DE3131731C2

DE3131731C2 - An der 6'- oder/und 1-Aminogruppe substituierte 5,3',4'-Tridesoxykanamycine B, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende antibakterielle Mittel

Info

Publication number: DE3131731C2
Application number: DE3131731A
Authority: DE
Inventors: Shinichi Yokohama Kanagawa Kondo; Hamao Tokyo Umezawa
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1980-08-12
Filing date: 1981-08-11
Publication date: 1984-02-16
Also published as: ES8308334A1; IT8109493A0; ES504697A0; IT1167959B; ES514621A0; ES514622A0; ES8301486A1; ES8401092A1; GB2082575B; FR2491073A1; CA1175816A; CH648564A5; ES8401093A1; DE3131731A1; GB2082575A; ES514620A0; NL8103639A; FR2491073B1; KR830006325A; KR850000979B1

Abstract

1-N-( α-Hydroxy- ω-aminoalkanoyl)-derivate von 5,3Δ,4Δ-Tri des oxy-oder 5,3Δ,4Δ-Tridesoxy-6Δ-N-methyl- oder 5,3Δ,4Δ,6ΔΔ-Tetradesoxy-kanamycin B, Verfahren zu ihrer Herstellung und antibakterielle Mittel. Neue antibakteriell wirksame Verbindungen, einschließlich 1-N-( α-Hydroxy- ω-aminoalkanoyl)-5,3Δ,4Δ-tridesoxykanamycin B; 1-N-( α-Hydroxy- ω-aminoalkanoyl)-5,3Δ,4Δ,6ΔΔ-tetradesoxykanamycin B; 1-N-( α-Hydroxy- ω-aminoalkanoyl)-5,3Δ,4Δ-tridesoxy-6Δ-N-methylkanamycin B; 5,3Δ,4Δ, 6ΔΔ-Tetradesoxykanamycin B und 5,3Δ,4Δ-Tridesoxy-6Δ-N-me thyl kanamycin B.

Description

(CHJ_nN

B'

oder der Formel (IV")

HO

CH₃

(IV")

(CH₂)JM

in der A, B, A', B' und η die angegebenen Bedeutungen haben, die noch vorhandene(n) Aminoschutzgruppe(n) in an sich bekannter Weise abspaltet.

5. Antibakterielle Mittel, enthaltend eine Verbindung gemäß Anspruch 1 oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz dieser Verbindung in Kombination mit üblichen Träger- und/oder Streckmitteln.

Die Erfindung betrifft die l-N-[e-Hydroxy-<k>-aminoalkanoyl]-5,3',4'-tridesoxykanamycine B und 1-N-[ff-Hydroxy-(0-aininoalkanoyl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methyl-kanamycine B sowie 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B gemäß Anspruch 1, die neue antibakteriell wirksamen Verbindungen darstellen. Ferner betrifft die Erfindung Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende antibakterielle Mittel.

Dibekacin (3',4'-Didesoxykanamycin b) wurde halbsynthetisch aus Kanamycin B hergestellt (JP-OS 7595/ 75; JP-AS 794 612; US-PS 37 53 973). Dibekacin wird als Chemotherapeuticum gegen verschiedene bakterielle Infektionen eingesetzt und ist sowohl gegen Kanamycin-empfindiiche als auch verschiedene Kanamycinresistente Bakterien wirksam. Ferner wurde Habekacin (l-N-(L-4-Amiiio-2-hydroxybutyryl)-dibekacin) halb synthetisch hergestellt, das ein gegen Dibekacin-resi- stente Bakterien wirksames Chemotherapeutikum darstellt (JP-OS 33 629/77; US-PS 41 07 424). Außerdem wurde 1 -N-tff-Hydroxy-Gj-aminoalkanoyll-ö'-N-methyldibekacin halbsynthetisch hergestellt, das sich gegen-

b5 über verschiedenen Bakterienstämmen als hochwirksam erwiesen hat (JP-OS 115 199/74; GB-PS 14 75 4SI; US-PS 41 47 861). In weiteren Untersuchungen wurden die 6"-Desoxy-und 4",6"-Didesoxyderivate von Dibeka-

ein und Habekacin (l-N-(L-4-Amino-2-hydroxybutyryl)-dibekacin) synthetisiert. Ferner wurde gefunden, daß diese 6"-Desoxy- und 4",6"-Didesoxyderivate von Dibekacin bzw. Habekacin nicht nur niedrige Toxizität, sondern eine ebenso hohe antibakterielle Aktivität wie Dibekacin bzw. Habekacin aufweisen (JP-OS 119 323/ 79, GB-PS 20 58 774 A).

Auch 5,3',4'-Triaesoxykanamycin B wurde als weiteres Desoxyderivat von Dibekacin hergestellt (Japanese Journal of Antibiotics, Bd. 32, S. 178, 1979). Es wurde jedoch gefunden, daß 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B weniger wirksam als Dibekacin ist.

Ferner konnte die neue Verbindung 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B synthetisiert werden, die eine höhere antibakterielle Aktivität als 5,3\4'-Tridesoxykanamycin B insbesondere gegenüber einigen resistenten Stämmen aufweist. Zur Herstellung neuer Derivate von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin E> bzw. 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B mit verbesserter antibakterieller Aktivität, und zwar der l-N-[a-Hydroxyl-<w-aminoalkanoyll·

^r> Derivate dieser Desoxykanamycine B wurde die 1-Aminogruppe des Detoxykanamycin B mit einer a-Hydroxy-(y-aminoalkansäure acyliert. Es zeigte sich, daß die erhaltenen neuen l-N-[<r-Hydroxy-a>-aminoalkanoylj-derivate von 5,3',4'-Tridesoxykani»mycin B und

ίο 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B äußerst aktiv sind gegen Kanamyein-sensitive und Kanamycin resistente Bakterien und auch hohe antibakteriell

Aktivität gegen eine Vielzahl anderer Bakterien zeigen. Gegenstand der Erfindung sind die neuen Verbindun-

gen, die in Anspruch 1 beschrieben und beansprucht sind und die der Formel

H₂N-K

HO

NHR,

H₂N

entsprechen, mit der ebenfalls im Anspruch 1 angegebenen Bedeutung und Zuordnung der Substituenten R₁ und R₂.

Die physikalisch-chemischen und biologischen Eigenschaften der neuen Verbindungen gemäß der Erfindung sind im folgenden angegeben:

(1) 1 - N - [(S) - 4 - Amino - 2 - hydroxybutyryl] -5,3',4' - tridesoxykanamycin B - monocarbonat-monohydrat ist ein farbloses Pulver, Zersetzungspunkt 163 bis 166⁰C, spezifische optische -to Drehung [a]^: _D ⁶ = + 87° (c 1, Wasser), deren Eiementaranalyse mit den theoretischen Werten für

C₂₂H₄₄H₆O, · H₂CO, ■ H₂O

(C 44,80%, H 7,85%, N 13,63%) übereinstimmt. Bei der Dünnschichtchromatographie an Silicagel ergibt die Substanz einen einzigen Fleck (Ninhydrin-positiv) bei Rf 0,05 im Falle der Entwicklung mit Butanol/Äthanol/Chloroformyi7% wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 4:5:2:5) bzw. so bei Rf 0,09 im Falle von Chloroform/Methanol/ konzentriertem wäßrigem Ammoniak/Wasser (Volumenverhältnis 1 :4 : 2 :1) als Entwicklungslösungsmittel.

(2) l-N-f(RS)-3-Amino-2-hydroxypropionyl]-5,3\4'-tridesoxykanamycin B-monocarbonat ist ein farbloses Pulver, Zersetzungspunkt 113 bis 116° C, spezifische Drehung [a]o = +120° (el, Wasser), deren Elementaranalyse mit den theoretischen Werten für

C₂₁H₄₂N₆O, · H₂CO₃

(C 42,85%, H 7,19%, N 13,63%) übereinstimmt Bei der Dünnschichtchromatographie an Silikagel ergibt die Substanz einen einzigen Fleck (Ninhydriu- positiv) bei Rf 0,12 im Falle der Entwicklung mit Butanol/Äthanol/Chlorofonn/17% wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 4:5:2:5) bzw. Rf

0,35 im Falle von Chloroform/Methanol/konzentriertem wäßrigem Ammoniak/Wasser (Volumenverhältnis 1:4:2:1) als Entwicklungslösungsmittel.

(3) l-N-[(SM-Amino-2-hydroxybutyryll-5,3',4'-tridesoxy-6'-N -methy!kanamycin-B-monocyrbonat ist ein farbloses Pulver, Zersetzungspunkt 162 bis 165° C, spezifische optische Drehung [a]^: _P ^: = + 88° (r 1, Wasser), deren Elementaranalyse mit den theoretischen Werten für

Q₃H₄₆N₀O., · H,CO₃

(C 47,05%, H 7,90%, N 13,72%) übereinstimmt. Die Substanz ergibt bei der Dünnschichtchromatographie an Silikagel einen einzigen Reck (Ninhydrinpositiv) bei R₁ 0,05 im Falle der Entwicklung mit Butanol/Äthanol/Chloroform/17% wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 4:5:2:5) bzw. R_f 0,08 im Falle von Chloroform/Methanol/wäßrigem Ammoniak/Wasser (Volumenverhältnis 1 :4 : 2 : 1) als Entwicklungslösungsmittel.

(4) 1 -N-[(RS)-3- Amino-2-hydroxypropionyl]-5,3',4'-tridesoxy -6'-N- methylkanamycin - B - monocarbonat - monohydrat ist ein farbloses Pulver, Zersetzungspunkt 162 bis 164° C, spezifische optische Drehung [a)j>^J = + 80° (cO,5, Wasser), deren EIementarana!yse mit den theoretischen Werten für

C₂₂H₄₄N₆O, ■ H₂CO₃ ■ H₂O

(C 44,80%, H 7,85%, N 13,62%) übereinstimmt Die Substanz ergibt bei der Dünnschichtchromatographie an Silikagel einen einzigen Fleck (Ninhydrinpositiv) bei Rf 0,05 im Falle der Entwicklung mit Butanol/Äthanol/Chloroform/17% wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 4:5:2:5) bzw. bei Rf 0,14 im Falle von CbJoroform/Methanol/koazentriertem wäßrigem Ammoniak/Wasser (1 :.4:2 : 1) als Entwicklungslösungsmittel.

(5) 1 - N - [(S) - 5 - Amino - 2 - hydroxyvaleryl] - 5,3',4' -

!ridesoxy-o'-N-methylkanamycin-B-monocarbonat - monohydrat ist ein farbloses Pulver, Zersetzungspunkt 163 bis 166° C, spezifische optische Dsehung [a]l^J = + 84° (cO,5, Wasser), deren Elementaranalyse mit den theoretischen Werten für

C₂₄H₄₈N₆O, · H₂CO₃ ■ H₂O

(C 46,57%, H 8,13%, N 13,03%) übereinstimmt. Die Substanz ergibt bei der Dünnschichtchromatographie an Silikagel einen einzigen Fleck (Ninhydrinpositiv) bei R_f 0,03 im Falle der Entwicklung mit ButanoI/Äthanol/Chloroform/17% wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 4:5:2:5) bzw. bei R, 0,08 im Falle von Chloroform/Methanol/konzi-ntriertem wäßrigem Ammoniak/Wasser (Volumenverhältnis 1:4:2:1) als Entwicklungslösungsmittel.

5,3',4' -Tridesoxy - 6' -N - methylkanamycin - B - monocarbonat - monohydrat ist ein farbloses Pulver, Zcfseicuiigspunki ί37 bis i4Ö°C, spezitische optische Drehung [ffjp¹ = + 66° (c ',Wasser), deren Elementaranalyse mit den theoretischen Werten für

C₁₉H₃₉N₅O₇ · H₂CO, · H₂O

(C 45,36%, H 8,18%, N 13,23%) übereinstimmt.

Die Substanz ergibt bei der Dünnschichtchromatographie an Silikagel einen einzigen Fleck (Ninhydrinpositiv) bei Rf 0,22 im Falle der Entwicklung mit Butanol/Äthanol/Chloroform/17% wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 4:5:2:5) bzw. be: R_f

ίο 0,49 im Falle von Chloroform/Methanol/konzentriertem wäßrigem Ammoniak/Wasser (Volumenverhältnis 1:4:2: 1) als Entwicklungslösungsmittel.

Die minimalen Hemmkonzentrationen (mcg/ml) der vorstehend angegebenen Verbindungen 1 -6 gegenüber verschiedenen Mikroorganismen wurden nach der Reihenverdünnungsmethode an einem Agar-Nährmedium bei 37° C nach 18stündiger Inkubation bestimmt. Zum Vergleich wurden auch die minimalen Hemmkonzentrationen von Habekacin und 5,3\4'-Tridesoxykanamyein B auf dieselbe Weise bestimmt. Die antibakteriellen Spektren der neuen und der bekannten Verbindungen sind in der folgenden Tabelle wiedergegeben.

Tabelle Testorganismus

MHK (mcg/ml) I Habckucin (Vergleich)

Tridcsoxy-KMB

(Vergleich)

Staphylococcus aureus 209P Staphylococcus aureus Smith Staphylococcus aureus APOl Staphylococcus epidermis Micrococcus flavus FDA 16 Sarcina lutea PCI 1001 Bacillus anthracis
Bacillus subtilis PCI 219 Bacillus subtilis NRRL, B-558 Bacillus cereus ATCC 10702 Mycobacterium smegmatis ATCC Escherichia coli NIHJ Escherichta coli K-12 Escherichia coli K-12 R5 Escherichia coli K-12 R 388 Escherichia coli K-12 J 5 R 11-2 Escherichia coli K-12 ML 1629 Escherichia coli K-12 ML 1630 Escherichia coli K-12 ML 1410 Escherichia coli K-12 ML 1410 R81 Escherichia coli K-12 LA 290 R55 Escherichia coli K-12 LA 290 R56 Escherichia coli K-12 LA 290 R64 Escherichia coli W677 Escherichia coli JR66/W677 Escherichia coli K-12 C 6OOR135 Escherichia coli JR255 Klebsiella pneumoniae PCI Klebsiella pneumoniae 22 # 3038 Shigella dysenteriae JS 11910

<0.20	<0.20	<0.20	.56	0.39
<0.20	<0.20	<0.20	.56	<0.20
0.78	0.78	0.39	.56	<0.20
1.56	0.78	<0.20	.56	<0.20
0.78	6.25	1.56	).78	3.13
6.25	0.78	0.39	.56	0.78
<0.20	<0.20	<0.20	.56	<0.20
<0.20	<0.20	<0.20	.56	0.39
<0.20	<0.20	<0.20	.56	0.39
0.78	0.78	0.39	0.78	1.56
<0.20	0.20	<0.20	0.78	0.39
3.13	1.56	0.78	1.56	3.13
1.56	1.56	0.78		3.13
100	100	3.13	.56	12.5
0.78	1.56	0.39	1.56
1.56	1.56	1.56	3.13
1.56	3.13	0.78	3.13
6.25	3.13		3.13
3.13	1.56		3.13
1.56	1.56		3.13
3.13	3.13		6.25
1.56	1.56	(	3.13
1.56	1.56		3.13
3.13	1.56		3.13
3.13	3.13		6.25
1.56	1.56		1.56
1.56	1.56	3.13
0.78	1.56	3.13
3.13	6.25	3.13
3.13	6.25	6.25

0.20 <0.20 0.39 <0.20 3.13 1.56 <0,20 <0.20 <0.20 1.56 0.39 1.56 1.56 6,25 1.56 3.13 3.13 3.13 3.13 3.13 3.13 1.56 1.56 1.56 3.13 1.56 1.56 1.56 3.13 6.25

0.39 <0.20 0.78 0.78 1.56 1.56 <0.20 <0.20 <0.20 1.56 0.39 3.13 3.13 100 1.56 1.56 3.13 3.13 6.25 3.13 6.25 3.13 3.13 3.13 6.25 1.56 3.13 1.56 3.13 12.5

1.56 0.39

25 6.25 100

25 0.78 <0.20 0.78

12.5 6.25

12.5

50

12.5

25

25 100

25

12.5 100

50

3.13 <0.20 6.25 6.25 100 100

0.39 <0.20 <0.20 6.25 0.78 12.5 12.5

>

6.25 12.5 12.5 25 12.5 12.5

>

50 50 12.5 >100 12.5 50 6.25 100 25

Ct)

Tabelle (Fortsetzung)

Testorganismus

MIIK (mcg/ml) I Hubekucin

(Vergleich)

Tridesoxy-KMB

(Vergleich)

Shigella llexneri 4b JSI1811
Shigella sonnei JSl 1746
Salmonella typhi T-63
Salmonella enteritidiis !891
Proteus vulgaris 0X19
Proteus rettgeri GN3U
Proteus rettgeri GN466
Serratia marcescens
Serrati SOU
Serratis 4
Providencia Pv 16
Providencia 2991
Pseudomonas aeruginosa A3
Pseudomonas aeruginosa No. 12
Pseudomonas aeruginosa H9
Pseudomonas aeruginosa H11
Pseudomonas aeruginosa TI-13
Pseudomonas aeruginosa GN315
Pseudomonas aeruginosa 99
Pseudomonas aeruginosa B-13
Pseudomonas aeruginosa 21-75
Pseudomonas aeruginosa PSTI
Pseudomonas aeruginosa ROS134/PU21
Pseudomonas aeruginosa K-Ps 102
Pseudomonas maltophilia GN9O7

Corynebacterium boivis 1810

3.13 3.13 0.78

12.5
0.78

25
1.56

25
100

25
6.25 3.13 0.39 1.56 3.13

12.5
1.56

25
3.13 6.25 6.25 6.25 100

1.56 > 100

6.25

6.25
6.25

50
6.25
0.78

25
3.13

25 >100

25 0.78 3.13 3.13 6.25 3.13

12.5 6.25 >

3.13 >100

0.78 3.13 1.56 0.78 <0.20

50
6.25 6.25

25
6.25 6.25

12.5
0.39 1.56 1.56

12.5
1.56 3.13 3.13

12.5

50

1.56 >100

1.56

3.13 6.25 3.13 6.25 0.78

25

12.5

50

12.5

50

50 0.78 3.13 3.13

12.5 3.13 3.13

12.5

25

50 3.13 ■100

1.56
6.25
3.13
3.13
0.78
100
6.25

25
0.39
3.13
3.13
6.25
1.56
3.13
6.25
12.5

6.25
6.25
1.56
3.13
0.78

50

12.5

50
>100

50

25

50
3.13
3.13
6.25

!2.5
3.13
6.25
6.25

25

25
>100

3.13
>100

25

6.25

25

3.13

100

25

100

>100

50

>100

3.13

25

12.5

25

50

100

>100

25

>100

100

25

25 6.25 >100

25

100

>100

100

>100

12.5

50

12.5

12.5 >100

25

50

>100 >100 >100

12.5 >100

100

Ilidesoxy-KMB = 5,3\,4'-Tridesoxykanamycin B.

Aus der Tabelle ist ersichtlich, daß die neuen erfindungsgemäßen Verbindungen das Wachstum vieler Sakterienstämme wirksam hemmen. Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen eine niedrige akute Toxizität gegenüber Tier und Mensch. l-N-[(S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl] - 5,3',4' - tridesoxykanamycin B und l-N-[3-Ämino-2-hydroxypropionyl]-5,3',4'-tridesoxykanamycin B haben LDs₀-WeHe von 25 bis 50 mg/kg bei Bestimmung derakuten Toxizität durch intravenöse Injektionen bei Mäusen. Ferner wurde gefunden, daß 1 -N -[(S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B; 1 -N-{3-Amino-2-hydroxypropionyl)-5,3\4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B; l-N-[(S)-5-Amino-2-hydroxyvaleryl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B und 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B bei Bestimmung der akuten Toxizität durch intravenöse Injektion bei Mäusen LD₅₀-Werte von 50 bis 100 mg/kg aufweisen.

Aus der Tabelle geht weiterhin klar hervor, daß 5,3',4'-Tridesoxy-fi'-N-mcfhylkanamycin B in seiner antibakteriellen Wirkung gegen Sarcina Iutea PCI 1001, Escherichia coli L-12 R5, E. coli, K-12 LA 290 R56 und R64, Salmonella typhi T-63, Proteus vulgaris OX19, Serratia SOU, Pseudomonas aeruginosa A3, H9 und GN315 erheblich besser ist als 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B. Auch die neuen l-N-Amino-alkanoylderivate von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B und 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B wirken erheblich stärker gegen fast alle Testorganismen als das bekannte 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden gewöhnlich in Form der freitn Base;r oder als Hydrate oder als Carbonate erhaiten. Sie können leicht in pharmazeutisch verträgliche Säureaddition jalze überfuhrt werden, z. B. Hydrochloride, Hydrobromide, Sulfate, Phosphate, Nitrate, Acetate, Maleate, Citrate, Ascorbate oder Methansulfonate, indem man sie in wäßrigen Medien mit der entsprechenden pharmazeutisch verträglichen organischen oder anorganischen Säure umsetzt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen und ihre pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalze können oral, intraperitoneal, intravenös, subcutan oder intramuskulär in beliebigen pharmazeutischen Formen verabfolgt werden, wie sie für derartige Verabreichungsformen und bei bekannten Kanamycinen üblich sind.

Beispielsweise können sie unter Verwendung beliebiger pharmazeutischer Formen für die orale Verabreichung oral angewandt werden. Beispiele für pharmazeutische Formen für die orale Verabreichung sind Pulver, Kapseln, Tabletten und Sirupe. Eine zur Behandlunf bakterieller Infektionen geeignete Dosis der erfindungsgemäßen Verbindungen liegt bei oraler Gabe im Bereich von 0,1 bis 1 g pro Person und Tag. Vorzugsweise wird diese Dosis in 3 bis 4 gleichen Teilen pro Tag verabreicht. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch in einer Dosis von 50 bis 500 mg/Person 2 bis 4mal täglich intramuskulär verabfolgt werden. Außerdem können sie zu Salben für die äußere Anwendung formuliert werden, die den WirkstofFin einer Konzentration von 0,5 bis 5 Gewichtsprozent, im Gemisch mit bekannten Salbengrundlagen, wie Polyäthylenglykol, enthalten. Ferner eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Sterilisation von chirurgischen Geräten und Sanitäreinrichtungen.

Gegenstand der Erfindung sind auch antibakterielle Mittel, die als Wirkstoff eine Verbindung gemäß Anspruch 1 oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz einer solchen in einer zur Hemmung des Bakterienwachstums ausreichenden Menge in Kombination mit einem Träger für den Wirkstoff enthalten.

Gegenstand der Erfindung ist auch ein Verfahren zur Herstellung von 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B der Formel (V) (Verbindung (a) gemäß Anspruch 1)

HO

H₂N

H,N-

NHCH₁

(V)

das dadurch gekennzeichnet ist, daß man

(a) 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B der Formel (VI)

H₂N-

HO

NH,

(VI)

H₅N

in eine 6'-N-Alkyloxycarbonyl-, Cycloalkyloxycarbonyl- oder Aralkyloxycarbonyl-Verbindung der Formel (X)

H₂N-

HO

(X)

in der R₃ eine Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, eine Cycloalkylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder eine Aralkylgruppe, insbesondere eine Phenyl-(C_r bis C₄)-alkylgruppe, vorzugsweise Benzyl, bedeutet, überführt und diese Verbindung (b) mit einem Metallhydrid in einem wasserfreien organischen Lösungsmittel reduziert.

In der ersten Stufe dieses Verfahrens wird eine Alkyloxycarbonyl-, Cycloalkyloxycarbonyl- oder Aralkyloxycarbonylgruppe in die 6'-Aminogruppe der Ausgangsverbindung (VT) eingeführt, wobei Gruppen verwendet werden können, die als Aminoschutzgruppen vom Urethantyp bekannt sind. Die Einführung der Alkyloxycarbonyl-, Cycloalkyloxycarbonyl- oder Aralkyloxycarbonylgruppe

15

-COR₃

in die 6'-Aminogruppe des eingesetzten 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B (VI) erfolgt auf dieselbe Weise wie bei der Herstellung des Amino-geschützten Derivats der Ausgangsverbindung (VT) im ersten erfindungsgemäßen Verfahren. Der selektive Schutz der 6'-Aminogruppe gelingt deshalb, weil diese unter den Aminogruppen des Kanamycins B (VI) am reaktivsten ist. Die in die 6'-Aminogruppe der Ausgangsverbindung einzuführende Gruppe

-COR₃

ist vorzugsweise eine Methoxycarbonyl-, Äthoxycarbonyl- oder Benzyloxycarbonylgrv7pe. Hierbei entsteht das o'-N-alkyloxycarbonylierte, n'-N-cycloalkyloxycarbonylierte oder 6'-N-aralkyloxycarbonylierte Produkt der Formel (X).

Die auf diese Weise eingeführte 6'-Alkyloxycarbonyl-, o'-N-Cycloalkyloxycarbonyl- oder 6'-N-Aralkyloxycarbonylgruppe wird für die 6'-N-Methylierung zu einer Methylgruppe reduziert Dies kann durch Reduktion der Verbindung (X) mit einem Metallhydrid, wie Lithiumaluminiumhydrid oder Diboran, in einem wasserfreien organischen Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran, erfolgen. Die Reduktion wird gewöhnlich 10 Stunden oder langer bei 40 bis 90⁰C durchgeführt.

Die Verbindungen (b) und (c) gemäß Anspruch 1 können synthetisiert werden, indem man als Ausgangsverbindung das bekannte 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B (Japanese Journal of Antibiotics, Bd. 32, S. 178 [1979]) einsetzt und die 1-Aminogruppe der Ausgangsverbindung mit einer entsprechenden a-Hydroxy-<y-aminr·- alkansäure oder einem entsprechenden funktionalen Äquivalent kondensiert.

Gegenstand der Erfindung ist daher auch ein Verfahren zur Herstellung der l-N-[a-Hydroxy-<y-aminoalkanoyl]-5,3',4'-tridesoxykanamycine B (Verbindungen (b) und (c) gemäß Anspruch 1) der Fcrmel (II)

H₃N-

HO

H,N

NH,

(II)

in der η die Zahl 1 o^er 2 ist, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man (a) die 1-Aminogruppe von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B der Formel (VI)

23

H₂N-

HO

H₃N

(VI)

oder eines teilweise aminogeschützten Derivats von 5,3'.4'-Tridesoxykanamycin B der Formel (VI')

HO

(VD

in der A ein Wasserstoffatom ist und mindestens ein B eine einwertige Aminoschutzgruppe bedeutet, der andere Rest oder die anderen Reste B jedoch Wasserstoffatome sind, oder mindestens ein Paar A und B zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bilden, die anderen Reste A und B jedoch Wasserstoffatome sind und die Aminoschutzgruppen A und B gleich oder verschieden voneinander sein können, mit der entsprechenden ff-Hydroxy-6>-aminoalkansäure oder deren aminogeschütztem Derivat der Formel (VH)

N(CH₂^CHCOOH OH

(VIl)

in der A' ein Wasserstoffatom und B' ein Wasserstoffatom oder eine einwertige Aminoschutzgruppe bedeuten oder A' und B' zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bilden und η die Zahl 1 oder 2 ist, oder einem funktionellen Äquivalent der Verbindung (VII) acyliert und

(b) aus der erhaltenen 1-N-acylierten Verbindung der Formel (W)

H,N-

HO

H₂N

(CH₂)^N

oder der Formel (II")

HO

(CHj)₁₁N

in der Λ, B, Λ', B' und η die angegebenen Bedeutungen haben, die noch vorhandene(n) Aminoschutzgruppe(n) auf übliche Weise abspaltet. Dieses Verfahren kann noch eine weitere Stufe umfassen, bei der die erhaltene Verbindung (II) durch Umsetzen mit einer pharmazeutisch verträglichen organischen oder anorganischen Säure in an sich bekannter Weise in ein pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz überführt wird.

Das vorstehende Verfahren wird im folgenden noch η .her erläutert. Bei Durchführung des Verfahrens ist es möglich, als Ausgangsverbindung 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B (VI) zu verwenden, dessen Aminogruppen nicht geschützt sind, d. h. in Form der freien Base oder in Form eines Säureadditionssalzes mit einer geeigneten Säure, wie Salzsäure oder Schwefelsäure. Vorzugsweise verwendet man jedoch als Ausgangsverbindung ein teilweise aminogeschütztes Derivat von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B (VIO, bei dem alle oder einige Aminogruppen mit Ausnahme der 1-Aminogruppe durch bekannte Aminoschutzgruppen geschützt sind und die durch Einführen einer bekannten Aminoschutzgruppe in die Verbindung (Vl) nach üblichen Aminoschutzmethoden hergestellt worden sind, wie sie bereits bei der Synthese bekannter Desoxyderivate von Kanamycin B angewandt werden.

Zur Herstellung des teilweise aminogeschützten 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B der Formel (VIO können . die Aminoschutzmethoden angewandt werden, die z. B. zur Herstellung des 6'-N-Benzyloxycarbonylderivats von Kanamycin B (US-PS 37 81 268 und 39 29 762), zur Herstellung von 2',6'-Di-n-tert-butoxycarbonyl-kanamycin B oder o'-N-Benzyloxycarbonyl-kanamycin B oder des Mono-N- oder Di-N-tert-butoxycarbonyl-oder Tri-N-tert-butoxycarbonylderivats von 6'-N-Benzyloxycarbonyl-kanamycin B entweder isoliert oder als Gemische (GB-PS 14 26 908 und US-PS 39 39143) oder zur Herstellung des 2\3,3",6"-Tetra-n-formyIderivats von Kanamycin B (BE-PS 8 17546) angewandt werden.

Beispiele für geeignete Aminoschutzgruppen, die zum Schutz einiger Aminogruppen in dem teilweise aminogeschützten Derivat der Formel (VT) verwendet werden können, sind gewöhnliche Aminoschutzgruppen, z. B. Alkoxycarbonylgruppen, wie tert.-Butoxycarbonyl und tert-Amyloxycarbonyl; Cycloalkyloxycarbonylgrappen, wie Cyclohexyloxycarbonyl; Aralkyloxycarbonylgruppen, wie Benzyloxycarbonyl; Acylgruppen, wie Trifluoracetyl und o-Nitrophenoxyacetyl; κι Phosphinothioylgruppen, wie Diphenylphosphinothioyl und Dimethylphosphinothioyl; und Phosphinylgruppen, wie Diphenylphosphinyl. Bevorzugte Beispiele für zweiwertige Aminoschutzgruppen sind die Phthaloylgruppe und Gruppen vom Schiff-Basen-Typ,

J5 wie Salicyliden. Die Einführung dieser Aminoschutzgruppen kann dadurch erfolgen, daß man die Verbin-

• dung (VI) mit einem gekannten Reagenz zum Einführen der Aminoschutzgruppe, z. B. einem Säurehalogenid, Säureazid, aktiven Ester oder Säureanhydrid,

■κι nach an sich bekannten Methoden der Peptidsynthe-.e umsetzt. Durch Einstellen der Menge des Reagenz zum Einführen der Aminoschutzgruppe im Bereich von 0,5 bis 6 Mol pro MoI der Verbindung (Vl) ist es möglich, aufgrund der unterschiedlichen Reaktivität der jeweili-

4i gen Aminogruppen der Verbindung (VI) ein Gemisch verschiedener, teilweise aminogeschützter Derivate (VIO in beliebigen Verhältnissen herzustellen.

In dem beschriebenen erfindungsgemäßen Verfahren verwendet man vorzugsweise als Ausgangsverbindung

>o ein aminogeschütztes 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B, bei dem alle oder einige der Aminogruppen mit Ausnahme der 1-Aminogruppe geschützt sind, z. B. ein 3,2',6',3"-Tetra-N-geschütztes Derivat, ein 3,2',6'-Tn-N-geschütztes Derivat, ein 2',6',3"-Tri-N-geschütztes Derivat, ein 2\6'-Di-N-geschütztes Derivat oder ein 6'- Mono-N-geschütztes Derivat.

Außerdem können Gemische aus zwei oder mehreren dieser teilweise N-geschützten Derivate ohne Reinigung für die 1-N-Acylierungsstufe des Verfahrens eingesetzt werden. Um sicherzustellen, daß das gewünschte Produkt der Formel (II) in hoher Ausbeute entsteht, muß gewährleistet sein, daß die 1-Aminogruppe der Verbindung (VI), d. h. von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B durch die a-Hydroxy-ö-aminoalkansäure (VII) selektiv acyliert wird. Dementsprechend ist es besonders bevorzugt, ein 3,2',6',3"-Tetra-N-geschütztes Derivat der Verbindung (VI), d. h. das aminogeschützte Derivat der Verbindung (VIO, bei dem alle Aminogrup-

pen mit Ausnahme der 1-Aminogruppe geschützt sind, als Ausgangsverbindung für die 1-N-Acylierung einzusetzen.

Zur Herstellung des 3,2\6',3"-Tetra-N-geschützten Derivats der Formel (VI^ aus der Verbindung (VI) kann z. B. das folgende Verfahren angewandt werden. Analog der US-PS 4136 254 wird ein 3,2\6'-Tri-N-acyliertes geschütztes Derivat von Kanamycin B dadurch hergestellt, daß man Kanamycin B mit einem zweiwertigen Übergangsmetallkation, wie Kupfer(II), Nickel(II) oder Kobalt(II) umsetzt, den erhaltenen Metallkomplex von Kanamycin B mit einem Acylierungsmittel umsetzt, das als Aminoschutzgruppen-Einführungsmittel für den Schutz aller Aminogruppen mit Ausnahme der 1-Amino- und 3"-Aminogruppe der Kanamycin B-Gruppierung des Kanamycin B-Metallkomplexes bekannt ist. wobei die V- und 3"-Aminogrupperi durch Komplexbildung mit dem zweiwertigen Metallkation in dem Kanamycin-B-Metaiikompiex blockiert sind, und hierauf das zweiwertige Metallkation aus dem Komplex abtrennt, z. B. durch Behandeln mit Schwefelwasserstoff oder wäßrigem Ammoniak. Es kann aber auch das Verfahren der JP-OS 1 38 402/78 (GB-PS 20 36 020 A, BE-PS 8 79 925) angewandt werden, bei dem man ein 3,2',6'-Tri-N-acyliertes geschütztes Derivat von Kanamycin B ähnlich dem Verfahren der US-PS 41 36 254 herstellt, jedoch ein Zinkkation an Stelle der zweiwertigen Übergangsmetallkationen verwendet. Auf diese Weise können die 3,2',6'-Tri-N-geschützten Derivate der Formel (VT) in hoher Ausbeute aus den Verbindungen (VI) hergestellt werden. Die 3"-Aminogruppe der3,2',6'-Tri-N-geschützten Derivate (Vl') kann dann durch selektive Acylierung analog dem Verfahren der JP-OS 73 064/79 (siehe Anspruch 15 der BE-PS 7 79 923) geschützt werden, um ein Amino-geschütztes Derivat eines Aminoglykosid-Antibioticums herzustellen, bei dsm 2Üs Αϊηΐπο^οΓΐ2^Γιη£π mit Ausnähme der l-Aminogruppe selektiv geschützt sind, so daß das 3,2',6',3"-Tetra-N-geschützte Derivat der Verbindung (Vl) in hoher Ausbeute hergestellt werden kann. Entsprechend der selektiven 3"-N-Acylierungsmethode der JP-OS 73 064/79 (Anspruch 15 der BE-PS 8 79 923) wird das genannte 3,2',6'-Tri-N-geschützte Derivat der Verbindung (Vl) mit einem Ameisensäurealkylester, einem Dihalogen- oder Trihalogenalkansäurealkylester. Formylimidazol oder einem N-Alkanoylimidazol als Acylierungsmittel umgesetzt, wodurch die 3"-Aminogruppe selektiv mit dem Acylrest des Acylierungsmittels in hoher Ausbeute acyliert wird, ohne daß eine Acylierung der l-Aminogruppe des 3,2',6'-Tri-N-geschützten Derivats erfolgt. Das 3,2',2',3"-Tetra-N-acylierte Derivat, z. B. das3,2',6'-Tri-N-benzyloxycarbonyl-3"-N-trifluoracetylderivat von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B, das nach den Methoden der US-PS 41 36 254 und BE-PS 8 79 923 zugänglich ist, ist die am meisten bevorzugte Ausgangsverbindung für die 1-N-Acylieningss'tufe mit der a-Hydroxy-w-aminoalkansäure (VII).

In dem beschriebenen erfindungsgemäßen Verfahren wird die 1-Aminogruppe der Verbindung (VI) oder deren teilweise aminogeschützter Derivate (VT) entweder isoliert oder als Gemisch aus zwei oder mehreren mit der a-Hydroxy-<a-aminoalkansäure der Formel (VII)

A'

B'

N-(CHj)₁₁-CHCOOH

OH

in der A'und B'die vorstehende Bedeutung haben und η die Zahl 1, 2 oder 3 ist, deren Aminogruppe geschützt oder nicht geschützt ist, acyliert. Diese a-Hydroxy-ω-aminoalkansäure kann eine 3-Amino-2-hydroxypropionsäure (n = 1 und A' und B' = H) oder 4-Amino-2-hydroxybuttersäure (n = 2 und A' und B' = H) sein. Unter diesen ist das S-lsomer bevorzugt.

In dem beschriebenen Verfahren kann die 1-N-Acylierung mit der a-Hydroxy-<u-aminoalkansäure (VII) nach herkömmlichen Methoden zur Peptidsynthese durchgeführt werden, z. B. nach der bekannten Dicyclohexylcarbodiimid-Methode, gemischten Säureanhydrid-Methode, Azidmethode oder aktiven Estermethode, unter Verwendung der a-Hydroxy-w-aminoalkansäure als solcher oder in Form eines reaktiven Derivats (funktionelles Äquivalent). Als Aminoschutzgruppe für die Aminogruppe der a-Hydroxy-w-aminoalkansäure kann, eine von der Ausgangsverbindung (VT) verschiedene oder die gleiche Aminoschuizgruppe verwendet werden. Eine für diesen Zweck bevorzugte Aminoschutzgruppe ist die tert.-Butoxycarbonylgruppe, die leicht mit wäßriger Trifluoressigsäure oder Essigsäure oder verdünnter wäßriger Salzsäure abgespalten werden kann. Eine ebenfalls geeignete N-Schutzgruppe ist die Benzyloxycarbony!gruppe, die durch herkömmliche Hydrogenolyse in Gegenwart eines Katalysators, wie Palladium oder Platinoxid, abspaltbar ist.

Die 1-N-Acylierung erfolgt im erfindungsgemäßen Verfahren vorzugsweise in einem wäßrigen organischen Lösungsmittel nach der aktiven Estermethode unter Verwendung der s-Hydrox> y-aminoalkansäure in Form ihres aktiven Esters. Der N-Hydroxysuccinimidester von L-4-Ben?ylo\ycarbonylamino-2-hydroxybuttersäure ist z. B. ein bevorzugter aktiver Ester, der nach herkömmlichen Methoden hergestellt werden kann. Dieser aktive Ester wird vorzugsweise in einem Anteil von 0.5 bis -3, insbesondere 1 his 1,5 Moläquivalenten pro Mol der Ausgangsverbindung (VI) oder (VT) angewandt. Das als Reaktionsmedium verwendete wäßrige organische Lösungsmittel krtnn ein mit Wasser mischbares organisches Lösungsmittel sein, "ie Dioxan, 1.2-Dimethoxyäthan, Dimethylformamid oder Tetrahydrofuran. Die 1-N-Acylierung kann bei Normaltemperatur oder gegebenenfalls erhöhter Temperatur von 20 bis 90⁰C über die Reaktionszeit von einigen Stunden, vorzugsweise 5 bis 6 Stunden, durchgeführt werden.

Wenn die 1-N-Acylierung unter Verwendung eines teilweise aminogeschützten Derivats als Ausgangsverbindung durchgeführt wird, bei der nicht alle der Aminogruppen mit Ausnahme der 1-Aminogruppe geschützt worden sind, z. B. des 6'-N-geschützten Derivats der Ausgangsverbindung (Vl), können die gebildeten Acylierungsprodukte teilweise durch Säulenchromatographie gereinigt werden, z. B. an Silikagel, so daß nicht umgesetztes Ausgangsmaterial abgetrennt und ein Gemisch des gewünschten 1-N-monoacylierten Produkts mit den anders N-acylierten Produkten erhalten werden, wie dies für die Synthese von Habekacin (1-N-[(S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl]-3',4'-didesoxy kanamycin B) in der US-PS 4107424 beschrieben ist. Diese gemischten Acylierungsprodukte können ohne weitere Reinigung und/oder Isolierung sofort der anschließenden Schutzgruppen-Abspaltungsstufe unterworfen werde iL. worauf man die gewünschten 1-N-monoacylierten Produkte reinigt und isoliert.

In der zweiten Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens wird das in der 1-N-Acylieningsstufe erhaltene

l-N-Acylierungsprodukt (einschließlich der gemisvhten Acyüerungsprodukte) zur Abspaltung der Aminoschut2{.nippen behandelt, wenn solche noch vorhanden sind. Die Abspaltung der Schutzgruppen erfolf.t auf herkömmliche Weise. Aminoschutzgruppcn des Alkoxycarbonyltyps werden z. B. durch schwach saure Hydrolyse mit einer wäßrigen Lösung von Trifluoressigsäure oder Essigsäure oder mit einer verdünnten wäßrigen Lösung einer anorganischen Säure, wie Salzsäure, abgespalten. Aralkyloxycarbonylgruppen, wie die Benzyloxycarbonylgruppe, können durch gewöhnliche katalytische Reduktion (Hydrogenolyse) abgespalten werden. Bei Verwendung der Phthaloylgruppe als Aminoschutzgruppe kann diese durch Erhitzen einer Lösung von Hydrazinhydrat in einem niederen Alkanol abgespalten werden.

Das in der Schutzgruppen-Abspaltstufe des erfindungsgemäßen Verfahrens erhaltene Acylierungsprodukt kann das gewünschte l-N-Acyüerungsprcdukt der Formel (II) zusammen mit einigen Isomeren enthalten. Dasgew ,fischte I-N-(a-Hydroxy-<y-aminoaIkanoyl)-derivat (II) kann chromatographisch unter Verwendung eines Kationenaustauschers mit Carboxylfunktionen, z. B. Amberlite CG-50 (Rohm & Haas Co., USA) oder CM-Sephadex C-25 (Pharmacia Co., Schweden) isoliert und gereinigt werden, wobei man die antibakterielle Aktivität der Eluatfraktionen mit einem geeigneten Kanamycin-empfindlichen und einem Kanamycin-resistcnten Bakterienstamm kontrolliert.

Im folgenden wird die Herste'lung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (IV),

l-N-[(RS)-3-Amino-2-hydroxypropionyl]-5,3',4'-ti;-desoxy-ö'-N-methylkanamycin B (Verbindung (d) von Anspruch 1),

l-N-[(S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl)-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B (Verbindung (e) von Anspruch 1) und
l-N-[(S)-5-Amino-2-hydroxyvaleryl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B (Verbindung (Ί) von Anspruch 1)

beschrieben.

.¹Ii Gegenstand der Erfindung ist daher auch ein Verfahren zur Herstellung der l-N-[a-Hydroxy-w-aminoalkanoyl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycine B (Verbindungen (d), (e) und (0 gemäß Anspruch 1 der Forme! (IV)

H₃N-

HO

H₂N

NHCH₃

(IV)

in der η die Zahl I, 2 oder 3 ist. das dadurch gekennzeichnet ist, daß man

(a) die 1-Aminogruppe von 5.3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B der Formel (V)

H₁N-

HO

NHCH₃

H₂N

oder eines teilweise aminogeschützten Derivats von 5.3'.4'-Tridesoxv-6'-N-methvlkanamvrin R

HO

31

32

CH₃

in dsr A ein WasserstofTaicui und mindestens sin B eine einwertige ArninGschuizgruppe ist, der andere Rest oder die anderen Reste B jedoch Wasserstoffatome sind, oder mindestens ein Paar A und B zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bilden, die anderen Reste A und B jedoch Wasserstoffatome sind, und die Aminoschutzgruppen A und B gleich oder verschieden voneinander sein können, mit der entsprechenden ff-Hydroxy-i-aminoalkansäure oder deren aminogeschütztem Derivat der Formel (VII)

A'

N(CHj)₁₁CHCOOH OH

(VHD

in der A' ein WasserstofTatom und B' ein Wasserstoffatom oder eine einwertige Aminoschutzgruppe bedeuten oder A' und B' zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bilden und η die Zahl 1,2 oder 3 ist, oder einem funktioneilen Äquivalent der Verbindung (VII) acyliert und

(b) aus der erhaltenen l-N-acylierten Verbindung der Formel (IV)

H₂N-

HO

H₂N

CH₃

oder der Formel (IV")

HO

CH,

(IV")

in der A, B, A', B' und π die angegebenen Bedeutungen haben, die noch vorhandcne(n) Aminoschutzgruppe(n) auf bekannte Weise abspaltet.

Dieses Verfahren kann als weitere Stufe die Überführung der Verbindung (VI) in ein pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz umfassen, indem man Segsbenenfalls auf bekannte Weise mit einer pharmazeutisch verträglichen organischen oder anorganischen Säure umsetzt.

Das vorstehend erläuterte Verfahren kann auf dieselbe Weise, w;ie weiter vorn bereits beschrieben, durchgeführt werden. Es ist möglich, als Ausgangsverbindung 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B (V), deren Aminogruppen nicht geschützt sind, in Form der freien Base oder in Form eines Säureadditionssalzes mit -»o einer geeigneten Säure, wie Salzsäure, einzusetzen. Vorzugsweise verwendet man jedoch als Ausgangsverbindung ein teilweise aminogeschütztes Derivat von 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B der Formel (V), bei dem alle oder einige der drei Aminogruppen und die Methyiaminogruppe mit Ausnahme der 1-Aminogruppe mit bekannten Aminoschutzgruppen geschützt sind und das durch Einführen bekannter Aminoschutzgruppen in die Verbindung (V) herstellbar ist.

5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B, das als w Ausgangsverbindung zur Herstellung der Verbindungen d bis f von Anspruch 1 verwendet wird, läßt sich aus dem bekannten 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B (Japanese Journal of Antibiotics, Vol. 32, S. 178 [1979J) durch N-Methylierung der 6'-Aminogruppe analog JP-OS 83 671/72, US-PS 39 25 353 oder »Journal of Antibiotics«, Bd. 25, S. 743 (1972), herstellen.

Beispiel 1

5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B

a) 4,0 g (9,18 mMol) 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B werden in einem Gemisch aus 40 ml Wasser und 40 ml Methanol gelöst, worauf man eine Lösung von 5,8 ml (9,18 mMol) Triäthylamin und 2,72 g (11,02 mMol) 2-(tert.-Buloxycarbonyloxyimino)-2-phenylacetonitril (Handelsprodukt BOC-ON von der Aldrich Co.. USA) in 40 ml Methanol zugibt. Das erhaltene Gemisch wird 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, worauf man die entstandene 6'-N-tert.-Butoxycarbonyl-5,3',4'-tridesoxykanamycin B enthaltende Lösung mit 2 ml 17prozentigem wäßrigem Ammoniak vermischt und zur Trockene einengt. Der Rückstand wird in 100 ml Wasser aufgenommen, und die Lösung wird mit 6 N Salzsäure auf pH 7,4 eingestellt, mit 50 ml Äthyläther gewaschen, und dann durch eine Säule (Innendurchmesser 20 mm) von 100 ml Amberlite® CG-50 (NHf-Form) geleitet. Die Säule wird mit 300 ml Wasser und 150 ml 0,1 M wäßrigem Ammoniak gewaschen und dann mit 0.2 M wäßrigem Ammoniak eluiert. Das Eluat wird in 5 ml Fraktionen aufgefangen, und die Fraktionen Nr. 11 bis 24 werden vereinigt und zur Trockene eingeengt, wobei 2,1 g (42,5%) o'-N-tert.-Butoxycarbonyl-S^'^'-tridesoxykanamycin B erhalten werden. Durch Eindampfen der Fraktionen Nr. 26 bis 33 erhält man 1,42 g (35,6%) nicht umgesetztes 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B.

b) 1,86 g (3,45 mMol) des vorstehend erhaltenen 6'-N-tert.-Butoxycarbonyl-S^Vi'-tridesoxykanamycin B werden in 60 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran gelöst, worauf man 1,31 g (34,5 mMol) Lithiumalumäniumhydrid zugibt und 20 Stunden unter Rückfluß auf 8O⁰C erhitzt. Zu dem erhaltenen Reaktionsgemisch werden 200 ml Wasser getropft, wobei sich ein Niederschlag bildet, der abfiltriert wird. Aus dem Filtrat wird Tetrahydrofuran abgedampft, worauf man den pH durch Zugabe von Salzsäure auf pH 6,5 einstellt und die Lösung durch eine Säule (12 mm Innendurchmesser) von 30 ml Amberlite® CG-50 (NH4-Form) leitet. Die Säule wird mit 150 ml Wasser gewaschen und nacheinander mit 150 ml 0,2 M wäßrigem Ammoniak, 150 ml 0,3 M wäßrigem Ammoniak und 0,4 M wäßrigem Ammoniak eluiert. Das Eluat wird in 6-ml-Fraktionen aufgefangen, und die Fraktionen Nr. 11 bis 17 werden vereinigt und zur Trockene eingeengt, um 740 mg (39,9%) nicht umgesetztes o'-N-tert.-Butoxycarbonyl-SJVi'-tridcsoxyliinamycin B zu erhalten. Durch Eindampfen der Prak-

tionen Nr. 37 bis 55 erhält man 592 mg (32,4%) des gewünschten 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B.

Beispiel 2

l-N-[(S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl]-5,3',4'-tridesoxykanamycin B

a) 4,36 g (10 mMol) 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B werden in 100 ml wasserfreiem Dimethylsulfoxid gelöst und mit 10,5 g (48 mMol) Zinkacetat [Zn(CH₃CO₂), • 2H₂OJ versetzt Das erhaltene Gemisch wird 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um einen Zinkkomplex von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B zu bilden. Nach Zugabe von 12,0 g (39,5 mMol) p-Methoxybenzyl-S-4,6-dimethylpyrimid-2-yl-thiocarbonat wird das Gemisch 7,5 Stunden bei 50⁰C gerührt, um die N-p-Methoxybenzyloxycarbonylierung durchzufuhren. Die erhaltene Reaktionslösung wird in 1000 ml Wasser gegossen und mit wäßrigem Ammoniak auf pH 11 eingestellt, um den Zinkkomplex zu zersetzen. Der entstehende Niederschlag wird abfiltriert, mit 500 ml Wasser gewaschen und in 60 ml Chloroform/Methanol/17% wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 50:10:1) gelöst. Die Lösung wird an einer Säule aus 500 g Silicagel (Wako^e-GeI C-200) Chromatographien und mit demselben Lösungsmittelgemisch entwickelt, wobei 4,1 g (44%) 3,2',6'-Tri -N -p - methoxybenzyloxycarbonyl -5,3',4'- tridesoxykanamycin B als farbloses Pulver erhalten werden.

3,7 g (4 mMol) des Produkts werden in 50 ml Dimethylsulfoxid gelöst und mit 0,95 ml (8 ·-. .Mol) Äthyltrifluoracetat versetzt. Das erhaltene Gemisch wird 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die 3"-N-Trifluoracetylierung durchzuführen und 3,2',6'-Tri-N-pmethoxybenzyloxycarbonyl-3"-N-trifluoracetyI-5,3',4'- tridesoxykanamycin B zu erhalten.

b) Die das N-geschützte Kanamycin B-Derivat enthaltende Reaktionslösung aus Stufe (a) wird mit 0,6 ml (4,4 mMol) Triäthylamin und dann mit einer Lösung von 1,9 g (6 mMol) N-Hydroxysuccinimidester von (S)-4-tert.-Butoxycarbonylamino-2-hydroxybuttersäure in 20 ml Dioxan versetzt. Das Gemisch wird 19 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann in 500 ml Wasser gegossen. Der entstehende Niederschlag wird abfiltriert und mit 100 ml Wasser gewaschen, wobei 10,9 g eines farblosen Pulvers erhalten werden, das man in 20 ml 90prozentiger Trifluoressigsäure löst und die Lösung 45 Minuten bei Raumtemperatur stehenläßt, um die Aminoschutzgruppen abzuspalten. Die Lösung wird dann zur Trockene eingeengt, und der Rückstand wird in 100 ml Wasser aufgenommen. Die wäßrige Lösung wird dann mit wäßrigem Ammoniak auf pH 10,5 eingestellt und 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die Trifluoracetylgruppe abzuspalten. Die erhaltene Reaktionslösung engt man auf ein Volumen von etwa 20 ml ein, bringt sie durch Zusatz von wäßrigem Ammoniak auf pH 7,5, verdünnt mit 50 ml Wasser und gibt auf eine Säule von 150 ml Amberlite" CG-50-Harz(NH?-Form) auf. Die Säule wird nacheinander mit 750 ml Wasser und 500 ml 0,5 N wäßrigem Ammoniak gewaschen und dann mit 0,8 N wäßrigem Ammoniak eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Eluatfraktionen werden vereinigt und zur Trockene eingeengt, wobei 1,76 g (72%) l-N-((S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl]-5,3',4'-tridesoxykanamycin B-monocarbonat-monohydrat als farbloses Pulver erhalten werden. Gesamtausbeute 32%.

Beispiel 3

l-N-[(RS)-3-Amino-2-hydroxypropionyl]-5,3',4'-tridesoxykanamycin B

(a) 435,5 mg (1 mMol) 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B werden in 10 ml wasserfreiem Dimethylsulfoxid gelöst und mit 1,05 g (4,8 mMol) Zinkacetat [Zn(CH₃CO_2/2 - 2 H₂O] versetzt. Das erhaltene Gemisch wird 23 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, worauf man eine

ίο Lösung von 937,5 mg (3,9 mMol) tert-Butyl-S-4,6-dimethyIpyrimid-2-ylthiocarbonat in 5 ml Dimethylsulfoxid zugibt und das erhaltene Gemisch 24 Stunden bei 5ö°C rührt, um die N-tert.-Butoxycarbonylierung durchzuführen. Die erhaltene Reaktionslösung wird

π mit 15 ml Wasser vermischt, mit wäßrigem Ammoniak auf pH 11 gebracht, mit 6,4 g Natriumchlorid verse'zt und mit 2 x 15 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatextrakte werden vereinigt und zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wird in 6 ml Dimethylsulfoxid aufgenommen, mit 0,125 ml (1 mMol) Äthyltrifluoracetat vermischt und 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die 3"-N-Trifluoracetylierung durchzuführen,
b) Die S^^-Tri-N-tert-butoxycarbonyl^-N-trifluoracetyl-5,3',4'-tridesoxykan«nycin B enthaltende Reaktionslösung aus Stufe (a) wird mit 0,1 ml (0,7 mMol) Triäthylamin und 384 mg (1,05 mMol) N-Hydroxysuccinimidester von p-Methoxybenzyloxycarbonylisoserin versetzt. Das erhaltene Gemisch wird 20 Stunden bei

jo Raumtemperatur gerührt, dann mit 10 ml Wasser vermischt und mit zweimal 10 ml Äthylacetat extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden eingeengt, mit 20 ml 3 N Salzsäure/50% Methanol versetzt und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um gleichzeitig die tert.-But-

ίί oxycarbonyl- und p-Methoxybenzyloxycarbonylgruppen als Aminoschutzgruppen abzuspalten. Die erhaltene Lösung wird mit wäßrigem Ammoniak auf pH 10 gebracht und 21 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die Trifluoraceiylgruppe abzuspalten. Die erhaltene

•to Reaktionslösung wird eingeengt, mit Wasser verdünnt und auf eine Säule von 25 ml Diaion® WK-IOS (NHf-Form; von der Mitsubishi Kasei K. K., Japan) aufgegeben. Die Säule wird mit 125 ml Wasser gewaschen und dann mit 0,4 N wäßrigem Ammoniak eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Eluatfraktionen werden vereinigt und zur Trockene eingeengt, wobei man 257 mg l-N-(3-Ammo-2-hydroxypropionyl)-5,3',4'-tridüsoxykanamycin B-monocarbonat als farbloses Pulver erhält. Gesamtausbeute 42%.

Beispiel 4

l-N-[(S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B

y> 583 mg (1,10 mMol) des in Beispiel 1 erhaltenen 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B werden in 10 ml 90prozentigem wäßrigem Dimethylsulfoxid gelöst und mit 1,16 g (5,28 mMol) Zinkacetat (Zn(CH₃CO₂J₂ -2H₂O] versetzt. Das Gemisch wird 20 Stunden bei

wi Raumtemperatur gerührt, worauf man eine Lösung von 1,06 g (4,29 mMol) 2-(tert.-Butoxycarbonyloxyimino)-2-phenyIacetonitril in 5 ml Dimethylsulfoxid zugibt und weitere 6 Stunden bei 5O⁰C rührt, um die N-tert-Butoxycarbonylierung durchzuführen. Die erhaltene Lösung wird mit 2 ml 17prozentigem wäßrigem Ammoniak und dann mit 100 ml Wasser vermischt und mit 50 ml Äthyläther gewaschen. Die abgetrennte wäßrige Schicht wird mit 17prozentigem wäßrigem Ammoniak

auf pH 11 eingestellt, mit 2 g Natriumchlorid vermischt und mit Äthylacetat (3 x 100 ml) extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird an einer Säule (20 mm Innendurchmesser) von 50 g Silikagel (Wako-Gel C-200 von der Wako Junyaku K. K., Japan) unter Verwendung von Chlorofonn/Methanol/konz. wäßrigem Ammoniak (Volumenverhältnis 30 : 10 :1) als Eluiermittel Chromatographien. Das Eluat wird in 10-ml-FraJctionen aufgefangen, und die Fraktionen Nr. 25 bis 50 werden vereinigt und eingedampft, um 607 mg (73,6%) S^o'-Tri-N-tert-butoxycarbonyl-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B zu erhalten.

590 mg (0,787 mMol) des erhaltenen Produkts werden in 10 ml Dirnethylsulfoxid gelöst und mit 0,14 ml (1,18 mMol) Äthyltrifluoracetat versetzt Das Gemisch wird 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die S'^N-Trifluoracetylierung durchzuführen. Die erhaltene S^'.o'-Tri-N-tert.-butoxycarbonyW-N-trifluoracclyl-5,3',4'-UidcSuxy-o'-N-niethyikanamycin B enthaltende Reaktionslösung wird mit 0,16 mi (1,18 mMol) Triäthylamin und 420 mg (1,18 mMol) N-Hydroxysuccinimidester von (S)-4-p-Methoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxybuttersäure, geiöst in 4 ml Tetrahydrofuran, versetzt und 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die 1-N-Acylierung durchzuführen. Hierauf gibt man 100 ml Wasser zu, extrahiert mit 2 x 100 ml Äthylacetat, trocknet die vereinigten Extrakte über Natriumsulfat und erhält durch Eindampfen das 1-N-acylierte Produkt in Form des Amino-geschützten Derivats.

Das erhaltene 1-N-acylierte Produkt wird in 10 ml 90prozentiger wäßriger Trifluoressigsäure gelöst und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die tert-Butoxycarbonyl- und p-Methoxybenzyloxycarbonylgruppen abzuspalten, worauf man die Reaktionslösung zur Trockene einengt. Der Rückstand wird in 30 ml Wasser aufgenommen, mit 17% wäßrigem Ammoniak auf pH 10 eingestellt und 18 Stunden bei Raumtemperaturgerührt, um die Trifluoracetylgruppe abzuspalten. Die erhaltene Reaktionslösung wird mit 6 N Salzsäure auf pH 7,5 eingestellt und durch eine Säule (13 mm Innendurchmesser) von 20 ml Amberlite* CG-50 (NH/-Form) geleitet. Die Säulewird mit 100 ml Wasser gewaschen und nacheinander mit 16U inl 0,5 M wäßrigem Ammoniak und 100 ml 0,8 M wäßrigem Ammoniak eluiert. Das Eluat wird in4-m-Fraktionen aufgefangen, und die Fraktionen Nr. 27 bis 62 werden vereinigt und eingedampft, wobei 356 mg (71,8%) des gewünschten l-N-[(S)-4-Amino-2-hydroxybuiyryl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B erhalten werden.

Beispiel 5

l-N-[(RS)-3-Amino-2-hydroxypropionyl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methyIkanamycin B

102 mg (0,136 mMol) des in Beispiel 4 erhaltenen 3,2',6'-Tri-N-tert-butoxycarbonyl-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B werden in 3 ml Dimethylsulfoxid gelöst und mit 0,02 ml (0,204 mMol) Äthyltrifluoracetat versetzt Das Gemisch wird 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt, worauf man die 3,2',6'-Tri-N-tert,-Butoxycarbonyl-3"-N-trifluoracetyI-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B enthaltende Reaktionslösung mit 0,03 ml (0,204 mMol) Triäthylamin und 75 mg (0,204 rnMol) N-Hydroxysuccinimidester von 3-p-Methoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxypropion- säure, gelöst in 0,5 ml Tetrahydrofuran, versetzt. Das Gemisch wird 7 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die 1-N-Acylierung durchzuführen. Hierauf versetzt man die Lösung mit 10 ml Wasser und extrahiert dann mit 2 x 10 ml Äthy'acetat. Die vereinigten Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft, wobei 136 mg des 1 N-acylierten Produkts in Form d.es aminogeschützten Derivats erhalten werden. Dieses 1-N-acylierte Produkt »··' J in 3 ml 90prozentiger wäßriger TriiiUöressigsäure gelö~t und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die tert.-Butoxycarbonyl- und p-Methoxybenzyloxycarbonylgruppen abzuspalten. Der durch Eindampfen der Lösung erhaltene Rückstand wird in 10 ml Wasser aufgenommen, mit 17prozentigem wäßrigem Ammoniak auf pH 10 eingestellt und 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, um die Trifluoracetylgruppe abzuspalten. Die erhaltene Reaktionslösung wird mit 6 N Salzsäure auf pH 6,4 eingestellt und durch eine Säule (11 mm Innendurchmes-

ifi ser) von 10 ml Amberlite® CG-50 (NH₄ ^S-Form) geleitet. Die Säule wird mit 30 ml Wasser und 30 ml 0,2 M wäßrigem Ammoniak gewaschen und dann mit 0,5 M wäßrigem Ammoniak eluiert. Das Eluat wird in 1-mI-Fraktionen aufgefangen, und die Fraktionen Nr. 4 bis 7 werden

r. vereinigt und eingedampft, wobei 38,1 mg (45,4%) des gewünschten 1 - N - [3 - Amino - 2 - hydroxypropionyl]-5,3'.4'-tridesoxy-6'-N-methylkanamycin 3-monocarbonat erhalten werden.

Beispiel 6

Herstellung von !-N-[(S)-5-Aminc-2-h>droxyvaleryl]-5,3',4'-tridesoxy-6'-N-methy!kanamycin B

i'> Das Verfahren von Beispiel 5 wird unter Verwendung von 76 mg (0,204 mMol) N-Hydroxysuccinimidester von (S)-5-p-Methoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxyvaleriansäure anstelle von 3-p-Methoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxypropionsäure-N-hydroxy-

"·" succinimidester bei der Umsetzung mit 3,2',6'-Tri-N-tert.-butoxycarbonyl-V'-N-trifluoracetyl - 5,3',4'- tridesox; -6'-N-methylkanamycin B wiederholt. Nach dem Eluieren der Amberlite^s-CG-50-Säule werden die Eluatfraktionen Nr. 11 bis 18 vereinigt und zur Trok-

>> kene eingeengt, wobei 47,2 mg (53,8%) der gewünschten Verbindung als Monocarbonat erhalten werden.

Claims

Patentansprüche:
1. An der 6- oder/und 1-Aminogruppe substituierte 5,3'^'-Tridesoxykanamycine B der allgemeinen Formel

CH₂OH
O

NHR₂

in der die Substituenten R₁ und R₂ folgende Bedeutungen und Zuordnungen haben:

a) Wasserstoff

b) (RS)-3-Amino-2-hydroxypropionyl

c) (S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl

d) (RS)-3-Amino-2-hydroxypropionyl

e) (S)-4-Amino-2-hydroxybutyryl O (S)-5-Amino-2-hydroxyvaleryl

Methyl

Wasserstoff

Wasserstoff

Methyl

Methyl

Methyl

und deren pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze.

2. Verfahren zur Herstellung von 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methyIkanamycin B (Verbindung a) gemäß Anspruch 1) der Formel (V)

H₂N-

HO

HO

dadurch gekennzeichnet, daß man

(a) 5,3\4'-Tridesoxykanamycin B der Formel (Vl)

H₂N-

HO ο

HO

H₂N

NHCH,

NH₂

in eine o'-N-Alkyloxycarbop.yl-, Cycloalkyloxycarbonyl- oder Aralkyloxycarbonyl-Verbindung der Formel (X)

H₂N-

HO

HO

Η,Ν

in der R₃ eine Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, eine Cycloalkylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder eine Aralkylgmppe, insbesondere eine PhenyHC,- bis C₄)-alkylgruppe, vorzugsweise Benzylgruppe, bedeutet, überfuhrt und diese Verbindung (b) mit einem Metallhydrid in einem wasserfreien organischen Lösungsmittel reduziert.

3. Verfahren zur Herstellung der l-N-{ff-Hydroxy-<a-aminoalkanoyl]-5,3',4'-tridesoxykanamycine B (Verbindungen b) und c) gemäß Anspruch 1) der Formel (II)

H₂N-K

HO

HO

Η,Ν

(CHJ_nNH₂

in der η die Zahl 1 oder 2 ist, dadurch gekennzeichnet, daß man

(a) die 1-Aminogruppe von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B der Formel (VI)

H-N-

HO

HO

H₃N

oder eines teilweise aminogeschützten Derivats von 5,3',4'-Tridesoxykanamycin B der Formel (VT)

HO

(VI')

5 6

in der A ein Wasserstoffatom ist und mindestens ein B eine einwertige Aminoschutzgruppe bedeutet, der andere Rest oder die anderen Reste B jedoch Wasserstoffatome sind, oder mindestens ein Paar A und B zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgnippe bilden, die anderen Reste A und B jedoch Wasserstoffatome sind und die Aminoschutzgnippen A und B gleich oder verschieden voneinander sein können, mit der entsprechenden a-Hydroxy-o-aminoalkansäure oder deren aminogeschütztem Derivat der Formel (VH)

A'

N(CH₂X₁CHCOOH

/ I

B' OH

(VID

in der A' ein Wassarstoffatom und B' ein Wasserstoffatom oder eine einwertige Aminoschutzgruppe bedeuten oder A' und B' zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bilden und η die Zahl 1 oder 2 ist, oder einem funktionell en Äquivalent der Verbindung (VH) acyliert und
(b) aus der erhaltenen 1-N-acylierten Verbindung der Formel (HO

H₂N-

HO

HO

H,N

NH₂

(CHj)_nN

B'

oder der Formel (H")

HO

HO

(CHJ_nN

B'

in der A, B, A', B' und η die angegebenen Bedeutungen haben, du· noch vorhandene(n) Aminoschutzgruppe(n) in an sich bekannter Weise abspaltet.

4. Verfahren zu; Herstellung der l-N-Ie-Hydroxy-o^aminoalkanoyll-S^'^'-tridesoxy-o'-N-methylkanamycine B Verbindungen d), e) und f) gemäß Anspruch 1) der Formel (IV)

HO ο

HO

H₂N

NHCH,

(IV)

in welcher η die Zahl 1, 2 oder 3 bedeutet, dadurch gekennzeichnet, daß man

(a) die 1-Aminogruppe von 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-uiethylkanamycin B der Formel (V)

HO

HO

NHCH₃

(V)

oder eines teilweise aminogeschützten Derivats von 5,3',4'-Tridesoxy-6'-N-methylkanamycin B der Formel (V)

HO

HO

CH₃

(V)

in der A ein Wasserstoffatom und mindestens ein B eine einwertige Aminoschutzgruppe bedeuten, der andere Rest oder die anderen Reste B jedoch Wasserstofiatome sind, oder mindestens ein Paar A und B zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bilden, die anderen Reste A und B jedoch Wasserstoffatome sind, und die Aminoschutzgruppen A und B gleich oder verschieden voneinander sein können, mit der entsprechenden ar-Hydroxy-o-aminoalkansäure oder deren aminogeschütztem Derivat der Formel (VII)

N(CH₂^CHCOOH OH

(VIII)

in der A' ein Wasserstoffatom und B' ein Wasserstoffatom oder eine einwertige Aminoschutzgruppe bedeuten oder A' und B' zusammen eine zweiwertige Aminoschutzgruppe bilden und π die Zahl 1,2 oder 3 ist, oder einem funktionellen Äquivalent der Verbindung (VII) acyliert und

9 (b) aus der erhaltenen 1-N-acylierten Verbindung der Formel (IV)

H₂N-^H° ,0

CHj

(IV)