EA003360B1

EA003360B1 - Производные мононитрата изосорбида и их использование в качестве сосудорасширяющих агентов с пониженной толерантностью

Info

Publication number: EA003360B1
Application number: EA200100422A
Authority: EA
Inventors: Хосе Репольес Молинер; Франсиско Пубиль Кой; Лидия Кабеса Льоренте; Марсель Карбо Банус; Кристина Негрье Рофес; Хуан Антонио Серда Риудаветс; Алисия Феррер Сисо; Марек В. Радомски; Эдуардо Салас Перес-Расилья; Хуан Мартинес Боннин
Original assignee: Ласер, С.А.
Priority date: 1998-10-07
Filing date: 1999-10-04
Publication date: 2003-04-24
Also published as: BR9914355A; IL142391A0; DE69930949T2; HRP20010256A2; YU25201A; RS50112B; CO5180544A1; NO328584B1; ES2142773B1; JP4659214B2; BG105417A; US20010051735A1; EA200100422A1; IS2312B; AP1555A; IS5910A; CU23162A3; PT1120419E; GB2359810B; CZ20011257A3

Abstract

Новые производные мононитрата изосорбида и его фармацевтически приемлемых солей, которые обладают сосудорасширяющей активностью с пониженным эффектом толерантности, формулы (I)в которой А и В, каждый независимо, представляет любую из групп -ONOи -Z-CO-R, где Z представляет атом кислорода или атом серы и R представляет С-С-алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную, или группув которой Rпредставляет водород или С-С-алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную, при условии, что один из А или В всегда представляет -ONO, но никогда оба из них не являются данной группой одновременно;когда Z представляет атом серы, R представляет С-С-алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную; и когда Z представляет атом кислорода, R представляет группу

Description

Настоящее изобретение относится к новым производным мононитрата изосорбида, которые обладают сильной сосудорасширяющей активностью и которые, в то же самое время, обладают значительно пониженной толерантностью.

Предпосылки создания изобретения

Образованные азотной кислотой эфиры органических соединений, обычно известные как нитрованные органические соединения, известны и используются в качестве сосудорасширяющих агентов. При этом хорошо известна полезность моно- и динитрованного изосорбида и, кроме того, были описаны соединения с сосудистой и коронарной активностью, основанные на реакциях замещения свободной гидроксильной группы мононитрата изосорбида. Например, в патенте США υδ-Ά-4891373 описываются производные аминопропанола, соответствующие формулам

для лечения стенокардии и системной и легочной гипертензии.

В патенте США υδ-Ά-5665766 описывается 2-ацетилсалицилат 5-мононитрата изосорбида формулы

а также его антиагрегирующая активность в отношении тромбоцитов.

Одна из основных проблем нитрованных органических соединений, упомянутых выше, заключается в том, что они очень чувствительны по отношению к явлениям, известным как тахифилатаксия или толерантность, что связано с тем, что их действие на организм снижается в процессе пролонгированного лечения, и тогда требуется ощутимо повысить вводимые дозы постепенным образом или иначе решить проблему фармакологическим способом.

Известно также, что один из путей уменьшения толерантности нитрованных органических соединений состоит во введении в молекулу тиольной группы, например, с использованием содержащих серу аминокислот. В европейском патенте ЕР-В-0362575 описываются нитрованные органические соединения с введенными молекулами цистеина и, главным образом, метионина.

В заявке на патент АО-Л-92/04337 описываются органические нитрованные производные кольца тиазолидина с сосудорасширяющей активностью и пониженной толерантностью.

В заявке на патент АО-Л-93/03037 описывается огромное количество различных нитрованных органических сосудорасширяющих соединений с пониженной толерантностью весьма различных структур. В их число включаются в общем, т.е. без конкретизации и без описания какого-либо конкретного продукта, производные мононитрата изосорбида со следующей

в которой В₅ представляет атом водорода, С₁-С₆алкильную группу, фенил и др.

Сами по себе нитрованные органические соединения, описанные в упомянутых выше документах, не решают проблем, связанных с толерантностью нитрованных органических соединений, поскольку они все еще имеют проблемы, связанные с низкой сосудорасширяющей активностью, высокой толерантностью и др. Соответственно существует все еще необходимость разработки новых нитрованных органических соединений, которые обладали бы высокой сосудорасширяющей активностью в сочетании с более пониженным и постоянно поддерживаемым уровнем толерантности.

Краткое изложение сущности изобретения

Объектом данного изобретения является новый тип соединений, производных мононитрата изосорбида, которые способны оказывать сильное сосудорасширяющее действие и которые в то же время проявляют незначительный или нулевой эффект толерантности.

Следующий объем настоящего изобретения относится к применению новых производных мононитрата изосорбида для производства медикаментов или лекарственных средств для лечения нарушений, связанных с дисфункциями циркуляторной системы, в частности, на уровне коронарной системы.

Подробное описание изобретения

Новые производные мононитрата изосорбида и его фармацевтически приемлемые соли, которые являются предметом изобретения, соответствуют следующей общей формуле (I)

в которой А и В, каждый независимо, представляет любую из групп

-ονο₂ ; -ζ κ где Ζ представляет атом кислорода или атом серы и К представляет С1-С₄-алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную, или группу

в которой К¹ представляет водород или С₁-С₄алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную. Все это с условием, что:

(a) один из А или В всегда представляет -ОЫО₂, но никогда оба из них не являются данной группой одновременно;

(b) когда Ζ представляет атом серы, К представляет С₁-С₄-алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную; и (c) когда Ζ представляет атом кислорода, К представляет группу

в которой К¹ представляет группы, указанные выше.

В числе новых производных изобретения предпочтительно, чтобы, когда Ζ представляет атом серы, К представлял С₁-С₄-алкильную группу с короткой цепью, и когда Ζ представляет атом кислорода, К¹ представлял атом водорода или С₁-С₄-алкильную группу с короткой цепью. Более предпочтительно в пределах вышеуказанных критериев, чтобы В представлял группу -ΟΝΟ₂, т.е. предпочтительны соединения, у которых нитратный эфир находится в положении 5 циклической системы изосорбида.

Упомянутые выше предпочтения не должны никоим образом рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения.

В случае, когда К¹ представляет водород, соединения изобретения могут быть представлены в виде любого из двух его таутомеров

и обе из таутомерных структур должны рассматриваться как охватываемые рамками объекта изобретения.

Примерами конкретных соединений в пределах изобретения могут быть следующие соединения:

5-мононитрат 2-(2'-этилтио)никотината изосорбида формулы

2-мононитрат 5-(2'-этилтио)никотината изосорбида формулы

5-мононитрат 2-(2'-меркапто)никотината изосорбида формулы

2-мононитрат 5-(2'-меркапто)никотината изосорбида формулы

5-мононитрат 2-ацетилмеркаптоизосорби-

5-мононитрат 2-(2'-метилтио)никотината изосорбида формулы

2-мононитрат 5-(2'-метилтио)никотината изосорбида формулы

а также их фармацевтически приемлемые соли, особенно их хлоргидраты.

Особенно предпочтительными являются соединение 1 и его хлоргидрат и соединение 5.

Соединения настоящего изобретения можно получить с помощью приемов сложной этерификации с использованием известных или доступных исходных продуктов, описанных в литературе по основной органической химии, известной специалисту в данной области, например, в публикациях Сйет1са1 ЛЬ81гас18 8егу1се, Вейз1е1п Епсус1ореб1а оГ огдашс ргобис18 или в любой другой соответствующей публикации, доступной в университетских библиотеках.

Например, когда Ζ представляет атом кислорода, соединения можно получить из изосорбида или соответствующего мононитрата изосорбида по реакции этерификации указанных соединений соответствующей карбоновой кислотой или ее активированным производным, например, хлорангидридом кислоты, ангидридом или активным эфиром и т.д. Если исходным продуктом является изосорбид, необходимо заканчивать синтез дополнительной стадией, состоящей в нитровании свободной гидроксильной группы изосорбида, стадией, которая не обязательна, если исходят из любого из мононитратов изосорбидов в положении 5 или в положении 2 циклической структуры указанного соединения.

Когда В¹ представляет водород, данные соединения имеют тиольную группу, которая может непреднамеренно окисляться, давая димеры с двумя атомами серы. В этом случае димеры могут превращаться обратно в соответствующие мономеры по реакции с трифенилфосфином в воде, как описано в В. Нитрйгеу (1964), Лпа1уйса1 Сйет., 36, 1812, и Б.Е. Оуегтап (1974), ЗупФеыз, 59.

Когда Ζ представляет атом серы, ситуация очень сходна, поскольку достаточно начать синтез из соответствующей тиокарбоновой кислоты вместо карбоновой кислоты, упомянутой выше, и использовать приемы, хорошо известные специалисту для образования сложной тиоэфирной связи. С другой стороны, если любая из реакций включает эпимеризацию хирального центра, в качестве исходного соединения можно использовать адекватный энантиомер изосорбида, например, изоманид.

Проведенные испытания показывают, что новые производные мононитрата изосорбида изобретения проявляют сосудорасширяющую активность, сравнимую, как минимум, с активностью самого мононитрата изосорбида, а в не которых случаях значительно превосходящую. Кроме того, они проявляют значительно меньшую толерантность по сравнению с толерантностью, наблюдаемой с указанным соединением, и в некоторых случаях она достигает практически нулевого значения.

Следовательно, соединения изобретения могут очень эффективно использоваться для изготовления лекарственных средств с сосудорасширяющим действием для лечения дисфункций циркуляторной системы, в частности, на сердечно-сосудистом и коронарном уровне.

Соответственно, соединения общей формулы (I), а также их фармацевтически приемлемые соли могут использоваться с помощью общепринятых фармацевтических приемов в производстве лекарственных средств, которые можно вводить различными путями.

Например, их можно вводить перорально в форме фармацевтических препаратов, таких как таблетки, капсулы, сиропы и суспензии, парентерально в форме растворов или эмульсий и т.д.

Их можно вводить также местно в форме кремов, помад, бальзамов и т.д. и чрескожно, например, с помощью использования пластырей или повязок. Их можно также применять непосредственно в прямой кишке в виде суппозиториев. Препараты могут включать физиологически приемлемые носители, наполнители или эксципиенты, активаторы, хелатирующие агенты, стабилизаторы и т.д. В случае инъекций могут вводиться физиологически приемлемые буферы, солюбилизирующие агенты или изотонические агенты. Суточная доза может варьировать в зависимости от конкретных симптомов, возраста, массы тела пациентов, конкретного способа введения и т.д., и суточная стандартная доза для взрослого человека может быть между 1 и 500 мг, ее можно вводить в виде только одной дозы или разделять на несколько доз, вводимых в течение дня.

В рабочих примерах, представленных здесь ниже, подробно описываются подходящие способы получения различных соединений, соответствующих общей формуле (I). Принимая во внимание эти примеры, на основании общих знаний специалисты в данной области смогут получить соединения, не приведенные здесь в качестве подробных примеров, с помощью подходящих видоизменений указанных здесь рабочих примеров.

Следовательно, приведенные здесь рабочие примеры должны толковаться не как ограничивающие объем изобретения, а единственно в качестве дополнительных подробных пояснений, которые смогут дать специалисту более глубокое понимание изобретения.

Примеры

Соединения, полученные в приведенных ниже примерах, идентифицируют при помощи их данных инфракрасной спектроскопии (ИК) и/или спектроскопии ядерного магнитного ре003360 зонанса протона ('Н ΝΜΚ) и углерода 13 (¹³С ΝΜΚ).

ИК-спектры регистрировали в пленке, выпаренной СНС1₃, или в таблетке КВг на приборе ΡΕΗΚΙΝ-ΕΕΜΕΗ ΕΤΙΒ Мобе1 1700. Положения наиболее значительных пиков указаны в см^-1.

Спектры ядерного магнитного резонанса регистрировали на приборе Уапаи 6еш1ш-200.

В спектрах ¹Н ΝΜΡ указывается рабочая частота и растворитель, используемый для регистрации спектра. Положение сигналов указывается в δ (м.д.) с использованием в качестве стандарта сигнала протонов растворителя. Значения стандарта составляют 7,24 м.д. для дейтерированного хлороформа и 2,49 м.д. для дейтерированного диметилсульфоксида. В скобках указывается число протонов, соответствующее каждому сигналу, измеренному по электронной интеграции, и тип сигнала указывают с использованием следующих сокращений: 8 (синглет), б (дублет), ΐ (триплет), бб (дублет дублетов), 8Ь (широкий сигнал), 8С (комплекс сигналов) б.е. Ό₂Θ (исчезает во время регистрации спектра после добавления нескольких капель дейтерированной воды).

В спектрах ¹³С ΝΜΡ указываются рабочая частота и растворитель на каждом спектре. Положение сигналов указывается в δ (м.д.) с использованием в качестве стандарта сигнала протонов растворителя. Значения стандарта составляют 77,00 м.д. для дейтерированного хлороформа и 39,50 м.д. для дейтерированного диметилсульфоксида.

Кроме того, были проведены эксперименты магнитного ядерного резонанса с использованием анализа присоединенных протонов (ΑΡΤ).

В экспериментальной части примеров используют следующие сокращения:

ΜΗζ МГерц, Ηζ Герц АсОЕ! этилацетат

ΌΜδΘ-бе гексадейтерированный диметилсульфоксид

ΕΐΘΕΐ диэтиловый эфир

Пример 1. Получение хлоргидрата 5мононитрата 2-(2'-этилтио)никотината изосорбида.

Стадия 1. В 50 мл стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником, закрытым трубкой с СаС1₂, и магнитной мешалкой, 4,25 г (23,2 ммоль) 2-этилтионикотиновой кислоты растворяют в 20 мл тионилхлорида (1,64 г/мл;

275,6 ммоль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3,5 ч. После этого смесь охлаждают и избыток тионилхлорида удаляют при пониженном давлении при добавлении порций толуола. После сушки при пониженном давлении добавляют 4,67 г твердого желтоватого продукта, соответствующего представляющему интерес хлорангидриду кислоты. Выход: 100%.

Стадия 2. В 50 мл стеклянной колбе, снабженной магнитной мешалкой и обратным холодильником, 4,67 г (23,2 ммоль) хлорангидрида кислоты, полученного на вышеуказанной стадии, растворяют в атмосфере Аг в 25 мл пиридина. Раствор охлаждают на ледяной бане и добавляют 4,44 г (23,2 ммоль) 5-мононитрата изосорбида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере Аг в течение 19 ч. После этого растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в 50 мл СНС1₃ и промывают сначала 50 мл воды, затем 50 мл 5% водного раствора НС1 и еще раз 50 мл воды. Органическую фазу сушат над безводным Мд§О₄, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. После сушки при пониженном давлении получают 7,25 г представляющего интерес продукта. Выход: 88%.

Стадия 3. В 250 мл трехгорлой стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником, закрытым трубкой с СаС12, и снабженной магнитной мешалкой и воронкой с компенсированным давлением, растворяют 6,0 г (16,85 ммоль) продукта, полученного на предыдущей стадии в 150 мл ΕΐΘΕΐ. Раствор перемешивают при комнатной температуре и добавляют по каплям 30 мл раствора ΕΐΘΕΐ, насыщенного НС1 (раствор предварительно получают барботированием газообразного НС1 непосредственно в ΕΐΘΕΐ до достижения насыщения), получая белый твердый осадок. Твердое вещество отфильтровывают и промывают избытком ΕΐΘΕΐ и сушат при пониженном давлении. Получают 6,55 г представляющего интерес продукта. Выход: 99%.

Ή-ΝΜΚ. (200 ΜΗζ, ΌΜδΘ-бб) : 10,26 (1Н, 8, б.е. Ό₂Θ, НС1), 8,60 (1Н, бб, 1=5 Ηζ, 1=1,8 Ηζ, СНЭ, 8,20 (1Н, бб, 1=7,7 Ηζ, 1=2 Ηζ, СН_аг), 7,22 (1Н, бб, 1=3 Ηζ, 1=8 Ηζ, СНЭ, 5,43 (1Н, 8С, СНΘΝΘ₂), 5,30 (1Н, б, 1=3 Ηζ, №-Θ^Θ), 5,05 (1Н, ΐ, 1=5,5 Ηζ, СН), 4,65 (1Η, б, 1=5 Ηζ, СН), 4,20-

3,80 (4Н, 8С, СН₂), 3,17 (2Н, ф 1=7,6 Ηζ, СН₃-8),

1,23 (3Н, ΐ, 1=7,6 Ηζ, СН₃).

Ύ-ΝΜΡ (50 ΜΗζ, ΌΜ8Θ-6₆): 164,06 (ΟΘ), 161,34 (ΟΗ^^ΘΘ), 152,88 (СН_аг), 139,63 (СНаг), 122,48 (СНат-8), 119,13 (СНаг), 86,19 (СНΘΝΘ₂), 82,64 (СН), 81,78 (СН), 78,10 (СН-ΘСΘ), 72,90 (СН₂), 69,33 (СН₂), 23,84 (СН₂-8), 14,31 (СН3).

Пример 2. Получение хлоргидрата 2мононитрата 5-(2'-этилтио)никотината изосорбида.

Стадия 1. Используют тот же способ, что на стадии 2 примера 1, применяя в качестве исходного продукта 2-мононитрат изосорбида. Представляющий интерес продукт получают с химическим выходом 88%.

Стадия 2. В 500 мл трехгорлой стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником, закрытым трубкой с СаС1₂, и магнитной мешалкой и капельной воронкой с компенсированным давлением, растворяют 7,0 г (19,66 ммоль) продукта, полученного на предыдущей стадии в смеси 200 мл ΕΐΟΕΐ + 100 мл СН₂С1₂. Раствор перемешивают при комнатной температуре и добавляют по каплям 30 мл раствора ΕΐΘΕΐ, насыщенного НС1 (раствор предварительно получают барботированием газообразного НС1 непосредственно в ΕΐΟΕΐ до достижения насыщения), получая белый твердый осадок. Твердое вещество отфильтровывают и промывают избытком ΕΐΟΕΐ и сушат при пониженном давлении. Получают 7,05 г представляющего интерес продукта. Выход: 91%.

Ή-ΝΜΚ. (200 ΜΗζ, ΌΜ8Ο-6₆): 8,63 (1Н, бб, 1=5 Ηζ, 1=1,8 Ηζ, СНаг), 8,33 (1Н, зЬ, б.е. ΙΤΟ. НС1), 8,23 (1Н, бб, 1=8 Ηζ, 1=1,8 Ηζ, СН_аг), 7,24 (1Н, бб, 1=3 Ηζ, 1=7,8 Ηζ, СН_аг), 5,44 (1Н, б, 1=3,2 Ηζ, СН-О-СО), 5,33 (1Н, зс, СНОИО₂),

4,91 (1Н, ΐ, 1=5,6 Ηζ, СН), 4,67 (1Н, б, 1=5,4 Ηζ, СН), 4,20-3,80 (4Н, зс, СН₂), 3,08 (2Н, ф 1=7,2 Ηζ, СН₂-8), 1,20 (3Н, ΐ, 1=7,2 Ηζ, СН₃).

' Τ'-ΝΜΗ (50 ΜΗζ, ΌΜδΟ-бб): 163,74 (С=О), 161,53 (Саг-СОО), 152,77 (СНаг), 139,24 (СНаг), 122,05 (Сат-8), 119,01 (СНаг), 86,65 (СНΟΝΟ₂), 84,13 (СН), 80,79 (СН), 74,48 (СН-ОСО), 70,78 (СН₂-О), 70,70 (СН₂-О), 23,67 (СН₂),

14,14 (СНэ).

Пример 3. Получение 5-мононитрата 2-(2'меркапто)никотината изосорбида (3).

Стадия 1. В 100 мл стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником, закрытым трубкой с СаС1₂, и магнитной мешалкой, 3,0 г (19,35 ммоль) 2-меркаптоникотиновой кислоты суспендируют в 30 мл тионилхлорида (1,64 г/мл; 431,4 ммоль). Смесь оставляют для кипячения с обратным холодильником в течение 2 ч, наблюдая растворение твердого вещества в течение данного периода. Смесь охлаждают и избыток тионилхлорида удаляют при пониженном давлении при добавлении порциями толуола. После сушки при пониженном давлении получают 3,35 г твердого желтооранжевого вещества, соответствующего представляющему интерес хлорангидриду кислоты. Выход: 100%.

Стадия 2. В 250 мл стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником и магнитной мешалкой, 3,0 г (17,29 ммоль) полученного на предыдущей стадии хлорангидрида кислоты суспендируют в атмосфере Аг в 75 мл пиридина. Суспензию охлаждают на ледяной бане и добавляют 3,30 г (17,29 ммоль) 5мононитрата изосорбида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере Аг в течение 19 ч периода времени, в течение которого смесь становится темной. После окончания реакции растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в 250 мл СНС1₃ и промывают: сначала 250 мл воды, затем 250 мл 5% водного раствора НС1 и еще раз 250 мл воды. Органическую фазу сушат над безводным Мд8О₄, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. После сушки при пониженном давлении получают 5,45 г желтого твердого вещества, которое перекристаллизовывают в изопропаноле с получением 4,83 г белого твердого вещества, которое подвергают взаимодействию в кислотной среде в течение 20 мин с трифенилфосфином (1:1,25, мол./мол.) в метаноле с 10% воды. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в ЛсОНк раствор промывают некоторым количеством воды. Органическую фазу сушат и растворитель удаляют при пониженном давлении, выделяя представляющий интерес продукт с помощью препаративной хроматографии. Выход: 35,7%.

Ή-ΝΜΚ. (200 ΜΗζ, СИзСОСИз): 7,90 (1Н, бб, 1=6,1 Ηζ, 1=1,6 Ηζ, СН_аг), 7,70 (1Н, бб, 1=7,2 Ηζ, 1=1,6 Ηζ, СН_аг), 6,97 (1Н, б, 1=6,4 Ηζ, 1=7,2 Ηζ, СН_аг), 5,63-5,55 (1Н, зс, СН-ΟΝΟ^, 5,38 (1Н, б, 1=3,4 Ηζ, СН-О-СО), 5,09 (1Н, ΐ, 1=5,1 Ηζ, СН), 4,75 (1Н, б, 1=4,8 Ηζ, СН), 4,20-3,85 (4Н, зс, СН2).

Ж (ИК) (табл. КВг): 3438, 2925, 1735, 1639, 1571, 1281, 1095.

Пример 4. Получение 2-мононитрата 5-(2'меркапто)никотината изосорбида (4).

В 250 мл стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником и магнитной мешал11 кой, 3,0 г (17,29 ммоль) хлорангидрида кислоты, полученного на стадии 1 примера 3, суспендируют в атмосфере Аг в смеси 50 мл пиридина и 25 мл СНС1₃. Суспензию охлаждают на ледяной бане и добавляют 3,30 г (17,29 ммоль) 2мононитрата изосорбида. Реакционную смесь оставляют перемешиваться при комнатной температуре в атмосфере Аг в течение 19-часового периода времени, во время которого смесь становится темной. После окончания реакции растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в 300 мл СНС1₃ и промывают сначала 300 мл воды, затем 300 мл 5% водного раствора НС1 и еще раз 300 мл воды. Органическую фазу сушат над безводным Мд8О₄, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. После сушки при пониженном давлении получают 5,10 г желтоватобелого твердого вещества, которое перекристаллизовывают в изопропаноле с получением 4,55 г белого твердого вещества, которое подвергают взаимодействию в кислотной среде в течение 20 мин с трифенилфосфином (1:1,25, мол./мол.) в метаноле с 10% воды. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в ЛсОЕ1, раствор промывают некоторым количеством воды. Органическую фазу сушат и растворитель удаляют при пониженном давлении, выделяя представляющий интерес продукт препаративной хроматографией. Выход: 37,6%.

'ΐ Ι-ΝΜΡ (200 ΜΗζ, СЕ^СОСГ^): 7,98 (1Н, бб, 1=4,2 Ηζ, 1=1,0 Ηζ, СНаг), 7,76 (1Η, бб, 1=4,9 Ηζ, 1=1,0 Ηζ, СЦД 7,34 (1Η, бб, 1=4,5 Ηζ, 1=4,8 Ηζ, ОДД, 5,50-5,36 (2Η, 8с, ίΗ-ΟΝΟζ+εΗ-ΟСО), 5,02 (1Η, ΐ, 1=3,7 Ηζ, ОТ), 4,74 (1Η, б, 1=3,4 Ηζ, ОТ), 4,20-3,90 (4Η, 8с, ОТ2).

1К (ИК) (табл. КВг): 3395, 2876, 1727, 1653, 1631, 1593, 1291, 1276.

Пример 5. Получение 5-мононитрата 2-

Стадия 1. В 1 л стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником, капельной воронкой с компенсированным давлением и магнитной мешалкой, смешивают 60 г (411 ммоль) изоманида, 88 г (461 ммоль) паратолуолсульфонилхлорида, 296 мл СС1₄, 33 мл ΠΗ₂α₂и 247 мл Н₂О. В колбе создают атмосферу Аг и по каплям добавляют раствор 29,9 г (453 ммоль) 85% КОН, поддерживая температуру реакции при 5°С. Период времени добавления составляет ч 20 мин. Получаемую смесь перемешивают при 5°С в течение 7 ч. Твердое вещество отфильтровывают, промывают 2x125 мл порциями Н2О и сушат при пониженном давлении.

Полученное твердое вещество перекристаллизовывают в 1200 мл СС1₄, фильтруют в горячем состоянии и фильтрат оставляют для охлаждения. Полученные кристаллы отфильтровывают и промывают, получая 54,5 г фракции А представляющего интерес продукта, монотозилата изоманида.

Твердое вещество, полученное при фильтровании, перекристаллизовывают в 1000 мл СС14, получая 29,5 г фракции В представляющего интерес продукта.

Стадия 2. В 500 мл стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником и магнитной мешалкой, 22,7 г (76 ммоль) монотозилата изоманида и 13,0 г (113 ммоль) тиоацетата калия смешивают в 113 мл н-бутанола. В колбе создают атмосферу Аг и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1

ч. Смесь охлаждают, фильтруют и промывают 200 мл этанола и растворители удаляют при пониженном давлении. Получают 20 г твердого вещества.

Анализ тонкослойной хроматографии с отдельным образцом показывает, что представляющий интерес продукт не является основной частью неочищенного продукта.

Полученный неочищенный продукт обрабатывают 300 мл н-бутанола и 40 мл тиоуксусной кислоты и кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь оставляют для охлаждения и фильтруют через слой 8ΐΟ₂. Растворители фильтрата выпаривают при пониженном давлении и получают неочищенный продукт, который подвергают флэш-хроматографии.

Для хроматографического разделения в качестве элюента используют смесь ΕΗΟ₃ΜόΟΕϊ, 4:1. Получают фракцию 4,14 г 2ацетилмеркаптоизосорбида, достаточно чистую, чтобы его можно было использовать на следующей стадии синтеза. Получают различные фракции представляющего интерес продукта с очень большим содержанием примеси. Данные последние фракции подвергают препаративной хроматографии с обращенной фазой, достигая очистки требуемого продукта.

Стадия 3. Получают нитрующую смесь добавлением, медленно и осторожно, 2,4 мл 60% НNО₃ в смесь 10 мл уксусного ангидрида и 10 мл уксусной кислоты. Смесь получают при 0°С.

В 100 мл стеклянной колбе, снабженной обратным холодильником и магнитной мешалкой, 2,51 г (12,3 ммоль) продукта, полученного на предыдущей стадии, растворяют при 0°С в 14,5 мл уксусной кислоты и после перемешивания в течение некоторого времени добавляют по каплям ранее полученную нитрующую смесь в течение 20 мин при поддержании температуры при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч при 0°С, неочищенный продукт выливают в 200 мл воды и получаемую смесь экстрагируют 3x200 мл порциями ЛеОЕ1. Каждую из трех порций промывают по отдельности 2x220 мл порциями насыщенного раствора №1НСО₃ и 200 мл воды. Полученный раствор сушат над №ь8О₄, фильтруют и растворители удаляют при пониженном давлении. Получают 2,4 г неочищенного продукта, который подвергают флэш-хроматографии с использованием в качестве элюента смеси СНС1₃/ЛеОЕ1, 25:1. Получают 2,08 г представляющего интерес продукта. Выход: 68%.

¹Η-ΝΜΒ (200 МН, СБСЕ): 5,36-5,24 (1Н, кс, СН-О^₂), 4,90-4,80 (1Н, кс, СН), 4,44-4,37 (1Н, кс, СН), 4,22-4,10 (1Н, кс, СН), 4,10-3,98 (2Н, кс, СН2), 3,92-3,78 (2Н, кс, СН2), 2,33 (3Н, к, СН3).

¹³С-ИМК (50 МН/, СБСЕ): 194,48 (С=О),

86,50 (СН-О^₂), 81,44 (СН), 81,22 (СН), 78,48 (СН₂), 69,25 (СН₂), 45,92 (СН-8), 30,48 (СН₃).

ΙΒ (ст^-1): 300-2800, 1700, 1650, 1630, 1280, 1080, 960.

Пример 6. Получение хлоргидрата 5мононитрата 2-(2'-метилтио)никотината изосорбида (6).

В 50 мл стеклянной колбе, снабженной магнитной мешалкой и обратным холодильником, 2,00 г (10,7 ммоль) хлорангидрида 2метилтионикотиновой кислоты суспендируют в атмосфере Аг в 12 мл пиридина. Смесь охлаждают на ледяной бане и добавляют 2,04 г (10,7 ммоль) 5-мононитрата изосорбида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере Аг в течение 15 ч. По истечении указанного периода растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в 50 мл СНС13 и промывают: сначала 50 мл воды, затем 50 мл 5% водного раствора НС1 и еще раз 50 мл воды. Органическую фазу сушат над безводным Мд8О₄, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. После сушки при пониженном давлении получают 2,80 г представляющего интерес продукта. Выход: 77%.

Ή-ΝΜΚ (200 МН/, Б\18О-б₆): 8,68 (1Н, бб, 1=5 Н, 1=1,8 Н, СН_аг), 8,22 (1Н, бб, 1=7,7 Н, 1=2 Н, СН_аг), 7,26 (1Н, бб, 1=3 Н, 1=8 Нг, СН_аг), 5,54 (1Н, 1б, 1=2 Нг, 1=6 Нг, СН-О^₂),

5,34 (1Н, б, 1=3 Н, СН-О-СО), 5,06 (1Н, 1, 1=5,5 Н, СН), 4,58 (1Н, б, 1=5 Нг, СН), 4,18-3,82 (4Н, кс, СН₂), 2,45 (3Н, к, СНэ-8).

¹³С-ИМК (50 МН/, Б\18О-б₆): 163,91 (С=О), 161,64 (С_аг-СОО), 152,80 (СН_аг), 139,27 (СНаг), 122,20 (Сат-8), 118,83 (СНаг), 85,97 (СНΘΝΘ₂), 82,41 (СН), 81,53 (СН), 77,87 (СН-ОСО), 72,67 (СН₂), 69,07 (СН₂), 13,324 (СН₃).

Пример 7. Получение хлоргидрата 2мононитрата 5-(2'-метилтио)никотината изосорбида (7).

В 50 мл стеклянной колбе, снабженной магнитной мешалкой и обратным холодильником, 2,00 г (10,7 ммоль) хлорангидрида 2метилтионикотиновой кислоты суспендируют в атмосфере Аг в 12 мл пиридина. Смесь охлаждают на ледяной бане и добавляют 2,04 г (10,7 ммоль) 5-мононитрата изосорбида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере Аг в течение 15 ч. По истечении указанного периода растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в 50 мл СНС13 и промывают сначала 50 мл воды, затем 50 мл 5% водного раствора НС1 и еще раз 50 мл воды. Органическую фазу сушат над безводным Мд8О₄, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. После сушки при пониженном давлении получают 2,75 г представляющего интерес продукта. Выход: 75%.

Ή-ΝΜΚ (200 МН/, Б\18О-б₆): 8,90 (1Н, бб, 1=5 Н, 1=1,8 Н, СН_аг), 8,27 (1Н, бб, 1=7,7 Н, 1=2 Н, СН_аг), 7,27 (1Н, бб, 1=3 Нг, 1=7,8 Нг, СН_аг), 5,42-5,31 (1Н, кс, 1=2 Нг, 1=6 Нг, СНΘΝΘ₂), 5,60 (1Н, б, 1=3,2 Н, СН-О-СО), 5,06 (1Н, 1, 1=5,5 Нд СН), 4,92 (1Н, б, 1=5,6 Н, СН),

4,10-3,88 (4Н, кс, СН₂), 1,24 (3Н, к, СН₃-8).

¹³С-МИВ (50 МН/, Б\18О-б₆): 163,71 (С=О), 161,89 (С_аг-СОО), 152,77 (СН_аг), 139,04 (СНаг), 121,92 (Сат-8), 118,87 (СНаг). 86,56 (СНΘΝΘ₂), 84,05 (СН), 80,69 (СН), 74,41 (СН-ОСО), 70,69 (СН₂), 70,61 (СН₂), 13,37 (СН₃).

Пример 8. Испытание на расширение кровеносных сосудов.

Используемый в данных анализах способ является по существу таким же, как способ, описанный в следующих ссылках:

Еитсйдо1 В.Е. Ме11обк ίη ийпс ох1бе гекеатсй. Ееейксй & 81ат1ет ебк. Ιοίιη АПеу & 8оик, С1ис11ек1ег. Еид1аиб, рр. 567-581.

Тгоидуашсйиат К., е1 а1. 1ри. 1. Р1агтасо1. 1996; 71:167-173.

8а1ак Е., е1 а1. Еиг. 1. Р1агтасо1. 1994; 258:47-55.

Различные соединения испытывают при 5 различных концентрациях в диапазоне концентраций от 0,001 до 10 мМ с использованием от 6 до 9 артериальных кругов для каждого соединения. Полученные результаты сравнивают с результатами 5-мононитрата изосорбида, который используют в качестве эталонного продукта.

Результаты представлены в приведенной ниже табл. 1 и даны в виде СЕ₅₀ (эффективная концентрация 50), которая представляет концентрацию каждого из испытуемых соединений, при которой происходит 50% расширение кровеносных сосудов артериального круга, предварительно сокращенного с помощью 1 мкМ норэпинефрина.

Таблица 1 Испытание на расширение кровеносных сосудов

Соединение	СЕ₅₀, мМ (среднее±СО)
5-Мононитрат изосорбида	0,92±0,2
Продукт, полученный в примере 5(5)	0,95±0,1
Продукт, полученный в примере 1(1)	0,13±0,01

Как можно видеть в таблице, два испытанных соединения обладают сильной сосудорасширяющей активностью, по меньшей мере, сходной с активностью эталонного продукта, а соединение 1 имеет сосудорасширяющую активность, превосходящую активность эталонного продукта.

Пример 9. Анализ толерантности.

Различные испытуемые соединения вводят подкожным способом крысам в дозе 10 мг/кг в течение трех дней, каждые восемь часов, и затем проводят анализ ех νΐνο для испытания способности расширять кровеносные сосуды артериальных сегментов крыс после подкожного введения соединения.

Применяемый способ по существу такой же, как описан в следующих ссылках:

Эе багатШа Ь., е! а1. Еиг. I. РЕагшасо1. 1996; 313:89-96.

КейЕ К. А., е! а1. 3. Рйагшасо1. Ехр. Тйег. 1982; 221:525-531.

Различные соединения испытывают при 5 различных концентрациях в диапазоне концентраций от 0,001 до 10 мМ с использованием от 6 до 9 артериальных кругов для каждого соединения. Полученные результаты сравнивают с результатами 5-мононитрата изосорбида, который используют в качестве эталонного продукта, и с результатами, полученными на животных, которым не вводили никакого соединения.

Полученные результаты, также представлены в виде СЕ₅₀, приводятся в табл. 2.

Таблица 2

Испытание толерантности

Соединение	Животные без какого-либо соединения, вводимого в течение трех дней (группа А). СЕ₅₀, мМ (среднее ± СО)	Животные с соединением, вводимым в течение трех дней (группа В). СЕ₅₀, мМ (среднее ± СО)
5-Мононитрат изосорбида	0,92±0,2	6,5±1,5
Продукт, полученный в примере 5 (5)	0,95±0,1	0,99±0,1
Продукт, полученный в примере 1 (1)	0,13±0,01	0,59±0,1

Должно быть понятно, что соединение проявляет толерантность, когда СЕ₅₀ продукта в сосудистых кольцах животных, которым вводили соединения, как описано выше, превосходит СЕ50 соединения в сосудистых кольцах животных, которым не вводили соединения.

СЕ₅₀ 5-мононитрата изосорбида в группе животных, которым вводили указанное соединение, являются превосходящими в 7 раз по сравнению с СЕ₅₀ необработанных животных.

СЕ₅о группы В ----------------=7 СЕ$о группы А что указывает на сильное проявление толерантности в случае эталонного продукта. В противоположность этому, в случае двух испытуемых соединений 1 и 5, которые составляют часть объекта изобретения, величины СЕ₅₀, полученные для обоих из них, значительно ниже, что указывает на развитие толерантности, более низкой по сравнению с эталонным продуктом. Кроме того, для соединения 5 проявление толерантности практически составляет нуль при указанных условиях испытания.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединения, которые являются производными мононитрата изосорбида и его фармацевтически приемлемых солей, соответствующие следующей общей формуле (I)

4 н в которой А и В, каждый независимо, представляет любую из групп

-ΟΝΟ₂ ;

О где Ζ представляет атом кислорода или атом серы и К представляет С1-С₄-алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, ино гда замещенную, или группу в которой К¹ представляет водород или С₁-С₄алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную;

при условии, что (a) один из А и В всегда представляет -ΟΝΟ2, но никогда оба из них не являются данной группой одновременно;

(b) когда Ζ представляет атом серы, Я представляет С₁-С₄-алкильную группу, арильную группу или аралкильную группу, иногда замещенную; и (c) когда Ζ представляет атом кислорода, Я представляет группу

а.

в которой Я¹ представляет группы, указанные выше.
2. Соединения по п.1, отличающиеся тем, что, когда Ζ представляет атом серы, Я представляет С₁-С₄-алкильную группу с короткой цепью и когда Ζ представляет атом кислорода, Я¹ представляет атом водорода или С₁-С₄алкильную группу с короткой цепью.
3. Соединения по п.1 или 2, отличающиеся тем, что В представляет группу -ΟΝΟ2.
4. Соединение 5-мононитрат 2-(2'-этилтио) никотината изосорбида и его фармацевтически приемлемые соли.
5. Соединение 2-мононитрат 5-(2'-этилтио) никотината изосорбида и его фармацевтически приемлемые соли.
6. Соединение 5-мононитрат 2-(2'меркапто)никотината изосорбида и его фармацевтически приемлемые соли.
7. Соединение 2-мононитрат 5-(2'меркапто)никотината изосорбида и его фармацевтически приемлемые соли.
8. Соединение 5-мононитрат 2-ацетилмеркаптоизосорбида.
9. Применение соединений по любому из пп.1-8 для производства лекарственных средств с сосудорасширяющим действием для лечения дисфункций циркуляторной системы.
10. Применение по п.9 соединений по любому из пп.1-8 для производства лекарственных средств для лечения сердечно-сосудистой и коронарной дисфункций.