JP2918746B2 - ペプチド誘導体およびその用途 - Google Patents
ペプチド誘導体およびその用途Info
- Publication number
- JP2918746B2 JP2918746B2 JP4189446A JP18944692A JP2918746B2 JP 2918746 B2 JP2918746 B2 JP 2918746B2 JP 4189446 A JP4189446 A JP 4189446A JP 18944692 A JP18944692 A JP 18944692A JP 2918746 B2 JP2918746 B2 JP 2918746B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- arg
- gly
- added
- ethyl acetate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、細胞接着ペプチドのコ
ア配列（Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐ）を有するペプチド誘導
体、およびそれを有効成分とする癌転移抑制剤に関す
る。
ア配列（Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐ）を有するペプチド誘導
体、およびそれを有効成分とする癌転移抑制剤に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】フィブロネクチンは細胞−細胞外基質の
接着に関与する蛋白質であり、血小板凝集や癌転移にも
関与していると考えられている。細胞−細胞外基質の相
互作用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、
フィブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるに
もかかわらず、これらのレセプターはその中のＡｒｇ-
Ｇｌｙ-Ａｓｐ配列（コア配列）を特異的に認識するこ
とが明らかにされ、該コア配列がレセプターとの相互作
用に重要なものであることが報告されている（ネイチャ
ー(Nature)、第309巻、30頁、1984年）。このArg-Gly-A
sp配列はビトロネクチン等の他の接着性蛋白質にも存在
しており、これらの接着性蛋白質は上記コア配列を介し
て被接着細胞のレセプターと接合し、その情報を接着細
胞に伝達する。また、このArg-Gly-Asp配列はヘパリ
ン、コラーゲン、フィブリン等の生体高分子との結合能
も有し、細胞と間質結合組織との接着、細胞の分化、増
殖に関与しているとも考えられている。このように細胞
接着活性蛋白質は種々の生物活性を有するため、医薬、
医用材料への応用が検討されている。
接着に関与する蛋白質であり、血小板凝集や癌転移にも
関与していると考えられている。細胞−細胞外基質の相
互作用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、
フィブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるに
もかかわらず、これらのレセプターはその中のＡｒｇ-
Ｇｌｙ-Ａｓｐ配列（コア配列）を特異的に認識するこ
とが明らかにされ、該コア配列がレセプターとの相互作
用に重要なものであることが報告されている（ネイチャ
ー(Nature)、第309巻、30頁、1984年）。このArg-Gly-A
sp配列はビトロネクチン等の他の接着性蛋白質にも存在
しており、これらの接着性蛋白質は上記コア配列を介し
て被接着細胞のレセプターと接合し、その情報を接着細
胞に伝達する。また、このArg-Gly-Asp配列はヘパリ
ン、コラーゲン、フィブリン等の生体高分子との結合能
も有し、細胞と間質結合組織との接着、細胞の分化、増
殖に関与しているとも考えられている。このように細胞
接着活性蛋白質は種々の生物活性を有するため、医薬、
医用材料への応用が検討されている。
【０００３】例えば、Arg-Gly-Asp配列を有する種々の
鎖状および環状のオリゴペプチドを用いて血小板凝集を
阻害する方法（高分子学会予稿集(Polymer Preprints,
Japan)、第38巻、3149頁、1989年；特開平2-174797
号）、Arg-Gly-Asp配列を有するペプチドを細胞移動抑
制剤として用いる方法（特開平2-4716号）、Arg-Gly-As
pを固定化したPMMA膜を細胞接着膜として用いる方法(高
分子学会予稿集(PolymerPreprints, Japan)、第37巻、7
05頁、1988年）等が報告されている。また、ポリマーに
Arg-Gly-Aspを必須構成単位とするペプチドを共有結合
させ動物細胞培養基体、生体複合人工臓器用基体として
用いる方法（特開平1-309682号、特開平1-305960号）、
Arg-Gly-Asp-Ser配列を有するポリペプチドを体外血液
用血小板保護剤として用いる方法（特開昭64-6217号）
等も開示されている。
鎖状および環状のオリゴペプチドを用いて血小板凝集を
阻害する方法（高分子学会予稿集(Polymer Preprints,
Japan)、第38巻、3149頁、1989年；特開平2-174797
号）、Arg-Gly-Asp配列を有するペプチドを細胞移動抑
制剤として用いる方法（特開平2-4716号）、Arg-Gly-As
pを固定化したPMMA膜を細胞接着膜として用いる方法(高
分子学会予稿集(PolymerPreprints, Japan)、第37巻、7
05頁、1988年）等が報告されている。また、ポリマーに
Arg-Gly-Aspを必須構成単位とするペプチドを共有結合
させ動物細胞培養基体、生体複合人工臓器用基体として
用いる方法（特開平1-309682号、特開平1-305960号）、
Arg-Gly-Asp-Ser配列を有するポリペプチドを体外血液
用血小板保護剤として用いる方法（特開昭64-6217号）
等も開示されている。
【０００４】さらに近年、細胞接着活性蛋白質は癌転移
に関係する物質としても注目されてきている。癌転移の
一連の段階では、癌細胞は種々の宿主細胞や生体高分子
と接触する。このとき、フィブロネクチンのような細胞
接着分子が存在すると、該細胞は多細胞塊を形成し、癌
細胞の増殖や生存をより容易にする。ところがこの際、
フィブロネクチンの接着コアであるトリペプチドArg-Gl
y-Aspが共存すると、競争的に癌細胞上のレセプターと
接合することにより逆に癌転移阻害活性を示すことが報
告されている（サイエンス、第２３８巻、４６７ペー
ジ、１９８６年）。
に関係する物質としても注目されてきている。癌転移の
一連の段階では、癌細胞は種々の宿主細胞や生体高分子
と接触する。このとき、フィブロネクチンのような細胞
接着分子が存在すると、該細胞は多細胞塊を形成し、癌
細胞の増殖や生存をより容易にする。ところがこの際、
フィブロネクチンの接着コアであるトリペプチドArg-Gl
y-Aspが共存すると、競争的に癌細胞上のレセプターと
接合することにより逆に癌転移阻害活性を示すことが報
告されている（サイエンス、第２３８巻、４６７ペー
ジ、１９８６年）。
【０００５】このように、フィブロネクチン等の細胞接
着活性蛋白質あるいはそのペプチド断片は様々な生物活
性を有しており、その関連物質を医薬品として応用する
技術の開発が望まれていた。特に、上記接着性コア配列
の癌転移抑制作用は医薬品として応用価値が高いものと
考えられる。しかしコア配列のみでは抑制効果はそれほ
ど大きいものではないので、効果の増強をはかる目的
で、この配列を有するオリゴペプチド、環状オリゴペプ
チド、あるいはその繰り返し構造を有するポリペプチド
を用いた癌転移抑制方法も開示されている(Int. J. Bio
l. Macromol.、第11巻、23頁、1989年；同誌、第11巻、
226頁、1989年；Jpn. J. Cancer Res. 、第60巻、 722
頁、1989年；特開平2-174797号）。しかし、例えば環状
ペプチドの合成は鎖状のものよりも困難で収率が低く、
またポリペプチドでは構造の特定が困難である等の問題
点が存在し、より簡単なコア配列の修飾で癌転移抑制能
を大幅に向上させる方法が望まれていた。
着活性蛋白質あるいはそのペプチド断片は様々な生物活
性を有しており、その関連物質を医薬品として応用する
技術の開発が望まれていた。特に、上記接着性コア配列
の癌転移抑制作用は医薬品として応用価値が高いものと
考えられる。しかしコア配列のみでは抑制効果はそれほ
ど大きいものではないので、効果の増強をはかる目的
で、この配列を有するオリゴペプチド、環状オリゴペプ
チド、あるいはその繰り返し構造を有するポリペプチド
を用いた癌転移抑制方法も開示されている(Int. J. Bio
l. Macromol.、第11巻、23頁、1989年；同誌、第11巻、
226頁、1989年；Jpn. J. Cancer Res. 、第60巻、 722
頁、1989年；特開平2-174797号）。しかし、例えば環状
ペプチドの合成は鎖状のものよりも困難で収率が低く、
またポリペプチドでは構造の特定が困難である等の問題
点が存在し、より簡単なコア配列の修飾で癌転移抑制能
を大幅に向上させる方法が望まれていた。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、上記コア配列（Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐ）の末端の修
飾が簡単なものでありながら、癌転移抑制能が大幅に向
上し、かつ抗癌スペクトルが広いペプチド誘導体を提供
することである。本発明の別の目的は、このペプチド誘
導体を有効成分とする癌転移抑制剤を提供することであ
る。
は、上記コア配列（Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐ）の末端の修
飾が簡単なものでありながら、癌転移抑制能が大幅に向
上し、かつ抗癌スペクトルが広いペプチド誘導体を提供
することである。本発明の別の目的は、このペプチド誘
導体を有効成分とする癌転移抑制剤を提供することであ
る。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明の目的は、下記一
般式（Ｉ）で表されるペプチド誘導体、およびその薬理
学的に許容される塩、およびそれらを有効成分とする癌
転移抑制剤により達成された。 一般式（Ｉ） Ｒ1-Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐ-Ｓｅｒ-Ｒ2 （式中、Ａｒｇ、Ｇｌｙ、ＡｓｐおよびＳｅｒはそれぞ
れアルギニン、グリシン、アスパラギン酸およびセリン
残基を表す。Ｒ1 はスクシニル基、グルタリル基または
アジポイル基を表す。Ｒ2 は−ＯＲ3 または−ＮＲ4 Ｒ
5 を表す。Ｒ3 、Ｒ4 、Ｒ5 はそれぞれ水素原子または
炭素数３以下のアルキル基を表す。）
般式（Ｉ）で表されるペプチド誘導体、およびその薬理
学的に許容される塩、およびそれらを有効成分とする癌
転移抑制剤により達成された。 一般式（Ｉ） Ｒ1-Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐ-Ｓｅｒ-Ｒ2 （式中、Ａｒｇ、Ｇｌｙ、ＡｓｐおよびＳｅｒはそれぞ
れアルギニン、グリシン、アスパラギン酸およびセリン
残基を表す。Ｒ1 はスクシニル基、グルタリル基または
アジポイル基を表す。Ｒ2 は−ＯＲ3 または−ＮＲ4 Ｒ
5 を表す。Ｒ3 、Ｒ4 、Ｒ5 はそれぞれ水素原子または
炭素数３以下のアルキル基を表す。）
【０００８】本発明のペプチド誘導体の塩としては、例
えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホウ酸塩等
の無機酸との塩や、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、トリ
フルオロメタンスルホン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩等の有
機酸との塩が挙げられ、そのような塩への変換は慣用の
手段により行なうことができる。
えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホウ酸塩等
の無機酸との塩や、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、トリ
フルオロメタンスルホン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩等の有
機酸との塩が挙げられ、そのような塩への変換は慣用の
手段により行なうことができる。
【０００９】本発明のペプチド誘導体を構成するアミノ
酸はL-体でもD-体でもよいが、L-体の方が好ましい。た
だしアルギニン残基はD-体でもL-体と同等の効果が得ら
れる。
酸はL-体でもD-体でもよいが、L-体の方が好ましい。た
だしアルギニン残基はD-体でもL-体と同等の効果が得ら
れる。
【００１０】Ｒ1 は、スクシニル基、グルタリル基また
はアジポイル基であり、Ｒ2 は−ＯＲ3 または−ＮＲ4
Ｒ5 を表す。Ｒ3 、Ｒ4 、Ｒ5 はそれぞれ水素原子また
は炭素数３以下のアルキル基を表す。特に好ましい例と
しては、 -ＯＨ、 -ＯＣＨ3、 -ＯＣ2Ｈ5 、 -ＮＨ2、
-ＮＨＣＨ3 が挙げられる。
はアジポイル基であり、Ｒ2 は−ＯＲ3 または−ＮＲ4
Ｒ5 を表す。Ｒ3 、Ｒ4 、Ｒ5 はそれぞれ水素原子また
は炭素数３以下のアルキル基を表す。特に好ましい例と
しては、 -ＯＨ、 -ＯＣＨ3、 -ＯＣ2Ｈ5 、 -ＮＨ2、
-ＮＨＣＨ3 が挙げられる。
【００１１】以下に本発明の化合物例を挙げるが、本発
明はこれらに限定されるものではない。なお、Ｒ2 が -
ＯＨの場合は、該分野の表記法の慣例により記載を省略
する。アミノ酸は３文字表記法で表記し、特に指定のな
い場合はL-体を表す。またＳｕｃ- 、Ｇｌｔ- 、Ａｄｐ
- はそれぞれスクシニル基、グルタリル基、アジポイル
基を表す。
明はこれらに限定されるものではない。なお、Ｒ2 が -
ＯＨの場合は、該分野の表記法の慣例により記載を省略
する。アミノ酸は３文字表記法で表記し、特に指定のな
い場合はL-体を表す。またＳｕｃ- 、Ｇｌｔ- 、Ａｄｐ
- はそれぞれスクシニル基、グルタリル基、アジポイル
基を表す。
【００１２】化合物１ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ
ｓｐ−Ｓｅｒ
【００１３】化合物２ Ｓｕｃ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇ
ｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ
ｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ
【００１４】化合物３ Ｓｕｃ−D-Ａｒｇ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ−Ｓｅｒ
Ａｓｐ−Ｓｅｒ
【００１５】化合物４ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3
ｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3
【００１６】化合物５ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ2
ｓｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ2
【００１７】化合物６ Ｇｌｔ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ
ｓｐ−Ｓｅｒ
【００１８】化合物７ Ｇｌｔ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3
ｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3
【００１９】化合物８ Ｓｕｃ-D-Ａｒｇ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3
Ａｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3
【００２０】化合物９ Ａｄｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ
ｓｐ−Ｓｅｒ
【００２１】
【００２２】
【００２３】
【００２４】
【００２５】
【００２６】
【００２７】
【００２８】
【００２９】
【００３０】化合物１９ Ｓｕｃ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｇ
ｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ
ｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ
【００３１】ペプチドの合成方法は特に限定されない
が、液相法、固相法、および自動合成装置による合成方
法が挙げられる。これらの合成方法の詳細については、
生化学実験講座”タンパク質の化学IV”ｐ２０７−４９
５（日本生化学会編、東京化学同人）、”続生化学実験
講座タンパク質の化学（下）”（日本生化学会編、東京
化学同人）、泉屋ら編”ペプチド合成の基礎と実験”
（丸善）に記載されている。また、市販されている合成
ペプチドを利用することも可能である。
が、液相法、固相法、および自動合成装置による合成方
法が挙げられる。これらの合成方法の詳細については、
生化学実験講座”タンパク質の化学IV”ｐ２０７−４９
５（日本生化学会編、東京化学同人）、”続生化学実験
講座タンパク質の化学（下）”（日本生化学会編、東京
化学同人）、泉屋ら編”ペプチド合成の基礎と実験”
（丸善）に記載されている。また、市販されている合成
ペプチドを利用することも可能である。
【００３２】本発明のペプチド誘導体またはその塩は、
細胞接着性蛋白質のコア配列Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐを有
し、該コア配列を介して細胞接着性蛋白質と同様の機序
で細胞に接着する。そのため、細胞接着性蛋白のアゴニ
ストまたはアンタゴニストとして種々の生理活性を示
し、免疫調整作用、創傷治癒作用、毛細血管中で起こる
癌細胞による血小板凝集抑制作用、神経疾患治癒作用な
どの広範な生物活性を示す。従って、本発明のペプチド
誘導体またはその塩は、その少なくとも一種を、場合に
より慣用の担体または医薬用助剤とともに、癌転移抑制
剤、創傷治癒剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着抑制剤と
して患者に投与することが可能である。その投与量は、
一回当り０．２μｇ／ｋｇ〜４００ｍｇ／ｋｇの範囲
で、症状、年齢、体重等に基づいて決定される。
細胞接着性蛋白質のコア配列Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐを有
し、該コア配列を介して細胞接着性蛋白質と同様の機序
で細胞に接着する。そのため、細胞接着性蛋白のアゴニ
ストまたはアンタゴニストとして種々の生理活性を示
し、免疫調整作用、創傷治癒作用、毛細血管中で起こる
癌細胞による血小板凝集抑制作用、神経疾患治癒作用な
どの広範な生物活性を示す。従って、本発明のペプチド
誘導体またはその塩は、その少なくとも一種を、場合に
より慣用の担体または医薬用助剤とともに、癌転移抑制
剤、創傷治癒剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着抑制剤と
して患者に投与することが可能である。その投与量は、
一回当り０．２μｇ／ｋｇ〜４００ｍｇ／ｋｇの範囲
で、症状、年齢、体重等に基づいて決定される。
【００３３】本発明のペプチド誘導体またはその塩は、
ペプチド系医薬に一般に使用されている投与方法、即ち
非経口投与方法、例えば静脈内投与、筋肉内投与、皮下
投与等によって投与するのが好ましい。そのような注射
用製剤を製造する場合、本発明のペプチド誘導体または
その塩を例えば、後記実施例で示すようにＰＢＳまたは
生理食塩水に溶解して、注射用製剤としてもよく、ある
いは０．１Ｎ程度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製
剤としてもよい。このような製剤には、グリシンやアル
ブミン等の慣用の安定剤を添加してもよい。さらに、本
発明のペプチド誘導体またはその塩は、例えばリポソー
ム中に包容したマイクロカプセル剤あるいはミクロスフ
ェア状、ハイドロゲル状とすれば、経口投与することも
可能であり、座剤、舌下錠、点鼻スプレー剤等の形にす
れば、消化菅以外の粘膜から吸収させることも可能であ
る。
ペプチド系医薬に一般に使用されている投与方法、即ち
非経口投与方法、例えば静脈内投与、筋肉内投与、皮下
投与等によって投与するのが好ましい。そのような注射
用製剤を製造する場合、本発明のペプチド誘導体または
その塩を例えば、後記実施例で示すようにＰＢＳまたは
生理食塩水に溶解して、注射用製剤としてもよく、ある
いは０．１Ｎ程度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製
剤としてもよい。このような製剤には、グリシンやアル
ブミン等の慣用の安定剤を添加してもよい。さらに、本
発明のペプチド誘導体またはその塩は、例えばリポソー
ム中に包容したマイクロカプセル剤あるいはミクロスフ
ェア状、ハイドロゲル状とすれば、経口投与することも
可能であり、座剤、舌下錠、点鼻スプレー剤等の形にす
れば、消化菅以外の粘膜から吸収させることも可能であ
る。
【００３４】
【実施例】以下、本発明の化合物の合成例及びその活性
の試験例により本発明をさらに説明するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。なお、以下の実施例に
おいては上記で使用したものの他、下記の略号を使用す
る。
の試験例により本発明をさらに説明するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。なお、以下の実施例に
おいては上記で使用したものの他、下記の略号を使用す
る。
【００３５】 ｔ−Ｂｏｃ ：ｔ−ブトキシカルボニル Ｂｚｌ ：ベンジル Ｚ ：ベンジルオキシカルボニル ＤＣＣ ：ジシクロヘキシルカルボジイミド ＨＯＢｔ ：ヒドロキシベンゾトリアゾール ＴＦＡ ：トリフルオロ酢酸 ＤＩＥＡ ：ジイソプロピルエチルエーテル ＤＭＦ ：ジメチルホルムアミド
【００３６】合成例１ 化合物１の合成 化合物１は下記に示す経路に従って合成した。
【００３７】
【化１】
【００３８】
【化２】
【００３９】(1a)の合成 t-Boc-Ser(Bzl)１４.８ｇ（５０ｍｍｏｌ）、NaHCO3 4
ｇ（０.１ｍｏｌ）、を含むＤＭＦ溶液（１５０ｍｌ）
に室温で臭化ベンジル８.５５ｇ（５０ｍｍｏｌ）を滴
下し、２４時間室温で撹拌した。反応溶液に４％NaHCO3
水溶液と酢酸エチルを加え抽出、分液した。酢酸エチル
層を水で、次いで食塩水で洗浄し、その後硫酸ナトリウ
ム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去することにより
油状の(1a)１７.０ｇ（４.４ｍｍｏｌ）を得た。収率８
８％。
ｇ（０.１ｍｏｌ）、を含むＤＭＦ溶液（１５０ｍｌ）
に室温で臭化ベンジル８.５５ｇ（５０ｍｍｏｌ）を滴
下し、２４時間室温で撹拌した。反応溶液に４％NaHCO3
水溶液と酢酸エチルを加え抽出、分液した。酢酸エチル
層を水で、次いで食塩水で洗浄し、その後硫酸ナトリウ
ム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去することにより
油状の(1a)１７.０ｇ（４.４ｍｍｏｌ）を得た。収率８
８％。
【００４０】(1b)の合成 (1a)１７.０ｇ（４４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン３０ｍ
ｌに溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）３０ｍｌを
加えて室温で３時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦ
Ａをロータリーエバポレーターで留去した後、残留物に
酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分
液した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した
後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧
留去した後、残留物を塩化メチレン（６０ｍｌ）とＤＭ
Ｆ（４０ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、t-Boc-Asp(OBzl)
１５ｇ（４６ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリアゾー
ル・１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ）６.７ｇ（４４ｍｍｏ
ｌ）を加えて氷冷撹拌した。この反応溶液にＤＣＣ１
０.３ｇを加え、氷冷で２時間、室温で終夜撹拌した。
析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残
留物に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて
抽出、分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で
洗浄し、新たに析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減
圧濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（n-ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）で精製するこ
とにより、白色固体の(1b)１５.８ｇ（２６.７ｍｍｏ
ｌ）を得た。収率６１％。
ｌに溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）３０ｍｌを
加えて室温で３時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦ
Ａをロータリーエバポレーターで留去した後、残留物に
酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分
液した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した
後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧
留去した後、残留物を塩化メチレン（６０ｍｌ）とＤＭ
Ｆ（４０ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、t-Boc-Asp(OBzl)
１５ｇ（４６ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリアゾー
ル・１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ）６.７ｇ（４４ｍｍｏ
ｌ）を加えて氷冷撹拌した。この反応溶液にＤＣＣ１
０.３ｇを加え、氷冷で２時間、室温で終夜撹拌した。
析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残
留物に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて
抽出、分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で
洗浄し、新たに析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減
圧濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（n-ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）で精製するこ
とにより、白色固体の(1b)１５.８ｇ（２６.７ｍｍｏ
ｌ）を得た。収率６１％。
【００４１】(1c)の合成 (1b)１５.５ｇ（２６.２ｍｍｏｌ）を塩化メチレン３０
ｍｌに溶解し、ＴＦＡ３０ｍｌを加えて室温で３０分撹
拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡをロータリーエバポ
レーターで留去し、残留物にn-ヘキサンとエーテルの混
合溶媒（５：１）を加えて析出した白色固体の(1c)を濾
取した。１５.０ｇ（２４.８ｍｍｏｌ）。収率９５％。
ｍｌに溶解し、ＴＦＡ３０ｍｌを加えて室温で３０分撹
拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡをロータリーエバポ
レーターで留去し、残留物にn-ヘキサンとエーテルの混
合溶媒（５：１）を加えて析出した白色固体の(1c)を濾
取した。１５.０ｇ（２４.８ｍｍｏｌ）。収率９５％。
【００４２】(1d)の合成 (1c)９ｇ（１４.９ｍｍｏｌ）、t-Boc-Gly ３ｇ（１７.
１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ２.３ｇ（２.５ｍｍｏ
ｌ）、ジイソプロピルエチルエーテル２.９ｍｌ（１６.
６ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（６０ｍｌ）とＤＭＦ
（３０ｍｌ）の反応溶液を氷冷撹拌した。
１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ２.３ｇ（２.５ｍｍｏ
ｌ）、ジイソプロピルエチルエーテル２.９ｍｌ（１６.
６ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（６０ｍｌ）とＤＭＦ
（３０ｍｌ）の反応溶液を氷冷撹拌した。
【００４３】この反応液にＤＣＣ３.４５ｇを加え、氷
冷で２時間、室温で終夜撹拌した。析出した尿素誘導体
を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残留物に酢酸エチルを
加え、１０％クエン酸水溶液、４％炭酸ナトリウム水溶
液、水、食塩水の順序で洗浄した。新たに析出した尿素
誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残留物とシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／酢酸エ
チル＝３／１）で精製することにより白色固体の(1d)
８.６４ｇ（１３.３ｍｍｏｌ）を得た。収率９０％。
冷で２時間、室温で終夜撹拌した。析出した尿素誘導体
を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残留物に酢酸エチルを
加え、１０％クエン酸水溶液、４％炭酸ナトリウム水溶
液、水、食塩水の順序で洗浄した。新たに析出した尿素
誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残留物とシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／酢酸エ
チル＝３／１）で精製することにより白色固体の(1d)
８.６４ｇ（１３.３ｍｍｏｌ）を得た。収率９０％。
【００４４】(1e)の合成 (1d)３.５ｇ（５.４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン２０ｍｌ
に溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）２０ｍｌを加
えて室温で１時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡ
をロータリーエバポレーターで留去した後、残留物に酢
酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分液
した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した
後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧
留去した後、残留物を塩化メチレン（４０ｍｌ）とＤＭ
Ｆ（２０ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、t-Boc-Arg(Z)2２.
８６ｇ（５.２７ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリア
ゾール・１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ）８３０ｍｇ（５.
３ｍｍｏｌ）を加えて氷冷撹拌した。この反応溶液にＤ
ＣＣ１.２４ｇを加え、氷冷で２時間、室温で終夜撹拌
した。析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮し
た。残留物に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を
加えて抽出、分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食
塩水で洗浄し、新たに析出した尿素誘導体を濾別した後
に硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮
し、残留物を酢酸エチルとn-ヘキサンの混合溶媒で再結
晶して、白色固体の(1e)５.０ｇ（４.６６ｍｍｏｌ）を
得た。収率８８％。
に溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）２０ｍｌを加
えて室温で１時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡ
をロータリーエバポレーターで留去した後、残留物に酢
酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分液
した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した
後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧
留去した後、残留物を塩化メチレン（４０ｍｌ）とＤＭ
Ｆ（２０ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、t-Boc-Arg(Z)2２.
８６ｇ（５.２７ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリア
ゾール・１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ）８３０ｍｇ（５.
３ｍｍｏｌ）を加えて氷冷撹拌した。この反応溶液にＤ
ＣＣ１.２４ｇを加え、氷冷で２時間、室温で終夜撹拌
した。析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮し
た。残留物に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を
加えて抽出、分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食
塩水で洗浄し、新たに析出した尿素誘導体を濾別した後
に硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチルを減圧濃縮
し、残留物を酢酸エチルとn-ヘキサンの混合溶媒で再結
晶して、白色固体の(1e)５.０ｇ（４.６６ｍｍｏｌ）を
得た。収率８８％。
【００４５】(1f)の合成 (1e)１.０７ｇ（１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン７ｍｌに
溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）７ｍｌを加えて
室温で１時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡをロ
ータリーエバポレーターで留去した後、残留物に酢酸エ
チルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分液し
た。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した後、
硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去
して、(1e)の脱t-Boc体を得た。
溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）７ｍｌを加えて
室温で１時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡをロ
ータリーエバポレーターで留去した後、残留物に酢酸エ
チルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分液し
た。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した後、
硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去
して、(1e)の脱t-Boc体を得た。
【００４６】これを塩化メチレン（１５ｍｌ）に溶解
し、無水コハク酸１２０ｍｇを加えて、室温で２時間撹
拌した。溶媒を減圧濃縮し、残留物をアセトニトリルで
再結晶して(1f)１.００ｇ（０.９３ｍｍｏｌ）を得た。
（収率９３％）
し、無水コハク酸１２０ｍｇを加えて、室温で２時間撹
拌した。溶媒を減圧濃縮し、残留物をアセトニトリルで
再結晶して(1f)１.００ｇ（０.９３ｍｍｏｌ）を得た。
（収率９３％）
【００４７】化合物１の合成 (1f)７２０ｍｇ（０.６７ｍｍｏｌ）を酢酸１５ｍｌに
溶解し、１０％パラジウム炭素を８０ｍｇ加えて加水素
分解を以下のように行った。まず反応温度を５５℃に設
定し、１時間かけて３５℃まで、さらに１時間かけて２
５℃まで温度を下げたところ沈澱析出を認めた。水７ｍ
ｌを加えたところ析出物は再溶解したので、さらに室温
で５時間加水素分解を続行した。
溶解し、１０％パラジウム炭素を８０ｍｇ加えて加水素
分解を以下のように行った。まず反応温度を５５℃に設
定し、１時間かけて３５℃まで、さらに１時間かけて２
５℃まで温度を下げたところ沈澱析出を認めた。水７ｍ
ｌを加えたところ析出物は再溶解したので、さらに室温
で５時間加水素分解を続行した。
【００４８】触媒を濾別し溶媒を減圧留去した後、残留
物にエーテルを加え析出物を濾取した。この粗ペプチド
を純水に溶解し、活性炭を加え室温で１５分撹拌した。
活性炭を濾別し、水を減圧留去した後に凍結乾燥して３
３０ｍｇの化合物１を白色無定形物として得た。プロト
ンＮＭＲにおいて２.０５ｐｐｍに酢酸のメチル基のピ
ークが認められ、その積分強度より、化合物１は１酢酸
塩の形であることがわかった。収率８３％。
物にエーテルを加え析出物を濾取した。この粗ペプチド
を純水に溶解し、活性炭を加え室温で１５分撹拌した。
活性炭を濾別し、水を減圧留去した後に凍結乾燥して３
３０ｍｇの化合物１を白色無定形物として得た。プロト
ンＮＭＲにおいて２.０５ｐｐｍに酢酸のメチル基のピ
ークが認められ、その積分強度より、化合物１は１酢酸
塩の形であることがわかった。収率８３％。
【００４９】 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５３４（Ｍ＋Ｈ）+、 ５５６
（Ｍ＋Ｎａ）+
（Ｍ＋Ｎａ）+
【００５０】合成例２ 化合物６の合成 合成例１の化合物(1f)の合成において、コハク酸無水物
の代わりにグルタル酸無水物を用いて同様の反応を行
い、化合物６の全保護体を得た。これを化合物１の合成
と同様の加水素分解による脱保護、およびそれに続く精
製を行って化合物６を得た。
の代わりにグルタル酸無水物を用いて同様の反応を行
い、化合物６の全保護体を得た。これを化合物１の合成
と同様の加水素分解による脱保護、およびそれに続く精
製を行って化合物６を得た。
【００５１】 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５４８（Ｍ＋Ｈ）+、 ５６８
（Ｍ＋Ｎａ）+
（Ｍ＋Ｎａ）+
【００５２】合成例３ 化合物４の合成 t-Boc-Ser(Bzl)８.８６ｇ（３０ｍｍｏｌ）、N,N-ジメ
チルアミノピリジン３６０ｍｇ、メタノール１.４ｍｌ
を含む塩化メチレン溶液（６０ｍｌ）を氷冷撹拌し、Ｄ
ＣＣ６.２ｇを加えた。室温で終夜撹拌したのち塩化メ
チレンを減圧留去し、残留物に酢酸エチルを加えた。尿
素誘導体を濾別し、酢酸エチル濾液を、クエン酸水溶
液、炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水の順序で洗浄
し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧
留去し、無色油状のt-Boc-Ser(Bzl)-CH3の粗製物９.３
ｇを得た。
チルアミノピリジン３６０ｍｇ、メタノール１.４ｍｌ
を含む塩化メチレン溶液（６０ｍｌ）を氷冷撹拌し、Ｄ
ＣＣ６.２ｇを加えた。室温で終夜撹拌したのち塩化メ
チレンを減圧留去し、残留物に酢酸エチルを加えた。尿
素誘導体を濾別し、酢酸エチル濾液を、クエン酸水溶
液、炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水の順序で洗浄
し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧
留去し、無色油状のt-Boc-Ser(Bzl)-CH3の粗製物９.３
ｇを得た。
【００５３】これを(1a)の代わりに用いて前記合成例１
と同様の経路で化合物４の全保護体(4f)を得た。各ステ
ップでの収率を以下に記す。なお、(4b)〜(4f)はそれぞ
れ(1b)〜(1f)のセリン残基のベンジルエステルがメチル
エステルに変更された化合物に相当する。 (4b) ７９％ (4c) ８６％ (4d) ８８％ (4e) ７０％ (4f) ８４％
と同様の経路で化合物４の全保護体(4f)を得た。各ステ
ップでの収率を以下に記す。なお、(4b)〜(4f)はそれぞ
れ(1b)〜(1f)のセリン残基のベンジルエステルがメチル
エステルに変更された化合物に相当する。 (4b) ７９％ (4c) ８６％ (4d) ８８％ (4e) ７０％ (4f) ８４％
【００５４】(4f)８５０ｍｇ（０.８５ｍｍｏｌ）を酢
酸１５ｍｌに溶解し、１０％パラジウム炭素を８０ｍｇ
加えて加水素分解を４０℃で１時間、次いで室温で終夜
行った。反応終了後再び４０℃に加温して析出物を溶解
させ、触媒を濾別し溶媒を減圧留去した後、残留物にエ
ーテルを加え析出物を濾取した。この粗ペプチドを純水
び溶解し、活性炭を加え室温で１５分撹拌した。活性炭
を濾別し、水を減圧留去した後に凍結乾燥して、３３０
ｍｇの化合物４を白色無定形物として得た。プロトンＮ
ＭＲにおいて２.０７ｐｐｍに酢酸のメチル基のピーク
が認められ、その積分強度より、化合物４は１酢酸塩の
形であることがわかった。収率７７％。
酸１５ｍｌに溶解し、１０％パラジウム炭素を８０ｍｇ
加えて加水素分解を４０℃で１時間、次いで室温で終夜
行った。反応終了後再び４０℃に加温して析出物を溶解
させ、触媒を濾別し溶媒を減圧留去した後、残留物にエ
ーテルを加え析出物を濾取した。この粗ペプチドを純水
び溶解し、活性炭を加え室温で１５分撹拌した。活性炭
を濾別し、水を減圧留去した後に凍結乾燥して、３３０
ｍｇの化合物４を白色無定形物として得た。プロトンＮ
ＭＲにおいて２.０７ｐｐｍに酢酸のメチル基のピーク
が認められ、その積分強度より、化合物４は１酢酸塩の
形であることがわかった。収率７７％。
【００５５】ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５４８（Ｍ＋Ｈ）+
【００５６】合成例４ 化合物３の合成 合成例１の化合物１の合成において、t-Boc-Arg(Z)2の
代わりにt-Boc-D-Arg(Z)2を用いて同様の操作を行い、
化合物３を１酢酸塩の形で得た。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５３４（Ｍ＋Ｈ）+、 ５５６
（Ｍ＋Ｎａ）+
代わりにt-Boc-D-Arg(Z)2を用いて同様の操作を行い、
化合物３を１酢酸塩の形で得た。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５３４（Ｍ＋Ｈ）+、 ５５６
（Ｍ＋Ｎａ）+
【００５７】合成例５ 化合物５の合成 t-Boc-Ser(Bzl)-NH2を(1a)の代わりに用いて合成例１と
同様の経路で化合物５を合成した。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５３３（Ｍ＋Ｈ）+
同様の経路で化合物５を合成した。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５３３（Ｍ＋Ｈ）+
【００５８】参考合成例１ 化合物１０の合成 化合物１０（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ）は下記に示す経路に従って合成した。尚、化合物(1
e)は合成例１と同様にして合成した。
ｒ）は下記に示す経路に従って合成した。尚、化合物(1
e)は合成例１と同様にして合成した。
【００５９】
【化３】
【００６０】(10f) の合成 合成例１と同様にして合成した(1e)４.０ｇ（３.７３ｍ
ｍｏｌ）を塩化メチレン２０ｍｌに溶解して、トリフル
オロ酢酸（ＴＦＡ）２０ｍｌを加えて室温で１時間攪拌
した。塩化メチレンおよびＴＦＡをロータリーエバポレ
ーターで留去した後、残留物に酢酸エチルと４％炭酸ナ
トリウム水溶液を加えて抽出分液した。酢酸エチル層を
水で、次いで食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシウム上
で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去した後、残留物を塩
化メチレン（３０ｍｌ）とＤＭＦ（３０ｍｌ）の混合溶
媒に溶解し、t-Boc-Asp(OBzl)１.３ｇ（４ｍｍｏｌ）と
ヒドロキシベンゾトリアゾール・１水和物（ＨＯＢｔ・
Ｈ2Ｏ）６１０ｍｇ（４ｍｍｏｌ）を加えて氷冷攪拌し
た。この反応溶液にＤＣＣ０.８５ｇを加え、氷冷で２
時間、室温で終夜攪拌した。析出した尿素誘導体を濾別
し、濾液を減圧濃縮した。残留物に酢酸エチルと４％炭
酸ナトリウム水溶液を加えて抽出、分液した。酢酸エチ
ル層を水で、次いで食塩水で洗浄し、新たに析出した尿
素誘導体を濾別した後に硫酸マグネシウムで乾燥した。
酢酸エチルを減圧濃縮し、残留物を酢酸エチルとn-ヘキ
サンの混合溶媒で再結晶して、白色固体の(10f) ３.４
ｇ（２.６６ｍｍｏｌ）を得た。収率７１％。
ｍｏｌ）を塩化メチレン２０ｍｌに溶解して、トリフル
オロ酢酸（ＴＦＡ）２０ｍｌを加えて室温で１時間攪拌
した。塩化メチレンおよびＴＦＡをロータリーエバポレ
ーターで留去した後、残留物に酢酸エチルと４％炭酸ナ
トリウム水溶液を加えて抽出分液した。酢酸エチル層を
水で、次いで食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシウム上
で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去した後、残留物を塩
化メチレン（３０ｍｌ）とＤＭＦ（３０ｍｌ）の混合溶
媒に溶解し、t-Boc-Asp(OBzl)１.３ｇ（４ｍｍｏｌ）と
ヒドロキシベンゾトリアゾール・１水和物（ＨＯＢｔ・
Ｈ2Ｏ）６１０ｍｇ（４ｍｍｏｌ）を加えて氷冷攪拌し
た。この反応溶液にＤＣＣ０.８５ｇを加え、氷冷で２
時間、室温で終夜攪拌した。析出した尿素誘導体を濾別
し、濾液を減圧濃縮した。残留物に酢酸エチルと４％炭
酸ナトリウム水溶液を加えて抽出、分液した。酢酸エチ
ル層を水で、次いで食塩水で洗浄し、新たに析出した尿
素誘導体を濾別した後に硫酸マグネシウムで乾燥した。
酢酸エチルを減圧濃縮し、残留物を酢酸エチルとn-ヘキ
サンの混合溶媒で再結晶して、白色固体の(10f) ３.４
ｇ（２.６６ｍｍｏｌ）を得た。収率７１％。
【００６１】(10g) の合成 (10f) ３.３ｇ（２.５８ｍｍｏｌ）を塩化メチレン１５
ｍｌに溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）１５ｍｌ
を加えて室温で１時間攪拌した。塩化メチレンおよびＴ
ＦＡをロータリーエバポレーターで留去した後、残留物
に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出
分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄し
た後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減
圧留去し、残留物を酢酸エチルで再結晶して、(10g)
２.７ｇ（２.２９ｍｍｏｌ）を得た。収率８９％。
ｍｌに溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）１５ｍｌ
を加えて室温で１時間攪拌した。塩化メチレンおよびＴ
ＦＡをロータリーエバポレーターで留去した後、残留物
に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出
分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄し
た後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減
圧留去し、残留物を酢酸エチルで再結晶して、(10g)
２.７ｇ（２.２９ｍｍｏｌ）を得た。収率８９％。
【００６２】化合物１０の合成 (10g) ９１０ｍｇ（０.７７ｍｍｏｌ）を酢酸１５ｍｌ
に溶解し、１０％パラジウム炭素を１００ｍｇ加えて加
水素分解を室温で１０時間行った。触媒を濾別し溶媒を
減圧留去した後、残留物にエーテルを加え析出物を濾取
した。この粗ペプチドを純水び溶解し、活性炭を加え室
温で１５分攪拌した。活性炭を濾別し、水を減圧留去し
た後に凍結乾燥して、２８０ｍｇの化合物１を白色無定
形物として得た。プロトンＮＭＲにおいて２.０５ｐｐ
ｍに酢酸のメチル基のピークが認められ、その積分強度
より、化合物１は１／２酢酸塩の形であることが判っ
た。収率６３％。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５４９（Ｍ＋Ｈ）+
に溶解し、１０％パラジウム炭素を１００ｍｇ加えて加
水素分解を室温で１０時間行った。触媒を濾別し溶媒を
減圧留去した後、残留物にエーテルを加え析出物を濾取
した。この粗ペプチドを純水び溶解し、活性炭を加え室
温で１５分攪拌した。活性炭を濾別し、水を減圧留去し
た後に凍結乾燥して、２８０ｍｇの化合物１を白色無定
形物として得た。プロトンＮＭＲにおいて２.０５ｐｐ
ｍに酢酸のメチル基のピークが認められ、その積分強度
より、化合物１は１／２酢酸塩の形であることが判っ
た。収率６３％。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５４９（Ｍ＋Ｈ）+
【００６３】
【００６４】
【００６５】
【００６６】
【００６７】
【００６８】合成例６ 化合物１９の合成 参考合成例１で合成した(10g) １．１ｇ（０．９４ｍｍ
ｏｌ）を塩化メチレン１５ｍｌに溶解し、室温で攪拌し
ながらコハク酸無水物１２０ｍｇを加えたところ、ただ
ちに沈澱の析出を認めた。室温で３０分攪拌を続けた後
塩化メチレンを減圧留去し、残留物をアセトニトリルで
再結晶して化合物２の保護体９１０ｍｇ（０．７１２ｍ
ｍｏｌ）を得た。この保護体８５０ｍｇ（０．６９７ｍ
ｍｏｌ）を化合物１の合成と同様の加水素分解による脱
保護およびそれに続く精製を行って化合物１９を１５０
ｍｇ得た。収率３３％。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ６４９（Ｍ＋Ｈ）+、 ６７１
（Ｍ＋Ｎａ）+
ｏｌ）を塩化メチレン１５ｍｌに溶解し、室温で攪拌し
ながらコハク酸無水物１２０ｍｇを加えたところ、ただ
ちに沈澱の析出を認めた。室温で３０分攪拌を続けた後
塩化メチレンを減圧留去し、残留物をアセトニトリルで
再結晶して化合物２の保護体９１０ｍｇ（０．７１２ｍ
ｍｏｌ）を得た。この保護体８５０ｍｇ（０．６９７ｍ
ｍｏｌ）を化合物１の合成と同様の加水素分解による脱
保護およびそれに続く精製を行って化合物１９を１５０
ｍｇ得た。収率３３％。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ６４９（Ｍ＋Ｈ）+、 ６７１
（Ｍ＋Ｎａ）+
【００６９】合成例７ 上記と同様にして化合物２、７、８及び９を合成した。 化合物２ ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５９１（Ｍ＋Ｈ）+ 化合物７ ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５６２（Ｍ＋Ｈ）+ 化合物８ ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５４８（Ｍ＋Ｈ）+ 化合物９ ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５６２（Ｍ＋Ｈ）+
【００７０】試験例（実験的肺転移） 本発明の化合物、およびアルギニンのＮ末端にアスパラ
ギン酸もしくはグルタミン酸残基またはカルボキシル基
で置換されたアシル基を持たないＲＧＤ化合物の癌転移
阻止作用について比較した。化合物１、３、４、５、
６、９、１９および比較用としてＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ（ＲＧＤＳ）、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ（ＧＲＧＤＳ）、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ−Ｓｅｒ（Ａｃ- ＲＧＤＳ）及びＡｒｇ−Ｇｌｙ
−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3 （ＲＧＤＳ- ＯＣＨ3 ）各
々１０００μgと、非常に転移性の強い癌細胞としてB16
-BL6 メラノーマ細胞５×104 個をそれぞれPBS 0.2 ml
中で混合後、１群５匹のC57BL/6 の雄マウスのそれぞれ
に静脈注射した。投与１４日後にマウスの肺メラノーマ
細胞コロニー数を数えて対照のPBS 投与群と比較した。
その結果を表１に示す。
ギン酸もしくはグルタミン酸残基またはカルボキシル基
で置換されたアシル基を持たないＲＧＤ化合物の癌転移
阻止作用について比較した。化合物１、３、４、５、
６、９、１９および比較用としてＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ（ＲＧＤＳ）、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ（ＧＲＧＤＳ）、Ａｃ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ−Ｓｅｒ（Ａｃ- ＲＧＤＳ）及びＡｒｇ−Ｇｌｙ
−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣＨ3 （ＲＧＤＳ- ＯＣＨ3 ）各
々１０００μgと、非常に転移性の強い癌細胞としてB16
-BL6 メラノーマ細胞５×104 個をそれぞれPBS 0.2 ml
中で混合後、１群５匹のC57BL/6 の雄マウスのそれぞれ
に静脈注射した。投与１４日後にマウスの肺メラノーマ
細胞コロニー数を数えて対照のPBS 投与群と比較した。
その結果を表１に示す。
【００７１】また、化合物１および比較用としてＡｒｇ
−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ（ＲＧＤＳ）各々３０００μ
gとL5178Y ML25 T-lymphoma４×104 個をそれぞれPBS
0.2 ml中で混合後、１群５匹の(BALB/C×DBA2)F1・CDF1
の雌マウスに静脈注射した。投与１４日後にマウスの肝
および脾臓の重量をはかり、対照のPBS投与群、および
未処理の群と比較した。その結果を表２に記す。
−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ（ＲＧＤＳ）各々３０００μ
gとL5178Y ML25 T-lymphoma４×104 個をそれぞれPBS
0.2 ml中で混合後、１群５匹の(BALB/C×DBA2)F1・CDF1
の雌マウスに静脈注射した。投与１４日後にマウスの肝
および脾臓の重量をはかり、対照のPBS投与群、および
未処理の群と比較した。その結果を表２に記す。
【００７２】
【００７３】
【表１】表１ B16-BL6メラノーマ細胞の注射で誘発さ
れた癌の実験的肺転移に対する ぺプチドの効果 ─────────────────────────────────── 投与化合物 投与量 肺への転移数 （μg) 平均±SD（範囲） ─────────────────────────────────── ＰＢＳ（対照群） − ９１±３３（５３−１３５） 化合物１ １０００ １９±１０（４−３２）** ３ １０００ ３８±１７（１８−６６）* ４ １０００ ３３±１２（１８−４７）* ５ １０００ ２５±１４（６−４６）** ６ １０００ ３６±１９（１３−７０）* ９ １０００ ３１±１６（１０−５４）* １９ １０００ ３０±１０（２０−４５）** ＲＧＤＳ １０００ １１４±３５（５３−１３５） ＧＲＧＤＳ １０００ １０８±１７（８５−１２１）* Ａｃ−ＲＧＤＳ １０００ ９５±２３（５７−１２１） ＲＧＤＳ−ＯＣＨ3 １０００ １２７±４３（６８−１６５）* ─────────────────────────────────── * ｔ検定で対照群と比較して p＜0.01 **ｔ検定で対照群と比較して p＜0.001
れた癌の実験的肺転移に対する ぺプチドの効果 ─────────────────────────────────── 投与化合物 投与量 肺への転移数 （μg) 平均±SD（範囲） ─────────────────────────────────── ＰＢＳ（対照群） − ９１±３３（５３−１３５） 化合物１ １０００ １９±１０（４−３２）** ３ １０００ ３８±１７（１８−６６）* ４ １０００ ３３±１２（１８−４７）* ５ １０００ ２５±１４（６−４６）** ６ １０００ ３６±１９（１３−７０）* ９ １０００ ３１±１６（１０−５４）* １９ １０００ ３０±１０（２０−４５）** ＲＧＤＳ １０００ １１４±３５（５３−１３５） ＧＲＧＤＳ １０００ １０８±１７（８５−１２１）* Ａｃ−ＲＧＤＳ １０００ ９５±２３（５７−１２１） ＲＧＤＳ−ＯＣＨ3 １０００ １２７±４３（６８−１６５）* ─────────────────────────────────── * ｔ検定で対照群と比較して p＜0.01 **ｔ検定で対照群と比較して p＜0.001
【００７４】
【表２】 表２ L5178Y ML25 T-lymphoma細胞の注射で誘発された癌の実験的肝および脾転 移に対するペプチドの効果 ──────────────────────────────────── 投与化合物 投与量 重量 平均±SD（範囲）(g) （μg） 肝臓 脾臓 ──────────────────────────────────── ＰＢＳ（対照群） − ４.５６±０.４７ ０.２８±０.０４ ＲＧＤＳ ３０００ ４.４２±０.７５ ０.２５±０.０６ 化合物１ ３０００ １.０８±０.０８* ０.１４±０.０４* 細胞未投与 − １.０６±０.００ ０.１１±０.０１ ──────────────────────────────────── * ｔ検定で対照群と比較して p＜0.001
【００７５】
【００７６】以上の結果より、ＲＧＤＳ配列のアミノ末
端をスクシニル基、グルタリル基またはアジポイル基で
修飾することにより、癌転移抑制能が向上することが判
った。
端をスクシニル基、グルタリル基またはアジポイル基で
修飾することにより、癌転移抑制能が向上することが判
った。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 東 市郎 北海道札幌市南区真駒内上町５丁目３− ２ (56)参考文献 特開 平２−62892（ＪＰ，Ａ) 米国特許4957902（ＵＳ，Ａ) Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ. 34，Ｎｏ．10（1991，Ｏｃｔ）ｐ．3114 −3125 Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏ ｌ．81，Ｎｏ．３（1988）ｐ，782−790 Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．233（1986) ｐ．467−470 Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ. 266，Ｎｏ．６（1991．Ｆｅｂ．）ｐ. 3579−3585 Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．110, Ｎｏ．３（1991．Ｓｅｐ．）ｐ．381− 387 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C07K 5/11 ZNA A61K 38/00 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (2)
- 【請求項１】 下記一般式（Ｉ）で表されるペプチド誘
導体、またはその生理学的に許容される塩。 一般式（Ｉ） Ｒ1-Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ａｓｐ-Ｓｅｒ-Ｒ2 （式中、Ａｒｇ、Ｇｌｙ、ＡｓｐおよびＳｅｒはそれぞ
れアルギニン、グリシン、アスパラギン酸およびセリン
残基を表す。Ｒ1 はスクシニル基、グルタリル基または
アジポイル基を表す。Ｒ2 は−ＯＲ3 または−ＮＲ4 Ｒ
5 を表す。Ｒ3 、Ｒ4 、Ｒ5 はそれぞれ水素原子または
炭素数３以下のアルキル基を表す。） - 【請求項２】 請求項１に記載の化合物を有効成分とす
る癌転移抑制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4189446A JP2918746B2 (ja) | 1991-12-18 | 1992-07-16 | ペプチド誘導体およびその用途 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3-335213 | 1991-12-18 | ||
| JP33521391 | 1991-12-18 | ||
| JP4189446A JP2918746B2 (ja) | 1991-12-18 | 1992-07-16 | ペプチド誘導体およびその用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05222092A JPH05222092A (ja) | 1993-08-31 |
| JP2918746B2 true JP2918746B2 (ja) | 1999-07-12 |
Family
ID=26505474
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4189446A Expired - Fee Related JP2918746B2 (ja) | 1991-12-18 | 1992-07-16 | ペプチド誘導体およびその用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2918746B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ542475A (en) * | 2003-04-03 | 2009-04-30 | Semafore Pharmaceuticals Inc | PI-3 kinase inhibitor prodrugs |
| WO2009033781A2 (en) * | 2007-09-11 | 2009-03-19 | Mondobiotech Laboratories Ag | Use of a peptide as a therapeutic agent |
| KR20100071983A (ko) * | 2007-09-11 | 2010-06-29 | 몬도바이오테크 래보래토리즈 아게 | 항―ｈｉｖ제로서의 ｒｇｄ－펩티드 및／또는 부갑상선 호르몬（１－３４）의 용도 |
-
1992
- 1992-07-16 JP JP4189446A patent/JP2918746B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．１１０，Ｎｏ．３（１９９１．Ｓｅｐ．）ｐ．３８１−３８７ |
| Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．２６６，Ｎｏ．６（１９９１．Ｆｅｂ．）ｐ．３５７９−３５８５ |
| Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏｌ．８１，Ｎｏ．３（１９８８）ｐ，７８２−７９０ |
| Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．１０（１９９１，Ｏｃｔ）ｐ．３１１４−３１２５ |
| Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２３３（１９８６）ｐ．４６７−４７０ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05222092A (ja) | 1993-08-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3509029B2 (ja) | 生物活性環化ポリペプチド | |
| JP3248584B2 (ja) | フィブロネクチン接着抑制剤 | |
| KR20000022075A (ko) | 세포 접착 억제 화합물 | |
| JPS6270396A (ja) | ｒｅｔｒｏ逆転ヘキサペプチドニユ−ロテンシン類似体 | |
| US5298488A (en) | CM-chitin derivatives and use thereof | |
| JPH06506699A (ja) | 抗血栓性ペプチドおよび偽ペプチド | |
| JPH05500954A (ja) | 抗血栓性ペプチド及び疑似ペプチド | |
| EP0644181B1 (en) | Amino acid derivative and use thereof | |
| JP2918746B2 (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| US5763408A (en) | Amino acid derivatives and application thereof | |
| JPH05271094A (ja) | カルボキシメチル化キチン誘導体を用いる癌転移抑制剤 | |
| JPH06306096A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH04221397A (ja) | 水溶性ポリペプチド誘導体とその用途 | |
| JP3190758B2 (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH06298797A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| JP3190765B2 (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| WO1997010261A1 (fr) | Derives peptidiques | |
| JPH04221400A (ja) | ゼラチン誘導体およびその用途 | |
| JPH10330398A (ja) | 新規環状ペプチド | |
| JPH047360B2 (ja) | ||
| JPH05320191A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| JPH06228189A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 | |
| JPH06321987A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH0717999A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JP2620728B2 (ja) | ペプチド含有ポリエチレングリコール誘導体とその用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080423 Year of fee payment: 9 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090423 Year of fee payment: 10 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |