DE69117922T2

DE69117922T2 - Zusammensetzungen gegen malaria

Info

Publication number: DE69117922T2
Application number: DE69117922T
Authority: DE
Inventors: Deben Beijing 100071 Ding; Guofu Beijing 100071 Li; Guangyu Beijing 100071 Liu; Dianxi Beijing 100071 Ning; Chengqi Beijing 100071 Shan; Shufen Beijing 100071 Wang; Yiqing Beijing 100071 Zhou
Original assignee: Ciba Geigy AG; Institute of Microbiology and Epidemiology of AMMS
Current assignee: Novartis AG; Institute of Microbiology and Epidemiology of AMMS
Priority date: 1990-08-08
Filing date: 1991-06-05
Publication date: 1996-09-05
Anticipated expiration: 2011-06-06
Also published as: JPH05501568A; DE10199038I2; FI921491A0; DE10199038I1; CA2065285C; AP9100275A0; CN1085527C; IE72095B1; KR100221689B1; HU9201528D0; NZ238477A; IL98463A0; ATE135209T1; AU642747B2; AP231A; HK1000312A1; SA91120263B1; CN1058717A; WO1992002217A1; JP2562857B2

Description

Zusammensetzungen gegen Malaria

Die vorliegende Erfindung betrifft eine synergistische Zusammensetzung zur oralen Verabreichung gegen Malaria und ein Verfahren zur Zubereitung der synergistischen Zusammensetzung gegen Malaria.
Wirkstoffresistente Malaria ist ein ernst zu nehmendes klinisches und allgemeingesundheitliches Problem. Der Malariaparasit Plasmodium falciparum hat die Vielseitigkeit entwickelt, sich den Wirkungen von Standardarzneistoffen, wie Chloroquin, entweder durch genetische Mutation oder durch nicht-genetische Anpassungsmethoden zu entziehen. Die Ausbreitung von Plasnodium falciparum, der gegen Chloroquin und andere Antimalaria-Arzneistoffe resistent ist, ist eine große Herausforderung für die Gesundheitsfürsorgeprogramme in den tropischen und subtropischen Ländern. Daher sind neue pharmazeutische Zusammensetzungen, die die Resistenz von Malariaparasiten vermindern, für eine erfolgreiche Therapie erforderlich.
Die Antimalaria-Wirkung von Zusammensetzungen, die das einzelne Mittel Benflumetol enthalten, wurde in Chemical Abstracts 97:28538 h und 101:136941 u mitgeteilt. Andere Zusammensetzungen enthalten Kombinationen bekannter Antimalana-Mittel. Beispielsweise wurde die Kombination von Amodiaquin und Tetracyclin bei der klinischen Behandlung verwendet [Suphat Noeypatimanond, et al. (1983), Treatment of Plasmodium falciparum malaria with a combination of amodiaquine and tetracycline in central Thailand, Trans. R. Soc. Trop. Med. and Hyg. 73 (3), 338 - 340]. Kürzlich wurde eine weitere Antimalaria-Kombination FANSIMED (Mefloquine, Pyrimethamin und Sulphadoxin) klinischen Tests unterzogen - [Tropical Diseases Research, Seventh Programme Report, Kapitel 2; Malaria, UNDP World Bank/WHO. Veröffentlicht von der WHO, 1985].
Die Verwendung von Kombinationen von Artemisinin und dessen Derivaten und anderen Antimalaria-Verbindungen, wie Chinin, wurde in der Indischen Patentanmeldung 26 BOM/87 und der Deutschen Patentanmeldung DE-A-3715378 vorgeschlagen.
Ebenfalls ist die synergistische Wirkung einer Kombination von Artemisinin und Primaquin bekannt (Wan Yaode, Cang Qizhong, Pharmacy Bulletin, Band 16, Nr. 1, 1981).
Kombinationen der Antimalaria-Mittel Artemether, Arteether, Artemisinin, Dihydroartemisinin oder Artesunat mit Chinidin oder mit Mefloquin wurden in der Europäischen Patentanmeldung EP-A-362 810 veröffentlicht.
Die Motivation für die vorliegende Erfindung entstand aus dem Erfordernis für eine verbesserte Zusammensetzung gegen Malaria höherer Aktivität und geringerer Resistenz gegen Malariaparasiten, wie Plasmodium falcinarum, bei der Therapie.
Es wurde nun gefunden, daß pharmazeutische Zusammensetzungen, die den Wirkstoff Benflumetol in Kombination mit dem Stoff Artemether enthalten, ausgezeichnete Wirkung gegen Malaria aufweisen und wirksamer sind als Zusammensetzungen, die nur die einzelne Komponente Benflumetol oder alternativ Artemisinin-Derivate enthalten.
Die nachstehende Erfindung betrifft eine oral verabreichbare, pharmazeutische Zusammensetzung, geeignet zur synergistischen Wirkung der wirksamen Komponenten gegen Malaria, umfassend eine synergistisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel
mit einer synergistisch wirksamen Menge mindestens einer Verbindung der Formel
worin einer der Reste R und R&sub1; einzeln Methoxy und der andere Wasserstoff wiedergibt und ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Die allgemeinen Definitionen und Begriffe, die in dieser Erfindungsbeschreibung verwendet werden, haben vorzugsweise die nachstehenden Bedeutungen:
Der Begriff pharmazeutische Zusammensetzung definiert ein Gemisch, das die Verbindung der Formel I und mindestens eine Verbindung der Formel II umfaßt. Dieses Gemisch besteht entweder aus einer trockenen Zubereitung der wirksamen Komponenten (I) und (II), wie einem Lyophilisat, oder enthält vorzugsweise Zusätze, die zur Herstellung einer Dosierungsform, wie Tabletten oder Kapseln, geeignet sind.
Der Begriff synergistische Wirkung definiert die Steigerung des Wirkungsgrades der Zusammensetzung über den Wirksamkeitsgrad mindestens einer einzelnen wirksamen Komponente bei gegebener Dosierung. Vorzugsweise ist der Wirkungsgrad aller in der pharmazeutischen Zusammensetzung vorliegenden wirksamen Komponenten erhöht. Die synergistische Wirkung ist höchst erwünscht, da sie die Verwendung einer geringeren Dosierung einer einzelnen Komponente und/oder die Verbesserung der Wirkung über den Wirkungsgrad der einzelnen Komponenten ermöglicht.
Der Synergismus der beanspruchten Zusammensetzung wurde durch experimentelle Ergebnisse von in-vitro- und invivo-Modellen bewiesen. Die Ergebnisse zeigen, daß die Wirkung der Komponente gemäß Formel I erhöht ist, verglichen mit der Wirkung von Benflumetol (I) bei einer einzelnen Dosierungsforn und daß die Wirkung der Artemetherkomponente (II) ebenfalls erhöht ist.
Die synergistische Wirkung der erfindungsgemäßen Zusammensetzung gegen Malaria erlaubt die kombinierte Anwendung anderer Arzneistoffverabreichungspläne während der Therapie durch die Verabreichung einer Dosierungsforn, wie ein oder zwei Tabletten pro Tag.
Die Anwendung einer Dosierungsfom, die die wirksame Komponente Benflumetol (I) umfaßt, gestattet dauerhafte Wirkung gegen Malaria. Die Anwesenheit der zweiten wirksamen Artemether-Komponente (II) in derselben Dosierungsform gestattet augenblickliche und rasche Wirkung gegen Protozoen nach Ausbruch der Erkrankung. Dies wurde durch Tests, die in verschiedenen pharmakologischen in-vitro- und in-vivo-Standardmodellen ausgeführt wurden, bewiesen.
Die wirksame Komponente (I), worin Bu n-Butyl bedeutet, ist unter dem Namen Benflumetol bekannt, vergleiche C.A.R.N. 82186-77-4. Für pharmazeutische Zusammensetzungen, die Benflumetol einzeln enthalten und deren Wirkung gegen Malaria ebenfalls bekannt ist, siehe Abstracts gemäß C.A. 97:28538 h und 101:136941. Die Herstellung von Benflumetol wurde in der veröffentlichten Chinesischen Patentanmeldung 88/07666.X offenbart.
Die Verbindung (II), worin einer der Reste R und R&sub1; Methoxy und der andere Wasserstoff wiedergibt, ist unter dem Namen Artemether bekannt.
Die in der Beschreibung der vorliegenden Erfindung verwendeten generischen Namen sind dem "Tropical Diseases Research, Seventh Programm Report", Kapitel 2; Malaria, UNDP WORLD BANK/WHO, veröffentlicht durch die WHO, 1985, entnommen.
Artemether ist ein halbsynthetisches Derivat von Artemisinin. Die Wirkung gegen Malaria ist in verschiedenen WHO-Berichten offenbart. [WHO. Report of the Scientific Working Group on the Chemotherapy Malaria, TDR/Chemal 3rd Review, 85.3, Genf, 3.-5. Juni 1985 und die darin enthaltenen Literaturhinweise.]
Übliche, pharmazeutisch verträgliche Zusätze liegen vorzugsweise in der erfindungsgemäßen Zusammensetzung vor.
Zur oralen Verabreichung geeignete Zusätze schließen inerte Verdünnungsmittel oder Füllstoffe ein, die damit Dosierungsformen, wie Tabletten, Pulver, Kapseln und dergleichen, bilden. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können, falls erwünscht, zusätzliche Bestandteile, wie Aromastoffe, Bindemittel, Exzipienten und dergleichen, enthalten.
Tabletten enthalten beispielsweise verschiedene feste Zusätze, wie Stärke, Dextrin, Alginsäure und bestimmte komplexe Silicate, zusammen mit Bindemitteln, wie Polyvinylpyrrolidon, Saccharose, Gelatine und Akazia. Zusätzlich sind Gleitmittel, wie Magnesiumstearat, Natriumlaurylsulfat und Talkum, häufig für Tablettierungszwecke nützlich. Feste Zusammensetzungen ähnlicher Art können auch als Füllungen in weichen und harten Gelatinekapseln verwendet werden, bevorzugte Materialien dafür schließen Laktose oder Milchzucker und Polyethylenglycole hohen Molekulargewichts ein.
Für weitere orale Dosierungsformen kann das Gemisch der Verbindungen beispielsweise in einer Gelatinekapsel verabreicht werden. Solche Formulierung könnte auf einem geeigneten raffinierten Speiseöl basieren, wie Sonnenblumenöl, Maisöl, Erdnußöl, Kokosnußöl oder Sesamöl (til oil).
In einer bevorzugten erfindungsgemäßen Ausführungsform sind die wirksamen Komponenten (I) und (II) in einer einzelnen Einheitsdosierungsform, wie Tabletten oder Kapseln, formuliert.
Die Eignung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung in der Therapie gegen Malaria wird durch die in-vitro- und in-vivo-Ergebnisse von Experimenten, die in bewährten Testmodellen ausgeführt wurden, bewiesen. Einige Ergebnisse sind in den Beispielen angeführt. Das Vermögen der Zusammensetzung, als wirksames und rasch wirkendes Antimalana-Mittel auch gegen Stämme von P. berghei, die als extrem resistent gegen andere Antimalaria-Mittel bekannt sind, zu wirken, spiegelt den Nutzen der vorliegenden Erfindung wieder.
Die orale Zusammensetzung ist bei einem Behandlungsverfahren gegen Malaria geeignet, das die Verabreichung der vorstehend genannten pharmazeutischen Zusammensetzung, die die kombinierten wirksamen Komponenten (I) und (II) umfaßt, an einen Patienten nach Ausbruch von Malaria umfaßt. Die Zusammensetzung wird an den Patienten für einen Zeitraum von mindestens 4 Tagen, vorzugsweise 5 oder mehr Tagen, verabreicht.
Der Begriff Verfahren zur Behandlung umfaßt auch prophylaktische Verabreichung der Zusammensetzung an gesunde Patienten, um den Ausbruch der Krankheit in Bereichen, in denen ein hohes Risiko an Kontamination besteht, besonders in Gebieten zwischen den Wendekreisen von Steinbock und Krebs zu verhindern.
Die Dosis der wirksamen Komponente Benflumetol (I), die in der pharmazeutischen Zusammensetzung enthalten ist, kann innerhalb breiter Grenzen variieren und hängt von dem Zustand des Patienten und dem Zeitraum, der nach Ausbruch der Krankheit abgelaufen ist, ab. Auf Grundlage von in-vivo-Daten aus dem P. berghei-Modellexperiment mit Mäusen, wie in den nachstehenden Beispielen mitgeteilt, hat es sich erwiesen, daß die tägliche Dosis an Benflumetol zwischen etwa 0,2 und 5,0 mg/kg, vorzugsweise 0,2 - 10,0 mg/kg, und insbesondere etwa 0,2 - 5,0 mg/kg liegt. Die tägliche Dosis kann erforderlichenfalls aufgrund der geringen Toxizität und hohen Tolerierbarkeit für Benflumetol drastisch angehoben werden. Es wird ebenfalls geschätzt, daß die tägliche Dosis von Komponente (II) in dem Mittel, insbesondere Artemether, zwischen 0,2 und 5 mg/kg, vorzugsweise 0,3 - 3,0 mg/kg, insbesondere zwischen etwa 0,4 - 5,0 mg/kg, liegt.
Das Dosierungsverhältnis von Komponente (I) zu Komponente (II) kann ebenfalls innerhalb breiter Bereiche variieren. Es wurde ermittelt, daß der Synergismus besonders effizient ist, wenn Benflumetol in gleichen Gewichtsmengen oder vorzugsweise in Überschußmengen, verglichen mit den Gewichtsmengen der verabreichten Komponente (II), verabreicht wird. Folglich kann die Gewichtsmenge von Benflumetol von 1 bis 10 Teilen für jedes Teil der verabreichten Artemether-Komponente (II) variieren. Vorzugsweise werden 3 bis 7 Teile, insbesondere 5 bis 6 Teile, Benflumetol für jeden Teil der Komponente (II) verabreicht. Die gegebenen Dosierungsmengen und die Dosierungsverhältnisse beziehen sich auf tägliche Verabreichungen.
Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Zubereitung der für die synergistische Wirkung der wirksamen Komponenten gegen Malaria geeigneten pharmazeutischen Zusammensetzung, umfassend die Kombination einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I mit einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel II und Formulieren dieser Kombination von wirksamen Komponenten gegebenenfalls unter Zugabe von pharmazeutisch verträglichen Zusätzen zu einer geeigneten Dosierungsform.
Die neuen pharmazeutischen Zusammensetzungen enthalten beispielsweise 10 % bis 80 %, vorzugsweise 20 % bis 60 %, der Kombination an wirksamen Komponenten. Erfindungsgemäße pharmazeutische Zusammensetzungen werden in oralen Einheitsdosierungsformen formuliert, wie Dragees, Tabletten oder Kapseln. Diese werden in an sich bekannter Weise, beispielsweise mit Hilfe üblicher Misch-, Granulier-, Konfektionier-, Löse- oder Gefriertrocknungsverfahren, hergestellt. Beispielsweise können pharmazeutische Zubereitungen zur oralen Verabreichung durch Kombination des Wirkstoffes mit festen Trägern, gegebenenfalls Granulieren eines erhaltenen Gemisches und Verarbeiten des Gemisches oder Granulats, falls erwünscht oder erforderlich, nach Zusatz geeigneter Hilfsstoffe, unter Herstellung von Tabletten oder Drageekernen erhalten werden.
In einer bevorzugten Ausführungsform des Verfahrens werden wirksame Komponenten (I) und (II) entweder einzeln oder zusammen zu Teilchengrößen von etwa 10 µm bis etwa 400 µm, vorzugsweise 20 µm bis 200 µm, vermahlen. Mindestens 90 % der Kristalle der wirksamen Komponenten liegen in diesen Bereichen vor.
Teilchen dieser Größe werden durch übliche Zerkleinerungsverfahren erhalten, beispielsweise Vermahlen in einer Luftprallmühle, Kugelmühle oder Vibratormühle. Mikronisierung wird vorzugsweise durch an sich bekannte Verfahren bewirkt unter Verwendung eines Ultraschallzerkleinerungsgeräts, beispielsweise dem Branson Sonifier, wie beschrieben in J. Pharm. Sci. 53 (9), 1040 - 1045 (1965), oder durch Rühren einer Suspension mit einem Hochgeschwindigkeitsrührer, beispielsweise mit einem Rührer vom Homorex-Typ (vertrieben von Brogli & Co., Basel). In diesen bevorzugten Verfahren wird Mikronisierung bei etwa 500 bis 10000 U/Minute durch Lösen oder Suspendieren der Kombination von wirksamen Komponenten in einem organischen Lösungsmittel, beispielsweise Methanol, Ethanol oder Propylenglycol, und Fällen in mikrokristalliner Form bei ca. 0 bis 5ºC in Wasser oder wäßriger Salzlösung, beispielsweise 2 % Natriumchloridlösung, die zusätzlich ein Schutzkolloid, wie Gelatine oder einen Celluloseether, beispielsweise Methylcellulose oder Hydroxypropylmethylcellulose, in geringer Konzentration (0,1 - 1 %) enthält, und Filtrieren der erhaltenen gerührten Suspension bewirkt. Der Filterkuchen wird bei geringer Temperatur, beispielsweise ca. 0º - 5ºC, unter Vakuum (beispielsweise unterhalb 50 mbar, vorzugsweise bei 0,5 mbar), getrocknet. Das anschließende Trocknen kann bei ca. 50 bis 90ºC bewirkt werden.
Die so erhaltenen Kristalle werden dann zu Granulaten formuliert, vorzugsweise durch Naßgranulieren, das gemäß üblichen Verfahren ausgeführt wird.
Die pharmazeutische Zusammensetzung wird vorzugsweise durch Komprimieren einer körnchenförmigen Formulierung, die beispielsweise durch Sieben erhalten wird, und, falls erwünscht, durch Zerkleinern des Arzneistoffes mit oder ohne Exzipienten, Verdichten mit einem anderen Lösungsmittel, wie Ethanol oder Wasser, Entfernen des Lösungsmittels oder Trocknen mit oder ohne Zusatz von Schmiermitteln oder Gleitmitteln, wie Magnesiumstearat oder TWEEN, Zerkleinern der Körnchen und erneutes Sieben hergestellt.
Die Körnchen können zu Tablettenkernen in einer üblichen Tablettiermaschine, beispielsweise in eine EKC Korsch Exzenter-Tablettiermaschine, bei einem Druck von ca. 10 kN verdichtet werden. Überzug kann durch Anwenden einer wäßrigethanolischen Lösung, in der beispielsweise Polyethylenglycol und Saccharose gelöst oder dispergiert ist, bewirkt werden.
Drageekerne werden mit geeigneten, gegen Magensaft beständigen Überzügen versehen, wobei u. a. konzentrierte, Gummi arabicum, Talkum, Polyvinylpyrrolidon oder Polyethylenglycol enthaltende Zuckerlösungen verwendet werden. Färbemittel oder Pigmente können zu den Tabletten- oder Drageeüberzügen, beispielsweise zu Kennzeichnungszwecken oder zur Kennzeichnung unterschiedlicher Dosierungen des Wirkstoffes, zugegeben werden.
Weitere oral verabreichbare pharmazeutische Zusammensetzungen sind trocken gefüllte Kapseln, die aus Gelatine bestehen, und auch weich verschlossene Kapseln, die aus Gelatine und einem Weichmacher bestehen, wie Glycerin oder Sorbit. Die trocken gefüllten Kapseln können die wirksamen Komponenten in Form eines Granulats, beispielsweise in Anmischung mit Füllstoffen, wie Laktose, Bindemitteln, beispielsweise Stärke, und/oder Gleitmitteln, wie Talkum oder Magnesiumstearat, und gegebenenfalls Stabilisatoren enthalten. In weichen Kapseln ist der Wirkstoff vorzugsweise in geeigneten Flüssigkeiten gelöst oder suspendiert, wie fetten Ölen, Paraffinöl oder flüssigen Polyethylenglycolen, zu denen Stabilisatoren ebenfalls gegeben werden können.
Die nachstehenden Beispiele erläutern die vorstehend beschriebene Erfindung; sie sind jedoch nicht vorgesehen, den Schutzbereich der Erfindung in irgendeiner Weise zu beschränken.

Beispiel 1

Bestimmung der Dosierungsverhältnisse für die Kombination von Benflumetol mit Artemether:
Albinomäuse wurden mit Plasinodium berghei als Teststamm infiziert. Unter Verwendung eines Versuchsplans (orthogonal design) wurden parallele Kontrastexperimente für verschiedene Dosierungen der Kombination gemäß dem "4-Tage-Inhibierungs-Test"-Verfahren ausgeführt. ED&sub5;&sub0; oder ED&sub9;&sub0; und die synergistischen Indizes wurden gemäß einer linearen Regressionsgleichung berechnet.
Index des synergismus = ED&sub5;&sub0; oder ED&sub9;&sub0; für die einzelne Komponente/ED&sub5;&sub0; oder ED&sub9;&sub0; für die Komponente in Kombination
Unter Verwendung dieser Gleichung wird das optimale Gewichtsverhältnis der Arzneistoffe in dieser Kombination gegen Malaria bei der Maus mit 2:0,75 berechnet (der Synergismus-Index für ED&sub9;&sub0; > 6). Auf Grundlage der Experimente bei muriner Malaria wurden Experimente beim Rhesusaffen mit Plasmodium Knowlesi ausgeführt und das Ergebnis zeigte, daß das optimale Gewichtsverhältnis der Arzneistoffe in dieser Kombination gegen Malaria 3 bis 6 Teile Benflumetol für jeden Teil Artemether ist.

Beispiel 2

Der Synergismus zwischen den Komponenten Benflumetol und Artemether wird gemäß dem Verfahren von Peters ermittelt: Am. Trop. Med. Parasitol, Band 62, Seiten 488 - 492 (1968). Die Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle angeführt.
Die blutschizontozidale Wirkung von Artemether (A) und Benflumetol (B), oral in verschiedenen Anteilen an mit P. Berghei K&sub1;&sub7;&sub3; N-Stamm infizierte Mäuse verabreicht im "4-Tage- Test" gemäß Peters (Mittelwerte aus drei Versuchen): Arzneistoff und Dosierung (mg/kg/Tag) Wirksame Dosis der ersten Komponenten (mg/kg/Tag) Benflumetol (B) Artemether (A)
Alle Punkte, die den ED&sub5;&sub0;- und ED&sub9;&sub0;-Wert der in der Kombination vorliegenden Komponenten A und B wiedergeben, sind unterhalb der Addition angeordnet und weisen Synergismus zwischen den einzelnen Komponenten aus.

Beispiel 3

Die Tötungsrate für Protozoen wurde in-vivo bestimmt. Wenn die Protozoen-Konzentration im Blut der Maus eine hohe Dichte erreicht hatte, wurde intragastrisch eine Mehrfachdosierung äquivalent, d.h. 20 x ED&sub9;&sub0; gegeben. Der Grad der Abnahme der Protozoen im Blut wurde ununterbrochen nach der Verabreichung beobachtet. Die Zeitspanne, die für die 90 %ige Abnahme der Protozoen erforderlich ist, betrug 49,7 Stunden für die Kombination und 64,3 Stunden für Benflumetol allein. Artemether allein konnte nicht mehr als 90 % Protozoen töten, bevor ihre Anzahl erneut anstieg.

Beispiel 4

Klinische Ermittlung des besten Verhältnisses der Kombination zwischen Artemether und Benflumetol in Kombination:
Auf Grundlage des Ergebnisses des Tierexperiments mit Hinweis auf die klinischen Wirkungsdosierungen von Artemether und Benflumetol allein wurde das optimale Verhältnis der Dosierungskombination dieser zwei Komponenten mit 1:4 bis 1:6 berechnet. Wenn beispielsweise 1:6 gewählt wird, würden die Dosierungen von Artemether und Benflumetol in jeder Tablette 20 mg bzw. 120 mg sein. Zwei Gruppen von Patienten, denen die Kombination mit 1:5- und 1:6-Verhältnissen verabreicht wurde, wurden für klinische Parallelvergleichstests ausgewählt. In beiden Gruppen wurde das "3-Tage-und-4-Dosierungen"-Behandlungsschema übernommen, d.h. 4 Tabletten wurden in der ersten Zeit verabreicht und dann 4 Tabletten jeweils für drei weitere Zeiträume mit 8-, 24- und 48-Stunden-Intervallen. Das ergibt insgesamt 16 Tabletten für jeden Erwachsenen. 40 Fälle von perniziöser Malaria wurden ausgewählt und willkürlich in zwei Gruppen aufgeteilt. Nachstehende Parameter wurden in diesen zwei Gruppen nach Verabreichung ermittelt: 1) Grad der Abnahme an Protozoen bei 24 Stunden; 2) mittlere Zeit für das Verschwinden der Protozoen; 3) mittlere Zeit für das Nachlassen des Fiebers; 4) 28-Tage-Heilungsgrad.
Die Ergebnisse zeigten, daß 24 Stunden nach Verabreichung der Grad der Abnahme der Protozoen in diesen Gruppen 96,3 % bzw. 94,2 % betrug, die Zeiträume für das Verschwinden der Protozoen 34,8 Stunden bzw. 36,0 Stunden betrugen und die mittleren Zeiträume für das Nachlassen des Fiebers 23,2 Stunden bzw. 22,4 Stunden betrugen. Die Rückfallrate am 28. Tag in der 1:5-Gruppe betrug jedoch 20 %, verglichen mit 0 % in der 1:6-Gruppe (d.h. alle Patienten in dieser Gruppe waren geheilt). Diese Ergebnisse weisen aus, daß das optimale Verhältnis der Kombination von Artemether und Benflumetol in der Kombination zur Behandlung von Malaria beim Menschen 1:6 beträgt.

Beisoiel 5

Toxikologische Bewertung der Kombination Artemether-Benflumetol:
Das Verhältnis der Kombination von 1:6 für Artemether und Benflumetol wurde in diesen Versuchen verwendet. Die mittlere letale Dosis (LD50) für Albinomäuse wurde in Akut- Toxizitätsversuchen mit 4 555 mg/kg für orale Verabreichung gefunden. Auf Grundlage von Bemessungskriterien für die chemische Toxizität ist diese komplexe Beschreibung ein sehr geringer Toxizitätsgrad. Toxizitätsversuche für 14 Tage wurden bei Ratten und Beagles ausgeführt, die in Hoch-, Mittel- und Geringdosierungsgruppen aufgeteilt wurden. Die Arzneistoffe wurden per os jeden Tag nacheinander 14 Tage verabreicht. Appetit und Körpergewicht wurden beobachtet, hämatologische und biologische Parameter ermittelt und pathologische Untersuchungen an den hauptsächlichen Eingeweiden und Zielorganen für die Arzneistoffe ausgeführt. Die Ergebnisse zeigten, daß die grundsätzlichen Sicherheitsdosierungen bei Ratten äquivalent der 40- bis 50fachen an Menschen verabreichten Dosierung waren. Obwohl einige abnorme Änderungen bei Zielorganen (Leber und Niere) bei den Gruppen mit höherer Dosierung gefunden wurden, kehrten sie am 28. Tag nach der Verabreichung der letzten Dosierung zur Normalität zurück. Diese Ergebnisse weisen aus, daß die Toxizität der synergistischen Kombination gering und der Sicherheitsbereich ohne irreversible toxische Reaktionen breit ist.

Beispiel 6

Ermittlung der therapeutischen Wirkung einzelner Komponenten, verglichen mit der synergistischen Kombination:
Zwei Patientengruppen wurden für die orale Verabreichung und das 3-Tage-und-4-Dosis-Behandlungsschema ausgewählt. Es waren 20 Patienten mit perniziöser Malaria in jeder Gruppe. Die therapeutische Wirkung der Kombination und Artemether und Benflumetol einzeln wurde getrennt verglichen. Die Dosierungen beider Arzneistoffe bei der einzelnen Verabreichung waren etwa die gleichen wie bei der komplexen Verschreibung. Die ermittelten Parameter waren: 1) Grad der Abnahme der Protozoen 24 Stunden nach Verabreichung; 2) mittlere Zeit für das Verschwinden der Protozoen; 3) mittlere Zeit für das Nachlassen des Fiebers und 4) Heilungsgrad am 28. Tag.
Der Grad der Abnahme bei Protozoen 24 Stunden nach Verabreichung wurde mit 97 %, 95,1% bzw. 74,5 % für die Kombination, Artemether einzeln bzw. Benflumetol einzeln ermittelt. Die Zeitpunkte für das Verschwinden der Protozoen betrugen 35,6 Stunden, 38,7 Stunden bzw. 68,4 Stunden. Die mittlere Zeit für das Nachlassen des Fiebers betrug 23,8 Stunden, 19,7 Stunden und 40 Stunden und der 28-Tage-Heilungsgrad betrug 95 %, 45 % bzw. 65 %. Dieses experimentelle therapeutische Schema weist deutlich die Überlegenheit der therapeutischen Wirkung der Kombination gegenüber den einzelnen Arzneistoffen aus.

Beisoiel 7

Zusätzliche klinische Versuche für die Kombination Artemether/Benflumetol:
a) Mit den 3-Tage-und-4-Dosierschemata und oraler Verabreichung wurden 400 Patienten mit perniziöser Malaria behandelt. Die hauptsächlich beobachteten Parameter waren: 1) mittlerer Zeitraum für das Verschwinden der Protozoen (die Ergebnisse betrugen 23,2 - 41,0); 2) mittlerer Zeitraum für das Nachlassen des Fiebers (20,4 - 25,7); 3) 28-Tage-Heilungsgrad (im Durchschnitt 96,8 %).
b) Die Kombinationszusammensetzung wurde auch nach dem 3-Tage-und-4-Dosierungen-Behandlungsschema, d.h. 4 Tabletten zuerst und dann 4 Tabletten zu jedem Zeitpunkt bei 8, 24 und 48 Stunden, mit insgesamt 16 Tabletten für Erwachsene, verabreicht. 48 Plasmodium vivax-Malariapatienten wurden mit der Kombination behandelt. Die beobachteten Parameter waren: 1) mittlere Zeit für das Verschwinden der Protozoen (die Ergebnisse waren 22,8 ± 9,5 Stunden); 2) mittlere Zeit für das Nachlassen des Fiebers (13,6 ± 6,9 Stunden); 3) 28-Tage-Heilungsrate (91,67 %). Diese Ergebnisse zeigten die deutliche therapeutische Wirkung der Kombination gegen Plasmodium vivax-Malaria.

Beispiel 8

Herstellung von Tabletten
Benflumetol 120 mg
Artemether 20 mg
Maisstärke 100 mg
Dextrin 40 mg
Tween -80 0,6 mg
15 % Maisstärkepaste "ausreichend"
Magnesiumstearat 3 mg
Artemether-Kristalle wurden durch ein 100 Mesh großes Sieb passiert. Benflumetol-Kristalle wurden durch ein 60 Mesh großes Sieb passiert und mit dem Artemether-Feststoff, Stärke und Dextrin vermischt. Dieses Gemisch wurde dreimal durch ein 40 Mesh großes Sieb passiert. Tween -80 wurde zu der Stärkepaste gegeben, die mit der vorstehenden Formulierung gemischt wurde. Dieses Gemisch wurde durch Naßgranulieren granuliert, durch ein 40 Mesh Sieb passiert und unter vermindertem Druck bei 50 - 60ºC getrocknet. Magnesiumstearat wurde zugegeben und die Tabletten gepreßt.

Claims

1. Oral verabreichbare, pharmazeutische Zusammensetzung, geeignet zur synergistischen Wirkung der wirksamen Komponenten gegen Malaria, umfassend eine synergistisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel:

mit einer synergistisch wirksamen Menge mindestens einer Verbindung der Formel

worin einer der Reste R und R&sub1; einzeln Methoxy und der andere Wasserstoff wiedergibt und ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

2. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, umfassend 1 bis 10 Gewichtsmengen Benflumetol (1), kombiniert mit einer Gewichtsmenge Artemether (II).

3. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, umfassend 3 bis 7 Gewichtsmengen Benflumetol (I), kombiniert mit einer Gewichtsmenge Artemether (II).

4. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, umfassend 5 bis 6 Gewichtsmengen Benflumetol (I), kombiniert mit einer Gewichtsmenge Artemether (II).

5. Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die zur synergistischen Wirkung der wirksamen Komponenten gegen Malaria geeignet ist, umfassend das Kombinieren einer synergistisch wirksamen Menge einer Verbindung (I) nach Anspruch 1 mit einer synergistisch wirksamen Menge mindestens einer Verbindung der Formel (II), oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes davon, und Formulieren dieser Kombination von wirksamen Komponenten, gegebenenfalls unter Zugabe von pharmazeutisch verträglichen Zusätzen, zu einer geeigneten Dosierungsform.

6. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1 zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung des menschlichen oder tierischen Körpers.

7. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1 zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung des menschlichen Körpers gegen Malaria.