ES2371781T3 - Método para producir una levadura seca que contiene s-adenosil-l-metionina y composición para ingestión oral. - Google Patents

Método para producir una levadura seca que contiene s-adenosil-l-metionina y composición para ingestión oral. Download PDF

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Abstract

Un método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina utilizando una levadura que tiene la capacidad para producir S-adenosil-L-metionina, que comprende las operaciones siguientes (i) separar un concentrado de células de levadura, de un líquido de cultivo celular de la levadura; (ii) someter el concentrado de células de levadura a un tratamiento de adición de un ácido mineral para ajustar el pH dentro del intervalo de 1 a 4; (iii) aplicar después al concentrado un tratamiento de calentamiento a una temperatura de 40 a 70 °C; y (iv) finalmente, secar el concentrado.

Description

Método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina y composición para ingestión oral.
Campo técnico
El presente invento se refiere a un método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina usando una levadura que tiene la capacidad para producir S-adenosil-L-metionina (que más adelante es descrita como SAMe), y a una composición para ingestión oral. Más específicamente, se refiere a un método para producir una levadura seca que contiene SAMe en elevada concentración, convenientemente con un buen rendimiento, y a una composición para ingestión oral formada al moldear una levadura seca que contiene SAMe obtenida mediante el método.
Técnica fundamental
La SAMe es una sustancia fisiológicamente activa y soluble en agua que desempeña un papel importante como dador de grupos metilo en la reacción de metilación con diversas transmetilasas en los organismos vivos, y se usa en gran medida como una medicación terapéutica para la depresión, el trastorno hepático, la artritis y similares, o como un alimento saludable. La célula de levadura contiene componentes útiles que incluyen 5'-nucleótido, un aminoácido libre, glutatión, que ejerce una acción antioxidante y se utiliza como una medicación terapéutica para el trastorno hepático, β-glucano, que ejerce una función de potenciación de la resistencia inmune y una función de mejora del estado intestinal, fibras dietéticas y similares, y se usa en gran medida como un alimento saludable.
En cuanto al método de producción convencional de SAMe, dicho método ha sido corrientemente utilizado de modo que la SAMe se acumule en las células por producción fermentativa usando un medio de cultivo que contiene Lmetionina como precursor (véanse, por ejemplo, los Documentos 1 y 2 no de Patente), sea extraída y purificada por cromatografía, y sea transformada en una sal de SAMe estable, tal como una sal con ácido sulfúrico o ácido ptoluenosulfónico o una sal con ácido butanodisulfónico (véanse, por ejemplo, los Documentos 3 y 4 no de Patente). Sin embargo, en el método de producción convencional, se requieren grandes cantidades de trabajo y coste para la extracción y purificación de la SAMe acumulada en las células y es difícil producir SAMe, que es importante como medicación terapéutica y alimento saludable, a bajo coste.
Se conoce un método de síntesis enzimática, que no requiere la extracción y purificación a partir de las células, como un método sustitutivo del método fermentativo. En consecuencia, se sintetiza enzimáticamente SAMe con adenosina 5'-trifosfato (ATP) y L-metionina como sustratos usando una enzima sintetizadora de SAMe (metionina adenosiltransferasa), que es aislada y purificada a partir de microorganismos, tal como una levadura (véanse, por ejemplo, el Documento 1 de Patente y los Documentos 5 y 10 no de Patente). En comparación con el método fermentativo, este método tiene las ventajas de que la SAMe se acumula en una gran cantidad y no es necesario extraer la SAMe de las células, pero presenta varios problemas ya que la preparación de la enzima es complicada, la enzima resultante presenta una actividad débil, es necesario eliminar la actividad enzimática inhibitoria, tal como la actividad de degradación de ATP, y el ATP es considerablemente caro como sustrato, y, por lo tanto, el método no ha experimentado un uso práctico. De acuerdo con el desarrollo de la ingeniería génica en los últimos años, la enzima puede ser convenientemente preparada usando un gen clonado de la enzima sintetizadora de SAMe (véanse, por ejemplo, los Documentos 6 a 9 no de Patente) para resolver el problema de la preparación de la enzima, pero aún no se han resuelto otros problemas prácticos, tal como el uso del caro ATP como sustrato.
En el Documento 2 de Patente se enseña un microorganismo o extracto de microorganismos secado que comprende SAM estabilizada, y un método para producir el mismo. De acuerdo con la reivindicación 1, se usa un microorganismo o extracto microbiano que contiene SAM, en combinación con un ácido carboxílico orgánico y/o un agente quelante (EDTA). Además, se usan un ácido tal como el ácido sulfónico y sus derivados para mejorar la estabilidad de la SAM. Son ejemplos de dichos ácidos el ácido sulfónico y el ácido p-toluenosulfónico. Los ácidos fueron aplicados a la biomasa de un cultivo de Saccharomyces cerevisiae. La biomasa que contenía la SAM fue aislada y fue luego tratada con 0,1 de citrato por célula secada (ejemplo 1 de trabajo) o 0,1 de ácido succínico por célula secada (ejemplo 2 de trabajo). En el Documento 2 de Patente no se describe el intervalo de pHs usado del método en su totalidad, ni siquiera el del ácido utilizado. Pero es importante controlar el pH para la estabilidad de la SAM, que depende del pH. Además de eso, al contrario que en el presente invento, en el que se aplica un tratamiento térmico con objeto de inactivar las enzimas que degradan la SAM, en el Documento 2 de Patente no se describe información alguna acerca de dichas enzimas, ni siquiera acerca de cualquier tratamiento que pudiera inactivar dichas enzimas.
[Documento 1 de Patente]
JP-A-51-125717
[Documento 2 de Patente]
JP-A-2005-229812
[Documento 1 no de Patente]
F. Schlenk y R. E. DePalma, J. Biol. Chem., 229, 1037-1050 (1957)
E07742933 15-11-2011
[Documento 2 no de Patente]
S. Shiozaki et al., Agric. Biol. Chem., 53, 3269-3274 (1989)
[Documento 3 no de Patente]
F. Schlenk y R. E. DePalma, J. Biol. Chem., 229, 1051-1057 (1957)
[Documento 4 no de Patente]
H. Kusakabe, A. Kuninaka y H. Yoshino, Agric. Biol. Chem., 38, 1669-1672
(1974)
[Documento 5 no de Patente]
S. H. Mudd, G. L. Cantoni et al., J. Biol. Chem., 231, 481-492 (1958)
[Documento 6 no de Patente]
G. D. Markham et al., J. Biol. Chem., 255, 9082-9092 (1980)
[Documento 7 no de Patente]
D. J. Markham y J. DeParisis, J. Biol. Chem., 259, 14.505-14.507 (1984)
[Documento 8 no de Patente]
S. Shiozaki et al., J. Biotechnology., 4, 345-354 (1986)
[Documento 9 no de Patente]
D. Thomas e Y. Surdin-Kerjan, J. Biol. Chem., 262, 16.704-16.709 (1987)
[Documento 10 no de Patente]
D. Thomas, H. Cherest et al., Mol. Cell. Biol., 8, 5132-5139 (1988)
Descripción del invento
Como se ha descrito anteriormente, el método fermentativo convencional en que se utilizan microorganismos requiere grandes cantidades de trabajo y coste para la extracción y la purificación, y el método enzimático convencional requiere grandes cantidades de trabajo y coste para la síntesis. En consecuencia, es considerablemente difícil producir a bajo coste un producto que contiene SAMe y pueda ser oralmente ingerido. Por lo tanto, un objeto del presente invento es establecer un método que permita producir una levadura seca que contiene SAMe en elevada concentración, convenientemente con un buen rendimiento, como un método para producir a bajo coste el producto que contiene SAMe, y proporcionar una composición para ingestión oral formada al moldear una levadura seca obtenida mediante el método de producción.
Como resultado de una seria investigación realizada por los inventores para alcanzar los objetivos, se ha hallado que la levadura seca diana que contiene SAMe en elevada concentración puede ser convenientemente producida a bajo coste y con rendimiento elevado del modo siguiente. Se usa una levadura que tiene capacidad para la producción de SAMe y que puede ser oralmente ingerida, y se sintetiza y acumula SAMe en concentración elevada en las células. Las células de levadura son luego separadas del líquido de cultivo con un medio de separación, tal como una centrifugación, y son sometidas a al menos un tratamiento de entre un tratamiento de adición de un ácido mineral para ajustar el pH a un valor específico y un tratamiento de calentamiento de las células de levadura a una temperatura específica. Luego se secan las células de levadura. En consecuencia, se ha completado el presente invento.
En consecuencia, el presente invento proporciona un método para producir una levadura seca que contiene SAMe en una concentración elevada, y una composición para ingestión oral formada al moldear la levadura seca, como se muestra en los puntos 1 a 5 siguientes.
1. Un método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina utilizando una levadura que tiene la capacidad para producir S-adenosil-L-metionina, que comprende las operaciones siguientes
(i)
separar un concentrado de células de levadura, de un líquido de cultivo celular de la levadura;
(ii)
someter el concentrado de células de levadura a un tratamiento de adición de un ácido mineral para ajustar el pH dentro del intervalo de 1 a 4 (1); y
(iii) aplicar después al concentrado un tratamiento de calentamiento a una temperatura de 40 a 70 °C (2); y
(iv) finalmente, secar el concentrado.
2.
El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con el punto 1, en que se utiliza una levadura perteneciente a Saccharomyces como la levadura que tiene la capacidad para producir S-adenosil-L-metionina.
3.
El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con el punto 2, en que la levadura que pertenece a Saccharomyces es Saccharomyces cerevisiae.
4.
El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con el punto 1, en que el ácido mineral utilizado en el tratamiento de adición de un ácido mineral (1) es ácido sulfúrico.
E07742933 15-11-2011
5. El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con el punto 1, en que el concentrado es secado mediante un método de liofilización o un método de secado por pulverización.
La clase de la levadura usada en el presente invento puede ser una que tenga la capacidad para producir SAMe y pueda ser oralmente ingerida, y los ejemplos preferidos de la misma incluyen levaduras pertenecientes a Saccharomyces. Entre éstas, Saccharomyces cerevisiae es más preferida.
Para el cultivo de la levadura, se usan una fuente de carbono, una fuente de nitrógeno, diversas clases de sales inorgánicas, diversas clases de aditivos y similares. La fuente de carbono usada no está particularmente limitada con tal de que pueda ser utilizada por la levadura, y los ejemplos de la misma incluyen un hidrocarburo, tal como glucosa, sacarosa, almidón y melaza residual, y un alcohol y un ácido orgánico, tal como etanol y ácido acético. La fuente de nitrógeno tampoco está particularmente limitada con tal de que pueda ser utilizada por la levadura, y los ejemplos de aquélla incluyen un compuesto nitrogenado inorgánico, tal como amoníaco, ácido nítrico o urea, y aquellos que contienen un compuesto nitrogenado orgánico, tal como extracto de levadura y extracto de malta. Los ejemplos de la sal inorgánica utilizada incluyen una sal de fosfato, una sal de potasio, una sal de sodio y una sal metálica, tal como magnesio, hierro, calcio, zinc, manganeso, cobalto, cobre y molibdeno. Además, se puede llevar el cultivo a cabo añadiendo metionina, adenina y adenosil-ribonucleósido, que constituyen el esqueleto de la SAMe.
Aunque la temperatura de cultivo y el pH del líquido de cultivo varían dependiendo de la clase de la levadura que se va a utilizar, la temperatura de cultivo puede estar en el intervalo de 20 a 35 °C y el pH del líquido de cultivo puede estar en el intervalo de 4 a 7.
Se prefiere el cultivo aeróbico para aumentar el contenido de SAMe en las células. En consecuencia, el recipiente para cultivo es preferiblemente aireado y puede ser agitado dependiendo de la necesidad, y, por ejemplo, se puede usar un recipiente para cultivo mecánicamente agitado, un recipiente para cultivo de tipo sustentación por aire, un recipiente para cultivo de tipo torre de burbujeo, y similares.
Los componentes del cultivo, tales como la fuente de carbono, la fuente de nitrógeno, las diversas sales inorgánicas y los diversos aditivos, se pueden añadir al recipiente para cultivo a la vez o individualmente y continua o intermitentemente. Por ejemplo, se puede alimentar el sustrato, tal como sacarosa y etanol, al recipiente para cultivo en forma de una mezcla con otros componentes del medio de cultivo, o se puede añadir independientemente al recipiente para cultivo, separadamente de los demás componentes del medio de cultivo. El pH del líquido de cultivo puede ser controlado con una disolución de ácido o álcali. El álcali para controlar el pH es preferiblemente amoníaco y urea, que se usan como fuente de nitrógeno, o una base no nitrogenada, tal como hidróxido sódico o hidróxido potásico. Los ejemplos del ácido usado incluyen un ácido inorgánico, tal como ácido fosfórico, ácido sulfúrico y ácido nítrico, y un ácido orgánico. Para controlar el pH se puede utilizar una sal de fosfato, una sal de potasio, una sal de sodio, una sal de nitrato y similares, que son bases inorgánicas.
La levadura se cultiva bajo las condiciones, y, en la fase en que se acumula la cantidad diana de SAMe en las células de levadura, se extrae el líquido de cultivo del recipiente para cultivo y luego se somete a separación para obtener un concentrado de células de levadura. El método de separación no está particularmente limitado con tal de que las células puedan ser separadas y enjuagadas eficazmente, y los ejemplos preferidos del mismo incluyen un separador de levaduras por flujo a contracorriente y un aparato de ultrafiltración en que se usa una membrana de separación.
El concentrado de células de levadura separado es luego sometido a un primer tratamiento de adición de un ácido mineral, tal como ácido sulfúrico, y a un segundo tratamiento de calentamiento. Al llevarse a cabo el tratamiento de adición de un ácido mineral, se mejora la estabilidad de la SAMe para aumentar el rendimiento. El ácido mineral añadido no está particularmente limitado con tal de que se pueda ingerir oralmente, y los ejemplos del mismo incluyen ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico, siendo más preferido el ácido sulfúrico. La cantidad de adición del ácido mineral es aquella cantidad que proporciona un pH en el intervalo de 1 a 4.
Al llevarse a cabo el tratamiento de calentamiento, se pueden alcanzar la desactivación de la enzima de degradación de SAMe y la esterilización. El tratamiento de calentamiento puede ser llevado a cabo bajo una condición tal que se aumente lo máximo posible el contenido de SAMe obtenido, y la condición para el tratamiento de calentamiento es necesariamente, aunque depende del tiempo de calentamiento, de 40 a 70 °C.
El tiempo de calentamiento no puede ser determinado incondicionalmente ya que varía dependiendo de la temperatura de calentamiento, y es preferiblemente de 30 a 600 segundos, y más preferiblemente de 30 a 60 segundos. Al llevarse a cabo el tratamiento de calentamiento durante 30 segundos o más, se pueden alcanzar la desactivación de la enzima de degradación de SAMe y la esterilización. Además, se acelera la permeación del ion del ácido mineral, por lo que se puede disminuir la cantidad del ácido mineral añadido. Al llevarse a cabo el tratamiento de calentamiento durante 600 segundos o menos, se puede evitar que se produzca una disminución del contenido de SAMe a causa de su degradación.
E07742933 15-11-2011
El tratamiento de calentamiento se puede llevar a cabo bajo presión normal o presión aumentada. Al llevarse a cabo el tratamiento de calentamiento, o al llevarse a cabo el tratamiento de adición de un ácido mineral, se pueden obtener dichas células de levaduras secas que tienen un contenido de SAMe relativamente elevado.
De acuerdo con el invento, se llevan a cabo tanto el tratamiento de adición de un ácido mineral como el tratamiento de calentamiento. La combinación de la cantidad de adición del ácido mineral y la temperatura de calentamiento es, aunque dependiendo del tiempo de calentamiento, una combinación de una cantidad de adición del ácido mineral que proporciona un pH de 1 a 4 y una condición de temperatura de 40 a 70 °C.
Una vez llevados a cabo tanto el tratamiento de adición de un ácido mineral como el tratamiento de calentamiento, se disminuye por evaporación el contenido de agua del concentrado de células de levadura resultante mediante, por ejemplo, un método de secado tal como un método de secado por pulverización con una secadora por pulverización
o un método de liofilización con una temperatura de fase final de 25 °C, obteniéndose por ello una levadura seca.
Posteriormente, la levadura seca puede ser pulverizada hasta un polvo, y, si es necesario, se pueden añadir otro componente bioactivo y un aditivo, tal como un vehículo, a la levadura seca en forma de polvo, la cual puede ser luego transformada en tabletas por compresión para obtener una composición para ingestión oral en forma de tableta. La superficie de la tableta puede ser revestida. Se puede granular el polvo en una forma granular y se pueden encapsular los gránulos así granulados.
EJEMPLOS
El presente invento será descrito con mayor detalle por referencia a ejemplos y ejemplos comparativos, pero el presente invento no se limita a los ejemplos.
Ejemplo 1 (no parte del invento)
(a)
Cultivo de células de levadura
De acuerdo con el conocido método de cultivo [S. Shiozaki et al., J. Biotechnology 4, 345-354 (1986) (Documento 8 no de Patente)] anteriormente descrito, se cultivaron células de levadura usando un recipiente para cultivo de 30 l de capacidad, producido por Marubishi Bioengineering Co., Ltd. En un medio de cultivo que contenía unos componentes que incluían 10% en masa de sacarosa y 1% en masa de extracto de levadura como fuente de carbono, 1,8% en masa de urea como fuente de nitrógeno, 1% en masa de L-metionina, 0,2% en masa de L-glicilglicina, 0,4% en masa de KH2PO4, 0,01% en masa de MgSO4·7H2O, 2 μg/ml de biotina y 0,2% en masa de minerales mixtos (la formulación de los minerales mixtos incluía 2,0% en masa de CaCl2·2H2O, 0,05% en masa de MnSO4·5H2O, 0,05% en masa de FeSO4·7H2O, 0,1% en masa de ZnSO4·7H2O, 0,001% en masa de CuSO4·5H2O, 0,001% en masa de Co-Cl2·6H2O, 0,001% en masa de H3BO3, 0,001% en masa de Na2MoO4 y 0,001% en masa de KI), se inoculó Saccharomyces cerevisiae IFO 2346, perteneciente a Saccharomyces, y se cultivó a una temperatura de cultivo de 27 a 29 °C y una velocidad de agitación de 150 rpm bajo aireación aerófila durante 6 días. Se añadieron sucesivamente etanol y MgSO4·7H2O, que se quedaron escasos durante el cultivo, para aumentar el contenido de SAMe. En consecuencia, se obtuvieron 18 l de un líquido de cultivo de células de levadura que tenía un contenido de células de 3,5% en masa y un contenido de SAMe de 205 mg por gramo de levadura seca.
(b)
Recogida de las células de levadura
Se trataron 18 l del líquido de cultivo de células de levadura con un separador centrífugo continuo de tipo giratorio (centrífuga Hitachi Himac CR10B2) para obtener 3,49 kg de un concentrado de células de levadura en forma de un líquido que tenía una concentración de células correspondiente a 18% en masa en términos de levadura seca.
(c)
Adición de ácido mineral al concentrado de células de levadura
Se añadieron 224 g de ácido sulfúrico al 95% en masa a 3,49 kg del concentrado de células de levadura para obtener 3,71 kg de un concentrado de células de levadura que tenía un pH de 1.
(d)
Producción de levadura seca
Los 3,71 kg del concentrado de células de levadura que tenía un pH de 1 fueron secados por pulverización con una secadora por pulverización (producida por Nipro Corporation) que tenía un atomizador giratorio (disco giratorio) como atomizador, bajo unas condiciones de una temperatura de entrada en la cámara de secado de 195 a 205 °C, una temperatura de salida de la misma de 80 a 90 °C y una velocidad de alimentación de líquido de 38 g/min, para obtener 570 g de un polvo de levadura seca. El polvo de levadura seca resultante tenía un contenido de SAMe de 174 mg por gramo de levadura seca.
El contenido de SAMe en el polvo de levadura seca fue medido de tal modo que la SAMe fue extraída de la levadura seca que contenía SAMe mediante un método conocido usando ácido perclórico [véase, por ejemplo, S. Shiozaki et al., Agric. Biol. Chem. 48, 2293-2300 (1984)] y fue cuantitativamente determinada por cromatografía líquida. La cromatografía líquida fue llevada a cabo bajo las siguientes condiciones analíticas.
5 Columna: Nacalai Tesque Inc., Cosmosil, 4,6 mm de diámetro x 100 mm.
Eluyente: disolución acuosa 0,2 M de KH2PO4/metanol = 95/5 (relación volúmica).
Caudal: 0,7 ml/min.
10 Detector: UV (260 nm).
Tiempo de retención de la SAMe: aproximadamente 150 segundos.
15 Ejemplos 2 a 4 (no parte del invento)
Se llevaron a cabo los mismos procedimientos que en el Ejemplo 1 salvo por que se añadió ácido sulfúrico al concentrado de células de levadura para proporcionar un pH de 2, 3 ó 4, y se investigó la relación entre el pH después de la adición del ácido sulfúrico y el contenido de SAMe después del secado por pulverización. Los resultados se
20 muestran en la Tabla 1.
Ejemplo Comparativo 1
Se llevaron a cabo los mismos procedimientos que en el Ejemplo 1 salvo por que no se añadió ácido sulfúrico al
25 concentrado de células de levadura, para obtener 581 g de un polvo de levadura seca que había sido secado por pulverización. El polvo de levadura seca resultante tenía un contenido de SAMe de 136 mg por gramo de levadura seca. Los resultados se muestran en la Tabla 1.
Tabla 1: relación entre el pH después de la adición de ácido mineral al concentrado de células de levadura y el con
30 tenido de SAMe del polvo de levadura seca obtenido mediante secado por pulverización, habiéndose llevado solamente a cabo el tratamiento de adición de ácido mineral (sin tratamiento de calentamiento).
Tabla 1 (no parte del invento).
Ejemplo
Cantidad de adición de ácido sulfúrico al 95% (g) pH después de la adición de ácido sulfúrico Contenido de SAMe en el polvo de levadura seca (mg por gramo de levadura seca)
Ejemplo 1
224 1 174
Ejemplo 2
118 2 171
Ejemplo 3
57,5 3 153
Ejemplo 4
23,6 4 144
Ejemplo Comparativo 1
0 5,2 136
35 Ejemplo 5 (no parte del invento)
Se llevaron a cabo los procedimientos (a) a (c) del mismo modo que en el Ejemplo 1, y 3,71 kg de un concentrado de células de levadura que tenía un pH de 1 por adición de ácido sulfúrico. Las células de levadura que no habían
40 sido calentadas fueron vertidas en una cubeta de acero inoxidable para liofilización en un liofilizador (producido por ULVAC, Inc.) y fueron congeladas a -50 °C, y las células de levadura fueron luego sometidas a liofilización durante 36 horas bajo unas condiciones de una temperatura de fase final de 25 °C. La levadura liofilizada resultante fue adicionalmente pulverizada para obtener 612 g de un polvo de levadura seca. El polvo de levadura seca resultante tenía un contenido de SAMe de 170 mg por gramo de levadura seca. Los resultados se muestran en la Tabla 2.
45 Ejemplos 6 a 8 (no parte del invento)
Se llevaron a cabo los mismos procedimientos que en el Ejemplo 5 salvo por que se añadió ácido sulfúrico al concentrado de células de levadura para proporcionar un pH de 2, 3 ó 4, y se investigó la relación entre el pH después
50 de la adición del ácido sulfúrico y el contenido de SAMe después de la liofilización. Los resultados se muestran en la Tabla 2.
Ejemplo Comparativo 2
55 Se llevaron a cabo los mismos procedimientos que en el Ejemplo 5 salvo por que no se añadió ácido sulfúrico al concentrado de células de levadura, para obtener 609 g de un polvo de levadura seca que había sido liofilizado. El polvo de levadura seca resultante tenía un contenido de SAMe de 136 mg por gramo de levadura seca. Los resultados se muestran en la Tabla 2.
Tabla 2: relación entre el pH después de la adición de ácido mineral al concentrado de células de levadura y el contenido de SAMe del polvo de levadura seca obtenido mediante liofilización, habiéndose llevado solamente a cabo el tratamiento de adición de ácido mineral (sin tratamiento de calentamiento).
Tabla 2 (no parte del invento).
Ejemplo
Cantidad de adición de ácido sulfúrico al 95% (g) pH después de la adición de ácido sulfúrico Contenido de SAMe en el polvo de levadura seca (mg por gramo de levadura seca)
Ejemplo 5
224 1 170
Ejemplo 6
118 2 168
Ejemplo 7
57,5 3 154
Ejemplo 8
23,6 4 143
Ejemplo Comparativo 2
0 5,2 136
Ejemplos 9 a 11 (no parte del invento)
Se llevaron a cabo los mismos procedimientos que en el Ejemplo 5 salvo por que el ácido sulfúrico añadido al con
15 centrado de células de levadura fue cambiado por ácido clorhídrico, ácido nítrico o ácido fosfórico (pH del concentrado de células de levadura después de la adición: 1), y se investigó la relación entre la cantidad de adición del ácido mineral y el contenido de SAMe después de la liofilización. Los resultados se muestran en la Tabla 3.
Tabla 3: relación entre el pH después de la adición de ácido mineral al concentrado de células de levadura y el con
20 tenido de SAMe del polvo de levadura seca obtenido mediante liofilización, habiéndose llevado solamente a cabo el tratamiento de adición de ácido mineral (sin tratamiento de calentamiento).
Tabla 3 (no parte del invento).
Ejemplo
Ácido mineral añadido Cantidad de adición de ácido mineral (g) pH después de la adición del ácido mineral Contenido de SAMe en el polvo de levadura seca (mg por gramo de levadura seca)
Ejemplo 9
Ácido clorhídrico al 35% 295 1 160
Ejemplo 10
Ácido nítrico al 61% 307 1 155
Ejemplo 11
Ácido fosfórico al 85% 927 1 156
Ejemplo Comparativo 2
Ninguno 0 5,2 136
25 Ejemplos 12 a 23 (no parte del invento) y Ejemplos Comparativos 3 a 5
Se llevaron a cabo los procedimientos (a) a (b) de la misma manera que en el Ejemplo 1, y el concentrado de células de levadura fue sometido a un tratamiento de calentamiento utilizando un vaso de precipitados de vidrio, un agitador30 magnético y un baño de agua de calefacción a una temperatura de calentamiento de 40 °C, 50 °C, 60 °C, 70 °C o 90 °C durante un tiempo de 60 segundos, 300 segundos o 600 segundos para el tratamiento de calentamiento, y fue luego enfriado a 25 °C con un baño de agua. El concentrado fue vertido en una cubeta de acero inoxidable para liofilización en un liofilizador (producido por ULVAC, Inc.) y fue congelado a -50 °C, y las células de levadura fueron luego sometidas a liofilización durante 36 horas bajo unas condiciones de una temperatura de fase final de 25 °C. En
35 la Tabla 4 se muestran los contenidos de SAMe de los polvos de levadura seca resultantes.
Tabla 4: relación entre la temperatura de calentamiento y el contenido de SAMe del polvo de levadura seca obtenido por liofilización de un concentrado de células de levadura solamente sometido a un tratamiento de calentamiento (sin adición de ácido sulfúrico).
E07742933 15-11-2011
Tabla 4 (no parte del invento)
Ejemplo
Ácido sulfúrico no añadido (pH del concentrado de células de levadura antes del calentamiento: 5,2)
Temperatura de calentamiento (°C)
Tiempo de calentamiento (segundos) Contenido de SAMe en el polvo de levadura seca (mg por gramo de levadura seca)
Ejemplo Comparativo 2
no calentado – 136
Ejemplo 12
40 60 155
Ejemplo 13
40 300 156
Ejemplo 14
40 600 155
Ejemplo 15
50 60 156
Ejemplo 16
50 300 159
Ejemplo 17
50 600 158
Ejemplo 18
60 60 163
Ejemplo 19
60 300 168
Ejemplo 20
60 600 164
Ejemplo 21
70 60 158
Ejemplo 22
70 300 161
Ejemplo 23
70 600 155
Ejemplo Comparativo 3
90 60 127
Ejemplo Comparativo 4
90 300 109
Ejemplo Comparativo 5
90 600 73
Ejemplos 24 a 32
5 Se llevaron a cabo los procedimientos (a) a (c) de la misma manera que en el Ejemplo 1 y se añadió ácido sulfúrico a un concentrado de células de levadura para proporcionar un pH de 1, 2 ó 3. El concentrado de células de levadura fue sometido a un tratamiento de calentamiento utilizando un vaso de precipitados de vidrio, un agitador magnético y un baño de agua de calefacción a una temperatura de calentamiento de 60 °C durante un tiempo de 60 segundos,
10 300 segundos o 600 segundos para el tratamiento de calentamiento, y fue luego enfriado a 25 °C con un baño de agua. Las células de levadura fueron vertidas en una cubeta de acero inoxidable para liofilización en un liofilizador (producido por ULVAC, Inc.) y fueron congeladas a -50 °C, y las células de levadura fueron luego sometidas a liofilización durante 36 horas bajo unas condiciones de una temperatura de fase final de 25 °C. En la Tabla 5 se muestran los contenidos de SAMe de los polvos de levadura seca resultantes.
15 Tabla 5: relación entre la temperatura de calentamiento y el contenido de SAMe del polvo de levadura seca obtenido por liofilización de un concentrado de células de levadura sometido tanto a un tratamiento de adición de ácido mineral como a un tratamiento de calentamiento (pH del concentrado de células de levadura antes del calentamiento: 1, 2 ó 3).
20 Tabla 5
Ejemplo
pH del concentrado de células de levadura antes del calentamiento Temperatura de calentamiento (°C) Tiempo de calentamiento (segundos) Contenidos de SAMe en el polvo de levadura seca (mg por gramo de levadura seca)
Ejemplo 5*
1 no calentado – 170
Ejemplo 24
1 60 60 172
Ejemplo 25
1 60 300 171
Ejemplo 26
1 60 600 166
Ejemplo 6*
2 no calentado – 168
Ejemplo 27
2 60 60 175
Ejemplo 28
2 60 300 177
Ejemplo 29
2 60 600 170
Ejemplo 7*
3 no calentado – 154
Ejemplo 30
3 60 60 176
Ejemplo 31
3 60 300 179
Ejemplo 32
3 60 600 173
* (no parte del invento)
Ejemplos 33 a 41 y Ejemplos Comparativos 6 a 8
5 Se llevaron a cabo los procedimientos (a) a (c) del mismo modo que en el Ejemplo 1, y 3,71 kg de un concentrado de células de levadura que tenía un pH de 3 por adición de ácido sulfúrico. El concentrado de células de levadura fue sometido a un tratamiento de calentamiento utilizando un vaso de precipitados de vidrio, un agitador magnético y un baño de agua de calefacción a una temperatura de calentamiento de 40 °C, 50 °C, 70 °C o 90 °C durante un tiempo de 60 segundos, 300 segundos o 600 segundos para el tratamiento de calentamiento, y fue luego enfriado a
10 25 °C con un baño de agua. El concentrado fue vertido en una cubeta de acero inoxidable para liofilización en un liofilizador (producido por ULVAC, Inc.) y fue congelado a -50 °C, y las células de levadura fueron luego sometidas a liofilización durante 36 horas bajo unas condiciones de una temperatura de fase final de 25 °C. En la Tabla 6 se muestran los contenidos de SAMe de los polvos de levadura seca resultantes.
15 Tabla 6: relación entre la temperatura de calentamiento y el contenido de SAMe del polvo de levadura seca obtenido por liofilización de un concentrado de células de levadura sometido tanto a un tratamiento de adición de ácido mineral como a un tratamiento de calentamiento (pH del concentrado de células de levadura antes del calentamiento: 3).
Tabla 6
Ejemplo
Ácido sulfúrico añadido (pH del concentrado de células de levadura antes del calentamiento: 3)
Temperatura de calentamiento (°C)
Tiempo de calentamiento (segundos) Contenido de SAMe en el polvo de levadura seca (mg por gramo de levadura seca)
Ejemplo 7*
no calentado – 154
Ejemplo 33
40 60 154
Ejemplo 34
40 300 157
Ejemplo 35
40 600 155
Ejemplo 36
50 60 154
Ejemplo 37
50 300 164
Ejemplo 38
50 600 162
Ejemplo 30
60 60 176
Ejemplo 31
60 300 179
Ejemplo 32
60 600 173
Ejemplo 39
70 60 172
Ejemplo 40
70 300 163
Ejemplo 41
70 600 155
Ejemplo Comparativo 6
90 60 140
Ejemplo Comparativo 7
90 300 118
Ejemplo Comparativo 8
90 600 81
20 * (no parte del invento)
Aplicabilidad industrial
De acuerdo con el presente invento, se puede producir convenientemente, con un buen rendimiento y a bajo coste,
25 una levadura seca que contiene SAMe en elevada concentración. Se puede usar en gran medida una composición para ingestión oral formada al moldear la levadura seca que contiene SAMe, como una medicación terapéutica para la depresión, el trastorno hepático, la artritis y similares, o como un alimento saludable.

Claims (4)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina utilizando una levadura que 5 tiene la capacidad para producir S-adenosil-L-metionina, que comprende las operaciones siguientes
    (i) separar un concentrado de células de levadura, de un líquido de cultivo celular de la levadura;
    (ii)
    someter el concentrado de células de levadura a un tratamiento de adición de un ácido mineral para ajustar 10 el pH dentro del intervalo de 1 a 4;
    (iii) aplicar después al concentrado un tratamiento de calentamiento a una temperatura de 40 a 70 °C; y
    (iv)
    finalmente, secar el concentrado. 15
  2. 2. El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con la reivindicación 1, en que se usa una levadura perteneciente a Saccharomyces como la levadura que tiene la capacidad para producir S-adenosil-L-metionina.
    20 3. El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con la reivindicación 2, en que la levadura que pertenece a Saccharomyces es Saccharomyces cerevisiae.
  3. 4. El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con la reivindicación
    1, en que el ácido mineral utilizado en el tratamiento de adición de un ácido mineral es ácido sulfúrico. 25
  4. 5. El método para producir una levadura seca que contiene S-adenosil-L-metionina, de acuerdo con la reivindicación 1, en que el concentrado es secado mediante un método de liofilización o un método de secado por pulverización.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2017331B1 (en) 2006-05-16 2015-04-01 Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. Method of producing s-adenosyl-l-methionine-containing dry yeast having excellent storage stability
JP4503700B1 (ja) * 2008-11-18 2010-07-14 アサヒビール株式会社 グルタミン酸高含有酵母の製造方法
EP3214167A1 (en) * 2010-04-07 2017-09-06 Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. S-adenosyl-l-methionine-containing dry yeast composition with excellent storage stability and process for producing same
US9023624B2 (en) 2010-12-30 2015-05-05 Metabolic Explorer Fermentative production of methionine hydroxy analog (MHA)
CN103704723A (zh) * 2013-12-11 2014-04-09 北京凯因科技股份有限公司 一种富含活性氨基酸的营养配制品

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2252405B1 (es) 1973-11-27 1978-04-28 Ajinomoto Kk
AR221676A1 (es) 1974-07-12 1981-03-13 Bioresearch Sas Procedimiento para la preparacion de sales estables sulfonicas y/o sulfuricas de la s-adenosil-l-metionina,particularmente utiles como donadores especificos de metilo para las reacciones bioquimicas de transferencia del grupo ch3;asi como tambien las reacciones fundamentales en el metabolismo lipilico,protilico y glucidico
GB2116172B (en) 1982-02-25 1986-07-09 Nippon Zeon Co Microbial cells containing s-adenosyl methionine in high concentrations and process for production of s adenosyl methionine
JP3078401B2 (ja) 1992-05-29 2000-08-21 信越化学工業株式会社 高分子プルランの製造方法
IT1318535B1 (it) 2000-05-25 2003-08-27 Chementecno Srl Processo per la preparazione di sali farmaceuticamente accettabili di(ss,rs)-s-adenosil-l-metionina.
CN102524737B (zh) 2003-01-27 2015-12-02 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 生产5’-核糖核苷酸的方法
JP2005229812A (ja) 2004-02-17 2005-09-02 Kohjin Co Ltd 安定化されたｓａｍを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物、及びその製造方法

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