CZ113299A3 - Antagonisté vitronektinového receptoru - Google Patents

Antagonisté vitronektinového receptoru Download PDF

Info

Publication number
CZ113299A3
CZ113299A3 CZ19991132A CZ113299A CZ113299A3 CZ 113299 A3 CZ113299 A3 CZ 113299A3 CZ 19991132 A CZ19991132 A CZ 19991132A CZ 113299 A CZ113299 A CZ 113299A CZ 113299 A3 CZ113299 A3 CZ 113299A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
alkyl
benzazepine
tetrahydro
oxo
propyloxy
Prior art date
Application number
CZ19991132A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ299076B6 (cs
Inventor
James Francis Callahan
Russell Donova Cousins
Richard Mccullock Keenan
Chet Kwon
William Henry Miller
Irene Nijole Uzinkas
Original Assignee
Smithkline Beecham Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Smithkline Beecham Corporation filed Critical Smithkline Beecham Corporation
Publication of CZ113299A3 publication Critical patent/CZ113299A3/cs
Publication of CZ299076B6 publication Critical patent/CZ299076B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/16—Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Antagonisté receptoru vitronektinu
Oblast techniky
Vynález se týká antagonistů receptoru vitronektinu, to jest farmaceuticky aktivních sloučenin, které inhibují vitronektinové receptory a jsou použitelné pro léčení zánětů, rakoviny a kardiovaskulární poruchy, jako je ateroskleróza a restenóza a onemocnění, u kterých dochází k resorpci kostní hmoty, jako je osteoporóza.
Dosavadní stav techniky
Integriny jsou nadtřídou receptorů buněčné adheze, které jsou transmembránové glykoproteiny, exprimované na povrchu řady buněk. Tyto buněčné povrchové adhezní receptory zahrnují gpIIb/IIIa (fibrinogenový receptor) a ανβ3 (vitronektinový receptor). Fibrinogenový receptor gpIIb/IIIa je exprimován na povrchu krevních destiček a mediuje agregaci krevních destiček a vytváření hemostatické sraženiny v místě krvácející rány, Philips, a kol., Biood., 1988, 71, 831. Vitronektinový receptor ανβ3 je exprimován množstvím buněk, v to počítaje endoteliální buňky, buňky hladkého svalstva, osteoklasty a nádorové buňky a v důsledku toho má mnoho funkcí. ανβ3 receptor exprimovaný na membráně osteoklastových buněk mediuje adhezi osteoklastů ke kostní matrici, což je klíčový krok při resorpci kostní hmoty, Ross, a kol., J. Biol. Chem., 1987, 262, 7703.
* ·9 ·· ·· • · · ···· · · · · • · ·······
4 · · · · · ··· ··· • ♦ · · · · · · • · · ·· · · · ·· ·· ··
Onemocnění charakterizované excesivní resorpcí kostní hmoty je osteoporóza. ανβ3 receptor exprimován na lidských buňkách hladkého svalstva aorty mediuje jejich migraci do neointima, proces, který vede k restenóze po perkutánní koronární angioplastice, Brown, a kol., Cardiovascular Res., 1994, 28, 1815. Kromě toho Brooks, a kol., Cell, 1994, 79, 1157 ukázali, že ανβ3 antagonista je schopen podporovat regresi nádoru indukcí apoptózy angiogenních krevních cév. Činidlo, které blokuje receptory vitronektinu by tedy mohlo být použitelné při léčbě onemocnění, jako je osteoporóza, restenóza a rakovina.
Je nyní známo, že receptory vitronektinu zahrnují tři různé integriny, označované ανβι, ανβ3 a ανβ5, Horton, a kol., Int. J. Exp. Pathol., 1990, 71, 741. ανβχ váže fibronektin a vitronektin. ανββ váže velké množství ligandů, v to počítaje fibrin, fibrinogen, laminin, trombospondin, vitronektin, von Willebrandův faktor, osteopontin a kostní sialoprotein I. ανβ5 váže vitronektin. Bylo ukázáno, že receptor vitronektinu ανβδ se zúčastňuje buněčné adheze různých typů buněk, mezi jiným mikrovaskulárních endoteliálních buněk, (Davis, a kol., J. Cell Biol., 1993, 51, 206) a jeho role v angiogenesi byla potvrzena, Brooks, a kol., Science, 1994, 264, 569. Tento integrin je exprimován v krevních cévách lidské granulační tkáni u zranění ale nikoli v normální pokožce.
Je známo, že receptor vitronektinu se váže k proteinům kostní matrice, které obsahují tri-peptidový motiv Arg-GlyAsp (neboli RGD). Horton, a kol., Exp. Cell Res. 1991, 195, f ·· ·· • · · · · ♦ β · · · · · • ·· · · · · · · • · · · • · · · · ·
368, na základě toho objevili, že peptidy obsahující RGD a protilátka proti receptoru vitronektinu (23C6) inhibují resorpci dentinu a šíření buněk prostřednictvím osteoklastů. Kromě toho Sáto, a kol., J. Cell Biol. 1990, 111, 1713, objevili, že echistatin, peptid hadího jedu, který obsahuje RGD sekvenci, je silný inhibitor resorpce kostní hmoty v tkáňových kulturách a inhibuje vazbu osteoklastů ke kostní tkáni.
Bylo objeveno, že jisté sloučeniny jsou silné inhibitory ανβ3 a ανβδ receptorů. Obzvláště bylo objeveno, že takové sloučeniny jsou silnější inhibitory receptorů vitronektinu než receptorů fibrinogenu.
Podstata vynálezu
Předložený vynález se týká sloučenin obecného vzorce (I), jak jsou zde popsány, které mají farmakologickou aktivitu pro inhibici receptorů vitronektinu a jsou použitelné při léčení zánětů, rakoviny a kardiovaskulárních poruch, jako je ateroskleróza a restenóza a onemocnění, ve kterém je zahrnuta resorpce kostní hmoty, jako je osteoporéza.
Předložený vynález se také týká farmaceutických komposic, obsahujících sloučeninu obecného vzorce (I) a farmaceutický nosič.
Předložený vynález se také týká způsobu léčení onemocnění, které jsou mediovány receptory vitronektinu. Konkrétně jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou použitelné pro léčení aterosklerózy, restenózy, zánětů, rakoviny a φφφφ • · · φ φ · · • · · · φφφφ • · φφ····· φ φ φ φφ φφ φφφφφφ φφφ φφφ φ φ φφφφφ φφφφφ φφ φφ
- 4 onemocnění, ve kterém je zahrnuta resorpce kostní hmoty, jako je osteoporóza.
Detailní popis vynálezu
Předložený vynález se týká nových sloučenin, které jsou silnější inhibitory receptorů vitronektinu než receptorů fibrinogenu. Nové sloučeniny obsahují benzazepinové jádro, ve kterém se nachází dusík obsahující substituent na aromatickém šestičlenném kruhu benzazepinu a alifatický substituent, obsahující kyselou skupinu se nachází na sedmičlenném kruhu benzazepinu. Předpokládá se, že benzazepinový kruhový systém příznivě interaguje s receptoru vitronektinu a a orientuje postranní řetězce, tvořené substituenty na šesti a sedmičlenných kruzích tak, že také mohou příznivě interagovat s receptorem. Je výhodné, aby na nej kratší intramolekulární cestě mezi kyselou skupinou na alifatickém substituentu sedmičlenného kruhu benzazepinu a dusíkatým substituentem na aromatickém šestičlenném kruhu benzazepinu bylo asi dvanáct až čtrnáct intervenujících kovalentních vazeb.
Předložený vynález se týká sloučenin obecného vzorce (I):
(D • · « · ·· ·» ·· • · · · · · • · · · ···· • · · · · * ··· ··· • · · · · · • · · · · · ·· · · ve kterém:
R1 představuje R7, nebo A-C0-C4-alkyl, A-C2-C4-alkenyl, A-C2C4-alkinyl, A-C3-C4-oxoalkenyl, A-C3~C4-oxoalkinyl, A-Ci-C4aminoalkyl, A-C3-C4-aminoalkenyl, A-C3-C4-aminoalkinyl, popřípadě substituovaný libovolnou přípustnou kombinací jednoho nebo více substituentů R10 nebo R7;
A představuje atom vodíku, C3-C6-cykloalkyl, Het nebo Ar;
R7 představuje -COR8, -COCR'2R9, -C(S)R8, -S(O)mOR',
S (O)mNR'R'', -PO(OR'), -PO(OR')2, -N02 nebo tetrazolyl; každý Rs nezávisle představuje -0R', -NR'R'', -NR'SO2R', NR'OR', nebo -OCR'2CO (0) R':
R9 představuje -0R', -CN, -S(O)rR', -S(O)mNR'2, -C(O)R',
C(O)NR'2, nebo -CO2R';
R10 představuje atom vodíku, atom halogenu, -0R11, -CN, NR'Rn, -N02, -CF3, CF3S(O)r, -CO2R', -CONR'2, A-C0-C6-alkyl-, A-Ci-C6-oxoalkyl-, A-C2-Cg-alkenyl-, A-C2-C6-alkinýl-, A-Co~ C6-alkyloxy-, A-Co-C6-alkylamino- nebo A-C0-C6-alkyl-S (0) r;
R11 představuje R', -C(O)R', -C(O)NR'2, -C(O)OR', -S(O)mR', nebo -S(O)mNR'2;
• · · ·
• · · ·
- 7 W představuje -(CHRg)a-U- (CHR9)b~;
U není přítomen nebo představuje CO, CRg2, C(=CRg2), S(O)k, 0, NRg, CRgORg, CRg(ORk)CRg2, CR92CRg (0Rk) , C(O)CRg2, CRg2C(O), CONR1, NR^-CO, 0C(0), C(0)0, C(S)O, OC(S), C(S)NRg, NRgC(S), S(O)2NRg, NRgS (O) 2N=N, NRgNRg, NRgCRg2, CRg2NRg, CRg2O, OCRg2, C=C nebo CRg=CRg;
G představuje NRe, S nebo O;
Rg představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Het-Co-Cg-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl· nebo Ar-C0-C6-alkyl;
Rk představuje Rg, -C(O)Rg, nebo -C(O)ORf; R1 představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Het-Co-C6-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, Ar-Co~C6-alkyl, nebo Ci-Cg-alkyl substituovaný jednou až třemi skupinami, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, CN, NRg2, 0Rg, SRg, CO2Rg a CON(Rg)2;
R£ představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl nebo Ar-Co-Cg-alkyl;
Re představuje
Het-Co-Cg-alkyl, (CH2) kCO2Rg;
atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-Co'-C6-alkyl, C3-C7-cykloalkyl-C0-Cs-alkyl, nebo
Rb a Rc jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-Co-Cg-alkyl, HetC0-C6-alkyl, nebo C3-Cg-cykloalkyl-C0-C6-alkyl, halogen, CF3, 0Rf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, nebo Rb a Rc jsou spojeny dohromady tak, že vytvářejí pěti- nebo šestičlenný aromatický nebo nearomatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh, popřípadě substituovaný až třemi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny CF3, Ci-C4-alkyl, 0Rf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; nebo methylendioxy;
• ·
-8-.
Q1, Q2, Q3 a Q4 představují nezávisle na sobě N nebo C-Ry, za předpokladu, že nejvýše jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4 představuje N.
R' představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl nebo C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl;
R' ' představuje R', -C(O)R' nebo -C(O)OR’;
R' ' ' představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-Co-C6-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, nebo C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, halogen, CF3, 0Rf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2 CO(NRf)2, CH2N(Rf)2;
Ry představuje atom vodíku, atom halogenu, -OR9, -SRg, -CN, -NRgRk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2, nebo Ci-C6-alkyl popřípadě substituovaný atomem halogenu, skupinami -0Rg, -SRg, -CN, -NRgR'', -N02, -CF3, R'S(O)r-, CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2;
a je rovno 0, 1 nebo 2;
b je rovno 0, 1 nebo 2;
k je rovno 0, 1 nebo 2;
m je rovno 1 nebo 2;
r je rovno 0, 1 nebo 2;
s je rovno 0, 1 nebo 2;
u je rovno 0 nebo 1; a v je rovno 0 nebo 1;
nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí.
Předložený vynález se také týká farmaceuticky přijatelných adičních solí a komplexů sloučenin podle předloženého vynálezu. V případech, kdy sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou mít jedno nebo více chirálních center, pak pokud není uvedeno jinak, předložený vynález zahrnuje každou jednotlivou neracemickou sloučeninu, která může být
44 44
4444 4444 • 444 4444
4 4 44 444 444
4 4 4 4 4
44444 44 44 syntetizována a rozdělena obvyklými způsoby. V případech kdy sloučeniny podle předloženého vynálezu mají nenasycenou dvojnou vazbu uhlík-uhlík, pak jek cis (Z), tak i trans (E) isomery spadají do rozsahu předmětu předloženého vynálezu. V případech, kdy sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou existovat v tautomerních formách jako jsou keto-enol tautomery, jako je
O a
OR* pak každá tautomerní forma spadá do rozsahu předloženého vynálezu bez ohledu a to, zda existuje v rovnovážné podobě nebo je omezena na jednu formu vhodnou substitucí R'.
Sloučeniny obecného vzorce (I) inhibují vazbu vitronektin a dalších peptidů obsahujících RGD k receptorů vitronektinu. Inhibice receptorů vitronektinu na osteoklasty inhibuje osteoklastovou resorpci kostní hmoty a je použitelná při léčení onemocnění, ve kterých je resorpce kostní hmoty vázána s patologií, jako je osteoporóza a osteoartritida.
Další předmět předloženého vynálezu je způsob stimulace vytváření kostní tkáně, který zahrnuje podávání sloučeniny,
• ·· toto • · · · · • to · · • · ·· ·· • · · ··· ·· ·· ··· ·· která způsobuje vzrůst vylučování osteokalcinu. Vzrůst vytváření kostní tkáně je zřejmý příznivý účinek u chorobných stavů, kde se vyskytuje nedostatek mineralizované kostní hmoty nebo je požadována remodelace kosti, jako je léčba fraktur a prevence fraktur kostí. Onemocnění a metabolické poruchy, které mají za následek ztrátu kostní struktury budou také příznivě ovlivněny takovýmto způsobem léčení. Například hyperparathyroidismus, Pagetova nemoc, hyperkalkémie při zhoubném bujení, osteolytické léze, způsobované kostními metastázami, ztráta kostní hmoty způsobená imobilizací nebo nedostatkem sexuálních hormonů, Behcetova nemoc, osteomalacie, hyperostóza a ostenopetróza mohou být příznivě ovlivněny podáváním sloučeniny podle předloženého vynálezu.
Kromě toho, jelikož sloučeniny podle předloženého vynálezu inhibují receptory vitronektinu v množství různých typů buněk, uvedené sloučeniny by mohly být použitelné pro léčení zánětlivých poruch, jako je rheumatická artritida a psoriáza a kardiovaskulární onemocnění, jako je ateroskleróza a restenóza. Sloučeniny obecného vzorce (I) podle předloženého vynálezu mohou být používány pro léčení nebo prevenci dalších onemocnění, které zahrnují, aniž by tím byly omezeny, tromboembolické poruchy, astma, alergie, respirační distress syndrom dospělých osob, odmítání štěpu hostitelem, odmítání transplantovaných orgánů, septický šok, ekzémy, kontaktní dermatitis, zánětlivá střevní onemocnění a další autoimunitní onemocnění. Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být také použitelné při léčbě zranění.
• ·* 4 « 44 44 · 4 * 4 4 4
4 4 4 4 4 4
44 444 444
4 4 4 4
444 44 44 44
Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být také použitelné pro léčení, v to počítaje i prevenci, angiogenních poruch. Výraz angiogenní porucha, jak je zde používán, zahrnuje stavy, zahrnující abnormální neovaskularizaci. Pokud růst nových krevních cév je příčinou a nebo přispívá k patologii onemocnění, inhibice angiogenese zmírní nepříznivé účinky onemocnění. Příkladem takových cílových onemocnění je diabetická retinopatie. Pokud je růst nových krevních cév nutný pro podporu růstu nežádoucí tkáně, inhibice angiogenese sníží přívod krve do takové tkáně a tím přispěje k omezení tkáně, která vyžaduje přívod krve. Příklady zahrnují růst nádorů, kde neovaskularizace je trvalý požadavek pro růst nádoru a vytvoření pevných nádorových metastáz. Sloučeniny podle předloženého vynálezu tedy inhibují angiogenesí nádorové tkáně a tím zabraňují růstu nádorů a nádorových metastáz.
Způsoby léčení podle předloženého vynálezu tedy tím, že přinášejí inhibici angiogenese použitím sloučenin podle předloženého vynálezu, mohou zlepšit symptomy onemocnění a v některých případech mohou vyléčit onemocnění.
Jiným terapeutickým cílem sloučenin podle předloženého onemocnění charakterizované oční onemocnění zahrnují jako je transplantace luetická keratitida, vynálezu jsou oční neovaskularizaci. Taková neovaskulární poruchy rohovky, rohovky, herpetická keratitida, pterygium a neovaskulární panus související s používáním kontaktních čoček. Další oční onemocnění také zahrnují makulární degeneraci starých osob, předpokládanou oční
4 «4 4 • 4 4 · ·
4 4 4 4 4 • 9 4 4 4 *
4 * 444 444
4 4 4
44 0 4 4 4 histoplasmózu, retinopatii dospívajících osob a neovaskulární glaukom.
Předložený vynález se dále týká způsobu inhibice růstu nádorů, který zahrnuje podávání sloučeniny obecného vzorce (I) a antineoplastového činidla, jako je topotekan a cisplatin postupně po sobě nebo jejich současné podávání.
V obecném vzorci (I) je vhodným substituentem R2:
(0)u
NR—CR'2-~Wve kterém
Q1, Q2 a Q3 představují každý CRy,
Q4 představuje CRy nebo N a u je rovno O a výhodně, každý R’ představuje atom vodíku,
R' ' představuje atom vodíku, Cx-C6-alkyl, -C (O) Ci-Cg-alkyl, C (O) OCi-Cg-alkyl, -C (O) C0-C6-alkyl-Ar, nebo C (O) OC0-C6-alkylAr,
W představuje -CH2-CH2- a
Ry představuje atom vodíku, atom halogenu, -0Rg, -SRg, -CN, -NRgRk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2Rg, -CORg -CONRg2, nebo CxC6-alkyl.
Alternativně R2 představuje • · • 0
ve kterém
Q1, Q2 a Q3 představují každý CH a u je rovno 0 a výhodně, každý R' představuje atom vodíku,
R'' představuje atom vodíku nebo Ci~C4-alkyl, W představuje -CH2-CH2- a v je rovno 0.
Alternativně R2 představuje
R
Wve kterém
G představuje NH a
Rb a Rc představují každý atom vodíku a výhodně, W představuje -NRg- (CHRg) b-.
Alternativně R2 představuje • ·'
• 9 · 9 · 9 • · · 9 9 · • · · 999 ···
9 9 9 · »9 9·
Rb
R*
ve kterém
G představuje NH a
Rb a Rc jsou spojeny dohromady tak, že vytvářejí pěti- nebo šestičlenný aromatický nebo nearomatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh, popřípadě substituovaný až třemi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny CF3, Ci-C4-alkyl, 0Rf, S(O)kRf, CORf, CO2RS OH, NO2, N(Rf)2 CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; nebo methylendioxy. Výhodně, Rb a Rc jsou spolu spojeny a vytvářejí šestičlenný aromatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh a W představuje -CH2-CH2Alternativně R2 představuje r γ
0,-^nr’
N. ,NR*—CR'Z—W ve kterém každý R' představuje atom vodíku,
R'' představuje atom vodíku nebo C1-C4 alkyl, Rg představuje atom vodíku nebo Ci-C4-alkyl a s je rovno 0, 1 nebo 2 a, výhodně,
W představuje -CH2-CH2-.
• · · * ·· Μ ·· • · · · · ♦ · · · • ··· · · · · • · ·· · · ······
V obecném vzorci (I) , vhodné substituenty R1 jsou atom vodíku, skupiny Ci-C6-alkyl, As-C0-C6-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, Ca-Ce-cykloalkyl-Co-Cg-alkyl, -CH2CF3, - (CH2) i-2C (0) OR', nebo -(CH2)2OR'. Výhodně, R1 představuje atom vodíku, C1-C4alkyl, Ph-C0-C4-alkyl, -CH2CF3, - (CH2) 1-2C (0) OR', nebo (CH2)2OR', ve kterém R' představuje atom vodíku nebo C1-C4alkyl. Nej výhodněji R1 představuje -CH2CF3.
Příklady nových sloučenin podle předloženého vynálezu jsou následující látky:
(±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2, 3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -8-[3-(4-amino-2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -8-[3-(4-methoxy-2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-8-[3-(2-imidazolylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-8-[3-[2-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidinyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
(±) -8-[2—[6—(methylamino)pyridyl]ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)—8—[2—(2-benzimidazolyl)ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-8-[2-(4-aza-2-benzimidazolyl)ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
«444
4 4 4 • 4 ·
4 4
444 444 • 4 • 4 4 4 (±) —8 —[2—[6—(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -8-[2-(benzimidazol-2-yl)-1-ethoxy]-3-oxo-2, 3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-methyl3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina; (±) -3-ΟΧΟ-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(R) -8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -3-OXO-8-[3-[(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)amino]-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(S) -8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terc.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
(±) -3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
(±)-2-methyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(methyl)amino]1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
• · · · · · • · · · · · • · · · « · • · · ··· · · · • · * · • · · · · · (±) -2-benzyl-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2,3,4,5.-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -2-(karboxymethyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-2-(4-aminobenzyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(benzoyl)amino]-1propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydroΙΗ-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -8-[3-(2-imidazolin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina; (±) -3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-8-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-1-ethoxy]-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-8-[3-(4,6-dimethylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±) -8-[3-(4,5,6,7-tetrahydro-lH-l,3-diazepin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)
2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(±)-3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4 octová kyselina;
• · · · ♦ • · · · • * ··· α· t·· • flfl ··· a* • ·· »· fl • · · • · ··· (S)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
(±)-3-OXO-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
(±) -3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(methyl)amino]-1propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(S)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(R) -3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(S) -8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
(S)-3-OXO-8-[3-(1,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1propyloxy]-2-[4- (trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(S)-3-ΟΧΟ-2-(2-fenylethyl)-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(S) -8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(S) -8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina; a « · · · · · · • · · · ♦ · 9 · • « · 9 9 9 4
4 · 4 ·»♦ 49 9
9 9 4 9
9 9 9 4 4 9 9 (S) -8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina;
nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Výhodné sloučeniny podle předloženého vynálezu zahrnují následující látky:
(S) -3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
(S) -8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina; a (S)-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
V případech, kdy sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou mít jedno nebo více chirálních center, pak pokud není uvedeno jinak, předložený vynález zahrnuje každou jednotlivou neracemickou sloučenina, která může být syntetizována a isolována obvyklými způsoby. V případě sloučenin podle předloženého vynálezu jsou výhodné (S) konfigurace sloučenin obecného vzorce (I) .
V případě, že sloučeniny obsahují nenasycené dvojné vazby uhlík-uhlík, potom jak cis (Z), tak i trans (E) isomery spadají do rozsahu předmětu předloženého vynálezu. Význam
9 · ·
·· 99 99
9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
99 999 999
9 9 9
999 99 99 kteréhokoli substituentu v jednom jeho výskytu je nezávislý na jeho jiném výskytu nebo na významu kteréhokoli jiného substituentu v libovolném jeho výskytu.
Předložený vynález se také týká prekurzorů sloučenin podle předloženého vynálezu. Prekurzory jsou jakékoli kovalentně vázané nosič, které uvolňují aktivní základní sloučeninu obecného vzorce (I) in vivo. Jiným předmětem předloženého vynálezu jsou tedy nové prekurzory, které jsou také meziprodukty při příprava sloučeniny obecného vzorce (I) a mají obecný vzorec (II):
ve kterém :
R1 představuje R7, nebo A-Co-C4-alkyl, A-C2~C4-alkenyl, A-C2C4-alkinyl, A-C3~C4-oxoalkenyl, A-C3-C4-oxoalkinyl, A-Ci-C4aminoalkyl, A-C3-C4-aminoalkenyl, A-C3-C4-aminoalkinyl, popřípadě substituovaný libovolnou přípustnou kombinací jednoho nebo více substituentů R10 nebo R7;
A představuje atom vodíku, C3~Cg-cykloalkyl, Het nebo Ar;
R7 představuje -COR8, -COCR'2R9, -C(S)R8, -S(O)mOR', S(O)mNR'R”, -PO(OR'), -PO(OR')2, -N02, nebo tetrazolyl;
• φ * φφφ • φ φ · · φφ φφφφ • φ φφφ « φ φ φφφφ φ φφ φφφ φφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φφ každý R8 nezávisle představuje -OR’, -NR’R’1, -NR’SC^R’ , NR'OR', nebo -OCR' 2C0 (0) R' ;
R9 představuje -OR', -CN, -S(O)rR', -S(O)mNR'2, -C(O)R
C(O)NR'2, nebo -CO2R';
R10 představuje atom vodíku, atom halogenu, -OR11, -CN, NR'Rn, -N02, -CF3, CF3S (O) r, -CO2R', -CONR'2, A-C0-C6-alkyl· A-Ci-Cg-oxoalkyl-, A-C2-C6-alkenyl-, A-C2-C6-alkinyl-, A-C C6-alkyloxy-, A-C0-C6-alkylamino- nebo A-C0-C6-alkyl-S (O) r;
R11 představuje R', -C(O)R', nebo -S (O)mNR'2;
R2 představuje
-C(O)NR’2, -C(O)OR’, -S(O)mR
« 4 4 4 · · · ·
4« 4 · 4« 444 444
W představuje -(CHRg)a-U- (CHRg)bU není přítomen nebo představuje CO, CRg2, C(=CRg2), S(0)k, 0, NRg, CRgORg, CRg (0Rk) CR92, CRg2CRg (0Rk) , C(O)CRg2, CRg2C(O), CONR1, NR^-CO, 0C(0), C(0)0, C(S)O, OC(S), C(S)NRg, NRgC(S), S(O)2NRg, NRgS(O)2N=N, NRgNRg, NRgCRg2, CRg2NRg, CRg2O, 0CRg2, C=C nebo CRg=CRg.
G představuje NRe, S nebo 0;
Rg představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Het-Co-C6-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl nebo Ar-Co-Cg-alkyl;
44 4
44 ··
9 4 · 4 4 • 4 4 4 4 4 * 4 4 444 444
4 4 4
44 44 44
Rk představuje Rg, -C(O)Rg nebo -C(O)ORf;
R1 představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, C3C7-cykloalkyl-C0-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, nebo Ci-C6-alkyl substituovaný jednou až třemi skupinami, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, CN, NRg2, OR9, SRg, CO2Rg a CON(Rg)2;
Rf představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl nebo Ar-C0-C6-alkyl; Re představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, Het-Co-Cg-alkyl, C3-C7-cykloalkyl-C0-Cg-alkyl, nebo (CH2)kCO2Rg;
Rb a Rc jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, HetC0-C6-alkyl nebo C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, halogen, CF3, 0Rf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, nebo Rb a Rc jsou spojeny dohromady tak, že vytvářejí pěti- nebo šestičlenný aromatický nebo nearomatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh, popřípadě substituovaný až třemi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny CF3, Ci-C4~alkyl, 0Rf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, N02, N(Rf)2 CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; nebo methylendioxy;
Q1, Q2, Q3 a Q4 představují nezávisle na sobě N nebo C-Ry, za předpokladu, že nejvýše jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4 představuje N.
R' představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl nebo C3-C6-cykloalkyl-Co~C6-alkyl;
R'' představuje R', -C(O)R' nebo -C(O)OR';
R' ' ' představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Ar-Co-Cg-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, nebo C3-Cg-cykloalkyl-Co-Cg-alkyl, halogen, CF3, 0Rf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2 CO(NRf)2, CH2N(Rf)2;
RY představuje atom vodíku, atom halogenu, -0Rg, -SRg, -CN, -NRgRk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2, ··♦· to · • to nebo Ci-Cg-alkyl popřípadě substituovaný skupinami -0Rg, -SRg, -CN, -NRgR'', -N02, CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2;
atomem halogenu,
-CF3, R'S(O)r-, -
a je rovno 0, 1 nebo 2;
b je rovno 0, 1 nebo 2;
k je rovno 0, 1 nebo 2;
m je rovno 1 nebo 2;
r je rovno 0, 1 nebo 2;
s je rovno 0, 1 nebo 2;
u je rovno 0 nebo 1; a
v je rovno 0 nebo 1;
nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Příklady nových prekurzorů podle předloženého vynálezu jsou následující látky:
methyl (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2,3,4,5-tetrahydro-“lH-2-benzazepin-4-acetát; a ethyl (±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát;
nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Ještě dalším předmětem předloženého vynálezu jsou nové meziprodukty obecného vzorce (III):
- 25 —
999 ♦ ·· ·· ·· • · · · 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9
99 99 999 999
9 9 9 9 9
9 999 99 9 9 99
ve kterém
R1 představuje R7, nebo A-C0-C4-alkyl, A-C2-C4-alkenyl, A-C2C4-alkinyl, A-C3-C4-oxoalkenyl, A-C3-C4-oxoalkinyl, A-Ci-C4aminoalkyl, A-C3-C4-aminoalkenyl, A-C3-C4-aminoalkinyl, popřípadě substituovaný libovolnou přípustnou kombinací jednoho nebo více substituentů R10 nebo R7;
A představuje atom vodíku, C3-Cg-cykloalkyl, Het nebo Ar;
R7 představuje -COR8, -COCR'2R9, -C(S)R8, -S(O)mOR',
S(O)mNR'R'', -PO(OR'), -PO(OR')2, -N02, nebo tetražolyl; každý R8 nezávisle představuje -0R', -NR’R'', -NR'SO2R', NROR', nebo -OCR'2C0 (0) R';
R9 představuje -0R’, -CN, -S(O)rR', -S(O)mNR'2, -C(O)R',
C(O)NR'2, nebo -CO2R';
R10 představuje atom vodíku, atom halogenu, -0R11, -CN, NR'R1;L, -N02, -CF3, CF3S(O)r, -CO2R', -CONR'2, A-Co-C6-alkyl-, A-Ci-C6-oxoalkyl-, A-C2-C6-alkenyl-, A-C2-C6-alkinyl-, A-CoCg-alkyloxy-, A-Co-Cg-alkylamino- nebo A-C0-C6-alkyl-S (0) r;
Ru představuje R', -C(0)R', -C(0)NR'2, -C(O)OR', -S(O)mR', nebo -S(O)mNR'2;
W představuje -(CHRg)a-U- (CHRg)b-;
U není přítomen nebo představuje CO, CRg2, C(=CRg2), S(0)k, 0, NRg, CRg0Rg, CRg (0Rk) CRg2, CRg2CRg (0Rk) , C(O)CRg2, CRg2C (0) , ···· ·· ·· toto • · · · · · • · · · to to to to • · toto to · ··· ··· • · · · · · ·· · · to · · · ·
CONR\ NR1CO, OC(O),
S (0) 2NRg, NRgS(O)2 C=C nebo CRg=CRg;
Rg představuje atom vodíku, C7-cykloalkyl-C0-C6-alkyl
Rk představuje Rg, -C(O)Rg,
R1 představuje atom vodíku, C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, substituovaný jednou až souboru, zahrnujícího atom CO2Rg a CON(Rg)2;
Rf představuje atom vodíku, Q1, Q2, Q3 a Q4 za předpokladu, představuje N.
R' představuje atom vodíku, C3-C<5-cykloalkyl-Co-C6-alkyl; R'' představuje R', -C(O)R' RY představuje atom -NRgRk, -N02, -CF3, nebo Ci-C6-alkyl skupinami -0Rg, -SRg,
CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2;
C(0)0, C(S)O, OC(S), C(S)NRgS, NRgC(S), N=N, NRgNRg, NRgCRg2, CRg2NRg, CRg2O, OCRg2,
Ci-C6-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, C3nebo Ar-C0-C6-alkyl; nebo -C(O)0Rf;
Ci-Ce-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, C3Ar-C0-C6-alkyl, nebo Ci-Cg-alkyl třemi skupinami, zvolenými ze halogenu, CN, NRg2, 0Rg, SRg,
Ci-C6-alkyl nebo Ar-Co-Cg-alkyl; představují nezávisle na sobě N nebo C-Ry, že nejvýše jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4
Ci-C6-alkyl, Ar-Co-C6-alkyl nebo nebo -C(O)OR';
atom halogenu, -0Rg, -SRg, -CN, vodíku,
CF3S(O)r-, -CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2, popřípadě -CN, substituovaný atomem halogenu, -NRgR' ' , -N02, -CF3, R’S(O)r-, -
a je rovno 0, 1 nebo 2;
b je rovno 0, 1 nebo 2;
m je rovno 1 nebo 2; a
r je rovno 0, 1 nebo 2;
nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Β Β Β «
·· ·· ·· • Β · · · · « Β · Β β ·
Β Β Β ··Β Β Β ·
Β Β Β · • Β Β Β · ··
Zkratky a symboly, které jsou běžně používány v chemii peptidů a v obecné chemii jsou zde používány pro popis sloučenin podle předloženého vynálezu. Obecně zkratky a označení aminokyselin jsou v souladu s nomenklaturou, kterou stanovila IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature, tak jak jsou popsány v Eur. J. Biochem, 158, 9 (1984) .
Výraz Ci-C4-alkyl, tak jak je používán v této přhlášce vynálezu, znamená popřípadě substituovanou alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a zahrnuje skupiny methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl a tbutyl. Ci-C6-alkyl kromě toho zahrnuje pentyl, n-pentyl, isopentyl, neopentyl a hexyl a jejich jednoduché alifatické isomery. Co-C4-alkyl a Co-Cg-alkyl kromě toho indikují, že nemusí být přítomna žádná alkylová skupina (například zahrnují případ, kdy je přítomna kovalentní vazba).
Kterákoli skupina Ci-C4-alkyl nebo Ci-C6-alkyl, C2-C6alkenyl, C2-C6-alkinyl nebo Ci-Cg-oxoalkyl může být popřípadě substituována skupinou Rx, která může být vázána ke kterémukoli atomu uhlíku a která vede k vytvoření stabilní struktury a je použitelný v obvyklých způsobech syntézy. Vhodné skupiny ve významu Rx jsou Ci-C4-alkyl, OR', SR', Ci-C4-alkylsulfonyl, Ci-C4-alkylsulfoxyl, -CN, N(R)2 CH2N(R)2, -N02, -CF3, -CO2R', -CON(R')2, -COR', -NR’C(O)R',
F, Cl, Br, I, nebo CF3S(O)r-, kde r je rovno 0, 1 nebo 2.
Halogen nebo atom halogenu znamená F, Cl, Br a I.
4
444 444
4
4 44
4 ··♦· • 4 4 4 • 4
4 4
4 4
444 44 4
Výraz Ar, nebo aryl, tak jak je zde používán, znamená fenyl nebo naftyl, nebo fenyl nebo naftyl substituovaný jedním až třemi substituenty, jako jsou substituenty definované výše ve významu alkyl, obzvláště Ci-C4-alkyl, C1-C4-alkoxy, Ci-C4alkylthio, CF3, NH2, OH, F, Cl, Br nebo I.
Het, nebo heterocyklus, indikuje popřípadě substituovaný pěti- nebo šestičlenný monocyklická kruh, nebo devíti nebo desetičlenný bicyklický kruhový systém, obsahující obsahující jeden až tři heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom dusíku, atom kyslíku a atom síry, Které jsou stabilní a je je možné vytvořit běžnými způsoby chemické syntézy. Příklady heterocyklů jsou benzofuryl, benzimidazol, benzopyran, benzothiofen, furan, imidazol, indolin, morfolin, piperidin, piperazin, pyrrol, pyrrolidin, tetrahydropyridin, pyridin, thiazol, thiofen, chinolin, isochinolin a tetra- a perhydro- chinolin a isochinolin. Libovolná možná kombinace až tří substituentů na Het kruhu, jako jsou kombinace, definované výše v případě alkylu, které lze získat chemickou syntézou a jsou stabilní, spadá do rozsahu předmětu předloženého vynálezu.
Výraz C3-C7~cykloalkyl se vztahuje k popřípadě substituovanému karbocyklickému systému tří až sedmi atomů uhlíku, které mohou obsahovat až dvě nenasycen vazby uhlíkuhlík.
Typickými příklady C3-C7-cykloalkylů jsou cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklopentenyl, cyklohexyl, cyklohexenyl a cykloheptyl. Libovolná možná kombinace až tří substituentů, jako jsou kombinace, definované výše v
999 «·*· •
* 9 9 9 • 99 »9 99
9 9 9 9 9 «
9 9 »999 • · 99 999 99«
9 9 9 9
999 · t 99 99 případě alkylu, které lze získat chemickou syntézou a jsou stabilní, spadá do rozsahu předmětu předloženého vynálezu.
Pokud Rb a Rc jsou spolu spojeny a vytvářejí pěti- nebo šestičlenný aromatický nebo nearomatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh kondenzovaný ke kruhu, ke kterému jsou Rb a Rc připojeny, vytvořený kruh je obecně pěti- nebo šestičlenný heterocyklus zvolený ze souboru, zahrnujícího heterocykly uvedené v případě symbolu Het nebo je jím fenylový, cyklohexylový nebo cyklopentylový kruh.
Výhodné Rb a Rc představují -Di=D2-D3=D4, kde Di - D4 představují nezávisle na sobě CH, N nebo C-Rx s tím, že nejvýše dvě ze skupin Dx - D4 představují N. Nejvýhodněji, pokud Rb a Rc jsou spolu spojeny, vytvářejí skupinu -CH=CHCH=CHPro označení některých skupin budou používány zkratky. t-Bu označuje terciární butylový zbytek, Boc označuje tbutyloxykarbonylový zbytek. Fmoc označuje fluorenylmethoxykarbonylový zbytek, Ph označuje fenylový zbytek. Cbz označuje benzyloxykarbonylový zbytek, Bn označuje benzylový zbytek. Me označuje methyl, Et označuje ethyl, Ac označuje acetyl, Alk označuje Ci-C4-alkyl, Nph označuje 1-or 2-naftyl a cHex označuje cyklohexyl. Tet označuje 5-tetrazolyl.
Dále jsou používány zkratky pro některé reagenty. DCC označuje dicyklohexylkarbodiimid, DMAP označuje dimethylaminopyridin, DIEA označuje diisopropylethylamin, EDC označuje hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3- 30 *4 4 4 4 • 4 4 · 4 · 4
4 4 4 4 ·· 4
4 4 4 4 4 4
4 44 444 444
4 4 4 4
444 44 4 4 44 ethylkarbodiimidu. HOBt označuje 1-hydroxybenzotriazol, THF označuje tetrahydrofuran, DIEA označuje diisopropylethylamin, DEAD označuje diethylazodikarboxylát, PPh3 označuje trifenylfosfin, DIAD označuje diisopropylazodikarboxylát, DME označuje dimethoxyethan, DMF označuje dimethylformamid, NBS označuje Nbromsukcinimid, Pd/C označuje katalyzátor, tvořený paládiem na aktivním uhlí, PPA označuje kyselinu polyfosforečnou, DPPA označuje difenylfosforylazid, BOP označuje benzotriazol-l-yloxy-tris(dimethylamino)fosfonium hexafluorfosforečnan, HF označuje kyselinu fluorovodíkovou, TEA označuje triethylamin, TFA označuje kyselinu trifluoroctovou, PCC označuje pyridinium chlorchromát.
Sloučeniny obecného vzorce (I) se obecně připraví reakcí sloučeniny obecného vzorce (IV) se sloučeninou obecného vzorce (V):
R2-L1 (V) ve kterých R1 a R2 mají stejný význam jako v obecném vzorci (I) , s chráněnými libovolnými reakčními funkčními skupinami a L1 představuje OH nebo atom halogenu;
• to • · to o · ·« ··· to·· • · · * · to·· · to toto to· a následným odstraněním ochranných skupin a popřípadě vytvořením farmaceuticky přijatelné soli.
Výhodně je možno některé sloučeniny obecného vzorce (I) připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce (IV) se sloučeninou obecného vzorce (VI)
0—W-OH Q 11.
Q (VI)
,.Q4
- Q2, Q3 a Q4 mají stejný význam
C), s chráněnými libovolnými i, ve kterém R1, R', R1’, W, Q1 jako v obecném vzorci ( reakčními funkčními skupinair a následným odstraněním ochranných skupin a popřípadě vytvořením farmaceuticky přijatelné soli.
Výhodně, v případě sloučenin obecného vzorce (I), Q1, Q2, Q3 a Q4 představují CH, W představuje -CH2-CH2-, R' představuje atom vodíku a R' ' představuje atom vodíku, Ci-C4-alkyl nebo —C (0) OCx-C4-alkyl. Výhodně se reakce mezi sloučeninou obecného vzorce (IV) a sloučeninou obecného vzorce (VI) provádí v přítomnosti diethylazodikarboxylátu a trifenylfosfinu v aprotickém rozpouštědle.
*
- 32 τ • ·» 9 9 > · · 9 > « β · ·· · ··«
Kromě toho je možno některé sloučeniny obecného vzorce (I) připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce (IV) se sloučeninou obecného vzorce (VII):
(VID ve kterém R1, R', R’ ', W, Q1, Q2, Q3 a v mají stejný význam jako v obecném vzorci (I), s chráněnými libovolnými reakčními funkčními skupinami;
a následným odstraněním ochranných skupin a popřípadě vytvořením farmaceuticky přijatelné soli.
V případě sloučenin obecného vzorce (VII) výhodně Q1, Q2 a Q3 představují CH, W představuje -CH2-CH2-, v je rovno 0, R' představuje atom vodíku a R' ' představuje atom vodíku nebo Ci-C4-alkyl. Výhodně se reakce mezi sloučeninou obecného vzorce (IV) a sloučeninou obecného vzorce (VII) provádí v přítomnosti diethylazodikarboxylátu a trifenylfosfinu v aprotickém rozpouštědle.
Sloučeniny obecného vzorce (I) se připraví obecnými způsoby, popsanými ve Schématech I-VII.
- 33 rí «· · · · * • · · · · » • · · · · · • · ♦ ·· · ··· • · · · • · »* · ·
Schéma I
a) 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxid. DEAD, (Ph)3P. DMF;
b) cyklohexen, 10% Pd/C, 2-propanol;
c) 1,0 N LiOH, THF, H2O, potom acidifikace.
- 34 • · * • · · » · · · 4 · ·
► · 4 *
Sloučenina 1-1, jejíž příprava probíhá podle obecných procedur, popsaných v Bondinell, a kol. (WO 93/00095), se nechá reagovat s 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-Noxidem v kopulační reakci Mitsunobova typu (Organic Reactions 1992, 42, 335-656; Synthesis 19S1, 1-28) a tím se získá 1-2. Reakce se mediuje komplexem, vytvořeným mezi diethylazodikarboxylátem a trifenylfosfinem a provádí se v aprotickém rozpouštědlo, například THF, CH2CI2, nebo DMF. Pyridin-N-oxidová část molekuly sloučeniny 1-2 se redukuje na odpovídající pyridin 1-3 za přenosových hydrogenačních podmínek s použitím paládiového katalyzátoru, výhodně kovového paládia na aktivním uhlí, v inertním rozpouštědle, jako je například methanol, ethanol, nebo 2-propanol. Cyklohexen, 1,4-cyklohexadien, kyseliny mravenčí, jako je mravenčan amonný, jsou běžně používány jako reagent pro přenos vodíku v tomto typu reakce. Methylester sloučenin I3 se hydrolyzuje použitím vodné báze, například LiOH ve vodném THF nebo NaOH ve vodném methanolu nebo ethanolu a meziprodukt, tvořený karboxylátovou solí, se okyselí vhodnou kyselinou, například TFA nebo kyselinou chlorovodíkovou a tím se získá karboxylové kyselina 1-4. Alternativně může být izolován, je-li to požadováno, meziprodukt, tvořený karboxylátovou solí nebo karboxylátová sůl volné karboxylové kyseliny může být připravena způsoby dobře známými odborníkům.
kyselina mravenčí a soli mravenčan draselný nebo
Sloučeniny obecného vzorce (I) mohou také být připraveny alternativními způsoby, dobře známými odborníkům. Například, etherová vazba sloučenin obecného vzorce (I) může být vytvořena reakcí alkoholové skupiny sloučeniny • · · · obecného vzorce 1 ze Schématu 1 obsahující přemístitelnou skupinu, bromová nebo jodová skupina. Mohou reakce vytvářející ether, které jsou se sloučeninou R2, jako je chlorová, být použity i další zřejmé odborníkům.
• · · 0
Schéma II
- 36 -i
Boc
I
OV/~0F3
O
CO^
• 0 0 0 0 0 »·· • · 0 · <· 00 00 • · · ·
a) 2-[N-(3-hydroxy-l-propyl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]pyridin-N-oxid, DEAD, (Ph)3P, DMF;
b) LiHMDS, 4-trifluormethylbenzylbromid, DMF;
c) cyklohexen, 10 % Pd/C, 2-propanol;
d) 1,0 N NaOH, MeOH;
e) HCl/dioxan;
Sloučenina II-l, připravená postupem podle Schématu I, se nechá reagovat s 2-[N-(3-hydroxy-l-propyl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]pyridin-N-oxidem kopulační reakci Mitsunobova type, detailně popsané ve Schématu I. Výsledný produkt II-2 může být alkylován v poloze 2 (benzazepinové číslování) za standardních alkylačních podmínek, které jsou dobře známy odborníkům. Například může být II-2 zpracován bází, jako je hydrid sodný, LDA, nebo hexamethyldisilazid lithný, ve vhodném rozpouštědle, obvykle THF, DMF, DME, nebo jejich směsi, pro způsobení deprotonace amidu N-H. Působení na výsledné anionické seskupení. vhodným elektrofilem, jako je alkyl- nebo benzylhalogenid, vede k N-alkylaci, dávající produkt, například II-3. N-oxid sloučeniny II-3 může být redukován způsobem, popsaným ve Schématu I pro získání sloučeniny II-4, která může být saponifikována na II-5 způsobem, popsaným ve Schématu I. Deprotekce sloučeniny II-5 pro získání II-6 se provede za standard acidických podmínek popsaných v Greene, Protective Groups in Organic Synthesis (publikoval WileyInterscience). Takové podmínky jsou dobře známy odborníkům. Alternativně se konverze sloučeniny II-3 na II. 6 může provést jiným způsobem, například počáteční Boc deprotekcí sloučeniny II-3, následovanou redukcí N-oxidu a konečnou saponifikaci.
« · • ·
• · · · · ·· «·· · · · · * • · · · » · · • · · · · · · ··· • · · · · • · · · · · · · ·
a) 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxid, DEAD, (Ph)3P, DMF;
b) LiHMDS, CH3I, DMF;
c) cyklohexen, 10% Pd/C, 2-propanol;
d) 1,0 N NaOH, MeOH, potom acidifikace.
Sloučenina III-2, připraven jak bylo popsáno ve Schématu I, může být alkylována současně v poloze 2 (benzazepinové číslování) a na atomu dusíku, připojenému k pyridinovému kruhu za standardních alkylačních podmínek dobře známých odborníkům. Například může být III-2 zpracována alespoň 2 molárními ekvivalenty báze jako je hydrid sodný, LDA, nebo hexamethyldisilazid lithný, ve vhodném rozpouštědle, obvykle THF, DMF, DME, nebo jejich směsi, pro provedení deprotonace. Působení na výsledné anionické seskupení vhodným elektrofilem, jako je alkyl- nebo benzylhalogenid, vede k bis-alkylaci, která dává produkt, například III-3. Přeměna sloučeniny III-3 na III-5 postupuje způsoby, popsanými ve Schématech I a II.
Schéma IV
a,b
Μ
Φ · · φ φ φφ φ φφφ φφφφ φ φ φφ φφφ φφφ φφφ φ φ φφφ φφ φφ φφ
a) cyklohexen, 10% Pd/C, 2-propanol;
b) HCl/dioxan;
c) terč.-butylacetylchlorid, Et%3N, CH2CI2;
• ΒΒΒ · · · · Β • Β · · Β 4 · Β
Β · Β Β 4 Β ΒΒΒ ΒΒΒ • Β ΒΒΒ Β Β
ΒΒ ΒΒΒ ΒΒ ΒΒ ··
d) 1,0 Ν NaOH, MeOH, potom acidifikace.
Sloučenina IV-2, připravená z IV-1 způsoby, popsanými ve Schématech I - III, může být acylována na atomu dusíku, vázanému k pyridinovému kruhu za standardních acylačních podmínek dobře známých odborníkům. Například reakce sloučeniny IV-2 s acylačním činidlem, například terc.butylacetylchloridem, v přítomnosti vhodného vychytávače kyselin, obecně triethylaminu, diisopropylethylaminu, nebo pyridinu, ve vhodném rozpouštědle, často CH2CI2, dává sloučeninu IV-3. Je známo množství dodatečných způsobů acylace aminu a mohou být nalezeny ve standardních referenčních publikacích, jako je Compendium of Organic Synthetic Methods, Vol. I - VI (publikovalo WileyInterscience). Saponifikace sloučeniny IV-3, jak byla popsána ve Schématech I - III, dává sloučeninu IV-4.
a) 3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-1-propanol, DEAD, (Ph)3P, DMF, CH2C12;
b) H2, Pd/C, EtOH;
c) 2-methylthio-2-imidazolin, hydrojodid, (i-Pr)2NEt, dimethylacetamid, 100 °C;
d) 1,0 N LiOH, THF, H2O, potom acidifikace.
Sloučenina V-l, připravena jak bylo popsáno ve Schématu I, se nechá reagovat s chráněnou verzí 3-amino-l-propanolu, ·· ·· ·· • · · · · · • · · · · · • ·· ··· ···
-43-.
jako je 3-(terč.-butoxykarbonylamino)-1-propanol, 3(benzyloxykarbonylamino) -1-propanol nebo 3-(4nitrobenzyloxykarbonylamino)-1-propanol, kopulační reakci Mitsunobova typu jak bylo popsáno ve Schématu I. Výsledná sloučenina, V-2, se zbaví ochrany a tím se získá sloučenina V-3. Jak je dobře známo odborníkům, deprotekční podmínky jsou zvoleny na základě funkčních a ochranných skupin, které se nacházejí v V-2. Například p-nitro-Cbz skupina přítomná ve sloučenině V-2 se odstranění hydrogenolýzou v přítomnosti paládiového katalyzátoru, obecně paládia na aktivním uhlí nebo Pd(OH)2 na uhlí, ve vhodném rozpouštědle, obvykle methanolu, ethanolu, ethyiacetátu nebo jejich směsích. Je-li to požadováno, hydrogenolýza může být prováděna v přítomnosti kyseliny, například HC1, pro získání odpovídajících amonných solí sloučeniny V-2. Reakce V-3 s hydrojodidem 2-methylthio-2-imidazolinu v přítomnosti báze, například diisopropylethylaminu, ve vhodném rozpouštědle jako je MeOH, EtOH, DMF nebo dimethylacetamid, dává V-4. Podobné podmínky pro provádění transformace jsou popsány ve WO 95/32710. Saponifikace pro získání sloučeniny V-5 se provádí tak, jak bylo popsáno ve Schématu I.
····
a) 3-(terč.-butoxykarbonylamino)-1-propanol, DEAD, (Ph)3P, DMF, THF;
b) TFA, CH2C12;
c) 2-brompyrimidin, NaHCO3, EtOH, zpětný tok;
d) H2, Pd/C, HC1, MeOH;
e) K2CO3, H2O.
Sloučenina VI-3, připravená z VI-1 způsobem popsaným ve Schématu V, se nechá reagovat s 2-halopyrimidinem, obecně 2-chlorpyrimidinem nebo 2-brompyrinidinem, v přítomnosti ···· φ ·* *« ·· • · · · · * · · • · t 9 9 9 9 · · · ««· ·«« • « · 9 9
99 99 99 *» vhodného vychytávače kyselin, obvykle hydrogenuhličitanu sodného, triethylaminu, diisopropylethylaminu nebo pyridinu, ve vhodném rozpouštědlo, jako je ethanol, DMF, nebo dimethylacetamide a tim se získá sloučenina VI-4. Pyrimidinový kruh sloučeniny VI-4 se redukuje na odpovídající 1,4,5,6-tetrahydropyrimidinový kruh postupem podle podmínek, popsaných pro provádění takové transformace (viz například WO 95/32710). Sloučenina VI-4 se tedy podrobí hydrogenaci v přítomnosti paládiového katalyzátoru, výhodně paládia na aktivním uhlí, ve vhodném rozpouštědle, jako je methanol nebo ethanol. Reakce se obvykle provádí za acidických podmínek; přidání anorganické kyseliny, jako je HC1, je obecně výhodné. Sloučenina VI-5 se získá následnou bazifikací filtrované reakční směsi s Κ2ΟΟ3 a Η2Ο.
Schéma VII
a) NaH, 4-(trifluormethyl) benzyl bromid, DMF;
• · · · · • ·
- 46·-·* • 4 · · · · • · >· 4 4 4 4 ►· 4 4 4 « ι 44 444 444
b) H2, Pd(OH)2/C, MeOH.
Sloučenina VII-1, připravená pomocí obecných procedur, které popsali Bondinell, a kol., PCT přihláška WO 93/00095, publikovaná 7. ledna 1993 a Bondinell, a kol., PCT přihláška WO 94/14776, se nechá reagovat s 4(trifluormethyl)benzylbromidem v přítomnosti vhodné báze, obecně hydridu sodného nebo bis(trimethylsilyl)amidu lithného v aprotickém rozpouštědle, výhodně DMF, THF, nebo jejich směsi, čímž se získá bis-alkylovaný produkt VII-2. 4-(trifluormethyl) benzylether sloučeniny VII-2 může být výhodně odstraněn hydrogenolýzou, čímž se získá fenol VII3. Způsoby hydrogenolýzy benzyletherů jsou dobře známy odborníkům a jsou popsány ve vhodných referenčních monografiích, například v Greene, Protective Groups in Organic Synthesis (publikovalo Wiley-Interscience). Fenol VII-3 se potom používá pro přípravu sloučenin obecného vzorce (I) způsoby, které byly popsány v předchozích Schématech.
Amidové kopulační reagenty, které jsou zde používány, představují reagenty, které mohou být používány pro vytváření peptidových vazeb. Typické kopulační způsoby používají karbodiimidy, aktivované anhydridy a estery a acylhalogenidy. Reagenty jako je EDC, DCC, DPPA, PPA, BOP reagent, HOBt, N-hydroxysukcinimid a oxalylchlorid jsou typické.
Kopulační způsoby vytváření peptidových vazeb jsou obecně dobře známy odborníkům. Způsoby syntézy peptidů jsou obecně popsány v monografii Bodansky a kol., THE PRACTICE OF
• · to to to to • · to · to · toto· ·· ·· •· ·· ··
PEPTIDE SYNTHESIS, Springer-Verlag, Berlin, 1984. Ali a kol. v J. Med. Chem, 29, 984 (1986) a J. Med Chem, 30, 2291 (1987) jsou obecné ilustrace těchto způsobů a a jsou zde zahrnuty jako reference.
Typicky se amin nebo anilin kopuluje prostřednictvím své aminoskupiny ke vhodnému substrátu, představovanému karboxylovou kyselinou, použitím vhodného karbodiimidového kopulačního činidla jako je N,N'-dicyklohexyl karbodiimid (DCC), popřípadě v přítomnosti katalyzátorů jako je 1hydroxybenzotriazol (HOBt) a dimethylaminopyridin (DMAP). Další způsoby, jako je vytváření aktivovaných esterů, anhydridů nebo halogenidů kyselin, volného karboxylu příslušným způsobem chráněného kyselého substrátu a následná reakce s volným aminem vhodně chráněného aminu, popřípadě v přítomnosti a báze, je možno použít také. Například se chráněná Boc-aminokyselina nebo Cbzamidinobenzoová kyselina zpracovává v bezvodém rozpouštědle jako je methylenchlorid nebo tetrahydrofuran (THF) v přítomnosti báze jako je N-methylmorfolin, DMAP nebo trialkylamin, s isobutylchlormravenčanem pro vytvoření aktivovaného anhydridů, který potom následně reaguje s volným aminem druhé chráněné aminokyseliny nebo anilinu.
Užitečné meziprodukty pro přípravu sloučenin obecného vzorce (I) , ve kterých R2 je benzimidazol, jsou popsány v Nestor a kol., J. Med. Chem 1984, 27, 320. Representativní způsoby přípravy benzimidazolových sloučenin, použitelných ve způsobu podle předloženého vynálezu, jsou také známy a mohou být nalezeny například v EP-A 0 381 033.
• · · ·
Adiční soli s kyselinami sloučenin podle vynálezu se připraví standardním způsobem ve vhodném rozpouštědle ze základní sloučeniny a v přebytku kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina fluorovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná, kyselina octová, kyselina trifluoroctová, kyselina maleinová, kyselina jantarová nebo kyselina methansulfonová. Jisté sloučeniny vytvářejí vnitřní soli nebo zwitteriony, které mohou být přijatelné. Kationtové soli se připraví zpracováním základní sloučeniny přebytkem alkalického reagentu, jako je hydroxide, uhličitan nebo alkoxid, obsahujícího vhodný kation; nebo vhodným organickým aminem. Kationty jako je Li+, Na+, K+, Ca++, Mg++ a NH4 + jsou specifické příklady kationtů, přítomných ve farmaceuticky přijatelných solích.
Předložený vynález se také týká farmaceutických komposic, které zahrnují sloučeninu obecného vzorce (I) a farmaceuticky přijatelný nosič. V souladu s tím sloučeniny obecného vzorce (I) mohou být používány pro výrobu léčiva. Farmaceutické kompozice sloučenin obecného vzorce (I) , připravené zde popsaným způsobem mohou být připraveny jako roztoky nebo lyofylizované prášky pro parenterální podávání. Prášky mohou být vhodného ředidla nebo jiného nosiče před jejich použitím. Kapalný přípravek může být pufrovaný izotonický vodný roztok. Příklady vhodných ředidel jsou normální izotonický fyziologický roztok, standardní 5% dextróza ve vodě nebo pufrovaný roztok octanu sodného nebo amonného. Takový přípravek je obzvláště vhodný pro parenterální podávání, ale může také být používán pro rekonstituována přidáním farmaceuticky přijatelného • · · ·
orální podávání nebo obsažen v odměřené dávce v inhalačním nebo rozprašovacím přístroji pro vdechování. Může být požadováno přidat excipienty jako je polyvinylpyrrolidon, želatina, hydroxycelulóza, arabská guma, polyethylenglykol, mannitol, chlorid sodný nebo citrát sodný.
Alternativně tyto sloučeniny mohou být enkapsulovány, tabletovány nebo připraven ve formě emulzí nebo sirupů pro orální podávání. Farmaceuticky přijatelné pevné nebo kapalné nosiče mohou být přidány pro zlepšení nebo stabilizaci kompozice nebo pro usnadnění přípravy kompozice. Pevné nosiče zahrnují škroby, laktózu, dihydrát síranu vápenatého, terru albu, stearan horečnatý nebo kyselinu stearovou, talek, pektin, arabskou gumu, agar nebo želatinu. Kapalné nosiče zahrnují sirupy, kokosový olej, olivový olej, fyziologický roztok a vodu. Nosiče také mohu zahrnovat materiály se zpožděným uvolňováním, jako je glycerylmonostearát nebo glyceryldistearát, samy o sobě nebo spolu s voskem. Množství pevného nosiče může být různé, ale výhodně je v rozmezí od asi 20 mg do asi 1 g na dávkovou jednotku. Farmaceutické přípravky se vyrábějí obvyklými způsoby známými z farmaceutické techniky, jako jsou mletí, míchání, granulace a lisování, je-li to nutné, do formy tablet; nebo mletí, míchání a plnění do tvrdých želatinových kapslí. Pokud je používán kapalný nosič přípravky se vyrábí ve formě sirupů, elixírů, emulzí nebo vodných nebo bezvodých suspenzí. Takové kapalné přípravky mohou být podávány přímo perorálně nebo plněny do měkkých želatinových kapslí.
• · · ·
Pro rektální podávání mohou také být sloučeniny podle předloženého vynálezu spojeny s excipienty jako je kakaové máslo, glycerin, želatina nebo polyethylenglykoly a být odlity do formy čípků.
Sloučeniny, které jsou zde popsány, jsou antagonisté receptorů vitronektinu a jsou použitelné pro léčení onemocnění, ve kterých základní patologie souvisí s ligandy nebo buňkami, které interagují s receptory vitronektinu. Například jsou tyto sloučeniny jsou použitelné pro léčení onemocnění, ve kterých je patologie představována ztrátou kostní matrice. Sloučeniny podle předloženého vynálezu proto mohou být použity pro léčení osteoporózy, hyperparathyroidismu, Pagetovy nemoc, hyperkalkémie zhoubného bujení, osteolytických lézí, vytvářených kostními metastázami, ztrátou kostní tkáně v důsledku imobilizace nebo nebo nedostatku sexuálních hormonů. Předpokládá se také, že sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být použita jako protinádorová, antiangiogenní, protizánětlivá a protimetastázová činidla a mohou být použitelná v léčení aterosklerózy a restenózy.
Sloučeniny se podávají buď orálně nebo parenterálně pacientovi takovým způsobem, aby koncentrace látky byla dostatečná pro inhibici resorpce kostní hmoty nebo další indikace. Farmaceutické kompozice, obsahující sloučeninu podle vynálezu, jsou podávány v orální dávce mezi asi 0,1 až asi 50 mg/kg způsobem, který je slučitelný s aktuálním stavem pacienta. Výhodně je orální dávka od asi 0,5 do asi 20 mg/kg. Pro akutní terapii je výhodné parenterální podávání. Intravenózní infuze peptidu v 5% dextróze ve vodě ·· · • ·
- 51 ·, nebo normálním fyziologickém roztoku nebo v podobném přípravku se vhodnými excipienty je nejúčinnější, ačkoliv intramuskulární bolus injekce je také použitelná. Typicky je parenterální dávka od asi 0,01 do asi 100 mg/kg; výhodně mezi 0,1 a 20 mg/kg. Sloučeniny se podávají jednou až čtyřikrát denně v úrovni, která zaručí dosažení celkové denní dávky od asi 0,4 do asi 400 mg/kg/den. Přesné množství a způsob, kterým jsou sloučeniny podle vynálezu podávány odborník snadno určí na základě koncentrace, požadované pro dosažení terapeutického účinku.
Předložený vynález se dále týká způsobu léčení osteoporózy nebo inhibice ztráty kostní hmoty, který zahrnuje podávání sloučeniny obecného vzorce (I) a dalších inhibitorů resorpce kostní hmoty, jako jsou bisfosfonáty (například allendronát), hormonová nahrazovací terapie, antiestrogeny nebo kalcitonin a to buď po sobě nebo současně. Kromě toho se předložený vynález týká způsobu léčení . použitím sloučenin podle předloženého vynálezu a anabolického činidla, jako kostní morfogenní protein, iproflavon, použitelný při prevenci ztráty kostní hmoty a/nebo pro dosažení přírustu kostní hmoty.
Kromě toho se předložený vynález týká způsobu inhibice růstu nádorů, který zahrnuje podávání postupně po sobě nebo ve fyzické kombinaci sloučenin obecného vzorce (I) a antineoplastového činidla. Sloučeniny kamptothecinové třídy jako je topotekan, irinotekan a platinové koordinační komplexy ormaplatin a tetraplatin, jsou
9-aminokamptothecin a jako je cisplatin, dobře známé skupiny antineoplastových činidel. Sloučeniny kamptothecinové třídy ·· ·· • . · · • · · · ··· ♦·· • · ·· ·· • ···· · «· • · · · · « • · · · • · · · · •S2*·»* ··· *·· jsou popsány v U.S, Patentech č. 5,004,758, 4,604,463, 4,473,692, 4,545,880 4,342,776, 4,513,138, 4,399,276, publikovaných EP patentových přihláškách č. 0 418 099 a 0 088 642, v publikacích Wani, a kol., J. Med. Chem., 1986, 29, 2358, Wani, a kol., J. Med. Chem., 1980, 23, 554, Wani, a kol., J. Med. Chem., 1987, 30, 1774 a Nitta, a kol., Proč. 14th International Congr. Chemotherapy., 1985, Anticancer Section 1, 28, které jsou zde ve své celistvosti zahrnuty jako reference. Platinový koordinační komplex, cisplatin, je dostupný pod obchodním označením Platinol® od společnosti Bristol Myers-Squibb Corporation.Použitelné přípravky obsahující cisplatin jsou popsány v U.S. patentech č. 5,562,925 a 4,310,515, které jsou zde ve své celistvosti zahrnuty jako reference.
Ve způsobech inhibice růstu nádorů, které zahrnují podávání po sobě nebo ve fyzické kombinaci sloučeniny obecného vzorce (I) a antineoplastového činidla může být koordinační sloučenina platiny, například cisplatin, podávána použitím pomalé intravenózní infuze. Výhodný nosič je roztok dextrózy/fyziologický roztok, obsahující mannitol. Dávkový rozvrh platinových koordinačních sloučenin může být v rozmezí od asi 1 do asi 500 mg na čtvereční metr (mg/m2) tělesného povrchu v průběhu léčení. Infuze platinových koordinačních sloučenin může být prováděna jednou nebo dvakrát týdně a týdenní léčení může být několikrát opakováno. Při použití sloučeniny kamptothecinové třídy při parenterálním podávání průběh léčby obecně používá od asi 0,1 do asi 300,0 mg/m2 tělesného povrchu denně po asi pět po sobě následujících dní. Nejvýhodněji způsob léčení použitý pro topotekan je od asi 1,0 do asi 2,0 mg/m2
• · • · • flflfl ,h· • fl fl tělesného povrchu denně po asi pět po sobě následujících dní. Alternativně se cyklus terapie opakuje alespoň jednou v intervalu od asi sedmi dní do asi dvaceti osmi dní.
Farmaceutické kompozice mohou být připraveny se sloučeninou obecného vzorce (I) a antineoplastovým činidlem v témže obalu, ale použití přípravků odděleným způsobem je výhodné. Pokud jsou obě činidla připravena ve formě roztoku, mohou být obsaženy v jediném systému pro podávání infuze nebo injekce pro současné podávání nebo v tandemovém uspořádání.
Pro výhodné podávání sloučeniny obecného vzorce (I) a antineoplastového činidla současně nebo v různých dobách je připravena souprava, která v jednom obalu jako je krabice nebo karton nebo jiný obal, obsahuje jednotlivé lahvičky, sáčky, nádobky nebo další obaly a v každém z nich je obsaženo účinné množství sloučeniny obecného vzorce (I) pro parenterální podávání jak je popsáno výše a účinné množství antineoplastového činidla pro parenterální podávání, jak je popsáno výše. Taková souprava může například obsahovat obě farmaceutická činidla v oddělených obalech nebo ve stejném obalu, popřípadě v lyofylizované formě spolu s nádobkami, obsahujícími roztoky pro rekonstituci. Variace této soupravy obsahují roztok rekonstituci a lyofylizovanou látku v oddělených komorách téhož obalu, ve kterém může být smíchán před použitím. Při takovémto uspořádání antineoplastové činidlo a sloučenina podle předloženého vynálezu mohou být baleny odděleně, to jest ve dvou různých obalech nebo lyofylizovány společně jako prášek a obsažené v jediném obalu.
• 0 00 9
9
0
•0 00 00 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
0 0 ·00 00«
0 9 9
000 00 00
Pokud jsou obě činidla podána ve formě roztoku, mohou být obsažena v infuzním/injekčním systému pro současné podávání nebo v tandemovém uspořádání. Například může být sloučenina obecného vzorce (I) v intravenózně injektovatelné formě nebo v infuzním sáčku, který je spojen do série prostřednictvím trubic s antineoplastovým činidlem v druhém infuzním sáčku. Při použití takového systému může pacient dostávat počáteční bolus injekce nebo infuzi sloučeniny obecného vzorce (I), následovanou infuzi antineoplastového činidla.
Sloučeniny mohou být testovány jedním nebo více biologických testů pro určení koncentrace sloučenina, která je nutná pro dosažení požadovaného farmakologického účinku.
Inhibice vazby vitronektinu
Vazba [3H] -SK&F-107260 v pevné fázi k 0^3:
Receptor ανβ3 z lidské placenty nebo lidských - krevních destiček (0,1-0,3 mg/ml) v pufru T (obsahujícím 2 mM CaCl2 a 1% oktylglukosidu) byl zředěn pufrem T obsahujícím 1 mM CaCl2, 1 mM MnCl2, 1 mM MgCl2 (pufr A) a 0,05% NaN3 a potom okamžitě přidán do 96-jamkových ELISA desek (Corning, New York, NY) v množství 0,1 ml na jamku. 0,1 - 0,2 gg ανβ3 bylo přidáno na jamku. Destičky byly inkubovány přes noc při teplotě 4 °C. V okamžiku experimentu, jamky byly promývány jednou pufrem A a byly inkubovány 0,1 ml 3,5% hovězího sérového albumino ve stejném pufru po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Po inkubaci byly jamky úplně odsáty a promývány dvakrát 0,2 ml pufru A.
• φ φ φ φ · » · * φ φ · • Φ φ · · ·
Sloučeniny byly rozpuštěny 100% DMSO a tím se získal 2 mM zásobní roztok, který byl zředěn vazebným pufrem (15 mM Tris-HCl (pH 7,4), 100 mM NaCl, 1 mM CaCl2, 1 mM MnCl2, 1 mM MgCl2) na konečnou koncentraci sloučeniny 100 μΜ. Tento roztok byl potom zředěn na požadovanou koncentraci sloučeniny. Různé koncentrace neoznačených antagonistů (0,001 - 100 μΜ) byly trojnásobně přidány do jamek, následovalo přidání 5,0 nM [3H]-SK&F-107260 (65 - 86 Ci/mmol).
Desky byly inkubovány po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Po ukončení inkubace byly jamky úplně odsáty a promývány jednou 0,2 ml ledového pufru A jamka po jamce. Receptory byly solubilizovány 0,1 ml 1% SDS a vazba [3H]-SK&F-107260 byla určena kapalinovým scintilačním počítačem s přidáním 3 ml Ready Safe v Beckmanově LS Liquid Scintillation Counter, s účinností 40%. Nespecifická vazba [3H]-SK&F-107260 byla určena v přítomnosti 2 μΜ SK&F-107260 a byla konsistentně menší než 1% celkového radioligandového vstupu. IC50 (koncentrace antagonisty, která inhibuje 50% vazby [3H]SK&F-107260) byla určena nelineárním způsobem aproximací křivky metodou nejmenších čtverců, která byla odvozena modifikací programu LUNDON-2. Ki (disociační konstanta antagonisty) byla vypočtena pomocí rovnice:
Ki = ICso/d + L/Kd) , kde L a Kd byly koncentrace respektive disociační konstanta [3H] -SK&F-107260.
·· ·» » · « 4 » · * <
• · · · · «
Sloučeniny podle předloženého vynálezu inhibuji vitronektinovou vazbu k SK&F 107260 v rozsahu koncentrací od 4,0 do asi 0,0003 μΜ.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly také testovány in vitro a in vivo resorpci kostní hmoty ve standardních testech pro zhodnocení inhibice vytváření kosti, jako je test vytváření jamek, popsaný v EP 528 587, který také může být prováděn s použitím lidský osteoklastů namísto krysích osteoklastů a ovarektomizovaný krysí model, který popsal Wronski a kol., Cells a Materials 1991, Sup. 1, 69-74.
Test migrace buněk vaskulárního hladkého svalstva
Byly používán krysí nebo lidské buňky hladkého svalstva aorty. Migrace buněk byla monitorována v komoře pro buněčné kultury Transwell použitím polykarbonátové membrány s póry 8 pm (Costar). Spodní povrch filtru byl pokryt vitronektinem. Buňky byly suspendovány v DMEM s -přídavkem 0,2% hovězího sérového albuminu v koncentraci 2,5 - 5,0 x 106 buněk/ml a byly přezpracovány testovanou sloučeninou v různých koncentracích po 20 minut při teplotě 20 °C. Samotné rozpouštědlo bylo používáno jako kontrola. 0,2 ml buněčné suspenze bylo umístěno do horního oddílu komory. Dolní oddíl obsahoval 0,6 ml DMEM s přídavkem 0,2% hovězího sérového albuminu. Inkubace byla prováděna při teplotě 37 °C v atmosféře 95% vzduchu/5% CO2 po dobu 24 hodin. Po inkubaci byly nezmigrované buňky na horním povrchu filtru odstraněny jemným seškrábáním. Filtr potom byl fixován v methanolu a označen pomocí 10% Giemsa barviva. Migrace byla měřena buď
·« • · • · • · · e ·
a) určením počtu buněk, které migrovaly na spodní povrch filtru, nebo
b) extrakcí označených buněk 10% octovou kyselinou, následovanou určením absorbce při 600 nM.
Thyroparathyroídektomizovaný krysí model
Každá pokusná skupina sestávala ze 5-6 dospělých krysích samců Sprague-Dawley (250-400 g tělesná hmotnost). Krysy byly thyroparathyroidektomizovány (provedeno prodávající společností, Taconic Farms) 7 dní před použitím. Všechny krysy dostaly náhradní dávku thyroxinu každé 3 dny. Při příjmu krys byly změřeny hladiny obíhajícího ionizovaného vápníku ve veškeré krvi okamžitě po odebrání ocasní venipunktury do heparinizovaných zkumavek. Krysy byly připuštěny do pokusu, pokud hladina ionizovaného Ca (měřená pomocí vápníkového pH analyzátoru Ciba-Corning model 634) byla menší než <1,2 mM/Ι. Každá krysa byla vybavena stálým žilním a tepenným katetrem pro dodávání testovaného materiálu a pro odebírání krevních vzorků. Krysy potom byly drženy o dietě prosté vápníku a o deionizované vodě. Byly měřeny základní hladiny Ca a každé kryse bylo podáváno buď kontrolní vehikulum nebo lidský peptidový hormon příštitných tělísek 1-34 (hPTHl-34, dávka 1,25 pg/kg/h v fyziologickém roztoku/0,1% hovězím sérovém albuminu, Bachem, Ca) nebo směs hPTHl-34 a testovaného materiálu kontinuální intravenózní infuzí žilním katetrem použitím vnější stříkačkové pumpy. Kalcemická odezva každé krysy byla měřena v dvouhodinových intervalech v průběhu infuzní periody 6-8 hodin.
Test lidské osteoklastové resorpce a adheze • · · . ♦ · · ··· ···
I» ·
- 58 *
Testy s jamkovou resorpci a adhezi byly vyvinuty a standardizovány pro použití normálních lidských osteoklastů, získaných z osteoklastomové tkáně. Test 1 byl vyvinut pro měření osteoklastových objemů laserová konfokální mikroskopií. Test 2 byl vyvinut jako třídění s velkým výkonem, ve kterém kolagenové fragmenty (uvolňované v průběhu resorpce) jsou měřeny kompetitivním ELISA testem.
Test 1 (použití laserové konfokální mikroskopie)
Alikvoty suspenzí buněk, získaných z lidských osteoklastom byly odebrány ze zásoby v kapalném dusíku, zahříván rychle na teplotu 37 °C a promývány x 1 v RPMI-1640 mediu centrifugací (1000 otáček/min., 5 minut při teplotě 4 °C).
Médium bylo odsáto a znovu umístěno spolu s myšími protilátkami proti HLA-DR a potom zředěno 1:3 v RPMI-1640 médiu. Suspenze byla inkubována po dobu 30 minut na ledu a často míchána.
Buňky byly promývány x 2 studeným RPMI-1640 a následovala centrifugace (1000 otáček/min., 5 minut při teplotě 4 °C) a buňky potom byly přeneseny do sterilní 15 ml centrifugační zkumavky. Počet jednojaderných buněk byl spočítán ve zlepšené Neubauerově počítací komoře.
Dostatečný počet magnetických kuliček (5/jednojadernou buňku), pokrytých kozími protilátkami proti myším IgG (Dynal, Great Neck, NY) byly odebrány ze zásobní láhve a umístěny do 5 ml čerstvého médium (které vymylo toxické azidové konzervační činidlo). Médium bylo odstraněno • 4 • * « · · · 4 • 4 ·
4 · « • 4 · c 4
imobilizací kuliček na magnet a bylo nahrazeno čerstvým médiem.
Kuličky byly smíchány s buňkami a suspenze byla inkubována po 30 minut na ledu. Suspenze byla často míchána.
Kuličkami pokryté buňky byly imobilizovány na magnetu a zbývající buňky (na osteoklasty bohatá frakce) byla dekantována do sterilní 50 ml centrifugační zkumavky.
K buňkám, pokrytým kuličkami, bylo přidáno čerstvé médium pro odplavení jakýchkoli zachycených osteoklastů. Tento proces promývání byl opakován desetkrát. Kuličkami pokryté buňky byly vyhozeny.
Životaschopné osteoklasty byly spočítány v čítači komoře s použitím fluoresceindiacetátu pro označení živých buněk. Pro přidávání vzorku do komory byla používána. plastická Pasteurova pipeta pro jedno pužití s velkým otvorem.
Osteoklasty byly peletovány centrifugací a hustota byla upravena na vhodnou velikost v DMEM médiu (počet osteoklastů se mění od nádoru k nádoru), s přídavkem 10% fetálního telecího séra a 1,7 g/litr hydrogenuhličitanu sodného.
3ml alikvotů buněčné suspenze (na jedno působení sloučeniny) bylo dekantováno do 15 ml centrifugovacích zkumavek. Buňky byly peletovány centrifugací.
-· ♦ ··· * ·· · · · · • · a · ·.·
Do každé zkumavky bylo přidáno 3 ml odpovídající sloučeniny (zředěna na 50 μΜ v EMEM médiu) . Byly také přidány vhodná kontrolní vehikula, pozitivní kontrola (myší monoklonální protilátky proti receptorům vitronektinu [87MEM1] zředěné na 100 gg/ml) a isotypová kontrola (IgG2a zředěná na 100 μg/ml) . Vzorky byly ínkubovány při teplotě 37 °C po 30 minut.
0,5 ml alikvotů buněk bylo naočkováno na sterilní dentinové řezy v 48-jamkové desce a inkubováno při teplotě 37 °C po 2 hodiny. Každé ošetření bylo kontrolováno čtyřnásobně.
Řezy byly promývány šesti šaržemi PBS (10 ml/jamku v 96 jamkové desce) a potom umístěny do čerstvého média, obsahujícího testovanou sloučeninu nebo kontrolní vzorek. Vzorky byly Ínkubovány při teplotě 37 °C po dobu 48 hodin.
Procedura s tartarátově odolnou kyselou fosfatázou (TRAP) (selektivní označování pro buňky osteoklastové linie)
Kostní řezy, obsahující připojené osteoklast, byly promývány ve fosforečnanem pufrovaném fyziologickém roztoku (PBS) a fixovány v 2% gluteraldehydu (v 0,2 M kakodylátu sodném) po 5 minut.
Potom byly promývány ve vodě a ínkubovány po 4 minuty v TRAP pufru při teplotě 37 °C (0,5 mg/ml naftol AS-BI fosforečnan rozpuštěný v N,N-dimethylformamidu a smíchaný s 0,25 M citrátovým pufrem (pH 4,5), obsahujícím 10 mM tartarát sodný.
- 61 7
Β B BBfl B « » · B • · • · • Β • · ·
Β Β
Po promývání ve studené vodě byly řezy ponořeny do studeného acetátového pufru (0,1 M, pH 6,2) obsahujícího 1 mg/ml červeného granátu a inkubovány při teplotě 4 °C po dobu 4 minut.
Přebytek pufru byl odsát a řezy byly sušeny na vzduchu s následujícím promýváním ve vodě. TRAP pozitivní osteoklasty (cihlově červený/ purpurový precipitát) byly spočítány bright-field mikroskopií a potom byly odebrány z povrchu dentinu sonikací.
Jamkové objemy byly určeny konfokálním mikroskopem Nikon/Lasertec ILM21W.
Test 2 (používající ELISA čtení)
Lidské osteoklasty byly obohaceny a připraveny pro testování sloučenin způsobem popsaným v počátečních 9 krocích Testu 1. Pro úplnost výkladu jsou tyto kroky zopakovány.
Alikvoty suspenzí buněk, získaných z lidských osteoklastom byly odebrány ze zásoby v kapalném dusíku, zahříván rychle na teplotu 37 °C a promývány x 1 v RPMI-1640 mediu centrifugací (1000 otáček/min., 5 minut při teplotě 4 °C).
Médium bylo odsáto a znovu umístěno spolu s myšími protilátkami proti HLA-DR a potom zředěno 1:3 v RPMI-1640 médiu. Suspenze byla inkubována po dobu 30 minut na ledu a často míchána.
• 4 · · ♦ * · ♦ • 4 4 « * ·· · ♦ · · • 4
Buňky byly promývány x 2 studeným RPMI-1640 a následovala centrifugace (1000 otáček/min., 5 minut při teplotě 4 °C) a buňky potom byly přeneseny do sterilní 15 ml centrifugační zkumavky. Počet jednojaderných buněk byl spočítán ve zlepšené Neubauerově počítací komoře.
Dostatečný počet magnetických kuliček (5/jednojadernou buňku), pokrytých kozími protilátkami proti myším IgG (Dynal, Great Neck, NY) byly odebrány ze zásobní láhve a umístěny do 5 ml čerstvého médium (které vymylo toxické azidové konzervační činidlo). Médium bylo odstraněno imobilizací kuliček na magnet a bylo nahrazeno čerstvým médiem.
Kuličky byly smíchány s buňkami a suspenze byla inkubována po 30 minut na ledu. Suspenze byla často míchána.
Kuličkami pokryté buňky byly imobilizovány na -magnetu a zbývající buňky (na osteoklasty bohatá frakce) byla dekantována do sterilní 50 ml centrifugační zkumavky.
K buňkám, pokrytým kuličkami, bylo přidáno čerstvé médium pro vymytí jakýchkoli zachycených osteoklastů. Tento proces promývání byl opakován desetkrát. Kuličkami pokryté buňky byly vyhozeny.
Životaschopné osteoklasty byly spočítány v citaci komoře s použitím fluoresceindiacetátu pro označení živých buněk. Pro přidávání vzorku do komory byla používána plastická Pasteurova pipeta pro jedno pužití s velkým otvorem.
«<··· · ·· · · · · • · · · · · · · 4 · ♦ • · · · · · · · · _ » · · ·· » · «»«··· ·*· ··» · · • · * · · 4 · · ·· ί· «·
Osteoklasty byly peletovány centrifugací a hustota byla upravena na vhodnou velikost v DMEM médiu (počet osteoklastů se mění od nádoru k nádoru), s přídavkem 10% fetálního telecího séra a 1,7 g/litr hydrogenuhličitanu sodného.
Na rozdíl od způsobu popsaného v Testu 1, sloučeniny byly tříděny ve 4 dávkách pro určení IC50následuj ícím způsobem:
Osteoklastové preparáty byly preinkubovány po 30 minut při teplotě 37 °C s testovanou sloučeninou (4 dávky) nebo kontrolní látkou.
Potom byly naočkovány na řezy hovězí kortikální kosti v jamkách ve 48-jamkové tkáňové kultivační desce a byly inkubovány po další 2 hodiny při teplotě 37 °C.
Kostní řezy byly promývány v šesti dávkách teplého fosforečnanově pufrovaného fyziologického roztoku (PBS) pro odstranění nepřilnutých buněk a potom byly navráceny do jamek 48 jamkové destičky, obsahujících čerstvé sloučeniny nebo kontrolní látky.
Tkáňová kultivační deska byla potom inkubovány po 48 hodin při teplotě 37 °C.
Supernatanty z každé jamky byly odsáty do jednotlivých zkumavek a byly testovány kompetitivním ELISA testem, který detekoval c-telopeptidy kolagenu typu I, které byly uvolňovány během procesu resorpce. Tento test je komerčně dostupný ELISA test (Osteometer, Denmark), který obsahuje •t · • · « · · · • · · · · 9 • 99 99 9 99 9
9 9 9
9 9 9 9 9 králičí protilátky, které specificky reagují s 8aminokyselinovou sekvencí (Glu-Lys-Ala-His-Asp-Gly-GlyArg) , která je přítomna v karboxy-terminálním telopeptidu řetězce al kolagenu typu I. Výsledky jsou vyjádřeny v % inhibice resorpce vzhledem ke kontrolnímu vehikulu.
Test adheze lidských osteoklastů
Lidské osteoklasty byly obohaceny a připraveny pro testování sloučenin způsobem popsaným v počátečních 9 krocích Testu 1. Pro úplnost výkladu jsou tyto kroky zopakovány.
Alikvoty suspenzí buněk, získaných z lidských osteoklastom byly odebrány ze zásoby v kapalném dusíku, zahříván rychle na teplotu 37 °C a promývány x 1 v RPMI-1640 mediu centrifugací (1000 otáček/min., 5 minut při teplotě 4 °C).
Médium bylo odsáto a znovu umístěno spolu . s myšími protilátkami proti HLA-DR a potom zředěno 1:3 v RPMI-1640 médiu. Suspenze byla inkubována po dobu 30 minut na ledu a často míchána.
Buňky byly promývány x 2 studeným RPMI-1640 a následovala centrifugace (1000 otáček/min., 5 minut při teplotě 4 °C) a buňky potom byly přeneseny do sterilní 15 ml centrifugační zkumavky. Počet jednojaderných buněk byl spočítán ve zlepšené Neubauerově počítací komoře.
Dostatečný počet magnetických kuliček (5/jednojadernou buňku), pokrytých kozími protilátkami proti myším IgG (Dynal, Great Neck, NY) byly odebrány ze zásobní láhve a • · *
• 4 «44 umístěny do 5 ml čerstvého médium (které vymylo toxické azidové konzervační činidlo). Médium bylo odstraněno imobilizací kuliček na magnet a bylo nahrazeno čerstvým médiem.
Kuličky byly smíchány s buňkami a suspenze byla inkubována po 30 minut na ledu. Suspenze byla často míchána.
Kuličkami pokryté buňky byly imobilizovány na magnetu a zbývající buňky (na osteoklasty bohatá frakce) byla dekantována do sterilní 50 ml centrifugační zkumavky.
K buňkám, pokrytým kuličkami, bylo přidáno čerstvé médium pro vymytí jakýchkoli zachycených osteoklastů. Tento proces promývání byl opakován desetkrát. Kuličkami pokryté buňky byly vyhozeny.
Životaschopné osteoklasty byly spočítány v čítači komoře s použitím fluoresceindiacetátu pro označení živých buněk. Pro přidávání vzorku do komory byla používána plastická Pasteurova pipeta pro jedno pužití s velkým otvorem.
Osteoklasty byly peletovány centrifugací a hustota byla upravena na vhodnou velikost v DMEM médiu (počet osteoklastů se mění od nádoru k nádoru), s přídavkem 10% fetálního telecího séra a 1,7 g/litr hydrogenuhličitanu sodného.
Osteoklastové preparáty byly preinkubovány po 30 minut při teplotě 37 °C s testovanou sloučeninou (4 dávky) nebo kontrolní látkou.
♦ ·· · • · 9 · • · # · · · • 9 · · ♦ · • · · · · · · · ·
9 9 9
99 99
Buňky byly potom naočkovány osteopontinem pokrytá sklíčka (lidský nebo krysí osteopontin, 2,5 gg/ml) a inkubovány po dobu 2 hodin při teplotě 37 °C.
Nepřilnuté buňky byly odstraněny intenzivním promýváním ve fosforečnanově pufrovaném fyziologickém roztoku a buňky, které zůstaly na sklíčkách byly fixovány v acetonu.
Osteoklasty byly označeny pro tartarárově odolnou fosfatázu (TRAP), selektivní markér pro buňky tohoto fenotypu (viz kroky 15 - 17) a byly počítány optickou mikroskopií. Výsledky jsou vyjádřeny jako % inhibice adheze ve srovnání s kontrolní látkou.
Test buněčné adheze
Buňky a buněčné kultury
Lidský zárodečné ledvinové buňky (HEK293 buňky) byly získány od ATCC (katalogové č. CRL 1573) . Buňky byly pěstovány na Earlově minimálním esenciálním médiu (EMEM), obsahujícím Earlovy soli, 10% zárodečného hovězího séra, 1% glutamin a 1% Penicilinu - Steptomycinu.
Konstrukty a transfekce
3,2 kb EcoRI-KpnI fragment podjednotky av a 2,4 kb XbaiXhol fragment podjednotky ββ byly vloženy do EcoRI - EcoRV klonovacích míst pCDN vektoru (Aiyar a kol., 1994), který obsahuje CMV promotor a G418 volitelný markér pomocí blunt
4
4 4 · 4 4 44 « • 494 444·
4 4 ·· 44 4 ··· end ligace. Pro stabilní expresi bylo 80 x 106 HEK 293 buněk elektrotransformováno αν+β3 konstrukty (20 gg DNA každé podjednotky) použitím přístroje Gene Pulser (Hensley a kol., 1994 ) a umístěny v 100 mm destičkách (5xl05 buněk/destičku). Po uplynutí 48 hodin bylo do růstového média přidáno 450 gg/ml Geneticinu (G418 Sulfáte, GIBCOBRL, Bethesda, MD). Buňky byly udržovány v selekčním médiu, dokud kolonie nebyly dostatečně velké pro testování.
Imunonocytochemická analýza transfektovaných buněk
Pro určení, zda HEK 293 transfektanty exprimovaly receptor vitronektinu byly buňky imobilizovány na skleněných mikroskopových sklíčkách centrifugací, fixovány v acetonu po 2 minuty při teplotě okolí a sušeny na vzduchu. Specifická reaktivita s 23C6, monoklonální protilátkou, specifickou pro ανβ3 komplex byla demonstrována použitím standardních nepřímých imunofluorescenčních metod.
Studie buněčné adheze jamkové ELISA destičky Corning byly předem pokryty přes noc při teplotě 4 °C 0,1 ml lidského vitronektinu (0,2 μς/ιηΐ v RPMI médium) . V okamžiku experimentu byly desky promývány jednou RPMI médiem a blokovány 3,5% BSA v RPMI médiu po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Transfektované 293 buňky byly resuspendovány v RPMI médiu s přídavkem 20 mM Hepes, pH 7,4 a 0,1% BSA při hustotě 0,5 x 106 buněk/ml. 0,1 ml buněčné suspenze bylo přidáno do každé jamky a inkubováno po 1 hodinu při teplotě 37 °C v přítomnosti nebo • 4 ► 4 · 4 4 •
• 4 » 4
4
4 4 4 ► 4 4 4 > 4 4 4
444 4··
4
44 nepřítomnosti různých antagonistů ανβ3. Po inkubaci bylo přidáno 0,025 ml 10% formaldehydového roztoku, pH 7,4 a buňky byly fixovány při teplotě okolí po 10 minut. Desky byly promývány třikrát 0,2 ml RPMI média a přilnuté buňky byly označeny 0,1 ml 0,5% toluidinové modři po 20 minut při teplotě okolí.
Přebytek barviva byl odstraněn extenzivním propíráním deionizovanou vodou. Toluidinová modř, která vstoupila do buněk, byla vymyta přidáním 0,1 ml 50% ethanolu, obsahujícího 50 mM HCl.Buněčná adheze byl kvantifikována pomocí optické hustoty při vlnové délce 600 nm čtečce mikrotitračních destiček (Titertek Multiskan MC, Sterling, VA) .
Vazebný test ανβ5 v pevné fázi:
Receptor vitronektinu ανβ5 byl purifikován z lidské placenty. Receptorový preparát byl zředěn 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 100 mM NaCl, 1 mM CaCl2, 1 mM MnCl2, 1 mM MgCl2 (pufr A) a byl okamžitě přidán na 96 jamkovou ELISA destičku v množství 0,1 ml na jamku. 0,1-0,2 μς ανβ3 bylo přidáno na jamku. Destičky byly inkubovány přes noc při teplotě 4 °C. V okamžiku experimentu byly jamky promývány jednou pufrem A a byly inkubovány 0,1 ml 3,5% hovězího sérového albuminu ve stejném pufr po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Po ukončení inkubace byly jamky úplně odsáty a promývány dvakrát 0,2 ml pufru A.
V [3H]-SK&F-107260 kompetičním testu byly do jamek přidány různé koncentrace neoznačených antagonisty (0,001-100 μΜ) , • · · · •9 ·· 9« • · · ···· ···· • · ······· • 49 9 · ·· ······
následovalo přidání 5,0 nM [3H]-SK&F-107260. Destičky byly inkubovány po 1 hodinu při teplotě okolí. Po ukončení inkubace byly jamky úplně odsáty a promýván jednou 0,2 ml ledového pufru A jamka po jamce. Receptory byly solubilizovány pomocí 0,1 ml 1% SDS a vazba [3H]-SK&F107260 byla určena kapalinovým scintilačním počítačem s přidáním 3 ml Ready Safe v přístroji Beckman LS 6800 Liquid Scintillation Counter a s účinností 40%. Nespecifická vazba [3H]-SK&F-107260 byla určena v přítomnosti 2 μΜ SK&F-107260 a byla konsistentně menší než 1% celkového radioligandového vstupu. IC50 (koncentrace antagonisty, která inhibuje 50% vazby [3H]-SK&F-107260) byla určena nelineárním způsobem aproximací křivky metodou nejmenších čtverců, která byla odvozena modifikací programu LUNDON-2. Ki (disociační konstanta antagonisty) byla vypočtena pomocí ChengPrusoffovy rovnice:
Ki = IC5O/(1 + L/Kd), kde L a Kd byly koncentrace respektive disociační konstanta [3H] -SK&F-107260.
Inhibice RGD-mediované GPIIb-IIIa vazby
Čištění GPIIb-IIIa
Deset jednotek promývaných lidských destiček (získány od Červeného kříže) bylo lyžováno jemným mícháním v 3% oktylglukosidu, 20 mM Tris-HCl, pH 7,4, 140 mM NaCl, 2 mM CaCl2 při teplotě 4 °C po dobu 2 hodin. Lyzát byl centrifugován při 100.000 g po dobu 1 hodiny. Získaný supernatant byl aplikován na 4B kolonu (E.Y. Labs) s 5 ml
00 00 00 000 0 0 00 0
0 0 0 0 0 0 0 0 00 000 000
000 000 0 0 000 00 000 00 00 00 lentilové lektinsefarózy, preekvilibrovanou 20 mM Tris-HCl, pH 7,4, 100 mM NaCl, 2 mM OC12, 1% oktylglukosidu (pufr A) . Po uplynutí 2 hodin inkubace byla kolona promývána 50 ml studeného pufru A. Lektinem zadržené GPIIb-IIIa byly vymyty pufrem A obsahujícím 10% dextrózy. Všechny procedury byly prováděny při teplotě 4 °C. Získaný GPIIb-IIIa byl > 95% čistý, jak bylo prokázáno SDS polyakrylamidovou gelovou elektroforézou.
Včlenění GPIIb-IIIa do liposomů.
Směs fosfatidylserinu (70%) a fosfatidylcholinu (30%) (Avanti Polar Lipids) byla sušena na stěnách skleněné zkumavky pod proudem dusíku. Čištěný GPIIb-IIIa byl zředěn na konečnou koncentraci 0,5 mg/ml a smíchán s fosfolipidy v poměru protein:fosfolipid rovném 1:3 (hmotnostně). Směs byla resuspendována a sonikována v lázni sonikátoru po 5 minut. Směs potom byla dialyzována přes noc použitím dialyzační trubice s hraniční molekulovou hmotností 1200014000 proti 1000 násobnému přebytku 50 mM Tris-HCl, pH 7,4, 100 mM NaCl, 2 mM CaCl2 (se 2 výměnami) . GPIIb-IIIaobsahující liposomy byly centrifugovány při 12000 g po 15 minut a resuspendovány v dialyzačním pufru na konečnou koncentraci proteinu přibližně 1 mg/ml. Liposomy byly uchovávány při teplotě -70 °C až do použití.
Kompetitivní vazba k GPIIb-IIIa
Vazba k fibrinogenovému receptoru (GPIIb-IIIa) byla testována nepřímou kompetitivní vazebnou metodou použitím [3H]-SK&F-107260 jako ligandu typu RGD. Vazebný test byl prováděn v 96-jamkové filtrační destičkové sestavě (Millipore Corporation, Bedford, MA) použitím 0,22 μπι
4 4
-y 44 4 44 4
4 4 4
4 4 4 4 4
4 4 4 4 4
44 444 444
4 4 4 hydrofilní duraporové membrány. Jamky byly předem pokryty 0,2 ml 10 μς/ιηΐ polylysinu (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.) při teplotě okolí po 1 hodinu pro blokování nespecifické vazby. Různé koncentrace neoznačených benzazepinů byly do jamek přidávány čtyřnásobně. [3H]-SK&F107260 byl aplikován do každé jamky v konečné koncentraci 4,5 nM·, následován přidáním 1 μς čištěných destičkový GPIIb-IIIa obsahujících liposomů. Směsi byly inkubovány po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. K GPIIb-IIIa vázané [3H] SK&F-107260 byly odděleny od nevázaných filtrací použitím filtrační sestavy Millipore, následovalo promývání ledovým pufrem (dvakrát, pokaždé 0,2 ml). Vázaná radioaktivita, zůstávající na filtrech byla určena v 1,5 ml Ready Solve (Beckman Instruments, Fullerton, CA) v přístroji Beckman Liquid Scintillation Counter (Model LS6800) se 40% účinností. Nespecifická vazba byla určena v přítomnosti 2 μΜ neoznačených SK&F-107260 a byla konsistentně menší než 0,14% celkové radioaktivity přidané ke vzorkům. Všechna určená data jsou střední hodnoty čtyřnásobného měření.
Kompetiční vazebná data byla analyzována nelineární aproximací křivky metodou nejmenších čtverců. Tento způsob dal hodnoty IC50 antagonistů (koncentrace antagonisty, která inhibuje specifickou vazbu [3H]-SK&F-107260 o 50% v rovnovážném stavu). IC50 se vztahuje k rovnovážné disociační konstantě (Ki) antagonisty na základě ChengPrusoffovy rovnice:
Ki = IC50/ (1+L/Kd), kde L je koncentrace [3H]- SK&F-107260 používaná v kompetičním vazebném testu (4,5 nM) a Kd je disociační
• · · · • 9 9 · • 4 4 4 • 44 4 4 4 4 • 4
44 konstanta [3H]-SK&F-107260, která byla určena na 4,5 nM pomocí Scatchardovy analýzy.
Popisované sloučeniny podle předloženého vynálezu mají afinitu pro receptor vitronektinu vzhledem k receptoru fibrinogenu vyšší než 10:1. Nejvýhodnější sloučeniny mají poměr aktivity vyšší než 100:1.
Účinnost sloučenin obecného vzorce (I) samotných nebo v kombinaci s antineoplastovým činidlem může být určena použitím několika modelů transplantovatelných myších nádorů. Viz U. S. patenty č. 5,004,758 a 5,633,016 pro detaily týkající se těchto modelů.
Příklady které následují nemají v žádném případě za cíl omezit rozsah předmětu předloženého vynálezu, ale poskytují ilustraci toho, jak lze vyrábět a používat sloučeniny podle předloženého vynálezu. Mnoho dalších možných provedení je okamžitě zřejmých odborníkům v oblasti.
Příklady provedení vynálezu
Obecný popis
Spektra XH nukleární magnetická resonance (NMR) byla zaznamenávána buď při 250 nebo 400 MHz. Chemické posuny jsou uváděny v částech na milion (δ) ze vnitřního standardu tetramethylsilanu (TMS). Zkratky používané pro NMR data jsou následující: s=singlet, d=doublet, t=triplet, q=kvartet, m=multiplet, dd=doublet doubletu, dt=doublet tripletů, app=zjevný, br=široký. J indikuje NMR kopulační
9«··
- 73 99 999 999 zaznamenavany v Hmotová spektra konstantu měřenou v Hertzech. CDCI3 je deuteriochloroform, DMSO-d6 je hexadeuteriodimethylsulfoxid a CD3OD je tetradeuteriomethanol. Infračervená (IR) spektra byla zaznamenávána v transmisním módu a polohy pásem jsou převrácených vlnových délkách (cm'1) . byla získána použitím ES nebo FAB ionizačních způsobů. Elementární analýzy byly prováděny buď vlastním zařízením nebo je prováděla společnost Quantitative Technologies lne., Whitehouse, NJ. Teploty tání určovány na přístroji pro určování teploty tání Thomas-Hoover a jsou nekorigovány. Všechny teploty jsou uvedeny ve stupních Celsia. Pro chromatografii na tenké vrstvě byly používány tenkovrstvé desky Analtech Silikagel GF a E a Merck Silikagel 60 F-254. Jak mžiková, tak gravitační chromatografie byly prováděny použitím silikagelu E. Merck Kieselgel 60 (230-400 mesh, t.j. 35-65 mikronů). Analytická a preparativní HPLC byly prováděny chromatografy Rainin nebo Beckman.
oktadecylsilylem derivatizovaný chromatografický nosič. 5 μ Apex-ODS indikuje oktadecylsilylem derivatizovaný silikagelový chromatografický nosič, který má nominální velikost částic 5 μ, vyráběný společností Jones Chromatography, Littleton, Colorado. YMC ODS-AQ® je ODS chromatografický nosič a je registrovanou obchodní známkou YMC Co. Ltd., Kyoto, Japonsko. PRP-1® polymerícký (styren-divinylbenzen) chromatografický nosič a a je registerovanou obchodní známkou společnosti Hamilton Co., Reno, Nevada. Celit® je filtrovací pomůcka, skládající se z kyselinou promývané
ODS - označuje silikagelový
0000 ·· * 0··· «000 • 0 000 0000 * · · 0 0 0 0 000 000 00« 000 0 0
0·0 «0 000 00 00 00 křemeliny a je registerovanou obchodní známkou společnosti Manville Corp., Denver, Colorado.
Příprava 1
Příprava methyl (±)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH2-benzazepin-4-acetátu
a) 4-Brom-3-brommethylanisol
Směs 2-brom-5-methoxytoluenu (20 g, 0,10 mol), Nbromsukcinimidu (19,6 g, 0,11 mol), benzoylperoxidu (1 g, 4 mmol) a methylenchloridu (200 ml) byla ozařována po dobu 18 hodin širokoúhlou lampou, která způsobila mírný zpětný tok. Směs byla potom ochlazována na teplotu -10 °C po dobu několika hodin a roztok byl usazováním oddělen od precipitovaného sukcinimidu. Roztok byl koncentrován a residuum bylo krystalizováno ze směsi chloroform/hexan a tím se získala sloučenina z názvu (19,7 g, 70%j ve formě bledě žlutých hranolků:
XH NMR (CDC13) δ 7,45 (d, J = 8,9 Hz, 1 H) , 6,99 (d, J = 3 Hz, 1 H), 6,74 (dd, J = 8,9, 3 Hz, 1 H), 4,55 (s, 2 H) 3,80 (s, 3 H) .
b) 3-Bis(terč.-butoxykarbonyl)aminomethyl-4-bromanisol Směs 4-brom-3-brommethylanisolu (24 g, 86 mmol) a di-terc.butyl iminodikarboxylátu draselného (24 g, 94 mmol) v dimethylformamidu (200 ml) byla míchána pod argonovou atmosférou při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs potom byla koncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi ethylacetát a vodu. Organická fáze byla promývána vodou a solankou, sušena (MgSO4) , a • · · · • ·
koncentrována. Residuum bylo rekrystalizováno z hexanu a
tím se získala sloučenina z názvu (15 g. 42% ) ve formě bílé
pevné látky:
XH NMR (CDCI3) 6 7,40 (d, J = 8,6 Hz 1 Η) , 6,68 (m, 2 Η) ,
4,81(s, 2 Η) , 3,74 (s, 3 Η) , 1,44 (s, 18 H) .
c) Methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-bis(terč.butoxykarbonyl) aminomethyl-4-methoxyfenyl] -3-butenoát Baňka o objemu 500 ml byla naplněna 3-bis(terc.butoxykarbonyl)aminomethyl-4-bromanisolem (15 g, 36 mmol), dimethyl itaconátem (7,5 g, 47 mmol), tri-o-tolylfosfinem (1 g, 3 mol), octanem paladnatým (0,4 g, 2 mmol), diisopropylethylaminem (12,8 ml, 72 mmol), a propionitrilem (150 ml) . Směs byla proplachována argonem (několik cyklů vyprázdnění a přivedení argonu), potom byla zahřívána na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou po dobu 1 hodiny. Reakční směs byla ponechána ochladit se na teplotu zpětného toku, potom byla vlita do ledového ethyletheru (500 ml) . Výsledný precipitát byl odstraněn filtrací a filtrát byl koncentrován. Residuum byl čištěn chromatografii na silikagelu (10% - 20% ethylacetát v hexanu) a tím se získala sloučenina z názvu (11,8 g, 66%) ve formě bledě žlutého oleje:
XH NMR (CDCla) δ 7,94 (s, 1 Η) , 7,15 (d, J = 8,1 Hz, 1 Η) , 6,77 (d, J = 8,1 Hz, 1 Η) , 6,76 (s, 1 Η) , 4,73 (s, 2 Η) , 3,81 (s, 3 H), 3,79 (s, 3 Η), 3,71 (s, 3 Η) , 3,38 (s, 2 Η), 1,45 (s, 18 H).
d) Methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-bis(terc.but oxy karbonyl) aminomethyl-4-methoxyf enyl] butanoát
- 76 « • · · · · · · φ · « · · · · · • · · · · · · • · ·· ·»· ···
Tlaková nádoba naplněná methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2bis(terč.-butoxykarbonyl)aminomethyl-4-methoxyfenyl]-3butenoátem (11,8 g) , ethylacetátem (120 ml), a 10% paládiem na aktivním uhlí (1 g) byla protřepávána za tlaku 45 psi vodíku po dobu 18 hodin. Směs byla potom filtrována a filtrát byl koncentrován a tím se získala sloučenina z názvu (12 g, 100%) ve formě bezbarvého oleje:
1H NMR (CDCls) δ 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1 H) , 6,71 (m, 2 H) , 4,81 (s, 2 H) , 3,75 (s, 3 H) , 3,66 (s,3 H) , 3,63 (s, 3 H) , 3,05 (m, 2 H), 2,73 (m, 2 H), 2,42 (dd, J = 16,0, 4,8 Hz, 1 H) , 1,44 (s, 18 H) .
e) Methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-(aminomethyl)-4methoxyfenyl]butanoát
Roztok methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-bis(terč.butoxykarbonyl)aminomethyl-4-methoxyfenyl]butanoátu (12 g) v chloroformu (100 ml) a trifluoroctová kyselina (50 ml) byl míchán pod argonovou atmosférou při teplotě okolí po dobu 4 hodin. Roztok potom byl koncentrován za sníženého tlaku a tím se získala sloučenina z názvu (10 g, 100%) ve formě vazkého oleje:
MS (ES) m/e 296,2 (M + H)+.
f) Methyl (+)-8-methoxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Roztok methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-(aminomethyl)-4methoxyfenyl]butanoátu (10 g, 24 mmol) a triethylaminu (17 ml, 120 mmol) v toluenu (100 ml) byl zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 18 hodin. Reakční směs potom byla koncentrována a residuum bylo rozděleno mezi ethylacetát a vodu. Vodná vrstva byla extrahována dvakrát ethylacetátem a ···· · ·· ·· ·· • · · · · · · · · ♦ · · ♦ ···· * · · · ·· · · · « · · • · · · ♦ · · sloučené organické extrakty byly promývány solankou, sušeny (MgSO4) a koncentrovány a tím se získala sloučenina z názvu (4,8 g, 76%) ve formě snědé pevné látky:
MS (ES) m/e 264,2 (M + H)+.
g) Methyl (±)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Bezvodý chlorid hlinitý (7,6 g, 57 mmol) byl přidán po částech do míchaného roztoku methyl (±)-8-methoxy-3-oxo2,3, 4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (3,0 g, 11 mmol) a ethanthiolu (4,2 ml, 57 mmol) v methylenchloridu (100 ml) při teplotě 0 °C pod argonovou atmosférou. Výsledná směs byla ponechán zahřát se na teplotu okolí a byla míchána přes noc, potom byla koncentrována. Residuum byl rozetřen s ledovou vodou a výsledná pevná látka byla shromážděna filtrací a sušena a tím se získala sloučenina z názvu (2,64 g, 91%) ve formě bšlavé pevné látky:
MS (ES) m/e 250,2 (M + H)+.
Příprava 2
Příprava methyl (±)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
a) 3-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-methylamino]methyl-4bromanisol
40% vodný methylamin (49 ml, 563 mmolu) byl přidán rychle do roztoku 4-brom-3-brommethylanisolu (15,76 g, 56,29 mmolu) v THF (280 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 2,5 hodin byla reakční směs koncentrována a residuum bylo rozděleno mezi Et2O (560 ml) a 1,0 N NaOH · · · • *
- 78 «· β ···· · · 0 »
004 0900
0 0 00 000 000
0 0 0 0 0
000·* 00 00 (100 ml) . Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla sušena (MgSO4) a koncentrován na žlutý olej:
TLC (5% MeOH/CHCl3) Rf 0,32.
Olej byl rozpuštěn v CHC13 (280 ml) a byl přidán di-terc.butyl dikarbonát (1,29 g, 56,29 mmolu) . Reakční směs byla míchána při teplotě zpětného toku po dobu 45 minut potom byla koncentrována. Silikagelová chromatografie (5%
EtOAc/toluen) poskytla sloučeninu z názvu (16,81 g, 90%) :
TLC (5% EtOAc/toluen) Rf 0,43;
XH NMR (400, CDC13) směs rotamerů; 6 7, 42 (d, J = 8,7 Hz, 1 Η) , 6, 65 - 6, 80 (m, 2 Η) , 4,40 - 4,55 (m, 2 Η) , 3,77 (s, 3 H), 2,81 - 2,97 (m, 3 Η) , 1, 37 - 1, 60 (m, 9 H) ;
MS (ES) m/e 352/354 (M + Na)+.
b) Methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-[N-(terč.butoxykarbonyl)-N-methylamino]methyl-4methoxyfenyl]butanoát
Roztok 3- [N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-methylamino]methyl-4bromanisolu (4,95 g, 15 mmol), dimethyl itaconátu (3,08 g, 19,5 mmol), octanu paladnatého (168 mg, 0,75 mmol), tri-otolylfosfinu (457 mg, 1,5 mol) a diisopropylethylaminu (5,2 ml, 30 mmol) v propionitrilu (75 ml) byl zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 45 minut potom byl koncentrován v rotační odparce. Residuum byl zředěn Et2O (150 ml) a směs byla filtrována přes celit® pro odstranění nerozpustných materiálů. Filtrát byl koncentrován a residuum bylo znovu koncentrováno z xylenů. Chromatografie na silikagelu (gradient: 20% EtOAc/hexany, potom 1: 1
EtOAc/hexany) odstranila fosfin a základní materiály;
• · ♦ · ·· • * · ♦ · • · · · · všechny další materiály s Rf 0,40 - 0,70 byly shromážděny a koncentrovány což dalo kalný žlutý olej:
TLC (30% EtOAc/hexany) Rf 0,41 (hlavní produkt).
Olej byl rozpuštěn v MeOH (75 ml) a opatrně bylo přidáno 10% Pd/C. Směs byla protřepáván pod vodíkovou atmosférou (50 psi) po dobu 2,5 hodin, potom byla filtrována přes celit® pro odstranění katalyzátoru. Filtrát byl koncentrován a residuum bylo znovu vystaveno reakčním podmínkám. Po uplynutí dalších 2,5 hodin byla směs filtrována přes celit® pro odstranění katalyzátoru a filtrát byl koncentrován což dalo světle žlutý olej. Tento olej byl znovu koncentrován ze směsi CHCls/hexany, potom byl chromatografován na silikagelu (gradient: 20%
EtOAc/hexany, potom 1:1 EtOAc/hexany) a tím se získala sloučenina z názvu (4,53 g, 74%) ve formě světle žlutého oleje:
TLC (30% EtOAc/toluen) Rf 0,46;
1H NMR (400, CDCI3) směs rotamerů; δ 7,03 (d, J = 8,2 Hz, 1 Η) , 6, 65 - 6, 80 (m, 2 Η), 4,46 (br s, 2 Η), 3,77 (s, 3 Η),
3,64 (s, 3 Η), 3,63 (s, 3 Η), 2,32 - 3,12 (m, 7 Η), 2,35 2,50 (m, 1 Η), 1,47 (br s, 9 H);
MS (ES) m/e 432 (M + Na)+.
c) Methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-(methylamino)-methyl-4methoxyfenyl]butanoát
TFA (55 ml) byl najednou přidán do roztoku methyl (±)-3karbomethoxy-4-[2-[N-(terč.-butoxykarbony1)-Nmethylamino] methyl-4-methoxyfenyl] butanoátu (4,53 g, 11,06 mmolu) v bezvodém CH2C12 (55 ml) při teplotě 0 °C a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 1 • · · · · · · · «· · • · · · · · to · · hodiny byla reakční směs koncentrována a residuum byl znovu koncentrován z toluenu (2 x 100 ml), což zanechalo sloučeninu z názvu (11,06 mmolu, kvantitativně) ve formě světle žlutého oleje:
MS (BS) m/e 310 (M + H)+.
d) Methyl (±)-8-methoxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát
Roztok methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-(methylamino) methyl4-methoxyfenyl]butanoátu (11,06 mmolu) a diisopropylethylaminu (5,8 ml, 33,18 mmolu) v toluenu (110 ml) byl zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 25 hodin, míchán při teplotě zpětného toku po dobu 4 dní, potom zahříván na teplotu zpětného toku po dobu dalších 24 hodin. Koncentrace a silikagelová chromatografie (5% MeOH v 1:1 EtOAc/CHCl3) poskytla sloučeninu z názvu (2,88 g, 94%) ve formě žluté pevné látky:
TLC (5% MeOH v 1:1 EtOAc/CHCl3) Rf 0,63;
NMR (250, CDC13) δ 7,02 (d, J = 8,4 Hz, 1 Η) , 6,78 (dd,
J = 8,4, 2,7 Hz, 1 Η), 6,63 (d, J = 2,7 Hz, 1 Η), 5,29 (d, J = 16,3 Hz, 1 H), 3,50 - 3, 90 (m, 2 Η) , 3,79 (s, 3 Η) , 3,71 (s, 3 Η) , 2,73 - 3,16 (m, 3 Η) , 3,04 (s, 3 Η) , 2,41 (dd, J = 16,7, 5,4 Hz, 1 H);
MS (ES) m/e 300 (M + Na)+, 278 (M + H) + .
e) Methyl (±)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát
Bezvodý chlorid hlinitý (1,35 g, 10. 15 mmolu) byl najednou přidán do roztoku methyl (±)-8-methoxy-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (562 mg, 2,03 mmolu) a ethanthiolu (0,75 ml, 10,15 mmolu) v bezvodém • · · ·
CH2Cl2 (20 ml) při teplotě 0 °C pod argonovou atmosférou. Směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku a míchána po dobu 4,5 hodin, potom byla znovu ochlazena na teplotu 0 °C. Potom byla přidána ledová H2O (20 ml) a směs byla prudce míchána po dobu 5 minut, potom byla extrahována CHC13 (3 x 20 ml) . Sloučené CHC13 vrstvy byly sušeny (MgSO4) a koncentrovány na residuum. Vodná vrstva byla podtlakově filtrována na pevný precipitát. Tento precipitát a residuum z CHCl3 vrstvy byly sloučeny v 1:1 MeOH/CHCl3 a roztok byl koncentrován a tím vznikla bělavá pevná látka. Ta byla rozetřena s horkým MeOH a směs byla ponechána ochladit se na teplotu zpětného toku. Pevná látka byla shromážděna podtlakovou filtrací a promývána postupně studeným MeOH a Et2O. Sušení ve vysokém vakuu při teplotě 40 °C poskytlo sloučeninu z názvu (467,9 mg, 88%) ve formě bezbarvé pevné látky:
TLC (5% MeOH/CHCl3) Rf 0,17;
XH NMR (250, DMSO-d6) 5 9,29(s, 1 Η) , 6,89 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 6, 50 - 6, 70 (m, 2 Η) , 5,16 (d, J = 16,4 Hz, 1 Η) , 3,84 (d, J = 16,4 Hz, 1 Η), 3.M - 3,85 (m, 1 Η), 3,56 (s, 3 Η), 230 - 3,00 (m, 4 Η) , 2,86 (s, 3 H) ;
MS (ES) m/e 286 (M + Na)+, 264 (M + H)+.
Příprava 3
Příprava 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu
a) 2-[(3-Hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxid
Směs 2-chlorpyridin-N-oxidu (16,6 g, 0,1 molu), 3-amino-lpropanolu (15,3 ml, 0,2 molu), NaHCO3 (42 g, 0,5 molu) a amylalkoholu (100 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného ···· 4 44 ·· ·· • 4 4 4 4 4···
444 4444
4 4 44 444 444
4 4 4 4 4 4
44 444 44 44 44 toku. Po uplynutí 21 hodin byla reakční směs ochlazena, zředěna CH2CI2 (300 ml) a podtlakově filtrována pro odstranění nerozpustných materiálů. Filtrát byl koncentrován a znovu koncentrován z toluenu a tím vznikl žlutý olej. Silikagelová chromatografie ( 20% MeOH/CHCl3) poskytla sloučeninu z názvu (15,62 g, 93%) ve formě žluté pevné látky:
TLC (20% MeOH/CHCl3) Rf 0,48;
XH NMR (250, CDC13) δ 8,07 (dd, J = 6,6, 1,2 Hz, 1 H) Λ 7,34
(br t, 1 H) , 7,10 - 7,30 (m, 1 Η) , 6.M (dd, J = 8, 5, 1,4
Hz, 1 H) , 6, 40-6 , 60 (m, 1 H), 4,49 (br s, 1 H) , 3, 65 -
3,90 (m, 2 H) , 3,35 - 3,60 (m, 2 H) , 1,75 - 2,00 (m, 2 H) ;
MS (ES) m/e 169 (M+ H)+.
Příprava 4
Příprava 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-nitropyridin-Noxidu
a) 2-[(3-Hydroxy-l-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oxid Postupovalo se způsobem podle Přípravy 3, pouze byl použit 2-chlor-4-nitropyridin-N-oxid (viz Jain, P. C.; Chatterjee, S. K.; Anand, N. Indián Journal of Chemistry 1966, 403) namísto hydrochloridu 2-chlorpyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě oranžové pevné látky:
MS (ES) m/e 214,2 (M + H)+.
Příprava 5
Příprava 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-methoxypyridin-Noxidu
a) 2-[(3-Hydroxy-l-propyl)amino]-4-methoxypyridin-N-oxid Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oxidu (0,275 g, 1 mmol) a 0,5 M NaOMe v MeOH (16 ml, 8 mmol) byl zahříván na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou po dobu 3 hodin. Reakční směs potom byla ponechána ochladit se a byl přidán ledový AcOH (0,5 ml, 8 mmol). Roztok byl koncentrován do sucha a residuum bylo rozetřeno s CH2C12. Nerozpustné materiály byly odstraněny filtrací a filtrát byl koncentrován. Silikagelová chromatografie (5 - 15%
MeOH/ CH2C12) poskytla sloučeninu z názvu (0,23 g, 90%) ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 199,0 (M + H)+.
Příprava 6
Příprava (±)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
a) 3-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)amino]methyl-4-bromanisol
2,2,2-Trifluorethylamin (4,9 ml, 62,5 mmolu) byl přidán rychle do roztoku 4-brom-3-brommethylanisolu (7,00 g, 25 mmolu) v bezvodém DMSO (25 ml) při teplotě zpětného toku. Reakční směs byla zahřívána na teplotu přibližně 30 - 35 °C. Po uplynutí 2 hodin byla reakční směs zředěna ledovým 0,5 N NaOH (100 ml) a extrahována Et2O (3 x 100 ml). Sloučené Et2O vrstvy byly promývány postupně H2O (2 x 25 ml) a solankou (25 ml) , sušeny (MgSO4) a koncentrovány na světle žlutý olej:
TLC (toluen) Rf 0,43.
• · · · • ·
4 4 4 · 4 • · 4 · 4 4
44 444 444
4 4 4
4 4 4 4 4 4
Olej byl rozpuštěn v bezvodém CH2CI2 (48 ml) v kulaté baňce a byl přidán di-terc.-butyl dikarbonát (10,48 g, 48,04 mmolu). Baňka, obsahující reakční směs roztok, byla umístěna v rotační odparce a rotována ve vakuu při teplotě 50 °C po dobu 16 hodin. Výsledné residuum bylo zředěno hexany (100 ml) a roztok byl naočkován malým množstvím čistého produktu (získaného v předchozím pokusu pomocí silikagelové chromatografie s použitím směsi 10% EtOAc/hexany jako vymývacího rozpouštědla). Směs byla ponechána v klidu při teplotě zpětného toku po dobu několika hodin, potom byl umístěna v ledničce přes noc. Produkt byl shromážděn podtlakovou filtrací a promýván hexany. Sušení za sníženého tlaku poskytlo sloučeninu z názvu (7,19 g, 75%) ve formě bezbarvé pevné látky. Matečné tekutiny byly koncentrovány a chromatografovány na silikagelu (10% EtOAc/hexany) což poskytlo dodatečnou sloučeninu z názvu (1,42 g; celkově = 8,61 g, 90%·):
TLC (10% EtOAc/toluen) Rf 0,48;
teplota tání 86 - 89 °C;
NMR (250, CDCI3) δ 7,44 (d, J = 9,0 Hz, 1 Η) , 6,64 6,82 (m, 2 H), 4,52 - 4,70 (m, 2 Η), 3,61 - 4,00 (m, 2 Η), 3,77 (s, 3 Η), 1,22 - 1,68 (m, 9 H).
b) Methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-[N-(terč.butoxykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluorethyl)amino]methyl-4methoxyfenyl]butanoát
Roztok 3-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(22,2— trifluorethyl)amino] methyl-4-bromanisolu (9,17 g, 23,03 mmol), dimethylitaconátu (4,73 g, 29,94 mmol), octanu paladnatého (259 mg, 1,15 mmol), tri-o-tolylfosfinu (701 mg • · · « ne · · · · · · · — ··· ·· ··· ·· ··
2,30 mol) a diisopropylethylaminu (8,0 ml 46,06 mmol) v propionitrilu (115 ml) byl deoxygenován (3x cyklus evakuace/naplnění argonem) , potom byl zahříván na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou. Po uplynutí 2 hodin reakční směs byla koncentrována a znovu koncentrována z toluenu. Silikagelová chromatografie (30% EtOAc/hexany, vzorek s CH2CI2) odstranila fosfin a základní materiály; všechny ostatní materiály s Rf 0,55 - 0,70 byly shromážděny a koncentrovány a tím vznikl žlutý olej. Ten byl vyjmut v 20% EtOAc/hexany (200 ml) a ponechán stát při teplotě zpětného toku po dobu 1 hodiny a potom v ledničce přes noc. Směs byla filtrována pro odstranění žlutého precipitátu a filtrát byl koncentrován a tím vzniklo 9,93 g (91%) žlutého olej e:
TLC (30% EtOAc/hexany) Rf 0,55 (hlavní produkt).
Olej byl rozpuštěn v EtOAc (100 ml) a bylo přidáno 10% Pd/C (4,44 g, 4,18 mmolu). Směs byla protřepáván pod - vodíkovou atmosférou (50 psi) po dobu 3,5 hodin, potom byla filtrována přes celit® pro odstranění katalyzátoru. Filtrát byl koncentrován a residuum bylo chromatografováno na silikagelu (gradient: 20% EtOAc/hexany) a tím se získala sloučenina z názvu (7,98 g, 73% pro dva kroky) ve formě bezbarvého oleje:
TLC (20% EtOAc/toluen) Rf 0,35;
XH NMR (250, CDCI3) δ 7,05 (d, J = 8, 4 Hz, 1 H) , 6,76 (dd,
J = 8,4, 2,7 Hz, 1 Η) , 6,60 - 6,72 (m, 1 Η), 4,50 - 4,80
(m, 2 Η) , 3,45 - 3,95 (m, 2 H) . 3,77 (s, 3 H), 3,63 (s, 6
Η) , 2,85 - 3,09 (m, 2 Η), 2,58 - 2,80 (m, 2 H), 2,33 - 2,50
(m, 1 Η), 1,20 - 1,70 (m 9 H) ;
··· · ·· ·· ·· • · · · · · • · · · · · • · · ··· ··· • · · · •» · · · ·
MS (ES) m/e 500 (M + Na)+.
c) Methyl (±)-3-karbomethoxy-4-[2-(2,2,2trif luorethylamino) methyl-4-methoxyfenyl] butanoát
TFA (55 ml) byl najednou přidán do roztoku methyl (±)-3karbomethoxy-4-[2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)amino]methyl-4-methoxyfenyl]butanoátu (7,98 g, 16,71 mmolu) v bezvodém CH2CI2 (42 ml) při teplotě 0 °C pod argonovou atmosférou a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 1,5 hodin byla reakční směs koncentrována a residuum bylo znovu koncentrováno z xylenů. Sušení ve vysokém vakuu při teplotě 40 °C zanechalo sloučeninu z názvu (8,70 g, kvantitativně) ve formě žluté pevné látky:
MS (ES) m/e 378 (M + H)+.
d) Methyl (±)-8-methoxy-3-oxo-2-(2,2, 2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Směs methyl (±)-3-karbomethoxy-4-(2-(2,2,2trif luorethylamino) methyl-4-rnethoxyfenyl] butanoátu (16, 71 mmolu), tripropylaminu (9,5 ml 50,13 mmolu) a xylenů (170 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 63 hodin reakční směs byla koncentrována a residuum bylo chromatografováno na oxidu křemičitém (2: 1 EtOAc/hexany, plněné CH2CI2) . Sloučenina z názvu (5,33 g, 92% pro dva kroky) byla získána ve formě žluté pevné látky:
TLC (40% EtOAc/hexany) Rf 0,49;
XH NMR (250, CDCI3) δ 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) , 6,80 (dd, J = 8,5, 2,6 Hz. 1 H) , 6,61 (d, J = 2,6 Hz, 1 H) , 5,35 (d, J = 16,8 Hz, 1 H), 3, 60 - 4,30 (m, 4 H) , 3,79 (s, 3 H) ,
4*'**· • · 4 4 Β · λ φ · • 4 4 4 4 4 4 4 » 4 4 4 44 4444*4 • 4 4 4 4 4
3,71 (s, 3 Η), 2,81-3,15 (m, 3 Η), 2,46 (dd, J = 16,9,5,5 Hz, 1 H);
MS (ES) m/e 368 (M + Na)+, 346 (M + H)+.
e) Methyl (±)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydroΙΗ-2-benzazepin-4-acetát
Roztok BBr3 v CH2CI2 (1,0 M, 60 ml, 60 mmolů) byl přidán po kapkách v půběhu 30 minut do roztoku methyl (±)-8-methoxy3-OXO-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu (5,16 g, 14,94 mmolů) v bezvodém CH2CI2 (60 ml) při teplotě -5 až -10 °C pod argonovou atmosférou. Po uplynutí další 1 hodiny při teplotě -5 to 10 °C byla reakční směs znovu ochlazena na -10 °C a reakce byla zastavena opatrným přidáním po kapkách MeOH (60 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě -10 až 0 °C po dobu 1 hodiny, potom byla koncentrována v rotační odparce. Residuum bylo znovu koncentrováno z MeOH (2x) a potom z EtOAc, potom bylo filtrováno přes vrstvu silikag-elu (EtOAc vymývací rozpouštědlo). Koncentrace filtrátu zanechala žlutou pevnou látku, která byla rozetřena s horkými hexany. Sloučenina z názvu (4,74 g, 96%) byla získána ve formě bělavé pevné látky:
TLC (1:1 EtOAc/hexany) Rf 0,40;
NMR (400 , DMSO-d6) δ 9,28 (s, 1 Η) , 6,90 (d, J = 8,3 Hz,
1 Η) , 6, 62 (dd, J = 8,3, 2,5 Hz, 1 Η) , 6,57 (d, J = 2,5 Hz,
1 Η) , 5,27 (d, J = 16,7 Hz, 1 H) , 4, 22 - 4,38 (m, 1 Η) ,
4,07 - 4,22 (m, 1 Η) , 4,07 (d, J = 16,7 Hz, 1 Η) , 3,72 3,83 (m, 1 Η), 3,58 (s, 3 Η), 2,94 (dd, J = 17,0, 3,8 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 16,7, 9. 1 Hz, 1 Η), 2,65 (dd, J = 17,0, 14 Hz, 1 Η) , 2,49 (dd, J = 16,7, 5,0 Hz, 1 H, zakryto residuálním signálem rozpouštědla);
částečně
- 88.
MS (ES) m/e 354 (M + Na)+.
Příprava 7
HPLC separace enantiomerů methyl (±)-8-hydroxy-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
a) Methyl (R)-(+)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát a methyl (S)-(-)-8-hydroxy-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Methyl (±)-8-hydroxy-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát byl rozdělen do svých enantiomerů chirální HPLC za následujících podmínek: Diacel Chirálnípak AS® kolona (21,2 x 250 mm), EtOH mobilní fáze, 7 ml/min velikost průtoku, UV detekce na vlnové délce 254 nm, 70 mg injekce;
tR pro methyl (R)-(+)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát = 21,5 min;
tR pro methyl (S) -(-)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát = 39,1 min.
Příprava 8
HPLC separace enantiomerů methyl (±)-8-methoxy-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
a) Methyl (R)-(+)-8-methoxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát a methyl (S)-(-)-8-methoxy-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Methyl (±)-8-methoxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát byl rozdělen do svých enantiomerů • · · · • ·
- 89 ·τ chirální HPLC za následujících podmínek: Diacel Chirálnípak AS® kolona (21,2 x 250 mm), CH3CN mobilní fáze, 15 ml/min velikost průtoku. UV detekce na vlnové délce 254 nm, 500 mg inj ekce;
tR pro methyl (R)-(+)-8-methoxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát = 10,2 min;
tR pro methyl (S)-(-)-8-methoxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát = 19,0 min.
Příprava 9
Demethylace methyl (S)-(-)-8-methoxy-3-oxo-2,3, 4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
a) Methyl (S)-(-)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Roztok methyl (S)-(-)-8-methoxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetátu (15,0 g, 0,057 molu) v'CHC13 (160 ml) byl přidán po kapkách v průběhu 30 minut do roztoku bromidu boritého (20,53 ml, 0,217 molu) v CHC13 (160 ml) při teplotě -8 °C pod argonovou atmosférou, udržujíce teplotu v rozmezí od -5 °C do 0 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě přibližně -8 °C po dobu 30 minut a potom byl přidán MeOH (200 ml) , z počátku po kapkách, udržujíce teplotu přibližně 0 °C. Reakční směs byla koncentrována a tím se získal viskózní olej, který byl znovu koncentrován z MeOH (100 ml) . Olej byl rozpuštěn v H2O/MeOH a malé množství tmavé pevné látky bylo odstraněno filtrací. Filtrát byl neutralizován (na pH 7) 50 % hydroxidem sodným a uložila se bílá pevná látka. pH suspenze bylo upraveno na 4,5 přidáním malého množství
- 90.:»·.
• 9 9 99 99
9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
9 99 999 99 9
9 9 9 9
999 9 9 99 99 octové kyseliny a pevná látka byla shromážděna a sušena za sníženého tlaku a tím se získala sloučenina z názvu (9,7 g, 68 %) . Produkt byl testován na chirální čistotu pomocí
HPLC: Chirálnípak AS® kolona (4,6 x 50 mm), 100% EtOH mobilní fáze, 0,5 ml/min velikost průtoku, UV detekce na vlnové délce 215 nm; tR = 7,5 minut (S-enantiomer, 99 %) ; tR = 4,4 minut (R-enantiomer, 1%).
Příprava 10
Příprava 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4,6-dimethylpyridinN-oxidu
a) 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4,6-dimethylpyridin-N-oxid Postupovalo se způsobem podle Přípravy 4, pouze byl použit 2-chlor-4,6-dimethylpyridin-N-oxide (viz Brown, E. V. J. Amer. Chem. Soc. 1957, 79, 3565) namísto hydrochloridu 2chlorpyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla 'připravena ve formě čirého oleje:
MS (ES) m/e 197,2 (M + H)+.
Příprava 11
Příprava 6-(methylamino)-2-pyridylethanol
a) 2-(terč.-Butoxykarbonylamino)-6-pikolin
Do míchaného roztoku 2-amino-6-pikolinu (4,33 g, 40 mmol), ΕίβΝ (6,2 ml, 40 mmol) a CH2CI2 (50 ml) při teplotě 0 °C byl přidán di-terc.-butyl dikarbonátu (9,6 g, 44 mmol). Po míchání při teplotě zpětného toku přes noc byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku, zředěna H20 a
- Q1 -ř
J- · · · • · · · · · · « · • · · · · · · · • 4 4 4 4 · ··· «·· • · · · · >
extrahována CH2C12 (2 x 50 ml) . Sušení (MgSO4) a koncentrace poskytla sloučeninu z názvu ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 209 (M + H)+.
b) 2-[ (terč. -Butoxykarbonyl)methylamino]-6-pikolin
Do suspenze NaH (60% disperse v minerálním oleji, 0,44 g, 1 1 mmol) v DMF (20 ml) při teplotě 0 °C byl přidán roztok 2(terč.-butoxykarbonylamino)-6-pikolinu (2,1 g, 10 mmol) v DMF (30 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 15 min; potom byl přidán methyljodid (1,6 g, 11 mmol). Reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku, zředěna H2O a extrahována CH2C12 (3 x 50 ml) . Sušení (MgSO4) a koncentrace poskytla sloučeninu z názvu ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 223 (M + H)+.
c) Ethyl-6-[ (terč.-butoxykarbonyl)methylarnino]-2pyridylácetát
LDA (18 mmol) byl připraven v THF (30 ml), ochlazen na -78 °C a byl přidán 2-[ (terč. -butoxykarbonyl)methylarnino] -6pikolin (2 g, 9 mmol) , čímž se vytvořil sytě červený roztok. Po uplynutí 15 min byl přidán diethylkarbonát (18 ml, 15 mmol). Roztok v barvě burgundské červené byl míchán při teplotě -78 °C po dobu dodatečných 15 minut potom byla reakce byla zastavena nasyceným NH4C1 roztokem. Směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku a extrahována EtOAc (3 x 30 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou, sušeny (MgSO4) , filtrovány a koncentrovány. Silikagelová chromatografie poskytla sloučeninu z názvu ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 294 (M + H)+.
♦ · · · · · • ··· · · · « * • · · · ···· •0 · · · · « 9 9 · 9 · • 9 9 9 9 9
9 9 f< 9 9 9 9 9 9
d) Ethyl-6-(methylamino)-2-pyridylacetát
Roztok ethyl-6-[(terč.-butoxykarbonyl)-methylamino]-2pyridylacetátu (0,6 g, 2 mmol) a 4 M HCl/dioxanu (5 ml, 20 mmol) byl míchán při teplotě zpětného toku přes noc, potom byl koncentrován. Opětná koncentrace z toluenu poskytla sloučeninu z názvu ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 195 (M + H)+.
e) 6-(Methylamino)-2-pyridylethanol
Do mechanicky míchaného roztoku LiAlH4 v THF (1,0 M, 20 ml, 20,4 mmol) byl přidán po kapkách roztok ethyl-2(methylamino)-6-pyridylacetátu (0,38 g, 2 mmol) v THF (10 ml) . Po ukončení přidávání byla reakční směs zahřívána na teplotu 0 °C a reakce byla zastavena 10% NaOH roztokem. Pevné látky byly odstraněny filtrací a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v CH2C12 a roztok byl sušen (MgSO4) a koncentrován. Rekoncentrace z toluenu (3 x) poskytla sloučeninu z názvu ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 153 (M + H)+.
Příprava 12
Příprava 3-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propanol
a) 3-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propanol
Roztok di-terc.-butyl dikarbonátu (10,91 g, 50 mmolu) v CH2C12 (50 ml) byl přidán po kapkách do roztoku 3-amino-lpropanolu (11,5 ml, 150 ml) v CH2C12 (250 ml) při teplotě 0 °C. Kalný roztok byl zahříván na teplotu zpětného toku a • ·
- 93 ···· · 4 · 44 • ···· · · 4 · « · 4 4 4 · 4 · • · · 4 «ο ··· · · · • · 4 4 4 4 · • ♦· 44··» · · φ» míchán po dobu 1 hodiny, potom byl koncentrován v rotační odparce. Residuum bylo vyjmuto v H20 (100 ml) a extrahováno Et2O (3 x 100 ml). Sušení (MgSO4) a koncentrace zanechala sloučeninu z názvu ve formě bezbarvého oleje:
XH NMR (250 MHz, CDC13) δ 4,80 (br s, 1 Η) , 3,50 - '3,80 (m, 2 Η) , 3,13 - 3,42 (m, 2 Η) , 3,03 (br t, 1 Η) , 1,55 - 1,80 (m, 2 Η) , 1,45 (s, 9 H) ;
MS (ES) m/e 198 (M + Na)+.
Příprava 13
Příprava 3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-1-propanol
a) 3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-1-propanol
Do roztoku 3-amino-l-propanolu (0,77 g, 1,1 mmol) a triethylaminu (2,85 ml, 7 mmol) v THF (5 ml), míchaného pod argonovou atmosférou při teplotě okolí, byla přidána suspenze 4-nitrobenzyl chlormravenčanu (2 g, 1 mmol) v THF (20 ml). Výsledná směs byla ponechána za míchání při teplotě okolí přes víkend a potom byla koncentrována. Residuum bylo čištěn chromatografií na silikagelu (0%-2% MeOH/CH2Cl2) a tím se získala sloučenina z názvu (0,80 g, 34%) ve formě bledě žlutého oleje:
MS (ES) m/e 254,3 (M + H)+.
Příprava 14
Příprava 2- [N-(3-hydroxy-l-propyl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]pyridin-N-oxid tttt • · _· · · • · · · · • · · · • « · · 9 9
9 9 9 9 9
9 9 99 9 999
9 9 9
9· 9 9 9 9
a) 2-[N-(3-hydroxy-l-propyl)-N-(terc.butoxykarbonyl)amino]pyridin-N-oxid
Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu (8,0 g, 47,6 mmol) v terc.-BuOH (80 ml) byl zpracován di-terc.butyl dikarbonátem (11,4 g, 55,3 mmol). Po uplynutí 18 hodin byl roztok koncentrován a residuum bylo rozetřeno s hexanem. Výsledná pevná látka byl sušen za sníženého tlaku a tím se získala sloučenina z názvu (12,5 g, 98%) ve formě bělavé pevné látky:
MS (ES) m/e 269, 3 (M + H)+.
Příprava 15
Příprava methyl (±)-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
a) Methyl (±)-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-[N-(3-hydroxy-l-propyl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]pyridin-N-oxid namísto 2-[(3-hydroxyl-propyl) amino] pyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě oranžové pěny:
MS (ES) m/e 500,4 (M + H)+.
Příprava 16
Příprava 2-[(3-hydroxy-l-propyl)aminol-4-methylpyridin-Noxid • · • · · · · ··«· • ··· · · « · • · · · ·· ··· · ··
Směs 2-chlor-4-methylpyridin-N-oxidu (12,1 g, 0,068 molu) (Brown, Ε. V. J. Amer. Chem. Soc. 1957, 79, 3565), 3-amino1-propanolu (10,33 ml, 0,14 molu), NaHCO3 (28 g, 0,34 molu) a terč.-amylalkoholu (70 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 16 hodin byla reakční směs ochlazena, zředěna CH2CI2 (300 ml) a podtlakově filtrována pro odstranění nerozpustných materiálů. Filtrát byl koncentrován a znovu koncentrován z toluenu a tím vznikl žlutý olej. Rekrystalizace z CH2Cl2/Et2O poskytla sloučeninu z názvu (10,87 g, 88%) ve formě žluté pevné látky:
TLC (15% MeOH/CH2Cl2) Rf 0,44;
XH NMR (400, CDCI3) δ 7,92 (d, J = 6,7, 1 Η) , 7,28 (brt, 1 Η) , 6,43 (s, 1 Η) , 6,33 (dd, J =6,6, 2,1 Hz, 1 Η), 3,73 (t,
J = 5,7 Hz, 2 H), 3,47 (q, J = 6,3 Hz, 2 Η), 2,29 (s, 3 Η) ,
1,82 - 1,88 (m, 2 H);
MS (ES) m/e 183 (M + H)+.
Příprava 17
Příprava methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2- [4-
(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetátu alkylací methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
a) Methyl (S)-3-oxo-8-[4-(trifluormethyl)benzyloxy]-2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetát
Do roztoku methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-2lH-benzazepin-4-acetátu (0,31 g, 1,24 mmol) a 4(trifluormethyl)-benzyl bromidu (0,89 g, 3,72 mmol) v DMF ··· • · (10 ml) byl přidán NaH (60% suspenze v oleji, 0,11 g, 2,75 mmol) . Po míchání při teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin, byla hlavní část DMF odstraněna za sníženého tlaku. Residuum bylo rozděleno mezi nasycený NaHCO3 a EtOAc. Vodná fáze byla extrahována EtOAc a sloučené organické extrakty byly promývány nasyceným NaCl, sušeny nad Na2SO4 a koncentrovány a tím se získal čirý olej (0,90 g) . Radiální chromatograf ie (5% acetonu/CH2Cl2, silikagel, 6 m deska) poskytla sloučeninu z názvu (0,53 g) ve formě bílé pěny.
MS (ES) m/e 566, 1 (M + H)+.
b) Methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Parrova hydrogenační nádoba byla naplněna methyl (S)-3-oxo8 - [ 4 - (trif luormethyl) benzyloxy] -2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetátem (0,78 g, 1,38 mmol) a Pearlmanovým katalyzátorem (20 mg) v MeOH (20 ml). Po hydrogenaci při tlaku 50 psi po dobu 24 hodin byla reakční nádoba otevřena a katalyzátor byl odstraněn filtrací. Odstranění rozpouštědla dalo bílou pěnu (0,60 g) . Radiální chromatografie (5% aceton/CH2Cl2, silikagel, 6 m deska) poskytla sloučeninu z názvu (0,42 g) ve formě bílé pěny.
ΧΗ NMR (250 MHz, CDC13) δ 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2 Η) , 7,23
(d, J = 8,5 Hz, 2 Η) , 6,90 (di J = 7,5 Hz, 1 Η), 6, 67 (dd,
J = 7,5, 3,4 Hz, 1 Η), 6,39 (d , J = 3,4 Hz, 1 Η) , 5,05 (m,
2 Η) , 4,35 (d, J = 15,4 Hz, 1 Η) , 3,85 (m, 1 Η) , 3,70 (s,
3H) , 3,60 (m, IH) , 2,95 (m, 4 Η) , 2,45 (dd, J = 17,1, 5,1
Hz, 1 H).
Příprava 18
4400 • 0
0 0 4
4 4 0 0
0 0 0 0 • 4 «04 044
0 0 • 40
Příprava methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetátu enantioselektivní syntézou
a) 4-Brom-3-brommethylanisol
Do míchaného roztoku 4-brom-3-methylanisolu (100 g, 497 mmol) v bezvodém dichlormethanu (500 ml) byl přidán Nbromsukcinimid (97 g, 545 mmol) následovaný benzoylperoxidem (6 g, 25 mmol) . Reakční směs byl jemně zahřívána na teplotu zpětného toku 150 wattovou širokoúhlou lampou lampou s reflektorem umístěným přibližně 12 palců od reakční nádoby. Po uplynutí 24 hodin byla reakční směs koncentrován rotačním odpařováním na poloviční objem a ponechána v klidu po dobu 4 hodin. Bílý precipitát, který se vytvořil, byl odfiltrován a proplachován malým množstvím dichlormethanu. Filtrát byl koncentrován do sucha a zbývající pevná látka byla rozetřena s hexany a filtrována. Sušení za sníženého tlaku poskytlo sloučeninu z názvu (100,25 g, 727d) ve formě bílých jehliček: GC tR = 6,56 minut (HP 530 mm x 20 m methylkřemičitanová kolona, Tok nosiče He 20 ml/min, 100 °C počáteční teplota, 1 minut počáteční doba, rychlost 10 °C/min, 200 °C konečná teplota, 1 minut konečná doba);
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,44 (d, J = 10 Hz, 1 Η) , 6,99 (d, J = 3 Hz, 1 H), 6,73 (dd, IH) , 4,55 (s, 2H), 3,80 (s, 3H) .
b) 3-[N-(4-trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-bromanisol Do míchaného roztoku 4-brom-3-brommethylanisolu (35 g, 125 mmol) v bezvodém DMSO (50 ml) a bezvodém THF (50 ml) byl • · · · • · • · • · · · · · • · · · ♦ · • ·· ··· ··· • · · · • ·· · · · · přidán 4-trifluormethylbenzylamin (30 g, 171 mmol) následovaný triethylaminem (18 ml, 129 mmol). Po míchání po dobu 18 hodiny při teplotě zpětného toku reakční směs byla koncentrována, zředěna vodným 1 N NaOH (250 ml) a extrahována Et2O (2 x 250 ml). Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou, sušeny (MgSO4) a koncentrovány do sucha. Zbylé residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií na silikagelu (10 to 20% EOAc/CHCl3) a tím se získala sloučenina z názvu (34,17 g, 73%):
TLC (20% EtOAc/CHCl3) Rf 0,63;
XH NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 2 Η) , 7,49 (d, J = 8,2 Hz, 2 Η), 7,43 (d, J = 8,6 Hz, 1 Η) , 6,96 (d, J = 3,1 Hz, 1 Η) , 6,70 (dd, 1 Η) , 3,86 (s, 2 Η) , 3,84 (s, 2 Η), 3,79 (s, 3H ), 1,75 (br s, 1 H).
c) 3-[N-(terč.-Butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-bromanisol Do míchaného roztoku - 3-[N-(4trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-bromanisolu (34,17 g, 91 mmol) v bezvodém THF (100 ml) byl přidán di-terc.butyldikarbonát (22 g, 101 mmol). Reakční směs byla míchána pod argonovou atmosférou po dobu 18 hodin (byl pozorován prudký vývin plynu). Koncentrace a silikagelová chromatografie (5 až 19% EtOAc/hexan) poskytla sloučeninu z názvu (41,09 g, 95%) ve formě čirého oleje:
TLC (oxid křemičitý, 20% EtOAc/hexan) Rf 0,44;
Úí NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,39-7,33 (m, 2H) , 6,83 a 6,72 (2 s, IH) , 6,71 (dd, IH) , 4,54 a 4,50 (2 s, 2H) , 4,43 (s, 2H) ,
3,75 (s, 3H), 1,47 (s, 9H).
• · · · • · • · · · · · · « · • · · · · · · · • · · · ·· ·· · ··· • · · · · · • ··· ·· ·· ··
d) Methyl 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl) aminomethyl] -4-methoxycinnamát Roztok 3- [N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl) aminomethyl] -4-bromanisolu (37,08 g, 78 mmol), methylakrylátu (35 ml, 390 mmol), octanu paladnatého (0,889, 3,9 mmol), tri-o-tolylfosfinu (2,38 g, 7,8 mol) a diisopropylethylaminu (31 ml, 178 mmol) v acetonitrilu (200 ml) byl deoxygenován (3 cykly evakuace a naplnění argonem), potom byl zahříván na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou (olejová lázeň nastavena na teplotu 80 °C). Po uplynutí 6 hodin byly přidány dodatečný octan paladnatý (0,88 g, 3,9 mmol) a tri-o- tolylfosfin ((2,38 g, 7,8 mmol) a frakce byla míchána za teploty zpětného toku po dobu dodatečných 18 hodin. Reakční směs byla koncentrována do sucha a residuum bylo vyjmuto v 1: 1 směsi Et2O/petrolejový ether (300 ml) a ponecháno stát po dobu 4 hodin. Šedivě zabarvený precipitát byl odfiltrován a promýván malým množstvím 1:1 směsi Et2O/petrolejový ether (100 ml) . Oranžově-červený filtrát byl koncentrován a čištěn mžikovou chromatografií na silikagelu (15% ethylacetát/hexany). Výsledné residuum bylo vyjmuto v hexanu a směs byla ponechán v klidu po dobu několika hodin, potom bylo filtrováno pro odstranění žlutého precipitátu. Koncentrace filtrátu dala sloučeninu z názvu (34,52 g, 92%) ve formě hustého žlutého oleje:
TLC (oxid křemičitý, 20% EtOAc/hexany) Rf 0,45;
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,80 (br s, IH) , 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 8,6 Hz, IH) , 7,29 (br s, 2H), 6,83 (dd, IH), 6,72 (br s, IH), 6,23 (d, J = 15,7 Hz, IH), 4,58
- 100 • to * ·> ·· ·· ·· · · · · · · • · · · · · · to · ·* ··· ··· • · · · · ··· ·· ·· ·· a 4,53 (2 br s, 2H) , 4,46 a 4,37 (2 br s, 2H) , 3,80 (s,
3H), 3,77 (s, 3H), 1,49 (s, 9H).
e) Methyl 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-methoxydihydrocinnamát Do 10% Pd/C (5 g, 4,7 mmol, předem namočeno v DMF) byl přidán roztok methyl 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-methoxycinnamátu (34,52 g, 72 mmol) v methanolu (100 ml) . Směs byla protřepávána pod vodíkovou atmosférou (50 psi) v Parrově přístroji po dobu 7 hodin, potom byla filtrována před vrstvu celitu® pro odstranění katalyzátoru. Filtrát byl koncentrován a tím se získala sloučenina z názvu (34,15 g, 98%) ve formě bezbarvého oleje:
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,31
(br s, 2H) , 7,09 (d, J = 8,4 Hz, IH), 6,76 (dd, IH) , 6,66
(s, IH) , 4, 47 (br s, 2H) , 4,40 (br s, 2H) , 3,76 (s, 3H),
3,63 (s , 3H) , 2,79 (br s, 2H), 2,47 (t, 2H), 1,48- (s, 9H) .
f) 2-[N-(terč.-Butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-methoxydihydroskořicová kyselina
Do míchaného roztoku 2-[N (terč.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluorbenzyl)aminomethyl]-4-methoxydihydroskořicové kyselina (34,15 g, 71 mmol) v dioxanu (150 ml) byl přidán vodný 1 N NaOH (85 ml, 85 mmol) . Kalná reakční směs byla míchána při teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin. Výsledné homogenní roztok byl neutralizován vodným 1 N HC1 (85 ml, 85 mmol) a extrahován ethylacetátem (2 x 250 ml). Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (250 ml) , sušeny • ·· ·
- 101 • · —· ··· (MgSO4) a koncentrovány a tím se získala sloučenina z názvu (34,60 g, 100%) ve formě hustého čirého oleje:
TLC (95:4: 1 CHCl3/MeOH/HOAc) Rf 0,49;
NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,30
(br s, 2H) , 7,09 (d, J = 8,4 Hz, , IH), 6,78 (dd, IH), 6, 65
(d, J = = 2,6 Hz, IH), 4,47 (br s, 2H), 4,42 (br s, 2H), 3,76
(s, 3H), 2,81 (br s, 2H), 2,53 (t, 2H) , 1,47 (s, 9H) .
g) (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinonyl 2-[N-(terc.butoxykarbonyl)-N-(4-trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4methoxydihydrocinnamid
Do míchaného roztoku 2-[N-(terc.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-methoxydihydroskořicové kyseliny (34,60 g, 71 mmol) a pyridinu (6,9 ml, 85 mmol) v bezvodém dichlormethanu (200 ml) pod argonovou atmosférou byl přidán stříkačkou kyanurfluorid (4,4 ml, 48 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 4 hodin při teplotě zpětného toku. Výsledná hustá suspenze byla filtrována před vrstvu celitu® a proplachována malým množstvím bezvodého dichlormethanu (50 ml). Čirý filtrát byl vlit do separační nálevky a promýván ledovou vodou (500 ml). Sušení (MgSO4) a koncentrace zanechala surový fluorid kyseliny (34,70 g, 100%), který byl používán bez dalšího čištění. Do míchaného roztoku (R)-4-benzyl-2-oxazolidinonu (13,8 g, 78 mmol) v bezvodém THF (300 ml) pod argonovou atmosférou při teplotě -78 °C byl přidán stříkačkou roztok n-BuLi v hexanech (2,5 M, 30 ml, 75 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě -78 °C po dobu 15 minut a potom byl přidán stříkačkou roztok výše uvedeného fluoridu kyseliny (34,70 g, 71 mmol) v bezvodém THF (100 ml) . Reakční směs byla míchána po dobu 1 hodin při teplotě -78 °C, potom byla ··· ·
- 102 -: . · a extrahována anické vrstvy byly reakce zastavena nasyceným NH4C1 ethylacetátem (2 x 200 ml). Sloučené or promývány solankou (400 ml), sušeny (MgSO4) a koncentrovány do sucha. Čištění mžikovou chromatografií na silikagelu (20% ethylacetát/hexany) poskytla sloučeninu z názvu (40,34 g, 90%) ve formě hustého čirého oleje:
TLC (20% EtOAc/hexane) Rf 0,21;
LH NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,33-
7,26 (m, 5H) , 7,16 (m, 3H), 6,77 (dd, IH), 6, 67 (d, J = 2,5
Hz, IH) , 4,62 (m, IH), 4,60-4,40 (m, 4H) , 4, 16 (m, 2H) ,
3,76 (s, 3H) , 3,27 (dd, IH), 3,21-3,10 (m, 2H) , 2,88 (br s,
2H) , 2,72 (dd, IH) , 1,48 (s, 9H).
h) (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinonyl 3-[2-[N-(terč.butoxykarbonyl)-N-(4-trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4methoxyfenyl]-2(S)-methoxykarbonylmethyl-propionamid Do míchaného roztoku (R)-4-benzyl-2-oxazolidinonyl 2-[N(terc.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl)aminomethyl]-4-methoxydihydrocinnamidu (40,30 g, 64 mmol) v bezvodém THF (300 ml) při teplotě -78 °C byl přidán roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (70 ml, 1 M v THF, 70 mmol) stříkačkou. Po uplynutí 30 minut byl přidán stříkačkou methyl bromacetát (30 ml, 317 mmol). Po uplynutí dalších 30 minut při teplotě -78 °C reakční směs byla ponechán zahřát se to -20 °C a stát po dobu dodatečných 6 hodin. Reakce byla zastavena nasyceným NH4C1 (400 ml) a extrahována ethylacetátem (2 x 200 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (300 ml) , sušeny (MgSO4) a koncentrovány do sucha. Čištění mžikovou chromatografií na silikagelu (20% ethylacetát/hexany) • · • ·
- .1Ώ3.Λ
HPLC (Altex vykázala, že
NMR (400 MHz, CDCI3
7,11 (m, 8H) , 6,71 (dd,
4,34 (m, 6H), 4,03 (d,
(s, 3H), 3,61 (s, 3H) ,
2,71 (m, 2H), 2,70 (dd,
poskytlo sloučeninu z názvu (38,62 g, 86%) ve formě bílé pevné látky:
Ultrasphere™-Si 5u, 20% EtOAc/hexane) přibližně 20% nealkylovaného výchozího materiálu byl stále přítomno. HPLC surové reakční směsi dalo výtěžek 90% po dobu reakce.
δ 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 7,4.H) , 6,63 (d, J = 2,7 Hz IH) , 4,57= 8,6 Hz, IH), 3,85 (t, IH), 3,72 ,28 (dd, IH), 2,90 (dd, IH), 2,862,70 (dd, IH), 2,44 (m, IH), 1,48 a 1,46 (2s,
9H) .
i) Methyl (S)-8-methoxy-3-oxo-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Do míchaného roztoku (R)-4-benzyl-2-oxazolidinonyl 3—[2—[N— (terč.-butoxykarbonyl)-N-(4trifluormethylbenzyl) aminomethyl] -4-methoxyfenyl]-2 (S) methoxykarbonylmethyl-propionamidu (38,0 g, 54 mmol) v THF (300 ml) a vody (100 ml) byl přidán po kapkách při teplotě 0 °C v průběhu 30 minut roztok 30% H2O2 (18,9 ml) a LiOH. H2O (2,3 g, 55 mmol) ve vodě (62 ml). Kalný roztok byl míchán po dobu dodatečné 1 hodiny při teplotě 0 °C.
Výsledný homogenní roztok byl pomalu zpracován roztokem siřičitanu sodného (34,3 g, 272 mmol) ve vodě (175 ml) při teplotě 0 °C, potom byl okyselen ledovým roztokem koncentrovaného HCl (35 ml) ve vodě (150 ml). Reakční směs byla extrahována ethylacetátem (2x200 ml) a sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (400 ml) , sušeny (MgSO4) a koncentrovány do sucha. Výsledné residuum bylo zpracováno 4,0 M HCl v dioxanu (400 ml) za míchání při teplotě zpětného toku (byl pozorován pomalý vývin plynu). Po uplynutí 1 hodiny byla reakční směs koncentrována a znovu koncentrována z 1: 1 směsi CHCla/toluen (2 χ) , potom residuum (37,65 g) bylo vyjmuto v bezvodém DMF (400 ml). Do tohoto roztoku byly za míchání pod argonovou atmosférou při teplotě 0 °C v Dewarově láhvi přidány triethylamin (15,3 ml, 109 mmol) a NaHCC>3 (22,9 g, 273 mmol), následované difenylfosforylazidem (13 ml, 60 mmol) . Po míchání po dobu 24 hodin při teplotě 0 °C reakční směs byla koncentrována do sucha. Residuum bylo vyjmuto v ethylacetátu (400 ml) a promýváno postupně vodou (300 ml) a solankou (300 ml) . Sušení (MgSO4) , koncentrace a mžiková chromatografie na silikagelu (35% ethylacetát/hexany) poskytla sloučeninu z názvu (16,87 g, 74%) ve formě čirého hustého oleje:
TLC (40% EtOAc/hexane) Rf 0,50;
MS (ES) m/e 422,3 (M + H)+;
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,52 (d, J = 8,1, 2H) 7,29 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,02 (d, J = 8,5 Hz, 1H) , 7,75' (dd, 1H) , 6,36(d, J =2,7 Hz, 1H), 5,18 (d,J = 16,5 Hz, 1H) , 4,96 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,87 (m, 1H), 3,74 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H) , 3,71 (s, 3H) , 3,08 (dd, 1H), 3,02 (dd, 1H), 2,95 (dd, 1H), 2,48 (dd, 1H).
j) Methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Roztok bromidu boritého v CH2C12 (1,0 M, 160 ml, 160 mmol) byl přidán po kapkách v průběhu 30 minut do roztoku methyl (S)-8-methoxy-3-oxo-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (16,67 g, 39,6 mmol) v bezvodém CH2C12 (150 ml) při teplotě -20 °C pod argonovou atmosférou. Po uplynutí dalších 1,5 hodin při teplotě -15 • ···· · ·· ·· ·· • · · «··· · · · f • · ······· • * · · · · · ······ — ι·3fe « ···*··* ··* až -20 °C byla reakční směs znovu ochlazena na teplotu -20 °C a reakce byla zastavena opatrným přidáním po kapkách MeOH (160 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě -10 až 0 °C po dobu 1 hodiny, potom byla koncentrována v rotační odparce. Residuum bylo znovu koncentrováno z MeOH (2 x) . Čištění mžikovou chromatografií na silikagelu (50 až 100% ethylacetát/hexany) poskytlo sloučeninu z názvu (14,87 g, 92%) ve formě bílé pevné látky:
[a]D -81,8° (c, 1,0, MeOH);
TLC (oxid křemičitý 50% EtOAc/hexane) Rf 0,54;
MS (ES) m/e 408,2 (M + H)+;
1H NM IR (400, CDC13 + 2% DMSO-d6) δ 7,53 (d, J = 8,1 Hz, 2H) ,
7,31 (d, J = 8,1 Hz, 2H) , 6,93 (d, J = 8, 4 Hz, IH), 6, 70
(dd, IH), 6,41 (d, , J = 2,3 Hz, IH) , 5,16 (d,J = 16,4 Hz,
IH) , 5,01 (d, J = 15,6 Hz, IH), 4,39 (d, J = 15,6 Hz, IH) ,
3,84 (m, IH), 3,73 (d, J = 16,4 Hz, IH), 3, 71 (s, 3H), 3,01
(dd, IH), 2,98 (m, IH), 2,90 (dd, IH), 2,47 (dd, IH) .
Příprava 19
HPLC separace enantiomerů methyl (±)-8-methoxy-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4acetátu
a) Methyl (R)-(+)-8-methoxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4-acetát a methyl (S)-(-)8-methoxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro2-benzazepin-4-acetát
Methyl (±)-8-methoxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5tetrahydro-2-benzazepin-4-acetát byl rozdělen do svých enantiomerů chirální HPLC za následujících podmínek: Diacel
Chiralcel OJ® kolona (21,2 x 250 mm), methanol mobilní fáze, 15 ml/min velikost průtoku, UV detekce na vlnové délce 295 nm, 400 mg injekce; tR pro methyl (R) -( + )-8methoxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2benzazepin-4-acetát = 4,9 min; tR pro methyl (S)-(-)-8methoxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro2-benzazepin-4-acetát =6,6 min
Příprava 20
HPLC separace enantiomerů methyl (±)-8-hydroxy-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4acetátu
a) Methyl (R)-(+)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4-acetát a methyl (S)-(-)8-hydroxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro2-benzazepin-4-acetát
Methyl (±)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl) -2,3,4,5tetrahydro-2-benzazepin-4-acetát byl rozdělen do svých enantiomerů chirální HPLC za následujících podmínek: Diacel Chiralcel OD® kolona (21,2 x 250 mm), 20% ethanol v hexanu mobilní fáze, 10 ml/min, UV detekce na vlnové délce 254 nm, 100 mg injekce; tR pro methyl (R)-(+)-8-hydroxy-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4acetát = 14 4 min; tR pro methyl (S)-(-)-8-hydroxy-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4acetát = 18,5 min.
Příprava 21
- 1ÍU·
• *
Příprava methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu enantioselektivní syntézou
a) 4-Brom-3-brommethylanisol
Do míchaného roztoku 4-brom-3-methylanisolu (100 g, 497 mmol) v bezvodém dichlormethanu (500 ml) byl přidán Nbromsukcinimid (97 g, 545 mmol) následovaný benzoylperoxidem (6 g, 25 mmol). Reakční směs byl jemné zahřívána na teplotu zpětného toku 150 wattovou širokoúhlou lampou s reflektorem umístěnou přibližně 12 palců od reakční nádoby. Po uplynutí 24 hodin reakční směs byla koncentrována rotačním odpařováním na poloviční objem a ponechána v klidu po dobu 4 hodin. Bílý precipitát, který se vytvořil, byl odfiltrován a proplachován malým množstvím dichlormethanu. Filtrát byl koncentrován do sucha a zbývající pevná látka byla rozetřena s hexany a filtrována. Sušení za sníženého tlaku poskytlo sloučeninu z názvu (100,25 g, 72%) ve formě bílých jehliček: GC tR = 6,56 minut (HP 530 pm x 20 m methylkřemičitanová kolona, tok nosiče He 20 ml/min, 100 °C počáteční teplota, 1 minut počáteční doba, 10 °C/min, 200 °C konečná teplota, 1 minut konečná doba);
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,44 (d, J = 10 Hz, 1 Η) , 6,99 (d, J = 3 Hz 1 Η) , 6,73 (dd, IH) , 4,55 (s, 2H) , 3,80 (s, 3H) .
b) 3-[N-(2,2,2-Trifluorethyl)aminomethyl]-4-bromanisol
2,2,2-Trifluorethylamin (24 g, 242 mmol) byl prudce přidán do míchaného roztoku 4-brom-3-brommethylanisolu (33,6 g, • ·
120 mmol) v bezvodém DMSO (125 ml) při teplotě zpětného toku. Reakční směs byla zahřívána na teplotu přibližně 30 35 °C. Po míchání po dobu 18 hodin byla reakční směs zředěna ledovým 1 N NaOH (200 ml) a extrahována Et2O (2 x 300 ml). Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (300 ml) , sušeny (MgSO4) a koncentrovány a tím se získala sloučenina z názvu (41,35 g, 96%) ve formě bledě žlutého olej e:
TLC (toluen) Rf 0,32;
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,43 (d, J = 9 Hz, 1H) , 6,97 (d, J = 3 Hz, 1H) , 6,71 (dd, 1H) , 3,93 (br s, 2H) , 3,80 (s, 3H), 3,18 (m, 2H), 1,86 (br s, 1H).
c) 3-[N-(terč.-Butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)aminomethyl]-4-bromanisol
Do 3-[N-(2,22-trifluorethyl)aminomethyl]-4-bromanisolu (41,35 g, 137 mmol) byl přidán di-terc.-butyl dikarbonát (36 g, 165 mmol, přeměněný na kapalinu zahříváním v horké vodní lázni). Reakční směs byla promývána malým množstvím dichlormethanu (-20 ml) a míchána pod argonovou atmosférou v 50 °C olejové lázni po dobu 18 hodin (byl pozorován pomalý vývin plynu). Po koncentraci rotačním odpařováním za sníženého tlaku výsledné residuum bylo zředěno hexany (100 ml) a roztok byl naočkován malým množstvím čistého pevného produktu (získaného z předchozí reakce silikagelovou chromatografií s použitím 10% hexanů jako vymývacího rozpouštědla). Směs byla ponechána v klidu při teplotě zpětného toku po dobu několik hodin a potom byla umístěna v ledničce přes noc. Produkt byl shromážděn podtlakovou filtrací a promýván hexany. Sušení za sníženého tlaku • · ·· · • · ·
1Ο3·.τ· poskytlo sloučeninu z názvu (48,54 g, 88%) ve formě bezbarvé pevné látky:
TLC (10% EtOAc/toluen) Rf 0,52;
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,44 (d, J = 9 Hz, IH), 6,75 (dd, IH) , 6,71 (s, IH), 4,65 a 4,58 (2s, 2H), 3,90 a 3,78 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H), 1,51 a 1,42 (2s, 9H) .
d) Methyl 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)aminomethyl]-4-methoxycinnamát Roztok 3- [N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)aminomethyl]-4-bromanisolu (48,19 g, 121 mmol), methylakrylátu (55 ml, 605 mmol), octanu paladnatého (1,36 g, 6,1 mmol), tri-o-tolylfosfinu (3,69 g, 12 mol) a diisopropylethylaminu (49 ml, 278 mmol) v acetonitrilu (200 ml) byl deoxygenován (3 x cykly evakuace a naplnění argonem), potom byl zahříván na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou v olejové lázni udržované na teplotě 80 °C. Po uplynutí 6 hodin byl přidán dodatečný octan paladnatý (1,36 g, 6,1 mmol) a tri-o-tolylfosfin (3,69 g, 12 mmol) a reakční směs byla míchána za teploty zpětného toku po dobu dodatečných 18 hodin. Reakční směs byla koncentrována do sucha a residuum bylo vyjmuto v 1: 1 směsi Et20/petrolejový ether (300 ml) a ponecháno stát po dobu 4 hodin. Šedivě zbarvený precipitát byl odfiltrován a promýván malým množstvím 1:1 Et20/petrolejového etheru (přibližně 100 ml) . Oranžově červený filtrát byl koncentrován a čištěn mžikovou chromatografií na silikagelu (15% ethylacetát/hexany). Výsledné residuum bylo vyjmuto v hexanu a směs byla ponechána v klidu po dobu 2 hodin, potom byla filtrována pro odstranění žlutého precipitátu.
Koncentrace filtrátu zanechala sloučeninu z názvu (45,85 g, 94%) ve formě žlutého oleje:
TLC (20% EtOAc/hexane) Rf 0,50;
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,84 (d, J = 16 Hz, IH) , 7,57 (d, J = 9 Hz, IH) , 6,86 (dd, IH) , 6,74 a 6,72 (2s, IH) , 6,26 (d, J = 16 Hz, IH) , 4,74 a 4,70 (2s, 2H) , 3,83 (s, 3H) , 3,79 (s, 3H), 3,80 a 3,66 (2m, 2H), 1,51 a 1,45 (2s, 9H).
e) Methyl 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)aminomethyl]-4-methoxydihydrocinnamát
Do 10% Pd/C (5 g, 4,7 mmol, předem namočeno v DMF) byl přidán roztok methyl 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)amino]methyl-4-methoxycinnamátu (45,85 g, 113 mmol) v methanolu (100 ml) . Směs byla protřepávána pod vodíkovou atmosférou (50 psi) v Parrově přístroji po dobu 6 hodin, potom byla filtrována před vrstvu celitu® pro odstranění katalyzátoru. Filtrát byl koncentrován a tím se získala sloučenina z názvu (43,71 g, 95%) ' ve formě bezbarvého oleje:
:H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,11 (d, J = 8 Hz, IH) , 6,78 (dd, IH) , 6,65 (s, IH), 4,63 a 4,60 (2s, 2H) , 3,84 a 3,70 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H) , 3,66 (s, 3H) , 2,86 (t, 2H) , 2,53 (t,
2H), 1,50 a 1,44 (2s, 9H).
f) 2- [N-(terč.-Butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl)aminomethyl]-4-methoxydihydroskořicová kyselina
Do míchaného roztoku methyl 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N(2,2,2-trifluorethyl)aminomethyl]-4-methoxydihydrocinnamátu (43,11 g, 108 mmol) v dioxanu (200 ml) byl přidán vodný 1 N NaOH (130 ml, 130 mmol). Kalná reakční směs byl míchána při
0 0 0 0
- ΠΑ\
00 00 • 0 0 0 0 9 • · · 0 0 ·
00 000 00« • 0 0 0
000 00 00 teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin. Výsledný homogenní roztok byl neutralizován pomocí 1 N HC1 (130 ml, 130 mmol) a extrahován ethylacetátem (2 x 250 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (250 ml), sušeny (MgSO4) a koncentrovány a tím se získala sloučenina z názvu (45,01 g, 100%) ve formě hustého čirého oleje:
TLC (95:4: 1 CHCI3, MeOH, HOAc) Rf 0,49.
g) (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinonyl 2-[N-(terc.butoxykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluorethyl)aminomethyl]-4methoxydihydrocinnamid
Do míchaného roztoku 2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2trifluorethyl) aminomethyl] -4-methoxydihydroskořicové kyseliny (45,0 g, 108 mmol) a pyridinu (10 ml, 124 mmol) v bezvodém dichlormethanu (400 ml) pod argonovou atmosférou byl stříkačkou přidán kyanurfluorid (6,8 ml, 74 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 4 hodin při teplotě zpětného toku. Výsledná hustá suspenze byla filtrována před vrstvu celitu® a filtrační vrstva byla proplachována malým množstvím bezvodého dichlormethanu (50 ml). Čirý filtrát byl vlit do oddělovací nálevky a promýván ledovou vodou (750 ml) . Sušení (MgSO4) a koncentrace zanechaly surový fluorid kyseliny (43,32 g, 100%), který byl používán bez dalšího čištění. Do míchaného roztoku (R)-4-benzyl-2oxazolidinonu (21 g, 119 mmol) v bezvodém THF (400 ml) pod argonovou atmosférou při teplotě -78 °C byl přidán stříkačkou roztok n-BuLi v hexanech (2,5 M, 113 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě -78 °C po dobu 15 minut a potom byl přidán stříkačkou roztok výše uvedeného fluoridu kyseliny (43,32 g, 108 mmol) v bezvodém THF (100 ml) . Reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny při teplotě
- 1«£2
Φ •
• φ
Γ4 ·· ΦΦ ·· • · · · · Φ • · ΦΦΦΦ • ΦΦ ΦΦΦ ΦΦΦ • · Φ Φ
ΦΦ ΦΦ ΦΦ
-78 °C a potom byla reakce zastavena nasyceným NH4CI a extrahována ethylacetátem (2 x 250 ml). Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (500 ml), sušeny (MgSO4) a koncentrovány do sucha. Čištění mžikovou chromatografií na silikagelu (20% ethylacetát/hexany) poskytlo sloučeninu z názvu (55,27 g, 91%) ve formě hustého čirého oleje:
TLC (oxid křemičitý, 20% EtOAc/hexane) Rf 0,24;
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,34-7,26 (m, 3H) , 7,19-7,16 (m,
3H) , 6,78 (dd, IH), 6,67 (s, IH), 4,68-4,63 (m, 3H), 4,214,11 (m, 2H), 3,87 a 3,74 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H) , 3,28 (dd, IH), 3,17 (m, 2H), 2,93 (m, 2H), 2,75 (dd, IH), 1,50 a 1,45 (2s, 9H).
h) (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinonyl 3-[2-[N-(terč.butoxykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluorethyl)aminomethyl]-4methoxyfenyl]-2(S)-methoxykarbonylmethyl-propionamid Do míchaného roztoku (R)-4-benzyl-2-oxazolidinonyl 2-[N(terc. -butoxykarbonyl) -N- (2,2,2-trifluorethyl) ami-nomethy 1 ] 4-methoxydihydrocinnamidu (55,2 g, 100 mmol) v bezvodém THF (300 ml) byl při teplotě -78 °C stříkačkou přidán roztok bis (trimethylsilyl)amidu lithného (115 ml, 1 M v THF, 115 mmol). Po uplynutí 30 minut byl přidán stříkačkou methylbromacetát (47 ml, 497 mmol). Po uplynutí dalších 30 minut při teplotě -78 °C reakční směs byla ponechána zahřát se na -20 °C a míchána po dobu dodatečných 6 hodin. Reakce byla ukončena nasyceným NH4CI (400 ml) a extrahována ethylacetátem (2 x 250 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (400 ml), sušeny (MgSO4) a koncentrovány do sucha. Čištění mžikovou chromatografií na silikagelu (20% ethylacetát/hexany) poskytlo sloučeninu z názvu (52,44 g, 75%) ve formě bílé pevné látky:
·· · ·
• ·· ·· ·Λ ··· · · · · · • · · · · · « • · · · ··· ··· • · · · · ··· ·· ·· «·
HPLC (Altex Ultrasphere™-Si 5u, 20% EtOAc/hexan) ukázala, že přibližně 6-7 % nealkylovaného výchozího materiálu byl stále přítomno. HPLC surové reakční směsi dala výtěžek reakce 86% .
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,35-7,13 (m, 6H) , 6,73 (dd, IH),
6,64 (s, IH) , 4,69-4,53 (m, 4H) , 4,04 (d, IH) , 3,87 (t,
IH), 3, 85-3,72 (m, 2H) , 3,75 (s, 3H) , 3, 64 (s, 3H), 3,31
(dd, IH), 2,95 (dd, IH), 2,92-2,71 (m, 2H) , 2,71 (dd, IH) ,
2,50 (m, IH), 1,50 a 1,47 (2 br s, 9H).
i) Methyl (S)-8-methoxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Do míchaného roztoku (R)-4-benzyl-2-oxazolidinonyl 3-[2-[N(terc.-butoxykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluorethyl)aminomethyl]4-methoxyfenyl]-2(S)- methoxykarbonylmethyl-propionamidu (52,40 g, 75 mmol) v THF (300 ml) a voda (100 ml) byl přidán po kapkách při teplotě 0 °C v průběhu 30 minut roztok 30% H2O2 (26 ml) a LiOH . H20 (3,2 g, 75 mmol) ve vodě (85 ml) . Kalný roztok byl míchán po dodatečnou 1 hodinu při teplotě 0 °C. Výsledný homogenní roztok byl zpracován pomalu roztokem siřičitanu sodného (46 g, 365 mmol) ve vodě (240 ml) při teplotě 0 °C, potom byl okyselen ledovým roztokem koncentrovaného HC1 (45 ml) ve vodě (200 ml) . Reakční směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 300 ml) a sloučené organické vrstvy byly promývány solankou (600 ml) , sušeny (MgSO4) a koncentrovány do sucha. Výsledné residuum bylo zpracováno 4,0 M HC1 v dioxanu (500 ml) za míchání při teplotě zpětného toku (byl pozorován pomalý vývin plynu). Po uplynutí 1 hodiny byla reakční směs koncentrována a znovu koncentrována z 1: 1 směsi
CHCls/toluen (2 x), potom residuum (48,89 g) bylo vyjmuto v • 4 4 ·
- 1·1·4 bezvodém DMF (500 ml) . Do tohoto roztoku za míchání pod argonovou atmosférou při teplotě 0 °C v Dewarově nádobě byly přidány triethylamin (21 ml, 150 mmol) a NaHCO3 (31,5 g, 375 mmol), následovaný difenylfosforylazidem (18 ml, 83,5 mmol). Po míchání po dobu 24 hodin při teplotě 0 °C byla reakční směs koncentrována do sucha. Residuum bylo vyjmuto v ethylacetátu (500 ml) a promýváno postupně vodou (400 ml) a solankou (400 ml). Sušení (MgSO4) , koncentrace a mžiková chromatografie na silikagelu (30% ethylacetát/hexany) poskytla sloučeninu z názvu (21,81 g, 84%) ve formě bílé pevné látky:
[<x]D -132,6 ° (c, 1,0, MeOH);
TLC (40% EtOAc/hexan) Rf 0,56;
chirální HPLC (Chiracel OD, 20% EtOH/hexane) k' = 2,05; opačný enantiomer z racemického standardu měl k' = 1,86 (nedetekován);
MS (ES) m/e 346,2 (M + H)+;
XH NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,03 (d, J = 8,5 Hz, ' IH) , 6,79
(dd, IH) , 6,61 (d, J =2,6 Hz, IH) , 5,35 (d, J = 16,7 Hz,
IH) , 4,17 (m, IH), 4,0 (m, IH), 3, 99 (d, J = 16,7 Hz, IH),
3,84 (m, IH) , 3,79 (s, 3H), 3,71 (s, 3H) , 3,01 (m, 2H) ,
2, 91 (dd, IH), 2,47 (dd, IH) .
Analýza: Vypočteno pro Ci6HigF3NO4: C, 55,65; H, 5,25; N,
4,06.
Nalezeno: C, 55,62; H, 5,27; N, 4,04.
j) Methyl (S)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát
Roztok bromidu boritého v CH2C12 (1,0 M, 250 ml, 250 mmol) byl přidán po kapkách v průběhu 30 minut do roztoku methyl (S)-8-methoxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5···· tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (21,5 g, 62,3 mmol) v bezvodém CH2CI2 (230 ml) při teplotě -20 °C pod argonovou atmosférou. Po uplynutí dalších 1,5 hodin při teplotě -15 až -20 °C byla reakční směs znovu ochlazena na teplotu -20 °C a reakce byla zastavena opatrným přidáním po kapkách MeOH (250 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě -10 až 0 °C po dobu 1 hodiny, potom byla koncentrována v rotační odparce. Residuum bylo znovu koncentrováno z MeOH (2 x) . Čištění mžikovou chromatografií na silikagelu (50% ethylacetát/hexany) poskytlo sloučeninu z názvu (19,38 g, 94%) ve formě bílé pevné látky:
[a]D -130,5° (c 1,0, MeOH);
TLC (oxid křemičitý, 40% EtOAc/hexane) Rf 0,40;
MS (ES) m/e 332,1 (M + H)+;
XH NMR(400, CDCl3-2% DMSO-d6) δ 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1 Η) , 6,71 (dd, IH), 6,58 (d, J = 2,5 Hz, IH) , 5,29 (d, J = 16,7 Hz, 1 Η) , 4,21 - 3,98 (m, 2H) , 3,96 (d, J = 16,7 Hz, IH) ,
3.82 (m, IH) , 3,68 (s, 3H) , 2,98 (dd, IH) , 2,94' (dd, IH) ,
2.83 (dd, IH), 2,46 (dd, IH).
Analýza: Vypočteno pro C15H16F3NO4: C, 54,38; H, 4,87; N, 4,23.
Nalezeno: C, 54,40; H, 4,96; N, 4,22.
Příprava 22
Příprava methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2-fenylethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu enantioselektivní syntézou
a) 3-[N-(terč.-Butoxykarbonyl)-N-(2fenylethyl)amino]methyl-4-bromanisol
- HŘ ·· ·· • · · 4 4 * · 4 4 4
4 ··· ··»
2-Fenethylamin (19,0 ml, 150 mmolu) byl najednou přidán do roztoku 4-brom-3-brommethylanisolu (14,0 g, 50,0 mmolu) v bezvodém THF (200 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 18 hodin směs byla koncentrována. Residuum bylo rozpuštěno v 2 M NaOH (300 ml) a extrahováno CH2C12 (3 x 200 ml) . Sloučené CH2C12 vrstvy byly sušeny nad MgSO4 a koncentrovány. Surový materiál byl filtrován přes vrstvu silikagelu použitím směsi 50% EtOAc/hexany jako vymývacího rozpouštědla. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a tím se získal žlutý olej:
MS (ES) m/e 320 (M + H)+.
Výše uvedený žlutý olej byl rozpuštěn v bezvodém THF (200 ml) a di-terc.-butyl dikarbonátu (13,0 g, 60,0 mmolu) byl najednou přidán při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 1 hodiny byl roztok koncentrován. Mžiková silikagelová chromatografie (10% EtOAc/hexany) poskytla sloučeninu z názvu ve formě bělavé pevné látky (20,8 g, 100% z 4-brom-3brommethylanisolu):
XH NMR (250 MHz, CDC13) δ 7,51-7,10 (m, 6H) , 6,85-6, 60 (m,
2H) , 4,52-4,33 (m, 2H) , 3,71 (s, 3H) , 3,52-3,31 (m, 2H) ,
2, 92-2, 73 (m, 2H) , 1,61-1,33 (m, 9H) .
b) 4-[2-[N-(terč.-Butoxykarbonyl)-N-(2fenylethyl)amino]methyl-4-methoxyfenyl]propionová kyselina Roztok 3-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2fenylethyl)amino]methyl-4-bromanisolu (20,0 g, 48,0 mmolu), benzylakrylátu (23,0 g, 144 mmolu), octanu paladnatého (540 mg, 2,40 mmolu), tri-o-tolylfosfinu (1,46 g, 4,80 mmolu) a diisopropylethylaminu (17,0 ml, 96,0 mmolu) v propionitrilu (250 ml) byl deoxygenován (3x cykly evakuace a naplnění
- 117 argonem), potom byl zahříván na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou. Po uplynutí 48 hodin reakční směs byla ochlazena na teplotu zpětného toku, filtrována před vrstvu celitu a koncentrována. Mžiková silikagelová chromatografie (10% EtOAc/hexane) dala žlutý olej, který byl rozpuštěn v 10% směsi EtOAc/hexany (100 ml) a ponechána při teplotě 4 °C po dobu 72 hodin. Žlutý precipitát byl odstraněn filtrací a potom byl roztok koncentrován a tím se získal bledě žlutý olej (14,98 g, 62%) :
XH NMR (250 MHz, CDC13) δ 8,00-7,85 (m, IH) , 7,61-7,01 (m, 1 IH), 6,85-6,76 (m, 2H) , 6, 75-6, 67 (m, IH) , 6,32 (m, IH) , 5,22 (s, 2H), 4,60-4,41 (m, 2H) , 3,75 (s, 3H) , 3,52-3,20 (m, 2H), 2,93-2,71 (m, 2H) , 1,55-1,33 (m, 9H).
Výše uvedený olej byl rozpuštěn v MeOH (150 ml) a 10% Pd/C (6,40 g, 6,00 mmolu) bylo přidáno při teplotě 0 °C. Směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku, protřepávána pod vodíkovou atmosférou (50 psi) po dobu 7 hodin, potom byla filtrována před vrstvu celitu® pro odstranění katalyzátoru. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a tím se získala sloučenina z názvu ve formě hustého žlutého oleje (10,35 g, 83%):
XH-NMR (250 MHz, CDC13) δ 7, 35-7,02 (m, 6H) , 6, 85-6, 76 (m, 2H) , 6,75-6,73 (m, IH) , 6, 69-6, 68 (m, IH) , 4,42-4,25 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 3, 44-3,25 (m, 2H) , 2,92-2,73 (m, 4H) , 2,59-2,50 (m, 2H) , 1, 60-1,33 (m, 9H) .
c) (R)-1,1-Dimethylethyl[[5-methoxy-2-[3-oxo-3-[2-oxo-4(fenylmethyl)-3-oxazolidinyl]propyl]fenyl]methyl](2fenylethyl)karbamát
- 118
Do roztoku 4-[2-[N-(terč.-butoxykarbonyl)-N-(2fenylethyl)amino]methyl-4-methoxyfenyl]propionové kyseliny (10,35 g, 25,0 mmolu) v CH2CI2 (125 ml) byl přidán pyridin (2,4 ml, 30,0 mmolu) a potom kyanurfluorid (1,4 ml, 15,0 mmolu) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 2 hodin směs byla filtrována před vrstvu celitu®, promývána studenou H2O (100 ml) a potom solankou (100 ml), sušena nad MgSO4 a koncentrována.
Do roztoku (R)-4-benzyl-2-oxazolidinonu (5,30 g, 30,0 mmolu) v bezvodém THF (125 ml) byl přidán n-BuLi (11,0 ml, 2,5 M roztok v hexanech, 27,5 mmolu) při teplotě -78 °C. Po uplynutí 15 minut byl přidán po kapkách výše uvedený fluorid kyseliny v bezvodém THF (25 ml) v průběhu 5 minut. Po uplynutí 1 hodiny směs byla vlita do 300 ml H2O a extrahována EtOAc (3 x 200 ml.). Sloučené EtOAc vrstvy byly sušeny nad MgSO4 a koncentrovány. Mžiková silikagelová chromatografie (30% EtOAc/hexany) poskytla sloučeninu z názvu ve formě hustého oleje (12,12 g, 85%):
XH NMR (250 MHz, CDC13) 6 7,41-7,12 (m, 11H) , 6,65 (m, IH) , 6,60 (m, IH), 4,70-4,62 (m, IH), 4,50-4,35 (m, 2H), 4,214,10 (m, 2H), 3,71(s, 3H) , 3,50-2,61 (m, 10H), 1,55-1,41 (m, 9H).
d) [R-(R*,S*)]-Methyl β-[[4-methoxy-2-[[[(1,1dimethylethoxy)karbonyl](2fenylethyl)amino]methyl]fenyl]methyl]-y-oxo-4(fenylmethyl)-3-oxazolidinbutanoát
Do roztoku (R)-1,1-dimethylethyl[[5-methoxy-2-[3-oxo-3-[2oxo-4-(fenylmethyl)-3-oxazolidinyl]propyl]fenyl]methyl](2fenylethyl)karbamátu (12,12 g, 21,0 mmolu) v bezvodém THF ♦ ·*·
- 119 ♦ · · * · koncentrovány.
EtOAc/hexany)
EtOAc/hexany) (100 ml) byl přidán bis(trimethylsilyl)amid lithný (22,0 ml, 1M v THF, 22,0 mmolu) při teplotě -78 °C. Po uplynutí minut byl přidán methylbromacetát (9,9 ml, 105 mmolu) a potom směs byla zahřívána na -20 °C. Po uplynutí 3 hodin směs byla vlita do 200 ml H2O a extrahována EtOAc (3 x 500 ml). Sloučené EtOAc vrstvy byly sušeny nad MgSO4 a Mžiková silikagelová chromatografie (25% dala 9,91 g 3:2 sloučeniny z názvu
Dimethylethyl[[5-methoxy-2-[3-oxo-3-[2-oxo-4-(fenylmethyl)3-oxazolidinyl]propyl]fenyl]methyl](2-fenylethyl)karbamátu. Tato směs byla používána bez dalšího čištění:
MS (ES) m/e 667 (M + Na)+.
směsi (HPLC, 20% respektive (R)-l,le) Methyl (S)-8-methoxy-3-oxo-2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Do roztoku [R-(R*,S*)]-methyl β-[[4-methoxy-2-[[[(1,1dimethylethoxy)karbonyl](2fenylethyl) amino]methyl] fenyl]methyl] -ygama-oxo-4(fenylmethyl)-3-oxazolidinebutanoátu (9,91 g, 15,4 mmolu) v THF (75 ml) byl přidán roztok monohydrátu hydroxidu lithného (646 mg, 15,4 mmolu) a H2O2 (5,2 ml, 30 % v H2O, 46,2 mmolu) v H2O (25 ml) při teplotě 0 °C v průběhu 10 minut. Po uplynutí 1,5 hodiny byl přidán roztok Na2SO3 (9,7 g, 77 mmolu) v H2O (100 ml) . Směs byla okyselena na pH 4 použitím 2 M HC1 a extrahována EtOAc (3 x 200 ml). Sloučené EtOAc vrstvy byly sušeny nad MgSO4 a koncentrovány. Výsledné residuum bylo rozpuštěno v 4,0 M HC1 v dioxanu (75 ml) . Po uplynutí 45 minut směs byla koncentrována a potom znovu koncentrována z toluenu (200 ml) .
120
Výše uvedené residuum bylo rozpuštěno v bezvodém DMF (75 ml). Do tohoto roztok byl přidán NaHCO3 (6,50 g, 77,0 mmolu) a triethylalanin (4,3 ml, 30,8 mmolu) při teplotě zpětného toku. Směs byla ochlazena na 0 °C a byl přidán difenyl (5 ml, 23,1 mmolu). Po uplynutí 16 hodin směs byla koncentrován. Výsledná pasta byla rozpuštěna v EtOAc (500 ml) , promývána H2O (2 x 300 ml) , sušena nad MgSO4 a koncentrována. Mžiková silikagelová chromatografie (40% EtOAc/hexany) poskytla sloučeninu z názvu (2,61 g, 33% z [R-(R*,S*)]-methyl β-[[4-methoxy-2-[[[(1,1dimethylethoxy)karbonyl](2fenylethyl) amino]methyl] fenyl]methyl] -γ-οχο-4(fenylmethyl)-3-oxazolidinebutanoátu) ve formě čirého olej e:
MS (ES) m/e 390 (M + Na)+.
f) Methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Do roztoku methyl (S)-8-methoxy-3-oxo-2-(2-fenylethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (2,61 g, 7,1 mmolu) v CH2C12 (40 ml) byl přidán BBr3 (21,3 ml, 1M v CH2C12, 213 mmolu) při teplotě -20 °C. Po uplynutí 45 minut byla reakce zastavena přidáním MeOH (200 ml) a reakční směs byla koncentrována. Residuum bylo filtrován vrstvu silikagelu pomocí 50 % směsi EtOAc/hexany jako vymývacího rozpouštědla. Výsledná oranžová pevná látka byla rekrystalizována z MeOH/H2O a tím se získala sloučenina z názvu ve formě bělavé pevné látky (2,16 g, 81%):
MS (ES) m/e 376 (M + Na)+.
121 • · ♦ • * · · · • · * · · • · · · · • · ··♦ ·· · • · · ♦ · ·
Příklad 1
Příprava (±)—8 —[3—(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny
a) Methyl (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu (1,4 g, 8 mmol) v bezvodém DMF (8 ml) byl přidán po kapkách do roztoku methyl (±)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu (1,7 g, 7 mmolu), trifenylfosfinu (2,76 g, 11 mmol) a diethylazodikarboxylátu (2,33 ml, 14 mmolu) v bezvodém DMF (4 ml) a bezvodého THF (10 ml) při teplotě zpětného toku pod argonovou atmosférou. Výsledný roztok byl míchán po dobu 18 hodin, potom byl koncentrován za sníženého tlaku. Silikagelová chromatografie (2% - 10% CH3OH/CH2CI2) dala sloučeninu z názvu (l,2g) :
MS (ES) m/e 400,2 (M + H)+.
Byl také odebrán nezreagovaný methyl (±)-8-hydroxy-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát (0,4 g).
b) Ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Směs methyl (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-l-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (1,2 g, 3 mmol), 1,2 g 10% paládia na aktivním uhlí (1,2 g) , cyklohexenu (3 ml, 15 mmol) a ethanolu (20 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 18 hodin. Směs byla filtrována a filtrát byl koncentrován. Residuum bylo • · · ·
- 122 ·· · ·* · • ·
Λ · · · čištěn chromatograf ií na silikagelu (2% - 5% CH3OH/CH2CI2) a tím se získala sloučenina z názvu (0,72 g, 64 %) ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 398,2 (M + H)+.
c) (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Směs ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,7 g, 2 mmol), monohydrátu hydroxidu lithného (0,12 g, 3 mmol), 5 ml THF (5 ml) , H2O (5 ml) a MeOH (2 ml) byla míchána při teplotě okolí po dobu 18 hodin, potom byla koncentrována. Residuum bylo rozděleno mezi ethylacetát a vodu a vrstvy byly odděleny. Vodná fáze byla opatrně upravena na pH 4 pomocí 3 N HC1 a ponechána stát. Výsledné krystaly byly shromážděny filtrací a sušeny a tím se získala sloučenina z názvu (0,4 g, 65%) ve formě snědé pevné látky:
MS m/e 370,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C20H23N3O4 . 0,25 H2O: C, 64,25; H, 6,34; N, 11,24.
Nalezeno: C, 64,02; H, 6,37; N, 11,20.
Příklad 2
Příprava ( + )-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl) amino]-1-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny
a) Methyl (±)-8-[3-[2-(4-nitro-N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát • ·· 44 ♦· • · ♦ · 4 4 4 4 • · · 4 4 4 · • 4 · 9 ·· · * · · • 44 · ·
444 4 4 4· 44
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oxid namísto 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N- oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě oranžové pěny: MS (ES) m/e 445,2 (M + H)+.
b) Methyl (±)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(b), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[2-(4-nitro-N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 399,3 (M + H)+.
c) (±) —8 —[3—[(4-Amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kysel-ina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 385, 4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C20H24N4O4 . 1,25 H20: C, 59, 03; H,
6,56; N, 13,76.
Nalezeno: C, 58,80; H, 6,49; N, 13,62.
Příklad 3
- 124 - · • 9 9 9 9 9 • · · · · · 9 9 ·
9 9 9 9 9 9 9
9 · 99 99 9 999
9 9 9 9 9
9 99 9 99 9 9 9 9
Příprava ( + )-8- [3-[ (4-methoxy-2-pyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
a) Methyl (±)—8—[3—[2-(4-methoxy-N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]-4-methoxypyridin-Noxid namísto 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin- N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 430,3 (M + H)+.
b) Methyl (+)-8-[3-[(4-methoxy-2-pyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1(b), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[2-(4-methoxy-N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bledě žlutého oleje:
MS (ES) m/e 414,4 (M + H)+.
c) (±)-8-[3-[(4-Methoxy-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[(4-methoxy-2-pyridyl)amino]-1-
- 125 ···♦ propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin- 4acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bělavé pevné látky:
MS (ES) m/e 400,3 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C21H25N3O5 . 0,75 H2O: C, 61,08; H,
6,47; N, 10,18.
Nalezeno: C, 61,15; H, 6,20; N, 10,12.
Příklad 4
Příprava (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu (252,3 mg, 1,5 mmolu) a diethylazodikarboxylátu (0,24 ml, 1,5 mmolu) v bezvodém DMF (7,5 ml) byl přidán pomalu po kapkách do roztoku methyl (±)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (197,5 mg, 0,75 mmolu) a trifenylfosfinu (413,1 mg, 1,58 mmolu) v bezvodém DMF (7,5 ml) při teplotě zpětného toku. Adice vyžadovala 15 minut a byla mírně exothermická. Po uplynutí 2 hodin byla reakční směs koncentrována a residuum bylo znovu koncentrováno z xylenů. Silikagelová chromatografie (2:2:1 EtOAc/CHCl3/MeOH) dala Rf 0,48 (TLC v 2:2:1 EtOAc/CHCl3/MeOH) materiálu ve formě kalného takřka bezbarvého oleje. Olej byl rechromatografován na silikagelu • ·· · (absolutní EtOH) a tím se získala sloučenina z názvu (243,9 mg, 79%) ve formě bělavé pěny:
TLC (absolutní EtOH) Rf 0,33;
1H NMR (250, CDC13) δ 8,12 (app. dd, 1 H) , 7,10-7,23 (m, 1 H) , 6,90-7,10 (m, 2 H) , 6,78 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1 H) ,
6, 45 - 6,72 (m, 3 H) , 5,28 (d, J = 16,3 Hz, 1 H) , 3,95 4,25 (m, 2 H), 3,60 - 3,90 (m, 1 H), 3,76 (d, J = 16,3 Hz, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,51 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,73 - 3,15 (m, 3 H) , 3,04 (s, 3 H), 2,41 (dd, J = 16,7, 5,4 Hz, 1 H), 2,05 - 2,28 (m, 2 H);
MS (ES) m/e 414 (M + H)+.
b) Methyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Směs methyl (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1-propyloxy]2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (243,9 mg, 0,59 mmolu), cyklohexenu (0,60 ml, 5,9 mmolu) a 10% Pd/C (63 mg, 0,06 mmolu) v 2-propanolu (6 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 21,5 hodin byla reakční směs ochlazena na teplotu zpětného toku a filtrována přes celit®. Filtrát byl koncentrován a residuum bylo znovu koncentrováno z toluenu. Silikagelová chromatografie (5 % MeOH v 1:1 EtOAc/CHCl3) poskytla sloučeninu z názvu (212,8 mg, 91%) ve formě bezbarvého oleje:
TLC (5 % MeOH v 1:1 EtOAc/CHC13) Rf 0,39;
1H NMR (250, CDCI3) δ 8,03 - 8,13 (m, 1 H) , 7,35 - 7,48 (m,
H) , 7,00 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,77 (dd, J = 8,4, 2,5 Hz,
H) , 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) , 6,52-6, 62 (m, 1 H) , 6,40 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 5,27 (d, J = 16,3 Hz, 1 H) , 4,624,82(m, 1 H) , 3, 95-4,20 (m, 2H) , 3,60-3,90(m, 2 H) , 3,71
- 127 ···· ·· ·· • · · « • · · · ·· · ··· • · (s, 3 Η), 3,50 (q, J = 6,3 Hz, 2 H), 2,75 - 3,15 (m, 3 H) , 3,03 (s, 3 H) , 2,40 (dd, J = 16,7, 5,3 Hz, 1 H), 2,00-2,22 (m, 2H) ;
MS (ES) m/e 398 (M + H)+.
c) (±)-8-[3-(2-Pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina 1,0 N LiOH (0,80 ml, 0,80 mmolu) byl přidán do roztoku methyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (207,5 mg, 0,52 mmolu) v THF (2,6 ml) a H2O (1,8 ml) při teplotě zpětného toku. Původně kalný roztok se stal homogenním v průběhu 1 minuty. Po uplynutí 18 hodin byla reakční směs okyselena TFA (0,12 ml, 1,56 mmolu) a koncentrována. ODS chromatograf ie (20% CH3CN/H2O obsahující 0,1% TFA), koncentrace a lyofilizace poskytla sloučeninu z názvu (252,4 mg, 83%) ve formě žluté hygroskopické pevné látky: HPLC (PRF-1®, 20% CH3CN/H2O obsahující 0,1% TFA) K’ =2,4;
XH NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,83 - 7,93 (m, 1 H) , 7,76 - 7,83 (m, 1 H), 7,00 - 7,11 (m, 2 H), 6,83 - 6,91 (m, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1 H) , 6,76 (d, J = 2,6 Hz, 1 H) , 5,30 (d, J = 16,5 Hz, 1 Hj , 4,05 - 4,18 (m, 2 H) , 3,94 (d, J = 16,5 Hz, 1 H), 3,77 - 3,90 (m, 1 H), 3,57 (t, J = 6,8 Hz, 2 H) , 3,03 (dd, J = 17,0, 4,2 Hz, 1 H) , 2,99 (s, 3 H) , 2,83 (dd, J = 17,0, 9,1 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 17,0 13,5 Hz, 1
H) , 2,44 (dd, J = 17,0, 4,7 Hz, 1 H), 2,11 - 2,23 (m, 2 H); MS (ES) m/e 384 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C2iH25N3O4 . 1,5 CF3CO2H . 1,5 H2O: C, 49,57; H, 5,11; N, 7,23.
Nalezeno: C, 49,65; H, 4,95; N, 7,15.
- 128
Φ · φ φ φ φ φ φ φφφφ φ φφ φφφ φφφ φ φ φ φ φφ φφ φφ
Příklad 5
Příprava (±)-8-[3-(2-imidazolylamino)-1-propyloxy]-3-οχο2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Sloučenina z názvu je obecně připravena způsobem, detailně popsaném v Příkladech 1-4.
Příklad 6
Příprava (±)-8- [3-[2-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidinyl)amino]1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octové kyseliny
a) Methyl (±)-8-[3-(terč.-butoxykarbonylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Roztok 3-[(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propanolu (0,14 g, 0,8 mmol) a diethylazodikarboxylátu (0,13 ml, 0,8 mmolu) v bezvodém DMF (2 ml) byl přidán po kapkách do roztoku methyl (±) -8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu (0,10 g, 0,4 mmolu) a trifenylfosfinu (0,21 g, 0,8 mmol) v bezvodém DMF (1,4 ml) a bezvodého THF (2 ml) při teplotě zpětného toku pod argonovou atmosférou. Výsledný roztok byl míchán po dobu 18 hodin, potom byl koncentrován za sníženého tlaku. Silikagelová chromatografie (1% - 3% MeOH/CHzCl2) poskytla sloučeninu z názvu (0,llg):
MS (ES) m/e 407,3 (M + H)+.
·· ·
- 129 ·· ·· ··
9 9 9 9 9 · 9 9 9 · · · ··· ···
9 9 9
99 99
b) Methyl (±)-8-(3-amino-l-propyloxy)-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát, trifluoracetátová sůl Roztok methyl (±)-8-[3-(terč.-butoxykarbonylamino)-1propyloxy]-3-oxo- 2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4~ acetátu (0,70 g) v CH2CI2 (7 ml) a TFA (2 ml) byl míchán pod argonovou atmosférou při teplotě 0 °C po dobu 1 hodiny, potom byl koncentrován a tím se získala sloučenina z názvu (0,75 g, 100%) ve formě bezbarvého skla:
MS (ES) m/e 321,4 (M + H)+.
c) Methyl (±)-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Směs trifluoracetátové soli methyl (+)-8-(3-amino-lpropyloxy ) -3-ΟΧΟ-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu (0,75 g, 2 mmol), 2-brompyrimidinu (0,5 g, 3 mmol), NaHCC>3 (1,4 g, 17 mmol) a EtOH (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 24 hodin byla směs byla filtrována a nerozpustný materiál byl promýván MeOH. Filtráty a promyté látky byly sloučeny a koncentrovány a residuum bylo čištěno chromatografií na silikagelu (1%-6% MeOH/CH2Cl2) a tím se získala sloučenina z názvu (0,54 g, 82 %) ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 385,5 (M + H)+.
d) (±)-8-[3-[(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
Směs methyl (+)-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát (0,36 g, 0,94 mmol), 4 M HC1 v dioxanu (0,25 ml, 1 mmol), 10% paládiem na aktivním uhlí (0,24 g, 0,24 mmol) a MeOH (5 ml)
- 130 ···· ·· ·· ··
9 1111
9 1119
I 9 9 111 19 1
II 11
11 11 byl míchán pod vodíkovým balónkem. Po uplynutí 18 hodin byla směs filtrována a filtrát byl koncentrován. Residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a vodný K2CO3. Precipitovaná pevná látka byla shromážděna filtrací a sušena a tím se získala sloučenina z názvu ve formě bílé pevné látky:
MS m/e 375,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C19H26N4O4 . 2,5 H2O: C, 54,40; H,
7,45; N, 13,35.
Nalezeno: C, 54,68; Η, 7X2; N, 13,39.
Příklad 7
Příprava (±)-8-[3-(6-amino-2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Sloučenina z názvu je obecně připravena způsobem, detailně popsaném v Příkladech 1-4.
Příklad 8
Příprava (±)-8-[2-[6-(methylamino)pyridyl]ethoxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (±)-8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1(a), pouze byl použit 6-(methylamino)-2-pyridylethanol namísto 2-[(3hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 384 (M + H)+.
- 131 tta · • · 9
Β · • « · • · · ·· · ·· • Φ· ·· ·· • · · · · · · · • · · » · · · • · · · ·«· ··« • · » · « »·· »· ♦ · ·<
b) (±)-8-[2-[6-(Methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-οχο2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát methyl namísto ethyl (±)-8-[3-[2-pyridylamino-l-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzodiazepine-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 370 (M + H)+.
Příklad 9
Příprava (±)-8-[2-(2-benzimidazolyl)ethoxy]-3-oxo-2,3 ,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (±)-8-[2-(benzimidazol-2-yl)-1-ethoxy]-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-(benzimidazol- 2-yl)- 1 -ethanol namísto 2—[(3— hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bělavé pevné látky:
MS (ES) m/e 394,4 (M + H)+, 416,3 (M + Na)+.
b) (+)-8-[2-(Benzimidazol-2-yl)-1-ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-8-[2-(benzimidazol-2-yl)-l-ethoxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±)-8-[3-[2-pyridylamino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,50 0 0 0 0 · · 0 ·· ·· ·· · 0 0 0 0 0 0 0 0
0 400 0044
04 0 4 00 00 0 0 0 0
Ο· — · 0 0 4 0 0 “ 40<0>«- 04 000 00 00 00 tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílého prášku:
MS (ES) m/e 380,4 (M + H)+, 402,3 (M + Na)+.
Příklad 10
Příprava (±)-8-[2-(4-aza-2-benzimidazolyl)ethoxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Sloučenina z názvu je obecně připravena způsobem, detailně popsaném v Příkladu 9.
Příklad 11
Příprava (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-(l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2- (2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu (252,3 mg, 1,5 mmolu) a diethylazodikarboxylátu (0,24 ml, 1,5 mmolu) v bezvodém DMF (7,5 ml) byl přidán pomalu po kapkách v průběhu 3-4 minut do roztoku methyl (±)-8-hydroxy-3oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazalin-4-acetátu (248,5 mg, 0,75 mmolu) a trifenylfosfinu (413,1 mg, 1,58 mmolu) v bezvodém DMF (7,5 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 17 hodin byla reakční směs koncentrována a residuum bylo znovu koncentrováno z xylenů/CHCl3. Silikagelová chromatografie ····· * ·« ·· ·· • · · · · · · · · · • · ······· (gradient: EtOAc (500 ml) potom 5% MeOH/CHCl3) poskytla sloučeninu z názvu (253,6 mg, 70%) ve formě bělavé pěny:
XH NMR (250, CDC13) δ 8,11 (dd, J = 6,4, 14 Hz, 1 Η) , 7,107,23 (m, 1 H), 6,93 -7,10 (m, 2 Η), 6,81 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1 Η) , 6,45-6,70(m, 3 Η) , 5,34 (d, J = 16,7 Hz, 1 Η) , 3,75-4,30 (m, 6 Η) , 3,71 (s, 3 Η), 3,51 (q, J = 6,4 Hz, 2 Η) , 2,80 - 3,15 (m, 3 Η), 2,46 (dd, J = 16 8 5,5 Hz, 1 Η), 2,07 - 2,28 (m, 2 H) ;
MS (ES) m/e 482,2 (M + H)+.
b) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetát
Směs methyl (±)-3-oxo-8-[3-(l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu (253,6 mg, 0,53 mmolu), cyklohexenu (0,54 ml, 5,3 mmolu), paládiové černi (11,3 mg, 0,11 mmolu) a isopropanolu (5,3 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 0,5 hodin bylo přidáno 10% Pd/C (28,2 mg, 0,03 mmolu) a po uplynutí 14,5 hodin byla přidána Pd čerň (11,3 mg, 0,11 mmolu) a cyklohexen (0,27 ml, 2,65 mmolu). Po uplynutí dalších 48 hodin byla reakční směs za horka filtrována přes celit® a filtrační vrstva byla promýván horkou směsí 1: 1 MeOH/CHCl3. Koncentrace a rekoncentrace z xylenů zanechala žlutý olej. Silikagelová chromatografie (5% MeOH v 1:1 EtOAc/CHCls) poskytla sloučeninu z názvu (194,0 mg, 79%) ve formě světle žlutého oleje:
TLC (5 % MeOH v 1:1 EtOAc/CHCl3) Rf 0,53;
XH NMR (250, CDCI3) δ 8,08 (dd, J = 5,0, 1,0 Hz, 1 Η) , 7,37
- 7,48 (m, 1 H), 7,02 (d, J = 8,4 Hz, 1 Η), 6,79 (dd, J = 8
2 5 Hz, 1 Η) , 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1 Η), 6,52-6, 62 (m, 1 • ···· · ·· ·· ·· ·· · ·· · · ···· • · ······· * · · · · · · ······
Η), 6,40 (d, J = 8,4 Hz, 1 Η), 5,34 (d, J = 16,6 Hz, 1 Η), 4,60 - 4,80 (m, 1 Η) , 3,75 - 4,30 (m, 6 Η), 3,71 (s, 3 Η), 3,50 (q, J = 6,4 Hz, 2 Η), 2,80-3,15 (m, 3 Η), 2,46 (dd, J = 16,8, 5,4 Hz, 1 Η), 2,00-2,25 (m, 2H) ;
MS (ES) m/e 466 (M + H)+.
c) (±)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
1,0 N LiOH (0,44 ml, 0,44 mmolu) byl přidán do roztoku methyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu (159,5 mg, 0,34 mmolu) v THF (1,7 ml) a H2O (1,3 ml) při teplotě zpětného toku. Žlutá kalná reakční směs se stala homogenní v průběhu 10 minut. Po uplynutí 24 hodin byla reakční směs koncentrována do sucha a žluté residuum bylo rozpuštěno v H2O (4 ml). Roztok byl filtrován, potom byl opatrně neutralizován (pH 7) pomocí 1,0 N HC1. Precipitát byl shromážděn, promýván množstvím H2O a sušen za vysokého vakua při teplotě 40 - 45 °C a tím se získala sloučenina z názvu (130,0 mg, 83%) ve formě bělavé pevné látky:
HPLC (PRP-1®, 25% CH3CN/Li2O obsahující 0,1% TFA) k' = 3,1; XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,91 - 8,00 (m, 1 Η) , 7,28 7,40 (m, 1 Η) , 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1 Η) , 6,76 - 6, 87 (m, 2 Η) , 6,51 - 6,60 (m, 1 Η), 6, 39 - 6, 50 (m, 2 Η), 5,30 (d, J = 16,6 Hz, 1 H), 4,10 - 4,30 (m, 3 Η) , 4,02 (t, J = 6,3 Hz,
Η) , 3,70 - 3, 82 (m, 1 Η), 3,20 - 3, 45 (m, 2 H, částečně zakryto residuálním signálem rozpouštědla), 2,99 (dd, 1 Η),
2,59 - 2,74 (m, 2 Η) , 2,39 (dd, J = 16,9, 4,8 Hz, 1 Η) ,
1,90 - 2,03 (m, 2 H);
• 4 4 4 4
4
4
4 4
- 135 ’τ.·
4 4 4 4 4
4 4 4 4 4
4 4 4 4 4
44 444 444
4 4 4
444 44 44
MS (ES) m/e 452 (M + H)\
Analýza: Vypočteno pro C22H24F3N3O4 . 0,5 H2O: C, 57,39; H, 5,47; N, 9,13.
Nalezeno: C, 57,39; H, 5,18; N, 9,00.
Příklad 12
Příprava (±)-8-[3-(4,6-dimethylpyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (±)-8-[3-(4,6-dimethyl-l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxyj-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4,6-dimethylpyridin-Noxid namísto 2-[(3-hydroxy-I - propyl)amino]pyridin-Noxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 442,3 (M + H)+.
b) Methyl (+)-8-[3-(4,6-dimethylpyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(b), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-(4,6-dimethyl-l-oxopyridin-2ylamino) -1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH2-benzazepín-4-acetát namísto (±)-8-[3-[2-(Noxopyridyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-2benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bledě žluté pevné látky:
• · · ··· · · 4 • · · ί • ♦· ·· ··
MS (ES) m/e 426, 3 (M + H)+.
c) (±)-8-[3-(4,6-Dimethylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[(4,6-dimethylpyridin-2-yl) amino]-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-l H-2benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±)—8—[3—(2— pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 412,2 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C23H29N3O4 . 0,5 HC1 . 0,25 H2O: C,
63, 62; H, 6,96; N, 9,68.
Nalezeno: C, 63,62; H, 6,96; N, 9,69.
Příklad 13
Příprava (±)-8-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-1-ethoxy]-2-methyl3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (±)-8-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-1-ethoxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-(2-aminothiazol-4-yl)ethanol (WO 95/32710) namísto 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 390 (M + H)+.
·· ·· ·· • · · · · · • · · · · · • · · ··· ··· • · · · ·· ·· ··
b) (±)-8-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-1-ethoxy]-2-methyl-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (+)-8-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-1-ethoxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino-l-propyloxy)-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 376 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C18H21N3O4S . 1,3 CF3CO2H . 0,36 H2O: C, 46,62; H. 4,38; N, 7,93.
Nalezeno: C, 46,45; H, 4,57; N, 8,27.
Příklad 14
Příprava (±)-8- [3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2- methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (±)-8-[3-(4-nitro-l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1 (a) , pouze byl použit 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oxid namísto 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxide a byl použit methyl (±)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-8-hydroxy3- oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, byla připravena sloučenina z názvu:
MS (ES) m/e 459 (M + H)+.
- 13» ·>··· «
• · • · ·· • · · · • · · » • ··« ·«» • · »· ··
b) Methyl (±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(b), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-(4-nitro-l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát namísto (±)-8-[3-(4-nitro-N-oxopyridin2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 413 (M + H)+.
b) (±)-8-[3-(4-Aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±-) — 8 — [ 3—(2— pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 399 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C21H26N4O4 . 1,5 CF3CO2H . 0,125 H2O: C 50,62: H. 4,91; N, 9,83.
Nalezeno: C, 50,63; hodin 5,26; N, 9,90.
Příklad 15
Příprava (±) -8-[3-(Pyrimidin-2-ylamino) -1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina • «
- 139 Směs methyl (±)-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-l-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,071 g, 0,18 mmol) a monohydrátu hydroxidu lithného (0,009 g, 2 mmol) v THF (5 ml) a H2O (2 ml) byla míchána při teplotě okolí po dobu 18 hodin, potom byla koncentrována. Residuum bylo rozpuštěno v H2O a pH byl upraveno na 4 pomocí 3 N HC1. Výsledná pevná látka byla shromážděna filtrací a sušena a tím se získala sloučenina z názvu (0,05 g, 73%) ve formě bílé pevné látky:
MS m/e 371,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C19H22N4O4 . 0,5 H2O: C, 60,15; H,
6, 11; N,. 14,77.
Nalezeno: C. 60-14; H, 6,06; N, 14,71.
Příklad 16
Příprava (R) -8- [3-[ (4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová- kyselina
a) Methyl (R)-8-[3-[2-(4-nitro-l-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oxid namísto 2-[ (3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě oranžové pěny: MS (ES) m/e 445,3 (M + H)+.
b) Methyl (R)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát • 9
- 140
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(b), pouze byl použit methyl (R)-8-[3-[2-(4-amino-N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé Pěny:
MS (ES) m/e 399, 4 (M + H)+.
c) (R)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (R)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-l H-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bělavé pevné látky:
[a]D 23 +74,97° (c 1,45, MeOH);
MS (ES) m/e 385,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C20H24N4O4 . HC1 . 1,5 H20: C, 53, 63; H, 6,30; N, 12,50.
Nalezeno: C, 53,87; H, 6,13; N, 12,42.
Příklad 17
Příprava (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
- 141 • 9
9 ·9
a) Methyl (S)-8-[3-[2-(4-nitro-N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oxid namísto 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě oranžové pěny: MS (ES) m/e 445,3 (M 4- H) + .
b) Methyl (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1(b). pouze byl použit methyl (S)-8-[3-[2-(4-amino-N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (+)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 399, 4 (M + H)+.
c) (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bělavé pevné látky:
[a]D 23 - 77,5° (c 1,45, MeOH);
MS (ES) m/e 385,4 (M + H)+.
• ···· · ·· ·· ·· 9» · 4 · · 4 4 4 4 4 • · ···*··· • · · 44 ·· 4 4 4 4 4 4
Analýza: Vypočteno pro C20H24N4O4 . 1,125 H20: C, 59,36; H, 6,54; N, 13,84.
Nalezeno: C, 59,31; H, 6,74; N, 13,73.
Příklad 18
Příprava ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
a) Ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Roztok (±)-8-[3-[ (4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny (0,27 g, 0,7 mmol) a 4 M HC1 v dioxanu (0,2 ml, 8 mmol) v ethanolu (10 ml) byl zahříván na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 72 hodin byla reakční směs koncentrována a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a vodný K2CO3. Organická fáze byla promývána solankou, sušena (MgSO4) . a koncentrována. Residuum bylo rozpuštěno v toluenu (5 ml) a triethylaminu (0,35 ml. 2,5 mmol) a výsledný roztok byl zahříván na teplotu zpětného toku. Po uplynutí 18 hodin byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a tím se získala sloučenina z názvu (0,20 g. 69%) ve formě snědé pěny:
MS (ES) m/e 413,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C22H28N4O4 . 0,25 H20: C, 63,37; H,
6,89; N,13,44.
Nalezeno: C, 63,32; H, 7,17; N, 13,05.
Příklad 19 • ·
- 143 • * · · · · • · · · · · • · · · · · · · · • · · · • · · · · ♦ ·
Příprava (±)-8-[3-[(2-imidazolin-2-yl)amino]-1-propyloxy]2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny
a) Příprava methyl (±)—8—[3—(4— nitrobenzyloxykarbonylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-1-propanol namísto 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu a byl použit methyl (±)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 500,3 (M + H)+.
b) Methyl (±)-8-[3-amino-l-propyloxy]-2-methyl-3-oxo2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Směs methyl (±)-8-[3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu (1,4 g, 3 mmol), 10% paládia na aktivním uhlí (0,55g, 0,6 mmol) a EtOH (20 ml) byla míchána při teplotě zpětného toku pod atmosférou vodíku. Po uplynutí 18 hodin byla směs filtrována a filtrát byl koncentrován a tím se získala sloučenina z názvu (0,89 g, 99%) ve formě snědé pevné látky:
MS (ES) m/e 321,4 (M + H)+.
c) Methyl(±)-8-[3-[(2-imidazolin-2-yl)amino]-1-propyloxy]2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
144 • · • · • · • · Λ ·
Směs methyl (±)-8-[3-amino-l-propyloxy]-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,3 g, 1 mmol), 2-methylthioimidazolinu (0,46g, 2 mmol), diisopropylethylaminu (0,42 ml, 2 mmol) a dimethylacetamidu (3 ml) byla zahřívána na teplotu 100 °C pod argonovou atmosférou. Po uplynutí 2 hodin byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi CHC13 a H2O. Organická fáze byla sušena (MgSO4) a koncentrována a residuum bylo čištěno preparativní HPLC a tím se získala sloučenina z názvu (0,24 g, 51%) ve formě žlutého oleje:
MS (ES) m/e 389,4 (M + H)+.
d) (±)-8-[3-[(2-imidazolin-2-yl)amino]-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Methyl(±)-8-[3-[(2-imidazolin-2-yl)amino]-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4.-acetát byl saponifikován způsobem podle Příkladu l(c). Čištění preparativní HPLC poskytlo sloučeninu z názvu ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 375,4 (M + H)+.
Analýza vypočteno pro: C2iH26N4O4 . 1,96 CF3CO2H: C, 46, 08;
H, 4,73; N, 9,39;
Nalezeno: C, 46,37; H, 4.53; N, 9,01.
Příklad 20
Příprava (±)-8-[3-[(4,5,6,7-tetrahydro-lH-2-diazepin-2yl)amino]-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2, 3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-octová kyselina • 4
145 • 4 4 4 · ·* ··· · · ·· · • 44 4 · 4 · • · · · 4·· 444 • · · 4 4 «·· 44 4 · ··
a) Methyl (±)-8-[3-[(2-diazepin-2-yl)amino]-1-propyloxy]-2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu 19(c), pouze byl použit 2-methylthio-1,3-diazepin namísto 2methylthioimidazolinu, byla připravena sloučenina z názvu: MS (ES) m/e 417,4 (M + H)+.
b) (±)-8-[3-[(2-diazepin-2-yl)amino]-1-propyloxy]-2-methyl3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu 19(d), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[(2-diazepin-2-yl)amino]-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát namísto (±)-8-[3-[(2-imidazolin-2yl) amino]-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetátu, sloučeninu z názvu byla připravena:
MS (ES) m/e 403,4 (M + H)+.
Příklad 21
Příprava (±)-3-oxo-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-(4-methyl-l-oxopyridin-2-ylamino)1- propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH2- benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(a), pouze byl použit 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-methylpyridin-N-oxid namísto 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxide a byl • ·« ·
- 146
použit methyl (±)-3-oxo-8-hydroxy-2-(2,2,2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)—8 — hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, byla připravena sloučenina z názvu:
MS (ES) m/e 496, 3 (M + H)+.
b) Methyl(±)-3-oxo-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(b), pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-(4-methyl-l-oxopyridin-2ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-8-[3-[2-(Noxopyridyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH2-benzazepin-4-acetátu, byla připravena sloučenina z názvu: MS (ES) m/e 480,2 (M + H)+.
c) (±)-3-OXO-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát namísto ethyl ( + )-8-(3-(2pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu, byla připravena sloučenina z názvu:
MS (ES) m/e 466,2 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C23H26F3N3O4 . 0,5 H2O: C, 58,22; H, 5,74; N,8,86.
Nalezeno: C, 58,54; H, 5,58; N, 8,64.
- 147 •Β ΒΒΒΒ
Β β Β Β Β · Β Β Β
ΒΒΒ · Β Β · • · · · ΒΒ Β · Β Β · Β • Β Β Β Β Β
ΒΒΒ ΒΒ ΒΒ ΒΒ
Příklad 22
Příprava (+)-3-οχο-8-[3-[Ν-(pyridin-2-yl)-Ν-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octové kyseliny (a) Methyl (±)-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1(b), pouze byla použita methyl (±)-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terc.butoxykarbonyl) amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina namísto (±)—8— [3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 484,4 (M + H)+.
(b) (±)-3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl) amino] -1-propyloxy] -2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1 (c), pouze byla použita methyl (±)-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílého prášku:
MS (ES) m/e 470,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C25H30NaN3O6 . 3,25 H2O: C. 54,59; H, 6,69: N, 7,64.
- 148 - · · ·
-L “ flflfl ·· • fl ·· ·· • · · · · fl • · · · · · fl flfl ·· · * · · • fl · · • flfl ·· ♦·
Nalezeno: C, 54,47; H, 6,32; N, 7,95.
Příklad 23
Příprava (1) -8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy] -3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina (a) (±)-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1 (c), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±)—8—[3— (2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílého prášku:
XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6,6-8,3 (m, 8 H) , 3,7-4,6 (m, 3 H) , 3,3-3,6 (m, 5 H) , 1,8-3,0 (m, 5 H) , 1,6 (s, 6 H) , 1,3 (s, 3 H) ;
MS (ES) m/e 486,4 (M + H)+.
Příklad 24
Příprava (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-d)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy] -2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
149
00
00 » 0 0 0 ► 0 0 0
000 000
0 «0 (a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Roztok methyl (±)-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny (0,4 g, 0,8 mmol) v DMF (5 ml) byl ochlazen na teplotu -20 °C (lázeň CCl4/suchý led) a byl přidán po kapkách (TMS)2NLi (1,0 M roztok v THF, 0,9 ml, 0,9 mmol). Po uplynutí 10 minut byl přidán roztok 4-trifluormethylbenzylbromidu (0,211 g, 0,88 mmol) v DMF (0,5 ml). Roztok byl míchán pod argonovou atmosférou při teplotě -20 °C po dobu 10 minut a potom při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin. Roztok byl koncentrován a residuum bylo vyjmuto v EtOAc a promýváno postupně 5% NaHCCb (2 χ), H2O (1 χ), 5% kyselinou citrónovou (2 χ), H2O (1 x) a solankou (1 x). EtOAc vrstva byla sušena (MgSO4) a koncentrována a tím se získala sloučenina z názvu (0,42 g, 80%):
MS (ES) m/e 658,3 (M + H)+.
(b) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(b), pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto ethyl (+)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzazepin-4-acetátu,
99 99
9 9 9 9
9 9 9 9
9 999 999
9 9
9999
- 150 ·· · 9 9 sloučenina z názvu (0,321 g, 78%) byl připravena ve formě čirého oleje:
MS (ES) m/e 642,3 (c) (±)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bělavé pevné látky:
MS (ES) m/e 628,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C33H36F3N3O6 . 0,5 H2O: C, .62,25; H, 5,86; N, 6,60.
Nalezeno: C, 62,01; H, 5,92; N, 6,81.
Příklad 25
Příprava (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina (a) (±)-3-ΟΧΟ-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina ····
- 151 • · • ·· ·♦ ·· • · · · • · · · • ·· · · · · • · • · ·· (±) -3-OXO-8-[3-[Ν-(pyridin-2-yl)-N-(terč. butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina (0,158 g, 0,25 mmol) byla zpracovávána 4 M HC1 v dioxanu (3 ml) při teplotě zpětného toku po dobu 1 hodiny, potom byl roztok koncentrován. ODS chromatografie (gradient 5-M% CH3CN/Li2O obsahující 0,1% TFA v průběhu 1 hodiny), koncentrace a lyofilizace poskytla sloučeninu z názvu (0,117 g, 82%):
MS (ES) m/e 528,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C28H28N3O4 . 1 CF3CO2H . 1,5 H2O: C, 53,89; H, 4,82; N. 6,28.
Nalezeno: C, 53,55; H. 4,55: N, 6.04.
Příklad 26
Příprava (±)-2-methyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(methyl) amino] -1-propyloxy] -2,3,4,5-tetrahydro-lH-'2benzazepin-4-octová kyselina (a) Methyl ( + )-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)-N-(methyl) amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-methyl-benzazepin4-acetát
Roztok methyl (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu (1,5 g, 3,8 mmol) v DMF (10 ml) byl ochlazen na teplotu -20 °C po argonovou atmosférou a byl přidán po kapkách (TMS)2NLi (1,0 M roztok v THF, 8 ml, 8 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě -20 °C po dobu 30 minut, potom byl přidán CH3I (0,5 ml, 7,6 mmol). Roztok byl míchán při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin, potom ···· « ·· ·* ·· • · · · · 4 « · 4
444 4444
4 4 44 44 4 444
4 4 4 4 4 4 byl koncentrován. Silikagelová chromatografie (10% MeOH/CH2Cl2) poskytla sloučeninu z názvu (1 g, 62%) :
MS (ES) m/e 428,4 (M + H)+.
(b) Methyl (+)-2-methyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(methyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 1 (b), pouze byl použit methyl (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)-N-(methyl)amino]1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2methylbenzazepin-4-acetát namísto ethyl (±)—8—[3—(2— pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,7 g, 73%):
MS (ES) m/e 412,4 (M + H)+.
(c) (±)-2-Methyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(methyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-2-methyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(methyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu, byla připravena surová sloučenina z názvu. Čištění pomocí ODS chromatografie (5-60% CH3CN/H2O obsahující 0,1% TFA v průběhu 1 hodiny). Koncentrace a lyofilizace poskytla sloučeninu z názvu:
MS (ES) m/e 398,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C22H27N3O4 . 1,5 CF3CO2H . 0,25 H2O: C, 52,40; H, 5,10; N, 7,33.
• 0
- 153.
Nalezeno: C, 52,09; H, 5,26; N, 7,20.
Příklad 27
Příprava (±)-2-benzyl-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina (a) Methyl (±)-2-benzyl-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24 (a), pouze byl použit benzyl bromid namísto 4-trifluormethylbenzyl bromidu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,105 g, 20%) :
MS (ES) m/e 590,4 (M + H)+.
(b) Methyl (±)-2-benzyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5tetrahydro- lH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(b), pouze byl použit methyl ( + )-2-benzyl-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]- 2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,045 g, 44%):
MS (ES) m/e 574,4 (M + H)+.
- 154
4 4 4
(c) ( + )-2-Benzyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-2-benzyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±)—8—[3— (2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,044 g, kvantitativně):
MS (ES) m/e 560,3 (M + H)+.
(d) (±)-2-Benzyl-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 25(a) pouze byla použita (±)-2-benzyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N(pyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octové kyseliny, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,014 g, 40%):
MS (ES) m/e 460,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C27H29N3O4 . CF3CO2H . 2 H2O: C, 57,14; H, 5,62: N, 6,89.
Nalezeno: C, 57,44: H, 5,32; N, 6,87.
Příklad 28 • · · ·
- 15¾
Příprava (±)-2-(karboxymethyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2ylamino)-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina (a) Methyl (±)-2-(terč.-butoxykarbonylmethyl)-3-oxo-8-[3[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(a) pouze byl použit terc.-butyl bromacetát namísto 4trifluormethylbenzylbromidu, tím byla připravena sloučenina z názvu (1,0 g, 80%):
MS (ES) m/e 614,4 (M + H)+.
(b) Methyl (+)-2-(terč.-butoxykarbonylmethyl)-3-oxo-8-[3[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(b) pouze byl použit methyl (±)-2-(terč.-butoxykarbonylmethyl)-3-oxo-8[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,72 g, 77%) :
MS (ES) m/e 598,4 (M + H)+.
(c) Methyl (±)-2-(karboxymethyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2ylamino)-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
- 156.
• to to · toto * · ···· • to · · ♦ to • · · ··· ··· ·· ·· • to «· «to
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 25(a) pouze byl použit methyl (±)-2-(terč.-butoxykarbonylmethyl)-3-oxo-8[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octové kyseliny, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,57 g, kvantitativně):
MS (ES) m/e 442,3 (M + H)+.
(d) (±)-2-(Karboxymethyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-2-(karboxymethyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2ylamino)-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,30 g, 56%) :
MS (ES) m/e 428,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C22H25N3O6 . 2 H2O: C, 57,01; H, 6,31; N, 9,07.
Nalezeno: C, 57,27; H, 6,24; N, 8,86.
Příklad 29
Příprava (±)-2- (4-aminobenzyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2ylamino)-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
- 157.h
0 0 0 • · 0 0 0 0 • · 0 · · · • 0 0 0 0 0 0 0 0 • · 0 0 • · 0 0 0 0 (a) Methyl(±)-2-(4-nitrobenzyl)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(a), pouze byl použit 4-nitrobenzylbromid namísto 4trifluormethylbenzylbromidu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,284 g, 69%):
MS (ES) m/e 635,3 (M + H)+.
(b) Methyl(±)-2-(4-aminobenzyl)-3-οχο-δ-[3-[N-(1-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(b) pouze byl použit methyl (±)-2-(4-nitrobenzyl)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-3οχο-δ- [3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,104 g, 40%) :
MS (ES) m/e 589,3 (M + H)+.
(c) (±)-2-(4-Aminobenzyl)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy] -2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-2-(4-aminobenzyl)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto ethyl • · • · · • ♦ o ·
- 158 (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,08g, 79%) :
MS (ES) m/e 575,4 (M + H)+.
(d) (±)-2-(4-Aminobenzyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-yl-amino)1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 25(a) pouze byla použita (±)-2-(4-aminobenzyl)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina namísto (+)-3oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-octové kyseliny, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,029 g, 44%):
MS (ES) m/e 475,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C27H30N4O4 . 2 CF3CO2H . l,-5 H20: C,
51,03; H, 4,83; N, 7,68.
Nalezeno: C, 50,92; H. 4,78: N, 7,64.
Příklad 30
Příprava (±)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(benzoyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina (a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-(l-oxo-pyridin-2-yl)amino-1propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát • ·
- 159.
• · · · · · • · · · · · • · · · · · · · · • » · · • · · · · · ·
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 25 (a), pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2, 3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octové kyseliny, tím byla připravena sloučenina z názvu (1,9 g, 90%):
MS (ES) m/e 558,3 (M + H)+.
(b) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-yl)amino-l-propyloxy]2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(b), pouze byl použit methyl (+)-3-oxo-8-[3-(l-oxo-pyridin-2-yl)amino-lpropyloxy] -2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(1oxopyridin-2-yl)-N-(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,40 g, 88%):
MS (ES) m/e 542,3 (M + H)+.
(c) Methyl(±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(benzoyl)amino]-1-propyloxy]-2- (4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Benzoylchlorid (0,094 ml, 0,8 mmol) byl přidán po kapkách do roztoku methyl (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-yl)amino-lpropyloxy] -2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetátu (0,4 g, 0,74 mmol) a
- 160··» diisopropylethylaminu (0,5 ml, 2,9 mmol) v CH2C12 (10 ml). Po uplynutí 18 hodin byl roztok koncentrován a residuum bylo čištěno silikagelovou chromatografií (1:1 EtOAc/hexan) a tím se získala sloučenina z názvu (0,293 g, 61%):
MS (ES) m/e 646,2 (M + H)+.
(d) (±)-3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(benzoyl)amino]-1propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydroΙΗ-2-benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c) pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(benzoyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3, 4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±) -8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, byla připravena surová sloučenina z názvu. Čištění ODS chromatografií (10— 80% CH3CN/Li2O obsahující 0,1% TFA v průběhu 1 hodiny), koncentrace a lyofilizace poskytla sloučeninu- z názvu (0,025 g, 10%):
MS (ES) m/e 632,4 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C35H32F3N3O5 . 0,85 CF3CO2H: C, 60,50; H, 4,54; N, 5,74.
Nalezeno: . C, M.22; H. 4,35; N, 5,77.
Příklad 31
Příprava (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč. butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
- 161 (a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N-(terč.butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Roztok terč.-butyloctové kyseliny (0,228 ml, 1,2 mmol) v CH2CI2 (10 ml) byl zpracován oxalylchloridem (1 ml, 11,4 mmol), následovaným DMF (0,0005 ml, 0,06 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě zpětného toku po dobu 1,5 hodiny, potom byla koncentrována. Residuum bylo vyjmuto v CH2CI2 (5 ml) a bylo přidáno po kapkách do roztoku methyl (±) -3-ΟΧΟ-8-[3-(l-oxo-pyridin-2-yl)amino-l-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu (0,35 g, 0,6 mmol) a Et3N (0,5 ml, 2,4 mmol) v CH2CI2 (10 ml) . Po uplynutí 18 hodin byl roztok promýván postupně H2O (1 x) , 5% NaHCC>3 (2 χ) , H2O (1 x) , 5% kyselinou citrónovou (2 χ) , H2O (1 x) a nasyceným NaCl (1 x) . Organická vrstva byla koncentrována a tím se získala sloučenina z názvu (0,4 g, 97%):
MS (ES) m/e 656, 4 (M + H)+.
(b) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(b), pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N(terc.-butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy] -2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,22 g, 56%) :
• 9
- 162 • 99 9
999 999 ·
• 9 9 9
MS (BS) m/e 642, 3 (M + H)+.
(c) (+)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto ethyl (±) -8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát, byla připravena surová sloučenina z názvu. Čištění ODS chromatografií (10-80% CH3CN/Li2O obsahující 0,1% TFA v průběhu 1 hodiny), koncentrace a lyofilizace poskytla sloučeninu z názvu (0,022 g, 10 %):
MS (ES) m/e 626, 4 (M + H) + .
Analýza: Vypočteno pro C34H38F3N3O5 . 1 H2O: C, 63,44; H,
6,26; N, 6,53.
Nalezeno: C, 63,24; H, 5,96; N, 6,39.
Příklad 32
Příprava (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina (a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát • ·· ·
- 163 .-:. ·..·
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 30(c), pouze byl použit isobutylchlormravenčan namísto benzoylchloridu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,47 g, 80%):
MS (ES) m/e 658,3 (M + H)+.
(b) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24 (b), pouze byl použit methyl(±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,4 g, 63%) :
MS (ES) m/e 642,3 (M + H)+.
(c) (±)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu l(c), pouze byl použit methyl(±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto ethyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, byla připravena surová sloučenina z názvu. Čištění ·♦· ·
- 164 » · · > · · ··· «
ODS chromatografií (10-80% CH3CN/H2O obsahující 0,1% TFA v průběhu 1 hodiny), koncentrace a lyofilizace poskytla sloučeninu z názvu (0,008g, 20%):
MS (ES) m/e 628,3 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C33H36F3N3O6 . 0,25 CF3CO2H . 0,5 H2O: C, M.49; H, 5,64; N, 6,32.
Nalezeno: C, 60,78; H, 5,50; N, 6,28.
Příklad 33
Příprava (S)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octové kyseliny (a) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu I (a), pouze byl použit methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát namísto (±)-8-hydroxy-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (3,0 g, 83%) :
MS (ES) m/e 500,3 (M + H)+.
(b) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(a), pouze byl použit methyl (S)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-
- 165 • · · ·· tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto methyl-(±)-3oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (2,3 g, 72%):
MS (ES) m/e 658,2 (M + H)+.
(c) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(b), pouze byl použit methyl (S)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxo-pyridin-2-yl)-N(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(terc.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl) -2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benz-azepin-4acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (1,1 g, 50%) :
MS (ES) m/e 642,1 (M + H)+.
(d) (S)-3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 24(c) pouze byl použit methyl (S)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl) -N-(terč.- 166 ···· • Β· ·· · · · ·· ·· • β Β Β
Β · Β Β
Β Β«· ΒΒΒ
Β Β
ΒΒ ΒΒ butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,8 g, 60%) :
MS (ES) m/e 628,1 (M + H)+.
(e) (S) -3-OXO-8-[3-(pyridin-2-yl-amino)-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 25 (a) pouze byla použita (S)-3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terc.butoxykarbonyl) amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octové kyseliny, byla připravena surová sloučenina z názvu. Čištění ODS chromatografií (30% CH3CN/LÍ2O obsahující 0,1% TFA v průběhu 1 hodiny), koncentrace a lyofilizace dala sloučeninu z názvu (0,657 g, 72%) sloučenina:
[a]D -42° (c 1, 0, MeOH) ;
MS (ES) m/e 528,1 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C28H28 F3N3O4 . 2 CF3CO2H . 3,75 H2O: C, 46,69; H, 4,59; N, 5,10.
Nalezeno: C, 46,47; H, 4,58; N, 5,48.
Příklad 34
Příprava methyl (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu
4··· • · 44 <4 · · 4 4 «4 4*44 <4 ·φ| 44 4 •4 4 4 (a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát Postupovalo se podle procedur, uvedených v Příklad l(b), pouze byl použit isopropanol namísto ethanolu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,35 g, 76%):
MS (ES) m/e 384,4 (M + H)+.
Příklad 35
Příprava (S)-3-oxo-8-[3-(1,4,5, 6-tetrahydropyrimid-2ylamino)-1-propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny
a) Methyl (S)-8-[3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2- [4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5tetrahydro-1H-2-benzazepin-4-acetát
Do methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]2,3, 4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,14 g, 0,34 mmol) a Ph3P (0,13 g, 0,50 mmol) v CH2C12 (2 ml) při teplotě 0 °C byl přidán po kapkách roztok 3-(4nitrobenzyloxykarbonylamino)-1-propanolu (0,13 g, 0,51 mmol) a diethylazodikarboxylátu (0,08 ml, 0,50 ml). Když bylo přidávání ukončeno, ledová lázeň byla odstraněna a reakční směs byla míchána při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 18 hodin bylo rozpouštědlo odstraněno a produkt byl izolován mžikovou chromatografií na silikagelu (100% CHC13 to 5% MeOH/CHCl3) a tím se získala sloučenina z názvu (0,12 g) ve formě čirého olej.
ΤΗ NMR (400 MHz, CDC13) δ 8,18 (d, J = 8,2 Hz 2H) , 7,65 (m, IH) , 7,50 (m, 5H) , 7,40 (d, J = 8,2 Hz, IH) , 7,03 (d, J = 9,8 Hz, IH), 6,70 (m, IH), 6,30 (s, IH), 5,23 (m, 3H), 4,95
- 168 ·· · ··· • · • # · · (d, J = 16,4 Hz, 1H) , 4,50 (d, J = 16,4 Hz, 1H) , 3,95 (m, 3H) , 3,78 (s, 3H), 3,70 (m, 1H), 3,45 (m, 2H) , 3,15 - 2,90 (m, 3H), 2,50 (dd, J = 19,2, 5,5 Hz, 1H), 1,95 (m, 2H).
b) Methyl (S)-8-(3-amino-l-propyloxy)-3-oxo-2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetát
Do methyl (S)-8-[3-(4-nitrobenzyloxykarbonylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,12 g, 0,19 mmol) v MeOH (2 ml) bylo přidáno 10% Pd/C (20 mg). Reakční nádoba byl propláchnuta vodíkem a potom připevněna k balónku, obsahujícímu vodík. Po uplynutí 4,5 hodin byl vodík odsát a katalyzátor byl odstraněn filtraci přes celit . Odstranění rozpouštědla poskytlo sloučeninu z názvu (0,09 g) ve formě bledě žlutého residua. Tento materiál byl používán bez dalšího čištění.
MS (ES) m/e 465,3 (M + H)+.
c) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát
Roztok methyl (S)-8-(3-amino-l-propyloxy)-3-oxo-2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetátu (0,09 g, 0,19 mmol), 2-brompyrimidinu (0,09 g, 0,57 mmol) a diisopropylethylaminu (0. 17 ml, 0,98 mmol) v DMF (2 ml) byl zahříván při teplotě 80 °C po dobu 18 hodin. Reakční směs byla ponechána ochladit se na teplotu zpětného toku a byla koncentrována a tím se získalo žluté residuum. Mžiková chromatografie na silikagelu (2% • · · ·
,MeOH/EtOAc) poskytla sloučeninu z názvu (42 mg) ve formě čirého oleje.
MS (ES) m/e 543, 1 (M + H)+.
d) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-(3,4,5, 6-tetrahydropyrimid-2ylamino) -1-propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Parrovo hydrogenační zařízení bylo naplněno methyl (S)-3oxo-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetátem (42 mg, 0,08 mmol), ledovou octovou kyselinou (2 ml), koncentrovaným HC1 (0,2 ml) a 10% Pd/C (10 mg). Směs byla protřepávána pod vodíkovou atmosférou (40 psi) po dobu 5 hodin, potom byl vodík odsát a katalyzátor byl odstraněn filtrací přes celit®. Odpaření rozpouštědel poskytla surovou sloučenina z názvu (52 mg) ve formě tmavého residua. Residuum bylo používáno bez dalšího čištění.
MS (ES) m/e 547,2 (M + H)+.
e) (S)-3-OXO-8-[3-(3,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydroΙΗ-2-benzazepin-4-octová kyselina
Do surového methyl (S)-3-oxo-8-[3-(3,4,5,6tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetátu z Příkladu 35d v EtOH (1 ml) byl přidán 1 N NaOH (0,25 ml, 0,25 mmol). Po ukončení míchání při teplotě zpětného toku po dobu 8,5 hodin byla reakce ukončena přidáním 1 N HC1 (0,25 ml, 0,25 mmol). Odstranění rozpouštědla poskytlo bledě žlutou pevnou látku. Preparativní HPLC s obrácenými fázemi (Hamilton PRP-1®, 30% • · · · • · · • · · • · · · fl fl
- 170
CH3CN/LÍ2O obsahující 0,1% TFA) poskytla sloučeninu z názvu (18,1 mg) ve formě bílého prášku.
MS (ES) m/e 533,3 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C27H31N4F3O4 . 2 H2O . 2 CF3CO2H: C,
46,74; H, 4,68; N, 7,03.
Nalezeno: C, 46,34; H, 4,31; N, 6,82.
Příklad 36
Příprava (±)-3-oxo-8-[3-(N-(pyridin-2-yl)-N-(methyl)amino)1-propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny
a) Methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(methyl)amino]-1-propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina Postupovalo se způsobem podle Příkladu 25 (a) , pouze byl použit methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(terč.-butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát namísto (±)-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octové kyseliny, byla připravena HC1 sůl. Tento materiál byl přeměněn na volnou bázi rozdělením mezi EtOAc a 5% NaHCO3. EtOAc vrstva byla oddělena a koncentrována a tím se získala sloučenina z názvu (4,1 g, 100%):
MS (ES) m/e 558,3 (M + H)+.
171 ··4 4·4
b) Methyl(±)-3-oxo-8-[3-(N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-methylamino) -1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 26 (a) , pouze byla použita methyl (±)-3-oxo-8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(methyl)amino]-1-propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina namísto (±)-8-[3-[2-(N-oxopyridyl)amino]-1-propyloxy]-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (3,0 g, 94%):
MS (ES) m/e 572,3
c) Methyl(±)-3-oxo-8-[3-(N-(pyridin-2-yl)-N-(methyl)amino) 1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 4 (b), pouze byl použit methyl(±)-3-oxo-8-[3-(N-(l-oxopyridin-2-yl)-N(methyl)amino)-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl) 2.3.4.5- tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-8[3-[2-[N-(oxopyridyl)amino]-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo2,3, 4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,32 g, M%):
MS (ES) m/e 556,2 (M + H)+.
d) (±)-3-ΟΧΟ-8-[3-(N- (pyridin-2-yl)-N-(methyl)amino)-1propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 4 (c) , pouze byl použit methyl(±)-3-oxo-8-[3-(N-(pyridin-2-yl)-N(methyl)amino)-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3, 4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát namísto (±)-8• · • ·
172 • · · ··· 000 « 0
0· [3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, tím byla připravena sloučenina z názvu (0,02 g, 15%):
MS (ES) m/e 542,1 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C29H30N3O4F3 . CF3CO2H . H2O; C, 55,28; H, 4,94; N, 6,24.
Nalezeno: C, 55,45; H, 4,68; N, 6,14.
Příklad 37
Příprava (S)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
a) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-(1-oxopyridin)-2-ylamino-lpropyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Do míchaného roztoku methyl (S)-8-hydroxy-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (19 g, 57,4 mmol) v bezvodém THF (400 ml) a bezvodého DMF (200 ml) pod argonovou atmosférou byl přidán 2-(3hydroxypropylamino)pyridin N-oxid (11,6 g, 69 mmol) a trifenylfosfin (18,0 g, 69 mmol). Po úplném rozpuštění všech pevných látek (přibližně 30 minut) byla reakční směs ochlazena na teplotu 0 °C v ledové lázni a byl přidán stříkačkou diisopropyl azodikarboxylát (14,3 ml, 69 mmol). Reakční směs byla ponechána zahřát se pomalu na teplotu zpětného toku a byla míchána po dobu 18 hodin. Koncentrace a mžiková chromatografie na silikagelu (8:2:1 CHCl3/EtOAc/EtOH) poskytla sloučeninu z názvu (20,83 g, 75%) ve formě pevné pěny. Dodatečných 5,73 g produkt mohlo • · 4 ·
- 173
44 » · · · » · 4 · ••4 444
4
44 být získáno recyklací získaného výchozího materiálu výše uvedené reakce a tím se získalo celkově 26,56 g (96%) sloučeniny z názvu:
MS (ES) m/e 482, 2 (M + H)+;
XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,09 (dd, J = 6,5, 1,3 Hz, IH) , 7,29 (t, IH), 7,18 (t, IH), 7,02 (d, J= 9,2 Hz, IH), 6,846,79 (m, 3H) , 6,59 (t, IH) , 5,32 (d, J = 16,5 Hz, IH) , 4,28-4,14 (m, 2H), 4,16 (d, J = 16,5 Hz, IH), 4,02 (t, 2H), 3,84 (m, IH), 3,58 (s, 3H) , 3,40 (dd, 2H) , 3,01 (dd, IH) ,
2,73 (dd, IH), 2,70 (dd, IH) , 2,52 (dd, IH) , 2,02 (ddd,
2H) .
b) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetát
Do míchaného roztoku methyl (S)-3-oxo-8-[3-(l-oxopyridin-2ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (26, 56 g, 5-5 mmol) v isopropanolu (500 ml) bylo přidáno 10% paládia na aktivním uhlí (8 g, 7,5 mmol, opatrně navlhčené v isopropanolu pod argonovou atmosférou) a cyklohexenu (55,7 ml, 550 mmol). Reakční směs potom byla zahřívána na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou v olejové lázni, zahřívané na teplotu 90 °C. Po uplynutí 6 hodin bylo přidáno dodatečné množství 10% paládia na aktivním uhlí (8 g, 7,5 mmol, opatrně navlhčeného v isopropanolu pod argonovou atmosférou) a cyklohexen (55,7 ml, 550 mmol). Po uplynutí dalších 18 hodin reakční směs byla filtrována za horka přes celit® a filtrační vrstva byla promývána 1: 1 směsí MeOH/CHCl3 (400 ml) . Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií na
174 “5 • · · ···· • · • · · · · • · ··· ··· silikagelu (95:5 CHCl3/MeOH) a tím se získala sloučenina z názvu (19,50 g, 76%) ve formě bílé lepivé pěny:
TLC (oxid křemičitý, 5% MeOH v CHCI3) Rf 0,52;
MS (ES) m/e 466,3 (M + H)+.
XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (dd, IH) , 7,34 (t, IH) ,
7,02 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,81 (m, 2H), 6,54 (t, IH), 6,46 (m, 2H), 5,31 (d, J =t 16,5 Hz, IH) , 4,23-4,13 (m, 2H) ,
4,17 (d, J= 16,5 Hz, IH) , 4,02 (t, 2H) , 3,82 (m, IH) , 3,58 (s, 3H) , 3,36 (m, 2H) , 3,01 (dd, IH) , 2,72 (dd, IH) , 2,68 (dd, IH), 2,50 (dd, IH), 1,96 (ddd, 2H).
c) (S)-3-ΟΧΟ-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
Do míchaného roztoku methyl (S)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (19,50 g, 42 mmol) v dioxanu (150 ml) byl přidán vodný 1 N NaOH (75 ml, 75 mmol). Kalná reakční směs byla míchána při teplotě zpětného toku po dobu 2 hodin, potom výsledný homogenní roztok byl neutralizován vodným 1 N HC1 (75 ml, 75 mmol) . Roztok byl koncentrován skoro do sucha rotačním odpařováním pro vyprecipitování produktu. Supernatant byl odstraněn usazováním a zbývající gumovitá pevná látka byl znovu rozpuštěna v methanolu. Čirý roztok potom byl znovu koncentrován rotačním odpařováním. Zbývající pevná látka byla rozetřena malým množstvím vody, filtrována a sušena za sníženého tlaku a tím se získala sloučenina z názvu (16,38 g, 86%) ve formě bílého prášku.
TPLC (Hamilton PRP-1®, 25 % CH3CN/H2O obsahující 0, 1% TFA) k' = 3,1;
• · ···· » · · ·
I · · · ··· ··» • · ·· ♦·
7,95 (dd, IH) . 7.34 ídt. IH) [a]D -112,3° (c, 1,0, MeOH);
MS (ES) m/e 452,3 (M + H)+;
’Ή NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ
7,02 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,81 (m, 2H), 6,58 (t, IH), 6,47 (m, 2H) , 5,30 (d, J = 16,5 Hz, IH) , 4,27 -4,13 (m, 2 Η) ,
4,15 (d, J = 16,5 Hz, IH), 4,02 (t, IH), 3,78 (m, IH), 3,37 (m, 2H), 3,00 (dd, 1 Η), 2,69 (dd, IH), 2,65 (dd, IH), 2,41 (dd, IH) , 1,96 (ddd, 2 H) .
Analýza: Vypočteno pro C22H24F3N3O4: C, 58,53; H, 5,36; N, 9,31.
Nalezeno: C, 58,37; H, 5,42; N, 9,20.
Příklad 38
Příprava (R)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octové kyseliny
a) Methyl (R)-3-oxo-8-[3-(l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu (0,33 g, 2 mmolu) a diethylazodikarboxylátu (0,3 ml, 2 mmolu) v bezvodém DMF (10 ml) byl přidán pomalu po kapkách do roztoku methyl (R)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,3 g, 1 mmolu) a trifenylfosfinu (0,485g, 26 mmolu) v bezvodém
CH2C12 (10 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 17 hodin byla reakční směs koncentrována. Silikagelová chromatografie (gradient: 0,5%- 5% MeOH/CH2Cl2) poskytla sloučeninu z názvu (0,35 g, 80%) ve formě bezbarvého oleje:
···
- 176 -.
• to·· • to
MS (ES) m/e 482,3 (M + H)+.
b) Methyl (R)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetát
Směs methyl (R)-3-oxo-8-[3-(l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu (0,35 g, 0,7 mmolu), cyklohexenu (0,75 ml, 7 mmolu), 10% Pd/C (88 mg, 0,07 mmolu) a isopropanolu (9 ml) byla zahříván na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou. Po uplynutí 18 hodin bylo přidáno dodatečné 10% Pd/C (36 mg, 0,03 mmolu) a cyklohexen (0,75 ml, 7 mmolu). Po uplynutí 36 hodin byla reakční směs byl filtrována za horka přes celit a filtrační vrstva byla promývána horkým EtOAc. Koncentrace zanechala žlutý olej. Silikagelová chromatografie (1%—5% MeOH v CH2CI2) poskytla sloučeninu z názvu (0,26 g, 77%) ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 466,2 (M + H)+.
c) (R)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
LiOH . H2O (25 mg, 0,6 mmolu) byl přidán do roztoku methyl (R)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2-(%2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,25 g, 0,54 mmolu) v THF (5 ml) a H2O (2 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 18 hodin byla reakční směs koncentrována do sucha a residuum bylo rozpuštěno v H2O (4 ml) . Roztok byl opatrně upraven na pH přibližně 4 pomocí 3,0 N HC1. Precipitát byl Shromážděn a sušen za vysokého • ·
- 177 • * · ♦ • · · * ··· ··· vakua při teplotě 40 - 45 °C a tím se získala sloučenina z názvu (0,15 g, 62%) ve formě bělavé pevné látky:
MS (ES) m/e 452,1 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C22H24F3N3O4 . 0,5 H2O: C, 57,38; H, 5,47; N, 9,12
Nalezeno: C, 57,72; H, 5,24; N, 8,92.
Příklad 39
Příprava (S)-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]3-OXO-2- (2Z,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-l H-2benzazepin-4-octové kyseliny
a) Methyl (S)-8-[3-(4-methyl-l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl) -2, 3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]-4-methylpyridin-Noxidu (0,60 g, 3,6 mmolu) a diethylazodikarboxylátu (0,6 ml, 3,6 mmolu) v bezvodém CH2C12 (12 ml) byl přidán po kapkách v průběhu 3-4 minut do roztoku methyl (S)—8— hydroxy-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetátu (0,60 g, 1,8 mmolu) a trifenylfosfinu (0,95g, 3,6 mmolu) v bezvodém CH2CI2 (6 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 17 hodin byla reakční směs koncentrována. Silikagelová chromatografie (gradient: 1%- 5% MeOH/CH2Cl2) poskytla sloučeninu z názvu (0,45g, 49%) ve formě bělavé pěny:
MS (ES) m/e 496,3 (M + H)+.
• · · · · · • · » · · · • «· ··· ···
- 178 -.
b) Methyl (S)-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl) -2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát
Směs methyl (S)-8-[3-(4-methyl-l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl) -2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,45 g, 0,9 mmolu), cyklohexenu (0,93 ml, 9 mmolu), 10% Pd/C (0,2 g, 0,18 mmolu) a isopropanolu (9 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou. Po uplynutí 18 hodin bylo přidáno dodatečné 10% Pd/C (0,2 g, 0,lS mmolu) a cyklohexen (0,27 ml, 2,65 mmolu). Po uplynutí 36 hodin byla reakční směs filtrována za horka přes celit a filtrační vrstva byla promývána horkým EtOAc. Koncentrace zanechala žlutý olej. Silikagelová chromatografie (1%—3% MeOH v CH2CI2) poskytla sloučeninu z názvu (O.32g, 74%) ve formě bílé pěny:
MS (ES) m/e 4S0,2 (M + H)+.
c) (S)-8-[3-(4-Methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-octová kyselina
LiOH . H2O (33 mg, 0,79 mmolu) byl přidán do roztoku methyl (S) -8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu (0,32 g, 0.67 mmolu) v THF (5 ml) a H2O (2 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 18 hodin byla reakční směs koncentrována do sucha a residuum bylo rozpuštěn v H2O (4 ml) . Roztok byl extrahován ethylacetátem, potom byl opatrně upraven na pH = 5 pomocí 3,0 N HC1. Precipitát byl shromážděn a sušen za vysokého vakua při teplotě 40 - 45 ····
- 179 °C a tím se získala sloučenina z názvu (0,22 g, 71%) ve formě bělavé pevné látky:
MS (ES) m/e 466,1 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C23H26F3N3O4: C, 59, 35; H, 5,63; N, 9,03.
Nalezeno: C, 58,97; H, 5,55; N, 8,73.
Příklad 40
Příprava (S)-8- [2- [6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]3-OXO-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina
a) Methyl (S)-8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]3- OXO-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 37 (a), pouze byl použit 6-(methylamino)-2-pyridylethanol namísto 2—[(3— hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu a byl použit (S)-8hydroxy-3-oxo-2- (2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát namísto (R)-8-hydroxy-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bezbarvého oleje:
MS (ES) m/e 466, 2 (M + H)+.
b) (S)-8-[2-[6-(Methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4- octová kyselina
Postupovalo se způsobem podle Příkladu 37(c), pouze byl použit methyl (S)-8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-19 · · · ·
- 180 -.
• * : )
44β
4· · · • · · 4 · • »444 • 4 · · · «·· • 4 4 «4 4 4 ethoxy]-3-οχο-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát namísto (R)-8-[3-(2-pyridylamino)1-propyloxy]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu, sloučenina z názvu byla připravena ve formě bílé pevné látky:
MS (ES) m/e 452,2 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C22H24F3N3O4 - 0,7 H2O: C, 56, 94; H, 5,52; N, 9,05.
Nalezeno: C, 56,80; H, 5,19; N. 8,85.
Příklad 41
Příprava (S)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octové kyseliny
a) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-(l-oxopyridin-2-ylamino)-1propyloxy] -2- (2-fenylethyl) -2,3,4,5-tetrahydro-lHr-2benzazepin-4-acetát
Roztok 2-[(3-hydroxy-l-propyl)amino]pyridin-N-oxidu (336 mg, 2,0 mmol) a diethylazodikarboxylátu (0,3 ml, 2,0 mmolu) v bezvodém DMF (10 ml) byl přidán do roztoku methyl (S)—8— hydroxy-3-oxo-2- (2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu (350 mg, 1,0 mmolu) a trifenylfosfinu (525 mg, 2,0 mmolu) v bezvodém DMF (10 ml) při teplotě zpětného toku. Po uplynutí 24 hodin směs byla koncentrována. Mžiková silikagelová chromatografie (gradient EtOAc (500 ml) potom 5% MeOH/CHCl3) poskytla sloučeninu z názvu ve formě oranžové pěny (288 mg, 57%):
MS (ES) m/e 504 (M + H)+.
- 181
b) Methyl (S)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Směs methyl (S)-3-oxo-8-[3-(l-oxopyridin-2-ylamino)- 1propyloxy]-2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátu (288 mg, 0,57 mmolu), cyklohexenu (0,6 ml, 5,8 mmolu), 10% Pd/C (62 mg, 0,58 mmolu) a 2-propanolu (6 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku pod argonovou atmosférou. Po uplynutí 31 hodin směs byla filtrována za horka před vrstvu celitu®, filtrační vrstva byla promývána horkou 1:1 směsí MeOH/CHCl3 (200 ml) a filtrát byl koncentrován. Mžiková silikagelová chromatografie (5% MeOH/CHCl3) následovaná druhou mžikovou silikagelovou chromatografií (50% THF/cyklohexan) poskytla sloučeninu z názvu ve formě bělavé pěny (133 mg, 48%) :
MS (ES) m/e 488 (M + H)+.
c) (S)-3-ΟΧΟ-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propylOxy]-2-(2fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
1,0 N LiOH (0,3 ml, 0,3 mmolu) byl přidán do roztoku methyl (S)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (133 mg, 0,27 mmolu) v THF (1,5 ml) a H2O (1,2 ml) při teplotě 0 °C. Směs byla ponechána zahřát se na teplotu zpětného toku v průběhu 18 hodin. Směs byla promýván Et2O (2 x 5 ml) potom byl použit mírný podtlak pro odstranění residuálních organických rozpouštědel. Vodná vrstva byl filtrována přes 0,45 μιη Acrodisk filtr, potom byla opatrně okyselena na pH 6 pomocí 10% HC1 v H20 při teplotě 0 °C.
Precipitát byl shromážděn, promýván H2O a sušen za ·· ·· ·· « · · · · · • · Λ · · · • ·· ·· · 4·· sníženého tlaku při teplotě 50 °C a tím se získala sloučenina z názvu ve formě bílé pevné látky (62 mg, 48%): MS (ES) m/e 474 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C28H3iN3O4 . 0,75 H2O: C, 69,05; H,
6,75; N, 8,63.
Nalezeno: C, 69,05; H, 6,66; N, 8,55.
Příklad 42
Příprava (S)-8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]ethoxy]-3oxo-2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina
a) Methyl (S)-8-[2-[6-methylamino)pyridin-2-yl]ethoxy]-3oxo-2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetát
Diisopropyl azodikarboxylát (0,3 ml, 1,5 mmolu) byl přidán do roztoku (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (350 mg, 1,0 mmolu), 6-(methylamino)-2-pyridylethanolu (228 mg, 1,5 mmolu) a trifenylfosfinu (393 mg, 1,5 mmolu) v bezvodém THF (10 ml) při teplotě 0 °C. Směs byla ponechána zahřát se na teplotu zpětného toku v průběhu 72 hodin a potom byla koncentrována. Mžiková silikagelová chromatografie (50% EtOAc/hexany) následovaná druhou mžikovou silikagelovou chromatografií (25% EtOAc/hexany) poskytla sloučeninu z názvu ve formě bílé pěny (250 mg, 51%):
MS (ES) m/e 488 (M + H)+.
• 4
183
b) (S)-8-[2-[6-(Methylamino)pyridin-2-yl]ethoxy]-3-oxo-2(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina
1,0 N LiOH (0,62 ml, 0,62 mmolu) byl přidán do roztoku methyl (S)-8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]ethoxy]-3-oxo2-(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4acetátu (250 mg, 0,51 mmolu) v THF (2,5 ml) a H2O (1,9 ml) při teplotě 0 °C a reakční směs byla ponechána za míchání při teplotě zpětného toku po dobu 18 hodin. Směs byla promývána H2O (2 x 5 ml) a potom byl použit mírný podtlak pro odstranění residuálních organických rozpouštědel. Vodná vrstva byl filtrována přes 0,45 μπι Acrodisk filtr a potom byla opatrně okyselena na pH 6 pomocí 10% HC1 v H2O při teplotě 0 °C. Precipitát byl shromážděn, promýván H2O a sušen za sníženého tlaku při teplotě 50 získala sloučenina z názvu (134 mg, 55%; pevné látky:
MS (ES) m/e 474 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C28H31N3O4 . 0,75 H2O: C, 69, 05; H,
6,73; N, 8,63.
Nalezeno: C, 69,23; H, 6,59; N, 8,55.
C a tím se ve formě bílé
Příklad 43
Příprava (S)-8-[2- [6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxyl3-ΟΧΟ-2-[4- (trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octové kyseliny
a) Methyl (S)-8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]3-OXO-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetát ····
- 184 -.
• · · · β 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9 9 999 999
9 9 9
9· 99
Do roztoku methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2-[4(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin4-acetátu (0,18 g, 0,44 mmol) a Ph3P (0,23 g, 0g8 mmol) v CH2C12 (2 ml) byl přidán roztok 6-(methylamino)-2pyridylethanolu (0,13 g, 0,88 mmol) a diethylazodikarboxylátu (0,14 ml, 0,89 mmol) v CH2C12 (2 ml) . Po uplynutí 2 dní při teplotě zpětného toku bylo rozpouštědlo odstraněno za sníženého tlaku. Radiální chromatografie na silikagelu (6 mm deska, 5% MeOH/CHCl3) dala čirý olej (0,63 g) , který obsahoval směs sloučeniny z názvu spolu s nezreagovaným methyl (S)-8-hydroxy-3-oxo-2[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-acetátem. Tento materiál byl dále čištěn radiální chromatografií na silikagelu (6 mm deska, 50% EtOAc/hexany) a tím se získala sloučenina z názvu (0,12 g) ve formě čirého oleje:
MS (ES) m/e 542,3 (M + H)+.
b) (S)-8-[2-[6-(Methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina
Do roztoku methyl (S)-8-[2-[6- (methylamino)pyridin-2-yl]-1ethoxy]-3-oxo-2- [4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetátu (0,12 g, 0,22 mmol) v EtOH (2 ml) byl přidán 1 N NaOH (0,50 ml). Po uplynutí 3,5 hodin při teplotě zpětného toku byla hlavní část rozpouštědla odstraněna za sníženého tlaku a tím se získalo bílé residuum. Residuum bylo rozpuštěno ve vodě a roztok byl neutralizován na pH = 7 pomocí 1 N HC1. Výsledný precipitát byl shromážděn a sušen za sníženého tlaku a tím ·· · · · · se získala sloučenina z názvu (28,1 mg) ve formě bílé pevné látky:
[oc] D -74,0° (c 0,05, EtOH) ;
MS (ES) m/e 528,3 (M + H)+.
Analýza: Vypočteno pro C28H28F3N3O4 . 0,5 H2O: C, 62, 68; H,
5,45; N, 7,83.
Nalezeno: C, 62,60; H, 5,35; N, 7,66.
Příklad 44
Dávková jednotka parenterální kompozice
Přípravek, obsahující 20 mg sloučeniny podle Příkladu 1 ve formě sterilního bezvodého prášku byla připravena následujícím způsobem: 20 mg sloučeniny bylo rozpuštěno v 15 ml destilované voda. Roztok byl filtrován za sterilních podmínek do 25 ml vícedávkové zkumavky a lyofilizován. Prášek je možno rekonstituovat přidáním 20 ml 5% dextrózy ve vodě (DSW) pro intravenózní nebo intrámuskulární injekce. Dávkování je tedy určeno objemem injekce. Následné zředění může být provedeno přidáním odměřeného objemu této dávkové jednotky do jiného objemu DSW pro injekce, nebo může být odměřená dávka vložena do jiného mechanismu pro podávání léku, jako je láhev nebo sáček pro IV drip infuzi nebo jiný injekční nebo infuzní systém.
- 186 • ·· ·· ·· • e « · · · · · • · 4 ♦ * · · «4 4 · · · ··· ··· • 4 · 4 · · • •4 ·· 4 · ··
Příklad 45
Dávková jednotka orální kompozice
Kapsle pro orální podávání byla připravena smícháním a rozemletím 50 mg sloučeniny podle Příkladu 1 s 75 mg laktózy a 5 mg stearanu hořečnatého. Výsledný prášek tříděn a plněn do tvrdých želatinových kapslí.
Příklad 46
Dávková jednotka orální kompozice
Tableta pro orální podávání byla připraven smícháním a granulací 20 mg sacharózy, 150 mg dihydrátu síranu vápenatého a 50 mg sloučeniny podle Příkladu 1 s 10% želatinovým roztokem. Vlhké granule byly tříděny, sušeny, smíchány s 10 mg škrobu, 5 mg talku a 3 mg kyseliny stearové a lisovány do tablet.
• ·
- 187
99 «9 • 9 9 9 9 · · • 9 · 9 9 9 9 « 99 999 ···
9 9 ·9
999 99 ·9 99
Výše uvedený popis plně popisuje výrobu a použití sloučenin podle vynálezu. Vynález však není omezen na konkrétní provedení uvedená výše, ale zahrnuje všechny jejich modifikace, které spadají do rozsahu přiložených patentových nároků. Různé reference na články v časopisech, patenty a další publikace, které jsou zde uvedeny popisují stav techniky a jsou zde zahrnuty jako reference, tak jak byly uvedeny v předcházejícím textu.

Claims (55)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučenina obecného vzorce (I) :
    ve kterém:
    R1 představuje R7, nebo A-Co-C4-alkyl, A-C2-C4-alkenyl, A-C2C4-alkinyl, A-C3-C4-oxoalkenyl, A-C3-C4-oxoalkinyl, A-Ci-C4aminoalkyl, A-C3-C4-aminoalkenyl, A-C3-C4-aminoalkinyl, popřípadě substituovaný libovolnou přípustnou kombinací jednoho nebo více substituentů R10 nebo R7;
    A představuje atom vodíku, C3-C6-cykloalkyl, Het nebo Ar;
    R7 představuje -COR8, -COCR'2R9, -C(S)R8, -S(O)mOR', S(O)mNR'R'', -PO(OR'), -PO(OR')2, -NO2 nebo tetrazolyl; každý R8 nezávisle představuje -OR', -NR'R'', -NR'SO2R', NROR', nebo -OCR'2CO (O) R':
    R9 představuje -OR', -CN, -S(O)rR', -S(O)mNR'2, -C(O)R',
    C(O)NR'2, nebo -CO2R';
    R10 představuje atom vodíku, atom halogenu, -OR11, -CN, NR'Rn, -NO2, -CF3, CF3S (O) r, -CO2R', -CONR'2, A-C0-C6-alkyl-, • · flflfl·
    - 189 • ···· flflfl · • fl·· ···· •fl · fl flfl ··· flflfl • · flflfl · · • fl flfl flfl· flfl flfl
    A-Ci-C6-oxoalkyl-, A-C2-C6-alkenyl-, A-C2-C6-alkinyl-, A-CoC6-alkyloxy-, A-Co-Cg-alkylamino- nebo A-Co-Cg-alkyl-S (O) r;
    Ru představuje R', -C(O)R', -C(O)NR'2, -C(O)OR', -S(O)mR', nebo -S(O)mNR'2;
    R2 představuje
    9 · 9 · • 9 9 9 9 · 9 · 9
    9 999 9999
    99 99 99 999999
    9 9 9 9 9 9
    99 999 99 99 99
    - 190 (Ο)„ —CR’2 —W- „,-^ NR—CR'2~Wθ ^>q3-Q nebo
    W představuje -(CHRg)a-U- (CHRg)b-;
    U není přítomen nebo představuje CO, CRg2, C(=CRg2), S(O)k, O, NRg, CRgORg, CRg(ORk) CRg2, CRg2CRg(ORk) , C(O)CRg2, CRg2C(O), CONRS NRYO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NRg, NRgC(S), S (O) 2NRg, NRgS(0)2N=N, NRgNRg, NRgCRg2, CRg2NRg, CRg2O, OCRg2, CsC nebo CRg=CRg;
    G představuje NRe, S nebo 0;
    Rg představuje atom vodíku, Ci-C6~alkyl, Het-Co-Cg-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl nebo Ar-Co-Cg-alkyl;
    Rk představuje Rg, -C(O)Rg, nebo -C(O)ORf; R1 představuje atom vodíku, Ci-Ce-alkyl, Het-Co-C6-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, nebo Ci-C6-alkyl substituovaný jednou až třemi skupinami, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, CN, NRg2, 0Rg, SRg, CO2Rg a CON(Rg)2;
    Rf představuje atom vodíku, Ci-C6~alkyl nebo Ar-Co-Cg-alkyl; Re představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-Co-Ce-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, C3-C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, nebo (CH2)kCO2Rg;
    Rb a Rc jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Ar-Co-C6-alkyl, Het191 » 4 4 4 » 4 4 ·
    444 444
    4 4 • 4 4·
    Co-C6-alkyl, nebo C3-C6-cykloalkyl-C0-C6-alkyl, halogen, CF3, 0Rf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, nebo Rb a Rc jsou spojeny dohromady tak, že vytvářejí pěti- nebo šestičlenný aromatický nebo nearomatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh, popřípadě substituovaný až třemi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny CF3, Ci-C4-alkyl, 0Rf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, N02, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; nebo methylendioxy;
    Q1, Q2, Q3 a Q4 představují nezávisle na sobě N nebo C-Ry, za předpokladu, že nejvýše jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4 představuje N.
    R' představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl nebo C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl;
    R'' představuje R', -C(O)R' nebo -C(O)OR';
    R' ' ' představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, Het-Co-C6-alkyl, nebo C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, halogen, CF3, 0Rf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2 CO(NRf)2, CH2N(Rf)2;
    Ry představuje atom vodíku, atom halogenu, -0Rg, -SRg, -CN, -NRgRk, -N02, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2, nebo Ci-C6-alkyl popřípadě substituovaný atomem halogenu, skupinami -0Rg, -SRg, -CN, -NRgR' ' , -N02, -CF3, R’S(O)r-, CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2;
    a je rovno 0, 1 nebo 2; b je rovno 0, 1 nebo 2; k je rovno 0, 1 nebo 2; m je rovno 1 nebo 2; r je rovno 0, 1 nebo 2; s je rovno 0, 1 nebo 2; u je rovno 0 nebo 1; a v je rovno 0 nebo 1;
    192
    4 4*44 4 4 4 · · · · • · 4 · 4 · 4 4 · · · • 4 4 ** 4 4 4 * ♦ 4 4 4 4 4 4 444444 ··· 4·· · 4
    444 44 444 44 44 44 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
  2. 2. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém R2 představuje (?)« kde Q1, Q2 a Q3 představují každý CRy,
    Q4 * * * * představuje CRy nebo N a u je rovno 0.
  3. 3. Sloučenina podle nároku 2, ve kterém každý R' představuje atom vodíku,
    R'' představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, -C (O) Ci-C6-alkyl,
    C (O) OCi-Cg-alkyl, -C (O) C0-C6-alkyl-Ar, nebo C (0) OC0-C6-alkylAr,
    W představuje -CH2-CH2- a
    Ry představuje atom vodíku, halogen, -OR9, -SRg, -CN, NRgRk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2R9, -CORg -CONRg2, nebo CiC6-alkyl·.
    ··<·
    -193-.
    • to ·· ·· • · · · · · · · · • · · · · to to · ·· · · ·· · · to · to · • · · · · · · ·· · · · ·· ·· »·
  4. 4. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém R2 je kde Q1, Q2 a Q3 jsou každý CH a u se rovná 0.
  5. 5. Sloučenina podle nároku 4, ve kterém každý R' představuje atom vodíku, R' ' představuje atom vodíku nebo Ci-C4-alkyl, v je rovno 0 a W představuje -CH2-CH2-.
  6. 6. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém R2 je
    RĎx
    R* ve kterém G představuje NH a Rb a Rc představují každý H.
  7. 7. Sloučenina podle nároku 6, ve kterém W představuje -NRg(CHRg)b-.
    194 ····
  8. 8. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém R2 je
    G
    N
    I w· ve kterém G představuje NH a Rb a Rc jsou spojeny dohromady tak, že vytvářejí pěti- nebo šestičlenný aromatický nebo nearomatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh, popřípadě substituovaný až třemi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny CF3, Ci-C4alkyl, 0Rf, S (0) kRf, C0Rf, C02Rf, OH, N02, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; nebo methylendioxy.
  9. 9. Sloučenina podle nároku 8, ve kterém Rb a Rc jsou spolu spojeny a vytvářejí šestičlenný aromatický karbocyklický kruh.
  10. 10. Sloučenina podle nároku 9, ve kterém W představuje CH2-CH2-.
  11. 11. Sloučenina podle nároku 8, ve kterém Rb a Rc jsou spolu spojeny a vytvářejí šestičlenný aromatický heterocyklický kruh.
  12. 12. Sloučenina podle nároku 11, ve kterém W představuje CH2-CH2-.
    195 «*<· • ·»
  13. 13. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém R2 je
    N. ^NR’—CR* — W r y ve kterém každý R' představuje atom vodíku, R’’ představuje atom vodíku nebo Ci-C4-alkyl, Rg představuje atom vodíku nebo Ci-C4-alkyl a s je rovno 0, 1 nebo 2.
  14. 14. Sloučenina podle nároku 13, ve kterém W představuje CH2-CH2-.
  15. 15. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém R1 představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, -CH2CF3, - (CH2) i-2C (O) OR', nebo -(CH2)2OR', kde R' představuje atom vodíku nebo Ci-C4-alkyl.
  16. 16. Sloučenina podle nároku 15, ve kterém R1 představuje atom vodíku, Ci-C4-alkyl, Ph-Co~C4-alkyl, -CH2CF3, -(CH2)i_ 2C(O)OR’, nebo -(CH2)2OR', kde R' představuje atom vodíku nebo Ci-C4-alkyl.
  17. 17. Sloučenina podle nároku 16, ve kterém R1 představuje CH2CF3.
  18. 18. Sloučenina podle nároku 1, kterou je:
    (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    - 196 (±) -8- [3- (4-amino-2-pyridylamino) -1-propyloxy] -3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8-[3-(4-methoxy-2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8-[3-(2-imidazolylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2, 3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (+)-8-[3-[2-(1,4,5,β-tetrahydropyrimidinyl)amino]-1propyloxy]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
    (±) -8-[3-(6-amino-2-pyridylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-8-[2-(2-benzimidazolyl)ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8-[2-(4-aza-2-benzimidazolyl)ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) —8 —[2—[6—(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8-[2-(benzimidazol-2-yl)-1-ethoxy]-3-oxo-2,3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)—8 —[3—(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-methyl3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina; (±)-3-OXO-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2, 3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (R) -8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-3-ΟΧΟ-8- [3-[ (1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl) amino]-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    • · · · • ·
    - 197 • · · · · · • · · · « · • ·· ··· ··· • · · · • · · · · · (S) -8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8-[3-[N-(l-oxopyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-3-oxo-2, 3,4,5tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy] -2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
    (±) -3-ΟΧΟ-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
    (±) -2-methyl-3-oxo-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(methyl)amino]1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-2-benzyl-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-2-(karboxymethyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -2-(4-aminobenzyl)-3-oxo-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -3-ΟΧΟ-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(benzoyl) amino]-1propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-8-[3-(2-imidazolin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-methyl-3oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    - 198 (±) -3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-1-ethoxy]-2-methyl-3-oxo2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±) -8- [3- (4,6-dimethylpyridin-2-ylamino) -1-propyloxy] -2methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-8-[3-(4,5,6,7-tetrahydro-lH-l,3-diazepin-2-ylamino)-1propyloxy]-2-methyl-3-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(terč.butylacetyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (±)-3-ΟΧΟ-8-[3- [N- (pyridin-2-yl)-N(isobutoxykarbonyl)amino]-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
    (S)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(4trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
    (±)-3-OXO-8-[3-(4-methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
    (±) -3-OXO-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(methyl)amino]-1propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (S)-3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    - 199 (R) -3-OXO-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (S) -8- [3- (4-methylpyridin-2-ylamino) -1-propyloxy] -3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina;
    (S)-3-OXO-8- [3-(1,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1propyloxy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl] -2,3,4,5-tetrahydroΙΗ-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (S) -3-ΟΧΟ-2-(2-fenylethyl)-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (S) -8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2(2-fenylethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina;
    (S) -8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2(2,2,2-trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4octová kyselina; a (S) -8-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2[4-(trifluormethyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2benzazepin-4-octová kyselina;
    nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
  19. 19. Sloučenina podle nároku 1, kterou je (S)-3-oxo-8-[3(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2-(2,2,2-trifluorethyl)2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
  20. 20. Sloučenina podle nároku 1, kterou je (S)—8—[2—[6— (methylamino)pyridin-2-yl]-1-ethoxy]-3-oxo-2-(2,2,2• ·
    200 trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
  21. 21. Sloučenina podle nároku 1, kterou je (S)—8—[3—(4— methylpyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3-oxo-2-(2,2,2trifluorethyl)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-octová kyselina nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
  22. 22. Farmaceutická kompozice, která obsahuje sloučeninu podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič.
  23. 23. Farmaceutická kompozice, která obsahuje sloučeninu podle nároku 1, antineoplastové činidlo a farmaceuticky přijatelný nosič.
  24. 24. Farmaceutická kompozice podle nároku 23, ve které antineoplastové činidlo je topotekan.
  25. 25. Farmaceutická kompozice podle nároku 23, ve které antineoplastové činidlo je cisplatin.
  26. 26. Farmaceutická kompozice, která obsahuje sloučeninu podle nároku 1, inhibitor resorpce kostní hmoty a farmaceuticky přijatelný nosič.
  27. 27. Způsob léčení chorobných stavů ve kterých je indikován antagonismus receptoru ανβ3, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má jeho potřebu, sloučeniny podle nároku 1.
    • 000
    - 201
  28. 28. Způsob léčení chorobných stavů ve kterých je indikován antagonismus receptoru ανβδ, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má jeho potřebu, sloučeniny podle nároku 1.
  29. 29. Způsob léčení osteoporózy, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má jeho potřebu, sloučeniny podle nároku 1.
  30. 30. Způsob inhibice angiogenese, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má jeho potřebu, sloučeniny podle nároku 1.
  31. 31. Způsob inhibice růstu nádorů nebo nádorových metastáz, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má jeho potřebu, sloučeniny podle nároku 1.
  32. 32. Způsob léčení aterosklerózy nebo restenózy, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má jeho potřebu, sloučeniny podle nároku 1.
  33. 33. Způsob léčení zánětu, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má jeho potřebu, sloučeniny podle nároku 1.
  34. 34. Způsob inhibice růstu nádoru, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání sloučeniny podle nároku 1 a antineoplastového činidla po sobě nebo ve fyzické kombinaci.
    ····
    202
  35. 35. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že antineoplastové činidlo je topotekan.
  36. 36. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že antineoplastové činidlo je cisplatin.
  37. 37. Způsob léčení osteoporózy nebo inhibice ztáty kostní hmoty, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání sloučeniny podle nároku 1 a inhibitoru resorpce kostní hmoty po sobě nebo ve fyzické kombinaci.
  38. 38. Sloučenina obecného vzorce (II):
    R (Π) ve kterém :
    R1 představuje R7, nebo A-Co-C4-alkyl, A-C2-C4-alkenyl, A-C2C4-alkinyl, A-C3~C4-oxoalkenyl, A-C3-C4-oxoalkinyl, A-Ci-C4aminoalkyl, A-C3-C4-aminoalkenyl, A-C3-C4-aminoalkinyl, popřípadě substituovaný libovolnou přípustnou kombinací jednoho nebo více substituentů R10 nebo R7;
    A představuje atom vodíku, C3-C6-cykloalkyl, Het nebo Ar;
    - 203 • toto · * toto ·· toto ·· · · · · · · • · · · · · · • · · · to · to ··· • to · · · • •to ·· ·· ··
    R7 představuje -COR8, -COCR'2R9, -C(S)R8, -S(O)mOR', S(O)mNR'R'', -PO(OR'), -PO(OR')2, -NO2, nebo tetrazolyl; každý R8 nezávisle představuje -OR', -NR'R'', -NR'SO2R', NR'OR', nebo -OCR'2CO(O)R';
    R9 představuje -OR', -CN, -S(O)rR', -S(O)mNR'2, -C(O)R
    C(O)NR'2, nebo -CO2R';
    R10 představuje atom vodíku, atom halogenu, -OR11, -CN, NR'Rn, -NO2, -CF3z CF3S(O)r, -CO2R', -CONR'2, A-C0-C6-alkyl· A-Ci-C6-oxoalkyl-, A-C2-C6-alkenyl-, A-C2-C6-alkinyl-, A-C Cg-alkyloxy-, A-C0-C6-alkylamino- nebo A-Co-Cg-alkyl-S (O) r; R11 představuje R', -C(O)R', -C(O)NR'2, -C(O)OR', -S(O)mR nebo -S(O)mNR'2;
    R2 představuje
    - 204 • · · φφφ·· ♦
    φ φ φ φ φφ • φφ φφ φφ φφ φ φ φ » · φ φφφ φφφφ φ φ φ φ φφφ φφφ φφφ · φ φφφ φφ φ · φφ
    NR*— CR'2 — W
    NR8
    Os
    W představuje -(CHRg)a~U- (CHRg)b~
    U není přítomen nebo představuje CO, CRg2, C(=CRg2), S(O)k, O, NR9, CRgORg, CR9(ORk)CRg2, CR92CRg (ORk) , C(O)CRg2, CRg2C(O), CONR1, NRiCO, 0C{0), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NRg, NRgC(S), S(O)2NRg, NRgS(O)2N=N, NRgNRg, NRgCRg2, CRg2NRg, CRg2O, OCRg2, C^C nebo CRg=CRg.
    G představuje NRe, S nebo O;
    Rg představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl nebo Ar-C0-C6-alkyl;
    Rk představuje Rg, -C(O)Rg nebo -C(O)ORf;
    R1 představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Het-Co-Cg-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, nebo Ci-C6-alkyl • · · · « «
    - 205 - »·· *·' substituovaný jednou až třemi skupinami, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 a CON(Rg)2;
    Rf představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl nebo Ar-C0-C6-alkyl; R® představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, Het-C0-C6-alkyl, C3-C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, nebo (CH2)kC02Rg;
    Rb a Rc jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, HetC0-C6-alkyl nebo C3-C6-cykloalkyl-C0-C6-alkyl, halogen, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, C0(NRf)2, CH2N(Rf)2, nebo Rb a Rc jsou spojeny dohromady tak, že vytvářejí pěti- nebo šestičlenný aromatický nebo nearomatický karbocyklický nebo heterocyklický kruh, popřípadě substituovaný až třemi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, skupiny CF3, C1-C4-alkyl, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2 CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; nebo methylendioxy;
    Q1, Q2, Q3 a Q4 představují nezávisle na sobě N nebo C-Ry, za předpokladu, že nejvýše jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4 představuje N.
    R' představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl, Ar-Co-C6-alkyl nebo C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl;
    R'' představuje R', -C(O)R' nebo -C(O)OR';
    R' ' ' představuje atom vodíku, Ci-Ce-alkyl, Ar-C0-C6-alkyl, Het-Co-Cá-alkyl, nebo C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, halogen, CF3, 0Rf, S (0) kRf, CORf, N02, N(Rf)2 C0(NRf)2, CH2N(Rf)2;
    Ry představuje atom vodíku, atom halogenu, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2R9, -COR9 nebo -CONRg2, nebo Ci-Cg-alkyl popřípadě substituovaný atomem halogenu, skupinami -OR9, -SR9, -CN, -NRgR'' , -N02, -CF3, R'S(O)r-, CO2Rg, -COR9 nebo -CONRg2;
    • ·
    I · · · » · · · ·· · 4 4 4
    - 206 -
    a je rovno 0, 1 nebo 2; b je rovno 0, 1 nebo 2; k je rovno 0, 1 nebo 2; m je rovno 1 nebo 2; r je rovno 0, 1 nebo 2; s je rovno 0, 1 nebo 2; u je rovno 0 nebo 1; a v je rovno 0 nebo 1; nebo její : farmaceuticky
  39. 39. Sloučenina podle nároku 38, kterou je methyl (±)-3-oxo 8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-2,3,4,5-tetrahydrolH-2-benzazepin-4-acetát; nebo ethyl (±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloxy]-3 oxo-2,3,4,5-tetrahydro-lH-2-benzazepin-4-acetát; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
  40. 40. Sloučenina obecného vzorce (III):
    οΙ 1<.N+ .NR—CRS 1 if ,2 Á4 1 «O
    CO2C^alkyl ve kterém
    R1 představuje R7, nebo A-Co-C4-alkyl, A-C2-C4-alkenyl, A-C2 C4-alkinyl, A-C3-C4-oxoalkenyl, A-C3-C4-oxoalkinyl, A-C1-C4 • 4
    - 207 - .
    • · · · • 4 4 · ·· · ··· • ·
    9* 9 4 aminoalkyl, A-C3-C4-aminoalkenyl, A-C3-C4-aminoalkinyl, popřípadě substituovaný libovolnou přípustnou kombinací jednoho nebo více substituentů R10 nebo R7;
    A představuje atom vodíku, C3-C6-cykloalkyl, Het nebo Ar;
    R7 představuje -COR8, -COCR'2R9, -C(S)R8, -S(O)mOR', S(O)mNR'R, -PO(OR'), -PO(OR')2, -NO2, nebo tetražolyl; každý R8 nezávisle představuje -OR', -NR'R'', -NR'SO2R', NROR', nebo -OCR' 2CO (O) R' ;
    R9 představuje -OR', -CN, -S(O)rR’, -S(O)mNR'2, -C(O)R',
    C(O)NR'2, nebo -CO2R';
    R10 představuje atom vodíku, atom halogenu, -OR11, -CN, NR'Rn, -NO2, -CF3, CF3S(O)r, -CO2R' , -CONR'2, A-C0-C6-alkyl-, A-Ci-Cg-oxoalkyl-, A-C2-C6-alkenyl-, A-C2-C6-alkinyl-, A-CoC6-alkyloxy-, A-Co-Cg-alkylamino- nebo A-Co-C6-alkyl-S (O) r;
    R11 představuje R', -C(O)R', -C(O)NR'2, -C(O)OR', -S(O)mR', nebo -S(O)mNR'2;
    W představuje -(CHRg)a-U- (CHRg)b-;
    U není přítomen nebo představuje CO, CRg2, C (=CRg-2) , S(O)k, O, NRg, CRgORg, CRg(ORk)CRg2, CRg2CRg (ORk) , C(O)CRg2, CRg2C(O), CONR1, NRiCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NRgS, NRgC(S), S(O)2NRg, NRgS(O)2 N=N, NRgNRg, NRgCRg2, CRg2NRg, CRg2O, OCRg2, CsC nebo CRg=CRg;
    Rg představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Het-Co-Ce-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl nebo Ar-Co-Cg-alkyl;
    Rk představuje Rg, -C(O)Rg, nebo -C(O)ORf;
    R1 představuje atom vodíku, Ci-C6-alkyl, Het-Co-C6-alkyl, C3C7-cykloalkyl-Co-C6-alkyl, Ar-Co-C6-alkyl, nebo Ci-C6-alkyl substituovaný jednou až třemi skupinami, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom halogenu, CN, NRg2, ORg, SRg, CO2R9 a CON(Rg)2;
    Rf představuje atom vodíku, Ci-Cg-alkyl nebo Ar-Co-Cg-alkyl;
    flfl · · • ·
    - 208 - .
    • flfl · · · · * • ··· fl··· • · · · · fl flflfl ♦ ·· • fl · fl · fl
    4« · · · * · · · ··
    Q1, Q2, Q3 a Q4 představují nezávisle na sobě N nebo C-RY, za předpokladu, že nejvýše jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4 představuje N.
    R' představuje atom vodíku, C3-C6-cykloalkyl-Co-C6-alkyl ; R'' představuje R', -C(O)R’ Ry představuje atom vodíku, -NRgRk, -NO2, -CF3, CF3S(O): nebo Ci-C6-alkyl popřípadě skupinami -ORg, -SRg, -CN, CO2Rg, -CORg nebo -CONRg2;
    Ci-C6-alkyl, Ar-Co-Cg-alkyl nebo nebo -C(O)OR';
    atom halogenu, -ORg, -SRg, -CN, -, -CO2Rg, -C0R9 nebo -CONRg2, substituovaný atomem halogenu,
    -NRgR ' , -NO2, -CF3, R'S(O)r-, -
    a je rovno 0, 1 nebo 2; b je rovno 0, 1 nebo 2; m je rovno 1 nebo 2; a r je rovno 0, 1 nebo 2;
    nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
    00·· • · 0 0 • · « 0
    0 0 0 · • · · · · · • 0 «0 0 0
  41. 41. Způsob výroby sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce (IV) se sloučeninou obecného vzorce (V):
    ve kterém R1 a R2 mají stejný význam jako v obecném vzorci (I) , s chráněnými libovolnými reakčními funkčními skupinami, a L1 představuje OH nebo atom halogenu;
    a následným odstraněním ochranných skupin a popřípadě vytvořením farmaceuticky přijatelné soli.
  42. 42. Způsob výroby sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce (IV) se sloučeninou obecného vzorce (VI):
    (TV) (VI)
    - 210
    4 4 4 4
    4 4 * • · 4
    444 444
    4 4
    4 4 4 4 ve kterém R1, R', R'', W, Q1, Q2, Q3 a Q4 mají stejný význam jako v obecném vzorci (I), s chráněnými libovolnými reakčními funkčními skupinami;
    a následným odstraněním ochranných skupin a popřípadě vytvořením farmaceuticky přijatelné soli.
  43. 43. Způsob výroby sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce (IV) se sloučeninou obecného vzorce (VII):
    (VID ve kterém R1, R', R'', W, Q1, Q2, Q3 a v mají stejný význam jako v obecném vzorci (I), s chráněnými libovolnými reakčními funkčními skupinami;
    a následným odstraněním ochranných skupin a popřípadě vytvořením farmaceuticky přijatelné soli.
  44. 44. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 21 pro použití jako léčivo.
  45. 45. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro léčení onemocnění ve kterých je indikován antagonismus receptoru ανβ3.
    <1
    - 211 ·· ·· • ♦ « • · 1
    99 9 ··<
    9 ’ • 9 9 9
  46. 46. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) pro výrobu léčiva pro léčení onemocnění indikován antagonismus receptoru ανβ5.
  47. 47. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) pro výrobu léčiva pro léčení osteoporózy.
    podle nároku 1 ve kterých je podle nároku 1
  48. 48. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro inhibici angiogenese.
  49. 49. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro inhibici růstu nádoru nebo nádorové metastázy.
  50. 50. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro léčení aterosklerózy nebo restenózy.
  51. 51. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro léčení zánětů.
  52. 52. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 a antineoplastového činidla pro výrobu léčiva pro inhibici růstu nádoru ve fyzické kombinaci nebo pro podávání po sobě.
  53. 53. Použití podle nároku 52, ve činidlo je topotekan.
    které antineoplastové
  54. 54. Použití podle nároku 52, ve které antineoplastové činidlo je cisplatin.
    • 000
    - 212 - .
    00 00 00 0 *··· 0 0 0 0 0 000 000· 00 0· 00 000000 0 0 0 0 0 0 00 000 «0 00 00
  55. 55. Použití sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1 a inhibitoru resorpce kostní hmoty pro výrobu léčiva pro léčení osteoporózy ve fyzické kombinaci nebo pro podávání po sobě.
    r
CZ0113299A 1996-10-02 1997-10-01 Deriváty vitronektinu CZ299076B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2732096P 1996-10-02 1996-10-02
US4377697P 1997-04-11 1997-04-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ113299A3 true CZ113299A3 (cs) 2000-03-15
CZ299076B6 CZ299076B6 (cs) 2008-04-16

Family

ID=26702318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0113299A CZ299076B6 (cs) 1996-10-02 1997-10-01 Deriváty vitronektinu

Country Status (37)

Country Link
EP (1) EP0957917B1 (cs)
JP (2) JP4491072B2 (cs)
KR (1) KR100589578B1 (cs)
CN (1) CN1114403C (cs)
AP (1) AP1463A (cs)
AR (1) AR008878A1 (cs)
AT (1) ATE312089T1 (cs)
AU (1) AU733417B2 (cs)
BG (1) BG64581B1 (cs)
BR (1) BR9712248B1 (cs)
CA (1) CA2267224C (cs)
CO (1) CO4900046A1 (cs)
CY (1) CY2576B1 (cs)
CZ (1) CZ299076B6 (cs)
DE (1) DE69734833T2 (cs)
DK (1) DK0957917T3 (cs)
DZ (1) DZ2320A1 (cs)
EA (1) EA002419B1 (cs)
ES (1) ES2252775T3 (cs)
HK (1) HK1023730A1 (cs)
HU (1) HU229221B1 (cs)
ID (1) ID19623A (cs)
IL (1) IL129243A (cs)
MA (1) MA24361A1 (cs)
MY (1) MY137606A (cs)
NO (1) NO320194B1 (cs)
NZ (1) NZ334953A (cs)
PE (1) PE10499A1 (cs)
PL (1) PL190859B1 (cs)
RO (1) RO119881B1 (cs)
SA (1) SA98180936B1 (cs)
SK (1) SK285029B6 (cs)
TR (1) TR199900737T2 (cs)
TW (1) TW487702B (cs)
UA (1) UA60311C2 (cs)
UY (2) UY24735A1 (cs)
WO (1) WO1998014192A1 (cs)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA60311C2 (uk) * 1996-10-02 2003-10-15 Смітклайн Бічам Корпорейшн Антагоністи рецептора вітронектину, спосіб одержання цих сполук та фармацевтична композиція
TW527355B (en) 1997-07-02 2003-04-11 Bristol Myers Squibb Co Inhibitors of farnesyl protein transferase
HUP0003949A2 (hu) * 1997-09-24 2001-10-28 Smithkline Beecham Corp. Vitronektin receptor antagonisták, valamint a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
KR20010024249A (ko) * 1997-09-24 2001-03-26 스튜어트 알. 수터 비트로넥틴 수용체 길항제
US6372719B1 (en) * 1998-03-04 2002-04-16 Jay Cunningham ανβ3 integrin antagonists in combination with chemotherapeutic agents
DE19842415A1 (de) * 1998-09-16 2000-03-23 Merck Patent Gmbh Pharmazeutische Zubereitung
BR9916536A (pt) * 1998-12-23 2002-01-02 Searle & Co Método para o tratamento ou prevenção de um distúrbio de neoplasia em um mamìfero em necessidade deste tratamento ou prevenção, e, combinação
WO2000046215A1 (en) * 1999-02-03 2000-08-10 Merck & Co., Inc. Benzazepine derivatives as alpha-v integrin receptor antagonists
IL146222A0 (en) * 1999-04-30 2002-07-25 Univ Michigan Therapeutic applications of pro-apoptotic benzodiazepines
JP2003506452A (ja) * 1999-08-06 2003-02-18 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 発作の治療に有用なビトロネクチン受容体アンタゴニスト
US6514964B1 (en) 1999-09-27 2003-02-04 Amgen Inc. Fused cycloheptane and fused azacycloheptane compounds and their methods of use
DE10027514A1 (de) * 2000-06-06 2002-01-03 Basf Ag Liganden von Integrinrezeptoren
DE10028575A1 (de) 2000-06-14 2002-03-14 Basf Ag Integrinliganden
FR2806082B1 (fr) * 2000-03-07 2002-05-17 Adir Nouveaux composes bicycliques antagonistes des recepteurs de la vitronectine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
WO2002060438A1 (en) 2001-01-29 2002-08-08 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Substituted indoles and their use as integrin antagonists
EP1385504B1 (en) * 2001-04-10 2008-12-17 SmithKline Beecham Corporation Method of inhibiting adhesion formation
SE0101386D0 (sv) 2001-04-20 2001-04-20 Astrazeneca Ab New compounds
EP1387688A2 (en) 2001-05-03 2004-02-11 Merck & Co., Inc. Benzazepinone alpha v integrin receptor antagonists
JP4750360B2 (ja) 2001-10-22 2011-08-17 ザ スクリプス リサーチ インスティチュート 抗体ターゲッティング化合物
GB0215867D0 (en) * 2002-07-09 2002-08-14 Glaxosmithkline Spa Novel method and compounds
JP2006522139A (ja) * 2003-04-04 2006-09-28 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ベンズアゼピンの製造方法およびその中間体
JP5223072B2 (ja) 2004-04-02 2013-06-26 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア ａｖβ５インテグリンに関連のある疾患を治療および予防するための方法および組成物
AU2012216372B2 (en) * 2004-04-02 2015-01-22 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for treating and preventing disease associated with alphaVbeta5 integrin
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
JP2008524334A (ja) * 2004-12-21 2008-07-10 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 方法および処方
CA2631173A1 (en) * 2005-11-29 2007-06-07 Smithkline Beecham Corporation Treatment method
ES2457822T3 (es) 2007-11-08 2014-04-29 The General Hospital Corporation Procedimientos y composiciones de tratamiento de enfermedades proteinúricas
CN101861319B (zh) * 2007-11-16 2013-12-11 宇部兴产株式会社 苯并氮杂*酮化合物
US8076475B2 (en) * 2008-03-06 2011-12-13 Glaxosmithkline Llc Process
EP2395992A2 (en) 2009-02-10 2011-12-21 The Scripps Research Institute Chemically programmed vaccination
AU2010231631A1 (en) 2009-03-30 2011-11-10 Ube Industries, Ltd. Pharmaceutical composition for treatment or prevention of ophthalmic diseases
JP5572996B2 (ja) * 2009-05-15 2014-08-20 宇部興産株式会社 ベンズアゼピノン化合物を有効成分として含有する医薬
EP2456460A4 (en) 2009-07-24 2013-02-20 Univ California METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING AND PREVENTING INEGRINE V ASSOCIATED DISEASES
CA2915237C (en) 2009-11-17 2017-10-10 The Regents Of The University Of Michigan 1,4-benzodiazepine-2,5-diones and related compounds with therapeutic properties
EP2325194A1 (en) * 2009-11-24 2011-05-25 Glycotope GmbH Process for the purification of glycoproteins
BR112016027778A2 (pt) 2014-05-30 2017-08-15 Pfizer Usos de derivados de carbonitrila, sua combinação e sua composição farmacêutica
WO2021218863A1 (zh) * 2020-04-26 2021-11-04 江苏恩华药业股份有限公司 1,5-二氢-2,4-苯二氮䓬-3-酮衍生物及其应用
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU689762B2 (en) * 1992-12-21 1998-04-09 Smithkline Beecham Corporation Bicyclic fibrinogen antagonists
JPH10504807A (ja) * 1994-06-29 1998-05-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ビトロネクチン受容体拮抗剤
JPH10504808A (ja) * 1994-06-29 1998-05-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ビトロネクチン受容体拮抗物質
US6008214A (en) * 1994-08-22 1999-12-28 Smithkline Beecham Corporation Bicyclic compounds
WO1996026190A1 (en) * 1995-02-22 1996-08-29 Smithkline Beecham Corporation Integrin receptor antagonists
UA60311C2 (uk) * 1996-10-02 2003-10-15 Смітклайн Бічам Корпорейшн Антагоністи рецептора вітронектину, спосіб одержання цих сполук та фармацевтична композиція

Also Published As

Publication number Publication date
UY24735A1 (es) 1998-03-30
AU4746297A (en) 1998-04-24
TR199900737T2 (xx) 1999-07-21
DE69734833D1 (de) 2006-01-12
AU733417B2 (en) 2001-05-17
CA2267224C (en) 2007-03-13
CN1238689A (zh) 1999-12-15
KR100589578B1 (ko) 2006-06-15
WO1998014192A1 (en) 1998-04-09
BR9712248A (pt) 1999-08-24
PL190859B1 (pl) 2006-02-28
CZ299076B6 (cs) 2008-04-16
HU229221B1 (en) 2013-09-30
EA002419B1 (ru) 2002-04-25
UY24935A1 (es) 2001-07-31
CA2267224A1 (en) 1998-04-09
EP0957917A4 (en) 2002-05-15
HK1023730A1 (en) 2000-09-22
CN1114403C (zh) 2003-07-16
EA199900356A1 (ru) 2000-02-28
RO119881B1 (ro) 2005-05-30
TW487702B (en) 2002-05-21
NZ334953A (en) 2000-01-28
ES2252775T3 (es) 2006-05-16
BG64581B1 (bg) 2005-08-31
NO991590L (no) 1999-05-31
BR9712248B1 (pt) 2010-06-29
HUP9903769A3 (en) 2000-07-28
JP2010006838A (ja) 2010-01-14
IL129243A (en) 2004-07-25
BG103299A (en) 2000-01-31
ATE312089T1 (de) 2005-12-15
CO4900046A1 (es) 2000-03-27
MA24361A1 (fr) 1998-07-01
CY2576B1 (en) 2008-07-02
JP2001501936A (ja) 2001-02-13
UA60311C2 (uk) 2003-10-15
NO991590D0 (no) 1999-03-31
SK285029B6 (sk) 2006-04-06
DZ2320A1 (fr) 2002-12-28
MY137606A (en) 2009-02-27
SK42599A3 (en) 1999-12-10
HUP9903769A2 (hu) 2000-03-28
PL332674A1 (en) 1999-09-27
AR008878A1 (es) 2000-02-23
IL129243A0 (en) 2000-02-17
AP1463A (en) 2005-09-10
NO320194B1 (no) 2005-11-14
EP0957917A1 (en) 1999-11-24
JP4491072B2 (ja) 2010-06-30
EP0957917B1 (en) 2005-12-07
PE10499A1 (es) 1999-03-27
SA98180936B1 (ar) 2006-05-30
ID19623A (id) 1998-07-23
AP9901493A0 (en) 1999-03-31
DE69734833T2 (de) 2006-07-13
KR20000048816A (ko) 2000-07-25
DK0957917T3 (da) 2006-04-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2267224C (en) Vitronectin receptor antagonists
AU9577498A (en) Vitronectin receptor antagonist
CA2304000A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
US6825188B2 (en) Vitronectin receptor antagonists
US6458814B1 (en) Vitronectin receptor antagonists
US20020123487A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
US20010014737A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
MXPA00002895A (en) Vitronectin receptor antagonist
MXPA01001386A (en) Vitronectin receptor antagonists
MXPA00002896A (en) Vitronectin receptor antagonist
CZ20001061A3 (cs) Antagonista receptoru pro vitronektin

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20161001