ES2252775T3 - Antagonistas del receptor de vitronectina. - Google Patents
Antagonistas del receptor de vitronectina.Info
- Publication number
- ES2252775T3 ES2252775T3 ES97909979T ES97909979T ES2252775T3 ES 2252775 T3 ES2252775 T3 ES 2252775T3 ES 97909979 T ES97909979 T ES 97909979T ES 97909979 T ES97909979 T ES 97909979T ES 2252775 T3 ES2252775 T3 ES 2252775T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- oxo
- tetrahydro
- benzazepin
- propyloxy
- methyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D223/16—Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
- A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
- C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
- C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UNOS COMPUESTOS QUE TIENEN UNA ESTRUCTURA CENTRAL DE BENZODIACEPINILO, QUE SON ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR DE LA VITRONECTINA, UTILES EN EL TRATAMIENTO DE LA OSTEOPOROSIS, ANGIOGENESIS, DEL CRECIMIENTO TUMORAL Y DE LA METASTASIS, ARTERIOSCLEROSIS, RESTENOSIS E INFLAMACION.
Description
Antagonistas del receptor de vitronectina.
Esta invención se refiere a compuestos
farmacéuticamente activos que inhiben el receptor de vitronectina y
que son útiles para el tratamiento de la inflamación, cáncer y
trastornos cardiovasculares, como aterosclerosis y reestenosis, y
enfermedades en las que la reabsorción ósea es un factor, como la
osteoporosis.
Las integrinas son una superfamilia de receptores
de la adhesión celular, que son glucoproteínas transmembrana
expresadas sobre una diversidad de células. Estos receptores de la
adhesión de la superficie celular incluyen gpIIb/IIIa (el receptor
de fibrinógeno) y \alpha_{V}\beta_{3} (el receptor de
vitronectina). El receptor de fibrinógeno gpIIb/IIIa se expresa
sobre la superficie de plaquetas, y media en la agregación
plaquetaria y la formación del coágulo hemostático en el sitio de
una herida sangrante. Philips, et al., Blood.,
1988, 71, 831. El receptor de vitronectina
\alpha_{V}\beta_{3} se expresa sobre una serie de células,
incluyendo células endoteliales, del músculo liso, osteoclastos y
células tumorales y, por tanto, tiene una diversidad de funciones.
El receptor \alpha_{V}\beta_{3} expresado sobre la membrana de
células de osteoclastos media en la adhesión de los osteoclastos a
la matriz ósea, una etapa clave en el proceso de reabsorción ósea.
Ross, et al., J. Biol. Chem., 1987,
262, 7703. Una enfermedad caracterizada por una excesiva
reabsorción ósea es la osteoporosis. El receptor
\alpha_{V}\beta_{3} expresado sobre células del músculo liso
aórticas humanas media en su migración hacia la capa neointima, un
proceso que puede conducir a reestenosis después de una
angioplastia coronaria percutánea. Brown, et al.,
Cardiovascular Res., 1994, 28, 1815. Además, Brooks,
et al., Cell, 1994, 79, 1157, han demostrado
que un antagonista de \alpha_{V}\beta_{3} es capaz de estimular
la regresión tumoral induciendo la apoptosis de vasos sanguíneos
angiogénicos. Por tanto, unos agentes que bloqueen
el receptor de vitronectina serían útiles para tratar enfermedades, como la osteoporosis, la reestenosis y el cáncer.
el receptor de vitronectina serían útiles para tratar enfermedades, como la osteoporosis, la reestenosis y el cáncer.
Ahora se sabe que el receptor de vitronectina se
relaciona con tres integrinas diferentes, denominadas
\alpha_{V}\beta_{1}, \alpha_{V}\beta_{3} y
\alpha_{V}\beta_{5}. Según Horton, et al., Int. J. Exp.
Pathol., 1990, 71, 741, \alpha_{V}\beta_{1} se
une a la fibronectina y vitronectina. La \alpha_{V}\beta_{3} se
une a una gran variedad de ligandos, incluyendo fibrina,
fibrinógeno, laminina, trombospondina, vitronectina, factor de von
Willebrand, osteopontina y sialoproteína I ósea. La
\alpha_{V}\beta_{5} se une a la vitronectina. Se ha demostrado
que el receptor de vitronectina \alpha_{V}\beta_{5} está implicado
en la adhesión celular de una diversidad de tipos celulares,
incluyendo células endoteliales microvasculares (Davis, et
al., J. Cell. Biol., 1993, 51, 206), y se
ha confirmado su papel en la angiogénesis. Brooks, et al.,
Science, 1994, 264, 569. Esta integrina se
expresa en vasos sanguíneos en tejido de granulación de heridas
humano, pero no en la piel normal.
Se sabe que el receptor de vitronectina se une a
proteínas de la matriz ósea que contienen el motivo tripeptídico
Arg-Gly-Asp (o RGD). Por tanto,
Horton, et al., Exp. Cell Res., 1991,
195, 368, indican que los péptidos que contienen RGD y un
anticuerpo antirreceptor de vitronectina (23C6) inhiben la
reabsorción de dentina y la diseminación de células por los
osteoclastos. Además, Sato, et al., J. Cell Biol.,
1990, 111, 1713, indican que la equistatina, un
péptido de veneno de serpiente que contiene la secuencia RGD, es un
potente inhibidor de la reabsorción ósea en cultivo de tejidos, e
inhibe la unión de los osteoclastos al hueso.
Los documentos WO 96/00574 y WO 94/14776 (ambos
de SmithKline Beecham Corporation) describen una serie de compuesto
bicíclicos reivindicados como potentes inhibidores del receptor de
vitronectina.
Ahora se ha descubierto que ciertos compuestos
son potentes inhibidores de los receptores \alpha_{V}\beta_{3} y
\alpha_{V}\beta_{5}. En particular, se ha descubierto que estos
compuestos son inhibidores más potentes del receptor de
vitronectina que del receptor de fibrinógeno.
Esta invención comprende compuestos de fórmula
(I) como se describe a continuación, que tienen actividad
farmacológica para la inhibición del receptor de vitronectiona y
son útiles en el tratamiento de la inflamación, cáncer y trastornos
cardiovasculares, como la aterosclerosis y la reestenosis, y
enfermedades en las que la reabsorción ósea es un factor, como la
osteoporosis.
Esta invención es también una composición
farmacéutica que comprende un compuesto según la fórmula (I) y un
vehículo farmacéuticamente aceptable.
Esta invención también es un método para tratar
enfermedades que son mediadas por el receptor de vitronectina. En
un aspecto particular, los compuestos de esta invención son útiles
para tratar la aterosclerosis, reestenosis, inflamación, cáncer y
enfermedades en las que la reabsorción ósea es un factor, como la
osteoporosis.
Esta invención comprende compuestos nuevos que
son inhibidores más potentes del receptor de vitronectina que del
receptor de fibrinógeno. Los compuestos nuevos comprenden un núcleo
de benzazepina en el que un sustituyente que contiene nitrógeno
está presente sobre el anillo aromático de seis miembros de la
benzazepina, y un sustituyente alifático que contiene un resto
ácido está presente sobre el anillo de siete miembros de la
benzazepina. Se cree que el sistema de anillo de la benzazepina
interacciona de modo favorable con el receptor de vitronectina, y
que orienta las cadenas laterales de los sustituyentes sobre los
anillos de seis y siete miembros de forma que tambíen pueden
interaccionar de modo favorable con el receptor. Se prefiere que
existan aproximadamente doce a catorce enlaces covalentes
intermedios a lo largo de la vía intramolecular más corta entre el
grupo ácido sobre el sustituyente alifático del anillo de siete
miembros de la benzazepina y el nitrógeno del sustituyente que
contiene nitrógeno sobre el anillo aromático de seis miembros de la
benzazepina.
Esta invención comprende compuestos de fórmula
(I):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
R^{1} es H, alquilo C_{1-6},
Ar-(alquilo C_{0-6}), Het-(alquilo
C_{0-6}), (cicloalquil
C_{3-6})-(alquilo C_{0-6}),
-CH_{2}CF_{3},
-(CH_{2})_{1-2}C(O)OR', o
-(CH_{2})_{2}OR';
R^{2} es
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en donde Q^{1}, Q^{2} y Q^{3}
son cada uno CR^{y}, y Q^{4} es CR^{y} o
N;
W es -CH_{2}-CH_{2}-;
R^{g} es H, alquilo C_{1-6},
Het-(alquilo C_{0-6}), (cicloalquil
C_{3-7})-(alquilo C_{0-6}) o
Ar-(alquilo C_{0-6});
R^{k} es R^{g}, -C(O)R^{g}, o
-C(O)OR^{f};
R^{f} es H, alquilo C_{1-6},
o Ar-(alquilo C_{0-6});
R' es H, alquilo C_{1-6},
Ar-(alquilo C_{0-6}), o (cicloalquil
C_{3-6})-(alquilo C_{0-6});
R'' es R', -C(O)R', o
-C(O)OR';
R^{y} es H, halógeno, -OR^{g}, -SR^{g},
-CN, -NR^{g}R^{k}, -NO_{2}, -CF_{3},
CF_{3}S(O)_{r}-, -CO_{2}R^{g}, -COR^{g},
-CONR^{g}{}_{2}, o alquilo C_{1-6};
r es 0,1 ó 2;
s es 0, 1 ó 2;
u es 0 ó 1; y
v es 0 ó 1;
o su sal farmacéuticamente
aceptable.
También se incluyen en esta invención las sales
de adición y complejos farmacéuticamente aceptables de los
compuestos de esta invención. En los casos en los que los compuestos
de esta invención puedan tener uno o más centros quirales, a menos
que se especifique, esta invención comprende cada compuesto no
racémico exclusivo que pueda sintetizarse y resolverse mediante
técnicas convencionales. En los casos en los que los compuestos
tengan dobles enlaces carbono-carbono insaturados,
ambos isómeros cis (Z) y trans (E) se encuentran dentro del alcance
de esta invención. En los casos en los que los compuestos pueden
existir en formas tautoméricas, como tautómeros
ceto-enol, como 3 y
4 , se contempla que cada forma tautomérica está
incluida dentro de esta invención, tanto si existe en equilibrio
como si está bloqueada en una forma por una sustitución apropiada
con R'.
Los compuestos de fórmula (I) inhiben la unión de
vitronectina y otros péptidos que contienen RGD al receptor de
vitronectina. La inhibición del receptor de vitronectina sobre los
osteoclastos inhibe la reabsorción ósea osteoclástica, y es útil en
el tratamiento de enfermedades en las que la reabsorción ósea está
asociada con una patología, como la osteoporosis y la
osteoartritis.
En otro aspecto, la invención es un uso de un
compuesto que provoca un aumento en la liberación de osteocalcina
en la fabricación de un medicamento para estimular la formación de
hueso. El aumento en la producción de hueso es un beneficio
evidente en estados de enfermedad en los que existe una deficiencia
de masa ósea mineralizada, o se desee una remodelación del hueso,
como la curación de fracturas y la prevención de fracturas óseas.
Las enfermedades y trastornos metabólicos que producen una pérdida
de la estructura ósea también se beneficiarán de dicho tratamiento.
Por ejemplo, el hiperparatiroidismo, enfermedad de Paget,
hipercalcemia de malignidad, lesiones osteolíticas producidas por
metástasis ósea, pérdida ósea debida a la inmovilización o
deficiencia en hormonas sexuales, enfermedad de Behçet,
osteomalacia, hiperostosis y osteopetrosis, pueden beneficiarse de
la administración de un compuesto de esta invención.
Además, puesto que los compuestos de la presente
invención inhiben los receptores de vitronectina sobre una serie de
tipos celulares diferentes, dichos compuestos serán útiles en el
tratamiento de trastornos inflamatorios, como artritis reumatoide y
psoriasis, y enfermedades cardiovasculares, como aterosclerosis y
reestenosis. Los compuestos de fórmula (I) de la presente invención
pueden ser útiles para el tratamiento o prevención de otras
enfermedades, incluyendo, pero sin limitarse a trastornos
tromboembólicos, asma, alergias, síndrome de insuficiencia
respiratoria de adultos, enfermedad del injerto contra el receptor,
rechazo de transplante de órganos, choque séptico, eccema,
dermatitis de contacto, enfermedad del intestino inflamatoria y
otras enfermedades autoinmunológicas. Los compuestos de la presente
invención también pueden ser útiles para la curación de
heridas.
Los compuestos de la presente invención también
son útiles para el tratamiento, incluyendo la prevención, de
trastornos angiogénicos. La expresión "trastornos
angiogénicos", tal como se utiliza en la presente, incluye
trastornos que implican una neovascularización anómala. Cuando el
crecimiento de nuevos vasos sanguíneos es la causa, o contribuye a
la patología asociada con una enfermedad, la inhibición de la
angiogénesis reducirá los efectos perjudiciales de la enfermedad.
Un ejemplo de esta diana de enfermedad es la retinopatía diabética.
Cuando el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos es necesario para
apoyar el crecimiento de un tejido perjudicial, la inhibición de la
angiogénesis reducirá el suministro de sangre al tejido y, con ello,
contribuye a la reducción de la masa del tejido, basándose en los
requerimientos de suministro de sangre. Los ejemplos incluyen
crecimiento de tumores en los que la neovascularización en un
requerimiento continuo para que el tumor crezca y se establezcan
metástasis de tumores sólidos. Por tanto, los compuestos de la
presente invención inhiben la angiogénesis del tejido tumoral,
evitando, con ello, la metástasis tumoral y el crecimiento
tumoral.
Por tanto, según los métodos de la presente
invención, la inhibición de la angiogénesis utilizando los
compuestos de la presente invención puede mejorar los síntomas de
la enfermedad y, en algunos casos, puede curar la enfer-
medad.
medad.
Otra diana terapéutica para los compuestos de la
presente invención son las enfermedades oculares caracterizadas por
la neovascularización. Estas enfermedades oculares incluyen
trastornos neovasculares corneales, como transplante de córnea,
queratitis herpética, queratitis luética, pterigión, y pannus
neovascular asociado con el uso de lentes de contacto. Otras
enfermedades oculares también incluyen degeneración macular
relacionada con el envejecimiento, histoplasmosis ocular
presumible, retinopatía de prematuridad, y glaucoma neovascular.
Esta invención proporciona además un método para
inhibir el crecimiento tumoral, que comprende la administración de
forma discontinua, o en una combinación física, de un compuesto de
fórmula (I) y un agente antineoplásico, como topotecano y
cisplatina.
Con respecto a la fórmula (I):
de forma adecuada, R^{2} es
Como alternativa, R^{2} es
Como alternativa, R^{2} es
Con respecto a la fórmula (I), de forma adecuada
R^{1} es H, alquilo C_{1-6}, Ar-(alquilo
C_{0-6}), Het-(alquilo
C_{0-6}), (cicloalquil
C_{3-6})-(alquilo C_{0-6}),
-CH_{2}CF_{3},
-(CH_{2})_{1-2}C(O)OR', o
-(CH_{2})_{2}OR'. Preferiblemente, R^{1} es H, alquilo
C_{1-4}, Ph-(alquilo C_{0-4}),
-CH_{2}CF_{3},
-(CH_{2})_{1-2}C(O)OR', o
-(CH_{2})_{2}OR', en donde R' es H o alquilo
C_{1-4}. Más preferiblemente, R^{1} es
-CR_{2}CF_{3}.
Los compuestos nuevos representativos de esta
invención son los siguientes:
Ácido
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4-amino-2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4-metoxi-2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-[2-(1,4,5,6-tetrahidropirimidinil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(6-amino-2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(R)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-2-bencil-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-2-(carboximetil)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-2-(4-aminobencil)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4,6-dimetilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3-diazepin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-
benzazepin-4-acético;
benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-(4-metilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(R)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(S)-8-[3-(4-metilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(S)-3-oxo-8-[3-(1,4,5,6-tetrahidropirimid-2-ilamino)propiloxi]-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetra-
hidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
hidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-3-oxo-2-(2-feniletil)-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-(2-feniltetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
o
ácido
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-[4-(trifluorometil)-bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
o su sal farmacéuticamente
aceptable.
Los compuestos preferidos de esta invención
incluyen:
ácido
(S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
y
ácido
(S)-8-[3-(4-metilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
o su sal farmacéuticamente
aceptable.
En los casos en los que los compuestos de esta
invención puedan tener uno o más centros quirales, a menos que se
especifique, esta invención comprende cada compuesto no racémico
exclusivo que pueda sintetizarse y resolverse mediante técnicas
convencionales. Según la presente invención, se prefiere la
configuración (S) de los compuestos de fórmula (I).
En los casos en los que los compuestos tengan
dobles enlaces carbono-carbono insaturados, ambos
isómeros cis (Z) y trans (E) se encuentran dentro del alcance de
esta invención. El significado de cualquier sustituyente cada vez
que aparece es independiente de su significado, o del significado de
cualquier otro sustituyente, cada vez que aparece en otra
parte.
También se incluyen en esta invención los
profármacos de los compuestos de esta invención. Se considera que
son profármacos cualquier vehículo unido de modo covalente que
libera el fármaco de origen activo, según la fórmula (I), in
vivo. Por tanto, otro aspecto de esta invención son profármacos
nuevos, que también son intermedios en la preparación de los
compuestos de fórmula (I), que tienen la fórmula (II):
en la que R^{1} y R^{2} son
como se definió en la fórmula (I), o su sal farmacéuticamente
aceptable.
Los profármacos nuevos representativos de esta
invención son los siguientes:
(\pm)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo; y
(\pm)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo;
o su sal farmacéuticamente
aceptable.
Otro aspecto de esta invención son intermedios
nuevos de fórmula (III):
en la que R^{1}, W, R', R'',
Q^{1}, Q^{2}, Q^{3} y Q^{4} son como se definió en la
fórmula (I), o su sal farmacéuticamente
aceptable.
En esta memoria se utilizan abreviaturas y
símbolos normalmente utilizados en las técnicas de péptidos y
químicas para describir los compuestos de esta invención. En
general, las abreviaturas de aminoácidos siguen la
IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical
Nomeclature, descrita en Eur. J. Biochem., 158, 9 (1984).
Alquilo C_{1-4}, tal como se
aplica en esta memoria, significa un grupo alquilo opcionalmente
sustituido de 1 a 4 átomos de carbono, e incluye metilo, etilo,
n-propilo, isopropilo, n-butilo,
isobutilo y t-butilo. Alquilo
C_{1-6} comprende además pentilo,
n-pentilo, isopentilo, neopentilo y hexilo y sus
isómeros alifáticos sencillos. Alquilo C_{0-4} y
alquilo C_{0-6} indican, además, que no necesita
estar presente ningún grupo alquilo (por ejemplo, que está presente
un enlace covalente).
Cualquier alquilo C_{1-4} o
alquilo C_{1-6}, alquenilo
C_{2-6}, alquinilo C_{2-6} u
oxoalquilo C_{1-6} puede estar opcionalmente
sustituido con el grupo R'', que puede estar sobre cualquier átomo
de carbono que produzca una estructura estable y esté disponible
mediante técnicas sintéticas convencionales. Los grupos adecuadas
para R^{x} son alquilo C_{1-4}, OR', SR',
(alquil C_{1-4})sulfonilo, (alquil
C_{1-4})sulfoxilo, -CN,
N(R')_{2}, CH_{2}N(R')_{2}, -NO_{2},
-CF_{3}, -CO_{2}R' -CON(R')_{2}, -COR',
-NR'C(O)R', F, Cl, Br, I, o
CF_{3}S(O)_{r}-, en donde r es 0, 1 ó 2.
Halógeno o halo significa F, Cl, Br e I.
Ar, o arilo, como se aplica en la presente,
significa fenilo o naftilo, o fenilo o naftilo sustituido con uno a
tres sustituyentes, como los definidos anteriormente para alquilo,
en especial alquilo C_{1-4}, alcoxi
C_{1-4}, (alquil
C_{1-4})tio, CF_{3}, NH_{2}, OH, F, Cl,
Br o I.
Het, o heterociclo, indica un anillo monocíclico
de cinco o seis miembros opcionalmente sustituido, o un anillo
bicíclico de nueve o diez miembros que contiene uno a tres
heteroátomos seleccionados del grupo de nitrógeno, oxígeno y
azufre, que son estables y están disponibles mediante síntesis
química convencional. Los ejemplos de heterociclos son benzofurilo,
benzimidazol, benzopirano, benzotiofeno, furano, imidazol, indolina,
morfolina, piperidina, piperazina, pirrol, pirrolidina,
tetrahidropiridina, piridina, tiazol, tiofeno, quinoleína,
isoquinoleína, y tetra- y perhidro-quinoleína e
isoquinoleína. Cualquier combinación accesible de hasta tres
sustituyentes en el anillo Het, como las definidas anteriormente
para alquilo, que estén disponibles mediante síntesis química y
sean estables, están dentro del alcance de esta invención.
Cicloalquilo C_{3-7} se refiere
a un sistema carbocíclico opcionalmente sustituido de tres a siete
átomos de carbono, que puede contener hasta dos enlaces
carbono-carbono insaturados. Los cicloalquilos
C_{3-7} típicos son ciclopropilo, ciclobutilo,
ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo y
cicloheptilo. Cualquier combinación de hasta tres sustituyentes,
como las definidas anteriormente para alquilo, sobre el anillo
cicloalquilo que estén disponibles mediante síntesis química
convencional y sean estables, están dentro del alcance de esta
invención.
Ciertos grupos radicales están abreviados en la
presente memoria. t-Bu se refiere al radical butilo
terciario, Boc se refiere al radical
t-butiloxicarbonilo, Fmoc se refiere al radical
fluorenilmetoxicarbonilo, Ph se refiere al radical fenilo, Cbz se
refiere al radical benciloxicarbonilo, Bn se refiere al radical
bencilo, Me se refiere al metilo, Et se refiere al etilo, Ac se
refiere al acetilo, Alq se refiere al alquilo
C_{1-4}, Nph se refiere al 1- o
2-naftilo y cHex se refiere al ciclohexilo. Tet se
refiere al 5-tetrazolilo.
Determinados reactivos están abreviados en la
presente. DCC se refiere a la diciclohexilcarbodiimida, DMAP se
refiere a la dimetilaminopiridina, DIEA se refiere a la
diisopropiletilamina, EDC se refiere al hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida,
HOBt se refiere al 1-hidroxibenzotriazol, THF se
refiere al tetrahidrofurano, DIEA se refiere a la
diisopropiletilamina, DEAD se refiere al azodicarboxilato de
dietilo, PPh_{3} se refiere a la trifenilfosfina, DIAD se refiere
al azodicarboxilato de diisopropilo, DME se refiere al
dimetoxietano, DMF se refiere a la dimetilformamida, NBS se refiere
a la N-bromosuccinimida, Pd/C se refiere a un
catalizador de paladio sobre carbono, PPA se refiere al ácido
polifosfórico, DPPA se refiere a la difenilfosforilazida, BOP se
refiere al hexafluorofosfato de
benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio,
HF se refiere al ácido fluorhídrico, TEA se refiere a la
trietilamina, TFA se refiere al ácido trifluoroacético, y PCC se
refiere al clorocromato de piridinio.
En general, los compuestos de fórmula (I) se
preparan haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (IV) con un
compuesto de fórmula (V):
\vskip1.000000\baselineskip
en las que R^{1} y R^{2} son
como se definió en la fórmula (I), con cualquier grupo funcional
reactivo protegido, y L^{1} es OH o
halógeno;
y a continuación eliminar cualquier grupo
protector, y opcionalmente formar una sal farmacéuticamente
aceptable.
De forma adecuada, ciertos compuestos de fórmula
(I) se preparan haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (IV)
con un compuesto de fórmula (VI):
\vskip1.000000\baselineskip
en las que R^{1}, R', R'', W,
Q^{1}, Q^{2}, Q^{3} y Q^{4} son como se definió en la
fórmula (I), con cualquier grupo funcional reactivo
protegido;
y a continuación eliminar cualquier grupo
protector, y opcionalmente formar una sal farmacéuticamente
aceptable.
Preferiblemente, para los compuestos de fórmula
(VI), Q^{1}, Q^{2}, Q^{3} y Q^{4} son CH, W es
-CH_{2}-CH_{2}-, R' es H, y R'' es H, alquilo
C_{1-4} o -C(O)O(alquilo
C_{1-4}). De forma adecuada, la reacción entre un
compuesto de fórmula (IV) con un compuesto de fórmula (VI) se
realiza en presencia de azodicarboxilato de dietilo y
trifenilfosfina en un disolvente aprótico.
Además, ciertos compuestos de fórmula (I) se
preparan haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (IV) con un
compuesto de fórmula (VII):
en las que R^{1}, R', R'', W,
Q^{1}, Q^{2}, Q^{3} y v son como se definió en la fórmula (I),
con cualquier grupo funcional reactivo
protegido;
y a continuación eliminar cualquier grupo
protector, y opcionalmente formar una sal farmacéuticamente
aceptable.
Preferiblemente, para los compuestos de fórmula
(VII), Q^{1}, Q^{2} y Q^{3} son CH, W es
-CH_{2}-CH_{2}-, v es 0, R' es H, y R'' es H o
alquilo C_{1-4}. De forma adecuada, la reacción
entre un compuesto de fórmula (IV) con un compuesto de fórmula
(VII) se realiza en presencia de azodicarboxilato de dietilo y
trifenilfosfina en un disolvente aprótico.
Los compuestos de fórmula (I) se preparan
mediante los métodos generales descritos en los esquemas
I-VII.
Esquema
I
a)
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido,
DEAD, (Ph)_{3}P, DMF; b) ciclohexeno, Pd al 10%/C,
2-propanol; c) LiOH 1,0 N, THF, H_{2}O, después
acidificación.
El compuesto I-1, cuya
preparación sigue los procedimientos generales indicados en
Bondinell, et al. (documento WO 93/00095), se hace
reaccionar con
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido
en una reacción de acoplamiento de tipo Mitsunobu (Organic
Reactions, 1992, 42, 335-656;
Synthesis, 1981, 1-28) para producir
I-2. La reacción está mediada por el complejo
formado entre el azodicarboxilato de dietilo y la trifenilfosfina,
y se realiza en un disolvente aprótico, por ejemplo THF,
CH_{2}Cl_{2}, o DMF. El resto N-óxido de piridina de
I-2 se reduce para producir la correspondiente
piridina I-3 bajo condiciones de hidrogenación de
transferencia utilizando un catalizador de paladio, preferiblemente
paladio metálico sobre carbono activado, en un disolvente inerte,
por ejemplo metanol, etanol, o 2-propanol.
Normalmente se utiliza ciclohexeno,
1,4-ciclohexadieno, ácido fórmico, y las sales del
ácido fórmico, como formiato de potasio o formiato de amonio, como
reactivo de transferencia de hidrógeno en este tipo de reacción. El
éster metílico de I-3 se hidroliza utilizando una
base acuosa, por ejemplo LiOH en THF acuoso, o NaOH en metanol o
etanol acuoso, y el intermedio de sal carboxilato se acidifica con
un ácido adecuado, por ejemplo TFA o HCI, para producir el ácido
carboxílico I-4. Como alternativa, el intermedio de
sal carboxilato puede aislarse, si se desea, o puede prepararse una
sal carboxilato del ácido carboxílico libre mediante métodos
conocidos por los expertos en la técnica.
Los compuestos de fórmula (I) también pueden
prepararse mediante métodos alternativos conocidos por los expertos
en la técnica. Por ejemplo, el enlace éter de los compuestos de
fórmula (I) puede formarse haciendo reaccionar el grupo alcohol del
compuesto de fórmula 1 del esquema I con un
compuesto-R^{2} que contiene un grupo desplazable,
como un grupo cloro, bromo o yodo. Pueden emplearse otras
reacciones formadoras de éter, que serán evidentes para los
expertos en la técnica.
Esquema
II
a)
2-[N-(3-hidroxi-1-propil)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]piridin-N-óxido,
DEAD, (Ph)_{3}P, DMF; b) LiHMDS, bromuro de
4-trifluorometilbencilo, DMF; c) ciclohexeno, Pd al
10%/C, 2-propanol; d) NaOH 1,0 N, MeOH; e)
HCl/
dioxano.
dioxano.
El compuesto II-1, preparado como
se describe en el Esquema I, se hace reaccionar con
2-[N-(3-hidroxi-1-propil)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]piridin-N-óxido
en una reacción de acoplamiento de Mitsunobu como se describe en
detalle en el Esquema I. El producto resultante,
II-2, puede alquilarse en la posición 2 (numeración
de la benzazepina) bajo condiciones de alquilación convencionales
muy conocidas por los expertos en la técnica. Por ejemplo,
II-2 puede tratarse con una base, como hidruro de
sodio, LDA, o hexametildisilazida de sodio, en un disolvente
apropiado, normalmente THF, DMF, DME, o sus mezclas, para realizar
la desprotonación de la amida N-H. El tratamiento de
la especie aniónica resultante con un electrófilo apropiado, como
un haluro de alquilo o bencilo, produce la
N-alquilación para producir el producto, por
ejemplo II-3. El N-óxido de II-3
puede reducirse como se describió en el Esquema I para producir
II-4, que puede saponificarse para producir
II-5 como se describió en el Esquema I. La
desprotección de II-5 para producir
II-6 se realiza bajo condiciones ácidas
convencionales como se describe en Greene, "Protective Groups in
Organic Synthesis" (publicado por
Wiley-Interscience). Estas condiciones son muy
conocidas por los expertos en la técnica. Como alternativa, la
conversión de II-3 en II-6 puede
realizarse mediante una secuencia alternativa, por ejemplo una
desprotección de Boc inicial de II-3, seguida de
una reducción del N-óxido y, por último, una saponificación.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema
III
\vskip1.000000\baselineskip
a)
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido,
DEAD, (Ph)_{3}P, DMF; b) LiHMDS, CH_{3}I, DMF; c)
ciclohexeno, Pd al 10%/C, 2-propanol; d) NaOH 1,0 N,
MeOH, después
acidificación.
El compuesto III-2, preparado
como se describe en el Esquema I, puede alquilarse simultáneamente
en la posición 2 (numeración de la benzazepina) y sobre el
nitrógeno unido al anillo de piridina bajo condiciones de
alquilación convencionales muy conocidas por los expertos en la
técnica. Por ejemplo, III-2 puede tratarse con al
menos 2 equivalentes molares de una base, como hidruro de sodio,
LDA, o hexametildisilazida de litio, en un disolvente apropiado,
normalmente THF, DMF, DME, o sus mezclas, para realizar la
desprotonación. El tratamiento de la especie aniónica resultante
con un exceso de un electrófilo apropiado, como un haluro de
alquilo o bencilo, produce la bis-alquilación para
producir el producto, por ejemplo III-3. La
conversión de III-3 a III-5 sigue
los métodos descritos en los Esquemas I y II.
\newpage
Esquema
IV
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
a) ciclohexeno, Pd al 10%/C,
2-propanol; b) HCl/dioxano; c) cloruro de
terc-butilacetilo, Et_{3}N, CH_{2}Cl_{2}; d) NaOH 1,0
N, MeOH, después
acidificación.
El compuesto IV-2, preparado a
partir de IV-1 mediante los procedimientos indicados
en los Esquemas I-III, puede acilarse en el átomo
de nitrógeno unido al anillo de piridina bajo condiciones de
acilación convencionales muy conocidas por los expertos en la
técnica. Por ejemplo, la reacción de IV-2 con un
agente acilante, por ejemplo cloruro de terc-butilacetilo, en
presencia de un captador de ácidos apropiado, en general
trietilamina, diisopropiletilamina, o piridina, en un disolvente
apropiado, a menudo CH_{2}Cl_{2}, proporciona
IV-3. Se conocen muchos métodos más para la
acilación de una amina y pueden encontrarse en libros de referencia
habituales, como "Compendium of Organic Synthetic Methods",
vol. I - VI (publicado por Wiley-Interscience). La
saponificación de IV-3 como se describe en los
esquemas I-III produce IV-4.
\newpage
Esquema
V
\vskip1.000000\baselineskip
a)
3-(4-nitrobenciloxicarbonilamino)-1-propanol,
DEAD, (Ph)_{3}P, DMF, CH_{2}Cl_{2}; b) H_{2}, Pd/C,
EtOH; c) hidroyoduro de
2-metiltio-2-imidazolina,
(i-Pr)_{2}NEt, dimetilacetamida, 100ºC; d)
LiOH 1,0 N, THF, H_{2}O, después
acidificación.
El compuesto V-1, preparado como
se describe en el Esquema I, se hace reaccionar con una versión
protegida del
3-amino-1-propanol,
como
3-(terc-butoxicarbonil-amino)-1-propanol,
3-(benciloxicarbonilamino)-1-propanol,
o
3-(4-nitrobenciloxi-carbonilamino)-1-propanol,
en una reacción de acoplamiento de tipo Mitsunobu como se describió
en el esquema I. El compuesto resultante, V-2, se
desprotege para producir V-3. Como saben los
expertos en la técnica, las condiciones de desprotección se
seleccionan basándose en la funcionalidad y el grupo protector
presentes en V-2. Por ejemplo, el grupo
p-nitro-Cbz presente en V-2
se retira mediante hidrogenolisis en presencia de un catalizador de
paladio, en general paladio sobre carbón o
Pd(OH)_{2} sobre carbón, en un disolvente apropiado,
normalmente metanol, etanol, acetato de etilo, o sus mezclas. Si se
desea, la hidrogenolisis puede realizarse en presencia de un ácido,
por ejemplo HCl, para obtener la correspondiente sal de amonio de
V-2. La reacción de V-3 con
hidroyoduro de
2-metiltio-2-imidazolina
en presencia de una base, por ejemplo diisopropiletilamina, en un
disolvente adecuado, como MeOH, EtOH, DMF o dimetilacetamida,
proporciona V-4. Se describen condiciones similares
para realizar una transformación relacionada en el documento WO
95/32710. Se realiza una saponificación para producir
V-5 como se describe en el Esquema I.
\newpage
Esquema
VI
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
a)
3-(terc-butoxicarbonilamino)-1-propanol,
DEAD, (Ph)_{3}P, DMF, THF; b) TFA, CH_{2}Cl_{2}; c)
2-bromopirimidina, NaHCO_{3}, EtOH, reflujo; d)
H_{2}, Pd/C, HCl, MeOH; e) K_{2}CO_{3},
H_{2}O.
El compuesto VI-3, preparado a
partir de VI-1 mediante el procedimiento indicado en
el Esquema V, se hace reaccionar con una
2-halopirimidina, en general
2-cloropirimidina o
2-bromopirimidina, en presencia de un captador de
ácidos apropiado, normalmente bicarbonato de sodio, trietilamina,
diisopropiletilamina, o piridina, en un disolvente adecuado, como
etanol, DMF, o dimetilacetamida, para proporcionar
VI-4. El anillo de pirimidina de
VI-4 se reduce para producir el correspondiente
anillo de 1,4,5,6-tetrahidropirimidina según las
condiciones indicadas para realizar esta transformación (véase, por
ejemplo, el documento WO 95/32710). Por tanto, VI-4
se somete a una hidrogenación en presencia de un catalizador de
paladio, preferiblemente paladio sobre carbono activado, en un
disolvente apropiado, como metanol o etanol. La reacción se realiza
normalmente bajo condiciones ácidas; en general se prefiere la
adición de un ácido mineral, como HCl. Se obtiene
VI-5 después de una basificación de la mezcla de
reacción filtrada con K_{2}CO_{3} y H_{2}O.
\newpage
Esquema
VII
a) NaH, bromuro de
4-(trifluorometil)bencilo, DMF; b) H_{2},
Pd(OH)_{2}/C,
MeOH.
El compuesto VII-1, preparado
mediante los procedimientos generales descritos en Bondinell, et
al., Solicitud de atente PCT WO 93/00095, publicada el 7 de
Enero, 1993, y Bondinell, et al., Solicitud de Patente PCT
WO 94/14776, se hace reaccionar con bromuro de
4-(trifluorometil)bencilo en presencia de una base adecuada,
en general hidruro de sodio o bis(trimetilsilil)amida
de litio, en un disolvente aprótico, preferiblemente DMF, THF, o
sus mezclas, para producir el producto bis-alquilado
VII-2. El éter 4-(trifluorometil)bencílico
de VII-2 puede retirarse de modo conveniente
mediante hidrogenolisis para producir el fenol
VII-3. Los métodos para la hidrogenolisis de los
éteres bencílicos son muy conocidos por los expertos en la técnica,
y se describen en volúmenes de referencia apropiados, por ejemplo en
Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis" (publicado
por Wiley-Interscience). El fenol de
VII-3 se utiliza entonces para preparar los
compuestos de fórmula (I) utilizando los métodos descritos en los
Esquemas previos.
Los reactivos de acoplamiento de amida tal como
se utilizan en esta memoria, indican reactivos que se pueden
utilizar para formar enlaces peptídicos. Los métodos de acoplamiento
típicos emplean carbodiimidas, anhídridos y ésteres activados y
haluros de acilo. Son típicos los reactivos como EDC, DCC, DPPA,
PPA, reactivo de BOP, HOBt, N-hidroxisuccinimida y
cloruro de oxalilo.
Los métodos de acoplamiento para formar enlaces
peptídicos, en general, son muy conocidos en la técnica. Los
métodos de síntesis peptídica indicados, en general, en Bodansky
et al., THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS,
Springer-Verlag, Berlín, 1984, Ali et al. en
J. Med Chem., 29, 984 (1986), y J. Med. Chem., 30,
2291 (1987) son generalmente ilustrativos de la técnica y se
incorporan en la presente como referencia.
De forma típica, la amina o anilina se acopla a
través de su grupo amino libre a un sustrato de ácido carboxilico
apropiado utilizando un agente de acoplamiento de carbodiimida
adecuado, como N,N'-diciclohexilcarbodiimida (DCC),
opcionalmente en presencia de catalizadores como
1-hidroxibenzotriazol (HOBt) y dimetilaminopiridina
(DMAP). Son también adecuados otros métodos, como la formación de
ésteres, anhídridos o haluros de ácido activados, del carboxilo
libre de un sustrato ácido protegido de forma adecuada, y la
posterior reacción con la amina libre de una amina protegida de
forma adecuada, opcionalmente en presencia de una base. Por ejemplo,
un Boc-aminoácido o
Cbz-amidino-ácido benzoico protegidos se tratan en
un disolvente anhidro, como cloruro de metileno o tetrahidrofurano
(THF), en presencia de una base, como
N-metilmorfolina, DMAP o una trialquilamina, con
cloroformiato de isobutilo para formar el "anhídrido
activado", que posteriormente se hace reaccionar con la amina
libre de un segundo aminoácido o anilina protegido.
Los intermedios útiles para preparar los
compuestos de fórmula (I), en la que R^{2} es un benzimidazol, se
describen en Nestor et al., J. Med. Chem.,
1984, 27, 320. Los métodos representativos para preparar
compuestos de benzimidazol útiles como intermedios en la presente
invención también son habituales en la técnica y pueden
encontrarse, por ejemplo, en el documento EP-A
0381033.
Las sales de adición de ácidos de los compuestos
se preparan de una forma convencional en un disolvente adecuado a
partir del compuesto precursor y un exceso de un ácido, como ácido
clorhídrico, bromhídrico, fluorhídrico, sulfúrico, fosfórico,
acético, trifluoroacético, maleico, succínico o metansulfónico.
Determinados compuestos forman sales internas o iones bipolares que
pueden ser aceptables. Las sales catiónicas se preparan tratando el
compuesto precursor con un exceso de un reactivo alcalino, como un
hidróxido, carbonato o alcóxido, que contiene el catión apropiado;
o con una amina orgánica apropiada. Los cationes como Li^{+},
Na^{+}, K^{+}, Ca^{++}, Mg^{++} y NH_{4}{}^{+} son
ejemplos específicos de cationes presentes en sales
farmacéuticamente aceptables.
Esta invención también proporciona una
composición farmacéutica que comprende un compuesto según la fórmula
(I) y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Por consiguiente,
los compuestos de fórmula (I) pueden utilizarse en la fabricación
de un medicamento. Las composiciones farmacéuticas de los compuestos
de fórmula (I) preparadas como se describió en esta memoria
anteriormente pueden formularse como disoluciones o polvos
liofilizados para la administración parenteral. Los polvos pueden
reconstituirse mediante la adición de un diluyente adecuado u otro
vehículo farmacéuticamente aceptable antes de su uso. La formulación
líquida puede ser una disolución acuosa, tamponada e isotónica. Los
ejemplos de diluyentes adecuados son la disolución salina isotónica
normal, dextrosa estándar al 5% en agua o una disolución tamponada
de acetato de sodio o de amonio. Dicha formulación es especialmente
adecuada para la administración parenteral, pero puede utilizarse
también para la administración oral o puede ester contenida en un
inhalador o nebulizador dosificador para la inhalación. Puede ser
deseable añadir excipientes como polivinilpirrolidona, gelatina,
hidroxicelulosa, goma arábiga, polietilenglicol, manitol, cloruro
de sodio o citrato de sodio.
Por otra parte, estos compuestos pueden estar
encapsulados, en comprimidos o preparados en una emulsión o jarabe
para la administración oral. Se pueden añadir vehículos sólidos o
líquidos farmacéuticalmente aceptables para mejorar o estabilizar
la composición o para facilitar la preparación de la composición.
Los vehículos sólidos incluyen almidón, lactosa, sulfato de calcio
dihidratado, terra alba, estearato de magnesio o ácido esteárico,
talco, pectina, goma arábiga, agar o gelatina. Los vehículos
líquidos comprenden jarabe, aceite de cacahuete, aceite de oliva,
disolución salina y agua. El vehículo puede también incluir un
material de liberación sostenida como monoestearato de glicerilo o
diestearato de glicerilo, solo o con una cera. La cantidad de
vehículo sólido varía pero, preferiblemente, estará comprendida
entre aproximadamente 20 mg y aproximadamente 1 g por unidad de
dosificación. Las preparaciones farmacéuticas se preparan siguiendo
técnicas convencionales de farmacia que comportan molienda,
mezclado, granulación y compresión, cuando sea necesario, para
formas en comprimidos; o molienda, mezclado y relleno para formas
en cápsulas de gelatina dura. Cuando se utiliza un vehículo
líquido, la preparación estará en forma de jarabe, elixir, emulsión
o de suspensión acuosa o no acuosa. Dicha formulación líquida se
puede administrar directamente por vía oral o rellenarse en una
cápsula de gelatina blanda.
Para la administración rectal, los compuestos de
esta invención también pueden combinarse con excipientes, como
manteca de cacao, glicerina, gelatina o polietilenglicoles, y
moldearse en un supositorio.
Los compuestos descritos en la presente son
antagonistas del receptor de vitronectina, y son útiles para tratar
enfermedades en las que la patología subyacente es atribuible a
ligandos o células que interaccionan con el receptor de
vitronectina. Por ejemplo, estos compuestos son útiles para el
tratamiento de enfermedades en las que la pérdida de la matriz ósea
crea una patología. Por tanto, los presentes compuestos son útiles
para el tratamiento de la osteoporosis, hiperparatiroidismo,
enfermedad de Paget, hipercalcemia de malignidad, lesiones
osteolíticas producidas por metástasis ósea, pérdida ósea debida a
inmovilización o deficiencia de hormonas sexuales. También se cree
que los compuestos de esta invención tienen utilidad como agentes
antitumorales, antiangiogénicos, antiinflamatorios y
antimetastásicos, y son útiles en el tratamiento de la
aterosclerosis y reestenosis.
El compuesto se administra por vía oral o
parenteral al paciente, de manera que la concentración del fármaco
sea suficiente para inhibir la reabsorción ósea u otra indicación
parecida. La composición farmacéutica que contiene el compuesto se
administra a una dosis oral de entre aproximadamente 0,1 a
aproximadamente 50 mg/kg, de una manera coherente con el trastorno
del paciente. Preferiblemente, la dosis oral será de aproximadamente
0,5 a aproximadamente 20 mg/kg. Para la terapia aguda, se prefiere
la administración parenteral. Una infusion intravenosa del péptido
en dextrosa al 5% en agua o una disolución salina normal, o una
formulación similar con excipientes adecuados, es la más eficaz,
aunque una inyección intramuscular en embolada también es útil. De
forma típica, la dosis parenteral será de aproximadamente 0,01 a
aproximadamente 100 mg/kg, preferiblemente entre 0,1 y 20 mg/kg.
Los compuestos se administran de una a cuatro veces diarias a un
nivel para lograr una dosis diaria total de aproximadamente 0,4 a
aproximadamente 400 mg/kg/día. Un experto en la técnica puede
determinar el método y nivel preciso en los que se administran los
compuestos comparando el nivel sanguíneo del agente con la
concentración requerida para producir un efecto terapéutico.
Esta invención proporciona además un método para
tratar la osteoporosis o para inhibir la pérdida ósea, que
comprende administrar de modo discontinuo o en una combinación
física un compuesto de fórmula (I) y otros inhibidores de la
reabsorción ósea, como bisfosfonatos (es decir, alendronato),
terapia de sustitución de hormonas, antiestrógenos, o calcitonina.
Además, esta invención proporciona un método de tratamiento que
utiliza un compuesto de esta invención y un agente anabólico, como
la proteína morfogénica ósea iproflavona, útil en la prevención de
la pérdida ósea y/o para aumentar la masa ósea.
Además, esta invención proporciona un método para
inhibir el crecimiento tumoral, que comprende administrar de forma
discontinua, o en una combinación física, un compuesto de fórmula
(I) y un agente antineoplásico. Los compuestos de la clase de
análogos de camptotecina, como topotecano, irinotecano y
9-aminocamptotecina, y los complejos de
coordinación de platino, como cisplatina, ormaplatina y
tetraplatina, son grupos muy conocidos de agentes antineoplásicos.
Los compuestos de la clase de análogos de camptotecina se describen
en las Patentes de EE.UU. nº 5.004.758, 4.604.463, 4.473.692,
4.545.880, 4.342.776, 4.513.138, 4.399.276, publicaciones de
Solicitud de Patente EP 0418099 y 0088642, Wani, et al.,
J. Med. Chem., 1986, 29, 2358, Wani, et al.,
J. Med. Chem., 1980, 23, 554, Wani, et al.,
J. Med. Chem., 1987, 30, 1774, y Nitta, et
al., Proc. 14th International Congr. Chemotherapy.,
1985, Anticancer Section 1, 28, cuyas
descripciones enteras se incorporan en la presente como referencia.
El complejo de coordinación de platino cisplatina está disponible
con el nombre Platinol® en Bristol Myers-Squibb
Corporation. Se describen formulaciones útiles para la cisplatina
en las Patentes de EE.UU. nº 5.562.925 y 4.310.515, cuyas
descripciones enteras se incorporan en la presente como
referencia.
En el método para inhibir el crecimiento tumoral
que comprende administrar de modo discontinuo o en una combinación
física un compuesto de fórmula (I) y un agente antineoplásico, el
compuesto de coordinación de platino, por ejemplo cisplatina, puede
administrarse utilizando una infusión lenta intravenosa. El vehículo
preferido es una disolución de dextrosa/disolución salina que
contiene manitol. El programa de dosis del compuesto de coordinación
de platino puede estar basado en aproximadamente 1 a
aproximadamente 500 mg por metro cuadrado (mg/m^{2}) de
superficie específica corporal por desarrollo del tratamiento. Las
infusiones del compuesto de coordinación de platino pueden
administrarse una o dos veces semanales, y los tratamientos
semanales pueden repetirse varias veces. Empleando un compuesto de
la clase de análogos de camptotecina en una administración
parenteral, el desarrollo de la terapia empleado en general es de
aproximadamente 0,1 a aproximadamente 300,0 mg/m^{2} de
superficie específica corporal diarios durante aproximadamente cinco
días consecutivos. Más preferiblemente, el desarrollo de la terapia
empleado para el topotecano es de aproximadamente 1,0 a
aproximadamente 2,0 mg/m^{2} de superficie específica corporal
diarios durante aproximadamente cinco días consecutivos.
Preferiblemente, el desarrollo de la terapia se repite al menos una
vez en un intervalo de aproximadamente siete días a aproximadamente
veintiocho días.
La composición farmacéutica puede formularse con
el compuesto de fórmula (I) y el agente antineoplásico en el mismo
recipiente, pero se prefiere la formulación en diferentes
recipientes. Cuando ambos agentes se proporcionan en forma de una
disolución, pueden estar contenidos en un sistema de
infusión/inyección para la administración simultánea o en una
disposición en tándem.
Para la administración conveniente del compuesto
de fórmula (I) y el agente antineoplásico en el mismo o diferentes
momentos, se prepara un kit que comprende, en un solo recipiente,
como una caja, envase de cartón u otro recipiente, botellas
individuales, bolsas, viales u otros recipientes, que contienen cada
uno una cantidad eficaz del compuesto de fórmula (I) para la
administración parenteral, como se describió anteriormente, y una
cantidad eficaz del agente antineoplásico para la administración
parenteral, como se describió anteriormente. Este kit puede
comprender, por ejemplo, ambos agentes farmacéuticos en recipientes
separados o en el mismo recipiente, opcionalmento como lechos
cortos liofilizados, y recipientes de disoluciones para la
reconstitución. Una variación de esto es incluir la disolución para
la reconstitución y el lecho corto liofilizado en dos cámaras de un
único recipiente, que pueden mezclarse antes del uso. Con esta
disposición, el agente antineoplásico y el compuesto de esta
invención pueden envasarse por separado, como en dos recipientes, o
liofilizarse juntos como un polvo y proporcionarse en un
único
recipiente.
recipiente.
Cuando ambos agentes se proporcionan en forma de
una disolución, pueden estar contenidos en un sistema de
infusión/inyección para la administración simultánea o en una
disposición en tándem. Por ejemplo, el compuesto de fórmula (I)
puede estar en una forma inyectable intravenosa, o bolsa de infusión
conectada en serie, mediante tubos, al agente antineoplásico en una
segunda bolsa de infusión. Utilizando este sistema, un paciente
puede recibir una infusión o inyección de tipo embolada inicial del
compuesto de fórmula (I), seguida de una infusión del agente
antineoplásico.
Los compuestos se pueden analizar mediante uno de
varios análisis biológicos para determinar la concentración de
compuesto que se necesita para tener un efecto farmacológico
dado.
Unión en fase sólida de
[^{3}H]-SK&F-107260 a
\alpha_{V}\beta_{3}: Se diluyó placenta humana o
plaquetas humanas \alpha_{V}\beta_{3} (0,1-0,3
mg/ml) en tampón T (que contiene CaCl_{2} 2 mM y octilglucósido
al 1%) con tampón T que contiene CaCl_{2} 1 mM, MnCl_{2} 1 mM,
MgCl_{2} 1 mM (tampón A) y NaN_{3} al 0,05%, y después se
añadieron inmediatamente a placas de ELISA de 96 pocillos (Coming,
Nueva York, NY) a 0,1 ml por pocillo. Se añaden 0,1 - 0,2 \mug de
\alpha_{V}\beta_{3} por pocillo. Las placas se incuban durante la
noche a 4ºC. En el momento del experimento, los pocillos se lavan
una vez con tampón A y se incuban con 0,1 ml de albúmina de suero
bovina al 3,5% en el mismo tampón durante 1 h a temperatura
ambiente. Después de la incubación, los pocillos se aspiran
completamente y se lavan dos veces con 0,2 ml de tampón A.
Los compuestos se disolvieron en DMSO al 100%
para producir una disolución madre 2 mM, que se diluyó con tampón
de unión (Tris-HCl 15 mM (pH 7,4), NaCl 100 mM,
CaCl_{2} 1 mM, MnCl_{2} 1 mM, MgCl_{2} 1 mM) hasta una
concentración final del compuesto de 100 \muM. Esta disolución
entonces se diluyó hasta la concentración final del compuesto
requerida. Se añadieron diversas concentraciones de antagonistas sin
marcar (0,001 - 100 \muM) a los pocillos por triplicado, seguido
de la adición de 5,0 nM de
[^{3}H]-SK&F-107260 (65 - 86
Ci/mmol).
Las placas se incubaron durante 1 h a temperatura
ambiente. Después de la incubación los pocillos se aspiraron
completamente y se lavaron una vez con 0,2 ml de tampón A enfriado
en hielo de una manera pocillo a pocillo. Los receptores se
solubilizaron con 0,1 ml de SDS al 1% y se determinó el
[^{3}H]-SK&F-107260 unido
mediante recuento de centelleo líquido con la adición de 3 ml de
Ready Safe en un contador de centelleo líquido Beckman LS, con una
eficacia de 40%. Se determinó la unión no específica de
[^{3}H]-SK&F-107260 en
presencia de SK&F-107260 2 \muM y era, de
modo coherente, menos de 1% de la adición de radioligando total. Se
determinó la IC_{50} (concentración del antagonista que inhibe
50% de la unión de
[^{3}H]-SK&F-107260) mediante
un método de ajuste de curvas de mínimos cuadrados no lineal, que se
modificó a partir del programa LUNDON-2. Se calculó
la K_{i} (constante de disociación del antagonista) según la
ecuación: K_{i} = IC_{50}/(1 + L/K_{d}), en la que L y K_{d}
son la concentración y la constante de disociación de
[^{3}H]-SK&F-107260,
respectivamente.
Los compuestos de la presente invención inhiben
la unión de la vitronectina al SK&F 107260 en el intervalo de
concentración de aproximadamente 4,0 a aproximadamente 0,0003
micromolar.
Los compuestos de esta invención también se
ensayaron para la reabsorción ósea in vitro e in vivo
en ensayos convencionales de la técnica para evaluar la inhibición
de la formación de hueso, como el ensayo de formación de hoyos
descrito en el documento EP 528587, que también puede realizarse
utilizando osteoclastos humanos en lugar de osteoclastos de rata, y
el modelo de rata ovarectomizada, descrito por Wronski et
al., Cells and Materials, 1991, sup. 1,
69-74.
Se utilizaron células del músculo liso aórtico de
rata o humanas. Se controló la migración de las células en una
cámara de cultivo celular Transwell utilizando una membrana de
policarbonato con poros de 8 \mum (Costar). La superficie
inferior del filtro se revistió con vitronectina. Las células se
suspendieron en DMEM suplementado con albúmina de suero bovina al
0,2% a una concentración de 2,5 - 5,0 x 10^{6} células/ml, y se
pretrataron con el compuesto de ensayo a diversas concentraciones
durante 20 min a 20ºC. Como control se utilizó el disolvente por sí
solo. Se colocaron 0,2 ml de la suspensión celular en el
compartimento superior de la cámara. El compartimento inferior
contenía 0,6 ml de DMEM suplementado con albúmina de suero bovina
al 0,2%. La incubación se realizó a 37ºC en una atmósfera de 95% de
aire/5% de CO_{2} durante 24 h. Después de la incubación, las
células no migradas de la superficie superior del filtro se
retiraron mediante un rascado suave. El filtro entonces se fijó con
metanol y se tiñó con tinte Giemsa al 10%. La migración se midió a)
mediante el recuento del número de células que habían migrado hasta
la superficie inferior del filtro, o
b) extrayendo las células teñidas con ácido acético al 10%, seguido de la determinación de la absorbancia a 600 nM.
b) extrayendo las células teñidas con ácido acético al 10%, seguido de la determinación de la absorbancia a 600 nM.
Cada grupo experimental consistía en
5-6 ratas adultas macho
Sprague-Dawley rats (250-400 g de
peso corporal). Las ratas se tiroparatiroidectomizaron (por el
vendedor, Taconic Farms) 7 días antes del uso. Todas las ratas
recibieron una dosis de sustitución de tiroxina cada 3 días. Cuando
se recibieron las ratas se midieron los niveles de calcio ionizado
en circulación con sangre completa inmediatamente después de
extraerla mediante venipunción en la cola e introducción en tubos
heparinizados. Las ratas se incluían si el nivel de Ca ionizado
(medido con un analizador de pH de calcio
Ciba-Corning modelo 634) era <1,2 mM/l. Cada rata
se equipó con un catéter venoso y arterial interno para la
administración del material de ensayo y la toma de muestras
sanguíneas, respectivamente. Las ratas entonces recibieron una
dieta de pienso exento de calcio y agua desionizada. Se miden los
niveles de línea de base de Ca y a cada rata se le administra
vehículo control o el péptido 1-34 de la hormona
paratiroidea humana (hPTH1-34, dosis 1,25
\mug/kg/h en disolución salina/albúmina de suero bovina al 0,1%,
Bachem, Ca) o una mezcla de hPTH1-34 y material de
ensayo, mediante infusión intravenosa continua a través del catéter
venoso utilizando una bomba de jeringa externa. La respuesta
calcémica de cada rata se mide en intervalos de dos horas durante
el periodo de infusión de 6-8 horas.
Se han desarrollado y estandarizado ensayos de
reabsorción y adhesión de hoyo utilizando osteoclastos humanos
normales derivados de tejido de osteoclastoma. El Ensayo 1 se
desarrolló para la medida de los volúmenes de hoyos de osteoclastos
mediante microscopía confocal de láser. El Ensayo 2 se desarrolló
como un ensayo de selección de mayor transmisión en el que se miden
los fragmentos de colágeno (liberados durante la reabsorción)
mediante ELISA competitiva.
Ensayo
1
(Utilizando microscopía confocal de
láser)
- \bullet
- Se retiraron parte alícuotas de suspensiones celulares derivadas de osteoclastoma humano de su conservación en nitrógeno líquido, se calentaron rápidamente a 37ºC y se lavaron x1 en medio RPMI-1640 mediante centrifugación (1000 rpm, 5 min a 4ºC).
- \bullet
- El medio se aspira y se sustituye por anticuerpo anti-HLA-DR murino, y después se diluye 1:3 en medio RPMI-1640. La suspensión se incuba durante 30 min en hielo y se mezcla con frecuencia.
- \bullet
- Las células se lavan x2 con RPMI-1640 frío, seguido de una centrifugación (1000 rpm, 5 min a 4ºC), y las células entonces se transfieren a un tubo de centrífuga estéril de 15 ml. El número de células mononucleares se enumera en una cámara de recuento Neubauer mejorada.
- \bullet
- Se retiran suficientes esferas magnéticas (5/célula mononuclear), revestidas con anti-IgG de ratón de cabra (Dynal, Great Neck, NY) de su botella de almacenaje y se colocan en 5 ml de medio fresco (esto lava el conservante de azida tóxico). El medio se retira inmovilizando las esferas sobre un imán y se sustituye por medio fresco.
- \bullet
- Las esferas se mezclan con las células y la suspensión se incuba durante 30 min en hielo. La suspensión se mezcla con frecuencia.
- \bullet
- Las células revestidas con esferas se inmovilizan sobre un imán y las células restantes (fracción rica en osteoclastos) se decantan hacia un tubo de centrífuga estéril de 50 ml.
- \bullet
- Se añade medio fresco a las células revestidas con esferas para desprender cualquier osteoclato atrapado. Este proceso de lavado se repite x10. Se rechazan las células revestidas de esferas.
- \bullet
- Los osteoclastos viables se enumeran en una cámara de recuento, utilizando diacetato de fluoresceína para marcar las células vivas. Se utiliza una pipeta Pasteur de plástico desechable de orificio grande para añadir la muestra a la cámara.
- \bullet
- Los osteoclastos se sedimentan mediante centrifugación, y la densidad se ajusta al número apropiado en medio EMEM (el número de osteoclastos es variable de un tumor a otro), suplementado con suero de ternera fetal al 10% y 1,7 g/litro de bicarbonato de sodio.
- \bullet
- Se decantan partes alícuotas de 3 ml de la suspensión celular (por tratamiento de compuesto) en tubos de centrífuga de 15 ml. Las células se sedimentan mediante centrifugación.
- \bullet
- A cada tubo se le añaden 3 ml del tratamiento de compuesto apropiado (diluido hasta 50 \muM en el medio EMEM). También se incluyen vehículos control apropiados, un control positivo (anticuerpo monoclonal murino antirreceptor de vitronectina [87MEM1] diluido hasta 100 \mug/ml) y un control de isotipo (IgG_{2a} diluido hasta 100 \mug/ml). Las muestras se incuban a 37ºC durante 30 min.
- \bullet
- Se siembran partes alícuotas de 0,5 ml de las células en rodajas de dentina estériles en una placa de 48 pocillos y se incuban a 37ºC durante 2 horas. Cada tratamiento se selecciona por cuadruplicado.
- \bullet
- Las rodajas se lavan en seis cambios de PBS caliente (10 ml/pocillo en una placa de 6 pocillos) y después se colocan en medio fresco que contiene el tratamiento de compuesto o las muestras control. Las muestras se incuban a 37ºC durante 48 horas.
- \bullet
- Las rodajas de hueso que contienen los osteoclastos unidos se lavan en disolución salina tamponada con fosfato y se fijan en glutaraldehído al 2% (en cacodilato de sodio 0,2 M) durante 5 min.
- \bullet
- Entonces se lavan en agua y se incuban durante 4 minutos en tampón TRAP a 37ºC (naftol-AS-BI-fosfato 0,5 mg/ml disuelto en N,N-dimetilformamida y mezclado con tampón citrato 0,25 M (pH 4,5), que contiene tartrato de sodio 10 mM.
- \bullet
- Después de un lavado en agua fría las rodajas se sumergen en tampón acetato frío (0,1 M, pH 6,2) que contiene rojo granate rápido 1 mg/ml y se incuban a 4ºC durante 4 minutos.
- \bullet
- Se aspira el exceso de tampón, y las rodajas se secan al aire después de un lavado en agua.
- \bullet
- Los osteoclastos positivos a TRAP (precipitado de color ladrillo/morado) se enumeran mediante microscopía de campo brillante y se retiran de la superficie de la dentina mediante sonicación.
- \bullet
- Los volúmenes de hoyos se determinan utilizando un microscopio confocal Nikon/Lasertec ILM21W.
Ensayo
2
(Utilizando una lectura de
ELISA)
Los osteoclastos humanos se enriquecen y preparan
para el ensayo de selección de compuestos como se describió en las
9 etapas iniciales del Ensayo 1. Para que quede más claro, las
etapas se repiten a continuación.
- \bullet
- Se retiraron parte alícuotas de suspensiones celulares derivadas de osteoclastoma humano de su conservación en nitrógeno líquido, se calentaron rápidamente a 37ºC y se lavaron x1 en medio RPMI-1640 mediante centrifugación (1000 rpm, 5 min a 4ºC).
- \bullet
- El medio se aspira y se sustituye por anticuerpo anti-HLA-DR murino, y después se diluye 1:3 en medio RPMI-1640. La suspensión se incuba durante 30 min en hielo y se mezcla con frecuencia.
- \bullet
- Las células se lavan x2 con RPMI-1640 frío, seguido de una centrifugación (1000 rpm, 5 min a 4ºC), y las células entonces se transfieren a un tubo de centrífuga estéril de 15 ml. El número de células mononucleares se enumera en una cámara de recuento Neubauer mejorada.
- \bullet
- Se retiran suficientes esferas magnéticas (5/célula mononuclear), revestidas con anti-IgG de ratón de cabra (Dynal, Great Neck, NY) de su botella de almacenaje y se colocan en 5 ml de medio fresco (esto lava el conservante de azida tóxico). El medio se retira inmovilizando las esferas sobre un imán y se sustituye por medio fresco.
- \bullet
- Las esferas se mezclan con las células y la suspensión se incuba durante 30 min en hielo. La suspensión se mezcla con frecuencia.
- \bullet
- Las células revestidas con esferas se inmovilizan sobre un imán y las células restantes (fracción rica en osteoclastos) se decantan hacia un tubo de centrífuga estéril de 50 ml.
- \bullet
- Se añade medio fresco a las células revestidas con esferas para desprender cualquier osteoclato atrapado. Este proceso de lavado se repite x10. Se rechazan las células revestidas de esferas.
- \bullet
- Los osteoclastos viables se enumeran en una cámara de recuento, utilizando diacetato de fluoresceína para marcar las células vivas. Se utiliza una pipeta Pasteur de plástico desechable de orificio grande para añadir la muestra a la cámara.
- \bullet
- Los osteoclastos se sedimentan mediante centrifugación, y la densidad se ajusta al número apropiado en medio EMEM (el número de osteoclastos es variable de un tumor a otro), suplementado con suero de ternera fetal al 10% y 1,7 g/litro de bicarbonato de sodio.
Por contraste con el método descrito
anteriormente en el Ensayo 1, los compuestos se seleccionan a 4
dosis para obtener una IC_{50}, como se indica a
continuación:
- \bullet
- Las preparaciones de osteoclastos se preincuban durante 30 minutos a 37ºC con compuesto de ensayo (4 dosis) o controles.
- \bullet
- Después se siembran sobre rodajas de hueso cortical bovino en pocillos de una placa de cultivo de tejidos de 48 pocillos y se incuban durante 2 horas más a 37ºC.
- \bullet
- Las rodajas de hueso se lavan en seis cambios de disolución salina tamponada con fosfato (PBS) tibia, para eliminar las células no adherentes, y después se vuelven a introducir en los pocillos de una placa de 48 pocillos que contiene compuesto fresco o controles.
- \bullet
- La placa de cultivo de tejidos entonces se incuba durante 48 horas a 37ºC.
- \bullet
- Los sobrenadantes de cada pocillo se aspiran hacia tubos individuales y se seleccionan con un ELISA competitivo que detecta el c-telopéptido del colágeno de tipo I, que se libera durante el proceso de reabsorción. Existe un ELISA disponible en el mercado (Osteometer, Dinamarca) que contiene un anticuerpo de conejo que reacciona, de forma específica, con la secuencia de 8 aminoácidos (Glu-Lys-Ala-His-Asp-Gly-Gly-Arg) que está presente en el telopéptido carboxi-terminal de la cadena a1 del colágeno de tipo I. Los resultados se expresan como porcentaje de inhibición de la reabsorción, comparado con un vehículo control.
Los osteoclastos humanos se enriquecen y preparan
para el ensayo de selección de compuestos como se describió
anteriormente en las 9 etapas iniciales del Ensayo 1. Para que quede
más claro, las etapas se repiten a continuación.
- \bullet
- Se retiraron parte alícuotas de suspensiones celulares derivadas de osteoclastoma humano de su conservación en nitrógeno líquido, se calentaron rápidamente a 37ºC y se lavaron x1 en medio RPMI-1640 mediante centrifugación (1000 rpm, 5 min a 4ºC).
- \bullet
- El medio se aspira y se sustituye por anticuerpo anti-HLA-DR murino, y después se diluye 1:3 en medio RPMI-1640. La suspensión se incuba durante 30 min en hielo y se mezcla con frecuencia.
- \bullet
- Las células se lavan x2 con RPMI-1640 frío, seguido de una centrifugación (1000 rpm, 5 min a 4ºC), y las células entonces se transfieren a un tubo de centrífuga estéril de 15 ml. El número de células mononucleares se enumera en una cámara de recuento Neubauer mejorada.
- \bullet
- Se retiran suficientes esferas magnéticas (5/célula mononuclear), revestidas con anti-IgG de ratón de cabra (Dynal, Great Neck, NY) de su botella de almacenaje y se colocan en 5 ml de medio fresco (esto lava el conservante de azida tóxico). El medio se retira inmovilizando las esferas sobre un imán y se sustituye por medio fresco.
- \bullet
- Las esferas se mezclan con las células y la suspensión se incuba durante 30 min en hielo. La suspensión se mezcla con frecuencia.
- \bullet
- Las células revestidas con esferas se inmovilizan sobre un imán y las células restantes (fracción rica en osteoclastos) se decantan hacia un tubo de centrífuga estéril de 50 ml.
- \bullet
- Se añade medio fresco a las células revestidas con esferas para desprender cualquier osteoclato atrapado. Este proceso de lavado se repite x10. Se rechazan las células revestidas de esferas.
- \bullet
- Los osteoclastos viables se enumeran en una cámara de recuento, utilizando diacetato de fluoresceína para marcar las células vivas. Se utiliza una pipeta Pasteur de plástico desechable de orificio grande para añadir la muestra a la cámara.
- \bullet
- Los osteoclastos se sedimentan mediante centrifugación, y la densidad se ajusta al número apropiado en medio EMEM (el número de osteoclastos es variable de un tumor a otro), suplementado con suero de ternera fetal al 10% y 1,7 g/litro de bicarbonato de sodio.
- \bullet
- Los osteoclastos derivados de osteoclastoma se preincuban con compuesto (4 dosis) o controles a 37ºC durante 30 minutos.
- \bullet
- Las células entonces se siembran sobre placas revestida de osteopontina (osteopontina humana o de rata, 2,5 \mug/ml) y se incuban durante 2 horas a 37ºC.
- \bullet
- Las células no adherentes se eliminan lavando las placas vigorosamente en disolución salina tamponada con fosfato, y las células que permanecen en las placas se fijan en acetona.
- \bullet
- Los osteoclastos se tiñen para la fosfatasa ácida resistente a tartrato (TRAP), un marcador selectivo para células de este fenotipo (véanse las etapas 15 -17), y se enumeran mediante microscopía óptica. Los resultados se expresan como porcentaje de inhibición de la adhesion, comparado con un vehículo control.
Se obtuvieron células renales embriónicas humanas
(células HEK293) del ATCC (nº de catálogo CRL 1573). Las células se
cultivaron en medio esencial mínimo de Earl (EMEM) que contiene
sales de Earl, suero bovino fetal al 10%, glutamina al 1% y
penicilina-estreptomicina al 1%.
Un fragmento de 3,2 kb EcoRI-Kpnl
de la subunidad \alpha_{V} y un fragmento de 2,4 kb
XbaI-XhoI de la subunidad \beta_{3} se insertaron
en los sitios de clonación EcoRI - EcoRV del vector pCDN (Aiyar
et al., 1994) que contiene un promotor CMV y un marcador
seleccionable G418 mediante acoplamiento de extremos romos. Para
una expresión estable, 80 x 10^{6} células HEK 293 se
electrotransformaron con constructos \alpha_{V}+\beta_{3} (20
\mug de DNA de cada subunidad) utilizando un Gene Pulser (Hensley
et al., 1994 ) y se colocaron en placas de 100 mm (5 x
10^{5} células/placa). Después de 48 horas el medio de crecimiento
se suplementó con Geneticin 450 \mug/ml (G418 Sulfate,
GIBCO-BRL, Bethesda, MD). Las células se mantuvieron
en el medio de selección hasta que las colonias fueron lo
suficientemente grandes para poder ensayarlas.
Para determinar si los transfectantes HEK 293
expresan el receptor de vitronectina, las células se inmovilizaron
sobre placas de microscopio de vidrio mediante centrifugación, se
fijaron en acetona durante 2 min a temperatura ambiente y se
secaron al aire. Se demostró la reactividad específica con 23C6, un
anticuerpo específico para el complejo \alpha_{V}\beta_{3}
utilizando un método de inmunofluorescencia indirecto
convencional.
Se prerrevistieron placas de ELISA de 96 pocillos
Corning durante la noche a 4ºC con 0,1 ml de vitronectina humana
(0,2 \mug/ml en medio RPMI). En el momento del experimento, las
placas se lavaron una vez con medio RPMI y se bloquearon con BSA al
3,5% en medio RPMI durante 1 hora a temperatura ambiente. Las
células 293 transfectadas se resuspendieron en medio RPMI,
suplementado con Hepes 20 mM, pH 7,4, y BSA al 0,1% a una densidad
de 0,5 x 10^{6} células/ml. Se añadieron 0,1 ml de suspensión
celular a cada pocillo y se incubó durante 1 hora a 37ºC, en
presencia o ausencia de diversos antagonistas de
\alpha_{V}\beta_{3}. Después de la incubación se añadieron 0,025
ml de una disolución de formaldehído al 10%, pH 7,4, y las células
se fijaron a temperatura ambiente durante 10 min. Las placas se
lavaron 3 veces con 0,2 ml de medio RPMI y las células adherentes se
tiñeron con 0,1 ml de azul de toluidina al 0,5% durante 20 min a
temperatura ambiente. El exceso de tinte se eliminó mediante un
lavado extenso con agua desionizada. El azul de toluidina
incorporado a las células se eluyó mediante la adición de 0,1 ml de
etanol al 50% que contiene HCl 50 mM. La adhesión celular se
cuantificó a una densidad óptica de 600 nm en un lector de placas
de microvaloración (Titertek Multiskan MC, Sterling, VA).
El receptor de vitronectina \alpha_{V}\beta_{5}
se purificó a partir de placenta humana. La preparación del
receptor se diluyó con Tris-HCl 50 mM, pH 7,5, NaCl
100 mM, CaCl_{2} 1 mM, MnCl_{2} 1 mM, MgCl_{2} 1 mM (tampón
A) y se añadió inmediatamente a placas ELISA de 96 pocillos a 0,1 ml
por pocillo. Se añadieron 0,1-0,2 \mug de
\alpha_{V}\beta_{3} por pocillo. Las placas se incuban durante la
noche a 4ºC. En el momento del experimento, los pocillos se lavan
una vez con tampón A y se incuban con 0,1 ml de albúmina de suero
bovina al 3,5% en el mismo tampón durante 1 h a temperatura
ambiente. Después de la incubación, los pocillos se aspiran
completamente y se lavan dos veces con 0,2 ml de tampón A.
En un ensayo de competición de
[^{3}H]-SK&F-107260 se
añadieron diversas concentraciones de antagonistas no marcados
(0,001-100 \muM) a los pocillos, seguido de la
adición de 5,0 nM de
[^{3}H]-SK&F-107260. Las
placas se incubaron durante 1 h a temperatura ambiente. Después de
la incubación los pocillos se aspiraron completamente y se lavaron
una vez con 0,2 ml de tampón A enfriado en hielo de una manera
pocillo a pocillo. Los receptores se solubilizaron con 0,1 ml de
SDS al 1% y se determinó el
[^{3}H]-SK&F-107260 unido
mediante recuento de centelleo líquido con la adición de 3 ml de
Ready Safe en un contador de centelleo líquido Beckman LS 6800, con
una eficacia de 40%. Se determinó la unión no específica de
[^{3}H]-SK&F-107260 en
presencia de SK&F-107260 2 µM y era, de modo
coherente, menos de 1% de la adición de radioligando total. Se
determinó la IC_{50} (concentración del antagonista que inhibe
50% de la unión de
[^{3}H]-SK&F-107260) mediante
un método de ajuste de curvas de mínimos cuadrados no lineal, que se
modificó a partir del programa LUNDON-2. Se calculó
la K_{i} (constante de disociación del antagonista) según la
ecuación de Cheng y Prusoff: K_{i} = IC_{50}/(1 + L/K_{d}),
en la que L y K_{d} son la concentración y la constante de
disociación de
[^{3}H]-SK&F-107260,
respectivamente.
Diez unidades de plaquetas humanas lavadas
caducadas (obtenidas de la Cruz Roja) se lisaron mediante agitación
suave en octilglucósido al 3%, Tris-HCl 20 mM, pH
7,4, NaCl 140 mM, CaCl_{2} 2 mM a 4ºC durante 2 h. El lisado se
centrifugó a 100.000 g durante 1 h. El sobrenadante obtenido se
aplicó a una columna 4B de sefarosa de lentejas de lectina de 5 ml
(E.Y. Labs) preequilibrada con Tris-HCl 20 mM, pH
7,4, NaCl 100 mM, CaCl_{2} 2 mM, octilglucósido al 1% (tampón A).
Después de 2 h de incubación, la columna se lavó con 50 ml de tampón
A frío. El GPIIb-IIIa retenido por la lectina se
eluyó con tampón A que contiene dextrosa al 10%. Todos los
procedimientos se realizaron a 4ºC. El GPIIb-IIIa
obtenido era >95% puro, según se demostró mediante una
electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS.
Una mezcla de fosfatidilserina (70%) y
fosfatidilcolina (30%) (Avanti Polar Lipids) se secó sobre las
paredes de un tubo de vidrio bajo una corriente de nitrógeno. El
GPIIb-IIIa purificado se diluyó hasta una
concentración final de 0,5 mg/ml y se mezcló con los fosfolípidos
en una proporción de proteínas:fosfolípidos de 1:3 (en p/p). La
mezcla se resuspendió y se sonicó en un baño de sonicación durante 5
min. La mezcla entonces se dializó durante la noche utilizando
tubos de diálisis con un límite de exclusión molecular de
12.000-14.000 frente un exceso de 1000 veces de
Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, NaCl 100 mM, CaCl_{2} 2 mM
(con 2 cambios). Los liposomas que contienen
GPIIb-IIIa se centrifugaron a 12.000 g durante 15
min y se resuspendieron en el tampón de diálisis con una
concentración final de proteínas de aproximadamente 1 mg/ml. Los
liposomas se conservaron a -70ºC hasta que fueron necesarios.
La unión al receptor de fibrinógeno
(GPIIb-IIIa) se ensayó mediante un método de unión
competitiva indirecta utilizando
[^{3}H]-SK&F-107260 como
ligando de tipo RGD. El ensayo de unión se realizó en un montaje de
placa de filtración de 96 pocillos (Millipore Corporation, Bedford,
MA) utilizando membranas de durapore hidrófilas de 0,22 um. Los
pocillos se prerrevistieron con 0,2 ml de polilisina 10 µg/ml (Sigma
Chemical Co., St. Louis, MO.) a temperatura ambiente durante 1 h
para bloquear la unión no específica. Se añadieron diversas
concentraciones de benzazepinas no marcadas a los pocillos por
cuadruplicado. Se aplicó
[^{3}H]-SK&F-107260 a cada
pocillo a una concentración final de 4,5 nM, seguido de la adición
de 1 \mug de los liposomas que contienen
GPIIb-IIIa purificados de plaquetas. Las mezclas se
incubaron durante 1 h a temperatura ambiente. El
[^{3}H]-SK&F-107260 unido a
GPIIb-IIIa se separó del que no estaba unido
mediante filtración utilizando un distribuidor de filtración
Millipore, seguido de un lavado con tampón enfriado en hielo (2
veces, 0,2 ml cada una). La radiactividad unida que permanece sobre
los filtros se contó en un Ready Solve de 1,5 ml (Beckman
Instruments, Fullerton, CA) en un contador de centelleo líquido
Beckman (modelo LS6800), con una eficacia de 40%. Se determinó la
unión no específica en presencia de SK&F-107260
sin marcar 2 \muM y era, de forma coherente, menor que 0,14% de
la radiactividad total añadida a las muestras. Todos los puntos de
datos son la media de determinaciones por cuadruplicado.
Los datos de la unión de competición se
analizaron mediante un procedimiento de ajuste de curvas de mínimos
cuadrados no lineal. Este método proporciona la IC_{50} de los
antagonistas (concentración del antagonista que inhibe la unión
específica de
[^{3}H]-SK&F-107260 en 50% en
el equilibrio). La IC_{50} está relacionada con la constante de
disociación en equilibrio (Ki) del antagonista, basándose en la
ecuación de Cheng y Prusoff: Ki = IC_{50}/(1+L/Kd), en la que L
es la concentración de
[3H]-SK&F-107260 utilizada en el
ensayo de unión competitiva (4,5 nM), y Kd es la constante de
disociación de [3H]-SK&F-107260,
que es 4,5 nM, según se determina mediante el análisis de
Scatchard.
Los compuestos preferidos de esta invención
tienen afinidad por el receptor de vitronectina, con relación al
receptor de fibrinógeno, que es mayor que 10:1. Los compuestos más
preferidos tienen una proporción de actividad mayor que 100:1.
La eficacia de los compuestos de fórmula (I) por
sí solos o en combinación con un agente antineoplásico puede
determinarse utilizando varios modelos tumorales de ratón
transplantables. Véanse las Patentes de EE.UU. nº 5.004.758 y
5.633.016 para los detalles de estos modelos.
Los espectros de resonancia magnética nuclear
(RMN) de ^{1}H se registraron a 250 ó 400 MHz. Los desplazamientos
químicos se expresan en partes por millón (d) campo abajo del
patrón interno tetrametilsilano (TMS). Las abreviaturas de los
datos de RMN son las siguientes: s = singulete, d = doblete, t =
triplete, q = cuadruplete, m = multiplete, dd = doblete de
dobletes, dt = doblete de tripletes, ap = aparente, a = ancho. J
indica la constante de acoplamiento RMN medida en hercios.
CDCl_{3} es deuteriocloroformo, DMSO-d_{6} es
sulfóxido de hexadeuteriodimetilo y CD_{3}OD es
tetradeuteriometanol. Los espectros de infrarrojos (IR) se
registraron en el modo de transmisión, y las posiciones de banda se
indican en números de onda inversos (cm^{-1}). Se obtuvieron los
espectros de masas utilizando técnicas de ionización de
electronebulización (ES) o FAB. Los análisis elementales se
realizaron en las instalaciones o en Quantitative Technologies Inc.,
Whitehouse, NJ. Los puntos de fusión se tomaron con un aparato de
punto de fusión Thomas-Hoover y están sin corregir.
Todas las temperaturas se expresan en grados Celsius. Se utilizaron
placas de capa fina de gel de sílice de Analtech y gel de sílice 60
F-254 de E. Merck para cromatografía en capa fina.
Tanto la cromatografía de resolución rápida como la cromatografía
por gravedad se realizaron en gel de sílice E. Merck Kieselgel 60
(malla 230-400). Las HPLC analíticas y preparativas
se realizaron en cromatógrafos Rainin o Beckman. ODS se refiere a un
soporte cromatográfico de gel de sílice modificado con
octadecilsililo. 5 \mu Apex-ODS indica un soporte
cromatográfico de gel de sílice modificado con octadecilsililo que
tiene un tamaño de partícula nominal de 5 \mu, fabricado por
Jones Chromatography, Littleton, Colorado. YMC
ODS-AQ® es un soporte cromatográfico de ODS y es una
marca comercial registrada de YMC Co. Ltd., Kyoto, Japón.
PRP-1® es un soporte cromatográfico polimérico
(estireno-divinilbenceno) y es una marca comercial
registrada de Hamilton Co., Reno, Nevada. Celite® es un auxiliar de
filtración compuesto de sílice de diatomeas lavada al ácido y es
una marca comercial registrada de Manville Corp., Denver,
Colorado.
Preparación
1
Una mezcla de
2-bromo-5-metoxitolueno
(20 g, 0,10 mol), N-bromosuccinimida (19,6 g, 0,11
mol), peróxido de benzoílo (1 g, 4 mmol), y cloruro de metileno
(200 ml) se irradió durante 18 h con una lámpara de inundación para
conseguir un reflujo suave. La mezcla entonces se enfrió hasta -10ºC
durante varias horas y la disolución se decantó de la succinimida
precipitada. La disolución se concentró y el residuo se cristalizó
en cloroformo/hexano para producir el compuesto del título (19,7 g,
70%) como prismas de color amarillo pálido: RMN de ^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 7,45 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 6,99 (d, J = 3 Hz,
1 H), 6,74 (dd, J = 8,9, 3 Hz, 1 H), 4,55 (s, 2 H) 3,80 (s, 3
H).
Una mezcla de
4-bromo-3-bromometilanisol
(24 g, 86 mmol) y
di-terc-butiliminodicarboxilato de
potasio (24 g, 94 mmol) en dimetilformamida (200 ml) se agitó bajo
una atmósfera de argón a temperatura ambiente durante 18 h. La
reacción entonces se concentró al vacío y el residuo se repartió
entre acetato de etilo y agua. La fase orgánica se lavó con agua y
salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se concentró. El residuo se
recristalizó en hexano para producir el compuesto del título (15 g,
42%) como un sólido blanco: RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) \delta
7,40 (d, J = 8,6 Hz, 1 H)), 6,68 (m, 2 H), 4,81 (s, 2 H), 3,74 (s, 3
H), 1,44 (s, 18 H).
Un matraz de 500 ml se cargó con
3-bis(terc-butoxicarbonil)aminometil-4-bromoanisol
(15 g, 36 mmol), itaconato de dimetilo (7,5 g, 47 mmol),
tri-o-tolilfosfina (1 g, 3 mol), acetato de paladio (0,4 g, 2
mmol), diisopropiletilamina (12,8 ml, 72 mmol), y propionitrilo (150
ml). La mezcla se purgó con argón (varios ciclos de
evacuación/lavado de argón), y después se calentó a reflujo bajo una
atmósfera de argón durante 1 h. Se dejó que la reacción se enfriase
hasta la temperatura ambiente, y después se vertió en éter etílico
enfriado en hielo (500 ml). El precipitado resultante se retiró
mediante filtración y el filtrado se concentró. El residuo se
purificó por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo al
10% -20% en hexano) para producir el compuesto del título (11,8 g,
66%) como un aceite de color amarillo pálido: RMN de ^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 7,94 (s, 1 H), 7,15 (d, J = 8,1 Hz, 1 H)),
6,77 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 6,76 (s, 1 H), 4,73 (s, 2 H), 3,81 (s, 3
H), 3,79 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 3,38 (s, 2 H), 1,45 (s, 18 H).
Un recipiente a presión cargado con
(\pm)-3-carbometoxi-4-[2-bis(terc-butoxicarbonil)aminometil-4-metoxifenil]-3-butenoato
de metilo (11,8 g), acetato de etilo (120 ml), y paladio al 10%
sobre carbón (1 g) se agitó bajo 3,1 x 10^{5} Pa de hidrógeno
durante 18 h. La mezcla entonces se filtró y el filtrado se
concentró para producir el compuesto del título (12 g, 100%) como
un aceite incoloro: RMN de ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,00 (d, J
= 8,2 Hz, 1 H), 6,71 (m, 2 H), 4,81 (s, 2 H), 3,75 (s, 3 H), 3,66
(s, 3 H), 3,63 (s, 3 H), 3,05 (m, 2 H), 2,73 (m, 2 H), 2,42 (dd, J
= 16,0, 4,8 Hz, 1 H), 1,44 (s, 18 H).
Una disolución de
(\pm)-3-carbometoxi-4-[2-bis(terc-butoxicarbonil)aminometil-4-metoxifenil]butanoato
de metilo (12 g) en cloroformo (100 ml) y ácido trifluoroacético
(50 ml) se agitó bajo una atmósfera de argón a temperatura ambiente
durante 4 h. La disolución entonces se concentró al vacío para
producir el compuesto del título (10 g, 100%) como un aceite
viscoso: MS (ES) m/e 296,2 (M + H)^{+}.
Una disolución de
(\pm)-3-carbometoxi-4-[2-(aminometil)-4-metoxifenil]butanoato
de metilo (10 g, 24 mmol) y trietilamina (17 ml, 120 mmol) en
tolueno (100 ml) se calentó a reflujo durante 18 h. La reacción
entonces se concentró y el residuo se repartió entre acetato de
etilo y agua. La capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de
etilo, y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera,
se secaron (MgSO_{4}), y se concentraron para producir el
compuesto del título (4,8 g, 76%) como un sólido de color tostado:
MS (ES) m/e 264,2 (M + H)^{+}.
Se añadió cloruro de aluminio anhidro (7,6 g, 57
mmol) de forma discontinua a una disolución agitada de
(\pm)-8-metoxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (3,0 g, 11 mmol) y etantiol (4,2 ml, 57 mmol) en cloruro
de metileno (100 ml) a 0ºC bajo una atmósfera de argón. La mezcla
resultante se dejó calentar hasta la temperatura ambiente, se agitó
durante la noche y después se concentró. El residuo se trituró con
agua helada, y el sólido resultante se recogió mediante filtración
y se secó para producir el compuesto del título (2,64 g, 91%) como
un sólido blancuzco: MS (ES) m/e 250,2 (M + H)^{+}.
Preparación
2
Se añadió rápidamente metilamina acuosa al 40%
(49 ml, 563 mmol) a una disolución de
4-bromo-3-bromometilanisol
(15,76 g, 56,29 mmol) en THF (280 ml) a temperatura ambiente.
Después de 2,5 h, la reacción se concentró, y el residuo se
repartió entre Et_{2}O (560 ml) y NaOH 1,0 N (100 ml). Las capas
se separaron, y la capa orgánica se secó (MgSO_{4}) y se
concentró hasta un aceite amarillo: TLC (MeOH al 5%/CHCl_{3})
R_{f} 0,32.
El aceite se disolvió en CHCl_{3} (280 ml), y
se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (1,29 g, 56,29
mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 45 min, y
después se concentró. Una cromatografía en gel de sílice (EtOAc al
5%/tolueno) produjo el compuesto del título (16,81 g, 90%) como un
aceite de color amarillo pálido: TLC (EtOAc al 5%/tolueno) R_{f}
0,43; RMN de ^{1}H (400, CDCl_{3}) mezcla de rotámeros;
\delta 7,42 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 6,65 - 6,80 (m, 2 H), 4,40 -
4,55 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 2,81 - 2,97 (m, 3 H), 1,37 - 1,60 (m,
9 H); MS (ES) m/e 352/354 (M + Na)^{+}.
Una disolución de
3-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-metilamino]metil-4-bromoanisol
(4,95 g, 15 mmol), itaconato de dimetilo (3,08 g, 19,5 mmol),
acetato de paladio (168 mg, 0,75 mmol), tri-o-tolilfosfina
(457 mg, 1,5 mol), y diisopropiletilamina (5,2 ml, 30 mmol) en
propionitrilo (75 ml) se calentó a reflujo durante 45 min, y
después se concentró en un rotavapor. El residuo se diluyó con
Et_{2}O (150 ml), y la mezcla se filtró a través de Celite® para
eliminar los materiales insolubles. El filtrado se concentró, y el
residuo se reconcentró en xilenos. Una cromatografía en gel de
sílice (gradiente: EtOAc al 20%/hexanos, después EtOAc/hexanos 1:1)
eliminó la fosfina y los materiales de línea de base; todos los
demás materiales con R_{f} 0,40 - 0,70 se recogieron juntos y se
concentraron para dejar un aceite amarillo turbio: TLC (EtOAc al
30%/hexanos) R_{f} 0,41 (producto principal).
El aceite se disolvió en MeOH (75 ml), y se
añadió cuidadosamente Pd al 10%/C. La mezcla se agitó bajo una
atmósfera de hidrógeno (3,4 x 10^{5} Pa) durante 2,5 h, y después
se filtró a través de Celite® para retirar el catalizador. El
filtrado se concentró, y el residuo se volvió a someter a las
condiciones de reacción. Después de otras 2,5 h, la mezcla se
filtró a través de Celite® para eliminar el catalizador, y el
filtrado se concentró para dejar un aceite de color amarillo
pálido. Esto se reconcentró en CHCl_{3}/hexanos, y después se
cromatografió en gel de sílice (gradiente: EtOAc al 20%/hexanos,
después EtOAc/hexanos 1:1) para producir el compuesto del título
(4,53 g, 74%) como una aceite de color amarillo pálido: TLC (EtOAc
al 30%/tolueno) R_{f} 0,46; RMN de ^{1}H (400, CDCl_{3})
mezcla de rotámeros;
\delta 7,03 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 6,65 - 6,80 (m, 2 H), 4,46 (s a, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,64 (s, 3 H), 3,63 (s, 3 H), 2,62 - 3,12 (m, 7 H), 2,35 - 2,50 (m, 1 H), 1,47 (s a, 9 H); MS (ES) m/e 432 (M + Na)^{+}.
\delta 7,03 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 6,65 - 6,80 (m, 2 H), 4,46 (s a, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,64 (s, 3 H), 3,63 (s, 3 H), 2,62 - 3,12 (m, 7 H), 2,35 - 2,50 (m, 1 H), 1,47 (s a, 9 H); MS (ES) m/e 432 (M + Na)^{+}.
Se añadió TFA (55 ml) de una vez a una disolución
de
(\pm)-3-carbometoxi-4-[2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-metilamino]metil-4-metoxifenil]butanoato
de metilo (4,53 g, 11,06 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (55 ml)
a 0ºC, y la reacción se calentó hasta la temperatura ambiente.
Después de 1 h, la reacción se concentró, y el residuo se
reconcentró en tolueno (2 x 100 ml) para dejar el compuesto del
título (11,06 mmol, cuantitativo) como un aceite de color amarillo
pálido: MS (ES) m/e 310 (M + H)^{+}.
Una disolución de
(\pm)-3-carbometoxi-4-[2-(metilamino)metil-4-metoxifenil]-butanoato
de metilo (11,06 mmol) y diisopropiletilamina (5,8 ml, 33,18 mmol)
en tolueno (110 ml) se calentó a reflujo durante 25 h, se agitó a
temperatura ambiente durante 4 días, y después se calentó a reflujo
durante 24 h más. Una concentración y una cromatografía en gel de
sílice (MeOH al 5% en EtOAc/CHCl_{3} 1:1) produjo el compuesto del
título (2,88 g, 94%) como un sólido de color amarillo pálido: TLC
(MeOH al 5% en EtOAc/CHCl_{3} 1:1) R_{f} 0,63; RMN de ^{1}H
(250, CDCl_{3}) \delta 7,02 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,78 (dd, J =
8,4, 2,7 Hz, 1 H), 6,63 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 16,3 Hz,
1 H), 3,50 - 3,90 (m, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 2,73 -
3,16 (m, 3 H), 3,04 (s, 3 H), 2,41 (dd, J = 16,7, 5,4 Hz, 1 H); MS
(ES) m/e 300 (M + Na)^{+}, 278 (M + H)^{+}.
Se añadió cloruro de aluminio anhidro (1,35 g,
10,15 mmol) de una vez a una disolución de
(\pm)-8-metoxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (562 mg, 2,03 mmol) y etantiol (0,75 ml, 10,15 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} anhidro (20 ml) a 0ºC bajo una atmósfera de argón.
La mezcla se calentó hasta la temperatura ambiente, se agitó durante
4,5 h, y después se reenfrió hasta 0ºC. Se añadió H_{2}O helada
(20 ml), y la mezcla se agitó enérgicamente durante 5 min, y
después se extrajo con CHCl_{3} (3 x 20 ml). Las capas de
CHCl_{3} reunidas se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron para
dejar un residuo. La capa acuosa se filtró con succión para recoger
un precipitado sólido. Este precipitado y el residuo de la capa de
CHCl_{3} se reunieron en MeOH/CHCl_{3} 1:1, y la disolución se
concentró para dejar un sólido blancuzco. Éste se trituró con MeOH
caliente, y se dejó que la mezcla se enfriase hasta la temperatura
ambiente. El sólido se recogió mediante filtración con succión y se
lavó secuencialmente con MeOH frío y Et_{2}O. Un secado a un
vacío elevado a 40ºC produjo el compuesto del título (467,9 mg,
88%) como un sólido incoloro: TLC (MeOH al 5%/CHCl_{3}) R_{f}
0,17; RMN de ^{1}H (250, DMSO-d_{6}) \delta
9,29 (s, 1 H), 6,89 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 6,50 - 6,70 (m, 2 H), 5,16
(d, J = 16,4 Hz, 1 H), 3,84 (d, J = 16,4 Hz, 1 H), 3,60 - 3,85 (m,
1 H), 3,56 (s, 3 H), 2,30 - 3,00 (m, 4 H), 2,86 (s, 3 H); MS (ES)
m/e 286 (M + Na)^{+}, 264 (M + H)^{+}.
Preparación
3
Una mezcla de
2-cloropiridin-N-óxido (16,6 g, 0,1
mol),
3-amino-1-propanol
(15,3 ml, 0,2 mol), NaHCO_{3} (42 g, 0,5 mol), y alcohol
terc-amílico (100 ml) se calentó a reflujo. Después de 21 h,
la reacción se enfrió, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (300 ml), y
se filtró con succión para eliminar los materiales insolubles. El
filtrado se concentró y se reconcentró en tolueno para dejar un
aceite amarillo. Una cromatografía en gel de sílice (MeOH al
20%/CHCl_{3}) produjo el compuesto del título (15,62 g, 93%) como
un sólido amarillo: TLC (MeOH al 20%/CHCl_{3}) R_{f} 0,48; RMN
de ^{1}H (250, CDCl_{3}) \delta 8,07 (dd, J = 6,6, 1,2 Hz, 1
H), 7,34 (t a, 1 H), 7,10 - 7,30 (m, 1 H), 6,64 (dd, J = 8,5, 1,4
Hz, 1 H), 6,40 - 6,60 (m, 1 H), 4,49 (s a, 1 H), 3,65 - 3,90 (m, 2
H), 3,35 - 3,60 (m, 2 H), 1,75 - 2,00 (m, 2 H); MS (ES) m/e 169 (M +
H)^{+}.
Preparación
4
Según el procedimiento de la Preparación 3,
excepto que se empleó
2-cloro-4-nitropiridin-N-óxido
(véase Jain, P. C.; Chatterjee, S. K.; Anand, N. Indian Journal
of Chemistry, 1966, 403) en lugar del hidrocloruro de
2-cloropiridin-N-óxido, se preparó
el compuesto del título como un sólido naranja: MS (ES) m/e 214,2
(M + H)^{+}.
\newpage
Preparación
5
Una disolución de
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]-4-nitropiridin-N-óxido
(0,275 g, 1 mmol) y NaOMe 0,5 M en MeOH (16 ml, 8 mmol) se calentó
a reflujo bajo una atmófera de argón durante 3 h. Entonces se dejó
que la reacción se enfriase y se añadió AcOH glacial (0,5 ml, 8
mmol). La disolución se concentró hasta la sequedad y el residuo se
trituró con CH_{2}Cl_{2}. Los materiales insolubles se retiraron
mediante filtración y el filtrado se concentró. Una cromatografía
en gel de sílice (MeOH al 5-15%/CHCl_{3}) produjo
el compuesto del título (0,23 g, 90%) como un aceite incoloro: MS
(ES) m/e 199,0 (M + H)^{+}.
Preparación
6
Se añadió
2,2,2-trifluoroetilamina (4,9 ml, 62,5 mmol)
rápidamente a una disolución de
4-bromo-3-bromometilanisol
(7,00 g, 25 mmol) en DMSO anhidro (25 ml) a temperatura ambiente.
La reacción se calentó hasta aproximadamente 30 - 35ºC. Después de
2 h, la reacción se diluyó NaOH 0,5 N enfriado en hielo (100 ml) y
se extrajo con Et_{2}O (3 x 100 ml). Las capas de Et_{2}O
reunidas se lavaron secuencialmente con H_{2}O (2 x 25 ml) y
salmuera (25 ml), se secaron (MgSO_{4}), y se concentraron hasta
un aceite amarillo pálido: TLC (tolueno) R_{f} 0,43.
El aceite se disolvió en CH_{2}Cl_{2} anhidro
(48 ml) en un matraz de fondo redondo, y se añadió dicarbonato de
di-terc-butilo (10,48 g, 48,04 mmol). El matraz que contenía
la disolución de reacción se colocó en un rotavapor y se rotó al
vacío a 50ºC durante 16 h. El residuo resultante se diluyó con
hexanos (100 ml) y la disolución se sembró con una pequeña cantidad
del producto sólido puro (obtenido de un experimento previo
mediante una cromatografía en gel de sílice empleando EtOAc al
10%/hexanos como eluyente). Se dejó la mezcla en reposo a
temperatura ambiente durante varias horas, y después se colocó en la
nevera durante la noche. El producto se recogió mediante filtración
con succión y se lavó con hexanos. Un secado al vacío produjo el
compuesto del título (7,19 g, 75%) como un sólido incoloro. Los
licores madre se concentraron y se cromatografiaron sobre gel de
sílice (EtOAc al 10%/hexanos) para producir más compuesto del título
(1,42 g; total = 8,61 g, 90%): TLC (EtOAc al 10%/tolueno) R_{f}
0,48; p.f. 86 - 89ºC; RMN de ^{1}H (250, CDCl_{3}) \delta 7,44
(d, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,64 - 6,82 (m, 2 H), 4,52 - 4,70 (m, 2 H),
3,61 - 4,00 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 1,22 - 1,68 (m, 9 H).
Una disolución de
3-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil-4-bromoanisol
(9,17 g, 23,03
mmol), itaconato de dimetilo (4,73 g, 29,94 mmol), acetato de paladio (259 mg, 1,15 mmol), tri-o-tolilfosfina (701 mg, 2,30 mol), y diisopropiletilamina (8,0 ml, 46,06 mmol) en propionitrilo (115 ml) se desoxigenó (3 x ciclos de evacuación/purga de argón), y después se calentó a reflujo bajo una atmósfera de argón. Después de 2 h la reacción se concentró y se reconcentró en tolueno. Una cromatografía en gel de sílice (EtOAc al 30%/hexanos, muestra de carga con CH_{2}Cl_{2}) eliminó la fosfina y los materiales de línea de base; todos los demás materiales con R_{f} 0,55 - 0,70 se recogieron juntos y se concentraron para dejar un aceite amarillo. Éste se suspendió en EtOAc al 20%/hexanos (200 ml) y se dejó en reposo a temperatura ambiente durante 1 h y después en la nevera durante la noche. La mezcla se filtró para eliminar un precipitado amarillo, y el filtrado se concentró para dejar 9,93 g (91%) de un aceite amarillo: TLC (EtOAc al 30%/hexanos) R_{f} 0,55 (producto principal).
mmol), itaconato de dimetilo (4,73 g, 29,94 mmol), acetato de paladio (259 mg, 1,15 mmol), tri-o-tolilfosfina (701 mg, 2,30 mol), y diisopropiletilamina (8,0 ml, 46,06 mmol) en propionitrilo (115 ml) se desoxigenó (3 x ciclos de evacuación/purga de argón), y después se calentó a reflujo bajo una atmósfera de argón. Después de 2 h la reacción se concentró y se reconcentró en tolueno. Una cromatografía en gel de sílice (EtOAc al 30%/hexanos, muestra de carga con CH_{2}Cl_{2}) eliminó la fosfina y los materiales de línea de base; todos los demás materiales con R_{f} 0,55 - 0,70 se recogieron juntos y se concentraron para dejar un aceite amarillo. Éste se suspendió en EtOAc al 20%/hexanos (200 ml) y se dejó en reposo a temperatura ambiente durante 1 h y después en la nevera durante la noche. La mezcla se filtró para eliminar un precipitado amarillo, y el filtrado se concentró para dejar 9,93 g (91%) de un aceite amarillo: TLC (EtOAc al 30%/hexanos) R_{f} 0,55 (producto principal).
El aceite se disolvió en EtOAc (100 ml), y se
añadió Pd al 10%/C (4,44 g, 4,18 mmol). La mezcla se agitó bajo una
atmósfera de hidrógeno (3,4 x 10^{5} Pa) durante 3,5 h, y después
se filtró a través de Celite® para retirar el catalizador. El
filtrado se concentró, y el residuo se cromatografió en gel de
sílice (gradiente: EtOAc al 20%/hexanos) para producir el compuesto
del título (7,98 g, 73% para dos etapas) como un aceite incoloro:
TLC (EtOAc al 20%/tolueno) R_{f} 0,35; RMN de ^{1}H (250,
CDCl_{3}) \delta 7,05 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,76 (dd, J = 8,4,
2,7 Hz, 1 H), 6,60 - 6,72 (m, 1 H), 4,50 - 4,80 (m, 2 H), 3,45 -
3,95 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,63 (s, 6 H), 2,85 - 3,09 (m, 2 H),
2,58 - 2,80 (m, 2 H), 2,33 - 2,50 (m, 1 H), 1,20 - 1,70 (m, 9 H);
MS (ES) m/e 500 (M + Na)^{+}.
Se añadió TFA (55 ml) de una vez a una disolución
de
(\pm)-3-carbometoxi-4-[2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil-4-metoxifenil]butanoato
de metilo (7,98 g, 16,71 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (42 ml)
a 0ºC bajo una atmósfera de argón, y la reacción se calentó hasta
la temperatura ambiente. Después de 1,5 h, la reacción se concentró,
y el residuo se reconcentró en xilenos. Un secado a un vacío
elevado a 40ºC produjo el compuesto del título (8,70 g,
cuantitativo) como un sólido amarillo: MS (ES) m/e 378 (M +
H)^{+}.
Una mezcla de
(\pm)-3-carbometoxi-4-[2-(2,2,2-trifluoroetilamino)metil-4-metoxifenil]butanoato
de metilo (16,71 mmol), tripropilamina (9,5 ml, 50,13 mmol), y
xilenos (170 ml) se calentó a reflujo. Después de 63 h la reacción
se concentró, y el residuo se cromatografió en sílice (EtOAc/hexanos
2:1, carga con CH_{2}Cl_{2}). El compuesto del título (5,33 g,
92% para dos etapas) se obtuvo como un sólido de color amarillo
pálido: TLC (EtOAc al 40%/tolueno) R_{f} 0,49; RMN de ^{1}H
(250, CDCl_{3}) \delta 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J =
8,5, 2,6 Hz, 1 H), 6,61 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 5,35 (d, J = 16,8 Hz,
1 H), 3,60 - 4,30 (m, 4 H), 3,79 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 2,81 -
3,15 (m, 3 H), 2,46 (dd, J = 16,9, 5,5 Hz, 1 H); MS (ES) m/e 368 (M
+ Na)^{+}, 346 (M + H)^{+}
Una disolución de BBr_{3} en CH_{2}Cl_{2}
(1,0 M, 60 ml, 60 mmol) se añadió gota a gota a lo largo de 30 min
a una disolución de
(\pm)-8-metoxi-3-oxo-2-(2,2,2-trífluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (5,16 g, 14,94 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (60 ml)
de -5ºC a -10ºC bajo una atmósfera de argón. Después de 1 h más de
-5ºC a -10ºC, la reacción se volvió a enfriar a fondo hasta -10ºC y
se extinguió mediante la adición cuidadosa gota a gota de MeOH (60
ml). La reacción se agitó de -10ºC a 0ºC durante 1 h, y después se
concentró en un rotavapor. El residuo se reconcentró en MeOH (2 x),
después en EtOAc, y después se filtró a través de un lecho corto de
gel de sílice (EtOAc como eluyente). La concentración del filtrado
dejó un sólido amarillo que se trituró con hexanos calientes. El
compuesto del título (4,74 g, 96%) se obtuvo como un sólido
blancuzco: TLC (EtOAc/hexanos 1:1) R_{f} 0,40; RMN de ^{1}H
(400, DMSO-d_{6}) \delta 9,28 (s, 1 H), 6,90
(d, J = 8,3 Hz, 1 H), 6,62 (dd, J = 8,3, 2,5 Hz, 1 H), 6,57 (d, J =
2,5 Hz, 1 H), 5,27 (d, J = 16,7 Hz, 1 H), 4,22 - 4,38 (m, 1 H),
4,07 - 4,22 (m, 1 H), 4,07 (d, J = 16,7 Hz, 1 H), 3,72 - 3,83 (m, 1
H), 3,58 (s, 3 H), 2,94 (dd, J = 17,0, 3,8 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J =
16,7, 9,1 Hz, 1 H), 2,65 (dd, J = 17,0, 14 Hz, 1 H), 2,49
(dd,
J =16,7, 5,0 Hz, 1 H, parcialmente oscurecido por una señal del disolvente residual); MS (ES) m/e 354 (M + Na)^{+}.
J =16,7, 5,0 Hz, 1 H, parcialmente oscurecido por una señal del disolvente residual); MS (ES) m/e 354 (M + Na)^{+}.
Preparación
7
El
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo se resolvió en sus enantiómeros mediante HPLC quiral
utilizando las siguientes condiciones: columna Diacel Chiralpak AS®
(21,2 x 250 mm), fase móvil de EtOH, caudal de 7 ml/min, detección
de uv a 254 nm, inyección de 70 mg; t_{R} para el
(R)-(+)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo = 21,5 min; t_{R} para el
(S)-(-)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo = 39,1 min.
Preparación
8
El
(\pm)-8-metoxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo se resolvió en sus enantiómeros mediante HPLC quiral
utilizando las siguientes condiciones: columna Diacel Chiralpak AS®
(21,2 x 250 mm), fase móvil de CH_{3}CN, caudal de 15 ml/min,
detección de uv a 254 nm, inyección de 500 mg; t_{R} para el
(R)-(+)-8-metoxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo = 10,2 min; t_{R} para el
(S)-(-)-8-metoxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo = 19,0 min.
Preparación
9
Una disolución de
(S)-(-)-8-metoxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (15,0 g, 0,057 mol) en CHCl_{3} (160 ml) se añadió gota
a gota a lo largo de 30 min a una disolución de tribromuro de boro
(20,53 ml, 0,217 mol) en CHCl_{3} (160 ml) a -8ºC bajo una
atmósfera de argón, manteniendo la temperatura entre -5ºC y 0ºC. La
mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -8ºC durante 30 min y
después se añadió MeOH (200 ml), al principio gota a gota,
manteniendo la temperatura a aproximadamente 0ºC. La mezcla de
reacción se concentró para producir un aceite viscoso que se
reconcentró en MeOH (100 ml). El aceite se disolvió en
H_{2}O/MeOH y se retiró una pequeña cantidad de un sólido oscuro
mediante filtración. El filtrado se neutralizó (hasta pH 7) con
hidróxido de sodio al 50%, depositándose un sólido blanco. El pH de
la suspensión se ajustó a 4,5 mediante la adición de una pequeña
cantidad de ácido acético y el sólido se recogió y se secó al vacío
para producir el compuesto del título (9,7 g, 68%). El producto se
ensayó para determinar la pureza quiral mediante HPLC: columna
Chiralpak AS® (4,6 x 50 mm), fase móvil de EtOH al 100%, caudal de
0,5 ml/min, detección de uv a 215 nm; t_{R} = 7,5 min
(S-enantiómero, 99%); t_{R} = 4,4 min
(R-enantiómero, 1%).
Preparación
10
Según el procedimiento de la Preparación 4,
excepto que se empleó
2-cloro-4,6-dimetilpiridin-N-óxido
(véase Brown, E. V., J. Amer. Chem. Soc., 1957,
79, 3565) en lugar del hidrocloruro de
2-cloropiridin-N-óxido, se preparó
el compuesto del título como un aceite transparente: MS (ES) m/e
197,2 (M + H)^{+}.
Preparación
11
A una disolución agitada de
2-amino-6-picolina
(4,33 g, 40 mmol), Et_{3}N (6,2 ml, 40 mmol) y CH_{2}Cl_{2}
(50 ml) a 0ºC se le añadió dicarbonato de di-terc-butilo (9,6
g, 44 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante la
noche, la mezcla de reacción se concentró al vacío, se diluyó con
H_{2}O y se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 50 ml). Un secado
(MgSO_{4}) y una concentración produjeron el compuesto del título
como un aceite incoloro: MS (ES) m/e 209
\hbox{(M +
H) ^{+} .}
A una suspensión de NaH (dispersión al 60% en
aceite mineral, 0,44 g, 11 mmol) en DMF (20 ml) a 0ºC se le añadió
una disolución de
2-(terc-butoxicarbonilamino)-6-picolina
(2,1 g, 10 mmol) en DMF (30 ml). La reacción se agitó a 0ºC durante
15 min; después se añadió yoduro de metilo (1,6 g, 11 mmol). La
mezcla de reacción se concentró al vacío, se diluyó con H_{2}O, y
se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 50 ml). Un secado (MgSO_{4})
y una concentración produjeron el compuesto del título como un
aceite incoloro: MS (ES) m/e 223 (M + H)^{+}.
Se preparó LDA (18 mmol) en THF (30 ml), se
enfrió hasta -78ºC, y se añadió
2-[(terc-butoxicarbonil)metilamino]-6-picolina
(2 g, 9 mmol), formando una disolución de color rojo oscuro. Después
de 15 min se añadió carbonato de dietilo (18 ml, 15 mmol). La
disolución de color burdeos se agitó a -78ºC durante 15 min más, y
después la reacción se extinguió con una disolución saturada de
NH_{4}Cl. La mezcla se calentó hasta la temperatura ambiente y se
extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Las capas orgánicas reunidas se
lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}), se filtraron y se
concentraron. Una cromatografía en gel de sílice produjo el
compuesto del título como un aceite incoloro: MS (ES) m/e 294 (M +
H)^{+}.
Una disolución de
6-[(terc-butoxicarbonil)metilamino]-2-piridilacetato
de etilo (0,6 g, 2 mmol) y HCl 4 M/dioxano (5 ml, 20 mmol) se agitó
a temperatura ambiente durante la noche, y después se concentró. Una
reconcentración en tolueno produjo el compuesto del título como un
sólido blanco: MS (ES) m/e 195 (M + H)^{+}.
A una disolución agitada de forma mecánica de
LiAlH_{4} en THF (1,0 M, 20 ml, 20,4 mmol) se le añadió gota a
gota una disolución de
2-(metilamino)-6-piridilacetato de
etilo (0,38 g, 2 mmol) en THF (10 ml). Después de terminar la
adición, la mezcla de reacción se calentó hasta 0ºC y se extinguió
con una disolución de NaOH al 10%. Los sólidos se retiraron
mediante filtración y el filtrado se concentró al vacío. El residuo
se disolvió en CH_{2}Cl_{2} y la disolución se secó
(MgSO_{4}) y se concentró. Una reconcentración en tolueno (3 x)
produjo el compuesto del título como un aceite incoloro: MS (ES) m/e
153 (M + H)^{+}.
Preparación
12
Una disolución de dicarbonato de
di-terc-butilo (10,91 g, 50 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (50 ml)
se añadió gota a gota a una disolución de
3-amino-1-propanol
(11,5 ml, 150 ml) en CH_{2}Cl_{2} (250 ml) a 0ºC. La disolución
turbia se calentó hasta la temperatura ambiente, se agitó durante 1
h, y después se concentró en un rotavapor. El residuo se suspendió
en H_{2}O (100 ml) y se extrajo con Et_{2}O (3 x 100 ml). Un
secado (MgSO_{4}) y una concentración produjeron el compuesto del
título como un aceite incoloro: RMN de ^{1}H (250 MHz,
CDCl_{3}) \delta 4,80 (s a, 1 H), 3,50 - 3,80 (m, 2 H), 3,13 -
3,42 (m, 2 H), 3,03 (t a, 1 H), 1,55 -1,80 (m, 2 H), 1,45 (s, 9 H);
MS (ES) m/e 198 (M + Na)^{+}.
Preparación
13
A una disolución agitada bajo una atmósfera de
argón a temperatura ambiente de
3-amino-1-propanol
(0,77 g, 1,1 mmol) y trietilamina (2,85 ml, 7 mmol) en THF (5 ml)
se le añadió una suspensión de cloroformiato de
4-nitrobencilo (2 g, 1 mmol) en THF (20 ml). La
mezcla resultante se dejó en agitación a temperatura ambiente
durante el fin de semana, y después se concentró. El residuo se
purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (MeOH al
0%-2%/CH_{2}Cl_{2}) para producir el compuesto del título (0,80
g, 34%) como un aceite de color amarillo pálido: MS (ES) m/e 254,3
(M + H)^{+}.
Una disolución de
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido
(8,0 g, 47,6 mmol) en terc-BuOH (80 ml) se trató con
dicarbonato de di-terc-butilo (11,4 g, 55,3 mmol). Después de
18 h, la disolución se concentró y el residuo se trituró con
hexano. El sólido resultante se secó al vacío para producir el
compuesto del título (12,5 g, 98%) como un sólido blancuzco: MS
(ES) m/e 269,3 (M + H)^{+}.
Preparación
15
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-[N-(3-hidroxi-1-propil)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]piridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como una espuma de color naranja
claro: MS (ES) m/e 500,4 (M + H)^{+}.
Preparación
16
Una mezcla de
2-cloro-4-metilpiridin-N-óxido
(12,1 g, 0,068 mol) (Brown, E. V., J. Amer. Chem. Soc.,
1957, 79, 3565),
3-amino-1-propanol
(10,33 ml, 0,14 mol), NaHCO_{3} (28 g, 0,34 mol), y alcohol
terc-amílico (70 ml) se calentó a reflujo. Después de 16 h,
la reacción se enfrió, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (300 ml), y se
filtró con succión para eliminar los materiales insolubles. El
filtrado se concentró y se reconcentró en tolueno para dejar un
aceite amarillo. Una recristalización en CH_{2}Cl_{2}/Et_{2}O
produjo el compuesto del título (10,87 g, 88%) como un sólido
amarillo: TLC (MeOH al 15%/CH_{2}Cl_{2}) R_{f} 0,44; RMN de
^{1}H (400, CDCl_{3}) \delta 7,92 (d, J = 6,7, 1 H), 7,28 (t
a, 1 H), 6,43 (s, 1 H), 6,33 (dd, J = 6,6, 2,1 Hz, 1 H), 3,73 (t, J
= 5,7 Hz, 2 H), 3,47 (q, J = 6,3 Hz, 2 H), 2,29 (s, 3 H), 1,82 -1,88
(m, 2 H); MS (ES) m/e 183 (M + H)^{+}.
Preparación
17
A una disolución de
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-2-1H-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,31 g, 1,24 mmol) y bromuro de
4-(trifluorometil)bencilo (0,89 g, 3,72 mmol) en DMF (10 ml)
se le añadió NaH (suspensión al 60% en aceite, 0,11 g, 2,75 mmol).
Después de agitar a temperatura ambiente durante 4 h, la mayor parte
de la DMF se retiró al vacío. El residuo se repartió entre
NaHCO_{3} saturado y EtOAc. La fase acuosa se extrajo con EtOAc y
los extractos orgánicos reunidos se lavaron con NaCl saturado, se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron para producir un
aceite transparente (0,90 g). Una cromatografía radial (acetona al
5%/CH_{2}Cl_{2}, gel de sílice, placa de 6 m) produjo el
compuesto del título (0,53 g) como una espuma blanca. MS (ES) m/e
566,1 (M + H)^{+}.
Un matraz de hidrogenación Parr se cargó con
(S)-3-oxo-8-[4-(trifluorometil)-benciloxi]-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,78 g, 1,38 mmol) y catalizador de Pearlman (20 mg) en
MeOH (20 ml). Después de una hidrogenación a 3,4 x 10^{5} Pa
durante 24 h, el matraz de reacción se expuso a la atmósfera y el
catalizador se retiró mediante filtración. La eliminación del
disolvente produjo una espuma blanca (0,60 g). Una cromatografía
radial (acetona al 5%/CH_{2}Cl_{2}, gel de sílice, placa de 6
m) produjo el compuesto del título (0,42 g) como una espuma blanca.
RMN de ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,50 (d, J = 8,5 Hz,
2H), 7,23 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,90 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,67 (dd,
J = 7,5, 3,4 Hz, 1H), 6,39 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 5,05 (m, 2H), 4,35
(d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,60 (m, 1H), 2,95
(m, 4H), 2,45 (dd, J =17,1, 5,1 Hz, 1H).
Preparación
18
A una disolución agitada de
4-bromo-3-metilanisol
(100 g, 497 mmol) en diclorometano seco (500 ml) se le añadió
N-bromosuccinimida (97 g, 545 mmol), seguido de
peróxido de benzoílo (6 g, 25 mmol). La reacción se sometió a un
reflujo suave con una lampara de inundación de 150 vatios con el
reflector colocado aproximadamente a 300 milímetros del matraz de
reacción. Después de 24 h la reacción se concentró mediante
evaporación rotatoria hasta la mitad de su volumen y se dejó en
reposo durante 4 h. El precipitado blanco que se formó se retiró
mediante filtración y se enjuagó con un pequeño volumen de
diclorometano. El filtrado se concentró hasta la sequedad y el
sólido remanente se trituró con hexanos y se filtró. Un secado al
vacío produjo el compuesto del título (100,25 g, 72%) como agujas
blancas. GC t_{R} = 6,56 min (columna de metilsilicona HP 530
\mum x 20 m, flujo del vehículo de He 20 ml/min, temperatura
inicial 100ºC, tiempo inicial 1 min, velocidad 10ºC/min,
temperatura final 200ºC, tiempo final 1 min); RMN de ^{1}H (400
MHz, CDCl_{3}) \delta 7,44 (d, J =10 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 3
Hz, 1H), 6,73 (dd, 1H), 4,55 (s, 2H), 3,80 (s, 3H).
A una disolución agitada de
4-bromo-3-bromometilanisol
(35 g, 125 mmol) en DMSO anhidro (50 ml) y THF seco (50 ml) se le
añadió 4-trifluorometilbencilamina (30 g, 171 mmol),
seguida de trietilamina (18 ml, 129 mmol). Después de agitar
durante 18 h a temperatura ambiente la reacción se concentró, se
diluyó con NaOH acuoso 1 N (250 ml) y se extrajo con Et_{2}O (2 x
250 ml). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se
secaron (Na_{2}SO_{4}), y se concentraron hasta la sequedad. El
residuo que permaneció se purificó mediante cromatografía de
resolución rápida sobre gel de sílice (EtOAc del 10% al
20%/CHCl_{3}) para obtener el compuesto del título (34,17 g,
73%): TLC (EtOAc al 20%/CHCl_{3}) R_{f} 0,63; RMN de ^{1}H
(400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,49 (d, J
= 8,2 Hz, 2H), 7,43
(d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 6,70 (dd, 1H), 3,86 (s, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,79 (s, 3H), 1,75 (s a, 1 H).
(d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 6,70 (dd, 1H), 3,86 (s, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,79 (s, 3H), 1,75 (s a, 1 H).
A una disolución agitada de
3-[N-(4-trifluorometilbencil)aminometil]-4-bromoanisol
(34,17 g, 91 mmol) en THF seco (100 ml) se le añadió dicarbonato de
di-terc-butilo (22 g, 101 mmol). La reacción se agitó bajo
una atmósfera de argón durante 18 h (se observó una vigorosa
producción de gas). Una concentración y una cromatografía en gel de
sílice (EtOAc del 5% al 10%/hexano) produjo el compuesto del título
(41,09 g, 95%) como un aceite transparente: TLC (silice, EtOAc al
20%/hexano) R_{f} 0,44; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3})
\delta 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 2H),
7,39-7,33 (m, 2H), 6,83 y 6,72 (2 s, 1H), 6,71 (dd,
1 H), 4,54 y 4,50 (2 s, 2H), 4,43 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 1,47 (s,
9H).
Una disolución de
3-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4-trifluorometilbencil)-aminometil]-4-bromoanisol
(37,08 g, 78 mmol), acrilato de metilo (35 ml, 390 mmol), acetato
de paladio (0,88 g, 3,9 mmol),
tri-o-tolilfosfina (2,38 g, 7,8
mol), y diisopropiletilamina (31 ml, 178 mmol) en acetonitrilo (200
ml) se desoxigenó (3 x ciclos de evacuación/purga de argón), y
después se calentó a reflujo bajo una atmósfera de argón (baño de
aceite ajustado a 80ºC). Después de 6 h se añadió más acetato de
paladio (0,88 g, 3,9 mmol) y se añadió tri-o-tolilfosfina
(2,38 g, 7,8 mmol) y la reacción se agitó a reflujo durante 18 h
más. La reacción se concentró hasta la sequedad, y el residuo se
suspendió en Et_{2}O/éter de petróleo 1:1 (300 ml) y se dejó en
reposo durante 4 h. Un precipitado de color gris se separó mediante
filtración y se lavó con un pequeño volumen de Et_{2}O/éter de
petróleo 1:1 (100 ml). El filtrado de color rojo anaranjado se
concentró y se purificó mediante una cromatografía de resolución
rápida en gel de sílice (acetato de etilo al 15%/hexanos). El
residuo resultante se suspendió en hexano, la mezcla se dejó en
reposo durante varias horas, y después se filtró para eliminar un
precipitado amarillo. La concentración del filtrado produjo el
compuesto del título (34,52 g, 92%) como un aceite amarillo espeso:
TLC (silice, EtOAc al 20%/hexanos) R_{f} 0,45; RMN de ^{1}H (400
MHz, CDCl_{3}) \delta 7,80 (s a, 1H), 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 2H),
7,53 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,29 (s a, 2H), 6,83 (dd, 1H), 6,72 (s a,
1H), 6,23 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 4,58 y 4,53 (2 s a, 2H), 4,46 y
4,37 (2 s a, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 1,49 (s, 9H).
A Pd al 10%/C (5 g, 4,7 mmol, prehumedecido con
DMF) se le añadió una disolución de
2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4-trifluorometilbencil)aminometil]-4-metoxi-cinnamato
de metilo (34,52 g, 72 mmol) en metanol (100 ml). La mezcla se
agitó bajo una atmósfera de hidrógeno (3,4 x 10^{3} Pa) en un
aparato Parr durante 7 h, y después se filtró a través de un lecho
corto de Celite® para eliminar el catalizador. El filtrado se
concentró para dar el compuesto del título (34,15 g, 98%) en forma
de un aceite incoloro; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta
7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,31 (s a, 2H), 7,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H),
6,76 (dd, 1H), 6,66 (s, 1H), 4,47 (s a, 2H), 4,40 (s a, 2H), 3,76
(s, 3H), 3,63 (s, 3H), 2,79 (s a, 2H), 2,47 (t, 2H),1,48 (s,
9H).
A una disolución agitada de ácido
2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4-trifluorobencil)aminometil]-4-metoxidihidrocinnámico
(34,15 g, 71 mmol) en dioxano (150 ml) se le añadió NaOH acuoso 1 N
(85 ml, 85 mmol). La reacción turbia se agitó a temperatura
ambiente durante 4 h. La disolución homogénea resultante se
neutralizó con HCl acuoso 1 N (85 ml, 85 mmol) y se extrajo con
acetato de etilo (2 x 250 ml). Las capas orgánicas reunidas se
lavaron con salmuera (250 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se
concentraron para producir el compuesto del título (34,60 g, 100%)
como un aceite transparente espeso: TLC (CHCl_{3}/MeOH/HOAc
95:4:1) R_{f} 0,49; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta
7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,30 (s a, 2H), 7,09 (d, J = 8,4 Hz,1H),
6,78 (dd, 1H), 6,65 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,47 (s a, 2H), 4,42 (s a,
2H), 3,76 (s, 3H), 2,81 (s a, 2H), 2,53 (t, 2H), 1,47 (s, 9H).
A una disolución agitada de ácido
2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4
trifluorometil-bencil)aminometil]-4-metoxidihidrocinnámico
(34,60 g, 71 mmol) y piridina (6,9 ml, 85 mmol) en diclorometano
seco (200 ml) bajo una atmósfera de argón se le añadió fluoruro
cianúrico (4,4 ml, 48 mmol) mediante una jeringa. La reacción se
agitó durante 4 h a temperatura ambiente. La suspensión espesa
resultante se filtró a través de un lecho corto de Celite® y se
enjuagó con un pequeño volumen de diclorometano seco (50 ml). El
filtrado transparente se vertió en un embudo de separación y se
lavó con agua helada (500 ml). Un secado (MgSO_{4}) y una
concentración dejaron el fluoruro de ácido bruto (34,70 g, 100%)
que se utilizó sin mayor purificación.
A una disolución agitada de
(R)-4-bencil-2-oxazolidinona
(13,8 g, 78 mmol) en THF seco (300 ml) bajo una atmósfera de argón
a -78ºC se le añadió mediante una jeringa una disolución de
n-BuLi en hexanos (2,5 M, 30 ml, 75 mmol). La
reacción se agitó a -78ºC durante 15 min, y después se añadió
mediante una jeringa una disolución del anterior fluoruro de ácido
(34,70 g, 71 mmol) en THF seco (100 ml). La reacción se agitó
durante 1 h a -78ºC, después se extinguió con NH_{4}Cl saturado y
se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 ml). Las capas orgánicas
reunidas se lavaron con salmuera (400 ml), se secaron (MgSO_{4}),
y se concentraron hasta la sequedad. Una purificación mediante
cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice (acetato de
etilo al 20%/hexanos) produjo el compuesto del título (40,34 g,
90%) como un aceite transparente espeso: TLC (EtOAc al 20%/hexano)
R_{f} 0,21; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,58
(d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,33-7,26 (m, 5H), 7,16 (m,
3H), 6,77 (dd, 1H), 6,67 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,62 (m, 1H),
4,60-4,40 (m, 4H), 4,16 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,27
(dd, 1H), 3,21-3,10 (m, 2H), 2,88 (s a, 2H), 2,72
(dd, 1H), 1,48 (s, 9H).
A una disolución agitada de
(R)-4-bencil-2-oxazolidinonil-2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4-trifluorometilbencil)aminometil]-4-metoxidihidrocinnamida
(40,30 g, 64 mmol) en THF seco (300 ml) a -78ºC se le añadió una
disolución de bis(trimetilsilil)amida de litio (70
ml, 1 M en THF, 70 mmol) mediante una jeringa. Después de 30 min, se
añadió bromoacetato de metilo (30 ml, 317 mmol) mediante una
jeringa. Después de 30 min más a -78ºC se dejó que la reacción se
calentase hasta -20ºC y se agitó durante 6 h más. La reacción se
extinguió con NH_{4}Cl saturado (400 ml) y se extrajo con acetato
de etilo (2 x 200 ml). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con
salmuera (300 ml), se secaron (MgSO_{4}), y se concentraron hasta
la sequedad. Una purificación mediante cromatografía de resolución
rápida sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20%/hexanos)
produjo el compuesto del título (38,62 g, 86%) como un sólido
blanco: HPLC (Altex Ultrasphere^{TM}-Si 5u, EtOAc
al 20%/hexano) demostró que aproximadamente 20% de material de
partida no alquilado aún estaba presente. Una HPLC de la mezcla de
reacción bruta produjo un d.e. de 90% para la reacción; RMN de
^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 2H),
7,40-7,11 (m, 8H), 6,71 (dd, 1H), 6,63 (d, J = 2,7
Hz, 1H), 4,57-4,34 (m, 6H), 4,03 (d, J= 8,6 Hz, 1H),
3,85 (t, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), 3,28 (dd, 1 H), 2,90 (dd,
1 H), 2,86-2,71 (m, 2H), 2,70 (dd, 1H), 2,44 (m,
1H), 1,48 y 1,46 (2s, 9H).
A una disolución agitada de
(R)-4-bencil-2-oxazolidinonil-3-(2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(4-trifluorometilbencil)aminometil]-4-metoxifenil]-2(S)-metoxi-carbonilmetilpropionamida
(38,0 g, 54 mmol) en THF (300 ml) y agua (100 ml) se le añadió gota
a gota a 0ºC durante 30 min una disolución de H_{2}O_{2} al 30%
(18,9 ml) y LiOH \cdot H_{2}O (2,3 g, 55 mmol) en agua (62 ml).
La disolución turbia se agitó durante 1 h más a 0ºC. La disolución
homogénea resultante se trató lentamente con una disolución de
sulfito de sodio (34,3 g, 272 mmol) en agua (175 ml) a 0ºC, y
después se acidificó con una disolución helada de HCl concentrado
(35 ml) en agua (150 ml). La reacción se extrajo con acetato de
etilo (2 x 200 ml), y las capas orgánicas reunidas se lavaron con
salmuera (400 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron hasta
la sequedad. El residuo resultante se trató con HCl 4,0 M en dioxano
(400 ml) con agitación a temperatura ambiente (se observó una lenta
producción de gas). Después de 1 h, la reacción se concentró y se
reconcentró en CHCl_{3}/tolueno 1:1 (2 x), y después el residuo
(37,65 g) se suspendió en DMF seco (400 ml). A esta disolución con
agitación bajo una atmósfera de argón a 0ºC en un matraz Dewar se le
añadió trietilamina (15,3 ml, 109 mmol) y NaHCO_{3} (22,9 g, 273
mmol), seguido de difenilfosforil azida (13 ml, 60 mmol). Después
de agitar durante 24 h a 0ºC, la reacción se concentró hasta la
sequedad. El residuo se suspendió en acetato de etilo (400 ml), y
se lavó secuencialmente con agua (300 ml) y salmuera (300 ml). Un
secado (MgSO_{4}), una concentración y una cromatografía de
resolución rápida en gel de sílice (acetato de etilo al 35%/hexanos)
produjo el compuesto del título (16,87 g, 74%) como un aceite
espeso transparente: TLC (EtOAc al 40%/hexano) R_{f} 0,50; MS
(ES) m/e 422,3 (M + H)^{+}; RMN de ^{1}H (400 MHz,
CDCl_{3}) \delta 7,52 (d, J = 8,1, 2H), 7,29 (d, J = 8,1 Hz,
2H), 7,02 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,75 (dd, 1H), 6,36
(d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,18 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,87 (m, 1H), 3,74 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H), 3,02 (dd, 1H), 2,95 (dd,1H), 2,48 (dd, 1H).
(d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,18 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 3,87 (m, 1H), 3,74 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H), 3,02 (dd, 1H), 2,95 (dd,1H), 2,48 (dd, 1H).
Una disolución de tribromuro de boro en
CH_{2}Cl_{2} (1,0 M, 160 ml, 160 mmol) se añadió gota a gota a
lo largo de 30 min a una disolución de
(S)-8-metoxi-3-oxo-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (16,67 g, 39,6 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (150 ml)
a -20ºC bajo una atmósfera de argón. Después de 1,5 h más de -15ºC
a -20ºC, la reacción se volvió a enfriar hasta -20ºC y se extinguió
mediante la adición cuidadosa gota a gota de MeOH (160 ml). La
reacción se agitó de -10ºC a 0ºC durante 1 h, y después se concentró
en un rotavapor. El residuo se reconcentró en MeOH (2 x). Una
purificación mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel
de sílice (acetato de etilo del 50% al 100%/hexanos) produjo el
compuesto del título (14,87 g, 92%) como un sólido blanco:
[\alpha]_{D} -81,8º (c, 1,0, MeOH); TLC (silice, EtOAc al
50%/hexano) R_{f} 0,54; MS (ES) m/e 408,2 (M + H)^{+};
RMN de ^{1}H (400, CDCl_{3} + DMSO-d_{6} al
2%) \delta 7,53 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 2H),
6,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,70 (dd, 1H), 6,41 (d, J = 2,3 Hz, 1H),
5,16 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,01 (d, J =15,6 Hz, 1H), 4,39 (d, J =
15,6 Hz, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,73 (d, J =16,4 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H),
3,01 (dd, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 2,47 (dd, 1H).
Preparación
19
El
(\pm)-8-metoxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de metilo se resolvió en sus enantiómeros mediante HPLC quiral
utilizando las siguientes condiciones: columna Diacel Chiralcel OJ®
(21,2 x 250 mm), fase móvil de metanol, caudal de 15 ml/min,
detección de uv a 295 nm, inyección de 400 mg; t_{R} para el
(R)-(+)-8-metoxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de metilo = 4,9 min; t_{R} para el
(S)-(-)-8-metoxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de metilo = 6,6 min.
Preparación
20
El
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de metilo se resolvió en sus enantiómeros mediante HPLC quiral
utilizando las siguientes condiciones: columna Diacel Chiralcel OD®
(21,2 x 250 mm), fase móvil de etanol al 20% en hexano, caudal de 10
ml/min, detección de uv a 254 nm, inyección de 100 mg; t_{R} para
el
(R)-(+)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de metilo = 14,4 min; t_{R} para el
(S)-(-)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de
metilo = 18,5 min.
metilo = 18,5 min.
Preparación
21
A una disolución agitada de
4-bromo-3-metilanisol
(100 g, 497 mmol) en diclorometano seco (500 ml) se le añadió
N-bromosuccinimida (97 g, 545 mmol), seguido de
peróxido de benzoílo (6 g, 25 mmol). La reacción se sometió a un
reflujo suave con una lampara de inundación de 150 vatios con el
reflector colocado aproximadamente a 300 milímetros del matraz de
reacción. Después de 24 h la reacción se concentró mediante
evaporación rotatoria hasta la mitad de su volumen y se dejó en
reposo durante 4 h. El precipitado blanco que se formó se retiró
mediante filtración y se enjuagó con un pequeño volumen de
diclorometano. El filtrado se concentró hasta la sequedad y el
sólido remanente se trituró con hexanos y se filtró. Un secado al
vacío produjo el compuesto del título (100,25 g, 72%) como agujas
blancas. GC t_{R} = 6,56 min (columna de metilsilicona HP 530 µm
x 20 m, flujo del vehículo de He 20 ml/min, temperatura inicial
100ºC, tiempo inicial 1 min, velocidad 10ºC/min, temperatura final
200ºC, tiempo final 1 min); RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3})
\delta 7,44 (d, J =10 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 3 Hz, 1H), 6,73 (dd,
1H), 4,55 (s, 2H), 3,80
(s, 3H).
(s, 3H).
Se añadió
2,2,2-trifluoroetilamina (24 g, 242 mmol)
rápidamente a una disolución agitada de
4-bromo-3-bromometilanisol
(33,6 g, 120 mmol) en DMSO anhidro (125 ml) a temperatura ambiente.
La reacción se calentó hasta aproximadamente 30 - 35ºC. Después de
agitar durante 18 h, la reacción se diluyó NaOH 1 N enfriado en
hielo (200 ml) y se extrajo con Et_{2}O (2 x 300 ml). Las capas
orgánicas reunidas se lavaron con salmuera (300 ml), se secaron
(MgSO_{4}), y se concentraron para producir el compuesto del
título (41,35 g, 96%) como un aceite de color amarillo pálido: TLC
(tolueno) R_{f} 0,32; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3})
\delta 7,43 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 3 Hz, 1H), 6,71 (dd,
1H), 3,93 (s a, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,18 (m, 2H), 1,86 (s a, 1H).
A
3-[N-(2,2,2-trifluoroetil)aminometil]-4-bromoanisol
(41,35 g, 137 mmol) se le añadió dicarbonato de
di-terc-butilo (36 g, 165 mmol, licuado mediante
calentamiento en un baño de agua caliente). La reacción se enjuagó
con una pequeña cantidad de diclorometano (aproximadamente 20 ml) y
se agitó bajo una atmósfera de argón en un baño de aceite de 50ºC
durante 18 h (se observó una lenta producción de gas). Después de
una concentración mediante evaporación rotatoria al vacío, el
residuo resultante se diluyó con hexanos (100 ml) y la disolución se
sembró con una pequeña cantidad del producto sólido puro (obtenido
de una reacción previa mediante una cromatografía en gel de sílice
utilizando EtOAc al 10%/hexanos como eluyente). Se dejó la mezcla en
reposo a temperatura ambiente durante varias horas, y después se
colocó en la nevera durante la noche. El producto se recogió
mediante filtración con succión y se lavó con hexanos. Un secado al
vacío produjo el compuesto del título (48,54 g, 88%) como un sólido
incoloro: TLC (EtOAc al 10%/tolueno) R_{f} 0,52; RMN de ^{1}H
(400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,44 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,75 (dd,
1H), 6,71 (s, 1H), 4,65 y 4,58 (2s, 2H), 3,90 y 3,78 (2m, 2H), 3,77
(s, 3H), 1,51 y 1,42 (2s, 9H).
Una disolución de
3-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)aminometil]-4-bromoanisol
(48,19 g, 121
mmol), acrilato de metilo (55 ml, 605 mmol), acetato de paladio (1,36 g, 6,1 mmol), tri-o-tolilfosfina (3,69 g, 12 mol), y diisopropiletilamina (49 ml, 278 mmol) en acetonitrilo (200 ml) se desoxigenó (3 x ciclos de evacuación/purga de argón), y después se calentó a reflujo bajo una atmósfera de argón en un baño de aceite ajustado a 80ºC. Después de 6 h se añadió más acetato de paladio (1,36 g, 6,1 mmol) y tri-o-tolilfosfina (3,69 g, 12 mmol) y la reacción se agitó a reflujo durante 18 h más. La reacción se concentró hasta la sequedad, y el residuo se suspendió en Et_{2}O/éter de petróleo 1:1 (300 ml) y se dejó en reposo durante 4 h. Un precipitado de color gris se separó mediante filtración y se lavó con un pequeño volumen de Et_{2}O/éter de petróleo 1:1 (aproximadamente 100 ml). El filtrado de color rojo anaranjado se concentró y se purificó mediante una cromatografía de resolución rápida en gel de sílice (acetato de etilo al 15%/hexanos). El residuo resultante se suspendió en hexano, la mezcla se dejó en reposo durante 2 horas, y después se filtró para eliminar un precipitado amarillo. La concentración del filtrado produjo el compuesto del título (45,85 g, 94%) como un aceite amarillo: TLC (EtOAc al 20%/hexano) R_{f} 0,50; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,84 (d, J = 16 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,86 (dd, 1H), 6,74 y 6,72 (2s, 1H), 6,26 (d, J = 16 Hz, 1H), 4,74 y 4,70 (2s, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,80 y 3,66 (2m, 2H), 1,51 y 1,45 (2s, 9H).
mmol), acrilato de metilo (55 ml, 605 mmol), acetato de paladio (1,36 g, 6,1 mmol), tri-o-tolilfosfina (3,69 g, 12 mol), y diisopropiletilamina (49 ml, 278 mmol) en acetonitrilo (200 ml) se desoxigenó (3 x ciclos de evacuación/purga de argón), y después se calentó a reflujo bajo una atmósfera de argón en un baño de aceite ajustado a 80ºC. Después de 6 h se añadió más acetato de paladio (1,36 g, 6,1 mmol) y tri-o-tolilfosfina (3,69 g, 12 mmol) y la reacción se agitó a reflujo durante 18 h más. La reacción se concentró hasta la sequedad, y el residuo se suspendió en Et_{2}O/éter de petróleo 1:1 (300 ml) y se dejó en reposo durante 4 h. Un precipitado de color gris se separó mediante filtración y se lavó con un pequeño volumen de Et_{2}O/éter de petróleo 1:1 (aproximadamente 100 ml). El filtrado de color rojo anaranjado se concentró y se purificó mediante una cromatografía de resolución rápida en gel de sílice (acetato de etilo al 15%/hexanos). El residuo resultante se suspendió en hexano, la mezcla se dejó en reposo durante 2 horas, y después se filtró para eliminar un precipitado amarillo. La concentración del filtrado produjo el compuesto del título (45,85 g, 94%) como un aceite amarillo: TLC (EtOAc al 20%/hexano) R_{f} 0,50; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,84 (d, J = 16 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,86 (dd, 1H), 6,74 y 6,72 (2s, 1H), 6,26 (d, J = 16 Hz, 1H), 4,74 y 4,70 (2s, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,80 y 3,66 (2m, 2H), 1,51 y 1,45 (2s, 9H).
A Pd al 10%/C (5 g, 4,7 mmol, prehumedecido con
DMF) se le añadió una disolución de
2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil-4-metoxi-cinnamato
de metilo (45,85 g, 113 mmol) en metanol (100 ml). La mezcla se
agitó bajo una atmósfera de hidrógeno (3,4 x 10^{5} Pa) en un
aparato Parr durante 6 h, y después se filtró a través de un lecho
corto de Celite® para eliminar el catalizador. El filtrado se
concentró para producir el compuesto del título (43,71 g, 95%) como
de un aceite incoloro: RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta
7,11 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,78 (dd, 1H), 6,65 (s, 1H), 4,63 y 4,60
(2s, 2H), 3,84 y 3,70 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 2,86 (t,
2H), 2,53 (t, 2H), 1,50 y 1,44 (2s, 9H).
A una disolución agitada de
2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)-aminometil]-4-metoxidihidrocinnamato
de metilo (43,71 g, 108 mmol) en dioxano (200 ml) se le añadió NaOH
acuoso 1 N (130 ml, 130 mmol). La reacción turbia se agitó a
temperatura ambiente durante 4 h. La disolución homogénea resultante
se neutralizó con HCl 1 N (130 ml, 130 mmol) y se extrajo con
acetato de etilo (2 x 250 ml). Las capas orgánicas reunidas se
lavaron con
salmuera (250 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron para producir el compuesto del título (45,01 g, 100%) como un aceite transparente espeso: TLC (CHCl_{3}/MeOH/HOAc 95:4:1) R_{f} 0,49.
salmuera (250 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron para producir el compuesto del título (45,01 g, 100%) como un aceite transparente espeso: TLC (CHCl_{3}/MeOH/HOAc 95:4:1) R_{f} 0,49.
A una disolución agitada de ácido
2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)aminometil]-4-metoxidihidrocinnámico
(45,0 g, 108 mmol) y piridina (10 ml, 124 mmol) en diclorometano
seco (400 ml) bajo una atmósfera de argón se le añadió fluoruro
cianúrico (6,8 ml, 74 mmol) mediante una jeringa. La reacción se
agitó durante 4 h a temperatura ambiente. La suspensión espesa
resultante se filtró a través de un lecho corto de Celite® y el
lecho corto del filtro se enjuagó con un pequeño volumen de
diclorometano seco (50 ml). El filtrado transparente se vertió en
un embudo de separación y se lavó con agua helada (750 ml). Un
secado (MgSO_{4}) y una concentración dejaron el fluoruro de
ácido bruto (43,32 g, 100%) que se utilizó sin mayor
purificación.
A una disolución agitada de
(R)-4-bencil-2-oxazolidinona
(21 g, 119 mmol) en THF seco (400 ml) bajo una atmósfera de argón a
-78ºC se le añadió mediante una jeringa una disolución de
n-BuLi en hexanos (2,5 M, 113 mmol). La reacción se
agitó a -78ºC durante 15 min, y después se añadió mediante una
jeringa una disolución del anterior fluoruro de ácido (43,32 g, 108
mmol) en THF seco (100 ml). La reacción se agitó durante 1 h a
-78ºC, después se extinguió con NH_{4}Cl saturado y se extrajo
con acetato de etilo (2 x 250 ml). Las capas orgánicas reunidas se
lavaron con salmuera (500 ml), se secaron (MgSO_{4}), y se
concentraron hasta la sequedad. Una purificación mediante
cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice (acetato de
etilo al 20%/hexanos) produjo el compuesto del título (55,27 g,
91%) como un aceite transparente espeso: TLC (silice, EtOAc al
20%/hexano) R_{f} 0,24; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3})
\delta 7,34-7,26 (m, 3H),
7,19-7,16 (m, 3H), 6,78 (dd, 1H), 6,67 (s, 1H),
4,68-4,63 (m, 3H), 4,21-4,11 (m,
2H), 3,87 y 3,74 (2m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,28 (dd, 1H), 3,17 (m,
2H), 2,93 (m, 2H), 2,75 (dd, 1H), 1,50 y 1,45 (2s, 9H).
A una disolución agitada de
(R)-4-bencil-2-oxazolidinonil-2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)aminometil]-4-metoxidihidrocinnamida
(55,2 g, 100 mmol) en THF seco (300 ml) a -78ºC se le añadió una
disolución de bis(trimetilsilil)amida de litio (115
ml, 1 M en THF, 115 mmol) mediante una jeringa. Después de 30 min,
se añadió bromoacetato de metilo (47 ml, 497 mmol) mediante una
jeringa. Después de 30 min más a -78ºC se dejó que la reacción se
calentase hasta -20ºC y se agitó durante 6 h más. La reacción se
extinguió con NH_{4}Cl saturado (400 ml) y se extrajo con acetato
de etilo (2 x 250 ml). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con
salmuera (400 ml), se secaron (MgSO_{4}), y se concentraron hasta
la sequedad. Una purificación mediante cromatografía de resolución
rápida sobre gel de sílice (acetato de etilo al 20%/hexanos)
produjo el compuesto del título (52,44 g, 75%) como un sólido
blanco: HPLC (Altex Ultrasphere^{TM}-Si 5u, EtOAc
al 20%/hexano) demostró que aproximadamente 6-7% de
material de partida no alquilado aún estaba presente. Una HPLC de la
mezcla de reacción bruta produjo un d.e. de 86% para la reacción;
RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta
7,35-7,13 (m, 6H), 6,73 (dd, 1H), 6,64 (s, 1H),
4,69-4,53 (m, 4H), 4,04 (d, 1H), 3,87 (t, 1H),
3,85-3,72 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,64 (s, 3H), 3,31
(dd, 1H), 2,95 (dd, 1H), 2,92-2,71 (m, 2H), 2,71
(dd, 1H), 2,50 (m, 1H), 1,50 y 1,47 (2 s a, 9H).
A una disolución agitada de
(R)-4-bencil-2-oxazolidinonil-3-[2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)
aminometil]-4-metoxifenil]-2(S)-metoxicarbonil-metilpropionamida (52,40 g, 75 mmol) en THF (300 ml) y agua (100 ml) se le añadió gota a gota a 0ºC durante 30 min una disolución de H_{2}O_{2} al 30% (26 ml) y LiOH \cdot H_{2}O (3,2 g, 75 mmol) en agua (85 ml). La disolución turbia se agitó durante 1 h más a 0ºC. La disolución homogénea resultante se trató lentamente con una disolución de sulfito de sodio (46 g, 365 mmol) en agua (240 ml) a 0ºC, y después se acidificó con una disolución helada de HCl concentrado (45 ml) en agua (200 ml). La reacción se extrajo con acetato de etilo (2 x 300 ml), y las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera (600 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron hasta la sequedad. El residuo resultante se trató con HCl 4,0 M en dioxano (500 ml) con agitación a temperatura ambiente (se observó una lenta producción de gas). Después de 1 h, la reacción se concentró y se reconcentró en CHCl_{3}/tolueno 1:1 (2 x), y después el residuo (48,89 g) se suspendió en DMF seco (500 ml). A esta disolución con agitación bajo una atmósfera de argón a 0ºC en un matraz Dewar se le añadió trietilamina (21 ml, 150 mmol) y NaHCO_{3} (31,5 g, 375 mmol), seguido de difenilfosforil azida (18 ml, 83,5 mmol). Después de agitar durante 24 h a 0ºC, la reacción se concentró hasta la sequedad. El residuo se suspendió en acetato de etilo (500 ml), y se lavó secuencialmente con agua (400 ml) y salmuera (400 ml). Un secado (MgSO_{4}), una concentración y una cromatografía de resolución rápida en gel de sílice (acetato de etilo al 30%/hexanos) produjo el compuesto del título (21,81 g, 84%) como un sólido blanco: [\alpha]_{D} -132,6º (c, 1,0, MeOH); TLC (EtOAc al 40%/hexano) R_{f} 0,56; HPLC quiral (Chiracel OD, EtOH al 20%/hexano) k' = 2,05; el enantiómero opuesto de una mezcla racémica convencional tiene k' = 1,86 (no se detectó); MS (ES) m/e 346,2 (M + H)^{+}; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,79 (dd, 1H), 6,61 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 4,17 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 3,99 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,01 (m, 2H), 2,91 (dd,1H), 2,47 (dd, 1H). Anal. calculado para C_{16}H_{18}F_{3}NO_{4}: C, 55,65; H, 5,25; N, 4,06. Encontrado: C, 55,62; H, 5,27; N, 4,04.
aminometil]-4-metoxifenil]-2(S)-metoxicarbonil-metilpropionamida (52,40 g, 75 mmol) en THF (300 ml) y agua (100 ml) se le añadió gota a gota a 0ºC durante 30 min una disolución de H_{2}O_{2} al 30% (26 ml) y LiOH \cdot H_{2}O (3,2 g, 75 mmol) en agua (85 ml). La disolución turbia se agitó durante 1 h más a 0ºC. La disolución homogénea resultante se trató lentamente con una disolución de sulfito de sodio (46 g, 365 mmol) en agua (240 ml) a 0ºC, y después se acidificó con una disolución helada de HCl concentrado (45 ml) en agua (200 ml). La reacción se extrajo con acetato de etilo (2 x 300 ml), y las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera (600 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron hasta la sequedad. El residuo resultante se trató con HCl 4,0 M en dioxano (500 ml) con agitación a temperatura ambiente (se observó una lenta producción de gas). Después de 1 h, la reacción se concentró y se reconcentró en CHCl_{3}/tolueno 1:1 (2 x), y después el residuo (48,89 g) se suspendió en DMF seco (500 ml). A esta disolución con agitación bajo una atmósfera de argón a 0ºC en un matraz Dewar se le añadió trietilamina (21 ml, 150 mmol) y NaHCO_{3} (31,5 g, 375 mmol), seguido de difenilfosforil azida (18 ml, 83,5 mmol). Después de agitar durante 24 h a 0ºC, la reacción se concentró hasta la sequedad. El residuo se suspendió en acetato de etilo (500 ml), y se lavó secuencialmente con agua (400 ml) y salmuera (400 ml). Un secado (MgSO_{4}), una concentración y una cromatografía de resolución rápida en gel de sílice (acetato de etilo al 30%/hexanos) produjo el compuesto del título (21,81 g, 84%) como un sólido blanco: [\alpha]_{D} -132,6º (c, 1,0, MeOH); TLC (EtOAc al 40%/hexano) R_{f} 0,56; HPLC quiral (Chiracel OD, EtOH al 20%/hexano) k' = 2,05; el enantiómero opuesto de una mezcla racémica convencional tiene k' = 1,86 (no se detectó); MS (ES) m/e 346,2 (M + H)^{+}; RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,79 (dd, 1H), 6,61 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 4,17 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 3,99 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,01 (m, 2H), 2,91 (dd,1H), 2,47 (dd, 1H). Anal. calculado para C_{16}H_{18}F_{3}NO_{4}: C, 55,65; H, 5,25; N, 4,06. Encontrado: C, 55,62; H, 5,27; N, 4,04.
Una disolución de tribromuro de boro en
CH_{2}Cl_{2} (1,0 M, 250 ml, 250 mmol) se añadió gota a gota a
lo largo de 30 min a una disolución de
(S)-8-metoxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (21,5 g, 62,3 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (230 ml) a
-20ºC bajo una atmósfera de argón. Después de 1,5 h más de -15ºC a
-20ºC, la reacción se volvió a enfriar hasta -20ºC y se extinguió
mediante la adición cuidadosa gota a gota de MeOH (250 ml). La
reacción se agitó de -10ºC a 0ºC durante 1 h, y después se concentró
en un rotavapor. El residuo se reconcentró en MeOH (2 x). Una
purificación mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel
de sílice (acetato de etilo al 50%/hexanos) produjo el compuesto del
título (19,38 g, 94%) como un sólido blanco:
[\alpha]_{D} -130,5º (c, 1,0, MeOH); TLC (silice, EtOAc
al 40%/hexano) R_{f} 0,40; MS (ES) m/e 332,1 (M +
H)^{+}; RMN de ^{1}H (400, CDCl_{3} +
DMSO-d_{6} al 2%) \delta 6,92 (d, J = 8,3 Hz,
1H), 6,71 (dd, 1H), 6,58 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 16,7 Hz,
1H), 4,21 - 3,98 (m, 2H), 3,96 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 3,82 (m, 1H),
3,68 (s, 3H), 2,98 (dd, 1H), 2,94 (dd, 1H), 2,83 (dd, 1H), 2,46 (dd,
1H). Anal. calculado para C_{15}H_{16}F_{3}NO_{4}: C,
54,38; H, 4,87; N, 4,23. Encontrado: C, 54,40; H, 4,96; N,
4,22.
Preparación
22
Se añadió 2-fenetilamina (19,0
ml, 150 mmol) de una vez a una disolución de
4-bromo-3-bromometilanisol
(14,0 g, 50,0 mmol) en TMF anhidro (200 ml) a temperatura ambiente.
Después de 18 h la mezcla se concentró. El residuo se disolvió en
NaOH 2 M (300 ml) y se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 200 ml).
Las capas de CH_{2}Cl_{2} reunidas se secaron sobre MgSO_{4}
y se concentraron. El material bruto se filtró a través de un lecho
corto de gel de sílice utilizando EtOAc al 50%/hexanos como
eluyente. El filtrado se concenetró a presión reducida para
producir un aceite amarillo: MS (ES) m/e 320 (M +
H)^{+}.
El aceite amarillo anterior se disolvió en THF
anhidro (200 ml) y se añadió dicarbonato de di-terc-butilo
(13,0 g, 60,0 mmol) de una vez a temperatura ambiente. Después de 1
h la disolución se concentró. Una cromatografía de resolución
rápida en gel de sílice (EtOAc al 10%/hexanos) produjo el compuesto
del título como un sólido blancuzco (20,8 g, 100% a partir de
4-bromo-3-bromometilanisol):
RMN de ^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta
7,51-7,10 (m, 6H), 6,85-6,60 (m,
2H), 4,52-4,33 (m, 2H), 3,71 (s, 3H),
3,52-3,31 (m, 2H), 2,92-2,73 (m,
2H), 1,61-1,33 (m, 9H).
Una disolución de
3-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2-feniletil)amino]metil-4-bromoanisol
(20,0 g, 48,0 mmol), acrilato de bencilo (23,0 g, 144 mmol),
acetato de paladio (540 mg, 2,40 mmol), tri-o-tolilfosfina
(1,46 mg, 4,80 mol), y diisopropiletilamina (17,0 ml, 96,0 mmol) en
propionitrilo (250 ml) se desoxigenó (3 x ciclos de
evacuación/purga de argón), y después se calentó a reflujo bajo una
atmósfera de argón. Después de 48 h la reacción se enfrió hasta la
temperatura ambiente, se filtró a través de un lecho corto de
Celite®, y se concentró. Una cromatografía de resolución rápida en
gel de sílice (EtOAc al 10%/hexano) produjo un aceite amarillo, que
se disolvió en EtOAc al 10%/hexanos (100 ml) y se dejó a 4ºC durante
72 h. El precipitado amarillo se retiró mediante filtración, y
después la disolución se concentró para producir un aceite de color
amarillo pálido (14,98 g, 62%): RMN de ^{1}H (250 MHz,
CDCl_{3}) \delta 8,00-7,85 (m, 1H),
7,61-7,01 (m, 11H), 6,85-6,76 (m,
2H), 6,75-6,67 (m, 1H), 6,32 (m, 1H), 5,22 (s, 2H),
4,60-4,41 (m, 2H), 3,75 (s, 3H),
3,52-3,20 (m, 2H), 2,93-2,71 (m,
2H), 1,55-1,33 (m, 9H).
El aceite anterior se disolvió en MeOH (150 ml),
y se añadió Pd al 10%/C (6,40 g, 6,00 mmol) a 0ºC. La mezcla se
calentó hasta la temperatura ambiente, se agitó bajo una atmósfera
de hidrógeno (3,4 x 10^{5} Pa) durante 7 h, y después se filtró a
través de un lecho corto de Celite® para eliminar el catalizador. El
filtrado se concentró a presión reducica para producir el compuesto
del título como un aceite amarillo espeso (10,35 g, 83%): RMN de
^{1}H (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,35-7,02 (m,
6H), 6,85-6,76 (m, 2H), 6,75-6,73
(m, 1H), 6,69-6,68 (m, 1H),
4,42-4,25 (m, 2H), 3,73 (s, 3H),
3,44-3,25 (m, 2H), 2,92-2,73 (m,
4H), 2,59-2,50 (m, 2H), 1,60-1,33
(m, 9H).
A una disolución de ácido
4-[2-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-(2-feniletil)amino]-metil-4-metoxifenil]propiónico
(10,35 g, 25,0 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (125 ml) se le añadió piridina (2,4 ml, 30,0 mmol) y después fluoruro cianúrico (1,4 ml, 15,0 mmol) a temperatura ambiente. Después de 2 h la mezcla se filtró a través de un lecho corto de Celite®, se lavó con H_{2}O fría (100 ml), después con salmuera (100 ml), se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró.
(10,35 g, 25,0 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (125 ml) se le añadió piridina (2,4 ml, 30,0 mmol) y después fluoruro cianúrico (1,4 ml, 15,0 mmol) a temperatura ambiente. Después de 2 h la mezcla se filtró a través de un lecho corto de Celite®, se lavó con H_{2}O fría (100 ml), después con salmuera (100 ml), se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró.
A una disolución de
(R)-4-bencil-2-oxazolidinona
(5,30 g, 30,0 mmol) en THF anhidro (125 ml) se le añadió
n-BuLi (11,0 ml, disolución 2,5 M en hexanos, 27,5 mmol) a
-78ºC. Después de 15 minutos el anterior fluoruro de ácido en THF
anhidro (25 ml) se añadió gota a gota durante 5 minutos. Después de
1 h la mezcla se vertió en 300 ml de H_{2}O y se extrajo con
EtOAc (3 x 200 ml). Las capas de EtOAc reunidas se secaron sobre
MgSO_{4} y se concentraron. Una cromatografía de resolución
rápida en gel de sílice (EtOAc al 30%/hexanos) produjo el compuesto
del título como un aceite espeso (12,12 g, 85%): RMN de ^{1}H (250
MHz, CDCl_{3}) \delta 7,41-7,12 (m, 11H), 6,65
(m, 1H), 6,60 (m, 1H), 4,70-4,62 (m, 1H),
4,50-4,35 (m, 2H), 4,21-4,10 (m,
2H), 3,71 (s, 3H), 3,50-2,61 (m, 10H),
1,55-1,41 (m, 9H).
A una disolución de
[[5-metoxi-2-[3-oxo-3-[2-oxo-4-(fenilmetil)-3-oxazolidinil]-propil)fenil]metil]-(2-feniletil)carbamato
de (R)-1,1-dimetiletilo (12,12 g,
21,0 mmol) en THF anhidro (100 ml) se le añadió
bis(trimetilsilil)amida de litio (22,0 ml, 1 M en
THF, 22,0 mmol) a -78ºC. Después de 15 minutos se añadió
bromoacetato de metilo (9,9 ml, 105 mmol) y después la mezcla se
calentó hasta -20ºC. Después de 3 h la mezcla se vertió en 200 ml
de H_{2}O y se extrajo con EtOAc (3 x 500 ml). Las capas de EtOAc
reunidas se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron. Una
cromatografía de resolución rápida en gel de sílice (EtOAc al
25%/hexanos) produjo 9,91 g de una mezcla 3:2 (HPLC, EtOAc al
20%/hexanos) del compuesto del título y
[[5-metoxi-2-[3-oxo-3-[2-oxo-4-(fenilmetil)-3-oxazolidinil]propil]fenil]metil]-(2-feniletil)carbamato
de (R)-1,1-dimetiletilo,
respectivamente. Este mezcla se usó sin mayor purificación. MS (ES)
m/e 667 (M + Na)^{+}.
A una disolución de
\beta-[[4-metoxi-2-[[[(1,1-dimetiletoxi)carbonil]-(2-feniletil)-amino]metil]fenil]metil]-\gamma-oxo-4-(fenilmetil)-3-oxazolidinbutanoato
de [R-(R*,S*)]-metilo (9,91 g, 15,4 mmol) en THF (75
ml) se le añadió una disolución de hidróxido de litio monohidrato
(646 mg, 15,4 mmol) y H_{2}O_{2} (5,2 ml, 30% en H_{2}O, 46,2
mmol) en H_{2}O (25 ml) a 0ºC a lo largo de 10 minutos. Después
de 1,5 h se añadió una disolución de Na_{2}SO_{3} (9,7 g, 77
mmol) en H_{2}O (100 ml). La mezcla se acidificó hasta pH 4
utilizando HCl 2 M y se extrajo con EtOAc (3 x 200 ml). Las capas de
EtOAc reunidas se secaron sobre MgSO_{4} y se concentraron. El
residuo resultante se disolvió en HCl 4,0 M en dioxano (75 ml).
Después de 45 minutos la mezcla se concentró y después se
reconcentró en tolueno (200 ml).
El anterior residuo se disolvió en DMF anhidra
(75 ml). A esta disolución se le añadió NaHCO_{3} (6,50 g, 77,0
mmol) y trietilamina (4,3 ml, 30,8 mmol) a temperatura ambiente. La
mezcla se enfrió hasta 0ºC y se añadió difenilfosforil azida (5 ml,
23,1 mmol). Después de 16 h la mezcla se concentró. La pasta
resultante se disolvió en EtOAc (500 ml), se lavó con H_{2}O (2 x
300 ml), se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró. Una cromatografía
de resolución rápida en gel de sílice (EtOAc al 40%/hexanos)
produjo el compuesto del título (2,61 g, 33% a partir de
\beta-[[4-metoxi-2-[[[(1,1-dimetiletoxi)-carbonil]-(2-feniletil)amino]metil]fenil]metil]-\gamma-oxo-4-(fenilmetil)-3-oxazolidin-butanoato
de [R-(R*,S*)]-metilo como un aceite transparente:
MS (ES) m/e 390 (M + Na)^{+}.
A una disolucón de
(S)-8-metoxi-3-oxo-2-(2-feniletil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (2,61 g, 7,1 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (40 ml) se le
añadió BBr_{3} (21,3 ml, 1 M en CH_{2}Cl_{2}, 21,3 mmol) a
-20ºC. Después de 45 minutos la mezcla se extinguió con MeOH (200
ml) y se concentró. El residuo se filtró a través de un lecho corto
de gel de sílice utilizando EtOAc al 50%/hexanos como eluyente. El
sólido naranja resultante se recristalizó en MeOH/H_{2}O para
producir el compuesto del título como un sólido blancuzco (2,16 g,
81%): MS (ES) m/e 376 (M + Na)^{+}.
Una disolución de
2-[(3-hidroxipropil)amino]piridin-N-óxido
(1,4 g, 8 mmol) en DMF anhidro (8 ml) se añadió gota a gota a una
disolución de
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (1,7 g, 7 mmol), trifenilfosfina (2,76 g, 11 mmol), y
azodicarboxilato de dietilo (2,33 ml, 14 mmol) en DMF anhidro (4
ml) y THF seco (10 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de
argón. La disolución resultante se agitó durante 18 h, y después se
concentró al vacío. Una cromatografía en gel de sílice (CH_{3}OH
al 2%-10%/CH_{2}Cl_{2}) produjo el compuesto del título (1,2
g): MS (ES) m/e 400,2 (M + H)^{+}. También se recuperó
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo sin reaccionar (0,4 g).
Una mezcla de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (1,2 g, 3 mmol), 1,2 g de paladio al 10% sobre carbón
(1,2 g), ciclohexeno (3 ml, 15 mmol), y etanol (20 ml) se calentó a
reflujo durante 18 h. La mezcla se filtró y el filtrado se
concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel
de sílice (CH_{3}OH al 2%-5%/CH_{2}Cl_{2}) para producir el
compuesto del título (0,72 g, 64%) como una espuma blanca: MS (ES)
m/e 398,2 (M + H)^{+}.
Una mezcla de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo (0,7 g, 2 mmol), hidróxido de litio monohidrato (0,12 g, 3
mmol), 5 ml de THF (5 ml), H_{2}O (5 ml), y MeOH (2 ml) se agitó
a temperatura ambiente durante 18 h, y después se concentró. El
residuo se repartió entre agua y acetato de etilo y las capas se
separaron. La fase acuosa se llevó cuidadosamente hasta pH 4 con HCl
3 N y se dejó en reposo. Los cristales resultantes se recogieron
mediante filtración y se secaron para producir el compuesto del
título (0,4 g, 65%) como un sólido de color tostado: MS m/e 370,4 (M
+ H)^{+}. Anal. calculado para
C_{20}H_{23}N_{3}O_{4} \cdot 0,25 H_{2}O: C, 64,25; H,
6,34; N, 11,24. Encontrado: C, 64,02; H, 6,37; N, 11,20.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-[(3-hidroxipropil)amino]-4-nitropiridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]-piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como una espuma de color
naranja: MS (ES) m/e 445,2 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[2-(4-nitro-N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como una espuma
blanca: MS (ES) m/e 399,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[(4-amino-2-piridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco:
MS (ES) m/e 385,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{20}H_{24}N_{4}O_{4} \cdot 1,25 H_{2}O: C, 59,03; H,
6,56; N, 13,76. Encontrado: C, 58,80; H, 6,49; N, 13,62.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-[(3-hidroxipropil-4-propil)amino]-4-metoxipiridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)-amino]piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como un aceite incoloro: MS (ES)
m/e 430,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[2-(4-metoxi-N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como un aceite
amarillo pálido: MS (ES) m/e 414,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[(4-metoxi-2-piridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido
blancuzco: MS (ES) m/e 400,3 (M + H)^{+}. Análisis
calculado para C_{21}H_{25}N_{3}O_{5} \cdot 0,75 H_{2}O:
C, 61,08; H, 6,47; N, 10,18. Encontrado: C, 61,15; H, 6,20; N,
10,12.
Una disolución de
2-[(3-hidroxipropil)amino]piridin-N-óxido
(252,3 mg, 1,5 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,24 ml, 1,5
mmol) en DMF anhidro (7,5 ml) se añadió lentamente gota a gota a una
disolución de
(\pm)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (197,5 mg, 0,75 mmol) y trifenilfosfina (413,1 mg, 1,58
mmol) en DMF anhidro (7,5 ml) a temperatura ambiente. La adición
requirió 15 min, y fue suavemente exotérmica. Después de 2 h, la
reacción se concentró y el residuo se reconcentró en xilenos. Una
cromatografía en gel de sílice (EtOAc/CHCl_{3}/MeOH 2:2:1) produjo
el material de R_{f} 0,48 (TLC en EtOAc/CHCl_{3}/MeOH 2:2:1)
como un aceite casi incoloro turbio. Éste se volvió a
recromatografiar en gel de sílice (EtOH absoluto) para producir el
compuesto del título (243,9 mg, 79%) como una espuma blancuzca: TLC
(EtOH absoluto) R_{f} 0,33; RMN de ^{1}H (250, CDCl_{3})
\delta 8,12 (dd ap., 1 H), 7,10 - 7,23 (m, 1 H), 6,90 - 7,10 (m,
2 H), 6,78 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1 H), 6,45 - 6,72 (m, 3 H), 5,28
(d, J = 16,3 Hz, 1 H), 3,95 - 4,25 (m, 2 H), 3,60 - 3,90 (m, 1 H),
3,76 (d, J =16,3 Hz, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,51 (q, J = 6,4 Hz, 2
H), 2,73 - 3,15 (m, 3 H), 3,04 (s, 3 H), 2,41 (dd, J =16,7, 5,4 Hz,
1 H), 2,05 - 2,28 (m, 2 H); MS (ES) m/e 414 (M +
H)^{+}.
Una mezcla de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (243,9 mg, 0,59 mmol), ciclohexeno (0,60 ml, 5,9 mmol), y
Pd al 10%/C (63 mg, 0,06 mmol) en 2-propanol (6 ml)
se calentó a reflujo. Después de 21,5 h, la reacción se enfrió hasta
la temperatura ambiente y se filtró a través de Celite®. El
filtrado se concentró, y el residuo se reconcentró en tolueno. Una
cromatografía en gel de sílice (MeOH al 5% en EtOAc/CHCl_{3} 1:1)
produjo el compuesto del título (212,8 mg, 91%) como un aceite
incoloro: TLC (MeOH al 5% en EtOAc/CHCl_{3} 1:1) R_{f} 0,39; RMN
de ^{1}H (250, CDCl_{3}) \delta 8,03 - 8,13 (m, 1 H), 7,35 -
7,48 (m, 1 H), 7,00 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,77 (dd, J = 8,4, 2,5 Hz,
1 H), 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 6,52 - 6,62 (m, 1 H), 6,40 (d, J =
8,5 Hz, 1 H), 5,27 (d, J = 16,3 Hz, 1 H), 4,62 - 4,82 (m, 1 H),
3,95 - 4,20 (m, 2 H), 3,60 - 3,90 (m, 2 H), 3,71 (s, 3 H), 3,50 (q,
J = 6,3 Hz, 2 H), 2,75 - 3,15 (m, 3 H), 3,03 (s, 3 H), 2,40 (dd,
J=16,7, 5,3 Hz, 1 H), 2,00 - 2,22 (m, 2 H); MS (ES) m/e 398 (M +
H)^{+}.
Se añadió LiOH 1,0 N (0,80 ml, 0,80 mmol) a una
disolución de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (207,5 mg, 0,52 mmol) en THF (2,6 ml) y H_{2}O (1,8 ml)
a temperatura ambiente. La disolución, inicialmente turbia, se hizo
homogénea en 1 min. Después de 18 h, la reacción se acidificó con
TFA (0,12 ml, 1,56 mrnol) y se concentró. Una cromatografía ODS
(CH_{3}CN al 20%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1%), una
concentración y una liofilización produjeron el compuesto del título
(252,4 mg, 83%) como un sólido higroscópico de color amarillo
pálido: HPLC (PRP-1®, CH_{3}CN al 20%/H_{2}O que
contiene TFA al 0,1%) K' = 2,4; RMN de ^{1}H (400 MHz,
CD_{3}OD) \delta 7,83 - 7,93 (m, 1 H), 7,76 - 7,83 (m, 1 H),
7,00 - 7,11 (m, 2 H), 6,83 - 6,91 (m, 1 H), 6,80 (dd, J = 8,4, 2,6
Hz, 1 H), 6,76 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 16,5 Hz, 1 H),
4,05 - 4,18 (m, 2 H), 3,94 (d, J =16,5 Hz, 1 H), 3,77 - 3,90 (m, 1
H), 3,57 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 3,03 (dd, J = 17,0, 4,2 Hz, 1 H),
2,99 (s, 3 H), 2,83 (dd, J = 17,0, 9,1 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 17,0,
13,5 Hz, 1 H), 2,44 (dd, J = 17,0, 4,7 Hz, 1 H), 2,11 - 2,23 (m, 2
H); MS (ES) m/e 384 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{21}H_{25}N_{3}NO_{4} \cdot 1,5 CF_{3}CO_{2}H
\cdot 1,5 H_{2}O: C, 49,57; H, 5,11; N, 7,23. Encontrado: C,
49,65; H, 4,95; N, 7,15.
Ejemplo de Referencia
5
El compuesto del título se preparó siguiendo, en
general, los procedimientos detallados en los Ejemplos
1-4.
Una disolución de
3-[(terc-butoxicarbonil)amino]propanol (0,14 g,
0,8 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,13 ml, 0,8 mmol) en DMF
anhidro (2 ml) se añadió gota a gota a una disolución de
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,10 g, 0,4 mmol) y trifenilfosfina (0,21 g, 0,8 mmol)
en DMF anhidro (1,4 ml) y THF seco (2 ml) a temperatura ambiente
bajo una atmósfera de argón. La disolución resultante se agitó
durante 18 h, y después se concentró al vacío. Una cromatografía en
gel de sílice (MeOH al 1%-3%/CH_{2}Cl_{2}) produjo el compuesto
del título (0,11 g): MS (ES) m/e 407,3 (M + H)^{+}.
Una disolución de
(\pm)-8-[3-(terc-butoxicarbonilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acetato de metilo (0,70 g) en CH_{2}Cl_{2} (7 ml) y TFA (2 ml) se agitó bajo una atmósfera de argón a 0ºC durante 1 h, y después se concentró para producir el compuesto del título (0,75 g, 100%) como un vidrio incoloro: MS (ES) m/e 321,4 (M + H)^{+}.
acetato de metilo (0,70 g) en CH_{2}Cl_{2} (7 ml) y TFA (2 ml) se agitó bajo una atmósfera de argón a 0ºC durante 1 h, y después se concentró para producir el compuesto del título (0,75 g, 100%) como un vidrio incoloro: MS (ES) m/e 321,4 (M + H)^{+}.
Una mezcla de la sal trifluoroacetato del
(\pm)-8-(3-aminopropiloxi)-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,75 g, 2 mmol), 2-bromopirimidina (0,5
g, 3 mmol), NaHCO_{3} (1,4 g, 17 mmol), y EtOH (10 ml) se calentó
a reflujo. Después de 24 h, la mezcla se filtró y el material
insoluble se lavó con MeOH. El filtrado y los lavados se reunieron
y se concentraron, y el residuo se purificó mediante cromatografía
en gel de sílice (MeOH al 1%-6%/CH_{2}Cl_{2}) para producir el
compuesto del título (0,54 g, 82%) como una espuma blanca: MS (ES)
m/e 385,5 (M + H)^{+}.
Una mezcla de
(\pm)-8-[3-(pirimidin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,36 g, 0,94 mmol), HCl 4 M en dioxano (0,25 ml, 1
mmol), paladio al 10% sobre carbón (0,24 g, 0,24 mmol), y MeOH (5
ml) se agitó bajo un balón de hidrógeno. Después de 18 h, la mezcla
se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se repartió entre
EtOAc y K_{2}CO_{3} acuoso. Un sólido precipitó, recogiéndose
mediante filtración, y se secó para producir el compuesto del título
como un sólido blanco: MS m/e 375,4 (M + H)^{+}. Anal.
calculado para C_{19}H_{26}N_{4}O_{4} \cdot 2,5
H_{2}O: C, 54,40; H, 7,45; N, 13,35. Encontrado: C, 54,68; H, 7,12; N, 13,39.
H_{2}O: C, 54,40; H, 7,45; N, 13,35. Encontrado: C, 54,68; H, 7,12; N, 13,39.
El compuesto del título se preparó siguiendo, en
general, los procedimientos detallados en los Ejemplos
1-4.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
6-(metilamino)-2-piridiletanol en
lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como una espuma blanca: MS (ES)
m/e 384 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-
3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-[2-piridilaminopropiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco: MS (ES) m/e 370 (M + H)^{+}.
3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-[2-piridilaminopropiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco: MS (ES) m/e 370 (M + H)^{+}.
Ejemplo de Referencia
9
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-(benzimidazol-2-il)etanol
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como un sólido blancuzco: MS
(ES) m/e 394,4 (M + H)^{+}, 416,3 (M +
Na)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[2-(benzimidazol-2-il)etoxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un polvo blanco:
MS (ES) m/e 380,4 (M + H)^{+}, 402,3 (M +
Na)^{+}.
Ejemplo de Referencia
10
El compuesto del título se preparó siguiendo, en
general, los procedimientos detallados en el Ejemplo 9.
Una disolución de
2-[(3-hidroxipropil)amino]piridin-N-óxido
(252,3 mg, 1,5 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,24 ml, 1,5
mmol) en DMF anhidro (7,5 ml) se añadió lentamente gota a gota a lo
largo de 3 - 4 min a una disolución de
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (248,5 mg, 0,75 mmol) y trifenilfosfina (413,1 mg, 1,58
mmol) en DMF anhidro (7,5 ml) a temperatura ambiente. Después de 17
h, la reacción se concentró y el residuo se reconcentró en
xilenos/CHCl_{3}. Una cromatografía en gel de sílice (gradiente:
EtOAc (500 ml), después MeOH al 5%/CHCl_{3}) produjo el compuesto
del título (253,6 mg, 70%) como una espuma blancuzca: RMN de ^{1}H
(250, CDCl_{3}) \delta 8,11 (dd, J = 6,4, 1,4 Hz, 1 H), 7,10 -
7,23 (m, 1 H), 6,93 - 7,10 (m, 2 H), 6,81 (dd, J = 8,4, 2,6 Hz, 1
H), 6,45 - 6,70 (m, 3 H), 5,34 (d, J = 16,7 Hz, 1 H), 3,75 - 4,30
(m, 6 H), 3,71 (s, 3 H), 3,51 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,80 - 3,15 (m,
3 H), 2,46 (dd, J = 16,8, 5,5 Hz, 1 H), 2,07 - 2,28 (m, 2 H); MS
(ES) m/e 482,2
(M + H)^{+}.
(M + H)^{+}.
Una mezcla de
(\pm)-3-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (253,6 mg, 0,53 mmol), ciclohexeno (0,54 ml, 5,3 mmol),
negro de paladio (11,3 mg, 0,11 mmol), e isopropanol (5,3 ml) se
calentó a reflujo. Después de 0,5 h se añadió Pd al 10%/C (28,2 mg,
0,03 mmol), y después de 14,5 h se añadió negro de Pd (11,3 mg,
0,11 mmol) y ciclohexeno (0,27 ml, 2,65 mmol). Después de 48 h más,
la reacción se filtró en caliente a través de Celite®, y el lecho
corto del filtro se lavó con MeOH/CHCl_{3} 1:1 caliente. Una
concentración y una reconcentración en xilenos dejó un aceite
amarillo. Una cromatografía en gel de sílice (MeOH al 5% en
EtOAc/CHCl_{3} 1:1) produjo el compuesto del título (194,0 mg,
79%) como un aceite de color amarillo pálido: TLC (MeOH al 5% en
EtOAc/CHCl_{3} 1:1) R_{f} 0,53; RMN de ^{1}H (250,
CDCl_{3}) \delta 8,08 (dd, J = 5,0, 1,0 Hz, 1 H), 7,37 - 7,48
(m, 1 H), 7,02 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,79 (dd, J = 8,4, 2,5 Hz, 1
H), 6,63 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 6,52 - 6,62 (m, 1 H), 6,40 (d, J =
8,4 Hz, 1 H), 5,34 (d, J = 16,6 Hz, 1 H), 4,60 - 4,80 (m, 1 H),
3,75 - 4,30 (m, 6 H), 3,71 (s, 3 H), 3,50 (q, J = 6,4 Hz, 2 H),
2,80 - 3,15 (m, 3 H), 2,46 (dd, J = 16,8, 5,4 Hz, 1 H), 2,00 - 2,25
(m, 2 H); MS (ES) m/e 466 (M + H)^{+}.
Se añadió LiOH 1,0 N (0,44 ml, 0,44 mmol) a una
disolución de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (159,5 mg, 0,34 mmol) en THF (1,7 ml) y H_{2}O (1,3 ml)
a temperatura ambiente. La disolución amarilla turbia se hizo
homogénea en 10 min. Después de 24 h, la reacción se concentró hasta
la sequedad y el residuo amarillo se disolvió en H_{2}O (4 ml).
La disolución se filtró, y después se neutralizó cuidadosamente (pH
aproximadamente 7) con HCl 1,0 N. El precipitado se recogió, se lavo
con gran cantidad de H_{2}O, y se secó a un vacío elevado a 40 -
45ºC para producir el compuesto del título (130,0 mg, 83%) como un
sólido blancuzco: HPLC (PRP-1®, CH_{3}CN al
25%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1%) k'= 3,1; RMN de ^{1}H (400
MHz, DMSO-d_{6}) \delta 7,91 - 8,00 (m, 1 H),
7,28 -7,40 (m, 1 H), 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1 H), 6,76 - 6,87 (m, 2
H), 6,51 - 6,60 (m, 1 H), 6,39 - 6,50 (m, 2 H), 5,30 (d, J = 16,6
Hz, 1 H), 4,10 - 4,30 (m, 3 H), 4,02 (t, J= 6,3 Hz, 1 H), 3,70 -
3,82 (m, 1 H), 3,20 - 3,45 (m, 2 H, parcialmente oscurecido por una
señal del disolvente residual), 2,99 (dd, 1 H), 2,59 - 2,74 (m, 2
H), 2,39 (dd, J = 16,9, 4,8 Hz, 1 H), 1,90 - 2,03 (m, 2 H); MS (ES)
m/e 452 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{22}H_{24}F_{3}N_{3}O_{4} \cdot 0,5 H_{2}O: C,
57,39; H, 5,47; N, 9,13. Encontrado: C, 57,39; H, 5,18; N, 9,00.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-[(3-hidroxipropil)amino]-4,6-dimetilpiridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxi-1-propil)-amino]piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como una espuma blanca: MS (ES)
m/e 442,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-(4,6-dimetil-1-oxopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como un aceite
amarillo pálido: MS (ES) m/e 426,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[(4,6-dimetilpiridin-2-il)amino]propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco:
MS (ES) m/e 412,2 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{23}H_{29}N_{3}O_{4} \cdot 0,5 HCl \cdot 0,25
H_{2}O: C, 63,62; H, 6,96; N, 9,68. Encontrado: C, 63,62; H,
6,96; N, 9,69.
Ejemplo de Referencia
13
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-(2-aminotiazol-4-il)etanol
(documento WO 95/32710) en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)-amino]piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como una espuma blanca: MS (ES)
m/e 390 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[2-(2-aminotiazol-4-il)etoxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilaminopropiloxi)-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco:
MS (ES) m/e 376 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{18}H_{21}N_{3}O_{4}S \cdot 1,3 CF_{3}CO_{2}H - 0,36
H_{2}O: C, 46,62; H, 4,38; N, 7,93. Encontrado: C, 46,45; H,
4,57; N, 8,27.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-[(3-hidroxipropil)amino]-4-nitropiridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]-piridin-N-óxido,
y se empleó
(\pm)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título: MS (ES) m/e 459 (M +
H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-(4-nitro-1-oxopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(4-nitro-N-oxopiridin-2-ilamino)-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como una espuma
blanca: MS (ES) m/e 413 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blanco:
MS (ES) m/e 399 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{21}H_{26}N_{4}O_{4} \cdot 1,5 CF_{3}CO_{2}H \cdot
0,125 H_{2}O: C, 50,62; H, 4,91; N, 9,83. Encontrado: C, 50,63;
H, 5,26; N, 9,90.
Una mezcla de
(\pm)-8-[3-(pirimidin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,071 g, 0,18 mmol) e hidróxido de litio monohidrato
(0,009 g, 2 mmol) en THF (5 ml) y H_{2}O (2 ml) se agitó a
temperatura ambiente durante 18 h, y después se concentró. El
residuo se disolvió en H_{2}O y el pH se ajustó a 4 con HCl 3 N.
El sólido resultante se recogió mediante filtraación y se secó para
producir el compuesto del título (0,05 g, 73%) como un sólido
blanco: MS m/e 371,4 (M + H)^{+}; Anal. calculado para
C_{19}H_{22}N_{4}O_{4} \cdot 0,5 H_{2}O: C, 60,15; H,
6,11; N, 14,77. Encontrado: C, 60,14; H, 6,06; N, 14,71.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-[(3-hidroxipropil)amino]-4-nitropiridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]-piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como una espuma de color
naranja: MS (ES) m/e 445,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(R)-8-[3-[2-(4-amino-N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como una espuma
blanca: MS (ES) m/e 399,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(R)-8-[3-[(4-amino-2-piridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido
blancuzco: [\alpha]_{D}^{23} +74,97º (c 1,45, MeOH); MS
(ES) m/e 385,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{20}H_{24}N_{4}O_{4} HCl \cdot 1,5 H_{2}O: C, 53,63;
H, 6,30; N, 12,50. Encontrado: C, 53,87; H, 6,13; N, 12,42.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
2-[(3-hidroxi-3-propil)amino]-4-nitropiridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]piridin-N-óxido,
se preparó el compuesto del título como una espuma de color
naranja: MS (ES) m/e 445,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(S)-8-[3-[2-(4-amino-N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como una espuma
blanca: MS (ES) m/e 399,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(S)-8-[3-[(4-amino-2-piridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido
blancuzco: [\alpha]_{D}^{23} - 77,5º (c 1,45, MeOH); MS
(ES) m/e 385,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{20}H_{24}N_{4}O_{4} \cdot 1,125 H_{2}O: C, 59,36; H,
6,54; N, 13,84. Encontrado: C, 59,31; H, 6,74; N, 13,73.
Ejemplo de Referencia
18
Una disolución de ácido
(\pm)-8-[3-[(4-amino-2-piridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
(0,27 g, 0,7 mmol) y HCl 4 M en dioxano (0,2 ml, 0,8 mmol) en
etanol (10 ml) se calentó a reflujo. Después de 72 h, la reacción
se concentró y el residuo se repartió entre EtOAc y K_{2}CO_{3}
acuoso. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4})
y se concentró. El residuo se disolvió en tolueno (5 ml) y
trietilamina (0,35 ml, 2,5 mmol), y la disolución resultante se
calentó a reflujo. Después de 18 h, la reacción se concentró al
vacío para producir el compuesto del título (0,20 g, 69%) como una
espuma de color tostado: MS (ES) m/e 413,4 (M + H)^{+}.
Anal. calculado para C_{22}H_{28}N_{4}O_{4} \cdot 0,25
H_{2}O: C, 63,37; H, 6,89; N, 13,44. Encontrado: C, 63,32; H,
7,17; N, 13,05.
Ejemplo de Referencia
19
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
3-(4-nitrobenciloxicarbonilamino)-1-propanol
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]piridin-N-óxido,
y se empleó
(\pm)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como un aceite
incoloro: MS (ES) m/e 500,3 (M + H)^{+}.
Una mezcla de
(\pm)-8-[3-(4-nitrobenciloxicarbonilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (1,4 g, 3 mmol), paladio al 10% sobre carbón (0,55 g, 0,6
mmol), y EtOH (20 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo un balón
de hidrógeno. Después de 18 h, la mezcla se filtró y el filtrado se
concentró para producir el compuesto del título (0,89 g, 99%) como
un sólido de color tostado: MS (ES) m/e 321,4 (M +
H)^{+}.
Una mezcla de
(\pm)-8-[3-aminopropiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2
benzazepin-4-acetato de metilo (0,3
g, 1 mmol), 2-metiltioimidazolina (0,46 g, 2 mmol),
diisopropiletilamina (0,42 ml, 2 mmol) y dimetilacetamida (3 ml) se
calentó hasta 100ºC bajo una atmósfera de argón. Después de 2 h, la
reacción se concentró al vacío y el residuo se repartió entre
CHCl_{3} y H_{2}O. La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se
concentró, y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para
producir el compuesto del título (0,24 g, 51%) como un aceite
amarillo: MS (ES) m/e 389,4 (M + H)^{+}.
El
(\pm)-8-[3-[(2-imidazolin-2-il)amino]propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo se saponificó según el procedimiento del Ejemplo
1(c). Una purificación mediante HPLC preparativa produjo el
compuesto del título como un sólido blanco: MS (ES) m/e 375,4 (M +
H)^{+}. Anal. calculado para
C_{21}H_{26}N_{4}O_{4} \cdot 1,96 CF_{3}CO_{2}H: C,
46,08; H, 4,73; N, 9,39; Encontrado: C, 46,37; H, 4,53; N,
9,01.
Según el procedimiento del Ejemplo 19(c),
excepto que se empleó
2-metiltio-1,3-diazepina
en lugar de 2-metiltioimidazolina, se preparó el
compuesto del título: MS (ES) m/e 417,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 19(d),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[(2-diazepin-2-il)amino]propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[(2-imidazolin-2-il)amino]propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título: MS (ES) m/e 403,4 (M
+ H)^{+}.
Siguiendo el procedimiento del Ejemplo
1(a), excepto que se empleó
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]-4-metilpiridin-N-óxido
en lugar de
2-[(3-hidroxipropil)amino]-piridin-N-óxido,
y se empleó
(\pm)-3-oxo-8-hidroxi-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título: MS (ES) m/e 496,3 (M
+ H)^{+}.
Siguiendo el procedimiento del Ejemplo
1(b), excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-(4-metil-1-oxopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título: MS (ES) m/e 480,2 (M
+ H)^{+}.
Siguiendo el procedimiento del Ejemplo
1(c), excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-(4-metilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título: MS (ES) m/e 466,2 (M
+ H)^{+}. Anal. calculado para
C_{23}H_{26}F_{3}N_{3}O_{4} \cdot 0,5 H_{2}O: C,
58,22; H, 5,74; N, 8,86. Encontrado: C, 58,54; H, 5,58; N, 8,64.
Ejemplo de Referencia
22
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó ácido
metil-(\pm)-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como una espuma
blanca: MS (ES) m/e 484,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó ácido
metil-(\pm)-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título como un polvo blanco:
MS (ES) m/e 470,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{25}H_{30}NaN_{3}O_{6} \cdot 3,25 H_{2}O: C, 54,59; H,
6,69; N, 7,64. Encontrado: C, 54,47; H, 6,32; N, 7,95.
Ejemplo de Referencia
23
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxi-
carbonil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título como un polvo blanco: RMN de ^{1}H (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 6,6-8,3 (m, 8 H), 3,7-4,6 (m, 3 H), 3,3-3,6 (m, 5 H), 1,8-3,0 (m, 5 H), 1,6 (s, 6 H), 1,3 (s, 3 H); MS (ES) m/e 486,4 (M + H)^{+}.
carbonil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título como un polvo blanco: RMN de ^{1}H (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 6,6-8,3 (m, 8 H), 3,7-4,6 (m, 3 H), 3,3-3,6 (m, 5 H), 1,8-3,0 (m, 5 H), 1,6 (s, 6 H), 1,3 (s, 3 H); MS (ES) m/e 486,4 (M + H)^{+}.
Ejemplo de Referencia
24
Una disolución de ácido
metil-(\pm)-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,
3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético (0,4 g, 0,8 mmol) en DMF (5 ml) se enfrió hasta -20ºC (CCl_{4}/baño de hielo seco), y se añadió gota a gota (TMS)_{2}NLi (disolución 1,0 M en THF, 0,9 ml, 0,9 mmol). Después de 10 min se añadió una disolución de bromuro de 4-trifluorometilbencilo (0,211 g, 0,88 mmol) en DMF (0,5 ml). La disolución se agitó bajo una atmósfera de argón a -20ºC durante 10 min, y después a temperatura ambiente (RT) durante 18 h. La disolución se concentró, y el residuo se suspendió en EtOAc y se lavó sucesivamente con NaHCO_{3} al 5% (2 x), H_{2}O (1 x), ácido cítrico al 5% (2 x), H_{2}O (1 x), y salmuera (1 x). La capa de EtOAc se secó (MgSO_{4}) y se concentró para producir el compuesto del título (0,42 g, 80%): MS (ES) m/e 658,3 (M + H)^{+}.
3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético (0,4 g, 0,8 mmol) en DMF (5 ml) se enfrió hasta -20ºC (CCl_{4}/baño de hielo seco), y se añadió gota a gota (TMS)_{2}NLi (disolución 1,0 M en THF, 0,9 ml, 0,9 mmol). Después de 10 min se añadió una disolución de bromuro de 4-trifluorometilbencilo (0,211 g, 0,88 mmol) en DMF (0,5 ml). La disolución se agitó bajo una atmósfera de argón a -20ºC durante 10 min, y después a temperatura ambiente (RT) durante 18 h. La disolución se concentró, y el residuo se suspendió en EtOAc y se lavó sucesivamente con NaHCO_{3} al 5% (2 x), H_{2}O (1 x), ácido cítrico al 5% (2 x), H_{2}O (1 x), y salmuera (1 x). La capa de EtOAc se secó (MgSO_{4}) y se concentró para producir el compuesto del título (0,42 g, 80%): MS (ES) m/e 658,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo
en lugar de (\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]-1-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título (0,321 g, 78%) como un aceite transparente: MS (ES) m/e 642,3 (M + H)^{+}.
en lugar de (\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]-1-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título (0,321 g, 78%) como un aceite transparente: MS (ES) m/e 642,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxi-
carbonil)amino]-1-propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blancuzco: MS (ES) m/e 628,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{33}H_{36}F_{3}N_{3}O_{6} \cdot 0,5
H_{2}O: C, 62,25; H, 5,86; N, 6,60. Encontrado: C, 62,01; H, 5,92; N, 6,81.
carbonil)amino]-1-propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título como un sólido blancuzco: MS (ES) m/e 628,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{33}H_{36}F_{3}N_{3}O_{6} \cdot 0,5
H_{2}O: C, 62,25; H, 5,86; N, 6,60. Encontrado: C, 62,01; H, 5,92; N, 6,81.
El ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]-propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,
3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético (0,158 g, 0,25 mmol) se trató con HCl 4 M en dioxano (3 ml) a temperatura ambiente durante 1 h, y después la disolución se concentró. Una cromatografía ODS (gradiente de CH_{3}CN al 5-60%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el compuesto del título (0,117 g, 82%): MS (ES) m/e 528,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{28}H_{28}N_{3}O_{4} \cdot 1 CF_{3}CO_{2}H \cdot 1,5 H_{2}O: C, 53,89; H, 4,82; N, 6,28. Encontrado: C, 53,55; H, 4,55; N, 6,04.
3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético (0,158 g, 0,25 mmol) se trató con HCl 4 M en dioxano (3 ml) a temperatura ambiente durante 1 h, y después la disolución se concentró. Una cromatografía ODS (gradiente de CH_{3}CN al 5-60%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el compuesto del título (0,117 g, 82%): MS (ES) m/e 528,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{28}H_{28}N_{3}O_{4} \cdot 1 CF_{3}CO_{2}H \cdot 1,5 H_{2}O: C, 53,89; H, 4,82; N, 6,28. Encontrado: C, 53,55; H, 4,55; N, 6,04.
Ejemplo de Referencia
26
Una disolución de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (1,5 g, 3,8 mmol) en DMF (10 ml) se enfrió hasta -20ºC
bajo una atmósfera de argón, y se añadió gota a gota
(TMS)_{2}NLi (disolución 1,0 M en THF, 8 ml, 8 mmol). La
reacción se agitó a -20ºC durante 30 min, y después se añadió
CH_{3}I (0,5 ml, 7,6 mmol). La disolución se agitó a temperatura
ambiente durante 18 h, y después se concentró. Una cromatografía en
gel de sílice (MeOH al 10%/CH_{2}Cl_{2}) produjo el compuesto
del título (1 g, 62%): MS (ES) m/e 428,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)-N-(metil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-metilbenzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título (0,7 g, 73%): MS (ES)
m/e 412,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-2-metil-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(metil)amino)]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título bruto. Una
purificación mediante cromatografía ODS (CH_{3}CN al
5-60%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo
de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el
compuesto del título: MS (ES) m/e 398,4 (M + H)^{+}. Anal.
calculado para C_{22}H_{27}N_{3}O_{4} \cdot 1,5
CF_{3}CO_{2}H \cdot 0,25 H_{2}O: C, 52,40; H, 5,10; N, 7,33.
Encontrado: C, 52,09; H, 5,26; N, 7,20.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(a),
excepto que se empleó bromuro de bencilo en lugar de bromuro de
4-trifluorometilbencilo, se preparó el compuesto del
título (0,105 g, 20%): MS (ES) m/e 590,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(b),
excepto que se empleó
(\pm)-2-bencil-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (0,045 g, 44%): MS
(ES) m/e 574,4
(M + H)^{+}.
(M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-2-bencil-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título (0,044 g,
cuantitativo): MS (ES) m/e 560,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 25(a),
excepto que se empleó ácido
(\pm)-2-bencil-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
en lugar de ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-
benzazepin-4-acético, se preparó el compuesto del título (0,014 g, 40%): MS (ES) m/e 460,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{27}H_{29}N_{3}O_{4} \cdot CF_{3}CO_{2}H \cdot 2 H_{2}O: C, 57,14; H, 5,62; N, 6,89. Encontrado: C, 57,44; H, 5,32; N, 6,87.
benzazepin-4-acético, se preparó el compuesto del título (0,014 g, 40%): MS (ES) m/e 460,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{27}H_{29}N_{3}O_{4} \cdot CF_{3}CO_{2}H \cdot 2 H_{2}O: C, 57,14; H, 5,62; N, 6,89. Encontrado: C, 57,44; H, 5,32; N, 6,87.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(a),
excepto que se empleó bromoacetato de terc-butilo en lugar de
bromuro de 4-trifluorometilbencilo, se preparó el
compuesto del título (1,0 g, 80%): MS (ES) m/e 614,4 (M +
H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(b),
excepto que se empleó
(\pm)-2-(terc-butoxicarbonilmetil)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]-propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (0,72 g, 77%): MS
(ES) m/e 598,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 25(a),
excepto que se empleó
(\pm)-2-(terc-butoxicarbonilmetil)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]-propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluoro-metilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético,
se preparó el compuesto del título (0,57 g, cuantitativo): MS (ES)
m/e 442,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-2-(carboximetil)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título (0,30 g, 56%): MS (ES)
m/e 428,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{22}H_{25}N_{3}O_{6} \cdot 2 H_{2}O: C, 57,01; H,
6,31; N, 9,07. Encontrado: C, 57,27; H, 6,24; N, 8,86.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(a),
excepto que se empleó bromuro de 4-nitrobencilo en
lugar de bromuro de 4-trifluorometilbencilo, se
preparó el compuesto del título (0,284 g, 69%): MS (ES) m/e 635,3 (M
+ H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(b),
excepto que se empleó
(\pm)-2-(4-nitrobencil)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (0,104 g, 40%): MS
(ES) m/e 589,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-2-(4-aminobencil)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]-propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título (0,08 g, 79%): MS (ES)
m/e 575,4 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 25(a),
excepto que se empleó ácido
(\pm)-2-(4-aminobencil)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
en lugar de ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético,
se preparó el compuesto del título (0,029 g, 44%): MS (ES) m/e
475,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{27}H_{30}N_{4}O_{4} \cdot 2 CF_{3}CO_{2}H \cdot
1,5 H_{2}O: C, 51,03; H, 4,83; N, 7,68. Encontrado: C, 50,92; H,
4,78; N, 7,64.
Ejemplo de Referencia
30
Según el procedimiento del Ejemplo 25(a),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-(trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético,
se preparó el compuesto del título (1,9 g, 90%): MS (ES) m/e 558,3
(M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(b),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-il)aminopropiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-
benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,40 g, 88%): MS (ES) m/e 542,3 (M + H)^{+}.
benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,40 g, 88%): MS (ES) m/e 542,3 (M + H)^{+}.
Se añadió cloruro de benzoílo (0,094 ml, 0,8
mmol) gota a gota a una disolución de
(\pm)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-il)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,4 g, 0,74 mmol) y diisopropiletilamina (0,5 ml, 2,9
mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml). Después de 18 h, la disolución
se concentró, y el residuo se purificó mediante una cromatografía en
gel de sílice (EtOAc/hexano 1:1) pra producir el compuesto del
título (0,293 g, 61%): MS (ES) m/e 646,2 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(benzoil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de etilo, se preparó el compuesto del título bruto. Una
purificación mediante cromatografía ODS (CH_{3}CN al
10-80%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo
de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el
compuesto del título (0,025 g, 10%): MS (ES) m/e 632,4 (M +
H)^{+}. Anal. calculado para C_{35}H_{32}
F_{3}N_{3}O_{5} \cdot 0,85 CF_{3}CO_{2}H: C, 60,50; H,
4,54; N, 5,74. Encontrado: C, 60,22; H, 4,35; N, 5,77.
Ejemplo de Referencia
31
Una disolución de ácido terc-butilacético
(0,228 ml, 1,2 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) se trató con
cloruro de oxalilo (1 ml, 11,4 mmol), seguido de DMF (0,0005 ml,
0,06 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5
h, y después se concentró. El residuo se suspendió en
CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadió gota a gota a una disolución de
(\pm)-3-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-il)aminopropiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,35 g, 0,6 mmol) y Et_{3}N (0,5 ml, 2,4 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} (10 ml). Después de 18 h, la disolución se lavó
secuencialmente con H_{2}O (1 x), NaHCO_{3} al 5% (2 x),
H_{2}O (1 x), ácido cítrico al 5% (2 x), H_{2}O (1 x) y NaCl
saturado (1 x). La capa orgánica se concentró para producir el
compuesto del título (0,4 g, 97%): MS (ES) m/e 656,4 (M +
H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(b),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butilacetil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,
4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,22 g, 56%): MS (ES) m/e 642,3 (M + H)^{+}.
4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,22 g, 56%): MS (ES) m/e 642,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butil-
acetil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título bruto. Una purificación mediante cromatografía ODS (CH_{3}CN al 10-80%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el compuesto del título (0,022 g, 10%): MS (ES) m/e 626,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{34}H_{38}F_{3}N_{3}O_{5} \cdot 1 H_{2}O: C, 63,44; H, 6,26; N, 6,53. Encontrado: C, 63,24; H, 5,96; N, 6,39.
acetil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título bruto. Una purificación mediante cromatografía ODS (CH_{3}CN al 10-80%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el compuesto del título (0,022 g, 10%): MS (ES) m/e 626,4 (M + H)^{+}. Anal. calculado para C_{34}H_{38}F_{3}N_{3}O_{5} \cdot 1 H_{2}O: C, 63,44; H, 6,26; N, 6,53. Encontrado: C, 63,24; H, 5,96; N, 6,39.
Ejemplo de Referencia
32
Según el procedimiento del Ejemplo 30(c),
excepto que se empleó cloroformiato de isobutilo en lugar de cloruro
de benzoílo, se preparó el compuesto del título (0,47 g, 80%): MS
(ES) m/e 658,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(b),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(iso-
butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo
en lugar de (\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-ben-
cil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,4 g, 63%): MS (ES) m/e 642,3 (M + H)^{+}.
butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo
en lugar de (\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-ben-
cil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,4 g, 63%): MS (ES) m/e 642,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(c),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(isobutoxi-
carbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título bruto. Una purificación mediante cromatografía ODS (CH_{3}CN al 10-80%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el compuesto del título (0,008 g, 20%): MS (ES) m/e 628,3 (M + H)^{+}. Anal calculado para for C_{33}H_{36} F_{3}N_{3}O_{6} \cdot 0,25 CF_{3}CO_{2}H \cdot 0,5 H_{2}O: C, 60,49; H, 5,64; N, 6,32. Encontrado: C, 60,78; H, 5,50; N, 6,28.
carbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de etilo, se preparó el compuesto del título bruto. Una purificación mediante cromatografía ODS (CH_{3}CN al 10-80%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1% a lo largo de 1 h), una concentración y una liofilización produjeron el compuesto del título (0,008 g, 20%): MS (ES) m/e 628,3 (M + H)^{+}. Anal calculado para for C_{33}H_{36} F_{3}N_{3}O_{6} \cdot 0,25 CF_{3}CO_{2}H \cdot 0,5 H_{2}O: C, 60,49; H, 5,64; N, 6,32. Encontrado: C, 60,78; H, 5,50; N, 6,28.
Según el procedimiento del Ejemplo 1(a),
excepto que se empleó
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (3,0 g, 83%): MS (ES)
m/e 500,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(a),
excepto que se empleó
(S)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (2,3 g, 72%): MS (ES)
m/e 658,2 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(b),
excepto que se empleó
(S)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo
en lugar de (\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-ben-
cil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (1,1 g, 50%): MS (ES) m/e 642,1 (M + H)^{+}.
en lugar de (\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-ben-
cil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (1,1 g, 50%): MS (ES) m/e 642,1 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 24(c),
excepto que se empleó
(S)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxi-
carbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,8 g, 60%): MS (ES) m/e 628,1 (M + H)^{+}.
carbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo en lugar de (\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato de metilo, se preparó el compuesto del título (0,8 g, 60%): MS (ES) m/e 628,1 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 25(a),
excepto que se empleó ácido
(S)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
en lugar de ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético,
se preparó el compuesto del título bruto. Una purificación mediante
cromatografía ODS (CH_{3}CN al 30%/H_{2}O que contiene TFA al
0,1% a lo largo de 1 h), una concentración y una liofilización
produjeron el compuesto del título (0,657 g, 72%):
[\alpha]_{D} -42º (c 1,0, MeOH); MS (ES) m/e 528,1 (M +
H)^{+}. Anal. calculado para
C_{28}H_{28}F_{3}N_{3}O_{4} \cdot 2 CF_{3}CO_{2}H
\cdot 3,75 H_{2}O: C, 46,69; H, 4,59; N, 5,10. Encontrado: C,
46,47; H, 4,58; N, 5,48.
Ejemplo de Referencia
34
Según el procedimiento del Ejemplo 1(b),
excepto que se empleó isopropanol en lugar de etanol, se preparó el
compuesto del título (0,35 g, 76%): MS (ES) m/e 384,4 (M +
H)^{+}.
A
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,14 g, 0,34 mmol) y Ph_{3}P (0,13 g, 0,50 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} (2 ml) a 0ºC se le añadió gota a gota una
disolución de
3-(4-nitrobenciloxi-carbonilamino)-1-propanol
(0,13 g, 0,51 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,08 ml, 0,50
ml). Cuando la adición finalizó, el baño de hielo se retiró y la
reacción se agitó a temperatura ambiente. Después de 18 h, el
disolvente se retiró y el producto se aisló mediante cromatografía
de resolución rápida en gel de sílice (CHCl_{3} al 100% hasta MeOH
al 5%/CHCl_{3}) para producir el compuesto del título (0,12 g)
como un aceite transparente. RMN de ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3})
\delta 8,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,65 (m, 1H), 7,50 (m, 5H), 7,40
(d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,03 (d, J =
9,8 Hz, 1H), 6,70 (m, 1H), 6,30 (s, 1H), 5,23 (m, 3H), 4,95 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 4,50 (d, J =16,4 Hz, 1H), 3,95 (m, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,70 (m, 1H), 3,45 (m, 2H), 3,15 - 2,90 (m, 3H), 2,50 (dd, J = 19,2, 5,5 Hz, 1H), 1,95 (m, 2H).
9,8 Hz, 1H), 6,70 (m, 1H), 6,30 (s, 1H), 5,23 (m, 3H), 4,95 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 4,50 (d, J =16,4 Hz, 1H), 3,95 (m, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,70 (m, 1H), 3,45 (m, 2H), 3,15 - 2,90 (m, 3H), 2,50 (dd, J = 19,2, 5,5 Hz, 1H), 1,95 (m, 2H).
A
(S)-8-[3-(4-nitrobenciloxicarbonilamino)propiloxi]-3-oxo-2-[4-(trifluoro-metil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,12 g, 0,19 mmol) en MeOH (2 ml) se le añadió Pd al
10%/C (20 mg). El recipiente de reacción se enjuagó con hidrógeno y
después se equipó con un balón lleno de hidrógeno. Después de 4,5 h,
el hidrógeno se expuso a la atmósfera y el catalizador se eliminó
mediante filtración a través de Celite®. La eliminación del
disolvente produjo el compuesto del título (0,09 g) como un residuo
de color amarillo pálido. Este material se usó sin mayor
purificación. MS (ES) m/e 465,3 (M + H)^{+}.
Una disolución de
(S)-8-(3-aminopropiloxi)-3-oxo-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,09 g, 0,19 mmol), 2-bromopirimidina
(0,09 g, 0,57 mmol) y diisopropiletilamina (0,17 ml, 0,98 mmol) en
DMF (2 ml) se calentó a 80ºC durante 18 h. Se dejó que la reacción
se enfriase hasta la temperatura ambiente y se concentró para
producir un residuo amarillo. Una cromatografía de resolución ràpida
en gel de sílice (MeOH al 2%/EtOAc) produjo el compuesto del título
(42 mg) como un aceite transparente: MS (ES) m/e 543,1
(M + H)^{+}.
(M + H)^{+}.
Un aparato de hidrogenación Parr se cargó con
(S)-3-oxo-8-[3-(pirimidin-2-ilamino)propiloxi]-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (42 mg, 0,08 mmol), ácido acético glacial (2 ml), HCl
concentrado (0,2 ml), y Pd al 10%/C (10 mg). La mezcla se agitó
bajo una atmósfera de hidrógeno (2,8 x 10^{5} Pa) durante 5 h,
después el hidrógeno se expuso a la atmósfera y el catalizador se
eliminó mediante filtración a través de Celite®. La evaporación de
los disolventes produjo el compuesto del título bruto (52 mg) como
un residuo oscuro. Este material se usó sin mayor purificación. MS
(ES) m/e 547,2 (M + H)^{+}.
Al
(S)-3-oxo-8-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimid-2-ilamino)propiloxi]-2-[4-(trifluoro-metil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo bruto del Ejemplo 35d en EtOH (1 ml) se le añadió NaOH 1 N
(0,25 ml, 0,25 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente
durante 8,5 h, la reacción se extinguió mediante la adición de HCl 1
N (0,25 ml, 0,25 mmol). La eliminación del disolvente produjo un
sólido de color amarillo pálido. Una HPLC en fase inversa
preparativa (Hamilton PRP-1®, CH_{3}CN al
30%/H_{2}O que contiene TFA al 0,1%) produjo el compuesto del
título (18,1 mg) como un polvo blanco: MS (ES) m/e 533,3 (M +
H)^{+}. Anal. calculado para
C_{27}H_{31}N_{4}F_{3}O_{4} \cdot 2 H_{2}O \cdot 2
CF_{3}CO_{2}H: C, 46,74; H, 4,68; N, 7,03. Encontrado: C, 46,34;
H, 4,31; N, 6,82.
Ejemplo de Referencia
36
Según el procedimiento del Ejemplo 25(a),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-(trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(piridin-2-il)-N-(terc-butoxicarbonil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético,
se preparó la sal HCl. Este material se convirtió en la base libre
repartiéndolo entre EtOAc y NaHCO_{3} al 5%. La capa de EtOAc se
separó y se concentró para producir el compuesto del título (4,1 g,
100%): MS (ES) m/e 558,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 26(a),
excepto que se empleó ácido
metil-(\pm)-3-oxo-8-[3-[N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(metil)amino]propiloxi]-2-(4-trifluorometil-bencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)amino]-1-propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (3,0 g, 94%): MS (ES)
m/e 572,3 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 4(b),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-(N-(1-oxopiridin-2-il)-N-(metil)amino)propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-[2-(N-oxopiridil)-amino]-1-propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (0,32 g, 60%): MS
(ES) m/e 556,2 (M + H)^{+}.
Según el procedimiento del Ejemplo 4(c),
excepto que se empleó
(\pm)-3-oxo-8-[3-(N-(piridin-2-il)-N-(metil)amino)propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)-1-propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título (0,02 g, 15%): MS
(ES) m/e 542,1 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{29}H_{30}N_{3}O_{4}F_{3} \cdot CF_{3}CO_{2}H
\cdot H_{2}O: C, 55,28; H, 4,94; N, 6,24. Encontrado: C, 55,45;
H, 4,68; N, 6,14.
A una disolución agitada de
(S)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (19 g, 57,4 mmol) en THF seco (400 ml) y DMF seca (200
ml) bajo una atmósfera de argón se le añadió
2-(3-hidroxipropilamino)piridin-N-óxido
(11,6 g, 69 mmol) y trifenilfosfina (18,0 g, 69 mmol). Después de
que todos los sólidos se hubieran disuelto completamente
(aproximadamente 30 minutos), la reacción se enfrió hasta 0ºC en un
baño de hielo y se añadió azodicarboxilato de diisopropilo (14,3
ml, 69 mmol) mediante una jeringa. Se dejó que la reacción se
calentase lentamente hasta la temperatura ambiente y se agitó
durante 18 h. Una concentración y una cromatografía de resolución
rápida en gel de sílice (CHCl_{3}/EtOAc/EtOH 8:2:1) produjo el
compuesto del título (20,83 g, 75%) como una espuma sólida. Pueden
obtenerse 5,73 g más del producto reciclando el material de partida
recuperado a partir de la reacción anterior para producir un total
de 26,56 g (96%) del compuesto del título: MS (ES) m/e 482,2 (M +
H)^{+}; RMN de ^{1}H (400 MHz,
DMSO-d_{6}) \delta 8,09 (dd, J = 6,5, 1,3 Hz,
1H), 7,29 (t, 1H), 7,18 (t, 1H), 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H),
6,84-6,79 (m, 3H), 6,59 (t, 1H), 5,32 (d, J = 16,5
Hz, 1H), 4,28-4,14 (m, 2H), 4,16 (d, J =16,5 Hz,
1H), 4,02 (t, 2H), 3,84 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,40 (dd, 2H), 3,01
(dd, 1H), 2,73 (dd, 1H), 2,70 (dd,1H), 2,52 (dd, 1H), 2,02 (ddd,
2H).
A una disolución agitada de
(S)-3-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (26,56 g, 55 mmol) en isopropanol (500 ml) se le añadió
paladio al 10% sobre carbono activado (8 g, 7,5 mmol, prehumedecido
cuidadosamente en isopropanol bajo una atmósfera de argón) y
ciclohexeno (55,7 ml, 550 mmol). La reacción entonces se calentó a
reflujo bajo una atmósfera de argón en un baño de aceite ajustado a
90ºC. Después de 6 h se añadió más cantidad de paladio al 10% sobre
carbono activado (8 g, 7,5 mmol, prehumedecido cuidadosamente en
isopropanol bajo una atmósfera de argón) y ciclohexeno (55,7 ml, 550
mmol). Después de 18 h más, la reacción se filtró en caliente a
través de Celite®, y el lecho corto del filtro se lavó con
MeOH/CHCl_{3} 1:1 (400 ml). El filtrado se concentró al vacío y el
residuo se purificó mediante una cromatografía de resolución rápida
en gel de sílice (CHCl_{3}/MeOH 95:5) para producir el compuesto
del título (19,50 g, 76%) como una espuma blanca pegajosa: TLC
(sílice, MeOH al 5% en CHCl_{3}) R_{f} 0,52; MS (ES) m/e 466,3
(M + H)^{+}; RMN de ^{1}H (400 MHz,
DMSO-d_{6}) \delta 7,94 (dd, 1H), 7,34 (t, 1H),
7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,54 (t, 1H), 6,46 (m, 2H),
5,31 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,23-4,13 (m, 2H), 4,17
(d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,02 (t, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,36
(m, 2H), 3,01 (dd,1H), 2,72 (dd, 1H), 2,68 (dd, 1H), 2,50 (dd, 1H),
1,96 (ddd, 2H).
A una disolución agitada de
(S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (19,50 g, 42 mmol) en dioxano (150 ml) se le añadió NaOH
1 N acuoso (75 ml, 75 mmol). La reacción turbia se agitó a
temperatura ambiente durante 2 h, y después la disolución homogénea
resultante se neutralizó con HCl 1 N acuoso (75 ml, 75 mmol). La
disolución se concentró hasta casi la sequedad mediante evaporación
rotatoria para precipitar el producto. El sobrenadante se separó
mediante decantación y el sólido gomoso remanente se redisolvió en
metanol. La disolución transparente entonces se reconcentró mediante
evaporación rotatoria. El sólido remanente se trituró con un
pequeño volumen de agua, se filtró y se secó al vacío para producir
el compuesto del título (16,38 g, 86%) como un polvo blanco. HPLC
(Hamilton PRP-1®, CH_{3}CN al 25%/H_{2}O que
contiene TFA al 0,1%) k' = 3,1; [\alpha]_{D} -112,3º (c
1,0, MeOH); MS (ES) m/e 452,3 (M + H)^{+}; RMN de ^{1}H
(400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 7,95 (dd, 1H), 7,34
(dt, 1H), 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,58 (t, 1H),
6,47 (m, 2H), 5,30 (d, J =16,5 Hz, 1H), 4,27 - 4,13 (m, 2 H), 4,15
(d, J = 16,5 Hz, 1 H), 4,02 (t, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,37 (m, 2H),
3,00 (dd, 1H), 2,69 (dd, 1H), 2,65 (dd, 1H), 2,41 (dd, 1H), 1,96
(ddd, 2H). Anal. calculado para
C_{22}H_{24}F_{3}N_{3}O_{4}: C, 58,53; H, 5,36; N, 9,31.
Encontrado: C, 58,37; H, 5,42; N, 9,20.
Una disolución de
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido
(0,33 g, 2 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,3 ml, 2 mmol) en
DMF anhidro (10 ml) se añadió lentamente gota a gota a una
disolución de
(R)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,3 g, 1 mmol) y trifenilfosfina (0,485 g, 26 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} anhidro (10 ml) a temperatura ambiente. Después de
17 h, la reacción se concentró. Una cromatografía en gel de sílice
(gradiente: MeOH al 0,5%-5%/CH_{2}Cl_{2}) produjo el compuesto
del título (0,35 g, 80%) como un aceite incoloro: MS (ES) m/e 482,3
(M + H)^{+}.
Una mezcla de
(R)-3-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,35 g, 0,7 mmol), ciclohexeno (0,75 ml, 7 mmol), Pd al
10%/C (88 mg, 0,07 mmol), e isopropanol (9 ml) se calentó a reflujo
bajo una atmósfera de argón. Después de 18 h, se añadió más Pd al
10%/C (36 mg, 0,03 mmol) y ciclohexeno (0,75 ml, 7 mmol). Después
de 36 h, la reacción se filtró en caliente a través de Celite®, y
el lecho corto del filtro se lavó con EtOAc caliente. Una
concentración dejó un aceite amarillo. Una cromatografía en gel de
sílice (MeOH al 1-15% en CH_{2}Cl_{2}) produjo
el compuesto del título (0,26 g, 77%) como un aceite incoloro: MS
(ES) m/e 466,2 (M + H)^{+}.
Se añadió LiOH \cdot H_{2}O (25 mg, 0,6 mmol)
a una disolución de
(R)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,25 g, 0,54 mmol) en THF (5 ml) y H_{2}O (2 ml) a
temperatura ambiente. Después de 18 h, la reacción se concentró
hasta la sequedad y el residuo se disolvió en H_{2}O (4 ml). La
disolución se llevó cuidadosamente hasta pH aproximadamente 4 con
HCl 3,0 N. El precipitado se recogió y se secó a un vacío elevado a
40 - 45ºC para producir el compuesto del título (0,15 mg, 62%) como
un sólido blancuzco: MS (ES) m/e 452,1 (M + H)^{+}. Anal.
calculado para C_{22}H_{24}F_{3}N_{3}O_{4} \cdot 0,5
H_{2}O: C, 57,38; H, 5,47; N, 9,12. Encontrado: C, 57,72; H,
5,24; N, 8,92.
Una disolución de
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]-4-metilpiridin-N-óxido
(0,60 g, 3,6 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,6 ml, 3,6 mmol)
en CH_{2}Cl_{2} anhidro (12 ml) se añadió gota a gota durante
3-4 min a una disolución de
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,60 g, 1,8 mmol) y trifenilfosfina (0,95 g, 3,6 mmol)
en CH_{2}Cl_{2} anhidro (6 ml) a temperatura ambiente. Después
de 17 h, la reacción se concentró. Una cromatografía en gel de
sílice (gradiente: MeOH al 1%-5%/CH_{2}Cl_{2}) para producir el
compuesto del título (0,45 g, 49%) como una espuma blancuzca: MS
(ES) m/e 496,3 (M + H)^{+}.
Una mezcla de
(S)-3-oxo-8-[3-(4-metil-1-oxopiridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,45 g, 0,9 mmol), ciclohexeno (0,93 ml, 9 mmol), Pd al
10%/C (0,2 g, 0,18 mmol), e isopropanol (9 ml) se calentó a reflujo
bajo una atmósfera de argón. Después de 18 h, se añadió más Pd al
10%/C (0,2 g, 0,18 mmol) y ciclohexeno (0,27 ml, 2,65 mmol).
Después de 36 h, la reacción se filtró en caliente a través de
Celite®, y el lecho corto del filtro se lavó con EtOAc caliente. Una
concentración dejó un aceite amarillo. Una cromatografía en gel de
sílice (MeOH al 1-3% en CH_{2}Cl_{2}) produjo el
compuesto del título (0,32 g, 74%) como una espuma blanca: MS (ES)
m/e 480,2 (M + H)^{+}.
Se añadió LiOH \cdot H_{2}O (33 mg, 0,79
mmol) a una disolución de
(S)-8-[3-(4-metilpiridin-2-illamino)propiloxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,32 g, 0,67 mmol) en THF (5 ml) y H_{2}O (2 ml) a
temperatura ambiente. Después de 18 h, la reacción se concentró
hasta la sequedad y el residuo se disolvió en H_{2}O (4 ml). La
disolución se extrajo con acetato de etilo, y después se llevó
cuidadosamente hasta pH aproximadamente 5 con HCl 3,0 N. El
precipitado se recogió y se secó a un vacío elevado a 40 - 45ºC
para producir el compuesto del título (0,22 mg, 71%) como un sólido
blancuzco: MS (ES) m/e 466,1 (M + H)^{+}. Anal. calculado
para C_{23}H_{26}F_{3}N_{3}O_{4}: C, 59,35; H, 5,63; N,
9,03. Encontrado: C, 58,97; H, 5,55; N, 8,73.
Según el método del Ejemplo 37(a), excepto
que se empleó
6-(metilamino)-2-piridiletanol en
lugar de
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido,
y se empleó
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
en lugar de
(R)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato,
se preparó el compuesto del título como un aceite incoloro: MS (ES)
m/e 466,2 (M + H)^{+}.
Según el método del Ejemplo 37(c), excepto
que se empleó
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo en lugar de
(R)-8-[3-(2-piridilamino)-1-propiloxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo, se preparó el compuesto del título como un sólido
blanco: MS (ES) m/e 452,2 (M + H)^{+}. Anal. calculado
para C_{22}H_{24}F_{3}N_{3}O_{4} \cdot 0,7 H_{2}O: C,
56,94; H, 5,52; N, 9,05. Encontrado: C, 56,80; H, 5,19; N,
8,85.
Una disolución de
2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridin-N-óxido
(336 g, 2,0 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,3 ml, 2,0 mmol)
en DMF anhidro (10 ml) se añadió a una disolución de
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2-feniletil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (350 g, 1,0 mmol) y trifenilfosfina (525 mg, 2,0 mmol) en
DMF anhidro (10 ml) a temperatura ambiente. Después de 24 h, la
reacción se concentró. Una cromatografía de resolución rápida en gel
de sílice (gradiente: EtOAc (500 ml), después MeOH al
5%/CHCl_{3}) produjo el compuesto del título como una espuma
naranja (288 mg, 57%): MS (ES) m/e 504 (M + H)^{+}.
Una mezcla de
(S)-2-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2-feniletil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (288 mg, 0,57 mmol), ciclohexeno (0,6 ml, 5,8 mmol), Pd
al 10%/C (62 mg, 0,58 mmol), y 2-propanol (6 ml) se
calentó a reflujo bajo una atmósfera de argón. Después de 31 h, la
mezcla se filtró en caliente a través de un lecho corto de Celite®,
el lecho corto del filtro se lavó con MeOH/CHCl_{3} 1:1 caliente
(200 ml), y el filtrado se concentró. Una cromatografía de
resolución rápida en gel de sílice (MeOH al 5%/CHCl_{3}), seguida
de una segunda cromatografía de resolución rápida en gel de sílice
(THF al 50%/ciclohexano) produjo el compuesto del título como una
espuma blancuzca (133 mg, 48%): MS (ES) m/e 488 (M +
H)^{+}.
Se añadió LiOH 1,0 N (0,3 ml, 0,3 mmol) a una
disolución de
(S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2-feniletil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (133 mg, 0,27 mmol) en THF (1,5 ml) y H_{2}O (1,2 ml) a
0ºC. La mezcla se dejó calentar hasta la temperatura ambiente
durante 18 h. La mezcla se lavó con Et_{2}O (2 x 5 ml) y después
se aplicó un vacío suave para eliminar los disolventes orgánicos
residuales. La capa acuosa se hizo pasar a través de un filtro
Acrodisk de 0,45 \mum, y después se acidificó cuidadosamente hasta
pH 6 utilizando HCl al 10% en H_{2}O a 0ºC. El precipitado se
recogió, se lavó con H_{2}O, y se secó al vacío a 50ºC para
producir el compuesto del título como un sólido blanco (62 mg,
48%): MS (ES) m/e 474 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{28}H_{31}N_{3}O_{4} \cdot 0,75 H_{2}O: C, 69,05; H,
6,75; N, 8,63. Encontrado: C, 69,05; H, 6,66; N, 8,55.
Se añadió azodicarboxilato de diisopropilo (0,3
ml, 1,5 mmol) a una disolución de
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2-(2-feniletil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
(350 mg, 1,0 mmol),
6-(metilamino)-2-piridiletanol (228
mg, 1,5 mmol), y trifenilfosfina (393 mg, 1,5 mmol) en THF anhidro
(10 ml) a 0ºC. Se dejó que la mezcla se calentase hasta la
temperatura ambiente a lo largo de 72 h y después se concentró. Una
cromatografía de resolución rápida en gel de sílice (EtOAc al
50%/hexanos), seguida de una segunda cromatografía de resolución
rápida en gel de sílice (EtOAc al 25%/hexano) produjo el compuesto
del título como una espuma blanca (250 mg, 51%): MS (ES) m/e 488 (M
+ H)^{+}.
Se añadió LiOH 1,0 N (0,62 ml, 0,62 mmol) a una
disolución de
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-(2-feniletil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (250 mg, 0,51 mmol) en THF (2,5 ml) y H_{2}O (1,9 ml) a
0ºC, y se dejó la reacción en agitación a temperatura ambiente
durante 18 h. La mezcla se lavó con Et_{2}O (2 x 5 ml) y después
se aplicó un vacío suave para eliminar los disolventes orgánicos
residuales. La capa acuosa se hizo pasar a través de un filtro
Acrodisk de 0,45 µm, y después se acidificó cuidadosamente hasta pH
6 utilizando HCl al 10% en H_{2}O a 0ºC. El precipitado se
recogió, se lavó con H_{2}O, y se secó al vacío a 50ºC para
producir el compuesto del título (134 mg, 55%) como un sólido
blanco: MS (ES) m/e 474 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{28}H_{31}N_{3}O_{4} \cdot 0,75 H_{2}O: C, 69,05; H,
6,73; N, 8,63. Encontrado: C, 69,23; H, 6,59; N, 8,55.
A una disolución de
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,18 g, 0,44 mmol) y Ph_{3}P (0,23 g, 0,88 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} (2 ml) se le añadió una disolución de
6-(metilamino)-2-piridiletanol (0,13
g, 0,88 mmol) y azodicarboxilato de dietilo (0,14 ml, 0,89 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} (2 ml). Después de 2 días a temperatura ambiente,
el disolvente se eliminó a presión reducida. Una cromatografía
radial sobre gel de sílice (placa de 6 mm, MeOH al 5%/CHCl_{3})
produjo un aceite transparente (0,63 g) que contenía una mezcla del
compuesto del título junto con
(S)-8-hidroxi-3-oxo-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo sin reaccionar. Este material se volvió a purificar
mediante cromatografía radial sobre gel de sílice (placa de 6 mm,
EtOAc al 50%/hexanos) para producir el compuesto del título (0,12 g)
como un aceite transparente: MS (ES) m/e 542,3 (M +
H)^{+}.
A una disolución de
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]-1-etoxi]-3-oxo-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acetato
de metilo (0,12 g, 0,22 mmol) en EtOH (2 ml) se le añadió NaOH 1 N
(0,50 ml). Después de 3,5 h a temperatura ambiente, la mayor parte
del disolvente se retiró a presión reducida para producir un residuo
blanco. Éste se disolvió en agua y la disolución se neutralizó
hasta pH = 7 con HCl 1 N. El precipitado resultante se recogió y se
secó al vacío para producir el compuesto del título (28,1 mg) como
un sólido blanco: [\alpha]_{D} -74,0º (c 0,05, EtOH); MS
(ES) m/e 528,3 (M + H)^{+}. Anal. calculado para
C_{28}H_{28}F_{3}N_{3}O_{4} \cdot 0,5 H_{2}O: C,
62,68; H, 5,45; N, 7,83. Encontrado: C, 62,60; H, 5,35; N, 7,66.
Se preparó una preparación que contenía 20 mg del
compuesto del Ejemplo 1 como un polvo anhidro esterilizado de la
forma siguiente. Se disuelven 20 mg del compuesto en 15 ml de agua
destilada. Se filtra la solución en condiciones estériles dentro de
una ampolla multidosis de 25 ml y se liofiliza. Se reconstituye el
polvo mediante la adición de 20 ml de dextrosa al 5% en agua (D5W)
para inyección intravenosa o intramuscular). Se determina de este
modo la dosificación mediante el volumen de inyección. La dilución
posterior puede realizarse por adición de un volumen medido de esta
unidad de dosificación a otro volumen de D5W para inyección, o se
puede añadir una dosis medida a otro mecanismo para dispensar el
fármaco, tal como a una botella o bolsa para infusión intravenosa
por goteo u otro sistema de inyección por infusión.
Se prepara una cápsula para la administración
oral mezclando y moliendo 50 mg del compuesto del ejemplo 1 con 75
mg de lactosa y 5 mg de estearato de magnesio. El polvo resultante
se tamiza y se rellena en una cápsula de gelatina dura.
Se preparó un comprimido para la administración
oral mezclando y granulando 20 mg de sacarosa, 150 mg de sulfato
cálcico dihidratado y 50 mg del compuesto del Ejemplo 1 con una
solución de gelatina al 10%. Los gránulos húmedos se tamizaron, se
secaron, se mezclaron con 10 mg de almidón, 5 mg de talco y 3 mg de
ácido esteárico y se prensaron en un comprimido.
La descripción anterior describe completamente
cómo preparar y utilizar la presente invención. Sin embargo, la
presente invención no se limita a las realizaciones particulares
descritas anteriormente en esta memoria, sino que incluye todas sus
modificaciones comprendidas dentro del alcance de las siguientes
reivindicaciones. Las diversas referencias a revistas, patentes y
otras publicaciones que se citan en esta memoria comprenden el
estado de la técnica y se incorporan en la presente memoria como
referencia, como si se presentaran en su totalidad.
Claims (9)
1. Un compuesto según la fórmula (I):
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
R^{1} es H, alquilo C_{1-6},
Ar-(alquilo C_{0-6}), Het-(alquilo
C_{0-6}), (cicloalquil
C_{3-6})-(alquilo C_{0-6}),
-CH_{2}CF_{3},
-(CH_{2})_{1-2}C(O)OR', o
-(CH_{2})_{2}OR';
R^{2} es
en donde Q^{1}, Q^{2} y Q^{3}
son cada uno CR^{y}, y Q^{4} es CR^{y} o
N;
W es -CH_{2}-CH_{2}-;
R^{g} es H, alquilo C_{1-6},
Het-(alquilo C_{0-6}), (cicloalquil
C_{3-7})-(alquilo C_{0-6}) o
Ar-(alquilo C_{0-6});
R^{k} es R^{g}, -C(O)R^{g}, o
-C(O)OR^{f};
R^{f} es H, alquilo C_{1-6},
o Ar-(alquilo C_{0-6});
R' es H, alquilo C_{1-6},
Ar-(alquilo C_{0-6}), o (cicloalquil
C_{3-6})-(alquilo C_{0-6});
R'' es R', -C(O)R', o
-C(O)OR';
R^{y} es H, halógeno, -OR^{g}, -SR^{g},
-CN, -NR^{g}R^{k}, -NO_{2}, -CF_{3},
CF_{3}S(O)_{r}-, -CO_{2}R^{g}, -COR^{g},
-CONR^{g}{}_{2}, o alquilo C_{1-6};
r es 0,1 ó 2;
s es 0, 1 ó 2;
u es 0 ó 1; y
v es 0 ó 1;
Ar es fenilo o naftilo que pueden estar
sustituidos con uno a tres sustituyentes seleccionados de alquilo
C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, (alquil
C_{1-4})tio, CF_{3}, NH_{2}, OH, F, Cl,
Br o I; y
Het es un anillo monocíclico de cinco o seis
miembros, o un anillo bicíclico de nuevo o diez miembros, que
contiene de uno a tres heteroátomos seleccionados del grupo del
nitrógeno, oxígeno y azufre, opcionalmente sustituido con uno a
tres sustituyentes seleccionados de alquilo
C_{1-4}, OR', SR', (alquil
C_{1-4})sulfonilo, (alquil
C_{1-4})sulfoxilo, -CN, N(R')_{2,}
CH_{2}N(R')_{2}, -NO_{2}, -CF_{3}, -CO_{2}R'
-CON(R')_{2}, -COR', -NR'C(O)R', F, Cl, Br,
I, o CF_{3}S(O)_{0-2}; o su sal
farmacéuticamente aceptable.
2. Un compuesto según la reivindicación 1, que
es:
ácido
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4-amino-2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4-metoxi-2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(2-piridilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-[2-(1,4,5,6-tetrahidropirimidinil)amino]propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(6-amino-2-piridilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(R)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-8-[3-(4-aminopiridin-2-ilamino)propiloxi]-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzaze-
pin-4-acético;
pin-4-acético;
ácido
(\pm)-2-bencil-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-2-(carboximetil)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-2-(4-aminobencil)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4,6-dimetilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-8-[3-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3-diazepin-2-ilamino)propiloxi]-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-
benzazepin-4-acético;
benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(4-trifluorometilbencil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(\pm)-3-oxo-8-[3-(4-metilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(R)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-
acético;
acético;
ácido
(S)-3-oxo-8-[3-(4-metilpiridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-3-oxo-8-[3-(1,4,5,6-tetrahidropirimid-2-ilamino)propiloxi]-2-[4-(trifluorometil)bencil]-2,3,4,5-tetrahi-
dro-1H-2-benzazepin-4-acético;
dro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-3-oxo-2-(2-feniletil)-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
ácido
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-(2-feniltetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
o
ácido
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-[4-(trifluorometil)-bencil]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético;
o su sal farmacéuticamente
aceptable.
3. Un compuesto según la reivindicación 1, que es
el ácido
(S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
o su sal farmacéuticamente aceptable.
4. Un compuesto según la reivindicación 1, que es
el ácido
(S)-8-[2-[6-(metilamino)piridin-2-il]etoxi]-3-oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-acético
o su sal farmacéuticamente aceptable.
5. Una composición farmacéutica que comprende un
compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y un
vehículo farmacéuticamente aceptable.
6. Un proceso para la preparación de un compuesto
de fórmula (I) como se define en la reivindicación 1, comprendiendo
dicho proceso hacer reaccionar un compuesto de fórmula (IV) con un
compuesto de fórmula (V):
en la que R^{1} y R^{2} son
como se definió en la fórmula (I), con cualquier grupo funcional
reactivo protegido, y L^{1} es OH o
halógeno;
y a continuación eliminar cualquier grupo
protector, y opcionalmente formar una sal farmacéuticamente
aceptable.
7. Un compuesto según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, para su uso como medicamento.
8. El uso de un compuesto según una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 4 en la fabricación de un medicamento para
el tratamiento de la osteoporosis.
9. El uso de un compuesto según una cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 4 en la fabricación de un medicamento para
la inhibición de la angiogénesis.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US2732096P | 1996-10-02 | 1996-10-02 | |
| US27320P | 1996-10-02 | ||
| US4377697P | 1997-04-11 | 1997-04-11 | |
| US43776P | 1997-04-11 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2252775T3 true ES2252775T3 (es) | 2006-05-16 |
Family
ID=26702318
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES97909979T Expired - Lifetime ES2252775T3 (es) | 1996-10-02 | 1997-10-01 | Antagonistas del receptor de vitronectina. |
Country Status (37)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0957917B1 (es) |
| JP (2) | JP4491072B2 (es) |
| KR (1) | KR100589578B1 (es) |
| CN (1) | CN1114403C (es) |
| AP (1) | AP1463A (es) |
| AR (1) | AR008878A1 (es) |
| AT (1) | ATE312089T1 (es) |
| AU (1) | AU733417B2 (es) |
| BG (1) | BG64581B1 (es) |
| BR (1) | BR9712248B1 (es) |
| CA (1) | CA2267224C (es) |
| CO (1) | CO4900046A1 (es) |
| CY (1) | CY2576B1 (es) |
| CZ (1) | CZ299076B6 (es) |
| DE (1) | DE69734833T2 (es) |
| DK (1) | DK0957917T3 (es) |
| DZ (1) | DZ2320A1 (es) |
| EA (1) | EA002419B1 (es) |
| ES (1) | ES2252775T3 (es) |
| HK (1) | HK1023730A1 (es) |
| HU (1) | HU229221B1 (es) |
| ID (1) | ID19623A (es) |
| IL (1) | IL129243A (es) |
| MA (1) | MA24361A1 (es) |
| MY (1) | MY137606A (es) |
| NO (1) | NO320194B1 (es) |
| NZ (1) | NZ334953A (es) |
| PE (1) | PE10499A1 (es) |
| PL (1) | PL190859B1 (es) |
| RO (1) | RO119881B1 (es) |
| SA (1) | SA98180936B1 (es) |
| SK (1) | SK285029B6 (es) |
| TR (1) | TR199900737T2 (es) |
| TW (1) | TW487702B (es) |
| UA (1) | UA60311C2 (es) |
| UY (2) | UY24735A1 (es) |
| WO (1) | WO1998014192A1 (es) |
Families Citing this family (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7125866B1 (en) * | 1999-04-30 | 2006-10-24 | Regents Of The University Of Michigan | Therapeutic applications of pro-apoptotic benzodiazepines |
| UA60311C2 (uk) * | 1996-10-02 | 2003-10-15 | Смітклайн Бічам Корпорейшн | Антагоністи рецептора вітронектину, спосіб одержання цих сполук та фармацевтична композиція |
| TW527355B (en) | 1997-07-02 | 2003-04-11 | Bristol Myers Squibb Co | Inhibitors of farnesyl protein transferase |
| BR9813208A (pt) * | 1997-09-24 | 2000-08-22 | Smithkline Beecham Corp | Antagonista receptor de vitronectina |
| TR200000786T2 (tr) * | 1997-09-24 | 2000-08-21 | Smithkline Beecham Corporation | Vitronektin reseptör antagonisti |
| US6372719B1 (en) | 1998-03-04 | 2002-04-16 | Jay Cunningham | ανβ3 integrin antagonists in combination with chemotherapeutic agents |
| DE19842415A1 (de) | 1998-09-16 | 2000-03-23 | Merck Patent Gmbh | Pharmazeutische Zubereitung |
| IL143901A0 (en) * | 1998-12-23 | 2002-04-21 | Searle & Co | Use of cyclooxygenase-2- inhibitor, a matrix metallaproteinase inhibitor, an antineoplastic agent and optionally radiation as a combination treatment of neoplasia |
| WO2000046215A1 (en) * | 1999-02-03 | 2000-08-10 | Merck & Co., Inc. | Benzazepine derivatives as alpha-v integrin receptor antagonists |
| JP2003506452A (ja) * | 1999-08-06 | 2003-02-18 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | 発作の治療に有用なビトロネクチン受容体アンタゴニスト |
| US6514964B1 (en) | 1999-09-27 | 2003-02-04 | Amgen Inc. | Fused cycloheptane and fused azacycloheptane compounds and their methods of use |
| DE10027514A1 (de) * | 2000-06-06 | 2002-01-03 | Basf Ag | Liganden von Integrinrezeptoren |
| DE10028575A1 (de) | 2000-06-14 | 2002-03-14 | Basf Ag | Integrinliganden |
| FR2806082B1 (fr) * | 2000-03-07 | 2002-05-17 | Adir | Nouveaux composes bicycliques antagonistes des recepteurs de la vitronectine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
| KR100854424B1 (ko) | 2001-01-29 | 2008-08-27 | 3-디멘져널 파마슈티칼즈 인코오포레이티드 | 치환된 인돌 및 인테그린 길항제로서의 이들의 용도 |
| JP4394882B2 (ja) * | 2001-04-10 | 2010-01-06 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | 接着形成阻害方法 |
| SE0101386D0 (sv) | 2001-04-20 | 2001-04-20 | Astrazeneca Ab | New compounds |
| US7109191B2 (en) | 2001-05-03 | 2006-09-19 | Merck & Co., Inc. | Benzazepinone alpha vintegrin receptor antagonists |
| CN100560131C (zh) | 2001-10-22 | 2009-11-18 | 斯克里普斯研究学院 | 抗体靶向化合物 |
| GB0215867D0 (en) * | 2002-07-09 | 2002-08-14 | Glaxosmithkline Spa | Novel method and compounds |
| JP2006522139A (ja) * | 2003-04-04 | 2006-09-28 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | ベンズアゼピンの製造方法およびその中間体 |
| AU2012216372B2 (en) * | 2004-04-02 | 2015-01-22 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for treating and preventing disease associated with alphaVbeta5 integrin |
| DK1734996T3 (da) * | 2004-04-02 | 2013-06-10 | Univ California | Fremgangsmåder og sammensætninger til behandling og forebyggelse af sygdom, der er associeret med alfa v beta 5-integrin |
| UA87854C2 (en) | 2004-06-07 | 2009-08-25 | Мерк Энд Ко., Инк. | N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators |
| TW200635902A (en) * | 2004-12-21 | 2006-10-16 | Smithkline Beecham Corp | Methods and formulations |
| US20080293691A1 (en) * | 2005-11-29 | 2008-11-27 | Smithkline Beecham Corporation | Treatment Method |
| JP5637855B2 (ja) | 2007-11-08 | 2014-12-10 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 蛋白尿症の治療のための方法及び組成物 |
| ES2428896T3 (es) * | 2007-11-16 | 2013-11-12 | Ube Industries, Ltd. | Compuesto de benzacepinona |
| EP2257538B1 (en) * | 2008-03-06 | 2016-04-27 | GlaxoSmithKline LLC | Process for the preparation of benzodiazepine derivatives |
| WO2010093706A2 (en) | 2009-02-10 | 2010-08-19 | The Scripps Research Institute | Chemically programmed vaccination |
| CN102427816A (zh) * | 2009-03-30 | 2012-04-25 | 宇部兴产株式会社 | 用于治疗或预防眼病的药物组合物 |
| JP5572996B2 (ja) * | 2009-05-15 | 2014-08-20 | 宇部興産株式会社 | ベンズアゼピノン化合物を有効成分として含有する医薬 |
| KR101752515B1 (ko) | 2009-07-24 | 2017-06-29 | 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 | Ａｖｂ５ 인테그린과 결부된 질환의 치료 및 예방을 위한 방법 및 조성물 |
| JP5856063B2 (ja) | 2009-11-17 | 2016-02-09 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン | 治療特性を有する１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオンおよび関連化合物 |
| EP2325194A1 (en) * | 2009-11-24 | 2011-05-25 | Glycotope GmbH | Process for the purification of glycoproteins |
| KR20160147007A (ko) | 2014-05-30 | 2016-12-21 | 화이자 인코포레이티드 | 선택적인 안드로겐 수용체 조절제로서의 카보니트릴 유도체 |
| EP4144725A4 (en) * | 2020-04-26 | 2023-10-25 | Jiangsu NHWA Pharmaceutical Co., Ltd | 1,5-DIHYDRO-2,4-BENZODIAZEPINE-3-ONE DERIVATIVE AND ITS USE |
| WO2023275715A1 (en) | 2021-06-30 | 2023-01-05 | Pfizer Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE236882T1 (de) * | 1992-12-21 | 2003-04-15 | Smithkline Beecham Corp | Bicyklische fibrinogen antagoniste |
| JPH10504807A (ja) * | 1994-06-29 | 1998-05-12 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | ビトロネクチン受容体拮抗剤 |
| PL318199A1 (en) * | 1994-06-29 | 1997-05-26 | Smithkline Beecham Corp | Antagonists of vitronectin receptors |
| WO1996006087A1 (en) * | 1994-08-22 | 1996-02-29 | Smithkline Beecham Corporation | Bicyclic compounds |
| WO1996026190A1 (en) * | 1995-02-22 | 1996-08-29 | Smithkline Beecham Corporation | Integrin receptor antagonists |
| UA60311C2 (uk) * | 1996-10-02 | 2003-10-15 | Смітклайн Бічам Корпорейшн | Антагоністи рецептора вітронектину, спосіб одержання цих сполук та фармацевтична композиція |
-
1997
- 1997-01-10 UA UA99031739A patent/UA60311C2/uk unknown
- 1997-09-29 DZ DZ970170A patent/DZ2320A1/xx active
- 1997-09-30 MA MA24817A patent/MA24361A1/fr unknown
- 1997-09-30 MY MYPI97004552A patent/MY137606A/en unknown
- 1997-10-01 EP EP97909979A patent/EP0957917B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-10-01 KR KR1019997002811A patent/KR100589578B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 WO PCT/US1997/018001 patent/WO1998014192A1/en active IP Right Grant
- 1997-10-01 CA CA002267224A patent/CA2267224C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-10-01 PE PE1997000876A patent/PE10499A1/es not_active Application Discontinuation
- 1997-10-01 CZ CZ0113299A patent/CZ299076B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 PL PL332674A patent/PL190859B1/pl unknown
- 1997-10-01 CO CO97057225A patent/CO4900046A1/es unknown
- 1997-10-01 TR TR1999/00737T patent/TR199900737T2/xx unknown
- 1997-10-01 AP APAP/P/1999/001493A patent/AP1463A/en active
- 1997-10-01 HU HU9903769A patent/HU229221B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 IL IL12924397A patent/IL129243A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 SK SK425-99A patent/SK285029B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 BR BRPI9712248-3A patent/BR9712248B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 ES ES97909979T patent/ES2252775T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-10-01 DE DE69734833T patent/DE69734833T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-10-01 AU AU47462/97A patent/AU733417B2/en not_active Ceased
- 1997-10-01 CN CN97180168A patent/CN1114403C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1997-10-01 NZ NZ334953A patent/NZ334953A/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 ID IDP973335A patent/ID19623A/id unknown
- 1997-10-01 RO RO99-00353A patent/RO119881B1/ro unknown
- 1997-10-01 UY UY24735A patent/UY24735A1/es not_active IP Right Cessation
- 1997-10-01 JP JP51694298A patent/JP4491072B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1997-10-01 DK DK97909979T patent/DK0957917T3/da active
- 1997-10-01 AT AT97909979T patent/ATE312089T1/de active
- 1997-10-01 EA EA199900356A patent/EA002419B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1997-10-02 AR ARP970104549A patent/AR008878A1/es active IP Right Grant
-
1998
- 1998-02-10 TW TW086114545A patent/TW487702B/zh not_active IP Right Cessation
- 1998-03-01 SA SA98180936A patent/SA98180936B1/ar unknown
- 1998-03-25 UY UY24935A patent/UY24935A1/es not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-03-31 BG BG103299A patent/BG64581B1/bg unknown
- 1999-03-31 NO NO19991590A patent/NO320194B1/no not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-05-22 HK HK00103033A patent/HK1023730A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-05-18 CY CY0700010A patent/CY2576B1/xx unknown
-
2009
- 2009-10-09 JP JP2009235447A patent/JP2010006838A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2252775T3 (es) | Antagonistas del receptor de vitronectina. | |
| KR20010024247A (ko) | 비트로넥틴 수용체 길항제 | |
| KR20010024249A (ko) | 비트로넥틴 수용체 길항제 | |
| SK102495A3 (en) | Fibrinogen receptor antagonists and pharmaceutical agents containing them | |
| US6825188B2 (en) | Vitronectin receptor antagonists | |
| US6458814B1 (en) | Vitronectin receptor antagonists | |
| US20020123487A1 (en) | Vitronectin receptor antagonist | |
| US20020128257A1 (en) | Vitronectin receptor antagonist | |
| CZ20001060A3 (cs) | Antagonista receptoru vitronektinu | |
| MXPA00002896A (es) | Antagonista del receptor de vitronectina | |
| MXPA00002895A (es) | Antagonista del receptor de vitronectina |