EA012240B1 - Пролекарства ингибиторов киназы pi-3 - Google Patents

Пролекарства ингибиторов киназы pi-3 Download PDF

Info

Publication number
EA012240B1
EA012240B1 EA200501563A EA200501563A EA012240B1 EA 012240 B1 EA012240 B1 EA 012240B1 EA 200501563 A EA200501563 A EA 200501563A EA 200501563 A EA200501563 A EA 200501563A EA 012240 B1 EA012240 B1 EA 012240B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
acid
compounds
group
solution
Prior art date
Application number
EA200501563A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200501563A1 (ru
Inventor
Джозеф Р. Гарлич
Дональд Л. Дерден
Мэри Паттерсон
Дзиндон Су
Роберт Г. Сур
Original Assignee
Семафор Фармасьютикалз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Семафор Фармасьютикалз, Инк. filed Critical Семафор Фармасьютикалз, Инк.
Publication of EA200501563A1 publication Critical patent/EA200501563A1/ru
Publication of EA012240B1 publication Critical patent/EA012240B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
    • C07D207/404—2,5-Pyrrolidine-diones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms, e.g. succinimide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D475/00—Heterocyclic compounds containing pteridine ring systems
    • C07D475/02—Heterocyclic compounds containing pteridine ring systems with an oxygen atom directly attached in position 4
    • C07D475/04—Heterocyclic compounds containing pteridine ring systems with an oxygen atom directly attached in position 4 with a nitrogen atom directly attached in position 2

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение предлагает новый ингибитор киназы PI-3. Новое соединение представляет собой соединение SF 1126 формулыили его соль.

Description

Данное изобретение относится к пролекарствам ингибиторов ΡΙ-киназ и способам использования указанных ингибиторов.
Киназы ΡΙ-3 представляют собой большое семейство липидных киназ, которые фосфорилируют фосфатидилинозитол в положении Ό3, генерируя важный вторичный мессенджер, фосфатидилинозитол З'-фосфат. Представители семейства киназ ΡΙ-3 делятся на три класса, исходя из гомологии последовательности и продукта, образуемого путем ферментативного катализа. Киназы ΡΙ-З класса I состоят из 2 субъединиц: каталитической субъединицы 110 кДа и регуляторной субъединицы 85 кДа. Киназы ΡΙ-3 класса Ι вовлечены в важнейшие события передачи (трансдукции) сигнала, происходящие по механизму обратной связи с участием цитокинов, интегринов ростовых факторов и иммунорецепторов, что наводит на мысль, что контроль этого пути может привести к важнейшим терапевтическим эффектам.
Ингибирование киназы ΡΙ-3 класса Ι индуцирует апоптоз, блокирует индуцированный опухолью ангиогенез ίη νίνο, и увеличивает чувствительность к действию радиации (радиочувствительность) некоторых опухолей. ЬУ294002 (2-(4-морфолинил)-8-фенил-4Н-1-бензопиран-4-он) (соединение 1, которое также является соединением 1101) представляет собой общеизвестный специфический ингибитор киназ ΡΙ-3 класса Ι и, как было показано, обладает противораковыми свойствами.
Однако противораковые применения ЬУ294002 сильно ограничены его недостаточной растворимостью в воде и из-за его плохой фармакокинетики. Кроме того, БУ294002 не имеет свойств, специфичных в отношении определенного типа ткани и, как было показано, быстро метаболизирует у животных. Из-за указанных факторов возникает необходимость во введении ЬУ294002 через частые интервалы времени и, в связи с чем, возникает потенциал также ингибировать киназы ΡΙ-3 в нормальных клетках, что тем самым приводит к нежелательным побочным действиям.
В настоящее время продолжает существовать потребность в новых ингибиторах киназ ΡΙ-3 класса Ι с улучшенными фармакокинетическими и фармакодинамическими свойствами. Настоящее изобретение реализует эти потребности и обеспечивает другие присущие ему преимущества.
Настоящее изобретение относится к просоединениям, содержащим кватернизованный (четвертичный) азот, при этом одна связь кватернизованного азота является гидролизуемой и после гидролиза указанной связи образуется соединение формулы
где К! и независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гидроксил, галоген, алкокси, гетероцикл, циано, амино или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный циклоалифатический радикал или необязательно замещенный арил;
К3 представляет Н, необязательно замещенный алифатический радикал и необязательно замещенный арил;
К4 и К5 независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гетероцикл, арилокси, карбокси или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный гетероцикл или необязательно замещенный гетероарил.
Просоединение может иметь формулу
где кольцо А представляет собой бензольное кольцо;
Ζ1 и Ζ2 независимо представляют собой 8 или О;
К! и К2 независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гидроксил, галоген, алкокси, гетероцикл, циано, амино или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный циклоалифатический радикал или необязательно замещенный арил;
- 1 012240
Я3 представляет собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал и необязательно замещенный арил;
Я4 и К5 независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гетероцикл, арилокси, карбокси или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный гетероцикл или необязательно замещенный гетероарил;
Р6 представляет собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, алкокси, карбокси, амино, гетероцикл, арилокси и необязательно замещенное к тому же средство, обеспечивающее целенаправленную доставку активного вещества к ткани-мишени (в дальнейшем, таргетирующее средство); и
Ь представляет линкерную группу (линкер).
Таргетирующее средство может представлять собой витамин, пептид, белок, липосому, обладающее тропностью к костной ткани (остеотропное) средство или хрящищущее (в дальнейшем имеющее сродство к хрящевой ткани) средство, т.е. средство, нацеленное на диффузию в хрящевую ткань.
Настоящее изобретение также относится к промежуточным соединениям формулы
где X представляет группу галогена, предпочтительно С1 или I;
Υ представляет -СН2-, -СН(СНз)-, -СН(РЬ)-, -С(СНз)(СООН)- или СН(СН(СНз)2)-;
Ζι и Ζ2 независимо представляют 8 или О; и п=0, 1.
Кроме того, настоящее изобретение относится к применению просоединений для лечения состояния, ассоциируемого с активностью киназ ΡΙ-3, воспалительного заболевания, возрастной дегенерации желтого пятна, состояний, ассоциируемых с мутантным ΡΤΕΝ, гипертензии, панкреатита, язв, рака; нарушения функции лейкоцитов; индуцирования апоптоза; повышения чувствительности опухолевых клеток к химиотерапии; увеличения чувствительности опухолевых клеток к воздействию радиации; ингибирования индуцированного опухолью ангиогенеза; ингибирования ангиогенных процессов, ассоциируемых с незлокачественными заболеваниями; улучшения функционирования стента; ингибирования фосфатидилинозитол 3-киназы в цельной клетке пациента, включающему введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества композиции, содержащей просоединения настоящего изобретения. Просоединения можно вводить пациенту путем медленного внутривенного (ί.ν.) вливания.
Кроме того, настоящее изобретение относится к способу подавления дифференциации клетокпредшественников, включающему контактирование клеток-предшественников с эффективным количеством композиции, содержащей просоединение данного изобретения.
Настоящее изобретение также относится к очистке просоединений данного изобретения путем добавления к раствору, содержащему по крайней мере 0,1% (об./об.) кислоты просоединений. Раствор, содержащий просоединение, хроматографируют, предпочтительно посредством ВЭЖХ, чтобы выделить просоединение.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 показывает химическую структуру ΕΌΤΜΡ, ΌΘΤΜΡ, ΑΒΌΤΜΡ, ΒΑΌ, ΜΤΧ-ΒΡ и СЕ-ВР.
Фиг. 2 показывает химические структуры потенциальных, имеющих сродство к костной ткани, средств.
Фиг. 3 показывает химическую реакцию для модификации фосфоната в имеющем сродство к костной ткани средстве.
Фиг. 4 показывает реакцию алкилирования для модифицирования фосфоната в имеющем сродство к костной ткани средстве.
Фиг. 5 представляет концепцию для химической модификации ΕΌΤΜΡ и ΌΘΤΜΡ.
Фиг. 6 показывает ингибирование фагоцитоза соединением ΕΥ294002 в клетках 1774. Столбцы означают фагоцитарный индекс или процент клеток, позитивных в отношении фагоцитарного ответа. Фагоцитарный индекс представляет собой число &КВС'§ (овечьи эритроциты), обнаруживаемых в 100 клетках 1774, и % фагоцитирующих клеток означает % 1774 клеток, которые фагоцитировали по крайней мере 1 &КВС. Планки погрешностей представляют стандартное отклонение среднего.
Фиг. 7 показывает УФ- и ЕЬ8-хроматограммы соединения 1126 (А036-33).
Фиг. 8 показывает масс-спектр положительных ионов соединения 1126 (А036-33).
Фиг. 9 показывает, что Ανβ3-целенаправленные ингибиторы киназы ΡΙ-3 аннулировали образование трубок эндотелиальных клеток ЕЭС-СВЕ1 на матригеле.
Прежде чем будут раскрыты и описаны соединения, продукты, композиции и способы настоящего изобретения, необходимо понять, что используемая здесь терминология представлена только для описания конкретных вариантов осуществления и, как подразумевается, не является ограничивающей.
На протяжении этого изобретения, где упомянуты публикации, раскрытия этих публикаций вклю
- 2 012240 чены в этот патент в полном объеме в виде ссылки, чтобы более полно описать состояние области, к которой относится данное изобретение.
1. Определения.
Используемый здесь термин разветвленный относится к группе, содержащий от 1 до 24 атомов основной цепи, и эта основная цепь группы содержит одно или несколько побочных ответвлений от основной цепи. Предпочтительные разветвленные группы содержат от 1 до 12 атомов основной цепи. Примеры разветвленных групп включают, но не ограничиваются ими, изобутил, т-бутил, изопропил, -СН2СН2СН(СНз)СН2СНз, -СН2СН(СН2СНз)СН2СНз, -СН2СН2С(СНз)2СНз, -СН2СН2С(СНз)з и т.п.
Используемый здесь термин неразветвленный относится к группе, содержащей от 1 до 24 атомов основной цепи, и эта основная цепь группы простирается по прямой (линии). Предпочтительные неразветвленные группы содержат от 1 до 12 атомов основной цепи.
Используемый здесь термин циклический или цикло, один или в комбинации, относится к группе, содержащей одно или несколько замкнутых колец, насыщенных ли, или ненасыщенных, и эти циклические системы имеют от з до 12 атомов в своей (циклической) структуре, предпочтительно от з до 7 атомов в своей (циклической) структуре.
Используемый здесь термин низший относится к группе с 1-6 атомами в основной цепи.
Используемый здесь термин насыщенный относится к группе, в которой все имеющиеся валентные связи атомов основной цепи связаны с другими атомами. Типичные примеры насыщенной группы включают, но не ограничиваются ими, бутил, циклогексил, пиперидин и т. п.
Используемый здесь термин ненасыщенный относится к группе, в которой по крайней мере одна имеющаяся валентная связь двух соседних атомов основной цепи не связана с другими атомами. Типичные примеры ненасыщенной группы включают, но не ограничиваются ими, -СН2СН2СН=СН2, фенил, пиррол и т. п.
Используемый здесь термин алифатический относится к неразветвленной (прямой), разветвленной или циклической углеводородной группе, которая может быть замещенной или незамещенной и которая может быть насыщенной или ненасыщенной, но которая не является ароматической. Термин алифатический дополнительно включает алифатические группы, которые включают атомы кислорода, азота, серы и фосфора, замещающие один или несколько углеродов углеводородной цепи.
Используемый здесь термин ароматический относится к ненасыщенной циклической углеводородной группе, имеющей 4п+2 делокализованных п(пи)-электронов, которая может быть замещенной или незамещенной. Термин ароматический дополнительно включает ароматические группы, которые включают атом азота, замещающий один или несколько углеродов основной углеводородной цепи. Примеры ароматических групп включают, но ими не ограничиваются, фенил, нафтил, тиенил, фуранил, пиридинил, (из)оксазоил и т.п.
Используемый здесь термин замещенный относится к группе, в которой один или несколько атомов водорода или других атомов углерода или подходящего гетероатома замещены другой группой. Используемые здесь предпочтительные замещенные группы замещены одним-пятью, наиболее предпочтительно одним-тремя заместителями. Атом с двумя заместителями обозначают ди, в то время как атом с больше чем двумя заместителями обозначают поли. Типичные примеры указанных заместителей включают, но ими не ограничиваются, алифатические группы, ароматические группы, алкил, алкенил, алкинил, арил, алкокси, галоген, арилокси, карбонил, акрил, циано, амино, нитро, фосфатсодержащие группы, серосодержащие группы, гидроксил, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, арилоксикарбонилокси, алкилкарбонил, арилкарбонил, алкоксикарбонил, аминокарбонил, алкиламинокарбонил, диалкиламинокарбонил, алкилтиокарбонил, ациламино, амидино, имино, алкилтио, арилтио, тиокарбоксилат, алкилсульфинил, трифторметил, азидо, гетероциклил, алкиларил, гетероарил, семикарбозидо, тиосемикарбазидо, малеимидо, оксимино, имидат, циклоалкил, циклоалкилкарбонил, диалкиламино, арилциклоалкил, арилкарбонил, арилалкилкарбонил, арилциклоалкилкарбонил, арилфосфинил, арилалкилфосфинил, арилциклоалкилфосфинил, арилфосфонил, арилалкилфосфонил, арилциклоалкилфосфонил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, арилциклоалкилсульфонил, их комбинации и вышеуказанные с заместителями.
Используемый здесь термин незамещенный относится к группе, которая не содержит никаких других групп, связанных с ней, или замещений в ней.
Используемый здесь термин алкил, один или в комбинации, относится к разветвленной или неразветвленной (прямой), насыщенной алифатической группе. Типичные примеры алкильных групп включают, без ограничения, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, третбутил, октил, децил, тетрадецил, гексадецил, эйкозил, тетракозил и т. п.
Используемый здесь термин алкенил, один или в комбинации, относится к разветвленной или прямой ненасыщенной алифатической группе, содержащей по крайней мере одну углерод-углеродную двойную связь, которая может находиться в любой стабильной точке вдоль цепи. Типичные примеры алкенильных групп включают, но ими не ограничиваются, этенил, Е- и Ζ-пентенил, деценил и т.п.
Используемый здесь термин алкинил, один или в комбинации, относится к разветвленной или неразветвленной (прямой), ненасыщенной алифатической группе, содержащей по крайней мере одну угле род-углеродную тройную связь, которая может находиться в любой стабильной точке по цепи. Типичные примеры алкинильных групп включают, но не ограничиваются ими, этинил, пропинил, пропаргил, бутинил, гексинил, децинил и т.п.
Используемый здесь термин арил, один или в комбинации, относится к замещенной или незамещенной ароматической группе, которая может быть необязательно конденсирована с другими ароматическими или неароматическими циклическими группами. Типичные примеры арильных групп включают, но не ограниваются ими, фенил, бензил, нафтил, бензилидин, ксилил, стирол, стирил, фенетил, фенилен, бензотриил и т.п.
Используемый здесь термин алкокси, один или в комбинации, относится к алкильной, алкенильной или алкинильной группе, связанной через простую (ординарную) концевую эфирную связь. Примеры алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, нбутокси, 2-бутокси, трет-бутокси, н-пентокси, 2-пентокси, 3-пентокси, изопентокси, неопентокси, нгексокси, 2-гексокси, 3-гексокси, 3-метилпентокси, фторметокси, дифторметокси, трифторметокси, хлорметокси, дихлорметокси и трихлорметокси.
Используемый здесь термин арилокси, один или в комбинации, относится к арильной группе, связанной через простую концевую эфирную связь.
Используемый здесь термин галоген, галогенид или гало, один или в комбинации, относится к фтору Р, хлору С1, брому Вг, йоду I и астату Άΐ. Типичные примеры групп галогена включают, но не ограничиваются ими, хлорацетамидо, бромацетамидо, иодацетамидо и т.п.
Используемый здесь термин гетеро, один или в комбинации, относится к группе, которая включает один или несколько атомов любого элемента, отличного от углерода или водорода. Типичные примеры гетерогрупп включают, но ими не ограничиваются, те группы, которые содержат гетероатомы, включая, но не ограничиваясь ими, азот, кислород, серу и фосфор.
Используемый здесь термин гетероцикл относится к циклической группе, содержащей гетероатом. Типичные примеры гетероциклов включают, но не ограничиваются ими, пиридин, пиперадин, пиримидин, пиридазин, пиперазин, пиррол, пирролидинон, пирролидин, морфолин, тиоморфолин, индол, изоиндол, имидазол, триазол, тетразол, фуран, бензофуран, дибензофуран, тиофен, тиазол, бензотиазол, бензоксазол, бензотиофен, хинолин, изохинолин, азапин, нафтопиран, фуранобензопиранон и т. п.
Используемый здесь термин карбонил или карбокси, один или в комбинации, относится к группе, которая содержит углерод-кислородную двойную связь. Типичные примеры групп, которые содержат карбонил, включают, но не ограничиваются ими, альдегиды (т.е. формилы), кетоны (т.е. ацилы) карбоновые кислоты (т. е. карбоксилы), амиды (т. е. амидо), имиды (т. е. имидо), сложные эфиры, ангидриды и т. п.
Используемый здесь термин акрил, один или в комбинации, относится к группе, представленной СН2=С(0)С(О)О-. где О означает алифатическую или ароматическую группу.
Используемый здесь термин циано, цианат или цианид, один или в комбинации, относится к двойной связи углерод-азот. Типичные примеры циано групп включают, но не ограничиваются ими, изоцианат, изотиоцианат и т. п.
Используемый здесь термин амино, один или в комбинации, относится к группе, содержащей атом азота в основной цепи. Типичные примеры аминогрупп включают, но не ограничиваются ими, алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино, алкилариламино, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, карбамоил, уреидо и т. п.
Используемый здесь термин фосфатсодержащая группа относится к группе, содержащей по крайней мере один атом фосфора в окисленном состоянии. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, фосфоновые кислоты, фосфиновые кислоты, фосфатные сложные эфиры, фосфинидены, фосфино, фосфинилы, фосфинилидены, фосфо, фосфоно, фосфоранилы, фосфоранилидены, фосфорозо и т.п.
Используемый здесь термин серосодержащая группа относится к группе, содержащей атом серы. Типичные примеры включают, но не ограничиваются ими, сульфгидрилы, сульфено, сульфино, сульфинилы, сульфосульфонилы, тио, тиоксо и т.п.
Используемый здесь термин необязательный или необязательно означает, что впоследствии описанное событие или обстоятельство может или не может иметь место и что описание включает примеры, в которых указанное событие или обстоятельство имеет место и примеры, где этого нет. Например, выражение необязательно замещенный алкил означает, что алкильная группа может быть как замещенной, так и незамещенной, и что описание включает как незамещенный алкил, так и замещенный алкил.
Термин эффективное количество», при использовании ссылаясь на соединение, продукт или композицию, предусмотренные здесь, означает количество соединения, продукта или композиции, достаточное для получения желаемого результата. Необходимое (для введения) точное количество обычно варьируется в зависимости от используемого конкретного соединения, продукта или композиции, способа его введения и т.п. Таким образом не всегда можно определить точное эффективное количество. Однако соответствующее эффективное количество может быть установлено квалифицированным в данной области специалистом, информированном в отношении раскрытия существа данного изобретения, используя только рутинное экспериментирование.
- 4 012240
Используемый здесь термин подходящий относится к группе, которая совместима с соединениями, продуктами или композициями, предусмотренными здесь для достижения поставленной цели. Пригодность для заявленной цели может быть установлена квалифицированным в данной области специали стом, используя только рутинное экспериментирование.
Используемый здесь термин гидролизуемый относится к группе, или способной, или склонной к гидролизу (т.е. расщеплению молекулы или группы на две или несколько новых молекул или группу).
2. Соединения.
Настоящее изобретение предлагает соединение, которое после расщепления одной связи кватернизованного амина дает соединение формулы
Соединение 2 где кольцо А представляет бензольное кольцо;
Ζ! и Ζ2 независимо представляют 8 или О;
К! и К2 независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гидроксил, галоген, алкокси, гетероцикл, циано, амино или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный циклоалифатический радикал или необязательно замещенный арил;
К3 представляет собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал и необязательно замещенный арил; и
К4 и К5 независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гетероцикл, арилокси, карбокси или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный гетероцикл или необязательно замещенный гетероарил.
Предпочтительно расщепление одной связи кватернизованного амина дает ЬУ294002 (соединение 1).
Настоящее изобретение также предлагает соединение формулы
Соединение 3 где кольцо А представляет собой бензольное кольцо;
Ζ1 и Ζ2 независимо представляют собой 8 или О;
К1 и К2 независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гидроксил, галоген, алкокси, гетероцикл, циано, амино или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный циклоалифатический радикал или необязательно замещенный арил;
К3 представляет собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал и необязательно замещенный арил;
К4 и К5 независимо представляют собой Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, гетероцикл, арилокси, карбокси или, взятые вместе, образуют необязательно замещенный гетероцикл или необязательно замещенный гетероарил; и
К6 представляет Н, необязательно замещенный алифатический радикал, необязательно замещенный арил, алкокси, карбокси, амино, гетероцикл, арилокси и необязательно замещенное к тому же таргетирующее средство; и
Ь представляет группу линкера.
В предпочтительном варианте соединения 2, 3 настоящего изобретения представляют такие соединения, где К1-кольцо А-К2 выбран из группы, состоящей из нижеследующего:
- 5 012240
В предпочтительном варианте соединения 2, 3 настоящего изобретения представляют собой такие соединения, где Κ4-Ν-Κ5 выбран из группы, состоящей из нижеследующего:
Ноа Нр Нт Но Ηό
Г й
В другом варианте соединения 2, 3 настоящего изобретения представляют собой такие соединения, где Кб выбран из группы, состоящей из нижеследующего:
- 6 012240
a. Линкер.
В другом варианте соединение 3 настоящего изобретения представляет собой такие соединения, где группа линкера является гидролизуемой. Группа линкера пролекарства может быть расщеплена ферментативным расщеплением или предпочтительно гидролизом в физиологических условиях, включая, но не ограничиваясь ими, водную среду в организме животных, с получением соединения 2. Скорость гидролиза группы-линкера при физиологических условиях составляет предпочтительно от около 1 мин полупериода существования до около 48 ч полупериода существования.
b. Гидролиз.
Используемый здесь термин гидролизуемый относится к группе, или способной, или склонной к гидролизу (т.е. расщеплению молекулы или группы на две или несколько новых молекул или группу вследствие ие! внедрения молекулы воды) со скоростью около 1 мин полупериода существования до 48 ч полупериода существования.
Линкерная группа может быть любой группой, которая может гидролизоваться или расщепляться ферментативным путем с получением соединения 2. В предпочтительном варианте линкерная группа имеет формулу *7-4 «в где Ζ3 и Ζ4 независимо представляют 8 или О; и
И представляет -СН2-, -СН(СН3)-, -СН(Рй)-, -С(СН3)(СООН)- или СН(СН(СН3)2)-.
Типичный пример гидролиза группы-линкера пролекарства с получением соединения 2 представ
- 7 012240 лен на схеме 1, где Ζ3 и Ζ4 независимо представляют, каждый, О. Гидролиз или ферментативное расщепление К6 сложного эфира дает гемиаминаль, который схлопывается с выделением К- альдегида, тем самым генерируя соединение 2, содержащее свободный третичный амин. Как К6, так и К- можно подобрать таким образом, чтобы обеспечить различные скорости превращения обратно в свободный третичный амин. Например, введением замещения в й6 и К7, или их комбинации, можно повысить устойчивость к гидролизу. Кроме того, электрон-акцептирующие группы на К6-остатке снижают устойчивость. Помимо изменения й6 и К7, раскрытых здесь, дополнительные факторы, которые могут изменять стабильность кватернизованного амина, можно найти в N. Вобог, 1оигиа1 о! Меб1С1па1 СНетШгу 1980, νοί. 23 #5 р. 469480 Зой Игидк. 1. ЬаЫ1е ОнаЮгпагу Лттошит 8а11ь ак Зой ЛийтюгоЫак; апб 6. ВгоиШейе е! а1.; 1оигпа1 о! Рйагтасеийса1 Заепсек, 1996, νο1. 85 #6, р. 620-623, содержание которых включено в настоящее описание в виде ссылки.
Схема 1
Гемиаминаль Карбоновая кислота
Спонтанное превращение
Альдегид Соединение 2 или кетон
с. Таргетирующее средство.
В другом варианте соединения настоящего изобретения представляют соединения, где Кб дополнительно включает одно или несколько таргетирующих средств (Т), ковалентно связанных с ним. Таргетирующие средства дают возможность селективно доставить пролекарства настоящего изобретения в конкретные типы клеток, тканей, органов или внеклеточных структур. Как было обсуждено выше, лечение соединением 1 (ЬУ 294002) осложняется его низкой биодоступностью, быстрым метаболизмом (превращением в организме) и побочными действиями, так как соединение не является специфичным в отношении ткани (тканеспецифичным). В соответствии с этим крайне желательно ограничить локализацию лекарственного средства в той области лечения или, по крайней мере, не допустить его доставку в ткани, где оно может вызвать побочные действия, и гарантировать использование эффективных, но нечрезмерных количеств лекарственного средства в любое конкретное время. Использование таргетирующих средств может позволить пролекарствам настоящего изобретения сконцентрироваться в месте лечения, а не равномерно распределиться по всему телу или подвергнуться преждевременному превращению или достаточно быстро экскретировать. Сразу после доставки к месту лечения линкер может быть отщеплен ферментативным путем или гидролизован, как описано выше, с получением соединения 2. Кроме того, использование таргетирующих средств может ограничить дозу, необходимую для введения, чтобы достичь эффективной концентрации лекарственного средства в месте лечения. Использование таргетирующих средств позволяет избежать частого введения доз или даже сделает возможным использование альтернативных способов введения для того, чтобы обеспечить эффективную концентрацию лекарственного средства в месте лечения.
Таргетирующие средства предпочтительно связаны с соединениями по данному изобретению посредством ковалентной связи, которая может быть образована способами, включая, но не ограничиваясь ими, ковалентное взаимодействие нуклеофильной или электрофильной группы таргетирующего средства с электрофильной или нуклеофильной группой (соответственно) на линкере.
В одном варианте настоящего изобретения соединения 2, 3 настоящего изобретения представляют собой соединения, где К6-Т выбран из группы, состоящей из нижеследующего:
- 8 012240
Таргетирующие средства, которые могут быть подвергнуты взаимодействию с пролекарствами настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, углеводы, витамины, пептиды, белки, нуклеозиды, нуклеотиды, нуклеиновые кислоты, липосомы, липиды, остеотропные средства и имеющие сродство к хрящевой ткани средства. Таргетирующее средство может также представлять собой молекулу, которая связывается с рецептором в желаемой ткани и необязательно транспортируется в клетку рецептор-опосредованным способом. Типичные примеры таких таргетирующих средств включают, без ограничения, диазепины, которые связываются с переферическими бензодиазепиновыми рецепторами (РВКб), присутствующими в глиальных клетках в головном мозге. Типичные примеры указанных диазепинов рассмотрены в публикации С. Ттараш, с1 а1. Вюсоищда!с С11сш. 2003, νοί. 14, р. 830-839 Рспр11сга1 Всп/оШахсртс ВсссрЮг Ыдапб-Мс1рйа1аи Сопщда1с5 Гог Ро!спИа1 8с1сс!йс Эгид Пс1йсту 1о Вташ Титога», содержание которой включено в настоящее описание путем ссылки.
Типичные витамины, которые могут быть использованы в качестве таргетирующих средств, включают, без ограничения, фолат, витамин В12 или витамин С. Термин фолат охватывает производные фолиевой кислоты со способностью связываться с фолат-рецепторами. Типичные примеры фолатов, которые могут быть использованы в качестве таргетирующих средств, включают, но не ограничиваются ими, фолиевую кислоту, фолиновую кислоту, птерополиглутаминовую кислоту, и связывающиеся с фолатным рецептором птеридины, такие как тетрагидроптерины, дигидрофолаты, тетрагидрофолаты и их деаза- и дидеазааналоги. Другие подходящие фолаты представляют собой аналоги фолата, включая, но не ограничиваясь ими, аминоптерин, аметоптерин (метотрексат), Ы10-метилфолат, 2-дезаминогидроксифолат, деазааналоги, такие как 1-деазаметоптерин или 3-деазаметоптерин, и 3'5'-дихлор-4-амино-4-дезокси-Ы10метилптероилглутаминовую кислоту (дихлорметотрексат). Способы конъюгирования молекул с фолатами, которые являются подходящими для ковалентного связывания с соединениями по данному изобретению, раскрыты в патентах США 6576239, 5820847, 5688488, 5108921, 5635382 и 5416016, содержание которых включено в настоящее описание в виде ссылки. Способы конъюгирования молекул с витамином С, которые пригодны для ковалентного связывания с соединением настоящего изобретения, раскрыты в 8. МапйШш 1. Мсб. Сйст. Уо1. 45, р. 559-562, 2002, содержание которого включено в настоящее описа
- 9 012240 ние в виде ссылки.
Типичные пептиды и пептидомиметики, которые могут быть использованы в качестве таргетирующих средств, включают, без ограничения, ΚΟΌ-содержащий пептид, выбранный из группы, состоящей из Κ.ΟΌ, ο(ΚΟΌίΚ), витронектины, фибронектина, агонистов рецептора соматостатина и антагонистов рецептора соматостатина. Молекулы, которые связываются с рецептором ауЬ3 интегрина и действуют в качестве антагонистов, могут быть использованы в качестве таргетирующих средств, как описано в патентах США 6552079, 6426353 В, международной публикации \УО 2002/40505 А2, и публикациях патентов США 2002/0055499, 2002/0061885, 2002/0065291, 2002/0072500, И.8. 2002/0072518; №. Агар е! а1. 8с1епсе νοί. 279, питЬег 16, 1998, р. 377-380; К.Д. Кок е! а1. Вю)опщда1е Скет. 2002, νοί. 13, рр. 128-135; ΌΑ 81рк1П5 е! а1. №1иге Мебкше νοί. 4, питЬег 5, 1998 рр. 623-626; Р.М. №ш!ег е! а1. Сапсег Яезеагск 2003, νοί. 63, рр. 5838-5843; и Ι.Ό. Нооб е! а1. 8с1епсе νοί. 296, р. 2404-2407; содержание которых входит в настоящее описание в виде ссылок. Типичные белки, которые могут быть использованы в качестве таргетирующих средств, включают, без ограничения, антитела или их фрагменты, такие как опухольспецифическое моноклональное антитело или его фрагмент. Типичные остеотропные средства, которые могут быть использованы в качестве таргетирующих средств, включают, без ограничения, фосфонат, фосфоновую кислоту, аминометилфосфоновую кислоту, фосфат, полифосфат и гидроксиапатитсвязывающие полипептиды. Другие пептиды включают хлортоксин (8И 6429187В1) и тканевый фактор (С.М. Бапха. е! а1. Тагде!еб АпйргойЕегайуе Эгид ОеНуегу !ο Уа5си1аг 8ιηοο11ι Ми5с1е Се11§ νίΐΐι а Мадпейс Реюпапсе 1тадшд №11юра1йс1е Сοп!^а5! Адеп!; С1гси1а1юп, 2002, νο1ите 106, р. 2842-2847).
Другие подходящие таргетирующие средства включают антитела. Антитела могут представлять собой антитела классов 1дС, 1дМ, 1дА, 1дБ или 1дЕ, или их фрагменты или их производные, включая РаЬ, Р(аЬ')2, Рб, и одноцепочечные антитела, двухцепочечные антитела, биспецифические антитела, бифункциональные антитела и их производные. Антитело может быть моноклональным антителом, поликлональным антителом, антителом со сродством определенного типа, или их смесями, которое проявляет достаточную связывающую специфичность по отношению к желаемому эпитопу (антигенная детерминанта) или последовательности, полученной из него. Антитела могут также представлять собой химерное антитело. Антитела могут быть направлены против ряда антигенных детерминант, включая антигенные детерминанты, связанные с опухолями, гистосовместимостью, и других антигенов клеточной поверхности, бактерий, грибов, вирусов, ферментов, токсинов, лекарственных средств и других биологически активных молекул. Антигены, ассоциируемые с опухолями, по отношению к которым антитела могут быть специфично реакционноспособны, включают, но не ограничиваются ими, карциноэмбриональный антиген (СЕА), муцины, такие как ТАС-72, глобулярные антигены жира человеческого молока, простатические сыворотные антигены (Р8А), простатический специфический мембранный антиген (Р8МА), Р8 (фосфатидилсерин), и рецепторы, включая, но не ограничиваясь ими, рецепторы 1Б-2, ЕСР, УЕСР и трансферрина. Другие типичные антигены, ассоциируемые с опухолями, включают, без ограничения, ассоциируемые с опухолями антигены, описанные в 2аюЬегд апб МсКепх1е, 1. С1ш. ОпотЕду, νο1. 3; р. 876-82 (1985), №О 01/68709 А1 и публикации патента США 2004/0009122 А1, содержание которых входит в настоящее описание в виде ссылки.
Другие подходящие таргетирующие средства включают глюкозу, галактозу, маннозу, маннозо-6фосфат, гормоны (например, инсулин, гормон роста и т. п.), ростовые факторы или цитокины (например, ТСРв, ЕСР, инсулиноподобный ростовой фактор и т.п.), УЕЕ(СаШАсАН).8иЬ.3 или производные, кобаламин, α-2 макроглобулины, гликопротеин, несодержащий частей солевой кислоты, альбумин, тексафирин, металлотексафирин, антитела, фрагмента антител (например, РаЬ), вариабельную область одноцепочечного антитела СсЕу), трансферрин, любой витамин и любой кофермент.
Таргетирующее средство может также представлять собой средство, которое доставляет пролекарство в костные ткани. Средства, обеспечивающие доставку в костные ткани (остеотропные средства), включают, но не ограничиваются ими, ЕБТМР, БОТМР и АВЕОТМР, которые раскрыты в патентах США 4937333, 4882142, 5064633 и международной публикации №О 94/00143, содержание которых входит в настоящее описание в виде ссылки. БОТМР и ЕБТМР могут быть присоединены к остатку линкера любым способом, включая, без ограничения, химию связывания, представленную на фиг. 3, и химию алкилирования, представленную на фиг. 4, где группа Я может содержать соответствующую электрофильную или нуклеофильную группу, которая взаимодействует с нуклеофильной или электрофильной (соответственно) группой на остатке линкера. Дополнительные детали относительно химии связывания рассмотрены в публикации Тейакебгоп 1999, 55, р. 12997-13010, содержание которой входит в настоящее описание в виде ссылки. Дополнительные детали относительно химии алкилирования представлены в Ргос. 8Р1Е-1п!. δοο Ор!. Епд. 1999, 3600; Вютебюа1 1тадп. Βерο^ιе^5 Буез & 1п8йитеп1а1, р. 99-106; патенте США 5177054; 1 Меб. Скет. 1994, 37, 498-511; Тейакебгоп Бейега, 1989, 30 #51 рр. 7141-7144; и патенте США 5955453, содержание которых включено в настоящее описание в виде ссылки.
Таргетирующее средство может быть использовано для доставки пролекарства в костные ткани в виде резервуара, медленно высвобождающего соединения настоящего изобретения. Таргетирующее средство может представлять собой обладающий тропностью к костной ткани (остеотропный) остаток,
- 10 012240 связанный с соединениями настоящего изобретения посредством расщепляемого кислотой линкера, присоединенного к кватернизованному амину. Примеры расщепляемого кислотой линкера включают, без ограничения, связь ортокислота-амид. При кислых условиях протеин-ЛСЬ-3 амидная связь легко расщепляется, высвобождая нативную аминогруппу амидной функциональности, как описано в международной публикации XVО 94/00143, содержание которой включено в настоящее описание в виде ссылки. Во время резорбции остеокластической костной ткани, которая происходит по кислотно-опосредованному механизму, соединение, привязывающее пролекарство к костной ткани, может расщепляться, высвобождая соединения по данному изобретению.
Таргетирующее средство, используемое для доставки пролекарств к костным тканям, может быть молекулой, которая связывается с №1е11-рецепторами. Передача сигналов локуса ηοίοΐι играет ключевую роль в развитии и дифференциации различных гемопоэтических процессов (нарушений). Как обсуждено в ΙιιηάΙ с1 а1., Βίοοά, 102 (11): 928а (2003), лигандиндуцированная передача сигнала локуса Νοίοΐι представляет собой новый ростовой фактор для клеток множественной миеломы и, предполагается, что эти взаимодействия способствуют лимфомагенезу множественной миеломы ίη νίνο.
Таргетирующее средство, используемое для доставки пролекарств к костным тканям (остеотропное средство), может иметь высокое сродство в отношении ионов кальция в гидроксиапатите, основная составляющая костной ткани. Соединение по данному изобретению может целенаправленно атаковать отложения кальция в областях тела других, чем костная ткань, как, например, отложения кальция в артериях, сердце, почке, желчном пузыре. Однако остеотропное средство идеально селективно связывается с костной тканью. Остеотропное средство притягивается к костной ткани субъекта, предпочтительно связывается с костной тканью при более высоком сродстве, чем с тканями некостной природы, и остается связанным в течение определенного периода времени, доставляя таким образом композицию в среду костной ткани. Другими словами, остеотропное средство предпочтительно связывается с костной тканью при сродстве, по крайней мере в 2 раза более высоком, (например, при сродстве по крайней мере в 3 раза, по крайней мере в 5 раз, по крайней мере в 10 раз или по крайней мере в 25 раз более высоком), чем остеотропное средство связывается с тканью некостной природы. Остеотропное средство обратимо связывается с костной тканью, что означает, в конечном счете, высвобождение остеотропного средства из костной ткани и выталкивание его из организма.
Остеотропное средство может оставаться связанным с костной тканью в течение периода времени, достаточного для того, чтобы дать возможность кватернизованному пролекарству прогидролизоваться, тем самым, доставляя активное лекарственное средство в клетки-мишени (например, клетки костного мозга). Остеотропное средство может оставаться связанным с костной тканью в течение от около 1 дня (например, около 2 дней, около 3 дней или около 7 дней) до около 1 года (например, около 330 дней, около 3б5 дней или около 400 дней), и по истечении этого времени остеотропное средство выбрасывается из организма. Остеотропное средство может оставаться связанным с костной тканью в течение от около 7 дней (например, около 7 дней, около 14 дней или около 21 дней) до около б месяцев (например, около 90 дней, около 120 дней или около 150 дней). Например, остеотропное средство может оставаться связанным с костной тканью в течение от около 30 дней и в течение этого времени лекарственное средство высвобождается. По истечении около 45 дней остеотропное средство должно высвободиться из костной ткани и, в конечном счете, экскретировать. Таким образом, остеотропное средство для использования в данном изобретении может быть выбрано, исходя из кинетики связывания с костной тканью. Наиболее перспективные с этой точки зрения остеотропные средства могут быть скринированы ίη νίίτο, определяя сродство к костной ткани (например, гидроксиапатиту) в многолуночном формате. Наиболее перспективные с этой точки зрения остеотропные средства могут быть также скринированы ίη νίνο, оценивая скорость и хронометраж экскреции наиболее перспективных остеотропных средств из организма. В этом отношении остеотропное средство предпочтительно выводится из организма через почки.
Остеотропное средство, в соответствии с желанием, выбирают из фосфата, фосфоната, бифосфоната, гидроксибифосфоната, аминометиленфосфоновой кислоты и кислого пептида. Остеотропное средство данного изобретения может нести одну, больше чем одну или смесь указанных групп. Например, остеотропное средство может быть фосфонатом, что означает, что остеотропное средство может включать один фосфонат, два фосфоната или три или большее число фосфонатов. Одно подходящее остеотропное средство, используемое в настоящем изобретении, представляет собой ΕΌΤΜΡ (этилендиамин-Ν,Ν,Ν',Ν'тетракисметиленфосфоновая кислота), химическая структура которой показана на фиг. 1, в настоящее время одобренное ΕΌΆ (Оиабгашс!)™ в виде радиоактивного комплекса 1538ш для доставки избирательной дозы облучения в метастаз в костную ткань для смягчения боли. ΕΌΤΜΡ представляет собой фосфонат, который содержит четыре группы фосфоновой кислоты и, в соответствии с этим, представляет собой тетрафосфонат. Соединения, такие как 1538ш-ЕОТМР, селективно локализуются в костной ткани, где присутствуют опухоли, по сравнению с нормальной костной ткани, при соотношении, больше чем 10:1, вероятно, потому что метаболический оборот кальция очень высок в метастатической области. 1538шΕΌΤΜΡ, как сообщается, быстро поглощается скелетом в метастазах остеобластической костной ткани и уходит из плазмы. Та часть соединения, которая не аккумулируется в скелете, как сообщается, быстро экскретирует и экскреция почти полностью происходит в пределах б ч после введения. (Ιίιηοηοί с1 а1.,
- 11 012240
Нс1сгоеуе1с5. 36, 2745 (1993)). Предполагается, что смягчение боли обусловлено облучением, исходящим от изотопа, связанного с метастазами остеобластической костной ткани, оказывающем некоторое действие на близлежащие метастические опухолевые клетки. Другой клинически полезной остеотропной системой является ΌΟΤΜΡ, химическая структура которого представлена на фиг. 1 и который в настоящее время проходит клинические испытания фазы III (называемая 8ΤΚ, целенаправленная доставка облучения в скелет) в виде радиоактивного комплекса 166Но, предназначенной для доставки больших доз облучения селективно в костный мозг для лечения множественной миеломы. Следует отметить, что радиоактивный комплекс 166Ηο-ΌΟΤΜΡ локализуется в скелетной системе и облучает близлежащий костный мозг, который вмещает злокачественные клетки миеломы. Аналогично Έιη-ΕΩΤΜΡ системе, фосфонат, который не локализуется в костной ткани, выводится из организма через мочу. В общем, поглощение скелетом составляет от около 20 до около 50% от введенной с помощью инъекции дозы, и локализация в областях скелета с опухолевым инфильтратом представлена на фиг. 7, Вауои1й е! а1., 1. Νιιοί. Мей., 36, 730 (1995).
Предпочтительным остеотропным средством является полифосфоновая кислота. Полифосфоновая кислота, как было показано, с успехом целенаправленно доставляет биологически активные молекулы в костные ткани. Например, конъюгация (посредством изотиоцианато-химии) полиаминофосфоновых кислот, таких как ΑΒΌΤΜΡ, химическая структура которой представлена на фиг. 1, с ростовыми факторами (чтобы стимулировать остеогенез) успешно привела к целенаправленной доставке ростовых факторов в костную ткань крыс (см., например, международную патентную заявку XVО 94/00145). Аналогично, остеотропные средства были связаны с белками. Например, биофосфонаты, которые были конъюгированы с человеческим сывороточным альбумином, успешно доставляли белок в костную ткань ίη νίΐτο (Вю!есйηοί. Ргод., 16. 258 (2000)) и ίη νίνο (Вю1еейпо1. Ргод., 16, 1116 (2000)). Использование остеотропных средств простирается за пределы доставки белков к костным тканям и включает, например, небольшие терапевтические молекулы. Конъюгат, содержащий обладающий тропностью к костной ткани бисфосфонат и алкилирующее средство, такой как ΒΑΌ (химическая структура которого представлена на фиг. 1, был генерирован (см., например, Χνίη^η е! а1., 1. Сапсег Век. С11п. Οηεοί., 111, 209 (1986)). В этой молекуле, алкилирующее средство не является специфичным в своем взаимодействии с мишенью (ДНК, ΌΝΑ), и поэтому нет необходимости в расщеплении между бисфосфонатом (т.е. остеотропным средством) и алкилирующим остатком. Бисфосфонат-алкилирующее средство проявило эффективность в модели остеосаркомы у крыс, используя ΒΑΌ. Был проведен другой ряд исследований, используя антифолат противоопухолевое средство, метотрексат, которое было ковалентно связано с бисфосфонатами с получением конъюгата, обозначенного МТХ-ВР и представленного на фиг. 1 (см., например, 8ΐιιΠζ е! а1., Еиг. 1. Мей. Сйеш., 27, 825 (1992); δίπΠζ е! а1., Еиг. 1. Мей. Сйеш., 28, 899 (1993); и 1 Ιοκιιιι е! а1., 1. ΝυΉ Мей., 37, 105 (1996)). Используя Тс-99т-меченый МТХ-ВР, было установлено, что около 15% введенной с помощью инъекции дозы локализуется в скелете через 4 ч после введения, при этом 61% дозы оказалось экскретировано (Ηο^η, см. выше). Кроме того, МТХ-ВР демонстрирует в пять раз более высокую противораковую активность по сравнению с метотрексатом, как таковым, на животных моделях трансплантированной остеосаркомы (8ΐιιι1ζ 1992, см. выше). Аналогичная работа была описана, используя конъюгат СР-ВР, группа карбоксифлуоресцеина с бифосфонатом на конце, чья химическая структура показана на фиг. 1 (Риркак1 е! а1., 1οιΐΓηη1 ο£ Эгид Τа^деί^ηд, 4, 117 (1994)). В этой молекуле группа СР представляет собой флуоресцентную метку-индикатор для количественной оценки фармакокинетики и биораспределения, и она связана с остеотропным средством через сложноэфирную связь, которая чувствительна к гидролизу ίη νίνο. Исследования на крысах, инъецированных внутривенно, показали, что СР-ВР локализовался в костной ткани и служил механизмом медленного высвобождения СР, генерируемого посредством общего гидролиза сложноэфирной связи (Рицкакц см. выше).
В другом варианте остеотропное средство может быть пептидом, таким как (Ακρ)6 и (С1и)6. Обогащенная кислотой пептидная последовательность гликопротеин остеонектина, который имеется в избытке в костной ткани и дентине, имеет сильное сродство к гидроксиапатиту (Риркага е! а1., ВюсЫтюа е! ВюрНукюа ЛсЩ 53, 1292 (1996)). Таким образом, пептидные лиганды, содержащие кислые аминокислоты, являются идеальными кандидатами для остеотропных средств. Действительно, (С1и)10, при связывании с биотином, успешно доставлял меченый стрепавидин в гидроксиапатит (описано подробно в С'1ш аой Огде1, Вю^и^да^ Сйет., 8, 103 (1997), и международной патентной заявке νΟ 98/35703). Кроме того, период биологического полувыведения флуоресцеин-изотиоцианата, конъюгированного с (Ακρ)6, составлял 14 дней в бедренной кости (Какида1 е! а1., 1οιΐΓηη1 ο£ Βοηе аой Мшета1 Кекеатсй, 15(5), 936 (2000)), который является приемлемым периодом полувыведения для остеотропного средства настоящего изобретения. Аналогично, доставка конъюгатов эстрадиол-^^^ в костную ткань была продемонстрирована на животных, подвергнутых овариэктомии, с сопутствующим ингибированием остеопороза типа οκΝοροι^Нс (Какида1 е! а1., 1οιΐΓηη1 ο£ Βοηе аой Мшета1 Векеатсй (8ιιρρί 1), 14, 8534 (1999)). Полагают, что связь (Ακρ)6 с костной тканью подвергается метаболизму во время процесса ресорбции костной ткани, опосредованного остеокластами. Поэтому, кислый пептидный лиганд обеспечивает не только средство вербовки соединений в костную ткань, но также обеспечивает механизм медленного высвобождения соединений в остеоциты и окружающую ткань.
- 12 012240
Другие примеры остеотропных средств включают, но не ограничиваются ими, амино- и гидроксиалкилфосфоновые кислоты и дифосфоновые кислоты; гидроксибисфосфоновые кислоты, включая алендронат, памидронат, 4-аминобутилфосфоновую кислоту, 1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновую кислоту и аминометиленбисфосфоновую кислоту; фосфаты, такие как фитиновая кислота; и аминометиленфосфоновые кислоты, такие как М,М-бис(метилфосфоно)-4-аминобензойная кислота и нитрилотри(метилфосфоновая кислота). Неограничивающие примеры некоторых остеотропных средств представлены на фиг. 2.
Предпочтительно остеотропное средство представляет собой аминометиленфосфоновую кислоту. Под термином аминометиленфосфоновая кислота понимают соединение, которое содержит остаток -ЫСН2РОзН, где аминогруппа имеет одну, две или три присоединенные группы метиленфосфоновой кислоты, и может быть дополнительно замещена другими химическими остатками. Аминометиленфосфоновая кислота может включать одну или несколько групп фосфоновой кислоты и одну или несколько аминогрупп. Примеры указанных аминометиленфосфоновых кислот включают, но не ограничиваются ими, соединения Е-Ν, показанные на фиг. 2.
Предполагается, что вышеуказанные остеотропные средства и другие остеотропные средства могут быть присоединены через один из гетероатомов или путем химической модификации, которая устанавливает дополнительную точку присоединения. Например, ΕΌΤΜΡ может быть связана с линкером одним из оксидов фосфора, образуя фосфонатную связь, как иллюстрировано на фиг. 3 (см., например, Уюйа бе А1шеб1а е! а1., Те1тайебгоп, 55, 12997-13010 (1999)). Фосфористый кислород может быть также алкилирован, как показано на фиг. 4, где группа К. может иметь, например, боковую аминогруппу, обеспечивая точку вторичного присоединения для лигирования, например, с активированным ПЭГ (ΡΕΟ). Другие типы алкилирования, которые могли бы быть использованы в данном изобретении, включают, без ограничения, примеры, аналогичные примеру, включающему ΌΟΤΜΡ, как подробно было описано в Сйатех е! а1., Вюшеб1еа1 1тадтд: Керойетк, Эуек. & 1пйитеп!айоп, Соп!ад & 8еу1ск-Мигас1а, Еб§., Ргос. 8ΡΙΕ, Уо1. 3600, 99-106 (1и1у, 1999), или как показано для других фосфоновых кислот, подробно описанных, например, в патенте США 5177064, патенте США 5955453, бе ЬотЬаей е! а1., 1. Меб. Сйет., 37, 498-511 (1994), апб 1уег е! а1., Тейайебгоп Ьейетк, 30(51), 7141-7144 (1989). Альтернативно, в случае химической модификации, ΕΌΤΜΡ может быть, например, модифицирован с получением ΑΒΌΤΜΡ путем инсталляции группы анилина (как подробно показано, например, на фиг. 1 международной патентной заявки АО 94/00145). Амин анилина впоследствии пригоден для образования, например, амидной связи. Аналогично может быть модифицирован ΌΟΜΤΡ, как описано в общих чертах на фиг. 5.
Подразумевается, что термины фосфонат, фосфат и аминометиленфосфонат охватывают фосфоновые кислоты, фосфорные кислоты и аминометиленфосфоновые, соответственно, а также их любые соли, гидролизуемые сложные эфиры и пролекарства на основе фосфорсодержащих кислот. При биологическом рН 7,4 в крови, или более кислом рН около кости, некоторая часть фосфата или фосфоната остеотропного средства может быть депротонирована и заменена противоионом. Кроме того, обмен протона на кальций - неотъемлемое событие для связывания остеотропного средства с гидроксиапатитом в настоящем изобретении. Однако получение и введение композиции, содержащей остеотропное средство, могут требовать или могут не требовать полной протонизации фосфористых кислот в нем. Поэтому фосфоновую кислоту, фосфорную кислоту и аминометиленфосфоновую кислоту изображают и используют взаимозаменяемо с фосфатом, фосфонатом и аминометиленфосфонатом. При отсутствии особого предпочтения, биологически гидролизуемые сложные эфиры на основе фосфорсодержащих кислот могут быть также использованы для ίη νί\Ό использования остеотропных пролекарств. Аналогично, пролекарства на основе фосфорсодержащих кислот могут быть также использованы ίη νί\Ό для маскировки кислотности композиции во время, например, изготовления и введения.
Таргетирующее средство может также представлять собой средство, которое целенаправленно доставляет лекарственное средство, исходя из свойств конкретной ткани. Типичные примеры таких таргетирующих средств включают, но не ограничиваются ими, полимеры, которые селективно локализуются в опухолевых тканях вследствие эффекта ΕΡΚ (повышенная проницаемость и удерживание), описанного в публикациях Н. Μаеба е! а1. Штот уа§си1аг реттеаЬййу апб !йе ΕΡΚ еГГес! ίη тасгото1еси1аг 1йегареибс5: А Ке\зе\\·; 1оагпа1 оГ Соп!го11еб К.е1еа§е, 2000, уо1. 63, р. 271-284, содержание которых входит в настоящее описание в виде ссылки. Другие типичные полимеры представляют собой Ν-(2гидроксипропил)метакриламид (НРМА) и (поли)Ь-глутаминовые кислоты.
Таргетирующее средство может также включать остаток Ρ.ΟΌ. Как было обсуждено в Сигай е! а1., Сапсег Кекеагсй, 64(2): 565-571 (2004), остатки ΒΟΌ доставляют ВСЭ-слитые белки в сосудистую сеть путем взаимодействия с клеточными адгезионными рецепторами, включая рецептор интегрина - ανβ3.
3. Синтез.
а. Основная циклическая система.
Соединения настоящего изобретения могут быть синтезированы, используя ЬУ294002 (соединение 1) в качестве исходного продукта. ЬУ294002 (соединение 1) может быть получено коммерчески или синтезировано, как описано в примере 1 или как описано в патенте США 5703075, содержание которого включено в настоящее описание в виде ссылки. Квалифицированный специалист среднего уровня в дан
- 13 012240 ной области может также синтезировать соединения настоящего изобретения, используя соединение 2 в качестве исходного продукта.
b. Получение производных основной циклической системы.
Основная циклическая система соединений 2 и 3 может представлять собой производные основной циклической системы ЬУ294002 (соединение 1). Производные основной циклической системы соединения 3 можно получить, как описано в патенте США 5703075, содержание которого включено в настоящее описание в виде ссылки, для получения основного цикла производных ЬУ294002 (соединение 1). Производные основной циклической системы соединения 3 могут быть также получены, используя коммерчески доступные соединения, включая, но не ограничиваясь, замещенные 2-гидроксиацетофеноны.
c. Получение производных морфолинового кольца.
Аминовые производные соединения 3 можно получить замещением тиоалкильной группы в примере 1 в условиях, начиная от комнатной температуры и до форсирующих условий (избыток нуклеофила и нагревание до 110°С). Любой первичный или вторичный азотсодержащий нуклеофил может взаимодействовать с получением альтернативных замещений амина в кольцевой структуре морфолина (включая различные аналоги морфолина). Синтез типичных примеров таких аминовых производных соединения 3 описаны в примерах настоящего описания.
б. Получение сложных эфиров.
Как описано выше, сложные эфиры могут быть использованы для получения кватернизованных соединений настоящего изобретения. Кватернизованные соединения по данному изобретению предпочтительно получают, используя галогенсодержащие сложные эфиры. В одном предпочтительном варианте кватернизованные соединения по изобретению получают, используя хлорметиловые сложные эфиры. Многочисленные хлорметиловые сложные эфиры, используемые для получения соединений по изобретению, являются доступными от коммерческих источников. Кроме того, хлорметиловые сложные эфиры можно синтезировать, как описано в \УО 02/42265, XVО 94/23724 и патентах США 4444686, 4264765 и 4342768, содержание которых входит в настоящее описание.
е. Кватернизация.
Пролекарства настоящего изобретения могут быть получены кватернизацией третичного амина соединения 1 или соединения 2 галогенметиловым сложным эфиром, например, как описано в примере 4 и примере 6. Кватернизованные аминовые соединения обычно необратимы при умеренных условиях. Однако кватернизованные соединения по данному изобретению могут легко гидролизоваться, как описано выше. Галогенметиловые сложные эфиры, которые могут быть использованы для кватернизации третичного амина соединения 1 или соединения 2, коммерчески доступны или их можно получить, как описано в нижеследующих примерах.
£. Линкеры.
Пролекарства по данному изобретению могут быть также получены кватернизацией третичного амина соединения 1 или соединения 2 линкером, содержащим по крайней мере две функциональные группы. Линкер может быть любым природным или синтетическим линкером, который способен кватернизовать третичный амин и который также способен ковалентно связываться с таргетирующей молекулой или может уже быть связан с таргетирующей молекулой.
Линкеры предпочтительно состоят из атома, такого как кислород или сера, части звена, такой как -ΝΗ-, -СН2-, -С(О)-, -ί.'(Ο)ΝΗ- или цепи из атомов. Молекулярная масса линкера, как правило, находится в диапазоне от около 14 до 200, предпочтительно в диапазоне от 14 до 96 при длине вплоть до около 6 атомов. Типичные примеры линкеров включают, но не ограничиваются ими, насыщенную или ненасыщенную алифатическую группу, которая является необязательно замещенной и в которой один или два насыщенных углерода цепи необязательно заменены на -С(О)-, -С(О)С(О)-, -ΓΟΝΗ-, -ΓΌΝΗΝΗ-, -С(О)О-, -ОС(О)-, -ΝΗΓΌ2-. -Ο-, -ΝΗΓΌΝΗ-, -ОС(О)КН-, -ΝΗΝΗ-, -КНСО-, -8-, -8О-, -8Ο2-, -ΝΗ-, -8Ο2ΝΗ- или -ΝΗ8Ο2-.
Первую функциональную группу линкера используют для кватернизации третичного амина, как обсуждено выше. Предпочтительной первой функциональной группой является галогенметилсодержащий сложный эфир, включая, без ограничения, хлорметилсложный эфир и йодметилсложный эфир. Вторая функциональная группа линкера может быть использована для ковалентного присоединения таргетирующего средства.
Вторая функциональная группа может быть электрофильной или нуклеофильной группой. Предпочтительные вторые функциональные группы для ковалентного присоединения таргетирующих групп представляют собой изотиоцианат, галогенацетамид, малеимид, имидосложный эфир, тиофталимид, Νгидроксисукцинимилсложный эфир, пиридилдисульфид, фенилазид, карбоксил (и его хлорангидриды), амино, ацилгидрозид, семикарбазид, тиосемикарбазид, диазоний, гидразин, азид, аминоалкилмочевину, аминоалкилтиомочевину, галогентриазин и мета(дигидроксиборил)фенилтиомочевину. Другие подходящие реакционноспособные остатки, которые могут быть подходящими для ковалентного присоединения пролекарств по данному изобретению к таргетирующим средствам, включают дисульфиды, нитрены, сульфонамиды, карбодиимиды, сульфонилхлориды, бензимидаты, -СОСН3 и -8Ο3Η.
Выбор соответствующей второй функциональной группы обычно зависит от функциональной
- 14 012240 группы таргетирующего средства, с которым будет образовываться ковалентная связь, и от потери биологической активности таргетирующего средства в результате образования данного типа связи. Если таргетирующее средство является белком, вторая функциональная группа может быть реакционноспособной в отношении боковых цепных групп аминокислот, составляющих полипептидную основную цепь. Такие боковые цепные группы включают карбоксильные группы остатков аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты, аминогруппы остатков лизина, ароматические группы тирозина и гистидина и сульфурильные группы остатков цистеина.
Боковые карбоксильные группы, представленные таргетирующим средством, таким как полипептидная основная цепь, могут быть подвергнуты взаимодействию с аминовыми вторыми функциональными группами посредством реакции, протекающей в растворе с участием карбодиимида. Боковые аминогруппы, представленные таргетирующим средством, могут быть подвергнуты взаимодействию с изотиоцианат-, изоцианат- или галогентриазин-вторыми функциональными группами, чтобы осуществить связь с пролекарствами по изобретению. Альтернативно, боковые аминогруппы на таргетирующем средстве могут быть связаны с пролекарственными соединениями по данному изобретению, несущими аминовые реакционноспособные группы, посредством бифункциональных средств, таких как диальдегиды и имидосложные эфиры. Ароматические группы, представленные таргетирующим средством, могут быть связаны с пролекарствами по изобретению через производные диазония. Сульфгидрильные группы на молекулах таргетирующего средства могут быть подвергнуты взаимодействию с малеимидами или с галогеналкилсодержащими реакционноспособными группами таргетирующего средства, такими как иодацетамид. Свободные сульфгидрильные группы, подходящие для таких реакций, могут быть генерированы из дисульфидных связей белка-иммуноглобулина или могут быть введены химическим превращением в производные. Связь со свободными сульфгидрильными группами, генерированными в области интра-тяжелой цепи иммуноглобулинов, не мешает месту связывания иммуноглобулина с антигеном, но может сделать антитело неспособным к активации комплемента.
Когда таргетирующее средство представляет собой гликозилированный белок, альтернатива для образования связи с соединением настоящего изобретения посредством полипептидной основной цепи состоит в образовании ковалентной связи с углеводными боковыми цепями гликопротеина согласно способам, таким как представлены в МсКеагп, с1 а1., ЕРО 88695. Так, углеводные боковые цепи антител могут быть селективно окислены с получением альдегидов, которые затем могут быть подвергнуты взаимодействию либо с аминовыми реакционноспособными группами с образованием основания Шиффа, либо с гидразин-, семикарбазин или тиосемикарбазидными реакционноспособными группами с получением соответствующих гидразон-, семикарбозон- или тиосемикарбазоновых связей. Такие же способы могут быть использованы для связывания пролекарств по данному изобретению с таргетирующими средствами небелковой природы, такими как углеводы и полисахариды.
Альтернативной реакционноспособной частью таргетирующего средства, используемой для связи с углеводами и полисахаридами без необходимости предшествующего окисления, является дигидроксиборильные группы, такие как присутствует в производных мета(дигидроксиборил)фенилтимочевины. Эта группа является реакционноспособной в отношении таргетирующих средств, содержащих 1,2-цис-диол, образуя 5-членный циклический боратный сложный эфир, и, поэтому имеет использование с теми углеводами, полисахаридами и гликопротеинами, которые содержат эту группу. Дигидроксиборилпроизводные могут быть использованы для присоединения пролекарств по данному изобретению к рибонуклеозидам, рибонуклеотидам и рибонуклеиновым кислотам, поскольку рибоза содержит 1,2-цисдиольную группу в 2',3'-положении, как было раскрыто КокепЬетд, е1 а1., Вюсйеткйу, 11, 3623-28 (1972). Дезоксирибонуклеотиды- и ДНК-таргетирующие средства не могут быть связаны с пролекарствами по изобретению таким образом, поскольку З'-гидроксильная группа отсутствует. Однако последние таргетирующие средства могут быть конъюгированы с изотиоцианатными производными пролекарств, образуя сначала аллиламиновое производное дезоксирибонуклеотида, как было раскрыто Епде1Нагй1. е1 а1., ЕРО 97373.
Когда таргетирующее средство, подлежащее связыванию с пролекарствами по изобретению, представляет собой интактную клетку, могут быть использованы либо полипептидные реакционноспособные остатки, либо углеводные реакционноспособные остатки. В публикации Н\тапд апй Ааке, ВюсЫш. В1орНук. Ас1а, 512, 54-71 (1978) раскрывается использование производного диазония бифункционального хелатора ЕЭТА 8ипйЬегд, е1 а1., 1. Мей. СНет., 17, 1304 (1974) для мечения эритроцитов и тромбоцитов индием-111.
Дигидроксиборильная группа является реакционноспособной в отношении ряда бактерий, вирусов и микроорганизмов, см. ΖίπΚ, Айуап. Еп/ут., 12 493 (1951) апй Витей, е1 а1., ВюсНет. ВюрНук. Век. Сотт., 96, 157-62 (1980).
Предпочтительные линкеры, которые могут быть использованы для ковалентной кватернизации третичного амина соединения 1 или соединения 2, имеют формулу
- 15 012240
Соединение 4 где X представляет собой группу галогена;
Υ представляет собой -СН2-, -СН(СН3)-, -СН(РЬ)-, -С(СН3)(СООН)- или СН(СН(СН3)2)-;
Ζ1 и Ζ2 независимо представляют 8 или О;
п=0-4.
В одном варианте соединение 4 настоящего изобретения представляет те соединения, где
X представляет С1 или I;
Υ представляет -СН2-, -СН(СН3)-, -СН(РЬ)-, -С(СН3)(СООН)- или СН(СН(СНзЦ)-;
Ζ1 и Ζ2 независимо представляют О;
п=0.
В другом варианте соединение 4 по изобретению представляет те соединения, где
X представляет С1 или I;
Υ представляет -СН2-, -СН(СН3)-, -СН(РЬ)-, -С(СН3)(СООН)- или СН(СН(СН3)2)-;
Ζ1 и Ζ2 независимо представляют О; и п=1.
Соединение 4 представляет собой линкеры с основной цепью, содержащей как алкильную группу, так и арилкарбоновую группу, что обеспечивает возможность варьирования скоростью расщепления конечного кватернизованного азота. Линкеры соединения 4 можно получить, используя коммерчески доступные исходные продукты, как описано в примере 5.
д. Очистка.
Соединения по данному изобретению могут быть выделены, используя обычные методы очистки. Гидролизуемая связь соединений по изобретению может быть склонной к гидролизу во время очистки соединений.
Настоящее изобретение также относится к способам очистки соединений по данному изобретению, включающим введение соединений в раствор, содержащий по крайней мере 0,1% кислоты (об./об.), чтобы сделать соединение растворимым. Затем соединение очищают, осуществляя хроматографию, предпочтительно ВЭЖХ.
й. Испытание.
Пролекарства по данному изобретению могут быть испытаны, определяя скорость гидролиза гидролизуемой связи и устанавливая продукты гидролиза посредством осуществления анализа методом ВЭЖХ пролекарства, экспонированного в условиях расщепления как функция времени. Биологическая активность соединений по данному изобретению может быть измерена способами, включая, но не ограничиваясь ими, блокирование фагоцитоза клеток 1774 клеточной линии макрофага, как описано в примере 17. Биологическая активность соединений настоящего изобретения может быть также измерена путем определения активности фермента киназы Р1-3, как описано в патенте 5480906; К. ЕисЫкат е! а1. 1. Βίοто1 8сгееп, 2002 Ос!. р. 441-450; VI 8йтепа е! а1. 1. Вюто1. 8сгееп, 2002, Эес. 7(6), 507-514; ΒΕ Эгеек СотЬта!опа1 СйетМгу апй Н1дй!йгоидйри! 8сгеешпд 2003, νο1. 6, 321-330, содержания которых включены в настоящее описание в виде ссылки.
1. Соли.
Соединения по данному изобретению используют в различных фармацевтически приемлемых солевых формах. Термин фармацевтически приемлемая соль относится к солевым формам, которые должны быть очевидны для фармацевта, т. е. солевые формы, которые являются, по существу, нетоксическими и которые обеспечивают желаемые фармакокинетические характеристики, аппетитность, абсорбцию, распределение, метаболизм или экскрецию. Другие факторы, более практичные по природе, которые также важны при выборе, представляют собой стоимость исходных материалов, легкость кристаллизации, выход, стабильность, гигроскопичность и текучесть полученного сыпучего лекарственного средства. На практике, фармацевтические композиции могут быть получены из активных компонентов или их фармацевтически приемлемых солей в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями.
Фармацевтически приемлемые соли соединений по данному изобретению, которые являются подходящими для использования в способах и композициях по изобретению, включают, но не ограничиваются ими, соли, образованные с рядом органических и неорганических кислот, таких как хлористоводородная кислота, гидроксиметансульфоновая кислота, бромисто-водородная кислота, метансульфоновая кислота, серная кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, малеиновая кислота, бензолсульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота, сульфаминовая кислота, гликолевая кислота, стеариновая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, памовая кислота, сульфаниловая кислота, 2ацетоксибензойная кислота, фумаровая кислота, этандисульфоновая кислота, щавелевая кислота, изэтионовая кислота, и включают различные другие фармацевтически приемлемые соли, такие как, например,
- 16 012240 нитраты, фосфаты, бораты, тартраты, цитраты, сукцинаты, бензоаты, аскорбаты, салицилаты и т.п. Катионы, такие как кватернизованные аммонийные ионы, предполагаются в качестве фармацевтически приемлемых противоионов для анионных остатков.
Предпочтительные соли соединений по данному изобретению включают гидрохлоридные соли, соли метансульфоновой кислоты и соли трифторуксусной кислоты, при этом соли метансульфоновой кислоты являются более предпочтительными. Кроме того, фармацевтически приемлемые соли соединений по данному изобретению могут быть образованы с щелочными металлами, такими как натрий, калий и литий; щелочно-земельными металлами, такими как кальций и магний; органическими основаниями, такими как дициклогексиламин, трибутиламин и пиридин; и аминокислотами, такими как аргинин, лизин и т. п.
Фармацевтически приемлемые соли по изобретению могут быть синтезированы обычными химическими способами. Как правило, соли получают взаимодействием свободного основания или кислоты со стехиометрическими количествами или с избытком желательной сольобразующей неорганической или органической кислоты или основания в подходящем растворителе или комбинации растворителей.
В общем случае, противоионы солей соединений по изобретению определяются реагирующими веществами, используемыми для синтеза соединений. Может иметься смесь противоионов солей, в зависимости от реагентов. Например, в тех случаях, когда ΝαΙ добавляют для облегчения протекания реакции, противоин может представлять собой смесь противоанионов С1 и Ι. Кроме того, препаративная ВЭЖХ может вынудить первоначальный противоион обменяться на ацетат, если уксусная кислота присутствует в элюенте. Противоионы солей могут быть обменены на различный противоион. Противоионы предпочтительно обменивают на фармацевтически приемлемый противоион с образованием вышеописанных солей. Способы обмена противоионов описаны в XVО 2002/042265, XVО 2002/042276 апб 8.Ό. С1а§, Оиа1сшхсб Со1е§бро1, ап ппргсл'еб Ы1е ка11 абкогЬеп!: Ιη Убго 5ΐιι6ίθ5. 1оигпа1 о£ Ρ1ι;·ιπη;·^ιιΐΦ;·ι1 8с1спсс5. 80(2): 128-131 (1991), содержания которые входят в настоящее описание в виде ссылки. По причинам ясности, в химических структурах, представленных в настоящем описании, противоионы в явном виде не показаны и характеристика соединений основана на идентифицировании кватернизованного катиона.
4. Композиция.
Настоящее изобретение также охватывает композицию, содержащую одно или несколько соединений по данному изобретению. Композиции по данному изобретению могут дополнительно содержать один или несколько фармацевтически приемлемых дополнительных компонента(ов), таких как квасцы, стабилизаторы, антимикробные средства, буферы, красители, ароматизаторы, адъюванты и т.п.
а. Препарат.
Композиции по изобретению могут быть в форме таблеток или леденцов, формированных обычным способом. Например, таблетки и капсулы для перорального введения могут содержать обычные наполнители, включая, но не ограничиваясь ими, связующие средства, наполнители, смазки, дезинтеграторы и увлажняющие средства. Связующие средства включают, но не ограничиваются ими, сироп, акацию, желатин, сорбит, трагакант, клейкое вещество крахмала и поливинилпирролидон. Наполнители включают, но не ограничиваются ими, лактозу, сахар, микрокристаллическую целлюлозу, рисовый крахмал, фосфат кальция и сорбит. Смазки включают, но не ограничиваются ими, стеарат магния, стеариновую кислоту, тальк, полиэтиленгликоль и диоксид кремния. Дезинтеграторы включают, но не ограничиваются ими, картофельный крахмал, натрий крахмал-гликолят. Смазки включают, но не ограниваются ими, лаурилсульфат натрия. Таблетки могут покрываться оболочкой, которая наносится общеизвестными в данной области способами.
Композиции по изобретению могут также представлять собой жидкие препараты, включая, без ограничения, водные или маслянистые суспензии, растворы, эмульсии, сиропы и эликсиры. Композиции могут быть также формулированы в виде сухого продукта для составления с водой или другим подходящим наполнителем перед использованием. Такие жидкие препараты могут содержать добавки, включая, без ограничения, суспендирующие средства, эмульгирующие средства, неводные наполнители и консерванты. Суспендирующее средство включает, без ограничения, сироп сорбита, метилцеллюлозу, сироп глюкоза/сахар, желатин, гидроксиэтилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, гель стеарата алюминия и гидрогенизированные съедобные жиры. Эмульгирующие средства включают, без ограничения, лецитин, сорбитмоноолеат и акацию. Неводные наполнители включают, без ограничения, съедобные масла, миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, маслянистые сложные эфиры, пропиленгликоль и этиловый спирт. Консерванты включают, без ограничения, метил- или пропил-п-гидроксибензоат и сорбиновую кислоту.
Композиции по изобретению могут быть также формулированы в виде суппозиториев, которые могут содержать основы суппозитория, включая, без ограничения, кокосовое масло или глицериды. Композиции по данному изобретению могут быть также формулированы в лекарственную форму для ингаляции, которая может включать, без ограничения, раствор, суспензию или эмульсию, которая может быть введена в виде сухого порошка или в форме аэрозоля, используя пропеллент, такой как дихлордифторметан или трихлорфторметан. Композиции по изобретению могут быть также формулированы в виде ле- 17 012240 карственной формы для трансдермального введения, содержащих водные или неводные наполнители, включая, без ограничения, кремы, мази, лосьоны, пасты, лечебный пластырь, повязку или мембрану.
Композиции по данному изобретению могут быть также формулированы для парентерального введения, включая, без ограничения, введение путем инъекции или медленного введения вещества. Препараты для инъекций могут быть в форме суспензий, растворов или эмульсий в маслянистых или водных наполнителях, и могут содержать вспомогательные формообразующие средства, включая, без ограничения, суспендирующие, стабилизирующие и диспергирующие средства. Композиция может также быть представлена в форме порошка для восстановления с подходящим наполнителем, включая, без ограничения, стерильную, апирогенную воду.
Композиции по данному изобретению могут быть также формулированы в виде препарата-депо, который можно вводить путем имплантации или путем внутримышечной инъекции. Композиции могут быть формулированы с подходящими полимерными или гидрофобными веществами (в виде эмульсии в приемлемом масле, например), ионообменными смолами (ионитами), или в виде труднорастворимых производных (в виде труднорастворимой соли, например).
Композиции по изобретению могут быть также формулированы в виде липосомного препарата. Липосомный препарат может включать липосомы, которые проникают в представляющие интерес клетки или рогового слоя и сливаются с клеточной мембраной, приводя к доставке содержимого липосомы в клетку. Например, могут быть использованы липосомы, такие как описаны в патенте США 5077211 УагоЩ. патенте США 4621023 Кебхбиак е! а1. или патенте США 4508703 Кеб/биак е! а1. Композиции по данному изобретению, предназначенные для целенаправленного воздействия на состояния кожи, могут быть введены до, во время или после экспозиции кожи млекопитающего УФ-облучению или средствам, вызывающим окислительное повреждение. Другие подходящие препараты могут использовать ниосомы. Ниосомы представляют собой липидные везикулы, подобные липосомам, с мембранами, состоящими, в значительной степени, из неионных липидов, некоторые формы которых являются эффективными для транспортирования соединений сквозь роговой слой кожи.
5. Лечение.
Настоящее изобретение также охватывает способ лечения пациента, страдающего состоянием, ассоциируемым с активностью киназы ΡΙ-3. Активность киназы ΡΙ-3 может быть анормальной, чрезмерной или конститутивно активной. Настоящее изобретение охватывает также способ лечения воспалительного заболевания, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. Такие заболевания и неблагоприятные для здоровья воздействия, которые могут быть приписаны неадекватной активности передачи сигнала ΡΙ-3, были раскрыты в данной области, например, в И8 2002/0150954А1; патенте США 5504103; И8 6518277В1; патентах США 6403588, 6482623, 6518277, 6667300; и.8. 20030216389; и.8. 20030195211; и.8. 20020037276 и патенте США 5703075, содержания которых включены в настоящее описание в виде ссылки.
Настоящее изобретение также охватывает способ увеличения р53-опосредованной запрограммированной смерти клеток, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению.
Настоящее изобретение также охватывает способ повышения чувствительности к химиотерапии опухолевых клеток, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению.
Настоящее изобретение также охватывает способ повышения радиочувствительности опухолевых клеток, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению.
Настоящее изобретение также охватывает способ ингибирования индуцированного опухолью ангиогенеза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению.
Настоящее изобретение также охватывает способ ингибирования ангиогенных процессов, ассоциируемых с нераковыми заболеваниями, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению.
Настоящее изобретение также охватывает способ лечения рака, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению.
Соединение можно вводить одновременно или регулярно с другими противораковыми лечениями, такими как химиотерапия и лучевая терапия. Используемый здесь термин одновременный или одновременно означает, что другое противораковое лечение и соединение настоящего изобретения вводят в пределах 48 ч, предпочтительно 24 ч, более предпочтительно 12 ч, еще более предпочтительно 6 ч и наиболее предпочтительно 3 ч или меньше, относительно друг друга. Используемый здесь термин регулярно означает введение соединений временами, отличными от химиотерапии, с определенной частотой относительно повторного введения и/или программы химиотерапевтического лечения.
Химиотерапевтическое лечение может включать введение цитотоксического средства или цитоста
- 18 012240 тического средства или их комбинации. Цитотоксические средства препятствуют размножению раковых клеток: (1) подавляя способность клеток к репликации ДНК и (2) индуцируя гибель клеток и/или апоптоз в раковых клетках. Цитостатические средства действуют через модуляцию, вмешательство или ингибирование процессов клеточной трансдукции сигнала, которые регулируют клеточную пролиферацию и иногда даже при низких непрерывных уровнях содержания.
Классы соединений, которые могут быть использованы в качестве цитотоксических средств, включают нижеследующие: алкилирующие средства (включая, без ограничения, азотистые иприты, производные этиленимина, алкилсульфонаты, нитрозомочевины и триазены): урацил, хлорметин, циклофосфамид (СуЮхап®). ифосфамид, мелфалан, хлорамбуцил, пипоброман, триэтиленмеламин, триэтилентиофосфорамин, бусульфан, кармустин, ломустин, стрептозоцин, дакарбазин и темозоломид; антиметаболиты (включая, без ограничения, антагонисты фолиевой кислоты, аналоги пиримидина, аналоги пурина и ингибиторы аденозиндезаминазы): метотрексат, 5-фторурацил, флоксуридин, цитарабин, 6меркатопурин, 6-тиогуанин, флударабинфосфат, пентостатин и гемцитабин; природные продукты и их производные (например, алкалоид барвинка, противоопухолевые антибиотики, ферменты, лимфокины и эпиподофиллотоксины): винбластин, винкристин, виндезин, блеомицин, дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, ара-с, паклитаксел (паклитаксел коммерчески доступен как Тахо1®), митрамицин, дезоксико-формицин, митомицин-с, 1-аспарагиназа, интерфероны (предпочтительно ΙΡΝ-α), этопозид и тенипозид.
Другие пролиферативные цитотоксические средства представляют собой навелбен, СРТ-11, анастразол, летразол, капецитабин, релоксафин, циклофосфамид, ифозамид и дролоксафин.
Средства, воздействующие на микроканальцы, противодействуют клеточному митозу и являются общеизвестными в данной области благодаря своей цитотоксической активности. Средства, воздействующие на микроканальцы, используемые в данном изобретении, включают, но не ограничиваются ими, аллоколхинин (№С 406042), галихондрин В (N80 609395), колхицин (N80 757), производные колхицина (например, №С 33410), доластатин 10 (№С 376128), майтанзин (№С 153858), ризоксин (№С 332598), паклитаксел (Тахо1®, N80 125973), производные Тахо1® (например, производные (например, №С 608832), тиоколхинин №С 361792), тритилцистин (№С 83265), винбластин-сульфат (№С 49842), винкристин-сульфат (N80 67574), природные и синтетические эпотилоны, включая, но не ограничиваясь ими, эпотилон А, эпотилон В и дискодермолид (см. 8ету1се, (1996) 8с1епсе, 274:2009) эстрамустин, нокодазол, МАР4, и т.п. Примеры указанных средств описаны также в Вийпкк1 (1997) 1. Се11 8с1. 110:3055 3064; Рапба (1997) Ргос. №б. Асаб. δα. И8А 94:10560-10564; МиЫтаб! (1997) Сапсег Век. 57:3344-3346; №со1аои (1997) Уинге 387:268-272; Уакдие/ (1997) Мо1. Вю1. Се11. 8:973-985; апб Рапба (1996) 1. Вю1. Сйет 271:29807-29812.
Подходящими также являются такие цитотоксические средства, как эпидофиллотоксин; противоопухолевый (антибластомный) фермент; ингибитор топоизомеразы; прокарбазин; митоксантрон; координационные комплексы платины, такие как цисплатин и карбоплатин; модификаторы биологического ответа; ингибиторы роста; антигормональные терапевтические средства; лейковорин; тегафур; и гемопоэтические факторы роста.
Цитостатические средства, которые могут быть использованы, включают, но не ограничиваются ими, гормоны и стероиды (включая синтетические аналоги): 17-а-этинилэстрадиол, диэтилстилбестрол, тестостерон, преднизон, флуоксиместерон, дромостанолонпропионат, тестолактон, мегестролацетат, метилпреднизолон, метилтестостерон, преднизолон, триамцинолон, хлортрианизен, гидроксипрогестерон, аминоглутетимид, эстрамустин, медроксипрогестеронацетат, лейпролид, флутамид, торемифен, золадекс.
Другими цитостатическими средствами являются антиангиогенные средства, такие как ингибиторы матриксной металлопротеиназы, и другие ингибиторы УБОР, такие как антитела против УБОР, и также сюда включены небольшие молекулы, такие как ΖΌ6474 и 8И6668. Могут быть также использованы антитела против Нег-2 от Сепе1есй. Подходящим ингибитором ЕСРВ является ЕКВ-5 69 (необратимый ингибитор). Включены также 1тс1опе антитело С225, иммуноспецифичное в отношении ЕСРВ и ингибиторы кгс.
Также подходящим для использования в качестве цитостатического средства является Сакобех® (бикалутамид, Ак1та Ζеηеса), который делает андрогензависимые карциномы непролиферативными. Очередным примером цитостатического средства является антиэстроген Татохйеп®, который ингибирует пролиферацию или рост эстрогензависимого рака молочной железы. Ингибиторы трансдукции сигналов клеточной пролиферации представляют собой цитостатические средства. Типичные примеры включают ингибиторы эпидермального фактора роста, ингибиторы Нег-2, ингибиторы киназы МЕК-1, ингибиторы киназы МАРК, ингибиторы Р1-3, ингибиторы киназы 8тс и ингибиторы РЭСР.
Целый ряд злокачественных новообразований можно лечить согласно настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь ими, нижеследующие: карциному, включая карциному мочевого пузыря (включая прогрессирующий и метастатический рак мочевого пузыря), молочной железы, ободочной кишки (включая колоректальный рак), почек, печени, легкого (включая мелкоклеточный и немелкокле
- 19 012240 точный рак легкого и аденокарциному легкого), яичника, простаты, яичков, мочеполовых путей, лимфатической системы, прямой кишки, гортани, поджелудочной железы (включая экзокринной карциномы поджелудочной железы), пищевода, желудка, желчного пузыря, шеи, щитовидной железы и кожи (включая плоскоклеточную (эпидермоидную) карциному); кроветворные опухоли лимфоидного происхождения, включая лейкоз, острый лимфолейкоз, острый лимфобластный лейкоз, В-клеточную лимфому, Тклеточную лимфому, лимфому Ходжкина, не-ходжкинскую лимфому, волосатоклеточная лимфома (лейкемический ретикулез) гистиоцитарная лимфома и лимфома Беркитта; кроветворные опухоли миелоидного происхождения, включая острые и хронические миелогенные лейкозы, миелодиспластический синдром, миелоидный лейкоз и промиелоцитарный лейкоз; опухоли центральной и периферической нервной системы, включая астроцитому, нейробластому, глиому и невриномы; опухоли мезенхимального происхождения, включая фибросаркому, рабдомиосаркому и остеосаркому; и другие опухоли, включая меланому, ретикулярный прогрессирующий меланоз, кератоакантому, семиному, фолликулярный рак щитовидной железы и тератокарциному.
Наиболее предпочтительно изобретение используют для лечения прогрессирующих или метастатических злокачественных новообразований мочевого пузыря, рака поджелудочной железы, рака простаты, немелкоклеточного рака легкого, колоректального рака и рака молочной железы.
Настоящее изобретение также охватывает способ лечения панкреатита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. Как обсуждено в Сикслъку с! а1., 6айгосп!сго1оду, 126(2):554-66 (2004), ингибирование киназы ΡΙ-з может предотвратить панкреатит.
Настоящее изобретение также охватывает способ лечения язв, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. Настоящее изобретение также охватывает способ лечения желудочного рака, такого как рак желудка, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. Как обсуждено в Васоп с! а1., ΩίβΟδΙίνο И^сакс \Усск АЬйгасй апй Йшсгагу Р1аппег, Уо1. 200з, АЬйгас! Νο. М921 (200з) апй РокШап с! а1., ОщсйБ'С И^сакс Усск ЛЬйгасЦ апй Шпсгагу Р1аппсг, Уо1. 200з, ЛЬйгас! №. з54 (200з), киназа ΡΙ-з вовлечена в адгезию НсйсоЬас!сг ру1оп к желудочным клеткам. Кроме того, 0§ак1 с! а1. 1оигпа1 ок Сапссг Всксагск апй С11шса1 Опсо1оду, 1з0(1): 8-14 (2004) указывает на то, что ингибитор киназы ΡΙ-з, такой как ΕΥ294002, может быть использован в качестве противоопухолевого средства в случае карциномы желудка.
Настоящее изобретение также охватывает способ улучшения функционирования стента, включающий введение пациенту со стентом, таким как кардиоваскулярный стент, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. Как было обсуждено в Ζ^ι.! с! а1., Лг1сг1о5с1сго515 ТйготЬойк апй Уа§си1аг Вю1оду, 2Э(11): 2015-2020 (200з), ингибирование киназы ΡΙ-з может предотвратить повреждение-растягивание, которое сопровождает размещение стента в сосудах. Соединения по данному изобретению в стенте или его полимерном матриксе могут улучшить растворимость в покрывающем стент матриксе, улучшить водно/сывороточную растворимость или улучшить перфузию в клетки, непосредственно примыкающие к размещению стента.
Настоящее изобретение также охватывает способ лечения возрастной дегенерации желтого пятна (ЛМЭ), включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. Как обсуждено в Всйпа, РсЬгиагу 18, 2004, ингибирование УБОР подавляет разрастание кровеносных сосудов, ассоциируемое с ΆΜΌ. Соединения по данному изобретению могут лечить ΆΜΌ, ингибируя ангиогенез.
Настоящее изобретение также охватывает способ лечения гипертензии, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. Как обсуждено в №й11со11 апй ^ай§, Нурсйспйоп, 4Э(1): 125-1Э0 (2004), ингибирование киназы ΡΙ-з может не допустить возникновение низких внеклеточных концентраций Мд2+, которое связывают с гипертензией.
Настоящее изобретение также охватывает способ подавления дифференцировки клетокпредшественников, таких как миелоидные клетки-предшественники, включающий введение эффективного количества соединения по данному изобретению в клетки-предшественники. Как было обсуждено в ЬсМк с! а1., Ехрсптсп1а1 Нста!о1оду, Э2(1): з6-44 (2004), ингибирование пути киназы ΡΙ-з подавляет миелоидную клетку-предшественник.
Настоящее изобретение также охватывает способ лечения рака печени, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. Как обсуждено в Бспд с! а1., Нсра!о1оду з8(4) 8ирр1 1: 401 А (200з), ΕΥ294002 ингибирует фосфорилирование Ак! (серин/треонин протеинкиназа В), которая является определителем состояния человеческих печеночных тканей.
Настоящее изобретение также охватывает лечение состояний, ассоциируемых с мутантным ΡΤΕΝ, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения по данному изобретению. ΡΤΕΝ представляет собой опухолевый ген-супрессор, локализованный на хромосоме 10д2з, который был идентифицирован у пациентов с болезнью Коудена. Как
- 20 012240 было обсуждено в Уеда е! а1., 1оигпа1 о£ ΙηνοδΙί^αΙίνο Оегта!о1оду, 121(6): 1356-1359 (2003), мутантный ΡΤΕΝ уменьшал способность ингибировать активацию прото-онкогена Лк1. Ингибиторы киназы ΡΙ-3 могут ингибировать фосфорилирование Лк1, тем самым ослабляя действие мутантного ΡΤΕΝ.
a. Введение.
Композиции по данному изобретению могут быть введены любым способом, включая, но не ограничиваясь ими, перорально, парентерально, сублингвально, трансдермально, ректально, трансмукозально, местно, посредством ингаляции, путем буккального введения или их комбинациями. Парентеральное введение включает, без ограничения, внутривенный, внутриартериальный, внутрибрюшинный, подкожный, внутримышечный, подоболочечный и внутрисуставный способы введения. Композиции по изобретению могут также вводиться в форме имплантата, который позволяет медленное высвобождение композиций, а также в виде медленного контролируемого в.в. (ί.ν.) вливания.
b. Дозирование.
Терапевтически эффективное количество соединения, необходимое для использования в лечении, варьируется в зависимости от природы состояния, подлежащего лечению; периода времени, на протяжении которого желательно проявление активности препарата, и возраста и состояния пациента, и, в конечном счете, определяется штатным врачом больницы. В общем, однако, дозы, используемые для лечения взрослого человека, обычно находятся в пределах от 0,001 до около 200 мг/кг в день. Доза может составлять от около 1 до 100 мкг/кг в день. Требуемую дозу можно вводить в виде однократной дозы или в виде множественных доз, вводимых через соответствующие интервалы времени, например в виде двух, трех, четырех и большего числа субдоз в день. Множественные дозы часто желательны или необходимы.
Соединения по данному изобретению могут вводиться в широком диапазоне доз, величина используемой конкретной дозы зависит от ряда факторов. При введении в комбинации с другими лечениями, соединения по данному изобретению могут вводиться при относительно более низких дозах. Кроме того, использование таргетирующих средств может позволить сделать необходимую дозу относительно низкой. Некоторые соединения настоящего изобретения могут вводиться при относительно высоких дозах, что обусловлено рядом факторов, включая, но не ограничиваясь ими, низкую токсичность, высокий клиренс, низкие скорости отщепления третичного амина. В результате, доза соединения по изобретению может составлять от около 1 нг/кг до около 100 мг/кг. Доза соединения по данному изобретению может составлять любую дозу, включая, без ограничения, около 1, 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575, 600, 625, 650, 675, 700, 725, 750, 775, 800, 825, 850, 875, 900, 925, 950, 975 мкг/кг, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 или 100 мг/кг.
Настоящее изобретение имеет разнообразные аспекты, иллюстрируемые нижеследующими неограничивающими примерами.
Пример 1. Получение ЬУ294002.
г образца ЬУ294002 получали согласно схеме 2, исходя из методики, описанной в У1а1ю5 е! а1., 1. В1о1. С1ет. 269(7): 5241 (1994), содержание которого входит в настоящее описание в виде ссылки. Замещение тиометильной группы тиохромонов, таких как 12, аминами, было описано ранее (Вапбск е! а1., 1. Не!егосус11с С1ет, 18:679 (1981), содержание которого входит в настоящее описание в виде ссылки), тогда как тиохромон получали циклизацией метилфенилкетонов, таких как 11, с дисульфидом углерода с сопутствующим алкилированием тиоланиона (У1аЬоз е! а1. апб Вапбск е! а1.). Получение метилкетонов (например, 11) одностадийной реакцией из карбоновой кислоты (10) осуществляли, используя способ, описанный в РнЬоНош е! а1., 1. Огд. С1ет., 48:1550 (1983), содержание которого входит в настоящее описание в виде ссылки.
Схема 2
ЬУ294002 (Соединение 1)
Пример 2. Получение кватернизованных аналогов ЬУ294002.
Следуя способу схемы 3, третичный амин ЬУ294002 кватернизуют, используя йодметан или бензилхлориды, при вынуждающих условиях, с получением соединений А052-10 и соединения 13В. Пример 56 описывает синтез метил-кватернизованного пролекарства А052-10. Пример 57 описывает синтез фталимидо-кватернизованного пролекарства А052-08. Пример 58 описывает синтез паракарбоксибензилкватернизованного А044-78. [Пример 47] [Пример 58] описывает синтез пара-зсп-бензилкватернизованного пролекарства А044-80.
- 21 012240
Схема 3
А052-10 Я= СН,
Γ.Υ264002 13 В А= Бензил
Пример 3. Получение хлорметиловых сложных эфиров.
Хлорметилсодержащие интермедиаты получают, следуя способу, описанному в ΤδμίίΗαΓα. 8уп111 Соттип, 24, 767, 1994. Кратко, соответствующую карбоновую кислоту разбавляют в смеси 50/50 дихлорметан/вода. Смесь охлаждают на бане со смесью лед-вода и добавляют бикарбонат натрия (4 экв.) и гидросульфат н-тетрабутиламмония (0,05 экв.). После перемешивания в течение 5 мин, добавляют хлорметилхлорсульфат (1,1 экв.). Раствор энергично перемешивают на протяжении ночи. Смесь переносят в делительную воронку с дополнительным количеством дихлорметана и промывают насыщенным раствором хлорида натрия. Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получая продукт. Вещество охарактеризовывают с помощью ЖХ-МС и в некоторых случаях с помощью 'Н-ЯМРспектроскопии. Согласно этой общей методике из соответствующих карбоновых кислот получают нижеследующие типичные хлорметиловые сложные эфиры.
Таблица 1
Структура Ссылочный № Время удерживания Время удерживания исходного продукта* **
О А029-42 3, 612 2,329
80Νγ^ О А029-44 4,273 3, 327
О А029-58 3, 820 2,833
О— А029-60 4,077 2, 956
О А029-62 НД НД
О А029-72 НД НД
о А029-80 НД нд
0 1 о А029-82 НД НД
О О А029-86 НД нд
М'П О А040-46 3, 903 2,901
О А040-58 нд НД
*ВЭЖХ-МС (№^^8), время удерживания, используя УФ-детектирование;
**ВЭЖХ-МС, время удерживания исходной карбоновой кислоты, используя УФ-детектирование; (НД)=недетектируемо из-за отсутствия УФ-поглощения и отсутствия ионизации при МС.
- 22 012240
Пример 4. Превращение ЬУ294002 в кватернизованное пролекарство.
ЬУ294002 (соединение 1) растворяют в ацетонитриле и затем добавляют каждый из хлорметиловых сложных эфиров (1-1,5 экв.) из примера 3 вместе с 1-2 эквивалентами иодида натрия. При комнатной температуре реакция с хлорметиловыми сложными эфирами протекает исключительно медленно с получением очень незначительных количеств кватернизованного аминового продукта наряду с осаждением хлорида натрия. При 65°С реакция протекает до полного завершения обычно за 4 ч. Реакционную смесь по завершению реакции (оцениваемому анализом с помощью ЖХ-МС) фильтруют; концентрируют и затем очищают ВЭЖХ с обращенной фазой. Фракции собирают и лиофилизуют, получая требуемые продукты в виде рыхлых порошков. Полученные и очищенные таким способом примеры представлены в нижеследующей таблице (противоанионы не изображены, но включали хлорид, иодид, ацетат или их смесь).
Таблица 2
Структура Молеку лярная масса/ мм (Время) удерживания ЕЬЗ МС Ссылочный Ν’ Выход (мг) Чистота
о. V 494,6 2,718 М+=494 А041-49 400, 6 93%
ζχΐίί г) 472,5 2, 661 ¢4+=472 А023-23 145 90%
ЫС5 ί уЪ 5134,6 3,019 М+=513 А036-48В 194,1 97¾
Т° и-η ό 470,6 2,724 N+=470 А031-11 190, 4 98,6%
γή—о ί 0 О о 484,6 2,926 М+=484 А031-14 204,8 98,5%
- 23 012240
я Д'4 СоД Г θ 436, 5 2,800 Μ+=436 Α028-81 31 90%
сод ό 451, 5 2,082 Μ+=451 Α029-92
сЛД 380,4 2, 204 Μ+=380 ΑΟ4Ο-7Ο 264,0 97%
2 о оЛгсУ ό ° 422 2,735 Μ+=422 Α045-09 102,3 93,7%
Пример 5. Галогенметил-сложноэфирные линкеры.
Исходя из результатов примера 3 и примера 4, получают галогенметил-сложноэфирные линкеры (схема 4 и диаграмма). Соединение В получают из соединения А (комммерчески доступное), как описано в примере 3. Это соединение превращают в более реакционноспособный иодметиловый сложный эфир (соединение С) по реакции Финкельштайна путем растворения в ацетоне или 2-бутаноне и затем растворения 2-5 эквивалентов иодида натрия, после чего осаждается хлорид натрия и в растворе получают иодметиловый сложный эфир (соединение С). Соединение С выделяют, удаляя растворитель и растворяя в несмешивающемся с водой растворителе, таком как метиленхлорид, и экстрагируя водой, чтобы удалить остаточный иодид натрия.
Соединение Е получают из соединения Ό (коммерчески доступного). Соединения Е и С получают способом, аналогичным получению соединений В и С соответственно.
Схема 4
Пример 6. Кватернизация БУ294402 галогенметилсодержащими линкерами.
Галогенметиловые сложные эфиры, включая сложные эфиры примера 5, были использованы для кватернизации ЬУ294002, используя условия, аналогичные методике в примере 4. Типичные пролекарства, содержащие линкер со свободной функциональной группой, включают нижеследующие:
- 24 012240
Соединение 1105 получают смешением соединения 1101 с соединением С в ацетонитриле, в котором оба растворимы, и продукт, соединение 1105, осаждается на протяжении трехдневного периода времени, затем его промывают небольшим количеством ацетонитрила, получая, по существу, чистое соединение 1105 (подтвержденное ЖХМС).
Пример 7. Получение пролекарств, используя соединение 1111.
Соединение 1111 получают способом, показанным на схеме 5, соединение 1110 обрабатывают беспримесной трифторуксусной кислотой в течение 1-3 ч и ТФУ (ТЕЛ) выдувают аргоном и сушат в вакууме, получая стекловидное твердое вещество, заключающее в себе соединение 1113. Затем соединение 1113 растворяют в 1-3 мл тионилхлорида и нагревают при 65°С в течение 3-8 ч. Тионилхлорид выдувают аргоном и затем сушат в высоком вакууме, получая соединение 1111 с хорошими выходами в виде стекловидного желтого твердого вещества. Соединение 1111 может быть подвергнуто взаимодействию в виде типичного хлорангидрида кислоты с различными азотсодержащими и гидроксилсодержащими нуклеофилами, например, путем простого растворения в метаноле, с получением соответствующего метилового сложного эфира соединения 1112.
- 25 012240
Схема 5
Пробу соединения 1111 растворяют в ацетонитриле и обрабатывают по крайней мере 5 экв. различных спиртов в отдельных пробирках. Через 1 ч пробы анализируют с помощью ВЭЖХ-МС, они демонстрируют хорошую конверсию >90% соединения 1111 в соответствующий сложный эфир, как показано и охарактеризовано в табл. 3.
Таблица 3
Структура, полученного сложного эфира Ссылочный № ММ Время удерживания (минуты)* МС+ найдено
л/с ΟΟψΑοο 0 Α046-92-1 518,55 2,849 518
сА/АУ у-ъ Α046-92-2 492,55 2,788 4 92
ό 0 Α046-92-3 476, 51 2,640 476
о Α046-92-4 528,59 2, 970 528
сгНгР·') го/ Α046-92-5 522,62 3, 197 522
^8 ΎΊ Сд1с° Λ°γ> о ν η ο-—/ ό Α046-92-6 524,55 2,490 524
0 Α046-92-7 466,52 2, 632 466
- 2б 012240
ь Ά046-92-8 480,54 2,787 480
и
*УФ 214 нм
Пример 8. Получение белок-конъюгированных пролекарств, используя соединение 1111.
Белки конъюгируют в, значительной степени, водном растворе (ρΗ 7-9) (фосфатный буфер до карбонатного буфера), используя 2-10-кратный избыток соединения 1111 относительно аминогрупп или гидроксильных групп, подлежащих модифицированию. Хлорангидрид кислоты соединения 1111 может быть введен в смешанном водно-органическом растворителе (таком как смесь 50/50 вода-ацетонитрил или 50/50 вода-ТГФ) или перемешен в метиленхлориде в двухфазной реакционной системе при комнатной температуре в течение 1-24 ч. Белок-конъюгаты могут быть очищены диализом или ультрафильтрацией и непосредственно использованы.
500-мкл аликвоту 5 мг/мл трансферринового белка (81дта) в 50 мМ буфере бикарбоната натрия смешивают с 100 мкл 30 мМ А024-79 (100 молярных эквивалентов), который получают согласно примеру 12, в ДМСО. Через 1 ч и 20 мин взаимодействия при комнатной температуре 50 мкл пробу извлекают и пропускают через колонку с 8ерЕабех С-10 (отсечка молекулярной массы 700), чтобы отделить белок от маленьких молекул. Затем аликвоту элюента очищенного конъюгированного белка экстрагируют ацетонитрилом и согласно данным ЖХ-МС при этом не наблюдают даже следов соединения 1. Элюент очищенного конъюгированного белка выдерживают при комнатной температуре 39 ч, и по истечении этого времени смесь белка вновь экстрагируют ацетонитрилом и в этом случае обнаруживают 15% от максимального теоретического количества соединения 1. Эти результаты указывают на то, что, в молярном отношении, 15 молей пролекарства приходится на моль трансферрина. Эти результаты демонстрируют связывание пролекарства, несущего электрофильный линкер, с типичным белком и наглядно показывают, что на протяжении определенного времени значительное количество ингибитора киназы ΡΙ-3 (соединение 1) высвобождается от белка в водных средах.
Пример 9. Получение связанных со смолой пролекарств, используя соединение 1111.
Пептид агд-д1у-а§р-8ег (КСЭ8) получают на смоле Ванга (смоле), используя химию связывания пептидов ЕМОС/ΗΟΒΤ, используя все природные аминокислоты. Связанный со смолой пептид подвергают взаимодействию с соединением 1111 в ДМФА (ЭМЕ) в течение 1-24 ч, фильтруют и полимер промывают ДМФА и затем метиленхлоридом и затем обрабатывают трифторуксусной кислотой, чтобы отщепить конъюгированное соединение 1126 от смолы (схема 6). Пример 55 описывает, в увеличенном масштабе, получение соединения 1111.
Схема 6
Пример 10. Получение пролекарств с фолат-таргетирующими средствами, используя соединение 1111.
Соединение 1111 имеет электрофильную группу, которая может быть подвергнута взаимодействию
- 27 012240 с нуклеофильными аминогруппами в среде умеренно основных органических растворителей или водных условиях (т.е. буфер бикарбоната натрия с концентрацией от 20 до 500 мМ) с получением необратимой тиомочевиновой связи. Подходящие нуклеофильные аминогруппы присутствуют на таргетирующем биомолекулярном фолате. Молекулы фолата А и С конъюгируют с соединением 1111 через аминогруппу в ДМФА при смешении в грубо равных пропорциях в присутствии основания, триэтиламина или диизопропилэтиламина, с получением соединений В и Ό (схема 7).
Схема 7
Соединение 1111
Соединение 1111
Пример 11. Получение пролекарств с антитело-таргетирующими средствами, используя соединение 1111.
Соединение 1111 конъюгируют с моноклональными антителами в водном растворе, рН 7-9, и затем отделяют ультрафильтрацией или другими обычными методами разделения белковых конъюгатов от небольших молекул. Конъюгированное соединение можно получить согласно примеру 8.
Пример 12. Получение пролекарств, используя Ν-гидроксисукцинимид сложные эфиры.
Получают сложный эфир, менее реакционноспособный, чем соединение 1111, Νгидроксисукцинимид активный сложный эфир соединения 1113 (схема 8). 100 мг пробу соединения 1113 (А024-67) растворяют в 1 мл сухого ТГФ вместе с 53 мг Ν-гидроксисукцинимида (2 экв.). При перемешивании добавляют, всю сразу, 45 ир-аликвоту 1М дициклогексилкарбодиимида в метиленхлориде (2 экв.). В пределах 3 мин образуется тяжелый белый осадок, указывая на то, что реакция связывания имела место. После предоставления возможности реакционной смеси перемешиваться в течение 23 ч, реакционную смесь фильтруют и растворитель удаляют из фильтрата, получая 172 мг продукта, неочищенного активного сложного эфира, в виде густого желтого масла, обозначенного А024-79 и показывающего время удерживания 2,334 мин с ожидаемой массой М+=535, найденной для этого пика.
Схема 8
Соединение 1113 Ρθί. Νο. А024-79
- 28 012240
Используя ту же самую химию, описанную выше для соединения 1111, А024-79 используют для конъюгирования таргетирующих белков, как описано в примере 8, и используют для конъюгирования с полимером, как описано в примере 74.
Пример 13. Получение пролекарств, используя соединение 1105.
Соединение 1105 имеет электрофильную группу, которая может быть подвергнута взаимодействию с нуклеофильными аминогруппами в среде умеренно основных органических растворителей или водных условиях (т.е. буфер бикарбоната натрия с концентрацией от 20 до 500 мМ) с получением необратимой тиомочевиновой связи. Подходящие нуклеофильные аминогруппы присутствуют на таргетирующих биомолекулах, таких как пептиды, белки и небольших молекулах, несущих аминогруппы, таких как производные витамина (А и С схемы 7). Типичные примеры таких продуктов включают соединения В и Ό.
Схема 9
Пример 14. Получение производных морфолинового кольца.
Тиометилсодержащее соединение схемы 1 получают, как описано в примере 1. Это соединение нагревают в соответствующем растворителе с или без каталитического количества уксусной кислоты и с избытком нуклеофильного аминового соединения до тех пор, пока большая часть тиометилсодержащего соединения не израсходуется. Затем смесь подвергают препаративной ЖХ-МС с обращенной фазой, чтобы выделить желаемый аналог морфолина. Соединения, полученные таким способом, представлены в табл. 4 наряду с условиями их получения, идентификации и выделения, представленными в табл. 5. Данные ЯМР для вышеуказанных соединений представлены в табл. 6.
- 29 012240
Таблица 4
Структура Соединение ММ Выход (мг) Выход (%)
1153 352,42 32, 6 24, 8
1154 483,5 54,6 30,3
О 1155 335,4 24,7 19,8
10 он 1156 307,3 5,0 61,2 4.4 53.4
§Г 0 1157 305, 4 100 (езЪ) 97,7 (езС)
- 30 012240
1158 321,4 30 25, 0
ЧУ- У у х0 1159 295 62 56, 4
ч^0ч^ 1160 293, 4 24,4 22, 3
ЧуЧ''С1 ΝΗ О 1161 295,3 71 64,5
Соча О ^° 1162 337, 4 6,7 23, 5
ЧуЧд-А---цЛ ό 1163 337,4 57,7 45, 9
§УР 1164 335, 4 41,0 32, 3
0 1165 265,31 17,2 17, 2
ρΖ^ρ 1166 319,29 2,4 3,0
- 31 012240
Таблица 5
Соединение № № лота (Прел. вещество) Растворитель Нагрев(°С) /Время (мин) Кат. Время удерживания (мин) Выход (мг) Выход (4)
1153 А037-36 н-ВиОН 115/350 нет 3,4 07 32,6 24,8
1154 А036-08 н-ВчОН 110/192 нет 3,156 54,6 30, 3
1155 А037-19-3 н-ВиОН 110/24 нет 3, 649 24,7 19, 9
1156 А037-18-1 н-ВцОН 110/48 нет 2,7 64 61,2 53, 4
1157 А037-15 н-ВиОВ 110/24 нет 3,837 100 87
115В А037-29 н-ВиОН 110/4 нет 2,753 30 25
1159 А037-31 н-ВцОН 110/20 нет 2,753 62 56,4
1160 А037-48 Ееон 65/220 да 3, 666 24,4 22,3
1161 А037-40 Е6 ОН 65/48 да 3,012 71 64,5
1162 А037-69 толуол 65/24 - 3,410 28,5 23, 5
1163 А037-99А н-ВиОН 110/180 нет 3,278 57,7 45, 9
1164 А037-99В н-ВиОН 110/180 нет 3,587 41 32,8
1165 А041-32 н-ВиОН/ДМФА 110/24 да 3,24 17,2 17,2
1166 А041-25 п-ВиОН 110/240 да 3, 427 11,1 9,3
Таблица 6
1153 3Н-ЯМР (С0С1з) : δ 1, 60-1,65 (уш.с, 2Н) , 3,772-3, 399 (т, 4Н), 3,506-3,533 (т, 4Н), 5,474 (с, 1Н), 7,367-7,550 (ы, 7Н), 8,178-8,202 (д, 1Н, Л=7,9 Гц)
1154 3Н-ЯМР (СОС13) : δ 3,533-3,644 (м, 4Н) 5,491 (с, 1Н} , 7,370-7,541 (м, 7Н) 8,173-8,197 (д, ΙΗ, Л=7,76 Гц)
1155 ^-ЯМР (СЭС1з) : з 1,165-1,187 (д, 6Н) , 2, 567-2,627 (т, 2Н) , 3,580-3, 640 (м, 4Н) 5, 496 (с, 1Н), 7,389-7,591 (м, 7Н), 8,164-8,187 (д, 1Н, Л=7,75 Гц)
1157 3Н-ЯМР (СЭСХз) : δ 1,573-1,698 (м, 6Н), 3, 344-3,370 (т, 4Н), 5,543 (с, 1Н), 7,37-7,562 (м, 7Н), 8,163-8,186 (д, 1Н, 0=7,8 Гц)
1158 3Н ЯМР- (СЭС13) : δ 1,498-1,547 (м, 7Н>, 1, 873-1,997 (м, ЗН), 2, 600-3,200 (уш., 1Н), 3,140-3,160 (м, 1Н) , 3,3163,323 (м, 1Н>, 3,737-3,831 (м, 2Н), 4,011-4,037 (м, 1Н), 5,624 (с, 1Н) , 7,337-7,582 (м, 7Н), 8,163-8,187 (д, 1Н, 0=7,8 Гц)
1159 ХН-ЯМР (СОС13) : δ 1,5-2,3 (уш.с, 2Н) , 3,015 (с, ЗН) , 3,400-3,426 (т, 2Н), 3,674-3,741 (т, 2Н), 5,412 (с, 1Н) , 7,287-7,325 (т, 1Н) , 7,404-7, 489 (м, 6Н) , 8,066- 8,090 (д, 1Н, 0=7,75 Гц)
1160 АяМР (СОС13) : δ 1,077-1,178 (т, 6Н) , 3,255-3, 308 (кв, 4Н) , 5, 447 (с, 1Н), 7,367-7,546 (м, 7Н) , 8,180-8,204 (д, 1Н, Л-8,01 ГЦ)
1161 ХН-ЯМР (СОС13) : δ 3, 326-3,358 (т, 2Н) , д 3,358 (с, ЗН) , д 3,517-3, 542 (т, 2Н) , д 5,099 (уш.с, 1Н) , д 5,427 (с, 1Н), д 7,373-7,565 (м, 7Н), д 8,172-8,195 (д, 1Н, 0=7,74 Гц)
1163 3Η-ΗΜΡ (СБС1з) : 6 3,035 (с, ЗН) , д 3,479-3,488 (д, 2Н) , д 3,806-3,888 (м, 4Н), д 4,961-4,980 (т, 1Н) , д 5,566 (с, 1Н) , д 7,385-7,489 (м, 4Н) , д 7,555-7,586 (м, ЗН) , д 8,180-8,204 (д, 1Н, 0=8,05 Гц)
1164 ^-ЯМР (СОС13) : δ 1, 931-2,103 (м, 4Н) , д 3,133-3,248 (уш.с, 5Н) , д 3,273-3,296 (м, 1Н), д 3,368-3,394 (м, 1Н) , д 3,990-3, 999 (уш.с, 1Н) , д 5, 403 (с, 1Н) , д 7, 374-7,556 (м, 7Н) , д 8,191-8,215 (д, 1Н, Л=7,81 Гц)
Пример 15. Анализ методом ВЭЖХ.
Анализ методом ВЭЖХ осуществляют на системе ЗЫтайхи ЖХМС-2010 и используют скорость потока 3 мл/мин и исходную концентрацию В 5%. Содержание растворителя В изменяли по линейному закону до концентрации 95% в течение 5,0 мин, поддерживали при 95% вплоть до 6,0 мин, затем линейно снижали обратно до 5% в течение 6,5 мин и оставляли таким до окончания эксперимента (пробега) в течение 7,5 мин. Если не оговорено особо, указанный способ элюирования используют в примерах. Способ В представляет собой способ с медленным изменением градиента для полярных соединений, который использует скорость потока 3 мл/мин и исходную концентрацию В 0%, и эти условия выдерживают в течение первой минуты. Растворитель В линейно изменяют до концентрации 10% в течение 3,0 мин,
- 32 012240 затем линейно изменяют до 95% в течение 5,0 мин, и эту концентрацию выдерживают вплоть до 6,0 мин и затем линейно изменяют до 5% в течение 6,5 мин, и эту концентрацию оставляют без изменения вплоть до окончания опыта в течение 7,5 мин. Помимо детектирования по массе, детектирование ЖХ включало 3 канала: УФ-поглощение при 254 нм, УФ-поглощение при 214 нм и рассеяние света в паровой фазе (АШесЬ ΕΕ8Ό 2000).
Детектор светорассеяния в паре функционировал при 50°С с потоком азота 1,5 л/мин. Как СЭЬ (линия химической десольватации), так и температурный блок системы 8Ытайги ЬСМ8-2010 функционировали при 300°С и поток газораспылителя азота составлял 4,5 л/мин. Масс-спектры положительных и отрицательных ионов детектировали в диапазоне М/ζ от 50 до 2000. Колонка представляла собой ΥМС СотЬ18сгееп ОЭ8-ЛО. размер частиц 8-5 мк, длина 50 мм с внутренним диаметром (Ι.Ό.) 4,6 мм. Подвижную фазу А составляли, используя воду для ВЭЖХ марки В&1 с добавлением 0,1% (об./об.) НОАс и подвижная фаза В представляла собой ацетонитрил для ВЭЖХ марки В&1 с добавлением 0,1% (об./об.) НОАс. Эта система дает время удерживания в диапазоне от 1,50 до 1,60 мин (!К=1,50-1,60) для стандартного коммерчески доступного продукта (4-гидроксифенилуксусная кислота; А1<1пс11 Са!а1од Н5000-4; т.пл. 149-151°С), используемого в качестве стандарта сравнения.
Пример 16. Препаративная ВЭЖХ.
Градиентную препаративную хроматографию ВЭЖХ осуществляют на системе 8Ытайи, состоящей из двух насосов ЬС-8Л, соединенных с автоматическим автосэмпляром 81Ь-10Л; с элюированием через колонку с обращенной фазой (УМС, са! ССАО8О80520\УТ; ОЭ8-ЛО СотЬгРгер, 20x50 мм) и последующим пропусканием через устройство разделения потока переменного объема МРА; затем с помощью подпиточного насоса (ΕΟ'-10ΛθνΡ (МеОН)) меньший поток устанавливают около 3 мл/мин, и элюент пропускают через двухканальный УФ-детектор с регистрацией при разных длинах волн и затем расщепляют приблизительно, в соотношении 6:1, направляя в детектор светорассеяния в паровой фазе (работает при 50°С с потоком азота 1,5 л/мин) и масс-детектор 8Ытаάζи 2010; затем больший поток из разделяющего устройства МКА подают в жидкостной манипулятор СШоп 215, служащий в качестве коллектора для отбора фракций, и управляемый данными размеров пиков, поступающих от детекторов по массе, УФ-поглощению или ЕЬ8.
При работе используют различные градиенты, всегда начиная с более водного растворителя А и изменяя до различных концентраций В. Подвижную фазу А составляют, используя воду для ВЭЖХ марки В&1 с добавлением 0,1% (об./об.) НОАс, и подвижная фаза В представляет собой ацетонитрил для ВЭЖХ марки В&1 с добавлением 0,1% (об./об.) НОАс.
Пример 17. Биоактивность гидролизуемых пролекарств.
Биоактивность ЬУ294002 (соединение 1) определяли, анализируя фагоцитоз в макрофагах 1774, который является киназа ΡΙ-3 класса 1-зависимым путем. Кратко, клетки 1774 обрабатывают ЬУ294002 при концентрациях 10, 1 и 0,1 мкМ наряду с соответствующим ДМСО контролем в течение 1 ч в ЭМЕМ с 10% ФТС и затем добавляют чувствительные кКВСк (эритроциты овцы) при соотношении мишень к эффектору, равном 100:1, в течение 30 мин при 37°С. Клетки претерпевали гипотонический шок, устраняя эритроциты, и фагоцитоз анализировали измерением концентрации гемоглобина в клеточных лизатах. Как показано на фиг. 1, ЬУ294002 значительно блокировал фагоцитоз при всех концентрациях дозазависимым образом. Эти результаты свидетельствуют о том, что система клеток 1774 может быть использована для быстрого и легкого определения способности соединений настоящего изобретения ингибировать активность киназы ΡΙ-3. Используя этот метод количественной оценки активности киназы ΡΙ-3, целенаправленное пролекарственное соединение 1126 испытали при концентрации 5 мкМ с различным временем предварительной инкубации, которое предоставляло возможность для ш йи превращения пролекарства в активное лекарственное средство (соединение 1). Контрольный образец (время нуль без предварительной инкубации соединения 1126) показал фагоцитарный индекс (РС1; мера степени фагоцитоза, происходящего в результате отсутствия ингибирования киназы Р1-3) 140, тогда как соединение 1126 со временем инкубации в водном (растворе) рН 7 в течение 2, 5 и 10 ч показало РС1 88, 78 и 37 соответственно. Этот пример наглядно показывает, что сначала пролекарство 1126 имеет незначительную ингибирующую активность в отношении киназы Р1-3, или не имеет ее совсем, и с течением времени превращается в биоактивное лекарственное средство, которое действительно демонстрирует значительное ингибирование киназы Р1-3. Другой эксперимент показал, что соединение 1126 при концентрации 20 мкм при экспозиция-ограниченной постановке эксперимента (20 мин экспозиции для тестируемого раствора, затем удаление тестируемого раствора) показало РС1 50 по сравнению с 163 для растворителя, 190 для соединения 1 и 170 для КСЭ8 (тетрапептид, который представляет собой таргетирующую часть соединения 1126). Этот пример демонстрирует преимущества целенаправленного в отношении места доставки ингибитора киназы Р1-3 при экспозиция-время-ограниченной постановке эксперимента. Этот эффект был дополнительно оценен повторением эксперимента, используя ряд снижающих доз соединения 1126, который показал, что 10, 3, 1 и 0 мкМ для периода инкубации 20 мин с последующим удалением соединения и затем 2 ч инкубации для протекания фагоцитоза дают РС1 33, 143, 206 и 213 соответственно. Этот пример наглядно показывает, что соединение 1126 при доза-экспозиция-ограниченной постановке экспе
- 33 012240 римента ингибировало киназу ΡΙ-3 доза-зависимым образом.
Пример 18. Получение остеотропной группы А030-84.
Раствор 500 мг 4-[Щ-ВОС)аминоэтил]анилина (А1бпс11) в 10 мл диоксана обрабатывают параформальдегидом (400 мол.%, 270 мг) и триметилфосфитом (400 мол.%, 1,12 г). Смесь нагревают до 95°С на протяжении ночи. Затем добавляют еще параформальдегид (270 мг) и триметилфосфит (1,12 г) и реакционную смесь снова нагревают при 95°С на протяжении ночи. Раствор охлаждают, поглощают хлороформом (20 мл) и промывают насыщенным хлоридом натрия (20 мл) и водой (20 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель и избыточный триметилфосфит удаляют роторным испарением при 80°С, получая 1,723 г прозрачного масла. Присутствие указанного в заголовке соединения, обозначенного номером лота А030-74, подтверждают методом ВЭЖХ-МС с электрораспылительной ионизацией, демонстрирующим время удерживания !К=2,9 мин и пик с т/ζ 467, отвечающий [М+Н]+, и пик с т/ζ 489, отвечающий [М+№]+, найденных для желаемой массы (М=С18Н32^О8Р2).
Раствор 870 мг А030-74, полученного выше, в 10 мл дихлорметана обрабатывают бромтриметилсиланом (690 мол.%, 1,97 г). Раствор перемешивают на протяжении ночи. Добавляют метанол (10 мл) и раствор перемешивают 15 мин и затем концентрируют, получая 1,12 г оранжевого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылительной ионизацией. Как было установлено, время удерживания при использовании указанного градиента составляло ТК=0,85 мин и в масс-спектре, полученном в режиме регистрации отрицательных ионов, для желаемого продукта (М=С9Н16^О6Р2), найден пик с т/ζ 309, отвечающий [М-Н]-. Этому продукту приписан ссылочный номер А030-84.
Пример 19. Синтез соединения А014-52.
К 1,0 г 4-карбоксифенилизотиоцианата добавляют дихлорметан (15 мл) и дистиллированную воду (15 мл). Колбу охлаждают на бане со смесью лед-вода и добавляют бикарбонат натрия (4,0 экв.) и гидросульфат н-тетрабутиламмония (0,05 экв.). Через 10 мин добавляют хлорметилхлорсульфат (1,2 экв.). Раствор энергично перемешивают на протяжении ночи и переносят в делительную воронку с добавкой дихлорметана (10 мл). Слои разделяют и органический слой промывают насыщенным хлоридом натрия (20 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получая 1,10 г желтоватокоричневого твердого вещества. На присутствие указанного в заголовке соединения указывает сдвиг во времени удержания для продукта (4,2 мин) по сравнению с исходной карбоновой кислотой (3,2 мин). Соединение также подтверждается 1Н-ЯМР-спектроскопией:
1Н (СБС1з) δ: 8,08 (д, 2Н, 1=8,8 Гц), 7,30 (д, 2Н, 1=8,8 Гц), 5,95 (с, 2Н).
Пример 20. Синтез соединения А014-48.
Раствор 250 мг хлорметилового сложного эфира (полученного по способу, описанному для А01452) в 2 мл ацетона обрабатывают иодидом натрия (1,2 экв.) и раствор перемешивают на протяжении ночи. Раствор фильтруют, растворитель удаляют и остаток поглощают дихлорметаном (10 мл). Раствор промывают 10% (мас./об.) сульфитом натрия (10 мл), 5% (мас./об.) бикарбонатом натрия (10 мл) и водой (10 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получая 137 мг светло-зеленого твердого вещества. На присутствие указанного в заголовке соединения указывает сдвиг во времени удерживания для продукта, иодметилового сложного эфира, (4,4 мин) по сравнению с исходным хлорметиловым сложным эфиром (4,2 мин). Соединение также подтверждается 1Н-ЯМР-спектроскопией:
- 34 012240
Ή (СБС13) δ: 8,04 (1, 2Н, 1=8,8 Гц), 7,29 (д, 2Н, 1=8,1 Гц), 6,15 (с, 2Н).
Пример 21. Синтез соединения А014-76.
Раствор 387 мг хлорметилового сложного эфира (полученного по способу, описанному для А01452) в 6 мл 2-бутанона обрабатывают иодидом натрия (1,2 экв.) и раствор нагревают 10 ч. Раствор фильтруют, растворитель удаляют и остаток поглощают дихлорметаном (10 мл). Раствор промывают 10% (мас./об.) сульфитом натрия (10 мл), 5% (мас./об.) бикарбонатом натрия (10 мл) и водой (5 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получая 310 мг желтовато-коричневого твердого вещества. На присутствие указанного в заголовке указывает сдвиг во времени удерживания для продукта, иодметилового сложного эфира, (4,4 мин) по сравнению с исходным хлорметиловым сложным эфиром (4,2 мин).
Пример 22. Синтез соединения А018-24.
Раствор 64 мг 2-п-нитробензил-1,4,7,10-тетраазациклододекана (МасгосусЕск) в 500 мкл диоксана обрабатывают параформальдегидом (50 мг) и триметилфосфитом (207 мг). Смесь нагревают до 85°С и затем растворитель удаляют посредством роторного испарения при 75°С. Добавляют хлороформ (10 мл) и раствор промывают насыщенным хлоридом натрия (2x10 мл) и водой (2x10 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получая коричневое масло. Его очищают посредством ЖХ, получая требуемый продукт. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждается ЖХ-МС с электрораспылительной ионизацией А; 1К=1.8 мин. МС [Μ=^7Η53Ν5Οι4Ρ4] т/ζ 796 (МН+), 818 (МЫа+)
Пример 23. Синтез соединения А022-32.
Раствор 33 мг фосфорсодержащего макроцикла (полученного в А018-24) в 700 мкл дихлорметана обрабатывают бромтриметилсиланом (72 мг). Смесь перемешивают на протяжении ночи и затем добавляют дополнительное количество бромтриметилсилана (36 мг) и реакционную смесь перемешивают дополнительно 3 дня. Добавляют метанол (500 мл) и раствор перемешивают 1 ч и затем летучие вещества удаляют, получая коричневое масло. Добавление метанола осаждает коричневое твердое вещество, которое отфильтровывают и сушат. Последнее очищают посредством ЖХ, получая 2,7 мг желаемого продукта. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждается ЖХ-МС с электрораспылением А; Ц=1,5 мин. МС [М^Щ^О^] т/ζ 682 (М-Н-), 340 [(М-2Н)/2)2-].
Нитрогруппу восстанавливают, используя обычные методы восстановления, например, перемешивая с катализатором, 5% палладием на углероде, в метаноле в атмосфере чистого водорода. Затем смесь фильтруют (заботясь о предотвращении воздействия воздуха на катализатор) и растворитель выпарива ют, получая амин.
Пример 24. Синтез соединения А022-56.
Смесь фосфорной кислоты (1,26 г), 6М хлористо-водородной кислоты (19,5 мл) и пксилолдиамином (1,0 г) нагревают до 100°С. К этому добавляют 37% (мас./мас.) водный формальдегид (1,15 мл) и смесь перемешивают при 100°С на протяжении ночи. Смесь фильтруют и воду удаляют ро
- 35 012240 торным испарением при 80°С, получая 2,11 г белого твердого вещества. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждается ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ элюирования В; !Я=1,8 мин. МС [М=С10Н18Ы2О6Р2] т/ζ 325 (МН+).
Пример 25. Синтез соединения А018-12.
Раствор 928 мг Ν-ВОС-1,4-диаминобутана в 10 мл диоксана обрабатывают параформальдегидом (592 мг) и триметилфосфитом (2,44 г). Смесь перемешивают при 108°С на протяжении ночи и растворитель удаляют роторным испарением при 75°С. Добавляют хлороформ (10 мл) и раствор промывают насыщенным хлоридом натрия (2x10 мл) и водой (2x10 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получая 1,55 г масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждается ЖХ-МС с электрораспылением; !Я=2,4 мин. МС [М=С15Н34Н2О8Р2] т/ζ 455 (МНа+).
Пример 26. Синтез соединения А026-92.
Раствор 783 мг фосфоната (полученного в А018-12) в 18 мл дихлорметана обрабатывают бромтриметилсиланом (2,2 г). Раствор перемешивают на протяжении ночи и добавляют метанол (10 мл) и смесь перемешивают в течение 2 ч. Летучие вещества удаляют, получая 1,22 г желтого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждается ЖХ-МС с электрораспылением, используя метод В; !Я=0,4 мин. МС [М=С6Н18Н2О6Р2] т/ζ 275 (М-Н-).
Пример 27. Синтез соединения А030-74.
Раствор 500 мг 4-[(Н-ВОС)аминоэтил]анилина в 10 мл диоксана обрабатывают параформальдегидом (270 мг) и триметилфосфитом (1,12 г). Смесь нагревают до 95°С на протяжении ночи. Затем добавляют еще параформальдегид (270 мг) и триметилфосфит (1,12 г) и смесь снова нагревают при 95°С на протяжении ночи. Раствор охлаждают, поглощают хлороформом (20 мл) и промывают насыщенным хлоридом натрия (20 мл) и водой (20 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель и избыточный триметилфосфит удаляют роторным испарением при 80°С, получая 1,72 г прозрачного масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждается ЖХ-МС с электрораспылением; !Я=2,9 мин. МС [С18Н32Н2О8Р2] т/ζ 467 (МН+); 489 (\1Νι').
Пример 28. Синтез соединения А030-84.
Раствор 870 мг А030-74 в 10 мл дихлорметана обрабатывают бромтриметилсиланом (1,97 г). Раствор перемешивают на протяжении ночи. Добавляют метанол (10 мл) и раствор перемешивают 15 мин и затем концентрируют, получая 1,12 г оранжевого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтвердают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ В; !Я=0,85 мин. МС |С9Н|6Н2О6Р2| найден пик с т/ζ 309, отвечающий иону [М-Н]-.
- 36 012240
Пример 29. Синтез соединения А035-66.
АОЗб-бб
Часть (2,0 г) 4-аминометилбензойной кислоты (А1бпсй) растворяют в 20 мл воды, содержащей 0,64 г твердого ΝΟΗ. Добавляют часть (3,18 г) Вос-ангидрида (А1бпсй) и смеси дают возможность перемешиваться на протяжении ночи. Смесь доводят до рН 2 осторожным добавлением 15 мл 2н. НС1. Полученное белое твердое вещество отфильтровывают и сушат, получая 2,9997 г продукта. Продукт охарактеризовывают ЖХМС (время удерживания 2,901 мин и желаемый ион [М-Н], наблюдаемый при т/ζ 250).
Пример 30. Синтез соединения А035-6.
О
1,5 части А035-66 растворяют в 17 мл сухого ТГФ наряду с 0,69 г Ν-гидроксисукцинимида (А1бпсй) и затем обрабатывают всю смесь сразу 6 мл 1М дициклогексилкарбодиимида (А1бпсй) в дихлорметане при перемешивании. Через 2 дня белый осадок (дициклогексилмочевина) отфильтровывают и фильтрат подвергают роторному испарению в вакууме, получая 2,8146 г белого твердого вещества, характеризуемого ЖХМС (время удерживания 3,2999 мин и желаемый ион [М+Н], наблюдаемый при т/ζ 349).
Пример 31. Синтез соединения А035-14.
500 мг часть А035-6 растворяют в 5 мл сухого ТГФ и обрабатывают 1,002 мл (10 экв.) этилендиамина (ΈΌΛ) и дают возможность перемешиваться в течение 2 ч. Затем раствор декантируют с образовавшегося твердого вещества. Затем из декантированного раствора роторным испарением в вакууме удаляют растворитель и избыток Ε^А, получая 0,8728 г белого твердого вещества; продукт охарактеризовывают ЖХМС (время удерживания 1,608 мин и желаемый ион [М+Н], наблюдаемый при т/ζ 294).
Пример 32. Синтез соединения А032-24.
Раствор 872 мг амина (полученного в А035-14) в 10 мл диоксана обрабатывают параформальдегидом (535 мг) и триметилфосфитом (2,21 г). Смесь нагревают при 100°С на протяжении ночи и затем растворитель удаляют роторным испарением при 80°С, получая коричневое твердое вещество. Добавляют
ритель удаляют, получая 241 мг желтого полутвердого вещества. Последнее очищают ЖХ, получая 58,8 мг желаемого продукта. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением; !К=2,6 мин. МС [Μ=^ιΗ37Ν3Ο9Ρ2] т/ζ 538 (МН+), 560 (ΜΝ;ί).
Пример 33. Синтез соединения А032-40
А032-40
О
Раствор 54,6 мг фосфоната (полученного в А032-24) в 1 мл дихлорметане обрабатывают бромтриметилсиланом (156 мг). Смесь перемешивают на протяжении ночи. Добавляют этанол (0,5 мл) и воду (3 капли) и смесь перемешивают 1 ч и затем удаляют летучие вещества и продукт сушат в вакууме. Последний поглощают водой (1 мл) и лиофилизуют, получая 59 мг желтовато-коричневого твердого вещества. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением,
- 37 012240 используя способ В; 1В=0,4 мин. МС [М=С12Н21№О7Р2] т/ζ 380 (М-Н-), 382 [МН+], 404 [М№+]. Пример 34. Синтез соединения А026-60.
А026-60
А026-60, полученное по способу Каи1ос1, Ό. Кешке, 1.К., ХУесЫег ν.1. 8уп. Соттип., 1996, 26(10), 2037.: Смесь №бензил-№метиламина (20,0 г), диэтилфосфита (70,7 г) и триэтилортоформиата (29,3 г) перемешивают в атмосфере аргона при температуре образования флегмы (150°С) в течение 5 ч. Этанол удаляют посредством роторного испарения при 70°С и смесь снова нагревают при температуре образования флегмы на протяжении ночи. Раствор разбавляют 600 мл хлороформа и промывают 1М гидроксидом натрия (3x100 мл) и насыщенным хлоридом натрия (3x150 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют, получая 74,0 г светло-желтого масла. 10,0 г этого вещества подвергают колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 14:4:1 этилацетат:гексан:метанол. Это дает 6,08 г прозрачного масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением; 1В=3,4 мин. МС |М=С|-Нз^О6Р2| т/ζ 408 (МН+), 430 (МУ!), 471 (М№-1-СН3С.А').
Пример 35. Синтез соединения А030-54.
. АОЗО-54
А030-54 (соединение известно, СА8 # 80475-00-9), полученное по способу КагИос/ Ό. Кешке, 1.К., ХУесЫег, XV.! 8уп. Соттип., 1996, 26(10), 2037. Раствор 4,52 г фосфонатированного бензиламина (полученного через А026-60) в метаноле (45 мл) обрабатывают 10% паладием на углероде (200 мг) и подвергают воздействию атмосферы водорода на протяжении ночи. Палладий/углерод отфильтровывают, получая 2,98 г светло-желтого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ А; ΐΒ=1,9 мин. МС [М=С10Н^ОбР2] т/ζ 318 (МН+).
Пример 36. Синтез соединения А039-16.
А039-16: 500 мг образца 4-хлорметилбензойной кислоты (А1бг1сН) растворяют в 8 мл ТГФ и раствор обрабатывают весь сразу 5 экв. этилендиамина (А1бпс11) (983 мкл). Через 24 ч растворитель удаляют в высоком вакууме и белое твердое вещество (93%) охарактеризовывают ЖХМС (время удерживания 0,4 мин и желаемый ион [М+Н], наблюдаемый при т/ζ 195).
Пример 37. Синтез соединения А038-24.
Смесь 679 мг аминокислоты (полученной посредством А039-16), 37% (мас./мас.) водного формальгегида (1,04 мл), фосфорной кислоты (1,15 г) и концентрированной (12,1М) хлористо-водородной кислоты (2,3 мл) в диоксане (10 мл) перемешивают при 100°С на протяжении ночи. Растворитель удаляют роторным испарением при 75°С и смесь центрифугируют и твердое вещество декантируют. К жидкости добавляют еще раствор формальдегида (1,04 мл), фосфорную кислоту (1,15 г), концентрированную хлористо-водородную кислоту (2 мл) и диоксан (10 мл) и полученную смесь снова перемешивают на протяжении ночи при 100°С. Растворитель удаляют роторным испарением при 75°С, получая вязкое масло. Масло очищают посредством ЖХ, получая 276 мг коричневого твердого вещества. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ А; ΐΒ=0,6 мин. МС [М=С13Н23№ОцР3] т/ζ 475 (М-Н-), 477 (МН+).
- 38 012240
Пример 38. Синтез соединения А038-50.
Смесь 6,0 г Ртοс-^уκ-ΟΗ ^Жатоей СНеи-ПесН) в метаноле (25 мл) и воды (25 мл) обрабатывают 37% (мас./мас.) водным формальдегидом (6,06 мл) и диметилфосфитом (8,96 г). Смесь перемешивают при 80°С в течение 2 ч, охлаждают и экстрагируют дихлорметаном (1x100 мл, 2x50 мл). Органику промывают насыщенным хлоридом натрия (50 мл), сушат над сульфатом магния в течение 30 мин и растворитель удаляют, получая 10,17 г светло-зеленого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ Α; !В=3,3 мин. МС [М=С27Н38^О10Р2] т/ζ 613 (МН+), 636 (ΜΝ;·Γ).
Пример 39. Синтез соединения А038-66.
Раствор 23,9 мг фосфонатированного Ртοс-^уκ-ΟΗ (полученного через А038-50) в дихлорметане (1 мл) обрабатывают бромтриметилсиланом (60 мг). Смесь перемешивают на протяжении ночи. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ А; !В=3,4 мин. МС [М=С23Н3(Х2ОюР2] т/ζ 555 (М-Н-).
Пример 40. Синтез соединения А038-76.
Раствор 112,9 мг фосфонатированного Ртοс-^уκ-ΟΗ (полученного через А038-50) в 6М хлористоводородной кислоте (3 мл) перемешивают при 80°С в течение 2 дней. Добавляют воду (9 мл) и спустя еще 2 дня смесь центрифугируют и жидкость декантируют. Твердое вещество сушат в вакууме, получая 86,8 мг не совсем белого твердого вещества. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ Α; !В=3,1 мин. МС [М^гЩ^гО^г] т/ζ 555 (М-Н-).
Пример 41. Синтез соединения А038-90.
- 39 012240
Раствор 500 мг Етос-Ьук-ОН (Аάνаηсеά СНетТесН) в диоксане (5 мл) обрабатывают 37% (мас./мас.) водным формальдегидом (303 мкл), фосфорной кислотой (333 мг) и концентрированной (12,1М) хлористо-водородной кислотой (674 мкл). Смесь перемешивают при 90°С на протяжении ночи, растворитель удаляют роторным испарением при 75°С. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ В; !К=5,4 мин. МС [М=С23Н3(Ц2О10Р2] т/ζ 555 (М-Н-).
Пример 42. Синтез А042-18.
Раствор 1,29 г Вос-защищенной аминокислоты (полученной выше как лот А035-66) в 15 мл тетрагидрофурана обрабатывают Ν-гидроксисукцинимидом (623 мг) и 1,0М 1,3-дициклогексилкарбодиимидом в дихлорметане (5,4 мл). Смесь перемешивают на протяжении ночи и белый осадок отфильтровывают и супернатант концентрируют, получая 1,89 г белого твердого вещества. На присутствие указанного в заголовке соединения указывает присутствие УФ-сигнала при 3,3 мин.
Пример 43. Синтез соединения А042-26.
К раствору 2,1 г трис-(2-аминоэтил)амина в 20 мл тетрагидрофурана добавляют по каплям раствор 1,0 г активированного сложного эфира (полученного через А042-18) в 20 мл тетрагидрофурана на протяжении периода времени 40 мин. Смесь перемешивают на протяжении ночи, что приводит к осадку, который отфильтровывают, и концентрируют роторным испарением, получая 2,10 г желтого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ А; !К=1,4 мин. МС [М=С19Н33М5О3] т/ζ 380 (МН+), 402 ιΜΝΓι.
Пример 44. Синтез соединения А042-32.
Раствор 2,08 г амина (полученного через А042-26) в диоксане (20 мл) и обрабатывают параформальдегидом (1,50 г) и диметилфосфитом (6,85 г). Смесь перемешивают при 90°С на протяжении ночи и растворитель удаляют роторным испарением при 70°С. Добавляют дихлорметан (50 мл) и смесь промывают насыщенным хлоридом натрия (25 мл) и водой (25 мл). Органику сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют. Остаток очищают с помощью ЖХ, получая 123,8 мг желтого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ Ό; !К=2,2 мин. МС [М=С31Н61ЩО15Р4] т/ζ 868 (МН+).
Пример 45. Синтез соединения А042-70.
Раствор 111,1 мг фосфонатированного диамина (полученного через А042-32) в 1 мл дихлорметана обрабатывают 194 мг бромтриметилсилана. Спустя 5 ч добавляют метанол (1 мл), смесь перемешивают в течение 1 ч и растворитель удаляют, получая 113,9 мг желтовато-коричневого твердого вещества. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ В; !К=1,0 мин. МС [М=С18Н37ЩО13Р4] т/ζ 328 [(М+2Н/2)2+], 656 (МН+). Соединение также анализируют с помощью метода протонной ЯМР-спектроскопии:
- 40 012240 1Н (СБС1з) δ: 7,77 (д, 2Н, 1=8,1 Гц), 7,43 (д, 2Н, 1=8,2 Гц), 4,1-3,3 (м, 33Н).
Пример 46. Синтез соединения А026-94.
Раствор 750 мг фосфоната (полученного через А030-54) в 24 мл дихлорметана обрабатывают бромтриметилсиланом (2,89 г). Раствор перемешивают на протяжении ночи. Добавляют метанол (10 мл) и раствор перемешивают в течение 2 ч и растворитель удаляют, получая желтое масло, которое лиофилизуют, что приводит к 364 мг белого твердого вещества. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ В; 1К=0,6 мин. МС [М=С2Η9NО6Ρ2] т/ζ 204 (М-Н-).
Пример 47. Синтез соединения А042-96.
А042-96 (ди-трет-бутилфосфит). Раствор 4,10 г фосфорной кислоты в 100 мл тетрагидрофурана обрабатывают 2-метил-2-пропанолом (7,41 г). Добавляют 1,0М раствор 1,3-дициклогексилкарбодиимида в дихлорметане (100,0 мл), что приводит к образованию белого твердого вещества. Смесь перемешивают на протяжении ночи и твердое вещество отфильтровывают и растворитель удаляют, получая 6,82 г желтого масла. Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ГХ-МС. Следующие фрагменты обнаруживают: 57 [(СНэЪС4], 83 [НР(ОН)3+], 123 [(НО)2РС(СН3)2+].
Пример 48. Синтез соединения А042-98.
Смесь этаноламина (858 мг), параформальдегида (1,05 г), ди-трет-бутилфосфита (полученного через А042-96, 6,82 г) в бензоле (100 мл) нагревают при 90°С на протяжении ночи, что приводит к образованию жидкости поверх вязкого масла. Жидкость декантируют и концентрируют роторным испарением, получая масло, которое подвергают колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента 10% метанол в дихлорметане. Получают прозрачное масло (436 мг). Присутствие указанного в заголовке соединения подтверждают ЖХ-МС с электрораспылением, используя способ А; 1К=3,6 мин. МС [Μ=^0Η45ΝΟ7Ρ2] т/ζ 496 (М№+).
Пример 49. Синтез соединения А029-34.
А029-34
Чтобы получить 4-изотиоцианатофенилуксусную кислоту, 1,3 мл (13,5 ммоль, 2 экв.) тиофосгена добавляют к 1,0 г 4-аминофенилуксусной кислоты (6,61 ммоль) |А1бг1сН| и 3,73 г безводного карбоната калия (4 экв.), суспендированного в 20 мл сухого ТГФ. Суспензию перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре с последующим 4-часовым нагреванием на бане с силиконовым маслом при 85°С. Раствор охлаждают и пропускают через слой целита (1 дюйм) в шприце-фильтре. Раствор собирают в круглодонной колбе и растворитель удаляют при пониженном давлении.
Образец хранят в вакуумном эксикаторе в течение двух часов, затем растворяют в смеси ацетонвода, замораживают и лиофилизуют, получая 1,65 г черноватого твердого вещества. Соединение идентифицируют по сдвигу во времени удерживания в хроматограме ЖХМС до 3,32 мин.
Пример 50. Синтез А040-22.
А040-22
Чтобы получить хлорметиловый эфир 4-изотиоцианатофенилуксусной кислоты, 0,530 г 4изоцианатофенилуксусной кислоты (2,7 ммоль) растворяют в 5,0 мл метиленхлорида в стеклянной пробирке, в которую добавляют 0,044 г гидросульфата тетра-н-бутиламмония (межфазный катализатор 0,05 экв.) и 0,866 г бикарбоната натрия (4 экв.), растворенного в 5,0 мл воды. Раствор перемешивают на бане со льдом в течение 10 мин. К холодной смеси добавляют 0,520 г хлорметилхлорсульфата (АСКО8
- 41 012240
С11ст1са1 - 1,2 экв.) и перемешивают в течение 4 ч при температуре, постепенно приходящей к комнатной температуре. Органический слой разделяют в делительной воронке, промывают 10 мл насыщенного раствора соли и сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют в вакууме, получая 0,70з г неочищенного масла. Продукт идентифицируют по образованию нового пика в хроматограмме ЖХМС при времени удерживания 4,268 мин и исчезновению пика, соответствующего исходному веществу.
Пример 51. Синтез соединения А040-26.
А04О-26
Чтобы получить производное четвертичной соли 4-изотиоцианатофенилуксусной кислоты соединения 1101, соединение 1101 (з00 г, 1,0 ммоль) и 582 г иодида натрия (4 экв.) растворяют в 4,0 мл сухого ацетонитрила в сосуде (емкостью одна драхма). При перемешивании добавляют хлорметиловый эфир 4изотиоцианатофенилуксусной кислоты (соединение А040-22) в 2,0 мл сухого ацетонитрила. Смесь нагревают на бане с силиконовым маслом при 65°С в течение пяти часов, контролируя протекание реакции с помощью ЖХМС. После того как большая часть исходного вещества-соединения 1101 израсходуется, реакционную смесь очищают, используя препаративную ЖХМС, время удерживания з,019 мин, т+=51з. Получают 194,1 мг продукта с чистотой 94% и идентифицируют с помощью ЖХМС. Затем соединение А040-26 подвергают взаимодействию с описанными нуклеофилнесущими таргетирующими средствами способами, раскрытыми в примерах, использующих соединение 1105, с получением полезных пролекарств целенаправленного действия.
Пример 52. Синтез соединения А044-52.
Чтобы получить №бензил-И-метилкарбамоил хлорметиловый сложный эфир, 0,з00 мг (з24 мкл, й=0,942) бензилметиламина и 640 мкл диизопропилэтиламина (1,5 экв.) растворяют в 2,0 мл сухого метиленхлорида и охлаждают на бане со льдом. После охлаждения раствора добавляют зз0 мкл хлорметилхлорформиата (1,5 экв.) в 2,0 мл сухого метиленхлорида и перемешивают в течение 2 ч, постепенно позволяя раствору достигнуть комнатной температуры. Желтый раствор помещают в делительную воронку и промывают 1н. НС1 (2x10 мл), водой (1x10 мл) и 1н. бикарбонатом натрия (2x10 мл). Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Получают хлорметилкарбамат в виде 0,95 г желтого масла и идентифицируют с помощью ЖХМС как УФ-активного компонента при времени удерживания з,520 мин.
Чтобы получить Ν-бензил, Ν-метилкарбамоилметил-четвертичную соль соединения 1101, 0,5 г соединения 1101 и 0,5 г иодида натрия (20 экв.) растворяют в 5,0 мл сухого ацетонитрила в стеклянной пробирке. Ν-бензил, Ν-метилкарбамоилхлорметиловый сложный эфир добавляют к раствору, затем помещают на масляную баню при 65°С на протяжении ночи. Продукт идентифицируют с помощью ЖХМС и очищают препаративной ЖХМС, получая 169,5 мг (21,5% теоретический выход) твердого вещества, приписываемого А044-52, со временем удерживания 2,7з1 мин, М+=485 и чистотой 90%.
Пример 5з. Синтез соединения А044-62.
Чтобы получить Ν-бензил, Ν-метилкарбамоилметил-четвертичную соль соединения 1157, 22 мг соединения 1157, 20 мг иодида натрия (2,0 экв.) и з0,7 мг №бензил-И-метилкарбамоилхлорметилового сложного эфира (2,0 экв.) смешивают в 500 мкл сухого ацетонитрила в стеклянной пробирке и нагревают на масляной бане при 65°С на протяжении ночи. Продукт идентифицируют с помощью ЖХМС и очищают препаративной ЖХМС. Получают 5,4 мг (15,5% теоретический выход) соединения со временем удерживания 2,810 мин, М+=48з и чистотой 98%.
- 42 012240
Пример 54. Синтез соединения А044-28.
Чтобы получить бензил формоил-1-этил-четвертичную соль соединения 1101, 200 мкл 1хлорэтилхлорформиата добавляют к 100 мкл бензилового спирта в 2,0 мл сухого метиленхлорида в стеклянной пробирке, инкубированной при 0°С на бане со льдом. К охлажденному раствору добавляют 200 мкл пиридина, что вызывает образование белого осадка в пределах нескольких минут. Продолжают перемешивание при комнатной температуре на протяжении ночи. К смеси добавляют 10 мл метиленхлорида, которую затем промывают 0,5М НС1 (1x10 мл), водой (1x10 мл) и 0,5н. раствором бикарбоната натрия (1x10 мл). Органический слой сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют при пониженном давлении. Бензил-1-хлорэтилформиат идентифицируют как УФ-активный компонент со временем удерживания 3,933 мин.
К 100 мг соединения 1101 и 100 мг ΝαΙ (20 экв.), растворенных в 1,0 мл сухого ацетонитрила, добавляют 107 мг (1,5 экв.) бензил-1-хлорэтилформиата. Смесь нагревают при 65°С на протяжении ночи. ЖХМС указывает на присутствие исходного вещества, поэтому добавляют еще 107 мг (1,5 экв.) бензил1-хлорэтилформиата и нагревание продолжают еще 24 ч. Методом ЖХМС идентифицируют продукт, который может быть отделен от исходного вещества хроматографией с медленным изменением градиента. Требуемое соединение выделяют, используя препаративную ЖХМС, получая 13,7 мг (теоретический выход 8,7%) соединения со временем удерживания 4,690 мин, М '=+488 с чистотой 98,6%.
Пример 55. Синтез соединения 1126.
Чтобы получить хлорметил-т-бутилсукцинат, в стеклянный сосуд, содержащий 4,0 г карбоната калия и 0,24 г гидросульфата тетра-н-бутиламмония в 8,0 мл воды, добавляют при перемешивании на бане со льдом 2,0 г моно-т-бутилсукцината (А1йг1сЬ), растворенного в 8,0 мл метиленхлорида. Через 15 мин 1,3 мл хлорметилхлорсульфата (Асгок) добавляют к метиленхлоридному слою и реакционную смесь перемешивают при температуре, медленно приходящей к комнатной температуре. Органический слой отделяют и промывают водой (1x10 мл) и насыщенным раствором соли (1x10 мл). Раствор сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель удаляют при пониженном давлении. Получают 3 г бледножелтого масла и присваивают номер лота А047-71.
г вышеуказанного А047-71 растворяют в 36 мл ацетонитрила и обрабатывают 1,8 г соединения 1101 и 1,8 г ΝαΙ и помещают на нагревательное устройство при перемешивании в течение 16 ч. Реакционную смесь (включая осадок) распределяют между водой и метиленхлоридом и метиленхлоридный слой отделяют, промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и упаривают, получая темное масло. Это масло растворяют в 5 мл ацетонитрила и хранят в холодильнике в течение двух дней. Желтый осадок, который образуется, затем отфильтровывают и промывают 3 мл ацетонитрила и сушат, получая 2,8435 г продукта, чистотой >95%, приписываемого лоту А046-67А, время удерживания 2,719 мин, т/ζ 494 (| М11). Все количество этого продукта растворяют в 10 мл тионилхлорида и нагревают до 65°С в течение 4 ч. Избыток тионилхлорида удаляют в вакууме и желтое масло сушат в высоком вакууме, получая 1,9906 г хлорангидрида кислоты (соединение 1111) в виде желтого хрусткого твердого вещества. Это твердое вещество непосредственно используют в последующих реакциях.
Чтобы связать хлорангидрид кислоты соединения 1101, и άе-БΜΟСеά ΚΟΌ8 пептид, 1,26 г хлорангидрида кислоты соединения 1111 и 5,6 г άе-БΜΟС-удаленной ΚΟΌ8 пептида (оба высушенные в вакуумном эксикаторе над пентоксидом фосфора) смешивают в 50-мл круглодонной колбе в атмосфере аргона. К твердым веществам добавляют 270 мкл сухого пиридина в 28 мл метиленхлорида и смесь встряхивают, чтобы растворить хлорангидрид кислоты. Смесь размещают на орбитальном вибраторе в течение одного часа. Раствор дренируют через фриттовый пластиковый шприц и промывают метиленхлоридом (2x10 мл) и растворитель отводят. К полимеру добавляют 500 мкл анизола с последующим добавлением 20 мл раствора 50/50 ΤΡΑ/метиленхлорид. Полимер выдерживают в растворе ΤΕΑ в течение 3 ч при встряхивании время от времени. Раствор ΤΕΑ отделяют от полимера. Полимер промывают 10 мл метиленхлорида, который объединяют с раствором ΤΕΑ. Раствор ΤΕΑ помещают в четыре пробирки, которые продувают досуха газом-аргоном. Каждую пробирку обрабатывают многократными эфирными промывками и снова продувают досуха газом-аргоном. Продукт идентифицируют с помощью ЖХМС и очищают, за семнадцать пробегов, используя комплексный метод препаративная ЖХМС с обращенной фазойМС. Объединенные пробеги дают 163,7 мг продукта с чистотой 96% (приписываемого лоту А036-33) со временем удерживания 1,768 мин, М+=853 и [М+Н]/2 при 427 т/ζ. Хроматограмма ЖХМС и масс-спектр для указанного соединения представлены на фиг. 7 и 8. На фиг. 7 х-ось представляет собой время в минутах и у-ось для верхней хроматограммы означает миллиединицы поглощения для УФ-детектора при 254 нм и для нижней хроматограммы означает милливольты, регистрируемые детектором светорассея- 43 012240 ния в паровой фазе. На фиг. 8 х-ось означает отношение масса-к-заряду (т/ζ) и у-ось представляет интенсивность импульса масс-иона.
Схема 10
Пример 56. Синтез соединения А052-10.
о
О
2-10
Для получения фталимидометил-четвертичной соли соединения
1101, смесь 100 мг соединения 1101 и 100 мг иодида натрия (2,0 экв.) растворяют в 3,0 мл сухого ацетонитрила. К смеси добавляют 128 мг хлорметилфталимида (А1бпс11) и пробирку нагревают на масляной бане при 55°С в течение четы
- 44 012240 рех дней. Продукт идентифицируют с помощью ЖХМС как новый пик со временем удерживания 3,984 мин, М+=467.
Пример 57. Синтез соединения А052-08.
Для получения фталимидометил-четвертичной соли соединения 1101, смесь 100 мг соединения 1101 и 100 мг иодида натрия (2,0 экв.) растворяют в 3,0 мл сухого ацетонитрила. К смеси добавляют 128 мг хлорметилфталимида и пробирку нагревают на масляной бане при 55°С в течение четырех дней. Продукт идентифицируют с помощью ЖХМС как новый пик с К£=3,984, М+=467.
Пример 58. Синтез соединения А044-78.
ОН
Чтобы получить 4-карбоксибензил-четвертичную соль соединения 1101, 300 мг соединения 1101, 400 мг иодида натрия и 500 мг хлорметилбензойной кислоты смешивают в стеклянной пробирке и суспендируют в 40 мл сухого ацетонитрила. Реакционную смесь нагревают на масляной бане при 65°С и ход реакции контролируют в течение двух недель с помощью ЖХМС. Раствор фильтруют через фриттовый пластиковый шприц, который был оснащен дополнительным фильтром 2 мкм. Требуемое соединение выделяют, используя препаративную ЖХМС, и оно имело время удерживания 3,717 мин, М+=442. Выход 27,7 мг, чистота 96%. Карбоксильную группу соединения А044-78 превращают в реакционноспособную группу а) реакцией с Ν-гидроксисукцинимидом, как описано способом в примере 31, с получением ΝΗ8 активного сложного эфира или Ь) превращением в хлорангидрид кислоты, как описано способом в примере 56. Затем любую из указанных реакционноспособных групп подвергают взаимодействию с нуклеофильным амином или спиртовыми группами таргетирующих средств, используя способы, описанные в предыдущих примерах, с получением конъюгатов пролекарств целенаправленного действия.
Пример 59. Синтез соединения А044-80.
Чтобы получить 4-изоцианатобензил-четвертичную соль соединения 1101, смесь 300 мг соединения 1101, 450 мг иодида натрия (3,0 экв.) и 490 мг (3,0 экв.) 4-хлорметилбензолизоцианата растворяют в 4,0 мл сухого ацетонитрила и нагревают на масляной бане при 65°С в течение 2 дней. ЖХМС свидетельствовала о завершении реакции вследствие отсутствия исходного продукта (соединение 1101). Продукт идентифицируют как новый пик со временем удерживания 4,577 мин, М+=439. Соединение А044-80 подвергают взаимодействию с нуклеофильными группами различных таргетирующих средств с получением карбаматной или мочевиновой связей с таргетирующими средствами способами примеров, использующих соединение 1105 и А040-26.
Пример 60. Синтез соединения А044-4.
Чтобы получить пивалоилметил-четвертичную соль соединения 1101, 100 мг хлорметиловый эфир пивалевой кислоты (2,0 экв.) добавляют по каплям к смеси 100 мг соединения 1101 и 100 мг иодида натрия (2,0 экв.) в 2,0 мл сухого ацетонитрила. Смесь нагревают на масляной бане при 65°С в течение 2 ч. Твердые вещества отфильтровывают, используя фриттовый пластиковый шприц, оснащенный 4
- 45 012240 микронным фильтром. Соединение идентифицируют и выделяют, используя препаративную ЖХМС. Получают 102,3 мг желтого твердого вещества, чистотой 93,7%, время удерживания 2,735 мин, М+=422.
Пример 61. Синтез соединения А040-70.
Для получения ацетоксиметил-четвертичной соли соединения 1101, 1,0 г соединения 1101 растворяют в 10 мл сухого ацетонитрила в стеклянном сосуде и добавляют 1,0 г бромметилацетата (2,0 экв.) и дают возможность перемешиваться при комнатной температуре на протяжении ночи.
ЖХМС указывала на присутствие исходного продукта, поэтому реакционную смесь нагревают при 65°С на масляной бане в течение 8 ч. Маточный раствор декантируют с твердого вещества и твердое вещество промывают небольшим количеством холодного ацетонитрила. Твердое вещество сушат в вакуумном эксикаторе на протяжении ночи. Продукт идентифицируют как 264 мг белого твердого вещества со временем удерживания 2,204 мин, М+=380, который имел чистоту 97%. Было обнаружено, что указанное соединение имеет очень высокую растворимость в воде; получают 32,5 миллимолярный раствор этого соединения в забуференном фосфатом физиологическом растворе путем растворения 27 мг в 1,865 мл забуференного фосфатом физиологического раствора с конечным рН около 4,50 мкл аликвоту этого раствора (которая содержит 1,625 мкмолей соединения 1101 в виде пролекарства) инъецируют в хвостовую вену бестимусной мыши без проявления каких-либо неблагоприятных воздействий, что иллюстрирует отсутствие токсичности для пролекарственной формы, тогда как инъекция 1,04 мкмолей соединения 1101 вызвала немедленную гибель трех из трех мышей. Кроме того, 250 мкл вышеуказанного 32,5 мМ раствора соединения А040-70 вводят бестимусной мыши с помощью перорального зонда. Через 5, 15 и 30 мин отбирают 40 мкл мышиной крови и анализируют с помощью ЖХМС (после экстракции с использованием ацетонитрила), демонстрируя при этом, что объединенные уровни крови пролекарства А040-70 и соединения 1 составляли 1,8, 4,97 и 4,80 микромоля в соответствующие моменты времени. Этот результат демонстрирует пероральную биодоступность активного лекарственного средства из пролекарства 1п νίνο. Хлоридную соль получают путем растворения указанного соединения А040-70 в минимальном количестве воды и пропускания полученного раствора через слой анионообменной смолы, такой как Ωο\\όχ 22 (хлоридная форма), доступной от А1блск, и затем промывания водой и сушки вымораживанием объединенного элюата, с получением твердого вещества, обладающего хлорид-ионом вместо бромидиона.
Пример 62. Получение полиоксиэтиленнесущего пролекарства для неионной растворимости в воде.
мг часть соединения 1 растворяют в 2 мл ацетонитрила вместе с 76 мг Ν;·ιΙ и раствор обрабатывают весь сразу 144 мг хлорметиловым сложным эфиром А029-62 и перемешивают при 65°С в течение 5 ч. Реакционную смесь очищают с помощью комбинированного метода ЖХ с обращенной фазой и МС, получая 72 мг (выход 51%) желтого твердого вещества А027-85 со временем удерживания 2,30 мин и характеризуемого наличием масс-спектра, показывающего М^=556, ожидаемого для С3оН38НО9. Небольшую пробу вводят в фосфатный буфер при рН 7,4 с последующим анализом методом ЖХМС на протяжении времени, после чего значительная часть пролекарства превращалась обратно в соединение 1 с оцененным полупериодом превращения около 3 ч.
- 46 012240
Пример 63. Получение остеотропного пролекарства соединения 1.
мкл 75 мМолярного А042-70 (1,5 мкмоль) в воде добавляют в пробирку, содержащую 500 мМолярный фосфатный буфер (11 пробирок при различных ρΗ, начиная от 3,0 и до 8,0, с приращением на 0,5 единицы). После смешения каждую пробирку затем обрабатывают 50 мкл 60 мкмолярного раствора соединения 1111 в ацетонитриле (3,0 мкмоля=2 экв. относительно аминогруппы остеотропного средства) и смешивают путем встряхивания. Через 1 ч 3 мкл аликвоту из каждой пробирки инжектируют на анализ методом ВЭЖХ и определяют площадь УФ-пика для исходного продукта и желаемого продукта и побочного продукта водного гидролиза, соединения 1111. Было обнаружено, что только пробы при ρΗ 6, 6,5, 7, 7,5 и 8 имеют значительные количества желаемого остеотропного пролекарства А046-89Р (время удерживания 2,50 мин; [М4], найден при т/ζ 1075 для СдгЩд^О^Рд) (также найден пик с т/ζ 538, отвечающий иону [М+2]/2). Этот пример демонстрирует, что оптимальным ρΗ для синтеза остеотропного пролекарства в этих условиях является ρΗ 7,0, при котором теоретический выход желаемого остеотропного пролекарства соединения 1, имеющего 4 группы фосфоновой кислоты, составляет 42%. Через 24 ч анализ этого раствора, выдержанного при стоянии в течение указанного времени при ρΗ 7,0, свидетельствовал о том, что целенаправленное пролекарство полностью превратилось обратно в соединение 1, что демонстрирует обратимость пролекарства в физиологически релевантных условиях.
Пример 64. Ιη νίνο эффективность соединения 1126 против немелкоклеточного рака легкого.
Лишенных шерсти мышей-самцов, возраста 4-6 недель, весом около 30 г, инокулировали подкожно в правый бок 5 миллионами опухолевых клеток (человеческие клетки немелкоклеточного рака легкого: Н1299) на день 0. Через 14 дней предоставления возможности опухолям расти, животных разделяли на 3 группы, по 5 животных в каждой. Одна группа получала только наполнитель, контрольная группа. Одна группа получала дважды в день инъекции в хвостовую вену (ί.ν.) 50 мкл 24,4 миллимолярного раствора соединения 1126 в забуференном фосфатом солевом растворе, соответствующие уровню дозы 25 мг/кг/день активного компонента пролекарства (т.е. соединения 1). Последняя группа получала дважды в день (ί.ν.) инъекции в хвостовую вену 50 мкл 4,9 миллимолярного раствора соединения 1126 в забуференном фосфатом солевом растворе, соответствующие уровню дозы 5 мг/кг/день активного компонента пролекарства (т.е. соединения 1). Опухоли измеряли каждые три дня, используя кронциркули для определения объема опухоли; и массы животных регистрировали после умерщвления животных на день 27. Результаты представлены в табл. 7 и свидетельствуют о сильном уменьшении объема опухоли по сравнению с контролем для обоих уровней доз для первой точки регистрации данных, спустя только 3 дня после начала лечения (день 17), и для продолжения лечения вплоть до конца исследования.
Таблица 7
% Уменьшения объема опухоли*, используя Соединение 1126 при 25 мг/кг/день % Уменьшения объема опухоли*, используя Соединение 1126 при 5 мг/кг/день
День 0 - -
День 17 35% 29%
День 20 66% 50%
День 24 68% 44%
День 27 68% 35%
*По сравнению с контрольными животными, получавшими только наполнитель
Дозы дважды в день оказались хорошо переносимыми на протяжении двухнедельного периода вве- 47 012240 дения. Результаты эффективности, представленные выше, также сопровождались отсутствием статически значимого различия в массах тела животных между контрольной группой и двумя группами, подвергнутыми лечению, которое как общая мера явной токсичности свидетельствует о том, что целенаправленное пролекарство имеет желательное свойство, заключающееся в отсутствии токсичности.
Пример 65. 1п νί\Ό эффективность соединения 1126 против рака мозга.
Исследование на животных проводили, как описано в вышеприведенном примере за исключением того, что в данном случае использовали клеточную линию рака мозга человека (υ87ΜΟ) и лечение начинали на день 7, так что первое измерение объема опухоли производили на день 10. Результаты соединения 1126 против указанной раковой клеточной линии представлены в табл. 8 и указывают на эффективность действия и желаемое отсутствие токсичности.
Таблица 8
Уменьшение объема опухоли’, %, используя Соединение 1126 при 25 мг/кг/день. на модели ксенотрансплантата О87МС
День 0 -
День 10 20,2%
День 14 52,6%
День 17 38,5%
День 21 35,2% *По сравнению с контрольными животными, получавшими только наполнитель
Пример 66.
Альфа ν-целенаправленные ингибиторы киназы ΡΙ-3 аннулировали образование трубок эндотелиальных клеток Ε^С-СВΕ1 на Μаίπде1.
Образование трубок представляет собой, до некоторой степени, образование ангиогенеза ш νί\Ό. В этом примере определяли, в какой степени ингибиторы киназы ΡΙ-3 (включая целенаправленные пролекарства ингибитора киназы ΡΙ-3) могут ингибировать образование трубок. Μа!^^де1 помещали в лунки 12луночного планшета и отверждали при 37°С в течение 2 ч. Затем 1х105 эндотелиальных клеток ΕΌί.'СВЕ1 наносят на верхнюю часть слоя Μа!^^де1 в присутствии ΡΒ8, КАОГУ (циклический отрицательный контрольный пептид), КСЭГУ (циклический положительный контрольный пептид), КАО8 (линейный отрицательный контрольный пептид), соединения 1 или соединения 1126 при концентрации 20 мкМ на протяжении ночи. Затем исследуют картину, используя микроскоп. Хорошо сформированные трубки могут быть визуализированы в контрольных лунках с ΡΒ8 (верхняя левая панель (фотоснимок) на фиг. 9). Нет сильного различия для лунок, содержащих ВСИГУ, КАЭГУ или ΒΟΌ8, по сравнению с ΡΒ8контролем. Образование трубок оказалось существенно меньше в лунках, содержащих соединение 1101 и соединение 1126.
Пример 67. Целенаправленные ингибиторы киназы ΡΙ-3 индуцировали транскриптационную активность р53 в ΗΒΕίΧ.
Этот эксперимент исследовал влияние ингибиторов киназы ΡΙ-3 (соединение 1 и целенаправленная версия пролекарства соединения 1; соединение 1126) на индуцирование активности люциферазы р53. Методика трансфекции была аналогична методике, описанной в литературе для контролирования транскрипции р53. Соединение 1 (экспозиция 6 ч) индуцировало активность люциферазы более чем в 2 раза сильнее, чем контроль, а целенаправленная версия соединения 1 (соединение 1126) имела даже лучшую способность индуцировать активность люциферазы р53 (в почти 3 раза). Это индуцирование функции р53, как было показано, аннулировалось ингибитором р53, пифитрином альфа при концентрации 20 мкМ. Котрансфекция каталитической активной Ак! также ингибировала функцию р53, индуцированную указанными соединениями. Этот результат показывает, что транскрипция р53, индуцированная ингибиторами киназы ΡΙ-3, является механизмом, запускающим каскад передачи сигнала и что целенаправленное пролекарство-соединение 1126 обладает повышенной способностью индуцировать р53 по сравнению с нецеленаправленным лекарственным средством, соединением 1.
Пример 68. Очистка соединения 1126.
Реакционную смесь А044-84 (2,33 г) развешивают на отдельные пробы, по 0,33 г каждая, и растворяют непосредственно перед проведением препаративной хроматографии в 800 мкл раствора, содержащего 1 часть, по объему, ацетонитрила, 1 часть, по объему, воды и 1%, по объему, уксусной кислоты.
400 мкл этого раствора инъецируют для каждого пробега препаративной хроматографии. Элюат А насоса представлял собой воду марки В&1 (365-4) с добавлением 0,1% уксусной кислоты, и элюат В насоса представлял собой ацетонитрил марки В&1 (015-4) с добавлением 0,1% уксусной кислоты. Сначала элюат представлял 10% В, затем линейно изменялся до 34% В на протяжении периода времени 4 мин, затем линейно изменялся до 95% В в течение 4,25 мин и поддерживался таким вплоть до 5,25 мин, затем линейно изменялся обратно до исходной концентрации 10% в течение 5,50 мин. Суммарный поток насоса составлял 20 мл/мин. Вновь устанавливалось равновесие системы, в то время как автосэмплер отбирал
- 48 012240 пробу для следующего пробега. Используя указанный градиент, элюируют продукт, имеющий в массспектре положительных ионов пики при 853 (т/х=1) 427 (ιη/ζ=2). в течение 3,37 мин. Фракции собирали во время пробегов препаративной хроматографии, когда сигнал, регистрируемый детектором ЕЬ8, превышал 10 мв. Фракции, содержащие продукт, разбавляли двухкратным избытком воды (по объему) и замораживали в сосуде для лиофилизации, используя баню со смесью лед-ацетон, сразу после сбора. После лиофилизации на протяжении 24-48-часового периода времени получали всего 180 мг соединения 1126 в виде пушистого белого твердого вещества с чистотой 95%. Этот пример демонстрирует, что лабильное пролекарство, соединение 1126, может быть выделено с высокой чистотой, используя методы разделения с обращенной фазой в водной среде при тщательном контроле ρΗ.
Пример 69. Получение 8СИ-реакционноспособного пролекарства.
184 мг часть А014-48, полученного способом примера 20, растворяют с 154 мг соединения 1 в 12 мл ацетонитрила и перемешивают при комнатной температуре. Спустя 16 ч, ЖХМС свидетельствует о приблизительно 65% конверсии в желаемое кватернизованное соединение, поэтому добавляют 45 мг иодсодержащего соединения и после дополнительных 22 ч реакция протекает до 80% конверсии, поэтому вновь добавляют еще 40 мг иодсодержащего соединения и реакционной смеси предоставляют возможность перемешиваться еще 24 ч. Затем твердое вещество центрифугируют и промывают ацетонитрилом, получая 282,6 мг (выход 45%) требуемого продукта с высокой чистотой, характеризуемого временем удерживания 2,89 мин и показывающего желаемый М+ 499 для ^8Η23Ν2Ο58, как соединение 1105.
При стоянии в метаноле соединение 1105 взаимодействует чисто с метанолом с получением соединения А013-94 со временем удерживания 2,78 мин и ожидаемым М+ 531 для ^9Η27Ν2Ο68. Это иллюстрирует взаимодействие изотиоцианатосодержащего пролекарства со спиртом с получением карбаматного сопряжения с линкером.
Изотиоцианатосодержащее интермедиатное пролекарство также подвергают взаимодействию с различными аминами в метиленхлориде (необязательно в присутствии триэтиламина), включая вторичные амины, с получением мочевинасодержащих продуктов, таких как соединение А017-55 (время удерживания 2,84 мин, показывающее желаемый М+ ион при т/ζ 644 для ί.'33Η38Ν3Ο-8); А017-57 (время удерживания 2,46 мин, показывающее желаемый М+ ион при т/ζ 616 для ί.'33Η34Ν3Ο-8); и А027-15 (время удерживания 2,82 мин, показывающее желаемый М+ при т/ζ 816 для ^8Η48Ν3ΟιιΡ28). Эти примеры демонстрируют реакцию с хорошим выходом изотиоцианатсодержащего пролекарства с другой группой нуклеофилов с получением желательных связанных продуктов. А017-55 соединение далее подвергают взаимодействию с трифторуксусной кислотой, что неожиданно дает циклическое соединение А017-59 в ходе
- 49 012240 отщепления т-бутильной группы (время удерживания 2,47 мин, показывающее желаемый М+ ион при т/ζ 570 для 03|Η28Ν3068). Этот пример демонстрирует, что может быть осуществлена дополнительная химия по линкер-группе пролекарственных соединений. Согласно ЖХМС в фосфатном буфере при рН 7,4 значительные количества указанного соединения превращаются обратно в соединение 1 на протяжении 17-часового периода времени.
Пример 70. Острая токсичность соединения 1 в сравнении с целенаправленным пролекарством.
Было установлено, что внутривенно введенное соединение 1 имеет 100% летальность в пределах 5 мин введения для трех, лишенных шерсти, мышей при уровне дозы 16 мг/кг. Соединение 1126, полученное по способу примера 56, при введении внутривенно при уровне дозы на 37% более высоком (22 мг/кг) показывает 0% летальность даже после 1 ч наблюдения. Этот пример наглядно демонстрирует улучшенную способность состава пролекарств и уменьшенную токсичность пролекарств соединения 1.
Пример 71. Аналог соединения 1.
Во время получения интермедиата Л046-678М, такого как описан для соединения 1126 в примере 56, обнаружен побочный продукт. Это вещество очищают ЖХ-МС, получая единственное соединение, А03794, соответствующее, согласно протонному ЯМР, предполагаемой структуре и показывающее время удерживания 3,00 мин и масс-спектр, демонстрирующий ожидаемый ион [М+Н]+ при т/ζ 338 (очень низкое относительное содержание) и более отчетливую массу [М+Н+41(ЛСИ)] при т/ζ 379. Этот пример демонстрирует выделение нового аналога соединения 1, подходящего для дополнительной модификации пролекарства.
Пример 72. Использование пролекарства для доставки соединения 1 мышам.
Мышам вводили подкожно миллион клеток немелкоклеточного рака легкого (Н1299) и клеткам предоставляли возможность расти около 7 дней до тех пор, пока масса опухоли не достигала, по размерам, 10-15 мм на 7-9 мм. Животным вводили парентерально пролекарство целенаправленной доставки, соединение 1126, либо внутривенно (ί.ν.) (50 мкл), либо внутрибрюшинно (1.р.) (50 мкл) в виде 32,6 мМолярных растворов Соединения 1126 в забуфенном фосфатом физиологическом растворе. Через 60 мин мышей умерщвляли и извлекали опухоли. Три небольших кусочка опухолей изымали и измельчали. После выдержки в течение 24 ч, позволяющей всему пролекарству превратиться в соединение 1, образцы опухолей экстрагировали ацетонитрилом.
Количественное определение методом ЖХ-МС показало, что концентрация экстрагируемого соединения 1 (в виде суммы свободного соединения 1 и полученного из соединения 1126) составляет 157±7 наномолей в кусочках опухолей в случае внутрибрюшинного введения и 271±17 наномолей в кусочках опухолей в случае внутривенного введения. Этот пример наглядно показывает доставку соединения 1 в опухолевую ткань, используя пролекарство целенаправленной доставки.
Пример 73. Обратимость пролекарств с получением соединения 1.
Пролекарственные соединения растворяют в воде или в ДМСО (если не растворимы легко в воде) и затем разбавляют по крайней мере в 10 раз в 50 мМ фосфатном буфере при рН 7,4 или рН 4,8 и выдерживают при комнатной температуре. Конечная концентрация соединений в водной среде варьировалась от 50 до 500 мкМ. Для того чтобы оценить исчезновение пролекарства и подтвердить появление лекарственного средства (соединения 1), на протяжении времени из испытуемых растворов отбирают аликвоты и анализируют с помощью ЖХ-МС. Соединение 1126, как было установлено, имеет полупериод существования около 1 ч при рН 7,5 и полупериод существования около 64 ч при рН 4,8. Соединение 1110, как было установлено, имеет полупериод около 10 ч при 7,4 и больше чем 120 ч при рН 4,8. Соединение А040-70, как было обнаружено, имеет полупериод существования около 10 ч при рН 7,4. Эти примеры наглядно показывают, что пролекарства химически превращались в лекарственное средство (соединение 1) и что исчезновение пролекарства сильно зависит от рН, при этом превращение протекает значительно быстрее при физиологическом рН и существенно медленнее при кислом рН.
Пример 74. Синтез опухольлокализующего конъюгата.
Электрофильную группу-несущие соединения (такие как А036-48В, 1105, 1107, 1111, А024-79 и 1113) могут взаимодействовать с полимерами, несущими нуклеофильные группы, такие спиртовые, амино- и тиоловые группы. И-(2-гидроксипропил)метилакриламид (НРМА), имеющий молекулярную массу от 2000 до 1000000, подвергают взаимодействию с избытком соединения 1111 в непротонном органическом растворителе, таком как метиленхлорид или тетрагидрофуран, в присутствии триэтиламина или диизопропилэтиламина и затем разделяют, используя методы вытеснительной хроматографии, центрифугирования или осаждения в другом растворителе, таком как метанол или простой эфир. Осажденный или отделенный таким образом полимер является, по существу, свободным от 1111 и его используют в качестве опухольлокализующего конъюгата, который высвобождает активное соединение 1 на протяже
- 50 012240 нии времени около опухоли, приводя к противоопухолевым и противоангиогенным воздействиям.
Аналогично, полиглутаминовые кислоты могут быть превращены в полинуклеофилнесущие группы путем взаимодействия карбоновых кислот с избытком диаминов, используя карбодиимидное связывание, с последующей очисткой с помощью вытеснительной хроматографии или ВЭЖХ с обращенной фазой, с получением полинуклеофилсодержащих версий полиглутаминовых кислот. Эти полимеры затем могут быть подвергнуты взаимодействию с избытком соединений 1111, или 1105, или А0з6-48А, или А024-79 в апротонном органическом растворителе, таком как метиленхлорид или тетрагидрофуран, в присутствии триэтиламина или диизопропилэтиламина и затем разделению, используя методы вытеснительной хроматографии, центрифугирования или осаждения в другом растворителе, таком как метанол или простой эфир. Осажденный или выделенный таким образом поликонъюгированный полимер, по существу, не содержит остаточного пролекарства с низкой молекулярной массой и его используют в качестве опухольлокализующего конъюгата, который высвобождает активное соединение 1 на протяжении времени вблизи опухоли, приводя к противоопухолевым и противоангиогенным воздействиям.

Claims (3)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение представляет собой соединение формулы или его соль.
  2. 2. Применение соединения по п.1 в качестве активного терапевтического средства.
  3. 3. Применение соединения по п.1 для производства лекарственного средства, предназначенного для:
    (a) лечения пациента, страдающего состоянием, ассоциируемым с активностью киназы ΡΙ-з;
    (b) лечения воспалительных заболеваний, причем лекарственное средство необязательно включает один или несколько дополнительных терапевтических агентов, которые могут быть выбраны из группы, состоящей из алкилирующих агентов, антиметаболитов, аспарагиназы, винкристина, винбластина, антрациклинов, агентов, разрушающих микроканальцы, таксола, герцептина, гемцитабина и этопозидов;
    (c) индуцирования апоптоза у пациента;
    (й) повышения чувствительности к химиотерапии опухолевых клеток;
    (с) повышения радиочувствительности опухолевых клеток;
    (к) ингибирования индуцированного опухолью ангиогенеза;
    (д) ингибирования ангиогенных процессов, ассоциируемых с нераковыми заболеваниями;
    (к) лечения панкреатита;
    (ί) лечения язв;
    (ί) лечения рака желудка;
    (k) лечения рака печени;
    (l) улучшения функционирования стента;
    (т) лечения возрастного желтого пятна;
    (п) лечения состояний, ассоциируемых с мутантным ΡΤΕΝ;
    (о) лечения гипертензии;
    (р) разрушения функции лейкоцитов;
    (с.|) подавления дифференцировки клеток-предшественников;
    (г) ингибирования фосфотидилинозитол з-киназы в центральной клетке млекопитающего.
EA200501563A 2003-04-03 2004-04-03 Пролекарства ингибиторов киназы pi-3 EA012240B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US46013703P 2003-04-03 2003-04-03
PCT/US2004/010399 WO2004089925A1 (en) 2003-04-03 2004-04-03 Pi-3 kinase inhibitor prodrugs

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200501563A1 EA200501563A1 (ru) 2006-06-30
EA012240B1 true EA012240B1 (ru) 2009-08-28

Family

ID=33159735

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200501563A EA012240B1 (ru) 2003-04-03 2004-04-03 Пролекарства ингибиторов киназы pi-3

Country Status (14)

Country Link
US (3) US6949537B2 (ru)
EP (1) EP1611119A1 (ru)
JP (2) JP2006523237A (ru)
KR (1) KR20070087266A (ru)
CN (1) CN1826331A (ru)
AU (1) AU2004228668B2 (ru)
BR (1) BRPI0409063A (ru)
CA (1) CA2518916A1 (ru)
EA (1) EA012240B1 (ru)
MX (1) MXPA05010471A (ru)
NZ (1) NZ542475A (ru)
SG (1) SG160211A1 (ru)
WO (1) WO2004089925A1 (ru)
ZA (1) ZA200507954B (ru)

Families Citing this family (166)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6667300B2 (en) 2000-04-25 2003-12-23 Icos Corporation Inhibitors of human phosphatidylinositol 3-kinase delta
US8651113B2 (en) * 2003-06-18 2014-02-18 Swr&D Inc. Magnetically responsive nanoparticle therapeutic constructs and methods of making and using
WO2005016348A1 (en) * 2003-08-14 2005-02-24 Icos Corporation Method of inhibiting immune responses stimulated by an endogenous factor
WO2005016349A1 (en) * 2003-08-14 2005-02-24 Icos Corporation Methods of inhibiting leukocyte accumulation
JP2007530017A (ja) 2004-03-02 2007-11-01 ザ ジョンズ ホプキンス ユニバーシティ ヒトの癌におけるｐｉｋ３ｃａ遺伝子の変異
ES2605792T3 (es) 2004-05-13 2017-03-16 Icos Corporation Quinazolinona usada como inhibidor de la fosfatidilinositol 3-quinasa delta humana
EP1755609A1 (en) * 2004-05-25 2007-02-28 Icos Corporation Methods for treating and/or preventing aberrant proliferation of hematopoietic cells
AU2006214190A1 (en) * 2005-02-17 2006-08-24 Icos Corporation Phosphoinositide 3-kinase inhibitors for inhibiting leukocyte accumulation
CA2620855A1 (en) * 2005-09-01 2007-08-02 Beth Israel Deaconess Medical Center Wortmannin conjugates and uses thereof
WO2007035395A2 (en) * 2005-09-16 2007-03-29 Virginia Commonwealth University Intellectual Property Foundation Therapeutic compositions comprising chorionic gonadotropins and hmg coa reductase inhibitors
CA2632797A1 (en) * 2005-12-01 2007-06-07 The Provost, Fellows And Scholars Of The College Of The Holy And Undivid Ed Trinity Of Queen Elizabeth Near Dublin Compositions and methods relating to treatment of cancer and infectious diseases using toll like receptor agonists
CN101420963B (zh) * 2006-02-09 2012-09-05 安佐制药股份有限公司 用于治疗乳腺癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌和肺癌的7-乙基-10-羟基喜树碱的多臂聚合轭合物
US8329683B2 (en) * 2006-06-02 2012-12-11 Nexgenix Pharmaceuticals, Llc Treatment of neurofibromatosis with radicicol and its derivatives
WO2007143630A2 (en) * 2006-06-02 2007-12-13 Nexgenix Pharmaceuticals Treatment of neurofibromatosis with hsp90 inhibitors
PE20090717A1 (es) * 2007-05-18 2009-07-18 Smithkline Beecham Corp Derivados de quinolina como inhibidores de la pi3 quinasa
US8557807B2 (en) 2008-01-24 2013-10-15 Signal Rx Pharmaceuticals, Inc. Thienopyranones as kinase inhibitors
WO2009108704A1 (en) * 2008-02-25 2009-09-03 Semafore Pharmaceuticals, Inc. O-alkylated pi-3 kinase inhibitor prodrug combination
DE102008001855A1 (de) * 2008-05-19 2009-11-26 Evonik Degussa Gmbh Zweikomponenten-Zusammensetzung zur Herstellung von flexiblen Polyurethan-Gelcoats
EP2303288A4 (en) 2008-05-22 2015-04-22 Univ Ramot CONJUGATES OF A POLYMER, BISPHOSPHONATE AND ANTI-ANGIOGENESIS AGENT AND USES THEREOF IN THE TREATMENT AND MONITORING OF DISEASES RELATING TO BONES
WO2010019511A2 (en) 2008-08-13 2010-02-18 Targanta Therapeutics Corp. Phosphonated rifamycins and uses thereof for the prevention and treatment of bone and joint infections
CN104042618B (zh) 2008-11-13 2018-02-16 吉利德卡利斯托加公司 恶性血液病的治疗
US9492449B2 (en) 2008-11-13 2016-11-15 Gilead Calistoga Llc Therapies for hematologic malignancies
US8864627B2 (en) 2009-03-17 2014-10-21 Woodway Usa, Inc. Power generating manually operated treadmill
AU2010229968A1 (en) 2009-03-24 2011-10-13 Gilead Calistoga Llc Atropisomers of2-purinyl-3-tolyl-quinazolinone derivatives and methods of use
EA201101507A1 (ru) 2009-04-20 2012-05-30 Гилеад Калистога Ллс. Способы лечения солидных опухолей
DK2445502T4 (da) 2009-06-25 2022-11-28 Alkermes Pharma Ireland Ltd Heterocycliske forbindelser til behandling af neurologiske og psykologiske lidelser
CA2937222C (en) 2009-06-25 2019-06-04 Alkermes Pharma Ireland Limited Prodrugs of nh-acidic compounds
EP2456443A1 (en) 2009-07-21 2012-05-30 Gilead Calistoga LLC Treatment of liver disorders with pi3k inhibitors
US8305582B2 (en) 2009-09-01 2012-11-06 Alltech Associates, Inc. Methods and apparatus for analyzing samples and collecting sample fractions
AP2012006294A0 (en) * 2009-11-05 2012-06-30 Rhizen Pharmaceuticals Sa Novel kinase modulators.
AU2011270701B2 (en) 2010-06-24 2015-05-14 Alkermes Pharma Ireland Limited Prodrugs of NH-acidic compounds: ester, carbonate, carbamate and phosphonate derivatives
PE20140234A1 (es) 2010-12-20 2014-03-08 Glenmark Phamaceuticals S A Compuestos de 2-amino-4-ariltiazol como antagonistas de trpa1
HUE065359T2 (hu) 2011-03-18 2024-05-28 Alkermes Pharma Ireland Ltd Szorbitán-észtereket tartalmazó gyógyászati készítmények
EP2693876B1 (en) * 2011-04-08 2020-01-15 Sphaera Pharma Pte. Ltd Substituted methylformyl reagents and method of using same to modify physicochemical and/or pharmacokinetic properties of compounds
CN103930135A (zh) * 2011-08-31 2014-07-16 马林克罗特有限公司 使用h-膦酸酯的纳米颗粒peg修饰
JP5952912B2 (ja) 2011-12-15 2016-07-13 アルカーメス ファーマ アイルランド リミテッド 二級アミン化合物のプロドラッグ
BRPI1107182B1 (pt) * 2011-12-29 2022-03-08 Fundação De Amparo À Pesquisa Do Estado De Minas Gerais - Fapemig Composições farmacêuticas contendo ang-(1-7) ou outro agonista do receptor mas em combinação com inibidores de pi3k/akt para tratamento terapêutico anticâncer
EA201691327A1 (ru) 2012-03-05 2017-03-31 Джилид Калистога Ллс Полиморфные формы (s)-2-(1-(9h-пурин-6-иламино)пропил)-5-фтор-3-фенилхиназолин-4(3h)-она
WO2013132485A1 (en) 2012-03-05 2013-09-12 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Polymers having therapeutically active agents conjugated thereto, processes of preparing same and uses thereof
CA2867121C (en) 2012-03-19 2021-05-25 Alkermes Pharma Ireland Limited Pharmaceutical compositions comprising fatty acid esters
CA2867123C (en) 2012-03-19 2021-02-16 Alkermes Pharma Ireland Limited Pharmaceutical compositions comprising water-insoluble antipsychotic agents and glycerol esters
WO2013142205A1 (en) 2012-03-19 2013-09-26 Alkermes Pharma Ireland Limited Pharmaceutical compositions comprising benzyl alcohol
US9193685B2 (en) 2012-09-19 2015-11-24 Alkermes Pharma Ireland Limited Pharmaceutical compositions having improved storage stability
EP2914260A1 (en) 2012-10-31 2015-09-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for preventing antiphospholipid syndrome (aps)
KR20150130451A (ko) 2013-03-15 2015-11-23 제넨테크, 인크. 암 치료 방법 및 항암제 내성 예방을 위한 방법
US10072018B2 (en) 2013-04-17 2018-09-11 Biopharma Works Compounds for treatment of pain
WO2014172482A1 (en) * 2013-04-17 2014-10-23 Robert Alfred Volkmann Compounds for treatment of pain
EP3083623A1 (en) 2013-12-20 2016-10-26 Gilead Calistoga LLC Polymorphic forms of a hydrochloride salt of (s) -2-(9h-purin-6-ylamino) propyl) -5-fluoro-3-phenylquinazolin-4 (3h) -one
NZ736970A (en) 2013-12-20 2018-11-30 Gilead Calistoga Llc Process methods for phosphatidylinositol 3-kinase inhibitors
CN106661039B (zh) 2014-02-28 2019-09-13 林伯士拉克许米公司 酪氨酸蛋白质激酶2(tyk2)抑制剂和其用途
US11066649B2 (en) 2014-03-19 2021-07-20 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Method for inducing human cholangiocyte differentiation
CN110368360A (zh) 2014-03-20 2019-10-25 奥克梅斯制药爱尔兰有限公司 具有增加的注射速度的阿立哌唑制剂
AU2015274696B2 (en) 2014-06-13 2018-09-27 Gilead Sciences, Inc. Phosphatidylinositol 3-kinase inhibitors
WO2016023082A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Monash University Lymph directing prodrugs
WO2016065145A2 (en) * 2014-10-22 2016-04-28 The Johns Hopkins University Psma targeted reversed carbamates and methods of use thereof
WO2016138352A1 (en) 2015-02-27 2016-09-01 Nimbus Lakshmi, Inc. Tyk2 inhibitors and uses thereof
WO2017004134A1 (en) 2015-06-29 2017-01-05 Nimbus Iris, Inc. Irak inhibitors and uses thereof
KR102651945B1 (ko) * 2015-07-07 2024-03-26 파이브 일레븐 파마 인크. Hbed-비스포스포네이트, 이의 방사성금속 접합체 및 이의 진단치료제로서의 용도
EP4327809A3 (en) 2015-09-02 2024-04-17 Takeda Pharmaceutical Company Limited Tyk2 inhibitors and uses thereof
AU2016318229A1 (en) 2015-09-08 2018-03-29 Monash University Lymph directing prodrugs
US10683308B2 (en) 2015-09-11 2020-06-16 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Rapamycin analogs and uses thereof
WO2017062504A1 (en) 2015-10-06 2017-04-13 Woodway Usa, Inc. Manual treadmill and methods of operating the same
SI3364958T1 (sl) 2015-10-23 2023-05-31 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Modulatorji interakcije sestrina in gator2 ter njihova uporaba
EP3378869A4 (en) * 2015-11-17 2019-09-18 Nissan Chemical Corporation PROCESS FOR THE PREPARATION OF OLIGONUCLEOTIDES
EP3389664A4 (en) 2015-12-14 2020-01-08 Raze Therapeutics Inc. MTHFD2 CAFFEIN INHIBITORS AND USES THEREOF
WO2017156165A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Raze Therapeutics, Inc. 3-phosphoglycerate dehydrogenase inhibitors and uses thereof
WO2017156179A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Raze Therapeutics, Inc. 3-phosphoglycerate dehydrogenase inhibitors and uses thereof
WO2017162536A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 H. Lundbeck A/S Vortioxetine prodrugs
WO2017175022A1 (en) 2016-04-07 2017-10-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for inhibiting mast cell degranulation
JP2019510785A (ja) 2016-04-08 2019-04-18 エックス４ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 癌を処置する方法
US11332470B2 (en) 2016-06-21 2022-05-17 X4 Pharmaceuticals, Inc. CXCR4 inhibitors and uses thereof
CA3027495A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
CN116554168A (zh) 2016-06-21 2023-08-08 X4 制药有限公司 Cxcr4抑制剂及其用途
CA3029593C (en) 2016-07-01 2022-08-09 Woodway Usa, Inc. Motorized treadmill with motor braking mechanism and methods of operating same
US10072032B2 (en) * 2016-09-19 2018-09-11 Afton Chemical Corporation AminoBisPhosphonate antiwear additives
CN109952303B (zh) 2016-10-14 2022-10-21 林伯士拉克许米公司 Tyk2抑制剂及其用途
AU2017345736B2 (en) 2016-10-21 2022-04-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited TYK2 inhibitors and uses thereof
US10414727B2 (en) 2016-11-08 2019-09-17 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Phenyl amino piperidine mTORC inhibitors and uses thereof
AU2017368050A1 (en) 2016-11-29 2019-06-20 Puretech Lyt, Inc. Exosomes for delivery of therapeutic agents
US11091451B2 (en) 2016-12-05 2021-08-17 Raze Therapeutics, Inc. SHMT inhibitors and uses thereof
CN110603261A (zh) 2016-12-23 2019-12-20 拜斯科阿迪有限公司 具有新型键结构的肽衍生物
EP3565638B8 (en) 2017-01-06 2024-04-10 BicycleRD Limited Bicycle conjugate for treating cancer
CA3055209A1 (en) 2017-03-08 2018-09-13 Nimbus Lakshmi, Inc. Tyk2 inhibitors, uses, and methods for production thereof
EP3375784A1 (en) 2017-03-14 2018-09-19 Artax Biopharma Inc. Aza-dihydro-acridone derivatives
EP3375778A1 (en) 2017-03-14 2018-09-19 Artax Biopharma Inc. Aryl-piperidine derivatives
WO2018191146A1 (en) 2017-04-10 2018-10-18 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl rheb inhibitors and uses thereof
US20200138964A1 (en) * 2017-04-25 2020-05-07 Seikagaku Corporation Tertiary amine compound or imine compound-polymer conjugate and production method therefor
CN116370448A (zh) 2017-04-26 2023-07-04 纳维托制药有限公司 Sestrin-gator2相互作用的调节剂及其用途
US10857196B2 (en) 2017-04-27 2020-12-08 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands and uses thereof
US11827616B2 (en) 2017-05-04 2023-11-28 Discovery Purchaser Corporation Heterocyclic compounds as pesticides
CN108929329B (zh) * 2017-05-24 2020-12-11 中国医学科学院药物研究所 2-氮杂环-5-三氟甲基-8-硝基苯并(硫代)吡喃-4-酮类化合物
CN111032678A (zh) 2017-06-26 2020-04-17 拜西克尔德有限公司 具有可检测部分的双环肽配体和其用途
US11046698B2 (en) 2017-07-28 2021-06-29 Nimbus Lakshmi, Inc. TYK2 inhibitors and uses thereof
EP3668887A1 (en) 2017-08-14 2020-06-24 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligand sting conjugates and uses thereof
US20200283482A1 (en) 2017-08-14 2020-09-10 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligand prr-a conjugates and uses thereof
US11883497B2 (en) 2017-08-29 2024-01-30 Puretech Lyt, Inc. Lymphatic system-directing lipid prodrugs
EP3675838A4 (en) 2017-08-29 2021-04-21 PureTech LYT, Inc. LIPID PRODUCTS DIRECTED TO THE LYMPHATIC SYSTEM
JP7366031B2 (ja) 2017-09-22 2023-10-20 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド タンパク質分解剤およびそれらの使用
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
GB201721265D0 (en) 2017-12-19 2018-01-31 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for EphA2
US11304954B2 (en) 2017-12-19 2022-04-19 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of mycophenolic acid and uses thereof
TWI825046B (zh) 2017-12-19 2023-12-11 英商拜西可泰克斯有限公司 Epha2特用之雙環胜肽配位基
US11608345B1 (en) 2017-12-19 2023-03-21 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of rapamycin and its analogs and uses thereof
EP3727362A4 (en) 2017-12-19 2021-10-06 PureTech LYT, Inc. MYCOPHENOLIC ACID LIPID MEDICINAL PRODUCTS AND THEIR USES
CN108003188A (zh) * 2017-12-25 2018-05-08 长春吉大天元化学技术股份有限公司 一种烷基磷酸酯类化合物的新型纯化方法
JP2021508703A (ja) 2017-12-26 2021-03-11 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ分解剤およびそれらの使用
WO2019140387A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Kymera Therapeutics, Inc. Crbn ligands and uses thereof
EP3737666A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
WO2019148136A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 Merck Patent Gmbh Gcn2 inhibitors and uses thereof
CA3089762A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 Merck Patent Gmbh Gcn2 inhibitors and uses thereof
WO2019157516A1 (en) 2018-02-12 2019-08-15 resTORbio, Inc. Combination therapies
IL301120A (en) 2018-02-27 2023-05-01 Artax Biopharma Inc A history of novel chromium as TCR–NCK interaction inhibitors
CN112423754A (zh) 2018-03-05 2021-02-26 奥克梅斯制药爱尔兰有限公司 阿立哌唑的给药策略
TWI813673B (zh) 2018-04-24 2023-09-01 德商馬克專利公司 抗增生化合物及其用途
AR114828A1 (es) 2018-04-24 2020-10-21 Vertex Pharma Compuestos de pteridinona y sus usos
JP7382353B2 (ja) 2018-06-15 2023-11-16 ヤンセン ファーマシューティカ エヌ．ベー． ラパマイシン類似体およびその使用
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
GB201810316D0 (en) 2018-06-22 2018-08-08 Bicyclerd Ltd Peptide ligands for binding to EphA2
US11292792B2 (en) 2018-07-06 2022-04-05 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic CRBN ligands and uses thereof
EP3827006A4 (en) 2018-07-23 2022-04-06 Signalrx Pharmaceuticals, Inc. SINGLE MOLECULE COMPOUNDS PROVIDING MULTI-TARGET INHIBITION OF BTK AND OTHER PROTEINS AND METHODS OF USING THEM
US10548889B1 (en) 2018-08-31 2020-02-04 X4 Pharmaceuticals, Inc. Compositions of CXCR4 inhibitors and methods of preparation and use
WO2020050378A1 (ja) * 2018-09-06 2020-03-12 生化学工業株式会社 第３級アミン化合物又はイミン化合物を結合させた、ポリマーコンジュゲートとその製造方法
EP3846793B1 (en) 2018-09-07 2024-01-24 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
US11414431B2 (en) 2018-10-15 2022-08-16 Nimbus Lakshmi, Inc. Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidines as TYK2 inhibitors
US10919937B2 (en) 2018-10-23 2021-02-16 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands and uses thereof
EP3870158A4 (en) 2018-10-24 2022-08-10 Navitor Pharmaceuticals, Inc. POLYMORPHIC COMPOUNDS AND USES THEREOF
KR20210111252A (ko) 2018-11-30 2021-09-10 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Irak 분해제 및 이의 용도
EP3886843A4 (en) 2018-11-30 2022-08-31 Nimbus Lakshmi, Inc. TYK2 INHIBITORS AND THEIR USES
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
JP2022518505A (ja) 2019-01-23 2022-03-15 ニンバス ラクシュミ， インコーポレイテッド Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
WO2020165600A1 (en) 2019-02-14 2020-08-20 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligand sting conjugates and uses thereof
USD930089S1 (en) 2019-03-12 2021-09-07 Woodway Usa, Inc. Treadmill
US20220184222A1 (en) 2019-04-02 2022-06-16 Bicycletx Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
WO2020206424A1 (en) 2019-04-05 2020-10-08 Kymera Therapeutics, Inc. Stat degraders and uses thereof
CN114502540A (zh) 2019-05-31 2022-05-13 医肯纳肿瘤学公司 Tead抑制剂和其用途
TW202110485A (zh) 2019-07-30 2021-03-16 英商拜西可泰克斯有限公司 異質雙環肽複合物
JP2022548594A (ja) 2019-09-11 2022-11-21 ビンシア・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド Ｕｓｐ３０阻害剤及びその使用
MX2022002877A (es) 2019-09-13 2022-08-08 Nimbus Saturn Inc Antagonistas de cinasa progenitora hematopoyetica 1 (hpk1) y sus usos.
MX2022005215A (es) 2019-11-01 2022-06-08 Navitor Pharm Inc Metodos de tratamiento que usan un modulador de la diana mecanicista del complejo 1 de rapamicina (mtorc1).
EP4069223A4 (en) 2019-12-05 2023-12-20 Janssen Pharmaceutica NV RAPAMYCIN ANALOGS AND THEIR USES
EP4076524A4 (en) 2019-12-17 2023-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. IRAQ DEGRADERS AND USES THEREOF
TW202136251A (zh) 2019-12-17 2021-10-01 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑及其用途
BR112022012410A2 (pt) 2019-12-23 2022-08-30 Kymera Therapeutics Inc Degradadores smarca e usos dos mesmos
EP4100017A4 (en) 2020-02-05 2024-04-10 PureTech LYT, Inc. LIPID PRODRUGS OF NEUROSTEROIDS
EP4114529A1 (en) 2020-03-03 2023-01-11 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
IL296451A (en) 2020-03-19 2022-11-01 Kymera Therapeutics Inc mdm2 joints and their uses
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
AU2021327130A1 (en) 2020-08-17 2023-03-02 Bicycletx Limited Bicycle conjugates specific for Nectin-4 and uses thereof
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
IL303376A (en) 2020-12-02 2023-08-01 Ikena Oncology Inc TEAD inhibitors and their uses
BR112023015590A2 (pt) 2021-02-02 2023-10-17 Liminal Biosciences Ltd Antagonistas de gpr84 e usos dos mesmos
MX2023009059A (es) 2021-02-02 2023-09-15 Liminal Biosciences Ltd Antagonistas de gpr84 y usos de estos.
CA3207380A1 (en) 2021-02-15 2022-08-18 Haojing RONG Irak4 degraders and uses thereof
US11926625B2 (en) 2021-03-05 2024-03-12 Nimbus Saturn, Inc. HPK1 antagonists and uses thereof
KR20230172548A (ko) 2021-04-16 2023-12-22 이케나 온콜로지, 인코포레이티드 Mek 억제제 및 이의 용도
CN118103368A (zh) 2021-08-25 2024-05-28 皮克医疗公司 Eif4e抑制剂及其用途
WO2023028238A1 (en) 2021-08-25 2023-03-02 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
TW202404581A (zh) 2022-05-25 2024-02-01 美商醫肯納腫瘤學公司 Ｍｅｋ抑制劑及其用途
TW202415650A (zh) 2022-08-02 2024-04-16 英商利米那生物科技有限公司 芳基-三唑基及相關gpr84拮抗劑及其用途
WO2024028365A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Substituted pyridone gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028363A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Heteroaryl carboxamide and related gpr84 antagonists and uses thereof
US20240208961A1 (en) 2022-11-22 2024-06-27 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991019707A2 (en) * 1990-06-20 1991-12-26 The Upjohn Company Antiatherosclerotic and antithrombotic 1-benzopyran-4-ones and 2-amino-1,3-benzoxazine-4-ones
WO2001053266A1 (en) * 2000-01-24 2001-07-26 Kinacia Pty Ltd. Therapeutic morpholino-substituted compounds
WO2003024949A1 (en) * 2001-08-14 2003-03-27 Cancer Research Technology Limited Dna-pk inhibitors

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3937719A (en) * 1975-01-06 1976-02-10 American Home Products Corporation (4-oxo-4h-1-benzopyran-2-yl)-oxamic acid, salts and esters anti-allergic agents
US5116954A (en) * 1988-04-06 1992-05-26 Lipha, Lyonnaise Industrielle Pharmaceutique Pharmaceutically useful flavonoic compounds containing at least one substituent on the benzopyranone ring moiety
GB8914020D0 (en) * 1989-06-19 1989-08-09 Antisoma Ltd Synthetic peptides for use in thrombus detection
JP2918746B2 (ja) * 1991-12-18 1999-07-12 富士写真フイルム株式会社 ペプチド誘導体およびその用途
WO1999033846A2 (en) 1997-12-31 1999-07-08 The University Of Kansas Water soluble prodrugs of secondary and tertiary amine containing drugs and methods of making thereof
JP2000169372A (ja) * 1998-09-29 2000-06-20 Takeda Chem Ind Ltd 抗真菌薬組成物
AU1494702A (en) * 2000-11-21 2002-06-03 Leo Pharma As Cyanoguanidine prodrugs

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1991019707A2 (en) * 1990-06-20 1991-12-26 The Upjohn Company Antiatherosclerotic and antithrombotic 1-benzopyran-4-ones and 2-amino-1,3-benzoxazine-4-ones
WO2001053266A1 (en) * 2000-01-24 2001-07-26 Kinacia Pty Ltd. Therapeutic morpholino-substituted compounds
WO2003024949A1 (en) * 2001-08-14 2003-03-27 Cancer Research Technology Limited Dna-pk inhibitors

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BANTICK J.R.: "Synthesis of 2-Aminochromanones. Studies on the nucleophilic displacement of sufphinyl and sulphonyl groups in the 2-position of 5,8-Di methoxychromanone" J. HET. CHEM., vol. 18, no. 4, 1981, pages 679-684, XP002290285, table 1 *
C. WERMUTH: "The Practice of Medicinal Chemistry", 1996, ACADEMIC PRESS LIMITED, LONDON, XP002290286, page 671-page 696 *
CHIOSIS G. ET AL.: "LY294002-geldanamycin heterodimers as selective inhibitors of the PI3K and PI3K-related family" BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, OXFORD, GB, vol. 11, no. 7, 9 April 2001 (2001-04-09), pages 909-913, XP004232522, ISSN: 0960-894X, Scheme 1 *
VLAHOS C.J. ET AL.: "A SPECIFIC INHIBITOR OF PHOSPHATIDYLINOSITOL 3-KINASE, 2-(4-MORPHOLINYL)-8-PHENYL-4H-1-BENZOPYRAN-4-ONE (LY294002)" JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, AMERICAN SOCIETY OF BIOLOGICAL CHEMISTS, BALTIMORE, MD, US, vol. 269, no. 7, 18 February 1994 (1994-02-18), pages 5241-5248, XP002023636, ISSN: 0021-9258, table 1 *
WALKER EDWARD H. ET AL.: "Structural determinants of phosphoinositide 3-kinase inhibition by wortmannin, LY294002, quercetin, myricetin, and staurosporine" MOLECULAR CELL, CAMBRIDGE, MA, US, vol. 6, no. 4, October 2000 (2000-10), pages 909-919, XP002214228, ISSN: 1097-2765, figure 1 *

Also Published As

Publication number Publication date
US7396828B2 (en) 2008-07-08
SG160211A1 (en) 2010-04-29
US20080188423A1 (en) 2008-08-07
CA2518916A1 (en) 2004-10-21
MXPA05010471A (es) 2006-05-25
CN1826331A (zh) 2006-08-30
NZ542475A (en) 2009-04-30
AU2004228668B2 (en) 2011-10-27
EA200501563A1 (ru) 2006-06-30
JP2006523237A (ja) 2006-10-12
AU2004228668A1 (en) 2004-10-21
BRPI0409063A (pt) 2006-03-28
US6949537B2 (en) 2005-09-27
ZA200507954B (en) 2007-02-28
US20050203173A1 (en) 2005-09-15
KR20070087266A (ko) 2007-08-28
JP2011057686A (ja) 2011-03-24
US7662977B2 (en) 2010-02-16
EP1611119A1 (en) 2006-01-04
WO2004089925A1 (en) 2004-10-21
US20040242631A1 (en) 2004-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA012240B1 (ru) Пролекарства ингибиторов киназы pi-3
JP2006523237A5 (ru)
US5484893A (en) Tri-aza macrocycles and metal complexes thereof
US5505931A (en) Acid cleavable compounds, their preparation and use as bifunctional acid-labile crosslinking agents
EP0404605B1 (en) Tri-aza macrocycles and processes for their production
US20090011975A1 (en) Targeted bone marrow protection agents
AU639495B2 (en) Gem-diphosphonic acids, a process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
KR20010099586A (ko) 약제학적 화합물로 유용한 나알라다제 억제제 및 그의조성물
JP2024522200A (ja) トリスリンカー結合二量体化標識前駆体およびそれに由来する放射性トレーサー
US20150291538A1 (en) Macrocyclic Compositions And Metal Complexes For Bioimaging And Biomedical Applications
US20090162290A1 (en) Method for the synthesis of penta-pendant enantiomer-pure chelators and process for therapeutically active bioconjugates preparation by a covalent binding thereof
JPH07502043A (ja) ビシクロポリアザ大環状ホスホン酸、結合体、造影剤及び製造
KR102302065B1 (ko) 흑색종 치료용 방사성 화합물 및 그의 용도
US5247077A (en) Tri-aza macrocycles and processes for their preparation
US20120277421A1 (en) Metal Complexes of Tetraazamacrocycle Derivatives
WO2009108704A1 (en) O-alkylated pi-3 kinase inhibitor prodrug combination
US5342936A (en) Tetra-aza macrocycles and processes for their preparation
US5684135A (en) Conjugate compounds containing aza-macro-cycles and processes for their preparation
WO2024026072A1 (en) Fibroblast activation protein-targeted compositions and methods of use thereof
CZ300074B6 (cs) Inteligentní trífunkcní makrokonjugáty a farmaceutický nebo diagnostický prostredek s jejich obsahem

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU