-2'-(N-Βοс-2(8)-Аминопропил)-3,3-ди-Βοс-1-(N-Βοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизоми цин.

Обработкой 6'-РNΖ-3,3-ди-Βοс-1-(N-Βοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,200 г, 0,195 ммоль) №Вос-2(8)-амино пропаналем согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-ΓΝΖ-2'-(ΝВос-2(8)-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(№Вос-2(8)-Аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-РNΖ-2'-(N-Βοс-2(8)-Аминопропил)-3,3-ди-Βοс-1-(N-Βοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,195 моль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(№Вос-2(8)-аминопропил)-3,3ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1006,6, найдено 1007,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

ш_г

2'-(2(8)-Аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(№Вос-2(8)-Аминопропил)-3,3 -ди-Вос-1 -(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,195 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(2(8)-аминопропил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,0035 г, 0,0058 ммоль, выход 3,0%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 606,4, найдено 606,3; чистота ΟΕΝΏ 89,4%.

- 115 017824

Пример 96. 2'-(Азетидин-3-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(М-Вос-Азетидин-3-ил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,200 г, 0,195 ммоль) Ы-Вос-3-азетидиноном (0,043 г, 0,253 ммоль) согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-Р№-2'-(М-Вос-азетидин-3-ил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1183,6, найдено 1184,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(М-Вос-Азетидин-3-ил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-Р№-2'-(М-Вос-Азетидин-3-ил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,195 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(М-Вос-азетидин-3-ил)-3,3-ди-Вос1-(Ы-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1004,6, найдено 1005,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(Азетидин-3-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(М-Вос-Азетидин-3-ил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,195 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(азетидин-3-ил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,0144 г, 0,024 ммоль, выход 12,3%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 604,4, найдено 604,2, [М+Ыа]⁺ 626,3; чистота (Ί.ΧΙ) 99,2%.

- 116 017824

Пример 97. 2'-(2-Аминопропанол-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

б'-Р№-2'-(Метил-№Вос-2,2-диметил-1,3-оксазолидин-4-ил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой б'-Р№-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,100 г, 0,097 ммоль) №Вос-2,2-диметил-1,3-оксазолидин-4-карбоксальдегидом (0,02б г, 0,12 ммоль) согласно процедуре 1-способ А получали желаемый б'-ΡNΖ-2'-(метил-N-Вос-2,2-диметил-1,3-оксазолидин-4-ил)-3,3-диВос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1241,б, найдено 1242,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(Метил-№Вос-2,2-диметил-1,3-оксазолидин-4-ил)-3,3''-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

б'-Р№-2'-(Метил-№Вос-2,2-диметил-1,3 -оксазолидин-4-ил)-3,3 -ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,097 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡNΖ, получая 2'-(метил-№Вос-2,2диметил-1,3 -оксазолидин-4-ил)-3,3 -ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 10б2,б, найдено 1063,3), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

ΝΗ]

2'-(2-Аминопропанол-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(Метил-№Вос-2,2-диметил-1,3-оксазолидин-4-ил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,097 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка А, получая 2'-(2аминопропанол-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0042 г, 0,00 67 ммоль, выход б,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 622,4, найдено 622,3, [М+№]⁺ 644,4; чистота ΟΕΝΩ 93,9%.

- 117 017824

Пример 98. 2'-(2-Гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-ΡNΖ-2'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-ΡNΖ-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) трет-бутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-ΡNΖ-2'-(2-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил)-3,3-ди-Вοс-1-(Ы-Вοс-4-амино-2(8-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Щ⁺ рассчит. 1186,6, найдено 1187,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-3,3-ди-Вос-1-(Ы-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизо мицин.

6Ч⁾^-2'-(7-цхл-Бутилдимелилсилил()1ссиэтил)-33-ди-В()с-1-Ш-В()с^-ами1ю-2(8)-1идр()1ссибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления Р№, получая 2'-(2-третбутилдиметилсилилоксиэтил)-3,3-ди-Вос-1-(К-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

но

2'-(2-Гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-3,3-ди-Вос-1-(Ы-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 3, получая 2'-(2-гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0107 г, 0,018 ммоль, выход 24,6%): М8 т/е [М+Щ⁺ рассчит. 593,3, найдено 593,8; чистота СБЫВ 95,9%.

- 118 017824

Пример 99. 2'-(2,5-Диаминопентоил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-ΡNΖ-2'-(N-Вос,N-Вοс-2,5-Диаминопентоил)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-ΡNΖ-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) Вοс-^^-ΟΚN(Вοс)-ΟН согласно процедуре 4-способ В получали желаемый 6'-ΡNΖ-2'-(N-Вοс,NВοс-2,5-диаминопентоил)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1342,7, найдено 1342,7), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(N-Вοс,N-Вοс-2,5-Диаминопентоил)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин 6'-ΡNΖ-2'-(N-Вοс,N-Вοс-2,5-диаминопентоил)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡΝΖ, получая 2'-(N-Вοс,N-Вос-2,5диаминопентоил)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(2,5-Диаминопентоил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(N-Вοс,N-Вοс-2,5-Диаминопентоил)-3,3-ди-Вοс-1-(N-Вοс-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 3, получая 2'-(2,5-диаминопентоил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0075 г, 0,0113 ммоль, выход% 15,5): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 663,4, найдено 663,4; чистота ίΤΝΩ 94,8%.

- 119 017824

Пример 100. 2'-(2-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-РNΖ-2'-(2-Гидроксипропанол)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-РNΖ-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) димером БЬ-глицеральдегида согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-Р№-2'-(2гидроксипропанол)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (М3 т/е [М+Н]⁺рассчит. 1102,5, найдено 1103,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(2-Гидроксипропанол)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-РNΖ-2'-(2-Гидроксипропанол)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(2-гидроксипропанол)-3,3''-ди-Вое1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

он

2'-(2-Гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(2-Гидроксипропанол)-3,3-ди-Вое-1-(N-Вое-4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 3, получая 2'-(2 гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(3)-гидроксибутирил)сизомицин (0,0008 г, 0,00128 ммоль, выход 1,75%): М3 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 623,3, найдено 623,8; чистота СБЫЛ 94,7%.

- 120 017824

Пример 101. 2'-(2-Г идрокси-3 -аминопропил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(2-Гидрокси-М-Вос-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(К-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-РNΖ-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутнрил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) №1рет-бутил-(2-оксиранил-метил)карбаматом согласно процедуре 5 получали желаемый 6'-ίΝΖ2'-(2-гидрокси-М-Вос-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1201,6, найдено 1201,6), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

мицин.

6'-Р№-2'-(2-Гидрокси-М-Вос-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(К-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(2-гидрокси-Ы-Вос3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутнрил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1022,6, найдено 1023,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(2-Гидрокси-3-аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(2-Гндрокси-N-Вос-3-аминопропил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гндроксибутнрил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 3, получая 2'-(2-гндрокси-3-аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гндроксибутнрил)сизомицнн (0,0112 г, 0,018 ммоль, выход 24,6%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 622,4, найдено 622,6; чистота СЬЫЭ 88,3%.

- 121 017824

Пример 102. 2'-(4-Аминобутил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-ΡNΖ-2'-Нозил-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-ΡNΖ-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) 2-нитробензолсульфонил хлоридом согласно процедуре 8 получали желаемый 6'-ΡNΖ-2'-нозил3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-ΡNΖ-2'-Нозил-2'-(N-Вос-4-аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-ΡNΖ-2'-Нозил-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) обрабатывали №Вос-4-амино-1-бутанолом согласно процедуре 17, получая желаемый 6'-ΡNΖ-2'-нозил-2'(№Вос-4-аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+4]⁺рассчит. 1384,6, находился 1384,2), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-ΡNΖ-2'-(N-Вос-4-Аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-ΡNΖ-2'-Нозил-2'-(N-Вос-4-аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 9 для удаления нозильной защитной группы, получая желаемый 6'-ΡNΖ-2'-(N-Вос-4-аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (Μ8 т/е [Μ+4]⁺ рассчит. 1199,6, найдено 1200,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 122 017824

2'-(М-Вос-4-Аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин. 6'-РМ2-2'-(М-Вос-4-Аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РЫ2, получая желаемый 2'-(Ы-Вос-4-аминобутил)3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

№<г

2'-(4-Аминобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(М-Вос-4-Аминобутил)-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 3, получая 2'-(4-аминобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,00065 г, 0,001 ммоль, выход 1,37%): М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 620,4, найдено 620,8; чистота СЬМЭ 85,6%.

Пример 103. 2'-Гуанидиний-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-РМ2-2'-Гуанидиний-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-РМ2-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицина (0,7 г, 0,68 ммоль) 1Н-пиразол-1-карбоксамидин гидрохлоридом (0,142 г, 0,96 ммоль) согласно процедуре 7 получали желаемый 6'-РМ2-2'-гуанидиний-3,3-ди-Вос-1-(М-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (М§ т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1070,5, найдено 1070,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 123 017824

2'-Гуанидиний-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-Р№-2'-Гуанидиний-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,68 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления ΡNΖ, получая 2'-гуанидиний-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 891,5, найдено 891,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-Гуанидиний-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-Гуанидиний-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин (0,68 ммоль) подвергали процедуре 3-способ В для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали ВЭЖХ с обратной фазой согласно способу 1-колонка В, получая 2'-гуанидиний-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,110 г, 0,186 ммоль, выход 27,4%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 591,3, найдено 591,6; чистота ίΧΝΩ 97,5%.

Пример 104. 2'-(Метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин

6'-Р№-2'-(Метил-транс-И-Вос-3-аминоциклобутил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-3-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицина (0,075 г, 0,073 ммоль) №Вос-транс-3-аминоциклобутилкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-Р№-2'-(метил-транс-И-Вос-3-аминоциклобутил)-3,3-ди-Вос-1-(№Вос-4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1211,6, найдено 1212,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 124 017824

2'-(Метил-транс-N-Вос-3-аминоциклобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин.

6'-РNΖ-2'-(Метил-транс-N-Вос-3-аминоциклобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 2 для удаления РNΖ, получая 2'-(метил-трансN-Вос-3-аминоциклобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-(Метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин.

2'-(Метил-транс-N-Вос-3-аминоциклобутил)-3,3-ди-Вос-1-(N-Вос-4-амино-2(§)-гидроксибутирил)сизомицин (0,073 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 3, получая 2'-(метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин (0,0103 г, 0,016 ммоль, выход 21,9%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 632,4, найдено 632,8; чистота ί.ΈΝΌ 90,4%.

Пример 105. 6',2'-бис-Гуанидиний-сизомицин

6',2'-бис-Гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин.

Обработкой 1,3,3'-три-Вос-сизомицина (0,075 г, 0,100 ммоль) 1Н-пиразол-1-карбоксамидин гидрохлоридом (0,037 г, 0,25 ммоль) согласно процедуре 7 получали желаемый 6',2'-бисгуанидиний-1,3,3-триВос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 832,5, найдено 832,8), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 125 017824

6',2'-бис-Гуанидиний-сизомицин.

6',2'-бис-Гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (0,100 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 3, получая 6',2'-бисгуанидинийсизомицин (0,0017 г, 0,0032 ммоль, выход 3,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 532,3, найдено 532,6; чистота ΟΕΝΩ 92,2%.

Пример 106. 6'-(2-Гидроксиэтил)-2'-гуанидиний-сизомицин

6'-Р№-2'-^№Ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин.

Обработкой 6'-Р№-1,3,3-три-Вос-сизомицина (0,075 г, 0,081 ммоль) №№бис-Вос-1Н-пиразол-1карбоксамидином согласно процедуре 7 получали желаемый 6'-РNΖ,2'-N,N-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3три-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1169,6, найдено 1170,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

2'-^№Ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин.

6'-Р№,2'-^№Ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 10 для удаления РNΖ, получая желаемый 2'-^№ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 990,5, найдено 990,9), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2'-^№ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин.

Обработкой 2'-^№ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицина (0,081 ммоль) третбутилдиметилсилилоксиацетальдегидом согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-(2-третбутилдиметилсилилоксиэтил)-2'-^№ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1148,7, найдено 1149,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(2-Гидроксиэтил)-2'-гуанидиний-сизомицин.

6'-(2-трет-Бутилдиметилсилилоксиэтил)-2'-^№ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин

- 126 017824 (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос и ТВ8, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая 6'-(2-гидроксиэтил)-2'-гуанидиний-сизомицин (0,00096 г, 0,0018 ммоль, выход 2,2%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 534,3, найдено 534,2; чистота ί.Έ·ΝΩ 84,4%.

Пример 107. 6'-(Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2'-гуанидиний-сизомицин

6'-(Метил-транс-Н-Вос-3-аминоциклобутил)-2'-М,М-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин.

Обработкой 2'-N,N-ди-Вос-гуаиидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицина (0,081 ммоль) М-Вос-транс-3аминоциклобутилкарбоксальдегидом согласно процедуре 1-способ А получали желаемый 6'-(метилтранс-N-Вос-3-аминоциклобутил)-2'-N,N-ди-Вос-гуаиидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺рассчит. 1173,7, найдено 1174,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-(Метил-транс-3-аминоциклобутил)-2'-гуанидиний-сизомицин.

6'-(Метил-транс-Н-Вос-3-аминоциклобутил)-2'-М,М-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая 6'-(метил-транс-3-аминоциклобутил)-2'-гуанидиний-сизомицин (0,001 г, 0,0017 ммоль, выход 2,1%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 573,4, найдено 573,1; чистота ί.Έ·ΝΩ 86,8%.

Пример 108. 6'-Метил-2'-гуанидиний-сизомицин

6'-Нозил-2'-М,М-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин.

Обработкой 2'-М,М-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицина (0,081 ммоль) 2нитробензолсульфонилхлоридом согласно процедуре 8 получали желаемый 6'-нозил-2'-М,М-ди-Восгуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин, который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Нозил-6'-метил-2'-М,М-ди-Востуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин.

6'-Нозил-2'-М,М-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (0,081 ммоль) обрабатывали метилйодидом согласно процедуре 11, получая желаемый 6'-нозил-6'-метил-2'-М,М-ди-Востуанидиний1,3,3-три-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1189,5, найдено 1190,0), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

- 127 017824

6'-Метил-2'-N,N-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3 -три-Вос-сизомицин.

6'-Нозил-6'-метил-2'-N,N-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 9 для удаления нозильной защитной группы, получая желаемый 6'-метил-2'-N,N-ди-Восгуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 1004,6, найдено 1005,1), который использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

6'-Метил-2'-гуанидиний-сизомицин.

6'-Метил-2'-N,N-ди-Вос-гуанидиний-1,3,3-три-Вос-сизомицин (0,081 ммоль) подвергали процедуре 3-способ А для удаления Вос, получая сырой продукт, который очищали способом 1-колонка А, получая 6'-метил-2'-гуанидиний-сизомицин (0,0029 г, 0,0058 ммоль, выход 7,1%): М8 т/е [М+Н]⁺ рассчит. 504,3, найдено 504,4; чистота СЬМИ 94,3%.

Пример 109. Соединения структуры (I)

в которой по меньшей мере одна группа Яд обозначает водород, могут быть получены согласно общим процедурам синтеза и очистки, сформулированным выше. Например, в ходе синтеза согласно Примерам 1-108, получали соответствующие 3 и 4 десметиловые соединения, которые могут быть очищены от сырых продуктов с использованием способов 1 или 3 из общих процедур очистки, сформулированных выше.

Пример 110. Протокол теста М1С.

Минимальные ингибирующие концентрации (М1С) определяли рефернсными способами микроразведений бульона С11шса1 аиб ЬаЬога1огу 8!ап6аг6з ИъШШе (СЬ81) М7-А7 [2006]. Диапазоны контроля качества с использованием Е. со11 АТСС 25922, Р. аегидтоза АТСС 27853 и 8. аигеиз АТСС 29213 и критерии интерпретации для средств сравнения были такими, как опубликовано в СЬ81 М100-817 [2007]. Кратко, серии двукратных разведений тестируемых соединений получали в 2Х концентрациях в бульоне Мюллера-Хинтона. Разведение соединения смешивали в 96-луночных тестовых планшетах в отношении 1:1 с бактериальным инокулятом. Инокулят получали суспендированием колонии с агарового планшета, которая была получена в предыдущий день. Бактерии суспендировали в стерильном солевом растворе и добавляли в каждый тестовый планшет, чтобы получить конечную концентрацию 5x105 КОЕ/мл. Планшеты инкубировали при 35°С в течение 20 ч в окружающей атмосфере. М1С определяли как самую низкую концентрацию тестируемого соединения, которая не приводила к видимому росту бактерий по сравнению с необработанным контролем. Данные для некоторых репрезентативных соединений показаны ниже в табл. 1.

- 128 017824

Таблица 1

- 129 017824

- 130 017824

95	А	С
96	А	В
97	А	В
98	В	В
99	В	В
100	В	С
101	А	в
102	А	в
103	А	А
104	А	В
105	С	с
106	А	в
107	В	А
108	А	В

* АЕСО001 представляет собой АТСС25922 и АРАЕ001 представляет собой АТСС27853 ** Ключ М1С:

М1С 1,0 мкг/мл или меньше = А М1С от более 1,0 до 16,0 мкг/мл = В М1С более 16,0 мкг/мл = С

Пример 111.

Модели эффективности ίη у1уо.

Как показано ниже в табл. 2, некоторые репрезентативные соединения и некоторые известные аминогликозиды (то есть гентамицин и амикацин), были проверены на эффективность ίη у1уо в мышиной модели инфекционного сепсиса. На каждое соединение использовали две модели, используя бактериальные штаммы Е. со11 и Р. аегидтока ОС. В обоих исследованиях использовали один и тот же протокол. Самцов мышей СБ-Ι, производных от (СКЕ) (индивидуальная масса тела 24±2 г), инокулировали внутрибрюшинно дозой 2хЬБ90-100 Е. со11 АТСС 25922 (4,5х10⁵ КОЕ/мышь) в 0,5 мл бульона ВН1, содержащего 5%-ный муцин, или дозой 2хЬБ90-100 Р. аегидтока АТСС 27853 (5,8х10⁴ КОЕ/ 0,5 мл/мышь) в бульоне ВН1, содержащем 5%-ный муцин. Через 1 ч после бактериальной провокации мыши получали, подкожно или внутривенно, единственную дозу носителя или тестируемого вещества для оценки активности ίη у1уо антибактериального средства. Летальность регистрировали один раз в сутки в течение 7 дней после бактериальной инокуляции. В обоих исследованиях единственная внутривенная или подкожная доза всех тестируемых соединений улучшала выживаемость дозозависимым образом, как отмечено в табл. 2.

Таблица 2

Тестируемое соединение	М1С Е. соИ	М1С Р. аегцд1поза	Εϋ50/ΜΙ€ Е. соИ	ЕЮ50/М1С Р. аехидхпоаа
Гентамицин	А	А	2,4	12
Амикацин	В	В	1,5	13
Пример 1	А	В	<2	4
Пример 15	А	В	<1	1
Пример 16	А	В	1	3
Пример 17	А	В	1	5
Пример 22	В	В	1	8
Пример 57	А	А	2	14
Пример 96	А	В	<1	3
Пример 103	А	А	2	6

* Ключ М1С:

М1С 1,0 мкг/мл или меньше = А М1С от более 1,0 до 16,0 мкг/мл = В М1С более 16,0 мкг/мл = С ** значения ΕΏ50 приведены в мг/кг

Пример 112.

Как показано ниже в табл. 3, некоторые двузамещенные производные сизомицина, некоторые монозамещенные производные сизомицина и сизомицин проверяли против ОС и аминогликозидрезистентных бактериальных штаммов, содержащих подтвержденные механизмы устойчивости, которые ковалентно модифицируют 6'-аминогруппу во многих аминогликозидах. Эти тесты М1С проводили согласно тому же самому протоколу, как описано в примере 110. Как показано, замещенные производные сизомицина с группами, отличными от метила, в 6'-положении улучшали активность против штаммов, экспрессирующих ААС6'-модифицирующие ферменты. Кроме того, двузамещенные производные сизомицина показывают более высокую по сравнению с однозамещенными производными активность в отношении тех же штаммов, экспрессирующих ААС6'-модифицирующие ферменты.

- 131 017824

Таблица 3

Тесты Соединений	АЕСО001	ДЕС0040	Ά5ΜΑ003	ААСА005
Сизомицин	0,5	32	8	32
Монозамещенное соединение 1	1	>64	1	2
Мон озамеще иное соединение 2	1	1	0,5	4
Монозамещенное соединение 3	0,5	0,25	1	0,5
Монозамеценное соединение 4	2	16	1	1

Монозамещенное соединение 5	0,5	8	2	32
Монозамещенное соединение 6	0,5	4	4	16
Монозамещенное соединение 7	1	4	16	32
Пример 1	0,5	0,5	2	2
Пример 12	1	0,5	4	2
Пример 13	1	0,125	2	2
Пример 16	1	1	2	2
Пример 17	1	0,5	2	2
Пример 18	1	0,25	4	2
Пример 48	1	0,5	2	2
Пример 61	1	16	4	2

* Ключ:

Штамм	АСН Код	Фенотип
е. со а	АЕСО001	АТСС25922
АЕСО040	ААС(6’)-1
5. тагсезсепз	Α5ΜΑ003	ΑΝΤ(2”) + ΑΑ6(6’)
А. са1соасеИсиз	ААСА005	ААС(6’)-1

** Сравнительные соединения

Монозамещенное соединение	Структура
		н

		1		ОН
		г?
1		Ϊ ?^н
				Ν''''
		= ‘‘у' ”		н
		νη₂	I он
			''ΝΗ.
		5 н

		1		он
		А-о	О''	'А>*
2			он I
		ЧА.		УХГ''
				1 ^н

		ЙМз		он
		Η₂Ν''	%н_г
	НГ'Ю	У
	I	н

		1		он
3		У'о	с
		1	он
				Ά
				\| н
		мн₂ I		он
		Η,Ν'

- 132 017824

	Н
	Η₂Ν \		он
	А'-о
4			он I
		'ΐκ
	=		1 ^н
	йн_а		он
		η₂ν'
	Н₂М		ОН
	ΓΪ	он
		?
5	νη₂		1 ^нон
	Η₂Ν'’”		ΝΗ
			Д. >5’4
			1 νη₂
	н_гм		он
	Λ	он
		?
	а		1 ^н
6	νη₂		он
	ηΧ’		%1Н
			/>н
		0	νη₂
			он
	ο	он
		?	^>0 ''И''
7			* 1 ^н
	νη₂		он
	η₂ν'		ΝΗ
	0'	1 он Ахд

			\НН

Все патенты США, публикации заявок на патент США, заявки на патент США, иностранные патенты, иностранные заявки на патент и непатентные публикации, указанные в настоящем описании, полностью включены в настоящее описание путем ссылки в той степени, в которой они не противоречат настоящему описанию.

Из описанного выше будет понятно, что, хотя некоторые варианты осуществления изобретения были описаны здесь в целях иллюстрации, в них могут быть внесены различные модификации без отступления от духа и объема изобретения. Соответственно изобретение не ограничено ничем, кроме приложенной формулы изобретения.

Claims

1. Соединение, имеющее следующую структуру (I):

или его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль, в которой обозначает водород,

- 133 017824

0₇ обозначает водород, -(СЕ₁₀Е₁₁)_р1Е_1;; -С1-С₆-алкил-С₃-С1₀-циклоалкил, в случае необходимости замещенный амино, гидроксилом или -С1-алкиламино; -С1-С₆-алкил-С₄-С₆-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом, амино или -С₁-С₆алкилом; -Ο^Ν^ΝΕ-^; или

Оз обозначает водород,-(СЯ₁₀Я₁₁)_рЯ₁₂; -С1-С₆-алкил-С₃-С1₀-циклоалкил, в случае необходимости замещенный амино или гидроксилом; -С₁-С₆-алкил-С₄-С₆-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом или амино; С4-С6гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν; -С(=NН)NЯ·_ιКз.

каждый К.!, Я₂, Я₃, Я₄, Я₅, Я₈ и Я₁₀, независимо, обозначают водород или С1-С₆-алкил, или Я! и Я₂вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С4-С6-гетероциклоалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, или Я2 и Я3 вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С4-С6-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, или Я1 и Я3 вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать С4-С6-циклоалкил;

каждый Яб и Я₇, независимо, обозначает водород или С1-С₆-алкил или Яб и Я₇ вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать гетероциклическое кольцо, имеющее от 4 до 6 кольцевых атомов;

каждый Я₉, независимо, обозначает водород или метил;

каждый Я_п, независимо, обозначает водород, гидроксил, амино или С1-С₆-алкил;

каждый Я₁₂, независимо, обозначает гидроксил или амино;

каждый р, независимо, означает целое число от 1 до 5, в которой (ί) по меньшей мере два из φι, Оз и Оз отличаются от водорода и (ίί) если 0₁ обозначает водород, то по меньшей мере один из Оз и Оз обозначает -С(=NН)NЯ₄Я5.

2. Соединение по п.1, в котором Я₈ обозначает водород.

3. Соединение по п.1 или 2, в котором каждый Я₉ обозначает метил.

4. Соединение по любому из пп.1-3, в котором 0₁ и 0₇ отличаются от водорода.

- 134 017824

5. Соединение по п.4, в котором 0₃, обозначает водород.

6. Соединение по п.4 или 5, в котором 0₁ обозначает где В₁ обозначает водород;

В₂ обозначает водород; каждый В обозначает водород.

7. Соединение по п.6, в котором 0₁ обозначает

8. Соединение по п.4 или 5, в котором 0₁ обозначает где В1 обозначает водород;

В2 и В3 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют С4-С6-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν.

9. Соединение по п.4 или 5, в котором 0₁ обозначает где В3 обозначает водород;

В₁ и В₂ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют С₄-С₆-гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν.

10. Соединение по п.4 или 5, в котором 0₁ обозначает где В₂ обозначает водород;

В! и В₃ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют С₄-С₆-циклоалкил.

11. Соединение по п.4 или 5, в котором 0₁ обозначает где В₂ обозначает водород; каждый В₃, обозначает водород.

12. Соединение по п.4 или 5, в котором 0₁ обозначает где В2 обозначает водород; каждый В3 обозначает водород.

13. Соединение по любому из пп.4-12, в котором О₃ обозначает -(СВ₁₀В_п)_рВ₁₂.

- 135 017824

14. Соединение по п.13, в котором каждый И₁₀ обозначает водород.

15. Соединение по п.14, в котором каждый Иц обозначает водород.

16. Соединение по любому из пп.4-12, в котором 0₂ обозначает -С1-С₆-алкил-С₃-С1₀-циклоалкил, в случае необходимости замещенный амино, гидроксилом или -С₁-алкиламино.

17. Соединение по любому из пп.4-12, в котором 0_; обозначает -С1-С₆-алкил-С₄-С₆гетероциклилалкил, в котором гетероатом представляет собой Ν, в случае необходимости замещенный гидроксилом, амино или -С₁-С₆-алкилом.

18. Соединение по п.4, в котором соединение представляет собой 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(И)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(И)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(метилпиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(И)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(метилциклопропил)-1-(4-амино-2(И)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(3 -аминопропил)-1-(4-амино-2(И)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-метилциклопропил-1-(3-амино-2(И)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-метилпиперидинил-1 -(3 -амино-2(И)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(3-амино-2(И)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(И)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(3-аминопропил)-1-(3-амино-2(И)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(метилпиперидин-4-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(метилциклопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(метилпиперидин-4-ил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(3-аминопропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(метилциклопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(3-амино-2-гидроксипропил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(2-гидроксиацетил)сизомицин; 6'-(3-аминопропил)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин; 6'-(2-гидроксипропанол)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин; 6'-(2(8)-гидроксипропанол)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(2-аминоэтилсульфонамид)сизомицин; 6'-(метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин; 6'-(2-гидрокси-4-аминобутил)-1-(3-гидроксипирролидин-3-илацетил)сизомицин; 6'-(метилциклопропил) -1-(3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(3-гидроксиазетидин-3-илацетил)сизомицин;

6'-(метил-( 1 -гидрокси-3 -метиламиноциклобутил)-1 -(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(3 -аминопропил)-1-(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин;

6'-(метилциклопропил) -1-(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин; 6'-(2-гидрокси-3 -аминопропил)-1 -(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин; 6'-(3 -аминопропил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(метилпирролидин-2-ил)-1-(4-амино-2(8)-гидроксибутирил)сизомицин; 6'-(3 -аминопропил)-1-(3 -гидроксиазетидин-3 -илацетил)сизомицин;

6'-(3 -аминопропил)-1-( 1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин; 6'-(метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(3-амино-2(8)-гидроксипропионил)сизомицин; 6'-(метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(1 -гидрокси-3 -аминоциклобутилацетил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(1-гидрокси-3-аминоциклобутилацетил)сизомицин; 6'-метилциклопропил-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин; 6'-(метил-транс-3-аминоциклобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин; 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин; 6'-(3-аминопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин;

6'-(метил-транс-3 -аминоциклобутил)-1 -(3 -гидроксипирролидин-3 -илацетил)сизомицин; 6'-(2-гидрокси-3-аминопропил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин или 6'-(метил-3-амино-1-гидроксициклобутил)-1-(2-(азетидин-3-ил)-2-гидроксиацетил)сизомицин.

19. Соединение по любому из пп.1-3, в котором 0₁ и 0₃ отличаются от водорода.

20. Соединение по п.19, в котором Оз обозначает водород.

21. Соединение по любому из пп.1-3, в котором О₂ и Оз отличаются от водорода.

22. Соединение по п.21, в котором 0₁ обозначает водород.

23. Соединение по п.4, представляющее собой 6'-(2-гидроксиэтил)-1-(4-амино-2(8)гидроксибутирил)сизомицин.

- 136 017824

24. Способ лечения бактериальной инфекции у млекопитающего, включающий введение млекопитающему эффективного количества соединения по любому из пп.1-23.