NO320194B1 - Vitronektin reseptor antagonister, anvendelse og fremstilling derav samt farmasoytisk sammensetning - Google Patents

Vitronektin reseptor antagonister, anvendelse og fremstilling derav samt farmasoytisk sammensetning Download PDF

Info

Publication number
NO320194B1
NO320194B1 NO19991590A NO991590A NO320194B1 NO 320194 B1 NO320194 B1 NO 320194B1 NO 19991590 A NO19991590 A NO 19991590A NO 991590 A NO991590 A NO 991590A NO 320194 B1 NO320194 B1 NO 320194B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
tetrahydro
oxo
benzazepine
propyloxy
acetic acid
Prior art date
Application number
NO19991590A
Other languages
English (en)
Other versions
NO991590D0 (no
NO991590L (no
Inventor
James Francis Callahan
Richard Mccullock Keenan
Russell Donovan Cousins
Irene Nijole Uzinskas
Chet Kwon
William Henry Miller
Original Assignee
Smithkline Beecham Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Smithkline Beecham Corp filed Critical Smithkline Beecham Corp
Publication of NO991590D0 publication Critical patent/NO991590D0/no
Publication of NO991590L publication Critical patent/NO991590L/no
Publication of NO320194B1 publication Critical patent/NO320194B1/no

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/16—Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører farmasøytiske aktive forbindelser som inhiberer vitronektinreseptoren, anvendelse og fremstilling derav samt farmasøytisk sammensetning.
Integriner er en superfamilie av celleadhesjonreseptorer, som er trans-membranglykoproteiner uttrykt på forskjellige celler. Disse celleoverflateadhesjons-reseptorene innbefatter gpllb/llla (fibrinogenreseptor) og avp3 (vintronektin reseptor). Fibrinogenreseptoren gpllb/llla blir uttrykt på blodplateoverflaten, og medierer blodplateaggregasjon og dannelse av en hemostatisk koagel ved et blødende sår. Philips, et al., Blood., 1988, 71, 831. VitronektinreseptorenOvp3blir uttrykt på et
antall celler, inkludert endotelial, glatt muskel, osteoklast og tumorceller, og har følgelig forskjellige funksjoner. avp3-reseptoren uttrykt på membranen av osteoklastceller medierer adhesjon av osteoklaster til benmatrisen, et nøkkeltrinn i benresorpsjonsprosessen. Ross, et al, J. Biol. Chem., 1987,262, 7703. Osteoporose er en sykdom kjennetegnet ved omfattende benresorpsjon. ctvP3-reseptoren uttrykt på humane aorta glattmuskelceller medierer deres migrering inn i neointima, en fremgangsmåte som kan føre til restenose etter perkutankoronar angioplasti. Brown, et al., Cardiovascular Res., 1994,28,1815. Additionally, Brooks, et al., Cell, 1994, 79,1157 har vist at en <xvP3-antagonist har evne til å fremme tumorregresjon ved indusering av apoptose av angiogene blodårer. Midler som følgelig blokkerer vitronektinreseptoren vil derfor være nyttige for behandling av sykdommer, så som osteoporose, restenose og cancer.
Vitronektinreseptoren er nå kjent for å referere til tre forskjellige integriner, betegnet ocypi, <xvp3og avps. Horton, et al., Int. J. Exp. PathoL, 1990, 71, 741. <xvfa binder fibronektin og vitronektin. avP3 binder en stor mengde ligander, inkludert fibrin, fibrinogen, laminin, trombospondin, vitronektin, von Willebrand's faktor, osteopontin og bensialprotein I. avpsbinder vintronektin. Vitronektinreseptoren avps er blitt vist å være involvert i celleadhesjon ifølge forskjellige celletyper, inkludert mikrovaskulære endotelialceller, (Davis, et al., J. Cell. Biol, 1993, 51, 206), og dets rolle i angiogenesen er blitt bekreftet. Brooks, et al, Science, 1994, 264, 569. Dette ingegrinet er uttrykt på blodårene i humant sårgranuleringsvev, men ikke i normal hud.
Vitronektinreseptoren er kjent for å bli bundet til benmatriseproteiner som inneholder tri-peptid Arg-Gly-Asp (eller RGD)-motivet. Horton, et al., Exp. Cell Res.
1991, 195, 368 beskriver følgelig at RGD-inneholdende peptider og et anti-vitronektinreseptorantistoff (23C6) inhiberer dentinresorpsjon og cellespredningen til osteklaster. I tillegg beskriver Sato, et al., J. Cell Biol. 1990,111,1713 at echistgatin, et slangevenompeptid som inneholder RGD-sekvensen, er en potent inhibitor av benresorpsjon i vevskultur, og hiniberer kopling av osteoklaster til ben.
Det er nå blitt oppdaget at visse forbindelser er potente inhibitorer av avpV og otvpVreseptorer. Det er spesielt blitt oppdaget at slike forbindelser er mer potente inhibitorer av vitronektinreseptoren enn fibrinogenreseptoren.
Foreliggende oppfinnelse omfatter forbindelser med formel (I) som beskrevet nedenfor, som har farmakologisk aktivitet for inhibisjon av vitronektinreseptoren og er nyttige for behandling av osteoporose og inhibering av angiogenese.
Foreliggende oppfinnelse omfatter også en farmasøytisk sammensetning omfattende en forbindelse ifølge formel (I) og en farmasøytisk bærer.
Foreliggende oppfinnelse omfatter nye forbindelser som er mer potente inhibitorer av vitronektinreseptoren enn fibrinogenreseptoren. De nye forbindelsene omfatter en benzasepinkjerne hvor en nitrogen-inneholdende substituent er til stede på den aromatiske seks-ieddete ringen til benzasepin og en alifatisk substituent inneholdende en sur del er til stede på den syv-leddete ringen til benzasepin. Benzasepinirngsystemet antas å reagere fordelaktig med vitronektinreseptoren og orientere substituenten sideveis på de seks- og syv-leddete ringene slik at de også kan reagere gunstig med reseptoren. Det er foretrukket at omtrent tolv til fjorten mellomliggende kovalente bindinger via den korteste intramolekulære veien vil eksistere mellom den sure gruppen på den alifatiske substituenten til den syv-leddete ringen til benzasepin og nitrogen til den nitrogen-inneholdene substituenten på den aromatiske seks-leddete ringen til benzasepin.
Foreliggende oppfinnelse omfatter følgelig forbindelser med formel (I):
hvor: R<1>er A-Co^alkyl, eventuelt substituert med en hvilken som helst oppnåelig kombinasjon av en eller flere avR10eller R<7>;
A er H eller Ar;
R7 er -COR<8>;
hver R<8>er uavhengig -OR";
R1<0>er H eller halogen;
R2 er
en seksleddet aromatisk karbocyklisk ring; eller
R' er H, Ci.6alkyl eller Ar-Co^alkyl;
R" er R", -C(0)R' eller-0(0)0^;
Ry er H, -OR<9>, -NR<9>R9 eller d.6alkyl;
hver R<9>er uavhengig H eller Ci^alkyl;
u er 0 eller 1;
v er 0 eller 1; og
hvor Ar er fenyl eller naftyl, eventuelt substituert med en til tre substituenter valgt fra Rx, (CrC^alkyl, C^alkoksy, C^alkyltio, CF3, NH2, OH, F, Cl, Br eller I:
hvor Rx er valgt fra (Ci-C4)alkyl, OR', SR', (Ci-C4)alkylsulfonyl, (CrC4)alkylsulfoksyl, -CN, N(R,)2, CH2N(R')2, -N02, -CF3, -C02R' -CON(R')2, -COR', -NR'C(0)R', F, Cl, Br, I eller CF3S(0)r;
hvor r er 0,1 eller 2;
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Også innbefattet i foreliggende oppfinnelse er farmasøytisk akseptable addisjonssalter og komplekser av forbindelsene ifølge oppfinnelsen. I tilfeller hvor forbindelsen ifølge oppfinnelsen kan ha en eller flere chirale sentre, ikke spesifisert, innbefatter oppfinnelsen hver unike ikke-rasemiske forbindelser som kan bli fremstilt og oppløst ifølge konvensjonelle teknikker. I tilfeller hvor forbindelser har umettete karbon-karbon dobbelbindinger er både cis (Z) og trans (E)-isomerene innenfor rammen av oppfinnelsen. I tilfeller hvor forbindelser kan eksistere i tautomeriske former, så som keto-enol tautomerer, så som
og hver tautomerisk form er betraktet å være innbefattet
ifølge foreliggende oppfinnelse enten den eksisterer i likevekt eller begrenset til en form av hensiktsmessig substitusjon med R'.
Forbindelsene med formel (I) inhiberer bindingen av vitronektin og andre RGD-inneholdende peptider til vitronektinreseptoren. Inhibisjon av vitronektin-reseptoren på osteoklaster inhiberer osteoklast-benresorpsjon og er nyttig for behandling av sykdommer hvor benresepsjon er assosiert med patologi, så som osteoporose og osteoartritt.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er også nyttige for behandling, inkludert forhindring av angiogene forstyrrelser. Betegnelsen angiogene forstyrrelser som blir anvendt heri, innbefatter tilstander som involverer unormal neovaskularise-ring. Når vekst av nye blodårer er årsaken til, eller bidrar til, patologien assosiert med en sykdom, vil inhibisjon av angiogenesen redusere de skadelige effektene av sykdommen. Et eksempel på et slikt sykdomsmål er diabetisk retinopati. Når vekst av nye blodårer er nødvendig for å understøtte veksten av et skadet vev, vil inhibisjon av angiogenesen redusere blodtilførselen til vevet og dermed bidra til reduksjon av vevsmassen basert på krav til blodtilførsel. Disse eksempler innbefatter vekst av tumorer hvor negovaskularisering er et kontinuerlig krav for at tumoren skal vokse og etablering av faste tumormetastaser. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse inhiberer følgelig tumorvevsangiogenesen og forhindrer dermed tumormetastase og tumorvekst.
Representanter for de nye forbindelsene ifølge oppfinnelsen er følgende: (iJ-S-p^-pyridylaminoJ-l-propyloksyj-a-okso^.S^.S-tetrahydro-IH^-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(4-amino)-2-pyridylamino)-1-propyloksyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(4-metoksy-2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-
1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(2-imidasolylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-[2-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidinyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(6-amino-2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[2-{2-benzimidasolyl)etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[2-benzimidasol-2-yl]-1-etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3-okso-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(R)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamm^ 1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3<>kso-8-[3-[(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)amino]-1-propyloksy]-2,3l4I^ tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(S)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(+)-3<)kso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl]-N-(feff-butoksykarbonyl)amino]-1-porpyloksy]-2,3t4t5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(feff-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-fluormetylbenzyl)-2I3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3-okso-8-[3-(pyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-2-metyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(iJ^-benzyl-S-okso-S-p-tpyirdin^-ylaminoJ-l-propyloksyJ^.S^.S-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-2-(karboksymetyl)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-2-(4-aminobenzyl)-3-okso-8-[3-(pyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(benzoyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(2-imidasolin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2l3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3-okso-8-[3-{pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl}-2l3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(4,6-dimetylpyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2l3,4l5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-8-[3-(4,5,6,7-tetrahydro-1 H-1,3-diasepin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-metyl]-S-okso^.S^.S-tetrahydro-IH^-benzasepin^-eddiksyre;
(±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-y^^ trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-{isobutoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3>4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(S-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3<)kscH8-[3-(4-metylpyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2(2)2-trifl 2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(±)-3<>kso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)]-1-propyloksy]-2-(4-(trifl metyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)h1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretylV^ tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(R)-3<>kso-8-[3-(pyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2l2,2-trifluoretyl)-2,^ tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(S)-8-[3-(4-metylpyridin-2-ylamino> 2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(S)-3-okso-8-[3-{ 1,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(SJ-S-okso^^-fenyletyO-S-p-pyridin^-ytaminoJ-l-propyloksyl^.S^.S-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3^ tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre;
(S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3^ 2,3,4,5-tetrahydro-l H-2-benzasepin-4-eddiksyre; eller
(S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3-okso-2-[4-trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-edd iksyre;
eller et farmasøyhtisk akseptabelt salt derav.
I tilfeller hvor forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan ha en eller flere chirale sentre, hvis ikke spesifisert, innbefatter foreliggende oppfinnelse hver unike ikke-rasemiske forbindelse som kan bli syntetisert og oppløst ved konvensjonelle teknikker. Ifølge foreliggende oppfinnelse er (S)-konfigurasjon med formel (I)-forbindelser foretrukket.
I tilfeller hvor forbindelsene har umettete karbon-karbon dobbeltbindinger hører både cis (Z)- og trans (E)-isomerene innenfor rammen av foreliggende oppfinnelse. Betydningen av en hvilken som helst substituent ved en hvilken som helst forekomst er uavhengig av dettes betydning, eller av en hvilken som helst annen substituents betydning, ved en hvilken som helst forekomst.
Forkortelser og symboler vanligvis anvendt i peptid- og kjemiområder blir anvendt heri for å beskrive forbindelsene ifølge oppfinnelsen. Generelt følger aminosyreforkortelsene IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature som beskeivet i Eur. J. Biochem., 158, 9 (1984).
C-Malkyl som anvendt heri, betyr en eventuelt substituert alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, og innbefatter metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl og t-butyl. C^alkyl innbefatter i tillegg pentyl, n-pentyl, isopentyl, neopentyl og heksyl og enkle alifatiske isomerer derav. Co^alkyl og Co-ealkyl indikerer i tillegg at ingen avlkylgruppe trenger å være til stede (f.eks. at en kovalent binding er til stede).
Halogen eller halo betyr F, Cl, Br, og I.
Ar, som anvendt heri, betyr fenyl eller naftyl, eller fenyl eller naftyl substituert med en til tre substituenter, som de som er definert ovenfor for alkyl, spesielt Ci.4alkyl, Ci^alkoksy, Ci^alktio, CF3, NR2, OH, F, Cl, Br eller I.
Visse reagenser er forkortet heri. DCC refererer til dicykloheksylkarbodiimid, DMAP refererer til dimetylaminopyridin, DIEA refererer til diisopropyetyl amin, EDC refererer til 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid, hydroklorid. HOB referer til 1-hydroksybenzotriasol, THF refererer til tetrahydrofuran, DIEA refererer til diisopropyletylamin, DEAD refererer til dietyl azodikarboksylat, PPh3refererer til trifenylfosfin, DIAD refererer til diisopropyl azodikarboksylat, DME refererer til dimetoksyetan, DMF refererer til dimetylformamid, NBS refererer til N-bromsukkinimid, Pd/C refererer til en palladium på karbonkatalysator, PPA refererer til polyfosforsyre, DPPA refererer til difenylfosforsyre, BOP refererer til benzotriasol-1-yloksy-tris(dimetylamino)fosfonium heksafluorfosfat, HF refererer til hydrofluorsyre, TEA refererer til trietylamin, TFA refererer til trifluoreddiksyre, PCC refererer til pyridinium klorkromat.
Foreliggende oppfinnelse vedrører videre fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) som definert i krav 1, kjennetegnet ved å omsette en forbindelse med formel (IV) med en forbindelse med formel (V):
hvor
R<1>og R<2>er som definert i formel (I), idet eventuelle reaktive forskjellige grupper er beskyttet, og L<1>er OH eller halogen;
og deretter fjerne eventuelle beskyttelsesgrupper, og eventuelt danne et farmasøytisk akseptabelt salt.
Forbindelser med formel (I) blir fremstilt ved generelle fremgangsmåter beskrevet i skjemaene l-Vll.
a) 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid, DEAD, (Ph)3P, DMF; b) cykloheksen, 10% Pd/C, 2-propanol; c) 1,0 N LiOH, THF, H20, deretter
surgjøring.
Forbindelser 1-1, hvor fremstillingen derav følger de generelle prosedyrene beskrevet i Bondinell, et al. (WO 93/00095), blir omsatt med 2-[(3-hydroksy-1 - propyl)amino)payridin-N-oksid i en Mitsunobu-type koplingsreaksjon ( Organic Reactions 1992, 42, 335-656; Synthesis 1981,1-28) for å tilveiebringe I-2. Reaksjonen blir formidlet av komplekset dannet mellom dietylazodikarboksylat og trifenylfosfin, og blir utført i et aprotisk oppløsningsmiddel, bl.a. THF, CH2CI2, eller DMF. Pyridin-N-oksid-delen til 1-2 blir redusert til tilsvarende pyridin 1-3 under betingelser for overføringshydrogenerring ved anvendelse av en paliadiumkatalysator, fortrinnsvis palladium metall på aktivert karbon, i et inert oppløs-ningsmiddel, bl.a. metanol, etanol, eller 2-propanol. Cykloheksen, 1,4-cykloheksadien, maursyre, og salter av maursyre, så som kaliumformat eller ammoniumformat, blir vanligvis anvendt som hydrogenoverføringsreagens i denne reaksjonstypen. Metylesteren til I-3 blir hydrolysert ved anvendelse av vanndig base, f.eks. LiOH i vanndig THF eller NaOH i vanndig metanol eller etanol, og mellomproduktkarboksylatsaltet blir surgjort med en egnet syre, bl.a. TFA eller HCI, for å tilveiebringe karboksylsyre I-4. Alternativt kan mellomproduktkarboksylatsaltet bli isolert, om ønskelig, eller et karboksylatsalt av den frie karboksylsyren kan bli fremstilt ved fremgangsmåter som er velkjente for fagfolk innenfor dette område.
Forbindelser med formel (I) kan også bli fremstilt ved alternativ fremgangsmåte kjent for fagfolk innenfor dette område. For eksempel kan
eterbinding av formel (l)-forbindelser bli dannet ved omsetning av alkoholgruppen til en formel 1-skjema 1-forbindelse med en R<2->forbindelse inneholdende en erstattbar gruppe, så som en klor-, brom- eller jodgruppe. Andre eter-dannende reaksjoner kan bli anvendt og er innlysende for fagfolk innenfor dette område.
a)2-[N-(3-hyroksy-1-propyl)-N-(terf-butoksykaoronyl)amino]pyridin-N-oksid, DEAD, (Ph)3P, DMF; b) LiHMDS, 4-trifluormetylbenzylbromid, DMF; c( cykloheksen, 10%
Pd/C, 2-propanol; d) 1,0 N NaOH, MeOH; e) HCI/dioksan;
Forbindelse 11-1, fremstilt som beskrevet i skjema I, blir omsatt med 2-[N-(3-hydroksy-1-propyl)-N-(fert-butoksykarbonyl)aminopyidin-N-oksid i en Mitsunobu-type koplingsreaksjon som beskrevet i detalj i skjema I. Det resulterende produktet, II-2, kan bli alkyltert i posisjon 2 (benzasepin-nummerering) under standard alkyleringsbetingelser som er velkjente for fagfolk innenfor dette område. For eksempel kan II-2 bli behandlet med en base, så som natriumhydrid, IDA, eller litium heksametyldisilasid, i et hensiktsmessig oppløsningsmiddel, vanligvis THF, DMF, DME, eller blandinger derav, for å tilveiebringe deprotonering av amidet N-H. Behandlingn av resulterende anioniske arter med en hensiktsmessig elektrofil, så som et alkyl- eller benzylhalid, resulterer i N-alkylering for å tilveiebringe produktet, f.eks. II-3. N-oksidet til II-3 kan bli redusert som beskrevet i skjema I for tilveiebringing av II-4, som kan bli forsåpet til II-5 som beskrevet i skjema I. Avspaltning av 11-5 for tilveiebringing av 11-6 blir oppnådd under standard sure betingelser som beskrevet i Green, "Protective Groups in Organic Synthesis" (publisert av Wiley-lnterscience). Slike betingelser er velkjente for fagfolk innenfor dette området. Alternativt kan omdanningen av 11-3 til 11-6 bli oppnådd ved en alternativ sekvens, for eksempel innledende Boc-avspaltning av 11-3, etterfulgt av reduksjon av N-oksidet, og til slutt forsåpning.
a) 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid, DEAD, (Ph)3P, DMF; b) LiHMDS, CH3I, DMF; c)cykloheksen, 10% Pd/C, 2-propanol; d) 1,0 N NaOH, MeOH, deretter
surgjøring.
Forbindelse 111-2, fremstilt som beskrevet i skjema I, kan bli samtidig alkylert i både posisjon 2 (benzasepin-nummerering) og på nitrogenet koplet til pyridin-ringen under standard alkyleringsbetingelser som er velkjente for fagfolk innenfor dette område. F.eks., kan 111-2 bli behandlet med minst to molare ekvivalenter av en base, så som natriumhydrid, LDA, eller litiumheksametyldisilasid, i et hensiktsmessig oppløsnignsmiddel, vanligvis THF, DMF, DME, eller blandinger derav, for å oppnå deprotonering. Behandling av resulterende anioniske arter med et overskudd av hensiktsmessig elektrofil, så som et alkyl- eller benzylhalogenid, resulterer i bis-alkylering for å tilveiebringe produktet, f.eks. 111-3. Omdanning av 111-3 til 111-5 følger fremgangsmåtene beskrevet i skjemaene I og II. a) cykloheksen, 10% Pd/C, 2-propanol; B) HCI/dioksan; c) fert-butylacetylklorid, Et^N, CH2CI2; d) 1,0 N NaOH, MeOH, deretter surgjøring.
Forbindelse IV-2, fremstilt fra IV-1 ved fremgangsmåter beskrevet i skjemaene I - III, kan bli acylert ved nitrogenatomet koplet til pyridin-ringen under standard acyleringsbetingelser velkjente for fagfolk innenfor dette området. F.eks., omsetning av IV-2 med et acyleringsmiddel, blant annet fert-butylacetylklorid, i nærvær av en hensiktsmessig syreoppfanger, generelt trietylamin, diisopropyletylamin, eller pyridin, i et egnet oppløsningsmiddel, oftest CH2CI2, tilveiebringer IV-3. Mange ytterligere fremgangsmåter for acylering av et amin er kjent, og kan finnes i standard referanse-bøker, så som "Compendium of Organic Synthetic Methods", Vol, I -VI (pulibsert av Wiley-lnterscience). Forsåpning av IV-3 som beskrevet i skjemaene I - III, tilveiebringer IV-4.
a) 3-(4-nitrobenzyloksykarbonylamino)-1-propanol, DEAD, (Ph)3P, DMF, CH2CI2; b) H2, Pd/C, EtOH; c) 2-metyltio-2-imidasolinhydriodid, (i-Pr^NEt, dimetylacetamid,
100° C; d) 1,0 N LiOH, THF, H20, deretter surgjøring.
Forbindelse V-1, fremstilt som beskrevet i skjema I, blir omsatt med en beskyttet versjon av 3-amino-1 -propanol, så som 3-(fert-butoksykarbonylamino)-1 - propanol, 3-(benzyloksykarbonylamino)-1-propanol, eller 3-{4-nitrobenzyl-oksykarbonylamino)-1-propanol, i en Mitsunobu-type koplingsreaksjon som beskrevet i skjema I. Den resulterende forbindelsen, V-2, blir avspaltet for tilveiebringing av V-3. Som velkjent for fagfolk innenfor dette området, blir avslpaltningsbetingelser valgt basert på funksjonalitet og beskyttelsesgruppe som er til stede i V-2. F.eks., blir p-nrtro-Cbz-gruppen til stede i V-2 fjernet ved hydrogenolyse i nærvær av en palladiumkatalysator, vanligvis palladium på trekull eller Pd{OH)2på trekull, i et hensiktsmessig oppløsningsmiddel, vanliglvis metanol, etanol, etylacetat, eller blandinger derav. Om ønskelig kan hydrogenolysen bli utført i nærvær av en syre, f.eks. HCI, for å oppnå tilsvarende ammoniumsalt av V-2. Omsetning av V-3 med 2-metyltio-2-imidasolinhydriodid i nærvær av en base, bl.a. diisopropyletylamin, i et egnet oppløsningsmiddel, så som MeOH, EtOH, DMF eller dimetylacetamid, tilveiebringer V-4. Lignende betingelser for tilveiebringing av en beslektet transformasjon er beskrevet i WO 95/32710. Forsåpning for tilveiebringing av V-5 blir oppnådd som beskrevet i skjema I. a) 3-(tert-butoksykarbonylamino)-1-propanol, DEAD, (Ph)3P. DMF, THF; b) TFA, CH2CI2; c) 2-bromopyrimidin, NaHC03, EtOH, tilbakestrømning; d)H2, Pd/C, HCI,
MeOH; e) K2C03, H20.
Forbindelse VI-3, fremstilt fra VI-1 ved fremgangsmåten beskrevet i skjema V, blir omsatt med et 2-halopyrimidin, generelt 2-klorpyrimidin eller 2-brompyrimidin, i nærvær av en egnet syreoppfanger, vanligvis natriumbikarbonat, trietylamin, diisopropyletylamin, eller pyridin, i et egnet oppløsningsmiddel, så som etanol, DMF, eller dimetylacetamid, for tilveiebringing av VI-4. Pyrimidin-ringen til VI-4 blir redusert til tilsvarende 1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-ring ifølge betingelsene rapportert for å tilveiebringe en slik transformasjon (se f.eks. WO 95/32710). VI-4 blir utsatt for hydrogenering i nærvær av en paliadiumkatalysator, fortrinnsvis palladium på aktivert karbon, i et hensiktsmessig oppløsningsmiddel, så som metanol eller etanol. Reaksjonen blir vanligvis utført under sure betingelser; addisjon av en mineralsyre så som HCI er generelt foretrukket. VI-5 blir oppnådd etter basisgjøring av den filtrerte reaksjonsblandingen med K2C03og H20.
a) NaH, 4-(trifluormetyl)benzyl bromid, DMF: b) H2, Pd(OH)2/C, MeOH.
Forbindelse VII-1, fremstilt ifølge den generelle fremgangsmåten beskrevet i
Bondinell, et al., PCT applikation WO 83/00095, publisert 7. januar 1993, og Bondinell, et al., PCT applikation WO 94/14776, blir omsatt med 4-(trifluormetyl)benzylbromid i nærvær av en egnet base, vanligvis natriumhydrid eller litium bis(trimetylsilyl)amid, i et aprotisk oppløsningsmiddel, fortrinnsvis DMF, THF, eller blandinger derav, for å tilveiebringe bis-alkylert produkt VII-2. 4-(trifluormetyl)-benzyleter av VII-2 kan med hensiktsmessig bli fjernet ved hydrogenolyse for å tilveiebringe fenol VII-3. Fremgangsmåter for hydrogenolyse av benzyleter er velkjente for fagfolk innenfor dette område, og er beskrevet i hensiktsmessig referansevolumer, bl.a. i Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis" (publisert av Wiley-lnterscience). Fenol VII-3 blir deretter anvendt for å fremstille forbindelse med formel (I) ved anvendelse av fremgangsmåtene beskrevet i foregående skjemaer.
Amidkoplingsreagensene som anvendt heri, angir reagenser som kan bli anvendt for å danne peptidbindinger. Typiske koplingsmetoder anvender karbo-diimider, aktiverte anhydrider og estere og acylhalider. Reagenser så som EDC, DCC, DPPA, PPA, BOP reagens, HOBt, N-hydroksysukkinimid og oksalylklorid er vanlige.
Koplingsmetoder for å danne peptidbindinger er generelt velkjente innenfor fagområdet. Fremgangsmåter for peptidsynteser generelt angitt av Bodansky et ai, THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS, Springer-Verlag, Berlin, 1984, Ali et al. in J. Med. Chem., 29, 984 (1986) og J. Med. Chem., 30, 2291 (1987) er generelt illustrerende for teknikken og er inkorporert heri som referanse.
Vanlgivis blir amin eller anilin koplet via dets frie aminogruppe til et hensiktsmessig karboksylsyresubstrat ved anvendelse av et egnet karbodimidkoplings-reagens, så som N,N' dicykloheksylkarbodiimid (DCC), eventuelt i nærvær av katalysatorer så som 1-hydroksybenzotriasol (HOBt) og dimetylaminopyridin (DMAP). Andre fremgangsmåter, så som dannelse av aktiverte estere, anhydrider eller syrehalider, av fri karboksyl til et hensiktsmessig beskyttet syresubstrat, og påfølgende reaksjon med fritt amin av et egnet matebeskyttet amin, eventuelt i nærvær av en base, er også egnet. F.eks. blir en beskyttet Boc-amino-syre eller Cbz-amidinobenzosyre behandlet i et vannfritt oppløsningsmiddel, så som metylenklorid eller tetrahydrofuran (TFH), i nærvær av en base, så som N-metyl morfolin, DMAP eller et trialkylamin, med isobutylklorformat for å danne "aktivert anhydrid", som deretter blir omsatt med fritt amin av en andre beskyttet aminosyre eller anilin.
Nyttige mellomprodukter for fremstilling av formel (l)-forbindelser hvor R<2>er en benzimidasol, er beskrevet i Nestor et al, J. Med. Chem. 1984, 27, 320. Represen-tativ fremgangsmåte for fremstilling av benzimidasolforbindelser nyttige som mellomprodukter i foreliggende oppfinnelse er også vanlige innenfor fagområdet, og kan bl.a. finnes i EP-A 0 381 033.
Syreaddisjonssaltene av forbindelsene blir fremstilt på standardmåter i et egnet oppløsningsmiddel fra opphavsforbindelsen og overskudd av en syre, så som saltstyre, hydrobromsyre, fluorsyre, svovelsyre, fosforsyre, eddiksyre, trifluoreddiksyre, maleinsyre, ravsyre og metansulfonsyre. Visse av forbindelsene danner indre salter eller switterioner som kan være akseptable. Kationiske salter blir fremstilt ved behandling av opphavsforbindelsen med et overskudd av alkalisk reagens, så som hydroksid, karbonat eller alkoksid, inneholdene hensiktsmessig kation; eller med et hensiktsmessig organisk amin. Kationer så som Li<+>, Na\ K<+>, Ca<++>, Mg<++>og NF4<+>er spesifikke eksempler på kationer til stede i farmasøytisk akseptable salter.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en farmasøytisk sammensetning som omfatter en forbindelse ifølge formel (I) og en farmasøytisk akseptabel bærer. Følgelig kan forbindelsene med formel (I) blir anvendt for fremstilling av et medikament. Farmasøytiske sammensetninger av forbindelsene med formel (I) fremstilt som beskrevet ovenfor, kan bli formulert som oppløsninger eller lyofiliserte pulvere for parenteral administrasjon. Pulverene kan bli gjenopprettet ved tilsetning av et egnet fortynningsmiddel eller annen farmasøytisk akseptabel bærer før bruk. Den flytende formuleringen kan være en bufret, isotonisk, vanndig oppløsning. Eksempler på egnete fortynningsmidler er normal isotonisk saltvannsoppløsning, standard 5% dekstrose i vann eller bufret natrium eller ammonium acetatoppløsning. En slik formulering er spesielt egnet for parenteral administrering, men kan også bli anvendt for oral administrering eller innbefattet i en innstilt doseinhalator eller forstøver for innånding. Det kan være ønskelig å tilsette eksipienter så som polyvinylpyrrolidon, gelatin, hydroksycellulose, akasi, polyetylglycol, mannitol, natriumklorid eller natriumcitrat.
Alternativt kan disse forbindelsene bli innkapslet, dannet tabletter av eller fremstilt i en emulsjon eller sirup for oral administrering. Farmasøytisk akseptabelt fast stoff eller flytende bærer kan bli tilsatt for å forsterke eller stabilisere sammensetningen, eller for å lette fremstilling av sammensetningen. Faste bærere innbefatter stivelse, laktose, kalsiumsulfatdihydrat, terra alba, magnesiumstearat eller stearinsyre, talk, pektin, akasi, agar eller gelatin. Flytende bærere innbefatter sirup, peanøttolje, olivenolje, saltvann og vann. Bæreren kan også innbefatte et materiale med vedvarende frigjøring så som glycerylmonostearat eller glyceryldistearat, alene eller med en voks. Mengden av fast bærer varierer, men er fortrinnsvis mellom omtrent 20 mg til omtrent 1 g pr. doseringsenhet. Farmasøytiske preparater blir fremstilt ifølge konvensjonelle teknikker for farmasi som innbefatter maling, blanding, granulering og komprimering, hvor nødvendig, for tablettform; eller maling, blanding og fylling for harde gelatinkapselformer. Når en flytende bærer blir anvendt, er preparatet i form av en sirup, eliksir, emulsjon eller en vanndig eller ikke-vanndig suspensjon. En slik flytende formulering kan blir administrert direkte, p.o. eller fylt inn i en bløt gelatinkapsel.
For rektal administrering kan forbindelsen ifølge oppfinnelsen også bli kombinert med eksipienter så som kakaosmør, glycerin, gelatin eller polyetylenglycoler og støpt inn i en suppositorie.
Forbindelsene beskrevet heri er antagonister av vitronektin-reseptoren, og er nyttige for behandling av sykdommer hvori den underliggende patologien skyldes ligand eller celler som reagerer med vitronektin-reseptoren. Forbindelsene er nyttige for behandling av sykdommer hvor tap av benmatrise danner patologi. Foreliggende forbindelser er følgelig nyttige for behandling av osteoporose
Forbindelsen administreres enten oralt eller parenteralt til pasienten, på en måte slik at konsentrasjonen av medikamentet er tilstrekkelig for å inhibere benresorpsjon, eller en annen slik indikasjon. Farmasøytsik sammensetning inneholdende forbindelsen administreres i en oral dose mellom omtrent 0,1 til omtrent 50 mg/kg på en måte som er i samsvar med pasientens tilstand. Det er foretrukket at den orale dosen er omtrent 0,5 til omtrent 20 mg/kg. For akutt terapi er parenteral administrering foretrukket. En intravenøs infusjon av peptid i 5% dekstrose i vann eller normalt saltvann, eller en lignende formulering med egnete eksipienter, er mest effektivt, til tross for at en intramuskulær bolusinjeksjon også er nyttig. Vanligvis vil den parenterale dosen være omtrent 0,01 til omtrent 100 mg/kg; fortrinnsvis mellom 0,1 og 20 mg/kg. Forbindelsene blir administrert en til fire ganger daglig i et nivå for å tilveiebringe en total daglig dose på omtrent 0,4 til omtrent 400 mg/kg/dag. Praksis-nivået og fremgangsmåten hvorved forbindelsene blir administrert, bestemmes lett av fagfolk innenfor dette området ved å sammenligne blodnivået av middelet med nødvendig konsentrasjon for å oppnå en terapeutisk effekt.
Forbindelsene kan bli testet i en av flere biologiske analyser for å bestemme konsentrasjonen av forbindelsen som er nødvendig for å gi farmakologisk effekt.
Inhibisjon av vitronektin-binding
Fast- fase [<3>H]-SK&F-107260 binding til avp3: Human placenta eller humane blodplater avp3(0,1-0,3 mg/ml) i buffer T inneholdende 2mM CaCI2 og 1% oktylglucosid ble fortynnet med buffer T inneholdende 1 mM CaCI2,1 mM MnCI2, 1 mM MgCI2(buffer A) og 0,05% NaN3<og deretter øyeblikkelig tilsatt til 96-brønn ELISA skåler (Coming, New York, NY) ved 0,1 ml pr. brønn. 0,1 - 0,2 jig avp3ble tilsatt pr. brønn. Skålene ble inkubert over natt ved 4° C. Ved tidspunkt for eksperimentet ble brønnene vasket en gang med buffer A og ble inkubert med 0,1 ml 3,5% bovint serum albumin i samme buffer i 1 time ved romtemperatur. Etter inkubasjon ble brønnene fullstendig utsugd og vasket to ganger med 0,2 ml buffer A.
Forbindelsene ble oppløst i 100% DMSO for å tilveiebringe en 2 mM stamoppløsning, som ble fortynnet med bindingsbuffer (15 mM Tris-CHI (pH 7,4), 100 mM NaCI, 1 mM CaCI2,1 mM MnCI2,1 mM MgCI2)til en endelig konsentrasjon av forbindelsen på 100 nM. Denne oppløsningen blir deretter fortynnet til nødvendig konsentrasjon av sluttforbindelsen. Forskjellige konsentrasjoner av umerkete antagonister (0,001 -100jiM) ble tilsatt til brønnene i triplikater, etterfulgt av tilsetning av 5,0 nM [<3>H]-SK&F-107260 (65 - 86 Ci/mmol).
Skålene ble inkubert i en 11. ved romtemepratur. Etter inkubasjon ble brønnene aspirert fullstendig og vasket en gang med 0,2 ml iskald buffer A på en brønn-til-brønn måte. Reseptorene ble oppløst med 0,1 ml 1% SDS og bundet [<3>H]-SK&F-107260 ble bestemt ved væskescintillasjonstelling ved tilsetning av 3 ml Ready Safe i en Beckman LS væskescintillasjonsteller, med 40% effektivitet. Uspesifisert binding av ^Hj-SK&F-107260 ble bestemt i nærvær av [3H]-SK&F-107260 og var totalt mindre enn 1% av total radioligandinnførsel. IC50(konsentrasjon av antagonister som inhiberer 50% binding av [<3>H]-SK&F-107260) ble bestemt ifølge en ikke-lineær, minst et kvadrat kurve-tilpasningsrutine, som var modifisert fra LUNDON-2-programmet. K| (dissosiasjonskonstanttil antagonist) ble beregnet ifølge ligningen: Kj = IC5o/(l1+L/Kd), hvor L og Kd var konsentrasjon og dissosiasjonskonstanten til [<3>H]-SK&F-107260.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse inhiberer vitronektin-bindingen til SK&F 107260 i konsentrasjonsområdet på omtrent 4,0 til omtrent 0,0003 mikromolar.
Forbindelsen ifølge denne oppfinnelsen ble også testet for in vitro og in vivo ben resorpsjon i analyser som er standard innenfor fagområdet for vurdering av inhibisjon av bendannelse, og som titteldannelsesanalysen beskrevet i EP 528 587, som også kan bli utført ved anvendelse av humane osteoklaster istedenfor rotte-osteklaster, og ovarektomisert råttemodell, beskrevet av Wronksi ef al., Cells and Materials 1991, Sup. 1. 69-74.
Valkulær glatt muskelcellemigreringsanalyse
Aorta glatte muskelceller fra rotter eller mennesker ble anvendt. Celle-migreringen ble registrert i et Transwell cellekulturrom ved anvendelse av en polykarbonatmembran med porer på 8 jam (Costar). Den lavere overflaten til filteret ble belagt med vitronektin. Cellene ble suspendert i DMEM supplementert med 0,2% bovint serumalbumin ved en konsentrasjon på 2,5 - 5,0 x 10<6>celler/ml, og ble forbehandlet med testforbindelse ved forskjellige konsentrasjoner i 20 min. ved 20°
C.
Oppløsningsmidlet alene ble anvendt som kontroll. 0,2 ml av cellesuspensjonen ble plassert i den øvre delen av rommet. Den lavere delen inneholdt 0,6 ml DMEM supplementert med 0,2% bovint serumalbumin. Inkubasjon ble utført ved 37° C i en atmosfære bestående av 95% luft/5% C02 i 24 timer. Etter inkubasjon ble ikke-migrerte celler på den øvre overflaten av filteret fjernet ved forsiktig skraping. Filteret ble deretter blandet i metanol og farget med 10% Giemsa karve. Migreringen ble målt enten ved a) telling av antall celler som hadde migrert til den lavere overflaten av filteret eller ved b) ekstrahering av fargete celler med 10% eddiksyre etterfulgt av bestemmelse av absorbansen ved 600 nM.
Tyroparatyroidektomisert rottemodell
Hver eksperimentelle gruppe besto av 5-6 voksne han Sprague-Dawley rotter (250-400 g kroppsvekt). Rottene ble tyroparatyroidektomisert (av oppretter, Taconic Farms) 7 dager før anvendelse. Alle rottene mottok en erstatningsdose av tyroriksin hver tredje dag. Ved mottakelse av rottene, blir sirkulerende ioniserende kalsium-nivåer målt i fullblod rett etter at det er blitt tappet ved haleblodtapping inn i hepariniserte rør. Rottene ble innbefattet dersom ionisert Ca-nivå (målt med en Ciba-Corning model 634 kalsium pH analysator) er <1,2 mM/l. Hver rotte blir utstyrt med et inngående venøst og arterielt kateter for levering av testmateriale og for blodtaking. Rottene ble deretter innordnet i en diett med kalsium-fritt for og deionisert vann. Grunnlinje Ca-nivåer blir målt og hver rotte får tilført enten kontrollbærer eller humant paratyroidhormon 1-34 peptid (hPTH1-34, doser 1,25 ng/kg/t i saltvann(0,1% bovin syrealbumin, Bachem, Ca) eller en blanding av hPTH1-34 og testmateriale, blir kontinuerlig intravenøs infusjon via underlivskateter ved anvendelse av en ytre sprøytepumpe. Kalsemisk respons til hver rotte blir målt i intervaller på to ganger i timen i løpet av infusjonsperioden på 6-8 timer.
Human osteoklastresorpsjon og adhesjonsanalyser
Pitresorpsjon og adhesjonsanalyser er blitt utviklet og standardisert ved anvendelse av normale humane osteoklaster avledet fra osteoklastomvev. Analyse 1 ble utviklet for måling av osteklastpitvolumer ved laser konfokal mikroskopi. Analyse 2 ble utviklet som en høyere gjennomføringsscreening hvor kollagenfragmenter (frigjort i løpet av resorpsjon) blir målt ved konkurrende ELISA.
Analyse 1 (ved anvendelse av laser konfokal mikroskopi)
• Alikvoter av humane osteoklastom-avledete cellesuspensjoner blir fjernet fra flytende nitrogenlager, hurtig oppvarmet ved 37° C og vasket x 1 i RPMI-1640
medium ved sentrifugering (1000 rpm, 5 min. ved 4° C).
• Mediet blir utsugd og erstattet med murint anti-HLA-DR antistoff og deretter fortynnet 1:3 i RPMI-1640 medium. Suspensjonen bli inkubert i 30 min. på is og
ofte blandet.
• Cellene blir vasket x2 med kald RPMI-1640 etterfulgt av sentrifugering (1000 rpm, 5 min. ved 4° C) og cellene blir deretter overført til et sterilt 15 ml sentrifugerar. Antall mononuklare celler blir opptelt i et forbedret Neubauer tellekammer. • Tilstrekkelig magnetiske kuler (5 / mononuklar celle), belagt med geite anti-muse IgG (Dynal, Gret Neck, NY) blir fjernet fra deres stamflaske og plassert i 5 ml friskt medium (dette vasker bort toksisk asid konserveringsmiddel). Mediet blir fjernet ved immobilisering av kulene på en magnet og blir erstattet med friskt
medium.
Kulene blir blandet med cellene og suspensjon inkubert i 30 min. på is.
Suspensjonen blir ofte blandet.
• Kule-belagte celler blir immobilisert på en magnet og gjenværende celler (osteoklast-rich fraksjon) blir dekantert inn i et sterilt 50 ml sentrifugerar. • Friskt medium blir tilsatt til kule-belagte celler for å fjerne eventuelt innesluttete osteoklaster. Denne vaskeprosessen blir gjentatt x10. Kule-belagte celler blir
fjernet.
• Levedyktige osteoklaster blir opptelt i et tellekammer ved anvendelse av fluorescindiacetat for å merke levende celler. En stor engangs plast pasteurisert
pipette blir anvendt for å tilsette prøven til kammeret.
• Osteoklasteret blir pelletert ved sentrifugering og tettheten justert til hensiktsmessig antall EMEM medium (antall osteoklaster er variabelt fra tumor til tumor),
supplementert med 10% fetalt kalveserum og 1,7 g/liter natrium bikarbonat.
3 ml alikvoter av cellesuspensjonen (pr. behandlet forbindelse) blir dekantert
inn i 15 ml sentrifugerør. Cellene blir pelletert ved sentrifugering.
Til hvert rør blir det tilsatt 3 ml av hensiktsmessig forbindelse (fortynnet til
50 nm i EMEM medium). Også innbefattet er hensiktsmessige bærekontroller, en positiv kontroll (anti-vitronektin-reseptor munn monoklonalt antistoff [87MEM1] fortynnet til 100 ug/ml) og en isotypekontroll (lgG2a fortynnet til 100 ug/ml).
Prøvene blir inkubert ved 37° C i 30 min.
0,5 ml alikvoter av cellene blir sådd ut på sterile tannobjektglass i en 48-brønn
skål og inkubert ved 37°C i 2 timer. Hver behandling blir screenet firedoblet. Objektglassene blir vasket i seks skift med varm PBS (10 ml / brønn i en 6-brønn skål) og deretter plassert i friskt medium inneholdende behandlings-forbindelsen eller kontrollprøvene. Prøvene blir inkubert ved 37° C i 48 timer.
Tartratresistenssyrefosfatase ( TRAP) prosedyre ( selektiv farging for celler fra osteoklastlinjen)
Benobjektglass inneholdende koplete osteoklaster blir vasket i fosfatbufret
saltvann og fiksert i 2% gluteraldehyd (i 0,2 m natriumkakodylat) i 5 min.
De blir deretter vasket i vann og inkubert i 4 minutter i TRAP buffer ved 37° C
(0,5 mg/ml naftol AS-BI fosfat oppløst i en N,N-dimetylformamid og blandet med 0,25 M sitratbuffer (pH 4,5), inneholdende 10 mM natriumtartrat.
• Etter en vask i kaldt vann blir objektglassene nedsenket i kald acetat buffer (0,1 M pH 6,2) inneholdende 1 mg/ml hurtig rød karve og inkubert ved 4° C i 4
minutter.
• Buffer i overskudd blir sugd ut, og objektmassene lufttørket etter vasking i vann. • TRAP positive osteoklaster (mursteinsrød/fiolett precipitat) blir opptelt ved
brett-felt mikroskopi og blir deretter fjernet fra overflaten av tannvektgasset ved
soniering.
• Pit volumene blir bestemt ved en anvendelse av Nikon/Lasertec ILM21W) konfokalt mikroskop.
Analyse 2 (ved anvendelse av en ELISA avlesning)
Humane osteoklaster blir anriket og preparert for forbindelsesscreening som beskrevet i de opprinnelige 9 trinnene i analyse 1. For klarhet blir disse trinnene gjentatt nedenfor.
Alikvoter av humane osteoklastom-avledete cellesuspensjoner blir fjernet fra lagring i flytende nitrogen, hurtig oppvarmet ved 37° C og vasket x1 i RPMI-1640
medium ved sentrifugering (1000 rpm, 4 min. ved 4° C).
• Mediet blir utsugd og erstattet med murint anti-HLA-DR antistoff og deretter fortynnet 1:3 i RPMI-1640 medium. Suspensjon blir inkubert i 30 min. på is og ofte
blandet.
• Cellene blir vasket x2 med kald RPMI-1640 etterfulgt av sentrifugering (1000 rpm, 5 min ved 4° C), og cellene blir deretter overført til et sterilt 15 ml sentrifugerar. Antall mononuklare celler blir opptelt i et forbedret Neubauer tellekammer. • Tilstrekkelig magnetiske kuler (5 / mononuklar celle), belagt med geite anti-muse IgG (Dynal, Great Neck, NY) blir fjernet fra deres stamflaske og plassert i • 5 ml friskt medium (dette vasker bort toksiske asid konserveringsmidler). Mediet blir fjernet ved immobilisering av kulene på en magnet og blir erstattet med friskt
medium.
• Kulene blir blandet med cellene og suspensjon inkubert i 30 min. på is. Suspensjonen blir hurtig blandet. • Kule-belagte celler blir immobilisert på en magnet og gjenværende celler (osteklast-rik fraksjon) blir dekantert inn i et sterilt 50 ml centrifugerør. • Friskt medium blir tilsatt til kule-belagte celler for å fjerne eventuelt innesluttete osteoklaster. Denne vaskeprosessen blir gjentatt x10. Kule-belagte celler blir
fjernet.
• Levedyktige osteoklastere blir opptelt i et tellekammer ved anvendelse av fluorescindiacetat for å merke levende celler. En stor engangsplast pasteurisert
pipette blir anvendt for å tilsette prøven til kammeret.
• Osteoklastere blir pelletert ved sentrifugering og tettheten justert til hensiktsmessig antall i EMEM medium (antall osteoklaster er variable fra tumor til tumor), supplementert med 10% fetal kalveserum og 1,7 g/liter natriumbikarbonat.
I kontrast til fremgangsmåten beskrevet ovenfor i alalyse 1, blir forbindelsene screenet i 4 doser for å oppnå IC50-som angitt nedenfor: • Osteoklast-preparatene blir preinkubert i 30 minutter ved 37° C med testforbindelse (4 doser) eller kontroller. • De blir deretter sådd ut på bovine kortikale benobjektglass i brønnene til en 48-brønn vevskulturskål og inkubert i ytterligere 2 timer ved 37° C. • Benobjektglassene blir vasket i seks skift med varmt fosfatbufret saltvann (PBS), for å fjerne ikke-adeherente celler, og blir deretter returnert til brønnene av
en 48-brønn skål inneholdende frisk forbindelse eller kontroller.
• Vevskulturskål blir deretter inkubert i 48 timer ved 37° C.
Supernatanter fra hver brønn blir utsugd i individuelle rør og blir screenet i en konkurrende ELISA som detekterer c-telopeptid type 1 kollagen som blir frigjort i løpet av resorpsjonsprosessen. Et egnet kommersielt tilgjengelig ELISA (Osteometer, Danmark) som inneholder et kanin-antistoff som spesifikt reagerer med en 8-aminosyresekvens (Glu-Lys-Ala-His-Asp-Gly-Gly-Arg) som er til stede i det karboksy-terminale telopeptidet til en a1 -kjeden av type 1 kollagen. Resultatene blir uttrykt som % inhibisjon av resorpsjon sammenlignet med en bærekontroll.
Human osteklast adhesjonsanalyse
Humane osteklaster blir anriket og preparert for screening av forbindelsen som beskrevet ovenfor i opprinnelig 9 trinn ifølge analyse 1. For klarhet blir disse trinnene gjentatt nedenfor.
Alikvoter av humame osteoklastom-avledete cellesuspensjoner blir fjernet fra lagring i flytende nitrogen, hurtig oppvarmet ved 37° C og vasket x1 i RPMI-1640
medium ved sentrifugering (1000 rpm, 5 min. ved 4° C).
Mediet blir utsugd og erstattet med murint anti-HLA-DR antistoff og deretter fortynnet 1:3 i RPMI-1640 medium. Suspensjonen blir inkubert i 30 min. på is og
ofte blandet.
Cellene blir vasket x2 med kald RPMI-1640 etterfulgt av sentrifugering (1000
rpm, 5 min. ved 4°C), og cellene blir deretter overført til et sterilt 15 ml sentrifugerar. Antall mononuklare celler blir opptelt i et forbedret Naubauer tellekammer. Tilstrekkelige magnetiske kuler (5 /mononuklar celle), blir geite anti-muse IgG
(Dynal, Great Neck, NY) blir fjernet fra deres stamflaske og plassert i 5 ml friskt medium (dette vasker bort toksisk asid konserveringsmiddel). Mediet blir fjernet
ved immobilisering av kulene på en magnet og erstattet med friskt medium. Kulene blir blandet med cellene og suspensjonen inkubert i 30 min. på is.
Suspensjonen blir ofte blandet.
Kule-belagte celler blir immobilisert på en magnet og gjenværende celler
(osteoklast-rik fraksjon) blir dekantert inn i et sterilt 50 ml sentrifugerar.
Friskt medium blir tilsatt til kule-belagte celler for å fjerne eventuelt innesluttete osteoklaster. Denne vaskeprosessen blir gjentatt x10. Kule-belagte celler blir
fjernet.
Levedyktige osteoklaster blir opptelt i et tellekammer ved en anvendelse av fluorescein diacetat for å merke levende celler. En stor engangs plast pasteurisert
pipette blir anvendt for å tilsette prøven til kammeret.
Osteoklasteme blir pelletert ved sentrifugering og tettheten justert til hensiktsmessig antall i EMEM medium (antall osteoklaster er variabelt fra tumor til tumor),
supplementert med 10% fetal kalveserum og 1,7 g/liter natriumbikarbonat. Osteoklastom-avledete osteoklaster blir preinkubert med en forbindelse (4
doser) eller kontroller ved 37° C i 30 minutter.
Cellene blir deretter sådd ut på osteopontin-belagte objektglass (human eller
rotte osteopontin, 2,5 ug/ml) og inkubert i 2 timer ved 37° C.
Ikke-adherente celler blir fjernet ved vasking av objektglassene vigorøst i fosfatbufret saltvann og cellene som er igjen på objektglassene, blir fiksert i aceton.
Osteoklastene blir farget for tartrat-resistent syrefosfatase (TRAP), en selektiv markør for celler av denne fenotypen (se trinnene 15 -17), og blir opptelt ved lys mikroskopi. Resultatene blir uttrykt for % inhibisjon av adhesjon sammenlignet med en bærers kontroll.
Celle adhesjonsanalyse
Celler og Cellekultur
Humane embryoniske nyreceller (HEK294 celler) blir oppnådd fra ATCC (Catalog No. CRL 1573). Cellene ble dyrket i EarTs minimale essensielt medium (EMEM) medium innholdende EarTs salter, 10% fetalt bovinserum, 1% glutamin og 1 % penicillin-streptomycin.
Konstruksjoner og transfeksjoner
Et 3,2 kb EcoRI-Kpnl fragment av av subuneten og et 2,4 kb Xbal-Xhol fragment av en p3subunet ble satt inn i EcoRI - EcoRV kloningssetene til pCDN vektoren (Aiyar et al., 1994) som inneholder en CMV promoter og en G418 selektert markør ved butt endelegering. For stabil ekspresjon ble 80 x 10<6>HEK 293 celler elektrotransformert med av + p3konstruksjoner (20 \ ig DNA av hver subunet) ved anvendelse av en genpulser (Hensley et al, 1994) og sådd ut i 100 mm skåler (5x10<5>celler/skål). Etter 48 timer ble vekstmediet supplementert ved 450ug/ml. Genericin (G418 Sulfate, GIBCO-BRL, Bethesda, MD). Cellene ble opprettholdt i seleksjons-medium helt til koloniene var store nok til å bli analysert.
Immunocytokjemisk analyse av transfekterte celler
For å bestemme om HEK293 transfektanter uttrykte vitronektin-reseptoren, ble cellene immobilisert på mikroskop objektglass ved sentrifugering, fiksert i aceton i 2 min. ved romtemperatur og lufttørket. Spesifikk aktivitet med 23C6, et monoklonalt antistoff spesifikt for ctvfJakomplekset ble demonstert ved anvendelse av en standard indirekte immunofluoressensmetode.
Celleadhesjonsstudier
Corning 96-brønn ELISA skåler ble fargelagt over natt ved 4° C med 0,1 ml human vitronektin (0,2 p-g/rnl i RPMI medium). Ved tidspunkt for eksperimentet ble skålene vasket en gang med RPMI medium og blokkert med 3,5% BSA i 1 time ved romtemperatur. Transfekterte 293 celler ble resuspendert i RPMI medium, supplementert med 20 mM Hepes, pH 7,4 og 0,1% BSA ved en tetthet på 0,5 x 10<6>celler/ml. 0,1 ml cellesuspensjon ble tilsatt til hver brønn og inkubert i 1 time ved 37° C, i nærvær eller fravær av forskjellige avp3antagonister. Etter inkubasjon ble 0,025 ml av en 10% formaldehyd oppløsning, Ph 7,4, tilsatt og cellene ble fiksert ved romtemperatur i 10 min. Skålene ble vasket tre ganger med 0,2 ml PRMI medium og adherente celler farget med 0,1 ml 0,5% toluidin blå i 20 min. ved romtemperatur. Farge i overskudd ble fjernet ved omfattende vasking med deionisert vann. Toluidin blå inkorporert inn i cellene ble eluert ved tilsetning av 0,1 ml 50% etanol inneholdende 50 mM HCI. Celleadhesjon ble kvantifisert i en optisk tetthet på 600 nm på en mikrotiter skålavleser (Titertek Multiskan MC, Sterling, VA).
Fast-faseOyBsbindingsanalyse
Vitronektin-reseptor avPsble renset fra human morkake. Reseptor preparering ble fortynnet med 50 mM Tris-HCI, pH 7,5,100 mM NaCI, 1 mM CaCI2,1 mM MnCfe, 1 mM MgCl2(buffer A) og ble øyeblikkelig tilsatt til 96-brønn ELISA skåler med 0,1 ml pr. brønn. 0,1-0,2 ug ctvp3ble tilsatt pr. brønn. Skålene ble inkubert over natt ved
4° C. Ved tidspunkt for eksperimentet ble brønnene vasket en gang med buffer A og ble inkubert med 0,1 ml 3,5% bovin serumalbumin i samme buffer i 1 time ved romtemperatur. Etter inkubasjon ble cellene utsugd fullstendig og vasket to ganger med 0,2 ml buffer A.
I en [<3>H]-SK&F-10760 konkurrerende analyse ble forskjellige konsentrasjoner av umerkete antagonister (0,001-100 \ iM) tilsatt til brønnene, etterfulgt av tilsetning av 5,0 nM [<3>H]-SK&F-10760. Skålene ble inkubert i 1 time ved romtemperatur. Etter inkubasjon ble brønnene fullstendig utsugd og vasket en gang med 0,2 ml iskald buffer A på en brønn-til-brønn måte. Reseptorene ble oppløst med 0,1 ml 1% SDS og bundet [<3>H]-SK&F-10760 ble bestemt ved væskescintillasjonstelling ved tilsetning av 3 ml Ready Safe i en Beckman LS6800 væskescintillasjonsteller, med 40% effektivitet. Uspesifikk binding av [<3>H]-SK&F-10760 ble bestemt i nærvær av 2 \ iM SK&F-10760 og var mindre enn 1% av total radiolilgand input. IC5o(konsentrasjon til antagonist for inhibering av 50% binding av [<3>H]-SK&F-10760) ble bestemt ifølge en ikke-lineær, minste kvadrat kurve-tilpasningsrutine, som ble modifisert fra LUNDON-2 programmet. Kj (dissosiasjonskonstant til antagonisten) ble beregnet ifølge Cheng og Prusoff ligningen: Kj = IC50/ (1 + Kd), hvor L og Kdvar konsentrasjon over dissasiasjonskonstant til ^Hj-SK&F-10760.
Inhibisjon av RGD-mediert GPIIb-llla binding
Rensing av GPIIb-llla
Ti enheter av utgått på dato, vaskete humane blodplater (oppnådd fra Røde Kors) ble lysert ved forsiktig omrøring i 3% oktylglucosid, 20 mM Tris-HCI, pH 7,4, 140 mM NaCI, 2 mM CaCI2ved 4° C i 21. Lysatet ble sentrifugert ved 100,000 g i 1 t. Oppnådd supernatant ble applisert på en 5 ml linse lektin sefarose 4 B kolonne (E.Y. Labs) preekvilibrert med 20 mM Tris-HCI, pH 7,4,100 mM NaCI, 2 mM CaCI2,1% oktylglukosid (buffer A). Etter 21. inkubasjon ble kolonnen vasket med 50 ml kald buffer A. Lektin-tilbakeholdt GPIIb-llla ble eluert med buffer A inneholdende 10% dekstrose. All prosedyrene ble utført ved 4° C. GPIIb-llla som ble oppnådd, hadde en renhet på >95% som vist ifølge SDS polyakrylamid gel elektroforese.
Inkorporering av GPIIb-llla i liposomer
En blanding av fosfatidylserin (70%) og fosfatidylkolin (30%) (Avanti Polar Lipids) ble tørket til veggene av et glassrør under en nitrogenstrøm. Renset GPIIb-llla ble fortynnet til en sluttkonsentrasjon på 0,5 mg/ml og blandet med fosfolipider i et protein:fosfolipid forhold på 1:3 (w:w). Blandingen ble resuspendert og sonikert i en badesonikator i 5 min. Blandingen ble deretter dialysert over natt ved anvendelse av et dialyserør med utelukkelse ved 12.000-14.000 molekylvekt mot 1000 ganger overskudd av 50 mM Tris-HCI, pH 7,4,100 mM NaCI, 2 mM NaCI2( med 2 skift). GPIIb-llla- inneholdende liposom ble sentrifugert ved 12,000 g i 15 min. og resuspendert i dialyseringsbuffer ved en endelig proteinkonsentrasjon på omtrent 1 mg/ml. Liposomene ble lagret ved -70° C frem til bruk.
Konkurrende binding til GPIIb-llla
Binding til fibrinogenrespetor (GPIIb-llla) ble analysert ifølge en indirekte konkurrende bindingsmetode ved anvendelse av [3H]-SK&F-10760 som en RGD-type ligand. Bindingsanalysen ble utført i en 96-brønn filtreringsskål oppstilling (Millipore Corporation, Bedford, MA) ved anvendelse av 0,22 nm hydrofile durapor-membraner. Brønnene ble fargelagt med 0,22 ml 10 ug/ml polylysin (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.) ved romtemperatur i 11. for å blokkere uspesifikk binding. Forskjellige konsentrasjoner av umerkete benzasepiner ble tilsatt til brønnene firedoblet. [<3>H]-SK&F-10760 ble applisert i hver brønn ved en sluttkonsentrasjon på 4,5 nM, etterfulgt av tilsetning av 1 \ ig rensete blodplate GPIIb-llla-inneholdende liposomer. Blandingene ble inkubert i 11. ved romtemepratur. GPIIb-llla-bundet [3HJ-SK&F-10760 ble separert fra det ubundete ved filtrering ved anvendelsle av en milliporfiltreringsmanifold, etterfulgt av vasking med is-kald buffer (2 ganger, hver 0,2 ml). Bundet radioaktivitet som var igjen på filtrene, ble opptelt i 1,5 ml Ready Solve (Beckman Instruments, Fullerton, CA) i en Beckmann væskescintillasjonsteller (Model LS6800), med 40% effektivitet. Uspesifikk binding ble bestemt i nærvær av 2 nM umerket SK&F-10760 og var mindre enn 0,14% av total radioaktivitet tilsatt til prøvene. Alle datapunktene er i gjennomsnitt av firedoplete bestemmelser.
Konkurransebindingsdata ble anlysert ifølge en ikke-lineær minst-kvadrat kurve tilpasningsprosedyre. Denne metoden tilveiebringer IC50 til antagonister (konsentrasjon av antagonist som inhiberer den spesifikke bindingen til [<3>H]-SK&F-10760 med 50% ved likevekt). IC50 er relatert til likevektsdissosiasjonskonstanten (Ki) til antagonisten basert på Cheng og Prusoff ligningen: Ki = IC50/(1+L/Kd), hvor L er konsentrasjonen til [3H]-SK&F-10760 anvendt i konkurrerende bindingsanalyse (4,5 nM), og Kd er dissosiasjonskonstanten til [3HJ-SK&F-10760 som er 4,5 nM bestemt ved Scatchard analyse.
Foretrukne forbindelser ifølge denne oppfinnelsen har en affinitet for vitronektin-reseptoren i forhold til fibrinogenreseptoren som er høyere enn 10:1. Mest foretrukne forbindelser har et aktivitetsforhold som er høyere enn 100:1.
Effektiviteten til forbindelsene med formel (I) alene eller i kombinasjon med et antineoplastisk middel kan bli bestemt ved anvendelse av flere transplantable musetumormodeller. Se U.S. Patent Nos. 5,004,758 og 5,633,016 for detaljer angående disse modellene.
Eksemplene nedenfor skal illustrere hvordan man kan fremstille og anvende forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse.
EKSEMPLER
Generelt
<1>H nuklear magnetisk resonans (NMR) spektre ble registrert ved enten 250 eller 400 MHz. Kjemiske skift er rapportert i deler pr. million (d) nedstrøms fra indre standard tetrametylsilan (TMS). Forkortelser for NMR data er som følger: s=singlett, d=dublett, t=triplett, q=kvartett, m=multiplett, dd=dublett av dubletter, dt=dublett av tripletter, app=tilsyntelatende, br=bred. J angir under NMR kopling konstant målt i Hertz. CDCI3er deuteriokloroform, DMSO-de er heksadeuteriodimetylsulfoksid, og CD3OD er tetradeuteriometanol. Infrarødt (ID) spektret ble registrert i transmisjons-måte, og båndposisjonene er rapportert i inverse bølgenumre (cm1). Massespektrene ble oppnådd ved anvendelse av elektrospray (ES) eller FAB ioniseringsteknikker. Elementæranalyse ble utført enten i huset eller av Quantitative Technologies Inc., Whitehouse, NJ. Smeltepunkter ble tatt på en Thomas-Hoover smeltepunktapparatur og er ukorrigerte. Alle temperaturer er rapportert i grader Celsius. Analtech Silica Gel GF og E. Merck Silica Gel 60 F-254 tynnkjeksskåler ble anvendt for tynnkjekskromatografi. Både flamme og tetthetskromatografi ble utført på en E. Merck Kieselgel 60 (230-400 mesh) silica gel. Analytisk og preparativ HPLC ble utført på Rainin eller Beckman kromatografer. ODS refererer til en oktadesylsilyl derivatisert silica gel kromatografisk bærer. 5 \ i Apex-ODS indikerer en oktadesylsilyl derivatisert silica gel kromatografisk bærer som har en nominell partikkelstørrelse på 5 n, dannet av Jones Chromatography, Littleton, Colorado. YMC ODS-AQ® er en ODS kromatografisk bærer og er et registrert varemerke til YMC Co. Ltd., Kyoto, Japan. PRP-1® er en polymerisk (styren-divinylbenzen) kromatografisk bærer, og er et registrert varemerke til Hamilton Co., Reno, Nevada. Celite® er et filterhjelpemidddel bestående av syre-vasket diatomesilica, og er et registrert varemerke til Manville Corp., Denver, Colorado.
Fremstilling 1
Fremstilling av metyl (+)-8-hydroksy-3-okso-2,3.4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
a) 4-Brom-3-abrommetylanisol
En blanding av 2-brom-5-metoksytoluen (20 g, 0,10 mol) N-bromosuksinimid
(19,6 g, 0,11 mol), benzoyl perioksid (1 g, 4 mmol), og metylen klorid (200 ml) ble bestrålt i 181. med en flomlampe for å oppnå forsiktig tilbakestrømming. Blandingen ble deretter avkjølt til -10° C i flere timer og oppløsningen ble dekantert bort fra presipitert suksinimid. Oppløsningen ble konsentrert, og resten ble krystallisert fra kloroform/heksan for å tilveiebringe tittelforbindelsen (19,7 g, 70%) som svakt gule prismer:<1>H NMR (CDCI3) 8 7,45 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 6,99 (d, J = 3 Hz,1 H), 6,74 (dd, J = 8,9, 3 Hz, 1 H), 4,55 (s, 2 H) 3,80 (s, 3 H).
b) 3-Bis(ten<*->butoksykarbonyl)aminometyl-4-bromanisol
En blanding av 4-brom-3-brommetylanisol (24 g, 86 mmol) og kalium ditert-butyl iminodikarboksylat (24 g, 94 mmol) i dimetylformamid (200 ml) ble omrørt under argon ved romtemperatur i 181. Reaksjonen ble deretter konsentert under vakuum, og resten ble fordelt mellom etylacetat og vann. Den organiske fasen ble vasket med vann og saltvann, tørket (MgS04) og konsentrert. Resten ble avkrystallisert fra heksan for å tilveiebringe tittelforbindelsen (15 g, 42%) som et hvitt fast stoff:<1>H NMR (CDCI3) 5 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 6,68 (m, 2 H), 4,81 (s, 2 H), 3,74 (s, 3 H), 1,44 (s, 18 H).
c) Metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-bis(fefr-butoksykarbonyl)aminometyl-4-metoksyfenyl]-3-butenoat
En 500 ml flaske ble tilført 3-bis(terf-butoksykarbonyl)aminometyl-4-bromanisol (15 g, 36 mmol), dimetyl itakonat (7,5 g, 47 mmol), tri-o-tolylfosfin (1 g, 3 mol), palladium acetat (0,4 g, 2 mmol), diisopropyletylamin (12,8 ml, 72 mmol), og propionitril (150 ml). Blandingen ble spylt med argon (flere evakuasjoner/argon spylesykluser), deretter oppvarmet til tilbakeløp under argon i 11. Reaksjonen ble avkjølt til RT, deretter helt på is-kald etyleter (500 ml). Det resulterende presipitatet ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble konsentrert. Resten ble renset ved kromatografi på silica gel (10% - 20% etylacetat i heksan) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (11,8 g, 66%) som en svakt gul olje:<1>H NMR (CDCI3) 5 7,94 (s,1 H), 7,15 (d, J = 8,1 Hz,1 H), 6,77 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 6,76 (s, 1 H), 4,73 (s, 2 H), 3,81 (s, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 3,38 (s, 2 H), 1,45 (s, 18 H).
d) Metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-bis(fetr-butoksykarbonyl)aminometyl-4-metoksyfenyijbutanoat
En trykkbeholder tilført metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-bis(tert-butoksykarbonyl)aminometyl-4-metoksyfenyl]-3-butanoat (11,8 g), etylacetat (120 ml), og 10% palladium på trekulll (1 g ) ble ristet under 45 psi hydrogen i 181. Blandingen ble deretter filtrert, og filtratet ble konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen
(12 g, 100%) som en fargeløs olje:<1>H NMR (CDCI3) 8 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 6,71 (m, 2 H), 4,81 (s, 2 H), 3,75 (s, 3 H) 3,66 (s, 3 H), 3,63 (s. 3 H), 3,05 (m, 2 H), 2,73 (m, 2 H), 2,42 (dd, J = 16,0, 4,8 Hz, 1 H), 1,44 (s, 18 H).
e) Metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-(aminometyl)-4-metoksyfenyl]butanoat
En oppløsning av metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-bis(ferf-butoksykarbonyl)aminometyl-4-metoksyfenyl]butanoat (12 g) i kloroform (100 ml) og trifluoreddiksyre (50 ml) ble omrørt under argon ved romtemperatur i 41. Oppløs-ningen ble deretter konsentrert under vakuum for å tilveiebringe tittelforbindelsen (10 g, 100%) som en viskøs olje: MS (ES) m/e 296,2 (M + H)<+>.
f) Metyl (±)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5,-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-(aminometyl)-4-metoksyfenyljbutanoat (10 g, 24 mmol) og trietylamin (17 ml, 120 mmol) i toluen (100 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 181. Reaksjonen ble deretter konsentrert, og resten ble fordelt mellom etylacetat og vann. Det vanndige laget ble ekstrahert to ganger med etylacetat, og kombinert organiske ekstrakter ble vasket med saltvann, tørket (MgS04), og konsentert for å tilveiebringe tittelforbindeslen (4,8 g, 76%) som et brunt fast stoff: MS (ES) m/e 264,2 (M + H)<+>.
g) Metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5,-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat Vannfri aluminiumklorid (7,6 g, 57 mmol) ble porsjonsvis tilsatt til en omrørt oppløsning av (±)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5,-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (3,0 g, 11 mmol) og etanetiol (4,2 ml, 57 mmol) i metylenklorid (100 ml) ved 0° C under argon. Den resulterende blandingen ble varmet til romtemperatur og omrørt over natt og ble deretter konsentrert. Resten ble triturert med is-vann, og resulterende fast stoff ble samlet ved filtrering og tørket for å tilveiebringe tittelforbindelsen (2,64 g, 91%) som et off-white fast stoff: MS (ES) m/e 250,2 (M +
H)<+>.
Fremstilling 2
Fremstilling av metyl (±)-8-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
a) 3-[N-(rerf-Butoksykarbonyl)-N-metylamino]metyl-4-bromanisol
40% vanndig metylamin (49 ml, 563 mmol) ble hurtig tilsatt til en oppløsning
av 4-brom-3-brommetylanisol (15,76 g, 56,29 mmol) i THF (280 ml) ved RT. Etter 2,51. ble reaksjonen konsentrert og resten fordelt mellom Et20 (560 ml) og 1,0 N NaOH (100 ml). Lagene ble separert, og det organiske laget ble tørket på (MgS04) og konsentrert til en gul olje: TLC (5% MeOH/CHCI3) Rf 0,32.
Oljen ble oppløst i CHCI3(280 ml), og di-tert-butyl dikarbonat (1,29 g, 56,29 mmol) ble tilsatt. Reaksjonen ble omrørt ved RT i 45 min., og ble deretter konsentrert. Silica gel kromatografi (5% EtOAc/toluen) ga tittelforbindelsen (16,81 g, 90%) som en lysegul olje: TLC (5% EtOAc/toluen) Rf 0,43;<*>H NMR (400, CDCI3) blanding av rotamerer, 8 7,25 (d, J = 8,79 Hz, 1 H), 6,65 - 6,80 (m, 21 H), 4,40 - 4,55 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 2,81 - 2,97 (m, 3 H), 1,37 -1,60 (m, 9 H); MS (ES) m/e 352/354 (M + Na)<+.>
b) Metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-[N-(fert-butoksykarbonyl)-N-metylamino]metyl-4-metoksyfenyljbutanoat
En oppløsning av 3-[N-(ferf-butoksykarbonyl)-N-metylamino]metyl-4-bromanisol (4,95 g, 15 mmol) dimetyl itakonat (3,08 g, 19,5 mmol) palladiumacetat (168 mg, 0,75 mmol) tri-o-tolylfosfin (457 mg, 1,5 mol), og diisopropyletylamin (5,2 ml, 30 mmol) i propionitril (75 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp i 45 min., ble deretter konsentrert på rotavap. Resten ble fortynnet med Et20 (150 ml), og blandingen ble filtrert gjennom Celite® for å fjerne uoppløselige materialer. Filtratet ble konsentrert, og resten ble på ny konsentrert fra xylener. Kromatografi på silica gel (gradient: 20% EtOAc/heksan) deretter 1:1 EtOAc/heksaner fjernet fosfin og grunnlinjematerialer; og alle andre materialene med Rf 0,40 - 0,70 ble samlet sammen og konsentrert for å tilveiebringe en sløret, gul olje: TLC (30% EtOAc/heksan) Rf 0,41 (hovedprodukt).
Oljen ble oppløst i MeOH (75 ml), og 10% Pd/C ble forsiktig tilsatt. Blandingen ble ristet under hydrogen (50 psi) i 2,51, og ble deretter filtrert gjennom Celite® for å fjerne katalysatoren. Filtratet ble konsentrert, og resten ble igjen tilbakeført til reaksjonsbetingelsene. Etter ytterligere 2,51, ble blandingen filtret gjennom Celite® for å fjerne katalysator, og filtratet ble konsentrert for å tilveiebringe en lysegul olje. Denne ble på ny konsentrert fra CHCIs/heksaner og ble kromatografert på silica gel (gradient: 20% EtOAc/heksaner, deretter 1:1 EtOAc/heksaner) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (4,53 g, 74%) som en lysegul olje: TLC (30% EtOAc(toluen) Rf 0,46;<1>H NMR (400, CDCI3) blanding av rotameren S 7,03 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 6,65 - 6,80 (m, 2 H), 4,46 (br s, 2 H), 3,77 (s, 3 H) 3,64 (s, 3 H), 3,63 (s, 3 H), 2,62 - 3,12 (m,
7 H), 2,35 - 250 (m, 1 H), 1,47 (br s, 9 H); MS (ES) m/e 432 (M + Na)<+>.
c) Metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-(metylamino)metyl-4-metoksyfenyl})butanoat
TFA (55 ml) ble tilsatt på en gang til en oppløsning av metyl (±)-3-karbometoksy-4-[N-(fert-butoksykarbonyl)-N-metylamino]metyl-4-metoksyfenyl]-butanoat (4,53 g, 11,06 mmol) i vannfri CH2CI2(55 ml) ved 0° C, og reaskjonen ble varmet til RT. Etter 11. ble reaksjonen konsentrert, og resten ble på ny konsentrert fra toluen (2 x 100 ml) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (11,06 mmol, kvantitativt) som en lysegul olje: MS (ES) m/e 310 (M + H)<+>.
d) Metyl (±)-8-metoksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-(metylamino)metyl-4-metoksyfenyl]butanoat (11,06 mmol) og diisopropyletylamin (5,8 ml, 33,18 mmol) i toluen (110 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 251., omrørt ved RT i 4 dager og deretter oppvarmet ved tilbakeløp i ytterligere 241. Konsentrering og silica gel kromatografi (5% MeOH i 1:1 EtOAc/CHCI3) ga tittelforbindelsen (2,88 g, 94%) som et lysegult fast stoff: TLC (5% MeOH i 1:1 EtOAc(CHCI3) Rf0,63;<1>H NMR (250, CDCI3) 8 7,02 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,78, (dd, J = 8,4, 2,7 Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 8,4 Hz, 1 H) 3,50 - 3,90 (m, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 2,73 - 3,16 (m, 3 H), 3,04 (s, 3 H), 2,41 (dd, J = 16,7, 5,4 Hz, 1H); MS (ES) m/e 300 (M + Na)<+>, 278 (M + H)<+>.
e) Metyl (±)-8-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Vannfri aluminiumklorid (1,35 g, 10,15 mmol) ble tilsatt på en gang til en
oppløsning av metyl (±)-8-metoksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (562 mg, 2,03 mmol) og etanetiol (0,75 ml, 10,15 mmol) i vannfri CH2CI2(20 ml) ved 0° C under argon. Blandingen ble varmet til RT og omrørt i 4,51„ og ble deretter på ny avkjølt til 0° C. Is-kald H20 (20 ml) ble tilsatt, og blandingen ble omfattende omrørt i 5 min., deretter ekstrahert med CHCI3(3 x 20 ml). Det kombinerte CHCI3lag ble tørket (MgS04) og konsentrert for å tilveiebringe en rest. Det vanndige laget ble filtrert ved sug for å samle et fast presipitat. Dette presipatet og resten fra CHCI3laget ble kombinert i 1:1 MeOH/CHCI3, og oppløsningen ble konsentrert for å tilveiebringe et off-white fast stoff. Dette ble triturert med varm MeOH, og blandingen ble avkjølt til RT. Det faste stoffet ble samlet ved filtreringssug og deretter vasket med kald MeOH og Et20. Tørking i høyt vakuum ved 40° C ga tittelforbindelsen (467,9 mg, 88%) som et fargeløst fast stoff: TLC (5% MeOH/CHCI3) Rf 0,17;<1>H NMR (250, DMSO-d6) 8 9,29 (s, 1 H), 6,89, (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 6,50 - 6,70 (m, 2 H), 5,16 (d, J = 16,4 Hz, 1 H) 3,84 (d, J = 16,4 Hz, 1 H), 3,60 - 3,85 (m, 1 H), 3,56 (s, 3 H), 2,30 - 3,00 (m, 4 H), 2,86 (s, 3 H); MS (ES) m/e 286 (M + Na)<+>, 264 (M + H)<+>.
Fremstilling 3
Fremstilling av 2-[(3-hydroksy-1-propyl(amino]pyridin-N-oksid
a) 2-[(3-Hydroksy-1 -propyl)amino]pyridin-N-oksid
En blanding av 2-klorpyridin-N-oksid (16,6 g, 0,1 mol)-3-amino-1-propanol
(15,3 ml, 0,2 mol), NaHC03(42 g, 0,5 mol), og fert-amyl alkohol (100 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp. Etter 21 t. ble reaksjonen avkjølt, fortynnet med CH2CI2(300 ml) og filtrert ved sug for å fjerne uoppløselige materialer. Filtratet ble konsentrert og på ny konsentrert fra toluen for å tilveiebringe en gul olje. Silica gel kromatografi (20% MeOH/CHCI3) ga tittelforbindelsen (15,62 g, 93%) som et gult fast stoff: TLC (20% MeOH/CHCI3Rf 0,48;<1>H NMR (250, CDCI3) 6 8,07 (dd, J = 6,6,1,2 Hz, 1 H), 7,34, (br t, 1 H), 7,10 - 7,30 (m, 1 H), 6,64 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1 H) 6,40 - 6,60 (m, 1 H), 4,49 (br s, 1 H), 3,65 - 3,90 (m, 2 H), 3,35 - 3,60 (m, 2H), 1,75 - 2,00 (rn, 2 H); MS (ES) m/e 169 (M + H)<+>.
Fremstilling 4
Fremstilling av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]^-nitropyridin-N-oksid
a) 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oksid
Ifølge fremgangsmåten i fremstilling 3, med unntakelse av erstatning av 2-klor-4-nitropyridin-N-oksid (se Jain, P.C.; Chatterjee, S.K.; Anand, N. Indian Journal of Chemistry 1966,403) med 2-klorpyridin-N-oksid-hydroklorid, ble tittelforbindelsen fremstilt som et oransje fast stoff: MS (ES) m/e 214,2 (M + H)<+>.
Fremstilling 5
Fremstillikng av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-metoksypyridin-N-oksid
a) 2-[(3-Hydroksy-1 -propyl)amino]-4-metoksypyridin-N-oksid
En oppløsning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oksid
(0,275 g, 1 mmol) og 0,5 M NaOMe i MeOH (16 ml, 8 mmol) ble oppvarmet ved tilbakeløp under argon i 31. Reaksjonen ble deretter avkjølt, og is AcOH (0,5 ml, 8 mmol) ble tilsatt. Oppløsningen ble konsentrert til tørrhet, og resten ble triturert med CH2CI2. De uoppløselige materialene ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble konsentrert. Silica gel kromatografi (5 -15% MeOH/CH2CI2) ga tittelforbindelsen (0,23 g, 90%) som en fargeløs olje: MS /(ES) m/e 199,0 (M + H)<+>.
Fremstilling 6
Fremstilling av (±)-8-hydroksy-3-okso-2-(2l2l2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
a) 3-[N-(fetr-Butoksykarbonyl)-N-(212,2-trifluoretyl)amino]metyl-4-bromanisol 2,2,2-Trifluoretylamin (4,9 ml, 62,5 mmol) ble hurtig tilsatt til en oppløsning av
4-brom-3-brommetylanisol (7,00 g, 25 mmol) i vannfri DMSO (25 ml) ved RT. Reaksjonen ble varmet til omtrent 30 - 35° C. Etter 21. ble reaksjonen fortynnet med is-kald 0,5 N NaOH (100 ml) og ekstrahert med Et20 (3 x 100 ml). Kombinerte Et20 lag ble vasket sekvensielt med H20 (2 x 25 ml) og saltvann (25 ml), tørket (MgS04) og konsentrert til en lysegul olje: TLC (toluen) Rf 0,43.
Oljen ble oppløst i vannfri CH2CI2(48 ml) i en rundbundet flaske, og di-ferf-butyl dikarbonat (10,48 g, 48,04 mmol) ble tilsatt. Flasken inneholdende reaksjons-oppløsningen ble plassert på rotavap og rotert i vakuum ved 50° C i 161. Den resulterende resten ble fortynnet med heksaner (100 ml), og oppløsningen ble utsådd med en liten mengde rent, fast produkt (oppnådd fra et tidligere eksperiment ved silica gel kromatografi ved anvendelse av 10% EtOAc/heksaner som elueringsmiddel). Blandingen ble latt stå ved RT i flere t., og ble deretter plassert i fryseren over natt. Produktet ble samlet med filtreringssug og vasket med heksaner. Tørking i vakuum ga tittelforbindelsen (7,19 g, 75%) som en fargeløst fast stoff. Morvæsken ble konsentrert og kromatografert på silica gel (10% EtOAc/heksaner) for å tilveiebringe ytterligere tittelforbindelse (1,42 g; total = 8,61 g, 90%): TLC (10% EtOAc/toluen) Rf 0,48; smp 86 - 89° C.<1>H NMR (250, CDCI3) 8 7,44 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,64 - 6,82 (m, 2 H), 4,52 - 4,70 (m, 2 H), 3,61 - 4,00 (m 2 H), 3,77 (s, 3 H), 1,22-168 (m, 9H).
b) Metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-[N-(rerf-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluoretyl)-amino]metyl-4-metoksyfenyl)butanoat
En oppløsning av 3-[N-(fert-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluoretyl)amino]metyl-4-bromanisol (9,17 g, 23,03 mmol), dimetyl itakonat (4,73 g, 29,94 mmol), palladium acetat (259 mg, 1,15 mmol), tri-o-tolylfosfin (701 mg, 2,30 mol), og diisopropyletylamin (8,0 ml, 46,06 mmol) i propionitril (115 ml) ble deoksygenert (3x evakuer-ing/argon spylesyklus), deretter oppvarmet til tilbakeløp under argon. Etter 21. ble reaksjonen konsentrert og på ny konsentrert fra toluen. Silica gel kromatografi (30% EtOAc/heksaner, appliseringsprøve med CH2CI2) fjernet fosfin og grunnlinjematerialer; alle andre materialene med Rf 0,55 - 0,70 ble samlet sammen og konsentrert for tilveiebringing av en gul olje. Denne ble tatt opp i 20% EtOAc/ heksaner (200 ml) og latt stå ved RT i 1 t. og deretter i kjøleskap over natt. Blandingen ble filtrert for å fjerne et gult presipitat, og filtratet ble konsentrert for tilveiebringing av 9,93 g (91%) av en gul olje: TLC (30% EtOAc/heksaner) Ff 0,55 (hovedprodukt).
Oljen ble oppløst i EtOAc (100 ml), og 10% Pd/C (4,44 g, 4,18 mmol) ble tilsatt. Blandingen ble ristet under hydrogen (50 psi) i 3,51. og ble deretter filtrert gjennom Celite® for å fjerne katalysatoren. Filtratet ble konsentrert, og resten ble kromatografert på silica gel (gradient: 20% EtOAc/heksaner) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (7,98 g, 73% i to trinn) som en fargeløs olje: TLC (20% EtOAc/toluen) Rf 0,35;<1>H NMR (250, CDCI3) 8 7,05 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,76 (dd = J 8,4, 2 7 Hz, 1 H), 6,60 - 6,72 (m, 1H) 4,50 - 4,80 (m, 2 H), 3,45 - 3,95 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,63 (s, 6 H), 2,85 - 3,09 (m, 2 H), 2,58 - 2,80 (m, 2H), 2,33 - 2,50 (m, 1 H), 1,20 -1,70 (m 9H; MS (ES) m/e 500 (M + Na)<+>.
c) Metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-(2,2,2-trifluoretylamino)metyl-4-metoksyfenyl]-butanoat
TFA (55 ml) ble tilsatt på en gang til en oppløsning av metyl (±)-3-karbo-metoksy-4-[2-[N-(fetr-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluoretyl)amino]metyl-4-metoksy-fenyljbutanoat (7,98 g, 16,71 mmol) i vannfri CH2CI2(42 ml) ved 0° C under argon, og reaksjonen ble varmet til RT. Etter 1,51, ble reaksjonen konsentrert, og resten ble rekonsentrert fra xylener. Tørking i høyt vakuum ved 40° C ga tittelforbindelsen (8,70 g, kvantitativt) som et gult fast stoff: MS (ES) m/e 378 (M + H)<+>.
d) Metyl (±).8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4l5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (±)-3-karbometoksy-4-[2-(2,2,2-trifluoretylamino)metyl-4-metoksyfenyljbutanoat (16,71 mmol) tripropylamin (9,5 ml, 50,13 mmol) og xylener (170 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp. Etter 631. ble reaksjonen konsentrert, og resten ble kromatografert på silica (2:1 EtOAc/heksaner, applisert med CH2CI2). Tittelforbindelsen (5,33 g, 92% i to trinn) ble oppnådd som et lysegult fast stoff: TLC (40% EtOAc/heksaner) Rf 0,49;<1>H NMR (250, CDCI3) 5 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,5, 2,6, Hz), 6,61 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 5,35 (d, J = 16,8 Hz, 1 H), 3,60 - 4,30 (m, 4 H), 3,79 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 2,81 - 3,15 (m, 3 H), 2,46 (dd, J = 16,9, 5,5 Hz, 1H); MS (ES) m/e 368 (M + Na)<+>, 246 (M + H)<+>.
e) Metyl (±)-8-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av BBr3i CH2CI2(1,0 M, 60 ml, 60 mmol) ble dråpevis tilsatt i
løpet av 30 min. til en oppløsning av metyl (±)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (5,16 g, 14,94 mmol) i vannfri CH2CI2(60 ml) ved -5 til -10° C under argon. Etter ytterligere 11. ved -5 til -10° C ble reaksjonen på ny avkjølt grundig til -10° C. og stoppet ved forsiktig dråpevis tilsetning av MeOH (60 ml). Reaksjonen ble omrørt ved -10 til 0° C i 11. og ble konsentrert opp på rotavap. Resten ble rekonsentrert fra MeOH (2x), deretter fra EtOAc, deretter filtrert gjennom et stykke silica gel (EtOAc elueringsmiddel). Konsentrering av filtratet ga et gult fast stoff som ble triturert med varme heksaner. Tittelforbindelsen (4,74 g, 96%) ble oppnådd som et off-white fast stoff: TLC (1:1 EtOAc/heksaner) Rf 0,40;<1>H NMR (400, DMSO-de) 8 9,28 (s, 1 H), 6,90 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,62 (dd, J = 8,3,
2,5 Hz, 1 H), 6,57 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 5,27 (d, J = 16,7 Hz, 1 H), 4,22 - 4,38 (m, 1 H), 4,07 - 4,22 (m, 1 H), 4,07 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 3,72 - 3,83 (m, 1 H), 3,58 (s, 3 H), 2,94 (dd, J = 17,0, 3.8 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 16,7, 9,1 Hz, 1 H), 2,65 (dd, J = 17,0, 14 Hz, 1 H), 2,49 (dd, J = 16,7, 5,0 Hz, 1H, delvis utydelig av gjenværende oppløs-ningsmiddelsignal); MS (ES) m/e 354 (M + Naf.
Fremstilling 7
HPLC separering av enantiomerene av metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
a) Metyl (R)-±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat og metyl (S)-(-)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble oppløst til dets enantiomerer ved chiral HPLC ved anvendelse av følgende betingelser: Diacel Chiralpak AS<®>kolonne (21,2 x 250 mm), EtOH mobilfase, 7 ml/min. strømningsrate, uv deteksjon ved 254 nm, 70 mg injeksjon; tø for metyl (R)-(+)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat = 21,5 min.; tpt for metyl (SH-J-S.-hydroksy-S-okso^.S^.S-tetrahydro-IH^-benzasepin^-acetat = 39,1 min.
Fremstilling 8
HPLC separasjon av enantiomerene av metyl (±)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
a) Metyl (R)-(+)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat og metyl (S)-(-)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-l H-2-benzasepin-4-acetat
Metyl (±)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble oppløst til dets enantiomerer ved Chiral HPLC ved anvendelse av følgende betingelser: Diacel Chiralpak AS<®>kolonne (21,2 x 250 mm), CH3CN mobilfase, 15 ml/min. strømningsrate, uv deteksjon ved 254 nm, 500 mg injeksjon; tRfor metyl (R)-(+)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat = 10,2 min.; tp for metyl (S)-(-)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat = 19,0 min.
Fremstilling 9
Fremstilling av metyl (S)-(-)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
a) Metyl (S)-(-)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av metyl (S)-(-)-8-metoksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (15,0 g, 0,057 mol) i CHCI3(160 ml) ble dråpevis tilsatt over 30 min. til en oppløsning av bortribromid (20,53 ml, 0,217 mol) i CHCI3(160 ml) ved - 8°C under argon, ved opprettholdelse av temperaturen mellom -5° C og 0° C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved ca. -8° C i 30 min., og deretter ble MeOH (200 ml) tilsatt dråpevis innledningsvis, ved opprettholdelse av temperaturen ved ca. 0°C. Rekasjonsblandingen ble konsentrert for å tilveiebringe en viskøs olje som ble rekonsentrert fra MeOH (100 ml). Oljen ble oppløst i H20/MeOH, og en liten mengde mørkt fast stoff ble fjernet ved filtrering. Filtratet ble nøytralisert (til pH 7) med 50% natriumhydroksid, ved deponering av et hvitt fast stoff. Suspensjonens pH ble justert til 4,5 ved tilsetning av en liten mengde eddiksyre, og det faste stoffet ble samlet og tørket i vakuum for å tilveiebringe tittelforbindelsen (9,7 g, 68%). Produktet ble analysert for chiral renhet ved HPLC: Chiralpak AS<®>kolonne (4,6 x 50 mm), 100% EtOH mobil fase, 0,5 ml/min. strømningsrate, uv deteksjon ved 215 nm; tR= 7,5 min.
(S-enantiomer, 99%); tR = 4,4 min. (R-enantiomer, 1%).
Fremstilling 10
Fremstilling av 2-[(3-hydroksy-i-propyl)amino]-4,6-dimetylpyridin-N-oksid
a) 2-[(3-hydroksy-1 -propyl-amino]-4,6-dimetylpyridin-N-oksid
Ifølge fremgangsmåten i fremstilling 4, med unntakelse av erstatning av 2-klor-4,6-dimetylpyridin-N-oksid (se Brown, E. MJAmer. Chem. Soc. 1957, 79, 3565) med 2-klorpyridin-N-oksid-hydroklorid, ble tittelforbindelsen fremstilt som en klar olje: MS (ES) m/e 197,2 (M + H)<+.>
Fremstilling 11
Fremstilling av 6-(metylamino)-2-pyridyletanol
a) 2-(terf-Butoksykarbonylamino)-6-pikolin
Til en omrørt oppløsning av 2-amino-6-pikolin (4,33 g, 40 mmol), EfeN (6,2 ml,
40 mmol) og CH2CI2(50 ml) ved 0° C ble det tilsatt di-ferf-butyl dikarbonat (9,6 g,
44 mmol). Etter omrøring ved RT over natt, ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum, fortynnet med H20 og ekstrahert med CH2CI2(2 x 50 ml). Tørking (MgS04) og konsentrering ga tittelforbindelsen som en fargeløs olje: MS (ES) m/e 209 (M + Hf.
b) 2-[(2-ferf-Butoksykarbonyl)metylamino]-6-pikolin
Til en suspensjon av NaH (60% dispersjon i mineralolje, 0,44 g, 11 mmol) i
DMF (20 ml) ved 0° C ble det tilsatt en oppløsning av 2-(re/t-butoksykarbonylamino)-6-pikolin (2,1 g, 10 mmol) i DMF (30 ml). Reaksjonen ble omrørt ved 0° C i 15 min.; deretter ble metyl iodid (1,6 g, 11 mmol) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum, fortynnet med H20 og ekstrahert med CH2CI2(3 x 50 ml). Tørking (MgS04) og konsentrering ga tittelforbindelsen som en fargeløs olje: ME (ES) m/e 223 (M +
H)<+>.
c) Etyl-6-[(ferf-butoksykarbonyl)metylamino]-2-pyridylacetat
LDA (18 mmol) ble fremstilt i THF (30 ml), avkjølt til -78° C, og 2-[(ferf-b
butoksykarbonyl)metylamino]-6-pikolin (2 g, 9 mmol) ble tilsatt, og dannet en dyp rød oppløsning. Etter 15 min. ble dietylkarbonat (18 ml, 15 mmol) tilsatt. Burgunderfarget oppløsning ble omrørt ved -78° C i ytterligere 15 min., og deretter ble reaksjonen stoppet med mettet NH4CI oppløsning. Blandingen ble varmet til RT og ekstrahert med EtOAc (3 x 30 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Sililca gel kromatografi ga tittelforbindelsen som en fargeløs olje: MS (ES) m/e 294 (M + H)<+>.
d) Etyl-6-(metylamino)-2-pyridylacetat
En oppløsning av etyl-6-[(te/t-butoksykarbonyl)metylamino]-2-pyridylacetat
(0,6 g, 2 mmol) og 4 M HCI/dioksan (5 ml, 20 mmol) ble omrørt ved RT over natt, deretter konsentrert. Rekonsentrering fra toluen ga tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 195 (M + H)<+>.
e) 6-(Metylamino)-2-pyridyletanol
Til en mekanisk omrørt oppløsning av LiAIH4 i THF (1,0 M, 20 ml, 20,4 mmol)
ble det dråpevis tilsatt en oppløsning av etyl-2-(metylamino)-6-pyridylacetat (0,38 g, 2 mmol) i THF (10 ml). Etter at tilsetningen var fullført, ble reaksjonsblandingen varmet til 0° C og stoppet med 10% NaOH oppløsning. De faste stoffene ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble konsentrert i vakuum. Resten ble oppløst i CH2CI2, og oppløsningen ble tørket (MgS04) og konsentrert. Rekonsentrering fra toluen (3 x) ga tittelforbindelsen som en fargeløs olje: MS (ES) m/e 153 (M + Hf.
Fremstilling 12
Fremstilling av 3-[(terf-butoksykarbonyl)amino]-1 -propanol
a) 3-[(tert-Butoksykarbonyl)amino]-1 -propanol
En oppløsning av di-tert-butyl dikarbonat (10,91 g, 50 mmol) i CH2CI2 (50 ml)
ble dråpevis tilsatt til en oppløsning av 3-amino-1-propanol (11,5 ml, 150 mi) i CH2CI2(250 ml) ved 0° C. Den slørete oppløsningen ble varmet til RT og omrørt i 11., og deretter konsentrert på rotavap. Resten ble tatt opp i H20 (100 ml) og ekstrahert med Et20 (3 x 100 ml). Tørking (MgS04) og konsentrering ga tittelforbindelsen som en fargeløs olje:<1>H NMR (250 MHz, CLCI3) 8 4,80 (br s, 1 H), 3,50 - 3,80 (m, 2 H), 3,13 - 3,42 (m, 2 H), 3,03 (brt, 1 H), 1,55 -1,80 (m, 2 H), 1,45 (s. 9 H); MS (ES) m/e 198 (M + Na)<+.>
Fremstilling 13
Fremstilling av 3-(4-nitrobenzyloksykarbonylamino)-1 -propanol
a) 3-(4-Nitrobenzyloksykarbonylamino)-1 -propanol
Til en oppløsning omrørt under argon ved romtemperatur av 3-amino-1-propanol (0,77 g, 1,1 mmol) og trietylamin (2,85 ml, 7 mmol) i THF (5 ml) ble det tilsatt en suspensjon av 4-nitrobenzyl klorformat (2 g, 1 mmol) i THF (20 ml). Den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur over helgen og ble deretter konsentrert. Resten ble renset ved kromatografi på silica gel (0%-2% MeOH/C^Cb) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,80 g, 34%) som en svakt gul olje: MS (ES) m/e 254,3 (M + H)<+>.
Fremstilling 14
Fremstilling av 2-[N-(3-hydroksy-1 -propyl)-N-[fefr-butoksykarbonyl)amino]pyridin-N-oksid
a) 2-[N-(3-hydroksy-1-propyl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]pyridin-N-oksid
En oppløsning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid (8,0 g, 47,6
mmol) i terf-BuOH (80 ml) ble behandlet med di-fe/f-butyl dikarbonat (11,4 g, 55,3 mmol). Etter 181. ble oppløsningen konsentrert og resten ble triturert med heksan. Det resulterende faste stoffet ble tørket i vakuum for å tilveiebringe tittelforbindelsen (12,5 g, 98%) som et off-white fast stoff: MS (ES) m/e 269,3 (M + H)<+.>
Fremstilling 15
Fremstilling av metyl (±)-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1 -propyloksyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
a) Metyl (±)-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a), med unntakelse av erstatning av 2-[N-(3-hydroksy-1 -propyl)-N-(fert-butoksykarbonyl(amino]pyridin-N-oksid med 2-[3(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid, ble tittelforbindelsen fremstilt som et lyst oransje skum: MS (ES) m/e 500,4 (M + H)<+>.
Fremstilling 16
Fremstilling av 2-[(3-hydroksy-1 -propyl)amino]-4-metylpyridin-N-oksid
En blanding av 2-klor-4-metylpyridin-N-oksid (12,1 g, 0,068 mol) (Brown, E. V. J. Amer. Chem. Soc. 1957, 79, 3656), 3-amino-1-propanol (10,33 ml, 0,14 mol), NaHCC-3 (28 g, 0,34 mol), og ferf-amyl alkohol (70 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp. Etter 161. ble reaksjonen avkjølt, fortynnet med CH2CI2(300 ml) og filtrert med sug for å fjerne uoppløselige materialer. Filtratet ble konsentrert og rekonsentrert fra toluen for å tilveiebringe en gul olje. Omkrystallisering fra CH2CI2/Et20 ga tittelforbindelsen (10,87 g, 88%) som et gult fast stoff: TLC (15% MeOH/CH2CI2) Rf 0,44;<1>H NMR (400, CDCI3) 8 7,92 (d, J = 6,7,1 H), 7,28 (brt, 1 H), 6,43 (s, 1 H), 6,33 (dd, J = 6,6, 2,1 Hz, 1 H), 3,73 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 3,47 (q, H = 6,3 Hz, 2 H), 2,29 (s, 3 H), 1,82 -1,88 (m, 2 H); MS (ES) m/e 183 (M + H)<+>.
Fremstilling 17
Fremstilling av metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-[4-{trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat via alkyliering av metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
a) Metyl (S)-3-okso-8-[4-(trifluormetyl)benzyloksy]-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Til en oppløsning av metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-2-1H-benzasepin-4-acetat (0,31 g, 1,24 mmol) og 4-(trifluormetyl)benzyl bromid (0,89 g, 3,72 mmol) i DMF (10 ml) ble det tilsatt NaH (60% suspensjon i olje, 0,11 g, 2,75 mmol). Etter omrøring ved RT i 41. ble bulk av DMF fjernet under vakuum. Resten ble fordelt mellom met. NaHC03 og EtOAc. Den vanndige fasen ble ekstrahert med EtOAc, og kombinerte organiske ekstrakter ble vasket med met. NaCI, tørket over Na2S04 og konsentrert for å tilveiebringe en klar olje (0,90 g). Radial kromatografi (5% aceton/CH2CI2, silical gel, 6 m skål) ga tittelforbindelsen (0,53 g) som et hvitt skum. MS (ES) m/e 566,1 (M + H)<+>.
b) Metyl (S)-8-hydroksy-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En Parr hydrogeneringsflaske ble tilført metyl (S)-3-okso-8-[4-(trifluormetyl)-benzyloksy]-2-[4-(trifluormetyl)ben2yl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin^4-acetat (0,78 g, 1,38 mmol) og Pearlman's katalysator (20 mg) i MeOH (20 ml). Etter hydrogenering ved 50 psi i 241. ble reaksjonsbeholderen utluftet og katalysatoren ble fjernet ved filtrering. Fjerning av oppløsningsmidlet ga et hvitt skum (0,60 g). Radial kromatografi (5% aceton/CH2CI2, silica gel, 6 m skål) ga tittelforbindelsen (0,42 g) som et hvitt skum.<1>H NMR (240 MHz, CDCI3) 6 7,50 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,90 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,67 (dd, J = 7,5, 3,4 Hz, 1H), 6,39 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 5,05 (m, 2 H), 4,35 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,60 (m, 1H), 2,95 (m, 4H), 2,45 (dd, J = 17,1, 5,1 Hz, 1H).
Fremstilling 18
Fremstilling av (S)-3-okso-8-hydroksy - 3-okso-2-[tirfluormetyl)benzyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat via enantioselektiv syntese
a) 4-Brom-3-brommetylanisol
Til en omrørt oppløsning av 4-brom-3-metylanisol (100 g, 497 mmol) i tørr
diklormetan (500 ml) ble det tilsatt N-bromsuksinimid (97 g, 545 mmol) etterfulgt av benzoyl periodsid (6 g, 25 mmol). Reaksjonen ble forsiktig tilbakestrømmet med en 150 watt flodlampe med reflektoren plassert omtrent 30,5 cm fra reaksjonsflasken. Etter 241. ble reaksjonen konsentrert ved roterende avdampning til halvt volum og latt stå i 41. Det hvite presipitatet som ble dannet, ble filtrert ut og skylt med et lite volum diklormetan. Filtratet ble konsentrert til tørrhet, og gjenværende fast stoff ble triturert med heksaner og filtrert. Tørking under vakuum ga tittelforbindelsen (100,25 g, 72%) som hvite nåler: GC tR= 6,56 min. (HP 530 nm x 20 m metylsilicon kolonne, He bærestrøm 20 ml/min., 100° C opprinnelig temp., 1 min. opprinnelig tid, 10° C/min. rate, 200° C sluttemp., 1 min. endelig tid);<1>H NMR (400 MHz, CDCI2) S 7,44 (d, J = 10 Hz, 1 H), 6,99 (d, J = 3 Hz, 1 H), 6,73 (dd, 1H), 4,55 (s, 2H), 3,80 (s, 3H).
b) 3-[N-(4-Trifluormetylbenzyl)aminometyl]-4-bromanisol
Til en omrørt oppløsning av 4-brom-3-bromometylanisol (35 g, 125 mmol) i
vannfri DMSO (50 ml) og tørr THF (50 ml) ble det tilsatt 4-trifluormetylbenzylamin
(30 g, 171 mmol) etterfulgt av trietylamin (18 ml, 129 mmol). Etter omrøring i 181. ved RT ble reaksjonen konsentrert, fortynnet med vanndig 1 N NaOH (250 ml), og ekstrahert med Et20 (2 x 250 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann, tørket (Na2S04), og konsentrert til tørrhet. Resten som var igjen, ble renset ved flammekromatografi på silica gel (10 til 20% EtOAc/CHCI3) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (34,17 g, 73%): TLC (20% EtOAc/CHCi3) Rf 0,63;<1>H NMR (400 MHz), CDCI3) 8 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 6,70 (dd, 1H), 3,86 (s, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,79 (s, 3H), 1,75 (brs, 1H).
c) 3-[N-(tert-Buoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetylbenzyl)aminometyl]-4-bromanisol
Til en omrørt oppløsning av 3-[N-(4-tirfluormetylbenzyl)aminometyl]-4-bromanisol (34,17 g, 91 mmo) i tørr THF (100 ml) ble det tilsatt di-tert-butyl dikarbonat (22 g, 1901 mmol). Reaksjonen ble omrørt under argon i 181. (vigorøs gassutvikling ble observert). Konsentrering og silica gel kromatografi (5 to 10% EtOAc/heksan) ga tittelforbindelsen (41,09 g, 95%) som en klar olje: TCL (silica, 20% EtOAc/heksan) Rf 0,44;<1>H NMR (400 MHz), CDCI3) 8 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,39-7,33 (m, 2H), 6,83 og 6,72 (2 s, 1H), 6,71 (dd, 1H), 4,54 og 4,50 (2 s, 2H), 4,43 (s, 2H), 3,75 (s. 3H), 1,47 (s, 9H).
d) Metyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetylbenzyl)aminometyl]-4-metoksycinnamat
En oppløsning av 3-[N-tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetylbenzyl)amino-metyl]-4-bromanisol (37,08 g, 78 mmol), metyl acrylat (35 ml, 390 mmol), palladium acetat (0,88 g, 3,9 mmol) tri-o-tolylfosfin (2,38 g, 7,8 mol), og diisopropyletylamin (31 ml, 178 mmol) i acetonitril (200 ml) ble deoksygenert (3 evakueringer/argon strømsykluser), deretter oppvarmet til tilbakeløp under argon (oljebad innstilt på
80° C). Etter 61. ble ytterligere palladium acetat (0,88 g, 3,9 mmol) og tri-o-tolylfosfin (2,38 g, 7,8 mmol) tilsatt, og reaksjonen ble omrørt under tilbakestrømning i ytterligere 181. Reaksjonen ble konsentrert til tørrhet og resten ble tatt opp i 1:1 Et20/petroleum eter (300 mi) og latt stå i 41. Et grått farget presipitat ble filtrert ut og vasket med et lite volum 1:1 Et20/petroleum eter (100 ml). Det organsje-røde filtratet ble konsentrert og renset ved flammekromatografi på silica gel (15% etylacetat/
heksaner). Resulterende rest ble tatt opp i heksan, og blandingen ble latt stå i flere timer og ble dertter filtrert for å fjerne et gult presipitat. Konsentrering av filtratet ga tittelforbindelsen (34,52 g, 92%) som en tykk gul olje: TLC (silica, 20% EtOAc/ heksaner) Rf 0,45;<1>H NMR (400 MHz), CDCI3) 6 7,80 (br s, 1H), 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,29 (br s, 2H), 6,83 (dd, 1H), 6,72 (br s, 1H), 6,23 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 4,58 og 4,53 (2 br s, 2H), 4,46 og 4,37 (2 br s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 149 (s, 9H).
e) Metyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trifluometylbenzyl)aminometyl]-4-metoksydihydrocinnamat
Til 10% Pd/C (5 g, 4,7 mmol på forhånd fuktet med DMF) ble det tilsatt en oppløsning av metyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetylbenzyl)amonimetyl]-4-metoksycinnamat (34,52 g, 72 mmol) i metanol (100 ml). Blandingen ble ristet under hydrogen (50 psi) i en Parr apparatur i 71., deretter filtrert gjennom et stykke Celite® for å fjerne katalysatoren. Filtratet ble konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (34,15 g, 98%), som en fargeløs olje:<1>H NMR (400 MHz), CDCI3) 8 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,31 (br s, 2H), 7,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,76 (dd, 1H), 6,66 (s, 1H), 4,47 (br s, 2H), 4,40 (br s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 2,79 (br s, 2H), 2,47 (t, 2H), 1,48 (s, 9H).
f) 2-[N-(tert-Butoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetylbenzyl)aminometyl]-4-metoksydihydrid kanelsyre
Til en omrørt oppløsning av 2-[N-(tert-butoksycaronyl)-N-(4-trifluormetyl-benzyl)aminometyl]-4-metoksydihydrid kanelsyre (34,15 g, 71 mmol) i dioksan (150 ml) ble det tilsatt vanndig 1 N NaOH (85 ml, 85 mmol). Den slørete reaksjonen ble omrørt ved RT i 41. Den resulterende homogoene oppløsningen ble nøytrailisert med vanndig N HCI (85 ml, 85 mmol) og ekstrahert med etylacetat (2 x 250 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (250 ml), tørket (MgS04) og konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (34,60 g, 100%) som en tykk klar olje: TLC (95:4:1 CHCU/MeOH/HOAc) Rf 0,49;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,30 (br s, 2H), 7,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,78 (dd, 1H), 6,65 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,47 (br s, 2H), 4,42 (br s, 2H), 3,76 ( s, 3H), 2,81 (br s, 2H), 2,53 (t, 2H), 1.47 (s, 9H).
g) (R)-4-Benzyl-2-oksasolidinonyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-{4-trifltrmetylbenzyl)-aminometyl]-4-metoksydihydrocinnamid
Til en omrørt oppløsning av 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetyl-benzyl)aminometyl]-4-metoksydihydro kanelsyre (34,60 g, 71 mmol) og pyridin (6,9 ml, 85 mmol) i tørr diklormetan (200 ml) under argon ble det tilsatt cyanurfluorid (4,4 ml, 48 mmol) via sprøyte. Reaksjonen ble omrøt i 41. ved RT. Den resulterende tykke suspensjonen ble filtrert gjennom et stykke Celite® og skylt med et lite volum tørr diklormetan (50 ml). Det klare filtratet ble helt inn i en separasjonssikt og vasket med iskaldt vann (500 ml). Tørking (MgS04) og konsentrering ga råsyrefluorid (34,70 g, 100%) som ble anvendt uten ytterligere rensing.
Til en omrørt oppløsning av (R)-4-benzyl-2-oksasolidinon (13,8 g, 78 mmol) i tørr THF (300 ml) under argon ved -78° C ble det tilsatt med sprøyte en oppløsning av n-BuLi i heksaner (2,5 M, 30 ml, 75 mmol). Reaksjonen ble omrørt ved -78°C i 15 min., deretter ble en oppløsning av ovennevnte syrefluorid (34,70 g, 71 mmol) i tørr THF (100 ml) tilsatt via sprøyte. Reaksjonen ble omrøt i 11. ved -78° C og ble deretter stoppet med mettet NH4CI og ekstrahert med etylacetat (2 x 200 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (400 ml), tørket (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Rensing ved flammekromatografi på silica gel (20% etylacetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (40,34 g, 90%) som en tykk klar olje: TLC (20% EtOAc/heksan) Rf 0,21;<1>H NMR (400 MHz), CDCI3) 8 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,33-7,26 (m, 5H), 7,16 (m, 3H), 6,77 (dd, 1H), 6,67 (d, J - 2,5 Hz, 1H), 4,62 (m, 1H), 4,60-4,40 (m, 4H), 4,16 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,27 (dd, 1H), 3,21-3,10 (m, 2H), 2,88 (br s, 2H), 2,72 (dd, 1H), 1,48 (s, 9H).
h) (R)-4-Benzyl-2-oksasolidinonyl 3-[2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trlffuormetyl-benzyl)aminometyl]-4-metoksyfenyl]-2(S)-metoksykarbonylmetylpropionamid
Til en omrørt oppløsning av (R)-4-benzyl-2-oksasolidinonyl-2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetylbenzyl)aminometyl]-4-metoksydihydrocinnamid (40,30 g, 64 mmol) i tørr THF (300 ml) ved -78° C ble det tilsatt en oppløsning av litium bis(trimetylsilyl)amid (70 ml, 1 M i THF, 70 mmol) via sprøyte. Etter 30 min. ble metyl bromacetat (30 ml), 317 mmol) tilsatt med sprøyte. Etter ytterligere 30 min. ved
-78° C ble reaksjonen varmet til -20°C og omrørt i ytterligere 61. Reaksjonen ble
stoppet med mettet NH4CI (400 ml) og ekstrahert med etylacetat (2 x 200 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (300 ml), tørket (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Rensing ved flammekromatografi på silica gel (20% etylacetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (38,62 g, 86%) som et hvitt fast stoff: HPLC (Altex Ultrasphere™-Si 5u, 20% EtOAc/heksan) viste at omtrent 20% ikke-alkylert utgangsmateriale fortsatt var til stede HPLC av råreaksjonsblandingen ga 90% for reaksjonen;<1>H NMR (400 MHz), CDCI3) 8 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,40-7,11 m, 8H), 6,71 (dd, 1H), 6,63 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,57-4,34 (m, 6H), 4,03 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 3,85 (t, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), 3,28 (dd, 1H), 2,90 (dd, 1H), 2,86-2,71 (m, 2H), 2,70 (dd, 1H), 2,44 (m, 1H), 1,48 og 1,46 (2s, 9H).
i) Metyl (S)-8-metoksy-3-okso-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tedtrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Til en omrørt oppløsning av (R)-4-benzyl-2-oksasolidinonyl 3-[2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(4-trifluormetylbenzyl)aminometyl]-4-metoksyfenyl]-2(S)-metoksykarbonylmetyl-propionamid (38,0 g, 54 mmol) i THF (300 ml) og vann (100 ml) ble det dråpevis tilsatt ved 0° C over 30 min. en oppløsning av 30% H2O2(18,9 ml) og LiOH H20 (2,3 g, 55 mmol) i vann (62 ml). Den slørete oppløsningen ble omrørt i en ytterligere time ved 0° C. Den resulterende homogene oppløsningen ble sakte behandlet med en oppløsning av natriumsulfat (34,3 g, 272 mmol) i vann (175 ml) ved 0° C, og ble deretter surgjort med en is-kald oppløsning av konsentrert HCI (35 ml) i vann (150 ml). Reaksjonen ble ekstrahert med etylacetat (2 x 200 ml), og kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (400 ml), tørket (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Den resulterende resten ble behandlet med 4,0 M HCI i dioksan (400 ml) med omrøring ved RT (sakte gassutvikling ble observert). Etter 11. ble reaksjonen konsentrert og rekonsentrert fra 1:1 CHCl3/toluen (2 x), og deretter ble resten (37,65 g) tatt opp i tørr DMF (400 ml). Til denne oppløsningen med omrøring under argon ved 0° C i en Dewar-flaske ble det tilsatt trietylamin (15,3 ml, 109 mmol) og NaHC03(22,9 g, 273 mmol), etterfulgt av difenylfosforylasid (13 ml, 60 mmol). Etter omrøring i 241. ved 0° C ble reaksjonen konsentrert til tørrhet. Resten ble tatt opp i etylacetat (400 ml), og vasket sekvensielt med vann (300 ml) og saltvann (300 ml). Tørking (MgS04), konsentrering og flammekromatografi på silica gel (35% etylacetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (16,87g, 74%) som en klar tykk olje: TLC (40% EtOAc/heksan) Rf 0,50; MS (ES) m/e 422,3 (M + H)<+>;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 7,52 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,29 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,02 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,75 (dd, 1H), 6,36 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,18 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,87 (m, 1H), 3,74 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 3,73, (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H), 3,02 (dd, 1H), 2,95 (dd, 1H), 2,48 (dd, 1H).
j) Metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av bortribromtd i CH2CI2(1,0 M, 160 ml, 160 mmol) ble tilsatt dråpevis over 30 min. til en oppløsning av metyl (S)-8-metoksy-3-okso-2-(4-trifluor-metylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (16,67 g, 39,6 mmol) i vannfri CH2CI2(150 ml) ved -20° C under argon. Etter ytterligere 1,51, ved -15 til -20° C ble reaksjonen på ny avkjølt til -20° C og stoppet ved forsiktig dråpevis tilsetning av MeOH (160 ml). Reaksjonen ble omrørt ved -10 til 0° C i11., deretter konsentrert på rotavap. Resten ble på ny konsentrert fra MeOH (2 x). Rensing ved flammekromatografi på silica gel (50 til 100% etyl- acetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (14,87 g, 92%), som et hvitt fast stoff: [a]D-81,8° (c, 1,0, MeOH); TLC (silica, 50% EtOAc/heksan) Rf 0,54; MS (ES) m/e 408,2 (M + H)<+>;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3+ 2% DMSO-d6) 8 7,53 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,70 (dd, 1H), 6,41 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,01 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,73 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 3,71, (s, 3H), 3,01 (dd, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 2,47 (dd, 1H).
Fremstilling 19
HPLC separering av enantiomerene av metyl (±)-8-metoksy-3-okso-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat
a) Metyl (R)-(+)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat og metyl (S)-(-)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat
Metyl (±)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoetyl)-2,3,415-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat ble oppløst i dets enantiomerer ved chiral HPLC ved anvendelse av følgende betingelser: Diacel Chiralcel OJ® kolonne (21,2 x 250 mm), metanol mobil fase, 15 ml/min. strømningsrate, uv deteksjon ved 295 nm, 400 mg injeksjon; tRfor metyl (R)-(+)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat = 4,9 min.; tRfor metyl (S)-(-)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat = 6,6 min.
Fremstilling 20
HPLC separering av enantiomerer av metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat
a) Metyl (R)-(+)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat og (S)-(-)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl).-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat
Metyl (R)-(+)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat ble oppløst i dets enantiomerer ved chiral HPLC ved anvendelse av følgende betingelser: Diacel Chiralcel OD® kolonne (21,2 x 250 mm), 20% etanol i heksan mobil fase, 10 ml /min., uv deteksjon ved 254 nm, 100 mg injeksjon; tRfor metyl (R)-(+)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat = 14,4 min.; rRfor metyl (S)-(-)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-2-benzasepin-4-acetat = 18,5 min.
Fremstilling 21
Fremstilling av metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4 acetat via enantioselektiv syntese
a) 4-Brom-3-brommetylanisol
Til en omrørt oppløsning av 4-brom-3-metylanisol (100 g, 497 mmol) i tørr
diklormetan (500 ml) ble det tilsatt N-bromsuksinimid (97 g, 545 mmol) etterfulgt av benzoyl peroksid (6 g, 25 mmol). Reaksjonen ble forsiktig tilbakestrømmet med en 150 watt flodlampe med reflektor plassert omtrent 30,5 cm fra reaksjonsflasken.
Etter 241. ble reaksjonen konsentrert ved roterende avdampning til halvt volum og latt være i 41. Det hvite presipitatet som ble dannet, ble filtrert ut og skylt med et lite volum diklormetan. Filtratet ble konsentrert til tørrhet og gjenværende fast stoff ble triurert med heksaner og filtrert. Tørking under vakuum ga tittelforbindelsen (100,25 g, 72%) som hvite nåler: GC tR= 6,56 min. (HP 530^m x 20 m metylsilikon kolonne, He bærestrøm 20 ml/min., 100° C opprinnelig temp., 1 min. opprinnelig tid, 10° C/min. rate, 200° C sluttemp., 1 min. endelig tid);<1>H NMR (400 MH CDCI3) 5 7,44 (d, J = 10 Hz, 1 H), 6,99 (d, J = 3 Hz, 1 H), 6,73 (dd, 1H), 4,55 (s, 2H), 3,80 (s, 3H).
b) 3-[N-(2,2,2-Trifluoretyl)-aminometyl]4-bromanisol
2,2,2-Trifluoretylamin (24 g, 242 mmol) ble hurtig tilsatt til en omrørt
oppløsning av 4-brom-3-brommetylanisol (33,6 g, 120 mmol) i vannfri DMSO (125 ml) ved RT. Reaksjonen ble varmet til omtrent 30 - 35° C. Etter omrøring i 181. ble reaksjonen fortynnet med is-kald 1 N NaOH (200 ml) og ekstrahert med Et20 (2 x 300 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (300 ml), tørket (MgS04) og konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (41,35 g, 96%) som en svak gul olje: TLC (toluen) Rf 0,32; 'H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7,43 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 3 Hz, 1H), 6,71 (dd, 1H), 3,93 (br s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,18 (m, 2H), 1,86 (brs, 1H).
c) 3-[N-(tetr-Butoksykabronyl-N-(2,2,2-trifluoretyl)aminometyl]-4-bromanisol
Til 3-[N-(2,2,2-trifluoretyl)aminometyl]-4-bromanisol (41,35 g, 137 mmol) ble
det tilsatt di-tert-butyl dikarbonat (36 g, 165 mmol, flytendegjort ved varming i et varmt vann bad). Reaksjonen ble skylt ned med en liten mengde diklormetan (-20 ml) og omrørt under argon i et 50° C oljebad i 181. (sakte gassutvikling ble observert). Etter konsentrering ved roterende avdampning under vakuum ble den resulterende resten fortynnet med heksaner (100 ml), og oppløsningen ble sådd ut med en liten mengde rent fast produkt (oppnådd fra en tidligere reaksjon ved silica gel kromatografi ved en anvendelse av 10% EtOAc/heksaner som elueringsmiddel). Blandingen ble latt stå ved RT i flere timer og deretter plassert i kjøleskap over natt. Produktet ble samlet ved filtreringssug og vasket med heksaner. Tørking i vakuum ga tittelforbindelsen (48,54 g, 88%) som et fargeløst fast stoff: TLC (10%
EtOAc/toluen) Rf 0,52;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 7,44 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,75 (dd, 1H), 6,71 (s, 1H), 4,65 og 4,58 (2s, 2H), 3,90 og 3.78 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H), 1,51 og 1,42 (2 s, 9H).
d) Metyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluoretyl)aminometyl]-4-metoksy-cinnamat
En oppløsning av 3-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifiuoretyl)aminometyl]-4-bromanisol (48,19 g, 121 mmol), metyl acrylat (55 ml, 605 mmol), palladium acetat (1,36 g, 6,1 mmol), tri-o-tolylfosfin (3,69 g, 12 mol), og diisopropyletylamin (49 ml, 278 mmol) i acetonitril (200 ml) ble deoksygenert (3 x evakurering/argon spylesykluser), deretter oppvarmet til tilbakeløp under argon i oljebad innstilt på 80° C. Etter 61. ble ytterligere palladium acetat (1,36 g, 6,1 mmol) og tri-o-tolylfosfin (3,69 g, 12 mmol) tilsatt og reaksjonen ble omrørt under tilbakeløp i ytterligere 181. Reaksjonen ble konsentrert til tørrhet, og resten ble tatt opp i 1:1 Et20/petroleum eter (300 ml) og latt stå i 41. Et grå-farget presipitat ble filtrert ut og vasket med et lite volum 1:1 Et20/petroleum eter (-100 ml). Det oransje-røde filtratet ble konsentrert og renset ved flammekromatografi på silica gel (15% etyl acetat/heksaner). Den resulterende resten ble tatt opp i heksan, og blandingen ble latt stå i 21. og filtrert for å fjerne et gult presipitat. Konsentrering av filtratet ga tittelforbindelsen (45,85 g, 94%) som en gul olje: TLC (20% EtOAc/heksan) Rf 0,50;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7,84 (d, J = 16 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,86 (dd, 1H), 6,74 pg 6,72 (2s, 1H), 6,26 (d, J = 16 Hz, 1H), 4,74 og 4,70 (2s, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,80 og 3,66 (2m, 2H), 1,51 og 1,45 (2s, 9H)
e) Metyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyI)-N-(2,2,2,-trifluoretyl)aminometyl]-4-metoksy-dihydrocinnamat
Til 10% Pd/C (5 g, 4,7 mmol), på forhånd fuktet med DMF) ble det tilsatt en oppløsning av metyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluormetyl)amino]metyl-4-metoksycinnamat (45,85 g, 113 mmol) i metanol (100 ml). Blandingen ble ristet under hydrogen (50 psi) i en Parr apparatur i 61., deretter filtrert gjennom et stykke Celite® for å fjerne katalysatoren. Filtratet ble konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (43,71 g, 85%) som en fargeløs olje:<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 7,11 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,78 (dd, 1H), 6,65 (s, 1H), 4,63 og 4,60 (2s, 2H), 3,84 og 3,70 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 2,86 (t, 2H), 2,53 (t, 2H), 1,50 og 1,44 (2s, 9H).
f) 2-[N-(tert-Butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-triflyoretyl)am kanelsyre
Til en omrørt oppløsning av metyl 2-[-N-(tetr-butoksycaronyl)-N-{2,2,2-trifluoretyl)aminometyl]-4-metoksydihydrocinnamat (43,7 g, 108 mmol) i dioksan (200 ml) ble det tilsatt vanndig 1 N NaOH (130 mi, 130 mmol). Den slørete reaksjonen ble omrørt ved RT i 41. Den resulterende homogene oppløsningen ble nøytralisert med 1 N HCI (130 ml, 130 mmol) og ekstrahert med etyl acetat (2 x 250 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (250 ml), tørket (MgS04), og konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (43,01 g, 100%) som en tykk klar olje: TLC (95:4:1 CHCI3, MeOH, HOAc) Rf 0,49.
g) (R)-4-Benzyl-2-oksasolidinonyl 2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluoretyl)-aminometyl]-4-metoksydihydro cinnamid
Til en omrørt oppløsning av 2-[N-(tert-butoksykarbonyl-N-(2,2,2-trifluoretyl)-aminoetyl]-4-metoksydihydro kanelsyre (45,0 g, 108 mmol) og pyridin (10 ml, 124 mmol) i tørr diklormetan (400 ml) under argon ble det tilsatt cyanurfluorid (6,8 ml, 74 mmol) via sprøyte. Reaksjonen ble omrørt i 41, ved RT. Den resulterende tykke suspensjonen ble filtrert gjennom et stykke Celite®, og filterstykket ble skylt med et lite volum tørr diklormetan (50 ml). Det klare filtratet ble heit inn i en skilletrakt og vasket med is-kaldt vann (750 ml). Tørking (MgS04) og konsentrering ga rå syrefluorid (43,32 g, 100%) som ble anvendt uten ytterligere rensing.
Til en omrørt oppløsning av (R)-4-benzyl-2-oksasolidinon (21 g, 119 mmol) i
tørr THF (400 ml) under argon ved -78° C ble det tilsatt via sprøyte en oppløsning av n-BuLi i heksaner (2,5 M, 113 mmol). Reaksjonen ble omrørt ved -78° C i 15 min. og deretter ble en oppløsning av ovennevnte syrefluorid (43,32 g, 108 mmol) i tørr THF (100 ml) tilsatt med sprøyte. Reaksjonen ble omrørt i 11. ved -78° C og ble deretter stoppet med mettet NH4CI og ekstrahert med etyl acetat (2 x 250 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (500 ml), tørket med (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Rensing ved flammekromatografi på silica gel (20% etyl acetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (55,27 g, 91%) som en tykk klar olje: TLC (silica, 20% EtOAc/heksan) Rf 0,24;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7,34-7,26 (m, 3H), 7,19-7,16 (m, 3H), 6,78 (dd, 1H), 6,67 (s, 1H), 4,68-4,63 (m, 3H), 4,21-4,11 (m, 2H), 3,87 og
3,74 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,28 (dd, 1H), 3,17 (m, 2H), 2,93 (m, 2H), 2,75 (dd, 1H), 1,50 og 1,45 (3s, 9H).
h) (R)-4-Benzyl-2-oksasolidinonyl 3-[2-N-(tert-butoksykarbonyl)-N-2,2,2-trifluoretyl)-aminometyl]-4-metoksyfenyl]-2(S)-metoksykarbonylmetyl-propion
Til en omrørt oppløsning av (R)-4-benzyl-2-oksasolidinonyl-2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluoretyl)aminometyl]-4-metoksydihydrocinnamid (55,2 g, 100 mmol), i tørr THF (300 ml) ved -78° C ble det tilsatt en oppløsning av litium bis(trimetylsilyl)amid (115 ml, 1 M i THF, 115 mmol) via sprøyte. Etter 30 min. ble metyl bromacetat (47 ml, 497 mmol) tilsatt med sprøyte. Etter ytterligere 30 min. ved -78° C ble reaksjonen varmet til -20° C og omrørt i ytterligere 61. Reaksjonen ble stoppet med mettet NF4CI (400 ml) og ekstrahert med etyl acetat (2 x 250 ml). Kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (400 ml), tørket (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Rensing ved flammekromatografi på silica gel (20% etyl acetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (52,44 g, 75%) som et hvitt fast stoff: HPLC (Altex Ultrasphere™-Si 5u, 20% EtOAc/heksan) viste at omtrent 6.-7% ikke-alkylert utgangsmateriale var fortsatt til stede. HPLC av rå reaksjonsblanding ga en de på 86% for reaksjonen;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 7,35-7,13 (m, 6H), 6.73 (dd, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,69-4,53 (m, 4H), 4,04 (d, 1H), 3,87 (t, 1H), 3,85-3,72 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,64 (s, 3H), 3,31 (dd, 1H), 2,95 (dd, 1H), 2,92-2,71 (m, 2H), 2,71 (dd, 1H), 2,50 (m, 1H), 1,50 og 1,47 (2 brs, 9H).
i) Metyl (S)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Til en omrørt oppløsning av (R)-4-benzyl-2-oksazolidinonyl 3-[2-[N-(tert-butoksykarbonyl)-N-(2,2,2-trifluoretyl)aminometyl]-4-metoksyfenyl]-2(S)-metoksykarbonylmetyl-propionamid (52,40 g, 75 mmol) i THF (300 ml) og vann (100 ml) ble det dråpevis tilsatt ved 0° C over 30 min. en oppløsning av 30% H2O2(26 ml) og LiOH - H2O (3,2 g, 75 mmol) i vann (85 ml). Den slørete oppløsningen ble omrørt i ytterligere 11. ved 0° C. Den resulterende homogene oppløsningen ble sakte behandlet med en oppløsning av natriumsulfit (46 g, 365 mmol) i vann (240 ml) ved 0° C, deretter surgjort med en is-kald oppløsning av konsentrert HCI (45 ml) i vann (200 ml). Reaksjonen ble ekstrahert med etyl acetat (2 x 300 ml), og kombinerte organiske lag ble vasket med saltvann (600 ml), tørket (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Den resulterende resten ble behandlet med 4,0 M HCI i dioksan (500 ml) med en omrøring ved RT (sakte gassutvikling ble observert). Etter 11. ble reaksjonen konsentrert og på ny konsentrert fra 1:1 CHCIs/toluen (23 x), deretter ble resten (48,89 g) tatt opp i tørr DMF (500 ml). Til denne oppløsningen med omrøring under argon ved 0° C i en Dewar-flaske ble det tilsatt trietylamin (21 ml, 150 mmol) og NaHC03(31,5 g, 375 mmol) etterfulgt av difenylfosforylasid (18 ml, 83,5 mmol). Etter omrøring i 241. ved 0° C ble reaksjonen konsentrert til tørrhet. Resten ble tatt opp i etylacetat (500 ml) og vasket sekvensielt med vann (400 ml) og saltvann (400 ml). Tørking (Mg S04), konsentrering og flammekromatografi på silica gel (30% etylacetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (21,81 g, 84%) som et hvitt fast stoff: [cx]d -132,6" (c, 1,0, MeOH); TLC (40% EtOAc/heksan) Rf 0,56; chiral HPLC (Chiracel OD, 20% EtOH/heksan) k' = 2,05; motsatt enantiomer fra en rasemisk standard hadde k' = 1,86 (ikke detektert); MS (ES) m/e 346,2 (M + H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3)6 7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,79 (dd, 1H), 6,61 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 4,17 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 3,99 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,01, (m, 2H), 2,91 (dd, 1H), 2,47 (dd, 1H). Anal beregnet for Ci6H18F3N04: C, 55,65; H, 5,25, N, 4,06; Funnet: C, 55,62; H, 5,27; N, 4,04.
j) Metyl (S)-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av bortribromid i CH2CI2(1,0 M, 250 ml, 250 mmol) ble dråpevis tilsatt over 30 min. til en oppløsning av metyl (S)-8-metoksy-3-okso-2-(2,2,2,-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (21,5 g, 62,3 mmol) i vannfri CH2CI2(230 ml) ved -20° C under argon. Etter ytterligere 1,51. ved -15 til -20° C ble reaksjonen på ny avkjølt til -20° C og stoppet ved forsiktig dråpevis tilsetning av MeOH (250 ml). Reaksjonen ble omrørt ved -10 til 0° C i 11., deretter konsentrert på rotavap. Resten ble på ny konsentrert fra MeOH (2 x). Rensing ved flammekromatografi på silica gel (50% etyl acetat/heksaner) ga tittelforbindelsen (19,38 g, 94%) som et hvitt fast stoff: [a]D-130,5° (c 1,0, MeOH), TLC (silica, 40% EtOAc/heksan) Rf 0,40; MS (ES) m/e 332,1 (M + H)<+>;<1>H NMR (400 MHz, CDCI3+ 2% DMSO-de) 8 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,71 (dd, 1H), 6,58 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 4,21 - 3,98 (m, 2H), 3,96 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 3,82 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 2,98 (dd, 1H), 2,94 (dd, 1H), 2,83 (dd, 1H), 2,46 (dd, 1H). Anal, beregnet for Ci5H16F3N04: C, 54,38; H, 4,87; N, 4,23; Funnet: C, 54,40, H, 4,96, N, 4,22.
Fremstilling 22
Fremstilling av metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat via enantioselektiv syntese
a) 3-[N-(tert-Butoksykarbonyl)-N-(2-fenyletyl)amino]metyl-4-bromanisol 2-Fenetylamin (19,0 ml, 150 mmol) ble tilsatt på en gang til en oppløsning av
4-brom-brommetylanisol (14,0 g, 50,0 mmol) i vannfrittTHF (200 ml) ved RT. Etter 181. ble blandingen konsentrert. Resten ble løst opp i 2 M NaOH (300 ml) og ekstrahert med CH2CI2(3 x 200 ml). Kombinerte CH2CI2lag ble tørket over MgS04og konsentert. Råmamterialet ble filtrert gjennom en plugg av silica gel ved anvendelse av 50% EtOAc/heksaner som elueringsmiddel. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk for å tilveiebringe en gul olje: MS (ES) m/e 320 (M + H)<+>.
Ovennevnte gule olje ble oppløst i vannfri THF (200 ml) og di-tefrt-butyl dikarbonat (13,0 g, 60,0 mmol) ble tilsatt på en gang ved RT. Etter 1 t. ble oppløsningen konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (10% EtOAc/heksaner) ga tittelforbindelsen som et off-white fast stoff (20,8 g, 100% fra 4-brom-3-brom-metylanisole):<1>H NMR (250 MHz, CDCI3) 8 7,51-7,10 (m, 6H), 6,85-6,60 (m, 2H), 4,52^,33 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,52-3,31 (m, 2H), 2,92-2,73 (m, 2H), 1,61-1,33 (m, 9H).
b) 4-[2-[N-(fert-Butoksykarbonyl)-N-(2-fenyletyl)amino]metyl-4-metoksyfenyl]-propionsyre
En oppløsning av 3-[N-(fert-butoksykarbonyl)-N-(2-fenyletyl)amino]metyl-4-bromanisol (20,0 g, 40,0 mmol), benzylacrylat (23,0 g, 144 mmol), palladiumacetat (540 mg, 2,40 mml), tri-o-tolylfosfin (1,46 g, 4,80 mmol) og diisopropyletylamin (17,0 ml, 96,0 mmol) i propionitril (250 ml) ble deoksygenert (3x evakuerings-/argon spylesykluser), deretter oppvarmet til tilbakeløp under argon. Etter 481. ble reaksjonen avkjølt til RT, filtrert gjennom et stykke Celite® og konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (10% EtOAc/heksan) ga en gul olje som ble oppløst i (10% EtOAc/heksaner (100 ml) og latt stå ved 4° C i 721. Det gule presipitatet ble fjernet ved filtrering, deretter ble oppløsningen konsentrert for å tilveiebringe en svak gul olje (14,98g, 62%):<1>H-NMR (250 MHz, CDCI3) 8 8,00-7,85 (m, 1H), 7,61-7,01 (m, 1H), 6,85-6,76 (m, 2H), 6,75-6,67 (m, 1H), 6,32 (m, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,60^,41 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3,52-3,20 (m, 2H), 2,93-2,71 (m, 2H), 1,55-1,33(m, 9H).
Ovennevnte olje ble oppløst i MeOH (150 ml) og 10% Pd/C (6,40 g, 6,00 mmol) ble tilsatt ved 0° C. Blandingen ble varmet til RT, ristet under hydrogen (50 psi) i 71., deretter filtrert gjennkom et stykke Celite® for å fjerne katalysatoren. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk for å tilveiebringe tittelforbindelsen som en tykk gul olje (10,35 g, 83%):<1>H-NMR (250 MHz, CDCI3) 8 7,35-7,02 (m, 6H), 6,85-6.76 (m, 2H), 6,75-6,73 (m, 1H), 6,69-6,68 (m, 1H), 4,42-4,25 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,44-3,25 (m, 2H), 2,92-2,73 (m, 4H), 2,59-2,50 (m, 2H), 1,60-1,33 (m, 9H).
c) (R)-1,1 -Dimetyletyl[(5-metoksy-2-[3-okso-3-[2-okso-4-(fenylmetyl)-3-oksazolidinyl]propyl]fenyl]metyl](2-fenyletyl)karbamat
Til en oppløsning av 4-[2-[N-(rert-butoksykari3onyl)-N-(2-fenyletyl)amino]metyl-4-metoksyfenyl]propionsyre (10,35 g, 25,0 mmol) i CH2CI2(125 ml) ble det tilsatt pyridin (2,4 ml, 30,0 mmol), deretter cyanurfluorid (1,4 ml, 15,0 mmol) ved RT. Etter 2 t. ble blandingen filtrert gjennom et stykke Celite®, vasket med kald (H20 (100 ml) og deretter med saltvann (100 ml), tørket MgS04og konsentrert.
Til en oppløsning av (R)-4-benzyl-2-oksazolidinon (5,30 g, 30,0 mmol) i vannfri THF (125 ml) ble det tilsatt n-BuLi (11,0 ml, 2,5 M oppløsning i heksaner, 27,5 mmol) ved -78° C. Etter 15 minutter ble ovennevnte syrefluorid i vannfri THF (25 ml) tilsatt dråpevis over 5 minutter. Etter 11. ble blandingen helt inn i 300 ml H20 og ekstrahert med EtOAc (3 x 200 ml). Kombinerte EtOAc lag ble tørket over MgS04og konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (30% EtOAc/heksaner) ga tittelforbindelsen som en tykk olje (12,12 g, 85%):<1>H-MR (250 MHz, CDCI3) 8 7,41-7,12 (m, 11H), 6,65 (m, 1H), 6,60 (m, 1H), 4,70-4,62 (m, 1H), 4,50-4,35 (m, 2H), 4,21-4,10 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,50-2,61 (m, 10H), 1,55-1,41 (m, 9H).
d) [r-(R<*>,S<*>)]-Metyl B-[[4-metoksy-2-[[[1,1-dimetyletoksy)karbonyl](2-fenyletyl)-amino]metyl]fenyl]metyl]-y-okso-4-(fenylmetyl)-3-oksazolidinbutanoat
Til en oppløsning av (R)-1,1-dimetyletyl[[5-metoksy-2-[3-okso-3-[2-okso-4-(fenyletyl)amino]metyl]fenyl]metyl](2-fenyletyl)karbamat (12,12 g, 21,0 mmol) i vannfri THF (100 ml) ble det tilsatt bis(trimetylsilyl)amid (22,0 ml, 1 M i THF, 22,0 mmol) ved -78° C. Etter 15 minutter ble metyl bromacetat (9,9 ml, 105 mmol) tilsatt og deretter ble blandingen varmet til -20° C. Etter 31. ble blandignen helt inn i 200 ml H2O og ekstrahert med EtOAc (3 x 500 ml). Kombinerte EtOAc lag ble tørket over MgS04og konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (25% EtOAc/heksaner) ga 9,91 g av en 3:2 blanding (HPLC, 20% EtOAc/heksaner) av tittelforbindelsen og (R)-1,1 -dimetyletyl[[5-metoksy-2-[d[3-okso-3-[2-okso-4-(fenylmetyl)-3-oksa20lidinyl]-propyl]fenyl]metyl](2-fenyletyl)karbamat. Denne blandingen ble anvendt uten ytterligere rensing: MS (ES) m/e 667 (M + Naf.
e) Metyl (S)-8-metoksy-3-okso-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Til en oppløsning av [R-(R<*>,S<*>)]-metyl p-[[4-metoksy-2-[[[1,1-dimetyletoksy)-karbonyl](2-fenyletyl)amino]fenyl]mety^
(9,91 g, 14,5 mmol) i THF (75 ml) ble det tilsatt en oppløsning av litiumhydroksid-monohydrat (646 g, 14,5 mmol) og H202(5,2 ml, 30% di H20,46,2 mmol) i H20
(25 ml) ved 0° C i 10 minutter. Etter 1,51. ble en oppløsning av Na2S03(9,7 g, 77 mmol) i H20 (100 ml) tilsatt, Blandingen ble surgjort til pH 4 ved anvendelse av 2 M HCI og ekstrahert med EtOAc (3 x 200 ml). Kombinerte EtOAc lag ble tørket over MgS04og konsentrert. Den resulterende resten ble oppløst i 4,0 M Hel i dioksan (75 ml). Etter 45 minutter ble blandingen konsentrert og deretter på ny konsentrert fra toluen (200 ml).
Ovennevnte rest ble oppløst i vannfri DMF (75 ml). Til denne oppløsningen ble det tilsatt NaHC03(6,50 g, 77,0 mmol) og trietylamin (4,3 ml, 30,8 mmol) ved RT. Blandingen ble avkjølt ti 0° C og difenylfosforylazid (15 ml, 23,1 mmol) ble tilsatt. Etter 161. ble blandingen konsentrert. Den resulterende pastaen ble oppløst i EtOAc (500 ml), vasket med H20 (2 x 300 ml), tørket over MgS04og konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (40% EtOAx/heksaner) ga tittelforbindelsen (2,61 g, 33% fra [R-(R<*>S<*>]-metyl p-[f4-metoksy-2-[[[1,1-dimetyletoksy)karbonyl]2fenykletyl)amino]-metyl]fenyl]metyl]-y-okso-4-(fenylmetyl)-3-oksazolidinbutanoat) som en klar olje: MS (ES) m/e 390 (M + Naf.
f) Metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-{fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Til en oppløsning av metyl (S)-8-metoksy-3-okso-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzesepin-4-acetat (2,61 g, 7,1 mmol) i CH2CI2(40 ml) ble det tilsatt B Br3(21,3 ml, 1 M i CH2CI2, 21,3 mmol) ved -20° C. Etter 45 minutter ble blandingen stoppet med MeOH (200 ml) og konsentrert. Resten ble filtrert gjennom en silica gel plugg ved anvendelse av 50 % EtOAc/heksaner som elueringsmiddel. Det resulterende oransje faste stoffet ble omkrystallisert fra MeOH/H20 for å tilveiebringe tittelforbindelsen som et off-white fast stoff (2,16 g, 81%): MS (ES) m/e 376 (M + Na)<+>.
Eksempel 1
Fremstilling av (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[3-[2-{N-oksopyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-
1 H-2-benzasepin-4-acetat
En fremstilling av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid (1,4 g, 8 mmol) i vannfri DMF (8 ml) ble det dråpevis tilsatt en oppløsning av metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (1.7 g, 7 mmol), trifenylfosfat (2,76 g, 11 mmol) og dietyl azodikarboksylat (2,33 ml, 14 mmol) i vannfri DMF (4 ml) og tørr THF (10 ml) ved RT under argon. Den resulterende oppløsningen ble omrørt i 181., deretter konsentrert under vakuum. Silica gel kromatografi (2% - 10% CH3OH/CH2CI2) ga tittelforbindelsen (1,2 g): MS (ES) m/e 400,2 (M + Hf. Ikke-reagert metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (0,4 g) ble også isolert.
b) Etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (±)-8-[3-[2-{N-oksopyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepinn-4-acetat (1,2 g, 3 mmol), 1,2 g 10% palladium på trekull (1,2 g), cykloheksen (3 ml, 15 mmol) og etanol (20 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 181. Blandingen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert. Resten ble renset ved kromatografi på silica gel (2% - 5% CH3OH/CH2CI2) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,72 g, 64%) som et hvitt skum: MS (ES) m/e 398,2 (M + Hf.
c) (±)-8-[3-(2-Pyridylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
En blanding av etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-oksy-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,7 g, 2 mmol), litium hydroksid monohydrat (0,12 g, 3 mmol), 5 ml THF (5 ml), H20, (5 ml) og MeOH (2 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 181. og konsentrert. Resten ble fordelt mellom etylacetat og vann, og lagene ble separert. Den vanndige fasen ble forsiktig brakt til pH 4 med 3N HCI og latt stå. De resulterende krystallene ble samlet ved filtrering og tørket for å tilveie bringe tittelforbindelsen (0,4 g, 65%) som et brunt fast stoff: MS m/e 370,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C20H23N3O4■ 0,25 H20: C, 64,25; H, 6,34; N, 1124. Funnet: C, 64,02: H, 6,37; N, 11,20.
Eksempel 2
Fremstilling av (±)-8-l3-[4-amino-2-pyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[3-[2-(4-nitro-N-oksypyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a), med unntakelse av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-nitropyridin-N-oksid med 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid, ble tittelforbindelsen fremstilt som et oransjefarget skum: MS (ES) m/e 445,2
(M + H)<+>.
b) Metyl (±)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-[2-(4-nitro-N-oksypyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksypyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 399,3 (M + H)<+>.
c) (±)-8-[3-[(4-Amino-2-pyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-[(4-amino-2-pyrid<y>l)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 385,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C20H24N5O4• 1,25 H20: C, 59,03; H, 6,56; N, 13,76. Funnet: C, 58,80; H, 6,49; N, 13,62.
Eksempel 3
Fremstilling av (±)-8-[3-[(4-ametoksy-2-pyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[3-[(2-(4-metoksy-2-N-oksopyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a), med unntakelse av erstatning av 2-[(3-hydroksy-1 -propyl)amino]-4-metoksypyridin-N-oksid med 2-[(3-hydroksy-1 - propyl)amino]pyridin-N-oksid, bie tittelforbindelsen fremstilt som en fargeløs olje: MS (ES) m/e 430.3 (M + H)<+>.
b) Metyl (±)-8-[3-[(4-metoksy-2-pyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-[2-(4-metoksy-N-oksopyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksypyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen fremstilt som en svakt gul olje: MS (ES) m/e 414,4 (M + H)<+.>
c) (±)-8-[3-[(4-Metoksy-2-pyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-[(4-metoksy-2-pyridyl)aminol-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-{2-pyridylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et off-white fast stoff: MS (ES) m/e 400,3 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C21H25N3O5 ■ 0,75 H20: C, 61,08; H, 6,47; N, 10,18. Funnet: C, 61,15; H, 6,20; N, 10,12.
Eksempel 4
Fremstilling av (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (+)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino]-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av 2-[{3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid (252,3 mg, 1,5 mmol) og dietyl azordikarboksylat (0,24 ml, 1,5 mmol) i vannfri DMF (7,5 ml) ble dråpevis tilsatt til en oppløsning av metyl (±)-8-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (197,5 mg, 0,75 mmol) og trifenylfosftn (413,1 mg, 1,58 mmol) i vannfri DMF (7,5 ml) ved RT. Tilsetningen krevde 15 min. og var svakt eksterm. Etter 21. ble reaksjonen konsentrert og resten ble på ny konsentrert fra xylener. Silica gel kromatografi (2:2:1 EtOAc/CHCl3/MeOH) ga Rf 0,48 (TLC i
2:2:1 EtOAc/CHCl3/MeOH) materiale som en sløret, nesten fargeløs olje. Denne ble på ny kromatografert på silica gel (absolutt EtOH) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (243,9 mg, 79%) som et off-white skum: TLC (absolutt EtOH) Ff 0,33;<1>H NMR (250, CDCI3) 5 8,12 (app. dd, 1 H), 7,10 - 7,23 (m, 1 H), 6,90 - 7,10 (m, 2 H), 6,78 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1 H), 6,45 - 6,72 (m, 3 H), 5,28 (d, J = 16,3 Hz, 1 H), 3,95 - 4,25 (m, 2 H), 3,60 - 3,90 (m, 1 H), 3,76 (d, J = 16,3 Hz, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,51 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,73 - 3,15 (m, 3 H), 3.04 (s, 3 H), 2,41 (dd, J = 16,7, 5,4 Hz, 1 H), 2,05 - 2,28 (m, 2 H); MS (ES) m/e 414 (M + H)<+>.
b) Metyl (±)-8-[3-(2pyridyl)amino]-1 -propyloksyl-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-
1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (243,0 mg, 0,59 mmol), cykloheksen (0,60 ml, 5,90 mmol), og 10% Pd/C (63 mg, 0,06 mmol) i 2-propanol (7 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp, Etter 21,51, ble reaksjonen avkjølt RT og filtrert gjennom celite®. Filtrlatet ble konsentrert, og resten ble på ny konsentrert f ra toluen. Silica gel kromatografi (5% MeOH i 1:1 EtOAc/CHCI3) ga tittelforbindelsen (212,8 mg, 91%) som en fargeløs olje: TLC (5% MeOH i 1:1 EtOAc/CHCI3) Rf 0,39;<1>H NMR (250, CDCI3) 5 8,03 - 8,13 (m, 1 H), 7,35 - 7,48 (m, 1 H), 7,00 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,77 (dd, J = 8,4, 2,5 Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 6,52 - 6,62 (m, 1 H), 6,40 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 5,27 (d, J = 16,3 Hz, 1 H), 4,62 - 4,82 (m, 1 H), 3,95 - 4, 20 (m, 2 H), 3,60 - 3,90 (m, 2H), 3,71 (s, 3 H), 3,50 (q, J = 6,3 Hz, 2 H), 2,75 - 3,15 (m, 3 H), 3,03 (s, 3 H), 2,40 (dd, J = 16,7, 5,3 Hz, 1 H), 2,00 - 2,22 (m, 2 H); MS (ES) m/e 398 (M +
H)<+>.
c) (±)-8-[3-(2-Pyaridylamino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,54etrah benzasepin-4-eddiksyre
1,0 N LiOH (0,80 ml, 0.80 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av metyl (+)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (207,5 mg, 0,52 mmol) i THF (2,6 ml) og H20 (1,8 ml) ved RT. Den opprinnelige slørete oppløsningen ble homogen i løpet av 1 min. Etter 181. ble reaksjonen surgjort med TFA (0,12 ml, 1,56 mmol) og konsentrert. ODS kromatografi (20% CH3CH/H20 inneholdende 0,1% TFA), konsentrering og lyofilisering ga tittelforbindelsen (252,4 mg, 83%) som et lysegult, hydroskopisk stoff: HPLC (PRP-1®, 20% CH3CN/H2O inneholdende 0,1% TFA) K' = 2,4;<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7,83 - 7,93 (m, 1 H), 7,76 - 7,83 (m, 1 H), 7,00 - 7,11 (m, 2 H), 6,83 - 6,91 (m, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1 H), 6,76 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 16,5 Hz, 1 H),
4,05-4,18 (m, 2 H), 3,94 (d, J = 16,5 Hz, 1 H), 3,77 - 3,900 (m, 1 H), 3,57 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 3,03 (dd, J = 17,0, 4,2 Hz, 1 H), 2,99 (s, 3 H), 2,83 (dd, J = 17,0, 9,1 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 17,0, 4,2 Hz, 1 H), 2,44 (dd, J = 17,0, 4,7 Hz, 1 H), 2,11 - 2,23 (m, 2 H); MS (ES) m/e 384 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C2iH25N304 • 1,5 CF3C02H • 1,5 H20: C, 49,57; H, 5,11; N, 7,23. Funnet: C, 49,65; H, 4,95; N, 7,15.
Eksempel 5
Fremstilling av (+)-8-[3-(2-imidazolylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Tittelforbindelsen blir fremstilt generelt ifølge fremgangsmåtene beskrevet i eksemplene 1-4.
Eksempel 6
Fremstilling av (±)-8-[3-[2-(1,4,5,6-tetrahydropyrimidinyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[3-(ferf-butoksykarbonyl)amino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av 3-[tert-butoksykarbonylamino]-1-propanol (0,14 g, 0,8 mmol) og dietyl azodikarboksylat (0,13 ml, 0,8 mmol) i vann fri DMF (2 ml) ble tilsatt dråpevis til en oppløsning av metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,10 g, 0,4 mmol) og trifenylfosfin (0,21 g, 0,8 mmol) i vannfri DMF (1,4 ml) og tørr THF (2 ml) ved RT under argon. Den resulterende oppløsningen ble omrørt i 181., deretter konsentrert under vakuum. Silica gel kromatografi (1% - 3%) MeOH/CH2CI2) ga tittelforbindelsen (0,11 g): MS (ES) m/e 407,3 (M + H)<+>.
b) Metyl (±)-8-{3-amino-1-propyloksy)-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat, trifluoracetatsalt
En oppløsning av metyl (±)-8-([3-tert-butoksykarbonylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,70 g) i CH2CI2(7 ml) og TFA (2 ml) ble omrørt under argon ved 0° C i 11., deretter konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,75 g, 100%) som et fargeløst glass: MS (ES) m/e 321,4 (M + H)<+>.
c) Metyl (±)-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (±)-8-(3-amino-1-propyloksy)-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat trifluoracetatsalt (0,75 g, 2 mmol), 2-brompyrimidin (0,5 g, 3 mmol), NaHC03 (1,4 g, 17 mmol), og EtOH (10 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp. Etter 241. ble blandingen filtrert, og det uoppløselige materialet ble vasket med MeOH. Filtratet og vaskingene ble kombinert og konsentrert, og resten ble renset ved kromatografi på silica gel (1%-6% MeOH/CH2CI2) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,54 g, 82%) som et hvitt skum: MS (ES) m/e 385,5 (M + H)<+.>
d) (±)-8-[(1,4,5,6-Tetrahydropyirmidin-2-yl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
En blanding av metyl (±)-8-[3-pyirmidin-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,36 g, 0,94 mmol), 4 M HCI i dioksan (0,25 ml, 1 mmol), 10% palladium på trekull (0,24 g, 0,24 mmol), og MeOH (5 ml) ble omrørt under en ballong av hydrogen. Etter 18 g. ble blandingen filtrert, og filtratet
ble konsentrert. Resten ble fordelt mellom EtOAc og vanndig K2AC3. Et fast prisipitat, som ble samlet ved fitlrering og tørket for å tilveiebringe tittelforbindelsen som et hvitt
fast stoff: MS m/e 375,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for CigH26N404• 2,5 H20; C, 54,40; H, 7,45; N, 13,35. Funnet: C, 54,68; H, 7,12; N, 13,39.
Eksempel 7
Fremstilling av (±)-8-[3-(6-amino-2-pyridylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Tittelforbindelsen blir fremstilt generelt ifølge fremgangsmåtene beskrevet i eksemplene 1-4.
Eksempel 8
Fremstiling av (±>-8-[2-[6-(metylamino)pyridyl]etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[2-[6-(metylamino)pyridyl]-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-
1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a), med unntakelse av erstatning av 6-(metylamino)-2-pyridyletanol med 2-[(3-hydroksyk-1 -propyl)amino]pyridin-N-oksid, biel tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 384 (M + H)<+.>
b) (+)-8-[2-[6-(Metylamino)pyridin-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat metyl med etyl (±)-8-[3-[2-pyridylamino-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzodiasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 370 (M + H)<+>.
Eksempel 9
Fremstiling av (±)-8-[2-{2-b enzimidasolyl)etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (iJ-S-p-tbenzimidasol^-eiJ-l-etoksyl-S-okso^.S^.S-tetrahydro-l H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a), med unntakelse av erstatning av 2-(benzimidasol-2-yl)-1-etanol med 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid, ble tittelforbindelsen fremstilt som et off-white fast stoff: MS (ES) m/e 394,4 (M + H)\ 416,3 (M + Na)<+>.
b) (±)-8-[2-(Benzimidasol-2-yl)-1 -etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[2-(benzimidasol-2-yl)-1-etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat metyl med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamin)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt pulver: MS (ES) m/e 380,4 (M + H)<+>, 402,3 (M + Na)<+>.
Eksempel 10
Fremstilling av (±)-8-[2-/4-aza-2-benzimidasolyl)etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-
1 H-2-benzsepin-4-eddiksyre
Tittelforbindelsen blir fremstilt generelt ifølge fremgangsmåtene beskrevet i eksempel 9.
Eksempel 11
Fremstilling av (±)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy-2-(2,2,2-trifluoretyl), 2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-3-okso-8-[3-(1 -oksopyridi-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2,2,2-trilfuoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid (252,3 mg, 1,5 mmol) og dietyl azodikarboksylat (0,24 ml, 1,5 mmol) i vannfri DMF (7,5 ml) ble det dråpevis sakte tilsatt over 3-4 min. en oppløsning av metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (248,5 mg, 0,75 mmol) og trifenylfosfin (413,1 mg, 1,58 mmol) i vannfri DMF (7,5 ml) ved RT. Etter 171. ble reaksjonen konsentrert, og resten ble omkonsentrert fra xylen/CHCI3. Silica gel kromatografi (gradient: EtOAc (500 ml) og deretter 5% MeOH/CHCI3) ga tittelforbindelsen (253,6 mg, 70%) som et off-white skum:<1>H NMR (250, CDCI3) 8 8,11 (dd, J = 6,4, 1,4 Hz, 1 H), 7,10 - 7,23 (m, 1 H), 6,93 - 7,10 (m, 2 H), 6,81 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1 H), 6,45 - 6,70 (m, 3 H), 5,34 (d, J = 16,7 Hz, 1 H), 3,75 - 4,30 (m, 6 H), 3,71 (s, 3 H), 3,51 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,80 - 3,15 (m, 3H), 2,46 (dd, J = 16,8, 5,5 Hz, 1 H), 2,07 - 2,28 (m, 2 H); ME (ES) m/e 482,2 (M + H)<+>.
b) Metyl (±)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(l2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (±)-8-3-okso-8-[3-(1-oksopyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifuloretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (253,6 mg, 0,53 mmol), cykloheksen (0,54 ml, 5,3 mmol), palladium svart (11,3 mg, 0,11 mmol) og isopropanol (5,3 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp, Etter 0,51. ble 10% Pd/C (28,2 mg, 0,03 mmol), og etter 14,51. ble Pd svart (11,3 mg, 0,1 mmol) og cykloheken (0,27 ml, 2,65 mmol) tilsatt. Etter ytterligere 481. ble reaksjonen varm-filtrert gjennom celite®, og filterstykket ble vasket med varm 1:1 MeOH/CHCI3. Konsentrering og omkonsentrering fra xylener ga en gul olje. Silica gel kromatografi (5% MeOH i 1:1 EtOAc/CHCI3) ga tittelforbindelsen (194,0 mg, 79% som en lysegul olje: TLC (5% MeOH i 1:1 EtOAc/CHCI3) Rf 0,53;<1>H NMR (250, CDCI3) 8 8,08 (dd, J = 5,0,1,0 Hz, 1 H), 7,37 - 7,49 (m, 1 H), 7,02 (d, J - 8,4 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,4, 2,5 Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 6,52 - 6,62 (m, 1 H), 6,40 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 5,34 (d, J = 16,6 Hz, 1 H), 4,60 - 4,80 (m, 1 H), 3,75 - 4,30 (m, 6 H), 3,71 (s, 3H), 3,50 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,80 - 3,15 (m, 3 H), 2,46 (dd, J = 16,8, 5,4 Hz, 1 H), 2,00 - 2,25 (m, 2 H); MS (ES) m/e 466 (M + H)<+>.
c) (±)-3-Okso-8-[3-(pyridin-2-^ tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
1,0 N LiOH (0,44 ml, 0.44 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av metyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-porpyloksy]-2-metyl-3^kso-2-(2,2,2-trifuloretyl)-2,3,4,5-tetrahydro^ 1H-2-benzasepin-4-acetat (159,5 mg, 0,34 mmol) i THF (1,7 ml) og H20 (1,3 ml) ved RT. Den gule, slørete reaksjonen ble homogen i løpet av 10 min. Etter 241. ble reaksjonen konsentrert til tørrhet, og den gule resten ble løst opp i H20 (4 ml). Oppløsningen ble filtrlert og deretter forsiktig nøytralisert (pH = 7) med 1,0 N Hel. Presipitatet ble samlet, vasket med en mengde H20 og tøkret i vakuum ved 40 - 45° C for å tilveiebringe tittelforbindelsen (130,0 mg, 83%) som et off-white fast stoff: HÅLC (PRP-1®, 25% CH3CN/H2O inneholdende 0,1% TFA) k* = 3,1;<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 6,51 - 5,60 (m, 1 H), 6,39 - 6,50 (m, 2 H), 5,30 (d, J = 16,6 Hz, 1 H), 4,10 - 4,30 (m, 3 H), 4,02 (t, J = 6,3, Hz, 1 H), 3,70 - 3,82 (m, 1 H), 3,20 - 3,45 (m, 2 H), delvis sløret ved gjenværende signal fra oppløsningsmidlet), 2,99 (dd, 1 H), 2,59 - 2.75 (m, 2 H), 2,39 (dd, J = 16,9,4,8 Hz, 1 H), 1,90 - 2,03 (m, 2 H); MS (ES) m/e 341 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C22H24F3N304• 0,5 CF3C02H • 1,5 H20: C, 57,39; H, 5,47; N, 9,13. Funnet: C, 57,39; H, 5,18; N, 9,00.
Eksempel 12
Fremstilling av (+)-8-[3-(4,6-dimetylpyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[3-(4,6-diemtyl-1-oksopyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a), med unntakelse av erstatning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4,6 dimetylpyridin-N-oksid med 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid, ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 442,3 (M + H)<+>.
b) Metyl (±)-8-[3-(4,6-dimetylpyridin-2-ylamino]-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-(4,6-dimetyl-1 -oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydrop-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyKaminoJ-l-propyloksyl-S-oks^.S^.S-tetrahydro-IH^-benzasepin^-acetat, ble tittelforbindelsen fremstilt som et svakt gult fast stoff: MS (ES) m/e 426,3
(M + H)<+>.
c) (±)-8-[3-(4,6-Dimetylpyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-(4,6-dimetylpyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med (±)-8-[3-(2-pyridyklamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/3 412,2 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C23H29N3O4 • 0,25 ■ H20: C, 63,62; H, 6,96; N, 9,68. Funnet: C, 63,62; H, 6,96; N, 9,69.
Eksempel 13
Fremstilling av (±)-8-[2-(2-aminotiasol-4-yl)-1 -etoksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[2-(2-aminotiasol-4-yl)-1-etoksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a) med unntakelse av erstatning av 2-(2-aminotiasol-4-yl)etanol (WO 95/32710) med 2-[(3-hydroksy-1 - propyl)amino]pyridin-N-oksid, ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 390 (M + H)<+>.
b) (±)-8-[2-(2-Aminotiasol-4-yl)-1 -etoksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatnings av (±)-8-[2-(2-aminotiasol-4-yl)-1-etoksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino-1-propyloksy)-3-okso-2,3,4,5- tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 376 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C18H21N3O4S ■ 1,3 CF3CO2H 0,36 H20: C, 46,62; H, 4,38; N, 7,93. Funnet: C, 46,45; H, 4,57; N, 8,27.
Eksempel 14
Fremstilling av (±)-8-[3-(4-aminopyridin)2-ylamino)-1-propyloksy]- 2 metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-8-[3-(4-nitro-1 -oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a) med unntakelse av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-nitroprydine-N-oksid med 2-[(3-hydroksy-1 -propyl)amino]pyridin-N-oksid og erstatning av metyl (±)-8-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt: MS (ES) m/e 450 (M + H)<+.>
b) Metyl (±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b) med unntakelse av erstatning av (+)-8-[3-(4-nitro-1-oksopyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-(4-nitro-N-oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 413 (M + H)<+>.
c) (±)-8-[3-(4-Aminokpyridi-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2t3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino-1 - propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 399 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C21H26N4O4 ■ 1,5 CF3C02H • 0,125 H20: C, 50,62; H, 4,91; N, 9,83. Funnet: C, 50,63: H, 5,26; N, 9,90
Eksempel 15
Fremstilling av (±)-8-[3-(Pyrimidin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
En blanding av metyl (±)-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,071 g, 0:18 mmol) og litium hydroksid monohydrat (0,009 g, 2 mmol) i THF (5 ml) og H20 (2 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 181. og deretter konsentrert. Resten ble oppløst i H20 og pH ble justert til 4 med 3 N HC. Det resutlerende faste stoffet ble samlet ved filtrering og tørket for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,05 g, 73%) som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 371,4 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C19H22N4O4 ■ 0,5 H20: C, 60,15; H, 6,11; N, 14,77. Funnet: C, 60,14: H, 6,06; N, 14,71.
Eksempel 16
Fremstilling av (R)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloksy]- 3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (R)-8-[3-[3-(4-nitro-1 -oksopyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a) med unntakelse av erstatning av 2-[(3-hydroksy-1 -propyl)amino]-4-nitroprydine-N-oksid med 2-[(3-hydroksy-1 - propyl)amino]pyridin-N-oksid ble tittelforbindelsen fremstilt som et oransjefarget skum: MS (ES) m/e 445,3 (M + H)<+>.
b) Metyl (R)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b) med unntakelse av erstatning av (R)-8-[3-[2-(4-amino-N-oksopyridyl)amino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino]-1- propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 399,4 (M + H)<+>.
c) (R)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatning av metyl (R)-8-[3-[(4-amino-2-pyrtdyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-l H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et off-white fast stoff: [a]D<23>+ 74,97° (c 1,45, MeOH); MS (ES) m/e 385,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C20H24N4O4 • HCI • 1,5 H20: C, 53,63; H, 6,30; N, 12,50. Funnet: C, 53,87: H,6,13; N, 12,42.
Eksempel 17
Fremstilling av (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloksy]- 3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-8-[3-[2-(4-nitro-N-oksopyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a) med unntakelse av erstatning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-nitroprydin-N-oksid med 2-[(3-hydroksy-1 - propyl)amino]pyridin-N-oksid ble tittelforbindelsen fremstilt som et oransjefarget skum: MS (ES) m/e 445,3 (M + Hf.
b) Metyl (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b) med unntakelse av erstatning av (S)-8-[342-(4-amino-N-oksopyridyl)amino>1-parpyloksyJ-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 399,4 (M + Hf.
c) (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahyd benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatning av metyl (S)-8-[3-[(4-amino-2-pyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et off-white fast stoff: [a]D<23>- 77,5° (c 1,45, MeOH); MS (ES) m/e 385,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C20H24N4O4-112,5 H20: C, 50,36; H, 6,54; N, 13,84. Funnet: C, 59,31: H,6,74d N, 13,73.
Eksempel 18
Fremstilling av Etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
a) Etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av (±)-8-[3-[(4-amino-2-pyridylamino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre (0,27 g, 0,7 mmol) og 4 M HCI i dioksan (0,2 ml, 8 mmol) i etanol (10 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp. Etter 721. ble reaksjonen konsentrert, og resten ble fordelt mellom EtOAc og vanndig K2C03. Den organiske fasen ble vasket med saltvann, tørket (MgS04) og konsentrert. Resten ble løst opp i toluen (5 ml) og trietylamin (0,35 ml, 2,5 mmol), og den resulterende oppløsning ble varmet til tilbakeløp. Etter 181. ble reaksjonen konsentrert under vakuum for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,20 g, 69%) som et brunt skum: MS (ES) m/e 413,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C22H2BN4O4■ 0,25 H20: C, 63,37; H, 6,89; N, 13,44. Funnet: C, 63,32: H, 7,17; N, 13,05.
Eksempel 19
Fremstilling av (±)-8-[3-[(2-imidasolin-2-yl)amino]-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Fremstilling av metyl (±)-8-[3-(4-nitrobenzyloksykarbonylamino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a) med unntakelse av erstatning av 3-(4-nitrobenzyloksykarbonylamino)-1-propanol med 2-[(3-hydroksy-1 - propyl)amino]pyridin-N-oksid og erstatning av metyl (+)-8-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som en fargeløs olje: MS (ES) m/e 500,3 (M + H)<+>.
b) Metyl (+)-8-[3-amino-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (±)-8-[3-[2-(4-nitrobenzyloksykakrbonylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (1,4 g, 3 mmol) 10% palladium på trekull (0,55 g, 0,6 mmol) og EtOH (20 ml) ble omrørt ved RT under en ballong av hydrogen. Etter 181. ble blandingen filtrert og filtratet konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,89g, 99%) som et brunt fast stoff: MS (ES) m/e 321,4 (M + H)<+>.
c) Metyl (±)-8-[3-[(2-imidasolin-2-yl)amino]-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (±)-8-[3-amino-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,3 g, 1 mmol), 2-metyltiomidasolin (0,46 g, 2 mmol), diisopropyetylamin (0,42 ml, 2 mmol) og dimetylacetamid (3 ml) ble oppvarmet til 100° C under argon. Etter 21. ble reaksjonen konsentrert under vakuum og resten ble fordelt mellom CHCI3og H2O. Den organiske fasen ble tørket (MgS04) og konsentrert, og resten ble renset ved preparativ HPLC for å tilveiebringe forbindelsen (0,24 g, 51%) som en gul olje: MS (ES) m/e 389,4 (M + H)<+>.
d) (±)-8-[3-[(2-lmidasolin-2-yl)amino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Metyl (±)-8-[3-[(2-imidasolin-2-yl)amino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble forsåpet ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c). Rensing ved preparativ HPLC ga tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 375,4 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C21H26N4O4 • 1,96 CF3C02H: C, 46,08; H, 4,73; N, 9,39. Funnet: C, 46,37: H, 4,53; N, 9,01.
Eksempel 20
Fremstilling av (±)-8-[3-[{4,5,6,7-tetrahydro-1 H-2diasepin-2-yl)amino]-1 -propyloksy)-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahyadro-1H-2-benzasepin-4-edikksyre
a) Metyl (±)-8-[3-(2-diasepin-2-yl)amino]-1 -propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahyd ro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 19 (c) med unntakelse av 2-metyltio-1,3-diasepin med 2-metyltiomidasolin ble tittelforbindelsen fremstilt: MS (ES) m/e 417,4
(M + H)<+>.
b) (±)-8-[3-(2-Diasepin-2-yl)amino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-
1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 19 (d) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-[(diasepin-2-yl)amino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (+)-8-[3-[(2-imidasolin-2-yl)amino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt: MS (ES) m/e 403,4 (M + H)<+>.
Eksempel 21
Fremstilling av (±)-3-okso-[3-(4-metylpyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]- 2-(2,2,2-trifuloretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-3-okso-8-[3-(4-metyl-1 -oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a) med unntakelse av substituering av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-metylpyridin-N-oksid med 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid og substituering av metyl (+)-3-okso-8-hydroksy-2-
(2,2,2-trifuloretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt: MS (ES) m/e 496,3 (M + H)<+>.
b) Metyl(±)-3<>kso-8-[3-(4-metylpyridin-2-ylamino]-1-porpyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-3-okso-8-[3-(4-metylpyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt: MS (ES) m/e 480.2 (M + H)<+.>
c) (±)-3-Okso-8-[3-[(4-metylpyridyn-2-ylamino>-1-propyloksy]-2-(2,2,2trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-3-okso-8-[3-(4-metyl-1 -oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt: MS (ES) m/e 466,2 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C23H26F3N3O4 • 0,5 H20: C, 59,22; H, 5,74; N, 8,86. Funnet: C, 58,54: H, 5,58, N, 8,64.
Eksempel 22
Fremstilling av (±)-3-okso-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fen4-butoksycarbonykl)amino]-1 - propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre (a) Metyl (±)-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b) med unntakelse av ersatning av (±)-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(/e/t-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3t4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt skum: MS (ES) m/e 484,4 (M + H)<+.>
b) (±)-3-okso-8-[3-[N-pyridin-2-^ 2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[3-[N-pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre med med etyl (±>-8-[3-[2-pyridylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt pulver: MS (ES) m/e 470,4 (M + H)\ Anal. beregnet for C25H3oNaN306 • 3,25 H20: C, 54,59; H, 6,69; N, 7,64. Funnet: C, 54,47: H, 6,32, N, 7,95.
Eksempel 23
Fremstilling av (±)-8-[3-[N-(1 .oksopyridin-2-yl)-N-(Yert-butoksycarbonykl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) (±)-8-[3-[N-(1 -oksopyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c) med unntakelse av erstatning av (±)-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt pulver:<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 6,6-8,3 (m, 8 H), 3,7-4,6 (m, 3 H), 3,3-3,6 (m, 5 H), 1,8-3,0 (m, 5 H), 1,6 (s, 6 H), 1,3 (s, 3 H); MS (ES) m/e 486,4 (M + H)<+>.
Eksempel 24
Fremstilling av (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-f;fert-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av metyl (+)-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre (0,4 g, 0,8 mmol) ble avkjølt til -20° C (CCU/tørrisbad), og (TMS)2NLi (1,0 M oppløsning i THF, 0,9 ml, 0,9 mmol) ble dråpevis tilsatt. Etter 10 min. ble en oppløsning av 4-frifluormetylbenzyl bromid (0,211g, 0,88 mmol) i DMF (0,5 ml) tilsatt. Oppløsningen ble omrørt under en argon atmosfære ved -20° C i 10 min., deretter ved RT i 181. Oppløsningen ble konsentrert, og resten ble tatt opp i EtOAc og vasket suksessivt med 5% NaHC03(2 x), H20 (1 x), 5% sitronsyre (2 x), H20 (1 x), og saltvann (1 x). EtOAc laget ble tørket (MgS04) og konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,42 g, 80%): MS (ES) m/e 658,3 (M + H)<+>.
(b) Metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenztyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b), men med unntakelse av erstatning av metyl (±)-3-okso-8-t3-(N-oksopyirdin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridhyl)amino]-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen 0,321 g, 78%) fremstilt som en klar olje: MS (ES) m/e 642,3 (M + H)<+>.
(c) (±)-3-Okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetyl)benztyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-pyridin-2-yl)-N-(fefr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(pyrilidylaminol)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et off-white stoff: ME (ES) m/e 628,4 (M + H)<+.>Anal. beregnet for CssHaeFsNsOe - 0,5 H20: C, 62,25; H, 5,86; N, 6,60. Funnet: C, 62,01: H, 5,92, N.6,81.
Eksempel 25
Fremstilling av (±)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(4-trifluormetyl-benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) (±)-3-Okso-8-[3-(pyridin-2-ylam 2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(db-3-Okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykaroonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre (0,158 g, 0,25 mmol) ble behandlet med 4 M Hel i dioksane (3 ml) ved RT i 1 t., deretter ble oppløsningen konsentrert. ODS kromatografi (gradient 5-60% CH3CN/H20 inneholdende 0,1% TFA over 1t.), konsentrering og lyofilisering ga tittelforbindelsen (0,117 g, 82%). MS (ES) m/e 528,4 (M + Hf. Anal. beregnet for C28H28N3O4 ■ CF3CO2H • 1,5 H20: C, 53,89; H, 4,82; N, 6,28. Funnet: C, 53,55: H, 4,55, N, 6,04.
Eksempel 26
Fremstilling av (+)-2-metyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-^metyl)amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)-N-(metyl)amino]-1 -propyloksy]-2-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (1,5 g, 3,8 mmol) i DMF (10 ml) ble avkjølt til -20° C under en argonatmosfære, og (TMS)2NLi (1,0 M oppløsning i THF, 8 ml, 8 mmol) ble dråpevis tilsatt. Reaksjonen ble omrørt ved -20 C i 30 minutter, og deretter ble CH3I (0,5 ml, 7,6 mmol) tilsatt. Oppløsningen ble omrørt ved RT i 18 t.,og deretter konsentrert. Silica gel koromatografi (10% MeOH/CH2Cl2) ga tittelforbindelsen (1 g, 62%): MS (ES) m/e 428 (M + Hf.
(b) Metyl (±)-2-metyl-3-okso-8-[N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b), men med unntakelse av erstatning
av metyl (+)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)-N-(metyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-metyl-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-{2-pyridhylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen (0,7 g, 73%) fremstilt: MS (ES) m/e 412,4 (M + Hf.
(c) (±)-2-Metyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(m^ tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-2-metyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-{2-(pyridylaminol)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble rå tittelforbindelse fremstilt. Rensing ved ODS krometografi (5-60% CH3CN/H20 inneholdende 0,1% TFA i 11.), konsentrering og lyofilisering ga tittelforbindelsen: ME (ES) m/e 398 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C22H27F3N3O4■ 0,25 H20: C, 52,40; H, 5,10; N, 7,33. Funnet: C, 52,09: H, 5,26, N, 7,20.
Eksempel 27
Fremstilling av (±)-2-benzyl-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (±)-2-benzyl-3-okso-8-[3-[N-(oksopyridin)-2-yl)-N-)tert-butoksykarbonyl)-amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksemkpel 24 (a), med unntakelse av erstatning av benzylbromid med 4-trifluormetylbromid, ble tittelforbindelsen (0,105 g, 20%) fremstilt: MS (ES) m/e 590 (M + H)<+>.
(b) Metyl (±)-2-benzyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(/ert-butoksykarbonyl)amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (b), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-2-benzyl-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2 yl)-N-(ferf-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-(N-(1 -oksopyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-2-4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen (0,045 g, 44%) fremstilt: MS (ES) m/e 574,4 (M + H)\ (c) (±)-2-Benzyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), men med erstatning av metyl (±)-2-benzyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fert-b utoksykarbonyl)amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-(pyridylaminol)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen (0,044 g, kvantitativt) fremstilt: MS (ES) m/e 560,3 (M + H)<+>.
(d) (±)-2-Benzyl-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 25 (a), med unntakelse av erstatning av (±)-2-benzyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(ferf-butoksykarbonyl)amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre med (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyriin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre, ble tittelforbindelsen (0,014 g, 40%) fremstilt: MS (ES) m/e 460,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C27H29N3O4 ■ CF3C02H ■ 2 H20: C, 57,14; H, 5,62; N, 6.89. Funnet: C, 57,44: H, 5,32, N, 6,87.
Eksempel 28
Fremstilling av (±)-2-(karkboksymetyl)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (±)-2-(fetr-butoksykarbonylmetyl)-3-okso-8-[3-[N-(1 -okso-pyridin)-2-yl)-N-(?ert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge frlemgangsmåten i eksempel 24 (a), med unntakelse av erstatning av fe/f-butylbromacetat med 4-trifluormetylbenzylbromid, ble tittelforbindelsen (1,0 g, 80%) fremstilt: MS (ES) m/e 614,4 (M + H)<+>.
(b) Metyl (±)-2-(fert-butoksykarbonylmetyl)-3-okso-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fe/f-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (b) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-2-(fert-butoksykarbonylmetyl)-3-okso-8-[3-EN-(1-okso-pyridin-2 yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1 -oksopyridin-2-yl)-N-(fen*-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen (0,72 g, 77%) fremstilt: MS (ES) m/e 598,4 (M + H)<+>.
(c) Metyl (+)-2-(karoksymetyl)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 25 (a), med erstatning av metyl (±)-2-(rert-butoksykarbonylmetyl)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med (±)-3-okso-8-[3-(N-(pyridin-2-yl)-N-(/etr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre ble tittelforbindelsen (0,57 g, kvantitativt) fremstilt: MS (ES) m/e 442,3 (M + H)<+>.
Eksempel 29
Fremstilling av (+)-2-(4-aminobenzyl)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (±)-2-(4-nitrobenzyl)-3-okso-8-[3-[N-(1 -okso-pyridin)-2-yl)-N-(ferf-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (a), med unntakelse av erstatning av 4-nitrobenzylbromid med 4-trifluormetylbenzylbromid, ble tittelforbindelsen (0,284 g, 69%) fremstilt: MS (ES) m/e 635,3 (M + H)<+>.
(b) Metyl (±)-2-(4-aminobenzyl)-3-okso-[3-[N-(1-okso-pyridin-2-yl)-N-(ferf-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-aacetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (b) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-2-(4-nitrogenzyl)-3-okso-8-[3-[N-(1 -okso-pyridin-2 yl)-N-(fefr-butoksy-karbonyl)amino]-1 -propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen (0,104 g, 40%) fremstilt: MS (ES) m/e 589,3 (M + H)<+.>
(c) (±)-2-(4-Aminobenzyl)-3<>kso-8-^^ aminoJ-l-propyloksyJ^.a^.S-tetrahydro-IH^-benzasepin^-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av erstatning av metyl (±)-2-(-4-aminobenzyl)-3-okso-8-[3-[N-( 1 -okso-pyridin-2-yl-N-(rert-butoksykarbonyl)amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med (±)-8-[3-(2-pyridyllamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-aceta,ble tittelforbindelsen (0,08 g, 79%) fremstilt: MS (ES) m/e 575,4
(M + H)<+>.
(d) (±)-2-(4-Aminobenzyl)-3-okso-8-[3-(pyirdin-2-yl-amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 25 (a), med unntakelse av erstatning av (±)-2-(4-aminobenzyl)-3-okso-8-[3-[N-(fetr-butoksykarbonyl)amino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre med (+)-3-okso-8-[3-[N-(2-pyridin-2-yl)-N-(fe/f-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre, ble tittelforbindelsen (0,029 g, 44%) fremstilt: MS (ES) m/e 475,4 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C27H30N3O4 • 2 CH3C02H • 1,5 H20: C, 51,03; H, 4,83, N, 7,68. Funnet: C, 50,92: H, 4,78, N, 7,64.
Eksempel 30
Fremstilling av (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(bensoyl)amino]-1 -propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (±)-3-okso-8-[3-(1 -okso-pyridin)-2-yl)amino-1 -propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 25 (a), med unntakelse av erstatning av metyl (+)-3-okso-8-[3-[N-(1 -oksopyridin)-2-yl)-N-(refr-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin)-2-yl)-N-(fefr-butoksykarbonyl)amino)-1 - propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre, ble tittelforbindelsen (1,9 g, 90%) fremstilt: MS (ES) m/e 558,3 (M + H)<+>.
(b) Metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(4-trifluormetyl-benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (b) med unntakelse av erstatning av metyl (±)-3-okso-8-[3-(1-okso-pyridin-2 yl)amino-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2- benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4l5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen (0,40 g, 88%) fremstilt: MS (ES) m/e 542,3 (M + H)<+>.
(c) Metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(benzoyl)amino]-1 -propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Benzylklorid (0,094 ml, 0,8 mmol) ble dråpevis tilsatt til en oppløsning av metyl (±)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetyhlbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,4 g, 0,74 mmol) og diisopropyletylamin (0,5 ml, 2,0 mmol) i CH2CI2(10 ml). Etter 181. ble oppløsningen konsentrert, og resten ble renset ved silica gel kromatografi (1:1 EtOAc/Heksan) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,293 g, 61%): MS (ES) m/e 646,2 (M + H)<+>.
(d) (±)-3-Okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(benzoyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av erstatning av (±)-3- okso-8-[3-[N-(benzoyl)amino]-1-propyloksy]-2-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med (±)~8-[3-(2-pyrididylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble den rå tittelforbindelsen fremstilt: Rensing ved ODS kromatografi (10-80% CH3CN/H20 inneholdende 0.2% TFA over 11.), konsentrering og lyofilisering ga tittelforbindelsen (0,025 g, 10%): MS (ES) m/e 632,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C35H32F3N3O5• 0,85 CF3C02H: C, 60,50; H, 4,54, N, 5,74. Funnet: C, 60,22: H, 4,35, N, 5,77.
Eksempel 31
Fremstilling av (±)-3-okso-8-[3-{N-(pyridin-2-yl)-N-(ferf-butylacetyl)amino]-1 - propyloksy}-2-(4-trilfuormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (+)-3-okso-8-[3-{N-(okso-pyridin-2-yl)-N-(etrt-butylacetyl)amino]-1 - propyloksy}-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,W
En oppløsning av ferf-butyl eddiksyre (0,228 ml, 1,2 mmol) i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med oksalyl klorid (1 1,11,4 mmol), etterfulg av DMF (0,0005 ml, 0,06 mmol). Reaksjonen ble omrørt ved RT i 1,51. og konsentrert. Resten ble tatt opp i CH2CI2(5 ml) og dråpevis tilsatt til en oppløsning av metyl (±)-3-okso-8-[3-(1-okso-pyridin-2-yl)-1-propyloksy}-2-(4-trifluormetyl benzyl )-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre (0,35 g, 0,6 mmol) og Et3N (0,5 ml, 2,4 mmol) i CH2CI2
(10 ml). Etter 181. ble oppløsningen vasket sekvensielt med H20 (1 x), 5% NaHC03(2 x), H20 (1 x), 5% sitronsyre (2 x), H20 (1 x) og met. NaCI (1 x). Det organiske laget ble konsentrert for å tilveiebringe tittelforbidnelsen (0,4 g, 97%: MS (ES) m/e 656,4 (M + H)<+>.
(b) Metyl (±)-3-okso-8-[3-{N-(pyridin-2-yl)-N-(etrt-butylacetyl)amino]-1 -propyloksy}-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (b), men med substituering av metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fefr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy}-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy}-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen (0,22 g, 56%) fremstilt: MS (ES) m/e 642,3 (M + H)<+>.
(c) (±)-3-Okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fefr-butylaacetyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), med unntakelse av substituering av metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fe/f-butylacetyl)amino]-1 -propyloksy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen fremstilt: Rensing ved ODS kromatografi (10-80% CH3CN/H20 inneholdende 0,1% TFA over 11), konsentrering og lyofilisering ga tittelforbindelsen (0,022 g, 10%): MS (ES) m/e 626,4 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C34H38F3N305 • 1 H20: C, 63,44; H, 6,26, N, 6,53. Funnet: C, 63,24: H, 5,96, N, 6,39.
Eksempel 32
Fremstilling av (±)-3-okso-8-[3-{N-(pyridin-2-yl)-N-(isobutoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy}-2-(4-trifluormetylben2yl)-2,3,4,5-tetrahydrc-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (+)-3-okso-8-[3-{N-(2-okso-pyridin-2-yl)-N-(isobutoksykarbonyl)amino]-1 - prapyloksy}-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2l3I4I5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 30 (c), med unntakelse av erstatning av isobutylklorformat med benzoylklorid, ble tittelforbindelsen (0,47 g, 80%) fremstilt: MS (ES) m/e 658,3 (M + H)<+.>
(b) Metyl (±)-3-okso-8-[3-{N-(pyridin-2-yl)-N-(isobutoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy}-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (b), med unntakelse av substituering av metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1 -okso-pyridin-2-yl)-N-(isobutoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy}-2-(4-trilfuormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1 -oksopyridin-2-yl)-N-(fefr-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy}-2-(4-tiifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen (0,42 g, 6356%) fremstilt: MS (ES) m/e 642,3 (M + H)<+>(c) (±)-3-Okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(isobutoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (c), men med substituering av metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(isobutoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med etyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble rå tittelforbindelse fremstilt: Rensing ved ODS kromatografi (10-80% CH3CN/H20 inneholdene 0.1% TFA over 11.), konsentrering og lyofilisering ga tittelforbindelsen (0,008 g, 20%): MS (ES) m/e 628,3 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C33H36F3N3O6 - 0,25 CF3CO2H ■ 0,5 H20: C, 60,49; H, 5,64, N, 6,32. Funnet: C, 60,78: H, 5,50, N, 6,28.
Eksempel 33
Fremstilling av (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy}-2-(4-trifluor-metylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
(a) Metyl (S)-3-okso-8-[3-{N-(1 -okso-pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy}-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (a), men med substituering av metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-hydroksy-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen (3,0 g, 83%) fremstilt: MS (ES) m/e 500,3 (M + H)<+.>
(b) Metyl (S)-3-okso-8-[3-{N-(1 -okso-pyridin-2-yl)-N-(/etr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy}-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (a), men med substituering av metyl (S)-3-okso-8-[3-[N-(1-okso-pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy}-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-okso-pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy}-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen 2,3 g, 72%) fremstilt: MS (ES) m/e 658,2 (M + H)<+>(c) Metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1 - propyloksy]-2-(4-trilfuormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (b), men med substituering av metyl (S)-3-okso-8-[3-[N-(1-okso-pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trilfuormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen (1,1 g, 50%) fremstilt: MS (ES) m/e 642,1 (M + H)<+>.
(d) (S)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 24 (c), men med substituering av metyl (S)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(rert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen (0,8 g, 60%) fremstilt: MS (ES) m/e 628,1 (M + H)<+>.
(e) (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-yl-amino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 25 (a), men med substituering av (S)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre med (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormethylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre, ble rå tittelforbindelse fremstilt: Rensing ved ODS kromatografi (30% CH3CN/H20 inneholdende 0,1% TFA over 11.), konsentrering og lyofilisering ga tittel (0,657 g, 72%) forbindelsen: [ab"<42>" (c 1,0, MeOH); MS (ES) m/e 528,1 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C2aH28F3N304 ■ 2 CF3C02H ■ 3,75 H20: C, 46,69; H.4,594, N, 5,10. Funnet: C, 46,47: H, 4,58, N, 5,48.
Eksempel 34
Fremstilling av metyl (±)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy}-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
(a) Metyl (S)-3-okso-8-[3-{N-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy}-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 (b), men med substituering av isopropanol med etanol, ble tittelforbindelsen (0,35 g, 76%) fremstilt: MS (ES) m/e 384,4 (M + H)<+>
Eksempel 35
Fremstilling av (S)-3-okso-8-[3-(1,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1-propyloksy}-2-[4-(trifluormetyl)enzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-8-[3-(4-nitrobenzyloksykarbonylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Til metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-
1 H-2-benzasepin-4-acetat (2 ml) ved 0° C ble det dråpevis tilsatt en oppløsning av 3-(4-nitrobenzyloksykarbonylamino)-1-propanol (0,13 g, 0,51 mmol) og dietylasodi-karboksyl (0,08 ml, 0,50 ml). Når tilsetningen var komplett, ble isbadet fjernet, og reaksjonen ble omrørt ved RT. Etter 181. ble oppløsningsmidlet fjernet og produktet isolert ved flammekromatografi på silica gei (100% CHCI3til 5% MeOH/CHCI3for å tilveiebringen tittelforbindelsen (0,12 g) som en klar olje.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,65 (m, 1H), 7,50 (m, 5H), 7,40 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 6,70 (m, 1H), 6,30 (s, 1H), 5,23 (m, 3H), 4,95 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 3,95 (m, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,70 (m, 1H), 3,45 (m, 2H), 3,15 - 2,90 (m, 3H), 2,50 (dd, J = 19,2, 5,5 Hz, 1H), 1,95 (m, 2H). b) Metyl (S)-8-(3-amino-1 -propopyloksy)-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)benzyll-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat Til metyl (S)-8-[3-(4-nitrobenzyloksykaronylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,12 g, 0,19 mmol) i MeOH (2 ml) ble det tilsatt 10% Pd/C (20 mg). Reaksjonsbeholderen ble spylt med hydrogen og utstyrt med en hydrogenfylt ballong. Etter 4,51. ble hydrogenen luftet og katalysatoren fjernet ved filtrering gjennom Celite®. Fjerning av oppløsningsmidlet ga tittelforbindelsen (0,09 g) som en svakt gul rest. Dette materiale ble anvendt uten ytterligere rensing. MS (ES) m/e 465,3 (M + H)<+>c) Metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyrimidin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(4-trifluormetyl)-benzylj-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (S)-8-(3-amino-propyloksy)-3-okso-2-[4-trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,09 g, 019 mmol), 2-brompyrimidin (0,19 g, 057 mmol) og diisopropyletylamin (0,17 ml, 0,98 mmol) i DMF (2 ml) ble oppvarmet ved 80° C i 181. Reaksjonen ble avkjølot til RT og ble konsentrert for å tilveiebringe en gul rest. Flammekromatografi på silica gel (2%, MeOH/EtOAc) ga tittelforbidnelsen (42 mg) som en klar olje. MS (ES) m/e 543,1 (M
+ H)+.
d) Metyl (S)-3-okso-8-[3-(3,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-[4-(trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En Parr hydrogenereirngsapparatur ble tilført med metyl (S)-3-okso-8-[3-(pyrimidin-2-ylamino)-1-]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (42 mg, 0,08 mmol) is-eddiksyre (2 ml), konsentrert Hel (0,2 ml) og 10% Pd/C (10 mg). Blandingen ble ristet under hydrogen (40 psi) i 51., deretter ble hydd ragen luftet, og katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom Celite®. Avdampning av oppløsningmidlene ga rå tittelforbindelse (52 mg) som en mørk rest. Denne ble blandet uten ytterligere rensing. MS (ES) m/e 547,2 (M + H)<+>.
e) (S)-3-Okso-8-[3-(3,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetyl)benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Til rå (S)-3-okso-8-[3-(a3,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-[4-(trifluormethyl)benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat fra eksempel 35d i EtOH (1 ml) ble det tilsatt 1 N NaOH (0,25 ml, 0,25 mmol). Etter omrøring ved RT i 8,51. ble reaksjonen stoppet ved tilsetning av 1 N Hel (0,25 ml, 0,25 mmol). Fjerning av oppløsningsmidlet ga et svakt fult fast stoff. Preparativ revers fase HPLC (Hamilton RPR-1®, 30% DH3CN/H20 inneholdende 0,1% TFA) ga tittelforbindelsen (181,1 mg) som et hvitt pulver. MS (ES) m/e 533,3 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C27H3iN4F304 - 2 H20 ■ 2 CF3C02H: C, 46,74; H,4,68, N, 7,03. Funnet: C, 46,34: H, 4,31, N, 6,82.
Eksempel 36
Fremstilling av (±)-3-okso-8-[3-(N-pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)-1-propytoksy}-2-[4-(trifluormetyl)benzyll-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (±)-3-okso-8-[3-[N-(1 -oksopyridin-2-yl)-N-(metylamino)-1 -propyloksy]-2-[4-(trifluormetyl)benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 25 (a), med med unntakelse av erstatning av metyl (±)-8-[N-(1oksopyridin-2-yl)-N-{fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-fluormetylbenzyl)-2I3I4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-acetat med metyl (+)-3-okso-8-[3-(pyridin-2yl)-N-(fert-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-{4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-eddiksyre, ble Hcl-saltet fremstilt. Dette amteriale ble omdannet til den frie basen med fordeling mellom EtOAc og 5% NaHC03. EtOAc-laget ble separert og konsentrert for å tilveiebringe tittelforbindelsen (4,1 g, 100%): MS (ES) m/e 558,3 (M + H)<+>.
b) Metyl (±)-3-okso-8-E3-(N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-metyl-amino)-1 -propyloksy-2-[4-trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 26 (a), men med erstatning av metyl (+) -3-okso-8-[3-[N-(1-oktopyridin-2-yl)-N-(metyl)amino]-1-propyloksy-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre med metyl (+)-8-[3-[2-(N-oksopyridil)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen (3,0 g, 94%) fremstilt: MS (ES) m/e 572,3
(M + H)<+>
c) Metyl (±)-3-okso-8-[3-(N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 4 (b), men med erstatning av metyl (±)-3-okso-8-[3-(N-(1-oksopyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4 acetat med metyl (±)-8-[3-[2-(N-oksopyridyl)amino)-1-propyloksy]-2-(metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4 acetat ble tittelforbindelsen (0,32 g, 60%) fremstilt: MS (ES) m/e 556,2
(M + H)<+>.
d) (±)-3-Okso-8-[3-(N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)-1-propyloksy]-2-[4-(trifluormetyl)benzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 4 (c), men med erstatning av metyl (±)-3-okso-8-[3-(N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)-1-propyloksy]-2-[4-(trifluormethylbenzyl)- 2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen (0,02 g, 15%) fremstilt: MS (ES) m/e 542,1 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C29H30N3O4F3 • CF3CO2H • 2 H20: C, 55,28; H, 4,94, N, 6,24. Funnet: C, 55,45: H, 4,68, N, 6,14.
Eksempel 37
Fremstilling av (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy}-2-(2,2.2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-3-okso-8-[3-1 -(oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Til en omrørt oppløsning av metyl (S)-8-hydroksy-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (19 g, 57, mmol) i tørr THF (400 ml) og tørr DMF (200 ml) under argon ble det tilsatt 2-(3-hydroksypropylalmino)pyridin N-Okid (11,6 g, 60 mmol) og trifenylfosfin (18,0 g, 69 mmol). Etter at alle faste stoffer var blitt fullstendig oppløste (-30 minutter), ble reaksjonen avkjølt til 0° i et isbad og diisopropyl azodikarboksylat (14,3 ml, 60 mmol) ble tilsatt med sprøyte. Reaksjonen ble sakte oppvarmet til RT og ble omrørt i 181. Konsentrering og flamme kromatografering på silica gel (8:2:1 CHCIj/EtOH) ga tittelforbindelsen (20,83 g, 75%) som er fast skum. Ytterligere 5,73 g av produktet kan bli oppnådd ved recyklisering av isolert utgangsmateriale fra ovennevnte reaksjon for å tilveiebringe total 26,56 g (96%) av tittelforbindelsen: MS (ES) m/e 482,2 (M + H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 8,09 (dd, J = 6,5, 1,3 Hz, 1H), 7,29 (t, 1H), 7,02 (d, J - 9,2 Hz, 1H), 6,84-6,79 (m, 3H), 6,59 (t, 1H), 5,32 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,28-4,14 (m, 2H), 4,16 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,02 (t, 2H), 3,84 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,40 (dd, 2H), 3,01 (dd, 1H), 2,73 (dd, 1H), 2,70 (dd, 1H), 2,52 (dd, 1H), 2,02 (ddd, 2H).
b) Metyl (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propopyloksy]-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Til en omrørt oppløsning av metyl (S)-3-okso-8-[3-(1-oksopyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
(26,56 g, 55 mmol) i isopropanol (500 ml) ble det tilsatt 10% palladium på aktivert karbon (8 g, 7,5 mmol, forsikring for-fuktet i isopropanol under argon) og cykloheksen (55,7 ml, 550 mmol). Reaksjonen ble deretter oppvarmet til tilbakeløp under argon i et oljebad innstilt på 90° C. Etter 61. ble en ytterligere mengde 10% palladium på aktivert karbon (8 g, 7,5 mmol) forsiktig for-fuktet i isopropanol under argon) og cykloheksen (55,7 ml, 550 mmol) ble tilsatt. Etter ytterligere 181. ble reaksjonen varm-fitlrert gjennom Celite®, og filterstykket ble vasket med 1:1 MeOH/CHCh (400 ml). Filtratet ble konsentrert under vakuum og resten ble renset ved flamme kromatografi på silica gel (95:5 CHCU/MeOH) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (19,50 g, 76%) som et hvitt klebrig skum: TLC (silica 5% MeOH i CHCI3) Rf 0,52; MS (ES) m/e 466,3 (M + H)<+.><1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7,94 (dd, 1H), 7,34 (t, 1H), 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,54 (t, 1H), 6,46 (m, 2H), 5,31 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,46 (m, 2H), 5,31 (d. J = 16,5 Hz, 1H), 4,23-5,13 (m, 2H), 4,17 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,02 (t, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,58 (2, 3H), 3,36 (m, 2H), 3,01 (dd, 1H), 2,72 (dd, 1H), 2,68 (33,1H), 2,50 (dd, 1H), 1,96 (ddd, 2H).
c) (S)-3-Okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Til en omrørt oppløsning av metyl (S)-3-okso-8-[3-pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (19,50 g, 42 mmol), i dioksan (150 ml) ble det tilsatt vanndig 1 N NaOH (75 ml, 75 mmol). Den slørete reaksjon ble omrørt ved RT i 21., deretter ble den resulterende homogene oppløsningen nøhytrailiset med vanndig 1 N HCI (75 ml, 75 mmol). Oppløsningen ble konsentrert nærmest til tørrhet ved roterende avdampning for å presipitere ut produktet. Supernatanten ble dekantert ut og gjenværende gummi-holdig fast stoff ble på ny oppløst i metanol. Den kalre oppløsningen ble deretter på ny konsentrert ved roterende avdampning. Gjenværende fast stoff ble triturert med et lite volum vann, filtrert og tørket under vakuum for å tilveiebringe tittelforbindelsen (16,38 g, 86a%) som et hvitt pulver. HPLC (Hamilton PRP-1®, 25% CH3CN/H20 inneholdende 0,1% TFA) k<*>= 3,1; [a]0-112,3° (c, 1,0, MeOH); MS (ES) m/e 452,3 (M + H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7,95 (dd, 1H), 7,34 (dt, 1H), 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,58 (t, 1H), 6,47 (m, 2H), 5,30 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,27 - 4,13 (m, 2H), 4,15 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,02 (t, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,37 (m, 2H), 3,00
(dd, 1H), 2,69 (dd, 1H), 2,65 (dd, 1H), 2,41 (dd, 1H), 1,96 (ddd, 2H). Anal. beregnet for C^HWaNsC* C, 58,53; H, 5,36, N, 9,a31 Funnet: C, 58,37: H, 5,42, N, 9,20.
Eksempel 38
Fremstilling av (R)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy}-2-(2,2.2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (R)-3-okso-8-[3-1 -(oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid (0,33 g, 2 mmol) og dietyl zsodikarboksylat (0,3 ml, 2 mmol) i vannfri DMF (10 ml) ble det dråpevis sakte tilslatt til en oppløsning av (R)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,3 g, 1 mmol) og trifenylfosfin (0,485 g, 26 mmol) i vannfri CH2CI2(10 ml) ved RT. Etter 171. ble reaksjonen konsentrert. Silica gel kromatografi (gradient: 0,5%-5% MeOH/CH2CI2) ga tittelforbindelsen 0,35 g, 80%) som en fargeløs olje; MS (ES) m/e 482,3 (M + H)<+.>
b) Metyl (R)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (R)-3-okso-8-[3-(1-oksopyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,35 g, 0,7 mmol), Cykloheksen (0,75 ml, 7 mmol), 10% Pd/C (88 mg, 0,07 mmol), og isopropanol
(9 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp under argon. Etter 181. ble ytterligere 10% Pd/C (36 mg, 0,03 mmol) og cykloheksen (0,75 ml, 7 mmol) tilsatt. Etter 361. ble reaksjonen varm-fitlrert gjennom Celite®, og filtstykket ble vasket med varm EtOAc. Konsentrering ga en gul olje. Sililca gel kromatografi (1 %-5% meOH i CH2CI2) ga tittelforbindelsen (0,26 g, 77%) som en fargeløs olje: MS (ES) m/e 466,2 (M + H)<+.>
c) (R)-3-Okso-8-[3-(pyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-edd iksyre
LiOH • H20 (25 mg, 0,6 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av metyl (F)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksyl-3-okso-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2- benzasepin-4-acetat (0,25 g, 0,54 mmol), i THF (5 ml) og H20 (2 ml) ved RT. Etter 181. ble reaksjonen konsentrert til tørrhet og resten ble oppløst i H20 (4 ml). Oppløsningen ble forsiktig brakt til pH * 4 med 3,0 N HCI. Presipipatet ble samlet og tørket i høyt vakuum ved 40-45° C for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,15 g, 62%) som et off-white fast stoff: MS (ES) m/e 452,1 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C22H24F3N304 • 0,5 H20: C, 57,38; H, 5,47, N, 9,12. Funnet: C, 57,72 , H, 5,24; N, 8,92.
Eksempel 39
Fremstilling av (S)-8-[3-(4-metylpyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy}-3-okso-2-(2,2.2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-8-[3-(4-metyM-oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]-4-metyl-pyridin-N-oksid (0,60 g, 3,6 mmol) og dietyl azodikarboksylat (0,63 ml, 3,6 mmol) i vannfri CH2CI2(12 ml) ble det dråpevis tilsatt over 3-4 min. til en oppløsning av metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifiuoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,60 g, 1,8 mmol) og trifenylfosfin (0,95 g, 3,6 mmol) i vannfri CH2CI2(16 ml) ved RT. Etter 171. ble reaksjonen konsentrert. Silica gel kromatografi (gradient: 1%-5% MeOH/CH2CI2) ga tittelforbindelsen (0,45 g, 49%) som et off-white skum: MS (ES) m/e 496,3 (M + H)<+>.
b) Metyl (S)-8-[3-(4-metylpyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (S)-8-[3-(4-metyl-1-oksopyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,45 g, 0,9 mmol), cykloheksen (0,93 ml, 9 mmol), 10% Pd/C (0,2 mg, 0,18 mmol), og isopropanol (19 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp under argon. Etter 181. ble ytterligere 10% Pd/C (0,2 g, 0,18 mmol) og cykloheksen (0,27 ml, 2,65 mmol) tilsatt. Etter 361. ble reaksjonen varm-filtrert gjennom Celite®, og filtstykket ble vasket med varm EtOAc. Konsentrering ga en gul olje. Silica gel kromatografi (1 %-3% MeOH i CH2CI2) ga tittelforbindelsen (0,32 g, 74%) som et hvitt skum: MS (ES) m/e 480,2 (M
c) (S)-8-[3-(4-Metylpyridin-2-ylam 2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
LiOH ■ H20 (33 mg, 0,79 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av metyl (S)-8-[3-(4-metylpyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,32 g, 0,67 mmol), i THF (5 ml) og H20 (2 ml) ved RT. Etter 181. ble reaksjonen konsentrert til tørrhet og resten ble løst opp i H20 (4 ml). Oppløsningen ble ekstrahert med etylacetat og ble forsiktig brakt til pH * 5 med 3,0 N HCI. Presipitatet ble samlet og tørket i høyt vakuum ved 40-45° C for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,22 g, 71%) som et off-white fast stoff: MS (ES) m/e 466,1 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C23H26F3N304: C, 59,35; H, 5,63. N, 9,03. Funnet: C, 58,97 , H, 5,55; N, 8,73.
Eksempel 40
Fremstilling av (S)-8-[2-[6-metylaminopyridin-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2-(2,2.2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-8-[2-[6-metylamino)pyridin-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 37 (a) med unntakelse av 6-(metylalmino)-2-pyridyletanol med 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid, og erstatning av (S)-8-hydroksy-3-okso-2-(2,2,2-trifluormetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat, ble tittelforbindelsen fremstilt som en fargeløs olje: MS (ES) m/e 466,2 (M +
H)<+>.
b) (S)-3-8-[2-[6-(Metylamino)pyridin-2-yl)-1-etoksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Ifølge fremgangsmåten i eksempel 37 (c) med erstatning av metyl (S)-8-[2-{6-(metylamino)pyridin-2-yl)-1-etoksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat med metyl (R)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat ble tittelforbindelsen fremstilt som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 452,2 (M + H)<+.>Anal. beregnet for C22H24F3N3O4 • 0,7 H20: C, 56,80; H, 5,19, N, 8,85. Funnet: C, 56,80 , H, 5,19; N, 8,85.
Eksempel 41
Fremstilling av (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-3-okso-8-[3-(1 -oksopyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2-fenykletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En oppløsning av 2-[(3-hydroksy-1-propyl)amino]pyridin-N-oksid (336 g, 2,0 mmol) og dietyl asodikarboksylat (0,3 ml, 2,0 mmol) i vannfri DMF (10 ml) ble det tilsatt en oppløsning av (S)-8-hydroksy-3-okso-2-(fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (350 mg, 1,0 mmol) og trifenylfosfin (525 mg, 2,0 mmol) i vannfri DMF (10 ml) ved RT. Etter 241. ble blandingen konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (gradient: EtOAc (500 ml), deretter 5% MeOH/CHCI3) ga tittelforbindelsen som et oransje skum (288 mg, 57%): MS (ES) m/e 504 (M + H)<+>.
b) Metyl (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahyd ro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
En blanding av metyl (S)-3-okso-8-[3-(1-oksopyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (288 mg, 0,57 mmol), cykloheksen (0,6 ml, 5,8 mmol), 10% Pd/C (62 mg, 0,58 mmol), og 2-propanol (16 ml) ble oppvarmet til tilbakeløp under argon. Etter 311. ble blandingen varm-filtrert gjennom et stykke Celite®, filterstykket ble vasket med varm 1:1 MeOH/CHCU (200 ml), og filtratet ble konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (5% MeOH/CHCI3) etterfulgt av andre flamme silica gel kromatografi (50% cykloheksan) ga tittelforbindelsen som et off-white skum (133 mg, 48%): MS (ES) m/e 488 (M +
H)<+>.
c) (S)-3-Okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
1,0 N LiOH (0,3 ml, 0,3 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av metyl (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2-fenyletyl)-2t3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (133 mg, 0,27 mmol), i THF (1,5 ml) og H20 (1,2 ml) ved 0° C. Blandingen ble oppvarmet til RT over 181. Blandingen ble vasket med Et20 (2, 5 ml), deretter ble et svakt vakuum påført for fjerne gjenværende organiske oppløsnings-midler. Det vanndige laget ble passert gjennom et 0,45 nm Acrodisk filter, og ble forsiktig surgjort ved pH 6 ved anvendelse av 10% HCI i H20 ved 0° C. Presipitatet ble samlet, vasket med H20 og tørket under vakuum ved 50°C for å tilveiebringe tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (62 mg, 48%): MS (ES) m/e 474 (M + H)<+>. Anal. beregnet for CajH^NsCu • 0,75 H20: C, 69,05; H, 6,75, N, 8,63. Funnet: C, 69,05 , H, 6,66; N, 8,55.
Eksempel 42
Fremstilling av (S)-8-[2-[2-[6-(metylylamino)pyridin-2-yl]etoksy]-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]etoksy-3-okso-2-(2-fenyletyl)-1 -2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat
Diisopropyl azodikarboksylat (0,3 ml, 1,5 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av (S)-8-hydroksy-3-okso-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (350 mg, 1,0 mmol) 6-(metylamino)-2-pyridyletanol (228 mg, 1,5 mmol) og trifenylfosfin (393 mg, 1,5 mmol) i vannfri THF (10 ml) ved 0° C. Blandingen ble varmet til RT over 72 t. og ble deretter konsentrert. Flamme silica gel kromatografi (50% EtOAc/heksan) etterfulgt av andre flamme silica gel kromatografi (25% EtOAc/heksaner) ga tittelforbidnelsen som et hvitt skum (250 mg, 51%): MS (ES) m/e (M + H)<+>.
b) (S)-8-[2-[6-(Metylamino)pyridin-2-yl]etoksy]-3-okso-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
1,0N LiOH (0,62 ml, 0,62 mmol) ble tilsatt til en oppløsning av metyl (S)-8-[2-[6(metyhlamino)pyridin-2-yl}etoksy]3-okso-2-(2-fenyletyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (250 mg, 0,51 mmol) i THF (2,5 ml) og H20 (1,0 ml) ved 0° C,
og reaksjonen ble omrørt ved RT i 181. Blandingen ble vasket med Et20 (2 c 5 ml), og deretter ble et svakt vakuum påført for å fjerne gjenværende organiske oppløsningsmidler. Det vanndige laget ble sendt gjennom et 0,45 jim Acrodisk filter som ble førtst forsiktig surgjort til pH 6 ved anvendelse av 10% HCI i H20 ved 0° C. Presipitatet ble samlet, vasket med H20 og tørket under vakuum ved 50° C for å tilveiebringe tittelforbindelsen (134 mg, 55%) som et hvitt fast stoff: MS (ES) m/e 474 (M + H)<+>.
Anal. beregnet for C28H3iN304 • 0,75 H20: C, 69,05; H, 6,73, N, 8,63. Funnet: C, 69,23 , H, 6,59; N, 8,55.
Eksempel 43
Fremstilling av (S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
a) Metyl (S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)-benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat
Til en oppløsning av metyl (S)-8-[2-hydroksy-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)-benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat (0,18 g, 0,44 mmol) og Ph3P (0,23 g, 0,88 mmol) i CH2CI2(2 ml) ble det tilsatt en oppløsning av 6-(metylamino)-2-pyridyletanol (0,13 g, 0,33 mmol) og dietylasodikarboksylat (0,14 ml, 0,89 mmol) i CH2CI2(2 ml). Etter 2 dager ved RT ble oppløsnignsmidlet fjernet under redusert trykk. Radial kromatografi på silica gel (6 mm skål, 5% MeOH/CHCI3) ga en klar olje (0,63 g) som inneholdt en blanding av tittelforbindeslen sammen med ureagert metyl (S)-8-hydroksy-3-okso-2-[4-trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-acetat. Dette materialet ble ytterligere renset ved radial kromatografi på silica gel ( 6 mm skål, 50% EtOAc/hekaner) for å tilveiebringe tittelforbindelsen (0,12 g) som en klar olje: MS (ES) m/e 542,3 (M + H)
b) (S)-8-[2-[6-(Metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre
Til en oppløsning av metyl (S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3-okso-2-[4-(trifluormetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-acetat (0,12 g, 0,22 mmol) i EtOH (2 ml) ble det tilsatt 1 N NaOH (0,50 ml). Etter 3,51. ved RT ble mengden av oppløsningsmiddel fjernet under redusert trykk for å tilveiebringe en hvit rest. Denne ble oppløst i vann, og oppløsningen nøytralisert ved pH = 7 med 1 N HCI. Det resulterende prestpitatet ble samlet og tørket under vakuum for å tilveiebringe tittelforbindelsen (28,1 mg) som et hvitt fast stoff: [cc]d-74,0° (c 0,05, EtOH); MS (ES) m/e 528,3 (M + H)<+>. Anal. beregnet for C28H28F3N3O4 ■ 0,5 H20: C, 62,68 H, 5,45, N, 7,83. Funnet: C, 62,60 , H, 5,35; N, 7,66
Eksempel 44
Sammensetning av parentral doseringsenhet
Et preparat som inneholder 20 mg i forbidnelsen ifølge eksempel 1 som et steritl tørt pulver, blir fremstilt som følger: 20 mg av forbindelsen blir løst opp i 15 ml destillert vann. Oppløsningen blir filtrert under sterile betingelser inn i en 25 ml multi-dose ampulle og lyofilisert. Pulveret blir gjenopprettet ved tilsetning av 20 ml 5% dekstrose i vann (D5W) for intravenøs eller intramuskulær injeksjon. Doseringen blir dermed bestemt av injeksjonsvolumet. Påfølgende fortynning ble dannet ved tilsetning av et oppmålt volum av denne doseringsenheten til et annet volum av D5W for injeksjon, eller innstilt dose kan bli tilsatt til en annen mekanisme for dispensering av medikamentet, som i en flaske eller bak for IV drypp infusjon eller annet injeksjons-inf usjonssystem.
Eksempel 45
Sammensetning av oral doseringsenhet
En kapsel for oral administrering blir fremstilt ved blanding og maling av 50 mg av forbindelsen ifølge eksempel 1 med 75 mg laktose og 5 mg magnesiumstearat. Det resulterende pulver blir screenet og fylt inn i en hard gelatinkapsel.
Eksempel 46
Sammensetning av oral doseringsenhet
En tablett for oral administrering blir fremstilt ved blanding og granulering av 20 mg i sukrose, 150 mg kalsiumsulfat di hyd rat og 50 mg og forbindelsen i eksempel 1 med 1 10% gelatinoppløsning. De våte granulene blir screenet, tørket, blandet med 10 mg stivelse, 5 mg talk og 3 mg stearinsyre; og komprimert til en tablett.
Ovennevnte beskrivelse beskriver fullstendig hvordan man skal fremstille og anvende foreliggende oppfinnelse. De forskjellige referansene til journaler, patenter og andre publikasjoner som er sitert heri, omfatter teknikkens stand og er inkorporert heri som referanse.

Claims (7)

1. Forbindelse,karakterisert vedat den har formel (I):
hvor: R<1>er A-Co-4alkyl, eventuelt substituert med en hvilken som helst oppnåelig kombinasjon av en eller flere av R<10>eller R<7>; A er H eller Ar; R<7>er-COR<8>; hver R<8>er uavhengig -OR"; R<10>er H eller halogen; R<2>er hvor R<b>og R<c>er bundet sammen for å danne en seksleddet aromatisk karbocyklisk ring; eller R' er H, d.6alkyl eller Ar-Co-ealkyl; R" er R\ -C(0)R' eller -C(0)OR'; Ry er H, -OR<9>, -NR9R9 eller C^alkyl; hver R<9>er uavhengig H eller Ci^alkyl; u er 0 eller 1; v er 0 eller 1; og hvor Ar er fenyl eller naftyl, eventuelt substituert med en til tre substituenter valgt fra Rx, (CrC^alkyl, C^alkoksy, C^alkyltio, CF3, NH2, OH, F, Cl, Br eller I: hvor Rx er valgt fra (CrC4)alkyl, OR', SR', (CrC4)alkylsulfonyl, (Ci-C4)alkylsulfoksyl, -CN, N(R')2, CH2N(R')2, -N02, -CF3, -C02R' -CON(R')2, -COR', -NR'C(0)R', F, Cl, Br, I eller CF3S{0)r; hvor r er 0,1 eller 2; eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
2. Forbindelse,karakterisert vedat den er: (±)-8-[3-(2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-(4-amino)-2-pyridy]amino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-(4-metoksy-2-pyridylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-(2-pyridy1aminoH-pro^ 2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-{2-imidasolylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-[2-(1,4,5,6-tetrahydorpyrimidinyl)amino]-1-propyloksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-(6-amino-2-pyridylamino)-1-pro^ 2- benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[2-(2-benzimidasolyl)etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; {±)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3-okso-2,3,4,54etrah benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[2-benzimidasol-2-yl]-1 -etoksy]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-l H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino]-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2l3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-(pyirmidin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (R)-8-[3-(4-aminopyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2,3l4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-[(1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-2-yl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (S)-8-[3-(4-aminopyridin-2-ylamino]-1-pro^ 1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre; {±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl]-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-[N-{1-oksopyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-porpyloksy]-3- okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fetr-butoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-fluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-(pyirdin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-2-metyl-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)]-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (i^-benzyl-S-okso-S-P-tpyridin^-ylaminoJ-l-propyloksy^.S^.S-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-2-(kaoroksymetyl)-3<>kso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-2-(4-aminobenzyl)-3-okso-8-[3-{pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(benzoyl)amino]-1-prapyloksy]-2-{4-trifluor7Tietylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre (±)-8-[3-(2-imidasolin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-8-[3-(4,6-dimetylpyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-metyl-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; {±)-8-[3-(4,5,6,7-tetrahydro-1 H-1,3-diasepin-2-ylamino)-1 -propyloksy]-2-metyl]-3-okso-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(fetr-butylacetyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(isobutoksykarbonyl)amino]-1-propyloksy]-2-(4-trifluoiTrietylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre (S-3-oksc-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(4-trifluormetylbenzyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-(4-metylpyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl}-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (±)-3-okso-8-[3-[N-(pyridin-2-yl)-N-(metyl)amino)]-1-propyloksy]-2-(4-(trifl metyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (S)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)]-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (R)-3-okso-8-[3-(pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (S)-8-[3-(4-metylpyrid in-2-ylamino)-1-propyloksy]-3-okso-2-(2,2,2-trifluoretyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (S)-3-okso-8-[3-(1,4,5,6-tetrahydropyrimid-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-[4-(trifluorTnetyl)benzyl]-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (S)-3-okso-2-(2-fenyletyl)-8-[3-pyridin-2-ylamino)-1-propyloksy]-2-2t3t4,5-tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yi]-1-etoksy]-3-okso-2-(2-fenylet^^ tetrahydro-1H-2-benzasepin-4-eddiksyre; (S)-8-[2-[6-(metylamino)pyirdin-2-yl]-1-etoksy]-3-^^ 2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzasepin-4-eddiksyre; eller (S)-8-[2-[6-(metylamino)pyridin-2-yl]-1-etoksy]-3-okso-2-[4-trifluonrietylJbenzylJ^.S^.S-tetrahydro-IH^-benzasepin^-eddiksyre; eller et farmasøyhtisk akseptabelt salt derav.
3. Farmasøytisk sammensetning,karakterisert vedat den omfatter den forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1-2 og en farmaøytisk akseptabel bærer.
4. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) som definert i krav 1,karakterisert vedå omsette en forbindelse med formel (IV) med en forbindelse med formel (V):
hvor R<1>og R<2>er som definert i formel (I), idet eventuelle reaktive forskjellige grupper er beskyttet, og L<1>er OH eller halogen; og deretter fjerne eventuelle beskyttelsesgrupper, og eventuelt danne et farmasøytisk akseptabelt salt.
5. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 2,karakterisert vedat den anvendes som et medikament.
6. Anvendelse av en forbindelse med formel (I) som definert i krav 1 for fremstilling av et medikament for behandling av osteoporose.
7. Anvendelse av en forbindelse med formel (I) som definert i krav 1 for fremstilling av et medikament for inhibering av angiogenese.
NO19991590A 1996-10-02 1999-03-31 Vitronektin reseptor antagonister, anvendelse og fremstilling derav samt farmasoytisk sammensetning NO320194B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US2732096P 1996-10-02 1996-10-02
US4377697P 1997-04-11 1997-04-11
PCT/US1997/018001 WO1998014192A1 (en) 1996-10-02 1997-10-01 Vitronectin receptor antagonists

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO991590D0 NO991590D0 (no) 1999-03-31
NO991590L NO991590L (no) 1999-05-31
NO320194B1 true NO320194B1 (no) 2005-11-14

Family

ID=26702318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19991590A NO320194B1 (no) 1996-10-02 1999-03-31 Vitronektin reseptor antagonister, anvendelse og fremstilling derav samt farmasoytisk sammensetning

Country Status (37)

Country Link
EP (1) EP0957917B1 (no)
JP (2) JP4491072B2 (no)
KR (1) KR100589578B1 (no)
CN (1) CN1114403C (no)
AP (1) AP1463A (no)
AR (1) AR008878A1 (no)
AT (1) ATE312089T1 (no)
AU (1) AU733417B2 (no)
BG (1) BG64581B1 (no)
BR (1) BR9712248B1 (no)
CA (1) CA2267224C (no)
CO (1) CO4900046A1 (no)
CY (1) CY2576B1 (no)
CZ (1) CZ299076B6 (no)
DE (1) DE69734833T2 (no)
DK (1) DK0957917T3 (no)
DZ (1) DZ2320A1 (no)
EA (1) EA002419B1 (no)
ES (1) ES2252775T3 (no)
HK (1) HK1023730A1 (no)
HU (1) HU229221B1 (no)
ID (1) ID19623A (no)
IL (1) IL129243A (no)
MA (1) MA24361A1 (no)
MY (1) MY137606A (no)
NO (1) NO320194B1 (no)
NZ (1) NZ334953A (no)
PE (1) PE10499A1 (no)
PL (1) PL190859B1 (no)
RO (1) RO119881B1 (no)
SA (1) SA98180936B1 (no)
SK (1) SK285029B6 (no)
TR (1) TR199900737T2 (no)
TW (1) TW487702B (no)
UA (1) UA60311C2 (no)
UY (2) UY24735A1 (no)
WO (1) WO1998014192A1 (no)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7125866B1 (en) * 1999-04-30 2006-10-24 Regents Of The University Of Michigan Therapeutic applications of pro-apoptotic benzodiazepines
UA60311C2 (uk) * 1996-10-02 2003-10-15 Смітклайн Бічам Корпорейшн Антагоністи рецептора вітронектину, спосіб одержання цих сполук та фармацевтична композиція
TW527355B (en) 1997-07-02 2003-04-11 Bristol Myers Squibb Co Inhibitors of farnesyl protein transferase
BR9813208A (pt) * 1997-09-24 2000-08-22 Smithkline Beecham Corp Antagonista receptor de vitronectina
TR200000786T2 (tr) * 1997-09-24 2000-08-21 Smithkline Beecham Corporation Vitronektin reseptör antagonisti
US6372719B1 (en) 1998-03-04 2002-04-16 Jay Cunningham ανβ3 integrin antagonists in combination with chemotherapeutic agents
DE19842415A1 (de) 1998-09-16 2000-03-23 Merck Patent Gmbh Pharmazeutische Zubereitung
IL143901A0 (en) * 1998-12-23 2002-04-21 Searle & Co Use of cyclooxygenase-2- inhibitor, a matrix metallaproteinase inhibitor, an antineoplastic agent and optionally radiation as a combination treatment of neoplasia
WO2000046215A1 (en) * 1999-02-03 2000-08-10 Merck & Co., Inc. Benzazepine derivatives as alpha-v integrin receptor antagonists
JP2003506452A (ja) * 1999-08-06 2003-02-18 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 発作の治療に有用なビトロネクチン受容体アンタゴニスト
US6514964B1 (en) 1999-09-27 2003-02-04 Amgen Inc. Fused cycloheptane and fused azacycloheptane compounds and their methods of use
DE10027514A1 (de) * 2000-06-06 2002-01-03 Basf Ag Liganden von Integrinrezeptoren
DE10028575A1 (de) 2000-06-14 2002-03-14 Basf Ag Integrinliganden
FR2806082B1 (fr) * 2000-03-07 2002-05-17 Adir Nouveaux composes bicycliques antagonistes des recepteurs de la vitronectine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
KR100854424B1 (ko) 2001-01-29 2008-08-27 3-디멘져널 파마슈티칼즈 인코오포레이티드 치환된 인돌 및 인테그린 길항제로서의 이들의 용도
JP4394882B2 (ja) * 2001-04-10 2010-01-06 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 接着形成阻害方法
SE0101386D0 (sv) 2001-04-20 2001-04-20 Astrazeneca Ab New compounds
US7109191B2 (en) 2001-05-03 2006-09-19 Merck & Co., Inc. Benzazepinone alpha vintegrin receptor antagonists
CN100560131C (zh) 2001-10-22 2009-11-18 斯克里普斯研究学院 抗体靶向化合物
GB0215867D0 (en) * 2002-07-09 2002-08-14 Glaxosmithkline Spa Novel method and compounds
JP2006522139A (ja) * 2003-04-04 2006-09-28 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ベンズアゼピンの製造方法およびその中間体
AU2012216372B2 (en) * 2004-04-02 2015-01-22 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for treating and preventing disease associated with alphaVbeta5 integrin
DK1734996T3 (da) * 2004-04-02 2013-06-10 Univ California Fremgangsmåder og sammensætninger til behandling og forebyggelse af sygdom, der er associeret med alfa v beta 5-integrin
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
TW200635902A (en) * 2004-12-21 2006-10-16 Smithkline Beecham Corp Methods and formulations
US20080293691A1 (en) * 2005-11-29 2008-11-27 Smithkline Beecham Corporation Treatment Method
JP5637855B2 (ja) 2007-11-08 2014-12-10 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 蛋白尿症の治療のための方法及び組成物
ES2428896T3 (es) * 2007-11-16 2013-11-12 Ube Industries, Ltd. Compuesto de benzacepinona
EP2257538B1 (en) * 2008-03-06 2016-04-27 GlaxoSmithKline LLC Process for the preparation of benzodiazepine derivatives
WO2010093706A2 (en) 2009-02-10 2010-08-19 The Scripps Research Institute Chemically programmed vaccination
CN102427816A (zh) * 2009-03-30 2012-04-25 宇部兴产株式会社 用于治疗或预防眼病的药物组合物
JP5572996B2 (ja) * 2009-05-15 2014-08-20 宇部興産株式会社 ベンズアゼピノン化合物を有効成分として含有する医薬
KR101752515B1 (ko) 2009-07-24 2017-06-29 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 Ａｖｂ５ 인테그린과 결부된 질환의 치료 및 예방을 위한 방법 및 조성물
JP5856063B2 (ja) 2009-11-17 2016-02-09 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン 治療特性を有する１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオンおよび関連化合物
EP2325194A1 (en) * 2009-11-24 2011-05-25 Glycotope GmbH Process for the purification of glycoproteins
KR20160147007A (ko) 2014-05-30 2016-12-21 화이자 인코포레이티드 선택적인 안드로겐 수용체 조절제로서의 카보니트릴 유도체
EP4144725A4 (en) * 2020-04-26 2023-10-25 Jiangsu NHWA Pharmaceutical Co., Ltd 1,5-DIHYDRO-2,4-BENZODIAZEPINE-3-ONE DERIVATIVE AND ITS USE
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE236882T1 (de) * 1992-12-21 2003-04-15 Smithkline Beecham Corp Bicyklische fibrinogen antagoniste
JPH10504807A (ja) * 1994-06-29 1998-05-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ビトロネクチン受容体拮抗剤
PL318199A1 (en) * 1994-06-29 1997-05-26 Smithkline Beecham Corp Antagonists of vitronectin receptors
WO1996006087A1 (en) * 1994-08-22 1996-02-29 Smithkline Beecham Corporation Bicyclic compounds
WO1996026190A1 (en) * 1995-02-22 1996-08-29 Smithkline Beecham Corporation Integrin receptor antagonists
UA60311C2 (uk) * 1996-10-02 2003-10-15 Смітклайн Бічам Корпорейшн Антагоністи рецептора вітронектину, спосіб одержання цих сполук та фармацевтична композиція

Also Published As

Publication number Publication date
BR9712248A (pt) 1999-08-24
UA60311C2 (uk) 2003-10-15
CA2267224A1 (en) 1998-04-09
UY24735A1 (es) 1998-03-30
NZ334953A (en) 2000-01-28
AP1463A (en) 2005-09-10
CN1238689A (zh) 1999-12-15
BG103299A (en) 2000-01-31
JP2001501936A (ja) 2001-02-13
CZ113299A3 (cs) 2000-03-15
ID19623A (id) 1998-07-23
EP0957917A4 (en) 2002-05-15
PE10499A1 (es) 1999-03-27
AU733417B2 (en) 2001-05-17
PL332674A1 (en) 1999-09-27
DE69734833D1 (de) 2006-01-12
EP0957917B1 (en) 2005-12-07
CA2267224C (en) 2007-03-13
IL129243A (en) 2004-07-25
EP0957917A1 (en) 1999-11-24
MY137606A (en) 2009-02-27
AU4746297A (en) 1998-04-24
JP4491072B2 (ja) 2010-06-30
BG64581B1 (bg) 2005-08-31
SK42599A3 (en) 1999-12-10
KR20000048816A (ko) 2000-07-25
DE69734833T2 (de) 2006-07-13
RO119881B1 (ro) 2005-05-30
CO4900046A1 (es) 2000-03-27
AP9901493A0 (en) 1999-03-31
HK1023730A1 (en) 2000-09-22
CN1114403C (zh) 2003-07-16
PL190859B1 (pl) 2006-02-28
WO1998014192A1 (en) 1998-04-09
MA24361A1 (fr) 1998-07-01
KR100589578B1 (ko) 2006-06-15
BR9712248B1 (pt) 2010-06-29
AR008878A1 (es) 2000-02-23
ES2252775T3 (es) 2006-05-16
EA199900356A1 (ru) 2000-02-28
IL129243A0 (en) 2000-02-17
JP2010006838A (ja) 2010-01-14
CZ299076B6 (cs) 2008-04-16
UY24935A1 (es) 2001-07-31
DK0957917T3 (da) 2006-04-18
DZ2320A1 (fr) 2002-12-28
SA98180936B1 (ar) 2006-05-30
NO991590D0 (no) 1999-03-31
TW487702B (en) 2002-05-21
TR199900737T2 (xx) 1999-07-21
HUP9903769A2 (hu) 2000-03-28
ATE312089T1 (de) 2005-12-15
EA002419B1 (ru) 2002-04-25
HU229221B1 (en) 2013-09-30
SK285029B6 (sk) 2006-04-06
HUP9903769A3 (en) 2000-07-28
CY2576B1 (en) 2008-07-02
NO991590L (no) 1999-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO320194B1 (no) Vitronektin reseptor antagonister, anvendelse og fremstilling derav samt farmasoytisk sammensetning
US6239138B1 (en) Vitronectin receptor antagonist
CA2303846A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
SK13292000A3 (sk) Antagonisty vitronektínového receptora, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom, ich použitie a medziprodukty
CA2304000A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
US6825188B2 (en) Vitronectin receptor antagonists
US6458814B1 (en) Vitronectin receptor antagonists
US20020123487A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
US20020128257A1 (en) Vitronectin receptor antagonist
MXPA00002896A (en) Vitronectin receptor antagonist
MXPA01001386A (en) Vitronectin receptor antagonists

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees