DE3406419A1 - Verfahren zur herstellung von lyophilisierten adsorbierten kombinierten vaccinen - Google Patents

Verfahren zur herstellung von lyophilisierten adsorbierten kombinierten vaccinen

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DE3406419A1 DE19843406419 DE3406419A DE3406419A1 DE 3406419 A1 DE3406419 A1 DE 3406419A1 DE 19843406419 DE19843406419 DE 19843406419 DE 3406419 A DE3406419 A DE 3406419A DE 3406419 A1 DE3406419 A1 DE 3406419A1
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Description

DR.STEPHAN G. BESZgDES PATENTANWALT
VNR: 101265 ^
ZUGELASSENER VERTRETER AUCH BEIM EUROPÄISCHEN PATENTAMT
PROFESSIONAL REPRESENTATIVE ALSO BEFORE THE EUROPEAN PATENT OFFICE
DACHAU BEI MÖNCHEN
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Girozentrale, München)
P 1 910
Patentansprüche und Beschreibung
zur Patentanmeldung
HUMAN OLTOANYAGTERMEL& ES KUTATO INTEZET
Budapest, Ungarn
betreffend
Verfahren zur Herstellung von lyophilisierten adsorbierten kombinierten Vaccinen
- 3 Beschreibung
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von lyophilisierten adsorbierten kombinierten Vaccinen.
Die kombinierten Vaccinen, zum Beispiel die Diphtherie-Tetanus-Pertussis-Vaccine (Di-Te-Pe-Vaccine), spielen im breiten Schutzimpfungsprogramm der Weltorganisation für Gesundheitswesen eine wichtige Rolle. Das Ziel des Programmes ist es, den gefährlichsten Infektionskrankheiten im Kindesalter durch Schutzimpfungen vorzubeugen. Die Wirksamkeit der gegenwärtig handelsüblichen Vaccinen sinkt jedoch im Laufe der Lagerung. Wegen der Wärmeempfindlichkeit des Pertussis- -Bestandteiles können die Diphtherie-Tetanus-Pertussis- -Vaccinen insbesondere unter tropischen Bedingungen nur sehr kurze Zeit gelagert werden, ihre Stabilität beträgt nur 1 bis 2 Wochen.
In den vergangenen Jahren wurde die Stabilität der Pertussis- und Diphtherie-Tetanus-Pertussis-Vaccinen eingehend untersucht (Csizer Z., Jo6 I., Zsidai J., Hegedüs L.: J. Biol. Standard ± [1973], 347 bis 355; Csizer Z., Zsidai J., Jo6 I.: Acta Microbiol. Acad. Sei. Hung., 22 [1975], 83 bis 93;
Csizer Z., Zsidai J., Jo6 I.: Acta Microbiol. Acad. Sei. Hung., 25_ [1978], 1 bis 9). In den Jahren 1960 bis 1973 wurden 400 aktive Mäuse Schutzuntersuchung en mit 53 Pertussis-Stammsuspensionsgemischen durchgeführt. Auf Grund der statistischen Analyse der Untersuchungen wurde festgestellt, daß beim Lagern bei Temperaturen von 5 bis 1O0C die Wirksamkeit der Suspensionen nach 8 Jahren unter den Wert von 4 internationalen Einheiten (Einmalige Humanimmunisierungsdosis) sank. In 1968 bis 1974 wurden 207 aktive Mäußeschutzuntersuchungen mit
-Z1-
21 Diphtherie-Tetanus-Pertussis-Vaccinen vorgenommen. Die statistische Analyse der Untersuchungsergebnisse ergibt, daß die Wirksamkeit des Pertussis-Bestandteiles der Vaccinen bei einer Lagerung bei Temperaturen von 5 bis 1O0C nach 6 Jahren noch den internationalen und ungarischen Vorschriften entspricht {WHO Techn. Rep. Ser., 63J3 [19793, 37 bis 115; VI. Magyar Gyogyszerkönyv (Ungarisches Arzneibuch VI.) 1967^j. Auf 1 Humarimmunisisrungsdosis bezogen beträgt die jährliche durchschnittliche Wirkungsabnahme der Pertussis-Stammsuspensionsgemische 1,01 internationale Einheit und die des Pertussis-Bestandteiles der Diphtherie- -Tetanus-Pertussis-Vaccinen 0,35 internationale Einheit. Bei einer Lagerung bei Temperaturen von 5 bis 100C kann also die Wirksamkeit entsprechend bewahrt werden. Bei der Lagerung bei einer Temperatur von 37 C sinkt aber die Wirksamkeit der Vaccinen schon nach 2 Wochen bedeutend, unter tropischen Bedingungen ist jedoch selbst diese Lagerungstemperatur schwer sicherzustellen.
Es ist auch bekannt, daß die optimale Adsorption der Antigene bei einem pH-Wert, der dem isoelektrischen Punkt entspricht, erfolgt. Bei einem pH-Wert, der viel höher als der isoelektrische Punkt ist, werden die Antigene eluiert.
Ferner ist es bekannt, daß der gemeinsame pH-Wert von kombinierten Antigenlösungen beim Adsorbieren nicht niedriger als der für das Antigen mit dem niedrigsten isoelektrischen Punkt charakteristische isoelektrische Punkt sein darf.
Bisher ist es jedoch nicht gelungen, Tetanus-, Diphtherie- und Pertussis- sowie gegebenenfalls Typhus- -Antigene in Kombination selbst unter verschiedenen klimatischen Bedingungen ausreichend lange zu lagern, insbesondere weil ein erfolgreiches Lyophilisieren nicht möglich war, vor allem weil die erhaltenen Gemische schon zum Lyophilisieren auf die für die Anwendung erforderlichen neutralen pH-Werte von 6,8 bis 7 gebracht wurden, bei welchem schon eine bedeutende Desorption und Fällung eintritt.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Herstellung von kombinierten Vaccinen, welche selbst unter verschiedenen klimatischen Bedingungen entsprechend lange gelagert werden können, zu schaffen.
Das Obige wurde überraschenderweise durch die Erfindung erreicht.
Die Erfindung beruht auf der überraschenden Feststellung, daß den obigen Anforderungen entsprechende kombinierte Vaccinen guter Qualität hergestellt werden können, wenn in der Lösung, deren pH-Wert dem isoelektrischen Punkt der Antigene entsprechend nahe ist, entsprechend konzentrierte Antigene verwendet und diese von den Antigenen gleich konzentrierten Trägern adsorbieren gelassen werden und das Lyophilisieren bei pH-Werten, bei denen noch keine bedeutende Desorption eintritt, durchgeführt wird. Als solche erwiesen ,sich pH-Werte von 5 bis 6. Das Herrichten beziehungsweise Rekonstituieren der lyophilisierten Vaccine kann dann bei der Anwendung durch einen Puffer erfolgen, durch welchen der neutrale pH-Wert des Impfstoffes eingestellt wird.
Gegenstand der Erfindung ist daher ein Verfahren zur Herstellung von lyophilisierten kombinierten Vaccinen durch Adsorbierenlassen von Tetanus-, Diphtherie- und Pertussis=» sowie gegebenenfalls Typhus-Antigenen von unlöslichen Trägern bei pH-Werten von 3 bis 6, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß zum Adsorbierenlassen als Tetanus-, Diphtherie- und Pertussis- sowie gegebenenfalls Typhus-Antigene solche, welche auf eine Konzentration von 5 bis 15 Dosen/3 ml eingeengt sind, und als Träger solche, welche gleich konzentriert sind, verwendet werden und das Lyophilisieren dieses Gemisches nach dem Einstellen des pH-Wertes auf 5 bis 6 mit einem in der Lyophilisierungstechnik üblichen Träger beziehungsweise Vehikel durchgeführt wird.
Die Adsorptionsverhältnisse des Tetanustoxoides in Abhängigkeit vom pH-Wert sind in der folgenden Tabelle veranschaulicht.
Tabelle 1
pH-Wert Alumini\
nach dem
Verfahren
nach
Holt
hergestellt		 Adsorptio
imphosphat
nach dem
Verfahren
• nach
Srickson
hergestellt		 η
Aluminiumhydroxyd
3,0 100 100 nicht meßbar
3,5 100 95 nicht meßbar
4,0 90 bis 100 80 bis 85 nicht meßbar
4,5 85 bis 90 60 bis 70 nicht meßbar
5,0 80 bis 85 60 bis 70 100
5,5 80 bis 85 60 bis 70 100
6,0 80 bis 85 50 bis 60 100
7,0 20 10 100
7,5 keine Adsorption 85
8,0 keine Adsorption 70
8,5 keine Adsorption 70
Bei den Versuchen der obigen Tabelle 1 wurden Je 1 Milliliter eine 1 mg Al+ -Ionen entsprechende Menge Träger und 10 BE (Bindungseinheiten) Tetanustoxoid verwendet. Die Angaben in der obigen Tabelle 1 drücken den prozentualen Anteil der Adsorption, bezogen auf das verwendete Tetanustoxoid, aus.
Beim erfindungsgemäßen Verfahren ist es auch für das Lyophilisieren verwirklicht, daß der gemeinsame pH-Wert den pH-Wert, bei dem mehr als 15 Gew.-% der Antigene, die bei dnem dem isoelektrischen Punkt entsprechenden pH-Wert gebunden wurden, eluiert werden, nicht übersteigt, verwirklicht, wodurch erst das brauchbare Lyophilisieren der Kombination von Tetanus-, Diphtherie- und Pertussis- sowie gegebenenfalls Typhus- -Antigenen ermöglicht wird, was nach dem Stand der Technik nicht gelang.
Zum Einstellen des pH-Wertes wird vorzugsweise eine Natriumhydroxydlösung beziehungsweise Salzsäure verwendet.
Vorzugsweise werden Je Dosis 20 bis 35 Lf Diphtherietoxoid, 10 bis 20 I0E Bordetella pertussis- -Zellensuspension, 5 bis 15 BE Tetanustoxoid und
gegebenenfalls Salmonella typhi-Zellensuspension mit
β 9 einer Zellenanzahl von 10 bis 10^ verwendet.
Es ist auch bevorzugt, als pH-Werte, auf welche das Gemisch vor dem Lyophilisieren eingestellt wird, 5,6 bis 5,»8 anzuwenden.
• · 9 · · ι
Vorteilhaft wird als unlöslicher Träger Aluminium-Phosphat- oder Aluminiumhydroxydgel verwendet. Zweckmäßig wird dessen Menge in Vorversuchen bestimmt.
Im Laufe von Versuchen wurden verschiedene Mengen des Trägers den Antigenlösungen gleicher Konzentration zugesetzt und die Inmiunisierungsfähigksit der erhaltenen Modellvaccinen wurde gemessen.
So wurden zum Beispiel bei der Untersuchung der Immunwirkung-des Tetanustoxoids an Meerschweinchen, bei welcher Aluminiumhydroxyd als Träger diente, die in der folgenden Tabelle 2 zusammengestellten Ergebnisse erzielt.
Tabelle 2
Aluminiumhydroxyd
in
mg/Dosis		 Durch«cbaitt c
14-ten Tag
nach der		 .ei Tetanusant
am
28-sten Tag
1-maligen Immi		 itoxIn-Titers
42-sten Tag
anisierung
0,625 0,4 0,8 r,2
1,25 0,8 1,9 2,6
2,5 0,8 5,0 6,0
5,0 1,5 8,0 8,0
10,0 0,5 4,0 3,0
20,0 0,2 0,5 1,0
- 10 -
Nach einer mathematischen Auswertung der erhaltenen Ergebnisse ergaben sich als optimale Aluminiumhydroxydmengen die folgenden Werte für die in der obigen Tabelle 2 angegebenen Zeiten in deren Reihenfolge: 3,1 mg, 3,06 mg beziehungsweise 3,44 mg.
Bei einer 5 BE Tetanustoxoid und 5 Lf (limes flocculans) Diphtherietoxoid enthaltenden Modellvaccinen wurden die in der folgenden Tabelle 3 zusammengestellten Ergebnisse erhalten.
Tabelle 3
Alur.iniurihydroxyd
in
mg/Dosis		 Durcha±nitt des
14-ten Tag
nach der		 Diphtherie antit ox
am
2S-3ten Tag
i-maligsn Irrjn		 :in -Titers
^2-sten Za-
unisierur.-j
0,625 0,03 0,3 0,4
1,25 0,12 0,8 0,8
2,5 0,2 1,6 1,6
5,0 0,2 1,8 2,0
10,0 0,04 0,3 0,6
- 11 -
Eine mathematische Auswertung der erhaltenen Ergebnisse ergab als optimale Aluminiumhydroxydmengen die folgenden Werte für die in der obigen Tabelle 3 angegebenen Zeiten in deren Reihenfolge: 2,72 mg, 2,78 mg beziehungsweise 3,0 mg.
Ähnliche Versuche wurden auch einen Aluminiumphosphatträger betreffend mit analogen Ergebnissen durchgeführt.
Die Ergebnisse der -Versuche zusammengefaßt ist zu sagen, daß die Menge der beiden Träger vorteilhaft von 1,25 bis 5,0 mg, insbesondere 1,75 bis 3»5 mg, je Dosis beträgt.
Nach einer bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens wird daher das Aluminiumphosphat- oder Aluminiumhydroxydgel in Mengen von 1,25 bis 5»0 mg, insbesondere 1,75 bis 3»5 mg, je Dosis verwendet.
Vorzugsweise werden im erfindungsgemäßen Verfahren die einzelnen konzentrierten Antigene in gesonderten Lösungen von einem den Antigenen gleich konzentrierten Träger bei einem für die einzelnen Antigene charakteristischen optimalen pH-Wert adsorbieren gelassen. So wird vorzugsweise das Tetanustoxoid bei einem pH-Wert um 3, das Diphtherietoxoid bei einem pH-Wert um 4 und das Pertussis- beziehungsweise Typhusantigen bei einem pH-Wert von 5,8 bis 6 vom Träger adsorbieren gelassen. Es kann aber auch so vorgegangen werden, daß das Adsorbieren in der vereinigten Lösung der Antigene vorgenommen wird.
- 12 -
- 12 -
Bekanntlich ändern sich die physikalisch-chemischen Eigenschaften des Aluminiumphosphat- beziehungsweise Aluminiumhydrojxydgels beim Lyophilisieren. Die Teilchengröße nimnjt bedeutend zu und die Adsorptionsfähigkeit sinkt. Mittels eines entsprechenden Trägers beziehungsweise Vehikels können die physikalisch-chemischen Eigenschaften des Gels jedoch bewahrt werden.
Geeignete Träger beziehungsweise Vehikel sind zum Beispiel Eiwei'ße, Polypeptide, Polysaccharide und andere synthetische Schutzkolloide. Die wichtigste Anforderung an den verwendeten Träger beziehungsweise an das verwendete Vehikel ist, daß es chemisch, immunologisch und pharmakologisch inert und ferner nicht toxisch ist.
Auch das entsprechend konzentrierte adsorbierte Antigen selbst übt, da es ein Eiweiß ist, eine bedeutende Schutzwirkung aus. Bei eigenen Versuchen wurde beobachtet, daß die Antigenkonzentration ausreichend ist, wenn 5 Dosen, insbesondere 10 Dosen, Vaccine in 3 ml Gesamtvolumen gelöst sind. Außerdem ist jedoch noch ein weiterer Träger beziehungsweise ein weiteres Vehikel erforderlich. Die beiden Wirkungen zusammen sichern einen ausreichenden Schutz beim Lyophilisieren. Bei den Versuchen erwies sich dafür Dextran mit einem Molekulargewicht von 40 000 beziehungsweise eine Kombination von Dextran und anderen Polysacchariden am geeignetsten.
Die physikalisch-chemischen Eigenschaften des für das Lyophilisieren verwendeten Trägerstoffes beziehungsweise Vehikels können durch die Sedimentiergeschwindigkeit nach dem auf das Lyophilisieren folgenden Her-
- 13 - '
richten beziehungsweise Rekonstituieren gut charakterisiert werden. In der folgenden Tabelle 4 sind die Ergebnisse der Versuche, welche die auf die physikalisch-chemischen Eigenschaften des Aluminiumphosphatträgers ausgeübte gemeinsame Wirkung aus Antigeneiweißes und Dextranes beim Lyophilisieren betreffen, zusammengestellt.
- 14 Tabelle 4
Eiweißmenge
in
mg/ml		 Dextran
in		 15 Minuten |
vor dem Lyop		 Sedime
i
m
30 Minuten
hilisieren		 ntation
η
m
5 Minuten
nach dem Lye		 30 Minuten
iphilisieren		 V
O 0 3 14 sandartig sandartig
0,2 0 3 14 s and artig1 sandartig
0,8 0 3 15 sandartig sandartig
3,2 0 4 13 sandartig sandartig
13,0 0 4 10 mehrphasig mehrphasig
50,0 0 1 8 50 100
0 1 4 15 sandartig sandartig
- 15
- 15 Fortsetzung der Tabelle 4
Eiweißmenge Dextran Sedimentation 15 Minuten ^O Minuten 14 5 Minuten | 30 Minuten mehrphasiger - 16 -
in in j vor dem Lyophi.Iisieren nach dem LyophiIisieren Niederschlag
mg/ml Gew.-?6 .η mehrphasiger mit sandarfci^em
mm Niederschlag Aggregieren
3 15 mit saidartigem mehrphasiger
Aggregieren Niederschlag
mehrphasiger mit sandartigem
0,2 1 ^ /. Niederschlag Aggregieren
3 14 mit sandartigem mehrphasiger
Aggregieren Niederschlag
15 mehrphasiger mit sardartigan
0,4 1 Niederschlag Aggregieren
3 mit sandartdgem homogen
Aggregieren
3 100
0,8 1
1,6 1
Dextran
in
Gew.-96		 - 16 -
Fort set 7Ai no; der Tabelle		 Sedime
i
π
30 Minuten
h L Lisieren		 4 .. 30 Minuten
>philisieren		 - 17 -
Eiweißmenge
in
mg/ml 		1 15 Minuten |
vor dem Lyop		 14 ntation
η
m
5 Minuten j
nach dem Lyr		 homogen
3,2 1 3- 14 100 homogen
. 6,4 1 3 5 100 100
13,0 1 2 6 45 45
26,0 1 2 4 25 23 '
50,0 2 1 14 10 72
0 2 4 14 28 65
0,2 2 3 14 30 66
0,4 2 3 13 30 60
0,8 3 20
- 17 Fortsetzung der Tabelle 4
Eiweißmenge
in
mg/ml		 Dextran
in
Gew.-% 		15 Minuten
vor dem Ly ο μ		 Sedime
i
η
30 Minuten
hi Ji sieren		 ntation
η
ra
5 Minuten
nach dem Ly		 30 Minuten
■>philisieren		 - 18 -
1,6 2 3 14 20 55
3,2 2 3 15 20 40
6,4 2 4 16 10 20
0 4 3 14 15 50
0,2 4 3 15 15 45
0,4 4 3 14 10 45
0,8 4 3 14 10 40
1,6 4 3 14 8 30
- 18 FortsotzuM·' der Tabelle
Eiweißmenge
in mg/ml
3,2
6,4
Dextran
in Gew.-% οcd Lmentation in mm
15 Minuten J 30 Mumien vor dem Lyophilinieren
. 5 Minuten
30 Minuten
nach dem Lynphilisieren
16
- 19 -
- 19 -
Dementsprechend werden der Lösung der Antigene vorteilhaft 0,5 bis 10 Gew.~%, vorzugsweise 2 bis 10 Gew.-%, Träger beziehungsweise Vehikel sowie ferner als Konservierungsmittel 0,01 Gew.-% Natriumäthylmercurithiosalicylat [Thiomersal] zugesetzt. ZweckmäPig wird das so hergestellte Gemisch in Ampullen abgefüllt und in der Weise lyophilisiert, daß die Temperatur des Materiales am Anfang -300C, vorteilhaft -350C, nicht übersteigt und in der zweiten Phase des Lyophilisierens seine Temperatur auf +20 bis +350C, insbesondere +30 bis +35°"C, gehalten und der gewünschte Feuchtigkeitsgehalt unter 3 Gew.-% gewährleistet wird.
Bei der Anwendung kann die lyophilisierte Vaccine mit einer physiologischen Kochsalzlösung, die mit einem Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von 6,8 bis 7 gepuffert ist, auf die Anwendungskonzentration verdünnt werden.
Ein wesentlicher Vorteil des erfindungsgemäßen Verfahrens besteht darin, daß die so hergestellten lyophilisierten adsorbierten kombinierten Vaccinen ihre Wirksamkeit wesentlich länger bewahren als die gegenwärtig handelsüblichen Vaccinen. Die nach dem erfindurgsgemäßen Verfahren hergestellten Diphtherie-Tetanus- -Pertussis-Vaccinen [Di-Te-Pe-Vaccinen] können nach eigenen Versuchen bei einer Temperatur von 560C mindestens 1 Woche und speziell im Falle von Dextran als Träger beziehungsweise Vehikel mindestens 4 Wochen und bei einer Temperatur von 370C mindestens 26 Wochen und speziell im Falle von Dextran als Träger beziehungsweise Vehikel mindestens 1 Jahr ohne Abnahme der Wirksamkeit gelagert werden.
- 20 -
Die Erfindung wird an Hand der folgenden Beispiele
näher erläutert.
Beispiele 1 bis 7
Es wurden Vaccinen der in der folgenden Tabelle 5 angegebenen Zusammensetzungen (die Kengen beziehen sich auf 10 Dosen in 3 ml Gesamtvolumen) hergestellt.
- 21 -
- 21 Tabelle 5
Verwendete Bestandteile 1 2 3 - Beispi
4		 el Nr.
5		 6 5 7
Diphtherietoxoid in Lf *) 250 250 250 - 250 300 300 300
Pertussis-Zellensuspension
in IOE *)		 150 150 150 150 ' 150 150 150
Tetanustoxoid in BE *) 50 50 100 100 100 100 100
Salmonella typhi in
Zellenanzahl		 - 5.1O9 — - —
Aluminiumphosphatgel in mg 30 30 30 30 30 30 30
Natriumäthylmercurithio-
salicylat [Thiomersal] in
Gew.-96		 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01
Rohrzucker in Gew.-96 9 9 9 - 9 - 4,5
Milchzucker in Gew.-% — - 9 — - -
Dextran in Gew.-% - - - - 2,5
- 22 -
*) Anmerkungen: Lf = Limes flocculans
IOE = internationale Opazitätseinheit
BE = Bindungseinheit
-23- .*
Die einzelnen Antigene wurden gesondert von AIumirnurr.phosphat adsorbieren gelassen, dem vereinig I on Gemisch wurden der Träger beziehungsweise das Vrbikfl und I.airiurr.äthyl rr-f rcurithiosalicyT at [Thii-r.r.-Tal j >-■■:;■·:- sei'.t, der pll-V.'ert dor L/'sung wurde ouf r-W.en zwischen 5 und. 5,8 0!",-/'.'3Lp]It, .'-ie vurde ""n Du; er: v:-n 3 ml in Ampullen gelullt und lyo-ihj 1 isiert. .u:L;r>;d der i-rzi en 10 Stunden des Lyjphi "i isic-rens +"H-Aq die Temperatur des Stoffes unter -35 C und denn 8 Siu.-id-n lang auf -35 bis +PO0C und schließlich 10 Stunden auf +20 bis +350C gehalten.
Das verwendete r>.-rlu.f.;sis-Ar;t.i.-en ist wie folgt Veschrieben hergestellt wor-den.
Es v.urden in <?-:!\(.-r Gärvorri chtun-r (Per·· entc-r) gezüchtete S1JS^ fnpic: ί η von rorclct^Tla t^rti^r-is durch saure Fällung konzentriert. Dic-re Fällung erfolgte mit einer η Salzsäure rei einem pK-V.'&rt um ^ u-d dann wurden die Suspensionen bei einer Tt-noeratur von U0C ^8 Stunden lang absetzen gelassen. Nach dem Dekantieren der überstehenden Flüssigkeit wurde der Niederschlag mit auf einen pH-Wert von 7,2 gepufferter isotonischer Hatriurch!oridlcsung erneut suspendiert, um eine Opazität beziehungsweise Undureh sichtigkeit der Suspension von 300 I0E/ml (internationale Opazitätseinheit) zu erhalten. Die Suspensionen wurden dann durch 0,02 Ga:.-5t Natriurr.äthylrcercurithio salicyl at [Thiomersal] und bei einer Temperatur von 5b C vorgenommene 30 Minuten dauernde Wärmebehandlung inaktiviert und bei 40C gelagert.
- 24 -
Untersuchung der V/är.r.etoIeranz der Vaccinen dieser Beispiele
Vaccine
Beispiel
Nr.		 Q r*Yäger
beziehungsweise
Vehikel		 Wirksamkeit des Fortuss
nach dem La,~e
bei
560C		 ' '
is-5esxandteiles
rii
37°C
5 5 Gew.-?b Rohrzucker 1 Woche j 26 Wochen s
6 L
2		 Gew.-% Dextran U Wochen 55 Wochen
7 ,5 Gew.-% Rohrzucker
+
,5 Gew.-6 Dextran		 1 Woche
I		 26 V/och en
- 25 -
Die Wirksamkeit des Pertussisbestandteiles eines hc-rk'"'.inl ich hergestellten Diph Iherie-Tetarius-Pertussi s -Iir.pfStoffes [Di-To-Pe-Impfstoffes] nahm hei einer Tcr-.'.'.porfjtur von Yf0C schon rsach 2 Wochen lrn^em Lagern T.f--:--u-l.f-:-.d ab.
Zusammenfassung

Claims (4)

  1. Patentansprüche
    Verfahren zur Herstellung von lyophilisierten kombinierten Vaccinen durch Adsorbierenlassen von Tetanus-, Diphtherie- und Pertussis- sowie gegebenenfalls Typhus-Antigenen von unlöslichen Trägern bei pH-Werten von 3 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß man zum Adsorbierenlassen als Tetanus-, Diphtherie- und Pertussis- sowie gegebenenfalls Typhus-Antigene solche, welche auf eine Konzentration von 5 bis 15 Dosen/3 ml eingeengt sind, und als Träger solche, welche gleich konzentriert sind, verwendet und das Lyophilisieren dieses Gemisches nach dem Einstellen des pH-Wertes auf 5 bis 6 mit einem in der Lyophilisierungstechnik üblichen Träger durchführt.
  2. 2.) Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als unlöslichen Träger Je Dosis 1,25 bis 5,0 mg, insbesondere 1,75 bis 3,5 mgjAluminiumphosphat- oder Aluminiumhydroxydgel verwendet.
  3. 3.) Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man je Dosis 20 bis 35 Lf Diphtherietoxoid, 10 bis 20 IOE Bordetella pertussis-Zellensuspension, 5 bis 15 BE Tetanustoxoid und gegebenenfalls Salmonella typhi-Zellensuspension mit einer
    8 Q Zellenanzahl von 10 bis 107 verwendet.
  4. 4.) Verfahren nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß man als pH-Werte, auf welche man das Gemisch vor dem Lyophilisieren einstellt, 5,6 bis 5,8 anwendet.
    Beschreibung
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