DE3304468A1 - Mikroorganismenzellen die s-adenosylmethionin enthalten verfahren zu deren herstellung - Google Patents

Mikroorganismenzellen die s-adenosylmethionin enthalten verfahren zu deren herstellung

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DE3304468A1 DE19833304468 DE3304468A DE3304468A1 DE 3304468 A1 DE3304468 A1 DE 3304468A1 DE 19833304468 DE19833304468 DE 19833304468 DE 3304468 A DE3304468 A DE 3304468A DE 3304468 A1 DE3304468 A1 DE 3304468A1
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Description

Die Erfindung betrifft Mikroorganismenzellen, welche S-Adenosylmethionin in hoher Konzentration und Adeninverwandte Substanzen und Ninhydrin-reaktive Substanzen nur in geringen Konzentrationen enthalten. Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung von S-Adenosylmethionin, gemäß dem S-Adenosylmethionin in hoher Reinheit aus solchen Mikroorganismenzellen mit guter Ausbeute nach einem einfachen Verfahren erhalten wird.
S-Adenosylmethionin (welches im folgenden als SAT-I abgekürzt wird) ist als Substanz bekannt, die therapeutische Wirkung bei Jecur-Adipsie, Lipämie, Arteriosklerose, etc. aufweist, und es besteht seit kurzem ein Bedarf, diese Substanz in großen Mengen herzustellen.
Ein industrielles Verfahren zur Herstellung von SAM besteht darin, daß man eine Hefe des Genus Saccharomyces in einem flüssigen Kulturmedium, das Methionin enthält, züchtet, das sich in den Mikroorganismenzellen angesammelte SAM extrahiert und reinigt [vergl. z.B. J.Biol. Chem., 222, 1°37 (1957)]. Bei diesem Verfahren beträgt jedoch die Menge an SAM, die sich in den Zellen akkumuliert, höchstens etwa 30A1 und es ist sehr schwierig, den Extrakt aus dem Mikroorganismenzellen zu reinigen, da er sehr große Mengen an Adeinin-verwandten Substanzen oder Ninhydrin-reaktiven Substanzen enthält, welche .
30 schwierig von SAM abzutrennen sind. Es ist besonders
schwierig, Adenin, S-Adenosylhomocystein und Methylthioadenosin abzutrennen. Bei einem Versuch, diesen Nachteil zu vermeiden, wurden Verfahren zur Reinigung von SAM vorgeschlagen (z.B. JA-ASen 13600/1971, 21079/1974 und
35 20998/1978 sowie JA-OS 145299/1901). Diese Verfahren
sind jedoch für die Herstellung von SAM mit hoher Reinheit auf wirtschaftliche Weise in hoher Ausbeute nicht zufriedenstellend.
b Es ist weiterhin ein Verfahren bekannt, bei dem eine Hefe, die zum Genus Candida, Pichia, Hansenula, Rhodötorula, etc. gehört, gezüchtet v/lrd, wobei sich SAM in den Zellen des Kulturmediums bilden und ansammeln kann (z.B. JA-AS 17118/1977). Bei diesem Verfahren ist ebenfalls die Reinigung von SAM in den Mikroorganismenzellen schwierig, und die Gewinnung von SAM aus dem Kulturmedium ist besonders schwierig, da das Kulturmedium verschiedene Metaboliten oder Abbauprodukte von SAM zusätzlich zu SAM enthält.
15
Da SAM weiterhin eine sehr instabile Substanz ist, ist es oft allgemeine Praxis, die Mikroorganismenzellen, welche SAM enthalten, an entfernte Stellen zu transportieren. In diesem Fall ist der niedrige Gehalt an SAM wirtschaftlich
20 nachteilig.
Zur Beseitigung der zuvor erwähnten Nachteile der bekannten Verfahren hat die Anmelderin das industrielle Verfahren zur Herstellung von SAM durch Fermentation untersucht. Die Arbeiten haben schließlich zu der Erfindung geführt, daß, wenn der Gehalt an SAM in dem Zellen der Mikroorganismen über einen bestimmten Wert, der nach dem bekannten Verfahren nicht erhalten werden kann, erhöht wird, die Menge an Verunreinigungen, die in den Mikroorganismenzellen vorhanden sind und die schwierig von SAM abzutrennen sind, bezogen auf SAIi, gering wird und daß solche Mikroorganismenzellen sehr leicht gereinigt werden können und daß SAM mit hoher Reinheit wirtschaftlich in hoher Ausbeute erhalten werden kann.
35
Gegenstand der Erfindung sind Hikroorganismonzel]en, die in sich akkumuliert mindestens 10 Gew./O, bezogen auf das Gewicht der trockenen Zellen, an SAM enthalten, wobei die Zellen erhalten werden, indem man Mikroorganismen,
5 die die Fähigkeit besitzen, SAM zu bilden, in einem
flüssigen Kulturmedium, welches Methionin enthält, züchtet.
Gegenstand der Erfindung ist weiterhin ein Verfahren zur Herstellung von SAM, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man Mikroorganismen, die die Fähigkeit aufweisen, SAM zu bilden, in einem flüssigen Kulturmedium, welches Methionin enthält, züchtet, so daß mindestens 10 Gew.?6, bezogen auf das Gewicht der trockenen Zellen, an SAM in den Mikroorganismenzellen akkumuliert werden, und man dann die Mikroorganismenzellen von dem Kulturmedium trennt und SM in stabiler Form aus den Mikroorganismenzellen gewinnt.
Die bei der vorliegenden Erfindung verwendeten Mikroorganismen können irgendwelche Mikroorganismen sein, solange sie die Fähigkeit aufweisen, SAM zu erzeugen,und die Akkumulation von mindestens 10 Gew.%, bezogen auf das Gewicht der trockenen Zellen, an SAM in den Mikroorganismenzellen in einem flüssigen Medium, das Methionin enthält, erlauben. Hefen des Genus Saccharomyces sind bevorzugt und Hefen von Saccharomyces cerevisiae sind besonders bevorzugt. Spezifische Beispiele sind Saccharomyces cerevisiae IFO 2342, Saccharomyces cerevisiae IFO 2343, Saccharomyces cerevisiae IFO 2345, Saccharomyces cerevisiae IFO 2346, Saccharomyces cerevisiae IFO 2347 und Hefe von Sake Kyokai Nr. 9· Natürliche und künstliche Mutanten dieser Stämme, welche die obigen Eigenschaften aufweisen, können ebenfalls verwendet wer-
35 den.
330U68
Die Mikroorganismenzellen gemäß der Erfindung enthalten SAM in einer Menge von mindestens 10 Gew.%, bevorzugt mindestens 12 Gew.%, bezogen auf das Gewicht der trockenen Zellen.
5
Die Mikroorganismenzellen gemäß der Erfindung sind hinsichtlich des Verfahrens zu ihrer Herstellung nicht irgendeiner Beschränkung unterworfen, und sie werden im allgemeinen hergestellt, indem man die Mikroorganismen bei aeroben Bedingungen in einem flüssigen Kulturmedium, welches Methionin, Kohlenstoffquellen, Stickstoffquellen, anorganische Salze und· sehr geringe Mengen organischer Nährquellen enthält, züchtet.
Methionin wird im allgemeinen in einem Verhältnis von mindestens 0,2 g/dl zu dem Kulturmedium zugesetzt. Methionin kann auf einmal oder nacheinander in Teilportionen zugegeben werden. Wenn jedoch das erstere Verfahren angewendet wird und wenn die Menge an zugegebenem Methionin groß ist, kann die Menge an SAM, die sich in den Mikroorganismenzellen akkumuliert, sinken. In einem solchen Fall ist es besser, das letztere Verfahren zu verwenden.
Beispiele von Kohlenstoffquellen sind Zucker, wie Glucose, Saccharose und Fructose, Alkohole, wie Ethanol und Glycerin, Stärkehydrolysate, Melassen, Sojabohnen, Sojabohnenmehl., Molke, Abfallflüssigkeiten von Fruchtsäften, Abfallflüssigkeiten der Fischverarbeitung, Fermentationsabfallflüssigkeiten und Flüssigkeiten von verbrauchter Pulpe. Bevorzugte Stickstoffquellen sind Harnstoff, Trimethylendiamin, Tetramethylendiamin, Spermin, Spermidin und 3-Amino-1,2,4-triazol.
Übliche anorganische Salze können je nach Erfordernis verwendet werden. Beispiele sind Phosphate, wie Kaliumphosphat, Natriumphosphat, Calciumphosphat und Lithium-
phosphat; Kaliumsalze, wie Kaliumchlorid; Nätriumsalze, wie Natriumchlorid und Natriumcarbonat; Magnesiumsalze, wie Magnesiumsulfat und Magnesiumchlorid; Mangansalze, wie Mangansulfat und Manganchlorid; Eisensalze, wie
5 Eisensulfat und Eisenchlorid; Zinksalze; Kupfersalze; und Kobaltsalze.
Beispiele organischer Nährquellen, die erforderlichenfalls verwendet werden können, sind Vitamine, Aminosäuren, Hefeextrakt, Malzextrakt, Fleischextrakt, Maisquellwasser, Casaminosäure, Sojabohnenmehl, Sojabohnenhydrolysat, Pepton, Trypton und ein ■""Abbauprodukt von Casein.
Die Züchtung erfolgt vorzugsweise unter aeroben Bedingungen. Im allgemeinen erfolgt die Züchtung bei einer Temperatur von 15 bis 45°C, bevorzugt 20 bis 35°C, während 2 bis 10 Tagen, während der pH-Wert des Kulturmediums auf 3 bis 8, vorzugsweise 3>5 bis 7, eingestellt wird,
20 und wobei sich SAM in den Mikroorganismenzellen bildet und dort akkumuliert.
Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren werden die Mikroorganismenzellen von dem Kulturmedium nach der Züchtung abgetrennt, und dann wird SAM aus den Mikroorganismenzellen extrahiert und gereinigt. Bei diesen Stufen können an sich bekannte Verfahren verwendet werden. Beispielsweise kann man eine Zentrifugentrennung oder Filtration zum Trennen der Mikroorganismenzellen aus dem Kultur-
30 medium verwenden. Bei der Erzeugung von SAM aus den
Mikroorganismenzellen ist es möglich, SAM aus den Zellen zu extrahieren, indem man ein Extraktionsmittel, wie Perchlorsäure, Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Ameisensäure, Essigsäure, Formiatester, Acetatester oder Ethanol, verwendet und SAM in dem Extrakt auf übliche Weise reinigt. Hinsichtlich des Reinigungsverfahren von
SAM gibt es keine besonderen Beschränkungen. Beispielsweise kann man ein chromatographisches Verfahren, bei dem Aktivkohle, stark saure Kationenaustauschharze, schwach saure Kationenaustauschharze oder Chelatharze verwendet werden; ein Verfahren, bei dem SAM mit Reineckesalz, Picrinsäure, Phosphowolframsäure, Picrolonsäure, etc. präzipitiert wird; und ein Verfahren, bei dem SM unter Verwendung eines organischen Lösungsmittels, wie Aceton oder Ethanol, präzipitiert wird, verwenden. Diese Verfahren können allein oder in Kombination angewandt v/erden. Zur Herstellung von SAM in stabilisierter Form ist es allgemeine Praxis, eine Säure, wie Schwefelsäure, p-Toluolsulfonsäure oder Sulfosalicylsäure, zuzugeben- und SAM als Salz oder Doppelsalz zu isolieren.
Die erfindungsgemäßen Mikroorganismenzellen sind für den Transport der instabilen SAM geeignet, da sie SAM in hohen Konzentrationen enthalten. Da diese Mikroorganismenzellen nur geringe Konzentrationen an Verunreinigun- gen enthalten, die schwierig von SAM abzutrennen sind, ist es leicht, SAM zu reinigen, und daher kann SAM in hoher Reinheit mit guter Ausbeute hergestellt werden.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.
Beispiel 1
Es wurde eine Öse voll der jeweiligen in der folgenden Tabelle 1 angegebenen Mikroorganismenstämme verwendet. Diese waren während 2 Tagen auf einem Agarschrägkulturmedium (pH 6,0) gezüchtet worden, wobei das Medium 5 g/dl Glucose, 0,5 g/dl Polypepton, 0,4 g/dl KH2PO4, 0,4 g/dl K2HPO4, 0,02 g/dl MgSO4.7H2O, 0,2 g/dl Hefeextrakt und 2 g/dl Agar enthielt. Es wurden 10 ml eines in der Wärme sterilisierten Kulturmediums, dessen pH auf 6,0 eingestellt war und welches 10 g/dl Saccharose, 1 g/dl Hefeextrakt, 0,4 g/dl KH2PO4, 0,01 g/dl MgSO4
1,0 g/dl L-Hethionin, 0,?5 mg/dl ZnSO^.7HgO und 1,25 ng/ dl MnSO^.4-6H2O enthielt, inokuliert,und dann wurde u.iter Schütteln 4 Tage bei 280C gezüchtet.
Die Mikroorganismenzellen wurden durch Zentrifugentrennung gesammelt, mit physiologischer Salzlösung gewascien, in 1,5N Perchlorsäure suspendiert und 1 h bei Zimmertemperatur zur Extraktion von SAM geschüttelt. Der Extrakt wurde der Papierchromatographie und der Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie zur Bestimmung von SAM, Adenin (kurz Ad), S-Adenosylhomocystein (kurz SAH) und Methyldhioadenosin (kurz MTA) unterworfen. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 aufgeführt.
ο:
cn		 Versuch
Nr.		 ω
O		 to to
CJl O		 >—»
CP		 Tabelle 1 cerevisiae 14,8 3,1 Menge an Ad 1—*
O		 CT κ- 0,03 0 0,54 wird • · · C
* I
Erfindung Mikroorganismenstamm Menge an SAM,
bez.auf die
trockenen Zel
len (Gew. ?0		 12,9 4,0
1,8		 0,08 0,33
0,69		 t * ( ι
1-1 Saccharomyces 13,0 5,3 2,5 x 10~3 Menge an SAH Menge an MTA 0,04 0,90 1 t ( (
1-2 IFO 2342 19,1 5,1 3,8 χ 10"3 0,02 0,34 *
1-3 IFO 2343 16,7 2.1 6,2 χ 10"3 0,06 0,03 0.47 «, .·
1-4 IFO 2345 Kvokai Nr.9 18,5 berechnet, wobei die Menge 1,9 x 10~3 0,13 0,07 < f
f « *
1-5 IFO 2346 cerevisiae 8,3 x 10"3 0,09 *
e 4 «:
t * ■
1 % (
< f β
1-6 IFO 2347 2,7 x 10~3 0,06 * 4
t * <
Vergleich Hefe von Sake 0,06
1-7 Saccharomvces 9,6 χ 10"*2 0,06
1-8
1-9		 IFO 0259 5,3 x 10~2
8,8 χ 10~2
1-10 IFO 1346
IAM 4175		 5,9 x 10~2 1,6 CjO
CO
CD
1-11 IAM 4274 4,9 x 10~2 1,4
3,5		 CD
OO
1-12 IFO 2003 7.3 χ 10"2 1,4
IFO 2363 an SAM als 100 1,7
Die relativen Vierte 3,1
angenommen
•
Die Ergebnisse der Tabelle 1 zeigen, daß, wenn der Gehalt an SAM, bezogen auf die trockenen Zellen, über -]2% liegt, der Gehalt an Verunreinigungen, die schwierig von SAM abzutrennen sind, sehr gering ist.
Beispiel 2
Mikroorganismenzellen mit unterschiedlichen Gehalten an SAM, bezogen auf das Gewicht der trockenen Zellen, werden hergestellt, indem man Saccharomyces cerevisiae IFO 2346 in dem gleichen Kulturmedium wie in Beispiel 1 züchtet, mit der Ausnahme, daß die Züchtungszeit, der pH des Kulturmediums und die Züchtungstemperatur geändert v/erden. Die resultierenden Mikroorganismenzellen werden nach den in Beispiel 1 beschriebenen Verfahren extrahiert und analysiert. Die Ergebnisse sind in Tabelle 2 aufgeführt.
Tabelle 2
Versuch
Nr.		 SAM-Gehalt,bez.
auf d.trockenen
Zellen(Gew.%) 		19,9 Vergleich 6,2 Menge X an Ad Menge an
SAH+		 Menge an
MTA*
Erfindung 19,1 2-6 3,5 X
2-1 16,3 2-7 1,8 1,8 X 1O~3 0,06 0,01
2-2 15,1 2-8 1,9 X 1O~3 0,06 0,02
2-3 12,0 3,1 X 10~3 0,08 0,04
2-4 6,2 1O~3 0,28 0,04
2-5 9,3 X 10"3 0,30 0,07
X
4,9 X ΙΟ"2 9,9 0,33
5,4 ΙΟ"* 1,4 0,33
9,6 1O"2 1,7 0,37
die relativen Werte sind berechnet unter der Annahme, daß SAM in einer Menge von 100 vorliegt.
Beispiel 3
10 ml von in der Hitze sterilisiertem Kulturmedium, dessen pH auf 6,0 eingestellt ist und welches 5 g/dl Glucose, 0,5 g/dl Polypepton, 0,4 g/dl KH2PO4, 0,4 g/dl K
0,02 g/dl MgSO^.7H2O und 0,2 g/dl Hefeextrakt enthält, werden mit je einer Öse voll der in Tabelle 3 aufgeführten Stämme von Mikroorganismen inokuliert und dann wird 24 h unter Schütteln bei 280C gezüchtet.
1 1 Kulturmedium, dessen pH auf 6,0 eingestellt ist und welches 10 g/dl Saccharose, 1 g/dl Hefeextrakt, 0,4 g/dl KH2PO4, 0,01 g/dl MgSO4.7H2O, 1,5 g/dl Harnstoff (getrennt sterilisiert), 0,75 g/dl L-Methionin, 0,02 g/dl CaCl2.2H2O, 0,25 mg/dl ZnSO4.7H2O, 0,25 mg FeSO4.7H2O, 125 mg/dl MnSO4.6H2O, 2/Ug/dl CuSO4.5H2O, 2/ug/dl H3BO3, 0,2/Ug/dl CoCl2.6H2O und 1 /ug/dl KJ enthält, wird in ein 2 1 Fermentationsgefäß gegeben und sterilisiert. Dann werden 5 ml Impfkulturbrühe, hergestellt wie oben beschrieben, zum Inokulieren des Kulturmediums verwendet, und dann wird 72 h bei 280C unter Belüftung und Bewegung gezüchtet.
Nach der Züchtung werden die Mikrobenzellen durch Zentrifugentrennung gesammelt, einmal mit physiologischer Salzlösung gewaschen, in 100 ml 1,5N Perchlorsäure suspendiert und 1 h bei Zimmertemperatur geschüttelt. Die Suspension wird dann zur Entfernung der Mikroorganismenzellen zentrifugiert und der pH der entstehenden Flüssigkeit durch Zugabe von Kaliumhydrοgencarbonat auf 4,5 eingestellt. Der entstehende Niederschlag aus Kaliumperchlorat wird dann durch Zentrifugieren entfernt, und man erhält einen Extrakt, der SAl-I enthält. Die Menge an SAM in dem Extrakt wird bestimmt und die Menge an SAM, bezogen auf die trockenen Zellen, ist in Tabelle 3 angegeben.
Der Extrakt wird in einer Menge von 0,2 g als SAM durch eine mit 50 ml Amberlite IRC-50 (H -Form), einem schwach sauren Kationenaustauscherharz, gefüllte Säule zur Adsorption von SAM geleitet. 0,005N Essigsäure wird dann
330U68
zum Auswaschen durch die Gäule geleitet, bis die Absorption bei 260 nm des Eluats unter 0,1 liegt. Auf diese Weise werden die Verunreinigungen entfernt. Die Menge an 0,005N Essigsäure, die dafür erforderlich ist, wird in Tabelle 3 angegeben. Dann wird 0,1N Schwefelsäure durch die Säule geleitet, und SAM wird eluiert, bis die Absorption bei 260 nm des Eluats unter 0,05 liegt. Das Eluat wird dann mit Amberlite IRA 900-Harz (0H~-Form) behandelt, um seinen pH auf 3,0 einzustellen, dann wird es lyophilisiert, wobei man SAM-sulfat erhält. Das Wiedergewinnungsverhältnis von SAM ist in Tabelle 3 aufgeführt. Die Reinheit von SAM wird durch Cellulose-Dünnschichtchromatographie, PapierChromatographie und Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie bestimmt und ist in Tabelle 3 ange-
15 geben.
25 30 35
(Jl
ω ο
to
cn
bo ο
CJl
Versuch llikroorganisraenstamm
Nr.
Tabelle
Menge an SAM, Menge d.zur bez.auf die Entfernung d. trockenen Verunreinig. Zellen(Gew.%) erford.Menge an
0,005N Essigsäure (ml)
Wiederge- Rein- Ninhydrin-Reak-
winnungs- heit tion der Sub-
verhältnis von stanzen,ausgen.
von SAM(^) SAM(I) SAM (2)
Erfindung Saccharomyces 2343
cerevisiae 2346
3-1 IFO 2347
3-2 IFO
3-3 IFO 1346
Vergleich 4274
3-4 IFO 2363
3-5 IAM
3-6 IFO
12,1 18,8 16,7
3,1 4,0
2,1
980 770 890
1910 1760 2440
94 95
96 96
94 95
86 84
86 83
81 86
Spur (+)
Il I!
(1) Reinheit von GAM: Nach der Entwicklung bei der zweidimensionalen Papierchromatographie wird ein Fleck, der SAM zugeordnet wird, nachgewiesen. Dann v/ird ein Teil, der dem SAM-Fleck entspricht, abgeschnitten
5 und SAM mit 0,1N Chlorwasserstoffsäure aus dem abgeschnittenen Teil extrahiert. Die Reinheit von SAIi v/ird aus dem Molekular-Extinktionskoeffizienten (15400) von SAM bei 260 mn bestimmt.
(2) Ninhydrin-Reaktion der Substanzen, ausgenommen SAM: Nach der Entwicklung mittels der zv/eidimensionalen Cellulose-DünnschichtChromatographie wird die Anwesenheit von Flecken, die Substanzen mit Ausnahme von SAM zuzuordnen sind, durch die Farbreaktion mit Nin-
15 hydrin festgestellt.
Aus Tabelle 3 ist erkennbar, daß bei der vorliegenden Erfindung die Menge an Eluat, die zur Entfernung der Verunreinigungen erforderlich ist, sehr gering ist und daß das Gewinnungsverhältnis von SAM und die Reinheit von SAM sehr gut sind.
Ende der Beschreibung. 25

Claims (1)

  1. PAT E N TA N WA LT L
    UND ZUGELASSENE VERTRETER VOR DEM EUROPÄISCHEN (1ATCNTAMT
    IR. WALTER KRAUS D I PLO M C H EM I K ER · D R.-I N G. ANNEKÄTE WEISERT DIPL-ING, FAC H Rl C HTU N Ci CHEMIE RMSARDSTRASSE 15 · D-8OOO MÜNCHF N 71 · TELEFON OB9/797O77-797O78 ■ TLlEX Ofi-:M'J1bB kpntd
    TKLEGRAMM KRAUSPATENT
    3592
    NIPPON ZEON CO., LTD. Tokyo, Japan
    Mikroorganismenzellen die S-Adenosylmethionin enthalten und Verfahren zu deren Herstellung
    Patentansprüche
    1. Mikroorganismenzellen, dadurch gekennzeichnet, daß sie mindestens 10 Gew.%, bezogen auf die trockenen Zellen, an S-Adenosylraethionin enthalten.
    2. Mikroorganismenzellen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es Zellen einer Hefe des Genus Saccharomyces sind.
    3. Mikroorganismenzellen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es Zellen einer Hefe sind, die zu Saccharomyces cerevisiae gehören.
    h. Vorfahren zur Herstellung von S-Adenosylmethionin, dadurch gekennzeichnet, daß man einen Mikroorganismus,
    der die Fähigkeit aufweist, S-Adenosylmethionin zu bilden, in flüssigem Kulturmedium, welches Methionin ent-
    hält, züchtet, um mindestens 10 Gew.% an S-Adenosylmethionin in den Mikroorganismenzellen, bezogen auf das
    Trockengewicht der Mikroorganismenzellen, zu akkumulieren, die Mikroorganismenzellen von dem Kulturmedium abtrennt und anschließend das S-Adenosylmethionin in stabiler Form aus den Mikroorganismenzellen gewinnt.
    5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Mikroorganismus eine Hefe des Genus Saccharomyces ist.
    15
    6. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Mikroorganismus eine Hefe ist, die zu Saccharomyces cerevisiae gehört.
    20 25 30 35
DE19833304468 1982-02-25 1983-02-09 Mikroorganismenzellen die s-adenosylmethionin enthalten verfahren zu deren herstellung Granted DE3304468A1 (de)

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JP2966082A JPS58146291A (ja) 1982-02-25 1982-02-25 Ｓ−アデノシルメチオニンの製造方法
JP2889382A JPS58146274A (ja) 1982-02-26 1982-02-26 Ｓ−アデノシルメチオニン高含有菌体

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3304468A1 true DE3304468A1 (de) 1983-09-01
DE3304468C2 DE3304468C2 (de) 1991-11-14

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ID=26367038

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