EA002419B1 - Антагонисты рецептора витронектина - Google Patents

Антагонисты рецептора витронектина Download PDF

Info

Publication number
EA002419B1
EA002419B1 EA199900356A EA199900356A EA002419B1 EA 002419 B1 EA002419 B1 EA 002419B1 EA 199900356 A EA199900356 A EA 199900356A EA 199900356 A EA199900356 A EA 199900356A EA 002419 B1 EA002419 B1 EA 002419B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
oxo
tetrahydro
benzazepine
acetic acid
propyloxy
Prior art date
Application number
EA199900356A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199900356A1 (ru
Inventor
Джеймс Фрэнсиз Каллахан
Расселл Донован Каузинс
Ричард МакКаллок Кинан
Чет Квон
Вилльям Генри Миллер
Ирен Нийоль Узинкас
Original Assignee
Смитклайн Бичам Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Смитклайн Бичам Корпорейшн filed Critical Смитклайн Бичам Корпорейшн
Publication of EA199900356A1 publication Critical patent/EA199900356A1/ru
Publication of EA002419B1 publication Critical patent/EA002419B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/16—Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Описаны соединения, структура которых включает в себя бензазепиновое ядро и которые являются антагонистами витронектина, способ получения этих соединений, фармацевтические композиции на их основе и применение этих соединений при лечении остеопороза и для ингибирования ангиогенеза.

Description

Настоящее изобретение относится к фармацевтически активным соединениям, которые ингибируют рецептор витронектина и используются для лечения воспаления, рака и сердечно-сосудистых заболеваний, таких как атеросклероз и рестеноз, а также заболеваний, при которых имеет место резорбция кости, таких как остеопороз.
Интегрины представляют собой крупное семейство рецепторов клеточной адгезии, которые относятся к трансмембранным гликопротеинам, проявляющим свою активность на множестве клеток. Указанные рецепторы, необходимые для адгезии клеточных поверхностей, включают дрГ ГЬ/111а (рецептор фибриногена) и ανβ3 (рецептор витронектина). Рецептор фибриногена дрГГЬ/Ша экспрессируется на поверхности тромбоцитов и опосредует агрегацию тромбоцитов и образование кровоостанавливающего сгустка крови на месте кровоточащей раны (РЫПрк, е! а1., В1ооб., 1988, 71, 831). Рецептор витронектина ανβ3 экспрессируется на множестве клеток, включая эндотелиальные клетки, клетки гладких мышц, остеокласты и опухолевые клетки и обладает множеством функций. Рецептор ανβ3, экспрессируемый на мембранах остеокластов, опосредует адгезию остеокластов к костному матриксу, что представляет собой ключевую стадию в процессе резорбции кости (Кокк, е! а1., 1. Βίο1. Сйеш., 1987, 262, 7703). Заболевание, характеризующееся избыточной резорбцией кости, называется остеопорозом. Рецептор ανβ3, экспрессируемый на клетках гладких мышц аорты человека, опосредует их миграцию в неоинтиму, что представляет собой процесс, ведущий к рестенозу после чрескожной коронарной ангиопластики (ΒΐΌ\νπ. е! а1., Сатбюуа8си1ат Кек., 1994, 28, 1815). Кроме того, Брук с соавт. (Вгоокк, е! а1., Се11, 1994, 79, 1157) показали, что антагонист ανβ3 способен вносить вклад в регрессию опухоли за счет индукции апоптоза ангиогенных сосудов крови. Таким образом, средства, которые блокируют рецептор витронектина, могут быть использованы при лечении заболеваний, таких как остеопороз, рестеноз и рак.
В настоящее время известно, что рецептор витронектина представлен тремя различными интегринами, обозначаемыми как ανβι, ανβ3 и ανβ5 (Нойоп, е! а1., Γη!. 1. Ехр. Ра!йо1., 1990, 71, 741). ανβι осуществляет связывание фибронектина и витронектина. ανβ3 осуществляет связывание множества лигандов, включая фибрин, фибриноген, ламинин, тромбоспондин, витронектин, фактор фон Виллебранда, остеопонтин и костный сиалопротеин Г. ανβ5 осуществляет связывание витронектина. Было показано, что рецептор витронектина ανβ5 принимает участие в клеточной адгезии различных типов клеток, включая эндотелиальные клетки микрососудов (Оау1к, е! а1., 1. Се11. Вю1., 1993, 51, 206), кроме того, была подтверждена его роль в ангиогенезе (Вгоокк, е! а1., 8с1епсе, 1994, 264, 569). Этот интегрин экспрессирован на кровеносных сосудах в грануляционной раневой ткани человека, но не обнаружен в нормальной ткани кожи.
Известно, что рецептор витронектина связывается с белками костного матрикса, который содержит трипептидный мотив Агд-С1у-Акр (или КСЭ). Так, Гортон с соавт. (Нойоп, е! а1., Ехр. Се11 Кек., 1991, 195, 368) обнаружили, что КСЭ-содержащие пептиды и антитело к рецептору витронектина (23 С6) ингибируют резорбцию дентина и рассеивание клеток остеокластами. Кроме того, Сато с соавт. (8а!о, е! а1., 1. Се11. Вю1., 1990, 111, 1713) обнаружили, что эхистатин-пептид из змеиного яда, который содержит ΚΟΌ-последовательность, является потенциальным ингибитором резорбции кости в культуре ткани и ингибирует прикрепление остеокластов к костной ткани.
В настоящее время обнаружено, что определенные соединения являются потенциальными ингибиторами рецепторов ανβ3 и ανβ5. В частности, было обнаружено, что такие соединения являются более мощными ингибиторами рецептора витронектина, чем рецептора фибриногена.
Настоящее изобретение включает соединения формулы (Г), определяемой ниже, которые обладают фармакологической активностью, направленной на ингибирование рецептора витронектина, и могут быть использованы для лечения воспаления, рака и сердечнососудистых заболеваний, таких как атеросклероз и рестеноз, а также заболеваний, в патологии которых существенную роль играет резорбция кости, таких как остеопороз.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей соединение формулы (Г) и фармацевтический носитель.
Настоящее изобретение также применяется в лечении заболеваний, в развитии которых участвует рецептор витронектина. В одном конкретном аспекте соединения согласно изобретению используются для лечения атеросклероза, рестеноза, воспаления, рака и заболеваний, связанных с резорбцией кости, таких как остеопороз.
Настоящее изобретение относится к новым соединениям, которые являются более мощными ингибиторами рецептора витронектина, чем рецептора фибриногена. Новые соединения включают бензазепиновое ядро, при этом на ароматическом шестичленном кольце бензазепина содержится азотсодержащий заместитель, и на семичленном кольце бензазепина имеется алифатический заместитель, содержащий кислотную группировку. Считается, что бензазепиновая система колец предпочтительно взаимодействует с рецептором витронектина и ориентирует заместители на боковых цепях шести3 и семичленных колец таким образом, что они могут предпочтительно взаимодействовать с рецептором. Предпочтительно, чтобы было примерно от двенадцати до примерно четырнадцати ковалентных связей на кратчайшем внутримолекулярном расстоянии между кислотной группировкой на алифатическом заместителе семичленного кольца бензазепина и азотом азотсодержащего заместителя в шестичленном ароматическом кольце бензазепина.
Настоящее изобретение включает соединения формулы (I) „ А1
где
К1 означает К7 или
А-Со-4 алкил, А-С2-4 алкенил, А-С2-4 алкинил, А-С3-4 оксоалкенил, А-С3-4 оксоалкинил, А-С1_4 аминоалкил, А-С3-4 аминоалкенил, А-С3=4 аминоалкинил, необязательно замещенные любым приемлемым сочетанием одного или более К10 или К7;
А означает Н, С3-6 циклоалкил, Не! или Аг;
К7 означает -СОК8, -СОСК'2К9, -С(8)К8, -8(О)тОК', -8(О)тИК’К, -РО(ОК'), -РО(ОК')2, -ΝΟ2 или тетразолил;
каждый К8 означает независимо -ОК', -ИК'К, -ИК'8О2К', -ИК'ОК' или -ОСК'2СО(О)К';
К9 означает -ОК', -СИ, -8(О)ГК', -8(О)тИК'2, -С(О)К', С(О)ИК'2 или -СО2К';
К10 означает Н, галоген, -ОК11, -СИ, -ИК'К11-, -ИО2, -СР3, -СР38(О)г-, -СО2К',
-СОИК'2, А-С0-6 алкил-, А-С1-6 оксоалкил-, А-С2-6 алкенил-, А-С2-6 алкинил-, А-С0-6 алкилокси-, А-Со-6 алкиламино- или А-Со-6 алкил
8(О)Г-;
К11 означает К', -С(О)К', -С(О)ИК'2,
-С(О)ОК', -8(О)тК' или -8(О)тИК'2;
К2 означает
означает -(СНКд)а-и-(СНКё)ь-;
и отсутствует или означает СО, СКд2, С(=СКд2), 8(О)к, О, ИКд, СКдОКд, СКд(ОКк)СКд2, СКд2СКд(ОКк), С(О)СКд2, СКд2С(О), СОИК1, ИК*СО, ОС(О), С(О)О, С(8)О, ОС(8), С(8)ИКд, ИКдС(8), 8(О)2ИКд, ИКд8(О)2И=И, ИКдИКд, ИКдСКд2, СКд2ИКд, СКд2О, ОСКд 2, С=С или СКд=СКд;
Θ означает ИКе, 8 или О;
Кд означает Н, С1-6 алкил, Не!-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил или Аг-С0-6 алкил;
Кк означает Кд, -С(О)Кд или -С(О)ОК£;
К1 означает Н, С1-6 алкил, Не!-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил, Аг-С0-6 алкил или С1-6 алкил, замещенный одной-тремя группами, выбранными из галогена, СИ, ИКд2, ОКд, 8Кд, СО2Кд и СО^КёЬ;
К£ означает Н, С1-6 алкил или Аг-С0-6 алкил;
Ке означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил, Не!-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил или (СН2)кСО2Кд;
Кь и Кс выбирают независимо друг от друга из Н, С1-6 алкила, Аг-С0-6 алкила, Не!-С0-6 алкила или С3-6 циклоалкил-С0-6 алкила, галогена, СР3, ОК£, 8(О)кКг, СОК£, ИО2, И(К£)2, СО(ИК£)2, СН2И(К£)2, или Кь и Кс соединяются с образованием пяти- или шестичленного ароматического или неароматического карбоциклического или гетероциклического кольца, необязательно замещенного заместителями в количестве до трех, выбранными из галогена, СР3, С1-4 алкила, ОК£, 8(О)кК£, СОК£, СО2К£, ОН, ИО2, И(К£)2, СО(ИК£)2 £ и СН2И(К)2; или метилендиокси;
Р1, р2, р3 и р4 означают независимо друг от друга И или С-Ку, при условии, что не более одного из р1, р2, р3 и р4 означает И;
К' означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил или С3-6 циклоалкил-С0-6 алкил;
К означает К', -С(О)К' или -С(О)ОК';
К''' означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил, Не!-С0-6 алкил или С3-6 циклоалкил-С0-6 алкил, галоген, СР3, ОК£, 8(О)кК£, СОК£, ИО2, И(К£)2, СО(ИК£)2, СН2И(К£)2;
Ку означает Н, галоген, -ОКд, -8Кд, -СИ, -ИКдКк, -ИО2, -СР3, Ср38(О)г-, -СО2К8, -СОК или -СОИКд2 или С1-6 алкил, необязательно замещенный галогеном, -ОКд, -8Кд, -СИ, -ИКдК'', -ИО2, -СР3, К'8(О)Г-, -СО2Кд, -СОК' или
-СОИКд 2;
а означает 0, 1 или 2;
Ь означает 0, 1 или 2; к означает 0, 1 или 2; т означает 1 или 2; г означает 0, 1 или 2; 8 означает 0, 1 или 2; и означает 0 или 1; и ν означает 0 или 1; или его фармацевтически приемлемую соль.
В рамки настоящего изобретения также включаются фармацевтические аддитивные соли и комплексы соединений согласно изобретению. В тех случаях, когда соединения согласно изобретению имеют один или более хиральных центров, если особо не оговорено, настоящее изобретение включает каждое такое отдельное нерацемическое соединение, которое может быть синтезировано и разрешено традиционными видами техники. В тех случаях, когда соединения имеют ненасыщенные углеродуглеродные двойные связи, как цис (Ζ)-, так и транс (Е)-изомеры входят в область настоящего изобретения. В тех случаях, когда соединения могут существовать в таутомерных формах, таких как кетоенольные таутомеры, такие как
каждая такая таутомерная форма рассматривается в рамках настоящего изобретения, независимо от того, существует она в равновесной форме или закрыта в какой-то одной форме, при соответствующем замещении В'.
Соединения формулы (I) ингибируют связывание витронектина и других Κ.ΟΌсодержащих пептидов с рецептором витронектина. Ингибирование рецептора витронектина на остеокластах приводит к снижению вызванной остеокластами резорбции костной ткани и полезно при лечении заболеваний, в которых патология связана с резорбцией кости, таких как остеопороз и остеоартрит.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения, вызывающего повышение высвобождения остеокальцина, для стимулирования образования кости при лечении остеопороза. Усиленное образование кости представляет собой весомое достоинство в случае таких болезненных состояний, где имеется дефицит минерализованной костной массы или требуется моделирование кости, в случае, например, лечения переломов и предупреждения переломов кости. В случае заболеваний и метаболических расстройств, которые приводят к потере костной структуры, использование такого лечения также может быть полезно. Так, например, при введении соединения согласно изобретению можно добиться улучшения в случае таких заболеваний как гиперпаратиреоз, болезнь Пеже, гиперкальциемия при новообразованиях, остеолитические поражения, возникающие в случае метастазов в костной ткани, разрежение кости, связанное с иммобилизацией или недостатком половых гормонов, болезнь Бехчета, остеомаляция, гиперостоз и остеопетроз.
Кроме того, поскольку соединения согласно изобретению ингибируют рецепторы витронектина на различных типах клеток, указанные соединения могут использоваться при лечении воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит и псориаз, а также сердечнососудистых заболеваний, таких как атеросклероз и рестеноз. Соединения формулы (I) согласно изобретению могут также использоваться при лечении или для профилактики других заболеваний, включающих, но не ограничиваю щихся ими, тромбоэмболические нарушения, астму, аллергию, респираторный дистресссиндром взрослых, реакцию трансплантат против хозяина, реакцию отторжения трансплантата органа, септический шок, экзему, контактный дерматит, воспалительные заболевания кишечника и другие аутоиммунные заболевания. Соединения согласно изобретению могут также использоваться для лечения ран.
Соединения согласно изобретению могут также применяться для лечения, в том числе и профилактики, ангиогенных заболеваний. Термин ангиогенные заболевания в контексте настоящего описания относится к состояниям, которые включают аномальную неоваскуляризацию. В тех случаях, когда возникновение новых кровеносных сосудов является причиной патологии или вносит вклад в развитие заболевания, ингибирование ангиогенеза будет снижать пагубный эффект заболевания. Примером такого заболевания-мишени является диабетическая ретинопатия. В том случае, когда для прогрессирования поражения ткани требуется развитие новых кровеносных сосудов, ингибирование ангиогенеза будет снижать поступление крови к ткани и, таким образом, сказываться на снижении тканевой массы в связи со снижением поступления крови. Такие примеры включают рост опухолей, когда необходима постоянная неоваскуляризация, для того, чтобы опухоль могла расти и обосноваться в виде твердых опухолевых метастазов. Таким образом, соединения согласно изобретению ингибируют ангиогенез опухолевой ткани, внося тем самым вклад в профилактику опухолевых метастазов и роста опухолей.
Таким образом, в соответствии с методами настоящего изобретения, ингибирование ангиогенеза с применением соединений согласно изобретению может облегчать симптомы заболевания и в некоторых случаях может вылечивать заболевание.
Другой терапевтической целью применения соединений согласно изобретению являются глазные заболевания, характеризующиеся наличием неоваскуляризации. Такие глазные заболевания включают неоваскулярные расстройства роговицы, такие как состояние при трансплантации роговицы, герпетический кератит, сифилитический кератит, птеригий и неоваскулярный паннус, связанный с использованием контактных линз. Другие заболевания глаз включают связанную с возрастом макулярную дегенерацию, предположительно глазной гистоплазмоз, возникающий при злоупотреблении линз, ретинопатия недоношенных и неоваскулярная глаукома.
Настоящее изобретение открывает возможности для ингибирования роста опухоли, например, путем постадийного введения соединения формулы (I) или же введения этого соединения в физической комбинации с антине002419 опластическим агентом, таким как топотекан и цисплатина.
В формуле (I) символы имеют следующие значения:
К2 означает (°)и
где р1, О2 и О3 каждый означают СКУ, О'1 означает СКУ или N и и означает О и предпочтительно каждый К' означает Н, К означает Н, С1-6 алкил, -С(О)С1-6 алкил, С(О)ОС1-6 алкил, -С(О)С0-6 алкил-Аг или С(О)ОС0-6 алкил-Аг, означает -СН2-СН2-, и КУ означает Н, галоген, -ОК8, -8К8, -ΟΝ, -ΝΚ8Κ\ -ΝΘ2, -СР3, -СР38(О)Г-, -СО2К8, -СОК8, -СОЧК82 или С1-6 алкил.
Альтернативно К2 означает
где р1, О2 и О3 каждый означают СН и и означает 0 и предпочтительно каждый К' означает Н, К означает Н или С1-4 алкил, означает -СН2СН2- и ν означает 0.
Альтернативно К2 означает
где О означает ΝΗ и Кь и Кс каждый означают Н и предпочтительно означает -ЧК8-(СНК8)Ь-.
2
Альтернативно К означает
где О означает ΝΗ и Кь и Кс соединяются с об разованием пяти- или шестичленного ароматического или неароматического карбоциклического или гетероциклического кольца, необязательно замещенного заместителями в количестве до трех, выбранными из галогена, СР3, С1-4 алкила, ОКГ, 8(О)кКг, СОКГ, СО2КГ, ОН, NО2, ΝΑε СС)(МКг)2 и СН^(КГ)2 или метилендиокси. Предпочтительно Кь и Кс соединяются с образованием шестичленного ароматического карбоциклического или гетероциклического кольца и означает -СН2-СН2-.
2
Альтернативно К означает
Ж. ΝΑ“— СН' — \Ν — Г т где каждый К' означает Н, К означает Н или
С1-4 алкил, К8 означает Н или С1-4 алкил и 8 означает 0, 1 или 2 и предпочтительно означает
-СН2-СН2-.
В формуле (I) К1 означает Н, С1-6 алкил,
Аг-С0-6 алкил, НеРС0-6 алкил, С3-6 циклоалкилС0-6 алкил, -СН2СР3, -(СН2)1-2С(О)ОК' или
-(СН2)2ОК'. Предпочтительно К1 означает Н, С1-4 алкил, Рй-С0-4 алкил, -СН2СР3, -(СН2)1-2С(О)ОК' или -(СН2)2ОК', в котором К' означает Н или С1-4 алкил. Наиболее предпочтительно К1 означает -СН2СР3.
Репрезентативными представителями новых соединений согласно изобретению являются следующие:
(±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусная кислота;
(±)-8-[3-(4-амино-2-пиридиламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-(4-метокси-2-пиридиламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-
2- метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-(2-имидазолиламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-[2-(1,4,5,6-тетрагидропиримидинил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[2-[6-(метиламино)пиридил]этокси]-
3- оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусная кислота;
(±)-8-[2-(2-бензимидазолил)этокси]-3-оксо-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[2-(4-аза-2-бензимидазолил)этокси]3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусная кислота;
(±)-8-[2- [6-(метиламино)пиридин-2-ил] -1 этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[2-(бензимидазол-2-ил)-1-этокси]-3оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусная кислота;
(±)-8-[3-(4-аминопиридин-2-иламино)-1пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3 -(пиримидин-2-иламино)-1 пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота;
(К)-8-[3-(4-аминопиридин-2-иламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-[(1,4,5,6-тетрагидропиримидин-2-ил)амино]-1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота;
(8)-8-[3-(4-аминопиридин-2-иламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3 - [Ν-(пиридин-2-ил)Ж-(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5тетрагидро- 1 Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-[Ν-( 1 -оксоииридин-2-ил)-Ы-(третбутоксикарбонил)амино]-1 -ироиилокси] -3 -оксо-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-[Х-(ииридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1 -ироиилокси] -2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-(ииридин-2-иламино)-1ироиилокси]-2-(4 -трифторметилбензил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-2-метил-3-оксо-8-[3-[Ы-(ииридин-2-ил)Ν-( метил )амино |-1 -ироиилокси]-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-2-бензил-3-оксо-8-[3-(ииридин-2иламино)-1 -ироиило кси]-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н 2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-2-(карбоксиметил)-3-оксо-8-[3(ииридин-2-иламино)-1 -ироиилокси] -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-2-(4-аминобензил)-3-оксо-8-[3-(ииридин-2-иламино)-1-ироиилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(ииридин-2-ил)-№ (бензоил)амино]-1 -ироиилокси] -2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-(2-имидазолин-2-иламино)-1 ироиилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-(ииридин-2-иламино)-1ироиилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[2-(2-аминотиазол-4-ил)-1-этокси]-2метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2-бе нзазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-(4,6-диметилииридин-2 -иламино)1 -ироиилокси]-2 -метил-3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-8-[3-(4,5,6,7-тетрагидро-1Н-1,3-диазеиин-2 -иламино)-1 -ироиило кси] -2 -метил-3 -оксо -
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-[Х-(ииридин-2-ил)-№(третбутилацетил)амино]-1 -ироиилокси]-2 -(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-[Х-(ииридин-2-ил)-Ы-(изобутоксикарбонил)амино]-1 -ироиилокси] -2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазеиин-4-уксусная кислота;
(8)-3-оксо-8-[3-(ииридин-2-иламино)-1ироиилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-(4-метилииридин-2-иламино)-1 -ироиилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(ииридин-2-ил)-№ (метил)амино]-1 -ироиилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазе иин-4-уксусная кислота;
(8)-3-оксо-8-[3-(ииридин-2-иламино)-1ироиилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(К)-3 -оксо-8-[3 -(ииридин-2-иламино)-1 ироиилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(8)-8-[3-(4-метилииридин-2-иламино)-1ироиилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(8)-3-оксо-8-[3-(1,4,5,6-тетрагидроииримид-2-иламино)-1-ироиилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазеиин-4-уксусная кислота;
(8)-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-8-[3-(ииридин2-иламино)-1 -ироиилокси]-2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(8)-8-[2-[6-(метиламино)ииридин-2-ил]-1этокси]-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
(8)-8-[2-[6-(метиламино)ииридин-2-ил]-1этокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота; и (8)-8-[2-[6-(метиламино)ииридин-2-ил]-1этокси]-3 -оксо-2-[4-(трифторметил)бензил] -
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота;
или их фармацевтически ириемлемая соль.
Предиочтительные соединения согласно изобретению включают (8)-3-оксо-8-[3-(ииридин-2-иламино)-1ироиилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусную кислоту;
(8)-8-[2-[6-(метиламино)ииридин-2-ил]-1этокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусную кислоту;
(8)-8-[3-(4-метилииридин-2-иламино)-1ироиилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусную кислоту;
или их фармацевтически ириемлемую соль.
В тех случаях, когда соединения согласно изобретению могут включать один или более хиральных центров, если не оговорено особо, настоящее изобретение включает каждое такое отдельное нерацемическое соединение, которое может быть синтезировано и разрешено с иомощью традиционных технологий. В соответствии с настоящим изобретением иредиочтительна (8)-конфигурация соединений формулы (I).
В тех случаях, когда соединения имеют ненасыщенные углерод-углеродные двойные связи, в рамки настоящего изобретения входят как цис (Ζ)-, так и транс (Е)-изомеры. Значение любого заместителя в любом случае не зависит от его собственного значения или от значений любых других заместителей в любом случае.
В рамки настоящего изобретения также включены пролекарства на основе соединений согласно изобретению. К пролекарствам относят любые ковалентно связанные носители, которые высвобождают активное родительское лекарственное средство, по формуле (I) ΐη νΐνο. Таким образом, в другом своем аспекте настоящее изобретение относится к новым пролекарствам формулы (II), которые являются также промежуточными агентами при изготовлении
соединений формулы (I) о
ΟΟ20ν6&ΙΚγΙ где К1 означает К7 или А-С0_4 алкил, А-С2_4 алкенил, А-С2_4 алкинил, А-Сз_4 оксоалкенил,
А-Сз_4 оксоалкинил, А-С1_4 аминоалкил, А-С3_4 аминоалкенил, А-С3_4 аминоалкинил, необязательно замещенные любым приемлемым сочетанием одного или более К10 или К7;
А означает Н, С3_6 циклоалкил, Не! или Аг;
К7 означает -СОК8, -СОСК'2К9, -С(8)К8, -8(О)тОК', -8(О)т1ЧК'К, -РО(ОК'), -РО(ОК')2, -ΝΟ2 или тетразолил;
β каждый К означает независимо -ОК’, -ΝΚ’Κ”, -ΝΚ’8Ο2Κ’, -ΝΚΌΚ или -ОСК’2СО(О)К;
К9 означает -ОК', -ΟΝ, -8(О)ГК', -8(О)тЬ[К'2, -С(О)К', С(О)ЫК'2 или -СО2К';
К10 означает Н, галоген, -ОК11, -ΟΝ, -ΝΚ'Κ11, -ΝΟ2, -СГз, -СГ38(О)г-, -СО2К', -СО№2, А-Со-6 алкил-, А-С1_6 оксоалкил-, А-С2_6 алкенил-, А-С2_6 алкинил-, А-Со-6 алкилокси-, А-С0_б алкиламино- или А-С0_б алкил-8(О)г-;
К11 означает К, -С(О)К, -Ο(Ο)ΝΚ'2,
-С(О)ОК, -8(О)тК' или -8(О)тИК’2;
К2 означает νν----
(О)и
Ν γ Νπ”“ сп г —
()8\^ΝΗ9 означает -(СНК8)а-и-(СНК8)ь-; и отсутствует или означает СО, СК82, С(=СК82), 8(О)к, О, ΝΚ8, СК8ОК8, СК8(ОКк)СК82, СК82СК8(ОКк), С(О)СК82, СК82С(О), СОЫК1, ΝΡΌΟ, ОС(О), С(О)О, С(8)О, ОС(8), Ο(8)ΝΚ8, ΝΚ8Ο(8),
8(Ο)2ΝΚ8, ΝΚ88(Ο)2Ν=Ν, ΝΚ8ΝΚ8, ΝΚ8ΟΚ82, ΟΚ82ΝΚ8, СК82О, ОСК«2, С=С или СК8=СК8;
О означает ΝΚ6, 8 или О;
Кё означает Η, Ομ6 алкил, Не!-С0_б алкил, С3_7 циклоалкил-Со-6 алкил или Аг-С0_б алкил;
Кк означает К8, -С(О)К8 или -С(О)ОКГ;
К1 означает Η, Ομ6 алкил, Не!-С0_б алкил, С3_7 циклоалкил-Со-6 алкил, Аг-С0_б алкил или С 1_6 алкил, замещенный одной-тремя группами, выбранными из галогена, ΟΝ, ΝΚ82, ОКё, 8Кё, СО2Кё и ΟΟΝ(Κ8)2;
К означает Η, Ομ6 алкил или Аг-С0_б алкил;
Ке означает Η, Ομ6 алкил, Аг-С0_б алкил, Не!-С0_б алкил, С3_7 циклоалкил-С0_б алкил или (СН2)кСО2К8;
Къ и Кс выбирают независимо друг от друга из Η, ϋμ6 алкила, Аг-С0_б алкила, Не!-С0_б алкила или Сз_6 циклоалкил-Со-6 алкила, галогена, СЕ3, ОК£, 8(О)кК£, СОК£, ΝΟ2, Ν(Κ£)2, СО(КК£)2, СН2К(К£)2, или Къ и Кс соединяются друг с другом с образованием пяти- или шестичленного ароматического или неароматического карбоциклического или гетероциклического кольца, необязательно замещенного заместителями в количестве до трех, выбранными из галогена, СЕ3, Εμ4 алкила, ОК£, 8(О)кК£, СОК£, СО2К£, ОН, ΝΟ2, Ν(Κ£)2, ΟΟ(ΝΚ£)2 и ΟΗ2Ν(Κ£)2; или метилендиокси;
(21, (З2, <23 и означают независимо друг от друга N или С-Ку, при условии, что не более одного из ί)1, О2, О3 и означает Ν;
К’ означает Η, Ομ6 алкил, Аг-С0_б алкил или Сз_6 циклоалкил-Со-6 алкил;
К” означает К’, -С(О)К’ или -С(О)ОК’;
К’” означает Η, Ομ6 алкил, Аг-С0_6 алкил, Не!-С0_б алкил или С3_6 циклоалкил-С0_б алкил, галоген, СР3, ОКГ, 8(О)кКг, СОКГ, ΝΟ2, Ν(ΚΓ)2, СО(ЫКГ)2, СН2Ы(КГ)2;
Ку означает Н, галоген, -ОКё, -8Кё, -ΟΝ, -ΝΡ^κΛ, -ΝΟ2, -СГ3, СГ38(О)г-, -СО, К8, -СОК8 или -ΟΟΝΚ82 или С1_б алкил, необязательно замещенный галогеном, -ОК8, -8К8, -ΟΝ, -ΝΚ8Κ, -ΝΟ2, -СГ3, К'8(О)г-, -СО2К8, -СОК8 или
-СОШ8,;
а означает 0, 1 или 2;
Ь означает 0, 1 или 2;
к означает 0, 1 или 2;
ш означает 1 или 2;
г означает 0, 1 или 2;
означает 0, 1 или 2;
и означает 0 или 1; и ν означает 0 или 1;
или его фармацевтически приемлемой соли.
Репрезентативными представителями новых пролекарств согласно изобретению являются следующие метил (±)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат; и этил (±)-8-[3-(4-аминопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетат;
или их фармацевтически приемлемая соль.
Помимо прочего, в настоящем изобретении получено новое промежуточное соединение
В1 означает В7 или А-С0-4 алкил, А-С2-4 алкенил, А-С2-4 алкинил, А-С3-4 оксоалкенил, А-С3-4 оксоалкинил, А-С1-4 аминоалкил, А-С3-4 аминоалкенил, А-С3-4 аминоалкинил, необязательно замещенные любым приемлемым сочетанием одного или более В10 и К7;
А означает Н, С3-6 циклоалкил, Не! или Аг;
К7 означает -СОВ8, -СОСВ'2В9, -С(8)В8, -8(О)тОК', -8(О)тЧВ'В'', -РО(ОВ'), -РО(ОВ')2, -ЧО2 или тетразолил;
каждый В8 означает независимо -ОВ', -ЧВ'В'', -ЧВ'8О2В', -ЧВ'ОВ' или -ОСВ'2СО(О)В';
В9 означает -ОВ', -СЧ, -8(О)ГВ', -8(О)тЧВ'2, -С(О)В', С(О)ЧВ'2 или -СО2В';
В10 означает Н, галоген, -ОВ11, -СЧ, -ЧВ'В11, -ЧО2, -СЕ3, -СРэ8(О)г-, -СО2В', -СОЧВ'2, А-С0-6 алкил-, А-С1-6 оксоалкил-, А-С2-6 алкенил-, А-С2-6 алкинил-, А-С0-6 алкилокси-, А-С0-6 алкиламино- или А-С0-6 алкил-8(О)г-;
В11 означает В', -С(О)В', -С(О)ЧВ'2,
-С(О)ОВ', -8(О)тВ' или -8(О)тЧВ'2;
Ψ означает -(СНВд)а-и-(СНВд)ь-;
и отсутствует или означает СО, СВд2, С(=СВ62), 8(О)к, О, ЧВд, СВ6ОВ6, СВ6(ОВк)СВ62, СВ62СВ6(ОВк), С(О )СВд2, СВд2С(О), СОЧВ‘, ЧВ’СО, ОС(О), С(О)О, С(8)О, ОС(8), С(8)ЧВд, ЧВдС(8), 8(О )2ЧВ6, ЧВ68(О)2Ч=Ч, ЧВ6ЧВ6, ЧВ6СВ6 2, ООЧЮ СВО, ОСЮ, С=С или СВд=СВ9;
Вд означает Н, С1-6 алкил, Не1-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил или Аг-С0-6 алкил;
Вк означает Вд, -С(О)Вд или -С(О)ОВ£;
В1 означает Н, С1-6 алкил, Не!-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил, Аг-С0-6 алкил или С1-6 алкил, замещенный одной-тремя группами, выбранными из галогена, СЧ, ЧВд2, ОВд, 8Вд, СО2Вд и СОЧ(Вд)2;
В£ означает Н, С1-6 алкил или Аг-С0-6 алкил;
Ω1, Ω2, Ω3 и р4 означают независимо друг от друга N или С-Ву, при условии, что не более одного из р1, ^2, р3 и р4 означает Ν;
В' означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил или С3-6 циклоалкил-С0-6 алкил;
В'' означает В', -С(О)В' или -С(О)ОВ';
Ву означает Н, галоген, -ОВд, -8Вд, -СЧ, -ЧВдВк, -ЧО2, -СР3, СР38(О)Г-, -СО2В6, -СОВ6 или -СОЧВд2 или С1-6 алкил, необязательно замещенный галогеном, -ОВд, -8Вд, -СЧ, -ЧВдВ'', -ЧО2, -СГэ, В'8(О)Г-, -СО2Вд, -СОВ’ или
-СОЧВд 2;
а означает 0, 1 или 2;
Ь означает 0, 1 или 2;
т означает 1 или 2; г означает 0, 1 или 2;
или его фармацевтически приемлемой соли.
Для описания соединений согласно изобретению использованы сокращения и символы, обычно применяемые в химии пептидов. В основном аминокислотные сокращения соответствуют принятым в номенклатуре биохимических соединений сокращениям (ШРАС-ШБ .Ιοΐηί Сотт188юи οη ВюсЕет1са1 Чотепс1а!иге) (Еиг. I. ВюсЬет., 158, 9 (1984)).
С1-4 алкил в контексте настоящего описания обозначает необязательно замещенную алкильную группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода и включает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил и т-бутил. С1-6 алкил включает, кроме того, пентил, н-пентил, изопентил, неопентил и гексил и их простые алифатические изомеры. С0-4 алкил и С0-6 алкил указывает, кроме того, что алкильная группа может не присутствовать (т.е. имеется ковалентная связь).
Любой С1-4 алкил или С1-6 алкил, С2-6 алкенил, С2-6 алкинил или С1-6 оксоалкил могут быть необязательно замещены группой Вх, которая может находиться на любом атоме углерода, что приводит к созданию более стабильной структуры, и получение которой достижимо традиционной техникой синтеза. Подходящими группами для Вх являются С1-4 алкил, ОВ', 8В', С1-4 алкилсульфонил, С1-4 алкилсульфоксил, -СЧ, Ч(В')2, СН2Ч(В')2, -ЧО2, -СР3, -СО2В', -СОЧ(В')2, -СОВ', -ЧВ'С(О)В', Е, С1, Вг, I или СР38(О)Г-, где г обозначает 0, 1 или 2.
Галоген означает Е, С1, Вг и I.
Аг, или арил, в контексте настоящего описания означает фенил или нафтил или фенил или нафтил, замещенные заместителями в количестве от одного до трех, такими как были определены выше для алкила, в особенности, С1-4 алкилом, С1-4 алкокси, С1-4 алкилтио, СЕ3, ЧН2, ОН, Е, С1, Вг или I.
Не!, или гетероцикл, указывает на наличие необязательно замещенного пяти- или шестичленного моноциклического кольца или девятиили десятичленного бициклического кольца, содержащего от одного до трех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, которые отличаются стабильностью и могут быть получены традиционным химическим синтезом. Примерами гетероциклов являются бензофурил, бензимидазол, бензопиран, бензотиофен, фуран, имидазол, индолин, морфолин, пиперидин, пиперазин, пиррол, пирролидин, тетрагидропиридин, пиридин, тиазол, тиофен, хинолин, изохинолин и тетра- и пергидрохинолин и изохинолин. В область настоящего изобретения входит также любая приемлемая комбинация заместителей на Не! кольце в количестве до трех, таких как было указано для алкила, получение которых возможно химическим синтезом и которые являются стабильными.
С3-7 циклоалкил относится к необязательно замещенной карбоциклической системе, включающей от трех до семи атомов углерода, которые могут содержать до двух ненасыщенных углерод-углеродных связей. Типичными представителями С3-7 циклоалкила являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил и циклогептил. В область настоящего изобретения входит также любая комбинация заместителей на циклоалкильном кольце в количестве до трех, таких как было указано для алкила, и получение которых возможно традиционным химическим синтезом, и которые являются стабильными.
Если Кь и Кс соединяются друг с другом с образованием пяти- или шестичленного ароматического или неароматического карбоциклического или гетероциклического кольца, слитого с кольцом, к которому присоединены Кь и Кс, то образованное кольцо будет обычно пяти- или шестичленным гетероциклом, выбранным из перечисленных выше примеров для Не!, или это может быть фенильное, циклогексильное или циклопентильное кольцо. Предпочтительно Кь и Кс означают -01=02-03=04, где 01-04 означает независимо СН, N или С-Кх, при условии, что не более чем два из 01-04 означают N. Наиболее предпочтительно, когда Кь и Кс соединяются друг с другом с образованием группы -СН=СНСН=СН-.
В настоящем описании определенные радикалы обозначены в сокращенном виде. !-Ви относится к третичному бутильному радикалу, Вос относится к т-бутилоксикарбонильному радикалу, Ешос относится к флуоренилметоксикарбонильному радикалу, РЕ относится к фенильному радикалу, СЬ/ относится к бензилоксикарбонильному радикалу, Вп относится к бензильному радикалу, Ме относится к метилу, Е! относится к этилу, Ас относится к ацетилу, А1к относится к С1-4 алкилу, Νρΐι относится к 1- или 2-нафтилу и сНех относится к циклогексилу. Те! относится к 5-тетразолилу.
Некоторые реагенты также даны в описании в сокращенном виде. ДЦК означает дициклогексилкарбодиимид, ДМАП означает диметиламинопиридин, ДИЭА означает диизопропилэтиламин, ЭДК означает 1-(3-диметиламинопропил)-3 -этилкарбодиимид, гидрохлорид,
НОВ! означает 1-гидроксибензотриазол, ТГФ означает тетрагидрофуран, ДИЭА означает диизопропилэтиламин, ДЭАД означает диэтилазодикарбоксилат, РРЕ3 означает трифенилфосфин, ДИАД означает диизопропилазодикарбоксилат, ДМЭ означает диметоксиэтан, ДМФ означает диметилформамид, ΝΒ8 означает Νбромсукцинимид, Ρά/С означает катализатор палладия на угле, ПФК означает полифосфорную кислоту, ДФФА означает дифенилфосфорилазид, ВОР означает бензотриазол-1-илокси3-(диметиламино)фосфония гексафторфосфат, ФВ означает фтористо-водородную кислоту, ТЭА означает триэтиламин, ТФУ означает трифторуксусную кислоту, ПХХ означает пиридиния хлорхромат.
Соединения формулы (I) в основном получают при взаимодействии соединения формулы (IV) с соединением формулы (V)
где К1 и К2 определены в формуле (I), при этом осуществляется защита реакционноспособных функциональных групп, и Ь1 означает ОН или галоген;
с последующим удалением любой из защищающих групп и необязательно с образованием фармацевтически приемлемой соли.
При этом некоторые соединения формулы (I) получают при взаимодействии соединения формулы (IV) с соединением формулы (VI)
н1 —-ν' ν-ΟΟ,,Ο^ΙίΑΐ ο- Ι Ν+ ΝΒ“— СП‘г--νν - ОН г %
(IV) (VI)
где К1, К', К'', ^, р1, р2, р3 и р4 определены в формуле (I), при этом осуществляется защита реакционноспособных функциональных групп;
с последующим удалением любой из защищающих групп и необязательно с образованием фармацевтически приемлемой соли.
Предпочтительно в случае соединений формулы (VI) р1, р2, р3 и р4 означают СН, означает -СН2-СН2-, К' означает Н и К'' означает Н, С1-4 алкил или -С(О)ОС1-4 алкил. При этом реакцию между соединением формулы (IV) и соединением формулы (VI) проводят в присутствии диэтилазодикарбоксилата и трифенилфосфина в апротонном растворителе.
Кроме того, некоторые соединения формулы (I) получают при взаимодействии соединения формулы (IV) с соединением формулы (VII)
(IV) (VII) где К1, К', К, \, р1, р2, ^3 и ν определены в формуле (I), при этом осуществляется защита реакционноспособных функциональных групп;
с последующим удалением любой из защищающих групп и необязательно с образованием фармацевтически приемлемой соли.
Предпочтительно в случае соединений формулы (VII) р1, О2 и О3 означают СН, \ означает -СН2-СН2-, ν означает О, К' означает Н и К'' означает Н или С1-4 алкил. При этом реакцию между соединением формулы (IV) с соединением формулы (VII) проводят в присутствии диэтилазодикарбоксилата и трифенилфосфина в апротонном растворителе.
Соединения формулы (I) получают с использованием общих методов, описанных на схемах ΓνΠ.
Схема I
а) 2- [(3 -гидрокси-1 -пропил) амино] пиридин-Х-оксид, ДЭАД, (Рй)3Р, ДМФ; Ь) циклогексен, 10% Ρά/С, 2-пропанол; с) 1,0Ν ЫОН, ТГФ, Н2О, затем проводится подкисление.
Соединение Н1, получение которого проводят с использованием общей процедуры, описанной в работе Бондинелла с соавт. (ВопФпе11, е! а1. (\О 93/00095)), взаимодействует с 2-[(3гидрокси- 1-пропил) амино] пиридин-№-оксидом по механизму реакции сопряжения Митсунобутипа (Огдашс Кеасйопз 1992, 42, 335-656; 8упФеыз 1981, 1-28) с получением Б2. В ходе реакции в качестве промежуточного продукта образуется комплекс между диэтилазодикарбоксилатом и трифенилфосфином, при этом указанная реакция проводится в апротонном растворителе, например, в ТГФ, СН2С12 или ДМФ. ПиридинΝ-оксидная группировка в Б2 восстанавливается до соответствующего пиридина Б3 в условиях гидрогенизационного переноса с использованием платинового катализатора, предпочтительно металлической платины на активированном угле, в инертном растворителе, например, в метаноле, этаноле или 2-пропаноле. Для осуще ствления этого типа реакции в качестве реагентов переноса водорода обычно используют циклогексен, 1,4-циклогексадиен, муравьиную кислоту и соли муравьиной кислоты, такие как формиат калия или формиат аммония. Метиловый эфир Б3 гидролизуют с использованием водного основания, например, ЫОН в водном ТГФ или Να()11 в водном метаноле или этаноле, при этом промежуточную соль карбоксилата подкисляют с помощью подходящей кислоты, например, ТФУ или НС1, с получением карбоновой кислоты Б4. В альтернативном варианте промежуточный продукт в виде соли карбоксилата может быть выделен при желании, или соль карбоксилата свободной карбоновой кислоты может быть получена с помощью методов, хорошо известных в технике.
Соединения формулы (I) могут быть также получены с помощью альтернативных методов, известных в технике. Так, например, эфирная связь в соединениях формулы (I) может быть образована при взаимодействии спиртовой группы соединения формулы 1-(Схема I) с соединением К2, содержащим замещаемую группу, такую как хлор, бром или иод. Могут быть также использованы другие эфирообразующие реакции, применение которых очевидно для специалистов в данной области.
Схема II
а) 2-[№(3-гидрокси-1-пропил)^-(третбутоксикарбонил)амино] пиридин-Ν-оксид,
ДЭАД, (РЬ)3Р, ДМФ; Ь) ЫНМП8, 4трифторметилбензилбромид, ДМФ; с) цикло19 гексен, 10% Ρά/С, 2-пропанол; ά) 1,0Ν ΝαΟΗ, МеОН; е) НС1/диоксан.
Соединение II-1, полученное в соответствии со схемой I, взаимодействует с 2-[Ν-(3гидрокси-1 -пропил)-№-(трет-бутоксикарбонил) амино]пиридин-№-оксидом по механизму реакции сопряжения типа Митсунобу, которая описана подробно на схеме I. Полученный продукт, П-2, может быть алкилирован в положении 2 (нумерация в бензазепине), в стандартных условиях алкилирования, известных каждому специалисту со средним уровнем знаний в данной области. Так, например, П-2 может быть обработан основанием, таким как гидрид натрия, ГОА или гексаметилдисилазид лития, в соответствующем растворителе, обычно в ТГФ, ДМФ, ДМЭ или их смеси, для осуществления депротонирования Ν-Н амида. Обработка полученных анионных видов соответствующим электрофилом, таким как галогенид алкила или бензила, приводит к Ν-алкилированию с получением продукта, например, ΙΙ-3. Ν-оксид ΙΙ-3 может быть восстановлен, как описано на схеме I, с получением П-4, который может быть далее омылен до П-5, как приведено на схеме I. Депротекцию П-5 с получением П-6 проводят в стандартных кислых условиях, в соответствии с описанием, приведенным Грином (Огеепе, РгоЩсбуе Огоирз ш Огдатс 8упШе81з (опубликована ^Пеу-ИЛегзиепсе)). Такие условия хорошо известны каждому специалисту со средним уровнем знаний в данной области. Альтернативно, превращение П-П-3 в П-6 может быть осуществлено за счет изменения последовательности, например, при проведении вначале снятия защитной Вос-группировки в П-3 с последующим восстановлением Ν-оксида и, наконец, при проведении омыления.
а) 2-[(3-гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-№-оксид, ДЭАД, (РГ)3Р, ДМФ; Ь) ЫНМО8, СЩ, ДМФ; с) циклогексен, 10% Ρά/С, 2пропанол; ά) 1,0Ν ΝαΟΗ, МеОН, затем проводится подкисление.
Соединение Ш-2, полученное в соответствии со схемой I, может быть алкилировано одновременно в положении 2 (нумерация в бензазепине) и на атоме азота, присоединенном к пиридиновому кольцу, в стандартных условиях алкилирования, известных каждому специалисту со средним уровнем знаний в данной области. Так, например, Ш-2 может быть обработан, по меньшей мере, двумя молярными эквивалентами основания, такого как гидрид натрия, ЬОЛ или гексаметилдисилазид лития, в подходящем растворителе, обычно в ТГФ, ДМФ, ДМЭ или их смеси, для осуществления депротонирования. Обработка полученных анионных видов избытком соответствующего электрофила, такого как галогенид алкила или бензила, приводит к бис-алкилированию с получением продукта, например, Ш-3. Превращение Ш-3 в Ш-5 осуществляют с применением методов, показанных на схемах I и II.
НС1/диоксан; с) трет-бутилацетилхлорид, Εΐ3Ν, СН2С12; ά) 1,0Ν ΝαΟΗ, МеОН, затем проводится подкисление.
Соединение !У-2, полученное из IV-1, с помощью процедур, указанных на схемах НИ, может быть ацилировано в положении атома азота, присоединенного к пиридиновому кольцу, в стандартных условиях ацилирования, известных каждому специалисту в данной области. Так, например, взаимодействие Γν-2 с ацилирующим агентом, например, с третбутилацетилхлоридом, в присутствии подходящего акцептора кислоты, обычно триэтиламина, диизопропилэтиламина или пиридина, в подходящем растворителе, чаще всего СН2С12, приводит к получению 1У-3. Известно множество других методик, применяемых для ацилирования амина, которые можно найти в стандартных руководствах (таких как Сошрепбшш о£ Огдап1с 8упШебс МеШобз, νοί. 1-У1 (опубликована ^11еу-1п1ег8с1епсе)). Омыление Σν-3, как показано на схемах Σ-ΣΣΣ, дает ΣΥ-4.
Схема V
а) 3-(4-нитробензилоксикарбониламино)-1 пропанол, ДЭАД, (РЬ)зР, ДМФ, С^СЦ; Ь) Н2, Рб/С; ΕΐΟΗ; с) гидроиодид 2-метилтио-2имидазолина, (ι-Ργ)2№Σ, диметилацетамид, 100°С; б) 1,0Ν ΕίΟΗ, ТГФ, Н2О, затем проводится подкисление.
Соединение ν-1, полученное в соответствии со схемой Σ, взаимодействует с защищенным вариантом 3-амино-1-пропанола, таким как З-(трет-бутоксикарбониламино)-1 -пропанол, 3 (бензилоксикарбониламино)-1-пропанол или 3(4-нитробензилоксикарбониламино)-1 -пропанол, по механизму реакции сопряжения типа Митсунобу, которая описана подробно на схеме Σ. Полученный продукт ν-2 подвергают депротекции с получением ν-3. Как хорошо известно каждому специалисту со средним уровнем знаний в данной области, условия депротекции выбирают с учетом функциональной способности и природы защищающих групп, имеющихся на ν-2. Так, например, п-нитро-СЬ/-группу, имеющуюся на ν-2, удаляют гидрогенолизом в присутствии палладиевого катализатора, обычно палладия на угле или Рб(ОН)2 на угле, в соответствующем растворителе, обычно в метаноле, этаноле, этилацетате или их смеси. При желании, гидрогенолиз может быть проведен в присутствии кислоты, например, НС1, для получения соответствующей аммониевой соли ν-2. Взаимодействие ν-3 с гидроиодидом 2-метилтио-2-имидазолина в присутствии основания, например, диизопропилэтиламина в подходящем растворителе, таком как МеОН, ΕΐΟΗ, ДМФ или диметилацетамид, приводит к получению ν-4. Сходные условия для осуществления родственной трансформации описаны в Ж')
95/32710. Омыление с получением ν-5 осуществляют в соответствии с описанием, приведенным на схеме Σ.
Схема νΣ
а) 3 -(трет-бутоксикарбониламино)-1 пропанол, ДЭАД, (РЬ^Р, ДМФ, ТГФ; Ь) ТФУ, СН2С12; с) 2-бромпиримидин, ЫаНСО3, ΕΐΟΗ, кипячение с обратным холодильником; б) Н2, Рб/С, НС1, МеОН; е) К2СО3, Н2О.
Соединение νΣ-3, полученное из νΣ-1 с применением процедуры, обозначенной на схеме ν, вступает в реакцию с 2-галогенпиримидином, обычно 2-хлорпиримидином или 2-бромпиримидином, в присутствии подходящего акцептора кислоты, обычно бикарбоната натрия, триэтиламина, диизопропилэтиламина, или пиридина, в подходящем растворителе, таком как этанол, ДМФ или диметилацетамид, что дает νΣ-4. Пиримидиновое кольцо νΣ-4 восстанавливают до соответствующего 1,4,5,6тетрагидропиримидинового кольца, при использовании условий, которые, как было сообщено, облегчают такую трансформацию (см., например, Ж') 95/32710). Так, νΣ-4 гидрогенизируют в присутствии палладиевого катализатора, предпочтительно палладия на активированном угле, в подходящем растворителе, таком как метанол или этанол. Реакцию обычно проводят в кислых условиях; при этом предпочтительно добавление минеральной кислоты, такой как НС1. νΣ-5 получают после подщелачивания отфильтрованной реакционной смеси с помощью К2СО3 и Н2О.
Схема νΣΣ
-со2сн3
а) ΝαΗ, 4-(трифторметил)бензилбромид,
ДМФ; Ь) Η2, Рб(ОЩ2/С, МеОН.
Соединение νΣΣ-1, полученное с использованием общих процедур, описанных в работе
Бондинелла (Вопбше11, е! а1., РСТ заявка XVО 93/00095, опубликованная 7 января 1993 г., и Вопб1пе11, е! а1., РСТ заявка νθ 94/14776), вступает в реакцию с 4-(трифторметил)бензилбромидом в присутствии подходящего основания, чаще всего гидрида натрия или бис(триметилсилил)амида лития в апротонном растворителе, предпочтительно ДМФ, ТГФ или их смеси, что дает бис-алкилированный продукт νΓΓ-2. 4-(Трифторметил)бензиловый эфир νΓΓ-2 может быть легко удален гидрогенолизом, что дает фенол νΓΓ-3. Методы, применяемые для гидрогенолиза бензиловых эфиров, хорошо известны специалистам в соответствующей области, и они приведены в соответствующих руководствах (например, Сгеепе Рю^с^е Сгоирк ш Огдашс 8уп!йек1к (опубликована \νίΕ\·Гп!егкс1епсе)). Фенол νΓΓ-3 используется затем для получения соединений формулы (Г) с использованием методов, приведенных на предыдущих схемах.
Реагенты связывания амидов в контексте настоящего описания обозначают реагенты, которые могут использоваться для образования пептидных связей. В типичных методах связывания используют карбодиимиды, активированные ангидриды и сложные эфиры и ацилгалогениды. Типичными для таких реакций являются ЭДК, ДЦК, ДФФА, ФФА, реагент ВОР, НОВ!, Ν-гидроксисукцинимид, оксалилхлорид.
Методы связывания для получения пептидных связей хорошо известны в технике. Основные методики пептидного синтеза, приведенные в работе Боданского с соавт. (Вобапкку, е! а1., ТНе ргасбсе о£ рерббе куп!Нек1к, ЗрппдегVе^1ад, Вегйп, 1984, А11 е! а1. ш 1. Меб. СНет., 29, 984 (1986) апб 1. Меб. СНет., 30, 2291 (1987)), хорошо иллюстрируют имеющуюся технику и приведены в настоящем описании в качестве ссылки.
В типичном случае амин или анилин связываются через свободные аминогруппы с субстратом, представляющим собой карбоновую кислоту, с использованием подходящего карбодиимидного связывающего реагента, такого как Ν,Ν'-дициклогексилкарбодиимид (ДЦК), необязательно в присутствии катализатора, такого как 1-гидроксибензотриазол (НОВ!) и диметиламинопиридин (ДМАП). Пригодны также и другие методы, такие как образование активированных сложных эфиров, ангидридов или галогенидов кислоты на основе свободного карбоксила подходящим образом защищенного кислотного субстрата, и с проведением последующей реакции со свободным амином или подходящим образом защищенным амином, необязательно в присутствии основания. Например, защищенную Вос-аминокислоту или СЬх-амидинобензойную кислоту обрабатывают безводным растворителем, таким как метиленхлорид или тетрагидрофуран (ТГФ) в присутствии основания, такого как Ν-метилморфолин, ДМАП или три алкиламин, с изобутилхлорформиатом, с образованием активированного ангидрида, который затем вступает в реакцию со свободным амином или второй защищенной аминокислотой или анилином.
В работе Нестора с соавт. (Ыек!ог, е! а1., 1. Меб. СНет., 1984, 27, 320) раскрываются интермедиаты, применимые для получения соединений формулы (Г), в которой К2 представляет собой бензимидазол. Методы получения бензимидазольных соединений, применимых в качестве интермедиатов согласно изобретению, также известны в технике и могут быть найдены, например, в ЕР-А 0 381 033.
Соли присоединения кислот соединений получают стандартным способом в подходящем растворителе из родительского соединения при наличии избытка кислоты, такой как соляная, бромисто-водородная, фтористо-водородная, серная, фосфорная, уксусная, трифторуксусная, малеиновая, янтарная или метансульфоновая. Некоторые из соединений образуют внутренние соли или цвиттерионы, которые могут быть также приемлемы. Катионные соли получают при обработке родительского соединения избытком щелочного реагента, такого как гидроксид, карбонат или алкоксид, содержащего соответствующий катион; или подходящим органическим амином. Конкретными примерами катионов, присутствующих в фармацевтически приемлемых солях, являются такие катионы, как Ь1+, Ыа+, К+, Са++, Мд++ и XII/.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, которая включает соединение формулы (Г) и фармацевтически приемлемый носитель. При этом соединения формулы (Г) могут быть использованы при производстве лекарственного средства. Фармацевтические композиции соединений формулы (Г), получаемые в соответствии с приведенным описанием, могут быть приготовлены в виде растворов или лиофилизированных порошков для парентерального введения. Порошки могут быть восстановлены при добавлении подходящего разбавителя или другого фармацевтически приемлемого носителя перед употреблением. Жидкая композиция может иметь вид забуференного изотонического водного раствора. Примеры подходящих разбавителей включают нормальный изотонический солевой раствор, стандартную водную 5% декстрозу или буферный раствор ацетата натрия или аммония. Такие композиции особенно приемлемы для парентерального введения, но могут также использоваться для перорального введения или при введении в ингалятор с отмеряемой дозой или использоваться для инсуффляции. Может быть также желательно добавить наполнители, такие как поливинилпирролидон, желатин, гидроксицеллюлоза, аравийская камедь, полиэтиленгликоль, маннит, хлорид натрия или цитрат натрия.
Альтернативно, указанные соединения могут быть инкапсулированы, таблетированы или приготовлены в виде эмульсий или сиропа для перорального введения. Могут быть добавлены фармацевтически приемлемые твердые или жидкие носители для усиления или стабилизации композиции или для облегчения приготовления композиций. Твердые носители включают крахмал, лактозу, дигидрат сульфата кальция, белую землю, стеарат магния или стеариновую кислоту, тальк, пектин, аравийскую камедь, агар или желатин. Жидкие носители включают сироп, арахисовое масло, оливковое масло, солевой раствор и воду. Носитель может также включать материал, способствующий пролонгированному высвобождению, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, один или в сочетании с воском. Количество твердого носителя варьирует, но предпочтительно составляет примерно от 20 мг приблизительно до 1 г на стандартную дозу. Фармацевтические препараты изготавливают с использованием традиционных фармацевтических методик, которые включают размалывание, смешивание, гранулирование и прессование, если необходимо для таблеточных форм; или размалывание, смешивание и наполнение в случае получения твердых желатиновых капсул. При использовании жидкого носителя препарат может иметь вид сиропа, эликсира, эмульсии или водной или неводной суспензии. Такая жидкая композиция может вводиться непосредственно перорально или может использоваться для введения в мягкую желатиновую капсулу.
Для ректального введения соединения согласно изобретению могут быть также объединены с наполнителями, такими, как масло какао, глицерин, желатин или полиэтиленгликоль, и сформированы в виде суппозиториев.
Приведенные в настоящем описании соединения являются антагонистами рецептора витронектина и могут использоваться для лечения заболеваний, в патологии которых имеет значение взаимодействие лиганда или клетки с рецептором витронектина. Так, например, указанные соединения могут применяться для лечения заболеваний, патологическую картину которых создает потеря костного матрикса. Так, соединения согласно изобретению могут использоваться для лечения остеопороза, гипертиреоидита, болезни Пеже, гиперкальциемии при злокачественных новообразованиях, остеолитических поражениях, возникающих при метастазах кости, разрежении кости, связанной с иммобилизацией или недостатком половых гормонов. Как полагают, соединения согласно изобретению могут также найти применение в качестве противоопухолевого, антиангиогенного, противовоспалительного и антиметастатического средства, а также могут использоваться для лечения атеросклероза и рестеноза.
Соединение вводится пациенту либо перорально, либо парентерально, и таким способом, чтобы концентрация лекарственного средства была достаточна для ингибирования резорбции костной ткани или снимала иные такие показания. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение, вводится в пероральной дозе примерно от 0,1 до приблизительно 50 мг/кг, способом, соответствующим состоянию пациента. Предпочтительно пероральная доза составляет примерно от 0,5 до приблизительно 20 мг/кг. В случае лечения острых состояний предпочтительно парентеральное введение. При этом наиболее эффективна внутривенная инфузия пептида в 5% декстрозе в воде или в физиологическом растворе или аналогичная композиция, включающая подходящие наполнители, однако, инъекция внутримышечного болюса также применима. В типичном случае парентеральная доза составляет примерно от 0,01 до приблизительно 100 мг/кг и предпочтительно находится в интервале от 0,1 до 20 мг/кг. Соединение вводится от одного до четырех раз в день в количестве, достаточном для достижения общей дневной дозы примерно от 0,4 до приблизительно 400 мг/кг день. Точный уровень и способ введения соединений может быть легко определен любым специалистом в данной области при сравнении уровня данного средства в крови с концентрацией, необходимой для достижения терапевтического эффекта.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к способу лечения остеопороза или ингибирования резорбции кости, который включает введение, постадийное или в физической комбинации, соединения формулы (I) и других ингибиторов резорбции кости, таких как бифосфонаты (например, алендронат), средства, применяемые при гормонозамещающей терапии, антиэстрогены или кальцитонин. Кроме того, настоящее изобретение относится к методу лечения, использующему соединения согласно изобретению и анаболический агент, такой как морфогенный костный белок, ипрофлавон, используемый для предотвращения резорбции кости и/или для увеличения массы костной ткани.
Настоящее изобретение относится также к способу ингибирования роста опухоли, включающему введение, постадийное или в виде физической комбинации, соединения формулы (I) и антинеопластического агента. Соединения из класса аналогов камптотецина, такие как топотекан, иринотекан и 9-аминокамптотецин, а также координационные комплексы платины, такие как цисплатина, ормаплатина и тетраплатина, относятся к хорошо известным группам антинеопластических средств. Соединения из класса аналогов камптотецина описаны в патентах США №№ 5004758, 4604463, 4473692, 4545880, 4342776, 4513138, 4399276 и в публикациях заявок на европейский патент №№
0418099 и 0088642, (№аш, е! а1., 1. Меб. Сйет., 1986, 29, 2358, \\аш е! а1., 1. Меб. Сйет., 1980, 23, 554, Уаш е! а1., ЙМеб.Сйет., 1987, 30, 1774 апб Ий1а, е! а1., Ргос. 14'1' 1п!егпа!. Сопдг. Сйето!йегару., 1985, Апйсапсег 8ес1юп I, 28), полное раскрытие указанных документов приводится в настоящем описании в качестве ссылки. Координационный комплекс платины, цисплатина, доступен под названием Платинол® от корпорации Вп5Ю1 Муег5-8с.|шЬЬ Согрогабоп. Композиция цисплатины, обладающая полезными свойствами, описана в патентах США №№ 5562925 и 4310515, полное раскрытие каждого из которых приведено в настоящем описании в качестве ссылки.
При использовании метода, ингибирующего рост опухоли, который включает введение, постадийное или в физической комбинации, соединения формулы (I) и антинеопластического агента, координационное соединение платины, например, цисплатина, может вводиться с помощью медленной внутривенной инфузии. Предпочтительным носителем в этом случае является декстроза/солевой раствор, содержащий маннит. Режим дозирования координационного соединения платины может составлять от примерно 1 до примерно 500 мг на квадратный метр (мг/м2) площади поверхности тела на курс лечения. Инфузии координационного соединения платины могут проводиться от одного до двух раз в неделю, а еженедельный курс лечения может быть повторен несколько раз. В использовании соединения из класса аналогов камптотецина для парентерального введения в курсе терапии обычно применяют примерно от 0,1 примерно до 300,0 мг/м2 на площадь поверхности тела в день в течение примерно пяти последовательных дней. Наиболее предпочтительно, чтобы при использовании в курсе лечения топотекана доза составляла примерно от 1,0 до примерно 2,0 мг/м2 на площадь поверхности тела в день в течение пяти последовательных дней. Предпочтительно повторение курса терапии, по меньшей мере, один раз с интервалом примерно от 7 до примерно 28 дней.
Фармацевтическая композиция может быть приготовлена при включении как соединения формулы (I), так и антинеопластического средства в один и тот же контейнер, однако, предпочтительно фасовать их в разные контейнеры. В том случае, когда оба средства имеют вид раствора, они могут входить в систему инфузии/инъекции для одновременного введения или для использования в режиме тандема.
Для удобства введения соединения формулы (I) и антинеопластического средства, в одно и то же или в разное время, готовят набор, включающий в одном контейнере, таком как бокс, картонная коробка или другой контейнер, отдельные флаконы, пакеты, ампулы или другие контейнеры, каждый из которых содержит эффективное количество соединений формулы (I) для парентерального введения в соответствии с приведенным описанием, а также эффективное количество антинеопластического средства для парентерального введения, как описано выше. Такой набор может включать в себя, например, как фармацевтические средства в отдельных контейнерах или в одном и том же контейнере, необязательно в виде лиофилизированного материала, так и контейнеры, содержащие растворы для восстановления. Один из вариантов такого набора может включать в себя раствор для восстановления и лиофилизированный материал в двух камерах одного и того же контейнера, в котором можно создать условия для перемешивания перед употреблением. При использовании такого режима антинеопластический агент и соединение согласно изобретению могут быть расфасованы отдельно в виде двух контейнеров или лиофилизированы вместе и в виде порошка введены в один контейнер.
Если оба средства имеют вид раствора, они могут входить в состав системы для инфузий/инъекций для одновременного введения или для введения в режиме тандема. Так, например, соединение формулы (I) может находиться в форме, пригодной для внутривенного введения, или в виде баллонов для инфузий, связанных в систему с помощью трубок, при наличии антинеопластического агента во втором баллоне для инфузий. При использовании такой системы пациент может получать начальную инъекцию в виде болюса или инфузию соединения формулы (I) с последующей инфузией антинеопластического агента.
С целью определения концентрации соединения, которая необходима для создания нужного фармакологического эффекта, соединения могут тестироваться с использованием одного из нескольких биологических методов исследования.
Ингибирование связывания витронектина
Твердофазное связывание [3Н]-8К&Е107260 с ανβ3:ανβ3 из плаценты человека или из тромбоцитов человека (0,1-0,3 мг/мл) в буфере Т (содержащем 5 мМ СаС12 и 1% октилглюкозида) разбавляют буфером Т, содержащим 1 мМ СаС12, 1 мМ МпС12, 1 мМ МдС12 (буфер А) и 0,05% Ν3Ν3. и затем сразу вносят в полученную смесь на 96-гнездные пластинки для ИФТФА (Сотшпд, Иете Уогк, ИУ) по 0,1 мл на каждую ячейку. К каждой ячейке добавляют 0,1-0,2 мкг ανβ3. Пластинки инкубируют в течение ночи при 4°С. Ячейки промывают один раз буфером А и инкубируют с 0,1 мл 3,5% бычьего сывороточного альбумина в том же буфере в течение 1 ч при комнатной температуре. После инкубации содержимое ячеек полностью отсасывают и промывают с помощью 0,2 мл буфера А.
Соединение растворяют в 100% ДМСО с получением 2 мМ основного раствора, который разбавляют буфером для связывания (15 мМ
Трис-НС1 (рН 7,4), 100 мМ ЫаС1, 1 мМ СаС12, 1 мМ МпС12, 1 мМ МдС12) до конечной концентрации соединения 100 мкМ. Указанный раствор затем разбавляют до нужной концентрации соединения. К ячейкам в тройном повторе добавляют различные концентрации немеченных антагонистов (0,001-100 мкМ) и затем добавляют 5,0 нМ [ЗН]-8К&Е-107260 (65-86 Кюри/ммоль).
Пластинки инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре. После инкубации содержимое ячеек полностью отсасывают и промывают один раз 0,2 мл охлажденного на льду буфера А. Рецепторы солюбилизируют с помощью 0,1 мл 1% ДСН, и количество связанного [3Н]-8К&Е-107260 определяют при добавлении 3 мл Реабу 8аТе методом счета в жидком сцинтилляторе в сцинтилляционном счетчике Весктап Ь8 с 40% эффективностью. Неспецифическое связывание [3Н]-8К&Р-107260 определяют в присутствии 2 мкМ 8К&Р-107260, которое постоянно составляло менее 1% от общего уровня меченого лиганда. Значение ИК50 (которое представляет собой концентрацию антагониста, ингибирующую на 50% связывание [3Н]8К&Р-107260) определяют с помощью нелинейной программы наименьших квадратов, которая представляет собой модификацию программы ΕυΝ-ΌΟΝ-2. Значение К1 (константы диссоциации антагониста) вычисляют по уравнению: К1=ИК50/(1+Е/Кб), где Ь и К,| представляют собой, соответственно, концентрацию и константу диссоциации [3Н]-8К&Е-107260.
Соединения согласно изобретению ингибируют связывание витронектина с 8К&Е107260 в диапазоне концентраций примерно от 4,0 примерно до 0,0003 микромолей.
Соединения согласно изобретению также исследовали ίη νίίτο и ίη νίνο с целью определения их влияния на резорбцию кости с использованием имеющихся стандартных тестов для оценки ингибирования костеобразования, таких как тест на образование вдавления, раскрытый в ЕР 528587, который может быть проведен с использованием вместо остеокластов человека остеокластов крыс на модели овариэктомированных крыс, описанной Вронским с соавт. (ЛУгощкг е1 а1., Се1к апб Ма1епаК 1991, 8ир.1, 69-74).
Тест на основе оценки миграции клеток гладких мышц сосудов
Используют клетки гладких мышц аорты крысы или человека. Клеточную миграцию отслеживают в камере для культуры клеток Тгап8^е11 с использованием поликарбонатной мембраны с размером пор 8 мкМ (Сойаг). Нижнюю часть поверхности покрывают витронектином. Клетки, которые были предварительно обработаны исследуемым соединением в различных концентрациях в течение 20 мин при 20°С, суспендируют в концентрации 2,5- 5,0 х 106 клеток/мл в среде ΌΜΕΜ, в которую добавлено
0,2% бычьего сывороточного альбумина. В качестве контроля используют только растворитель. 0,2 мл клеточной суспензии помещают в верхний отсек камеры. Нижний отсек содержит 0,6 мл среды ΌΜΕΜ с добавлением 0,2% бычьего сывороточного альбумина. Инкубацию проводят при 37°С в атмосфере 95% воздуха/5% СО2 в течение 24 ч. После окончания инкубации оставшиеся на верхней поверхности фильтра не мигрировавшие клетки удаляют осторожным соскабливанием. Затем фильтр фиксируют в метаноле и окрашивают 10% красителем Гимза. Миграцию определяют либо путем а) подсчета количества клеток, которые мигрировали на нижнюю поверхность фильтра, либо Ь) при экстракции окрашенных клеток 10% уксусной кислотой с последующим определением поглощения при 600 нМ.
Модель с использованием крыс без щитовидной и паращитовидной желез
Каждая экспериментальная группа включает 5-6 взрослых самцов крыс линии 8ргадиеОа\\!еу (с весом тела 250-400 г). У всех крыс были удалены щитовидная и паращитовидная железы (фирмой-поставщиком Тасошс Еагтк) за 7 дней до эксперимента. Все крысы получали замещающую дозу тироксина каждые 3 дня. В цельной крови был определен уровень ионизированного кальция сразу же после отбора крови из хвостовой вены в пробирки с гепарином. Крыс включали в экспериментальную группу, если уровень ионизированного кальция (измеренного на анализаторе ОЬа-С’огшпд тобе1 634 са1с1ит рН апа1ухег) был <1,2 мМ/л. Каждой крысе был введен постоянный венозный и артериальный катетер для доставки исследуемого материала и для отбора образцов крови, соответственно. Затем крыс переводят на бескальциевую диету и деионизированную воду. Измеряют базовый уровень кальция, и каждой крысе вводят либо контрольный носитель, либо 1-34 пептид гормона паращитовидной железы человека (11РТН1-34 в дозе 1,25 мкг/кг/ч в физрастворе/0,1% бычьего сывороточного альбумина, Васйет, Са) или смесь ПРТН1-34 и исследуемого материала путем постоянной внутривенной инфузии через венозный катетер с использованием внешнего шприцевого насоса. Реакцию каждой крысы на изменение уровня кальция в крови измеряют с двухчасовыми интервалами в течение периода инфузии, составляющего 6-8 ч.
Метод определения резорбции остеокластов человека и тест на наличие адгезии
Был разработан метод определения резорбции по развитию вдавления и тест на наличие адгезии, которые затем были стандартизованы с использованием нормальных остеокластов человека, полученных из ткани остеокластомы. Метод 1 был разработан для измерения величины вдавления остеокластов с применением лазерной конфокальной микроскопии. Метод 2 был разработан как более совершенный скри31 нинг, в ходе которого уровень коллагеновых фрагментов (высвобождающихся при резорбции), измеряют с помощью конкурентного метода ЕЫ8А.
Метод определения 1 (с использованием лазерной конфокальной микроскопии)
Аликвоты клеточных суспензий из остеокластомы человека вынимают из жидкого азота, где они хранились, быстро нагревают до 37°С и промывают один раз средой ΕΡΜΕ 1640 при центрифугировании (100 об./мин, 5 мин при 4°С).
Среду отсасывают и замещают ее мышиным антителом к НЬА-ЭК и затем разбавляют в соотношении 1:3 средой КРМЕ1640. Суспензию инкубируют в течение 30 мин на льду и часто перемешивают.
Клетки промывают два раза холодной средой ΕΡΜΕ 1640 с последующим центрифугированием (1000 об./мин, 5 мин при 4°С), и затем клетки переносят в стерильную 15 мл центрифужную пробирку. Количество моноядерных клеток подсчитывают в усовершенствованной камере для счета Нейбауэра.
Вынимают из флакона достаточное количество хранящихся в нем магнитных шариков (5/моноядерную клетку), которые покрыты антителами козы против ЦС мыши (Эупак Стеа! №ск. ΝΥ) и помещают их в 5 мл свежей среды (которая смывает с них токсичный консервант азид). Среду удаляют, иммобилизуя шарики на магните, и замещают ее свежей средой.
Шарики перемешивают с клетками и суспензию инкубируют в течение 30 мин на льду. Суспензию часто перемешивают.
Клетки, покрытые шариками, иммобилизуют на магните и оставшиеся клетки (фракцию, обогащенную остеокластами) декантируют в стерильную 50 мл центрифужную пробирку.
К клеткам, покрытым шариками, добавляют свежую среду для удаления захваченных остеокластов. Указанный процесс промывки повторяют 10 раз. Клетки, покрытые шариками, отбрасывают.
Количество жизнеспособных остеокластов подсчитывают в счетной камере с использованием флуоресцеиндиацетата для мечения живых клеток. Для внесения образца в камеру используют крупнокалиберную одноразовую пластиковую пастеровскую пипетку.
Остеокласты собирают центрифугированием и плотность их доводят до нужного уровня средой ЕМЕМ (количество остеокластов варьирует от опухоли к опухоли), в которую добавлено 10% околоплодной сыворотки теленка и 1,7 г/л бикарбоната натрия.
Аликвоты клеточной суспензии по 3 мл (на тестирование 1 соединения) декантируют в 15 мл центрифужную пробирку. Клетки собирают центрифугированием.
К каждой пробирке добавляют 3 мл соответствующего исследуемого соединения (разбавленного до 50 мкМ средой ЕМЕМ). В эксперимент включаются также контроли на носитель, положительный контроль (мышиное моноклональное антитело к рецептору витронектина [87МЕМ1], разбавленной до 100 мкг/мл) и изотипный контроль (!дС2а, разбавленный до 100 мкг/мл). Образцы инкубируют при 37°С в течение 30 мин.
Аликвоты по 0,5 мл клеток высевают на стерильные срезы дентина в 48-луночном планшете и инкубируют при 37°С в течение 2 ч. Каждую обработку проводят в четырехкратном повторе.
Срезы промывают теплым РВ8, меняя его 6 раз (10 мл/лунку в 6-луночном планшете) и затем помещают в свежую среду, содержащую обрабатываемое соединение или контрольные образцы. Образцы инкубируют при 37°С в течение 48 ч.
Процедура, основанная на определении устойчивости кислой фосфатазы к тартрату (ТКАР) (селективное окрашивание клеток остеокластной линии)
Срезы костей, содержащие прикрепленные остеокласты, промывают фосфатно-буферным раствором и фиксируют в 3% глютеральдегиде (в 0,2 М какодилате натрия) в течение 5 мин.
Затем их промывают в воде и инкубируют 4 мин в ТКАР-буфере при 37°С (0,5 мг/мл нафтол А8-В! фосфата растворяют в Νдиметилформамиде и смешивают с 0,25 М цитратным буфером (рН 4,5), содержащим 10 мМ тартрата натрия).
После промывки в холодной воде срезы погружают в холодный ацетатный буфер (0,1 М, рН 6,2), содержащий 1 мг/мл фаст ред гарнета и инкубируют при 4°С в течение 4 мин.
Отсасывают избыток буфера, и срезы высушивают на воздухе с последующей промывкой в воде.
Количество ТКАР-положительных остеокластов (кирпично-красный/фиолетовый осадок) подсчитывают в освещенном поле микроскопа и затем удаляют с поверхности дентина озвучиванием. Объем вдавления определяют с использованием конфокального микроскопа №коп/Еахег1ес ШМ21\.
Метод определения 2 (с использованием ЕЫ8А)
Фракцию остеокластов человека обогащают и подготавливают к скринингу соединений, как описано на начальных девяти стадиях метода определения 1. Для ясности эти стадии ниже повторены.
Аликвоты клеточных суспензий из остеокластомы человека вынимают из жидкого азота, где они хранились, быстро нагревают до 37°С и промывают один раз средой ΡΡΜΕ1640 при центрифугировании (100 об./мин, 5 мин при 4°С).
Среду отсасывают и замещают ее мышиным антителом к НЬА-ЭК и затем разбавляют в соотношении 1:3 средой КРМ1-1640. Суспензию инкубируют в течение 30 мин на льду и часто перемешивают.
Клетки промывают два раза холодной средой КРМ1-1640 с последующим центрифугированием (1000 об./мин, 5 мин при 4°С), и затем клетки переносят в стерильную 15 мл центрифужную пробирку.
Количество моноядерных клеток подсчитывают в усовершенствованной камере Нейбауэра.
Вынимают из флакона достаточное количество хранящихся в нем магнитных шариков (5/моноядерную клетку), которые покрыты козьими антителами против 1дС мыши (Эупа1. Сгеа! №ск, ΝΥ) и помещают их в 5 мл свежей среды (которая смывает с них токсичный консервант азид). Среду удаляют, иммобилизуя шарики на магните, и замещают ее свежей средой.
Шарики перемешивают с клетками, и суспензию инкубируют в течение 30 мин на льду. Суспензию часто перемешивают.
Клетки, покрытые шариками, иммобилизуют на магните, и оставшиеся клетки (фракцию, обогащенную остеокластами) декантируют в стерильную 50 мл центрифужную пробирку.
К клеткам, покрытым шариками, добавляют свежую среду для удаления захваченных остеокластов. Указанный процесс промывки повторяют 10 раз. Клетки, покрытые шариками, отбрасывают.
Количество жизнеспособных остеокластов подсчитывают в счетной камере с использованием флуоресцеиндиацетата для мечения живых клеток. Для внесения образца в камеру используют крупнокалиберную одноразовую пластиковую пастеровскую пипетку.
Остеокласты собирают центрифугированием, и плотность их доводят до нужного уровня средой ЕМЕМ (количество остеокластов варьирует от опухоли к опухоли), в которую добавлено 10% околоплодной сыворотки теленка и 1,7 г/л бикарбоната натрия.
В отличие от метода определения 1, скрининг соединений проводят в 4 дозах для получения значений ИК50, в соответствии с приведенным ниже описанием.
Препараты остеокластов преинкубируют в течение 30 мин при 37°С с исследуемым соединением (4 дозы) или с контролями.
Затем их высевают на кортикальные срезы бычьей кости в лунки 48-луночного планшета для культуры тканей и инкубируют еще в течение 2 ч при 37°С.
Костные срезы промывают теплым забуференным фосфатом физраствором (РВ8), проводя шесть раз его замену для удаления не прилипших клеток, и затем возвращают их в лунки
48-луночного планшета, содержащие свежие соединения или контроли.
Планшет для культуры ткани инкубируют затем в течение 48 ч при 37°С.
Из каждой лунки отсасывают супернатанты в отдельные пробирки и проводят скрининг методом конкурентного ЕШЗА, что позволяет обнаружить с-телопептид коллагена типа I, который высвобождается в ходе процесса резорбции. Для определения используют коммерчески доступный набор для ЕЬ18Л (О§1еоте1ег, Дания), содержащий антитело кролика, которое специфически реагирует с последовательностью из 8 аминокислот (С1и-Еу8-А1а-Н18-А8р-С1у-С1уАгд), присутствующей на карбокси-конце телопептида а1-цепи коллагена типа I. Полученные результаты выражают в виде процента ингибирования резорбции в сравнении с контролем, содержащим носитель.
Метод определения адгезии остеокластов человека
Обогащенную фракцию остеокластов человека подготавливают для скрининга соединений, как описано выше на начальных девяти стадиях метода исследования 1. Для ясности указанные стадии повторены ниже.
Аликвоты клеточных суспензий из остеокластомы человека вынимают из жидкого азота, где они хранились, быстро нагревают до 37°С и промывают один раз средой КРМЕ1640 при центрифугировании (100 об./мин, 5 мин при 4°С).
Среду отсасывают и замещают ее мышиным антителом к НЬА-ЭК и затем разбавляют в соотношении 1:3 средой КРМЫ640. Суспензию инкубируют в течение 30 мин на льду и часто перемешивают.
Клетки промывают два раза холодной средой КРМЫ640 с последующим центрифугированием (1000 об./мин, 5 мин при 4°С), и затем клетки переносят в стерильную 15 мл центрифужную пробирку.
Количество моноядерных клеток подсчитывают в усовершенствованной камере Нейбауэра для счета клеток.
Вынимают из флакона достаточное количество хранящихся в нем магнитных шариков (5/моноядерную клетку), которые покрыты козьими антителами против !§С мыши (Оуиа1, Стеа! №ск, ΝΥ) и помещают их в 5 мл свежей среды (которая смывает с них токсичный консервант азид). Среду удаляют, иммобилизуя шарики на магните, и замещают ее свежей средой.
Шарики перемешивают с клетками, и суспензию инкубируют в течение 30 мин на льду. Суспензию часто перемешивают.
Клетки, покрытые шариками, иммобилизуют на магните и оставшиеся клетки (фракцию, обогащенную остеокластами) декантируют в стерильную 50 мл центрифужную пробирку.
К клеткам, покрытым шариками, добавляют свежую среду для удаления каких-либо захваченных остеокластов. Указанный процесс промывки повторяют 10 раз. Клетки, покрытые шариками, отбрасывают.
Количество жизнеспособных остеокластов подсчитывают в счетной камере с использованием флуоресцеиндиацетата для мечения живых клеток. Для внесения образца в камеру используют крупнокалиберную одноразовую пластиковую пастеровскую пипетку.
Остеокласты собирают центрифугированием и плотность их доводят до нужного уровня средой ЕМЕМ (количество остеокластов варьирует от опухоли к опухоли), в которую добавлено 10% околоплодной сыворотки теленка и 1,7 г/л бикарбоната натрия.
В отличие от метода определения 1, скрининг соединений проводят в 4 дозах для получения значений ИК50, в соответствии с приведенным ниже описанием.
Остеокласты, происходящие из остеокластомы, преинкубируют с соединением (4 дозы) или с контролями при 37°С в течение 30 мин.
Затем клетки высевают на срезы, покрытые остепонтином (остеопонтин человека или крысы, 2,5 мкг/мл) инкубируют в течение 2 ч при 37°С.
Не прилипшие клетки удаляют энергичным промыванием срезов в фосфатно-буферном растворе и оставшиеся на срезах клетки фиксируют в ацетоне.
Остеокласты окрашивают для определения кислой фосфатазы, устойчивой к тартрату (ТКАР), который представляет собой селективный маркер клеток указанного фенотипа (см. стадии 15-17), и количество их подсчитывают в световом микроскопе. Полученные результаты выражают в виде процента ингибирования адгезии в сравнении с контролем, содержащим носитель.
Метод определения адгезии клеток Клетки и клеточные культуры
Эмбриональные клетки почки человека (клетки НЕК 293) получают из АТСС (каталожный номер СКЕ 1573). Клетки выращивают на минимальной среде Эрла (ЕМЕМ), содержащей соли Эрла, 10% околоплодной сыворотки теленка, 1% глютамина и 1% пенициллинастрептомицина.
Конструкции и трансфекции
ЕсоК1-Кри1-фрагмент субъединицы α, размером 3,2 т.п.н. и ХЬа1-Хйо1-фрагмент субъединицы β3 размером 2,4 т.п.н. вставляют в ЕсоК1-ЕсоКУ клонируемые сайты ρί'ΌΝ вектора (А1уаг с1 а1., 1994), который содержит промотор СМУ и селективный маркер 6418, отслеживаемый по лигированию тупых концов. Для стабильной экспрессии 80 х 106 НЕК 293 клеток подвергают электротрансформации с использованием конструкций αν+β3 (20 мкг ДНК каждой субъединицы) с использованием Сепе Рийет (Непк1еу е1 а1., 1994) и помещают на 100 мм пластины (5 х 105 клеток/пластину). Через 48 ч в ростовую среду добавляют 450 мкг/мл генетицина (6418 Би1£а1е, 61ВСО-ВКЕ, ВеШекба, МО). Клетки поддерживают на селективной среде до того момента, пока колонии достаточно вырастут для их исследования.
Иммунохимический анализ трансфицированных клеток
Для того, чтобы определить, экспрессируют ли НЕК 293 трансфектанты рецептор витронектина, клетки иммобилизуют на микроскопическом стекле при центрифугировании, фиксируют в ацетоне в течение 2 мин при комнатной температуре и высушивают на воздухе. Специфичная реакционная способность в отношении моноклонального антитела, специфичного для комплекса α,,β3-23ί’6. была продемонстрирована с использованием стандартного метода непрямой иммунофлюоресценции.
Определение адгезии клеток
На 96-луночный микротитрационный планшет Сотишд для ЕША предварительно вносят на ночь при 4°С по 0,1 мл витронектина человека (0,2 мкг/мл в среде КРМ1). Для эксперимента планшет промывают один раз средой КРМ1 и блокируют 3,5% БСА в среде КРМ1 в течение 1 ч при комнатной температуре. Трансфицированные клетки 293 ресуспендируют в среде КРМ1, в которую добавлены 20 мМ Нерек, рН 7,4 и 0,1% БСА с плотностью 0,5 х 106 клеток/мл. К каждому гнезду добавляют 0,1 мл клеточной суспензии и инкубируют в течение 1 ч при 37°С, в присутствии или в отсутствие различных антагонистов α,,β3. После инкубации добавляют 0,025 мл 10% раствора формальдегида, рН 7,4, и клетки фиксируют при комнатной температуре в течение 10 мин. Планшет промывают 3 раза по 0,2 мл среды КРМ1 и прилипшие клетки окрашивают 0,1 мл 0,5% толуидинового синего в течение 20 мин при комнатной температуре. Избыток красителя удаляют обильным промыванием деионизированной водой. Толуидиновый синий, включенный в клетки, элюируют при добавлении 0,1 мл 50% этанола, содержащего 50 мМ НС1. Уровень клеточной адгезии определяют количественно по оптической плотности при 600 нм на счетчике микротитрационного планшета (Тйейек МиШккап МС, 81ет1шд, УА).
Твердофазный метод определения связывания с αφ5
Рецептор витронектина ανβ5 получают из плаценты человека и очищают. Препарат рецептора разбавляют 50 мМ Трис-НС1, рН 7,5, 100 мМ №С1, 1 мМ СаС12, 1 мМ МпС12, 1 мМ МдС12 (буфер А) и сразу же добавляют к 96-луночному планшету для проведения ЕША по 0,1 мл на каждую лунку. К каждой лунке добавляют 0,10,2 мкг аф3. Плато инкубируют в течение ночи при 4°С. Для эксперимента гнезда промывают один раз буфером А и инкубируют с 0,1 мл 3,5% бычьего сывороточного альбумина в том же буфере в течение 1 ч при комнатной температуре. После инкубации содержимое лунок полностью отсасывают и дважды промывают с помощью 0,2 мл буфера А.
В конкурентном анализе с использованием [3Н]-8К&Е-107260 к лункам добавляют различные концентрации немеченных антагонистов (0,001-100 мкМ), и затем вносят 5,0 нМ [3Н]8К&Е-107260. Планшеты инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре. После инкубации содержимое лунок полностью отсасывают и промывают один раз от ячейки к ячейке с использованием 0,2 мл охлажденного на льду буфера А на каждую ячейку. Рецепторы солюбилизируют добавлением 0,1 мл 1% ДСН, и количество связанного [3Н]-8К&Е-107260 определяют при добавлении 3 мл Кеабу 8 а Ге методом счета в жидком сцинтилляторе в сцинтилляционном счетчике Весктап Ь8 6800 с 40% эффективностью. Неспецифическое связывание [3Н]8К&Е-107260 определяют в присутствии 2 мкМ [3Н]-8К&Е-107260, которое постоянно составляло менее 1% от общего уровня меченого лиганда. Значение ИК50 (которое представляет собой концентрацию антагониста, ингибирующую на 50% связывание [3Н]-8К&Е-107260 определяют с помощью нелинейной программы наименьших квадратов, представляющих собой модификацию программы ΕυΝΏΘΝ-2. Значение К1 (константы диссоциации антагониста) вычисляют по уравнению Ченга-Прусова К1=ИК50/(1+Ь/Кб), где Ь и Кб представляют собой, соответственно, концентрацию и константу диссоциации [3Н]-8К&Е-107260.
Ингибирование опосредованного КСИ связывания СР11Ь-111а Очистка СРПЬ-Ша
Единиц старых промытых тромбоцитов человека (полученных от Красного Креста) лизируют при осторожном перемешивании в среде, содержащей 3% октилглюкозида, 20 мМ Трис-НС1, рН 7,4, 140 мМ №С1, 2 мМ СаС12 при 4°С в течение 2 ч. Лизат центрифугируют при 100000 г в течение 1 ч. Полученный супернатант наносят на 5 мл колонку с лентиллектинсефарозой 4В (Е.У. ЬаЬз), уравновешенной буфером, содержащим 20 мМ Трис-НС1, рН 7,4, 100 мМ №С1, 2 мм СаС12, 1% октилглюкозида (буфер А). После 2 ч инкубации колонку промывают 50 мл холодного буфера А. 6Р11Ь-111а, удержанный лектином, элюируют буфером А, содержащим 10% декстрозы. Все процедуры выполняют при 4°С. Полученный 6Р11Ь-111а характеризуется чистотой >95%, как было показано при анализе гель-электрофорезом в 8Ό8полиакриламиде.
Включение СРПЬ-Ша в липосомы
Смесь фосфатидилсерина (70%) и фосфатидилхолина (30%) (полярные липиды Аванти) высушивают на стенках стеклянной пробирки в потоке азота. Очищенный СР11Ь-111а разбавляют до конечной концентрации 0,5 мг/мл и смешивают с фосфолипидами в соотношении белок: фосфолипид, равным 1:3 (объем:объем). Смесь ресуспендируют и озвучивают в бане для озвучивания в течение 5 мин. Затем смесь диализуют в течение ночи с использованием диализных трубок, рассчитанных на молекулярный вес 12000-14000, против 1000-кратного избытка среды, содержащей 50 мМ Трис-НС1, рН 7,4, 100 мМ №С1, 2 мМ СаС12 (с двумя сменами среды). Липосомы, содержащие СР11Ь-111а, центрифугируют при 12000 г в течение 15 мин и ресуспендируют в диализном буфере с конечной концентрацией белка примерно 1 мг/мл. Липосомы хранят при -70°С до надобности.
Конкурентное связывание с СР11Ь-111а
Связывание рецептора фибриногена (СР11Ь-111а) исследуют с помощью метода непрямого конкурентного связывания с использованием [3Н]-8К&Е-107260 в качестве лиганда ΚΟΌ-типа. Тест на связывание проводят в 96луночных микротитрационных планшетах (М11йроге Согрогабои, ВебГогб, МА) с использованием 0,22 мкм гидрофильных дюрапоровых мембран. Гнезда предварительно покрывают 0,2 мл полилизина в концентрации 10 мкг/мл (8щта Сйет1са1 Со., 8ΐ. Ьоик, МО) при комнатной температуре в течение 1 ч для блокирования неспецифического связывания. Затем к гнездам (в четырехкратном повторе) добавляют различные концентрации немеченных бензазепинов. В каждое гнездо вносят [3Н]-8К&Е-107260 до конечной концентрации 4,5 мМ, и затем добавляют 1 мкг очищенных липосом, содержащих тромбоцитарный СРПЬ-Ша. Смеси инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре. 6Р11Ь-111а, связанный с [3Н]-8К&Е-107260, отделяют от несвязанного многократным фильтрованием через миллипоровые фильтры с последующей промывкой их ледяным буфером (2 раза по 0,2 мл). Оставшаяся на фильтрах связанная радиоактивность подсчитывается с использованием 1,5 мл Кеабу 8о1уе (Весктап 1пкбитепк, Ги11ег1оп, СА) на счетчике Весктап (Модель Ь86800) в сцинтилляционной жидкости с 40% эффективностью. Неспецифическое связывание определяют в присутствии 2 мкМ [3Н]8К&Е-107260, которое постоянно составляло менее 0,14% от общей радиоактивности, добавленной к образцам. Все указанные данные представляют собой среднее арифметическое значение четырех повторных определений.
Данные по конкурентному связыванию анализируют с использованием нелинейного метода наименьших квадратов. Этот метод позволяет получить значение МК50 антагонистов (значение концентрации антагониста, которая ингибирует специфическое связывание [3Н]8К&Е-107260 на 50% в состоянии равновесия). ИК50 сазана с равновесной константой диссоциации (К1) антагониста уравнением ЧенгаПрусова: К1=ИК50/(1+Ь/Кб), где Ь означает концентрацию [3Н]-8К&Е-107260, использованную в тесте на конкурентное связывание (4,5 нМ), и Ка означает константу диссоциации [3Н]-8К&Е107260, которая составляет 4,5 нМ, как было показано при анализе по методу 8са1сйагб.
Предпочтительные соединения согласно изобретению имеют отношение аффинности к рецептору витронектина к аффинности к рецептору фибриногена более чем 10:1. Наиболее предпочтительные соединения имеют коэффициент активности более чем 100:1.
Эффективность соединений формулы (I), самих по себе или в комбинации с антинеопластическим агентом, может быть определена с использованием нескольких моделей трансплантируемых опухолей мышей. Для выяснения деталей указанных моделей см. патенты США № 5004758 и 5633016.
Приведенные ниже примеры никоим образом не ограничивают область настоящего изобретения, а даны лишь для иллюстрации того, как можно получить и использовать соединения согласно изобретению. Многие варианты реализации изобретения будут вполне очевидны для специалистов в данной области.
Примеры Общие замечания
Спектры ядерного магнитного резонанса 1Н (ЯМР) записывают при 250 или 400 МГц. Химические сдвиги обозначают в частях на миллион (б) в сторону слабого поля относительно внутреннего стандарта тетраметилсилана (ТМС). Для записи показаний ЯМР используют следующие обозначения: с. - синглет, д. - дублет, т. - триплет, к. - квартет, м. - мультиплет, дд. - дублет дублетов, дт. - дублет триплетов, оч. - очевидный, ш. - широкий. 1 указывает константу связывания в спектрах ЯМР, измеренную в герцах, СЭСЕ, - обозначает дейтерохлороформ, ДМСО-б6 - обозначает гексадейтеродиметилсульфоксид и СЭзОЭ - обозначает тетрадейтерометанол. Спектр инфракрасных лучей (ИК) записывают методом трансмиссии, положение полосы обозначают в величинах, обратных длинам волн (см-1). Масс-спектры определяют с использованием электронапыления (Ε8) или методом ионизации с применением бомбардировок ускоренными атомами (ЕЛБ). Элементный анализ проводят с использованием собственной методики или по методу ОиапШабге Тес11по1о§1ек Шс., Аййейоике, Ν1. Точки плавления определяют с использованием прибора для определения точек плавления Тйотак-Нооуег и не корректируют. Все значения температур приведены в градусах Цельсия. Для тонкослойной хроматографии используют пластины с тонким слоем силикагеля Лпайесй СЕ и силикагеля Ε. Мегск 60 Е-254. Флэш-хроматографию и гравитационную хроматографию проводят с использованием силикагеля Ε. Мегск К1еке1де1 60 (230400 меш). Аналитическую и препаративную ВЭЖХ проводят с использованием хроматографов Кшшп или Весктап. ΟΌ8 (ОДС) относится к хроматографическому носителю, представляющему собой октадецилсилиловое производное силикагеля. Лрех-ΟΌδ, 5 мкм означает хроматографический носитель на основе октадецилсилилового производного силикагеля, имеющий номинальный размер частиц в 5 мкм, который производится компанией 1опек Сйгота!одгарйу, Ы111е1оп, Со1огабо. УМС ΟΌ8-ΛΟ'®· представляет собой хроматографический носитель на основе ОДС (ΟΌ8), который относится к изделиям с торговой маркой УМС Со. Ыб., Куо1о, 1арап. РКР-1® обозначает полимерный (стиролдивинилбензоловый) хроматографический носитель, который относится к изделиям с торговой маркой НатШоп Со., Кепо, №габа. Се1йе® представляет собой фильтрующее устройство, включающее диатомовый кремнезем, промытый кислотой, который относится к изделиям с торговой маркой МапуШе Согр., Цепуег, Со1огабо.
Способ получения 1. Получение метил (±)8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетата.
a) 4-Бром-3-бромметиланизол.
Смесь 2-бром-5-метокситолуола (20 г, 0,10 моль), Ν-бромсукцинимида (19,6 г, 0,11 моль), перекиси бензоила (1 г, 4 ммоль) и метиленхлорида (200 мл) облучают в течение 18 ч прожектором для создания щадящих условий нагревания с обратным холодильником. Затем смесь охлаждают до -10°С в течение нескольких часов и раствор декантируют от осажденного сукцинимида. Раствор концентрируют и остаток кристаллизуют из хлороформа/гексана с получением целевого соединения (10,7 г, 70%) в виде бледно-желтых призматических кристаллов: 1Н ЯМР (СОС13) δ 7,45 (д., 1=8,9 Гц, 1Н), 6,99 (д., 1=3 Гц, 1Н), 6,74 (дц., 1=8,9, 3 Гц, 1Н), 4,55 (с., 2Н), 3,80 (с., 3Н).
b) 3 -бис(трет-бутоксикарбонил)аминометил-4-броманизол.
Смесь 4-бром-3-бромметиланизола (24 г, 86 ммоль) и ди-трет-бутилиминодикарбоксилата калия (24 г, 94 ммоль) в диметилформамиде (200 мл) перемешивают в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем реакционную смесь концентрируют под вакуумом и остаток распределяют между этилацетатом и водой. Органическую фазу промывают водой и насыщенным солевым раствором, высушивают (Мд8О4) и концентрируют. Остаток повторно кристаллизуют из гексана с получением целевого соединения (15 г, 42%) в виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР (СЭС13) δ 7,40 (д., 1=8,6 Гц, 1Н), 6,68 (м., 2Н), 4,81 (с., 2Н), 3,74 (с., 3Н), 1,44 (с., 18Н).
c) Метил (±)-3-карбометокси-4-[2-бис (трет-бутоксикарбонил)аминометил-4-метоксифенил]-3-бутеноат.
В колбу объемом 500 мл вносят 3бис(трет-бутоксикарбонил)аминометил-4-бром41 анизол (15 г, 36 ммоль), диметилитаконат (7,5 г, 47 ммоль), три-о-толилфосфин (1 г, 3 моль), ацетат палладия (0,4 г, 2 ммоль), диизопропилэтиламин (12,8 мл, 72 ммоль) и пропионитрил (150 мл). Через смесь пропускают аргон (несколько циклов наполнения аргоном/удаления) и затем нагревают ее до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 ч. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры (КТ) и вливают в охлажденный льдом этиловый эфир (500 мл). Полученный осадок удаляют фильтрованием, а фильтрат концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (10-20% этилацетат в гексане) с получением целевого соединения (11,8 г, 66%) в виде бледно-желтого масла: ' Н ЯМР (СПС13) δ 7,94 (с., 1Н), 7,15 (д., 1=8,1 Гц, 1Н), 6,77 (д., 1=8,1 Гц, 1Н), 6,76 (с., 1Н), 4,73 (с., 2Н), 3,81 (с., 3Н), 3,79 (с., 3Н), 3,71 (с., 3Н), 3,38 (с., 2Н), 1,45 (с., 18Н).
6) Метил (±)-3-карбометокси-4-[2-бис (трет-бутоксикарбонил)аминометил-4-метоксифенил]бутаноат.
В колбу под давлением вводят метил (±)-3карбометокси-4-[2-бис(трет-бутоксикарбонил) аминометил-4-метоксифенил]-3-бутеноат (11,8
г), этилацетат (120 мл) и 10% палладий на угле (1 г), перемешивают в течение 18 ч под давлением водорода 45 фунт/кв.дюйм (255101 Па). Затем смесь фильтруют и фильтрат концентрируют с получением целевого соединения (12 г, 100%) в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (СВС13) δ 7,00 (д., 1=8,2 Гц, 1Н), 6,71 (м., 2Н), 4,81 (с., 2Н), 3,75 (с., 3Н), 3,66 (с., 3Н), 3,63 (с., 3Н), 3,05 (м., 2Н), 2,73 (м., 2Н), 2,42 (дд., 1=16,0, 4,8 Гц, 1Н), 1,44 (с., 18Н).
е) Метил (±)-3-карбометокси-4-[2-(аминометил) -4-метоксифенил] бутаноат.
Раствор метил (±)-3-карбометокси-4-[2бис(трет-бутоксикарбонил)аминометил-4метоксифенил]бутаноата (12 г) в хлороформе (100 мл) и трифторуксусной кислоте (50 мл) перемешивают в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем раствор концентрируют под вакуумом с получением целевого соединения (10 г, 100%) в виде вязкого масла: М8 (Е8) т/е 296,2 (М+Н)+.
1) Метил (±)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор метил (±)-3-карбометокси-4-[(2аминометил)-4-метоксифенил]бутаноата (10 г, 24 ммоль) и триэтиламина (17 мл, 120 ммоль) в толуоле (100 мл) нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 18 ч. Затем реакционную смесь концентрируют и остаток распределяют между этилацетатом и водой. Водный слой экстрагируют дважды этилацетатом и объединенные органические экстракты промывают насыщенным солевым раствором, высушивают (Мд8О4) и концентрируют с получением целевого соединения (4,8 г,
76%) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 264,2 (М+Н)+.
д) Метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Безводный хлорид алюминия (7,6 г, 57 ммоль) добавляют порциями к перемешанному раствору метил (±)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (3,0 г, 11 ммоль) и этантиола (4,2 мл, 57 ммоль) в метиленхлориде (100 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Полученной смеси позволяют нагреться до комнатной температуры и перемешивают ее в течение ночи и затем концентрируют. Остаток растирают с ледяной водой и полученное после фильтрования твердое вещество высушивают, что дает целевое соединение (2,64 г, 91%) в виде желтовато-белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 250,2 (М+Н)+.
Способ получения 2. Получение метил (±)8-гидрокси-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата.
a) 3 - [Ν-(трет-бутоксикарбо нил)-Ν-метиламино] метил-4 -броманизол.
Быстро добавляют 40% водный метиламин (49 мл, 563 ммоль) к раствору 4-бром-3бромметиланизола (15,76 г, 56,29 ммоль) в ТГФ (280 л) при комнатной температуре. Через 2,5 ч реакционную смесь концентрируют и остаток распределяют между Е!2О (560 мл) и 1,0Ν ΝαΟΗ (100 мл). Слои разделяют и органический слой высушивают (Мд8О4) и концентрируют с получением желтого масла: ТСХ (5% МеОН/СНС13) Кг - 0,32.
Масло растворяют в СНС13 (280 мл) и добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (1,29 г, 56,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 45 мин и затем концентрируют. Хроматография на силикагеле (5% ЕЮЛс/толуол) дает целевое соединение (16,81 г, 90%) в виде светло-желтого масла: ТСХ (5% Е!ОАс/толуол) Кг - 0,43; '11 ЯМР (400, СЭС13) смесь ротамеров; δ 7,42 (д., 1=8,7 Гц, 1Н), 6,65-6,80 (м., 2Н), 4,40-4,55 (м., 2Н), 3,77 (с., 3Н), 2,81-2,97 (м., 3Н), 1,37-1,60 (м., 9Н); М8 (Е8) т/е 352/354 (\Г\а)'.
b) Метил (±)-3-карбометокси-4-[2-[№ (трет-бутоксикарбонил) -Ν-метиламино] метил-4 метоксифенил] бутаноат.
Раствор 3-[№(трет-бутоксикарбонил)-№ метиламино]метил-4-броманизола (4,95 г, 15 ммоль), диметилитаконата (3,08 г, 19,5 ммоль), ацетата палладия (168 мг, 0,75 ммоль), три-отолилфосфина (457 мг, 1,5 моль) и диизопропилэтиламина (5,2 мл, 30 ммоль) в пропионитриле (75 мл) нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 45 мин, затем концентрируют на роторном испарителе. Остаток разбавляют Е!2О (150 мл) и смесь фильтруют через целит (се11!е®) с целью удаления нерастворимого материала. Фильтрат концентрируют и остаток вновь концентрируют из ксилолов. Хроматография на силикагеле (гради ент: 20% ЕЮЛс/гексаны, затем 1:1 ЕЮАс/ гексаны) позволяет удалить фосфиновые и основные материалы; все другие материалы со значением Ю - 0,40-0,70 собирают и концентрируют с получением мутного желтого масла: ТСХ (30% ЕЮЛс/гексаны) Ю - 0,41 (основная масса продукта).
Масло растворяют в МеОН (75 мл) и осторожно добавляют 10% Рб/С. Смесь встряхивают в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм (283446)) в течение 2,5 ч и затем фильтруют через целит (се111еЖ) для удаления катализатора. Фильтрат концентрируют и остаток вновь помещают в условия реакции. Еще через 2,5 ч смесь фильтруют через целит (сеШе®) для удаления катализатора и фильтрат концентрируют с получением светло-желтого масла. Его вновь концентрируют из СНС13/гексанов, затем хроматографируют на силикагель (градиент: 20% ЕЮЛс/гексаны. затем 1:1 ЕЮЛс/гексаны) с получением целевого соединения (4,53 г, 74%) в виде светло-желтого масла: ТСХ (30% ЕЮЛс/гексаны) Ю - 0,46; '11 ЯМР (400, СОС13) смесь ротамеров; δ 7,03 (д., 1=8,2 Гц, 1Н), 6,656,80 (м., 2Н), 4,46 (шс., 2Н), 3,77 (с., 3Н), 3,64 (с., 3Н), 3,63 (с., 3Н), 2,62-3,12 (м., 7Н), 2,35-2,50 (м., 1Н), 1,47 (шс., 9Н); М8 (Е8) т/е 432 (Μ+Να)+.
с) Метил (±)-3-карбометокси-4-[2-(метиламино)метил-4 -метоксифенил] бутаноат.
ТФУ (55 мл) добавляют сразу в виде одной порции к раствору метил (±)-3-карбометокси-4[2-[Ы-(трет-бутоксикарбонил)-Ы-метиламино] метил-4-метоксифенил]бутаноата (4,53 г, 11,06 ммоль) в безводном СЩС12 (55 мл) при 0°С и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Через 1 ч реакционную смесь концентрируют и остаток повторно концентрируют из толуола (2 х 100 мл) с получением целевого соединения (11,06 ммоль, количественно) в виде светло-желтого масла: М8 (Е8) т/е 310 (М+Н)+.
б) Метил (±)-8-метокси-2-метил-3-оксо-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор метил (±)-3-карбометокси-4-[2(метиламино)метил-4-метоксифенил]бутаноата (11,06 ммоль) и диизопропилэтиламина (5,8 мл, 33,18 ммоль) в толуоле (110 мл) нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 25 ч, перемешивают при комнатной температуре в течение 4 дней и затем нагревают при температуре кипения с обратным холодильником еще в течение 24 ч. Концентрирование и последующая хроматография на силикагеле (5% МеОН в ЕЮАс/СнС13, 1:1) дают целевое соединение (2,88 г, 94%) в виде светложелтого твердого вещества: ТСХ (5% МеОН в 1:1 Ε1ΟΑο/ΟΗα3) Ю - 0,63; '11 ЯМР (250, СОС1;) δ 7,02 (д., 1=8,4 Гц, 1Η), 6,78 (дд., 1=8,4, 2,7 Гц, 1Η), 6,63 (д., 1=2,7 Гц, 1Η), 5,29 (д., 1=16,3 Гц, 1Η), 3,50-3,90 (м., 2Н), 3,79 (с., 3Н), 3,71 (с., 3Н),
2,73-3,16 (м., 3Н), 3,04 (с., 3Н), 2,41 (дд., 1=16,7, 5,4 Гц, 1Η); М8 (Е8) т/е 300 (М \а) + . 278 (М+Н)+.
е) Метил (±)-8-гидрокси-2-метил-3-оксо-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Безводный хлорид алюминия (1,35 г, 10,15 ммоль) добавляют сразу в виде одной порции к раствору метил (±)-8-метокси-2-метил-3-оксо-
2.3.4.5- тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (562 мг, 2,03 ммоль) и этантиола (0,75 мл, 10,15 ммоль) в безводном СН2С12 (20 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 4,5 ч и затем снова охлаждают до 0°С. Добавляют ледяную Η2Ο (20 мл) и смесь энергично перемешивают в течение 5 мин и затем экстрагируют СНС13 (3 х 20 мл). Объединенные СНС13 слои высушивают (Мд§О4) и концентрируют с получением остатка. Водный слой фильтруют под разрежением с получением твердого осадка. Указанный осадок и остаток, полученный в СНС13 слое, объединяют в МеОН/СНС13 (1:1) и концентрируют этот раствор с получением желтовато-белого твердого вещества. Указанное вещество растирают с горячим МеОН и затем смесь охлаждают до комнатной температуры. Твердое вещество собирают фильтрованием под разрежением и промывают последовательно холодным МеОН и Εΐ2Ο. Высушивание под глубоким вакуумом при 40°С дает целевое соединение (467,9 мг, 88%) в виде бесцветного твердого вещества: ТСХ (5% МеОН/СНС13) Ю - 0,17; Ή ЯМР (250, ДМСО-бе) δ 9,29 (с., 1Η), 6,89 (д., 1=8,1 Гц, 1Η), 6,50-6,70 (м., 2Н), 5,16 (д., 1=16,4 Гц, 1Η), 3,84 (д., 1=16,4 Гц, 1Η), 3,60-3,85 (м., 1Η), 3,56 (с., 3Н), 2,30-3,00 (м., 4Н), 2,86 (с., 3Н); М8 (Е8) т/е 286 (М+Ыа)+, 264 (М+Н)+.
Способ получения 3. Получение 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ы-оксида.
а) 2- [(3 -Г идрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ы-оксид.
Смесь 2-хлорпиридин-Ы-оксида (16,6 г, 0,1 моль), 3-амино-1-пропанола (15,3 мл, 0,2 моль), Ν;·ιΗί.Ό3 (42 г, 0,5 моль) и трет-амилового спирта (100 мл) нагревают до температуры кипения с обратным холодильником. Через 21 ч реакционную смесь охлаждают, разбавляют СЩС12 (300 мл) и фильтруют под разрежением для удаления нерастворимого материала. Фильтрат концентрируют и повторно концентрируют из толуола с получением желтого масла. Хроматография на силикагеле (20% ΜеΟΗ/СΗС13) приводит к получению целевого соединения (15,62 г, 93%) в виде желтого твердого вещества: ТСХ (20% ΜеΟΗ/СΗС13) Ю - 0,48; Ή ЯМР (250, С1)С1;) δ 8,07 (дд., 1=6,6, 1,2 Гц, 1Η), 7,34 (шс., 1Η), 7,107,30 (м., 1Н), 6,64 (дд., 1=8,5, 1,4 Гц, 1Η), 6,406,60 (м., 1Η), 4,49 (шс., 1Η), 3,65-3,90 (м., 2Н), 3,35-3,60 (м., 2Н), 1,75-2,00 (м., 2Н), М8 (Е8) т/е 169 (М+Н)+.
Способ получения 4. Получение 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино ]-4-нитропиридин-Ыоксида.
а) 2-[(3 -Г идрокси-1 -пропил)амино]-4нитропиридин-Ы-оксид.
В соответствии с процедурой способа получения 3, за исключением того, что проводится замена 2-хлорпиридин-Ы-оксида гидрохлорида на 2-хлор-4-нитропиридин-Ы-оксид (см. Ιαίη. Р.С.; Сбабедее, 8.К.; Апапб, N. Ιηάίαη 1оигпа1 о£ Сбеш18бу 1966, 403), получают целевое соединение в виде оранжевого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 214,2 (М+Н)+.
Способ получения 5. Получение 2-[(3гидрокси-1-пропил)амино]-4-метоксипиридинΝ-оксида.
а) 2-[(3 -Г идрокси-1 -пропил)амино]-4метоксипиридин-Ν -оксид.
Раствор 2-[(3 -гидрокси-1 -пропил)амино]-4нитропиридин-Ы-оксида (0,275 г, 1 ммоль) и 0,5 М №1ОМе в МеОН (16 мл, 8 ммоль) нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 3 ч. Затем реакционную смесь охлаждают и добавляют ледяную АсОН (0,5 мл, 8 ммоль). Раствор концентрируют досуха и остаток растирают с СН2С12. Нерастворимый материал удаляют фильтрованием, и фильтрат концентрируют. Хроматография на силикагеле (5-15% МеОН/СН2С12) дает целевое соединение (0,23 г, 90%) в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 199,0 (М+Н)+.
Способ получения 6. Получение (±)-8гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата.
а) 3-Щ-(трет-Бутоксикарбонил)-№(2,2,2трифторэтил)амино]метил-4-броманизол.
2,2,2-Трифторэтиламин (4,9 мл, 62,5 ммоль) быстро добавляют к раствору 4-бром-3бромметиланизола (7,00 г, 25 ммоль) в безводном ДМСО (25 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревают примерно до 3035°С. Через 2 ч реакционную смесь разбавляют охлажденным на льду 0,5Ν ΝαΟΗ (100 мл) и проводят экстракцию с применением ЕьО (3 х 100 мл). Объединенные ЕьО слои промывают последовательно Н2О (2 х 25 мл) и насыщенным солевым раствором (25 мл), высушивают (Мд8О4) и концентрируют с получением светложелтого масла: ТСХ (толуол) К£ - 0,43.
Масло растворяют в безводном СН2С12 (48 мл) в круглодонной колбе и добавляют ди-третбутилдикарбонат (10,48 г, 48,04 ммоль). Колбу, содержащую реакционный раствор, помещают в роторный испаритель и проводят испарение под вакуумом при 50°С в течение 16 ч. Полученный остаток разбавляют гексанами (100 мл) и в раствор вносят в качестве затравки небольшое количество чистого твердого вещества (полученного в предыдущем эксперименте при хроматографии на силикагеле с использованием в каче стве элюента 10% ЕЮЛс/гексанов). Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение нескольких часов и затем помещают в холодильник на ночь. Продукт собирают фильтрованием под разрежением и промывают гексанами. Высушивание под вакуумом дает целевое соединение (7,19 г, 75%) в виде бесцветного твердого вещества. Маточный раствор концентрируют и хроматографируют на силикагеле (10% ЕЮЛс/гексаны) с получением дополнительного количества целевого соединения (1,42 г; всего 8,61 г, 90%); ТСХ (10% ЕЮЛс/толуол) К£ - 0,48; Т.пл. 86-89°С; Ί1 ЯМР (250, С1)С1;) δ 7,44 (д., 1=9, 0 Гц, 1Н), 6,64-6,82 (м., 2Н), 4,52-4,70 (м., 2Н), 3,61-4,00 (м., 2Н), 3,77 (с., 3Н), 1,22-1,68 (м., 9Н).
Ь) Метил (±)-3-карбометокси-4-[2-[Ы(трет-бутоксикарбонил)-№(2,2,2-трифторэтил) амино]метил-4-метоксифенил]бутаноат.
Раствор 3 - [Ы-(трет-бутоксикарбонил)^ (2,2,2-трифторэтил)амино]метил-4-броманизола (9,17 г, 23,03 ммоль), диметилитаконата (4,73 г, 29,94 ммоль), ацетата палладия (259 мг, 1,15 ммоль) три-о-толилфосфина (701 мг, 2,30 моль) и диизопропилэтиламина (8,0 мл, 46,06 ммоль) в пропионитриле (115 мл) дезоксигенерируют (3 цикла наполнения аргоном/удаления) и затем нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере аргона. Через 2 ч реакционную смесь концентрируют и повторно концентрируют из толуола. Хроматография на силикагеле (30% ЕЮЛс/гексаны, образец вводят в СН2С12) удаляет фосфиновые и основные материалы; все другие материалы со значением К£ - 0,55-0,70 собирают и концентрируют с получением желтого масла. Указанное масло смывают с помощью 20% ЕЮЛс/гексанов (200 мл) и полученную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч и затем в течение ночи в холодильнике. Смесь фильтруют с удалением желтого осадка и фильтрат концентрируют с получением 9,93 г (91%) желтого масла: ТСХ (30% ЕЮЛс/гексаны) К£ - 0,55 (основная масса продукта).
Масло растворяют в ЕЮЛс (100 мл) и добавляют 10% Рб/С (44,4 г, 4,18 ммоль). Смесь перемешивают в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм (283446 Па)) в течение 3,5 ч и затем фильтруют ее через целит (сеШе ®) для удаления катализатора. Фильтрат концентрируют и остаток хроматографируют на силикагеле (градиент: 20% ЕЮЛс/гексаны) с получением целевого соединения (7,98 г, 73% для двух стадий) в виде бесцветного масла: ТСХ (20% ЕЮЛс/толуол) К£ - 0,35; ' Н ЯМР (250, С1)С1;) δ 7,05 (д., 1=8,4 Гц, 1Н), 6,76 (дд., 1=8,4, 2,7 Гц, 1Н), 6,60-6,72 (м., 1Н), 4,50-4,80 (м., 2Н), 3,453,95 (м., 2Н), 3,77 (с., 3Н), 3,63 (с., 6Н), 2,85-3,09 (м., 2Н), 2,58-2,80 (м., 2Н), 2,33-2,50 (м., 1Н), 1,20-1,70 (м., 9Н), М8 (Е8) т/е 500 (М+№)+.
с) Метил (±)-3-карбометокси-4-[2-(2,2,2трифторэтиламино)метил-4-метоксифенил] бутаноат.
ТФУ (55 мл) добавляют сразу в виде одной иорции к раствору метил (±)-3-карбометокси-4[2-[Х-(трет-бутоксикарбонил)-Ы-(2,2,2-трифторэтил)амино]метил-4-метоксифенил]бутаноата (7,98 г, 16,71 ммоль) в безводном СН2С12 (42 мл) ири 0°С в атмосфере аргона, и затем реакционную смесь нагревают до комнатной темиературы. Через 1,5 ч реакционную смесь концентрируют и остаток иовторно концентрируют из ксилолов. Высушивание иод высоким вакуумом ири 40°С дает целевое соединение (8,70 г, количественно) в виде желтого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 378 (М+Н)+.
б) Метил (±)-8-метокси-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
Смесь метил (±)-3-карбометокси-4-[2(2,2,2-трифторэтиламино)метил-4-метоксифенил]бутаноата (16,71 ммоль), триироииламина (9,5 мл, 50,13 ммоль) и ксилолов (170 мл) нагревают ири темиературе кииения с обратным холодильником. Через 63 ч реакционную смесь концентрируют и остаток хроматографируют на кремнеземе (2:1, ЕЮАс/гексаны, загрузка в СН2С12).
Целевое соединение (5,33 г, 92% для двух стадий) иолучают в виде светло-желтого твердого вещества: ТСХ (40% ЕЮАс/гексаны) К£ 0,49; Ή ЯМР (250, СЭС1;) δ 7,04 (д., 6=8,5 Гц, 1Н), 6,80 (дд., 1=8,5, 2,6 Гц, 1Н), 6,61 (д., 1=2,6 Гц, 1Н), 5,35 (д., 1=16,8 Гц, 1Н), 3,60-4,30 (м., 4Н), 3,79 (с., 3Н), 3,71 (с., 3Н), 2,81-3,15 (м., 3Н), 2,46 (дд., 1=16,9, 5,5 Гц, 1Н); М8 (Е8) т/е 368 (Μ+Να)'. 346 (М+Н)+.
е) Метил (±)-8-гидрокси-2-метил-3-оксо-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
Раствор ВВг3 в СН2С12 (1,0 М, 60 мл, 60 ммоль) добавляют ио каилям в течение 30 мин к раствору метил (±)-8-метокси-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетата (5,16 г, 14,94 ммоль) в безводном СН2С12 (60 мл) ири темиературе от -5 до -1 0°С в атмосфере аргона. После еще 1 ч выдерживания ири темиературе от -5 до -10°С реакционную смесь вновь тщательно охлаждают до -10°С и гасят реакцию добавлением ио каилям МеОН (60 мл). Реакционную смесь иеремешивают ири темиературе от -10 до 0°С в течение 1 ч и затем концентрируют на роторном исиарителе. Остаток иовторно концентрируют из МеОН (2х) и затем из ЕЮАс, иосле чего фильтруют через ирокладку силикагеля (элюент ЕЮАс). Концентрирование фильтрата дает желтое твердое вещество, которое растирают с горячими гексанами. Целевое соединение (4,74 г, 96%) иолучают в виде желтовато-белого твердого вещества: ТСХ (ЕЮАс/гексаны, 1:1) Кг - 0,40; Ή ЯМР (400, ДМСО-66) δ 9,28 (с., 1Н), 6,90 (д., 1=8,3 Гц,
1Н), 6,62 (дд., 1=8,3, 2,5 Гц, 1Н), 6,57 (д., 1=2,5 Гц, 1Н), 5,27 (д., 1=16,7 Гц, 1Н), 4,22-4,38 (м., 1Н), 4,07-4,22 (м., 1Н), 4,07 (д., 1=16,7 Гц, 1Н), 3,72-3,83 (м., 1Н), 3,58 (с., 3Н), 2,94 (дд., 1=17,0, 3,8 Гц, 1Н), 2,72 (дд., 1=16,7, 9,1 Гц, 1Н), 2,65 (дд., 1=17,0, 14 Гц, 1Н), 2,49 (дд., 1=16,7, 5,0 Гц, 1Н, частично иогашен сигналом остатка растворителя); М8 (Е8) т/е 354 (Μ+Να)'.
Сиособ иолучения 7. Разделение энантиомеров метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетата с иомощью ВЭЖХ.
а) Метил (К)-(+)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат и метил (8)-(-)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н2-бензазеиин-4-ацетат.
Метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат разрешают на энантиомеры с иомощью хиральной ВЭЖХ с исиользованием следующих условий: колонка Э1асе1 СЫга1рак А8® (21,2x250 мм), иодвижная фаза - ЕЮН, скорость течения - 7 мл/мин, УФ обнаружение ироводят ири 254 нм, инъецируемое количество - 70 мг; 1к для метил (Я)-(+)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазеиин-4-ацетата составляет 21,5 мин; 1к для метил (8)-(-)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетата составляет 39,1 мин.
Сиособ иолучения 8. Разделение энантиомеров метил (±)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетата с иомощью ВЭЖХ.
а) Метил (Я)-(+)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат и метил (8)-(-)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н2-бензазеиин-4-ацетат.
Метил (±)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат разрешают на энантиомеры с иомощью хиральной ВЭЖХ с исиользованием следующих условий: колонка Э1асе1 СЫга1рак А8® (21,2x250 мм), иодвижная фаза - СН3СЫ, скорость течения - 15 мл/мин, УФ обнаружение ироводят ири 254 нм, инъецируемое количество - 500 мг; 1к для метил (Я)-(+)-8-метокси-3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н2-бензазеиин-4-ацетата составляет 10,2 мин; 1к для метил (8)-(-)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетата составляет 19,0 мин.
Сиособ иолучения 9. Деметилирование метил (8)-(-)-8-метокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазеиин-4-ацетата.
а) Метил (8)-(-)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
Раствор метил (8)-(-)-8-метокси-3-оксо2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазеиин-4 -ацетата (15,0 г, 0,057 моль) в СНС13 (160 мл) добавляют ио каилям в течение 30 мин к раствору трибромида бора (20,53 мл, 0,217 моль) в СНС13 (160 мл) ири -8°С в атмосфере аргона, иоддерживая температуру в диапазоне от -5 до 0°С. Реакционную смесь перемешивают при температуре примерно -8°С в течение 30 мин и затем добавляют МеОН (200 мл), вначале по каплям, поддерживая температуру примерно на уровне 0°С. Реакционную смесь концентрируют с получением вязкого масла, которое повторно концентрируют из МеОН (100 мл). Масло растворяют в Н2О/МеОН и небольшое количество образовавшегося темного твердого вещества удаляют фильтрованием. Фильтрат нейтрализуют (до рН 7) с помощью 50% гидроксида натрия, который осаждается в виде белого твердого вещества. рН суспензии доводят до значения 4,5 добавлением небольшого количества уксусной кислоты и собирают твердое вещество, которое высушивают под вакуумом с получением целевого соединения (9,7 г, 68%). Продукт анализируют на хиральную чистоту с применением ВЭЖХ: колонка СЫга1рак А8® (4,6 х 50 мм), подвижная фаза - 100% Е!ОН, скорость течения - 0,5 мл/мин, УФ обнаружение проводят при 215 нм, !К составляет 7,5 мин (8-энантиомер, 99%); и !К составляет 4,4 мин (К-энантиомер, 1%).
Способ получения 10. Получение 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]-4,6-диметилпиридин-Ы-оксида.
а) 2- [(3 -Г идрокси-1 -пропил)амино]-4,6диметилпиридин-Ы-оксид.
В соответствии с процедурой способа получения 4, но с заменой 2-хлорпиридин-Ыоксида гидрохлорида на 2-хлор-4,6-диметилпиридин-Ы-оксид (см. Вго^п, Ε.ν.1. Атег. СНет. 8ос. 1957, 79, 3565), получают целевое соединение в виде прозрачного масла: М8 (Е8) т/е 197,2 (М+Н)+.
Способ получения 11. Получение 6(метиламино)-2-пиридилэтанола.
a) 2-(трет-Бутоксикарбониламино)-6пиколин.
К перемешанному раствору 2-амино-6пиколина (4,33 г, 40 ммоль), Ε!3Ν (6,2 мл, 40 ммоль) и СН2С12 (50 мл) при 0°С добавляют дитрет-бутилдикарбонат (9,6 г, 44 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи реакционную смесь концентрируют под вакуумом, разбавляют Н2О и экстрагируют СН2С12 (2 х 50 мл). Высушивание (Мд8О4) и концентрирование дают целевое соединение в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 209 (М+Н)+.
b) 2-[(трет-Бутоксикарбонил)метиламино]6-пиколин.
К суспензии ХаН (60% дисперсия в минеральном масле, 0,44 г, 11 ммоль) в ДМФ (20 мл) при 0°С добавляют раствор 2-(третбутоксикарбониламино)-6-пиколина (2,1 г, 10 ммоль) в ДМФ (30 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 15 мин, и затем добавляют метилиодид (1,6 г, 11 ммоль). Реакционную смесь концентрируют под вакуумом, разбавляют Н2О и экстрагируют СН2С12 (3 х 50 мл). Высушивание (Мд8О4) и концентрирование дают целевое соединение в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 223 (М+Н)+.
с) Этил-6-[(трет-бутоксикарбонил)метиламино]-2 -пиридилацетат.
Готовят БЭА (18 ммоль) в ТГФ (30 мл), охлаждают до -78°С и добавляют 2-[(третбутоксикарбонил)метиламино]-6-пиколин (2 г, 9 ммоль), что приводит к образованию темнокрасного раствора. Через 15 мин добавляют диэтилкарбонат (18 мл, 15 ммоль). Раствор цвета красного бургундского вина перемешивают при -78°С в течение еще 15 мин и затем реакцию гасят добавлением насыщенного раствора ХН4С1. Смесь нагревают до комнатной температуры и экстрагируют Е!ОАс (3 х 30 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, высушивают (Мд8О4), фильтруют и концентрируют. Хроматография на силикагеле дает целевое соединение в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 294 (М+Н)+.
б) Этил-6-(метиламино)-2-пиридилацетат.
Раствор этил-6-[(трет-бутоксикарбонил) метиламино]-2-пиридилацетата (0,6 г, 2 ммоль) и 4 М НС1/диоксана (5 мл, 20 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрируют. Повторная концентрация из толуола дает целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 195 (М+Н)+.
е) 6-(Метиламино)-2-пиридилэтанол.
К механически перемешанному раствору Ь1А1Н4 в ТГФ (1,0 М, 20 мл, 20,4 ммоль) добавляют по каплям раствор этил-2-(метиламино)-6пиридилацетата (0,38 г, 2 ммоль) в ТГФ (10 мл). После завершения добавления реакционную смесь нагревают до 0°С и реакцию гасят добавлением 10% раствора ХаОН. Твердые вещества удаляют фильтрованием и фильтрат концентрируют под вакуумом. Остаток растворяют в СН2С12 и раствор высушивают (Мд8О4) и концентрируют. Повторная концентрация из толуола (3х) дает целевое соединение в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 153 (М+Н)+.
Способ получения 12. Получение 3-[(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропанола.
а) 3-[(трет-Бутоксикарбонил)амино]-1пропанол.
Раствор ди-трет-бутилдикарбоната (10,91 г, 50 ммоль) в СН2С12 (50 мл) добавляют по каплям к раствору 3-амино-1-пропанола (11,5 мл, 150 мл) в СНС12 (250 мл) при 0°С. Мутный раствор нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч и затем концентрируют на роторном испарителе. Остаток смывают Н2О (100 мл) и экстрагируют с применением Е!2О (3 х 100 мл). Высушивание (Мд8О4) и концентрирование дают целевое соединение в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (250 МГц, СЭС13) δ
4,80 (шс., 1Н), 3,50-3,80 (м., 2Н), 3,13-3,42 (м., 2Н), 3,03 (шт., 1Н), 1,55-1,80 (м., 2Н), 1,45 (с., 9Н); М8 (Е8) т/е 198 (М+№)+.
Способ получения 13. Получение 3-(4нитробензилоксикарбониламино)-1-пропанола.
а) 3-(4-Нитробензилоксикарбониламино)1 -пропанол.
К раствору 3-амино-1-пропанола (0,77 г, 1,1 ммоль) и триэтиламина (2,85 мл, 7 ммоль) в ТГФ (5 мл), перемешанному в атмосфере аргона при комнатной температуре, добавляют суспензию 4-нитробензилхлорформиата (2 г, 1 ммоль) в ТГФ (20 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение недели и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (0-2% МеОН/СН2С12), что дает целевое соединение (0,80 г, 34%) в виде бледно-желтого масла: М8 (Е8) т/е 254,3 (М+Н)+.
Способ получения 14. Получение 2-[И-(3гидрокси-1 -пропил)-№(трет-бутоксикарбонил) амино] пиридин-Ν -оксида.
а) 2-[И-(3-Г идрокси-1 -пропил)-И-(третбутоксикарбонил)амино] пиридин-Ν -оксид.
Раствор 2- [(3 -гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ν-оксида (8,0 г, 47,6 ммоль) в третВиОН (80 мл) обрабатывают ди-третбутилдикарбонатом (11,4 г, 55,3 ммоль). Через 18 ч раствор концентрируют и остаток растирают с гексаном. Полученное твердое вещество высушивают под вакуумом, что дает целевое соединение (12,5 г, 98%) в виде желтоватобелого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 269,3 (М+Н)+.
Способ получения 15. Получение метил (±)-8-[3-[И-(1-оксопиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата.
а) Метил (±)-8-[3-[И-(1-оксопиридин-2ил)-И-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-№оксида на 2-[И-(3-гидрокси-1-пропил)-И-(трет-бутоксикарбонил)амино]пиридин-№оксид, получают целевое соединение в виде светло-оранжевой пены: М8 (Е8) т/е 500,4 (М+Н)+.
Способ получения 16. Получение 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]-4-метилпиридин-№ оксида.
Смесь 2-хлор-4-метилпиридин-№оксида (12,1 г, 0,068 моль) (ΒΐΌ\νπ. Е.У.1. Атег. Сйет. 8ос. 1957, 79, 3565), 3-амино-1-пропанола (10,33 мл, 0,14 моль), NаНСОз (28 г, 0,34 моль) и третамилового спирта (70 мл) нагревают до температуры кипения с обратным холодильником. Через 16 ч реакционную смесь охлаждают, разбавляют СН2С12 (300 мл) и фильтруют под разрежением для удаления нерастворимого материала. Фильтрат концентрируют и повторно концентрируют из толуола с получением желтого масла. Повторная кристаллизация из СН2С12/Е!2О дает целевое соединение (10,87 г, 88%) в виде желтого твердого вещества: ТСХ (15% МеОН/СН2С12) К£ - 0,44; '11 ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 7,92 (д., 1=6,7 Гц, 1Н), 7,28 (шт., 1Н), 6,43 (с., 1Н), 6,33 (дд., 1=6,6, 2,1 Гц, 1Н), 3,73 (т., 1=5,7 Гц, 2Н), 3,47 (к., Н=6,3 Гц, 2Н), 2,29 (с., 3Н), 1,82-1,88 (м., 2Н), М8 (Е8) т/е 183 (М+Н)+.
Способ получения 17. Получение метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-[4-(трифторметил) бензил] -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетата через алкилирование метил (8)-8гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата.
a) Метил (8)-3-оксо-8-[4-(трифторметил) бензилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил]-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
К раствору метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-
2.3.4.5- тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (0,31 г, 1,24 ммоль) и 4-(трифторметил) бензилбромида (0,89 г, 3,72 ммоль) в ДМФ (10 мл) добавляют ИаН (60% суспензия в масле, 0,11 г, 2,75 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 ч весь ДМФ удаляют под вакуумом. Остаток распределяют между насыщенным №1НСО3 и Е!ОАс. Водную фазу экстрагируют Е!ОАс и объединенные органические экстракты промывают насыщенным ИаС1, высушивают над Иа28О4 и концентрируют с получением прозрачного масла (0,90 г). Радиальная хроматография (5% ацетон/СН2С12, силикагель, пластинка 6 м) дает целевое соединение (0,53 г) в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 566,1 (М+Н)+.
b) Метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4 -ацетат.
В колбу для гидрогенизации Парра вносят метил (8)-3-оксо-8-[4-(трифторметил)бензилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат (0,78 г, 1,38 ммоль) и катализатор Перлмана (20 мг) в МеОН (20 мл). После гидрогенизации под давлением 50 фунт/кв.дюйм (283446 Па) в течение 24 ч из реакционного сосуда удаляют газ вентилированием, а катализатор удаляют фильтрованием. После удаления растворителя получают белую пену (0,60 г). Радиальная хроматография (5% ацетон/СН2С12, силикагель, пластинка 6 м) дают целевое соединение (0,42 г) в виде белой пены: '11 ЯМР (250 МГц, С1)С1;) δ 7,50 (д., 1=8,5 Гц, 2Н), 7,23 (д., 1=8,5 Гц, 2Н), 6,90 (д., 1=7,5 Гц, 1Н), 6,67 (дд., 1=7,5, 3,4 Гц, 1Н), 6,39 (д., 1=3,4 Гц, 1Н), 5,05 (м., 2Н), 4,35 (д., 1=15,4 Гц, 1Н), 3,85 (м., 1Н), 3,70 (с., 3Н), 3,60 (м., 1Н), 2,95 (м., 4Н), 2,45 (дд., 1=17,1, 5,1 Гц, 1Н).
Способ получения 18. Получение метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-[4-(трифторметил)бен53 зил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4 ацетата через энантиоселективный синтез.
a) 4-Бром-3-бромметиланизол.
К перемешанному раствору 4-бром-3метиланизола (100 г, 497 ммоль) в сухом дихлорметане (500 мл) добавляют Νбромсукцинимид (97 г, 545 ммоль) и затем перекись бензоила (6 г, 25 ммоль). Реакционную смесь медленно нагревают до температуры кипения с обратным холодильником с помощью прожектора мощностью 150 Вт, при этом рефлектор помещают на расстоянии примерно 12 дюймов (0,3048 м) от реакционной колбы. Через 24 ч реакционную смесь концентрируют на роторном испарителе до половинного объема и выдерживают в течение 4 ч. Образованный белый осадок отфильтровывают и промывают небольшим количеством дихлорметана. Фильтрат концентрируют досуха и оставшийся твердый материал растирают с гексанами и фильтруют. Высушивание под вакуумом дает целевое соединение (100,25 г, 72%) в виде белых игольчатых кристаллов: ОС 1К=6.56 мин (метилсиликоновая колонка НР 530 мкм х 20 м, скорость течения Не носителя - 20 мл/мин, исходная температура 100°С, исходное время - 1 мин, скорость изменения температуры 10°С/мин, конечная температура - 200°С конечное время - 1 мин); 1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ 7,44 (д., 1=10 Гц, 1Н), 6,99 (д., 1=3 Гц, 1Н), 6,73 (дд., 1Н), 4,55. (с., 2Н), 3,80 (с., 3Н).
b) 3 -[N-(4-4 рифторметилбензил)амино метил] -4-броманизол.
К перемешанному раствору 4-бром-3бромметиланизола (35 г, 125 ммоль) в безводном ДМСО (50 мл) и сухом ТГФ (50 мл) добавляют 4-трифторметилбензиламин (30 г, 171 ммоль) и затем триэтиламин (18 мл, 129 ммоль). После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре реакционную смесь концентрируют, разбавляют 1Ν водным ΝαΟΗ (250 мл) и экстрагируют с применением Е12О (2 х250 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, высушивают Ща28О4) и концентрируют досуха. Полученный остаток очищают флэшхроматографией на силикагеле (10-20% Е1ОАс/СНС13), что дает целевое соединение (34,17 г, 73%): ТСХ (20% ЕЮАс/СНС13) 1И 0,63; !Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ 7,59 (д., 1=8,2 Гц, 2Н), 7,49 (д., 1=8,2 Гц, 2Н), 7,43 (д., 1=8,6 Гц, 1Н), 6,96 (д., 1=3,1 Гц, 1Н), 6,70 (дд., 1Н), 3,86 (с., 2Н), 3,84 (с., 2Н), 3,79 (с., 3Н), 1,75 (шс., 1Н).
c) 3-Щ-(трет-Бутоксикарбонил)-№(4трифторметилбензил)аминометил]-4-броманизол.
К перемешанному раствору 3-[Ν-(4трифторметилбензил)аминометил]-4-броманизола (34,17 г, 91 ммоль) в сухом ТГФ (100 мл) добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (22 г, 101 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере аргона в течение 18 ч (наблюдается энергичное выделение газа). Концентрирование и хроматография на силикагеле (5-10% ЕЮАс/гексан) дает целевое соединение (41,09 г, 95%) в виде прозрачного масла: ТСХ (кремнезем, 25% ЕЮАс/гексан) Кг - 0,44; 1Н ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ 7,57 (д., 1=8,3 Гц, 2Н), 7,40 (д., 1=8,3 Гц, 2Н), 7,39-7,33 (м., 2Н), 6,83 и 6,72 (2с., 1Н), 6,71 (дд., 1Н), 4,54 и 4,50 (2с., 2Н), 4,43 (с., 2Н), 3,75 (с., 3Н), 1,47 (с., 9Н).
б) Метил 2-Щ-(трет-бутоксикарбонил)-№ (4-трифторметилбензил)аминометил]-4-метоксициннамат.
Раствор 3-Щ-(трет-бутоксикарбонил)-№(4трифторметилбензил)аминометил]-4 -броманизола (37,08 г, 78 ммоль), метилакрилата (35 мл, 390 ммоль), ацетата палладия (0,88 г, 3,9 ммоль), три-о-толилфосфина (2,38 г, 7,8 моль) и диизопропилэтиламина (31 мл, 178 ммоль) в ацетонитриле (200 мл) дезоксигенерируют (3 цикла заполнения аргоном/удаления) и затем нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере аргона (масляная баня установлена на отметке 80°С). Через 6 ч добавляют дополнительное количество ацетата палладия (0,88 г, 3,9 ммоль) и три-отолилфосфина (2,38 г, 7,8 моль) и реакционную смесь перемешивают при температуре кипения с обратным холодильником в течение еще 18 ч. Реакционную смесь концентрируют досуха и остаток смывают Е12О/петролейный эфир, 1:1 (300 мл) и затем выдерживают в течение 4 ч. Окрашенный в серый цвет осадок отфильтровывают и промывают небольшим объемом Е12О/петролейный эфир, 1:1 (100 мл). Оранжево-красный фильтрат концентрируют и очищают флэш-хроматографией на силикагеле (15% этилацетат/гексаны). Полученный остаток переносят в гексан и смесь выдерживают в течение нескольких часов, после чего фильтруют с удалением желтого осадка. Концентрирование фильтрата дает целевое соединение (34,52 г, 92%) в вида густого желтого масла: ТСХ (кремнезем, 20% ЕЮАс/гексаны) К£ - 0,45; 1Н ЯМР (400 МГц, СОСТ) δ 7,80 (шс., 1Н), 7,57 (д., 1=8,1 Гц, 2Н), 7,53 (д., 1=8,6 Гц, 1Н), 7,29 (шс., 2Н), 6,83 (дд., 1Н), 6,72 (шс., 1Н), 6,23 (д., 1=15,7 Гц, 1Н), 4,58 и 4,53 (2 шс., 2Н), 4,46 и 4,37 (2 шс., 2Н), 3,80 (с., 3Н), 3,77 (с., 3Н), 1,49 (с., 9Н).
е) Метил 2-Щ-(трет-бутоксикарбонил)-№ (4-трифторметилбензил)аминометил]-4-метоксидигидроциннамат.
К 10% Рб/С (5 г, 4,7 ммоль, смоченному в ДМФ) добавляют раствор метил 2-|№(третбутоксикарбонил)-№(4-трифторметилбензил) аминометил]-4-метоксициннамата (34,52 г, 72 ммоль) в метаноле (100 мл). Смесь перемешивают в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм (283446 Па)) в аппарате Парра в течение 7 ч и затем фильтруют через целитную прокладку (се1йе®) для удаления катализатора. Фильтрат концентрируют с получением целевого соединения (34,15 г, 98%) в виде бесцветного масла: '|| ЯМР (400 МГц, СЭС13) 5 7,58 (д., 1=8,1 Гц, 2Н), 7,31 (шс., 2Н), 7,09 (д., 1=8,4 Гц, 1Н), 6,76 (дд., 1Н), 6,66 (с., 1Н), 4,47 (шс., 2Н), 4,40 (шс., 2Н), 3,76 (с., 3Н), 3,63 (с., 3Н), 2,79 (шс., 2Н), 2,47 (т., 2Н), 1,48 (с., 9Н).
1) 2 - [N-(трет-Буто ксикарбонил) -N-(4трифторметилбензил)аминометил]-4-метоксидигидрокоричная кислота.
К перемешанному раствору 2-Щ-(третбутоксикарбонил)-№(4-трифторбензил)аминометил]-4-метоксидигидрокоричной кислоты (34,15 г, 71 ммоль) в диоксане (150 мл) добавляют 1Ν водный №ОН (85 мл, 85 ммоль). Мутную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Полученный гомогенный раствор нейтрализуют 1Ν водным НС1 (85 мл, 85 ммоль) и экстрагируют этилацетатом (2 х 250 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (250 мл), высушивают (Мд§О4) и концентрируют с получением целевого соединения (34,60 г, 100%) в виде густого прозрачного масла: ТСХ (95:4:1, СНС13/МеОН/НОАс) К1 0,49; '11 ЯМР (400 МГц, ГОСТ) δ 7,58 (д., 1=8,1 Гц, 2Н), 7,30 (шс., 2Н), 7,09 (д., 1=8,4 Гц, 1Н), 6,78 (дд., 1Н), 6,65 (д., 1=2,6 Гц, 1Н), 4,47 (шс., 2Н), 4,42 (шс., 2Н), 3,76 (с., 3Н), 2,81 (шс., 2Н), 2,53 (т., 2Н), 1,47 (с., 9Н).
д) (К)-4-Бензил-2-оксазолидинонил 2-[Ν(трет-бутоксикарбонил)-№(4-трифторметилбензил)аминометил]-4-метоксидигидроциннамид.
К перемешанному раствору 2-Щ-(третбутоксикарбонил)-№(4-трифторметилбензил) аминометил]-4-метоксидигидрокоричной кислоты (34,60 г, 71 ммоль) и пиридина (6,9 мл, 85 ммоль) в сухом дихлорметане (200 мл) в атмосфере аргона добавляют с помощью шприца фторид циануровой кислоты (4,4 мл, 48 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 4 ч при комнатной температуре. Полученную густую суспензию фильтруют через целитную прокладку (сеШе®) и промывают небольшим объемом сухого дихлорметана (50 мл). Прозрачный фильтрат вливают в отделительную воронку и промывают ледяной водой (500 мл). Высушивание (Мд§О4) и концентрированно дают неочищенный фторангидрид (34,70 г, 100%), который используют дальше без дополнительной очистки.
К перемешанному раствору (К)-4-бензил2-оксазолидинона (13,8 г, 78 ммоль) в сухом ТГФ (300 мл) в атмосфере аргона при -78°С добавляют с помощью шприца раствор п-ВиЫ в гексанах (2,5 М, 30 мл, 75 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 15 мин и затем с помощью шприца добавляют раствор указанного выше фторангидрида (34,70 г, 71 ммоль) в сухом ТГФ (200 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при -78°С и затем реакцию гасят добавлением насыщенного ΝΉ4Ο и проводят экстракцию этилацетатом (2 х 200 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (400 мл), высушивают (Мд8О4) и концентрируют досуха. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (20% этилацетат/гексаны) дает целевое соединение (40,34 г, 90%) в виде густого прозрачного масла: ТСХ (20% ЕЮАс/гексан) К1 0,21; '11 ЯМР (400 МГц, СОС1;) δ 7,58 (д., 1=8,1
Гц, 2Н), 7,33-7,26 (м., 5Н), 7,16 (м., ЗН), 6,77 (дд., 1Н), 6,67 (д., 1=2,5 Гц, 1Н), 4,62 (м., 1Н),
4,60-4,40 (м., 4Н), 4,16 (м., 2Н), 3,76 (с., ЗН),
3,27 (дд., 1Н), 3,21-3,10 (м., 2Н), 2,88 (шс., 2Н), 2,72 (дд., 1Н), 1,48 (с., 9Н).
б) (К)-4-Бензил-2-оксазолидинонил 3-[2[Ν-Стрет-бутоксикарбо нил) -Ν-(4 -трифторметилбензил)аминометил]-4-метоксифенил] -2(8)метоксикарбонилметилпропионамид.
К перемешанному раствору (К)-4-бензил2-оксазолидинонил-2-Щ-(трет-бутоксикарбонил)-№(4-трифторметилбензил)аминометил]-4метоксидигидроциннамида (40,30 г, 64 ммоль) в сухом ТГФ (300 мл) при -78°С добавляют с помощью шприца раствор бис(триметилсилил) амида лития (70 мл, 1 М в ТГФ, 70 ммоль). По истечении 30 мин добавляют с помощью шприца метилбромацетат (30 мл, 317 ммоль). После выдерживания еще в течение 30 мин при -78°С реакционную смесь нагревают до -20°С и перемешивают еще в течение 6 ч. Реакцию гасят добавлением насыщенного ΝΉ4Ο (400 мл) и экстрагируют этилацетатом (2 х 200 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (300 мл), высушивают (Мд8О4) и концентрируют досуха. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (20% этилацетат/гексаны) дает целевое соединение (38,62 г, 86%) в виде белого твердого вещества: данные ВЭЖХ (А1!ех Ыбакрбеге™ -81 5и, 20% Е1ОАс/гексан) указывают на то, что остается еще примерно 20% неалкилированного исходного материала. Данные ВЭЖХ неочищенной реакционной смеси указывают на 90% выход реакции; '11 ЯМР (400 МГц, СИСЕ) δ 7,57 (д., 1=8,1 Гц, 2Н), 7,40-7,11 (м., 8Н), 6,71 (дд., 1Н), 6,63 (д., 1=2,7 Гц, 1Н), 4,57-4,34 (м., 6Н), 4,03 (д., 1=8,6 Гц, 1Н), 3,85 (т., 1Н), 3,72 (с., ЗН), 3,61 (с., ЗН), 3,28 (дд., 1Н), 2,90 (дд., 1Н), 2,86-2,71 (м., 2Н), 2,70 (дд., 1Н), 2,44 (м., 1Н), 1,48 и 1,46 (2с., 9Н).
ί) Метил (8)-8-метокси-3-оксо-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат.
К перемешанному раствору (К)-4-бензил2-оксазолидинонил 3-[2-Щ-(трет-бутоксикарбонил)-№(4-трифторметилбензил)аминометил]-4метоксифенил]-2(8)-метоксикарбонилметилпропионамида (38,0 г, 54 ммоль) в ТГФ (300 мл) и воде (100 мл) добавляют по каплям при температуре 0°С в течение 30 мин раствор 30% Н2О2 (18,9 мл) и ЫОН · Н20 (2,3 г, 55 ммоль) в воде (62 мл). Мутный раствор перемешивают еще в течение 1 ч при 0°С. Полученный гомогенный раствор медленно обрабатывают раствором сульфита натрия (34,3 г, 272 ммоль) в воде (175 мл) при 0°С и затем подкисляют его охлажденным на льду раствором концентрированной НС1 (35 мл) в воде (150 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2 х 200 мл) и объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (400 мл), высушивают (Мд8О4) и концентрируют досуха. Полученный остаток обрабатывают 4,0 М НС1 в диоксане (400 мл) при перемешивании в условиях комнатной температуры (наблюдается медленное выделение газа). По истечении 1 ч реакционную смесь концентрируют и повторно концентрируют из СНС13/толуол, 1:1 (2х), и затем остаток (37,65 г) переносят в сухой ДМФ (400 мл). К указанному раствору добавляют при перемешивании в атмосфере аргона при 0°С в колбе Дьюара триэтиламин (15,3 мл, 109 ммоль) и NаНСΟ3 (22,9 г, 273 ммоль) и затем дифенилфосфорилазид (13 мл, 60 ммоль). После перемешивания в течение 24 ч при 0°С реакционную смесь концентрируют досуха. Остаток переносят в этилацетат (400 мл) и промывают последовательно водой (300 мл) и насыщенным солевым раствором (300 мл). Высушивание (Мд8О4), концентрирование и флэшхроматография на силикагеле (35% этилацетат/гексаны) дают целевое соединение (16,87 г, 74%) в виде прозрачного густого масла: ТСХ (40% ЕЮЛс/гексан) Кг - 0,50; М8 (Ε8) т/е 422,3 (М+Н)+; Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 7,52 (д., 1=8,1 Гц, 2Н), 7,29 (д., 1=8,1 Гц, 2Н), 7,02 (д., 1=8,5 Гц, 1Н), 7,75 (дд., 1Н), 6,36 (д., 1=2,7 Гц, 1Н), 5,18 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 4,96 (д., 1=15,4 Гц, 1Н), 4,48 (д., 1=15,4 Гц, 1Н), 3,87 (м., 1Н), 3,74 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 3,73 (с., 3Н), 3,71 (с., 3Н), 3,08 (дд., 1Н), 3,02 (дд., 1Н), 2,95 (дд., 1Н), 2,48 (дд., 1Н).
_)) Метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат.
Раствор трибромида бора в СН2С12 (1,0 М, 160 мл, 160 ммоль) добавляют по каплям в течение 30 мин к раствору метил (8)-8-метокси-3оксо-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (16,67 г, 39,6 ммоль) в безводном СН2С12 (150 мл) при -20°С в атмосфере аргона. После дополнительного выдерживания в течение 1,5 ч при температуре от -15 до -20°С реакционную смесь вновь охлаждают до -20°С и реакцию гасят осторожным добавлением по каплям МеОН (160 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре от -10 до 0°С и затем концентрируют на роторном испарителе. Остаток повторно концентрируют из МеОН (2х). Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (50-100% этилацетата/гексаны) дает целевое соединение (14,87 г, 92%) в виде белого твердого вещества: [α]ο-81,8° (с, 1,0 МеОН; ТСХ (кремнезем, 50% ЕЮЛс/гексан) К£ - 0,54; М8 (Ε8) т/е 408,2 (М+Н)+; 1Н ЯМР (400, СЭС13 + 2% ДМСО-б.) δ 7,53 (д., 1=8,1 Гц, 2Н), 7,31 (д., 1=8,1 Гц, 2Н),
6,93 (д., 1=8,4 Гц, 1Н), 6,70 (дд., 1Н), 6,41 (д.,
1=2,3 Гц, 1Н), 5,16 (д, 1=16,4 Гц, 1Н), 5,01 (д., 1=15,6 Гц, 1Н), 4,39 (д., 1=15,6 Гц, 1Н), 3,84 (м., 1Н), 3,73 (д., 1=16,4 Гц, 1Н), 3,71 (с., 3Н), 3,01 (дд., 1Н, 2,98 (м., 1Н), 2,90 (дд., 1Н), 2,47 (дд., 1Н).
Способ получения 19. Разделение энантиомеров метил (±)-8-метокси-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-2-бензазепин4-ацетата с помощью ВЭЖХ.
а) Метил (К)-(+)-8-метокси-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-2-бензазепин4-ацетат и метил (8)-(-)-8-метокси-3-оксо-2(2,2,2 -трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат.
Метил (±)-8-метокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -2 -бензазепин-4 ацетат разрешают на его энантиомеры с помощью хиральной ВЭЖХ с использованием следующих условий: колонка Э1асе1 СЫга1се1 ΟΙ® (21,2 х 250 мм), подвижная фаза - метанол, скорость течения - 15 мл/мин, УФ обнаружение проводят при 295 нм, инъецируемое количество - 400 мг; для метил (К)-(+)-8-метокси-3-оксо2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -2-бензазепин-4-ацетата составляет 4,9 мин; для метил (8)-(-)-8-метокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бенза-зепин-4ацетата составляет 6,6 мин.
Способ получения 20. Разделение энантиомеров метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-2-бензазепин4-ацетата с помощью ВЭЖХ.
а) Метил (К)-(+)-8-гидрокси-3-оксо-2(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-2-бензазепин-4-ацетат и метил (8)-(-)-8-гидрокси-3оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-2бензазепин-4-ацетат.
Метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-2-бензазепин4-ацетат разрешают на его энантиомеры с помощью хиральной ВЭЖХ с использованием следующих условий: колонка Э1асе1 СЫга1се1 ΟΌ® (21,2 х 250 мм), подвижная фаза - 20% этанол в гексане, скорость течения 10 мл/мин, УФ обнаружение проводят при 254 нм, инъецируемое количество 100 мг; для метил (К.)-(+)8-гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-2-бензазепин-4-ацетата составляет 14,4 мин; для метил (8)-(-)-8-гидрокси-3-оксо2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -2бензазепин-4-ацетата составляет 18,5 мин.
Способ получения 21. Получение метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)59
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата через энантиоселективный синтез.
a) 4-Бром-3-бромметиланизол.
К перемешанному раствору 4-бром-3метиланизола (100 г, 497 ммоль) в сухом дихлорметане (500 мл) добавляют Νбромсукцинимид (97 г, 545 ммоль) и затем перекись бензоила (6 г, 25 ммоль). Реакционную смесь осторожно нагревают до температуры кипения с обратным холодильником с помощью прожектора мощностью 150 Вт, в котором рефлектор помещен на расстоянии примерно 12 дюймов (0,3048 м) от колбы с реакционной смесью. Через 24 ч реакционную смесь концентрируют на роторном испарителе до половинного объема и выдерживают в течение 4 ч. Образовавшийся белый осадок отфильтровывают и промывают небольшим количеством дихлорметана. Фильтрат концентрируют досуха и оставшийся твердый материал растирают с гексанами и фильтруют. Высушивание под вакуумом дает целевое соединение (100,25 г, 72%) в виде белых игольчатых кристаллов: СС !К=6,56 мин (метилсиликоновая колонка НР 530 мкм х 20 м, скорость течения Не носителя - 20 мл/мин, исходная температура - 100°С, исходное время - 1 мин, скорость изменения температуры 10°С/мин, конечная температура - 200°С, конечное время - 1 мин); 'Н ЯМР (400 МГц, СОСГ) δ 7,44 (д., 1=10 Гц, 1Н), 6,99 (д., 1=3 Гц, 1Н), 6,73 (дд., 1Н), 4,55 (с., 2Н), 3,80 (с., 3Н).
b) 3-[№(2,2,2-Трифторэтил)аминометил]-4броманизол.
К перемешанному раствору 4-бром-3бромметиланизола (33,6 г, 120 ммоль) в безводном ДМСО (125 мл) быстро добавляют 2,2,2трифторэтиламин (24 г, 242 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревают примерно до 30-35°С. После перемешивания в течение 18 ч реакционную смесь разбавляют охлажденным на льду 1Ν №1ОН (200 мл) и экстрагируют с помощью Е!2О (2 х 300 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (300 мл), высушивают (Мд§О4) и концентрируют с получением целевого соединения (41,35 г, 96%) в виде бледно-желтого масла: ТСХ (толуол) К£ - 0,32; 1Н ЯМР (400 МГц, СОСГ) δ 7,43 (д., 1=9 Гц, 1Н), 6,97 (д., 1=3 Гц, 1Н), 6,71 (дд., 1Н), 3,93 (шс., 2Н), 3,80 (с., 3Н), 3,18 (м., 2Н), 1,86 (шс., 1Н).
c) 3-[№(трет-Бутоксикарбонил)-№(2,2,2трифторэтил)аминометил]-4-броманизол.
К 3 -[№(2,2,2-трифторэтил)аминометил] -4броманизолу (41,35 г, 137 ммоль) добавляют дитрет-бутилдикарбонат (36 г, 165 ммоль, ожиженный при нагревании в горячей водяной бане). Реакционную смесь промывают в указанном порядке небольшим количеством дихлорметана (~20 мл) и перемешивают в атмосфере аргона на масляной бане, установленной на 50°С в течение 18 ч (наблюдается медленное выделение газа). Остаток, полученный после концентрирования на роторном испарителе под вакуумом разбавляют гексанами (100 мл) и в раствор вносят в качестве затравки небольшое количество чистого твердого продукта (полученного в результате предыдущей реакции после хроматографии на силикагеле с использованием 10% ЕЮЛс/гексанов в качестве элюента). Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение нескольких часов и затем помещают на ночь в холодильник. Продукт собирают фильтрованием под разрежением и промывают гексанами. Высушивание под вакуумом дает целевое соединение (48,54 г, 88%) в виде бесцветного твердого вещества: ТСХ (10% ЕЮЛс/толуол) Кг - 0,52; 1Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) δ 7,44 (д., 1=9 Гц, 1Н), 6,75 (дц., 1Н), 6,71 (с., 1Н), 4,65 и 4,58 (2с., 2Н), 3,90 и 3,78 (2м., 2Н), 3,77 (с., 3Н), 1,51 и 1,42 (2с., 9Н).
б) Метил 2-[№(трет-бутоксикарбонил)-№ (2,2,2-трифторэтил)аминометил]-4-метоксициннамат.
Раствор 3-[№(трет-бутоксикарбонил)-№ (2,2,2-трифторэтил)аминометил]-4-броманизола (48,19 г, 121 ммоль), метилакрилата (55 мл, 605 ммоль), ацетата палладия (1,36 г, 6,1 ммоль), три-о-толилфосфина (3,69 г, 12 моль) и диизопропилэтиламина (49 мл, 278 ммоль) в ацетонитриле (200 мл) дезоксигенируют (3 цикла заполнения аргоном/удаления) и затем нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере аргона на масляной бане, установленной на отметке 80°С. Через 6 ч вносят дополнительное количество ацетата палладия (1,36 г, 6,1 ммоль) и три-о-толилфосфина (3,69 г, 12 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при температуре кипения с обратным холодильником в течение еще 18 ч. Реакционную смесь концентрируют досуха, и остаток переносят в Е12О/петролейный эфир, 1:1 (300 мл) и выдерживают в течение 4 ч. Окрашенный в серый цвет осадок отфильтровывают и промывают небольшим объемом Е!2О/петролейный эфир, 1:1 (~100 мл). Оранжево-красный фильтрат концентрируют и очищают флэшхроматографией на силикагеле (15% этилацетат/гексаны). Полученный осадок переносят в гексан и смесь выдерживают в течение 2 ч, после чего фильтруют с удалением желтого осадка. Концентрирование фильтрата дает целевое соединение (45,85 г, 94%) в виде желтого масла: ТСХ (20% ЕЮЛс/гексан) Кг - 0,50; 1Н ЯМР (400 МГц, СОСГ) δ 7,84 (д., 1=16 Гц, 1Н), 7,57 (д., 1=9 Гц, 1Н), 6,86 (дд., 1Н), 6,74 и 6,72 (2с., 1Н), 6,26 (д., 1=16 Гц, 1Н), 4,74 и 4,70 (2с., 2Н), 3,83 (с., 3Н), 3,79 (с., 3Н), 3,80 и 3,66 (2м., 2Н), 1,51 и 1,45 (2с., 9Н).
е) Метил 2-[№(трет-бутоксикарбонил)-№ (2,2,2-трифторэтил)аминометил]-4-метоксидигидроциннамат.
К 10% Рй/С (5 г, 4,7 ммоль, смоченный в ДМФ) добавляют раствор метил 2-[Ч-(третбутоксикарбонил)-Ч-(2,2,2-трифторэтил)амино] метил-4-метоксициннамата (45,85 г, 113 ммоль) в метаноле (100 мл). Смесь перемешивают в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм (283446 Па)) в аппарате Парра в течение 6 ч и затем фильтруют через целитную прокладку (се1йе®) для удаления катализатора. Фильтрат концентрируют с получением целевого соединения (43,71 г, 95%) в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 7,11 (д., 1=8 Гц, 1Н), 6,78 (дд., 1Н), 6,65 (с., 1Н), 4,63 и 4,60 (2с., 2Н), 3,84 и 3,70 (2м., 2Н), 3,77 (с., 3Н), 3,66 (с., 3Н), 2,86 (т., 2Н), 2,53 (т., 2Н), 1,50 и 1,44 (2с., 9Н).
1) 2 - [Ч-(трет-бутоксикарбо нил)-Ч-(2,2,2трифторэтил)аминометил]-4-метоксидигидрокоричная кислота.
К перемешанному раствору метил 2-[Ч(трет-буто ксикарбонил) -Ч-(2,2,2-трифторэтил) аминометил]-4-метоксидигидроциннамата (43,71 г, 108 ммоль) в диоксане (200 мл) добавляют 1Ч водный ЧаОН (130 мл, 130 ммоль). Мутную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Полученный гомогенный раствор нейтрализуют с помощью 1Ч НС1 (130 мл, 130 ммоль) и экстрагируют этилацетатом (2 х 250 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (250 мл), высушивают (Мд8О4) и концентрируют с получением целевого соединения (45,01, 100%) в виде густого прозрачного масла: ТСХ (95:4:1, СНС13, МеОН, НОАс) В1 - 0,49.
д) (В)-4-Бензил-2-оксазолидинонил 2-[Ч(трет-бутоксикарбонил)-Ч-(2,2,2-трифторэтил) аминометил]-4-метоксидигидроциннамид.
К перемешанному раствору 2-[Ч-(третбутоксикарбонил)-Ч-(2,2,2-трифторэтил)аминометил]-4-метоксидигидрокоричной кислоты (45,0 г, 108 ммоль) и пиридина (10 мл, 124 ммоль) в сухом дихлорметане (400 мл) в атмосфере аргона добавляют с помощью шприца фторид циануровой кислоты (6,8 мл, 74 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 4 ч при комнатной температуре. Полученную густую суспензию фильтруют через целитную прокладку (сеШе®), которую промывают небольшим объемом сухого дихлорметана (50 мл). Прозрачный фильтрат вливают в отделительную воронку и промывают ледяной водой (750 мл). Высушивание (Мд8О4) и концентрирование дают неочищенный фторангидрид (43,32 г, 100%), который используют дальше без дополнительной очистки.
К перемешанному раствору (К)-4-бензил2-оксазолидинона (21 г, 119 ммоль) в сухом
ТГФ (400 мл) в атмосфере аргона при -78°С добавляют с помощью шприца раствор п-ВцЫ в гексанах (2,5 М, 113 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 15 мин и затем с помощью шприца добавляют раствор указанного выше фторангидрида (43,32 г, 108 ммоль) в сухом ТГФ (100 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при -78°С и затем реакцию гасят добавлением насыщенного ЧН4С1 и проводят экстракцию этилацетатом (2 х 250 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (500 мл), высушивают (Мд§О4) и концентрируют досуха. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (20% этилацетат/гексаны) дает целевое соединение (55,27 г, 91%) в виде густого прозрачного масла: ТСХ (кремнезем, 20%
ЕЮЛс/гексан) В1 - 0,24; 1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 7,34-7,26 (м., 3Н), 7,19-7,16 (м., 3Н), 6,78 (дд., 1Н), 6,67 (с., 1Н), 4,68-4,63 (м., 3Н), 4,21-4,11 (м., 2Н), 3,87 и 3,74 (2м., 2Н), 3,77 (с., 3Н), 3,28 (дд., 1Н), 3,17 (м., 2Н), 2,93 (м., 2Н), 2,75 (дд., 1Н), 1,50 и 1,45 (2с., 9Н).
Е) (В)-4-Бензил-2-оксазолидинонил 3-[2[Ч-(трет-бутоксикарбонил)-Ч-(2,2,2-трифторэтил)аминометил]-4-метоксифенил]-2-(8)метоксикарбонилметилпропионамид.
К перемешанному раствору (В)-4-бензил2-оксазолидинонил 2-[Ч-(трет-бутоксикарбонил)-Ч-(2,2,2-трифторэтил)аминометил]-4метоксидигидроциннамида (55,2 г, 100 ммоль) в сухом ТГФ (300 мл) при -78°С добавляют с помощью шприца раствор бис(триметилсилил) амида лития (115 мл, 1 М в ТГФ, 115 ммоль). По истечении 30 мин добавляют с помощью шприца метилбромацетат (47 мл, 497 ммоль). После выдерживания еще в течение 30 мин при -78°С реакционную смесь нагревают до -20°С и перемешивают еще в течение 6 ч. Реакцию гасят добавлением насыщенного ЧН4С1 (400 мл) и экстрагируют этилацетатом (2 х 250 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (400 мл), высушивают (Мд8О4) и концентрируют досуха. Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (20% этилацетат/гексаны) дает целевое соединение (52,44 г, 75%) в виде белого твердого вещества: данные ВЭЖХ (А1!ех ИИгакрИеге™ -81 5и, 20% ЕЮЛс/гексан) указывают на то, что остается еще примерно 6-7% неалкилированного исходного материала. Данные ВЭЖХ неочищенной реакционной смеси указывают на 86% выход реакции; 1Н ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 7,35-7,13 (м., 6Н), 6,73 (дд., 1Н), 6,64 (с., 1Н), 4,69-4,53 (м., 4Н), 4,04 (д., 1Н), 3,87 (т., 1Н), 3,85-3,72 (м., 2Н), 3,75 (с., 3Н), 3,64 (с., 3Н), 3,31 (дд., 1Н),
2,95 (дд., 1Н), 2,95-2,71 (м., 2Н), 2,71 (дд., 1Н),
2,50 (м., 1Н), 1,50 и 1,47 (2 шс., 9Н).
ί) Метил (8)-8-метокси-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
К перемешанному раствору (В)-4-бензил2-оксазолидинонил-3-[2-[Ч-(трет-бутоксикарбонил)-Ч-(2,2,2-трифторэтил)аминометил]-4метоксифенил]-2-(8)-метоксикарбонилметил63 пропионамида (52,40 г, 75 ммоль) в ТГФ (300 мл) и воде (100 мл) добавляют по каплям при температуре 0°С в течение 30 мин раствор 30% Н2О2 (26 мл) и Ь1ОН · Н2О (3,2 г, 75 ммоль) в воде (85 мл). Мутный раствор перемешивают еще в течение 1 ч при 0°С. Полученный гомогенный раствор медленно обрабатывают раствором сульфита натрия (46 г, 365 ммоль) в воде (240 мл) при 0°С и затем подкисляют его охлажденным на льду раствором концентрированной НС1 (45 мл) в воде (200 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2 х 300 мл) и объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором (600 мл), высушивают (Мд8О4) и концентрируют досуха. Полученный остаток обрабатывают 4,0 М НС1 в диоксане (500 мл) при перемешивании в условиях комнатной температуры (наблюдается медленное выделение газа). По истечении 1 ч реакционную смесь концентрируют и повторно концентрируют из СНС13/толуол, 1:1 (2х) и затем остаток (48,89 г) переносят в сухой ДМФ (500 мл). К указанному раствору добавляют при перемешивании в атмосфере аргона при 0°С в колбе Дьюара триэтиламин (21 мл, 150 ммоль) и ЫаНСО3 (31,5 г, 375 ммоль) и затем дифенилфосфорилазид (18 мл, 83,5 ммоль). После перемешивания в течение 24 ч при 0°С реакционную смесь концентрируют досуха. Остаток переносят в этилацетат (500 мл) и промывают последовательно водой (400 мл) и насыщенным солевым раствором (400 мл). Высушивание (Мд8О4), концентрирование и флэшхроматография на силикагеле (30% этилацетат/гексаны) дают целевое соединение (21,81 г, 84%) в виде белого твердого вещества: [δο]132,6° (с, 1,0, МеОН); ТСХ (40% ЕЮЛс/гексан) Кг - 0,56; хиральная ВЭЖХ (СЫгасе1 ΟΌ, 20% ЕЮН/гексан) к'=2,05; противоположный энантиомер из рацемического стандарта имеет значение к'= 1,86 (не обнаружен); М8 (Е8) т/е 346,2 (М+Н)+; !Н ЯМР (400 МГц, С1)С1;) δ 7,03 (д., 1=8,5 Гц, 1Н), 6,79 (дд., 1Н), 6,61 (д., 1=2,6 Гц, 1Н), 5,35 (д., 1=16,7 Гц, 1Н), 4,17 (м., 1Н), 4,0 (м., 1Н), 3,99 (д., 1=16,7 Гц, 1Н), 3,84 (м., 1Н), 3,79 (с., 3Н), 3,71 (с., 3Н), 3,01 (м., 2Н), 2,91 (дд., 1Н), 2,47 (дд., 1Н). Элементный анализ
СЛЕ» расчет (в %): С 55,65; Н 5,25; N 4,06. Найдено (в %): С 55,62; Н 5,27; Ν 4,04.
_)) Метил (8)-8-гидрокси-2-метил-3-оксо-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор трибромида бора в СН2С12 (1,0 М, 250 мл, 250 ммоль) добавляют по каплям в течение 30 мин к раствору метил (8)-8-метокси-3оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата (21,5 г, 62,3 ммоль) в безводном СН2С12 (230 мл) при -20°С в атмосфере аргона. После выдерживания еще в течение 1,5 ч при температуре от -15 до -20°С реакционную смесь вновь охлаждают до -20°С и реакцию гасят осторожным добавлением по ка плям МеОН (250 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре от -10 до 0°С и затем концентрируют на роторном испарителе. Остаток повторно концентрируют из МеОН (2х). Очистка флэш-хроматографией на силикагеле (50% этилацетат/гексаны) дает целевое соединение (19,38 г, 94%) в виде белого твердого вещества: [ас]-130,5° (с, 1,0, МеОН); ТСХ (кремнезем, 40% ЕЮЛс/гексан) К.£ - 0,40; М8 (Е8) т/е 332,1 (М+Н)+; !Н ЯМР (400 МГц, СЭС13+2% Д\1СО-с1..) δ 6,92 (д., 1=8,3 Гц, 1Н), 6,71 (дд., 1Н), 6,58 (д., 1=2,5 Гц, 1Н), 5,29 (д., 16,7 Гц, 1Н), 4,21-3,98 (м., 2Н), 3,96 (д., 1=16,7 Гц, 1Н), 3,82 (м., 1Н), 3,68 (с., 3Н), 2,98 (дц., 1Н), 2,94 (дц., 1Н), 2,83 (дд., 1Н), 2,46 (дд., 1Н). Элементный анализ С15Н16Г^О4: расчет (в %): С 54,38; Н 4,87; N 4,23. Найдено (в %): С 54,40; Н 4,96; N 4,22.
Способ получения 22. Получение метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата через энантиоселективный синтез.
a) 3-Щ-(трет-Бутоксикарбонил)-№(2фенилэтил)амино]метил-4-броманизол.
2-фенэтиламин (19,0 мл, 150 ммоль) добавляют в виде одной порции к раствору 4бром-3-бромметиланизола (14,0 г, 50,0 ммоль) в безводном ТГФ (200 мл) при комнатной температуре. Через 18 ч смесь концентрируют. Остаток растворяют в 2 М №ЮН (300 мл) и экстрагируют с применением СН2С12 (3 х 200 мл). Объединенные СН2С12 слои высушивают над Мд8О4 и концентрируют. Неочищенный материал фильтруют через прокладку с силикагелем с использованием 50% ЕЮЛс/гексанов в качестве элюента. Фильтрат концентрируют под пониженным давлением, что дает желтое масло: М8 (Е8) т/е 320 (М+Н)+.
Указанное желтое масло растворяют в безводном ТГФ (200 мл) и добавляют сразу в виде одной порции при комнатной температуре дитрет-бутилдикарбонат (13,0 г, 60,0 ммоль). Через 1 ч раствор концентрируют. Флэшхроматография на силикагеле (10% ЕЮЛс/гексаны) дает целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества (20,8 г, 100% из 4-бром-3-бромметиланизола): 1Н ЯМР (250 МГц, С1)С1;) δ 7,51-7,10 (м., 6Н), 6,85-6,60 (м., 2Н), 4,52-4,33 (м., 2Н), 3,71 (с., 3Н), 3,523,31 (м., 2Н), 2,92-2,73 (м., 2Н), 1,61-1,33 (м., 9Н).
b) 4-[2-Щ-(трет-Бутоксикарбонил)-№(2фенилэтил)амино]метил-4-метоксифенил] пропионовая кислота.
Раствор 3-Щ-(трет-бутоксикарбонил)-№(2фенилэтил)амино]метил-4-броманизола (20,0 г,
48,0 ммоль), бензилакрилата (23,0 г, 144 ммоль), ацетата палладия (540 мг, 2,40 ммоль), три-отолилфосфина (1,46 г, 4,80 ммоль) и диизопропилэтиламина (17,0 мл, 96,0 ммоль) в пропионитриле (250 мг) дезоксигенируют (3 цикла за65 полнения аргоном/удаления) и затем нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере аргона. Через 48 ч реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через целитную прокладку (сеШе®) и концентрируют. Флэшхроматография на силикагеле (10% ЕЮАс/гексан) дает желтое масло, которое растворяют в 10% ЕЮАс/гексанах (100 мл) и оставляют на 72 ч при 4°С. Желтый осадок удаляют фильтрованием и затем полученный раствор концентрируют, что дает слегка желтое масло (14,98 г, 62%): '11 ЯМР (250 МГц, СБС1;) δ 8,007,85 (м., 1Н), 7,61-7,01 (м., 11Н), 6,85-6,76 (м., 2Н), 6,75-6,67 (м., 1Н), 6,32 (м., 1Н), 5,22 (с., 2Н), 4,60-4,41 (м., 2Н), 3,75 (с., 3Н), 3,52-3,20 (м., 2Н), 2,93-2,71 (м., 2Н), 1,55-1,33 (м., 9Н).
Указанное масло растворяют в МеОН (150 мл) и добавляют 10% Рб/С (6,40 г, 6,00 ммоль) при 0°С. Смесь нагревают до комнатной температуры, перемешивают в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм (283446 Па)) в течение 7 ч и затем фильтруют через целитную прокладку (сеШе®) для удаления катализатора. Фильтрат концентрируют под пониженным давлением с получением целевого соединения в виде густого желтого масла (10,35 г, 83%): 1Н ЯМР (250 МГц, СБС1;) δ 7,35-7,02 (м., 6Н), 6,85-6,76 (м., 2Н),
6,75-6,73 (м., 1Н), 6,69-6,68 (м., 1Н), 4,42-4,25 (м., 2Н), 3,73 (с., 3Н), 3,44-3,25 (м., 2Н), 2,922,73 (м., 4Н), 2,59-2,50 (м., 2Н), 1,69-1,33 (м., 9Н).
с) (К)-1,1-Диметилэтил[[5-метокси-2-[3оксо-3-[2-оксо-4-(фенилметил)-3-оксазолидинил]пропил]фенил]метил](2-фенилэтил)карбамат.
К раствору 4-[2-Щ-(трет-бутоксикарбонил)-И-(2-фенилэтил)амино]метил-4-метоксифенил]пропионовой кислоты (10,35 г, 25,0 ммоль) в СН2С12 (125 мл) добавляют при комнатной температуре пиридин (2,4 мл, 30,0 ммоль) и затем фторид циануровой кислоты (1,4 мл, 15,0 ммоль). Через 2 ч смесь фильтруют через целитную прокладку (се1йе®), промывают холодной Н2О (100 мл) и затем насыщенным солевым раствором (100 мл), после чего высушивают над Мд§О4 и концентрируют.
К раствору (К)-4-бензил-2-оксазолидинона (5,30 г, 30,0 ммоль) в безводном ТГФ (125 мл) добавляют п-ВиЫ (11,0 мл, 2,5 М раствор в гексанах, 27,5 ммоль) при -78°С. Через 15 мин добавляют по каплям в течение 5 мин указанный выше фторангидрид кислоты в безводном ТГФ (25 мл). Через 1 ч смесь вливают в 300 мл Н2О и экстрагируют с помощью ЕЮАс (3 х 200 мл). Объединенные ЕЮАс слои высушивают над Мд§О4 и концентрируют. Флэш-хроматография на силикагеле (30% ЕЮАс/гексаны) дает целевое соединение в виде густого масла (12,12 г, 85%): '11 ЯМР (250 МГц, СБС1;) δ 7,41-7,12 (м., 11Н), 6,65 (м., 1Н), 6,60 (м., 1Н), 4,70-4,62 (м.,
1Н), 4,50-4,35 (м., 2Н), 4,21-4,10 (м., 2Н), 3,71 (с., 3Н), 3,50-2,61 (м., 10Н), 1,55-1,41 (м., 9Н).
б) [К-(К*,§*)]-Метил в-[[4-метокси-2[[[(1,1-диметилэтокси)карбонил](2-фенилэтил) амино]метил]фенил]метил]-у-оксо-4-(фенилметил)-3-оксазолидинбутаноат.
К раствору (К)-1,1-диметилэтил-[[5метокси-2-[3-оксо-3-[2-оксо-4-(фенилметил)-3оксазолидинил]пропил]фенил]метил](2-фенилэтил)карбамата (12,12 г, 21,0 ммоль) в безводном ТГФ (100 мл) добавляют бис(триметилсилил)амид лития (22,0 мл, 1 М в ТГФ, 22,0 ммоль) при -78°С. Через 15 мин добавляют метилбромацетат (9,9 мл, 105 ммоль) и затем смесь нагревают до -20°С. Через 3 ч смесь вливают в 200 мл Н2О и экстрагируют с помощью ЕЮАс (3 х 500 мл). Объединенные ЕЮАс слои высушивают над Мд§О4 и концентрируют. Флэш-хроматография на силикагеле (25% ЕЮАс/гексаны) дает 9,91 г смеси целевого соединения и соединения (К)-1,1-диметилэтил-[[5метокси-2-[3-оксо-3-[2-оксо-4-(фенилметил)-3оксазолидинил]пропил]фенил]метил](2-фенилэтил)карбамата, соответственно в соотношении 3:2 (ВЭЖХ, 20% -ЕЮАс/гексаны). Указанную смесь используют дальше без дополнительной очистки: М§ (Е§) т/е 667 (М+Νη)'.
е) Метил (§)-8-метокси-3-оксо-2-(2фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин4-ацетат.
К раствору [К-(К*,§*)]-метил β-[[4метокси-2-[[[1,1-диметилэтокси)карбонил](2фенилэтил)амино] метил] фенил] метил] -у-оксо-4 (фенилметил)-3-оксазолидинбутаноата (9,91 г, 15,4 ммоль) в ТГФ (75 мл) добавляют раствор моногидрата гидроксида лития (646 мг, 15,4 ммоль) и Н2О2 (5,2 мл, 30% в Н2О, 46,2 ммоль) в Н2О (25 мл) при 0°С в течение 10 мин. Через 1,5 ч добавляют раствор №ь8О3 (9,7 г, 77 ммоль) в Н2О (100 мл). Смесь подкисляют с использованием 2 М НС1 до значения рН 4 и экстрагируют с помощью ЕЮАс (3 х 200 мл). Объединенные ЕЮАс слои высушивают над Мд§О4 и концентрируют. Полученный остаток растворяют в 4,0 М НС1 в диоксане (75 мл). Через 45 мин смесь концентрируют и затем повторно концентрируют из толуола (200 мл). Указанный остаток растворяют в безводном ДМФ (75 мл). К этому раствору добавляют №1НСО3 (6,50 г, 77,0 ммоль) и триэтиламин (4,3 мл, 30,8 ммоль) при комнатной температуре. Смесь охлаждают до 0°С и добавляют дифенилфосфорилазид (5 мл, 23,1 ммоль). Через 16 ч смесь концентрируют. Полученную пасту растворяют в ЕЮАс (500 мл), промывают Н2О (2 х 300 мл), высушивают над Мд§О4 и концентрируют. Флэшхроматография на силикагеле (40%
ЕЮАс/гексаны) дает целевое соединение (2,61 г, 33% из [К-(К*,§*)]-метил в-[[4-метокси-2[[[(1,1-диметилэтокси)карбонил](2-фенилэтил) амино] метил] фенил] метил] -у-оксо-4 -(фенилме67 тил)-3-оксазолидинбутаноата) в виде прозрачного масла: М8 (Е8) т/е 390 (М+Να)'.
1) Метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2фенилэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин4-ацетат.
К раствору метил (8)-8-метокси-3-оксо-2(2-фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (2,61 г, 7,1 ммоль) в СН2С12 (40 мл) добавляют ВВг3 (21,3 мл, 1 М в СН2С12, 21,3 ммоль) при -20°С. Через 45 мин реакцию гасят добавлением МеОН (200 мл) и реакционную смесь концентрируют. Остаток фильтруют через прокладку с силикагелем с использованием в качестве элюента 50% ЕЮЛс/гексанов. Полученное твердое вещество оранжевого цвета повторно кристаллизуют из МеОН/Н2О с получением целевого соединения в виде желтоватобелого твердого вещества (2,16 г, 81%): М8 (Е8) т/е 376 (М+Να)'.
Пример 1. Получение (±)-8-[3-(2пиридиламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-[2-(Ы-оксопиридил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор 2- [(3 -гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ν-оксида (1,4 г, 8 ммоль) в безводном ДМФ (8 мл) добавляют по каплям к раствору метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата (1,7 г, 7 ммоль), трифенилфосфина (2,76 г, 11 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (2,33 мл, 14 ммоль) в безводном ДМФ (4 мл) и сухого ТГФ (10 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Полученный раствор перемешивают в течение 18 ч и затем концентрируют под вакуумом. Хроматография на силикагеле (2-10% СН3ОН/СН2С12) дает целевое соединение (1,2 г): М8 (Е8) т/е
400.2 (М+Н)+. Разрешается также непрореагировавший метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат (0,4 г).
b) Этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат.
Смесь метил (±)-8-[3-[2-(Ы-оксопиридил) амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-2-бензазепин-4-ацетата (1,2 г, 3 ммоль),
1.2 г 10% палладия на угле (1,2 г), циклогексена (3 мл, 15 ммоль) и этанола (20 мл) нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 18 ч. Смесь фильтруют и фильтрат концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (2-5% СН3ОН/СН2С12) с получением целевого соединения (0,72 г, 64%) в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 398,2 (М+Н)+.
c) (±)-8-[3-(2-Пиридиламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
Смесь этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2- бензазепин-4-ацетата (0,7 г, 2 ммоль), моногидрата гидроксида лития (0,12 г, 3 ммоль), 5 мл ТГФ (5 мл), Н2О (5 мл) и МеОН (2 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч и затем концентрируют. Остаток распределяют между этилацетатом и водой и слои разделяют. Водную фазу осторожно доводят до значения рН 4 с помощью 3Ν НС1 и оставляют для выстаивания. Полученные кристаллы собирают фильтрованием и высушивают с получением целевого соединения (0,4 г, 65%) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 370,4 (М+Н)+. Элементный анализ С20Н23№!О4 · 0,25 Н2О: Расчет (в %): С 64,25; Н 6,34; Ν 11,24. Найдено (в %): С 64,02; Н 6,37; Ν 11,20.
Пример 2. Получение (±)-8-[3-[(4-амино-2пиридил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-[2-(4-нитро-Ы-оксопиридил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1 (а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ν-оксида на 2-[(3-гидрокси-1-пропил)амино]-4-нитропиридин-Ы-оксид, получают целевое соединение в виде оранжевой пены: М8 (Е8) т/е 445,2 (М+Н)+.
b) Метил (±)-8-[3-[(4-амино-2-пиридил) амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3 -[2-(Ы-оксопиридил)амино] -1 -пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-8-[3-[2-(4-нитроЫ-оксопиридил)амино] -1 -пропилокси]-3 -оксо-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетат, получают целевое соединение в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 399,3 (М+Н)+.
c) (±)-8-[3-[(4-Амино-2-пиридил)амино]-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-[(4-амино-2пиридил)амино]-1 -пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 385,4 (М+Н)+. Элементный анализ С2оН24^О4 · 1,25 Н2О: расчет (в %): С 59,03; Н 6,56; Ν 13,76. Найдено (в %): С 58,80; Н 6,49; Ν 13,62.
Пример 3. Получение (±)-8-[3-[(4-метокси2-пиридил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-[2-(4-метокси-Ы-оксопиридил)амино]-1 -пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводя замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ν -оксида на
2- [(3-гидрокси-1 -пропил)амино]-4-метоксипиридин-№оксид, получают целевое соединение в виде бесцветного масла: Μδ (Е8) т/е 430,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-8-[3-[(4-метокси-2-пиридил) амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3 -[2-(№оксопиридил)амино] -1 -пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-8-[3-[2-(4метокси-№оксопиридил)амино]-1 -пропилокси] -
3- оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетат, получают целевое соединение в виде бледно-желтого масла: Μδ (Εδ) т/е 414,4 (М+Н)+.
c) (±)-8- [3 - [(4-Метокси-2 -пиридил)амино]1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-[(4-метокси-2пиридил)амино]-1 -пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества: Μδ (Εδ) т/е 400,3 (М+Н)+. Элементный анализ С21Н25МзО5 · 0,75 Н2О: расчет (в %): С 61,08; Н 6,47; N 10,18. Найдено (в %): С 61,15 ; Н 6,20; N 10,12.
Пример 4. Получение (±)-8-[3-(2пиридиламино)-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо2,3,4-5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
а) Метил (±)-8-[3-[2-(№оксопиридил) амино]-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор 2- [(3 -гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ν-оксида (252,3 мг, 1,5 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (0,24 мл, 1,5 ммоль) в безводном ДМФ (7,5 мл) медленно по каплям добавляют к раствору метил (±)-8-гидрокси-2метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2-бе нзазепин-4-ацетата (197,5 мг, 0,75 ммоль) и трифенилфосфина (413,1 мг, 1,58 ммоль) в безводном ДМФ (7,5 мл) при комнатной температуре. Добавление требует 15 мин и представляет собой умеренно экзотермическую реакцию. Через 2 ч реакционную смесь концентрируют и остаток повторно концентрируют из ксилолов. Хроматография на силикагеле (Е1ОАс/СНС13/МеОН, 2:2:1) дает соединение со значением К£ - 0,48 (ТСХ в Е1ОАс/СНС13/МеОН, 2:2:1), которое представляет собой мутное, практически бес цветное масло. Указанное масло подвергают повторной хроматографии на силикагеле (абсолютный Е1ОН) с получением целевого соединения (243,9 мг, 79%) в виде желтовато-белой пены: ТСХ (абсолютный ЕЮН) Кг - 0,33; 'Н ЯМР (250, СЭС13) δ 8,12 (оч. дд., 1Н), 7,10-7,23 (м., 1Н), 6,90-7,10 (м., 2Н), 6,78 (дд., 1=8,4, 2,6 Гц, 1Н), 6,45-6,72 (м., 3Н), 5,28 (д., 1=16,3 Гц, 1Н), 3,95-4,25 (м., 2Н), 3,60-3,90 (м., 1Н), 3,76 (д., 1=16,3 Гц, 1Н), 3,71 (с., 3Н), 3,51 (к., 1=6,4 Гц, 2Н), 2,73-3,15 (м., 3Н), 3,04 (с., 3Н), 2,41 (дд., 1=16,7, 5,4 Гц, 1Н), 2,05-2,28 (м., 2Н); Μδ (Εδ) т/е 414 (М+Н)+.
b) Метил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Смесь метил (±)-8-[3-[2-(№оксопиридил) амино]-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (243,9 мг, 0,59 ммоль), циклогексена (0,60 мл, 5,9 ммоль) и 10% Рб/С (63 мг, 0,06 ммоль) в 2пропаноле (6 мл) нагревают при температуре кипения с обратным холодильником. Через 21,5 ч реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через целитную прокладку (се1йе®). Фильтрат концентрируют и остаток повторно концентрируют из толуола. Хроматография на силикагеле (5% МеОН в Е1ОАс/СНС13, 1:1) дает целевое соединение (212,8 мг, 91%) в виде бесцветного масла: ТСХ (5% МеОН в Е1ОАс/СНС13, 1:1) Кг - 0,39; Ή ЯМР (250, СЭС13) δ 8,03-8,13 (м., 1Н), 7,35-7,48 (м., 1Н), 7,00 (д., 1=8,4 Гц, 1Н), 6,77 (дд., 1=8,4, 2,5 Гц, 1Н), 6,63 (д., 1=2,5 Гц, 1Н), 6,52-6,62 (м., 1Н), 6,40 (д., 1=8,5 Гц, 1Н), 5,27 (д., 1=16,3 Гц, 1Н), 4,62-4,82 (м., 1Н), 3,95-4,20 (м., 2Н), 3,603,90 (м., 2Н), 3,71 (с., 3Н), 3,50 (к., 1=6,3 Гц, 2Н),
2.75- 3,15 (м., 3Н), 3,03 (с., 3Н), 2,40 (дд., 1=16,7,
5,3 Гц, 1Н), 2,00-2,22 (м., 2Н); Μδ (Е8) т/е 398 (М+Н)+.
c) (±)-8-[3 -(2-Пиридиламино)-1 -пропилокси]-2 -метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-уксусная кислота.
1,0Ν ЫОН (0,80 мл, 0,80 ммоль) добавляют к раствору метил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)1 -пропилокс и]-2 -метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (207,5 мг, 0,52 ммоль) в ТГФ (2,6 мл) и Н2О (1,8 мл) при комнатной температуре. Мутный вначале раствор становится гомогенным в течение 1 мин. Через 18 ч реакционную смесь подкисляют с применением ТФУ (0,12 мл, 1,56 ммоль) и концентрируют. Хроматография на ОДС (20% СН3С.^/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ), концентрирование и лиофилизация дают целевое соединение (252,4 мг, 83%) в виде светло-желтого гигроскопичного твердого вещества: ВЭЖХ (РКР-1®, 20% СН3С№Н2О с содержанием 0,1% ТФУ) К'=2,4; Ή ЯМР (400 МГц, СЭ3ОЭ) δ 7,83-7,93 (м., 1Н),
7.76- 7,83 (м., 1Н), 7,00-7,11 (м., 2Н), 6,83-6,91 (м., 1Н), 6,80 (дд., 1=8,4, 2,6 Гц, 1Н), 6,76 (д.,
1=2,6 Гц, 1Н), 5,30 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 4,05-4,18 (м., 2Н), 3,94 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 3,77-3,90 (м., 1Н), 3,57 (т., 1=6,8 Гц, 2Н), 3,03 (дд., 1=17,0, 4,2 Гц, 1Н), 2,99 (с., 3Н), 2,83 (дд., 1=17,0, 9,1 Гц, 1Н), 2,72 (дд., 1=17,0, 13,5 Гц, 1Н), 2,44 (дд., 1=17,0, 4,7 Гц, 1Н), 2,11-2,23 (м., 2Н); М8 (Е8) т/е 384 (М+Н)+. Элементный анализ С21Н25^О4 • 1,5 СЕ3СО2Н · 1,5 Н2О: расчет (в %): С 49,57; Н 5,11; N 7,23. Найдено (в %): С 49,65; Н 4,95; N 7,15.
Пример 5. Получение (±)-8-[3-(2имидазолиламино)-1-пропилокси]-3-оксо-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
Целевое соединение получают в основном с использованием процедур, которые были детально описаны в примерах 1-4.
Пример 6. Получение (±)-8-[3-[2-(1,4,5,6тетрагидропиримидинил)амино]-1-пропилокси]-
3- оксо-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-(трет-бутоксикарбониламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор 3-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-
1-пропанола (0,14 г, 0,8 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (0,13 мл, 0,8 ммоль) в безводном ДМФ (2 мл) добавляют по каплям к раствору метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата (0,10 г, 0,4 ммоль) и трифенилфосфина (0,21 г, 0,8 ммоль) в безводном ДМФ (1,4 мл) и сухом ТГФ (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Полученный раствор перемешивают в течение 18 часов и затем концентрируют под вакуумом. Хроматография на силикагеле (1-3%
МеОН/СН2С12) дает целевое соединение (0,11 г): М8 (Е8) т/е 407,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-8-(3-амино-1-пропилокси)-3оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4 ацетат, трифторуксусная соль.
Раствор метил (±)-8-[3-(трет-бутоксикарбониламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (0,70 г) в СН2С12 (7 мл) и ТФУ (2 мл) перемешивают в атмосфере аргона при 0°С в течение 1 ч и затем концентрируют с получением целевого соединения (0,75 г, 100%) в виде бесцветного стеклоподобного вещества: М8 (Е8) т/е 321,4 (М+Н)+.
c) Метил (±)-8-[3-(пиримидин-2-иламино)1-пропилокси]-3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат.
Смесь метил (±)-8-(3-амино-1-пропилокси)-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-
4- ацетата, трифторуксусной соли (0,75 г, 2 ммоль), 2-бромпиримидина (0,5 г, 3 ммоль), ЫаНСО3 (1,4 г, 17 ммоль) и ЕЮН (10 мл) нагревают до температуры кипения с обратным холодильником. Через 24 ч смесь фильтруют и нерастворимый материал промывают МеОН. Фильтрат и промывную воду объединяют и концентрируют и остаток очищают хромато графией на силикагеле (1-6% МеОН/СН2С12) с получением целевого соединения (0,54 г, 82%) в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 385,5 (М+Н)+.
б) (±)-8-[3-[(1,4,5,6-Тетрагидропиримидин2-ил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
Смесь метил (±)-8-[3-(пиримидин-2иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (0,36 г, 0,94 ммоль), 4 М НС1 в диоксане (0,25 мл, 1 ммоль), 10% палладия на угле (0,24 г, 0,24 ммоль) и МеОН (5 мл) перемешивают при подключении баллона с водородом. Через 18 ч смесь фильтруют и фильтрат концентрируют. Остаток распределяют между ЕЮАс и водным К2СО3. Твердый осадок, который далее собирают фильтрованием и высушивают, дает целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 375,4 (М+Н)+. Элементный анализ С19Н2^4О4 · 2,5 Н2О: расчет (в %): С 54,40; Н 7,45; N 13,35. Найдено (в %): С 54,68; Н 7,12; N 13,39.
Пример 7. Получение (±)-8-[3-(6-амино-2пиридиламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
Целевое соединение получают в основном с использованием процедур, которые были детально описаны в примерах 1-4.
Пример 8. Получение (±)-8-[2-[6(метиламино)пиридил]этокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил]-1-этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводя замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ы-оксида на 6-(метиламино)-2-пиридилэтанол, получают целевое соединение в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 384 (М+Н)+.
b) (±)-8-[2-[6-(Метиламино)пиридин-2-ил] -
1-этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-[2-пиридиламино-1 -пропилокси] -3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[2-[6-(метиламино) пиридин-2-ил]-1 -этокси] -3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат метил, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 370 (М+Н)+.
Пример 9. Получение (±)-8-[2-(2бензимидазолил)этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
а) Метил (±)-8-[2-(бензимидазол-2-ил)-1этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводят замену 2-[(373 гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ы-оксида на
2- (бензимидазол-2-ил)-1-этанол, получают целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 394,4 (М+Н)+,
416,3 (М+Ха)+.
Ь) (±)-8-[2-(Бензимидазол-2-ил)-1 -этокси]-
3- оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[2-(бензимидазол-2-ил)-
1- этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белого порошка: М8 (Е8) т/е 380,4 (М+Н)+, 402,3 (М+Ха)+.
Пример 10. Получение (±)-8-[2-(4-аза-2бензимидазолил)этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
Целевое соединение получают в основном с использованием процедур, которые были детально описаны в примере 9.
Пример 11. Получение (±)-3-оксо-8-[3(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-3-оксо-8-[3-(1-оксопиридин-
2- иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 ацетат.
Раствор 2- [(3 -гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ν-оксида (252,3 мг, 1,5 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (0,24 мл, 1,5 ммоль) в безводном ДМФ (7,5 мл) медленно по каплям добавляют в течение 3-4 мин к раствору метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2.3.4.5- тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (248,5 мг, 0,75 ммоль) и трифенилфосфина (413,1 мг, 1,58 ммоль) в безводном ДМФ (7,5 мл) при комнатной температуре. Через 17 ч реакционную смесь концентрируют и остаток повторно концентрируют из ксилолов/СНС13. Хроматография на силикагеле (градиент: Е!ОАс (500 мл), затем 5% МеОН/СНС13) дает целевое соединение (253,6 мг, 70%) в виде желтоватобелой пены: !Н ЯМР (250, С1)С13) δ 8,11 (дд., 1=6,4, 1,4 Гц, 1Н), 7,10-7,23 (м., 1Н), 6,93-7,10 (м., 2Н), 6,81 (дд., 1=8,4, 2,6 Гц, 1Н), 6,45-6,70 (м., 3Н), 5,34 (д., 1=16,7 Гц, 1Н), 3,75-4,30 (м., 6Н), 3,71 (с., 3Н), 3,51 (к., 1=6,4 Гц, 2Н), 2,803,15 (м., 3Н), 2,46 (дд., 1=16,8, 5,5 Гц, 1Н), 2,072,28 (м., 2Н); М8 (Е8) т/е 482,2 (М+Н)+.
b) Метил (±)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2- иламино)-1 -пропилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил)-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Смесь метил (±)-3-оксо-8-[3-(1-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2-бензазепин-
4- ацетата (253,6 мг, 0,53 ммоль), циклогексена (0,54 мл, 5,3 ммоль), палладиевой черни (11,3 мг, 0,11 ммоль) и изопропанола (5,3 мл) нагре вают до температуры кипения с обратным холодильником. Через 0,5 ч добавляют 10% Рб/С (28,2 мг, 0,03 ммоль) и через 14,5 ч добавляют Рб чернь (11,3 мг, 0,11 ммоль) и циклогексен (0,27 мл, 2,65 ммоль). Еще через 48 ч реакционную смесь фильтруют в горячем состоянии через целит (се1йе®) и фильтровальную прокладку промывают горячим МеОН/СНС13, 1:1. Концентрирование и повторное концентрирование из ксилолов дают желтое масло. Хроматография на силикагеле (5% МеОН в Е!ОАс/СНС13 1:1) дает целевое соединение (194,0 мг, 79%) в виде светло-желтого масла: ТСХ (5% МеОН в Е!ОАс/СНС13, 1:1) Кг - 0,53; !Н ЯМР (250, С1)С1;) δ 8,08 (дд., 1=5,0, 1,0 Гц, 1Н), 7,37-7,48 (м., 1Н), 7,02 (д., 1=8,4 Гц, 1Н), 6,79 (дд., 1=8,4, 2,5 Гц, 1Н), 6,63 (д., 1=2,5 Гц, 1Н), 6,52-6,62 (м., 1Н), 6,40 (д., 1=8,4 Гц, 1Н), 5,34 (д., 1=16,6 Гц, 1Н), 4,60-4,80 (м., 1Н), 3,75-4,30 (м., 6Н), 3,71 (с., 3Н), 3,50 (к., 6,4 Гц, 2Н), 2,80-3,15 (м., 3Н), 2,46 (дд., 1=16,8, 5,4 Гц, 1Н), 2,00-2,25 (м., 2Н); М8 (Е8) т/е 466 (М+Н)+.
с) (±)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
1,0Ν ЫОН (0,44 мл, 0,44 ммоль) добавляют к раствору метил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-
1-пропилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (159,5 мг, 0,34 ммоль) в ТГФ (1,7 мл) и Н2О (1,3 мл) при комнатной температуре. Желтая мутная реакционная смесь становится гомогенной в течение 10 мин. Через 24 ч реакционную смесь концентрируют досуха и желтый остаток растворяют в Н2О (4 мл). Раствор фильтруют и затем осторожно нейтрализуют (рН~7) с помощью 1,0Ν НС1. Осадок собирают, промывают избытком Н2О и высушивают под высоким вакуумом при 40-45°С, что дает целевое соединение (130,0 мг, 83%) в виде желтовато-белого твердого вещества: ВЭЖХ (РКР-1®, 25%
СН3С№/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ) К'=3,1; !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бе) δ 7,91-8,00 (м., 1Н), 7,28-7,40 (м., 1Н), 7,02 (д., 1=9,2 Гц, 1Н),
6,76-6,87 (м., 2Н), 6,51-6,60 (м., 1Н), 6,39-6,50 (м., 2Н), 5,30 (д., 1=16,6 Гц, 1Н), 4,10-4,30 (м., 3Н), 4,02 (т., 1=6,3 Гц, 1Н), 3,70-3,82 (м., 1Н), 3,20-3,45 (м., 2Н, частично погашен сигналом остатка растворителя), 2,99 (дд., 1Н), 2,59-2,74 (м., 2Н), 2,39 (дд., 1=16,9, 4,8 Гц, 1Н), 1,90-2,03 (м., 2Н); М8 (Е8) т/е 452 (М+Н)+. Элементный анализ С22Н24Р3Х3О4 · 0,5 Н2О: расчет (в %): С 57,39; Н 5,47; N 9,13. Найдено (в %): С 57,39; Н 5,18; N 9,00.
Пример 12. Получение (±)-8-[3-(4,6Диметилпиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
а) Метил (±)-8-[3-(4,6-диметил-1-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-метил-375 оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ы-оксида на 2-[(3-гидрокси-1 -пропил)амино]-4,6-диметилпиридин-№оксид, получают целевое соединение в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 442,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-8-[3-(4,6-диметилпиридин-2иламино)-1 -пропило кси]-2 -метил-3 -оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3-[2-(Ы-оксопиридил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-8-[3-(4,6диметил-1-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2 -метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде бледно-желтого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 426,3 (М+Н)+.
c) (±)-8-[3-(4,6-Диметилпиридин-2-иламино)-1 -пропилокси]-2-метил-3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-[(4,6-диметилпиридин2-ил)амино]-1 -пропилокси] -2-метил-3 -оксо-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 412,2 (М+Н)+. Элементный анализ С23Н29ЩО4 · 0,5 НС1 · 0,25 Н2О: расчет (в %): С 63,62; Н 6,96; N 9,68. Найдено (в %): С 63,62; Н 6,96; N 9,69.
Пример 13. Получение (±)-8-[2-(2аминотиазол-4-ил)-1-этокси]-2-метил-3-оксо-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[2-(2-аминотиазол-4-ил)-1этокси]-2 -метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ы-оксида на
2-(2-аминотиазол-4-ил)-1-этанол (АО 95/32710), получают целевое соединение в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 390 (М+Н)+.
b) (±)-8-[2-(2-Аминотиазол-4-ил)-1-этокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино-1-пропилокси)-3оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[2-(2-аминотиазол-4-ил)1 -этокси] -2 -метил-3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 376 (М+Н)+. Элементный анализ
С18Н21ЩО4§ · 1,3 СЕ3СО2Н · 0,36 Н2О: расчет (в %): С 46,62; Н 4,38; N 7,93. Найдено (в %): С 46,45; Н 4,57; N 8,27.
Пример 14. Получение (±)-8-[3-(4аминопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-(4-нитро-1-оксопиридин2-иламино)-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-
2.3.4.5- тетрагидро - 1Н-2-2 -бензазепин-4 -ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ы-оксида на 2-[(3-гидрокси-1 -пропил)амино]-4-нитропиридин-Ы-оксид и проводят также замену метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4 -ацетата на метил (±)-8-гидрокси-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение: М8 (Е8) т/е 459 (М+Н)+.
b) Метил (±)-8-[3-(4-аминопиридин-2иламино)-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3-(4-нитро-Ы-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-8-[3-(4нитро-1-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2 -метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 413 (М+Н)+.
c) (±)-8-[3-(4-Аминопиридин-2-иламино)1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-[2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-(4-аминопиридин-2иламино)-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 399,2 (М+Н)+. Элементный анализ ОДЖ · 1,5 СЕ3СО2Н · 0,125 Н2О: расчет (в %) С 50,62; Н 4,91; N 9,83. Найдено (в %): С 50,63; Н 5,26; N 9,90.
Пример 15. Получение (±)-8-[3(пиримидин-2-иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
Смесь метил (±)-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата (0,071 г, 0,18 ммоль) и гидроксида лития моногидрата (0,009 г, 2 ммоль) в ТГФ (5 мл) и Н2О (2 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч и затем концентрируют. Остаток растворяют в Н2О и рН доводят до значения 4 с помощью 3N НС1. Образованное твердое вещество собирают фильтрованием и высушивают с иолучением целевого соединения (0,05 г, 73%) в виде белого твердого вещества:
М8 (Е8) т/е 371,4 (М+Н)+. Элементный анализ С1дН2^4О4 · 0,5 Н2О: расчет (в %): С 60,15; Н 6,11; N 14,77. Найдено (в %): С 60,14; Н 6,06; N 14,71.
Пример 16. Получение (К)-8-[3-[(4-амино2-ииридил)амино]-1-ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (К)-8-[3-[2-(4-нитро-1-оксоииридил)амино]-1-ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
В соответствии с ироцедурой иримера 1 (а), за исключением того, что ироводят замену 2-[(3гидрокси-1 -ироиил)амино] ииридин-Ν -оксида на 2-[(3-гидрокси-1 -ироиил)амино]-4-нитроииридин-№оксид, иолучают целевое соединение в виде оранжевой иены: М8 (Е8) т/е 445,3 (М+Н)+.
b) Метил (К)-8-[3-[(4-амино-2-ииридил) амино]-1-ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
В соответствии с ироцедурой иримера 1(Ь), за исключением того, что ироводят замену метил (±)-8-[3 -[2-(№оксоииридил)амино] -1 -ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетата на метил (К)-8-[3-[2-(4-нитро№оксоииридил)амино] -1 -ироиилокси]-3-оксо2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазеиин-4 -ацетат, иолучают целевое соединение в виде белой иены: М8 (Е8) т/е 399,4 (М+Н)+.
c) (К)-8-[3-[ (4-амино-2-ииридил)амино]-1ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазеиин-4-уксусная кислота.
В соответствии с ироцедурой иримера 1(с), за исключением того, что ироводят замену этил (±)-8-[3-(2-ииридиламино)-1 -ироиилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4ацетата на метил (К)-8-[3-[(4-амино-2ииридил)амино]-1-ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат, иолучают целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества: [ас]23+74,97° (с, 1,45, МеОН); М8 (Е8) т/е 385,4 (М+Н)+. Элементный анализ С20Н24^О4 · НС1 · 1,5 Н2О: расчет (в %): С 53,63; Н 6,30; N 12,50. Найдено (в %): С 53,87; Н 6,13; N 12,42.
Пример 17. Получение (8)-8-[3-[(4-амино2-ииридил)амино]-1-ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусной кислоты.
а) Метил (8)-8-[3-[2-(4-нитро-№оксоииридил)амино]-1-ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
В соответствии с ироцедурой иримера 1 (а), за исключением того, что ироводят замену 2-[(3гидрокси-1 -ироиил)амино] ииридин-Ν -оксида на
2-[(3-гидрокси-1 -ироиил)амино]-4-нитроииридин-№оксид, иолучают целевое соединение в виде оранжевой иены: М8 (Е8) т/е 445,3 (М+Н)+.
b) Метил (8)-8-[3-[(4-амино-2-ииридил) амино]-1-ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1 Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
В соответствии с ироцедурой иримера 1(Ь), за исключением того, что ироводят замену метил (±)-8- [3 - [2-(Ν -оксоииридил)амино] -1 ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазеиин-4-ацетата на метил (8)-8-[3-[2-(4амино-№оксоииридил)амино]-1 -ироиилокси]-3 оксо -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазеиин-4ацетат, иолучают целевое соединение в виде белой иены: М8 (Е8) т/е 399,3 (М+Н)+.
c) (8)-8-[3-[(4-амино-2-ииридил)амино]-1ироиилокси] -3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазеиин-4-уксусная кислота.
В соответствии с ироцедурой иримера 1(с), за исключением того, что ироводят замену этил (±)-8-[3-(2-ииридиламино)-1 -ироиилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазеиин-4ацетата на метил (8)-8-[3-[(4-амино-2ииридил)амино]-1 -ироиилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат, иолучают целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества: [ас]23-77,5° (с, 1,45, МеОН); М8 (Е8) т/е 385,4 (М+Н)+. Элементный анализ С1ЕЛЕСЕ · НС1 · 1,125 Н2О: расчет (в %): С 59,36; Н 6,54; N 13,84. Найдено (в %): С 59,31; Н 6,74; N 13,73.
Пример 18. Получение этил (±)-8-[3-(2ииридиламино)- 1 -ироиилокси] -2-метил-3 -оксо2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазеиин-4 -ацетата.
а) Этил (±)-8-[3-(2-ииридиламино)-1ироиилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазеиин-4-ацетат.
Раствор (±)-8-[3-[(4 -амино -2 -ииридил) амино] -1 -ироиилокси] -3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусной кислоты (0,27 г, 0,7 ммоль) и 4 М НС1 в диоксане (0,2 мл, 8 ммоль) в этаноле (10 мл) нагревают до темиературы кииения с обратным холодильником. Через 72 ч реакционную смесь концентрируют и остаток расиределяют между ЕЮАс и водным К2СО3. Органическую фазу иромывают насыщенным солевым раствором, высушивают (Мд8О4) и концентрируют. Остаток растворяют в толуоле (5 мл) и триэтиламине (0,35 мл, 2,5 ммоль) и иолученный раствор нагревают до темиературы кииения с обратным холодильником. Через 18 ч реакционную смесь концентрируют иод вакуумом с иолучением целевого соединения (0,20 г, 69%) в виде рыжеватокоричневой иены: М8 (Е8) т/е 413,4 (М+Н)+. Элементный анализ С22Н2^4О4 · 0,25 Н2О: расчет (в %) С 63,37; Н 6,89; N 13,44. Найдено (в %): С 63,32; Н 7,17; N 13,05.
Пример 19. Получение (±)-8-[3-[(2имидазолин-2-ил)амино]-1-ироиилокси]-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусной кислоты.
a) Получение метил (±)-8-[3-(4-нитробензилоксикарбониламино)-1 -пропилокси]-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ы-оксида на
3-(4-нитробензилоксикарбониламино)-1 -пропанол, а также замену метил (±)-8-гидрокси-3оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4 ацетата на метил (±)-8-гидрокси-2-метил-3оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4 ацетат, получают целевое соединение в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 500,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-8-[3-амино-1-пропилокси]-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Смесь метил (±)-8-[3-(4-нитробензилоксикарбониламино)-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (1,4 г, 3 ммоль), 10% палладия на угле (0,55 г, 0,6 ммоль) и ΕΐΟΗ (20 мл) перемешивают при комнатной температуре при подключении баллона с водородом. Через 18 ч смесь фильтруют и фильтрат концентрируют с получением целевого соединения (0,89 г, 99%) в виде рыжеватокоричневого твердого вещества: М8 (Ε8) т/е
321,4 (М+Н)+.
c) Метил (±)-8-[3-[(2-имидазолин-2-ил) амино]-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Смесь метил (±)-8-[3-амино-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетата (0,3 г, 1 ммоль), 2метилтиоимидазолина (0,46 г, 2 ммоль), диизопропилэтиламина (0,42 мл, 2 ммоль) и диметилацетамида (3 мл) нагревают до 1 00°С в атмосфере аргона. Через 2 ч реакционную смесь концентрируют под вакуумом и остаток распределяют между СНС13 и Η2Ο. Органическую фазу высушивают (Мд§О4) и концентрируют и остаток очищают препаративной ВЭЖХ с получением целевого соединения (0,24 г, 51%) в виде желтого масла: М8 (Ε8) т/е 389,4 (М+Н)+.
б) (±)-8-[3-[(2-Имидазолин-2-ил)амино]-1пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
Метил (±)-8-[3-[(2 -имидазо лин-2 -ил) амино] -1 -пропилокси] -2-метил-3 -оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат омыляют в соответствии с процедурой примера 1(с). Очищение с применением препаративной ВЭЖХ дает целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Ε8) т/е 375,4 (М+Н)+. Элементный анализ ^ιΗ26Ν4Ο4 · 1,96 СΕ3СΟ2Η: расчет (в %): С 46,08; Н 4,73; N 9,39. Найдено (в %): С 46,37; Н 4,53; N 9,01.
Пример 20. Получение (±)-8-[3-[(4,5,6,7тетрагидро-1Н-2-диазепин-2-ил)амино]-1пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-[(2-диазепин-2-ил) амино]-1-пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 19(с), за исключением того, что проводят замену 2-метилтиоимидазолина на 2-метилтио-1,3диазепин, получают целевое соединение: М8 (Ε8) т/е 417,4 (М+Н)+.
b) (±)-8-[3-[(2-Диазепин-2-ил)амино]-1пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 19(б), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3-[(2-диазепин-2-ил)амино]-1пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-8-[3-[(2диазепин-2-ил)амино]-1-пропилокси]-2-метил-3оксо-2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетат, получают целевое соединение: М8 (Ε8) т/е 403,4 (М+Н)+.
Пример 21. Получение (±)-3-оксо-8-[3-(4метилпиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4 -уксусной кислоты.
a) Метил (±)-3-оксо-8-[3-(4-метил-1- оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат.
С использованием процедуры примера 1 (а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3-гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин -Νоксида на 2-[(3-гидрокси-1-пропил)амино]-4метилпиридин-Ы-оксид, а также замену метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетата на метил (±)-3-оксо-8гидрокси-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение: М8 (Ε8) т/е 496,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-3-оксо-8-[3-(4-метилпиридин-
2- иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетат.
С использованием процедуры примера 1(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3 -[2-(Ы-оксопиридил)амино]-1 пропилокси] -3-оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3(4-метил-1 -оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение: М8 (Ε8) т/е 480,2 (М+Н)+.
c) (±)-3-оксо-8-[3-(4-метилпиридин-2иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
С использованием процедуры примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-
3- оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4 ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3-(4метилпиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -281 бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение: М8 (Е8) т/е 466,2 (М+Н)+. Элементный анализ С23Н26Р3И3О4 · 0,5 Н2О: расчет (в %): С 58,22; Н 5,74; И 8,86. Найдено (в %): С 58,54; Н 5,58; И 8,64.
Пример 22. Получение (±)-3-оксо-8-[3-Щ(пиридин-2-ил)-№трет -бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-[И-(пиридин-2-ил)-И(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-
3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3 -[2-(№оксопиридил)амино] -1 -пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-8-[3-[И-(1-оксопиридин-2-ил)-И-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту, получают целевое соединение в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 484,4 (М+Н)+.
b) (±)-3-оксо-8-[3-Щ-(пиридин-2-ил)-И(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-[И-(пиридин-2-ил)-И(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 уксусную кислоту, получают целевое соединение в виде белого порошка: М8 (Е8) т/е 470,4 (М+Н)+. Элементный анализ С25Нзо№^О6 · 3,25 Н2О: расчет (в %): С 54,59; Н 6,69; И 7,64. Найдено (в %): С 54,47; Н 6,32; И 7,95.
Пример 23. Получение (±)-8-[3-[Ν-(1оксопиридин-2-ил)-№(трет-бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
а) (±)-8-[3-[И-(1-Оксопиридин-2-ил)-И(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-[И-(1-оксопиридин-2ил)-И-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белого порошка: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 6,6-8,3 (м., 8Н), 3,7-4,6 (м., 3Н), 3,3-3,6 (м., 5Н), 1,8-3,0 (м., 5Н), 1,6 (с., 6Н),
1,3 (с., 3Н); М8 (Е8) т/е 486,4 (М+Н)+.
Пример 24. Получение (±)-3-оксо-8-[3-Щ(пиридин-2-ил)-№трет -бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4уксусной кислоты.
a) Метил (±)-3-оксо-8-[3-Щ-(1-оксопиридин-2-ил)-№трет-бутоксикарбонил)амино]-1пропилокси] -2-(4 -трифторметилбензил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор метил (±)-8-[3-[И-(1-оксопиридин2-ил)-№трет-бутоксикарбонил)амино]-1 пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусной кислоты (0,4 г, 0,8 ммоль) в ДМФ (5 мл) охлаждают до ~20°С (баня СС14/сухой лед) и добавляют по каплям (ТМ8)2ИЬ1 (1,0 М раствор в ТГФ, 0,9 мл, 0,9 ммоль). Через 10 мин добавляют раствор 4трифторметилбензилбромида (0,211 г, 0,88 ммоль) в ДМФ (0,5 мл). Раствор перемешивают в атмосфере аргона при -20°С в течение 10 мин и затем при комнатной температуре в течение 18 ч. Раствор концентрируют, и остаток переносят в Е!ОАс и промывают последовательно 5% NаНСО3 (2х), Н2О (1х), 5% уксусной кислотой (2х), Н2О (1х) и насыщенным солевым раствором (1х). Е!ОАс слой высушивают (Мд§О4) и концентрируют с получением целевого соединения (0,42 г, 80%): М8 (Е8) т/е 658,3 (М+Н)+.
b) (±)-3-оксо-8-[3-Щ-(пиридин-2-ил)-Итрет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(Ь), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-[2-(№оксопиридил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3-Щ-(1оксопиридин-2-ил)-И-(трет-бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2-бензазепин-4ацетат, получают целевое соединение (0,321 г, 78%) в виде прозрачного масла: М8 (Е8) т/е
642,3 (М+Н)+.
c) (±)-3-оксо-8-[3-Щ-(пиридин-2-ил)-И(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-[И-(пиридин-2-ил)-И(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси] 2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде желтовато-белого порошка: М8 (Е8) т/е 628,4 (М+Н)+. Элементный анализ СззНзвРзИзО6 · 0,5 Н2О: расчет (в %): С 62,25; Н 5,86; И 6.60. Найдено (в %): С 62,01; Н 5,92; И 6,81.
Пример 25. Получение (±)-3-оксо-8-[3(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(4трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-уксусной кислоты.
а) (±)-3 -Оксо-8-[3 -(пиридин-2 -иламино)-1 пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
(±)-3-Оксо -8-[3-[Ν-(пиридин-2 -ил)-Ν (трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси] 2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту (0,158 г, 0,25 ммоль) обрабатывают 4 М НС1 в диоксане (3 мл) при комнатной температуре в течение 1 ч и затем раствор концентрируют. Хроматография на ОДС (градиент 5-60% Сн3С№/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ, в течение 1 ч), концентрирование и лиофилизация дают целевое соединение (0,117 г, 82%): М8 (Ε8) т/е 528,4 (М+Н)+. Элементный анализ С28Н2^3О4 · 1 СЕ3СО2Н · 1,5 Н2О: расчет (в %): С 53,89; Н 4,82; Ν 6,28. Найдено (в %): С 53,55; Н 4,55; N 6,04.
Пример 26. Получение (±)-2-метил-3-оксо8-[3- |Ν-( пиридин-2-ил)^ -(метил)амино]-1пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-8-[3-[2-(№оксопиридил)-Ы(метил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор метил (±)-8-[3-[2-(№оксопиридил) амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (1,5 г, 3,8 ммоль) в ДМФ (10 мл) охлаждают до -20°С в атмосфере аргона и добавляют по каплям (ТМ8)2ЫЬ1 (1,0 М раствор в ТГФ, 8 мл, 8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -20°С в течение 30 мин и затем добавляют СН31 (0,5 мл, 7,6 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч и затем концентрируют. Хроматография на силикагеле (10% МеОН/СН2С12) дает целевое соединение (1 г, 62%): М8 (Ε8) т/е 428,4 (М+Н)+.
b) Метил (±)-2-метил-3-оксо-8-[3-[№ (пиридин-2-ил) -Ν-(метил)амино] -1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2-бензазепин-4ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(Ь), за исключением того, что проводят замену этил (±) -8-[3 -(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-8-[3-[2-(№оксопиридил)-Ы(метил)амино]-1 -пропилокси]-3 -оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-метилбензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,7 г, 73%): М8 (Ε8) т/е 412,4 (М+Н)+.
c) (±)-2-Метил-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2ил) -Ν-(метил)амино] -1 -пропилокси] -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-2-метил-3-оксо-8-[3-[(№ (пиридин-2-ил)-Ы-(метил)амино)]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4- ацетат, получают неочищенное целевое соединение. Очистка с помощью хроматографии на ОДС (5-60% СН3,СН/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ, в течение 1 ч), концентрирование и лиофилизация дают целевое соединение: М8 (Ε8) т/е 398,4 (М+Н)+. Элементный анализ С22Н27№,О4 · 1,5 СЕ3СО2Н · 0,25 Н2О: расчет (в %): С 52,40; Н 5,10; N 7,33. Найдено (в %): С 52,09; Н 5,26; N 7,20.
Пример 27. Получение (±)-2-бензил-3оксо-8-[3 -(пиридин-2-иламино)-1 -пропилокси] -
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-2-бензил-3-оксо-8-[3-[№(1оксопиридин-2-ил)-Ы-(трет -бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(а), за исключением того, что проводят замену 4-трифторметилбензилбромида на бензилбромид, получают целевое соединение (0,105 г, 20%): М8 (Ε8) т/е 590,4 (М+Н)+.
b) Метил (±)-2-бензил-3-оксо-8-[3-[№ (пиридин-2-ил) -Ν-(трет-бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[№(1-оксопиридин-2ил)-Ы-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)2-бензил-3-оксо-8-[3-[№(1-оксопиридин-2-ил)№(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетат, получают целевое соединение (0,045 г, 44%): М8 (Ε8) т/е 574,4 (М+Н)+.
c) (±)-2-Бензил-3-оксо-8-[3-[№(1-пиридин2-ил)-Ы-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-2-бензил-3-оксо-8-[3-[№ пиридин-2-ил)-Ы-(трет -бутоксикарбонил) амино] -1 -пропилокси] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4 -ацетат, получают целевое соединение (0,044 г, количественно): М8 (Ε8) т/е
560,3 (М+Н)+.
б) (±)-2-Бензил-3-оксо-8-[3-(пиридин-2иламино)-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 25(а), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2-ил)-Ы(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты на (±)-2бензил-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2-ил)-Ы-(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2,3,4,585 тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту, получают целевое соединение (0,014 г, 40%): М8 (Е8) т/е 460,4 (М+Н)+. Элементный анализ С- ΙΙ ΝΧΓ · СР3СО2Н · 2 Н2О: расчет (в %): С 57,14; Н 5,62; N 6,89. Найдено (в %): С 57,44; Н 5,32; N 6,87.
Пример 28. Получение (±)-2(карбоксиметил)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2иламино)-1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро -1Н 2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-2-(трет-бутоксикарбонилметил)-3-оксо-8-[3-[№(1-оксопиридин-2-ил)-№ (трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(а), за исключением того, что проводят замену 4-трифторметилбензилбромида на третбутилбромацетат, получают целевое соединение (1,0 г, 80%): М8 (Е8) т/е 614,4 (М+Н)+.
b) Метил (±)-2-(трет-бутоксикарбонилметил)-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси] -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[№(1-оксопиридин-2ил)-№(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2 -(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)2-(трет-бутоксикарбонилметил) -3 -оксо -8-[3-[Ν(1 -оксопиридин -2-ил)-И-(трет -бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,72 г, 77%): М8 (Е8) т/е 598,4 (М+Н)+.
c) Метил (±)-2-(карбоксиметил)-3-оксо-8[3-(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 25(а), за исключением того, что проводят замену (±)-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-уксусной кислоты на метил (±)-2(трет-бутоксикарбонилметил)-3-оксо-8-[3-[№ (пиридин-2-ил)-№(трет -бутоксикарбонил) амино] -1 -пропилокси] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,57 г, количественно): М8 (Е8) т/е
442,3 (М+Н)+.
б) (±)-2-(Карбоксиметил)-3-оксо-8-[3(пиридин-2 -иламино) -1-пропилокси] -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-2-(карбоксиметил)-3-оксо8-[3-(пиридин-2 -иламино)-1 -пропилокси]-
2.3.4.5- тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетат, получают целевое соединение (0,30 г, 56%): М8 (Е8) т/е 428,4 (М+Н)+. Элементный анализ С^Н^эОб · 2 Н2О: расчет (в %): С 57,01; Н 6,31; N 9,07. Найдено (в %): С 57,27; Н 6,24; N 8,86.
Пример 29. Получение (±)-2-(4аминобензил)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-
1- пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-2-(4-нитробензил)-3-оксо-8[3-[Ν-( 1 -оксо-пиридин-2-ил)-№(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(а), за исключением того, что проводят замену 4-трифторметилбензилбромида на 4нитробензилбромид, получают целевое соединение (0,284 г, 69%): М8 (Е8) т/е 635,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-2-(4-аминобензил)-3-оксо-8[3-[Ν-( 1 -оксо -пиридин-2-ил )-Ν -(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[№(1-оксо-пиридин-2ил) -Ν-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-
2- (4-нитробензил)-3-оксо-8-[3-[Н-(1-оксо-пиридин-2-ил)-№(трет-бутоксикарбонил)амино]-1пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,104 г, 40%): М8 (Е8) т/е 589,3 (М+Н)+.
c) (±)-2-(4-Аминобензил)-3-оксо-8-[3-[№ (пиридин-2-ил)-№(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1 (с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-2-(4-аминобензил)-3-оксо8-[3-[Ν-(1 -оксо -пиридин-2 -ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси] -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,08 г, 79%): М8 (Е8) т/е
575,4 (М+Н)+.
б) (±)-2-(4-Аминобензил)-3-оксо-8-[3(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 25(а), за исключением того, что проводят замену 3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-уксусной кислоты на (±)-2-(4аминобензил)-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2-ил)-№ (трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси] -
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту, получают целевое соединение (0,029 г, 44%): М8 (Е8) т/е 475,4 (М+Н)+. Элементный анализ С27Н30ЩО4 · 2 СГ3СО2Н · 1,5 Н2О:расчет (в %): С 51,03; Н 4,83; N 7,68. Найдено (в %): С 50,92; Н 4,78; N 7,64.
Пример 30. Получение (±)-3-оксо-8-[3-[Ы(пиридин-2-ил)-Ы-(бензоил)амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-3-оксо-8-[3-(1-оксо-пиридин2-ил)амино-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетат.
В соответствии с процедурой примера 25(а), за исключением того, что проводят замену (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-уксусной кислоты на метил (±)-3оксо-8-[3-[Ы-(1-оксопиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)-амино]-1-пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (1,9 г, 90%): М8 (Е8) т/е 558,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2- ил)амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2-ил)-№ (трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-3-оксо8-[3-( 1 -оксо-пиридин-2 -ил)амино -1 -пропилокси]-2-(4-триторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,40 г, 88%): М8 (Е8) т/е
542,3 (М+Н)+.
c) Метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2ил) -№(бензоил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат.
Бензоилхлорид (0,094 мл, 0,8 ммоль) добавляют по каплям к раствору метил (±)-3-оксо8-[3-пиридин-2 -ил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетата (0,4 г, 0,74 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,5 мл, 2,9 ммоль) в СН2С12 (10 мл). Через 18 ч раствор концентрируют и остаток очищают хроматографией на силикагеле (ЕЮАс/гексан, 1:1) с получением целевого соединения (0,293 г, 61%): М8 (Е8) т/е 646,2 (М+Н)+.
б) (±)-3-Оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2-ил)-№ (бензоил)амино]-1 -пропилокси] -2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3 -(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2ил)-№(бензоил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат, получают неочищенное целевое соединение. Очистка с помощью хроматографии на ОДС (10-80% СН3СЫ/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ в течение 1 ч), концентрирование и лиофилизация дают целевое соединение (0,025 г, 10%): М8 (Е8) т/е 632,4 (М+Н)+. Элементный анализ С35Н32Е3ЩО5 · 0,85 СГ3СО2Н: расчет (в %): С 60,50; Н 4,54; N 5,74. Найдено (в %): С 60,22; Н 4,35; N 5,77.
Пример 31. Получение (±)-3-оксо-8-[3-[Ы(пиридин-2-ил) -Ν-(трет-бутилацетил)амино]-1 пропилокси] -2-(4 -трифторметилбензил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-3-оксо-8-[3-Щ-(1-оксопиридин-2-ил)-№(трет-бутилацетил)амино]-1 пропилокси] -2-(4 -трифторметилбензил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор трет-бутилуксусной кислоты (0,228 мл, 1,2 ммоль) в СН2С12 (10 мл) обрабатывают оксалилхлоридом (1 мл, 11,4 ммоль) и затем ДМФ (0,0005 мл, 0,06 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч и затем концентрируют. Остаток переносят в СН2С12 (5 мл) и добавляют по каплям к раствору метил (±)-3-оксо-8[3-( 1 -оксопиридин-2-ил)амино -1 -пропилокси]-2(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н 2-бензазепин-4-ацетата (0,35 г, 0,6 ммоль) и Е1^ (0,5 мл, 2,4 ммоль) в СН2С12 (10 мл). Через 18 ч раствор промывают последовательно Н2О (1х), 5% NаНСО3 (2х), Н2О (1х), 5% лимонной кислотой (2х), Н2О (1х) и насыщенным №С1 (1х). Органический слой концентрируют с получением целевого соединения (0,4 г, 97%): М8 (Е8) т/е 656,4 (М+Н)+.
b) Метил (±)-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2- ил) -(трет-бутилацетил)амино]-1 -пропилокси] -
2- (4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[№(1-оксопиридин-2ил)-№(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-
3- оксо-8-[3-Щ-(1-оксо-пиридин-2-ил)-№(третбутилацетил)амино]-1-пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,22 г, 56%): М8 (Е8) т/е 642,3 (М+Н)+.
c) (±) -3 -Оксо -8-[3-[Ν-(пиридин-2 -ил) -№ (трет-бутилацетил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]-3 оксо -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2ил) -№-(трет-бутилацетил)амино]-1 -пропилокси] 89
2- (4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают неочищенное целевое соединение. Очистка с помощью хроматографии на ОДС (10-80% СН3СЫ/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ, в течение 1 ч), концентрирование и лиофилизация дают целевое соединение (0,022 г, 10%): М8 (Е8) т/е 626,4 (М+Н)+. Элементный анализ С34Н38Е3Ч3О5 · 1 Н2О: расчет (в %): С 63,44; Н 6,26; Ч 6,53. Найдено (в %): С 63,24; Н 5,96; Ч 6,39.
Пример 32. Получение (±)-3-оксо-8-[3-[Ы(пиридин-2-ил)-Ы-(изобутоксикарбонил)амино]-
1- пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(1-оксопиридин-2-ил)-Ч-(изобутоксикарбонил)амино]-1 пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 30(с), за исключением того, что проводят замену бензоилхлорида на изобутилхлорформиат, получают целевое соединение (0,47 г, 80%): М8 (Е8) т/е 658,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2ил)-Ч-(изобутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(1-оксо-пиридин-2ил)-Ч-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-
3- оксо-8-[3-[Ы-(1-оксопиридин-2-ил)-Ч-(изобутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,4 г, 63%): М8 (Е8) т/е 642,3 (М+Н)+.
c) (±)-3-Оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2-ил)-Ч(изобутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -
2- бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 1(с), за исключением того, что проводят замену этил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-3оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2ил)-Ч-(изобутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают неочищенное целевое соединение. Очистка с помощью хроматографии на ОДС (10-80% СН3СЫ/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ, в течение 1 ч), концентрирование и лиофилизация дают целевое соединение (0,008 г, 20%): М8 (Е8) т/е 628,3 (М+Н)+. Элементный анализ С33Н36Е3Ч3Об · 0,25 СЕ3СО2Н · 0,5 Н2О: расчет (в %): С 60,49; Н 5,64; Ч 6,32. Найдено (в %): С 60,78; Н 5,50; Ч 6,28.
Пример 33. Получение (8)-3-оксо-8-[3(пиридин-2-иламино)-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (8)-3-оксо-8-[3-Ы-(1-оксо- пиридин-2-ил)-Ч-(трет-бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(а), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (8)-8гидрокси-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (3,0 г, 83%): М8 (Е8) т/е 500,3 (М+Н)+.
b) Метил (8)-3-оксо-8-[3-Ы-(1-оксо- пиридин-2-ил)-Ч-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(а), за исключением того, что проводят замену метил (+)-3-оксо-8-[3-[Ы-(1-оксопиридин-2ил)-Ч-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (8)-3-оксо-8-[3-[Ы-(1оксо-пиридин-2-ил)-Ч-(трет-бутоксикарбонил) амино]-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (2,3 г, 72%): М8 (Е8) т/е 658,2 (М+Н)+.
c) Метил (8)-3-оксо-8-[3-Ы-(пиридин-2ил)-Ч-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 24(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(1-оксопиридин-2ил)-Ч-(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (8)3-оксо-8-[3-[Ы-( 1 -оксопиридин-2-ил)-Ч-(третбутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (1,1 г, 50%): М8 (Е8) т/е 642,1 (М+Н)+.
й) (8)-3-оксо-8-[3-Ы-(пиридин-2-ил)-Ч(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 24(с), за исключением того, что проводят замену метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(пиридин-2-ил)-Ч(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси]2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (8)-3-оксо8-[3-[Ч-(пиридин-2 -ил) -Ч-(трет-бутоксикарбо нил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4ацетат, получают целевое соединение (0,8 г, 60%): М8 (Е8) т/е 628,1 (М+Н)+.
е) (8)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,591 тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 25(а), за исключением того, что проводят замену (±)-3-оксо-8-[3-Щ-(пиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино]-1-пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-уксусной кислоты на (8)-3-оксо-8[3-Щ-(пиридин-2-ил)-№(трет-бутоксикарбонил) амино] -1 -пропилокси] -2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусную кислоту, получают неочищенное целевое соединение. Очистка с помощью хроматографии на ОДС (30% СН3С№/Н2О с содержанием 0,1% ТФУ, в течение 1 ч), концентрирование и лиофилизация дают целевое соединение (0,657 г, 72%): [ас]-42° (с, 1,0, МеОН); М8 (Е8) т/е 528,1 (М+Н)+. Элементный анализ С28Н28Е3ЩО4 • 2 СЕ3СО2Н · 3,75 Н2О: расчет (в %): С 46,69; Н 4,59; Ν 5,10. Найдено (в %): С 46,47; Н 4,58; Ν 5,48.
Пример 34. Получение метил (±)-3-оксо-8[3-(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2,3,4,5тетрагидро-1 Н-2-бензазепин-4-ацетата.
а) Метил (±)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2иламино)-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 1(Ь), за исключением того, что проводят замену этанола на изопропанол, получают целевое соединение (0,35 г, 76%): М8 (Е8) т/е 384,4 (М+Н)+.
Пример 35. Получение (8)-3-оксо-8-[3(1,4,5,6-тетрагидропиримид-2-иламино)-1пропилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил]-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
а) Метил (8)-8-[3-(4-нитробензилоксикарбониламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2-[4-(трифторметил)бензил]-2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-ацетат.
К метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетату (0,14 г, 0,34 ммоль) и Ρ1ι3Ρ (0,13 г, 0,540 ммоль) в СН2С12 (2 мл) при 0°С добавляют по каплям раствор 3-(4нитробензилоксикарбониламино)-1-пропанола (0,13 г, 0,51 ммоль) и диэтилазодикарбоксилат (0,08 мл, 0,50 мл). После завершения добавления убирают ледяную баню и реакцию проводят при перемешивании при комнатной температуре. Через 18 ч растворитель удаляют и продукт выделяют флэш-хроматографией на силикагеле (100% СНС13 - 5% МеОН/СНС13) с получением целевого соединения (0,12 г) в виде прозрачного масла. '11 ЯМР (400 МГц, С1)С1;) δ 8,18 (д., 1=8,2 Гц, 2Н), 7,65 (м., 1Н), 7,50 (м., 5Н), 7,40 (д., 1=8,2 Гц, 1Н), 7,03 (д., 1=9,8 Гц, 1Н), 6,70 (м., 1Н), 6,30 (с., 1Н), 5,23 (м., 3Н), 4,95 (д., 1=16,4 Гц, 1Н), 4,50 (д., 1=16,4 Гц, 1Н), 3,95 (м., 3Н), 3,78 (с., 3Н), 3,70 (м., 1Н), 3,45 (м., 2Н), 3,15
2,90 (м., 3Н), 2,50 (дд., 1=19,2, 5,5 Гц, 1Н), 1,95 (м., 2Н).
b) Метил (8)-8-(3-амино-1-пропилокси)-3оксо-2-[4-(трифторметил)бензил]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
К метил (8)-8-[3-(4-нитробензилоксикарбониламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2-бензазепин-4-ацетату (0,12 г, 0,19 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляют 10% Рб/С (20 мг). Через реакционный сосуд пропускают водород и затем подключают его к водородному баллону. Через 4,5 ч водород удаляют вентилированием и катализатор удаляют фильтрованием через целит (сеШе®). Удаление растворителя дает целевое соединение (0,09 г) в виде бледно-желтого остатка. Указанный материал используют без дальнейшей очистки. М8 (Е8) т/е 465,3 (М+Н)+.
c) Метил (8)-3-оксо-8-[3-(пиримидин-2иламино)-1-пропилокси]-2-[4-(трифторметил) бензил] -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-бензазепин-4ацетат.
Раствор метил (8)-8-(3-амино-1-пропилокси)-3-оксо-2-[4-(трифторметил)бензил]-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (0,09 г, 0,19 ммоль), 2-бромпиридина (0,09 г, 0,57 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,17 мл, 0,98 ммоль) в ДМФ (2 мл) нагревают при 80°С в течение 18 ч. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют с получением желтого остатка. Флэшхроматография на силикагеле (2% МеОН/ ЕЮАс) дает целевое соединение (42 мг) в виде прозрачного масла. М8 (Е8) т/е 543,1 (М+Н)+.
б) Метил (8)-3-оксо-8-[3-(3,4,5,6-тетрагидропиримид-2-иламино)-1-пропилокси]-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-ацетат.
В аппарат Парра для проведения гидрогенизации вводят метил (8)-3-оксо-8-[3(пиримидин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро- 1Нбензазепин-4-ацетат (42 мг, 0,08 ммоль), ледяную уксусную кислоту (2 мл), концентрированную НС1 (0,2 мл) и 10% Рб/С (10 мг). Смесь перемешивают в атмосфере водорода (40 фунт/кв.дюйм (226756 Па)) в течение 5 ч и затем водород удаляют вентилированием, а катализатор удаляют фильтрованием через целит (се11!е®). Выпаривание растворителя дает неочищенное целевое соединение (52 мг) в виде остатка темного цвета. Указанный остаток используют без дальнейшей очистки. М8 (Е8) т/е 547,2 (М+Н)+.
е) Метил (8)-3-оксо-8-[3-(3,4,5,6-тетрагидропиримид-2-иламино)-1-пропилокси]-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота.
К неочищенному метил (8)-3-оксо-8-[3(3,4,5,6-тетрагидропиримид-2-иламино)-1пропилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил]2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетату из примера 35 (г) в Е!ОН (1 мл) добавляют 1Ν №ОН (0,25 мл, 0,25 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 8,5 ч реакцию гасят добавлением 1Ν НС1 (0,25 мл, 0,25 ммоль). Удаление растворителя приводит к получению бледно-желтого твердого вещества. Препаративная ВЭЖХ хроматография с обращением фаз (Натб!оп РКР-1®, 30% СН3С№Н;О с содержанием 0,1% ТФУ) дает целевое соединение (18,1 мг) в виде белого порошка. М8 (Е8) т/е 533,3 (М+Н)+. Элементный анализ СтНя^ЕэОд · 2 Н2О · 2 СЕ3СО2Н: расчет (в %): С 46,74; Н 4,68; Ν 7,03. Найдено (в %): С 46,34; Н 4,31; Ν 6,82.
Пример 36. Получение (±)-3-оксо-8-[3-(Ы(пиридин-2-ил)-Ы-(метил)амино)-1-пропилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (±)-3-оксо-8-[3-[Ы-(1-оксопиридин-2-ил)-№(метил)амино)-1 -пропилокси] -2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 25(а), за исключением того, что проводят замену (±)-3-оксо-8-[3-(№(пиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино)-1-пропилокси]-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-уксусной кислоты на метил (±)-3оксо-8-[3-(№( 1 -оксопиридин-2-ил)-№(третбутоксикарбонил)амино)-1-пропилокси]-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат, получают хлористоводородную соль. Указанный материал превращают далее в свободное основание при распределении между Е!ОАс и 5% №1НСО3. Е!ОАс слой отделяют и концентрируют с получением целевого соединения (4,1 г, 100%): М8 (Е8) т/е
558,3 (М+Н)+.
b) Метил (±)-3-оксо-8-|3-(№(оксопиридин2-ил) -Ν-(метил) амино) -1 -пропилокс и]-2-[4(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 26(а), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3-[2-(Ы-оксопиридин)амино]-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3[Ν-( 1 -оксопиридин-2-ил)-№(метил)амино)]-1 пропилокси] -2-[4-(трифторметил)бензил]-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту, получают целевое соединение (3,0 г, 94%): М8 (Е8) т/е 572,3 (М+Н)+.
c) (±)-3-Оксо-8-[3-(№(пиридин-2-ил)-№ (метил)амино)-1-пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
В соответствии с процедурой примера 4(Ь), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8- [3 - [2-(Ν -оксопиридин)амино] -1 пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-3-оксо8-[3-(№(1-оксопиридин-2-ил)-№(метил)амино)-
-пропилокси]-2-[4-(трифторметилбензил]-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,32 г, 60%): М8 (Е8) т/е 556,2 (М+Н)+.
б) (±) -3 -Оксо -8-[3-(№(пиридин-2 -ил) -Ν(метил)амино)-1-пропилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с процедурой примера 4(с), за исключением того, что проводят замену метил (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1-пропилокси]-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (±)-3-оксо-8-[3-(№ (пиридин-2-ил) -Ν-(метил)амино) -1 -пропилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение (0,02 г, 15%): М8 (Е8) т/е 542,1 (М+Н)+. Элементный анализ С29Н30№,О.-|Е3 · СЕ3СО2Н · Н2О: расчет (в %): С 55,28; Н 4,94; Ν 6,24. Найдено (в %): С 55,45; Н 4,68; Ν 6,14.
Пример 37. Получение (8)-3-оксо-8-[3(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагиро -1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (8)-3-оксо-8-[3-(1-оксопиридин2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагиро-1Н-2-бензазепин-4ацетат.
К перемешанному раствору метил (8)-8гидрокси-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н2-бензазепин-4-ацетата (19 г, 57,4 ммоль) в сухом ТГФ (400 мл) и сухого ДМФ (200 мл) в атмосфере аргона добавляют 2-(3-гидроксипропиламино)пиридин-Ν-оксид (11,6 г, 69 ммоль) и трифенилфосфин (18,0 г, 69 ммоль). После полного растворения всех твердых веществ (~30 мин) реакционную смесь охлаждают до 0°С в ледяной бане и с помощью шприца добавляют диизопропилазодикарбоксилат (14,3 мл, 69 ммоль). Реакционной смеси дают медленно нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 18 ч. Концентрирование и флэшхроматография на силикагеле (СНС13/Е!ОАс/ Е!ОН, 8:2:1) дают целевое соединение (20,83 г, 75%) в виде твердой пены. Дополнительное количество продукта в виде 5,73 г может быть получено при возвращении в реакционный цикл восстановленного исходного материала из указанной реакции, что дает в целом 26,56 г (96%) целевого соединения: М8 (Е8) т/е 482,2 (М+Н)+; Ί1 ЯМР (400 МГц, ДМСО-б.) δ 8,09 (дд., 1=6,5, 1,3 Гц, 1Н), 7,29 (т., 1Н), 7,18 (т., 1Н), 7,02 (д., 1=9,2 Гц, 1Н), 6,84-6,79 (м., 3Н), 6,59 (т., 1Н) , 5,32 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 4,28-4,14 (м., 2Н), 4,16 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 4,02 (т., 2Н), 3,84 (м.,1Н), 3,58 (С., 3Н), 3,40 (дд., 2Н), 3,01 (дд., 1Н), 2,73 (дд., 1Н), 2,70 (дд., 1Н), 2,52 (дд., 1Н), 2,02 (ддд., 2Н).
b) Метил (8)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2- иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2.3.4.5- тетрагиро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетат.
К перемешанному раствору метил (8)-3оксо-8-[3-( 1-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-ацетата (26,56 г, 55 моль) в изопропаноле (500 мл) добавляют 10% палладий на активированном угле (8 г, 7,5 ммоль, который был тщательно смочен изопропанолом в атмосфере аргона) и циклогексен (55,7 мл, 550 ммоль). Реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в атмосфере аргона на масляной бане, установленной на 90°С. Через 6 ч вносят дополнительное количество 10% палладия на активированном угле (8 г, 7,5 ммоль, который был тщательно смочен изопропанолом в атмосфере аргона) и циклогексена (55,7 мл, 550 ммоль). Еще через 18 ч реакционную смесь фильтруют в горячем состоянии через целит (сеШе®) и фильтровальную прокладку промывают МеОН/СНС13, 1:1 (400 мл). Фильтрат концентрируют под вакуумом и остаток чистят флэш-хроматографией на силикагеле (СНС13/МеОН, 95:5) с получением целевого соединения (19,50 г, 76%) в виде белой липкой пены: ТСХ (кремнезем, 5% МеОН в СНС13) Кг - 0,52; М8 (Е8) т/е 466,3 (М+Н)+; '11 ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 7,94 (дд., 1Н), 7,34 (т., 1Н), 7,02 (д., 1=9,2 Гц, 1Н), 6,81 (м., 2Н), 6,54 (т., 1Н), 6,46 (м., 2Н), 5,31 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 4,23-4,13 (м., 2Н), 4,17 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 4,02 (т., 2Н), 3,82 (м., 1Н), 3,58 (с., 3Н), 3,36 (м., 2Н), 3,01 (дд., 1Н), 2,72 (дд., 1Н), 2,68 (дд., 1Н), 2,50 (дд., 1Н), 1,96 (ддд., 2Н).
с) (8)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
К перемешанному раствору метил (8)-3оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетата (19,50 г, 42 ммоль) в диоксане (150 мл) добавляют водный Ш №1ОН (75 мл, 75 ммоль). Мутную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч и затем полученный гомогенный раствор нейтрализуют добавлением водного Ш НС1 (75 мл, 75 ммоль). Раствор концентрируют почти досуха на роторном испарителе для осаждения продукта. Супернатант декантируют и оставшееся резиноподобное твердое вещество перерастворяют в метаноле. Прозрачный раствор затем повторно концентрируют на роторном испарителе. Оставшееся твердое вещество растирают с небольшим объемом воды, фильтруют и высушивают под вакуумом с получением целевого соединения (16,38 г, 86%) в виде белого порошка. ВЭЖХ (НатШоп РКР-1®, 25% СН3С№/Н2О, содержащий 0,1% ТФУ) к'=3,1; [ас]-112,3° (с, 1,0, МеОН); М8(Е8) т/е 452,3 (М+Н)+. '11 ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 7,95 (дд., 1Н), 7,34 (дт., 1Н), 7,02 (д., 1=9,2 Гц, 1Н), 6,81 (м., 2Н), 6,58 (т., 1Н), 6,47 (м., 2Н), 5,30 (д.,
1=16,5 Гц, 1Н), 4,27-4,13 (м., 2Н), 4,15 (д., 1=16,5 Гц, 1Н), 4,02 (т., 1Н), 3,78 (м., 1Н), 3,37 (м., 2Н), 3,00 (дд., 1Н), 2,69 (дд., 1Н), 2,65 (дд., 1Н), 2,41 (дд., 1Н), 1,96 (ддд., 2Н). Элементный анализ С22Н24Е^3О4: расчет (в %): С 58,53; Н 5,36; N 9,31. Найдено (в %): С 58,37; Н 5,42; N 9,20.
Пример 38. Получение (К)-3-оксо-8-[3(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (К)-3-оксо-8-[3-(1-оксопиридин2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагиро-1Н-2-бензазепин-4ацетат.
Раствор 2-[(3 -гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ы-оксида (0,33 г, 2 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (0,3 ммоль, 2 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) медленно добавляют по каплям к раствору метил (К)-8-гидрокси-3-оксо(2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-ацетата (0,3 г, 1 ммоль) и трифенилфосфина (0,485 г, 26 ммоль) в безводном СН2С12 (10 мл) при комнатной температуре. Через 17 ч реакционную смесь концентрируют. Хроматография на силикагеле (градиент: 0,5%5% МеОН/СН2С12) дает целевое соединение (0,35 г, 80%) в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 482,3 (М+Н)+.
b) Метил (К)-3-оксо-8-[3-(1-оксопиридин2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагиро - 1Н -2 -бензазепин-4 ацетат.
Смесь метил (К)-3-оксо-8-[3-(1-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (0,35 г, 0,7 ммоль), циклогексена (0,75 мл, 7 ммоль), 10% Рб/С (88 мг, 0,07 ммоль) и изопропанола (9 мл) нагревают в атмосфере аргона до температуры кипения с обратным холодильником. Через 18 ч вносят дополнительное количество 10% Рб/С (36 мг, 0,03 ммоль) и циклогексена (0,75 мл, 7 ммоль). Через 36 ч реакционную смесь подвергают горячему фильтрованию через целит (се1йе®) и фильтровальную прокладку промывают горячим ЕЮАс. Концентрирование дает желтое масло. Хроматография на силикагеле (1-5% МеОН в СН2С12) дает целевое соединение (0,26 г, 77%) в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 466,2 (М+Н)+.
c) (К.)-3-Оксо-8-[3 -(пиридин-2-иламино)-1 пропилокси]-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагиро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
ЫОН · Н2О (25 мг, 0,6 ммоль) добавляют к раствору метил (К)-8-[3-(2-пиридиламино)-1пропилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (0,25 г, 0,54 ммоль) в ТГФ (5 мл) и Н2О (2 мл) при комнатной температуре. Через 18 ч реакционную смесь концентрируют досуха и остаток растворяют в Н2О (4 мл). Раствор осторожно доводят до значения рН~4 с помощью 3,0N НС1.
Собирают осадок и высушивают его под высоким вакуумом при 40-45°С с получением целевого соединения (0,15 г, 62%) в виде желтоватобелого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 452,1 (М+Н)+. Элементный анализ С22Н24Р3ЩО4 · 0,5 Н2О: расчет (в %): С 57,38; Н 5,47; N 9,12. Найдено (в %): С 57,72; Н 5,24; N 8,92.
Пример 39. Получение (8)-8-[3-(4метилпиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-3оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (8)-8-[3-(4-метил-1-оксопиридин2-иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2-(2,2,2трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Раствор 2-[(3 -гидрокси-1 -пропил)амино]-4метилпиридин-Ы-оксида (0,60 г, 3,6 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (0,6 мл, 3,6 ммоль) в безводном СН2С12 (12 мл) добавляют по каплям в течение 3-4 мин к раствору метил (8)-8гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (0,60 г, 1,8 ммоль) и трифенилфосфина (0,95 г, 3,6 ммоль) в безводном СН2С12 (6 мл) при комнатной температуре. Через 17 ч реакционную смесь концентрируют. Хроматография на силикагеле (градиент: 1-5% МеОН/СН2С12) дает целевое соединение (0,45 г, 49%) в виде желтоватобелой пены: М8 (Е8) т/е 496,3 (М+Н)+.
b) Метил (8)-8-[3-(4-метилпиридин-2- иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин4-ацетат.
Смесь метил (8)-8-[3-(4-метил-1-оксопиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетата (0,45 г, 0,9 ммоль), циклогексена (0,93 мл, 9 ммоль), 10% Рб/С (0,2 г, 0,18 ммоль) и изопропанола (9 мл) нагревают в атмосфере аргона до температуры кипения с обратным холодильником. Через 18 ч вносят дополнительное количество 10% Рб/С (0,2 г, 0,18 ммоль) и циклогексена (0,27 мл, 2,65 ммоль). Через 36 ч реакционную смесь подвергают горячему фильтрованию через целит (сеШе®) и фильтровальную прокладку промывают горячим ЕЮАс. Концентрирование дает желтое масло. Хроматография на силикагеле (1%-3% МеОН в СН2С12) дает целевое соединение (0,32 г, 74%) в виде белой пены: М8 (Е8) т/е 480,2 (М+Н)+.
c) (8)-8-[3-(4-метилпиридин-2-иламино)-1пропилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
ЬЮН · Н2О (33 мг, 0,79 ммоль) добавляют к раствору метил (8)-8-[3-(4-метилпиридин-2иламино)-1-пропилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин4-ацетата (0,32 г, 0,67 ммоль) в ТГФ (5 мл) и
Н2О (2 мл) при комнатной температуре. Через ч реакционную смесь концентрируют досуха и остаток растворяют в Н2О (4 мл). Раствор экстрагируют этилацетатом и затем осторожно доводят до значения рН~5 с помощью 3,0N НС1. Осадок собирают и высушивают под высоким вакуумом при 40-45°С с получением целевого соединения (0,22 г, 71%) в виде желтоватобелого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 466,1 (М+Н)+. Элементный анализ С23Н26Е3ЩО4: расчет (в %): С 59,35; Н 5,63; N 9,03. Найдено (в %): С 58,97; Н 5,55; N 8,73.
Пример 40. Получение (8)-8-[2-[6(метиламино)пиридин-2-ил]-1-этокси]-3-оксо-2(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-уксусной кислоты.
a) Метил (8)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил]-1-этокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетат.
В соответствии с методикой примера 37(а), за исключением того, что проводят замену 2-[(3гидрокси-1 -пропил)амино]пиридин-Ы-оксида на 6-(метиламино)-2-пиридилэтанол, а также замену (К)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата на (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетат, получают целевое соединение в виде бесцветного масла: М8 (Е8) т/е 466,2 (М+Н)+.
b) (8)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил]-
1- этокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
В соответствии с методикой примера 37(с), за исключением того, что проводят замену метил (К)-8-|3 -(2-пиридиламино)-1 -пропилокси] -
3- оксо-2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -
1Н-2-бензазепин-4-ацетата на метил (8)-8-[2-[6(метиламино)пиридин-2-ил]-1 -этокси]-3 -оксо-2(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-ацетат, получают целевое соединение в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 452,2 (М+Н)+. Элементный анализ
С22Н24Е3ЩО4 · 0,7 Н2О: расчет (в %): С 56,94; Н 5,52; N 9,05. Найдено (в %): С 56,80; Н 5,19; N 8,85.
Пример 41. Получение (8)-3-оксо-8-[3(пиридин-2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-
4- уксусной кислоты.
а) Метил (8)-3-оксо-8-[3-(1-оксопиридин-
2- иламино)-1-пропилокси]-2-(2-фенилэтил)-
2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетат.
Раствор 2-[(3 -гидрокси-1 -пропил)амино] пиридин-Ы-оксида (336 мг, 2,0 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (0,3 мл, 2,0 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) добавляют к раствору метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2-(2-фенилэтил)2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (350 мг, 1,0 ммоль) и трифенилфосфина (525 мг,
2,0 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) при ком99
100 натной температуре. Через 24 ч смесь концентрируют. Хроматография на силикагеле (градиент: ЕЮАс (500 мл) и затем 5% МеОН/СНС13) дает целевое соединение в виде оранжевой пены (288 мг, 57%): М8 (Е8) т/е 504 (М+Н)+.
b) Метил (8)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2- иламино)-1-пропилокси]-2-(2-фенилэтил)-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Смесь метил (8)-3-оксо-8-[3-(оксопиридин2-иламино)-1-пропилокси]-2-(2-фенилэтил)-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетата (288 мг, 0,57 ммоль), циклогексена (0,6 мл, 5,8 ммоль), 10% Рб/С (62 мг, 0,58 ммоль) и 2пропанола (6 мл) нагревают в атмосфере аргона до температуры кипения с обратным холодильником. Через 31 ч смесь фильтруют в горячем состоянии через целитную прокладку (сеШе®) и фильтровальную прокладку промывают горячим МеОН/СНС13, 1:1 (200 мл) и фильтрат концентрируют. Флэш-хроматография на силикагеле (5% МеОН/СНС13) с последующей второй флэш-хроматографией на силикагеле (50% ТГФ/циклогексан) дают целевое соединение в виде желтовато-белой пены (133 мг, 48%): М8 (Е8) т/е 488 (М+Н)+.
c) (8)-3-Оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1пропилокси]-2-(2-фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
1,0Ν ЬЮН (0,3 мл, 0,3 ммоль) добавляют к раствору метил (8)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2иламино)-1-пропилокси]-2-(2-фенилэтил)-
2.3.4.5- тетрагидро - 1Н-2 -бензазепин-4 -ацетата (133 мг, 0,27 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) и Н2О (1,2 мл) при 0°С. Смеси позволяют нагреться до комнатной температуры в течение 18 ч. Далее смесь промывают ЕьО (2 х 5 мл) и затем помещают в условия слабого вакуума для удаления остатков органических растворителей. Водный слой пропускают через фильтр Акродиск (Асгоб1кк) с размером пор 0,45 мкм и затем осторожно подкисляют до рН 6 с использованием 10% НС1 в Н2О при 0°С. Осадок собирают, промывают Н2О и высушивают под вакуумом при 50°С с получением целевого соединения в виде белого твердого вещества (62 мг, 48%): М8 (Е8) т/е 474 (М+Н)+. Элементный анализ С28Н3Щ3О4 • 0,75 Н2О: расчет (в %): С 69,05; Н 6,75; Ν 8,63. Найдено (в %): С 69,05; Н 6,66; Ν 8,55.
Пример 42. Получение (8)-8-[2-[6(метиламино)пиридин-2-ил]этокси]-3-оксо-2-(2фенилэтил) -2,3,4,5-тетрагидро -1Н-2-бензазепин4-уксусной кислоты.
а) Метил (8)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил]этокси]-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-
2.3.4.5- тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетат.
Диизопропилазодикарбоксилат (0,3 мл, 1,5 ммоль) добавляют к раствору (8)-8-гидрокси-3оксо-2-(2-фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-ацетата (350 мг, 1,0 ммоль), 6(метиламино)-2-пиридилэтанола (228 мг, 1,5 ммоль) и трифенилфосфина (393 мг, 1,5 ммоль) в безводном ТГФ (10 мл) при 0°С. Смеси дают нагреться до комнатной температуры в течение 72 ч и затем концентрируют. Флэшхроматография на силикагеле (50% ЕЮАс/ гексаны) с последующей второй флэшхроматографией на силикагеле (25% ЕЮАс/гексаны) дают целевое соединение в виде белой пены (250 мг, 51%): М8 (Е8) т/е 488 (М+Н)+.
Ь) (8)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил] этокси]-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусная кислота.
1,0Ν ЬЮН (0,61 мл, 0,62 ммоль) добавляют к раствору метил (8)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил]этокси]-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4ацетата (250 мг, 0,51 ммоль) в ТГФ (2,5 мл) и Н2О (1,9 мл) при 0°С и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Далее смесь промывают ЕьО (2 х 5 мл) и затем помещают ее в условия слабого вакуума для удаления остатков органических растворителей. Водный слой пропускают через фильтр Акродиск (Асгобйк) с размером пор 0,45 мкм и затем осторожно подкисляют до рН 6 с использованием 10% НС1 в Н2О при 0°С. Осадок собирают, промывают Н2О и высушивают под вакуумом при 50°С с получением целевого соединения в виде белого твердого вещества (134 мг, 55%) в виде белого твердого вещества: М8 (Е8) т/е 474 (М+Н)+. Элементный анализ С28Н3Щ3О4 · 0,75 Н2О: расчет (в %): С 69,05; Н 6,73; Ν 8,63. Найдено (в %): С 69,23; Н 6,59; Ν 8,55.
Пример 43. Получение (8)-8-[2-[6(метиламино)пиридин-2-ил]-1-этокси]-3-оксо-2[4-(трифторметил)бензил]-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусной кислоты.
а) Метил (8)-8-[2-[6-(метиламино) пиридин-2-ил]-1-этокси]-3-оксо-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазе пин-4-ацетат.
К раствору метил (8)-8-гидрокси-3-оксо-2[4-(трифторметил)бензил]-2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазепин-4-ацетата (0,18 г, 0,44 ммоль) и Р113Р (0,23 г, 0,88 ммоль) в СН2С12 (2 мл) добавляют раствор 6-(метиламино)-2-пиридилэтанола (0,13 г, 0,88 ммоль) и диэтилазодикарбоксилата (0,14 мл, 0,89 ммоль) в СН2С12 (2 мл). После выдерживания при комнатной температуре в течение 2 дней растворитель удаляют под пониженным давлением. Радиальная хроматография на силикагеле (пластинки толщиной 6 мм, 5% МеОН/СНС13) дает прозрачное масло (0,63 г), которое содержит смесь целевого соединения с непрореагировавшим метил (8)-8-гидрокси-3оксо-2-[4-(трифторметил)бензил]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-ацетатом. Указанный материал очищают дальше радиальной хроматографией на силикагеле (пластинки толщиной 6 мм, 50% ЕЮАс/гексаны) с получением целевого
101
102 соединения (0,12 г), в виде ирозрачного масла: М8 (Е8) т/е 542,3 (М+Н)+.
Ь) (8)-8-[2-[6-(метиламино)ииридин-2-ил]1-этокси]-3-оксо-2-[4-( трифторметил)бензил]-
2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-уксусная кислота.
К раствору метил (8)-8-[2-[6-(метиламино) ииридин-2-ил]-1-этокси]-3-оксо-2-[4-(трифторметил)бензил]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазеиин-4-ацетат (0,12 г, 0,22 моль) в ЕЮН (2 мл) добавляют Ш №О11 (0,50 мл). По истечению 3,5 ч выдерживания ири комнатной темиературе всю массу растворителя удаляют иод иониженным давлением с иолучением белого остатка. Указанный остаток растворяют в воде и нейтрализуют раствор до значения рН 7 с иомощью Ш НС1. Полученный осадок собирают и высушивают иод вакуумом, что дает целевое соединение (28,1 мг) в виде белого твердого вещества: [αο]-74,0° (0,05, ЕЮН); М8 (Е8) т/е 528,3 (М+Н)+. Элементный анализ С28Н28Е3^О4 · 0,5 Н2О: расчет (в %): С 62,68; Н 5,45; N 7,83. Найдено (в %): С 62,60; Н 5,35; N 7,66.
Пример 44. Стандартная дозированная комиозиция для иарентерального введения.
Преиарат, который содержит 20 мг соединения иримера 1 в виде стерильного сухого иорошка, готовят следующим образом: 20 мг соединения растворяют в 15 мл дистиллированной воды. Раствор фильтруют в стерильных условиях в 25 мл амиулу, рассчитанную на много доз и лиофилизируют. Порошок восстанавливают ири добавлении 20 мл 5% декстроны в воде (1)5Ш) с иолучением комиозиции для внутривенной или внутримышечной инъекции. Дозировка в этом случае оиределяется инъецируемым объемом. Последующее разбавление может быть достигнуто ири добавлении отмеренного объема указанной стандартной дозы к другому объему □5Ш для инъекции, или отмеренная доза может быть добавлена в другое устройство для расиределения лекарственного иреиарата, наиример во флакон или бутыль для внутривенной каиельной инфузии или в другую систему для инъекций/инфузий.
Пример 45. Стандартная дозированная комиозиция для иерорального введения.
Каисулу для иерорального введения готовят ири смешивании и размалывании 50 мг соединения иримера 1 с 75 мг лактозы и 5 мг стеарата магния. Полученный иорошок ироиускают через сито и наиолняют им твердую желатиновую каисулу.
Пример 46. Стандартная дозированная комиозиция для иерорального введения.
Таблетку для иерорального введения готовят ири смешивании и гранулировании 20 мг сахарозы, 150 мг сульфата кальция дигидрата и мг соединения иримера 1 с 10% раствора желатина. Влажные гранулы ироиускают через сито, высушивают, смешивают с 10 мг крахмала, 5 мг талька и 3 мг стеариновой кислоты и далее ирессуют иолученную массу в таблетки.
Приведенное выше оиисание иолностью раскрывает, как изготовить и исиользовать то, что является иредметом настоящего изобретения. Однако настоящее изобретение не ограничивает конкретные варианты реализации теми, что были оиисаны выше, а включает все модификации, охватываемые ирилагаемой формулой изобретения. Различные ссылки на журналы, иатенты и другие иубликации, которые ириведены в оиисании, содержат оиисание достигнутого в технике уровня, и включены в настоящее оиисание в качестве ссылки в иолном размере.

Claims (11)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (I) где К1 означает К7 или А-С0-4 алкил, А-С2-4 алкенил, А-С2-4 алкинил, А-С3-4 оксоалкенил, А-С3-4 оксоалкинил, А-С1-4 аминоалкил, А-С3-4 аминоалкенил, А-С3=4 аминоалкинил, необязательно замещенные любым ириемлемым сочетанием одного или более К10 и К7;
    А означает Н, С3-6 циклоалкил, Не! или Аг;
    К7 означает -СОЕ8, -СОСК'2К9, -С(8)К8, -8(О)ЮОК', -8(О)юNК'К. -РО(ОК'), -РО(ОК')2, -Ж)2 или тетразолил;
    каждый К8 означает независимо -ОК', ^К'К, ^К'8О2К', ^К'ОК' или -ОСК'2СО(О)К';
    К9 означает -ОК', -СЧ -8(О)ГК', ^(ОХ^К^ -С(О)К', С(О)МС или -СО2К';
    К10 означает Н, галоген, -ОК11, -СЧ ^О2, -СР3, СР38(О)Г-, -СО2К', -СОNК'2. А-С0-6 алкил-, А-С1-6 оксоалкил-, А-С2-6 алкенил-, А-С2-6 алкинил-, А-С0-6 алкилокси-, А-С0-6 алкиламино- или А-С0-6 алкил-8(О)г-;
    К11 означает К', -С(О)К', -С(О)т’2,
    -С(О)ОК', -8(О)юЕ' или -8(0^^;
    К2 означает
    103
    104
    А означает -(СНКё)а-и-(СНКё)Ь-;
    и отсутствует или означает СО, СКё2, С(=СКё2), 8(О)к, О, Ж8, СКёОКё, СКё(ОКк)СКё2, СКё2СКё(ОКк), С(О)СКё2, СКё2С(О), №N^3, N14 СО, ОС(О), С(О)О, С(8)О, ОС(8), С(8)ЯКё, N^^8), 8(О)2ЯКё, Ж^О^, N^^^2, СЖЛК, СКё2О, ОСКё2, С=С или СКё=СКё;
    О означает NКе, 8 или О;
    Кд означает Н, С1-6 алкил, Не1-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил или Аг-С0-6 алкил;
    Кк означает Кё, -С(О)Кё или -С(О)ОК£;
    К1 означает Н, С1-6 алкил, Не1-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил, Аг-С0-6 алкил или С1-6 алкил, замещенный одной-тремя группами, выбранными из галогена, СИ NКё2, ОКё, 8Кё, СО2Кё и СОЫ(Кё)2;
    К£ означает Н, С1-6 алкил или Аг-С0-6 алкил;
    Ке означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил, Не1-С0-6 алкил, С3-7 циклоалкил-С0-6 алкил или (СН2)кСО2Кд;
    КЬ и Кс выбирают независимо друг от друга из Н, С1-6 алкила, Аг-С0-6 алкила, Не1-С0-6 алкила или С3-6 циклоалкил-С0-6 алкила, галогена, СР3, ОК£, 8(О)кК£, СОК1, Ш2, С1С;, СОЩКУ, СЩ^Ку, или КЬ и Кс соединяются друг с другом с образованием пяти- или шестичленного ароматического или неароматического карбоциклического или гетероциклического кольца, необязательно замещенного заместителями в количестве до трех, выбранными из галогена, СР3, С1-4 алкила, ОК£, 8(О)кК£, СОК£, СО2К£, ОН, Ю2, ЖК£)2, СОЩЖЬ и СЩЖЖЪ; или метилендиокси;
    Р1, р2, р3 и р4 означают независимо друг от друга N или С-Ку, при условии, что не более одного из р1, р2, р3 и р4 означает N
    К' означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил или С3-6 циклоалкил-С0-6 алкил;
    К означает К', -С(О)К' или -С(О)ОК';
    К''' означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил, Не1-С0-6 алкил или С3-6 циклоалкил-С0-6 алкил, галоген, СР3, ОК£, 8(О)кК£, СОК£, ^2, N1 Шн СОЩЖу, С1СМК1'),:
    Ку означает Н, галоген, -ОК8, -8К8, -СН ^Κ^, -СР3, СР38(О)Г-, -СО2К8 -СОК8 или -СΟNК82 или С1-6 алкил, необязательно замещенный галогеном, -ОК8, -8К8, -СП ^О2, -СГ3, К'8(О)Г-, -СО2К8, -СОК8 или
    -СО^^;
    а означает 0, 1 или 2;
    Ь означает 0, 1 или 2;
    к означает 0, 1 или 2;
    т означает 1 или 2;
    г означает 0, 1 или 2;
    8 означает 0, 1 или 2;
    и означает 0 или 1; и ν означает 0 или 1;
    причем Не! или гетероцикл означает необязательно замещенное пяти- или шестичленное моноциклическое кольцо или девяти- или десятичленное бициклическое кольцо, содержащие от одного до трех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы; или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Соединение по п.1, в котором К2 означа ет
    Т° α^Ν γ ся’г— νν— где р1, р2 и р3 каждый означают СКу, р4 означает СКу или N и означает О, каждый К' означает Н, К'' означает Н, С1-6 алкил, -С(О)С1-6 алкил, С(О)ОС1-6 алкил, -С(О)С0-6 алкил-Аг или С(О)ОС0-6 алкил-Аг, А означает -СН2-СН2- и Ку означает Н, галоген, -ОКё, -8Кё, -С^ ^О, -СРз, СР3(О)Г-, -СО2Кё, -СОКё, -СОЖ^ или С1-6 алкил; или где р1, р2 и р3 каждый означают СН, и означает
    0, каждый К' означает Н, К означает Н или С1-4 алкил, ν означает 0 и А означает -СН2-СН2-; или где О означает ЫН и КЬ и Кс каждый означает Н и А означает ^^-(^^)^ или где О означает NН и КЬ и Кс соединяются друг с другом с образованием пяти- или шестичленно го ароматического или неароматического карбоциклического или гетероциклического кольца, необязательно замещенного заместителями в количестве до трех, выбранными из галогена, СР3, С1-4 алкила, ОК£, 8(О)кК£, СОК£, СО2К£, ОН, ^2, ЖК'Ъ, СОЩКУ и СЩ^кУ; или метилендиокси; и А означает -СН2-СН2-; или ν γ ΝΡ-— сп’2—νν— где каждый К' означает Н, К означает Н или С1-4 алкил, Кд означает Н или С1-4 алкил, 8 означает 0, 1 или 2 и А означает -СН2-СН2-.
  3. 3. Соединение по п.1, в котором К1 означает Н, С1-6 алкил, Аг-С0-6 алкил, Не1-С0-6 алкил, С3-6 циклоалкил-С0-6 алкил, -СН2СР3, -(СН2)1-2С(О)ОК' или -(СН2)2ОК', где К1 означает Н или С1-4 алкил.
  4. 4. Соединение по п.3, в котором К1 означает -СН2СР3.
  5. 5. Соединение, которое представляет собой (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4- уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-(4-амино-2-пиридиламино)-1 пропилокси] -3 -оксо-2,3,4,5-тетрагидро- 1Н-2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    105
    106 (±)-8-[3-(4-метокси-2-пиридиламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-(2-пиридиламино)-1 -пропилокси]2-метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-[2-(1,4,5,6-тетрагидропиримидинил)амино]-1-пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[2-(2-бензимидазолил)этокси]-3-оксо-
    2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил)-1этокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[2-(бензимидазол-2-ил)-1 -этокси] -3 оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-(4-аминопиридин-2-иламино)-1пропилокси]-2-метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-(пиримидин-2-иламино)-1пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (К)-8-[3-(4-аминопиридин-2-иламино)-1пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-[(1,4,5,6-тетрагидропиримидин-2-ил)амино]-1 -пропилокси] -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (8) -8-[3-(4 -амино пиридин-2 -иламино)-1 пропилокси]-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-[N-(пиридин-2-ил)-N-(третбутоксикарбонил)амино] -1 -пропилокси] -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-[Ν-( 1-оксопиридин-2-ил)-Х-(третбутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси] -3 -оксо-
    2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-[N-(пиридин-2-ил)-N-(третбутоксикарбонил)амино]-1 -пропилокси] -2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-2-метил-3-оксо-8-[3-[№(пиридин-2-ил)Х-(метил)амино]-1 -пропилокси]-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-2-бензил-3-оксо-8-[3-(пиридин-2иламино)-1 -пропилокси] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н 2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-2-(карбоксиметил)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2 -иламино) -1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-2-(4-аминобензил)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1 -пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-[N-(пиридин-2-ил)-N-(бензоил)амино] -1 -пропилокси]-2-(4-трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-(2-имидазолин-2-иламино)-1пропилокси] -2-метил-3-оксо -2,3,4,5-тетрагидро 1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3 -(пиридин-2-иламино)-1 пропилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[2-(2-аминотиазол-4-ил)-1 -этокси]-2метил-3-оксо-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-(4,6-диметилпиридин-2-иламино)1 -пропилокси]-2 -метил-3 -оксо -2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-8-[3-(4,5,6,7-тетрагидро-1Н-1,3диазепин-2-иламино)-1 -пропилокси] -2-метил-3 оксо -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазепин-4уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-[N-(пиридин-2-ил)-N-(третбутилацетил)амино]-1 -пропилокси]-2-(4трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-[N-(пиридин-2-ил)-Nизобутоксикарбониламино] -1 -пропилокси] -2-(4 трифторметилбензил) -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н-2бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (8)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1пропилокси] -2-(4 -трифторметилбензил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-(4-метилпиридин-2иламино)-1 -пропилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил)-
    2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (±)-3-оксо-8-[3-[N-(пиридин-2-ил)-N(метил)амино]-1 -пропилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазе пин-4-уксусную кислоту;
    (8)-3-оксо-8-[3-(пиридин-2-иламино)-1пропилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (К)-3 -оксо-8-[3 -(пиридин-2-иламино)-1 пропилокси] -2-(2,2,2-трифторэтил) -2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (8)-8-[3-(4-метилпиридин-2-иламино)-1пропилокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-
    2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    (8)-3-оксо-8-[3-(1,4,5,6-тетрагидропиримид-2-иламино)-1-пропилокси]-2-[4-(трифторметил)бензил] -2,3,4,5-тетрагидро - 1Н -2 -бензазе пин-4-уксусную кислоту;
    107
    108
    ^)-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-8-[3-(пиридин2-иламино)-1-пропилокси]-2,3,4,5-тетрагидро1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    ^)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил]-1этокси]-3-оксо-2-(2-фенилэтил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    ^)-8-[2-[6-(метиламино) пиридин-2-ил]-1этокси]-3-оксо-2-(2,2,2-трифторэтил)-2,3,4,5тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту; или
    ^)-8-[2-[6-(метиламино)пиридин-2-ил]-1этокси]-3 -оксо-2 - [4-(трифторметил)бензил] -
    2,3,4,5-тетрагидро-1Н-2-бензазепин-4-уксусную кислоту;
    или их фармацевтически приемлемую соль.
  6. 6. Фармацевтическая композиция, которая включает соединение по любому одному из пп.1-5 и фармацевтически приемлемый носитель.
  7. 7. Способ получения соединения формулы (I) по п.1, отличающийся тем, что указанный способ включает взаимодействие соединения формулы (IV) с соединением формулы (V) где К1 и К2 определены как в формуле (I), при этом осуществляется защита реакционноспособных функциональных групп, и Ь1 означает ОН или галоген;
    с последующим удалением любой из защищающих групп и, необязательно, с образованием фармацевтически приемлемой соли.
  8. 8. Применение соединения по любому из пп. 1-5 в качестве лекарственного средства.
  9. 9. Применение соединения формулы (I) по п. 1 для изготовления лекарственного средства.
  10. 10. Применение соединения формулы (I) по п. 1 для лечения остеопороза.
  11. 11. Применение соединения формулы (I) по п.1 для ингибирования ангиогенеза.
EA199900356A 1996-10-02 1997-10-01 Антагонисты рецептора витронектина EA002419B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2732096P 1996-10-02 1996-10-02
US4377697P 1997-04-11 1997-04-11
PCT/US1997/018001 WO1998014192A1 (en) 1996-10-02 1997-10-01 Vitronectin receptor antagonists

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199900356A1 EA199900356A1 (ru) 2000-02-28
EA002419B1 true EA002419B1 (ru) 2002-04-25

Family

ID=26702318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199900356A EA002419B1 (ru) 1996-10-02 1997-10-01 Антагонисты рецептора витронектина

Country Status (37)

Country Link
EP (1) EP0957917B1 (ru)
JP (2) JP4491072B2 (ru)
KR (1) KR100589578B1 (ru)
CN (1) CN1114403C (ru)
AP (1) AP1463A (ru)
AR (1) AR008878A1 (ru)
AT (1) ATE312089T1 (ru)
AU (1) AU733417B2 (ru)
BG (1) BG64581B1 (ru)
BR (1) BR9712248B1 (ru)
CA (1) CA2267224C (ru)
CO (1) CO4900046A1 (ru)
CY (1) CY2576B1 (ru)
CZ (1) CZ299076B6 (ru)
DE (1) DE69734833T2 (ru)
DK (1) DK0957917T3 (ru)
DZ (1) DZ2320A1 (ru)
EA (1) EA002419B1 (ru)
ES (1) ES2252775T3 (ru)
HK (1) HK1023730A1 (ru)
HU (1) HU229221B1 (ru)
ID (1) ID19623A (ru)
IL (1) IL129243A (ru)
MA (1) MA24361A1 (ru)
MY (1) MY137606A (ru)
NO (1) NO320194B1 (ru)
NZ (1) NZ334953A (ru)
PE (1) PE10499A1 (ru)
PL (1) PL190859B1 (ru)
RO (1) RO119881B1 (ru)
SA (1) SA98180936B1 (ru)
SK (1) SK285029B6 (ru)
TR (1) TR199900737T2 (ru)
TW (1) TW487702B (ru)
UA (1) UA60311C2 (ru)
UY (2) UY24735A1 (ru)
WO (1) WO1998014192A1 (ru)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA60311C2 (ru) * 1996-10-02 2003-10-15 Смітклайн Бічам Корпорейшн Антагонисты рецептора витронектина
TW527355B (en) 1997-07-02 2003-04-11 Bristol Myers Squibb Co Inhibitors of farnesyl protein transferase
EP1017387A4 (en) * 1997-09-24 2004-08-18 Smithkline Beecham Corp VITRONEECT RECEPTOR ANTAGONIST
CA2304000A1 (en) * 1997-09-24 1999-04-01 William E. Bondinell Vitronectin receptor antagonist
US6372719B1 (en) 1998-03-04 2002-04-16 Jay Cunningham ανβ3 integrin antagonists in combination with chemotherapeutic agents
DE19842415A1 (de) 1998-09-16 2000-03-23 Merck Patent Gmbh Pharmazeutische Zubereitung
JP2002533416A (ja) * 1998-12-23 2002-10-08 ジー．ディー．サール ＆ カンパニー 新形成の治療における組み合わせ治療としてのシクロオキシゲナーゼ−２インヒビターおよび一つまたはそれ以上の抗腫瘍薬の使用方法
EP1150965A4 (en) * 1999-02-03 2002-05-15 Merck & Co Inc BENZAZEPINE DERIVATIVES FOR USE AS ANTAGONISTS OF THE INTEGRIN ALPHA-V RECEPTOR
DE60007960T2 (de) * 1999-04-30 2004-10-21 Univ Michigan Ann Arbor Therapeutische Anwendungen von pro-apoptotischen Benzodiazepinen
AU6523200A (en) * 1999-08-06 2001-03-05 Smithkline Beecham Corporation Vitronectin receptor antagonists useful for the treatment of strokes
US6514964B1 (en) 1999-09-27 2003-02-04 Amgen Inc. Fused cycloheptane and fused azacycloheptane compounds and their methods of use
DE10027514A1 (de) * 2000-06-06 2002-01-03 Basf Ag Liganden von Integrinrezeptoren
DE10028575A1 (de) 2000-06-14 2002-03-14 Basf Ag Integrinliganden
FR2806082B1 (fr) * 2000-03-07 2002-05-17 Adir Nouveaux composes bicycliques antagonistes des recepteurs de la vitronectine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
JP4615826B2 (ja) 2001-01-29 2011-01-19 オーソ−マクニール・フアーマシユーチカル・インコーポレーテツド 置換インドールおよびインテグリンアンタゴニストとしてのそれらの使用
EP1385504B1 (en) * 2001-04-10 2008-12-17 SmithKline Beecham Corporation Method of inhibiting adhesion formation
SE0101386D0 (sv) 2001-04-20 2001-04-20 Astrazeneca Ab New compounds
EP1387688A2 (en) 2001-05-03 2004-02-11 Merck & Co., Inc. Benzazepinone alpha v integrin receptor antagonists
WO2003059251A2 (en) 2001-10-22 2003-07-24 The Scripps Research Institute Antibody targeting compounds
GB0215867D0 (en) * 2002-07-09 2002-08-14 Glaxosmithkline Spa Novel method and compounds
JP2006522139A (ja) * 2003-04-04 2006-09-28 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ベンズアゼピンの製造方法およびその中間体
EP2394662B1 (en) * 2004-04-02 2018-03-21 The Regents of The University of California Methods and compositions for treating and preventing disease associated with alpha v beta 5 integrin
AU2012216372B2 (en) * 2004-04-02 2015-01-22 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for treating and preventing disease associated with alphaVbeta5 integrin
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
EP1841406A4 (en) * 2004-12-21 2008-06-25 Smithkline Beecham Corp METHOD AND FORMULATIONS
CA2631173A1 (en) * 2005-11-29 2007-06-07 Smithkline Beecham Corporation Treatment method
EP2217238B1 (en) 2007-11-08 2014-03-12 The General Hospital Corporation Methods and compositions for the treatment of proteinuric diseases
CN101861319B (zh) * 2007-11-16 2013-12-11 宇部兴产株式会社 苯并氮杂*酮化合物
WO2009111679A2 (en) * 2008-03-06 2009-09-11 Smithkline Beecham Corporation Process
JP2012517447A (ja) 2009-02-10 2012-08-02 ザ スクリプス リサーチ インスティチュート 化学的にプログラムされたワクチン接種法
JPWO2010113958A1 (ja) * 2009-03-30 2012-10-11 宇部興産株式会社 眼の疾患の治療又は予防のための医薬組成物
JP5572996B2 (ja) * 2009-05-15 2014-08-20 宇部興産株式会社 ベンズアゼピノン化合物を有効成分として含有する医薬
JP5755647B2 (ja) 2009-07-24 2015-07-29 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア αｖβ５インテグリンに関連する疾患の処置および予防のための方法および組成物
CA2780333C (en) 2009-11-17 2016-05-24 The Regents Of The University Of Michigan 1,4-benzodiazepine-2,5-diones and related compounds with therapeutic properties
EP2325194A1 (en) * 2009-11-24 2011-05-25 Glycotope GmbH Process for the purification of glycoproteins
SG11201609050UA (en) 2014-05-30 2016-12-29 Pfizer Carbonitrile derivatives as selective androgen receptor modulators
CN115667236B (zh) * 2020-04-26 2024-04-26 江苏恩华药业股份有限公司 1,5-二氢-2,4-苯二氮䓬-3-酮衍生物及其应用
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996000730A1 (en) * 1994-06-29 1996-01-11 Smithkline Beecham Corporation Vitronectin receptor antagonists
WO1996000574A1 (en) * 1994-06-29 1996-01-11 Smithkline Beecham Corporation Vitronectin receptor antagonists
WO1996006087A1 (en) * 1994-08-22 1996-02-29 Smithkline Beecham Corporation Bicyclic compounds
WO1996026190A1 (en) * 1995-02-22 1996-08-29 Smithkline Beecham Corporation Integrin receptor antagonists

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU689762B2 (en) * 1992-12-21 1998-04-09 Smithkline Beecham Corporation Bicyclic fibrinogen antagonists
UA60311C2 (ru) * 1996-10-02 2003-10-15 Смітклайн Бічам Корпорейшн Антагонисты рецептора витронектина

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996000730A1 (en) * 1994-06-29 1996-01-11 Smithkline Beecham Corporation Vitronectin receptor antagonists
WO1996000574A1 (en) * 1994-06-29 1996-01-11 Smithkline Beecham Corporation Vitronectin receptor antagonists
WO1996006087A1 (en) * 1994-08-22 1996-02-29 Smithkline Beecham Corporation Bicyclic compounds
WO1996026190A1 (en) * 1995-02-22 1996-08-29 Smithkline Beecham Corporation Integrin receptor antagonists

Also Published As

Publication number Publication date
BR9712248A (pt) 1999-08-24
TW487702B (en) 2002-05-21
RO119881B1 (ro) 2005-05-30
NO320194B1 (no) 2005-11-14
IL129243A0 (en) 2000-02-17
WO1998014192A1 (en) 1998-04-09
PL332674A1 (en) 1999-09-27
NO991590D0 (no) 1999-03-31
EA199900356A1 (ru) 2000-02-28
PL190859B1 (pl) 2006-02-28
PE10499A1 (es) 1999-03-27
AR008878A1 (es) 2000-02-23
DZ2320A1 (fr) 2002-12-28
JP2001501936A (ja) 2001-02-13
CZ299076B6 (cs) 2008-04-16
HU229221B1 (en) 2013-09-30
CA2267224C (en) 2007-03-13
BG103299A (en) 2000-01-31
AU733417B2 (en) 2001-05-17
EP0957917A1 (en) 1999-11-24
DK0957917T3 (da) 2006-04-18
IL129243A (en) 2004-07-25
CN1238689A (zh) 1999-12-15
HUP9903769A3 (en) 2000-07-28
DE69734833T2 (de) 2006-07-13
SA98180936B1 (ar) 2006-05-30
UA60311C2 (ru) 2003-10-15
CO4900046A1 (es) 2000-03-27
AP9901493A0 (en) 1999-03-31
ES2252775T3 (es) 2006-05-16
DE69734833D1 (de) 2006-01-12
JP4491072B2 (ja) 2010-06-30
EP0957917A4 (en) 2002-05-15
NO991590L (no) 1999-05-31
AU4746297A (en) 1998-04-24
SK42599A3 (en) 1999-12-10
HUP9903769A2 (hu) 2000-03-28
BG64581B1 (bg) 2005-08-31
HK1023730A1 (en) 2000-09-22
NZ334953A (en) 2000-01-28
MY137606A (en) 2009-02-27
CZ113299A3 (cs) 2000-03-15
AP1463A (en) 2005-09-10
ID19623A (id) 1998-07-23
CY2576B1 (en) 2008-07-02
BR9712248B1 (pt) 2010-06-29
TR199900737T2 (xx) 1999-07-21
UY24935A1 (es) 2001-07-31
CA2267224A1 (en) 1998-04-09
MA24361A1 (fr) 1998-07-01
ATE312089T1 (de) 2005-12-15
CN1114403C (zh) 2003-07-16
KR100589578B1 (ko) 2006-06-15
JP2010006838A (ja) 2010-01-14
SK285029B6 (sk) 2006-04-06
UY24735A1 (es) 1998-03-30
KR20000048816A (ko) 2000-07-25
EP0957917B1 (en) 2005-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA002419B1 (ru) Антагонисты рецептора витронектина
US6159964A (en) Vitronectin receptor antagonists
US6239138B1 (en) Vitronectin receptor antagonist
CZ203698A3 (cs) Antagonista vitronektinového receptoru, farmaceutický přípravek s jeho obsahem, způsob a použití
JPH10504807A (ja) ビトロネクチン受容体拮抗剤
KR19990076876A (ko) 비트로넥틴 수용체 길항제
WO2003041641A2 (en) Tetrahydroisoquinoline analogs as modulators of chemokine receptor activity
KR20010024247A (ko) 비트로넥틴 수용체 길항제
KR20010024249A (ko) 비트로넥틴 수용체 길항제
HUT71796A (en) Condensed cyclic compounds with nitrogen heteroatoms and pharmaceutical compositions of fibrinogen receptor antagonistic activity containing them
US6825188B2 (en) Vitronectin receptor antagonists
US6458814B1 (en) Vitronectin receptor antagonists
US20020123487A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
US20010034445A1 (en) Vitronectin receptor antagonists
US6458784B1 (en) Vitronectin receptor antagonists
US20010014737A1 (en) Vitronectin receptor antagonist

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU