DE69829879T2

DE69829879T2 - Indolderivate als faktor xa inhibitoren

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Publication number: DE69829879T2
Application number: DE69829879T
Authority: DE
Inventors: Elisabeth Defossa; Uwe Heinelt; Otmar Klingler; Gerhard Zoller; Fahad Al-Obeidi; Armin Walser; Peter Wildgoose; Hans Matter
Original assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Current assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Priority date: 1997-12-24
Filing date: 1998-12-10
Publication date: 2006-03-02
Anticipated expiration: 2018-12-11
Also published as: CA2316172C; CZ20002310A3; EP1042287B1; NO316912B1; BR9814340A; BR9814340B1; PL341400A1; KR100608472B1; NZ505370A; DK1042287T3; US6337344B1; CN1283186A; DE69829879D1; TR200001954T2; KR20010033573A; CA2316172A1; MY120064A; TWI241294B; ATE293599T1; ID27044A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft die Inhibierung von Blutgerinnungsproteinen und insbesondere Indolderivate der Formel I
worin R^1a, R^1b, R^1c, R^1d, R², R³, R⁴ und A wie nachstehend ausgewiesen definiert sind. Die Verbindungen der Formel I sind Inhibitoren des Blutgerinnungsenzyms Faktor Xa. Die Erfindung betrifft auch Verfahren für die Herstellung der Verbindungen der Formel I, Verfahren zum Inhibieren von Faktor-Xa-Aktivität und zum Inhibieren von Blutgerinnselbildung, die Verwendung der Verbindungen der Formel I bei der Behandlung und Prophylaxe von Erkrankungen, die durch die Inhibierung der Faktor-Xa-Aktivität verhindert oder geheilt werden können, wie thromboembolische Erkrankungen, und die Verwendung der Verbindungen der Formel I bei der Herstellung von Arzneimitteln, die bei solchen Erkrankungen anzuwenden sind. Die Erfindung betrifft weiterhin Zusammensetzungen, die eine Verbindung der Formel I in Beimengung oder in anderweitiger Verbindung mit einem inerten Träger enthalten, insbesondere pharmazeutische Zusammensetzungen, die eine Verbindung der Formel I zusammen mit pharmazeutisch verträglichen Trägersubstanzen und/oder Hilfssubstanzen enthalten.
Die Fähigkeit, Blutgerinnsel zu bilden, ist zum Überleben wichtig. Bei bestimmten Erkrankungszuständen jedoch stellt die Bildung von Blutgerinnseln innerhalb des Kreislaufsystems selbst eine Todesursache dar. Es ist bei solchen Erkrankungszuständen trotzdem unerwünscht, das Gerinnungssystem vollständig zu inhibieren, weil dem lebensbedrohliche Hämorrhagie folgen würde. Um die Fälle von intravaskulärer Bildung von Blutgerinnseln zu vermindern, hat der Fachmann sich bemüht, einen wirksamen Inhibitor von Faktor Xa oder Pro-thrombinase, das Enzym, das in dem Prothrombinasekomplex enthalten ist, wo es zur Aktivierung von Thrombin während der Gerinnungsbildung dient, zu vermindern. Geeignete Konzentrationen eines solchen Inhibitors würden den zum Auslösen der Gerinnselbildung erforderlichen Spiegel an Prothrombinase-bildenden Mitteln erhöhen, würden den Gerinnungsprozess, wenn einmal eine Schwellenwertkonzentration von Thrombin erhalten wurde, jedoch nicht unnötig verlängern.
Die Blutkoagulation bzw. Blutgerinnung ist ein komplexer Vorgang unter Einbezug einer zunehmend stärker werdenden Reihe von Enzymaktivierungsreaktionen, wobei Plasmazymogene durch begrenzte Proteolyse nacheinander aktiviert werden. Mechanistisch wurde die Blutgerinnungskaskade in intrinsische und extrinsische Wege eingeteilt, die bei der Aktivierung von Faktor X konvergieren; anschließende Erzeugung des Thrombins verläuft über einen einzigen gemeinsamen Weg (siehe Schema 1).
Schema 1: Blutgerinnungskaskade
Der gegenwärtige Wissensstand lässt vermuten, dass der intrinsische Weg eine wichtige Rolle beim Halten und Wachstum der Fibrinbildung spielt, während der extrinsische Weg bei der Anfangsphase der Blutgerinnung kritisch ist. Es wird im Allgemeinen akzeptiert, dass Blutkoagulation nach der Bildung eines Gewebsfaktor-/Faktor-VIIa-Komplexes physikalisch gestartet wird. Einmal gebildet, startet dieser Komplex schnell die Koagulation bzw. Gerinnung durch Aktivierung von Faktoren IX und X. Der neu erzeugte aktivierte Faktor X, d.h. Faktor Xa, bildet dann einen 1:1-Komplex mit Faktor Va und Phospholipiden unter Bildung eines Prothrombinasekomplexes, der für das Umwandeln von löslichem Fibrinogen in unlösliches Fibrin über die Aktivierung von Thrombin von seiner Vorstufe Prothrombin verantwortlich ist. Wenn die Zeit fortschreitet, wird die Aktivität von Faktor-VIIa-/Gewebsfaktorkomplex (extrinsischer Weg) durch ein Proteaseinhibitorprotein vom Kunitz-Typ, TFPI, unterdrückt, welches, wenn mit Faktor Xa komplexiert, direkt die proteolytische Aktivität von Faktor-VIIa/Gewebsfaktor inhibieren kann. Um den Gerinnungsvorgang in Gegenwart eines inhibierten extrinsischen Systems zu halten, wird zusätzlich Faktor Xa über die Thrombin-vermittelte Aktivität des intrinsischen Wegs erzeugt. Somit spielt Thrombin eine duale autokatalytische Rolle, die ihre Eigenproduktion und die Umwandlung von Fibrinogen zu Fibrin vermittelt.
Die autokatalytische Beschaffenheit der Thrombinerzeugung ist ein wichtiger Schutz gegen ungesteuertes Bluten und gewährleistet, dass, wenn ein angegebener Schwellenwertspiegel von Prothrombinase vorliegt, Blutgerinnung bis zur Vollständigkeit verlaufen wird, was beispielsweise das Ende der Hämorrhagie bewirkt. Somit ist es sehr erwünscht, Mittel zu entwickeln, die die Gerinnung hemmen, ohne direkt Thrombin zu inhibieren. Jedoch trotz des lange bestehenden Wunsches für einen solchen Inhibitor gibt es gegenwärtig keinen spezifischen Xa-Inhibitor in der klinischen Nutzung.
Bei vielen klinischen Anwendungen gibt es einen großen Bedarf für die Verhinderung von intravaskulären Blutge rinnseln oder für eine gewisse Behandlung Antikoagulationsmittel bzw. Gerinnungshemmer. Die gegenwärtig verfügbaren Arzneimittel sind in vielen speziellen klinischen Anwendungen nicht befriedigend. Beispielsweise nahezu 50% der Patienten, die einen Totalhüftersatz gehabt haben, entwickeln eine tiefe Venenthrombose (DVT). Die gegenwärtig zugelassenen Therapien sind eine fixe Dosis von Heparin mit niederem Molekulargewicht (LMWH) und eine variable Dosis an Heparin. Selbst mit diesen Arzneistoffabfolgen entwickeln 10% bis 20% der Patienten DVT und 5% bis 10% entwickeln Blutungskomplikationen.
Eine weitere klinische Situation, für die bessere Gerinnungshemmer benötigt werden, betrifft Patienten, die einer transluminalen koronaren Angioplastie unterzogen wurden, und Patienten mit einem Risiko für Herzinfarkt oder die unter Crescendo-Angina leiden. Die gegenwärtige herkömmlich akzeptierte Therapie, die aus dem Verabreichen von Heparin und Aspirin besteht, ist mit einer 6%igen bis 8%igen Rate von abruptem Gefäßverschluss innerhalb von 24 Stunden des Verfahrens verbunden. Die Rate der Blutungskomplikationen, die aufgrund der Verwendung von Heparin Transfusionstherapie erfordern, ist auch ungefähr 7%. Darüber hinaus ist auch, selbst wenn verzögerte Verschlüsse wesentlich sind, die Verabreichung von Heparin nach Beendigung der Verfahren von geringem Wert und kann schädlich sein.
Die am umfangreichsten verwendeten Blutgerinnselbildungsinhibitoren sind Heparin und die verwandten sulfatierten Polysaccharide LMWH und Heparinsulfat. Diese Moleküle üben ihre Antigerinnungswirkungen durch Fördern des Bindens eines natürlichen Regulators des Gerinnungsvorgangs, Antithrombin III, an Thrombin und an Faktor Xa aus. Die Inhibitoraktivität von Heparin ist primär auf Thrombin gerichtet, welches ungefähr 100fach schneller als Faktor Xa inaktiviert ist. Obwohl mit Heparin verwandt, sind Heparinsulfat und LMWH etwas stärkere Inhibitoren von Xa als Thrombin. Die Unterschiede in vitro sind mäßig (3- bis 30fach) und die Wirkungen in vivo können inkonsequent sein. Hirudin und Hirulog sind zwei zusätz liche Thrombin-spezifische Antikoagulantien bzw. Gerinnungshemmer, die sich gegenwärtig im klinischen Versuch befinden. Jedoch, diese Antikoagulantien, die Thrombin inhibieren, sind auch mit Blutungskomplikationen verbunden.
Vorklinische Studien mit Pavianen und Hunden haben gezeigt, dass spezifische Inhibitoren von Faktor Xa Gerinnungsbildung ohne Erzeugen der Blutungsnebenwirkungen, die mit direkten Thrombininhibitoren beobachtet werden, verhindern. Solche Faktor-Xa-Inhibitoren schließen beispielsweise 2,7-Bis-(4-amidinobenzyliden)cycloheptanon und N(α)-Tosylglycyl-3-amidinophenylalaninmethylester („TENSTOP"), die wirksame inhibitorische Konzentrationen (Ki's) von etwa 20 nM bzw. 800 nM aufweisen, ein. (+)-(2S)-2-(4-({(3S)-1-Acetimidoyl-3-pyrrolidinyl}oxy)phenyl)-3-(7-amidino-2-naphthyl)propansäure ist auch ein Vertreter einer Klasse von Faktor-Xa-Inhibitoren (Katakura et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 197 (1993), 965–972). Bislang wurden diese Verbindungen jedoch nicht klinisch entwickelt.
Verschiedene spezifische Inhibitoren von Faktor Xa wurden mitgeteilt. Sowohl synthetische als auch Proteininhibitoren von Faktor Xa wurden identifiziert, einschließlich beispielsweise Antistasin („ATS") und Zecken-Antigerinnungspeptid („TAP"). ATS, das aus dem Blutegel, Haementerin officinalis, isoliert wird, enthält 119 Aminosäuren und hat einen Ki-Wert für Faktor Xa von 0,05 nM. TAP, das aus der Zecke, Ornithodoros moubata, isoliert wird, enthält 60 Aminosäuren und hat einen Ki-Wert für Faktor Xa von etwa 0,5 nM.
Die Wirksamkeit von rekombinant erzeugtem ATS und TAP wurde in einer Vielzahl von Tiermodellsystemen untersucht. Beide Inhibitoren senken die Blutungszeit verglichen mit anderen Antikoagulantien bzw. Gerinnungshemmern und verhindern das Gerinnen in einem Thromboplastin-induzierten, ligierten jugulären Venenmodell von tiefer Venenthrombose. Die in diesem Modell erreichten Ergebnisse korrelieren mit Ergebnissen, die unter Verwendung des gegenwärtigen Arzneistoffs der Wahl, Heparin, erhalten werden.
Subkutanes ATS erwies sich auch als eine wirksame Behandlung bei einem Thromboplastin-induzierten Modell von disseminierter intravaskulärer Koagulation (DIC). TAP verhindert wirksam arterielle Thrombose durch „hohe Scherwirkung" und „verminderten Fluss", die durch chirurgischen Ersatz eines Polyester(„DACRON")-transplantats in Maßen hervorgerufen werden, die eine klinisch akzeptable Verlängerung der aktivierten Teilthromboplastinzeit (aPTT), d.h. weniger als etwa die zweifache Verlängerung, erzeugten. Beim Vergleich verhinderte Standardheparin auch bei Dosen, die eine fünffache Erhöhung in dem aPTT verursachten, nicht die Thrombose und verminderte den Fluss innerhalb des Transplantats. Das aPTT ist ein klinisches Assay für Koagulation, das besonders empfindlich auf Thrombininhibitoren ist.
ATS und TAP wurden klinisch nicht entwickelt. Ein Hauptnachteil von diesen zwei Inhibitoren ist, dass Verabreichung der erforderlichen wiederholten Dosen die Erzeugung von neutralisierenden Antikörpern verursacht, was somit ihr Potenzial zur klinischen Verwendung begrenzt. Darüber hinaus machen die Größen von TAP und ATS orale Verabreichung unmöglich, was weiterhin die Anzahl an Patienten begrenzt, die von diesem Mittel profitieren könnten.
Andere Verbindungen mit einer Faktor-Xa-Inhibitorwirkung wurden beschrieben. WO-A-95/29189 offenbart beispielsweise Faktor-Xa-Inhibitoren, die eine peptidartige Struktur aufweisen, und WO-A-97/08165 offenbart cyclische Guanidine, die Faktor Xa inhibieren. In WO-A-97/21437 werden naphthylsubstituierte Benzimidazole beschrieben, die eine Inhibitorwirkung gegen Faktor Xa und Faktor IIa aufweisen und die als Antikoagulantien verwendet werden können, und in WO-A-97/30971 werden Faktor-Xa-Inhibitor-m-Amidinophenylanaloge beschrieben. Jedoch gibt es noch einen Bedarf für weitere Faktor-Xa-Inhibitoren mit verbesserten Eigenschaften, wie günstigem pharmakologischem Wirkungsprofil.
Ein spezieller Inhibitor für Faktor Xa würde wesentlichen praktischen Wert in der Praxis der Medizin aufweisen. Insbesondere würde ein Faktor-Xa-Inhibitor unter Umständen wirksam sein, wo vorliegende Arzneistoffe der Wahl, Heparin und verwandte sulfatierte Polysaccharide, unwirksam oder nur marginal wirksam sind. Somit gibt es einen Bedarf für einen Faktor-Xa-spezifischen Blutgerinnungsinhibitor mit niedrigem Molekulargewicht, der wirksam ist, jedoch nicht unerwünschte Nebenwirkungen verursacht. Die vorliegende Erfindung genügt diesem Bedarf durch Bereitstellen von neuen Faktor-Xa-Aktivitätinhibierungsindolderivaten der Formel I und ebenfalls durch Bereitstellen ähnlicher Vorteile.
Wie hierin verwendet, bezieht sich der Begriff „Faktor-Xa-Aktivität" auf die Fähigkeit von Faktor Xa, durch sich selbst oder in Anordnung mit Untereinheiten, die als der Prothrombinasekomplex bekannt sind, die Umwandlung von Prothrombin zu Thrombin zu katalysieren. Wenn in Bezug auf Faktor-Xa-Aktivität verwendet, schließt der Begriff „Inhibierung" sowohl die direkte als auch indirekte Inhibierung von Faktor-Xa-Aktivität ein. Indirekte Inhibierung von Faktor-Xa-Aktivität kann beispielsweise durch das Binden einer Verbindung der Formel I an Faktor Xa oder an Prothrombinase, um das Binden von Prothrombin an die aktive Stelle des Prothrombinkomplexes zu verhindern, ausgeführt werden. Direkte Inhibierung von Faktor-Xa-Aktivität kann beispielsweise durch das Binden einer erfindungsgemäßen Verbindung an löslichen Faktor Xa ausgeführt werden, um seine Anordnung in dem Prothrombinasekomplex zu verhindern. Wie hierin verwendet, bedeutet der Begriff „spezifisch", wenn in Bezug auf die Inhibierung von Faktor-Xa-Aktivität verwendet, dass eine Verbindung der Formel I Faktor-Xa-Aktivität inhibieren kann, ohne wesentliches Inhibieren der Aktivität von anderen ausgewiesenen Proteasen, einschließlich Plasmin und Thrombin (unter Verwendung der gleichen Konzentration des Inhibitors). Solche Proteasen sind in die Blutkoagulation und Fibrinolysekaskade einbezogen. Die vorliegende Erfindung stellt neue Verbindungen bereit, die Faktor-Xa-Aktivität inhibieren, jedoch nicht im Wesentlichen die Aktivität von anderen Proteasen, die in den Blutkoagulationsweg einbezogen sind, inhibieren.
Somit sind ein Gegenstand der vorliegenden Erfindung Indolderivate der Formel I
worin
zwei von den Resten R^1a, R^1b, R^1c, und R^1d unabhängig voneinander Wasserstoff, F, Cl, Br, I, Methyl, (C₁-C₄)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₄)-alkoxy-, OH oder NR^5aR^5b darstellen und gleich oder verschieden sind, und die anderen zwei der Reste R^1a, R^1b, R^1c und R^1d Wasserstoff darstellen;
R^5a Wasserstoff oder ((C₁-C₄)-Alkoxy)carbonyl- darstellt;
R^5b Wasserstoff darstellt;
R² Wasserstoff, Cl oder Br darstellt;
R³ -CO-NHR¹⁰ darstellt;
R⁷ Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₄)-alkoxy- oder -NR^5aR^5b darstellt;
R¹⁰ (C₁-C₁₀)-Alkyl-, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt, wobei der (C₁-C₁₀)-Alkyl-Rest, der Phenyl-Rest und der Naphthyl-Rest unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R¹¹ substituiert sind;
R¹¹ -N(R¹²)₂, -OR¹², -CO-N(R¹³)₂, -CO-R⁷, R^15b (C₁-C₁₄)-Alkyl, Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist, Naphthyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist, Chinolinyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist, und/oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert ist, Isochinolinyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist, und/oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert ist, Pyridyl, das unsubstituiert oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert ist, oder Het, das unsubstituiert oder mit R^15a substituiert ist, darstellt, wobei Reste R¹¹, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
Het den Rest eines 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Rings, enthaltend 1 oder 2 gleiche oder verschiedene Ringheteroatome, ausgewählt aus der Reihe bestehend aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel, darstellt;
jeder Rest R¹² unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹² Wasserstoff, (C₁-C₄)-Alkyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl-, Naphthyl, Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl-, Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Pyrrolidinyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder Piperidinyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt, wobei jeder Pyrrolidinyl-Rest und jeder Piperidinyl-Rest unsubstituiert oder an dem Stickstoffatom mit Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder R^15a substituiert ist;
jeder Rest R¹³ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹³ Wasserstoff, (C₁-C₄)-Alkyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl-, Naphthyl oder Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt oder die zwei Reste R¹³ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Ring bilden, der ein weiteres Stickstoffatom oder Sauerstoffatom in dem Ring enthalten kann, wobei das weitere Stickstoffatom in dem Ring unsubstituiert oder mit (C₁-C₄)-Alkyl oder Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl-substituiert ist;
R¹⁴ (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R¹⁴ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest darstellt, wobei die Substitution durch diese Reste an dem Stickstoffatom des heterocyclischen Rests zu einer positiv geladenen Gruppe mit X^– als Gegenion führt; oder R¹⁴ Oxido darstellt, wobei diese Substitution an dem Stickstoffatom des heterocyclischen Rests zu einem N-Oxid führt; und wobei Reste R¹⁴, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
R^15a (C₁-C₆)-Alkyl, ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-, -(CH₂)_t- N(R¹⁶)₂, (CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–), -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^–, -(CH₂)_t-NHR¹⁷, -(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ oder -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, wobei ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)- an ein Ringstickstoffatom gebunden ist, und wobei Reste R^15a, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
R^15b (C₁-C₆)-Alkyl, Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, F, Cl, Br, I, NO₂, -(CH₂)_t-N(R¹⁶)₂, -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–), -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^–, -(CH₂)_t-NHR¹⁷, -(CH₂)_t-CO-OR¹⁸, -(CH₂)_t-CO-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ oder -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, wobei Alkyl 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- oder 7-fach mit Fluor substituiert sein kann, und wobei Reste R^15b, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
t 0, 1, 2 oder 3 ist, wobei Zahlen t, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R¹⁶ unabhängig von den Bedeutungen von einem weiteren Rest R¹⁶ Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R¹⁶ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R¹⁶ enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R^16a unabhängig von den Bedeutungen von einem weiteren Rest R^16a (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R^16a vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R^16a enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R¹ ⁷ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹⁷ Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkylcarbonyl-, (C₁-C₆)-Alkoxycarbonyl-, (C₁-C₆)-Alkylcarbonyloxy-(C₁-C₆)-alkoxycarbonyl-, Phenylcarbonyl-, Phenoxycarbonyl-, Phenyl-(C₁-C₆)-alkoxycarbonyl-, Hydroxy, (C₁-C₆)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₆)-alkoxy- oder Amino darstellt und zusätzlich in den Gruppen -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ und -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ die zwei Reste R¹⁷ zusammen mit der Gruppe C(=N)-NH, an die sie gebunden sind, einen 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bilden können, und wobei in R¹⁷ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R¹⁷ enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R¹⁸ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹⁸ Wasserstoff oder (C₁-C₄)-Alkyl darstellt;
A einen Methylen-Rest -CH₂- darstellt;
R⁴ Phenyl darstellt, das in der Metaposition mit einem Rest R^15c substituiert ist;
R^15c -C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, worin die Reste R¹⁷ Wasserstoff darstellen;
X^– ein physiologisch verträgliches Anion darstellt; in allen ihren stereoisomeren Formen und Gemische davon in einem beliebigen Verhältnis und ihre physiologisch verträglichen Salze.
Im Allgemeinen können Reste oder Substituenten, die mehr als einmal in den Verbindungen der Formel I auftreten können, alle unabhängig voneinander die gleichen ausgewiesenen Bedeutungen aufweisen und können in alle Fällen gleich oder verschieden sein.
In den Verbindungen der Formel I vorliegende Alkylreste können geradkettig oder verzweigt sein. Dies gilt auch, wenn sie Substituenten tragen oder als Substituenten in anderen Resten, wie beispielsweise Alkoxyresten, Alkylcarbonylresten, Alkoxycarbonylresten oder Phenylalkylresten vorkommen. Ein Alkylrest, wie (C₁-C₆)-Alkyl, umfasst Alkylreste mit 1, 2, 3, 4, 5 oder 6 Kohlenstoffatomen, ein Alkylrest, wie (C₁-C₁₀)-Alkyl, zusätzlich Alkylreste mit 7, 8, 9 oder 10 Kohlenstoffatomen, ein Alkylrest, wie (C₁-C₁₄)-Alkyl, zusätzlich Alkylreste mit 11, 12, 13 oder 14 Kohlenstoffatomen. Beispiele für Alkylreste sind Methyl, Ethyl, n-Propyl, n-Butyl, n-Pentyl, n-Hexyl, n-Heptyl, n-Octyl, n-Nonyl, n-Decyl, n-Undecyl, n-Dodecyl, n-Tridecyl, n-Tetradecyl, Isopropyl, Isobutyl, Isopentyl, Isohexyl, Isooctyl, Neopentyl, 3-Methylpentyl, sec-Butyl, tert-Butyl und tert-Pentyl. Eine Gruppe von bevorzugten Alkylresten wird durch die Reste Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, Isobutyl, sec-Butyl und tert-Butyl gebildet. Beispiele für Fluor-substituierte Alkylgruppen sind Trifluormethyl, Pentafluorethyl, Heptafluorpropyl oder 2,2,2-Trifluorethyl, insbesondere Trifluormethyl.
Weiterhin, wie hierin verwendet, umfasst der Begriff Alkyl acyclische Alkylreste sowie Alkylreste, die ein oder mehrere alicyclisches Ringsystem enthalten. Somit umfasst zusätzlich zu acyclische Alkylreste der Begriff Alkyl ausdrücklich auch Cycloalkylreste, die über ein Ringkohlenstoffatom gebunden sind, und Cycloalkylalkylreste, die über ein Kohlenstoffatom in einer acyclischen Untereinheit gebunden sind. Dies gilt auch, wenn Alkylreste Substituenten tragen oder als Substituenten in anderen Resten vorkommen, wie beispielsweise in Alkoxyresten, Alkylcarbonylresten, Alkoxycarbonylresten oder Phenylalkylresten. Cycloalkylreste, die Alkylreste wiedergeben oder in Alkylresten enthalten sind, können monocyclisch oder polycyclisch, beispielsweise monocyclisch, bicyclisch oder tricyclisch, sein. Natürlich umfasst der Begriff Alkyl nur solche cyclischen Reste, die im Hinblick auf die Anzahl in den betrachteten, in dem Alkylrest vorliegenden Kohlenstoffatomen stabil sind. Da monocyclische Alkylreste mindestens drei Kohlenstoffatome in dem Ring enthalten müs sen, umfasst ein (C₁-C₄)-Alkylrest beispielsweise auch (C₃-C₄)-Monocycloalkylreste, ein (C₁-C₆)-Alkylrest umfasst auch (C₃-C₆)-Monocycloalkylreste, ein (C₁-C₁₀)-Alkylrest umfasst auch (C₃-C₁₀)-Monocycloalkylreste oder ein (C₁-C₁ ₄)-Alkylrest umfasst auch (C₃-C₁₄)-Monocycloalkylreste. Bicyclische und tricyclische Alkylreste enthalten vorzugsweise 6, 7, 8, 9, 10, 11 oder 12 Kohlenstoffatome. Somit umfasst ein (C₁-C₁₀)-Alkylrest beispielsweise auch (C₆-C₁₀)-Bicycloalkylreste und (C₆-C₁₀)-Tricycloalkylreste oder ein (C₁-C₁ ₄)-Alkylrest umfasst auch (C₆-C₁ ₄)-Bicycloalkylreste und (C₆-C₁ ₄)-Tricycloalkylreste, wobei beide vorzugsweise Bicycloalkylreste und Tricycloalkylreste mit 7 oder mehr Kohlenstoffatomen umfassen. Beispiele für cyclische Alkylreste oder für alkylsubstituierte Alkylreste, worin die Alkylgruppe, die als ein Substituent betrachtet wird, ein cyclischer Rest ist, sind Cyclopropyl, Cyclopropylmethyl, Cyclopropylethyl, Cyclopropylpropyl, Cyclopropylbutyl, Cyclopropylpentyl, Cyclopropylhexyl, Cyclopropylheptyl, Cyclobutyl, Cyclobutylmethyl, Cyclobutylethyl, Cyclobutylpropyl, Cyclobutylbutyl, Cyclobutylpentyl, Cyclobutylhexyl, Cyclopentyl, Cyclopentylmethyl, Cyclopentylethyl, Cyclopentylpropyl, Cyclopentylbutyl, Cyclopentylpentyl, Cyclohexyl, Cyclohexylmethyl, Cyclohexylethyl, Cyclohexylpropyl, Cyclohexylbutyl, Cycloheptyl, Cyclooctyl, Octahydroindenyl, Bicyclo[4.2.0]octyl, Octahydropentalenyl, Bicyclo[3.3.1]nonyl, Tetradecahydrophenanthryl, Dodecahydrophenalenyl, Octahydro-1,4-ethanoindenyl, Adamantyl oder Adamantylmethyl, worin die Ethyl-, Propyl-, Butyl-, Pentyl-, Hexyl- und Heptylgruppen, die die cyclischen Gruppen tragen, geradkettig oder verzweigt, wie vorstehend beschrieben, sein können. Die cyclischen Gruppen können über beliebiges geeignetes Kohlenstoffatom gebunden sein. Reste, abgeleitet von überbrückten Kohlenwasserstoffen, können über Brückenkopfkohlenstoffatome oder Kohlenstoffatome in den Brücken gebunden sein. Adamantyl kann beispielsweise 1-Adamantyl oder 2-Adamantyl sein.
Alkenylreste und Alkinylreste können auch geradkettig oder verzweigt sein. Beispiele für Alkenylreste sind Vinyl, 1-Propenyl, 2-Propenyl (= Allyl), Butenyl, 3-Methyl-2-butenyl, Pentenyl und Hexenyl, Beispiele für Alkinylreste sind Ethinyl, 1-Propinyl, 2-Propinyl (= Propargyl), Butinyl, Pentinyl und Hexinyl.
Die vorstehenden Angaben bezüglich Alkylresten gelten entsprechend für zweiwertige Alkylreste, d.h. Alkylenreste oder Alkandiylreste.
Beispiele für gesättigte zweiwertige Alkylreste sind Methylen (-CH₂-), Methylmethylen (-CH(CH₃)-), Dimethylmethylen (-C(CH₃)₂-), Ethylen (-CH₂-CH₂-), Methylethylen (-CH(CH₃)-CH₂- und -CH₂-CH(CH₃)-), Trimethylen -(CH₂)₃- oder Tetramethylen -(CH₂)₄-.
In monosubstituierten Phenylresten kann der Substituent in der 2-Position, der 3-Position oder der 4-Position angeordnet sein, wobei die 3-Position und die 4-Position bevorzugt sind. Wenn Phenyl zweifach substituiert ist, können die Substituenten in der 2,3-Position, der 2,4-Position, der 2,5-Position, der 2,6-Position, der 3,4-Position oder der 3,5-Position vorliegen. In drei Substituenten tragenden Phenylresten können die Substituenten in der 2,3,4-Position, 2,3,5-Position, 2,3,6-Position, 2,4,5-Position, 2,4,6-Position oder 3,4,5-Position vorliegen.
Naphthylreste können 1-Naphthyl und 2-Naphthyl sein. In substituierten Naphthylresten können die Substituenten in beliebigen Positionen vorliegen, d.h. in monosubstituierten 1-Naphthylresten in der 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- oder 8-Position und in monosubstituierten 2-Naphthylresten in der 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- oder 8-Position.
Beispiele für Pyridylreste sind 2-Pyridyl, 3-Pyridyl und 4-Pyridyl. Auch wenn ein Pyridylrest, der in einer Verbindung der Formel I vorliegt, an dem Stickstoffatom durch eine Oxidogruppe -O^– substituiert ist, d.h., wenn ein Pyridin-N-oxidrest in einer Verbindung der Formel I vorliegt, kann er über die 2-Position, die 3-Position oder die 4- Position von dem Pyridinring gebunden sein. Dies gilt auch für Pyridylreste, worin das Stickstoffatom mit einer Alkylgruppe usw. substituiert ist, wobei diese Substitution zu einer positiv geladenen Pyridiniumgruppe führt.
Chinolinyl- und Isochinolinylreste können 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- oder 8-Chinolinyl bzw. 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- oder 8-Isochinolinyl sein. In substituierten Chinolinyl- und Isochinolinylresten können die Substituenten in beliebigen gewünschten Positionen vorliegen, beispielsweise in einem monosubstituierten 4-Chinolinylrest in der 2-, 3-, 5-, 6-, 7- oder 8-Position und in einem monosubstituierten 1-Isochinolinylrest in der 3-, 4-, 5-, 6-, 7- oder 8-Position. Auch wenn ein Chinolinyl- oder Isochinolinylrest, der in einer Verbindung der Formel I vorliegt, an dem Stickstoffatom mit einer Oxidogruppe -O^– substituiert ist, d.h., wenn ein Chinolin- oder Isochinolin-N-oxidrest in einer Verbindung der Formel I vorliegt, kann er über eine beliebige gewünschte Position gebunden sein. Dies gilt auch für Chinolinyl- und Isochinolinylreste, worin das Stickstoffatom mit einer Alkylgruppe usw. substituiert ist, wobei diese Substitution zu einer positiv geladenen Chinolinium- oder Isochinoliniumgruppe führt.
Gruppen, wie Alkylgruppen, Phenylgruppen, Naphthylgruppen, Chinolinylgruppen oder Isochinolinylgruppen, welche in Gruppen wie R¹⁰ oder R¹¹ vorkommen oder welche solche wiedergeben oder welche als Substituenten eine oder mehrere der R^15b wiedergebenden Gruppen tragen, können vorzugsweise nicht mehr als 2, insbesondere nicht mehr als eine der Gruppen -(CH₂)_t-N(R¹⁶)₂, -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–), -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^–, -(CH₂)_t-NHR¹⁷, -(CH₂)_t-CO-OR¹⁸, -(CH₂)_t-CO-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ und -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ tragen. Von Gruppen, wie (C₁-C₆)-Alkyl, Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, F, Cl, Br, I, NO₂ und Fluor-substituiertem Alkyl, die als Substituenten in solchen Alkylgruppen, Phenylgruppen usw. vorliegen können, können gewöhnlich auch mehr als eine oder mehr als zwei Gruppen vorliegen, beispielsweise eine, zwei oder drei gleiche oder verschiedene Gruppen, entweder zusätzlich zu den ersten angeführten Gruppen -(CH₂)_t-N(R¹⁶)₂ usw. oder ohne dass die ersten angeführten Gruppen vorliegen.
Sofern nicht anders ausgewiesen, können Arylgruppen, wie Phenyl oder Naphthyl, die in den Verbindungen der Formel I vorliegen, im Allgemeinen unsubstituiert sein oder können an beliebigen gewünschten Positionen durch einen oder mehrere beispielsweise einen, zwei oder drei gleiche oder verschiedene Substituenten, beispielsweise Substituenten, wie (C₁-C₄)-Alkyl, wie Methyl oder tert-Butyl, Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, wie Methoxy, Ethoxy oder tert-Butoxy, Methylendioxy, Ethylendioxy, F, Cl, Br, I, Cyano, Nitro, Trifluormethyl, Hydroxymethyl, Formyl, Acetyl, Amino, Mono- oder Di-(C₁-C₄)-alkylamino, ((C₁-C₄)-Alkyl)carbonylamino, Hydroxycarbonyl, ((C₁-C₄)-Alkoxy)carbonyl, Carbamoyl, Phenyl, Benzyl, Phenoxy oder Benzyloxy, substituiert sein.
Im Allgemeinen können nicht mehr als zwei Nitrogruppen in den Verbindungen der Formel I vorliegen.
Beispiele für die fünfgliedrigen oder sechsgliedrigen gesättigten heterocyclischen Ringe, die durch die zwei Reste R¹³ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, gebildet werden können, sind Pyrrolidin, Piperidin, Piperazin oder Morpholin.
Beispiele für Het sind Pyrrolidin, Piperidin, Perhydroazepin, Tetrahydrofuran, Perhydropyran, Tetrahydrothiophen, Perhydrothiopyran, Pyrazolidin, Imidazolidin, Hexahydropyridazin, Hexahydropyrimidin, Piperazin, Dioxolan, Perhydrodioxan, Oxazolidin, Isoxazolidin, Thiazolidin, Isothiazolidin, Perhydro-1,2-oxazin, Perhydro-1,3-oxazin, Perhydro-1,4-oxazin (Morpholin), Perhydro-1,3-thiazin und Perhydro-1,4-thiazin (Thiomorpholin). Bevorzugte Gruppen Het schließen beispielsweise Gruppen ein, die ein Stickstoffatom als Ringheteroatom enthalten, wie Pyrrolidin oder Piperidin. In Het vorliegende Substituenten können über beliebige Positionen gebunden sein, sofern nicht anders ausgewiesen. Ein in Het vorliegendes Ringstickstoffatom kann einen oder zwei Substituenten tragen. Wenn ein Ringstickstoffatom zwei Substituenten trägt, d.h., wenn es quaternisiert ist, ist es positiv geladen, und die Verbindung der Formel I umfasst dann auch ein Anion X^– als Gegenion. Im Allgemeinen kann eine Gruppe Het einen oder mehr als einen Substituenten, beispielsweise einen, zwei, drei, vier oder fünf gleiche oder verschiedene Substituenten, tragen. Von den R^15a wiedergebenden Gruppen, die als Substituenten in einer Gruppe Het vorliegen können, können vorzugsweise nur eine oder zwei, insbesondere nicht mehr als eine der Gruppen ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-, -(CH₂)_t--(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ und -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ als ein Substituent in Het vorliegen, wohingegen beispielsweise (C₁-C₆)-Alkyl-Substituenten einmal oder mehr als einmal in Het vorliegen können, beispielsweise 1-, 2-, 3- oder 4fach, entweder ohne dass ein Substituent aus der ersten Gruppe vorliegt oder zusätzlich zu Substituenten aus der ersten Gruppe. Diese Angaben gelten entsprechend für Substituenten in anderen heterocyclischen Ringen. Eine Gruppe Het und ähnliche heterocyclische Gruppen können im Allgemeinen mit Substituenten, wie beispielsweise (C₁-C₆)-Alkylgruppen, und auch anderen Substituenten, beispielsweise Phenyl-(C₁-C₄)-alkylgruppen, wie einer Benzylgruppe, substituiert sein.
Beispiele für fünfgliedrige oder sechsgliedrige heterocyclische Ringe, die mit zwei Resten R¹⁷ zusammen mit der Gruppe C(=N)-NH, an die sie gebunden sind, gebildet werden, sind 4,5-Dihydro-1H-imidazol und 1,4,5,6-Tetrahydropyrimidin.
Beispiele für den Substituenten ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-, der an das Ringstickstoffatom eines Heterocyclus gebunden ist, sind der Acetimidoylrest, d.h. der Rest CH₃-C(=NH)-, oder die Reste CH₃-CH₂-C(=NH)-, CH₃-CH₂-CH₂-C(=NH)- oder (CH₃)₂CH-C(=NH)-.
Nachstehend sind einige Gruppen, die den Substituenten ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)- enthalten, aufgeführt, die in dem Rest R³ vorliegen können. Die nachstehenden Gruppen entsprechen der Gruppe -NHR¹⁰ in der Definition der Verbindungen der Formel I und sind an die Gruppe CO in der Gruppe -CO-NHR¹⁰ über das Stickstoffatom mit einer freien Bindung gebunden, die in den nachstehenden Formeln durch die Linie, beginnend von einer NH-Gruppe, ausgewiesen ist. In den nachstehenden Formeln wird der Substituent ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)- als Aim- abgekürzt.
Ein durch die Formel -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–) wiedergegebener Rest ist der Rest eines Aminoxids.
Physiologisch verträgliche Anionen X^–, die in den Verbindungen der Formel I vorliegen, wenn eine positiv geladene Gruppe, wie eine quaternäre Ammoniumgruppe, oder eine Pyridinium-, Chinolinium- oder Isochinoliniumgruppe vorliegt, können Anionen darstellen, die von geeigneten anorganischen Säuren oder organischen Carbonsäuren oder Sulfonsäuren abgeleitet sind. Geeignete Säuren sind insbesondere pharmazeutisch verwendbare oder nicht toxische Säuren. Beispiele für solche Säuren sind jene, die nachstehend als Beispiele für Säuren angegeben werden, die physiologisch verträgliche Salze mit Verbindungen der Formel I, die basische Gruppen enthalten, bilden können. Wenn eine Verbindung der Formel I ein Anion X^– enthält und gleichzeitig als ein Säureadditionssalz, das bei einer basischen Gruppe gebildet wird, vorliegt, kann das Anion X^– das Gleiche wie oder verschieden von dem durch die Salzbildung eingeführten Anion sein.
Physiologisch verträgliche Salze von Verbindungen der Formel I sind insbesondere pharmazeutisch verwendbare oder nicht toxische Salze. Solche Salze werden beispielsweise aus Verbindungen der Formel I gebildet, die Säuregruppen enthalten, beispielsweise Carbonsäure- oder Sulfonsäuregruppen. Beispiele für solche Salze sind Salze, die Kationen von Alkalimetallen oder Erdalkalimetallen enthalten, wie beispielsweise Natrium-, Kalium-, Magnesium- oder Calciumsalze, oder Salze, die das unsubstituierte Ammoniumkation NH₄ ⁺ oder organische Ammoniumkationen enthalten, wobei die Letzteren Kationen einschließen, die aus physiologisch verträglichen organischen Aminen erhalten wurden, wie beispielsweise Methylamin, Ethylamin, Triethylamin, Ethanolamin, Tris(2-hydroxyethyl)-amin oder Aminosäuren durch Protonierung, und geeignete quaternäre Ammoniumkationen, wie beispielsweise Tetramethylammonium.
Verbindungen der Formel I, die basische Gruppen enthalten, beispielsweise eine oder mehrere Aminogruppen und/oder Amidinogruppen oder Guanidinogruppen, bilden Säureadditionssalze mit beispielsweise anorganischen Säuren, organischen Carbonsäuren und organischen Sulfonsäuren. Beispiele für solche Säuren, deren Anionen in physiologisch verträglichen Salzen von Verbindungen vorliegen können, sind Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Essigsäure, Benzoesäure, Oxalsäure, Malonsäure, Bernsteinsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Äpfelsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Methansulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure oder Naphthalinsulfonsäure.
Die vorliegende Erfindung erfasst auch innere Salze, Zwitterionen oder Betaine der Verbindungen der Formel I.
Physiologisch verträgliche Salze der Verbindungen der Formel I können gemäß Standardverfahren hergestellt werden, beispielsweise durch Kombinieren der Verbindung der Formel I mit der gewünschten Base, beispielsweise mit einem Alkalimetallhydroxid oder Carbonat oder Hydrogencarbonat oder einem Amin oder mit der gewünschten Säure in einem Lösungs- oder Verdünnungsmittel. Ein physiologisch verträgliches Salz einer Verbindung der Formel I kann auch aus einem weiteren Salz durch Kationenaustausch oder Anionenaustausch durch Standardverfahren hergestellt werden. Darüber hinaus erfasst die vorliegende Erfindung auch Salze der Verbindungen der Formel I, die beispielsweise während der chemischen Synthese der Verbindungen erhalten werden und die weniger zur gewünschten Verwendung der Verbindungen der Formel I geeignet sind, die jedoch als Ausgangsmaterialien für die anschließende Herstellung eines gewünschten physiologisch verträglichen Salzes verwendet werden können. Die vorliegende Erfindung erfasst weiterhin Solvate der Verbindungen der Formel I, beispielsweise Hydrate oder Alkoholate.
Die Verbindungen der Formel I können als stereoisomere Formen vorliegen. Die vorliegende Erfindung erfasst auch alle möglichen Stereoisomeren. Beispielsweise können die Verbindungen der Formel I gemäß der Erfindung optisch aktive Kohlenstoffatome enthalten, die unabhängig voneinander R-Konfiguration oder S-Konfiguration aufweisen können. Die Verbindungen der Formel I können somit in Form von individuellen Enantiomeren oder individuellen Diastereomeren oder in Form von Enantiomerengemischen, einschließlich Racematen oder Diastereomerengemischen, vorliegen. Die vorliegende Erfindung betrifft sowohl reine Enantiomere als auch Gemische von Enantiomeren in allen Verhältnissen und reine Diastereomeren und Gemische von Diastereomeren in allen Verhältnissen. Die Erfindung erfasst Gemische von zwei Stereoisomeren sowie Gemische von mehr als zwei Stereoisomeren und alle Verhältnisse von Stereoisomeren in den Gemischen. Die Verbindungen der Formel I können auch als E-Isomere oder Z-Isomere (oder cis-Isomere oder trans-Isomere) vorliegen. Die vorliegende Erfindung betrifft sowohl reine E-Isomere als auch Z-Isomere und Gemische von E-Isomeren und Z-Isomeren in allen Verhältnissen.
Diastereomere, einschließlich E/Z-Isomere, können in die einzelnen Isomeren, beispielsweise durch Chromatographie, getrennt werden. Gemische von Enantiomeren, einschließlich Racemate, können in die zwei Enantiomeren durch Chromatographie an chiralen Phasen oder durch Auftrennung gemäß Standardverfahren, wie Kristallisation der diastereomeren Salze, die mit Hilfsmitteln erhalten wurden, getrennt werden. Stereochemisch reine Verbindungen, beispielsweise reine Enantiomere, können auch durch Anwenden von optisch aktiven Ausgangsmaterialien bei der Synthese oder durch Anwenden von stereoselektiven Reaktionen erhalten werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I können weiterhin bewegliche Wasserstoffatome enthalten, d.h., sie können in verschiedenen tautomeren Formen vorliegen. Die vorliegende Erfindung betrifft alle diese Tautomeren.
Die vorliegende Erfindung erfasst weiterhin Derivate der Verbindungen der Formel I, worin funktionelle Gruppen durch geeignete Gruppen maskiert oder geschützt sind, beispielsweise durch übliche Schutzgruppen. Solche funktionellen Gruppen sind beispielsweise Carbonsäuregruppen, die als Estergruppen oder Amidgruppen vorliegen können oder acylierbare, Stickstoff enthaltende Gruppen, die als Acylderivate vorliegen können. Die vorliegende Erfindung erfasst auch andere Derivate und Prodrugs der Erfindungen der Formel I, die aufgebaut sind, um das Eigenschaftsprofil der Verbindungen der Formel I zu verstärken und die gemäß dem Fachmann gut bekannten Techniken hergestellt werden können, und sie erfasst aktive Metaboliten der Verbindungen der Formel I.
Eine besondere Gruppe von Verbindungen der Formel I wird durch jene Verbindungen gebildet, worin zwei von den Re sten R^1a, R^1b, R^1c und R^1d unabhängig voneinander Wasserstoff, F, Cl, Br, I, Methyl, (C₁-C₄)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₄)-alkoxy-, OH oder NR^5aR^5b darstellen und gleich oder verschieden sind, und die anderen zwei der Reste R^1a, R^1b, R^1c und R^1d Wasserstoff darstellen;
R^5a Wasserstoff oder ((C₁-C₄)-Alkoxy)carbonyl- darstellt;
R^5b Wasserstoff darstellt;
R² Wasserstoff, Cl oder Br darstellt;
R³ -CO-NHR¹⁰ darstellt;
R⁷ Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₄)-alkoxy- oder -NR^5aR^5b darstellt;
R¹⁰ (C₁-C₈)-Alkyl-, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt, wobei der (C₁-C₈)-Alkyl-Rest, der Phenyl-Rest und der Naphthyl-Rest unsubstituiert oder mit einem oder zwei gleichen oder verschiedenen Resten R¹¹ substituiert sind;
R¹¹ -NHR¹², -OR¹², -CO-N(R¹³)₂, -CO-R⁷, R^15b, Cyclohexyl, Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist, Naphthyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R15b substituiert ist, Pyridyl, das unsubstituiert oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert ist, oder Het, das unsubstituiert oder mit R^15a substituiert ist, darstellt, wobei Reste R¹¹, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
Het den Rest eines 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Rings, enthaltend 1 oder 2 gleiche oder verschiedene Ringheteroatome, ausgewählt aus der Reihe, bestehend aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel, darstellt;
R¹² Wasserstoff, Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Pyrrolidinyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder Piperidinyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt, worin jeder Pyrrolidinylrest und jeder Piperidinylrest unsubstituiert oder an dem Stickstoffatom mit Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder R^15a substituiert ist;
jeder Rest R¹³ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹³ Wasserstoff, (C₁-C₄)-Alkyl oder Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt oder die zwei Reste R¹³ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Ring bilden, der ein weiteres Stickstoffatom oder Sauerstoffatom in dem Ring enthalten kann, wobei das weitere Stickstoffatom in dem Ring unsubstituiert oder mit (C₁-C₄)-Alkyl oder Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- substituiert ist;
R¹⁴ (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R¹⁴ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest darstellt, wobei die Substitution durch diese Reste an dem Stickstoffatom des heterocyclischen Rests zu einer Pyridiniumgruppe mit X^– als Gegenion führt; oder R¹⁴ Oxido darstellt, wobei diese Substitution an dem Stickstoffatom des Pyridiniumrests zu einem Pyridinium-N-oxid führt; und wobei Reste R¹⁴, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
R^15a (C₁-C₆)-Alkyl, ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-, -(CH₂)_t-N(R¹⁶)₂, -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–), -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^–, -(CH₂)_t-NHR¹⁷, -(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ oder -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, wobei ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)- an ein Ringstickstoffatom gebunden ist, und wobei Reste R^15a, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
R^15b (C₁-C₆)-Alkyl, Hydroxy, F, Cl, Br, -(CH₂)_t-N(R¹⁶)₂, -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–), -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^–, -(CH₂)_t-NHR¹⁷, -(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ oder -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, worin Reste R^15b, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
t 0, 1, 2 oder 3 ist, wobei die Zahlen t, wenn mehr als einmal im Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R¹⁶ unabhängig von den Bedeutungen von einem weiteren Rest R¹⁶ Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R¹⁶ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R¹⁶ enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R^16a unabhängig von den Bedeutungen von einem weiteren Rest R^16a (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R^16a vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R^16a enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R¹⁷ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹⁷ Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkylcarbonyl-, (C₁-C₆)-Alkoxycarbonyl-, (C₁-C₆)-Alkylcarbonyloxy-(C₁-C₆)-alkoxycarbonyl-, Phenylcarbonyl-, Phenoxycarbonyl-, Phenyl-(C₁-C₆)-alkoxycarbonyl-, Hydroxy, (C₁-C₆)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₆)-alkoxy- oder Amino darstellt und zusätzlich in den Gruppen -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ und -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ die zwei Reste R¹⁷ zusammen mit der Gruppe C(=N)-NH, an die sie gebunden sind, einen 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bilden können, und wobei in R¹⁷ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R¹⁷ enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können;
jeder Rest R¹⁸ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹⁸ Wasserstoff oder (C₁-C₄)-Alkyl darstellt;
A einen Methylen-Rest -CH₂- darstellt;
R⁴ Phenyl darstellt, das in der Metaposition mit einem Rest R^15c substituiert ist;
R^15c -C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, worin die Reste R¹⁷ Wasserstoff darstellen;
X^– ein physiologisch verträgliches Anion darstellt;
in allen ihren stereoisomeren Formen und Gemische davon in einem beliebigen Verhältnis und ihre physiologisch verträglichen Salze.
Wie bei jeder Gruppe von strukturell verwandten Verbindungen, die eine besondere generische Verwendbarkeit besitzen, sind bestimmte Gruppen und Konfigurationen für Verbindungen der Formel I bei deren Endanwendung bevorzugt.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind jene, worin die Reste R^1a, R^1b R^1c und R^1d unabhängig voneinander ausgewählt sind aus den Reihen, bestehend aus Wasserstoff, Methyl, F, Cl, Br, Hydroxy, Methoxy, Benzyloxy und -NHR^5a.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin drei oder alle vier von den Resten R^1a, R^1b, R^1c und R^1d Wasserstoff darstellen. Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin die Reste R^1c und R^1d Wasserstoff darstellen.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin die Reste R^1a und R^1b Wasserstoff darstellen oder ein oder zwei der Reste R^1a und R^1b von Wasserstoff verschieden sind. Besonders bevorzugte Verbindungen der Formel I sind jene, worin einer der Reste R^1a und R^1b Wasserstoff darstellt und der andere der Reste R^1a und R^1b Wasserstoff darstellt oder von Wasserstoff verschieden ist. Besonders bevorzugt sind Verbindungen der Formel I, worin einer der Reste R^1a und R^1b aus den Reihen, bestehend aus Wasserstoff, Methyl, F, Br, Hydroxy, Methoxy, Benzyloxy und -NHR^5a, ausgewählt ist und der andere der Reste R^1a und R^1b sowie die Reste R^1c und R^1d Wasserstoff darstellen.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin der Rest R^5a Wasserstoff oder tert-Butyloxycarbonyl darstellt.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin R¹⁰ (C₁-C₁₀)-Alkyl, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt, worin der (C₁-C₁₀)-Alkylrest und der Phenylrest mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R¹¹ substituiert sind und der Naphthylrest unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R¹¹ substituiert ist und insbesondere der (C₁-C₁₀)-Alkylrest und der Phenylrest mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R¹¹ substituiert sind und der Naphthylrest unsubstituiert ist.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin R¹¹ R^15b, (C₁-C₁ ₄)-Alkyl, Chinolinyl, Isochinolinyl oder Pyridyl darstellt, worin Chinolinyl, Isochinolinyl und Pyridyl unsubstituiert oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert sind. Ein R¹¹ wiedergebender (C₁-C₁ ₄)-Alkylrest hat vorzugsweise bis zu 12, bevorzugter bis zu 10 Kohlenstoffatome.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin R¹⁴ (C₁-C₆)-Alkyl darstellt.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin R^15b (C₁-C₆)-Alkyl darstellt, worin der Alkylrest 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- oder 7fach mit Fluor substituiert sein kann oder R^15b F, Cl, I, -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^– oder -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin t 0 oder 1 ist, insbesondere 0, worin Zahlen t, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sind.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin R^16a (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkinyl oder Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl darstellt.
Bevorzugte Verbindungen der Formel I sind auch jene, worin R¹⁷ Wasserstoff darstellt.
Besonders bevorzugte Verbindungen der Formel I sind jene, worin zwei oder mehr Reste, wie vorstehend für bevorzugte Verbindungen der Formel I ausgewiesen, definiert sind, oder Reste können eine oder einige der spezifischen Bedeutungen der Reste, die in ihren allgemeinen Definitionen angegeben wurden oder in den Definitionen der bevorzugten Verbindungen vorstehend, aufweisen. Alle möglichen Kombinationen von Definitionen, die in bevorzugten Definitionen oder von speziellen Bedeutungen der Reste explizit angegeben wurden, sind Gegenstand der vorliegenden Erfindung.
Bezüglich aller bevorzugten Verbindungen der Formel I sind auch alle stereoisomeren Formen und Gemische davon in beliebigem Verhältnis und ihre physiologisch verträglichen Salze sowie ihre Prodrugs explizit alle Gegenstände der vorliegenden Erfindung. In ähnlicher Weise sind in allen bevorzugten Verbindungen der Formel I alle Reste, die mehr als einmal in dem Molekül vorliegen, unabhängig voneinander und können gleich oder verschieden sein.
Die Verbindungen der Formel I können durch Anwenden von Verfahren und Techniken, die an sich gut bekannt sind, und dem Durchschnittsfachmann geläufig sind, hergestellt werden. Ausgangsmaterialien oder Aufbaublöcke zur Verwendung der allgemeinen Syntheseverfahren, die bei der Herstellung von Verbindungen der Formel I angewendet werden können, sind für den Durchschnittsfachmann leicht zugänglich. In vielen Fällen sind sie kommerziell erhältlich oder wurden in der Literatur beschrieben. Andererseits können sie aus leicht zugänglichen Vorstufenverbindungen analog zu in der Literatur beschriebenen Verfahren oder durch Verfahren oder analog zu in dieser Anmeldung beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
Im Allgemeinen können Verbindungen der Formel I beispielsweise im Verlauf einer Konvergenzsynthese durch Verbinden von zwei oder mehreren Fragmenten, die retrosynthetisch aus der Formel I abgeleitet werden können, hergestellt werden. Insbesondere werden geeignet substituierte Ausgangsindolderivate als Aufbaublöcke bei der Herstellung der Verbindungen der Formel I angewendet. Wenn nicht kommerziell erhältlich, können solche Indolderivate gemäß gut bekannten Standardverfahren für die Herstellung des Indolringsystems, wie beispielsweise die Fischer-Indol-Synthese, die Madelung-Indol-Synthese, die Indolsynthese ausgehend von N-Chloranilinen und β-Ketosulfiden, beschrieben von Gassman et al., die Bischler-Indol-Synthese, die Reissert-Indol-Synthese oder die Nenitzescu-Indol-Synthese, hergestellt werden. Durch Auswählen geeigneter Vorstufenmoleküle erlauben diese Indolsynthesen die Einführung einer Vielzahl von Substituenten in die verschiedenen Positionen des Indolsystems, welches dann chemisch modifiziert werden kann, um schließlich an dem Molekül der Formel I das gewünschte Substitutionsmuster zu erzielen. Als eine der neueren Übersichten, worin zahlreiche Einzelheiten und Literaturhinweise der Chemie der Indole und Syntheseverfahren für deren Herstellung gefunden werden können, wird in Band 25 „Indoles, Part One", W. J. Houlihan (Hrsg.), 1972, aus den Reihen „The Chemistry of Heterocyclic Compounds", A. Weissberger und E. C. Taylor (Hrsg.), John Wiley & Sons, angegeben.
Beispiele für viele kommerziell erhältliche Indolderivate, die als Ausgangsmaterialien für die Herstellung der Verbindungen der Formel I geeignet sind, sind die Nachstehenden (die angeführten Säuren sind kommerziell als freie Säuren selbst erhältlich und/oder als die Methyl- oder Ethylester): Indol-2-carbonsäure, Indol-2,3-dicarbonsäure, 5-Fluorindol-2-carbonsäure, 5-Chlorindol-2-carbonsäure, 5-Brom-indol-2-carbonsäure, 5-Methoxy-indol-2-carbonsäure, 5-Hydroxy-indol-2-carbonsäure, 5,6-Dimethoxy-indol-2-carbonsäure, 4-Benzyloxyindol-2-carbonsäure, 5-Benzyloxyindol-2-carbonsäure, 6-Benzyloxy-5-methoxy-indol-2-carbonsäure, 5-Methyl-indol-2-carbonsäure, 7-Methyl-indol-2-carbonsäure, 4-Methoxy-indol-2-carbonsäure, 6-Methoxy-indol-2-carbonsäure, 4,6-Dimethoxy-indol-2-carbonsäure, 4,6-Dichlor-indol-2-carbonsäure, 5-Nitro-indol-2-carbonsäure, 7-Nitro-indol-2-carbonsäure, 7-tert-Butylcarbonylamino-indol-2-carbonsäure, 5-Brom-3-methyl-indol-2-carbonsäure.
Wenn Ausgangsindolderivate synthetisiert werden sollen, kann dies beispielsweise gemäß den gut bekannten vorste hend erwähnten Indolsynthesen erfolgen. Nachstehend werden sie kurz erläutert, sie sind allerdings Standardverfahren, die in der Literatur umfassend erörtert werden und sind dem Fachmann gut bekannt.
Die Fischer-Indol-Synthese umfasst die saure Cyclisierung von Phenylhydrazonen, beispielsweise der allgemeinen Formel II
die durch verschiedene Verfahren erhalten werden können und worin R³⁰, R³¹ und R³² und n eine breite Vielzahl von Bedeutungen aufweisen können. Neben Wasserstoff und Alkyl können R³¹ und R³² insbesondere Estergruppen oder Methyl- oder Ethylgruppen bedeuten, die eine Estergruppe als Substituent tragen, wodurch somit die CO-Einheit, die in der Gruppe R³ in den Verbindungen der Formel I auftritt, in das Indolmolekül eingeführt wird. Als Beispiele für viele Literaturhinweise, die die Synthese von Indolderivaten gemäß der Fischer-Synthese beschreiben, neben dem vorstehend erwähnten Buch, das von Houlihan herausgegeben wurde, werden die nachstehenden Artikel erwähnt: F. G. Salituro et al., J. Med. Chem. 33 (1990), 2944; N. M. Gray et al., J. Med. Chem. 34 (1991); 1283; J. Sh. Chikvaidze et al., Khim. Geterotsikl. Soedin. (1991), 1508; S. P. Hiremath et al., Indian J. Chem. 19 (1980), 770; J. Bornstein, J. Amer. Chem. Soc. 79 (1957), 1745.
Die Reissert-Indol-Synthese umfasst die reduktive Cyclisierung von o-Nitrophenylbrenztraubensäuren oder Estern davon, beispielsweise der allgemeinen Formel III
worin die Gruppen R³⁰ eine breite Vielzahl von Bedeutungen aufweisen können und in allen Positionen des Benzol rings vorliegen können. Die Reissert-Indol-Synthese führt zu Derivaten von Indol-2-carbonsäuren. Die Brenztraubensäurederivate der Formel III können durch Kondensation von Oxalsäureestern mit substituierten o-Nitrotoluolen erhalten werden. Als Literaturhinweise werden neben dem vorstehend erwähnten Buch, herausgegeben von Houlihan, und den vorstehend erwähnten Literaturartikeln beispielsweise die Artikel von H. G. Lindwall und G. J. Mantell, J. Org. Chem. 18 (1953), 345 oder von H. Burton und J. L. Stoves, J. Chem. Soc. (1937), 1726 erwähnt.
Gemäß der Bischler-Indol-Synthese können α-Anilinoketone beispielsweise der allgemeinen Formel IV
zu Indolderivaten cyclisiert werden.
Die Nenitzescu-Indol-Synthese liefert einen wertvollen Weg zu Indol-3-carbonsäurederivaten, die eine Hydroxygruppe in der 5-Position tragen. Sie umfasst die Reaktion eines para-Benzochinons mit einem β-Aminocrotonat, beispielsweise von den Verbindungen der Formeln V und VI.
Ein weiterer Weg zu speziell substituierten Indolderivaten verläuft über 2,3-Dihydroindole (Indoline), die leicht durch Reduktion von Indolen, beispielsweise durch Hydrierung oder durch Cyclisierung von geeigneten Phenylethylaminderivaten, erhalten werden können. Indoline können eine Vielzahl von elektrophiler aromatischer Substitutionsreaktion eingehen, was die Einführung von verschiedenen Substituenten in den Benzolkern erlaubt, die nicht direkt durch solche Re aktionen in den Benzolkern des Indolmoleküls eingeführt werden können. Die Indoline können dann zu den entsprechenden Indolen dehydriert werden, beispielsweise mit Reagenzien, wie Chloranil oder Palladium zusammen mit einem Wasserstoffakzeptor. Wiederum können Einzelheiten für diese Synthesen dem vorstehend erwähnten Buch, herausgegeben von Houlihan, entnommen werden.
In Abhängigkeit von den Substituenten in Ausgangsmaterialien können bei bestimmten Indol-Synthesen Gemische von Positionsisomeren erhalten werden, die jedoch durch moderne Abtrennungstechniken, wie beispielsweise präparative HPLC, abgetrennt werden können.
Um die gewünschten Substituenten in dem Benzolkern und in dem heterocyclischen Kern des Indolringsystems der Formel I zu erhalten, können weiterhin die während der Indolsynthese in das Ringsystem eingeführten funktionellen Gruppen chemisch modifiziert werden. Beispielsweise können ein Wasserstoffatom in der 3-Position tragende Indole auch durch Verseifung und anschließende Decarboxylierung von Indolen, die eine Estergruppe in der entsprechenden Position tragen, erhalten werden. Halogenatome können in die 3-Position beispielsweise durch Umsetzen des entsprechenden Indolinons mit einem Halogenierungsmittel, wie Phosphorpentachlorid, analog zu dem von J. C. Powers, J. Org. Chem. 31 (1966), 2627, beschriebenen Verfahren eingeführt werden. Die Ausgangsindolinone für eine Synthese können aus 2-Aminophenylessigsäuren erhalten werden. Ausgangsindolderivate für die Herstellung von Verbindungen der Formel I, die in der 3-Position einen Halogensubstituenten tragen, können auch gemäß Verfahren erhalten werden, die in der Literatur beschrieben sind, wie die nachstehenden. Chlorierung von 1H-Indol-2-carbonsäureethylester in der 3-Position durch Reaktion mit Sulfurylchlorid in Benzol ergibt 3-Chlor-1H-indol-2-carbonsäureethylester (Chem. Abstr. 1962, 3441i–3442b). 3-Brom-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester kann analog zu J. Het. Chem. 33 (1996), 1627 durch Reaktion von 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2- carbonsäureethylester mit Pyridiniumbromidperbromid in Pyridin synthetisiert werden.
Insbesondere können die in dem Benzolkern in dem Indolringsystem vorliegenden Gruppen durch eine Vielzahl von Reaktionen modifiziert werden und somit die gewünschten Reste R^1a, R^1b, R^1c und R^1d erhalten werden. Beispielsweise können Nitrogruppen zu der Aminogruppe mit verschiedenen Reduktionsmitteln, wie Sulfiden, Dithioniten, Komplexhydriden, oder durch katalytische Hydrierung reduziert werden. Eine Reduktion einer Nitrogruppe kann auch bei einer späteren Stufe der Synthese einer Verbindung der Formel I ausgeführt werden und eine Reduktion einer Nitrogruppe zu einer Aminogruppe kann auch gleichzeitig mit einer an einer weiteren funktionellen Gruppe ausgeführten Reaktion stattfinden, beispielsweise beim Umsetzen einer Gruppe, wie einer Cyanogruppe, mit Schwefelwasserstoff oder beim Hydrieren einer Gruppe. Um den Rest R^5a einzuführen, können Aminogruppen dann gemäß Standardverfahren zur Acylierung, beispielsweise durch Reaktion mit aktivierten Carbonsäurederivaten, wie Säurechloriden, Anhydriden, aktivierten Estern oder anderen, oder durch Reaktion mit Carbonsäuren in Gegenwart eines Aktivierungsmittels, modifiziert werden.
In dem Benzolkern vorliegende Estergruppen können zu den entsprechenden Carbonsäuren hydrolysiert werden, die nach Aktivierung dann mit Aminen oder Alkohol unter Standardbedingungen umgesetzt werden können. An dem Benzylkern vorliegende Ethergruppen, beispielsweise Benzyloxygruppen oder andere leicht abspaltbare Ethergruppen, können gespalten werden, um Hydroxygruppen zu ergeben, die dann mit einer Vielzahl von Mitteln umgesetzt werden können, beispielsweise Veretherungsmitteln oder aktivierenden Mitteln, die den Ersatz der Hydroxygruppe durch andere Gruppen erlauben. Schwefel enthaltende Gruppen können folglich umgesetzt werden.
Die vorstehend erwähnten Reaktionen für die Umwandlung von funktionellen Gruppen werden im Allgemeinen ausführlich in Lehrbüchern der organischen Chemie und in Abhandlun gen, wie Houben-Weyl, „Methoden der Organischen Chemie" (Methods of Organic Chemistry), Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Deutschland, oder „Organic Reactions", John Wiley & Sons, New York, worin Einzelheiten über die Reaktionen und primäre Quellenliteratur gefunden werden können, beschrieben. Aufgrund der Tatsache, dass im vorliegenden Fall die funktionellen Gruppen an einen Indolring gebunden sind, kann es in bestimmten Fällen notwendig werden, die Reaktionsbedingungen speziell anzupassen oder spezielle Reagenzien aus einer Vielzahl von Reagenzien, die im Prinzip für eine Umwandlungsreaktion angewendet werden können, auszuwählen oder andererseits spezielle Messungen zum Erreichen des gewünschten Umsatzes auszuführen, beispielsweise zur Anwendung von Schutzgruppentechniken. Das Herausfinden geeigneter Reaktionsvarianten und Reaktionsbedingungen in solchen Fällen verursacht dem Fachmann jedoch keine Probleme.
Die Strukturelemente, die in den Resten in der 1-Position des Indolrings in den Verbindungen der Formel I und in der Gruppe CONHR¹⁰, die in 2-Position des Indolrings vorliegt, vorliegen, können durch aufeinander folgende Reaktionsschritte, wie jene nachstehend ausgewiesenen, unter Verwendung von Verfahren, die dem Fachmann an sich bekannt sind, in das Ausgangsindolderivat eingeführt werden, wie vorstehend ausgewiesen.
Die Reste NHR¹⁰, die in R³ vorliegen können, können beispielsweise durch Kondensieren einer entsprechenden Carbonsäure der Formel VII oder eines Derivats davon mit einer Verbindung oder mit Verbindungen der Formel H₂NR^10', d.h. mit einem Amin, in eine Verbindung der Formel VIII eingeführt werden. Die so erhaltene Verbindung der Formel VIII kann leicht die gewünschten Endgruppen enthalten, d.h., die Gruppen NHR^10' und R⁴⁰ können die Gruppen NHR¹⁰ und R⁴-A-, wie für Formel I definiert, sein oder gegebenenfalls in der so erhaltenen Verbindung der Formel VIII werden anschließend der Rest NHR^10' und der Rest R⁴⁰ in die Reste NHR¹⁰ bzw. R⁴-A- umgewandelt, um die gewünschte Verbindung der Formel I zu ergeben.
Somit kann der hier enthaltene Rest NHR^10' die vorste- hend angegebenen Bedeutungen von NHR¹⁰ bzw. R¹⁰ aufweisen, oder zusätzlich können in den Resten NHR^10' und R¹⁰ funktionelle Gruppen ebenfalls in Form von Gruppen vorliegen, die anschließend in die Endgruppen NHR¹⁰ und R¹⁰ überführt werden können, d.h., funktionelle Gruppen können in Form von Vorstufengruppen oder von Derivaten, beispielsweise in geschützter Form, vorliegen. Beispiele für Vorstufengruppen sind Cyanogruppen, die in einem späteren Schritt in Carbonsäurederivate oder durch Reduktion in Aminomethylgruppen oder Nitrogruppen überführt werden können, die durch Reduktion, wie katalytische Hydrierung, in Aminogruppen überführt werden können.
Der Rest R⁴⁰ in den Verbindungen der Formel VII und VIII kann die wie vorstehend angeführte -A-R⁴ bedeuten, die schließlich in dem gewünschten C-Molekül der Formel I vorliegen soll, oder sie kann eine Gruppe bedeuten, die anschließend in die Gruppe -A-R⁴ überführt werden kann, beispielsweise eine Vorstufengruppe oder ein Derivat der Gruppe -A-R⁴, worin die funktionellen Gruppen in geschützter Form vorliegen, oder R⁴⁰ kann ein Wasserstoffatom oder eine Schutzgruppe für das Stickstoffatom an dem Indolring bedeuten. In ähnlicher Weise sind die Reste R^1a, R^1b, R^1c und R^1d in den Formeln VII und VIII wie vorstehend definiert, jedoch für die Synthese der Verbindungen der Formeln I können diese Reste auch im Prinzip bei der Stufe der Kondensation einer Verbindung der Formel VII mit einer Verbindung der Formel H₂NR^10' vorliegen, unter Gewinnung einer Verbindung der Formel VIII in Form von Vorstufengruppen oder in geschützter Form.
Die Reste R⁴¹ in den Verbindungen der Formel VII, die gleich oder verschieden sein können, können beispielsweise Hydroxy oder (C₁-C₄)-Alkoxy sein, d.h., die in den Verbindungen der Formel VII vorliegenden Gruppen COR⁴¹ können beispielsweise die freien Carbonsäuren oder Ester davon sein, wie Alkylester. Die Gruppen COR⁴¹ können ebenfalls ein beliebiges anderes aktiviertes Derivat einer Carbonsäure darstellen, welche Amidbildung mit einer Verbindung der Formel H₂NR^10' erlaubt. Die Gruppe COR⁴¹ kann beispielsweise ein Säurechlorid, ein aktivierter Ester, wie ein substituierter Phenylester, ein Azolid, wie ein Imidazolid, ein Azid oder ein gemischtes Anhydrid, beispielsweise ein gemischtes Anhydrid mit einem Kohlensäureester oder mit einer Sulfonsäure sein, wobei alle Derivate aus der Carbonsäure durch Standardverfahren hergestellt werden können und mit einem Amin der Formel H₂NR^10' unter Standardbedingungen umgesetzt werden können. Eine COR⁴¹ wiedergebende Carbonsäuregruppe COOH in einer Verbindung der Formel VII kann beispielsweise aus einer in das Indolsystem während einer Indolsynthese durch Standardhydrolyseverfahren eingeführten Estergruppe erhalten werden.
Die Verbindungen der Formel I, worin die Gruppe CONHR¹⁰ eine Amidgruppe darstellt, können aus Aminen und Verbindungen der Formel VIII, worin COR⁴¹ eine Carbonsäuregruppe oder ein Ester davon darstellt, durch übliche Aminierungsreaktionen hergestellt werden. Für die Herstellung der Amide können die Verbindungen der Formel VII, worin COR⁴¹ eine Carbonsäuregruppe darstellt, unter Standardbedingungen mit Aminen der Formel H₂NR^10' mithilfe von üblichen Kupplungsreagenzien, die in der Peptidsynthese verwendet werden, kondensiert werden. Solche Kupplungsreagenzien sind beispielsweise Carbodiimide, wie Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) oder Diisopropylcarbodiimid, Carbonyldiazole, wie Carbonyldiimidazol und ähnliche Reagenzien, Propylphosphonsäureanhydrid, O-((Cyano-(ethoxycarbonyl)methylen)amino)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumtetrafluoroborat (TOTU) und viele andere.
Wenn der in einem Indol der Formel I vorliegende Rest R⁴-A- oder der in einem Indol der Formel VII vorliegende Rest R⁴⁰ oder ein Rest, worin funktionelle Gruppen innerhalb des Restes R⁴-A- oder R⁴⁰ in geschützter Form oder in Form einer Vorstufengruppe vorliegen, nicht bereits während des vorangehenden Schritts eingeführt wurden, beispielsweise während einer Synthese des Indolkerns, können diese Reste beispielsweise in die 1-Position des Indolsystems durch herkömmliche Literaturverfahren, die dem Fachmann zur N-Alkylierung von Ringstickstoffatomen von Heterocyclen gut bekannt sind, eingeführt werden. Das Ausgangsindolderivat, das in einer solchen Reaktion angewendet werden soll, trägt ein Wasserstoffatom in der 1-Position. N-Alkylierung eines Ringstickstoffatoms kann beispielsweise unter Standardbedingungen, vorzugsweise in Gegenwart einer Base, unter Verwendung einer alkylierenden Verbindung der Formel R⁴-A-LG oder der Formel R⁴⁰-LG, worin das Atom in der Gruppe A oder in der Gruppe R⁴⁰, das an die Gruppe LG gebunden ist, in diesem Fall ein aliphatisches Kohlenstoffatom einer Alkyleinheit ist und LG eine Abgangsgruppe, beispielsweise Halogen, wie Chlor, Brom oder Jod, oder eine Sulfonyloxygruppe, wie Tosyloxy, Mesyloxy oder Trifluormethylsulfonyloxy, ist, ausgeführt werden. LG kann beispielsweise auch eine Hydroxygruppe sein, die, um die Alkylierungsreaktion zu erreichen, durch ein herkömmliches Aktivierungsmittel aktiviert wird.
Eine in einer Verbindung der Formel I vorliegende Guanidinofunktion kann durch Umwandlung einer Aminofunktion, die beispielsweise durch Reduktion einer Nitrofunktion oder einer Cyanofunktion erhalten werden kann, eingeführt werden, unter Verwendung der nachstehenden Reagenzien:

1. O-Methylisoharnstoff (S. Weiss und H. Krommer, Chemiker-Zeitung 98 (1974), 617–618)
2. S-Methylisothioharnstoff (R. F. Borne, M. L. Forrester und I. W. Waters, J. Med. Chem. 20 (1977), 771–776)
3. Nitro-S-methylisothioharnstoff (L. S. Hafner und R. E. Evans, J. Org. Chem. 24 (1959), 1157)
4. Formamidinsulfonsäure (K. Kim, Y.–T. Lin und H. S. Mosher, Tetra. Lett. 29 (1988), 3183–3186)
5. 3,5-Dimethyl-1-pyrazolylformamidiniumnitrat (F. L. Scott, D. G. O'Donovan und J. Reilly, J. Amer. Chem. Soc. 75 (1953), 4053–4054)
6. N,N'-Di-tert-butyloxycarbonyl-S-methylisothioharnstoff (R. J. Bergeron und J. S. McManis, J. Org. Chem. 52 (1987), 1700–1703)
7. N-Alkoxycarbonyl-, N,N'-Dialkoxycarbonyl-, N-Alkylcarbonyl- und N,N'-Dialkylcarbonyl-S-methylisothioharnstoff (H. Wollweber, H. Kölling, E. Niemers, A. Widdig, P. Andrews, H. P. Schulz und H. Thomas, Arzneim. Forsch./Drug Res. 34 (1984), 531–542).

Amidine können aus den entsprechenden Cyanoverbindungen durch Addition von Alkoholen, beispielsweise Methanol oder Ethanol, in einem sauren wasserfreien Medium, beispielsweise Dioxan, Methanol oder Ethanol, und anschließender Aminolyse, beispielsweise Behandlung mit Ammoniak in Alkoholen, wie beispielsweise Isopropanol, Methanol oder Ethanol (G. Wagner, P. Richter und Ch. Garbe, Pharmazie 29 (1974), 12–55), hergestellt werden. Weitere Verfahren zum Herstellen von Amidinen sind die Addition von Schwefelwasserstoff an eine Cyanogruppe, gefolgt von Alkylierung, beispielsweise Methylierung, mit einem Mittel, wie Methyljodid, des erhaltenen Thioamids und anschließende Reaktion mit Ammoniak (DDR-Patent-Nr. 235866) oder die Addition von Hydroxylamin, das aus dem Hydroxylammoniumsalz mit einer Base erhalten werden kann, an die Cyanogruppe, gefolgt von Umwandlung des Amidoxims zu dem Amidin, beispielsweise durch katalytische Hydrierung (siehe beispielsweise R. P. Mull et al., J. Med. Pharm. Chem. 5 (1962), 651; B. J. Broughton et al., J. Med. Chem. 18 (1975), 1117).
Verbindungen der Formel I, worin eine Gruppe ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-, gebunden an ein Stickstoffatom, vorliegt, kann aus einer Vorstufenverbindung, die das Stickstoffatom als eine NH-Gruppe enthält, beispielsweise durch die nachstehenden Verfahren hergestellt werden. Die Vorstufengruppe, die die NH-Gruppe enthält, wird mit einem Mono- oder Bisbenzyl-oxycarbonyl (Z)-geschützten Alkylamidin der Formeln ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-NH-Z oder ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NZ)-NH-Z, wovon das bisgeschützte Reagenz reaktiver als das monogeschützte ist, umgesetzt (Y. Sugimura et al., Heterocycles 24 (1986), 1331–1345; J. Eustache und A. Grob, Tetrahedron Lett. 36 (1995), 2045–2046). In einem weiteren Verfahren wird die die NH-Gruppe enthaltende Vorstufenverbindung mit einem Iminoether, beispielsweise der Formel ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-O-((C₁-C₄)-alkyl), welcher wiederum unter Standardbedingungen aus einem Nitril der Formel ((C₁-C₆)-Alkyl)-CN durch Addition eines Alkohols in Gegenwart einer Säure erhältlich ist, umgesetzt. Wenn zwei oder mehrere NH-Gruppen in der Verbindung vorliegen, um mit dem Iminoether oder der Z-geschützten Alkylamidinschutzgruppenstrategie umgesetzt zu werden, können sie verwendet werden, um das gewünschte Ergebnis zu erreichen, wie dem Fachmann gut bekannt ist.
Ein Iminoether, der als ein aktiviertes Nitril betrachtet werden kann, ist auch ein vielseitiges Zwischenprodukt, wenn es aus einer Cyanogruppe hergestellt wird, d.h. in einer Verbindung vorliegt, die bereits das Indolsystem enthält und die als ein Zwischenprodukt während der Synthese einer Verbindung der Formel I erhalten wurde. Beispielsweise kann eine Cyanogruppe, die in dem Rest R⁴⁰ in einer Verbindung der Formeln VII oder VIII oder in einem weiteren Rest vorliegt, gemäß Standardverfahren umgesetzt werden, um einen Iminoether zu ergeben. Ein solcher Iminoether kann beispielsweise mit Hydroxylamin umgesetzt werden, um eine Amidoximgruppe, die an der Stelle der früheren Cyanogruppe steht, zu ergeben. Wiederum kann in solchen Reaktionen, wie in allen bei der Synthese von Verbindungen der Formel I angewendeten Reaktionen, es in Abhängigkeit von dem einzelnen Fall bevorzugt sein, unerwünschte Reaktionen oder Sekundärreaktionen zum Anwenden von Schutzgruppentechniken und zum temporären Blockieren der Gruppen, wie beispielsweise Aminogruppen oder Carbonsäuregruppen, durch Schutzgruppen, die für das spezielle Syntheseproblem geeignet sind, zu vermeiden.
Die Verbindungen der Formel I, worin eine Aminoxideinheit oder eine Pyridin-N-oxid-, Chinolin-N-oxid- oder Isochinolin-N-oxid-Einheit vorliegt, können durch Oxidation der Amine oder der Stickstoffheterocyclen gemäß Standardverfahren, wie beispielsweise in J. March, Advanced Organic Chemistry, 3. Ausgabe, S. 1088, beschrieben, erhalten werden.
Die Verbindungen der Formel I können beispielsweise durch schrittweises Synthetisieren der Verbindungen an einer festen Phase gemäß üblichen Verfahren der Festphasenchemie, die dem Fachmann gut bekannt sind und die durch die nachstehenden Beispiele erläutert werden, hergestellt werden.
Wie in den nachstehend beschriebenen pharmakologischen Tests gezeigt, inhibieren die Verbindungen der Formel I Faktor-Xa-Aktivität. Sie können deshalb vorteilhafterweise als Pharmazeutika verwendet werden, insbesondere wenn es erwünscht ist, Faktor-Xa-Aktivität zu vermindern oder Wirkungen zu erzeugen, die durch Inhibieren von Faktor-Xa-Aktivität in einem System, wie das Beeinflussen von Koagulation oder das Inhibieren von Blutgerinnung, erreicht werden können. Somit betrifft die vorliegende Erfindung auch Verbindungen der Formel I zur Verwendung als Pharmazeutika sowie als Verbindungen der Formel I zur Anwendung bei der Herstellung von Arzneimitteln, insbesondere von Arzneimitteln für die Behandlung oder Prophylaxe der Zustände und Erkrankungen, die nachstehend und vorstehend erwähnt wurden. Die vorliegende Erfindung stellt ein Verfahren zum spezifischen Inhibieren von Faktor-Xa-Aktivität durch In-Kontakt-Bringen von Faktor Xa mit einer Verbindung der Formel I bereit, worin eine Verbindung der Erfindung die katalytische Aktivität von Faktor Xa entweder direkt innerhalb des Prothrombinasekomplexes oder als eine lös liche Untereinheit oder indirekt durch Inhibieren der Anordnung von, Faktor Xa in den Prothrombinasekomplex inhibiert. Eine bevorzugte Ausführungsform der Erfindung umfasst solche Verbindungen der Formel I, die Faktor-Xa-Aktivität mit einem Ki ≤ 100 μM und bevorzugter mit einem Ki ≤ 2 μM, wie durch das nachstehend beschriebene Faktor-Xa-Assay bestimmt, inhibieren können.
Die Inhibierung der Faktor-Xa-Aktivität oder die Erzeugung von Wirkungen, die durch eine solche Inhibierung erreicht werden, können beispielsweise in vivo, d.h. bei einem Individuum, stattfinden. Wie hierin verwendet, bedeutet der Begriff „individuell" ein Wirbeltier, einschließlich eines Säugers, wie beispielsweise eine Maus, eine Ratte, ein Kaninchen, ein Hund, ein Schwein und insbesondere ein Mensch, wobei Faktor Xa in die Gerinnungskaskade einbezogen ist. Es kann auch außerhalb des Körpers eines Individuums stattfinden, beispielsweise in einem extrakorporalen Kreislauf oder bei der Behandlung von Blutproben von einem Individuum und allgemein in vitro. In-vitro-Anwendungen der Verbindungen der Formel I sind beispielsweise die Verwendung als ein biomechanisches Werkzeug oder Reagenz bei wissenschaftlichen oder analytischen Untersuchungen oder die Verwendung bei In-vitro-Diagnosen. Weiterhin kann eine Verbindung der Formel I vorteilhafterweise als ein Antikoagulanz verwendet werden, das mit einer Blutprobe zur Verhinderung von Gerinnung in Kontakt gebracht werden kann. Beispielsweise kann eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I mit einer frisch gezogenen Blutprobe zum Verhindern von Koagulation der Blutprobe in Kontakt gebracht werden.
Wie hierin verwendet, bedeutet der Begriff „wirksame Menge", wenn in diesem Zusammenhang verwendet, eine Menge einer Verbindung der Formel I, die die Faktor-Xa-Aktivität zu dem gewünschten Ausmaß inhibiert. Der Fachmann würde erkennen, dass eine wirksame Menge einer Verbindung der Erfindung unter Verwendung der hierin offenbarten und sonst auf dem Fachgebiet bekannten Verfahren bestimmt werden kann.
Im Hinblick auf die offenbarte Verwendbarkeit der Verbindungen der Formel I würde der Fachmann auch erkennen, dass ein Mittel, wie Heparin, gegen eine erfindungsgemäße Verbindung ersetzt werden kann. Eine solche Anwendung einer Verbindung der Formel I kann, verglichen mit anderen Koagulanzien, beispielsweise eine Kosteneinsparung oder weniger Nebenwirkungen ergeben.
In einer weiteren Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zum Inhibieren von Faktor Xa bei einem Patienten bei Bedarf davon bereit, umfassend Verabreichen an den Patienten einer wirksamen Faktor-Xa-Inhibitormenge einer Verbindung der Formel I. Wenn hierin verwendet, bezieht sich der Begriff „Patient" insbesondere auf einen Warmblüter, einschließlich eines Säugers und insbesondere eines Menschen. Ein Patient benötigt eine Behandlung zum Inhibieren von Faktor Xa, wenn der Patient unter einem Erkrankungszustand leidet, der vorteilhaft durch Inhibieren von Faktor-Xa-Aktivität beeinflusst werden kann oder von dem der Arzt erwartet, dass jener durch das Inhibieren von Faktor-Xa-Aktivität vorteilhaft beeinflusst wird. Die Identifizierung jener Patienten, die zum Inhibieren von Faktor Xa Behandlungsbedarf haben, liegt deutlich innerhalb der Fähigkeit und des Wissens des Fachmanns. Ein Arzt kann, beispielsweise durch die Verwendung von klinischen Tests, physikalischer Prüfung und medizinischer/familiärer Geschichte, leicht jene Patienten herausfinden, die Bedarf für eine solche Behandlung haben.
Da eine Verbindung der Formel I Faktor-Xa-Aktivität Inhibieren kann, kann eine solche Verbindung zum Vermindern oder Inhibieren von Blutgerinnung bei einem Individuum verwendet werden. Somit stellt die vorliegende Erfindung weiterhin ein Verfahren zum Vermindern oder Inhibieren der Bildung von Blutgerinnung bei einem Individuum, insbesondere bei einem Patienten bei Bedarf dafür, durch Verabreichen einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I bereit.
Eine „therapeutisch wirksame Menge", die die Herstellung in einem Individuum von einer Wirkung wie Inhibierung oder Verminderung von Blutgerinnung betrifft, oder eine „wirksame Faktor-Xa-Inhibitormenge" einer Verbindung der Formel I bedeutet die Menge oder die Dosis einer Verbindung der Formel I, die an ein Individuum verabreicht werden muss, um die gewünschte Wirkung zu erreichen oder beizubehalten oder um Faktor-Xa-Aktivität bei dem Individuum zu dem gewünschten Ausmaß zu inhibieren. Eine solche zu verabreichende wirksame Menge oder Dosis muss auf die individuellen Umstände in jedem Fall eingestellt sein. Sie kann leicht durch die Anwendung von herkömmlichen Techniken unter Anwendung der hierin oder sonst auf dem Fachgebiet beschriebenen Verfahren und durch Beobachtungsergebnisse, die unter analogen Umständen erhalten wurden, bestimmt werden. Beim Bestimmen der wirksamen Dosis wird eine Vielzahl von Faktoren berücksichtigt, einschließlich Habitus des Patienten, seine Größe, Alter und Allgemeinzustand; der speziellen einbezogenen Erkrankung; des Grads oder des Einbezugs oder der Schwere der Erkrankung; der Reaktion des einzelnen Patienten; der einzelnen zu verabreichenden Verbindung; der Verabreichungsart, der Bioverfügbarkeitseigenschaften der verabreichten pharmazeutischen Zubereitung; des ausgewählten Dosisregimes und der Anwendung von begleitender Medikation, jedoch nicht darauf begrenzt. Eine geeignete Dosierung kann unter Verwendung von auf dem medizinischen Fachgebiet gut bekannten klinischen Versuchen erreicht werden.
Im Allgemeinen ist es im Hinblick auf die vorstehenden Faktoren klar, dass die wirksame Faktor-Xa-Inhibitormenge oder die therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel I variieren wird und innerhalb breiter Grenzen variiert werden kann. Gewöhnlich wird eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I von etwa 0,01 mg/kg Körpergewicht pro Tag (mg/kg pro Tag) bis etwa 20 mg/kg pro Tag variieren. Eine tägliche Dosis von etwa 0,1 mg/kg bis etwa 10 mg/kg ist gewöhnlich bevorzugt. Diese Daten beziehen sich auf einen er wachsenen Menschen von etwa 75 kg Körpergewicht. Jedoch in Abhängigkeit von den individuellen Umständen kann es notwendig sein, von den gegebenen Dosen aufwärts oder abwärts abzuweichen. Insbesondere beim Verabreichen von relativ großen Mengen kann es günstig sein, die tägliche Dosis in verschiedene, beispielsweise zwei, drei oder vier, Unterdosisverabreichungen, zu unterteilen.
Eine Verbindung der Formel I kann an ein Individuum für die Behandlung einer Vielzahl von klinischen Zuständen, einschließlich beispielsweise die Behandlung und Prophylaxe von kardiovaskulären Störungen oder damit verbundenen Komplikationen, beispielsweise bei Infektion oder Chirurgie, verabreicht werden. Beispiele für kardiovaskuläre Störungen schließen Restenose, beispielsweise Restenose nach Angioplastie, Reokklusionsprophylaxe einschließlich Wiederverstopfungsprophylaxe nach Lyse oder Dilatation (PTCA), Zustände nach koronaren Bypassoperationen, arterielle, venöse und mikrozirkulierende Erkrankungszustände, Herzinfarkt, Angina pectoris, einschließlich instabile Angina pectoris, thromboembolische Erkrankungen, Thrombosen, Embolismus, adultes respiratorisches Distresssyndrom, Mehrfachorganversagen, Schlaganfall und disseminierte intravaskuläre Koagulationsgerinnungsstörung, ein. Beispiele für ähnliche Komplikationen, die mit einem Eingriff verbunden sind, schließen beispielsweise tiefe Venen- und proximale Venenthrombose ein, die nach Chirurgie auftreten kann. Im Allgemeinen ist eine erfindungsgemäße Verbindung als ein Arzneimittel zur Verminderung oder Inhibierung oder Verhinderung unerwünschter Koagulation oder Blutgerinnung oder Thrombusbildung bei einem Individuum verwendbar.
Die Verbindungen der Formel I, deren physiologisch verträgliche Salze und andere geeignete Derivate davon, wie Prodrugs, können als Arzneimittel oder Pharmazeutika in den vorstehend erwähnten Verfahren von Behandlung oder Prophylaxe selbst, in Gemischen miteinander oder in Form von pharmazeutischen Zubereitungen, die als Wirkbestandteile eine wirksame Menge von mindestens einer Verbindung der Formel I und/oder einem physiologisch verträglichen Salz und/oder weiterem geeignetem Derivat davon in Anmischung oder sonst in Verbindung mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger umfassen, verabreicht werden.
Bei wirksamer Behandlung eines Patienten können Verbindungen der Formel I oder dieselben umfassenden pharmazeutischen Zusammensetzungen in beliebiger Form oder Modus verabreicht werden, die die Verbindungen der Formel I in wirksamen Mengen bioverfügbar macht, einschließlich oraler und parenteraler Wege. Beispielsweise können sie oral, subkutan, intramuskulär, intravenös, transdermal, intranasal, rektal und dergleichen verabreicht werden. Orale Verabreichung ist im Allgemeinen günstig, jedoch in Abhängigkeit von dem speziellen Fall können auch andere Arten der Verabreichung bevorzugt sein, beispielsweise in einem akuten Zustand der Erkrankung intravenöse Verabreichung mithilfe von Injektion oder Infusion. Ein Fachmann kann leicht die geeignete Form oder Art der Verabreichung in Abhängigkeit von dem zu behandelnden Erkrankungszustand, der Stufe der Erkrankung und anderen relevanten Umständen auswählen.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen oder Medikamente, die eine Verbindung der Formel I und/oder ein physiologisch verträgliches Salz und/oder anderes geeignetes Derivat davon umfassen, können durch Kombinieren durch Standardverfahren die Verbindungen der Formel I und/oder deren physiologisch verträgliche Salze und/oder andere geeignete Derivate davon mit einer oder mehreren pharmazeutisch verträglichen Trägersubstanzen und/oder Hilfssubstanzen den Anteil oder deren Beschaffenheit durch den ausgewählten Verabreichungsweg und pharmazeutische Standardpraxis bestimmt werden. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen oder Medikamente werden in einer auf dem pharmazeutischen Fachgebiet gut bekannten Weise hergestellt. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen werden im Allgemeinen eine wirksame Menge von einer oder mehreren Verbindungen der Formel I und/oder deren physiologisch verträglichem Salz und/oder anderem geeigneten Derivat davon, zusammen mit einer geeigneten Menge eines Trägers, sodass sie geeignete Dosierung zur Verabreichung an ein Individuum zu umfassen, enthalten. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können zur oralen oder parenteralen Anwendung angepasst sein und können an den Patienten in Form von beispielsweise Tabletten, Kapseln, Suppositorien, Lösungen, Suspensionen, Salben, Tinkturen, Nasensprays, Aerosolgemischen, Implantaten, Stäben, Mikrokapseln oder dergleichen verabreicht werden. Somit werden zusammen mit den beanspruchten Verbindungen der Formel I der vorliegenden Erfindung verwendbare pharmazeutische Zusammensetzungen oder Medikamente zum Inhibieren von Faktor-Xa-Aktivität, zum Inhibieren von Blutgerinnung und/oder für die Behandlung und Prophylaxe der vorstehend erwähnten Erkrankungen bei einem Individuum bereitgestellt. Die vorliegende Erfindung umfasst weiterhin ein Verfahren für die Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen oder Arzneimitteln, die mindestens eine Verbindung der Formel I und/oder ein physiologisch verträgliches Salz und/oder ein weiteres geeignetes Derivat davon umfassen, ebenso umfasst sie die Verwendung der Verbindungen der Formel I und/oder physiologisch verträglichen Salze und/oder anderer geeigneter Derivate davon für die Herstellung von Arzneimitteln, insbesondere von Arzneimitteln für die Behandlung oder Prophylaxe der vorstehend erwähnten Erkrankungen.
Pharmazeutisch verträgliche Träger und Hilfssubstanzen werden als Substanzen oder Zusammensetzungen bezeichnet, die für ein Individuum nicht toxisch sind und annehmbare Toxizität, wie durch die geeignete Zulassungsbehörde bestimmt, aufweisen. Die Trägersubstanz oder Exzipient kann ein festes, halbfestes oder flüssiges Material sein, das als ein Vehikel oder Medium für den Wirkbestandteil dienen kann. Wie hierin verwendet, umfasst der Begriff „pharmazeutisch verträglicher Träger" beliebige von den pharmazeutischen Standardträgern, wie flüssige Träger, beispielsweise Wasser, Salzlösung, phosphatgepufferte Salzlösung, eine Emulsion, wie eine Öl/Wasser- oder Wasser/Öl-Emulsion, oder feste oder halbfeste Träger, wie beispielsweise Laktose, Maisstärke, Fette, Wachse usw. Geeignete pharmazeutische Träger und deren Formulierungen sind auf dem Fachgebiet gut bekannt und werden beispielsweise von Martin in Remington's Pharmaceutical Sciences, 15. Ausgabe, Mack Publishing Co., Easton 1975, was hierin durch Hinweis auch bezüglich anderer Aspekte der Bestandteile und der Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen einbezogen ist, beschrieben.
Beispiele für Hilfssubstanzen sind Füllstoffe, Sprengmittel, Bindemittel, Gleitmittel, Netzmittel, Stabilisatoren, Emulgatoren, Konservierungsmittel, Süßungsmittel, Farbstoffe, Geschmacksmittel, Aromamittel, Verdickungsmittel, Verdünnungsmittel, puffernde Substanzen, Solubilisierungsmittel, Mittel zum Erreichen von langsamem Freisetzen der Wirkung, Salz zum Verändern des osmotischen Drucks, Beschichtungsmittel, Antioxidanzien usw.
Für den Zweck der oralen Verabreichung können die Verbindungen der Formel I und/oder deren physiologisch verträgliche Salze und/oder andere geeignete Derivate davon mit Exzipienten oder inerten Verdünnungsmitteln oder essbarem Träger eingearbeitet werden und in Form von beispielsweise Tabletten, Filmtabletten, beschichteten Tabletten, Pillen, Pastillen, Kapseln, Granulaten, Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Elixieren, Sirupen, Waffeln, Kaugummis usw. verwendet werden oder sie können in Gelatinekapseln eingeschlossen sein. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen zur oralen Verabreichung können in Abhängigkeit von der besonderen Form variiert werden. Gewöhnlich enthalten solche pharmazeutischen Zusammensetzungen mindestens 1% des Wirkbestandteils der Formel I und/oder ein physiologisch verträgliches Salz und/oder ein weiteres geeignetes Derivat davon und können geeigneterweise bis zu etwa 90% des Gewichts der Einheit enthalten. Vorzugsweise ist der Gehalt von Verbindungen der Formel I und/oder deren physiologisch verträgliches Salz und/oder anderer geeigneter Derivate etwa 4% bis etwa 70 Gew.-%. Vorzugsweise ist die Menge des in den Zusammensetzungen vorliegenden Wirkbestandteils derart, dass eine Einheitsdosierungsform, die zur Verabreichung geeignet ist, erhalten wird.
Die Tabletten, Pillen, Kapseln, Pastillen und dergleichen können auch beispielsweise eine oder mehrere der nachstehenden Träger und Hilfssubstanzen enthalten: Bindemittel, wie mikrokristalline Zellulose, Tragacanthgummi oder Gelatine; Exzipienten, wie Stärke oder Laktose; Sprengmittel, wie Alginsäure, Primogel, Maisstärke und dergleichen; Gleitmittel, wie Magnesiumstearat oder Sterotex; Gleitmittel (Glidants), wie kolloidales Siliziumdioxid. Weiterhin können Süßungsmittel, wie Saccharose oder Saccharin, oder Geschmacksmittel, wie Pfefferminz, Salicylsäuremethylester oder Orangengeschmack, zugesetzt werden. Wenn die Dosierungseinheitsform eine Kapsel ist, kann sie zusätzlich zu Materialien des vorstehenden Typs einen flüssigen Träger, wie Polyethylenglykol oder ein fettes Öl, enthalten. Andere Dosierungseinheitsformen können verschiedene andere Materialien enthalten, die die physikalische Form der Dosierungseinheit modifizieren, beispielsweise als Beschichtungen. Somit können Tabletten oder Pillen mit Zucker, Schellack oder anderen enterischen Beschichtungsmitteln beschichtet werden. Ein Sirup kann zusätzlich zu dem Wirkbestandteil beispielsweise Saccharose als ein Süßungsmittel und bestimmte Konservierungsmittel, Farbstoffe oder Färbemittel und Geschmacksmittel enthalten.
Für den Zweck von beispielsweise parenteraler Verabreichung können die Verbindungen der Formel I und/oder physiologisch verträgliche Salze davon und/oder andere geeignete Derivate davon in eine Lösung oder eine Suspension eingearbeitet werden. Die Lösungen oder Suspensionen können beispielsweise auch eine oder mehrere der nachstehenden Träger und Hilfssubstanzen einschließen: sterile Verdünnungsmittel, wie Wasser zur Injektion, Salzlösung, fixierte Öle, Polyethylenglykole, Glycerin, Propylenglykol oder andere synthetische Lösungsmittel; antibakterielle Mittel, wie Benzylalkohol oder Methylparaben; Antioxidantien, wie Ascorbinsäure oder Natriumbisulfit; Chelatisierungsmittel, wie Ethylendiamintetraessigsäure; Puffer, wie Acetate, Citrate oder Phosphate; Mittel für die Einstellung von Toxizität, wie Natriumchlorid oder Dextrose. Der Gehalt der Verbindungen der Formel I und/oder von deren physiologisch verträglichen Salzen und/oder anderen geeigneten Derivaten davon in den Herstellungen zur parenteralen Verabreichung kann variiert werden. Gewöhnlich enthalten sie mindestens 0,1 Gew.-% der Verbindung der Formel I und/oder ein physiologisch verträgliches Salz und/oder ein weiteres geeignetes Derivat davon und bis zu 90 Gew.-%. Vorzugsweise ist der Gehalt der Verbindung der Formel I und/oder der physiologisch verträglichen Salze davon und/oder anderer geeigneter Derivate davon etwa 0,1% bis 50%. Die parenteralen Zubereitungen können beispielsweise in Ampullen, Wegwerfspritzen, Mehrfachdosisfläschchen, hergestellt aus Glas oder Kunststoff, oder Infusionsflaschen eingeschlossen sein. Geeignete Exzipienten für Mikrokapseln, Implantate und Stäbe sind beispielsweise gemischte Polymere von Glykolsäure und Milchsäure.
Im Allgemeinen liegt die Menge der Verbindungen der Formel I und/oder physiologisch verträglicher Salze davon und/oder anderer geeigneter Derivate davon, die in einer pharmazeutischen Zusammensetzung vorliegt, von etwa 0,5 mg bis etwa 1 g, vorzugsweise etwa 1 mg bis etwa 500 mg. Neben einer oder mehreren Verbindungen der Formel I und/oder einem oder mehreren physiologisch verträglichen Salzen davon und/oder einem oder mehreren anderen geeigneten Derivaten davon als Wirkverbindungen können die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen auch eine oder mehrere andere pharmazeutische Wirkstoffe enthalten. Beliebige zum Herstellen der verschiedenen pharmazeutischen Zusammensetzungen verwendete Materialien sollten in den angewendeten Mengen pharmazeutisch rein und nicht toxisch sein.
In einer weiteren allgemeineren Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung Zusammensetzungen bereit, die mindestens eine Verbindung der Formel I und/oder ein Salz davon und/oder ein weiteres geeignetes Derivat davon in Anmischung oder sonst in Verbindung mit einem oder mehreren inerten Trägern umfasst. Diese Zusammensetzungen sind beispielsweise als Assaystandards, als herkömmliche Mittel zur Herstellung von Massentransporten, als pharmazeutische Zusammensetzungen oder als Ausgangsmaterialien für die Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen verwendbar. Die Menge einer Verbindung der Formel I in einer solchen Zusammensetzung wird im Allgemeinen von etwa 0,001% bis etwa 90 Gew.-% variieren. Inerte Träger können beliebiges Material sein, das nicht abbaut oder andererseits kovalent mit einer Verbindung der Formel I reagiert. Beispiele für geeignete inerte Träger sind Wasser, wässrige Puffer, wie beispielsweise jene, die im Allgemeinen bei der Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC)-Analyse verwendbar sind; organische Lösungsmittel, wie Acetonitril, Essigsäureethylester, Hexan und dergleichen; und pharmazeutisch verträgliche Träger und/oder Hilfssubstanzen.
Die Verbindungen der Formel I können auch als Ausgangsmaterialien oder chemische Zwischenprodukte für die Herstellung von anderen Verbindungen, insbesondere für die Herstellung von anderen pharmazeutischen Wirkstoffen, verwendet werden. Beispiele für solche Umwandlungen von Verbindungen der Erfindung in andere Verbindungen der Erfindung werden vorstehend erörtert und werden nachstehend im Einzelnen angegeben. Für diese Verwendung können neben den Verbindungen der Formel I und deren physiologisch verträglichen Salzen auch andere Salze der Verbindungen der Formel I nützlich sein, die zur Verwendung als Pharmazeutika nicht geeignet oder weniger geeignet sind. Somit betrifft die vorliegende Erfindung auch Verbindungen der Formel I und deren Salze im Allgemeinen als chemische Zwischenprodukte, insbesondere als Zwischenprodukte für die Herstellung von pharmakologisch wirksamen Verbindungen. Ein Gegenstand der Erfindung sind auch Zwischenprodukte, die bei der Synthese von Verbindungen der Formel I, die vorstehend und nachstehend beschrieben wurden, verwendbar sind, und deren Verwendung als chemische Zwischenprodukte, insbesondere als Zwischenprodukte bei der Herstellung von pharmakologisch wirksamen Verbindungen.
Die nachstehenden Tests können zu Untersuchungen der pharmakologischen Wirksamkeit und zum Erläutern des Nutzens der erfindungsgemäßen Verbindungen als Faktor-Xa-Inhibitoren dienen.
Test 1: In-vitro-Inhibierung von ausgewählten gereinigten Koagulationsenzymen und anderen Serinproteasen
Die Fähigkeit einer Verbindung der Formel I, Faktor Xa, Thrombin, Plasmin, Elastase und Trypsin zu inhibieren, kann durch Bestimmen der Konzentration der Verbindung der Formel I, die die Enzymaktivität um 50% inhibiert (IC₅₀), bewertet werden. Gereinigte Enzyme werden in chromogenen Assays angewendet. Um die Inhibierungskonstante Ki zu bestimmen, wird der IC₅₀-Wert zur Konkurrenz mit dem Substrat unter Verwendung der Formel Ki = IC50 × (1/{1 + ((Substratkonzentration)/Substrat Km)})worin Km die Michaelis-Menten-Konstante (Chen und Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22 (1973), 3099–3018, was hierein durch Hinweis einbezogen ist) darstellt, korrigiert.
a. Factor-Xa-Assay
TBS-PEG-Puffer (50 mM Tris-Cl, pH 7,8, 200 mM NaCl, 0,05% (Gewicht/Volumen) PEG-8000, 0,02% (Gewicht/Volumen) NaN₃) wird für dieses Assay verwendet. Der IC₅₀-Wert wird durch Vereinigen in geeigneten Vertiefungen einer Costar-Halbflächen-Mikrotiter-Platte von 25 μl Humanfaktor Xa (Enzyme Research Laboratories, Inc.; South Bend, Ind.) in TBS-PEG; 40 μl 10% (Volumen/Volumen) DMSO in TBS-PEG (ungehemmte Kontrolle) oder verschiedenen Konzentrationen der zu testenden Verbindung, verdünnt in 10% (Volumen/Volumen) DMSO in TBS-PEG; und Substrat S-2765 (N(α)-Benzyloxycarbonyl-D-Arg-Giy-L- Arg-p-nitroanilid; Kabi Pharmacia, Inc.; Franklin Ohio) in TBS-PEG bestimmt.
Das Assay wird durch Vorinkubieren der Verbindung der Formel I plus Enzym für 10 min ausgeführt. Dann wird das Assay durch Zusetzen von Substrat gestartet, um ein Endvolumen von 100 μl zu erhalten. Die Anfangsgeschwindigkeit der chromogenen Substrathydrolyse wird durch die Veränderung der Absorption bei 405 nm unter Verwendung eines Bio-tek Instruments Kinetic-Plattenlesers (Ceres UV900HDi) bei 25°C während des linearen Teils des Zeitverlaufs (gewöhnlich 1,5 min nach Zugabe von Substrat) gemessen. Die Konzentration an Inhibitor, die 50%ige Senkung in der Geschwindigkeit von Substrathydrolyse verursacht, wird durch lineare Regression nach Auftragen der relativen Hydrolysegeschwindigkeiten (verglichen mit der ungehemmten Kontrolle) gegen den Logarithmus der Konzentration der Verbindung der Formel I vorhergesagt. Die Enzymkonzentration ist 0,5 nM und Substratkonzentration ist 140 μM.
b. Thrombinassay
TBS-PEG-Puffer wird für dieses Assay verwendet. Der IC₅₀-Wert wird wie vorstehend für das Faktor-Xa-Assay bestimmt, ausgenommen, dass das Substrat S-2366 (L-PyroGlu-L-Pro-L-Arg-p-nitroanilid; Kabi) ist und das Enzym Humanthrombin (Enzyme Research Laboratories, Inc.; South Bend Ind.) ist. Die Enzymkonzentration ist 175 μM.
c. Plasminassay
TBS-PEG-Puffer wird für dieses Assay verwendet. Der IC₅₀-Wert wird wie vorstehend für das Faktor-Xa-Assay bestimmt mit der Ausnahme, dass das Substrat S-2251 (D-Val-L-Leu-L-Lys-p-nitroanilid; Kabi) ist und das Enzym Humanplasmin (Kabi) ist. Die Enzymkonzentration ist 5 nm und die Substratkonzentration ist 300 μM.
d. Trypsinassay
TBS-PEG-Puffer, enthaltend 10 mM CaCl₂, wird für dieses Assay verwendet. Der IC₅₀-Wert wird, wie vorstehend in dem Faktor-Xa-Assay beschrieben, bestimmt, mit der Ausnahme, dass das Substrat BAPNA (Benzoyl-L-Arg-p-nitroanilid; Sigma Chemical Co.; St. Louis Mo.) ist und das Enzym Rinderpankreastrypsin (Type XIII, TPCK-behandelt; Sigma) ist. Die Enzymkonzentration ist 50 nM und die Substratkonzentration ist 300 μM.
e. Elastatassay
Tris-Cl-Puffer (pH 7,4, 300 mM NaCl, 2% (Volumen/Volumen) N-Methylpyrrolidon, 0,01% (Gewicht/Volumen) NaN₃) wurde für dieses Assay verwendet. Der IC₅₀-Wert wird, wie vorstehend für das Assay von Faktor Xa beschrieben, bestimmt mit der Ausnahme, dass das Substrat Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilid (Calbiochem-Nova Biochem Corp.; San Diego Calif.) ist und das Enzym Humanneutrophilenelastase (Athens Research und Technology, Inc.; Athens Ga.) ist. Die Enzymkonzentration ist 75 nM und die Substratkonzentration ist 600 μM. Die Kontrollverbindung ist „TENSTOP" (N(α)-Tosyl-Gly-p-amidinophenylalaninmethylester; American Diagnostica, Inc.; Greenwish Conn.), was ein reversibler Faktor-Xa-Inhibitor ist (Sturzebecher et al., Thromb. Res. 54 (1989), 245–252; Hauptmann et al., Thromb. Haem. 63 (1990), 220–223, wobei jeder davon hierin durch Hinweis einbezogen ist).
Test 2: Assays zur Bestimmung der Inhibierung von Koagulation
Die Wirksamkeit der Verbindungen der Formel I kann durch das In-vitro-Thrombinzeit (PT)-Assay unter Verwendung von vereinigtem Humandonorplasma bewertet werden. Ein Ex-vivo-Assay kann auch verwendet werden, worin Plasma bei verschiedenen Zeiten nach intravenöser (iv) Verabreichung einer Verbindung der Formel I an Ratten oder an Kaninchen oder nach intraduodenaler (id) Verabreichung an Ratten gesammelt wird und unter Verwendung des PT-Assays zur Bestimmung der Plasmahalbwertszeit analysiert wird. Das PT-Assay wird mit einer Thromboplastinverdünnung, ausgewählt unter Gewinnung eines ausgedehnten und stark reproduzierbaren Koagulationsendpunkts, bezeichnet als das wie nachstehend beschriebene „verdünnte PT-Assay", gestartet. Die Wirksamkeit der Verbindungen kann auch unter Verwendung eines arteriovenösen in vivo-Shunt-Modells von Thrombose bei der Ratte bestimmt werden.
a. In-vitro-Verdünnungsprothrombinzeitassay
100 μl vorerwärmtes (37°C) vereinigtes Humanthrombozytenreinplasma (PPP) wird zu einem Fibrometer-Becher (Baxter Diagnostics, Inc.; McGaw Park Ill.) gegeben. 50 μl verschiedene Konzentrationen einer Verbindung der Formel I in TBS-BSA mit Calcium (50 mM Tris-Cl, 100 mM NaCl, 0,1% (Gewicht/Volumen) Rinderserumalbumin (BSA), 20 mM CaCl₂) werden zugegeben. Bei Kontrollversuchen wird TBS-BSA mit Calcium, jedoch ohne eine Testverbindung der Formel I zur Messung der ungehemmten Koagulationszeit zugegeben. 150 μl verdünntes, vorerwärmtes Kaninchenthromboplastin (Baxter) mit Calcium wird zu dem Fibrometer-Becher gegeben und der Fibrometer-Timer wird gestartet. Eine Kaninchenthromboplastinverdünnungskurve wird vor dem Behandeln der Verbindung erhalten und wird angewendet, um eine Thromboplastinverdünnung auszuwählen, die ungefähr 30 s PT-Zeit für ungehemmte Kontrollen erlaubt. Die experimentelle Konzentration, die 50% Inhibierung der Koagulation (EC₅₀) ergibt, wird aus den Verdünnungskurvenzeiten berechnet.
Alternativ kann das Verdünnungsprothrombinzeitassay unter Verwendung des „Research"-Modus auf einem automatisierten Koagulationsinstrument ACL3000-plus von Instrumentation Laboratories (IL) (IL; Mailand, Italien) durchgeführt werden. Thromboplastin wird, bis eine Gerinnungszeit von 30–35 Sekunden erreicht ist, verdünnt. Diese Gerinnungszeit wird als 100% Aktivität genommen. Eine Standardkurve für die Eichung wird durch serielle zweifache Verdünnung des verdünnten Throm boplastinreagenz (Kaninchenhirn IL-Brand Thromboplastin) hergestellt. Während des Assays wird eine 50-μl-Probe (Plasma, abgetrennt durch Zentrifugierung) mit 100 μl Thromboplastinreagenz vermischt und nephelometrische Ablesungen werden innerhalb 169 s genommen. Koagulationszeit wird durch die maximale Geschwindigkeit der Veränderung von leichter Streuung, berechnet durch das Instrument, bestimmt. Die Inhibierung wird als prozentuale Aktivität, wie durch den Vergleich mit der Eichkurve bestimmt, ausgedrückt.
b. Ex-vivo-Verdünnungsprothrombinzeitassay
Eine Testverbindung der Formel I wird iv entweder durch die Schwanzvene (Ratte) oder Ohrvene (Kaninchen) verabreicht, gefolgt von einem zugelassenen Protokoll. Blutproben von 1 ml Volumen werden in Zeitintervallen nach Verabreichung der Testverbindung aus einer kanülierten Carotidarterie (Ratte) oder auriculären Arterie (Kaninchen) entfernt. Nach Zentrifugierung unter Gewinnung von PPP wird das Plasma sofort auf Eis gelagert oder gefroren.
Zur Bestimmung der Prothrombinverdünnungszeit wird das Plasma vorerwärmt und, wie vorstehend beschrieben, bestimmt. Die prozentuale Inhibierung wird aus einer Thromboplastinverdünnungskurve berechnet, die wiederum mit jeder Reihe von Proben läuft und angewendet wird, um die Zeit zu bestimmen, bei der ungefähr 50% der anfänglichen Antikoagulationsaktivität in dem Plasma verbleibt (T_1/2).
Die Testverbindung der Formel I kann auch an Ratten unter Anwendung eines intraduodenalen Dosierungsprotokolls verabreicht werden. Männliche Sprague-Dawley-Ratten mit dem Gewicht von ungefähr 300 g werden mit einer Kombination von Ketamin/Xylazin, verabreicht subkutan, anästhesiert, gefolgt von einem zugelassenen Protokoll. Die rechte Carotidarterie wird zum Blutprobennehmen kanüliert. Eine Laparotomie wird ausgeführt und das Duodenum wird mit einer Kugelspitzennadel kanüliert und am Platz verzurrt, um zu sichern, dass die Naht distal zu dem Punkt des Einschubs ist. Eine weitere Schlaufe wird proximal zu dem Einschubpunkt zum Verhindern von Auslaufen von Darminhalt angeordnet. Die Wirksamkeit der Naht beim Verhindern, dass eine Verbindung die Einschubstelle erreicht, wird durch Drucktest an dem Verschluss bei jedem Versuch getestet. Der Einschubpunkt ist ungefähr 4 cm von der duodenalen gastrischen Verbindung. Die Verbindung wird in 1 ml normaler Salzlösung verabreicht. Eine Blutprobe von 0,7 ml wird vor der Verabreichung der Testverbindung der Formel I und bei 15, 30, 60, 90 und 120 Minuten nach Verabreichung gezogen. Das Plasma wird durch Zentrifugierung abgetrennt und zur Inhibierung der Koagulation unter Anwendung des Verdünnungsprothrombinzeitassays bewertet.
c. Arteriovenöses Shunt-Modell von Thrombose bei der Ratte
Die antithrombotische Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen kann unter Anwendung eines extracorporalen arteriovenösen (AV)-Shunts bei der Ratte bewertet werden. Der AV-Shunt-Kreislauf besteht aus 20 cm langem Polyethylen (PE)-60-Schlauch, eingeschoben in die rechte Carotidarterie, einem 6 cm langen PE-160-Schlauch, enthaltend einen 6,5 cm langen mercerisierten Baumwollfaden (5 cm ausgesetzt dem Blutstrom), und einen zweiten langen PE-60-Schlauch (20 cm), der den Kreislauf in der linken jugularen Vene komplettiert. Der gesamte Kreislauf wird vor dem Einschub mit normaler Salzlösung gefüllt.
Eine Testverbindung der Formel I wird durch kontinuierliche Infusion in die Schwanzvene unter Anwendung einer Spritzenpumpe und Schmetterlingskatheters (Infusionsvolumen 1,02 ml/h) verabreicht. Die Verbindung wird 30 min verabreicht, dann wird die Umleitung geöffnet und das Blut für einen Zeitraum von 15 min (insgesamt 45 min) Infusion fließen lassen. Am Ende des 15-Minuten-Zeitraums wird die Umleitung geklammert und der Faden wird vorsichtig entfernt und auf einer analytischen Waage gewogen. Die prozentuale Inhibierung der Thrombusbildung wird unter Anwendung des Thrombusge wichts, erhalten von Kontrollratten, die mit Salzlösung infundiert werden, berechnet.
In Tabelle 1 werden einige Inhibierungskonstanten Ki für Faktor-Xa-Inhibierung durch Beispielverbindungen der vorliegenden Erfindung angegeben. Die Inhibierungskonstanten wurden wie vorstehend beschrieben bestimmt (Test 1, a., Faktor-Xa-Assay).
Tabelle 1: Ki-Werte für Faktor-Xa-Inhibierung
Wie hierin verwendet, haben die nachstehenden Begriffe die ausgewiesenen Bedeutungen: „g" bezieht sich auf Gramm; „mMol" bezieht sich auf Millimol; „mM" bezieht sich auf millimolar; „ml" bezieht sich auf Milliliter; „Fp." bezieht sich auf Schmelzpunkt; „Zers." bezieht sich auf Zersetzung; „°C" bezieht sich auf Grad Celsius; „μl" bezieht sich auf Mikroliter; „nM" bezieht sich auf nanomolar und „μM" bezieht sich auf mikromolar.
BEISPIELE
Die nachstehenden Beispiele geben typische Synthesen der Verbindungen der Formel I wieder. Diese Beispiele sind nur als erläuternd auffassen und sind nicht vorgesehen, den Umfang der vorliegenden Erfindung in irgendeiner Weise zu begrenzen. Die Verbindungen der Beispiele wurden durch Massenspektren (MS) und/oder NMR-Spektren und/oder Schmelzpunkte charakterisiert.
Beispiel 1: 4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]amino}-methyl)-1-methylpyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Eine Lösung von 1,9 g (10 mMol) 1H-Indol-2-carbonsäureethylester in 15 ml Dimethylformamid wurde mit 1,2 g (10,5 mMol) Kalium-tert-butoxid behandelt. Das Gemisch wurde 10 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, um eine klare Lösung zu ergeben. 2 g (10 mMol) 3-Cyanobenzylbromid wurden zugegeben und das Gemisch wurde langsam auf 100°C erhitzt, gekühlt, mit Essigsäure angesäuert und auf Eis-Wasser gegossen. Das ausgefällte Produkt wurde abfiltriert und in Methylenchlorid gelöst. Die Lösung wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde aus Methylenchlorid/Methanol kristallisiert unter Gewinnung von 2,5 g farblosen Kristallen mit Fp. 93–95°C.
2.) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure
Ein Gemisch von 0,61 g (2 mMol) von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester, 25 ml Methanol, 2,5 ml Wasser und 0,6 g Natriumhydroxid wurde 15 Minuten unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und 1 N Salzsäure verteilt. Die organische Phase wurde getrocknet und eingedampft. Kristallisation aus Methylenchlorid/Hexan ergab 0,53 g farblose Kristalle mit Fp. 226–228°C (Zers.).
3.) 1-(3-Cyanobenzyl)-N-[(4-pyridyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Ein Gemisch von 300 mg von vorstehender 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure, 20 ml Methylenchlorid und 10 ml Thionylchlorid wurde 4 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel und überschüssiges Reagenz wurden verdampft, am Ende azeotrop mit Toluol. Der Rückstand wurde in Methylenchlorid gelöst und die Lösung wurde mit 0,3 ml 4-Aminomethylpyridin behandelt. Das Gemisch wurde mit 10%iger wässriger Natriumcarbonatlösung unterschichtet und 15 Minuten heftig gerührt. Die organische Schicht wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde aus Essigsäureethylester/Ether kristallisiert unter Gewinnung von 280 mg farbloser Kristalle mit Fp. 154–156°C.
4.) N-[(4-Pyridyl)methyl]-1-[(3-thiocarbamoylphenyl)-methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Schwefelwasserstoff wurde innerhalb von 15 Minuten zu einer Eis-Wasser-gekühlten Lösung von 250 mg von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-N-[(4-Pyridyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid in 5 ml Pyridin und 4 ml Triethylamin eingeführt. Das Gemisch wurde 18 Stunden in einem geschlossenen Gefäß bei Raumtemperatur gerührt und dann zwischen Toluol/Pyridin und 10%iger wässriger Natriumcarbonatlösung verteilt. Die organische Schicht wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde aus Aceton/Ether kristallisiert unter Gewinnung von 220 mg hellgelber Kristalle mit Fp. 197–200°C (Zers.).
5.) 4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]amino}methyl)1-methylpyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 220 mg N-[(4-Pyridyl)methyl]-1-[(3-thiocarbamoylphenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid, 2 ml Dimethylsulfoxid, 5 ml Aceton und 0,5 ml Methyljodid wurde in einem geschlossenen Fläschchen 20 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Toluol verdünnt und eingedampft. Der Rückstand wurde in Aceton gelöst und das Produkt wurde mit Ether ausgefällt. Die Lösungsmittel wurden dekantiert und der Rückstand wurde mit frischem Aceton/Ether gerührt. Die Feststoffe wurden abgetrennt und im Vakuum getrocknet. Dieses Material wurde in 20 ml Methanol gelöst und die Lösung wurde mit 0,3 ml Essigsäure und 0,4 g Ammoniumacetat behandelt. Das Gemisch wurde 2 Stunden in einem verschlossenen Fläschchen auf 55–60°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und die Ammoniumacetatmenge wurde unter Hochvakuum entfernt. Der Rückstand wurde aus Acetonitril/Wasser 1:1, enthaltend 1 Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Die Endreinigung durch Umkehrphasen-HPLC ergab das Produkt mit einer Retentionszeit von 16,14 min und einem korrekten Molekulargewicht.
Beispiel 2: (RS)-4-(1-{[1-(3-Amidinobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-ethyl)-1-methylpyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) (RS)-1-(3-Cyano-benzyl)-N-[1-(4-pyridyl)-1-ethyl]-1H-indol-2-carboxamid
Ein Gemisch von 280 mg 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2), 10 ml Methylenchlorid und 4 ml Thionylchlorid wurde 4 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel und überschüssiges Reagenz wurden verdampft, am Ende azeotrop mit Hexan. Dieses Säurechlorid wurde in Methylenchlorid gelöst und zu einem Gemisch von 0,3 g (RS)-1-(4-Pyridyl)ethylamindihydrochlorid, 20 ml Methylenchlorid und 0,5 ml Diisopropylethylamin gegeben. Nach Rühren für 15 Minuten wurde das Reaktionsgemisch mit 10%igem wässrigem Natriumcarbonat unterschichtet und für weitere 15 Minuten heftig gerührt. Die organische Schicht wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde aus Essigsäureethylester/Ether kristallisiert unter Gewinnung von 300 mg farblosem Produkt mit Fp. 176–180°C.
2.) (RS)-N-[1-(4-Pyridyl)-1-ethyl]-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Schwefelwasserstoff wurde 15 Minuten in eine Eis-Wasser-gekühlte Lösung von 250 mg von vorstehendem (RS)-1-(3-Cyanobenzyl)-N-[1-(4-pyridyl)-1-ethyl]-1H-indol-2-carboxamid in 5 ml Pyridin und 4 ml Triethylamin eingeführt. Das Gemisch wurde 18 Stunden in einem verschlossenen Fläschchen bei Raumtemperatur gerührt und dann eingedampft. Der Rückstand wurde aus Aceton/Ether kristallisiert unter Gewinnung von 220 mg hellgelber Kristalle mit Fp. 197–200°C (Zers.).
3.) (RS)-4-(1-{[1-(3-Amidinobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}ethyl)-1-methylpyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 200 mg (RS)-N-[1-(4-Pyridyl)-1-ethyl]-1-[(3-thiocarbamoylphenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid, 1,5 ml Dimethylsulfoxid, 5 ml Aceton und 0,8 ml Methyljodid wurde in einem verschlossenen Fläschchen 18 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Toluol verdünnt und eingedampft. Der Rückstand wurde in Aceton gelöst und das Produkt wurde mit Ether ausgefällt. Die Lösungsmittel wurden dekantiert und der Rückstand wurde mit frischem Aceton/Ether gerührt. Die Feststoffe wurden abgetrennt, im Vakuum getrocknet und in 20 ml Methanol gelöst. Nach Zugabe von 0,3 ml Essigsäure und 0,65 g Ammoniumacetat wurde das Gemisch in einem verschlossenen Fläschchen für 3 Stunden auf 55°C erhitzt. Das Lösungsmittel und überschüssiges Ammoniumacetat wurden im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde aus Acetonitril/Wasser, enthaltend 1% Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasen-HPLC gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts mit Retentionszeit von 16,6 min und korrektem Molekulargewicht.
Beispiel 3: 1-(3-Amidinobenzyl)-N-(4-amidino-benzyl)-1H-indol-2-carboxamidtrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyanobenzyl)-N-(4-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carboxamid
Ein Gemisch von 275 mg (1 mMol) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2), 350 mg Diphenylphosphorylazid, 200 mg 4-Cyanobenzylaminhydrochlorid, 5 ml Dimethylformamid und 0,4 ml Diisopropylethylamin wurde 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde in Methylenchlorid gelöst. Die Lösung wurde mit 1 N Salzsäure und 10%igem wässrigem Natriumcarbonat gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde über 10 g Kieselgel unter Verwendung von Methylenchlorid zur Elution geleitet. Kristallisation aus Methylenchlorid/Hexan ergab 310 mg farblose Kristalle mit Fp. 160–162°C.
2.) 1-[(3-Thiocarbamoylphenyl)methyl]-N-[4-(thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Eine Lösung von 150 mg von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-N-(4-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carboxamid in 4 ml Pyridin und 2 ml Triethylamin wurde in Eiswasser gekühlt und mit Schwefelwasserstoff gesättigt. Nach Rühren in einem verschlossenen Gefäß für 18 Stunden bei Raumtemperatur wurde das Lösungsmittel verdampft und der Rückstand wurde aus Aceton/Methylenchlorid/Ether kristallisiert unter Gewinnung von 180 mg hellgelber Kristalle mit Fp. 225–230°C (Zers.).
3.) 1-(3-Amidinobenzyl)-N-(4-amidinobenzyl)-1H-indol-2-carboxamidtrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 160 mg 1-[(3-Thiocarbamoyl-phenyl)-methyl]-N-[4-(thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid, 5 ml Aceton, 1 ml Dimethylsulfoxid und 0,4 ml Methyljodid wurde 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde mit Toluol verdünnt und eingedampft. Der Rückstand wurde mit Aceton/Ether gerührt und das Lösungsmittel wurde dekantiert. Der Rückstand wurde in Aceton/Methanol gelöst und das Produkt wurde durch Zugabe von Ether ausgefällt. Die Feststoffe wurden abfiltriert, getrocknet und in 20 ml Methanol gelöst. Die Lösung wurde mit 0,3 ml Essigsäure und 0,6 g Ammoniumacetat behandelt und das Gemisch wurde in einem verschlossenen Fläschchen 3 Stunden auf 55°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und die Ammoniumacetatmenge wurde unter Hochvakuum entfernt. Der Rückstand wurde aus Acetonitril und Wasser, enthaltend 1% Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Reinigung durch HPLC ergab die Titelverbindung mit Retentionszeit von 17,46 min und dem korrekten Molekulargewicht.
Beispiel 4: [4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]amino}-methyl)phenyl]trimethylammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-[3-Cyanobenzyl]-N-[4-(dimethylaminophenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Ein Gemisch von 275 mg (1 mMol) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2), 350 mg Diphenylphosphorylazid, 250 mg 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid, 5 ml Dimethylformamid und 0,5 ml Diisopropylethylamin wurde 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde in Methylenchlorid gelöst. Die Lösung wurde mit 10%igem wässrigem Natriumcarbonat gewaschen, getrocknet und eingedampft. Kristallisation des Rückstands aus Methylenchlorid/Ether/Hexan ergab 330 mg farblose Kristalle mit Fp. 153–155°C.
2.) N-[4-(Dimethylaminophenyl)methyl]-1-[(3-thiocarbamoylphenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Schwefelwasserstoff wurde in eine Eis-Wasser-gekühlte Lösung von 200 mg von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-N-[4-(dimethylaminophenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid in 5 ml Pyridin und 3 ml Triethylamin eingeführt. Das Gemisch wurde in einem verschlossenen Fläschchen im Kühlschrank 3 Tage gelagert. Die Lösungsmittel wurden verdampft und der Rückstand wurde aus Methylenchlorid/Ether/Hexan kristallisiert unter Hinterlassen von 170 mg gelblichem Produkt mit Fp. 152–154°C.
3.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 160 mg N-[4-(Dimethylaminophenyl)-methyl]-1-[(3-thiocarbamoylphenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid, 5 ml Aceton und 0,4 ml Methyljodid wurde in einem verschlossenen Fläschchen 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Produkt wurde durch Zugabe von Ether ausgefällt und durch Filtration gesammelt. Die Feststoffe wurden mit Aceton/Ether gewaschen und getrocknet. Dieses Material wurde in 10 ml Methanol gelöst und die Lösung wurde mit 0,25 ml Essigsäure und 0,5 g Ammoniumacetat behandelt. Das Gemisch wurde 3 Stunden in einem verschlossenen Fläschchen auf 55°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde aus Acetonitril und Wasser, enthaltend 1% Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Reinigung durch HPLC ergab die Titelverbindung mit Retentionszeit von 17,38 min und korrektem Molekulargewicht.
Beispiel 6: [4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-benzyl]-trimethylammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-N-{[4-(dimethylaminomethyl)-phenyl]methyl}-1H-indol-2-carboxamid
Ein Gemisch von 275 mg (1 mMol) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2), 350 mg Diphenylphosphorylazid, 250 mg 4-(Dimethylaminomethyl)benzylamindihydrochlorid, 5 ml Dimethylformamid und 0,2 ml Diisopropylethylamin wurde 3 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und 10%iger wässriger Natriumcarbonatlösung verteilt. Die organische Phase wurde getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde mit Ether/Hexan gerührt unter Gewinnung von 240 mg farbloser Kristalle mit Fp. 127–128°C.
2.) N-{[4-(Dimethylaminomethyl)phenyl]-methyl}-1-[(3-thiocarbamoylphenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Eine Lösung von 240 mg von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-N-{[4-(dimethylaminomethyl)phenyl]-methyl}-1H-indol-2-carboxamid in 5 ml Pyridin und 3 ml Triethylamin wurde mit Schwefelwasserstoff gesättigt, während in Eis-Wasser gekühlt wurde. Das Gemisch wurde 20 Stunden bei Raumtemperatur in einem verschlossenen Fläschchen absetzen lassen. Die Lösungsmittel wurden verdampft und der Rückstand wurde mit Ether gerührt unter Gewinnung von 200 mg gelber Kristalle mit Fp. 120–125°C.
3.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-benzyl]-trimethylammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 200 mg N-{[4-(Dimethylaminomethyl)-phenyl]-methyl}-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid, 6 ml Aceton, 1 ml Dimethylsulfoxid und 0,8 ml Methyljodid wurde in einem verschlossenen Fläschchen 20 Stunden gerührt. Nach Verdampfung wurde der Rückstand in Aceton gelöst und das Produkt wurde mit Ether ausgefällt. Die Feststoffe wurden aus Aceton mit Ether erneut ausgefällt. Nach Trocknen wurde das Produkt in 20 ml Methanol gelöst. Die Lösung wurde mit 0,3 ml Essigsäure und 0,6 g Ammoniumacetat behandelt und das Gemisch wurde 3 Stunden auf 55°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde mit Acetonitril/Wasser, enthaltend 1% Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Das Rohprodukt wurde durch HPLC gereinigt unter Gewinnung der Titelverbindung mit einer Retentionszeit von 17,96 min und dem korrekten Molekulargewicht.
Beispiel 7: 4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäuremethylester
Eine Lösung von 0,96 g (5 mMol) 5-Fluor-1H-indol-2-carbonsäuremethylester in 20 ml Dimethylformamid wurde mit 0,6 g (5,25 mMol) Kalium-tert-butoxid behandelt. Das Gemisch wurde 10 Minuten bei Raumtemperatur gerührt unter Gewinnung einer klaren Lösung. 3-Cyanobenzylbromid, 1 g (5 mMol), wurde zugegeben und das Gemisch wurde langsam auf 100°C erhitzt, gekühlt, mit Essigsäure angesäuert und auf Eis-Wasser gegossen. Das ausgefällte Produkt wurde abfiltriert und in Methylenchlorid gelöst. Die Lösung wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde aus Methanol kristallisiert unter Gewinnung von 1,3 g farbloser Kristalle mit Fp. 148–148°C.
2.) 1-(3-Cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure
Ein Gemisch von 1 g von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäuremethylester, 30 ml Methanol, 3 ml Wasser und 0,5 g Natriumhydroxid wurde 20 Minuten unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde teilweise verdampft und der Rückstand wurde mit 2 N Salzsäure angesäuert. Die ausgefallenen Kristalle wurden abfiltriert und in Methylenchlorid/2-Propanol gelöst. Die Lösung wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde aus Aceton/Hexan kristallisiert unter Gewinnung von 0,9 g farbloser Kristalle mit Fp. 247–250°C (Zers.).
3.) 1-(3-Cyanobenzyl)-5-fluor-N-[(4-pyridyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Diese Verbindung wurde durch Umwandeln der vorstehenden Carbonsäure zu dem Säurechlorid und Umsetzen desselben mit 4-Aminomethylpyridin, wie für das Desfluoranaloge in Beispiel 1/3 beschrieben, hergestellt. Es wurde aus Essigsäureethylester/Ether/Hexan umkristallisiert unter Gewinnung farbloser Kristalle mit Fp. 160–162°C.
4.) 5-Fluor-N-[(4-pyridyl)methyl]-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Dieses Thioamid wurde durch Reaktion des vorstehenden Nitrils mit Schwefelwasserstoff, wie in Beispiel 1/4 für das Desfluoranaloge beschrieben, erhalten. Es wurde als ein gel ber kristalliner Feststoff aus Aceton mit Fp. 220–223°C erhalten.
5.) 4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-1-methylpyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde in ähnlicher Weise durch Behandlung von 5-Fluor-N-[(4-pyridyl)methyl]-1-[(3-thiocarbamoylphenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid mit Methyljodid und anschließend mit Ammoniumacetat, wie in Beispiel 1/5 beschrieben, hergestellt. Das Produkt wurde durch HPLC gereinigt und hatte eine Retentionszeit von 16,64 min und das korrekte Molekulargewicht.
Beispiel 8: 4-(2-{[1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-ethyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyanobenzyl)-N-[2-(4-pyridyl)ethyl]-1H-indol-2-carboxamid
1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2), 280 mg, wurde in das Säurechlorid mithilfe von Thionylchlorid, wie in Beispiel 1/3 beschrieben, umgewandelt. Dieses Säurechlorid wurde zu einem Gemisch von 300 mg 2-(4-Pyridyl)ethylamindihydrochlorid und 0,4 ml Diisopropylethylamin in Methylenchlorid gegeben. Nach Rühren für 10 Minuten wurde das Gemisch mit 10%igem wässrigem Natriumcarbonat unterschichtet und weitere 10 Minuten gerührt. Die organische Schicht wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde über 12 g Kieselgel unter Verwendung von Methylenchlorid/Aceton 1:1 chromatographiert unter Gewinnung von 280 mg harzartigem Produkt.
2.) N-[2-(4-Pyridyl)ethyl]-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Das vorstehende 1-(3-Cyanobenzyl)-N-[2-(4-pyridyl)-ethyl]-1H-indol-2-carboxamid wurde mit Schwefelwasserstoff, wie in Beispiel 1/4 beschrieben, umgesetzt. Kristallisation aus Aceton/Hexan ergab 290 mg gelbliche Kristalle mit Fp. 208–210°C.
3.) 4-(2-{[1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonyl)-amino}-ethyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 250 mg N-[2-(4-Pyridyl)ethyl]-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid, 2 ml Dimethylsulfoxid, 10 ml Aceton und 1 ml Methyljodid wurde in einem verschlossenen Fläschchen 20 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Toluol verdünnt und eingedampft. Der Rückstand wurde in Aceton gelöst und das Produkt wurde mit Ether ausgefällt. Die Lösungsmittel wurden dekantiert und der Rückstand wurde aus Methanol mit Ether erneut ausgefällt. Die Feststoffe wurden abgetrennt und im Vakuum getrocknet. Dieses Material wurde in 25 ml Methanol gelöst und die Lösung wurde mit 0,4 ml Essigsäure und 0,8 g Ammoniumacetat behandelt. Das Gemisch wurde 2 Stunden in einem verschlossenen Fläschchen auf 55–60°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und die Ammoniumacetatmenge wurde unter Hochvakuum entfernt. Der Rückstand wurde aus Acetonitril/Wasser 1:1, enthaltend 1 Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Endreinigung durch Umkehrphasen-HPLC ergab das Produkt mit einer Retentionszeit von 16,23 min und korrektem Molekulargewicht.
Beispiel 11 (Bezug): 4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-3-methoxycarbonyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2,3-dicarbonsäuredimethylester
Eine Lösung von 0,47 g (2 mMol) 1H-Indol-2,3-dicarbonsäuredimethylester in 10 ml Dimethylformamid wurde mit 0,23 g (2 mMol) Kalium-tert-butoxid behandelt. Nach Rühren für 5 Minuten wurden 0,4 g (2 mMol) 3-Cyanobenzylbromid zugegeben und das Gemisch wurde auf 95°C erhitzt. Nach Kühlen wurde das Gemisch zwischen Methylenchlorid/Hexan und wässriger Natriumbicarbonatlösung verteilt. Die organische Phase wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde über 15 g Kieselgel unter Verwendung von 10% Ether in Methylenchlorid zur Elution chromatographiert. Die sauberen Fraktionen wurden vereinigt und eingedampft unter Hinterlassen von 6 g farblosem Harz.
2.) 1-(3-Cyanobenzyl)-3-methoxycarbonyl-1H-indol-2-carbonsäure
Ein Gemisch von 0,4 g von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2,3-dicarbonsäuredimethylester, 20 ml Methanol, 2 ml Wasser und 0,4 g Natriumhydroxid wurde 5 Minuten unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde teilweise entfernt und der Rückstand wurde mit Wasser verdünnt und mit 2 N Salzsäure angesäuert. Die ausgefallene Säure wurde mit Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte wurden getrocknet und eingedampft. Kristallisation des Rückstands aus Methylenchlorid/Ether/Hexan ergab 370 mg farblose Kristalle.
3.) 1-(3-Cyano-benzyl)-3-methoxycarbonyl-N-(4-pyridylmethyl)-1H-indol-2-carboxamid
Ein Gemisch von 200 mg 1-(3-Cyano-benzyl)-3-methoxycarbonyl-1H-indol-2-carbonsäure, 110 mg 4-Aminomethylpyridin, 210 mg Diphenylphosphorylazid, 4 ml Dimethylformamid und 0,3 ml Diisopropylethylamin wurde bei Raumtemperatur 18 Stunden absetzen lassen. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und 10%igem wässrigem Natriumcarbonat verteilt. Die organische Schicht wurde getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde über 12 g Kiesegel unter Verwendung von Methylenchlorid/Essigsäureethylester/Aceton 2:2:1 zur Elution chromatographiert. Kristallisation aus Essigsäureethylester/Ether/Hexan ergab 170 mg farblose Kristalle mit Fp. 152–154°C.
4.) 3-Methoxycarbonyl-N-[(4-pyridyl)methyl]-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Eine Lösung von 150 mg 1-(3-Cyano-benzyl)-3-methoxycarbonyl-N-(4-pyridylmethyl)-1H-indol-2-carboxamid in 4 ml Pyridin und 2 ml Triethylamin wurde in Eis-Wasser gekühlt und mit Schwefelwasserstoff gesättigt. Nach Absetzen in einem verschlossenen Fläschchen für 4 Stunden bei Raumtemperatur wurden die Lösungsmittel verdampft, am Ende azeotrop mit Essigsäureethylester. Der Rückstand wurde aus Methylenchlorid/Ether/Hexan kristallisiert unter Hinterlassen von 160 mg hellgelbem Produkt, das im anschließenden Schritt verwendet wurde.
5.) 4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-3-methoxycarbonyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}methyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 150 mg 3-Methoxycarbonyl-N-(4-pyridylmethyl)-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2- carboxamid, 10 ml Aceton, 1 ml Dimethylsulfoxid und 0,6 ml Methyljodid wurde 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde dann mit Essigsäureethylester verdünnt und eingedampft. Der Rückstand wurde mit Ether gerührt und das Lösungsmittel wurde dekantiert. Der Rückstand wurde aus Essigsäureethylester mit Ether ausgefällt, gesammelt und im Vakuum getrocknet. Dieses Material wurde in 15 ml Methanol gelöst, mit 0,15 ml Essigsäure und 0,3 g Ammoniumacetat behandelt und zwei Stunden auf 55°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde aus Wasser, enthaltend 1% Trifluoressigsäure und Acetonitril (1:1), lyophilisiert. Reinigung durch HPLC ergab die Titelverbindung mit einer Retentionszeit von 16,2 Minuten und dem korrektem Molekulargewicht.
Beispiel 13 (Bezug): 1-[4-Amidino-benzyl]-1H-indol-2-carbonsäureethylesterhydrochlorid
1.) 1-(4-Thiocarbamoyl-phenyl)methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Eine Lösung von 300 mg 1-(4-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester in 8 ml Pyridin und 4 ml Triethylamin wurde mit Schwefelwasserstoff unter Kühlen mit Eis-Wasser gesättigt. Nach Absetzen lassen bei Raumtemperatur über Nacht in einem verschlossenen Fläschchen wurde das Reaktionsgemisch zwischen Toluol und 10%igem wässrigem Natriumcarbonat verteilt. Die organische Phase wurde getrocknet und eingedampft. Kristallisation des Rückstands aus Ether ergab 0,3 g gelbe Kristalle mit Fp. 187–189°C.
2.) 1-[4-Amidino-benzyl]-1H-indol-2-carbonsäureethylesterhydrochlorid
Ein Gemisch von 250 mg 1-(4-Thiocarbamoyl-phenyl)methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylester, 10 ml Aceton und 1 ml Methyljodid wurde 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die ausgefallenen Kristalle wurden abfiltriert, mit Ether gewaschen und in 10 ml Methanol gelöst. Die Lösung wurde mit 0,2 ml Essigsäure und 0,5 g Ammoniumacetat behandelt und 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid/2-Propanol und 1 N Natriumhydroxidlösung verteilt. Die organische Phase wurde getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde mit Chlorwasserstoff in Ether behandelt und aus Ethanol/Ether kristallisiert unter Hinterlassen von farblosen Kristallen mit Fp. 240–241°C.
Beispiel 14 (Bezug): 1-[3-Amidino-benzyl]-1H-indol-2-carbonsäureethylesterhydrochlorid
1.) 1-(3-Thiocarbamoyl-phenyl)methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Diese Verbindung wurde durch die Standardreaktion (siehe Beispiel 13/1) aus 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester (Beispiel 1/1) mit Schwefelwasserstoff erhalten. Sie wurde aus Ether/Hexan kristallisiert unter Gewinnung gelber Kristalle mit Fp. 124–126°C.
2.) 1-[3-Amidino-benzyl]-1H-indol-2-carbonsäureethylesterhydrochlorid
Diese Verbindung wurde in ähnlicher Weise zu Beispiel 13/2 durch Reaktion von 1-(3-Thiocarbamoylphenyl)methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylester mit Methyljodid und anschließend mit Ammoniumacetat hergestellt. Das Hydrochlorid wurde aus 2-Propanol/Essigsäureethylester/Ether kristallisiert unter Gewinnung von farblosen solvatisierten Kristallen mit Fp. 136–140°C (Zers.). Diese Verbindung hatte eine HPLC-Retentionszeit von 23,95 Minuten und das korrekte Molekulargewicht.
Beispiel 15 (Bezug): 1-[3-Amidino-benzyl]-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäuremethylesterhydrochlorid
Das Ausgangsmaterial 5-Fluor-1-(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl-1H-indol-2-carbonsäuremethylester wurde in ähnlicher Weise zu Beispiel 13/1 aus der Reaktion von 1-(3-Cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäuremethylester (Beispiel 7/1) mit Schwefelwasserstoff erhalten. Es wurde aus Ether/Hexan kristallisiert unter Gewinnung eines gelben kristallinen Pulvers, das analog zu Beispiel 1/5 direkt zu dem Amidin umgewandelt wurde.
Die Titelverbindung wurde analog zu Beispiel 1 hergestellt. Das Hydrochlorid wurde aus Methanol/Ether kristallisiert und ergab farblose Kristalle mit Fp. 235–237°C (Zers.).
Beispiel 16 (Bezug): 1-[3-Amidino-benzyl]-1H-indol-2,3-dicarbonsäuredimethylestertrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial 1-(3-Thiocarbamoylphenyl)methyl-1H-indol-2,3-dicarbonsäuredimethylester wurde analog zu Beispiel 13/1 durch Umsetzung von 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2,3-dicarbonsäuredimethylester (Beispiel 11/1) mit Schwefelwasserstoff hergestellt. Es wurde aus Ether/Hexan kristallisiert unter Gewinnung gelber Kristalle mit Fp. 176–178°C.
Das Produkt wurde analog zu Beispiel 1/5 zu dem Amidin umgewandelt. Das Amidin wurde aus Acetonitril/Wasser/Trifluoressigsäure lyophilisiert und hatte eine Retentionszeit bei HPLC von 20,9 min und das korrekte Molekulargewicht.
Beispiel 17 [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäuremethylester
Eine Lösung von 1,025 g (5 mMol) 4-Methoxy-1H-indol-2-carbonsäuremethylester in 20 ml Dimethylformamid wurde mit 0,6 g (5,25 mMol) Kalium-tert-butoxid behandelt. Das Gemisch wurde 10 Minuten bei Raumtemperatur gerührt unter Gewinnung einer klaren Lösung. 1 g (5 mMol) 3-Cyanobenzylbromid wurde zugegeben und das Gemisch wurde langsam auf 90°C erhitzt, gekühlt, mit Essigsäure angesäuert und auf Eis-Wasser gegossen und zum Kristallisieren gerührt. Die Kristalle wurden abfiltriert, mit Wasser gewaschen und in Methylenchlorid gelöst. Die Lösung wurde mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft und der Rückstand wurde aus Methanol kristallisiert unter Gewinnung von 1,3 g farbloser Kristalle mit Fp. 135–136°C.
2.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure
Ein Gemisch von 0,96 g (3 mMol) von vorstehendem 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäuremethylester, 20 ml Methanol, 2 ml Wasser und 0,5 g Natriumhydroxid wurde 40 Minuten unter Rückfluss erhitzt. Das Gemisch wurde mit Wasser verdünnt und mit Ether/Hexan extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit 2 N Salzsäure angesäuert und mit Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte wurden getrocknet und eingedampft. Kristallisation des Rückstands aus Methylenchlorid/Hexan ergab 0,87 g farblose Kristalle mit Fp. 222–224°C (Zers.).
3.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-N-[(4-dimethylaminophenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Ein Gemisch von 306 mg (1 mMol) der vorstehenden 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure, 250 mg (1,12 mMol) 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid, 350 mg Diphenylphosphorylazid, 0,5 ml Diisopropylethylamin und 5 ml Dimethylformamid wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt.
Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und 10%iger wässriger Natriumcarbonatlösung verteilt. Die organische Schicht wurde mit verdünnter Essigsäure und Natriumbicarbonat gewaschen, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde über eine Lage Kieselgel unter Verwendung von 10% Essigsäureethylester in Dichlormethan geleitet. Kristallisation aus Essigsäureethylester/Hexan ergab 330 mg (75%) farblose Kristalle mit Fp. 138–140°C.
4.) N-[(4-Dimethylaminophenyl)methyl]-4-methoxy-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Schwefelwasserstoff wurde 15 Minuten in eine Eis-Wasser-gekühlte Lösung von 200 mg von vorstehendem 1-(3-Cyanobenzyl)-4-methoxy-N-[(4-dimethylaminophenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid in 65 ml Pyridin und 3 ml Triethylamin eingeführt. Das Gemisch wurde 18 Stunden in einem verschlossenen Gefäß bei Raumtemperatur gerührt und dann eingedampft. Der Rückstand wurde über 10 g Kieselgel unter Verwendung von 20 Aceton in Dichlormethan geleitet und aus Essigsäureethylester/Hexan kristallisiert unter Gewinnung von 150 mg (70%) hellgelber Kristalle mit Fp. 192–193°C.
5.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 125 mg N-[4-(Dimethylaminophenyl)methyl]-4-methoxy-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)-methyl)-1H-indol-2-carboxamid, 10 ml Aceton, 1 ml Dimethylsulfoxid und 0,6 ml Methyljodid wurde in einem verschlossenen Fläschchen 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde mit Essigsäureethylester verdünnt und eingedampft. Der Rückstand wurde mit Aceton/Ether gerührt und das Lösungsmittel wurde dekantiert. Der Rückstand wurde in einer kleinen Menge Methanol gelöst und das Produkt wurde mit Ether ausgefällt, gesammelt und getrocknet. Dieses Material wurde in 15 ml Methanol ge löst und die Lösung wurde mit 0,2 ml Essigsäure und 0,4 g Ammoniumacetat behandelt. Das Gemisch wurde 3 Stunden in einem verschlossenen Fläschchen auf 55°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde aus Acetonitril und Wasser, enthaltend 1% Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Reinigung durch HPLC ergab die Titelverbindung mit der Retentionszeit von 17,6 min und korrektem Molekulargewicht.
Beispiel 18 [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-6-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial wurde gemäß den in Beispiel 17 beschriebenen Verfahren hergestellt.
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-6-methoxy-1H-indol-2-carbonsäuremethylester
Diese Verbindung wurde in 86%iger Ausbeute durch Alkylierung von 6-Methoxy-1H-indol-2-carbonsäuremethylester mit 3-Cyanobenzylbromid erhalten und hatte Fp. 152–153°C, kristallisiert aus Methanol.
2.) 1-(3-Cyano-benzyl)-6-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure
Diese Verbindung wurde in 91%iger Ausbeute durch alkalische Hydrolyse des vorstehenden Methylesters erhalten und hatte Fp. 225–227°C (Zers.), kristallisiert aus Dichlormethan/Hexan.
3.) 1-(3-Cyano-benzyl)-N-[(4-dimethylaminophenyl)methyl]-6-methoxy-1H-indol-2-carboxamid
Diese Verbindung wurde in 78%iger Ausbeute durch Kuppeln der vorstehenden Säure mit 4-Dimethylaminobenzylamin unter Verwendung von Diphenylphosphorylazid hergestellt und hatte Fp. 156–158°C, kristallisiert aus Essigsäureethylester/Hexan.
4.) N-[(4-Dimethylaminophenyl)methyl]-6-methoxy-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)methyl]-1H-indol-2-carboxamid
Diese Verbindung wurde in 93%iger Ausbeute durch Reaktion des vorstehenden Nitrils mit Schwefelwasserstoff erhalten. Sie wurde aus Essigsäureethylester/Hexan kristallisiert unter Gewinnung gelber Kristalle mit Fp. 190–192°C.
5.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-6-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Ein Gemisch von 150 mg N-[4-(Dimethylaminophenyl)methyl]-6-methoxy-1-[(3-thiocarbamoyl-phenyl)-methyl]-1H-indol-2-carboxamid, 10 ml Aceton, 1 ml Dimethylsulfoxid und 0,7 ml Methyljodid wurde in einem verschlossenen Fläschchen für 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde mit Essigsäureethylester verdünnt und eingedampft. Der Rückstand wurde in Aceton/Essigsäureethylester gelöst und mit Ether ausgefällt. Das Lösungsmittel wurde dekantiert und der Rückstand wurde in einer kleinen Menge Methanol gelöst und das Produkt wurde mit Ether ausgefällt, gesammelt und getrocknet. Dieses Material wurde in 20 ml Methanol gelöst und die Lösung wurde mit 0,2 ml Essigsäure und 0,4 g Ammoniumacetat behandelt. Das Gemisch wurde 2,5 Stunden in einem verschlossenen Fläschchen auf 55°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand wurde aus Acetonitril und Wasser, enthaltend 1% Trifluoressigsäure, lyophilisiert. Reinigung durch HPLC ergab die Titelverbindung mit Retentionszeit von 17,5 min und korrektem Molekulargewicht.
Beispiel 19 (Bezug) 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-3-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-3-carbonsäure
Zu einer Lösung von 9 g (0,055 Mol) 3-Indolcarbonsäure in 200 ml Tetrahydrofuran wurden 3 g (0,122 Mol) Natriumhydrid bei 0°C in Portionen gegeben. Nach 75 Minuten bei 0°C wurden 10,7 g (0,055 Mol) 3-Cyano-benzylbromid zugegeben. Nach 16 h Rühren bei Raumtemperatur wurde der Niederschlag abfiltriert, in Wasser gelöst und durch Zugabe von Salzsäure ausgefällt unter Gewinnung von 13 g (86%) des gewünschten Produkts. Fp. 226–228°C
MS: 277,2 (M + H⁺).
2.) 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-3-carbonsäure-4-(dimethylamino)benzylamid
Die Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-3-carbonsäure, 4-Dimethylaminobenzylamin, Diphenylphoshorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Kieselgelchromatographie mit Toluol/Essigsäureethylester 5:1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 32%iger Ausbeute. Fp. 126–128°C
MS: 409,3 (M + H⁺).
3.) 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-3-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
In eine Lösung von 250 mg (0,612 mMol) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-3-carbonsäure-4-dimethylaminobenzylamid in 10 ml Ethanol wurde Chlorwasserstoffgas bei 0°C für 4 Stunden geleitet. Das Gemisch wurde über Nacht auf Raumtemperatur erwärmt und verdampft. Der Rückstand wurde in 10 ml Ethanol gelöst und flüssiges Ammoniak wurde zugegeben. Das Gemisch wurde unter Rühren auf Raumtemperatur erwärmen lassen und eingedampft. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 6,5:3,5:0,1 gereinigt unter Gewinnung von 180 mg (36%) des gewünschten Produkts. Fp. 92–96°C.
MS: 426,3 (M + H⁺).
Beispiel 20 (Bezug): [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-3-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) [4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-3-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumjodid
Zu einer Lösung von 250 mg (0,611 mMol) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-3-carbonsäure-(4-dimethylaminobenzyl)amid (Beispiel 19/2) in 20 ml Aceton wurden 384 μl (6,11 mMol) Methyljodid gegeben und sie wurde 4 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde eingedampft unter Gewinnung von 350 mg (quantitative Ausbeute) des gewünschten Produkts.
MS: 423,2 (M⁺).
2.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-3-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus (4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-3-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumjodid durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 7:3:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 39%iger Ausbeute. Fp. 177°C (Zers.).
MS: 440,3 (M⁺).
Beispiel 21: (R)-1-(3-Amidino-benzyl)-5-benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäure-(1-phenyl-ethyl)-amidessigsäuresalz
1.) 5-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester
10 g (0,034 Mol) 5-Benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäureethylester wurden in 100 ml Dimethylformamid gelöst und 976 mg (0,04 Mol) Natriumhydrid wurden portionsweise zugegeben. Nach einer Stunde Rühren bei Raumtemperatur wurden 797 mg (0,04 Mol) 3-Cyano-benzylbromid zugegeben. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur 1,5 Stunden gerührt, mit 2 N Salzsäure neutralisiert und mit Methyl-tert-butylether extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet und eingedampft. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Heptan/Methyl-tert-butylether 12:8 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 84%iger Ausbeute. Fp. 98–102°C.
MS: 411,2 (M + H⁺).
2.) 5-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure
Diese Verbindung wurde aus 5-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester und Natriumhydroxid, wie in Beispiel 1/2 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:0,25 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 83%iger Ausbeute.
¹H-NMR (DMSO-d₆, 200 MHz): δ = 5,11 (s, 2H, OCH₂); 5,88 (s, 2H, N-CH₂); 7,04 (dd, 1H, aromatisches H); 7,20–7,60 (m, 11H, aromatisches H); 7,70 (d, 1H, aromatisches H).
MS: 383,2 (M + H⁺).
3.) (R)-5-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(1-phenyl-ethyl)amid
Diese Verbindung wurde aus 5-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure und (R)-1-Phenyl-ethyl-amin durch Anwenden von Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 73%iger Ausbeute. Fp. 169–170°C.
MS: 486,3 (M + H⁺).
4.) (R)-5-Benzyloxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(1-phenyl-ethyl)amid
Die Verbindung wurde aus (R)-5-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(1-phenyl-ethyl)-amid und Schwefelwasserstoff, wie in Beispiel 1/4 beschrieben, hergestellt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 55%iger Ausbeute. Fp. 146–148°C.
MS: 520,3 (M + H⁺).
5.) (R)-1-(3-Amidino-benzyl)-5-benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäure-(1-phenyl-ethyl)-amidessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus (R)-5-Benzyloxy-1-(3-thiocarbamoylbenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(1-phenyl-ethyl)-amid, Methyljodid und Ammoniumacetat, wie in Beispiel 1/5 beschrieben, hergestellt, jedoch für die Methylierung wurde Aceton als Lösungsmittel verwendet und im letzten Schritt wurden Methanol und Aceton als Lösungsmittel verwendet. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol/Essigsäure 9:0,25:0,5 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 28%iger Ausbeute. Fp. 72°C (Zers.).
MS: 503,3 (M + H⁺).
Beispiel 22: 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäurebenzylamidessigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäurebenzylamid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2) und Benzylamin unter Verwendung von Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Toluol/Ethanol 19:0,5 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 97%iger Ausbeute. Fp. 129–131°C MS: 366,2 (M + H⁺).
2.) 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäurebenzylamidessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäurebenzylamid unter Verwendung von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/2 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Acetonitril/Ammoniumacetat 6:4:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 40%iger Ausbeute. Fp. 266–268°C (Zers.).
MS: 383,2 (M + H⁺).
Beispiel 23: (RS)-1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)benzylamidtrifluoressigsäuresalz
1.) (RS)-1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2) und (RS)-α-(4-Pyridyl)-benzylamin durch Anwenden von Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Ethanol 19:0,25 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 43%iger Ausbeute. Fp. 90–110°C.
MS: 443,2 (M + H⁺).
2.) (RS)-1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus (RS)-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)benzylamid durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 7:3:0,1 gereinigt unter Gewinnung von 13% des gewünschten Produkts. Fp. 88–92°C.
MS: 460,3 (M + H⁺).
Beispiel 24: (RS)-4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-phenyl-methyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) (RS)-1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 17/2) und (RS)-α-(4-Pyridyl)-benzylamin durch Anwenden von Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:0,3 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 18%iger Ausbeute.
MS: 473,2 (M + H⁺).
2.) (RS)-4-Methoxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)benzylamid
Die Verbindung wurde aus (RS)-1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)benzylamid und Schwefelwasserstoff, wie in Beispiel 1/4 beschrieben, hergestellt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 78%iger Ausbeute.
MS: 507,1 (M + H⁺).
5.) 4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-phenyl-methyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus (RS)-4-Methoxy-1-(3-thiocarbamoylbenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)-benzylamid, Methyljodid und Ammoniumacetat, wie in Beispiel 1/5 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel durch zuerst Anwenden von Dichlormethan/Methanol/Trifluoressigsäure 9:1:0,2 gereinigt unter Gewinnung eines Produkts, beschrieben in Beispiel 54, und zweitens 5:1:0,2 unter Gewinnung des gewünschten Produkts (20% Ausbeute). Fp. 135°C.
MS: 504,2 (M⁺).
Beispiel 25: 1-(3-Amidinobenzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure(2-(4-hydroxy-phenyl)ethyl)amidtrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-(2-(4-hydroxy-phenyl)ethyl)amid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 17/2) und 4-(2-Aminoethyl)-phenol durch Anwenden von Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts als ein Öl in 74%iger Ausbeute.
MS: 426 (M + H⁺).
2.) 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-(2-(4-hydroxy-phenyl)ethyl)amidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-(2-(4-hydroxy-phenyl)-ethyl)-amid durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Dichlormethan/Methanol/Trifluoressigsäure 19:1,4:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 62%iger Ausbeute. Fp. 140–142°C.
MS: 443,3 (M + H⁺).
Beispiel 26 (Bezug): 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylestertrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylester
Diese Verbindung wurde aus 1H-Indol-2-carbonsäureethylester und 3-Cyano-benzylbromid durch Anwenden von Natriumhydrid, wie in Beispiel 21/1 beschrieben, hergestellt, jedoch wurde es bei 100°C anstelle von Raumtemperatur ausgeführt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Heptan/Essigsäureethylester 5:1 gereinigt unter Gewinnung von 67% 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester (Fraktion 1) und 10% der Titelverbindung (Fraktion 2). Ausbeute: 10%. Fp. 119–120°C.
MS: 392,1 (M + H⁺).
2.) 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylestertrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylester durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch MPLC an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 7:3:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 12%iger Ausbeute. Fp. 258°C.
MS: 426,2 (M + H⁺).
Beispiel 27: (RS)-1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-((6-chlor-2-naphthyl)-(1-methyl-piperidin-4-yl)-methyl)amidtrifluoressigsäuresalz
1.) (RS)-1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-((6-chlor-2-naphthyl)-(1-methyl-piperidin-4-yl)-methyl)amid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2) und (RS)-(6-Chlor-2-naphthyl)-(1-methylpiperidin-4-yl)methylamin durch Anwenden von Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:2 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 58%iger Ausbeute. Fp. 141–145°C.
MS: 547,2 (M + H⁺).
2.) (RS)-1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-((6-chlor-2-naphthyl)-(1-methyl-piperidin-4-yl)-methyl)amidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus (RS)-1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-((6-chlor-2-naphthyl)-(1-methyl-piperidin-4-yl)-methyl)amid durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 5:5:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 31%iger Ausbeute. Fp. 110–120°C.
MS: 564,2 (M + H⁺).
Beispiel 28: 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-chlorbenzylamidtrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-chlor-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 1/2) und 4-Chlorbenzylamin durch Anwenden Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Toluol/Ethanol 19:0,065 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 80%iger Ausbeute. Fp. 147–149°C.
MS: 400,1 (M + H⁺).
2.) 1-(3-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-chlorbenzylamidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-chlorbenzylamid durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 7:3:0,1 gereinigt zu dem gewünschten Produkt in 74%iger Ausbeute. Fp. 230°C (Zers.).
MS: 439,3 (M + H⁺).
Beispiel 29: 4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-benzyl-dimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Diese Verbindung wurde aus 4-Methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylester und 3-Cyanobenzylbromid durch Anwenden von Natriumhydrid, wie in Beispiel 21/1 beschrieben, hergestellt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 70%iger Ausbeute.
¹H-NMR DMSO-d₆, 200 MHz): δ = 1,29 (t, 3H, OCH₂CH₃); 2,52 (s, 3H, CH₃); 4,29 (q, 2H, OCH₂CH₃); 5,88 (s, 2H, N-CH₂); 6,97 (d, 1H, aromatisches H); 7,12–7,32 (m, 2H, aromatisches H); 7,34–7,55 (m, 4H, aromatisches H); 7,69 (d, 1H, aromatisches H).
2.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylester und Natriumhydroxid, wie in Beispiel 1/2 beschrieben, hergestellt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 99%iger Ausbeute. Fp. 227–229°C.
MS: 291,1 (M + H⁺).
3.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure und 4-(Dimethylamino)-benzylamin durch Anwenden von Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin, wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:0,05 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 78%iger Ausbeute.
¹H-NMR DMSO-d₆, 200 MHz): δ = 2,50 (s, 3H, CH₃); 2,85 (s, 6H, N(CH₃)₂); 4,32 (d, 2H, NH-CH₂); 5,92 (s, 2H, N-CH₂); 6,68 (m, 2H, AA'BB'-System); 6,91 (d, 1H, aromatisches H); 7,09 (m, 2H, AA'BB'-System); 7,15 (m, 2H, aromatisches H); 7,27–7,40 (m, 3H, aromatisches H); 7,48 (t, 1H, aromatisches H); 7,50 (s, 1H, aromatisches H); 7,69 (d, 1H, aromatisches H); 9,01 (t, 1H, NH).
4.) Benzyl-[4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethyl-ammoniumbromid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid und Benzylbromid, wie in Beispiel 20/1 beschrieben, hergestellt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 90%iger Ausbeute.
MS: 513,3 (M⁺).
5.) 4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-benzyl-dimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus Benzyl-[4-({[1-(3-cyanobenzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethylammoniumbromid durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 7:3:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 60%iger Ausbeute. Fp. 113°C (Zers.).
MS: 530,2 (M⁺).
Beispiel 30: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-ethyl-dimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Diese Verbindung wurde aus 5-Fluor-1H-indol-2-carbonsäureethylester (5 g, 24 mMol), Natriumhydrid (695 mg, 29 mMol), 3-Cyano-benzylbromid (5,678 g, 29 mMol) und N,N-Dimethylformamid (50 ml) hergestellt. Das Indol wurde in N,N-Dimethylformamid gelöst und Natriumhydrid wurde in Portionen zugegeben und das Reaktionsgemisch wurde 90 min gerührt. Dann wurde das Nitril zugegeben. Nach Rühren für 3 h und Stehen über Nacht wurde das Gemisch zwischen Natriumbicarbonatlösung (5% in Wasser) und Methyl-tert-butylether verteilt. Die organische Schicht wurde getrocknet, eingedampft und durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Heptan 1:1 gereinigt unter Gewinnung von 5,524 g (71%) des gewünschten Produkts. Fp. 94–96°C.
MS: 323,1 (M + H⁺).
2.) 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäureethylester (5,48 g, 17 mMol), Natriumhydroxid (7,9 g, 198 mMol), Methanol (600 ml) und Wasser (33,4 ml) analog zu Beispiel 1/2 hergestellt. Das nach Trocknen und Eindampfen der organischen Schicht erhaltene Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an Kiesegel mit Dichlormethan/Methanol 19:1 gereinigt unter Gewinnung von 4,679 g (94%) des gewünschten Produkts. Fp. 253°C (Zers.).
MS: 295,0 (M + H⁺).
3.) 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure (1,0 g, 3,4 mMol), Diphenylphosphorylazid (955 μl, 1,3 Äquivalente), N,N-Diisopropylethylamin (2,02 ml, 3,5 Äquivalente), 4-(Dimethylamino)-benzylamindihydrochlorid (849 mg, 1,1 Äquivalente) und N,N-Dimethylformamid (40 ml), wie in Beispiel 3/1 beschrieben, her gestellt. Reinigung wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:0,1 ausgeführt. Ausbeute: 1,22 g (84%).
¹H-NMR DMSO-d₆, 200 MHz): δ = 2,85 (s, 6H, N(CH₃)₂); 4,32 (d, 2H, NH-CH₂); 5,91 (s, 2H, N-CH₂); 6,65 (m, 2H, AA'BB'-System); 7,13–7,00 (m, 2H, AA'BB'-System); 7,15 (d, 1H, aromatisches H); 7,20 (s, 1H, aromatisches H); 7,32 (d, 1H, aromatisches H); 7,53–7,40 (m, 3H, aromatisches H); 7,58 (m, 1H, aromatisches H); 7,71 (m, 1H, aromatisches H); 9,10 (t, 1H, NH).
4.) [4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}methyl)-phenyl]-ethyl-dimethyl-ammoniumjodid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid und Ethyljodid, wie in Beispiel 20/1 beschrieben, hergestellt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 74%iger Ausbeute. MS: 455,3 (M⁺).
5.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-ethyl-dimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus [4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-ethyldimethylammoniumjodid durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 7:3:0,1 gereinigt unter Gewinnung des gewünschten Produkts in 28%iger Ausbeute. Fp. 73–75°C (Zers.).
MS: 472,3 (M⁺).
Beispiel 31: 1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure(4-dimethylamino)-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamid (Beispiel 30/3), Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Ausbeute: 59%. Fp. 90°C (Zers.).
MS: 444,2 (M + H⁺).
Beispiel 32: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
1.) [4-({[1-(3-Cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumjodid
Ausgehend von 5-Fluor-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)benzylamid (Beispiel 30/3) wurde die Verbindung durch Alkylierung mit Methyljodid analog zu Beispiel 20/1 hergestellt. Ausbeute: 90%. Fp. 203–205°C.
MS: 441,2 (M⁺).
2.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus [4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]trimethylammoniumjodid, Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Anstelle von Trifluoressigsäure wurde Essigsäure zur Chromatographie verwendet. Ausbeute: 74%. Fp. 172°C (Zers.).
MS: 458,2 (M⁺).
Beispiel 33: [4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
[4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumacetatessigsäuresalz (32/2) wurde in Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 1:1:0,1 gelöst. Das Produkt wurde durch Flashchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 1:1:0,1 getrennt unter Gewinnung des Trifluoressigsäuresalzes in 100%iger Ausbeute. Fp. 120–124°C.
MS: 458,2 (M⁺).
Beispiel 34: 1-(3-(Amidinobenzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)benzylamid (Beispiel 29/3) wurde analog zu Beispiel 19/3 behandelt. Ausbeute: 46%. Fp. 106°C (Zers.).
MS: 440,3 (M + H⁺).
Beispiel 35: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial war 1-(3-Cyanobenzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid (Beispiel 29/3). Alle Schritte wurden analog zu Beispiel 20/1 und 19/3 ausgeführt. Ausbeute (letzter Schritt): 45%. Fp. 81°C (Zers.).
MS: 454,3 (M⁺).
Beispiel 36 (Bezug): [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-nitro-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial war 5-Nitro-1H-indol-2-carbonsäureethylester. Alle Schritte wurden analog zu Beispielen 21/1, 1/2, 3/1, 20/1 und 19/3 ausgeführt. Ausbeute (letzter Schritt): 52%. Fp. 120°C (Zers.).
MS: 485,3 (M⁺).
Beispiel 37: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-amino-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-nitro-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz (Beispiel 36) durch Hydrierung in Ethanol mit 3 Äquivalenten Essigsäure, katalysiert durch Pd/C (10%), ausgeführt. Ausbeute: 70%. Fp. 114°C (Zers.).
MS: 455,3 (M⁺).
Beispiel 39: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial war 4-Benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäureethylester. Alle Zwischenprodukte wurden analog zu Beispielen 21/1, 1/2, 3/1 und 20/1 hergestellt. Im letzten Schritt wurde Chlorwasserstoffgas in eine Lösung von 4-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1-H-indol-2-carbonsäureethylester und Ethanol für 4 Stunden bei 0°C eingeleitet. Das Gemisch wurde auf Raumtemperatur über Nacht erwärmt und eingedampft. Der Rückstand wurde in 10 ml Ethanol gelöst und flüssiges Ammoniak wurde zugegeben. Das Gemisch wurde unter Rühren auf Raumtemperatur erwärmen lassen und auf konzentriert. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Essigsäure 7:3:0,1 gereinigt. Ausbeute (letzter Schritt): 57%. Fp. 113°C (Zers.).
MS: 456,3 (M⁺).
Beispiel 40: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial war 5-Methoxy-1H-indol-2-carbonsäureethylester. Alle Schritte wurden analog zu Beispielen 21/1, 1/2, 3/1, 20/1 und 19/3 ausgeführt. Ausbeute (letzter Schritt): 74%. Fp. 94°C (Zers.).
MS: 470 (M⁺).
Beispiel 41: 4-(2-{[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-ethyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial war 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 17/2). Alle Schritte wurden analog zu Beispielen 3/1, 20/1 und 19/3 ausgeführt, jedoch war das Amin in Schritt 3/1 4-(2-Aminoethyl)pyridin anstelle von 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid und zu dem Lösungsmittel in Schritt 20/1 wurde Dimethylsulfoxid gegeben. Ausbeute (letzter Schritt): 83%. Fp. 164°C (Zers.).
MS: 442,3 (M⁺).
Beispiel 42 (Bezug): 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylesteressigsäuresalz
1.) 4-Methyl-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylester
Das Ausgangsmaterial war 4-Methyl-1H-indol-2-carbonsäure. Alkylierung mit 3-Cyanobenzylbromid (analog zu Beispiel 19/1, jedoch war das Lösungsmittel Dimethylformamid anstelle Tetrahydrofuran) ergab 4-Methyl-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyanobenzylester. Ausbeute: 75%.
MS: 291,1 (M + H⁺).
2.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylester
Die Alkylierung von 4-Methyl-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylester mit 3-Cyanobenzylbromid wurde analog zu Beispiel 21/1 ausgeführt. Ausbeute: 90%.
MS: 406,1 (M + H⁺).
3.) 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäureethylesteressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylester durch Anwenden von Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak, wie in Beispiel 19/3 beschrieben, hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Etha nol/Essigsäure 4:1:0,2 gereinigt unter Gewinnung einer in einer Ausbeute von 7% die in Beispiel 63 beschriebene Verbindung enthaltenden Fraktion und einer in einer Ausbeute von 16% die Titelverbindung von diesem Beispiel enthaltenden Fraktion. Fp. 187°C (Zers.).
MS: 336,2 (M + H⁺).
Beispiel 43: 1-(4-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäurebenzylamidhydrochlorid
Eine Lösung von 10 g (53 mMol) 1H-Indol-2-carbonsäureethylester in 80 ml Dimethylformamid wurde mit 10,95 g (79 mMol) Kaliumcarbonat behandelt. Das Gemisch wurde 10 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. 3-Cyano-benzylbromid, 15,47 g (79 mMol), wurde zugegeben und das Gemisch wurde auf 100°C erhitzt. Nach 4 Stunden bei der Temperatur wurde es auf Raumtemperatur gekühlt, mit Essigsäure (pH 5–6) angesäuert und auf Eis-Wasser gegossen. Das Produkt wurde mit Methylenchlorid extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde aus 2-Propanol kristallisiert unter Gewinnung von 9,8 g des gewünschten Produkts. Ausbeute: 61%. Fp. 214°C.
MS: 305,1 (M + H⁺).
Die nachstehenden Schritte wurden analog zu Beispielen 1/2, 3/1 und 19/3 hergestellt, jedoch das Amin in Schritt 3/1 war Benzylamin anstelle von 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid. Ausbeute (letzter Schritt): 35%. Fp. 266–268°C (Zers.).
MS: 383,2 (M + H⁺).
Beispiel 44: (RS)-1-(4-Amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl)-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1H-Indol-2-carbonsäureethylester analog zu Beispiel 43 hergestellt. Alle Schritte wurden analog zu Beispielen 1/2, 3/1 und 19/3 ausgeführt, jedoch das Amin in Schritt 3/1 war (RS)-α-(4-Pyridyl)benzylamindihydrochlorid anstelle von 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid. Ausbeute (letzter Schritt): 70%. Fp. 150°C.
MS: 460,3 (M + H⁺).
Beispiel 47: 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyanobenzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 29/2) analog zu Beispielen 3/1 und 19/3 hergestellt, jedoch das Amin in Schritt 3/1 war 3-Cyanobenzylaminhydrobromid anstelle von 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid. Ausbeute (letzter Schritt): 25%. Fp. 242–243°C.
MS: 439,3 (M + H⁺).
Beispiel 49 (Bezug) 1-(3-Hydroxyamidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-2-(4-pyridyl)-ethylamid
Das Ausgangsmaterial 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-2-(4-pyridyl)ethylamid (Beispiel 41) wurde in Ethanol gelöst, 2,4 Äquivalente Hydroxylaminhydrochlorid und 2,4 Äquivalente Triethylamin wurden zugegeben und das Gemisch wurde 6,5 h unter Rückfluss erhitzt. Der Niederschlag wurde abfiltriert unter Gewinnung von 54% des gewünschten Produkts. Fp. 220–222°C.
MS: 444,3 (M + H⁺).
Beispiel 50 (Bezug): 1-(3-Hydroxyamidinobenzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-2-(4-pyridyl)-ethylamidbishydrochlorid
Das Ausgangsmaterial, 1-(3-Hydroxyamidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-2-(4-pyridyl)-ethylamid (Beispiel 49), wurde in 0,1 N Salzsäure gelöst, im Vakuum aufkonzentriert, erneut in Wasser gelöst und lyophilisiert. Ausbeute: 66%. Fp. 215–217°C.
MS: 444,3 (M + H⁺).
Beispiel 51 (Bezug): 1-(3-Hydroxyamidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-2-(4-hydroxy-phenyl)-ethylamid
Das Ausgangsmaterial 1-(3-Cyanobenzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-2-(4-hydroxyphenyl)ethylamid (Beispiel 25/1) wurde in Ethanol und Hydroxylaminhydrochlorid gelöst und Triethylamin wurde zugegeben. Nach Erhitzen unter Rückfluss für 5 h wurde das Reaktionsgemisch im Vakuum aufkonzentriert und zwischen Dichlormethan und Wasser verteilt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum auf konzentriert. Der Rückstand wurde durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:1 gereinigt unter Gewinnung von 63% des gewünschten Produkts, das unter Wasser verfestigte. Fp. 173–175°C (Zers.).
MS: 459,3 (M + H⁺).
Beispiel 52 (Bezug): 1-(3-Hydroxyamidino-benzyl)-5-chlor-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid
Das Ausgangsmaterial, 5-Chlor-1H-indol-2-carbonsäureethylester, wurde analog zu Beispiel 21/1 behandelt. Alle Zwischenprodukte wurden analog zu Beispiel 1/2 und 3/1 hergestellt. Die Titelverbindung wurde analog zu Beispiel 49 hergestellt. Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:0,6 ergab ein Gemisch von zwei Verbindungen, die Titelverbindung und eine unbekannte Verbindung, die durch HPLC getrennt wurden. Ausbeute (letzter Schritt): 6%. Fp. 200°C (Zers.).
MS: 476,1 (M + H⁺).
Beispiel 53 (Bezug): 1-(3-Hydroxyamidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(3-hydroxyamidino-benzyl)ester
1-(3-Cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyanobenzylester (Beispiel 26/1) wurde in Ethanol gelöst, 3 Äquivalente Hydroxylamin wurden zugegeben und das Gemisch wurde 3 h unter Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand wurde zwischen Essigsäureethylester und Wasser verteilt. Die organische Schicht wurde über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum auf konzentriert. Die Verbindung wurde durch Flashchromatographie an Kiesegel mit Dichlormethan/Methanol 20:1 gereinigt unter Gewinnung von 76% des gewünschten Produkts. Fp. 114–116°C.
MS: 458,2 (M + H⁺).
Beispiel 54: (RS)-1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-α-(4-pyridyl-benzyl)amidtrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung war ein Nebenprodukt der in Beispiel 24 beschriebenen Reaktionen. Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol/Trifluoressigsäure 9:1:0,2 ergab 3% der Titelverbindung. Fp. 105°C.
MS: 490,2 (M + H⁺).
Beispiel 55: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-chlor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial, 5-Chlor-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)benzylamid (Beispiel 52) wurde analog zu Beispiel 1/4 und 1/5 umgesetzt. Ausbeute (letzte zwei Schritte): 8%. Fp. 112°C (Zers.).
MS: 474,2 (M⁺).
Beispiel 56: [4-({[5-Benzyloxy-1-(3-amidino-benzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 5-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (Beispiel 21/2), 4-(Dimethylamino)-benzylamindihydrochlorid, Diphenylphosphorylazid und Diisopropylethylamin analog zu Beispiel 3/1, Schwefelwasserstoff analog zu Beispiel 1/4 und Methyljodid in Aceton analog zu Beispiel 1/5 hergestellt. Ausbeute (letzter Schritt): 52%. Fp. 60°C (Zers.).
MS: 546,3 (M⁺).
Beispiel 57: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-hydroxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
Das Ausgangsmaterial, [4-({[5-Benzyloxy-1-(3-amidinobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]trimethylammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz (Beispiel 56), wurde in Ethanol gelöst, 2 Äquivalente Trifluoressigsäure und Pd/C (10%) wurden zugegeben und das Gemisch wurde hydriert. Das Reaktionsgemisch wurde auf konzentriert und durch Flash-chromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol/Trifluoressigsäure 9:1:0,1 gereinigt. Das Produkt wurde aufkonzentriert und lyophilisiert unter Gewinnung von 53% des gewünschten Produkts. Fp. 78°C (Zers.).
MS: 456,4 (M⁺).
Beispiel 58: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-tert-butoxycarbonylamino-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumacetatessigsäuresalz
1.) 5-(tert-Butoxycarbonylamino)-1-(3-thiocarbamo-yl)benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamid
Das Ausgangsmaterial, 1-(3-Cyano-benzyl)-5-nitro-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)benzylamid (Beispiel 36), wurde mit Schwefelwasserstoffgas analog zu Beispiel 1/4 behandelt. Die erhaltene Verbindung wurde in Ethanol gelöst, 2 Äquivalente Di-tert-butyldicarbonat und 3 Äquivalente Natriumbicarbonat wurden zugegeben und das Gemisch wurde 10 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde auf konzentriert und dann zwischen Dichlormethan und Zitronensäure (0,1% in Wasser) verteilt. Die organische Schicht wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, auf konzentriert und durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 20:0,2 gereinigt unter Gewinnung von 43% des gewünschten Produkts.
MS: 558,4 (M + H⁺).
2.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-tert-butoxycarbonylamino-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumacetatessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde analog zu Beispiel 1/5 hergestellt, jedoch war das Lösungsmittel für die Methylierung reines Aceton. Das Rohprodukt wurde durch Flashchromatographie an RP₁₈-Material mit Ethanol/Wasser/Trifluoressigsäure 1:1:0,1 gereinigt unter Gewinnung von 55% des gewünschten Produkts. Fp. 146°C (Zers.).
MS: 555 (M⁺).
Beispiel 59: 1-(3-Amidino-benzyl)-5-benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamiddihydrojodid
1.) 5-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 5-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (500 mg, 1,3 mMol, Beispiel 21/2), Diphenylphosphorylazid (370 μl, 1,7 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (440 μl, 2,6 mMol) und 3-Cyano-benzylaminhydrobromid (312 mg, 1,5 mMol) in N,N-Dimethylformamid (10 ml), wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Die Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel wurde mit Dichlormethan ausgeführt unter Gewinnung von 451 mg (69%) des gewünschten Produkts.
2.) 5-Benzyloxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-thiocarbamoyl-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 5-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylamid (451 mg, 0,9 mMol), Pyridin (6,67 ml, 83 mMol), Triethylamin (5,41 ml, 39 mMol) und Schwefelwasserstoff, wie in Beispiel 1/4 beschrieben, hergestellt. Die Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel wurde mit Dichlormethan/Methanol 19:0,15 ausgeführt unter Gewinnung von 138 mg (27%) des gewünschten Produkts.
3.) 1-(3-Amidino-benzyl)-5-benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamiddihydrojodid
5-Benzyloxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-thiocarbamoyl-benzylamid (138 mg, 0,24 mMol) wurde in 5 ml Aceton in einem Fläschchen gelöst, das Fläschchen wurde verschlossen und Methyljodid (0,4 ml, 26 Äquivalente) wurde über eine Spritze zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur gerührt. 4 Tage später wurde der gelbe Niederschlag durch Filtration gesammelt und mit Diethylether gewaschen. Der Niederschlag (188 mg, 0,22 mMol), Essigsäure (0,15 ml, 12 Äquivalente), Ammoniumacetat (307 mg, 18 Äquivalente) und Methanol (6 ml) wurden, wie in Beispiel 1/5 beschrieben, behandelt. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an RP₁₈-Material mit Ethanol/Wasser/Trifluoressigsäure 1:1:0,1 gereinigt unter Gewinnung von 157 mg der gewünschten Verbindung (90%) nach Lyophilisierung. Fp. 138°C (Zers.).
MS: 531,3 (M + H⁺).
Beispiel 60: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-benzyldimethyl-ammoniumchloridhydrochlorid
1.) Benzyl-[4-({[1-(3-cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethylammoniumbromid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)benzylamid (840 mg, 1,97 mMol, Beispiel 30/3), Benzylbromid (237 μl, 1 Äquivalent) und Aceton (8 ml) analog zu Beispiel 20/1 herge stellt, jedoch wurde die Reaktionstemperatur bei 50°C gehalten. Der Niederschlag wurde abfiltriert unter Gewinnung von 1,02 g des gewünschten Produkts (87%).
2.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-benzyl-dimethyl-ammoniumchloridhydrochlorid
Diese Verbindung wurde aus Benzyl-[4-({[1-(3-cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethyl-ammoniumbromid (200 mg, 0,335 mMol), Ethanol, Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Reinigung durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material (Wasser/Ethanol/Essigsäure 7:3:0,1), gefolgt von Lyophilisierung ergab 156 mg des gewünschten Produkts (77%). Fp. 136°C.
MS: 534,4 (4%, M⁺).
Beispiel 61: Allyl-[4-({[1-(3-amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethyl-ammoniumchloridessigsäuresalz
1.) Allyl-[4-({[1-(3-cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethylammoniumbromid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid (200 mg, 0,47 mMol, Beispiel 30/3), Allylbromid (81 μl, 2 Äquivalente) und Aceton (3,5 ml) hergestellt. Die Reaktionspartner wurden vermischt, der Kolben wurde verschlossen und auf 55°C erhitzt. Nach 6 h wurde das Erhitzen gestoppt. Vier Wochen später wurden weitere 1,06 ml Allylbromid zugegeben, der Kol ben wurde verschlossen und er wurde erneut auf 55°C erhitzt. Nach 3 Wochen wurde ein weißer Niederschlag abfiltriert, mit Diethylether gewaschen und im Vakuum getrocknet unter Gewinnung von 222 mg des gewünschten Produkts (86%). Fp. 163–165°C.
2.) Allyl-[4-({[1-(3-amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethyl-ammoniumchloridessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus Allyl-[4-({[1-(3-cyanobenzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)phenyl]-dimethyl-ammoniumbromid (222 mg, 0,406 mMol), Ethanol (12 ml), Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol/Essigsäure 3:2:0,05 bis 1:4:0,05 gereinigt. Lyophilisierung ergab 131 mg des gewünschten Produkts (56%). Fp. 133°C (Zers.).
MS: 484,3 (M⁺).
Beispiel 62: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethyl-2-propinyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
1.) [4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethyl-2-propinyl-ammoniumbromid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonsäure-(4-dimethylamino)-benzylamid (200 mg, 0,47 mMol, Beispiel 30/3), Propargylbromid (140 mg, 2 Äquivalente, 80% in Toluol) und Aceton (5 ml) hergestellt.
Die Reaktionspartner wurden vermischt, der Kolben wurde verschlossen und auf 50°C erhitzt. Nach 5 h wurde das Erhitzen gestoppt. Nach 2 Tagen wurde das Gemisch im Vakuum aufkonzentriert und das gewünschte Produkt wurde mit Diethylether ausgefällt unter Gewinnung von 220 mg eines weißen Feststoffs (86%).
2.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-dimethyl-2-propinyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus [4-({[1-(3-Cyano-benzyl)-5-fluor-1H-indol-2-carbonyl]-amino)-methyl)-phenyl]-dimethyl-2-propinyl-ammoniumbromid (220 mg, 0,406 mMol), Ethanol (12 ml), Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol/Essigsäure 3:2:0,05 bis 1:4:0,05 gereinigt. Lyophilisierung ergab 131 mg des gewünschten Produkts (56%). Fp. 109°C (Zers.).
MS: 482,3 (M⁺).
Beispiel 64: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
10 g Ionenaustauscherharz AG 1-X8 (Bio-Rad) wurden in eine Säule gefüllt, zuerst mit Wasser, dann mit 1 N Natriumacetatlösung und wieder mit Wasser gespült. [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-methyl-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz (Beispiel 35) wurde in Wasser gelöst und durch eine Io nenaustauschersäule geleitet. Nach Spülen mit 150 ml Wasser wurde die Lösung im Vakuum auf 25 ml auf konzentriert, welche lyophilisiert wurden, unter Gewinnung von 79 mg des gewünschten Produkts (100%). Fp. 89°C (Zers.).
MS: 454,3 (M⁺).
Beispiel 65: 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-hydroxy-benzylamidhydrochlorid
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-hydroxy-benzylamid
Die Titelverbindung wurde unter Verwendung von 1-(3-Cyanobenzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure (400 mg, 1,31 mMol; Beispiel 24/12), Diphenylphosphorylazid (365 μl, 1,3 Äquivalente), N,N-Diisopropylethylamin (850 μl, 3,75 Äquivalente) und 4-Aminomethylphenol (560 mg, 2,1 Äquivalente) in N,N-Dimethylformamid (10 ml), wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt.
2.) 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-hydroxy-benzylamidhydrochlorid
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-hydroxy-benzylamid (200 mg, 0,49 mMol), Chlorwassserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Reinigung durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Essigsäure 7:3:0,1 und Lyophilisierung ergab 179 mg des gewünschten Produkts (79%). Fp. 202°C (Zers.).
MS: 429,2 (100%; M + H⁺).
Beispiel 66: 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-amidino-benzylamidessigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyanobenzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-cyano-benzylamid
Die Titelverbindung wurde unter Verwendung von 1-(3-Cyanobenzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure (400 mg, 1,31 mMol; Beispiel 24/2), Diphenylphosphorylazid (365 μl, 1,3 Äquivalente), N,N-Diisopropylethylamin (850 μl, 3,75 Äquivalente) und 4-Aminomethylbenzonitril (585 mg, 2,1 Äquivalente) in N,N-Dimethylformamid (10 ml), wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt.
2.) 1-(3-Amidino-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-amidino-benzylamidessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus 1-(3-Cyano-benzyl)-4-methoxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-cyanobenzylamid (200 mg, 0,48 mMol), Chlorwassserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Reinigung durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Essigsäure 1:1:0,1, gefolgt von Lyophilisierung ergab 68 mg des gewünschten Produkts (25%). Fp. 186°C (Zers.).
MS: 228,1 ((M + 2H⁺)/2).
Beispiel 68: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-benzyloxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumjodidhydrojodid
1.) 4-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Diese Verbindung wurde aus 4-Benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäureethylester (3 g, 10 mMol), Natriumhydrid (294 mg, 12 mMol), 3-Cyanobenzylbromid (2,4 g, 12 mMol) und N,N-Dimethylformamid (20 ml) analog zu Beispiel 21/1 hergestellt. Das Reaktionsgemisch wurde mit 2 N Salzsäure neutralisiert und zwischen Wasser und Methyl-tert-butylether verteilt. Die organische Schicht wurde getrocknet, im Vakuum aufkonzentriert und durch Flashchromatographie mit Dichlormethan/Heptan 7:3 gereinigt unter Gewinnung von 2,914 g (71%) des gewünschten Produkts.
2.) 4-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure
Diese Verbindung wurde aus 4-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester (2,914 g, 7,1 mMol), Natriumhydroxid (2,13 g, 53 mMol), Methanol (175 ml) und Wasser (8,95 ml) analog zu Beispiel 1/2 hergestellt. Das Reaktionsgemisch wurde mit 4 N Salzsäure neutralisiert. Der weiße Niederschlag wurde durch Filtration gesammelt, mit Wasser gewaschen und durch Flashchromatographie an Kieselgel mit Dichlormethan/Methanol 19:1 gereinigt unter Gewinnung von 2,147 g (79%) des gewünschten Produkts.
3.) 4-Benzyloxy-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 4-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (400 mg, 1,05 mMol), Diphenylphosphorylazid (290 μl, 1,36 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (360 μl, 2,1 mMol) und 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid (261 mg, 1,2 mMol) in N,N-Dimethylformamid (10 ml), wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Die Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel wurde mit Dichlormethan/Methanol 20:0,05 ausgeführt unter Gewinnung von 347 mg (64%) des gewünschten Produkts.
4.) 4-Benzyloxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 4-Benzyloxy-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamid (347 mg, 0,67 mMol) und Schwefelwasserstoff, wie in Beispiel 1/4 beschrieben, hergestellt. Die Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel wurde mit Dichlormethan/Methanol 19:1 ausgeführt unter Gewinnung von 342 mg (92%) des gewünschten Produkts.
5.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-benzyloxy-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumjodidhydrojodid
Diese Verbindung wurde aus 4-Benzyloxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-(dimethylamino)-benzylamid (342 mg, 0,62 mMol), Aceton (15 ml), Methyljodid (0,98 ml, 15 mMol), Essigsäure (0,4 m, 0,7 mMol), Ammoniumacetat (809 mg, 10 mMol) und Methanol (7 ml), wie in Beispiel 1/5 beschrieben, hergestellt, jedoch war das Lösungsmittel für die Methylierung reines Aceton. Das Rohmaterial wurde durch Flashchromatographie an RP₁₈-Material mit Ethanol/Wasser/Essigsäure 1:1:0,1 gereinigt unter Gewinnung von 374 mg der gewünschten Verbindung (80%). Fp. 158°C (Zers.).
MS: 546,2 (M⁺).
Beispiel 69: 1-(3-Amidino-benzyl)-5-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
1-(3-Amidino-benzyl)-5-benzyloxy-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamiddihydrojodid (74 mg, 0,09 mMol; Beispiel 59) wurde in Ethanol (9 ml) gelöst. Chlorwasserstoffgas wurde für 5 h durch die Lösung geleitet. Nach Stehen für etwa 3 Tage wurde das Gemisch eingedampft und durch Flashchromatographie an RP₁₈-Material mit Ethanol/Wasser/Trifluoressigsäure 1:1:0,1 gereinigt unter Gewinnung von 51 mg des gewünschten Produkts, das eine unbekannte Verunreinigung enthält. Präparative HPLC von 44 mg dieses Gemisches ergab 6,7 mg der reinen gewünschten Verbindung (10%). Fp. 125°C (Zers.).
MS: 441,3 (M + H⁺).
Beispiel 70: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-4-brom-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
1.) 4-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Die Verbindung wurde aus 4-Brom-1H-indol-2-carbonsäureethylester (5 g, 19 mMol), Natriumhydrid (537 mg, 22 mMol), 3-Cyanobenzylbromid (4,39 g, 22 mMol) und N,N-Dimethylformamid (50 ml) analog zu Beispiel 21/1 hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Kristallisation aus Methanol gereinigt unter Gewinnung von 6,093 g (84%) des gewünschten Produkts. Fp. 163–165°C (Zers.).
2.) 4-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure
Diese Verbindung wurde aus 4-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester (6,093 g, 16 mMol), Natriumhydroxid (4,77 g, 120 mMol), Methanol (800 ml) und Wasser (20,2 ml) analog zu Beispiel 1/2 hergestellt. Das ausgefällte Produkt wurde gewaschen und getrocknet. 5,562 g (98%). Fp. 236–238°C.
3.) 4-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-dimethylamino-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 4-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (1 g, 2,8 mMol), Diphenylphosphorylazid (790 μl, 3,66 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (960 μl, 5,6 mMol) und 4-(Dimethylamino)-benzylamindihydrochlorid (703 mg, 3,1 mMol) in N,N-Dimethylformamid (40 ml), wie in Bei spiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Die Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel wurde mit Dichlormethan/Methanol 20:0,05 ausgeführt unter Gewinnung von 818 mg (60%) des gewünschten Produkts. Fp. 110–112°C.
4.) [4-({[4-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumjodid
Diese Verbindung wurde aus 4-Brom-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-dimethylaminobenzylamid (818 mg, 1,68 mMol), Methyljodid (2,27 ml, 44 mMol) und Aceton (8 ml) analog zu Beispiel 20/1 hergestellt. Ausbeute: 927 mg (88%). Fp. 219–224°C.
5.) [4-({[1-(3-Amidinobenzyl)-4-Brom-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumacetatessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus [4-({[4-Brom-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethylammoniumjodid (200 mg, 0,32 mMol), Ethanol (13 ml), Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Reinigung durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 1:1:0,1 ergab 249 mg des gewünschten Produkts als Trifluoressigsäuresalz. Diese Verbindung wurde in das Essigsäuresalz durch Ionenaustauschchromatographie analog zu Beispiel 64 umgewandelt. Ausbeute: 150 mg (74%). Fp. 145°C (Zers.).
MS: 518,2 (M⁺; ⁷⁹Br).
Beispiel 71: [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-brom-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
1.) 5-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester
Die Verbindung wurde aus 5-Brom-1H-indol-2-carbonsäureethylester (6 g, 22 mMol), Natriumhydrid (645 mg, 27 mMol), 3-Cyanobenzylbromid (5,26 g, 27 mMol) und N,N-Dimethylformamid (50 ml) analog zu Beispiel 21/1 hergestellt. Das Rohmaterial wurde durch Kristallisation aus Methanol gereinigt unter Gewinnung von 8,07 g (96%) des gewünschten Produkts. Fp. 124–128°C (Zers.).
2.) 5-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure
Diese Verbindung wurde aus 5-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylester (8,07 g, 21 mMol), Natriumhydroxid (6,32 g, 160 mMol), Methanol (360 ml) und Wasser (26,8 ml) analog zu Beispiel 1/2 hergestellt. Der Niederschlag wurde gewaschen und getrocknet. Er wurde im nächsten Schritt ohne weitre Reinigung verwendet. Ausbeute: 6,63 g (89%). Fp. 230–233°C.
3.) 5-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-dimethylamino-benzylamid
Diese Verbindung wurde aus 5-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure (1 g, 2,8 mMol), Diphenylphosphorylazid (790 μl, 3,66 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (960 μl, 5,6 mMol) und 4-(Dimethylamino)benzylamindihydrochlorid (703 mg, 3,1 mMol) in N,N-Dimethylformamid (40 ml), wie in Beispiel 3/1 beschrieben, hergestellt. Die Reinigung durch Flashchromatographie an Kieselgel wurde mit Dichlormethan/Methanol 20:0,05 ausgeführt, um 949 mg (69%) des gewünschten Produkts zu ergeben. Fp. 145–146°C.
4.) [4-({[5-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumjodid
Diese Verbindung wurde aus 5-Brom-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-dimethylaminobenzylamid (890 mg, 1,83 mMol), Methyljodid (2,95 ml, 47 mMol) und Aceton (8 ml) analog zu Beispiel 20/1 hergestellt. Ausbeute: 1,289 g. Fp. 145–148°C. Die Verbindung wurde für die nächsten Schritte ohne weitere Reinigung verwendet.
5.) [4-({[1-(3-Amidino-benzyl)-5-brom-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]-trimethyl-ammoniumacetatessigsäuresalz
Diese Verbindung wurde aus [4-({[5-Brom-1-(3-cyanobenzyl)-1H-indol-2-carbonyl]-amino}-methyl)-phenyl]trimethylammoniumjodid (200 mg, 0,32 mMol), Ethanol, Chlorwasserstoff und flüssigem Ammoniak analog zu Beispiel 19/3 hergestellt. Reinigung durch Umkehrphasenchromatographie an RP₁₈-Material mit Wasser/Ethanol/Trifluoressigsäure 1:1:0,1 ergab 199 mg des gewünschten Produkts als Trifluoressigsäuresalz. Diese Verbindung wurde in das Essigsäuresalz durch Ionenaustauschchromatographie analog zu Beispiel 64 umgewandelt. Ausbeute: 130 mg (64%). Fp. 86°C (Zers.).
MS: 520,2 (M⁺; ⁸¹Br).
Beispiele 74–78 wurden an fester Phase unter Verwendung eines Polystyrolharzes (PS) mit einem 2-Chlortritylchloridlinker (L) (Substitution 1,05 mMol/g bzw. 0,67 mMol/g; Novabiochem) synthetisiert.
Linker L
Die in Beispielen 74–78 angewendeten allgemeinen Verfahren sind wie nachstehend.
Verbinden:
Die Indolderivate wurden in Dichlormethan oder Di-chlormethan-Tetrahydrofuran-Gemischen gelöst. N,N-Diisopropylethylamin wurde zugegeben und das Gemisch wurde in eine Spritze gesaugt, die mit einer Polyethylenfolie ausgestattet war und das Harz enthielt. Nach Schütteln für 2 Stunden bei Raumtemperatur wurde das Gemisch entfernt und das Harz wurde mit Dichlormethan gewaschen. Ein Gemisch von Methanol, N,N-Diisopropylethylamin und Dichlormethan wurde zugegeben und die Spritze wurde bei Raumtemperatur geschüttelt. Nach 1,5 Stunden wurde das Gemisch entfernt und das Harz wurde mit N,N-Dimethylformamid (1 ×), Dichlormethan (3 ×) und Methanol (3 ×) gewaschen.
Spalten:
Die Verbindungen wurden von dem Harz durch Behandeln des Harzes mit einem Gemisch von Dichlormethan, Trifluoressigsäure und Wasser (60:40:0,1) gespalten. Nach 15 Minuten wurde das Spaltungsgemisch in einen Kolben überführt und das Harz wurde mit Methanol (3 ×) gewaschen. Die Methanolwaschlaugen wurden zu dem Spaltungsgemisch gegeben und die erhaltene Lösung wurde im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde in einen geeignetem Acetonitril-Wasser-Gemisch gelöst und durch HPLC und MS (Beckman HPLC verwendet mit den nachstehenden Säulen: A: YMC ODS-AM 4,6 mm × 250 mm; B: VYDAC RP-18, 90 Å, 4,6 mm × 250 mm; C: YMC basic, 4,6 mm × 250 mm; Thermo-Trennungsprodukte-HPLC verwendet mit Säule D: Macherey-Nagel ET 250/8/4 Nucleosil 7 C₁₈) charakterisiert.
Reinigung:
Die Endprodukte wurden durch präparative HPLC unter Anwendung der nachstehenden Bedingungen gereinigt:
System 1, verwendet für Beispiele 74–78: Beckman HPLC, Säule: VYDAC Protein & Peptide, C₁₈, 10 μm, 22 × 250 mm; Strömungsgeschwindigkeit 8 ml/min, Acetonitril/Wasser-Gradient, Wellenlänge 324 nm, oder
System 2, verwendet für alle anderen Verbindungen, die an fester Phase synthetisiert wurden: Thermo-Abtrennungsprodukte HPLC, Säule: Macherey-Nagel 100 7 C₁₈, 20 mm × 250 mm; Strömungsgeschwindigkeit 5–6 ml/min, geeignete Gemische von Wasser (70–60%) und Acetonitril (30–40%), Wellenlänge 236–242 nm.
Beispiel 74 4-(((1-(3-Amidino-benzyl)-5-amino-1H-indol-2-carbonyl)-amino)-methyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz
1.) 5-Amino-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäureethylestertrifluoressigsäuresalz
5-Amino-1H-indol-2-carbonsäureethylester (343 mg, 1,68 mMol) wurde an das Harz (529 mg, 0,56 mMol), wie vorstehend beschrieben, gekuppelt. Das trockene Indol-gekuppelte Harz wurde in trockenem N,N-Dimethylformamid 5 min geschüttelt. Nach Entfernung des N,N-Dimethylformamids wurde ein Ge misch von 2-tert-Butylimino-2-diethylamino-1,3-dimethylperhydro-1,3,2-diazaphosphorin (405 μl; 1,4 mMol) und N,N-Dimethylformamid (5 ml) zugegeben, gefolgt von einer Lösung von 3-Cyanobenzylbromid (220 mg, 1,12 mMol) in N,N-Dimethylformamid nach einer Stunde. 3 Stunden später wurde das Gemisch entfernt, das Harz wurde mit N,N-Dimethylformamid (5 ×) und Methanol (5 ×) gewaschen und im Vakuum getrocknet. Eine Probe wurde genommen und, wie vorstehend beschrieben, abgespalten. Die erhaltene Verbindung wurde durch HPLC und MS charakterisiert.
HPLC: Säule B. 0–60% Acetonitril in Wasser, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 16,88 min.
MS: 320,1 (M + H⁺).
2.) 5-Amino-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäuretrifluoressigsäuresalz
Das Harz aus Schritt 1 (331 mg) wurde 5 Minuten mit N,N-Dimethylformamid (8 ml) geschüttelt. Nach Entfernung des N,N-Dimethylformamids wurde ein Gemisch von Benzyl-trimethylammoniumhydroxid (40% in Methanol; 2,8 mMol, 1,27 ml) und N,N-Dimethylformamid (10 ml) eingesaugt und 4 h 40 Minuten geschüttelt. Nach Entfernung des Gemisches wurde das Harz mit N,N-Dimethylformamid (5 ×) und Dichlormethan (3 ×) gewaschen und im Vakuum getrocknet. Eine Probe wurde genommen und gespalten.
HPLC: Säule B. 0–60% Acetonitril in Wasser, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 11,72 min.
MS: 292,1 (M + H⁺).
3.) 5-Amino-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(4-pyridylmethyl)-amidtrifluoressigsäuresalz
Das Harz von Schritt 2 (105 mg) wurde 5 Minuten mit N,N-Dimethylformamid geschüttelt, bevor das Reagenzgemisch, bestehend aus 4-(Aminomethyl)pyridin (34 μl, 0,33 mMol), N,N'-Diisopropylcarbodiimid (49 mg, 0,39 mMol) und 1-Hydroxybenzotriazolhydrat (53 mg, 0,39 mMol) in N,N-Dimethylform amid (4 ml), zugegeben wurde. Nach 22 Stunden wurde das Reaktionsgemisch entfernt und das Harz wurde mit N,N-Dimethylformamid, Methanol und Dichlormethan gewaschen und im Vakuum getrocknet. Eine Probe wurde genommen und gespalten.
HPLC: Säule B, 0–60% Acetonitril in Wasser, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 9,73 min.
MS: 382,1 (M + H⁺).
4.) 5-Amino-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-(4-pyridylmethyl)-amidtrifluoressigsäuresalz
Das Harz von Schritt 3 (45 mg) wurde in 2 ml Pyridin/Triethylamin (2:1) für 15 Minuten geschüttelt. Die Lösung wurde entfernt, eine gesättigte Lösung von Schwefelwasserstoff in Pyridin/Triethylamin (2:1) (1 ml) wurde zugegeben und das Gemisch wurde über Nacht geschüttelt. Am nächsten Tag wurde die Schwefelwasserstofflösung entfernt. Das Harz wurde mit Aceton gewaschen und im Vakuum getrocknet. Eine Probe wurde genommen und gespalten.
HPLC: Säule C, 0–60% Acetonitril in Wasser, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 14,30 min.
MS: 416,0 (M + H⁺).
5.) 4-(((1-(3-Amidino-benzyl)-5-amino-1H-indol-2-carbonyl)-amino)-methyl)-1-methyl-pyridiniumtrifluoracetattrifluoressigsäuresalz

5.1) Zu 10 mg des Harzes von Schritt 4 wurde eine Lösung von Methyljodid (100 μl) in Aceton (0,4 ml) gegeben. Nach Schütteln über Nacht wurde das Reaktionsgemisch entfernt und das Harz wurde mit Aceton (7 ×) und Methanol gewaschen. Eine Lösung von Ammoniumacetat (31 mg), Essigsäure (15 μl) und Methanol (300 μl) wurde zugegeben. Die Spritze wurde verschlossen und in einem Wasserbad bei 50°C für 3 Stunden erhitzt. Nach dieser Umwandlung wurde die Lösung entfernt und das Harz wurde mit Methanol, N,N-Dimethylformamid und Di-chlormethan gewaschen.
5.2) Zu 10 mg des Harzes von Schritt 4 wurde eine Lösung von N,N-Dimethylformamid (0,4 ml) und Methyljodid (100 μl) gegeben. Nach Schütteln über Nacht wurde das Reaktionsgemisch entfernt und das Harz wurde mit Aceton (7 ×) und Methanol gewaschen. Eine Lösung von Ammoniumacetat (31 mg), Essigsäure (15 μl) und Methanol (300 μl) wurde zugegeben. Die Spritze wurde verschlossen und in einem Wasserbad für 3 Stunden auf 50°C erhitzt. Nach dieser Umwandlung wurde die Lösung entfernt und das Harz wurde mit Methanol, N,N-Dimethylformamid und Dichlormethan gewaschen.
5.3) Das Harz von Schritt 4 (25 mg) wurde mit Aceton 5 Minuten geschüttelt. Das Aceton wurde durch eine Lösung von Methyljodid (0,3 ml) in Aceton (1,2 ml) ersetzt und die Spritze wurde über Nacht geschüttelt. Am nächsten Tag wurde die Methyljodidlösung entfernt und das Harz wurde mit Aceton und Methanol gewaschen. Eine Lösung von Ammoniumacetat (92 mg), Essigsäure (45 μl) und Methanol (300 μl) wurde zugegeben und die Spritze 3 Stunden auf 50°C erhitzt. Die Lösung wurde entfernt und das Harz mit Methanol, N,N-Dimethylformamid und Dichlormethan gewaschen.

Die in Schritten 5.1 bis 5.3 erhaltenen Harze wurden vereinigt. Das vereinigte Material wurde gespalten und dann durch präparative HPLC gereinigt. Nach Lyophilisierung wurden 8 mg eines festen Materials erhalten. Fp. 115°C.
HPLC: Säule C, 0–40% Acetonitril in Wasser, 20 min, 230 nm, Retentionszeit: 11,05 min.
MS: 413,0 (M⁺).
Beispiele 75 und 76: 1-(3-Amidino-benzyl)-5-amino-1H-indol-2-carbonsäure-4-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz (Beispiel 75)
1-(3-Amidino-benzyl)-5-amino-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz (Beispiel 76)
1.) 5-Amino-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-cyano-benzylamidtrifluoressigsäuresalz und 5-Amino-1-(3-cyano-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylamidtrifluoressigsäuresalz

1.1) Das Harz aus Beispiel 74 Schritt 2 (130 mg, 0,11 mMol) wurde mit N,N-Dimethylformamid 5 Minuten geschüttelt. Nach Entfernung des N,N-Dimethylformamids wurde eine Lösung von Diphenylphosphorylazid (36 μl, 0,165 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (172 μl, 0,99 mMol) und 4-Aminomethylbenzonitrilhydrobromid (70 mg, 0,33 mMol) in N,N-Dimethylformamid (4 ml) zugegeben und die Spritze wurde über Nacht geschüttelt. Nach 16 Stunden wurde das Reaktionsgemisch entfernt, das Harz mit N,N-Dimethylformamid, Methanol und Dichlormethan gewaschen und getrocknet. Nach Trocknen wurde eine Probe genommen und gespalten. HPLC-Analyse zeigte einen Umsatz von 50%.
1.2) Das Harz von Schritt 1.1 wurde mit N,N-Dimethylformamid 5 Minuten geschüttelt. Die Entfernung von N,N-Dimethylformamid wurde von der Zugabe des Reagenzgemisches, bestehend aus 3-Aminomethylbenzonitril (22 mg, 0,165 mMol), 1-Hydroxybenzotriazol (30 mg, 0,22 mMol), N,N'-Diisopropylcarbodiimid (24 mg, 0,193 mMol) und N,N-Dimethylformamid (2 ml), gefolgt. Nach Schütteln für 16 Stunden wurde das Reaktionsgemisch entfernt, das Harz mit N,N-Dimethylformamid, Methanol und Dichlormethan gewaschen und getrocknet. Eine Probe wurde genommen und gespalten. HPLC: Säule C, 0–60% Acetonitril in Wasser, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 23,70 min (Peak zeigte eine Schulter).

2.) 5-Amino-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-thiocarbamoyl-benzylamidtrifluoressigsäuresalz und
5-Amino-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-thiocarbamoyl-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Das in Schritt 1.2 erhaltene Harz wurde mit Schwefelwasserstoff, Pyridin und Triethylamin, wie in Beispiel 74/4 beschrieben, behandelt. Aufgrund der Tatsache, dass es noch etwas vorliegendes Ausgangsmaterial gab, wurde es ein weiteres Mal mit Schwefelwasserstoff, Pyridin und Triethylamin behandelt, um vollständigen Umsatz zu bekommen. Nach Abspaltung einer kleinen Probe wurden die erhaltenen Verbindungen durch HPLC-Analyse charakterisiert.
HPLC: Säule C, 0–60% Acetonitril in Wasser, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 20,17 min (53%), 20,52 min (32%).
3.) 1-(3-Amidino-benzyl)-5-amino-1H-indol-2-carbonsäure-4-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz und
1-(3-Amidino-benzyl)-5-amino-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Das Harz von Schritt 2 wurde mit Methyljodid (250 μl, 4 mMol), Aceton (2 ml), Ammoniumacetat (210 mg, 2,7 mMol), Essigsäure (100 μl) und Methanol (2 ml) analog zu Beispiel (74/5,3) behandelt. Die Verbindungen wurden von dem Harz abgespalten. Nach Verdampfung wurde der Rückstand in Acetonitril/Wasser 15:85 (400 μl) gelöst. Präparative HPLC des Rückstands ergab zwei Hauptfraktionen. Fraktion I enthielt metapara-Amidin mit einer Verunreinigung von Bis-meta-amidin, Fraktion II enthielt Bis-meta-amidin mit einer Verunreinigung von meta-para-Amidin.
Eine zweite präparative HPLC von Fraktion I ergab 10,2 mg des meta-para-Amidins (Beispiel 75) als einen weißen Feststoff. Fp. 146°C (Zers.).
HPLC: Säule C, 0–40% Acetonitril in Wasser, 20 min, 230 nm, Retentionszeit: 12,45 min.
MS: 439,9 (M + H⁺).
Ein zweite präparative HPLC von Fraktion II ergab 12,5 mg des Bis-meta-amidins (Beispiel 76). Fp. 125°C (Zers.).
HPLC: Säule C, 0–40% Acetonitril in Wasser, 20 min, 230 nm, Retentionszeit: 12,57 min.
MS: 440,0 (M + H⁺).
Beispiel 77: 1-(3-Amidino-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäureethylester
4-Hydroxy-1H-indol-2-carbonsäureethylester (345 mg, 1,69 mMol) wurde an das Harz (535 mg, 0,56 mMol) gekoppelt. Dann wurde das Harz in trockenem N,N-Dimethylformamid 5 Minuten geschüttelt, mit N,N-Dimethylformamid gewaschen und ein Gemisch von 2-tert-Butylimino-2-diethylamino-1,3-dimethylperhydro-1,3,2-diazaphosphorin (405 μl, 1,4 mMol) und N,N-Dimethylformamid (5 ml) wurde zu dem Harz gegeben. Nach Schütteln für eine Stunde wurde 3-Cyano-benzylbromid (220 mg, 1,12 mMol) zugegeben. 3 Stunden später wurde das Gemisch entfernt, das Harz wurde mit N,N-Dimethylformamid (5 ×) und Methanol (5 ×) gewaschen und im Vakuum getrocknet. Nach Abspaltung einer kleinen Probe wurde das Produkt durch HPLC charakterisiert.
HPLC: Säule B, 0–80% Acetonitril in Wasser, 40 min, 324 nm, Retentionszeit: 25,53 min.
2.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure
Das in Schritt 1 erhaltene Harz wurde mit Benzyltrimethylammoniumhydroxid (40% in Methanol, 2,5 ml, 5,6 mMol) in N,N-Dimethylformamid (15 ml) analog zu dem Harz in Beispiel 74/2 behandelt. Eine Probe wurde genommen und gespalten.
HPLC: Säule B, 0–60% Acetonitril in Wasser, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 20,98 min.
3.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-3-cyano-benzylamid
Das in Schritt 2 erhaltene Harz (98 mg, 0,1 mMol) wurde mit einem Gemisch von 3-Aminomethylbenzonitrilhydrobromid (64 mg, 0,3 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (70 μl, 0,4 mMol), 1-Hydroxybenzotriazol (54 mg, 0,4 mMol) und N,N'-Diisopropylcarbodiimid (44 mg, 0,35 mMol) analog zu Beispielen 75 und 76, Schritt 1.2, umgesetzt.
4. 4-Hydroxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-3-thiocarbamoyl-benzylamid
Das in Schritt 3 erhaltene Harz wurde mit Schwefelwasserstoff, Pyridin und Triethylamin, wie in Beispiel 74.4 beschrieben, erhalten.
5.) 1-(3-Amidino-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-3-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Das in Schritt 4 erhaltene Harz wurde mit Methyljodid (250 μl, 4 mMol), Aceton (2 ml), Ammoniumacetat (210 mg, 2,7 mMol), Essigsäure (100 μl) und Methanol (2 ml) analog zu Beispiel 74, Schritt 5.3, behandelt. Präparative HPLC nach Abspaltung: Der Rückstand wurde in Wasser und Acetonitril gelöst unter Gewinnung von 900 μl Volumen. Diese Lösung wurde in zwei Teile gespalten und jeder Teil wurde durch HPLC getrennt unter Gewinnung einer Gesamtmenge von 11 mg eines weißen Feststoffs. Fp. 128–131°C.
HPLC: Säule B, 0–40% Acetonitril in Wasser, 20 min, 230 nm, Retentionszeit: 11,97 min.
MS: 441,0 (M + H⁺).
Beispiel 78: 1-(3-Amidino-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-cyano-benzylamid
50 mg (0,05 mMol) des in Beispiel 77/2 erhaltenen Harzes wurden mit einem Gemisch von 4-Aminomethylbenzonitrilhydrobromid (32 mg, 0,15 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (35 μl, 0,2 mMol), 1-Hydroxybenzotriazol (27 mg, 0,2 mMol) und N,N'-Diisopropylcarbodiimid (22 mg, 0,175 mMol) analog zu Beispiel 74/3 umgesetzt.
2.) 4-Hydroxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-4-thio-carbamoyl-benzylamid
Das in Schritt 1 erhaltene Harz wurde mit Schwefelwasserstoff, Pyridin und Triethylamin, wie in Beispiel 74/4 beschrieben, behandelt.
3.) 1-(3-Amidino-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-4-amidino-benzylamidtrifluoressigsäuresalz
Das in Schritt 2 erhaltene Harz wurde mit Methyljodid (125 μl, 2 mMol), Aceton (1 ml), Ammoniumacetat (105 mg, 1,35 mMol), Essigsäure (50 μl) und Methanol (1 ml) analog zu Beispiel 75/5.3 behandelt. Präparative HPLC nach Spaltung: Der Rückstand wurde in Wasser und Acetonitril gelöst und gereinigt unter Gewinnung von 7 mg eines weißen Feststoffs. Fp. 155–157°C.
HPLC: Säule B, 0–40% Acetonitril in Wasser, 20 min, 324 nm, Retentionszeit: 11,77 min.
MS: 441,0 (M + H⁺).
Beispiel 79: 1-(3-Amidino-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-[2-(2,4-dichlor-phenyl)ethyl]-amidtrifluoressigsäuresalz
1.) 1-(3-Cyano-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-[2-(2,4-dichlor-phenyl)ethyl]-amid
Diese Verbindung wurde unter Verwendung eines substituierten Harzes, wie jenes beschrieben in Beispiel 77/2, synthetisiert, jedoch mit einer niedrigeren Substitution (das 2-Chlortritylchloridharz, das in dem Bindungsschritt verwendet wurde, hatte nur eine Substitution von 0,67 mMol/g). Dieses Harz (300 mg, 0,201 mMol), das 1-(3-Cyanobenzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure trägt, wurde mit N,N-Dimethylformamid für fünf Minuten behandelt. Nach Entfernung des N,N-Dimethylformamids wurde ein Gemisch von 2-(2,4-Dichlorphenyl)ethylamin (0,51 ml, 3,35 mMol), N,N-Diisopropylethylamin (0,57 ml, 3,35 mMol), Diphenylphosphorylazid (0,72 ml, 3,35 mMol) und N,N-Dimethylformamid (6 ml) zugegeben. Nach Schütteln über Nacht wurde das Reaktionsgemisch entfernt und das Harz mit N,N-Dimethylformamid (5 ×) und Methanol (5 ×) gewaschen. Nach Trocknen im Vakuum wurde eine Probe genommen und gespalten.
HPLC: Säule D; Wasser/Acetonitril 90:10 bis 10:90, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 23,10 min.
2.) 4-Hydroxy-1-(3-thiocarbamoyl-benzyl)-1H-indol-2-carbonsäure-[2-(2,4-dichlor-phenyl)-ethyl]-amid
Das Harz von Beispiel 79/1 wurde in ähnlicher Weise, wie in Beispiel 74/4 beschrieben, behandelt.
HPLC: Säule D, Wasser/Acetonitril 90:10 bis 10:90, 30 min, 324 nm, Retentionszeit: 20,74 min.
3.) 1-(3-Amidino-benzyl)-4-hydroxy-1H-indol-2-carbonsäure-[2-(2,4-dichlor-phenyl)ethyl]-amidtrifluoressigsäuresalz
Das Harz von Beispiel 79/2 wurde in ähnlicher Weise, wie in 74/5.3 beschrieben, behandelt. Präparative HPLC nach Spaltung ergab 20 mg eines weißen Feststoffs. Fp. 144°C
HPLC: Säule D, Wasser/Acetonitril 45:55, 30 min, 236 nm, Retentionszeit 9,43 min.
MS: 481,2 (M + H⁺; 2 × ³⁵Cl).
Analog zu den vorstehend beschriebenen Verbindungen wurden die nachstehenden Beispielverbindungen der Formel Ib hergestellt, die in Tabelle 2 angeführt sind. Sofern nicht anders ausgewiesen, wurden in Tabelle 2 die Verbindungen von Beispielen 85 bis 165 als Trifluoressigsäuresalze erhalten.
Tabelle 2: Beispielverbindungen der Formel Ib

nd: = nicht bestimmt
(a): Herstellungsweg: c = klassische Synthese, s = Festphasenchemie
(b): erhalten als Essigsäuresalz anstelle von Trifluoressigsäuresalz
(c): nicht erhalten als Trifluoressigsäuresalz, jedoch als die freie Verbindung (die im Fall von Beispiel 135 ein Betain darstellt)
(d): erhalten als Hydrochlorid anstelle von Trifluoressigsäuresalz
(R): Bezug

Die Offenbarung von allen vorstehend erwähnten Publikationen wird ausdrücklich hierin in ihrer Gesamtheit zu dem gleichen Ausmaß aufgenommen, als wenn jede Publikation durch einen Hinweis einzeln aufgenommen worden wäre.

Claims

Verbindung der Formel I
worin zwei von den Resten R^1a, R^1b, R^1c und R^1d unabhängig voneinander Wasserstoff, F, Cl, Br, I, Methyl, (C₁-C₄)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₄)-alkoxy-, OH oder NR^5aR^5b darstellen und gleich oder verschieden sind, und die anderen zwei der Reste R^1a, R^1b, R^1c und R^1d Wasserstoff darstellen; R^5a Wasserstoff oder ((C₁-C₄)-Alkoxy)carbonyl- darstellt; R^5b Wasserstoff darstellt; R² Wasserstoff, Cl oder Br darstellt; R³ -CO-NHR¹⁰ darstellt; R⁷ Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₄)-alkoxy- oder -NR^5aR^5b darstellt; R¹⁰ (C₁-C₁₀)-Alkyl-, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt, wobei der (C₁-C₁₀)-Alkyl-Rest, der Phenyl-Rest und der Naphthyl-Rest unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R¹¹ substituiert sind; R¹¹ -N(R¹²)₂, -OR¹², -CO-N(R¹³)₂, -CO-R⁷, R^15b, (C₁-C₁₄)-Alkyl, Phenyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist, Naphthyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist, Chinolinyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist und/oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert ist, Isochinolinyl, das unsubstituiert oder mit einem, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Resten R^15b substituiert ist und/oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert ist, Pyridyl, das unsubstituiert oder an dem Stickstoffatom mit R¹⁴ substituiert ist, oder Het, das unsubstituiert oder mit R^15a substituiert ist, darstellt, wobei Reste R¹¹, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; Het den Rest eines 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Rings, enthaltend 1 oder 2 gleiche oder verschiedene Ringheteroatome, ausgewählt aus der Reihe bestehend aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel, darstellt; jeder Rest R¹² unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹² Wasserstoff, (C₁-C₄)-Alkyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl-, Naphthyl, Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl-, Pyrrolidinyl, Piperidinyl, Pyrrolidinyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder Piperidinyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt, wobei jeder Pyrrolidinyl-Rest und jeder Piperidinyl-Rest unsubstituiert oder an dem Stickstoffatom mit Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- oder R^15a substituiert ist; jeder Rest R¹³ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹³ Wasserstoff, (C₁-C₄)-Alkyl, Phenyl, Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl-, Naphthyl oder Naphthyl-(C₁-C₄)-alkyl- darstellt oder die zwei Reste R¹³ zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen gesättigten heterocyclischen Ring bilden, der ein weiteres Stickstoffatom oder Sauerstoffatom in dem Ring enthalten kann, wobei das weitere Stickstoffatom in dem Ring unsubstituiert oder mit (C₁-C₄)-Alkyl oder Phenyl-(C₁-C₄)-alkyl- substituiert ist; R¹⁴ (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)- alkyl- darstellt, wobei in R¹⁴ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest darstellt, wobei die Substitution durch diese Reste an dem Stickstoffatom des heterocyclischen Rests zu einer positiv geladenen Gruppe mit X^– als Gegenion führt; oder R¹⁴ Oxido darstellt, wobei diese Substitution an dem Stickstoffatom des heterocyclischen Rests zu einem N-Oxid führt; und wobei Reste R¹⁴, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; R^15a (C₁-C₆)-Alkyl, ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(=NH)-, -(CH₂)_t-N(R¹⁶)₂, -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–), -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^–, -(CH₂)_t-NHR¹⁷, -(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ oder -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, wobei ((C₁-C₆)-Alkyl)-C(-NH)- an ein Ringstickstoffatom gebunden ist, und wobei Reste R^15a, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; R^15b (C₁-C₆)-Alkyl, Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, F, Cl, Br, I, NO₂, -(CH₂)_t-N(R¹⁶)₂, -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₂(-O^–), -(CH₂)_t-N⁺(R^16a)₃X^–, -(CH₂)_t-NHR¹⁷, -(CH₂)_t-CO-OR¹⁸, -(CH₂)_t-CO-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-CN, -(CH₂)_t-CS-N(R¹⁸)₂, -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ oder -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, wobei Alkyl 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- oder 7-fach mit Fluor substituiert sein kann, und wobei Reste R^15b, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; t 0, 1, 2 oder 3 ist, wobei Zahlen t, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; jeder Rest R¹⁶ unabhängig von den Bedeutungen von einem weiteren Rest R¹⁶ Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C₁-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R¹⁶ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R¹⁶ enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; jeder Rest R^16a unabhängig von den Bedeutungen von einem weiteren Rest R^16a (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkenyl, (C₁-C₆)-Alkinyl, Phenyl-(C₁-C₆)-alkyl- oder ((C₁-C₆)-Alkoxy)carbonyl-(C_l-C₆)-alkyl- darstellt, wobei in R^16a vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R^16a enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; jeder Rest R¹⁷ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹⁷ Wasserstoff, (C₁-C₆)-Alkyl, (C₁-C₆)-Alkylcarbonyl-, (C₁-C₆)-Alkoxycarbonyl-, (C₁-C₆)-Alkylcarbonyloxy-(C₁-C₆)-alkoxycarbonyl-, Phenylcarbonyl-, Phenoxycarbonyl-, Phenyl-(C₁-C₆)-alkoxycarbonyl-, Hydroxy, (C₁-C₆)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₆)-alkoxy- oder Amino darstellt und zusätzlich in den Gruppen -(CH₂)_t-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ und -(CH₂)_t-NH-C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ die zwei Reste R¹⁷ zusammen mit der Gruppe C(=N)-NH, an die sie gebunden sind, einen 5-gliedrigen oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bilden können, und wobei in R¹⁷ vorliegendes Phenyl einen unsubstituierten Phenyl-Rest bedeutet und wobei Reste R¹⁷ enthaltende Gruppen, falls mehr als einmal in dem Molekül vorliegend, unabhängig voneinander sind und gleich oder verschieden sein können; jeder Rest R¹⁸ unabhängig von der Bedeutung von einem weiteren Rest R¹⁸ Wasserstoff oder (C₁-C₄)-Alkyl darstellt; A einen Methylen-Rest -CH₂- darstellt; R⁴ Phenyl darstellt, das in der Metaposition mit einem Rest R^15c substituiert ist; R^15c -C(=NR¹⁷)-NHR¹⁷ darstellt, worin die Reste R¹⁷ Wasserstoff darstellen; X^– ein physiologisch verträgliches Anion darstellt; in allen ihren stereoisomeren Formen und Gemische davon in einem beliebigen Verhältnis, und ihre physiologisch verträglichen Salze.
Verbindung der Formel I nach Anspruch 1, worin die Reste R^1c und R^1d Wasserstoff darstellen, in allen ihren stereoisomeren Formen und Gemische davon in beliebigem Verhältnis und ihre physiologisch verträglichen Salze.
Verbindung der Formel I nach Ansprüchen 1 und/oder 2, worin einer der Reste R^1a und R^1b Wasserstoff darstellt und der andere ausgewählt ist aus der Reihe bestehend aus Wasserstoff, Methyl, F, Cl, Br, I, Hydroxy, (C₁-C₄)-Alkoxy, Phenyl-(C₁-C₄)-alkoxy- und -NHR^5a, in allen ihren stereoisomeren Formen und Gemische davon in beliebigem Verhältnis und ihre physiologisch verträglichen Salze.
Verbindung der Formel I nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 3, worin der Rest R² Wasserstoff darstellt, in allen ihren stereoisomeren Formen und Gemische davon in beliebigem Verhältnis und ihre physiologisch verträglichen Salze.
verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel I nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 4, umfassend das Kondensieren einer Verbindung der Formel VII mit einer Verbindung der Formel H₂NR¹⁰ zu einer Verbindung der Formel VIII und das Umwandeln der Verbindung der Formel VIII in eine Verbindung der Formel I,
wobei der Rest R^10' die Bedeutungen von R¹⁰, die in Ansprüchen 1 bis 4 ausgewiesen sind, aufweisen kann, wobei jedoch in R^10' funktionelle Gruppen ebenfalls in Form von Gruppen vorliegen können, die anschließend in die in R¹⁰ vorliegenden endgültigen funktionellen Gruppen überführt werden, und wobei der Rest R⁴⁰ die Gruppe -A-R⁴ bedeuten kann oder eine Gruppe bedeuten kann, die anschließend in die Gruppe -A-R⁴ überführt wird, und wobei die Gruppe -COR⁴¹ eine Carbonsäure-Gruppe oder ein Derivat davon sein kann, und worin die Gruppen R^1a, R^1b, R^1c und R^1d wie in Ansprüchen 1 bis 4 definiert sind oder funktionelle Gruppen in ihnen auch in geschützter Form oder in Form von Vorstufengruppen vorliegen können.
Pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend eine oder mehrere Verbindungen der Formel I nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 4 und/oder deren physiologisch verträgliche Salze zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger.
Verbindung der Formel I nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 4 und/oder ihre physiologisch verträglichen Salze zur Verwendung als Arzneimittel.
Verbindung der Formel I nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 4 und/oder ihre physiologisch verträglichen Salze zur Verwendung als Inhibitor von Faktor Xa.
Verbindung der Formel I nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 4 und/oder ihre physiologisch verträglichen Salze zur Verwendung als Inhibitor der Blutgerinnung.
Verbindung der Formel I nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 4 und/oder ihre physiologisch verträglichen Salze zur Verwendung bei der Behandlung oder Prophylaxe von cardiovaskulären Störungen oder thromboembolischen Zuständen.
Verbindung der Formel 2 nach einem oder mehreren der Ansprüche 1 bis 4 und/oder ihre physiologisch verträglichen Salze zur Verwendung bei der Behandlung oder Prophylaxe von Thrombosen, Herzinfarkt, Angina Pectoris, Restenosen oder Wiederverschluss.