DE472221C - Verfahren zur Gewinnung der toxischen Komponenten aus den Aufschluessen von Bakterien - Google Patents

Description

• Verfahren zur Gewinnung der toxischen Komponenten aus den Aufschlüssen von Bakterien in reinem Zustande Es ist nachgewiesen worden, daß die Filtrate der nach den Patentschriften 254769 und 270 ozo hexgestellten Aufschlüsse von Bazillen, insbesondere Tuberkelbazillen, eine to-zische Komponente enthalten, deren Iso'ierung in einem für besondere Zwecke erforderlichen hinlänglich reinen Zustande bisher noch nicht gelungen war.
• Es ist nun gefunden worden, daß dieser Zweck dadurch erreicht wird, daß man die Filtrate mit vorher auszumittelnden Mengen von Trichloressigsäure oder vorzugsweise Tannin versetzt und die entstandenen Niederschläge, nachdem sie sich genügend zu Flokhen zusammengezogen haben, durch Filtration oder Zentrifugieren abtrennt und sie je nach dem Fällungsmittel mit ganz wenig Aceton oder Wasser auswäscht. Hierauf löst man sie in reinem bzw. schwach alkalischem Wasser. Beispiele i. 9o Teile Filtrat vom Milchsäureaufschluß der Tuberkelbazillen nach Patentschrift 254 769 werden mit 1o Teilen zoprozentiger Tanninlösung gefällt. Der Niederschlag wird abfiltriert oder abzentrifugiert, zunächst mit etwas schwachem Tanninwasser und dann reinem Wasser abgewaschen und mit ganz schwacher Sodalösung im Verhältnis von i : zoo in Lösung gebracht. Diese 1prozentige Lösung hat mindestens die toxische Stärke des Alttuberkulins Kochii.
• 2. Ein abgemessenes Volumen des Filtrats vom Milchsäureaufschluß wird vorsichtig mit Trichloressigsäure (am besten in sehr starker Lösung) versetzt, bis der Gesamtgehalt an dieser Säure 1o °j. beträgt. Man wartet hierauf nur gerade den Beginn der Flockenbildung ab, schleudert sofort, wäscht mit wenig Aceton aus und läßt den Niederschlag trokken werden. Man zerreibt im Achatmörser mit ganz wenig Wasser und füllt auf 6o ccm für je i g Trockensubstanz auf. Durch Zentrifugieren wird eine geringe Menge ungelöster Substanz entfernt und der klare Abguß mit q.o ccm eines Gemenges von reinem Glycerin, welches mit z,5 'ja Phenol versetzt ist, auf zoo ccm aufgefüllt.
• 3. Eine größere Anzahl von Agarkulturen des Bact. col. wird nach i bis :2tägigem Wachstum mit sterilem destilliertem Wasser abgespült und .aufgeschwemmt. Die erhaltene Aufschwemmung (auf Trockengewicht bezogen etwa i : iooo) wird mit Sodalösung eben schwach alkalisch gemacht, dann auf dem Wasserbade bei nicht zu hoher Temperatur auf den zehnten Teil eingedampft, die Flüssigkeit vom Rückstand getrennt, schwach angesäuert (z. B. mit Milchsäure), etwaiger Ausfall abzentrifugiert und die verbleibende klare Flüssigkeit mit Tannin in der üblichen Weise gefällt.

Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH Venfahren .zur Gewinnung der toxischen Komponenten aus den Aufschlüssen von Bakterien, dadurch gekennzeichnet, daß man die Filtrate der Aufschlüsse mit Trichtoressigsäure oder Tannin versetzt und die entstandenen Niederschläge von der Lösung trennt, worauf die Niederschläge in Lösung gebracht werden.