NL8103639A - Nieuwe 1-n-(alfa-hydroxy-omega-aminoalkanoyl)-derivaten van 5,3',4'-trideoxy-,5,3',4'-trideoxy-6'-methyl-of 5,3',4',6"-tetradeoxykanamycine-b, en werkwijze voor het bereiden daarvan. - Google Patents

Description

?·( ..... " ' ^

ί I

Lx 5871

Nieuwe 1-N-(a-hydroxy-«-aminoalkanoyl)-derivaten van 5,3' ,4'-tri-deoxy- , 5*3' ^’-trideoxy-é'-N-methyl- of 5i3* »Bn*=tetradeoxy- kanamycine-B, en-werkwijze voor het bereiden daarvan.

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe half-synthetische aminoglycoside-antibiotica, waaronder 1-N-(a- hydroxy-ω- aminoalka-noyl)-5,3^41 -trideoxykanamycine-B, 1-N- Ca -hydroxy-» -aminoalkanoyl) “3*3',4’,6H-tetradeoxykanamycine-B en-5,3',4',6n-tetradeoxykanamycine-5 B, alsmede 1-N-(a-hydroxy-üi-aminoalkanoyl)-5,31 j^’-trideoxy-ó’-N-methylkanamycine-B en-5,3’Λ'-trideoxy-ó’-N-methylkanamycine-B, die alle nieuwe verbindingen zijn, die bruikbaar zijn als bacteriebe-strijdingsmiddel. De uitvinding heeft verder betrekking op een werkwijze voor het bereiden van deze nieuwe verbindingen. Voorts heeft 10 de uitvinding betrekking op een bacteriebestrijdingsmiddel, dat tenminste een van deze nieuwe verbindingen als het werkzame bestanddeel bevat.

Dibekacine, d.w.z. 3' ,4*-dideoxykanamycine-B is reeds halfsynthetisch bereid uit kanamycine-B, zie JP-A 7593/75, JP-B 794 612, 15 en ÏÏS 3 753 973- Dibekacine is reeds uitgebreid toegepast voor het behandelen van verschillende bacterie-infecties als een chemotherapeu-tisch middel, dat werkzaam is tegen voor kanamycine gevoelige bacteriën, en tevens tegen verschillende voor kanamycine resistente bacteriën. Voorts is reeds op half-synthetische wijze habekacine bereid, 20 d.w.z. 1-N-(L-4-amino-2-hydroxybutyryl)-dibekacine, dat een doeltreffend chemotherapeutisch middel tegen voor dibekacine resistente bacteriën is, zie JP-A 33 629/77 en US 4 107 424. Voorts is half-syn-thetisch 1-N- (a-hydroxy-a>-amino-alkanoyl) -6' -N-methyldibekacine bereid, dat zeer werkzaam tegen velschillende bacteriestammen is ger '1 25 bleken, zie JP-A 115 199/74, GB 1475 481, en ÏÏS ^147 861. Bij verder onderzoek zijn synthetisch 6H-deoxy- of 4",6M-dideoxyderivaten van dibekacine en habekacine bereid. Voorts is gebleken, dat de 6"-de-oxyderivaten en 4”,6M-dideoxydederivaten van dibekacine of habekaci-nen niet alleen een geringe ototoxiciteit te vertonen, doch ook een 30 even sterke bacteriebestrijdingswerking als dibekacine of habekacine, zie JP-A 119323/79, GB-A 2 058 774, en ÏÏS-aanvrage 174 630.

Ook is 5,3',4·-trideoxykanamycine-B als een verder deoxy-derivaat van dibekacine-bereid,(zie Jap. J. Antibiot. 32, (1979) S-78) , Het is echter gebleken, dat deze verbinding minder werkzaam is 81öoJ39 * ' » t w 2 * dan dibekacine.

Hieraan kan worden toegevoegd, dat verder enige deoxy-derivaten van 1-N-(L-4-amino-2-hydroxybutyryl)-kanamycine-A (zgn. amikacine) zijn bereid, waaronder 3'-deoxyamikacine, zie JP-A 4 9 105/ 3 75 en US ^ 104 372 , 3'»^' -dideoxyamikacine, zie JP-A 11 ^02/79, GB-A 2 0^3 03b en US-aanvrage -114 7791 6”-deoxyamikacine, zie JP-A 5^ 733/ 79» *l·”,6"-dideoxyamikacine, zie JP-A 5½733/79 * 3'»V,4”,6"-tetra-deoxyamikacine, zie JP-A 138 685/79, en 3 ',**·'»6"-trideoxyamikacine, zie JP-A 5657/80, alsmede 3',6”-dideoxyamikacine, 5»3’-dideoxyamika-10 cine en 5*3',6"-trideoxyamikacine, zie JP-A 107 202/80, welke verbindingen alle een geringe acute toxiciteit en een geringe ototoxici-teit vertonen, terwijl de nuttige bacteriebestrijdingswerking ervan even sterk is als die van amikacine·

Bij een verdere ontwikkeling van deze onderzoekingen op 15 deoxyderivaten van dibekacine of habekacine is bet nu gelukt een nieuwe verbinding te bereiden, en wel 5,3'',6"-tetradeoxykanamycine-B, die duidelijk werkzaam tegen bepaalde soorten bacteriën is gebleken, terwijl daarentegen 5*3' ,Λ'-trideoxykanamycine-B geen bacteriebestri jdingswerking vertoont. Voorts is bet gelukt een nieuwe ver-20 binding 5*3',*l·'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B te bereiden, die eveneens een bacteriebestrijdingswerking vertoont, die sterker is dan die van 5*3',^'-trideoxykanamycine-B, in bet bijzonder tegen bepaalde resistente stammen. In een poging om dergelijke- nieuwe derivaten van 5*3’ ,V-trideoxykanamycine-B, 5*3' ***' ,6"-tetradeoxykanamycine-B of 25 5»3'*^'-trideoxy-6*-N-methylkanamycine-B te bereiden, die een betere bacteriebestrijdingswerking bebben, zijn nu nieuwe 1-N-(cc-hydro xy-ίύ -aminoalkanoyl)-derivaten van deze deoxykanamycinen-B gesynthetiseerd door het acyleren van de 1-aminogroep van deoxykanamycine-B met een ce-bydroxy-a)-aminoalkaanzuur. Verder is ontdekt, dat de ver-30 kregen nieuwe 1-N-(cc-hydroxy-a>-aminoalkanoyl)-derivaten van 5*3,»^,“-trideoxykanamycine-B, 5*3'*^'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B, en 5*3' t1*·’ ,6"-tetradeoxykanamycine-B zeer werkzaam zijn tegen voor kana-mycine gevoelige en daartegen resistente bacteriën, terwijl zij verder een sterke bacteriebestrijdingswerking tegen een breed gebied 35 van bacteriën vertonen.

Volgens een eerste meest algemeen gezichtspunt van deze uitvinding wordt als nieuwe verbinding 1-N-(cc-hydroxy-ai-aminoalkanoyl) ~5i3' ,^'-trideoxy- of 1-N-(cc-hydroxy-ω-aminoalkanoyl)-5,3, Λ'-tri-deoxy-6’-N-methylkanamycine-B, of 5*3'-trideoxy-6'-N-methylkana- 8103639 \ x

* J

• 3 - mycine-B,of 1-N-(cί-hydroxy-öi-aminoalkanoyl)-5,3, »4·* »6w-tetradeo3Ey-kanamycine-B, of 5i3'>4*,6u-tetradeoxykanamycine-B verschaft, voorgesteld door de formule-(1) R- H0—„ w 2* 4* H-N 11 Γ~~~ ° QH 6 4 ' (ν^γ-^^V·0 nhr2

RtHN Λ—'"'"5\\^nh2 1 3 3 waarin R een hydroxyigroep of een waterstofatoom, en R^ een waterstofatoom of een a-hydroxy-6>-aminoalkanoylgroep met de formule -CO-CH-(CH-,) -NH0 I c. n c.

OH

is, waarbij n 1, 2 of 3 voorstelt, en R2 een waterstofatoom of een methylgroep is, mits R2 geen methylgroep is wanneer R een waterstof-10 atoom is, waarbij tevens een farmaceutisch geschikt zuuradditiezout van deze verbinding door de uitvinding wordt omvat·

Volgens een eerste voorkeursuitvoeringsvorm verschaft de uitvinding een nieuwe verbinding, die aan de voornoemde formule (1) voldoet, en een 1 -N- (a -hydroxy- α>-amino alkanoyl) -5,31 -41 -tri de oxy-' 13 kanamycine-B of een 1-N-(<x-hydroxy-6)-aminoalkanoyl)-3,3'Λ',6n-tetradeoxykanamycine-B is, zoals voorgesteld door de formule (2) 6» R λ 2' 4f

° \ H2N

H2KV^0hV'' ,T

\ C2) ΗΝ-~γ 3

CO

CHOH

i 81 0 3 6 3 9 (cH2)nNH2 ♦ ♦ . V» * . ( - k - waarin H een hydroxylgroep of een waterstofatoom, en n 1,-.2 of 3 voorstelt, terwijl R een hydroxylgroep is, wanneer deze verbinding 1-N-(oc -hydroxyl-ω-aminoalkanoyl) -5*31*4' -trideoxykanamycine-B is, terwijl R een waterstofatoom is,-wanneer-deze formule 1-N-(a-hy-5 droxy-w-aminoalkanoy1)-5,31,4* ,6,,-tetradeoxykanamycine-B is, terwijl voorts deze uitvoeringsvorm ook een farmaceutisch geschikt zuur-additiezout van de verbinding (2) omvat.·

Volgens een tweede voorkeursuitvoeringsvorm wordt een nieuwe verbinding verschaft, die door de formule (l) wordt voorge-10 steldi en die 5*3'Λ*i6M-tetradeoxykanamycine-B is, zoals voorgesteld door de formule (3)ί 6" 2' 4« CH3 /0 h2'n \ i__' 5’ NHo HPN-\X OH I 6 3" 0^\ \ \ NH 2 <3) H2N-^ q

1 J

dan wel een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout van deze verbinding.

13 Ce fysicochemische en biologische eigenschappen van de nieuwe verbindingen met de formules (2) en (3) zijn als volgt: (1) 1-N-((S)-i^-amino-2-hydfoxybutyryl)-513, ,4'-trideoxy-kanamycine-B-monocarbonaat-monohydraat is een stof in de vorm van een , i kleurloos poeder, dat bij 163··166 °C ontleedt, en dat een ioorteliji- 26 o 20 ke optische draaiing [a]^ = +8? (c 1, water) vertoont. De element-analyse ervan komt overeen met C^H^NgQ^.HgCO^.E^O (C 44,80 #, H 7»85 %, N 13*63 %)· Deze stof geeft een enkele vlek (positief voor | ninhydrine) bij Rf 0,05 en Rf 0,09 bij dunnelaagchromatografie op silicagel, ontwikkeld met butanol-ethanol-chloroform-17 %’s amonia 25 (4 · 5 ! 2 : 5 in volume) resp. met chloroform-methanol-geconc. amonia-water (1:4:2:1 in volume) als de desbetreffende ontwikkelings-oplossing; (2) 1-N-((RS)-3”aMiπo-2-hydroxypropionyl)-5^3,|4’-tri- deoxykanamycine-B-monocarbonaat is een stof in de vorm van een kleur- 30 loos poeder, dat bij 113- -116 °C ontleedt, en dat een ©oontelijke op- 27 ö tische draaiing [cc] ^ = +120 (c 1, water) vertoont. De element- 8103639 - 5 - 4

analyse komt overeen met C21ÏÏ42N609*H2C°3 H ?i 19 N

13,63 ¢). Deze stof geeft een enkele vlek (positief voor ninhydrine) bij Hf 0,12 en Hf 0,35 bij de voornoemde dunnelaagchromatografie op silicagel, ontwikkeld met butanol-ethanol-chloroform-17 %*s ammonia 5 (4 : 5 : 2 : 5 ia volume) resp· met chloroform-methanol-geconc. ammonia-water (1:4:2:1 in volume) als de desbetreffende ontwikkelings-oplossing: (3) 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5»3,*4',6H-tetra- deoxykanamycine-B-dicarbonaat is een stof in de vorm van een kleur- j

10 loos poeder, dat bij 131·-135 °C ontleedt, en een soortelijke optische draaiing [et] ^ « +90° (c 1, water) vertoont. De elementana-lyse komt overeen met C;>?Hj1 j^Oq.2H^CQ^ (C 44,71 H 7,30 #, N

13,04 %). Deze stof geeft een enkele vlek (positief voor ninhydrine) bij Hf 0,07 en Hf 0,23 bij de voornoemde dunnelaagchromatografie op , 15 silicagel, ontwikkeld met butanol-ethanol-chloroform-17 %'s ammonia (4 : 5 * 2 : 5 in volume) resp. met chloroform-methanol-geconc. ammonia-water (1:4:2:1 in volume) als de desbetreffende ontwikkelings-oplossing} (4) 5»3 ’ 14',ó’^tetradeoxykanamycine-B-dicarbonaat-monohy- 20 draat is een stof in de vorm van een kleurloos poeder dat bij 128·· 23 o 136 °C ontleedt, en een soortelijke optische draaiing [«] ^ » +102 (c 1, water) vertoont. De elementanalyse komt overeen met C18H37N5°6· 2H2C03.H20 (C 42,77 %, H 7,72 N 12,47 #). Deze stof geeft een enkele vlek (positief voor ninhydrine) bij Hf 0,42 en bij Hf 0,56 * 25 bij de voornoemde dunnelaagchromatografie op silicagel, ontwikkeld met butanol-ethanol-chloroform-17 #'s ammonia (4: 5 · 2 : 5 ia volume) resp. met chloroform-methanol-geconc. ammonia-water (1 : 4 : 2 : 1 in volume) als de desbetreffende ontwikkelingsoplossing.

De minimale onderdrukkingsconcentratie (pg/ml) van 1-N-((s) 30 -4-amino-2-hydroxybutyryl)-5*3' ,4f-trideoxykanamycine-B .(afgekort als . AHB-trideoxy-KMB), 1-N-((ES)-3-amino-2-hydroxypropionyl)-5»3l»4'-tri-deoxykanamycine-B (afgekort als AHP-trideoxy-KMB), en 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3'Λ' ,6"-tetradeoxykanamycine-B (afgekort al« AHB-tetradeoxy-KMB) met-de-formule (2) volgens de uitvinding, als-35 mede van de nieuwe verbinding 5»3*j4f,6H-tetradeoxykanamycine-B (afgekort als tetradeoxy-KMB) met de-formule (3) volgens de uitvinding, tegen verschillende mikro-organismen, werden bepaald volgens de reeksver dunningswerkwijze op een agar-voedingsbodem bij 37 °C, waarbij de schatting na 18 h broedtijd werd gemaakt. Ter vergelijking werden de 8103639 .* «t - 6 - minimale onderdrukkingsconcentraties van habekacine op dezelfde wijze bepaald.

De bacteriebestrijdingsspectra van deze nieuwe en bekende stoffen volgen uit tabel A.

5 Volgens een derde voorkeursuitvoeringsvorm van de uitvin ding wordt een nieuwe verbinding verschaft, die aan de formule (1) voldoet, en 1-N-(cc-hydroxy-o>-aminoalkanoyl)-5»3*tV-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B is, voorgesteld door de formule (4·); _ .....- ΗΟ'-Λ6" 2' Η2Ν\τ^ν^ιη 6 „ Ί "^^hch3 ! 1 3 ik) co

CHOH

(CH2)nNH2 10 waarin n gelijk is aan 1, 2 of 3» terwijl deze uitvoeringsvorm ook farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten van deze verbinding omvat.

Volgens een vierde voorkeursuitvoeringsvorm wordt een nieuwe verbinding verschaft, die eveneens aan de formule (1) voldoet, 15 en die 5*3'^'-trideoxy-é'-N-methylkanamycine-B is, voorgesteld door de formule (5)s '? i 6" ' . . [ ΗΟ^Λ 2' 4» i \ H2Ny\3>^ 3" OH 6 5 Λ--0 NHCH3 Η^Λ^ν”2 (5)

1 J

8103639 £ $ -7 - of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan·

Se fysicochemische en biologische eigenschappen van de nieuwe verbindingen met de formule (4) of (5) zijn als volgt: (5) 1-N-((s)-4-amino-2-hydro2ybutyryl)-5»3',4'-trideoxy-56'-N-methylkanamycine-B-monocarbonaat is een stof in de vorm van een kleurloos poeder, dat bij 162·«165 °C ontleedt, en een soortelijke optische draaiing [os] ^ = +88° (c 1, water) vertoont· De element-analyse ervan komt overeen met C^H^gNgO^.H^CO^ (C 47,05 #, H 7*90 #» N 13»72 %)· Deze stof vormt een enkele vlek (positief voor ninhydrine 10 bij Rf 0,05 en Bf 0,08 bij dunnelaagchromatografie op silicagel, ontwikkeld met butanol-ethanol-chloroform-17 %'s ammonia (4 : 5 : 2: 5 ia volume) resp· met chloroform-methanol-geconc. ammonia-water (1:4:2 : 1 in volume) als ontwikkeloplossing· (6) 1-N-((RS)-3-amino-2-hydroxypropionyl)-5»3,»4,-trideo:xy-15 61 -N-methylkanamycine-B-monocarbonaat-monohydraat is een stof in de vorm van een kleurloos poeder, dat bij 1Ö2..164 °C ontleedt, en dat 23 o een soortelijke optische draaiing [«J^ = +30 (c 0,3» water) ver toont. De elementanalyse komt overeen met CggH^N^Og .H^CO^ .HgO (C 44,80 #, H 7*33 #» N 13*32 #). Deze stof vormt een enkele vlek 20 (positief voor ninhydrine) bij Rf 0,03 en Rf 0,14 bij de voornoemde dunnelaagchromatografie op silicagel, ontwikkeld met butanol-ethanol-chloroform-17 #'s ammonia (4: 5 : 2: 5 ia volume) resp. met chloroform-methanol-geconc. ammonia-water (1:4:2:1 in volume) als ontwikkeloplossing· 25 (7) 1-N-((S)-5-amino-2-hydroxyvaleryl)-3»3,»4'-trideoxy- 6*-N-methylkanamycine-B-monocarbonaat-monohydraat is een stof in de vorm van een kleurloos poeder, dat bij 163··166 °C ontleedt, en dat een·soortelijke optische draaiing [cc j ^ = +84 (c 0,3» water) ver- .**' toont. De elementanalyse ervan komt overeen met Cg^H^gNgO^.HgCOj.

30 Η^Ο (C 46,57 H 8,13 %, N 13*03 %)· Deze stof vormt een enkele vlek ^ (positief voor ninhydrine) bij Rf 0,03 en Rf 0,08 bij de voornoemde dunnelaagchromatografie op silicagel, ontwikkeld met butanol-ethanol-chloroform-17 #'s ammonia (4 ï 3 · 2 : 3 ia volume) resp. met chloroform-methanol-geconc· ammonia-water (1:4:2:1 in volume) als ontwikkel-33 oplossing.

(3) 5*3*,4,-trideoxy-6,-N-methylkanamycine-B-monocarbonaat-monohydraat is een stof in de vorm van een kleurloos poeder, dat bij 137··140 °C ontleedt, en dat een soortelijke optische draaiing [cc] 25 — +66 (c 1, water) vertoont. De elementanalyse ervan komt over- 81 03 6 39 Μ- * * ' - δ - een met C^H^N^.H^O^^O (C 45,36 96, Η 8,18 %, N 13,23 %) · Deze stof vormt een enkele vlek (positief voor ninhydrine) bij Bf 0,22 en Rf 0,49 bij de voornoemde dunnelaagchromatografie opsilicagel, ont- | wikkeld met butanol-ethanol-chloroform-1? %'b ammonia (4: 5 : 2 : 5 ia 5. volume) resp. chloroform-methanol-geconc. ammonia-water ¢1:4:2:1 ! in volume) als ontwikkeloplossing.

De minimale onderdrukkingsconcentraties ζμg/ml) van. 1-N- ; ((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3',4*-trideoxy-6'-N-methylkanamycine- , B (afgekort als AHB-trideoxy-MKMB), 1-N-((RS)-3-amino-2-hydroxy- \ 1 [ 10 propionyl)-5,3' ^'-trideoxy-é'-N-methylkanamycine-B (afgekort als j AHP-trideoxy-MKMB), en l-N-USi^-amino^-hydroxyvaleryl)^^' ,4'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B (afgekort als AHV-trideoxy-MKMB) met de formule (4) volgens de uitvinding, alsmede van de nieuwe verbinding 5,3',4'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B (afgekort als trideoxy-15 MKMB) met de formule (5) volgens de uitvinding tegen verschillende mikro-organismen werden bepaald volgens de reeksverbindingswerkwijze op een agarvoedingsbodem bij 37 °C, waarbij de schatting na 18 h broedtijd werd uitgevoerd. Ter vergelijking werden de minimale onderdrukkingsconcentraties van l-N-iiSj^-amino^-hydroxybutyryiy^' ,4'-20 dideoxykanamycine-B (d.w.z. habekacine) eveneens en op dezelfde wijze bepaald.

De bacteriebestrijdingsspectra van deze nieuwe en bekende verbindingen zijn in tabel B weergegeven.

Uit de tabellen A en B blijkt, dat de nieuwe verbindingen 25 volgens de uitvinding, die aan de formule (1) voldoen, waaronder de verbindingen met de formules (2), (3), (4) en (5), de groei van vele soorten bacteriestammen doeltreffend verhinderen. De nieuwe verbindingen volgens de uitvinding vertonen een geringe acute toxiciteit ^ voor dieren en ook voor mensen. Het is gebleken, dat de nieuwe ver-30 bindingen met de formule (2) en (3), zoals 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxy-, butyryl)-5,3’,4'-trideoxy-kanamycine-B, 1-N-(3**amino-2-hydroxypropi-onyl)-5,3',4'-trideoxykanamycine-B, 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl) “5,3',4',6M-tetradeoxykanamycine-B, en 5,3’,4',6"-tetradeoxykanamycine-B hebben een LD^-waarde van 25· «50 mg/kg, wanneer de acute toxiciteit 35 wordt bepaald door intraveneuze injectie bij muizen. Voorts is gebleken, dat de nieuwe verbindingen met de formule (5) en (4), zoals 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3',4'-trideoxy-6'-N-methylkana-mycine-B, 1-N-(3-amino-2-hydroxypropionyl)-5,3',4’-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B, 1-N-((S)-5-araino-2-hydroxyvaleryl)-5,3’,4'-tri- 8103639 ‘« - 9 - deoxy-β'-N-methylkanamycine-B, en 5i3'j^'-trideoxy-ó’-N-methylkana-mycine-B een LD,-Q-waarde van 50·.100 mg/kg hebben, eveneens bepaald door intraveneuze injectie bij muizen.

Be nieuwe verbindingen volgens de uitvinding worden gewoon-5 lijk verkregen in de vorm van de vrije base of een hydraat of carbo-naat daarvan. Deze verbindingen kunnen elk gemakkelijk worden omgevormd in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout, zoals het hydrochloride, hydrobromide, sulfaat, fosfaat, nitraat, acetaat, maleaat, citraat, ascorbaat, methaansulfonaat en dergelijke, door re-10 actie met het overeenkomstige farmaceutisch aanvaardbare anorganische of organische zuur in een waterig midden.

De nieuwe verbindingen met de formules (1), (2), (3)» (4) of (5) en de farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan kunnen op elke gewenste wijze, zoals oraal, intraperitonaal, intra- , 15 veneus, subcutaan of intramusculair, worden toegediend door gebruik te maken van de voor een dergelijke toediening geschikte vorm, zoals dit ook bij de bekende kanamycinen gebruikelijk is. Zo kunnen deze verbindingen bijvoorbeeld oraal worden toegediend door gebruik te maken van elke voor deze wijze van toediening geschikte vorm, zoals 20 poeders, capsules, tabletten, siroop of dergelijke. Sen geschikte dosis van deze verbindingen voor een doeltreffende behandeling van bacterie-infecties bedraagt 0,1..1 g per persoon per dag bij orale toediening. Het verdient de voorkeur een dergelijke dosis in drie of vier gedeelten per dag toe te dienen. Deze nieuwe verbindingen kunnen *25 ook intramusculair worden toegediend met een dosis van 50..500 mg per persoon en 2.Λ maal per dag. Voorts kunnen deze verbindingen in een zalf voor uitwendig gebruik worden opgenomen, waarin de werkzame verbinding aanwezig is in een concentratie van 0,5··5 gew.# gemengd .* met een bekende zalfdrager zoals polyetheenglycol. Voorts zijn deze 50 nieuwe verbindingen bruikbaar voor het steriliseren van heelkundige instrumenten en verplegingsmateriaal.

Volgens een tweede gezichtspunt van de uitvinding wordt een bacteriebestrijdingssamenstelling verschaft, die als werkzaam bestanddeel 1-N-(cc-hydΓOxy-ω-aminoalkanoyl)-5,3, ,^'-trideoxykanamycine-B, 55 1-N-(a-hydroxy-ea-aminoalkanoyl)-5,3' *4·' ,6n-tetradeoxykanamycine-B, dan wel een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan bevat, dit in overeenstemming met de formule (2), of 5,3’*,6H-tetradeoxy-kanamycine-B of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan, in overeenstemming met de formule (5), ia een voor bacterie- 8103639 ________ - 10 - I i bestrijding doeltreffende hoeveelheid, teneinde de groei van bacteriën te verhinderen, samen met een drager voor de werkzame verbinding, alsmede een bacteriebestrijdingssamenstelling, die als werkzaam bestanddeel l-N-Ca-hydroxyrcö-aminoalkanoyl)-^?1 ,V-trideoxy- 5 6’-N-methylkanamycine-B,of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditie-zout daarvan, in overeenstemming met de formule (4), of 5»3’»^'-tri- > deoxy-ó'-N-methylkanamycine-B,of een farmaceutisch aanvaardbaar zuur- f additiezout daarvan, in overeenstemming met de formule (5) bevat, dit in een voor bacteriebestrijding doeltreffende hoeveelheid voor ‘ 10 het verhinderen van de groei van bacteriën, en samen met een drager j voor de werkzame verbinding.

Het bereiden van de nieuwe verbinding met de formule (2) * volgens de uitvinding zal nu worden beschreven. De nieuwe verbinding met de formule (2), zoals 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5»3'» 15 ^'-trideoxykanamycine-B en 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3’» V ,6,,-tetradeoxykanamycine-B, kan worden gesynthetiseerd door uit te gaan van ofwel de bekende stof 5*3'Λ'-trideoxykanamycine-B (Jap.J.

Antibiot. 32 (1979) S-178 ), of van de nieuwe verbinding 5*3'Λ’,6"-tetradeoxykanamycine-B verkregen volgens de uitvinding, en de 1-20 aminogroep van de uitgangsverbinding te condenseren met een overeenkomstig a -hydroxy- ω-amino-alkaanzuur als een gelijkwaardige verbinding.

Volgens een derde gezichtspunt van de uitvinding wordt een werkwijze verschaft voor het bereiden van 1-N-(a-hydroxy-0)-amino-25 alkanoyl)-5,3'»V-trideoxykanamycine-B of 1-N-(cs-hydroxy-o>-amino- alkanoyl)-5,3' *^' ,6M-tetradeoxykanamycine-B volgens de formule (2); ‘ fli%' HN ^ ά I (2)

CO

CHOH

81 0 3 6 3 9 (CH2)nNH2 •t ^ $ - 11 - waarin B een hydroxylgroep of een waterstofatoom is, en n gelijk is aan 1, 2 of 3» omvattende: (a) het acyleren van de 1-aminogroep van 5,3* ,V-trideoxy-kanamycine-B of van 5,3' ,**·’ ,6H-tetradeoxykanamycine-B volgens de 5 formule (6): _______ NH2 h2n\^VNH2 (S) « waarin H dezelfde betekenis heeft, dan wel een derivaat met gedeeltelijke aminobescherming is van 5,3*,^’-trideoxykanamycine-B of van 5,3'Λ'jé^-tetradeoxykanamycine-B is volgens formule (61)s

10 B/ 0H

’ «-> 'waarin B een hydroxylgroep of een waterstofatoom, en A een waterstofatoom is, terwijl tenminste een B een eenwaardige aminobeschermings-groep is, en de overige een waterstofatoom voorstellen, of tenminste één paar van A en B samen een tweewaardige aminobeschermingsgroep 15 vormen, terwijl de andere A en B elk een waterstofatoom zijn, welke door A en B voorgestelde aminobeschermingsgroepen onderling gelijk of verschillend kunnen zijn, hetgeen geschiedt door een reactie met een oc-hydroxy-o-aminoalkaanzuur of een aminobeschermd derivaat daarvan is, voorgesteld door de formule (7)ï A*

X>N(CH0) CHC00H

2 “I (7) 81 0 3 6 3 9 oh -* * -*· - 12 - ' t waarin A' een waterstofatoom, en B' een waterstofatoom of een een-waardige aminobeschermingsgroep is, of waarin A* en B' samen een tweewaardige aminobeschermingsgroep vormen, terwijl n gelijk is aan Tr 2 of 3i terwijl ook een daaraan gelijkwaardige verbinding kan wor-5 den gebruikt, teneinde het 1-N-geacyleerde produkt te vormen, dat wordt voorgesteld door de formule (2'): 6» \

HN

| (20

CO

CHOH

I a r (0Η2)ηΝ<Β' r of door de formule (2n):

N rA

GO % ' | (2»)

CHOH

I A* (CH2) c u B’ 1G waarin R, A, B, A·, B’ en n dezelfde betekenis hebben als boven; en (b) het verwijderen van de overblijvende aminobeschermings-groepen, waar deze aanwezig zijn, van het 1-N-geacyleerde produkt met de formule (2') of(2”), hetgeen op de bekende wijze geschiedt, ten- 8103639 f » - 13 - einde de verbinding met de formule (2) te verkrijgen.

Deze werkwijze kan nog een bijkomende stap omvatten, en wel het omvormen van de verbinding (2) in een farmaceutisch aanvaard-» baar zuuradditiezout ervan door een bekende reactie met een geschikt 5 anorganisch of organisch zuur, wanneer dit gewenst is.

Bij het uitvoeren van deze werkwijze is het mogelijk als uitgangsverbinding 5»3' ,4’-trideoxykanamycine-B .of 5i3' »V ,6"-tetra-deoxykanamycine-B (6) te gebruiken, waarvan de aminogroepen in het geheel niet zijn beschermd, in de vorm van de vrije base dan wel in 10 de vorm van een zuuradditiezout met een geschikt zuur zoals chloor-waterstofzuur of zwavelzuur. Het verdient echter de voorkeur als uitgangsverbinding een gedeeltelijk beschermd derivaat van 5i3’,4·-ΐΓί-deoxykanamyciae-B of 5i3'»4*,6H-tetradeoxykanamycine-B volgens de formule (6’) te gebruiken, waarin tenminste een deel van de aminogroepen.

15 anders dan de 1-aminogroep met bekende beschermingsgroepen zijn beschermd, hetgeen kan worden verkregen door een bekende aminobescher-mingsgroep in de verbinding met de formule (6) in te voeren door middel van een bekende werkwijze, die reeds eerder is toegepast bij de synthese van sommige bekende deoxyderivaten van kanamycine-B. Voor 20 het bereiden van deze gedeeltelijk beschermde verbindingen met de formule (6') kan van de aminobeschermingswerkwijzen gebruik worden gemaakt, die reeds zijn toegepast voor het bereiden van het 6*-N-benzyl-oxycarbonylderivaat van kanamycine-B, zoals beschreven in US 3 781 268 en US 3 929 762, of bij het bereiden van 2' ,6'-di-N-tert.-butoxycarbo-‘ 25 nylkanamycine-B of ö'-N-benzyloxycarbonylkanamycine-B, of het mono-N-of di-N-tert.-butoxycarbonyl- of zelfs tri-N-tert.-butoxycarbonyl-derivaat van 6'-N-benzyloxycarbonylkanamycine-B, afgescheiden of in een mengsel ervan, zoals beschreven in GB 1 426 908 of US 3 939 143, of bij de bereiding van het 2',3»3"*6,-tetra-N-formylderivaat van 30 kanamycine-B, zoals beschreven in BE 817546.

In het algemeen zijn geschikte voorbeelden van aminobescher-mingsgroepen, die voor het onderhavige doel kunnen worden gebruikt, de gewone aminobeschermingsgroepen, met inbegrip van een alkoxycarbo-nylgroep, zoals tert.-butoxycarbonyl en tert.-amyloxycarbonyl, een 35 cycloalkyloxycarbonylgroep zoals cyclohexyloxycarbonyl, een aralky-loxycarbonylgroep zoals benzyloxycarbonyl, een acylgroep zoals tri-fluoracetyl en o-nitrofenoxyacetyl, een fosfinothioylgroep zoals di-fenylfosfinothioyl en dimethylfosfinothioyl, een fosfinylgroep zoals difenylfosfinyl, en dergelijke. Voorkeursvormen van de tweewaardige 81 03 639 ___ -1½ - aminobesehermingsgroep zijn de ftaloylgroep en een groep van de Schiff-basesoort zoals salicylideen. Het invoeren van een aminobeschermings-groep van deze soort kan geschieden door middel van een reactie tussen een verbinding met de formule (6) en een geschikt bekend reagens 5 voor het invoeren van een dergelijke groep, bijvoorbeeld in de vorm van een zuurhalogenide, een zuurazide, een actieve ester, of een zuur-anhydride of dergelijke, zoals dit bij de gangbare synthese van peptiden bekend is. Bij het kiezen van de hoeveelheid reagens voor het invoeren van een aminobesehermingsgroep in een verhouding van 0,5 *· 10 6 mol/mol ten opzichte van de verbinding met de formule (6) is het mogelijk dat een mengsel van verschillende, derivaten (6') met willekeurige verhouding wordt verkregen, hetgeen een gevolg is van verschillen in reactiviteit van de verschillende aminogroepen van de verbinding (6).

15 Bij het uitvoeren van deze werkwijze is het zinvol uit te gaan van een 5*3'Λ’-trideoxykanamycine-B- of 5*3',6"-tetradeoxy-kanamycine-B-derivaat met aminobescherming, waarin tenminste een deel van de aminogroepen anders dan de 1-aminogroep is geblokkeerd, bijvoorbeeld met 3i2V,6’,3"-tetra-N-, 3»2’,6'-tri-N-, 2',6,-5"-tri-K-, 20 2',6'-di-N- of ö'-mono-N-bescherming* Voorts kan een mengsel van twee of meer van deze gedeeltelijk N-beschermde derivaten zonder verdere zuivering worden gebruikt voor de 1-N-acyleringsstap van de onderhavige werkwijze.

Om te verzekeren, dat het gewenste produkt met de algemene ‘ 25 formule (2) met een grote opbrengst bij toepassing van deze werkwijze kan worden verkregen, is het slechts nodig, dat de 1-aminogroep van de verbinding met de formule (6), namelijk 5>3' ,V-trideoxykanamyci-ne-B of 5,3*^"-tetradeoxykanamycine-B,selectief wordt geacyleerd met cc -hydroxy- ω-aminoalkaanzuur (7). Het zal duidelijk zijn, dat bij 30 voorkeur een derivaat met 3,2' ,6' ,3,,-tetra-N-bescherming van de verbinding (6), d.w.z. het derivaat met aminobescherming van de verbinr ding (61), waarin alle aminogroepen behalve de 1-aminogroep met de beschermingsgroepen zijn geblokkeerd, als de te acyleren uitgangsver-binding wordt gebruikt.

35 Om het beschermde derivaat met de formule (6’) van de ver binding met de formule (6) te bereiden, kan bijvoorbeeld als volgt te werk worden gegaan. Er kan een bekende werkwijze volgens US k 136 25^ worden toegepast, volgens welke een 3»2',6'-tri-N-geacyleerd beschermd derivaat van kaaamycine-B wordt bereid door middel van een reactie 8103639 r .

-lotussen kanamycine-B en een tweewaardig overgangsraetaal-kation, bijvoorbeeld van Cu (II), Ni (II), Co (II) e.d., voor het vormen van een metaalcomplex van kanamycine-B, waarna.dit complex met een acylerings-middel voor het invoeren van een aminobeschermingsgroep in reactie 5 wordt gebracht, teneinde alle aminogroepen behalve de 1-amino- en 3n-aminogroepen van het kanamycine-B-gedeèlte van dit complex te beschermen (welke aminogroepen zijn geblokkeerd door complexvorming met het tweewaardige metaalkation in dit complex), waarna het tweewaardige metaalkation uit het complex wordt verwijderd, bijvoorbeeld 10 door een behandeling met zwavelwaterstof of met ammonia. Ook kan een werkwijze volgens JP-A 138 *f02/?8 (overeenkomend met US-aanvrage 90591, GB-A 2036020 en BE 879 925) worden toegepast, waarbij een 3,2’,6*-tri-N-geacyleerd beschermd derivaat van kanamycine-B op een wijze wordt bereid, die in hoofdzaak met de voorgaande overeenkomt, 15 met uitzondering van het feit, dat een zinkkation wordt gebruikt in plaats van een tweewaardig overgangsraetaal-kation. Op deze wijze kan een beschermd derivaat met de formule (6') met een grote opbrengst worden bereid uit de verbinding met de formule (6). De 3"-amiJiogroep van dit beschermde derivaat (6), dat op deze wijze is bereid, kan nog 20 verder worden beschermd door een selectieve acylering volgens het voornoemde JP-A 73 064/79 (en conclusie 15 van BE 879 923) voor het bereiden van een derivaat met aminobescherming van een aminoglycoside-antibioticum, waarvan alle aminogroepen behalve de 1-aminogroep selectief zijn beschermd, zodat een derivaat met 3,2',6',3n-tetra-N-25 bescherming van de verbinding (6) met grote opbrengst kan worden ver= kregen. Daarbij wordt het voornoemde 3,2'^’-tri-N-bescherrade derivaat van de verbinding (6) in reactie gebracht met een mierenzuur-alkylester, een di- of tri-halogeen-alkaanzuur-alkylester, formyl-imidazol of een N-alkanoyl-imidazol als acyleermiddel, waarbij de 30 3M-aminogroep selectief kan worden geacyleerd met de acylrest van het acyleermiddel, waarbij een grote opbrengst wordt verkregen, zonder dat de 1-aminogroep van het voornoemde derivaat wordt geacyleerd.

Het 3,2',2*^"-tetra-N-geacyleerde derivaat, bijvoorbeeld 3,2',6’-tri-N-benzyloxycarbonyl-3”-N-trifluoracetylderivaat van 5,3’ ,V-tri-35 deoxykanamycine-B of van 5,3’Λ1 ,6,f-tetradeoxykanamycine-B, verkregen door toepassing van de voornoemde werkwijzen volgens US 4 136 25^ en BE 879923, vormt een bij voorkeur toegepaste uitgangsverbinding om selectief te worden geacyleerd met cc-hydroxy-öi -aminoalkaanzuur (7) in de 1-N-acyleerstap van de onderhavige werkwijze.

8103639 ' I , % , s - 16 -

Bij de onderhavige werkwijze wordt de 1-aminogroep van de verbinding met de formule (6) of (6’), afzonderlijk of in mengsels van twee of meer van dergelijke verbindingen, geacyleerd met hét oc- I · hydroxy- ω-aminoalkaanzuur met de formule (7): A' ^ 5 j: N-(CH-) -CHCOOH (7) B-^ 2n|

OH

waarin A' en B' de in het voorgaande genoemde betekenis hebben, en n gelijk is aan 1, 2 of 5, terwijl de aminogroep al dan niet beschermd is. Dit zuur kan 3-amino-2-hydroxypropionzuur zijn (d.w.z. de verbinding met de formule (7)» waarin n gelijk is aan 1, en A' en 10 B' waterstofatomen zijn), 4-amino-2-hydroxybutaanzuur (id. met n gelijk aan 2), of 5-amino-2-hydroxypentaanzuur (id.met n gelijk aan 3). Het (S)-isomeer heeft daarbij de voorkeur.

De 1-N-acylering met os-hydroxy-co-aminoalkaanzuur (7) kan worden uitgevoerd op de voor het synthetiseren van peptiden gebrui-15 kelijke wijze, bijvoorbeeld volgens de bekende dicyclohexylcarbodi-imide-werkwijze, de bekende gemengd-zuuranhydride-werkwijze, de bekende azidewerkwijze, of de actieve-esterwerkwijze of dergelijke, waarbij het voornoemde zuur als zodanig of in de vorm van een daaraan gelijkwaardig reactief derivaat wordt gebruikt. Voor het bescher-20 men van de aminogroep van dit zuur kan een beschermingsgroep worden gebruikt, die gelijk is aan of verschilt van de in de uitgangsver-binding (6·) aanwezige groep. Een bij voorkeur gebruikte beschermingsgroep is bijvoorbeeld de tert.-butoxycarbonylgroep, die gemakkelijk kan worden verwijderd door een behandeling met waterig trifluorazijn-25 zuur> azijnzuur of met water verdund chloorwatefstofzuur. Een ben-zyloxycarbonylgroep, die de gebruikelijke hydrogenolyse in tegenwoordigheid van een katalysator zoals palladium- of platina-oxyde kan worden verwijderd, is een geschikte N-beschermingsgroep.

De 1-N-acylering wordt bij voorkeur uitgevoerd in een wate-30 rig organisch oplosmiddel volgens de actieve-esterwerkwijze, waarbij een os-hydroxy-co-aminoalkaanzuur in de vorm van de actieve ester daarvan wordt gebruikt. Bijvoorbeeld kan de N-hydroxysuccinimide-ester van L-^-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutaanzuur als de actieve ester worden gebruikt, die op de gebruikelijke wijze kan worden be-35 reid. Deze actieve ester wordt bij voorkeur gebruikt in een verhouding van 0,5··3» en bij voorkeur van 1..1,5 mol/eq. per mol van de uit- gangsverbinding (6) of (6'), die moet worden geacyleerd. Het waterige 81 0 3 6 3 3 ___________________ e >

1 I

- 17 - organische oplosmiddel, dat in het reactiemidden wordt gebruikt, kan een met water mengbaar organisch oplosmiddel zijn zoals dioxan, 1,2-dimethoxyethaan, dimethylformamide, tetrahydrofuran e.d. De acylering kan bij de omgevingstemperatuur plaatsvinden, doch kan ook desgewenst 5 bij een hogere temperatuur worden uitgevoerd, bijvoorbeeld van 20·.

90 °C, dit met een reactieduur van verscheidene h, en bij voorkeur van 5..6 h.

Wanneer de acylering wordt uitgevoerd met een uitgangsver-binding, zoals een gedeeltelijk amino-beschermd derivaat, waarin ten-10 minste enige aminogroepen anders dan de 1-arainogroep zijn beschermd, zoals bijvoorbeeld het 6'-N-beschermcte derivaat van de uitgangsver-binding (6), kunnen de gevormde acyleringsprodukten gedeeltelijk worden gezuiverd door kolomchromatografie, bijvoorbeeld op silicagel, zodat het niet gereageerd hebbende uitgangsmateriaal wordt verwijderd, 15 waardoor een mengsel van het gewenste 1-N-monogeacyleerde produkt met op andere wijze N-geacyleerde produkten wordt verkregen, zoals in het geval van habekacine, namelijk 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-3'1 41-dideoxykanamycine-B volgens ÏÏS k 107 ^2½. Deze gemengde acyleringsprodukten kunnen zonder te worden gezuiverd en/of afgescheiden on-20 middellijk worden onderworpen aan de volgende bewerkingsstap voor het verwijderen van de bescherming, waarna zuivering en afscheiding plaatsvindt, zodat dan het gewenste 1-N-monogeacyleerde produkt wordt verkregen.

In de tweede stap van de beschouwde werkwijze wordt het ' 25 1-N-acyleringsprodukt (met inbegrip van de gemengde-acyleringspro- \ dukten) onderworpen aan het verwijderen van de amino-beschermings-groepen, wanneer deze nog in het produkt aanwezig zijn. Het verwijderen van deze beschermingsgroepen geschiedt op de gangbare wijze. Zo wordt de aminobeschermingsgroep van de alkoxycarbonylsoort verwijderd 30 door hydrolyse met een zwak zuur in een waterige oplossing van tri-fluorazijnzuur of azijnzuur of dergelijke, of met een verdunde waterige oplossing van een anorganisch zuur zoals chloorwaterstofzuur.

De aralkyloxycarbonylgroep zoals benzyloxycarbonyl kan worden verwijderd door een gewone katalytische reductie (hydrogenolyse). Wan-55 ueer een ftaloylgroep in de beschermingsgroep aanwezig is, kan deze worden verwijderd door verwarming in een oplossing van hydrazine-hydraat in een lagere alkanol.

Het aldus behandelde acyleringsprodukt na het uitvoeren van deze tweede stap kan het gewenste 1-N-acyleringsprodukt met de for- 8103639 - 18 - ' „ 4

V

mule (2) samen met enige isomeren daarvan bevatten. Het gewenste 1-N-(oc-hydroxy-<ü-arainoalkanoyl)-derivaat (2) kan langs chromatogra-fische weg worden afgescheiden en gezuiverd, waarbij gebruik wordt gemaakt van een kationenwisselaar, die carboxylfuncties bevat, zoals 5 Amberlite CG-50 (Rohm & Haas Co.) of CM-Sephadex C-25 (Pharmacia Co.), - waarna de bacteriebestrijdende werking van de uitwasfracties kan worden vastgesteld met behulp van een geschikte voor kanamyeine gevoelige resp. resistente bacteriestam.

Het 5,3',**’,6H-tetradeoxykanamycine-B, dat als uitgangsver-10 binding in de werkwijze voor het bereiden van een 1-N-(cc-hydroxy-6)--aminoalkanoyl)-5,3' ,**·' ^"-tetradeoxykanaraycine-B wordt gebruikt, kan worden bereid door uit te gaan van 3' ,**·' ,6"-trideoxykanamycine-B, dat al eerder is gesynthetiseerd (en 6u-deoxydibekacine is genoemd in het voornoemde JP-A 119 323/79 of GB-A 2 058 77**·)» of een N,0-bescherrad 15 derivaat daarvan voorgestold door de formule (8*): CH3 a \n

OH JV

B 0D \ \ Νζ (8') waarin A een waterstofatoom en B een eenwaardige aminobeschermings-groep is, of A en B samen een tweewaardige aminobescherraingsgroep vormen, terwijl D een hydroxylbeschermings-acylgroep is.

20 Volgens een vierde gezichtspunt van de uitvinding wordt een werkwijze voor het bereiden van 5»3' »**·' ,6"-tetradeoxykanamycine-B met de voornoemde formule (3) verschaft, die bestaat uit; (a) de ^'‘-hydroxylgroep van een penta-N-beschermd en 2n- O-beschermd derivaat van 3 ',**' ,6u-trideoxykanamycine-B volgens de 25 formule (8): n^a

\ 5^ \ XB

81 0 3 6 3 9 b^n Cb • » , ft — 19 " waarin A een waterstofatoom en B een eenwaardige aminobescherraings-groep is, of A en B samen een tweewaardige aminobeschermingsgroep vormen, terwijl D een hydroxylbeschermings-acylgroep is, met een eenwaardige hydroxyIbeschermende acylgroep van dezelfde soort als de 5 groep D in de 2”-stand, teneinde de V'-O-bescherrade verbinding met de formule C8') te verkrijgen? ^ CIi3 η A ^ (8*) waarin A, B en D de voornoemde betekenis hebben; (b) het laten reageren van de ^'-O-beschermde verbinding 10 met de formule (80 met sulfurylchloride voor het vervangen van de 5-hydroxylgroep ervan door een chlooratoom voor het vormen van het overeenkomstige 5~chloorderivaat; (c) het reduceren van dit 5-chloorderivaat voor het verwijderen van de 5"*chloorgroep en het vormen van een beschermd derivaat 15 van 5*3',4',6H-tetradeoxykanamycine-B met de formule (9)? CH3 O A ^ ΛΤ \ B-" 7^-^/ (,) - waarin A, B en D weer dezelfde betekenis hebben; en (d) het op de bekende wijze verwijderen van de overblijvende hydroxyl- en aminobeschermingsgroepen uit de verbinding (9) om de 20 verbinding met de formule (3) te verkrijgen.

Bij deze werkwijze kunnen de aminobeschermingsgroepen,die in penta-N-beschermd en 2n-0-beschermd 3' »**',6,,-trideoxykanamycine-B

8103639 ___ \ Λ % , ' V ‘ - 20 - met de formule (8), dat als uitgangsmateriaal wordt gebruikt* aanwezig zijn, van dezelfde soort zijn als die in de uitgangsverbinding volgens de formule (6*), die in de eerder beschreven werkwijze werden gebruikt. De bereiding van de uitgangsverbinding met de formule (8) 5 zal nu worden beschreven.

Als eerste stap wordt de 4H-hydroxylgroep van de uitgangsverbinding (8) beschermd met een eenwaardige hydroxylbeschermings-groep van de acylsoort, die een lagere alkanoylgroep zoals een acetyl-of aroylgroep, bijvoorbeeld benzoyl, kan zijn. Het invoeren van een 10 dergelijke hydroxylbeschermings-acylgroep in de ^l’-hydroxylgroep van de uitgangsverbinding (8) kan op bekende wijze tot stand worden gebracht door de uitgangsverbinding (8) te laten reageren met een geschikt acyleermiddel, zoals een zuuranhydride, zuurhalogenide of actieve ester, bijvoorbeeld in een organisch oplosmiddel zoals pyri-15 dine, en bij een temperatuur van 10..50 °C, bij voorkeur de omgevingstemperatuur. Bij voorkeur wordt voor dit doel acetylchloride of ben-zoylchloride gebruikt. In deze reactie wordt de 5-hydroxylgroep van de uitgangsverbinding (8) nauwelijks geacyleerd wegens de geringe reactiviteit van deze groep.

20 Op deze wijze wordt het 1,5*2',6',3"-penta-N- en 2",A"-di- 0-beschermd derivaat van 5' »**·' ,6"-trideoxykanamycine-B met de formule (8') verkregen.

Als tweede stap wordt het aldus verkregen beschermde derivaat (8') aan de-oxygenering in de 5-hydroxylgroep daarvan onderwor-' 25 pen, zoals beschreven in Buil. Chem. Soc. Jap. 51. (1978) 2351*· Het beschermde derivaat (8') wordt in reactie gebracht met 1..5 mol sulfurylchloride in een organisch oplosmiddel zoals droog pyridine, dit bij een temperatuur, die lager is dan de omgevingstemperatuur, en wel gedurende 2..20 h onder roeren, waarbij het‘5-chloorderivaat 50 wordt verkregen.

De derde stap van deze werkwijze omvat het reduceren van het aldus verkregen derivaat om dit te dehalogeneren. Het verwijderen van de 5-chloorgroep kan geschieden door een reactie met een metaal-hydride, bijvoorbeeld tributyl-tinhydride, zoals beschreven in het 35 laatstgenoemde artikel, of door een gebruikelijke katalytische hydro-genering in aanwezigheid van Eaney-nikkel. Op deze wijze wordt het Ν,Ο-beschermde derivaat van 5,3',4',6"-tetradeoxykanamycine-B met de formule (9) verkregen.

De vierde stap omvat het wegnemen van de bescherming in het 8103639

* A

- 21 - aldus verkregen derivaat (9)· De eenwaardige hydroxylbeschermings-acylgroepen (D) in de 5-gedeoxygeneerde verbinding (9) kan gemakkelijk worden verwijderd door een basische hydrolyse bij de omgevingstemperatuur, bijvoorbeeld door de verbinding (9) in een ammonia- .

5 methanol-mengsel op te lossen· De in de uitgangsverbinding (8) aanwezige aminobeschermingsgroep is van de aralkyloxycarbonylsoort, waarbij een groep van deze aard gelijktijdig met de katalytische hy-drogenering, waaraan het 5-chloorderivaat tijdens de derde stap wordt onderworpen, kan worden verwijderd. De andere aminobeschermingsgroβία pen kunnen gemakkelijk op bekende wijze worden verwijderd, bijvoorbeeld door hydrolyse in een zwak zuur. Wanneer de aminobeschermingsgroep een lagere alkoxycarbonylgroep is, zoals ethoxycarbonyl, kan deze worden verwijderd door basische hydrolyse met bariumhydroxide.

Bij deze. werkwijze is het verder mogelijk een gewijzigde .

15 bewerking toe te passen, waarin 3’t^',6M-trideoxykanamycine-B als het beginraaterial wordt gebruikt, de vijf aminogroepen ervan worden beschermd, en vervolgens de twee 2"- en 4”-hydroxylgroepen tegelijk met dezelfde eenwaardige hydroxylbeschermingsgroepen (D) worden beschermd, teneinde het Ν,Ο-beschermde derivaat met de formule (8') te verkrijgen.

20 De bereiding van het penta-N-beschermde en 2”-0-beschermde derivaat van 3‘ , 6,,-trideoxykanamycine-B met de formule (8),*dat als uitgangsverbinding wordt gebruikt, kan op de in GB-A 2 058 77^· beschreven wijze worden uitgevoerd. Er wordt dan een penta-N-beschermd derivaat van 3', V-dideoxykanamycine-B verkregen, dat wordt voorge-25 steld door de formule H0^\ 0 oh i

B 1 3 B

waarin A en B dezelfde betekenis hebben als in de formule (8), terwijl de beide bn- en 6"-hydroxylgroepen ervan gelijktijdig worden beschermd met een tweewaardige hydroxylbeschermingsgroep, zoals de 30 isopropylideengroep, terwijl de 2”-hydroxylgroep wordt beschermd met 8103639

* V

< * ‘ - 22 - een eenwaardige hydroxylbeschermings-acylgroep, zoals benzoyl of acetyl, waarbij een 2M^"-tri-O-beschermd derivaat met de formules 6” y/ \0 4» γ^2„ \

B OD^l OH N ""'B

a ---__ \ ^ ^ (b)

3 ’ ~"B

wordt verkregen, waarin A en B de voornoemde betekenis hebben, en de groep X^ 5 y ^ ^ een tweewaardige hydroxylbeschermingsgroep is, waarin X en Y een waterstofatoom, een alkylgroep met 1.Λ C-atomen, een arylgroep zoals t fenyl, of een alkoxylgroep met 1..4 C-atomen is, welke groep ook een cyclohexylideengroep of een tetrahydropyranylideengroep kan voor-10 stellen, en D een eenwaardige hydroxylbeschermings-acylgroep is* Het derivaat met de formule (b) wordt dan behandeld met een waterige azijnzuuroplossing om de voornoemde groep, die de kH- en 6n-hydroxyl-groepen beschermt, te verwijderen, waarna het aldus gedeeltelijk niet-beschermde produkt in reactie wordt gebracht met een geschikt sulfo-15 nyleermiddel zoals p-tolueensulfonylchloride in pyridine, teneinde de 6"-hydroxylgroep ervan te sulfonyleren, en een 6n-0-gesulfonyleerd derivaat te vormen, dat de volgende formule heeft: GSOg-'-'A A.

(o) - 8103639 - 23 - waarin A, B en D de in het voorgaande genoemde betekenis hebben, en G een lagere alkylgroep is, in het bijzonder met 1..4 C-atomen, of een arylgroep zoals fenyl of p-methylfenyl, of een aralkylgroep zoals benzyl· Het aldus verkregen derivaat wordt dan met een alkalimetaal-5 jodide of -bromide behandeld om de 6n-sulfonyloxygroep (GSO^-) doof de jood- of broomgroep te vervangen en het ö'^jood- of *broomderiraat met de overeenkomstige formule te vormen, dat later wordt gereduceerd met waterstof in tegenwoordigheid van een bekende hydrogeneerkataly-sator, zoals palladium, die de dehalogenering tot gevolg heeft, waar-10 bij het penta-N-beschermde en 2n-0-beschermde 3',6n-trideoxykana-mycine-B-derivaat met de formule (8) wordt verkregen, zoals wordt beoogd.

Het vormen van de nieuwe verbinding met de formule (4) volgens de uitvinding zal nu worden beschreven· Deze nieuwe verbin-15 ding zoals 1-N-((S)-ίi-amino-2=hydroxybutyryl)-5ί3, ,V-trideoxy-6'-N= methylkanamycine-B en 1-N-((S)-5-amino-2-hydroxyvaleryl)-5,31,^*-tri-deoxy-6'-N-methylkanamycine-B kan worden gesynthetiseerd door als uitgangsverbinding de nieuwe verbinding 5,3',^'-trideoxy-6'-N-raethyl-kanamycine-B volgens de uitvinding te gebruiken, en de 1-aminogroep 20 ervan te condenseren met een overeenkomstig os-hydroxy-w-aminoalkaan-zuur of een gelijkwaardige verbinding.

Als een vijfde gezichtspunt van de uitvinding wordt een werkwijze voor het vormen van l-N-Ca-hydroxy-aJ-aminoalkanoylJ-S^1» ^’-trideoxy-é'-N-methylkanaraycine-B met de formule (*0 verschafts Η0*~"Λ ΗΟ-γΛ^Λ OH NHCHo

HN

CO (.k)

CHOH

(CH2)nNH2 8103639 - 2b - waarin n gelijk is aan 1, 2 of 3» welke werkwijze omvat! (a) het acyleren van de 1-aminogroep van 5i3'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B met de formule (5): HO*— ho h2n

η2Α-άΑ I

2 OH x NHCH, l'VA0 5 of een gedeeltelijk aminobeschermd derivaat daarvan met de formule (5’):

r°^A

\ (5,) waarin A een waterstofatoom, en tenminste een B een eenwaardige amino-beschermingsgroep is, terwijl de andere een waterstofatoom voorstel-10 len, of tenminste een paar A en B samen een tweewaardige amino-beschermingsgroep vormen, terwijl de andere elk een waterstofatoom voorstellen, terwijl de aminobeschermingsgroepen, die door deze A en B worden gevormd, onderling gelijk kunnen zijn of kunnen verschillen, hetgeen geschiedt door een reactie met een oe-hydroxy-w-aminoalkaan-15 zuur of een aminobeschermd derivaat daarvan, voorgesteld door de formule (7) A| ^^NCCEL) GHGOOH (7)

/ I

B' OH

waarin A' een waterstofatoom en B' een waterstofatoom of een eenwaardige aminobeschermingsgroep is, of A' en B' samen een tweewaardige 81 p 3 6 3 9 τ * » Λ * -25- aminobeschermingsgroep vormen, en n gelijk is aan 1, 2 of 3, of met een daaraanggelijkwaardige verbinding,· voor het vormen van het 1-N-geacyleerde produkt met de formule (4')ί ΗζΝΛ^ HN —^ (Ιμ) co

CHOH

I A* (CH2)nN <; Bf 3 of met de formule (4·1): ,, i

CO

CHOH

I Ar (CH2)nN \ gt waarin A, B, A’, B' en n de voornoemde betekenis hebben; en (b) het verwijderen van de overblijvende aminobeschermings-groepen van het 1-N-geacyleerde produkt met de formule (V) of (4M) 10 op een bekende wijze om de verbinding met de formule (4) te verkrijgen· Deze werkwijze kan voorts een bijkomende stap omvatten, waarbij de verbinding (6) wordt omgevormd in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout ervan door een reactie met een aanvaardbaar anorganisch of organisch zuur, wanneer dit gewenst is.

8103639 \ - 26 -

Deze werkwijze kan op dezelfde wijze worden uitgeroerd als onder het derde gezichtspunt van de uitvinding is beschreven.

Bij het uitvoeren van de werkwijze volgens het vijfde gezichtspunt van de uitvinding is het zinvol als uitgangsverbinding % 5,3'A'-trideoxy-ö’-N-methylkanamycine-B met de formule (5) te gebruiken» waarvan de aminogroepen in het geheel niet zijn beschermd, en wel in de vorm van een vrije base of van een zuuradditiezout met een geschikt zuur zoals chloorwaterstofzuur. Het verdient echter de voorkeur als uitgangsverbinding een gedeeltelijk aminobescherrad deri-10 vaat van 5,3', V-trideoxy-ö'-N-methylkanamycine-B met de formule (5’) te gebruiken, waarin tenminste sommige van de drie aminogroepen en methylaminogroepen, behalve de 1-aminogroep, zijn beschermd met bekende aminobeschermingsgroepen, hetgeen kan geschieden door het invoeren van een bekende aminobeschermingsgroep in de verbinding (5), 15 zoals in verband met het derde gezichtspunt van de uitvinding uitvoerig is beschreven.

Bij de beschouwde werkwijze worden de stappen voor het 1-N-acyleren van de uitgangsverbinding (4) of (V) en van het verwijderen van de bescherming van het 1-N-geacyleerde produkt (V) of 20 (VO, alsmede het zuiveren van het van de bescherming ontdane produkt op dezelfde wijze uitgevoerd als aan de hand van het derde gezichtspunt van de uitvinding is beschreven.

De nieuwe verbinding met de formule (5), namelijk 5»3,»^,“· tri-deoxy-6'-N-methylkanamycine-B, dat als uitgangsverbinding bij de 25 onderhavige werkwijze wordt gebruikt, kan worden bereid door uit te gaan van een bekende verbinding zoals 5>3’i^'-trideoxykanamycine-B (zie Jap. J. Antibiot. 32 (1979) S-178), waarbij de N-methylering van de 6’-aminogroep van deze verbinding op dezelfde wijze wordt uitgevoerd als is beschreven in JP-Λ 83 671/72, US 3 925 353 en J. Antibiot. 30 2£, (1972) 7^3-

Volgens een zesde gezichtspunt van de uitvinding wordt een werkwijze voor het vormen van 5,3’ ,V-trideoxy-6’-N-methylkanamycine. -B verschaft, dat de formule (5) heeft: 8103639

* - I

- 27 -

HO --—V

HO H2N

H2N \ NHCH3 H2nV/"-^NH2 (5) welke werkwijze de volgende stappen omvat: (a) liet invoeren van een alkyloxycarbonylgroep, een cyclo-alkyloxycarbonylgroep of een aralkyloxycarbonylgroep in de 6'-amino-5 groep van 5»3’, V-trideoxykanamycine-B met de formule (10): HO---Λ h2n\^vA r0'^/ 0H ^nh2 η2ν^^^Λ^ nh2 (10) voor bet vormen van de verbinding met de formule (11): ':Λ^\ T^Z.

I NHCORo 0H s 3 h2n\-^vV-'«h2 (11)· waarin een alkylgroep met 1..6 C-atomen, een cycloalkylgroep met 10 3..6 C-atomen of een aralkylgroep, in het bijzonder een fenyl-iC^-C^) alkylgroep, zoals benzyl; en (b) het reduceren van de verbinding (11) met een metaal-hydride in een watervrij organisch oplosmiddel voor het vormen van de verbinding met de formule (5)· 81 0 3 6 3 9 .

- 28 -

Het uitvoeren van deze werkwijze zal nu nader worden beschreven. Tijdens een eerste stap wordt een alkyloxycarbonylgroep, een cycloalkyloxycarbonylgroep of een aralkyloxycarbonylgroep in de 6'-aminogroep van de uitgangsverbinding (10) ingevoerd, welke een 5 groep zoals de aminobeschermingsgroep van de urethansoort kan zijn. Het invoeren van de voornoerade groep (-0=0.OR^) in de 6'-aminogroep van de uitgangsverbinding (10). wordt op dezelfde wijze verkregen als in het voorgaande is beschreven voor de bereiding van het aminobe-schermde derivaat van het uitgangsmateriaal (6’) volgens het derde 10 gezichtspunt van de uitvinding. De selectieve bescherming van de 6'-aminogroep kan plaatsvinden omdat de 6’-aminogroep de meest reactieve van de aminogroepen van de verbinding (10) is. De in te voeren groep kan bij voorkeur een methoxycarbonylgroep, een ethoxycarbonylgroep of een benzyloxycarbonylgroep zijn. Op deze wijze wordt het 6’-N-alkylf 15 oxy-, het 6'-N-cycloalkyloxy- of ó'-N-aralkyloxy-gecarbonyleerde pro-dukt met de formule (11) gevormd.

De 6'-N-alkyloxy-, ö'-N-cycloalkyloxy- of 6'-N-aralkyloxy-carbonylgroep, die op deze wijze is ingevoerd, wordt door reductie omgevormd, teneinde de 6’-N-methylering te verkrijgen. Dit kan ge-20 schieden door de verbinding met de formule (11) te reduceren met een metaalhydride zoals lithium-aluminiumhydride en diboran in een water-vrij organisch oplosmiddel zoals tetrahydrofuran. Deze reductie zal gewoonlijk worden uitgevoerd bij een temperatuur van 40..9Q °C gedurende tenminste 10 h.

25 De uitvinding zal in het onderstaande nader worden toege licht aan de hand van enige niet-beperkende voorbeelden. De yoorbeel-den I..III hebben betrekking op het eerste en derde gezichtspunt van de uitvinding, het voorbeeld IV op het eerste en het vierde gezichtspunt, het voorbeeld V op het zesde, en de voorbeelden VI..VIII op het 30 vijfde gezichtspunt van de uitvinding.

Voorbeeld I:

Synthese van l-N-UsJ-A-amino-H-hydroxybutyryl)^^' ,Λ'-trideoxy-kanamycine-B.

(a) 4,36 g (10 mmol) 5,3' ,4'-trideoxykanamycine-B werd in 35 100 ml droog dimethylsulfoxyde opgelost, waaraan vervolgens 10,5 g (48 mmol) zinkacetaat, ZniCH^CO^^^H^O, werd toegevoegd. Het verkregen mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende 20 h geroerd voor het vormen van een complex van 5,3',4'-trideoxykanamycine-B met een zinkkation. Na het toevoegen van 12,0 g (39,5 mmol) paramethoxy- 8103639 * *· .. Λ -29- benzyl-S-4,6-dimethylpyrimid-2-ylthiocarbonaat (geleverd door Kokusan Kagaku K.K.) werd het verkregen mengsel bij 50 °C gedurende 7,5 h. geroerd om de N-p-methoxybenzyloxycarbonylering te verkrijgen. De verkregen reactie-oplossing werd vervolgens in 1000 ml water gegoten, 5 waarbij de pïï op 11 werd ingesteld door toevoeging van ammonia voor het verkrijgen van het afbreken van het zinkcomplex, hetgeen tot een neerslag leidde. De neerslag werd afgefiltreerd, met 500 ml water gewassen, en in 60 ml van een gemengd oplosmiddel uit chloroform-metha-nol-17 %'b ammonia (50 : 10 : 1 in volume) opgelost. Deze oplossing 10 werd aan chromatografie onderworpen in een kolom van 500 g silicagel (Wako-gel C-200), waarbij werd ontwikkeld met hetzelfde gemengde oplosmiddel, hetgeen tot ^,1 g (.bb #) van een kleurloos poeder van 3,2',61-tri-N-paramethoxybenzyloxycarbonyl-5,31,b1-trideoxykanamycine-B leidde.

15- 3»7 g (b mmol) van dit kleurloze poeder werd opgelost in 50 ml dimethylsulfoxyde, waarna 0,95 ml (8 mmol) ethyltrifluoracetaat aan de oplossing werd toegevoegd. Het verkregen mengsel werd bij kamertemperatuur gedurende 5 h geroerd om de 3u-N-trifluoracetylering te verkrijgen, waarbij 3*2’,6,-tri-N-paramethoxybenzyloxycarbonyl-20 3,,"N-trifluoracetyl-5,3’«^’“trideoxykanamycine-B werd verkregen.

(b) Aan de aldus verkregen reactie-oplossing, die het N-be- schermde kanamycine-B-derivaat bevatte, werd 0,6 ml (b,b mmol) tri-ethylamine toegevoegd, gevolgd door een oplossing van 1,9 g (6 mmol) N-hydrosuccinimide-ester van (S)-4-tert.-butoxycarbonylamino-2-25 hydroxyboterzuur in 20 ml dioxan. Dit mengsel werd bij kamertemperatuur gedurende 19 h geroerd, waarna de reactie-oplossing in 500 ral water werd gegoten om een neerslag te doen afscheiden. De neerslag werd afgefiltreerd, en werd met 100 ml water gewassen, hetgeen tot 10,9 g kleurloos poeder leidde. Dit poeder werd in 20 ml 90 tri-30 fluorazijnzuur opgelost, waarna men de oplossing gedurende J+5 min bij kamertemperatuur liet staan om verwijdering van de aminobeschermings-groepen te verkrijgen. De oplossing werd vervolgens ingedroogd, waarna de rest in 100 ral water werd opgenomen. De waterige oplossing werd op een pH van 10,5 gebracht door het toevoegen van ammonia, en bij 35 kamertemperatuur gedurende 20 h geroerd om verwijdering van de tri-fluoracetylgroep te verkrijgen. De verkregen reactie-oplossing werd tot ongeveer 20 ml geconcentreerd, op een pH van 7,5 gebracht door toevoeging van ammonia, met 50 nil water verdund, en vervolgens door een kolom van 150 ml Amberlite-CG-50-hars gevoerd (in de NH^-vorm, 8103639 . 3 * - 30 - geleverd door Bohm & Haas Co.). Deze kolom werd achtereenvolgens met 750 ml water en 500 ml 0,5 N ammonia gewassen, en met 0,8 N ammonia gespoeld. De fracties, die het gewenste produkt bevatten, werden samengevoegd en ingedroogd, hetgeen 1,76 g (72 %) 1-N-((S)-4-amino-2-5 hydroxybutyryl)-5,3’, V-trideoxykanamycine-B-monoearbonaat-monohy-draat als een kleurloos poeder opleverde. De totale opbrengst bedroeg 32 %.

Voorbeeld II;

Synthese van 1-N-(3-amino-2-hydroxypropionyl)-5»3',4'-trideoxykana-10 raycine-B.

(a) 435»5 (1 mmol) 5*3',4'-trideoxykanamycine-B werd in 10 ml droog dimethylsulfoxyde opgelost, waaraan vervolgens 1,05 B (4,8 mmol) zinkacetaat, Zn (CH^CO., )^,.2^0, werd toegevoegd. Het verkregen mengsel werd bij kamertemperatuur gedurende 23 h geroerd. Vervolgens' 15 werd een oplossing van 937i3 mg (3»9 mmol) tert.-butyl-S-4,6-di- methylpyrimid-2-ylthiocarbonaat in 5 ml dimethylsulfoxyde toegevoegd, waarna het verkregen mengsel bij 50 °C gedurende 24 h werd geroerd om de N-tert.-butoxycarbonylering te verkrijgen. De verkregen oplossing werd met 15 ml water gemengd, met ammonia op een pH van 11 ge-20 bracht, hetgeen werd gevolgd door het toevoegen van 6,4 g natrium-chloride en extractie met ethylacetaat (2 x 15 ml). De ethylacetaat-extracten werden samengevoegd en ingedroogd, waarna de rest in 6 ml dimethylsulfoxyde werd opgelost. De oplossing werd met 0,125 ml (1 mmol) ethyltrifluoracetaat gemengd, welk mengsel bij kamertemperatuur 25 gedurende 4 h werd geroerd om de 3n**N-trifluoracetylering te verkrijgen.

(b) Aan de voornoemde reactie-oplossing, die 3»2f,6'-tri-N-tert.-butoxycarbonyl-3H-N-trifluoracetyl-5,3’14'-trideoxykanamycine-B bevatte, werd 0,1 ml (0,7 mmol) triethylamine en 3^4 mg (1,05 mmol) 30 N-hydroxysuccinimide-ester van paramethoxybenzyloxycarbonylisoserine toegevoegd. Het verkregen mengsel werd bij kamertemperatuur gedurende 20 h geroerd, waarna de reactie-oplossing met 10 ml water werd gemengd en met ethylacetaat (2 x 10 ral) geëxtraheerd. De samengevoegde extracten werden tot een geringe inhoud geconcentreerd, gevolgd door 35 het toevoegen van 20 ml 3N-chloorwaterstofzuur-50 %'b methanol. Het mengsel werd bij kamertemperatuur gedurende 2 h geroerd om het gelijktijdig verwijderen van zowel de tert.-butoxycarbonyl- en paramethoxy-benzyloxycarbonylgroepen als van de aminobescherraingsgroepen te verkrijgen. De verkregen oplossing werd op een pH van 10 gebracht door 8103639 - 31 - * t liet toevoegen van ammonia, en werd vervolgens gedurende 21 h bij de omgevingstemperatuur geroerd om het verwijderen van de trifluorace-tylgroep te verkrijgen. De reactie-oplossing werd ingedampt en met water verdund, waarna de verkregen waterige oplossing door een kolom 5 van 25 ral Diaion-WK-10S (in de ΝΗ^+-νοπη, geleverd door Mitsubishi Kasei K.K) gevoerd. Deze kolom werd met 125 ml water gewassen, en daarna met 0,4 N ammonia gespoeld. De fracties, die het gewenste pro-dukt bevatten, werden samengevoegd, en ingedroogd tot 257 mg 1-N-(3-amino-2-hydroxypropionyl)-5,3'»4'-trideoxykanamycine-B-monocarbonaat 10 als een kleurloos poeder. De totale opbrengst bedroeg 42 %·

Voorbeeld III: Synthese van 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,31,4',6"-tetradeoxykanamycine-B.

(a) 419,5 mg (0,75 mraol) 5,3'|4',6H-tetradeoxykanamycine-B- dicarbonaat-monohydraat werd in 10 ml droog dimethylsulfoxyde opgelost, 15 waaraan vervolgens 1,05 g (4,8 ramol) zinkacetaat, ZniCH^CO.,) £.22^0 werd toegevoegd, welk mengsel bij de omgevingstemperatuur gedurende 18 h werd geroerd. Vervolgens werd een oplossing van 1,44 g (6,0 mmol) terto-butyl«S-4,6-dimethylpyrimid-2-ylthiocarbonaat in 5 rol dimethylsulfoxyde toegevoegd, welk mengsel bij 50 °C gedurende 25 h werd ge-20 roerd. De verkregen reactie-oplossing werd met 15 ml water gemengd, met ammonia op een pH 11 gebracht, en met ethylacetaat (2 x 15 ml) geëxtraheerd. De waterige laag werd met 6,4 g natriumchloride gemengd, en verder met 20 ml ethylacetaat geëxtraheerd. De ethylacetaatextracten werden samengevoegd en ingedroogd, waarna de rest in 6 ml di-25 methylsulfoxyde werd opgelost. Deze oplossing werd met 0,125 ml (1 mmol) ethyltrifluoracetaat gemengd, welk mensel bij de omgevingstemperatuur gedurende 4 h werd geroerd.

(b) Aan de voornoemde reactie-oplossing, die 3*2',6'-tol”1*” tert.-butoxycarbonyl-3w-N-trifluoracetyl-5,31,4 *,6f,-tetradeoxykana-30 mycine-B bevatte, werd 0,1 ml (0,7 mmol) triethylamine en 399»4 mg (1,05 mmol) N-hydroxysuccinimide-ester van (S)-4-p-methoxybenzyloxy-carbonylamino-2-hydroxyboterzuur toegevoegd. Het verkregen mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende Ί8 h geroerd, waarna de oplossing werd gemengd met 10 ml water, en met ethylacetaat (2 x 10 ml) 35 werd geëxtraheerd. De samengevoegde extracten werden tot een geringe inhoud geconcentreerd, gevolgd door het toevoegen van 20 ml 3N-chloor-waterstofzuur-50 %'s methanol. Het mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende 2 h geroerd om verwijdering van zowel de tert.-bu-toxy- als de paramethoxybenzyloxycarbonylgroepen te verkrijgen. De " " ^ .........................

- 32 - verkregen oplossing werd op een pH 10 gebracht door toevoeging van ammonia, en vervolgens bij de omgevingstemperatuur gedurende 20 h geroerd om de trifluoracetylgroep te verwijderen. De aldus verkregen oplossing werd tot een geringe inhoud ingedampt, en vervolgens met 3 water verdund, waarna deze oplossing door een kolom van 25 al Diaion-VK-10S (NH^-vorm) werd gevoerd. Deze kolom werd met 125 al water gewassen, vervolgens met 0,32 N ammonia gespoeld. De fracties, die het gewenste produkt bevatten, werden samengevoegd, en vervolgens ingedroogd tot 303 ag l-N-iisO-^-amino-B-hydroxybutyryl)^^' ,6"- 10 tetradeoxykanaraycine-B-dicarbonaat in de vorm van een kleurloos poeder. De totale opbrengst bedroeg 63 %·

Voorbeeld IVi Synthese van 5,31»^'i6"-tetradeoxykanamycine-B.

(a) Bereiding van 1 ,3,2' ,6’ ^"-penta-N-ethoxycarbonyl^’ dideoxykanamycine-B.

15 g (10,3 mraol) 3’-dideoxykanamycine-B werd opgelost in een mengsel van ^5 al water en ^5 al methanol, waaraan 8 g (95»2 mraol) natriumbicarbonaat werd toegevoegd, gevolgd door het langzaam toevoegen van 7,2 ml (75,6 mmol) ethylchloroformaat onder koeling met ijs. Het verkregen mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende 20 18 h geroerd om de N-ethoxycarbonylering te verkrijgen. De verkregen oplossing werd gemengd met 500 ml water voor het afscheiden van een neerslag. Deze werd afgefiltreerd en met water gewassen, hetgeen 6^9 g (78 %) kleurloos poeder met de bovengenoemde samenstelling opleverde.

25 (b) Bereiding van 1,3,2’,6'^"-penta-N-ethoxycarbonyl-^",6n- O-isopropylideen-3', V' -dideoxykanamycine-B.

4,83 g (5,93 mraol) van het produkt van de stap (a) werd opgelost in 50 ml dimethylformamide, waaraan 30 mg (0,16 mmol) p-tolueen-sulfonzuur en 1,1 ml (9,0 mraol) 2,2-dimethoxypropaan werd toegevoegd.

30 Het verkregen mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende 25 h geroerd (voor het verkrijgen van de 4*,-6,,-Q-isopropylidenering), waarna de oplossing werd gemengd met 1 ml (7,2 mmol) triethylamine, waarna de oplossing werd ingedroogd tot 5,1 g (100 %) van de bovengenoemde verbinding in de vorm van een bleek-geel poeder.

35 (c) Bereiding van 1,3,2' ,6’ ,3"-penta-N-ethoxycarbonyl-4n,6,,-0- isopropylideen-2”-0-benzoyl-3,,4’-dideoxykanamycine-B.

5,1 g (6,0 mmol) van het produkt van de stap (b) werd opgelost in 75 ml pyridine, waaraan vervolgens 1 ml (8,6 mmol) benzoyl-chloride werd toegevoegd, welk mengsel bij kamertemperatuur gedurende — — — —t Λ t - 33 - 5 li werd geroerd om de 2"-Q-benzoylering te verkrijgen. De aldus verkregen oplossing werd gemengd met 10 ml water, bij de omgevingstemperatuur geroerd, en vervolgens ingedroogd. De rest werd in 250 ml chloroform opgelost, welke oplossing achtereenvolgens met 100 ml 5 0,2 N chloorwaterstofzuur en 2 x 100 ml verzadigd waterig natriumbicarbonaat werd gewassen. De chloroformlaag werd afgescheiden, boven watervrij natriumsulfaat gedroogd, en verder ingedroogd tot 5,7 g (99 #) van de bovengenoemde verbinding in de vorm van een bleek-geel poeder.

10 (d) Bereiding van 1 ;3,2· ,6* ^"-penta-N-ethyoxycarbonyl^*’-

0-benzoyl-3',4'-dideoxykanamycine-B

5*3 g (5,5 mmol) van het aldus verkregen produkt werd in 80 ml van een mengsel van azijnzuur-methanol-water (2s 1 s 1 in volume) opgelost, welke oplossing bij de omgevingstemperatuur 21 h bleef 15 staan, waarna deze werd ingedroogd tot 4,9 g (97 %) van de bovengenoemde verbinding in de vorm van een bleek-geel poeder.

(e) Bereiding van 1,3,2' ,6' ,3”-penta-N-ethoxycarbonyl-2,,-0-

benzoyl-6n-0-tosyl-3',4’-dideoxykanamycine-B

1,5 g (1,63 mmol) van het aldus verkregen produkt werd in 20 28 ml pyridine opgelost, waaraan vervolgens 374 mg (1,96 mmol) para-tolueensulfonylchloride werd toegevoegd, welk mengsel bij de omgevingstemperatuur gedurende 28 h werd geroerd om de ó^-O-tosylering te bewerkstelligen. De oplossing werd vervolgens ingedroogd, waarbij de poedervormige rest (2,3 g) in 12,5 ml dichloorraethaan werd opge-' 25 lost, welke oplossing aan kolomchromatografie op silicagel (Wako-gel C-200, 200 g) werd onderworpen. De kolom werd met 1000 ml dichloor-methaan-ethanol (60 : 1) gewassen, en met dichloormethaan-ethanol (50 : 1) ontwikkeld, hetgeen 1,0 g (60 %) van een kleurloos poeder van de bovengenoemde verbinding opleverde.

30 (f) Bereiding van 1,3*2' ,6' ,3"-penta-N-ethoxycarbonyl-2,,-0- benzoyl-6“-jood-31,4 *-dideoxykanamycine-B· 900 mg (0,84 mmol) van het voornoemde produkt werd in 18 ml dimethylformamide opgelost, waarna 12,6 g (84 mmol) natriumjodide werd toegevoegd, en gedurende 2 h bij 95 °C werd geroerd om de 6”-jo-. 35 dering te bewerkstelligen. De verkregen oplossing werd in 250 ml water gegoten, waarna de gevormde neerslag wérd afgefiltreerd, en vervolgens in 100 ml chloroform werd opgelost. Deze oplossing werd met 100 ml 20 s waterig natriumthiosulfaat en 100 ml verzadigd waterig natriumchloride gewassen. De afgescheiden chloroformlaag werd boven 8103639 " ί -e - 34 -

V

watervrij natriumsulfaat gedroogd, en verder ingedroogd tot 817 (95 %) van de bovengenoemde verbinding in de vorm van een kleurloos poeder.

(g) Bereiding van 1,3*2' ,6’ ,3n-penta-N-ethoxycarbonyl-2n-Q- 3 benzoyl-3 * ,4 ’, 6M-trideoxykanamycine-B.

773 rag (0,75 mmol) van bet voornoemde produkt* werd in 20 ml dioxan opgelost, waaraan een geringe hoeveelheid. Haney-«nikkel ¥-2 werd toegevoegd, welk mengsel werd gehydrogeneerd onder een waterstof-druk van 0,35 MPa gedurende 23,5 h onder toepassing van een Parr-10 toestel. De verkregen oplossing werd gefiltreerd om de katalysator te verwijderen, en vervolgens ingedro'ogd tot 655 mg (97 %) van een kleurloos poeder van de bovengenoemde verbinding.

(h) Bereiding van 1,3*2' ,6' ,3"-penta-N-ethoxycarbonyl-2,,,M,“ di-O-benzoyl-3’,4’,6'-trideoxykanamycine-B.

15 622 mg (0,69 mmol) van het voornoemde produkt werd in 30 ml pyridine opgelost, gevolgd door het toevoegen van 0,1 ral (0,86 mmol) benzoylchloride, welk mengsel bij de omgevingstemperatuur gedurende 25 h werd geroerd om de 4"-0-benzoylering te bewerkstelligen. De verkregen oplossing werd ingedroogd, waarna de rest in 50 ml chloroform 20 werd opgelost. De oplossing werd achtereenvolgens met 20 %'s waterig kaliumbisulfaat (2 x 30 ral)» verzadigd waterig natriumbicarbonaat (2 X 30 ml), en verzadigd waterig natriumchloride (1 x 30 ml) gewassen, vervolgens boven watervrij natriumsulfaat. gedroogd, en ingedroogd tot 663 mg (96 %) van de voornoemde verbinding in de vorm van een kleur-25 loos poeder.

(j) Bereiding van 1,3,2' ,6' ,3,,-penta-N-ethoxycarbonyl-2M, V‘- di-0-benzoyl-5-chloor-3’ ,4’ ^"-trideoxykanamycine-B.

600 mg (0,6 mmol) van het voornoemde produkt werd in 12 ml pyridine opgelost, waai&a 0,1 ml (1,24 mmoljsuifurylchloride onder 30 koeling met ijs werd toegevoegd, welk mengsel bij de omgevingstemperatuur gedurende 18 h werd geroerd om de 5-chlorering te bewerkstelligen. De aldus verkregen oplossing werd gemengd met 100 ml water, en met 60 ml chloroform geëxtraheerd. Het extract werd achtereenvolgens met 60 ml 10#'s waterig kaliumbisulfaat, 60 ml verzadigd waterig na-35 triumbicarbonaat, en 60 ml verzadigd waterig natriurachloride gewassen, vervolgens boven watervrij natriumsulfaat gedroogd, en tenslotte ingedroogd. De verkregen poedervormige rest (572 mg) werd in 5 ml di-chloorraethaan opgelost, en gechromatografeerd op een kolom van sili-cagel (Wako-gel C-200, 50 g). Deze kolom werd met 500 ml dichloor- 8103639 - 35 - methaan gewassen en met een dichloormethaan-ethanol-mengsel (100 f^l) ontwikkeld tot 356 mg (58 %>) kleurloos poeder van de bovengenoemde verbinding.

(k) Bereiding van 1,3>2' ,6’ ,3,,-penta-N-ethoxycarbonyl-2n, V‘- 5 di-O-benzoyl-5,3' > ^ S 6,,-tetradeoxykanamycine-B.

308 mg (0,13 mmol) van het voornoemde produkt werd in 5 ml dioxan opgelost, waaraan vervolgens een kleine hoeveelheid Eaney-nikkel W-2 werd toegevoegd, welk mengsel onder een waterstofdruk van 0,35 MPa gedurende 23>5 h werd gehydrogeneerd, waarbij een Parr-10 toestel werd gebruiktom de ontchloring te bewerkstelligen. De verkregen oplossing werd gefiltreerd om de katalysator te verwijderen, en vervolgens ingedroogd tot 295 mg (100 #) kleurloos poeder van de bovengenoemde verbinding.

(l) Bereiding van 5,31,6"-tetradeoxykanamycine-B.

15 120 mg (0,12 mmol) van het voornoemde produkt werd in een mengsel van 1 ml dioxan en 1 ml water opgelost, waaraan vervolgens UOO mg (1,27 mmol) bariumhydroxyde, BaCOH^).δί^Ο, werd toegevoegd, welk mengsel vervolgens werd onderworpen aan een beschermingsverwij-deringsbehandeling door verwarming tot 110 °C gedurende 15 h onder 20 terugstroming. Vervolgens werd kooldioxydegas in de reactie-oplossing gevoerd om bariumcarbonaat te doen neerslaan, dat werd afgefiltreerd. Het filtraat werd gemengd met 30 ml water, en vervolgens door een kolom van 20 ml Amberlite CG-50 (NH^-vorm, Eohm 8e Haas Co.) gevoerd. Daze kolom werd met 100 ml water en 75 ml 0,1-N ammonia-oplossing ge- 25 wassen, en vervolgens met 0,3 N ammonia gespoeld. De spoelfracties, die het gewenste produkt bevatten, werden samengevoegd, en ingedroogd tot 19*5 mg (29 #) 5,3’ ,6,,-tetradeoxykanamycine-B-dicarbonaat-monohydraat in de vorm van een kleurloos poeder.

Voorbeeld Vt Synthese van 5*3'iV-trideoxy-ö’-N-methylkanamycine-B.

30 (a) A-,0 g (9,18 mmol) 5»3',4'-trideoxykanamycine-B werd opge lost in een mengsel van 40 ml water en kO ml methanol, waaraan vervolgens een oplossing van 5*8 ml (9,18 mmol) triethylamine en 2,72 g (11,02 mmol) 2-(tert.-butoxycarbonyloxyimino)-2-fenylacetonitril (in de handel verkrijgbaar onder de naam B0C-0N van Aldrich Co.) in 35 4-0 ml methanol werd toegevoegd. Het verkregen mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende 3 h geroerd, waarna de oplossing, die 6'-N-tert .-butoxycarbonyl-5,3' ,V-trideoxykanamycine-B bevatte, met 2 ml 17 Se's-waterig ammonia werd gemengd, en vervolgens werd ingedroogd. De rest werd opgelost in 100 ml water, welke oplossing op een pH van - 36 - 7,4 werd gebracht met 6 N chloorwaterstofzuur, vervolgens met JO^inl ethylether werd gewassen, en tenslotte door een kolom werd gevoerd (20 mm inwendige middellijn) van 100 ml Amberlite CG-50 (NH^+-vorm Rohm & Haas Co·). Deze kolom werd met 300 ml water en 150 ml 0,1 M 5 waterige ammonia gewassen,, en daarna met 0,2 M waterige ammonia gespoeld. De spoelvloeistof werd in delen van 5 Ml verzameld, waarna de delen 11..24 bij elkaar werden gevoegd, en werden ingedroogd tot 2,1 g (42,5%) 6'-N-tert.-butoxycarbonyl-5,3',4'-trideoxykanamycine- B. Het indrogen van de samengevoegde delen 2β··33 leverde 1,4-2 g 10 (35,6 %) niet-gereageerd hebbend 5,3'^'-trideoxykanamycine-B op.

(b) 1,86 g (3i45 mmol) 6'-N-tert.-butoxycarbonyl·^^',4*-tri- deoxykanamycine-B, dat op de voornoemde wijze was verkregen, werd in 60 ml droog tetrahydrofuran opgelost, gevolgd door het toevoegen van 1,31 g (34,5 mmol) lithium-aluminium-hydride, waarna het geheel ge-15 durende 20 h onder terugstroming op 80 °C werd verwarmd. Het verkregen mengsel werd druppelsgewijs in 200 ml water gevoegd, waarbij een neerslag werd afgescheiden, dat werd afgefiltreerd. Het filtraat werd uitgedampt om het tetrahydrofuran te verwijderen, en daarna op een pH van 6,5 gebracht door het toevoegen van chloorwaterstofzuur. De 20 aldus verkregen oplossing werd door een kolom (12 mm inwendige middellijn) van 30 ml Amberlite CG-50 (NH^+) gevoerd, welke kolom met 150 ml water werd gewassen,en achtereenvolgens met 0,2 M waterige ammonia (150 ral), 0,3 M waterige ammonia (150 ml), en 0,4 M waterige ammonia werd gespoeld. De spoelvloeistof werd in delen Van 6 ml verzameld, ' 25 waarna de delen 11..1? werden samengevoegd, en werden ingedroogd tot ?40 rag (39»9 %) niet-gereageerd hebbend ö’-N-tert.-butoxycarbonyl-5»3'^'-trideoxykanaraycine-B. De delen 37··55 werden eveneens ingedroogd, hetgeen 592 mg (32,4 %) van de bovengenoemde verbinding 5,3’, 4’-trideoxy-6*-N-raethylkanamycine-B opleverde.

30 Voorbeeld VI; Synthese van 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3', 4'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B.

583 mg (1,10 mmol) 5,3'14’-trideoxy-6’-N-methylkanamycine-B, bereid op de wijze van voorbeeld V, werd in 10 ml 90 %'s-waterig dimethylsulfoxyde opgelost, waaraan vervolgens 1,16 g (5,28 mmol) 25 zinkacetaat, ZniCHjCO^J^SHgO, werd toegevoegd. Het mengsel werd bij de. omgevingstemperatuur gedurende 20 h geroerd, gevolgd door het toevoegen van een oplossing van 1,06 g (4,29 mmol) 2-(tert.-butoxycar-bonyloxyimino)-2-fenylacetonitril in 5 ml dimethylsulfoxyde, waarna gedurende 6 h bij 50 °C verder werd geroerd om de N-tert.-butoxy- 8103639 - 37 - carbonylering te verkrijgen. De verkregen oplossing werd gemengd'wet 2 ml 17 %'s waterige ammonia, en vervolgens met 100 ml water, waarna de oplossing met 50 ml ethylether werd gewassen. De afgescheiden waterige laag werd op een pH van 11 gebracht met 17 %'s waterige ammonia, 5 en met 2 g natriumchloride gemengd, waarna de verkregen oplossing met ethylacetaat (3 x 100 ml) werd geëxtraheerd. De ethylacetaatextracten werden bij elkaar gevoegd, boven watervrij natriumsulfaat gedroogd, en daarna ingedroogd· De rest werd gechromatografeerd op een kolom (20 mm inwendige middellijn) van 50 g silicagel (Wako-gel C-200 van 10 Wako Junyaku K.K.), waarbij als spoelvloeistof een chloroform-metha-nol-geconc. waterige ammonia (30 : 10 t 1 in volume) werd gebruikt. De spoelvloeistof werd in delen van 10 ml verzameld, waarna de delen 25··50 werden samengevoegd, en werden ingedroogd tot 607 mg (73,6 %) van 3,2',6’-tri-N-tert.-butoxycarbonyl-5,3'»^'-trideoxy-6'-N-methyl-15 kanamycine-B.

590 mg (0,787 mmol) van het laatstgenoemde produkt werd in 10 ml dimethylsulfoxyde opgelost, waarna aan de oplossing 0,1½ ml (1,18 mmol) ethyltrifluoracetaat werd toegevoegd. Het mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende 1,5 h geroerd om de 3u“N“tri-20 fluoracetylering te verkrijgen. De verkregen oplossing, die 3»2,,6I-tri-N-tert *-butoxycarbonyl-3"-N-trifluoracetyl-5,31»^1-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B bevatte, werd met zowel 0,16 ml (1,18 mmol) tri-ethylamine als *f20 mg (1,18 mmol) N-hydroxysuccinimide-ester van (S)-p-methoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxyboterzuur, opgelost in ' 25 ^ ml tetrahydrofuran, gemengd, welk mengsel bij de omgevingstemperatuur gedurende ^ h werd geroerd om de 1-N-acylering te bewerkstelligen. Daarna werd 100 ml water toegevoegd, waarna het mengsel met ethylacetaat (2 x 100 ml) werd geëxtraheerd. De samengevoegde extracten werden boven watervrij natriumsulfaat gedroogd, en verder inge-30 droogd tot het 1-N-geacyleerde produkt in de vorm van een amino-be-schermd derivaat daarvan.

Het aldus verkregen 1-N-geacyleerde produkt werd in 10 ml 90 %'s-waterig trifluorazijnzuur opgelost, welke oplossing bij de omgevingstemperatuur gedurende 5 b. werd geroerd om de tert.-butoxy-35 carbonyl- en p-methoxybenzyloxycarbonylgroepen te verwijderen, waarna de oplossing werd ingedroogd. De rest werd opgelost in 30 ml water, waarna de pH op 10 werd gebracht met 17 %’s waterige ammonia, gevolgd door roeren bij de omgevingstemperatuur gedurende 18 h voor het verwijderen van de trifluoracetylgroep. De aldus verkregen oplossing 8103639 - 38 - werd op een pH van 7»5 gebracht door het toevoegen van 6 N chloor-^ waterstofzuur, en vervolgens door een kolom (13 mm inwendige middellijn) van 20 ml Amberlite CG-50 (NH^+-vorm) gevoerd. Deze kolom werd met 100 ml water gewassen, en achtereenvolgens met 160 ml 0,3 M wate-3 rig ammonia en 100 ml 0,8 M waterige ammonia gespoeld. De spoelvloei-stof werd in delen van 4 ml verzameld, waarna de delen 27·»62 bij elkaar werden gevoegd, en daarna werden ingedroogd tot 3^6 mg (71,8 %) van de voornoemde verbinding 1-N-((S)-4-araino-2-hydroxybutyryl)-5i3'» A-'-trideoxy-é'-N-raethylkanamycine-B in de vorm van het monocarbonaat 10 daarvan.

Voorbeeld VII: Synthese van 1-N-(3-amino-2·‘hydroxypropionyl)-5»3, »V-trideoxy-61-N-methylkanaraycine-B.

102 mg (0,136 mmol) 312,,6,-tri-K-tert.-butoxycarbonyl-5,3*,41-trideoxy-61-N-methylkanaraycine-B, bereid op de wijze van 15 voorbeeld VI, werd in 3 nil dimethylsulfoxyde opgelost, waarna 0,02 ml (0,204 mmol) ethyltrifluoracetaat werd toegevoegd. Het mengsel werd bij de omgevingstemperatuur gedurende 1 h geroerd. De oplossing, die het gevormde 3»2,»6,-tri-N-tert.-butoxycarbonyl-3n-N-trifluoracetyl-5,3'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B bevatte, werd met zowel 0,03 20 ml (0,204 mmol) triethylamine als 73 mg (0,204 mmol) N-hydroxy-succinimide-ester van 3-,P"methoxybenzyloxycarbonyl-amino-2-hydroxy-propionzuur, opgelost in 0,5 ml tetrahydrofuran, gemengd, welk mengsel bij de omgevingstemperatuur gedurende 7 h werd geroerd om de 1-N-acylering te bewerkstelligen. Daarna werd 10 ml water toegevoegd, 25 waarna de oplossing met ethylacetaat (2 x 10 ral) werd ge*éxtraheerd.

De samengevoegde extracten werden boven watervrij natriumsulfaat gedroogd, en vervolgens ingedroogd tot 136 mg van het 1-N-geacyleerde produkt in de vorm van het amino-beschermd derivaat daarvan.

Dit geacyleerde produkt werd in 3 ml 90 %%s waterig tri-30 fluorazijnzuur opgelost, en vervolgens bij de omgevingstemperatuur gedurende 2 h geroerd om de tert.-butoxycarbonyl- en p-methoxybenzyl-oxycarbonylgroèpen te verwijderen, waarna de oplossing werd ingedroogd. De rest werd in 10 ml water opgelost, waarna de pH ervan op 10 werd gebracht met 17 %'s waterige ammonia, gevolgd door roeren bij 35 de omgevingstemperatuur gedurende 16 h voor het verwijderen van de trifluoracetylgroep. De aldus verkregen oplossing werd op een pH van 6,4 gebracht door het toevoegen van 6 N chloorwaterstofzuur, en vervolgens door een kolom (11 mm inwendige middellijn) van 10 ml Amberlite CG-50 (NH.+-vorm) gevoerd. Deze kolom werd met 3° ml water en 8103639 - 39 - 30 ml 0,2 M waterig ammonia gewassen, en daarna met 0,5 M waterage ammonia gespoeld. De spoelvloeistof werd in delen van 1 ml verzameld, waarna de delen 4..7 werden samengevoegd, en werden ingedroogd tot 38,1 mg (45,½ #) van het gewenste 1-N-(3-amino-2-hydroxypropionyl)-5 5i3',4'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B in de vorm van het monocar-bonaat daarvan.

Voorbeeld VIII: Synthese van 1-N-((S)-5-araino-2-hydroxyvaleryl)-5»3,» 4'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B·

Dezelfde bewerkingen als in voorbeeld VII werden uitgevoerd, 10 waarbij echter 76 mg (0,204 mmol) van de N-hydroxysuccinimide-ester van (S)-5-p-methoxybenzyloxycarbonylamino-2-hydroxyvaleriaanzuur werd gebruikt in plaats van de overeenkomstige ester van 3-p-methoxybenzyl" oxycarbonylamino-2-hydroxy-propionzuur, welke ester in reactie werd gebracht met het 3*2',6'-tri-N-tert.-butoxycarbonyl-3'’-N-trifluor-15 acetyl-5»3',4’-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B.

Na het uitwassen van de Amberlite CG-50-kolom werden de delen 22·.18 bij elkaar gevoegd, en ingedroogd tot 47,2 mg (53*8 #) van de bovengenoemde verbinding in de monocarbonaatvorm.

8103639 - bo - ' « >3

K

0 m o in in ον o o on co in on

0) H CM CM CM on cm cm h cm H

ojj rnovovoooooomovo tno on U in in cm o

.p CQ V V V H

d)S Λ E-< M________.

.5 I*

o CJ Ch o OO CO VO VO O O O VO CJ\ ΓΟ (Ό VO

nj *3 g on cm ¢--. c— in in cvj cm cm in on h h · in

φ o' o' cT ο η h o' ooHocnmoH

.£> φ O

cd > . V V V V- H

• iX!'— I cd ji,® o oooco inco ο ο ο σν ο oo oo on

H JJ S CM CM 0— C*- CM t— CM CM CM OO CM ^ C— OO

®CDtó *·*"**'·“**““ ***" “ \ p 1¾ o O O O VO O O O O O O O O o o 5ί I * tn nfflOvv v v v · v *- ffi φ < Ό I (X)

•HS O ocooo loco ο ο O CO OVOVO VO

fL, jii) CM CM t— C— CM t~- CVJ CM CM C— CM in LTV LPl

IWOOOOVOOOOOOOHHOH

H cl, O °

‘ο K <Ü V V VVV H

,0 __ cd 1 ’ —————

r. I CQ

dS ο ο σνσννο σν o o o oo ocooo co fnWCMCMononinoncMCMCMc— cMc— c— C" P ï*3

IttOOOOHOOOOOOOOOO

mo o .

Κ φ V V V V V 1 H

< ^ c*- o

CT\ VO

o H CO o

Xi in o oo (H+3HCQ in CM E-* oo ö ον η ο η vo crv I o < on gosmoH h m e- !£}

s cm co <! h cm O IQ KK

[Q Ë <ί H m H *H

.HK> S* Q O HCC P H CM CM CM

d 3 Φ ft O omo cÖWHHH

id φ ο η msogHiii &o k = s Η w ra· eh öO 53 W « W- .

3 ft 3 H TH CQ co -3 Φ

° Cd Φ > O O H *H S*H

Λ% CdmctiiHiHWCQiH

is CQ WH ShHH3_OS = c PJ .3 3Η30Ι+3·ΡΦδθ oo o φ p p p d 3 o o owpCddGHcd

N o 033cdWWO?-iTH

O GOH Φ jd

JÏOCSOO W W W W P O

'Hh Hocdddddo-n i? >a >sOCHHrHHcdCi ^ ,3 ,ΟΐΟΉΗΗΗΗ,ΟΦΕίε ft ftCiOHHiHHOX! cd cdocioooooo p p -H cd cd cd cd cd >3 w ~ co coscommmmsw 8103639 - 41 - (vervolg Tab* A) <·; ix\ m lt\ lh m oo _ w c\i m in fti w ^ ^ vovocmcmvoooovoovolcn fn ° ™ Γ-tH OOO o CM Oi-f

Η Η Η Η H

Λ Λ / vocncnmooLnoococoinvocovoco lAH iH OJr-tCMrHHiHCJlAHLaH Ln Λ Λ ^ ^ r »· ** ^ ^ k ,-icorovooovooooooovoHooHoocM oo co vo vo co vo cnoocovocococovovo ^-t^LTvLnc^-unooC'-t^inxc^c^-c^vciun - j* ~ _7 _7

COOHHOHOOOHOOOHiH

vo co co vo vo oo vo vo vo ro vo vo vo in\ inv

LT\ tH i-I in ΙΑ Η lf\ LT> lf\ H LC\ Lf\ ΙΛ CM CM

HCOCOHrHCOHHHCOHHHVOVO

co vo vo vo vo CO oo CO co vo CO o\ co coco in in in in H c^c-->-ini>-oot>-r-4p-^ ohhhhcoooohooococo

iH

oo in vo ^sr __ ¢1 in in vo lc\ co

CM (¾¾¾ Γ1 m 2 O

I rrv o O O \ CM Ο O

h£°hhooo £ ° ^ £

Hvovo-=r^=r σ\ σ\ σ\ o

Η Η Η H CM CM CM C- O

Qj C~- VO Η H

LnJiJJiJ‘:i!<i‘a5 vo O CM

t?SS-SS>JiJJ ζ. ° un ^ ™ S

CMCMCMCMCMCMOJCMt— VOCMLO Φ HHHHr-irHHHC-VOHCM Cd Φ I I I I I I I IVOPhIKtH CÖ

nH S ’ <U

Zj 3 -p

OSS = = = = = = = = =<ü G

s as 5 - 3 § Η «

5 (U H

U Ή H

m-*--- = rss = = = m = to j§......... .Ω bo r a) ή j_ 5 s 81 0 3 6 3 9

Cvervolg Tab.A) v Jf - k-2 -

VO CO

in in in h *» «· ·* inojcMin HoinooocDOooino cm η h cm o oj o o m o o w o

Η Η Η Η Η H

Λ Λ Λ Λ in in ιο οο co on co in cm cm in h c- in Η H oj ·· «V «I (k r «k- ^

VOVOrHOOOOOJOOOLnCDOOOOVO

in h in o in cm in H Λ vo oo co on vo co in co inHHfoin c*- cm h »> « k n rk ·* * *

HcotncooinHinomihinovoco oj oj cm o OJ CM OJ

rH

inininco co co co oo

CM CM CM C— H t— Η H

1« ·« K H ► *k ·* vovo o vo o incoino in in in o oo on in cm cm o CM oj oj

I—I

Λ coco on σ\ co in ov co on

HH HCO H ininOJOOHH

K ·* » #* » » ·* ·* * ·* on co in co o in on in o cm cm vo o coco

OJ CM CM Ο Η H

iH

H CM

Η Η H

CO ON

H CO CO 0 ON

rH pH <C S IXl

CO VO

CQ pH VO Cd

1>- CO *H ON H VO CO

,Ο H VO Ό H OO ·=Γ Ο

=t H I ·Η X g a W G

CQE-t-POCiSOC! *H s z

•H l~3 ·Η O VO hO

G ·Η G CQ *H *H O pH rH G

(DtH.CO'H GGcQ ON ti

Goa-pSHaiajcu > on cu WG>iG<d kQ W}o Ph cm <d

CD G -P <L> bo+i-p G D

rH O rH *0 Ό Cd O Cd Cd CQ

<PwcdcdS(D<uSC0-=r*H*Hcd Η H > G G ooG

cdcdHH cd cd cd G G o

HrH<b<DlOcQtÖTH*H'iH<D<l>S HHCGGGG-P-P-PtdOO (UdJOOOCDCUCdcdcd'HTHOc S hOhOSej-»jJ^GGGl>>G •HiHrHrHOOOGGGOOCD GGcdcdGGGooajGGco COCOCOCOPhCGCHCOCOCOP-iCUCG

8103639 -^3.- (vervolg Tab. A) ^ »

Sr 9

LA LA

K I*

LA Al O LA O O O O OJ O

CM H O CM LA O O O H O

H rH rH i—1 rH

Λ A Λ Λ Λ m ia ία on ΙΑ «Η Al CM Η r κ ·» #* CM OOMDVD LALALAO ΟΠΟ H CM CM CM Ο Ο

H rH

Λ Λ m !Α ΙΑ οο LA Η CM LA LA CM Η » ** ·ν ·* 6s. *»

CM ΟΟ Ο LO CM CM VO O COO

Η Ο Η Η Ο O

rH rH rH

Λ la on on la on

CM rH H LA LA CM H

* «k » *» ff1 9» MDonooncMAivoo on o

LA Η Η Ο O

rH rH

A A

LA on on LA LA LA Ά

CM H rH CM CM CM LA

. . k rv ^ · ^ voonLAonvovo voo ho

CM Ο O

Η H

A A

CM

o c^-

on LA LA HO

Η H CA C— H CQ ON

Η I on Η 1 EH Ph S

Η H 55 ON I H CO IO

K B Ü ON f£) CM Hr W

cd cd cd h

CQ CQ H

O OH

c ex: H r s r r e r e H& bQ bO O - 3 3 -p

& Pr H

CD CD Cd cd cd £

CQ H CQ M

cd cm cd cd

C DCC

o P-, o o £ \ £ £ ο .=1-00

Dr r ε c s r e CO D D

3 H 3 3 CD CO Φ (1)

CQ O CO CQ

pk E (L Λ 8103639 t t * - kk - « >s X VO CT\ LO CO O 00 Ln 0 moo cm c— cm c~- in cm in in m φ ** » r· *> N ► « ’ ► »* to

'öcQHOinvooLnooocvivocvjniocM •Hg OJ O CM H HHinH

h Μ Η V

E-ι g

fi I

Oh O'NOCOCOOVDOOOVOO'iOnon U3 m oj^ m w s n in in w cm cm in on h H in isJCUO·*·' *

(Üg>OOOOHHOOOHOOOOOOH

£> o -H O

Cd O -P V - VVV H

K'-' (Ώ 1 g •riW o o cr\ o m 10 o o ovo σ\νονο invo r-v h g cm cm mcM η incM cm cm in on in tn cm in

·»·*« ·*·>·» ^^ ·*·*· S IXO OOOOnHOOOHOHHVDH

\ > O

b£ S φ V V VVV

i «üti l—l____ m 1 g •HWcriOOOoocooa\cr\U3CT\onm vo h g cricMCMCMH^-CMcnonLnonHHinin [ Λ «,·>»·**·**» ** * ·* ^ ^ ·* *·

IXOOOOCOOOQOHO-mcnCMH

PP fL| O 1-1 trj (L) vvv v Η < ·0 (0-------------------------------

° CQ

ti I g rl M O O C^OVO CT\ O o o cnoooco on σ\ 6-1 PhS CM CM mCMinCOCM CM CM (n-CMt-f-H on

IXOO OOHOOOOOOO OCnO

ra o

K φ V V V VVV V

< X3 C·— o σ\ vo o

H CO O

£ in o oo (1| +s H W inCME-l oo H σν ή o ·η vo σ\ I o < on g O g Pk «Ö H H ffl C*- !£} ^

2 CM M <1 Ή CM OM K (S

m g «3j H (-5 H *H

•Η M h Ω O H- (¾ -P *"3 CM CM CM

ö 3 φ pc, O OKOCÖffiHHH

cd φ Ό H P-ι a O g Η I I 1

&0 h = S ·Η M M &H&0aWMW

h 3 0,3Η·ΗΜΜ<ω

O cd φ |> ' O O Ή H g*H

CdP-cCdHHMMH

2 M Μ H h*H*H3 0.ES5 £ 3 d<Pcöi!ppa)go u 'O O φ P ,Ω ,Q k 3 o O OM-PG3dOiHCti tq O 03^ίβ«ΐωθ·?-ι·Η ho o o η α> Λ

O O = = O O Μ Μ Μ Μ P O

'Ö Η ΗΟ £ΰ3 3 3:3θ·Η J·* JsjoCH HHHcCf-tCS5

° Λ XIO-HHiHHHilO

CU CU h O Ή ·Η ·Η ·Η O ,C

cd cdohoooooo

p p.rjCdCdCdCdCd>jM

W COSCOCQCQPQCQgW

8103639

Cvervolg Tab# B) -45 - m in m A (\

LninminLAOLaLnajocMOCMOO CM CM CM CM OJ· OCMCMr—lOr—lOrHOLO

i—i Η Η H

vo cncnincnincncncninvo cn vo en

tniHHCMHCVHHHCMLTiHLPvHLA

·%> ·

rHmoQvooniocQCQcniorHcnrHCQCM

rH

cncncncncncnvovovo cn vo vo vo cn m

HiHi—ii—IHr—ILALPiLAHLAIALAH CM

cnmmcnooonHr—ihoohhhoovo cncncncncoincncncninvo cn cn cn in

ι-HrHrHrHr-ICMrHrHrHCM in iH iH rH CM

» o.

cnonoococnvocncncnvorHcncncnvo

vo co vo vo vo vo CO VO VO VO 'O OO 00 VO VO

mt'intnininsininLniriNNinin

iHOrHHHrHOHHHHOOHH

rH

co in vo -=r ïC tn m vo m co cm K K pi cn cn ΐσνοο ο \ cm o o

rH CM CO rH rH O O O fc O Π") H

rH VO VO -=J- -=T 0\ C\ ffi O VO cn

H rH H rH CM CM CM C- O % H

Ρί C» VO Η H

int4tJjiq<<;<a; vo o cm

IoSSSSPJiJ O Pn CM CO

\ m h,

CMCMCMCMCMCMCMCMt— VOCMLni) rHrHrHrHi—IrHrHrHC— VOrHCM Oj <D

I I 1 I I I I I VO Ρί | QS iH (¾

«H

Os Sn

•H iH g <D

H rH O -P

OSSESOSSSSSCO Ö

O O CO

a CQ

ctf cd p>5 •H *H CÖ Ό

rO Λ rH

O O H cd

Ή Ή O rH

^EESC SHsssesriHErH (U (1) CQ CU

A A A faO

O O CU Ή CQ CQ rH Λ w ω w . co 8103639 - 6 - ? fe (vervolg Tab«B) in ro oo cm H h 1« M **

intncoincooirioooooooinin CM CM CM OCMOOinOO CM CM

Η Η H iH rH

Λ Λ Λ in in co oo co oo oo in

cm cm in h c- in HHCM

», «t « η, «« ·* Λ ^ * cocohoooocmooo in o oo oo co in h in o in cm Ln H Λ co in co co co in m co oo in CM Η H >- CMLTl in'· COHr-l r «S *. ·. » Λ θ' βν *· m 9·

HCOCOCOOOCOCMOCMininOCOCO

O Η IT\ H CM CM

rH

co in co in co co co co (H cm η cm c~- inin in c^hh

COCOCOCOOinCMCMOCMOOOCOCO

cm Η H in H in in co co co co o inin in in cr\ co co s H in s w cm cm cMCMincoinin *, A <r> ·* 0» * ·* «“ S ·*·*·* o co h o o o co co in co co cm o η h in cm h

V

H ™ (-1 rH i oo σ\ _ h co 5 o » H rH S ffi m co h> ra H co co

fr— OO *H ffi H CO CQ

,QHCOOHCO-=r o H I *H M Z a ’ CQ Ö

CO EH -P O O C5 G -H

•rl h Η Φ co bO s s

U *rl SH Μ «rl Ή O Η H G

Φ·Η£!Φ·Η ?η?η03 CT\?h G<Dft.pk(D<D(D > CJ\ Φ XCïoCctibObOO P-ι CM Cd CDÖ-PCDbQ-P-P&P» HO H-P-PCtiO Cd CÖ 03

Ho3cdcdd<U(i)Gco^r*H <Hcd

Η H > G G OOG

cd cd Η H cd cd ra G G o

hh φ cd ra ra ra ·η ή *H Φ cd S

HHGCGdd-P-P-P'Ö 'GOC = (UlDOOCDCDCÜCdGcdHH'd b0bQËË-P-P-PkSH£i>!>3 •HHHHOOOGfnGO OCD

GGGGG?4PH<ü«DCDG^ra COWCOWPhCHCHCOCOCOCHPHCH

8103639 t * ψ -^7- (vervolg Tab.B) v, « in LPiCMLnOOOOO mo

OJHCMinOOOO CJO

iH iH iH H

Λ Λ Λ Λ m in in to

in H CM CM H

·»*.*<· CMcovovoininino coo

I—1 CM CM CM O O

r-( H

Λ Λ in vo co in vo cu in h cm in in in in

(· ^ · « ·» Μ βι K

VO H CO VO CM CM CM O HO

i—[ i—i f—i in o

H

Λ

CO CO CO

in η h in H

«V * CMCococMininino coo H H CM CM CM in o

H

Λ

VO CO CO VO

in in η H in in in in «V A » I* ·% ·* ·· I»

CMHCOCOCMCMCMO HO

Η Η Η H in O

H

A

CM

O fr- co in in Η ο h h co c— h co σ\

H ! CO Η I lr( (¾ S

Η H S σ\ I H CO ! O

S5 B O C\ ff) (Μ Λ W

cd

cd cd *H

w co H

O OH

fi c si H H Pi

&0CC SS = ES &0O

3 3 -P

H

0) CD CÖ cd Cd £ ra H w co cd cm cd cd G D C fl O Ph o o £ \ £ £ 0ECSCSCBJ3-00 Ό CO Ό Ό 3 H 3 3 Φ CO Φ ω

CO O W CO

Pk K fH Ph 8103639

Claims (14)

1. Verbinding met de formule (1): H-.6" Xcit^O, 2' 4' ΗΟΐΓ^^ \ h2 h2nA^^^\^~\." vf~ 3" 0H \ o 5' NHRj ^ΗΝ-^^^ν4*112 C1 waarin R een hydroxylgroep of een waterstofatoom, R^ een waterstofatoom of een o:-hydroxy-ω-aminoalkanoylgroep met de formule: -CO-CH-(CH_) -NH-5 , 2 n 2 OH is, waarin n gelijk is aan 1, 2 of 3» en R^ een waterstofatoom of een raethylgroep is, mits R^ niet een methylgroep is wanneer R een waterstofatoom is, alsmede een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditie-zout van deze verbinding.

2. Verbinding volgens conclusie 1, m et he t kenme r k, dat deze 1-N-(a -hydroxy- ω-aminoalkanoy 1) -5»3', 4 ’ -trideoxykanamycine-B of 1 -N-(ot -hydroxy- -aminoalkanoyl)-5,3' ,4' ,6"-tetradeoxykanamycine-B met de formule (2) is: 6« • R^\ 2» ^ \ Ή-2^7" H_N '—η ii ^ M-u- 2 3" ' OH j1 g 4 o 5 JNh2 HN-Af 3 I (2) CO CHOH 81 0 3 6 3 9 (cH2)nNH2 - 49 - waarin S een hydroxylgroep of een waterstofatoom is, en n gelijk'aan 1, 2 of 3) alsmede een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout van deze verbinding.

3- Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat 5 deze l-N-Coc-hydroxy-w-aminoalkanoyl)^^' ^’-trideoxy.-é'-N-methyl-kanaraycine-B met de formule (4) is: 6» HO \ 2' 4» _ \«t h2n-t\3' ho4"V^^T \ X0 / * on OH 4 I 5 NHCHg Λη0 I 1 3 (4) CO CHOH i (CH2)nNH2 waarin n gelijk is aan 1, 2 of 3» alsmede een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout van deze verbinding.

4. Verbinding volgens conclusie 2, met het kenmerk, dat deze 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3'^'-trideoxykanamycine-B,

1-N-(3-amino-2-hydroxypropionyl)-5,3',4'-trideoxykanamycine-B, of 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-3,3',4',6u-tetradeoxykanamycine-B is. 5* Verbinding volgens conclusie 3» met het kenmerk, dat 15 deze 1-N-(3-amino-2-hydroxypropionyl)-5,31^'-trideoxy-ó'-N-methyl-kanamycine-B, 1-N-((S)-4-amino-2-hydroxybutyryl)-5,3,,4,-trideoxy-ö'-N-methylkanamycine-B, of l-N-CCSJ^-amino^-hydroxyvaleryl)^^' · 4'-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B is.

6. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat 20 deze 3,3'»41^“-tetradeoxykanamycine-B met de formule (3) is: 8103639 t -50 - 4 6" 2’ 4» Cft .0 \ V\~ 0 X/wM 1" **q' 5^"NH2 H2 3" 0/\ ^ \ HgNjy^2 "Y 2 (3) alsmede een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout van deze verbinding.

7· Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat 5 deze 5,3' jV-trideoxy-ó'-N-methylkanamycine-B met de formule (5) is: 6" ΗΟ-^Λ 2t Zf· ΗΟ'γΛγ0^ Η2Ν·γ\3^^ HonY-^V^Ai" lr| '^^7>nhch3 2 au OH. fr 4 50 οΛ-^\° H2n\^^2^^nh2 C5) 1 3 alsmede een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout van deze verbinding.

8. Werkwijze voor het bereiden van de verbinding volgens con-10 clusie 2 met de formule (2), gekenmerkt door: (a) het acyleren van de 1-ammogroep van 5»3f,4-'-trideoxykanamy- cine-B of 5»3' »4·* ^’'-tetradeoxykanamycine-B met de formule (6): ° ™2 H2n\-^A^-NH2 (6) waarin E dezelfde betekenis heeft als in de formule (2), of van een 15 gedeeltelijk amino-beschermd derivaat van 5»3'«^'-tri- of 5»3,·ι4',βΜ- 8103639 - 51 - tetradeoxykanamycine-B met de formule (β1). .. waarin. R een hydroxylgroep of een waterstofatoom is, en A een waterstofatoom, en tenminste een B een eenwaardige aminobeschermingsgroep 5 is, terwijl elke andere B een waterstofatoom is,of tenminste èèn paar A en B samen een tweewaardige aminobeschermingsgroep vormen, terwijl de andere A en B elk een waterstofatoom zijn, waarbij deze aminobeschermingsgroepenonderling gelijk of verschillend kunnen zijn, door een reactie met een οί -hydroxy-a>-aminoalkaanzuur of een amino-10 beschermd derivaat daarvan met de formule (7): A» NV'S‘ N(CH_) -CHC00H ( 7) / 22 B' OH waarin A' een waterstofatoom, en B’ een waterstofatoom of een eenwaardige aminobeschermingsgroep is, of A' en B’ samen een tweewaardige aminobeschermingsgroep vormen, en n gelijk is aan 1, 2 of 3, of 15 met een daaraan gelijkwaardige verbinding, voor het vormen van het

1-N-geacyleerde produkt met de formule (2') -=.¾¾ HN—^ (2‘) CO CHOH I A* 81 03 63 9 (CH2)nN<· B' ^ ·ƒ· ( -52 - of met de formule (2M): R "" q As ΗΟ^~Λ^ \ B / /^^^7 b/~^oh^ ""-b (2"> I ^B co CHOH ' x"A’ <CH2)nNCB, waarin R, A, B, A', B’ en n de voornoemde betekenis hebben,en door (b) het op bekende wijze verwijderen van de overblijvende 5 aminobeschermingsgroepen, voor zover aanwezig, uit het 1-N-geacyleer-de produkt met de formule (2') of (2H) voor het vormen van de verbinding met de formule (2).

9. Werkwijze voor het vormen van de verbinding volgens conclusie 3 met de formule (*0, gek.enmerkt door: IQ (a) het acyleren van de 1-aminogroep van 5*3', V-trideoxy-6'- N-methylkanamycine-B met de formule (5) H0-^\ . ^ oh ^^nnhch3 (5) of een gedeeltelijk amino-beschermd derivaat daarvan met de formule (5') 8103639 - 53 - « f°^<? 0^\^^<B (5I) waarin A een waterstofatoom, en tenminste één B een eenwaardige ami-nobeschermingsgroep is, terwijl de andere B elk een waterstofatoom zijn, of tenminste een paar A en B samen een tweewaardige amino-5 beschermxngsgroep vormen, en de overige A en B elk een waterstof- « atoom zijn, welke aminobeschermingsgroepen onderling gelijk of verschillend kunnen zijn, door een reactie met een ce-hydroxy-t«>-aminoal-kaanzuur of een aminobeschermd derivaat daarvan met de formule (7): A* >SS^N(CH,) (CHCOOH (7) / 2 n B» OH IQ waarin A' een waterstofatoom, en B’ een waterstofatoom of een eenwaardige aminobeschermingsgroep is, of A’ en B' samen een tweewaardige aminobeschermingsgroep vormen, terwijl n gelijk is aan 1, 2 of 3» of met een daaraan gelijkwaardige verbinding, voor het vormen van het 1-N-geacyleerde produkt met de formule (4')ί rX, HN —^ CO I (ift) CHOH I ^ A* (CH2)nN < B, 8103639 » ' ^ »r t - 5* - of met de formule (V1): H°^ a^n Av* \ r^0v'\^C ^ch3 oh| ^B ο/νΛ - hn\^'~''^'n'v'b CO (4n) CHOH , · x ^A' (0H2)nN ^ ^B' waarin A, B, A', B' en n de voornoemde betekenis hebben, en door (b) het op bekende wijze verwijderen van de overige amino- 5 beschermingsgroepen, voor zover aanwezig, uit het ΙτΝ-geacyleerde produkt met de formule (Λ1) of (A") voor het vormen van de verbinding met de formule (½). , 10. Werkwijze voor het vormen van de verbinding volgens conc- clusie 6 met de formule (3)» geken m er kt door; 10 (a) het beschermen van de ^"-hydroxylgroep van een penta-N- beschermd en 2n-Q-beschérmd derivaat van 3'Λ',6"-trideoxykanamycine-B met de formule (8): 4" CH.3 λ a B/N OD I OH | A A \ N~i^ \^.N^ (8) waarin A een waterstofatoom, en B een eenwaardige aminobeschermings-15 groep is, of A en B samen een tweewaardige aminobeschermingsgroep vormen, terwijl D een hydroxylbeschermings-acylgroep is, met een eenwaardige hydroxylbeschermings-acylgroep van dezelfde soort als de 8103639 - 5? - hydroxylbescherraingsgroep CD) op de 2"-plaats van de verbinding C$), voor het vormen van de 4f,-0*sbeschermde verbinding met de formule C8'>: CH3 oh r°^<: (8f) B 5 waarin A, B en D de voornoemde betekenis hebben, door (b) het laten reageren van de ^"-O-beschermde verbinding met de formule (8') met sulfurylchloride voor het vervangen van de 5-hydroxylgroep daarvan door een chlooratoom voor het vormen van het overeenkomstige 5-chloorderivaat, door 10 (c) het reduceren van dit 5-chloorderivaat voor het verwijderen van de 5-chloorgroep en het vormen van een beschermd derivaat van 5,3» ,4' ^'‘-tetradeoxykanamycine-B met de formule (9)ï CH3 η A ^ (9) waarin A, B en D de voornoemde betekenis hebben, en door 15 (d) het verwijderen van de overblijvende hydroxylbeschermings- groepen en aminobescherraingsgroepen uit de verbinding met de formule (9) voor het vormen van de verbinding met de formule (3)·

11. Werkwijze voor het bereiden van de verbinding volgens conclusie 7 met de formule (3), gekenmerkt door:

20 Ca) het invoeren van een alkyl-, een cycloalkyl- of een aral- kyl-oxycarbonylgroep in de 6'-aminogroep van 5,3', V-trideoxykana-mycine-B met de formule C10): 8103639 - 56 ·“ φ «*· T' c « HO---Λ, 0i °^NH2 (10) voor het vormen van de verbinding met de formule (11): ^V" nh2 (11) waarin R^ een alkylgroep met 1..6 C-atomen, een cycloalkylgroep met 5 3..6 C-atomen, of een aralkylgroep, in het bijzonder een fenyl-(0^..0^)alkylgroep, en meer in het bijzonder benzyl is, en door (b) het reduceren van de verbinding met de formule (11) met een raetaalhydride in een watervrij organisch oplosmiddel voor het vormen van de verbinding met de formule (5)·

12. Bacteriebestrijdingssamenstelling, omvattende als het werk zame bestanddeel l-N-Cce-hydroxy-w-aminoalkanoyl)^^’ ,4*-trideoxy-kanamycine-B, 1-N-(ce-hydroxy-a-aminoalkanoyl-5,3' *V ^"-tetradeoxy-kanamycine-B of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan volgens conclusie 2 of 5»3'»V ^"-tetradeoxykanaraycine-B of een 15 farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan volgens conclusie 6 voor een bacteriebestrijding doeltreffende hoeveelheid om de groei van bacteriën te verhinderen, samen met een drager voor deze werkzame verbinding.

13. Bacteriebestrijdingssamenstelling, met het kenmerk, 20 dat deze als het werkzame bestanddeel 1-N-(cc-hydroxy- ω-aminoalkanoyl) -5131 j^'-trideoxy-61 -N-methylkanamycine-B of 3*3',V-trideoxy-6'-N-methylkanamycine-B of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout 8103639 - 57 - » « β daarvan volgens conclusie 3 of 7 bevat in een voor bacteriebestri ding doeltreffende hoeveelheid voor het verhinderen van de groei van bacteriën, samen met een drager voor deze werkzame verbinding. 1 8103639